TWI508964B

TWI508964B - 3,5-di-substituted phenynyl compounds and salts thereof

Info

Publication number: TWI508964B
Application number: TW102102005A
Authority: TW
Inventors: Takeshi Sagara; Satoru Ito; Sachie Otsuki; Hiroshi Sootome
Original assignee: Taiho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2012-01-19
Filing date: 2013-01-18
Publication date: 2015-11-21
Also published as: RU2576384C1; CA2854093A1; CN103958512A; AU2013210403B2; AU2013210403A1; US9108973B2; SG2014009286A; EP2657233A4; FIC20230038I1; CA2854093C; PL2657233T3; KR20140080551A; FR23C1050I1; EP2657233B1; EP2657233A1; HK1198164A1; MX351513B; US20140343035A1; DK2657233T3; MY171055A

Description

3,5-二取代苯炔基化合物及其鹽

本發明係關於一種具有纖維母細胞生長因子受體拮抗作用之新穎3,5-二取代苯炔基化合物及其鹽、含有其等作為有效成分之藥學組成物、FGFR抑制劑、抗腫瘤劑、腫瘤治療方法以及用以治療腫瘤之前述化合物的用途。

背景技術

纖維母細胞生長因子(FGF；fibroblast growth factor)參與了細胞增殖、細胞遷移及分化等之多樣生理過程的調節。FGF之生理學活性係透過具專一性之細胞表面受體[即纖維母細胞生長因子受體(FGFR；fibroblast growth factor receptor)]來傳達。FGFR屬於受體型之蛋白質酪胺酸激酶家族，其係由細胞外配位子結合區域、1次穿膜區域及細胞內酪胺酸激酶區域所構成，迄今已鑑定出4種FGFR(FGFR1、FGFR2、FGFR3及FGFR4)。FGFR透過FGF之結合而形成二聚物，並藉由磷酸化而活性化。受體之活性化會誘導下游特定信號傳達分子之動員及活性化，進而表現生理機能。

至今為止，已有多數針對FGF/FGFR信號傳達異常與人類各種癌症之關聯性的報告(例如非專利文獻1、2或 3等)。人類癌細胞中FGF/FGFR信號之異常活性化被認為肇因於FGFR之過剩表現及/或基因擴增、基因突變、染色體移位或是配位子FGF過剩產生所引起的自迴分泌或旁分泌機制。此外，此種信號異常被視為人類癌細胞對既存之化學療法抗癌劑或其它受體型酪胺酸激酶抑制藥發生抗治療性的原因之一(非專利文獻4)。更甚者，已知其會成為血管形成過程異常之原因，而與血管形成過程異常所引起之各種疾病相關，諸如固態腫瘤、類風濕性關節炎、乾癬、網膜症、老年性黃斑部病變等(非專利文獻5)。

因此，以FGF/FGFR信號傳達作為標的之療法對於與FGF/FGFR信號傳達具高相依性之腫瘤細胞具有直接抗腫瘤作用，除此之外，亦有可能對於FGF/FGFR信號所誘導之腫瘤血管形成顯示出抑制作用，因此，有可能成為可望具有充分抗腫瘤效果之標的療法而廣受期待。此外，亦期待此標的療法可成為既有之化學療法抗癌劑或其他受體型酪胺酸激酶抑制藥之藥效增強劑，或者是對於已對此等藥劑具抗治療性或非感受性之癌種提供有效之治療手段。

專利文獻1已廣泛揭示一種具有Mtor抑制活性之縮合二環化合物，但有具體揭示之化合物皆為咪唑并吡系化合物，並未有針對FGFR抑制活性之記載。專利文獻2雖然有將吡唑并嘧啶環之3位上具有具特徴之取代基的化合物用作BTK抑制劑之記載，但未有針對FGFR抑制活性之記載。專利文獻3中，雖有將吡咯并嘧啶環之5位上具有具特徴之取代基的化合物用作HSP90抑制劑的揭示內容，但未有針對FGFR抑制活性之記載。

先行技術文獻

專利文獻

【專利文獻1】國際公開WO2007/087395手冊。

【專利文獻2】國際公開WO2008/121742手冊。

【專利文獻3】國際公開WO2010/043865手冊。

非專利文獻

【非專利文獻1】J. Clin. Oncol. 24, 3664-3671 (2006)

【非專利文獻2】Mol. Cancer Res. 3, 655-667 (2005)

【非專利文獻3】Cancer Res. 70, 2085-2094 (2010)

【非專利文獻4】Clin. Cancer Res. 17, 6130-6139 (2011)

【非專利文獻5】Nat. Med. 1, 27-31 (1995)

發明概要

如前所述，雖然期待FGFR抑制劑對於各種癌症腫瘤之治療效果，但現狀卻是目前尚未找出強效且具高選擇性之FGFR抑制劑。

因此，本發明之課題即在於提供一種具有FGFR抑制活性且作為抗癌劑有用之新穎化合物。

本案發明人為解決前述課題而反覆精心研討，結果發現，具有特定取代基之苯炔基化合物對於FGFR具有優異之抑制活性及癌細胞增殖抑制作用，作為用以治療癌症之藥品甚是有用，終至完成了本發明。

亦即，本發明提供一種通式(1)所示之化合物或其鹽。

(式中，R₁ 互為相同或相異，表示C₁ -C₆ 烷基；X₁ 及X₂ 各自獨立為N或CH；Y為通式(A)、通式(B)或通式(C)所示之基： (於此，下式所示之2價部分表示含氮C₃ ~C₁₀ 雜環伸烷基)；

(於此，下式所示之2價部分表示C₃ ~C₁₀ 環伸烷基)；

(於此，下式所示之2價部分表示C₆ ~C₁₂ 伸芳基)；

R₂ 為氫原子、C₂ ~C₆ 炔基、-C(=O)OR_x 、-C(=O)N(R_x )(R_y )、羥基C₁ ~C₆ 烷基、二(C₁ ~C₆ 烷基)胺基C₁ ~C₆ 烷基或是可具有R₃ 之C₂ ~C₉ 雜芳基；R₃ 為C₁ ~C₆ 烷基或二(C₁ ~C₆ 烷基)胺基C₁ ~C₆ 烷基；Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )或-C≡C-R₇ ；R₄ 、R₅ 及R₆ 相同或相異，表示氫原子、鹵素原子、可具有R₈ 之C₁ ~C₆ 烷基或是通式(D)所示之基；

(於此，下式所示之1價部分表示含氮C₃ ~C₁₀ 雜環烷基)；【化9】

R₇ 為氫原子、C₁ ~C₆ 烷基或羥基C₁ ~C₆ 烷基；R₈ 為-OR_x 或-N(R_x )(R_y )；R₉ 為C₁ ~C₆ 烷基、鹵素原子或-OR_x ；R_x 及R_y 相同或相異，為氫原子、C₁ ~C₆ 烷基、C₃ ~C₁₀ 環烷基、二(C₁ -C₆ 烷基)胺基C₁ ~C₆ 烷基、或C₁ ~C₆ 烷氧基C₁ ~C₆ 烷基；l為0~3之整數；m為1~3之整數；n為0~2之整數)。

此外，本發明提供一種以上述通式(I)化合物或其鹽作為有效成分之FGFR抑制劑。

再者，本發明提供一種含有上述通式(I)化合物或其鹽與藥學載體之藥學組成物。

再者，本發明提供一種以上述通式(I)化合物或其鹽作為有效成分之抗腫瘤劑。

再者，本發明提供一種腫瘤之治療方法，包含：對於需要此種治療之患者投予有效量之上述通式(I)化合物或其鹽。

再者，本發明提供一種供用於治療腫瘤之上述通式(I)化合物或其鹽。

再者，本發明提供一種用以治療腫瘤之上述通式(I)化合物或其鹽之用途。

再者，本發明提供一種用以製造抗腫瘤劑之上述通式(I)化合物或其鹽之用途。

依據本發明，可提供一種作為FGFR抑制劑係有用之上述通式(I)所示新穎化合物或其鹽。

已確知本發明化合物或其鹽具有優異之FGFR抑制活性，且對於癌細胞株顯示出增殖抑制效果。因此，本發明化合物或其鹽作為癌症之預防及/或治療劑甚是有用。

用以實施發明之形態

本發明之上述通式(I)所示化合物係一透過間隔(spacer)部位而具有已取代α,β不飽和醯胺之縮合雜芳基的3,5-二取代苯炔基化合物，為前述先行技術文獻等中之任一者均未記載之新穎化合物。

本案說明書中，「C₁ ~C₆ 烷基」表示碳數1~6之直鏈狀或分枝狀烷基，可具體列舉如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、戊基及己基等，且宜為碳數1~4之直鏈狀或分枝狀烷基(C₁ ~C₄ 烷基)，更宜為甲基、乙基、異丙基及第三丁基。

本案說明書中，「C₃ ~C₁₀ 環烷基」表示碳數3~10之單環或多環式環烷基，且宜為碳數3~6之單環式環烷基(C₃ ~C₆ 環烷基)，可具體列舉如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、二環癸基(decalyl)等，且宜為環丙基及環丁基。

於本案說明書中，通式(A)所示之基如下：

(式中，R₂ 及l與前述者同義)；其中，下式2價部分(moiety)表示：

於環內含有至少1個氮原子且進一步於環內含有0~2個選自氧原子及硫原子之同種或異種雜原子之碳數3~10的2價雜環伸烷基(含氮C₃ ~C₁₀ 雜環伸烷基)，且宜為在環內含有1~3個氮原子且進一步於環內具有0~1個氧原子之碳數3~5的雜環伸烷基(含氮C₃ ~C₅ 雜環伸烷基)，可具體列舉如伸四氫氮唉基、伸吡咯啶基、伸哌啶基、伸哌基、伸啉基、八氫伸喹啉基(octahydro-quinolinylene)及八氫伸吲哚基(octahydro-indolylene)等，且宜為伸四氫氮唉基、伸吡咯啶基、伸哌啶基、伸哌基及伸啉基。

上述通式(A)所示之基意指：

上式所示2價含氮C₃ ~C₁₀ 雜環伸烷基上之1個氮原子具有結合鍵，另一結合鍵則與取代基(-(CH₂ )_l -)鍵結，且該環上具有取代基R₂ 。

於本案說明書中，通式(B)所示之基如下：

(式中，R₂ 及l與前述者同義)；

該基之上述2價部分(moiety)表示碳數3~10之單環或多環式2價環伸烷基(C₃ ~C₁₀ 環伸烷基)，且宜碳數3~6之單環式2價環伸烷基(C₃ ~C₆ 環伸烷基)，可具體列舉如環伸丙基、環伸丁基、環伸戊基、環伸己基、環伸庚基、二環伸癸基(decalylene)等，且宜為環伸丙基、(1,2-或1,3-)環伸丁基。

下述通式(B)表示：

上式所示之2價C₃ ~C₁₀ 環伸烷基之1個結合鍵與鄰接之胺基(NH)鍵結，另一結合鍵則與取代基(-(CH₂ )_l -)鍵結，且該環上具有取代基R₂ 。

於本案說明書中，通式(C)所示之基如下：

(式中，R₂ 及l與前述者同義)；

該基之上述2價部分(moiety)表示碳數6~12之2價伸芳基(C₆ ~C₁₂ 伸芳基)，可具體列舉如伸苯基、伸萘基及伸聯苯基等，且宜為伸苯基。

下述通式(C)表示：

上式所示之2價C₆ ~C₁₂ 伸芳基之1個結合鍵係與鄰接之胺基(NH)鍵結，另一結合鍵則與取代基(-(CH₂ )_l -)鍵結，該環上具有取代基R₂ 。

於本案說明書中，通式(D)所示之基如下：

(式中，R₉ 、m及n與前述者同義)；

該基中上述1價部分(moiety)表示：環內含有至少1個氮原子，且環內進一步含有0~2個選自氧原子及硫原子之同種或異種雜原子的碳數3~10雜環烷基(含氮C₃ ~C₁₀ 雜環烷基)；且宜為環內含有1~3個氮原子且進一步於環內含有0~1個氧原子之碳數3~5雜環烷基(含氮C₃ ~C₅ 雜環烷基)，可具體列舉如四氫氮唉基、吡咯啶基、哌啶基、哌基、啉基、八氫伸喹啉基及八氫伸吲哚基等，且宜為四氫氮唉基、吡咯啶基、哌啶基、哌基及啉基。

下述通式(D)表示：

上式所示之前述含氮C₃ ~C₁₀ 雜環烷基上之1個氮原子與取代基(-(CH₂ )_m -)鍵結，且該環上具有取代基(-(R₉ )_n )。

於本案說明書中，「C₂ ~C₉ 雜芳基」表示：含有1~3個選自氮原子、氧原子及硫原子之同種或異種雜原子之單環或二環式碳數2~9雜芳基，且宜為含有1~3個選自氮原子、氧原子及硫原子之同種或異種雜原子的單環式碳數2~5雜芳基(單環C₂ -C₅ 雜芳基)，可具體列舉如噻吩基、呋喃基、吡咯基、***基、咪唑基、吡唑基、噁二唑基、異噻唑基、異噁唑基、吡啶基、吡基、嘧啶基、嗒基、異苯并呋喃基、吲基、異吲哚基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、異喹啉基、呔基及啶基等，且宜為1,3,4-噁二唑基。

於本案說明書中，「C₂ ~C₆ 炔基」表示含有至少1個碳-碳參鍵之碳數2~6直鏈狀或分枝狀炔基，可具體列舉如乙炔基、2-丙炔基及2-己炔基等，且宜為乙炔基。

於本案說明書中，「羥基C₁ ~C₆ 烷基」表示具有1個羥基之碳數1~6直鏈狀或分枝狀之烷基，可具體列舉如羥甲基、羥乙基、羥丙基、羥丁基、羥戊基及羥己基等，且宜為羥甲基、2-羥乙基、2-羥丙基及2-羥丁基。

於本案說明書中，「二(C₁ ~C₆ 烷基)胺基C₁ -C₆ 烷基」表示：含有具2個碳數1~6直鏈狀或分枝狀烷基之胺基的碳數1~6直鏈狀或分枝狀烷基；且，宜為含有具2個碳數1~4直鏈狀或分枝狀烷基之胺基的碳數1~4直鏈狀或分枝狀烷基(二(C₁ ~C₄ 烷基)胺基C₁ ~C₄ 烷基)；可具體列舉如二甲基胺基甲基、二甲基胺基乙基、二甲基胺基丙基、二甲基胺基丁基、二甲基胺基戊基、二甲基胺基己基、二乙基胺基甲基、二乙基胺基乙基、二乙基胺基丙基、二乙基胺基丁基、二乙基胺基戊基、二乙基胺基己基、二丙基胺基甲基、二丁基胺基甲基、二戊基胺基甲基、二己基胺基甲基及乙基(甲基)胺基甲基等，且宜為二甲基胺基甲基及二乙基胺基乙基。

