TWI253932B - Steroidal glycosides having appetite suppressant activity and the pharmaceutical compositions thereof - Google Patents

Steroidal glycosides having appetite suppressant activity and the pharmaceutical compositions thereof Download PDF

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TWI253932B TW091137164A TW91137164A TWI253932B TW I253932 B TWI253932 B TW I253932B TW 091137164 A TW091137164 A TW 091137164A TW 91137164 A TW91137164 A TW 91137164A TW I253932 B TWI253932 B TW I253932B
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Description

1253932 1Γ/ 五、發明説明（t ) ~…—' ― — 本發明是有關於類類固醇酿甘以及含㈣類類類固 醇酷甘之組合物，以及該些類類固醇醣甘和含有此類類 類固醇酿甘組合物之用途。本發明更有關於一種由植物 材料中萃取和分離出類固醇類酿甘的方法，以及一種合 成該些類固醇類醋甘的方法，並且有關於製造該些萃取 物的方法和該些合成該些萃取物的製程。 在一較佳應用中’本發明是有關於一種食慾抑制 劑，一種合成該食慾抑制劑的製程，一獐由植物材料中 萃取該食慾抑制劑的製程，一種含有該食慾抑制劑之組 合物’以及一種合成該食慾抑制劑的方法。 根據本發明，其揭示一種由⑽屬和 //〇以m屬之植物中製備萃取物的製程，該萃取物包含有 一食慾抑制劑，而該製程包括：利用溶劑處理收集到的 植物材料，以從該植物材料中萃取具有食慾抑制活性之 化合物，去除萃取液中的溶劑。收集到的萃取物可進一 步純化之，例如利用適當的溶劑進行再次的萃取。 本發明也揭示一種取自⑽屬或者 屬植物_之具有食慾抑制活性的植物萃取物。 此萃取物可由TYichocaubn屬或者Hoodia屬楂物 之莖和根取得。屬植物和包括肉質植物在 内的屬植物均生長在乾燥的地區，例如南非。在 本發明之一應用中，活化的食慾抑制萃取物是取自 Trichocaulon piUiferum 楂植物，而 Trich〇caul〇n 〇仿如山 種植物也可提供活化的食慾抑制萃取物。在本發明的另 -----5_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格7210X 297公楚) " --—-- (請先閱讀背面之注意事項再填j .裝· 線 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 \ 1253932 A7 B7 經 濟 部 智 慧 財 產 局 員 工 消 費 合 作 社 印 η 五、發明說明（2 ) 一應用中，活化的食慾抑制萃取物可取自//如山· α 楂楂物，而 Hoodia curr〇rii、或 Hoodia !ugardii 楂楂物 也可提供活化的食给抑制萃取物。經過老鼠生物分析 後’其結果顯示根據本發明所揭示的萃取物的確具有食 慾抑制活性。 植物材料可在適當溶劑存在下利用一裝置進行均質 化，該適當溶劑例如可為曱醇/二氣曱烷所構成的溶劑， 而該均質化裝置例如可為Wanng攪拌器。萃取的溶液可 利用一適當的分離步驟由殘餘的植物材料分離，該分離 步驟例如是過濾或者離心。萃取的溶劑可利用旋轉蒸發 器去除，較佳的是在60°C的水浴中進行。分離出來的粗 萃取物可進一步的利用二氣曱烷以及水再次萃取，其 二氣曱烷萃取液可藉由旋轉蒸發器去除萃取的二氯/甲 浴劑，然後再以甲醇/己烷進一步萃取所得到的萃取物 曱醇/己烧之萃取產物可進-步分離成曱醇萃取物以及 烷萃取產物。去除甲醇萃取物的溶劑後，便可獲得一 分純化的活化萃取物。 、 接著’將此部分純化的活化萃取物溶解於甲醇中， 然後再以㈣構成吸附基質和氣仿/3G%甲醇混合物 沖堤液之色層管柱分析法進行分管純化。收集到的複數 官純化液揮發掉溶劑後，可以適當的生物分析 食慾抑制活性。 、 具有食愁抑制活性的分離管最好再進一步地利 膠構成吸附基質和氣仿/甲醇（9: υ作為沖堤液之色層 中 烷 己 部 其 矽 管 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 訂---------線！
-ϋ ϋ 1 n ! I
j本紙張尺度翻巾關家標準（CNS)A4麟⑵Q 1253932 A7 五、發明說明（3 ) 柱分析法進行分管純 所述般以適當的生物八：：到的次純化部分並再如前 中，顯示有”抑：、:J測其食慾抑制活性。其 有艮怒抑制活性的次純化分離管 — 地利用石夕勝構成吸附基質和乙酸乙醋/己 ;^步 作為沖堤液之色芦營·丨'）此合物 巳e吕柱刀析法進行分管純化， 的純化管並再以適當的生 所伸到 性。 勺生物刀析法偵測其食慾抑制活 本I月之申睛者已經發現至少一此類純化 好的食懲抑制活性，且管中主要的活化物質可利用！:: 包括核磁共振儀在㈣化學儀器較之，此化合= 結構式如下所示 口之
Ο) 根據S.I.命名法，此主要的活化物質（1)為 D-theveto吡喃糖基_(1 —4)_β_〇-西馬吡喃糖基句* D-西馬吡喃糖基Η2β-〇_剔氧基氫氧基_14卜娠烯_ 20-酮（C47H74〇15, Μ + 878) ' 紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297 C 先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂---------線丨- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製
L — — — — — — — — II 7 1253932 五、發明説明（4) ~ 根據本發明之另一特徵，本發明揭示一種由 Trich〇cau!〇n屬或Hoodia屬植物製備一包含有食慾抑制 劑的萃取物，此製程包括輾壓收集到的植物材料，以及 回收輾壓固體植物過程中所生產的游離汁液以製備萃取 物。 萃取物之蒸氣可藉由例如喷霧乾燥法、冷凍乾燥法 或者真空乾燥法被去除，以形成一可自由流動的粉末。 本發明更揭示一種組合物，其包含有如前所述之具 食慾抑制活性的萃取物。 此組合物更可與一藥學附型劑、稀釋劑、或者再體 選擇性的以單位劑量形式摻混。 本發明也揭示利用如前所述的具食慾抑制活性的 萃取物製備藥物以及藉由投服有效劑量之具食慾抑制活 性的組合物至人體或動物體内以抑制其食慾的方法。 化合物1疋一新穎的化合物，且本發明更延伸化 合物1以及某些化合物i的類似物或者具有食慾抑制活 性的類固醇類三醣化合物的衍生物。被選作化合物丨之 類似物—或衍生的分子是用以增加類固醇類三醣化合物的 活性。挑選類似務實必須考慮到下列幾個影響： (i)疏水***互作用和親脂性 活化分子的官能基修飾是為了改變該分子的疏水性 和親脂性，增加的疏水性顯示可同時與此分子增加的生 物活性、較差的水溶性、增加的detergency/細胞分解、 增加組織的儲存、更快速的代謝和排除、增加的血漿蛋 本紙張I度適用中國國家^7cNS) (請先閱讀背面之注意事項再填寫·
線 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ^1 1253932 --—-—~~-____ ΙΓ 五、發明説明（5 ) "一' " -— 白結合和較快的攻擊動作有關。 (ii)電性和離子常數 此分子的官能基修韩也可改變其酸、驗性，其在控 制化合物於標的位置之運送與結合有關。 (⑴）氫鍵結 活化分子的羧基和羰基之修飾可改變其與生物系統 内的蛋白質和化學性修飾官能基間的交互 (iv)立體參數 改變此分子的粒子特性可增加其與接受子間的結 合，並進而增加其生物活性。 口 下列的化學性修飾可影響該分子的疏水性、親脂 性、電性、氫鍵結、以及立體參數。 曰 a) 化學修飾C-12基以及酯基； b) 化學修飾5,6-雙鍵，例如氫化和位移； c) 化學修飾C-20魏基和C-17乙酿基； d) 化學修飾類固醇之D環或糖苷配基環； e) 修飾三醣部位的碳水化合物。 因此，本發明揭示一結構式如下所示之化合物： (請先閱讀背面之注意事項再填
線_ 經濟部中央標準局員工消費合作社印f
1253932 Λ: Η" 五、發明説明（6 ) —— ~〜一一-—^— 其中R=烧基； R产氫，烷基，剔基，笨曱醯基， 機能基； 4任何其他的有 氫或一種或多種6-去氧碳氫化合物， 多種2,6-二去氧碳氫化合物，或葡萄糖分子，或其組^ 而虛線則代表位在C4-C5或c r 4 5及C5-C6間選擇性存在的 雙鍵。
如前所述，本發明也揭示一化人铷M 化口物⑴，其C5-C6 間具有雙鍵’ 1^曱基’…剔基’ R2=3办[仙_thevet〇 。比鳴糖基-(1 —4)-β·〇-西馬咕喃糖基·（1〜4)个D_西馬吨 喃糖基]，且其結構式如下所示： ^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -Φ
經濟部中央標準局員工消費合作社印製
另外’根據本發明更揭示如同化合物1般具食慾抑 制活性之類似物或衍生物，其結構式如下所八· 線 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（2丨0X 297公犛 1253932 Λ A / ΙΓ 五、發明説明（7)
0H (3) 其中R=烧基，且 Rf氫，烷基，剔基，苯曱醯基，或任何其他的有 機酯基。 (請先閱讀背面之注意事項再娘、' $ 、-口 經濟部中央標準局員工消費合作社印裂
0H (4) 其中R=烧基，且 Rm二氫，烷基，剔基，苯甲醯基，或任何其他的有 機酯基。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） 1253932 Λ7 B? 五、發明説明（
0
R (請先閱讀背面之注意事項再填寫 (5) 其中R=烷基；且 ί^=氫，烷基，剔基，苯曱醯基 機酯基。 或任何其他的有
-\口 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Η0
OMe
R ⑹ 其中烷基；且 R产氫，烷基，剔基，苯甲醯基，或任何其他的有 12 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐) y^l 1253932 Λ7 B1 五、發明説明（9 ) 機S旨基。
(7) 其中R=烷基；且
Rf氫，烧基，剔基，苯甲醯基，或任何其他的有 機酯基。 (請先閱讀背面之注意事項^^寫本頁) -裝-
R
、17 Μ 經濟部中央標準局員工消費合作社印裂 y 其中R=烷基；
Rf氫，烧基，剔基，苯甲酸基，或任何其他的有 機酯基； R2二氫或一種或多種6-去氧碳氫化合物’或一種或 多種2,6-二去氧碳氫化合物，或葡萄糖分子，或其組合 物； 本紙張尺度適·。茗S芡巧立（C、NS ) Λ4規格（210X297公处） 1253932 Λ7 B7 雙鍵。 五、發明説明（1〇 而虛線則代表位在匕-(：5或^-(^間選擇性存在的 r2 R Η
(9) (請先閱讀背面之注意事項^寫本頁) »* 經濟部中央標李局員工消費合作社印製 !
(1〇) 其中R=烷基 氫，烷基，剔基，苯甲醯基，或任何其他 的有機酯基； ^
Rf氫或一種或多種6_去氧碳氫化合物，或— 種或多種2,6-二去氧碳氳化合物，或葡萄糖分 組合物； — 而虛線則代表位在C4-C5或ρ r日日 在的雙鍵。 選擇性存 Η 只 0Η 14 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210Χ 297公势 1253932 B? 五、發明説明（u ) 其中R=烧基； R产氫，烷基，剔基，笨甲醯基，或任何其他的有 機酯基； 尺2=氫或一種或多種6-去氧碳氫化合物，或一種或 多種2,6-二去氧碳氫化合物，或葡萄糖分子，或其組合 物； 而虛線則代表位在CrC5或c：5-C6間選擇性存-在的 雙鍵。 (請先閱讀背面之注意事項
R
(11) 本頁) 裝· 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 其中R=烷基；
Ri-鼠，院基，剔基，本曱酿基，或任何其他的有 機δ旨基； 氫或一種或多種6-去氧碳氫化合物，或一種或 多種2,6-二去氧碳氫化合物，或葡萄糖分子，或其組合 物； 而虛線則代表位在cvc：5、cvc0或C14-C15間選擇 性存在的雙鍵。 本纸張尺度適€ 士 SS家磾準（CNS ) Λ4規格（210X 297公势) 1253932 Λ7 η1 五、發明説明（12 )
R
(12) 其中R=烷基； 氫，烷基，剔基，苯甲醯基，或任何其他的有 機酯基； R2=氫或一種或多種6-去氧碳氫化合物’或一種或 多種2,6-二去氧碳氫化合物，或葡萄糖分子，或其組合 物； 而虛線則代表位在C4-C5、C5-C6或C14-C15間選擇 性存在的雙鍵。- (請先閱讀背面之注意事項寫本頁) mi: 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
R
本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210 X 297公發） 1253932 Λ 7 -- ~~-___^_____ 五、發明説明（13 ) Γ '一 其中烷基；
Ri-氫，烧基，剔基，笨甲醯基，或任何其他的 機醋基； 八2-乳或一種或多種6-去氧碳氫化合物，或一種^ 多種2,6-二去氧碳氫化合物，或葡萄糖分子，或其組^ 物； ' 而虛線則代表位在c4-c5、C5_Cd Ci4_Ci5間-性存在的雙鍵；且 尺3-虱，烷基，芳香基，醯基，或葡萄糖氧基。
OR …其中，R=氫，烧基，芳香基，或任何含有—C 虱氧基，一 c12p氫氧基，一 C17醯 一 14 或含該些組合之類固醇化合物。 土 5 C6烯火 經濟部中央標準局員工消f合作社印裂
本發明更揭示-種合成具有食慾抑制活 使用類固醇化合物作為起始材料（M 鱗物），結/μ人从/1 (、θ. 一 日’物’或
0 1253932
A7 B7 五、發明說明（l4) 此類固醇化合物（15)可由化合物（22)製備獲得，豆 步驟包括： & ’、 ^ I \ 以微生物Ca/onecir/a decora處理結構式如下 所示之黃體素： 〇 (16) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) t 以製備一結構式如下所示之12β，15α-雙氫黃體素 (17)
訂---------線J 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (11)以對曱笨確―氣以及fltL啶處理化合物（17)，以 製備一結構式如下所示之12β_氫氧基_15α_(ρ_甲 笨楓基）-黃體素（18): 18 ϋ n I ϋ I- i n ϋ ϋ n -I ϋ n n ϋ ϋ ϋ n I _ 本紙張尺度過用中國國豕標準（CNS)A4規格（21〇 X 297公髮 1253932 Λ7 B7 五、發明説明（15 )
(iii)以collidine於150〇C處理化合物（18)，以一製備 結構式如下所示之化合物（19): 12β-氫氧基-Δ14- 黃體素 (請先閱讀背面之注意事項寫本頁)
(19) (iv)以乙醯氣以及醋酸酐於 120 °C處理化合物 (19)，以製備結構式如下所示之化合物（20): 3，1邛-二醋酸基娠烷-3，5，14-三烯-20-酮 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製
(20) ffc % _19 本紙張尺度適.τ嗱立U、N，S ) Λ4規格（210X297公始） 1253932 A7
五、發明說明（16 (v)利用乙二醇和催化量的對-曱笨磺酸處理化合 物（20)，以製備結構式如下所示之化合物（2丨）： 3，12β_二醋酸基-20,2(M申乙基二氧基娠烷-3,5，14- 三稀 ， 〇 0-J
(21) (vi)以硼氫化鈉處理化合物（21)，以製備結構式如 下所示之化合物（22) ·· 3，12β-二氫氧基-20,20-伸 乙基一氧基娘院-5,14 -二稀-12 -乙酸g旨 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 程
〇 〇 ] 至此，根據本發明以製備化合物（15)之其中之一製 其步驟包括： (a)利用一種還原劑，例如氫化鋰鋁（LAH)，處理 化合物（22)，以製備結構式如下所示之化合物（23): 3β，12β-二氫氧基_20,20-伸乙基二氧基娠烷_5，14_ 20 >紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -— — — — — — II «II — — — — — — I — — — — — — — — — — — — — — — — — A7 1253932 五、發明說明（I7) 二烯
(b)以Ν- >臭化乙酿胺（ΝΒ Α)以及一種驗，例如at：U定 處理化合物（23)，以製備一結構式如下所示之化合物（2句·· 3β, 12β-二氫氧基_14，15_環氧基_2〇,2〇_伸乙基二氧基娠-5-烯 -----------I 11 ----I---訂---------線丨 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經 濟 部 智 慧 財 產 局 員 工 消 費 合 作 社 印 製 (c)以一種還原劑f]如氫化鋰鋁，處理化合物（24)以 製備結構式如下所示之化合物（25): 3β，12β，14β·三氫氧 基_20,20一伸乙基二氡基娠-5-烯 21
〇- 0- 297公釐） 本紙張尺度適用中國國家辟（CNS)A4規格（2ΐ〇Ί 1253932 A7 B7
五、發明説明（18 0 0. 以及（d)利用酸，例如醋酸，和水處理化合物（25)以製備 類固醇類中間化合物：30，120，140-三氫氧基-娠-5-烯 (15)。 反應圖式A顯示根據本發明由化合物（22)製備類固 醇化合物（15)的第一製程（也包括由化合物16製備化合 物22的步驟）。 {請先閱讀背面之注意事項寫本頁) -穿. 經濟部中央標準局員工消费合作社印製,Γ/ 22 本紙浪尺度適用中國國家標华（CNS ) Λ4規格（210X 297公飨） 1253932 Λ7 B7 五、發明説明（19
Scheme A
OH
6) %/ (請先閲讀背面之注意事項\^寫本頁)
TS 9) 18 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
Ac
〇
Ac
〇〇 ο 2 2 本纸張尺度適用+§§家嗱准（〇^)/\4規格（210父297公潑） 1253932 Λ7 Β7 五、發明説明（20 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210x 297公漦） 1253932 A7 13/ 五、發明說明（2l) 根據本發明以製備類固醇化合物1 5之另 其步驟包括： (a)以對-曱苯磺醯氣以及一種鹼，例如吡啶處理化 合物（22)以製備一結構式如下所示之化合物（26): 一氫氧基20,20-伸乙基二氧基娠烧_5，14-二稀_3_對曱苯 石買基-12 -乙酸 製程，
(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) # 訂----- (26)，以製備一結構式如下所示之化合物（27): 6β，12β-， 氫氧基-20,20-伸乙基二氧基-3,5α-環化助孕_丨各烯_12 酸酯
ο 〇
OH 7 2 5 2 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公爱） 線丨i
1253932 A7 B7 五 _I_____ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 發明說明（22) (c)以一種還原劑，例如氫化鋰鋁，處理化合物（27) 以製備一結構式如下所示之化合物（28): 6β，ΐ2β-二氫氧 基-20，20-伸乙基二氧基_3,5α-環化助孕-14-稀
