CN109868242A - 一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌及其应用 - Google Patents
一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109868242A CN109868242A CN201910191640.8A CN201910191640A CN109868242A CN 109868242 A CN109868242 A CN 109868242A CN 201910191640 A CN201910191640 A CN 201910191640A CN 109868242 A CN109868242 A CN 109868242A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bacillus subtilis
- butanone
- hydroxy
- salt
- nrcb002
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 title claims abstract description 63
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 title claims abstract description 63
- ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N Acetoin Chemical compound CC(O)C(C)=O ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 58
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title claims abstract description 34
- 241000219793 Trifolium Species 0.000 claims abstract description 34
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 33
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 20
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 6
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 30
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 15
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 8
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 claims description 5
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 claims description 5
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 5
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 claims description 4
- 241000726221 Gemma Species 0.000 claims description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 25
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 17
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 17
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 16
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 13
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 12
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 11
- 241000219823 Medicago Species 0.000 description 10
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 4
- 239000010871 livestock manure Substances 0.000 description 4
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 3
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 3
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 3
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 3
- 108091000130 1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 2
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 2
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- WYWFMUBFNXLFJK-UHFFFAOYSA-N [Mo].[Sb] Chemical compound [Mo].[Sb] WYWFMUBFNXLFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 2
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 2
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 2
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 2
- CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N methyl red Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1C(O)=O CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N 0.000 description 2
- 239000002068 microbial inoculum Substances 0.000 description 2
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004382 potting Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000009938 salting Methods 0.000 description 2
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 241000522190 Desmodium Species 0.000 description 1
- 229930191978 Gibberellin Natural products 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 235000010624 Medicago sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012271 agricultural production Methods 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 238000001479 atomic absorption spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229910052564 epsomite Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 239000010433 feldspar Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000004459 forage Substances 0.000 description 1
- IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N gibberellic acid GA3 Natural products OC(=O)C1C2(C3)CC(=C)C3(O)CCC2C2(C=CC3O)C1C3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003448 gibberellin Substances 0.000 description 1
- 229910052602 gypsum Inorganic materials 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 150000002475 indoles Chemical class 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000013081 phylogenetic analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000002786 root growth Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229910000391 tricalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌，其分类命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，菌株号为NRCB002，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO.17213，保藏日期为2019年1月18日。本发明还公开了上述枯草芽孢杆菌的应用。本发明的枯草芽孢杆菌株NRCB002通过纯培养试验、实验室平板试验和温室盆栽实验证明其具有耐盐特性，能够产生乙偶姻，并且能促进苜蓿的生长，具有良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域，涉及枯草芽孢杆菌及其在促进作物生长中的应用。
背景技术
目前在农业生产内部，由于化肥等农业投入品长期不合理使用，不仅造成农田土壤酸化、板结、次生盐渍化等问题日趋严重，还破坏了土壤根际微生物群落结构，使许多有益微生物从优势菌群变为次要菌群。紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是世界上分布最广的多年生豆科牧草，素有“牧草之王”之称。我国苜蓿的种植面积约为377.5万hm2，但是苜蓿产量低，每年都要从国外进口苜蓿以满足国内畜牧业的需求。苜蓿具有中强度的耐盐性，但随着土地盐碱化程度的不断加剧，紫花苜蓿的种植范围逐步减小。因此提高苜蓿的耐盐能力不仅是改良利用盐碱地的重要方法，也是扩大苜蓿种植范围提高苜蓿产量的根本途径。
