CN103717571A - 9-氨基甲基取代的四环素类化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及通式(I)所示的9-氨基甲基取代的四环素类化合物、其药学上可接受的盐、溶剂化物或其异构体，其中R2a、R2b、R3、R4a、R4b、R5、R6a、R6b、R7、R8、R9a、R9b、R10、R11、R12、R13a、R13b如说明书中所定义；本发明还涉及这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物组合物，以及这些化合物在制备治疗和／或预防对四环素类敏感的疾病的药物中的应用。

Description

9-氨基曱基取代的四环素类化合物 本申请要求申请日为 201 1年 7月 26 日、申请号为 201 1 10222016.3 的中国专利申请的优先权， 该优先权文本的内容在本申请中全部引用 作为参考。 本申请中所引用的全部文献的内容也全部作为本申请的一 部分。 技术领域
本发明涉及 9-氨基甲基取代的四环素类化合物、 其药学上可接受 的盐、 其前体药物、 其溶剂化物或其异构体， 这些化合物的制备方法， 含有这些化合物的药物组合物， 以及这些化合物在制备治疗和 /或预防 对四环素类药物敏感的疾病药物中的应用。 背景技术
四环素类抗生素是由放线菌链霉菌属发酵产生的一类口服广谱抗 生素， 对立克次氏体、 许多革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌、 性病淋巴 肉芽肿病原体、 包涵体结膜炎病原体和鹦鹉热病原体有很好的药理学 效应。
第一个四环素类抗生素是 1948 年从金色链丝菌分离得到的金霉 素， 随后相继发展了土霉素、 四环素及地美环素， 都属于天然产物， 具有高度耐药性和多种副作用。 之后， 对这些化合物的化学结构进行 了研究， 合成了去曱基四环素类抗生素、 二曱胺四环素类抗生素。 然 而， 由于广泛使用四环素导致细菌的耐药性越来越严重， 使得四环素 类抗生素在使用中全面减少。
20世纪 90年代初研发了新一类四环素类药物——甘氨酰环素类药 物（glycyclines), 代表药物为替加环素 (tigecylcine, GAR-936)0 替加环 素抗菌谱广， 不但具有早期四环素类的抗菌活性， 而且对因外排机制 和核糖体保护机制而对四环素类耐药的病原菌也具抗菌活性。 但是， 替加环素不能口服给药， 只能静脉滴注， 一天需用药两次， 用药不方 便， 给患者带来痛苦。 目前还没有可以口服的替加环素类药物上市。
替加环素
另外 , PCT专利申请 WO2004/064728公开了如下结构的化合物 , 并对这些化合物进行了抑菌活性研究， 但是它们的抑菌活性并不理想。
PTK-0796是 Paratek制药公司开发的可口服的四环素类抗生素， 目前处于临床 III期， 用于复杂的皮肤和皮肤软组织感染的治疗， 每天 只需一次注射或口服给药， 其抗菌谱广， 对多药耐药或敏感的革兰氏
P曰性菌、 革兰氏阴性菌、 厌氧菌及非典型性细菌有较强的抗菌活性等。 但类似 PTK-0796的四环素类抗生素很少， 因此， 目前临床用药还具有 很大的局限性。
PTK-0796 因此， 市场亟待开发抗菌谱广、 抗菌活性强、 且能够单次或口服 给药、 合成简单、 适合工业化生产的新一类四环素类抗生素。 发明内容
本发明涉及下述通式 （I ) 所示的化合物、 其药学上可接受的盐 其前体药物、 其溶剂化物或其异构体：
其中， R2A、 R2B、 R3、 R1G、 R11和 R12分别独立地为氢；
R5、 R6A、 R6B和 R8分别独立地为： 氢、 巯基、 卤素、 羟基、 氨基、 羧基、 C1-6烷基、 鹵代 d.6烷基、 C2-6烯基、 C2-6炔基、 C1-6烷氧基、 卤 代 C1-6烷氧基、 d.6烷硫基、 d-6烷基氨基、 二 (Cw烷基)氨基、 羟基 C1-6烷基、 羧基 d.6烷基、 氨基 d_6烷基、 d.6烷基氨基 烷基、 d.6 烷基羰基、 d_6烷基羰氧基、 d.6烷氧基羰基、 烷基亚磺酰基、 烷基磺酰基、 磺酸基、 磺酰基 d.6烷基、 磺酰氨基、 磺酰氨基 d— 6烷 基、 d.6烷基磺酰氨基、 氨基磺酰基、 d.6烷基氨基磺酰基、 二 烷 基)氨基磺酰基、 氨基磺酰基 烷基、 d_6烷基甲酰氨基、 C 烷基氨 基甲酰基、 二 (d_6烷基)氨基曱酰基、 氨基曱酰基、 氨基甲酰基 d-6烷 基、 3-8元环烷基、 6-14元芳基、 6-14元芳基 C1-6烷基、 6-14元芳基甲 酰基、 6-14元芳基曱酰氧基、 3-8元杂环基、 3-8元杂环基 C1-6烷基、 6-14元杂芳基或 6-14元杂芳基 烷基；
R7为： NR7AR7B;
R4A、 R4B、 R7A和 R7B分别独立地为： 氢、 d.6烷基、 卤代 d_6烷基、 C2-6烯基、 C2-6炔基、 d-6烷氧基、 代 C1-6烷氧基、 C1-6烷硫基、 羟基 C 烷基、 羧基 烷基、 氨基 烷基、 d.6烷基氨基 d.6烷基、 C1-6 烷基羰基、 d_6烷氧基羰基、 C 烷基亚磺酰基、 d_6烷基磺酰基、 磺 酸基、 磺酰基 d.6烷基、 磺酰氨基(^.6烷基、 氨基磺酰基、 d_6烷基氨 基磺酰基、 二 (Cw烷基)氨基磺酰基、 氨基磺酰基 烷基、 d_6烷基 氨基甲酰基、 二 (C1-6烷基)氨基曱酰基、 氨基曱酰基、 氨基曱酰基 C!-6 烷基、 3-8元环烷基、 6-14元芳基、 6-14元芳基、 6-14元芳基 d.6烷基、 3-14元杂环基或 3-14元杂环基 C1-6烷基；
R9A、 R9B分别独立地为:
( 1 ) 氢， 且 R9A、 R9B不能同时为氢，
( 2 )未被取代或被 1-3个相同或不同的 Q1取代的环丙烷基、环丁 烷基、 6-12元螺环基、 6元桥环基、 8-12元桥环基或 6-10元饱和稠环 基， 且所述的环丙烷基、 环丁烷基、 6-12元螺环基、 6元桥环基、 8-12 元桥环基和 6-10元饱和稠环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 S、 SO、 S02、 N或 NRe替换， R°代表氢或 C1-6烷基；
( 3 ) 未被取代或被 1-3 个相同或不同的 Q1取代的环丁烷基 d— 6 烷基、 环戊烷基 C1-6烷基、 6-12元螺环基 C1-6烷基、 6-9元桥环基 C1-6 烷基或 6-10元饱和稠环基 烷基， 且所述的环丁烷基、 6-12元螺环 基和 6-9元桥环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 S、 SO、 S02、 N或 NRe替换， 所述的 6-10元饱和稠环基中的碳原子可以 -3个相同或不同的 CO、 S、 SO、 S02、 N或 NRe替换， Re代表氢 N原子一起形成未被取代或被 1-3个相同 或不同的 Q2取代的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基或 6-9元饱和稠环基， 且所述的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基和 6-9元饱和稠环基中的碳原子 可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 S、 SO、 S02、 N或 NIT替换， Rc 代表氢或 烷基；
Q2分别独立地选自卤素、 羟基、 氨基、 羧基、 c1-6烷基、 c1-6 烷氧基、 卤代 c1-6烷基、 卤代 c1-6烷氧基、 羟基 c1-6烷基、 氨基 c1-6 烷基、 羧基 d_6烷基、 d.6烷基氨基、 二 (d_6烷基)氨基、 氨基磺酰基、 氨基磺酰基 C1-6烷基、 氨基曱酰基、 氨基甲酰基 C1-6烷基、 d-6烷基羰 基、 C1-6烷基羰氧基、 C1-6烷氧基羰基、 苯基、 3-8元环烷基或 3-8元杂 环基；
13\ R13b分别独立地为： 氢、 C 烷基或 3-8元环烷基。
优选地， 通式 （I ) 具有下述通式（II ) 所示的结构：
R9a、 R9b分别独立地如上述通式（I ) 中所定义。
优选地， 通式（I ) 具有下述通式（III ) 所示的结构:
R9A、 R9B分别独立地如上述通式 （I ) 中所定义。
更优选地， 上述通式 （I ) ~ ( III ) 中，
R9A、 R9B分别独立地为：
( 1 ) 氢， 且 R9A、 R9B不能同时为氢，
( 2 )未被取代或被 1 -3个相同或不同的 Q1取代的环丙烷基、环丁烷 基、 6-12元螺环基、 6元桥环基或 6-10元饱和稠环基， 且所述的环丙烷 基、 环丁烷基、 6-12元螺环基、 6元桥环基和 6-10元饱和稠环基中的碳 原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 S、 N或 NRE替换， RC代表氢或
( 3 ) 未被取代或被 1-3个相同或不同的 Q1取代的环丁烷基 C1 -4烷 基、 环戊烷基 CM烷基、 6- 12元螺环 烷基、 6-9元桥环基。 烷基或 6-10无饱和稠环 CM烷基， 且所述的环丁烷基、 6-12元螺环基和 6-9元桥 环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 S、 N或 NRE替换， 所述的 6-10元饱和稠环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 CO、 S、 N或 NRE替换， RE代表氢或(^.4烷基；
或 R9A、 R9B与所连接的 N原子一起形成未被取代或被 1 -3个相同或不 同的 Q2取代的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基或 6-9元饱和稠环基， 且所述 的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基和 6-9元饱和稠环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 S、 N或 NR°替换， RE代表氢或 CM烷基； 并 且，
Q1 , Q2分别独立地选自卤素、 羟基、 氨基、 羧基、 C1-4烷基、 C1 -4 烷氧基、 代。 烷基、 卤代。1-4烷氧基、 苯基、 3-8元环烷基或 3-8 元杂环基。
进一步优选地， 上述通式 （I ) ~ ( III ) 中，
R9A、 R9B分别独立的为:
( 1 ) 氢， 且 R9A、 R9B不能同时为氢， (2 )未被取代或被 1-3个相同或不同的 Q1取代的环丙烷基、 环丁 烷基、 6-10元螺环基、 6元桥环基或 6-10元饱和稠环基， 且所述的环 丙烷基、 环丁烷基、 6-10元螺环基、 6元桥环基和 6-10元饱和稠环基 中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 N或 NIT替换， RC代 表氢或 d.4烷基，
(3 ) 未被取代或被 1-3 个相同或不同的 Q1取代的环丁烷基 CM 烷基、 环戊烷基。^烷基、 6-10元螺环基 CM烷基、 6-9元桥环基。^ 烷基或 6-10元饱和稠环 CM烷基， 且所述的环丁烷基、 6-10元螺环基 和 6-9元桥环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 N或 NRE替换， 所述的 6-10元饱和稠环基中的碳原子可以被 1-3个相同或 不同的 CO、 N或 NRe替换， Re代表氢或 d.4烷基；
或 R9A、 R9B与所连接的 N原子一起形成未被取代或被 1-3个相同或不 同的 Q2取代的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基或 6-9元饱和稠环基， 且所述 的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基和 6-9元饱和稠环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 N或 NRE替换， R°代表氢或。 烷基； 并且，
Q Q2分别独立地选自卤素、 羟基、 氨基、 羧基、 c1-4烷基、 c1-4 烷氧基或! ¾代<： 4烷基。
更进一步优选地， 上述通式 （I) - (III) 中，
i9a、 R9b分别独立的为:
( 1 ) 氢， 且 R9A、 1 %不能同时为氢，
( 2 )未被取代或被 1 -3个相同或不同的 Q1取代的环丙烷基、环丁烷 基、 6-10元螺环基、 6元桥环基或 6-10元饱和稠环基， 且所述的环丙烷 基、 环丁烷基、 6-10元螺环基、 6元桥环基和 6-10元饱和稠环基中的碳 原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 N或 NRE替换， RE代表氢或〇1-4烷基；
( 3 ) 未被取代或被 1-3个相同或不同的 Q1取代的环丁烷基(^-3烷 基、 环戊烷基 C1-3烷基、 6-10元螺环基 C1-3烷基、 6-9元桥环基 烷基或 6-10元饱和稠环基 C1-3烷基， 且所述的环丁烷基、 6-10元螺环基和 6-9元 桥环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 N或 NRE替换， 所述的 6-10元饱和稠环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 N或 NRE替换， RE代表氢或 CM烷基；
或 R9A、 1 %与所连接的 N原子一起形成未被取代或被 1 -3个相同或不 同的 Q2取代的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基或 6-9元饱和稠环基， 且所述 的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基和 6-9元饱和稠环基中的碳原子可以被 1 -3个相同或不同的 0、 N或 NRE替换， RE代表氢或 C1 -4烷基； 并且
Q1 , Q2分别独立地选自卤素、 C1-4烷基、 卤代 CM烷基或氨基。 更进一步优选地， 上述通式 （I ) ~ ( III ) 中，
R9A、 R9B分别独立地为：
( 1 ) 氢， 且 R9A、 R9B不能同时为氢,
( 2 )未被取代或被 1 -3个相同或不同的 Q1取代的环丙烷基、环丁烷 基、 6-8元螺环基或 6元桥环基， 且所述的环丙烷基、 环丁烷基、 6-8元 螺环基和 6元桥环基中的碳原子可以被 1 - 3个相同或不同的 0、 N或 N RE 替换， R 表氢、 曱基或乙基；
