DK158669B - Fremgangsmaade til fremstilling af 6beta-halogensubstituerede penicillansyrederivater. - Google Patents

Description

DK 158669B

Den foreliggende opfindelse angår en særlig frem-5 gangsmåde til fremstilling af 6β-halogenpenici11ansyre-derivater med den almene formel I

H H

V_

6 5 2V

7 T 4 , 1 !0 \

0 H COOH

i hvilken X betyder chlor, brom eller jod, farmaceutisk acceptable, ugiftige salte og let hydrolyserbare estre af forbindelserne af formel I, samt salte af sådanne estre.

15 Fremgangsmåden er ejendommelig ved det i krav l’s kendetegnende del angivne.

I behandlingen af bakterieinfektioner er det et alvorligt problem, at β-lactamase-producerende bakterier forekommer med stigende hyppighed. Disse enzymer inak-20 tiverer et stort antal β-lactamantibiotika, og det er velkendt, at β-lactamaserne fra både gram-positive og gramnegative bakterier bidrager betydeligt til bakteriernes resistens overfor β-lactamantibiotika.

Det har nu vist sig, at ββ-halopenicillansyrerne af 25 formel I er stærke inhibitorer af β-lactamaser hidrørende fra et antal gram-positive og gram-negative bakterier.

Denne egenskab gør ββ-halopenicillansyrerne såvel som deres salte og let hydrolyserbare estre værdifulde i human- og veterinærmedicinen, fordi de beskytter β-lactamantibiotika 30 mod inaktivering når de indgives samtidigt med disse.

Foruden den inhibitoriske aktivitet overfor β--lactamaserne har ββ-halopenicillansyrerne antibakterielle egenskaber (se tabel I) og er især aktive overfor 2

DK 158669 B

Neisseria-arterne.

Bortset fra 6 β-brompenici11ansyrerne, som er omtalt i nedennævnte litteratur, er forbindelserne ifølge opfindelsen nye, og ingen af dem, heller ikke 6p-brompenicillan-5 syre, er hidtil fremstillet i ren form.

Som allerede beskrevet (J. Org. Chem. Vol. 43, pp. 3611-3613, 1978; Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 75, pp. 4145-4149, 1978; US Patent nr. 4.180.506 (Dec. 25, 1979);

Biochem. J., Vol. 177, pp. 365-367, 1979) fremstilles blan-10 dinger af 6β- og 6a-brompenicillansyrer enten ved epimeri-sation af sidstnævnte forbindelse eller ved selektiv hydrogenering af 6,6-dibrompenicillansyre, idet 6β-bromisomeren er tilstede i reaktionsblandingen i anslåede mængder på fra 5 til 15%. I samme litteratur er beskrevet, hvorledes så-15 danne epimere blandinger optræder som inhibitorer af β--lactamaser, og da ren 6a-brompenicillansyre ingen effekt har på disse enzymer, tilskrives den inhibitoriske aktivitet 6β-bromisomeren. Efter indleveringen af prioritetsdokumentet til nærværende ansøgning er det beskrevet (Tetra-20 hedron Letters No. 48, pp. 4631-4634, Nov. 1979), at selektiv reduktion af trimethylsilyl-6,6-dibrompenicillanat med tri-n-butyltinhydrid, efterfulgt af hydrolyse og saltdannelse, giver et 30% udbytte af η3ΪΓχηιιι-6β^Γοπιρβηχοχ1-lanat, som indeholder mindre end 5% af 6a-bromepimeren, men 25 den vigtigste sidereaktion var overreduktion til penicil-lansyre. Denne litteratur beskriver endvidere en lignende reduktion af det tilsvarende 6-chlor-6-jodpenicillanat, som giver et udbytte på 39% af blandingen af 6β- og 6a-chlor-penicillansyrer, indeholdende ca. 25% af 6a-epimeren.

30 Imidlertid er hverken δβ^Γοπι- og θβ-σΙιΙοΓρβηχοϋΙηηβγΓβ eller salte og let hydrolyserbare estre af disse forbindelser isoleret i en ren krystallinsk form. 6β-Jodpeni-cillansyre, dens salte eller estre er ikke tidligere beskrevet i litteraturen.

35 Det er således formålet med den foreliggende opfin delse af tilvejebringe en fremgangsmåde til fremstilling af 6p-halopenicillansyrer af formel I og salte deraf i en i det væsentlige ren, krystallinsk form, som er egnet til 3

DK 158669 B

medicinsk brug, idet disse forbindelser udviser stærk β-lactamaseinhibitorisk aktivitet, stigende i rækkefølgen Cl<Br<I, og som også udviser antibakteriel aktivitet, især mod Neisseria-arter.

5 Et andet formål med den foreliggende opfindelse er at tilvejebringe en fremgangsmåde til fremstilling af let hydrolyserbare estre af syrerne af formel I og salte af sådanne estre, som er værdifulde som pro-drugs og/eller me11emprodukter.

10 Der er ligelededs i det følgende beskrevet kombi nationer af forbindelserne af opfindelsen med udvalgte β-lactamantibiotika, med hvilke de nye forbindelser optræder synergistisk overfor et stort antal β-lactamase-producerende bakterier, fordi de beskytter β-lactamanti-15 biotika mod at blive inaktiveret af disse enzymer.

Saltene af ββ-ΙϊβΙορβηϊοίΙΙβηβ^τβΓηβ er salte med farmaceutisk acceptable, ugiftige baser, og blandt egnede salte kan nævnes alkalimetalsalte og jordalkalimetalsalte, såsom lithium-, natrium-, kalium-, magnesium- og calcium-20 salte, såvel som salte med ammoniak og egnede ugiftige aminer, såsom lavere alkylaminer, fx triethylamin, lavere alkanolaminer, fx diethanolamin eller triethanolamin; pro-cain; cycloalkylaminer, fx dicyclohexylamin; benzylaminer, fx N-methylbenzylamin, N-ethylbenzylamin, N-benzyl^-phen-25 ethylamin, N,N'-dibenzylethylendiamin eller dibenzylamin; og heterocykliske aminer, fx morfolin, N-ethylpiperidin og lignende aminer. Også salte dannet med fx β-lactamantibiotika eller pro-drugs deraf, som indeholder en basisk gruppe, såsom pivampicillin, pivmecilinam, bacampicillin, 30 bacmecillinam, penethamat, ampicillin eller amoxycillin, er inden for opfindelsens omfang. I nogle tilfælde foretrækkes brug af salte, som er letopløselige i vand, medens det til andre formål vil være formålstjenligt at anvende kun lidt opløselige salte, fx for at opnå en forlænget virkning 35 eller ved fremstilling af vandige suspensioner.

Ovenstående liste skal imidlertid kun illustrere den foreliggende opfindelses omfang.

De foreliggende estre af ββ-halopenicillansyrerne er

DK 158669B

4 estre, som er let hydrolyserbare in vivo eller in vitro.

Sådanne estre omfatter acyloxyalky1-, alkoxycarbonyloxy-alkyl- eller aminoacyloxyalkylestre af formel II

γ Η H

5 ^ 1 11

„ R O

Λ-^ I* II 2

0r ff /C00-C-0-C-R

H

10 i hvilken X har samme betydning som i formel I, R1 er 2 hydrogen, methyl eller ethyl, og R er en lige eller forgrenet alkyl- eller alkoxygruppe med fra 1 til 6 carbon-atomer, en aryl- eller aryloxygruppe eller en lige eller forgrenet aminoalkylgruppe med fra 1 til 6 carbonatomer, 15 idet alkyldelen eventuelt kan være substitueret med en eller flere grupper, såsom hydroxy-, mercapto-, alkoxy-, alkylthio-, carbalkoxy-, carboxamido-, phenyl- eller hydroxyphenylgruper. Stjernen i esterdelen angiver muligheden for et asymmetrisk carbonatom.

20 Blandt ovennævnte estre foretrækkes følgende: alkano- oyloxymethyl med fra 3 til 8 carbonatomer, l-(alkanoyloxy)-ethyl med fra 4 til 9 carbonatomer, alkoxycarbonyloxy-methyl med fra 3 til 6 carbonatomer, l-(alkoxycarbonyloxy)-ethyl med fra 4 til 7 carbonatomer, og a-aminoalkanoyloxy-25 methyl med fra 2 til 6 carbonatomer.

Andre foretrukne estre er lactonylester, fx 3-phthal-idyl-, 4-crotonolactonyl- eller X-butyrolacton-4-yl-estre.

Inden for opfindelsens omfang er methoxymethyl-, cyanomethyl-, eller mono- eller dialkylsubstituerede amino-30 alkylestre, fx 2-dimethylaminoethyl-, 2-diethylaminoethyl-eller 3-dimethylaminopropylestre.

I særdeleshed foretrækkes sådanne estre, som er let resorberbare efter oral indgift, og som under eller efter optagelsen hydrolyseres til de frie syrer af formel I.