植物根际促生细菌(PGPR)在植物根部有很强的定殖能力，同时能促进作物的生长，如提高种子的发芽率、促进根系生长和增加作物的产量。现在已经从水稻、小麦、玉米、花生等多种作物的根际分离得到了大量的PRPG菌株，并被广泛用于微生物肥料和微生物菌剂领域。其中芽孢杆菌因其良好的环境适应性，应用最为广泛。微生物肥料和微生物菌剂在施用时一般要求施用在根部或蘸根处理，原因是一般的芽孢杆菌的促生机制为：1、提高作物根际养分的可利用性，如溶磷、解钾等；2、分泌植物激素，如吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GAs)等；3、很少有人提及菌株产生挥发性化合物能促进作物生长，而挥发性物质可以在不接触根系的情况下发挥作用。如果能获得具备一般芽孢杆菌促生特征并且产生一定量挥发性物质的菌株，将有效扩大微生物肥料和微生物菌剂施用时距离根系的范围，具有高效、安全、施用方便等优点。
专利CN102827793A公开了一株产ACC脱氨酶的苜蓿假单胞菌的使用方法，其特征在于产ACC脱氨酶的苜蓿假单胞菌能够提高苜蓿的抗逆性并促进苜蓿生长，但其专利中所述土壤含盐量仅0.037％。专利CN201611205485.3公开了一种苜蓿专用生物肥的使用方法，其特征值在于其苜蓿专用肥包含了枯草芽孢杆菌等菌株，其虽然提高了苜蓿的产量，但是却没有提及促进盐碱地苜蓿的生长。专利CN105296381 A公开了一株枯草芽孢杆菌CYY-25及其应用的方法，其特征在于能促进盐碱地苜蓿的生长，但其并没有说明盐碱土的含盐量，并且其操作比较繁琐，其在苜蓿生长过程中，需每7d浇一次CYY-25菌悬液。枯草芽孢杆菌虽然能促进盐碱地和非盐碱地苜蓿的生长，但是，其应用的盐碱土含盐量比较低且操作流程繁琐，很难满足中度和重度盐碱地土壤的要求。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌，该菌株具有优异的在高盐和弱碱条件下促进苜蓿等植物生长的能力，促进苜蓿在中度和重度盐碱地土壤的生长。
本发明还要解决的技术问题是提供上述枯草芽孢杆菌的应用。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌，其分类命名为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)，菌株号为NRCB002，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO.17213，保藏日期为2019年1月18日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮政编码100101。
其中，所述的耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌NRCB002是发明人于2018年8月从江苏省宜兴市大铺镇水稻根际土中分离得到，该菌落呈圆形，不透明，罕见半透明，淡黄色白色和凸起，边缘不规则，易挑起。对菌株的16SrDNA序列进行测定，通过***发育分析和生理生化鉴定，确定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，并命名为NRCB002。该菌能够生成吲哚乙酸、溶解无机磷、溶解不溶性钾，这与大多数芽孢杆菌相同。此外，该菌还可以生成挥发性气体乙偶姻，在菌体不接触作物根系的时候发挥作用，有效扩大微生物肥料和微生物菌剂施用时距离根系的范围，具有高效、安全、施用方便的优点。本发明的枯草芽孢杆菌株NRCB002通过纯培养试验、实验室平板试验和温室盆栽实验证明其具有耐盐特性，能够产生乙偶姻，并且能促进苜蓿的生长，具有良好的应用前景。本发明的其他特征将在后面的具体实施部分予以详细说明。
其中，所述的枯草芽孢杆菌是嗜盐型枯草芽孢杆菌，在液体培养基中，其耐盐度最高可达100g/L。
其中，所述的枯草芽孢杆菌，在土壤中，其耐盐度最高可达20g/kg。
上述耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌在发酵生产乙偶姻中的作用也在本发明保护范围之内。
上述耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌在提高植物耐盐迫能力中的应用也在本发明保护范围之内。
其中，所述的植物优选为苜蓿。
具体应用方法是，将枯草芽孢杆菌NRCB002应用于盐碱土壤，所述的盐碱土壤含可溶性盐浓度最高达20g/kg。
上述耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌在促进植物生长中的应用也在本发明保护范围之内。
其中，所述的植物优选为苜蓿。
本发明所述的耐盐性能，所述的盐是指KCl、K2SO4、K2CO3、KNO3、NaCl、Na2SO4、Na2CO3等无机盐中的一种或几种。
有益效果：本发明提供的枯草芽孢杆菌NRCB002能显著提高苜蓿等作物的耐盐能力，在可溶性盐含量为0g/kg，15g/kg，20g/kg时枯草芽孢杆菌NRCB002均能显著地促进苜蓿的生长，其中在可溶性盐含量为20g/kg时，促生效果最好，接种该菌株NCBR002的苜蓿的干重较空白增加102％。使用本发明提供的微生物菌剂可以扩大苜蓿的种植范围，提高作物的种植面积。
附图说明
图1为枯草芽孢杆菌NRCB002在固氮培养基上的菌落形态。
图2为枯草芽孢杆菌NRCB002的耐盐性实验结果。
图3为枯草芽孢杆菌NRCB002乙偶姻色谱检测结果，其中，A是1g/L乙偶姻标样，B为1/30的48h发酵液。
其中此发酵液NaCl含量为60g/L。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细的说明。实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例进行修改，或者对其中部分进行替换；而这些修改或替换，并不使相应的技术方案脱离本发明所要求保护的技术方案的范围。