於本案說明書中，「C₁ ~C₆ 烷氧基C₁ ~C₆ 烷基」表示：具有碳數1~6直鏈狀或分枝狀烷氧基之碳數1~6直鏈狀或分枝狀烷基，且宜為具有碳數1~4直鏈狀或分枝狀烷氧基之碳數1~4直鏈狀或分枝狀烷基(C₁ ~C₄ 烷氧基C₁ ~C₄ 烷基)；可具體列舉如甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、甲氧基丁基、甲氧基戊基、甲氧基己基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、乙氧基丙基、乙氧基丁基、乙氧基戊基、乙氧基己基、丙氧基甲基、丁氧基甲基、戊氧基甲基及己氧基甲基等，且宜為2-甲氧基乙基。

於本案說明書中，「鹵素原子」可具體列舉如氯原子、溴原子、氟原子、碘原子，且宜為氟原子。

於通式(I)中，X₁ 及X₂ 之較佳組合如下： (1)X₂ 為N時，X₁ 為N或CH；(2)X₂ 為CH時，X₁ 為CH。

通式(I)中，1宜為0或1。

通式(I)中，Y宜為通式(A)所示之基或通式(C)所示之基：

(式中，R₂ 及l與前述者同義)；

(式中，R₂ 及l與前述者同義)；其中，以通式(A)所示之基的下述2價部分(moiety)為伸吡咯啶基、伸四氫氮唉基及伸哌啶基時更佳；

或者，以通式(C)所示之基的下述2價部分(moiety)為伸苯基時更佳。

通式(I)中，Y及Z之較佳組合：Y為下述通式(A)所示之基時，Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )或-C≡C-R₇ ；

(式中，R₂ 及l與前述者同義)；Y為下述通式(B)或通式(C)所示之基時，Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )；

(式中，R₂ 、l與前述者同義)。

通式(I)中，R₁ 宜為C₁ ~C₄ 烷基，更宜為甲基或乙基。

通式(I)中，R₂ 宜為C₂ ~C₆ 炔基、-C(=O)OR_x 、羥基C₁ ~C₄ 烷基或是可具有R₃ 之C₂ ~C₉ 雜芳基，更宜為乙炔基、甲氧羰基、羥甲基或是可具有R₃ 之1,3,4-噁二唑基。

通式(I)中，R₃ 宜為C₁ ~C₄ 烷基或二(C₁ ~C₄ 烷基)胺基C₁ ~C₄ 烷基，更宜為甲基或二甲基胺基甲基。

通式(I)中，R₄ 宜為氫原子或鹵素原子，更宜為氫原子或氟原子，尤宜為氫原子。

通式(I)中，R₅ 及R₆ 宜為氫原子、可具有1個R₈ 之C₁ ~C₄ 烷基或是通式(D)所示之基：

(式中，R₂ 及l與前述者同義)；更宜為氫原子、具有R₈ 之甲基或通式(D)所示之基：

(式中，R₉ 、m及n與前述者同義)。

通式(I)中，m宜為1。

通式(I)中，R₉ 宜為C₁ ~C₄ 烷基、氟原子或羥基，更宜為甲基、氟原子或羥基。

通式(I)中，n宜為0或1。

通式(I)中，R₇ 宜為氫原子、C₁ ~C₄ 烷基或羥基C₁ ~C₄ 烷基，更宜為氫原子、羥甲基、甲基或2-羥基-2-甲基-乙基。

通式(I)中，R₈ 宜為羥基或-N(R_x )(R_y )。於此，R_x 及R_y 宜為氫原子、C₁ ~C₄ 烷基、C₃ ~C₁₀ 環烷基或C₁ ~C₄ 烷氧基C₁ ~C₄ 烷基，更宜為氫原子、甲基、乙基、第三丁基、異丙基、環丙基、環丁基或2-甲氧基乙基。

於本發明化合物中，以下述化合物為佳：通式(I)中，R₁ 為C₁ ~C₄ 烷基；X₁ 及X₂ 各自獨立為N或CH；Y為下述通式(A)或通式(C)所示之基；R₂ 為C₂ ~C₆ 炔基、-C(=O)OR_x 、羥基C₁ ~C₄ 烷基或是可具有R₃ 之C₂ ~C₉ 雜芳基；R₃ 為C₁ ~C₄ 烷基或二(C₁ ~C₄ 烷基)胺基C₁ ~C₄ 烷基；Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )或-C≡C-R₇ ；R₄ 為氫原子或鹵素原子；R₅ 及R₆ 相同或相異，為氫原子、可具有R₈ 之C₁ ~C₄ 烷基或下述通式(D)所示之基；R₇ 為氫原子、C₁ ~C₄ 烷基或羥基C₁ ~C₄ 烷基；R₈ 為羥基或-N(R_x )(R_y )；R₉ 為C₁ ~C₄ 烷基、氟原子或羥基；R_x 及R_y 相同或相異，為氫原子、C₁ ~C₄ 烷基、C₃ ~C₁₀ 環烷基或C₁ ~C₄ 烷氧基C₁ ~C₄ 烷基；l為0或1，m為1，n為0或1。

本發明化合物更宜為下述化合物：通式(I)中，R₁ 為C₁ ~C₄ 烷基；X₁ 及X₂ 在(1)X₂ 為N時，X₁ 為N或CH，在(2)X₂ 為CH時，X₁ 為CH；就Y而言，下述通式(A)所示之基的下述2價部分(moiety)為伸吡咯啶基、伸四氫氮唉基及伸哌啶基；

或者，下述通式(C)所示之基的下述2價部分(moiety)為伸苯基；

(a)Y為下述通式(A)所示之基時，Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )或-C≡C-R₇ ；

(式中，R₂ 為乙炔基、甲氧羰基、羥甲基或是可具有R₃ 之1,3,4-噁二唑基；R₃ 為C₁ ~C₄ 烷基；l為0或1)；(b)Y為下述通式(C)所示之基時，Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )；R₄ 為氫原子或氟原子；R₅ 及R₆ 相同或相異，為氫原子、可具有R₈ 之C₁ ~C₄ 烷基或是下述通式(D)所示之基；R₇ 為氫原子、羥甲基、甲基或2-羥基-2-甲基-乙基；R₈ 為-N(R_x )(R_y )；R₉ 為C₁ ~C₄ 烷基、氟原子或羥基；R_x 及R_y 相同或相異，為氫原子、C₁ ~C₄ 烷基、C₃ ~C₁₀ 環烷基或C₁ ~C₄ 烷氧基C₁ ~C₄ 烷基，m為1，n為0或1；

(式中，R₂ 為氫原子；l為0或1)；

於本發明化合物中，以下述化合物更佳：通式(I)中，R₁ 為甲基或乙基；X₁ 及X₂ 中，當(1)X₂ 為N時，X₁ 為N或CH，當(2)X₂ 為CH時，X₁ 為CH；於Y之中，下式2價部分(moiety)為伸吡咯啶基、伸四氫氮唉基或伸哌啶基，

或者，下式2價部分(moiety)為伸苯基；

(a)Y為如下通式(A)所示之基時，Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )或-C≡C-R₇ ，

(式中，R₂ 為乙炔基、甲氧羰基、羥甲基或是可具有甲基之1,3,4-噁二唑基；l為0或1)；(b)Y為如下通式(C)所示之基時，Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )，R₄ 為氫原子，【化46】 (式中，R₂ 為氫原子；l為1)

R₅ 及R₆ 相同或相異，為氫原子、可具有R₈ 之甲基或如下通式(D)所示之基：

式中，下述1價部分(moiety)為吡咯啶基、哌啶基、四氫氮唉基、哌基及啉基；

R₇ 為氫原子、羥甲基、甲基或2-羥基-2-甲基-乙基；R₈ 為-N(R_x )(R_y )；R₉ 為甲基、氟原子或羥基；R_x 及R_y 相同或相異，為氫原子、甲基、乙基、第三丁基、異丙基、環丙基、環丁基或2-甲氧基乙基；m為1，n為0或1。

具體且理想之本發明化合物可例示如下述者：(1)(S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物2)；(2)(S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-炔-1-酮(實施例化合物5)；(3)(S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二乙氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮 (實施例化合物8)；(4)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物9)；(5)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-羥基丁-2-炔-1-酮(實施例化合物10)；(6)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物12)；(7)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(環丙基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物13)；(8)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(異丙基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物14)；(9)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(乙基(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物15)；(10)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(環丁基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物16)；(11)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(乙基胺基)丁 -2-烯-1-酮(實施例化合物17)；(12)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(第三丁基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物18)；(13)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(異丙基(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物19)；(14)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物20)；(15)(S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物22)；(16)(R)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物23)；(17)1-((2S,4S)-4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物28)；(18)1-((2S,4S)-4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-乙炔基吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物32)；(19)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物38)；(20)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物39)；(21)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物40)；(22)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(4-羥基哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物42)；(23)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)丁-2-炔-1-酮(實施例化合物46)；(24)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-羥基-4-甲基戊-2-炔-1-酮(實施例化合物47)；(25)1-((S)-3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-((S)-3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物49)；(26)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物50)；(27)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物51)；(28)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物52)；(29)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物53)；(30)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(四氫氮唉-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物55)；(31)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(乙基(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物56)；(32)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(異丙基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物57)；(33)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二乙基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物59)；(34)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-((2-甲氧基乙基)(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物60)；(35)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(4-羥基哌啶-1- 基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物61)；(36)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-羥基吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物62)；(37)(R)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-羥基吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物63)；(38)(2S,4S)-甲基1-丙烯醯基-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-羧酸酯(實施例化合物66)；(39)1-((2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物68)；及(40)(S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物73)。

接著，就本發明化合物之製造法予以說明。

舉例來說，可藉由下述製造法或實施例所示方法等來製造本發明化合物(I)。但本發明化合物(I)之製造法並不受此等反應例所侷限。

製造法1

[式中，P₁ 表示包含於Y中之胺基的保護基；R₁ 、X₁ 、X₂ 、Y、Z與前述者同義。]

(步驟1)本步驟係一將通式(II)所示化合物之胺基保護予以脫保護以製造通式(III)所示化合物的步驟。脫保護之方法可以一般習知方法進行，例如記載於Protective Groups in Organic Synthesis,T.W.Greene,John Wiley & Sons(1981年)之方法或是以其為準之方法。保護基可例示如第三丁氧羰基。保護基使用第三丁氧羰基時，宜於酸性條件下進行脫保護，且酸可列舉如鹽酸、乙酸、三氟乙酸、硫酸、甲磺酸、對甲苯磺酸(tosylic acid)等。酸之使用量相對於1莫耳之化合物(II)宜為1~100莫耳。

用於反應之溶劑僅須為不對反應造成不良影響者即可，舉例可說可使用醇類(例如甲醇等)、烴類(例如苯、甲苯、二甲苯等)、鹵化烴類(例如二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷等)、腈類(例如乙腈等)、醚類(例如二甲氧基乙烷、四氫呋喃等)、非質子性極性溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺、二甲亞碸、六甲基磷醯三胺(hexamethyl phosphoramide)等)或是其等之混合物。反應時間為0.1~100 小時，且宜為0.5~24小時。反應溫度為0~120℃，且宜為0~90℃。

如此獲得之通式(III)所示化合物可以習知之分離純化手段進行單離純化，例如濃縮、減壓濃縮、結晶化、溶劑萃取、再沉澱、層析法等，或者亦可不經單離純化而交付予下一步驟。

(步驟2)本步驟係一利用通式(III)所示化合物與Z-COOH所示羧酸或Z-C(=O)-L(L表示氯原子或溴原子)所示酸鹵化物之醯胺化反應來製造通式(I)所示本發明化合物的步驟。

醯胺化試劑使用Z-COOH所示羧酸時，係在適當之縮合劑存在下，相對於1莫耳之通式(III)所示化合物，使用0.5~10莫耳(宜1~3莫耳)之羧酸來進行。此外，該羧酸可使用市售品或依據習知方法製造。

反應溶劑只要是不妨礙反應者即未特別受限，舉例來說宜為異丙醇、第三丁基醇、甲苯、苯、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、1,4-二噁烷、二甲基甲醯胺、二甲基乙醯胺、N-甲基吡咯啶酮、二甲亞碸等或其混合溶劑等。反應溫度通常為-78~200℃，且宜為0~50℃。反應時間通常為5分鐘~3天，且宜為5分鐘~10小時。

縮合劑可舉例如：二苯基磷酸疊氮、N,N’-二環己基碳二亞胺、苯并***-1-基氧基-參二甲基胺基鏻鹽、氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三-2-基)-4-甲基啉鎓、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺與1-羥基苯并***之組合、氯化2-氯-1,3-二甲基咪唑鎓、O-(7-氮雜苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基六氟磷酸酯等。

此外，上述反應可依需要而添加鹼。鹼可列舉如：三乙胺、二異丙基乙基胺、吡啶、二甲吡啶、柯林鹼(collidine)、4-二甲基胺基吡啶、第三丁酸鉀、第三丁酸鈉、甲氧基鈉、乙氧基鈉、六甲基二矽疊氮鋰(Lithium hexamethyldisilazide)、六甲基二矽疊氮鈉、六甲基二矽疊氮鉀及丁基鋰等之有機鹼；或者，碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉及氫化鈉等之無機鹼。就添加量而言，相對於1莫耳之通式(III)所示化合物為1~100莫耳，且宜為1~10莫耳。

醯胺化試劑使用Z-C(=O)-L(L表示氯原子或溴原子)所示之酸鹵化物時，相對於1莫耳之通式(III)所示化合物，使用0.5~5莫耳(宜0.9~1.1莫耳)之酸鹵化物來進行反應。此外，該酸鹵化物可使用市售品或依據習知方法予以製造。

反應溶劑只要是不妨礙反應者即不特別受限，但舉例來說，以甲苯、苯、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、1,4-二噁烷、二甲基甲醯胺、二甲基乙醯胺、N-甲基吡咯啶酮等或其混合溶劑等為宜。反應溫度通常為-78~200℃，且宜為-20~50℃。反應時間通常為5分鐘~3天，且較宜為5分鐘~10小時。

此外，上述反應可依需要而添加鹼。鹼可列舉如：三乙胺、二異丙基乙基胺、吡啶、二甲吡啶、柯林鹼、4-二甲基胺基吡啶、第三丁酸鉀、第三丁酸鈉、甲氧基鈉、乙氧基鈉、六甲基二矽疊氮鋰、六甲基二矽疊氮鈉、六甲基二矽疊氮鉀及丁基鋰等之有機鹼；或者是碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉及氫化鈉等之無機鹼。就添加量而言，相對於1莫耳之通式(III)所示化合物可使用1~100莫耳，且宜為1~10莫耳。

如此製得之通式(I)所示化合物可以習知之分離純化手段進行單離純化，例如濃縮、減壓濃縮、結晶化、溶劑萃取、再沉澱及層析法等。

於本發明化合物(I)中，就下述通式(I’)或(I”)所示化合物而言，舉例來說，可將製造法1之步驟1所得化合物(III)作為原料並使用特定之胺類，而以製造法2來進行製造。

