CN109776544B - 吡唑并[3,4-d]嘧啶类化合物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
在本发明涉及的化合物为一种布鲁顿酪氨酸激酶的抑制剂。此外，本发明阐述了包含该化合物的药物组分及制剂，及这类激酶抑制剂的用途，可单一用药或与其它化合物联合用药，用来治疗由激酶介导或激酶依赖的症状。
Description
技术领域
本发明涉及化合物，制备化合物的方法，化合物的药物组合物和药剂，及将该化合物用于治疗、预防、诊断布鲁顿酪氨酸激酶(Bruton’s tyrosine kinase,Btk)相关的疾病、失调或症状。
背景技术
蛋白酪氨酸激酶通过控制细胞的信号传导通路调节细胞的生长、分化、凋亡等一系列生理生化过程。异常的激酶活性已经涉及许多人类疾病，包括炎症、自身免疫性疾病和癌症等疾病。在一般人类癌症中(如胃癌、肺癌和淋巴瘤等)已发现蛋白酪氨酸激酶的异常表达，蛋白酪氨酸激酶已成为抗肿瘤药物研究开发的重要靶点之一。
Btk是非受体酪氨酸激酶Tec家族的成员，由PH结构域、TH结构域、SH3结构域、SH2结构域和催化结构域5部分组成。Btk参与多种信号通路，对细胞的增殖、分化和凋亡起着重要的调控作用，在连接细胞表面B细胞受体(B-cell receptor，BCR)的信号通路中，随着BCR的激活，Btk依赖Syk、Lyn活化，活化后的Btk可以引起包括MAPK、NFκB等下游信号的活化，异常的BCR介导的信号转导可引起错误调节的B细胞活化或病原性自身抗体的形成，这将导致多种自身免疫性或炎症性疾病。Btk的持续激活是慢性淋巴细胞白血病(CLL)发展的一个先决条件，其异常表达还会促进弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中活化B细胞亚型的存活。
Btk小分子抑制剂通过抑制Btk的活性，可以抑制B淋巴瘤细胞的增殖，促进肿瘤细胞的凋亡，还可以抑制B细胞自身抗体和细胞因子的产生，对于治疗血液恶性肿瘤和自身免疫失调性疾病具有良好前景。已有多个化合物进入临床研究，用于治疗B细胞淋巴瘤和白血病等。Pharmacyclics生物制药公司研发的依鲁替尼(Ibrutinib)作为首个上市的一种不可逆的Btk小分子抑制剂药物，目前用于治疗套细胞淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病和巨球蛋白血症等均有明显的疗效。其他处于临床开发阶段的小分子Btk抑制剂还有ONO公司的ONO-4059、Acerta公司的ACP-196和Celgene公司的CC-292等。
目前，依鲁替尼的优秀临床结果昭示着Btk激酶的高选择性小分子抑制剂将会成为全球新药研发领域的又一热点，也表明吡唑并[3,4-d]嘧啶类结构化合物是一种口服有效的Btk小分子抑制剂药物。因此，鉴于***疾病的迫切需要，研究结构多样化的吡唑并[3,4-d]嘧啶类化合物对开发新的效果更加良好的Btk小分子抑制剂药物具有重要意义。
发明内容
本发明涉及的化合物，药物组合物，药剂和方法，可用于(a)诊断、预防、治疗与Btk相关的疾病、失调或症状；(b)减轻与Btk相关的副作用或症状；(c)控制与Btk相关的疾病、失调或症状。在一方面，在此阐述的方法、化合物、药物组合物和药剂由抑制Btk的抑制剂构成。
在本发明的第一方面，提供了一种式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物、活性代谢物、多晶型物、酯、异构体或前药：
其中：
L1选自未取代或取代的C1-C6的烷基、未取代或取代的C2-C6的烯基、未取代或取代的C2-C6的炔基；
L2选自-(CH2)n-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2)n-NH-，其中，n是0、1、2、3或4；
Ar选自未取代或取代的芳基或杂芳基；
Y选自未取代或取代的烷基，或者是4元、5元、6元环烷基环；
R1选自H或低级烷基；
或者，Y和N和R1相连形成一个四元、五元或六元杂环；
G选自H，
其中，R2、R3和R4分别独立地选自H、卤素、-COOH、未取代或取代的低级烷基、未取代或取代的低级杂烷基。
在另一优选例中，其中：n是1或2。
在另一优选例中，其中：Ar选自未取代或取代的芳基；更佳地，取代为间位或对位取代；更佳地，取代基为烷氧基或卤素。
在另一优选例中，其中：L1选自未取代的C2-C6的烯基或未取代的C2-C6的炔基；更佳地，其中：L1选自乙烯基或乙炔基。
在另一优选例中，其中：Y和N和R1相连形成六元杂环。
在另一优选例中，其中：G为
在另一优选例中，本发明提供的化合物选自于：
在另一优选例中，本发明提供的化合物对布鲁顿酪氨酸激酶(Bruton’s tyrosinekinase,Btk)具有抑制活性。
在本发明的第二方面，提供了一种药物组合物，该组合包含如上所述的本发明提供的化合物和药学上可接受的赋形剂。
在另一优选例中，上述药物组合物的形式为水性分散剂、液体、啫哩、糖浆、西也剂、药浆、悬浮液、气雾剂、控释剂、速溶剂、泡腾剂、冻干剂、片剂、粉末、药丸、糖衣完、胶囊、延迟释放剂、延长释放剂、脉冲控释剂、多微粒剂、或立即释放剂。
在本发明的第三方面，提供了一种如上所述的本发明提供的化合物的制备方法，所述方法包括步骤：在氮气保护下，将结构如式Ⅰ-d所示的化合物与DMF、钯催化剂和有机碱混合，进而与结构如式Ⅰ-c所示的化合物在30-150℃下反应3－15小时，得到的结构如式Ⅰ-e所示的化合物在酸性条件下脱保护制备结构如式Ⅰ-f所示的中间体，随后在碱或缩合剂及烷类溶剂存在下，与G-Z进行酰胺缩合反应，得到如上所述的本发明提供的化合物；
其中：L1、L2、Ar、Y、R1、G的定义如权利要求1所示；Z选自卤素或羟基。
在本发明的第四方面，提供了一种如上所述的本发明提供的化合物在制备预防或治疗炎症、与异常B细胞增殖相关的自身免疫性疾病(如类风湿性关节炎)和/或肿瘤疾病的药物中的应用。
据此，本发明提供了新的效果更加良好的Btk小分子抑制剂药物。
附图说明
图1显示均相时间分辨荧光(HTRF)方法建立了Btk小分子抑制剂的激酶活性检测原理。
图2显示均相时间分辨荧光(HTRF)方法建立了Btk小分子抑制剂的激酶活性检测操作过程。
具体实施方式
术语
如果无另外说明，用于本发明申请，包括说明书和权利要求书中的术语，定义如下。必须注意，在说明书和所附的权利要求书中，如果文中无另外清楚指示，单数形式“一个”包括复数意义。如果无另外说明，使用质谱、核磁、HPLC、蛋白化学、生物化学、重组DNA技术和药理的常规方法。在本申请中，如果无另外说明，使用“或”或“和”指“和/或”。
“式(I)化合物”指结构式为(I)的化合物。
“烷基”指脂肪烃碳氢基团。烷基部分可以是饱和的烷基(指不含有任何不饱和单元，如碳-碳双键或碳-碳三键)或烷基部分可以是不饱和烷基(指至少含有一个不饱和单元)。烷基部分，不管饱和还是不饱和，可以是支链或直链。
“烷基”片断(moiety)可以有1到8个碳原子(只要在这里出现，一个数字范围如“1到8”指在给出范围中的每个整数，如“1到8个碳原子”指可以含有1个碳原子，2个碳原子，3个碳原子等直到包含8个碳原子的烷基，虽然目前的定义在没有指定数字范围的情况下，也包含了术语“烷基”的出现)。本文所述的化合物的烷基可以被指定为“C1-C6烷基”或类似的指定。举例说明“C1-C6烷基”指在烷基链中有一个，两个，三个，四个，五个或六个碳原子。典型的烷基包括但不限于甲基，乙基，丙基异丙基，丁基异丁基，叔丁基，戊基，己基等。术语“低级烷基”类似地用于具有1到4个碳原子的基团。
“烷氧基”基团指“烷基”O-基团，烷基如本文中定义。
“酰氨基”是分子式为-C(＝O)NHR或-NHC(＝O)R的化学片断，R选自于基团含有烷基，环烷基，芳基，杂芳基(通过环碳连接的)和杂脂环烃(通过环碳连接)。酰胺可以是氨基酸或连接到式(I)化合物的肽分子，从而形成前药。本文所述的化合物中的任何氨基或碳侧链按照需要被选择性的酰胺化。见Greene和Wuts，Protective Groups in OrganicSynthesis，3rd Ed.，John Wiley&Sons，New York，NY，1999。
如在此用到的术语“芳基”指芳香环，其中形成环的每个原子都是碳原子。芳基的环由五个，六个，七个，八个，九个或更多原子组成。芳基被任选取代。一方面，芳基是苯基或萘基。根据结构，芳基可以是单自由基或双自由基(如亚芳基)。一方面，芳基是C6-C10芳基。
术语“环烷基”指单环或多环脂肪烃，非芳香自由基，其中成环的每个原子(如骨架原子)均为碳原子。环烷基可以是饱和的或部分未饱和的。环烷基可以与芳环连接，连接点在非芳环碳原子的碳原子上。环烷基包括从3到10个成环原子。在某些具体方面，环烷基选自于环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基和环辛基。环烷基可以被取代或不取代。
术语“酯”指带有-COOR基团的化学片断，其中R选自于基团含有烷基，环烷基，芳基，杂芳基(通过环碳连接)和杂脂环烃(通过环碳连接)。如果需要，本文所述的化合物中任何羟基或羧基侧链被酯化。制备这类酯的过程和具体基团的例子可参考Greene和Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，3rd Ed.，John Wiley&Sons，New York，NY，1999。
术语“卤素”或“卤化物”指氟，氯，溴或碘。
术语“杂烷基”指烷基中一个或多个骨架原子选自于除了碳原子外的原子，如氧，氮，硫，磷或它们同时存在。一方面，杂烷基为C1-C6杂烷基。
