TWI821200B

TWI821200B - Tam抑制劑之鹽

Info

Publication number: TWI821200B
Application number: TW107133765A
Authority: TW
Inventors: 忠將賈; 永忠吳; 永春潘; 家謙周; 李群
Original assignee: 美商英塞特公司
Priority date: 2017-09-27
Filing date: 2018-09-26
Publication date: 2023-11-11
Also published as: JP2020535168A; AU2018342471B2; MD3687996T2; AU2023270198A1; WO2019067594A1; US10633387B2; EP3988552A1; PL3687996T3; BR112020006145A2; ECSP20021655A; TW201920186A; KR20200088308A; EP3687996B1; AU2018342471A1; CL2022001014A1; CY1124952T1; PH12020550143A1; DK3687996T3; LT3687996T; SG11202002821UA

Abstract

本申請案提供N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺及N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺之鹽形式，該等鹽形式適用作TAM激酶抑制劑；以及其相關製程及中間物。

Description

TAM抑制劑之鹽

受體酪胺酸激酶(RTK)為自細胞外環境向細胞質及細胞核傳遞信號以調控諸如存活、生長、增殖、分化、黏著及移行之細胞事件的細胞表面蛋白。

TAM亞家族由三種RTK，包括Tyro3、AXL及Mer組成(Graham等人，2014,Nature Reviews Cancer 14,769-785；Linger等人，2008,Advances in Cancer Research 100,35-83)。TAM激酶之特徵在於由兩個免疫球蛋白樣結構域及兩個III型纖網蛋白結構域組成之細胞外配位體結合結構域。已鑑定TAM激酶之兩種配位體，亦即，生長停滯特異性蛋白6(GAS6)及蛋白S(PROS1)。GAS6可結合至所有三種TAM激酶並將其活化，而PROS1為Mer及Tyro3之配位體(Graham等人，2014,Nature Reviews Cancer 14,769-785)。

AXL(亦稱為UFO、ARK、JTK11及TYRO7)最初鑑定為來自慢性骨髓性白血病患者之DNA的轉型基因(O'Bryan等人，1991,Mol Cell Biol 11,5016-5031；Graham等人，2014,Nature Reviews Cancer 14,769-785；Linger等人，2008,Advances in Cancer Research 100,35-83)。GAS6結合至AXL並誘導後續自磷酸化及AXL酪胺酸激酶活化。AXL活化若干下游信號傳導途徑，包括PI3K-Akt、Raf-MAPK、PLC-PKC(Feneyrolles等人，2014,Molecular Cancer Therapeutics 13,2141-2148；Linger等人，2008,Advances in Cancer Research 100,35-83)。

MER(亦稱為MERTK、EYK、RYK、RP38、NYK及TYRO12)最初鑑定為來自類淋巴母細胞表現庫之磷酸化蛋白(Graham等人，1995,Oncogene 10,2349-2359；Graham等人，2014,Nature Reviews Cancer 14,769-785；Linger等人， 2008,Advances in Cancer Research 100,35-83)。GAS6與PROS1兩者皆可結合至Mer並誘導Mer激酶磷酸化及活化(Lew等人，2014)。如同AXL，MER活化亦傳遞下游信號傳導途徑，包括PI3K-Akt及Raf-MAPK(Linger等人，2008,Advances in Cancer Research 100,35-83)。

TYRO3(亦稱為DTK、SKY、RSE、BRT、TIF、ETK2)最初係藉由基於PCR之選殖研究而鑑定(Lai等人，Neuron 6,691-70,1991；Graham等人，2014,Nature Reviews Cancer 14,769-785；Linger等人，2008,Advances in CancerResearch 100,35-83)。兩種配位體，GAS6與PROS1，皆可結合至TYRO3並將其活化。儘管很少研究TAM RTK之TYRO3活化下游之信號傳導途徑，但看似涉及PI3K-Akt與Raf-MAPK途徑兩者(Linger等人，2008,Advances in Cancer Research 100,35-83)。發現AXL、MER及TYRO3過度表現於癌細胞中。

因此，需要用於調節TAM激酶從而治療癌症之化合物及其使用方法。

本申請案提供式I化合物之鹽：

其適用作TAM抑制劑。

本申請案進一步提供該式I化合物之馬來酸鹽。

本申請案進一步提供製備該式I化合物之鹽的方法。

本申請案提供式II化合物之鹽：

其適用作TAM抑制劑。

本申請案進一步提供該式II化合物之半硫酸鹽。

本申請案進一步提供該式II化合物之磷酸鹽。

本申請案進一步提供該式II化合物之馬來酸鹽。

本申請案進一步提供該式II化合物之鹽酸鹽。

本申請案進一步提供該式II化合物之柳酸鹽。

本申請案進一步提供該式II化合物之甲烷磺酸鹽(亦即，甲磺酸鹽)。

本申請案進一步提供該式II化合物之乙烷磺酸鹽(亦即，乙磺酸鹽)。

本申請案進一步提供製備該式II化合物之鹽的方法。

本申請案進一步提供包含式I化合物之鹽及式II化合物之鹽中的任一種的醫藥組合物。

本申請案亦提供抑制TAM激酶之方法，其中該等方法包括使該TAM激酶與式I化合物之鹽及式II化合物之鹽中的任一種接觸。

本申請案亦提供抑制AXL及MER激酶之方法，其中該等方法包括使該AXL或MER激酶與式I化合物之鹽及式II化合物之鹽中的任一種接觸。

本申請案亦提供治療患者之癌症的方法，該等方法包括向該患者投與治療有效量的式I化合物之鹽及式II化合物之鹽中的任一種。

圖1顯示代表化合物I馬來酸鹽形式I之XRPD圖案。

圖2顯示代表化合物I馬來酸形式I之DSC熱分析圖。

圖3顯示代表化合物I馬來酸鹽形式I之TGA資料。

圖4顯示代表化合物II磷酸鹽之XRPD圖案。

圖5顯示代表化合物II磷酸鹽之DSC熱分析圖。

圖6顯示代表化合物II磷酸鹽之TGA資料。

圖7顯示代表化合物II馬來酸鹽之XRPD圖案。

圖8顯示代表化合物II馬來酸鹽之DSC熱分析圖。

圖9顯示代表化合物II馬來酸鹽之TGA資料。

圖10顯示代表化合物II半硫酸鹽之XRPD圖案。

圖11顯示代表化合物II半硫酸鹽之DSC熱分析圖。

圖12顯示代表化合物II半硫酸鹽之TGA資料。

圖13顯示代表化合物II鹽酸鹽之XRPD圖案。

圖14顯示代表化合物II鹽酸鹽之DSC熱分析圖。

圖15顯示代表化合物II鹽酸鹽之TGA資料。

圖16顯示代表化合物II柳酸鹽之XRPD圖案。

圖17顯示代表化合物II柳酸鹽之DSC熱分析圖。

圖18顯示代表化合物II柳酸鹽之TGA資料。

圖19顯示代表化合物II甲磺酸鹽之XRPD圖案。

圖20顯示代表化合物II甲磺酸鹽之DSC熱分析圖。

圖21顯示代表化合物II甲磺酸鹽之TGA資料。

圖22顯示代表化合物II乙磺酸鹽之XRPD圖案。

圖23顯示代表化合物II乙磺酸鹽之DSC熱分析圖。

圖24顯示代表化合物II乙磺酸鹽之TGA資料。

圖25顯示代表化合物I馬來酸鹽形式II之XRPD圖案。

圖26顯示代表化合物I馬來酸鹽形式III之XRPD圖案。

圖27顯示代表化合物I馬來酸形式III之DSC熱分析圖。

圖28顯示代表化合物I馬來酸鹽形式III之TGA資料。

圖29顯示代表化合物I馬來酸鹽形式IV之XRPD圖案。

圖30顯示代表化合物I馬來酸形式IV之DSC熱分析圖。

圖31顯示代表化合物I馬來酸鹽形式IV之TGA資料。

圖32顯示代表化合物I馬來酸鹽形式V之XRPD圖案。

圖33顯示代表化合物I馬來酸形式V之DSC熱分析圖。

圖34顯示代表化合物I馬來酸鹽形式V之TGA資料。

化合物及鹽

本申請案提供式I化合物之鹽：

或其醫藥學上可接受之水合物及溶劑合物，其適用作TAM抑制劑。

因此，在一些實施例中，本申請案提供N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽(本文中亦稱為式I化合物之馬來酸鹽、化合物I之馬來酸鹽、化合物I馬來酸鹽或其任何變化形式)。

在一些實施例中，該鹽為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺與馬來酸之1：1化學計算比。

關於例如吸濕性、溶解度、穩定性及其類似性質，相同物質之不同形式具有不同的整體性質。具有高熔點之形式通常具有良好熱力學穩定性，從而有利於延長含有該固體形式之藥物調配物的儲架壽命。具有較低熔點之形式通常在熱力學上不太穩定，但有利之處在於其具有增加之水溶解度，從而轉化為增加之藥物生體可用率。具有弱吸濕性之形式因其熱穩定性及濕氣穩定性而合乎需要，並且在長期儲存期間抵抗降解。

本文中所描述之固體形式(例如結晶形式)可具有某些優勢，例如其可具有合乎需要之性質，諸如易處理性、易加工性、儲存穩定性及易純化性。此外，結晶形式可適用於改良醫藥產品之效能特徵，諸如溶解輪廓、儲架壽命及生體可用率。

在一些實施例中，本文中所提供之式I化合物之馬來酸鹽為結晶的。如本文中所使用，「結晶」或「結晶形式」意在指結晶物質之某一晶格組態。相同物質之不同結晶形式典型地具有不同的晶格(例如單位晶胞)，此可歸因於各結晶形式所特有的不同物理性質。在一些情況下，不同的晶格組態具有不同的水或溶劑含量。

可藉由固態表徵方法，諸如藉由X射線粉末繞射(XRPD)來鑑定不同的鹽形式。其他表徵方法，諸如差示掃描量熱術(DSC)、熱解重量分析(TGA)、動態蒸汽吸附(DVS)及其類似方法，更有助於鑑定形式以及有助於確定穩定性及溶劑/水含量。

反射(峰)之XRPD圖案典型地被視為特定結晶形式之指紋。眾所周知，XRPD峰之相對強度可尤其視樣品製備技術、晶體大小分佈、所使用之各種過濾器、樣品固定程度及所採用之特定儀器而廣泛變化。在一些情況下，可觀察到新的峰或現有的峰可能消失，視儀器類型或設定而定。如本文中所使用，術語「峰」係指具有佔最大峰高度/強度之至少約4%的相對高度/強度的反射。此外，儀器偏差及其他因素可能影響2-θ值。因此，峰指定，諸如本文中所報導之彼等，可變化加或減約0.2°(2-θ)，且如本文中在XRPD之情形下所使用之術語「實質上」及「約」意欲涵蓋以上提及之偏差。

同樣，與DSC、TGA或其他熱實驗相關之溫度讀數可變化約±3℃，視儀器、特定設定、樣品製備等而定。因此，本文所報導之具有「實質上」或術語「約」如任何附圖中所示之DSC熱分析圖的結晶形式均應理解為包括此種偏差。

在一些實施例中，本文中所描述之鹽及化合物(例如式I化合物或式I化合物之馬來酸鹽)實質上經分離。「實質上經分離」意謂該鹽或化合物至少部分或實質上與形成或偵測到其之環境分離。部分分離可包括例如富含本文中所描述之鹽的組合物。實質性分離可包括以重量計含有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約97%或至少約99%本文中所描述之鹽或其鹽的組合物。用於分離化合物及其鹽之方法在此項技術中為習知的。

式I化合物之馬來酸鹽可製備成各種結晶形式，包括例如形式I、形式II、形式III、形式IV或形式V。

式I化合物馬來酸鹽形式I：

本文中提供以下實例1及實例7中所描述之式I化合物之結晶形式之實施例(i)至實施例(x)，稱為形式I。

(i)在一些實施例中，式I化合物之馬來酸鹽就2-θ而言具有選自約4.3°、約8.4°、約12.6°、約13.2°及約18.5°之至少一個XRPD峰。

(ii)在一些實施例中，式I化合物之馬來酸鹽就2-θ而言具有選自約4.3°、約8.4°、約12.6°、約13.2°及約18.5°之至少兩個XRPD峰。

(iii)在一些實施例中，式I化合物之馬來酸鹽就2-θ而言具有選自約4.3°、約8.4°、約12.6°、約13.2°及約18.5°之至少三個XRPD峰。

(iv)在一些實施例中，式I化合物之馬來酸鹽就2-θ而言具有選自約4.3°、約8.4°、約12.6°、約13.2°及約18.5°之至少四個XRPD峰。

(v)在一些實施例中，式I化合物之馬來酸鹽就2-θ而言包括以下XRPD峰：約4.3°、約8.4°、約12.6°、約13.2°及約18.5°。

(vi)在一些實施例中，式I化合物之馬來酸鹽就2-θ而言包括以下XRPD峰：約4.3°、約8.4°及約13.2°。

(vii)在一些實施例中，式I化合物之馬來酸鹽具有實質上如圖1中所示之XRPD輪廓。

(viii)在一些實施例中，式I化合物之馬來酸鹽具有在約211℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。

(ix)在一些實施例中，式I化合物之馬來酸鹽具有實質上如圖2中所示之DSC熱分析圖。

(x)在一些實施例中，式I化合物之馬來酸鹽具有實質上如圖3中所示之TGA熱分析圖。

式I化合物馬來酸鹽形式II：

本文中提供以下實例16及實例17中所描述之式I化合物之結晶形式，稱為形式II。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式II就2-θ而言具有選自約3.8°、約7.8°、約23.5°及約26.0°之至少一個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式II就2-θ而言具有選自約3.8°、約7.8°、約23.5°及約26.0°之至少兩個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式II就2-θ而言具有選自約3.8°、約7.8°、約23.5°及約26.0°之至少三個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式II具有就2-θ而言包括以下XRPD峰：約3.8°、約7.8°、約23.5°及約26.0°。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式II具有就2-θ而言包括以下XRPD峰：約3.8°、約7.8°及約23.5°。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式II具有實質上如圖25中所示之XRPD輪廓。

式I化合物馬來酸鹽形式III：

本文中提供以下實例16及實例18中所描述之式I化合物之結晶形式，稱為形式III。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III就2-θ而言具有選自約3.8°、約7.7°、約12.1°、約18.9°及約20.6°之至少一個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III就2-θ而言具有選自約3.8°、約7.7°、約12.1°、約18.9°及約20.6°之至少兩個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III就2-θ而言具有選自約3.8°、約7.7°、約12.1°、約18.9°及約20.6°之至少三個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III就2-θ而言具有選自約3.8°、約7.7°、約12.1°、約18.9°及約20.6°之至少四個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III就2-θ而言包括以下XRPD峰：3.8°、約7.7°、約12.1°、約18.9°及約20.6°。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III就2-θ而言包括以下XRPD峰：約3.8°、約7.7°、約12.1°及約18.9°。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III具有實質上如圖26中所示之XRPD輪廓。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III具有在約165.4℃及約195.4℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III具有在約165.4℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III具有在約195.4℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III具有實質上如圖27中所示之DSC熱分析圖。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式III具有實質上如圖28中所示之TGA熱分析圖。

式I化合物馬來酸鹽形式IV：

本文中提供以下實例16及實例19中所描述之式I化合物之結晶形式，稱為形式IV。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV就2-θ而言具有選自約3.9°、約4.6°、約7.8°、約9.1°及約22.8°之至少一個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV就2-θ而言具有選自約3.9°、約4.6°、約7.8°、約9.1°及約22.8°之至少兩個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV就2-θ而言具有選自約3.9°、約4.6°、約7.8°、約9.1°及約22.8°之至少三個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV就2-θ而言具有選自約3.9°、約4.6°、約7.8°、約9.1°及約22.8°之至少四個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV就2-θ而言包括以下XRPD峰：約3.9°、約4.6°、約7.8°、約9.1°及約22.8°。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV就2-θ而言包括以下XRPD峰：約3.9°、約4.6°、約7.8°及約9.1°。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV具有實質上如圖29中所示之XRPD輪廓。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV具有在約152.1℃及202.6℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV具有在約152.1℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV具有在約202.6℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV具有實質上如圖30中所示之DSC熱分析圖。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式IV具有實質上如圖31中所示之TGA熱分析圖。

式I化合物馬來酸鹽形式V：

本文中提供以下實例16及實例20中所描述之式I化合物之結晶形式，稱為形式V。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式V就2-θ而言具有選自約4.1°、約8.3°、約8.8°、約18.0°及約27.3°之至少一個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式V就2-θ而言具有選自約4.1°、約8.3°、約8.8°、約18.0°及約27.3°之至少兩個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式V就2-θ而言具有選自約4.1°、約8.3°、約8.8°、約18.0°及約27.3°之至少三個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式V就2-θ而言具有選自約4.1°、約8.3°、約8.8°、約18.0°及約27.3°之至少四個XRPD峰。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式V就2-θ而言包括以下XRPD峰：約4.1°、約8.3°、約8.8°、約18.0°及約27.3°。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式V就2-θ而言包括以下XRPD峰：約4.1°、約8.3°、約8.8°及約27.3°。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式V具有實質上如圖32中所示之XRPD輪廓。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式V具有在約200.1℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式V具有實質上如圖33中所示之DSC熱分析圖。

在一些實施例中，式I化合物馬來酸鹽形式V具有實質上如圖34中所示之TGA熱分析圖。

本申請案亦提供式II化合物之鹽：

因此，在一些實施例中，本申請案提供選自以下之鹽： N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺磷酸鹽；N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽；N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽；N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺鹽酸鹽；N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺柳酸鹽；N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺甲磺酸鹽；及N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺乙磺酸鹽，或其醫藥學上可接受之溶劑合物及水合物。

在一些實施例中，本申請案提供N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺磷酸鹽(本文中亦稱為式II化合物之磷酸鹽、化合物II之磷酸鹽、化合物II磷酸鹽或其任何變化形式)。

在一些實施例中，該鹽為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺與磷酸之1：1化學計算比。

在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽為結晶的。

在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽實質上經分離。

在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽就2-θ而言具有選自約5.3°、約9.1°、約14.9°、約15.8°及約19.3°之至少一個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽就2-θ而言具有選自約5.3°、約9.1°、約14.9°、約15.8°及約19.3°之至少兩個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽就2-θ而言具有選自約5.3°、約9.1°、約14.9°、約15.8°及約19.3°之至少三個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽就2-θ而言具有選自約5.3°、約9.1°、約14.9°、約15.8°及約19.3°之至少四個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽就2-θ而言包括以下XRPD峰：5.3°、約9.1°、約14.9°、約15.8°及約19.3°。

在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽具有實質上如圖4中所示之XRPD輪廓。

在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽具有在約257.2℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽具有實質上如圖5中所示之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之磷酸鹽具有實質上如圖6中所示之TGA熱分析圖。

在一些實施例中，本申請案提供N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽(本文中亦稱為式II化合物之馬來酸鹽、化合物II之馬來酸鹽、化合物II馬來酸鹽或其任何變化形式)。

在一些實施例中，該鹽為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺與馬來酸之1：1化學計算比。

在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽為結晶的。

在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽實質上經分離。

在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽就2-θ而言具有選自約4.5°、約6.5°、約14.1°、約24.0°及約28.2°之至少一個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽就2-θ而言具有選自約4.5°、約6.5°、約14.1°、約24.0°及約28.2°之至少兩個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽就2-θ而言具有選自約4.5°、約6.5°、約14.1°、約24.0°及約28.2°之至少三個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽就2-θ而言具有選自約4.5°、約6.5°、約14.1°、約24.0°及約28.2°之至少四個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽就2-θ而言包括以下XRPD峰：約4.5°、約6.5°、約14.1°、約24.0°及約28.2°。