实施例1菌株NRCB002的分离及筛选
取10g水稻根际土放入装有90mL盐溶液的锥形瓶中，在28℃、200r/min条件下，振荡1h，制成10-1的土壤悬液，取10-1的土壤悬液10mL，放入装有90mL盐溶液的瓶中，配成10-2的稀释液，以此类推。分别配成10-3、10-4、10-5的稀释液。然后用移液器分别移取10-3、10-4、10-5的稀释液100μL涂布于固氮固体培养基上，每个梯度三个重复。在28℃恒温生化培养箱中培养2～4d，每天观察其生长情况，出现单菌落后，在超净工作台中用接种环挑取比较大的菌落接种到BMS培养基上进行纯化，纯化5～6代后，用30％的甘油保藏在-80℃中，待用。
实施例2菌株NRCB002的鉴定
菌株外观形态见图1。
16S rDNA鉴定通过16SrDNA序列分析，经NCBI中BLAST比对后与枯草芽孢杆菌同源较高，相似度为100％，在根据其外形以及生理生化特性，初步鉴定菌株NRCB002为枯草芽孢杆菌。
生理生化性质见表1：淀粉水解、V-P反应、明胶液化、葡萄糖产酸、溶菌酶、甲基红试验均为阳性。
表1菌株NRCB002生理生化性质
| 菌株编号 | 淀粉水解 | V-P反应 | 甲基红试验 | 明胶液化 | 葡萄糖产酸 | 溶菌酶 |
| NRCB002 | + | + | + | + | + | + |
实施例3枯草芽孢杆菌NRCB002的耐盐性分析
将分离纯化的耐盐菌株枯草芽孢杆菌NRCB002菌悬液，分别转接相同量到不同盐浓度的液体培养基中，25～30℃，150～200r/min摇床培养，观察生长情况，每隔1d时间测其菌浓度(OD600)，以确定细菌耐盐程度，菌株的耐盐性能见图2。从图中可以看出随着NaCl浓度的增加，菌株NRCB002OD600逐渐增大，这可以推断菌株NRCB002为嗜盐菌。
实施例4枯草芽孢杆菌NRCB002产挥发性气体乙偶姻的测定
发酵种子培养基：采用LB培养基(酵母粉5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl10g/L)，培养条件为旋转式摇床28℃，200r/min。
发酵培养基：酵母膏5g/L，玉米浆4g/L，尿素4g/L，葡萄糖100g/L，NaCl 10～100g/L，在培养条件为28℃，200r/min摇床里面培养48h后，用气相色谱测定发酵液中乙偶姻含量。
乙偶姻采用Agilent 7890A GC分析，GC条件为：氢火焰检测器220℃，进样口温度210℃，载气N2，程序升温。
菌株NRCB002产乙偶姻能力见表2。
实施例5枯草芽孢杆菌NRCB002产吲哚乙酸(IAA)能力鉴定
采用Salkowski比色法测定菌株NRCB002分泌IAA的能力。
发酵培养基：酵母粉5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 10g～100g/L，色氨酸1g/L。将活化好的菌株按1％的接种量接入发酵培养基中，在28℃，200r/min下培养2～3d，每株菌3个重复。发酵液在8000r/min离心5min，取上清液1mL于4mL离心管中，加入2mL比色液，摇匀，在室温黑暗条件下放置15～20min，在530nm处测定吸光值。用IAA标品配不同浓度的IAA溶液，与测样品相同方法处理并测定吸光值，绘制标准曲线。参考标准曲线确定IAA含量。
枯草芽孢杆菌NRCB002产吲哚乙酸(IAA)的情况见表2。
实施例6枯草芽孢杆菌NRCB002的溶磷活性分析
利用钼锑抗比色法测定其溶磷能力。
发酵培养基：KH2PO4，0.2g/L；K2HPO4，0.8g/L；MgSO4·7H2O，0.2g/L；NaCl10g～100g/L CaSO4·2H2O，0.1g/L；Ca3(PO4)2，5g/L；FeCl3，微量；Na2Mo4·2H2O，微量；酵母提取物，0.5g/L；甘露醇，20g/L.将活化好的菌株NRCB002按1％的接种量将活化的菌株接入发酵培养基中，在28℃，200r/min下培养2～3d，每株菌3个重复。发酵液在8000r/min离心，取上清液5mL于50mL容量瓶中，加去离子水约30mL，加入二硝基苯酚指示剂2滴，用氢氧化钠和稀硫酸调溶液至微黄，然后加入钼锑抗显色剂5mL，摇匀，定溶，在700nm处比色。
枯草芽孢杆菌NRCB002的溶磷活性见表2。
实施例7枯草芽孢杆菌NRCB002的解钾能力测定
发酵种子培养基：采用LB培养基(酵母粉5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl10g/L)，培养条件为旋转式摇床28℃，200r/min。
发酵培养基：蔗糖50g/L，MgSO4·7H2O0.5g/L，CaCl20.1g/L，FeCl30.005g/L，NaCl10g～100g/L，钾长石粉1.0g/L，去离子水1.0L，pH值7.2～7.5，在培养条件为28℃，200r/min摇床培养3d后，用原子吸收光谱仪测定发酵液中速效钾的含量。
枯草芽孢杆菌NRCB002的解钾能力见表2。
从表中可以看出，在发酵液NaCl浓度为10g/L时，菌株NRCB002IAA分泌量最高为70mg/L；在发酵液NaCl浓度为60g/L时，菌株NRCB002分泌乙偶姻能力最强达16g/L；在发酵液NaCl浓度为40g/L时，菌株NRCB002具有较好的溶磷量解钾能力，分别达到75mg/L和7.8mg/L。
表2枯草芽孢杆菌NRCB002的促生特性
实施例8由枯草芽孢杆菌NRCB002发酵产生的有机性挥发气体乙偶姻对苜蓿的促生作用
将枯草芽孢杆菌NRCB002接种于LB液体养基中，在25～30℃，150～200r/min摇床下培养至对数中期(OD600＝1.0)，4℃离心收集菌体，菌体用0.86％生理盐水重悬，待用。
