JP5808797B2 - 筋萎縮を阻害するための方法 - Google Patents

Description

関連出願の相互参照
本明細書は、参考によってすべてが組み込まれている、２０１０年５月２０日に申請された米国特許第６１／３４６，８１３号明細書および２０１１年２月２２日に申請された米国特許第６１／４４５，４８８号明細書の利益を請求する。
連邦政府支援研究に関する声明

本発明は、Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ Ｍ．Ａｄａｍｓに対する、助成金ＶＡ Ｃａｒｅｅｒ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ａｗａｒｄ−２下での政府支援、およびＳｔｅｖｅｎ Ｄ．Ｋｕｎｋｅｌに対するＶＡ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ Ａｗａｒｄ Ｐｒｏｇｒａｍからの支援で実施された。米国政府は本発明において特定の権利を有する。

骨格筋萎縮は、飢餓および加齢の一般的影響の特徴である。それはまた、がん、慢性腎不全、鬱血性心不全、慢性呼吸器疾患、インスリン欠損、急性重症疾患、ＨＩＶ／ＡＩＤＳのような慢性感染、筋肉脱神経、および筋肉の利用を制限する多くの医学的および外科状態を含む、重度のヒト疾患のほぼ普遍的な結果でもある。しかしながら、ヒト患者における骨格筋萎縮を予防する、または逆転させる医学的治療は存在しない。結果として、数百万人が、衰弱、落下、骨折、日和見呼吸器感染および自立性の喪失を含む、筋肉萎縮の後遺症を受ける。骨格筋萎縮が個人、それらの家族、および一般的に社会にのこる重荷は非常に大きい。

骨格筋萎縮の病因はよくわかってない。それにもかかわらず、重要な進展がなされてきた。例えば、インスリン／ＩＧＦ１シグナル伝達が、筋肉肥大を促進し、筋萎縮を阻害することがすでに記述されたが、しかし絶食または筋肉脱神経のような萎縮誘導ストレスによって減少する（Ｂｏｄｉｎｅ ＳＣ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｎａｔ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ３（１１）：１０１４−１０１９；Ｓａｎｄｒｉ Ｍ，ｅｔ ａｌ，（２００４）Ｃｅｌｌ １１７（３）：３９９−４１２１；Ｓｔｉｔｔ ＴＮ，ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ １４（３）：３９５−４０３；Ｈｕ Ｚ，ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ １１９（１０）：３０５９−３０６９； Ｄｏｂｒｏｗｏｌｎｙ Ｇ、ｅｔ ａｌ． （２００５） Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｃｅｌｌ ｂｉｏｌｏｇｙ １６８（２）：１９３−１９９； Ｋａｎｄａｒｉａｎ ＳＣ ＆ Ｊａｃｋｍａｎ ＲＷ （２００６） Ｍｕｓｃｌｅ ＆ ｎｅｒｖｅ ３３（２）：１５５−１６５； Ｈｉｒｏｓｅ Ｍ、ｅｔ ａｌ． （２００１） Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ： ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ５０（２）：２１６−２２２； Ｐａｌｌａｆａｃｃｈｉｎａ Ｇ、ｅｔ ａｌ． （２００２） Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ ９９（１４）：９２１３−９２１８）。インスリン／ＩＧＦ１シグナル伝達の異常肥大および抗萎縮効果は、Ａｋｔおよびラパマイシン複合体１の哺乳動物標的（ｍＴＯＲＣｌ）を含む、ホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）とその下流エフェクターの活性の増加を介して、少なくとも部分的に仲介される。Ｓａｎｄｒｉ Ｍ （２００８） Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ （Ｂｅｔｈｅｓｄａ） ２３：１６０−１７０； Ｇｌａｓｓ ＤＪ （２００５） Ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ ｃｅｌｌ ｂｉｏｌｏｇｙ ３７（１０）：１９７４−１９８４）。

齧歯動物の筋肉を萎縮させるマイクロアレイ研究により他の重要な進展があった（Ｌｅｃｋｅｒ ＳＨ、ｅｔ ａｌ． （２００４） Ｆａｓｅｂ Ｊ １８（１）：３９−５１； Ｓａｃｈｅｃｋ ＪＭ、ｅｔ ａｌ． （２００７） Ｆａｓｅｂ Ｊ ２１（１）：１４０−１５５； Ｊａｇｏｅ ＲＴ、ｅｔ ａｌ． Ｆａｓｅｂ Ｊ １６（１３）：１６９７−１７１２）。これらの研究により、（絶食、筋肉脱神経および重度の全身病を含む）種々の外見上異質の萎縮誘導ストレスが、骨格筋ｍＲＮＡ発現において多くの共通の変化を発生することが示された。これらの萎縮関連変化のいくつかが、マウスにおける筋萎縮を促進し、これらには、アトロジンＩ／ＭＡＦｂｘおよびＭｕＲＦ１（タンパク質分解事象を触媒する２つのＥ３ユビキチンリガーゼ）をコードしているｍＲＮＡの誘導と、ＰＧＣ−１α（筋萎縮を阻害する転写共アクティベーター）をコードしているｍＲＮＡの抑制が含まれる（Ｓａｎｄｒｉ Ｍ、ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ １０３（４４）：１６２６０−１６２６５；Ｗｅｎｚ Ｔ，ｅｔ ａｌ． Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ １０６（４８）：２０４０５−２０４１０；Ｂｏｄｉｎｅ ＳＣ、ｅｔ ａｌ． （２００１）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ ２９４（５５４７）：１７０４−１７０８；Ｌａｇｉｒａｎｄ−Ｃａｎｔａｌｏｕｂｅ Ｊ，ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｔｈｅ ＥＭＢＯ ｊｏｕｒｎａｌ ２７（８）：１２６６−１２７６；Ｃｏｈｅｎ Ｓ，ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｃｅｌｌ ｂｉｏｌｏｇｙ １８５（６）：１０８３−１０９５；Ａｄａｍｓ Ｖ，ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ３８４（１）：４８−５９）。しかしながら、齧歯類筋肉を萎縮させることにおいて増加または減少する多くの他のｍＲＮＡの役割はまだ同定されていない。アトロジン−１およびＭｕＲＦ１が関与する可能性が高いけれども、ヒト筋萎縮の機構におけるデータもまたさらに限られている（Ｌｅｇｅｒ Ｂ，ｅｔ ａｌ． （２００６）Ｆａｓｅｂ Ｊ ２０（３）：５８３−５８５；Ｄｏｕｃｅｔ Ｍ，ｅｔ ａｌ．（２００７）Ａｍｅｒｉｃａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ａｎｄ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｃａｒｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ １７６（３）：２６１−２６９； Ｌｅｖｉｎｅ Ｓ，ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３５８（１３）：１３２７−１３３５）。

筋萎縮の生理学および病態生理学の理解の進展にもかかわらず、強力、効果的かつ選択的両方である筋発達のモジュレーターであり、また筋萎縮関連、筋萎縮または筋肉量を増加させるために必要なものが関与する疾患の処置において効果的である化合物はまだほとんど存在しない。これらの必要性および他の必要性が、本発明によって満たされる。

本発明の目的にしたがって、本明細書で具体的かつ広く記述したように、１つの態様において、本発明は効果的な量のそのウルソル酸またはその誘導体を、それらを必要とする対象に提供することによって、筋萎縮を阻害し、筋肉量を増加させる方法にて有用である化合物、および本方法にて使用される化合物を含む薬学的組成物に関する。

さらなる態様、本発明の目的において、本明細書で具体的かつ広く記述したように、本発明は、１つの態様において、筋成長を調節するための方法、筋萎縮を阻害し、筋肉量を増加させる方法、骨格筋肥大を誘導するための方法、組織増殖を増強するための方法にて有用な化合物、および本方法にて使用する化合物を含む、薬学的組成物に関する。

動物における筋萎縮を予防、または処置するための方法が開示され、本方法には、動物における筋萎縮を予防する、または処置するために効果的な量で、式、

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体を動物に投与することが含まれ、
式中、それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、
Ｒ⁰は、任意に存在し、ｎは、０または１であり、Ｒ⁰は、存在する場合、水素であり、Ｒ^1aは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、Ｒ^1bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bは、少なくとも１つのＲ^2aおよびＲ^2bが−ＯＲ¹¹であるという条件で、独立して水素および−ＯＲ¹¹から選択され、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシルから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分(moiety)を含み、Ｙは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、前記量が、化合物がウルソル酸、ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である場合に、１０００／日より多い。

動物における筋肉量および／または筋肉強度を増加させるための方法がまた開示され、本方法には、動物における筋肉量および／または筋肉強度を増加させるために効果的な量で、式、

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体を動物に投与することが含まれ、
式中、それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は、任意に存在し、ｎは、０または１であり、Ｒ⁰は、存在する場合、水素であり、Ｒ^1aは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、Ｒ^1bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bは、少なくとも１つのＲ^2aおよびＲ^2bが−ＯＲ¹¹であるという条件で、独立して水素および−ＯＲ¹¹から選択され、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシルから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は、式、

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、前記量が、化合物がウルソル酸、ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である場合に、約１０００ｍｇ／日より多い。

ｉｎ ｖｉｔｒｏでの組織増殖を増強するための方法がまた開示され、本方法には、組織の増殖を増強するために効果的な量で、式、

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体を組織に投与することが含まれ、
式中、それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は、任意に存在し、ｎは、０または１であり、Ｒ⁰は、存在する場合、水素であり、Ｒ^1aは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、Ｒ^1bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bは、少なくとも１つのＲ^2aおよびＲ^2bが−ＯＲ¹¹であるという条件で、独立して水素および−ＯＲ¹¹から選択され、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシルから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は、共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は、式、

の部分を含み、Ｙは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

哺乳動物における筋肉形成を増強するための方法がまた開示されており、この方法には、約１０００ｍｇ／日より多く、哺乳動物中の筋肉形成を増強するために効果的である量で、式、

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体を哺乳動物に投与することが含まれ、
式中、Ｒ¹¹が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、そこで許されるならば、Ｒ¹¹はシアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは、−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

動物内でのウルソル酸類似体の利用を増強する性能に関して試験するための方法も開示されており、方法には、（ａ）動物から生物学的試験試料を得ること、および（ｂ）超生理学的量の化合物が試験試料中に存在するかどうかを決定するために、試験試料中の式、

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体の量を測定すること、が含まれ、
式中、それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は、任意に存在し、ｎは、０または１であり、Ｒ⁰は、存在する場合、水素であり、Ｒ^1aは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、Ｒ^1bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つが、−ＯＲ¹¹であり、他は、水素であり、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが、同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ¹⁰は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならば、Ｒ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、試験試料中の前記超生理学的な量の化合物が、化合物の利用を増強させる性能の示唆である。

動物における筋萎縮を予防または処置するために効果的な量で、薬学的に許容可能な担体と、効果的な量の、式

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体を含む薬学的組成物がまた開示されており、式中、
それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は、任意に存在し、
ｎは、０または１であり、Ｒ⁰は存在する場合、水素であり、Ｒ^1aは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、Ｒ^1bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、共有結合しており、中間炭素とともに、一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bは、少なくとも１つのＲ^2aおよびＲ^2bが−ＯＲ¹¹であるという条件で、独立して水素および−ＯＲ¹¹から選択され、またはＲ^2aおよびＲ^2bは、一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式、

の部分を含み、Ｙは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、前記量が、化合物がウルソル酸、ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である場合に、約１０００ｍｇ／日より多い。

式、

によって表される構造を持つ少なくとも１つの化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体と、１つまたはそれ以上の（ａ）タンパク質サプリメント、（ｂ）同化剤、（ｃ）異化剤、（ｄ）栄養補助食品、（ｅ）筋肉消耗に関連した疾病を処置すると公知の少なくとも１つの薬剤、（ｆ）コリン作用活性と関連した疾病を処置するための手引き、または（ｇ）筋肉量および／または筋肉強度を増加させるために、化合物を使用するための手引き、を含むキットがまた開示されており、
式中、それぞれ、−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は、任意に存在し、ｎは、０または１であり、Ｒ⁰は、存在する場合、水素であり、Ｒ^1aは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、Ｒ^1bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bは、少なくとも１つのＲ^2aおよびＲ^2bが−ＯＲ¹¹であるという条件で、独立して水素および−ＯＲ¹¹から選択され、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は、共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は、式、

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

筋萎縮に関する医薬品、または少なくとも１つの開示された化合物、または少なくとも１つの開示された産物を薬学的に許容可能な担体または希釈剤と混合することを含む、筋肉量を増加させるための必需品を製造するための方法も開示されている。

筋萎縮と関連する疾病の処置のための医薬品または筋肉量を増加させるための必需品の製造における、開示された化合物または開示された産物の利用も開示されている。

本発明の態様が、システム法定クラスのような、特定の法定クラスを記述および請求可能である一方で、利便性のためのみであり、当業者は、本発明のそれぞれの態様を、任意の法定クラスにて記述および請求可能であることを理解するであろう。

他に言及しない限り、本明細書で説明した任意の方法または態様が、その段階を特定の順番で実施する必要があると理解される意図はない。したがって、方法請求項が、段階が特定の順番に制限されるべきであると、請求項または記述で特に言及しない場合、任意の観点で、順番が推測される意図はない。これは、段階または実施フローのアレンジメントに関する論理、文法的構成または句読点から由来する平易な意味、または本明細書で記述した態様の数または型を含む、解釈のための任意の可能な非発現基準を保留する。

本明細書の一部に組み込まれ、構成する、付随する図面が、本発明の原理を説明するために役立つ記述とともに、種々の態様を説明する。

骨格筋増殖を促進し、骨格筋萎縮を阻害する薬理学的化合物を導く、探索工程の概略図である。 健康ヒト成人における骨格筋ｍＲＮＡ発現における絶食の影響についての代表的なデータである。 ヒト骨格筋からの、代表的な絶食応答性ｍＲＮＡのｑＰＣＲ解析を示している。 絶食誘導骨格筋萎縮の阻害剤としての、ウルソル酸の同定における代表的データを示している。 脱神経誘導筋萎縮の阻害剤としての、ウルソル酸の同定における代表的データを示している。 筋肥大のウルソル酸仲介誘導における代表的データを示している。 マウス骨格筋特異的強縮性力における、ウルソル酸の効果における代表的データを示している。 筋肉増殖、萎縮性遺伝子発現、栄養遺伝子発現および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達における、ウルソル酸の効果における代表的データを示している。 ＩＧＦ１遺伝子エクソンの骨格筋発現、脂肪ＩＧＦ１ ｍＲＮＡ発現、および骨格筋インスリンシグナル伝達における、ウルソル酸の効果における代表的データを示している。 脂肪症におけるウルソル酸の効果における代表データを示している。 食物消費、肝臓重量、腎臓重量、および血漿ＡＬＴ、ビリルビンおよびクレアチニン濃度における、ウルソル酸の効果における代表データを示している。 肥満および代謝性症候群のマウスモデルにおける、体重増加、白色脂肪組織重量、骨格筋重量、茶色脂肪組織重量およびエネルギー消費における、ウルソル酸の効果における代表データを示している。 肥満および代謝性症候群のマウスモデルにおける、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪肝疾患および高脂血症における、ウルソル酸の効果における代表データを示している。 骨格筋量における、オレアノール酸の効果における代表データを示している。 骨格筋増殖における、ＰＴＰ１Ｂの標的化阻害の効果における代表的データを示している。 筋肉量および脂肪症におけるウルソル酸血清濃度の効果における代表的データを示している。

本発明のさらなる利点が、部分的に以下に続く記述中で説明され、部分的に記述から明らかであり、または本発明の実施によって理解され得る。本発明の利点は、付随する請求項にて特に指摘された要素および組み合わせの方法によって実現し、達成される。以上の一般的な記述と、以下の詳細な記述両方が、例示的であり、説明的のみであり、請求したように、本発明の制限ではないことが理解されるべきである。

本発明は、本発明の以下の詳細な記述と、そこに含まれる実施例を参照することによって、より簡単に理解可能である。

本化合物、組成物、文献、システム、デバイスおよび／または方法が開示され、記述される前に、特定しない限り特定の合成方法、または特定しない限り特定の試薬に制限されず、もちろんそれらは変化し得ることが理解されるべきである。また、本明細書で使用する語句は、特定の態様を記述する目的のためのみであり、制限の意味はないことも理解されるべきである。本明細書で記述された同様のまたは等価の任意の方法および物質が、本発明の実施において、または試験において使用可能であるけれども、典型的方法および物質を本明細書で記述する。

本明細書で言及したすべての発行物が、その発行物が引用されたものと関連した方法および／または物質を開示し、記述するために、参考文献によって本明細書に組み込まれている。本明細書で議論した発行物は、本発明明細書の申請日前のそれらの開示に対してのみ提供される。本明細書のいずれもが、本発明が、先行技術発明のおかげでそのような発行物に先行する権利を与えられないことの承認として解釈されるべきでない。さらに、本明細書で提供された発行物の日付は、実際の発行日とは異なり得、独立した確認が必要であり得る。

Ａ．定義
本明細書で使用するところの、有機化合物を含む化合物の用語体系は、用語体系に対する一般名、ＩＵＰＡＣ、ＩＵＢＭＢ、またはＣＡＳ推奨を用いて与えられてよい。１つまたはそれ以上の立体化学特徴が存在し、立体化学に対するＣａｈｎ−Ｉｎｇｏｌｄ−Ｐｒｅｌｏｇルールを用いて、立体化学優先度、Ｅ／Ｚ特定などを指定可能である。当業者は、命名慣習を用いた化合物構造の合成全体減少によって、またはＣＨＥＭＤＲＡＷ^TM（ケンブリッジソフト・コーポレーション、Ｕ．Ｓ．Ａ）のような市販されているソフトウェアによってのいずれかで、名前が与えられた場合化合物の構造を簡単に確定可能である。

本明細書および付随する請求項で使用するところの、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」には、前後関係が他に明確に特定されてない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「官能基」、「アルキル」または「残基」に対する参照には、２つまたはそれ以上のそのような官能基、アルキルまたは残基などが含まれる。

範囲は、「約」１つの特定の値から、および／または「約」他の特定の値まで、のように本明細書で表現可能である。そのような範囲を表現する時に、さらなる態様には、１つの特定の値から、および／または他の特定の値へ、が含まれる。同様に、先行詞「約」の利用によって値がおよそとして表現される場合、特定の値がさらなる態様を形成すると理解される。各範囲の末端が、他の末端に関連して、そして他の末端と独立しての両方で明らかであることがさらに理解される。本明細書で開示された多数の値が存在すること、各値が、値それ自身に加えて「約」その特定の値としても本明細書で開示されることも理解される。例えば、値「１０」が開示された場合、「約１０」も開示される。２つの特定のユニット間の各ユニットも開示されることも理解される。例えば、１０および１５が開示される場合、１１、１２、１３および１４も開示される。

組成物中の特定の要素または構成要素の重量に対する部分に関する、本明細書と終結請求項における参照は、重量に対する部分が表現される組成物または文献中の要素または構成要素と、他の任意の要素または構成要素間の重量関係を意味する。したがって、構成要素Ｘの体重あたり２部分と、構成要素Ｙの体重あたり５部分を含む化合物において、ＸおよびＹは、２：５の重量比として存在し、さらなる構成要素が化合物に含まれるかどうかにかかわらず、そのような比で存在する。

正反対で特に言及されない限り、構成要素の重量パ−セント（ｗｔ．％）は、構成要素が含まれる処方または組成物の総重量に基づく。

本明細書で使用するところの語句「任意の」または「任意に」は、それ以後記述された事象または環境が発生可能または発生不可能であること、および記述が、前記事象または環境が発生する場合、または発生しない場合を含むこと、を意味する。

本明細書で使用するところの、「ウルソル酸」は、ウルソル酸と、リンゴ、トゥルシー、ビルベリー、クランベリー、エルダーフラワー、ペパーミント、ラベンダー、オレガノ、タイム、セージ、サンサジ、ベアベリーまたはスモモのような植物からのウルソル酸を含む抽出物を意味する。

本明細書で使用するところの、「ウルソル酸誘導体」は、コロソル酸、ベツリン酸、ヘデラゲニン、ボスウェル酸、ＵＡ０７１３、置換ウルソル酸類似物、ウルサン化合物、またはヒトを含む動物における筋萎縮を予防し、筋萎縮を減少させ、筋肉量を増加させ、筋肉強度を増加させ、Ａｋｔリン酸化を増加させ、Ｓ６Ｋリン酸化を増加させ、またはＡｋｔリン酸化またはＳ６Ｋリン酸化を進めるまたは続くと公知の生化学的事象を刺激する任意の他のペンタ環状トリテルペン酸を意味する。例えば、限定はしないが、Ａｋｔリン酸化またはＳ６Ｋリン酸化を進めるまたは続くと公知の生化学的事象は、インスリン受容体リン酸化、ＩＧＦ−１受容体リン酸化、インスリン受容体基質（ＩＲＳ）タンパク質リン酸化、ホスホイノシチド−３キナーゼリン酸化、ホスホイノシチド−３キナーゼ活性化、ホスホイノシチド依存キナーゼ１活性化、ラパマイシン複合体２の哺乳動物標的活性化、アドレナリン受容体活性化、ヘテロトリメリックＧタンパク質活性化、アデニレートシクラーゼ活性化、細胞内環状ＡＭＰ増加、ＡＭＰキナーゼ活性化、タンパク質キナーゼＡ活性化、タンパク質キナーゼＣ活性化、ＣＲＥＢ活性化、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ経路活性化、ラパマイシン複合体１の哺乳動物標的活性化、４Ｅ−ＢＰ１リン酸化、４Ｅ−ＢＰ１不活性化、ＧＳＫ３βリン酸化、ＧＳＫ３β不活性化、タンパク質合成増加、グルコース取込増加、Ｆｏｘｏ転写因子リン酸化、Ｆｏｘｏ転写因子不活性化、Ｃｄｋｎ１ａリン酸化、Ｃｄｋｎ１ａ不活性化、アトロジン−１ ｍＲＮＡ減少、ＭｕＲＦ１ ｍＲＮＡ減少、ＶＥＧＦＡ ｍＲＮＡ増加またはＩＧＦ１ ｍＲＮＡ増加のような事象であり得る。

本明細書で使用するところの語句「対象」は、投与の対象、例えば動物を意味する。したがって、本明細書で開示された方法の対象は、哺乳動物、魚、鳥、は虫類または両生類のような脊椎動物であり得る。あるいは、本明細書で開示された方法の対象は、ヒト、非ヒト霊長類、ウマ、ブタ、ウサギ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ネコ、モルモットまたは齧歯類であり得る。本語句は、特定の年齢または性別を意味しない。したがって、成体および新生対象、ならびに胎児は、オスであろうとメスであろうと、カバーされるように意図される。１つの態様において、対象は哺乳動物である。患者は、疾患または疾病を患っている対象を意味する。語句「患者」には、ヒトおよび脊椎対象が含まれる。開示された方法のいくつかの態様において、対象は、投与段階の前に、１つまたはそれ以上の筋肉疾病の処置に対する必要性であると診断された。開示された方法のいくつかの態様において、対象は、投与段階の前に、筋肉量を増加させることが必要であると診断される。開示された方法のいくつかの態様において、対象は、投与段階前に、筋肉量を増加させることが必要性であると診断される。

本明細書で使用するところの語句「処置」は、疾患、病理的状態または疾病を治癒させる、緩和する、安定化させるまたは予防する意図を伴う、患者の医学的マネージメントを意味する。本語句には、能動的処置、すなわち疾患、病理的状態または疾病の改善を特に指向する処置が含まれ、また因果的処置、すなわち、関連する疾患、病理的状態または疾病の原因を取り除くことを指向する処置が含まれる。さらに、本語句には、苦痛緩和処置、すなわち疾患、病理的状態または疾病の治癒よりも、症状の緩和のためにデザインされた処置、保護処置、すなわち関連した疾患、病理的状態または疾病の発達を最小化すること、または部分的または完全に阻害することを指向する処置、サポーティブ処置、すなわち関連する疾患、病理的状態または疾病の改善を指向する他の特定の治療を補完するために使用する処置が含まれる。種々の態様において、本語句は、哺乳動物（例えばヒト）を含む対象の任意の処置をカバーし、（ｉ）疾患にかかりやすいが、疾患を持つと診断はされていない対象において疾患が発生することを予防すること、（ｉｉ）疾患を阻害すること、すなわちその発達を停止すること、または（ｉｉｉ）疾患を軽減すること、すなわち疾患の退行を引き起こすこと、が含まれる。１つの態様において、対象は、霊長類のような哺乳動物であり、さらなる態様において、対象はヒトである。語句「対象」はまた、家畜（ｄｏｍｅｓｔｉｃａｔｅｄ）動物（例えばネコ、イヌなど）、家畜（ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ）（例えば、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギなど）、および実験室動物（例えば、マウス、ウサギ、ラット、モルモット、ミバエなど）を含む。

本明細書で使用するところの語句「予防する」または「予防すること」は、とりわけ前もっての操作によって、あることが発生することを、起きないようにすること、回避すること、取り除くこと、未然に防ぐこと、停止させること、または妨害することを意味する。減少する、阻害するまたは予防するが本明細書で使用される場合、他に特に示唆しない限り、他の２つの語句の利用もまた明確に開示される。

本明細書で使用するところの語句「診断された」は、当業者、例えば医師による健康診断にかかり、本明細書で開示された化合物、組成物、または方法によって診断または処置可能である状態を持つことが発見されることを意味する。例えば、「筋萎縮疾病を診断された」は、当業者、例えば医師による健康診断にかかり、筋肉量を増加させることが可能な化合物または組成物によって診断または処置可能な状態を持つことが発見されることを意味する。さらなる例として、「筋肉量を増加させることが必要と診断された」は、当業者、例えば医師による健康診断にかかり、筋肉量の増加が当該対象に有益であり得る筋萎縮または他の疾患によって特徴付けられる状態を持つことが発見されることを意味する。そのような診断は、本明細書で議論したように、筋萎縮などのような疾病に関連し得る。

本明細書で使用するところの表現「疾病に対する処置が必要であると同定された」などは、疾病の処置に対する必要性に基づいた対象の選別を意味する。例えば、当業者による初期診断に基づき、疾病（例えば、筋萎縮に関連した疾病）の処置に対する必要性があると対象を同定可能であり、その後、その疾病の処置にかけることが可能である。１つの態様において、同定は、診断を実施する人とは異なる人によって実施可能であることが企図される。さらなる態様において、投与が、続いて投与を実施する人によって実施可能であることが企図される。

本明細書で使用するところの語句「投与すること」および「投与」は、対象へ薬学的調製物を提供する任意の方法を意味する。そのような方法は、当業者に周知であり、経口投与、経皮投与、吸入による投与、経鼻投与、局所投与、直腸内投与、眼内投与、耳内投与、脳内投与、直腸投与、舌下投与、口腔投与、および静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与および皮下投与のような注射可能を含む非経口投与を含むが、これらに限定はされない。投与は連続または断続的であり得る。種々の態様において、調製物は治療的に投与可能であり、すなわち、現存する疾患または疾病を処置するために投与可能である。さらなる種々の態様において、調製物は予防的に投与可能であり、すなわち疾患または状態の予防のために投与可能である。

本明細書で使用するところの語句「接触すること」は、化合物が、直接的、すなわち標的それ自身との相互作用によって、または間接的、すなわち他の分子、その上で標的の活性が依存する補因子、因子またはタンパク質との相互作用によってのいずれかで、標的（例えば受容体、転写因子、細胞など）の活性に影響を与えることができるような様式で、開示された化合物および細胞、標的受容体または他の生物学的実体を一緒に運ぶことを意味する。

本明細書で使用するところの語句「効果的量」および「効果的な量」は、望む結果を達成するため、または望まない状態に効果を持つために十分な量を意味する。例えば、「治療的に効果的な量」は、望む治療的結果を達成するために、または望まない症状において効果を持つために十分であるが、一般的に副作用を引き起こすには不十分である量を意味する。任意の特定の患者に対する特定の治療的に効果的な投与レベルは、処置している疾病、疾病の重症度、使用する特定の組成物、患者の年齢、体重、一般的健康、性別および食事、投与時間、投与経路、使用する特定の化合物の排出速度、処置期間、使用する特定の化合物との組み合わせ、または同時に使用する薬物および医学領域で周知の同様の因子を含む種々の因子に依存する。例えば、望む治療効果を達成するために必要なものよりも低いレベルで、化合物の投与を開始し、望む効果が達成されるまで用量を徐々に増加させることが当業者の中で良く行われる。望むならば、効果的な毎日投与量を投与の目的で複数の用量に分割可能である。結果として、単一投与量組成物は、毎日投与量を構成するために、そのような量またはその約数を含んでよい。用量は、任意の禁忌の事象において、個々の医師によって調整され得る。用量は、変化可能であり、１日または数日にわたり、毎日１つまたはそれ以上の用量投与で投与可能である。当該クラスの薬学的産物に対する適切な用量に対して、文献中でガイドラインを見つけることが可能である。さらなる種々の態様において、調製物を、「予防的に効果的な量」にて、すなわち、疾患または状態の予防に効果的な量で投与可能である。

本明細書で使用するところの「ＥＣ₅₀」は、タンパク質、サブユニット、オルガネラ、リボヌクレオタンパク質などを含む、生物学的工程、または工程の構成要素の５０％増強または活性化のために必要な基質（例えば化合物または薬物）の濃度または用量を意味する。ＥＣ₅₀はまた、本明細書の他でさらに定義するように、ｉｎ ｖｉｖｏで５０％増幅または活性化のために必要な基質の濃度または用量を意味する。あるいは、ＥＣ₅₀は、ベースラインと最大応答間の半分の応答を発揮する化合物の濃度または用量を意味することができる。応答は、対象の生物学的応答に対して便利で、適切であるように、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏシステムにて測定可能である。例えば、応答は、培養筋肉細胞を用いてｉｎ ｖｉｔｒｏで、または単離した筋肉線維を含む、ｅｘ ｖｉｖｏ器官培養システムにて測定可能である。あるいは、応答は、マウスおよびラットを含む齧歯類のような適切な研究モデルを用いて、ｉｎ ｖｉｖｏにて測定可能である。マウスまたはラットは、肥満または糖尿病のような対象の表現型特徴を持つ近交系種であってよい。適切に、応答は、疾患工程を再現するために、適切に、遺伝子または遺伝子類が導入されるか、ノックアウトされた、トランスジェニックまたはノックアウトマウスまたはラットにて測定可能である。