在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽具有實質上如圖7中所示之XRPD輪廓。

在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽具有在約194.8℃及/或約239.7℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽具有實質上如圖8中所示之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之馬來酸鹽具有實質上如圖9中所示之TGA熱分析圖。

在一些實施例中，本申請案提供N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽(本文中亦稱為式II化合物之半硫酸鹽、化合物II之半硫酸鹽、化合物II半硫酸鹽或其任何變化形式)。

在一些實施例中，該鹽為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺與硫酸之1：0.5(亦即，2：1)化學計算比。

在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽為結晶的。

在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽實質上經分離。

在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽就2-θ而言具有選自約5.3°、約8.5°、約15.3°、約20.1°及約24.9°之至少一個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽就2-θ而言具有選自約5.3°、約8.5°、約15.3°、約20.1°及約24.9°之至少兩個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽就2-θ而言具有選自約5.3°、約8.5°、約15.3°、約20.1°及約24.9°之至少三個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽就2-θ而言具有選自約5.3°、約8.5°、約15.3°、約20.1°及約24.9°之至少四個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽就2-θ而言包括以下XRPD峰：約5.3°、約8.5°、約15.3°、約20.1°及約24.9°。

在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽具有實質上如圖10中所示之XRPD輪廓。

在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽具有在約289.4℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽具有實質上如圖11中所示之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之半硫酸鹽具有實質上如圖12中所示之TGA熱分析圖。

在一些實施例中，本申請案提供N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺鹽酸鹽(本文中亦稱為式II化合物之鹽酸鹽、化合物II之鹽酸鹽、化合物II鹽酸鹽或其任何變化形式)。

在一些實施例中，該鹽為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺與鹽酸之1：1化學計算比。

在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽為結晶的。

在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽實質上經分離。

在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽就2-θ而言具有選自約6.5°、約9.7°、約14.9°、約21.5°及約23.9°之至少一個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽就2-θ而言具有選自約6.5°、約9.7°、約14.9°、約21.5°及約23.9°之至少兩個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽就2-θ而言具有選自約6.5°、約9.7°、約14.9°、約21.5°及約23.9°之至少三個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽就2-θ而言具有選自約6.5°、約9.7°、約14.9°、約21.5°及約23.9°之至少四個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽就2-θ而言包括以下XRPD峰：約6.5°、約9.7°、約14.9°、約21.5°及約23.9°。

在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽具有實質上如圖13中所示之XRPD輪廓。

在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽具有在約190℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽具有實質上如圖14中所示之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之鹽酸鹽具有實質上如圖15中所示之TGA熱分析圖。

在一些實施例中，本申請案提供N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺柳酸鹽(本文中亦稱為式II化合物之柳酸鹽、化合物II之柳酸鹽、化合物II柳酸鹽或其任何變化形式)。

在一些實施例中，該鹽為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺與柳酸之1：1化學計算比。

在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽為結晶的。

在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽實質上經分離。

在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽就2-θ而言具有選自約7.3°、約14.4°、約15.7°、約19.9°及約21.9°之至少一個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽就2-θ而言具有選自約7.3°、約14.4°、約15.7°、約19.9°及約21.9°之至少兩個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽就2-θ而言具有選自約7.3°、約14.4°、約15.7°、約19.9°及約21.9°之至少三個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽就2-θ而言具有選自約7.3°、約14.4°、約15.7°、約19.9°及約21.9°之至少四個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽就2-θ而言包括以下XRPD峰：約7.3°、約14.4°、約15.7°、約19.9°及約21.9°。

在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽具有實質上如圖16中所示之XRPD輪廓。

在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽具有在約181.7℃、約224.9℃及/或264.5℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽具有實質上如圖17中所示之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之柳酸鹽具有實質上如圖18中所示之TGA熱分析圖。

在一些實施例中，本申請案提供N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺甲磺酸鹽(本文中亦稱為式II化合物之甲磺酸鹽、化合物II之甲磺酸鹽、化合物II甲磺酸鹽或其任何變化形式)。

在一些實施例中，該鹽為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺與甲磺酸之1：1化學計算比。

在一些實施例中，式II化合物之甲磺酸鹽為結晶的。

在一些實施例中，式II化合物之甲磺酸鹽實質上經分離。

在一些實施例中，式II化合物之甲磺酸鹽就2-θ而言具有選自約5.0°、約8.2°、約13.2°及約16.9°之至少一個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之甲磺酸鹽就2-θ而言具有選自約5.0°、約8.2°、約13.2°及約16.9°之至少兩個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之甲磺酸鹽就2-θ而言具有選自約5.0°、約8.2°、約13.2°及約16.9°之至少三個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之甲磺酸鹽就2-θ而言包括以下XRPD峰：約5.0°、約8.2°、約13.2°及約16.9°。

在一些實施例中，式II化合物之甲磺酸鹽具有實質上如圖19中所示之XRPD輪廓。

在一些實施例中，式II化合物之甲磺酸鹽具有在約174.8℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之甲磺酸鹽具有實質上如圖20中所示之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之甲磺酸鹽具有實質上如圖21中所示之TGA熱分析圖。

在一些實施例中，本申請案提供N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺乙磺酸鹽(本文中亦稱為式II化合物之乙磺酸鹽、化合物II之乙磺酸鹽、化合物II乙磺酸鹽或其任何變化形式)。

在一些實施例中，該鹽為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺與乙磺酸之1：1化學計算比。

在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽為結晶的。

在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽實質上經分離。

在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽就2-θ而言具有選自約4.9°、約7.6°、約15.4°、約16.8°及約17.5°之至少一個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽就2-θ而言具有選自約4.9°、約7.6°、約15.4°、約16.8°及約17.5°之至少兩個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽就2-θ而言具有選自約4.9°、約7.6°、約15.4°、約16.8°及約17.5°之至少三個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽就2-θ而言具有選自約4.9°、約7.6°、約15.4°、約16.8°及約17.5°之至少四個XRPD峰。在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽就2-θ而言包括以下XRPD峰：約4.9°、約7.6°、約15.4°、約16.8°及約17.5°。在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽就2-θ而言包括以下XRPD峰：約4.9°、約7.6°、約15.4°及約17.5°。

在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽具有實質上如圖22中所示之XRPD輪廓。

在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽具有在約187.7℃處存在吸熱峰之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽具有實質上如圖23中所示之DSC熱分析圖。在一些實施例中，式II化合物之乙磺酸鹽具有實質上如圖24中所示之TGA熱分析圖。

方法

本申請案進一步提供一種製備式I之鹽的方法：

因此，本文中提供一種製備鹽N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基) 吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽之方法，該方法包括使式I化合物與馬來酸反應以形成該鹽。製備式I化合物之馬來酸鹽的方法示於流程1中且描述於實例1中。

在一些實施例中，基於1當量式I化合物使用約1當量馬來酸。

在一些實施例中，該使式I化合物與馬來酸反應係在溶劑組分之存在下進行。

在一些實施例中，該溶劑組分包含甲醇。

在一些實施例中，該溶劑組分包含二氯甲烷。

在一些實施例中，該溶劑組分包含甲醇及二氯甲烷。

在一些實施例中，該方法進一步包括移除大部分二氯甲烷以使該鹽沈澱。

在一些實施例中，該方法進一步包括在該反應之前形成式I化合物於溶劑組分中之溶液。

在另一實施例中，該溶液係藉由將式I化合物於溶劑組分中之漿液加熱至約45℃至約55℃之溫度而形成。

在另一實施例中，該方法進一步包括在該使式I化合物與馬來酸反應之前攪拌該溶液；及過濾該溶液以形成濾液。

在另一實施例中，該方法進一步包括在該將該漿液加熱至約45℃至約55℃之溫度以形成溶液之步驟之後且在該攪拌該溶液之步驟之前向溶液中添加活性碳及矽膠。

在一些實施例中，製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并 [1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽之方法包括：在室溫下向溶劑組分中添加式I化合物以形成漿液；將該漿液加熱至約45℃至約55℃之溫度以形成溶液；攪拌該溶液；過濾該溶液以產生濾液；向該濾液中添加馬來酸；及自該濾液中移除溶劑以使該鹽沈澱。

在一些實施例中，該溶劑組分包含甲醇。

在一些實施例中，該溶劑組分包含二氯甲烷。

在一些實施例中，該溶劑組分包含甲醇及二氯甲烷。

在一些實施例中，該方法進一步包括在該將該漿液加熱至約45℃至約55℃之溫度以形成溶液之步驟之後且在該攪拌該溶液之步驟之前向該溶液中添加活性碳。

在一些實施例中，該方法進一步包括在該將該漿液加熱至約45℃至約55℃之溫度以形成溶液之步驟之後且在該攪拌該溶液之步驟之前向該溶液中添加矽膠。

在一些實施例中，該方法進一步包括在該將該漿液加熱至約45℃至約55℃之溫度以形成溶液之步驟之後且在該攪拌該溶液之步驟之前向該溶液中添加活性碳及矽膠。

本文中提供一種製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽形式II之方法，該方法包括在25±1℃下使化合物I馬來酸鹽於三氯甲烷中之飽和溶液蒸發。製備式I化合物馬來酸鹽形式II的方法見於實例16、表10中。

本文中提供一種製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽形式III之方法，該方法包括在25±1℃下使化合物I馬來酸鹽於1,4-二噁烷中之飽和溶液蒸發。製備式I化合物馬來酸鹽形式III的方法見於實例16、表10中。

本文中提供一種製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽形式IV之方法，該方法包括在50±1℃下使化合物I馬來酸鹽於n-BuOH中之飽和溶液蒸發。製備式I化合物馬來酸鹽形式IV的方法見於實例16、表10中。

本文中提供一種製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽形式V之方法，該方法包括向庚烷中添加化合物I馬來酸鹽於二氯甲烷中之飽和溶液並且攪拌。製備式I化合物馬來酸鹽形式V的方法見於實例16、表10中。

本申請案進一步提供一種製備式II之鹽的方法：

因此，本文中提供一種製備鹽N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽之方法，該方法包括使式II化合物與硫酸反應以形成該鹽。製備式II化合物之半硫酸鹽的方法見於實例2及實例8、表2中。

在一些實施例中，基於1當量式II化合物使用約0.6當量硫酸。

在一些實施例中，該方法包括：向溶劑組分中添加式II化合物以形成溶液；在室溫下向該溶液中添加硫酸；濃縮該溶液以形成漿液；在約60℃至約70℃之溫度下攪拌該漿液；及將該漿液冷卻至約15℃至約25℃之溫度以使該鹽沈澱。

在一些實施例中，該溶劑組分包含甲醇。

在一些實施例中，該溶劑組分包含二氯甲烷。

在一些實施例中，該溶劑組分包含甲醇及二氯甲烷。

在一些實施例中，該硫酸為約1M水溶液。

在一些實施例中，該方法進一步包括製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽。製備式II化合物之硫酸鹽的方法示於流程2中且描述於實例2中。

在一些實施例中，製備鹽N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽之方法包括基於1當量式II化合物使式II化合物與約1當量硫酸反應。

在一些實施例中，製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并 [1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽之方法包括：在室溫下向第一溶劑組分中添加式II化合物以形成溶液；將該溶液加熱至約50℃至約60℃之溫度；向該溶液中添加硫酸；及移除溶劑以使該硫酸鹽沈澱。

在一些實施例中，該第一溶劑包含甲醇。

在一些實施例中，該硫酸係呈水溶液形式添加。

在一些實施例中，以上製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽之方法包括以下步驟：向第二溶劑組分中添加N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽以形成漿液；將該漿液加熱至約30℃至約40℃之溫度；攪拌該漿液；及收集所得半硫酸鹽。

在一些實施例中，該第二溶劑組分包含水。

本文中提供一種製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽之非晶形式的方法。製備式II化合物之半硫酸鹽之非晶形式的方法示於流程1中且描述於實例2中。

在一些實施例中，製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5- 甲醯胺半硫酸鹽之非晶形式的方法包括以下步驟：在室溫下向第三溶劑組分中添加N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽以形成溶液；過濾該溶液；濃縮濾液；及乾燥所得固體，從而獲得非晶半硫酸鹽。

在一些實施例中，該第三溶劑組分包含丙酮及甲醇。

本文中提供一種製備鹽N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺磷酸鹽之方法，該方法包括使式II化合物與磷酸反應以形成該鹽。製備式II化合物之磷酸鹽的方法見於實例8、表2中。在一些實施例中，基於1當量式II化合物使用約1.2當量磷酸。

本文中提供一種製備鹽N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽之方法，該方法包括使式II化合物與馬來酸反應以形成該鹽。製備式II化合物之馬來酸鹽的方法見於實例8、表2中。在一些實施例中，基於1當量式II化合物使用約1.5當量馬來酸。

本文中提供一種製備鹽N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺鹽酸鹽之方法，該方法包括使式II化合物與鹽酸反應以形成該鹽。製備式II化合物之鹽酸鹽的方法見於實例8、表2中。在一些實施例中，基於1當量式II化合物使用約1.2當量鹽酸。

本文中提供一種製備鹽N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺柳酸鹽之方法，該方法包括使式II化合物與柳酸反應以形成該鹽。製備式II化合物之柳酸鹽的方法見於實例8、表2中。在一些實施例中，基於1當量式II化合物使用約1.2當量柳酸。

本文中提供一種製備鹽N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺甲磺酸鹽之方法，該方法包括使式II化合物與甲磺酸反應以形成該鹽。製備式II化合物之甲磺酸鹽的方法見於實例8、表2中。在一些實施例中，基於1當量式II化合物使用約1當量甲磺酸。

本文中提供一種製備鹽N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺乙磺酸鹽之方法，該方法包括使式II化合物與乙磺酸反應以形成該鹽。製備式II化合物之乙磺酸鹽的方法見於實例8、表2中。在一些實施例中，基於1當量式II化合物使用約1當量乙磺酸。

應瞭解，個別實施例之內容中出於清楚性目的而描述之某些本發明特徵亦可組合提供於單一實施例中(在該等實施例意欲組合為如同以多重依賴性形式書寫時)。相反，單一實施例之內容中出於簡便性目的而描述之各種本發明特徵亦可各別地或以任何適合之子組合形式提供。

本發明之鹽及化合物亦可包括中間物或者最終鹽或化合物中存在之原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序數但不同質量數之彼等原子。舉例而言，氫之同位素包括氚及氘。

在一些實施例中，可發現該等化合物及鹽與諸如水及溶劑之其他物質在一起(例如水合物及溶劑合物)或可加以分離。

在一些實施例中，本文中所描述之化合物或其鹽(例如式I化合物之馬來酸鹽或式II化合物之半硫酸鹽)實質上經分離。

片語「醫藥學上可接受」在本文中用於指在合理醫學判斷之範疇內、適用於與人類及動物之組織接觸而無過度毒性、刺激、過敏反應或其他問題或併發症、與合理效益/風險比相稱的彼等化合物、物質、組合物及/或劑型。

如應瞭解，本文中提供之化合物，包括其鹽，可使用已知有機合成技術來製備且可根據許多可能合成途徑中之任一種來合成。可根據此項技術中已知的任何適合之方法來監測本文中所描述之方法。舉例而言，可藉由光譜手段來監測產物形成，諸如核磁共振光譜法(例如1H或13C)、紅外光譜法或分光光度法(例如UV-可見光)；或藉由層析法，諸如高效液相層析法(HPLC)或薄層層析法(TLC)或其他相關技術。

如本文中所使用，術語「皮應」如此項技術中已知加以使用且一般係指以允許化學試劑在分子層級上相互作用從而達成化學或物理轉化之方式使其在一起。在一些實施例中，該反應涉及至少兩種試劑，其中相對於第一試劑使用一或多當量第二試劑。本文中所描述之製程的反應步驟可在一定時間內且在適於製備所鑑定之產物的條件進行。

本文中所描述之方法的反應可在適合之溶劑中進行，該等溶劑可由熟習有機合成技術者容易地選擇。適合之溶劑在進行反應之溫度，例如可在溶劑之冰點溫度至溶劑之沸點溫度範圍內之溫度下可能實質上與起始物質(反應物)、中間物或產物不具反應性。指定反應可在一種溶劑或多於一種溶劑之混合物中進行。視特定反應步驟而定，可選擇適用於特定反應步驟之溶劑(或其混合物)。

適合之溶劑可包括鹵化溶劑，諸如四氯化碳、溴二氯甲烷、二溴氯甲烷、三溴甲烷、三氯甲烷、溴氯甲烷、二溴甲烷、氯丁烷、二氯甲烷、四氯乙烯、三氯乙烯、1,1,1-三氯乙烷、1,1,2-三氯乙烷、1,1-二氯乙烷、2-氯丙烷、 1,2-二氯乙烷、1,2-二溴乙烷、六氟苯、1,2,4-三氯苯、1,2-二氯苯、氯苯、氟苯、其混合物及其類似物。

適合之醚溶劑包括：二甲氧基甲烷、四氫呋喃、1,3-二噁烷、1,4-二噁烷、呋喃、***、乙二醇二甲醚、乙二醇二***、二乙二醇二甲醚、二乙二醇二***、三乙二醇二甲醚、苯甲醚、第三丁基甲醚、其混合物及其類似物。

適合之質子性溶劑可包括例如但不限於水、甲醇、乙醇、2-硝基乙醇、2-氟乙醇、2,2,2-三氟乙醇、乙二醇、1-丙醇、2-丙醇、2-甲氧基乙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、第三丁醇、2-乙氧基乙醇、二乙二醇、1-戊醇、2-戊醇或3-戊醇、新戊醇、第三戊醇、二乙二醇單甲醚、二乙二醇單***、環己醇、苯甲醇、苯酚或甘油。

適合之非質子性溶劑可包括例如但不限於四氫呋喃(THF)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N-二甲基乙醯胺(DMA)、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(DMPU)、1,3-二甲基-2-咪唑啶酮(DMI)、N-甲基吡咯啶酮(NMP)、甲醯胺、N-甲基乙醯胺、N-甲基甲醯胺、乙腈、二甲亞碸、丙腈、甲酸乙酯、乙酸甲酯、六氯丙酮、丙酮、乙基甲基酮、乙酸乙酯、環丁碸、N,N-二甲基丙醯胺、四甲基脲、硝基甲烷、硝基苯或六甲基磷醯胺。

適合之烴溶劑包括苯、環己烷、戊烷、己烷、甲苯、環庚烷、甲基環己烷、庚烷、乙苯、間二甲苯、鄰二甲苯或對二甲苯、辛烷、茚烷、壬烷或萘。

本文中所描述之方法之反應可在適當溫度下進行，該等溫度可由熟習此項技術者容易地確定。反應溫度將視例如以下因素而定：試劑及溶劑(若存在)之熔點及沸點；反應熱力學(例如，劇烈放熱反應可能需要在低溫下進行)；及反應動力學(例如，高活化能屏障可能需要高溫)。

此項技術中應理解如本文中所使用之表述「環境溫度」及「室溫」且其大體上係指約為進行反應之室內溫度的溫度，例如反應溫度，例如約20℃至約30℃之溫度。

本文中描述之方法的反應可在空氣中或在惰性氛圍下進行。典型地，含有實質上與空氣有反應性之試劑或產物的反應可使用熟習此項技術者熟知的空氣敏感性合成技術來進行。

使用方法

本發明之鹽(例如式I化合物之鹽及式II化合物之鹽)可調節或抑制TAM激酶之活性。舉例而言，本發明化合物可用於藉由向需要抑制TAM激酶之細胞、個體或患者投與抑制量之本發明化合物來抑制該等激酶在該細胞中或者在該個體或患者中之活性。

在一些實施例中，本發明之鹽對TAM激酶之選擇性超過一或多種其他激酶。在一些實施例中，本發明之化合物對TAM激酶之選擇性超過其他激酶。在一些實施例中，該選擇性是2倍或更多倍、3倍或更多倍、5倍或更多倍、10倍或更多倍、25倍或更多倍、50倍或更多倍，或者100倍或更多倍。