术语“杂环”或“杂环的”指杂芳环(也被称为杂芳基)和杂环烷基(也被称为杂脂环基团)，环中含有一个到四个杂原子，其中每个杂原子选自于O，S和N，在环系中每个杂环基含有4到10个原子，但任何环不能含有两个邻近的O或S原子。非芳香杂环基团(也被称为杂环烷基)包括在环中仅有3个原子的基团，但是芳基杂环基在环中必须具有至少5个原子。杂环基包括苯并环系。三元杂环基的例子为氮丙定基；四元杂环基的例子为氮杂环丁基；五元杂环基的例子为噻唑基；六元杂环基的例子为吡啶基；十元杂环基的例子为喹啉基。非芳香杂环基的例子为吡咯烷基，四氢呋喃基，二氢呋喃基，四氢噻吩基，噁唑烷酮基，四氢吡喃基，二氢吡喃基，四氢噻喃基，哌啶基，吗啉基，噻吗啉基，噻烷基，哌嗪基，氮丙定基，氮杂环丁基，氧环丁基，硫杂环丁基，类哌啶基，oxepanyl，thiepanyl，oxazepinyl，二氮杂卓基，thiazepinyl，1,2,3,6-四氢吡啶基，吡咯啉-2-基，吡咯啉-3-基，吲哚啉基，2H-吡喃基，4H-吡喃基，二噁烷基，1，3-二氧戊环，吡唑啉基，二噻烷基，二硫戊环基，二氢吡喃基，二氢噻吩基，二氢呋喃基，吡唑烷基，咪唑啉基，咪唑烷基，3-氮杂二环[3.1.0]己烷基，3-氮杂二环[4.1.0]庚烷基，3H-吲哚基和喹嗪基。芳杂环基的例子为吡啶基，咪唑基，嘧啶基，吡唑基，***基，吡嗪基，四唑基，呋喃基，噻吩基，异唑基，噻唑基，唑基，异噻唑基，吡咯基，喹啉基，异喹啉基，吲哚基，苯并咪唑基，苯并呋喃基，噌啉，吲唑基，吲嗪基，二氮杂萘基，哒嗪基，三嗪基，异氮杂茚基，蝶啶基，嘌呤基，二唑基，噻重氮基，呋咱基，苯并呋咱基，苯并噻吩基，苯并噻唑基，苯并唑基，喹唑啉基，喹喔啉基，萘啶基，呋喃吡啶基(furopyridinyl)。前述基团可以是连接碳的或连接氮的。例如，从吡咯衍生的基团可以是吡咯-1-基(连接N)或吡咯-3-基(连接C)。更进一步，从咪唑衍生的基团可以是咪唑-1-基或咪唑-3-基(均连接N)或咪唑-2-基，咪唑-4-基或咪唑-5-基(均连接C)。杂环基包括苯并融合环系。非芳香杂环可以被一个或两个氧(＝O)片断所取代，如吡咯啉-2-酮。
术语“杂芳基”或“芳香杂环”指包括一个或多个选自于氮，氧和硫的环杂原子的化合物。更优的，杂芳基包括吲哚，氮杂吲哚，吡咯，吡唑，嘧啶，吡嗪，吡啶，喹啉，噻吩和呋喃。一方面，一个杂芳基包含0到3个氮原子。另一方面，一个杂芳基包含0到3个氮原子，0到1个氧原子和0到1个硫原子。另一方面，杂芳基是单环或双环杂芳基。
“杂环烷基”，“杂脂环基”或“非芳香杂环”指一个环烷基至少包含一个选自于氮，氧和硫的杂原子。自由基可以与芳基或杂芳基融合。在某些具体方面，杂环烷基选自于唑烷基，吡咯烷基，四氢呋喃基，四氢噻吩基，四氢吡喃基，四氢噻喃基，哌啶基，吗啉基，噻吗啉基，哌嗪基和吲哚啉基。术语杂脂环基也包括所有的糖类环，包括但不限于单糖，二糖和低聚糖。一方面，杂环烷基是C2-C10杂环烷基。另一方面，杂环烷基是C4-C10杂环烷基。一方面，杂环烷基含有0到2个氮原子。另一方面，杂环烷基含有0到2个氮原子，0到2个氧原子或0到1个硫原子。
术语“键”指两个原子间或两个片断间(当通过键来连接的原子被认为是大结构的一部分时)的化学键。一方面，当本文所述的基团是一个键时，缺少参考基团，允许在剩余的确定基团间形成一个键。
术语“元环”包括任何环状结构。术语“元”意为表示构成环的骨架原子的数量。这样，如，环己基，吡啶基，吡喃基，噻喃基是六元环，环戊基，吡咯基，呋喃基和噻吩基是五元环。
术语“任选取代”或“取代”指参考基团可以被一个或多个额外基团所取代，额外基团单独地且独立的选自于，烷基，环烷基，芳基，杂芳基，杂脂环烃，羟基，烷氧基，烷硫基，芳硫基，烷亚砜基，芳亚砜基，烷砜基，芳砜基，氰基，卤基，羰基，硫代羰基，硝基，卤烷基，氟烷基和氨基，包括单取代和双取代的氨基基团及其被保护的衍生物。举例说明，任选取代可以是卤化物，-CN，-NO2或LsRs，其中每个Ls独立的选自于一个键，-O-，-C(＝O)-，-C(＝O)O-，-S-，-S(＝O)-，-S(＝O)2-，-NH-，-NHC(＝O)-，-C(＝O)NH-，S(＝O)2NH-，-NHS(＝O)2，-OC(＝O)NH-，-NHC(＝O)O-，或-(C1-C6烷基)；每个Rs选自于氢，烷基，氟烷基，杂烷基，环烷基，芳基，杂芳基或杂环烷基。可以形成以上取代基的保护衍生物的保护基可以参考Greene和Wuts。一方面，任选取代基选自于卤素，CF3，OH，CN，NO2，SO3H，SO2NH2，SO2Me，NH2，COOH，CONH2，烷氧基，-N(CH3)2和烷基。
在某些具体实施例中，所述化合物具有一个或多个立构中心，且每个中心以R或S型独立存在。在此提到的化合物包括所有非对映体形，对映体形，差向构体形和它们的适当混合物。立体异构体可通过如手性色谱柱对立体异构体分离的方法得到。
本文所述的方法和分子式包括使用N-氧化物(如果合适)，结晶形式(也被称为多晶型)或式(I)结构化合物的药学上可接受的盐，和具有相同活性的这些化合物的活性代谢物。在某些情况下，化合物可能作为互变异构体而存在。所有的互变异构体包括在此提到的化合物的范围之内。在某个具体实施例中，所述化合物以溶剂化形式存在，药学上可接受的溶剂如水，乙醇等。在其它具体实施例中，所述化合物以非溶剂化形式存在。
特定药学及医学术语
术语“可接受的”，如本文所用，指一个处方组分或活性成分对一般治疗目标的健康没有过分的有害影响。
术语“Btk依赖”，如本文所用，指在缺少Btk的情况下可能不会引起，或不会引起相同程度的失调或症状。
术语“Btk介导”，如本文所用，指在Btk存在时所导致的疾病或症状，Btk缺失时也可能产生类似情况。
术语“癌症”，如本文所用，指一种不能控制的细胞的异常生长，并且在某种条件下能够转移(传播)。这种类型的癌症包括但不限于，固体肿瘤(如膀胱、肠、脑、胸、子宫、心脏、肾、肺、淋巴组织(淋巴瘤)、卵巢、胰腺或其它内分泌器官(如甲状腺)、***、皮肤(黑色素瘤)或血液瘤(如非白血性白血病)。
术语“联合给药”或其类似术语，如本文所用，指将几种所选的治疗药物给一个病人用药，以相同或不同的给药方式在相同或不同的时间给药。
术语“增强”或“能增强”，如本文所用，指预期的结果能够在效价或是持续时间方面都有增加或延长。因此，在增强药物的治疗效果方面，术语“能增强”指药物在***中有提高或延长效价或持续时间的能力。本文所用的“增效值”，指在理想的***中，能够最大限度地的增强另外一个治疗药物的能力。
术语“炎性疾病”指有一种或多种以下病症特征。如疼痛、发热、发红、肿大、暂时性或永久性功能缺失。炎症有很多表现形式，包括但不限于，急性、粘性、萎缩性、卡他性、慢性、硬化、弥漫性、散布性、渗出性、含纤维性、成纤维性、局部、肉芽肿、增生性、肥大性、间质性、转移性、坏死性、闭塞性、实质性、可塑性、产生性、增殖性、假膜性、化脓性、致硬化性、浆液纤维蛋白性、血浆性、单纯性、特异性、亚急性、催脓性、毒性、外伤性、和/或溃疡性。更进一步的，炎性疾病还包括，但不限于以下血管表象(多动脉炎，颞动脉炎)；关节表象(关节炎——结晶性、骨骼性、牛皮癣、反应性、风湿性、赖特性)；胃肠道表象(结肠炎)；皮肤(皮炎)；或多种组织和器官的表象(全身性红斑狼疮)。
术语“免疫性疾病”指对内源性或外源性抗原产生的不良或有害反应的疾病或症状。结果通常会造成细胞的功能障碍、或因此而破坏并造成机能障碍、或破坏可能产生免疫症状的器官或组织。
如本文所用的化合物的“代谢产物”指化合物代谢过程中产生的衍生物。术语“活性代谢物”指在化合物代谢过程中产生的有生物学活性的衍生物。术语“代谢”，如本文所述，指特定物质被有机体转化的整个过程(包括但不限于，水解反应和由酶催化的反应)。因此，酶可以特异地改变化合物的结构。如，细胞色素P540催化一系列氧化和还原反应，而尿苷二磷酸葡糖醛酸基转移酶催化活化的葡糖醛酸分子连接到芳基醇、脂族醇、羧酸、胺及自由巯基上。本文所用的代谢物是指将化合物给予一种宿主，然后分析宿主的组织样品；或是将化合物与肝脏细胞在体外共孵育，然后分析反应后的化合物。
术语“受试者”或“病人”包括哺乳动物和非哺乳动物。哺乳动物包括但不限于，哺乳类：人、非人灵长类如猩猩、猿及猴类；农业动物如牛、马、山羊、绵羊、猪；家畜如兔、狗；实验动物包括啮齿类，如大鼠、小鼠及豚鼠等。非哺乳类动物包括但不限于，鸟、鱼等。在一优选例中，所选哺乳动物是人。
术语“治疗”、“治疗过程”或“疗法”如本文所用，包括缓和、抑制或改善疾病的症状或状况；抑制并发症的产生；改善或预防潜在代谢综合症；抑制疾病或症状的产生，如控制疾病或情况的发展；减轻疾病或症状；使疾病或症状减退；减轻由疾病或症状引起的并发症，或预防或治疗由疾病或症状引起的征兆。
如本文所用，某一化合物或药物组合物，给药后，可以使某一疾病、症状或情况得到改善，尤指其严重度得到改善，延迟发病，减缓病情进展，或减少病情持续时间。无论固定给药或临时给药、持续给药或断续给药，可以归因于或与给药有关的情况。
化合物
在本发明的一方面，提供了一种式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物、活性代谢物、多晶型物、酯、异构体或前药：
其中，L1选自未取代或取代的C1-C6的烷基、未取代或取代的C2-C6的烯基、未取代或取代的C2-C6的炔基；
L2选自-(CH2)n-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2)n-NH-，其中，n是0、1、2、3或4；
