DE2748825C2

DE2748825C2 - Substituierte 3,5-Dihydroxyheptansäurederivate und diese enthaltende Arzneimittel gegen Hyperlipämie

Info

Publication number: DE2748825C2
Application number: DE2748825A
Authority: DE
Inventors: Akira Endo; Noritoshi Yokohama Kanagawa Kitano; Seiji Tokio/Tokyo Mitsui; Akira Mitaka Tokio/Tokyo Ogiso; Akira Tokio/Tokyo Terahara
Original assignee: Sankyo Co Ltd
Current assignee: Sankyo Co Ltd
Priority date: 1976-11-02
Filing date: 1977-10-31
Publication date: 1986-11-27
Also published as: CH643806A5; GB1555831A; NL7712106A; NL186001C; NL186001B; FR2369241B2; FR2369241A2; US4137322A; CH642939A5; DE2748825A1

Description

CH,0

H₃C

C CH₃

CH₃

15

(D

20

in der R eine Alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, eine gegebenenfalls C _r bis C ralkyl-, C _r bis C ralkoxy- oder halogensubstituierte Benzylgruppe oder eine gegebenenfalls C _r bis C jalkyl-, C _r bis C _T alkoxy- oder halogensubstituierte Phenacylgruppe, eine Gruppe 1/nM, worin M ein Alkalimetall, ein Erdalkalimetall oder Aluminium und «die Wertigkeit dieses Metalls bedeuten, oder eine Gruppe AH ⁺ ist, worin A für eine basische Aminosäure, wie Arginin, Lysin, Histidin, aiy-Diaminobuttersäure oder Ornithin steht.

2. Arzneimittel zur Behandlung der Hyperlipämie, gekennzeichnet durch den Gehalt an einer Verbindung nach Anspruch 1, neben einem pharmazeutisch geeigneten Träger und gegebenenfalls üblichen Zusätzen.

Die Erfindung betrifft eine Gruppe von substituierten 3,5-Dihydroxyheptansäurederivaten der Formel (I) und deren Verwendung als Mittel gegen Hyperlipämie.

In der Veröffentlichung der japanischen Patentanmeldung Nr. 1 55 690/1975 (veröffentlicht am 16. Dezember 1975), der entsprechenden US-PS 39 83 140, GB-PS 53 425, und BE-PS 8 30 033 sowie dem DE-Patent 24 355 wurde eine als »ML-236B« bezeichnete Verbindung der nachstehenden chemischen Struktur beschrieben, die durch Züchtung von Penicillium citrinum SANK 18 767 gebildet werden kann, und es wurde erläutert, daß diese Verbindung pharmakologische Aktivität als hypocholesterinämisches Mittel und hypolipämisches Mittel zeigt.

HO

H -.C

45

50

55

60

(.5 Durch weitere Untersuchungen der Anmelderin wurde gefunden, daß das Carbonsäurederivai von ML-236B der nachstehend angegebenen Formel I in einfacher Weise aus der Verbindung ML-236B selbst gebildet werden kann und daß dieser neue Verbindungstyp - nachstehend als ML-236B-Carbonsäurederivate bezeichnet - eine unerwartet höhere biologische Aktivität gegen Hyperlipämie zeigt, als die Verbindung ML-236B. Der Erfindung liegen diese vorstehend erwähnten Untersuchungen zugrunde.

Es ist Aufgabe der Erfindung, neue ML-236B-Carbonsäurederivate (I) zur Verfugung zu stellen, die eine bedeutende Aktivität als Mittel gegen Hypenipämie besitzen, und ein Mittel zur Behandlung von Hyperlipämie zur Verfugung zu stellen, welches ein ML-236B-Carbonsäurederivat (1) als Wirkstoff enthält.

Gegenstand der Erfindung sind 3,5-Dihydroxyhcptansäurederivate (ML^oB-Carbonsäurederivate) der allgemeinen Formel

HO

in der R eine C_r bis C,,-AIkylgruppe , eine gegebenenfalls C|- bis Ci-alkyl-, C_r bis C₂- alkoxy- oder halogensubstituierte Benzylgruppe oder eine gegebenenfalls C ρ bis C₂-alkyl-, C ρ bis C₂- alkoxy- oder halogensubstituierte Phenacylgruppe;

eine Gruppe Mn M, worin M ein Alkalimetall, ein Erdalkalimetall oder Aluminium und η die Wertigkeit dieses Metalls bedeuten; oder eine Gruppe All ',worin A für eine basische Aminosäure, wie Arginin, Lysin, Histidin, a,)»-Diaminobuttersäure oder Ornithin, bedeutet, darstellt.

Gegenstand der Erfindung ist außerdem ein Arzneimittel zur Behandlung der Hyperlipämie, das die vorstehend beschriebenen ML-236B-Carbonsäurcdcrivalc der Formel (I) als Wirkstoff neben einem pharmazeutischen Träger und gegebenenfalls üblichen Zusätzen enthält.

Zu diesen erfindungsgemäßen ML-236B-Cnrbonsäurederiv.iten der Formel (I) gehören spezieller:

Die Ester von ML^oB-Carbonsäuredcrivatcn der Formel (I), worin R folgende Gruppen bedeutet:

Methyl-, Äthyl-, n-Propyl-, Isopropyl-, n-Bulyl-,
n-Hexylgruppen; Benzyl-, 2-Methylben/yl-,
3-Methylbenzyl-, 4-Methylbenzyl-,
2-Äthylbenzyl-, 3-Äthylbenzyl-. 4-Athylbenzyl-.
2-Methoxybenzyl-, 3-Methoxybenzyl-,
4-Methoxybenzyl-, 2-Äthoxybenzyl-,
3-Athoxybenzyl-, 4-Äthoxybenzyl-,
2-Chlorbenzyl-, 3-Chlorbenzyl-, 4C'!ilorlicn/yl-,
2-Brombenzyl-, 3-ßrombenzyl-,
4-Brombenzyl-Gruppc;
Phenacyl-, 2-Methylphcnacyl-,

3-Methylphenacyl-, 4-Methylphenacyl-,
2-ÄlhyIphenacyl-, 3-Äthylphenacyl-,
4-ÄthylphenacyI-, 2-Methoxyphenacyl-,
3-Methoxyphenacyl-, 4-Methoxyphenacyl-,
2-ChIorphenacyl-, 3-Chlorphenacyl-, 4-Chlorphenacyl-, 2-Bromphenacyl-,
3-BromphenacyI-, 4-Bromphenacyl-Gruppe.