本發明之鹽可抑制AXL、MER及TYRO3中之一或多者。在一些實施例中，該等鹽對一種TAM激酶之選擇性超過另一種。「選擇性」意謂與參考酶，諸如另一TAM激酶相比，化合物分別以更大親和力或效力結合或抑制TAM激酶。舉例而言，該等鹽可能對AXL之選擇性超過MER及TYRO3、對MER之選擇性超過AXL及TYRO3，或者對AXL及MER之選擇性超過TYRO3。在一些實施例中，該等鹽抑制所有TAM家族成員(例如，AXL、MER及TYRO3)。在一些實施例中，該等鹽可能對AXL及MER之選擇性超過TYRO3及其他激酶。在一些實施例中，本文中提供一種抑制AXL及MER激酶之方法，該方法包括使該AXL及MER激酶與本文中提供之鹽或其醫藥學上可接受之鹽接觸。

作為TAM激酶抑制劑，本發明化合物適用於治療各種與TAM激酶異常表現或活性相關之疾病。抑制TAM激酶之(式I及式II)化合物之鹽將適用於提供預防腫瘤生長或誘導腫瘤細胞凋亡之手段，特定言之，藉由抑制血管生成。因此，預期該等鹽將被證實適用於治療或預防增殖性病症，諸如癌症。特定言之，存在受體酪胺酸激酶活化突變體或受體酪胺酸激酶上調之腫瘤可能對該等抑制劑尤其敏感。

在某些實施例中，本發明提供一種治療有需要之患者的由TAM激酶介導之疾病或病症的方法，該方法包括向該患者投與本文中提供之鹽(例如，式I化合物之鹽及式II化合物之鹽)或其醫藥學上可接受之組合物的步驟。

舉例而言，本發明之鹽適用於治療癌症。實例癌症包括膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、小腸癌、結腸癌、直腸癌、肛門癌、子宮內膜癌、胃癌、頭頸癌(例如喉癌、下咽癌、鼻咽癌、口咽癌、唇癌及口癌)、腎癌、肝癌(例如，肝細胞癌、膽管細胞癌)、肺癌(例如，腺癌、小細胞肺癌及非小細胞肺癌、小細胞癌及非小細胞癌、支氣管肺癌、支氣管腺瘤、胸膜肺胚細胞瘤)、卵巢癌、***癌、睾丸癌、子宮癌、食道癌、膽囊癌、胰臟癌(例如外分泌胰臟癌)、胃癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、皮膚癌(例如鱗狀細胞癌、卡波西氏肉瘤(Kaposi sarcoma)、麥克爾氏細胞皮膚癌(Merkel cell skin cancer))及腦癌(例如星形細胞瘤、髓母細胞瘤、室管膜瘤、神經外胚層腫瘤、松果體瘤)。

可用本發明化合物治療之其他癌症包括骨癌、眼內癌、婦科癌、內分泌系統癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、垂體癌、三陰性乳癌(TNBC)及環境誘導之癌症，包括彼等由石棉誘導之癌症。

其他實例癌症包括造血惡性病，諸如白血病或淋巴瘤、多發性骨髓瘤、慢性淋巴細胞性淋巴瘤、成人T細胞白血病、B細胞淋巴瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、急性骨髓性白血病、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)或非霍奇金氏淋巴瘤、骨髓增生性贅瘤(例如真性紅血球增多症、本態性血小板增多症及原發性骨髓纖維化)、瓦登斯特隆氏巨球蛋白血症(Waldenstrom's Macroglubulinemia)、毛細胞性淋巴瘤、慢性骨髓性淋巴瘤、急性淋巴母細胞性淋巴瘤、AIDS相關淋巴瘤及伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)。

可用本發明化合物治療之其他癌症包括眼腫瘤、神經膠質母細胞瘤、黑素瘤、橫紋肌肉瘤、淋巴肉瘤及骨肉瘤。

本發明之鹽亦可用於抑制腫瘤轉移。

在一些實施例中，可使用本發明化合物治療之疾病及適應症包括但不限於血液學癌症、肉瘤、肺癌、胃腸癌、生殖泌尿道癌、肝癌、骨癌、神經系統癌症、婦科癌及皮膚癌。

例示性血液學癌症包括淋巴瘤及白血病，諸如急性淋巴母細胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、急性前骨髓細胞性白血病(APL)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、小淋巴細胞性淋巴瘤(SLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)、套細胞淋巴瘤(MCL)、邊緣區淋巴瘤(MZL)、非霍奇金氏淋巴瘤(包括復發性或難治性NHL)、濾泡性淋巴瘤(FL)、霍奇金氏淋巴瘤、淋巴母細胞性淋巴瘤、骨髓增殖性疾病(例如原發性骨髓纖維化(PMF)、真性紅血球增多症(PV)、本態性血小板增多症(ET))、脊髓發育不良症候群(MDS)、T細胞急性淋巴母細胞性淋巴瘤(T-ALL)、多發性骨髓瘤(MM)、皮膚T細胞淋巴瘤、周圍T細胞淋巴瘤、瓦登斯特隆氏巨球蛋白血症、毛細胞性淋巴瘤、慢性骨髓性淋巴瘤及伯基特氏淋巴瘤。

例示性肉瘤包括軟骨肉瘤、尤因氏肉瘤(Ewing's sarcoma)、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、血管肉瘤、纖維肉瘤、脂肪肉瘤、黏液瘤、橫紋肌瘤、橫紋肌肉瘤、纖維瘤、脂肪瘤、錯構瘤及畸胎瘤。

例示性肺癌包括非小細胞肺癌(NSCLC)、小細胞肺癌、支氣管癌(鱗狀細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌)、肺泡(小支氣管)癌、支氣管腺瘤、軟骨瘤型錯構瘤及間皮瘤。

例示性胃腸癌包括食道癌(鱗狀細胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃癌(癌瘤、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰臟癌(導管腺癌、胰島瘤、升糖素瘤、胃泌素瘤、類癌腫瘤、血管活性腸肽瘤)、小腸癌(腺癌、淋巴瘤、類癌腫瘤、卡波西氏肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神經纖維瘤、纖維瘤)、大腸癌(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯構瘤、平滑肌瘤)、結腸直腸癌及膽管癌。

例示性泌尿生殖道癌包括腎癌(腺癌、威爾姆氏腫瘤[腎母細胞瘤]、腎細胞癌)、膀胱癌及尿路癌(鱗狀細胞癌、移行細胞癌、腺癌、尿路上皮癌)、***癌(腺癌、肉瘤)及睪丸癌(精原細胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質細胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣瘤、脂肪瘤)。

例示性肝癌包括肝細胞瘤(肝細胞癌)、膽管型肝癌、肝母細胞瘤、血管肉瘤、肝細胞腺瘤及血管瘤。

例示性骨癌包括例如骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、軟骨肉瘤、尤因氏肉瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤)、多發性骨髓瘤、惡性巨細胞瘤脊索瘤、骨軟骨纖維瘤(骨軟骨性外生骨疣)、良性軟骨瘤、軟骨母細胞瘤、軟骨黏液樣纖維瘤、骨樣骨瘤及巨細胞瘤。

例示性神經系統癌症包括顱骨癌(骨瘤、血管瘤、肉芽腫、黃瘤、變形性骨炎)、腦膜癌(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經膠質瘤病)、腦癌(星細胞瘤、神經管細胞瘤、神經膠質瘤、室管膜瘤、胚組織瘤(松果體瘤)、神經膠質母細胞瘤、多型性神經膠質母細胞瘤、寡突膠質瘤、許旺氏細胞瘤(schwannoma)、視網膜母細胞瘤、先天性腫瘤)及脊髓癌(神經纖維瘤、腦膜瘤、神經膠質瘤、肉瘤)以及神經母細胞瘤、賴爾米特-杜克洛氏病(Lhermitte-Duclos disease)、中樞神經系統(CNS)贅瘤、原發性CNS淋巴瘤及脊髓腫瘤。

例示性婦科癌症包括子宮癌(子宮內膜癌)、子宮頸癌(子宮頸癌、腫瘤前子宮頸發育異常)、卵巢癌(卵巢癌瘤(漿液性囊腺癌、黏液性囊腺癌、未分類癌瘤)、粒層-泡膜細胞腫瘤、塞氏細胞-萊氏細胞腫瘤(Sertoli-Leydig cell tumor)、無性細胞瘤、惡性畸胎瘤)、外陰癌(鱗狀細胞癌、上皮內癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤)、***癌(透明細胞癌、鱗狀細胞癌、葡萄樣肉瘤(胚胎性橫紋肌肉瘤)及輸卵管癌(癌瘤)。

例示性皮膚癌包括黑素瘤、基底細胞癌、鱗狀細胞癌、卡波西氏肉瘤、莫克爾氏細胞皮膚癌、胎塊發育不良痣、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤及瘢痕瘤。

例示性頭頸癌包括神經膠質母細胞瘤、黑素瘤、橫紋肌肉瘤、淋巴肉瘤、骨肉瘤、鱗狀細胞癌、腺癌、口腔癌、喉癌、鼻咽癌、鼻癌及副鼻癌、甲狀腺癌及副甲狀腺癌。

在一些實施例中，本發明提供一種治療有需要之患者的肝細胞癌的方法，該方法包括向該患者投與式I化合物之鹽或式II化合物之鹽或者包含式I化合物之鹽或式II化合物之鹽的組合物的步驟。

在一些實施例中，本發明提供一種治療有需要之患者的橫紋肌肉瘤、食道癌、乳癌或頭頸癌的方法，該方法包括向該患者投與式I化合物之鹽或式II化合物之鹽或者包含式I化合物之鹽或式II化合物之鹽的組合物的步驟。

在一些實施例中，本發明提供一種治療癌症之方法，其中該癌症係選自肝細胞癌、乳癌、膀胱癌、結腸直腸癌、黑素瘤、間皮瘤、肺癌、***癌、胰臟癌、睾丸癌、甲狀腺癌、鱗狀細胞癌、神經膠質母細胞瘤、神經母細胞瘤、子宮癌及橫紋肌肉瘤。

靶向TAM受體酪胺酸激酶可提供治療病毒性疾病之治療方法(T Shibata等人，The Journal of Immunology,2014,192,3569-3581)。本發明提供一種治療感染，諸如病毒感染之方法。該方法包括向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物之鹽或式II化合物之鹽或者包含式I化合物之鹽或式II化合物之鹽的組合物。

引起可藉由本發明方法治療之感染的病毒的實例包括但不限於人類免疫缺乏病毒、人類乳頭狀瘤病毒、流感、A型、B型、C型或D型肝炎病毒、腺病毒、痘病毒、單純疱疹病毒、人類巨細胞病毒、嚴重急性呼吸道症候群病毒、埃博拉病毒(ebola virus)、馬伯格氏病毒(Marburg virus)及麻疹病毒。在一些實施例中，引起可藉由本發明方法治療之感染的病毒包括但不限於肝炎(A型、B型或C型)病毒、疱疹病毒(例如VZV、HSV-1、HAV-6、HSV-II及CMV、埃巴二氏病毒(Epstein Barr virus))、腺病毒、流感病毒、黃熱病病毒(例如：西尼羅病毒、登革熱病毒、壁蝨傳染性腦炎病毒、黃熱病病毒、寨卡病毒(Zika))、埃可病毒(echovirus)、鼻病毒、柯薩奇病毒(coxsackie virus)、冠狀病毒、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、輪狀病毒、麻疹病毒、風疹病毒、細小病毒、牛痘病毒、HTLV病毒、登革熱病毒、乳頭狀瘤病毒、軟疣病毒、脊髓灰質炎病毒、狂犬病病毒、JC病毒及蟲媒病毒性腦炎病毒。

在一些實施例中，本發明提供一種治療血栓形成之方法(J.M.E.M.Cosemans等人，J.of Thrombosis and Haemostasis 2010,8,1797-1808；及A.Angelillo-Scherrer等人，J.Clin.Invest.2008,118,583-596)。

組合療法

一或多種其他醫藥劑或治療方法，諸如抗病毒劑、化學治療劑或其他抗癌劑、免疫增強劑、免疫抑制劑、放射、抗腫瘤及抗病毒疫苗、細胞因子療法(例如，IL2、GM-CSF等)及/或酪胺酸激酶抑制劑可與式(I)化合物或如本文中所描述之化合物組合用於治療TAM相關疾病、病症或病狀。該等劑可與本發明鹽(例如，式I化合物之鹽及式II化合物之鹽)組合於單一劑型中，或該等劑可作為單獨的劑型同時或依序投與。

設想與本發明之鹽組合使用之適合抗病毒劑可包含核苷及核苷酸逆轉錄酶抑制劑(NRTI)、非核苷逆轉錄酶抑制劑(NNRTI)、蛋白酶抑制劑及其他抗病毒藥物。

實例適合之NRTI包括齊多夫定(zidovudine)(AZT)；地達諾新(didanosine)(ddl)；紮西他濱(zalcitabine)(ddC)；司坦夫定(stavudine)(d4T)；拉米夫定(lamivudine)(3TC)；阿巴卡韋(abacavir)(1592U89)；阿德福韋酯(adefovir dipivoxil)[雙(POM)-PMEA]；洛布卡韋(lobucavir)(BMS-180194)；BCH-10652；恩曲他濱(emitricitabine)[(-)-FTC]；β-L-FD4(亦稱為β-L-D4C且名為β-L-2',3'-二去氧-5-氟-包苷)；DAPD((-)-β-D-2,6,-二胺基-嘌呤二氧雜環戊烷)；及洛德諾新(lodenosine)(FddA)。典型的適合NNRTI包括奈韋拉平(nevirapine)(BI-RG-587)；地拉韋定(delaviradine)(BHAP、U-90152)；依法韋侖(efavirenz)(DMP-266)；PNU-142721；AG-1549；MKC-442(1-(乙氧基-甲基)-5-(1-甲基乙基)-6-(苯基甲基)-(2,4(1H,3H)-嘧啶二酮)；以及(+)-胡桐內酯A(NSC-675451)及B。典型的適合蛋白酶抑制劑包括沙奎那韋(saquinavir)(Ro 31-8959)；利托那韋(ritonavir)(ABT-538)；茚地那韋(indinavir)(MK-639)；奈非那韋(nelfnavir)(AG-1343)；安普那韋(amprenavir)(141W94)；拉西那韋(lasinavir)(BMS-234475)；DMP-450；BMS-2322623；ABT-378；及AG-1549。其他抗病毒劑包括羥基脲、利巴韋林(ribavirin)、IL-2、IL-12、噴他夫西(pentafuside)及伊薩姆計畫第11607號。

適用於與本申請案之鹽組合用於治療癌症之劑包括化學治療劑、靶向性癌症療法、免疫療法或放射療法。本發明之鹽可有效地與抗激素劑組合用於治療乳癌及其他腫瘤。適合實例為抗***劑，包括但不限於他莫西芬(tamoxifen)及托瑞米芬(toremifene)；芳香酶抑制劑，包括但不限於來曲唑(letrozole)、阿那曲唑(anastrozole)及依西美坦(exemestane)；腎上腺類固醇(例如培尼皮質酮(prednisone))、孕酮(例如醋酸甲地孕酮(megastrol acetate))及***受體拮抗劑(例如氟維司群(fulvestrant))。適用於治療***癌及其他癌症之抗激素劑亦可與本發明化合物組合。此等包括抗雄性素劑，包括但不限於氟他胺(flutamide)、比卡米特(bicalutamide)及尼魯米特(nilutamide)；促黃體激素釋放激素(LHRH)類似物，包括亮丙瑞林(leuprolide)、奧舍瑞林(oserelin)、曲普瑞林(triptorelin)及組胺瑞林(histrelin)；LHRH拮抗劑(例如地加瑞克(degarelix))；雄激素受體阻斷劑(例如恩紮魯胺(enzalutamide))；及抑制雄性素產生之劑(例如阿比特龍(abiraterone))。

本發明之鹽可與其他針對膜受體激酶之劑組合或依序尤其用於已對靶向性療法發展出原發性或獲得性抗性的患者。此等治療劑包括針對EGFR、Her2、VEGFR、c-Met、Ret、IGFR1、PDGFR、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、TrkA、TrkB、TrkC、ROS、c-Kit或Flt-3以及針對諸如Bcr-Abl及EML4-Alk之癌症相關融合蛋白激酶之抑制劑或抗體。針對EGFR之抑制劑包括吉非替尼(gefitinib)及埃羅替尼(erlotinib)，且針對EGFR/Her2之抑制劑包括但不限於達克替尼(dacomitinib)、阿法替尼(afatinib)、拉帕替尼(lapitinib)及來那替尼(neratinib)。針對EGFR之抗體包括但不限於西妥昔單抗(cetuximab)、帕尼單抗(panitumumab)及奈昔木單抗(necitumumab)。c-Met抑制劑可與TAM抑制劑組合使用。此等包括奧納妥珠單抗(onartumzumab)、替萬替尼(tivantnib)及INC-280。針對FGFR之劑包括但不限於AZD4547、BAY1187982、ARQ087、BGJ398、BIBF1120、TKI258、德立替尼(lucitanib)、多韋替尼(dovitinib)、TAS-120、JNJ-42756493及Debio1347。針對Trk之劑包括但不限於LOXO-101及RXDX-101。針對Abl(或Bcr-Abl)之劑包括伊馬替尼(imatinib)、達沙替尼(dasatinib)、尼羅替尼(nilotinib)及普納替尼(ponatinib)，以及彼等針對Alk(或EML4-ALK)者，包括克唑替尼(crizotinib)。

血管生成抑制劑與TAM抑制劑之組合可能在一些腫瘤中有效。此等包括針對VEGF或VEGFR之抗體或VEGFR激酶抑制劑。針對VEGF之抗體或其他治療蛋白質包括貝伐珠單抗(bevacizumab)及阿柏西普(aflibercept)。VEGFR激酶抑制劑及其他抗血管生成抑制劑包括但不限於舒尼替尼(sunitinib)、索拉非尼(sorafenib)、阿西替尼(axitinib)、西地尼布(cediranib)、帕唑帕尼(pazopanib)、瑞戈非尼(regorafenib)、布立尼布(brivanib)及凡德他尼(vandetanib)。

細胞內信號傳導途徑活化頻繁見於癌症中，且靶向此等途徑之組分的劑已與受體靶向劑組合以增強效力並降低抗性。可與本發明化合物組合之劑的實例包括PI3K-AKT-mTOR途徑抑制劑、Raf-MAPK途徑抑制劑、JAK-STAT途徑抑制劑、Pim激酶抑制劑以及蛋白侶伴及細胞週期進展抑制劑。

針對PI3激酶之劑包括但不限於匹拉昔布(pilaralisib)、伊德昔布(idelalisib)、布帕昔布(buparlisib)及IPI-549。在一些實施例中，PI3K抑制劑對PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kγ或PI3Kδ具有選擇性。mTOR抑制劑，諸如雷帕黴素(rapamycin)、斥消靈(sirolimus)、替西羅莫司(temsirolimus)及依維莫司(everolimus)可與TAM激酶抑制劑組合。其他適合之實例包括但不限於維羅非尼(vemurafenib)及達拉非尼(dabrafenib)(Raf抑制劑)以及曲美替尼(trametinib)、司美替尼(selumetinib)及GDC-0973(MEK抑制劑)。一或多種JAK抑制劑(例如魯索替尼(ruxolitinib)、巴瑞克替尼(baricitinib)、托法替尼(tofacitinib))、Hsp90抑制劑(例如坦螺旋黴素(tanespimycin))、週期素依賴性激酶抑制劑(例如帕博西尼(palbociclib))、PARP抑制劑(例如奧拉帕尼(olaparib))及蛋白酶體抑制劑(例如硼替佐米(bortezomib)、卡非佐米(carfilzomib))亦可與本發明化合物組合。在一些實施例中，JAK抑制劑對JAK1之選擇性超過JAK2及JAK3。針對Pim激酶之劑包括但不限於LGH447、INCB053914及SGI-1776。