苜蓿种子表面消毒，过程如下：70％乙醇浸泡15s，2.5％次氯酸钠浸泡15min，再用无菌水冲洗7～8次，将苜蓿种子移到1/2MS培养基后，放入24℃光照培养箱中催芽2天。将发芽的苜蓿种子移到带有隔板的13*13cm培养皿的一室中，每皿移栽五株，培养基另一室加200μL无菌水悬浮的NRCB002的菌液(OD600＝1)。培养基两边均为含0g/L、15g/L和20g/LNaCl的1/2MS固体培养基，以200μL无菌水为对照。培养皿用封口膜封住，放置于24℃，16h光照、8h黑暗的光照培养箱中培养。培养7d后，测量苜蓿的株高、鲜重、干重。从表3可以看出由枯草芽孢杆菌NRCB002产生的有机性挥发气体能在NaCl含量为0g/L，15g/L和20g/L时均能显著地促进苜蓿的生长，其中在NaCl含量为15g/L时，促生效果最好，接种该菌剂的苜蓿的干重较空白增加18.1％。
表3枯草芽孢杆菌NRCB002产生的有机性挥发气体对苜蓿促生实验数据
实施例9供试土壤的理化性质
依据鲁如坤主编的《土壤农业化学分析方法》进行测定，供试土壤初始理化性质见表4。
表4供试土壤的理化性质
实施例10枯草芽孢杆菌NRCB002在含可溶性盐土壤中对盆栽苜蓿的促生作用
将枯草芽孢杆菌NRCB002接入LB培养基，在28℃、200r/min条件下，摇床培养，每隔2小时测OD600，当OD600值为1时，将菌液在8000r/min离心，收集已经活化的菌株。将收集菌体用0.86％生理盐水清洗，然后用等体积的无菌水重悬，并将其稀释100倍后制成菌悬液待用。将挑选大小一致，无损伤的苜蓿种子用清水冲洗后，放入装有待测菌悬液的培养皿内，浸泡2～3h后，将其移入装有NaCl浓度为13.7g/kg，18.7g/kg和0g/kg的农田土花盆中(其中装填的供试土壤为实施例9所述土壤)每盆移入20颗苜蓿籽，每处理播种4盆，在自然光照条件下，生长14d时统计发芽率，生长30d测量株高、叶面积、鲜重，以不接种菌株NCBR002为空白对照。实验结果见表5。从表5可以看出在可溶性盐含量为1.3g/kg，15g/kg，20g/kg时枯草芽孢杆菌NRCB002均能显著地促进苜蓿的生长，其中在可溶性盐含量为15g/kg时，促生效果最好，接种该菌剂的苜蓿的干重较空白增加124％。
表5枯草芽孢杆菌NRCB002对盆栽苜蓿促生实验数据
序列表
<110> 南京工业大学
<120> 一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌及其应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1393
<212> DNA
<213> 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)
<400> 1
tacctcaccg acttcgggtg ttacaaactc tcgtggtgtg acgggcggtg tgtacaaggc 60
ccgggaacgt attcaccgcg gcatgctgat ccgcgattac tagcgattcc agcttcacgc 120
agtcgagttg cagactgcga tccgaactga gaacagattt gtgggattgg cttaacctcg 180
cggtttcgct gccctttgtt ctgtccattg tagcacgtgt gtagcccagg tcataagggg 240
catgatgatt tgacgtcatc cccaccttcc tccggtttgt caccggcagt caccttagag 300
tgcccaactg aatgctggca actaagatca agggttgcgc tcgttgcggg acttaaccca 360
acatctcacg acacgagctg acgacaacca tgcaccacct gtcactctgc ccccgaaggg 420
gacgtcctat ctctaggatt gtcagaggat gtcaagacct ggtaaggttc ttcgcgttgc 480
ttcgaattaa accacatgct ccaccgcttg tgcgggcccc cgtcaattcc tttgagtttc 540
agtcttgcga ccgtactccc caggcggagt gcttaatgcg ttagctgcag cactaagggg 600
cggaaacccc ctaacactta gcactcatcg tttacggcgt ggactaccag ggtatctaat 660
cctgttcgct ccccacgctt tcgctcctca gcgtcagtta cagaccagag agtcgccttc 720
gccactggtg ttcctccaca tctctacgca tttcaccgct acacgtggaa ttccactctc 780
ctcttctgca ctcaagttcc ccagtttcca atgaccctcc ccggttgagc cgggggcttt 840
cacatcagac ttaagaaacc gcctgcgagc cctttacgcc caataattcc ggacaacgct 900
tgccacctac gtattaccgc ggctgctggc acgtagttag ccgtggcttt ctggttaggt 960
accgtcaagg taccgcccta ttcgaacggt acttgttctt ccctaacaac agagctttac 1020
gatccgaaaa ccttcatcac tcacgcggcg ttgctccgtc agactttcgt ccattgcgga 1080
agattcccta ctgctgcctc ccgtaggagt ctgggccgtg tctcagtccc agtgtggccg 1140
atcaccctct caggtcggct acgcatcgtt gccttggtga gccgttacct caccaactag 1200
ctaatgcgcc gcgggtccat ctgtaagtgg tagccgaagc caccttttat gtttgaacca 1260
tgcggttcaa acaaccatcc ggtattagcc ccggtttccc ggagttatcc cagtcttaca 1320