35 Estre, som indeholder en aminogruppe i esterdelen, kan fremstilles og anvendes i form af deres salte med farmaceutiske acceptable, ugiftige, uorganiske eller organiske syrer. Eksempler på egnede uorganiske eller organiske syrer 5

DK 158669 B

omfatter halogenbrintesyrer, fx saltsyre, brombrinte- og jodbrintesyre, fosforsyre, svovlsyre, salpetersyre, p--toluensulfonsyre, methansulfonsyre, myresyre, eddikesyre, propionsyre, citronsyre, vinsyre, maleinsyre, pamoinsyre 5 (4,4’-methylenbis[3hydroxy-2-naphthalencarboxylsyre]), p-(dipropylsulfamyl)benzoesyre (probenecid), og phenoxy-methylpenicillin og andre sure β-lactamantibiotika. Som ovenfor nævnt kan letopløselige eller kun lidt opløselige salte foretrækkes til forskellige formål.

10 Den foreliggende opfindelse angår således en frem gangsmåde til fremstilling af de foreliggende forbindelser, herunder deres adskillelse fra blandinger, som indeholder de tilsvarende 6a-epimerer og/eller 6,6-dihaloderivater, som kan være tilstede i den rå reaktionsblanding.

15 Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan 6,6-dihalo- peniciliansyrer eller salte deraf selektivt reduceres ved behandling med alkalimetal- eller tetraalkylammoniumbora-nater, fx natriumborhydrid, kaliumborhydrid, natriumcyano-borhydrid, tetrabutylammoniumboranat, eller cetyltrimethyl-20 ammoniumboranat, hvorved fås fordelagtige høje udbytter (>50%) af de frie ββ-halopenicillansyrer af formel I. Reaktionerne udføres i et passende organisk opløsningsmiddel, fx dimethylsulfoxid, dimethylformamid, ethylacetat eller methylenchlorid, og ved temperaturer på mellem 0°C og 25 80°C, fortrinsvis ved stuetemperatur. 6p-Halopenicillan- syrerne af formel I kan skilles fra de tilsvarende 6a-halo-og/eller 6,6-dihalopenicillansyrer i de rå reaktionsblandinger ved kolonnekromatografi som nedenfor omtalt eller ved fraktioneret krystallisation, som er kendt for fag-3 0 manden.

De epimere blandinger af de således fremkomne 6--chlor-, 6-brom- eller 6-jodpenicillansyrer kan skilles ved kolonnekromatografi på silicagel under anvendelse af en egnet blanding af organiske opløsningsmidler som frem-35 kaldervæske, fx ether-petroleumsether, ethylacetat- petroleumsether, chloroform-benzen eller ethylacetat-cyclo-hexan, idet disse opløsningsmiddelblandinger fortrinsvis indeholder en lille procentdel (0,1-0,5%) af en carboxyl-

DK 158669B

6 syre, såsom myresyre eller eddikesyre. -En meget effektiv fremkaldervæske til adskillelse af de ovenfor omtalte epimere blandinger ved tør kolonnekromatografi på silicagel er fx ether-petroleumsether-myresyre, 70:30:0,1. Herved 5 fraskilles de mere polære ββ-halopenicillansyrer fuldstændigt fra deres mindre polære 6a-epimerer, som efter sædvanlig oparbejdning af eluaterne fremstilles i ren krystallinsk form, enten i form af de frie syrer eller som de tilsvarende kalium- eller natriumsalte. Renheden af de 10 således fremkomne krystallinske ββ-halopenicillansyrer såvel som de respektive kalium- og natriumsalte er mindst 99%, bestemt ved tyndtlags- og gas-væske-kromatografi.

De foreliggende estre fås ved selektiv reduktion af 6,6-dihalopenicillansyreestre med alkalimetal- eller tetra-15 alkylammoniumboranater, i lighed med den førnævnte fremgangsmåde. De således fremkomne ββ-haloestre adskilles fra mindre mængder af de tilsvarende 6a-epimerer og/eller ufor-brugte udgangsmaterialer ved kolonnekromatografi som beskrevet ovenfor.

20 ββ-Halopenicillansyrerne af formel I eller deres salte kan omdannes til de tilsvarende estre ved velkendte esterifikationsprocesser, og omvendt kan sådanne estre spaltes kemisk eller enzymatisk, hvorved man får de tilsvarende frie syrer af formel I eller salte deraf, under 25 betingelser, som ikke forårsager nogen væsentlig ødelæggelse af den resterende del af molekylet.

Som allerede nævnt, forøger de foreliggende ββ-halo-penicillansyrer virkningen af β-lactamasefølsomme antibiotika og er også i sig selv værdifulde til bekæmpelse af 30 visse særlige bakterieinfektioner.

De antibakterielle spektra af de rene ββ-halopenicil-lansyrer fremstillet ifølge opfindelsen fremgår af nedenstående tabel I.

35

DK 158669B

7

Tabel I

Antibakterielle spektre af 6p-brompenicillansyre (A), ββ-ο^οΓρβηΙοΐΐΙβηΒγΓβ (B) og 6p-jodpenicillansyre (C) 5 1 1 ’" ""Il 1 """ ~ IC^Q Ug/ml)

Organisme - ' ““

A B C

20 Staph, aureus CJ9 32 40 63

Dipl, pneumoniae EA 1,6 5» O 5»0

Strep, pyogenes EC 6,3 6,3 3,0

Strep, faecalis EI3 >100 >100 >100

Coryneb. xerosis FF 5,0 5»0 l6 X5 Bacillus subt. KA2 5,0 7>9 13

Pseud, aeruginosa BA2 >100 >100 >100

Alcaligenes faecalis GA 2,0 2,5 10

Escherichia coli HA2 50 50 >100 " " HA58(RTEM) 100 >100 >100 20 Kleb. pneumoniae HE 63 63 >100

Enterobact. aerogenes HC7A 63 63 >100

Proteus vulg. HJ 40 hO 100

Salm. typhimurium HL2 100 100 >100

Shigella dysenteriae HR 50 ^0 >100 25 Neisseria gonorrhoeae DA2 0,25 0,20 0,79 " meningitidis DB 0,79 0,63 1»6

Haemophilus influenzae 1X3 32 20 >100 30 a) bestemt ved seriefortyndinger i flydende medium, inoculum 10^ CFU ^ (gram-positive organismer) eller 4 10 CFU (gram-negative organismer).

35 b) CFU = kolonidannende enheder

DK 158669B

8 I tabel II er vist in vitro-aktiviteten overfor β--lactamaseproducerende bakteriestammer af udvalgte β--lactamantibiotika i 1:1 kombinationer med δβ-ΐιβίορβηίσχΐ-lansyrerne af formel I. Disse data viser, at benzylpenicil-5 lin og ampicillin er stærkt aktive overfor ellers resisten-re stammer af Staphylococcus aureus, når de anvendes i kombination med 6β-halopenicillansγrerne. En lignende synergistisk virkning ses overfor stammer af Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis og Escherichia coli, når 10 ampicillin eller mecillinam kombineres med δβ-ΐ^ίορβηχσχΐ-lansyrerne fremstillet ifølge opfindelsen.

15 20 25 30 35

DK 158669 B

9 •HH ^ •Η cd o cd o η * s m ch

S H R S OS O C\i Η O H

•Hpi 0(¾ λ ·»·*·*·» ·>

+3 Φ (0 £-1 i> -tf CH CH O O O

0 ft H -H Pi - d HT) d H'—' O O O O R R + 0 + +H + + + Φ

fl 0 (DO 101000¾¾ o P H

H,r"5 R O 00 •-“•'.•''NHH Os H O ¾ C\i VQIOCO H

-PI o ΙΟ ^ ψ* ^ *· Η O H O

£ CO. CQ<J £> -tf tfs - - - cd vo PS o O O ^ 'Τ' s ___—--- ti ti

Cd 60 CO (D o

-po cd ΙΟ o io h so ε E

Q (OH — ·- *\ λ #\ CD (D

Cd-—s 3H c\l m W CH Η O Η H

HSCDHOO *· Λ ti ti 1 w -p c\| OOOOPQ + 0 + R + so + R + Cd Cd cn. O ti H 101000¾¾ “Ί ¾ S 60 60 <D ti ti S Λ ^ Η H io y\ O io co co ti ti

φ ti ft-H ^ ^ - - - - SO O O

-P P g CMlOCVH-

&D CD O <D 0) C

H S--—-—-—- > > <D

cd cd cd 0 OS ·Η ·Η >

ί> H Hed OsCOiOOr^-P-HS

XJH HH r—s -----Htiti 3·Η Οβ!> S |>HOJiOOCDElDft Ο HOP Ο Ο Ο Ο Ο ιοο Ο Φ hH toes lOiOOORR +10 + R + CM + ¾ + ft ti ·Π

ο ti ί S -^-^^-)¾¾ ^ ¾ ^ _ II

ρ φ ΦΦ Λ ο- oscoioOOsESe ti ft Η s - - - - iNcdcdcd φ ti Η ft IS— Η CM ΙΟ — ti ti Π > ο ^ ο 6ο 6ο η Ο Η Η--—- ^ '— Η S S « ^ ^ -—·. ο \ 2 S S ·γι cd ι 6UD ο Ρ Ρ ο CO. i ϋ 00 SO CM ’ Ό ΟΟΦ RSO wo CM -tf Ο HCOH C\f O CVi Ξ φ OCO CO - -- SO -- - - -- us -tf S·· o O S lO - 000-000 cO-^-CO OO ti H ιΟΗΦΡί-OCOSOO Η O HH_0

HO<d Q P ti Η Η H H + + + + + +10+ + + P

cow H R d S ^ B

HH ftedO CM -tf 00 SO CM SO CM O CM ti H

φ IS φ cd — — O HCOH -- — H £5 n ft ti -p OO - - - - OS -tf CH d \ cdPM OOOO 0 60 PH CO CD _______ 0 =*.