製造法2

[式中，L₁ 、L₂ 表示鹵素原子；Y-H之H表示與氮原子直接鍵結之氫；X₁ 、X₂ 、Y、R_x 、R_y 、R_1、下式所示基團、m、n與前述者同義]。

(步驟3)本步驟係一藉由通式(III)所示化合物與通式(IV)所示酸鹵化物之醯胺化反應來製造通式(V)所示化合物的步驟。

於通式(IV)中，L₁ 、L₂ 所示之鹵素原子為溴原子或氯原子。此外，通式(IV)所示化合物可使用市售品或以習知方法而準進行製造。

相對於1莫耳之通式(III)所示化合物，使用0.5~5莫耳(宜0.9~1.1莫耳)之通式(IV)所示化合物來進行反應。

此外，上述反應可依需要而添加鹼。鹼可舉例如：三乙胺、二異丙基乙基胺、吡啶、二甲吡啶、柯林鹼、4-二甲基胺基吡啶、第三丁酸鉀、第三丁酸鈉、甲氧基鈉、乙氧基鈉、六甲基二矽疊氮鋰、六甲基二矽疊氮鈉、六甲基二矽疊氮鉀及丁基鋰等之有機鹼；或是碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉及氫化鈉等之無機鹼。就添加量而言，相對於1莫耳之通式(III)所示化合物，可使用1~100莫耳，且宜為1~10莫耳。

反應溶劑只要不妨礙反應即不特別受限，舉例來說，以甲苯、苯、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、1,4-二噁烷、二甲基甲醯胺、二甲基乙醯胺、N-甲基吡咯啶酮等或其混合溶劑等為宜。反應溫度通常為-78~200℃，且宜為 0~50℃。反應時間通常為5分鐘~3天，且宜為5分鐘~10小時。

如此製得之通式(V)所示化合物可以習知之分離純化手段進行單離純化，例如濃縮、減壓濃縮、結晶化、溶劑萃取、再沉澱、層析法等，或者，可不進行單離純化而交付後續步驟。

(步驟4)本步驟係一藉由通式(V)所示化合物與通式(VI)或(VI’)所示胺類之烷基化反應來製造通式(I’)或(I”)所示本發明化合物的步驟。

通式(VI)或(VI’)所示化合物相對於1莫耳之通式(V)所示化合物可使用1~20莫耳，且為1~10莫耳。

此外，上述反應可依需要而添加鹼。鹼可列舉如：三乙胺、二異丙基乙基胺、吡啶、二甲吡啶、柯林鹼、4-二甲基胺基吡啶、第三丁酸鉀、第三丁酸鈉、甲氧基鈉、乙氧基鈉、六甲基二矽疊氮鋰、六甲基二矽疊氮鈉、六甲基二矽疊氮鉀及丁基鋰等之有機鹼；或是碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉及氫化鈉等之無機鹼。就添加量而言，相對於1莫耳之通式(V)所示化合物，可使用1~100莫耳，且宜為1~20莫耳。

反應溶劑只要是不妨礙反應者即不特別受限，但舉例來說，可將N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、二甲亞碸、四氫呋喃、1,4-二噁烷、N-鉀基吡咯啶-2-酮及乙腈等單獨使用或予以混合使用。反應時間為0.1~100小時，且宜為0.5~24小時。反應溫度為0℃~溶劑沸騰之溫度，且宜為0~100℃。

如此獲得之通式(I’)或(I”)所示本發明化合物可利用習知之分離純化手段進行單離純化，例如濃縮、減壓濃縮、結晶化、溶劑萃取、再沉澱、層析法等。

舉例來說，可藉由製造法3或4來製造用以製造本發明化合物(I)之通式(II)所示化合物。

製造法3

[式中，L₃ 、L₄ 表示脫離基；R₁ 、X₁ 、X₂ 、Y、P₁ 與前述者同義]。

(步驟5)本步驟係一使通式(VII)所示化合物與通式(VIII)所示化合物進行偶合(Sonogashira)反應藉以製造通式(IX)所示化合物之步驟。本步驟可以習用公知之方法(例如Chemical Reviews,Vol.107,p.874,2007)為準來進行，舉例來說，可在過渡金屬催化劑及鹼之存在下，於不對反應造成不良影響之溶劑中。

於通式(VII)中，L₃ 所示脫離基為溴原子或碘原子，且該化合物可為市售品或按習知方法進行製造。

於本步驟中，通式(VIII)所示化合物之使用量相對於1莫耳之通式(VII)所示化合物可使用1~10莫耳，且宜為1~3莫耳。

可利用於本步驟之過渡金屬催化劑舉例來說為鈀催化劑(例如乙酸鈀、參(二亞苄基丙酮)二鈀、1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鈀(II)二氯化物-二氯甲烷錯合物等)，可依需要而添加配位子(ligand，例如三苯基膦、三第三丁基膦等)，並將銅試劑(例如碘化銅、乙酸銅等)用作共催化劑。過渡金屬催化劑之使用量雖依催化劑種類而異，但相對於1莫耳之通式(VII)所示化合物通常為0.0001~1莫耳，且宜為0.01~0.5莫耳。配位子之使用量相對於1莫耳之通式(VII)所示化合物通常為0.0001~4莫耳，且宜為0.01~2莫耳。共催化劑之使用量相對於1莫耳之通式(VII)所示化合物通常為0.0001~4莫耳，且宜為0.01~2莫耳。

此外，上述反應可依需要而添加鹼。鹼可列舉如：三乙胺、二異丙基乙基胺、吡啶、二甲吡啶、柯林鹼、4-二甲基胺基吡啶、第三丁酸鉀、第三丁酸鈉、甲氧基鈉、乙氧基鈉、六甲基二矽疊氮鋰、六甲基二矽疊氮鈉、六甲基二矽疊氮鉀及丁基鋰等之有機鹼；或是碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉及氫化鈉等之無機鹼。其中，尤以三乙胺、二異丙基乙基胺等之有機鹼為佳。鹼之使用量相對於1莫耳之通式(VII)所示化合物通常為0.1~50莫耳，且宜為1~20莫耳。

反應溶劑只要是無礙於反應者即不特別受限，但可舉例如烴類(例如苯、甲苯及二甲苯等)、腈類(例如乙腈等)、醚類(例如二甲基乙烷、四氫呋喃及1,4-二噁烷等)、醇類(例如甲醇及乙醇等)、非質子性極性溶劑(例如二甲基甲醯胺、二甲亞碸、六甲基磷醯三胺等)、水或是其等之混合物等。反應時間為0.1~100小時，且宜為0.5~24小時。反應溫度為0℃~溶劑沸騰溫度，且宜為0~150℃。

如此獲得之通式(IX)所示化合物可利用習知之分離純化手段進行單離純化，例如濃縮、減壓濃縮、結晶化、溶劑萃取、再沉澱及層析法等，或者，可不經單離純化而交付後續步驟。

(步驟6)本步驟係一使用通式(IX)與(X)或(XI)所示化合物來製造通式(II)所示化合物的步驟。

將通式(X)所示化合物用作烷基化試劑時，可在鹼存在下進行製造。於通式(X)中，L₄ 可舉例如氯原子、溴原子、碘原子、甲磺酸酯及對甲苯磺酸酯等之脫離基，可使用市售品或按習知方法進行製造。通式(X)所示化合物相對於1莫耳之通式(IX)所示化合物可使用1~10莫耳，且宜為1~5莫耳。

鹼可列舉如碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、氫氧化銫、氫化鈉、氫化鉀等之無機鹼或是三甲胺、三乙胺、三丙胺、二異丙基乙基胺、N-甲基啉、吡啶、4-(N,N-二甲基胺基)吡啶、二甲吡啶、柯林鹼等之有機胺類，鹼之使用量則相對於1莫耳之通式(IX)所示化合物可使用1~100莫耳，且宜為2~10莫耳。

作為溶劑，可將N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、二甲亞碸、四氫呋喃、1,4-二噁烷、N-甲基吡咯啶-2-酮及乙腈等單獨使用或混合使用。反應時間為0.1~100小時，且宜為0.5~24小時。反應溫度則為0℃~溶劑沸騰溫度，且宜為0~100℃。

將通式(XI)用作烷基化試藥時，可使用光延反應(Mitsunobu reaction)進行製造。本步驟可按一般習知方法(例如Chemical Reviews,Vol.109,p.2551,2009)進行，例如，可在光延試劑(Mitsunobu Reagents)及膦試劑存在下，於不對反應造成不良影響之溶劑中實施。於本步驟中，相對於1莫耳之通式(IX)所示化合物，通常使用1~10莫耳(宜1~5莫耳)之通式(XI)所示化合物來進行。

光延試劑可例示如二乙基偶氮二羧酸酯及二異丙基偶氮二羧酸酯等。光延試劑之使用量相對於1莫耳之通式(IX)所示化合物為1~10莫耳，且宜使用1~5莫耳來進行反應。

膦試劑可例示如三苯基膦及三丁基膦。膦試劑相對於1莫耳之通式(IX)所示化合物為1~10莫耳，且宜使用1~5莫耳進行反應。

反應溶劑只要為無礙反應者即不特別受限，但舉例來說，以甲苯、苯四氫呋喃、1,4-二噁烷、二甲基甲醯胺、二甲基乙醯胺、N-甲基吡咯啶酮、二甲亞碸等或其混合溶劑等為宜。

反應溫度通常為-78~200℃，且宜為0~50℃。反應時間通常為5分鐘~3天，且宜為10分鐘~10小時。

如此製得之通式(II)所示化合物可以習知之分離純化手段進行單離純化，例如濃縮、減壓濃縮、結晶化、溶劑萃取、再沉澱、層析法等，或者不經單離純化而直接用於本發明化合物(I)之製造。

製造法4

[式中，L₃ 、L₄ 、R₁ 、X₁ 、X₂ 、Y、P₁ 與前述者同義]。

(步驟7)本步驟可以與第6步驟同樣之方法進行。

(步驟8)本步驟可以與第5步驟同樣之方法進行。

舉例來說，可用於製造本發明化合物(I)之通式(XII)所示化合物亦可以製造法5來進行製造。

製造法5

[式中，L₃ 、L₄ 、X₁ 、X₂ 、Y、P₁ 與前述者同義]。

(步驟9)本步驟可按第6步驟之方法進行。

(步驟10)本步驟係一使通式(XIV)所示化合物與氨或其鹽反應以製造通式(XII)所示化合物之方法。

本步驟中使用之氨或其鹽之量相對於1莫耳之通式(XIII)所示化合物通常為等莫耳或過剩莫耳。反應溶劑只要是無礙於反應者即未特別受限，但舉例來說，以水、甲醇、乙醇、異丙醇、第三丁醇、四氫呋喃、1,4-二噁烷、二甲基甲醯胺、N-甲基吡咯啶酮、二甲亞碸等或其混合溶劑等。

反應溫度通常為0~200℃，且宜為室溫~150℃。反應時間通常為5分鐘~7天，且宜為30分鐘~24小時。

如此製得之通式(XIV)所示化合物可藉習知之分離純化手段進行單離純化，例如濃縮、減壓濃縮、結晶化、溶劑萃取、再沉澱及層析法等，或者，可不經單離純化而用於步驟8。

舉例來說，可以製造法6來製造用於製造本發明化合物(I)之通式(IX)所示化合物。

製造法6

[式中，L₃ 、X₁ 、X₂ 與前述者同義。SEM表示三甲基矽基乙氧基甲基]。

(步驟11)本步驟係一使通式(XIII)所示化合物與SEMCl(三甲基矽基乙氧基甲基氯)在鹼存在下反應以製造通式(XV)所示化合物之方法。通式(XIII)所示化合物可為市售品或按習知方法製造。

本步驟中所使用之SEMC1相對於1莫耳之通式(XIII)所示化合物通常為等莫耳或過剩莫耳。反應溶劑只要是無礙於反應者即不特別受限，舉例來說，以四氫呋喃、1,4-二噁烷、氯仿、二氯甲烷、二甲基甲醯胺、N-甲基吡咯啶酮等或其混合溶劑等而宜。

舉例來說，鹼可使用三乙胺、二異丙基乙基胺、吡啶、4-二甲基胺基吡啶等之有機鹼或碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉、氫化鈉及第三丁酸鉀等之無機鹼。

該鹼之使用量相對於1莫耳之通式(III)所示化合物通常為等莫耳或過剩莫耳，且宜為1~3莫耳。

反應溫度通常為-78~50℃，且宜為0℃~室溫。反應時間通常為5分鐘~7天，且宜為10分鐘~24小時。

如此獲得之通式(XV)所示化合物可藉習知之分離純化手段進行單離純化，例如濃縮、減壓濃縮、結晶化、溶劑萃取、再沉澱及層析法等，或者，可不經單離純化而交付後續步驟。

(步驟12)本步驟可按第10步驟之方法進行。

如此製得之通式(XVI)所示化合物可藉習知之分離純化手段進行單離純化，例如濃縮、減壓濃縮、結晶化、溶劑萃取、再沉澱及層析法等，或者，可不經單離純化而交付後續步驟。

(步驟13)本步驟可按第5步驟之方法進行。

(步驟14)本步驟係一使通式(XVII)所示化合物於酸性條件下脫保護藉此製造通式(IX)所示化合物之方法。脫保護之方法可按一般習知方法，例如記載於Protective Groups in Organic Synthesis,T.W.Greene,John Wiley & Sons(1981年)之方法或是以其為準之方法來進行。

酸可舉例如鹽酸、乙酸、三氟乙酸、硫酸、甲磺酸、對甲苯磺酸等。酸之使用量相對於1莫耳之通式(XVII)所示化合物為1~100莫耳。

用於反應之溶劑僅須為不對反應造成不良影響者即可，舉例來說，可使用醇類(例如甲醇等)、烴類(例如苯、甲苯、二甲苯等)、鹵化烴類(例如二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷等)、腈類(例如乙腈等)、醚類(例如二甲氧基乙烷、四氫呋喃、1,4-二噁烷等)、非質子性極性溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺、二甲亞碸、六甲基磷醯三胺等)或是其等之混合物。反應時間為0.1~100小時，且宜為0.5~24小時。反應溫度為0℃~溶劑沸騰溫度，且宜為0~100℃。

如此製得之通式(IX)所示化合物可藉習知之分離純化手段進行單離純化，例如濃縮、減壓濃縮、結晶化、溶劑萃取、再沉澱及層析法等，或者，可不經單離純化而利用於步驟6。

上述製造法1~6中，胺基、亞胺基、羥基、羧基、羰基及醯胺基以及如同吲哚般具有活性質子之官能基等可在各製造法之適當步驟中使用經保護之試劑或是依常法而在對該官能基導入保護基後去除該保護基。