(28) (d)以Ν-溴化乙醯胺，選擇性地醋酸，以及一種驗， 例如吡啶，處理化合物（28)，以製備一結構式如下所示 之化合物（29): 6β，12β-二氫氧基·2〇,2〇-伸乙基二氧義 14，15-環氧基-3,5〇〇-環化娠烷
(29)(e)以一種還原劑’例如氫化ms或是四氫D夫喃，處理 化合物（29)，以製備一化學式如下所示之化合物（3〇) 60，120，140-三氫氧基-2〇,2〇-伸乙基二氧基-3,5心環化振燒 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂---------線丨j T — — — — — — — — — — — — — — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐 1253932 A 1Γ 五、發明説明（23
(30) 以及（f)以酸和水處理化合物（30)以獲得化合物15。 反應圖式B顯示根據本發明由化合物（22)製備類固 醇化合物（15)的第二製程。 (請先閱讀背面之注意事項^一^寫本頁)
•A 、τ 經濟部中央標李局員工消費合作社印製 27 本紙张尺度適用士£:€之4立飞、\5)八4現格（210'乂297公趁 1253932 Λ7 B7 五、發明説明（ 24
Scheme B 〇- 〇-
0—1 〇 -1
T5〇
(請先閲讀背面之注意事項\^寫本頁)
〇
〇- 〇- 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公麓） 103932 ---~^ 、發明説明\25化合物1可由含右、壬#留 —碳水化合物合成，卜:^馬糖部位的形式的第 u 战其可由化合物36製備而猓儿 36的製備包括下列步驟： 衣備而诗。化合物⑴以苯甲醛和氣化鋅處理結構式如下所示之 -α-D-葡萄糖（31) Τ * H〇^
/—〇 ¾. (請先閱讀背面之注意事項再崎 HI IK . .I- f f --- —I -I · (31) :製備結構式如下所示之化合物(32):甲基_4,6_〇_ 下基-α-D-吡喃葡萄糖苷
·· (32) ·)於〇 C以對甲本石黃醯基chloride以及°比咬處理 化3物32 ’以製備結構式如下所示之化合物 (33) ·曱基_4,6_0_亞苄基對甲苯磺醯基_a-D_ °比喃葡萄糖苷 頁) 線 經濟、那中央標準局員工消費合作社印製
29 (〔阳）八4規格（210'/297公釐） U53932
發明説明 26
(33) (Hi)於loot以甲美气知各 構式如下所示之化合物=化合物33，以製備結 基喃阿卓糖苷·
Fh
(34) (1V)以N-溴化琥珀醯胺（NBA)處理化合物34，以 〜製備結構式如下所示之化合物（35):甲基6_溴_4_ 〇-本甲酿基_3_〇-甲基_6_a_D“比。南阿卓糖苷 經濟部中央標準局員工消費合作社印裳
Br — ( L V HO II / PhCO OMe (35) 30 OMe 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨OX 297公廣） 1253932 Λ7 五、發明説明（27 ) 以及（v)以硼氫化鈉和氣化鎳處理化合物（35)，以 製備結構式如下所示之化合物（36):甲基4-0-笨甲醯基-3-0-曱基-6-去氧-α-D-吡喃阿卓糖苷
(36) _ 本發明更揭示一種製備含活化西馬糖單醣形式的碳 水化合物中間物的製程，其包括下列步驟： ⑴以PhSSiMe3,碘化鋅以及Βιι4+Γ處理化合物（36)， 以製備一化學式如下所示之化合物（37): 4-0-笨甲醯基-3-0-6-去氧-αβ-D-苯硫阿卓糖苷
(請先閱讀背面之注意亨項再填 -裝. 訂 線 (37) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (ii)以二乙氨硫三氟化物（DAST)選擇性地處理化合物 (37)，例如在0°C，以製備一結構式如下所示之化合物（38): 4-0-笨甲醯基-3-0-曱基-2-苯硫-2,6-di去氧-(10-〇-fluorocymaropyranoside 3 1 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公飨） 1253932 五、發明説明（28 或
F (38) (請先閱讀背面之注意寧項再填，
(iii)在溶劑（例如口比口定）中選擇性地以 t-butyldimethylsilylchloride 以及味唾處理化合物（37)，以 製備一結構式如下所示之化合物：4-0-苯曱醯基-3-0-曱 基-2-〇-t-butyldimethylsilyl -αβ-D-苯硫阿卓糖苷 、-tv
SPh 線 OMe ~ (39) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 其中，Z=TBDMS(t-butyldimethylsilyl); 以及（iv)以一種鹼（例如曱氧基鈉）處理化合物（39)，以製 備結構式如下所示之單醣化合物：3-0- 曱基-2-O-t-butyldimethylsilyl-ap-D-笨硫阿卓糖苷 32 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 1253932 ___ 五、發明説明（29 )
OMe (40) 其中，Z=TBDMS(t-butyldimethylsilyl)。 反應圖式C顯示根據本發明由化合物（36)合成活化 西馬糖單部位（40)的步驟（也包括由化合物31製備化 合物3 6的步驟）。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 3 3 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公兌） 1253932 ΑΊ Β7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
7/ι 1253932 Λ· 五 1發明説明（31 ) " -----~ 合成化合物1時也可包合_人 〇 s 3活化thebetose單酿 口 f5位的第二碳水化合物中門 ^ 亿口物中間物，其可由化合物47來製 而化合物47則係由下列製程獲得，其步驟包括： ⑴以丙綱和硫酸處理結構式如下所示之化合物 (41) : a-D-葡萄糖
(請先閱讀背面之注意事項再填：： .裝 以獲得一結構式如下所示之化合物（42) : i，2 : 5,6 dl七-異丙烯基-〇^〇_吡喃葡萄糖苷
線 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 (i〇以氫化鈉和碘化曱烷處理化合物42，以製備結 構式如下所述之化合物（43) : 1，2 : 5,6-di-0-異丙烯基_3_ 曱基-α-D-。比喃葡萄糖苷 本.·氏張尺度適用中國_家標準（) Λ4規格（2丨G X297公势) 1253932 五、發明説明（32 ) X0 〇— η OMe：
0 Ο (43) (iii)以醋酸處理化合物（43)，以製備結構式如下所 示之化合物（44) : 3-0-甲基_αβ·〇-吡喃葡莛糖勞
0Η 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 、 — 1 本紙張尺度1¾用巾關家標準（CNS )八视2⑴Χ297公楚） (44) (IV)以曱醇和氫氯酸處理化合物44，以製備―、妹 構式如下所示之化合物（45) ·· 甲基吡喃葡 糖苷 H0 OMe V^OMe H0
(45) (ν)以笨甲醛和氣化鋅處理化合物45，以製備一龄 構式如下所示之化合物（46) : 4,6-0-亞苄基-3-0-甲基-αβ-D-。比喃葡萄糖苷 36
1253932 Λ, _— ____Β~ 五、發明説明（33 ) OMe (46) (vi)以N->臭化破ίό醯胺，氣化鎳和棚氫化鈉處理 化合物46，以製備一結構式如下所示之化合物（47): ‘ 〇-苯曱醯基_3_0-曱基-0-去氧-αβ-吡喃葡萄糖苷 (請先閱讀背面之注意事項再填 .¾衣— 頁
PhCO
OMe 、-口 線 (47) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 £發明更揭示一種製備活化6_去氧_3_鄰_曱基_葡萄 糖部位形式之碳水化合物中間物的製程，盆 ⑴以苯硫基三甲基㈣以及三曱基二括績酸 鹽處理化合物（47)，以製備一化學式如下所示之化合物 (48): 4-0-苯甲醯基·3·〇·甲基小苯硫_6去氧·略心比喃 葡萄糖苷 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規^ 1253932
(ii)以三甲 ^ ^ (49)，,χ' 1 )4 11 笨曱醯基-3·〇-甲基-2_〇_三甲基乙酿:二合物J49): 4· αβ-吡喃葡萄糖苷 土 ~石瓜-6-去』 裝— (請先閱讀背面之：¾意事項再填
SPh 訂 (49) 以及 經濟部中央榡準局員工消費合作社印製 —(1二)以溴化试劑（例如：N_溴化琥珀醯胺）和三氟二乙 氨硫處理化合物（49)，以製備結構式如下所示之單醣化 合物的立體異構物（50A，50B)·· 4-0-苯甲醯基-3-0-甲基· 2-0-三曱基乙醯基-丨-氟·6·去氧吡喃苷 -—-----—_______ Ί β 本纸張尺度適用t®國家標準(CNS) Λ4ϋΤ77^7^Ι"Τ Γ\ Α Μ 4 1253932 五 、發明説明
-〇
〇 y^OMe PhCO
F ΟΡν (50B) 反應圖式D顯示根據本發明由化合物（48)合成活化 去氧_3务甲基、葡萄糖單畴部位（50A和遍)的步驟（也 包括由化合物41製備化合物们的步驟）。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫 裝一· 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 一準 標 I家 國 國 I中 用 適 一度 尺 張 紙 一本 1253932 Λ7 B? 五、發明説明（36
Scheme D
OMe (請先閱讀背面之注意事項再填¾. 裝丨 、\: 口 線
經濟部中央標準局員工消費合作社印製 . L/V
SPh 十 40 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐）
SPh 1253932 Λ 五 發明説明（37 ) ~… ----------- 根據本發明之另一牿料，士拉 人私，^ ， 奇傻本發明亦提供另一合成化 B物1之類似物以及衍生物 ^ ^ ΛΑ ^ r, ^ 生物的衣桎，其步驟包括合成一 適备的類固醇類中間物戋前 ^ Λ引取物，並且將適當數目的單 畴與該類固醇類中間物偶合起來。 ⑴使結構式（38)所示之西馬糖以及結構式（15)所示 之類固醇類依中請專利範圍第53項所述之含氣化錫存在 的溶劑中產生反應，以製備紝媸彳 3-〇-[4-0-笨曱醯基-2-1石亡β η π ^ 本爪-卜D-西馬吡喃糖基]-12，14-β- 一氣氧基-助孕-5-稀- 20-酮 ΟΗ ΒζΟ
衣W π構式如下所不之化合物（5 j ): ◦Me (51) 以及 (ii)以ί谷有α-甲基巴豆酸氣化物的比定處理化合物 (51)，然後再以鹼處理之，以製備一結構式如下所示之 化合物（52): 3-0-[4-0-笨曱醯基-2-苯硫西馬。比喃糖 基]-12石-剔基-14β -鼠氧基-助孕-5-稀- 20-嗣 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
0
(52) 41 (21〇X 297^>t ) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格 1253932 五 發明説明（38 ) 本發明揭示一種偶合西馬糖單醣以及6-去氧·3_鄰· 甲基-葡萄糖單醣以製備一雙醣類固醇化合物（52)的製 程’其步驟包括： (0利用氣化錫和三氟甲烷磺酸銀於-15°C使一選擇性 保護的西馬糖部位（40)以及一選擇性保護的6-去 氧-3-鄰-曱基-葡萄糖部位（50A)進行偶合，以製備 一結構式如下所述之化合物（53)
SPh 〇Pv (53) 其中，Z=TBDMS=t-丁基二曱基矽 (ii)以氣化四丁氨處理化合物（53)，以獲得一結構式 如下所示之化合物（54): (請先閱讀背面之注意事項再填寫^頁) 裝 、\'ό 經濟部中央標隼局員工消費合作社印裝
(54) (iii)利用氣化二乙銨硫處理化合物（54)，以製備一結 構式如下所述之化合物（5 5): --- 42 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇Χ 297公趁） 線 1253932 λ 1Γ 五 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 發明説明（39
ΟΡν (55) iv)使化合物（55)與申請專利範圍中的化合物（52)反 應，以製備結構式如下所述之化合物（56)""
(56) 以及（v)以瑞尼-鎳反應處理化合物（56)，然後再以鹼（例 如曱氧基鈉）處理之，以製備如前所述之化合物（1)。 反應圖式E顯示根據本發明由中間物（52)和（55)偶 合以合成化合物（56)的製程。 43 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210Χ 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫 裝丨 線 1253932 五、發明説明（4〇 A7 B7
BzO '〇
F SPh +
反應圖式E 〇Me(38)
〇
本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐）
A 1 1253932 Λ7 五、發明説明（41 )
154) (53)
(請先閱讀背面之注意事項再填寫. 裝丨 頁 、-口 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
2 5
線
SPh OMe
(56) Z « t-butyIdimethylsi lyI 45 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） 1253932
---P 五、發明説明（） ~~ · …一-—— 42 1 务 根據本發明另一偶合西馬糖和6-去氧-3-鄰一甲 土葡萄糖邛位以形成一三醣化合物之製程，以及使此三 醣化合物與一類固醇化合物偶合以形成化合物（1)。 如上所述用以形成三醣化合物以及偶合所得到的三 醣化合物與類固醇化合物以形成化合物（1)的製程，其步 驟包括： (1)利用氣化錫、三氟甲烷磺酸銀以及Cp2ZrC12使 化合物（4〇)的選擇性保護西馬糖部位以及化合物（45)偶 合’以製備結構式如下所示之化合物（57): (請先閱讀背面之注意事項再填.
線 一 (57) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 其中’ Z=TBDMS=肆-丁基二曱基石夕 (W以氟化四丁銨以及二乙胺硫三氣化物處理處理, 合物（57)’製備一結構式如下所示之三醣化合物（58): 本紙張尺度適用中
K 1253932
A 五、發明説明 43
F SPh OMe (58) 以及iii)利用氣化錫、三氟曱烷磺酸銀、以及Cp2ZrC12 使二醣化合物（58)以及一結構式如下所示之類固醇化合 物（59) 0
0 製備一~如申請專利範圍第36項所述之化合物（1)。 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 此類固醇化合物（59)可利用類固醇化合物（15)與巴豆 酸氯化物反應而製備。 反應圖式F顯示製備三醣化合物之製程，以及偶合 三醣（5 8)化合物與類固醇類中間物（59)以製備化合物〇、 的製程。 > Λ2- 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210Χ 297公犛） 1253932 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明 、44
反應圖式F
SPh
0 0 〇Pv
/ …一〇 / I SPh O^/OMe/ 〇Me PhCO (58) (請先閱讀背面之注意事項再填 -裝- 、-0
F I SPh + OMe
〇 Z*t -butyldimethylsilyl 線 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX 297公釐） 1253932 五、發明説明（45 ) 一 — 如前所述之中間物23、24、25、27、、29、30、 37 、 38 、 39 、 40 、 48 、 49 、 50 、 51 、 53 、 54 、 55 、 56 、 57和58以及該些化合物的合成方法均為新穎的。 化合物（1) : 3_〇+p_D_theveto吡喃糖基屮—4)·卜〇· 西馬吡喃糖基西馬吡喃糖基Η2卜〇·剔氧基一 14-氫氧基-14β-娘-5-稀-20-酮，以及其類似物和衍生物 已經被發現均具有食慾抑制的活性。 本發明也揭示一種具有食慾抑制活悻的組合物或化 合物，其中該活性成分是一種來自屬或 屬植物的萃取物。 此具活性的成分可為一化學式1所示的化合物，其 乃取自Trichoccn^训屬或Hoodia屬楂物的萃取物，該 些植物可為 THchoccwlon 0fficinah 楂氟 mch〇caid〇n piliferumm 氙者 Hoodia curr〇rii 楂、H〇〇dia g〇rd〇nU 後 或者 Hoodia lugardii 種。 本發明也揭卜種具有食慾抑制活性之組合物或化 合物，_其中該活性成分係利用合成法以製作化合物i， 或者克衍生物或類似物，如前面所提及的化合物2〜丨4。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 根據本發明之特徵，本發明亦揭示一種抑制食慾的 方法，其乃藉由投服適當劑量的含食慾抑制劑的萃取物 至人to或動物體内，其中該萃取物乃來自乃⑽ 屬或者如加屬的植物。此外，此食慾抑制組合物除該 萃取物外，尚可包括藥學可接受的其他成分。 此食慾抑制劑可由天然化合物中分離出來，或者利 本録纽巾 1253932 A 7 五、 發明説明 (46 用 化學合成法獲得，此食慾抑制劑之結構式 如 下所示 II — ! I - 0
