DK156900B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af cephalosporinderivater - Google Patents

Description

DK 156900 B

Den foreliggende opfindelse angar en analogïfremgangsmade til fremstilling af hidtil ukendte cephalosporînderivater med formlen „__C—L- NH-r-Y^ .

»2Â}\ 2 V

2 10 hvori R betegner en ligekædet eller forgrenet alkylgruppe îndeholdende fra 1 til 4 carbonatomer, allyl, 2-butenyl eller 3-bute-nyl, eller en gruppe 3 I 4

15 R -C-R

COOH

3 4 hvori R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hy- 3 4 drogen, methyl eller ethyl, eller R og R danner sammen med det 20 carbonatom, hvortil de er bundne, en cykloalkylidenring indehol-dende fra 3 til 5 carbonatomer, samt non-toxiske, farmaceutisk acceptable salte, fysiologisk hydrolyserbare estere og solvater deraf. De if0lge opfindelsen fremstillede forbïndelser med formlen (I) eksisterer som tautomere former, f.eks. 2-iminothiazolin-4-yl-formen 25 af 2-aminothiazol-4-yl-delen.

Som vist i strukturformlen har forbïndelserne med formel (I) syn- eller Z-konfïguration med hensyn til alkoxyimino- (eller alke-nyloxyimino-)gruppen eller den carboxysubstituerede alkoxyimino-gruppe. Fordi forbïndelserne er geometriske isomere, kan noget af antï-isomeren ogsa være til.stede. Den foreliggende opfindelse om-fatter forbïndelser med formel (I) îndeholdende mindst 90% af syn--isomeren. Fortrinsvis er forbïndelserne med formel (l) syn-isomere, som er ï det væsentlige uden de tilsvarende anti-isomere.

GB patentbeskrivelse nr. 1.399.086 ïndeholder en almen be-skrivelse omfattende et stort antal cephalosporiner med formlen 2

DK 156900 B

.B

R-C—CO-NH-i-^ N

Π Γ N 1 \a/-NV^ 05 ORa 1

COOII

hvori R er hydrogen eller en organîsk gruppe, Ra er en etheri-ficerende monovalent organîsk gruppe bundet til oxygenet gennern 10 et carbonatom, B er eller J^S-K), og P er en organîsk gruppe. 2-amïnothiazol-4-yl-gruppen er imîdlertid ikke identifîceret som en R-substituent, og der er ingen antydnïng af, at P kan være N-methylpyrroIïdiniummethyl (eller nogen anden fuldt mættet nitro-gen-holdig ring, som er bundet til 3-methyl-delen via dens nitrogen- 15 atom, og som ïndeholder en yderligere substituent pa nitrogenato-met). USA patentskrift nr. 3.971.778 og deraf ved deling frem-komne patenter nr. 4.024.133, 4.024.137, 4.064.346, 4.033.950, 4.079.178, 4.091.209, 4.092.477 og 4.093.803 har tilsvarende ind-hold.

20 USA patentskrift nr. 4.278.793 ïndeholder en almen beskrivelse omfattende et stort antal cephalosporîn-derivater med formlen o î4 25 V-jj-C'-U-Nil f-S ^ h II lu

\0R

2 COOR3 30 hvori variablerne R^, R^, R^, X og A inkluderer almene definîtioner af de tilsvarende substituenter pi de her omhandlede forbindelser med formel (I). I de 20 spalter med definîtioner pa de forskellige substituentgrupper, i den 78 sider lange tabel med strukturformler og de 225 eksempler, findes der imîdlertid ingen 35 omtale af, at A kan være N-methylpyrrolidïniummethyl (eller nogen anden fuldt mættet nitrogen-holdig heterocyklisk ring), som er 3

DK 156900 B

bundet til 3-methyldelen via dens nitrogenatom, og som indeholder en yderligere substituent pa dens nitrogenatom. GB patentbeskrivel-se nr. 1.604.971 svarer dertil og har et i det væsentlîge identisk • indhold. Bekendtgjort GB patentanspgning nr. 2.028.305 A inde-05 holder, selv om den tilsyneladende ikke er formelt beslægtet, den samme brede, almene beskrîveise, men eksemplificerer kun A som hydrogen.

DE offentligg0relsesskrîft nr. 2.805.655 beskriver 7-[2-(2--aminothiazol-4-yl)-2-(syn)methoxyiminoacetamido]cephalosporinsyre-10 -derîvater med formlen *Ί'Χ

C-CONH-i-N

15 Il I

\ch3 / "Y^h2

r COOR

1 2 20 hvori R N H er en eventuelt beskyttet aminogruppe, R er halogen elier en eventuelt substitueret hydroxyi-, thiol- eller aminogruppe, og COOR er en eventuelt esterificeret carboxylgruppe. Det er ogsa 2 omhandlet, at R , nâr det er en aminogruppe, kan være disubstitue- ret, og at substituenterne, sammen med N-atomet, inter alîa kan 25 danne en pyrrolidinogruppe. Der er dog ingen omtale af en N- -methyl-pyrrolïdïniummethylgruppe (eller af nogen anden kvaternær 2 ammoniumgruppe), og substituenten R kan ikke være forbundet til 3-stillingen via en methylengruppe.

USA patentskrift nr. 4.278.671 omhandler 7-[2-(2-aminothiazol-30 -1-4-yl)-2-(syn)methoxyiminoacetamido]cephalosporin-derivater med formlen

S

ΛΧ ^-s w ^-C-CONH-j-f

35 II

0CH3 & Nvs'V^:;^^CH2R3

COOH

4

DK 156900 B

hvori R2NH er en eventuelt beskyttet aminogruppe, og er hydrogen eller "resten af en nucleofil forbindelse". Udtrykket "resten af en nucleofil forbindelse" er defineret bredt, og det er 3 ' dernæst anf0rt, at R "alternativt kan være en kvaternaer ammoni-05 umgruppe". Pyridinium, forskelligt substitueret pyridinium, quino-lïnium, picolinium og lutidinïum er omhandlet som kvaternære ammo-nîumgrupper. Der er ingen antydnïng af, at den kvaternære ammo-niumgruppe kan besta af et fuldt mættet, nitrogenholdigt heterocyk-lisk ringsystem, som er bundet via dets nitrogenatom, og som înde-10 holder en yderligere substituent pa nitrogenatomt. GB patent- beskrivelse nr. 1.581.854 svarer dertil og har i det væsentlïge ïdentîsk ïndhold. André patentskrifter tilh0rende samme patent-haver, som ikke er formelt beslægtede, men som har lignende ind-hold, omfatter USA patentskrïft nr. 4.098.888 og ved deling frem-15 komne USA patenter nr. 4.203.899, 4.205.180 og 4.298.606, samt UK patentskrïft nr. 1.536.281.

USA patentskrïft nr. 4.168.309 omhandler cephalosporïn-deri-vater med formlen

O

20 II

R-C-C-NH—j-f

I ^ vO

' \ ,·

0(CH2)m-ï-(CH2)nC00H

lh 30 hvori R er phenyl, thienyl eller furyl, Ra og R*3 uafhængigt er hydrogen, alkyl, cykloalkyl, phenyl, naphthyl, thienyl, furyl, carb-oxy, alkoxycarbonyl eller cyano, eller Ra og R*3 danner, sammen med carbonatomet, hvortil de er bundet, en cykloalkyliden- eller 35 cykloalkenylidenrJng, m og n er hver 0 eller 1, sâledes at summen af m og n er 0 eller 1, og R er, sammen med nitrogenatomet, hvortil det er bundet, bredt defineret, men kan inter alia ikke være en mættet 5-leddet ring. Forbindelsen med formlen 5

DK 156900 B

f\ », 0 II . I cf3coo^ » t V-“V^«,70 \ ÇH3 cooh j O-C-COOH CH,

V

10 er eksemplificeret i eksempel 5 deri. GB patentskrift nr. 1.591.439 svarer dertil og har et î det væsentlige identisk indhold. Der er ïngen antydning i dette patentskrift af, at R-substituenten kan være 2-aminothiazol-4-yl-delen/ eller at iminosubstituenten ikke 15 indeholder en carboxylgruppe.

De farmaceutisk acceptable salte af forbïndelserne med formel (l) omfatter de uorganïske base-salte, sasom alkalimetalsaltene (f.eks. natrium- og kalîumsaltene) og jordalkalimetalsaltene (f.eks. calciumsaltene), ammoniumsalte, organiske basesalte (f.eks. med 20 trïethylamïn, procain, phenethylbenzylamin, dibenzylethylendiamin og andre organiske baser, som har været anvendt inden for peni-cillin- og cephalosporinomridet), samt syreadditîonssaltene (f.eks. saltene med saltsyre, hydrogenbromidsyre, myresyre, salpetersyre, svovlsyre, methansulfonsyre, phosphorsyre, eddïkesyre eller tri- 25 fluoreddikesyre) og andre syrer, som har været anvendt inden for penicillin- og cephalosporinomridet. De fysiologisk hydrolyserbare estere omfatter acyloxyalkylestrene, f.eks. (lavere)alkanoyl(lavere)-alkylestere, sasom acetoxymethyl, acetoxyethyl, pïvaloyloxymethyl og lignende. Basesaltene og estrene kan dannes med en vïlklrlig af 30 carboxylgrupperne i forbïndelserne med formel (I).

De omhandlede forbindelser med formel (I) udviser hpj antibakteriel aktivitet over for forskellige gram-positive og gram-negatïve bakterier, og de er værdifulde i behandlingen af bakterielle infektioner i dyr og mennesker. Forbïndelserne med for-35 mel (I) kan formuleres tîl parentéral brug pi konventionel rnlde under anvendelse af kendte farmaceutiske bærere og excipienter, og 6

DK 156900 B

de kan foreligge pi enhedsdosisform eller i multi-dosis beholdere. Præparaterne kan være i form af opl0sninger, suspensioner eller emulsioner i olieagtige eller vandige vehikler, og kan indeholde kon-ventionelle dispergerings-, suspenderings- eller stabîlîserîngsmidler.