IcS--ti Φ cd to H -tf B Η 0 - g H 0 0\ 0\ - o

CdH O 1T\ CH i> -tf SO !> O S

-PO 0(0 -- — --- —od s CO H Od OHO O H O -tf HH Φ od oooscosooo o o R s > Η Φ H ti H HH(ΛiO + + +H + + +lO + ¾+ Φ

ti ft P ti O H A B H

φ g R cd Λ ΙΟ Π ø\ -tf SO Os O O I Ό -P0 ft - - {>, - - O- - H ti ti R ti cd OH- OH- -S" ti & cd s -p O O 60 > SIM dl

ro O

φ SO —J__—-- . - Η io

S O

dS <JSO d HH

Φ o Φ E

dg + + + 60 φ ti φ S Η Φ od ddtiti £ ®

do Η Η Η H S Φ H

Hd HHHH <!SO <J s o ti s H

00 HHHi—[ PH

ti H g HHHH + + + + + + Η Φ cL-p d oooo ti R φ

Φ cd-"- S Η Η Η H d ti ti ti E B S S o SS

to d O H d ti ti ti H H H H cd cd cd ti ft H d cd H'—- H OOOØHHHHdtidti CD ® g s 0 ft ft ft ft Η Η Η Η Η Η Η Η Η II d

Cd S CD H HHHHHHHHHHHH d Λ ti -POd S ΡΡΡΡΩΟΟΟΗΗΗΗ Φ Q > 0 R P Η N N N N Η Η Η Η Η Η Η H CO ¾ (0 cd to h dtititiftftRftoooo R H d ti ΦΦΦΦΕΒΒΕΦΩΦΦ -— < 1 ·· cd <! <!sossms<!<|<J<!SSSS ti so CCL Η H _____________;___

DK 158669B

10

De foreliggende forbindelser kan indgå i farmaceutiske præparater til brug ved behandlingen af infektionssygdomme,. idet sådanne præparater som aktiv bestanddel indeholder mindst én af de foreliggende forbindelser.

5 Præparaterne omfatter former, som er egnede til enteral, parenteral, intramammær eller topisk brug og kan anvendes til behandling af infektioner hos pattedyr, herunder mennesker.

De frie ββ-halopenicillansyrer af formel I eller 10 deres salte kan anvendes til enteral, parenteral og topisk indgift. Til oral brug kan det imidlertid undertiden være fordelagtigt at anvende en let hydrolyserbar ester eller et salt deraf.

Præparater af ββ-halopenicillansyrer af formel I 15 eller deres salte, som kan anvendes til injektion eller infusion, er egnede, når der ønskes opnået høje værdier for 5β-halopeniciliansyrerne i vævet hurtigt efter indgivelsen, eller når det anvendes i kombination med et parenteralt indgivet β-lactamantibiotikum, som beskrevet nedenfor.

20 Til intramammær brug foretrækker man at anvende en ester af forbindelsen af formel I, som tilvejebringer en passende lokal koncentration, fx en dialkylaminoalkylester eller et salt deraf.

Den aktive bestanddel kan anvendes som sådan eller 25 blandet med bærer- og/eller hjælpestoffer.

I sådanne præparater kan forholdet mellem terapeutisk aktivt stof og bærere og hjælpestoffer variere mellem 1% og 95%. Præparaterne kan oparbejdes på forskellige farmaceutiske indgivelsesformer, såsom tabletter, kapsler, 30 pulvere, saft, suspensioner og opløsninger, herunder former, som egner sig til injektion eller infusion.

Bærerne og/eller hjælpestofferne er farmaceutisk acceptable materialer, såsom gelatine, lactose, stivelse, magnesiumstearat, talkum, vegetabilske og animalske fedt-35 stoffer og olie, gummiarter, polyalkylenglycol og andre kendte bærere til brug i farmaceutiske præparater, fortyndingsmidler, bindemidler, puffere, konserveringsmidler, sprængmidler, overtræksmateriale, og lignende stoffer, i 11

DK 158669 B

overensstemmelse med sædvanlig farmaceutisk praksis, hvorved tilvejebringes passende farmaceutiske ingivelsesformer, herunder præparater med forsinket afgivelse, dobbelttabletter indeholdende de terapeutisk aktive bestanddele 5 adskilt fra hinanden, tabletter med særligt overtræk, osv.

Forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen er tilstede i præparaterne enten alene eller sammen med andre terapeutiske stoffer, især et β-lactamantibiotikum eller en synergistisk kombination af β-lactamantibiotika. Til så-10 danne præparater egner sig ikke blot de β-lactamanti- biotika, som er kendte for at være meget følsomme overfor β-lactamaser, men også sådanne, som i væsentlig grad er resistente overfor β-lactamaser. Således omfatter egnede β-lactamantibiotika benzylpenicillin, phenoxymethylpeni-15 cillin, carbenicillin, methicillin, propicillin, ampi-cillin, amoxycillin, epicillin, ticarcillin, cyclacillin, cephaloridin, cephalothin, cefazolin, cephalexin, cefaclor, cephacetril, cephamandol, cephapirin, cephradin, cephalo-glycin og mecillinam, samt andre velkendte penicilliner, 20 cephalosporiner eller amidinopenicillansyrer eller pro-drugs derfor, såsom hetacillin, metampicillin, acetoxy-methyl-, pivaloyloxymethyl-, ethoxycarbonyloxyethyl og phthalidylestre af benzylpenicillin, ampicillin, amoxycillin eller cephaloglycin, eller phenyl-, tolyl-, og 25 indanyl-a-estrene af carbenicillin, ticarcillin, eller lignende, eller 6β-amidinopenicillansyre-pro-drugs, såsom pivmecillinam eller bacmecillinam, eller lignende 7β--amidinocephalosporansyrederivater.

Når forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen 30 kombineres med andre β-lactamantibiotika i farmaceutiske præparater, er forholdet mellem forbindelserne og andre β-lactamantibiotika fra 10:1 til 1:10, og helst mellem 3:1 og 1:3, beregnet som de frie syrer, idet dette område dog ikke skal opfattes som begrænsende for opfindelsen.

35 De foreliggende forbindelser skal anvendes i præpa rater i sådanne doser, at de ønskede resultater opnås uden samtidige bivirkninger.

Sådanne præparater indgives bekvemt i dosisenheder

DK 158669B

12 indeholdende en samlet mængde på fra 0,025 g til 2,5 g, og fortrinsvis fra 0,1 g til 1,0 g, af de antibakterielle stoffer, beregnet som de frie syrer. Udtrykket "antibakterielle stoffer" betyder her og i det følgende én eller 5 flere forbindelser fremstillet ifølge opfindelsen, alene eller sammen med ét eller flere kendte β-lactamantibiotika, salte eller pro-drugs deraf. Anvendt i den veterinære praksis kan dosisenheden være op til 25 g af de antibakterielle stoffer.

10 Ved betegnelsen "dosisenhed" forstås en enhedsdosis, dvs. en enkelt dosis, som let kan håndteres og pakkes, idet den forbliver fysisk stabil, og som indeholder de aktive stoffer som sådanne eller en blanding deraf med en farmaceutisk bærer.

15 På lignende måde kan de foreliggende præparater ind gives ved infusion i enheder indeholdende op til 10 g af de antibakterielle stoffer i vandig opløsning.

Til parenteral brug, fx injektioner, indgives de foreliggende præparater fx i vandig opløsning eller sus-20 pension som dosisenhed indeholdende fra 0,1 g til 1 g af de antibakterielle stoffer, beregnet som de frie syrer, idet præparaterne enten er klar til brug eller kan opløses eller suspenderes umiddelbart før brug i en farmaceutisk acceptabel bærer.

25 I form af en dosisenhed kan forbindelserne indgives én eller flere gange om dagen med passende intervaller, altid afhængig af patientens tilstand.

Således vil en daglig dosis være en mængde på fra 0,1 g til 30 g (svarende til 1-425 mg/kg legemsvægt/dag), for-30 trinsvis fra 0,2 til 6 g af de antibakterielle stoffer, beregnet som de frie syrer.

De foreliggende præparater kan anvendes i behandlingen af infektioner i bl.a. luftvejene, urinvejene og vævet hos mennesker og kan også anvendes til behandling af 35 infektioner hos dyr, såsom mastitis hos kvæg.

I kombinationspræparater indeholdende andre β-lactamantibiotika vil de sidstnævnte normalt anvendes i omtrent de samme mængder, som almindeligvis anvendes, når sådanne 13

DK 158669 B

β-lactamantibiotika benyttes alene, men under visse omstændigheder vil det være passende at nedsætte mængden heraf.

Særligt foretrukne blandingspræparater vil indeholde fra 50 til 1000 mg β-lactamantibiotikum, et salt eller et 5 pro-drug deraf, i en mængde indenfor den førnævnte grænse, og passende fra 200 til 500 mg af β-lactamantibiotiket, et salt eller en pro-drug deraf, og fra 25-250 mg af ββ-halo-penicillansyren, et salt eller en pro-drug deraf.