Ar选自未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基；
所述未取代或取代的C1-C6的烷基表示未经取代或经取代的直链或支链饱和烃基，包括1至6个碳原子的直链或支链基团，包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、环丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基或环戊基；所述未取代或取代的C2-C6的烯基表示未经取代或经取代的直链或支链烯基，包括2至6个碳原子的直链或支链基团，包括但不限于顺式或反式的乙烯、丙烯、1-丁烯，2-丁烯、1,3-丁二烯、1-戊烯、2-戊烯、1,3-戊二烯、1,4-戊二烯、1-已烯、2-已烯、3-已烯、1,3-已二烯、1,4-已二烯、1,5-已二烯、2,4-已二烯、1,3,5-已三烯；所述未取代或取代的C2-C6的炔基表示具有1个或多个三键的直链或支链炔基，包括但不限于乙炔、丙炔、1-丁炔、2-丁炔、1,3-丁二炔、1-戊炔、2-戊炔、1,3-戊二炔、1,4-戊二炔、1-已炔、2-已炔、3-已炔、1,3-已二炔、1,4-已二炔、1,5-已二炔、2,4-已二炔、1,3,5-已三炔。
其中，以上所述烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基和-(CH2)n-可任选的被一种或多种下述中的各种取代基团所取代：羟基、卤素、-C1-4烷基和-OC1-4烷基；所述卤素选自氟、氯、溴或碘。
在某些具体实施例中，L1选自未取代或取代的顺式或反式的C2-C6烯基和未取代或取代的C2-C6炔基。
在某些具体实施例中，L1选自未取代或取代的顺式或反式的C2烯基和未取代或取代的C2炔基，L2选自-(CH2)n-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2)n-NH-，其中，n是0、1、2、3或4；进一步优选n是1或2。
在某些具体实施例中，L1选自未取代或取代的顺式或反式的C2烯基和未取代或取代的C2炔基，L2选自-(CH2)n-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2)n-NH-，其中，n是1或2。Ar选自未取代或取代的芳基和未取代或取代的杂芳基。
在某些具体实施例中，L1选自未取代或取代的顺式或反式的C2烯基和未取代或取代的C2炔基，L2选自-(CH2)n-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2)n-NH-，其中，n是1或2。Ar选自未取代或取代的芳基。
如式Ⅰ所示的吡唑并[3,4-d]嘧啶类化合物，其中，Y选自未取代或取代的烷基，或者是4元、5元、6元环烷基环；且R1选自H或低级烷基；
或者，Y和R1可以结合在一起形成一个4元、5元或者6元的杂环；
G选自H，
其中，R2、R3和R4分别独立地选自H、卤素、-COOH、未取代或取代的低级烷基、未取代或取代的低级杂烷基；
在某些具体实施例中，
选自
更在某些具体实施例中，
选自
还更在某些具体实施例中，
选自
在某些具体实施例中，G为
在某些具体实施例中，G为
其中R2选自H、-COOH以及任选地被以下基团取代的低级烷基：卤素、-OH、-O-低级烷基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、杂环烷基氨基、烷酰基氧基、烷基磺酰氨基；
在某些具体实施例中，G为
其中R2选自H和低级烷基。
在其它具体实施例中，G选自
以上说明的对于不同变量的基团的任何组合在此都给予预期。
式(I)化合物包括但不限于表1中的说明。
表1。
化合物的合成
以上说明的式(I)化合物可使用标准的合成技术或公知的技术与文中结合的方法来合成。此外，在此提到的溶剂，温度和其他反应条件可以改变。
用于式(I)化合物的合成的起始物料可以由合成或从商业来源上获得，如，但不限于Aldrich Chemical Co.(Milwaukee，Wis.)或Sigma Chemical Co.(St.Louis，Mo.)。本文所述的化合物和其他具有不同取代基的有关化合物可使用公知的技术和原料来合成，包括发现于March，ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4th Ed.，(Wiley 1992)；Carey和Sundberg，ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4th Ed.，Vols.A和B(Plenum 2000，2001)，Green和Wuts，PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS 3rd Ed.，(Wiley 1999)中的方法。化合物制备的一般方法可通过使用适当的试剂和在此提供的分子式中引入不同基团的条件来改变。
本文所述的式(I)化合物以如下方案所示的合成路线合成，在一些实施方案中，可通过下述方法制备本文所述的化合物。以下方法和实施例是为了说明这些方法。这些流程和实施例不应以任何方式被解释为对本发明的限制。也可使用本领域技术人员已知的标准合成技术合成本文所述化合物，或者组合使用本领域已知方法和本文所述方法。
化合物I的合成方法包括如下步骤：
步骤A：I-c的合成：在溶剂中，在无机碱的作用下，将化合物I-a与I-b进行取代反应，得到化合物I-c；
其中，化合物I-a的结构中L1选自未取代或取代的C1-C6的烷基、未取代或取代的C2-C6的烯基和未取代或取代的C2-C6的炔基；-(CH2)n-中的n是0、1、2、3或4；X选自卤素；化合物I-b的结构中Ar选自未取代或取代的芳基和未取代或取代的杂芳基；R2选自羟基，氨基或巯基；化合物I-c的结构中L2选自-(CH2)n-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2)n-NH-，其中，n是0、1、2、3或4；优选地，L1选自未取代或取代的顺式或反式的C2烯基和未取代或取代的C2炔基；-(CH2)n-中的n是0、1或2；X选自溴；Ar选自未取代或取代的芳基；R2选自羟基；L2选自-(CH2)n-O-，其中，n是0、1或2。
制备化合物I-c的方法可以为本领域中该类取代反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物I-b与有机溶剂和无机碱混合，进而与化合物I-a发生取代反应制得化合物I-c；
在制备化合物I-c的方法中，所述的溶剂优选醚类溶剂、醇类溶剂、腈类溶剂和丙酮、DMF、水中的一种或多种；进一步优选丙酮和DMF。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃。所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇。所述的腈类溶剂优选乙腈。
在制备化合物I-c的方法中，所述的溶剂与所述的化合物I-b的体积质量比优选5mL/g-50mL/g，进一步优选10mL/g-30mL/g。
在制备化合物I-c的方法中，所述的无机碱优选氢氧化钾、碳酸钾、氢氧化钠、碳酸钠和碳酸铯中的一种或多种，进一步优选碳酸钾。
在制备化合物I-c的方法中，所述的无机碱与所述的化合物I-b的摩尔比优选1:1-5:1，进一步优选1:1-2:1。
在制备化合物I-c的方法中，所述的化合物I-a与所述的化合物I-b的摩尔比优选1:1-5:1，进一步优选1:1-2:1。
在制备化合物I-c的方法中，所述的取代反应的温度优选0℃-150℃，进一步优选30℃-70℃。
在制备化合物I-c的方法中，所述的取代反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物I-b消失时作为反应的终点，反应时间优选0.5h-16h，进一步优选3h-10h。
在制备化合物I-c的方法中优选包括以下任一后处理步骤：当溶剂选自DMF时，优选采用方法(1)。当溶剂选自丙酮时，优选采用方法(2)。方法(1)包括如下步骤：反应结束后，加入有机溶剂和水，有机相用水和饱和氯化钠洗涤，干燥，浓缩，柱层析即可。方法(2)包括如下步骤：反应结束后，过滤，浓缩，柱层析即可。其中，所述的有机溶剂进一步优选乙酸乙酯。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。
步骤B：I-e的合成：在过渡金属催化剂和碱的存在下，使化合物I-c和化合物I-d于氮气保护下和不对反应产生负面影响的溶剂中进行偶联反应以制备化合物I-e。
其中，化合物I-c、化合物I-d和化合物I-e的结构中L1选自未取代或取代的C1-C6的烷基、未取代或取代的C2-C6的烯基和未取代或取代的C2-C6的炔基；L2选自-(CH2)n-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2)n-NH-，其中，n是0、1、2、3或4；Ar选自未取代或取代的芳基和未取代或取代的杂芳基；Y选自未取代或取代的烷基，或者是4元、5元、6元环烷基环；且R1选自H或低级烷基；或者，Y和R1可以结合在一起形成一个4元、5元或者6元的杂环；优选地，L1选自未取代或取代的顺式或反式的C2烯基和未取代或取代的C2炔基；L2选自-(CH2)n-O-，其中，n是0、1或2；Ar选自未取代或取代的芳基；
选自
更优选地，
选自