Die Ester der ML-236B-Carbonsäure sind neue Verbindungen. Sie können in einfacher Weise nach üblichen Methoden hergestellt werden, beispielsweise mit Hilfe eines der nachstehenden Verfahren:

(1) Umsetzung von ML-236B mit einem Alkohol, wobei eine anorganische Säure, wie Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure, ein Borfluorid oder ein saures lonenaustauscherharz als Katalysator angewendet werden kann und wobei de«· gleiche Alkohol oder irgendein anderes Lösungsmittel, welches nicht an der Reaktion teilnimmt, beispielsweise Chloroform, Benzol oder Äther, als Lösungsmittel angewendet werden kann.

(2) Umsetzung eines Metallsalzes der ML-236B-Carbonsäure mit einem Alkylhalogenid, wobei Dimethylformamid, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxid oder Aceton als Lösungsmittel angewendet werden kann. Das Metallsalz der ML-236B-Carbonsäure kann durch Verseifung von ML-236B mit schwachen Alkalien hergestellt werden.

(3) Umsetzung von ML-236B-Carbonsäure mit einem Alkohol in der gleichen Verfahrensweise, wie vorstehend unter Verfahren (1) beschrieben wurde. Die ML-236B-Carbonsäure kann durch Umsetzung eines Metallsalzes der ML-236B-Carbonsäure mit einer Säure hergestellt werden.

Alsdann gehören zu den erfindungsgemäßen Derivaten die Alkalisalze, z. B. das Natrium- oder Kaliumsalz, Erdalkalisalze, z.B. das Calcium- oder Magnesiumsalz und das Aluminiumsalz der ML-236B-Carb&nsäure; diese sind ebenfalls neue Verbindungen und können nach beliebigen üblichen Methoden hergestellt werden, z. B. durch Verseifung von ML-236B mit schwachen Alkalien.

Bevorzugt und besonders gui geeignet sind das Natriumsalz, Calciumsalz und Aluminiumsalz.

Die weitere Gruppe der erfindungsgemäßen Derivate sind die Aminosäuresalze von ML-236B-CaVbonsäure mit basischen Aminosäuren wie Arginin, Lysin, Histidin, a,y-Diaminobuttersäure, Ornithin; sie sind neue Verbindungen und können beispielsweise durch Behandlung von ML-236B mit den basischen Aminosäuren hergestellt werden.

Die Derivate der ML-236B-Carbonsäure der allgemeinen Formel (I) können die Biosynthese von Cholesterin in der Leber in gleicher Weise hemmen, wie ML-236B selbst; sie zeigen jedoch eine weit größere Aktivität als ML-236B. Diese kräftige Hemmwirkung auf die Biosynthese von Cholesterin, die durch ML-236B-Carbonsäurederivate ausgeübt wird, ist aufgrund der Wirkung voi'i iviL-23uß selbst unerwartet. Die ML-236B-Carbonsäurederivate sind daher sehr wirksame Mittel gegen Hyperlipämie.

Die inhibierende Aktivität auf die Biosynthese von Cholesterin, die Aktivität zur Erniedrigung des Serum-Cholestcrinspiegels, die wirksame Dosis und die Toxizi-UiI der ML-236B-Carbonsäurederivate der allgemeinen l'ormcl (I) werden nachstehend verdeutlicht.

(1) Inhibierende Aktivität auf die Biosynthese
von Cholesterin

Es hat sich gezeigt, daß die Carbonsäurederivate von ML-236B die S-HydroxyO-methylglutaryl-CoA-Reduktase spezifisch hemmen, die als geschwindigkeitsbesti-Timendes Enzym bei der Biosynthese von Cholesterin bekannt ist. Die Aktivität zur Hemmung der Biosynthese von Cholesterin (bestimmt nach der Methode gemäß J. Biol. Chem. 234 Seite 2835 [1959]) und die inhibierende Aktivität auf S-Hydroxy^-methylglutaryl-CoA-Reduktase (bestimmt nach der Methode gemäß Anal. Biochem. 31, Seite 383 [1969]) dieser Verbindungen sind in Tabelle 1 zusammengefaßt.

Tabelle 1

Hemmung der Biosynthese von Cholesterin und

von 3-Hydroxy-3-methylglutyryl-CoA-Reduktase

Geprüfte Verbindung	Konzentra	Konzentralion
R =	lion tür die	für die 50 "/..ige
	50%ige	Hemmung der
	Hemmung	3-Hydroxy-
	der Biosyn	3-methylgluta-
	these von	ryl-CoA-
	Cholesterin	Reduktase
	(/g/ml)	(■ig/m·)·)
Methyl	0,01	0,15
Äthyl	0,01	0,16
Isopropyl	0,04	0,16
n-Butyl	0,02	0,16
n-Hexyl	0,02	0,18
Benzyl	0,01	0,2
4-Methylbenzyl	0,01	0,2
4-Methoxybenzyl	0,01	0,2
4-Chlorbenzyl	0,01	0,2
Phenacyl	0,01	0,2
4-Methylphenacyl	0,01	0,2
4-Methoxyphcnacyl	0,01	0,2
4-Bromphenacyl	0,01	0,2
Na	0,006	0,16
Ca	0,006	0,16
Al	0,006	0,16
Arginin	0,007	0,18
Lysin	0,006	0,16

ML-236B

0,01

4,8

*) Das Enzym wurde in Form von Rattenlebermikrosomen eingesetzt.

Die ML-236B-Carbonsäureester haben danach die gleiche Inhibierungswirkung auf die Biosynthese von Cholesterin, wie ML-236B, während jedoch Metallsalze der ML-236B-Carbonsäure eine um etwa das 2fache stärkere Inhibierungsaktivität gegenüber der Biosynthese von Cholesterin und eine etwa 30fsch stärken» Inhibierungsaktivität gegenüber 3-Hydroxy-3-methylglutaryl-CoA-Reduktase zeigen, als ML-236B.

