CN105166412A - 一种复合微生物制剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种复合微生物制剂，主要由5种菌剂和辅料混合制成，二者的质量份配比为20～30：70～80，其中5种菌剂为光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂和丝状细菌菌剂，所述光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂和丝状细菌菌剂的质量份配比为：2～3:2～3:1～2:3～4:1～2。本发明还公开了上述复合微生物制剂在制备籽粒苋青贮饲料中的应用，该复合微生物制剂在籽粒苋青贮发酵时，发酵效果好，能提高籽粒苋青贮品质。还公开了上述复合微生物制剂在制备籽粒苋青贮饲料中的应用。
Description
技术领域
本发明属于青贮技术领域，具体涉及一种复合微生物制剂及其应用。
背景技术
籽粒苋别名为千穗谷、西黏谷、猪苋菜，是由南美的野生苋经栽培驯化选育出的优质籽粒苋栽培种。我国也属于原产地之一，是牛、羊、猪、鸡、兔、鹅等草食家畜的优良饲料。籽粒苋属于一年生草本植物，主要特点是适应性强，种植范围广，产量高，抗病力强，适口性好，再生能力强。籽粒苋柔嫩多汁清香可口，适口性好，营养丰富，是畜禽的优质饲料，鲜喂、青贮或调制优质草粒均宜。籽粒苋茎叶和籽实中粗蛋白质含量分别为17.7％～27.1％和30％以上，生物学价值高达80％以上，具有蛋白质、脂肪含量丰富、适口性好、易于消化等特性。
籽粒苋直接作为动物饲料时，其中的营养价值不容易被动物吸收，大部分随着粪便排出体外，极大的浪费了籽粒苋中的营养，而采用微生物对籽粒苋进行发酵后，能将籽粒苋中的粗蛋白、粗脂肪、粗纤维等转化为易于被动物吸收的蛋白饲料，让动物更加容易吸收和转化。
此外，由于籽粒苋内含有较多硝酸盐，刈割后堆放1～2d会转化为亚硝酸盐，饲喂易造成亚硝酸中毒，青贮是一种有效的方法。理想的青贮原料应该具备如下条件：可溶性糖分多，低的缓冲能值，高于20％的干物质含量。然而生产中籽粒苋不具备上述条件，按常规青贮方法难以成功，通过添加有益微生物对提高青贮品质效果非常明显，但经常使用的商品乳酸菌制剂属于特定的乳酸菌菌种，并不是对所有的饲草适用，常出现效果不稳定的现象。使用多种有益微生物组合在同一状态，青贮时进行发酵处理，形成了复杂而又稳定的微生态***，可以产生抗氧化物质，清除氧化物质，消除腐败，抑制病原菌，形成适于家畜生长的良好环境，同时，它还产生大量易为家畜吸收的有益物质，如氨基酸、有机酸、多醣类、各种维生素、各种生化酶、促生长因子、抗生素和抗病物质等，提升猪等家畜的免疫功能，促进健康生长。但目前籽粒苋青贮时进行发酵处理时，大多采用单一菌剂，存在发酵效果不佳，以及选择性问题，常常出现不稳定现象。因此关于多种有益微生物的筛选以及将其用于籽粒苋青贮，是未来籽粒苋青贮发展的方向。
发明内容
本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种复合微生物制剂，该复合微生物制剂在籽粒苋青贮发酵时，发酵效果好，能提高籽粒苋青贮品质。
本发明所要解决的第二个技术问题是提供上述复合微生物制剂在制备籽粒苋青贮饲料中的应用。
本发明所要解决的第一个技术问题是通过以下技术方案来实现的：一种复合微生物制剂，主要由5种菌剂和辅料混合制成，二者的质量份配比为20～30：70～80，其中5种菌剂为光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂和丝状细菌菌剂，所述光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂和丝状细菌菌剂的质量份配比为：2～3:2～3:1～2:3～4:1～2。
所述的5种菌剂优选通过以下方法制备获得：选取光合细菌菌种、乳酸细菌菌种、酵母细菌菌种、放线细菌菌种或丝状细菌菌种，分别斜面活化后，接入麦芽汁培养基在20～30℃、100～200RPM条件下摇床培养20～30h，接着接入反应釜中采用麦芽汁培养基在25～35℃、100～200RPM条件下扩大培养20～30h，得种子液，最后接入固体发酵培养基中，在25～35℃下发酵培养20～30h后，分别收集菌体后制成粉剂，即为光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂或丝状细菌菌剂。
其中光合细菌菌种、乳酸细菌菌种、酵母细菌菌种、放线细菌菌种、丝状细菌菌种为市售菌种。
上述制备获得的光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂或丝状细菌菌剂中含菌量为1×107～1×108个/g，水分含量≤10％。
