JPH0443080B2 - - Google Patents
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Description
本発明は、抗腫瘍活性を有する新規生理活性物
質に関するものである。 本明細書において、アミノ酸、ペプチドは
IUPAC−IUB生化学命名委員会(CBN)で採用
された略記法により表示され、例えば下記の略号
が使用される。なお、アミノ酸などに関し光学異
性体があり得る場合は、特に明示しなければL体
を示すものとする。 Ala:アラニン Arg:アルギニン Asn:アスパラギン Asp:アスパラギン酸 Gln:グルタミン Glu:グルタミン酸 Gly:グリシン His:ヒスチジン Leu:ロイシン Lys:リジン Pro:プロリン Ser:セリン Val:バリン 網内系賦活化作用を有する種々の物質、例え
ば、各種グラム陽性菌やエンドトキシンにより誘
導され、抗腫瘍細胞能力などの生理活性を有する
物質の存在は多数報告されている。例えば
Carswellらは、CD−1 SwissマウスにBacillus
Calmette−Gue′rin(BCG)を投与し、その2週
間後にエンドトキシンを静脈内注射して得られる
該マウスの血清が、培養し細胞に対して殺細胞作
用を有すること、およびMeth A sarcomaで担
癌させた(BALB/c×C57BL/6)F1マウス
の腫瘍を出血性壊死に至らしめる現象を見出し、
TNF(Tumor Necrosis Fator)と名づけた
〔Proc.Nat.Acad.Sci.USA 72巻(No.9)3666〜
3670頁(1975年)〕。その後、Ruffら〔J.
Immunol.125巻(No.4)1671〜1677頁(1980年)〕
およびMatthewsら〔Br.J.Cancer 42巻416〜422
頁(1980年)〕は、前記Carswellらの方法に準じ
て調製したウサギ血清からTNFの精製を試みて、
それぞれ原血清に比べて約2000倍および約1000倍
精製されたものを得ている。しかし、いずれの場
合にも精製されたものに関しては動物実験におい
て抗腫癌効果を確認していない。 特開昭57−140725号は、網内系賦活化作用を有
する物質の1種または2種以上を哺乳動物(マウ
ス、ウサギ、モルモツト等)に投与し、次いでグ
ラム陰性菌由来のエンドトキシンを注射すること
によつて、または哺乳動物由来の活性化マクロフ
アージを含む組織培養系にグラム陰性菌由来のエ
ンドトキシンを加えることによつて誘発される、
制癌作用を有する蛋白性生理活性物質を単離精製
した、と開示している。更に、その物質の分子量
は、ゲル過法およびSDS−ポリアクリルアミド
ゲル電気泳動法では39000±5000、等電点はPH3.9
±0.3(等電点電気泳動法)である、と開示してい
る。 上記物質の制癌作用は極めて優れたものである
が、それを単離精製するためには、粗製溶液を煩
雑な精製工程に付さなければならないうえ、その
活性回収率が低い、という欠点を有する。 本発明者らは、本明細書中に記載の方法により
調製したウサギ血清から上記物質を収率良く得る
精製法について鋭意研究を続けていたが、その過
程で、特開昭57−140725号の精製法とは異なる精
製法を採用することにより、意外にも上記物質と
は異なる、優れた抗腫瘍活性を有する新規蛋白質
が収率良く(すなわち全工程を通じての回収率が
約50〜70%)得られることを見いだし、更に研究
を続けた結果、本発明を完成するに至つた。 本発明は、網内系賦活化作用を有する物質を1
種または2種以上、ウサギに投与し、次いでグラ
ム陰性菌由来のエンドトキシンを注射することに
よつて、またはウサギ由来のマクロフアージを含
む組織培養系にグラム陰性菌由来のエンドトキシ
ンを加えることによつて誘発される、アミノ末端