(2) Dosis und Verabreichung

Die Aktivität zur Erniedrigung des Blut-Cholesterinspiegelsbei Beagle-Hunden (Körpergewicht etwa 10 kg)

	27 48	Die zu	prüfende Verbindung	16 Uhr). Diese Verab- 5	Gesamtchülesterinspiegel im	Dosis	Blut-Cholesterin-	] ς	Verminderung	Gesamtcho-	825	6	derML-236B-Car-	ML-236B selbst.	in Forrr	entnommen und der Chole-	üblichen Methode	Dosis	t-Cholesterrn-
		eine Kapsel eingeschlossenen	lang durchgeführt und nach	Serum mit Hilfe einer üblichen Methode bestimmt. Die				(mg/kg/ lag) aes aerum-	lesterins (%)		; Derivate	bonsäure der Formel (I) eine um das mehrfache stärkere	Die Aktivität zur Erniedrigung des Blut-Cholestcrin-	l einer in Wasser	sterinspiegel im Serum nach einer	sind in der nachstehenden	(mg/kg)
	wurde für verschiedene ML-236B-Carbonsäurederivate	oral verabreicht, und zwar am	Ablauf von 5 Tagen wurde am Morgen eine Blutprobe	Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle 2 gezeigt. io				Es ist ersichtlich, daß die		Aktivität zur Verminderung des Blutcholesteringehalts	spiegels bei Ratten wurde an Ratten geprüft. Die zu prü	suspendierten Probe oral verabreicht, und nach 18 Stun	bestimmt. Die Ergebnisse
5	der Formel (I) geprüft.	Abend(	entnommen und der			20 22			haben, als die Verbindung	fende Verbindung wurde	den wurde eine Blutprobe	Tabelle 3 gezeigt.			Vermindcrung
wurde in Form einer in	Tabelle 2		26			5	des Scrum-
Probe zweimal pro Tag		25	13	Tabelle 3	Aktivität zur Verminderung des BIu	20	Cholestcrin-
Morgen (9 Uhr) und am		100	19 25 19 30	Gehalts bei Ratten	5 20 5	Gchalts (%)
reichung wurde 5 Tage	Aktivität zur Verminderung des	25	32		20	18
spiegeis bei Beagle-Hunden	100 25 100	46 30 17 29 24 38 35 30 41	Zu prüfende Verbindung	5 20 5 20 5 20 5 20	23
	25	26 36 40	R =	5 20	19 25 16
	100 25 100 25 100 25 100	20 36		5 20	25
Zu prüfende Veibindung TJ	25 100	32 42 45		5 20	20 26 14 23 14 24 13 26
K -	25 100	20 33		5 20	17 20
	25 100	26 39 50	Methyl	5 20	15 21
	25 100	21 30	Äthyl	5 20	14 21
	25 100	24 47 55	Isopropyl	5 20	14 19
	25 100	28 44	n-Butyl n-Hexyl Benzyl 4-Methylbenzyl	5 20	14 23
Methyl	25 100	26 41 ⁶⁰	4-Methoxybenzyl	5 20	17 24
	25 100	26	4-Chlorbenzyl	C	20,6 23,1
Äthyl Isopropyl	25 100	45	Phenacyl	20	16,5 20,9
	25	24 44 ⁶⁵	4-Methylphenacyl	5 20	18,3 22,1
n-Butyl n-Hexyl Benzyl 4-Methylbenzyl	100	<5 19	4-Methoxyphenacyl	5 20	in L·
4-Methoxybenzyl	25 100	4-Bromphenacyl		24,1
4-Chlorbenzyl	25 100	Na		16,9 23,8
Phenacyl	Ca		11,2 17.1
4-Methylphenacyl	Al
4-Mcthoxy phenacyl
4-Bromphenacyl	Arginin
Na	L> sin
Ca	ML-236B
Al

Arginin
Lysin
ML-236B

I\s ist ersichtlich, daß die Derivate der ML-236B-Carbonsiiurc eine sehr zufriedenstellende Aktivität zur Verminderung des Blut-Cholesterinspiegels im Vergleich mit der Verbindung ML-236B zeigen.

(3) Akute Toxizität

Die akute Toxizität von Derivaten der ML-236B-Carbonsäure der Formel (I) wurde durch orale und intraperitoncale Verabreichung, die in beiden Fällen unter Verwendung einer wässerigen Suspension erfolgte, geprüft. Die erzielten Ergebnisse sind in Tabelle 4 gezeigt.

Tabelle 4 - (1)
Akute Toxizität

Zu prüfende Verbindung	LD₅₁, (mg/kg)	Raite
R	Maus	p.o.
	i. p.	>2000
Methyl	>500	>2000
Äthyl	>500	>2000
I sop ropy I	>500	>2000
η-Butyl	>500	>2000
n-llexyl	>500	>2000
n-Benzyl	>500	>2000
4-Mcthylbenzyl	>500	>2000
4-Mcthoxybenzyl	>500	>2000
4-Chlorbenzyl	>500	>2000
Phcnacyl	>500	>2000
4-Methylphenacyl	>500	>2000
4-Mcthoxyphenacyl	>500	>2000
4-Bromphenacyl	>500
Tabelle 4 - (2)
Akute Toxizität		LD₅₀ ing/kg)
Verbindung Tier	Verab
	reichung

ML-236B-Na-Salz

ML-236B-Ca-Salz

M L-236 B-Al-Salz

Argininsalz

Lysinsalz

Maus Ratte

p.o.	>2000
i. p.	> 500
p.o.	>2000
i. p.	> 500
p.o.	>2000
i. p.	> 500
p.o.	>2000
i. p.	> 500
p.o.	>2000
i. p.	> 500
p.o.	>2000
i. p.	> 500
p.o.	>2000
i-P-	> 500
p. o.	>2000
i-P-	> 500
p.o.	>2000
i. p.	> 500
p.o.	>2000
i. P-	> 500

Wie aus den vorstehend erläuterten Versuchen ersichtlich ist, können die erfindungsgemäßen Derivate der ML-236B-Carbonsäure oral verabreicht werden oder auch durch intravenöse Injektion verabreicht werden, und die erzielten Wirkungen sind deutlich den Wirkungen von M L-236B überlegen. Die Dosis zur Behandlung eines Erwachsenen kann in Abhängigkeit von der Verabreichungsart und der Häufigkeit variiert werden, sie liegt jedoch normalerweise im Bereich von 100 bis 3000 mg pro Tag, vorzugsweise bei etwa 1500 mg pro Tag.

Die Derivate der ML-236B-Carbonsäure der Formel (I) können für die Verabreichung in die Form verschiedener Zubereitungen gebracht werden, was nach beliebigen üblichen Methoden und in Analogie mit anderen bekannten Mittein gegen Hyperlipämie erfolgen kann, wie Chlofibrat, Sinfibrat.