ggcaggttac ccacgtgtta ctcacccgtc cgccgctaac atcagggagc aagctcccat 1380
ctgtccgctc gac 1393
Claims (9)
1.一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌，其分类命名为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)，菌株号为NRCB002，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO.17213，保藏日期为2019年1月18日。
2.根据权利要求1所述的耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌是嗜盐型枯草芽孢杆菌，在液体培养基中，其耐盐度最高可达100g/L。
3.根据权利要求1所述的耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌，在土壤中，其耐盐度最高可达20g/kg。
4.权利要求1所述的耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌在发酵生产乙偶姻中的应用。
5.权利要求1所述的耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌在提高植物耐盐迫能力中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的植物为苜蓿。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，将枯草芽孢杆菌NRCB002应用于盐碱土壤，所述的盐碱土壤含可溶性盐浓度最高达20g/kg。
8.权利要求1所述的耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌在促进植物生长中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的植物为苜蓿。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910191640.8A CN109868242B (zh) | 2019-03-13 | 2019-03-13 | 一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910191640.8A CN109868242B (zh) | 2019-03-13 | 2019-03-13 | 一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109868242A true CN109868242A (zh) | 2019-06-11 |
| CN109868242B CN109868242B (zh) | 2020-07-03 |
Family
ID=66920459
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910191640.8A Active CN109868242B (zh) | 2019-03-13 | 2019-03-13 | 一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109868242B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112111427A (zh) * | 2020-09-25 | 2020-12-22 | 重庆市农业科学院 | 一株枯草芽孢杆菌pa8及其应用 |
| CN114574401A (zh) * | 2022-04-07 | 2022-06-03 | 南京工业大学 | 乙偶姻在提高根际促生菌在植物根际定殖上的应用 |
| CN115895936A (zh) * | 2022-08-08 | 2023-04-04 | 河北农业大学 | 一种枯草芽孢杆菌2-22及其应用 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101974444A (zh) * | 2010-05-13 | 2011-02-16 | 南京工业大学 | 一种高产d-核糖且联产乙偶姻的枯草芽孢杆菌 |
| CN102634563A (zh) * | 2011-10-19 | 2012-08-15 | 江南大学 | 一种产乙偶姻菌株的筛选方法及用该菌株发酵法生产乙偶姻 |
| CN102876760A (zh) * | 2012-10-22 | 2013-01-16 | 南京工业大学 | 枯草芽孢菌在高产腺苷且联产乙偶姻中的应用 |
| CN103627698A (zh) * | 2013-12-05 | 2014-03-12 | 江南大学 | 乙偶姻高耐受性菌株的选育和用该菌株发酵生产乙偶姻 |
| CN105296381A (zh) * | 2015-08-31 | 2016-02-03 | 哈尔滨师范大学 | 一株枯草芽孢杆菌cyy-25及其应用 |
| CN106748471A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-05-31 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 苜蓿专用生物肥 |
| CN107058173A (zh) * | 2017-03-01 | 2017-08-18 | 大连理工大学 | 一株发酵生产(3r)‑乙偶姻的枯草芽孢杆菌及其应用 |
-
2019