(請先閱讀背面之注意?項再歧： I ί I 11- -裝· 或如前所述之化合物1的衍生物或類似物。 ,此食慾抑制組合物或配方可由食慾抑制劑與一種藥 學附型劑、稀釋劑或載體摻混構成，其他包括穩定器或 其他成分在内的適合添加劑也可視需要加入此組合物或 配方内。 σ 本發明也利用化合物1或其衍生物或類似物製造一 具有食慾抑制活性的藥物。 ^發明也揭示利用化合物丨或如前所述之衍生物或 類似物作為食慾抑制活性的藥物。 本發明也揭示一種抑制食慾的方法，其乃藉由投服 有效劑量的前述組合物至人體或動物體内。 本發明也揭不一種由⑽/〇”屬或屬 植物萃取具有食慾抑制活性的類固醇類糖苷化合物的方 法，且本發明更揭示—種由前述TWMoeaW⑽屬或 屬植物材料中分離出出實質含有純化類固醇類糖苷化合 、-口 線 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 I - I - I 1:1 . 4 1253932 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 五、發明説明（47 ) — ----------_ 物的萃取物。 本發明也揭示一種含有效醇翻输π人， 里如化合物1所不之類固 料'/或前述之衍生物或類似物的飼料和飲 抖’使得動物攝食後會產生食您抑制效果。“飲 n刀子基因的研究對於食慾、飽食感、和體重間的, 即作用的了解，ρ古如米> & 些調Γ作用曰-， 度的助益，該些研究顯示該 p疋错由許多中樞調節途徑中的多種神經胜肪來調節。正常體重的维牲β士脚 、肪 重的、准持疋由體内能量的_攝取、食物以月，以耗間取得平衡所達成。能量練定係由許多因素所影響，然而最終則是由腦來控制。不同的訊號，包 括對事務的嗅覺和味覺；腸胃道的訊號例如腸胃道的擴 張；胃黏膜的化學訊號；以及血管產生的代謝物，例如 脂肪酸和葡萄糖。 被leptin所負性調節的中樞神經胜肽，，γ，，(Νργ)，其 已被認為是進食行為的—正性調節劑。表現内生性的黑 色腎上腺皮質浸液接受子加強劑也顯示在特定模式中 (〇b/ob老鼠）會產生厭食的的效果。事實上，mc4黑色 腎上腺皮質浸液接受子完全缺乏時，則會出現厭食症。 其他的調節劑則是在能量平衡上扮演重要的較色，該些 調節劑包括bombesin，gal〇ninh以及似肝糖胜肽]。 雖然本發明所提出任何理論，然發明人相信化合物 (1)及前述之類似物或其衍生物均是黑色腎上腺皮質浸液 接受子的加強劑，其造成的效果乃是調節Νργ以及增加 chloecystokinin，其中 chloecystokinin 的效用主要在於 (請先閱讀背而之注意事項再填·巧， •裝 、1Τ 線 本纸張尺度適用中國國家標李（CNS ) Λ4規格（21 Οχ 297公 1253932 經濟部中央標準局員工消f合作社印製 五、發明説明（48 ) ———— 可抑制胃的空虛感。 如前所述，本發明也揭示一種包括有黑色腎上腺皮 質浸液4#受子加強劑之具食慾抑制活性的組合物。此 加強劑可為一種如前所述之萃取物或化合物，且該化合 物特別是化合物1。此外，此組合物也可與一種藥學附 型劑、稀釋劑、或者載體以單位劑量形式摻混。 本發明更揭示使用黑色腎上腺皮質浸液4接受子 加強劑以製造具有食慾抑制活性之藥物；使用黑色腎上 腺皮質浸液4接受子加強劑作為食慾抑制劑；投服有效 劑量之含黑色腎上腺皮質浸液4接受子加強劑之組合物 至人體或動物體内以抑制其食慾之方法；以及使用黑色 腎上腺皮質浸液4接受子加強劑以抑制人體或動物食慾 及/或產生厭食性感的方法。 為使本發明之優點以及特徵更清楚可見，玆將以根 據本發明之較佳實施例以及相關圖式，詳細說明如下。 圖式之簡單說明： ^ 1圖顯示由7WM此⑽/〇«屬或屬植物萃 取第-— 粗食慾抑制萃取物以及純化此第—粗食慾抑制萃 取物的流程圖。 第2圖顯示一利用部分純化的甲醇⑻⑽/⑽ 萃取物進行生物分析的抑制圖。 第3圖和第4圖顯示根據本發明之較佳實施例所製 備之似/〇π屬和屬植物的萃取物之抑制 圖。 1 52 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X29*7公楚） (請先閱讀背面之注意事項再填：； 裝丨 -一口 線 1253932 五、發明説明（49 ) 第5圖和第6圖顯示使用Hoodia gordonii種植物 之之汁液萃取物和喷霧乾燥的萃取物重複劑量分別處理 老鼠後，觀察老鼠在-7〜7天以及〇〜7天間的體重變化 百分比。 製備一如申請專利範圍第36項所述之化合物〇)。 例1 ·· 從⑽屬或屬中萃取第一粗製的 食慈抑制萃取物以及純化的t慾抑制促取物#方法是利 用如第1圖所示的流程圖。 例2 ·· 使用根據例-所示的方法所獲得的制純化甲醇萃 取物在大白鼠體内進行生物分析，其結果顯示此萃取物 的確具有食慾抑制的效果。此活化的萃取物之食慾抑制 活性可由第2圖顯示的π咖咖“㈣咖函之甲醇萃 取物在大白鼠體内的食慾抑制性例子中看出。 由第2圖所顯示的圖示可看出在第五天給予萃取物 處理的—大白W試族群，其在兩錢的食物攝取量實質 上有降低’而此時對昭纟且目丨本 — 、 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 、、、且則未顯不食慾降低的現象。實 驗組大白鼠之食物攝取奮方筮 、 例3 · 在弟八天以後才回復正常。 根據本發明以製造具有今欲 佳實施例製程顯示於第3圖：P:’舌性之卒取物的較 兩個圖式顯示全部的製…：第4圖所秀的圖式中’ 熟悉此技藝者所了解的步驟獲^也取可:。使用其他可被
1253932 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（50 ) 請參照第3圖，由給料線路i將巧/〜此⑽/⑽屬或 //⑽心α屬的植物材料放入攪拌機3(例如Wanng攪拌機） 中，然後再將二氣曱烷/曱醇所構成之溶劑揪給料線路2 導入。均質化的產物經由線路4被送到分離裝置，，例如 過濾機或離心機，然後再將植物殘渣由線路27去除。 溶劑/萃取混合物是由線路6到揮發步驟7，用以去 除溶劑’其例如可利用旋轉蒸發器完成。乾燥後的粗萃 取物可由線路8到進一步萃取步驟9，其乃藉由二氣甲 烧/水進行進-步萃取，並且由線路u到分離步驟13, 其中水分是在線路13被去除。接著，將溶解萃取物由線 路15到乾燥步驟17,揮發掉其中的溶劑，其例如可夢 由旋轉蒸發機完成。 3 請參閱第4圖，乾燥後的萃取物經由線路1〇 促㈣^2’並且經由線路14將甲醇/己烧所構成之溶劑 运到卒取階段12内’以進一步純化和促乾燥的萃取物。 接著’將萃取物/甲醇/己烧混合物經由線路16送 階段18，然後於線路2〇去除己烧，再將甲醇/萃取物 成之混合物經線路22送到乾燥階段24,去除溶劑， 中可利用例如旋轉蒸發機完成此目的。 " 然後’將乾燥的部分純的活化萃取物經線路 到〉谷劑3 0内，並經績故9 s、、天| 、 線路28添加甲醇，接著再將溶解的 部分由線路36送到色層分析管助38。 在管柱38内，甲醇溶解的部分可使用石夕膠 麵甲醇進-步地再純化，形成如圖所示之分離液 其 氣仿 54
請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁，> ---------訂---------線' 1253932 五、發明説明（5 i ) 〜— — v。根據發明人所揭示的純化步驟，該些分離液的產率 分別是：I(3.9g) ; II(2.6g) ; III(2.lg) ; IV〇 lg);以及 V(2.0g)。該些分離液經個別的生物分析步驟鑑定後，其 結果發現分離液I和II顯示顯著的食慾抑制活性。因此， 將此二分離液分別經由線路40和42送到管柱44和46， 以便再次以矽膠和氣仿/曱醇（9:丨）構成之色層分析管桎 糸統進一步地再純化。 由管柱46獲得的次分離液1(a)〜（L)輕分析後（利用 位顯示的分析步驟），其結果顯示次分離液〗(c)具有最顯 著的食慾抑制活性。將次分離液1(C)經線路送至管柱 50，並利用矽膠和乙酸乙酯/己烷（9 :丨）構成之色層分析 管柱系統進行進一步的分離和純化。對所得到之分離液 進行生物分析後，其中以分離液I(c)(ii)顯示最顯著的食 慾抑制活性。 純化的產物經核磁共振光譜鑑定後，此食慾抑制活 性之化合物（1)的光譜數據顯示於表1和表2。 經濟部中央標率局員工消費合作社印製 A4規格（21 Οχ 297公釐） 本纸張尺度適 A Η 1253932 五、發明説明（52 ) 化合物1 氫原子 J(HH/Hz) δ H/p.p.m Agly-3 — 3.522 m 6 — 5.381 m 12 11.5 » 4.1 4.607 dd 17 9.3 ， 9.3 3.157 dd 18 — 1.029 s 19 — 0.951 s 21 — 2.164 s 3* 7.1 ， 1.5 6.888 qq 4* 7_1 ， 1.2 1.806 dq 5* 1.6 ， 1.2 1.853 dq
Cym-1 ’ 9.4 » 2.1 4.816 dd 2， ^ aq 13.8，3.7，2.1 2.055 ddd 2， “ ax 13.8 ， 9.4 ， 2.6 1.552 ddd 3， 3.7 ， 2.9 ， 2.6 3.776 ddd 4， 9.4 ， 2.9 3.179 dd 5， 6.3 ， 9.4 3.821 dd 6， 6.3 1.279 da e Μο e mo 4 · .7433 • 3 3 . . . . 2 2.6 ， 2 7 4， 1 /1· 9 9 4 3.408 sd 4.730 dd 2.108 ddd 1.601 ddd 3.755 ddd 3.239 dd 3.898 dd 1.243 db 3.392 se (請先閱讀背而之注意事項再填vr .裝·
、1T 絲 每欄中之a，b，c表示其可能是可内轉換的； 每攔中之d，e 表示其可能是可内轉換的； 參考tigloate官能基原子。 56_ % 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
Thev-Γ，， 7.7 4.273 d ^2,M 7.7， 8.0 3.469 dd 31" 8.0， 2.9 3.099 dd 4M, 9.3， 2.9 3.179 dd 5M, 6.3， 9.3 3.351 dd 6，，， 6.3 1.183 d,c 3"'-Ome — 3.622 s 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公f ) 1253932 Λ Β 五、發明説明（53 ) 表2 :化合物1在CDC13中的相對13C NMR(75.25 MHz) 數據 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
糖苷配基 糖部位 碳 δ c/ppm 碳 δ c/ppm 1 37.04 T Cym- Γ 95.84 D 2 29.44 Τ 2, 3 5.57 T 3 77.24 D 3' 77.05 D 4 38.62 Τ 4' 82.57 D 5 1 38.95 S 5, 68.48 D 6 13 1.90 D 6, 18.14 Q 7 27.30 D 3'-0me 57.93 Q 8 35.30 D Γ' 99.54 D 9 43.04 D 2M 35.17 T 10 37.22 S 3，， 76.99 D 11 26.04 T 4，， 82.52 D 12 75.88 D 5，， 68.30 D 13 53.71 S 6" 18.36 Q 14 85.69 S 3，，-0Me 57.09 Q 15 34.36 T Thev- 1，，， 104.28 D 16 24.31 T 2,M 74.62 D 17 57.18 D ^ t 1 f 85.30 D 18 9.85 Q 4，" 74.62 D 19 19.27 Q 5M, 71.62 D 20 — 216.85 S 6，" 17.75 Q 21 33.01 Q 3，，，-0me 60.60 Q 1* 167.60 S 2* 128.69 D 3* 1 37.66 D 4 * 14.41 Q 5* 12.08 Q *參考tigloate官能基原子 (請先閱讀背而之注意事項再填Η本頁 、-a 線 57 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（2丨0Χ 297公势） A7 1253932 五、發明說明（54 ) 化合物⑴
光谱數據· 3440cm-i(OH)，2910cm_1(CH)，i770cm_1(C=〇） [aD] 205 89二 12,670(03, CHC13) m.p. = l47〇C -152〇C 例4〜例13所顯示的是合成製程，其中的中間化合物和 類固醇（丨5)可根據，，第一製程，，加以製備。 例4 ·· 15qc-二氫氧基黃體素（17)
Calonectria decora (ATCC 14767)的培養是在含有蔗 糖（900g)，磷酸氫鈉（3〇g)，Czapek濃縮物（3〇〇mi)，玉米 steep液體（300ml)，以及滅菌水（3〇丨）之錐形瓶（15〇><5〇〇 ml)中進行。於26°C的環境下振動培養5天後，加入151 溶有黃體素（16)之Tween-80懸浮液（0.i%)，然後再經 5天的培養，然後再離心、去除上清液，然後以氣:萃 取之，待氣仿揮發掉後便可獲得二氫氧基黃體素 (17)(75g，產率 45%)。 光譜資料：1HNMR(CDC13): 5·71(1Η，s，h_4); 4 12 4 22 (m m, H-15)； 4.43 (1H, br, s, OH)； 3.46-3.53 (1H, dd, J^.6 Hz ? H-12) ； 2.16Hz (3H, s, H-21) ； 1.18 (3H, s, H-19)； 〇.74 (3^ s，H-18)。 ’ 例5 : 基_15oc-(對-曱笨磺醯音 將二氫氧基黃體素（17)(75g，0.22 m〇1)溶解於3〇〇mi 乾燥的吡啶中’並冷卻至Ot：。然後， 次 π υ c的環境下逐 58 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂---------線 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1253932 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 -- 五、發明說明（55 ) -- 滴加入溶有對-甲笑兰斤 本只Si&鼠化物（46g，〇.24mol)之吡啶溶 液 200ml，並於 〇γ> & 々、境下攪拌過夜，接著再加入5〇0ml 的水終止反膺。坎你 -…、後’以乙酸乙酯（1 1)萃取生成物之水 曰有機層則依序以氫氣酸（6Μ，3x1 1)、飽和碳酸氫 ^、^二夜（5QQ Μ)、飽和氣化納水溶液_ ml)以及水（500 /1了〜接者再以硫酸鎂乾燥有機層。過濾、揮發後 便可彳又彳于黏稠的暗黃色油狀對-甲笨磺醯化的黃體素 (18)(98g，產率 92%)。 光譜資料：旧蘭邮⑽3): 77(2H d,J=14Hz，H_26); 7.34(2H, d, J=8.4Hz, H-3)； 5.67(1H, s, H-4)； 4.86-4.93 (1H, m, H-15) , 3.45-3.50(lH, dd, J=4.6Hz, H-12) ； 2.44(3H s H-4Me)；2.15(3H,s,H-21)； 1.13(3^3,^19):0.74(3^ s，H-18) 〇 例6 ·· I33.r k 19) 溶有對曱笨磺醯化黃體素（18)(98g，019 m〇ie)的 2,4,6-三甲基吡啶於15〇r迴流3小時，冷卻後在倒入5〇〇 水中。然後’以1升的乙酸乙酯萃取水層，以6m的鹽 酸水溶液（3xl升）、5〇e〇ml飽和碳酸氫鈉水溶液、5〇〇ml 飽和氣化鈉水溶液萃取有機層，然後再以硫酸鎂乾燥並 過濾之。揮發掉乙酸乙醋後所得到的粗製混合物再經過 矽膠色層分析管柱以及丙酮/氯仿（1:1〇)構成之充堤液， 便可獲得暗紅色的△ t黃體素（19)(5〇g，78%)。 光譜資料：iHNMRCCDClJ : 5·73(1Η，s，H-4) ; 5·28(1Η , 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 χ 297公釐） --------訂---------線 —·* (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
V 1253932 A7 D7 五、發明說明（56 ) 2.2Hz) ； 4.41(1H9 br, s, OH) ； 3.49-3.52( 1H, dd? J-4.3Hz, H-12);2.80-2.84(lH，dd，J=9.2Hz，H-17);2.14(3H，s，H- 21) ; 1.19(3H，s，H-19) ; 0.89 (3H，s，H-18)。 例7 : 3，12β-二醋酸基娠烧-3,5，14_三烯_2〇-酮（20) 將△ 14_黃體素（19)(50g，0.15mole)溶於乙醯氣（1.51) 以及乙酸酐（750ml)所構成的混合溶液内，並且迴流2小 時。其次，將反應混合物倒入冷的乙酸乙酯（1 1)内，然 後邊攪拌邊加入飽和碳酸氫鈉水溶液。然後，由碳酸氫 納層分離出乙酸乙酯層，並且進一步以碳酸氫鈉水溶液 清洗之（3 X700ml)，然後再以飽和氣化納水溶液沖洗（7〇〇 ml)，最後再以水沖洗之（700 ml)。有機層以硫酸鎂乾燥、 過濾後，揮發掉乙酸乙酯便可得到橙色油狀的3，12β-二 醋酸基娠烷-3,5，14-三烯-20-酮（20)(60g，93%)。 光譜資料·· ^MR (CDC13) : 5.68 (1H，s，H-4)，5·44(1Η，m， H-6)，5·31(1Η，dd，J二2·2Ηζ，H-15)，4·82，-4·86(1Η，dd， J二4.5Hz，H-12)，3·10-3.18(1Η，t，J=9.5Hz，H-17)，2·18(3Η， s，3Ac)，2·11(3Η，s，12-Ac)，2·08(3Η，s，H-21)，ΐ·〇2(3Η， s，H-19)，1.01(3H，s，十18)。 例8 3,12β-二醋酸基娠烷-20,20-伸乙基二氧基娠烷U, 14-三 度(21) 將例7所得到的二醋酸基化合物（20)(60g，O.i4mole) 溶解於笨（1 1)以及乙二醇（60 ml)構成的混合溶劑内，並 60 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ---------訂---------線- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1253932 五、發明說明（57 ) 且加入P-曱笨磺酸（1 g)[在此所使用的 , .-, u、士无在 Dean-
Stark trap中回流過]，然後攪拌迴流^ ^。反應液冷 卻後，加入飽和碳酸氫鈉水溶液（5〇〇 ^ )’再依序加入 鹽水(则ml)以及水(5〇〇 ml)清洗。接著，再以硫侧乞 燥、過遽、，揮發掉溶劑後便可得到粗製的混合物。此粗 製的混合物以石夕膠色層分析管柱以及 丨&杜M及乙酸乙酯/環己烷 (2 ·· 8)作為充提液純化後便可得到伸乙基二氧美妮浐 3,5，14-三烯(21)(35g，53%) 〇 土又兀 光譜資料：iHNMR (CDCl3): 5·68(1Η，s，Η-4)，5·45(ιη，叫 Η-6)，5·31(1Η，dd，J=2.2Hz，Η-15)，4·73-4·85(1Η，dd， J=4.4Hz，Η-12)，3·78-3·98(4Η，m，伸乙基二氧基）， 2.16(3H，s，3-Ac)’ 2·04(3Η，s，12-Ac)，1·29 (3H，s，H-21)， 1.12(3H，s，H-19)，1.02 (3H，s，H-18)。 例9 : 二氫氧基-20,20-伸乙基二氣基娠烧·5,；[4_二嫦_12_ 乙酸酯（22) 例8所獲得之二烯醇醋酸酯（21)(35g，0.077m〇le)懸 浮於乙醇内（500 ml)，於〇。〇的條件下加入硼氫化鈉（2.8g， 0·074 mole)。使混合物回溫到室溫後，在攪拌過夜。然 後’於真空環境下去除大部分的溶劑，然後加水（500 ml) 稀釋，並以乙酸乙酯（5〇〇 ml)萃取之。最後，以矽膠色 層分析管柱以及丙酮/氣仿（1 : 1 〇)作為充堤液，便可得 到3β-醇類化合物（22)(25g，80%)。 光譜資料：丨H NMR (CDC13) ·· 5·41(1Η, m，H-6)，5·28(1Η， 61 W氏張尺度_中關家鮮（cns)A4規格⑵Q χ挪公髮 -------------MW--------^---------^1#------------------------ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1253932 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 __- B7 一-----—------ 五、發明說明（58 ) dd，>2·2Ηζ，H-15)，4·72-4·81(1Η，dd，J=4.4HZ，H-12)， 3.82-4.02(4H，m，伸乙基二氧基），3·45-3·59(1Η，m， 3) ’ 2·03(3H，s，12-Ac) ’ 1.28(3H，s，H-21)，i qi(3h s H-19)，1·〇1(3Η，s，H-18)。 例10 二氫—氧基-20,20-伸—— 乙基二氧基娠-5，14二£^(?3) 將溶有3β-醇類（22)(25g，60.2mole)之乾燥四氫卩夫喃 溶劑（300 ml)逐滴加入懸浮有氫化鋰鋁（2.7g，72.2 m〇iej 之乾燥四氫呋喃溶劑（500 ml)内，此混合物並在室溫下 攪拌24小時。之後，小心的加入水（2 7 ^1)，並且另外 再攪拌10分鐘。然後，加入氫氧化納溶液（15%水溶液， 2.7ml)，並再授拌1〇分鐘。接著，再加入水（8.i如）， 並再攪拌10分鐘。然後，過濾、乾燥（以硫酸鎂乾燥之）。 揮發掉溶劑後’便可得到3β，12β_二氫氧基娠烷_二稀 (23)(20g，90%)。 光譜資料：1HNMR(CDC13): 5·36(1Η，m，H-6)，5·23(1Η，dd， J=2.2Hz，Η-15)，3·94-4·06(4Η，m5 伸乙基二氧基）， 3.41-3.52(lH，m，H-3)，3.32-3.36(lH，dd，J=4.3Hz，H-12)，1.31(3H，s，Η)，1{1(3H，s，H-19)，〇.96(3H，s，H-18)。 C NMR (CDC13) : 152.4 (C-14)，140.2 (C-5)，121.1 (c 15) ’ 119.7 (C-6)，111.1 (C-20)，79·8 (CM2)，71.6 (C-3)， 63.7 and (伸乙基二氧基），58,8 (c_17)，19 〇 (c_19)，u 9 (CM8 卜 二氧氧基申乙基二氧基 ---------------------訂---------線 I Γ%先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁}