Die Erfindung betrifft gemäß einer Ausfuhrungsform eine pharmazeutische Zubereitung, die als Wirkstoff mindestens ein Derivat der ML-236B-Carbonsäure der Formel (I) enthält. Diese Zubereitung kann natürlich beliebige pharmazeutisch geeignete Träger oder Exzipienten und gegebenenfalls übliche Zusätze enthalten.

Die Zubereitung wird wünschenswert in der Form vorgesehen, welche für die Absorption im Gastrointestinaltrakt bevorzugt ist. Tabletten und Kapseln für die orale Verabreichung liegen in Form einer Dosiseinheit vor und können übliche Träger, wie ein Bindemittel, wie Sirup, Gummi arabicum. Gelatine. Sorbit, Tragacanthgummi oder Polyvinylpyrrolidon, einen Exzipienten, wie Lactose, Saccharose, Maisstärke oder andere Kornstärken, Calciumphosphat, Sorbit oder Glycin, ein Gleitmittel, wie Magnesiumstearat, Talkum, Polyäthylenglykol oder Kieselsäure, ein Zerfallhilfsmittel, wie Kartoffelstärke, oder ein Netzmittel, wie Natriumlaurylsulfat, enthalten. Tabletten können mit Hilfe von beliebigen üblichen, auf dem Fachgebiet bekannten Methoden überzogen werden. Flüssige Zubereitungen zur oralen Verabreichung können in Form einer wässerigen oder Ölsuspension, einer Lösung, eines Sirups, eines Elixiers, vorliegen, oder sie können in beliebiger getrockneter Form vorliegen, die sich zur Anwendung in Wasser oder einem anderen geeigneten Trägermedium wieder auflösen läßt. Diese flüssigen Zubereitungen können übliche Zusätze, beispielsweise Suspendiermittel, wie Sorbitsirup, Methylcellulose, Glucose/Zuckersirup, Gelatine, Hydroxyäthylcellulose, Carboxymethylcellulose, Aluminiumstearatgel oder hydrierte eßbare Fette, Emulgiermittel, wie Lecithin, Sorbitanmonooleat oder Gummi arabicum, einen nicht wässerigen Träger, wie Mandelöl, fraktioniertes Kokosnußöl, Ölester (oily ester), Propylenglykol oder Äthanol, ein Konservierungsmittel, wie Methyl-p-hydroxybenzoat, Propyl-p-hydroxybenzoat oder Sorbinsäure, enthalten.

Injizierbare Zubereitungen werden in einer Ampulle für die Dosiseinheit oder in einem mehrere Dosen enthaltenden Gefäß mit zugesetzten Konservierungsmitteln vorgesehen.
Die Zubereitungen können in Form einer Suspension oder einer Lösung oder einer Emulsion in öligen oder wässerigen Trägern vorliegen und können auch Zusätze zur Ausbildung der Zubereitung, wie Suspendiermittel, Stabilisatoren und/oder Dispergiermittel, enthalten. Gemäß einer weiteren Ausführungsform kann der Wirkstoff in Form eines Pulvers vorliegen, der in einem geeigneten Lösungsmittel, beispielsweise pyrogenfreiem sterilem Wasser, vor der Anwendung wieder aufgelöst werden kann. Diese Zubereitungen

können den WirkstofTin einer Menge von nicht weniger als 0,1 %, vorzugsweise 10 bis 60%, enthalten, wobei der genaue Anteil von dem Verabreichungsweg abhängt. Eine Einheitsdosisform der Zubereitung kann vorzugsweise 50 bis 500 mg des Wirkstoffes enthalten.

Die Aminosäuresalze oder Metallsalze der ML-236B-Carbonsäure haben in wässeriger Lösung die Eigenschaft, im sauren pH-Bereich unter Bildung von ML-236B laktonisiert zu werden. Die wässerige Lösung der Salze wird daher vorzugsweise im neutralen bis schwach alkalischen pH-Bereich gehalten.

Die Erfindung wird durch die nachstehenden Beispiele für die Verbindungen (I) und die Beispiele für die Zubereitung ausführlicher erläutert.

Beispiel 1 Äthylester der ML-236B-Carbonsäure

10

20

10 g ML-236B wurden unter Erhitzen in 150 ml Äthanol gelöst, und zu der gebildeten Lösung wurden 20 g eines ^sauren Ionenaustauscherharzes (trockenes Dowex^s 50 W in der H⁺-Form) gegeben, und danach wurde 3 Stunden bei 60 bis 70⁰C gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wurde das Harz abfiltriert, das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert, und der Rückstand wurde isoliert und durch Chromatographie an 100 g Kieselsäure gereinigt, wobei 6,1 g des gewünschten Produkts und 3,1 g der Ausgangsverbin- %o dung ML-236B erhalten wurden.

Analyse für C₂^H₄₀O₆:

Berechnet: C 68,77%; H 9,24%

Gefunden: C 68,82%; H 9,31% NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₁):

4,20 (2H, Quadruplett) 1,25 (3H, Triplett) IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

1730

35

40

Beispiel 2 Propylester der ML-236B-Carbonsäure

Die gleiche Verfahrensweise wie in Bespiel 1 wurde durchgeführt, mit der Abänderung, daß 2,5 g ML-236B, 50 ml n-Propanol und 5 g des sauren lonenaustauscherharzes angewendet wurden. Auf diese Weise wurden 1,5 g des gewünschten Produkts erhalten.

Analyse für C₂₆H₄₂O₆:

Berechnet: C 69,30%; H 9,40%

Gefunden: C 69,52%; H 9,45% NMR-Spektrum δ ppm (CDCl-,):

3,6-4,4 (4H, Multiplen)
IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

1732

Beispiel 3
Isopropylester der ML-236B-Carbonsäure

50

55

60

Die gleiche Verfahrensweise wie in Beispiel 1 wurde wiederholt, mit der Abänderung, daß 10 g ML-236B, ml Isopropanol und 20 g des sauren Ionenaustauscherharzes angewendet wurden, wobei 6,5 g des gewünschten Produkts und 3,6 g der Ausgangsverbindung ML-236B erhalten wurden.