よりSer−Ala−Ser−Arg−Ala−Leu−Ser−
Asp−Lys−Pro−Leu−Ala−His−Val−Val−
Ala−Asn−Pro−Gln−Val−Glu−Gly−Gln−
Leu−Gln−X1−Leu……(但し、式中X1は1個
のアミノ酸残基を示す。)で表わされるアミノ酸
配列構造を有するポリペプチドのサブユニツトか
らなる構造を有し、かつ下記特性を有する蛋白質
に関するものである。 a) 分子量 40000±5000(ゲル過法)17500
±2000(SDS−ポリアクリルアミド電気泳動法) b) 等電点 5.0±0.3(等電点電気泳動法) c) 実験例3に記載のL−M細胞を用いる評価
における比活性が5×106〜1×107単位/mg蛋
白質 d) Meth A sarcoma担癌F1マウスを用い
る生物評価系において癌を壊死させる性質 上記d)は、具体的には、実験例4に記載の
Meth A sarcoma担癌BALB/c系マウスを用
いる生物評価において、1匹当り3000〜5000単位
を静脈内に投与した場合の活性が(+)以上であ
る。また、セルロースアセテート膜を用いる電気
泳動ではα−グロブリン領域に泳動され、各種レ
クチンカラム〔Con A−セフアロース(フアル
マシア社製)、RCA−I−ゲル(E.Y.ラボラトリ
ー社製)、WGA−セフアロース6MB(フアルマシ
ア社製)、UEA−I−ゲル(E.Y.ラボラトリー社
製)、LPA−ゲル(E.Y.ラボラトリー社製)〕に
吸着しない性状を有している。 本発明の新規生理活性物質の物性は、以下に記
載する実験例1〜8の各方法によつて測定したも
のである。 実験例 1) 分子量測定法 A) セフアクリルS−200(フアルマシア社製ス
ウエーデン)のカラム(1.5×100cm)を用い、
0.1M塩化ナトリウム/50mMリン酸緩衝液
(PH7.4)にてゲル過を行つた。分子量測定用
標準蛋白質(フアルマシア社製、リボヌクレア
ーゼA、キモトリプシノーゲンA、オブアルブ
ミン、アルドラーゼ)を用いて分子量検量線を
作成し、L−M細胞を用いた活性評価により分
子量の測定をした。本発明になる生理活性物質
は、オブアルブミンとキモトリプシノーゲンA
の中間に溶出し、分子量は40000±5000であつ
た。 B) Segrestらの方法〔Method in
Enzymology 28−B巻54−63頁(1972年)〕に
従い、トリス/グリシン/SDS(PH8.3)で
SDS/ポリアクリルアミドゲルに10μgの試料
を付与し、電気泳動を行つた。標準分子量キツ
ト(フアルマシア社製)を用いて分子量検量線
を作成し、L−M細胞での活性評価と、染色
(クーマシー・ブリリアント・ブルーR−250)
により分子量を決定した。本発明になる生理活
性物質は、17500±2000の位置に、単一染色バ
ンドと活性を示した。 2) 等電点測定法 アトー株式会社製の等電点電気泳動装置(SJ
−1071EC型)を用い、フアルマライト(フアル
マシア社製、PH4〜6.5)とグリセロールを含む
5%ポリアクリルアミド平板ゲル(厚み1mm、長
さ10cm、巾10cm)を作成した。陽極側に0.04M、
DL−グルタミン酸、陰極側に0.2M、L−ヒスチ
ジンを使用して、700Vで50分間の前泳動を行つ
た。続いて試料50μgを付与し、700Vで1時間、
500Vで16時間泳動を行つた。泳動終了後ゲルを
2.5mm巾で切出し、次いで各ゲル片を0.15M塩化
ナトリウムを含む0.02Mトリス−塩酸緩衝液(PH
8.2)0.2mlで抽出し、各抽出液についてL−M細
胞を用いた活性評価を行つた。本発明になる生理
活性物質の等電点は5.0±0.3であつた。 3) L−M細胞を用いる活性評価 L−M細胞を用いる活性評価は、Ruff
〔Lymphokine Reports2巻E.Pick編集、
Academic Press 235頁(1980年)〕あるいは〔J.