De foreliggende forbindelser kan indgives i form af 10 deres farmaceutisk acceptable, ugiftige estre. Udtrykket "ugiftig" for sådanne estre betyder, at de er terapeutisk acceptable i den form, de er tænkt indgivet. I almindelighed anvendes estrene af de foreliggende forbindelser til oral indgift, men deres brug af parenteral indgift er også 15 inden for opfindelsens omfang.

De foreliggende forbindelser indgives enten alene eller sammen med præparater, som indeholder andre β-lactamantibiotika. I sidstnævnte tilfælde kan de to typer præparater indgives samtidig eller med mellemrum og med vari-20 erende forhold mellem ββ-halopenicillansyren og β-lactamantibiotiket .

Det skal udtrykkeligt bemærkes, at de ovenstående dosisforhold angiver den totale mængde antibakterielt stof, dvs. en eller flere forbindelser fremstillet ifølge opfin-25 delsen indgivet alene, kombineret med eller givet med mellemrum med andre β-lactamantibiotika som ovenfor angivet.

Opfindelsen skal yderligere beskrives i de følgende eksempler.

30 35 14

DK 158669B

Eksempel 1

Natrium—66-brompenicillanat A. Tetrabutylammonium-6,6-dibrompenicillanat

Til en opløsning af jh g tetrabutylammoniumhydrogen-5 sulfat (0,1 mol) i 50 ml vand sattes 100 ml methylenchlorid, efterfulgt af 50 ml 2 N natriumhydroxyd. Til den omrørte blanding sattes 36 g 6,6-dibrotnpenicillansyre (θ,1 mol), og pH indstilledes på 7*0 med 2 N natriumhydroxyd. Det organiske lag fraskiltes, og den vandige fase re-ekstraheredes med 10 50 ml methylenchlorid. Efter indtørring af de kombinerede organiske faser tilsattes 500 ml ethylacetat, og opløsningen inddampedes til ca. 300 ml i vakuum.

B. Natrium-63-brompenicillanat 15 Til den ovenfor omtalte opløsning af tetrabutylammo- nium-6,6-dibrompenicillanat sattes 24,9 g tetrabutylammo-niumboranat (0,1 mol) på én gang under omrøring. Efter ca.

30 minutters forløb var temperaturen i blandingen steget til 45-50 C, hvorefter den faldt langsomt. Efter henstand 20 il time fortyndedes opløsningen med 300 ml ether, 300 ml vand tilsattes, og pH indstilledes på 3 med saltsyre. Den organiske fase fraskiltes og vaskedes med vand. 50 ml vand tilsattes den organiske fase, og pH indstilledes på 6,8 med vandig kaliumbikarbonat. Det vandige lag fraskiltes, og van-25 det fjernedes azeotropisk med n-butanol i vakuum, hvo-rved man fik en krystallinsk blanding af kaliumsaltene af 6β--brom-, 6a-brom- og 6,6-dibrompenicillansyre i et forhold på ca. 65:25:-10.

Fra en vandig opløsning af ovennævnte salte frigjordes 30 de frie syrer ved pH på 3 (fortyndet saltsyre) under et lag af ether, og den resulterende blanding adskiltes ved kolonnekromatografi på samme måde som beskrevet i eksempel 1, hvorved man, efter saltdannelse med 0,5 M natriumbikarbonat og fjernelse af vand ved azeotropisk destillation med n-bu- 35 tanol, fik krystallinsk natrium-6p-brompenicillanat} [a]^ +266° (c=0,5, 1 M fosfatbuffer pH 7). Udbytte 34%.

20

; DK 158669B

15

Beregnet for CgH^BrNNaO^S: C, 31,80; H, 3,00; Br, 26,45; N, 4,64; S, 10,6l#. Fundet: C, 31,85, H, 3,04; Br, 26,53; N, 4,56; S, 10,72#.

5 Eksempel 2 6g-Brompenicillansyre

Til en omrørt suspension af 11,91 g kalium-6,6-dibrom-penicillanat (30 mmol) i 30 ml dimethylformamid sattes 1,14 g natriumborhydrid (30 mmol). I løbet af ca. 30 minutter 10 steg temperaturen i reaktionsblandingen til ca. 50°C, hvorefter den langsomt faldt til stuetemperatur. Efter omrøring ved stuetemperatur i 20 timer, tilsattes 100 ml vand og 100 ml ether, og blandingens pH indstilledes på 3 med fortyndet saltsyre. Det organiske lag fraskiltes, det vandige lag eks-15 traheredes med 25 ml ether, og de kombinerede organiske ekstrakter vaskedes med 25 ml vand. Til den organiske fase sattes 25 ml vand, og pH i den vandige fase indstilledes på 7 ved tilsætning af 1 M kaliumbikarbonat under omrøring.

Det vandige lag fraskiltes, og vandet fjernedes azeotropisk 20 ved destillation med n-butanol i vakuum, hvorved man fik en krystallinsk blanding af kaliumsaltene af 6β- og 6a-brom-penicillansyren i et forhold på ca. 55:^-5, som vist ved NMR-spektroskopi.

De ovennævnte kaliumsalte opløstes i vand (5 ml/g 25 salt), og den vandige fases pH indstilledes på 3 med 4 N

saltsyre under et lag af ethylacetat (5 ml/g salt). Den organiske fase fraskiltes, vaskedes med vand, tørredes og fortyndedes med samme mængde hexan. Podning af den resulterende opløsning, efterfulgt af inddampning til ca. det 30 halve rumfang under reduceret tryk, gav krystallinsk 6β- -brompenicillansyre, som frafiltreredes, vaskedes med ethyl-acetat-hexan (l:l) og tørredes. Omkrystallisation fra ether--diisopropylether gav en analytisk prøve med [a]^ +268° (c=0,5, CHCl^). Udbytte 20%.

35 Beregnet for CgH^BrNO^S: C, 3^,30; H, 3,60; Br, 28,53; N, 5,00; S, 11,45#. Fundet: C, 34,47; H, 3,81; Br, 28,66; N, 4,99; s, 11,43%.

DK 158669B

16

Eksempel 3 6p-Brompenicillansyre A. Dicyclohexvlammonium-6B-bronrpenicillanat

Til en opløsning af 10,8 g 6,6-dibrompenicillansyre 5 (30 ramol) i 75 ml dimethylsulfoxid sattes 2,1 g natrium- cyanoborhydrid (90^1s renhed), og blandingen omrørtes, indtil man fik en klar opløsning (efter ca. 30 min.). Efter henstand i 72 timer fortyndedes blandingen med 75 ml vand, hvorved der bundfældedes ikke omsat udgangsmateriale som 10 dimethylsulfoxidsolvat (CgH^Br^NO^S, C2HgOS). Krystallerne frafiltrerdes, vaskedes med vand og tørredes. Filtratet eks-traheredes med 4 x 25 ml methylenchlorid, og de kombinerede ekstrakter vaskedes med 50 ml vand, tørredes (Na2S0^), og inddampedes under formindsket tryk til ca. halvdelen af 15 rumfanget. Efter tilsætning af 2,5 ml dicyclohexylamin og 50 ml acetone inddampedes blandingen yderligere til ca.

25 ml. Krystallisation fremkaldtes ved skrabning, og efter henstand i 1 time ved stuetemperatur frafiltreredes det rene dicyclohexylammonium-6p~brompenicillanat, der vaskedes med 20 acetone og tørredes. Udbytte 31%. Forbindelsen udviste ikke noget veldefineret smeltepunkt, og efter at være blevet mørkt ved ca. 170°C sønderdeledes det ved 280-290°C.

B. 63-Brompenicillansyre 25 En omrørt suspension af dicyclohexylammonium-6p-brom- penicillanat i ethylacetat-vand (1 s 1) (.20 ml/g salt) ind stilledes på pH 3 med 4 N saltsyre. Bundfældet dicyclohexyl-ammoniumchlorid frafiltreredes, og det organiske lag fraskiltes, vaskedes to gange med vand og tørredes. Tilsætning 30 af samme mængde hexan, efterfulgt af inddampning af opløsningen under formindsket tryk, gav ren krystallinsk 6p-brom-penicillansyre, som var identisk med den i eksempel 12 og 16 beskrevne. Udbytte 81%.

35 Eksempel 4 3STatrium-63-.iodpenicillanat A, 6,6-Di,iodpenicillansyre . morfolinsalt

Til en omrørt opløsning af 110 g 6-aminopenicillansyre 17

DK 158669 B

(~>0,5 mol) i en blanding af 400 ml 5 N svovlsyre og 1,5 liter methylenchlorid sattes dråbevis og samtidigt med 0°C 340 'ml 2,5 M vandig natriumnitrit og 1 liter 0,5 M methano-lisk jod. Efter at tilsætningen var tilendebragt, fjernedes 5 kølebadet, og omrøringen af blandingen fortsattes i en time.