其他適合與本發明之鹽組合使用之劑包括化學療法組合，諸如用於肺癌及其他實體腫瘤之基於鉑之雙藥療法(順鉑(cisplatin)或卡鉑(carboplatin)加吉西他濱(gemcitabine)；順鉑或卡鉑加歐洲紫杉醇(docetaxel)；順鉑或卡鉑加太平洋紫杉醇(paclitaxel)；順鉑或卡鉑加培美曲塞(pemetrexed))或吉西他濱加太平洋紫杉醇結合之粒子(Abraxane®)。

適合之化學治療劑或其他抗癌劑包括例如烷基化劑(包括但不限於氮芥類、乙烯亞胺衍生物、烷基磺酸鹽、亞硝基脲及三氮烯)，諸如尿嘧啶氮芥、氮芥、環磷醯胺(Cytoxan^TM)、依弗醯胺(ifosfamide)、美法侖(melphalan)、氮芥苯丁酸(chlorambucil)、哌泊溴烷(pipobroman)、三乙烯-三聚氰胺、三乙烯硫代磷胺、白消安(busulfan)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、鏈脲黴素、達卡巴嗪(dacarbazine)及替莫唑胺(temozolomide)。

其他適用於與本發明之鹽組合之劑包括：達卡巴嗪(DTIC)，視情況連同：其他化學療法藥物，諸如卡莫司汀(BCNU)及順鉑；「達特茅斯方案(Dartmouth regimen)」，其由DTIC、BCNU、順鉑及他莫西芬組成；順鉑、長春花鹼(vinblastine)及DTIC之組合；或替莫唑胺。本文中提供之化合物亦可與免疫療法藥物組合，包括細胞因子，諸如干擾素α、白介素2及腫瘤壞死因子(TNF)抑制劑。

適合之化學治療劑或其他抗癌劑包括例如抗代謝物(包括但不限於葉酸拮抗劑、嘧啶類似物、嘌呤類似物及腺苷脫胺酶抑制劑)，諸如胺甲喋呤、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤、磷酸氟達拉濱(fludarabine phosphate)、噴司他汀(pentostatine)及吉西他濱。

適合之化學治療劑或其他抗癌劑進一步包括例如某些天然產物及其衍生物(例如長春花生物鹼、抗腫瘤抗生素、酶、淋巴因子及表鬼臼毒素)，諸如長春花鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、長春地辛(vindesine)、博來黴素(bleomycin)、放線菌素D(dactinomycin)、道諾黴素(daunorubicin)、艾黴素(doxorubicin)、泛艾黴素(epirubicin)、艾達魯比辛(idarubicin)、阿糖胞苷(ara-C)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)(TAXOL^TM)、光輝黴素(mithramycin)、去氧可弗米辛(deoxycoformycin)、絲裂黴素C(mitomycin-C)、L-天冬醯胺酶、干擾素(尤其IFN-a)、伊托泊苷(etoposide)及替尼泊苷(teniposide)。

其他細胞毒性劑包括納維本(navelbene)、CPT-11、阿那曲唑(anastrazole)、來曲唑(letrazole)、卡培他濱(capecitabine)、雷洛薩芬(reloxafine)、環磷醯胺、異環磷醯胺(ifosamide)及屈洛昔芬(droloxafine)。

亦適合的有細胞毒性劑，諸如表鬼臼毒素；抗贅生酶；拓撲異構酶抑制劑；丙卡巴肼(procarbazine)；米托蒽醌(mitoxantrone)；鉑配位複合物，諸如順鉑及卡鉑；生物反應調節劑；生長抑制劑；抗激素治療劑；甲醯四氫葉酸；替加氟(tegafur)；及造血生長因子。

其他抗癌劑包括抗體治療劑，諸如曲妥珠單抗(trastuzumab)(Herceptin)；針對諸如CTLA-4、4-1BB及PD-1之共刺激分子之抗體；或針對細胞因子(IL-10、TGF-β等)之抗體。

其他抗癌劑包括CSF1R抑制劑(PLX3397、LY3022855等)及CSF1R抗體(IMC-CS4、RG7155等)。

其他抗癌劑包括BET抑制劑(INCB054329、OTX015、CPI-0610等)、LSD1抑制劑(GSK2979552、INCB059872等)、HDAC抑制劑(帕比司他(panobinostat)、伏立諾他(vorinostat)等)、DNA甲基轉移酶抑制劑(阿紮胞苷(azacitidine)及地西他濱(decitabine))及其他表觀基因調節劑。

其他抗癌劑包括Bcl2抑制劑ABT-199及其他Bcl-2家族蛋白抑制劑。

其他抗癌劑包括TGFβ受體激酶抑制劑，諸如LY2157299。

其他抗癌劑包括BTK抑制劑，諸如依魯替尼(ibrutinib)。

其他抗癌劑包括β連環蛋白途徑抑制劑、notch途徑抑制劑及刺蝟途徑抑制劑。

其他抗癌劑包括細胞增殖病症相關激酶抑制劑。此等激酶包括但不限於Aurora-A、CDK1、CDK2、CDK3、CDK5、CDK7、CDK8、CDK9、ephrin受體激酶、CHK1、CHK2、SRC、Yes、Fyn、Lck、Fer、Fes、Syk、Itk、Bmx、GSK3、JNK、PAK1、PAK2、PAK3、PAK4、PDK1、PKA、PKC、Rsk及SGK。

其他抗癌劑亦包括彼等阻斷免疫細胞遷移之抗癌劑，諸如針對趨化因子受體，包括CCR2及CCR4之拮抗劑。

其他抗癌劑亦包括強化免疫系統之彼等抗癌劑，諸如佐劑或授受性T細胞轉移。

抗癌疫苗包括樹突狀細胞、合成肽、DNA疫苗及重組病毒。

一或多種其他免疫檢查點抑制劑可與如本文中所描述之鹽組合用於治療TAM相關疾病、病症或病狀。例示性免疫檢查點抑制劑包括針對諸如CD20、CD27、CD28、CD40、CD122、CD96、CD73、CD47、OX40、GITR、CSF1R、JAK、PI3Kδ、PI3Kγ、TAM、精胺酸酶、CD137(亦稱為4-1BB)、ICOS、A2AR、B7-H3、B7-H4、BTLA、CTLA-4、LAG3、TIM3、VISTA、CD96、TIGIT、PD-1、PD-L1及PD-L2之免疫檢查點分子的抑制劑。在一些實施例中，免疫檢查點分子為選自CD27、CD28、CD40、ICOS、OX40、GITR及CD137之刺激性檢查點分子。在一些實施例中，免疫檢查點分子為選自A2AR、B7-H3、B7-H4、BTLA、CTLA-4、IDO、KIR、LAG3、PD-1、TIM3、CD96、TIGIT及VISTA之抑制性檢查點分子。在一些實施例中，本文中所提供之鹽可與選自KIR抑制劑、TIGIT抑制劑、LAIR1抑制劑、CD160抑制劑、2B4抑制劑及TGFRβ抑制劑之一或多種劑組合使用。

在一些實施例中，免疫檢查點分子抑制劑為抗PD1抗體、抗PD-L1抗體或抗CTLA-4抗體。

在一些實施例中，免疫檢查點分子抑制劑為PD-1抑制劑，例如抗 PD-1單株抗體。在一些實施例中，抗PD-1單株抗體為尼魯單抗(nivolumab)、噴羅珠單抗(pembrolizumab)(亦稱為MK-3475)、皮地珠單抗(pidilizumab)、SHR-1210、PDR001或AMP-224。在一些實施例中，抗PD-1單株抗體為尼魯單抗、噴羅珠單抗或PDR001。在一些實施例中，抗PD1抗體為噴羅珠單抗。

在一些實施例中，免疫檢查點分子抑制劑為PD-L1抑制劑，例如抗PD-L1單株抗體。在一些實施例中，抗PD-L1單株抗體為BMS-935559、MEDI4736、MPDL3280A(亦稱為RG7446)或MSB0010718C。在一些實施例中，抗PD-L1單株抗體為MPDL3280A(阿替珠單抗(atezolizumab))或MEDI4736(度伐魯單抗(durvalumab))。

在一些實施例中，免疫檢查點分子抑制劑為CTLA-4抑制劑，例如抗CTLA-4抗體。在一些實施例中，抗CTLA-4抗體為伊匹單抗(ipilimumab)或曲美目單抗(tremelimumab)。

在一些實施例中，免疫檢查點分子抑制劑為LAG3抑制劑，例如抗LAG3抗體。在一些實施例中，抗LAG3抗體為BMS-986016或LAG525。

在一些實施例中，免疫檢查點分子抑制劑為GITR抑制劑，例如抗GITR抗體。在一些實施例中，抗GITR抗體為TRX518、MK-4166、INCAGN01876或MK-1248。

在一些實施例中，免疫檢查點分子抑制劑為OX40抑制劑，例如抗OX40抗體或OX40L融合蛋白。在一些實施例中，抗OX40抗體為MEDI0562、INCAGN01949、GSK2831781、GSK-3174998、MOXR-0916、PF-04518600或LAG525。在一些實施例中，OX40L融合蛋白為MEDI6383。

在一些實施例中，免疫檢查點分子抑制劑為CD20抑制劑，例如抗CD20抗體。在一些實施例中，抗CD20抗體為奧妥珠單抗(obinutuzumab)或利妥昔單抗(rituximab)。

本發明之鹽可與雙特異性抗體組合使用。在一些實施例中，雙特異性抗體之結構域之一靶向PD-1、PD-L1、CTLA-4、GITR、OX40、TIM3、LAG3、CD137、ICOS、CD3或TGFβ受體。

本發明之鹽可與一或多種用於治療諸如癌症之疾病的藥劑組合使用。在一些實施例中，該藥劑為烷基化劑、蛋白酶體抑制劑、皮質類固醇或免疫調節劑。烷基化劑之實例包括環磷醯胺(CY)、美法侖(MEL)及苯達莫司汀(bendamustine)。在一些實施例中，蛋白酶體抑制劑為卡非佐米(carfilzomib)。在一些實施例中，皮質類固醇為***(dexamethasone)(DEX)。在一些實施例中，免疫調節劑為來那度胺(lenalidomide)(LEN)或泊馬度胺(pomalidomide)(POM)。

本發明之鹽可與另一免疫原性劑，諸如癌細胞、經純化之腫瘤抗原(包括重組蛋白質、肽及碳水化合物分子)、細胞及經編碼免疫刺激細胞因子之基因轉染之細胞組合。可使用之腫瘤疫苗之非限制性實例包括黑素瘤抗原之肽，諸如gp100、MAGE抗原、Trp-2、MARTI及/或酪胺酸酶之肽，或經轉染以表現細胞因子GM-CSF之腫瘤細胞。

本發明之鹽可與疫苗接種方案組合用於治療癌症。在一些實施例中，腫瘤細胞經轉導以表現GM-CSF。在一些實施例中，腫瘤疫苗包括來自牽涉人類癌症之病毒，諸如人類乳頭狀瘤病毒(HPV)、肝炎病毒(HBV及HCV)及卡波西氏疱疹肉瘤病毒(KHSV)的蛋白質。在一些實施例中，本發明之鹽可與腫瘤特異性抗原，諸如自腫瘤組織本身分離之熱休克蛋白組合使用。在一些實施例中，本發明之鹽可與樹突狀細胞免疫組合以活化有效抗腫瘤反應。

本發明之鹽可與使表現Fcα或Fcγ受體之效應細胞靶向腫瘤細胞之雙特異性大環肽組合。本發明之鹽亦可與活化宿主免疫反應性之大環肽組合。

本發明之鹽可與精胺酸酶抑制劑，例如CB-1158組合使用。

本發明之鹽可與一或多種代謝酶抑制劑組合使用。在一些實施例中，代謝酶抑制劑為IDO1抑制劑、TDO抑制劑或精胺酸酶抑制劑。IDO1抑制劑之實例包括依卡多他(epacadostat)及NGL919。

本發明之鹽可與骨髓移植組合用於治療多種造血源性腫瘤。

本發明之鹽可用作抗凝劑，呈單一藥劑形式或與其他抗凝劑，包括但不限於阿哌沙班(apixaban)、達比加群(dabigatran)、依度沙班(edoxaban)、磺達肝癸(fondaparinex)、肝素、利伐沙班(rivaroxaban)及華法林(warfarin)組合。

安全且有效地投與此等化學治療劑中之大部分的方法對熟習此項技術者為已知的。另外，其投與描述於標準文獻中。舉例而言，化學治療劑中之許多種的投與描述於「Physicians' Desk Reference」(PDR，例如1996版，Medical Economics Company,Montvale,NJ)中，其揭示內容以引用之方式併入本文中，如同對其全文加以闡述。

醫藥調配物及劑型

當用作醫藥時，本文中提供之鹽可呈醫藥組合物形式投與，此係指本文中提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與至少一種醫藥學上可接受之載劑的組合。此等組合物可用醫藥技術中眾所周知的方式製備，且可藉由多種途徑投與，視需要局部治療或是全身治療以及欲治療之區域而定。投與可為局部(包括經眼及投與至黏膜，包括經鼻內、經***及經直腸遞送)、經肺(例如藉由吸入或吹入粉劑或氣霧劑，包括藉由噴霧器；經氣管內、經鼻內、經表皮及經皮)、經眼、經口或非經腸。經眼遞送之方法可包括局部投與(滴眼劑)、結膜下、眼周或玻璃體內注射或者藉由經手術置放於結膜囊中之球囊導管或眼***物引入。非經腸投與包括靜脈內、動脈內、皮下、腹膜內或者肌肉內或注射或輸注；或顱內(例如鞘內)或心室內投與。非經腸投與可呈單次團注劑量形式，或可例如藉由連續灌注泵。用於局部投與之醫藥組合物及調配物可包括經皮貼片、軟膏、洗劑、乳膏、凝膠、滴劑、栓劑、噴霧、液體及粉劑。習知醫藥載劑、水溶液、粉劑或油性基質、增稠劑及其類似物可能為必需的或合乎需要的。

本申請案亦包括諸多醫藥組合物，該等醫藥組合物含有作為活性成分之一或多種本文中提供之鹽(例如式I化合物之鹽及式II化合物之鹽)與一或多種醫藥學上可接受之載劑之組合。在製造本發明之組合物時，典型地將活性成分與賦形劑混合，藉由賦形劑稀釋或囊封於呈例如膠囊、香囊、紙張或其他容器形式之載體內。當賦形劑充當稀釋劑時，其可為固體、半固體或液體材料，充當活性成分之媒劑、載劑或介質。因而，該等組合物可呈錠劑、丸劑、粉劑、糖錠、香囊、扁囊、酏劑、懸浮液、乳液、溶液、糖漿、氣霧劑(呈固體形式或處於液體介質中)、含有例如多達10重量%活性化合物之軟膏、軟膠囊及硬膠囊、栓劑、無菌可注射溶液及無菌包裝粉劑之形式。

在製備調配物時，可研磨活性化合物(或本發明之鹽形式)以提供適當粒度，隨後與其他成分組合。若活性化合物實質上不可溶，則可將其研磨至小於200目之粒度。若活性化合物實質上可溶於水，則可藉由研磨至能在調配物中提供實質上均勻分佈，例如約40目來調節粒度。

適合之賦形劑的一些實例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、澱粉、***樹膠、磷酸鈣、海藻酸鹽、黃芪膠、明膠、矽酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、纖維素、水、糖漿及甲基纖維素。該等調配物可另外包括：潤滑劑，諸如滑石、硬脂酸鎂及礦物油；潤濕劑；乳化劑及懸浮劑；防腐劑，諸如苯甲酸甲酯及羥基苯甲酸丙酯；以及甜味劑及調味劑。可調配本發明之組合物以便在藉由使用此項技術中已知的程序投與患者之後提供活性成分之快速、持續或延遲釋放。

該組合物可經調配而呈單位劑量形式，各劑量含有約5至約100mg，更通常約10至約30mg活性成分。術語「單位劑量形式」係指適合作為單位劑量用於人類個體及其他哺乳動物之物理離散單元，各單元含有經計算能產生所要治療效應且與適合之醫藥賦形劑締合的預定量之活性材料。

活性化合物可在較寬劑量範圍內有效且一般以治療有效量投與。然而，應理解，化合物之實際投與量通常將由醫師根據相關情形(包括欲治療之病狀、所選投與途徑、所投與之實際化合物、個別患者之年齡、體重及反應、患者症狀之嚴重程度及其類似因素)來決定。

為了製備諸如錠劑之固體組合物，將主要活性成分與醫藥賦形劑混合，以形成含有本發明化合物之均質混合物的固體預調配組合物。當提及此等預調配組合物為均質時，活性成分典型地均勻分散於整個組合物中，使得該組合物可容易地再分成同樣有效之單位劑型，諸如錠劑、丸劑及膠囊。隨後將此固體預調配物再分成含有例如約0.1至約500mg本發明活性成分之屬於以上所描述之類型的單位劑型。

本發明之錠劑或丸劑可經塗佈或以其他方式混配以提供能獲得延長作用時間優勢之劑型。舉例而言，錠劑或丸劑可包含內部劑量及外部劑量組分，後者呈處於前者上之封套形式。該兩種組分可由腸衣層隔開，該腸衣層用於在胃中抵抗崩解且允許內部組分完整地進入十二指腸或延遲釋放。多種材料可用於此種腸衣層或包衣層，此種材料包括許多聚合酸及聚合酸與諸如蟲膠、鯨蠟醇及醋酸纖維素之材料的混合物。

可併入本發明之鹽及組合物以供經口或藉由注射投與之液體形式包括水溶液、適當調味之糖漿、水或油懸浮液及含諸如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油之可食用油之調味乳液，以及酏劑及類似醫藥媒劑。

用於吸入或吹入之組合物包括處於醫藥學上可接受之水性溶劑或有機溶劑或其混合物中之溶液及懸浮液，以及粉末。液體或固體組成物可含有如上文所描述之適合之醫藥學上可接受之賦形劑。在一些實施例中，該等組合物係藉由經口或經鼻呼吸途徑投與以達成局部或全身效應。組合物可利用惰性氣體進行霧化。霧化之溶液可由霧化裝置直接呼吸，或霧化裝置可連接於面罩幕、帳幕或間歇性正壓呼吸機。溶液、懸浮液或粉劑組成物可自以適當方式遞送調配物之裝置經口或經鼻投與。

投與患者之鹽(例如式I化合物之鹽及式II化合物之鹽)或組合物之量將視投與何物、投與目的(諸如預防或治療)、患者狀態、投與方式及其類似因素而定。在治療性應用中，可投與已罹患疾病之患者的組合物的量足以治癒或至少部分阻遏該疾病及其併發症之症狀。有效劑量將視所治療之疾病病狀以及由護理醫師視諸如疾病嚴重程度、患者之年齡、體重及一般狀況之因素而作出之判斷以及其類似因素而定。

投與患者之組合物可呈以上所描述之醫藥組合物形式。此等組合物可藉由習知滅菌技術進行滅菌，或可進行無菌過濾。水溶液可經封裝以供依原樣使用，或經凍乾，凍乾製劑可在投藥前與無菌水性載劑組合。化合物製劑之pH值典型地將介於3與11之間，更佳為5至9且最佳為7至8。應理解，使用某些前述賦形劑、載劑或穩定劑將形成醫藥鹽。