摇床培养时接种量为8～15％，扩大培养时接种量为15～25％，发酵培养时种子液与固体发酵培养基的质量份配比为0.5～2:1。
所述辅料为米糠、燕麦麸和蜜糖，三者的质量份配比为20～30:60～80：0.5～2。
本发明上述复合微生物制剂的其中一种优选的制备方法如下：
(1)制备光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂和丝状细菌菌剂；
(2)将光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂和丝状细菌菌剂按比例混合，然后加入辅料，混合后，即制得复合微生物制剂。
本发明所要解决的第二个技术问题是通过以下技术方案来实现的：上述复合微生物制剂在制备籽粒苋青贮饲料中的应用。
该籽粒苋青贮饲料的制备方法优选如下：选取预处理后的籽粒苋原料，在籽粒苋原料上喷洒上述复合微生物制剂，调节温度为15～25℃在厌氧条件下进行发酵处理20～40天，再经包括打捆和裹包工序处理后贮藏即制得籽粒苋青贮饲料。
所述的预处理是：将收割的籽粒苋经包括粉碎和预干燥工序处理，其中，粉碎时粉碎至籽粒苋的长度为1.0～1.5cm，破节率在75％以上；预干燥时预干燥至籽粒苋中水分的质量百分含量为65～75％。
复合微生物制剂的用量占籽粒苋原料总质量的8～12％。
再经包括打捆和裹包工序处理后贮藏40～60天进行继续发酵处理即可作为青贮饲料食用。
本发明具有以下优点：
(1)本发明中的复合微生物制剂对籽粒苋的发酵效果好，发酵获得的籽粒苋饲料中蛋白质含量高，能改善饲料适口性，增加产量，提高经济效益，且获得的籽粒苋青贮饲料不含化学有害物质，绿色无污染，健康无公害；
(2)本发明通过将复合微生物制剂负载在籽粒苋中并经过发酵处理，制成的籽粒苋青贮饲料中籽粒苋和多种有益微生物组合在同一状态，形成了复杂而又稳定的微生态***，能产生抗氧化物质，清除氧化物质，消除腐败，抑制病原菌，形成适于家畜生长的良好环境，提升猪等家畜的免疫功能，促进健康生长；
(3)本发明中的复合微生物制剂用在制备籽粒苋青贮饲料时，安全可靠，无任何激素成份，无任何毒副作用，在发展绿色农业、生态畜牧业，人类健康受到日益关注的今天，本发明复合微生物制剂的广泛应用，为人们提供了切实可行的一个更好选择。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
第一部分复合微生物制剂
实施例1
(1)菌种
光合细菌菌种、乳酸细菌菌种、酵母细菌菌种、放线细菌菌种、丝状细菌菌种购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。也可以是市售产品，此处并不进行限定，属于上述种类的细菌均可使用，其中放线细菌菌种较佳是高温放线细菌菌种，丝状细菌菌种较佳米曲霉或黑曲霉。酵母细菌菌种最好是酿酒酵母，啤酒酵母等。乳酸细菌菌种可以是乳酸链球菌等。
(2)培养基
光合细菌斜面培养基：醋酸钠1.145g/L、蛋白胨0.055g/L、碳酸氢钠0.6g/L、硫代硫酸钠0.4g/L、氯化钠0.3g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.05g/L。
乳酸细菌斜面培养基：酵母膏7.5g、蛋白胨7.5g、葡萄糖10g、KH2PO42g、西红柿汁100mL、吐温800.5mL、蒸馏水900mL，pH7.0。
牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养基：用于酵母细菌、放线细菌和丝状细菌的斜面培养基。
麦芽汁培养基：用于光合细菌、乳酸细菌、酵母细菌、放线细菌、丝状细菌的大批量培养，配方：发酵啤酒原料(未加啤酒花)：30％，琼脂：35％，牛肉膏：10％，蜜糖5％，巴氏灭菌，pH值7.0-7.5，余量为水。
固体发酵培养基：玉米胚芽(pH值自然)，121.5℃灭菌30min；
(3)光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂、丝状细菌菌剂的制备
斜面菌体—活化(光合细菌、乳酸细菌采用对应培养基培养基)，酵母细菌、放线细菌、丝状细菌采用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基)—按10％(体积百分含量)接种量接入麦芽汁培养基25℃、150RPM摇床培养24h—20％(体积百分含量)接种量接入反应釜(麦芽汁培养基)30℃、150RPM培养24h—将培养后光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂、丝状细菌菌剂按1:1的比例接入固体发酵培养基—30℃培养24h—分别收集菌体后制成粉剂，晾干备用。
制备的光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂、丝状细菌菌剂含菌量为1×107～1×108个/g，水分≤10％。