( 3 ) 未被取代或被 1-3个相同或不同的 Q1取代的环丁烷基 烷 基、 环戊烷基 烷基、 6-8元螺环基 d_3烷基、 6-8元桥环基(^.3烷基， 且所述的环丁烷基、 6-8元螺环基和 6-8元桥环基中的碳原子可以被 1 -3 个相同或不同的 0、 N或 NRE替换， RC代表氢、 甲基或乙基；
或 R9A、 R9B与所连接的 N原子一起形成未被取代或被 1-3个相同 或不同的 Q2取代的氮杂环丁烷基、 6-8元螺环基或 6-9元饱和稠环基， 且所述的氮杂环丁烷基、 6-8元螺环基和 6-9元饱和稠环基中的碳原子 可以被 1-3个相同或不同的 0、 N或 NIT替换， RC代表氢、 甲基或乙 基； 并且
Q1 , Q2分别独立地选自卤素、 CM烷基或氨基。
特别优选地， 上述通式 （I ) ~ ( III ) 中，
R9A、 R9B分别独立地为:
( 1 ) 氢， 且 R9A、 1 %不能同时为氢，
( 3 )未被取代或被 1-3个相同或不同的 Q1取代的 与所连接的 N原子 起形成未被取代或被 1-3个相同
具体实施方式
本申请中术语 "C1-6烷基" 指含有 1 -6个碳原子的直链或支链的烷 基， 其中包括例如 "C1-4烷基" 、 "C1-3烷基" 、 "d-2烷基" 等； 具 体实例包括但不限于例如曱基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正丁基、 2- 曱基丙基、 1 -甲基丙基、 1,1-二曱基乙基、 正戊基、 3-甲基丁基、 2-曱 基丁基、 1-甲基丁基、 1-乙基丙基、 正己基、 4-甲基戊基、 3-曱基戊基、 2-甲基戊基、 1-甲基戊基、 3,3-二甲基丁基、 2,2-二甲基丁基、 1 ,1-二甲 基丁基、 1,2-二甲基丁基、 1,3-二甲基丁基、 2,3-二曱基丁基、 2-乙基丁 基、 1 ,2-二甲基丙基等。
本申请中术语 "C^6烯基" 是指含有欢键的碳原子数为 2-6的直链 或支链或环状的烯基，其中包括例如 "Cw烯基"、 "C2-4烯基"、 "C2-3 烯基" 、 "C3_6环烯基" 等； 其实例包括但不限于例如乙烯基、 1-丙烯 基、 2-丙烯基、 1-曱基乙烯基、 1-丁烯基、 2-丁烯基、 3-丁烯基、 1-甲 基 -1 -丙烯基、 2-曱基 -1-丙烤基、 1-甲基 -2-丙烯基、 2-甲基 -2-丙烯基、 1-戊烯基、 2-戊烯基、 3-戊烯基、 4-戊烯基、 1 -甲基 -1-丁婦基、 2-曱基 -1-丁烯基、 3-曱基 - 1-丁烯基、 1-甲基 -2-丁浠基、 2-甲基 -2-丁烯基、 3- 曱基 -2-丁烯基、 1 -曱基 -3-丁烯基、 2-曱基 -3-丁烯基、 3-曱基 -3-丁烯基、 1 ,1-二甲基 -2-丙烯基、 1,2-二甲基小丙烯基、 1 ,2-二甲基 -2-丙烯基、 1- 乙基 -1-丙烯基、 1-乙基 -2-丙烯基、 1-己烯基、 2-己烯基、 3-己烯基、 4- 己烯基、 5-己烯基、 1-曱基小戊烯基、 2-甲基小戊烯基、 3-曱基 -1-戊烯 基、 4-曱基 -1-戊烯基、 1-曱基 -2-戊烯基、 2-甲基 -2-戊烯基、 3-曱基 -2- 戊烯基、 4-甲基 -2-戊烯基、 1-曱基 -3-戊烯基、 2-曱基 -3-戊烯基、 3-甲基 -3-戊烯基、 4-曱基 -3-戊烯基、 1-甲基 -4-戊烯基、 2-曱基 -4-戊烯基、 3- 甲基 -4-戊烯基、 4-甲基 -4-戊烯基、 1 ,1-二甲基 -2-丁烯基、 1 ,1-二甲基 -3- 丁烯基、 1 ,2-二曱基小丁烯基、 1,2-二甲基 -2-丁烯基、 1,2-二甲基 -3-丁 烯基、 1,3-二甲基小丁烯基、 1,3-二甲基 -2-丁烯基、 1,3-二甲基 -2-丁婦 基、 2,2-二曱基 -3-丁烯基、 2,3-二曱基 -1-丁烯基、 2,3-二甲基 -2-丁烯基、 2,3-二曱基 -3-丁烯基、 3,3-二甲基小丁烯基、 3,3-二甲基 -2-丁烯基、 1- 乙基 -1-丁婦基、 1-乙基 -2-丁烯基、 1-乙基 -3-丁烯基、 2-乙基小丁烯基、 2-乙基 -2-丁烯基、 2-乙基 -3-丁烯基、 1,1,2-三甲基 -2-丙烯基、 1-乙基 -1- 甲基- 2-丙烯基、 1-乙基 -2-曱基 -1-丙烯基、 1-乙基 -2-甲基 -2- 烯基、 1,3- 丁二烯、 1,3-戊二烯、 1,4-戊二烯、 1,4-己二烯、 环丙烯基、 环丁烯基、 环戊烯基、 1,3-环戊二烯基、 环己烯基、 1 ,4-环己二烯基等。
本申请中术语 "C2-6炔基" 是指含有三键的碳原子数为 2-6的直链 或支链的炔基， 其中包括例如 "C2-5炔基" 、 "C2-4炔基" 、 "C2.3炔 基，， 等； 其实例包括但不限于例如乙炔基、 2-丙炔基、 2-丁炔基、 3-丁 炔基、 1-甲基 -2-丙炔基、 2-戊炔基、 3-戊炔基、 4-戊炔基、 1-曱基 -2-丁 炔基、 1-曱基 -3-丁炔基、 2-曱基 -3-丁炔基、 1,1-二曱基 -2-丙炔基、 1- 乙基 -2-丙炔基、 2-己炔基、 3-己炔基、 4-己炔基、 5-己炔基、 1-甲基 -2- 戊块基、 1 -曱基 -3-戊块基、 1-甲基 -4-戊炔基、 2-甲基 -3-戊炔基、 2-甲基 -4-戊炔基、 3-曱基 -4-戊炔基、 4-甲基 -2-戊炔基、 1,1-二甲基 -2-丁炔基、 1,1-二甲基 -3-丁炔基、 1,2-二曱基 -3-丁炔基、 2,2-二甲基 -3-丁炔基、 1- 乙基 -2-丁炔基、 1-乙基 -3-丁炔基、 2-乙基 -3-丁炔基、 1-乙基 -1-曱基 -2- 丙炔基等。
本申请中术语 "C1-6烷氧基"、 "C1-6烷硫基"、 "C1-6烷基氨基"、 "二 (CL6烷基)氨基"、 "Cw烷基羰氧基"、 "Cw烷氧基羰基"、 "Ci-6 烷基羰基" 、 "d_6烷基磺酰基" 、 "C1-6烷基亚磺酰基" 、 "C1-6烷 基磺酰氨基" 、 "Cw烷基甲酰氨基" 、 "C1-6烷基氨基甲酰基" 、 "二 (C1-6烷基)氨基曱酰基" 、 "Cw烷基氨基磺酰基" 、 "二 (d.6烷基)氨 基磺酰基"分别是指 "d.6烷基- 0-"基团、 "C1-6烷基 -S-"基团、 "d.6 烷基 -NH-"基团、 "(C1-6烷基 )2N-，，基团、 "C1-6烷基 -C(0)-0-"基团、 "C1-6烷基 -O-C(O)-"基团、 "C1-6烷基 -C(O)-"基团、 "C1-6烷基 -SO " 基团、 "d.6烷基- SO-" 基团、 "C1-6烷基 -S02-NH-，， 基团、 "C1-6烷 基 -C(0)-NH-，，基团、 "C1-6烷基 -NH-C(O)-"基团、 "(C1-6烷基 )2N-C(0)-，， 基团、 "d.6烷基- NH-S02-，， 基团、 "(C1-6烷基) 2N-S02-，， 基团， 其中 "CL6烷基" 如前文所定义。 本申请中术语 "C1-4烷氧基"、 "d.4烷硫基"、 "d.4烷基氨基"、
"二 (C1-4烷基)氨基"、 "C1-4烷基羰氧基"、 "CM烷氧基羰基"、 "d.4 烷基羰基" 、 "C1-4烷基磺酰基" 、 "C^烷基亚磺酰基" 、 "C^烷 基磺酰氨基" 、 "C1-4烷基甲酰氨基"、 "C1-4烷基氨基甲酰基" 、 "二 (C1-4烷基)氨基甲酰基" 、 "CM烷基氨基磺酰基" 、 "二 (CM烷基)氨 基磺酰基"分别是指 "C1-4烷基 -0-"基团、 "d_4烷基 -S-"基团、 "C14 烷基 -NH-"基团、 "(C1-4烷基 )2N-，，基团、 "C1-4烷基 -C(0)-0-，，基团、 "C1-4烷基 -O-C(O)-"基团、 "C1-4烷基 -C(O)-"基团、 "CM烷基 -S02-，， 基团、 "CM烷基 -SO-" 基团、 "C1-4烷基 -S02-NH-，， 基团、 "CM烷 基 -C(0)-NH-，，基团、 "C1-4烷基 -NH-C(O)-"基团、 "(C1-4烷基 )2N-C(0)-，， 基团、 "C1-4烷基 -NH-S02-，， 基团、 "(C1-4烷基 )2N-S02-，， 基团， 其中 "C14烷基" 如前文所定义。
本申请中术语 "羟基 C1-6烷基" 、 "羧基 d_6烷基" 、 "氨基 d-6 烷基" 、 "C^6烷基氨基(^.6烷基" 、 "磺酰基<^.6烷基" 、 "磺酰氨 基 Cr-6烷基" 、 "氨基磺酰基 烷基" 、 "氨基甲酰基 d.6烷基" 分别是指一个以上羟基、 羧基、 氨基、 烷基氨基、 磺酰基、 磺酰氨 基、 氨基磺酰基、 氨基曱酰基取代 C1-6烷基所形成的基团， 其中 "C1-6 烷基" 如前文所定义。
本申请中术语 "羟基 d_4烷基" 、 "羧基 C1-4烷基" 、 "氨基 C1-4 烷基" 、 "d.4烷基氨基 CM烷基" 、 "磺酰基。 烷基" 、 "磺酰氨 基(^.4烷基" 、 "氨基磺酰基 C1-4烷基" 、 "氨基曱酰基 C1-4烷基" ， 分别是指一个以上羟基、 羧基、 氨基、 CM烷基氨基、 磺酰基、 磺酰氨 基、 氨基磺酰基、 氨基曱酰基取代（^.4烷基所形成的基团， 其中 "C1-4 烷基" 如前文所定义。
本申请中术语 "卤素" 是指氟原子、 氯原子、 溴原子或碘原子。 本申请中术语 "卤代 C1-6烷基"指一个以上 "卤素，，原子取代 "C1-6 烷基" 所形成的基团， 所述的 "卤代 C1-4烷基" 指一个以上 "卤素" 原子取代 "C^4烷基" 所形成的基团， 所述 "卤素" 和 "C1-6烷基" 、 "CM烷基" 如前文所定义。
本申请中术语 "卤代 C1-6烷氧基" 指一个以上 "卤素" 原子取代 "C^烷氧基" 所形成的基团， 所述的 " 代 C1-4烷氧基" 指一个以上 "卤素"原子取代 "C1-4烷氧基" 所形成的基团， 所述 "卤素" 、 "C1-6 烷氧基" 、 " d_4烷氧基" 如前文所定义。
本申请中术语 "3-8元环烷基" 是指环原子全部为碳原子、 去除一 个氢原子形成的环状烷基基团， 其中包括例如 "3-7元环烷基" 、 "3-6 元环烷基" 、 "4-6元环烷基" 、 "5-6元环烷基" 等； 其实例包括但 不限于例如： 环丙基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 环庚基、 环辛基。
本申请中术语 "6-12 元螺环基" 是指至少有两个环共享一个原子 形成的含有 6- 12个碳原子或 /和杂原子的结构， 所述的杂原子有氮、 氧 和硫等。 其中包括例如 "6-10元螺环" 、 "6-9元螺环" 、 "6-8元螺
"7-8元螺环"等。 其实例包括但不仅限于例如:
本申请中术语 "6元桥环基" 和 "8 ~ 12元桥环基" 是指任意两个 环共用两不相邻的原子形成的含有 6个或 8 - 12个碳原子或 /和杂原子 的结构，所述的杂原子有氮、氧和硫等。其实例包括但不限于例如
Φ、 Θ、 Θ、 、 ¾ & 、 6
本申请中术语 "6-10 元饱和稠环基" 是指由两个或两个以上环状 结构彼此共用两个相邻的原子连接起来形成的含有 6-10 个碳原子或 / 和杂原子的饱和稠环基团， 所述的杂原子有 1、 和 等。 其中包括 "6-9元饱和稠环基" 、 "6-8元饱和稠环基" 等。 具体实例包括但不 仅限于例如欢环 [3.1.0]己烷基、 3-氮杂默环 [3.1.0]己烷基、 2-氮杂双环 [3. 1.0]己烷基、 3-氮杂汉环 [3.2.0]庚烷基、 2-八氢环戊烷 [C]吡咯基、 双 环 [3.2.0]庚烷基、 3-氮杂双环 [3.2.0]庚烷基、 八氢并环戊二烯基、 八氢 环戊二烯并 [c]吡咯基、 八氢吡咯并 [3,4-c]吡咯基、 双环 [4.2.0]辛烷基、 3-氮杂双环 [4.2.0]辛烷基、双环 [4丄 0]庚烷基、八氢 茚基、八氢 异吲哚基、 十氢化萘基、 十氢异喹啉基等。
本申请中术语 "6-14元芳基" 是指含有 6-14个碳原子的环状芳香 基团， 其中包括 "6-8元芳基" 、 "8-14元芳基" 等。 其实例包括但不 限于例如苯基、 萘基、 菲基、 2,3-二氢 茚基、 茚基、 1 ,2,3,4-四 氢萘基、 1,4-二氢萘基等。
本申请中术语 "3-8元杂环基" 是指含有 3-8个环原子、 并且其中 至少一个为杂原子的单环杂环基， 包括 "5-8元杂环基" 、 "5-6元杂 环基" 等， 其具体实例包括但不限于例如呋喃基、 噻吩基、 吡咯基、 噻唑基、 噻二唑基、 噁唑基、 噁二唑基、 咪唑基、 吡唑基、 吡啶基、 嘧啶基、 1 ,4-二氧杂环己二烯基、 2/ -1 ,2-噁嗪基、 4 - 1,2-噁嗪基、 6 /- 1 ,2- 噁嗪基、 4//-1 ,3-(¾嗪基、 6 -1 ,3-噁嗪基、 4 -1 ,4-噁嗪基、 哒嗪基、 吡 嗪基、 1 ,2,3-三嗪基、 1,2,4-三嗪基、 1,3,5-三嗪基、 1 ,2,4,5-四嗪基、 氧 杂环庚三烯基、 硫杂环庚三烯基、 氮杂环庚三烯基、 1,3-二氮杂环庚三 烯基、氮杂环辛四烯基、 2,5-二氢噻吩基、 4,5-二氢吡唑基、 3,4-二氢 -2/ - 吡喃基、 5，6-二氢 -4/ -1,3-嗨嗪基、 氮杂环丙烷基、 氮杂环丁烷基、 硫 杂环丁烷基、 四氢呋喃基、 四氢吡咯基、 咪唑烷基、 吡唑烷基、 四氢 呋喃基、 1,4-二氧杂环己烷基、 1,3-二氧杂环己烷基、 1,3-二硫杂环己烷 基、 吗啉基、 哌嗪基等。
本申请中术语 "6- 14元杂芳基" 是指含有 6-14个环原子、 并且其 中至少一个为杂原子、 由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻 的原子连接起来形成的稠环结构， 包括 "8-12元杂芳基" 、 "9-10元 杂芳基" 等， 例如苯并 3-8元杂环基形成的结构， 3-8元杂环基并 3-8 元杂环基形成的结构等， 其具体实例包括但不限于例如： 苯并呋喃基、 苯并异呋喃基、 苯并噻吩基、 吲哚基、 苯并嗯唑基、 苯并咪唑基、 吲 唑基、 苯并***基、 喹啉基、 异喹啉基、 吖啶基、 菲啶基、 苯并哒嗪 基、 酞嗪基、 喹唑啉基、 喹喔啉基、 酚嗪基、 喋啶基、 嘌呤基、 萘啶 基、 1 ,3-二氢苯并呋喃基、 苯并 [ [1.3]二氧杂环戊烯基、 异吲哚啉基、 色满基、 1 ,2,3,4-四氢吡咯并 [3,4-c]吡咯基、 5,6-二氢咪唑 [1.2-β]吡嗪 -7(8 ^)-基、 5,6-二氢 -1,7-萘啶 -7(8/ )-基、 5/ -吡咯 [3.4-b]吡啶 -6(7 /)-基、 7,8-二氢吡啶 [4.3- 嘧啶 -6(5 )-基、 2,3,6,7-四氢 -1/7-吡唑 [4.3-c]吡啶 -5(4 -基、 6,7-二氢噻唑 [5.4-c]吡啶 -5(4/ )-基、 3-曱基 -6,7-二氢 -3 -吡 唑 [4.5-c]吡啶 -5(4 )-基， 2-曱基六氢环戊并 [c]吡咯 -5-基等。
本发明特别优选的化合物如下表 1中所示。 表 1
本发明还涉及上述通式（I)化合物的制备方法,所述方法包括下列 步骤：
反应步骤：
(1) 中间体 1的制备
将原料 1 (市购）加入到酸性催化剂中， 待全部溶解后加入 N-碘 代丁二酰亚胺（NIS ) 。 将反应液倾入到溶解有硫代硫酸钠的;水水中搅 拌。 所得混合液用有机溶剂萃取， 将有机相旋转蒸发除去溶剂， 干燥, 得到中间体 1。
(2) 中间体 2的制备
将中间体 1、 无水碳酸钠、钯催化剂和金属络合物配体置于无水有 机溶剂中， 保持正压一氧化碳气氛， 加入三乙基硅烷或三正丁基锡生 成氢气， 或者直接通入一氧化碳和氢气的混合气体,反应完毕后， 将反 应液过反相柱分离纯化， 得到中间体 2。
(3) 式 （I ) 的制备
将中间体 2溶于有机溶剂中： 加入原料 2或其盐， 进一步加入碱。 将混合物在室温下搅拌后， 加入还原剂， 搅拌， 分离得到式 （I ) 所示 的化合物。
所述 "酸性催化剂" 选自例如， 但不限于， 甲磺酸、 对曱苯磺酸、 苯磺酸等。
所述 "钯催化剂"选自例如， 但不限于， 乙酸钯、 乙酰丙酮钯（11 )、 二 (三苯基膦)二氯化钯，四 (三苯基膦)钯等。
所述 "金属络合物配体"选自例如， 但不限于， 4,5-双（二苯基膦） -9,9-二曱基氧杂蒽、 双（二苯基膦） 甲烷等。
所述 "有机溶剂" 选自例如， 但不限于， 乙腈、 二甲基曱酰胺、 二曱基亚砜、 丙酮、 1,3-二曱基 -2-咪唑啉酮、 1,3-二甲基 -3,4,5,6-四氢 -2- 嘧啶酮、 曱苯、 乙酸乙酯、 氯仿、 ***、 N-曱基吡咯烷酮等。
所述 "碱" 包括有机碱和无机碱， 无机碱选自例如， 但不仅限于， 氢氧化钾、 氢氧化钠、 氢氧化锌、 氢氧化钙、 碳酸钾、 碳酸氢钾、 碳 酸钠、 碳酸氢钠等； 所述有机碱选自例如， 但不仅限于， 胺类化合物， 如甲胺、 三曱胺、 二乙胺、 三乙胺、 二异丙胺、 乙二胺、 三乙醇胺、 二异丙基乙胺、 三丁基胺、 Ν,Ν-二甲基苯胺、 二环己基胺、 二苄基胺、 Ν-苄基 - β -苯乙基胺、 1-二苯羟曱胺、 Ν,Ν， -二苄基亚乙基二胺、 二乙 醇胺、 二曱基乙醇胺、 2- (二乙基氨基）乙醇、 2-氨基乙醇、 氨基丁三醇； 醇的碱金属盐类， 例如甲醇钠、 乙醇钾、 叔丁醇钾等； 烷基金属锂化 合物， 例如乙基锂、 正丁基锂、 仲丁基锂、 叔丁基锂等； 氨基锂化合 物， 例如二异丙基氨基锂、 六甲基二硅氨基锂等。
所述 "还原剂" 选自例如， 但不仅限于， 氢化铝锂、 氰基硼氢化 钠、 三乙酰氧基硼氢化钠等。
上反应方程式中的 R2a、 R2b、 R3、 R4a、 R4b、 R5、 R6a、 R6b、 R7、 R8、 R9a、 R9b、 R1Q、 Ru、 R12如前文所定义。 必要时， 可对需要保护的 官能团进行保护， 此后通过常规方法脱去保护基团。
本发明式（ I )化合物的 "药学上可接受的盐"， 是指当式（I )化 合物中存在酸性官能团 （例如， -COOH, -OH, S03H等） 时， 与适当 的无机或者有机阳离子 （碱） 形成的盐， 包括与碱金属如钠、 钾、 锂 等形成的盐； 与碱土金属如钙、 镁等形成的盐； 与其他金属如铝、 铁、 锌、 铜等形成的盐； 与无机碱如铵形成的盐； 与有机碱如叔辛基胺、 二苄基胺、 吗啉、 葡糖胺、 苯基廿氨酸烷基酯、 乙二胺、 N-曱基葡糖 胺、 胍、 二乙胺、 三乙胺、 二环己基胺、 N，N， -二苄基乙二胺、 氯普 鲁卡因、 普鲁卡因、 二乙醇胺、 N-苄基 -苯乙基胺、 哌嗪、 四曱基胺、 三 (羟曱基)氨基甲烷等形成的盐； 以及当式 (I)化合物中存在碱性官能团 (例如， -NH2等）， 与适当的无机或者有机阴离子 （酸）形成的盐， 包 括与无机酸如硝酸、 高氯酸、 硫酸、 磷酸、 氢氟酸、 盐酸、 氢溴酸、 氢碘酸等形成的盐； 与磺酸如曱磺酸、 三氟曱磺酸、 乙磺酸、 苯磺酸、 对曱苯磺酸等形成的盐； 与有机酸如醋酸、 苹果酸、 富马酸、 琥珀酸、 柠檬酸、 酒石酸、 草酸、 马来酸等形成的盐； 与氨基酸如甘氨酸、 三 曱基甘氨酸、 精氨酸、 鸟氨酸、 谷氨酸、 天冬氨酸等形成的盐。
本发明式（ I )化合物的 "溶剂化物"， 是指其与溶剂締合形成的 物质。 所述溶剂可以是有机溶剂 （例如乙醇、 曱醇、 丙醇、 乙腈等）、 水等。 例如本发明化合物可以与乙醇形成乙醇化物， 与水形成水合物。
本发明式 （I )化合物中存在一个或多个不对称碳原子时， 会产生 对映异构体； 当化合物含有烯基或者环状结构时， 会产生顺 /反异构体； 当化合物存在有酮或者肟时， 会产生互变异构体等等。 所有这些产生 的对映异构体、 非对映异构体、 消旋异构体、 顺反异构体、 互变异构 体、 几何异构体、 差向异构体及它们的混合物都均包括在本发明的范 围内。
本发明式 （ I ) 化合物的 "前体药物" 是指在体内转化为活性形 式的本发明化合物的化合物（参见 R.B.Silverman, 1992 , "The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Actiion" , Academic Press， Chp.8 )。 前体药物可用于改变生物分布或药代动力学。 例如， 羟基或羧基基团 酯化形成酯， 当将所述酯给予患者时， 该酯经酶解或非酶解， 还原或 水解除去酯基。
本发明式 （ I ) 化合物、 其药学上可接受的盐、 其前体药物、 其 溶剂化物或其异构体可以与一种或多种药用载体制成药物制剂。 所述 药物制剂指临床上使用的常规制剂， 可以口服或肠胃外给药等方式施 用于需要这种治疗的患者。 用于口服给药时， 可制成常规的固体制剂， 如片剂、 胶嚢剂、 丸剂、 颗粒剂等； 也可制成口服液体制剂， 如口服 溶液剂、 口服混悬剂、 糖浆剂等。 用于肠胃外给药时， 可制成注射剂， 包括注射液、 注射用无菌粉末、 注射用浓溶液、 注射用混悬剂。 用于 直肠给药时， 可制成栓剂等。 用千经肺给药时， 可制成吸入剂或喷雾 剂等。 用于局部或经皮给药时， 可制成软膏剂、 糊剂、 霜剂、 洗剂、 凝胶剂、 粉剂、 溶液或透皮贴剂等。 这些制剂可以通过常规方法， 添 加药用载体如赋形剂、 黏合剂、 增湿剂、 崩解剂、 增稠剂等制备而成。
本发明式 （ I )化合物、 其药学上可接受的盐、 其前体药物、 其 溶剂化物或其异构体能够用于治疗和 /或预防对四环素类药物敏感的疾 病。 对四环素类药物敏感的疾病包括感染 （例如立克次体感染， 性病 淋巴肉芽肿、 包涵体结膜炎、 鹦鹉热病原体感染及其它四环素化合物 耐药性感染）、 癌症、 糖尿病和已经发现可以用四环素类化合物治疗和 /或预防的其它疾病。 所述的四环素类化合物是指具有四环素环结构的 化合物， 其实例包括： 金霉素、 土霉素、 地美环素、 美他环素、 山环 素、 罗利环素、 胍甲环素、 米诺环素、 多西环素、 螯霉素等。
本发明化合物的施用量和施用频率可以根据临床医生或药师的判 断考虑例如以下的一些因素而作出调整： 患者的年龄、 体重、 待治疗 病征的严重性。 一般而言， 以单次剂量或分剂量给予患者的本发明化 合物的日剂量可为例如 0.2-3 mg/kg体重， 优选 0.5-2.5 mg/kg体重。 在 一个实施方案中， 每日以单次剂量或多个剂量给予患者例如约 10 mg-200 mg、 优选 30 mg-180 mg的本发明化合物。 在另一个实施方案 中， 首次给予患者例如 50 mg-150 mg、 优选 80 mg-120 mg本发明化合 物， 以后分剂量（例如一天一~四次）给予 20 mg-100 mg/次、 优选 50 mg-80 mg/次本发明的化合物。
本发明化合物抗菌谱广， 抗菌活性强， 对革兰氏阳性、 阴性菌包 括需氧菌和厌氧菌均具有良好的抗菌活性； 且具有较好的药代动力学 特征， 口服生物利用度高。 另外， 本发明化合物给药方便， 能够满足 临床的需要。 并且， 本发明化合物合成简单， 利于工业化生产。 实施例
以下通过实施例对本发明作进一步的详细说明， 但本发明不限于 以下实施例中所公开的具体实施方案， 其是作为本发明的举例说明， 在功能上相当的任何实施方案均在本发明的范围内。
以下实施例中所用的各缩写的含义如下
DAST: 二乙氨基三氟化硫；
DCC: Ν,Ν'-二环己基碳二亚胺' DCM: 二氯曱烷；
DMF: Ν,Ν-二甲基甲酰胺；
DMA: 己二酸二甲酯；
Et3N: 三乙胺；
EtOAc: 乙酸乙酯；
TEA: 三乙醇胺；
TFA: 三氟乙酸；
THF: 四氢呋喃；
NMP: N-曱基吡咯烷酮；
NIS: N-碘代丁二酰亚胺；
NaBH3CN: 氰基硼氢化钠；
NaBH4: 硼氢化钠；
InCl3: 三氯化铟；
NH4C1: 氯化铵；
MeOH: 甲醇；
CClsCOCl: 三氯乙酰氯；
Me2S: 二曱基硫醚；
ΝΗ3 · H20:氨水；
STAB: 三乙酰氧基硼氢化钠；
Boc-: 叔丁氧羰基；
Cbz-: 苄氧羰基；
Ph-:苯基；
Ms-: 曱磺酰基。 下述实施例中所米诺环素盐酸盐， 购买于苏州巨立化工有限公司 和湖北兴银河化工有限公司。 实 施 例 1 (4S,4aS,5aR,12aS)-9- 醛 基 -4,7- 二 （ 二 甲 氨 基) -3,10,12,12a-四羟基 -1,11-二氧代 -l,4,4a,5，5a,6,l 1,12a-八氢并四苯 -2- 曱酰胺 (化合物 A)的制备
1 ) (43,4&8,5&1 ,12&3)-9-碘-4,7-二（二曱氨基)-3,10,12,12&-四羟基 -1,11-二氧代 -l,4,4a,5,5a,6,l l,12a-八氢并四苯 -2-甲酰胺 （化合物 B)
米诺环素盐酸盐 将米诺环素盐酸盐 (28 g)分批緩慢加入到曱磺酸 (200 mL)中 , 待全 部溶解后于室温下 3小时内分批加入 NIS(38 g， 168.9 mmol)。 然后将反 应液倾入到溶解有 17.9 g硫代硫酸钠的 20 mL ;水水中并剧烈搅拌 30分 钟。 所得混合液用乙酸乙酯洗涤后， 将水相倾入到碳酸氢钠 (260 g)和 正丁醇 (300 mL)的混合物中， 搅拌后静置并分液， 水相再用正丁醇提取 一次。 将有机相合并后用水和饱和氯化钠水溶液各洗涤一次， 然后将 有机相旋转蒸发除去溶剂， 真空干燥， 得 22.8 g化合物 B, 为黄色固 体。
2 )化合物 A
将上步所得化合物 B(14.6 g)、无水碳酸钠（10.6 g, 100 mmol)、 乙酸 钯 (0.11 g, 0.5 mmol)和 4,5-双二苯基膦 -9,9-二曱基氧杂蒽 (0.29 g, 0.5 mmol)置于无水 NMP(lOO mL)中，保持正压一氧化碳气氛。将反应液加 热至 70 °C， 同时用注射器于 90分钟内滴加三乙基硅烷 (4.44 mL， 27.5 mmol)。 滴加完毕后用反相中压制备柱 (水 /乙腈)分离纯化， 得 4.8 g化 合物 A, 为黄色固体。
LC-MS (M+H): 486 (实测值） 实施例 2 (4S,4aS,5aR,12aS)-9-((3,3-二曱基氮杂环丁烷 -1-基）甲 基 ）_4,7- 二 （ 二 曱 氨 基 ）-3, 10,12,12a- 四 羟 基 -1,11- 二 氧 代 -l,4，4a,5,5a,6,l l,12a-八氢并四苯 -2-甲酰胺 （化合物 1)的制备
1 ) 2,2-二甲基丙二酸二乙酯 （化合物 1-2) 将钠 (36 g, 1.56 mol)溶于 800 mL无水乙醇中， 用水水浴冷却， 緩 慢滴加丙二酸二乙酯 (化合物 1-1) (100 g, 0.62 mol), 滴加完毕后进一步 滴加碘曱烷 (97.3 mL, 1.56 mol)， 滴加完毕后撤去;氷水浴， 室温搅拌过 夜。 向反应液中加入 1000 mL水， 然后用 1000 mL乙酸乙酯分三次提 取， 将有机相合并后用饱和氯化钠水溶液洗涤一次， 用无水硫酸钠干 燥，过滤除去干燥剂，浓缩得到粗品化合物 1-2， 为淡黄色油状物（102.1 g,收率 87.5 %)， 直接用于下步反应。
2 ) 2,2-二曱基 -1,3-丙二醇 （化合物 1-3)
将上步所得的化合物 1-2 (101.8 g, 0.54 mol)溶于 750 mL干燥四氢 呋喃中， 用水水浴冷却， 往上述溶液中分批加入四氢铝锂 (30.8 g, 0.81 mol), 加完后撤去水水浴， 室温搅拌过夜。 加入 100 mL乙酸乙酯并搅 拌 2小时淬灭反应， 用盐酸调 pH至酸性， 旋转蒸发除去溶剂。 将所得 油状物用短硅胶柱 (二氯甲烷 /甲醇 =10: 1)纯化， 然后浓缩， 得到粗品化 合物 1-3， 为淡黄色油状物 36 g, 收率 64%。
3 ) 2,2-二曱基 -1,3-丙二醇二曱磺酸酯 （化合物 1-4)
将上步所得化合物 1-3 (56.3 g， 0.54 mol)和三乙胺 (302 mL, 2.17 mol)溶于 600 mL二氯甲烷中，用水水浴冷却，将曱基磺酰氯（168.7 mL, 2.17 mol)滴加到上述混合物中， 室温搅拌过夜。 加入 1000 mL水， 搅 拌， 分液。 水相用 300 mL二氯甲烷分两次萃取， 将有机相合并， 依次 用水和饱和氯化钠水溶液洗涤， 用无水硫酸钠干燥， 抽滤除去干燥剂， 旋转蒸发除去溶剂， 残留物用乙酸乙酯 /环己烷 (体积比 10: 1)重结晶， 得到化合物 1-4， 为棕色固体 (76.6 g,收率 54.5 %)。
4 ) 2,2-二甲基 -1,3-二碘丙烷 (化合物 1-5)
将化合物 1-4 (50.4 g, 0.19 mol)和碘化钾（193 g, 1.16 mol)溶于 250 mL DMF中， 加热至 110 °C搅拌过夜。 加入 2000 mL水， 用 1000 mL 乙酸乙酯分三次提取， 将有机相合并， 依次用水、 盐水洗涤， 用无水 硫酸钠千燥， 抽滤除去干燥剂， 浓缩得粗品化合物 1-5 , 为黑色油状物 (62.6 g, 粗品）。
5 ) 3,3-二甲基 -1-对甲苯磺酰基氮杂环丁烷 （化合物 1-6)
将上步所得化合物 1-5 (64.8 g, 0.2 mol), 无水碳酸钾 (82.2 g， 0.6 mol)和对曱苯磺酰胺 (34.2 g, 0.2mol) 溶于 200 mL DMF中， 在 110 °C 反应 3小时。 加入 2000 mL水， 用 1000 mL石油醚分三次提取， 将有 机相合并， 依次用水、 盐水洗涤， 用无水硫酸钠干燥， 抽滤除去干燥 剂， 浓缩， 得到化合物 1-6 (21.9 g,收率 46 %)， 为白色固体。
6 ) 3,3-二甲基氮杂环丁烷盐酸盐 （化合物 1-7)
将化合物 1-6 (7.2 g, 30 mmol)溶于 100 mL正戊醇中， 将反应液控 制在 110 °C ,分批加入 6.9 g金属钠，待钠消失后继续保持温度 1小时， 冷却， 向其中倾入 100 mL水， 分出水相， 有机相用 2N的盐酸 450 mL 洗涤三次， 旋转蒸发除去溶剂， 所得残余物用 100 mL 2N NaOH水溶 液溶解， 然后用 300 mL二氯曱烷分三次提取， 将有机相合并后用饱和 氯化钠水溶液洗涤两次， 用无水硫酸钠干燥， 加入 100 mL 2N盐酸， 浓缩除去溶剂， 得到白色固体化合物 1-7 (0.9 g,收率 24.7 %)。
A 化合物 1
将化合物 A (0.5 g, 1.0 mmol)溶于 DMF(10 mL)中， 加入化合物 1-7 (0.3 g, 2.5 mmol)、 三乙胺 (500 mg, 5 mmol)和无水氯化铟（10 mg), 将 混合物在室温下搅拌 30分钟后，加入氰基硼氢化钠 （0.3 g， 5.8 mmol), 然后室温搅拌 0.5小时， 经 HPLC分离， 得到化合物 1 (35 mg) 。
lU NMR (D20, 400 MHz) δ： 7.42 (s, IH), 4.29 (s, 2H), 3.78 - 3.89 (m, 4H), 3.74 (s, IH), 3.03 (m, IH), 2.82 (s, 7H), 2.62 (m, IH), 2.48 - 2.56 (m, 6H), 2.26 (m, IH), 2.13 (m, IH), 1.53 - 1.68 (m, IH), 1.11 - 1.28 (m, 6H) 实施例 3 (4S,4aS,5aR,12aS)-9-((3,3-二氟环丁基氨基）曱基) -4,7-二 (二曱氨基) -3, 10,12,12a-四羟基 -1,11-二氧代 -l,4,4a,5,5a,6，l 1,12a-八氢并 四苯 -2-甲酰胺 （化合物 2)的制备
将化合物 A (0.8 g, 1.65 mmol), 3,3-二氟环丁基胺 （0.5 g, 3.30 mmol), Et3N (0.3 g, 3.30 mmol)和 InCl3 (73 mg, 0.33 mmol)溶于 10 mL DMF中， 室温下搅拌 2h后加入 NaB¾CN (209 mg, 3.30 mmol), 将混 合液在室温下搅拌过夜。 将混合物浓缩后用制备色谱分离纯化， 得到 黄色固体目标化合物 2 (0.508 g)。
LC-MS (M+H): 577.2 (实测值）
^-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 7.65 (s, IH), 4.24 (s, 2H), 4.09(s, IH), 3.84(m, IH), 3.40(m, IH), 2.83-3.22 (m, 12H), 2.62-2.82(m, 6H), 2.15-2.40(m, 2H), 1.67(m, IH) 实施例 4 (4S,4aS,5aR,12aS)-9- ((螺 [2.3]己烷 -5-基氨基）甲基) -4,7- 二 (二甲氨基) -3, 10,12, 12a-四羟基 -1 ,11-二氧代 -l，4,4a,5,5a,6,l 1 ,12a-八氢 并四苯 -2-甲酰胺 （化合物 3)的制备
1 ) 3-亚曱基环丁基氨基甲酸叔丁酯 （化合物 3-2)
将溴化三苯甲基辚 (11 g, 30.8 mmol)悬浮于 250 mL 四氢呋喃中， 用水 浴冷却至 -5 °C以下， 分 4批加入叔丁醇钾 (4 g, 35.6 mmol), 加完 后升至室温搅拌 1小时， 再冷却至 -5 °C , 将溶于 40 mL四氢呋喃的 3- 氧代环丁基氨基甲酸叔丁酯 （化合物 3-1) (5 g, 27 mmol)滴加至上述悬 浊液中， 加完后室温并搅拌 2 小时， 然后抽滤除去不溶物， 旋转蒸发 除去溶剂， 所得残余物通过硅胶柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =10: 1)纯化， 得到化合物 3-2 (3.5 g, 收率 70.7 %)。
2 ) 螺 [2.3]己烷 -5-基氨基甲酸叔丁酯 （化合物 3-3)
在氮气保护下往 100 mL无水二氯曱烷中加入二乙基锌 (40 mL, IN 己烷溶液）， 加完后用干水 -丙酮冷却至 -78°C， 緩慢滴加二碘甲烷（15 g, 56 mmol), 加完后继续搅拌 30分钟， 然后改成水水浴， 再滴加化合物 3-2 (1.7 g, 9.3 mmol)溶于二氯曱烷 100 mL中的溶液，搅拌过夜，加 200 mL水淬灭反应， 分液， 水相用 200 mL二氯甲垸分三次萃取， 将有机 相合并， 然后旋转蒸发除去溶剂， 通过硅胶柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =10: 1)纯化， 得到化合物 3-3 (1.03 g,收率 56.1%)。
3 ) 螺 [2.3]己烷 -5-胺三氟乙酸盐 （化合物 3-4)
将上步所得化合物 3-3 (1 g， 5.1 mmol)溶于 5 mL三氟乙酸， 搅拌 10分钟后， 旋转蒸发除去三氟乙酸， 得到 1.1 g化合物 3-4, 将其直接 用于下步反应。
4 )化合物 3的
将化合物 A (0.5 g, 1.03 mmol)溶于 DMF(10 mL)中，加入化合物 3-4 (0.7 g, 3.3 mmol), 三乙胺 (500 mg, 5 mmol)和无水三氯化铟（10 mg)， 将 混合物在室温下搅拌 30分钟后，加入氰基硼氢化钠 （0.3 g, 4.8 mmol), 然后室温搅拌 0.5小时， 经 HPLC分离， 得到化合物 3 ( 41 mg ) 。
^-NMR (D20, 400 MHz) δ： 7.82 (s, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.92(s, 1H), 3.84(s, 1H), 3.10 (s, 7H)， 2.73 - 2.98 (m, 8H), 2.42 (m, 1H), 2.38 (m, 2H), 2.13 (tn, 3H), 1.45 - 1.60 (m, 1H), 0.30 (m, 4H) 实施例 5 (45,4&8,5&1 ,12 8)-9-((螺[3.3]庚烷-2-基曱基氨基）曱 基 ）-4,7- 二 （ 二 甲 氨 基 ）-3，10,12,12a- 四 羟 基 -1，1- 二 氧 代 -1,4，4&,5,5&,6，11 ,12&-八氢并四苯-2-曱酰胺(化合物 4)的制备
1 ) 3-亚曱基环丁基曱基胺 （化合物 4-2) 将 AlLiH4 (2.45 g, 64.5 mmol) 溶于 50 mL无水四氢呋喃中， 加入 溶于 20 mL四氢呋喃的 3-亚曱基环丁基曱基腈 （化合物 4-1) (5 g, 53.7 mmol)并加热回流搅拌 2小时， 冷却后， 在;水水浴下緩慢滴加水 (5 mL, 0.7 mmol), 滴加完毕后继续搅拌 2小时， 用硅藻土过滤除去不溶物， 将所得滤液旋转蒸发除去溶剂，得到化合物 4-2 ( 3.5 g,收率 67.1 % ) 2 ) 3-亚甲基环丁基甲基氨基甲酸苄酯 （化合物 4-3)
将化合物 4-2 (3 g, 30.9 mmol)溶于 50 mL 四氢呋喃中， 加入 Na2C03(6.3 g, 60 mmol)和氯曱酸苄酯 (5.25 g, 30.8 mmol),室温搅拌 12 小时， 加入 100 mL水， 用乙酸乙酯 300 mL分三次提取， 将有机相合 并， 然后旋转蒸发除去溶剂， 通过柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =10: 1)纯化， 得到化合物 4-3 ( 4 g, 收率 56 % ) 。
3 ) (5,5-二氯 -6-氧代螺 [3.3]庚烷 -2-基）甲基氨基甲酸苄酯 （化合物
4-4)
将化合物 4-3 (3 g, 12.98 mmol)和锌铜合金 (7.78 g, 64.9 mmol)置于 100 mL***中， 搅拌下緩慢滴加 CC13C0C1 (6.97 g, 38.33 mmol)溶于 15 mL DMA中的溶液， 滴加完毕后室温搅拌 18小时。 向反应液中倾 入 100 mL饱和碳酸氢钠水溶液， 抽滤除去不溶物， 分液， 水相用*** 提取。 将有机相合并后用无水硫酸钠干燥， 抽滤除去干燥剂， 旋转蒸 发除去溶剂， 所得粗品化合物 4-4直接用于下步反应。
4 ) (6-氧代螺 [3.3]庚烷 -2-基)曱基氨基甲酸苄酯 （化合物 4-5)
将上步所得化合物 4-4、 辞粉 (2.18 g， 33.3 mmol)和 NH4C1 (1.38 g, 25.8 mmol)加入到 50 mL甲醇中， 回流 4小时。 抽滤除去不溶物， 旋转 蒸发除去溶剂。 通过柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 -5: 1)纯化， 得到化合物 4-5 ( 2.1 g, 收率 59.2% (两步）） 。
5 ) 螺 [3.3]庚烷 -2-基甲基胺 （化合物 4-6)
将化合物 4-5 (2 g, 7.32 mmol)、 水合肼 (0.828 g, 16.5 mmol) 和 NaOH(0.585 g, 14.63 mmol)加入到三甘醇 (20 mL)中，加热回流 1小时。 然后摘去冷凝管， 油浴加热至 200 °C , 保持 3小时， 冷却后通过柱层 析纯化， 得到化合物 4-6 (0.67 g,收率 73%)。
6 )化合物 4的合成
将化合物 A (0.230 g, 0.474 mmol)、 化合物 4-6 (0.65 g, 5.2 mmol)、 三乙胺 (500 mg, 5 mmol)和无水三氯化铟（10 mg)溶于 DMF中并搅拌 1 小时， 加入氰基硼氢化钠 (0.090 g , 1.43 mmol)搅拌 4小时， 通过反相 制备色谱分离得到化合物 4 ( 13 mg ) 。
iH-NMR (D20, 400 MHz) δ： 7.69 (s, IH), 4.12 - 4.27 (m, 2H), 3.77 - 3.88 (m, IH), 2.73 - 3.07 (m, 17H), 2.41 - 2.45 (m, IH), 2.19 (m, IH), 2.05 - 2.14 (m, IH), 1.87 - 1.96 (m， 2H), 1.74 - 1.82 (m， 2H), 1.58 - 1.73 (m, 7H) 实施例 6 (4S,4aS,5aR,12aS)-9- ((螺 [2.5]辛烷 -6-基氨基）甲基) -4,7- 二 (二甲氨基) -3, 10,12, 12a-四羟基 -1 ,11-二氧代 -l,4,4a,5，5a,6,l 1 ,12a-八氢 并四苯 -2-曱酰胺 （化合物 7)的制备
1 ) 4-亚甲基环己基氨基曱酸叔丁酯 （化合物 7-2) 将溴化三苯曱基辚 (53.7 g , 0.15 mol)溶于 500 mL四氢呋喃中， 于 -20 °C下加入叔丁醇钾（16.8 g, 0.15 mol), 温度升高到 0 °C后反应半小 时，接着，将 4-氧代环己基氨基甲酸叔丁酯 (化合物 7-1) (21.3 g, 0.1 mol) 溶于 lOO mL THF中并在氮气保护下将其滴加于瓶中，室温反应 3小时 后， 加入少量水使固体溶解， 旋转蒸发除去 THF， 用无水***萃取， 干燥， 浓缩后将浓缩物溶于正己烷中， 用硅胶过滤， 浓缩得到化合物 7-2, 为无色液体（19.5 g， 收率 92.3 % ) 。
2 ) 螺 [2.5]辛烷 -6-基氨基曱酸叔丁酯 （化合物 7-3)
将二乙基锌 (40 mL, 1 M己烷溶液)在 -78 °C、 氮气保护下， 緩慢加 入到 300 mL无水 DCM中， 进一步緩慢加入二碘曱烷（15 g， 56 mmol), 30分钟后升温至室温保持 30分钟，然后用水水浴冷却 ,加入溶于 10 mL 二氯甲烷的化合物 7-2 (2 g, 9.5 mmol),反应过夜。向反应液中倾入 100 mL饱和氯化铵溶液， 分液， 有机相用 100 mL乙酸乙酯分两次提取， 将有机相合并后用无水硫酸钠干燥。 抽滤除去干燥剂， 旋转蒸发除去 溶剂， 残余物通过硅胶柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =10: 1)纯化， 得到化合 物 7-3， 为白色固体 (0.8 g， 收率 37.4 %)。
3 ) 螺 [2.5]辛烷 -6-胺三氟乙酸盐 （化合物 7-4)
将化合物 7-3 (1.5 g, 6.7 mmol)溶于 15 mL DCM中， 加入 TFA(2.5 mL), 搅拌 1小时后， 得到化合物 7-4 (1.6 g,收率 99.8 %)。
4 )化合物 7
将化合物 A (1.0 g, 2.1mmol)、 化合物 7-4 (300.0 mg, 1.25 mmol), 1 mL TEA和 10 mg无水三氯化铟溶于 10 mL DMF中， 室温反应 0.5小 时， 緩慢加入 400 mg的醋酸硼氢化钠， 继续反应 1.5小时后， 将反应 液用 1L水稀释， 用反相制备色 "i普分离得到 600 mg粗品， 进一步用高 压半制备色谱分离， 得到化合物 7 (83 mg)。
^-NMR (D20, 400 MHz) δ： 7.48 (s, 1H), 4.28 (br. s 2H), 3.75 (s, 1H), 2.98 - 3.19(m, 2H), 2.69 - 2.95(m, 7H), 2.45 - 2.65 (m, 8H), 2.28 (m, 1H), 2.13(m, 1H), 2.01 (m, 2H), 1.40 - 1.76 (m, 6H), 0.93 (m, 2H), 0.25 (m, 2H), 0.16 (m, 2H) 实施例 7 (4S,4aS,5aR,12aS)-9- ((螺 [2.5]辛烷 -6-基曱基氨基）曱 基 ）-4,7- 二 （ 二 甲 氨基 ）-3, 10,12,12a- 四 羟 基 -1,1 1- 二 氧 代 -l,4,4a,5,5a,6,l l ,12a-八氢并四苯 -2-曱酰胺 （化合物 8)的制备
1 ) 4-亚甲基环己基曱酸乙酯 （化合物 8-2)
将溴化三苯甲基燐 (53.7 g, 0.15 mol)溶于 500 mL THF中，于 -20 °C 下加入叔丁醇钾（16.8 g, 0.15 mol), 温度升高到 0 后反应半小时， 接 着， 将 4-氧代环己基甲酸乙酯 (化合物 8-1) (17 g, 0.1 mol)溶于 100 mL THF并在氮气保护下将其滴加于瓶中， 室温反应 3 小时后， 加入少量 水使固体溶解， 旋转蒸发除去 THF, 用无水***萃取， 干燥， 浓缩后 将浓缩物溶于正己烷中， 用硅胶过滤， 浓缩得到化合物 8-2， 为无色液 体（16.1g,收率 95.7 %)。
2 ) 4-亚 -3)
将化合物 8-2 (16.1 g, 0.096 mol)和氢氧化钠（8 g, 0.2 mol)溶于 100 mL 曱醇和水的混合溶剂 （体积比 1 : 1 ) 中， 于 50 下反应半小时后 旋转蒸发除去曱醇， 加入 200 mL水溶解， 调节 pH至弱酸性， 用二氯 曱烷萃取， 用饱和食盐水洗涤， 然后用无水硫酸钠干燥， 抽滤除去干 燥剂， 旋转蒸发除去溶剂， 浓缩得白色固体。
将所得白色固体和 N-羟基琥珀酰亚胺 (13.2 g, 0.115 mol)溶于 200 mL DCM中， 于 -10 °C緩慢加入 DCC(23.65 g, 0.1 14 mol)， 加完后室温 搅拌 1 小时， 抽滤， 旋转蒸发除去溶剂。 将所得残余物分散于水水浴 冷却的 200 mL氨水中， 然后加热至 80 °C并保持该温度反应 2小时， 然后加压除去大部分氨气， 用乙酸乙酯萃取， 干燥并浓缩后采用乙酸 乙酯 /石油醚结晶， 得到化合物 8-3 (9.5 g,收率 71.1 %)。
3 ) 4-亚曱基环己基曱基氨基甲酸苄酯 （化合物 8-4)
8-3 8-4
将化合物 8-3 (9.5 g, 0.068 mol)溶于 300 mL THF中，于 -10 °C下緩 '1·曼加入四氢铝锂 (2.62 g, 0.069 mol), 加入完毕后在室温下反应 2小时， 原料反应完毕后加 5 mL水， 用硅藻土抽滤， 将滤液浓缩得到油状物。 将所得油状物和三乙胺（10.7 mL, 0.075 mol)溶于 100 mL DCM中 ,于 -10 下緩慢滴加氯甲酸苄酯（11.6 g, 0.068 mol),加入完毕后在室温下反应 2小时， 用 100 mL水和 100 mL饱和食盐水各洗涤一次， 干燥后浓缩， 通过柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =10: 1)纯化，得到化合物 8-4, 为白色固体 ( 6.3 g, 收率 35.7 % ) 。
4 ) 螺 [2.5]辛烷 -6-基曱基氨基曱酸苄酯 （化合物 8-5)
将二乙基锌 (25 mL, 1 M己烷溶液)在 -40 。C、 氮气保护下， 緩慢加 入到 100 mL无水 DCM中 , 进一步緩慢加入 TFA(2.85 g, 0.025 mol ) 并反应 0.5小时后， 将二碘甲烷 (6.67 g, 0.025 mol)緩慢加入其中， 继续 反应半小时后 ,将化合物 8-4 (3 g, 0.012 mol )溶于 20 mL无水 DCM中 并在氮气保护下将其滴加至上述反应液中， 于 -5 °C下反应过夜， 加入 饱和氯化铵淬灭反应， 分液， 浓缩有机相， 通过柱层析 (石油醚 /乙酸乙 酯 =10: 1)纯化， 得到化合物 8-5 , 为白色固体 (2.85 g, 收率 86.9 %)。
5 ) 螺 [2.5]辛烷 -6-基曱基胺盐酸盐 （化合物 8-6)
将化合物 8-5 (2.85 g, 10.4 mmol)溶于 30 mL曱醇中， 加入 0.2 g钯 炭和 l mL浓盐酸， 进行催化氢化反应过夜， 抽滤除去不溶物， 浓缩得 到化合物 8-6 ( 1.8 g， 收率 98.5 % ) 。
6 )化合物 8
A
将化合物 A (1 g, 2.06 mmol)、 化合物 8-6 (1 g, 5.69 mmol)、 2 mL TEA和 30 mg无水三氯化铟溶于 10 mLDMF中， 在室温下反应 0.5小 时，緩慢加入 1 g氰基硼氢化钠，继续反应 0.5小时后，将反应液用 1 L 水稀释， 通过反相制备色谱分离， 得到化合物 8 (320 mg：)。
^-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 7.52 (s, IH), 4.20 - 4.32 (m, 2H), 3.62 (br. s.， IH), 3.41 -3.35(m, IH), 2.98 (m， 4H), 2.81 (m, 5H), 2.54 - 2.75 (m, 7H), 2.06 - 2.28 (m, 2H), 1.59 - 1.86 (m， 6H), 1.17 - 1.25 (m, 2H), 0.89 - 1.03 (m, 2H), 0.17 - 0.36 (m, 4H) 实施例 8 (4 & 4aS,5aR, 12aS)-9-(2-氮杂螺 [3.3]庚烷-2-基曱基)-4，7- 二(二甲氨基)-3,10,12, 12a-四羟基-l , l l-二氧代-l ,4,4a,5,5a,6, l U2a-八氢 并四苯 -2-甲酰胺的制备 （化合物 9)的制备
将化合物 A (0.230 g， 0.474 mmol)溶于 DMF (2 mmol)中， 加入 2- 氮杂螺 [3.3]庚烷盐酸盐（0.126 g, 0.948 mmol)和三乙胺（180 mg, 1.8 mmol)。将混合物在室温下搅拌 30分钟后，加入氰基硼氢化钠 (0.2 g, 1.7 mmol) , 然后室温搅拌 4小时， 经 HPLC分离得到化合物 9 (60 mg)。
^-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 7.57 (s, IH), 4.35 (br. s., 2H), 4.16
(br. s.， 4H), 3.69 (s, IH), 3.34 - 3.50 (m, IH), 2.82 - 2.97 (m, 7H), 2.77 (d， IH), 2.56 - 2.70 (m, 6H), 2.29 (t, 4H), 2.20 (d, 2H), 1.85 (m, 2H), 1.57 - 1.71 (m,lH) 实施例 9 (4S,4aS,5aR,12aS)-9-(((3,3-二氟环丁基）甲基氨基）甲 基 ）-4,7- 二 （ 二 曱 氨 基 ）-3,10,12,12a- 四 羟 基 -1,11- 二 氧 代 -l,4,4a,5,5a,6,l l,12a-八氢并四苯 -2-曱酰胺 (化合物 10)的制备
1 ) 3-氧代环丁烷曱腈 （化合物 10-2)
10-1 10-2
将化合物 10-1 (10 g, 0.108 mol)溶于 50 mL MeOH和 50 mL DCM 的混合溶剂中， 通入 03气体， 将体系降温到 -78 °C , 溶液变成蓝色。 用 TLC (石油醚 /乙酸乙酯 =2: 1)监测反应结束，往反应体系中通入 02 0.5 h、 通入 N2 0.5 h以除去体系中多余的 03气体， 加入 15 mL Me2S淬灭 反应， 室温搅拌过夜， 旋转干燥得到粗品， 通过硅胶柱层析 (石油醚 / 乙酸乙酯 =15: 1-7: 1)纯化， 得到白色固体化合物 10-2 (7.5 g，收率 73.0 %)。
2 ) 3,3_二氟环丁烷甲腈 （化合物 10-3)
10-2 10-3
在 0°C将化合物 10-2 (8.0 g, 84.21 mmol)溶于 DCM (80 mL)中 , 加 入 DAST (27 g, 0.168 mol)。 将反应液室温搅拌过夜， 用 TLC (石油醚 / 乙酸乙酯 =3: 1)检测反应结束， 往反应液中加入冰水， 用 DCM 萃取， 用饱和食盐水洗涤， 然后用无水 Na2S04干燥， 将有机层减压浓缩， 通 过柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =150: 1-30:1)纯化， 得到棕色油状粗品化合 物 10*3 (8.1 g)。
3 ) 3,3_二氟环丁基甲胺盐酸盐 （化合物 10-4)
将化合物 10-3 (7.0 g, 59.78 mmol), NH3 · H20 (7 mL)和雷尼镍 (7.0 g, 100 %/W)溶于乙醇 (70 mL)中， 将混合液在 Η2 (50 Psi)氛围、 室温条 件下搅拌 3小时。 将混合物过滤， 加入 4M的盐酸甲醇溶液 10 mL， 浓 缩得到白色固体化合物 10-4 (5.5 g, 58.4 %)。
4 )化合物 10
将化合物 A (1.0 g, 2.06 mmol), 化合物 10-4 (0.65 g, 4.12 mmol),
Et3N (0.416 g, 4.12 mmol)和 InCl3 (91 mg, 0.41 mmol)溶于 DMF (10 mL) 中， 将混合液在室温下搅拌 2 h。 加入 NaBH3CN (260 mg, 4.14 mmol), 将混合液室温搅拌过夜， 通过制备色谱纯化得到黄色固体化合物 10 (0.5 g)。
LC-MS (M+H): 591.3 (实测值）
^-NMR (D20, 400MHz) δ： 7.95 (s, 1H), 4.32 (s, 2H), 4.11 (s, 1H), 3.37 - 3.28 (m, 3H), 3.20 - 2.92 (m, 13H), 2.79 (m, 2H), 2.65 - 2.54 (m, 1H), 2.52 - 2.40 (m, 4H), 2.31 - 2.15 (m, 1H)， 1,68 (m, 1H) 实施例 10 (4S,4aS,5aR,12aS)-9-(4-氮杂螺 [2.4]庚烷 -4-基曱 基 ）-4,7- 二 （ 二 甲 氨基 ）-3,10,12,12a- 四 羟 基 -1,11- 二 氧 代 -l,4,4a，5,5a,6,l l,12a-八氢并四苯 -2-曱酰胺 （化合物 11)的制备
1 ) 4-氮杂螺 [2,4]庚烷三氟乙酸盐 （化合物 11-2)
将 4-氮杂螺 [2.4]庚垸 -4-甲酸叔丁酯 （化合物 11-1 ) (0.75 g, 3.80 mmol)和 TFA (3 mL)加入 DCM (10 mL)中 , 将混合液室温搅拌 1小时， 浓缩得到黄色油状化合物 11-2 (800 mg, 99.6 %)。
2 )化合物 11
将化合物 A(0.8 g, 1.65 mmol)、化合物 11-2 (0.7 g, 3.30 mmol), Et3N (0.33 g, 3.30 mmol) 和 InCl3 (73 mg, 0.33 mmol)溶于 DMF (8 mL)中 ,将 混合液在室温下搅拌 2小时。加入 NaBH3CN (0.21 g, 3.30 mmol), 将混 合液在室温下搅拌过夜， 通过制备色谱纯化得到黄色固体化合物 1 1 (0.21 g)。
LC-MS (M+H): 567.3 (实测值）
1H-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 7.71 (d, 1H), 4.30 - 4.23(m, 2H), 4.08(s， 1H), 3.49 - 3.36 (m, 3H), 3.25 - 2.85 (m, 9H), 2.76 (m, 5H), 2.48 - 1.90 (m, 6H), 1.65 (m, 2H)， 1.39 (m， 1H), 1.02 (m, 2H) 实施例 11 (48,4&8,5&1 ,12&5)-4,7-二(二甲氨基)-3,10,12,12&-四羟 基 -9 ((3-曱基氧杂环丁基 -3-基）甲氨基）曱基）-1,11-二氧代 -l,4,½,5,5a,6,l l,12a-八氢并四苯 -2-曱酰胺 （化合物 14)的制备 将化合物 A (0.8 g, 1.65 mmol)、 （ 3-甲基氧杂环丁烷 -3-基） 甲胺 (化合物 14-1 ) (333 mg, 3.30 mmol)和 InCl3 (73 mg， 0.33 mmol) 溶于 DMF (8 mL)中，室温搅拌 2小时，加入 NaBH3CN (208 mg, 3.30 mmol), 将混合液在室温下搅拌过夜， 通过制备色谱纯化得到黄色固体化合物 14(0.4 g)。
LC-MS (M+H): 571.3 (实测值）
¾-NMR (D20, 400MHz) δ： 7.67 (s, IH), 4.50(m, 2H), 4.42(m, 2H) 4.34 (m， 2H), 4.09(s, IH), 3.44(m, 3H), 2.89-3.12(m, 8H), 2.74(s, 6H), 2.15 - 2.40 (m, 2H), 1 ,67 (m, IH), 1.46 (s, 3H) 实施例 12 (4S,4aS,5aR,12aS)-9-((6,6-二氟 -2-氮杂螺 [3.3]庚烷 -2- 基）甲基 )-4,7-二（二 甲氨基） -3, 10,12,12a-四羟基 -1,1 1-二氧代 -l ,4,4a,5,5a,6,l l ,12a-八氢并四苯 -2-甲酰胺 （化合物 16)的制备
除了用 6,6-二氟 -2-氮杂螺 [3.3]庚烷盐酸盐替代 2-氮杂螺 [3.3]庚烷 盐酸益之外， 按照与实施例 8相同的方法制备。
iH-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 7.48 - 7.57 (m, IH), 4.40 - 4.49 (m， 2H), 4.24 - 4.36 (m, 4H), 4.02 - 4.13 (m, IH), 3.37 - 3.50 (m, IH), 2.85 - 3.05 (m, 10H), 2.56 - 2.70 (m, 8H), 2.14 - 2.33 (m, 2H), 1.57 - 1.75 (m, IH) 实施例 13 (48,4 8,5 1 ,12&3)-9-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基 甲 基）-4,7-二（二 甲 氨基）-3, 10,12,12a-四 羟 基 -1,11-二 氧代 -1,4,4&,5,5&,6,11,12&-八氢并四苯 -2-甲酰胺 （化合物 17)的制备
除了用 2-氧杂 -6-氮杂螺 [3.3]庚烷盐酸盐替代 2-氮杂螺 [3.3]庚烷盐 酸盐之外， 按照与实施例 8相同的方法制备。
^-NMR (D20, 400 MHz) δ： 7.85 (s, IH), 4.27 - 4.37 (m, 2H), 3.80 - 4.00 (m， 4H), 3.51(s, 2H), 3.41(s, 2H), 2.65 - 3.20(m, 15H), 2.40 (m, IH) 2.09(m, IH), 1.50(m, IH) 实施例 14 (4S,4aS,5aR,l2aS)-9-((3,3-二氟氮杂环 -1-基）曱基) _4,7- 二 (二甲氨基) -3, 10,12,12a-四羟基 -1,11-二氧代 -l,4，4a,5,5a，6,l 1,12a-八氢 并四苯 -2-曱酰胺 （化合物 18)的制备
将化合物 A (0.8 g, 1.65 mmol)、 3,3-二氟氮杂环丁烷盐酸盐 (0.43 g,
3.30 mmol)、 Et3N (0.33 g, 3.30 mmol)和 InCl3 (73 mg, 0.33 mmol)溶于 DMF (lO mL)中， 将混合液在室温下搅拌 2小时， 加入 NaBH3CN (208 mg, 3.30 mmol), 室温搅拌过夜， 通过制备色谱纯化得到黄色固体化合 物 18 (0.377 g)。
^-NMR (CD3OD, 400MHz) δ :7.63 (br. s.， IH), 4.78 (m, 4H), 4.58
(br. s.， 2H), 4.08 (br. s.， IH), 3.40(m, IH), 2.85 - 3.08 (m, 8H), 2.72 (s, 6H), 2.13-2.45 (m, 2H), 1.68 (m, IH) 实施例 15 (4S,4aS,5aR，12aS)-4,7-二 (二曱氨基) -9-((3-氟氮杂环丁 烷 -1-基）曱基) -3,10,12,12&-四羟基-1,11-二氧代-1,4,4^5,5^6,11,12&-八 氢并四苯 -2-曱酰胺 （化合物 19)的制备
0 OH
NaBH, DAST Pd(OH),
N N N
N
P Ph ？ K Ph PIT 、Ph H.HC1
19-1 -2 19-3 19-4
1 ) 1-二苯曱基氮杂环丁烷 -3-醇 （化合物 19-2)
19-1 19-2 在 0°C将 NaBH4 (2.39 g, 0.063 mol)分批加入到化合物 19-1 (15.0 g, 0.063 mol) 的甲醇（100 mL)溶液中， 将反应液在室温下搅拌 2 h, 用 TLC (石油醚 /乙酸乙酯 =3: 1)监测反应结束。 将反应液倒入水水中， 减压 浓缩， 用乙酸乙酯 （ 100 mL x 3 ) 萃取， 用饱和食盐水洗涤， 用无水 Na2S04干燥，将有机层减压浓缩得到白色固体化合物 19-2 (13.0 g,收率 86.2 %)。
2 ) 1-二苯甲基 -3-氟氮杂环丁烷 （化合物 19-3)
OH
DAST
N N
pr Ph Ph" 、Ph
19-2 19-3 在 0 °C将 DAST (26.46 g, 0.164 mol)加入到化合物 19-2 (13.1 g, 0.0547 mol)的干燥 DCM (200 ml^溶液中。 将反应液在室温下搅拌过 夜， 用 TLC (石油醚 /乙酸乙酯 =5: 1)监测反应结束。 将反应液倒入水水 中， 用 DCM萃取， 用饱和食盐水洗涤， 用无水 Na2S04干燥， 将有机 层减压浓缩。 所得粗品用柱色语 (石油醚 /乙酸乙酯 =150: 1)纯化， 得到白 色固体化合物 19-3 (4.0 g, 收率 30 %)。
3 ) 3-氟氮杂环丁烷盐酸盐 （化合物 19-4)
19-3 19-4 在氩气保护下将 Pd(OH)2 (8 g, 0.057 mol)加入到化合物 19-3 (6 g, 0.025 mol) 的曱醇 （70 mL)溶液中， 抽真空脱气， 再用 H2清洗几次。 将混合液在 H2 (50 psi)氛围、 30°C下搅拌过夜， 用 TLC (石油醚 /乙酸乙 酯 =10: 1)监测反应结束。 过滤后， 向滤液中逐滴加入浓度为 1 mol/L的 盐酸的甲醇溶液 30 mL, 浓缩得到白色固体化合物 19-4 (1.96 g,收率 70.3 %)。
4 ) 化合物 19
将化合物 A (0.8 g, 1.65 mmol), 化合物 19-4 (0.366 g, 3.30 mmol)、 Et3N (0.333 g, 3.30 mmol)和 InCl3 (73 mg, 0.33 mmol)溶于 DMF (15 mL) 中， 室温搅拌 2小时， 加入 NaBH3CN (208 mg， 3.30 mmol)， 室温搅拌 过夜， 通过制备色谱纯化， 得到黄色固体化合物 19 (0.242 g)。
】H-丽 R (CD3OD, 400MHz) δ： 7.62 (br. s" 1H), 5.40 (m， 1H), 4.30 - 4.70(m, 6H), 4.08(s, 1H), 3.33(m, 1H), 2.99(m, 8H), 2.73(m, 6H), 2.15-2.40 (m, 2H), 1.61 (m, 1H) 实施例 16 (4S,4aS,5aR,12aS)-9-(6-氮杂螺 [2.5]辛烷 -6-基曱 基 ）-4,7- 二 （ 二 甲 氨 基 ）-3，10,12,12a- 四 羟 基 -1,11- 二 氧 代 -l,4,4a,5,5a,6,l l,12a-八氢并四苯 -2-曱酰胺 （化合物 20)的制备
除了用 6-氮杂螺 [2.5]辛烷三氟乙酸盐代替 4-氮杂螺 [2.4]庚烷三氟 乙酸盐之外， 按照与实施例 10步骤 2 )相同的方法制备。
1H-NMR (D20， 400 MHz) δ： 7.49 - 7.69 (m, IH), 4.24 (br. s.， 2H), 3.72 (s, IH), 3.36 (m, 2H), 2.93 - 3.13 (m, 3H), 2.55 - 2.93 (m, 13H), 2.29 (m, IH), 2.1 1 (m, IH), 1.97 (m, 2H), 1.48 - 1.67 (m, IH), 0.94 - 1.14 (m, 2H), 0.13 - 0.44 (m, 4H) 实施例 17 (4S,4aS,5aR，12aS)-9-(5-氮杂螺 [2.4]庚烷 -5-基曱 基 ）_4，7- 二 （ 二 甲 氨 基 ）-3,10,12,l2a- 四 羟 基 -1,11- 二 氧 代 -l,4，4a,5,5a,6,l l,12a-八氢并四苯 -2-甲酰胺 （化合物 21)的制备
除了用 5-氮杂螺 [2.4]庚烷三氟乙酸盐代替 4-氮杂螺 [2.4]庚烷三氟 乙酸盐之外， 按照与实施例 10步骤 2 )相同的方法制备。
^-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 7.44 - 7.58 (m, IH), 4.64 (m, 1H)，
4.20 - 4.45 (m, 2H), 3.49 (s, 2H), 3.09 - 3.27 (m, 4H), 2.48 - 2.85 (m, 11H) 1.94 - 2.11 (m, 4H), 1.48 - 1.64 (m， IH), 0.64 - 0.81 (m, 4H)
(4S,4aS,5aR,12aS)-9-(6-氮杂螺 [3.4]辛烷 -6-基曱 基 ）-4,7- 二 （ 二 曱 氨 基 ）-3，10,12,12a- 四 羟 基 -1,11- 二 氧 代 -l ^a^aAl USa-八氢并四苯 -2-曱酰胺 （化合物 22)的制备
除了用 6-氮杂螺 [3.4]辛烷三氟乙酸盐代替 4-氮杂螺 [2.4]庚烷三氟 乙酸盐之外， 按照与实施例 10步骤 2相同的方法制备
!H-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 7.54 (s, IH), 4.38 (s, 2H), 3.71 (br. s.， IH), 3.36 - 3.54 (m, 4H), 2.89 - 3.02 (m, 1H)， 2.84 (s, 6H), 2.70 - 2.78 (m, IH), 2.64 (s, 6H), 2.11 - 2.33 (m, 5H)， 1.59 - 1.76 (m, IH), 1.49 (m, IH), 1.29 (s, 4H) 实施例 19 (4S,4aS,5aR,12aS)-9-(3-氮杂双环 [3· 1 ·0]己烷 -3-基甲 基 ）-4,7- 二 （ 二 甲 氨 基 ）-3, 10,12,12a- 四 羟 基 -1,11- 二 氧 代 -l,4,4a,5,5a,6,l l,12a-八氢并四苯 -2-曱酰胺 (化合物 23)的制备
1 ) 3-苄基 -3-氮杂双环 [3.1.0]己烷 -2,4-二酮 (化合物 23-2 )
23-1 23-2 将 3-氧杂双环 [3.1.0]己烷 -2,4-二酮（23-1 ) ( 20 g, 0.179 mol )溶于 100 mL乙酸中, 在水浴冷却下， 滴加苄胺 （28.8 g, 0.269 mol) ,滴加 完毕后升温至回流， 搅拌过夜。 将反应液冷却至室温， 倒入 1 L水中， 析出大量白色固体， 过滤， 滤饼用异丙醇重结晶， 得到化合物 23-2(27 g) 。
2) 3-苄基 -3-氮杂双环 [3.1.0]己烷盐酸盐 (化合物 23-3)
23-2 23-3
在氮气保护下，将二氢双（2-曱氧基乙氧基)铝酸钠（商品名 RED-A1) (70%甲苯溶液） （ 100 mL, 0.36mol ) 溶于 100 mL THF中， 在水浴 冷却下滴加化合物 23-2 ( 16 g, 0.08 mol) 的 THF ( 100 mL)溶液， 滴 加完毕后搅拌 0.5 h， 升温至室温后搅拌过夜。 反应液小心加水淬灭， 用乙酸乙酯萃取， 旋转蒸发干燥。 往浓缩物中加乙醇使其溶解， 用氯 化氢-乙醇溶液调节 pH值至强酸性， 旋转蒸发干燥得到白色固体， 用 乙酸 酯洗涤， 得到化合物 23-3 ( 18.5 g)粗品， 将其直接用于下一步。
3) 3-氮杂双环 [3.1.0]己烷盐酸盐 （化合物 23-4)
23-3 23-4 将化合物 23-3 ( 18g, 0.086 mol)溶于 270 mL乙醇中， 加入 10% Pd/C (2.8g) , 置换成氢气后室温搅拌过夜。 将反应液过滤， 将滤液旋 转蒸发干燥， 得到白色固体， 将其用乙酸乙酯洗涤， 得到化合物 23-3 (9.4g) 。
4 )化合物 23 将化合物 A (4.85 g, 1011111101)、3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐（1.43 g 12 mmol)溶于 80 mL 二氯曱烷中， 室温下分批加入 NaBH(OAc)3(6.36 g,30mmol),加完后反应 30min,加入 30 mL曱醇淬灭反应，将反应液蒸 干， 加入 100 mL丙酮， 并用三氟乙酸调 pH到 3-4, 过滤， 往滤液中 滴加过量氯化氢乙醇溶液（7mol/L)至有大量固体析出， 过滤， 干燥得 到固体 5g。 将 5g固体用反相柱分离， 得到粗品 0.8 g, 进一步用反相 柱纯化， 得到化合物 23 (0.5 g) 。
^-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 7.42(s, IH), 3.93-4.05 (Abq, 2H) , 3.23-3.35 (m, 3H ) , 3.16 ( s, IH ) , 2.92-3.06 (m, 2H) , 2.73-2.84 (m， IH) , 2.59 (s, 6H) , 2.55 (s, 6H) ， 2.53-2.61 (m, IH ) , 1.96-2.07 ( m, 2H ) , 1.52-1.63 ( m, 3H ) , 0.81-0.86 ( m， IH )， 0.54-0.61 (m， IH)
5)化合物 23的盐酸盐
将化合物 23 (0.3 g)加入单口瓶中， 加入 4.5 mL丙酮， 在;水浴冷 却下滴加过量的氯化氢乙醇溶液 （7 mol/L ) 至有大量白色固体析出， 并继续搅拌 15 min,过滤， 用 2mL丙酮淋洗， 干燥， 得化合物 23的盐 酸盐 0.28g。
^-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 7.52 (s, IH), 4.30 - 4.45 (m, 2H), 3.62 (br. s.， IH), 3.56 (m, 4H), 3.36 (m， IH), 2.77 - 3.02 (m, 6H), 2.69 (m, IH), 2.58 (s, 6H), 2.09 - 2.26 (m, 2H), 1.83 (m, IH), 1.52 - 1.70 (m, IH), 0.90 (m, 2H), 0.82 (m, IH), 0.52 - 0.63 (m, IH) 实施例 20 (4S,4aS,5aR, 12aS)-9-(3-氮杂双环 [3丄 1 ]庚烷 -3-基甲 基 ）-4,7- 二 （ 二 甲 氨 基 ）-3, 10,12,12a- 四 羟 基 -1,11- 二 氧 代 -l,4,4a,5,5a,6,ll,12a-八氢并四苯 -2-曱酰胺 （化合物 24)的制备 在 25 mL单口瓶中， 将化合物 A (0.5g)、 3-氮杂双环 [3丄 1]庚烷三 氟乙酸盐（ 150 mg )、 lmL TEA和 10 mg无水三氯化铟溶于 lO mL DMF 中， 室温反应 0.5h, 緩慢加入 300 mg的氰基硼氢化钠， 继续反应 0.5h 后， 将反应液用 1L水稀释， 用反相柱分离得到 300 mg粗品， 进一步 用高压半制备色谱分离， 得到化合物 24(74 mg)。
1H-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 7.63 (s, 1H), 4.41 - 4.57 (m, 2H), 4.08 (s, 1H), 3.53 - 3.91 (m, 4H), 3.38 - 3.49 (m, 1H), 2.92 - 3.06 (m, 8H), 2.59 - 2.70 (m, 6H), 2.53 (m, 2H), 2.08 - 2.32 (m, 2H), 1.55 - 1.75 (m, 1H): 1.23 - 1.40 (m, 4H) 实施例 21 (4S,4aS,5aR, 12aS)-9-((6-氨基 -3-氮杂双环 [3.1.0]己烷 -3-基)甲基） -4,7-二（二曱氨基） -3, 10,12,12a-四羟基 -1,11-二氧代 -l,4,4a,5,5a,6,l l ,12a -八氢并四苯 -2-甲酰胺的盐酸盐 （化合物 26 的盐 酸盐） 的制备
在 25 mL的单口瓶中， 将化合物 A (1 g)和 3-氮杂双环 [3.1.0]己烷 -6-基氨基甲酸叔丁酯（ 1 g )溶于 5 mL DMF中 , 室温反应 0.5 h, 緩慢 加入 1.4 g三乙酰氧基硼氢化钠， 继续反应 0.5 h后， 将 10 g C18填料 和上述反应液混合， 装柱， 通过 ISCO 快速制备色谱柱 （ 乙腈：水 =1-10: 100 )分离， 收集经薄层色谱（TLC )验证含有化合物 26的分离 液， 加入 10 mL浓盐酸， 室温搅拌半小时后， 富集浓缩后， 冷冻干燥 得到化合物 26的盐酸盐 (58 mg, 浅黄色粉末)。
¾ NMR(D20, 400MHz) δ： 7.93 (s, 1H), 4.50 (m， 3H), 3.97 (s, 1H)， 3.67(br, 2H), 3.18 (s, 6H), 2.86-3.09(m, 10H), 2.49(t, IH), 2.32(s, 2H), 2.17(d, 2H), 1.58(m, IH) 实施例 22 (48,4 8,5&1 ,12&8)-9-((6-二甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷 -3-基）曱基）-4,7-二（二曱氨基）-3,10,12,12a-四羟基 -1,11-二氧代 -l,4,4a,5,5a,6,ll,12a-八氢并四苯 -2-甲酰胺 (化合物 27 ) 的制备
在 25 mL单口瓶中， 将化合物 A (1 g)和 6,6-二曱基 -3-氮杂双环 [3.1.0]己烷（18)溶于 5111^01\^中， 室温反应 0.5h, 緩慢加入 1.4 g 三乙酰氧基硼氢化钠， 继续反应 0.5 h后， 将 10 gC18填料与上述反应 液混合， 装柱， 通过 ISCO快速制备色谱柱（乙腈：水 =1-10:100)分离， 收集烃薄层色谱（TLC)验证含有化合物 27的分离液， 富集浓缩后， 冷冻千燥得到化合物 27(60mg， 浅黄色粉末)。
LC-MS(M+1):581 (实测值）
]H NMR(D20, 400MHz) δ： 7.34 (s, 1H)， 4.17 (s, 2H), 3.68 (s, IH), 3.53( r, 2H), 2.96 (m, IH), 2.79(s, 6H), 2.55-2.73(m, 4H), 2.43(s, 6H), 2.07-2.13(m, 2H), 1.66(s, 2H), 1.50-1.60(m, IH), 0.99(s, 3H), 0.93(s, 3H) 奖施例 23 (4S,4aS,5aR,12aS)-4,7-二 (二曱氨基) -9- ((六氢环戊二烯 并 [c]吡咯 -2(1// 基）曱基 )-3, 10,12,12a-四羟基 -1,11-二氧代 -l,4,4a,5,5a,6,ll,12a-八氢并四苯 -2-甲酰胺 (化合物 28 ) 的制备
在 25 mL单口瓶中，将化合物 A (1 g)和八氢环戊二烯并 [c]吡咯（ 1 g) 溶于 5 mL DMF中， 室温反应 0.5 h, 緩慢加入 1.4 g三乙酰氧基硼 氢化钠， 继续反应 0.5 h后，将 10 gC18填料与上述反应液混合， 装柱， 通过 ISCO快速制备色谱柱 （乙腈:水 =1-10:100) 分离， 收集经薄层色 谱 （T C) 验证含有化合物 28的分离液， 富集浓缩后， 冷冻干燥得到 化合物 28(50mg, 浅黄色粉末)。
LC-MS(M+1):581 (实测值）
]H NMR(D20, 400MHz) δ： 7.42 (s, 1H), 4.18 (s, 2H), 3.66 (s, 1H)， 3.49(br, 2H), 2.93-2.98 (m， 1H), 2.79(s, 6H), 2.55-2.73(m, 5H), 2.43(s, 6H), 2.08(t, 2H), 1.38-1.56(m, 8H) 实 施 例 24 (4S,4aS,5aR,12aS)-9-((l /- 异 吲 哚
-2(3H93SLH,4H,5H,6H,7H,7SLH ) -基）曱基) -4,7-二 (二曱氨基) -3 , 10,12,12a- 四羟基 -1,11-二氧代 -l,4,4a,5,5a,6,ll，12a -八氢并四苯 -2-曱酰胺 （化合 物 29) 的制备
在 25 mL单口瓶中， 将化合物 A (1 g)和八氢 异吲哚（ 1 g) 溶 于 5 niL DMF中，室温反应 0.5 h,緩慢加入 1.4 g三乙酰氧基硼氢化钠， 继续反应 0.5 h后，将 10 gC18填料与上述反应液混合，装柱，通过 ISCO 快速制备色谱柱 （乙腈:水 =1-10:100)分离， 收集经薄层色谱（TLC) 验证含有化合物 29 的洗脱液， 富集浓缩后， 冷冻干燥得到化合物 29 (160 mg, 浅黄色粉末)。
LC-MS(M+1):595 (实测值）
!H NMR(MeOD,400MHz) δ： 7.58 (s, 1H), 4.44 (s, 2H), 3.69 (s,
1H), 3.48 (s, 2H), 3.37-3.42 (m, 2H), 2.87-2.99 (m, 1H), 2.83(s, 6H), 2.65-2.71 (d, 1H), 2.62 (s, 6H), 2.48 (s, 2H), 2.14-2.26 (m, 2H), 1.14-1.71 (m, 10H) 以下通过体外、 体内抗菌实验及药代动力学实验测定， 进一步阐 述本发明化合物的有益效果， 但不应将此理解为本发明化合物仅具有 下列有益效果。 实验例 1 本发明化合物的抗菌谱及体外抗菌活性
供试菌种：
测试物： 对照药： （1)替加环素、 （2) ΡΤΚ-0796, 结构式见上 背景技术"部分所述；
(3)
(以下称为化合物 c) , ( 4 )
(以下称为化合物 d ) , 述化合物 c和化合物 d参照 WO2004/064728中公开的制备方法 本发明化合物的化学名称、 结构式及制备方法参见实施例； 实验方法： 琼脂稀释法， 参照 Clinical And Laboratory Standards Institute. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard- Seventh Edition. CLSI Document M7-A7.Vol 26, no. 2, Wayne, PA: Clinical And Laboratory Standards Institute,2006进行。 实验结果和结论:
表 2 抗菌活性 MIC ( g/mL)
测试物 肺炎 鲍曼 化脓
MRSA MRSE 大肠埃希菌
克雷伯菌 不动杆菌 链球菌
PT -0796 0.5 0.5 1 4 2 0.25 化合物 2 0.5 0.25 1 4 0.5 0.125 化合物 3 0.5 0.5 1 2 4 0.06 化合物 10 1 0.5 1 2 4 0.125 表 3 抗菌活性 MIC ( g/mL)
测试物 大肠 肺炎 鲍曼 产酸
MRSA MRSE
埃希菌 克雷伯菌 不动杆菌 克雷伯菌 化合物 d 1 2 2 8 4 8 化合物 9 0.5 0.5 0.5 1 4 1 化合物 16 0.5 0.5 1 1 1 1 化合物 20 0.5 1 0.5 2 1 1 化合物 1 0.5 1 1 2 1 1 化合物 19 0.5 0.5 1 1 0.25 0.25 表 4 抗菌活性 MIC ( g/mL)
醋酸钙 大 肠 无 乳 肺 炎 测试物 鲍曼不 粪 肠
MRSA 不 动 杆 埃 希 链 球 克 雷
动杆菌 球菌 菌 囷 囷 伯菌
PT -0796 2 4 0.5 4 0.5 8 0.25 化合物 c 1 4 0.5 4 0.25 16 0.5 化合物 23 0.25 1 0.125 0.25 0.06 1 0.06 化合物 24 0.5 1 0.25 1 0.125 2 0.25 化合物 27 0.5 0.5 0.125 2 0.125 4 0.125 化合物 28 0.5 1 0.125 1 0.125 2 0.06 化合物 29 1 2 0.25 1 0.25 4 0.125 抗菌活性 MIC9G ( μ g/mL)
测试物 o 星座链球 金黄色葡萄 鲍曼不动 流感嗜血
MRSA ^
囷 球菌 杆菌 杆菌 替加环素 1 o 0.•25 0.5 4 0.5
PTK-0796 2 0.5 0.5 8 1
化合物 23 0.25 2 0.5
MIC代表最低抑菌浓度， MIC9。代表 90%抑菌浓度 由表 2-5可见， 本发明化合物对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌均具 有^艮好的活性， 比对照药的抑菌活性高。 验例 2 本发明化合物的大鼠体内药代动力学实验
受试动物 雄性 SD 大鼠， 每个测试物测试 6只 SD 大鼠， 体重 230-250 g„购自上海斯莱克实验动物有限公司，合格证号： SCXK ( SH ) 2007-0005 22045
测试物 本发明化合物 2， 按照实施例 3的方法制备； 用生理盐水 溶解。
内标物 化合物 2的测定中使用 50ng/ml的 KBP-5747的乙腈溶液 作为内标液。
实验方法
给药 本发明化合物 2,静脉推注给药（ iv ) ,给药剂量为 5 mg/kg, 给药体积 5 mL/kg; 灌胃给药 （po ) ， 给药剂量为 5 mg/kg, 给药体积 5 mL/kg。 给药前禁食不禁水 12小时， 给药后 4小时给食。
采血 iv采血时间点为， 给药前记作 Omin, 给药后 5min, 15min,
30min, lh, 2h, 4h， 8h, 24h, 30h, 48h,
po采血时间点为，给药前记作 Omin,给药后 5min， 15min, 30min, lh, 2h， 4h, 8h, 24h, 30h, 48h，
每个时间点采取 150 μ ΐ左右全血， 在 4°C下在低温高速离心机中 以 2000 x g离心 5分钟， 分离血浆， 将所得血浆于 -70 °C冰箱中冻存。
血浆样品分析 取 30 μ ΐ , 加入 100 μ ΐ 内标液， 用涡旋仪 以 14000转 /分钟涡旋 5分钟， 然后 12000转 /分钟离心 5分钟， 取上清 液， 使用 LC-MS/MS分析。
计算公式 绝对生物利用度 F% = [AUC]INF (po) x Dose(lv) I
实验结果和结论 本发明化合物的大鼠药代动力学评价结果 （iv )
AUQnf代表药时曲线下面积
CL代表血浆清除率
Vss代表表观分布容积
Tl/2代表半衰期
Tmax代表血药浓度达峰时间
(„^代表血药峰浓度
F%代表绝对生物利用度 由表 6、 表 7可知， 本发明化合物具有良好的药代动力学特征， 生 物利用度高， 具有较大的临床应用价值。 实验例 3 本发明化合物的大鼠体内药代动力学实验
受试动物 雄性 SD大鼠， 6只 /化合物， 体重 180-280 g, 购自北 京维通利华实验动物技术有限公司； 动物合格证号： SCXK (京）
2006-0009。 测试物 本发明化合物， 按照上述实施例的方法制备； 用生理盐 水溶解。
替加环素， 用生理盐水溶解。
内标物
化合物 9 的测定中使用 50ng/ml 的阿洛利停的曱醇溶液作为内标 液；
化合物 20的测定中使用 50ng/ml的阿洛利停的 0.1%甲酸-曱醇溶 液作为内标液；
化合物 23的测定中使用 20ng/ml的阿洛利停曱醇溶液作为内标液； 替加环素的测定中使用 200ng/ml的阿洛利停甲醇溶液作为内标液 实验方法
给药 本发明化合物静脉推注给药 （iv) , 给药剂量为 5mg/kg, 给药体积 5 mL/kg; 灌胃给药 （po) ， 给药剂量为 5 mg/kg, 给药体积 5 mL/kg。 替加环素灌胃给药 （ρο) , 给药剂量为 10 mg/kg, 给药体积 5mL/kg。 给药前禁食不禁水 16小时， 给药后 4小时给食。
采血
化合物 9: iv采血时间点为， 给药前记作 Omin, 给药后 5 min, 15 min, 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 8h, 24 h, 30 h;
po采血时间点为，给药前记作 0 min，给药后 5 min, 15 min, 30 min, 1 h, 2h, 4h, 8 h, 24 h, 30 h。
化合物 20: iv采血时间点为， 给药后 5min, 15 min, 30 min, 1 h, 2h, h, 8h, 24 h, 30 h;
po采血时间点为， 给药后 10min， 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 8 h, 24 h, 30 h;
化合物 23： iv采血时间点为， 给药前记作 0 min， 给药后 5 min，
15 min, 30 min, 1 h， 2 h, 4 h, 8 h, 24 h, 30 h, 48 h;
po采血时间点为，给药前记作 0 min,给药后 5 min, 15 min, 30 min, 1 h, 2h, 4h, 8h， 24 h, 30 h, 48 h;
替加环素： iv采血时间点为 ,给药后 5min, 15min, 30min, lh, 2h, 4h, 6h, 8h;
po采血时间点为， 给药后 lOmin, 30min, lh, 2h, 4h, 6h，8h， 24h。 每个时间点采取 100 μΐ左右全血， 放置在肝素钠抗凝管中， 在 4 °C用低温高速离心机以 8000转 /分钟离心 6分钟， 分离血浆， 将所得血 浆在 80 °C水箱中冻存。
血浆样品分析
取 20 μ ΐ血浆， 加入 200 μ ΐ内标液， 用涡旋仪涡旋 3分钟， 然 后以 12000转 /分钟离心 5分钟，取 100 μ ΐ上清液并加入 100 μ ΐ纯水， 涡旋混匀， 使用 LC-MS/MS分析。
计算公式 绝对生物利用度 F% = [AUC] (po) x Dose(iv) I [AUC] (lv) x Dose(po)
实验结果 见表 8、 9。 表 8 本发明化合物的大鼠药代动力学评价结果（iv )
表 9 本发明化合物的大鼠药代动力学评价结果（po )
① AUClast代表药时曲线下面积 0
(D AUCinf代表药时曲线下面积 o ,
CL代表血浆清除率
Vss代表表观分布容积 T1/2代表半衰期
Tmax代表血药浓度达峰时间
cmax代表血药峰浓度
F%代表绝对生物利用度
CENTER FOR DRUG EVALUATION AND RESEARCH APPLICATION NUMBER 21-821 MEDICAL REVIEW(S) 第 2页第三 段报道： 替加环素口服不吸收， 仅能以静脉注射方式给药。 另外， 该 文献正文第 9页 "PHARMACOKINETICS / TOXICOKINETICS" 项下 考察了猴子口服给予替加环素的药代动力学特征， 结果证明替加环素 在猴子体内口服不吸收。 另外， 该项下以静脉注射方式考察其药代动 力学， 并在第 10页公开了如下结果：
表 8 中可以看出本发明化合物的静脉注射给药药代动力学指标比 实测的替加环素以及上述文献值好， 说明本发明化合物 9、 20、 23 的 药代动力学特征比替加环素好。
由表 9 可以看出， 替加环素给药剂量为本发明化合物给药剂量 2 倍时， 本发明化合物的 F%均比替加环素大， 因为 ％是衡量口服药代 动力学性质的最重要指标， 可以看出， 本发明化合物口服给药时药代 动力学性质好， 生物利用度高， 因此适合制成口服制剂。 实验例 4 本发明化合物对金黄色葡萄球菌致小鼠大腿感染模型 的体内杀菌作用
1、 试验动物和菌株
SPF级 CD-I ( ICR )雌性小鼠， 饲养于 SPF级环境， 体重 25 ± 2g。 动物购自北京维通利华实验动物技术有限公司， 许可格证号： SCXK (京 ) 2006-0009。
金黄色葡萄球菌， 购买于上海仁济医院。
2、 测试物 S£ (1 ) 对照药： 替加环素、 PTK-0796
(2) 本发明化合物
3、 试验方法
3.1 中性粒细胞减少的小鼠模型
接受细菌感染前 4天，腹腔注射（ip) 环磷酰胺（cyclophosphamide) 150 mg/kg;
接受细菌感染前 1天，腹腔注射（ip) 环磷酰胺（cyclophosphamide) 100 mg/kg;
给药体积为 10ml/kg。
3.2 中性粒细胞减少的小鼠大腿感染模型
挑取平板培养 18h的新鲜金葡菌单一菌落， 接种到肉汤中在 35°C 培养 18h 后， 将菌液用肉汤稀释， 用麦氏浊度仪配制 0.5号的菌悬液， 将菌愚液用肉汤稀释 10倍注入小鼠大腿肌肉， 每条大腿注射 0.1ml, 菌液的浓度大约为 106-107 CFU/ml。接种菌液浓度用琼脂平板活菌计数 法验证。
3.3 试验操作
空白组： 在动物接种细菌 2h后 （记为 Oh) , 将动物脱臼处死。 溶剂组： 动物感染细菌 2h为首次给药时间 （记为 Oh) , 皮下给予 溶剂， 24h后脱臼处死。
治疗组： 动物感染细菌 2h 为首次给药时间 （记为 Oh) , 按照表
10所设定的给药剂量、 给药次数进行皮下给药， 治疗 24h脱臼处死。
从上述处死的动物分离大腿肌肉组织，加 5 ml氯化钠注射液匀浆， 将匀浆后得到的菌液进行系列稀释后取 0.05 ml接种到琼脂平板上， 每 个梯度的菌液平行接种二个平板， 在 35°C培养 18 h。 观察各个平板上 菌落的生长状况， 选择菌落数在 30-300之间的平皿进行菌落计数， 分 别将菌落数记作 、 n2, N代表稀释倍数， 以公式 （ +112 ) /2/0.05 X 5 χΝ计算出每条大腿的菌落数（单位 CFU) ， 将每条大腿的菌落数以 10为底数取对数值， 得到每条大腿的 log1QCFU值。
4、 试^ r结果及讨论
动物给药治疗 24h后， 不同给药组动物每条大腿的 log1QCFU值和 标准; ¾如表 10所示： 表 10 给药
给药 MIC值 空白组 平均值 ±
测试物 剂量 变化值 次数 ( ug/ml ) 平均值 （Oh) 标准差 (24h)
mg/kg/天
2 2 7.67士 0.17 1.28 化合物 23 6 2 0.25 6.27 ± 0.41 -0.12
18 2 4.35 ± 0.45 -2.04
2 2 8.02 ± 0.24 1.63 替加环素 6 2 0.25 7.02 ± 0.43
6.39士 0.07
18 2 4.20 ± 0.25
2 2 8.16士 0.13 1.77
PTK-0796 6 2 0.5 7.59 ± 0.21 1.20
18 2 5.34 ± 0.79 -1.05 溶剂 0 2 1 8.93 ± 0.14 2.54 表 10数据则显示， 当给药剂量达到 6 mg/kg/天时， 化合物 23在小 鼠体内对金葡菌达到杀菌作用， 每条大腿的细菌减少值为 0.1 ο2 , 而此 时对照药替加环素和 PTK-0796均未达到杀菌效果，其每条大腿的细菌 增长值分别为 0.63、 1.20。 对照药替加环素和 PTK-0796在给药剂量达 到 18 mg/kg/天时才显示杀菌效果。 由以上结果得出结论： 皮下给药时， 化合物 23的体内杀菌效果好于对照药替加环素和 PTK-0796的体内杀 菌效果。

Claims (1)

  1. 权 利 要 求
    1. 通式（ I )所示的化合物、 其药学上可接受的盐、 其前体药物. 其溶剂化物或其异构体：
    其中，
    R2a、 R2b、 R3、 R1G、 R11和 R12分别独立地为氢；
    R5、 R6a、 R6b和 R8分别独立地为： 氢、 巯基、 卤素、 羟基、 氨基、 羧基、 d.6烷基、 卤代 d-6烷基、 C2-6烯基、 C2-6炔基、 d-6烷氧基、 卤 代 CM烷氧基、 d.6烷硫基、 烷基胺基、 二 (C1 -6烷基)胺基、 羟基 坑基、 羧基 d.6烷基、 氨基 d_6烷基、 d.6烷基胺基(^.6烷基、 d.6 烷基欺基、 d-6烷基羰氧基、 烷氧基羰基、 烷基亚磺酰基、 d_6 烷基磺酰基、 磺酸基、 磺酰基 烷基、 磺酰胺基、 磺酖胺基 C1-6烷 基、 烷基磺酰胺基、 氨基磺酰基、 d.6烷基胺基磺酰基、 二 (d-6烷 基)胺基磺酰基、 氨基磺酰基 d.6烷基、 d.6烷基曱酰胺基、 d.6烷基胺 基甲酰基、 二 (Cw烷基)胺基甲酰基、 氨基甲酰基、 氨基甲酰基 d_6烷 基、 3卜 8元环烷基、 6-14元芳基、 6-14元芳基 C1-6烷基、 6-14元芳基曱 酰基、 6-14元芳基曱酰氧基、 3-8元杂环基、 3-8元杂环基 d-6烷基、 6-14元杂芳基或 6-14元杂芳基 烷基；
    R7为： NR7aR7b;
    R4a、 R4b、 R7a和 R7b分别独立地为： 氢、 d.6烷基、 卤代 d.6烷基、 C2-6烯基、 C2.6炔基、 d_6烷氧基、 卤代 C1-6烷氧基、 C1-6烷硫基、 羟基 烷基、 羧基 d.6烷基、 氨基 d.6烷基、 d.6烷基胺基(^.6烷基、 C1-6 烷基羰基、 烷氧基羰基、 烷基亚磺酰基、 d.6烷基磺酰基、 磺 酸基、 磺酰基 烷基、 磺酰胺基 d_6烷基、 氨基磺酰基、 C1-6烷基胺 基磺酰基、 二 (C1-6烷基)胺基磺酰基、 氨基磺酰基 d.6烷基、 d.6烷基 胺基甲酰基、 二 (C1 -6烷基)胺基曱酰基、 氨基曱酰基、 氨基甲酰基 C1-6 烷基、 3-8元环烷基、 6-14元芳基、 6- 14元芳基、 6-14元芳基 C1-6烷基、 3-14无杂环基或 3-14元杂环基 C^6烷基；
    R!9a、 R9b分别独立地为:
    ( 1 ) 氢， 且 R9a、 R9b不能同时为氢，
    ( 2 )未被取代或被 1-3个相同或不同的 Q1取代的： 环丙烷基、 环 丁烷碁、 6-12元螺环基、 6元桥环基、 8-12元桥环基或 6-10元饱和稠 环基，且所述的环丙烷基、环丁烷基、 6-12元螺环基、 6元桥环基、 8-12 元桥坏基和 6-10元饱和稠环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 S、 SO、 S02、 N或 NRe替换， R。代表氢或 d.6烷基；
    ( 3 )未被取代或被 1-3个相同或不同的 Q1取代的： 环丁烷基。1-6 烷基、 环戊烷基 d_6烷基、 6-12元螺环基 d_6烷基、 6-9元桥环基 C1-6 烷基或 6-10元饱和稠环基 C1-6烷基， 且所述的环丁烷基、 6-12元螺环 基和 6-9元桥环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 S、 SO、 S02、 N或 NRe替换， 所述的 6-10元饱和稠环基中的碳原子可以 被 1-3个相同或不同的 CO、 S、 SO、 S02、 N或 NRe替换， R°代表氢 或 Ci-6烷基；
    或 R9a、 R9b与所连接的 N原子一起形成未被取代或被 1-3个相同 或不同的 Q2取代的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基或 6-9元饱和稠环基， 且所述的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基和 6-9元饱和稠环基中的碳原子 可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 S、 SO、 S02、 N或 NRe替换， Rc 代表氢或 d-6烷基；
    Q\ Q2分别独立地选自卤素、 羟基、 氨基、 羧基、 c1-6烷基、 c1-6 烷氧基、 代 C1-6烷基、 代（ 1-6烷氧基、 羟基 c1-6烷基、 氨基 c1-6 烷基、 羧基 d_6烷基、 C1-6烷基胺基、 二 (C1-6烷基)胺基、 氨基磺酰基、 氨基璜酰基 C1-6烷基、 氨基曱酰基、 氨基曱酰基 C1-6烷基、 d-6烷基羰 基、 烷基羰氧基、 C1-6烷氧基羰基、 苯基、 3-8元环烷基或 3-8元杂 环基；
    R13a、 R13b分别独立地为： 氢、 C1-6烷基或 3-8元环烷基。
    2. 权利要求 1所迷的化合物、 其药学上可接受的盐、 溶剂化物或 其异构体， 其中通式（I ) 具有下 ^通式 （II ) 所示的结构：
    R9a、 R9B分别如权利要求 1中所定义。
    3. 权利要求 1所述的化合物、 其药学上可接受的盐、 溶剂化物或 其异构体， 其中通式 （I )具有下述通式（ΙΠ ) 所示的结构：
    其中， R9A、 R9B分别如权利要求 1中所定义。
    4. 如权利要求 3所述的化合物、 其药学上可接受的盐、 其前体药 物、 其溶剂化物或其异构体：
    其中，
    R9A、 R9B分别独立地为：
    ( 1 ) 氢， 且 R9A、 R9B不能同时为氢，
    ( 2 )未被取代或被 1-3个相同或不同的 Q1取代的环丙烷基、环丁 烷基、 6-10元螺环基、 6元桥环基或 6-10元饱和稠环基， 且所述的环 丙烷基、 环丁烷基、 6-10元螺环基、 6元桥环基和 6-10元饱和稠环基 中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 N或 NR°替换， RE代 表氢或 CM烷基，
    ( 3 ) 未被取代或被 1-3 个相同或不同的 Q1取代的环丁烷基 C1-4 烷基、 环戊烷基 CM烷基、 6-10元螺环基 C1-4烷基、 6-9元桥环基(^-4 烷基或 6-10元饱和稠环基 d-4烷基， 且所述的环丁烷基、 6-10元螺环 基和 6-9元桥环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 N 或 NRC替换， 所述的 6-10元饱和稠环基中的碳原子可以被 1-3个相同 或不同的 CO、 N或 NRE替换， RE代表氢或（ μ4烷基；
    或 R9A、 R9B与所连接的 N原子一起形成未被取代或被 1-3个相同或不 同的 (^取代的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基或 6-9元饱和稠环基， 且所述 的氮杂环丁烷基、 6-9元螺环基和 6-9元饱和稠环基中的碳原子可以被 1-3个相同或不同的 0、 CO、 N或 NRe替换， Re代表氢或(^-4烷基；
    qK Q2分别独立地选自卤素、 羟基、 氨基、 羧基、 CM烷基、 CM 烷氧基或! ¾代(^.4烷基。
    5. 如权利要求 4所述的化合物、 其药学上可接受的盐、 其前体药 物、 其溶剂化物或其异构体：
    其中，
    R9a、 R9b分别独立地为：
    ( 1 ) 氢， 且 R9a、 R9b不能同时为氢，
    ( 2 )未被取代或被 1 -3个相同或不同的 Q1取代的环丙烷基、环丁烷 基、 6;-8元螺环基或 6元桥环基， 且所述的环丙烷基、 环丁烷基、 6-8元 螺环基和 6元桥环基中的碳原子可以被 1 -3个相同或不同的 0、 N或 NRe 替换， Re代表氢、 曱基或乙基；
    ( 3 ) 未被取代或被 1 -3个相同或不同的 Q1取代的环丁烷基 C1-3烷 基、 环戊烷基(^.3烷基、 6-8元螺环基 d_3烷基、 6-8元桥环基(^-3烷基， 且所迷的环丁烷基、 6-8元螺环基和 6-8元桥环基中的碳原子可以被 1-3 个相! ¾或不同的 0、 N或 NIT替换， Re代表氢、 甲基或乙基；
    或 R9a、 R9b与所连接的 N原子一起形成未被取代或被 1-3个相同 或不 [¾的 Q2取代的氮杂环丁烷基、 6-8元螺环基或 6-9元饱和稠环基， 且所迷的氮杂环丁烷基、 6-8元螺环基和 6-9元饱和稠环基中的碳原子 可以被 1-3个相同或不同的 0、 N或 NRC替换， Rc代表氢、 曱基或乙 基；
    Q\ Q2分别独立地选自 素、 d.4烷基或氨基。
    6. 如权利要求 5所述的化合物、 其药学上可接受的盐、 其前体药 物、 其溶剂化物或其异构体：
    其中，
    U9\ R9b分别独立地为：
    ( 1 ) 氢， 且 R9a、 R9b不能同时为氢，
    ( 2 ) 未被取代或被 1-3 个相同或不同的 Q1取代的 ^、 ^° (3)未被取代或被 1-3个相同或不同的 Q1 .、^X>、 、^X、/J A^;
    或 R9a、 R9b与所连接的 N原子一起形成未被取代或被 1-3个相同
    或不同的 Q2取代的 ^、、
    Q1, Q2分别独立地选自氟原子、 氯原子、 曱基或氨基。
    7. 如权利要求 1所述的化合物、 其药学上可接受的盐、 其前体药 物、
    t9
    100100/1101^3/ I d sosno/fioz: OAV
    8. 药物组合物， 该组合物包含权利要求 1 所述的化合物、 其药学 上可接受的盐、 其前体药物、 其溶剂化物或其异构体、 以及药用载体 和 /或稀释剂。
    9. 如权利要求 1所述的化合物、 其药学上可接受的盐、 其前体药 的疾病的药物中的应用， 所述对四环素类药物敏感的疾病例如是感染、 它疾病。
    10. 一种制备通式 （I ) 所示的化合物、 其药学上可接受的盐、 其 前体药物、 其溶剂化物或其异构体的方法， 该方法包括使原料 1 化合 物与 N-碘代丁二酰亚胺反应得到中间体 1化合物， 中间体 1在催化剂 的作用下反应得到中间体 2化合物， 然后使中间体 2化合物与原料 2 化合物反应， 得到通式 （I ) 所示的化合物、 其药学上可接受的盐、 其 前体药物、 其溶剂化物或其异构体：
    式 （I)
    其中 R2a、 R2b、 R3、 R4a、 R4b、 R5、 R6a、 R6b、 R'、 Rs、 R 、 R R10、 Ru、 R12如权利要求 1中所定义。
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