Det organiske lag fraskiltes, og den vandige fase ekstrahe-redes med 200 ml methylenchlorid. De kombinerede organiske ekstrakter vaskedes med 600 ml 1 M vandig natriumthiosulfat og tørredes (Na^SO^). Efter tilsætning af 32,6 ml morfolin 10 (O,375 mol) inddampedes den resulterende opløsning under formindsket tryk til ca. 200-250 ml, og man fik efter afkøling titelforbindelsen som farveløse krystaller, der opsamledes, vaskedes med acetone og tørredes. Udbytte: l62,6 g, smeltepunkt: 152-154°C (under sønderdeling).

15 Beregnet for ^2^18^2^2^4^: ^ ’ 26,68; H, 3,36; I, 46,99; N, 5,19; S, 5,94% Fundet: C, 27,01; H, 3,44; I, 46,70; N, 5,18; S, 5,64% B· Natrium-6Q-jodpenicillanat 20 Til en omrørt opløsning af g 6,6-dijodpenicillan- syre, morfolinsalt (θ,1 mol) i 500 ml methylenchlorid, beskyttet mod lys, sattes 36 g cetyltrimethylammoniumboranat (0,12 mol). Efter omrøring i 15 minutter ved stuetemperatur inddampedes blandingen i vakuum. Remanensen behandledes med 25 250 ml acetone, uopløseligt salt fjernedes ved filtrering, og filtratet inddampedes til tørhed. Den tilbageblevne olie opløstes i 200 ml ethylacetat, 200 ml vand tilsattes, og pH i den vandige fase indstilledes på 7 ved tilsætning af 2 N natriumhydroxyd under omrøring. Den vandige fase fraskiltes, 30 den organiske fase vaskedes med 50 ml vand, og de kombinerede vandige fasers pH indstilledes på 3 med fortyndet saltsyre under et lag af 200 ml ether. Den organiske fase fraskiltes, den vandige fase genekstraheredes med ether, og de kombinerede ether-ekstrakter tørredes og inddampedes under 35 formindsket tryk til ca. 80-100 ml. Koncentratet indeholdt en blanding af 6β- og 60c — jodpenicillansyrer samt mindre mængder penicillansyre i et forhold på ca, 50:40:10 og ad- 18

DK 158669B

. skiltes ved tør kolonnekromatografi under anvendelse af samme fremgangsmåde som beskrevet i eksempel 1. Den således fremstillede rene δβ-jodsyre gav, efter saltdannelse med 0. 5 M vandig natriumbikarbonat og fjernelse af vand ved aze-5 otropisk destillation med n-butanol, krystallinsk natrium- -6β-jodpenicillanat; [α]^ +274° (c=0,5, 1 M fosfatbuffer pH 7)0 Udbytte 28%.

Beregnet for CgH^IWNaO^Si C, 27,52; H, 2,60; I, 36,35; N, 4,01; S, 9,18%. Fundet: C, 27,31; H, 2,64; I, 36,12; 10 3,92; S, 9,34%.

Eksempel 5 6β-Jodpenicillansyre A. 6.6-Di.jodpenicillansyre, dimethylsulfoxydsolvat 15 Til en afkølet opløsning af 10,8 g 6,6-dijodpenicil lansyre, morfolinsalt (20 mmol) i 20 ml dimethylsulfoxyd sattes 1 N saltsyre, og der fremkaldtes krystallisation ved skrabning. Efter tilsætning af yderligere 20 ml vand fra-filtreredes krystallerne, der vaskedes med vand og tørredes, 20 hvorefter man fik et næsten kvantitativt udbytte af titelforbindelsen, som havde et ikke veldefineret smeltepunkt med langsom sønderdeling over 120-125°C.

Beregnet for CgH^I^NO^S, C^H^OS: C, 22,6l; H, 2,85; 1, 47,78; N, 2,64; S, 12,07%. Fundet: C, 22,96; H, 2,8l; 25 I, 47,64; N, 2,74; S, 12,14%.

B. Dicyclohexylammonium-6S-jodpenicillanat

Til en opløsning af 5,31 g 6,6-dijodpenicillansyre, dimethylsulfoxydsolvat (10 mmol) i 25 ml dimethylsulfoxyd 30 sattes 0,7 g natriumcyanoborhydrid (90%'s renhed), og blandingen omrørtes, indtil der dannedes en klar opløsning (efter ca. 30 minutter). Efter henstand i 4θ timer ved stuetemperatur tilsattes 50 ml vand, og blandingen afkøledes til 5°C, hvorved bundfældedes uforbrugt udgangsmateriale, der 35 opsamledes, vaskedes med vand og tørredes. Filtratet eks-traheredes med 3 x 25 ml methylenchlorid, og de kombinerede ekstrakter vaskedes med 2 x 10 ml vand, tørredes (Na^SO^) og inddampedes forsigtigt i vakuum. Den tilbageblevne olie op- 19

DK 158669 B

løstes i 25 ml acetone, der tilsattes en ækvivalent mængde dicyclohexylamin, og der fremkaldtes krystallisation ved skrabning. Efter henstand i 1 time frafiltreredes rent di-cyclohexylammonium-6p-jodpenicillanat, der vaskedes med ace-5 tone og tørredes. Forbindelsen havde ikke noget veldefineret smeltepunkt, og efter at være blevet mørk ved ca. 150°C sønderdeledes den ved en temperatur derover. * Udbytte 24%.

C. 63-Jodpenicillansyre 10 Ved at anvende dicyclohexylammonium-6p-jodpenicillanat i stedet for det tilsvarende 6p-brompenicillanat ifølge fremgangsmåden fra eksempel 17 B fik man 6β-jodpenicillan- * syre som farveløse krystaller. Omkrystallisation fra ether- r π 20 o -diisopropylether gav en analytisk prøve med LaJj) +278 15 (c=0,5, CHCl^). * Udbytte 80%.

Beregnet for CgH^INO^: C, 29,37; H, 3,08; I, 38,79; N, 4,28; S, 9,80%. Fundet: C, 29,46; H, 3,13; I, 38,96; N, 4,27; S, 9,81%.

20 Eksempel 6

Pivaloyloxymethyl-63-brompenicillanat A. Pivaloyloxymethyl-6,6-dibrompenicillanat

Til en opløsning af 5,96 g kalium-6,6-dibrompenicillanat (15 mmol) i 30 ml dimethylformamid sattes 2,22 ml chlor-25 methylpivalat (15 mmol), og blandingen omrystedes i l6 timer ved stuetemperatur. Efter fortynding med 120 ml ethylacetat vaskedes blandingen med 4 x 30 ml vand, tørredes, affarvedes ved omrøring med 0,5 S trækul (l time) og inddampedes til tørhed, hvorved man fik den ønskede forbindelse som en gul 30 olie, der krystalliserede fra ether-hexan; smeltepunkt 101--102°C.

B. Pivaloyloxymethyl-63-brompenicillanat

Til en opløsning af 5,68 g pivaloyloxymethyl-6,6-di-35 brompenicillanat (l2 mmol) i 25 ml dimethylsulfoxyd sattes O, 84 g natriumcyanoborhydrid (90% renhed), og blandingen omrørtes i 24 timer ved stuetemperatur i et mørkt rum. Efter tilsætning af 75 ml vand ekstraheredes blandingen med 3 x 25

DK 158669B

20 ml ether, og de kombinerede ether-ekstrakter vaskedes med 3 x 10 ml vand, tørredes og inddampedes under formindsket tryk til ca. 20 ml. Koncentratet underkastedes kolonnekromatografi på silicagel i lighed med fremgangsmåden beskrevet 5 i eksempel 9 C. Herved fraskiltes 6p~bromforbindelsen fra uforbrugt udgangsmateriale. Praktioner indeholdende den mere polære 6β-bromester kombineredes og inddampedes i vakuum.

Den tilbageblevne olie krystalliseredes fra ether-diisoprop-ylether, hvorved man fik pivaloyloxymethyl-6p-brompenicil-10 lanat med smeltepunkt; 66-68°C, som var identisk med forbindelsen beskrevet i eksempel 9 C, Udbytte 37%.

Eksempel 7 6p-Brompenicillansyre, pivampicillinsalt 15 Til en omrørt opløsning af 2,50 g pivampicillin hydro- chlorid (5 mmol) i 100 ml vand sattes dråbevis 50 ml 0,1 M vandig kalium-6p-brompenicillanat, Det således fremkomne farveløse bundfald frafiltreredes, vaskedes med 3 x 10 ml vand og tørredes i vakuum, hvorved man fik den rene titel-20 forbindelse som farveløse krystaller, der begyndte at sønderdeles ved 120-130°C uden smeltning. Udbytte 96%.

XR-spektret (KBr) udviste bånd ved 3030, 2970, 2935» 2870, 1790, 1770, 1680, l600 og 627 cm"1.

NMR-spektret (CDCl^) udviste signaler ved S = 1,20 25 (s, 9H; C(CH3)3), 1,36 (s, 3H; ^-2), 1,44 (s, 3H; CH -2), 1,52 (s, 3H; CH -2), 1,54 (s, 3H; CH -2), 4,26 (s,. IH; CH-3), 4,4O (s, IH; CH-3), 5,11 (s, IH; CHCO), 5,23, 5,36, 5,43 og->5,76 (4 doublets, J=3,8-4,2 Hz, 4H; CH-5 og CH-6), 5,79 (ABq, j=5,5 Hz, 2H; 0CH20), 7,40 (s, 5H; arom. CH) 30 og 7,82 (d, J=8,2 Hz, IH; CONH) ppm.