制备化合物I-e的方法可以为本领域中该类偶联反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：在氮气保护下，将化合物I-d与有机溶剂、过渡金属催化剂、碱混合，进而与化合物I-c在30-150℃(优选80℃)下反应3-15小时(优选10小时)发生偶联反应制得化合物I-e；
在制备化合物I-e的方法中，所述的溶剂可以使用不对反应产生负面影响的任何溶剂。优选包括烃类溶剂(例如苯、甲苯和二甲苯)，腈类溶剂、醚类溶剂(例如二甲氧基乙烷、四氢呋喃和1,4-二氧六环)、醇类溶剂、非质子极性溶剂(例如DMF、DMSO和六甲基磷酰胺)和水中的一种或多种；进一步优选DMF。所述的醚类溶剂优选1,4-二氧六环。所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇。所述的腈类溶剂优选乙腈。
在制备化合物I-e的方法中，所述的溶剂与所述的化合物I-d的体积质量比优选5mL/g-50mL/g，进一步优选10mL/g-30mL/g。
在制备化合物I-e的方法中，所述的碱的实例包括：有机碱，例如三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、二甲基吡啶、三甲基吡啶、4-二甲基氨基吡啶、叔丁酸钾、叔丁酸钠、甲醇钠、乙醇钠、六甲基二硅基氨基锂、六甲基二硅基氨基钠、六甲基二硅基氨基钾和丁基锂；以及无机碱，例如碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠和氢化钠。进一步优选三乙胺和二异丙基乙胺。
在制备化合物I-e的方法中，所述的碱与所述的化合物I-d的摩尔比优选1:1-5:1，进一步优选1:1-2:1。
在制备化合物I-e的方法中，所述的化合物I-c与所述的化合物I-d的摩尔比优选1:1-5:1，进一步优选3:1-5:1。
在制备化合物I-e的方法中，可以用于该步骤的过渡金属催化剂的实例包括钯催化剂(例如乙酸钯、三(二亚苄基丙酮)二铯和1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物等)。若需要，可以添加配体(例如三苯基膦和三叔丁基膦)，并可以将铜试剂(例如碘化亚铜和乙酸铜)用作共催化剂。进一步优选过渡金属催化剂为四(三苯基膦)钯，共催化剂为碘化亚铜。
在制备化合物I-e的方法中，所述的化合物I-d与所述的过渡金属催化剂的摩尔比优选0.0001-1，进一步优选0.01-0.5。所述的化合物I-d与所述的配体的摩尔比优选0.0001-4，进一步优选0.01-0.2。所述的化合物I-d与所述的共催化剂的摩尔比优选0.0001-4，进一步优选0.01-0.2。
在制备化合物I-e的方法中，所述的偶联反应的温度优选0℃-溶剂回流的温度，进一步优选室温-150℃。
在制备化合物I-e的方法中，所述的偶联反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物I-d消失时作为反应的终点，反应时间优选0.5h-20h，进一步优选3h-15h。
在制备化合物I-e的方法中，可以在通过已知的分享和纯化手段分离和纯化之后或者在不进行通过已知的分离和纯化手段分离和纯化的情况下进行随后的步骤，所述已知分离和纯化手段例如浓缩、真空浓缩、结晶、溶剂萃取、沉淀和柱层析。
制备化合物I-e的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，加入水和有机溶剂，有机相经水和饱和氯化钠洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，抽滤、浓缩，经柱层析纯化，即可。其中，所述的有机溶剂进一步优选乙酸乙酯或二氯甲烷。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。
步骤C：I-f的合成：在溶剂中，在酸的作用下，将化合物I-e经脱保护反应得到化合物I-f；
其中，化合物I-e和化合物I-f的结构中L1选自未取代或取代的C1-C6的烷基、未取代或取代的C2-C6的烯基和未取代或取代的C2-C6的炔基；L2选自-(CH2)n-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2)n-NH-，其中，n是0、1、2、3或4；Ar选自未取代或取代的芳基和未取代或取代的杂芳基；Y选自未取代或取代的烷基，或者是4元、5元、6元环烷基环；且R1选自H或低级烷基；或者，Y和R1可以结合在一起形成一个4元、5元或者6元的杂环；优选地，L1选自未取代或取代的顺式或反式的C2烯基和未取代或取代的C2炔基；L2选自-(CH2)n-O-，其中，n是0、1或2；Ar选自未取代或取代的芳基；
选自
更优选地，
选自
制备化合物I-f的方法可以为本领域中该类脱保护的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物I-e与有机溶剂和酸混合，脱保护制得化合物I-f；
在制备化合物I-f的方法中，所述的溶剂优选醚类溶剂、醇类溶剂、腈类溶剂和丙酮、DMF、乙酸乙酯、二氯甲烷、水中的一种或多种；进一步优选乙酸乙酯和二氯甲烷。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃。所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇。所述的腈类溶剂优选乙腈。
在制备化合物I-f的方法中，所述的溶剂与所述的化合物I-e的体积质量比优选5mL/g-50mL/g，进一步优选10mL/g-30mL/g。
在制备化合物I-f的方法中，所述的酸优选有机酸或无机酸，所述的有机酸选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、苹果酸、马来酸、富马酸、琥珀酸、苯甲酸、甲磺酸、苯磺酸、乙酸、丙酸、丁酸、辛酸、己二酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、酒石酸、苯乙酸、邻苯二甲酸、对苯二甲酸、戊酸、己酸、癸酸、硬脂酸、软脂酸、丙烯酸等；所述的无机酸为盐酸、氢溴酸、磷酸、磷酸氢盐、硫酸或硫酸氢盐等。，进一步优选盐酸或三氟乙酸。
在制备化合物I-f的方法中，所述的酸与所述的化合物I-e的摩尔比优选1:1-20:1，进一步优选5:1-10:1。
在制备化合物I-f的方法中，所述的脱保护反应的温度优选0℃-150℃，进一步优选室温。
在制备化合物I-f的方法中，所述的脱保护反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物I-e消失时作为反应的终点，反应时间优选0.5h-20h，进一步优选3h-12h。
制备化合物I-f的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，加入有机溶剂打浆，抽滤、干燥，即可。其中，所述的有机溶剂优选醇类溶剂、醚类溶剂、烃类溶剂等。进一步优选为乙醇和石油醚。
步骤D：I的合成：在溶剂中，在碱和/或缩合剂的作用下，将化合物I-f与G-Z进行成酰胺反应，得到化合物I；
其中，化合物I-f和化合物I的结构中L1选自未取代或取代的C1-C6的烷基、未取代或取代的C2-C6的烯基和未取代或取代的C2-C6的炔基；L2选自-(CH2)n-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2)n-NH-，其中，n是0、1、2、3或4；Ar选自未取代或取代的芳基和未取代或取代的杂芳基；Y选自未取代或取代的烷基，或者是4元、5元、6元环烷基环；且R1选自H或低级烷基；或者，Y和R1可以结合在一起形成一个4元、5元或者6元的杂环；G选自H，
其中，R2、R3和R4分别独立地选自H、卤素、-COOH、未取代或取代的低级烷基、未取代或取代的低级杂烷基；Z选自卤素或羟基；优选地，L1选自未取代或取代的顺式或反式的C2烯基和未取代或取代的C2炔基；L2选自-(CH2)n-O-，其中，n是0、1或2；Ar选自未取代或取代的芳基；
选自
更优选地，
选自
G选自
Z选自氯。
制备化合物I的方法可以为本领域中该类成酰胺反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物I-f与有机溶剂和碱和/或缩合剂混合，进而与化合物G-Z(未取代或取代的低级烷烃、羧酸或酰卤)成酰胺反应制得化合物I；
在制备化合物I的方法中，所述的溶剂优选醚类溶剂、醇类溶剂、腈类溶剂、烷类溶剂和非质子极性溶剂中的一种或多种；进一步优选烷类溶剂。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃。所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇。所述的腈类溶剂优选乙腈。所述的烷类溶剂优选二氯甲烷。所述的非质子极性溶剂优选N,N-二甲基甲酰胺。
在制备化合物I的方法中，所述的溶剂与所述的化合物I-f的体积质量比优选5mL/g-50mL/g，进一步优选10mL/g-30mL/g。
在制备化合物I的方法中，所述的碱优选有机碱，例如三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、二甲基吡啶、三甲基吡啶、4-二甲基氨基吡啶、叔丁酸钾、叔丁酸钠、甲醇钠、乙醇钠、六甲基二硅基氨基锂、六甲基二硅基氨基钠、六甲基二硅基氨基钾和丁基锂；以及无机碱，例如碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠和氢化钠。进一步优选三乙胺和二异丙基乙胺。