Immunol.126巻 235頁(1981年)〕の方法に準
じ、本発明者らが改良したものであり、本発明に
なる生理活性物質がL−M細胞(アメリカン・タ
イプ・カルチヤー・コレクシヨン,CCL1.2)を
殺す効果を測定するものである。すなわち、順次
培地で希釈した試料0.1mlと105コ/mlの濃度のL
−M細胞の培地懸濁液0.1mlを96穴の組織培養用
マイクロプレート(フロー・ラボラトリー社)に
加えた。培地は1v/v%のウシ胎児血清を含む
イーグルのミニマム・エツセンシヤル培地(その
組成は、たとえば、「組織培養」中井準之助他編
集、朝倉書店、1967年に記載されている)を用い
た。マイクロプレートを5%の炭酸ガスを含む空
気中、37℃で48時間培養した。培養終了後、グル
タルアルデヒド20μを加え細胞を固定した。固
定後、マイクロプレートを洗浄、乾燥して、0.05
%メチレンブルー溶液を0.1ml加え、生き残つた
細胞を染色した。余分なメチレンブルーを洗い流
し乾燥した後、残つたメチレンブルーを0.36M塩
酸溶液で抽出し、その665nmにおける吸光度をタ
イターテツク・マルチスキヤン(フロー・ラボラ
トリー社)で測定した。この吸光度は、生き残つ
た細胞数に比例する。L−M細胞の50%を殺すた
めに必要な生理活性量を1単位/mlと定義し、試
料を加えない対照の吸光度の50%の値に相当する
試料の希釈率を、グラフあるいは計算によつて求
め、その希釈率の逆数を試料の生理活性量(単
位/mlで表記する)とした。 一方、蛋白質量は、Branfordらの方法〔Anal.
Biochem.72巻248〜254頁(1976年)〕により、ク
ーマシー・ブリリアント・ブルーG250を用いる
色素結合法から算出した。 本発明になる生理活性物質の比活性は、5×
106〜1×107単位/mg蛋白質であつた。 4) Meth A sarcoma担癌マウスを用いる活
性評価 BALB/cマウスの腹部皮内に2×105コの
Meth A sarcoma細胞を移植し、7日後移植し
た腫瘍の大きさが直径7〜8mmとなり、出血性壊
死がなく良好な血行状態にある腫瘍を有するマウ
スを選び、尾静脈より生理食塩水で希釈した0.2
mlの試料を注射し、24時間後に次の判定基準に則
り壊死反応の判定を行つた。 (−):変化なし (+):かすかな出血性壊死 ():中程度の出血性壊死 (移植癌表面の真中から50%以上にわたつて
壊死) ():顕著な出血性壊死 (移植癌の中央部が重度に壊死し、周囲の癌
組織がわずかに残つた状態) また、試料投与後20日目に癌が完全に退縮した
かどうかを観察し完治率を求めた。 以上の方法により測定した本生理活性物質の活
性を下表に示す。
質に関するものである。 本明細書において、アミノ酸、ペプチドは
IUPAC−IUB生化学命名委員会(CBN)で採用
された略記法により表示され、例えば下記の略号
が使用される。なお、アミノ酸などに関し光学異
性体があり得る場合は、特に明示しなければL体
を示すものとする。 Ala:アラニン Arg:アルギニン Asn:アスパラギン Asp:アスパラギン酸 Gln:グルタミン Glu:グルタミン酸 Gly:グリシン His:ヒスチジン Leu:ロイシン Lys:リジン Pro:プロリン Ser:セリン Val:バリン 網内系賦活化作用を有する種々の物質、例え
ば、各種グラム陽性菌やエンドトキシンにより誘
導され、抗腫瘍細胞能力などの生理活性を有する
物質の存在は多数報告されている。例えば
Carswellらは、CD−1 SwissマウスにBacillus
Calmette−Gue′rin(BCG)を投与し、その2週
間後にエンドトキシンを静脈内注射して得られる
該マウスの血清が、培養し細胞に対して殺細胞作
用を有すること、およびMeth A sarcomaで担
癌させた(BALB/c×C57BL/6)F1マウス
の腫瘍を出血性壊死に至らしめる現象を見出し、
TNF(Tumor Necrosis Fator)と名づけた
〔Proc.Nat.Acad.Sci.USA 72巻(No.9)3666〜
3670頁(1975年)〕。その後、Ruffら〔J.