本明細書で使用するところの「ＩＣ₅₀」は、タンパク質、サブユニット、オルガネラ、リボヌクレオタンパク質などを含む、生物学的工程、または工程の構成要素の、５０％阻害または減少のために必要な基質（例えば化合物または薬物）の濃度または用量を意味する意図がある。ＩＣ₅₀はまた、本明細書の他でさらに定義するように、ｉｎ ｖｉｖｏで５０％阻害または減少のために必要な基質の濃度または用量を意味する。あるいは、ＩＣ₅₀はまた、基質の半最大（５０％）阻害濃度（ＩＣ）または阻害用量を意味する。応答は、対象の生物学的応答に対して便利で、適切であるように、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏシステムにて測定可能である。応答は培養筋肉細胞を用いてｉｎ ｖｉｔｒｏで、または単離した筋肉線維を含む、ｅｘ ｖｉｖｏ器官培養システムにて測定可能である。あるいは、応答は、マウスおよびラットを含む齧歯類のような適切な研究モデルを用いて、ｉｎ ｖｉｖｏにて測定可能である。マウスまたはラットは、肥満または糖尿病のような対象の表現型特徴を持つ近交系種であってよい。適切に、応答は、疾患工程を再現するために、適切に、遺伝子または遺伝子類が導入されるか、ノックアウトされた、トランスジェニックまたはノックアウトマウスまたはラットにて測定可能である。

語句「薬学的に許容可能」は、生物学的ではない、または望まない、すなわち許容できないレベルの望まない生物学的効果を引き起こすことなし、または有害な様式で相互作用することなしの、物質を記述する。

本明細書で使用するところの語句「誘導体」は、親化合物（例えば本明細書で開示された化合物）の構造から誘導される構造を持ち、その構造が、本明細書で開示したものと十分の同様であり、類似性に基づき、請求した化合物と同一であるか、類似する活性および利便性を示唆し、または請求した化合物と同一であるか、または類似する活性および利便性を、前駆体として誘導することが当業者によって期待される、化合物を意味する。典型的な誘導体には、親化合物の塩、エステル、アミド、エステルまたはアミドの塩、およびＮ−オキシドが含まれる。

本明細書で使用するとことの語句「薬学的に許容可能な担体」は、無菌水性または非水性溶液、分散、懸濁液または乳液、ならびに使用の直前に無菌注射可能溶液または分散内に再構成するための無菌粉末を意味する。好適な水性および非水性担体、希釈剤、溶媒または賦形剤の例には、水、エタノール、（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどのような）ポリオール類、カルボキシメチルセルロースおよび好適なそれらの混合物、（オリーブ油のような）植物油およびオレイン酸エチルのような注射可能有機エステルが含まれる。適切な流動性を、レシチンのようなコーティング物質を利用することによって、懸濁液の場合、必要な粒子サイズを維持することによって、および界面活性剤を利用することによって、維持可能である。これらの組成物はまた、保存剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のような添加剤を含んでよい。微生物の活性の防止を、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などのような種々の抗生物質および抗菌剤の挿入によって確かなものにし得る。糖、塩化ナトリウムなどのような等張剤を含むことも望ましい。注射可能薬学的形態の吸収の延長を、吸収を遅延するモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンのような薬剤の封入によって引き起こすことが可能である。注射可能貯蔵形態を、薬物の微小カプセルマトリックスを、ポリラクチド−ポリグリコシド、ポリ（オルトエステル類）およびポリ（無水物類）のような生物分解性ポリマー内に形成させることによって作製する。ポリマーに対する薬物の比率、および使用する特定のポリマーの性質に依存して、薬物放出の速度を制御可能である。貯蔵注射可能処方をまた、薬物を、体組織と適合するリポソームまたはミクロエマルジョン中に入れることによって調製する。注射可能処方は、例えば、細菌残余フィルターを通した濾過によって、または利用の直前に、無菌水または他の無菌注射可能培地中に溶解または分散可能な無菌固体組成物の形態で、無菌薬剤を組み込むことによって滅菌可能である。好適な不活性担体には、ラクトースのような糖を含んでよい。望むように、活性成分の粒子の重量あたり少なくとも９５％が、０．０１〜１０マイクロメーターの範囲で、効果的な粒子サイズを持つ。

本明細書と終結請求項にて使用されるような、化学種の残基は、部分が実際に化学種から得られるかどうかにかかわらず、特定の反応スキーム中の化学種の得られる産物、または続く処方または化学産物である部分を意味する。したがって、ポリエステル中のエチレングリコール残基は、エチレングリコールがポリエステルを調製するために使用されたかどうかにかかわらず、ポリエステル中の１つまたはそれ以上の−ＯＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ−ユニットを意味する。同様に、ポリエステル中のセバシン酸残基は、ポリエステルを得るために、セバシン酸またはそのエステルを反応させることによって残基を得るかどうかにかかわらず、ポリマー中の１つまたはそれ以上の−ＣＯ（ＣＨ₂）₈ＣＯ−部分を意味する。

本明細書で使用するところの語句「置換」は、有機化合物のすべての許容される置換基を含むことが企図される。広い態様において、許容可能な置換基には、有機化合物の非環式および環式、分岐および未分岐、炭素環式およびヘテロ環式、芳香族および非芳香族置換基が含まれる。代表的置換基には、例えば以下で記述するものが含まれる。許容可能な置換基は、適切な有機化合物に対して、１つまたはそれ以上であり、同一または異なってよい。本開示物の目的のために、窒素のようなヘテロ原子が、水素置換基、および／またはヘテロ原子の価数を満足させる、本明細書で記述した有機化合物の任意の許容可能な置換基を持ってよい。本開示物は、有機化合物の許容可能な置換基によって任意の様式で制限される意図はない。また、語句「置換」または「によって置換された」には、そのような置換基が、置換された原子と置換基の許容された価数にしたがってであり、置換が結果として安定化合物、例えば再配置、環化、除外などによってのような変化を自発的に受けない化合物となるという暗黙の条件を含む。特定の態様において、反対のことを明確に指摘しない限り、個々の置換基をさらに任意に置換（すなわちさらに置換または未置換）可能であることも企図される。

種々の語句の同定において、「Ａ¹」、「Ａ²」、「Ａ³」および「Ａ⁴」を、種々の特定の置換基を表すための一般的シンボルとして本明細書で使用する。これらのシンボルは、任意の置換基であってよいが、本明細書に開示されたものに限定はせず、１つの例で特定の置換基であると定義する場合、他の例では、他の置換基として定義可能である。

本明細書で使用するところの語句「アルキル」は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｓ−ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、エイコシル、テトラコシルなどのような、１〜２４炭素原子の分岐または未分岐飽和炭化水素基である。アルキル基は、環状または非環状であってよい。アルキル基は分岐しているか、分岐していなくてよい。アルキル基はまた飽和しているか、または飽和していなくてよい。例えば、アルキル基は、１つまたはそれ以上の本明細書で記述したような、アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アミノ、エーテル、ハライド、ヒドロキシ、ニトロ、シリル、スルホ−オキシまたはチオールを含む基によって置換されてよいが、それらに限定はされない。「低級アルキル」基は、１〜６（例えば１〜４）炭素原子を含むアルキル基である。

本明細書の至る所で、「アルキル」は一般的に、非置換アルキル基および置換アルキル基両方を意味するために使用されるが、置換アルキル基はまた、アルキル基上の特定の置換基（類）を同定することによって本明細書で特に参照される。例えば、語句「ハロゲン化アルキル」または「ハロアルキル」は特に、１つまたはそれ以上のハライド、例えばフッ素、塩素、臭素およびヨウ素で置換されたアルキル基を意味する。語句「アルコキシアルキル」は特に、以下で記述するような、１つまたはそれ以上のアルコキシ基で置換されるアルキル基を意味する。語句「アルキルアミノ」は特に、以下で記述するような１つまたはそれ以上のアミノ基などで置換されるアルキル基を意味する。「アルキル」が１つの例で使用される場合、「アルキルアルコール」のような特定の語が、他で使用され、語句「アルキル」がまた、「アルキルアルコール」などのような特定の語を引用しないことを暗示する意味はない。

本実施はまた、本明細書で記述した他の基に対して使用される。すなわち、「シクロアルキル」のような語句が、非置換および置換シクロアルキル部位両方を意味する一方で、置換部位が加えて、本明細書で特に同定可能であり、例えば、特定の置換シクロアルキルが、例えば「アルキルシクロアルキル」として引用可能である。同様に、置換アルコキシが、例えば「ハロゲン化アルコキシ」として特に引用可能であり、特定の置換アルケニルが、例えば「アルケニルアルコール」であり得、その他同様である。再び、「シクロアルキル」のような一般語句、および「アルキルシクロアルキル」のような特定の語句を用いる実施は、一般語句が特定の語句も含まないことを暗示する意味はない。

本明細書で使用するところの語句「シクロアルキル」は、少なくとも３つの炭素原子からなる、非芳香族炭素基礎環である。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ノルボルニルなどが含まれるが、これらに限定されない。語句「ヘテロシクロアルキル」は、以上で定義したような１つの型のシクロアルキル基であり、語句「シクロアルキル」の意味内に含まれ、そこで環の炭素原子の少なくとも１つが窒素、酸素、硫黄またはリンのようなヘテロ原子で置換されるが、それらに限定はされない。シクロアルキル基とヘテロシクロアルキル基は、置換されてよく、または未置換でよい。シクロアルキル基およびヘテロシクロアルキル基は、本明細書で記述したアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アミノ、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ニトロ、シリル、スルホ−オキソ、またはチオールを含むがこれらの限定はされない、１つまたはそれ以上の基によって置換可能である。

本明細書で使用するところの語句「ポリアルキレン基」は、他に連結した、２つまたはそれ以上のＣＨ₂基を持つ基である。ポリアルキレン基は、式−（ＣＨ₂）_a−によって表すことが可能であり、式中「ａ」は２〜５００の整数である。

本明細書で使用するところの語句「アルコキシ」および「アルコキシル」は、エーテル結合を通して結合したアルキルまたはシクロアルキル基を意味し、すなわち「アルコキシ」基は−ＯＡ¹−として定義することができ、式中Ａ¹は以上で定義したようなアルキルまたはシクロアルキルである。「アルコキシ」はまた、ただ記述したようなアルコキシ基のポリマーを含み、すなわち、アルコキシは、−ＯＡ¹−ＯＡ²または−ＯＡ¹−（ＯＡ²）_a−ＯＡ³のようなポリエーテルであってよく、式中「ａ」は１〜２００の整数であり、Ａ¹、Ａ²およびＡ³はアルキルおよび／またはシクロアルキル基である。

本明細書で使用するところの語句「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む構造式を持つ、２〜２４の炭素原子の炭化水素基である。（Ａ¹Ａ²）Ｃ＝Ｃ（Ａ³Ａ⁴）のような非対称構造が、ＥおよびＺ異性体両方を含むことを意図する。これは、非対称アルケンが存在する本明細書の構造式中で推測可能であり、または結合シンボルＣ＝Ｃによって明確に示唆され得る。アルケニル基は、本明細書で記述したように、アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、アルデヒド、アミノ、カルボン酸、エステル、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ケトン、アジド、ニトロ、シリル、スルホ−オキソまたはチオールを含むが、これらに限定はされない１またはそれ以上の基によって置換可能である。

本明細書で使用するところの語句「シクロアルケニル」は、少なくとも３つの炭素原子からなり、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合、すなわちＣ＝Ｃを含む、非芳香族炭素基礎環である。シクロアルケニル基の例には、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、ノルボルネニルなどが含まれるが、これらに限定はされない。語句「ヘテロシクロアルケニル」は、以上で定義したような、シクロアルケニル基の１つの型であり、語句「シクロアルケニル」の意味の中に含まれ、そこで環の少なくとも１つの炭素原子が、窒素、酸素、硫黄またはリンのような、しかしこれらに限定はされないヘテロ原子で置換される。シクロアルケニル基およびヘテロシクロアルケニル基は、置換されてよく、未置換であってよい。シクロアルケニル基およびヘテロシクロアルケニル基は、本明細書で記述したような、アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、アルデヒド、アミノ、カルボン酸、エステル、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ケトン、アジド、ニトロ、シリル、スルホ−オキソまたはチオールを含むが、これらの限定はされない１つまたはそれ以上の基で置換可能である。

本明細書で使用するところの語句「アルキニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む構造式を持つ、２〜２４炭素原子の炭化水素基である。アルキニル基は、未置換であってよく、または本明細書で記述したような、アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、アルデヒド、アミノ、カルボン酸、エステル、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ケトン、アジド、ニトロ、シリル、スルホ−オキソまたはチオールを含むが、これらの限定はされない１つまたはそれ以上の基で置換可能である。

本明細書で使用するところの語句「シクロアルキニル」は、少なくとも７つの炭素原子からなり、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む、非芳香族炭素基礎環である。シクロアルキニル基の例には、シクロへプチニル、シクロオクチニル、シクロノニニルなどが含まれるが、それらに限定はされない。語句「ヘテロシクロアルキニル」は、以上に定義したようなシクロアルケニル基の１つの型であり、語句「シクロアルキニル」の意味内に含まれ、そこで環の少なくとも１つの炭素原子が、窒素、酸素、硫黄またはリンのような、しかしこれらの限定はされないヘテロ原子で置換される。シクロアルキニル基およびヘテロシクロアルキニル基は、置換されてよく、または未置換であってよい。シクロアルキニル基およびヘテロシクロアルキニル基は、本明細書で記述したような、アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、アルデヒド、アミノ、カルボン酸、エステル、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ケトン、アジド、ニトロ、シリル、スルホ−オキソまたはチオールを含むが、これらの限定はされない１つまたはそれ以上の基で置換可能である。

本明細書で使用するところの語句「アリール」は、ベンゼン、ナフタレン、フェニル、ビフェニル、フェノキシベンゼンなどを含むが、これらに限定はされない、任意の炭素基礎芳香族基を含む一基である。語句「アリール」はまた、「ヘテロアリール」を含み、これは、芳香族基の環内に組み込まれた少なくとも１つのヘテロ原子を持つ芳香族基を含む一基として定義される。ヘテロ原子の例には、窒素、酸素、硫黄およびリンが含まれるが、これらの限定はされない。同様に、また語句「アリール」内に含まれる、語句「非ヘテロアリール」は、ヘテロ原子を含まない芳香族基を含む一基を定義する。アリール基は、置換されてよく、または未置換であってよい。アリール基は、本明細書で記述したような、アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、アルデヒド、アミノ、カルボン酸、エステル、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ケトン、アジド、ニトロ、シリル、スルホ−オキソまたはチオールを含むが、これらの限定はされない１つまたはそれ以上の基で置換可能である。語句「ビアリール」は、アリール基の特定の型であり、「アリール」の定義に含まれる。ビアリールは、ナフタレン中のように、融合環構造を介して一緒に結合する、またはビフェニル中のように、１つまたはそれ以上の炭素−炭素結合を介して接続する、２つのアリール基を意味する。

本明細書で使用するところの語句「アルデヒド」は、−Ｃ（Ｏ）Ｈによって表される。本明細書の至る所で、「Ｃ（Ｏ）」はカルボニル基に対する略語、すなわちＣ＝Ｏである。

本明細書で使用するところの語句「アミン」または「アミノ」は、式−ＮＡ¹Ａ²によって表され、式中Ａ¹およびＡ²は独立して、本明細書にて記述したような、水素またはアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得る。

本明細書で使用するところの語句「アルキルアミノ」は、式−ＮＨ（−アルキル）によって表され、そこでアルキルは本明細書で記述されたものである。代表的な例には、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、ブチルアミノ基、イソブチルアミノ基、（ｓｅｃ−ブチル）アミノ基、（ｔｅｒｔ−ブチル）アミノ基、ペンチルアミノ基、イソペンチルアミノ基、（ｔｅｒｔ−ペンチル）アミノ基、ヘキシルアミノ基などが含まれるが、これらに限定はされない。

本明細書で使用するところの語句「ジアルキルアミノ」は、式−Ｎ（−アルキル）₂によって表され、アルキルは本明細書で記述されたものである。代表的な例には、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ジプロピルアミノ基、ジイソプロピルアミノ基、ジブチルアミノ基、ジイソブチルアミノ基、ジ（ｓｅｃ−ブチル）アミノ基、ジ（ｔｅｒｔ−ブチル）アミノ基、ジペンチルアミノ基、ジイソペンチルアミノ基、ジ（ｔｅｒｔ−ペンチル）アミノ基、ジヘキシルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−プロピルアミノ基などが含まれるが、これらに限定はされない。

本明細書で使用するところの語句「カルボン酸」は、式−Ｃ（Ｏ）ＯＨによって表される。

本明細書で使用するところの語句「エステル」は、式−ＯＣ（Ｏ）Ａ¹または−Ｃ（Ｏ）ＯＡ¹によって表され、式中Ａ¹は本明細書で記述したような、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得る。本明細書で使用するところの語句「ポリエステル」は、式−（Ａ¹Ｏ（Ｏ）Ｃ−Ａ²−Ｃ（Ｏ）Ｏ）_a−または−（Ａ¹Ｏ（Ｏ）Ｃ−Ａ²−ＯＣ（Ｏ））_a−によって表され、式中Ａ¹およびＡ²は独立して、本明細書で記述したアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得、「ａ」は１〜５００の整数である。「ポリエステル」は、少なくとも２つのカルボン酸基を持つ化合物と、少なくとも２つのヒドロキシル基を持つ化合物間の反応によって産出される基を記述するために使用される。

本明細書で使用するところの語句「エーテル」は、式Ａ¹ＯＡ²によって表され、式中Ａ¹およびＡ²は独立して、本明細書で記述したアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得る。本明細書で使用するところの語句「ポリエーテル」は、式−（Ａ¹Ｏ−Ａ²Ｏ）_a−によって表され、式中Ａ¹およびＡ²は独立して、本明細書で記述したアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得、「ａ」は１〜５００の整数である。ポリエーテル基の例には、酸化ポリエチレン、酸化ポリプロピレンおよび酸化ポリブチレンが含まれる。

本明細書で使用するところの語句「ハロゲン化物」は、ハロゲン、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を意味する。

本明細書で使用するところの語句「ヘテロ環」は、環メンバーの少なくとも１つが炭素以外である、単環および多重環状芳香族または非芳香族環システムを意味する。ヘテロ環には、アゼチジン、ジオキサン、フラン、イミダゾール、イソチアゾール、イソキサゾール、モルホリン、オキサゾール、１，２，３−オキサジアゾール、１，２，５−オキサジアゾールおよび１，３，４−オキサジアゾールを含むオキサゾール、ピペラジン、ピペリジン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、１，２，４，５−テトラジンを含むテトラジン、１，２，３，４−テトラゾールおよび１，２，４，５−テトラゾールを含むテトラゾール、１，２，３−チアジアゾール、１，２，５−チアジアゾールおよび１，３，４−チアジアゾールを含むチアジアゾール、チアゾール、チオフェン、１，３，５−トリアジンおよび１，２，４−トリアジンを含むトリアジン、１，２，３−トリアゾール、１，３，４−トリアゾールを含むトリアゾールなどが含まれる。

本明細書で使用するところの語句「ヒドロキシル」は、式−ＯＨによって表される。

本明細書で使用するところの語句「ケトン」は、式Ａ¹Ｃ（Ｏ）Ａ²によって表され、式中Ａ¹およびＡ²は独立して、本明細書で記述したような、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得る。

本明細書で使用するところの語句「アジド」は、式−Ｎ₃によって表される。

本明細書で使用するところの語句「ニトロ」は、式−ＮＯ₂によって表される。

本明細書で使用するところの語句「ニトリル」は、式−ＣＮによって表される。

本明細書で使用するところの語句「シリル」は、式−ＳｉＡ¹Ａ²Ａ³によって表され、式中Ａ¹、Ａ²およびＡ³は独立して、水素または本明細書で記述したようなアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得る。

本明細書で使用するところの語句「スルホ−オキソ」は、式−Ｓ（Ｏ）Ａ¹、−Ｓ（Ｏ）₂Ａ¹、−ＯＳ（Ｏ）₂Ａ¹または−ＯＳ（Ｏ）₂ＯＡ¹によって表され、式中Ａ¹は水素、または本明細書で記述したようなアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得る。本明細書の至る所で、「Ｓ（Ｏ）」はＳ＝Ｏに対する略語である。語句「スルホニル」は、式−Ｓ（Ｏ）₂Ａ¹によって表されるスルホ−オキソ基を意味するために本明細書で使用され、式中Ａ¹は、水素または本明細書で記述したようなアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得る。本明細書で使用するところの語句「スルホン」は、式Ａ¹Ｓ（Ｏ）₂Ａ²によって表され、式中Ａ¹およびＡ²は独立して本明細書で記述したようなアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得る。本明細書で使用するところの語句「スルホキシド」は、式Ａ¹Ｓ（Ｏ）Ａ²によって表され、式中Ａ¹およびＡ²は独立して、本明細書で記述したようなアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリールまたはヘテロアリール基であり得る。

本明細書で使用するところの語句「チオール」は、式−ＳＨによって表される。

本明細書で使用するところの、ｎが整数である、「Ｒ¹」、「Ｒ²」、「Ｒ³」、「Ｒⁿ」は独立して、１つまたはそれ以上の以上で列記した基を有し得る。例えば、Ｒ¹が直鎖アルキル基である場合、アルキル基の水素原子の１つは、任意にヒドロキシル基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン化物などによって置換可能である。選択される基に依存して、第一基が、第二基内に組み込まれてよく、あるいは、第一基が、第二基に対してぶら下がり（すなわち接続）可能である。例えば、語句「アミノ基を含むアルキル基」によって、アミノ基が、アルキル基の骨格内に組み込まれ得る。あるいは、アミノ基をアルキル基の骨格に接続可能である。選択される基の性質は、第一基が第二基に埋め込まれるか、または接続するかどうかを決定する。

本明細書で使用するように、本発明の化合物は、「任意に置換された」部位を含んでよい。一般に、語句「任意に」が先行するかまたはせずに、語句「置換された」は、指定された部位の１つまたはそれ以上の水素が、好適な置換基で置換されることを意味する。他に指摘しない限り、「任意に置換された」基は、基の各置換可能位置にて好適な置換基を持ってよく、任意の与えられた構造中の２つ以上の位置が、特定の基から選択された２つ以上の置換基で置換され得る時に、置換基は、すべての位置にて同一か異なるかいずれかであってよい。本発明によって想定された置換基の組み合わせが、好ましくは、安定または化学的に実現可能な化合物の形成となるものである。特定の態様において、反対に明確に示唆しない限り、個々の置換基は、さらに任意に置換可能である（すなわちさらに置換されるか、または未置換であってよい）ことも企図される。

本明細書で使用するところの語句「安定」は、それらの産出、検出、および特定の態様において、それらの回収、精製、および１つまたはそれ以上の本明細書で開示した目的のための利用を許容するための条件にかけた時に、本質的に変化しない化合物を意味する。

「任意に置換された」基の置換可能炭素原子上の好適な一価置換基は独立して、ハロゲン、−（ＣＨ₂）_0-4Ｒ°、−（ＣＨ₂）_0-4ＯＲ°、−Ｏ（ＣＨ₂）_0-4Ｒ^o、−Ｏ−（ＣＨ₂）_0-4Ｃ（Ｏ）ＯＲ°、−（ＣＨ₂）_0-4ＣＨ（ＯＲ°）₂、−（ＣＨ₂）_0-4ＳＲ°、Ｒ°によって置換され得る−（ＣＨ₂）_0-4Ｐｈ、Ｒ°によって置換され得る−（ＣＨ₂）_0-4Ｏ（ＣＨ₂）_0-1Ｐｈ、Ｒ°によって置換され得る−ＣＨ＝ＣＨＰｈ、Ｒ°によって置換され得る−（ＣＨ₂）_0-4Ｏ（ＣＨ₂）_0-1−ピリジル、−ＮＯ₂、−ＣＮ、−Ｎ₃、−（ＣＨ₂）_0-4Ｎ（Ｒ°）₂、−（ＣＨ₂）_0-4Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）Ｒ°、−Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｓ）Ｒ°、−（ＣＨ₂）₀₄Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＮＲ°₂、−Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｓ）ＮＲ°₂、−（ＣＨ₂）_0-4Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＯＲ°、−Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）Ｒ°、−Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＮＲ°₂、−Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＯＲ°、−（ＣＨ₂）_0-4Ｃ（Ｏ）Ｒ°、−Ｃ（Ｓ）Ｒ°、−（ＣＨ₂）_0-4Ｃ（Ｏ）ＯＲ°、−（ＣＨ₂）_0-4Ｃ（Ｏ）ＳＲ°、−（ＣＨ₂）_0-4Ｃ（Ｏ）ＯＳｉＲ°₃、−（ＣＨ₂）₀₄ＯＣ（Ｏ）Ｒ°、−ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ₂）₀₄ＳＲ−、ＳＣ（Ｓ）ＳＲ°、−（ＣＨ₂）_0-4ＳＣ（Ｏ）Ｒ°、−（ＣＨ₂）_0-4Ｃ（Ｏ）ＮＲ°₂、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ°₂、−Ｃ（Ｓ）ＳＲ°、−ＳＣ（Ｓ）ＳＲ°、−（ＣＨ₂）_0-4ＯＣ（Ｏ）ＮＲ°₂、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ°）Ｒ°、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ°、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）Ｒ°、−Ｃ（ＮＯＲ°）Ｒ°、−（ＣＨ₂）₀₄ＳＳＲ°、−（ＣＨ₂）_0-4Ｓ（Ｏ）₂Ｒ°、−（ＣＨ₂）_0-4Ｓ（Ｏ）₂ＯＲ°、−（ＣＨ₂）_0-4ＯＳ（Ｏ）₂Ｒ°、−Ｓ（Ｏ）₂ＮＲ°₂、−（ＣＨ₂）₀₄Ｓ（Ｏ）Ｒ°、−Ｎ（Ｒ°）Ｓ（Ｏ）₂ＮＲ°₂、−Ｎ（Ｒ°）Ｓ（Ｏ）₂Ｒ°、−Ｎ（ＯＲ°）Ｒ°、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ°₂、−Ｐ（Ｏ）₂Ｒ°、−Ｐ（Ｏ）Ｒ°₂、−ＯＰ（Ｏ）Ｒ°₂、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ°）₂、ＳｉＲ°₃、各Ｒ⁰が以下で定義したように置換されてよく、独立して、水素、Ｃ_1〜6脂肪族化合物、−ＣＨ₂Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ₂）_0-1Ｐｈ、−ＣＨ₂−（５，６−員ヘテロアリール環）、または５−６−員飽和、部分不飽和、または窒素、酸素または硫黄から独立して選択された０〜４ヘテロ原子を持つアリール環、または以上の定義にもかかわらず、Ｒ⁰の２つの独立した存在が、その介在原子（類）と一緒に、以下で定義したように置換されてよい、３〜１２員飽和、部分不飽和、または窒素、酸素または硫黄から独立して選択された０〜４のヘテロ原子を持つアリール一−または二環状環である、−（Ｃ_1-4直鎖または分岐アルキレン）Ｏ−Ｎ（Ｒ°）₂または−（Ｃ_1-4直鎖または分岐アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｎ（Ｒ°）₂である。

Ｒ⁰上（またはそれらの介在原子と一緒のＲ⁰の２つの独立した発生を取ることによって形成した環）上の好適な一価置換基は、独立して、ハロゲン、−（ＣＨ₂）₀₂Ｒ^●、−（ハロＲ^●）、−（ＣＨ₂）₀₂ＯＨ、−（ＣＨ₂）₀₂ＯＲ^●、−（ＣＨ₂）₀₂ＣＨ（ＯＲ^●）₂、−Ｏ（ハロＲ^●）、−ＣＮ、−Ｎ₃、−（ＣＨ₂）₀₂Ｃ（Ｏ）Ｒ^●、−（ＣＨ₂）₀₂Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ₂）₀₂Ｃ（Ｏ）ＯＲ^●、−（ＣＨ₂）₀₂ＳＲ^●、−（ＣＨ₂）₀₂ＳＨ、−（ＣＨ₂）₀₂ＮＨ₂、−（ＣＨ₂）₀₂ＮＨＲ^●、−（ＣＨ₂）₀₂ＮＲ^● ₂、−ＮＯ₂、−ＳｉＲ^● ₃、−ＯＳｉＲ^● ₃、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ^●、−（Ｃ_1-4直鎖または分岐アルキレン）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^●、または−ＳＳＲ^●であり、各Ｒ^●は未置換であり、または「ハロ」が先立つ場合、１つまたはそれ以上のハロゲンによってのみ置換され、独立してＣ_1〜4脂肪族、−ＣＨ₂Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ₂）_0-1Ｐｈ、または５〜６−員飽和、部分不飽和、または窒素、酸素または硫黄から独立して選択された０〜４のヘテロ原子を持つアリール環である。Ｒ°の飽和炭素原子上の好適な二価置換基には、＝Ｏおよび＝Ｓが含まれる。

「任意に置換された」基の飽和炭素原子上の好適な二価置換基には、以下の、＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮＲ^* ₂、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^*、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ^*、＝ＮＮＨＳ（Ｏ）₂Ｒ^*、＝ＮＲ^*、＝ＮＯＲ^*、Ｏ（Ｃ（Ｒ^* ₂））_2-3Ｏ−、または−Ｓ（Ｃ（Ｒ^* ₂））_2-3Ｓ−が含まれ、Ｒ^*の各独立した存在は、水素、以下で定義したように置換され得るＣ_1〜6脂肪族、または未置換５〜６−員飽和、部分不飽和、または窒素、酸素または硫黄から独立して選択された０〜４のヘテロ原子を持つアリール環から選択される。「任意に置換された」基の近接置換可能炭素に結合した好適な二価置換基には、−Ｏ（ＣＲ^* ₂）_2-3Ｏ−が含まれ、式中、Ｒ^*の各独立した存在は、水素、以下で定義したように置換され得るＣ_1〜6脂肪族、または未置換５〜６−員飽和、部分不飽和、または窒素、酸素または硫黄から独立して選択された０〜４のヘテロ原子を持つアリール環から選択される。