在制备化合物I的方法中，所述的碱与所述的化合物I-f的摩尔比优选1:1-5:1，进一步优选2:1-3:1。
在制备化合物I的方法中，所述的缩合剂优选有CDI，DCC，EDCI，DIC，HATU，HBTU，PyBOP等，若需要，可以添加酰化催化剂，例如DMAP，HOBt等。进一步优选EDCI和HATU。
在制备化合物I的方法中，所述的缩合剂与所述的化合物G-Z的摩尔比优选1:1-5:1，进一步优选1:1-3:1。
在制备化合物I的方法中，所述的酰化催化剂与所述的化合物G-Z的摩尔比优选0.001:1-5:1，进一步优选0.1:1-2:1。
在制备化合物I的方法中，所述的化合物G-Z与所述的化合物I-f的摩尔比优选1:1-5:1，进一步优选1:1-3:1。
在制备化合物I的方法中，所述的成酰胺反应的温度优选-30℃-150℃，进一步优选-10℃-30℃。
在制备化合物I的方法中，所述的成酰胺反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物I-f消失时作为反应的终点，反应时间优选0.1h-30h，进一步优选0.1h-16h。
在制备化合物I的方法中优选包括以下任一后处理步骤：当Z选自氯，优选采用方法(1)。当Z选自羟基时，优选采用方法(2)。方法(1)包括如下步骤：反应结束后，加入水，有机相用水，柠檬酸水溶液，饱和碳酸氢钠和饱和氯化钠洗涤，干燥，浓缩，柱层析即可。方法(2)包括如下步骤：反应结束后，加入有机溶剂和水，有机相用水和饱和氯化钠洗涤，干燥，浓缩，柱层析即可。其中，所述的有机溶剂进一步优选乙酸乙酯或二氯甲烷。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。
步骤E：化合物2的合成：在溶剂中，将化合物1与NIS进行取代反应，得到化合物2；
制备化合物2的方法可以为本领域中该类取代反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物1与有机溶剂混合，进而与NIS发生取代反应制得化合物2；
在制备化合物2的方法中，所述的溶剂优选醚类溶剂、醇类溶剂、腈类溶剂和丙酮、DMF、水中的一种或多种；进一步优选DMF。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃。所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇。所述的腈类溶剂优选乙腈。
在制备化合物2的方法中，所述的溶剂与所述的化合物1的体积质量比优选5mL/g-50mL/g，进一步优选10mL/g-30mL/g。
在制备化合物2的方法中，所述的化合物1与所述的NIS的摩尔比优选1:1-1:5，进一步优选1:1-1:2。
在制备化合物2的方法中，所述的取代反应的温度优选0℃-150℃，进一步优选50℃-100℃。
在制备化合物2的方法中，所述的取代反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物1消失时作为反应的终点，反应时间优选0.5h-16h，进一步优选5h-12h。
在制备化合物2的方法中当溶剂选自DMF时优选以下后处理步骤：降至室温，加入水，固体过滤，依次用水和有机溶剂洗，50-90℃干燥即可。其中，所述的有机溶剂进一步优选乙醇。
步骤F：I-d的合成：在溶剂中，在三取代膦和二取代的偶氮二羧酸酯存在下，化合物2与化合物3发生Mitsunobu反应。
其中，化合物3和化合物I-d中的Y选自未取代或取代的烷基，或者是4元、5元、6元环烷基环；且R1选自H或低级烷基；或者，Y和R1可以结合在一起形成一个4元、5元或者6元的杂环；优选地，
选自
更优选地，
选自
制备化合物I-d的方法可以为本领域中该类Mitsunobu反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：在溶剂中，在三苯基膦和偶氮二甲酸二异丙酯存在下，化合物2与化合物3发生Mitsunobu反应。
制备化合物I-d的方法优选包括以下步骤：在0℃-10℃下，将偶氮二甲酸二异丙酯滴入化合物2、三苯基膦和化合物3与溶剂形成的溶液中，进行Mitsunobu反应。
在制备化合物I-d的方法中，所述的溶剂优选腈类溶剂、醚类溶剂和卤代烃类溶剂中的一种或多种；进一步优选醚类溶剂。所述的腈类溶剂优选乙腈；所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。
在制备化合物I-d的方法中，所述的溶剂与所述的化合物2的体积质量比优选1mL/g-40mL/g，进一步优选5mL/g-20mL/g。
在制备化合物I-d的方法中，所述的偶氮二甲酸二异丙酯与所述的化合物2的摩尔比优选1:1-3:1，进一步优选1:1-2:1。
在制备化合物I-d的方法中，所述的三苯基膦与所述的化合物2的摩尔比优选1:1-3:1，进一步优选1:1-2:1。
在制备化合物I-d的方法三中，所述的化合物3与所述的化合物2的摩尔比优选1:1-3:1，进一步优选1:1-2:1。
在制备化合物I-d的方法中，所述的Mitsunobu反应的温度优选-10℃-35℃，进一步优选0℃-20℃。
在制备化合物I-d的方法中，所述的Mitsunobu反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物I-d消失时作为反应的终点，反应时间优选0.5h-24h，进一步优选3h-12h。
制备化合物I-d的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化，即可。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。
式(I)化合物的合成在实施例中概述。
化合物的进一步形式
在某个具体实施例中，式(I)化合物按照药学上可接受的酸加成盐(一种药学上可接受的盐)来制备，通过化合物的自由碱形式与药学上可接受的无机或有机酸反应，包括但不限于无机酸，如盐酸、氢溴酸、磷酸、磷酸氢盐、硫酸，硫酸氢盐等；有机酸甲酸、乙酸、三氟乙酸、苹果酸、马来酸、富马酸、琥珀酸、苯甲酸、甲磺酸、苯磺酸、乙酸、丙酸、丁酸、辛酸、己二酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、酒石酸、苯乙酸、邻苯二甲酸、对苯二甲酸、戊酸、己酸、癸酸、硬脂酸、软脂酸、丙烯酸等。
无机酸优选自盐酸、氢溴酸或磷酸。有机酸优选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、苹果酸、马来酸、富马酸、琥珀酸、苯甲酸、甲磺酸或苯磺酸；更优选自乙酸或三氟乙酸。
“药学上可接受”这里指一种物质，如载体或稀释液，不会使化合物的生物活性或性质消失，且相对无毒，如，给予个体某物质，不会引起不想要的生物影响或以有害的方式与任何其含有的组分相互作用。
术语“药学上可接受的盐”指一种化合物的存在形式，该形式不会引起对给药有机体的重要的刺激，且不会使化合物的生物活性和性质消失。在某些具体方面，药学上可接受的盐是通过式(I)化合物与酸反应获得，如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸，甲磺酸，乙磺酸，对甲苯磺酸，水杨酸等。药学上可接受的盐也可通过式(I)化合物与碱反应形成盐，如铵盐；碱金属盐，如钠或钾盐；碱土金属盐，如钙或镁盐；有机碱盐，如二环己基胺，N-甲基-D-葡糖胺，三(羟甲基)甲胺；氨基酸盐，如精氨酸，赖氨酸等。
应理解药学上可接受的盐的参考包括溶剂添加形式或结晶形式，尤其是溶剂化物或多晶型。溶剂化物含有化学计量或非化学计量的溶剂，且是在与药学上可接受溶剂如水，乙醇等，结晶化过程中选择性形成的。当溶剂是水时形成水合物，或当溶剂是乙醇时形成醇化物。式(I)化合物的溶剂化物按照本文所述的方法，很方便的制得或形成。举例说明，式(I)化合物的水合物从水/有机溶剂的混合溶剂中重结晶而方便的制得，使用的有机溶剂包括但不限于，二氧杂环乙烷，四氢呋喃，乙醇或甲醇。此外，在此提到的化合物能够以非溶剂化和溶剂化形式存在。总之，对于在此提供的化合物和方法为目的，溶剂化形式被认为相当于非溶剂化形式。
在其他具体实施例中，式(I)化合物被制备成不同的形式，包括但不限于，无定形，粉碎形和毫微-粒度形式。此外，式(I)化合物包括结晶型，也可以作为多晶型。多晶型包括化合物的相同元素组成的不同晶格排列。多晶型通常有不同的X-射线衍射图，红外光谱，熔点，密度，硬度，晶型，光和电的性质，稳定性和溶解性。不同的因素如重结晶溶剂，结晶速率和贮存温度可能引起单一晶型为主导。
在某些具体实施例中，式(I)化合物被制备为前药。“前药”是指一个试剂在体内转化为原型药。前药通常是有用的，因为在某种情况下，它们可能比原型药容易给药。他们可以，例如，通过口服给药而可以生物利用，但原型药不行。前药也可以在药学组分上改善原型药的溶解性。例如，没有限制，前药为式(I)化合物，在水溶性不利于通过细胞膜的情况下，前药作为酯给药使通过细胞膜更容易，然后通过代谢水解成羧酸，活性实体一旦进入到细胞中，水溶性就十分有利。更进一步的例子，前药可以是一个短肽(聚氨基酸)连接到一个酸基团，肽被代谢后展现出活性片段。