Analyse Tür C₂₆H₄₂O₆:

Berechnet: C 69,30%; H 9,40%

Gefunden: C 69,83%; H 9,30%
NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₁):

5,10 (IH, Multiplett) 1,25 (6H, Duplett)
IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

1725

Beispiel 4
Hexylester der ML-236B-Carbonsäure

Zu einer Lösung von 10 g ML-236B-Carbonsäure in 50 ml n-Hexylalkohol und 20 ml Benzol wurde 0,5 ml konzentrierte Schwefelsäure gegeben, und das erhaltene Gemisch wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Dann wurde das Reaktionsgemisch mit Hilfe einer wässerigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat neutralisiert, mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, und schließlich wurde das Lösungsmittel bei einer Temperatur von nicht mehr als 6O⁰C unter vermindertem Druck abdestilliert. Der Rückstand wurde isoliert und durch Chromatographie an 100 g Kieselsäuregel gereinigt, wobei 7,4 g des gewünschten Produkts und 2,3 g der Ausgangsverbindung ML-236B erhalten wurden.

Analyse Tür C₂₉H₄₈O₆:

Berechnet: C 70,69%; H 9,82%

Gefunden: C 70,54%; H 10,12%
NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

3,5-4,5 (4H, Multiplett)
IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

1735

Beispiel 5
Benzylester der ML-236B-Carbonsäure

Zu einer Lösung von 2,1 g des Natriumsalzes von ML-236B-Carbonsäure in 10 ml Dimethylformamid wurden 10 mg Natriumiodid und 2 ml Benzylchiorid gegeben, und das erhaltene Gemisch wurde 16 Stunden stehengelassen. Dann wurde Wasser dem Reaktionsgemisch zugefügt und das Gemisch wurde mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, und danach wurde das Lösungsmittel abdestilliert. Der Rückstand wurde isoliert und durch Chromatographie an 60 g Kieselsäuregel gereinigt, wobei 2,2 g des gewünschten Produkts erhalten wurden.

Analyse für C₃₀H₄₂O₆:

Berechnet: C 72,26%; H 8,49%

Gefunden: C 72,45%; H 8,46%
NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

5,18 (2H, Singulett), 7,40 (5H, Singuiett)
IR-Spektrum ν cm"' (flüssiger Film):

1730

Beispiel 6
4-Methylbenzylester der ML-236B-Carbonsäure

Die gleiche Verfahrensweise wie in Beispiel 5 wurde wiederholt, jedoch mit der Abänderung, daß 2,0 g des Natriumsalzes von ML-236B-Carbonsäure, 2 ml 4-Methylbenzylchlorid und 10 ml Dimethylformamid ver-

wendet wurden. Dabei wurden 2,3 g des gewünschten Produkts erhalten.

Analyse für CnH₄₄O₆:

Berechnet: C 72,62%; H 8,65%

Gerunden: C 72,50%; H 8,32% NMR-Spektrum <5ppm (CDCI₁):

2,30 (3H, Singulett), 5,10 (2H, Singulett),

7,40 (5H, Singulett)
IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

1730

Analyse für CJiH₄₄O₇:

Berechnet: C 70,43%; H 8,39%

Gerunden: C 70,81%; H 8,52% NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

3,?5 (3H, Singulett), 5,12 (2H, Singulett),

6,80, 7,05 (4H, Quadruplatt)
IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

Beispiel 8 4-Chlorbenzylester der ML-236B-Carbonsäure

Die gleiche Verfahrensweise wie in Beispiel 5 wurde wiederholt, mit der Abänderung, daß 1,0 g des Natriumsalzes der ML-236B-Carbonsäure, 1,5 g 4-Chlorbenzylchlorid und 7 ml Dimethylformamid verwendet wurden. Dabei wurden 1,3 g des gewünschten Produkts erhalten.

Analyse für C₃₀H₄₁O₆Cl:

Berechnet: C 67,58%; H 7,75%

Gerunden: C 67,71%; H 7,77% NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

5,20 (2H, Singulett), 7,38 (4H, Singulett) IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

1730

Analyse für C₃IH₄₂O₇:

Berechnet: C 70,69%; H 8,04%

Gefunden: C 70,45%; H 8,21% NMR-Spektrum ö ppm (CDCl₃):

5,44 (2H, Singulett), 7,4-8,2 (5H, Multiplett) IR-Spektrum ν cm"' (flüssiger Film):

1745, 1725, 1710

IO

Beispiel 7 4-Methoxybenzylester der ML-236B-Carbonsäure

Die gleiche Verfahrensweise wie in Beispiel 5 wurde wiederholt, mit der Abänderung, daß 2,0 g des Natriumsalzes der ML-236B-Carbonsäure, 2,5 g 4-Methoxybenzylchlorid und 10 ml Dimethylformamid verwendet wurden. Auf diese Weise wurden 2,2 g des gewünschten Produkts erhalten.

20 Beispiel 10 4-Bromphenacylester der ML-236B-Carbonsäure

Die gleiche Verfahrensweise wie in Beispiel 9 wurde wiederholt, mit der Abänderung, daß 1,0 g des Natriumsalzes der ML-236B-Carbonsäure, 1 g p-Bromphenacylbromid und 10 ml Dimethylformamid verwendet wurden, wobei 1,4 g des gewünschten Produkts erhalten wurden.

Analyse für C₃iH₄|O₇Br:

Berechnet: C 61,48%; H 6,82%

Gefunden: C 61,20%; H 7,01% NMR-Spektrum δ ppm (CDCI,):

5,40 (2H, Singulett), 7,45-8,0 (4H, Multiplett) IR-Spektrum ν cm"' (flüssiger Film):

1730, 1710

Beispiel 11 4-Methylphenacylester der ML-236B-Carbonsäure

Die gleiche Verfahrensweise wie in Beispiel 9 wurde wiederholt, mit der Abänderung, daß 1,0 g des Natriumsalzes von ML-236B-Carbonsäure, 1,0 g 4-Methylphenacylbromid und 10 ml Dimethylformamid verwendet wurden, wobei 1,1 g des gewünschten Produkts erhalten wurde.

Analyse für C₃₂H₄₄O₇:

Berechnet: C 71,08%; H 8,20%

Gefunden: C 71,38%; H 8,46% NMR-Spektrum ö ppm (CDCl₃):

2,46 (3H, Singulett), 5,42 (2H, Singulett), 7,5-8,2 (4H, Multiplen)

IR-Spektrum ν cm"' (flüssiger Film):

1745, 1730, 1710

25

30

35

40

50

Beispiel 9 Phenacylester der ML-236B-Carbonsäure

Eine Lösung von 10,5 g des Natriumsalzes der ML-236B-Carbonsäure und 6,3 g Phenacylbromid in 50 ml Dimethylformamid wurde bei Raumtemperatur 3 Stunden stehengelassen. Dann wurde dem Reaktionsgemisch Wasser zugefügt, und uas erhaltene Gemisch wurde mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, und dann wurde das Lösungsmittel abdestilliert. Der Rückstand wurde isoliert und durch Chromatographie an 150 g Kieselsäuregel gereinigt, wobei 11,3 g des gewünschten Produkts in Form einer farblosen ölieen Substanz erhalten wurden.