05 Præparaterne kan ogsa være i form af et t0rt pulver til rekonstitue-ring f0r brug, f.eks. med sterilt, pyrogenfrit vand. Forbindelserne med formel (I) kan ogsa formuleres som suppositorier undr anven-delse af konventïonelle suppositoriegrundlag, sasom cacaosm0r eller andre glycerider. De omhandlede forbindelser kan, om 0nsket, ad-10 ministreres i kombïnation med andre antibïotika, sasom penicillîner eller andre cephalosporiner.

Nar præparaterne tilvejebringes pi enhedsdosïsformer, vil de fortrînsvis indeholde fra ca. 50 til ca. 1500 mg af den aktive be-standdel med formel (I). Dosis for behandling af et voksent men-15 neske vil fortrînsvis være î omradet fra ca. 500 til ca. 5000 mg pr. dag, afhaengîgt af frekvensen og admînistreringsvejen. Ved întra-muskulær eller Întraven0s administrering til en voksen person vil en total dosis pa fra ca. 750 til ca. 3000 mg pr. dag i opdelte doser normalt være tilstrækkelig, selv om h0jere daglîge doser af nogle af 20 forbindelserne kan være 0nskelïge i tilfælde af Pseudomonas ïnfek-tioner.

De foretrukne forbindelser med formel (I) er sadanne, hvorî 2 3 4 R er methyl eller ethyl, eller R og R uafhængigt er hydrogen 2 eller methyl. I de mest foretrukne forbindelser er R methyl, eller - 3 4 25 R og R er begge methyl. I den primære vurdering af de omhandlede forbindelser blev de minimale ïnhibïtorîske koncentrationer (IVIlC-værdier) af forbindelserne og to sammenligningsforbindelser (cefotaxim og ceftazidim) bestemt ved hjælp af dobbelt-serie-agar fortyndingsmetoden ï Mueller-Hinton agar overfor 32 stammer af test-30 organismer i seks grupper. De geometriske middelværdier for MIC, som blev bestemt ved denne test, er vist ï tabel (I) og (IV).

N-r-C-CONH—-r η 35 HtA. / \ ^V^-CH-jolicn H2N S OCH ^ j

: COOH

(Cefotaxim; sammenligningsforbindelse) 7

DK 156900 B

N-r-C-CONH- f ]

PV-vO

H,N Xsx u T n \=z/

λι- z ‘ Ί cocF

05 K3C-C-CH3

COOH

(Ceftazidim; sammenligningsforbïndelser) 10 N--—Ç- CONH--I-f 1 . Jpû XI 2 ©/-, (I) H2N -S^ ^ CIL· 3 15 (T estforbindelser)

Det kan ses, at aile testforbindelserne var mere aktive end cefotaxim over for (G-)-ll- og (G-)-lIl-grupperne af testorganismer, med den mest foretrukne forbindelse (la) markant mere aktiv.

20 Aile testforbindelserne var mere aktive end ceftazidim over for (G+)-la og (g+)-lb-grupperne af testorganismer, med den mest foretrukne forbindelse (la) markant mere aktiv end ceftazidim over for aile grupper af testorganismer med undtagelse af (G-)-lll, som var mere modtagelig for ceftazidim.

25 Absorptionen af den mest foretrukne forbindelse (la) og sam- menligningsforbindelserne (cefotaxim og ceftazidim) bestemtes ï mus efter en enkelt intramuskulær injektion af testforbindelsen (opl0st i p.1M phosphatpuffer, pH 7) i en dosis pâ 20 mg/kg. Blodpr0ver opsamledes fra de orbitale sinus i heparinicerede kapillærr0r og 30 unders0gtes i Mueller-Hinton medium under anvendelse af Morganella Morganiî A9695 som testorganisme. Blodkoncentrationerne ved for-skellige tidsïntervaller, halverîngstiderne (t, ) og areaierne under kurven (AUC) er vist i tabel (II).

Fors0g til identificering af organismer, som var resîstente over 35 for den foretrukne forbindelse (la), cefotaxim og ceftazidim, fore-toges ogsa. MlC-værdierne for disse tre forbindelser over for 240 8

DK 156900 B

stammer af Enterobacteriaceae bestemtes i Mueller-Hinton medium, og en MIC-værdï lig med eller st0rre end 8 for mindst én af testfor-bindelserne blev arbitrært taget som indikation for en résistent ‘ organisme. Blandt de 240 stammer fandtes 27 at være resistente 05 over for mindst én af testforbindelserne. Resultaterne, som viser 3 organismer resistente over for forbindelse (la), 15 organismer resistente over for ceftazidim og 18 organismer resistente over for cefotaxim, er givet ï tabel (III).

10 15 20 25 30 35

9 DK 156900 B

Tabel I

✓—\ CO CD 00 1 ςο - " ^ cm m *- oo cm *-

^ r- τ- CM

w

* r—V

s_ -—- ω ε ε _ -Μ 'incoocM^t-r-cû ω Λ ~ Ο ^ « « * « ^ “ g» à « Ε ^ ! 0 \ <υ 5 υ --g «Μ 3 E w υ Œ γλ y Λ w V, - |

> Τ ^ 00 CM 00 _ CU

' CD r (1 PI r Ο h ^ (0 u_ . ν-/ «. ·» » * -> “> — £_ ® ο ο τ— τ— ο φ £ ® _ Ο ra ° (Λ Έ 1 □ σ> »--Ε g ° > 3 α. Τ' ® g . » ό k - ε

"0Π3 ΙΛ Ν ΙΠΟ C

‘5 — ^-νομοοιποογ-γ^· . k t= i in ο o oo in ο o — D)+j ,'-" - - - ^ ·- ^ ow „ O O O O O O _

(Λ ü _ Τ' - CM

Έ ^ 7: ω Τ' ω ^ α> ÏÏ E oj c ai E--| Ε E I « o § ra £ ra ro ® iB ω ro -μ o ü In UJ -H (Λ — -Q m « u

~ r— r CO CO CM t/5 CO

1 LO v *. ·. ** * CM " •O ' 00 00 00 00 CM CM (Λ''-'' _ +ί o " “ g = ’ô .S ^ 8^u ' -î 5 î- · ^ É _ . — 3 ^ - eu tu ω c ra . lu ε E m Λ · U) ^ E 2 E £ θ' tO .c «3 3; <s ω Λ\ +“* 4-) ·Μ ±J "H ,-y

ra £ > c ·- w ·£ w <Q

lp CM'if'M-OOOr- '-H +J C CM W r- ü> γ % V. «5 ® « - £ ^ S $ S tt ^ ««t-cïco ^ w î- .E — .££·- <i- to i I r- O r- ro O)

^ cc^-g^pjE

---—--.---1 ^;^zoj_o£!L<î) = = -5=rôi®^- ,y .y .c £ -c £ ro 11- _ c. c cl . û. . . co >, φ φ Q) t. d) t_ i/i a CLû.uaOü.D.^ > _ O S_ s: > k C ffi s s ί i ....>' I E ï î «v E · ® Il II 11 " ·- £ „ _ m n - Ό C CM CM cm CM (D N T T T T T T ^ •r o; ûi q; ûi -g ra r~> ^~\ s-\ s~\ T _ £ ¢- + + i i i i ^ o ra i ‘ U -a ® - ® ο O ü Ü Ü 15 co IL _ _ _ — (J U •w' 'w' w

10 DK 156900 B

£ \ lo en oo (J 0) *» " * —) C 00 ^ 00 —: r- r- t—

< '-M

6) a.

/—\ O) x --—-- \ en

E

0 ^ OJ î- w' <u +* tn \n if h- tn Γ" 3 -^5 ^ E £

_ E

— \_/ p σι --- e ί α) i.

+-> .2 en cm oo e o >- *· *· — en o ï- o E ^ * •a__ _ ra U ffi C- O) o “ ^ j3 "a ecco ra ^ ^ Έ I- w σ a)-- 1 à ï ra £_ ·- oo r- £ a) .E î? od en oo

e CE

.2 TJ___ . +j ra φ 2 *.

£ £ ra „ ® 05 λ\ C 4-* O **·

ω a) q- 00 en CO

J_ O <D r- r- τα) C J___ C O ¢) o +-» +3 TJ £ CO 00 O" ra 0 2 0 - * · c. — c cm en en oo +J 0 — T— T- T—

C S

a)-- υ o h od ra θ’ O) H O v - - Ol ^Θ.