Tetramethylsilan anvendtes som intern reference.

Eksempel 8 6β-Jodpenicillansyre, bacampicillinsalt 35 En opløsning af 0,73 g kalium-6p-jodpenicillanat (2 mmol) i 20 ml vand sattes dråbevis til en omrørt opløsning af 1,0 g bacampicillin hydrochlorid (2 mmol) i 40 ml vand.

DK 158669B

21

Det resulterende krystallinske bundfald frafiltreredes, vaskedes med vand og tørredes, hvorved man fik den rene titelforbindelse, som sønderdeledes ved 110-120°C uden smeltning.. Udbytte 72%.

5 IR-spektret (KBr) udviste bånd ved 3030, 2980, 2870, 1780, 1765, 1695, 1625 og 6l8 cm"1.

NMR-spektret (CDC'l^) udviste signaler ved S = 1,31 (t, J=7 Hz, 3H; OCH2CH3), 1,38 (s, 3H; CH -2), 1,49 (s, 3H; CH3-2), 1,54 (s, 3H; CH3-2), 1,59 (s, 3H; CH -2), 4,25 (m, 10 4H; OCH2CH3ogCH-3), 4,99 (s, IH; CHCO), 5,12 (bs, NH3+), 5,21, 5,^5, 5,54 og 5,64 (4 doublets, J=3,8-4,2 Hz, 4H; CH-5 Og CH-6), 6,76 (ABq, J=5,5 Hz, IH; CHCH^, 7,39 (s, 5H; arom.CH) og 7,72 (d, J=8,5 Hz, IH; CONH) ppm.

Tetramethylsilan anvendtes som intern reference.

15

Eksempel 9-11

Andre salte af 6B-halopenxcxllansyrer med uorganiske baser Behandling af en etheropløsning af 6β-1ι^1ορβηχοχ11αη-syren med en ækvivalent mængde vandig base, efterfulgt af 20 fraskillelse af den vandige fase og frysetørring, gav de i Tabel IY anførte salte som farveløse pulvere.

Tabel IV v Η H ^ - x<a_j/s\z

Se næste side | Z

25 0=^ N (2) _ H 'C00u n

Eksempel X η Z

9a Cl 1 Na+ 9-b Cl 2 Ca++ 10 a Br 1 Li + 30 10b Br 2 Ca++

Ha I 1 Li +

Hb I 2 Ca+ + 22

DK 158669B

Eksempel 12-Ί 4

Andre salte af 6p-halopenicillansyrer med organiske baser Ved behandling af en opløsning af 6p-halopenicillan-syren i et egnet organisk opløsningsmiddel, fx acetone, 5 ethylacetat eller ether, med en ækvivalent mængde organisk base (fortrinsvis opløst i samme opløsningsmiddel), dannedes det ønskede salt som et krystallinsk bundfald, der fra-filtreredes og tørredes i vakuum. De ifølge denne fremgangsmåde fremstillede salte er anført i nedenstående tabel V.

10 -Tabel V

-V ^ z o=i_N_7l H 'COOH J n 15

Eksempel X η Z

12a Cl 1 dicyclohexylamin 12b Cl 2 Ν,Ν'-dibenzylethylendiamin 13a Br 1 morfolin 20 13b Br 2 N,N·-dibenzylethylendiamin 13c Br 1 N-ethylpiperidin 13d Br 1 procain 14a I 1 dibenzylamin 14b I 2 N,N*-dibenzylethylendiamin 25 14c I 1 N-methylbenzylamin 14d I 1 procain

DK 158669B

23

Eksempel 15-16

Salte af 63-h.alopenicillansyrer med β-lactamantibiotika og pro-drugs deraf, indeholdende en basisk gruppe

De i nedenstående tabel VI anførte salte fremstilledes 5 ifølge fremgangsmåder, som ligner de i de foregående eksempler 7 og 8(a), 9-11 (b) eller 12-14 (c) beskrevne.

Tabel VI Η H „ 10 LI [hz] ir\00 ® m „ Frem- IR-data (om-1)

Eks. X Z gangs måde 15a Br Bacampicillin A 3010, 2980, 294Ό, 1785» 1765» I69O, 1620, 628 15b Br Pivmecillinam C 2970, 2932, 2865, 1775» I69O, 1630, l600, 625 15c Br Bacmecillinam C 2970, 2935» 2860, 1770, 1685, I63O, l600, 628 15 15d Br Penethamat C 34-55» 3020, 294-0, 2860, 2660, 1800, 1780, 1745, 1675, 625

15e Br Ampicillin B

15f Br Amoxycillin B

16a I Pivampicillin A 3θ4θ, 2975, 2935» 2870, 1782, 1770, 1685, I6OO, 618 20 16b I Pivmecillinam C 2970, 2935, 2865, 1780, 1770, 1685, 1630, l600, 6l6 16c I Bacmecillinam C 2970, 2930, 2860, 1775» I76O, 1685, I63O, l600, 616 16d I Penethamat C 3460, 3018, 2940, 2855, 2665» 1795, 1775, 174-5, 1670, 615

16 e I Ampicillin B

16 f I Amoxycillin B

_L_J_____ 24

DK 158669B

Eksempel 17

Pivaloyloxymethyl-63-brompenicillanat

Til en opløsning af 0,64 g kalium-6p-brompenicillanat (2 mmol) i 15 ml dimethylformamid sattes 0,27 ml chlormeth-5 ylpivalat (2,5 mmol), og blandingen omrørtes i l6 timer ved stuetemperatur. Efter fortynding med 45 ml ethylacetat vaskedes blandingen med 4 x 10 ml vand, tørredes (MgSO^) og inddampedes i vakuum. Den tilbageblevne olie krystalliserede fra diisopropylether, hvorved man fik titelforbindel-10 sen, smeltepunkt: 67-68°C. Udbytte 71%.

NMR-spektret (CDCl^) udviste signaler ved 6 = 1,23 (s, 9H; c(CH3)3), 1,51 (s, 3H; CH3-2a), 1,68 (s, 3H; 0Η3-2β), 4,54 (s, IH; CH-3), 5,32 og 5,57 (2d, J=4 Hz, 2H; CH-5 og CH-6) og 5,82 (ABq, J=5,5 Hz, 2H; OCHgO) ppm.

15 Tetramethylsilan anvendtes som intern reference.

Eksempel 18

Pivalovloxvmethyl-6B-chlorpenicillanat

Ved at erstatte kalium-6p-brompenicillanat i frem-20 gangsmåden ifølge eksempel 7 med kalium-6p-chlorpenicilla-nat fik man pivaloyloxymethyl-6p-chlorpenicillanat som farveløse krystaller, smeltepunkt:68-69°C. Udbytte 74%.

NMR-spektret (CDC13) udviste signaler ved 6 = 1,22 (s, 9H; C(CH3)3), 1,51 (s, 3H; CH^a), 1,66 (s, 3H; CH3-2p), 25 4,53 (s, IH; CH-3), 5,22 og 5,60 (2d, J=4 Hz, 2H; CH-5 og CH-6) og 5,82 (ABq, J=5,5 Hz, 2H; 0CH20) ppm.

Tetramethylsilan anvendtes som intern reference.

Eksempel 19 30 Acetoxymethyl-6B-brompenicillanat 0,11 ml Chlormethylacetat (l,2 mmol) sattes til en opløsning af 0,32 g kalium-6p-brompenicillanat (l mmol) i 5 ml dimethylformamid, og blandingen omrørtes i l6 timer ved stuetemperatur i et mørkt riam. Efter fortynding med 20 35 ml ether vaskedes blandingen med 4 x 5 ml vand, tørredes (MgSO^) og inddampedes i vakuum, hvorved man fik titelforbindelsen som en gullig olie. Udbytte 73%.

DK 158669 B

25 NMR-spektret (CDCl^) udviste signaler ved S = 1,49 (s, 3H} CH3-2a), 1,68 (s, 3H; CH -2p), 2,11 (s, 3H; COCH )f 4,54 (s, IH; CH-3), 5,33 Og 5,59 (2d, J=4 Hz, 2H; CH-5cc Og CH-6ct) og 5,82 ABq, J=5,5 Hz, 2H; 0CH20) ppm.

5 Tetramethylsilan anvendtes som intern reference.

Eksempel 20

Acetoxymethyl-6g-.jodpenicillanat

Ved at følge fremgangsmåden ifølge eksempel 10, idet 10 man erstattede kalium-6p-brompenicillanat med kalium-6p-jod-penicillanat, fik man titélforbindelsen som en gullig olie. Udbytte 75%.

NMR-spektret (CDC13) udviste signaler ved 6 = 1,50 (s, 3H; CH3-2a), 1,70 (s, 3H; CH3-2p), 2,12 (s, 3H; C0CH3), .

15 4,55 (s, IH; CH-3), 5,39 Og 5,63 (2d, j=3,5 Hz, 2H; CH-5<x og CH-6a) og 5,83 (ABq, J=5,5 Hz, 2H; 0CH20) ppm.

Tetramethylsilan anvendtes som intern reference.