A7 1253932 ______— _B7 --—--——— _ 五、發明說明（59 ) 瘦； 瘦 取N-邊化乙酸胺（211 mg，1於〇。〇環,境下加 入搜摔的此合浴液内，此溶液含有5，14 -二稀（2 3)(5 0 0 mg，1.34 mmole)、丙酮（100ml)、醋酸（2 5ml)、以及水 (5ml)。15分鐘後，取磺酸鈉溶液（5%溶液，5()ml)加入 反應溶液内。揮發掉丙酮後，以二氯曱烷（3x5〇ml)萃取 水層。有機層以硫酸鎂乾燥之，過濾後再揮發掉萃取的 溶劑。然後，加入lml的收啶於所得到的產物中，並且 擾拌0.5小時。接著加入i〇0ml的二氣曱烷於反應混合 物中’再依序以擰檬酸溶液（5%溶液，3 X 1 〇〇ml)、飽和 碳酸氫鈉水溶液（5〇ml)、以及水（5〇ml)清洗二氣甲烷。 有機層以硫酸鎂乾燥後，再過濾、揮發掉有機溶劑，便 可得到白色泡沫狀的14，15-以及5,6-環氧化物（360mg， 69%)，此環氧化物的混合物無法以矽膠色層分析管柱分離。 例11 : 邱，1叩二^1^氧基-14，15_環氧基-20,20-伸乙基二氣基娘-5-座（24) 將14，15-以及5,6-環氧化物（14.4g，37.0mmol)溶於 乾燥四氫4喃（200ml)，並且加入含氫化鋰鋁（1.69g， 44.4mmole)的乾燥四氫吹喃（3〇〇ml)溶劑中，此混合物並 在室溫攪拌24小時。其次，以先前所述的方法加入水 (1.69ml)以及氫氧化鈉水溶液（丨5%溶液，i.69mi)回收 63 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 χ 297公釐） ---- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 >
' · ϋ n ϋ ϋ ϋ n 一口、I n n n n ϋ ϋ ϋ I ϋ i —H I κ ·ϋ n fl_— n I I n ϋ I I I I I ϋ ϋ n n n I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1253932 A7 一 B7 五、發明說明（60 ) 之。過濾以及揮發掉溶劑後，粗製的產物以矽膠色層分 析管柱以及曱醇/氣仿（1 : 9)構成的充堤液純化之，便可 得到未反應的14,15-環氧基-20,20-伸乙基二氧基娠烯 (24)(300 mg，2.1%)。 光譜資料·· iHNMRCCDClJ : 5.31(1H，m，H-6)，3.82-3·98(4Η，m，伸乙基二氧基），3.43-3·52(1Η，m，H-3)， 3·41(1Η，s，H-15)，3.31-3.35(1H，dd，J=4.3Hz，H-12)， 1·29(3Η，s，H-21)，1·17(3Η，s，H-19)，l.〇2(3H，s，H-18)。 UCNMR (CDC13): 139.8 (C-5)，120.8 (C-6)，112·1 (C-20)， 77.2 (C-12)，75.4 (C-14)，61.0 (C-15)，22·3 (C-21)，19.2 (C-19) ， 9.5 (C-18)。 例12 : 1^，12β，14β·三氤氧基_20,20_伸乙基二氫篡祕坪pq 取溶有14，15-環氧化物（24)(300mg，〇.77mmole)之乾 燥四氫呋喃溶液（l〇ml) ’加入懸浮有氫化鋰鋁（3〇〇mg， 7·89mmol)的乾餘四氮咲喃溶液（1 〇ml)中，並且迴流反庳 48小時。其次，以先前所述的回收方法，加入水（〇 31^)、 清氧化鈉水溶液（15%水溶液，0.3ml)，然後再過滤之。 所得到的粗製產物再％矽膠色層分析管柱以及甲醇/氣仿 (1 : 9)所構成之沖堤液純化，便可得到三氫氧基助孕稀 (25)(250mg? 83%) ° 光譜資料·· iHNMRCCDClJ，5·38(1Η，m，Η-6)，3·98(4Η，m， 伸乙基一氧基）’ 3·43-3·53(1Η，m，Η-3)，3·25-3·32(1Η dd J二4·1Ηζ，H-12)，1·32(3Η，s，H-21)，1·01(3Η，s，H19)， (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) n n n n _1· ϋ 一 δ、· n i-«i n in ϋ n n 線！_-----------------------
1253932 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 〇 A7 ----------—_____JB7__ 五、發明說明（61 ) 0·98(3Η，s，H-18) 〇 13CNMR(CDC13):139.1(C-5)，122.1(C-6)，112.2(C-20)，85.1 (C-14)，75·1 (C-12)，71.6 (C-3)，23.4 (C-21)， 19.4 (C-19)，8.9 (CM8)。 , 例13 : 3 3，1_23，143-吴氫氧基^娠-5_烯(15) 取伸乙基二氧助孕烯（25)(250mg，〇.64mmol)溶解於 醋酸（13,4ml)以及水中，然後冷凍乾燥之，獲得三氫氧 基類固醇化合物（l5)(2〇〇mg，89%)，熔點：228ι_235^：(1Η 225°C-235°C)，M+348，[aD]2〇+35。（lit[aD]2°+29。）。 光譜資料：1«[>^11(〇0€13):5.39(111，111,^6)，3.56- 3.62(1H，t，J=8.1Hz，H-17)，3·42-3·51(1Η，m，H-3)， 3·28-3·39(1Η，dd，J=4.3Hz，H-12)，2·23(3Η，s，H-21)， 1·01(3Η，s，H-19)，0.90(3H，s，H-18)。 13C NMR (CDC13) ： 217.7 (C-20) ^ 138.9 (C-5) 5 122.2 (C-6)，85.5 (C-14)，73·6 (C-12)，71.6 (C-3)，57.0 (CM7)， 55.1 (C-13)，43.6 (C-9)，42.1 (C-4)，37.3 (CM)，36·8 (C-10)，35·9 (C-8)，34.5 (C-15)，32.9 (021)，31.5 (C、 16)，30.1 (02) ’ 27.4 (C-7)，24.4 (C-ll)，19.4 (C-19)， 8.3 (C-18)。 例14-19將顯示根據本發明之另一第二步驟中所需 的中間化合物以及類固醇化合物（1 5)的合成步驟。 例14 : 20，20 -伸乙基一氧基- 3β-曱苯-對-確醯氧基__嫌_5,14 -二稀. 65 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297 ^~____ --------訂---------線 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) A7 1253932 五、發明說明（62 12β-醇-乙酸酯（26) 取一溶有對-甲笨磺醯氣化物（65〇mg，3·4 mm〇丨）之 也匕疋/谷液（l〇ml)，於〇 C環境下逐滴加入含有2〇,2〇-伸乙 基二氧基娠烷-5，14-二烯〇β，12卜二醇_12乙酸酯 (22)(1.3g，3·1 mmol)之吡啶溶液（151111)中，然後在室溫環 境下攪拌24小時。之後，加入水於反應完畢的溶液内。 接著，利用乙酸乙酯（2X50ml)萃取，並以檸檬酸溶液 (5x50ml)、飽和碳酸氫鈉溶液（1〇〇ml)、飽和氣化鈉溶液 (100ml)以及水（100ml)清洗之。清洗過的乙酸乙g旨萃取 液以硫酸鎂乾燥後，過濾，然後揮發掉乙酸乙酯。最後， 再以快閃式色層分析管柱以及環己烷/乙酸乙酯（8:2 v/v) 構成的沖堤液純化所得到的粗製產物，而得到一純化的 黃色由狀(3-0-對曱苯磺醯基類固醇（26)(1.58，84%)(其分 子量為570.271 ;而C32H4207S的分子量為570.273)。 光譜資料：NMR(CDC13): 1.021 (3H，s，19-H)，1·13 1(3H， s，18-H)，1·282(3Η，s，21-H)，2.021(acetateOCH3), 2.431(3H，s，Ar-CH3)，3.883(4H，m，〇CH2CH2〇），4.750(1H， dd，3J l〇8Hz，5.2Hz，12-H)，4·890(1Η，m，30H)，5.281(1H， dd，3J 4.2Hz，2·1Ηζ，15-H)，5·388(1Η，m，6-H)，7·341(2Η， d，3J 8·2Ηζ，ArH)，7·746(2Η，d5 3J 8·2Ηζ，ArH)。
13C NMR (CDC13) ·· 13.498Q (C-18)，19.002Q (C-19)， 21.61 2Q (Ar-曱基）*，21.671 (C-21)*，24.1 75Q (醋酸曱 基），63.401T (伸乙基二氧基），63.498T (伸乙基二氧基）， 71.53 1S (C-13)，80.912D (C-12)，82.53 1D (C-3)，1 1 1.363S 66 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------t 請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁} 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 訂------- ——線—_丨---------------------- 1253932 A7 — ---------B7__ 五、發明說明（63 ) (C-20) ^ 120.881D (C-15) ^ 121.461D (C-6) ^ 123.715-13 3.917 (芳香環），139.903S (CM4)，1 5 1.722S (05)， 170.819S (酯化羰基）。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) *可能是内轉換的◦ , 例 15 ·· 20,20-伸乙基 一《氧基-3〇1，5-壤氧基- 5oc -娘-14-稀-6β，12β -二 醇-12-乙酸酯（27) 取一含有對-曱苯磺醯氧-娠-5,4-二烯（26)(1.2g，2.1 mmol)、乙酸 _ (2.2g，22.4mmol)、水（250ml)以及丙酮 (500ml)的混合溶液於60°C迴流16小時。揮發掉丙酮後， 以乙酸乙酯（200ml)萃取水層。乙酸乙酯萃取層以硫酸鎂 乾燥後，過濾，揮發掉乙酸乙酯，然後再以快閃式色層 分析管柱以及氣仿-丙酮（9:1，v/v)構成之充堤液純化粗 製的產物，獲得純化的黃色油狀3α，5 -環化衍生物 (27)(530mg，61%)。（其分子量為 416.262 ;而 C25H3605 的分子量為416.263)。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 光譜資料：W NMR(CDC13):0.288 (1H，dd，3J 8· 1Hz，4.9Hz， 4-Ha)，0·477(1Η，dd，3J 4.4 Hz，4.4Hz，4_Hb)，l.〇25(3H，s， 19_H)，1.121(3H，s，18-H)，1 ·256(3Η，s，2 1-H)，1 ·989(3Η， s，acetate-CH3)，3.302(1H，dd，3J 2·8Ηζ, 2·8Ηζ，6-H)， 3·784-3·947(4Η，m，〇CH2CH2〇），4·721(1Η，dd，3J 8.5Hz， 5.6Hz，12-H)，5.232(1H，dd，3J 3.9Hz，1.9Hz，15-H)。 nC NMR (CDC13) ·· 12.298 Q (C-18)，19.971Q (C-19)， 23.623Q (C-21)，24.1 53Q (acetate 曱基），63.700T (伸 67 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐) ' ' 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1253932 A7 ---~~-----_ _ 五、發明說明（64 ) 乙基二氧基），63·788Τ(伸乙基二氧基），73 591D(C_6)， 551D (C-12) ’ 111.1216 (C-20)，ns.778D (C-15)， 152.959S(CM4)，170.991S(醋羰基）。 例16 : ，2〇伸乙基一氧基-3α-5-環-5α-娠-14-烯-6β，12β-二醇 (28) 卜取溶有3α_5-環衍生物（27)(50〇mg，l.2mm〇l)的四 乳咲喃溶液逐滴加入懸浮有氫化經銘（5〇mg，13_〇1)的 四氫呋喃溶液内（10ml)，然後攪拌4小時，之後再以水 終止反應。30分鐘後，加入氫氧化納（15%溶液，5〇μ1)， 並再持續攪拌30分鐘。接著，加入15〇μ1的水，並且過 濾反應溶液。四氫呋喃溶液以硫酸鎂乾燥後，揮發掉四 氣口夫喃/谷劑’然後以快閃式色層分析管柱以及氣仿/丙酮 (8 : 2，Wv)構成的充堤液純化粗製的產物，得到純化的 油狀雙醇類化合物（28)(370mg，83%)。（其分子量為 374.250 ;而 C23H34〇4 的分子量為 374.252)。 光譜資料：iH NMR(CDC13): 0.298 (1H, dd，3J 8.1Hz，4·9Ηζ， 4~Ha) ’ 〇·51〇(1Η，dd，3J 4.4 Hz，4·4Ηζ，4-Hb)，0·985(3Η，s， B-H)，l.〇5 5(3H，s，18-H)，1.325(3H，s，21-H)，3.318(1H， 紙 3J 3.0Hz，3·0Ηζ，6-H)，3·363(1Η，dd，3J 11.4 Hz， 4·2Ηζ，12-Η)，4·019 (4H，m，0CH2CH2〇），4.622(1H，s，〇H)， 5·255(1Η，dd，3.9Hz，1.9Hz，15-H)。 13C NMR(CDC13) ： 11.681T(C-4) ， 12.234(C-18)， 19.844Q(C-19) ’ 2 3.604Q (C-21)，63.620T(伸乙基二氧 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .. --線·
A7 1253932 _____B7^_ 五、發明說明（65 ) 基）’ 63·733Τ(伸乙基二氧基），73.5690(<3-6)，77.4780(匕 12)，111.125S(C-20)，118.702D(C-15)，152.912S(C-14)。 例17 : 20,20-伸乙基二氧基-14，15β-環氧-3α，5-環-5α，14β-娠烷_ 6β，12β-二醇（29) 取Ν-溴化醯胺（150mg，l.lmmol)於0°C環境下加入 含有20,20-伸乙基二氧基-3α，5-環-5α-娠-14-烯-6β，12β-二醇（28)(340mg，0.91 mmol)的丙酮溶液（2〇ml)、水（〇.25ml) 以及（醋酸0.25ml)的混合溶液中。15分鐘後，加入續酸 鈉（5%溶液，20ml)。然後，減壓去除反應液中的丙酮， 而殘餘物則以二氣甲烷（3 X 30ml)萃取之。二氣曱烷萃取 液利用硫酸鎂乾燥後’過渡，揮發掉部分二氣曱烧，得 到一體積50ml的濃縮液。接著，加入〇.5mi的卩比σ定於該 濃縮液中，並再攪拌1小時。然後，以檸檬酸溶液（5〇/〇， 3><30ml)、飽和碳酸氫納水溶液（3〇mi)、以及水（3〇mi)清 洗一氣曱烧層。然後，以硫酸錢乾燥二氣甲烧層。過渡 後，揮發掉二氣曱烷，然後再以快閃式色層分析管柱以 及氣仿/甲醇（9 · 5 · 0 · 5，v/v)純化粗製的產物，得到一泡 沫狀的環氧化物（29)(1 80mg，51 %是泡沫狀）（其分子量為 390.245，而 C23H34〇2 之分子量為 390.247)。 光譜資料：iHNMRfDClO : 〇.287(lH，dd，3J8.1 Ηζ，4·9 Hz，4-Ha)，0·501(1Η，dd，3J 4.4Ηζ，4·4Ηζ，4-Hb)，0·987(3Η， s，19-H)，l.〇48(3H，s，18-H)，1·321(3Η，s，21-H)，3·318(1Η， dd，3J 3.1 Hz，3.1 Hz，6-Η)，3·355(1Η，dd，3J 11·2Ηζ，4·1Ηζ， 69 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐) ' -- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) f 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 ·1111 — — I1 — — I — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — 1253932 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 五、發明說明（66 ) 12-H)，3·491(1Η，s，15-H)，4.001(4H，m，〇CH2CH2〇）， 4.901(1H，s，OH) 〇 13C NMR (CDC13) : 1 1.668T (C-4)，1 1.973Q (C-18)， 19.515Q (C-19)，23.519Q (C-21)，59.91 OD (C-l 5)，63.601 T (伸乙基二氧基），63.713T (伸乙基二氧基），72.5018 ((：- 14) ’ 73.571D (C-6) ’ 77.471 (C-12)，1 1 1.0858 (C-20)。 例18 : 20,20-伸乙基二氧基αβ,ρβ,Μβ-三氫氧基_3(χ，孓環化_ 5α，14β-娠烷（30) 取一溶有環氧化物（29)(170mg，〇.44mmol)的四氫 喃溶液（10ml)逐滴加入懸浮有氫化鋰鋁（2〇mg，〇 53mm〇1) 的四氫。夫喃溶液（5ml)内，然後迴流2小時。之後，加入 20μ1的水並再攪拌〇·5小時。接著，再加入氫氧化鈉溶 液（15%，20μ1)並再繼續攪拌〇·5小時。另外，加入6〇μΐ 的水，並再攪拌1小時。過濾後，懸浮液以硫酸鎂乾燥， 再過濾，然後揮發掉四氫呋喃溶劑。接著，以快閃式色 層分析管柱以及氣仿/甲醇（9: i，v/vm成之充堤液㈣ 所得到的混合物，便可得到澄清的油狀三醇類（9 53〇/〇)(其分量為 392.261，而 c2 η 〇 沾、 ’ • ^23Η38〇5的分子量為 392.263) 〇 光譜資料：'H NMR (CDC13)0.287(1H, dd，3J 8」Ηζ 4 9 & 4-Η2). 0.510(1H, dd,^J 4.4 Hz, 4.4 Hz, 4-Hb)，〇. 97 1 (3 Η ? s，AH)’ 1402(3^，18_H)，丨·3ι9(3Η，δ 2ι_Η) 3 32⑴η dd, 3J 3.0Hz, 3.0Hz, 6-H)，3.321(lH,dd,3J 3 〇Hz 3^^ 70 表紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公复 ---------------------訂---------線丨·1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1253932 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（67 ) 12-H)，3·561(1Η，dd，3J 11·1 Ηζ，3·9Ηζ，12-H)，3.561(1H， s，OH)，4·084(4Η，m，0CH2CH20)，4·671(1Η，s，OH)。 UC (CDC13) ·· 11.688T (C-4)，11.971Q (C-18)，19.511Q (C-19)，23.520Q (C-211)，63.612T (伸乙基二氧基）， 63.711T (伸乙基二氧基），73.4830(匕6)，76.0510(〇 12)，84.307S (C-14)，111.099S (020)。 例 19 ·· 叩，12 0，14-三氫氧基-140-娠-5-烯-2〇-酮（15) 提供一由溶有三醇化合物（30)(80mg，0.20mmol)的 丙酮溶液（20ml)以及氫氣酸溶液（1 Μ, 10ml)所構成的混合 溶液，並在60°C迴流2小時。待反應溶液冷卻後，加入 20ml飽和碳酸氫鈉溶液。揮發掉丙酮後，以氣仿（3x2〇ml) 萃取水層，再以硫酸鎂乾燥氣仿萃取液。過濾後，揮發 掉氣仿，得到差向異構的（epimeric)三氫氧基類固醇化 合物（15a，15b)(42mg，61%)。差向異構的混合物（15a， 15b)(15mg)可利用快閃式色層分析管柱以及氣仿/曱醇 (9:1，Wv)作為充堤液，得到純化的πβ-差向異構物 (15&)，（1〇11^)，熔點（224-229。〇(丙酮）（以.226-223。），（其 分子量為 348.234， C;· 72.32，Η 9.21%，而 C21H32〇4 需 要 C，72.38; Η 9.26%，分子量為 348.236)，且 17a-epimer (15B)(3mg)，熔點 183-19 1°C (丙酮），（lit 184-196。）。 30，120，4-二氫乳基-140-娘-5-稀-2〇-嗣（158)之光譜資料： 4 NMR (CDC13): 0.963( 1 H，s，19-H)，1·192(3Η，s，18-H)， 2·236(3Η，s，21Η)，3.325(1Η，dd，3 11·2 Ηζ，3·9Ηζ，12- 丨 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇χ 297公餐）
I --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1253932 Λ 經濟部中央標隼局員工消费合作社印製 }Γ 五、發明説明（68 ) Η)，3·464(1Η，s，OH)，3·5140(1Η，m，3-H)，3·598(1Η，dd， 3J 9.6 Hz，9.6 Hz，17-H)，4·255(1Η，s，OH)，5·383(1Η，m， 5-H)。 13C (CDC13) : 8.275Q(C-18)，19.414Q(C-19)，24.400(C· 11)，24.581T(C-16)，27.443T(C-7)，30.062T(C-2)， 32.972Q(C-21) ，34.543T(C-15) ，35.864D(C-8)， 36.975S(C-10) ， 37.337T(C-1) ， 42.144T(C-4)， 43.565D(C-9) ， 55.101 S(C-13) ， 57.Q38D(C-17)， 71.597D(C-3) ，73.558D(C-12) ，85.566S(C-14)， 122.223D(C-6)，138.932S(C-5)，217.011S(C-20)。 3β，12β，14-三氫氧基-14β-娠-5-烯-20-酮（15b)之光譜分 析： lH NMR (CDC13) ： 0.996(1H, s, 19-H), 1.144(3H, s, 18-H), 2.221(3H，s，21-H)，3·339(1Η，dd，3J 9.4Hz，9.4Hz，17_H)， 3·492(1Η，m，3-H)，3.629(1H，dd，3J 11·1 Hz，3·9Ηζ，12· Η)，3·712(1Η，s，OH)，4·325(1Η，s，OH)，5·383(1Η，m，5· H) 〇 作Γ 20至28將顯示可用以製造第一單醣（40)的中間 物製程。 例20 : 甲基-4, 6-0-亞节基-喃葡萄糖苷（32) 提供一由甲基-a-D-吡喃葡萄糖苷（30g，0.15m〇l)、 笨甲醛（70ml)、以及氣化鋅（2〇g)所構成之混合物，並在 室溫下攪拌24小時。之後，將反應的產物倒入冰水中， ----- 72 f請先閱讀背面之：>i意，：¥1?再^寫本頁) 訂 本纸張尺度適用中國國家標孪（CNS ) Λ4現格（210X 297公分） 1253932 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 五、發明說明（69 ) 並繼續攪拌15分鐘。所得到的白色沉澱物先過濾，然後 以***沖洗之。接著，以焦亞硫酸鈉（S〇dium metabisumte ·’ Ν02〇5)(1〇%，溶液）擾拌所得到的白色 固體沉澱物，並以水沖洗之。最後，由氣仿及***中結 晶出亞V基化合物之固體產物（32)(3 lg，72%)。 例21 : 曱基-4,6-0-亞▼基-2-0-對曱苯確醯基咲喃葡萄糖 苷(33) 取溶有p-曱苯磺醯氣（25g，12當量）之吡啶（1〇〇如） 於環境下逐滴加於含有亞苄基—葡萄糖（32)(3ig， 0.12mole)的吡啶（l〇〇ml)中，然後在室溫下攪拌48小時。 接著，將冰加入反應混合物中，所得到的白色固體材料 以水清洗後，再以熱乙醇進行在結晶反應，得到對曱笨 磺醯化的葡萄糖（33)(28g，60%卜 例22 : 甲基_4, 6-0-亞苄基-3-0-甲基吡喃阿卓糖苷〇幻 取對甲苯磺醯鹽（33)(28g，64 mmol)溶於甲醇（i5〇mi) 鈉（7g)溶液内，並在壓力鍋内於11〇。〇加熱小時。待 壓力鍋冷卻後，在反應·混合溶液内加入乾冰。過濾後，' 揮發掉甲醇，然後以水回收固體材料。然後，先以氣仿（χ3) 卒：水層，再以硫酸鎂乾燥氣仿萃取液。過濾後，揮發 掉氣仿。得到的粗製混合物再以矽膠色層分析管柱以及 氣仿/丙酮（9 : 1)純化之，便可得到純化的阿 (34)(10g，52%)。 --------------------訂---------線 IAV. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 73
1253932 五、發明說明（70 ) 例23 : 甲基-6-4-0-苯曱酿基_3_〇_曱基_6_去氧_a_D_口比喃 (35) 取純化的阿卓糖苷（34)(10g，33mm〇l)加入溶有队溴 化琥珀醯亞胺（7g)以及碳酸鈀（2〇g)的四氣化碳溶劑内， 並在75X：環境下攪拌3小時。反應後的混合物經過過渡 後，以水清洗四氣化碳層，然後再以硫酸鎂乾燥有機層。 過濾後，揮發掉四氣化碳，便得到6-溴-阿卓糖苷（35)， (9g，69%) 〇 例 24 ·· 曱基-4-0 -本曱酿基- 3-0 -甲基-6-去氧-a-D-D比喃阿卓糖脊 (36) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製
取溶有硼氫化鈉的水溶液（3〇ml)於0°C環境下，逐 滴加入含有6-溴-阿卓糖苷（35)(9g, 23mmol)以及氣化鎳 (18g)的乙醇溶液（3〇〇ml)中，然後於75°C迴流1小時。 過濾後，揮發掉乙醇，然後以氣仿（x3)萃取殘餘的水層。 接著’再以硫酸鎂乾燥氣仿萃取液。過濾、後，揮發掉氯 仿，得到6-去氧-阿卓糖苷（36)(5g，72%)。 例25 : 4-0-笨曱醯基-3-0 -曱基-6-去氧- αβ-D-笨硫D比喃阿卓糖答 (37) 取笨基硫三曱基矽曱烷（5ml)以及矽甲烷三氟曱烷磺 酸鹽（2ml)於Ot加入溶有6-去氧-阿卓糖苷（36)(5g， 17mmol)的二氣曱烷溶液内（2〇〇ml)，並在室溫攪拌6小 74 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 訂---------線*
I I 1 I n ϋ I _ 1253932
A __________Lr. --------------------- 五、發明説明（71 ) 時。然後，加入飽和碳酸氫鈉溶液。接著’以硫酸錢乾 燥二氣曱烷層。過濾後，揮發掉二氯甲炫。所得到的粗 製產物再以矽膠色層分析管柱以及氣仿/丙酮（9: Π構成 的充堤液純化αβ-笨硫阿卓糖苷（37)(4g，63%)。 例26 : 4-0-苯曱醯基-3-0-甲基-2-苯基硫-2,6-二去氧-αβ-D-氟化 西馬吨喃糖苷（38) 取二乙氨硫三氟化物（0.65g)，於〇*°C環境下迅速 加入含有αβ-苯硫阿卓糖苷（3 7)(0.5, 1.3 3mmol)的二氣甲 烧，並攪拌0.5小時，然後再加入飽和破酸氫鈉溶液。 然後，以硫酸鎂乾燥二氣曱烷層，經過濾、揮發掉二 氣曱烷後，便可得到αβ-氟化西馬糖 （38) (450mg， 90%) 〇 例27 : 4-0-苯甲醯基-3-0-曱基-2-O-t-丁基二曱基矽烷基-αβ-D-笨硫阿卓糖苷（39) 經濟部中央標準局員工消費合作社印褽 (請先閱讀背而之注意·¥項再填寫本頁 利用溶有卜丁基二甲基氣化物（3g)以及咪唑（3g)之 外匕啶矽烷基化的6-去氧阿卓糖苷（37)(5g)，然後以乙酸 乙醋回收之。接著’先以6N鹽酸清洗乙酸乙醋回收液， 再依序以碳酸氫鈉以及水清洗之。所得到的乙酸乙酯以 硫酸鎂乾燥後，過濾，揮發掉乙酸乙酯，得到矽烷化的 苯甲醯基苯硫阿卓糖苷（39)(80%)。 例28 : 3-0-甲基丁基二甲基矽烷基苯硫阿卓糖苷 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（21〇·χ 297公兑） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 1253932 五、發明説明（72 ) (40) 矽烷基化的苯甲醯基笨硫阿卓糖苷（39)(6幻甲醇鈉 (100ml)處理4小時，然後揮發掉甲醇，並加入水。水層 以pH5的醋酸水溶液酸化後，再以乙酸乙酯萃取之。然 後，以水清洗乙酸乙酯萃取液，再以硫酸鎂乾燥之。過 濾後，揮發掉乙酸乙酯，得到矽烷基化的甲基苯硫阿卓 糖苷（40)(75%)。 例29至37將顯示可用以製造第；單醣（5〇)的中 間物製程。 例29 : U ·· 5,6-二-0-晷丙叉 取硫酸（40ml)於〇。(：逐滴加入溶有葡萄糖 (41) (50g，0.28m〇l)的丙酮溶液中（1丨），並且攪拌24小時。 然後，以6M氫氧化鈉溶液中和反應後的溶液。揮發掉 丙酮後，以氣仿萃取水層（X2)。接著，以硫酸鎂乾燥氣 仿萃取液後，過濾，揮發掉氣仿。最後，再由環己烧中 得到結晶的二-異丙叉-葡萄糖。 例 30 1，2 · 5,6-二-0-異丙叉-3-0-甲基吹喃葡萄糖（43) 將a-D-决喃葡萄糖（42)(41g，0.16 mol)溶於四氫呋 喃（300ml)中，然後逐滴加入懸浮有氫化鈉的四氫p夫喃溶 液（200ml)中。反應0.5小時後，逐低加入溶有甲基峨（25g) 的四氫呋喃（l〇〇ml)，然後攪拌24小時。反應完畢後， 加入水，然後以***萃取3次。接著，以硫酸錤乾燥乙 ------X6—______ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS >Λ4現格（210X 297公势) --- (請先閱讀背而之·;!意言·項再填寫本頁)
、1T Μ濟部中央標準局員工消费合作社印¾ 1253932 a Η 五、發明説明（73 ) 謎層，過波後，揮發掉***，得到甲基保護的葡萄糖 (43)(38g，83%)。 例31 : 3-0-甲基-αβ-Ρ-πί» 喃^ 萄糖 _ 取曱基-二異丙又化合物（43)(38g，〇l4m〇ie)溶解於 醋酸水溶液内（50% ’ 700ml)，並且迴流1 8小時。冷卻 後’揮發掉醋酸。所得到的粗製產物以色層分析管柱以 及氣仿/甲醇/丙酮/水（70 : 27 : 2 : 1)構成的充堤液純化， 便得到3-0-甲基-αβ-吡喃葡萄糖苷（44)(13g，5〇0/。）。 例32 : 曱基-3_〇-甲基-ocpH南葡萄糖苷（45) 取3-0-曱基-αβ_吡喃葡萄糖苷（44)(i〇g)溶解於甲醇 (50ml)以及濃鹽酸（lmi)中，並且迴流過夜。然後，加入 固體的碳酸氫鈉。過濾後，揮發掉曱醇，得到l，3_di_〇_ 曱基-〇60-〇^比喃葡萄糖苷（45)(95%)。 例33 : 曱基-亞苄基-3-〇_曱基々卜。比喃葡萄糖苷（46) 取吡喃葡萄糖苷（45) (8g)溶於含有5g的氣化鋅之 笨曱醛中（20ml)，並且在室溫中攪拌24小時。然後，加 入冰，再以氣仿萃取水層。接著，以硫酸鎂乾燥氣仿層， 過濾後，揮發掉氣仿，然後再以真空蒸餾法去除笨曱醛。 所得到的粗製產物再以矽膠色層分析管柱以及丙酮/氣仿 (0·5: 9.5)構成的沖提液純化，便可得到純化的亞苄基π卜 外匕喃葡萄糖苷（46)(60%)。 - --—------ 7 7 本紙乐尺度^^^^7^ )/\4賴（210Χ 297々>^ΓΤ ήί ¾先閱讀背而之.注意枣項再填巧本頁) 、-口 1253932 五、發明説明（74 ) 134 : 曱基-4-0-笨曱醯甲基_6-去氧卜吡喃葡萄糖苷（47) 將亞芊基化合物（46)(5 g)加入含有Ν_溴化琥珀醯亞 胺（3.7 g)以及碳酸鈀（4g)的四氣化碳溶劑内，並且在8〇 C迴流4小時。然後，過濾反應溶液，揮發掉四氣化碳， 並以水清洗之。接著，以硫酸鎂乾燥，過濾，揮發掉溶 劑，便獲得溴化產物（70%)。 然後，於0°C環境下將此溴化產物溶解於含氯化鎳 (8.6g)的乙醇（3 〇〇ml)内。接著，於15分鐘内逐滴加入溶 有蝴氫化鈉（8.6g)的水溶液（5〇ml)，所得到的混合溶液再 於l〇〇°C迴流45分鐘。反應完畢後，待反應溶液冷卻， 二;、後再過;慮、揮發掉溶劑。接著，加入氣仿，再以水清 洗氣仿層。最後，以硫酸鎂乾燥水洗過的氣仿層後，過 濾’揮發掉氣仿，便得到6-去氧糖（47)(70%)。 例35 : iiQ-苯甲醯基曱基-1-苯基硫-6_去氣—αβ-吡喃葡葙糠 苷（48) 經濟部中央標準局員工消资合作社印製 (請先閒讀背而之注意¥項再填寫本頁) i 6-去氧吡喃葡萄糖苷化合物（47)(3g)溶解於5〇ml 的二氣曱烷内，然後加入苯曱基硫三曱基矽曱烷（2g)以 及二甲基矽烧基三氟曱石風（0.2ml)，並且在室溫環境攪拌 過仪。其次’先加入飽和碳酸氫鈉水溶液，然後以硫酸 鎮乾燥，過濾，揮發掉溶劑。接著，以矽膠色層分析管 柱以及乙酸乙酯/還己烷（2 : 8)構成之充堤液純化所得到 的粗產物，而得到一純化產物（48)(60%)。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公梦) 1253932
A 五、發明説明（75 ) · 例36二 圭比喃葡萄糖苷MQ、 將比南葡萄糖脊化合物（48)(2g)溶解於σ比咬（2〇mI) 中，然後再加入三甲基乙醯氣，並在室溫攪拌過夜。然 後加水，再以乙酸乙酯萃取。接著，先以6N鹽酸洗 有機層，再以硫酸鎂乾燥有機層；過濾後，揮發掉乙酸 乙醋’得到三曱基乙醯酯化合物（49)(8〇%)。 例37 : 酿基-3-0-甲暮」2-0-三曱基乙醯小氤-6-去氣-β-世Α里萄糖苷化合物 在溶有三曱基乙醯酯（49)(2g)的二氣甲烷（l〇〇ml) 中’在〇°C環境下加入N-溴化琥珀醯亞胺（i.2g)以及二乙 稀氨硫三I化物（1.2g)。一小時後，加入飽和碳酸氫鈉， 然後再以硫酸鎂乾燥之。接著，過濾，揮發掉溶劑。所 得到的β-氟化吡喃糖苷化合物（5〇)並進一步以矽膠色層 分析管柱以及乙酸乙酯（2 : 8)構成之沖堤液純化。所得 到的純化產物，其產率為45%。 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 (#♦先«讀背而之注意事項再M..艿本頁) 例38顯示3-0-[4-0-笨曱醯基-2-笨基硫-β-d-吡喃 西馬糖基]-12,14β-二氫氧基-助孕-5-烯-20-酮（51)的合成 步驟。 例 38 ·· 3-0-[4-0-笨曱醯基笨基硫吡喃西馬糖基]-12，Ηβ-二氫氧基-助孕-5-稀-20-酮（51) 本紙张尺度適用中國國豕樣導（CNS ) Λ4現格（210 x 297公筇)
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五、發明説明（76 ) 取氣化錫（190mg, lmmol)於-15°C環境下加入含有 (請先間讀背而之注意卞項再本黃) 3，12，14β-三氫氧基-助孕-5-烯-20-酮（15)(100mg，0.28 mmol)以及氟化吡喃西馬糖苷化合物（38)(2 10mg，0.56 mmol)之乾燥***以及4A之分子篩，此反應混合物並在 -15°C維持3天。然後，加入飽和碳酸氫鈉溶液，再以硫 酸鎂乾燥之。接著，過濾，揮發掉溶劑，得到的粗產物 再以矽膠色層分析管柱以及氣仿/甲醇（9.5 : 0.5)純化， 便可得到純化的糖苷化合物（51)(30mg，15%)。 例39〜40顯示可偶合西馬糖以及6-去氧-3-鄰-曱基 -葡萄糖的合成步驟。 例39 : 6-去氧-3-膦-曱基-葡萄糖-西馬糖雙醣（53) 取6-去氧-3·鄰-甲基-葡萄糖（50 A)(1.5g)，西馬糖 (4〇)(1.3g)以及分子篩（4入）溶解於二氣曱烷中，並在室溫 搜拌1小時。然後，將反應溶液於冷卻至-15°C後，加入 氣化錫（11)(0.8g)，三氟曱艰（ι·ιg)，以及三乙胺（〇 5g)， 並在-15。(：攪拌16小時。反應完畢後，過濾，揮發掉二 氣曱烧。所得到的雙醣（53)再以色層分析管柱以及乙酸 經濟部中央標準局Μ工消资合作社印製 乙/已烧（2 : 8)，得到得純化產物之產率為丨5。/〇。 例 40 :― 6-去氧-3-膦-曱基-葡萄糖-西馬糖雙醣（5 4) 取雙_化合物（53)(200g)溶解於四氫块喃（20ml) 中’然後加入四乙基氣化銨（0 4g)，並且在室溫攪拌1 小時。然後，加入飽和碳酸氫鈉溶液，再以乙酸乙酯萃 \ 4 π -----_ 80 、·⑽人/久·丨因囤卷標孪（cNS > Λ4現枋（2丨〇χ297公 1253932 a 、發明説明（77 ) 取。接著’以硫酸鎂乾燥乙酸乙酯層，過濾後再揮發掉 乙酸乙酯。得到的雙醣化合物（54)再以矽膠管柱以及丙 闹/氣仿（0.5 ·· 9.5)所構成之沖堤液純化之，純化出來的 雙醣產率為60%。 例41 : 6-去氧-3-膦-曱基-葡萄糖-西馬糖雙醣（55) 取雙醣化合物（54)(80g)溶解於二氣曱烷（10mi)中， 然後加入二乙基氨三氟化硫（80μ1)，並且在〇°c搜拌〇·5 小時。然後，加入飽和碳酸氫鈉溶液，以及更多的二氣 曱烷進行萃取。接著，以硫酸鎂乾燥二氣曱烷層，過濾 後再揮發掉乙酸乙。得到的雙St化合物（54)再以石夕膠 管柱以及乙酸乙酯/己烷（1 : 9)所構成之沖堤液純化之， 純化出來的雙醣（55)產率為65%。 例 42 ·· 下列將顯示食慾抑制分析實驗的結果： a) Irwin 測試； b) 急性毒性測試；以及 A 口服劑量降低食慾測試。 a) Irwin test iLMiS實驗的目的是在了解根據+本發明it告的具食 盤抑制性的_植物萃取物的效果。 f驗步驟：_ 食慾抑制劑是由本發明先前所揭示的方法萃取出 來’並施加予四組含三隻動物的其中兩組··四組中有一 本紙认尺度遠州中國国家標率（CNS ) Λ4現格（210X 297公兑） (評先閱讀背而之注意字項再杧一:^本頁) 訂 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 1253932 五、發明説明（78 ) -- 口匕藥，組給予二甲亞砜（DMSO); —組給予測試樣 其劏里為50mg/kg;而另一組則給予劑量3〇〇mg/kg 的^試樣品。給藥的方式是腹膜注射，並在施藥5 M守後觀察’其中只有被施予DMSO的動物在腹膜注射 後出現不同的症狀。 結果：_ 此貫驗的結果清楚的顯示DMS〇溶劑對動物具有明 顯的衫響’且特別是熱調節的機制。所有被此溶劑單獨 處理或伴隨測試樣品處理的動物，其體溫都顯示有明顯 的下降。 #觀察低劑量測試樣品處理的動物族群，結果顯示其 在1子内的分散性以及活動力均較所有其他族群（包括控 制組）來得低。此外，在DMSO—處理的族群中可看到相 同程度的神情呆滯現象。呼吸減緩則在藥物施予後的15 60 s鐘出現。上眼瞼下垂（關閉上眼瞼）的情形則比 DMSO處理族群來的嚴重。耳翼（耳）的反應則與陽性的 才曰頭反應相同，顯示膽怯狀。體溫則在處理後降到32 7 t：。一 问劑ϊ處理的族群中，一開始在籠子裡的分散性以 及活動力會降低，但在死亡前會出現分散性以及活動力 增加的情形，其約在處理後一小時出現。處理後3()分鐘 後會出現嚴重的床對稱性抽搐；而呼吸則一開始會降 低，然後在死亡前增加。耳翼（耳）的反應則是延遲的， 並且可觀察到陽性手指反應，顯示膽怯狀，此二現象在 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公势） (請先間讀背而之注意事項再Mvi:H本頁)