Beispiel 12 4-Methoxyphenacylester der ML-236B-Carbonsäure

Die gleiche Verfahrensweise wie in Beispiel 9 wurde wiederholt, mit der Abänderung, daß 1,0 g des Natriumsalzes der ML-236B-Carbonsäure, 1,2 g 4-Methoxyphenacylbromid und 10 ml Dimethylformamid verwendet wurden, wobei 0,9 g des gewünschten Produkts erhalten wurde.

Analyse für C₃₂H₄₄O₈:

Berechnet: C 69,04%; H 7,97%

Gefunden: C 69,20%; H 8,19% NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

3,81 (3H, Singulett), 5,45 (2H, Singulett),

6,6-8,0 (4H, Multiplett)
IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

1740, 1725, 1710

Beispiel 13
Methylester der ML-236B-Carbonsäure

Ein Gemisch aus 9,75 g ML-236B und 225 ml einer wässerigen 0,1 η NaOH-Lösung wurde 1 Stunde auf einem Wasserbad auf 80 bis 90⁰C erhitzt, während es gelegentlich geschüttelt wurde. Nach 1 Stunde wurde ungelöstes ML-236B abfiltriert, das Filtrat wurde mit HCI unter Eiskühlung angesäuert und mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer gesättigten wässerigen NaCl-Lösung gut gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet. Der getrocknete Äthylacetat-Extrakt wurde mit einer ätherischen Lösung von Diazomethan behandelt. Das Lösungsmittel wurde abdestilliert, und der Rückstand wurde durch Chromatographie an Kieselsäuregel gereinigt, wobei 6,1 g des gewünschten Produkts in Form einer farblosen öligen Substanz erhalten wurden. Ausbeute: 58%.

[a]j} = +202,55 (c = 1%, Äthanol)
NMR-Spektrum δ ppm (CDCl,):

3,7 (3H, Singulett)
IR-Spektrum ν cm"' (flüssiger Film):

1725,3450
Massenspektrum (Molekulargewicht 422,54):

M" 422

Beispiel 14
Äthylester der ML-236B-Carbonsäure

Ein Gemisch aus 30,9 g ML-236B und 775 ml einer wässerigen 0,1 η NaOH-Lösung wurde 1 Stunde auf einem Wasserbad auf 80 bis 9O⁰C erhitzt, wobei es gelegentlich geschüttelt wurde. Das ML-236B löste sich allmählich. Nach 1 Stunde wurde ungelöstes ML-236B abfiltriert, und das Filtrat wurde gefriergetrocknet, wobei 27,0 g des Natriumsalzes der ML-236B-Carbonsäure in Form eines weißen Pulvers erhalten wurden.

5,0 g (0,01 Mol) der so erhaltenen Substanz wurden zu 30 ml absolutem Äthanol gegeben, um eine Suspension zu bilden. In die Suspension wurde unter Eiskühlung trockener gasförmiger Chlorwasserstoff eingeleitet, worauf NaCl sich abschied. Das Lösungsmittel wurde bei niederer Temperatur abdestilliert, und der Rückstand wurde in Benzol gelöst. Die erhaltene Lösung wurde mit einer wässerigen Natriumhydrogencarbonatlösung und danach mit einer gesättigten wässerigen Natriumchloridlösung gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet. Das Lösungsmittel wurde abdestilliert, und der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Kieselsäuregel gereinigt, wobei 2,0 g des gewünschten Produkts als farblose ölige Substanz erhalten wurden. Ausbeute: 45,87%.

[a]^:ö = +188,25 (c = 1 %, Äthanol)
NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

4,14 (2H, Quadruplet!), 1,25(3H, Triplett)
IR-Spektrum ν cm"' (flüssiger Film):

1725, 3450
Massenspektrum (Molekulargewicht 436,57):

M⁺436

Beispiel 15
Äthylester der ML-236B-Carbonsäure

Zu einem Gemisch aus 1,0 g (0,0025 Mol) ML-236B und 15 ml absolutem Äthanol wurden einige Tropfen Acetylchlorid unter Rühren gegeben, und das Rühren

wurde bei Raumtemperatur über Nacht fortgesetzt. Das Lösungsmittel wurde abdestilliert, und der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Kieselsäuregel gereinigt, wobei 0,3 g des gewünschten Produkts in Form einer farblosen öligen Substanz erhalten wurde. Ausbeute: 26,85%.

[a]² _D ⁵ - +188,25 (c = 1%, Äthanol)
NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

4,14 (2H, Quadruplet!.), 1,25 (3 H, Triplett)
IR-Spektrum ν cm"' (flüssiger Film):

1725, 3450
Massenspektrum (Molekulargewicht 436,57):

M⁺436

Beispiel 16
Isopropylester der ML-236B-Carbonsäure

Zu 20 ml absolutem Isopropanol wurden 3,0 g (0,0069 Mol) des Natriumsalzes von ML-236B-Carbonsäure gegeben, wobei eine Suspension gebildet wurde. Trockener gasförmiger Chlorwasserstoff wurde unter Eiskühlung und Rühren in die Suspension eingeleitet. Das abgeschiedene NaCl wurde abgetrennt. Das Lösungsmittel wurde bei niederer Temperatur abdestilliert, und der Rückstand wurde in Benzol gelöst. Die Lösung wurde mit einer wässerigen Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet. Das Lösungsmittel wurde abdestilliert, und der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Kieselsäuregel gereinigt, wobei 1,6 g des gewünschten Produkts in Form einer farblosen öligen Substanz erhalten wurden. Ausbeute: 51,02%.

[a]$ = 178,24 (c = 1 %, Äthanol)
NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

5,08 (IH, Multiplett), 1,25 (6H, Duplett)
IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

1725, 3450
Massenspektrum (Molekulargewicht 450,60):

M⁺450

Beispiel 17
Isopropylester der ML-236B-Carbonsäure

Zu 30 ml absolutem Isopropanol wurden 3,9 g (0,01 Mol) ML-236B und einige Tropfen Acetylchlorid gegeben, und das gebildete Gemisch wurde einige Minuten auf 5O⁰C erhitzt. Dann wurde das Lösungsmittel abdestilliert und der Rückstand, wurde durch Säulenchromatographie an Kieselsäuregel gereinigt, wobei 2,6 g des gewünschten Produkts in Form einer farblosen öligen Substanz erhalten wurden. Ausbeute: 57,78%.

