JPH02172910A - 歯垢生成防止剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 【産業上の利用分野】

本発明はう蝕並びに歯周炎、歯肉炎及び歯槽膿漏の予防
に関し、詳しくは、これらの発生の原因となる歯垢の生
成防止剤に関する。

【従来の技術】

口腔内の疾患において、う蝕及び歯槽膿漏は、そのいず
れもが、終局的には歯牙の喪失の原因となる三大疾患で
あり、かつ臨床上極めて高頻度に認められるものである
。これらの疾患が口腔内に常在する細菌によって引き起
こされること、及びこれらの疾患が発生する機序につい
ては、以下のごとく歯垢の存在が必須の要件であること
が、今や学会の定説となっている。すなわち、食物中に
含まれる蔗糖が、口腔内の一常在菌であるストレプトコ
ッカス・ミニ−タンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　
ｍｕｔａｎｓ）が産生ずる菌体外酵素であるグリコジル
トランスフェラーゼ（以下、ＧＴａｓｅという）によっ
て不溶性の多糖類（以下、不溶性グルカンという）に変
換され、これが菌牙表面に付着することにより、ストレ
プトコッカス・ミュータンスを含む常在菌の菌体凝集塊
である歯垢が形成される。 ここにおいて、歯垢の総量から不溶性グルカンと食物残
さを差し引いた残りである約７０％相当は細菌体そのも
のであり、この菌が、食物中に含まれる糖類を解糖系に
よって代謝することにより、乳酸等の有機酸を生じて歯
垢のｐＨが低下し、歯牙面においてｐｉが５．４以下に
なると歯牙のエナメル質に脱灰が生じる。これかう蝕の
発生及び進行の機序であり、一方また、歯垢中で増殖す
る菌の毒素その他の産生物及び死骸が、歯肉に作用して
これを刺激することが、歯周炎、歯肉炎、更に歯槽膿漏
の原因となっている、というものである。 この様に、う蝕及び歯槽膿漏という口腔の三大疾患にお
いて、疾患の成立に歯垢の存在が必須の要因として関与
していることから、何等かの方法で歯垢を除去し又は歯
垢の生成を防止しすることができれば、それらの疾患を
有効に予防することができるものと考えられている。そ
の考え方に沿って、最近では例えば、歯垢の除去に関す
るものでは、不溶性グルカン等の分解酵素が特公昭５２
−３８１１３号（フラボバクテリウム属菌由来不溶性グ
ルカン分解酵素）、特公昭５６−１０７０号（シュード
モナス属菌由来不溶性グルカン分解酵素）、特公昭５９
−１２２７４号（ストレプトミセス属菌由来α−１，３
−グルコシド結合分解酵素）等に開示されており、また
、歯垢の除去と殺菌とを組合わせたものが特公昭５８−
２１６０３（デキストラナーゼと細菌壁溶解酵素との配
合剤）に開示されている。更に、歯垢の生成を防止する
ものとしては、例えば、ストレプトコッカス・ミュータ
ンスに対して特異的抗菌作用等を示す物質が、特開昭６
３−１１９４１６号（ギムネマ酸）や特公昭６３−２６
０８３号（トリテルペン化合物）等に開示されている一
方、特公昭６３−２４４８８及び特開昭６３−２７７６
１２の記載に見られるように、ストレプトコッカス・ミ
ニ−タンスによる不溶性グルカン産生そのものを阻害す
ることによって、口腔内の菌が凝集して画境、すなわち
歯垢、を形成する過程を遮断しようとする方法が試みら
れるに至っている。

【発明が解決しようとする課題】

しかしながら、上記のように歯垢の除去又は生成防止に
向けての研究が続けられているものの、未だ、実用に供
されて満足すべき効果を奏すると広く認められた歯垢除
去剤又は生成防止剤を得るまでには至っておらず、強い
効果の歯垢除去剤又は生成防止剤が望まれていた。