Ｒ^*の脂肪族基上の好適な置換基には、ハロゲン、−Ｒ^●、−（ハロＲ^●）、−ＯＨ、−ＯＲ^●、−Ｏ（ハロＲ^●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^●、−ＮＨ₂、−ＮＨＲ^●、−ＮＲ^● ₂、または−ＮＯ₂が含まれ、式中各Ｒ^●は未置換であるか、または「ハロ」が先行する場合、１つまたはそれ以上のハロゲンで置換され、独立してＣ_1〜4脂肪族、−ＣＨ₂Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ₂）_0-1Ｐｈ、または５〜６−員飽和、部分的不飽和、または窒素、酸素または硫黄から独立して選択された０〜４のヘテロ原子を持つアリール環である。

「任意に置換された」基の置換可能窒素上の好適な置換基には、−Ｒ^†、−ＮＲ^† ₂、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^†、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^†、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^†、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）Ｒ^†、−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ^†、−Ｓ（Ｏ）₂ＮＲ^† ₂、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ^† ₂、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ^† ₂、または−Ｎ（Ｒ^†）Ｓ（Ｏ）₂Ｒ^†が含まれ、式中各Ｒ^†は独立して、水素、以下で定義したように置換され得るＣ_1~6脂肪族、未置換−ＯＰｈ、または５〜６−員飽和、不飽和、または窒素、酸素または硫黄から独立して選択された０〜４のヘテロ原子を持つアリール環、または以上の定義にもかかわらず、Ｒ^†の２つの独立した存在が、その介在原子（類）と一緒に、未置換３〜１２員飽和、部分不飽和、または窒素、酸素または硫黄から独立して選択された０〜４のヘテロ原子を持つアリール一−または二環状環を形成する。

Ｒ^†の脂肪族基上の好適な置換基には、独立してハロゲン、−Ｒ^●、−（ハロＲ^●）、−ＯＨ、−ＯＲ^●、−Ｏ（ハロＲ^●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^●、−ＮＨ₂、−ＮＨＲ^●、−ＮＲ^● ₂、または−ＮＯ₂が含まれ、式中各Ｒ^●は未置換であるか、または「ハロ」が先行する場合、１つまたはそれ以上のハロゲンのみで置換され、独立してＣ_1〜4脂肪族、−ＣＨ₂Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ₂）_0-1Ｐｈ、または５〜６−員飽和、部分不飽和、または窒素、酸素または硫黄から独立して選択された０〜４のヘテロ原子を持つアリール環である。

語句「脱離基」は、安定種として移すことが可能である電子吸引性能を持ち、結合電子を持つ原子（または原子の一群）を意味する。好適な脱離基の例には、トリフラート、メシレート、トシレート、ブロシレートおよびハロゲン化物を含むが、これらに限定はされないハロゲン化物およびスルホン酸エステルが含まれる。

語句「加水分解性基」および「加水分解性部位」は、例えば塩基性または酸性条件下、加水分解を受けることが可能な官能基を意味する。加水分解性残基の例には、酸ハロゲン化物、活性化カルボン酸および本技術分野で公知の種々の保護基（例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，” Ｔ． Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐ． Ｇ． Ｍ． Ｗｕｔｓ、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、１９９９を参照のこと）が含まれるが、これらに限定はされない。

語句「有機残基」は、残基を含む炭素、すなわち少なくとも１つの炭素原子を含む残基を定義し、本明細書以上で定義した炭素含有基、残基、またはラジカルが含まれるが、それらに限定はされない。有機残基は、酸素、窒素、硫黄、リンなどのような、種々のヘテロ原子を含んでよく、またはヘテロ原子を通して他の分子に結合してよい。有機残基の例には、アルキルまたは置換アルキル類、アルコキシまたは置換アルコキシ、一または二置換アミノ、アミド基などが含まれるが、これらに限定はされない。有機残基は好ましくは、１〜１８の炭素原子、１〜１５炭素原子、１〜１２炭素原子、１〜８炭素原子、１〜６炭素原子または１〜４炭素原子を含んでよい。さらなる態様において、有機残基は、２〜１８炭素原子、２〜１５炭素原子、２〜１２炭素原子、２〜８炭素原子、２〜４炭素原子または２〜４炭素原子を含んでよい。

語句「残基」の非常に近い類義語は、語句「ラジカル」であり、本明細書および終結請求項にて使用するように、どのように分子が調製されたかにかかわらず、本明細書で記述した分子の断片、基または基礎を意味する。例えば、特定の化合物中の２，４−チアゾリジンジオンラジカルが、チアゾリジンジオンが化合物を調製するために使用されるかどうかにかかわらず、構造

を持つ。いくつかの実施形態において、ラジカル（例えばアルキル）はさらに、１つまたはそれ以上の「置換ラジカル」に結合することによって、改変可能である（すなわち置換アルキル）。所与のラジカル中の原子数は、反対に本明細書他の場所で指摘しない限り、本発明に対して重大ではない。

本明細書で定義し、使用する語句として「有機ラジカル」は、１つまたはそれ以上の炭素原子を含む。有機ラジカルは、例えば１〜２６炭素原子、１〜１８炭素原子、１〜１２炭素原子、１〜８炭素原子、１〜６炭素原子または１〜４炭素原子を持ち得る。さらなる態様において、有機ラジカルは、２〜２６炭素原子、２〜１８炭素原子、２〜１２炭素原子、２〜８炭素原子、２〜６炭素原子、または２〜４炭素原子を持ち得る。有機ラジカルはしばしば、有機ラジカルの炭素原子の少なくともいくつかに結合した水素を持つ。無機原子を含まない有機ラジカルの１つの例は、５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチルラジカルである。いくつかの実施形態において、有機ラジカルは、ハロゲン、酸素、硫黄、窒素、リンなどを含む、それに対して、またはそこで結合した１〜１０無機ヘテロ原子を含んでよい。有機ラジカルの例には、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、一置換アミノ、二置換アミノ、アシルオキシ、シアノ、カルボキシ、カルボアルコキシ、アルキルカルボキシアミド、置換アルキルカルボキシアミド、ジアルキルカルボキシアミド、置換ジアルコキシカルボキシアミド、アルキルスルホニル、アルキルスルフィニル、チオアルキル、チオハロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、ヘテロ環状または置換ヘテロ環状ラジカルが含まれるが、これらに限定はされず、そこで語句は本明細書他の場所で定義されている。ヘテロ原子を含む有機ラジカルの２〜３の非限定例には、アルコキシラジカル、トリフルオロメトキシラジカル、アセトキシラジカル、ジメチルアミノラジカルなどが含まれる。

本明細書で定義し、使用する語句として「無機ラジカル」は、炭素原子を含まず、したがって炭素以外の原子のみでなる。無機ラジカルは、それらの化学的に安定な組み合わせ中で個々に、または一緒に結合して存在し得る、水素、窒素、酸素、ケイ素、リン、硫黄、セレニウム、およびフッ素、塩素、臭素およびヨウ素のようなハロゲンから選択される原子の結合組み合わせを含む。無機ラジカルは１０以下、または好ましくは１〜６、または１〜４の、一緒に結合した以上で列記したような無機原子を持つ。無機ラジカルの例には、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲン、ニトロ、チオール、硫酸塩、リン酸塩、および同様の一般に公知の無機ラジカルが含まれるが、それらに限定はされない。無機ラジカルは、そのような金属イオンがしばしば、硫酸、リン酸のようなアニオン性無機ラジカル、または類似のアニオン性無機ラジカルに対して薬学的に許容可能なカチオンとして働き得るけれども、（アルカリ金属、アルカリ土類金属、遷移金属、ランタノイド金属またはアクチノイド金属のような）周期表の金属性要素にそこで結合していない。無機ラジカルは、本明細書の他の場所で特に指摘しない限り、ホウ素、アルミニウム、ガリウム、ゲルマニウム、ヒ素、スズ、鉛またはテルリウムのようなメタロイド要素、または希ガス要素を含まない。

本明細書で記述した化合物は、１つまたはそれ以上の二重結合を含んでよく、したがって、潜在的に、シス／トランス（Ｅ／Ｚ）異性体、ならびに他の配座異性体を生じさせる。反対に言及しない限り、本発明は、すべてのそのような可能性のある異性体、ならびにそのような異性体の混合物を含む。

それとは反対に記載しない限り、くさび状または点線としてではなく、実線としてのみで示した化学結合を持つ式が、各可能性ある異性体、例えば各エナンチオマーおよびジアステレオマー、ラセミまたはスケーレミック混合物のような異性体の混合物を企図する。本明細書で記述した化合物は、１つまたはそれ以上の不斉中心を含み得、したがってジアステレオマーおよび光学異性体を潜在的に生じさせる。それとは反対に記載しない限り、本発明には、すべてのそのような可能性のあるジアステレオマー、ならびにそれらのラセミ体混合物、それらの本質的に純粋な分解エナンチオマー、すべての可能性ある幾何異性体、およびそれらの薬学的許容可能な塩が含まれる。立体異性体の混合物、ならびに単離された特定の立体異性体も含まれる。そのような化合物の調製をするために使用した、または当業者に公知のラセミ化またはエピマー化手順を用いることにおける、合成手順の経過の間、そのような手順の産物は立体異性体の混合物であり得る。

多くの有機化合物が、平面偏光の平面を回転させる能力を持つ光学的に活性な形態で存在する。光学的に活性な化合物を記述する際に、接頭辞ＤおよびＬまたはＲおよびＳは、そのキラル中心周辺の分子の絶対配座を記述するために使用される。接頭辞ｄおよびｌまたは（＋）および（−）は、化合物による平面偏光の回転の兆候を指定するために使用され、（−）は化合物が左旋性であることを意味する。（＋）またはｄが接頭にある化合物は右旋性である。所与の化学構造に関して、立体異性体と呼ばれるこれらの化合物は、他の重ね合わせることができないミラーイメージであることを除いて同一である。特定の立体異性体はまた、エナンチオマーと呼ばれ、そのような異性体の混合物はしばしば、エナンチオマー混合物と呼ばれる。エナンチオマーの５０：５０混合物がラセミ混合物と呼ばれる。本明細書で記述した多くの化合物が、１つまたはそれ以上のキラル中心を持ち、したがって、異なるエナンチオマー形態で存在可能である。望むのならば、キラル炭素は、アスタリスク（^*）で指定可能である。キラル炭素への結合が、開示された式中直線で描写される場合、キラル炭素の（Ｒ）および（Ｓ）配座両方、故に両方のエナンチオマーおよびその混合物が式内に含まれる。本技術分野で使用されるように、キラル炭素周辺の絶対配座を特定することが望ましい場合、キラル炭素への結合の１つが、くさび形（平面上の原子への結合）として描写可能であり、他が、短い平行直線の連続またはくさび形（平面下の原子への結合）として描写可能である。Ｃａｈｎ−Ｉｎｇｌｏｄ−Ｐｒｅｌｏｇシステムを、キラル炭素への（Ｒ）または（Ｓ）配座を指定するために使用可能である。

本明細書で記述した化合物は、それらの天然の同位体存在度および非天然存在度両方で原子を含む。開示された化合物は、記述されたものと同一の、同位体的に標識化された、または同位体的に置換された化合物であり得るが、ただし、１つまたはそれ以上の原子が天然に典型的に見られる原子量または質量数からは異なる原子量または質量数を持つ原子によって置換される事実に対するものである。本発明の化合物内に組み込むことが可能なアイソトープの例には、それぞれ²Ｈ、³Ｈ、¹³Ｃ、¹⁴Ｃ、¹⁵Ｎ、¹⁸Ｏ、¹⁷Ｏ、³⁵Ｓ、¹⁸Ｆおよび³⁶Ｃｌのような、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素および塩素のアイソトープが含まれる。化合物はさらに、そのプロドラッグ、上記アイソトープを含む前記化合物の、または前記プロドラッグの薬学的に許容可能な塩を含み、および／または他の原子の他のアイソトープが本発明の範囲内である。例えば³Ｈおよび¹⁴Ｃのような放射活性アイソトープがその中に組み込まれたもののような、特定の同位体的に標識化された本発明の化合物が、薬物および／または基質組織分布アッセイにて有用である。トリチウム化すなわち³Ｈ、および炭素−１４、すなわち¹⁴Ｃアイソトープが、それらの調製のしやすさ、および検出性のために特に好ましい。さらに、重水素、すなわち²Ｈのようなより重いアイソトープでの置換が、より大きな代謝安定性の結果である特定の治療的な利点、例えば、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期の増加、または投与量要求の減少を提供し、したがっていくつかの環境で好ましい可能性がある。同位体的に標識された本発明の化合物およびそのプロドラッグを一般的に、以下の手順を実施することによって、簡単に入手可能な同位体的に標識された試薬を、非同位体的に標識された試薬と取り替えることによって、調製可能である。

本発明で記述した化合物は溶媒和物として存在可能である。いくつかの場合、溶媒和物を調製するために使用する溶媒は、水性溶液であり、溶媒和物はよってしばしば、水和物と呼ばれる。化合物は水和物として存在可能であり、例えば、溶媒から、または水性溶液からの結晶化によって得ることが可能である。これに関して、１、２、３または任意の数字の溶媒和物または水分子を、本発明にしたがった化合物と組み合わせて、溶媒和物および水和物を形成可能である。それとは反対に記載しない限り、本発明には、すべてのそのような可能性のある溶媒和物が含まれる。

語句「共結晶」は、非共有相互作用を通してそれらの安定性を持つ２つまたはそれ以上の分子の物理的結合を意味する。本分子複合体の１つまたはそれ以上の構成要素が、結晶格子中の安定フレームワークを提供する。特定の例において、ゲスト分子が、無水物または溶媒和物として、結晶格子内に組み込まれ、例えば“Ｃｒｙｓｔａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｈａｓｅｓ．Ｄｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ−ｃｒｙｓｔａｌｓ Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ ａ Ｎｅｗ Ｐａｔｈ ｔｏ Ｉｍｐｒｏｖｅｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ？”Ａｌｍａｒａｓｓｏｎ，Ｏ．，ｅｔ．ａｌ．，Ｔｈｅ Ｒｏｙａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１８８９−１８９６，２００４を参照のこと。共結晶の例には、ｐ−トルエンスルホン酸およびベンゼンスルホン酸が含まれる。

本明細書で記述された特定の化合物が、互変異性体平衡として表すことができることも評価される。例えば、α−水素を持つケトンが、ケト形態とエノール形態の平衡で存在可能である。

同様に、Ｎ−水素を持つアミドが、アミド形態とイミド酸形態の平衡で存在可能である。それとは反対に記載しない限り、本発明には、すべてのそのような可能性のある互変異性体が含まれる。

化学基質が、多型形態または変更と呼ばれる異なる秩序状態で存在する固体を形成することが公知である。多型基質の異なる変更が、それらの物理的特性を大きく変えることができる。本発明にしたがった化合物は、異なる多型形態で存在可能であり、純安定原子であるように特定の改変が可能である。それとは反対に記載しない限り、本発明はすべてのそのような可能性ある多型形態を含む。

いくつかの態様において、化合物の構造は、式

によって表すことができ、式

と等価であると理解され、
式中ｎは典型的には整数である。すなわちＲⁿは５つの独立した置換基、Ｒ^n(a)、Ｒ^n(b)、Ｒ^n(c)、Ｒ^n(d)、Ｒ^n(e)を表すと理解される。「独立した置換基」によって、各Ｒ置換基が、独立して定義可能であることが意味される。例えば、１つの例で、Ｒ^n(a)がハロゲンである場合、Ｒ^n(b)はその例において、ハロゲンである必要はない。

本明細書で開示された特定の物質、化合物、組成物および構成要素が、市販され入手可能であるか、または当業者に一般的に公知の技術を用いて簡単に合成可能である。例えば、開示された化合物および組成物を調製するために使用する開始物質および試薬は、アルドリッチ ケミカル社（Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，、Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，Ｗｉｓ．）、アクロス オーガニクス（Ａｃｒｏｓ Ｏｒｇａｎｉｃｓ、Ｍｏｒｒｉｓ Ｐｌａｉｎｓ，Ｎ．Ｊ．）、フィッシャー サイエンティフィック（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，Ｐａ）またはシグマ（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．）のような市販供給業者より入手可能であるか、またはＦｉｅｓｅｒ ａｎｄ Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ Ｒｅａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｖｏｌｕｍｅｓ １−１７ （Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、１９９１）； Ｒｏｄｄ’ｓ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｃａｒｂｏｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、Ｖｏｌｕｍｅｓ １−５ ａｎｄ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｌｓ （Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９８９）； Ｏｒｇａｎｉｃ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ、Ｖｏｌｕｍｅｓ １−４０ （Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、１９９１）； Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ）； ａｎｄ Ｌａｒｏｃｋ’ｓ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ （ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ Ｉｎｃ．、１９８９）のような参考文献にて記載された手順にしたがって当業者に公知の方法によって調製される。

他に明確に言及しない限り、本明細書で記載した任意の方法が、その段階が、特定の順番で実施されることを必要とするように解釈されることは全く意図されていない。したがって、方法請求項は、その段階が続くような順番を実際に列挙しておらず、または段階が特定の順番に制限されると請求項または記述中で他に特に言及されない場合、任意の態様において、順番が暗示されるとは全く意図されていない。これは、段階または操作フローのアレンジメントに関するロジックの問題、文法的構成または句読点から由来する単純な意味、および本明細書で記述された実施形態の数または型を含む、解釈のための任意の可能性ある非発現基礎に対して維持する。

本発明の組成物を調製するために使用されるべき構成要素、ならびに本明細書で開示された方法内で使用されるべき組成物それ自身が開示される。これら、および他の物質が本明細書で開示され、これらの物質が組み合わせ、サブセット、相互作用、群などが、それぞれ種々の個々および共同組み合わせ、およびこれらの化合物の置換の特定の参照が、明確に開示不可能である一方で、それぞれが、本明細書で特に企図され、記述されることが開示されることが理解される。例えば、特定の化合物が開示され、議論され、当該化合物が含まれる多数の分子に対して実施可能である多数の改変が議論される場合、特にそれとは反対に指摘されない限り、可能である化合物および改変のそれぞれ、およびすべての組み合わせおよび置換が特に企図される。したがって、分子のクラス、Ａ、ＢおよびＣが開示され、分子のクラスＤ、ＥおよびＦと、組み合わせ分子Ａ〜Ｄの例が開示される場合、それぞれが個々に引用されていなくても、それぞれが個々に、そして集合的に企図された意味の組み合わせ、Ａ−Ｅ、Ａ−Ｆ、Ｂ−Ｄ、Ｂ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、Ｃ−Ｄ、Ｃ−ＥおよびＣ−Ｆが考慮され、開示される。同様に、これらの任意のサブセットまたは組み合わせがまた開示される。したがって、例えば、Ａ−Ｅ、Ｂ−ＦおよびＣ−Ｅのサブグループが考慮されて記述される。このコンセプトは、本発明の組成物を作製し、使用する方法における段階を含むが、それらに限定されない、本明細書のすべての態様に適用される。したがって、実施可能な種々のさらなる段階が存在する場合、これらのさらなる段階のそれぞれが、本発明の方法の任意の特定の実施形態、または実施形態の組み合わせで実施可能であることが理解される。

本明細書で開示された組成物が、特定の機能を持つことが理解される。開示された機能を実施するための特定の構造的な要求が本明細書で開示され、様々な構造が、開示された構造に関連する同機能を実施可能であること、およびこれらの構造が、典型的に同一の結果を達成することが理解される。

Ｂ．化合物
１つの態様において、本発明は、必要としている対象に、効果的な量の、ウルソル酸またはその誘導体、および本方法で使用した化合物を含む、薬学的組成物を提供することによって、筋萎縮を阻害し、筋肉量を増加させる方法において有用な化合物に関する。さらなる態様において、本発明は、筋肉増殖を調節するための方法、筋萎縮を阻害し、および筋肉量を増加させるための方法、骨格筋肥大を誘導するための方法、組織増殖を増強するための方法において有用な化合物、およびそれらの方法にて使用される化合物を含む薬学的組成物に関する。

１つの態様において、本発明の化合物は、筋肉疾病の処置において有用である。さらなる態様において、筋肉疾病は、栄養失調、筋肉不使用（自発的および無意識の絶対安静に続発する）、（多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、重症ニューロパシー、脊髄損傷または末梢神経損傷を含む）神経系疾病、整形外科的損傷、キャスティングおよび他の四肢固定の手術後形態、（がん、鬱血性心不全、慢性肺疾病、慢性腎不全、慢性肝疾病、糖尿病、クッシング症候群およびＨＩＶ／ＡＩＤＳまたは結核のような慢性感染症を含む）慢性疾患、やけど、敗血症、機械的通気を必要とする他の疾病、（グルココルチコイド誘導ミオパシーおよびスタチン誘導ミオパシーのような）薬物誘導筋疾患、（筋ジストロフィーおよび筋硬直性ジストロフィーのような）まず骨格筋に影響を与える遺伝疾患、（多発性筋炎および皮膚筋炎のような）骨格筋に影響を与える自己免疫疾患、宇宙飛行、または加齢関連サルコペニアに続発する骨格筋萎縮であり得る。

各開示された誘導体は、任意にさらに置換可能であることが企図される。任意の１つまたはそれ以上の誘導体が任意に本発明より除外されることも企図される。開示された化合物が、開示された方法によって提供可能であることが理解される。また開示された化合物が、開示された使用の方法にて利用可能であることも理解される。

１．ウルソル酸誘導体
ウルソル酸は、抗がん、抗酸化、抗炎症、抗アレルギー、肝臓保護、胃保護、低脂血症、低血糖、脂肪分解抗肥満、抗動脈硬化および免疫調節効果を含む、広い範囲の生物学的効果を有する、高水溶性五環性トリテルペン酸である（Ｌｉｕ Ｊ（１９９５）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ４９（２）：５７−６８； Ｌｉｕ Ｊ （２００５）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ １００（１−２）：９２−９４；Ｗａｎｇ ＺＨ，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ６２８（１−３）：２５５−２６０；Ｊａｎｇ ＳＭ，ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ ９（１）：１１３−１１９）。しかしながら、骨格筋におけるその効果は今まで知られていなかった。分子レベルにおいて、ウルソル酸は、多くの他の記述された効果の他に、ＳＴＡＴ３活性化経路を阻害し、グルココルチコイド受容体を介したマトリックスメタロプロテイナーゼ−９発現を減少させ、タンパク質チロシンホスファターゼを阻害し、インスリン模倣剤として働き、ＰＰＡＲαを活性化し、ＮＦ−κＢ転写因子を阻害し、ホルモン感受性リパーゼを、脂肪分解を刺激するように移行させ、肝臓ポリオール経路を阻害する。骨格筋とＩＧＦ−Ｉシグナル伝達におけるその効果は先に知られてはいなかった。

医薬品として、ウルソル酸はよく認容性であり、局所および経口で使用可能である。ウルソル酸は、リンゴ、バジル、ビルベリー、クランベリー、エルダーフラワー、ペパーミント、ローズマリー、ラベンダー、オレガノ、タイム、サンザシ、プルーンを含む多くの植物中に存在する．リンゴの皮が、リンゴの抗がん活性に寄与する、多量のウルソル酸と関連化合物を含む。ウルソル酸はまた、抗腫瘍剤のような、より強力な生物活性誘導体の合成のための、開始物質として利用可能である。

ウルソル酸の他の名前には、３−β−ヒドロキシ−ウルソ−１２−エン−２８−酸、ウルソン、プルノール、ミクロメロール、ウルソンおよびマロールが含まれる。構造は以下に示す。

他の近縁関係にある、インスリン感作活性を持つ五員環状トリテルペン酸には、オレアノール酸（Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ，２０１０）、コロソリン酸（Ｓｉｖａｋｕｍａｒ ｅｔ ａｌ，２００９）およびＵＡ０７１３（Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｔ，２００６）が含まれる。

１つの態様において、本発明は、式

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体に関し、式中それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は任意に存在し、ｎは０または１であり、Ｒ⁰は存在する場合、水素であり、Ｒ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、そこでＲ^1bはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、任意に共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つが−ＯＲ¹¹であり、他が水素であり、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、任意に共有結合し、中間炭素と一緒に、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意にＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜 ２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜 ２個の基によって置換される。

さらなる態様において、本発明は、式

の化合物に関し、式中Ｒ^1aおよびＲ^1bがＣ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つが−ＯＲ¹¹であり、他が水素であり、Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶のそれぞれが独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ⁸が水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ^9bがＣ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ¹¹が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、そこで許されるならば、Ｒ¹¹はシアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、そしてＲ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、本発明は、式

の化合物に関し、式中Ｒ^1aが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、Ｒ^1bがＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bが共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換された３〜７員スピロシクロアルキルを含み、Ｒ⁸がＣ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ^9aがＣ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ¹¹が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、そこで許されるならば、Ｒ¹¹はシアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、そしてＲ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、本発明は、式

の化合物に関する。

さらなる態様において、本発明は、式

の化合物に関し、式中Ｒ^1aが−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰であり、Ｒ^1bがＣ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つが−ＯＲ¹¹であり、他が水素であり、Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶のそれぞれが独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷がＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁸が水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ^9aが水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｚが−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹⁰が、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ¹¹が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、そこで許されるならば、Ｒ¹¹はシアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹³が水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺがＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の一部を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、そしてＲ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、本発明は、式

の化合物に関し、式中各Ｒ^1aおよびＲ^1bが独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つが−ＯＲ¹¹であり、他が水素であり、Ｒ^3aおよびＲ^3bの１つが−ＯＲ¹¹であり、他が水素であり、Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶のそれぞれが独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁸がＣ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ^9aがＣ１〜Ｃ６アルキルであり、各Ｒ¹¹が、独立して水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、そこで許されるならば、Ｒ¹¹はシアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、本発明は、式

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体に関し、式中Ｒ¹¹が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許される場合Ｒ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²が水素、および１〜２０炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚが−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³が、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³が共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³が式

の一部を含み、Ｙが−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、そしてＲ¹⁴がＣ１〜Ｃ６アルキルでありシアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、化合物は、動物における筋萎縮を予防または処置するために効果的な量で投与される。またさらなる態様において、化合物は、化合物がウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である場合に、約１０００ｍｇ／日より多くの量で投与される。またさらなる態様において、化合物は、哺乳動物内で筋肉形成を増強するのに効果的な、約１０００ｍｇ／日より多くの量で投与される。

さらなる態様において、本発明は、

より選択される式の化合物に関する。

ａ．Ｒ⁰基と任意の結合
１つの態様において、任意の共有結合を−−−によって表すことが可能である。したがって、特定の態様において、特定の結合が存在し、それによって一重共有結合が提供される。さらなる態様において、特定の結合が存在し、それによって二重共有結合が提供される。さらなる態様において、特定の結合が存在せず、それによって二重共有結合が提供される。

１つの態様において、Ｒ⁰は任意に存在する。すなわち、特定の態様において、Ｒ⁰は存在する。さらなる態様において、Ｒ⁰は存在しない。さらなる態様において、Ｒ⁰は、存在する場合、水素である。Ｒ⁰基および任意の結合の存在および／または不在は、隣接する化学部位の価数を満たすために働くことが理解される。

ｂ．Ｒ¹基
１つの態様において、Ｒ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、式中Ｒ^1bはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは共有結合し、中間炭素とともに、一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含む。さらなる態様において、Ｒ^1aは−ＣＯ₂Ｈである。さらなる態様において、Ｒ^1bはメチルである。さらなる態様において、Ｒ^1aおよびＲ^1bは両方ともメチルである。

１つの態様において、Ｒ^1aは−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰である。さらなる態様において、Ｒ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルから選択される。さらなる態様において、Ｒ^1bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルから選択される。

さらなる態様において、Ｒ^1aとＲ^1bは共有結合し、中間炭素とともに、一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含む。

ｃ．Ｒ²基
１つの態様において、Ｒ^2aおよびＲ^2bは独立して、少なくとも１つのＲ^2aとＲ^2bが−ＯＲ¹¹という条件で、水素および−ＯＲ¹¹より選択され、またはＲ^2aとＲ^2bは一緒に＝Ｏを含む。さらなる態様において、Ｒ^2aは水素であり、Ｒ^2bは−ＯＲ¹¹である。さらなる態様において、Ｒ^2aは−ＯＲ¹¹であり、Ｒ^2bが水素である。さらなる態様において、Ｒ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含む。

さらなる態様において、Ｒ^2aは水素である。さらなる態様において、Ｒ^2aは−ＯＲ¹¹であり、式中Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、式中Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルである。さらなる態様において、Ｒ^2bは−ＯＲ¹¹であり、式中Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、式中Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルである。さらなる態様において、Ｒ^2bは−ＯＲ¹¹であり、式中Ｒ¹¹は水素である。

さらなる態様において、Ｒ^2bは水素である。さらなる態様において、Ｒ^2aは−ＯＲ¹¹であり、式中Ｒ¹¹は水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、式中Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルである。さらなる態様において、Ｒ^2aは−ＯＲ¹¹であり、式中Ｒ¹¹は水素である。

ｄ．Ｒ³基
１つの態様において、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは独立して、Ｒ^3aとＲ^3bが同時にヒドロキシルではない、という条件で、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは共有結合し、中間炭素と一緒に、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含む。

さらなる態様において、Ｒ^3aは水素である。さらなる態様において、Ｒ^3bは−ＯＲ¹¹であり、式中Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、式中Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルである。

ｅ．Ｒ⁴基
１つの態様において、Ｒ⁴は独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルから選択される。さらなる態様において、Ｒ⁴はメチルである。さらなる態様において、Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶はすべてメチルである。

ｆ．Ｒ⁵基
１つの態様において、Ｒ⁵は独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルから選択される。さらなる態様において、Ｒ⁵はメチルである。

ｇ．Ｒ⁶基
１つの態様において、Ｒ⁶は独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルから選択される。さらなる態様において、Ｒ⁶はメチルである。

ｈ．Ｒ⁷基
１つの態様において、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²、および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択される。さらなる態様において、Ｒ⁷はＣ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルである。さらなる態様において、Ｒ⁷は−ＣＨ₂ＯＲ¹²である。さらなる態様において、Ｒ⁷は−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²である。

ｉ．Ｒ⁸基
１つの態様において、Ｒ⁸は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される。さらなる態様において、Ｒ⁸は水素である。さらなる態様において、Ｒ⁸はＣ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルである。