“ T— O l''· r- 'p ψ

TJ CM CM CM E E

O O O

— 4— 4- Cû ______ CM 00 /-> 4- μοβ ro ro £ Ü

C C

~ « O) g

rt, a) η ο £ τ?- E

I C c 2

0) Il Ë £ C £ C

tj x 2 a) a) c CM ra N O) r- O) ·- ac. *£ ta -O ,0 4->

*" ··* *ί» /“N

O ra Λ Λ ra J3 ο LL — U U ^

DK 156900 B

11

Tabel III

Resistens (MIC = pg/ml) over for én eller flere testforbindeiser ' blandt 240 stammer af Enterobacteriaceae i Mueller-Hinton medium 05 ---—

Geometrisk mîddelværdi MIC (pg/ml)

Organisme Antal stammer la Ceftazidîm Cefotaxim

Escherichia 10 coli 1 0,25 32 8

Escherichia coli 1 4 0,5 8

Klebsiella pneumoniae 1 2 16 0,13

1R

Enterobacter aerogenes 3 0,25 32 13

Enterobacter aerogenes 1 4 8 32

Enterobacter 20 cloacae 1 0,13 4 8

Enterobacter cloacae 3 0,5 40 50

Enterobacter cloacae 3 1,6 >63 >63 ?5

Enterobacter cloacae 1 >32 >63 >63

Citrobacter freundii 2 0,35 45 32

Citrobacter 30 species 1 0,03 >63 32

Proteus vulgarîs 1 0,06 8 8

Morganella morganîi 1 0,06 32 32 ^ Serratia marcescens 1 1 1 16 12

DK 156900 B

Tabel lll - fortsat______

Geometrisk middelværdï MlC

(Mg/ml)_

Organisme Antal stammer la Ceftazidim Cefotaxim ------ 05 Serratia marcescens 1 2 8 16

Serratia marcescens 2 2,8 2 11

Serratia ^ marcescens 1 4 8 63

Serratia marcescens 1 8 16 8

Serratia marcescens 1 32 >63 >63 15

Antal resistente stammer I ait J 27 3 15 18 20 25 30 35 13

DK 156900 B

N-x-jj-CONII--Ç 05 H2H^\/ \ (le) 2 5 î ïcxP / ^ H3C ? CH3 Oï, COOH ** (Testforbindelse) 10

Tabel IV

Geometrisk middelvaerdï af MIC (pg/ml) Forbindelse 15 Test- Forbindelse organismer le Cefotaxin/3^ Ceftazîdim^ (G+)-la (5 stammer) 14 1,0 5,1 20 (G+)-lb (5) 33 2,2 12 (G-)-la (5) 0,066 0,015 0,070 (G-)-lb (6) 0,79 0,35 1,7 (G-)-ll (5) 1,2 4,1 2,6 (G-)-lll (6) 4,0 22 1,8 25 -----1 (G+)-la : Penîcîllïn-sensîtîv S. aureus (5 stammer) (G+)-lb : Penicillin-resistent S. aureus (5 stammer) (G-)-la : Cephalothïn-sensitiv E. coli (2 stammer), 30 Kl. pneumonîae (1 stamme) og Pr. mirabilis (2 stammer) (G-)-lb : Cephalothin-resistent E. coli (3 stammer) og

Kl. pneumonîae (3 stammer) (G-)-ll : Pr. morgani (1 stamme), Ent. cloacae (2 stammer) 35 og Ser. Marcescens (2 stammer) (G-)-lll : Ps. aeruginosa (6 stammer) (a) Middelvaerdï af fem fors0g 14

DK 156900 B

Det kan ses, at forbindelse le var mere aktiv end cefotaxim over for (G-)-ll-gruppen af testorganismer og markant mere aktiv end cefotaxim over for (G-)-HI-gruppen af testorganismer (Ps.

- aeruginosa). Den var mere aktiv end ceftazïdim over for aile grup-05 per af Gram-negative testorganismer, med undtagelse af (G-)-lll (Ps. aeruginosa), som var noget mere modtagelig for ceftazidim.

Fremgangsmaden if0lge opfindelsen er karakteriseret ved det i krav 1's kendetegnende del anf0rte.

Ved fremgangsmide a) acyleres en forbindelse med formlen 10 h2n1-1 I J3 2 ^ (XVI) 15 C00B /h3 '| eller et N-silyl-derivat deraf, hvori B er hydrogen eller en kon-ventionel carboxylbeskyttende gruppe, med et acylerende dérivât af 20 en syre med formlen

N-r-C-COOH

N-r-C-COOH JU \ J! Λ II (Xvii) eller b2»n Xs 0 b2hnxXks// or2 r3-:-R4 COOB3 2 3 hvori B er en konventionel amïnobeskyttende gruppe, B er en 3 4 konventionel carboxylbeskyttende gruppe, og R og R har de 30 ovenfor anf0rte betydninger, til fremstilling af en forbindelse med formlen O g

N-rC-!;--NH-t-S ^ P

3S bJ^V (XV) COOB1 15

DK 156900 B

eller O , S . _ --Ü--NHT f I ^ A-", Cxva) “ üv A/SO ήΛ·Α.· £r

Ub3 10 hvorefter man fjerner aile beskyttende grupper.

Ved fremgangsmade b) omsættes en forbîndelse med formlen 15

j| S

N-?~C-;ü-NH-f ^ JJ W J l J (χιν)

B1HN^\s/ \jR2 ÿ \j^CH2I

20 COOB1 eller

O

N--t-C-t!—-NH—-S N

25 2 À XJ JL

B1HN/\sX O (Y \j^CH2I

r3-L-R4 COOB1 COOB3 30 3 4 1 3 hvori R , R og R har den ovenfor anf0rte betydning, B og B er 2 konventionelle carboxylbeskyttende grupper, B er en konventionel 35 aminobeskyttende gruppe, med N-methylpyrrolidin til fremstilling af en forbîndelse med formlen 16

DK 156900 B

0 S

N-r-C-H-NH-r-S ^ _0

05 COOB

10 eller

O

N-r-C-Ü-NH-i——N q , /TTlL \ ( XVa )

15 B2HN^\sy \ /~\^y=H2-N

r3-c-r4 coob1

COOB J J

20 hvorefter man fjerner aile beskyttende grupper med konventionelle 25 midler.

Omsætningen ved fremgangsmide b) udf0res i et ikke-vandigt organisk opl0sningsmîddel, sâsom methylenchlorid, chloroform, ethyl-ether, hexan7 ethylacetat, tetrahydrofuran, acetonitril og lignende, eller blandinger af sadanne opl0sningsmîdler. Omsætningen udf0res hensigtsmæssigt ved en temperatur fra ca. -10°C til ca. +50°C, idet det normalt foretrækkes at udf0re omsætningen ved stuetemperatur.

Mindst ét mol N-methylpyrrolidin b0r anvendes pr. mol forbîndelse (XIV) eller (XlVa), og det foretrækkes normalt at anvende fra ca.

50% til ca. 100% overskud af N-methylpyrrolidin.

35 DK 156900 8 17

Carboxylbeskyttende grupper, der er egnede til anvendelse som B og B ved ovennævnte fremgangsmade b), er velkendte for fagmanden og omfatter aralkylgrupper, sasom benzyl, p-methoxybenzyi, • p-nitrobenzyl og diphenylmethyl (benzhydryl), alkylgrupper, sasom 05 t-butyl, halogenalkylgrupper, sasom 2,2,2-trichlorethyl, og andre carboxylbeskyttende grupper, som er beskrevet i litteraturen, f.eks. i GB patentskrift nr. 1.399.086. Det foretrækkes at anvende carboxylbeskyttende grupper, der let fjernes ved behandling med syre. Særlîgt foretrukne carboxylbeskyttende grupper er benz-10 hydryl- og t-butyl-delene.

Aminobeskyttende grupper, der er egnede til anvendelse som 2 B ved fremgangsmade b), er ogsa velkendte i teknikken og medîager tritylgruppen og acylgrupper, sasom chloracetyl. Aminobeskyttende grupper, der let fjernes ved behandling med syre, f.eks. trityîgrup-15 pen, foretrækkes.

De acylerende derivater af syren med formel (XVII) eller (XVI la) ved fremgangsmade a) inkluderer syrehalogenîderne (og îsær syrechloridet), blandede syreanhydrider (sasom syreanhydriderne dannet med pivalinsyre eller et halogenformiat, sasom ethylchlorformiat), 20 samt aktiverede estere (sasom kan dannes med N-hydroxybenztriazol I nærværelsen af et kondensationsmiddel, sasom dicyklohexylcarbodiimid). Acyleringen kan ogsi udf0res ved anvendelse af den frie syre af forbindelsen med formel (XVII) eller (XVI la) i nærværelsen af et kondensationsmiddel, sasom dicyklohexylcarbodiimid, carbonyldîimida-25 zol eller et isoxazoliumsalt. Som her anvendt omfatter udtrykket "acylerende dérivât" af syren med formel (XVII) eller (XVIla) selve den frie syre i nærværelse af et kondensationsmiddel, sasom ovenfor beskrevet. Det foretrukne acylerende dérivât af syren med formel (XVII) eller (XVIla) er syrechloridet, fortrinsvis anvendt i nær-30 værelsen af et syrebindende mîddel (og îsær et tertiær amin syre-bindende middel, sasom triethylamin, dimethylanilin eller pyridin).

Nâr acyleringen ved fremgangsmade a) udf0res med et syrehalo-genid, er det mulïgt at anvende et vandigt reaktionsmedium, men et ikke-vandïgt medium foretrækkes. Nâr syreanhydrider, aktiverede 35 estere eller den frie syre i nærværelsen af et kondensationsmiddel anvendes til acyleringen, b0r reaktionsmedîet være ikke-vandigt.

18

DK 156900 B

Særlïgt foretrukne opl0sningsmidler til acyleringsreaktionen er haloge-nerede carbonhydrider, sasom methylenchlorid og chloroform, men tertïære amider, sasom dimethylacetamid eller dîmethylformamïd, kan anvendes, lige som andre konventionelle opl0sningsmîdler, sasom 05 tetrahydrofuran, acetonitril og lignende.

Acyleringsreaktionen ved fremgangsmade a) kan udf0res ved en temperatur fra ca. -50°C til ca. +50°C. Den udf0res dog fortrinsvis ved eller under stuetemperatur og mest foretrukkent fra ca. -30°C til ca. 0°C. Det foretrækkes sædvanligvïs at acylere forbindelsen med formel (XVI) med cirka en st0kiometrisk mængde af acylerings-midlet med formel (XVII) eller (XVIla), selv om et lille overskud (f.eks. 5-25%) af acyleringsmidlet kan anvendes.