【問題点を解決するための手段】

本発明者は、歯垢生成の過程における最初の段階を構成
するものである、ストレプトフッカス・ミュータンスの
ＧＴａｓｅが蔗糖を不溶性グルカンに変換する反応にお
いて、同酵素を直接に阻害することによれば、不溶性グ
ルカンの産生を強力に４抑制し、それによって、極めて
効率的に歯垢の生成を抑制することができるとの前提に
立ち、ストレプトコッカス・ミコータンスより同酵素を
分離粗製して、各種の物質につき同酵素に対する阻害作
用の有無及び阻害の強さを鋭意検討した結果、驚くべき
ことに、式（１） （式中、Ｒ，、Ｒ２およびＲ３は、同−又は異なって、
水素原子又はメチル基を示す。）によって示される化合
物又はその医薬として許容される塩がＧＴａｓｅに対す
る強力な阻害作用を有することを発見すると共に、それ
らの化合物に、不溶性グルカン産生条件下にてストレプ
トコッカス・ミュータンスと共に培養された人歯牙表面
への開閉の粘着を完全に防止する効果のあることをも確
認し、本発明を完成するに至った。 すなわち本発明は、上記の式（１）によって示される化
合物又はその医薬として許容される塩を含有する歯垢生
成防止剤である。 本発明の歯垢生成防止剤の主成分として用いられる上記
式（１）で示される化合物は、例えば、特開昭５９−２
１９２９５号に開示された方法に準じて、各々対応する
式（ｉｆ） （式中の記号は前記と同意義を有する）とアスコルビン
酸とをリン酸を介してエステル結合させることによって
容易に合成できる。 なお、式（１）で示される化合物の医薬として許容され
る塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等の
アルカリ金属塩及びカルシウム塩、マグネシウム塩等の
アルカリ土類金属塩があり、これらはいずれも有利に用
いることができる。 また、本発明にかかる歯垢生成防止剤には、式（Ｔ、　
）で示される化合物又はその医薬として許容される塩の
他に、例えば、第２リン酸カルシウム、炭酸カルシウム
１、ビロリン酸カルシウム、不溶性メタリン酸ナトリウ
ム、非晶質シリカ、結晶質シリカ、アルミノシリケート
、酸化アルミニウム、水酸化アルミニウム及びレジン等
の研磨剤、ポリビニルアルコール、カルボキシメチルセ
ルロース、ヒドロキシエチルセルロース、アラビアゴム
、アルギン酸塩、カラゲナン、等の粘結剤、グリセリン
、ポリエチレングリコール及びプロピレングリコール等
の粘ちょう荊、ホリソルベート８０、ラウリル硫酸ナト
リウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、オレ
イン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ポリオキ
シエチレンソルビタンモノラウレート、蔗糖脂肪酸エス
テル、Ｎ−アシルグルタミン酸及びＮ−ラウロイルザル
コシン酸ナトリウム等の界面活性剤、ぶどう糖、麦芽糖
、ソルビトール、サッカリンナトリウム、ステビオサイ
ド、ネオヘスベリジルジヒドロカルニン、グリチルリチ
ンペリラルチン及びｐ−メトキシシンナミックアルデヒ
ド等の甘味剤、弗化ナトリウム、モノフルオロ酢酸ナト
リウム及び弗化第一錫等のうｍ抑制剤、メントール、オ
イゲノール、チモール、ユーカリブトール及びサリチル
酸メチル、等の香味剤、白色ワセリン、流動パラフィン
、プラスチベース及びステアリルアルコール等の軟膏基
剤、クロルヘキシジンジグルコネート、セチルピリジニ
ウムクロライド及びパラベン類等の保存剤、ガムベース
、色素及びエタノール等を適宜添加してもよく、例えば
練歯磨、粉歯磨、液状歯磨、マウスウォッシュ、うがい
用の錠剤及び液剤、トローチ剤、チコウインガム、口腔
軟膏等の種々の形態の剤形で使用できる。これらは公知
の手段で製造でき、その製造のいずれの段階で式（１）
で示される化合物又はその医薬として許容される塩を添
加してもよい。添加量は製品に対して　０．０５　　ｗ
、／ｖ％〜５．　　Ｏｗ、／ｖ％程度が望ましく、Ｏ，
ｌ　　ｗ／ｖ％〜　２．Ｏｗ／ｖ％であることが更に望
ましい。また液状歯磨、マウスウォッシュ及びうがい用
液剤等の液剤の場合においては、その液剤のｐＨを４．
０〜９．　０の範囲に調製することが望ましい。 本発明の構成要素たる式（１）によって示される化合物
又はその医薬として許容される塩のうち、上記の特開昭
５９−２１９２９５号に記載されたもの並びに同方法に
準じて合成され得る、特開昭６２−１４５０１９号、特
開昭６２−２０５０９１号、特開昭６３−１３９１１４
号、特開昭６３−１３９９７２号又は特開昭６３−２７
０６２６に記載されたものについては、抗酸化作用、抗
炎症作用、抗潰瘍作用、ふけ防止作用、白内障予防治療
作用、更年期障害予防治療作用、又は美肌作用を有する
ことが知られているが、これらの作用とは全く異なった
、歯垢生成防止作用が上述のごと（本発明の構成要素た
る式（１）によって示される化合物又はその医薬として
許容される塩に存することは驚くべきことである。