(4)复合微生物制剂的制备
将上述制备的光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂、丝状细菌菌剂按照2:3:1:4:1的质量份配比混匀后制成5种菌剂，将该5种菌剂与辅料按20:80的质量份配比混匀，制成复合微生物制剂，其中辅料为米糠、燕麦麸和蜜糖，三者的质量份配比为20：80：0.5。
实施例2
光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂、丝状细菌菌剂的制备方式与实施例1不同的是，斜面菌体—活化(光合细菌、乳酸细菌采用对应培养基培养基)，酵母细菌、放线细菌、丝状细菌采用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基)—按8％(体积百分含量)接种量接入麦芽汁培养基30℃、100RPM摇床培养30h—15％(体积百分含量)接种量接入反应釜(麦芽汁培养基)30℃、150RPM培养30h—将培养后光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂、丝状细菌菌剂按0.5:1的比例接入固体发酵培养基—35℃培养30h—分别收集菌体后制成粉剂，晾干备用。
本实施例复合微生物制剂主要由5种菌剂和辅料混合制成，其中5种菌剂为光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂和丝状细菌菌剂，各菌剂的质量份配比为2.5:2.5:1.5:3.5:1.5。
5种菌剂与辅料的按25：75的质量份配比混合，制得复合微生物制剂，其中辅料为米糠、燕麦麸和蜜糖，三者的质量份配比为25：70：1.2。
实施例3
光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂、丝状细菌菌剂的制备方式与实施例1不同的是，斜面菌体—活化(光合细菌、乳酸细菌采用对应培养基培养基)，酵母细菌、放线细菌、丝状细菌采用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基)—按15％(体积百分含量)接种量接入麦芽汁培养基20℃、200RPM摇床培养20h—25％(体积百分含量)接种量接入反应釜(麦芽汁培养基)20℃、100RPM培养20h—将培养后光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂、丝状细菌菌剂按2:1的比例接入固体发酵培养基—25℃培养20h—分别收集菌体后制成粉剂，晾干备用。
本实施例复合微生物制剂主要由5种菌剂和辅料混合制成，其中5种菌剂为光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂和丝状细菌菌剂，各菌剂的质量份配比为3:2:2:3:2。
5种菌剂与辅料的按80：20的质量份配比混合，制得复合微生物制剂，其中辅料为米糠、燕麦麸和蜜糖，三者的质量份配比为30：60：2。
第二部分复合微生物制剂在制备籽粒苋青贮饲料中的应用
实施例4
本实施例提供的籽粒苋青贮饲料，通过以下方法制备获得：选取预处理后的籽粒苋原料，在籽粒苋原料上喷洒实施例1中的复合微生物制剂，调节温度为15℃在厌氧条件下进行发酵处理40天，再经包括打捆和裹包工序处理后贮藏即制得籽粒苋青贮饲料。
预处理是：将收割的籽粒苋经包括粉碎和预干燥工序处理，其中，粉碎时粉碎至籽粒苋的长度为1.0～1.5cm，破节率在75％以上；预干燥时预干燥至籽粒苋中水分的质量百分含量为65％。
复合微生物制剂的用量占籽粒苋原料总质量的12％。
再经包括打捆和裹包工序处理后贮藏60天进行继续发酵处理即可作为青贮饲料食用。
实施例5
本实施例提供的籽粒苋青贮饲料，通过以下方法制备获得：选取预处理后的籽粒苋原料，在籽粒苋原料上喷洒实施例2中的复合微生物制剂，调节温度为20℃在厌氧条件下进行发酵处理30天，再经包括打捆和裹包工序处理后贮藏即制得籽粒苋青贮饲料。
预处理是：将收割的籽粒苋经包括粉碎和预干燥工序处理，其中，粉碎时粉碎至籽粒苋的长度为1.0～1.5cm，破节率在75％以上；预干燥时预干燥至籽粒苋中水分的质量百分含量为70％。
复合微生物制剂的用量占籽粒苋原料总质量的10％。
再经包括打捆和裹包工序处理后贮藏50天进行继续发酵处理即可作为青贮饲料食用。
实施例6
本实施例提供的籽粒苋青贮饲料，通过以下方法制备获得：选取预处理后的籽粒苋原料，在籽粒苋原料上喷洒实施例3中的复合微生物制剂，调节温度为25℃在厌氧条件下进行发酵处理20天，再经包括打捆和裹包工序处理后贮藏即制得籽粒苋青贮饲料。