Det foretrækkes ved fremgangsmade a), at forbindelsen med formel (XVI) acyleres î form af dens N-silyl-dérivât (nir der anven-15 des et îkke-vandigt reaktionsmedium). Dette foretages hensïgtsmæssigt in situ ved blot at tilsætte et passende silyleringsmiddel (f.eks. Ν,Ο-bîstrîmethylsîlylacetamid) til opl0snîngen af forbindelse (XVI) f0r tîlsætningen af acyleringsmidlet med formel (XVII) eller (XVIla). Det foretrækkes at anvende cirka 3 mol silyleringsmiddel pr. mol forbindelse 20 (XVI), selv om dette dog îkke er kritîsk. Silylforbindelsen fjernes let efter acylerïng ved tilsætning af vand.

De acylerende syrer ved fremgangsmade a) med formel (XVII) eller (XVIla), herunder carboxyl- og aminobeskyttede derivater deraf, er kendte i teknikken eller kan fremstilles ved hjælp af kendte frem-25 gangsmider. Saledes fremstilledes (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop- 2-oxyïmîno)-2-(2-trïtylamino-thïazol-4-yl)eddikesyre (Ilia) ved hjælp af den almene fremgangsmade, som er beskrevet i USA patentskrift nr.

4.258.041 og UK patentskrift nr. 2.025.398. Det dér angivne smelte-punkt var 152-156°C (dekomp.), men her smeltede forbindelsen ved 30 174-175°C (dekomp.).

P ræpa ration seksempel 1 N-r-C-COOC-Ης 35 J) U (III)

TrHN^S's> S ^ OR2 19

DK 156900 B

Ethyl-(Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-acetat (Ilia)

En blandîng af ethyl-(Z)-2-hydroxyimino-2-(2-tritylamino-thia-zol-4-yl)acetat (II) (5,00 g, 10,9 mmol), CHgl (2,04 ml, 32,8 mmol) . og KgCOg (4,54 g, 32,8 mmol) i t0r dimethylsulfoxid (DMSO) (100 05 ml) omr0rtes ved stuetemperatur natten over og hældtes dernæst i vand (250 ml). Det dannede bundfald opsamledes ved filtrering, vaskedes med vand og t0rredes til dannelse af titelforbindelsen (5,15 g, kvantitatîvt udbytte). Smp. 115°C (dek.).

ΡΠΠ NMR: δ 3 ppm 1,32 (3H, t), 3,98, (3H, s), 4,30 (2H, q), 10 6,42 (1H, s), 7,2 (1H, m), 7,25 (15H, s).

Forbindelser (lllb), (Ille) og (111d) fremstilledes ved hjælp af den ovenfor beskrevne almene fremgangsmide, men under erstatning af methyliodid med det tilsvarende andet iodid.

15 Lîtteratur

Forbindelse Udbytte (%) Smp. (°C) Smp. (°C) (ilia) methyl 100 115° ca. 120° (dek.) (dek.) 20 (lllb) ethyl 67 97-98° * (Il le) isopropyl 26 51-55° * ( I il d) allyl * * * * Esteren hydrolyseredes uden isolering 25 ^ Tetrahedrom, 34, 2233 (1978)

Præparationseksempel 2 j-jr1’

TrHN^X s/ \R2 (Z)-2-methoxvimino-2-(2-trïtylaminothiazol-4-yl)eddikesyre (IVa) 35 Den i præparatïonseksempel 1 fremstillede ethylester (Ilia)

(6,00 g, 12,7 mmol) I éthanol (120 ml) behandledes med 2N NaOH

20

DK 156900 B

(12,7 ml) ved stuetemperatur natten over. Reaktionsblandingen ind-stïlledes pa pH-værdi 8 ved tîlsætning af pulveriseret tpris, og opl0sningsmïdlet afdampedes under reduceret tryk. Remanensen op-. I0stes i vand (100 ml), og opl0sningen gjordes sur med 1N HCl til 05 pH-vaerdi 2 og ekstraheredes dernæst med ethylacetat (3 x 50 ml).

De forenede ekstrakter vaskedes med en mættet vandig NaCI-opl0s-ning, t0rredes og inddampedes. Remanensen krystalliseredes fra ethylacetat-hexan til dannelse af 5,56 g (udbytte 98%) af titelforbin-delsen. Smp. 138-143°C (dek.).

10 NMR: ÔCDC,3 ppm 3,89 (3H, s), 6,52 (1H, s), 7,2 (15H, s).

Forbîndelser (IVb), (IVc) og (IVd) fremstilledes ved hjælp af den ovenfor anf0rte almene fremgangsmâde.

(1)

Smp. Litteratur v J

15 Forbindelse R^ Udbytte (%) (°C, dek.) Smp. (°C dek.) (IVa) methyl 98 138-143 ca. 140 (IVb) ethyl 85 140-145 ikke rapporteret (IVc) isopropyl 85 166-169 ca. 170 20 (llld) allyl 66 170-178 ca. 170 ^ Tetrahedrom, 34, 2233 (1978)

Præparatîonseksempel 3 25 Benzhydryl-3-hydroxymethyl-7-phenylacetamido-3-cephem-4-carboxy-lat (VIII)

Til en omr0rt suspension af phosphatpuffer (pH 7, 162,5 ml) og hvedeklîd (20 g, t0r) ved stuetemperatur sattes 7-phenylacet-amïdocephalosporansyre, natrïumsalt (5 g, 12,1 mmol) i en portion.

30 Reaktionsforl0bet maltes ved HPLC, indtil hydrolysen var komplet (5 tïmer). Suspensionen filtreredes til fjernelse af hvedekliddet, og fil-tratet afk0ledes til 5-10°C til ekstraktionsesterifîcerïng. Methylen-chlorid (32 ml) sattes til den afk0lede opl0snîng, efterfulgt af en 0,5 M opl0sning af diphenyldïazomethan i methylenchlorid (24 ml).

35 pH-værdien indstïlledes til 3,0 med 28% phosphorsyre. Efter 1 tïme 21

DK 156900 B

hævedes reaktionsblandïngens temperatur til 20°C. Heptan (56 ml) tilsattes langsomt, og den resulterende krystallinske titelforbindelse genvandtes ved filtrering. Udbyttet af titelforbindelsen var 3,0 g ' (50%).

05

Præparationseksempel 4

Benzhydryl-7-amino-3-chlormethyl-3-cephem-4-carboxyiat (V)

Til en opslæmning af PCI,. (8,3 g, 40 mmol) i CH^Cl^ (100 ml) sattes pyridïn (3,2 g, 40 mmol), og blandingen omrprtes i 20 mïnut-10 ter ved 20°C. Til blandingen sattes benzhydryl-3-hydroxymethyI~7--phenylacetamïdo-3-cephem-4-carboxylat som fremstillet i præpara-tionseksempel 3 (5,1 g, 10 mmol) under omr0ring ved -40°C, i en portion. Blandingen omrprtes ved -10°C i 15 minutter og henstod ved -10°C til -15°C i 7 timer. Til den afk0lede opl0snïng (-20°C) 15 sattes propan-1,3-diol (10 ml), og blandingen henstod ved -2Q°C i 16 timer og dernæst ved stuetemperatur i 20 minutter under omr0-ring. Den resulterende opl0sning vaskedes med isvand (2 x 20 ml) og mættet vandig NaCI (10 ml), tprredes over MgSO^ og koncentre-redes i vakuum. Den gummiagtïge remanens (12 g) opl0stes i en 20 blanding af CHCI3 og n-hexan (2:1), og underkastedes kromatografi under anvendelse af en silicagelspjle (200 g) og det samme op!0s-nîngsmiddel som elueringsmïddel. Fraktioner indehoidende tîtelfor-bindelsen afdampedes i vakuum, og remanensen tritureredes med n-hexan, hvilket gav titelforbindelsen (2,1 g, 51%), der smeltede 25 ved >110°C (dek.).

IR: v„„ 3400, 2800, 1785, 1725 cm"1.

Ι\θΓ

EtOH

UV: λ 265 nm (E1-6 160).

max 1cm 30

DMSO-d + CDCI 3,69 (2H, s), 4,43 (2H, s), 5,09 NMR: δ 6 3 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,24 (1H, d, J

Ppm = 4,5 Hz), 6,87 (1H, s), 7,3 (10, m).

35 22

DK 156900 B

Eksempel 1 1 - Γ (Z)-2-methoxyimino-2-(2-aminothiazol-4-y I )acetamido] -3- f (1 -me- thyl-1-pyrrolidinium)nnethyl1-3-cephem-4-carboxylat (la) A. Benzhydryl-3-chlormethyl-7-[(Z)-2-methoxyimino-2-(2-trityl- 05 aminothiazol -4~yl )acetamido] -3-cephem-4-carboxylat (Via1)

Benzhydryl-7-amÎno-3-chlormethyl-3-cephem-4-carboxylat som

fremstillet î præparationseksempel 4 (2,29 g, 5,52 mmol) i CH^CN

(57 ml) behandledes med bis(trimethylsîlyl)acetamid (BSA, 4,09 ml, 16,6 mmol) ved stuetemperatur I 50 minutter til dannelse af en klar 10 oplpsnlng. ΤΠ opl0sningen sattes en syrechloridopl0sning, der var fremstillet ud fra (Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)- eddikesyre (IVa) (2,04 g, 4,60 mmol) og PCI^ (1,15 g, 5,52 mmol) i methylenchlorîd (20 ml). Blandingen omrprtes ved stuetemperatur i 30 minutter, hældtes i koldt vand (200 ml) og ekstraheredes med 15 ethylacetat (3 x 100 ml). De kombinerede ekstrakter vaskedes med vandig NaCI, tprredes og inddampedes. Den tîlbageblevne sirup (4 g) kromatograferedes successivt pâ en silicagel (150 g) kolonne ved eluering med 10:1 og 3:1 blandînger af toluen og ethylacetat. Frak- tionerne indeholdende den 0nskede forbindelse kombineredes og af- 20 dampedes, hvilket gav 2,61 g (68%) af (Via1) som et amorft pulver.