ｊ．Ｒ⁹基
１つの態様において、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは独立して、Ｒ^9aおよびＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは共有結合し、中間炭素と一緒に、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含む。

さらなる態様において、Ｒ^9aは水素である。さらなる態様において、Ｒ^9aは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルである。さらなる態様において、Ｒ^9bは水素である。さらなる態様において、Ｒ^9bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルである。さらなる態様において、Ｒ^9bは、メチル、エチル、ビニル、ｎ−プロピル、プロペン−２−イル、ｉ−プロピル、２−プロペニル、ｎ−ブチル、１−ブテン−２−イル、１−ブテン−３−イル、ｉ−ブチル、１−ブテン−２−イル、１−ブテン−３−イル、ｓ−ブチル、２−ブテン−１−イル、２−ブテン−２−イル、２−ブテン−３−イルおよびｔ−ブチルから選択される。

さらなる態様において、Ｒ^9aおよびＲ^9bは共有結合し、中間炭素と一緒に、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含む。

ｋ．Ｒ¹⁰基
１つの態様において、Ｒ¹⁰は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される。さらなる態様において、Ｒ¹⁰は水素である。さらなる態様において、Ｒ¹⁰は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルである。

ｌ．Ｒ¹¹基
１つの態様において、Ｒ¹¹は水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、そこで許されるならば、Ｒ¹¹はシアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、Ｒ¹¹は水素である。さらなる態様において、Ｒ¹¹は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択される。さらなる態様において、Ｒ¹¹はＣ１〜Ｃ６アルキルである。さらなる態様において、Ｒ¹¹は、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキルである。さらなる態様において、Ｒ¹¹は、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルである。さらなる態様において、Ｒ¹¹は、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキルである。さらなる態様において、Ｒ¹¹は、フェニルである。さらなる態様において、Ｒ¹¹は、ヘテロアリールである。さらなる態様において、Ｒ¹¹は、−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴である。

さらなる態様において、Ｒ¹¹は置換されていない。さらなる態様において、Ｒ¹¹は、許容されるならば、０〜２つの基によって置換される。さらなる態様において、Ｒ¹¹は、許容されるならば、１つの基によって置換される。さらなる態様において、Ｒ¹¹は、許容されるならば、２つの基によって置換される。

ｍ．Ｒ¹²基
１つの態様において、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択される。さらなる態様において、Ｒ¹²は水素である。さらなる態様において、Ｒ¹²は１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択される。さらなる態様において、Ｒ¹²は３〜１２の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択される。

さらなる態様において、Ｒ¹²は水素である。さらなる態様において、Ｒ¹²はアルキルである。さらなる態様において、Ｒ¹²はヘテロアルキルである。さらなる態様において、Ｒ¹²はシクロアルキルである。さらなる態様において、Ｒ¹²はヘテロシクロアルキルである。さらなる態様において、Ｒ¹²はアリールである。さらなる態様において、Ｒ¹²はヘテロアリールである。さらなる態様において、Ｒ¹²はシアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。さらなる態様において、Ｒ¹²は、式

を持つ群を含み、式中ｍは０〜１０（例えば０、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０）の整数であり、ＡＡはアミノ酸残基を表す。さらなる態様において、Ｒ¹²は、ＡＡはフェニルアラニン残基である。さらなる態様において、Ｒ¹²は式

を持つ群を含む。

ｎ．Ｒ¹³基
１つの態様において、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺがＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³が式

の部分を含み、

Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択される。

さらなる態様において、Ｒ¹³は水素である。さらなる態様において、Ｒ¹³はＣ１〜Ｃ４アルキル、例えば、メチル、エチル、プロピルまたはブチルである。さらなる態様において、ＺはＮであり、−ＮＲ¹²Ｒ¹³が式

の部分を含む。

ｏ．Ｒ¹⁴基
１つの態様において、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルまたはヘキシルである。さらなる態様において、Ｒ¹⁴は置換されない。さらなる態様において、許容されるのならば、Ｒ¹⁴は０〜２個の基によって置換される。さらなる態様において、許容されるならば、Ｒ¹⁴は１基によって置換される。さらなる態様において、許容されるならば、Ｒ¹⁴は２基によって置換される。

ｐ．ＡＡ基
１つの態様において、ＡＡはアミノ酸残基、例えばフェニルアラニンを表す。

ｑ．Ｙ基
１つの態様において、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、および−ＮＣＨ₃−から選択される。

ｒ．Ｚ基
１つの態様において、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択される。さらなる態様において、Ｚは−Ｏ−である。さらなる態様において、Ｚは−ＮＲ¹³−であり、式中Ｒ¹³は水素である。さらなる態様において、Ｚは−ＮＲ¹³−であり、式中Ｒ¹³はＣ１〜Ｃ４アルキルである。

２．例示化合物
１つの実施形態において、化合物は、１つまたはそれ以上の以下の構造として存在可能である。

さらなる態様において、化合物は、１つまたはそれ以上の以下の構造として存在可能である。

３．筋萎縮の阻害および筋肥大の誘導
１つの態様において、開示された化合物は、筋萎縮を阻害する。さらなる態様において、開示された化合物は筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、開示された化合物は筋肥大を誘導する。またさらなる態様において、開示された化合物は筋萎縮を阻害し、筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、開示された化合物は、筋萎縮を阻害し、筋肥大を誘導する。さらなる態様において、筋萎縮の阻害は、動物においてである。またさらなる態様において、筋肉量の増加は動物においてである。またさらなる態様において、動物は哺乳動物である。またさらなる態様において、動物はヒトである。さらなる態様において、哺乳動物はマウスである。またさらなる態様において、哺乳動物は齧歯類である。

さらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約２００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋萎縮を阻害する。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約３００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋萎縮を阻害する。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約４００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋萎縮を阻害する。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約５００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋萎縮を阻害する。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約７５０ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋萎縮を阻害する。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約１０００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋萎縮を阻害する。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋萎縮を阻害する。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約２０００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋萎縮を阻害する。

さらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約２００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約３００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約４００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約５００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約７５０ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約１０００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、開示された化合物は、ヒトにおいて、約２０００ｍｇ／日より多くの経口投与量にて投与された時に、筋肉量を増加させる。

１つまたはそれ以上の化合物を、開示された本発明から任意に除外可能であることが企図される。

Ｃ．化合物を作製する方法
１つの態様において、開示された化合物は、本明細書で記述された合成方法の産物を含む。さらなる態様において、開示された化合物は、本明細書で記述された合成方法によって産出された化合物を含む。またさらなる態様において、本発明は、治療的に効果的な量の、開示された方法の産物およびその薬学的に許容可能な担体を含む、薬学的組成物を含む。またさらなる態様において、本発明は、任意の開示された化合物の少なくとも１つの化合物または開示された方法の少なくとも１つの化合物を、薬学的に許容可能な担体または希釈剤と混合することを含む、医薬品を製造するための方法を含む。

１つの態様において、本発明は、筋萎縮を阻害し、筋肉量を増加させる方法において有用な、官能化されたウルサン化合物を作製する方法に関する。そのような化合物は、筋肉消費に関連する種々の疾患の処置において有用であり、筋肉量および／または筋肉強度を増加させるために有用であり、ならびに筋肉形成および／または筋肉性能を増強することにおいて有用であり得る。本発明の化合物は、文献中で公知であり、実験項目において例証され、当業者により明確である、他の標準操作に加えて、以下のスキームにて示したような反応を利用することによって調製可能である。明確化のために、単一の置換基を持つ実施例が示されているが、多数の置換基が、本明細書で開示されている定義の下、許容される。以下の実施例は、本発明がさらに完全に理解されるように提供され、例示のみであり、制限と解釈されるべきではない。

１．経路１：アルキルエーテル化
１つの態様において、本発明の官能化ウルサン化合物は、一般的に以下に示したように調製可能である。

化合物は、一般的形態で示され、置換基は、本明細書の他の場所での化合物の記述中で言及されたものである。より特定の実施例を以下に明記する。

１つの態様において、経路１段階１は、遊離酸より開始する。適切な溶媒中、カルボン酸を脱プロトン化するのに十分な強度であるが、アルコールは脱プロトン化しない塩基（例えばＫ₂ＣＯ₃、ＮａＯＨ）を加え、反応を、カルボン酸の脱プロトン化を確かにするのに効果的な温度にて、効果的な時間、実施する。適切なハロゲン化アルキルまたはハロゲン化等価物を反応混合液に加え、反応を、カルボキシル基のアルキル化を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で実施する。さらなる態様において、他の経路１段階１をまた、遊離カルボン酸より開始する。ジアゾメタンを加え、反応を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で、反応を実施する。

さらなる態様において、経路１段階２で、アルキルエステルを、無水反応条件下、適切な乾燥溶媒中に溶解する。塩基を加え、反応を、脱プロトン化を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間、実施する。ついで、適切なアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルまたはハロゲン化ヘテロシクロアルキル、またはハロゲン化等価物（例えばＲ¹¹Ｘ）を反応混合液に加える。反応完了するのを確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で実施する。

さらなる態様において、経路１段階３にて、Ｏ−アルキル化ウルサン化合物アルキルエステルを、反応を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で、適切な有機−水性混合溶媒システム中、ＬｉＯＨのような適切な塩基で加水分解する。ついで、反応混合液を、反応を確かにするのに十分な濃度の適切な水性酸にて、効果的な温度、効果的な時間で、好適なｐＨに酸性化可能である。

２．経路２：アリールエーテル化
１つの態様において、本発明の官能化ウルサン化合物を、一般的に以下で示したように調製可能である。

化合物は、一般的形態で示され、置換基は、本明細書の他の場所での化合物の記述中で言及されたものである。より特定の実施例を以下に明記する。

１つの態様において、経路２段階１を、ウルサン化合物遊離カルボン酸で開始する。適切な溶媒中、カルボン酸を脱プロトン化するのに十分強力であるが、アルコール基は脱プロトン化しない塩基（例えばＫ₂ＣＯ₃、ＮａＯＨ）を添加し、反応を、脱プロトン化を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で実施する。ついで、適切なハロゲン化アルキルまたはハロゲン化等価物を反応混合液中に加え、反応を、カルボキシル基のアルキル化を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で実施する。さらなる態様において、他の経路２段階１を、適切な溶媒中、ウルサン化合物遊離カルボン酸で開始する。ジアゾメタンを添加し、反応を確かにするのに十分な温度、十分な時間で、反応を実施する。

さらなる態様において、経路２段階２にて、ウルサン化合物アルキルエステルを適切な、乾燥溶媒に、フェノール、アリールアルコール、または適切なヘテロアリールアルコールと一緒に、無水反応条件下で溶解し、続いてトリフェニルホスフィンを加える。反応を、効果的な温度および効果的な時間で実施する。ついで、ＤＩＡＤまたはＤＥＡＤのような適切なカップリング剤を加え、反応を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で反応を実施する。さらなる態様において、経路２段階３にて、Ｏ−アリール化またはヘテロアリール化ウルサン化合物アルキルエステルを、反応を完了することを確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で、適切な有機−水性混合溶媒システム中、ＬｉＯＨのような適切な塩基で処置する。反応混合液をついで好適なｐＨまで酸性化することができる。

３．経路３：アシル化
１つの態様において、本発明の官能化ウルサン化合物を、一般的に以下で示したように調製可能である。

化合物は、一般的形態で示され、置換基は、本明細書の他の場所での化合物の記述中で言及されたものである。より特定の実施例を以下に明記する。

１つの態様において、経路３段階１を、ウルソン化合物遊離カルボン酸で開始する。適切な溶媒中、カルボン酸を脱プロトン化するのに十分強力であるが、アルコール基は脱プロトン化しない塩基（例えばＫ₂ＣＯ₃、ＮａＯＨ）を添加し、反応を、カルボン酸脱プロトン化を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で進行させる。ついで、適切なハロゲン化ベンジルまたはハロゲン化等価物を反応混合液に加え、反応を、カルボキシル基の保護を確かにするために効果的な温度、効果的な時間で実施する。

経路３段階２にて、ウルサン化合物ベンジルエステルを、無水反応条件下、適切な乾燥溶媒中に溶解させ、続いて適切な酸スカベンジャー（弱塩基、例えばＫ₂ＣＯ₃またはＤＩＥＡ）を添加する。ハロゲン化アシル（例えばＲ¹⁴ＣＯＸ）または等価アシル化試薬をついで加える。反応を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で反応を実施する。さらなる態様において、他の経路３段階２にてウルサン化合物ベンジルエステルと好適なカルボン酸（例えばＲ¹⁴ＣＯ₂Ｈ）を、無水反応条件下、適切な乾燥溶媒中に溶解させる。塩酸エチル−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノ）プロピルカルボジイミド（ＥＤＣ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）およびトリアルキルアミン（Ｒ₃Ｎ）をついで加え、反応を確かにするのに十分な温度、十分な時間で反応を実施する。

経路３段階３において、アシル化ウルサン化合物ベンジルエステルを、標準条件（例えば好適なパラジウム触媒の存在下、水素ガスでの水素化）下で還元し、それによってウルサン化合物遊離カルボン酸を遊離させる。

４．経路４：エステル化
１つの態様において、本発明の官能化ウルサン化合物を、一般的に以下で示したように調製可能である。

化合物は、一般的形態で示され、置換基は、本明細書の他の場所での化合物の記述中で言及されたものである。より特定の実施例を以下に明記する。

１つの態様において、経路４段階１を、ウルサン化合物遊離カルボン酸で開始する。適切なアルコール（例えばＲ¹²ＯＨ）を添加し、反応を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で、反応を実施する。

他の合成におけるさらなる態様において、経路４段階１を、乾燥反応条件下、乾燥溶媒中のウルサン化合物遊離カルボン酸で開始する。テトラヒドロピラン（ＴＨＰ）を、酸触媒（例えばｐＴｓＯＨ）とともに、添加する。反応を、ヒドロキシル基の保護を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で実施する。塩基（例えばＮａＯＨまたはＮａＨ）をついで、無水反応条件下、乾燥溶媒中で、ＴＨＰ−保護ウルサン化合物遊離カルボン酸に加える。反応を、カルボン酸脱プロトン化を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で実施する。ついで、適切なハロゲン化アルキル（すなわちＲ¹²Ｘ）または等価物を、反応混合物に加え、反応を、カルボキシル基のアルキル化を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で実施する。経路４段階３を、アルコール溶媒中の、ＴＨＰ−保護ウルサン化合物アルキルエステルで開始する。酸触媒（例えばｐＴｓＯＨ）を加え、反応を、脱プロトン化を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で実施する。

５．経路５：アミド形成
１つの態様において、本発明の官能化ウルサン化合物を、一般的に以下で示したように調製可能である。

化合物は、一般的形態で示され、置換基は、本明細書の他の場所での化合物の記述中で言及されたものである。より特定の実施例を以下に明記する。

１つの態様において、経路５段階１を、乾燥溶媒中、ウルサン化合物遊離カルボン酸で開始する。乾燥反応条件下、テトラヒドロピラン（ＴＨＰ）と酸触媒（例えばｐＴｓＯＨ）を加える。ついで、反応を、ヒドロキシル基の保護を確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で実施する。経路５段階２において、ＴＨＰ−保護ウルサン化合物遊離カルボン酸を、適切な乾燥溶媒中に溶解する。無水反応条件下、好適なアミン（例えばＲ¹²Ｒ¹³ＮＨ）を、塩酸エチル−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノ）プロピルカルボジイミド（ＥＤＣ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、およびトリアルキルアミン（Ｒ₃Ｎ）と一緒に添加し、反応を完了させるのを確かにするのに効果的な温度、効果的な時間で反応を実施する。経路５段階３にて、ＴＨＰ−保護ウルサン化合物アミドをついで、酸触媒（例えばｐＴｓＯＨ）の添加によって脱保護可能であり、反応を確かにするのに効果的な温度、効果的な量で反応を実施する。

６．経路６：アルコールへの還元
１つの態様において、本発明の官能化ウルサン化合物を、一般的に以下で示したように調製可能である。

化合物は、一般的形態で示され、置換基は、本明細書の他の場所での化合物の記述中で言及されたものである。より特定の実施例を以下に明記する。

１つの態様において、乾燥溶媒中のウルサン化合物遊離カルボン酸を、乾燥反応条件下、リチウムアルミニウムヒドリド（ＬｉＡｌＨ₄）と反応させて、相当する一級アルコールを得ることが可能である。あるいは、乾燥溶媒中のウルサン化合物遊離カルボン酸を、乾燥反応条件下にて、ジボラン（Ｂ₂Ｈ₆）と反応させて、相当する一級アルコールを得ることが可能である。必要であれば、保護基化学反応を使用して、これらの反応段階の間、敏感な遠位官能性を保護することが可能であることが理解される。

７．経路７：ヒドロキシル反転
１つの態様において、本発明の官能化ウルサン化合物を、一般的に以下で示したように調製可能である。

化合物は、一般的形態で示され、置換基は、本明細書の他の場所での化合物の記述中で言及されたものである。より特定の実施例を以下に明記する。

１つの態様において、光延反応条件下、ジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）およびトリフェニルホスフィンの存在のもと、適切なプロトン求核試薬との反応によって、隣接する炭素での立体化学を反転させる一方で、ヒドロキシル官能性を、他の基（例えばアルコキシル、アシル、アミノなど）で置換可能である。−ＯＲ¹¹を示す一方で、さらなる部位（例えばアセトキシル、アミノなど）をプロトン求核試薬（例えば酢酸、アンモニアなど）の適切な選択によって、その部位で置換可能である。

８．ウルソン酸誘導体の植物供給源
以上で記述した合成方法におけるウルソル酸誘導体に対する合成前駆体として有用な多くの五員環状酸トリテルペンを、植物または植物から由来した物質のような、天然の供給源より単離および精製してよい。あるいは、ウルソル酸誘導体の調製において有用な特定の公知の合成前駆体をしばしば、商用供給源より得ることが可能である。ウルソル酸は、特定の開示された化合物を調製するために、合成前駆体として使用可能なウルソル酸誘導体に対する、有用な公知の合成前駆体である。例えば、ウルソル酸は、ホリーバジル（Ｏｃｉｍｕｍ ｓａｎｃｔｕｍ Ｌ．）、ペパーミント葉（Ｍｅｎｔｈａ ｐｉｐｅｒｉｔａ Ｌ．）、ラベンダー（Ｌａｖａｎｄｕｌａ ａｕｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ Ｍｉｌｌ．）、オレガノ（Ｏｒｉｇａｎｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ Ｌ．）、タイム（Ｔｈｙｍｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ Ｌ．）、サンザシ（Ｃｒａｔａｅｇｕｓ ｌａｅｖｉｇａｔａ （Ｐｏｉｒ）ＤＣ）、セイヨウバクチノキ葉（Ｐｒｕｎｕｓ ｌａｕｒｏｃｅｒａｓｕｓ Ｌ．）、ビワ葉（Ｅｒｉｏｂｏｔｒｙａ ｊａｐｏｎｉｃａ Ｌ．）、光沢イボタノキ葉（Ｌｉｇｕｓｔｒｕｍ ｌｕｃｉｄｕｍ ａｉｔ．Ｌ．）、ビルベリー（Ｖａｃｃｉｕｎｕｍ ｍｙｒｔｉｌｌｕｓ Ｌ．）、デビルズクロー（Ｈａｒｐａｇｏｐｈｙｔｕｍ ｐｒｏｃｕｍｂｅｎｓ ＤＣ）、エルダーフラワーズ（Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｖａｒ．；Ｓａｍｂｕｃｕｓ ｎｉｇｒａ Ｌ．）およびツルニチニチソウ（Ｖｉｎｃａ ｍｉｎｏｒ Ｌ．）のような植物から単離可能である。

種々の方法が、ウルソル酸およびウルソル酸誘導体を精製するために一般的に適用可能である。例えば、Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，ｅｔ ａｌ．（Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．１９９９，６２，１０６１−１０６４）は、２，３−ジヒドロキシ−２４−ノル−ウルス−４（２３）、１２−ジエン−２８−酸および２３−ヒドロキシウルソル酸の同定を記述した。Ｎｉｓｈｉｍｕｒａは、これらの化合物を単離するための手順を記述した。本明細書で記述した手順は、これらの化合物を、実施例にて記述したように、フラッシュクロマトグラフィー画分３（ＦＣＦ３）中に含めることを記述している。本明細書で記述した同様のＨＰＬＣ手順を使用して、それぞれ移動相ＡおよびＢ、０．０５％ＴＦＡ含有水と、０．０５％ＴＦＡ含有アセトニトリルの勾配、Ｃ１８ ＢｅｔａＭａｘ Ｎｅｕｔｒａｌ カラム（２５０×８ｍｍ；５ｕｍ）を用いることを含み、これらの化合物をさらに精製可能である。勾配は、５分間の４０％ β定組成、ついで３０分間およそ４０％〜７０％のＢからなってよい。当業者は、Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌにて記述された方法の、ウルソル酸、ウルソル酸誘導体または構造的に関連する五員環状酸トリテルペン類いずれかを、種々の植物から効果的に単離するための一般的適応性を認識し得る。

ウルソル酸およびウルソル酸誘導体を精製するために一般的に適用可能な他の典型的方法がまた公知である。例えば、Ｃｈａｔｕｒｖｅｄｕｌａ，ｅｔ ａｌ．（Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００４，６７，ｐ．８９９−９０１）は、３−アセトキシ−２−ヒドロキシウルソル酸、３−（ｐ−コウマロイル）ウルソル酸、および２，３−ジアセトキシウルソル酸の単離を記述している。Ａｄｎｙａｎａ，ｅｔ ａｌ．（Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００１，６４，ｐ．３６０−３６３）は、２，３，６，１９−テトラヒドロキシオレアノール酸、２，３，１９−トリヒドロキシオレアノール酸、２，３，１９，２３−テトラヒドロキシウルソル酸、および２，３，２３−トリヒドロキシオレアノール酸の単離を記述している。Ｉｌｕｔａ，ｅｔ ａｌ．（Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００３，６６，ｐ．１０５１−１０５４）は、２，３−ジヒドロキシウルス−１２−エン−１１−オン−２８−酸および２，３−ジヒドロキシ−１１−メトキシウルス−１２−エン−２８酸の単離を記述している。例えば、米国特許第７，６１２，０４５号明細書にて記述されたもののような、同様のＨＰＬＣ手順を、Ｃ１８ ＢｅｔａＭａｘ Ｎｅｕｔｒａｌカラム（２５０×８ｍｍ、５ｕｍ）にて、それぞれ移動相ＡおよびＢ、０．０５％ＴＦＡ含有水と０．０５％ＴＦＡ含有アセトニトリルでの勾配を用いることを含む、これらの化合物をさらに精製するために使用可能である。勾配は、５分間の４０％ β定組成、ついで３０分間およそ４０％〜７０％のＢからなってよい。

最後に、ウルソル酸誘導体を調製するために、以上で記述した合成方法において有用な公知の合成前駆体の他の供給源は、商業的供給源または供給業者である。コロソル酸、ウルソル酸、オレアノール酸、マデカシ酸、アジア酸、ピジェニ酸（Ａ、ＢまたはＣ）、カウロフィロゲニンおよびエチノシス酸の精製形態が、商業的供給業者から得ることができる。例えば、ウルソル酸およびオレアノール酸は、シグマ−アルドリッチ ケミカル社（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ）（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．，ＵＳＡ）から購入可能であり、コロソル酸、アジア酸、マデカシ酸、ピジェニ酸（Ａ、ＢまたはＣ）、カウロフィロゲニンおよびエチノシス酸は、クロマデックス（Ｃｈｒｏｍａｄｅｘ）（Ｓａｎｔａ Ａｎａ、Ｃａｌｉｆ．，ＵＳＡ）から購入可能である。商業的供給源から得た化合物を、必要に応じて、本明細書で記述したカラムクロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、および／または再結晶のような方法を用いて、さらに分離および精製してよい。前駆体の単離のさらなる方法が、米国特許第７，６１２，０４５号明細書、米国特許出願第１０／３５５，２0１号明細書、米国特許出願第１０／４４５，９４３号明細書にて記述されている。

本発明の化合物を、直接合成によって得ることが可能であることがさらに見込まれる。直接合成には、総合成または半合成いずれかが含まれてよい。これらの化合物を得るための典型的な合成方法は以上に記述している。ウルソル酸誘導体の調製において有用なさらなる合成手順が、米国特許第３，９０３，０８９号明細書、米国特許第７，６１２，０４５明細書、米国特許出願第１０／４４５，９４３号明細書、米国特許出願第１０／３５５，２０１号明細書に記述されている。ウルソル酸誘導体の調製において有用なさらなる合成方法は、Ｍｅｎｇ，Ｙ．，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ １５：４０３３−４０４０；Ｇａｏ，Ｙ．，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ １５：４４３９−４４４９；Ｓｐｏｒｎ，Ｍ．Ｂ．，ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ７４：５３７−５４５；Ｃｈａｄａｌａｐａｋａ，Ｇ．、ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｂｉｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ １８（８）：２６３３−２６３９；およびＳｕｎ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｂｏｔａｎｉｃａｌ Ｓｔｕｄｉｅｓ ４７：３３９−３６８である。

各開示された方法はさらに、追加の段階、操作および／または構成要素を含んでよいことが企図される。また、任意の１つまたはそれ以上の段階、操作および／または構成要素を、任意の本発明より削除可能であることも企図される。開示された方法は、開示された化合物を提供するために使用可能であることが理解される。また、開示された方法の産物を、開示された使用方法にて利用可能であることも理解される。

Ｄ．薬学的組成物
１つの態様において、本発明は、開示された化合物を含む薬学的組成物に関する。すなわち、薬学的組成物は、治療的に効果的な量の、少なくとも１つの開示された化合物、または少なくとも１つの開示された方法の産物と、薬学的に許容可能な担体を含んで提供され得る。

１つの態様において、本発明は、動物において、筋萎縮を予防するまたは処置するために効果的な量で、薬学的に許容可能な担体と、効果的な量の、式

によって表される構造を持つ化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体を含む薬学的組成物に関し、
式中それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は任意に存在し、ｎは０または１であり、Ｒ⁰は存在する場合、水素であり、Ｒ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、そこでＲ^1bはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つは−ＯＲ¹¹であり、他は水素であり、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、Ｒ^3aおよびＲ^3bは、共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、前記量が、化合物がウルソル酸、ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である場合に、約１０００ｍｇ／日より多い。

１つの態様において、動物は動物である。さらなる態様において、動物は哺乳動物である。またさらなる態様において、哺乳動物は霊長類である。またさらなる態様において、哺乳動物はヒトである。またさらなる態様において、ヒトは患者である。

さらなる態様において、動物は家畜化された動物である。またさらなる態様において、家畜化された動物は、家畜化された魚、家畜化された甲殻類、家畜化された軟体動物である。またさらなる態様において、家畜化された動物は家禽である。またさらなる態様において、家禽は、ニワトリ、シチメンチョウ、カモおよびガチョウから選択される。またさらなる態様において、家畜化された動物は家畜（ｌｉｖｅｒｓｔｏｃｋ）である。またさらなる態様において、家畜動物は、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、バイソンおよびヒツジより選択される。

さらなる態様において、効果的な量は、治療的に効果的な量である。またさらなる態様において、効果的な量は、予防的に効果的な量である。またさらなる態様において、筋肉疾病は筋萎縮である。またさらなる態様において、筋肉疾病は、筋肉量の増加が必要となる状態である。またさらなる態様において、効果的な量は、化合物がウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である場合に、約１０００ｍｇ／日より多い。

さらなる態様において、薬学的組成物は、筋萎縮の処置が必要な哺乳動物の同定に続いて投与される。またさらなる態様において、薬学的組成物は、筋萎縮の予防が必要な哺乳動物の同定に続いて投与される。またさらなる態様において、哺乳動物は、投与段階の前

さらなる態様において、化合物は、ウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３ではない。またさらなる態様において、化合物は、ウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である。

特定の態様において、開示された薬学的組成物には、活性成分として（その薬学的に許容可能な塩（類）を含む）開示された化合物、薬学的に許容可能な担体、および任意の他の治療成分またはアジュバントが含まれる。任意の所与の場合にもっとも好適な経路は、特定の宿主、および活性成分が投与されている状態の性質および重度に依存するけれども、即時組成物には、経口、直腸、局所および（皮下、筋肉内および静脈内を含む）非経口投与のために好適なものが含まれる。薬学的組成物は、ユニット投与量形態で都合よく存在し、薬学分野で周知の任意の方法によって調製可能である。

本明細書で使用するところの語句「薬学的に許容可能な塩」は、薬学的に許容可能な非毒性塩基または酸から調製される塩を意味する。本発明の化合物が酸性である場合、相当する塩は、無機塩基および有機塩基を含む、薬学的に許容可能な非毒性塩基から都合よく調製可能である。そのような無機塩基から由来する塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅（第二および第一）、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（第二および第一）、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩が含まれる。特に好ましいのは、アンモニア、カルシウム、マグネシウム、カリウムおよびナトリウム塩である。薬学的に許容可能な有機非毒性塩基から由来する塩には、一級、二級および三級アミン類、ならびに環状アミン類、天然に存在するか、合成置換アミンのような置換アミンの塩が含まれる。それより塩を形成可能な他の薬学的に許容可能な有機非毒性塩基には、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン類、セオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどのようなイオン交換樹脂が含まれる。

本明細書で使用するところの語句「薬学的に許容可能な非毒性酸」には、無機酸、有機酸、およびそれらから調製された塩、例えば酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンホルスルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモン酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが含まれる。好ましいのは、クエン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸および酒石酸である。

実施において、本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、従来の薬学的配合技術にしたがって、薬学的担体との親密な混合物中の活性成分として組み合わせることが可能である。担体は、投与に対して望ましい調製の形態、例えば経口または（静脈内を含む）非経口に依存して、広く種々の形態を取りうる。したがって、本発明の薬学的組成物を、先に決定された量の活性成分をそれぞれ含むカプセル、カシェーまたは錠剤のような経口投与に好適な個別のユニットとして存在可能である。さらに、組成物は、粉末として、顆粒として、溶液として、水性液体中の懸濁液として、非水性液体として、水中油エマルジョンとして、油中水液体エマルジョンとして存在可能である。以上で説明した一般的な投与形態に加えて、本発明の化合物、および／またはそれらの薬学的に許容可能な塩（類）をまた、徐放方法および／または伝達デバイスによって投与も可能である。組成物は任意の調剤学の方法によって調製可能である。一般に、そのような方法には、活性成分を、１つまたはそれ以上の必要な成分を構築する担体との結合に持って行く段階が含まれる。一般に、組成物は、活性成分を、液体担体または微細に分割された固体担体または両方と、均一かつ緊密に混合することによって調製される。産物をついで、望む形に都合よく成形可能である。