预处理是：将收割的籽粒苋经包括粉碎和预干燥工序处理，其中，粉碎时粉碎至籽粒苋的长度为1.0～1.5cm，破节率在75％以上；预干燥时预干燥至籽粒苋中水分的质量百分含量为75％。
复合微生物制剂的用量占籽粒苋原料总质量的8％。
再经包括打捆和裹包工序处理后贮藏40天进行继续发酵处理即可作为青贮饲料食用。
第三部分采用复合微生物制剂发酵后的籽粒苋青贮饲料的品质分析
实施例7
参照我国农业部下发的《青贮饲料质量评定标准》，对发酵后的籽粒苋青贮饲料的颜色、气味、酸味和质地等感官指标及pH进行评定。
将实施例5中制备的籽粒苋青贮饲料(籽粒苋草料裹包)及未喷洒微生物制剂的籽粒苋草料裹包(对照空白)作对比实验。
(1)实验方法
取上述样品各20g，加入180mL蒸馏水，用榨汁机将其榨碎，经4层纱布过滤后，搅拌均匀，用pH计测定pH值。剩余样品，65℃，48h烘干测初水分。样品过40目筛粉碎后，装入自封袋内待测。将待测样品烘干法测定绝干水分。用凯氏定氮法测定CP(粗蛋白)，范式法测定NDF(中性洗涤纤维)和ADF(酸性洗涤纤维)，醚浸出法测定EE(粗脂肪)，灼烧法测定ASH(粗灰分)，蒽酮-硫酸法测定WSC(水溶性碳水化合物)，水杨酸-浓硫酸法测定硝酸盐含量，盐酸萘乙二胺法测定亚硝酸盐含量。
(2)结果与分析
2.1感官评定分析
表1感官评定比较表
从表1可知，微生物制剂发酵后的籽粒苋裹包的颜色、气味、酸味、质地的感官评定上都达到了优良品质的效果。
2.2发酵品质
表2发酵品质比较表
从表2可知，采用本发明中的复合微生物制剂发酵后的籽粒苋裹包中，DM和CP的含量增加，且使ADF和NDF的含量降低，从而减少了青贮饲料的腐败。此外，发酵后，硝酸盐含量显著下降，亚硝酸盐含量也有所降低，大大提高了饲养的安全性，提升生猪等家畜的免疫功能，促进健康生长。
显然，上述内容只是为了说明本发明的特点，而并非对本发明的限制，有关技术领域的普通技术人员根据本发明在相应的技术领域做出的变化应属于本发明的保护范畴。
Claims (9)
1.一种复合微生物制剂，其特征是：主要由5种菌剂和辅料混合制成，二者的质量份配比为20～30：70～80，其中5种菌剂为光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂和丝状细菌菌剂，所述光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂和丝状细菌菌剂的质量份配比为：2～3:2～3:1～2:3～4:1～2。
2.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征是：所述的5种菌剂通过以下方法制备获得：选取光合细菌菌种、乳酸细菌菌种、酵母细菌菌种、放线细菌菌种或丝状细菌菌种，分别斜面活化后，接入麦芽汁培养基在20～30℃、100～200RPM条件下摇床培养20～30h，接着接入反应釜中采用麦芽汁培养基在25～35℃、100～200RPM条件下扩大培养20～30h，得种子液，最后接入固体发酵培养基中，在25～35℃下发酵培养20～30h后，分别收集菌体后制成粉剂，即为光合细菌菌剂、乳酸细菌菌剂、酵母细菌菌剂、放线细菌菌剂或丝状细菌菌剂。
3.根据权利要求2所述的复合微生物制剂，其特征是：摇床培养时接种量为8～15％，扩大培养时接种量为15～25％，发酵培养时种子液与固体发酵培养基的质量份配比为0.5～2:1。
4.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征是：所述辅料为米糠、燕麦麸和蜜糖，三者的质量份配比为20～30:60～80：0.5～2。
5.权利要求1-4任一项所述的复合微生物制剂在制备籽粒苋青贮饲料中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征是：所述的籽粒苋青贮饲料通过以下方法制备获得：选取预处理后的籽粒苋原料，在籽粒苋原料上喷洒上述复合微生物制剂，调节温度为15～25℃在厌氧条件下进行发酵处理20～40天，再经包括打捆和裹包工序处理后贮藏即制得籽粒苋青贮饲料。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征是所述的预处理是：将收割的籽粒苋经包括粉碎和预干燥工序处理，其中，粉碎时粉碎至籽粒苋的长度为1.0～1.5cm，破节率在75％以上；预干燥时预干燥至籽粒苋中水分的质量百分含量为65～75％。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征是：复合微生物制剂的用量占籽粒苋原料总质量的8～12％。
9.根据权利要求6所述的应用，其特征是：再经包括打捆和裹包工序处理后贮藏40～60天进行继续发酵处理即可作为青贮饲料食用。
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