前药通常是药的前体，接下来的给药和吸收被转化为活性物质，或通过一些过程变为活性更强的种类，如通过代谢途径转化。一些前药具有的化学基团使其活性较低和/或对比原型药的溶解性或一些其它性质。一旦前药的化学基团被去除和/或对其修饰，得到活性药。前药通常是有用的，在某些情况下，它们比原型药容易给药。在某种具体实施例中，本文所述的前药化合物通过口服给药而可以生物利用，但原型药不行。而且，在某些具体实施例中，本文所述的前药也可以在药学组分上改善原型药的溶解性。
在其它具体实施例中，前药作为可逆的药物衍生物来设计，作为修饰物来使用以增强药物运输到具***置的组织。在具体的方面，前药设计的目的是对于靶向区域是水为主要溶剂的治疗化合物，能够增加其有效水溶性。Fedorak et al.，Am.J.Physiol.，269:G210-218(1995)；McLoed et al.，Gastroenterol，106:405-413(1994)；Hochhaus et al.，Biomed.Chrom.，6:283-286(1992)；J.Larsen和H.Bundgaard，Int.J.Pharmaceutics，37，87(1987)；J.Larsen et al.，Int.J.Pharmaceutics，47，103(1988)；Sinkula et al.，J.Pharm.Sci.，64:181-210(1975)；T.Higuchi和V.Stella，Prodrugs as Novel DeliverySystems，Vol.14 of the A.C.S.Symposium Series；和Edward B.Roche，BioreversibleCarriers in Drug Design，American Pharmaceutical Association and PergamonPress，1987。
在另一个具体实施例中，本文所述的化合物有同位素标记(如，放射性同位元素)或通过其它方法，包括但不限于，使用发色团或荧光片断，发冷光标记或化学发光标记。
在另一个方面，式(I)化合物有一个或多个立体中心，每个中心以R或S构型独立存在。在此提到的化合物包括所有非对应异构体，对映体，差向异构体和它们的适当混合物。在某个具体方面，式(I)化合物作为它们的单一立体异构体，其制备可通过使消旋混合物与光学活性拆分试剂反应形成一对非对映异构体，分离非对映异构体得到光学纯的对映体。在某些具体方面，对映体的分离是使用本文所述的化合物的共价的非对映异构体衍生物来进行。在其他具体方面，使用可分离的复合物(如结晶非对映异构体盐)。非对映异构体有不同的物理性质(如，熔点，沸点，溶解性，反应活性等)，且在具体方面，非对映异构体通过利用这些不同特性而进行分离。在这些具体方面，非对映异构体通过手性色谱或基于溶解性不同的分离技术来分离。通过任何不会导致消旋化的切实可行的方法，连同拆分试剂一起，得到光学纯的对映体。Jean Jacques，Andre Collet，Samuel H.Wilen，“Enantiomers，Racemates and Resolutions”，John Wiley And Sons，Inc.，1981。
另外，在某一具体实施例中，在此提供的化合物作为几何异构体存在。在此提供的化合物和方法包括所有顺式，反式，E式，Z式异构体和它们的适当混合物。在某些具体方面，本文所述的化合物作为互变异构体存在。所有互变异构体均本文所述的分子结构式范围内。在此提供的化合物和方法的另外方面，从单一制备步骤中(结合或互变)得到的对映体和/或非对映体的混合物被预期。
治疗用途
一方面，式I化合物可抑制Btk。另一方面，式I化合物显示了抗增殖活性并能有效地治疗增殖性疾病。一方面，式I化合物显示了预防或治疗炎症、与异常B细胞增殖相关的自身免疫性疾病和肿瘤疾病的作用。
在进一步方面中，本文提供的是通过给予有需要的治疗者一种含有治疗有效量的至少一种式I化合物或组合物，从而抑制所述受治疗者的布鲁顿酪氨酸激酶活性的方法。在一些实施方式中，有需要的受治疗者罹患自身免疫性疾病，例如炎性肠病、关节炎、狼疮、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、骨关节炎、斯蒂尔病、青少年关节炎、类风湿性关节炎综合征和自身免疫性肝炎等。
在进一步的实施方式中，有需要的受治疗者罹患癌症。在一个实施方式中，所述癌症是B细胞增生性疾病，例如弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、B细胞前淋巴细胞性白血病、淋巴浆细胞淋巴瘤/瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、脾边缘区淋巴瘤、浆细胞性骨髓瘤、浆细胞瘤、结外边缘区B细胞淋巴瘤、***边缘区B细胞淋巴瘤、外套细胞淋巴瘤、纵膈(胸腺)大B细胞淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、伯基特淋巴瘤/白血病或淋巴瘤样肉芽肿病等。
本发明还提供本发明所述的化合物或其可药用盐在制备Btk抑制剂中的应用，特别是在制备治疗细胞增生疾病中的应用。所述的细胞增生疾病包括癌症。换言之，本发明还提供通式I所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物单独或和其他药物联合使用在治疗增生类疾病(如癌症)中的应用。能和本发明所提供的化合物或其可药用盐联合使用的抗肿瘤药包括但并非限定至少一种以下种类：有丝***抑制剂(如长春碱、长春地辛和长春瑞宾)；微管蛋白分解抑制剂(如泰素)；烷基化试剂(如顺铂、卡铂和环磷酰胺)；抗代谢物(如5-氟尿嘧啶、替加氟、甲氨蝶呤、阿糖胞苷和羟基脲)；可***抗生素(如阿雷素、丝裂霉素和争光霉素)；酶(如天门冬氨酶)；拓扑异构酶抑制剂(如依托伯苷和喜树碱)和生物反应调节剂(如干扰素)等。
本发明中化合物的用途为制备制剂，包括：直接使用化合物或在制备过程中获得的任一成分使用。本发明还提供了一种药物组合物，该药物组合物包含有一定量的能抑制Btk活性的式I化合物及药学上可接受的赋形剂。该药物组合物是以水性分散剂、液体、啫哩、糖浆、西也剂、药浆、悬浮剂、吸入剂、控释剂、速溶剂、泡腾剂、冻干剂、片剂、粉剂、丸剂、糖衣丸、胶囊、延迟释放剂、延长释放剂、脉冲释放剂、多微粒剂、或即刻释放剂的形式。
在此阐述的药物组合物由药学上可接受的稀释剂、赋形剂或结合剂及式I化合物或其药学上可接受的盐、其药学上可接受的前药或其药学上可接受的溶剂化物组成。
在一方面，在此阐述的药物组合物包含了一定有效量的如上所述化合物及药学上可接受的赋形剂。在另一方面，该药物组合物除了含有式I化合物外，包含有第二种药学上有活性的成分。
在特定实施例中，提供了一种药物组合物，该药物组合物包括：i)生理上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂；和ii)一种在此阐述的化合物。
上述任一方面含有更进一步的实施例，包括单纯给予一定有效量的式I化合物。这些优选例具体包括：i)一次性给予式I化合物；ii)在一天内多次给予哺乳动物式I化合物；iii)持续给予式I化合物；或iv)连续给予式I化合物。
上述任一方面含有更进一步的实施例，包括多次给予一定有效量的式I化合物。这些优选例具体包括：i)单剂量给予式I化合物；ii)多次给药，时间间隔为六小时；iii)每隔八小时给予哺乳动物式I化合物。在更进一步或可选的优选例中，该方法有药物假期，具体指式I化合物的给予有暂时性的延缓或式I化合物的剂量被暂时性的降低；在药物假期结束时，恢复式I化合物的剂量。药物假期的时间从两天到一年不等。
本发明的化合物可与药学上各种常用添加剂(如稀释剂和赋形剂等)制成药物组合物。根据治疗目的，可将药物组合物制成各种类型的给药单位剂型，如片剂、丸剂、粉剂、液体、悬浮液、乳液、颗粒剂、胶囊、栓剂和针剂(溶液及悬浮液)等。
为了使片剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋形剂。例如，载体，如乳糖、白糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、淀粉、碳酸钙、高岭土、结晶纤维素和硅酸等；粘合剂，如水、乙醇、丙醇、普通糖浆、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明教溶液，羧甲基纤维素、紫胶、甲基纤维素和磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，如干淀粉、藻酸钠、琼脂粉和海带粉，碳酸氢钠、碳酸钙、聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯、十二烷基硫酸钠、硬脂酸单甘酯、淀粉和乳糖等；崩解抑制剂，如白糖、甘油三硬脂酸酯、椰子油和氢化油；吸附促进剂，如季胺碱和十二烷基硫酸钠等；润湿剂，如甘油、淀粉等；吸附剂，如淀粉、乳糖、高岭土、膨润土和胶体硅酸等；以及润滑剂，如纯净的滑石，硬脂酸盐、硼酸粉和聚乙二醇等。如果需要的话，还可以用通常的涂渍材料使片剂作为糖衣片剂、涂明胶膜片剂、肠衣片剂、涂膜片剂、双层膜片剂及多层片剂。
为了使丸剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋性剂，例如，载体，如乳糖，淀粉，椰子油，硬化植物油，高岭土和滑石等；粘合剂，如***树胶粉，黄著胶粉，明胶和乙醇等；崩解剂，如琼脂和海带粉等。
为了使栓剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何已知并广泛使用的赋性剂，例如，聚乙二醇，椰子油，高级醇，高级醇的酯，明胶和半合成的甘油酯等。