【作用】

上述の通り、本発明は、不溶性グルカンを生成する菌体
外酵素であるＧ　Ｔ　ａｓｅそのものに対し阻害的に作
用することにより、不溶性グルカンの生成を阻止するも
のであり、従って、不溶性グルカンに絡められて生ずる
菌体の凝集塊である歯垢の生成が防止され、それにより
、菌の解糖系の代謝活動の産物たる乳酸等の酸が歯牙表
面で生成されることによるエナメル質の脱灰や、菌の死
骸及び毒素等に歯肉が刺激されることよって引き起こさ
れる歯肉の障害が防止される。すなわち、う蝕の発生並
びに歯周合、歯肉炎及び歯槽膿漏の発生が防止できる。

【実施例】

ｌ　　ＧＴａｓｅ ストレプトコッカス・ミュータンスからＧＴａＢｅを調
製し、蔗糖を基質として不溶性グルカンを生成させ、そ
の生成に対する被験物質の阻害作用を測定した。 方　　　法 粗Ｇ　Ｔ　ａｓｓ標品の　製　法： Ｇ　Ｔ　ａｓｅの調製は「微生物の分離法」　（山里−
英他編：　Ｒ＆Ｄプランニング）、７３３頁、（１）無
細胞ＧＴａｓｅ標品の調製、に準じて行った。すなわち
、ストレプトコッカス・ミュータンスＡＴＣＣ３３４０
２ｔ−プレインハートインフュージョンブロス（Ｄｌｆ
ｃｏ製、以下ＢＨＩ培地という）中で３７°Ｃ，１８時
間靜置場養（植菌ｆｆ１１％）した後、４０００回転／
分で１０分間遠心して上清を採取し、これに６０％飽和
になる様に硫安を加えて４°Ｃにて緩徐に一夜攪拌して
塩析し、沈澱を５ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ６，
５）に溶解後、同緩衝液にて４℃にて一夜透析て粗ＧＴ
ａｓｅを得た。 ＧＴａｓｅの°　　ｍ 酵素活性の測定はＧＴａｓｅによる不溶性グルカンの生
成に対する、阻害活性「微生物の分離法」（同上）、７
３３頁、（２）微生物培養濾液の活性測定法、に記載の
方法を一部改変して行った。すなわち、試料溶液には下
記の表１及び表２に示す通りに調製した反応液を、対照
溶液には同組成中被験物質溶液の代わりに同量の蒸留水
を添加したものを用いた。試験管に各５ｍｌの試料溶液
又は対照溶液を加え、直立した状態にて、８７℃、１６
時間放置し反応させ、反応終了後、試験管を震盪して反
応液を十分攪拌し、波長５５０ｎｍにて吸光度を測定し
て濁度とした。ＧＴａｓｅに対する被験物質の阻害活性
は、溶媒無添加系の濁度を対照に、％阻害率として算出
した。 く表１　基質・被験物質溶液の組成〉 蔗糖　　　　　　　　　　　　　１．０　　駕ｔトリウ
ム７シ゛シ゛　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　０．０２　％被験物質　　　　　　　　０．０１〜
１．０　　％く表２　反応液の組成〉 基質・被験物質溶液　　　５０００μ１ＧＴａｓｅ品　
　　　１００１ ５１００　μ　皿 験勿　“°の−・　： 被験物質として本発明の構成要件にかかる物質のうちか
ら表３の物質（物質１〜６）を使用した。 物質１ 物質２ 物質３ 物質４ 物質５ メチル基 メチル基 水素原子 水素原子 水素原子 メチル基 水素原子 メチル基 水素原子 水素原子 メチル基 メチル基 メチル基 メチル基 水素原子 注）物質１〜５；　カリウム塩、　物質６；　ナトリウ
ム塩１１　　　　　　　　　　　の　　　　　　・表３
の各物質について、各々反応液中０．　５％の濃度での
ＧＴａｓｅ活性を測定し、各被験物質の阻害活性を求め
た。 験１．　２　　　験　　　　と阻　活性との　　：物質
ｌについて、０．０１％〜１．　０％の範囲において、
反応液中における被験物質の各濃度に対するＧＴａｓｅ
活性を測定し、被験物質の濃度と阻害活性との相関を求
めた。 １．３　　　応゛の　Ｈと　　活　との相　：０．５％
濃度の物質ｌについて、表１の基質・被験物質溶液に水
酸化す）　１７ウム水溶液又は塩酸を添加えることによ
ってｐＨを４．５．６．７又は８に調製した液を使用す
ることによって、反応液のｐＨを同ｐＨに調製して反応
を行い、各ｐＨにおけるＧＴａｓｅ活性を測定し、反応
液のｐＨと阻害活性との相関を求めた。 結　　　果 １、　１　　　　　験　　　の　　　活　　：下記の各
被験物質は０．５％濃度において不溶性グルカンの生成
をほぼ完全に阻害し、ＧＴａｓｅ阻害活性で何れも９０
％以上の作用を示した。 物質１　　　　　０．０４　　　　９２．７物質２　　
　　　０，８３　　　　９４．５物質３ 物質４ 物質５ ０．０３　　　　　　　９４．５ ０．０３　　　　　　　９４．５ ０、　０３　　　　　　　９４．　５ ０、０２　　　　　　　９５．８ １−２　　　　　　　　　と　　　　との　　：物質ｌ
は０．０１％から１．　０％の範囲内において、次の表
の通りに、不溶性グルカンの生成を阻害した。その阻害