本發明化合物或鹽之治療劑量可根據例如進行治療之特定用途、化合物之投與方式、患者之健康狀況及處方醫師之判斷而變化。本文中提供之化合物或鹽在醫藥組合物中之比例或濃度可視許多因素而變化，包括劑量、化學特徵(例如疏水性)及投與途徑。舉例而言，本文中提供之化合物或鹽可呈含有約0.1%至約10% w/v化合物或鹽之水性生理學緩衝溶液形式提供以供非經腸投與。一些典型劑量範圍為每日約1μg/kg至約1g/kg體重。在一些實施例中，劑量範圍為每日約0.01mg/kg至約100mg/kg體重。劑量有可能視諸如疾病或病症之類型及進展程度、特定患者之總體健康狀態、所選化合物之相對生物學效力、賦形劑之配方及其投藥途徑之變數而定。有效劑量可由得自於活體外或動物模型測試系統之劑量反應曲線外推。

本文中提供之化合物或鹽亦可與一或多種其他活性成分組合調配，該等活性成分可包括任何醫藥劑，諸如抗病毒劑、疫苗、抗體、免疫增強劑、免疫抑制劑、消炎劑及其類似物。

套組

本發明亦包括適用於例如治療或預防TAM相關疾病或病症、肥胖、糖尿病及本文中提及之其他疾病的醫藥套組，其包括一或多個含有包含治療有效量之本文中提供之鹽(例如，式I化合物之鹽及式II化合物之鹽)的醫藥組合物的容器。如熟習此項技術者應顯而易見，該等套組可視需要進一步包括多種習知醫藥套組組件中之一或多種，諸如，舉例而言，含一或多種醫藥學上可接受之載劑的容器、附加容器等。套組中亦可包括呈插頁形式或呈標籤形式之說明書，從而指示欲投與之組分之量、關於投藥之指導及/或關於混合組分之指導。

實例

將藉由特定實例更詳細地描述本發明。以下實例係出於說明之目的而提供，且不欲以任何方式限制本發明。熟習此項技術者應容易地識別可加以變化或修改以產生基本上相同之結果的多個非重要參數。發現實例之化合物為如以下所描述之TAM激酶抑制劑。

一般方法

在Waters質量指導型分餾系統上對所製備之一些化合物進行製備型LC-MS純化。文獻中已詳細描述用於操作此等系統之基本設備設定、方案及控制軟體。參見例如「Two-Pump At Column Dilution Configuration for Preparative LC-MS」,K.Blom,J.Combi.Chem.,4,295(2002)；「Optimizing Preparative LC-MS Configurations and Methods for Parallel Synthesis Purification」,K.Blom,R.Sparks,J.Doughty,G.Everlof,T.Haque,A.Combs,J.Combi.Chem.,5,670(2003)；及「Preparative LC-MS Purification：Improved Compound Specific Method Optimization」,K.Blom,B.Glass,R.Sparks,A.Combs,J.Combi.Chem.,6,874-883(2004)。典型地在以下條件下對所分離之化合物進行分析型液相層析質譜(LCMS)以進行純度檢驗：儀器：Agilent 1100系列，LC/MSD；管柱：Waters Sunfire^TM C₁₈ 5μm粒度，2.1×5.0mm；緩衝液：移動相A：0.025% TFA/水，及移動相B：乙腈；梯度：2%至80% B，3分鐘，流速2.0mL/min。

亦如實例中所指示藉由利用MS偵測器之逆相高效液相層析法(RP-HPLC)或急驟層析法(矽膠)以製備規模分離一些所製備之化合物。典型製備型逆相高效液相層析法(RP-HPLC)管柱條件如下：pH=2純化：Waters Sunfire^TM C₁₈ 5μm粒度，19×100mm管柱，用移動相A：0.1% TFA(三氟乙酸)/水及移動相B：乙腈來進行溶析；流速為30mL/min，使用如文獻中所描述之化合物特異性方法最佳化方案(Compound Specific Method Optimization protocol)將各化合物之分離梯度最佳化[參見「Preparative LCMS Purification：Improved Compound Specific Method Optimization」,K.Blom,B.Glass,R.Sparks,A.Combs,J.Comb.Chem.,6,874-883(2004)]。典型地，用於30×100mm管柱之流速為60mL/min。 pH=10純化：Waters XBridge C₁₈ 5μm粒度，19×100mm管柱，用移動相A：0.15% NH₄OH/水及移動相B：乙腈進行溶析；流速為30mL/min，使用如文獻中所描述之化合物特異性方法最佳化方案將各化合物之分離梯度最佳化[參見「Preparative LCMS Purification：Improved Compound Specific Method Optimization」,K.Blom,B.Glass,R.Sparks,A.Combs,J.Comb.Chem.,6,874-883(2004)]。典型地，用於30×100mm管柱之流速為60mL/min。

實例1. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽(化 合物I馬來酸鹽，形式I)之合成

步驟1. 5-溴-7-(哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺二鹽酸鹽(化合物2)

在室溫下，在配備有機械攪拌器、加熱套、熱電偶、回流冷凝器、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶中置放含4-(4-胺基-5-溴吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物1，880g，2.221mol)之二氯甲烷(DCM，8.0L)。向該懸浮液中添加含鹽酸之2-丙醇(5.8N，2.7L，15.66mol，7.05當量)。將混合物加熱至35℃。4小時之後，用第三丁基甲醚(TBME，4.5L)稀釋反應混合物。將所得混合物冷卻至室溫，過濾且用TBME(2.0L)洗滌。在過濾器上，在室內真空下將濾餅乾燥24小時，獲得呈淡棕色固體狀之5-溴-7-(哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺二鹽酸鹽(化合物2，848g，103%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 9.53-9.29(m,3H),8.23(s,1H),6.91(s,1H),3.38(tt,J=11.8,3.6Hz,1H),3.30(d,J=12.4Hz,2H),3.00(dtd,J=12.8,10.1,2.6Hz,2H),2.07 (dd,J=14.1,3.8Hz,2H),1.97-1.87(m,2H)ppm；¹³C NMR(101MHz,DMSO-d ₆)δ 150.34,139.32,138.92,113.24,109.67,95.70,43.06,30.57,26.89ppm；C₁₁H₁₄BrN₅(MW 295.0)，LCMS(EI)m/e 296.0(M⁺+H)。

步驟2. 1-(4-(4-胺基-5-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(化合物3).

在室溫下，在配備有機械攪拌器、熱電偶、回流冷凝器、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶中置放含5-溴-7-(哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺二鹽酸鹽(化合物2，1300g，3.522mol)之N-甲基哌啶酮(NMP，10L)。向懸浮液中添加N,N-二異丙基乙胺(1593g，12.3mol)。將混合物冷卻至10℃，隨後裝入異丁醯氯(388g，3.645mol)。在室溫下攪拌反應物，且藉由HPLC加以監測。添加額外的異丁醯氯(22.5g，0.211mol)以耗盡所有起始物質。一旦反應完畢後，便將反應混合物濾過矽藻土墊。將所得濾液冷卻至10℃，逐漸添加水(26L)以使產物沈澱析出。藉由過濾來收集固體，且藉由水(12L)加以洗滌。在過濾器上，在室內真空下將濾餅乾燥48小時，獲得呈淡棕色固體狀之1-(4-(4-胺基-5-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(化合物3，1095g，85%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.86(s,1H),6.64(s,1H),4.51(d,J=12.6Hz,1H),4.01(d,J=13.2Hz,1H),3.35-3.30(m,1H),3.12(t,J=12.3Hz,1H),2.91-2.84(m,1H),2.64(t,J=12.1Hz,1H),2.02-1.93(m,2H),1.55-1.42(m,2H),1.02(d,J=6.5Hz,3H),1.00(d,J=6.5Hz,3H)ppm；¹³C NMR(101MHZ,DMSO-d ₆)δ 174.50,155.68,148.37,135.22,111.36,110.65,87.27,45.34,41.67,32.91,31.30,30.33,29.49,20.03,19.87ppm；C₁₅H₂₀BrN₅O(MW 365.09)，LCMS(EI)m/e 366.1(M⁺+H)。

步驟3. 1-(4-(4-胺基-5-(4-胺基苯基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(化合物5).

在室溫下，將配備有機械攪拌器、加熱套、熱電偶、回流冷凝器、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶裝入含1-(4-(4-胺基-5-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(化合物3，700g，1.911mol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)苯胺(化合物4，502g，2.293mol)及碳酸鉀(528g，3.822mol)之1-丁醇(7.7L)及水(1.4L)。在室溫下向混合物中添加氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)[2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]鈀(II)(XPhos Pd G2，90g，115mmol)。對反應混合物進行脫氣且用氮氣再填充，隨後加熱升至80℃。在80℃下兩小時之後，向反應混合物中添加正庚烷(8L)。將所得漿液冷卻至室溫。藉由過濾來收集固體，且用水(6L)加以洗滌。在過濾器上，在室內真空下將濾餅乾燥72小時，獲得呈棕色固體狀之1-(4-(4-胺基-5-(4-胺基苯基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(化合物5，648g，90%)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆)δ 7.85(s,1H),7.09(d,J=8.4Hz,2H),6.65(d,J=8.4Hz,2H),6.43(s,1H),5.24(s,2H),4.53(d,J=12.6Hz,1H),4.04(d,J=13.1Hz,1H),3.38(ddd,J=11.8,8.2,3.8Hz,1H),3.16(t,J=12.7Hz,1H),2.87(p,J=6.7Hz,1H),2.71-2.66(m,1H),2.08-2.00(m,2H),1.61-1.58(m,2H),1.02(d,J=6.5Hz,3H),1.00(d,J=6.5Hz,3H)ppm；¹³C NMR(126MHz,DMSO-d ₆)δ 174.51,156.31,148.51,147.65,133.98,130.35,122.57,119.37,114.57,109.67,108.85,45.48,41.81,32.97,31.50,30.56,29.50,20.06,19.89ppm；C₂₁H₂₆N₆O(MW 378.48)，LCMS(EI)m/e 379.2(M⁺+H)。

步驟4. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯井[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物I).

在室溫下，在配備有機械攪拌器、熱電偶、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶中置放含1-(4-(4-胺基-5-(4-胺基苯基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(化合物5，944g，2.494mol)及1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸鹽酸鹽(化合物6，801g，2.569mol)之四氫呋喃(THF，10L)。向反應混合物中添加三乙胺(NEt₃，0.695L，4.988mol)。在反應完畢後，將反應混合物均分至兩個22-L圓底燒瓶中。在室溫下向各燒瓶中裝入水(8L)。藉由過濾來收集固體。將所得濕濾餅放回22-L圓底燒瓶中。向燒瓶中裝入THF(3.2L)及水(10.5L)。將漿液加熱至55℃，且在55℃下攪拌兩小時。在30℃下藉由過濾來收集固體，且用水(8L)加以洗滌。在過濾器上，在室內真空下將濾餅乾燥72小時，獲得呈淡棕色固體狀之N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物I，1425g，90%)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆)δ 10.82(s,1H),8.71(s,1H),8.64(ddd,J=4.8,1.8,0.8Hz,1H),8.06(td,J=7.7,1.9Hz,1H),7.91(s,1H),7.77(d,J=8.6Hz,2H),7.60-7.53(m,2H),7.43(d,J=8.6Hz,2H),6.58(s,1H),4.78(hept,J=6.8Hz,1H),4.54(d,J=12.3Hz,1H),4.06(d,J=12.5Hz,1H),3.40(tt,J=11.7,3.5Hz,1H),3.20(t,J=12.3Hz,1H),2.91(hept,J=6.7Hz,1H),2.69(t,J=12.3Hz,1H),2.06(dd,J=27.7,12.3Hz,2H),1.61(q,J=11.8Hz,1H),1.55-1.47(m,1H),1.44(d,J=6.8Hz,6H),1.02(d,J=6.8Hz,3H),1.00(d,J=6.8Hz,3H)ppm；¹³C NMR(126MHz,DMSO-d ₆)δ 174.51,163.02,160.31,156.20,150.18,149.98,149.18,148.08,147.79,139.55,137.51,134.45,131.24,130.23,125.09,124.57,120.46,117.98,109.90,109.35,105.27,51.17,45.46,41.79,32.97,31.48,30.54,29.49,21.09(2-CH3),20.07,19.89ppm；C₃₄H₃₇N₉O₄(MW 635.73)，LCMS(EI)m/e 636.3(M⁺+H)。

步驟5. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽(化合物I馬來酸鹽，形式I).

在室溫下，在配備有機械攪拌器、加熱夾套、熱電偶、回流冷凝器、氮氣入口及氮氣出口之50-L反應器中置放含N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物I，1401g，2.204mol)之甲醇(MeOH，10L)及二氯甲烷(DCM，20L)。將漿液加熱至50℃以獲得溶液。向溶液中添加活性碳(70g)及矽膠(70g)。在50℃下攪拌2小時之後，將混合物濾過矽藻土墊。向濾液中添加馬來酸(269g，2.314mol)。在大氣壓力下蒸餾出大部分DCM。固體逐漸沈澱析出。在18℃下藉由過濾來收集固體，且用MeOH(3L)加以洗滌。在過濾器上，在室內真空下將濾餅乾燥72小時，獲得呈灰白色固體狀之N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽(化合物I馬來酸鹽，1425g，86%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 10.83(s,1H),8.71(s,1H),8.65-8.63(m,1H),8.06(td,J=7.8,1.9Hz,1H),7.95(s,1H),7.77(d,J=8.6Hz,2H),7.58-7.55(m,2H),7.44(d,J=8.5Hz,2H),6.62(s,1H),6.25(s,2H),4.78(hept,J=6.7Hz,1H),4.54(d,J=12.3Hz,1H),4.06(d,J=12.5Hz,1H),3.40(tt,J=11.6,3.2Hz,1H),3.20(t,J=12.3Hz,1H),2.90(hept,J=6.6Hz,1H),2.69(t,J=12.1Hz,1H),2.09-2.01(m,2H),1.65-1.57(m,1H),1.56-1.49(m,1H),1.44(d,J=6.8Hz,6H),1.02(d,J=5.5Hz,3H),1.00(d,J=5.5Hz,3H)ppm；¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ 174.52,167.21,163.03,160.33,155.20,150.18,149.99,149.18,148.07,146.26,139.55,137.67,135.32,131.34,130.87,130.22,125.09,124.57,120.49,119.30,109.80,109.47,105.26,51.17,45.43,41.76,32.97,31.45,30.53,29.50,21.09(2-CH₃),20.06,19.89ppm；C₃₄H₃₇N₉O₄(游離鹼，MW 635.73)，LCMS(EI)m/e 636.3(M⁺+H)。

實例2. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽(非晶)(化 合物II半硫酸鹽)之合成

在室溫下，將配備有機械攪拌器、加熱套、熱電偶、回流冷凝器、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶裝入含4-(4-胺基-5-溴吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物1，880g，2.221mol)之二氯甲烷(DCM，8.0L)。向該懸浮液中添加含鹽酸之2-丙醇(5.8N，2.7L，15.66mol， 7.05當量)。將混合物加熱至35℃後維持4小時。用第三丁基甲醚(TBME，4.5L)稀釋反應混合物且冷卻至室溫。過濾漿液且用TBME(2.0L)加以洗滌。在過濾器上，在真空下將濾餅乾燥24小時，獲得呈淡棕色固體狀之5-溴-7-(哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺二鹽酸鹽(化合物2，848g，103%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 9.53-9.29(m,3H),8.23(s,1H),6.91(s,1H),3.38(tt,J=11.8,3.6Hz,1H),3.30(d,J=12.4Hz,2H),3.00(dtd,J=12.8,10.1,2.6Hz,2H),2.07(dd,J=14.1,3.8Hz,2H),1.97-1.87(m,2H)ppm；¹³C NMR(101MHz,DMSO-d ₆)δ 150.34,139.32,138.92,113.24,109.67,95.70,43.06,30.57,26.89ppm；C₁₁H₁₄BrN₅(MW 295.0)，LCMS(EI)m/e 296.0(M⁺+H)。

在室溫下，將配備有機械攪拌器、熱電偶、回流冷凝器、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶裝入含5-溴-7-(哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺二鹽酸鹽(化合物2，1300g，3.522mol)之N-甲基哌啶酮(NMP，10L)。向懸浮液中添加N,N-二異丙基乙胺(1593g，12.3mol)。將混合物冷卻至10℃，且用異丁醯氯(388g，3.645mol)加以處理。攪拌反應混合物，同時升溫至室溫，且藉由HPLC加以監測。添加額外的異丁醯氯(22.5g，0.211mol)以耗盡所有起始物質。一旦反應完畢後，便將反應混合物濾過矽藻土墊。將所得濾液冷卻至10℃且逐漸添加水(26L)以使產物沈澱析出。藉由過濾來收集固體，且藉由水(12L)加以洗滌。在過濾器上，在真空下將濾餅乾燥48小時，獲得呈淡棕色固體狀之1-(4-(4-胺基-5-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(化合物3，1095g，85%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.86(s,1H),6.64(s,1H),4.51(d,J=12.6Hz,1H),4.01(d,J=13.2Hz,1H),3.35-3.30(m,1H),3.12(t,J=12.3Hz,1H),2.91-2.84(m,1H),2.64(t,J=12.1Hz,1H),2.02-1.93(m,2H),1.55-1.42(m, 2H),1.02(d,J=6.5Hz,3H),1.00(d,J=6.5Hz,3H)ppm；¹³C NMR(101MHz,DMSO-d ₆)δ 174.50,155.68,148.37,135.22,111.36,110.65,87.27,45.34,41.67,32.91,31.30,30.33,29.49,20.03,19.87ppm；C₁₅H₂₀BrN₅O(MW 365.09)，LCMS(EI)m/e 366.1(M⁺+H)。

步驟3. 1-(4-(4-胺基-5-(4-胺基苯基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙1-酮(化合物5).

在室溫下，將配備有機械攪拌器、加熱套、熱電偶、回流冷凝器、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶裝入含1-(4-(4-胺基-5-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(化合物3，700g，1.911mol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)苯胺(化合物4，502g，2.293mol)及碳酸鉀(528g，3.822mol)之1-丁醇(7.7L)及水(1.4L)。在室溫下用氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)[2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]鈀(II)(XPhos Pd G2，90g，115mmol)處理混合物。對反應混合物進行脫氣且用氮氣再填充，隨後加熱升至80℃。在80℃下兩小時之後，用正庚烷(8L)稀釋反應混合物。將所得漿液冷卻至室溫。藉由過濾來收集固體，且用水(6L)加以洗滌。在過濾器上，在真空下將濾餅乾燥72小時，獲得呈棕色固體狀之1-(4-(4-胺基-5-(4-胺基苯基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(化合物5，648g，90%)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆)δ 7.85(s,1H),7.09(d,J=8.4Hz,2H),6.65(d,J=8.4Hz,2H),6.43(s,1H),5.24(s,2H),4.53(d,J=12.6Hz,1H),4.04(d,J=13.1Hz,1H),3.38(ddd,J=11.8,8.2,3.8Hz,1H),3.16(t,J=12.7Hz,1H),2.87(p,J=6.7Hz,1H),2.71-2.66(m,1H),2.08-2.00(m,2H),1.61-1.58(m,2H),1.02(d,J=6.5Hz,3H),1.00(d,J=6.5Hz,3H)ppm；¹³C NMR(126MHz,DMSO-d ₆)δ 174.51,156.31,148.51,147.65,133.98,130.35,122.57,119.37,114.57,109.67,108.85,45.48,41.81,32.97,31.50,30.56,29.50,20.06,19.89ppm；C₂₁H₂₆N₆O(MW 378.48)，LCMS(EI)m/e 379.2(M⁺+H)。

步驟4. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物II).