經濟部中央標準局員工消费合作社印裝 1253932 五、發明説明（79 ) · 一 u里處理的動物中均可觀察到。體溫則在處理後降低 到30.7 C。此外，動物也會出現位置妄想以及身體張力 降低的現象。另外’可觀察到不正常的肢體晃動現象， 抓、握的張力降低’無痛覺反應，以及喪失正確的反射 現象。 討論： 當與控制組以及DMS〇_處理的動物比較後，低劑 量（50 mg/kg)處理的動物只會降低呼吸並且增加上眼瞼 下垂，而高劑量處理的動物則反應非常強烈，出現的症 狀包括抽搐以及死亡。所有在其他動物觀察到的症狀都 可在抽搐以及與死亡的動物觀察到。鎮靜劑以及鎮定劑 施予個體後所會出現的特徵例如在籠子内的分散力降 低、活動力增加、以及神情呆滯的現象在此高劑量樣品 處理的動物族群中均未被觀察到。 因此，根據此實驗的結果，其結論是當測試樣品是 以DMSO作為腹膜注射時的溶劑時，測試樣品對小白鼠 的致死— 劑量為300 mg/kg，而對呼吸具有抑制性的測試 樣品劑量則為50 mg/kg。 b)急性毒性測試 此測試實驗之目的是在獲得此測試樣品的毒性資料。 實驗步驟： 根據先前本發明所描述之方法所製備的具食慾抑制 性的植物萃取物’其毒性測試的步驟是以增加劑量的純 化萃取物口服處理小白鼠，其中除最高劑量的測試矣 ______ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4坭格（210X 297公筇） Γ靖先聞讀背而之>x意事¾再j4Ef本頁」
丁 -三 I « n n n · 1253932 五、發明説明（8〇 ) 一― 一 — …:他d里均只以—隻小白鼠進行測試。實驗進行時 必須每天彳双查動物的健康情況以及動物的體量。 劑里的車巳圍由100 mg/kg到3〇28 5 mg/kg。根據與 斤準備的馬鈴薯澱粉混合之測試樣品的計算結果，每隻 動物所G得的劑里為〇 2ml，動物13則得到。馬 鈴薯殿粉的製備是在少量的冷水推混2〇g的殿粉，然後 加入滾水中，使其最終體積為1升。所得到的懸浮液在 給藥前必須冷卻到室溫。 在無群1和2中的動物在同一天處理，經過24小 時後並未觀察到有毒性徵兆出現。然後再繼續進行下一 組的測試，依照相同的方法進行處理，直到所有的動物 都被處理元畢。此计劃持續進行，直到急性毒性劑量已 經在先前的族群中達到，才不需要持續處理動物。 在測試樣品處理後，立即（1〜2小時後）以及每天觀 察動物的毒性臨床徵兆，而每隻動物的體重、食物以及 水分的攝取量則一週測量一次。 存^活的動物可在實驗的第14天腹膜注射戊基巴比 特魯 6 (pentobarbitone sodium)(取自商品 Euthanaze，
CentaurR)而安樂死。該些動物以及一隻在實驗中死亡的 動物並且經過驗屍，並且收集其組織樣品。 結果： 苐1族群（控制組） 在第14天的觀察階段並未觀察到臨床毒性徵兆， 食物、水分的攝取量以及體重的改變也在正常的參數範 ______ 84 _ 本纸张尺度適用中國國家標率（CNS ) Λ4規格（210x 297公犮） '一 (請先閱讀背而之;i意事項再填艿本頁) •V"
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經濟部中央標準局員工消費合作社印掣 C 五 _I_；__^_ 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 1253932 A ^ 1Γ 、發明説明（8 1 ) 圍内’而肝的組織樣品也未紀錄任何改變。 第2族群（劑量：100mg/mg) 在14天的觀察階段並未觀察到臨床毒性徵兆，食 物、水分的攝取量以及體重的改變也在正常的參數範圍 内’而肝的組織樣品也未紀錄任何大體病理或者組織、 型態的改變。 第3族群（劑量：200 mg/mg) 在14天的觀察階段並未觀察到臨床毒性徵兆，食 物、水分的攝取量以及體重的改變也在正常的參數範圍 内，而肝的組織樣品也未紀錄任何大體病變，然卻出現 組織病變。有些微的斑紋腫脹肝細胞出現在動物6中， 但動物5的肝細胞則出現中度斑紋腫脹。 弟4族群（劑量：400 mg/mg) 在14天的觀察階段並未觀察到臨床毒性徵兆，食 物、水分的攝取量以及體重的改變也在正常的參數範圍 内；而在驗屍中，肝的組織樣品也未紀錄任何大體病變。 動物組織切片觀察到肝細胞有些微斑紋腫脹以及水腫。 動物7的水分、食物攝取以及體重的增加都正常。 動物8的水分以及食物攝取量幾乎是動物7的兩倍（分別 是144.6g以及73.9g)，但是其體重卻只增加〇.81g(相較 於動物7增加的體重為2.7g)。 苐 5 族群（8〇〇 mg/kg) 此族群中的一隻動物在施予測試藥物後於未出現任 何特別症狀的情況下死亡。另一隻動物（動物9)則在整個 本紙張尺度朗中諸準（CNS )从胁（2mx 297公兑） (請先閱讀1Γ而之>1意事項再^寫本頁 、-0 ·· 五 ___I_ 經濟部中央標隼局員工消費合作社印褽 1253932 、發明説明（82 ) '… ^— 規察其中均存活，未出現任何毒性症狀。此存活動物的 水攝取量是正常的（42·42 ml),而食物的攝取量卻是高的 (1 34.2 g)。此動物的增加量在此實驗的所有動物中增加 最多（2.85 g)。 θ 口服測試藥物不久後便死亡的動物10，其驗屍結果 顯示其肺臟是充血的，沒有外來的動物體反應顯示肺臟 的充血是由於測試樣品被吸入。動物9並未未出現大體 病理現象。動物1 〇出現有輕微的細胞中空現象（水腫退 化），然動物9卻出現中度的細胞中空現象。此二動物的 肝臟線細胞根據其外表被歸類為適當的。 第 6 族群（i6〇〇mg/kg) 本組實驗之動物在實驗中均未出現任何臨床的毒性 徵死。動物的驗屍實驗未觀察到大體病理現象，但卻在 動物Π的肝細胞組織切片中觀察到適度的退化改變。動 物12的肝細胞顯示適度的斑紋腫脹以及輕微的水腫改 變。食物和水的攝取量均正常，如同其在實驗階段所增 加的體重。 第 7 族1^(3028.5 mg/kg) 此劑量只測試一隻動物，此動物在觀察階段中並未 出現毒性徵兆，且大體檢查也未觀察到病理現象。在組 織切片檢查中，觀察到肝細胞有斑紋腫脹以及適度的水 腫退化現象。此動物在觀察階段中體重下降（-0.82 g)， 但食物以及水分攝取卻正常。 讨論· 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) Λ4坭格（210x 297^^ ) (請先閱讀背而之注意事項再硝寫本頁) *11 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 1253932 五、發明説明（83 ) ---—---——_ 雖‘然在每個劑量的族群中均採用少量的動物加以測 二隹但要做出任何結論卻是相當困難的。實驗過程中有 ，低劑置處理的老鼠在未出現任何徵此的情況下死 β -死亡原因可能與測試的樣品無直接的關係，可能 是因為在處理過程或者處理後受聰力所造成；而更言 μ里處理的動物族群並未死亡或者出現任何毒性徵此， 更加支持此一假設。 在動物8觀察到其食物的攝取量增力g，可能是由於 食物中過量的获菜，也是導致體重增加的原因。值得注 意的是此實驗中的所有動物均只施藥一次，因此測試的 食懲抑制劑不可能在14天的觀察期間對食物及水的攝取 或者體重產生顯著的影響。 由肝樣品的組織切片檢查結果，肝細胞的病變與劑 量是相關的，隨著動物接受的測試樣品劑量越高，肝L 胞的病變也越顯著。病變的發生並不是自然代謝反應所 ie成，其可爿b疋測试樣品所引起的，不過此病變只是退 化，且是可回復的；至於不可回復的肝細胞病變則未被 觀察到 (C)厭食口服劑量測試 此測試之目的乃在偵測根據本發明揭示之方法所製 備的植物萃取物之活性，以及最小的有效劑量，和任何 可能伴隨發生的副作用，例如在Irwin測試中所出現的 呼吸抑制現象（清參考前述）。 實驗步驟： 87 本紙伕尺度適用中國國家標準（CNS)A4規枯（2丨0X29?公犮） b (請先間讀背而之注意夺項再填寫本頁)
[253932 五 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 、發明説明（84 ) 動物是根據隨意表所列的資料配給食物給處理的群 組’每個處理群組是由3隻動物所組成，而控制組則由 6隻動物所組成。年輕母鼠所給予的測試樣品 〜，*體重，連續三天，使其可適應。動物可為J 耳裱和過錳酸鉀塗佈在皮膚上作為辨別的依據。動物是 個別養在標準《類動物用的聚㈣，水和粉末狀的喷 :類動物藥丸可隨性地由商業上獲得。每天需測量和計 异水和食物的攝取量。此外，為了找出最小的測試樣品 有，劑量’本實驗測試了 5個劑量，處理時是以懸浮有 測试樣品的馬鈐薯殿粉口腔灌食。 測試時所採用的物質是化合物⑴，一根據本發明之 植物材料所製備萃取物所獲得之白色顆粒粉末，然後依 ，劑量科取定量的測試樣品，並與準備好的馬鈐著㈣ 混合。每天在银食前，才將測試樣品與馬鈴驗粉混入7 此：，在取回每隻動物的劑量體積前，其： 以震㈣混合均勻。 刃勺 的樣品範圍有5個劑量，而控制組則僅給予載 祖物貝，而劑量的挑選則是根據Irwin測試的結果― 一組的測試劑量詳述如下： 母 第1組· 〇·〇〇 mg/kg (控制組） 第 2 組·· 6·25 mg/kg 第 3 組：12.5〇mg/kg 第 4 組·· 25.00mg/kg 第 5 組·· 37.5〇 mg/kg (請先閱讀背而之;i意亨項再靖¥本頁
*1T 線 本紙張尺度劍巾_ 乃規格⑺0X2:势) 經濟部中央標準局員工消f合作社印製 1253932 五、發明説明（85 ) 第 6 組：50.00 mg/kg 結果： 本貫驗的處理並不會影響到測試動物的徤康，且所 有經過測試樣品處理過的動物，在經過整個研究過程 後’其平均體種均顯著地下降，且五個劑量中之3組動 物的體重的確有降低。 在研九過程中，所有處理組動物之平均食物攝取均 降低，且在高劑量測試樣品處理的實驗紙中，動物對水 分的攝取也有增加的現象。 所有的實驗動物之呼吸速率均未顯著地被任何劑量 的測試樣品所影響。 各個劑量處理之所有動物的易碎肝臟的驗屍檢查中 均未觀察到有任何的顯著病變。 討論· 在適應階段所收集到的資料確定了所有的實驗動物 均是健康的，且每隻動物間的體重差異是差不多的。 體重增加的降低，甚至於體重的降低均強烈地顯示 疋食慾中柩受到抑制而造成食物攝取降低的結果。 食物攝取的降低以及體重增加的降低在最低劑量的 κ驗組中均可觀察到（6 25 mg/kg)，而體重有確實降低的 實驗組則是劑量12.5〇mg/kg之實驗組。 值得慎重注意的是，實驗組均顯示在攝食減少時， t分的攝取會增加（第2圖），其可能是因為測試樣品所 造成的厭食效應，或者是因為測試樣品刺激了大腦中的 本紙狀度適用中國國 \ 1?^ (請先阽讀背而之注意事項再填巧本頁 訂 線 經濟部中央標準局員工消費合作社印繁 1253932 ____ Η' 五、發明説明（Μ ) — 一~ 60 飲水中樞。 利用如前所述之方法對所處理的動物進行急性毒物 測試，檢測動物之腹膜時並未觀察到呼吸抑制的現象， 其可能是因為測試樣品會減少胃腸道的吸收，並進而降 低其生物致獲性；然而，測試樣品之口服量生物致獲性 部足以有效地降低其食慾。大多數的族群在處理後1小 時後會出現些微的呼吸速率降低的現象，其可歸咎於胃 部填入該些劑量體積後，動物接著由於被動性而產生的 反應。 在處理過的實驗組動物中所觀察到的易碎肝臟，其 可能是因為食物攝取的降低而導致能量代謝的改變，而 增加肝臟的脂肪代謝以及負荷增加。若此假設確實是造 成易碎肝臟的主因，則該些改變可經由一緩慢的回復時 間而達到的一穩定狀態所降低，或者停止服用該些測試 樣即可被改善。對於肝臟所可能造成的影響需要進一 步的探討。 由於此實驗主要是在篩選測試樣品，因此本實驗使 用小族群的測試動物，導致所得到的數據不易進行統計 分析，特別是個別動物間的整體差異性。然而，此數據 顯不測试的樣品具有食慾抑制的功用，甚至於在最低劑 里的測试樣品（6.25 mg/kg)，且所有的測試劑量均不會造 成顯著的臨床呼吸抑制徵兆。 例43 : 由天然環境中所收集到或者來自培養機構的//οοΑα (請先«1讀背而之注意事項再^¾本頁) 訂 經濟部中央標準局員工消費合作社印策 1253932 五、發明説明（87 ) ' — 植物先儲存在4。(：環境中，爭具 衣兄甲敢長不超過48小時，然德 自來水清洗，接著再切成厚产差1 ^ 欣与度差異土 lcm的薄片。然後， 將该些植物薄片以壓力Μα bai« % , JUU加丨的千斤頂輾壓至少〇乃 小時，並且在樣壓過裎中你隹 枉〒收木所付到的植物汁液，並收 集在-18°C環境，直到需要進一步加工。 、接著’於適當的條件下將該些汁液噴霧蒸乾，以制 被-游離狀的流動粉末，該些粉末在喷霧蒸乾後 氣含廖以少於5〇/〇為佳，需要的化可利甩真空供箱或者 流體床乾餘機進一步的乾燥之。 如上所述之汁液以及噴霧乾燥的材料，在經過老鼠 的生物分析後，其結果顯示此二材料均具有食慾抑2 性。 實驗： 取50kg的而m.z•植物，先以自來水清先 後，再切成後厚度lcm左右的切片，然後再以壓力3〇扑叶 的千斤頂輾壓所得到的植物切片，為時至少〇 5小奸 並且在輾壓過程中收集植物汁液。若使用的乐a 植物是野生的，則輾壓後可獲得2〇kg的植物汁 液·，若使用的Z/ooAa goWom·/植物是培養機構所得，則 輾壓後可獲得10kg的植物汁液。 、 接著，取500g的植物汁液，並且依照下列條件喷 霧蒸乾： ' 流 速 ：2.85 ml/min
進水口溫度 ：110°C 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（21 Ox 297公兑） Μ 0------1T------ (讀先閱讀背而之注意事項再填.>5本頁) 1253932 五、發明説明（88 ) — 出水口溫度 ·· 70〇C 反應室溫度 ：7 8。(3 經過上述噴霧蒸乾步驟處理所得 到的游離狀流動粉 末（22g)，其蒸氣含量約為6 9%。 喷務洛乾後的粉末並利用HPLC分析其活化的非 踢度濃度’其結果顯示喷霧蒸乾後的粉末活化濃度為13 g/kg。 jjPLC分析方法： 充堤液 :乙腈/水（7 : 3)，平等參數 管 柱 ••逆相式C-18 UV-吸收 • 225 nm 流 速 :lml/min 注射體積 :1〇μ1 方法： 將贺霧蒸乾所得之粉末溶解在水（0·5πι1)和乙腈 (〇.5ml)中，然後取1〇μ1之此混合溶液注射道HPLc内， 並且使用純的化合物（1)定出一標準曲線，以決定此粉末 之活化1農度。 經濟部中央標準局員工消费合作社印裝 #-I (請先閱讀背而之注意事項再填寫本頁) 例 44 ·· 化合物1在老鼠中所可能驅使的厭食效應之研究結 果將在下面描述。在下列的實驗中，所使用的測試樣品 式純的汁液（樣品1)，喷霧蒸乾的汁液（樣品2),以及具 活性的部位（樣品3)。樣品1和2分別是例43中所述的 汁液和噴霧詹乾的汁液，而樣品3則是溶劑萃取的化合 本纸張尺度適用中國國家標牟（CNS ) Λ4現袼（210Χ297公梦） 1253932 五、發明説明（89 ) 物1，其純度^95%。 (請先½讀背而之注意玄：項再栌艿本頁 樣品1(純汁液）口服投服後，導致劑量依附形式的 艮心抑制現象’且與單以載體處理的控制組比較下，劑 i 1 600 mg/kg以上具有統計上的顯著性。在測試樣品投 服後，開始紀錄厭食所造成的體重（或生長速率）降低，3 小時（劑量64〇0和1_0 mg/kg)和6小時（1_ mg/kg)後 可紀錄到統計顯著的飲水增加現象，而劑量32〇〇 和以上的實驗組則可分別在24小時和小時後紀錄到 統計顯著的飲水降低現象。 樣品2 (喷霧蒸乾的汁液）以76 mg/kg的劑量使實驗 動物口服後，與只給予載體處理的動物比較後，也可觀 察到統計顯著地食物攝取降低以及體重下降的現象，然 並未紀錄到統計顯著的飲水增加現象。 線< 樣品3 (活化的部位）以口服劑量5 mg/kg處理實驗 動物後，可產生顯著的食物攝取降低現象。此外，與只 以載體處理的動物比較後雖可發現有些微生長延遲的現 象’然而卻未觀察到統計顯著的體重影響。另外，也未 觀察到統計顯著的飲水增加現象。 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 參考的標準物，秘氟胺（7·5 mg/lcg)，與利用載體 處理的控制組比較下，可在6小時和24小時後產生統計 顯著的食慾抑制現象，然而並未觀察到飲水或者體重有 顯著的影響。 此外，也沒有因為處理而引起肝臟病變的數據被紀 錄到。 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規枋（210X 297公楚) I〆 1253932 五、 發明説明（90 r--__ ^^_ .. 測試檨品 確認性 樣品1 樣品2 樣品3 '—-- 棕色液體 粉末 白色粉末 純度 -20°C黑暗環境 室溫黑暗環境 4°C黑暗環境 純汁液 純噴霧乾燥汁液 ^95% 蒸餾水 蒸餾水 二甲基亞颯(DMSO) 本實驗使用55隻雄Wistar鼠。 體重；食物消耗量（食物漏斗重量）；以及水消耗量（瓶 重）都在每天的同一時間紀錄，以在此實‘的最終進广八 析。 、丁勺 第一天，老鼠口服（灌食）單一劑量的測試樣品，芝 中母一族群之劑量如下所表所示： “
---------? (請先間讀背而之注意古> 項再蛾·，寫本頁I 經濟部中央標隼局員工消费合作社印褽 族群 數量（η) 口服處理 劑 量 1 5 載體（蒸餾水） (mg/kg) 2 4 樣品1(純汁液） 800 3 5 樣品1(純汁液） 1600 4 5 樣品1 (純汁液） 3200 5 — 6 5 樣品1 (純汁液） 6400 5 樣品1 (純汁液） 10000 7 5 樣品2喷霧蒸乾汁液 38 8 5 樣品2喷霧蒸乾汁液 76 9 5 樣品3(活化部位） 2.5 10 5 樣品3(活化部位） 5.0 11 5 袼氟胺 7.5 12 5 載體（DMSO) 族群 1〜8 之劑量是固定的10 ml/kg ’而族群9〜 -、訂