活性は、物質１の濃度に依存性を示し、０．０７５％以
上の濃度において約９０％乃至それ以上の阻害活性を、
０．Ｏ１％１％濃おいても約６０％の阻害活性を示した
。 ９６゜ ９６゜ ９６゜ ９６゜ ９６゜ ０．０７５　　　　　０．０５　　　　　　　　ｇ１９
０．０５　　　　　　　０．２０　　　　　　　５９．
７０．０２５　　　　　０．２０　　　　　　　５９．
７００１　　　　　　　０２０　　　　　　　５９．７
１−３　　　゛の　Ｈと　　　　との　　：０．５％濃
度の物資ｌはｐＨ４から８の範囲内において、次の通り
、不溶性グルカンの生成を阻害した。阻害活性は、Ｇ　
Ｔ　ａｓｅが最大の活性を示したｐＨ６及び７において
９０％以上であり、対照でのＧＴａｓｅの活性自体がや
や低下したｐＨ５においては約７０％の阻害を示した。 ｐＨ４又は８では、対照でのＧＴａｓｅの活性そのもの
が殆ど失われており、阻害率の算出は、それ故、無意味
である。Ｇ　Ｔ　ａｓｅが活性を示すｐＨ範囲において
、０．５％濃度の物質ｌを含む反応液中においては、−
様に、不溶性グルカンの生成が極めて僅かであった。 く　　　６　〉 Ｈ％ 、ｉ　　　　　　　０．０ｇ　　　　　０．０５５　　
　　　０．３５　　　　０．０６　　　　　７１．４６
　　　　　０．６２　　　　０．０５　　　　　９１．
９７　　　　　０．５９　　　　０．０３　　　　　９
４．９８　　　　　０．０５　　　　０．０２験２．　
　へ虫　因の　の止 方　　　法 試験管２本に５％庶蔗糖含むＢＨＩ培地を加え、各々に
人から得られた滅菌歯牙をステンレスワイヤーで吊した
。一方の試験管のみに物質ｌを０゜５％の濃度になるよ
うに添加した後、両方の試験管にＢＨＩ培地で３７℃、
１８時間培養したストレプトコッカスミュータンスＡＴ
ＣＣ３３４０２の菌液を最終濃度１０　”　ＣＰＵ／ｍ
　ｌ　　になるように加えた。 次いでこれらを３７℃で６時間培養した後、歯牙を取り
出して水洗し、走査型電子顕微鏡で４０００倍にて観察
した。 吸光度　　　阻害率 結　　　果 第１図は物質ｌを添加することなく培養した歯牙の表面
の走査型電子顕微鏡写真（倍率；４０００倍）であり第
２図は物質ｌを添加して培養した歯牙の表面の走査型電
子顕微鏡写真（倍率；４０００倍）である。物質１を添
加せずに培養した歯牙表面には第１図に見られるとおり
多数のストレプトコッカス・ミュータンスの菌体の粘着
及び集落形成が認められたが、物質ｌを添加して培養し
た歯牙表面には第２図に見られるとおり菌体の粘着も集
落形成も全く認められず、物質１により菌体の歯牙表面
への粘着及びそれに続（集落形成が完全に阻止されるこ
とが確認された。 以下に本発明の歯垢生成防止剤の実施例を示す。 ［実施例１］　練歯磨 区−立　　　　　　　　　　１ヱエＵ 第ニリン酸カルシウム　　　　　　　　　　　　　　５
０．０ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　　　
　　　　　２．０り゛リセリン　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　２０．０ヒドロキノエｆルセルＯ
−ス　　　　　　　　　　　　　　　　１．０物質１２
．０ サッカリンナトリウム 香料 ７°σ七”ルバラヘ″ン ［実施例２］　粉歯磨 炙−立 炭酸カルシウム ク′リセリン 香料 プロＥ“ルへ°ラヘ゛ン ラウリル硫酸ナトリウム 物質２ 号ツカリンナトリウム ［実施例３］ 区−圀 液状歯磨 ０．１ １．０ ｏ、ｏｏｓ 重１工証 ７５、Ｏ １、Ｏ ｏ、ｏｏｓ １．０ ０．１ 里１工Ｕ グリセリン エタノール ポリアクリル酸ナトリウム 物質３ ラウリル硫酸ナトリウム サッカリンナトリウム 香料 ［実施例５１ 腹−旦 炭酸水素ナトリウム クエン酸 リン酸−ナトリウム 本°すＸｆレノク゛す］−ル 香料 うがい用錠剤 重１ユ担− ５３、Ｏ １６、Ｏ ４０００５、０ し実施例４］ 炙−笠 １りＩ−ル（９５％） フ゛０ピレンク゛リコール Ｖルヒ゛トール ハツカ油 物質４ 全量 マウスウォッシュ 重重（％） ０．５　　ｇ ０．１ ０．１ 量 １００慎ｌ ［実施例６コ 久−立 物質ｌ ホウ酸 ホウ砂 うがい用液剤 重ｊ工Ｕ Ｏ，２ ５，０ ０，５ 〔実施例７］　　トローチ剤 人−旦　　　　小虫（％） −Ｉ：ｙＲ− アラビアゴム ブドウ糖 物質１ 香料 ［実施例８］ 腹−公 ガムベース キシリトール ソルビトール 物質ｌ 香料 チュウインガム １１旦 ３０．０ ３５．０ ３０．９ ０．１ １．０ ［実施例９］　口腔軟膏 腹−公　　　　　　１１旦 物質１０．５ 第１図 プラスチベース 白色ワセリン 流動パラフィン ５．０ ２０、０