为了制备针剂形式的药物组合物，可将溶液和悬浮液消毒，并最好加入适量的氯化钠，葡萄糖或甘油等，制成与血液等渗压的针剂。在制备针剂时，也可使用本领域内任何常用的载体。例如，水，乙醇，丙二醇，乙氧基化的异硬脂醇，聚氧基化的异硬脂醇和聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯等。此外，还可加入通常的溶解剂、缓冲剂和止痛剂等。根据需要，在治疗精神***症期间，也可加入着色剂、防腐剂、香料、调味剂、香化剂和其它药物等。
本发明的如式I所示的化合物及其药学上可接受的盐在药物组合物中的含量无特殊限制，可在很宽的范围内进行选择，通常可为质量百分比1-90％，较佳的为质量百分比1-30％。
本发明中，所述的药物组合物的给药方法没有特殊限制。可根据病人年龄、性别和其它条件及症状，选择各种剂型的制剂给药。例如，片剂、丸剂、溶液、悬浮液、乳液、颗粒剂和胶囊是口服给药；针剂可以单独给药，或者和注射用输送液(如葡萄糖溶液及氨基酸溶液)混合进行静脉注射，如有必要可以单纯用针剂进行肌肉、皮内、皮下或腹内注射；栓剂为给药到直肠。
本发明中，可以根据服药方法、病人年龄、性别和其它条件以及症状适当地选择用药剂量。
本发明的积极进步效果在于：
本发明的吡唑并[3,4-d]嘧啶类化合物及其盐对Btk具有良好的抑制效果，部分化合物活性/水溶性优于上市药物依鲁替尼，为Btk小分子抑制剂的研发提供了多样化类型的结构，具有良好的市场开发前景。
在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商用说明书选择。虽然无需进一步详细描述，但是可以相信本领域技术人员能基于本文的描述，完全利用本公开。
在以下实施例中，未定义的缩写具有其普遍接受的含义，除非另外声明。表1、表2和表3分别为化合物I-1-I-24的理化数据、化合物I-1-I-24的1H-NMR数据和I-1-I-24体外酶水平抑制活性数据。
实施例1
关键中间体4的制备
步骤A：化合物2的合成
将化合物1(15g，111mmol)，NIS(30g，133.2mmol)和DMF(150ml)于90℃搅拌4h，后降至室温，加入水150ml，固体过滤，依次用水100ml，乙醇100ml洗，70℃干燥得固体23g，收率：79.4％。
步骤B：化合物4的合成
将化合物2(15g，57.47mmol)，(S)-1-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶(23.2g，114.9mmol)、三苯基膦(30.1g，114.9mmol)和150ml THF于冰盐浴冷却至0℃，滴加DIAD(23.2g，114.9mmol)，升至室温搅拌过夜，柱层析得固体13.1g，收率：51.3％。
实施例2
化合物I-1的制备
步骤A：化合物5的合成
溴丙炔(18.9g，159mmol)，苯酚(10g，106mmol)，碳酸钾(44g，318mmol)于100mlDMF中室温搅拌过夜，加入乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠、水洗涤，浓缩后得透明油状液体11.9g，收率84.3％。
步骤B：化合物6的合成
将化合物4(4.45g，10mmol)，CuI(0.38g，2mmol)，Pd(PPh3)4(1.39g，1.2mmol)，Et3N(2.03g，20mmol)，化合物5(6.62g，50mmol)和50ml DMF于氮气下升温至80℃搅拌过夜，降至室温，后浓缩柱层析得固体3.31g，收率：73.6％。
步骤C：化合物7的合成
化合物6(3.3g，10.5mmol)，4M HCl-1,4-dioxane(20ml，72mmol)和20ml乙酸乙酯，室温搅拌过夜，过滤后75℃烘干得固体1.9g，收率：67.1％。
步骤D：化合物I-1的合成
将化合物7(600mg，1.56mmol)，DIPEA(403mg，3.12mmol)和30mlDCM于冰盐浴冷却，滴加丙烯酰氯(183mg，2.03mmol)的DCM溶液10ml，升至室温，浓缩后柱层析得固体420mg，收率：67％。
实施例3
化合物I-2的制备
化合物I-2的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例4
化合物I-3的制备
化合物I-3的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例5
化合物I-4的制备
化合物I-4的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例6
化合物I-5的制备
化合物I-5的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例7
化合物I-6的制备
化合物I-6的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例8
化合物I-7的制备
化合物I-7的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例9
化合物I-8的制备
化合物I-8的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例10
化合物I-9的制备
化合物I-9的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例11
化合物I-10的制备
化合物I-10的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例12
化合物I-11的制备
化合物I-11的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例13
化合物I-12的制备
化合物I-12的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例14
化合物I-13的制备
化合物I-13的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例15
化合物I-14的制备
化合物I-14的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例16
化合物I-15的制备
化合物I-15的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例17
化合物I-16的制备
步骤A：化合物8的合成
将3-丁炔-1-醇(10g，142.67mmol)，苯酚(16.11g，171.2mmol)，三苯基膦(44.9g，171.2mmol)和100mlTHF于冰盐浴冷却，0℃滴加DIAD(34.62g，171.2mmol)，后升至室温搅拌过夜，经柱层析得液体5.45g，收率：26.1％。
步骤B：化合物9，10和I-16的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例18
化合物I-17的制备
步骤A：化合物11的合成
将化合物7(880mg，2.3mmol),10％Pd-BaSO4(260mg，0.23mmol)和20ml甲醇在常压氢气下45℃搅拌过夜，后柱层析得固体470mg，收率：60％。
步骤B：化合物I-17的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例19
化合物I-18的制备
步骤A：化合物12的合成
将化合物7(1.57g，4.08mmol)和70ml THF于0℃下加入LiAlH4(929mg，24.47mmol)，升至室温搅拌过夜，加入乙酸乙酯和氢氧化钠水溶液，后柱层析得固体330mg，收率：23.2％。
步骤B：化合物I-18的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例20
化合物I-19的制备
步骤A：化合物13的合成
将化合物7(1g，2.6mmol)，10％Pd/C(400mg)和30ml甲醇在常压氢气下于55℃搅拌过夜，过滤后柱层析得油状物890mg，收率：88.08％。
步骤B：化合物I-19的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例21
化合物I-20的制备
步骤A：化合物14的合成
将三甲基乙炔基硅(23g，233.88mmol)和100ml THF在0℃下加入i-PrMgCl(2M inTHF 117ml，233.88mmol)搅拌30min，升至室温搅拌30min，加入CuBr(5.03g，35.08mmol)和苄溴(10g，58.47mmol)回流反应5h，降至室温，加入乙酸乙酯，水洗，后柱层析得液体9.2g，收率：83.5％。
步骤B：化合物15的合成
将化合物14(9.2g，48.85mmol)和100ml甲醇于冰浴冷却，加入碳酸钾(33.76g，244.2mmol)搅拌2h，室温搅拌过夜，加入乙酸乙酯，水洗，浓缩后得油状物5g，直接投入下一步。
步骤C：化合物16，17和I-20的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例22
化合物I-21的制备
将2-氟丙烯酸(175mg，1.95mmol)和10ml DMF于0℃下加入DIPEA(504mg，3.9mmol)，HATU(741mg，1.95mmol)和化合物7(500mg，1.3mmol)，室温搅拌过夜，加入乙酸乙酯，水洗，后柱层析得固体330mg，收率：60％。