作為「胺基或亞胺基之保護基」，只要是具有其機能者即不特別受限，但可舉例如：苄基、對甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、鄰硝基苄基、對硝基苄基、二苯甲基(benzhydryl)、三苯甲基(trityl)、枯基(cumyl)等之芳烷基；甲醯基、乙醯基、丙醯基、丁醯基、三甲基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基等之低級烷醯基；苯甲醯基；苯基乙醯基、苯氧基乙醯基等之芳基烷醯基；甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、第三丁氧羰基等之低級烷氧羰基；對硝基苄氧羰基、苯乙基氧羰基等之芳烷基氧羰基；三甲基矽基、第三丁基二甲基矽基等之低級烷基矽基；四氫哌喃基；三甲基矽基乙氧基甲基；甲磺醯基、乙磺醯基、第三丁基磺醯基等之低級烷基磺醯基等；第三丁基亞磺醯基等之低級烷基亞磺醯基等；苯磺醯基、甲苯磺醯基等之芳基磺醯基等；酞醯亞胺基等之醯亞胺基。特別是以三氟乙醯基、乙醯基、第三丁氧羰基、苄氧羰基、三甲基矽基乙氧基甲基及枯基等為佳。

「羥基之保護基」僅需為具有其機能者即不特別受限，但可舉例如：甲基、乙基、丙基、異丙基、第三丁基等之低級烷基；三甲基矽基、第三丁基二甲基矽基等之低級烷基矽基；甲氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基等之低級烷氧基甲基；四氫哌喃基；三甲基矽基乙氧基甲基；苄基、對甲氧基苄基、2,3-二甲氧基苄基、鄰硝基苄基、對硝基苄基、三苯甲基等之芳烷基；甲醯基、乙醯基、三氟乙醯基等之醯基基等。特別以甲基、甲氧基甲基、四氫哌喃基、三甲基矽基乙氧基甲基、第三丁基二甲基矽基、乙醯基等為佳。

「羧基之保護基」僅需為具有其機能者即不受特別限制，但可舉例如：甲基、乙基、丙基、異丙基、第三丁基等之低級烷基；2,2,2-三氯乙基等之鹵基低級烷基；烯丙基等之低級烯基；三甲基矽基乙氧基甲基；苄基、對甲氧基苄基、對硝基苄基、二苯甲基、三苯甲基等之芳烷基等。尤以甲基、乙基、第三丁基、烯丙基、苄基、對甲氧基苄基、三甲基矽基乙氧基甲基等為佳。

「羰基之保護基」僅需為具有其機能者即不受特別限定，可舉例如伸乙基縮酮、三亞甲基縮酮、二甲基縮酮、伸乙基縮醛、三亞甲基縮醛、二甲基縮醛等之縮酮及縮醛等。

保護基之除去法雖依該保護基之種類及目的化合物(I)之安定性等而異，但舉例來說，可依照文獻記載之方法[參照有機合成中之保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)，第3版，T.W.格林氏(T.W.Greene)著，John Wiley & Sons公司(1999年)]或是以其為準之方法來進行，例如：使用酸或鹼之加溶劑分解，亦即，使用例如0.01莫耳至過度過剩之酸(宜為三氟乙酸、甲酸、鹽酸等)或者等莫耳至過度過剩之鹼(宜為氫氧化鉀、氫氧化鈣等)而使其等作用之方法；使用氫化金屬錯合物等之化學還原，或是使用鈀-碳催化劑、雷氏鎳(Raney nickel)催化劑等之接觸還原等。

本發明化合物可藉一般之分離手段而容易地單離純化。該手段可例示如溶劑萃取、再結晶、製備分離用逆相高速液體層析法、管柱層析法、製備分離薄層層析法等。

本發明化合物於具有光學異構物、立體異構物、位置異構物、旋轉異構物等之異構物時，任一異構物之混合物均含括於本發明化合物中。舉例來說，在本發明化合物中存有光學異構物時，自外消旋物分割出之光學異構物亦包含於本發明化合物中。此等異構物可利用本身已習知之合成手法及分離手法(濃縮、溶劑萃取、管柱層析法、再結晶等)而各自以單一化合物形式獲得。

本發明化合物或其鹽可為結晶，且無論結晶形為單一或多形混合物，均包含在本發明化合物或其鹽中。結晶可藉由應用本身已習知之結晶化法進行結晶化來製造。本發明化合物或其鹽可為溶劑合物(例如水合物等)，亦可為無溶劑合物，且其中任一者均包含在本發明化合物或其鹽之中。經同位素(例如³ H、¹⁴ C、³⁵ S、¹²⁵ I等)等標識之化合物亦包含在本發明化合物或其鹽中。

本發明化合物或其鹽之前驅藥係指會在活體內之生理條件下透過利用酵素或胃酸等之反應而轉變成本發明化合物或其鹽之化合物，即：酵素性引發氧化、還原、水解等而轉變成本發明化合物或其鹽之化合物，及透過胃酸等引發水解等而轉變成本發明化合物或其鹽之化合物。此外，本發明化合物或其鹽之前驅藥亦可為在廣川書店1990年刊「醫藥品之開発」第7卷分子設計第163頁至198頁所載之生理條件下轉變成本發明化合物或其鹽者。

本發明化合物之鹽意指使用在有機化學領域中之慣用物，可舉例如：具有羧基時，該羧基上之鹼加成鹽或胺基；或者，具有鹼性雜環基時，在該胺基或鹼性雜環基上之酸加成鹽的鹽類。

該鹼加成鹽可舉例如：鈉鹽、鉀鹽等之鹼金屬鹽；鈣鹽、鎂鹽等之鹼土族金屬鹽；銨鹽；三甲胺鹽、三乙胺鹽、二環己胺鹽、乙醇胺鹽、二乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、普羅卡因鹽(procaine salt)、N,N’-二苄基乙二胺鹽等之有機胺鹽等。

該酸加成鹽可舉例如：鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、過氯酸鹽等之無機酸鹽；乙酸鹽、甲酸鹽、順丁烯二酸鹽、反丁烯二酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、三氟乙酸鹽等之有機酸鹽；甲磺酸鹽、2-羥乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽等之磺酸鹽等。

本發明化合物或其鹽具有優異之FGER抑制活性，作為抗腫瘤劑甚是有用。此外，對於FGFR具有優異之選擇性，而具有其他激酶所引起之副作用較少的好處。對象之癌並未特別受限，但可舉例如頭頸部癌、食道癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、肝臟癌、膽嚢/膽管癌、膽道癌、胰臟癌、肺癌、乳癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮癌、腎癌、膀胱癌、***癌、睪丸腫瘤、骨/軟組織肉瘤、血液癌、多發性骨髓瘤、皮膚癌、腦腫瘤及間皮瘤等，且以B細胞淋巴瘤、慢性淋巴性白血病、末梢性T細胞性淋巴瘤、骨髓生成不良症候群(myelodysplastic syndromes)、急性骨髓性白血病、急性淋巴性白血病等之血液癌。

本發明化合物或其鹽用作醫藥品時，可依需要而配合藥學載體，可因應預防或治療目的而採用各種投藥形態，舉例來說，該形態可為經口製劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、貼劑等之任一者皆可，且宜採用經口製劑。其等之投予形態可各自以業界人士所習知慣用之製劑方法。

就藥學載體而言，可使用慣用之各種有機或無機載體物質作為製劑素材，可作為固態製劑中之賦形劑、結合劑、崩解劑、潤滑劑、著色劑以及液狀製劑中之溶劑、溶解輔劑、懸濁化劑、等張化劑、緩衝劑、無痛化劑等予以調配。此外，亦可依需要使用防腐劑、抗氧化劑、著色劑、甜味劑及安定化劑等之製劑添加物。

調製經口用固態製劑時，可在本發明化合物中加入賦形劑後，或是依需要而加入賦形劑、結合劑、崩解劑、潤滑劑、著色劑、矯味矯臭劑等後，依常法製造錠劑、被覆錠劑、顆粒劑、粉劑、膠囊劑等。

調製注射劑時，可在本發明化合物中添加pH調節劑、緩衝劑、安定化劑、等張化劑、局部麻醉劑等，並依常法製造皮下、肌肉內及靜脈內用注射劑。

應調配至上述各投予單位形態中之本發明化合物之量係依照應適用其之患者的症狀或其劑形等而非固定，但一般而言，每投藥單位形態以經口製劑而言宜為0.05~1000mg，以注射劑而言宜為0.01~500mg，以栓劑而言宜為1~1000mg。

此外，具有上述投藥形態之藥劑的每日投藥量雖依患者之症狀、體重、年齡、性別等而異，無法一概而定，但以本發明化合物而言，通常成人(體重50kg)每日為0.05~5000mg，且宜為0.1~1000mg，且將其以1日1次或分為2~3次程度投藥為宜。

【實施例】

以下，列舉實施例以更具體說明本發明，但本發明並不因其等而受到任何限制。

實施例中使用之各種試劑只要無特別記載即使用市售品。二氧化矽凝膠管柱層析法使用MORITEX Corporation製Purif-Pack(註冊商標)SI、Biotage公司製KP-Sil(註冊商標)二氧化矽預注管柱(Silica prepacked column)或Biotage公司製HP-Sil(註冊商標)二氧化矽預注管柱。鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法使用MORITEX Corporation製Purif-Pack(註冊商標)NH或Biotage公司製KP-NH(註冊商標)預注管柱。製備分離用薄層層析法使用默克公司製Kieselgel TM60F254,Art.5744或和光社NH2二氧化矽凝膠60F254板型(plate)。NMR圖譜使用AL400(400MHz；日本電子(JEOL))、Mercury400型(400MHz；安捷倫科技公司)分光計或裝備有OMNMR探針(Protasis)之Inova400型(400MHz；安捷倫科技公司)分光計，於重溶劑中含有四甲基矽烷時，使用四甲基矽烷作為內部基準，此外的情況則使用NMR溶劑作為內部基準進行測定，並以ppm顯示全δ值。微波反應使用CEM公司製Discover S class進行。

此外，LCMS圖譜則使用Waters公司製ACQUITY SQD(四極型)，於下述條件下測定。

管柱：YMC公司製YMC-Triart C18,2.0X50mm,1.9μm

MS檢測：ESI positive

UV檢測：254及210nm

管柱流速：0.5mL/min

移動相：水/乙腈(0.1%甲酸)

注入量：1μL

梯度(表1)

此外，逆相製備分離HPLC純化則使用WATERS公司製之製備分離系統，於下述條件下實施。

管柱：使用連結有YMC公司製YMC-Actus Triart C18,20X50mm,5μm與YMC公司製YMC-Actus Triart C18,20X10mm,5μm者。

UV檢測：254nm

MS檢測：ESI positive

管柱流速：25mL/min

移動相：水/乙腈(0.1%甲酸)

注入量：0.1-0.5mL

茲將縮寫的意義顯示如下。

s：單峰(singlet)

d：二重峰(doublet)

t：三重峰(Triplet)

q：四重峰(quartet)

dd：雙二重峰(double doublet)

dt：雙三重峰(double triplet)

td：三雙重峰(triple doublet)

tt：參三重峰(triple triplet)

ddd：貳雙二重峰(double double doublet)

ddt：貳雙三重峰(double double triplet)

dtd：貳參二重峰(double triple doublet)

tdd：參雙二重峰(triple double doublet)

m：多重峰(multiplet)

br：寬峰(broad)

brs：寬單峰(broad singlet)

DMSO-d₆ ：重二甲亞碸

CDCl₃ ：重氯仿

CD₃ OD：重甲醇

THF：四氫呋喃

DMF：N,N-二甲基甲醯胺

NMP：1-甲基-2-吡咯啶酮

DMSO：二甲亞碸

TFA：三氟乙酸

SEMCl：2-(三甲基矽基)乙氧基甲基氯

PdCl₂ (dppf)CH₂ Cl₂ ：1,1’-雙(二苯基膦)二茂鐵-鈀(II)二氯化物-二氯甲烷錯合物

WSC：1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽

HOBt：1-羥基苯并***1水合物

HATU：O-(7-氮雜苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基六六氟磷酸酯

HBTU：O-苯并***-N,N,N’,N’-四甲基六六氟磷酸酯

DIAD：二異丙基偶氮二羧酸酯

TBAF：氟化四丁基銨

DIPEA：二異丙基乙基胺

Boc₂ O：二碳酸二第三丁基

DMAP：二甲基胺基吡啶

實施例1 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物1)之合成 (步驟1)3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺之合成

於520mg之利用國際公開WO2007/126841號手冊所載方法合成出之3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺、504mg之1-乙炔基-3,5-二甲氧基苯、57.3mg之碘化銅(I)及0.56ml之三乙胺的10ml DMF混合物中，加入163mg之PdCl₂ (dppf)CH₂ Cl₂ ，經氮置換後，於90℃下攪拌6小時。於反應液中加入氯仿與水，分離出有機層。以飽和食鹽水洗淨有機層，再以無水硫酸鈉乾燥後，減壓餾除溶劑。以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：氯仿/甲醇)純化所得殘渣，製得120mg之呈茶褐色固體物質的標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 296.0

(步驟2)第三丁基3-(甲基磺醯氧基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

將1000mg之N-Boc-3-吡咯烷醇溶解於氯仿20ml，於0℃下添加1.15ml之三乙胺及498μl之甲磺醯氯。室溫下攪拌1.0小時後，立刻添加乙酸乙酯與水，分離出有機層。以飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化銨水溶液、水洗淨有機層後，以無水硫酸鈉乾燥，減壓餾除溶劑而製得1.2g無色油狀化合物之標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 266.1

(步驟3)第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯4之合成

將62mg之上述步驟1所得3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺、217mg之步驟2所得第三丁基3-(甲基磺醯氧基)吡咯啶-1-羧酸酯、221mg之碳酸鉀的DMF懸濁溶液2.0ml於70℃下攪拌1小時。加入乙酸乙酯與水，使有機層分離。以無水硫酸鈉乾燥有機層，再減壓餾除溶劑，以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化所得殘渣，而製得呈淡黃色非晶質之標題化合物36.2mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 465.1

(步驟4)實施例化合物1之合成

對32mg之上述步驟3所得第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯添加4N-鹽酸/1,4-二噁烷4ml，於室溫下攪拌1.5小時。減壓餾除所得反應混合物之溶劑後，接著進行甲苯共沸，獲得32mg之3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的粗生成物。對一部分之粗生成物(12mg)添加2.0ml之氯仿及20μl之三乙胺。冷卻至0℃後，添加已溶有2.3μl丙烯醯氯之100μl氯仿，於室溫下攪拌10分鐘。以飽和碳酸氫鈉溶液使反應停止後，以乙酸乙酯萃取生成物，再以無水硫酸鈉乾燥後，減壓餾除溶劑。以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：乙酸乙酯/甲醇)純化所得殘渣，製得呈白色固體之標題化合物6.5mg。茲將物性值顯示於表1。

實施例2 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物2)之合成 (步驟1)(R)-第三丁基3-(甲基磺醯氧基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

將935mg之(R)-N-Boc-3-吡咯烷醇溶解於氯仿15ml中，於0℃下添加三乙胺1.04ml及甲磺醯氯467μl。於室溫下攪拌1.5小時後，立刻加入乙酸乙酯與水，使有機層分離。以飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化銨水溶液及水洗淨有機層後，以無水硫酸鈉乾燥，再減壓餾除溶劑，而製得無色油狀化合物之標題化合物1.1g。物性值：m/z[M+H]⁺ 266.1