Immunol.125巻(No.4)1671〜1677頁(1980年)〕
およびMatthewsら〔Br.J.Cancer 42巻416〜422
頁(1980年)〕は、前記Carswellらの方法に準じ
て調製したウサギ血清からTNFの精製を試みて、
それぞれ原血清に比べて約2000倍および約1000倍
精製されたものを得ている。しかし、いずれの場
合にも精製されたものに関しては動物実験におい
て抗腫癌効果を確認していない。 特開昭57−140725号は、網内系賦活化作用を有
する物質の1種または2種以上を哺乳動物(マウ
ス、ウサギ、モルモツト等)に投与し、次いでグ
ラム陰性菌由来のエンドトキシンを注射すること
によつて、または哺乳動物由来の活性化マクロフ
アージを含む組織培養系にグラム陰性菌由来のエ
ンドトキシンを加えることによつて誘発される、
制癌作用を有する蛋白性生理活性物質を単離精製
した、と開示している。更に、その物質の分子量
は、ゲル過法およびSDS−ポリアクリルアミド
ゲル電気泳動法では39000±5000、等電点はPH3.9
±0.3(等電点電気泳動法)である、と開示してい
る。 上記物質の制癌作用は極めて優れたものである
が、それを単離精製するためには、粗製溶液を煩
雑な精製工程に付さなければならないうえ、その
活性回収率が低い、という欠点を有する。 本発明者らは、本明細書中に記載の方法により
調製したウサギ血清から上記物質を収率良く得る
精製法について鋭意研究を続けていたが、その過
程で、特開昭57−140725号の精製法とは異なる精
製法を採用することにより、意外にも上記物質と
は異なる、優れた抗腫瘍活性を有する新規蛋白質
が収率良く(すなわち全工程を通じての回収率が
約50〜70%)得られることを見いだし、更に研究
を続けた結果、本発明を完成するに至つた。 本発明は、網内系賦活化作用を有する物質を1
種または2種以上、ウサギに投与し、次いでグラ
ム陰性菌由来のエンドトキシンを注射することに
よつて、またはウサギ由来のマクロフアージを含
む組織培養系にグラム陰性菌由来のエンドトキシ
ンを加えることによつて誘発される、アミノ末端
よりSer−Ala−Ser−Arg−Ala−Leu−Ser−
Asp−Lys−Pro−Leu−Ala−His−Val−Val−
Ala−Asn−Pro−Gln−Val−Glu−Gly−Gln−
Leu−Gln−X1−Leu……(但し、式中X1は1個
のアミノ酸残基を示す。)で表わされるアミノ酸
配列構造を有するポリペプチドのサブユニツトか
らなる構造を有し、かつ下記特性を有する蛋白質
に関するものである。 a) 分子量 40000±5000(ゲル過法)17500
±2000(SDS−ポリアクリルアミド電気泳動法) b) 等電点 5.0±0.3(等電点電気泳動法) c) 実験例3に記載のL−M細胞を用いる評価
における比活性が5×106〜1×107単位/mg蛋
白質 d) Meth A sarcoma担癌F1マウスを用い
る生物評価系において癌を壊死させる性質 上記d)は、具体的には、実験例4に記載の
Meth A sarcoma担癌BALB/c系マウスを用
いる生物評価において、1匹当り3000〜5000単位
を静脈内に投与した場合の活性が(+)以上であ
る。また、セルロースアセテート膜を用いる電気
泳動ではα−グロブリン領域に泳動され、各種レ
クチンカラム〔Con A−セフアロース(フアル
マシア社製)、RCA−I−ゲル(E.Y.ラボラトリ
ー社製)、WGA−セフアロース6MB(フアルマシ
ア社製)、UEA−I−ゲル(E.Y.ラボラトリー社
製)、LPA−ゲル(E.Y.ラボラトリー社製)〕に
吸着しない性状を有している。 本発明の新規生理活性物質の物性は、以下に記
載する実験例1〜8の各方法によつて測定したも