实施例23
化合物I-22的制备
步骤A：化合物18的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤B完成。
步骤B：化合物19，20和I-22的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例24
化合物I-23的制备
步骤A：化合物21的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤B完成。
步骤B：化合物22，23和I-23的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
实施例25
化合物I-24的制备
步骤A：化合物24的合成通过使用类似于实施例1中所述的步骤B完成。
步骤B：化合物25，26和I-24的合成通过使用类似于实施例2中所述的步骤完成。
本发明中所述的室温指环境温度，为15℃-30℃。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
表2化合物I-1-I-24理化数据
表3化合物I-1-I-24的1H-NMR数据
实施例26
化合物体外生化酶水平的Btk抑制活性测试
原理和方法：
采用均相时间分辨荧光(HTRF)方法建立了Btk小分子抑制剂的激酶活性检测平台，进行化合物酶水平活性的测定。Btk抑制剂酶活性测定方法是能与TK类激酶反应的单磷酸化位点底物的另一端接上biotin，在biotin端，biotin能与streptavidin-XL665(acceptor)相连，完成标记。而在经过磷酸化之后，该底物便能与抗磷酸化位点的抗体(已标有Doner)结合，从而产生FRET信号，如图1所示。
操作步骤：
1.待测化合物溶解在100％的DMSO中，起始稀释浓度分别为100μM，然后在96孔板中用配置好的缓冲液梯度稀释。
2.转移4μl稀释好的化合物到384孔板中。
3.准备底物和ATP的缓冲液。
4.使用微孔板加样器加4μl底物和ATP的缓冲液到384孔板内。
5.使用微孔板加样器加2μl酶的缓冲液到384孔板内。
6.轻轻震荡384孔板，1000g室温短时间离心，室温孵育60分钟。
7.准备终止液，用微孔板加样器分别加入SA-XL665和TK抗体各5μl，震荡1分钟，然后离心，室温孵育60分钟。参见附图2。
8.PHERAStar多功能读板器读数。
9.GraphPad Prism 5.0分析软件分析数据。
列公式求得IC50：
计算IC50值：
以log[给药浓度]为横坐标，抑制率为纵坐标，在GraphPad Prism 5.0中拟合出一条剂量反应曲线，得出其50％抑制率时的药物浓度，即为此化合物在酶水平的IC50值。
所述化合物Btk抑制活性数据如下：
| 化合物号 | Btk IC<sub>50</sub>(nM) | 编号 | Btk IC<sub>50</sub>(nM) |
| I-1 | 2.95 | I-14 | 209.2 |
| I-2 | 18.1 | I-15 | 45.35 |
| I-3 | 3.95 | I-16 | 39.8 |
| I-4 | 15.9 | I-17 | 23.2 |
| I-5 | >500 | I-18 | 11.3 |
| I-6 | >500 | I-19 | 22.18 |
| I-7 | 49.23 | I-20 | 102.4 |
| I-8 | 20.85 | I-21 | >500 |
| I-9 | 26.89 | I-22 | >1000 |
| I-10 | 38.17 | I-23 | >1000 |
| I-11 | 3.84 | I-24 | >1000 |
| I-12 | 89.62 | Ibrutinib | 5.49 |
| I-13 | 18.11 |
结果表明，所合成的化合物具有优良的Btk抑制活性。其中公开的部分化合物如I-1、I-3和I-11的活性优于Ibrutinb，对今后开发结构多样化的Btk小分子抑制剂和结构改造起到了指导作用。
实施例27
体外生化酶水平的Btk抑制活性对比
中国专利申请CN103958512A记载的化合物A结构式为：
该化合物为FGFR抑制剂，参考文献CN103958512A报道的方法合成了化合物A根据，实施例26的方法测试了化合物A的体外BTK酶水平抑制活性，结果如下：
| 化合物号 | Btk IC<sub>50</sub>(nM) |
| A | >1000 |
结果表明，本发明提供的化合物抑制Btk的活性远甚于化合物A。
实施例28
化合物体外细胞水平的BTK抑制活性测试
方法：CCK-8检测法
操作步骤：
1.在96孔培养板中配制100ul的细胞悬液(2000-3000cells/孔)，将培养板在培养箱(37℃，5％CO2)预培养24小时。
2.向培养板加入梯度浓度的待测化合物。
3.将培养板在培养箱孵育48小时。
4.向每孔加入10ul CCK-8溶液，加入后轻轻振摇培养板。
5.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
记录结果：
细胞生长抑制率％＝(对照组吸光度值-实验组吸光度值)/对照组吸光度值*100％；
计算IC50值：
以log[给药浓度]为横坐标，抑制率为纵坐标，在GraphPad Prism 5.0中拟合出一条剂量反应曲线，得出其50％抑制率时的药物浓度，即为此化合物在细胞水平的IC50值。
测试活性结果如下表如示：
备注：Ramos和Raji为典型B淋巴细胞白血病细胞，BTK激酶高度表达。
结果表明，本发明提供的大部分化合物对淋巴细胞白血病细胞(Ramos和Raji)有较强的抑制作用，其中化合物I-1显示出了与依鲁替尼相当的细胞水平抑制活性，预示此类分子具有开发成新型高效BTK抑制剂的潜力，对治疗相关的肿瘤疾病尤其是弥漫性大B细胞淋巴瘤或慢性淋巴细胞白血病有较大的应用价值。
实施例29
部分化合物的cLog P值
cLog P值由ACD-Labs(V6.0)计算。
| 化合物 | cLog P |
| I-1 | 1.84±1.49 |
| I-3 | 2.41±1.49 |
| I-4 | 2.42±1.49 |
| I-11 | 1.64±1.49 |
| I-18 | 1.53±1.14 |
| 依鲁替尼(Ibrutinib) | 2.92±1.18 |
结果表明，本发明提供的化合物在水中的溶解性优于依鲁替尼，从而可减少用药量，减轻副作用。
此处描述的实施例只用于说明(作为例证)，技术人员所做的各种修改或变更也应包括在专利申请的实质和范围内以及附加权利要求范畴之内。
Claims (10)
1.一种化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物选自于：
2.一种药物组合物，该组合物包含权利要求1所述的化合物和药学上可接受的赋形剂。
3.如权利要求2所述的药物组合物，其中药物组合物的形式为水性分散剂、液体、啫哩、气雾剂、控释剂、速溶剂、泡腾剂、冻干剂、片剂、粉末、药丸、胶囊、或多微粒剂。
4.如权利要求3所述的药物组合物，所述控释剂选自延迟释放剂、延长释放剂、脉冲控释剂、或立即释放剂。
5.如权利要求3所述的药物组合物，所述液体选自药浆、或悬浮液。
6.如权利要求5所述的药物组合物，所述药浆为糖浆。
7.如权利要求3所述的药物组合物，所述药丸为糖衣丸。
8.一种如权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
(1)将化合物1、NIS和DMF混合反应得到化合物2；
(2)将化合物2、(S)-1-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶、三苯基膦和DIAD混合反应得到化合物4；
(3)将化合物4和化合物5混合反应得到化合物6；
(4)化合物6、HCl和1,4-dioxane混合反应得到化合物7；
(5)将化合物7、DIPEA和丙烯酰氯混合反应得到固体化合物I-1；
在替换以相应炔基化合物的情况下，采用上述步骤(1)-(5)得到化合物I-3；
将化合物7、THF和LiAlH4混合反应得到化合物12；将化合物12、DIPEA和丙烯酰氯混合反应得到固体化合物I-18；
9.一种如权利要求1所述的化合物在制备预防或治疗炎症、与异常B细胞增殖相关的自身免疫性疾病和/或肿瘤疾病的药物中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述自身免疫性疾病为类风湿性关节炎。
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| CN105837575A (zh) * | 2015-01-13 | 2016-08-10 | 四川大学 | 3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物及其制备方法和用途 |
| CN107344940A (zh) * | 2016-05-06 | 2017-11-14 | 广东东阳光药业有限公司 | Btk抑制剂及其用途 |
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2017
- 2017-11-15 CN CN201711129015.8A patent/CN109776544B/zh active Active
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