(步驟2)(S)-第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

將實施例1(步驟1)所得3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺334mg、上述(步驟1)所得(R)-第三丁基3-(甲基磺醯氧基)吡咯啶-1-羧酸酯379mg及碳酸鉀391mg之DMF懸濁溶液4.0ml於70℃下攪拌3小時。加入乙酸乙酯與水使有機層分離。以無水硫酸鈉乾燥有機層後減壓餾除溶劑，再以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化所得殘渣，製得呈淡黃色非晶質之標題化合物149mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 465.1

(步驟3)實施例化合物2合成

按實施例1(步驟4)，使用上述(步驟2)所得(S)-第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯來取代第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯，於酸性條件下去除Boc基，藉此製得(S)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺之粗生成物，之後進行醯胺化，而製得呈白色固體之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例3 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物3)之合成

按實施例1(步驟4)，使用巴豆基氯取代丙烯醯氯，藉此製得呈白色固體之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例4 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物4)之合成

將實施例2製得之中間產物(S)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺之粗生成物5.6mg、4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸鹽酸鹽6.3mg、HATU15mg溶解於DMF1.0ml，添加50μl之DIPEA後攪拌整夜。於反應液中添加氯仿與水，分離有機層。以飽和食鹽水洗淨有機層後，立即以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。所得殘渣以逆相製備分離HPLC純化(水/乙腈(0.1%甲酸))純化，製得呈無色非晶質之標題化合物2.3mg。茲將物性值顯示於表1。

實施例5 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-炔-1-酮(實施例化合物5)之合成

將實施例2製得之中間產物(S)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺之粗生成物16mg、3-(三甲基矽基)-丙炔酸10mg及28mg之HATU溶解於0.5ml之DMF，添加31μl之DIPEA並攪拌整夜。於反應液中加入乙酸乙酯與飽和碳酸氫鈉水溶液，使有機層分離。以無水硫酸鈉乾燥有機層後，減壓餾除溶劑。以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：乙酸乙酯/甲醇)純化殘渣，製得呈白色固體之標題化合物0.7mg。茲將物性值顯示於表1。

實施例6 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(實施例化合物6)之合成

按實施例4，使用2-氟丙烯酸取代4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸鹽酸鹽，藉此製得呈無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例7 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)-2-(吡咯啶-1-基甲基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物7)之合成

按實施例4，使用2-(吡咯啶-1-基甲基)乙酸(syn.comm.1995,641)取代4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸鹽酸鹽，藉此製得呈無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例8 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二乙氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物8)之合成 (步驟1)1,3-二乙氧基-5-乙炔基苯之合成

將四溴化碳4.78g溶解於二氯乙烷14mL中，於0℃下添加三苯基膦7.56g。於0℃下攪拌5分鐘後，添加3,5-二乙氧基苯并醛1.40g之二氯甲烷溶液7mL，攪拌20分鐘。直接以二氧化矽凝膠層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化反應溶液，獲得1-(2,2-二溴乙烯基)-3,5-二乙氧基苯。所得化合物不經純化而用於後續反應。將上述所得化合物溶解於30mL之THF中，於-78℃下添加1.63M之正丁基鋰的己烷溶液10.5mL，於-78℃下攪拌30分鐘攪拌。添加飽和氯化銨水溶液後，以乙酸乙酯萃取反應混合物，再以飽和食鹽水洗淨所得有機層，以無水硫酸鈉乾燥後，減壓濃縮溶劑。以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化所得殘渣，製得呈無色油狀物之標題化合物1.31g。物性值：m/z[M+H]⁺ 191.0

(步驟2)按實施例1，使用上述步驟1所得1,3-二乙氧基-5-乙炔基苯來取代1-乙炔基-3,5-二甲氧基苯，藉此製得呈無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。實施例9 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物9)之合成 (步驟1)第三丁基3-(甲基磺醯氧基)四氫氮唉-1-羧酸酯之合成

將N-Boc-3-羥基四氫氮唉1.73g溶解於氯仿20ml，於0℃下添加三乙胺2.09ml、甲磺醯氯856μl。室溫下攪拌0.5小時後立刻添加乙酸乙酯與水，使有機層分離。以飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化銨水溶液及水洗淨有機層後，再以無水硫酸鈉乾燥後減壓餾除溶劑，製得呈無色油狀化合物之標題化合物2.32g。物性值：m/z[M+H]⁺ 252.0

(步驟2)第三丁基-3-(4-胺基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-羧酸酯之合成

將上述步驟1所得第三丁基3-(甲基磺醯氧基)四氫氮唉-1-羧酸酯1.32g、3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺1.37g、碳酸銫3.47g之DMF懸濁溶液10ml於90℃下攪拌10小時。添加乙酸乙酯與水使有機層分離。以無水硫酸鈉乾燥有機層，再減壓餾除溶劑，以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化所得殘渣，製得呈淡黃色非晶質之標題化合物482mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 417.0

(步驟3)第三丁基-3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-羧酸酯之合成

於上述步驟2所得第三丁基-3-(4-胺基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-羧酸酯200mg、1-乙炔基-3,5-二甲氧基苯117mg、碘化銅(I)14mg及三乙胺0.5ml之THF 5ml混合物中，添加39mg之PdCl₂ (dppf)CH₂ Cl₂ ，經氮置換後，於80℃下攪拌1.5小時。於反應液中添加乙酸乙酯與水，使有機層分離。以飽和食鹽水洗淨有機層後，立刻以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化所得殘渣，製得呈無色非晶質之標題化合物185mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 451.1

(步驟4)實施例化合物9之合成

按實施例1(步驟4)，使用上述步驟3所得第三丁基-3-(4-胺基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-羧酸酯來取代第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯，於酸性條件下藉由去除Boc基製得1-(四氫氮唉-3-基)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺之粗生成物後進行醯胺化，製得呈白色固體之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例10 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-羥基丁-2-炔-1-酮(實施例化合物10)之合成

將實施例9製得之中間產物1-(四氫氮唉-3-基)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的粗生成物6.0mg、4-羥基丁-2-炔酸3.7mg、HATU 11mg溶解於DMF 1.0ml，添加DIPEA 30μl後攪拌整夜。

於反應液中加入氯仿與水，分離出有機層。以飽和食鹽水洗淨有機層後，立即以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。以逆相製備分離HPLC純化(水/乙腈(0.1%甲酸))純化所得殘渣，製得呈無色非晶質之標題化合物1.4mg。茲將物性值顯示於表1。

實施例11 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-羥基-4-甲基戊-2-炔-1-酮(實施例化合物11)之合成

按實施例10，使用4-羥基-4-甲基戊-2-炔酸取代4-羥基丁-2-炔酸，藉此製得呈無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例12 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物12)之合成

按實施例10，使用4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸鹽酸鹽取代4-羥基丁-2-炔酸，藉此製得呈無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例13 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(環丙基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物13)之合成 (步驟1)4-溴丁-2-烯醯氯之合成

於4-溴巴豆酸329mg中添加亞硫醯氯3.0ml，並於80℃下攪拌5小時。減壓濃縮反應液後，更進行甲苯共沸，製得標題化合物之粗生成物394mg。

(步驟2)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-溴丁-2- 烯-1-酮之合成

將上述實施例9所得中間產物1-(四氫氮唉-3-基)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺之粗生成物140mg懸濁於THF4.5ml，添加DIPEA 178μl，並冷卻至0℃。滴定上述步驟1所得4-溴丁-2-烯醯氯66mg之THF 0.5ml溶液，室溫下攪拌15分鐘。以飽和碳酸氫鈉溶液使反應停止後，以乙酸乙酯萃取生成物，再以無水硫酸鈉乾燥後，減壓餾除溶劑，製得標題化合物之粗生成物160mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 497.0,499.0

(步驟3)實施例化合物13之合成

使上述步驟2所得1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-溴丁-2-烯-1-酮之粗生成物12mg溶解於DMF 0.5ml中，添加環丙基胺5μl、DIPEA 10μl，室溫下攪拌1小時。減壓濃縮後，以逆相製備分離HPLC純化(水/乙腈(0.1%甲酸))純化所得殘渣，製得無色非晶質之標題化合物3.4mg。茲將物性值顯示於表1。

實施例14 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(異丙基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物14)之合成

按實施例13(步驟3)，並使用異丙胺取代環丙基胺，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例15 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(乙基(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物15)之合成

按實施例13(步驟3)，使用乙基甲基胺取代環丙基胺，藉此製得呈無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例16 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(環丁基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物16)之合成

按實施例13(步驟3)，使用環丁胺取代環丙胺，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例17 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二乙基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物17)之合成

按實施例13(步驟3)，使用二乙胺取代環丙基胺，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例18 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(第三丁基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物18)之合成

按實施例13(步驟3)，使用第三丁基胺取代環丙基胺，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表 1。

實施例19 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(異丙基(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物19)之合成

按實施例13(步驟3)，使用異丙基甲基胺取代環丙基胺，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例20 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物20)之合成

按實施例13(步驟3)，使用哌啶取代環丙基胺，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例21 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-啉基丁-2-烯-1-酮(實施例化合物21)之合成

按實施例13(步驟3)，使用啉取代環丙基胺，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例22 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮之合成

按實施例13(步驟3)，使用(S)-3-氟吡咯啶取代環丙基胺，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表1。

實施例23 (R)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮之合成

按實施例13(步驟3)，使用(R)-3-氟吡咯啶來取代環丙基胺，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例24 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二乙氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物24)之合成

按實施例9，使用1,3-二乙氧基-5-乙炔基苯來取代1-乙炔基-3,5-二甲氧基苯，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例25 1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二乙氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物25)之合成

按實施例12，使用1,3-二乙氧基-5-乙炔基苯來取代1-乙炔基-3,5-二甲氧基苯，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例26 1-(3-((4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物26)之合成 (步驟1)第三丁基3-((4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於實施例1(步驟1)所得3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺148mg、N-Boc-3-羥基甲基吡咯啶154mg、聚合物載持三苯基膦(~3.0mmol/g)334mg之THF 5.0ml懸濁溶液中添加DIAD 197μl，於室溫下攪拌3小時。過濾不溶物並減壓餾除溶劑。以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化殘渣，製得無色非晶質之標題化合物94.5mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 479.1

(步驟2)實施例化合物26之合成

按實施例1(步驟4)，使用上述步驟1所得第三丁基3-((4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯來取代第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯，藉此製得白色固體之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例27 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并 [3,4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物27)之合成

按實施例26，使用(R)-1-Boc-3-羥基哌啶來取代N-Boc-3-羥基甲基吡咯啶，藉此製得白色固體之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例28 1-((2S,4S)-4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物28)之合成 (步驟1)(2S,4R)-第三丁基2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)-4-羥基吡咯啶-1-羧酸酯之合成

將1-N-Boc-(2S,4R)-4-羥基-2-(羥基甲基)-吡咯啶500mg溶解於DMF 4.0ml中，添加咪唑164mg。冷卻至0℃後，添加第三丁基氯二苯基矽烷616μl攪拌1小時。於反應液中添加乙酸乙酯與飽和碳酸氫鈉溶液，分離有機層。以飽和食鹽水洗淨有機層，再以無水硫酸鈉乾燥後，減壓餾除溶劑。以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化所得殘渣，製得無色油狀物質之標題化合物655mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 456.2

(步驟2)(2S,4S)-第三丁基2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)-4-(甲基磺醯氧基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

使上述步驟1所得(2S,4R)-第三丁基2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)-4-羥基吡咯啶-1-羧酸酯300mg溶解於氯仿3.0ml中，於0℃下添加三乙胺137μl及甲磺醯氯 56μl。於室溫下攪拌2.0小時後，立即加入氯仿與水，使有機層分離。以無水硫酸鎂乾燥有機層，減壓餾除溶劑，製得無色油狀化合物之標題化合物389mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 534.1

(步驟3)(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

將上述步驟2所得(2S,4S)-第三丁基2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)-4-(甲基磺醯氧基)吡咯啶-1-羧酸酯389mg、3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺188mg、碳酸鉀363mg懸濁於DMF 4.0ml中，於80℃下攪拌整夜。加入乙酸乙酯與水，使有機層分離，再以無水硫酸鎂乾燥，減壓餾除溶劑。以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化所得殘渣，製得無色油狀物質之標題化合物191mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 699.1

(步驟4)(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於上述步驟3所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯113mg、1-乙炔基-3,5-二甲氧基苯52mg、碘化銅(I)6mg及三乙胺0.4ml之THF 4ml混合物中添加PdCl₂ (dppf)CH₂ Cl₂ 13mg，氮置換後於85℃下攪拌3小時。於反應液中添加乙酸乙酯與水，使有機層分離。以飽和食鹽水洗淨有機層後，立刻以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化所得殘渣，製得無色非晶質之標題化合物100mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 733.3

(步驟5)(2S,4S)-第三丁基-4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

將上述步驟4所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯25mg溶解於THF 1.0ml，添加二氧化矽凝膠載持之氟化四丁基銨(~1.5mmol/g)34mg並攪拌整夜。追加二氧化矽凝膠載持之氟化四丁基銨(~1.5mmol/g)30mg，更攪拌二天。過濾試劑後，減壓餾除溶劑。以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化所得殘渣，製得無色非晶質之標題化合物62mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 495.1

(步驟6)實施例化合物28之合成

按實施例1(步驟4)，使用上述步驟5所得4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-羧酸酯來取代第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯，藉此製得白色固體之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例29 1-(3-((4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)四氫氮唉-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物29)之合成

按實施例26，使用1-Boc-3-羥基甲基四氫氮唉來取代N-Boc-3-羥基甲基吡咯啶，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例30 N-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)丙烯醯胺(實施例化合物30)之合成

按實施例1，使用第三丁基3-羥基環丁基胺甲酸酯來取代N-Boc-3-羥基吡咯啶，製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例31 1-(4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物31)之合成

按實施例1為準，使用第三丁基4-溴哌啶-1-羧酸酯來取代第三丁基3-(甲基磺醯氧基)吡咯啶-1-羧酸酯，製得白色固體之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例32 1-((2S,4S)-4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-乙炔基吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物32)之合成 (步驟1)(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-乙炔基吡咯啶-1-羧酸酯之合成

將實施例1(步驟1)所得3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺14mg、以國際公開WO2005/007083號手冊所記載之方法合成之(2S,4R)-第三丁基2-乙炔基-4-羥基吡咯啶-1-羧酸酯15mg及三苯基膦23mg懸濁於THF 1.0ml，添加DIAD 18μl，室溫下攪拌1小時。使反應液濃縮後，溶解於DMSO溶液，以逆相製備分離HPLC純化(水/乙腈(0.1%甲酸))純化，獲得無色非晶質之標題化合物5.0mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 489.2

(步驟2)實施例化合物32之合成

按實施例1(步驟4)，使用上述步驟1所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-乙炔基吡咯啶-1-羧酸酯來取代第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯，藉此製得白色固體之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例33 1-(4-((4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物33)之合成

按實施例26，使用1-Boc-4-羥基甲基哌啶來取代N-Boc-3-羥基甲基吡咯啶，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例34 N-(3-((4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯基)丙烯醯胺(實施例化合物34)之合成