のである。 実験例 1) 分子量測定法 A) セフアクリルS−200(フアルマシア社製ス
ウエーデン)のカラム(1.5×100cm)を用い、
0.1M塩化ナトリウム/50mMリン酸緩衝液
(PH7.4)にてゲル過を行つた。分子量測定用
標準蛋白質(フアルマシア社製、リボヌクレア
ーゼA、キモトリプシノーゲンA、オブアルブ
ミン、アルドラーゼ)を用いて分子量検量線を
作成し、L−M細胞を用いた活性評価により分
子量の測定をした。本発明になる生理活性物質
は、オブアルブミンとキモトリプシノーゲンA
の中間に溶出し、分子量は40000±5000であつ
た。 B) Segrestらの方法〔Method in
Enzymology 28−B巻54−63頁(1972年)〕に
従い、トリス/グリシン/SDS(PH8.3)で
SDS/ポリアクリルアミドゲルに10μgの試料
を付与し、電気泳動を行つた。標準分子量キツ
ト(フアルマシア社製)を用いて分子量検量線
を作成し、L−M細胞での活性評価と、染色
(クーマシー・ブリリアント・ブルーR−250)
により分子量を決定した。本発明になる生理活
性物質は、17500±2000の位置に、単一染色バ
ンドと活性を示した。 2) 等電点測定法 アトー株式会社製の等電点電気泳動装置(SJ
−1071EC型)を用い、フアルマライト(フアル
マシア社製、PH4〜6.5)とグリセロールを含む
5%ポリアクリルアミド平板ゲル(厚み1mm、長
さ10cm、巾10cm)を作成した。陽極側に0.04M、
DL−グルタミン酸、陰極側に0.2M、L−ヒスチ
ジンを使用して、700Vで50分間の前泳動を行つ
た。続いて試料50μgを付与し、700Vで1時間、
500Vで16時間泳動を行つた。泳動終了後ゲルを
2.5mm巾で切出し、次いで各ゲル片を0.15M塩化
ナトリウムを含む0.02Mトリス−塩酸緩衝液(PH
8.2)0.2mlで抽出し、各抽出液についてL−M細
胞を用いた活性評価を行つた。本発明になる生理
活性物質の等電点は5.0±0.3であつた。 3) L−M細胞を用いる活性評価 L−M細胞を用いる活性評価は、Ruff
〔Lymphokine Reports2巻E.Pick編集、
Academic Press 235頁(1980年)〕あるいは〔J.
Immunol.126巻 235頁(1981年)〕の方法に準
じ、本発明者らが改良したものであり、本発明に
なる生理活性物質がL−M細胞(アメリカン・タ
イプ・カルチヤー・コレクシヨン,CCL1.2)を
殺す効果を測定するものである。すなわち、順次
培地で希釈した試料0.1mlと105コ/mlの濃度のL
−M細胞の培地懸濁液0.1mlを96穴の組織培養用
マイクロプレート(フロー・ラボラトリー社)に
加えた。培地は1v/v%のウシ胎児血清を含む
イーグルのミニマム・エツセンシヤル培地(その
組成は、たとえば、「組織培養」中井準之助他編
集、朝倉書店、1967年に記載されている)を用い
た。マイクロプレートを5%の炭酸ガスを含む空
気中、37℃で48時間培養した。培養終了後、グル
タルアルデヒド20μを加え細胞を固定した。固
定後、マイクロプレートを洗浄、乾燥して、0.05
%メチレンブルー溶液を0.1ml加え、生き残つた
細胞を染色した。余分なメチレンブルーを洗い流
し乾燥した後、残つたメチレンブルーを0.36M塩
酸溶液で抽出し、その665nmにおける吸光度をタ
イターテツク・マルチスキヤン(フロー・ラボラ
トリー社)で測定した。この吸光度は、生き残つ
た細胞数に比例する。L−M細胞の50%を殺すた
めに必要な生理活性量を1単位/mlと定義し、試
料を加えない対照の吸光度の50%の値に相当する
試料の希釈率を、グラフあるいは計算によつて求
め、その希釈率の逆数を試料の生理活性量(単
位/mlで表記する)とした。 一方、蛋白質量は、Branfordらの方法〔Anal.