Eksempel 21-23 20 63-Halopenicillansyrer

Krystallinske 6p-halopenicillansyrer som anført i nedenstående Tabel III fremstilles som følgers a) Ved at inddampe under formindsket tryk de ethylacetat-opløsninger, som indeholder de rene 6p-haloforbindelser, som 25 man fik efter adskillelse fra de tilsvarende 6a-epimerer ved tør kolonnekromatografi på silicagel (som beskrevet i eksempel l) .

b) Ved at frigøre de tilsvarende kaliumsalte fra vandige opløsninger under et lag af ether eller ethylacetat ved pH

30 3, efterfulgt af fraskillelse af den organiske fase, tørring og krystallisation fra ether-diisopropylether eller ethylacetat -hexan.

DK 158669B

26

Tabel III

H H

x^4-4/iV

6 3 x 2 ' 7 4 Ί — N-Λ

° if^'COOH

Eksempel X Md° ^NMR-data (ί/ppm, CVjCX) (c=0,5, CHC13) CH-5 og ch-6 21 Br +272° 5,48 og 5,54, 2d, J=4,0 Hz 5 22 Cl +264° 5,38 og 5,58, 2d, J=4,0 Hz 23 I +276° 5,35 og 5,74, 2d, J=4,0 Hz

Ovennævnte syrer sønderdeles ved ca. 80-100°C, hvorfor der ikke kan bestemmes et eksakt smeltepunkt.

10 Eksempel 24 Tablet

Bestanddel Pr. tablet 6β-Jodpenicillansyre, natriumsalt 250 mg

Mikrokrystallinsk cellulose 110 mg 15 Hydroxypropylcellulose 5 mg

Alginsyre 10 mg

Talkum 23 mg

Magnesiumstearat 2 mg 400 mg 20 Den aktive bestanddel blandes med mikrokrystallinsk cellulose, granuleres med en 10^ opløsning af hydroxypropyl-cellulose i isopropanol, tørres ved 40°C og sigtes gennem 1 mm sigte. Alginsyre, talkum og magnesiumstearat tilsættes, og blandingen slås til tabletter a 400 mg. Tabletterne 25 film-coates med hydroxypropylmethylcellulose.

Bestanddel Pr. tablet

DK 158669 B

Eksempel 25

Tablet 27 ép-Brompenicillansyre, natriumsalt 250 mg 5 Mikrokrystallinsk cellulose 110 mg

Hydroxypropylcellulose 5 mg

Alginsyre 10 mg

Talkum 23 mg

Magnesiumstearat 2 mg ^ k00 mg

Ved at følge samme metode som anvendt i eksempel 24 fik man tabletter indeholdende 6p-brompenicillansyre, natriumsalt,

Eksempel 26 15 Parenteralt middel

Bestanddel Pr. hætteglas 6β-Jodpenicillansyre, natriumsalt 125 mg

Den sterile krystallinske bestanddel fyldes i sterile hætteglas, som lukkes aseptisk. Før parenteral indgivelse 20 sættes 2 ml af en steril, fysiologisk saltopløsning til hætteglassets indhold.

Eksempel 27 Parenteralt middel 25 Bestanddel Pr. hætteglas 6p-Brompenicillansyre, natriumsalt 125 mg

Ovenstående middel fås ved at følge samme metode, som beskrevet i eksempel 26.

DK 158669B

28

Bestanddel Pr. kapsel

Eksempel 28 Kapsel 6β-Jodpenicillansyre, kaliumsalt 125 mg 5 Hydroxypropylcellulose 3 mg

Talkum 6 mg

Magnesiumstearat 1 mg 135 mg

Den aktive bestanddel granuleres med en opløsning af 10 hydroxypropylcellulose i isopropanol, tørres ved 40°C og sigtes gennem 1 mm sigte. Talkum og magnesiumstearat tilsættes, bestanddelene blandes grundigt til en ensartet blanding, og 135 mg af blandingen fyldes i en hård gelatinekapsel nr.

3.

15 Eksempel 29 Kapsel

Bestanddel Pr. kapsel 6B-Brompenicillansyre, pivampicillin- salt 25Ο mg

Hydroxypropylcellulose 5 mg 20 Talkum 23 mg

Magnesiumstearat 2 mg 280 mg

Den aktive bestanddel granuleres med en opløsning af hydroxypropylcellulose i isopropanol, tørres ved 40°C og 25 sigtes gennem 1 mm sigte. Fortyndingsmidlerne tilsættes, og det hele blandes forsigtigt, hvorefter 280 mg af blandingen fyldes i gelatine kapsler nr. 2.

Eksempel 30

Tablet 29

DK 158669B

Bestanddel Pr· tablet 6β-Jodpenicillansyre, natriumsalt 125 mg 5 Ampicillin 250 mg

Majsstivelse 75 mg

Hydroxypropylcellulose 10 mg

Alginsyre 10 mg

Talkum 2o mg 10 Magnesiumstearat 5 mg 495 mg I ovenstående præparat blandes de aktive bestanddele med majsstivelse, granuleres med en 10°Jo opløsning af hydroxypropylcellulose i isopropanol, tørres ved 4o°C og sig-15 tes gennem 1 mm sigtevæv. Alginsyre, talkum og magnesium-* stearat tilsættes, og blandingen slås til tabletter a 495 mg. Tabletterne film-coates med hydroxypropylmethylcellu-lose.

Eksempel 31 20 Tablet

Bestanddel Pr. tablet 6p-Brompenicillansyre, kaliumsalt 125 mg

Ampicillin 250 mg

Majsstivelse 75 mg 25 Hydroxypropylcellulose 10 mg

Alginsyre 10 mg

Talkum 20 mg

Magnesiumstearat 5 mg 495 mg 30 Ved at anvende fremgangsmåden ifølge eksempel 30 fik man tabletter indeholdende 6p~brompenicillansyre, kaliumsalt og ampicillin.

Bestanddel Pr. tablet

Eksempel 32

Tablet 30

DK 158669B

6β-Jodpenicillansyre, kaliumsalt 200 mg 5 Pivampicillin, fri base 250 mg

Majsstivelse 100 mg

Hydroxypropylcellulose 5 mg

Methylcellulose 5 mg

Alginsyre 15 mg 10 Talkum 20 mg

Magnesiumstearat 5 mg 600 mg 6β-Jodpenicillansyre, kaliumsalt og halvdelen af majsstivelsen blandes, granuleres med en 10^ opløsning af hy-15 droxypropylcellulose i isopropanol, tørres ved 40°C og sigtes gennem 1 mm sigtevæv. Resten af majsstivelsen blandes med pivampicillin, granuleres med en pasta bestående af methylcellulose og vand, tørres ved 50°C og sigtes gennem 0,7 mm sigtevæv. Granulatet blandes med alginsyre, talkum 20 og magnesiumstearat, og blandingen slås til tabletter å 600 mg. Endelig overtrækkes tabletterne med en film af hydroxy-propylmethylcellulose.

Eksempel 33 25 Tablet

Bestanddel Pr. tablet 6p-Brompenicillansyre, Narsalt 150 mg

Pivampicillin, fri base 250 mg

Majsstivelse 100 mg 30 Hydroxypropylcellulose 5 mg

Methylcellulose 5 mg

Alginsyre 15 mg

Talkum 20 mg

Magnesiumstearat 5 mg 550 mg 35

DK 158669B

31

Tabletterne indeholdende 6p=brompenicillansyre, Nasalt og pivampicillin, fri base fremstilles på samme måde som beskrevet i eksempel 32.

5 Eksempel 34 Tablet

Bestanddel Pr. tablet 6p-Jodpenicillansyre, natriumsalt 125 mg

Amoxycillin 250 mg 10 Majsstivelse 80 mg

Hydroxypropylcellulose 10 mg

Alginsyre 10 mg

Talkum 20 mg

Magnesiumstearat 5 mg 500 mg

De aktive bestanddele blandes med majsstivelsen, granuleres med en 10°/o opløsning af hydroxypropylcellulose i isopropanol, tørres ved 40°C og sigtes gennem 1 mm sigtevæv. Efter tilsætning af alginsyre, talkum og magnesiumstearat, 20 slås blandingen til tabletter a 500 mg. Tabletterne overtrækkes med en film af hydroxypropylmethylcellulose,

Eksempel 35 Tablet 25 Bestanddel Pr. tablet 6p-Brompenicillansyre, kaliumsalt 125 mg

Amoxycillin 250 mg

Majsstivelse 80 mg

Hydroxypropylcellulose 10 mg 30 Alginsyre 10 mg

Talkum 20 mg

Magnesiumstearat 5 mg 500 mg

Ved at anvende fremgangsmåden ifølge eksempel 34 fik

DK 158669 B

32 man tabletter indeholdende 6p-brompenicillansyre, kaliumsalt og amoxycillin.

Eksempel 36 5 Tablet

Bestanddel Pr. tablet 6p-Jodpenicillansyre, pivampicillin- salt 500 mg

Hydroxypropylcellulose 10 mg

Mikrokrystallinsk cellulose 200 mg 10 Magnesiumstearat 10 mg 710 mg

Den aktive bestanddel granuleres med en 15°/o opløsning af hydroxypropylcellulose og isopropanol, tørres ved 40°C og sigtes gennem 1 mm sigtevæv. Mikrokrystallinsk cellulose 15 og magnesiumstearat tilsættes, og blandingen slås til tabletter a 710 mg.