[a] ²J = 178,24 (c = 1%, Äthanol)
NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

5,08 (IH, Multiplett), 1,25 (6H, Duplett)
IR-Spektrum ν cm"' (flüssiger Film):

1725, 3450
Massenspektrum (Molekulargewicht 450,60):

M⁺450

Beispiel 18
n-Butylester der ML-236B-Carbonsäure

Zu 50 ml einer 1 %igen wässerigen Natriumhydroxidlösung wurden 10,0 g (0,026 Mol) ML-236B gegeben, und es wurde erhitzt und geschüttelt, bis die vollstän-

dige Lösung erzielt war. Dann wurde der pH-Wert der Lösung mit I π Chlorwasserstoffsäuio unter Eiskühlung aufpH 4 eingestellt Sofort nach der Einstellung des pH-Weris wurde die Lösung zweimal mit Äthylacetat extrahiert, und die kombinierten Extrakte wurden über Natriumsulfat getrocknet Das Ätbylacetat wurde abdestilliert und der Rückstand in n-Butanol gelöst. In die Lösung wurde trockener gasförmiger Chlorwasserstoff unter Eiskühlung und Rühren während 10 Minuten eingeleitet. Das Reaktionsgemisch wurde mit einer wässerigen Natriumhydrogencarbonatlösung und einer gesättigten wässerigen Natriumchloridlösung gewaschen. Dann wurde n-Butanol unter vermindertem Druck abdestilliert, und der Rückstand wurde in Benzol gelöst und schließlich der Säulenchromatographie an Kieselsäuregel unterworfen. Dabei wurden 4,9 g des gewünschten Produkts in Form einer farblosen öligen Substanz erhalten. Ausbeute: 41,21%.

Analyse für C27H44O6:

Berechnet: C 69,79%; H 9,55%

Gerunden: C 69,40%; H 9,45%
la] £ = +207,44 (c = 1 %, Äthanol)
NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

4,13 (5H, Triplett)
IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

1725,3450
Massenspektrum (Molekulargewicht 464,62):

M⁺464

Beispiel 19
n-Butylester der ML-236B-Carbonsäure

Zu 100 ml n-Butanol wurden 13 g (0,033 Mol) ML-236B und eine kleine Menge Acetylchlorid zügesetzt, und das erhaltene Gemisch wurde bei Raumtemperatur gerührt. Die Bildung des entsprechenden n-Butyleslers wurde gelegentlich durch Dünnschichtchromatographie überprüft und, wenn festgestellt wurde, daß der Ester sich schlecht bildete, wurde eine weitere kleine Menge an Acetylchlorid zugesetzt und das Rühren fortgesetzt. Wenn praktisch keine Ausgangsverbindung mehr festgestellt wurde, wurde die Reaktion beendet. Die Gesamtmenge an Acetylchlorid betrug 1 g. Das Reaktionsgemisch wurde mit einer wässerigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat und einer gesättigten wässerigen Natriumchloridlösung gewaschen, und das n-Butanol wurde unter vermindertem Druck abdestilliert. Der Rückstand wurde der Säulenchromatographie an Kieselsäuregel unter Verwendung von Benzol als Entwicklungslösungsmittel unterworfen, wobei 10,9 g des gewünschten Produkts erhalten wurden. Ausbeute: 70,4%.

10

15

20

25

30 gentlich geschüttelt wurde. Das ML-236B löste sich allmählich. Nach 1 Stunde wurde ungelöstes ML-236B abfiltriert und das Filtrat mit HCl unter Eiskühlung angesäuert und mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer gesättigten wässerigen Natriumchloridlösung gut gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Dieser Äthylacetatextrakt wurde mit einer gesondert hergestellten ätherischen Lösung von Phenyldiazomethan vermischt. Das Lösungsmittel wurde abdestillicrt, und der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Kieselsäuregel gereinigt, wobei 8,6 g des gewünschten Produkts in Form einer farblosen öligen Substanz erhalten wurden. Ausbeute: 17,27%.

NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₁):
5,08 (2H, Singulett), 7,34 (5H, Singulett)

IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):
1725, 3450

Massenspektrum (Molekulargewicht 498,64):
M⁺498

Beispiel 21
Natriumsalz der ML-236B-Carbonsäure

Eine Suspension vt Ji 39 g ML-236B in einer0,2 η wässerigen Lösung von Natriumhydroxid (500 ml) wurde 2 Stunden bei 50⁰C gerührt, um eine im wesentlichen klare wässerige Lösung zu bilden. Eine kleine Menge eines unlöslichen Rückstands wurde abfiltriert, und das Filtrat wurde gefriergetrocknet, wobei 40,2 g des Natriumsalzes von ML-236B-Carbonsäure erhalten wurden.

UV-Spektrum (wässerige Lösung)

[a|;/ = +207,44 (c = 1 %, Äthanol)
NMR-Spektrum δ ppm (CDCl₃):

4,13 (3H, Triplett)
IR-Spektrum ν cm"¹ (flüssiger Film):

1725, 3450
Massenspektrum (Molekulargewicht 464,62):

M⁺ 464

Beispiel 20
Benzylester der ML-236B-Carbonsäure

Ein Gemisch aus 39,0 g (0,1 Mol) ML-236B und 1 1 einer OJ η wässerigen NaOH-Lösung wurde auf einem Wasserbad 1 Stunde auf 80 bis 90°C erhitzt, wobei gele-

55

λ max (rrw)	509
229,0	580
236,2	386
245,0	Beispiel 22
	der ML-236B-Carbonsäure
Calciumsalz

Zu 1 1 einer wässerigen Lösung, die 4,7 g Calciumhydroxid enthielt, wurden 50 g ML-236B gegeben, und das •Gemisch wurde 2 Stunden bei 50⁰C gerührt. Die gesamte Lösung, welche den in situ gebildeten Niederschlag enthielt, wurde gefriergetrocknet. Die getrocknete Substanz (etwa 55 g) wurde in 500 ml Äthylacetat suspendiert. Die Suspension wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt, und der Niederschlag wurde durch Filtration gewonnen. Der Niederschlag wurde weiterhin mit 1 1 Äthylacetat gewaschen und unter Vakuum getrocknet, wobei 49,5 g des Calciumsalzes der ML-236B-Carbonsäure erhalten wurden.