Biochem.72巻248〜254頁(1976年)〕により、ク
ーマシー・ブリリアント・ブルーG250を用いる
色素結合法から算出した。 本発明になる生理活性物質の比活性は、5×
106〜1×107単位/mg蛋白質であつた。 4) Meth A sarcoma担癌マウスを用いる活
性評価 BALB/cマウスの腹部皮内に2×105コの
Meth A sarcoma細胞を移植し、7日後移植し
た腫瘍の大きさが直径7〜8mmとなり、出血性壊
死がなく良好な血行状態にある腫瘍を有するマウ
スを選び、尾静脈より生理食塩水で希釈した0.2
mlの試料を注射し、24時間後に次の判定基準に則
り壊死反応の判定を行つた。 (−):変化なし (+):かすかな出血性壊死 ():中程度の出血性壊死 (移植癌表面の真中から50%以上にわたつて
壊死) ():顕著な出血性壊死 (移植癌の中央部が重度に壊死し、周囲の癌
組織がわずかに残つた状態) また、試料投与後20日目に癌が完全に退縮した
かどうかを観察し完治率を求めた。 以上の方法により測定した本生理活性物質の活
性を下表に示す。
【表】
塩水)
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 網内系賦活化作用を有する物質を1種または
2種以上、ウサギに投与し、次いでグラム陰性菌
由来のエンドトキシンを注射することによつて、
またはウサギ由来のマクロフアージを含む組織培
養系にグラム陰性菌由来のエンドトキシンを加え
ることによつて誘発される、アミノ末端より Ser−Ala−Ser−Arg−Ala−Leu−Ser−Asp
−Lys−Pro−Leu−Ala−His−Val−Val−Ala
−Asn−Pro−Gln−Val−Glu−Gly−Gln−Leu
−Gln−X1−Leu…… (但し、式中X1は1個のアミノ酸残基を示
す。)で表わされるアミノ酸配列構造を有するポ
リペプチドのサブユニツトからなる構造を有し、
かつ下記特性を有する蛋白質。 a) 分子量 40000±5000(ゲル濾過法) 17500±2000(SDS−ポリアクリルアミド電気泳
動法) b) 等電点 5.0±0.3(等電点電気泳動法) c) 本文定義のL−M細胞を用いる評価におけ
る比活性が5×106〜1×107単位/mg蛋白質。 d) Meth A sarcoma担癌F1マウスを用い
る生物評価系において癌を壊死させる性質
Priority Applications (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP58127779A JPS6019719A (ja) | 1983-07-15 | 1983-07-15 | 抗腫瘍活性を有する蛋白質 |
US06/629,853 US4529594A (en) | 1983-07-15 | 1984-07-11 | Protein having antitumor activity |
EP84304769A EP0132125B2 (en) | 1983-07-15 | 1984-07-12 | A protein having antitumor activity |
DE8484304769T DE3462506D1 (en) | 1983-07-15 | 1984-07-12 | A protein having antitumor activity |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP58127779A JPS6019719A (ja) | 1983-07-15 | 1983-07-15 | 抗腫瘍活性を有する蛋白質 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
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JPS6019719A JPS6019719A (ja) | 1985-01-31 |
JPH0443080B2 true JPH0443080B2 (ja) | 1992-07-15 |
Family
ID=14968472
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP58127779A Granted JPS6019719A (ja) | 1983-07-15 | 1983-07-15 | 抗腫瘍活性を有する蛋白質 |
Country Status (4)
Country | Link |
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US (1) | US4529594A (ja) |
EP (1) | EP0132125B2 (ja) |
JP (1) | JPS6019719A (ja) |
DE (1) | DE3462506D1 (ja) |
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JPH0695939B2 (ja) * | 1983-12-02 | 1994-11-30 | 大日本製薬株式会社 | ウサギ癌壊死因子をコ−ドするクロ−ン化dνa |
US5248666A (en) * | 1984-03-23 | 1993-09-28 | Oncogen | Methods for inhibiting neoplastic cell proliferation using platelet factor 4 |
US4879226A (en) * | 1984-04-06 | 1989-11-07 | Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha | Novel human physiologically active polypeptide |