在室溫下，將配備有機械攪拌器、熱電偶、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶裝入含1-(4-(4-胺基-5-(4-胺基苯基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(化合物5，450g，1.189mol)及1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸(化合物7，342g，1.248mol)之四氫呋喃(THF，5L)。用三乙胺(NEt₃，241g，2.378mol)且隨後用2-(3H-[1,2,3]***并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽(V)(HATU，565g，1.486mol)依序處理反應混合物。反應完畢後，在室溫下向反應混合物中添加水(8L)。藉由過濾來收集固體。將所得濕濾餅放回22-L圓底燒瓶中，且與THF(2.7L)及水(5.4L)一起形成漿液。將漿液加熱至55℃，且在55℃下攪拌兩小時。冷卻至30℃之後藉由過濾來收集固體，且用水(8L)加以洗滌。在過濾器上，在真空下將濾餅乾燥2天，獲得呈淡棕色固體狀之N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物II，717g，95%)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆)δ 11.03(s,1H),8.68(s,1H),8.19(s,1H),7.82(d,J=8.6Hz,2H),7.55-7.46(m,5H),7.38-7.36(m,2H),6.85(s,1H),4.79(hept,J=6.8Hz,1H),4.55(d,J=12.3Hz,1H),4.08(d,J=12.9Hz,1H),3.43(tt,J=11.8,3.5Hz,1H),3.21(t,J=12.4Hz,1H),2.90(hept,J=6.7Hz,1H),2.70(t,J=12.2Hz,1H),2.02(dd,J=23.0,13.5Hz,2H),1.66(q,J=11.8,11.3Hz,1H),1.53(q,J=12.2,11.7Hz,1H),1.44(d,J=6.8Hz,6H),1.03(d,J=7.0Hz,3H),1.01(d,J=7.0Hz,3H)ppm；¹³C NMR(126MHz,DMSO-d ₆)δ 174.55,163.26,160.65,152.60,150.48,147.46,142.27,138.14,137.56,135.87,130.21,129.89,129.50,129.12,129.05,122.72,120.55,111.00,108.35,105.10,50.94,45.35,41.67, 32.98,31.40,30.50,29.49,21.19(2-CH₃),20.06,19.89ppm；C₃₅H₃₈N₈O₄(MW 634.74)，LCMS(EI)m/e 635.3(M⁺+H)。

步驟5. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽(化合物II硫酸鹽).

在室溫下，將配備有機械攪拌器、熱電偶、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶裝入含N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物II，713g，1.123mol)之甲醇(MeOH，5.6L)。將混合物加熱至55℃且用硫酸(H₂SO₄，116g，1.179mol)於水(1L)中之溶液加以處理。在55℃下攪拌30分鐘之後，在減壓下蒸餾出2.8L溶劑。將反應混合物冷卻至室溫。藉由過濾來收集所得固體，且用MeOH(0.7L)加以洗滌。在過濾器上，在真空下將濾餅乾燥2天，獲得呈黃色固體狀之N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽(化合物II硫酸鹽，744g，90%)。

步驟6. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽(化合物II半硫酸鹽).

在室溫下，將配備有機械攪拌器、熱電偶、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶裝入含N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽(化合物II之硫酸鹽，729g，0.995mol)之水(16L)。將漿液加熱至35℃，且攪拌3天。藉由過濾來收集固體，且用水(10L)加以洗滌。在過濾器上，在真空下對濕濾餅進行乾燥，獲得呈灰白色固體狀之N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽(化合物II半硫酸鹽，644g，95%)。

步驟7. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽，非晶.

在室溫下，將2-L圓底燒瓶裝入含N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽(化合物II半硫酸鹽，40g，58.5mmol)之丙酮(500mL)及甲醇(500mL)。將溶液經濾紙過濾至3-L單頸圓底燒瓶中。在減壓下濃縮濾液以移除大部分溶劑。在真空烘箱中，在50℃下、在室內真空下、在氮氣吹掃下對所得發泡體樣固體進行乾燥，獲得呈淡黃色固體狀之N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽(化合物II之非晶半硫酸鹽，38g，95%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 11.01(s,1H),8.68(s,1H),8.07(s,1H),7.80(d,J=8.6Hz,2H),7.55-7.45(m,5H),7.38-7.36(m,2H),6.74(s,1H),4.79(hept,J=6.8Hz,1H),4.55(d,J=12.3Hz,1H),4.07(d,J=13.0Hz,1H),3.42(tt,J=11.8,3.3Hz,1H),3.24-3.18(m,1H),2.91(hept,J=6.7Hz,1H),2.70(t,J=12.0Hz,1H),2.07-1.99(m,2H),1.68-1.51(m,2H),1.44(d,J=6.8Hz,6H),1.03(d,J=7.0Hz,3H),1.01(d,J=7.0Hz,3H)ppm；¹³C NMR(101MHz,DMSO-d ₆)δ 174.55,163.26,160.65,152.60,150.48,147.46,142.28,138.14,137.56,135.87,130.21,129.89,129.50,129.12,129.05,122.72,120.55,111.00,108.35,105.10,50.94,45.35,41.67,32.98,31.40,30.50,29.49,21.19(2-CH₃),20.06,19.89ppm；C₃₅H₃₈N₈O₄(MW 634.74)，LCMS(EI)m/e 635.3(M⁺+H)；酸滴定，硫酸：游離鹼=0.50；針對硫之元素分析，計算值2.34%，觀測值2.29%。

實例3. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯 基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物II)之替代合成

步驟1. 1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-N-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物8).

在室溫下，將配備有機械攪拌器、熱電偶、氮氣入口及氮氣出口之5-L 4頸圓底燒瓶裝入含1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸(化合物7，202g，0.736mol)及4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)苯胺(169g，0.773mol)之N,N-二甲基甲醯胺(DMF，1.2L)。在室溫下向混合物中添加2-(3H-[1,2,3]***并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽(V)(HATU，336g，0.884mmol)。在冷卻至15℃以下之內部溫度之後向混合物中添加三乙胺(NEt₃，97g，0.957mol)。隨後在15-25℃下將反應混合物攪拌4小時。緩慢添加水(1.2L)以使產物沈澱析出。藉由過濾來收集固體，且用水(3×0.6L)加以洗滌。在真空烘箱中，在50℃下、在輕緩氮氣吹掃下對濾餅進行乾燥，獲得呈白色固體狀之1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-N-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物8，363g，104%)。¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆)δ 10.99(s,1H),8.65(s,1H),7.68-7.63(m,4H),7.53-7.51(m,2H),7.48-7.45(m,1H),7.36(dd,J=8.2,1.2Hz,2H),4.78(hept,J=6.8Hz,1H),1.43(d,J=6.8Hz,6H),1.29(s,12H)ppm；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆)δ 163.24,160.69,150.46,147.50,141.32,135.96,135.83,129.47,129.09,129.03,124.09,119.19,105.10,83.98,50.89,25.14,21.18ppm；C₂₆H₃₀BN₃O₅(MW 475.35)，LCMS(EI)m/e 476.3(M⁺+H)。

步驟2. 4-(4-胺基-5-(4-(1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺基)苯基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物9)

在室溫下，將配備有機械攪拌器、回流冷凝器、熱電偶、加熱套、氮氣入口及氮氣出口之22-L 5頸圓底燒瓶裝入含4-(4-胺基-5-溴吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物1，557g，1.406mol)、1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-N-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物8，735g，1.546mol)及磷酸三鉀(K₃PO₄，597g，2.811mol)之1,4-二噁烷(6.0L)及水(1.1L)。將混合物脫氣且用氮氣氛圍再填充。向反應混合物中添加氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)[2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]鈀(II)(XPhos Pd G2，77g，98mmol)。對反應混合物進行脫氣，用氮氣氛圍再填充且加熱至80℃。在80℃下攪拌3小時之後，經一小時向反應物中添加水(6.0L)。藉由在20℃下過濾來收集所得固體，且用水(2×3.0L)及正庚烷(2×2.0L)加以洗滌。將濾餅轉移回22-L圓底燒瓶且在室溫下在乙酸乙酯(EtOAc，6.0L)及甲基第三丁基醚(MTBE，2.2L)中形成漿液。將懸浮液加熱至55℃，且攪拌2小時。將混合物冷卻至20℃之後，藉由過濾來收集固體，且用MTBE(2×1.0L)加以洗滌。在過濾漏斗上，在真空下將濾餅乾燥2天，獲得呈淡棕色固體狀之4-(4-胺基-5-(4-(1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺基)苯基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物9，827g，85%)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆)δ 10.97(s,1H),8.67(s,1H),7.90(s,1H),7.78(d,J=8.6Hz,2H),7.54(t,J=7.5Hz,2H),7.48-7.46(m,1H),7.43(d,J=8.6Hz,2H),7.38-7.36(m,2H),6.58(s,1H),4.79(hept,J=6.7Hz,1H),4.08-4.03(m,2H),3.34-3.28(m,1H),2.89(s,2H),1.99(d,J=11.4Hz,2H),1.56(qd,J=12.7,4.1Hz,2H),1.44(d,J=6.8Hz,6H),1.42(s,9H)ppm；¹³C NMR(126MHz,DMSO-d ₆)δ 163.25,160.57,156.20,154.33,150.49,147.78,147.40,135.56,135.89,134.56,131.20,130.24,129.49,129.12,129.03,120.42,117.99,109.88,109.35,105.16,79.08,50.91,43.90,32.71,30.54,28.59,21.11ppm；C₃₆H₄₀N₈O₅(MW 664.76)，LCMS(EI)m/e 665.3(M⁺+H)。

步驟3. N-(4-(4-胺基-7-(哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺二鹽酸鹽(化合物10)

在室溫下，將配備有機械攪拌器、回流冷凝器、熱電偶、加熱套、氮氣入口及氮氣出口之22-L 5頸圓底燒瓶裝入含4-(4-胺基-5-(4-(1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺基)苯基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物9，737g，1.053mol)之二氯甲烷(DCM，4.5L)。向懸浮液中添加含鹽酸之2-丙醇(5.8N，於IPA中，1.474L，8.549mol，8.12當量)。將混合物加熱至35-40℃。在35-40℃下3小時之後，將反應混合物冷卻至15℃。添加水(0.4L)，且在15℃下將混合物攪拌1小時。用DCM(9.0L)稀釋混合物。藉由過濾來收集固體，且用DCM(2×0.2L)加以洗滌。在過濾漏斗上，在真空下將濾餅乾燥2天，獲得呈針樣固體狀之N-(4-(4-胺基-7-(哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺二鹽酸鹽(630g，94%)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆)δ 11.03(s,1H),9.31-9.21(m,3H),8.68(s,1H),8.29(s,1H),7.83(d,J=8.7Hz,2H),7.55-7.46(m,5H),7.38-7.37(m,2H),6.80(s,1H),4.83(hept,J=6.8Hz,1H),3.50(tt,J=11.7,3.4Hz,1H),3.35(d,J=12.4Hz,2H),3.08(q,J=12.5Hz,2H),2.18-2.15(m,2H),1.99-1.96(m,2H),1.44(d,J=6.8Hz,6H)ppm；¹³C NMR(126MHz,DMSO-d ₆)δ 163.26,160.70,150.47,150.38,147.52,138.68,138.59,138.06,135.86,130.21,129.50,129.12,129.05,128.76,126.12,120.66,111.81,107.49,105.09,50.96,43.19,30.65,27.07,21.19ppm；C₃₁H₃₂N₈O₃(MW 564.64)，LCMS(EI)m/e 565.3(M⁺+H)。

在室溫下，將配備有機械攪拌器、熱電偶、氮氣入口及氮氣出口之22-L 5頸圓底燒瓶裝入含N-(4-(4-胺基-7-(哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺二鹽酸鹽(608g，0.954mol)之二氯甲烷(DCM，17.6L)。向懸浮液中添加氫氧化鈉水溶液(NaOH，1N，3.815L，3.815mol)。在室溫下攪拌1小時之後，將混合物冷卻至0-5℃且用異丁醯氯(107g，1.001mol)加以處理。在室溫下將反應混合物攪拌24小時。在反應完畢後，將混合物濾過矽藻土墊。分離有機相，用水(2×2.5L)洗滌，且在減壓下濃縮。向殘餘物中添加DCM(2.4L)及甲基第三丁基醚(MTBE，9.7L)。將混合物加熱至50℃，且攪拌1小時。冷卻至室溫之後，藉由過濾來收集所得固體。在過濾器上，在真空下將濾餅乾燥24小時，獲得呈淡黃色固體狀之N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(化合物II，548g，91%)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆)δ 11.03(s,1H),8.68(s,1H),8.19(s,1H),7.82(d,J=8.6 Hz,2H),7.55-7.46(m,5H),7.38-7.36(m,2H),6.85(s,1H),4.79(hept,J=6.8Hz,1H),4.55(d,J=12.3Hz,1H),4.08(d,J=12.9Hz,1H),3.43(tt,J=11.8,3.5Hz,1H),3.21(t,J=12.4Hz,1H),2.90(hept,J=6.7Hz,1H),2.70(t,J=12.2Hz,1H),2.02(dd,J=23.0,13.5Hz,2H),1.66(q,J=11.8,11.3Hz,1H),1.53(q,J=12.2,11.7Hz,1H),1.44(d,J=6.8Hz,6H),1.03(d,J=7.0Hz,3H),1.01(d,J=7.0Hz,3H)ppm；¹³C NMR(126MHz,DMSO-d ₆)δ 174.55,163.26,160.65,152.60,150.48,147.46,142.27,138.14,137.56,135.87,130.21,129.89,129.50,129.12,129.05,122.72,120.55,111.00,108.35,105.10,50.94,45.35,41.67,32.98,31.40,30.50,29.49,21.19(2-CH₃),20.06,19.89ppm；C₃₅H₃₈N₈O₄(MW 634.74)，LCMS(EI)m/e 635.3(M⁺+H)。

實例4. 4-(4-胺基-5-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(流程1及流程2之化合物1)之合成

步驟1. 4-(4-胺基吡咯井[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(化合物13)

在室溫下，將配備有機械攪拌器、加熱套、熱電偶、回流冷凝器、氮氣入口及氮氣出口之3-L圓底燒瓶裝入含7-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(化合物11，100g，469mmol)及4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(化合物12，174g，563mmol)之1,4-二噁烷(876mL)。向反應燒瓶中依序添加碳酸鉀(130g，939mmol)及水(218g)。藉由曝露於真空對反應混合物進行脫氣且用氮氣氛圍再填充，持續三次。添加肆(三苯基膦)鈀(0)(Pd(PPh₃)₄，13.56g，11.7mmol)之後，在室溫下對反應混合物進行脫氣且用氮氣再填充，持續三次。隨後將反應混合物加熱至85-90℃，且在該溫度下攪拌16小時。反應完畢後，在30分鐘內添加水(900mL)，同時內部溫度在50℃以上。將混合物冷卻至室溫。固體逐漸沈澱析出。藉由在18℃下過濾來收集固體，且用水(2×250mL)及甲基第三丁基醚(MTBE，3×200mL)加以洗滌。將濕濾餅放回反應燒瓶中，且在50℃下在MTBE(750mL)中攪拌1小時。在室溫下藉由過濾來收集固體。在真空烘箱中，在50℃下、在真空下、在氮氣吹掃下將濾餅乾燥72小時，獲得棕色固體狀4-(4-胺基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(化合物13，123.7g，84%)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆)δ 7.89(s,1H),7.69(s,2H),7.00(s,1H),6.91(d,J=4.6Hz,1 H),6.69(d,J=4.5Hz,1H),4.06(s,2H),3.55(t,J=5.5Hz,2H),2.59-2.52(m,2H),1.43(s,9H)ppm；C₁₆H₂₁N₅O₂(MW 315.37)，LCMS(EI)m/e 316.1(M⁺+H)。

步驟2. 4-(4-胺基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物14)

在室溫下，將2-L燒瓶裝入含4-(4-胺基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(化合物13,50.0g，159mmol)及氧化鉑(IV)(10.0g，44mmol)之乙酸(1000mL)。在50psi氫氣下將燒瓶放在帕爾振盪器(Parr Shaker)上。16小時之後，將反應混合物濾過矽藻土墊(50g)，且用甲醇(500mL)加以洗滌。在減壓下濃縮濾液。在室溫下向殘餘物中添加甲基第三丁基醚(MTBE，600mL)。將碳酸鉀(約50g)於水(1200mL)中之溶液添加至MTBE溶液中以便將pH值調節至6-7。藉由過濾來收集固體，且用水(2×300mL)及正庚烷 (2×300mL)加以洗滌。在真空烘箱中，在50℃下、在真空下、在氮氣吹掃下將濾餅乾燥16小時，獲得淡棕色固體狀4-(4-胺基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物14,49.3g，98%)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆)δ 7.82(s,1H),7.59(s,2H),6.81(d,J=4.4Hz,1H),6.44(d,J=4.3Hz,1H),4.05(d,J=11.3Hz,2H),3.25(tt,J=11.8,3.3Hz,1H),2.88(s,2H),1.95(d,J=11.9Hz,2H),1.51(qd,J=12.6,4.0Hz,2H),1.42(s,9H)ppm；C₁₆H₂₃N₅O₂(MW 317.39)，LCMS(EI)m/e 318.1(M⁺+H)。

步驟3. 4-(4-胺基-5-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物1)

在室溫下，將配備有機械攪拌器、熱電偶、回流冷凝器、氮氣入口及氮氣出口之5頸22-L圓底燒瓶裝入含4-(4-胺基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物14，730g，2.30mol)之四氫呋喃(THF，14.0L)。將混合物冷卻至0-5℃。在5分鐘內向反應混合物中添加N-溴琥珀醯亞胺(NBS，409g，2.30mol)，同時維持內部溫度在15℃以下。在10℃以下攪拌1小時之後，在減壓下移除一些溶劑(9.0L)。在5分鐘內向殘餘溶液中添加碳酸氫鈉(140g，1.67mol)於水(14.0L)中之溶液。固體沈澱析出。藉由過濾來收集固體，且用水(7.0L)及正庚烷(4L)加以洗滌。在過濾器上，在室內真空下將濕濾餅乾燥48小時，獲得呈棕色固體狀之4-(4-胺基-5-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(化合物1，886g，97%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.86(s,1H),6.66(s,1H),4.04(d,J=11.0Hz,2H),3.30-3.23(m,1H),2.86(br.s,2H),1.92(d,J=12.4Hz,2H),1.50(qd,J=12.8,4.1Hz,2H),1.41(s,9H)ppm；¹³C NMR(101MHz,DMSO-d ₆)δ 155.68,154.29,148.35,135.37,111.31,110.68,87.29,79.10,43.97,32.63,30.37,28.58ppm；C₁₆H₂₂BrN₅O₂(MW 395.10)，LCMS(EI)m/e 396.1(M⁺+H)。

實例5. 1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸(流程2及流程3之化合物7)之合成 步驟1：2-((3-苯基脲基)亞甲基)丙二酸二乙酯

在室溫下向(胺基亞甲基)丙二酸二乙酯(6.0g，32mmol)及異氰酸苯酯(3.8mL，35mmol)於1,2-二氯乙烷(20mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(7.2mL，42mmol)。隨後在70℃下將反應混合物攪拌隔夜，冷卻至室溫，添加Et₂O(50mL)，且再攪拌30分鐘。藉由過濾來收集所得固體，用醚洗滌並乾燥，得到呈白色固體狀之產物(4.88g，50%)。LCMS C₁₅H₁₉N₂O₅(M+H)⁺計算值：m/z=307.1。實驗值：307.2。

步驟2：2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸乙酯

在室溫下將來自先前步驟之2-((3-苯基脲基)亞甲基)丙二酸二乙酯(4.88g，15.9mmol)及含2.5M NaOEt之EtOH(13mL，32mmol)於EtOH(20mL)中之混合物攪拌1小時。用EtOAc稀釋所得混合物，用1N檸檬酸加以洗滌/酸化，用水、鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥並濃縮，獲得呈白色固體狀之粗產物，直接用於下一步驟(4.1g，99%)。LCMS C₁₃H₁₃N₂O₄(M+H)⁺計算值：m/z=261.1。實驗值：261.1。