ΡΠΓΊ NMR: Ô 3 3,50 (2H, s), 4,02 (3H, s), 4,33 (2H, s), 4,98 (1H, d), 5,87 (1H, q), 6,65 (1H, s), 6,90 (1H, s), 7,3 (25H, m).

25 B. Benzhydryl-3-iodmethyl-7-[(Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylamino-thiazol -4-yl )acetam?do1 -3-cephem-4-carboxy lat (V11a1 )

En blandïng af 3-chlormethy]-derîvatet (Via1) (1,50 g, 179 mmol) og Mal (1,34 g, 8,93 mmol) î methylethylketon (30 ml) omr0r-tes ved stuetemperatur ί 1 time. Efter inddampning af opl0snings-30 midlet opl0stes remanensen i ethylacetat (100 ml) og vaskedes med vand, vandig Na^^O^ og vandig NaCI, t0rredes og inddampedes til dannelse af tïtelforbîndelsen (VIla1) (1,47 g, 89%) som et amorft pulver.

NMR: ÔCDCI3 pprp 3,55 (2H, ABq), 4,00 (3H, s), 4,25 (2H, 35 s), 4,97 (1H, d), 5,80 (1H, q), 6,65 (1H, s), 6,90 (1H, s), 7,3 (25H, m).

23

DK 156900 B

C. 7-f(Z)-2-methoxyîmino-2-(2-aminothiazol-4-yl)acetamido]-3-[(1--methyl-1-pyrrolidinium)methyl]-3-cephem-4-carboxylat (la)

En blanding af (V11a1 ) (4,5 g, 4,83 mmol) og N-methylpyrroli-' din (0,65 ml, 6,28 mmol) i CHgClg (45 ml) omr0rtes ved stuetempe-05 ratur i 20 minutter. Ether (300 ml) sattes til blandingen til udskil-lelse af det kvaternære sait af den blokerede cephalosporin, hvîlket opsamledes ved fîltrering og behandledes med 90% trifluoreddikesyre (TFE) (40 ml) ved stuetemperatur i 1 time. Blandingen inddampedes dernæst under reduceret tryk under 20°C. Remanensen tritureredes 10 med ether, hvîlket gav TFE-saltet af (la) (2,40 g), der opl0stes i methanol (5 ml) og behandledes med 1M opl0snïng af natrium-2--ethylhexoat (NEH) i ethylacetat (8 ml) ved stuetemperatur i 30 minutter. Efter tilsaetningen af ethylacetat (100 ml) opsamledes det dannede bundfald (1,94 g) ved fîltrering. HPLC-analyse viste, at 3 15 det ra produkt var 7% rent med et 1:8 forhold af Δ -îsomeren til 2 Δ -îsomeren. Rensning af produktet med HPLC gentoges tre gange ("Lichrosorb RP-18", 8 x 300 mm, fortyndet med 5% vandig CH^OH eller 0,01M ammoniumphosphatpuffer (pH 7,2)) indeholdende 5% CHgOH, hvîlket gav 35 mg (1,5%) af titelforbîndelsen som et farve-20 I0st pulver. Beregnet renhed (ved HPLC) 90%. Smp. 150°C (dek.).

KBr IR: v cm"1 1770, 1660, 1620.

max phosphatpuffer, pH 7 25 UV: λ nm(e) 235 (16.200), 258 (15.400).

max NMR: ôD2° ppm 2,31 (4H, m), 3,08 (3H, s), 3,63 (4H, m), 4,09 (3H, s), 5,43 (1H, d, J = 4,8 Hz), 5,93 (1H, d), 7,08 (1H, s).

30

Eksempel 2 7-r(Z)-2-methoxyimîno-2-(2-aminothiazol-4-yl)acetamîdo]-3-f(1-me-thyl-1-pyrrolidinium)methyn-3-cephem-4-carboxylat (la)

Til en omrprt opl0sning af 20,4 g (21,9 mmol) af (VIla') i 150 35 ml t0r methylenchlorid sattes 2,42 g (28,5 mmol) 1-methylpyrrolidin i én portion ved stuetemperatur. Blandingen omr0rtes i 5 minutter 24

DK 156900 B

og hældtes î 1000 ml ether under kraftig omr0rïng tll dannelse af et bundfald, der fïltreredes, vaskedes med ether (5 x 30 ml) og t0r-redes i vakuum, hvilket gav 19,3 g af det blokerede produkt som et bleggult pulver.

05 KBr IR: u cm"1 3400, 1780 (s), 1740, 1675, 1530.

max TLC: opl0snïngsmïddel ethanol-CHCI^ (1:3), Rf = 0,30 (Rf = 0,95 for (VIla1)).

10

Det faste stof oplpstes i 185 ml trïfluoreddïkesyre-vand (99:1), omrprtes î 1 time ved stuetemperatur og koncentreredes til ca. 30 ml under 10°C. Koncentratet hældtes i 1000 ml ether under kraftig omr0rïng til dannelse af et bundfald, der fïltreredes, vaskedes med 15 ether (5 x 40 ml) og t0rredes under vakuum, hvilket gav 10,6 g bleggult pulver. Pulveret opl0stes i 20 ml methanol, og oplpsningen fïltreredes. Tïl fïltratet sattes 45 ml 0,8 Μ NEH ï ethylacetat. Den resulterende opl0snïng hældtes ï 400 ml ethylacetat og fïltreredes, hvilket gav 8,08 g af et fast stof, som var en blanding af tïtelfor-20 bïndelsen og den tïlsvarende Δ -isomer (Δ /Δ = 1:8) som vïst ved HPLC-analyse ("Lichrosorb RP-18", 10-15% methanol ï 0,01 M phos-phatpuffer, pH 7). Et andet fors0g fra 28,9 g (31,0 mmol) af (VIl'a) gav 16,0 g af det ra produkt (Δ^/Δ^ = 1:8). Isolering af 3 o den 0nskede Δ -ïsomer fra det kombinerede ra produkt (24,08 g) 25 ved anvendelse af præparativ HPLC (System 500, Waters Associates, PrepPAK 500/C^g, 5-10%, CH^OH) gav 769 mg af forbïndelse (la).

Eksempel 3 7- f (Z)-2-methoxyîmino-2-(2-(2-amînothiazol-4-yl )acetamido1 -3- [ (1 - 30 -methyl-1-pyrrolîdînium)methyl1-3-cephem-4-carboxylat (la)

En række fors0g udf0rtes til bestemmelse af effekten af opI0s- ningsmiddel, mængde af opl0sningsmiddel og reaktionstïd pi udbyt- 3 2 tet af forbïndelse (la) samt Δ /Δ -forholdet i reaktionsproduktet.

Den almene fremgangsmade var som f0lger: 35 Til en suspension af 3-îodmethyl-derivatet (VIla1) (45 mg, 0,048 mmol) i den nævnte mængde af det nævnte opl0sningsmidde! 25

DK 156900 B

sattes en opl0sning af N-methylpyrrolidîn (0,01 ml, 0,097 mmol) i ether (0,1 ml), og blandïngen omrprtes ved stuetemperatur î den nævnte période. Reaktionsblandingen fortyndedes med ether (5 ml), • og det resulterende bundfald opsamledes ved filtrering og blandedes 05 med 90% TFE. Blandïngen omr0rtes i én time og inddampedes til t0r- hed under reduceret tryk under 20°C til dannelse af produktet.

3 2

Forholdet af Δ /A i produktet bestemtes ved H P LC ("Lichrosorb RP-18"; mobîl fase, 0,01 M ammoniumphosphatpuffer (pH 7,2) ïnde- holdende 15% CH,OH; retentionstid, Δ3 6,60 minutter, Δ2 5,56 6 3 2 10 minutter). Udbyttet af produktet og forholdet af Δ /Δ -isomere for h vert fors0g er givet nedenfor.

Forhold af (VI la1) 15 Opl0s- (i gram) til Reak-

Fors0g nings- opl0snings- tionstid Udbytte Forhold 3 2 nr. middel middel (i ml) (min.) (%) Δ /Δ 1 CH2CI2 1:20 15 73 1/8 20 2 CH2-CI2-ether 1:100 15 25 4/1 (1/10) 3 Ethylacetat 1:100 15 27 4/1 ether (1/10) 4 Ethylacetat- 1:100 60 64 2/1 25 ether (1/10) 5 Ether 1:100 15 31 6/1 6 Ether 1:100 60 62 3/1 7 Ether 1:60 15 55 3,5/1 8 Ether 1:60 60 82 1/1 30

Eksempel 4 7-KZ)-2-ethoxvimino-2-(2-aminothiazol-4-yl)acetamido]-3-[(1-methyl- -1-pyrrolidinium)methyl]-3-cephenv-4-carboxylat (ib) A. Benzhydryl-3-chlormethvl-7-r(Z)-2-ethoxy?mino-2-(2-tritylami-35 nothiazol-4-yl)acetamido1-3-cephem-4-carboxylat (Vlb)

Til en opl0sning af (Z)-2-ethoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4--yl)-eddikesyre (IVb) (1,095 g, 2,4 mmol) i dichlormethan (20 ml) 26

DK 156900 B

sattes phosphor-pentachlorïd (500 mg). Efter omr0ring i 1 time ved stuetemperatur sattes blandingen î én portion til en îsafkplet opl0s- ning af forbindelse (V) (1,083 g, 2,4 mmol) og BSA (1 ml) i di- chlormethan (20 ml). Efter omr0ring i 0,5 time hældtes reaktions- 05 blandingen i 10% vandîg NaHCOg (200 ml) og ekstraheredes med CHCI3 (100 ml). Ekstrakten vaskedes med vand, t0rredes over

MgSO^ og inddampedes under reduceret tryk.