US5683688A (en) * | 1984-05-31 | 1997-11-04 | Genentech, Inc. | Unglycosylated recombinant human lymphotoxin polypeptides and compositions |
US6686455B1 (en) | 1984-07-05 | 2004-02-03 | Genentech, Inc. | Tumor necrosis factor |
US5672347A (en) * | 1984-07-05 | 1997-09-30 | Genentech, Inc. | Tumor necrosis factor antagonists and their use |
US4777270A (en) * | 1985-01-25 | 1988-10-11 | Pfizer Inc. | Macrocyclic polyether carboxylic acids |
US4714683A (en) * | 1985-01-25 | 1987-12-22 | Oncogen | Polypeptide tumor inhibitors and antibodies thereto |
US5011777A (en) * | 1985-01-25 | 1991-04-30 | Oncogen | Vectors encoding brain derivable polypeptide factors |
EP0216934A4 (en) * | 1985-03-04 | 1987-07-09 | Sawai Seiyaku Kk | NOVEL SUBSTANCE INDUCING TUMOR NECROSIC FACTOR FROM ACID RESISTANT BACTERIA. |
CA1265446A (en) * | 1985-09-30 | 1990-02-06 | Masahiro Maki | Anticoagulating substance, process for preparing same and anticoagulant comprising same as an effective component |
EP0249618A1 (en) * | 1985-12-05 | 1987-12-23 | Biogen N.V. | Combinations of tumor necrosis factors and antibiotics and methods for treating tumors |
US4822605A (en) * | 1986-02-18 | 1989-04-18 | Exovir, Inc. | Compositions and methods employing the same for the treatment of viral and cancerous skin lesions and the like |
CA2508375C (en) * | 2002-12-02 | 2014-05-27 | Abgenix, Inc. | Antibodies directed to tumor necrosis factor and uses thereof |
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US4076701A (en) * | 1975-07-29 | 1978-02-28 | Immunology Research Foundation, Inc. | Tumor complement fraction recovery method and product |
EP0027514B1 (en) * | 1979-08-17 | 1983-08-31 | Daicel Chemical Industries, Ltd. | Antitumor substance and its production |
US4309418A (en) * | 1980-03-25 | 1982-01-05 | Sloan-Kettering Research Institute For Cancer | Anti-tumor agent from human serum and process |
DK366380A (da) * | 1980-08-28 | 1982-03-01 | Novo Industri As | Anvendelsen af grp og salte deraf |
JPS57140725A (en) | 1981-12-28 | 1982-08-31 | Dainippon Pharmaceut Co Ltd | Physiologically active substance having carcinostatic action |
HU189251B (en) * | 1982-04-07 | 1986-06-30 | Asahi Kasei Kogyo Kk,Jp | Process for stabilizing tumor necrosis factor |
US4390468A (en) * | 1982-08-04 | 1983-06-28 | Maruzen Oil Co., Ltd. | Preparation of antitumor agent from shellfish |
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Also Published As
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EP0132125B2 (en) | 1990-06-27 |
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