線I -—-----—_____ 94 本錄尺料财_家丨〇 x 29— 12 1253932 五、發明説明（91 ) 一 ~~—- 之劑量則為1 ml/kg。 第-天給藥後之i、3、6小時後，開始紀錄食 水的消耗量。 在第八天測量後，以二氧化碳窒息法殺死實驗動 物^後剎取其肝臟，並且在進行組織觀測前先置放於 10%的緩衝祸馬林中。每個肝臟先塗佈一厚度約4〜5陶 的鏈烧烴臘，然後再以蘇木素以及伊紅色素染色，另外 再以切片機製作—厚度約12网的切片進行㈤⑽ O(ORO)的染色。 數據分析： 給予P-57藥物處理後的動物，其食物和水的消耗 量的測量以及其體重，在每一觀測時間均與利用相同載 體處理的控制組做比較，並以wilHams，測驗法分析其差 異性。 一 以帖氟胺處理過的動物則以Student’s測驗法與載 體處理過的控制組進行差異性分析。 結果： 所得到的結果整理於表中。 經濟部中央標隼局員工消费合作社印裝 樣品1(純汁液）以口服給藥後，在每天的食物消耗 星產生顯著的劑量依附形式，且食物消耗量的降低持續 時間以及長度也是劑量依附的。在給藥24小時後，藥品 1(純汁液）劑量1600 mg/kg或者以上劑量處理的族群與 利用載體處理之控制組比較後，可發現統計顯著的食物 消耗量降低，而以最高劑量（10000 mg/kg)的樣品ι(汁液） 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公势） 1253932 五、發明説明（92 ) —… 處理的族群則會產生統計顯著的食物消耗量降低的現 象，並維持5天之久。 樣品2(喷霧蒸乾的汁液）以及樣品3(活化部位）分別 以口服劑量76和5.0 mg/kg處理後可產生顯著且具統計 思義的食物消耗量降低的現象。 參考標準物，砀氟胺（7.5mg，p.〇·)與以載體處理的 控制組（族群12)比較後，可發現其在給藥6小時和24小 時後可產生統計顯著的食物消耗量降低現象。 樣品2(喷霧之乾的汁液）和樣品3(活化部位）對水的 消耗量並不會產生顯著的劑量依附關係。在給藥當天， 純的汁液可分別在3小時後（64〇〇和1〇〇〇〇 mg/kg)和6 小時後（10000 mg/kg)觀察到統計顯著的水消耗量增加現 象。然而，給藥兩天後，則觀察到給予樣品1之族群（劑 !為3200，6400，和l〇〇〇〇mg/kg)其水消耗量有統計顯 著減少的現象，這些水消耗量減少的現象並非劑量依附 形式，其僅在給藥後的第1天和第2天觀察到。因此， 其所造成顯著生物效應的原因仍然未知。 樣品1 (純汁液）處理的族群與僅以載體處理的族群 (族群1)比較下，可對體重產生劑量依附形式的統計顯著 影響。當給藥的劑量超過3200 mg/kg時，與樣品1(純 汁液）與僅以載體處理的族群（族群1)比較下可對體重降 低或者生長速率產生具有統計意義的降低效果。這些效 果在給藥後48小時到實驗結束時仍然具有統計顯著意 義。 本纸张尺度適用中國國家標皁（CNS ) Λ4規格（210X29*7公处） (請先間讀背而之注意ί¥項再填艿本頁) ,=口 線 經濟部中央標準局員工消f合作社印掣 t/ 五 1253932 發明説明（93 ) ~ ------------ 樣品2(噴霧乾燥汁液）以劑量％ 〇服哈 理動物後’與僅以載體處理的控制族群(族群1)比較；， 其對於動物生長的降低仍然具有統計顯著的意義 些效果在第3天(給藥後48小時)以及第5天仍 計顯著的意義。 "雖然樣品3(活化部位）與以載體處理的控制族群（族 群12)比較後，顯示其在最高劑量（5〇叫㈣處理時會出 顯生長延遲的現象，然而其效果並不具有統計上的顯著 意義。 帖氟胺（7.5 mg/kg)與僅以載體處理的控制族群（族 群12)比較後，顯示其在水消耗量或者體重上並未產生 具統計顯著意義的效果。 此外’也沒有因為處理而引起肝臟病變的數據被紀 錄到。 (請先閱讀背而之>·!意掌項再访寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 本紙张尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格 97 (210x297公勢） 1253932 1Γ 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 ----------- . - , 五、 發明説明（94 ) 表la 〇 ---- 服給藥後對老鼠食物消耗量的影響（每天給藥前的收據） 族群 口服處理 劑量 隔天族群的食物消耗量(g± sd) (mg/kg) -6- -5- -4- -3- -2- _ -5 -4 -3 -2 -1 01 載體(水） - 27.8 24.2 27.6 28.3 29.4 ±1·54 ±1·83 ±3.67 ±3·50 ±2.66 02 樣品1(汁液） 800 28.3 24.9 27.7 28.4 30.1 ----------- ±1.43 ±0·82 ±0.76 ±1·51 ±0·27 03 樣品1(汁液） 1600 29.0 25.0 27.4 28.8 29.5 一 ±1.39 ±2.16 ±1.96 ±0.61 ±1.55 04 樣品1(汁液） 3200 27.2 25.1 26.0 28.5 27.6 ±2·33 ±2.46 ±2·52 ±2·29 ±1.15 05 樣品1(汁液） 6400 28.7 25.3 27.3 29.2 30.3 ----- ±1.64 ±1.73 ±1·45 ±1.09 ±0.90 06 樣品1(汁液） 10000 28.5 23.7 26.0 27.0 28.7 ——- 士 2.38 ±2.73 ±2.31 ±3·50 ±2.26 07 樣品2(喷霧乾汁液) 38 28.1 23.9 24.5 27.6 28.5 ±1·24 ±1·79 ±2·30 ±1·61 ±1.87 08 樣品2(噴霧乾汁液) 76 28.7 26.5 27.1 28.7 28.9 ±0·91 ±1·55 ±1·01 ±1.99 ±1.37 09 樣品3(噴霧乾汁液) 2.5 28.8 26.4 29.0 29.4 29.5 士 1.49 ±3.12 ±1.99 ±1.76 ±2.81 10 樣品3(噴霧乾汁液) 5.0 28.3 25.8 28.1 28.0 28.5 一 ±2·1 ±1.86 ±2·65 ±2.65 ±3.03 11 W氟胺 7.5 29.1 25.3 27.0 30.8 29.7 ±0.66 ±4.03 ±1·53 ±0.54 ±2.84 12 載體(DMSO) - 27.9 26.7 28.7 28.1 30.5 ±1·8 ±2.11 ±1.99 ±4.06 ±2.54 sd:標準偏差 98 (請先間讀背而之注意事項再填巧本頁 本紙張尺度適用中國國家標率（CNS ) Λ4現格（21 〇χ 297公兑）
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A 1253932 五、發明説明（9 5 表lb 口服給藥後對老鼠食物消耗量的影響（每天給藥前的收據) 經濟部中央標準局員工消費合作社印1i 族群 口服處理 劑量 隔天族群的食物消耗量(g士 sd) (mg/kg) 1-2 2-3 4-5 5-6 6-7 7-8 01 載體(水） - 29.5 ±3.15 29.6 ±2.84 30.6 ±3.49 31.8 ±3.21 30.7 ±2.24 31.7 ±3.03 32.9 ±3.18 02 樣品1(汁液） 800 26· 1 ±0.98 29.3 ±1.49 30.7 ±1.15 30.9 ±0.60 33.3 ±1.69 32.7 ±0.80 40.1 ±13.40 03 樣品1(汁液） 1600 22.6** ±3.17 26.9 ±2.06 30.9 ±2.54 30.9 ±1·22_ 34.1 ±1.36 33.7 ±1.69 33.8 ±1.61 04 樣品1(汁液） 3200 20.1** ±1.39 19.0** ±1.88 22.8** ±1·77 28.0 ±3.14 31.4 ±2.82 32.3 ±2.91 33.0 ±3·01 05 樣品1(汁液） 6400 18.2** ±4.18 14.8** ±1.75 18.4** ±0.97 22.4** ±3.01 26.9 ±2.81 31.0 ±2·31 32.0 ±2.34 06 樣品1(汁液） 10000 15.1** ±2.98 12.4** ±2·61 16.0** ±3.15 19.7** ±4.31 22.6* ±5.70 30.1 士 4.79 32.6 ±5.90 07 樣品2(噴霧乾汁液) 38 25.6 ±2.85 27.3 ±0.95 30.3 ±2·06 31.0 ±2.13 31.8 ±1.63 31.1 ±1.94 31.8 ±2·45 08 樣品2(噴霧乾汁液) 76 24.2** ±3.25 25.2* ±3.24 29.9 ±1.85 30.2 ±2.28 31.2 ±2.26 32.3 ±1.44 33.1 ±0.61 09 樣品3(喷霧乾汁液) 2.5 26.8 ±3·33 29.1 ±3.43 31.7 ±3.08 34.0 ±2.95 34.4 ±4.32 33.1 ±4.11 34.8 ±3.71 10 樣品3(噴霧乾汁液) 5.0 22.1++ ±2.19 21.0++ ±3.07 27.6 ±5·26 30.5 ±3·33 33.0 ±3·16 32.4 ±3.25 33.0 ±3.84 II 移氟胺 7.5 22.4+ ±3·19 31.9 ±0.84 32.7 ±2.50 33.0 ±2·55 30.4 ±0.23 32.7 ±1·90 32.4 ±1.60 12 載體_so) - 29.9 ±3.36 30.6 ±4.43 30.1 ±4.17 32.4 ±5.26 31.8 ±3.08 32.8 ±3.98 33.3 ±3.76 Sd:標準偏差 族群2〜8與載體族群1比較：*p + <0.05，**Pt<0.01 族群9〜11與載體族群12比較：ρ<0·05，p<0.01 (請先閱讀背而之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標莩（CNS ) A4ML格（210X 297公处） 1253932 1Γ 五、發明説明（96 ) 表2a 口服給藥後對老鼠水份消耗量的影響（每天給藥前的收據) 族群 口服處理 劑量 (mg/kg) 隔天族群的水份消耗量(g士 sd) -6- -5 -5- -4 -4- -3 -3- -2 -2- -1 01 載體(水） - 40.9 ±4.61 34.8 ±4.15 37.6 ±5.63 33.5 ±7.42 32.2 ±6.32 02 樣品1(汁液） 800 38.6 ±1.96 37.1 ±9.74 36.4 ±4.81 28.1 ±1.83 30.4 ±4.75 03 樣品1(汁液） 1600 43.4 ±10.53 35.9 ±3.84 38.4 ±4.56 - 31.1 ±4.47 36.5 ±5.39 04 樣品1(汁液） 3200 40.1 ±5.58 33.3 ±3.01 37.3 ±4.46 31.3 ±3.48 31.7 ±3.18 05 樣品1(汁液） 6400 43.8 ±8.57 36.3 ±9.02 35.4 ±8.18 34.0 ±6.62 35.1 ±5·72 06 樣品1(汁液） 10000 37.4 ±5.34 32.7 ±3.35 33.2 ±4.86 29.0 ±5.11 32.2 ±3.27 07 樣品2(噴霧乾汁液) 38 40.0 ±4.36 35.8 ±4.92 34.7 ±3.20 30.2 ±1.88 31.4 ±2.98 08 樣品2(噴霧乾汁液) 76 38.6 ±1.98 37.0 ±1.96 48.8 ±21.5 31.6 ±4.56 39.0 ±17.72 09 樣品3(噴霧乾汁液) 2.5 42.0 ±6.70 37.0 ±5.05 34.1 ±3.16 28.0 ±2.58 31.6 ±3.12 10 樣品3(噴霧乾汁液) 5.0 40.9 ±4.48 34.2 ±3.00 32.7 ±1.26 28.2 ±1.65 33.1 ±4.82 11 W氟胺 7.5 47.0 ±53 35.5 ±7.49 34.7 ±3.73 30.9 ±2.12 31.6 ±2.80 12 載體(DMSO) - 43.3 士 5.67 34.5 ±4.97 35.2 ±4.34 28.3 ±4.64 31.4 ±6.44 scL標準偏差 (請先閱讀背而之注意事項再填巧本頁 經濟部中央標準局員工消资合作社印製 _1 00 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4現格（2丨OX 297公筇） 1253932 A 1Γ 老鼠水份消耗量的影響（每天給藥前的收據) 五 _I_；_^_ 經濟部中央標準局員工消费合作社印褽 族群 口服處理 劑量 (mg/kg) 隔天族群的水份消耗量(g± sd) 1-2 2-3 3-4 4-5 5-6 6-7 7-8 01 載體(水） - 34.9 ±5·45 39.6 ±6.06 38.0 ±7.59 37.2 ±6.18 37.7 ±5.54 35.3 ±2.86 36.5 ±5.85 02 樣品1(汁液） 800 30.9 ±3·77 34.4 ±8.12 38.2 ±13.71 35.9 ±13.51 39.5 ±11.20 28.8 ±1.22 31.8 ±5.58 03 樣品1(汁液） 1600 29.2 ±1.66 31.7 ±5.35 41.3 ±11.21 34.6 ±4.ια 48.1 ±12.27 37.8 ±7·28 36.9 ±9.28 04 樣品1(汁液） 3200 35.9 ±5.88 26.2* ±2.66 30.5 ±2.44 34.1 ±4.80 45.8 ±18.54 51.0 ±35.21 42.6 ±13.88 05 樣品1(汁液） 6400 33.4 ±12.04 27.4* ±8·13 32.6 ±10·67 35.4 ±10.78 45.2 ±8·72 36.2 ±6.72 35.9 ±9.58 06 樣品1(汁液） 10000 31.7 ±12.74 28.5* ±8.85 32.4 ±8·87 36.6 ±6.50 40.7 ±11.51 38.0 ±6.66 37.5 ±6.21 07 樣品2(噴霧乾汁液) 38 36.0 ±6.02 34.5 ±1.79 38.2 ±7·16 39.6 ±7·09 42.7 ±9.74 45.6 ±17.15 46.1 ±9.49 08 樣品2(喷霧乾汁液) 76 45.0 ±19.03 39.1* ±16.59 46.9 ±18.34 35.9 士 3.40 41.9 ±12·37 36.9 ±8.47 38.1 ±8.93 09 樣品3(喷霧乾汁液) 2.5 32.2 ±4.01 36.1 ±12·42 38.3 ±11.71 41.5 ±16.60 34.7 ±7·57 33.0 ±4.20 353 ±8.70 10 樣品3(噴霧乾汁液) 5.0 33.9 ±2.40 31.5 ±8.12 35.1 ±3.82 37.7 ±5.99 39.5 ±7.78 37.4 ±11.07 37.8 ±6·42 11 袼氟胺 7.5 34.1 ±3.60 37.2 ±1.48 36.7 ±3.92 33.8 ±2.89 33.7 ±5.43 32.1 ±1.93 33.6 ±2.50 12 載體_so) 一 40.7 ±9·10 33.8 ±9·37 32.9 ±7.07 35.2 ±11.49 33.8 ±9·82 323 ±7.44 32.0 ±7.22 (請先間讀背而之注意·Ϋ項再衫.寫本頁) 發明説明（97 表2b
Scl··標準偏差 族群2〜8與載體族群1比較：*p<〇.〇5 族群9〜11與載體族群12比較：（無顯著性） 101 尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4現枋（210X 297公兑） 1253932 五 發明説明（98 )表 3a 口服給藥後對老鼠體重的影響（每天給藥前的收據) 經濟部中央標率局員工消费合作社印5i 族群 口服處理 劑量 (mg/kg) 隔天族群的平均體重(g土sd) -5 -4 -3 -2 -1 01 載體(水） - 130.9 ±5.56 150.7 ±5.37 157.3 ±5·29 168.1 ±6.20 177.5 ±6.70 02 樣品1(汁液） 800 131.6 ±4.34 150.1 ±4.84 158.5 ±4.35 169.6 ±4.99 177.7 ±4.10 03 樣品1(汁液） 1600 130.1 ±4.3 148.6 ±6·59 156.7 ±6.38 - 167.5 ±6.04 176.6 ±6.37 04 樣品1(汁液） 3200 130.8 ±6·19 147.7 ±7.56 154.4 ±8.06 165.2 ±8·43 175.8 ±9.10 05 樣品1(汁液） 6400 132.6 ±7·01 151.3 ±7.23 158.4 ±8·50 169.0 ±8·79 178.1 ±7.75 06 樣品1(汁液） 10000 132.3 ±6.75 151.8 ±9·08 157.3 ±9.37 167.1 ±10.41 175.4 ±10.90 07 樣品2(噴霧乾汁液) 38 131.7 ±8.28 149.0 ±5·85 156.2 ±5.81 166.7 ±5.54 175.6 ±8·42 08 樣品2(喷霧乾汁液) 76 130.0 ±6.99 146.1 ±6.00 155.9 ±6·59 166.0 ±6·87 175.1 ±6·55 09 樣品3(噴霧乾汁液) 2.5 132.6 ±7.63 148.9 ±8.51 157.3 ±8·91 169.8 ±8.96 179.4 ±8·71 10 樣品3(噴霧乾汁液) 5.0 133.5 ±6·45 150.5 ±9.55 158.8 ±8.48 171.0 ±7·72 179.0 ±9·20 11 航胺 7.5 133.2 ±9·21 152.7 ±9·09 160.0 ±9.82 170.0 ±9.15 182.8 ±10.21 12 載體(DMSO) 129.1 ±3·17 147.3 ±4.37 155.0 ±6.29 166.0 ±5.91 174.8 ±8.26 sd:標準偏差 102 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS〉Λ4規袼（210X297公ft ) (請先閱請背而之注意事項再#寫本頁) 1253932 Λ· ΙΓ 五、發明説明（99 q£< 經濟部中央標準局員工消f合作社印製 (fi^K<nfe^^¥#)^^^«ll^^^^^^WD +1 3 Artui 絮 ¥ 〇〇 OO ON CN+丨 〇S §Ή od^ ^+1 η卜 a+丨 c4 — 5+丨 VO ^ m — ^+1 ^ +1 O rn 寸― ^+1 p ON ^d rn m r-^ ^+1 η艺 ^ +1 to 〇 m ON K r^ — ^+1 卜 oq oq u〇· “ cn ^+1 CN+I \/ On +| 益VO Is ?ί+ι OO 寸·々 O — 丨 寸· q r~H 〇 Γ^Ί »—' 04+丨 闷+| od寸· C^) ' ^+1 00 (Ν <N 〇6H (N 一 ^+1 寸· <N* ΓΠ r—« ^+1 卜ON 〇i〇* m — ^+1 CnI CN ο CN 1 °ΗΙ 95 〇S as If (N ^+1 q s §+i 兴ο (Ν ^―' 2:+1 ^+1 ΓΝ+Ι as 寸VO cKd (N *—· ^+1 coS ........M ^+1 (N m 一 ^+1 寸 m oo <N — ^+1 CO (N m 异2 ^+1 2寸· (N +丨 <n+| %n §5 t OS 2+1 -κ- 〇〇 -X- (Ν 22+1 寸· s 2。· N+丨 ν〇 宕+丨 Ό 〇s CK <N V—^ ^ 士丨 0<CN o — °Hl r- S K o 1—4 1—4 ^+1 m 卜O W寸· f",M^ < ^+1 寸 二卜· N +丨 〇： S+i P^. §HH |i On 00^. 鲜 τ 1 i If 22 & 2+i -X- οο Ο Τ—Η 22+1 vqg s?i ^+1 兴〇 (Ν ^n 〇6 〇6 2+丨 OO <N cKH 〇 — C"+i ρ (N 1—^ o — N+丨 _5 VO 卜VO O — ^+1 m Ο ^ S2 α+丨 1 $ v〇 00 2+1 |ss g+i •Η- 4f οο 〇Ν r—< t+l oqg —+| to P od ^d 2+( P (N 〇 〇 — ^+1 寸.s -Ή (N O 00 〇；〇 〇N vh —+丨 <N 寸· q οο — ^+1 〇〇« 寸· S 22+1 CN ^ r·"^ r~H On — —+1 PS —Ή o o On < —+1 VO <^Ί <N o o 〇S t—«< —+1 I pg p^£ 〇〇2 2¾ (Ν ΟΟ (Ν Η <Ν ΟΟ — s«j m十1 —+1 Tt o vd o 〇〇 i~* —+1 ?s 1 旦 Φ1— I o 〇〇 § r Ή o (N 〇 s ο ο f 1 < 〇〇 m VO uo o tri t Qlil 5v D έ > ^ 蝰 r—Η 妥 w f1嶒 ng 妥 w f < ri m 口 s 赛 士： m s Q 瑞 5 s s s s s g ο = rs ^if«i-#:ps (讀先讀背而之注意寧項再坟艿本頁)(±1、砌蘧碟)銻-13JLi(Nl歡炎鍥蘇破II〜6軚繁 lo.ovd:二 odvd'^qOJWI^^餒碟硃 8〜 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4坭格（2丨0X2W公处) 1253932 ΙΓ五、發明説明（100)
經濟部中央標準局員工消費合作社印β ¥驾Νί媒癍叫，< απ 荽ππ ί (命如)0昵笺傘?:丨涂契«1^ Ϊ (一1邮如)y Ψ脒，ί、丨隹契«Bffe 泌蚝拉喊ί-f W笨碟 σπ*ί喇变 (β 涨 so)fe ,ί (命如)^赞«蓥u 2部今)命哫I«ι^ΐι怒妒 夂一F 丨β念tia3类 2部4)祆哫 lwti«J.fe ί ^ ϊ ^ ^ ί (一1邮如)y Ψ 觫，f、丨 Y ^«J.fe ,T\HW (狳4)固銮4 s etfe鉍駟 鉍¥i鉍砩瓦荩¥>硪 Mfe (請先閱讀背而之注意事項再填巧本頁)
本紙乐尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公势） 1253932 Λ 1Γ五、發明説明（1()1 ) 0 ΓΝ1一軚焚 01竑焚 ΓΓΝί 6敉焚