按實施例26，使用(3-胺基苯基)甲醇來取代N-Boc-3-羥基甲基吡咯啶，製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例35 1-(3-((4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)四氫氮唉-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物35)之合成

按實施例4，使用實施例29所得中間產物1-(四氫氮唉-3-基甲基)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺來取代(S)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例36 1-(4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物36)之合成

按實施例4，使用實施例31所得中間產物3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺來取代(S)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3- 基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例37 1-(4-((4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)哌啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物37)之合成

按實施例4，使用實施例33所得中間產物3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺來取代(S)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例38 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物38)之合成 (步驟1)(S)-第三丁基3-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶1.00g、(R)-N-Boc-3-吡咯烷醇1.01g及三苯基膦1.88g之四氫呋喃溶液40ml溶液中添加DIAD 1.41ml，攪拌反應液1小時。濃縮反應液後以乙酸乙酯洗淨，製得白色固體之標題化合物1.04g。物性值：m/z[M+H]⁺ 448.9

(步驟2)(S)-第三丁基3-(4-胺基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於上述步驟1所得(S)-第三丁基3-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-羧酸酯400mg中加入四氫呋喃2.5ml及28%氨水2.5ml，以微波反應裝置使反應液於100℃下攪拌1.5小時。加入氯仿與水使有機層分離，再以無水硫酸鈉乾燥有機層，減壓餾除溶劑，製得白色固體化合物之標題化合物382mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 430.3

(步驟3)(S)-第三丁基3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-羧酸酯合成

於上述步驟2所得(S)-第三丁基3-(4-胺基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-羧酸酯660mg、1-乙炔基-3,5-二甲氧基苯374mg、碘化銅(I)44mg及三乙胺2.0ml之THF 15ml混合物中加入PdCl₂ (dppf)₂ CH₂ Cl₂ 122mg，氮置換後於80℃下攪拌3.5小時。於反應液中加入乙酸乙酯與水，使有機層分離。以飽和食鹽水洗淨有機層後，立即以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化所得殘渣，製得無色非晶質之標題化合物714mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 464.1

(步驟4)實施例化合物38之合成

於上述步驟3所得(S)-第三丁基3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-羧酸酯30mg中加入4N-鹽酸/1,4-二噁烷2ml，室溫下攪拌1.5小時。減壓餾除所得反應混合物之溶劑後，接著進行甲苯共沸，獲得(S)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-(吡咯啶 -3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之粗生成物30mg。將一部分之所得粗生成物10mg、4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸鹽酸鹽5.9mg及HATU 14mg溶解於DMF 1.0ml，添加DIPEA 50μl，室溫下攪拌5分鐘。對反應液添加氯仿與水，使有機層分離。以飽和食鹽水洗淨有機層後，立刻以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。以逆相製備分離HPLC純化(水/乙腈(0.1%甲酸))純化所得殘渣，製得無色非晶質之標題化合物3.9mg。茲將物性值示於表1。

實施例39 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物39)之合成

按實施例1(步驟4)，使用實施例38(步驟3)所得(S)-第三丁基3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-羧酸酯來取代第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯，於酸性條件下去除Boc基，藉此獲得(S)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-(吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之粗生成物後，進行醯胺化而製得白色固體物質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例40 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物40)之合成 (步驟1)4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯酸鹽酸鹽之合成

使4-溴巴豆酸甲酯1.79g溶解於四氫呋喃40ml，於0℃下添加吡咯啶1.67ml後，室溫下攪拌1小時。對反應液添加二***與水，使有機層分離。以飽和食鹽水洗淨有機層後，立刻以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。對所得生成物添加3N鹽酸40ml，於100℃下加熱回流1小時。減壓濃縮反應液，以2-異丙醇與乙酸乙酯之混合溶劑洗淨所得殘渣，獲得白色固體之標題化合物939mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 156.0

(步驟2)實施例化合物40之合成

按實施例4(步驟1)，使用實施例38(步驟4)所得中間產物(S)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-(吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺與上述步驟1所得4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯酸鹽酸鹽，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例41 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(4-甲基哌-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物41)之合成 (步驟1)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-溴丁-2-烯-1-酮之合成

將實施例38(步驟4)所得中間產物(S)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-(吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之粗生成物100mg懸濁於氯仿3.0ml中，添加DIPEA 117μl後冷卻至0℃。滴定實施例16(步驟1)所得4-溴丁-2-烯醯氯46mg之氯仿0.3ml溶液，於室溫下攪拌15分鐘。以飽和碳酸氫鈉溶液使反應停止後，以乙酸乙酯萃取生成物，以無水硫酸鈉乾燥後減壓餾除溶劑，製得粗生成物之標題化合物140mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 509.9,511.9

(步驟2)實施例化合物41之合成

使上述步驟1所得(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-溴丁-2-烯-1-酮之粗生成物12mg溶解於DMF 0.5ml中，添加N-甲基哌4mg及DIPEA 10μl，於室溫下攪拌整夜。減壓濃縮後，以逆相製備分離HPLC純化(水/乙腈(0.1%甲酸))將所得殘渣純化，製得無色非晶質之標題化合物3.0mg。茲將物性值示於表1。

實施例42 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(4-羥基哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物42)之合成

按實施例41(步驟2)，使用4-羥基哌啶取代N-甲基哌，製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例43 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(4-氟哌啶-1-基)丁-2-烯 -1-酮(實施例化合物43)之合成

按實施例41(步驟2)，使用4-氟哌啶來取代N-甲基哌，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例44 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(3,3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物44)之合成

按實施例41(步驟2)，使用3,3-二氟吡咯啶取代N-甲基哌，製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例45 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(4,4-二氟哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物45)之合成

按實施例41(步驟2)，使用4,4-二氟哌啶來取代N-甲基哌，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例46 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)丁-2-炔-1-酮(實施例化合物46)之合成

按實施例4(步驟1)，使用實施例38(步驟4)所得中間產物(S)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-(吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺與2-丁炔酸，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例47 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-羥基-4-甲基戊-2-炔-1-酮(實施例化合物47)之合成

按實施例4(步驟1)，使用實施例38(步驟4)所得中間產物(S)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-(吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺與4-羥基-4-甲基戊-2-炔酸，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例48 1-((S)-3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-((R)-3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物48)之合成

按實施例41(步驟2)，使用(R)-3-氟吡咯啶來取代N-甲基哌，製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例49 1-((S)-3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-((S)-3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物49)之合成

按實施例41(步驟2)，使用(S)-3-氟吡咯啶來取代N-甲基哌，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例50 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物50)之合成

按實施例41(步驟2)，使用哌啶來取代N-甲基哌，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例51 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物51)之合成 (步驟1)第三丁基3-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-羧酸酯之合成

於4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶1.00g、N-Boc-3-羥基四氫氮唉930mg及三苯基膦1.85g之四氫呋喃溶液40ml溶液中，添加DIAD 1.41ml，攪拌反應液1小時。濃縮反應液後以乙酸乙酯洗淨，製得白色固體之標題化合物1.07g。物性值：m/z[M+H]⁺ 435.0

(步驟2)第三丁基3-(4-胺基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-羧酸酯之合成

對上述步驟1所得第三丁基3-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-羧酸酯350mg添加四氫呋喃2.5ml及28%氨水2.5ml，以微波反應裝置使反應液於100℃下攪拌1.5小時。加入氯仿與水，使有機層分離，再以無水硫酸鈉乾燥有機層，減壓餾除溶劑，製得白色固體化合物之標題化合物340mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 416.0

(步驟3)第三丁基3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-羧酸酯之合成

於上述步驟2所得第三丁基3-(4-胺基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-羧酸酯639mg、1-乙炔基-3,5-二甲氧基苯374mg、碘化銅(I)44mg及三乙胺2.0ml之THF 15ml混合物中添加PdCl₂ (dppf)CH₂ Cl₂ 122mg，氮置換後於80℃下攪拌3.5小時。對反應液添加乙酸乙酯與水，使有機層分離。以飽和食鹽水洗淨有機層後，立刻以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。所得殘渣以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，製得無色非晶質之標題化合物704mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 450.1

(步驟4)實施例化合物51之合成

按實施例1(步驟4)，使用上述步驟3所得第三丁基3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-羧酸酯來取代第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯，於酸性條件下去除Boc基，藉此獲得7-(四氫氮唉-3-基)-5-((3,5-)二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之粗生成物，之後進行醯胺化，製得白色固體之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例52 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 (實施例化合物52)之合成

按實施例4(步驟1)，使用實施例51(步驟3)所得第三丁基3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-羧酸酯來取代第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯，製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例53 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物53)之合成

按實施例4(步驟1)，使用實施例51(步驟4)所得中間產物7-(四氫氮唉-3-基)-5-((3,5-)二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺與實施例40(步驟1)所得4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯酸鹽酸鹽，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例54 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)丁-2-炔-1-酮(實施例化合物54)之合成

按實施例4(步驟1)，使用實施例51(步驟4)所得中間產物7-(四氫氮唉-3-基)-5-((3,5-)二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺與2-丁炔酸，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例55 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(四氫氮唉-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物55)合成 (步驟1)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-溴丁-2-烯-1-酮之合成

將上述實施例52(步驟4)所得中間体7-(四氫氮唉-3-基)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之粗生成物160mg懸濁於THF 3.0ml，添加DIPEA 202μl後冷卻至0℃。滴定實施例16(步驟1)所得4-溴丁-2-烯醯氯75mg之THF 0.5ml溶液，於室溫下攪拌15分鐘。以飽和碳酸氫鈉溶液使反應停止後，以乙酸乙酯萃取生成物，再以無水硫酸鈉乾燥後，減壓餾除溶劑，製得標題化合物之粗生成物204mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 496.0,498.0

(步驟2)實施例化合物55之合成

將上述步驟1所得1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-溴丁-2-烯-1-酮之粗生成物10mg懸濁於THF 0.5ml，添加四氫氮唉7μl並於室溫下攪拌1小時。減壓濃縮後，使所得殘渣以逆相製備分離HPLC純化(水/乙腈(0.1%甲酸))純化，製得無色非晶質之標題化合物1.6mg。茲將物性值示於表1。

實施例56 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2, 3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(乙基(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物56)之合成

按實施例55(步驟2)，使用乙基甲基胺取代四氫氮唉，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例57 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(異丙基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物57)之合成

按實施例55(步驟2)，使用異丙基胺來取代四氫氮唉，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例58 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(異丙基(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物58)之合成

按實施例55(步驟2)，使用異丙基甲基胺來取代四氫氮唉，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例59 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二乙基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物59)之合成

按實施例55(步驟2)，使用二乙胺來取代四氫氮唉，製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例60 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-((2-甲氧基乙基)(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物60)之合成

按實施例55(步驟2)，使用2-甲氧基-N-甲基乙烷胺取代四氫氮唉，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例61 1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(4-羥基哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物61)之合成

按實施例55(步驟2)，使用4-羥基哌啶取代四氫氮唉，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例62 (S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-羥基吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物62)之合成

按實施例55(步驟2)，使用(S)-3-羥基吡咯啶取代四氫氮唉，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例63 (R)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-羥基吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物63)之合成

按實施例55(步驟2)，使用(R)-3-羥基吡咯啶來取代四氫氮唉，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例64 1-(4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物64)之合成

按實施例39，使用N-Boc-4-哌啶醇來取代(R)-N-Boc-3-吡咯烷醇，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例65 1-(4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)哌啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物65)之合成

按實施例38，使用N-Boc-4-哌啶醇來取代(R)-N-Boc-3-吡咯烷醇，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例66 (2S,4S)-甲基1-丙烯醯基-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-羧酸酯(實施例化合物66)之合成 (步驟1)4-氯-5-碘-7-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶之合成

將以國際公開WO2005/042556號手冊所記載之方法合成之4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶7.01g溶解於無水THF 125ml，冷卻至0℃後添加60%氫化鈉4.02g。攪拌20分鐘後，添加SEMC 113.3ml，於室溫下攪拌整夜。再次冷卻至0℃後，加入水使反應停止，以乙酸乙酯萃取生成物。以飽和食鹽水洗淨有機層後，立刻以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，製得白色固體物質之標題化合物7.28g。物性值：m/z[M+H]⁺ 410.0

(步驟2)5-碘-7-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之合成

將上述步驟1所得4-氯-5-碘-7-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶200mg溶解於THF 2.0ml中，加入28%胺水2ml後，使反應液於微波反應裝置中在105℃下攪拌1.5小時。以乙酸乙酯萃取生成物，再以飽和食鹽水洗淨有機層後，立刻以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑，製得白色固體物質之標題化合物192mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 391.0

(步驟3)5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之合成

按實施例1(步驟1)，使用上述步驟2所得5-碘-7-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺來取代3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺，藉此製得無色固體之標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 425.4

(步驟4)5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之合成

將上述步驟3所得5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺4.27g之二氯甲烷20ml溶液冷卻至0℃，添加TFA 10ml。於室溫下攪拌反應液5小時，減壓餾除溶劑。對殘渣加入THF 50ml，冷卻至0℃後，添加4N氫氧化鈉溶液12.5ml，於室溫下攪拌整夜。以乙酸乙酯萃取並以無水硫酸鎂乾燥後，減壓餾除溶劑。對所得殘渣加入氯仿，過濾而獲得白色固體之標題化合物2.60g。物性值：m/z[M+H]⁺ 295.3

(步驟5)(2S,4R)-4-(甲基磺醯氧基)-吡咯啶-1,2-二羧酸1-第三丁基酯-2-甲基酯之合成

按實施例1(步驟2)，使用(2S,4R)-4-羥基-吡咯啶-1,2-二羧酸1-第三丁基酯-2-甲基酯來取代N-Boc-3-吡咯烷醇，藉此製得無色非晶質之標題化合物。

(步驟6)(2S,4S)-1-第三丁基2-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1,2-二羧酸酯之合成

按實施例1(步驟3)，使用上述步驟4所得5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺來取代3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺，並使用上述步驟5所得(2S,4R)-4-(甲基磺醯氧基)-吡咯啶-1,2-二羧酸1-第三丁基酯-2-甲基酯來取代第三丁基3-(甲基磺醯氧基)吡咯啶-1-羧酸酯，使用氫化鈉來取代碳酸鉀，使用NMP來取代DMF，藉此製得無色非晶質之標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 522.4

(步驟7)(2S,4S)-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-羧酸酯之合成

使用上述步驟6所得(2S,4S)-1-第三丁基2-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1,2-二羧酸酯24mg之二氯甲烷2.0ml、TFA 2.0ml溶液，於室溫下攪拌30分鐘。減壓餾除溶劑，將所得殘渣以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：氯仿/甲醇)純化，而製得淡黃色非晶質之標題化合物11.9mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 422.1

(步驟8)實施例化合物66之合成

對上述步驟7所得(2S,4S)-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-羧酸酯12mg添加二氯甲烷2.0ml及三乙胺16μl。冷卻至0℃後，添加溶有丙烯醯氯5μl之氯仿100μl，於室溫下攪拌10分鐘。以飽和碳酸氫鈉溶液使反應停止後，以乙酸乙酯萃取生成物再以無水硫酸鈉乾燥後，減壓餾除溶劑。將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：乙酸乙酯/甲醇)純化，而製得無色非晶質之標題化合物4.2mg。茲將物性值示於表1。