Remanensen kromatograferedes pa en silicagels0jle. Eluering med CHCL· gav (Vlb) som et amorft pulver, 1,76 g (86%).

^ ΡΠΡ1 10 NMR: Ô^u^'3 ppm 1,40 (3H, t, CH^CHg), 3,53 (2H, A Bq, 2-CH2), 4,37 (2H, s, -CHgCI), 4,60 (2H·, q, -CH2CH3), 4,90 (1H, d, 6-H), 5,89 (1H, d, 7-H), 6,88 (1H, s, thiazol-H), 6,91 (1H, s, benzhydryl-CH).

15 B. Diphenylmethyl-7-[(Z)-2-ethoxyîmîno-2-(2-tritylaminothiazol-4--yl)-acetamîdo]-3-iodmethyl-3-cephem-4-carboxylat (VIIb)

En blanding af (Vlb) (1,07 g, 1,25 mmol) og Nal (562 mg, 2,75 mmol) i acetone (20 ml) omr0rtes ï 1 time. Blandingen filtrere-20 des og filtratet hældtes i vand og ekstraheredes med ethylacetat.

Det organîske lag vaskedes successïvt med 5% vandig Na2S2C>3, vand og mættet vandig NaCI, t0rredes over MgSO^ og afdampedes, hvilket gav 1,04 g (89%) af forbindelse (Vllb).

NMR: 6^^3 ppm 3,55 (2H, q, 2-CH2), 4,27 (2H, s, 25 CH2-I), 5,02 (1H, d, 6-H, 5,87 (1H, d, 7-H), 6,68 (1H, s, thiazolring H), 6,93 (1H, s, benzhydryl-CH).

C. 7-f(Z)-2-ethoxyîmîno-2-(2-aminothiazol-4-yl)acetamîdo]-3-f(1- 30 -methyl-1-pyrrolïdînium)methyl1-3-cephem-4-carboxylat (Ib)

En blanding (Vllb) (333 mg, 0,35 mmol) og N-methylpyrrolidin (60 mg, 0,7 mmol) i CH2CI2 (5 ml) omr0rtes i 0,5 timer ved stuetemperatur og inddampedes dernæst i vakuum. Remanensen vaskedes med ether og opl0stes i 90% vandîg TFE. Efter henstand i 0,5 timer 35 ved stuetemperatur koncentreredes blandingen under reduceret tryk. Ether tilsattes til koncentratet til adskillelse af det kvaterni- 27

DK 156900 B

serede produkt, hvilket opsamledes ved fïitrerîng og opl0stes i en lille mængde methanol. Opl0sningen kromatograferedes pi en HP-2- s0jle (40 mi)· Eluering med 30% vandig CH„OH efterfuigt af lyofilise- 2^3 23 • ring gav 0,062 g af en blanding af Δ - og Δ -isomeren (Δ :Δ = 05 5:1). Blandingen rensedes ved HPLC ("Lichrosorb RP-18", 8 x 300 3 mm, 15% methanol), og den 0nskede Δ -isomer (Ib) isoleredes som bleggult pulver, 4,9 mg (2,7%).

phosphatpuffer, pH 7 UV : λ nm(s) 235 (15.000), 258 (14.000).

10 max NMR : Ô°2° ppm 1,43 (3H, t), 2,33 (4H, m), 3,10 (3H, s), 3,64 (4H, m), 4,36 (2H, q), 5,44 (1H, d), 5,95 (1H, d), 7,08 (1H, s).

15 Eksempei 5 7-f(Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2-aminothiazol“4-yl)acetamido]-3-[(1--methyl-1-pyrrolidinium)methyl]-3-cephem-4-carboxylat (le) A. Diphenylmethyl-3-chlormethyl-7-f(Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2--tritylaminothiazol-4-yl)acetamido1-3-cephem-4-carboxylat (Vie) 20 En blanding af (Z)-2-(2-propoxyïmïno)-2-(2-tritylamino-thiazol- 4-yl)-eddikesyre (IVc) (707 mg, 1,5 mmol) og phosphor-pentachlo-rïd (344 mg, 1,65 mmol) i dîchlormethan (14 ml) omr0rtes ved stue-temperatur i 1 time og hældtes i en opl0smng af forbindelse (V) (677 mg, 1,5 mmol) og BSA (1,1 ml, 4,5 mmol) i dîchlormethan (15 25 ml). Reaktionsblandingen omr0rtes ved stuetemperatur i 30 minut-ter, fortyndedes med ethylacetat (200 ml), og vand (3 x 100 ml), t0rredes over natrïumsulfat og ïnddampedes, hvilket gav 1,4 g (100%) af forbindelse (Vie).

KBr -1 ΑΛ IR : ü Cm 3360, 3020, 3060, 2960, 1785, 1725, 1680, maX 1520, 1500, 1450, 1375, 1300, 1250, 1160, 1090, 1060, 1010, 990, 840, 740, 700.

EtOH

UV : λ nm(e) 240 (24.600), 260 (20.700).

35 max 28

DK 156900 B

/-'HCl NMR : Ô^n 3 ppm 1,35 (6H, d, J = 6 Hz), 3,50 (2H, s), 4,35 2H, s), 4,58 (1H, m, J = 6 Hz), 5,00 O H, d, J = 4,5 Hz), 5,91 (1H, d-d, J = 4,5 & 9 Hz; d med D2<D, J = 4,5 Hz), 6,68 05 (1H, s), 6,88 (1H, s), 7,25 (25H, s).

B. Dîphenylmethyl-3-iodmethyf-7-r (Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2-tri-tylamînothiazol-4-yl)acetamidol-3-cephem-4-carboxylat (VIle)

En blanding af forbindelse (Vie) (500 mg, 0,55 mmol) og na-10 trîumïodîd (248 mg, 1,66 mmol) i acetone (10 ml) omrtfrtes ved stue-temperatur i 50 minutter. Efter inddampning oplpstes remanensen i ethylacetat (15 ml), vaskedes successivt med 10% vandîg natrïum-thiosulfat (10 ml), vand (10 ml) og vandîg NaCI (10 ml), tprredes over natrîumsulfat og înddampedes, hvilket gav 494 mg (90%) af 15 titelforbindelsen (VIle).

KBr -1 cm IR : υ 3360, 3040, 3020, 2960, 1785, 1720, 1680, may 1600, 1520, 1500, 1450, 1370, 1300, 1230, 1150, 1115, 1080, 990, 900, 840, 750, 700.

20

EtOH

UV : λ nm(e) 240 ¢24.900), 260 (19.400).

max C'tjf'i

NMR : Ô 3 ppm 1,30 (6H, d, J = 6 Hz), 3,37 & 3,70 (1H

25 h ver, d, J = 16 Hz), 4,22 (2H, s), 4,55 (1H, m, J = 16 Hz), 4,95 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,83 (1H, d-d, J = 4,5 & 9 Hz; d med DgO), 6,66 (1H, s), 6,87 (1H, s), 7,25 (25H, s).

30 C. 7-[(Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2-aminothiazol-4-yl)acetamido]-3-- [ (1 -methyl-1 -pyrrolidînîum)methyl ] -3-cephem-4-carboxylat ( I c)

En blanding af forbindelse (Vile) (545 mg, 0,55 mmol) og 1- -methylpyrrolidïn (70 mg, 0,82 mmol) i dichlormethan (10 ml) omr0r-35 tes ved stuetemperatur i 30 minutter og fortyndedes med ether (100 ml). Det resulterende bundfald opsamledes ved filtrering. En opl0s- 29

DK 156900 B

ning af bundfaldet i 90% TFE (4,5 ml) omr0rtes ved stuetemperatur i 30 minutter og inddampedes i vakuum. Remanensen tritureredes med ether, hvilket gav 317 mg af det ra produkt, der kromatografe-* redes pa en HP-2O-s0jle (50 ml), fortyndedes med vand (500 ml) og 05 30% CH_OH (500 ml). 30% CH_OH-elueringsmidlet koncentreredes og ^ ύ 2 3 lyofiliseredes, hvilket gav 109 mg af en blanding af Δ - og Δ ~iso~ 2 3 merene (Δ /Δ = 6/1), hvoraf 100 mg rensedes ved HPLC ("Lichro-sorb RP-18", 15% MeOH), hvilket gav 5 mg (3%) af den 0nskede titelforbindelse (le).

^ pH 7 puffer UV : λ nm(e) 236 (15.100), 252 (14.600).

max NMR : ÔD2° ppm 1,42 (6H, d, J = 6 Hz), 2,33 (4H, s), 3,10 (3H, s), 3,65 (4H, s), 3,83 & 4,23 15 (1H hver, d, J = 17 Hz), 5,45 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,95 (1H, d, J = 4,5 Hz), 7,05 (1H, s).

Eksempel 6 20 7-r(Z)-2-allyloxyimino-2-(2-aminothiazol-4-yl)acetam?do]-3-r(1-me-thyl-1-pvrrolidinium)methyl1-3-cephem-4“carboxylat (Id) A. Benzhydryl-7-r(Z)-2-allyloxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-acetamidol-3-chlormethyl-3-cephem-4-carboxylat (Vld)

Til en suspension af forbindelse (V) (1,35 g, 3 mmol) i methy-25 lenchlorïd (20 ml) sattes BSA (1,1 ml, 4,5 mmol), og blandingen omr0rtes i 30 minutter ved stuetemperatur, hvorefter den blev til en klar opl0sning. En blanding af (Z)-2-aJly;loxyimino-2-(2-trityl“ amïnothiazol-4-yl)eddikesyre (IVd) (1,40 g, 3,© mmol) og phosphor--pentachlorid (690 mg, 3,3 mmol) i methylenchJorid (20 ml) omr0rtes 30 i 15 minutter ved stuetemperatur og hældtes i én portion i opl0snin-gen af den trimethylsïlylerede forbindelse (V). Blandingen omr0rtes i 20 minutter ved stuetemperatur og fortyndedes med ethylacetat (200 ml), vaskedes med vandig natrïumbicarbonat og vand, t0rredes og inddampedes under reduceret tryk. Den olieagtige remanens ren-35 sedes ved silicagels0jle-kromatografi (“Wako-gel", C-200, 30 g).