步驟3：1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸乙酯

在50℃下將來自先前步驟之2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶 -5-甲酸乙酯(1.50g，5.76mmol)、碘化異丙烷(1.2mL，12mmol)及Cs₂CO₃(5.6g，17mmol)於DMF(20mL)中之混合物攪拌5小時。隨後將反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc加以稀釋，用水、鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥並濃縮，獲得粗產物，直接用於下一步驟。LCMS C₁₆H₁₉N₂O₄(M+H)⁺計算值：m/z=303.1。實驗值：303.1。

步驟4：1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸

在60℃下將來自先前步驟之1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸乙酯(1.70g，5.62mmol)於4.0M HCl/1,4-二噁烷(9.8mL，39mmol)及水(2.1mL)中之混合物攪拌4小時，冷卻至室溫，並且添加水。隨後藉由過濾來收集所得固體(用水洗滌)，得到呈白色固體狀之產物(1.1g，71%)。LCMS C₁₄H₁₅N₂O₄(M+H)⁺計算值：m/z=275.1。實驗值：275.1。

實例6. 1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸(流程1之化合物6)之合成 步驟3：2-((3-吡啶-2-基脲基)亞甲基)丙二酸二乙酯

在室溫下向2-(胺基亞甲基)丙二酸二乙酯(3.0g，16.0mmol)及2-異氰酸基吡啶(2.02g，16.8mmol)於1,2-二氯乙烷(9.0mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(3.6mL，20.8mmol)。隨後在70℃下將反應混合物攪拌隔夜，冷卻至室溫，且直接經由管柱層析(0%至15% MeOH/CH₂Cl₂)加以純化，得到產物(3.18g，65%)。LCMS C₁₄H₁₈N₃O₅(M+H)⁺計算值：m/z=308.1。實驗值：308.1。

步驟4：1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸

在室溫下將2-((3-(吡啶-2-基)脲基)亞甲基)丙二酸二乙酯(3.18g，10.4mmol)及2.5M NaOEt/EtOH(6.2mL，15.5mmol)於EtOH(25mL)中之混合物攪拌3小時。用EtOAc稀釋所得混合物，且用1N棕檬酸溶液(30mL)加以洗滌/酸化。分離有機層，且用3：1 CHCl₃/異丙醇(30mL×3)進一步萃取水層。使所合併之有機層經Na₂SO₄乾燥並濃縮，獲得粗產物2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸乙酯，直接用於下一步驟。LCMS C₁₂H₁₂N₃O₄(M+H)⁺計算值：m/z=262.1。實驗值：262.2。

在70℃下將來自先前步驟之粗2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸乙酯、2-碘丙烷(2.06mL，20.7mmol)及Cs₂CO₃(10.1g，31.0mmol)於DMF(35mL)中之混合物攪拌3小時。隨後將反應混合物冷卻至室溫，用3：1 CHCl₃/異丙醇(75mL)稀釋，用水、鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥並濃縮，得到粗產物1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸乙酯，直接用於下一步驟。LCMS C₁₅H₁₈N₃O₄(M+H)⁺計算值：m/z=304.1。實驗值：304.1。

在80℃下將來自先前步驟之粗1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸乙酯於4M HCl/1,4-二噁烷(20mL，82mmol)及水(5.0mL)中之混合物攪拌5小時，冷卻至室溫並濃縮。隨後經由管柱層析(0%至15% MeOH/CH₂Cl₂)對所得物質進行純化，得到呈微黃色固體狀之產物(1.50g，三個步驟47%)。LCMS C₁₃H₁₄N₃O₄(M+H)⁺計算值：m/z=276.1。實驗值：276.1。

實例7. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽(化 合物I馬來酸鹽，形式I)之固態表徵 化合物I馬來酸鹽之X射線粉末繞射(XRPD)

由Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀(XRPD)獲得X射線粉末繞射(XRPD)。用於XRPD之一般實驗程序為：(1)來自銅之X射線輻射處於1.054056Å，利用K_β濾光器；(2)X射線功率30KV，15mA；及(3)使樣品粉末分散在零背景樣品容器上。用於XRPD之一般量測條件為：起始角度3°；終止角度45°；取樣0.02°；及掃描速度2°/min。XRPD圖案示於圖1中且XRPD資料提供於表1中。

化合物I馬來酸鹽(形式I)之差示掃描量熱術(DSC)

由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-300℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；及氮氣流速50mL/min。DSC熱分析圖示於圖2中。DSC熱分析圖顯示在起始溫度202.9℃與峰值溫度211.0℃處存在主要吸熱事件，據信此為化合物之熔融與分解溫度。

化合物I馬來酸鹽(形式I)之熱解重量分析(TGA)

由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。TGA熱分析圖示於圖3中。觀測到達至150℃之重量損失為約0.7%且據信與濕氣及殘餘溶劑之損失相關。化合物在200℃以上開始顯著分解。

化合物I馬來酸鹽(形式I)之溶解度

量測化合物I馬來酸鹽在25±1℃下及在50±1℃下之溶解度。用於測試在25±1℃下之溶解度的一般程序如下：1)將3mL表1A中所列出之各溶劑添加至個別小瓶；2)在25℃下添加化合物I馬來酸鹽以形成混濁溶液；3)再添加15-20mg化合物I馬來酸鹽；4)在25±1℃下將混合物攪拌48小時；5)使用注射器式過濾器來過濾上清液；及6)用MeOH稀釋飽和溶液且藉由HPLC加以分析。用於測試在50±1℃下之溶解度的一般程序如下：1)將3mL表1A中所列出之各溶劑添加至個別小瓶；2)在50℃下添加化合物I馬來酸鹽以形成混濁溶液；3)再添加20-25mg化合物I馬來酸鹽；4)在50±1℃下將混合物攪拌24小時；5)在50±1℃下使用經升溫之注射器式過濾器來過濾上清液；及6)用MeOH稀釋飽和溶液且藉由HPLC加以分析。結果彙總於表1A中。

其他結晶鹽

已發現並製備式I化合物之其他結晶鹽，諸如鹽酸鹽、單硫酸鹽、半硫酸鹽、甲磺酸鹽及苯磺酸鹽。

實例8：N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺之鹽(化合物II之鹽)的製備

根據以下表2中之程序來製備化合物II之鹽。藉由XRPD、DSC及 TGA來分析此等鹽(參見實例9-15)。

實例9.化合物II磷酸鹽之固態表徵 化合物II磷酸鹽之X射線粉末繞射(XRPD)研究

藉由XRPD表徵化合物II之磷酸鹽。由Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀(XRPD)獲得XRPD。用於XRPD之一般實驗程序為：(1)來自銅之X射線輻射處於1.054056Å，利用K_β濾光器；(2)X射線功率30KV，15mA；及(3)使樣品粉末分散在零背景樣品容器上。用於XRPD之一般量測條件為：起始角度3°；終止角度45°；取樣0.02°；及掃描速度2°/min。

化合物II磷酸鹽之XRPD圖案示於圖4中且XRPD資料提供於表3中。

化合物II磷酸鹽之差示掃描量熱術(DSC)研究

藉由DSC表徵化合物II之磷酸鹽。由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-350℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；以及氮氣流速50mL/min。

化合物II磷酸鹽之DSC熱分析圖示於圖5中。DSC熱分析圖顯示在起始溫度252.6℃與峰值溫度257.2℃處存在主要吸熱事件，據信此為化合物熔融/分解。

化合物II磷酸鹽之熱解重量分析(TGA)研究

藉由TGA表徵化合物II之磷酸鹽。由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。

化合物II磷酸鹽之TGA熱分析圖示於圖6中。觀測到達至200℃之重量損失為約1.8%且據信與濕氣或殘餘溶劑之損失相關。觀測到在230℃以上存在顯著重量損失且據信與化合物分解相關。

實例10.化合物II馬來酸鹽之固態表徵 化合物II馬來酸鹽之X射線粉末繞射(XRPD)研究

藉由XRPD表徵化合物II之馬來酸鹽。由Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀(XRPD)獲得XRPD。用於XRPD之一般實驗程序為：(1)來自銅之X射線輻射處於1.054056Å，利用K_β濾光器；(2)X射線功率30KV，15mA；及(3)使樣品粉末分散在零背景樣品容器上。用於XRPD之一般量測條件為：起始角度3°；終止角度45°；取樣0.02°；及掃描速度2°/min。

化合物II馬來酸鹽之XRPD圖案示於圖7中且XRPD資料提供於表4中。

表4.

化合物II馬來酸鹽之差示掃描量熱術(DSC)研究

藉由DSC表徵化合物II之馬來酸鹽。由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-300℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；以及氮氣流速50mL/min。

化合物II馬來酸鹽之DSC熱分析圖示於圖8中。DSC熱分析圖顯示兩個主要吸熱事件，其中第一事件在起始溫度183.4℃及峰值溫度194.8℃處，繼之以第二事件在起始溫度233.4℃及峰值溫度239.7℃處。

化合物II馬來酸鹽之熱解重量分析(TGA)研究

藉由TGA表徵化合物II之馬來酸鹽。由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。

化合物II馬來酸鹽之TGA熱分析圖示於圖9中。觀測到達至125℃ 之重量損失為約1.8%且據信與濕氣或殘餘溶劑之損失相關。觀測到在175℃以上存在顯著重量損失且據信與化合物分解相關。

實例11.化合物II半硫酸鹽之固態表徵 化合物II半硫酸鹽之X射線粉末繞射(XRPD)研究

藉由XRPD表徵化合物II之半硫酸鹽。由Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀(XRPD)獲得XRPD。用於XRPD之一般實驗程序為：(1)來自銅之X射線輻射處於1.054056Å，利用K_β濾光器；(2)X射線功率30KV，15mA；及(3)使樣品粉末分散在零背景樣品容器上。用於XRPD之一般量測條件為：起始角度3°；終止角度45°；取樣0.02°；及掃描速度2°/min。

化合物II半硫酸鹽之XRPD圖案示於圖10中且XRPD資料提供於表5中。

化合物II半硫酸鹽之差示掃描量熱術(DSC)研究

藉由DSC表徵化合物II之半硫酸鹽。由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-350℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；以及氮氣流速50mL/min。

化合物II半硫酸鹽之DSC熱分析圖示於圖11中。DSC熱分析圖顯示在起始溫度283.8℃與峰值溫度289.4℃處存在主要吸熱事件，據信此為化合物熔融/分解。

化合物II半硫酸鹽之熱解重量分析(TGA)研究

藉由TGA表徵化合物II之半硫酸鹽。由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。

化合物II半硫酸鹽之TGA熱分析圖示於圖12中。觀測到達至100℃之重量損失為約1.5%且據信與濕氣或殘餘溶劑之損失相關。在多個步驟中觀測到在200℃以上存在顯著重量損失且據信與化合物分解相關。

實例12.化合物II鹽酸鹽之固態表徵 化合物II鹽酸鹽之X射線粉末繞射(XRPD)研究

藉由XRPD表徵化合物II之鹽酸鹽。由Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀(XRPD)獲得XRPD。用於XRPD之一般實驗程序為：(1)來自銅之X射線輻射處於1.054056Å，利用K_β濾光器；(2)X射線功率30KV，15mA；及(3)使樣品粉末分散在零背景樣品容器上。用於XRPD之一般量測條件為：起始角度3°；終止角度45°；取樣0.02°；及掃描速度2°/min。

化合物II鹽酸鹽之XRPD圖案示於圖13中且XRPD資料提供於表6中。

化合物II鹽酸鹽之差示掃描量熱術(DSC)研究

藉由DSC表徵化合物II之鹽酸鹽。由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-300℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；以及氮氣流速50mL/min。

化合物II鹽酸鹽之DSC熱分析圖示於圖14中。DSC熱分析圖顯示在起始溫度183.5℃與峰值溫度190.0℃處存在主要吸熱事件，據信此為化合物熔融/分解。

化合物II鹽酸鹽之熱解重量分析(TGA)研究

藉由TGA表徵化合物II之鹽酸鹽。由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。

化合物II鹽酸鹽之TGA熱分析圖示於圖15中。觀測到達至200℃之重量損失為約5.9%且據信與濕氣或殘餘溶劑之損失相關。觀測到在200℃以上存在顯著重量損失且據信與化合物分解相關。

實例13.化合物II柳酸鹽之固態表徵 化合物II柳酸鹽之X射線粉末繞射(XRPD)研究

藉由XRPD表徵化合物II之柳酸鹽。由Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀(XRPD)獲得XRPD。用於XRPD之一般實驗程序為：(1)來自銅之X射線輻射處於1.054056Å，利用K_β濾光器；(2)X射線功率30KV，15mA；及(3)使樣品粉末分散在零背景樣品容器上。用於XRPD之一般量測條件為：起始角度3°；終止角度45°；取樣0.02°；及掃描速度2°/min。

化合物II柳酸鹽之XRPD圖案示於圖16中且XRPD資料提供於表7中。

化合物II柳酸鹽之差示掃描量熱術(DSC)研究

藉由DSC表徵化合物II之柳酸鹽。由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-300℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；以及氮氣流速50mL/min。

化合物II柳酸鹽之DSC熱分析圖示於圖17中。DSC熱分析圖顯示3個主要吸熱事件：第一個在起始溫度176.0℃與峰值溫度181.7℃處，第二個在起始溫度209.9℃與峰值溫度224.9℃處，且第三個在起始溫度254.7℃與峰值溫度264.5℃處。

化合物II柳酸鹽之熱解重量分析(TGA)研究

藉由TGA表徵化合物II之柳酸鹽。由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。

化合物II柳酸鹽之TGA熱分析圖示於圖18中。在第一步驟中觀測到達至250℃之重量損失為約8.1%。觀測到在300℃以上存在顯著重量損失且據信與化合物分解相關。

實例14.化合物II甲磺酸鹽之固態表徵 化合物II甲磺酸鹽之X射線粉末繞射(XRPD)研究

藉由XRPD表徵化合物II之甲磺酸鹽。由Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀(XRPD)獲得XRPD。用於XRPD之一般實驗程序為：(1)來自銅之X射線輻射處於1.054056Å，利用K_β濾光器；(2)X射線功率30KV，15mA；及(3)使樣品粉末分散在零背景樣品容器上。用於XRPD之一般量測條件為：起始角度3°；終止角度45°；取樣0.02°；及掃描速度2°/min。

化合物II甲磺酸鹽之XRPD圖案示於圖19中且XRPD資料提供於表8中。

化合物II甲磺酸鹽之差示掃描量熱術(DSC)研究

藉由DSC表徵化合物II之甲磺酸鹽。由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-300℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；以及氮氣流速50mL/min。

化合物II甲磺酸鹽之DSC熱分析圖示於圖20中。DSC熱分析圖顯示在起始溫度166.3℃與峰值溫度174.8℃處存在主要吸熱事件，據信此為化合物熔融/分解。

化合物II甲磺酸鹽之熱解重量分析(TGA)研究

藉由TGA表徵化合物II之甲磺酸鹽。由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。

化合物II甲磺酸鹽之TGA熱分析圖示於圖21中。觀測到達至100℃之重量損失為約2.3%且據信與濕氣或殘餘溶劑之損失相關。觀測到在200℃以上存在顯著重量損失且據信與化合物分解相關。

實例15.化合物II乙磺酸鹽之固態表徵 化合物II乙磺酸鹽之X射線粉末繞射(XRPD)研究

藉由XRPD表徵化合物II之乙磺酸鹽。由Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀(XRPD)獲得XRPD。用於XRPD之一般實驗程序為：(1)來自銅之X射線輻射處於1.054056Å，利用K_β濾光器；(2)X射線功率30KV，15mA；及(3)使樣品粉末分散在零背景樣品容器上。用於XRPD之一般量測條件為：起始角度3°；終止角度45°；取樣0.02°；及掃描速度2°/min。

化合物II乙磺酸鹽之XRPD圖案示於圖22中且XRPD資料提供於表9中。

化合物II乙磺酸鹽之差示掃描量熱術(DSC)研究

藉由DSC表徵化合物II之乙磺酸鹽。由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-300℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；以及氮氣流速50mL/min。

化合物II乙磺酸鹽之DSC熱分析圖示於圖23中。DSC熱分析圖顯示在起始溫度180.4℃與峰值溫度187.7℃處存在主要吸熱事件，據信此為化合物熔融/分解。

化合物II乙磺酸鹽之熱解重量分析(TGA)研究

藉由TGA表徵化合物II之乙磺酸鹽。由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。

化合物II乙磺酸鹽之TGA熱分析圖示於圖24中。觀測到達至100℃之重量損失為約1.6%且據信與濕氣或殘餘溶劑之損失相關。觀測到在200℃以上存在顯著重量損失且據信與化合物分解相關。

實例16. N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽之其他結晶形式(化合物I馬來酸鹽，形式II-V)之製備

用於形成化合物I馬來酸鹽形式II、III、IV及V之實驗程序彙總於表10中。

實例17.化合物I馬來酸鹽形式II之固態表徵 化合物I馬來酸鹽形式II之X射線粉末繞射(XRPD)

由Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀(XRPD)獲得X射線粉末繞射(XRPD)。用於XRPD之一般實驗程序為：(1)來自銅之X射線輻射處於1.054056Å，利用K_β濾光器；(2)X射線功率30KV，15mA；及(3)使樣品粉末分散在零背景樣品容器上。用於XRPD之一般量測條件為：起始角度3°；終止角度45°；取樣0.02°；及掃描速度2°/min。

化合物I馬來酸鹽形式II之XRPD圖案示於圖25中且XRPD資料提供於表11中。

實例18.化合物I馬來酸鹽形式III之固態表徵

化合物I馬來酸鹽形式III之XRPD圖案示於圖26中且XRPD資料提供於表12中。

化合物I馬來酸鹽形式III之差示掃描量熱術(DSC)研究

藉由DSC表徵化合物I馬來酸鹽形式III。由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-300℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；以及氮氣流速50mL/min。

化合物I馬來酸鹽形式III之DSC熱分析圖示於圖27中。DSC熱分析圖顯示兩個吸熱事件：第一個具有起始溫度143.9℃與峰值溫度165.4℃，且第二個具有起始溫度186.3℃與峰值溫度195.4℃。

化合物I馬來酸鹽形式III之熱解重量分析(TGA)研究

藉由TGA表徵化合物I馬來酸鹽形式III。由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。

化合物I馬來酸鹽形式III之TGA熱分析圖示於圖28中。

實例19.化合物I馬來酸鹽形式IV之固態表徵

化合物I馬來酸鹽形式IV之XRPD圖案示於圖29中且XRPD資料提供於表13中。

化合物I馬來酸鹽形式IV之差示掃描量熱術(DSC)研究

藉由DSC表徵化合物I馬來酸鹽形式IV。由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-300℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；以及氮氣流速50mL/min。

化合物I馬來酸鹽形式IV之DSC熱分析圖示於圖30中。DSC熱分析圖顯示兩個吸熱事件：第一個具有起始溫度145.7℃與峰值溫度152.1℃，且第二個具有起始溫度188.3℃與峰值溫度202.6℃。

化合物I馬來酸鹽形式IV之熱解重量分析(TGA)研究

藉由TGA表徵化合物I馬來酸鹽形式IV。由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。

化合物I馬來酸鹽形式IV之TGA熱分析圖示於圖31中。

實例20.化合物I馬來酸鹽形式V之固態表徵

化合物I馬來酸鹽形式V之XRPD圖案示於圖32中且XRPD資料提供於表14中。

化合物I馬來酸鹽形式V之差示掃描量熱術(DSC)研究

藉由DSC表徵化合物I馬來酸鹽形式V。由具有自動取樣器之TA Instruments差示掃描量熱儀型號Q200獲得DSC。DSC儀器條件如下：30-300℃，10℃/min；T0鋁樣品皿及蓋；以及氮氣流速50mL/min。