60

65

Vj v-opcMiuiu vwaaaciigc

229,0	516
236,2	596
245,0	393

Beispiel 23

Aluminiumsalz der ML-236B-Carbonsäure

Eine Lösung von 10 g des in Beispiel 12 hergestellten Natriumsalzes der ML-236B-Carbonsäure in 100 ml Wasser wurde mit Hilfe van ChlorwasserstofTsäure auf einen pH-Wert von 2 eingestellt, und zu der Lösung wurden 100 ml Benzol zugefügt. Nach dem Schütteln wurde die Benzolschicht gewonnen und zur Trockne konzentriert. 8 g des Rückstands und 1,3 g Aluminiumisopropoxid wurden in 200 ml wasserfreiem Benzol gelöst und die gebildete Lösung wurde 2,5 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Dann wurde das Lösungsmittel abdestilliert, wobei 9,0 g des Aluminiumsalzes der ML-236B-Carbonsäure verblieben.

UV-Spektrum (wässerige Lösung)

18	250	mg
Zubereitung Nr. 1	75	mg
Kapsel zur oralen Verabreichung	15	mg
Methylester von ML-236B-Carbonsäure	340	mg
Lactose
Magne siumstearat
insgesamt

/ max	*(mi)*	Beispiel	E\\.
229,0		506
236,2		580
245,0		389
	24

Analyse Tür C₂₉H₄₈N₂O₇:

Berechnet: C 71,58; H 6,99; N 2,89%

Gefunden: C 71,53; H 7,08; N 2,82% IR-Spektrum cm"¹ (Nujol):

3150,2100, 1730, 1610, 1585, 1510, 1410, 1180, 1080, 545

Beispiel 25 Argininsalz der ML-236B-Carbonsäure

Analyse Tür C₂₉H₄₈N₄O₇:
Berechnet: C 59,77; H 8,64; N 9,62% Gefunden: C 59,63; 118,72; N 9,56% In den vorstehend für die Zubereitung angegebenen Mangen wurden die pulverformigen Bestandteile miteinander vermischt und durch ein Sieb einer Maschenweite von 0,25 mm (ASTM-Sieb mit 60 Maschen) gesiebt. Dann wurden 340 mg des gesiebten Pulvers in eine Gelatinekapsel Nr. 1 gegeben, wobei ein Präparat in Form einer Kapsel erhalten wurde.

Lysinsalz der ML-236B-Carbonsäure

Zu einer Lösung von 4,10 g ML-236B-Carbonsäure in 50 ml Äthanol wurden 5 ml einer wässerigen Lösung von 1,46 g Lysin gegeben. Das gebildete Gemisch wurde 30 Minuten bei 60⁰C gerührt. Danach wurde das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert. Zu dem Rückstand wurden 100 ml Äthylacetat gegeben, und das Gemisch wurde bei 70⁰C gerührt. Die so abgeschiedene kristalline Substanz wurde durch Filtration abgetrennt. Ausbeute: 4,7 g; F. 182°C.

30

Zubereitung Nr. 2 Injizierbare Zubereitung

Das Natriumsalz von ML-236B-Carbonsäure wurde unter aseptischen Bedingungen in ein Fläschchen gegeben, so daß sich 250 mg des sterilen Salzes in dem Fläschchen befanden, unter aseptischen Bedingungen gefriergetrocknet und dann dicht verschlossen. Vor der Anwendung wurde das Mittel mit 2 ml einer physiologischen Kochsalzlösung vermischt, wobei eine injizierbare Zubereitung erhalten wurde.

	Zubereitung Nr. 3	250	mg
Kapsel	für die orale Verabreichung	75	mg
Calciumsalz der	ML-236B-Carbonsäure	15	mg
Lactose		340	mg
Magnesiumstearat
insgesamt

Zu einer Lösung von 4,05 g ML-236B-Carbonsäure in 40 ml Tetrahydrofuran wurden 10 ml einer wässerigen Lösung von 1,75 g Arginin gegeben. Dann wurde die gleiche Behandlung -.vie in Beispiel 24 durchgeführt, wobei 4,71 g des gewünschten Produkts erhalten wurden. F. 147°C.

40

Entsprechend der vorstehend angegebenen Rezeptur wurden die pulverformigen Bestandteile vermischt und durch ein Sieb einer Maschenweite von 0,25 mm (ASTM-Sieb mit 60 Maschen) gesiebt. Dann wurden 340 mg des gesiebten Pulvers in eine Gelatinekapsel Nr. 1 eingeschlossen, wobei die Zubereitung in Form einer Kapsel erhalten wurde.

3350, 315O₁ 1730, 1640, 1560, 1400, 1260, 1180 1080, 830, 530

Nachstehend werden einige Beispiele für erfindungsgemiiße Zubereitungen gegeben, welche die erllndungsgemäßen Mittel verdeutlichen sollen.

Zubereitung Nr. 4 Injizierbare Zubereitung

Das Argininsalz der ML-236B-Carbonsäure wurde unter aseptischen Bedingungen in ein Fläschchen gegeben, su uaß sich in dem Fiäsciichen iOü g des sieriiisierten Salzes befanden, unter aseptischen Bedingungen gefriergetrocknet und danach verschlossen. Das Präparat wurde vorder Anwendung mit 2 ml einer physiologischen Kochsalzlösung vermischt, wobei eine injizierbare Zubereitung erhalten wurde.

Zubereitung Nr. 5 Kapsel für die orale Verabreichung

Lysinsalz der ML-236B-Carbonsäure

Lactose

Magnesiumstearat

insgesamt

mg 5

75 mg

15 mg 190 mg

Entsprechend der vorstehend angegebenen Rezeptur wurden die pulverformigen Bestandteile vermischt und durch ein Sieb einer Maschenweite von 0,25 mm (ASTM-Sieb mit 60 Maschen) gesiebt Dann wurden 190 mg des gesiebten Pulvers in eine Gelatinekapsel eingeschlossen, wobei eine Zubereitung in Form einer Kapsel erhalten wurde.

15

60

Claims

Patentansprüche:

1. Substituierte 3,5-Dihydroxyheptansäurederivate der allgemeinen Formel

HO

10

H₂C

ii