【図面の簡単な説明】

第１図は物質ｌを添加せずに培養した歯牙の表面の走査
型電子顕微鏡写真（倍率；　４０００倍）であり、第２
図は物質２を添加して培養した歯牙の表面の走査型電子
顕微鏡写真（倍率；４０００倍）である 特許出願人　　千寿製薬株式会社 手続き補正書 （方式） 事件の表示 事件との関係　　特許出願人 住　　所　　大阪市中央区平野町２丁目５番８号

【図面の簡単な説明】

第１図は、物質ｌを添加せずに培養した歯牙の表面にお
いて生育した微生物の形態を表す図面に代わる写真（走
査型電子顕微鏡写真：倍率４０００）であり、第２図は
、物質１を添加して培養した歯牙の表面において生育し
た微生物の形態を表す図面に代わる写真（走査型電子顕
微鏡写真：倍率４０００）である。 ５゜ ６゜ 平成１年３月１３日（発送日平成１年３月２８日）補正
の対象 明細書の図面の簡単な説明の欄 補正の内容 明細書の図面の簡単な説明の全文（第２４頁第６〜１１
行）を別紙の通り補正する。 （備考） なお、 同時に住所（居所）変更届を提出しました。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＿１、Ｒ＿２およびＲ＿３は、同一又は異な
   って、水素原子又はメチル基を示す。）によって示され
   る化合物又はその医薬として許容される塩を含有するこ
   とを特徴とする、歯垢生成防止剤。
2. （２）含有量が０．０５ｗ／ｖ％〜５．０ｗ／ｖ％であ
   る特許請求の範囲第（１）項記載の歯垢生成防止剤。
3. （３）医薬として許容される塩がナトリウム塩、カリウ
   ム塩、カルシウム塩又はマグネシウム塩である特許請求
   の範囲第（１）項又は第（２）項記載の歯垢生成防止剤
   。