30

DK 156900 B

S0jlen fortyndedes med chloroform, og fraktionerne indeholdende det 0nskede produkt kombïneredes. Inddampnîng under reduceret tryk gav titefforbîndelsen (Vld) som et amorft pulver, udbytte 2,32 g • (89%). Smp. 100-115°C (dek.).

05 KBr -1 IR : υ Cm 3990, 1790, 1730, 1680, 1530, 1380, 1250, maX 1160, 1020.

ΓΠΓΙ NMR : ô 3 ppm 3,50 (2H, 2-H), 4,32 (2H, s, 3-CH2>, 4,6-6,1 (7H, M, CHpCH = CH og 6,7-H), 6,70 (1H, s, thiazol-H), 6,90 (1H, s,

Ph^CH), 7,1-7,6 (30H, M, phenylpro- toner).

Analyse beregnet for C4gH4QN,-OgS2C1,1/3CHCI3: C, 64,05; H, 4,45; N, 7,73; S, 7,08; Cl, 15 7,82.

Fundet: C, 64,13, 63,99; H, 4,61, 4,64; N, 7,50, 7,30; S, 6,85, 6,85; Cl, 7,55, 7,46.

B. Benzhydryl-7-r(Z)-2-allyloxyîmino-2-(trîtylaminothiazol)-4-yl)- 20 acetamîdo]-3-iodrnethyl-3-cephem-4-carboxylat (VI Id)

En blanding af forbïndelse (Vld) (2,30 g, 2,65 mmol) og na- triumiodid (2 g, 13,3 mmol) i acetone (15 ml) omrprtes ï 1 time ved stuetemperatur og inddampedes dernæst under reduceret tryk. En opl0snîng af den olieagtige remanens i ethylacetat (200 ml) vaskedes 25 med 10% natriumthiosulfat og vand, og inddampedes under reduceret tryk, hvilket gav forbïndelse (VIId) som et amorft pulver, der anvendtes i det næste trîn uden yderlîgere rensning. Udbytte 2,52 g (99%).

30 C. 7- [ (Z)-2-aHyloxyimîno-2-(2-amînothiazol-4-yl )acetamido] -3- f (1 --methyl-1 -pyrrolïdiniunrQmethyl]-3-cephem-4-carboxylat (Id)

En blanding af forbïndelse (Vlld) (478 mg, 0,5 mmol) og N- methylpyrrolidin (0,05 ml, 0,5 mmol) î methylenchlorid (5 ml) om- r0rtes i 20 minutter ved stuetemperatur og fortyndedes med ether 35 (50 ml) til bundfæfdelse af det kvaternîserede produkt (udbytte 500 mg). En blanding af det kvaternîserede produkt og TFE (2 ml)

DK 156900B

31 henstod ved stuetemperatur i 1,5 time og fortyndedes med ether til bundfældelse af det râ TFE-salt af produktet (udbytte 265 mg), der kromatograferedes pi en s0jle af HP-20 (1,8 x 18 cm). S0jlen for- - tyndedes med vand og 30% vandig methanol. Det methanoliske elue- 05 ringsmiddel inddampedes under reduceret tryk, og remanensen fryset0rredes til dannelse af et amorft pulver (udbytte 124 mg), 2 der indeholdt det 0nskede produkt (17%) og den tilsvarende Δ -iso-mer (83%). Blandingen rensedes ved HPLC ("Lichrosorb RP-18"; 0,01 NI NH4H2P04 (pH 7):CH3OH = 85:15). Elueringsmidlet gjordes 10 surt til pH-værdien 3 med fortyndet HCl og kromatograferedes pi en s0jle af HP-20 (1,8 x 10 cm). S0jlen fortyndedes med vand og dernæst med 30% vandig methanol. Det methanoliske eluerïngsmiddel afdampedes under reduceret tryk, og remanensen fryset0rredes, hvilket gav titelforbïndelsen (Id) som et amorfft pulver (udbytte 13 15 mg, 5,1%). Smp. 155°C (dek.).

KBr -1 IR : u cm 3600-2800, 1770, 1670,, 1610, 1530, 1200.

max 20 pH 7 puffer UV : λ nm(s) 235 (16.600), 2S3 (15.600).

max NMR : ôD2° ppm 2,1-2,5 (4H, m, pyrrolidin-H), 3,10 (3H, + s, NCHg), 3,4-3,8 (4H, m, pyrrolidin-H), 25 5,95 (1H, d, 4 Hz, “-H), 7,10 (1H, s, thiazol-H).

Eksempel 7 7-f2-(2-aminothiazol-4-vl)-(Z)-2-(2-carboxyprop-2-oxyimino)-acet- 30 amido1-3-r(1-methyl-1-pvrrolidinium)methyl]-3-cephem-4-carboxy-lat (le) A. Benzhvdrvl-3-chlormethyl-7-r(Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2- -oxvimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamido1-3-cephem-4- -carboxylat (Va) 35 32

DK 156900 B

Fremgangsmade 1

En blanding af (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyimino)-2--(2-trïtylamînothîazol-4-yI)eddikesyre (II la1) (1/94 g, 3,6 mmol) * DDC (742 mg, 3,6 mmol) og N-hydroxybenztrîazol (486 mg, 3,6 05 mmol) I tetrahydrofuran (THF) (45 ml) omrprtes ved stuetemperatur i 45 minutter, hvorunder dicyklohexylurinstof udskiltes. Dïcyklo-hexylurinstoffet fjernedes ved filtrering, og filtratet blandedes med (V) (1,5 g, 3,6 mmol). Blandingen omrprtes natten over ved stue-temperatun og înddampedes dernæst i vakuum. Den tiloversblevne 10 olie oplpstes i CHCI^ (20 ml), vaskedes med mættet vandig NaHCO^ og mættet vandig NaCI, t0rredes over MgSO^ og afdampedes til t0rhed. Remanensen (3,9 g) oplpstes î n-hexan:CHCI3 (1:2) og fpr-tes gennem en sîlicagelspjle (40 g) under anvendelse af samme oplpsnîngsmiddelsystem. Fraktioner indeholdende tïtelforbindelsen 15 afdampedes i vakuum, hvilket gav 1,3 g (39%) af (Va), der smel-tede ved >100°C (dek.).

KBr -1 IR : υ Cm 3990, 1790, 1715, 1690.

max 20

EtOH 1% 1% UV : λ nm 240 (E 280), 265 (E 190).

max 1 cm 1 cm rnpi NMR : Ô 3 ppm 1,45 (9H, s), 1,63 & 1,66 (6H, hver s), 3,49 (2H, bred s), 4,34 (2H, s), 4,96 (1H, d, 25 J = 4,5 Hz), 5,90 (1H, d-d, J = 4,5 & 7,5), 6,66 (1H, s), 6,86 (1H, s), 7,0-7,5 (25H, m), 8,23 (1H, d, J = 7,5 Hz).

Fremgangsmade 2 30

En oplpsning af (V) (1,86 g, 4,49 mmol) i CH^CN (46,5 ml) behandledes med BSA (3,33 ml, 13,5 mmol) ved stuetemperatur i 50 minutter, hvîlket gav en klar oplpsning. Til oplpsningen sattes en sur chlorid-oplpsnîng, der var blevet fremstillet ud fra (Ilia1) (2,56 g, 4,49 mmol) og PCL· (1,12 g, 5,38 mmol) i methylenchlorid (26 35 ^ ml). Blandingen omrprtes ved stuetemperatur ï 30 minutter, hældtes 33

DK 156900 B

i koldt vand (100 ml) og ekstraheredes med ethylacetat (3 x 50 ml).

De kombïnerede ekstrakter vaskedes med vandig NaCI, t0rredes og inddampedes. Den tiloversblevne sirup (5 g) kromatograferedes pl • en silicagels0jle (100 g) ved fortynding med 10:1 blanding af toluen 05 og ethylacetat. Fraktionerne indeholdende den jzfnskede forbindelse kombineredes og afdampedes, hvilket gav 2,84 g (65%) af (Va).

B. Benzhydryl-7- [ (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-1 -oxyimino)-2--(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamïdol-3-iodmethyi-3-cephem-4- 10 -carboxylat (Via)

En blanding af (Va) (500 mg, 0,53 mmol) og Nal (240 mg, 1,6 mmol) i acetone (3 ml) omr0rtes i 2 timer ved stuetemperatur og inddampedes dernæt ï vakuum. Til remanensen sattes CH^CI^ (20 ml) og vand (10 ml). Det organiske lag vaskedes med 10% s/v 15 natriumthiosulfat (5 ml) og vandig NaCI (5 ml), t0rredes over MgSO^ og afdampedes til t0rhed, hvilket gav 540 mg (90%) af (Via) som et amorft pulver, der smeltede ved 106°C (dek.).

KBr -1 IR : υ Cm 3350, 1790, 1690.

20 max

EtOH 1% 1% UV : λ nm 240 (E 270), 265 (E 190).

max 1 cm 1 cm

CDD

NMR : Ô 3 ppm 1,44 (9H, s), 1,65 (6IH, s), 3,54 (1H, 4,28 25 (2H, s), 4,98 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,85 (1H, d-d, J = 4,5 & 7,5 Hz), 6,70 (1H, s), 6,90 (1H, s), 7,1-7,5 (25H, m).