實施例67 1-((2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((二甲基胺基)甲基)吡咯啶-1- 基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物67)之合成 (步驟1)(2S,4S)-第三丁基2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)-4-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

將三苯基膦443mg之THF 25ml溶液冷卻至0℃，滴定DIAD 340μl，於0℃下攪拌反應液1小時。加入4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶363mg與實施例28(步驟1)所得(2S,4R)-第三丁基2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)-4-羥基吡咯啶-1-羧酸酯651.6mg，於室溫下攪拌整夜。添加乙酸乙酯與水使有機層分離。以無水硫酸鎂乾燥有機層，並減壓餾除溶劑，將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，而製得呈淡黃色非晶質之標題化合物400mg。m/z[M+H]⁺ 718.5

(步驟2)(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

對上述步驟1所得(2S,4S)-第三丁基2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)-4-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-羧酸酯400mg添加THF 10ml、8N氨水甲醇溶液5ml，微波照射下於120℃下攪拌2小時。減壓餾除溶劑，將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：氯仿/甲醇)純化，製得淡黃色固體之標題化合物293mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 698.5

(步驟3)(2S,4S)-第三丁基4-(4-(雙(第三丁氧羰基) 胺基)-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

對上述步驟2所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯200mg之THF 5ml溶液中添加Boc₂ O 188mg、DMAP 7mg，於室溫下攪拌整夜。對反應液添加乙酸乙酯與水，使有機層分離。將有機層以無水硫酸鎂乾燥，減壓餾除溶劑後，將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，製得淡黃色非晶質之標題化合物238mg。m/z[M+H]⁺ 898.5

(步驟4)(2S,4S)-第三丁基4-(4-(雙(第三丁氧羰基)胺基)-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於上述步驟3所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-(雙(第三丁氧羰基)胺基)-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((第三丁基二苯基矽基氧基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯237.5mg之THF 5ml溶液中添加二氧化矽載持之氟化四丁基銨(~1.5mmol/g)700mg，室溫下攪拌整夜。過濾二氧化矽凝膠，減壓餾除濾液之溶劑，將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，而製得淡黃色非晶質之標題化合物185mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 660.2

(步驟5)(2S,4S)-第三丁基4-(4-(雙(第三丁氧羰基)胺基)-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-甲醯基吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於上述步驟4所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-(雙(第三丁氧羰基)胺基)-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-羧酸酯66mg之二氯甲烷2ml溶液中添加Dess-Martin Periodinane 51mg，於室溫下攪拌1小時。更添加Dess-Martin Periodinane 100mg，室溫下攪拌1小時。進一步添加Dess-Martin Periodinane 70mg，於室溫下攪拌1小時。對反應液加水，使有機層分離。將有機層以飽和碳酸氫鈉水溶液、10%硫代硫酸鈉水溶液洗淨，再以無水硫酸鈉乾燥，減壓餾除溶劑，製得淡黃色非晶質之標題化合物68mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 658.1

(步驟6)(2S,4S)-第三丁基4-(4-(雙(第三丁氧羰基)胺基)-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((二甲基胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於上述步驟5所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-(雙(第三丁氧羰基)胺基)-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-甲醯基吡咯啶-1-羧酸酯68mg之二氯甲烷2ml溶液中添加1M二甲基胺THF溶液0.3ml及乙酸0.2ml，冷卻至0℃。對反應液添加三乙醯氧基硼氫化鈉127mg，0℃下攪拌2小時。以飽和碳酸氫鈉水溶液中和反應液，再以無水硫酸鈉乾燥有機層，減壓餾除溶劑，製得淡黃色非晶質之標題化合物31.9mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 687.2

(步驟7)(2S,4S)-第三丁基4-(4-(雙(第三丁氧羰基)胺基)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((二甲基胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

按實施例1(步驟1)，使用上述步驟6所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-(雙(第三丁氧羰基)胺基)-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((二甲基胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯來取代3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 721.5

(步驟8)5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-((3S,5S)-5-((二甲基胺基)甲基)吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之合成

按實施例66(步驟7)，使用上述步驟7所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-(雙(第三丁氧羰基)胺基)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((二甲基胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯來取代(2S,4S)-1-第三丁基2-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1,2-二羧酸酯，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 421.1

(步驟9)實施例化合物67之合成

按實施例66(步驟8)，使用上述步驟8所得5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-((3S,5S)-5-((二甲基胺基)甲基)吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺來取代(2S,4S)-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-羧酸酯，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例68 1-((2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H- 吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物68)之合成 (步驟1)(2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-1-(第三丁氧羰基)吡咯啶-2-羧酸之合成

將實施例66(步驟6)所得(2S,4S)-1-第三丁基2-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1,2-二羧酸酯393.8mg溶解於甲醇6ml，冷卻至0℃後，添加4N氫氧化鈉水溶液3ml。於室溫下攪拌反應懸濁液3小時。對反應液添加5N鹽酸，令pH為5，再添加乙酸乙酯與水使有機層分離。將有機層以無水硫酸鎂乾燥，減壓餾除溶劑後製得淡黃色固體之標題化合物280mg。物性值m/z[M+H]⁺ 508.3

(步驟2)(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(肼羰基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於上述步驟1所得(2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-1-(第三丁氧羰基)吡咯啶-2-羧酸106mg及TBTU 100mg之DMF 2ml溶液中添加DIPEA 73μl、肼單水合物46μl，於室溫下攪拌10分鐘。對反應液加入乙酸乙酯與水，使有機層分離。將有機層以無水硫酸鎂乾燥，減壓餾除溶劑後製得淡黃色非晶質之標題化合物93.6mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 522.4

(步驟3)(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

對上述步驟2所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(肼羰基)吡咯啶-1-羧酸酯93.6mg添加甲苯3ml及原甲酸三甲酯79μl，於110℃下攪拌整夜。對反應液添加乙酸400μl，於110℃下攪拌6小時。對反應液添加乙酸乙酯與水，使有機層分離。將有機層以無水硫酸鎂乾燥後，減壓餾除溶劑，將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：氯仿/甲醇)純化，製得淡黃色非晶質之標題化合物50mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 532.2

(步驟4)7-((3S,5S)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-3-基)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之合成

按實施例66(步驟7)，使用上述步驟3所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-1-羧酸酯50mg來取代(2S,4S)-1-第三丁基2-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1,2-二羧酸酯，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物30.3mg。m/z[M+H]⁺ 432.0

(步驟5)實施例化合物68之合成

按實施例66(步驟8)，使用上述步驟4所得7-((3S,5S)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-3-基)-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺來取代(2S,4S)-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-羧酸酯，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例69 1-((2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物69)之合成 (步驟1)(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

按實施例68(步驟3)，使用原乙酸三乙酯來取代原甲酸三甲酯，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 546.5

(步驟2)5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-((3S,5S)-5-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之合成

按實施例66(步驟7)，使用上述步驟1所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-1-羧酸酯來取代(2S,4S)-1-第三丁基2-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1,2-二羧酸酯，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 466.0

(步驟3)實施例化合物69之合成

按實施例66(步驟8)，使用上述步驟2所得5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-((3S,5S)-5-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺來取代(2S,4S)-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-羧酸酯，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例70 1-((2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(5-((二甲基胺基)甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物70)之合成 (步驟1)(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(2-(2-(二甲基胺基)乙醯基)肼羰基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

按實施例68(步驟2)，使用2-(二甲基胺基)乙醯肼來取代肼單水合物，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 607.3

(步驟2)(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(5-((二甲基胺基)甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於上述步驟1所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(2-(2-(二甲基胺基)乙醯基)肼羰基)吡咯啶-1-羧酸酯 100mg之乙腈3ml溶液中加入DIPEA 105μl及對甲苯磺醯氯56mg，於40℃下攪拌1小時。對反應液添加乙酸乙酯與水，使有機層分離。以無水硫酸鎂乾燥有機層後，減壓餾除溶劑，將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：氯仿/甲醇)純化，製得淡黃色非晶質之標題化合物40.5mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 589.2

(步驟3)5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-((3S,5S)-5-(5-((二甲基胺基)甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺之合成

按實施例66(步驟7)，使用上述步驟2所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(5-((二甲基胺基)甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-1-羧酸酯來取代(2S,4S)-1-第三丁基2-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1,2-二羧酸酯，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 489.2

(步驟4)實施例化合物70之合成

按實施例66(步驟8)，使用上述步驟3所得5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7-((3S,5S)-5-(5-((二甲基胺基)甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡咯啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺來取代(2S,4S)-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-羧酸酯，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例71 (2S,4S)-1-丙烯醯基-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-N-(2-(二甲基胺基)乙基)-N-甲基吡咯啶-2-甲醯胺(實施例化合物71)之合成 (步驟1)(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((2-(二甲基胺基)乙基)(甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於室溫下將實施例68(步驟1)所得(2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-1-(第三丁氧羰基)吡咯啶-2-羧酸25.4mg、TBTU 17.7mg、N,N,N’-三甲基乙烷-1,2-二胺13μl、DIPEA 26μl之乙腈3ml溶液攪拌1小時。加入乙酸乙酯與水使有機層分離。以無水硫酸鈉乾燥有機層後，減壓餾除溶劑，再將所得殘渣以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：氯仿/甲醇)純化，製得淡黃色非晶質之標題化合物3mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 592.4

(步驟2)(2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-N-(2-(二甲基胺基)乙基)-N-甲基吡咯啶-2-甲醯胺之合成

按實施例66(步驟7)，使用上述步驟1所得(2S,4S)-第三丁基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((2-(二甲基胺基)乙基)(甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-羧酸酯來取代(2S,4S)-1-第三丁基2-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1,2-二羧酸酯，藉此製得無色非晶質之標題化合物。物性值：m/z[M+H]⁺ 492.4

(步驟3)實施例化合物71合成

按實施例66(步驟8)，使用上述步驟2所得(2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-N-(2-(二甲基胺基)乙基)-N-甲基吡咯啶-2-甲醯胺來取代(2S,4S)-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-羧酸酯，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例72 1-(4-((4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)甲基)哌啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(實施例化合物72)之合成

按實施例38，使用N-Boc-4-羥基甲基哌啶取代(R)-N-Boc-3-吡咯烷醇，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值示於表1。

實施例73 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例化合物73)之合成 (步驟1)4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶之合成

將以國際公開WO2007/095223號手冊所載之方法合成之4-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶247mg溶解於DMF 7.0ml，冷卻至0℃後，加入N-碘琥珀醯亞胺382mg。於室溫下攪拌1小時後，加入氯仿與水使有機層分離。以無水硫酸鎂乾燥有機層後，減壓餾除溶劑。將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，製得茶褐色固體物質之標題化合物455mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 279.1

(步驟2)(S)-第三丁基3-(4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

將上述步驟1所得4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶225mg溶解於DMF 3.0ml，冷卻至0℃後添加60%氫化鈉64.5mg。使用DMF 2.0ml，將實施例2(步驟1)所得(R)-第三丁基3-(甲基磺醯氧基)吡咯啶-1-羧酸酯322mg加入反應液，於室溫下攪拌整夜。追加60%氫化鈉64.5mg後，於85℃下攪拌整夜。於反應液中加入乙酸乙酯與水，使有機層分離。以無水硫酸鎂乾燥有機層後，減壓餾除溶劑。將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，製得標題化合物之粗生成物192mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 448.3

(步驟3)(S)-第三丁基3-(4-氯-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於上述步驟2所得(S)-第三丁基3-(4-氯-3-碘-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯之粗生成物180mg、1-乙炔基-3,5-二甲氧基苯97mg、碘化銅(I)15mg、三乙胺1.0ml之THF 4.0ml混合物中加入PdCl₂ (dppf)CH₂ Cl₂ 33mg，氮置換後於50℃下攪拌30分鐘。對反應液添加乙酸乙酯與水，使有機層分離。以飽和食鹽水洗淨有機層後，以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，製得無色非晶質之標題化合物133mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 482.4

(步驟4)(S)-第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於氮氣環境下，使上述步驟3所得(S)-第三丁基3-(4-氯-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯120mg、2,2’-雙(二苯基膦基)-1,1’-聯萘(BINAP)26mg、第三丁氧基鈉72mg、二苯甲酮亞胺(benzophenone imine)92mg及參(二亞苄基丙酮)二鈀36mg懸濁於甲苯10ml中，於115℃下攪拌90分鐘。以乙酸乙酯稀釋後，以矽藻土過濾，減壓餾除溶劑。對所得殘渣加入羥基胺鹽酸鹽366mg、碳酸氫鈉442mg、甲醇16ml及水4ml，於室溫下攪拌2小時。減壓餾除溶劑後，添加乙酸乙酯與飽和食鹽水，使有機層分離。以無水硫酸鈉乾燥有機層後，減壓餾除溶劑。將所得殘渣以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，製得無色非晶質之標題化合物35mg。物性值：1m/z[M+H]⁺ 463.4

(步驟5)實施例化合物73之合成

按實施例1(步驟4)，使用上述步驟3所得(S)-第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯來取代第三丁基3-(4-胺基 -3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯，藉此製得白色固體之標題化合物。茲將物性值示於表1。

參考例1 (R)-1-(3-(4-胺基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(參考例化合物1)之合成

按國際公開WO2008/121742號手冊記載之方法合成。茲將物性值顯示於表2。

參考例2 3-環丁基-1-(苯基乙炔基)咪唑并[1,5-a]吡-8-胺(參考例化合物2)之合成

按國際公開WO2007/087395號手冊記載之方法合成。茲將物性值顯示於表2。

參考例3 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-1-酮(參考例化合物3)之合成

按實施例1，使用(S)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺與丙醯氯，製得白色固體之標題化合物。茲將物性值顯示於表2。

參考例4 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二異丙基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(參考例化合物4)之合成 (步驟1)1-乙炔基-3,5-二異丙基苯之合成

對三甲基矽基乙炔589mg、1-溴-3,5-二異丙基苯480mg、碘化銅(I)76mg及三乙胺0.11ml之THF 4ml混合物加入PdCl₂ (dppf)CH₂ Cl₂ 163mg，氮置換後於80℃下攪拌4小時。對反應液加入乙酸乙酯與水，分離有機層並以無水硫酸鈉乾燥後，減壓餾除溶劑。對所得殘渣加入2%氫氧化鉀之甲醇溶液10ml，於室溫下攪拌整夜。對反應液加入氯仿與水，使有機層分離並以無水硫酸鈉乾燥後，減壓餾除溶劑。將所得殘渣以二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷)純化，製得黃色油狀物質之標題化合物181mg。

(步驟2)(S)-第三丁基3-(4-胺基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

於85℃下將3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺446mg、(R)-第三丁基3-(甲基磺醯氧基)吡咯啶-1-羧酸酯450mg、碳酸鉀692mg之DMF 5.0ml懸濁溶液攪拌6小時。加入乙酸乙酯與水，使有機層分離。以無水硫酸鈉乾燥有機層後，減壓餾除溶劑，將所得殘渣以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，獲得淡黃色非晶質之標題化合物354mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 431.1