したがって、本発明の薬学的組成物には、薬学的に許容可能な担体および本発明の化合物、または薬学的に許容可能な塩を含み得る。本発明の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩はまた、１つまたはそれ以上の他の治療的に活性な化合物との組み合わせで、薬学的組成物中に含まれてよい。

使用される薬学的な担体は例えば、固体、液体または気体であり得る。固体担体の例には、ラクトース、テラアルバ、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸が含まれる。液体担体の例は、シュガーシロップ、ピーナッツ油、オリーブ油および水である。気体担体の例には、二酸化炭素および窒素が含まれる。

経口投与形態のための組成物を調製することにおいて、任意の従来の薬学的培地を使用可能である。例えば、水、グリコール、油、アルコール、香味料、保存剤、着色料などを、懸濁液、エリキシルおよび溶液のような経口液体調製物を形成するために使用可能であり、一方で、デンプン、糖、微晶質性セルロース、希釈剤、顆粒剤、潤滑油、結合剤、崩壊剤などのような担体を、粉末、カプセルおよび錠剤のような経口固体調製物を形成するために使用可能である。それらの投与の簡便さにより、錠剤およびカプセルが、好ましい経口投与ユニットであり、それによって固体薬学的担体が使用される。任意の、錠剤を、標準の水性または非水性技術によってコート可能である。

本発明の組成物を含む錠剤を、任意に１つまたはそれ以上のアクセサリー成分またはアジュバントとともに、加圧または成形することによって調製可能である。加圧錠剤を、好適な機械の中で、任意に結合剤、潤滑油、不活性希釈剤、界面活性剤または崩壊剤を混合した、粉末または顆粒のようなフリーフロー形態中で、活性成分を加圧することによって調製可能である。成形した錠剤を、好適な機械の中で、不活性液体希釈剤にて湿らせた粉末化化合物の混合物を成形することによって作製可能である。

本発明の薬学的組成物は、活性成分として本発明の化合物（またはその薬学的に許容可能な塩）、薬学的に許容可能な担体、および任意に１つまたはそれ以上のさらなる治療薬剤またはアジュバントを含む。任意の所与の場合にもっとも好適な経路は、特定の宿主、および活性成分が投与されている状態の性質および重度に依存するけれども、即時組成物には、経口、直腸、局所および（皮下、筋肉内および静脈内を含む）非経口投与のために好適なものが含まれる。薬学的組成物は、ユニット投与量形態で都合よく存在し、薬学分野に周知の任意の方法によって調製可能である。

非経口投与に対して好適な本発明の薬学的組成物は、水中の活性化合物の溶液または懸濁液として調製可能である。例えばヒドロキシプロピルセルロースのような好適な界面活性剤が含まれ得る。分散液をまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、および油中のそれらの混合液中に調製も可能である。さらに、保存剤を、微生物の有害な増殖を防止するために含めてよい。

注射可能利用のために好適な本発明の薬学的組成物には、無菌水溶液または分散液が含まれる。さらに、組成物は、そのような無菌注射可能溶液または分散液の準備なしの調製のための無菌粉末の形態であり得る。すべての場合において、最終注射可能形態は、無菌でなければならず、簡単にシリンジに添加するために、効果的に流体でなければならない。薬学的組成物は、製造および保管の条件下で安定でなければならず、したがって、好ましくは、細菌および真菌のような微生物の共雑活性に対して防止されるべきである。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、植物油および好適なこれらの混合物を含む、溶媒または分散培地であり得る。

本発明の薬学的組成物は、例えばエアロゾル、クリーム、軟膏、ローション、散布剤、マウスウォッシュ、うがい薬などのような、局所利用のために好適な形態であり得る。さらに、組成物は、経皮デバイスでの使用に好適な形態であり得る。これらの処方は、本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、従来の処理方法を介して利用することによって調製可能である。例として、クリームまたは軟膏を、望む濃度を持つクリームまたは軟膏を産出するために、約５ｗｔ％〜約１０ｗｔ％の化合物と一緒に、親水性物質と水を混合することによって調製する。

本発明の薬学的組成物は、担体が固体である、直腸投与のために好適な形態であり得る。混合物が、ユニット投与坐薬を形成することが好ましい。好適な担体には、ココアバター、および本技術分野で一般的に使用される他の物質が含まれる。坐薬は、まず組成物を、軟化または融解担体と混合し、続いて冷却して、鋳型中で成形することによって都合よく形成可能である。

以上の担体成分に加えて、以上で記述した薬学的処方には、必要に応じて、希釈剤、緩衝液、香味料、結合剤、界面活性剤、増粘剤、潤滑剤、（抗酸化剤を含む）保存剤などのような、１つまたはそれ以上のさらなる担体成分を含み得る。さらに、他のアジュバントを、処方を意図するレシピエントの血液と等張とするために、含めることが可能である。本発明の化合物および／またはその薬学的に許容可能な塩を含む組成物をまた、粉末または液体濃縮形態中に調製可能である。

筋成長に関する細胞機能の調節が要求される処置条件において、適切な投与レベルは一般的に、約０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ患者体重／日であり、単一または多重投与量にて投与可能である。好ましくは、投与レベルは，約０．１〜約２５０ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは、０．５〜１００ｍｇ／ｋｇ／日である。好適な投与レベルは、約０．０１〜２５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、または約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日である。この範囲内で、投与量は、０．０５〜０．５、０．５〜５．０または５．０〜５０ｍｇ／ｋｇ／日である。経口投与のために、組成物は、処置されるべき患者の投与量の症状調節のために、１．０〜１０００ミリグラムの活性成分、とりわけ１．０、５．０、１０、１５、２０、２５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７５０、８００、９００および１０００ミリグラムの活性成分を含む錠剤の形態で好ましく提供される。化合物は、１〜４回／日、好ましくは１〜２回／日のレジメで投与可能である。この投与レジメは、最適な治療応答を提供するように調節可能である。

しかしながら、任意の特定の患者に対する特定の投与レベルが、種々の要素に依存することが理解される。そのような要素には、患者の年齢、体重、一般的な健康、性別および食事が含まれる。他の因子には、投与時間および経路、排出速度、薬物の組み合わせ、治療を行っている特定の疾患の型と重度が含まれる。

本発明はさらに、１つまたはそれ以上の開示された化合物、産物または薬学的に許容可能な担体または希釈剤との組み合わせを含む、哺乳動物（例えばヒト）での筋成長に関連する細胞活性を調節する（例えば、筋不全または萎縮に関連した１つまたはそれ以上の疾病の処置）ための医薬品の製造の方法を指向する。したがって、１つの態様において、本発明は、少なくとも１つの開示された化合物または少なくとも１つの開示された産物を、薬学的に許容可能な担体または希釈剤と混合することを含む、医薬品の製造のための方法に関する。

開示された薬学的組成物はさらに、上述した病理学的状態の処置にて通常適用される、他の治療的に活性な化合物を含み得る。

開示された組成物は、開示された化合物から調製可能であることが理解される。開示された組成物が、開示された利用の方法にて使用可能であることも理解される。

Ｅ．化合物および組成物を利用する方法
１．筋萎縮
筋萎縮は、筋肉の量の減少として定義され、筋肉の部分的または完全な消費であり得る。筋萎縮の場合、力を発揮する能力は量に関連するので、筋肉の弱化を導く。筋萎縮は、種々の一般的な疾患の併存疾病であり、これらの疾患状況での「悪疫質」を持つ患者の予後が悪い。

筋萎縮はまた、栄養失調、加齢、（自発的および無意識の絶対安静、（多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、重症ニューロパシー、脊髄損傷または末梢神経損傷のような）神経系疾病、四肢または関節に対する損傷、キャスティング、他の四肢固定の手術後形態または宇宙飛行のような）筋肉不使用、（がん、鬱血性心不全、慢性肺疾病、慢性腎不全、慢性肝疾病、糖尿病、グルココルチコイド過剰分泌およびＨＩＶ／ＡＩＤＳまたは結核のような慢性感染症のような）慢性疾患、やけど、敗血症、機械的通気を必要とする他の疾病、（グルココルチコイド誘導ミオパシーおよびスタチン誘導ミオパシーのような）薬物誘導筋疾患、（筋ジストロフィーおよび筋硬直性ジストロフィーのような）まず骨格筋に影響を与える遺伝疾患、（多発性筋炎および皮膚筋炎のような）骨格筋に影響を与える自己免疫疾患によって引き起こされる骨格筋欠損または弱化でもあり得る。

栄養失調、（自発的および無意識の絶対安静、（多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、重症ニューロパシー、脊髄損傷または末梢神経損傷を含む）神経系疾病、整形外科的損傷、キャスティングおよび他の四肢固定の手術後形態に続発する）筋肉不使用、（がん、鬱血性心不全、慢性肺疾病、慢性腎不全、慢性肝疾病、糖尿病、クッシング症候群およびＨＩＶ／ＡＩＤＳまたは結核のような慢性感染症を含む）慢性疾患、やけど、敗血症、機械的通気を必要とする他の疾病、（グルココルチコイド誘導ミオパシーおよびスタチン誘導ミオパシーのような）薬物誘導筋疾患、（筋ジストロフィーおよび筋硬直性ジストロフィーのような）まず骨格筋に影響を与える遺伝疾患、（多発性筋炎および皮膚筋炎のような）骨格筋に影響を与える自己免疫疾患、宇宙飛行、および加齢を含む、筋萎縮を引き起こす多くの疾患および状態が存在する。

筋萎縮は、タンパク質合成とタンパク質分解の間の正常のバランスにおける変化によって発生する。萎縮の間、タンパク質合成経路のダウンレギュレーションと、タンパク質分解経路の活性化が存在する。萎縮を受けている筋肉にて見られる多くの筋肉欠損に関与するとみられる特定のタンパク質分解経路は、ＡＴＰ−依存、ユビキチン／プロテアソーム経路である。本システムにおいて、特定のタンパク質が、基質タンパク質上へ、ユビキチンと呼ばれる小さなペプチドの少なくとも４つのコピーのライゲーションによる破壊に対して標的化される。基質がしたがって、「ポリ−ユビキチン化」される場合、プロテアソームによる破壊に対して標的化される。ユビキチン／プロテアソーム経路における特定の酵素が、ユビキチン化を、いくつかのタンパク質を指向するように許容するが、他にはせず、特に、「Ｅ３ユビキチンリガーゼ」に標的化タンパク質を連結することによって得られる。各Ｅ３ユビキチンリガーゼが、特定の一組の基質に結合し、それらのユビキチン化を引き起こす。例えば、骨格筋において、Ｅ３ユビキチンリガーゼアトロジン−１およびＭｕＲＦ１が、タンパク質分解と筋萎縮において重要な役割を果たすことが公知である。

筋萎縮は、筋肥大を誘導するシグナル伝達経路、または筋肉サイズの増加によって対抗可能である。したがって、運動が、筋肉量の増加を誘導する１つの方向が、反対の効果を持つ経路をダウンレギュレートするものである。筋萎縮に対する１つの重要なリハビリテーションツールには、下半身不随患者のリハビリテーションにてその成功が制限されてきた、筋肉を刺激するための、機能的電気刺激の利用が含まれる。

ウルソル酸またはウルソル酸誘導体を、疾患関連および加齢関連筋萎縮のための治療として使用可能である。単独治療として、またはミオスタチン阻害（Ｚｈｏｕ，Ｘ．，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｃｅｌｌ １４２（４）：５３１−５４３）のような、考慮されてきた他の戦略との組み合わせで有用であり得る。脂肪症、空腹時血糖および血症脂質レベルを減少させるその能力を考えると、ウルソル酸またはウルソル酸誘導体をまた、肥満、代謝性疾患および２型糖尿病に対する治療としても使用可能である。

開示された化合物を、単独試薬として、または１つまたはそれ以上の薬物との組み合わせで、一緒の薬物の組み合わせが、いずれかの薬物のみよりもより安全で、より効果的であり、式Ｉの化合物または他の薬物が有用である、上記疾患、疾病および状態の処置、予防、制御、緩和またはリスクの減少において使用可能である。他の薬物（類）を、開示された薬物と同時に、または連続して、一般に使用される経路によって、そして量で投与可能である。開示された化合物が、１つまたはそれ以上の他の薬物と一緒に使用される場合、そのような薬物と開示化合物が含まれるユニット用量形態での薬学的組成物が好ましい。しかしながら、組み合わせ治療はまた、重なり合ったスケジュールにて投与可能である。１つまたはそれ以上の活性成分と、開示された化合物の組み合わせが、単独試薬としていずれかよりも、より効果的であることも想定される。

（非経口注射による、または経口消費による）ウルソル酸の全身投与を、四肢および隔膜の筋肉を含む、すべての筋肉における筋肉成長を促進し、筋萎縮を減少させるために使用可能である。（局所経路または局在注射による）ウルソル酸の局所投与を、続いて局所の傷害または手術を必要とし得るように、局所筋肉増殖を促進するために使用可能である。

１つの態様において、対象化合物を、インスリン、インスリン類似体、インスリン様増殖因子１、メタホルミン、チアゾラジンジオン類、スルホニルウレア類、メグリチニド類、レプチン、ジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド−１アゴニスト、チロシン−タンパク質ホスファターゼ非１型受容体（ＰＴＰＮ１ａ．ｋ．ａ．ＰＴＰ１Ｂ）阻害剤、ミオスタチンシグナル伝達阻害剤、クレンブテロール、およびテストステロンおよび５−デヒドロエピアンドロステロンを含むアンドロゲンを含む、インスリンシグナル伝達、ＩＧＦ１シグナル伝達および／または筋肉増殖を刺激する薬剤と併用可能である。誘導体は、コルソル酸、ＵＡ０７１３、または他の五員環トリテルペン酸であり得る。ウルソル酸、その誘導体または塩を、経口、筋肉内、静脈内または経動脈で投与可能である。ウルソル酸、その誘導体または塩は、本質的に純粋であり得る。ウルソル酸、その誘導体または塩を、約１０ｍｇ／日〜１０ｇ／日で投与可能である。

他の態様において、対象化合物を、インスリン、インスリン類似体、インスリン様増殖因子１、メタホルミン、チアゾラジンジオン類、スルホニルウレア類、メグリチニド類、レプチン、ジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド−１アゴニスト、チロシン−タンパク質ホスファターゼ非１型受容体（ＰＴＰＮ１ａ．ｋ．ａ．ＰＴＰ１Ｂ）阻害剤、ミオスタチンシグナル伝達阻害剤、クレンブテロール、およびテストステロンおよび５−デヒドロエピアンドロステロンを含むアンドロゲンを含む、インスリンシグナル伝達、ＩＧＦ１シグナル伝達および／または筋肉増殖を刺激する薬剤との組み合わせで投与可能である。誘導体は、コルソル酸、ＵＡ０７１３、または他の五員環トリテルペン酸であり得る。ウルソル酸、その誘導体または塩を、経口、筋肉内、静脈内または経動脈で投与可能である。ウルソル酸、その誘導体または塩は、本質的に純粋であり得る。ウルソル酸、その誘導体または塩を、約１０ｍｇ／日〜１０ｇ／日で投与可能である。

本発明の薬学的組成物および方法はさらに、上記病理学的状態の処置において通常適用される、本明細書で述べた他の治療的に活性な化合物をさらに含み得る。

２．処置方法
本明細書で開示された化合物は、種々の筋肉疾病を処置する、予防する、緩和する、リスクを制御するまたは減少させるために有用である。そのような筋肉疾病の例には、栄養失調、筋肉不使用（自発的および無意識の絶対安静に続発する）、（多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、重症ニューロパシー、脊髄損傷または末梢神経損傷を含む）神経系疾病、整形外科的損傷、キャスティングおよび他の四肢固定の手術後形態、（がん、鬱血性心不全、慢性肺疾病、慢性腎不全、慢性肝疾病、糖尿病、クッシング症候群およびＨＩＶ／ＡＩＤＳまたは結核のような慢性感染症を含む）慢性疾患、やけど、敗血症、機械的通気を必要とする他の疾病、（グルココルチコイド誘導ミオパシーおよびスタチン誘導ミオパシーのような）薬物誘導筋疾患、（筋ジストロフィーおよび筋硬直性ジストロフィーのような）まず骨格筋に影響を与える遺伝疾患、（多発性筋炎および皮膚筋炎のような）骨格筋に影響を与える自己免疫疾患、宇宙飛行、または加齢関連サルコペニアに続発する骨格筋萎縮が含まれるが、これらの限定はされない。

したがって、対象に、少なくとも１つの開示された化合物、少なくとも１つの開示された薬学的組成物、および／または少なくとも１つの開示された産物を、対象中の疾病を処置するために効果的な投与量および量で投与すること、を含む筋萎縮を処置すること、または予防することのための方法が提供される。

また、対象に、少なくとも１つの開示された化合物、少なくとも１つの開示された薬学的組成物、および／または少なくとも１つの開示された産物を、対象中の疾病を処置するために効果的な投与量および量で投与すること、を含む筋肉量を増加させるための方法も提供される。

ａ．筋萎縮の予防または処置
１つの態様において、本発明は、動物における筋萎縮を予防する、または処置するための方法に関し、動物中の筋萎縮を予防するまたは処置するために効果的な量で、式

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体を動物に投与することを含む方法に関し、
式中それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は任意に存在し、ｎは０または１であり、Ｒ⁰は存在する場合、水素であり、Ｒ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、そこでＲ^1bはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つは−ＯＲ¹¹であり、他は水素であり、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシルから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、任意に共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、前記量が、化合物がウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である場合に、約１０００ｍｇ／日より多い。

さらなる態様において、投与される化合物は、開示された化合物、または化合物を作製する開示された方法の産物である。

さらなる態様において、動物は哺乳動物である。またさらなる態様において、哺乳動物は霊長類である。またさらなる態様において、哺乳動物はヒトである。またさらなる態様において、ヒトは患者である。

さらなる態様において、動物は家畜化された動物である。またさらなる態様において、家畜化された動物は、家畜化された魚、家畜化された甲殻類、家畜化された軟体動物である。またさらなる態様において、家畜化された動物は家禽である。またさらなる態様において、家禽は、ニワトリ、シチメンチョウ、カモおよびガチョウから選択される。またさらなる態様において、家畜化された動物は家畜である。またさらなる態様において、家畜動物は、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、バイソンおよびヒツジより選択される。

さらなる態様において、効果的な量は、治療的に効果的な量である。またさらなる態様において、効果的な量は、予防的に効果的な量である。またさらなる態様において、筋萎縮が、化合物の投与によって予防される。またさらなる態様において、筋萎縮が、化合物の投与によって処置される。またさらなる態様において、方法にはさらに、筋萎縮の処置が必要な動物を同定する段階が含まれる。またさらなる態様において、方法にはさらに、筋萎縮の予防を必要とする哺乳動物を同定する段階が含まれる。またさらなる態様において、哺乳動物は、投与段階の前に、筋萎縮の処置を必要とすると診断される。

さらなる態様において、化合物は、ウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３ではない。またさらなる態様において、化合物は、ウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である。またさらなる態様において、化合物は、食品として投与されない。

ｂ．筋肉量および／または強度の増加
１つの態様において、本発明は、動物における筋肉量および／または筋肉強度を増加させるための方法に関し、動物中の筋萎縮を予防するまたは処置するために効果的な量で、式

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体を動物に投与することを含む方法に関し、
式中それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は任意に存在し、ｎは０または１であり、Ｒ⁰は存在する場合、水素であり、Ｒ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、そこでＲ^1bはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つは−ＯＲ¹¹であり、他は水素であり、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒にＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、前記量が、化合物がウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である場合に、約１０００ｍｇ／日より多い。さらなる実施態様において、投与される化合物は、開示された化合物または化合物を作製する開示された方法の産物である。

さらなる態様において、投与される化合物は、開示された化合物、または化合物を作製する開示された方法の産物である。

さらなる態様において、動物は哺乳動物である。またさらなる態様において、哺乳動物は霊長類である。またさらなる態様において、哺乳動物はヒトである。またさらなる態様において、ヒトは患者である。

さらなる態様において、動物は家畜化された動物である。またさらなる態様において、家畜化された動物は、家畜化された魚、家畜化された甲殻類、家畜化された軟体動物である。またさらなる態様において、家畜化された動物は家禽である。またさらなる態様において、家禽は、ニワトリ、シチメンチョウ、カモおよびガチョウから選択される。またさらなる態様において、家畜化された動物は家畜である。またさらなる態様において、家畜動物は、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、バイソンおよびヒツジより選択される。

さらなる態様において、効果的な量は、治療的に効果的な量である。またさらなる態様において、効果的な量は、予防的に効果的な量である。またさらなる態様において、筋萎縮が、化合物の投与によって予防される。またさらなる態様において、筋萎縮が、化合物の投与によって処置される。またさらなる態様において、方法にはさらに、筋萎縮の処置が必要な動物を同定する段階が含まれる。またさらなる態様において、方法にはさらに、筋萎縮の予防を必要とする哺乳動物を同定する段階が含まれる。またさらなる態様において、哺乳動物は、投与段階の前に、筋萎縮の処置を必要とすると診断される。

さらなる態様において、化合物は、ウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３ではない。またさらなる態様において、化合物は、ウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である。またさらなる態様において、化合物は、食品として投与されない。

ｃ．筋肉形成の増強
１つの態様において、本発明は、動物における筋肉形成を増強さる方法に関し、哺乳動物中の筋肉形成を増強するために効果的な、少なくとも約２００ｍｇ／ｋｇの量で、式

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体を哺乳動物に投与することを含む方法に関し、
式中Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＲ¹²およびＲ¹³は存在する場合共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、ＸはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ₂、ＮＨ、およびＮＣＨ₃から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、投与される化合物は、開示された化合物、または化合物を作製する開示された方法の産物である。

さらなる態様において、哺乳動物はヒトである。またさらなる態様において、ヒトは患者である。またさらなる態様において、化合物の投与は、哺乳動物における筋萎縮を予防する。またさらなる態様において、化合物の投与は、哺乳動物における筋萎縮を処置する。またさらなる態様において、化合物の投与は、哺乳動物における筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、化合物の投与は、哺乳動物における筋肉強度を増加させる。

さらなる態様において、効果的な量は、治療的に効果的な量である。またさらなる態様において、効果的な量は、治療的に効果的な量である。またさらなる態様において、効果的な量は、予防的に効果的な量である。またさらなる態様において、筋疾患が、化合物の投与によって予防される。またさらなる態様において、方法にはさらに、筋萎縮の処置が必要な動物を同定する段階が含まれる。またさらなる態様において、方法にはさらに、筋萎縮の予防を必要とする哺乳動物を同定する段階が含まれる。またさらなる態様において、哺乳動物は、投与段階の前に、筋萎縮の処置を必要とすると診断される。

さらなる態様において、動物は家畜化された動物である。またさらなる態様において、家畜化された動物は家畜である。またさらなる態様において、家畜動物は、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、バイソンおよびヒツジより選択される。

さらなる態様において、化合物はウルソル酸ではない。またさらなる態様において、化合物はウルソル酸である。さらなる態様において、化合物は、ウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３ではない。またさらなる態様において、化合物は、ウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である。またさらなる態様において、化合物は、食品として投与されない。

３．ｉｎ ｖｉｔｒｏでの組織増殖の増強
１つの態様において、本発明は、ｉｎ ｖｉｔｒｏにて組織増殖を増強する方法に関し、組織の増殖を増強するために効果的な量で、式

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体を組織に投与することを含む方法に関し、
式中それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は任意に存在し、ｎは０または１であり、Ｒ⁰は存在する場合、水素であり、Ｒ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、そこでＲ^1bはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つは−ＯＲ¹¹であり、他は水素であり、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、投与される化合物は、開示された化合物、または化合物を作製する開示された方法の産物である。

さらなる態様において、組織には動物細胞が含まれる。またさらなる態様において、動物細胞は筋肉細胞である。またさらなる態様において、筋肉細胞は、筋衛星細胞である。またさらなる態様において、筋衛星細胞は、足場上で増殖する。

４．医薬品の製造
１つの態様において、本発明は、治療的に効果的な量の開示された化合物、または開示された方法の産物を、薬学的に許容可能な担体または希釈剤と混合することを含む、哺乳動物中の筋萎縮を阻害するため、および筋肉量を増加させるための、医薬品の製造のための方法に関する。

さらなる態様において、医薬品は、筋肉増殖を調節する。またさらなる態様において、医薬品は、筋萎縮を阻害する。またさらなる態様において、医薬品は筋肉量を増加させる。またさらなる態様において、医薬品は、骨格筋肥大を誘導する。

５．性能増強利用のための試験方法
１つの態様において、本発明は、動物におけるウルソル酸類似体の利用を増強する性能のための試験の方法に関し、超生理学的量の化合物が試験試料中に存在するかどうかを決定するために、（ａ）動物より生物学的試験試料を得ること、および（ｂ）式

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体の量を測定することを含む方法に関し、
式中それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は任意に存在し、ｎは０または１であり、Ｒ⁰は存在する場合、水素であり、Ｒ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、そこでＲ^1bはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、任意に共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つは−ＯＲ¹¹であり、他は水素であり、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、生物学的試験試料中の超生理学的量の化合物が、化合物の利用を増強する性能の示唆である。

さらなる態様において、超生理学的量は、約１０００ｍｇ／日のレベルでの投与からのピーク濃度よりも大きい。またさらなる態様において、超生理学的量は、２００ｍｇ／日より大きなレベルでの化合物の投与からの結果である量である。またさらなる態様において、超生理学的量は、２００ｍｇ／日より大きなレベルでの化合物の投与からの結果である量である。またさらなる態様において、生物学的試験試料は、化合物の投与後約１２時間〜約９６時間で得られる。

さらなる態様において、動物は哺乳動物である。またさらなる態様において、動物は家畜化された動物である。またさらなる態様において、哺乳動物はヒトである。

さらなる態様において、生物学的試料は血液、尿、唾液、毛、筋肉、皮膚、脂肪または息である。

６．化合物の利用
１つの態様において、本発明は、哺乳動物における筋肉量を増加させるための化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体の利用に関し、化合物は、式

によって表される構造を持ち、
式中それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は任意に存在し、ｎは０または１であり、Ｒ⁰は存在する場合、水素であり、Ｒ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、そこでＲ^1bはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、任意に共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bの１つは−ＯＲ¹¹であり、他は水素であり、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、任意に共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒にＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＲ¹²およびＲ¹³は、存在するとき、共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、ＸはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ₂、ＮＨ、およびＮＣＨ₃から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、利用は哺乳動物の処置である。またさらなる態様において、哺乳動物はヒトである。またさらなる態様において、ヒトは患者である。またさらなる態様において、利用は、筋萎縮を予防するための、哺乳動物への化合物の投与である。またさらなる態様において、利用は、哺乳動物における筋肉強度を増加させるための化合物の投与である。またさらなる態様において、哺乳動物は家畜化された動物である。またさらなる態様において、家畜化された動物は家畜である。またさらなる態様において、家畜動物は、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、バイソンおよびヒツジより選択される。

さらなる態様において、利用は効果的な量での化合物の投与である。さらなる態様において、効果的な量は、治療的に効果的な量である。またさらなる態様において、効果的な量は、予防的に効果的な量である。またさらなる態様において、使用の前に筋萎縮の処置が必要な哺乳動物を同定する。またさらなる態様において、使用の前に筋萎縮の予防が必要な哺乳動物を同定する。またさらなる態様において、哺乳動物は、投与段階の前に、筋萎縮の処置を必要とすると診断される。

さらなる態様において、化合物はウルソル酸ではない。またさらなる態様において、化合物はウルソル酸である。さらなる態様において、化合物は、ウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３ではない。またさらなる態様において、化合物は、ウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である。またさらなる態様において、化合物は、食品として投与されない。またさらなる態様において、化合物がウルソル酸、ベータ−ボスウェル酸、コロソル酸、ベツリン酸またはＵＡ０７１３である場合に、化合物は、約１０００ｍｇ／日より多い量で利用される。

７．キット
１つの実施形態において、本発明は、式

によって表される構造を持つ少なくとも１つの化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物または多型体と、１つまたはそれ以上の、（ａ）タンパク質サプリメント、（ｂ）同化剤、（ｃ）異化剤、（ｄ）栄養補助食品、（ｅ）少なくとも１つの、筋肉消費に関連した疾病を処置することが公知の薬剤、（ｆ）コリン活性に関連した疾病を処置するための指示、または（ｇ）筋肉量および／または筋肉強度を増加させるための化合物の利用のための指示を含むキットに関し、
式中それぞれ−−−−は任意の共有結合であり、Ｒ⁰は任意に存在し、ｎは０または１であり、Ｒ⁰は存在する場合、水素であり、Ｒ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹⁰から選択され、そこでＲ^1aはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^1aおよびＲ^1bは、共有結合しており、中間炭素とともに、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ^2aおよびＲ^2bは、少なくとも１つのＲ^1aおよびＲ^2bが−ＯＲ¹¹であるという条件で、独立して水素および−ＯＲ¹¹から選択され、またはＲ^2aおよびＲ^2bは一緒に＝Ｏを含み、各Ｒ^3aおよびＲ^3bは、Ｒ^3aおよびＲ^3bが同時にヒドロキシルではないという条件で、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣ１〜Ｃ６アルコキシルから選択され、またはＲ^3aおよびＲ^3bは、共有結合し、中間炭素と一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、各Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶は独立してＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ⁷は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−ＣＨ₂ＯＲ¹²および−Ｃ（Ｏ）ＺＲ¹²から選択され、Ｒ⁸は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ^9aおよびＲ^9bは、Ｒ^9aとＲ^9bが同時に水素ではないという条件で、独立して水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、またはＲ^9aおよびＲ^9bは、共有結合しており、中間炭素とともに一緒に任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを含み、Ｒ¹⁰は水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、各Ｒ¹¹は独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ６ヘテロシクロアルキル、フェニル、ヘテロアリールおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒ¹⁴から選択され、許されるならばＲ¹¹は、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換され、Ｒ¹²は、水素および１〜２０の炭素を持つ任意に置換された有機残基から選択され、Ｚは−Ｏ−および−ＮＲ¹³−から選択され、Ｒ¹³は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＺはＮであり、Ｒ¹²およびＲ¹³は共有結合し、−ＮＲ¹²Ｒ¹³は式