化合物I馬來酸鹽形式V之DSC熱分析圖示於圖33中。DSC熱分析圖顯示具有起始溫度189.1℃與峰值溫度200.1℃之吸熱事件。

化合物I馬來酸鹽形式V之熱解重量分析(TGA)研究

藉由TGA表徵化合物I馬來酸鹽形式V。由TA Instrument熱解重量分析儀型號Q500獲得TGA。用於TGA之一般實驗條件為：以20℃/min自20℃升至600℃；氮氣吹掃，氣體流速40mL/min，隨後吹掃流速達到平衡；樣品吹掃流速60mL/min；鉑樣品皿。

化合物I馬來酸鹽形式V之TGA熱分析圖示於圖34中。

實例A Axl自磷酸化分析

藉由在室溫下在含有50mM Tris pH 7.5、0.2mg/ml Axl、5mM ATP、20mM MgCl₂及2mM DTT之緩衝液中將重組Axl蛋白(Life Technologies，PV4275)培育1小時來進行Axl自磷酸化。

TAM酶分析

激酶分析緩衝液含有50mM HEPES pH 7.5、10mM MgCl2、1mM EGTA、0.01% NP-40及2mM DTT。將溶解於DMSO中之0.1ul測試化合物自化合物板轉移至白色384孔分析板(Greiner LUMITRAC板)。DMSO之最終濃度為1.25%。在分析緩衝液中製備5.1nM磷酸化-Axl或0.0625nM c-Mer(Carna Biosciences，08-108)或0.366nM Tyro3(Life Technologies，PR7480A)之酶溶液。在含有2000uM ATP之分析緩衝液中將肽受質生物素-EQEDEPEGDYFEWLE-醯胺SEQ ID NO：1(Quality Controlled Biochemicals，MA)溶解於DMSO中之1mM儲備溶液稀釋至1uM。將4ul酶溶液(或用於酶空白之分析緩衝液)添加至各板中之適當孔中，隨後添加4ul/孔受質溶液以引發反應。將板避光保存且在室溫下培育60分鐘。藉由添加含有50mM Tris-HCl pH 7.8、150mM NaCl、0.05% BSA、45mM EDTA、180nM SA-APC(Perkin Elmer，CR130-100)及3nM Eu-W1024抗磷酸化酪胺酸PY20(Perkin Elmer，AD0067)之4ul偵測溶液來終止反應。在室溫下將板培育1小時，且在PHERAstar FS板讀取器(BMG labtech)上量測HTRF(均質時間解析螢光)信號。計算各濃度之抑制百分比且利用GraphPad Prism軟體由曲線擬合產生IC50值。

發現式I化合物及式II化合物為AXL、MER及TYRO3中之一或多者的抑制劑。式I化合物及式II化合物之三氟乙酸鹽之IC₅₀資料揭示於美國申請案第15/469,975號中且提供於以下表10中。符號「†」指示IC₅₀

5nM，「††」指示IC₅₀>5nM但

10nM，且「†††」指示IC₅₀>10nM但

100nM。

實例B. BAF3-AXL、BAF3-MER及BAF3-TYRO3細胞之產生及細胞增殖分析

將與二聚序列及HA標籤融合之AXL、MER或TYRO3之胞質結構域選殖至具有嘌呤黴素抗性標記物之pMSCV載體中，以產生三種構築體(pMSCV-AXL、pMSCV-MER及pMSCV-TYRO3)。用該三種構築體藉由電穿孔逐一對BAF3細胞進行轉染。選擇與IL3無關且具有嘌呤黴素抗性之單一純系並且加以表徵。選擇穩定表現AXL、MER或TYRO3之細胞且命名為BAF3-AXL細胞、BAF3-MER細胞及BAF3-TYRO3細胞。

將BAF3、BAF3-AXL、BAF3-MER或BAF3-TYRO3細胞株維持在含10% FBS之RPMI1640(Gibco/Life Technologies，Carlsbad，CA)中。為了量測測試化合物對細胞活力之影響，將1000個細胞/孔接種至384孔組織培養板中含化合物之連續稀釋或單獨DMSO之生長培養基中，在37℃與5% CO₂下維持48小時，藉由ATP分析(CellTiter-Glo Assay，Promega)，根據製造商之程序來量測細胞活力。將資料轉化成相對於DMSO對照物之抑制百分比，且使用GraphPad Prism軟體來擬合IC₅₀曲線。

實例C. BaF3-AXL ELISA及BaF3-MER ELISA

將BaF3-AXL或BaF3-MER細胞維持在含10% FBS及嘌呤黴素(1μg/ml)之培養基RPMI(Gibco/Life Technologies，Carlsbad，CA)中。為了量測測試化合物對磷酸化-AXL或磷酸化-MER之影響，在存在或不存在稀釋於培養基中之測試化合物的情況下將細胞接種(5×10⁴個細胞/孔)於V形底聚丙烯板(Greiner bio-one)中，且在37℃與5% CO₂下培育1小時。藉由離心來收集細胞，並且溶解於110μl含蛋白酶及磷酸酶抑制劑(Halts PI，Thermo Fisher)之冰***解緩衝液(Cell Signaling)中，在冰上持續30分鐘。將細胞溶解物儲存在-80℃下以供用於ELISA。藉由在室溫下將Costar板與抗HA抗體(1μg/ml)一起培育1小時來製備ELISA板。對諸板進行洗滌並且用含3% BSA之PBS加以阻斷。將細胞溶解物負載至ELISA板上且在4℃下培育隔夜。對諸板進行洗滌且與LANCE Eu-W1024抗磷酸化酪胺酸抗體(PY-20)(Perkin Elmer)一起在DELFIA分析緩衝液(Perkin Elmer)中培育1小時，並且在Pherastar(BMG Labtech)上讀取。將資料轉化成相對於DMSO對照物之抑制百分比，且藉由使用GraphPad Prism擬合抑制百分比曲線相對於抑制劑濃度之對數來進行IC₅₀測定。

實例D. H1299磷酸化-AXL ELISA

將存在Axl表現之人類非小細胞肺癌細胞株H1299細胞(ATCC)維持在含10% FBS之培養基RPMI(Gibco/Life Technologies，Carlsbad，CA)中。為了量測測試化合物對磷酸化-AXL之影響，將細胞接種(30000個細胞/孔)於96孔組織培養板(Costar)中且在37℃與5% CO₂下培育隔夜。以適當濃度添加化合物且在37℃與5% CO₂下培育1小時。向各孔中添加rhGas6(R&D Systems，6μg/ml)。在37℃與5% CO₂下將諸板培育15分鐘。收集細胞並且溶解於110μL含蛋白酶及磷酸酶抑制劑(Halts PI，Thermo Fisher)之冰***解緩衝液(Cell Signaling)中。在冰上將溶解物培育1小時且儲存在-80℃下以供用於ELISA。藉由在室溫下將Costar板與抗HA抗體(1μg/ml)一起培育1小時來製備ELISA板。對諸板進行洗滌，且用含3% BSA之PBS加以阻斷。將細胞溶解物負載至ELISA板上且在4℃下培育隔夜。對諸板進行洗滌且與LANCE Eu-W1024抗磷酸化酪胺酸抗體 (PY-20)(Perkin Elmer)一起在DELFIA分析緩衝液(Perkin Elmer)中培育1小時，並且在Pherastar(BMG Labtech)上讀取。將資料轉化成相對於DMSO對照物之抑制百分比，且藉由使用GraphPad Prism擬合抑制百分比曲線相對於抑制劑濃度之對數來進行IC₅₀測定。

實例E.全血H1299磷酸化-AXL ELISA

將H1299細胞(ATCC)維持在含10% FBS之培養基RPMI(Gibco/Life Technologies，Carlsbad，CA)中。為了量測測試化合物對全血中之磷酸化-AXL之影響，將細胞接種(30000個細胞/孔)於96孔組織培養板(Costar)中且在37℃與5% CO₂下培育隔夜。將獲自正常供體之血液與測試化合物混合1小時。自H1299細胞移除培養基，且向各孔添加含化合物之血液。在37℃與5% CO₂下培育1小時之後，向各孔添加rh-Gas6(4μg/ml，R&D Systems)。在37℃與5% CO₂下將板培育15分鐘。用PBS洗滌細胞，並且溶解於110uL含蛋白酶及磷酸酶抑制劑(Halts PI，Thermo Fisher)之冰***解緩衝液(Cell Signaling)中，在冰上1小時。將板儲存在-80℃下以供用於ELISA。藉由在室溫下將Costar板與抗HA抗體(1ug/ml)一起培育1小時來製備ELISA板。對諸板進行洗滌，且用含3% BSA之PBS加以阻斷。將細胞溶解物負載至ELISA板上且在4℃下培育隔夜。對諸板進行洗滌且與LANCE Eu-W1024抗磷酸化酪胺酸抗體(PY-20)(Perkin Elmer)一起在DELFIA分析緩衝液(Perkin Elmer)中培育1小時，並且在Pherastar(BMG Labtech)上讀取。將資料轉化成相對於DMSO對照物之抑制百分比，且藉由使用GraphPad Prism擬合抑制百分比曲線相對於抑制劑濃度之對數來進行IC₅₀測定。

實例F. G361磷酸化-Akt Cell Insight ELISA

將表現Mer之人類惡性黑素瘤細胞株G361細胞(ATCC)維持在含10% FBS之培養基RPMI(Gibco/Life Technologies，Carlsbad，CA)中。為了量測測試化合物對MER信號傳導途徑之影響，將細胞以2×10⁴個細胞/孔以100μL 體積接種於96孔CellBind平板(Corning)中，且在37℃與5% CO₂下培育隔夜。將20μL測試化合物以適當濃度添加至細胞並且培育1小時。向各孔添加rhGas6(4μg/ml，R&D Systems)，並且培育20分鐘。在室溫下藉由添加50uL含4%聚甲醛(Electron Microscopy Sciences)之PBS(Corning)將細胞固定30分鐘。對諸板進行洗滌並且在室溫下與50uL含0.2% triton X-100(Sigma)之PBS一起培育10分鐘。對諸板進行洗滌並且與100uL阻斷緩衝液(含0.1% BSA之PBS)一起培育30分鐘。對諸板進行洗滌並且在4℃下與稀釋於0.1% BSA中(1：300稀釋)之磷酸化-AKT(Ser473)(D9E)兔mAb(Cell Signaling)一起培育隔夜。對諸板進行洗滌並且在室溫下與50uL含山羊抗兔IgG(H+L)之Alexaflour 488 F(ab')²片段(Molecular Probes，1：1000稀釋)及Hoechst 33342(Thermo Fisher，1：2000稀釋)之PBS一起培育2小時。用PBS洗滌諸板，且在Cell Insight CX5(Thermo Fisher)上讀取。

根據先前描述，除本文中所描述之彼等修改以外的對本發明之各種修改對於熟習此項技術者亦將顯而易見。此種修改亦意欲屬於所附申請專利範圍之範疇內。本申請案中所引用之各參考文獻，包括所有專利、專利申請案及公開案，係以引用之方式整體併入本文中。

<110> 美商英塞特公司

<120> TAM抑制劑之鹽

<130> 20443-0522WO1

<150> 62/564,070

<151> 2017-09-27

<150> 62/714,196

<151> 2018-08-03

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 合成多肽

<400> 1

Claims

一種鹽，其為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽，其中該鹽為結晶型，其就2-θ而言具有選自4.3°±0.2°、8.4°±0.2°、12.6°±0.2°、13.2°±0.2°及18.5°±0.2°之至少一個XRPD峰。
如請求項1之鹽，其為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺與馬來酸之1：1化學計算比。
如請求項1之鹽，其以在211℃±3℃處具有吸熱峰的DSC熱分析圖為特徵。
如請求項1之鹽，其具有如圖2中所示之DSC熱分析圖。
如請求項1之鹽，其具有如圖3中所示之TGA熱分析圖。
如請求項1之鹽，其就2-θ而言具有選自4.3°±0.2°、8.4°±0.2°、12.6°±0.2°、13.2°±0.2°及18.5°±0.2°之至少兩個XRPD峰。
如請求項1之鹽，其就2-θ而言具有選自4.3°±0.2°、8.4°±0.2°、12.6°±0.2°、13.2°±0.2°及18.5°±0.2°之至少三個XRPD峰。
如請求項1之鹽，其就2-θ而言具有選自4.3°±0.2°、8.4°±0.2°、12.6°±0.2°、13.2°±0.2°及18.5°±0.2°之至少四個XRPD峰。
如請求項1之鹽，其就2-θ而言包括以下XRPD峰：4.3°±0.2°、8.4°±0.2°、12.6°±0.2°、13.2°±0.2°及18.5°±0.2°。
如請求項1之鹽，其具有如圖1中所示之XRPD輪廓。
一種鹽，其為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺半硫酸鹽，其中該鹽為結晶型，其就2-θ而言具有選自5.3°± 0.2°、8.5°±0.2°、15.3°±0.2°、20.1°±0.2°及24.9°±0.2°之至少一個XRPD峰。
如請求項11之鹽，其為N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺與硫酸之1：0.5化學計算比。
如請求項11之鹽，其以在289.4℃±3℃處具有吸熱峰之DSC熱分析圖為特徵。
如請求項11之鹽，其具有如圖11中所示之DSC熱分析圖。
如請求項11之鹽，其具有如圖12中所示之TGA熱分析圖。
如請求項11之鹽，其就2-θ而言具有選自5.3°±0.2°、8.5°±0.2°、15.3°±0.2°、20.1°±0.2°及24.9°±0.2°之至少兩個XRPD峰。
如請求項11之鹽，其就2-θ而言具有選自5.3°±0.2°、8.5°±0.2°、15.3°±0.2°、20.1°±0.2°及24.9°±0.2°之至少三個XRPD峰。
如請求項11之鹽，其就2-θ而言具有選自5.3°±0.2°、8.5°±0.2°、15.3°±0.2°、20.1°±0.2°及24.9°±0.2°之至少四個XRPD峰。
如請求項11之鹽，其就2-θ而言包括以下XRPD峰：5.3°±0.2°、8.5°±0.2°、15.3°±0.2°、20.1°±0.2°及24.9°±0.2°。
如請求項11之鹽，其具有如圖10中所示之XRPD輪廓。
一種鹽，其係選自：N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺磷酸鹽，其就2-θ而言具有選自5.3°±0.2°、9.1°±0.2°、14.9°±0.2°、15.8°±0.2°及19.3°±0.2°之至少一個XRPD峰；N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺馬來酸鹽，其就 2-θ而言具有選自4.5°±0.2°、6.5°±0.2°、14.1°±0.2°、24.0°±0.2°及28.2°±0.2°之至少一個XRPD峰；N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺鹽酸鹽，其就2-θ而言具有選自6.5°±0.2°、9.7°±0.2°、14.9°±0.2°、21.5°±0.2°及23.9°±0.2°之至少一個XRPD峰；N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺柳酸鹽，其就2-θ而言具有選自7.3°±0.2°、14.4°±0.2°、15.7°±0.2°、19.9°±0.2°及21.9°±0.2°之至少一個XRPD峰；N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺甲磺酸鹽，其就2-θ而言具有選自5.0°±0.2°、8.2°±0.2°、13.2°±0.2°及16.9°±0.2°之至少一個XRPD峰；及N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺乙磺酸鹽，其就2-θ而言具有選自4.9°±0.2°、7.6°±0.2°、15.4°±0.2°、16.8°±0.2°及17.5°±0.2°之至少一個XRPD峰。
一種醫藥組合物，其包含如請求項1至21中任一項之鹽及醫藥學上可接受之載劑。
一種如請求項1至21中任一項之鹽之用途，其係用於製備抑制TAM激酶之醫藥品。
一種如請求項1至21中任一項之鹽之用途，其係用於製備抑制AXL及MER激酶之醫藥品。
一種如請求項1至21中任一項之鹽之用途，其係用於製備治療癌症的醫藥品。
如請求項25之用途，其中該癌症係選自肝細胞癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、***癌、食道癌、膽囊癌、胰臟癌、甲狀腺癌、皮膚癌、白血病、多發性骨髓瘤、慢性淋巴細胞性淋巴瘤、B細胞淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)或非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma)、華氏巨球蛋白血症(Waldenstrom's Macroglubulinemia)、毛細胞性淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤(Burkett's lymphoma)、神經膠質母細胞瘤、黑色素瘤及橫紋肌肉瘤。
如請求項25之用途，其中該癌症為肺癌、***癌、結腸癌、乳癌、黑色素瘤、腎細胞癌、多發性骨髓瘤、胃癌、橫紋肌肉瘤、成人T細胞白血病或急性骨髓性白血病。
一種製備如請求項1之鹽的方法，其包括使式I化合物：
與馬來酸反應以形成該鹽。
如請求項28之方法，其中基於1當量該式I化合物使用約1當量馬來酸。
如請求項28之方法，其中該使該式I化合物與馬來酸反應係在溶劑組分之存在下進行。
如請求項30之方法，其中該溶劑組分包含甲醇。
如請求項30之方法，其中該溶劑組分包含二氯甲烷。
如請求項30之方法，其中該溶劑組分包含甲醇及二氯甲烷。
如請求項33之方法，其中該方法進一步包括移除大部分二氯甲烷以使該鹽沈澱。
如請求項30之方法，其中該方法進一步包括在該反應之前形成該式I化合物於溶劑組分中之溶液。
如請求項35之方法，其中藉由將該式I化合物於該溶劑組分中之漿液加熱至45℃至55℃之溫度而形成該溶液。
如請求項36之方法，其中該方法進一步包括在該使該式I化合物與馬來酸反應之前攪拌該溶液；及過濾該溶液以形成濾液。
如請求項37之方法，其中該方法進一步包括在該將該漿液加熱至45℃至55℃之溫度以形成溶液之步驟之後且在該攪拌該溶液之步驟之前向該溶液中添加活性碳及矽膠。
一種製備如請求項11之鹽的方法，其包括使式II化合物：
與硫酸反應以形成該鹽。
如請求項39之方法，其中基於約1當量該式II化合物使用約0.6當量硫酸。
如請求項39或40之方法，其中該方法包括：向溶劑組分中添加該式II化合物以形成溶液；在室溫下向該溶液中添加硫酸；濃縮該溶液以形成漿液；在60℃至70℃之溫度下攪拌該漿液；及將該漿液冷卻至15℃至25℃之溫度以使該鹽沈澱。
如請求項41之方法，其中該溶劑組分包含甲醇。
如請求項41之方法，其中該溶劑組分包含二氯甲烷。
如請求項41之方法，其中該溶劑組分包含甲醇及二氯甲烷。
如請求項41之方法，其中該硫酸為約1M水溶液。
如請求項39之方法，其中該方法包括製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽。
如請求項46之方法，其中製備呈N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽形式之鹽的方法包括基於約1當量式II化合物使該式II化合物與約1當量硫酸反應。
如請求項46或47之方法，其中該用於製備N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽之方法包括：在室溫下向第一溶劑組分中添加該式II化合物以形成溶液；將該溶液加熱至50℃至60℃之溫度；向該溶液中添加硫酸；及移除溶劑以使該硫酸鹽沈澱。
如請求項48之方法，其中該第一溶劑組分包含甲醇。
如請求項48之方法，其中該硫酸係呈水溶液形式添加。
如請求項46或47之方法，其進一步包括以下步驟：向第二溶劑組分中添加該N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-苯基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺硫酸鹽以形成漿液；將該漿液加熱至30℃至40℃之溫度；攪拌該漿液；及收集所得半硫酸鹽。
如請求項51之方法，其中該第二溶劑組分包含水。
如請求項51之方法，其進一步包括製備該半硫酸鹽之非晶形式，其中該製備該半硫酸鹽之非晶形式包括以下步驟：在室溫下向第三溶劑組分中添加該半硫酸鹽以形成溶液；過濾該溶液；濃縮濾液；及乾燥所得固體，從而獲得該非晶半硫酸鹽。
如請求項53之方法，其中該第三溶劑組分包含丙酮及甲醇。