C. 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-(Z)-2-(2-carboxyprop-2-oxyimino)-30 -acetamido] -3- [(1 -methyl-1 -pyrrolidinium)methyl ] -3-cephem-4--carboxylat (le)

En blanding af îodmethyl-derivatet (Via) (538 mg, 0,51 mmol) og N-methylpyrrolidin (0,079 ml, 0,076 mmol) i CH2CI2 (10,8 ml) henstod ved stuetemperatur i 30 minutter og fortyndedes dernæst 35 med ether (80 ml). Det dannede bundfald opsamledes ved filtrering 34

DK 156900 B

og vaskedes med ether, hvilket gav 420 mg af det kvaterniserede produkt, der afblokeredes med 90%ïg trifluoreddikesyre (TFE) (4,2 ml) ved stuetemperatur i 1 time. Reaktionsblandïngen inddampedes ' dernæst til t0rhed. Til remanensen sattes ether, hvilket gav rat 05 TFE-salt af (la) (245 mg, kvantitativt), hvilken var en 1:4 blan-ding af Δ - og Δ -isomerene. Det râ materiale underkastedes HPLC-rensning ["Lichrosorb RP-18”, 4 x 300 mm, fortyndet med 0,01 M ammonîumphosphat-puffer (pH 7,0) indeholdende 10% CH^OH]. Frak-tionen indeholdende det 0nskede produkt opsamledes og afdampedes 10 til et lïlle volumen. Koncentratet ïndstilledes til pH-værdî ca. 2 ved tilsætning af 1 M HCl, og ledtes gennem en HP-2O-s0jle (2 x 15 cm) til fjernelse af det uorganiske sait. S0jlen vaskedes med H^O (1000 ml) og fortyndedes med 30% CHgOH. Elueringsmidlet afdampedes og lyofilïseredes, hvilket gav 21 mg (10%) af titelforbindelsen (le) som 15 et farvelpst pulver. Smp. 160°C (dek.).

KBr -1 IR : υ Cm 3400, 1775, 1610.

max 2Q phosphatpuffer, pH 7 UV : k nm(e) 237 (15.700), 257 (155.500).

max rnp! NMR : Ô 3 ppm 1,65 (6H, s), 2,3 (4H, m), 3,09 (3H, s),

3,6 (4H, m), 4,0 (2H, m), 5,44 (1H, d, J

= 4,8 Hz), 5,94 (1H, d), 7,15 (1H, s).

25 30 35

Claims (3)

1. Analogifremgangsmâde til fremstillïng af cephalosporinderivater . med den almene formel

05 O N-Γ—C--Ü-Nff-j-S ^ c0° /h 10 2 hvori R betegner en ligekædet eller forgrenet alkylgruppe indeholdende fra 1 til 4 carbonatomer, allyl, 2-ibutenyl eller 3-bute-nyl, eller en gruppe 15 R3-C--R4 COOH pn 3 4 ^ hvori R og R , som kan være ens eller forslkellige, betegner hy- 3 4 drogen, methyl eller ethyl, eller R og R daraner sammen med det carbonatom, hvortil de er bundne, en cykloailikylidenring indeholdende fra 3 til 5 carbonatomer, samt non-toxiske, farmaceutïsk acceptable salte, fysiologisk hydrolyserbare estere eller solvater ^ deraf, KENDETEGNET ved, AT man enten a) acylerer en forbindelse med formlen H2N1 ^ Ί P (XVI V COOB eller et N-silyl-derivat deraf, hvori B er hydrogen eller en kon-35 ventionel carboxylbeskyttende gruppe, med et acylerende dérivât af en syre med formlen DK 156900 B N-r-C-COOH H-'r-C-COOH J! ^ J // \\ll (XVII, eller B HN S ? ^1131 b^hnIS'S or2 r3-C-R4 os COOB3 2 3 hvorï B er en konventionel amïnobeskyttende gruppe, B er en 3 4 konventionel carboxylbeskyttende gruppe, og R og R har de ovenfor anfprte betydninger, til fremstilling af en forbindelse med 10 formlen N-rC-11——NH-i-^ <3 Jf \\ 1 \ . Θ CO°B eller

0 S

20 N-r-C-C-NH-|-3 3 -β Il \\" ' j I / ©/^ (XVa) β2ηνΛ5/ \ "!/v R3 —C—R4 COOB " I 3

25 COOBJ hvorefter man fjerner aile beskyttende grupper, eller b) omsætter en forbindelse med formlen 30 η-τ*-I-HH-^ ^ // \ J 1 JL (xiv> B2HN'\s/ \,r2 <y \^CH2I COOB1 i t 35 eller i DK 156900 B O N-\\~ϊ\-^-NH—-S ^

05 JL V*X il / b2hn-^\sX \ J ”\j^S:h2i R3-t-R4 COOB1 I 3 COOB"5 10 hvori R2, R3 og R^ har de ovenfor anf0rte betydning, og B3 er 2 konventîonelle carboxylbeskyttende grupper, B er en konventionel aminobeskyttende gruppe, med N-methylpyrrolidin tîl fremstilling af en forbindelse med formlen

15. S N-r-C-Ü-NH-j-S ^ J0 îJî}\ 2 ΛΛ'ί'Ο ™ b OR I -, / COOB

20 CH3 eller ^—NHi—T" Ί £ bh^s/ \ R3-ç-R4 COOB1 COOBJ J 30 hvorefter man fjerner aile beskyttende grupper med konventîonelle midler.

2. Fremgangsmide if0lge krav 1 tîl fremstilling af 7-[2--(2-amïnothiazol-4-yl)-(Z)-2-(2-carboxyprop-2-oxyimino)-acetamido]--3-[(1-methyl-1-pyrrolidinium)methyl]-3-cephem-4-carboxylat (le) 35 eller et non-toxisk, farmaceutisk acceptabelt sait, fysiologisk hydro-lyserbare estere eller solvater deraf, KENDETEGNET ved, AT man DK 156900 B omsætter en blanding af benzhydryl-7-amïno-3-chIormethyl-3-cephem--4-carboxylat, (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyîmino)-2(2-trityl-aminothiazoI-4-yl)-eddikesyre, dicyclohexylcarbodimid, N-hydroxybenz-- triazoi i et organïsk oplpsnîngsmiddel til dannelse af benzhydryl-3-05 chlormethyl-7- [(Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyimino)-2-(2-trîtyl-aminothiazol-4-yi)acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (If) eller alterna-tivt omsætter en blanding af benzhydryl-7-amino-3-chlormethyl-3-cephem-4-carboxylat og bis(trimethylsnyl)acetamid med et syrechlorïd af (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyîmino)-2-(2-tritylammothïazol-10 -4-yl)eddïkesyre til dannelse af (If), dernæst omsætter (If) med îodidsaltet til dannelse af benzhydryl-7-[(Z)-2-(2-t-butoxycarbonyl-prop-2-oxyimino)-2-(2-trîtylaminothiazol-4-yl)acetamido]-3-iodmethyl--3-cephem-4-carboxylat (Ig), og dernæst yderlîgere omsætter (Ig) med N-methylpyrrolidin i et organïsk oplpsningsmiddel tri dannelse 15 af (Ih), og endelig afblokerer (Ih) til dannelse af forbindelsen (le), og/eller om 0nsket eventuelt omdanner (le) til dets non-toxiske, farmaceutisk acceptable salte, fysiologïsk hydrolyserbare estere og solvater deraf.

3. Fremgangsmade if0lge krav 1 til fremstilling af for-20 bindelser med formlen S J J—“ .t:J cil'*.' I ΙΊ 2 hvori R betegner methyl, ethyJ, isopropyl eller allyl, eller et non-toxisk, farmaceutisk acceptabelt sait eller solvat deraf, KENDETEGNET 30 ved, AT man omsætter en blanding af benzhydryl-7-amino-3-chlor-methyi-3-cephem-4-carboxy!at og bïs(trimethyl-silyl)acetamid med et syrechlorïd af (Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)-eddike-syre eller (Z)-2-ethoxyimino-2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)-eddikesyre eller (Z)-2-(2-propoxyïmïno)-2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)-eddikesyre 35 eller (Z)-2-allyloxyimino-2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)-eddikesyre til dannelse af det tilsvarende kondenserede dérivât indeholdende 2-meth- DK 156900 B oxyïmino- eller 2-ethoxyimîno- eller 2-propoxyîmino- eller 2-allyloxy-imino-gruppen, dernæst omsætter nævnte kondenserede dérivât med iodidsalt til dannelse af det tilsvarende 3-iodmethyl-derivat, dernæst yderligere omsætter nævnte 3-iodmethyl-derivat med N-methyl-pyrrolidïn 05 i et organisk opljbsningsmiddel eller en blanding af organiske opljzisnïnger til dannelse af det tilsvarende pyrrolidinium-derivat, og endelig af-blokerer nævnte pyrrolidinium-derivat til dannelse af 7-[(Z)-2-meth-oxyimino-2-(2-aminothïazol-4-yl)acetamido] -3- [(1 -methyl-1 -pyrrolïdi-nium)-methyI]-3-cephem-4-carboxylat, eller 7-[(Z)-2-ethoxyimino-2-Ί0 -(2-aminothiazol-4-yl)acetamido]-3-[(1-methyM-pyrrolidïnium)-me- thyl]-3-cephem-4-carboxylat, eller 7-[(Z)-2-(2-propoxyimïno)-2-(2--amïnothiazol-4-yl )acetamido]-3-(1 -methyl-1 -pyrrolïdinium)methyl]-3--cephem-4-carboxylat, eller 7-[(Z)-2-allyloxyimino-2-(2-aminothiazol--4-yl )acetamido] -3- [(1 -methyM -pyrrolidinium)methyl] -3-cephem-4-Ί5 -carboxylat, og/eller om 0nsket omdanner nævnte afblokerede deri- vater til non-toxiske, farmaceutisk acceptable salte eller solvater deraf. 20 25 30 35