の部分を含み、Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ₃−から選択され、Ｒ¹⁴はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、シアノ、アシル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヒドロキシル、アセトキシル、メトキシル、エトキシル、プロポキシルおよびブトキシルから選択された０〜２個の基によって置換される。

さらなる態様において、キットは、開示された化合物または開示された方法の産物を含む。

さらなる態様において、少なくとも１つの化合物および少なくとも１つの薬剤を、共処方する。さらなる態様において、少なくとも１つの化合物および少なくとも１つの薬剤を一緒にパッケージする。

キットにはまた、他の構成要素と一緒にパッケージされる、共処方される、および／または一緒に伝達される化合物および／または産物を含むことができる。例えば、薬物製造業者、薬物再販売業者、医師、調合店、または薬剤師が、開示された化合物および／または産物、および患者への伝達のための他の構成要素を含むキットを提供可能である。

開示されたキットを、開示された作製方法、開示された利用方法および／または開示された組成物に関連して使用可能であることが企図される。

８．非医用利用
ネコ、イヌ、ウサギ、サル、ラットおよびマウスのような実験動物中の、筋肥大の調節物、または筋萎縮関連活性の阻害剤の効果の評価のために、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏ試験システムの開発と標準化における薬理学的ツールとして、筋肉量を増加させるおよび／または筋肥大を阻害する新規治療薬剤の探索の一部として、開示された化合物および産物の利用も提供される。

Ｆ．実験
以下の実施例は、本明細書で請求される化合物、組成物、記事、デバイスおよび／または方法がどのように作製され、評価されるか、の完全な開示および記述を当業者に提供するために提出され、本発明者等が、なにを発明者等の発明と見なしているかの範囲を制限する意図はない。しかしながら、当業者は、本開示物に関して、開示され、本発明の精神および範囲から逸脱することなしに、類似のまたは同様の結果を得る、特定の実施例において多くの変化を行うことが可能であることを理解すべきである。

数字（例えば量、温度など）に関連して正確さを確かにする努力が行われて来たが、いくつかの間違いおよび偏差が考慮されるべきである。他に指摘しない限り、部分は重量部であり、温度は、℃であるか、大気温度であり、圧力は大気圧であるか、その近辺である。

特定の物質、試薬およびキットを、以下で示すような特定の業者より得、適切に業者カタログ、物品を特定する部分または他の数字を示す。以下に指摘した業者は、次のようなものである。「Ａｍｂｉｏｎ」はライフ テクノロジーズ社（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）Ａｕｓｔｉｎ，Ｔｅｘａｓ ＵＳＡの一部門であるアンビオンである。「Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ」は、ライフ テクノロジーズ社（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡの一部門である、アプライド バイオシステムズである。「Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ」は、べーリンガー マンハイム社（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、Ｉｎｄｉａｐｏｌｉｓ，Ｉｎｄｉａｎａ，ＵＳＡである。「ＣａｒｄｉｎａｌＨｅａｌｔｈ」はカーディナル ヘルス社（Ｃａｒｄｉｎａｌ Ｈｅａｌｔｈ，Ｉｎｃ．）、Ｄｕｂｌｉｎ，Ｏｈｉｏ，ＵＳＡである。「Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ」はセル シグナリング テクノロジー社（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ．）、Ｂｅｒｖｅｒｌｙ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｓｅｔｔｓ、ＵＳＡである。「Ｃｏｌｕｍｂｕｓ Ｉｎｓｔ」はコロンブス インストゥルメンツ インターナショナル（Ｃｏｌｕｍｂｕｓ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）、Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，Ｏｈｉｏ，ＵＳＡである。「Ｈａｒｌａｎ」はハーラン ラボラトリーズ（Ｈａｒｌａｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）」Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，Ｉｎｄｉａｎａ，ＵＳＡである。「Ｉｎｓｔｒｕｍｅｄｉｃｓ」はインストゥルメディクス社（Ｉｎｓｔｒｕｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．）、Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ，ＵＳＡである。「Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ」は、インビトロジェン社（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡである。「Ｍｉｃｒｏｍ」は、サーモ フィッシャー サイエンティフィック社（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ．）Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ，ＵＳＡのミクロム部門（Ｗａｌｌｄｏｒｆ，Ｇｅｒｍａｎｙ）である。「Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ」は、ミリポア社（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｓｅｔｔｓ，ＵＳＡ、メルクＫＧａＡ（Ｍｅｒｃｋ ＫＧａＡ）、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙの一部門である。「Ｏｒｔｈｏ」は、オルソ クリニカル ダイアグノスティックス（Ｏｒｔｈ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＵＳＡである。「Ｐｉｅｒｃｅ」は、ピアス バイオテクノロジーズ社（Ｐｉｅｒｃｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｉｎｃ．）、Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，ＵＳＡ、サーモ フィッシャー サイエンティフィック社の一部門である。「Ｒ＆Ｄシステムズ」は、Ｒ＆Ｄシステムズ社（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ．）、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ，ＵＳＡである。「Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ」は、ロッシュ ダイアグノスティックス社（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，Ｉｎｄｉａｎａ，ＵＳＡである。「Ｓａｋｕｒａ」は、サクラ ファインテック ＵＳＡ社（Ｓａｋｕｒａ Ｆｉｎｅｔｅｋ ＵＳＡ，Ｉｎｃ．）、Ｔｏｒｒａｎｃｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡである。「Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ」は、サンタ クルズ バイオテクノロジー社（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ．），Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡである。「Ｓｉｍｇａ」はシグマ−アルドリッチ社（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ），Ｓａｉｎｔ Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉ，ＵＳＡである。

１．一般法
ａ．ヒト対象プロトコール
本明細書で引用した研究は、ｔｈｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｂｏａｒｄ ａｔ ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｉｏｗａによって許可され、参加前にインフォームドコンセントを取った７人の健康成人が参加した。絶食研究の１週間前に、対象を、身体測定、各対象の通常の食物摂取および食物の好みを確立するための食事インタビュー、およびＢＭ／Ｈｉｔａｃｈｉ９１１アナライザー（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ）を用いた、血液ヘモグロビン（「Ｈｂ」）Ａｌｃ比濁免疫阻害のベースメント測定、Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）Ｓｙｓｔｅｍ（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を用いる、電気化学発光免疫アッセイによる、血漿トリグリセリドおよび血漿遊離Ｔ４およびＴＳＨ、Ｒｏｃｈｅ Ｃｏｂａｓ Ｉｎｔｅｇｒａ（登録商標）高感度アッセイ（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を用いる、免疫比濁アッセイによる血漿ＣＲＰ、およびＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）Ｋｉｔ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いる血漿ＴＮＦ−αレベルのために、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｕｎｉｔ（「ＣＲＵ」）に１回訪問させた。対象が、絶食試験の前にその通常の食事を取ることを確かにするために、対象は、絶食試験前４８時間、（食事インタビューに基づき）ＣＲＵ栄養士によって準備された食事のみを食した。絶食試験を、ｔ＝０時間で開始し、対象がＣＲＵに収容され、絶食が開始された。絶食の間、対象はＣＲＵに滞在し、その通常の運動を維持するように奨励された。水は自由裁量で与えられたが、カロリー摂取は許可されなかった。約４０時間の時点で、超音波ガイダンス下、Ｔｅｍｎｏ（登録商標）Ｂｉｏｐｓｙ Ｎｅｅｄｌｅ（ＣａｒｄｉｎａｌＨｅａｌｔｈ；Ｃａｔ番号Ｔ１４２０）を用いて、外側広筋より経皮的生検をとった。ついで対象は、ＣＲＵ−調製混合食をとり、ｔ＝４６時間で、筋肉生検を、反対側の外側広筋よりとった。血漿グルコースおよびインスリンレベルを、ｔ＝３６、４０、４２および４６時間で測定し、Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）システムを使用して、血漿インスリンを定量した。脊髄損傷を伴うヒトの本発明者らのプロトコールは先に記述されている（Ａｄａｍｓ ＣＭ，ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｍｕｓｃｌｅ Ｎｅｒｖｅ．４３（１）：６５−７５）。

ｂ．ヒト骨格筋ＭＲＮＡレベルのマイクロアレイ解析
回収後、骨格筋試料をすぐにＲＮＡｌａｔｅｒ（Ａｍｂｉｏｎ）に配置し、さらなる利用まで−８０℃で保存した。総ＲＮＡをＴＲＩｚｏｌ溶液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて抽出し、マイクロアレイハイブリダイゼーションを、先に記述された（Ｌａｍｂ Ｊ，ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ ３１３（５７９５）：１９２９−１９３５）ようにアイオワ大学ＤＮＡの研究所で実施した。本明細書で示したように、ｌｏｇ₂ハイブリダイゼーションシグナルが、個々のｍＲＮＡに特異的なすべてのエクソンプローブの平均シグナル強度を反映する。どのヒト骨格筋ｍＲＮＡが有意に絶食によって変化するか（Ｐ≦０．０２）を決定するために、対となるｔ−検定を使用して、絶食および食事ｌｏｇ₂シグナルを比較した。そのマウス骨格筋ｍＲＮＡが有意にウルソル酸によって変化するか（Ｐ≦０．００５）を決定するために、対でないｔ−検定を使用して、対照餌、またはウルソル酸を加えた餌を給餌されたマウス中のｌｏｇ₂シグナルを比較した。高く発現しているｍＲＮＡｓを、ｌｏｇ₂シグナル＞８から抑制するかまたは誘導された有意に変化したｍＲＮＡとして定義した。ヒトおよびマウスからのこれらの生のマイクロアレイデータを、ＮＣＢＩのＧｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｏｍｎｉｂｕｓ（「ＧＥＯ」）中に預け、それぞれ、ＧＥＯ Ｓｅｒｉｅｓ登録番号ＧＳＥ２８０１６およびＧＳＥ２８０１７をとしてアクセス可能である。マウス骨格筋における絶食の効果、およびヒト骨格筋の脊髄損傷の効果のエクソンアレイ研究が、すでに記述されている（Ａｄａｍｓ ＣＭ，ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｍｕｓｃｌｅ ＆ ｎｅｒｖｅ ４３（１）：６５−７５；Ｅｂｅｒｔ ＳＭ，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ２４（４）：７９０−７９９）。

ｃ．定量性リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ（ＱＰＣＲ）
ＴＲＩｚｏｌ−抽出ｍＲＮＡを、Ｔｕｒｂｏ ＤＮＡフリーキット（Ａｍｂｉｏｎ）を用いて、ＤＮａｓｅＩで処理した。ヒトｍＲＮＡおよびマウスＩＧＦ−Ｉ ｍＲＮＡのｑＰＣＲ解析を、ＴａｑＭａｎ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｓｓａｙｓ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて実施した。第一鎖ｃＤＮＡを、Ｈｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙ ｃＤＮＡ Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ａｐｐｌｉｃｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，番号４３６８８１４）を用いて、２μｇのＲＮＡから合成した。リアルタイムＰＣＲは、最終用量２０μｌで、２０ｎｇの逆転写ＲＮＡ、１μｌの２０× ＴａｑＭａｎ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｓｓａｙおよび１０μｌのＴａｑＭａｎ Ｆａｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（Ａｐｐｌｉｃｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、パート番号４３５２０４２）を含んだ。ｑＰＣＲを、９６００懸濁液モードにて、７５００ Ｆａｓｔ Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて実施した。マウスアストロジン−１およびＭｕＲＦ１ ｍＲＮＡレベルのｑＰＣＲ解析を、先に記述された（Ｅｂｅｒｔ ＳＭ、ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ２４（４）：７９０−７９９）ように実施した。すべてのｑＰＣＲ反応を、三重で実施し、サイクル閾値（Ｃｔ）値を、最終結果を得るために平均化した。データを解析するために、△Ｃｔ法を使用し、不変対照として、３６Ｂ４ ｍＲＮＡのレベルを使用した。

ｄ．マウスプロトコール
オスＣ５７ＢＬ／６マウス、６〜８週齢を、ＮＣＩより得て、１２時間明／１２時間暗サイクルでコロニーケージ内で飼い、それぞれの到着から３週間以内に実験に使用した。他に指摘しない限り、マウスを、標準食事（Ｈａｒｌａｎ； Ｔｅｋｌａｄ Ｄｉｅｔ、Ｆｏｒｍｕｌａ ７０１３、ＮＩＨ−３１ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｏｐｅｎ Ｆｏｒｍｕｌａ Ｍｏｕｓｅ／Ｒａｔ Ｓｔｅｒｉｌｉｚａｂｌｅ Ｄｉｅｔ）で維持した。メトフォルミン（Ｓｉｇｍａ）を０．９％ ＮａＣｌ中に、２５０ｍｇ／ｍｌの濃度で溶解させた。ウルソル酸（Ｅｎｚｏ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を、２００ｍｇ／ｍｌ（ｉ．ｐ．注射のため）の濃度でトウモロコシ油中で溶解させ、あるいはウルソル酸を、カスタマイズ食事として標準食事（Ｈａｒｌａｎ； Ｔｅｋｌａｄ Ｄｉｅｔ、Ｆｏｒｍｕｌａ ７０１３）または標準高脂食（Ｈａｒｌａｎ； Ｔｅｋｌａｄ Ｄｉｅｔ、Ｆｏｒｍｕｌａ ＴＤ．９３０７５）に直接加えた。オレアノール酸（Ｓｉｇｍａ）を、２００ｍｇ／ｍｌの濃度でトウモロコシ油中に溶解させた。マウスを、２４時間食物を取り除くことで絶食させたが、水は与えた。絶食血液グルコースレベルを、ＡＣＣＵ−ＣＨＥＫ（登録商標）Ａｖｉｖａグルコースメーター（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）で、尾静脈より得た。片側後肢筋脱神経を、麻酔下で、座骨神経を切断することによって実施し、続いて、ウルソル酸（２００ｍｇ／ｋｇ）または賦形剤のみ（トウモロコシ油）を、１日２回、７日間、ｉ．ｐ．注射を介して投与した。Ｆｏｒｅｌｉｍｂグリップ強度を、三角形プルバー（Ｃｏｌｕｍｂｕｓ Ｉｎｓｔ．）を備えたグリップ強度メーターを用いて測定した。各マウスを、ピーク値を得るために、５連続試験にかけた。血漿ＩＧＦ−Ｉレプチンレベルを、Ｖａｎｄｅｒｂｉｌｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｈｏｒｍｏｎｅ Ａｓｓａｙ Ｃｏｒｅ Ｆａｃｉｌｉｔｙにて、ＲＩＡによって測定した。血漿コレステロール、トリグリセリド、クレアチニン、ビリルビンおよびＡＬＴを、ＶＩＴＲＯＳ（登録商標）３５０Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｏｒｔｈｏ）を用いて測定した。すべての動物手順は、ｔｈｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｉｏｗａによって許可された。

ｅ．組織学的研究
回収に続いて、組織をすぐに、液体Ｎ₂にて−１６０℃まで冷却したイソペンタン中に配置した。筋肉を、組織凍結培地中に埋め込み、中腹から１０μｍ切片を、ＣｒｙｏＪａｎｅ切断システムを備えたＭｉｃｒｏｍ ＨＭ５０５Ｅクリオスタット（Ｉｎｓｔｒｕｍｅｄｉｃｓ）を用いて調製した。脂肪組織を１０％中性緩衝ホルマリンで固定し、パラフィン中に埋め込み、ついでＭｉｃｒｏｍ ＨＭ３５５ Ｓ電動ミクロトーム（Ｍｉｃｒｏｍ）を用いて４μｍ切片を調製した。ヘマトキシリンとエオシン染色を、ＤＲＳ−６０１自動化スライド染色器（Ｓａｋｕｒａ）を用いて実施し、ＤＰ−７０カメラを備えたＯｌｙｍｐｕｓ ＩＸ−７１顕微鏡上で試験した。イメージ解析を、ＩｍａｇｅＪソフトウェア（パブリックドメイン、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，ＵＳＡより入手可能）を用いて実施した。筋線維直径を、他で記述された（Ｄｕｂｏｗｉｔｚ Ｖ、ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｍｕｓｃｌｅ ｂｉｏｐｓｙ：ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｓａｕｎｄｅｒｓ Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ）３ｒｄＥｄ ｐｐＸＩＩＩ，６１１ｓ）ように、レーザー直径法を用いて測定した。

ｆ．ＩＧＦ−Ｉおよびインスリン−仲介タンパク質リン酸化の解析
マウス大腿四頭筋を、液体Ｎ₂中で即時凍結し、Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００可溶性タンパク質抽出物を先に記述されたように（Ｅｂｅｒｔ ＳＭ、ｅｔ ａｌ．（２０１０） Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ２４（４）：７９０−７９９）調製した。マウスＣ２Ｃｌ２筋芽細胞をＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（「ＡＴＣＣ」）より得、抗生物質（１００ユニット／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌ硫酸ストレプトマイシン）および１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ；ＡＴＣＣ＃３０−２００２）中で維持した。０日に、筋芽細胞を２．５×１０⁵細胞／ウェルの密度で、６−ウェルプレート中に設定した。２日に、筋管への分化を、２％ウマ血清で１０％ＦＢＳを置換することによって誘導した。７日に、筋管を、リン酸緩衝食塩水で２回洗浄することによって血清をなくし、ついで新鮮な血清を含まない培地に加えた。血清をなくした１６時間後に、（ＤＭＳＯ中に調製した１０ｍＭストックからの）１０μＭウルソル酸、または等量のＤＭＳＯを、１０ｎＭマウスＩＧＦ−Ｉ（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｉ８７７９）または１０ｎＭウシインスリン（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｉ６６３４）あり、またはなしで直接培地に加えた。Ａｋｔ、Ｓ６Ｋ、ＥＲＫおよびＦｏｘＯリン酸化の解析のために、筋管を、ウルソル酸、ＩＧＦ−Ｉおよび／またはインスリンの存在下、または存在しないところで、２０分間インキュベートし、ついでＳＤＳ溶解緩衝液（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．６、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１％（ｗ／ｖ）ＳＤＳ、１μｇ／ｍｌペプスタチンＡ、２μｇ／ｍｌアプロトニン、１０μｇ／ｍｌロイペプチン、２００μＭフッ化フェニルメチルスルホニルおよびホスファターゼ阻害剤カクテル３（Ｓｉｇｍａ）の１：１００希釈液内に回収した。各筋肉抽出物または細胞溶解物の分液を、０．２５容量の試料緩衝液（２５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ６．８、１０％ ＳＤＳ、２５％グリセロール、０．２％（ｗ／ｖ）ブロモフェノールブルーおよび５％（ｗ／ｖ）２−メルカプトエタノール）と混合し、９５℃にて５分間熱し、一方で異なる分液を、ＢＣＡキット（Ｐｉｅｒｃｅ）によって、タンパク質濃度を決定するために使用した。試料（２５μｇ）を、８％ＳＤＳ−ＰＡＧＥにかけ、ついでＨｙｂｏｎｄ−Ｃエクストラニトロセルロースフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に移した。免疫ブロットを、総Ａｋｔ、ホスホ−Ａｋｔ（Ｓｅｒ４７３）、総Ｓ６Ｋ、ホスホ−Ｓ６Ｋ（Ｔ４２１／Ｓ４２４）、総ＥＲＫ１／２、ホスホ−ＥＲＫ（Ｔ２０２／Ｙ２０４）、ＦｏｘＯ３ａまたはホスホ−ＦｏｘＯ１（Ｔ２４）／ＦｏｘＯ３ａ（Ｔ３２）（Ｃｅｌｌ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）を検出する抗体の１：２０００希釈液を用いて、４℃にて１６時間実施した。ＩＧＦ−１受容体またはインスリン受容体リン酸化の解析のために、筋管を、ウルソル酸、ＩＧＦ−１および／またはインスリンの存在下、または存在しない状態で２分間インキュベートし、ついで、ＲＩＰＡ緩衝液（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣＬ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％（ｗ／ｖ）ＳＤＳ、１％（ｗ／ｖ）Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、１％ Ｎａデオキシコレート、５ｍＭ ＥＤＴＡ、１ｍＭ ＮａＦ、１ｍＭ Ｎａオルソバナデート、１μｇ／ｍｌペプスタチンＡ、２μｇ／ｍｌアプロトニン、１０μｇ／ｍｌロイペプチン、２００μＭフッ化フェニルメチルスルホニル、ホスファターゼ阻害剤カクテル２（Ｓｉｇｍａ）の１：１００希釈液およびホスファターゼ阻害剤カクテル３（Ｓｉｇｍａ）の１：１００希釈液内に回収した。タンパク質濃度を、ＢＣＡキットを用いて測定し、その後、抽出物を、ＲＩＰＡ緩衝液（最終容量５００μｌ）中の１ｍｇ／ｍｌの濃度まで希釈した。ついで、２μｇ抗−ＩＧＦ−１受容体β抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）または２μｇ抗−インスリン受容体β抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ）を、５０μｌタンパク質Ｇプラスセファロースビーズ（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ）とともに加え、ついで試料を４℃にて１６時間回転させた。免疫沈殿物を、１ｍｌ ＲＩＰＡ緩衝液にて２０分間、３回洗浄し、ついで１００μｌ試料緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ６．８）、２％ＳＤＳ、５％グリセロール、０．０４％（ｗ／ｖ）ブロモフェノールブルーおよび５％（ｗ／ｖ）２−メルカプトエタノール）と混合し、ついで５分間煮沸した。免疫沈殿物を、８％ＳＤＳ−ＰＡＧＥにかけた。総ＩＧＦ−１受容体、ホスホ−インスリン受容体および総インスリン受容体の解析のために、タンパク質をＨｙｂｏｎｄ−Ｃエクストラニトロセルロースフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に移した。ホスホ−ＩＧＦ−１受容体の解析のために、タンパク質をＰＶＤＦ膜（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）に移した。免疫ブロットを、抗ＩＧＦ−１受容体β抗体の１：２０００希釈液、マウス抗−ホスホ−チロシン４Ｇ１０モノクローナル抗体（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）の１：５０００希釈液、抗インスリン受容体βの１：２０００希釈液、または抗−ホスホ−インスリン受容体β（Ｙ１１６２／１１６３）（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ）の１：２０００希釈液を用いて室温で実施した。

ｇ．ＲＮＡ干渉を介したＰＴＰ１Ｂ阻害
プラスミドｐＣＭＶ−ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ ＃１とｐＣＭＶ−ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ ＃２を、ＰＴＰＮ１−特異的オリゴヌクレオチド二本鎖（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を、遺伝工学的に改変したプレｍｉＲＮＡとＥｍＧＦＰの共シストロン発現を駆動しているＣＭＶプロモーターを含む、ｐｃＤＮＡ６．２ＧＷ／ＥｍＧＦＰ ｍｉＲプラスミド（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）内にライゲーションすることによって作製した。ｐＣＭＶ−ｍｉＲ−対照は、ｐｃＤＮＡ６．２ＧＷ／ＥｍＧＦＰ ｍｉＲプラスミド内に、非標的化プレ−ｍｉＲＮＡヘアピン配列（ｍｉＲ−ｎｅｇ対照；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）をコードしている。オスＣ５７ＢＬ／６マウスを、６〜８週齢にてＮＣＩより得、その到着から３週間以内に実験に使用した。マウス前脛骨筋の電気泳動と、骨格筋ＲＮＡの単離を、先に記述されたように実施した（Ｅｂｅｒｔ ＳＭ、ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ２４（４）：７９０−７９９）。第一鎖ｃＤＮＡを、２μｇのＲＮＡ、ランダムヘキサマープライマー、およびＨｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙ ｃＤＮＡ逆転写キット（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）の構成要素を含む、２０μｌ反応液中で合成した。ＰＴＰＮ１ ｍＲＮＡレベルのｑＰＣＲ解析を、先に記述された（Ｅｂｅｒｔ ＳＭ，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ２４（４）：７９０−７９９）ように、Ｔａｑｍａｎ発現アッセイを用いて実施した。ｑＰＣＲを、７５００ Ｆａｓｔ Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて実施した。すべてのｑＰＣＲ反応を三重で実施し、サイクル閾値（Ｃｔ）を平均化して最終結果を得た。ホールド変化を△Ｃｔ法によって決定し、３６Ｂ４ ｍＲＮＡのレベルを、不変対照として使用した．骨格筋切片を調製し、トランスフェクトした（ＥｍＧＦＰ−陽性）筋線維を、先に記述されたように同定し、測定した（Ｅｂｅｒｔ ＳＭ、ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ２４（４）：７９０−７９９）。

ｈ．血清ウルソル酸レベルの測定
ウルソル酸を、ヘキサン：プロパノールの１０：１混合液（回収＞９０％）を用いて血清より抽出し、ついでそのカルボン酸基を介して、ＴＵＶと蛍光検出を増強する部分である、２−（２，３−ナフタルイミノ）エチルトリフルオロメタンスルホン酸（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ；Ｎｅ−ＯＴｆ）に共役させた。誘導された試料をついで、１．８μｍビーズ（Ｗａｔｅｒｓ Ｐａｒｔ Ｎｏ．１８６００３５３３）とＴＵＶ検出器を持つ１００×２．１ｍｍ Ｃ１８ ＨＳＳカラムを備えるＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ上で解析した。

２．筋萎縮を措置するための治療の同定
骨格筋萎縮は、薬理学的治療を欠く、一般的で消耗性の状態である。この病理学的状態に対する新規の治療アプローチを同定するために（図１）、低分子、遺伝子および疾患を連結する遺伝子発現シグナチャーを使用するアプローチが使用された。簡単に記すと、６３のｍＲＮＡを、ヒトおよびマウス筋肉両方で絶食によって制御されたとして同定し、２９のｍＲＮＡが、ヒト筋肉中、絶食および脊髄損傷両方によって制御されたとして同定した。筋萎縮のこれらの２つのバイアスのかかっていないｍＲＮＡ発現シグナチャーを使用して、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐ、筋萎縮の遺伝子シグナチャーデータセットを低分子、遺伝子、疾患間の関係を見つけ出すために使用可能にするアルゴリズムにクエリーを行う。

ヒトおよびマウスにおける骨格筋ｍＲＮＡレベルのグローバル萎縮関連変化を特徴付けるための３つの無料の試験が実施された。これらの３つの研究は、Ａ）ヒト骨格筋ｍＲＮＡレベルにおける絶食、Ｂ）ヒト骨格ｍＲＮＡレベルにおける脊髄損傷（「ＳＣＩ」）（Ａｄａｍｓ ＣＭ，ｅｔ ａｌ． （２０１１）Ｍｕｓｃｌｅ ＆ ｎｅｒｖｅ ４３（１）：６５−７５）、Ｃ）マウス骨格筋ｍＲＮＡレベルにおける絶食（Ｅｂｅｒｔ ＳＭ，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ２４（４）：７９０−７９９）の効果を決定した。各試験において、エクソン発現アレイを使用して、１６，０００ｍＲＮＡレベル未満を定量した。各試験において多くの有意な変化が存在したが、解析はそのレベルが、少なくとも２つの萎縮モデルにて同様に変化したｍＲＮＡに焦点を当てた。したがって、ヒトおよびマウス骨格筋における絶食の効果を比較することによって、２つの組のｍＲＮＡが同定された。ａ）両方の種において、絶食によって増加した３１ｍＲＮＡ、およびｂ）両方の種で絶食によって減少した３２ ｍＲＮＡ。これらの進化的保存、絶食制御骨格筋ｍＲＮＡを、「萎縮シグナチャー−１」と命名した。次に、ヒト骨格筋における絶食およびＳＣＩの効果を測定し、２つの組のｍＲＮＡを同定した。ａ）絶食およびＳＣＬによって増加した１８ｍＲＮＡ、およびｂ）絶食およびＳＣＩにより減少した１７ｍＲＮＡ。この第二の群のｍＲＮＡを「萎縮シグナチャー−２」と名付けた。萎縮シグナチャー−１および−２におけるほとんどすべてのｍＲＮＡは、通常のまたは萎縮骨格筋において、すでに特徴付けられてはいない役割を持つ。ついで、細胞ｍＲＮＡレベルにおけるそれらの効果が、萎縮シグナチャー−１および−２とは反対である薬学的化合物が、骨格筋萎縮を阻害し得ると仮定した。候補化合物を同定するために、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐ（Ｌａｍｂ Ｊ，ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ ３１３（５７９５）：１９２９−１９３５）を使用して、萎縮シグナチャー−１および−２を、＞１３００生物活性低分子のｍＲＮＡ発現シグナチャーと比較した。これらの結果は、ウルソル酸を含む、ヒト骨格筋萎縮の種々の予想される阻害剤を同定した。本明細書で記述した萎縮シグナチャー−１および−２の利用のプルーフオブコンセプトとして、ウルソル酸の効果をマウスで査定し、驚くべきことに、ウルソル酸が、筋萎縮を阻害し、筋肥大を促進したことが発見された。

３．ヒトにおける骨格筋ｍＲＮＡ発現における絶食の効果
長期絶食が筋萎縮を誘導するが、ヒト骨格筋中のグローバルｍＲＮＡ発現におけるその効果は今まで公知ではなかった。グローバルｍＲＮＡ発現とヒト骨格筋状態間の関係を決定するために、２５〜６９歳（平均＝４６歳）範囲の年齢の７人の大人健康人ボランティア（３人の男性、４人の女性）を試験した。総研究デザインを図２Ａにて示している。これらの対象の平均体重指数（±ＳＥＭ）は２５±１であった。彼らの平均体重は、６９．４±４．８ｋｇであった。ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）、トリグリセリド（ＴＧ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、遊離チロキシン（遊離Ｔ４）、Ｃ−応答性タンパク質（ＣＲＰ）および腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）の基線循環レベルは、平均制限内であった（図２Ａ）。表（図２Ａ、挿入）は、基線循代謝および炎症マーカーを示している。グラフは、血漿グルコールおよびインスリンレベルを示している（図２Ａ）。データは、７人の研究対象からの平均値±ＳＥＭである。いくつかの場合、エラーバーは小さすぎて見えない。Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｉｏｗａ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｕｎｉｔに滞在する間、対象は食事を与えず４０時間絶食してもらい、ただし水は与えた。絶食の間の平均体重減少は、１．７±０．１ｋｇ（初期体重の３±０％）であった。