- 2019-03-13 CN CN201910191640.8A patent/CN109868242B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101974444A (zh) * | 2010-05-13 | 2011-02-16 | 南京工业大学 | 一种高产d-核糖且联产乙偶姻的枯草芽孢杆菌 |
| CN102634563A (zh) * | 2011-10-19 | 2012-08-15 | 江南大学 | 一种产乙偶姻菌株的筛选方法及用该菌株发酵法生产乙偶姻 |
| CN102876760A (zh) * | 2012-10-22 | 2013-01-16 | 南京工业大学 | 枯草芽孢菌在高产腺苷且联产乙偶姻中的应用 |
| CN103627698A (zh) * | 2013-12-05 | 2014-03-12 | 江南大学 | 乙偶姻高耐受性菌株的选育和用该菌株发酵生产乙偶姻 |
| CN105296381A (zh) * | 2015-08-31 | 2016-02-03 | 哈尔滨师范大学 | 一株枯草芽孢杆菌cyy-25及其应用 |
| CN106748471A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-05-31 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 苜蓿专用生物肥 |
| CN107058173A (zh) * | 2017-03-01 | 2017-08-18 | 大连理工大学 | 一株发酵生产(3r)‑乙偶姻的枯草芽孢杆菌及其应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 周佳宇等: "植物促生微生物挥发性物质的生态功能研究进展", 《中国生态农业学报》 * |
| 韩庆庆等: "枯草芽孢杆菌GB03对紫花苜蓿耐盐性的影响", 《植物生理学报》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112111427A (zh) * | 2020-09-25 | 2020-12-22 | 重庆市农业科学院 | 一株枯草芽孢杆菌pa8及其应用 |
| CN114574401A (zh) * | 2022-04-07 | 2022-06-03 | 南京工业大学 | 乙偶姻在提高根际促生菌在植物根际定殖上的应用 |
| CN115895936A (zh) * | 2022-08-08 | 2023-04-04 | 河北农业大学 | 一种枯草芽孢杆菌2-22及其应用 |
| CN115895936B (zh) * | 2022-08-08 | 2023-06-16 | 河北农业大学 | 一种枯草芽孢杆菌2-22及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN109868242B (zh) | 2020-07-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105950502B (zh) | 一种复合内生细菌菌剂及其在重金属污染土壤植物修复中的应用 | |
| CN103539535B (zh) | 一种黄瓜育苗专用活性生物基质产品 | |
| CN102399713B (zh) | 枯草芽孢杆菌hl-1及其在土壤解磷方面的应用 | |
| CN108660098A (zh) | 一株具有耐盐防病促生的枯草芽孢杆菌hg-15及其菌剂制备和应用 | |
| CN109868242A (zh) | 一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
| CN104630087B (zh) | 一种玉米根际促生菌ym4及其应用 | |
| CN104726378B (zh) | 采用强化耐盐微生物菌剂提高盐胁迫草坪草保护酶活性的方法 | |
| CN102172145A (zh) | 垃圾堆肥微生物菌剂在提高草坪草抗盐性方面的应用 | |
| CN103484396A (zh) | 一种嗜热一氧化碳链霉菌新菌株及其应用 | |
| CN104630090B (zh) | 一种玉米根际促生菌ym3及其应用 | |
| CN101519644B (zh) | 一株根瘤菌及其应用 | |
| CN107384823A (zh) | 一株油脂降解菌及其应用 | |
| CN104560787B (zh) | 一种花生根际促生菌hs11及其应用 | |
| CN102286400B (zh) | 一株提高作物抗病、抗逆的水稻内生固氮菌及其用途 | |
| CN109735475A (zh) | 一株耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌及其应用 | |
| CN109576171B (zh) | 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用 | |
| CN103146632A (zh) | 一种多功能有机磷农药降解细菌的筛选方法 | |
| CN104560789A (zh) | 一种花生根际促生菌hs2及其应用 | |
| CN102286401B (zh) | 一株产acc脱氨酶并拮抗赤霉病菌的水稻内生固氮菌及其用途 | |
| CN104560788B (zh) | 一种花生根际促生菌hs9及其应用 | |
| CN110257282A (zh) | 一种寡氧单胞固氮菌株系si-njau-1及其应用 | |
| CN109234213A (zh) | 一种绿针假单胞菌株x8及其应用 | |
| CN109182194A (zh) | 一株促进小冠花生长的杨凌根瘤菌及其培养方法与应用 | |
| CN102286402B (zh) | 产acc脱氨酶并拮抗多种病原真菌的大豆根际固氮菌及其用途 | |
| CN106754373A (zh) | 耐镉产铁载体菌株的分离方法及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |