BR112021005960A2

BR112021005960A2 - composto, método de fabricação do mesmo, uso do mesmo, composição farmacêutica e formulação farmacêutica

Info

Publication number: BR112021005960A2
Application number: BR112021005960-1A
Authority: BR
Inventors: Rongyao Chen
Original assignee: Nanjing Transthera Biosciences Co., Ltd.
Priority date: 2018-09-29
Filing date: 2019-07-05
Publication date: 2021-07-13
Also published as: AU2019348752B2; WO2020063012A1; AU2019348752A1; CN112135826A; EP3858833A1; EP3858833A4; JP2022501403A; US20210332057A1; US20220144843A1; CA3114259A1; CN112135826B; JP7370617B2; CN110964016B; MX2021003662A; US11420975B2; CN110964016A; KR20210070304A

Abstract

COMPOSTO, MÉTODO DE FABRICAÇÃO DO MESMO, USO DO MESMO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA. A presente invenção se refere a um composto tendo uma estrutura representada pela fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável, um solvato, um metabólito ativo, um polimorfo, um éster, um isômero óptico ou uma pró-droga do mesmo, uma composição farmacêutica que compreende o composto tendo a estrutura representada pela fórmula I e o uso do mesmo, como um inibidor da tirosina quinase de Bruton com alta seletividade para mutantes BTK(C481S) e usados para a preparação de uma droga para prevenir ou tratar doenças heteroimunes, doenças autoimunes ou cânceres.

Description

COMPOSTO, MÉTODO DE FABRICAÇÃO DO MESMO, USO DO MESMO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA CAMPO TÉCNICO

[0001] A presente invenção pertence ao campo da medicina e se refere particularmente a um derivado de aminonorbornano como um inibidor de tirosina quinase de Bruton com alta seletividade para um mutante C481S, uma composição farmacêutica do mesmo, um método de fabricação para os mesmos e uso do mesmo na fabricação de um medicamento.

FUNDAMENTOS

[0002] A via de sinalização do receptor de células B (BCR) desempenha uma função fundamental na maturação, diferenciação e desenvolvimento das células B. A transdução de sinal mediada por BCR aberrante pode levar à ativação desregulada de células B e/ou formação de autoanticorpos patogênicos, resultando em uma variedade de doenças humanas, incluindo câncer, doenças autoimunes, incluindo lúpus eritematoso, linfoma linfocítico crônico, linfoma difuso de grandes células, linfoma folicular ou leucemia linfocítica crônica, doenças heteroimunes, incluindo doenças inflamatórias, asma e semelhantes.

[0003] A tirosina quinase de Bruton (BTK) é um membro da família TEC de tirosina quinases não receptoras. Esta desempenha uma função fundamental na ativação da via de sinalização BCR e é um regulador chave da formação inicial de células B e da ativação e sobrevivência de células B maduras (Khan et al., Immunity 1995 3: 283; Ellmeier et al., J Exp Med 2000 192: 1611). A BTK desempenha uma função importante na regulação da proliferação de células B e apoptose (Islam e Smith, Immunol Rev 2000 178: 49; Davis et al., Nature 2010 463: 88-94) e, portanto, inibição de BTK pode ser usada para tratar certos linfomas e leucemia de células B (Feldhahn et al., J Exp Med 2005 201: 1837).

[0004] A função da BTK em doenças autoimunes e inflamatórias foi confirmada por modelos de camundongos deficientes em BTK. Em um modelo de camundongo pré-clínico de lúpus eritematoso sistêmico (LES), camundongos com deficiência de BTK mostram melhora significativa na doença progressiva. Além disso, os camundongos deficientes em BTK são resistentes à artrite induzida por colágeno (Jansson e Holmdahl, Clin Exp Immunol 1993 94: 459). Os inibidores seletivos de BTK mostram uma relação dose-efeito clara em modelos de camundongo com artrite (Pan et al., Chem. Med. Chem. 2007 2: 58-61). Estudos clínicos estão em andamento para o tratamento da artrite com inibidores de BTK.

[0005] Como o primeiro inibidor de BTK comercializado, ibrutinibe (nome comercial Imbruvica) obteve grande sucesso com suas vendas anuais atingindo 2,6 bilhões de dólares americanos em 2017. Contudo, como acontece com muitas outras drogas anticâncer, alguns pacientes exibem resistência à droga. A mutação C481S da quinase BTK foi verificada por ser a principal causa de resistência às drogas. O ibrutinibe atua farmacodinamicamente por ligação covalente irreversível ao resíduo de triptofano C481 da quinase BTK; contudo, o resíduo de triptofano perde a capacidade de se ligar covalentemente ao ibrutinibe, pois a mutação C481S transforma o triptofano em serina.

[0006] De acordo com estatísticas clínicas, a mutação BTK(C481S) está associada a 87% de pacientes com linfoma crônico (CLL) recorrente (Woyach et al., J Clin Oncol 2017 35: 1437-1443) e cerca de 80% dos pacientes com linfoma de células do manto (MCL) recorrente (Chiron et al., Cancer Discovery 2014 4 (9): 1-14). O desenvolvimento de um inibidor de BTK eficaz contra o mutante BTK(C481S) superaria a resistência ao ibrutinibe devido à mutação C481S.

RESUMO

[0007] O problema técnico a ser resolvido pela invenção preventiva é prover um composto novo e não divulgado do inibidor de tirosina quinase de Bruton com alta seletividade para mutante BTK(C481S), um sal farmaceuticamente aceitável, um solvato, um metabólito ativo, um polimorfo, um éster, um isômero óptico ou uma pró-droga do mesmo, uso do composto em farmácia e um método para prevenir ou tratar doenças relacionadas à atividade excessiva de BTK em humanos ou mamíferos pelo uso do composto divulgado neste documento.

[0008] A fim de resolver o problema técnico, o esquema técnico adotado na presente invenção é o seguinte: É provido um composto da fórmula (I)

A L

B C 2

R

N R1 (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável, um solvato, um metabólito ativo, um polimorfo, um éster, um isômero óptico ou uma pró-droga do mesmo, em que o anel A é selecionado a partir de uma das seguintes estruturas:

N N

N N O N NH2 N NH2 NH2 N NH2 H2N NH2

N N N N N N N N N

O R5

N N HN N N HN N N NH2 NH2 O NH2 NH2 O NH2

N N N N N N N

N 5 R R5 O

N N N

N N N NH2 NH2 NH2 N NH2 NH2

N N N N N N N

N R5 R5

R5 sendo selecionado a partir de hidrogênio, halogênio, ciano, hidroxila, alquinila, amino, alquila C1-3, alcoxi C1-3, haloalquila C1-3, haloalcoxi C1-3, haloalquilamino C1-3, cicloalquila C3-7, cicloalcoxi C3-7 e cicloalquilamino C3-7; o anel B é um anel aromático ou anel heteroaromático substituído ou não substituído; o anel C é um anel aromático substituído ou não substituído ou anel heteroaromático; L é uma ligação simples ou uma das seguintes estruturas:

O O O N N

H H R1 é selecionado a partir de R3 e uma das seguintes estruturas: R3 sendo selecionado a partir de hidrogênio, alquila C1-6 substituída ou não substituída, alquinila C1-6 substituída ou não substituída, alquenila C1-6 substituída ou não substituída, arila C6-10 substituída ou não substituída, heteroarila C1-9 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída e heterocicloalquilamino C2-7 substituído ou não substituído; e R4 sendo selecionado a partir de hidrogênio, alquila C1-6 substituída ou não substituída, arila C6-10 substituída ou não substituída, heteroarila C1-9 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída e heterocicloalquila C3-7 substituída ou não substituída; e R2 sendo selecionado a partir de H, alquila C1-3 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída, heterocicloalquila C2-7 substituída ou não substituída, arila C6-10 substituída ou não substituída e heteroarila C1-9 substituída ou não substituída.

R1 e R2, juntamente com N anexado a ele, formam um anel heterocíclico C2-7 substituído ou não substituído e R3 e R4, juntamente com N anexado a ele, forma ou não forma um heterociclilamino C3-7 ou um heteroarilamino C3-9.

[0009] Preferencialmente, para R3, um substituinte da alquila C1- 6 substituída, a alquinila C1-6 substituída, a alquenila C1-6 substituída, a arila C6-10 substituída, a heteroarila C1-9 substituída, a cicloalquila C3-7 substituída ou a heterocicloalquila C2-7 substituída é selecionada a partir de um ou mais dentre halogênio, ciano, hidroxila, amino, acilamino substituído ou não substituído, aminoacila substituída ou não substituída, alquila C1-4 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída, cicloalcoxi C3-7 substituído ou não substituído, alquilamino C1-4 substituído ou não substituído, di[alquila C1-4 substituída ou não substituída]amino, cicloalquilamino C3-7 substituído ou não substituído, heterocicloalquilamino C3-7 substituído ou não substituído, alcoxi C1-3 substituído ou não substituído, cicloalcoxi C3-7 substituído ou não substituído, arila C6-10 substituída ou não substituída e heterocicloalquila C3- 7 substituída ou não substituída.

[0010] Preferencialmente, para R4, um substituinte da alquila C1- 6 substituída, a arila C6-10 substituída, a heteroarila C1-9 substituída, a cicloalquila C3-7 substituída ou a heterocicloalquila C3-7 substituída é selecionado a partir de um ou mais dentre halogênio, hidroxila, ciano, amino, alquenila C1-4 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída, cicloalcoxi C3-7 substituído ou não substituído, alquilamino C1-4 substituído ou não substituído, di[alquila C1-4 substituída ou não substituída]amino, cicloalquilamino C3-7 substituído ou não substituído, heterocicloalquilamino C3-7 substituído ou não substituído, alcoxi C1-3 substituído ou não substituído, cicloalcoxi C3-7 substituído ou não substituído, arila C6-10 substituída ou não substituída e heterocicloalquila C3- 7 substituída ou não substituída.

[0011] Preferencialmente, o anel A é uma das seguintes estruturas:

N N

N N N NH2 N NH2 NH2 N NH2

N N N N N N N

O R5 R5 sendo selecionado a partir de hidrogênio, halogênio, ciano, hidroxila, alquinila, amino, alquila C1-3, alcoxi C1-3, haloalquila C1-3, haloalcoxi C1-3, haloalquilamino C1-3, cicloalquila C3-7, cicloalcoxi C3-7 e cicloalquilamino C3-7; preferencialmente, para o anel B, um substituinte do anel aromático ou anel heteroaromático substituído é selecionado a partir de um ou mais dentre halogênio, hidroxila, ciano, amino, alquila C1-3, alcoxi C1-3, haloalquila C1-3 e haloalcoxi C1-3.

[0012] Preferencialmente, o anel B é uma das seguintes estruturas:

F F OMe

[0013] Preferencialmente, para o anel C, um substituinte do anel aromático ou anel heteroaromático substituído é selecionado a partir de um ou mais dentre halogênio, hidroxila, ciano, amino, alquila C1-3, alcoxi C1-3, haloalquila C1-3 e haloalcoxi C1-3.

[0014] Preferencialmente, o anel C é uma das seguintes estruturas:

NC MeO MeO MeO F

F N F F3C

S N N N N N

[0015] Preferencialmente, R2 sendo selecionado a partir de H e R1 sendo selecionado a partir de , em que R3 sendo selecionado a partir de hidrogênio, alquila C1-6 substituída ou não substituída, alquinila C1-6 substituída ou não substituída, alquenila C1-6 substituída ou não substituída, arila C6-10 substituída ou não substituída, heteroarila C1-9 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída e heterocicloalquilamino C2-7 substituído ou não substituído.

[0016] Mais preferencialmente, o composto é selecionado a partir de qualquer uma das seguintes estruturas:

O H O H O H O H O H O H N N N N N N

N N N N N N NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 F3C F3C F3C F3C F3C F3C

N N N N N N N N N N N N N N N N N N O O N HN HN HN HN HN HN OH O O O O O O O H O H O H O H O H O H N N N N N N

N N N N N N NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 F3C F3C F3C F3C F3C F3C

N N N N N N N N N N N N N N N N N N O O OH N O CN HN HN HN HN O HN HN O O O O O O O H O H O H O H O H O H N N N N N N

N N N N N N NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 F3C F3C F3C F3C F3C F3C

N N N N N N N N N N N N N N N N N N NC CN CN O COOH HN HN N HN HN HN HN O O O O O O O H O H O H O H O H O H N N N N N N

N N N N N N NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 F3C F3C F3C F3C F3C F3C

N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N O S N N HN HN HN HN HN O HN O O

O O O O O O MeO MeO MeO MeO

H H H H O H O H N N N N N N N N

O F O F O F O F NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 F3C F3C

N N N N N N N N N N N N N N N N N N N O O OH HN HN HN N HN HN HN O O O O O O O O H O H O H O H O H O H N N N N N N

N N N N N F N NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 F F3C NC

N N N N N N N N N N N N N N N N N N HN HN HN HN HN HN O O O O O O F O H O H O H O H H H N N N N N N N N N N S O O

O O NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 F FF3C OF3C

N N N N N N N N N N N N N N N N N N HN HN HN HN HN HN O O O O O O H N F O O O O O O

O NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 NH2

N N N N N N N N N N N N N N N N N N O O HN HN HN OH HN HN HN N O O O O O O O O H O H O H O H O H N N N N N

N N N N N NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 F3C F3C F3C F3C F3C

N N N N N N N O O N N N N N N N N N N O O HN HN N HN OH HN HN O O O O O O

[0017] É provido uso do composto, de acordo com qualquer um dos aspectos acima, para fabricação de um medicamento para prevenir ou tratar uma doença heteroimune, uma doença autoimune ou um câncer,

em que a doença heteroimune, a doença autoimune ou o câncer estão associados a uma atividade excessiva da tirosina quinase de Bruton, ou a doença heteroimune, a doença autoimune ou o câncer estão associados à proliferação aberrante de células B.

[0018] Adicionalmente, a doença heteroimune é uma doença inflamatória ou asma.

[0019] Além disso, a doença autoimune é lúpus eritematoso, linfoma linfocítico crônico, linfoma difuso de grandes células, linfoma folicular ou leucemia linfocítica crônica.

[0020] É provida uma composição farmacêutica que compreende um ou mais compostos de acordo com qualquer um dos aspectos acima.

[0021] É provida uma formulação farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto, de acordo com qualquer um dos aspectos acima e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0022] A formulação farmacêutica é formulada para administração oral, administração parentérica, administração bucal, administração nasal, administração tópica ou administração retal.

[0023] A formulação farmacêutica é para uso no tratamento de uma doença ou condição associada à atividade excessiva da tirosina quinase de Bruton, que compreende a administração da formulação farmacêutica a um ser humano ou mamífero em necessidade da mesma; a doença associada à atividade excessiva da tirosina quinase de Bruton é uma doença heteroimune, uma doença autoimune ou um câncer; a doença heteroimune é uma doença inflamatória ou asma; a doença autoimune é o lúpus eritematoso, linfoma linfocítico crônico, linfoma difuso de grandes células, linfoma folicular ou leucemia linfocítica crônica.

[0024] A presente invenção compreende a etapa de contato da formulação farmacêutica com BTK, que compreende um ensaio in vitro ou in vivo.

[0025] O método de fabricação 1 para o composto I compreende acima: (S1) realizar acoplamento de Suzuki do composto IIIA com ácido borônico ou borato II para resultar no composto IV; (S2) converter o composto IV no cloridrato do composto V pela remoção da benziloxicarbonila com ácido trifluoroacético; e (S3) acoplar o composto V com um ácido orgânico para resultar no composto I descrito acima; em que X = halogênio e R2, R3, L, anel A, anel B e anel C são descritos conforme acima.

[0026] O método de fabricação 2 para o composto I compreende acima: (A1) converter o composto IIIA em cloridrato do composto VI pela remoção da benziloxicarbonila com ácido trifluoroacético; e (A2) acoplar o composto VI com um ácido orgânico para resultar no composto VII; e (A3) realizar acoplamento de Suzuki do composto VII com ácido borônico ou borato II para resultar no composto I descrito acima;

em que X = halogênio e R2, R3, L, anel A, anel B e anel C são descritos conforme acima.

[0027] O método de fabricação 3 para o composto I compreende acima: (B1) realizar o acoplamento de Chan-Lam-Evans do composto IIIB com ácido borônico II na presença de catalisação de acetato de cobre para resultar no composto VIII; (B2) converter o composto VIII no cloridrato do composto IX pela remoção da benziloxicarbonila com ácido trifluoroacético; e (B3) acoplar o composto IX com um ácido orgânico para resultar no composto I descrito acima; em que R2, R3, L, anel A, anel B e anel C são descritos conforme acima.

[0028] Cada um dos produtos resultantes a partir das reações nos métodos 1, 2 e 3 pode ser obtido por técnicas de separação convencionais, incluindo, mas não se limitando a, filtração, destilação, cristalização, separação cromatográfica e semelhantes. Os materiais de partida necessários para a síntese podem ser sintetizados por si mesmo ou adquiridos em estabelecimentos comerciais, tal como Adrich ou Sigma. Esses materiais podem ser caracterizados por meios convencionais, tais como constantes físicas e dados espectrais. Os compostos descritos neste documento podem ser sintetizados para resultar em um isômero óptico simples ou uma mistura de isômeros ópticos.

[0029] Os sobrescritos das letras na presente invenção indicam o número de sequência do grupo e os subscritos indicam o número do átomo. Por exemplo: R1, R2 e R3 representam os grupos R 1º a 3º e alquila C1-4 representa alquila contendo 1-4 átomos de C. O número de átomos de C no substituinte não é contado na cadeia principal.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0030] A Figura 1 é um modelo de tumor de xenoenxerto OCI- LY10.

[0031] A Figura 2 é um modelo de tumor de xenoenxerto TMD-

8.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0032] A presente invenção pode ser melhor compreendida de acordo com os seguintes exemplos. Contudo, é facilmente entendido por aqueles versados na técnica que o conteúdo descrito nos exemplos é usado apenas para ilustrar a presente invenção, e não devem e não irão limitar a presente invenção descrita em detalhes nas reivindicações. Síntese do intermediário I-5 Rota sintética do intermediário I-5

I-2: 4-(((benziloxi)carbonil)amino)biciclo[2.2.1]heptan-1-carboxilato de metila

[0033] A uma solução de ácido 4- (metoxicarbonil)biciclo[2.2.1]heptan-1-carboxílico (I-1) (3,5 g, 17,7 mmol) e TEA (1,78 g, 17,7 mmol) em tolueno (30 mL) foi adicionado DPPA (5,34 g, 19,5 mmol). A mistura foi aquecida a 90 °C e mantida a esta temperatura por 2 h. Após ser arrefecida à temperatura ambiente, a mistura foi adicionada com BnOH (1,9 g, 17,7 mmol). O resultado da mistura foi agitado a 90 °C por 4 dias. Após ser arrefecida à temperatura ambiente, a mistura foi diluída com acetato de etila e lavada com solução aquosa de NaHCO3. A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:4) para resultar no composto desejado I-2 (3 g, rendimento: 56%). I-3: ácido 4-(((benziloxi)carbonil)amino)biciclo[2.2.1]heptan-1- carboxílico

[0034] A uma solução de 4- (((benziloxi)carbonil)amino)biciclo[2.2.1]heptan-1-carboxilato de metila (I-2) (3 g, 9,9 mmol) foi adicionado NaOH (792 mg, 19,8 mmol), e a mistura foi aquecida a 60 °C e mantida a esta temperatura por 10 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (50 mL) e, então, adicionada com solução aquosa 1 N de HCl para ajustar o pH a 4. Acetato de etila (20 mL × 3) foi adicionado para extração e a fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada para resultar no composto desejado I-3 (2,2 g, rendimento: 77%), que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação. I-4: (4-carbamoilbiciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila

[0035] A uma solução do composto I-3 (2 g, 6,9 mmol) e Et3N (1 g, 10 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionado cloroformato de isobutila (1,36 g, 10 mmol) gota a gota a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C por 20 min, adicionada com NH4OH (10 mL) gota a gota e então agitada à temperatura ambiente por 10 min. A mistura resultante foi despejada em água (30 mL) e a fase orgânica foi separada. A solução aquosa foi extraída com DCM (15 mL × 2) e as fases orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (eluente: EA/PE (1:1)–EA/MeOH (10:1)), para resultar no composto desejado I-4 (1,7 g, rendimento: 85%). I-5: (4-aminobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila

[0036] Uma solução de composto I-4 (1,6 g, 5,55 mmol) e [hidroxi(tosiloxi)iodo]benzeno (2,17 g, 5,55 mmol) em ACN (20 mL) foi aquecida sob refluxo por 1 h. O solvente foi evaporado e 1 M de NaOH (12 mL) foi adicionado. EA (15 mL × 2) foi adicionado para extração, e a fase orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (eluente: DCM/MeOH = 10:1), para resultar no composto desejado I-5 (920 mg, rendimento: 64%). LC-MS m/z = 261,1 [M+1]+. Síntese de ácido borônico intermediário II Rota sintética do intermediário II-1 4-bromo-N-(piridin-2-il)benzamida

[0037] A uma mistura de ácido 4-bromobenzoico (5 g, 24,8 mmol) e piridin-2-amina (4,68 g, 49 mmol) em piridina (30 mL) foi adicionado POCl3 (11,4 g, 74 mmol) gota a gota sob um banho gelado. A suspensão foi agitada à temperatura ambiente por 20 min. A mistura de reação foi despejada em água (100 mL) e extraída com acetato de etila (40 mL × 3). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl (50 mL × 2), seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:9-1:1) para resultar no produto 4-bromo-N-(piridin-2-il)benzamida (3,28 g, 48%). LC-MS m/z = 277,0 [M+1]+. N-(piridin-2-il)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzamida

[0038] Uma mistura de 4-bromo-N-(piridin-2-il)benzamida (2 g, 7,22 mmol), 4,4,4',4', 5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (2,75 g, 10,83 mmol), PdCl2(dppf) (527 mg, 0,72 mmol) e KOAc (235 mg, 2,4 mmol) em tolueno (30 mL) foi aquecida a 110 °C e mantida a esta temperatura por 6 h. A mistura de reação foi evaporada e adicionada com água (100 mL). O acetato de etila (40 mL x 2) foi adicionado para extração. A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:4-1:1) para resultar no produto N-(piridin-2-il)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- diaxoborolan-2-il)benzamida (2 g, 85%). II-1: ácido (4-(piridin-2-ilcarbamoil)fenil)borônico

[0039] A uma solução de N-(piridin-2-il)-4-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzamida (2 g, 6,2 mmol) em um solvente misto de THF:H2O (24 mL:6 mL) foi adicionado NaIO4 (3,27 g, 18,6 mmol), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. Foi então adicionada 2N de solução aquosa de HCl (1,65 mL) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 3 h. A mistura foi diluída com acetato de etila e lavada com salmoura. A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (MeOH/DCM = 1:10) para resultar no produto de ácido (4-(piridin-2-ilcarbamoil)fenil)borônico (II-1) (1,4 g, 93%). LC-MS m/z = 243,1 [M+1]+. Rota sintética do intermediário II-2 Cloreto de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoila

[0040] A uma solução de ácido 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzóico (10 g, 40 mmol) e 1 gota de DMF em DCM (100 mL) foi cloreto de oxalila adicionado (10,2 g, 80 mmol) gota a gota sob um banho de gelo. A mistura foi agitada a 0 °C por 30 min e, então, aquecida à temperatura ambiente e mantida a esta temperatura por 3 h. A mistura foi então concentrada para resultar um produto, que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação. N-(4-fluoropiridin-2-il)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzamida

[0041] A uma solução de 4-fluoropiridin-2-amina (421 mg, 3,76 mmol) em piridina (3 mL) foi adicionada uma solução de cloreto de 4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-il)benzoila (1 g, 3,76 mmol) em DCM (6 mL) e a suspensão foi agitada a 0 °C por 30 min. A mistura foi despejada em água e extraída com DCM (20 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro e evaporada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1: 9) para resultar no produto (1,04 g, 81%). LC-MS m/z = 243,1 [M+1]+. II-2: ácido (4-((4-fluoropiridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico

[0042] A uma solução de N-(4-fluoropiridin-2-il)-4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzamida (1,04 g, 3,04 mmol) em um solvente misto de THF:H2O (24 mL:6 mL) foi adicionado NaIO4 (1,9 g, 9,12 mmol), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. Foi então adicionada solução aquosa de HCl (1,65 mL) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 3 h. A mistura foi diluída com acetato de etila e lavada com salmoura. A fase orgânica foi separada, seca sobre

Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (MeOH/DCM = 1:10) para resultar no produto II-2 (648 mg. 82%). LC-MS m/z = 261,1 [M+1]+. II-3: ácido (4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico

[0043] Com 4-(trifluorometil)piridin-2-amina (609 mg, 3,76 mmol) e cloreto de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-il)benzoil (1 g, 3,76 mmol) como materiais de partida, o mesmo método sintético que aquele de II-2 foi usado para resultar no composto desejado (607 mg). LC- MS m/z = 311,1 [M+1]+. II-4: ácido (4-((4-metilpiridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico

[0044] Com 4-metil-piridin-2-amina (406 mg, 3,76 mmol) e cloreto de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-il)benzoila (1 g, 3,76 mmol) como materiais de partida, o mesmo método sintético que aquele de II-2 foi usado para resultar no composto desejado (589 mg). LC- MS m/z = 257,1 [M+1]+. II-5: ácido (4-((4-cianopiridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico

[0045] Com 4-ciano-piridin-2-amina (447 mg, 3,76 mmol) e cloreto de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-il)benzoila (1 g, 3,76 mmol) como materiais de partida, o mesmo método sintético que aquele de II-2 foi usado para resultar no composto desejado (465 mg). LC- MS m/z = 268,0 [M+1]+. Rota sintética do intermediário II-6 4-bromo-2-fluoro-N-(piridin-2-il)benzamida

[0046] A uma solução de ácido 4-bromo-2-fluorobenzóico (1 g, 4,56 mmol) em DCM (30 mL) foi adicionado cloreto de oxalila (1,16 g, 9,13 mmol) gota a gota sob um banho de gelo e então 1 gota de DMF foi adicionada. Após ser agitada à temperatura ambiente por 3 h, a mistura foi concentrada e dissolvida em DCM (6 mL). A solução resultante foi adicionada a uma solução de piridin-2-amina (428 mg, 4,56 mmol) em piridina (3 mL) a 0 °C e a suspensão foi agitada a 0 °C por 30 min. A mistura foi despejada em água e extraída com DCM (20 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro e evaporada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:9) para resultar no produto (1,05 g, 78%). LC-MS m/z = 295,0 [M+1]+. 2-fluoro-N-(piridin-2-il)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzamida

[0047] Uma solução de 4-bromo-2-fluoro-N-(piridin-2- il)benzamida (1,05 g, 3,55 mmol), (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-diaxaborolan-2- il)-1,3,2-dioxaborolane (1,36 g, 5,3 mmol), PdCl2(dppf) (260 mg, 0,36 mmol) e KOAc (1,04 mg, 10,65 mmol) em tolueno (30 mL) foi aquecida a 110 °C e mantida a esta temperatura por 6 h. A mistura de reação foi evaporada e então adicionada com água (100 mL). Acetato de etila (40 mL x 2) foi adicionado para extração. A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:4-1:1) para resultar no produto (971 mg, 80%). II-6: ácido (3-fluoro-4-(piridin-2-ilcarbamoil)fenil)borônico

[0048] A uma solução de 2-fluro-N-(piridin-2-il)-4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)2-benzamida (970 mg, 2,84 mmol) em um solvente misto de THF:H2O (24 mL:6 mL) foi adicionado NaIO4 (1,8 g, 8,52 mmol), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. Foi então adicionada solução aquosa de HCl (1,65 mL). Após ser agitada à temperatura ambiente por 3 h, a mistura foi diluída com acetato de etila e lavada com salmoura. A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (MeOH/DCM = 1:10) para resultar no produto II-6 (605 mg, 82%). LC-MS m/z = 261,1 [M+1]+. II-7: ácido (4-(tiazol-2-ilcarbamoil)fenil)borônico

[0049] Com tiazol-2-amina (376 mg, 3,76 mmol) e cloreto de 4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-il)benzoila (1 g, 3,76 mmol) como materiais de partida, o mesmo método sintético que aquele de II-2 foi usado para resultar no composto desejado II-7 (580 mg). LC-MS m/z = 249,1 [M+1]+. II-8: ácido (2-fluoro-4-(piridin-2-ilcarbamoil)fenil)borônico

[0050] Com ácido 4-bromo-3-fluoro-benzóico e piridin-2-amina como os materiais de partida, o mesmo método sintético que aquele de II-1 foi usado para resultar no composto desejado II-8 (138 mg). LC-MS m/z = 261,1 [M+1]+. II-9: ácido (2-fluoro-4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)borônico

[0051] Com ácido 4-bromo-3-fluoro-benzóico e 4-(trifluorometil)- piridin-2-amina como os materiais de partida, o mesmo método sintético que aquele de II-1 foi usado para resultar no composto desejado II-9 (130 mg). LC-MS m/z = 329,0 [M+1]+. II-10: ácido (2-metoxi-4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)borônico

[0052] Com ácido 4-bromo-3-metoxi-benzóico (1 g, 4,36 mmol) e 4-(trifluorometil)-piridin-2-amina (706 mg, 4,36 mmol) como os materiais de partida, o mesmo método sintético que aquele de II-6 foi usado para resultar no composto desejado II-10 (440 mg). LC-MS m/z = 341,0 [M+1]+.

Rota sintética do borato intermediário II-11 O O O OMe

B B O OMe O O N O OMe HATU H NH2 DIEA O

N B

HO H Br PdCl2dppf, KOAc O Br II-11 N-(4-bromobenzil)-2-metoxibenzamida

[0053] Uma solução de 4-bromobenzilamina (1 g, 5,38 mmol), ácido 2-metoxibenzóico (818 mg, 5,38 mmol), HATU (2,45 g, 6,46 mmol) e DIEA (1,39 g, 10,76 mmol) em DMF (20 mL) foi agitado à temperatura ambiente por 2 h. A mistura foi despejada em água (50 mL), filtrada, lavada com água (30 mL × 2) e seca para resultar no composto desejado (1,6 g, rendimento: 93%), que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação. II-11: 2-metoxi-N-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzil)benzamida

[0054] Uma solução de N-(4-bromobenzil)-2-metoxibenzamida (1,6 g, 5 mmol), 4,4,4',4', 5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,9 g, 7,5 mmol), PdCl2(dppf) (365 mg, 0,5 mmol) e KOAc (1,47 mg, 15 mmol) em dioxano (30 mL) foi aquecida a 100 °C e mantida nesta temperatura por 6 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (100 mL) e então extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:9) para resultar o composto desejado II-11 (1,5 g, rendimento: 82%).

II-12: 5-fluoro-2-metoxi-N-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzil)benzamida

[0055] Com ácido 5-fluoro-2-metoxibenzóico (915 mg, 5,38 mmol) e 4-bromobenzilamina (1 g, 5,38 mmol) como os materiais de partida, o mesmo método sintético que aquele de II-11 foi usado para resultar no composto desejado II-12 (900 mg). II-13: 4-fluoro-2-metoxi-N-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzil)benzamida

[0056] Com ácido 4-fluoro-2-metoxibenzóico (915 mg, 5,38 mmol) e 4-bromobenzilamina (1 g, 5,38 mmol) como os materiais de partida, o mesmo método sintético que aquele de II-11 foi usado para resultar no composto desejado II-13 (1 g). Rota sintética do intermediário A-4 Cl COOH PCl5, Py N

HATU N N Cl N Cl NHCbz ACN, 56oC N

DIEA

H NH2 N

N N NHCbz O A-1 A-2 NHCbz I-3 Cl NH2 I

I

N N N NH4OH, IPA N NIS,DMF N N 120oC, 5h 60oC, 2h A-3 NHCbz A-4 NHCbz

A-1: (4-(((3-cloropirazin-2-il)metil)carbamoil)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)carbamato de benzila

[0057] Uma solução de ácido 4- (((benziloxi)carbonil)amino)biciclo[2.2.1]heptan-1-carboxílico (2 g, 6,9 mmol), HATU (2,89 g, 7,6 mmol), DIEA (3,56 g, 27,6 mmol) e o cloridrato de (3-cloropirazin-2-il)metilamina (1,3 g, 7,24 mmol) em DMF (20 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 6 h. A mistura foi despejada em água (100 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1-1:0) para resultar no composto desejado A-1 (2 g, rendimento de 70%). LC-MS m/z = 414,9[M+1]+. A-2: (4-(8-cloroimidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila

[0058] A uma solução de (4N-(((3-cloropirazin-2- il)metil)carbamoil)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila (A-1) (2 g, 4,83 mmol ) em ACN (30 mL) foram adicionados piridina (381 mg, 4,83 mmol) e PCl5(4 g, 19,32 mmol), e a mistura foi aquecida a 56 °C e mantida nesta temperatura por 1 h. Após ser arrefecida à temperatura ambiente, a mistura foi lentamente despejada em solução aquosa saturada de gelo de NaHCO3 (100 mL). Enquanto se mantinha o pH a 9, a mistura foi extraída com acetato de etila (30 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-2 (1,5 g, rendimento: 78%). A-3: (4-(8-cloro-1-iodoimidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)carbamato de benzila

[0059] Uma solução mista de (4-(8-cloroimidazo[1,5-a]pirazin-3- il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila (A-2) (1,5 g, 3,79 mmol) e NIS (1,13 g, 5,04 mmol) em DMF (10 mL) foi aquecida a 60 °C sob atmosfera de N2 e agitada por 10 h. Após ser arrefecida à temperatura ambiente, a mistura foi despejada em água (100 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 2:3) para resultar no composto desejado A-3 (1,52 g, rendimento 77%). A-4: (4-(8-amino-1-iodoimidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)carbamato de benzila

[0060] A uma suspensão do composto A-3 (1,5 g, 2,87 mmol) em IPA (15 mL) foi adicionado NH4OH (3 mL) e a mistura foi aquecida a 110 °C e mantida nesta temperatura por 6 h. A mistura foi então concentrada e adicionada com solução aquosa saturada de NaHCO3 (20 mL). Acetato de etila (30 mL x 2) foi adicionado para extração. A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-4 (1,1 g, rendimento: 77%). Rota sintética do intermediário B-3 Cl Cl I

N N NH2 N Cl EtOH,TEA N NIS, DMF

N N N 80oC,16h 60oC, 6h

N CHO NHCbz Cl NHCbz NHCbz I-5 B-1 B-2 NH2 I

N NH4OH,IPA

N N 110oC, 6h NHCbz B-3 B-1: (4-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il) carbamato de benzila

[0061] Uma solução de 2-(4,6-dicloropirimidin-5-il)acetaldeído (735 mg, 3,8 mmol), (4-aminobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila (1 g, 3,8 mmol) e Et3N (389 mg, 3,8 mmol) em EtOH (20 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida nesta temperatura por 16 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (EA/PE = 1:4) para resultar no composto desejado B-1 (1,25 g, rendimento: 83%). LC-MS m/z = 397,1 [M+1]+. B-2: (4-(4-cloro-5-iodo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)biciclo[2.2.1]heptan- 1-il)carbamato de benzila

[0062] A uma solução do composto B-1 (1,25 g, 3,16 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado NIS (950 mg, 4,2 mmol) e a mistura foi aquecida a 60 °C e mantida nesta temperatura por 6 h. A mistura foi despejada em água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (EA/PE = 1:4) para resultar no composto desejado (1,09 g, rendimento: 66%). LC-MS m/z = 523,1 [M+1]+. B-3: (4-(4-amino-5-iodo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)biciclo[2.2.1]heptan- 1-il)carbamato de benzila

[0063] A uma solução de (4-(4-cloro-5-iodo-7H-pirrolo [2,3- d]pirimidin-7-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila (B-2) (1,09 g, 2,08 mmol) em IPA (10 mL) foi adicionado NH4OH (2 mL) e a mistura foi aquecida a 110 °C e mantida nesta temperatura por 6 h. A mistura foi então concentrada, despejada em solução aquosa de NaHCO3 e extraída com DCM (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca, filtrada e concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (MeOH/DCM = 1:20) para resultar no composto desejado B-3 (900 mg, rendimento: 86%). Rota sintética do intermediário C-4 C-1: (4-((6-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)carbamato de benzila

[0064] Uma solução de 4,6-dicloro-5-nitropirimidina (518 mg, 2,68 mmol), (4-aminobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila (I-5) (698 mg, 2,68 mmol) e Et3N (1,1 g, 10,72 mmol) em DCM (20 mL) foi agitado à temperatura ambiente por 4 h. O solvente foi removido e o resíduo foi tratado com acetato de etila (50 mL) e lavado com solução aquosa saturada de NaCl. A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (EA/PE = 1:4) para resultar no composto desejado C-1 (633 mg, rendimento: 57%). C-2: (4-((5-amino-6-cloropirimidin-4-il)amino)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)carbamato de benzila

[0065] A uma solução de composto C-1 (400 mg, 0,96 mmol) em um solvente misto (EtOH/H2O = 20 mL/4 mL) foram adicionados Fe em pó (268 mg, 4,8 mmol) e NH4Cl (254 mg, 4,8 mmol). A mistura foi então aquecida ao refluxo por 1 h. Após ser arrefecida à temperatura ambiente, a mistura foi filtrada e lavada com MeOH (10 mL). O filtrado foi concentrado e o produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna (EA/PE = 1:4) para resultar no composto desejado C-2 (292 mg, rendimento: 79%). C-3: (4-(6-cloro-8-oxo-7,8-dihidropurin-9-il)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)carbamato de benzila

[0066] A uma solução do composto C-2 (290 mg, 0,75 mmol) em DCM (10 mL) a 0 °C foram adicionados Et3N (166 mg, 1,5 mmol) e trifosgênio (291 mg, 0,9 mmol), e a mistura foi agitada a 0 °C por 2 h. A mistura foi então despejada em água (20 mL) e a fase orgânica foi separada e, então, a solução aquosa foi extraída com DCM (10 mL × 2) para separar a fase orgânica. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para resultar no C-3 bruto (316 mg), que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação. C-4: (4-(6-amino-8-oxo-7,8-dihidropurin-9-il)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)carbamato de benzila

[0067] A uma solução de composto C-3 (310 mg, 0,75 mmol) em IPA (10 mL) foi adicionado NH4OH (2 mL) e a mistura foi aquecida a 150 °C e mantida nesta temperatura por 24 h. A mistura foi então concentrada, despejada em solução aquosa de NaHCO3 e extraída com DCM (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca, filtrada e concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (MeOH/DCM = 1:20) para resultar no composto desejado C-4 (100 mg, rendimento: 34%). LC-MS m/z = 395,1 [M+1]+. Rota sintética do intermediário D-5 NH2 TEA, DCM NHCbz N N rt, 1h NHCbz NH OSO H N N N N 2 3 DCM,DIEA ACN,DCM MsCl,rt Cl Cl Cl N Cl N

H H

CHO CHO NHCbz N I-5 D-1 OH D-2 HBF4,ACN NH4OH,IPA N N N N N N NIS, 85oC 120oC NHCbz NHCbz NHCbz H2N Cl H2N N N

N N N

N D-3 D-4 D-5 D-1: (4-((6-cloro-5-formilpirimidin-4-il)amino)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)carbamato de benzila

[0068] Uma solução mista de I-5 (1,47 g, 5,65 mmol), 4,6- dicloropirimidina-5-carbaldeído (1 g, 5,65 mmol) e trietilamina (1,15 g, 11,4 mmol) em DCM (20 mL) foi agitada durante a noite a temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com EA (50 mL) e lavada com água (30 mL × 2). A fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada.

O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (eluente: éter de petróleo/acetato de etila = 1:1) para resultar no produto desejado D- 1 (1,24 g, 55%). LC-MS m/z = 401,0 [M + 1]+. D-2: (E)-(4-((6-cloro-5-((hidroximino)metil)pirimidin-4- il)amino)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila

[0069] Uma solução mista de D-1 (1,2 g, 3,0 mmol), ácido hidroxilamina-O-sulfônico (0,41 g, 3,6 mmol) em DCM/ACN (50 mL/50 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 16 h e, então, agitada a 50 °C por 6 h. Após ser arrefecida, a mistura foi concentrada para 10 mL, e o concentrado foi filtrado e lavado com ACN (2 mL) para resultar no produto desejado D-2 (1,0 g, 81%). LC-MS m/z = 416,0 [M+ 1]+. D-3: (4-(4-cloro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)carbamato de benzila

[0070] A uma solução de D-2 (1,0 g, 2,41 mmol) em DCM (100 mL) foi adicionado DIEA (4 mL) e, então, TsCl (0,23 mL, 2,9 mmol) foi adicionado gota a gota. Após ser agitada à temperatura ambiente por 3 h, a mistura de reação foi tratada com água (100 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura (30 mL x 2), seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (eluente: acetato de etila/éter de petróleo = 1:6) para resultar no produto desejado D-3 (400 mg, 42%). LC-MS m/z = 398,1 [M + 1] +. D-4: (4-(4-amino-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)biciclo[2.2.1]heptan- 1-il)carbamato de benzila

[0071] Uma mistura de D-3 (400 mg, 1,0 mmol) e hidróxido de amônio (30%, 5 mL) em isopropanol (20 mL) foi agitada em um tubo selado a 120 °C por 6 h. O solvente foi evaporado e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (eluente: PE/EA = 2:1) para resultar no produto desejado D-4 (280 mg, 73,4%). D-5: (4-(4-amino-3-iodo-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1- il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila

[0072] Uma mistura de D-4 (190 mg, 0,5 mmol), NIS (400 mg, 1,78 mmol) e HBF4 (50%, 19,6 mmol, 4 mL) em ACN (2,5 mL) foi aquecida a 85 °C em um tubo selado e agitado por 6 h. Após a mistura ser arrefecida, a reação foi extinta com NaHCO3 saturado e EA (50 mL × 2) foi adicionado para extração. A fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (eluente: PE/EA = 1:1-1:0) para resultar no produto desejado D-5 (96 mg, 38,1%). LC-MS m/z = 505,0 [M+ 1]+. Exemplo 1 Rota sintética de composto A-7-n A-5: 3-(4-aminobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)-1-iodoimidazo[1,5-a]pirazin- 8-amina

[0073] Uma solução de composto A-4 (1 g, 1,99 mmol) em um solvente misto de TFA/DCM (10 mL/10 mL) foi aquecida a 60 °C e mantida nesta temperatura por 6 h. A mistura foi concentrada e adicionada com DCM (20 mL × 2). A mistura resultante foi concentrada, dissolvida em DCM (20 mL), adicionada com uma solução de HCl em dioxano (5 mL) e agitada à temperatura ambiente por 10 min. A mistura foi evaporada e adicionada com DCM (20 mL × 2), e a mistura resultante foi evaporada e adicionada com DME (20 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 min, filtrada e então lavada com DME (10 mL × 2). O composto A-5 obtido foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação. LC-MS m/z = 370,1 [M+1]+. A-6: N-(4-(8-amino-1-iodoimidazo[1,5-a]pirazin-3- il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)but-2-inamida

[0074] Uma solução do composto A-5 (1,35 g, 2,8 mmol), DIEA (3,28 g, 25,2 mmol), ácido but-2-inóico (235 mg, 2,8 mmol) e HATU (1,06 g, 2,8 mmol) em DMF (20 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. A mistura foi despejada em água (30 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 2:3) para resultar no composto desejado A-6 (800 mg, rendimento: 65%). A-7-1: 4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(piridin-2-il)benzamida

[0075] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (4-(piridin-2-ilcarbamoil)fenil)borônico (II-1) (20 mg, 0,085 mmol), Pd [PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida nesta temperatura por 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-1 (10 mg, rendimento: 30%). LC-MS m/z = 506,2 [M+1]+. A-7-2: 4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-fluoropiridin-2-il)benzamida

[0076] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (4-((4-fluoropiridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico (II-2) (22 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida nesta temperatura por 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-2 (15 mg, rendimento: 34%). LC-MS m/z = 524,0 [M+1]+. A-7-3: 4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0077] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico (II-3) (26 mg,

0,085 mmol), Pd [PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida nesta temperatura por 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-3 (12 mg, rendimento: 31%). LC-MS m/z = 574,2 [M+1]+. A-7-4: 4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-metilpiridin-2-il)benzamida

[0078] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (4-((4-metilpiridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico (II-4) (22 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida nesta temperatura por 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-4 (14 mg, rendimento: 39%). LC-MS m/z = 520,2 [M+1]+. A-7-5: 4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-cianopiridin-2-il)benzamida

[0079] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (4-((4-cianopiridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico (II-5) (23 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida nesta temperatura por 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-5 (12 mg, rendimento: 33%). LC-MS m/z = 531,0 [M+1]+. A-7-6: 4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-2-fluoro-N-(piridin-2-il)benzamida

[0080] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (3-fluoro-4-(piridin-2-ilcarbamoil)fenil)borônico (II-6) (22 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida nesta temperatura por 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-6 (15 mg, rendimento: 42%) LC-MS m/z = 524,2 [M+1]+. A-7-7: 4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(tiazol-2-il)benzamida

[0081] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (4-(tiazol-2-ilcarbamoil)fenil)borônico (II-7) (28 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida nesta temperatura por 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada à secagem. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-7 (13 mg, rendimento: 37%). LC-MS m/z = 512,0 [M+1]+. A-7-8: 4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-3-fluoro-N-(piridin-2-il)benzamida

[0082] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (2-fluoro-4-(piridin-2-ilcarbamoil)fenil)borônico (II-8) (22 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida nesta temperatura por 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-8 (14 mg, rendimento: 39%). LC-MS m/z = 524,0 [M+1]+. A-7-9: 4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-3-fluoro-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0083] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (2-fluoro-4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico (II-9) (28 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg,

0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida nesta temperatura por 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-9 (19 mg, rendimento: 47%). LC-MS m/z = 592,0 [M+1]+. A-7-10: 4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-3-metoxi-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0084] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (2-metoxi-4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico (II- 10) (29 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida a esta temperatura durante 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-10 (16 mg, rendimento: 38%). LC-MS m/z = 604,0 [M+1]+. A-7-11: N-(4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)benzil)-2-metoxibenzamida

[0085] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido (2-metoxi-N-(4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzil)benzamida (II-11) (31 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida a esta temperatura durante 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-11 (21 mg, rendimento: 50%). LC-MS m/z = 549,3 [M+1]+. A-7-12: N-(4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)benzil)-5-fluoro-2-metoxibenzamida

[0086] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), 5- fluoro-2-metoxi-N-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-

il)benzil)benzamida (II-12) (33 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida a esta temperatura durante 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-12 (24 mg, rendimento: 56%). LC-MS m/z = 567,0 [M+1]+. A-7-13: N-(4-(8-amino-3-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)benzil)-4-fluoro-2-metoxibenzamida

[0087] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), 4- fluoro-2-metoxi-N-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzil)benzamida (II-13) (33 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida a esta temperatura durante 3 h. A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-13 (26 mg, rendimento: 60%). LC-MS m/z = 567,1 [M+1]+. A-7-14: N-(4-(8-amino-1-(4-fenoxifenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3- il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)but-2-inamida

[0088] Uma solução de composto A-6 (30 mg, 0,069 mmol), ácido 4-fenoxifenilborônico (18 mg, 0,085 mmol), Pd[PPh3]4 (8 mg, 0,0069 mmol) e Cs2CO3 (45 mg, 0,138 mmol) em um solvente misto de DME/H2O (1,5 mL/0,3 mL) foi aquecida a 80 °C e mantida a esta temperatura durante 3 h.

A mistura foi concentrada, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada até a secura.

O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila/éter de petróleo = 1:1) para resultar no composto desejado A-7-14 (19 mg, rendimento: 49%). LC-MS m/z = 478,0 [M+1]+. Rota sintética de composto A-10-n

A-8: (4-(8-amino-1-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila

[0089] Uma solução de (4-(8-amino-1-iodoimidazo[1,5-a]pirazin- 3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila (A-4) (300 mg, 0,6 mmol), ácido (4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico (II-3) (229 mg, 0,738 mmol), Pd[PPh3]4 (69 mg, 0,06 mmol) e Cs2O3 (239 mg, 0,738 mmol) em um solvente misto de DME:H2O (2,5 mL:0,5 mL) foi aquecida a 80 °C e agitada durante a noite. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (metanol/DCM = 1:30) para resultar no composto desejado A-8 (265 mg, rendimento: 69%). A-9: 4-(8-amino-3-(4-aminobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)imidazo[1,5- a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0090] Uma solução de composto A-8 (265 mg, 0,42 mmol) em um solvente misto de DCM/TFA (10 mL:10 mL) foi aquecida a 60 °C e agitada durante 18 h. Depois que a mistura foi evaporada até a secura, DCM (20 mL × 2) foi adicionado e a mistura resultante foi concentrada. O resíduo foi dissolvido em DCM (30 mL), e então a solução foi adicionada a uma solução de HCl em dioxano. Depois que a mistura foi evaporada até a secura, DCM (20 mL × 2) foi então adicionado e a mistura resultante foi concentrada, seguida pela adição de éter isopropílico (30 mL). Após ser agitada durante 2 h, a mistura foi filtrada e lavada com éter isopropílico (10 mL × 2) para resultar no cloridrato do produto desejado A-9 (196 mg), que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação. A-10-1: (E)-4-(8-amino-3-(4-(4-metoxibut-2- enamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4- (trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0091] Uma solução de composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido (E)-4- metoxibut-2-enoico (2,8 mg, 0,024 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (5 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (eluente: DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-1 (5 mg, rendimento: 35%). LC-MS m/z = 606,1 [M+1]+. A-10-2: (E)-4-(8-amino-3-(4-(4-(tetrahidropirrol-1-il)but-2- enamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4- (trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0092] Uma solução de composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido (E)-4- (tetrahidropirrol-1-il)-but-2-enoico (4 mg, 0,024 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (5 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-2 (6 mg, rendimento: 38%). LC-MS m/z = 645,0 [M+1]+. A-10-3: 4-(3-(4-acrilamidobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)-8- aminoimidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0093] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido acrílico (2 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-3 (5 mg, rendimento: 38%). LC-MS m/z = 562,0 [M+1]+. A-10-4: 4-(3-(4-acetamidobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)-8- aminoimidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0094] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido acético (1,5 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-4 (4 mg, rendimento: 31%). LC-MS m/z = 550,0 [M+1]+. A-10-5: N-(4-(8-amino-1-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-3- metiloxetano-3-carboxamida

[0095] Uma solução de composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 3- metiloxetano-3-carboxílico (3 mg, 0,024 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (5 mL) e lavada com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A- 10-5 (6 mg, rendimento: 40%). LC-MS m/z = 606,1 [M+1]+. A-10-6: 4-(8-amino-3-(4-(2-hidroxi-2- metilpropanamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4- (trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0096] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 2-hidroxi-2-metilpropiônico (2,5 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-6 (6 mg, rendimento: 41%). LC-MS m/z = 594,1 [M+1]+. A-10-7: 4-(8-amino-3-(4-(2-metoxiacetamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0097] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 2-metoxiacético (2 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-7 (5 mg, rendimento: 36%). LC-MS m/z = 580,1 [M+1]+. A-10-8: 4-(8-amino-3-(4-(3-metoxipropanamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0098] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 3-metoxipropiônico (2,5 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-8 (5 mg, rendimento: 35%). LC-MS m/z = 594,1 [M+1]+. A-10-9: 4-(8-amino-3-(4-(1- hidroxiciclopropanocarboxamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)imidazo[1,5- a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[0099] Uma solução de composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 1- hidroxiciclopropanocarboxílico (2,5 mg, 0,024 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (5 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-9 (5 mg, rendimento: 36%). LC-MS m/z = 592,0 [M+1]+. A-10-10: 4-(8-amino-3-(4-(2-morfolinoacetamido)biciclo[2.2.1]heptan- 1-il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00100] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 2-morfolinoacético (3,5 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-10 (7 mg, rendimento: 47%). LC-MS m/z = 635,0 [M+1]+. A-10-11: N-(4-(8-amino-1-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)tetrahidrofuran-2-carboxamida

[00101] Uma solução de composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido tetrahidrofuran-2-carboxílico (2,8 mg, 0,024 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (5 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-11 (5 mg, rendimento: 35%). LC-MS m/z = 606,0 [M+1]+. A-10-12: 4-(8-amino-3-(4-(1- cianociclopropanocarboxamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)imidazo[1,5- a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00102] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 1- cianociclopropanocarboxílico (2,7 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A- 10-12 (6 mg, rendimento: 42%). LC-MS m/z = 601,3 [M+1]+. A-10-13: 4-(8-amino-3-(4-(2-cianoacetamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00103] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 2-cianoacético (2 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-13 (6 mg, rendimento: 44%). LC-MS m/z = 575,2 [M+1]+. A-10-14: 4-(8-amino-3-(4-(2-cianopropanamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00104] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 2-cianopropiônico (2,4 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-14 (5 mg, rendimento: 36%). LC-MS m/z = 589,3 [M+1]+. A-10-15: N-(4-(8-amino-1-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-4- cianotetrahidro-2H-piran-4-carboxamida

[00105] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 4-cianotetrahidro-2H-piran- 4-carboxílico (3,7 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-15 (6 mg, rendimento: 39%). LC-MS m/z = 645,0 [M+1]+. A-10-16: ácido 1-((4-(8-amino-1-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)carbamoil)ciclopropano-1-carboxílico

[00106] Uma solução de composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido ciclopropano-1,1-dicarboxílico (3 mg, 0,024 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (5 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-16 (6 mg, rendimento: 40%). LC-MS m/z = 555,3 [M+1]+. A-10-17: 4-(8-amino-3-(4-benzamidobiciclo[2.2.1]heptan-1- il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00107] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido benzoico (3 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-17 (8 mg, rendimento: 53%). LC-MS m/z = 612,2 [M+1]+. A-10-18: N-(4-(8-amino-1-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)picolinamida

[00108] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 2-picolínico (3 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL

× 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-18 (9 mg, rendimento: 60%). LC-MS m/z = 613,2 [M+1]+. A-10-19: N-(4-(8-amino-1-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)nicotinamida

[00109] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido nicotínico (3 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-19 (8 mg, rendimento: 54%). LC-MS m/z = 613,2 [M+1]+. A-10-20: N-(4-(8-amino-1-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-2- metoxibenzamida

[00110] Composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido 2-metoxibenzoico (3,6 mg, 0,024 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-20 (8 mg, rendimento: 52%). LC-MS m/z = 642,3 [M+1]+. A-10-21: N-(4-(8-amino-1-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)furan-2- carboxamida

[00111] Uma solução de composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido furan-2- carboxílico (2,7 mg, 0,024 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (5 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-21 (6 mg, rendimento: 43%). LC-MS m/z = 602,2 [M+1]+. A-10-22: N-(4-(8-amino-1-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamoil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)tiazol-2- carboxamida

[00112] Uma solução de composto A-9 (15 mg, 0,024 mmol), HATU (9,12 mg, 0,024 mmol), DIEA (16 mg, 0,12 mmol) e ácido tiazol-2- carboxílico (3 mg, 0,024 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (5 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-10-22 (6 mg, rendimento: 40%). LC-MS m/z = 619,2 [M+1]+. Rota sintética de composto A-13-n

A-11: (4-(8-amino-1-(4-fenoxifenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3- il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila

[00113] Uma solução de (4-(8-amino-1-iodoimidazo[1,5-a]pirazin- 3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila (A-4) (300 mg, 0,6 mmol), ácido 4-fenoxibenzoico (158 mg, 0,738 mmol), Pd[PPh3]4 (69 mg, 0,06 mmol) e Cs2O3 (239 mg, 0,738 mmol) em um solvente misto de DME:H2O (2,5 mL:0,5 mL) foi aquecida a 80 °C e agitada durante a noite. A mistura foi então concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para resultar no composto desejado A-11 (268 mg, rendimento: 82%). A-12: 3-(4-aminobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)-1-(4-fenoxifenil)imidazo[1,5- a]pirazin-8-amina

[00114] Uma solução de composto A-11 (260 mg, 0,48 mmol) em um solvente misto de DCM/TFA (10 mL:10 mL) foi aquecida a 60 °C e agitada durante 18 h. Depois que a mistura foi evaporada até a secura, DCM (20 mL × 2) foi adicionado e a mistura resultante foi concentrada. O resíduo foi dissolvido em DCM (30 mL), e então a solução foi adicionada a uma solução de HCl em dioxano. Depois que a mistura foi evaporada até a secura, DCM (20 mL × 2) foi então adicionado e a mistura resultante foi concentrada, seguida pela adição de éter isopropílico (30 mL). Após ser agitada durante 2 h, a mistura foi filtrada e lavada com éter isopropílico (10 mL × 2) para resultar no cloridrato do produto desejado A-12 (200 mg), que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação. A-13-1: N-(4-(8-amino-1-(4-fenoxifenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3- il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-2-hidroxi-2-metilpropanamida

[00115] Composto A-12 (15 mg, 0,025 mmol), HATU (9,3 mg, 0,025 mmol), DIEA (19 mg, 0,15 mmol) e ácido 2-hidroxi-2-propiônico (3 mg, 0,029 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-13-1 (8 mg, rendimento: 57%). LC-MS m/z = 498,4 [M+1]+. A-13-2: N-(4-(8-amino-1-(4-fenoxifenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3- il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-3-metoxipropanamida

[00116] Composto A-12 (15 mg, 0,025 mmol), HATU (9,3 mg, 0,025 mmol), DIEA (19 mg, 0,15 mmol) e ácido 3-metoxipropiônico (3 mg, 0,029 mmol) foram agitados à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-13-2 (6 mg, rendimento: 40%). LC-MS m/z = 498,7 [M+1]+. A-13-3: N-(4-(8-amino-1-(4-fenoxifenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3- il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-3-metiloxetano-3-carboxamida

[00117] Uma solução de composto A-12 (15 mg, 0,025 mmol), HATU (9,3 mg, 0,025 mmol), DIEA (19 mg, 0,15 mmol) e ácido 3- metiloxetano-3-carboxílico (3,4 mg, 0,029 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (5 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-13-3 (8 mg, rendimento: 53%). LC-MS m/z = 510,2 [M+1]+. A-13-4: N-(4-(8-amino-1-(4-fenoxifenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3- il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-2-morfolinoacetamida

[00118] Uma solução de composto A-12 (15 mg, 0,025 mmol), HATU (9,3 mg, 0,025 mmol), DIEA (19 mg, 0,15 mmol) e ácido 2- morfolinoacético (4,2 mg, 0,029 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água

(1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A- 13-4 (9 mg, rendimento: 58%). Rota sintética de composto A-16-n A-14: (4-(8-amino-1-(4-((5-fluoro-2- metoxibenzamido)metil)fenil)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan- 1-il)carbamato de benzila

[00119] Uma solução de (4-(8-amino-1-iodoimidazo[1,5-a]pirazin- 3-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila (A-4) (300 mg, 0,6 mmol), 5-fluoro-2-metoxi-N-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzil)benzamida (II-12) (284 mg, 0,738 mmol), Pd[PPh3]4 (69 mg, 0,06 mmol) e Cs2O3 (239 mg, 0,738 mmol) em um solvente misto de DME:H2O (2,5 mL:0,5 mL) foi aquecida a 80 °C e agitada durante a noite. A mistura foi então concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para resultar no composto desejado A-14 (285 mg, rendimento: 75%). A-15: N-(4-(8-amino-3-(4-aminobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)imidazo[1,5- a]pirazin-1-il)benzil)-5-fluoro-2-metoxibenzamida

[00120] Uma solução de composto A-14 (280 mg, 0,44 mmol) em um solvente misto de DCM/TFA (10 mL:10 mL) foi aquecida a 60 °C e agitada durante 18 h. Depois que a mistura foi evaporada até a secura, DCM (20 mL × 2) foi adicionado e a mistura resultante foi concentrada. O resíduo foi dissolvido em DCM (30 mL), e então a solução foi adicionada a uma solução de HCl em dioxano (10 mL). Depois que a mistura foi evaporada até a secura, DCM (20 mL × 2) foi então adicionado e a mistura resultante foi concentrada, seguida pela adição de éter isopropílico (30 mL). Após ser agitada durante 2 h, a mistura foi filtrada e lavada com éter isopropílico (10 mL × 2) para resultar no cloridrato do produto desejado A- 15 (180 mg), que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação. A-16-1: N-(4-(8-amino-3-(4-(2-hidroxi-2- metilpropanamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)imidazo[1,5-a]pirazin-1-il)benzil)- 5-fluoro-2-metoxibenzamida

[00121] Uma solução de composto A-15 (15 mg, 0,025 mmol), HATU (9,3 mg, 0,025 mmol), DIEA (19 mg, 0,15 mmol) e ácido 2-hidroxi-2- propiônico (2,6 mg, 0,025 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-16-1 (6 mg, rendimento: 40%). LC-MS m/z = 587,3 [M+1]+. A-16-2: N-(4-(8-amino-3-(4-(3- metoxipropanamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)imidazo[1,5-a]pirazin-1- il)benzil)-5-fluoro-2-metoxibenzamida

[00122] Uma solução de composto A-15 (15 mg, 0,025 mmol), HATU (9,3 mg, 0,025 mmol), DIEA (19 mg, 0,15 mmol) e ácido 3-

metoxipropiônico (2,6 mg, 0,025 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A- 16-2 (8 mg, rendimento: 40%). LC-MS m/z = 587,3 [M+1]+. A-16-3: N-(4-(8-amino-1-(4-((5-fluoro-2- metoxibenzamido)metil)fenil)imidazo [1,5-a]pirazin-3-il)biciclo[2.2.1]heptan- 1-il)-3-metiloxetano-3-carboxamida

[00123] Uma solução de composto A-15 (15 mg, 0,025 mmol), HATU (9,3 mg, 0,025 mmol), DIEA (19 mg, 0,15 mmol) e ácido 3- metiloxetano-3-carboxílico (2,9 mg, 0,025 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (5 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A-16-3 (10 mg, rendimento: 66%). LC-MS m/z = 599,3 [M+1]+. A-16-4: N-(4-(8-amino-3-(4-(2- morfolinoacetamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)imidazo[1,5-a]pirazin-1- il)benzil)-5-fluoro-2-metoxibenzamida

[00124] Uma solução de composto A-15 (15 mg, 0,025 mmol), HATU (9,3 mg, 0,025 mmol), DIEA (19 mg, 0,15 mmol) e ácido 2- morfolinoacético (3,6 mg, 0,025 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura.

O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto A- 16-4 (9 mg, rendimento: 57%). LC-MS m/z = 628,3 [M+1]+. Rota sintética de composto B-6-n

B-4: (4-(4-amino-5-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato de benzila

[00125] Uma solução de composto B-3 (200 mg, 0,4 mmol), ácido (4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico (II-3) (152 mg, 0,49 mmol), Pd[PPh3]4 (46 mg, 0,04 mmol) e Cs2CO3 (159 mg, 0,49 mmol) em um solvente misto de DME:H2O (2,5 mL/0,5 mL) foi aquecida a 80 °C e agitada durante a noite. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (metanol/DCM = 1:40) para resultar no composto desejado B-4 (187 mg, rendimento: 73%). B-5: 4-(4-amino-7-(4-aminobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-5-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00126] Uma solução de composto B-4 (187 mg, 0,29 mmol) em um solvente misto de DCM/TFA (10 mL:10 mL) foi aquecida a 60 °C e agitada durante 18 h. Depois que a mistura foi evaporada até a secura, DCM (20 mL × 2) foi adicionado e a mistura resultante foi concentrada. O resíduo foi adicionado com DCM (30 mL), e então a mistura foi adicionada a uma solução de HCl em dioxano (10 mL). Depois que a mistura foi evaporada até a secura, DCM (20 mL × 2) foi então adicionado novamente e a mistura resultante foi evaporada até a secura, seguida pela adição de éter isopropílico (30 mL). Após ser agitada durante 2 h, a mistura foi filtrada e lavada com éter isopropílico (10 mL × 2) para resultar no cloridrato do produto desejado B-5, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação. B-6-1: 4-(4-amino-7-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00127] Uma solução de composto B-5 (19 mg, 0,031 mmol), HATU (12 mg, 0,031 mmol), DIEA (24 mg, 0,19 mmol) e ácido but-2-inoico (2,6 mg, 0,031 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto B-6-1 (11 mg, rendimento: 59%). LC-MS m/z = 574,3 [M+1]+. B-6-2: 4-(4-amino-7-(4-(2-hidroxi-2- metilpropanamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-N- (4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00128] Uma solução de composto B-5 (19 mg, 0,031 mmol), HATU (12 mg, 0,031 mmol), DIEA (24 mg, 0,19 mmol) e ácido 2-hidroxi-2- metilpropiônico (3,2 mg, 0,031 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto B-6- 2 (9 mg, rendimento: 49%). LC-MS m/z = 594,2 [M+1]+. B-6-3: 4-(4-amino-7-(4-(3-metoxipropanamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00129] Uma solução de composto B-5 (19 mg, 0,031 mmol), HATU (12 mg, 0,031 mmol), DIEA (24 mg, 0,19 mmol) e ácido 3- metoxipropiônico (3,2 mg, 0,031 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto B-6- 3 (12 mg, rendimento: 66%). LC-MS m/z = 594,2 [M+1]+. B-6-4: N-(4-(4-amino-5-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)- 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-3-metiloxetano-3- carboxamida

[00130] Uma solução de composto B-5 (19 mg, 0,031 mmol), HATU (12 mg, 0,031 mmol), DIEA (24 mg, 0,19 mmol) e ácido 3- metiloxetano-3-carboxílico (3,6 mg, 0,031 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto B-6-4 (12 mg, rendimento: 64%). LC-MS m/z = 606,3 [M+1]+. B-6-5: 4-(4-amino-7-(4-(2-morfolinoacetamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00131] Uma solução de composto B-5 (19 mg, 0,031 mmol), HATU (12 mg, 0,031 mmol), DIEA (24 mg, 0,19 mmol) e ácido 2- morfolinoacético (4,5 mg, 0,031 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto B-6- 5 (11 mg, rendimento: 58%). LC-MS m/z = 635,2 [M+1]+. Rota sintética de composto C-7-n

O H O H N O H N

N N N NH2 N

H

N N NH2 1.TFA, DCM NH2 O Cu(OAc)2, TEA F3C NH2 F3C N DCM, rt N 60oC F3C HATU N

N N N O 2. HCl N N DIEA O

N O RCOOH II-3 N N N

N N NHCbz

R NHCbz HN NH2 C-4 O C-5 C-6 C-7-n C-5: (4-(6-amino-8-oxo-7-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)- 7,8-dihidro-9H-purin-9-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato

[00132] Uma solução do composto C-4 (100 mg, 0,25 mmol), ácido (4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)borônico (II-3) (160 mg, 0,5 mmol), acetato de cobre (60 mg, 0,3 mmol) e Et3N (30 mg, 0,3 mmol) em DCM (10 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 24 h e, então, a mistura foi despejada em água (20 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL × 2). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (EA/PE = 1:1 –EA), para resultar no composto desejado C-5 (47 mg, rendimento: 29%). LC-MS m/z = 657,3 [M-1]-. C-6: 4-(6-amino-9-(4-aminobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)-8-oxo-8,9-dihidro- 7H-purin-7-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00133] Uma solução de composto C-5 (45 mg, 0,09 mmol) em um solvente misto de DCM/TFA (10 mL:10 mL) foi aquecida a 60 °C e agitada durante 18 h. Depois que a mistura foi evaporada até a secura, DCM (20 mL × 2) foi adicionado e a mistura resultante foi concentrada. O resíduo foi dissolvido em DCM (30 mL), e então a solução foi adicionada a uma solução de HCl em dioxano (10 mL). Depois que a mistura foi evaporada até a secura, DCM (20 mL × 2) foi então adicionado e a mistura resultante foi concentrada, seguida pela adição de éter isopropílico (30 mL). Após ser agitada durante 2 h, a mistura foi filtrada e lavada com éter isopropílico (10 mL × 2) para resultar no cloridrato do produto desejado C-6, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação. C-7-1: 4-(6-amino-9-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-8-oxo- 8,9-dihidro-7H-purin-7-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00134] Uma solução de composto C-6 (13 mg, 0,022 mmol), HATU (9 mg, 0,022 mmol), DIEA (16,8 mg, 0,13 mmol) e ácido but-2-inoico (1,8 mg, 0,022 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto C-7-1 (5 mg, rendimento: 38%). LC-MS m/z = 591,2 [M+1]+. C-7-2: 4-(6-amino-9-(4-(2-morfolinoacetamido)biciclo[2.2.1]heptan-1- il)-8-oxo-8,9-dihidro-7H-purin-7-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00135] Uma solução de composto C-6 (13 mg, 0,022 mmol), HATU (9 mg, 0,022 mmol), DIEA (16,8 mg, 0,13 mmol) e ácido 2- morfolinoacético (3,2 mg, 0,022 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, e então a mistura foi despejada em água (1 mL) e extraída com acetato de etila (5 mL × 2). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaCl, separada, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e evaporada até a secura.

O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (DCM/MeOH = 20:1) para resultar no produto C-7- 2 (6 mg, rendimento: 42%). LC-MS m/z = 652,2 [M+1]+. Rota sintética de composto D-8-n

D-6: (4-(4-amino-3-(4-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamoil)fenil)-1H- pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)carbamato

[00136] Uma solução mista de D-5 (96 mg, 0,19 mmol), II-3 (73 mg, 0,234 mmol), Pd[PPh3]4 (22 mg, 0,019 mmol) e Cs2CO3 (76,4 mg, 0,234 mmol) em DME/H2O (9 mL/1 mL) foi purgada com N2 durante 1 min para remover o oxigênio e então aquecida a 80 °C em um tubo vedado e agitado durante 12 h. Após a mistura ser resfriada, a reação foi extinta com salmoura (20 mL) e EA (50 mL × 2) foi adicionado para extração. A fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (eluente: PE/EA = 1:1) para resultar no produto desejado D-6 (42 mg, 34,4%). LC-MS m/z = 643,2 [M+1]+. D-7: 4-(4-amino-1-(4-aminobiciclo[2.2.1]heptan-1-il)-1H-pirazolo[3,4- d]pirimidin-3-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00137] Uma mistura de D-6 (42 mg, 0,065 mmol) em TFA/DCM (1 mL/1 mL) foi agitada a 60 °C durante 12 h. Após a mistura ser resfriada, o solvente foi removido por evaporação. Uma solução de HCl em dioxano (2 mL) foi então adicionada, e a mistura resultante foi agitada durante 10 min e concentrada. O resíduo foi adicionado com éter isopropílico (10 mL), agitado e concentrado. O procedimento acima foi repetido duas vezes. O sólido foi filtrado, lavado com éter isopropílico e seco para resultar no cloridrato do produto desejado D-7 (30 mg, 75%). D-8-1: 4-(4-amino-1-(4-(but-2-inamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)-1H- pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00138] Uma solução mista D-7 (15 mg, 0,025 mmol), ácido but- 2-inoico (2 mg, 0,024 mmol), HATU (9,1 mg, 0,024 mmol) e DIEA (0,041 mL, 0,241 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h. A solução de reação foi diluída com EA (30 mL) e lavada com salmoura e a fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (eluente: PE/EA = 1:1) para resultar no produto desejado D-8-1 (12 mg, 86%). LC-MS m/z = 575,1 [M+1]+. D-8-2: 4-(4-amino-1-(4-(2-morfolinoacetamido)biciclo[2.2.1]heptan-1-il)- 1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)benzamida

[00139] Uma solução mista D-7 (15 mg, 0,025 mmol), ácido 2- morfolinoacético (3,5 mg, 0,024 mmol), HATU (9,1 mg, 0,024 mmol) e DIEA (0,041 mL, 0,241 mmol) em DMF (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h. A solução de reação foi diluída com EA (30 mL) e lavada com salmoura e a fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (eluente: PE/EA = 1:1) para resultar no produto desejado D-8-2 (8,5 mg, 56%). LC-MS m/z = 636,3 [M+1]+.

1. Atividade Inibitória In Vitro Contra BTK(wt)/BTK(C481S) (determinação do valor IC50) (1) Método

[00140] A solução de substrato foi preparada adicionando o substrato de sal de sódio poli(Glu, Tyr) (Sigma Aldrich, St. Louis, MO) ao tampão de reação de substrato (Hepes 20 mM (pH 7,5), 10 mM de MgCl2, 1 mM de EGTA, Brij35 a 0,02%, 0,02 mg/mL de BSA, 0,1 mM de Na3VO4, 2 mM de DTT e DMSO a 1%) (concentração final de substrato na solução de reação foi 0,2 μM). O composto de teste foi formulado em soluções estoque em concentração de 10 mM com DMSO a 100%, e a diluição em série de 3 vezes para 10 doses foi realizada em uma microplaca de LDV de copolímero de olefina cíclica de 384 poços. BTK(wt) ou BTK(C481S) quinase (proteína de comprimento total humana recombinante, marcação de histidina, expressa em células de inseto, Invitrogen, Carlsbad, CA) foi adicionada à solução de substrato e misturada suavemente (a concentração final de BTK na solução de reação era de 8 nM). O composto de teste em DMSO a 100% foi então adicionado à mistura de reação de quinase por tecnologia de transferência de líquido acústica (Echo 550; faixa de nanolitro) (Labcyte Inc, Sunnyvale, CA) e incubado por 20 min em temperatura ambiente. 33P-ATP (atividade específica de 10 μCi/μL) foi adicionado à mistura de reação para iniciar a reação, seguido por incubação à temperatura ambiente durante 2 h. Uma pequena porção da mistura de reação foi gotejada em papel de filtro de troca iônica P-81 (Whatman). Depois de lavar o fosfato não ligado do papel de filtro com 0,75% de tampão de fosfato (três vezes) e secar, a radioatividade remanescente no papel de filtro foi medida. A atividade da quinase foi expressa como a porcentagem da atividade da quinase restante na amostra de teste para a atividade da quinase no controle em branco do veículo (dimetilsulfóxido). Os valores IC50 foram calculados por ajuste de curva dos dados obtidos usando Prism (GraphPad Software). (2) Resultados

[00141] Em comparação com o inibidor de BTK de segunda geração acalabrutinibe, a maioria dos compostos divulgados neste documento têm uma capacidade de inibição mais forte contra a atividade da enzima BTK(wt) do tipo selvagem. Mais importante, a maioria dos compostos exibe atividade de inibição mais excelente contra mutantes BTK(C481S), e alguns até mostram atividade de inibição de menos de 0,1 nM. Tabela 1. Inibição contra a atividade da enzima BTK(wt)/BTK(C481S) (A≤0,1 nM; 0,1 nM<B≤1 nM; 1 nM<C≤10 nM; 10 nM<D≤50 nM)

Número IC50 IC50 Número do IC50 IC50 do BTK(wt) BTK(C481S) composto BTK(wt) BTK(C481S) composto A-7-2 C B A-7-3 B B A-7-5 C B A-7-9 C B A-7-12 C B A-7-14 C B A-10-1 C B A-10-3 C B A-10-5 C A A-10-6 C A A-10-7 C B A-10-8 C A A-10-10 C A A-10-11 C B A-10-12 C B A-10-13 C A A-10-14 C B A-10-15 C B A-10-17 D C A-10-18 D C A-10-19 D C A-10-20 D C A-10-21 C C A-10-22 C C A-13-1 C C A-13-2 C B A-13-3 C C A-13-4 D C A-16-1 D C A-16-2 C C A-16-3 C C A-16-4 C C B-6-1 C C B-6-2 D C B-6-3 C C B-6-4 C C B-6-5 C C C-7-1 C C C-7-2 C B Acalabrutinibe 18,6 nM 815 nM

2. Experimento na inibição da proliferação de células tumorais in vitro (1) Método • A linhagem celular tumoral (TMD-8/OCY-LY10) foi suspensa em RPMI1640 + FBS10% e cultivada em uma incubadora (37 °C, CO2 a 5%). As células foram passadas periodicamente e as células na fase de crescimento logarítmico foram coletadas para plaqueamento. • A coloração das células foi realizada com azul de tripano e as células viáveis foram contadas. • A concentração de células foi ajustada a 7000 células/poço com meio. • 90 μL de suspensão de células foram adicionados a uma placa com 96 poços e meio de cultura sem células foi adicionado aos poços de controle em branco. • As células na placa com 96 poços foram incubadas durante a noite em uma incubadora (37 °C, CO2 a 5%, 100% de umidade relativa). • Preparação de placas de armazenamento de composto de 400×: os compostos de teste e a droga de referência foram dissolvidos em DMSO e diluídos 3× a partir da concentração mais alta (400 μM) para a concentração mais baixa (0,61 μM). • Preparação de soluções de trabalho de composto de 10×: 78 μL de meio de cultura de células foram adicionados a uma placa com 96 poços com fundo em V e 2 μL do composto foram pipetados da placa de armazenamento de composto 400× para a placa com 96 poços.

Poços de controle de veículo e poços de controle em branco foram adicionados com 2 μL de DMSO.

Após a adição do composto ou DMSO, a mistura foi bem misturada por uma pipeta. • Adição de composto: 10 μL de solução de trabalho de composto 10× (conforme mostrado na Tabela 1) foram adicionados à placa de cultura de células. 10 μL da mistura de DMSO e solução de cultura de células foram adicionados aos poços de controle de veículo e aos poços de controle em branco.

A concentração final de DMSO foi de 0,25%. • A placa de células com 96 poços foi colocada de volta na incubadora durante 72 h de cultura. • O tampão CellTiter-Glo foi descongelado e deixado repousar à temperatura ambiente. • O substrato CellTiter-Glo foi deixado repousar à temperatura ambiente. • Um frasco de substrato CellTiter-Glo foi adicionado com o tampão CellTiter-Glo para dissolução, de modo que uma solução de trabalho CellTiter-Glo foi preparada. • O frasco foi submetido à agitação de vórtice lenta para dissolver completamente o substrato. • A placa de cultura de células foi retirada e deixada repousar durante 30 minutos para ser equilibrada à temperatura ambiente.

• 50 μL (equivalente à metade do volume do meio de cultura de células em cada poço) da solução de trabalho CellTiter-Glo foi adicionado a cada poço. A placa de células foi enrolada com papel alumínio para manter- se fora da luz. • A placa foi sacudida em um agitador orbital por 2 minutos para induzir a lise celular. • A placa deixada repousar à temperatura ambiente por 10 min para estabilizar os sinais de luminescência. • Os sinais de luminescência foram detectados no leitor de placas EnVision 2104. • Análise de dados: A taxa de inibição (IR) do composto de teste foi calculada pela seguinte fórmula: IR (%) = (1 – (composto RLU – controle em branco RLU) / (controle de veículo RLU – controle em branco RLU)) × 100%. As taxas de inibição de compostos em diferentes concentrações foram calculadas no Excel, seguido pela representação gráfica das curvas de inibição e cálculo dos valores IC50 com GraphPad Prism. (2) Resultados

[00142] No experimento de inibição de proliferação de células de linfoma de células B TMD-8 e OCI-LY10, o composto A-10-10 e ibrutinibe exibem forte atividade de inibição contra a proliferação de células tumorais. Tabela 2. Atividade inibidora do composto A-10-10/ibrutinibe contra a proliferação de células tumorais Número do IC50 (nM) composto TMD-8 OCI-LY10 A-10-10 2,9 10,3 Ibrutinibe 0,4 1,7

3. Estudo farmacocinético (1) Método

[00143] Ratos SD machos jejuaram durante a noite antes do teste. Cada uma das drogas de teste foi suspensa em uma solução de

0,5% de metilcelulose (MC) e 0,1% de SDS em água desionizada (p/p/v), e a suspensão, cada uma a uma concentração de 1 mg/mL, foi administrada por via intragástrica a 5 mL/kg. Aos 15 min, 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h e 24 h após a administração, aproximadamente 0,4 mL de sangue total foi coletado do plexo venoso orbital dos animais e, então, colocado em tubos de anticoagulante de heparina. Três animais foram amostrados em cada momento e, então, condenados à morte, e assim a coleta de amostras foi concluída em diferentes indivíduos. A amostra de sangue total seria centrifugada em 15 minutos e centrifugada a 4 °C/4200 rpm durante 5 minutos. Todas as amostras de plasma foram armazenadas em um refrigerador a -80±15 °C antes da análise. Um ensaio LC-MS/MS (espectrometria de massa em tandem Waters I Classe UPLC-Xevo TQD) para os compostos foi estabelecido antes da análise de amostra. O plasma coletado foi analisado quantitativamente, os dados de concentração de plasma-tempo de animais foram analisados usando o software WinNonlin (edição profissional, versão 5.2), um modelo não compartimental foi usado para análise de concentração e os parâmetros farmacocinéticos dos compostos de teste foram calculados.

[00144] Três cães beagle machos adultos jejuaram durante a noite antes do teste. Cada uma das drogas de teste foi suspensa em uma solução de 0,5% de metilcelulose (MC) e 0,1% de SDS em água desionizada (p/p/v), e a suspensão, cada uma a uma concentração de 1 mg/mL, foi administrada por via intragástrica a 5 mL/kg. O sangue foi coletado 15 min, 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h e 24 h após a administração. Os animais foram levemente anestesiados com hidrato de cloral e aproximadamente 0,5 mL de sangue total foi coletado da veia do membro anterior usando um tubo de vidro para coleta de sangue e colocado em um tubo anticoagulante de heparina. A amostra foi centrifugada a 4 °C/4200 rpm durante 5 minutos. Todas as amostras de plasma foram armazenadas em um refrigerador a -80±15 °C antes da análise. Um ensaio LC-MS/MS

(espectrometria de massa em tandem Waters I Classe UPLC-Xevo TQD) para os compostos foi estabelecido antes da análise de amostra. O plasma coletado foi analisado quantitativamente, os dados de concentração de plasma-tempo de animais foram analisados usando o software WinNonlin (edição profissional, versão 5.2), um modelo não compartimental foi usado para análise de concentração e os parâmetros farmacocinéticos dos compostos de teste foram calculados. (2) Resultados

[00145] O composto A-10-10 (administrado por via intragástrica, 5 mg/kg) mostrou boa absorção com Cmax de 8323 ng/mL e 641 ng/mL em rato e cães beagle, respectivamente, e teve uma exposição de sangue bastante alta (AUC0-INF = 73318 hr*ng/mL e 14867 hr*ng/mL). Tabela 3. Dados farmacocinéticos para rato/beagle (macho) submetidos à administração intragástrica (5 mg/kg) (t1/2: meia-vida; Tmax: tempo de pico; Cmax: concentração plasmática máxima; AUC0-INF: área sob a curva de concentração de tempo 0-INF) Parâmetros Composto A-10-10 (p.o., 5 mg/kg) Unidade PK Rato Cão t1/2 hr 3,74 14,2 Tmax hr 2,00 8,00 Cmax ng/mL 8323 641 AUC0-INF hr*ng/mL 73318 14867

4. Experimento de inibição de pBTK em células HEK293 transfectadas com BTK(wt) e BTK(C481S)

[00146] A principal causa da resistência de droga ao ibrutinibe está na mutação C481S da quinase BTK, e o desenvolvimento de um inibidor de BTK que pode inibir efetivamente as células com variação de BTK(C481S) é de grande importância para superar a resistência de droga ao ibrutinibe. (1) Método • Células de rim embrionário humano HEK293 foram transitoriamente transfectadas com vetor BTK ou BTK(C481S) de comprimento total humano. • As células foram dispensadas em uma placa com 96 poços em uma densidade celular predeterminada. • Cada composto de teste foi submetido a uma diluição em série de 3 vezes por oito vezes com DMSO a 100%. • O composto foi então diluído em meio de cultura de tecidos para uma concentração de ensaio final de 10 vezes e DMSO a 5%. • O composto foi adicionado às células na placa com 96 poços (diluição de 10 vezes no meio de cultura) e a concentração final foi composto 1× e DMSO a 0,5%. Para controles positivos (sinal alto), as células foram tratadas com DMSO a 0,5% sozinho.

Para controles negativos (sinal baixo), as células foram tratadas com ibrutinibe 20 μM e a concentração final foi de DMSO a 0,5%. • As células foram incubadas com os compostos durante 2 h a 37 °C. • As células foram lisadas e o lisado foi transferido para uma placa de ELISA previamente revestida com um anticorpo que captura o substrato (BTK humana ou BTK(C481S)). • A placa foi lavada e então incubada com anticorpo ligado a HRP para detectar a fosforilação total da tirosina. • A placa foi lavada e então adicionada com substrato HRP.

A absorbância foi lida a 450 nm. • Com base nas leituras de absorbância dos valores de controle positivo e negativo, o valor de inibição percentual (%) foi calculado de acordo com a seguinte fórmula: (%INH = ((controle positivo – amostra) / (controle positivo – controle negativo)) × 100. • O valor Z foi calculado com base na seguinte fórmula: 1 – ((3 × desvio padrão de positivo + 3 × desvio padrão de negativo) / (média positiva – média negativa)).

• O logaritmo de valor de inibição percentual vs. concentração do composto foi representado graficamente usando GraphPad Prism. • Os valores IC50 foram determinados após o ajuste da curva sigmoidal de resposta à dose. (2) Resultados

[00147] A mutação C481S reduz a inibição de ibrutinibe contra a fosforilação BTK de células HEK293 de 0,021 μM para 1,58 μM, enquanto o composto A-10-10 divulgado neste documento tem forte inibição (0,077 μM) contra células HEK293 transfectadas com BTK(wt) e ainda mais forte inibição (0,066 μM) contra células HEK293 transfectadas com BTK(C481S). Tabela 4. Valores de inibição de pBTK (IC50) contra células HEK293 transfectadas com BTK(wt) e BTK(C481S) Transfectado em células HEK293 Inibidores BTK(wt) pBTK IC50 (μM) BTK(C481S) pBTK IC50(μM) A-10-10 0,077 0,063 Ibrutinibe 0,021 1,58

5. Experimento Farmacodinâmico 1 (1) Método

[00148] Camundongos fêmeas CB17/SCID com deficiência imunológica grave foram adquiridos de Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. e criados em biotérios SPF. Células humanas OCI- LY10 (Shanghai Junrui-UFBN0102) foram cultivadas em um meio de cultura RPMI 1640 contendo 10% de soro fetal bovino, 100 U/mL de penicilina e 100 μg/mL de estreptomicina através de cultura em monocamada in vitro em uma incubadora (37 °C, 5% CO2). O tratamento de rotina foi realizado duas vezes por semana para o processo de desenvolvimento. Em uma saturação celular de 80%-90% e um número necessário, as células foram colhidas e contadas. 0,2 mL (1×107) de células OCI-LY10 (juntamente com matrigel em uma razão de volume de 1:1) foram inoculados por via subcutânea na parte traseira direita de cada camundongo, e o tamanho do tumor pode ser medido cerca de uma semana após inoculação. O tamanho do tumor foi medido usando um paquímetro e o volume do tumor foi calculado usando a seguinte fórmula: volume do tumor = (comprimento x largura2) / 2. Quando o volume médio do tumor atingiu 109 mm3, os camundongos foram divididos em quatro grupos (8 camundongos por grupo) para administração, ou seja, grupo de controle de veículo (5% DMSO + 20% HP-β-CD), grupo de administração intragástrica de ibrutinibe (25 mg/kg, uma vez/dia) e grupo de administração intragástrica do composto A-10-10 (25 mg/kg, 50 mg/kg, duas vezes/dia). O ibrutinibe ou composto A-10-10 foi dissolvido em 5% DMSO + 20% HP-β-CD e administrado por via intragástrica a 10 mL/kg por 28 dias consecutivos. (2) Resultados

[00149] O composto A-10-10 e ibrutinibe mostraram atividade antitumoral extremamente forte no modelo de tumor de xenoenxerto OCI- LY10 (Figura 1). O composto A-10-10 administrado por via intragástrica (a dosagem foi de 25 mg/kg, duas vezes/dia; 50 mg/kg, duas vezes/dia) pode inibir significativamente o crescimento da cepa de células difusas de linfoma de células B grandes OCI-LY10 (TGI = 110% ,110%; p <0,001, p <0,001). Após 21 dias de administração, todos os tumores de xenoenxerto OCI-LY10 desapareceram completamente no grupo de 50 mg/kg. Após 28 dias de administração, todos os tumores de xenoenxerto OCI-LY10 também desapareceram completamente no grupo de 25 mg/kg. No dia 28, o valor de TGI para o grupo de controle de composto ibrutinibe 25 mg/ g foi de 94% (p <0,001).

[00150] O efeito da substância de teste no peso corporal de camundongos com tumor é mostrado na Figura 1. Os camundongos com tumor mostraram boa tolerância à droga de teste A-10-10 em todas as dosagens, e nenhuma perda de peso significativa foi observada em todos os grupos de tratamento.

6. Experimento Farmacodinâmico 2 (1) Método

[00151] Camundongos fêmeas CB17/SCID com deficiência imunológica grave foram adquiridos de Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. e criados em biotérios SPF. Células humanas TMD-8 (Shanghai Junrui-UFBN1682) foram cultivadas em um meio de cultura RPMI 1640 contendo 10% de soro fetal bovino, 100 U/mL de penicilina e 100 μg/mL de estreptomicina através de cultura em monocamada in vitro em uma incubadora (37 °C, 5% CO2). O tratamento de rotina foi realizado duas vezes por semana para o processo de desenvolvimento. Em uma saturação celular de 80%-90% e um número necessário, as células foram colhidas e contadas. 0,2 mL (1×107) de células TMD-8 (juntamente com matrigel em uma razão de volume de 1:1) foram inoculados por via subcutânea na parte traseira direita de cada camundongo, e o tamanho do tumor pode ser medido cerca de uma semana após inoculação. O tamanho do tumor foi medido usando um paquímetro e o volume do tumor foi calculado usando a seguinte fórmula: volume do tumor = (comprimento x largura2) / 2. Quando o volume médio do tumor atingiu 107 mm3, os camundongos foram divididos em quatro grupos (8 camundongos por grupo) para administração, ou seja, grupo de controle de veículo (5% DMSO + 20% HP-β-CD), grupo de administração intragástrica de ibrutinibe (25 mg/kg, uma vez/dia) e grupo de administração intragástrica do composto A-10-10 (25 mg/kg, 50 mg/kg, duas vezes/dia). O ibrutinibe ou composto A-10-10 foi dissolvido em 5% DMSO + 20% HP-β-CD e administrado por via intragástrica a 10 mL/kg por 27 dias consecutivos. (2) Resultados

[00152] O composto A-10-10 e ibrutinibe mostraram atividade antitumoral extremamente forte no modelo de tumor de xenoenxerto TMD-8 (Figura 2). O composto A-10-10 administrado por via intragástrica (a dosagem foi de 25 mg/kg, duas vezes/dia; 50 mg/kg, duas vezes/dia) pode inibir significativamente o crescimento da cepa de células difusas de linfoma de células B grandes TMD-8 (TGI = 94% ,104%; p <0,001, p <0,001). Após

27 dias de administração, 5/8 dos tumores de xenoenxerto TMD-8 desapareceram no grupo de 50 mg/kg. O valor de TGI para o grupo de controle de composto ibrutinibe 25 mg/ g foi de 90% (p <0,001).

[00153] O efeito da substância de teste no peso corporal de camundongos com tumor é mostrado na Figura 2. Os camundongos com tumor mostraram boa tolerância à droga de teste A-10-10 em todas as dosagens, e nenhuma perda de peso significativa foi observada em todos os grupos de tratamento.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto, caracterizado pelo fato de que é da fórmula I

A L

B C 1

R

N R2 I ou um sal farmaceuticamente aceitável, um solvato, um metabólito ativo, um polimorfo, um éster, um isômero óptico ou uma pró-droga do mesmo, em que o anel A é selecionado a partir de uma das seguintes estruturas:

N N

N N O N NH2 N NH2 NH2 N NH2 H2N NH2

N

N N N

N N

N N N

O R5

N N HN N N HN N N NH2 NH2 O NH2 NH2 O NH2

N

N N N N

N N

N 5 R R5 O

N N N

N N N NH2 NH2 NH2 N NH2 NH2

N N N

N N N N

N 5 R R5 R5 sendo selecionado a partir de hidrogênio, halogênio, ciano, hidroxila, alquinila, amino, alquila C1-3, alcoxi C1-3, haloalquila C1-3, haloalcoxi C1-3, haloalquilamino C1-3, cicloalquila C3-7, cicloalcoxi C3-7 e cicloalquilamino C3-7; o anel B é um anel aromático ou anel heteroaromático substituído ou não substituído; o anel C é um anel aromático ou anel heteroaromático substituído ou não substituído; L é uma ligação simples ou uma das seguintes estruturas:

O O

O

N N

H H

R1 é selecionado a partir de R3 e uma das seguintes estruturas:

O O O O O O O O O S S R3 R3 S R3 S R3 R3 R3 R3 O S O O

O O O O O O O O R3 S 3 R S R 3 R3 S R 3 S R3

N N N N N N H H H R4 R4 R4 R3 sendo selecionado a partir de hidrogênio, alquila C1-6 substituída ou não substituída, alquinila C1-6 substituída ou não substituída, alquenila C1-6 substituída ou não substituída, arila C6-10 substituída ou não substituída, heteroarila C1-9 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída e heterocicloalquilamino C2-7 substituído ou não substituído; e R4 sendo selecionado a partir de hidrogênio, alquila C1-6 substituída ou não substituída, arila C6-10 substituída ou não substituída, heteroarila C1-9 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída e heterocicloalquila C3-7 substituída ou não substituída; e R2 é selecionado a partir de H, alquila C1-3 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída, heterocicloalquila C2-7 substituída ou não substituída, arila C6-10 substituída ou não substituída e heteroarila C1-9 substituída ou não substituída.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 e R2, juntamente com o N anexado a ele, formam um anel heterocíclico C2-7 substituído ou não substituído e R3 e R4, juntamente com o N anexado a ele, forma um heterociclilamino C3-7 ou um heteroarilamino C3-9.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que para R3, um substituinte da alquila C1-6 substituída, da alquinila C1-6 substituída, da alquenila C1-6 substituída, da arila C6-10 substituída, da heteroarila C1-9 substituída, da cicloalquila C3-7 substituída ou do heterocicloalquilamino C2-7 substituído é selecionado a partir de um ou mais dentre halogênio, ciano, hidroxila, amino, acilamino substituído ou não substituído, aminoacila substituída ou não substituída, alquila C1-4 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída, cicloalcoxi C3-7 substituído ou não substituído, alquilamino C1-4 substituído ou não substituído, di[alquila C1-4 substituída ou não substituída]amino, cicloalquilamino C3-7 substituído ou não substituído, heterocicloalquilamino C3-7 substituído ou não substituído, alcoxi C1-3 substituído ou não substituído, cicloalcoxi C3-7 substituído ou não substituído, arila C6-10 substituída ou não substituída e heterocicloalquila C3- 7 substituída ou não substituída.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que para R4, um substituinte da alquila C1-6 substituída, da arila C6-10 substituída, da heteroarila C1-9 substituída, da cicloalquila C3-7 substituída ou da heterocicloalquila C3-7 substituída é selecionado a partir de um ou mais dentre halogênio, hidroxila, ciano, amino, alquenila C1-4 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída, cicloalcoxi C3-7 substituído ou não substituído, alquilamino C1-4 substituído ou não substituído, di[alquila C1-4 substituída ou não substituída]amino, cicloalquilamino C3-7 substituído ou não substituído, heterocicloalquilamino C3-7 substituído ou não substituído, alcoxi C1-3 substituído ou não substituído, cicloalcoxi C3-7 substituído ou não substituído, arila C6-10 substituída ou não substituída e heterocicloalquila C3-7 substituída ou não substituída.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que para o anel B, um substituinte do anel aromático ou anel heteroaromático substituído é selecionado a partir de um ou mais dentre halogênio, hidroxila, ciano, amino, alquila C1-3, alcoxi C1-3, alquilamino C1-3, haloalquila C1-3 e haloalcoxi C1-3.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que para o anel C, um substituinte do anel aromático ou anel heteroaromático substituído é selecionado a partir de um ou mais dentre halogênio, hidroxila, ciano, amino, alquila C1-3, alcoxi C1-3, alquilamino C1-3, haloalquila C1-3 e haloalcoxi C1-3.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o anel A é selecionado de uma das seguintes estruturas:

N N

N N N NH2 N NH2 NH2 N NH2

N

N N N

N

N N 5 O

R R5 sendo selecionado a partir de hidrogênio, halogênio, ciano, hidroxila, alquinila, amino, alquila C1-3, alcoxi C1-3, haloalquila C1-3, haloalcoxi C1-3, haloalquilamino C1-3, cicloalquila C3-7, cicloalcoxi C3-7 e cicloalquilamino C3-7.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o anel B é selecionado de uma das seguintes estruturas:

F F OMe .

9. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o anel C é selecionado de uma das seguintes estruturas:

NC MeO MeO MeO F

F N F F3C

S

N N N N N .

10. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é selecionado de uma das seguintes estruturas:

O O O O O

O

O N O

O O O O O O

OH O CN CN COOH

O

CN O O

O O O

OH N

CN

O O O O O O O O OMe

O S N

O

N

N N .

11. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R2 é selecionado a partir de H, e R1 é selecionado a partir de: , R3 sendo selecionado a partir de hidrogênio, alquila C1-6 substituída ou não substituída, alquinila C1-6 substituída ou não substituída, alquenila C1-6 substituída ou não substituída, arila C6-10 substituída ou não substituída, heteroarila C1-9 substituída ou não substituída, cicloalquila C3-7 substituída ou não substituída e heterocicloalquilamino C2-7 substituído ou não substituído.

12. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é um composto selecionado a partir de qualquer uma das seguintes estruturas:

O H O H O H O H O H O H

N N N N N N

N N N N N N NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 F3C F3C F3C F3C F3C F3C

N N N N N N

O

O N

HN HN HN HN HN HN OH

O O O O O O

O H O H O H O H O H O H

N N N N N N

N N N N N N NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 NH2 F3C F3C F3C F3C F3C F3C

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13. Uso do composto, conforme qualquer uma das reivindicações de 1 a 12, caracterizado pelo fato de que é para fabricação de um medicamento para prevenir ou tratar uma doença heteroimune, uma doença autoimune ou um câncer.

14. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a doença heteroimune, a doença autoimune ou o câncer estão associados a uma atividade excessiva da tirosina quinase de Bruton.

15. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a doença heteroimune, a doença autoimune ou o câncer estão associados à proliferação aberrante de células B.

16. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a doença heteroimune é uma doença inflamatória ou asma.

17. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a doença autoimune é lúpus eritematoso, linfoma linfocítico crônico, linfoma difuso de grandes células, linfoma folicular ou leucemia linfocítica crônica.

18. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o composto conforme qualquer uma das reivindicações de 1 a

12.

19. Formulação farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto conforme qualquer uma das reivindicações de 1 a 12, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

20. Método de fabricação para o composto conforme qualquer uma das reivindicações de 1 a 12, caracterizado pelo fato de que compreende: (S1) realizar acoplamento de Suzuki do composto IIIA com ácido borônico ou borato II para resultar no composto IV; (S2) converter o composto IV no cloridrato do composto V pela remoção da benziloxicarbonila com ácido trifluoroacético; e (S3) acoplar o composto V com um ácido orgânico para resultar no composto I, conforme a reivindicação 1;

em que X = halogênio e R2, R1, L, anel A, anel B e anel C são descritos conforme nas reivindicações de 1 a 12.

21. Método de fabricação para o composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 12, caracterizado pelo fato de que compreende: (A1) converter o composto IIIA em cloridrato do composto VI pela remoção da benziloxicarbonila com ácido trifluoroacético; (A2) acoplar o composto VI com um ácido orgânico para resultar no composto VII; e (A3) realizar acoplamento de Suzuki do composto VII com ácido borônico ou borato II para resultar no composto I, conforme a reivindicação 1; em que X = halogênio e R2, R1, L, anel A, anel B e anel C são descritos conforme nas reivindicações de 1 a 12.

22. Método de fabricação para o composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 12, caracterizado pelo fato de que compreende: (B1) realizar o acoplamento de Chan-Lam-Evans do composto IIIB com ácido borônico II na presença de catalisação de acetato de cobre para resultar no composto VIII; (B2) converter o composto VIII no cloridrato do composto IX pela remoção da benziloxicarbonila com ácido trifluoroacético; e (B3) acoplar o composto IX com um ácido orgânico para resultar no composto I, conforme a reivindicação 1;

em que R2, R1, L, anel A, anel B e anel C são descritos conforme nas reivindicações de 1 a 12.