Eksempel 37 Tablet 20 Bestanddel Pr. tablet 6p-Brompenicillansyre, pivmecillinam- salt 350 mg

Bydroxypropylcellulose 10 mg

Mikrokrystallinsk cellulose 130 mg

Magnesiumstearat 10 mg 25 500 mg

Tabletterne indeholdende pivmecillinamsaltet af 6β--brompenicillansyre fremstilledes på samme måde som beskrevet i eksempel 36.

Eksempel 38

Tablet

Bestanddel Pr. tablet

DK 158669 B

33 6β-Jodpenicillansyre, kalium-salt 125 mg 5 Cephalexin 250 mg

Majsstivelse 80 mg

Hydroxypropylcellulose 10 mg

Alginsyre 10 mg

Talkum 20 mg 10 Magnesiumstearat 5 mg 500 mg

Tabletterne indeholdende 6β-jodpenicillansyre, kaliumsalt og Cephalexin fremstilles på samme måde som beskrevet i eksempel 34.

15

Eksempel 39 Tablet

Bestanddel Pr. tablet 6p-Brompenicillansyre, natriumsalt 125 mg 20 Cefaclor 250 mg

Majsstivelse 80 mg

Hydroxypropylcellulose 10 mg

Alginsyre 10 mg

Talkum 20 mg 25 Magnesiumstearat 5 mg 500 mg

Ved at følge fremgangsmåden beskrevet i eksempel 34 fik man tabletter indeholdende 6β-brompenicillansyre, natriumsalt og Cefaclor.

DK 158669B

34

Eksempel 40

6g-Jodpenicillansyre, Na-salt/Pivmecillinam HC1 Tolagstabletier Granulat I

5 Bestanddel Pr. tablet 6β-Jodpenicillansyre, Na-salt 100 mg

Hydroxypropylcellulose 2 mg

Dicalciumfosfatdihydrat 86 mg

Natriumstivelseglykolat 10 mg 10 Magnesiumstearat 2 mg 6β~Jodpenicillansyre, natriumsalt granuleres med en opløsning af Ixydroxypropylcellulose i isopropanol, tørres ved 40°C, og sigtes gennem 0,75 mm sigtevæv. Granulatet blandes med dicalciumfosfatdibydrat, natriumstivelseglyko-15 lat og magnesiumstearat.

Granulat II

Bestanddel Pr. tablet

Pivmecillinam hydrochlorid 100 mg 20 Hydroxypropylcellulose 2 mg

Mikrokrystallinsk cellulose 50 mg

Magnesiumstearat 1,5 mg

Talkum 3,5 mg

Pivmecillinam hydrochlorid granuleres med en opløsning 25 af hydroxypropylcellulose, tørres ved ^0°C og sigtes gennem 0,75 mm sigtevæv. Granulatet blandes med mikrokrystallinsk cellulose, magnesiumstearat og talkum.

Derpå fremstilles tolagstabletter indeholdende 200 mg af granulat I som bundlag og 157 mg af granulat II som top-30 lag.

Tabletterne overtrækkes med en film af hydroxypropyl-methylcellulose opløst i ethanol-vand (lsl).

DK 158669B

35

Eksempel 41

6(3-Brompenicillansyre« Na-salt/Pivampicillinbase Tolagstabletter Granulat I

5 Bestanddel Pr. tablet 6p-Brompenicillansyre, Na-salt 100 mg

Polyvinylpyrrolidon 5 mg

Dicalciumfosfatdihydrat 85 mg

Natriumstivelseglykolat 8 mg 10 Magneslumstearat 2 mg 6p-Brompenicillansyre, Na-salt granuleres med en opløsning af polyvinylpyrrolidon i isopropanol, tørres ved 40°C, sigtes gennem 0,75 mm sigtevæv og blandes med dicalciumf osf atdihydratstivelse og magnesiumstearat.

15

Granulat II

Bestanddel Pr, tablet

Pivampicillin, base 125 mg

Stivelse 30 mg 20 Hydroxypropylcellulose 3,5 mg

Magnesiumstearat 1,5 mg

Pivampicillin-basen og 10 mg stivelse blandes og granuleres med en opløsning af hydroxypropylcellulose i afioniseret vand, tørres ved 50°C og sigtes gennem 0,75 mm sigte-25 væv. Granulatet blandes med resten af stivelsen og niagne-siumstearatet.

Der fremstilles tolagstabletter indeholdende 200 mg af granulat I som bundlag og l60 mg af granulat XI som toplag. Tabletterne overtrækkes med film af hydroxypropyl.-* 30 methylcellulose opløst i lige dele afioniseret vand-ethanol.

DK 158669B

36

Eksempel 42

6B-Brompenicillansyre. Na-salt/Amoxycillin Tolagstabletier Granulat X

5 Bestanddel Pr. tablet ép-Brompenicillansyre, Na-salt 100 mg

Polyvinylpyrrolidon 7 mg

Lactose 50 mg

Siliciumdioxyd 1,5 mg 10 Magneslumstearat 1,5 mg 6p-Brompenicillansyre, Na-salt granuleres med en opløsning af polyvinylpyrrolidon i isopropanol, tørres ved 40°C og sigtes gennem 0,75 mm sigtevæv. Granulatet blandes med lactose, siliciumdioxyd og magneslumstearat.

15

Granulat II

Bestanddel Pr. tablet

Amoxycillin 200 mg

Stivelse 30 mg 20 Polyvinylpyrrolidon 6 mg

Siliciumdioxyd 2 mg

Magnesiumstearat 2 mg

Amoxycillin blandes med stivelse, granuleres med en opløsning af polyvinylpyrrolidon i afioniseret vand, tørres 25 ved 50°C og sigtes gennem 0,75 mm sigtevæv. Granulatet blandes med siliciumdioxyd og magnesiumstearat.

Granulatet slås til tabletter indeholdende 240 mg af granulat II som bundlag og l60 mg af granulat I som toplag.

DK 158669 B

37

Eksempel 43 6β-Jodpenicillansyre , Na-salt /Pivmecillinam HCl/Pivampi-τ cillin

Trelagstabletter 5 Granulat I

Bestanddel Pr. tablet 6p-Jodpenicillansyre, Na-salt 100 mg

Hydroxypropylcellulose 2 mg

Mikrokrystallinsk cellulose 50 mg 10 Natriumstivelseglykolat 6 mg

Magnesiumstearat 2 mg 6β-Jodpenicillansyre, Na-salt granuleres med en opløsning af hydroxypropylcellulose i isopropanol, tørres ved hO°C og sigtes gennem 0,75 mm sigtevæv, hvorefter det iblan-15 des mikrokrystallinsk cellulose, natriumstivelseglykolat og magnesiumstearat.

Granulat II

Bestanddel Pr. tablet 20 Pivmecillinam, hydrochlorid 100 mg

Hydroxypropylcellulose 2 mg

Mikrokrystallinsk cellulose 50 mg

Magnesiumstearat 1,5 mg

Pivmecillinam, hydrochlorid granuleres med en opløs-25 ning af hydroxypropylcellulose i isopropanol, tørres ved 40°C og sigtes gennem 0,75 mm sigtevæv. Granulatet blandes med mikrokrystallinsk cellulose og magnesiumstearat.

Bestanddel pr, tablet 38

DK 158669B

Granulat III

Pivampicillin base 125 mg

Stivelse 24 mg 5 Hydroxypropylcellulose 3,5 mg

Natriumstivelseglykolat 7 mg

Magneslumstearat 1,5 mg

Pivampicillin base og 10 mg stivelse blandes og granuleres med en opløsning af hydroxypropylcellulose opløst i 10 afioniseret vand, og den granulerede masse tørres ved 50°C og sigtes gennem 0,75 π™ sigtevæv. Derefter tilsættes natriumstivelseglykolat, resten af stivelsen og magnesiumstearat.

Granulaterne slås til tabletter indeholdende l60 mg granulat X som bundlag, 153»5 mg af granulat IX som mellem-15 lag og l6l mg af granulat III som toplag. Tabletterne overtrækkes med en film af hydroxypropylmethylcellulose opløst i lige dele vand og ethanol.

20

Claims (3)

39 DK 158669 B

1. Fremgangsmåde til fremstilling af et i det væsentlige rent 6p-halogen-penicillansyrederivat med den almene formel

5 I Η H 6 5 2V I

0. COOH i hvilken X betyder chlor, brom eller jod, samt salte og 15 let hydrolyserbare estre deraf og salte af sådanne estre, kendetegnet ved, at en 6,6-dihalogen-penicillan-syre eller et salt eller en ester deraf reduceres med et alkalimetaleller et tetraalkylammoniumboranat eller med natriumcyanoborhydrid i et passende opløsningsmiddel, hvor-20 efter 6p-halogenpenicillansyren eller et salt eller ester deraf separeres fra den ved reduktionen fremkomne blanding.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at separationen gennemføres ved kromatografi eller ved 25 fraktioneret krystallisation.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet ved, at separationen gennemføres ved kromatografi under anvendelse af en blanding af organiske opløsningsmidler 30 indeholdende en lille mængde af en karboxylsyre som elueringsmiddel. 35