４０時間の絶食の後、筋肉生検を、対象の外側広筋（ＶＬ）から得た。筋肉生検直後に、混合食を与えた。５時間後（第一生検から６時間後）、彼らの反対側のＶＬから第二筋肉生検を得た。したがって各対象より、絶食および非絶食状態下の筋肉生検を得た。予想したように、血漿グルコースおよびインスリンレベルは、４０時間の絶食の終了時点で低く、食事の後上昇し、第二生検の時点までに、基線まで戻った（図２Ａ）。これらのデータは、第一（絶食）および第二（非絶食）筋肉生検の時点での、血漿グルコースおよびインスリンの同等のレベルを示唆している。

骨格筋ｍＲＮＡ発現における絶食の効果を決定するために、ＲＮＡを、対となる筋肉生検より単離し、エクソン発現アレイで解析した。統計学的有意差に対する基準として（対となるｔ−検定による）Ｐ≦０．０２を用いて、２８１のｍＲＮＡが絶食状態でより高く、２７７がより低かったことが発見された（測定した＞１７，０００ ｍＲＮＡのうち、図２Ｂを参照のこと）。これらの絶食応答性ｍＲＮＡの完全リストを表１中以下で示している（「変化」は、絶食および食事状態間でのｌｏｇ₂変化または差違を意味する）。表１中のデータは、そのレベルが、絶食によって増加または減少した、本研究におけるすべてのｍＲＮＡに対してである（対となるｔ−検定によってＰ≦０．０２）。

代表的な絶食応答性ヒト骨格筋ｍＲＮＡ、およびＡｆｆｙｍｅｔｒｉｓ Ｈｕｍａｎ Ｅｘｏｎ １．０ＳＴアレイによって査定されたような、それらのｌｏｇ２ハイブリッド形成シグナルにおける絶食の効果を、図２Ｂにて示している。各対象において、絶食シグナルを、同一の対象からの非絶食シグナルに対して標準化した。データは、７人の対象からの平均値±ＳＥＭである。示したすべてのｍＲＮＡに対する対となるｔ−検定によるＰ≦０．０２。４５８の絶食応答性ｍＲＮＡの完全組を表１にて示している。絶食によって変化したと同定された、ほとんどが異なって発現したｍＲＮＡは、驚くべきことに、筋萎縮において先に公知である役割を持たなかった。しかしながら、絶食が、脂肪酸化、逆コレステロール輸送、熱発生、タンパク質合成の阻害、自食作用、ユビキチン仲介タンパク分解、グルタミン輸送およびヘモ異化のような、異化作用工程における公知の役割を持つタンパク質をコードしている種々のｍＲＮＡを増加させた（図２Ｂ）。これらのうち、アトロジン−１、ＭｕＲＦ１およびＺＦＡＮＤ５ ｍＲＮＡが、マウスにおける骨格筋萎縮に必要であろうと公知のタンパク質をコードしている（Ｂｏｄｉｎｅ ＳＣ，ｅｔ ａｌ． （２００１）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ ２９４（５５４７）：１７０４−１７０８； Ｈｉｓｈｉｙａ Ａ，ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｔｈｅ ＥＭＢＯ ｊｏｕｒｎａｌ ２５（３）：５５４−５６４）。反対に絶食は、グリコーゲン合成、脂質合成および取込、ポリアミン合成、鉄取込、血管新生およびミトコンドリア生合成のような同化工程において公知の役割を持つタンパク質をコードしている種々のＲＮＡを有意に減少させた（図２Ｂ）。これらのうち、ＰＧＣ−１αｍＲＮＡは、マウスにおける、萎縮関連遺伝子発現と、骨格筋萎縮を阻害するタンパク質をコードしている（Ｓａｎｄｒｉ Ｍ、ｅｔ ａｌ．（２００６） Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ １０３（４４）：１６２６０−１６２６５）。

結果をさらに、ｑＰＣＲを用いて立証し、７人の健康ヒト対象からの対の絶食および食事骨格筋生検試料からのＲＮＡを解析した（図３を参照のこと。データは、平均値±ＳＥＭである。^*対となるｔ−検定によってＰ≦０．０１）。各対象において、絶食ｍＲＮＡレベルを、１と設定した、非絶食レベルに対して標準化した。ミオスタチンをコードしているｍＲＮＡ（ＭＳＴＮ）は、エクソン発現アレイによって査定されたように、そのレベルが絶食によって変化しなかった対照転写物である。総合すれば、これらのデータにより、ヒト骨格筋における絶食のｍＲＮＡ発現シグナチャーを確立した。

４．絶食誘導筋萎縮の阻害剤としてのウルソル酸の同定
Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐは、種々の培養細胞系におけるグローバルｍＲＮＡ発現における＞１３００の生物活性低分子の効果を記述しており、化合物特異的ｍＲＮＡ発現シグナチャーと、対象のｍＲＮＡ発現シグナチャー間の比較を許容するサーチアルゴリズムを含む（Ｌａｍｂ Ｊ、ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ ３１３（５７９５）：１９２９−１９３５）。本明細書で、絶食のｍＲＮＡ発現シグナチャー（萎縮シグナチャー−１）でのＣｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐのクエリングが、萎縮関連遺伝子発現の阻害剤を同定し、したがって、筋萎縮の潜在的阻害剤を同定すると仮定した。また、クエリーの特異性の増加が、アウトプットを増強することが、本明細書で理由付けされた。この目的を達成するために、本明細書で記述したように、絶食の進化的に保存されたｍＲＮＡ発現シグナチャーを、ヒト骨格筋における絶食の効果を、マウス骨格筋における２４時間絶食の効果と比較することによって探索した。マウス研究を、先に記述されたように実施した（Ｅｂｅｒｔ ＳＭ，ｅｔ ａｌ．（２０１０） Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ２４（４）：７９０−７９９）。完全に、絶食によって増加した３５のｍＲＮＡと、絶食によって減少した４０のｍＲＮＡが、ヒトおよびマウス骨格筋両方で同定された（表２；「変化」とラベルされたカラム中のデータが、指摘された種に対する、絶食および食事状態間のｌｏｇ₂ハイブリッド形成シグナルにおける平均変化を示し、［絶食に対する平均ｌｏｇ₂ｍＲＮＡレベル］−［非絶食における平均ｌｏｇ₂ｍＲＮＡレベル］、ｐ−値は対となるｔ−検定にて決定した）。表２にて示したデータには、そのレベルが、ヒト筋肉（Ｐ≦０．０２）およびマウス筋肉（Ｐ≦０．０５）において、絶食によって増加したすべてのｍＲＮＡと、ヒト筋肉（Ｐ≦０．０２）およびマウス筋肉（Ｐ≦０．０５）において、絶食によって減少したすべてのｍＲＮＡが含まれる。表２で示したｍＲＮＡのうち、６３のｍＲＮＡが、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐ中で使用したＨＧ−Ｕ１３３Ａアレイ上で表されている（図４Ａ）。これらのｍＲＮＡ（３１が絶食により増加、３２が絶食により減少）を使用して、筋萎縮の候補低分子阻害剤に対して、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐに対してクエリーした。

図４Ｂの左側は、骨格筋における絶食の効果に対して、もっとも有意に正の相関（Ｐ＜０．００４）である、１０のＣｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐ事例（またはデータ組）を示している。ｙ−軸上に示した結合性スコアは、相関の強度の測定であり（Ｌａｍｂ Ｊ，ｅｔ ａｌ． （２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ ３１３（５７９５）：１９２９−１９３５）、化合物および細胞株を、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｓｃｏｒｅを表しているバーの下に示している。これらのうち、６つはウォルトマニンまたはＬＹ−２９４００２（ホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）の阻害剤）またはラパマイシン（ラパマイシン複合体１の哺乳動物標的（ｍＴＯＲＣ１）の阻害剤）に関連した。ＰＩ３ＫおよびｍＴＯＲＣ１は、インスリンおよびＩＧＦ−Ｉの効果を仲介し、インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達が、筋萎縮と、骨格筋ｍＲＮＡ発現における萎縮関連変化を阻害する（Ｂｏｄｉｎｅ ＳＣ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｎａｔ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ３（１１）：１０１４−１０１９； Ｓａｎｄｒｉ Ｍ、ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｃｅｌｌ １１７（３）：３９９−４１２）ことから、これらの結果は、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐが、筋萎縮の可能生ある阻害剤を同定するために使用しうることの確かさを添える。図４Ｂの右側は、骨格筋における絶食の効果に対して、もっとも有意に負の相関（Ｐ＜０．００４）を持つ、１０のＣｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐ事例を示している。その培養細胞株における効果が、筋肉における絶食の効果と反対であるこれらの化合物には、メトフォルミン（２型糖尿病を処置するために広く使用されるインスリン感受性薬剤）ならびにウルソル酸が含まれる。さらなる実験でメルフォルミンとウルソル酸に焦点を当てた。メトフォルミンとウルソル酸が、絶食誘導型筋萎縮を減少させうるという仮説を試験するために、それぞれの化合物、または賦形剤のみを、Ｃ５７ＢＬ／６マウスにｉ．ｐ．注射を介して投与した。ついでマウスを絶食させ、絶食の１２時間後に、マウスに第二用量の化合物または賦形剤を与えた。２４時間の絶食後、血中グルコースを測定し、筋肉を回収した。図４Ｃ〜４Ｈに示したデータは、１６匹のマウスからの平均値±ＳＥＭである。メトフォルミン（２５０ｍｇ／ｋｇ）とウルソル酸（２００ｍｇ／ｋｇ）両方は、絶食血中グルコースを有意に減少させた（図４Ｃおよび４Ｄ）。メトフォルミンとウルソル酸の絶食誘導筋萎縮における効果、すなわち下部後肢骨格筋（両側前脛骨筋（「ＴＡ筋」）、腓腹筋、およびひらめ筋、図４Ｅ〜４Ｇを参照のこと）の湿重量における２４時間絶食（アドリブ給餌に相当）における効果もまた試験した。メトフォルミンおよびウルソル酸が存在しない場合、絶食は筋肉重量を９％まで減少させた（図４Ｅ）。メトフォルミンは絶食ラットにおける筋肉重量を変化させなかった（図４Ｆ）が、ウルソル酸は、７±２％まで増加させた（図４Ｇ）。さらに、本明細書で記述した絶食誘導遺伝子発現における予想された阻害効果と一致して、ウルソル酸は、絶食マウスのＴＡ筋肉におけるアトロジン−１およびＭｕＲＦ１ ｍＲＮＡレベルを減少させた（図４Ｈ、示したデータは、１と設定した、賦形剤処理マウスにおけるレベルに対して標準化している）。図４Ｅ〜４Ｈにおいて、それぞれのデータ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは平均を意味する。図４Ｃ〜４Ｈにおいて、Ｐ−値は、対になっていないｔ−検定を用いて決定した。したがって、ウルソル酸が絶食誘導筋萎縮を減少させたが、メトフォルミンではしなかった。

５．ウルソル酸は、脱神経誘導筋萎縮を減少させる
Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐに、第二ｍＲＮＡ発現シグナチャー、萎縮シグナチャー−２（以上で記述）でクエリーし、この筋萎縮シグナチャーが、他の化合物のうち、ウルソル酸に相関するかどうかを決定した。以上で記述したように、萎縮シグナチャー−２は、絶食によって、また脊髄損傷（「ＳＣＩ」）によって誘導されるか、抑制されたヒト骨格筋ｍＲＮＡに対して、本明細書で記述したように同定されたｍＲＮＡ発現シグナチャーであった。ＳＣＩの、ヒト骨格筋遺伝子発現における効果の研究はすでに記述されている（Ａｄａｍｓ ＣＭ，ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｍｕｓｃｌｅ Ｎｅｒｖｅ． ４３（１）：６５−７５）。本明細書で記述された筋萎縮発現シグナチャーで、このアプローチを用いて、絶食およびＳＣＩによって増加した１８のヒトｍＲＮＡ、絶食およびＳＣＩによって減少した１７のヒトｍＲＮＡが存在し、表３にて示している（「変化」は、示したように、例えば「（絶食−食事）」と標識されたカラムに対して絶食および食事状態、または「（未訓練−訓練）」と標識されたカラムに対して、未訓練および訓練の対に対する、ｌｏｇ₂ハイブリッド形成シグナルにおける平均変化を表す）。表３中のデータは、そのレベルが、絶食によって（Ｐ≦０．０２）、およびＳＣＩによって（Ｐ≦０．０５）増加したすべてのｍＲＮＡと、絶食によって（Ｐ≦０．０２）、およびＳＣＩによって（Ｐ≦０．０５）減少したすべてのｍＲＮＡとを含む。表３におけるＰ値は、対となるｔ−検定で決定した。

表３に列記したｍＲＮＡのうち、２９が、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐにて使用したＨＧ−Ｕ１３３Ａアレイ上で示されているが（図５Ａ）、１０のみが、萎縮シグナチャー−１に対して上記した第一Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐクエリーにて使用された６３のｍＲＮＡに共通であった（ＩＧＦ−ＩＲ、ＮＯＸ４、ＳＵＰＴ６Ｈ、ＭＲＰＳ１５、ＰＤＥ７Ｂ、ＰＧＣ−１ａ、ＴＳＰＡＮ１３、ＴＴＬＬ１、ＶＥＧＦＡおよびＺＮＦ２８０Ｂ）。図５Ａにて列記したｍＲＮＡは、ヒト筋萎縮シグナチャー−２を表しており、ｍＲＮＡはヒト筋肉において、絶食およびＳＣＩ両方によって変化した。これらのｍＲＮＡを、上記したように、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐをクエリーするために使用した。試験対象基準は、（ｔ−検定によって）絶食ヒト筋肉にてＰ≦０．０２、（ｔ−検定によって）未訓練、まひ筋肉に対してＰ≦０．０５、およびＨＧ−Ｕ１３３Ａアレイ上、優遇プローブの存在であった。ヒト筋肉中の絶食およびＳＣＩの効果に対するもっとも有意な正のおよび負の相関をもつＣｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐ事例。すべての化合物に対してＰ＜０．００５を図５Ｂで示す。結果は、第一検索の結果と部分的に重なり、両方の検索戦略が、萎縮誘導ストレスの予測された模倣として、ＬＹ−２９４００２、ウォルトマニンおよびラパマイシンを同定し、予測された阻害剤としてウルソル酸（メトフォルミンではない）を同定した（図５Ｂ）。

萎縮シグナチャー−２がＳＣＩ対象からのデータを利用したので、ウルソル酸が、脱神経誘導筋萎縮を減少しうると仮設した。これを試験するために、マウスにおける左後肢筋、脱神経誘導骨格筋萎縮モデルを使用した。簡単に記すと、０日にて、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの左後肢を、左座骨神経を切断することによって脱神経した。このアプローチにより、右後肢が、対象内対照として役立つことが可能になる。ついでマウスにウルソル酸（２００ｍｇ／ｋｇ）または等用量容量の賦形剤のみ（とうもろこし油）をｉ．ｐ．注射によって７日間、１日２回投与した。この間、マウスに食物に対してアドリブで接触できるようにした。７日目に、筋肉組織を解析のために回収し、両方の群（ウルソル酸対賦形剤投与）における左（脱神経）および右（神経支配）後肢筋肉を比較した。ウルソル酸は有意に脱神経誘導筋肉欠損を減少させた（図５Ｃ）。図５Ｃにおいて、左（脱神経）下部後肢筋肉を、同一のマウスの右（神経支配）下部後肢筋肉に対して標準化した。各データ点は、１匹のマウスを示しており、水平バーは平均を意味し、Ｐ−値を、対になっていないｔ−検定を用いて決定した。組織学的に、ウルソル酸のこの効果は、脱神経化腓腹筋（Ｄ）およびＴＡ（Ｅ）筋肉における、脱神経化骨格筋線維直径の大きさの増加として反映された（それぞれ図５Ｄおよび５Ｅ）。図５Ｄおよび５Ｅにて示したデータは、＞２５００筋肉線維／状態からであり、対ではないｔ−検定によってＰ＜０．０００１である。したがって、ウルソル酸は、脱神経誘導筋萎縮を減少させた。

６．ウルソル酸は、骨格筋肥大を誘導する
脱神経誘導マウス筋萎縮モデルからの結果は、ウルソル酸が、筋萎縮を減少させることを示唆しており、したがって、ウルソル酸が、萎縮誘導ストレスが存在しない場合、筋肥大を促進するという仮説が合理的であった。マウスには、標準食（対照餌）または０．２７％ウルソル酸を含む標準食（ウルソル酸餌）のいずれかを、グリップ強度を測定し、組織を回収する前５週間、アドリブでのアクセスを与えた。５週間後、ウルソル酸を与えたマウスは、下部後肢筋肉重量（図６Ａ）、大腿四頭筋重量（図６Ｂ）および上部前肢筋肉（三頭筋および二頭筋）重量（図６Ｃ）を増加させた。図６Ａ〜６Ｃにおける各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは平均値を意味する。骨格筋線維サイズ分布における、本研究でのウルソル酸の効果を図６Ｄに示している。各分布は、７匹の動物からの＞８００三頭筋線維の測定（＞１００測定／動物）、Ｐ＜０．０００１を表している。（体重に対して標準化した）ピークグリップ強度におけるウルソル酸の効果を図６Ｅに示している。各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味する。非標準化グリップ強度データは、１５７±９ｇ（対照餌）および１８１±６ｇ（ウルソル酸餌）であった（Ｐ＝０．０４）。

さらに、食事ウルソル酸は、ｅｘ ｖｉｖｏで筋肉によって発生した特定の力を増加させた（図７）。簡単に記すと、６週齢オスＣ５７ＢＬ／６マウスに、安楽死させる前に、１６週間、標準食または０．２７％ウルソル酸含有食いずれかを与えた。下部後肢を（大腿骨を通した中間で、上部後肢を切断することによって）除去し、９５％Ｏ２および５％ＣＯ２で通気したＫｒｅｂｓ溶液中に配置した。腓腹筋、ひらめ筋および前脛骨筋、ならびに脛骨および排骨の遠位半分をついで除去し、破棄し、それらのオリジンおよび挿入を持つ長趾伸筋および腓骨筋を無傷のままとした。縫合を、近位腱を通して配置し、遠位大腿骨断片に対してしっかり固定した。このｅｘ ｖｉｖｏ調製をついで、縫合をセルボ制御レバー（上方）に接続し、中足骨をクランピング（上方）することによって、水ジャケット浴（Ａｕｒｏｒａ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ １２００Ａ Ｉｎｔａｃｔ Ｍｕｓｃｌｅ Ｔｅｓｔ Ｓｙｓｔｅｍ、通気Ｋｅｒｂｓ溶液で満たす）中で垂直にマウントした。受動筋肉力を、１ｇのベースラインに調節し、ついで筋肉を、１００Ｈｚにて最大上電圧（８０Ｖ）で刺激した。安楽死から、最大強縮力測定までの平均時間は１０分間であった。力測定の後、筋肉を取り出し、特定のチタン力を計算するために計量した。最大強縮力および筋肉重量は、２つの群間で変わらなかった（それぞれＰ＝０．２０および０．２６）。データは、５〜６匹マウス／食事からの、平均値±ＳＥＭである。Ｐ−値を、ｔ−検定にて決定した。一緒に、図６および７でのデータが、ウルソル酸が骨格筋肥大を誘導した形態学的および機能的証拠を提供する。

７．ウルソル酸は、骨格筋遺伝子発現における栄養変化を誘導する
以上の結果は、ウルソル酸が、骨格筋遺伝子発現を変化させうることを示唆した。この仮説を試験するために、不偏アプローチを使用し、とくにエクソン発現アレイを使用して、ウルソル酸を欠くか、または含む食事を５日間与えられたマウスにおける、腓腹筋ｍＲＮＡ発現を解析した。マウスには、標準食（対照餌）または０．２７％ウルソル酸を含む標準食（ウルソル酸餌）のいずれかを、腓腹筋ＲＮＡを回収し、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ Ｍｏｕｓｅ Ｅｘｏｎ １．０ＳＴアレイ（ｎ＝４アレイ／餌）によって解析する前５週間、アドリブでのアクセスを与えた。各アレイは、２匹のマウスからのプールした腓腹筋ＲＮＡを査定した。厳しい基準を、ｍＲＮＡレベルにおける、ウルソル酸誘導効果に対して使用し（Ｐ＜０．００５）、低レベルの発現を持つｍＲＮＡを無視した（すなわち、平均ｌｏｇ₂ハイブリッド形成シグナル≧８まで増加した、または平均ｌｏｇ₂ハイブリッド形成シグナル≧８から抑制された転写のみ含めた）。結果は、ウルソル酸が、（解析した＞１６，０００ｍＲＮＡのうち）１８のｍＲＮＡを減少させ、５１のｍＲＮＡを増加させたということであった。結果を表４に示している（「変化」は、ウルソル酸餌と対照餌における、マウス間の平均ｌｏｇ₂変化または差である、すなわち［ウルソル酸餌平均ｌｏｇ₂ｍＲＮＡレベル］−［対照餌平均ｌｏｇ₂ｍＲＮＡレベル］）。

以上で議論したように、アトロジン−１およびＭｕＲＦ１は、萎縮誘導ストレスによって転写的にアップレギュレートされ（図２ＢおよびＳａｃｈｅｃｋ ＪＭ，ｅｔ ａｌ． （２００７）Ｆａｓｅｂ Ｊ ２１（１）：１４０−１５５参照のこと）、これらは、筋萎縮にとって必要である（Ｂｏｄｉｎｅ ＳＣ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｓｃｉｅｎｃｅ （Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ ２９４（５５４７）：１７０４−１７０８）。さらに、以上で本明細書にて記述したように、絶食マウスの研究において、ウルソル酸は、アトロジン−１およびＭｕＲＦ１ ｍＲＮＡを減少させた（図４Ｈ）。発見と一致して、アレイにより、餌ウルソル酸が、アトロジン−１ ｍＲＮＡを減少させ、もっとも大きく抑制されたｍＲＮＡであったことが示唆された（図８Ａ）。図８Ａにて示した結果は、ウルソル酸に対する応答において、発現レベルのもっとも大きな増加または減少を持った、表４からのｍＲＮＡのサブセットを表している。ＭｕＲＦ１ ｍＲＮＡは、これらの実験で使用したアレイによって測定されなかったが、ｑＰＣＲ解析により、餌ウルソル酸が、アトロジン−１およびＭｕＲＦ１ ｍＲＮＡ両方を抑制することが確認された（図８Ｂ、データは平均値±ＳＥＭ）。興味深いことに、もっとも高くアップレギュレートされた筋肉ｍＲＮＡはＩＧＦ１であり（図８Ａおよび８Ｂ）、インスリン様増殖因子−Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）、局所に産出されるオートクリン／パラクリンホルモンをコードしている。ＩＧＦ１ ｍＲＮＡは、肥大筋肉において転写的に誘導されると知られている（Ｈａｍｅｅｄ Ｍ，ｅｔ ａｌ．（２００４） Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ５５５（Ｐｔ １）：２３１−２４０；Ａｄａｍｓ ＧＲ ＆ Ｈａｄｄａｄ Ｆ（１９９６）Ｊ Ａｐｐｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ ８１（６）：２５０９−２５１６；Ｇｅｎｔｉｌｅ ＭＡ，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ４４（１）：５５−７３）。さらに、増加した骨格筋ＩＧＦ１発現は、脱神経誘導筋萎縮を減少させ（Ｓｈａｖｌａｋａｄｚｅ Ｔ，ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌ Ｄｉｓｏｒｄ １５（２）：１３９−１４６）、筋肥大を刺激する（Ｂａｒｔｏｎ−Ｄａｖｉｓ ＥＲ，ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ ９５（２６）：１５６０３−１５６０７；Ｍｕｓａｒｏ Ａ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ２７（２）：１９５−２００）。さらに、骨格筋インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を刺激することによって、ＩＧＦ−Ｉは、アトロジン−１およびＭｕＲＦ ｍＲＮＡ（Ｓａｃｈｅｃｋ ＪＭ，ｅｔ ａｌ．（２００４）Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ ２８７（４）：Ｅ５９１−６０１；Ｆｒｏｓｔ ＲＡ，ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ １０８（５）：１１９２−１２０２．）、ならびにＤＤＩＴ４Ｌ ｍＲＮＡ（ｉｂｉｄ）を抑制し、これは、アトロジン−１ ｍＲＮＡの後、ウルソル酸処理マウスからの筋肉中の第二のもっとも高く抑制されたｍＲＮＡであった（図８Ａ）。したがって、５週間のウルソル酸は、萎縮を減少させ、肥大を促進することが公知の様式で、骨格筋遺伝子発現を変化させ、筋肉特異的ＩＧＦ１誘導が、おそらくウルソル酸誘導筋肥大における寄与機構として浮かび上がる。血漿ＩＧＦ−Ｉレベルにおけるウルソル酸の効果もまた測定し、主として、成長ホルモン仲介肝臓ＩＧＦ−Ｉ産出を反映する（Ｙａｋａｒ Ｓ，ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ ９６（１３）：７３２４−７３２９）。０．１４％または０．２７％ウルソル酸を含む餌が、筋肉量を増加させたけれども（以下でより詳細に記述された、図１０Ａ）、血漿ＩＧＦ−Ｉは増加させなかった（図８Ｃ）。図８Ｃにおけるデータに関して、血漿ＩＧＦ−Ｉレベルを測定する前７週間、マウスに標準食（対照餌）または示唆した濃度のウルソル酸を含む標準食いずれかに対するアドリブのアクセスを提供した。各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは平均を意味する。Ｐ−値を、Ｄｕｎｎｅｔｔの事後テストでの一方向ＡＮＯＶＡによって決定した。注目すべきことに、エクソン発現アレイが、ウルソル酸が、すべての測定したＩＧＦ１エクソン（エクソン２〜６、図９Ａ）のレベルを増加させたことを示唆した。図９Ａにおけるデータは、表２で記述したアレイからの平均エクソン−特異的ｌｏｇ₂ハイブリッド形成シグナルである。しかしながら、ウルソル酸は、（筋肉量を減少させる、例えばＬｅｅ ＳＪ （２００４） Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｃｅｌｌ Ｄｅｖ Ｂｉｏｌ ２０：６１−８６を参照のこと）ミオスタチン、または（発達の間ＩＧＦ−Ｉによって誘導される、例えばＤｕｐｏｎｔ Ｊ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７６（２８）：２６６９９−２６７０７；Ｔｕｒｅｃｋｏｖａ Ｊ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７６（４２）：３９２６４−３９２７０を参照のこと）ツイストまたはミオゲニンをコードしているｍＲＮＡのレベルを変化させなかった。さらに、ウルソル酸は、脂肪組織におけるＩＧＦ１ ｍＲＮＡの量を変化させなかった（図９Ｂ）。簡単に記すと、図９Ｂにおいて示したデータは、以下のように得た。後腹膜脂肪組織を、ＩＧＦ１ ｍＲＮＡのｑＰＣＲ定量のために回収する前、７週間、マウスに標準食（対照餌）または０．２７％ウルソル酸（ウルソル酸餌）を含む標準食いずれかに対するアドリブのアクセスを提供した。示したデータは、５匹／群からの平均値±ＳＥＭである。特定の理論に制約されず、ウルソル酸仲介ＩＧＦ１誘導は、骨格筋に対して局在化しうる。

８．ウルソル酸は、骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を増強する
筋肉特異的ＩＧＦ１誘導は、筋肉肥大の特徴であり、寄与するが、他の刺激によって開始された後に肥大を促進する比較的後期の事象であり得る（Ａｄａｍｓ ＧＲ， ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｊ Ａｐｐｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ ８７（５）：１７０５−１７１２）。特定の理論に制約されず、ウルソル酸は、インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達におけるより近位の効果を持ちうる可能性がある。非筋肉細胞株の先の研究において（ＣＨＯ／ＩＲおよび３Ｔ３−Ｌ１細胞）、ウルソル酸は、インスリン仲介Ａｋｔ活性化を増強した（Ｊｕｎｇ ＳＨ，ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｔｈｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ４０３（２）：２４３−２５０）。ウルソル酸が骨格筋にて同様の効果を持ちうるかどうかを決定するために、リン酸化Ａｋｔのレベルを、ウルソル酸を含まない、または含む餌を与えたマウスの大腿四頭筋にて査定した。簡単に記すと、マウスに標準食（対照餌）または０．２７％ウルソル酸（ウルソル酸餌）を含む標準食いずれかに対するアドリブのアクセスを１６週間、提供した。大腿四頭筋からの総タンパク質抽出物を、示唆したように、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、つづいてリン酸化および総Ａｋｔに対する免疫ブロット解析にかけた。代表的免疫ブロットを図８Ｄにて示している。免疫ブロットデータを以下のように定量化した。各マウスにおいて、ホスホ−Ａｋｔのレベルを、総Ａｋｔのレベルに対して標準化した。これらの比をついで、対照マウスからの平均ホスホ−Ａｋｔ／総Ａｋｔ比に対して標準化し、結果を図８Ｅにて示している（データは９匹のマウス／餌からの平均値±ＳＥＭである。Ｐ−値は対とならないｔ−検定によって決定した）。データは、大腿四頭筋において、ウルソル酸が、１．８倍までＡｋｔリン酸化を増加させたことを示している。

Ａｋｔ活性化におけるウルソル酸の効果を、よく確立された骨格筋のｉｎ ｖｉｔｒｏモデルである、Ｃ２Ｃｌ２骨格筋管にて試験した（Ｓａｎｄｒｉ Ｍ， ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｃｅｌｌ １１７（３）：３９９−４１２；Ｓｔｉｔｔ ＴＮ，ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ １４（３）：３９５−４０３）。Ｃ２Ｃｌ２骨格筋管のようなｉｎ ｖｉｔｒｏシステムの利用は、非筋肉組織からの可能性ある混同効果をさけ、ＩＧＦ−Ｉまたはインスリンが、ウルソル酸の効果に対して必要であったかどうかの決定を可能にした。後者の考慮は、循環ＩＧＦ−Ｉおよびインスリンがいつも健康な動物中に存在するので、重要であった。ｉｎ ｖｉｔｒｏシステムの利用によりまた、明らかに定義された濃度のウルソル酸（１０μＭ、明確に定義されたインキュベーション時間（２０分）の間、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐにて使用したもの（８．８μＭ）と同様）の試験を可能にした。これらの考慮は、ウルソル酸のｉｎ ｖｉｖｏ薬物動態特性がまだ公知ではないので、重要であった。