(步驟3)(S)-第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二異丙基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成

對上述步驟1所得1-乙炔基-3,5-二異丙基苯56mg、上述步驟2所得(S)-第三丁基3-(4-胺基-3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯43mg、碘化銅(I)3.8mg及三乙胺0.2ml之THF 2.0ml混合物添加PdCl₂ (dppf)CH₂ Cl₂ 8.2mg，氮置換後於80℃下攪拌1.5小時。對反應液加入乙酸乙酯與水，使有機層。以飽和食鹽水洗淨有機層後，立刻以無水硫酸鈉乾燥，之後減壓餾除溶劑。將所得殘渣以鹼性二氧化矽凝膠管柱層析法(展開溶劑：己烷/乙酸乙酯)純化，製得無色非晶質之標題化合物42mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 489.2

(步驟4)(S)-3-((3,5-二異丙基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺之合成

按實施例66(步驟7)，使用上述步驟3所得(S)-第三丁基3-(4-胺基-3-((3,5-二異丙基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯取代(2S,4S)-1-第三丁基2-甲基4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1,2-二羧酸酯，藉此製得淡黃色非晶質之標題化合物。

(步驟5)參考例化合物4之合成

按實施例4，使用上述步驟4所得(S)-3-((3,5-二異丙基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺來取代(S)-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺，製得淡黃色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表2。

參考例5 (S)-1-(3-(4-胺基-3-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(參考例化合物5)之合成 (步驟1)(S)-1-(3-(4-胺基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮之合成

對參考例4(步驟2)所得(S)-第三丁基3-(4-胺基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-羧酸酯488mg加入4N-鹽酸/1,4-二噁烷4ml，攪拌1小時，於減壓下餾除溶劑。對所得殘渣加入4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸鹽酸鹽281mg、HATU 647mg之DMF 5.0ml溶液，更添加DIPEA 0.78ml攪拌整夜。減壓下濃縮反應液，對所得殘渣加入氯仿50ml與乙醇50ml，藉過濾去除不溶物。減壓下濃縮濾液，將所得殘渣以乙酸乙酯5.0ml洗淨後乾燥，製得標題化合物之粗生成物458mg。物性值：m/z[M+H]⁺ 442.0

(步驟2)參考例化合物5之合成

對上述步驟1所得(S)-1-(3-(4-胺基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮8.0mg、1-乙炔基-3-甲氧基苯4.0mg、碘化銅(I)0.6mg、三乙胺8.6μl之THF 1.0ml混合物加入PdCl₂ (dppf)CH₂ Cl₂ 1.3mg，氮置換後於80℃下攪拌整夜。以乙酸乙酯與甲醇稀釋反應液，將所得稀釋溶液以鹼性二氧化矽凝膠處理後濃縮。以逆相製備分離HPLC純化(水/乙腈(0.1%甲酸))將所得殘渣純化，製得無色非晶質之標題化合物1.4mg。茲將物性值顯示於表2。

參考例6 (S)-N-(3-((4-胺基-1-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基)吡咯啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)乙炔基)苯基)乙醯胺(參考例化合物6)之合成

按參考例5，使用N-(3-乙炔基苯基)乙醯胺來取代1-乙炔基-3-甲氧基苯，藉此製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表2。

參考例7 (S)-1-(3-(4-胺基-3-(吡啶-3-基乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(參考例化合物7)之合成

按參考例5，使用3-乙炔基吡啶來取代1-乙炔基-3-甲氧基苯，製得無色非晶質之標題化合物。茲將物性值顯示於表2。

試驗例1 FGFR2激酶活性抑制作用之測定

於針對FGFR2激酶活性之抑制活性測定法的條件設定中，使用Caliper Life Sciences,Inc.之FL-Peptide 22作為基質。用於試驗之經純化之重組人類FGFR2蛋白質係購自Carna Biosciences,Inc.社。就化合物之抑制活性測定而言，首先以二甲亞碸(DMSO)將受測化合物分階稀釋至最終濃度之20倍濃度。接著，於反應用緩衝液(15mM Tris-HCl pH7.5,0.01% Tween-20,2mM DTT)中加入經純化之人類FGFR2蛋白質、FL-Peptide 22(最終濃度為1.5μM)、氯化鎂(最終濃度為5mM)、ATP(最終濃度為75μM)與受測化合物之DMSO溶液(DMSO之最終濃度為5%)，於25℃下培養120分鐘進行激酶反應。對其加入業經Caliper Life Sciences,Inc.之分離緩衝液(Separation Buffe)稀釋的EDTA(最終濃度為30mM)，使激酶反應停止。最後以LabChip(註冊商標)3000系統(Caliper Life Sciences,Inc.社，激發波長488nm，檢測波長530nm)將磷酸化肽與非磷酸化肽分離，測定各自之量，再從其量比求出酸化反應量，並將可將磷酸化反應抑制50%之化合物濃度定義為IC₅₀ 值(nM)。茲將結果示於表3。

結果，受測化合物所代表之本發明化合物(具有二烷氧基苯乙炔基及α、β不飽和醯胺之部分結構)無論何者皆表現出高度之FGFR2阻害活性。相對於此，不具有二烷氧基苯乙炔基及α、β不飽和醯胺之部分結構的參考例化合物則是FGFR2抑制活性顯著較低。

試驗例2 對於高度表現FGFR且源自人類之胃癌細胞株的細胞增殖抑制效果

使過剩表現FGFR2受體且源自人類之胃癌細胞株OCUM-2MD3細胞在含有10%胎牛血清(FBS)之Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)中以不超過80%之細胞密度每日繼代。為了開始細胞增殖抑制活性之試驗，將OCUM-2MD3細胞懸濁於上述DMEM培養基中，並撥種到96井皿之各井，使每井之細胞數成為3,000個後，於含有5%二氧化碳氣體之培養器中，在37℃下培養1天。翌日以 DMSO分階稀釋受測化合物至最終濃度之100倍濃度。將受測化合物之DMSO溶液以經用於培養之培養基稀釋，再將其加入細胞培養皿之各井中，使DMSO之最終濃度成為0.5%，再於含有5%二氧化碳氣體之培養器中，在37℃下培養72小時。受測化合物添加時及72小時培養後之細胞數計測係使用細胞計數套組-8(同仁化學社製)，並按同仁化學社所建議之規程來實施。將套組所含試藥添加到各皿，使用含有5%二氧化碳氣體之培養器，於37℃下進行預定時間之呈色反應。反應結束後，使用微量盤分析儀(Microplate Reader)，進行波長450nm下之吸光度計測。依下式算出增殖抑制率，求出抑制50%之受測化合物濃度(GI₅₀ (nM))。茲將結果顯示於第4表。

結果，受測化合物所代表之本發明化合物無論何者皆對於源自人類之胃癌細胞株OCUM-2MD3細胞顯示出高度增殖抑制作用。

增殖抑制率(%)=(C-T)/(C-C0)X 100

T：添加有受測化合物之井的吸光度

C：未添加受測化合物之井的吸光度

C0：化合物添加前測得之井的吸光度

試驗例3 FGFR1激酶活性抑制作用之測定

就對於FGFR1激酶活性之抑制活性測定法的條件設定而言，參考Caliper Life Sciences,Inc.之FL-Peptide 22，合成出於其胺基酸序列中附加有生物素修飾之生物素化肽(biotin-EEPLYWSFPAKKK)並用作基質。用於試驗之經純化重組人類FGFR1蛋白質係購自Carna Biosciences,Inc.。於化合物之抑制活性測定中，首先以二甲亞碸(DMSO)將受測化合物分階稀釋至最終濃度之20倍濃度。接著，於反應用緩衝液(15mM Tris-HCl pH7.5,0.01% Tween-20,2mM DTT)中添加經純化人類FGFR1蛋白質、基質肽(最終濃度為 250nM)、氯化鎂(最終濃度為5mM)、ATP(最終濃度為190μM)與受測化合物之DMSO溶液(DMSO之最終濃度為5%)，於25℃下培養120分鐘進行激酶反應。對其添加EDTA使最終濃度成為40mM，藉此使反應停止後，添加含有Eu標記化抗磷酸化酪胺酸抗體PT66(PerkinElmer)與SureLight APC-SA(PerkinElmer)之檢測液，於室溫下靜置2小時以上。最後藉著PHERAstar FS(BMG LABTECH)，以620nm與665nm之二種波長測定照射波長337nm之激發光時的螢光量。從二種波長之螢光量比求出磷酸化反應量，並將可抑制磷酸化反應至50%之化合物濃度定義為IC₅₀ 值(nM)，顯示於下表。茲將結果顯示於表5。

試驗例4 FGFR3激酶活性抑制作用之測定

對FGFR3激酶活性之抑制活性測定係按試驗例3之方法進行。經純化之重組人類FGFR3蛋白質係購自Carna Biosciences,Inc.。令ATP之最終濃度為50μM。茲將結果顯示於表5。

試驗例5 FGFR4激酶活性抑制作用之測定

對FGFR4激酶活性之抑制活性測定係按試驗例3之方法進行。經純化之重組人類FGFR4蛋白質係購自Carna Biosciences,Inc.。令ATP之最終濃度為200μM。茲將結果顯示於表5。

從試驗例3~5之結果，清楚得知受測化合物所代表之本發明化合物無論何者皆對FGFR1、3、4顯示出高度抑制活性，而係pan-FGFR抑制劑。

Claims

一種如下述通式(I)所示之化合物或其鹽： (式中，R₁ 互為相同或相異，表示C₁ ~C₆ 烷基；X₁ 及X₂ 各自獨立為N或CH；Y為通式(A)、通式(B)或通式(C)所示之基： (於此，下式所示之2價部分表示含氮C₃ ~C₁₀ 雜環伸烷基) (於此，下式所示之2價部分表示C₃ ~C₁₀ 環伸烷基) (於此，下式所示之2價部分表示C₆ ~C₁₂ 伸芳基) R₂ 為氫原子、C₂ ~C₆ 炔基、-C(=O)OR_x 、-C(=O)N(R_x )(R_y )、羥基C₁ ~C₆ 烷基、二(C₁ ~C₆ 烷基)胺基C₁ ~C₆ 烷基或是可具有R₃ 之C₂ ~C₉ 雜芳基；R₃ 為C₁ ~C₆ 烷基或二(C₁ ~C₆ 烷基)胺基C₁ ~C₆ 烷基；Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )或-C≡C-R₇ ；R₄ 、R₅ 及R₆ 相同或相異，表示氫原子、鹵素原子、可具有R₈ 之C₁ ~C₆ 烷基或是通式(D)所示之基； (於此，下式所示之1價部分表示含氮C₃ ~C₁₀ 雜環烷基) R₇ 為氫原子、C₁ ~C₆ 烷基或羥基C₁ ~C₆ 烷基；R₈ 為-OR_x 或-N(R_x )(R_y )；R₉ 為C₁ ~C₆ 烷基、鹵素原子或-OR_x ； R_x 及R_y 相同或相異，為氫原子、C₁ ~C₆ 烷基、C₃ ~C₁₀ 環烷基、二(C₁ ~C₆ 烷基)胺基C₁ ~C₆ 烷基、或C₁ ~C₆ 烷氧基C₁ ~C₆ 烷基；l為0~3之整數；m為1~3之整數；n為0~2之整數但是，當(1)X₂ 為N時，X₁ 為N或CH；(2)X₂ 為CH時，X₁ 為CH)。
如申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中通式(I)中，l為0或1。
如申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中通式(I)中：(1)Y為通式(A)所示之基時，下式所示之基為伸四氫氮唉基(azetidinylene)、伸吡咯啶基(pyrrolidinylene)、伸哌啶基(piperidinylene)、伸哌基(piperazinylene)、伸啉基(morpholinylene)； (2)Y為通式(B)所示之基時，下式所示之基為環伸丙基、環伸丁基； (3)Y為通式(C)所示之基時，下式所示之基為伸苯基；
如申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中通式(I)中：(1)Y為通式(A)所示之基時，Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )或-C≡C-R₇ ；(2)Y為通式(B)或通式(C)所示之基時，Z為-C(R₄ )=C(R₅ )(R₆ )。
如申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中通式(I)中R₁ 為甲基或乙基。
如申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中通式(I)中，R₂ 為C₂ ~C₆ 炔基、-C(=O)OR_x 、羥基C₁ -C₄ 烷基或是可具有R₃ 之C₂ ~C₉ 雜芳基。
如申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中化合物係選自下述化合物群者：(1)(S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮；(2)(S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-炔-1-酮；(3)(S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二乙氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮；(4)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)丙-2-烯-1-酮；(5)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-羥基丁-2-炔-1-酮； (6)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮；(7)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(環丙基胺基)丁-2-烯-1-酮；(8)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(異丙基胺基)丁-2-烯-1-酮；(9)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(乙基(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮；(10)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(環丁基胺基)丁-2-烯-1-酮；(11)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二乙基胺基)丁-2-烯-1-酮；(12)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(第三丁基胺基)丁-2-烯-1-酮；(13)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(異丙基(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮； (14)1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(15)(S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(16)(R)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(17)1-((2S,4S)-4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮；(18)1-((2S,4S)-4-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-乙炔基吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮；(19)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮；(20)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮；(21)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(22)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(4-羥基哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(23)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)丁-2-炔-1-酮；(24)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-羥基-4-甲基戊-2-炔-1-酮；(25)1-((S)-3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-((S)-3-氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(26)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-1-基)-4-(哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(27)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)丙-2-烯-1-酮；(28)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮；(29)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(30)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(四氫氮唉-1-基)丁-2-烯-1-酮； (31)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(乙基(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮；(32)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(異丙基胺基)丁-2-烯-1-酮；(33)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(二乙基胺基)丁-2-烯-1-酮；(34)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-((2-甲氧基乙基)(甲基)胺基)丁-2-烯-1-酮；(35)1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(4-羥基哌啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(36)(S)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-羥基吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(37)(R)-1-(3-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)四氫氮唉-1-基)-4-(3-羥基吡咯啶-1-基)丁-2-烯-1-酮；(38)(2S,4S)-甲基1-丙烯醯基-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-羧酸酯； (39)1-((2S,4S)-4-(4-胺基-5-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(1,3,4-二唑-2-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮；及(40)(S)-1-(3-(4-胺基-3-((3,5-二甲氧基苯基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)吡咯啶-1-基)丙-2-烯-1-酮。
一種FGFR抑制劑，係以如申請專利範圍第1至7項中任一項之化合物或其鹽作為有效成分者。
一種藥學組成物，含有：如申請專利範圍第1至7項中任一項之化合物或其鹽，及藥學載體。
一種抗腫瘤劑，係以如申請專利範圍第1至7項中任一項之化合物或其鹽作為有效成分者。
如申請專利範圍第1至7項中任一項之化合物或其鹽，其係供使用於腫瘤之治療者。
一種如申請專利範圍第1至7項中任一項之化合物或其鹽之用途，其係用以製造抗腫瘤劑者。