図８Ｆ〜８Ｋにて示したデータに対して、血清を含まないＣ２Ｃｌ２筋管を、示唆したように、ウルソル酸（１０μＭ）および／またはＩＧＦ−Ｉ（１０ｎＭ）が存在しない場合、またはする場合で処理した。ＩＧＦ−Ｉ受容体の研究に対して、細胞を２分後に回収し、タンパク質抽出物を、抗ＩＧＦ−Ｉ受容体β抗体での免疫沈降、続いて抗−ホスホ−チロシンまたは抗−ＩＧＦ−Ｉ受容体β抗体での免疫ブロット解析にかけ、それぞれ、ホスホ−および総ＩＧＦ−Ｉ受容体を査定した。他の研究に対して、細胞を、ウルソル酸および／またはＩＧＦ−Ｉの添加２０分後に回収し、免疫ブロット解析を、総細胞タンパク質抽出物と、示唆したリン酸化または総タンパク質に特異的な抗体を用いて実施した。Ａｋｔ（図８Ｆ）、Ｓ６Ｋ（図８Ｇ）およびＩＧＦ−Ｉ受容体（図８Ｈ）のＩＧＦ−Ｉ−仲介リン酸化におけるウルソル酸の効果を示している代表的な免疫ブロット。免疫ブロットからのデータを以下のように定量化した。ウルソル酸とＩＧＦ−Ｉの存在下のレベルを、１に設定したＩＧＦ−Ｉのみ存在下でのレベルに対して標準化し、点線によって示している。図８Ｉにて示したデータは、≧３実験からの平均値±ＳＥＭである。

図９Ｃ〜９Ｆにて示したデータに関して、示唆したように、血清を含まないＣ２Ｃｌ２筋管を、ウルソル酸（１０μＭ）、インスリン（１０ｎＭ）、および／またはＩＧＦ−Ｉ（１０ｎＭ）の存在しない場合、存在する場合で処理した。インスリン受容体の研究に関して、細胞を２分以降に回収し、タンパク質抽出物を、抗インスリン受容体β抗体での免疫沈降、続いて抗−ホスホ−インスリン受容体β（Ｙ１１６２／１１６３）または抗インスリン受容体β抗体での免疫ブロット解析にかけ、それぞれホスホ−および総インスリン受容体を査定した。他の研究に関して、細胞をウルソル酸、インスリンおよび／またはＩＧＦ−Ｉの添加２０分後に回収し、免疫ブロット解析を、総細胞タンパク質抽出物、および示唆したリン酸化または総タンパク質に対して特異的な抗体を用いて実施した。

血清を含まない筋管を、ウルソル酸のみで処理した時に、Ａｋｔリン酸化は増加しなかった（図８Ｆ）。しかしながら、ＩＧＦ−Ｉ存在下、ウルソル酸は、１．９倍までＡｋｔリン酸化を増加させた（図８Ｆおよび８Ｉ）。ウルソル酸はまた、インスリンの存在下、Ａｋｔリン酸化を増加させた（図９Ｃ）。したがって、ウルソル酸は、ＩＧＦ−Ｉ仲介およびインスリン−仲介Ａｋｔリン酸化を増強した。ウルソル酸が、ｉｎ ｖｉｖｏおよびｉｎ ｖｉｔｒｏにて筋肉Ａｋｔ活性を増強したという発見は、ウルソル酸のｍＲＮＡ発現シグナチャーが、Ａｋｔのインスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達上流を阻害する、ＬＹ−２９４００２およびウォルトマニンのｍＲＮＡ発現シグナチャー（図４Ｂおよび５Ｂ）と負に相関するという発見と一致した。しかしながら、ウルソル酸のシグナチャーはまた、Ａｋｔのインスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達下流を阻害する、ラパマイシンのシグナチャーと負に相関した。

ウルソル酸のみは、Ｓ６Ｋリン酸化を増加させなかったが（図９Ｄ）、ＩＧＦ−Ｉ仲介およびインスリン仲介Ｓ６Ｋリン酸化を増強した（図８Ｇ、８Ｉおよび９Ｄ）。機構をさらに調査するために、ＩＧＦ−Ｉ受容体におけるウルソル酸の効果を試験した。ウルソル酸は、ＩＧＦ−Ｉの存在下でＩＧＦ−Ｉ受容体リン酸化を増加させたが、ＩＧＦ−Ｉが存在しない場合増加させなかった（図８Ｈおよび８Ｉ）。同様に、ウルソル酸は、インスリンの存在下、インスリン受容体リン酸化を増加させたが、インスリンが存在しない場合増加させなかった（図９Ｅ）。これらの効果の両方が迅速であり、ウルソル酸と、ＩＧＦ−Ｉまたはインスリンいずれかの添加後２分以内に発生した。ＩＧＦ−Ｉおよびインスリンのレベルにおけるシグナル伝達の増強と一致して、ウルソル酸がまた、ＩＧＦ−Ｉ仲介およびインスリン仲介ＥＲＫリン酸化を増強した（図８Ｊおよび９Ｆ）。さらに、ウルソル酸は、アトロジン−１およびＭｕＲＦ１ ｍＲＮＡの転写を活性化する、ＦｏｘＯ転写因子のＩＧＦ−Ｉ仲介リン酸化（阻害）を増強した（図８Ｋ、Ｓａｎｄｒｉ Ｍ，ｅｔ ａｌ．（２００４） Ｃｅｌｌ １１７（３）：３９９−４１２；Ｓｔｉｔｔ ＴＮ，ｅｔ ａｌ．（２００４） Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ １４（３）：３９５−４０３）。特定の理論に制約されず、ウルソル酸は、ＩＧＦ−Ｉおよびインスリン受容体の活性を増加させることによって、萎縮関連遺伝子発現を抑制し、筋肥大を促進する。

９．ウルソル酸が脂肪症を減少させる
マウスに、組織を解析のために回収する前７週間、示唆した濃度（食事中重量パーセント、図１０にて示唆したように０．１４％または０．２８％いずれか）のウルソル酸を加えた標準食に対するアドリブのアクセスを提供した。データは、１０匹マウス／食事からの平均値±ＳＥＭである。骨格筋（大腿四頭筋＋三頭筋）の重量、精巣上体脂肪、腹膜後脂肪および心臓の重量におけるウルソル酸の効果に対するデータを図１０Ａにて示している。直線傾向に対して事後テストでの一方向ＡＮＯＶＡによって決定したＰ−値は、筋肉に対して＜０．００１であり、精巣上体および腹膜後脂肪に対してそれぞれ０．０１および０．０４、心臓に対して０．４６であった。データは、餌ウルソル酸の７週間が、０．１４％ウルソル酸でピーク効果を持ち、用量依存様式で骨格筋重量を増加させたことを示している。興味深いことに、ウルソル酸が筋肉重量を増加させるけれども、総体重は増加させなかった（図１０Ｂ、Ｐ値は、初期および最終重量に関して、それぞれ０．７１および０．８０であった）。

図１０Ａで示したデータはまた、７週間の餌ウルソル酸が、精巣上体および腹膜後脂肪貯蔵の重量を減少させ、０．１４％でピーク効果であることを示している。他の研究において、マウスに、５週間、マウスに標準食（対照餌）または０．２７％ウルソル酸を含む標準食（ウルソル酸餌）に対するアドリブのアクセスを提供した。骨格筋重量（四頭筋、三頭筋、二頭筋、ＴＡ、腓腹筋およびひらめ筋）と、腹膜後脂肪重量間の関係を図１０Ｃにて示している。図１０Ｃにおける各データ点は、１匹のマウスを表し、対ではないｔ−検定により筋肉および脂肪両方に対して、Ｐ＜０．００１。データは、５週間のウルソル酸投与（０．１４％）がまた、脂肪重量を減少させたことを示している。したがって、筋肉および脂肪重量は、反比例した。特定の理論に制約されず、ウルソル酸処理マウスは、部分的にウルソル酸がＡｋｔ活性を増加させるので（図８および９を参照のこと）、ほとんど脂肪を含まず、Ａｋｔ活性における筋肉特異的増加が、筋肥大の第二の結果として、脂肪症を減少させる（Ｌａｉ ＫＭ，ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ２４（２１）：９２９５−９３０４； Ｉｚｕｍｉｙａ Ｙ， ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｃｅｌｌ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ７（２）：１５９−１７２）。

図１０Ｄ〜１０Ｆ中のデータによって示したように、ウルソル酸は、含脂肪細胞サイズを減少させることによって、脂肪重量を減少させた。図１０Ｄは、示唆したように、対照データまたは０．２７％ウルソル酸を含む食事を与えた動物に対する、腹膜後脂肪の代表的なＨ＆Ｅ染色を示している。図１０Ｄ中のデータは、含脂肪細胞直径に関して、図１０Ｅにて定量的に示されており、データ点は１匹のマウスからの≧１２５腹膜後含脂肪細胞の平均直径を表している。腹膜後含脂肪細胞サイズ分布。各分布は、図１０Ｅからの組み合わせ含脂肪細胞測定（＞１０００／餌）を表している。

含脂肪細胞サイズにおける変化には、脂肪重量に非常に近く相関する、血漿レプチンレベルにおける有意な減少が付随して起こる（図１０Ｇおよび１０Ｈを参照のこと）。図１０Ｇにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは平均を表す。Ｐ−値は、ｔ−検定によって決定した。図１０Ｈにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表す。重要なことに、ウルソル酸はまた、血漿トリグリセリド（図１０Ｉ）およびコレステロール（図１０Ｊ）を有意に減少させた。図１０Ｉおよび１０Ｊにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは平均を意味する。Ｐ−値は対ではないｔ−検定によって決定した。ウルソル酸がレプチンを減少させたけれども、食物取込は変えなかった（図１１Ａ）。この研究において、マウスには、４週間、標準食事（対照餌）または０．２７％のウルソル酸を含む標準食事（ウルソル酸餌）いずれかに対するアドリブでのアクセスを提供した。マウスをついで包括的動物代謝モニタリングシステム（ＣＬＡＭＳ：Ｃｏｌｕｍｂｕｓ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，ＯＨ）に写し、同一の餌に対するアドリブでのアクセスを提供した。食物消費を、４８時間測定した。データは、６匹マウス／群からの平均値±ＳＥＭである。しかしながら、ウルソル酸は、心臓（図１０Ａ）、肝臓または腎臓（図１１Ｂおよび１１Ｃ）の重量を変えず、肝臓毒性および腎臓毒性の血漿マーカー（アラニンアミノトランスフェラーゼ、ビリルビンおよびクレアチニン、図１１Ｄ〜１１Ｆを参照のこと）を上昇させなかった。図１１Ｂ〜１１Ｆにおけるデータは、以下のように得た。示唆した測定のために組織および血漿を回収する前５週間、マウスに標準食（対照餌）または０．２７％ウルソル酸を含む標準食（ウルソル酸餌）に対するアドリブのアクセスを提供した。各データ点は１匹のマウスを表し、水平バーは平均値を意味する。図１１に関して、Ｐ−値を対になっていないｔ−検定で決定した。したがって、餌ウルソル酸は、２つの主要な効果、骨格筋肥大および脂肪の減少を持った。

１０．ウルソル酸は、体重増加および白色脂肪組織を減少させる
ウルソル酸が、骨格筋を増加させ、脂肪を減少させたという発見は、ウルソル酸がエネルギー消費を増加させ、肥満耐性を導きうることを示唆した。これを試験するために、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、０．２７％のウルソル酸を含まないか、含む高脂肪餌（ＨＦＤ；Ｔｅｋｌａｄ ＴＤ．９３０７５；脂肪から５５％カロリー）に対するアドリブアクセスを与えた。７週間後、各群からのマウスを、包括的研究所動物モニタリングシステム（「ＣＬＡＭＳ」；Ｃｏｌｕｍｂｕｓ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）において、３日間研究した。ＣＬＡＭＳにおいて、マウスを、同一の餌で維持し、実験の開始から食べていた。ＣＬＡＭＳに続き、組織を解析のために回収した。高脂肪食マウスにおいて、ウルソル酸は、体重増加を劇的に減少させ、この効果は、１週間以内で明らかであった（図１２Ａ）。ウルソル酸と標準食を食べたマウスにおいて先に観察されたように（図６）、ウルソル酸は、グリップ強度と筋肉量を増加させた（図１２Ｂおよび１２Ｃ）。さらに、ウルソル酸は、腹膜後および精巣上体脂肪を減少させた（図１２Ｄおよび１２Ｅ）。興味深いことに、白色および発熱茶色脂肪の混合物を含む、肩甲脂肪パッドにおいて、ウルソル酸が白色脂肪を減少させた（図１２Ｆ）が、茶色脂肪を増加させた（図１２Ｇ）。重要な事に、骨格筋の増加と茶色脂肪組織は、エネルギー消費を増加させることが予想された。実際、ＣＬＡＭＳは、ウルソル酸が、エネルギー消費を増加させたことを明らかにし（図１２Ｈ）、どのようにしてウルソル酸が脂肪症および肥満を減少させたかの説明を提供している。著しく、ＣＬＡＭＳ解析は、ほとんど体重増加がなかったけれども（図１２Ａ）、ウルソル酸処理マウスが、より食事を消費したこと（図１２Ｉ）を明らかにした。図１２Ａにて示したデータに関して、データは、１２対照マウスおよび１５処理マウスからの平均値±ＳＥＭを意味し、いくつかのエラーバーは、小さすぎて見られないことに気がつくべきである。１週間および各続く時間点でＰ＜０．０１。図１２Ｂ〜１２Ｉにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは平均値を意味する。Ｐ−値は対ではないｔ−検定で決定した。

１１．ウルソル酸は、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪肝疾患および高コレステロール血症を減少させる
研究を以下のように実施した。Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、０．２７％ウルソル酸を含まないか、または含む高脂肪食（「ＨＦＤ」、Ｔｅｋｌａｄ ＴＤ．９３０７５；脂肪から５５％カロリー）に対するアドリブでのアクセスを与えた。５週間後、尾静脈から血中グルコースを測定した後、１６時間マウスを絶食させた（図１３Ａ）。正常の絶食血中グルコース：≦１００ｍｇ／ｄｌ。（Ｂ−Ｉ）７週間後、肝臓および血漿を解析のために回収した（図１３Ｂ〜１３Ｉ）。図１３Ａで示したデータは、６週間ウルソル酸無しのＨＦＤを食したほとんどのマウスが、障害のある絶食グルコース（前糖尿病）または糖尿病を発達させたことを示唆している。重要な事に、これは、ウルソル酸によって防止された（図１３Ａ）。さらに、ウルソル酸なしのＨＦＤを食したマウスが、肝臓重量の増加でも明らかなような脂肪肝疾患（１５００ｍｇの正常マウス肝臓重量よりも＞３０％増加、図１３Ｂ）、肝細胞脂質集積（図１３Ｃ、２０×倍率でのＨ＆Ｅ染色、図１３Ｄ、１０×倍率での脂質染色オスミウム）、および血漿肝臓機能試験の上昇（図１３Ｅ、ＡＳＴ；１３Ｆ、ＡＬＴ；１３Ｇ、アルカリホスファターゼ（以後「Ａｌｋ．Ｐｈｏｓ．と表記）および１３Ｈ、コレステロール）を発達させた。しかしながら、ウルソル酸は、これらの肝臓変化のすべてを予防した（図１３Ｂ〜１３Ｇ）。さらに、ウルソル酸は、肥満関連高コレステロール血症を減少させた（図１３Ｈ）。図１３Ａ、１３Ｂおよび１３Ｅ〜１３Ｈにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは平均値を意味する。

１２．オレアノール酸は、骨格筋重量を増加させない
骨格筋重量および肝重量におけるウルソル酸の効果を、オレアノール酸およびメトフォルミンによる効果と比較した。メトフォルミンは、萎縮シグナチャー−２ではなく、萎縮シグナチャー１より同定された化合物であった。オレアノール酸は、ウルソル酸と同様、五員環状酸トリテルペンである。これは、ウルソル酸と構造的に同様の化合物である。しかしながら、２つの化合物は異なり、オレアノール酸は、位置２０で２つのメチル基を持ち、一方で、ウルソル酸は、位置１９および２０のそれぞれで、単一メチル基を持つ（図１４Ａと１４Ｄを比較のこと）。ウルソル酸とオレアノール酸両方が血中グルコース、脂肪および肝硬変を減少させる（Ｗａｎｇ ＺＨ，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ６２８（１−３）：２５５−２６０；Ｊａｙａｐｒａｋａｓａｍ Ｂ，ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｊ Ａｇｒｉｃ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ ５４（１）：２４３−２４８；ｄｅ Ｍｅｌｏ ＣＬ，ｅｔ ａｌ．（２０１０） Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔ １８５（１）：５９−６５）。さらに、ウルソル酸とオレアノール酸両方が、タンパク質チロシンキナーゼ類のほぼ等価の阻害を含む、多数の細胞効果と生化学標的を有する（「ＰＴＰ」、Ｚｈａｎｇ Ｗ，ｅｔ ａｌ．（２００６） Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ ａｃｔａ １７６０（１０）：１５０５−１５１２；Ｑｉａｎ Ｓ，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｊ Ｎａｔ Ｐｒｏｄ ７３（１１）：１７４３−１７５０；Ｚｈａｎｇ ＹＮ，ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ １６（１８）：８６９７−８７０５を参照のこと）。しかしながら、これらの化合物の骨格筋重量における効果は知られていなかった。

いくつかのＰＴＰｓ（特にＰＴＰ１Ｂ）がインスリン受容体を脱リン酸化（不活性化）するので、ＰＴＰ阻害は、インスリンシグナル伝達のウルソル酸仲介増強を説明するための、可能性のある機構を表した。したがって、オレアノール酸とウルソル酸は、ＰＴＰ１Ｂと、ｉｎ ｖｉｔｒｏで同様の効果および有効性を持つ他のＰＴＰｓを阻害するため（Ｑｉａｎ Ｓ，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｊ Ｎａｔ Ｐｒｏｄ ７３（１１）：１７４３−１７５０；Ｚｈａｎｇ ＹＮ，ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ １６（１８）：８６９７−８７０５）、オレアノール酸の骨格筋重量における効果を試験することは、ＰＴＰ阻害の潜在的役割を試験する。ウルソル酸またはオレアノール酸いずれもが、ｉｎ ｖｉｖｏにてＰＴＰｓを阻害するとは知られておらず、これらの化合物いずれもが、ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を増強するとは公知ではないことに留意すべきである。さらに，ウルソル酸の、ＰＴＰｓを阻害するキャパシティーは、ウルソル酸が、培養細胞中のインスリン受容体脱リン酸化を遅延させないこと（Ｊｕｎｇ ＳＨ，ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｔｈｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ４０３（２）：２４３−２５０）、およびインスリン模倣体として働くウルソル酸のキャパシティー（Ｊｕｎｇ ＳＨ，ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｔｈｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ４０３（２）：２４３−２５０）に基づいて議論となってきている。さらに、グローバルおよび筋肉特異的ＰＴＰ１Ｂノックアウトマウスは、筋肉量の増加を持たず、一方肥満および肥満関連疾患に対して耐性である（Ｄｅｌｉｂｅｇｏｖｉｃ Ｍ，ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ２７（２１）：７７２７−７７３４；Ｋｌａｍａｎ ＬＤ，ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ２０（１５）：５４７９−５４８９）。さらに、ウルソル酸は、おそらくその抗炎症効果を介して、膵臓ベータ細胞重量およびｉｎ ｖｉｖｏでの血清インスリンレベルを増加させる（Ｗａｎｇ ＺＨ，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ６２８（１−３）：２５５−２６０；Ｊａｙａｐｒａｋａｓａｍ Ｂ， ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｊ Ａｇｒｉｃ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ ５４（１）：２４３−２４８；ｄｅ Ｍｅｌｏ ＣＬ，ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔ １８５（１）：５９−６５）。重要な事に、炎症はここで、筋萎縮、代謝症候群、肥満、脂肪肝疾患および２型糖尿病における、中心となる病因機構であると認識される。したがって、存在するデータは、ウルソル酸のｉｎ ｖｉｖｏでのインスリンシグナル伝達を増加させるためのキャパシティーを説明するための少なくとも４つの機構、ＰＴＰ阻害、インスリン受容体の直接刺激、インスリン産出の増加、および炎症の減少を示唆する。これらの４つの可能性ある機構のうち、後ろの３つのみが、ｉｎ ｖｉｖｏにて立証されてきた。

ウルソル酸とオレアノール酸の、骨格筋および肝臓重量における効果を比較するために、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、ｉ．ｐ．注射を介して、ウルソル酸（２００ｍｇ／ｋｇ）、オレアノール酸（２００ｍｇ／ｋｇ）または賦形剤のみ（トウモロコシ油）を与えた。ついでマウスを絶食させ、絶食１２時間後、マウスに、第二用量のウルソル酸、オレアノール酸または賦形剤を与えた。絶食の２４時間後、下部後肢骨格筋および肝臓を回収し、計量した。先に示したように、ウルソル酸は、骨格筋重量を増加させたが（図１４Ｂ）、肝臓重量は増加させなかった（図１４Ｃ）。反対に、オレアノール酸は肝臓重量を増加させたが（図１４Ｆ）、骨格筋重量は増加させなかった（図１４Ｅ）。興味深いことに、メトフォルミン（２５０ｍｇ／ｋｇ）は、生物学的効果において、オレアノール酸と共通点があり、肝臓重量を増加させる（図１４Ｉ）が、筋肉重量は増加させなかった（図１４Ｈ）。特定の理論に制約されず、ウルソル酸は、ＰＴＰ阻害が関与しない経路によって、骨格筋を増加させ、筋萎縮を阻害する。

１３．ＰＴＰ１Ｂの標的化阻害は、骨格筋肥大を誘導しない
骨格筋肥大におけるＰＴＰ１Ｂ阻害の可能性ある役割をさらに排除するために、ＰＴＰ１Ｂ発現を、ＲＮＡ干渉構造物を発現させるために構築したプラスミドＤＮＡをトランスフェクトすることによって、マウス骨格筋にて特異的に減少させた。簡単に記すと、Ｃ５７ＢＬ／６マウス三頭筋前部筋肉に、２０μｇ ｐＣＭＶ−ｍｉＲ−対照（左ＴＡ中にトランスフェクトした対照プラスミド）、または２０μｇ ｐＣＭＶ−ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ＃１（ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ ＃１をコードしている、右ＴＡにトランスフェクト）、または２０μｇ ｐＣＭＶ−ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ＃２（ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ ＃２をコードしている、右ＴＡにトランスフェクト）いずれかをトランスフェクトした。ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ＃１およびｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ＃２は、ＰＴＰ１Ｂ ｍＲＮＡの異なる領域を標的とする２つの異なるＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）構築物をコードしている。組織をトランスフェクト後１０日で回収した。

図１５Ａに関する注目すべきは、ｍＲＮＡ測定を全ＴＡ筋肉から行ったことである。エレクトロポレーションは、筋肉線維の一部のみをトランスフェクトするので、データは、トランスフェクトされた筋肉線維内のＰＴＰ１Ｂノックダウンを過小評価する。図１５Ａにおいて、右ＴＡ中のｍＲＮＡレベルを、１と設定した左ＴＡ中のレベルに対して標準化した。データは３匹のマウスからの平均値±ＳＥＭである。図１５Ｂにおいて、各ＴＡ筋肉中、＞３００のトランスフェクトした線維の平均直径を決定した。データは、３ＴＡ筋肉／条件からの平均値±ＳＥＭである。図１５Ａおよび１５Ｂ両方に関して、Ｐ−値は、片側対になるｔ−検定で決定した。

両方のｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ構造物が、ＰＴＰ１Ｂ ｍＲＮＡを減少させた（図１５Ａ）けれど、いずれも骨格筋線維直径を増加させなかった（図１５Ｂ）。これらのデータは、標的化ＰＴＰ１Ｂ阻害が、筋肉線維肥大を引き起こさないことを示唆している。特定の理論に制約されず、ウルソル酸は、ＰＴＰ１Ｂを阻害することによって骨格筋を増加させない。

１４．ウルソル酸血清レベルは、筋肉量の増加および脂肪症の減少に関連した
餌ウルソル酸と筋肉および脂肪重量間の用量応答性関係を決定するために、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、７週間、種々の量のウルソル酸を含む標準食を与えた。マウスからの血清ウルソル酸レベルを上記のように測定した。図１０Ａですでに示したように、用量依存的様式で、ウルソル酸は、骨格筋重量を増加させ、腹膜後および精巣上体脂肪パッドの重量を減少させたが、心臓重量は変化させなかった（図１６Ａ、データは平均値±ＳＥＭ）。ウルソル酸のこれらの効果は、０．０３５％ウルソル酸にて認識され、用量≧０．１４％ウルソル酸で最大であった。血清をこれらの同一のマウスから、脂肪解剖の時点で回収し、ついで、超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）を介して、ランダム血清ウルソル酸レベルを測定した。データは、０．２５〜０．５μｇ／ｍｌの範囲でウルソル酸血清レベルが、筋肉量を増加させ、脂肪症を減少させるのに十分であることを示唆している（図１６Ｂ、データは平均値±ＳＥＭである）。注目すべきは、０．５μｇ／ｍｌが、１．１μＭウルソル酸に等しく、上記したＣｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｍａｐ（８．８μＭ）にて、およびＣ２Ｃ１２実験（１０μＭ）にて使用した用量と近かった。

本明細書で記述したデータは、ウルソル酸がマウスにおける筋萎縮を減少させ、筋肥大を刺激したことを示唆している。重要なことに、筋肉におけるウルソル酸の効果には、脂肪症、絶食血液グルコースおよび血漿レプチン、コレステロールおよびトリグリセリドの
減少、ならびに骨格筋の脂肪に対する比、茶色脂肪の量、茶色脂肪と白色脂肪の比の増加、およびエネルギー消費の増加を伴った。特定の理論に制約されず、ウルソル酸は、骨格筋ＩＧＦ−Ｉ発現とＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を増進させ、萎縮関連骨格筋ｍＲＮＡ発現を阻害することによって、筋萎縮を減少させ、筋肥大を刺激した。

本明細書で開示し、請求したすべての組成物および／または方法を、本開示に照らして、不必要な実験なしに作製し実行可能である。当業者によって、種々の改変および変法を、本発明の範囲または精神から逸脱することなしに、本発明で実施可能であることが理解されるであろう。

よりとりわけ、化学的および生理学的両方に関連した特定の試薬を、同一または同様の結果を達成可能である、本明細書で記述した試薬に対して置換可能である。当業者にとって明かなすべてのそのような同様の置換および改変は、付随する請求項によって定義させるように、本発明の精神、範囲およびコンセプトの範囲内と見なされる。

本発明の他の実施形態が、本明細書で開示された本発明の明細および実施例の考慮により、当業者に理解されるであろう。明細および実施例が例示のみとして考慮され、以下の請求項によって示唆されている本発明の真の範囲および精神であることが意図される。

Ｇ．参考文献
本明細書で記載されたものに補助的な典型的手順または他の詳細を提供する範囲で、以下の参考文献が、参考文献にて本明細書に特に組み込まれる。
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Claims (20)

1. 動物における骨格筋量を増加させるための医薬の製造のための、ウルソル酸、又は、その薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物若しくは多型体の使用。
2. 前記ウルソル酸、又は、その薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物若しくは多型体が、２００ｍｇ／日より多くの量にて前記動物に投与される、請求項１に記載の使用。
3. 前記動物が、哺乳動物である、請求項１に記載の使用。
4. 前記動物が、ヒトである、請求項１に記載の使用。
5. 前記動物が、家畜化された動物である、請求項１に記載の使用。
6. 前記動物が、家畜、家畜化された魚、又は、家禽である、請求項１に記載の使用。
7. 前記ウルソル酸が、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅（第二又は第一）、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（第二又は第一）、カリウム、ナトリウム又は亜鉛から由来する塩、一級、二級及び三級アミンの塩、並びに、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、セオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン又はトロメタミンから由来する塩、から選択される薬学的に許容可能な塩として存在する、請求項１に記載の使用。
8. ウルソル酸、又は、その薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物若しくは多型体と、薬学的に許容可能な担体とを含む、動物における骨格筋量を増加させるための薬学的組成物。
9. 前記ウルソル酸、又は、その薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物若しくは多型体が、少なくとも５０ｍｇの量で前記組成物中に存在する、請求項８に記載の組成物。
10. 前記組成物が、０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量で投与されるように調製される、請求項８に記載の組成物。
11. 前記ウルソル酸が、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅（第二又は第一）、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（第二又は第一）、カリウム、ナトリウム又は亜鉛から由来する塩、一級、二級及び三級アミンの塩、並びに、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、セオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン又はトロメタミンから由来する塩、から選択される薬学的に許容可能な塩として存在する、請求項８に記載の組成物。
12. 前記組成物が、１．０〜１０００ｍｇのウルソル酸、又は、その薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物若しくは多型体を含む錠剤の形態である、請求項８に記載の組成物。
13. 前記ウルソル酸、又は、その薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物若しくは多型体が、１０００ｍｇ／日より多くの量にて投与される、請求項８に記載の組成物。
14. 前記組成物が、希釈剤、緩衝液、香味料、結合剤、界面活性剤、増粘剤、潤滑剤若しくは保存剤、又は、それらの組み合わせを含む、請求項８に記載の組成物。
15. ウルソル酸、又は、その薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物若しくは多型体を、少なくとも１００ｍｇの量で経口投薬形態中に含む、動物における骨格筋量を増加させるための薬学的組成物。
16. 前記経口投薬形態が、少なくとも１５０ｍｇの前記ウルソル酸、又は、その薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物若しくは多型体を含む、請求項１５に記載の組成物。
17. 前記経口投薬形態が、粉末、カプセル、カシュー及び錠剤から選択される、請求項１５に記載の組成物。
18. １つ又はそれ以上の薬学的に許容可能な担体、治療薬、又は、アジュバントをさらに含む、請求項１５に記載の組成物。
19. 前記組成物が、０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量で投与されるように調製される、請求項１５に記載の組成物。
20. 前記組成物が、１．０〜１０００ｍｇのウルソル酸、又は、その薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物若しくは多型体を含む、請求項１５に記載の組成物。

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