9L ooe L^m 經濟部中央標準局員工消f合作社印製 nn^^^s^<H 皿鵷茗«名鵁忘2έί (οϋο^ε) 軚类|(I Τ赞)¥」 ί,ί (命如)命哫丨β^?1Q关笺uΐ (眾^)%哫—女 ff^Jffe,ί (命如)@銮1S故念 囬為 ,ϊ (命^) y-δ-脒，ί、丨案^^J.fe (W 涨 oso)t (钟先>τ讀背而之;χ意事項再记、寫本頁)
本紙張尺度適用中國國家標準（CN!S ) Λ4現枋（2 10X297公郑 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 1253932 Λ 一 ΙΓ 五、發明説明（1C)2) 例45 : 在此例中’使用如例44所述之測試樣品進一步進 行生物分析。在此研究中，限制饒食動物的食物，例如 動物只在每天中午12:〇〇到下午3:〇〇餵食。此生物分析 的方法與前述的生物分析法完全不同，隨意供應老鼠食 物。先經過7天（-7〜_1)的適應後，接著再由第〇天〜第 6天的早上九點以口服灌食方式給藥，第7天〜第13天 則是回復階段。給藥的族群如後面表一所述，其中要注 意的是標號09的族群是實際控制組；而苐5族群是與第 4族群獲得相同食物的控制組，其目的乃在估計限制飲 食對動物生活的影響。 結果 此研究的結果顯示適應的時間太短。老鼠餵食主要 在仪晚以及突然改變於白天3小時的餵食會導致白天的 低攝R里。大多數族群在適應階段結束而開始以測試樣 2給藥時，其每天進食量仍然增加，其結果顯示測試樣 口口亚未在給藥期間顯著的影響老鼠的食物攝取。 此〜外，在給藥處理的老鼠肝臟組織病理檢測結果也 未顯示有任何顯著的病變。 旦食物消耗量必須在適應階段以及研究階段進行時每 1 I則其中κ物的供給是在每天中午12:〇〇至下午 ^•00供應3小時，其餘的時間動物則是被斷食的。第$ 群之動物在第1天被給予一已知量的食物，其等於第 106 210X 297^^；) IT^ {靖先閱讀背而之注意束.項再填Η本頁) 五 1253932 發明説明（丨03) -------~— 4族群動物在第〇天之平均旦 习艮物 耗ΐ。苐5族群的护
制餵食模式（由偵測第4 #被ΛΑ Τ X 』弟4私辟的平均食物消耗 在第1〜7天進行。 于’疋 水是提供於一標準容哭向 R . e 奋卩。内，且水疋取自商業產品 (Magalies Water Board Tan \\τ ^ ^ a
Up Water，適合人體飲用），且在 食物消耗量量測完畢後，於各 ^ 於母天的同一時間量測水的消 耗量。 適應化 一 本實驗之動物在開始進行研究前，先經過7天的是 硬化處理，期間的食物和水分的消耗量已如前所述之方 式里取，且在此期間也每天秤量動物的體重。 標準設計和裎序 表 — (請先閱讀背而之注意事項再填.寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 研究設計 族群 測試 數量 劑量 測試樣品 01 6 001-006 1 〇〇 mg/kg 冷東汁液 02 6 007-012 400 mg/kg 冷凍汁液 03 6 013-018 1600 mg/ka 冷凍汁液 04 6 019-024 3200 mg/ks 冷凍汁液 05 6 025-030 控制組 Elga Option 4 純水 06 6 031-036 ^ 2.2 mg/kg 喷霧乾燥汁液 07 6 037-042 8.8 mg/kg 噴霧乾燥汁液 08 6 043-048 35 mg/kg 噴霧乾燥汁液 09 6 049-054 控制組 Elga Option 4 純水 定期給藥 107 L度適用中國國家標窣（CNS ) Λ4峴枋（21〇κ297公处 1253932 ---------- Η 五、發明説明（） ' '
104 J 測試的樣品在7天φ 田 日/ a Μ、， 中稭由内月針施加到動物體内， 且在給樂W 18小時使動物斷食。 處理的時^ 動物連續7天給筚（箓 樂（弟〇天〜弟6天），且在最後一 二人給樂處理24小時（第7天）後’除第5族群的動物外， 其㈣f群取3隻動物宰殺之，且剩餘的動物則在最後 人、口藥7天後（第13天）宰殺之。帛5族群的動物在最 後一次的控制儀食24小時（第8天）後，宰们隻動物， 並在最後依次控制饒食7天候（第13天）宰殺另外3隻動 物。 體重 研九/月間以及適應期間，於每天的同一時間量 物的體重。 安樂死 經濟部中央標準局員工消资合作社印製 最後一次給藥處理24小時（第7天）後，除第5族群 的動物外，其他的族群取3隻動物以二氧化碳安樂死法 宰殺之」且剩餘的動物則在最後一次給藥7天後（第U 天）’同樣以二氧化碳安樂死法宰殺之。第5族群的動物 在最後一次的控制餵食24小時（第8天）後，使用二氧化 石反安樂死法宰殺3隻動物，並在最後依次控制餵食7天 候（第1 3天），使用二氧化碳安樂死法宰殺g外3隻動物。 巨觀病理學 安樂死處理的動物，在研究結束後，必須進行完整 的驗屍檢查。 本紙仏尺度i4用中關家標GcNS ) Λ4規格（2ΗΪ—^ 公筇） 1253932 Λ ΙΓ 五、發明説明（105) 組織病理學 每隻動物的肝臟均必須經過組織病理學的檢查。 表D.1 平均體重/族群/周 族群 口服處理 劑量 平均體重(g)及標準偏差 (mg/kg) Day-7 Day-6 Day-5 Day-4 Day-3 Day-2 Day-1 01 樣品1(汁液） 100 203.38 ±95.39 197.13 ±90.63 192.75 ±89.49 188.62 ±86.75 184.95 ±84.80 182.48 ±83.47 182.25 ±82.57 02 樣品1(汁液） 400 192.53 ±65.60 183.92 ±61.20 187.25 ±59.37 173.17 ±58.10 170.82 ±57·42 168.25 ±58.40 169.37 ±59.25 03 樣品1(汁液） 1 600 149.25 ±54.80 142.87 ±51.89 136.85 ±52.17 132.37 ±49.64 131.50 ±49.50 129.67 ±48.89 131.12 ±48.22 04 樣品1(汁液） 3 200 224.15 ±80.70 214.45 ±77.25 207.10 ±76.38 201.82 ±75.42 198.25 ±74.82 194.83 ±75.34 196.77 ±74.56 05 純水(控制組） - 214.55 ±74.90 204.85 ±72.41 198.57 ±71.79 193.48 ±68.49 192.40 ±67.48 190.87 ±67.39 190.15 ±65.24 06 樣品2(噴霧乾/汁液) 2.2 208.65 ±65.74 199.37 ±62.49 193.18 ±61.18 188.25 ±60.89 186.22 ±59.98 184.55 ±58.86 185.97 ±58.76 07 樣品2(噴霧乾汁液) 8.8 256.95 ±77.55 246.02 ±73.67 237.47 ±73.53 232.62 ±71.73 229.78 ±71.76 228.07 ±69.88 228.45 ±68.81 08 樣品2(噴霧乾汁液) 35 194.37 ±43.74 185.83 ±42.70 177.53 ±41.10 172.05 ±40.13 170.10 ±39.49 167.25 ±37.61 168.00 ±38.83 09 純水(控制組） - 171.52 ±69.81 162.67 ±62.68 154.95 ±61.83 151.38 ±59.48 149.63 ±57.66 148.30 ±57·12 149.07 ±56.01 經濟部中央標隼局員工消費合作社印裝 (誚先閱讀背而之;i意事項再填；本頁) 109 本紙張尺度適/Π中國國家標準（CNS ) Λ4現格（210X 297公匁） 1253932 Λ 一 1Γ 五、發明説明（1〇6 ) 表D.2 平均體重/族群/周（續） 族群 口服處理 劑量 平均體重(g)及標準偏差 (mg/kg) Day 0 Day 1 Day 2 Day 3 Day 4 Day 5 Day 6 01 樣品1(汁液） 100 183.87 ±83.33 175.83 ±81.82 175.72 ±79.05 175.48 ±77.54 175.53 ±76.20 177.95 ±73.99 178.43 ±72.68 02 樣品1(汁液） 400 173.45 ±60.73 164.58 ±58.52 164.75 ±58.37 166.22 ±57.69 166.55 ±57.79 169.93 ±57.47 171.77 ±57.29 03 樣品1(汁液） 1 600 134.38 ±46.01 129.20 ±44.74 127.53 ±43.20 127.20 ±41.36 126.70 ±39.19 128.00 ±39.22 128.07 ±38.66 04 樣品1(汁液） 3 200 199.60 ±75.16 196.38 士 73.96 192.20 ±71.20 189.05 ±69.11 186.57 ±66.29 186.05 ±67.45 185.68 ±65.73 05 純水(控制組） - 194.27 ±67.46 187.93 ±65.48 181.97 ±65.01 177.53 ±64.73 174.73 ±61.08 172.85 ±58.63 171.45 ±56.79 06 樣品2(噴霧乾汁液) 2.2 189.07 ±60.15 181.52 ±58.99 181.48 ±57.79 184.42 ±55.64 185.75 ±55.29 189.35 ±54.66 189.68 ±53.70 07 樣品2(噴霧乾汁液) 8.8 230.28 ±69.32 221.55 ±68.02 220.17 ±66.63 221.80 ±63.88 222.82 ±63.56 224.82 ±62.38 224.90 ±62.05 08 樣品2(噴霧乾汁液) 35 169.10 ±38.40 164.42 ±38.03 162.50 ±36.81 162.75 ±36.36 162.52 ±36.93 164.30 ±37.69 164.22 ±37.18 09 純水(控制組） - 151.02 ±55.45 146.55 ±53.77 148.10 ±52.67 149.70 ±52.05 152.58 ±50.37 155.82 ±49.91 157.85 ±49.70 (請先閱讀背而之注意事項再填.Η本頁) 線 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 - _1 1 π 木紙张尺度適用中國國家標隼（CNS ) Λ4現格（210Χ 297公兑）
1253932 Λ 1Γ 五、發明説明（丨〇7) 表D.3 平均體重/族群/周（續） 族群 口服處理 劑量 平均體重(g)及標準偏差 (mg/kg) Day 7 Day 8 Day 9 Day 10 Day 11 Day 12 Day 13 01 樣品1(汁液） (GHA 1 35A) 100 185.38 ±72.64 234.73 ±62.44 236.73 ±62.39 234.07 ±62,09 236.33 ±62.31 239.07 ±60.24 238.43 ±59.85 02 樣品1(汁液） (GHA 1 35A) 400 178.83 ±58.24 225.63 ±13.05 277.13 ±14.18 227.10 ±14.03 229.43 ±16.97 234.93 ±18.35 236.20 ±15.97 03 樣品1(汁液） (GHA 1 35A) 1 600 132.22 ±37.08 133.80 ±55.17 135.23 ±455.74 134.53 ±54.96 138.30 ±53.03 139.30 ±51.10 142.80 ±49.51 04 樣品1(汁液） (GHA9 35A) 3 200 188.57 ±66.14 199.63 ±61.07 198.90 ±57.48 198.70 ±54.55 194.73 ±52.78 194.93 ±50.78 197.93 ±51.57 05 純水(控制組） - 173.97 ± 54.29 172.98 ±52.06 157.80 ±58.62 158.87 ±57.76 160.80 ±57.67 163.40 ±56.27 167.80 ±58.49 06 樣品2(噴霧乾汁液) (GHA 1 59) 2.2 196.00 ±53.09 190.27 ±27.78 190.27 ±29.54 192.60 ±29.09 194.73 ±29.68 196.97 ±29.04 198.60 ±30.18 07 樣品2(噴霧乾汁液) (GHA 1 59) 8.8 231.30 ±61.91 177.27 ±24.48 178.17 ±23.79 180.67 ±25.04 182.03 ±25.31 185.10 ±24.60 189.73 ±2158 08 樣品2(噴霧乾汁液) (GHA 1 59) 35 167.48 ±36.75 164.90 ±22.54 166.63 ±23.08 168.43 ±22.66 171.67 ±24.42 174.90 ±25·70 178.57 ±23.58 09 純水(控制組） 165.50 ±49.27 193.73 ±22.37 196.87 ±21.86 198.07 ±21.02 199.83 ±20·21 204.93 |土 18.65 207.13 ±18·22 (請先閱讀背而之注意事項再垆寫本頁 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4煶格（210X 297公筇）
JL 1253932 五、發明説明（108) 表1 :雄鼠之肝臟組織學檢查 族群1 : 100 mg/kg的樣品1 族群2 : 400 mg/kg的樣品1 動物編號 肝損害 動物編號 肝損害 第7天 01 NPL 07 FHS1 + 02 NPL 08 NPLC1 + 03 NPLC1 + 09 NPL 第13天 04 NPL MLC 第13天 10 DHS1 + 05 FHS1 + 11 NPL 06 NPL 12 - DHS1 +
族群3 : 1600 mg/kg的樣品1 族群4:32〇〇_的樣品i 動物編號 肝損害 動物編號 肝損害 第7天 13 NPL 19 NPL 14 NPL 20 NPL 15 NPL 21 NPL 第13天 16 NPL 第13天 22 DHS1 + 17 DHS1 + 23 FHS1 + 1 18 NPL 24 NPL (請先間讀背而之注意事項再填巧本頁) 族群5 :控制組：ELGA 0PTI0N4純水：限制食物攝取
族群5 :控制組：ELGA ΟΡΊΓΙΟΝ4純水：限制 食物攝取~ 動物編號 肝損害 第7天 2$ NPL MLC 26 NPL 27 NPL 第13天 28 DHS1 + 29 DHSK 30 NPL 代號： 經濟部中央標隼局負工消费合作社印製 c =充血的 DHS =滲透水腫細胞腫脹 F H S =局部水腫細月包月重月長 NPL=無實質的傷害 MLC=最小淋巴細胞圍管現象 1 + =輕微的 2 + =中度的 3 + =嚴重的 1 12__ 本紙汝尺度適用中國國家標卑（（、NS ) Λ4規格（21〇X297公;)
A 1253932 Η 五、發明説明（1〇9) 表2 :雄鼠之肝臟組織學檢查 樣品2 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 r 1 一丨▲_一---» .-«T-iir II 族群 6 : 22 mg/kg 的; 表品2 族群7 : 8.8 mg/kg的樣品2 動物編號 肝損害 動物編號 肝損害 第7天 31 NPL 37 NPL 32 NPL MLC 38 NPL 33 FHS1 + 39 NPL C1+ 第13天 34 NPL 第13天 40 DHS1 + 35 DHS1 + 41 NPL 36 NPL 42 - MLC DHS1 + 族群 8 : 35 mg/kg 的; 篆品2 動物編號 肝損害 第7天 43 NPL 44 NPL 45 NPL 第13天 46 NPL 47 NPL C1+ 48 MLC FHS1+ 1 族群5 :控制組：ELGA OPTION4 純水 代號： 族群9 :控制組：ELGA OPTION4純水：限帝j 食物攝取~ 1 動物編號 肝損害 C =充血的 DHS:滲透水腫細胞腫脹 FHS =局部水腫細胞肢服 NPL=無實質的傷害 M LC =最小淋巴細胞圍管現象 =輕微的 2 + =中度的 第7天 49 NPL 50 NPL 51 FHS1 + 第13天 52 DHS1 + 53 NPL 54 FHS1 + 3 + =嚴重的 (請先閱讀背而之注意京·項再填^本頁) _111 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4現格（2丨0X2W公;) 1253932
1 1(V 五、發明説明 由口服上述冷凍汁液以及喷霧乾燥汁液的老鼠驗屍檢查 中，亚未紀錄到特別的肝部位損壞現象。然而，在控制 組以及實驗組老鼠的細胞中均觀察到有水腫的現象，其 可此疋因為正常代謝細胞的腫脹以及缺氧性的改變所造 成。周邊淋巴細胞的最小細胞團（foci)可在一些動物中觀 察到，其最可能是一種輸入的觀察。 雖然本發明在前面所揭示的化合物以及組合物之主 要特性是食慾抑制，然應能意的是在此所謂的，，食慾抑 制”適用來表示其可用以限制食慾及/或增加厭食感，且 可用以降低整體的卡洛里的攝取而同時降低肥胖。此 外本發明揭不-種處理的方法，其可用以妨礙或者限 制人體或非人類動物的肥胖，此方法包括對人體或非人 類動物施予-厭食處理，其包含有由化合物2所組成的 U礙或肥胖降低有效量之配方。另外，本發明之另 一較佳實施例所使用的乃是-種含有化合物ί之組合物 或萃取物配方。 經濟部中央標準局員工消f合作社印製 在―此所明@冑物”名詞其所代表的乃是種類相同 知動物’但並非用以限定，例如家裡的寵物或者剔養的 物’非用以限疋的動物包括牛、綿羊、紹、豬、絡轮、 馬、家禽、魚、兔子、山羊、狗和猫。 作為-種減肥藥劑或者用以處理或防止人 樂劑’含化合物2之配方，+ 土 ^ 或者含化合物1之較佳配方， 請專利範圍第9項和第25〜3丨項中所述之任-•’且°物’其施予人體之劑量約A 0.01 mg/kg/天〜丨〇 \n
1253932
五、發明說明（1X
mg/kg/天，丘其較佳劑量約為0 05 mg/kg/天〜ο·5啤 天。當使用根擄本發明前述之噴霧乾燥萃取粉末時，給藥之 劑量約為G.l mg/kg/天〜2Gmg/kg/天，且特佳的劑量約為 〇· 5 mg/kg/天〜5 mg/kg/天。 雖然本發明已以較佳實施例揭露如上，然其並非用以限 定本發明，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範 圍内，所作之各種更動與潤飾，均落在本發明的專利範圍& 内。此外，本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界 定者為準。 符號說明： 1給料線路 46、44、50 管柱 3 0溶劑 9萃取步驟 24乾燥階段 38色層分析管柱 3攪拌機 2溶劑揪給料線路 12萃取階段 7揮發步驟 17乾燥步驟 18分離階段 路 線 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁}
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Claims (1)

125 3 @2n 37164號中文申請專利範圍修綠 修正日期：95.2.8 C8 D8 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 六、申請專利範圍 1. 一種製備選自亞羅漢（TWdoaa/o/?)屬及麗杯角 屬之一植物之萃取物的製程，上述亞羅漢 (TrichocauJon)M ^ % Trichocaulon piliferum it >5. Trichocaulonofficinale^，SLJsL^%^^iUloodia)Mi^ 物為 Hoodia currorii 後 \ Hoodia gordonii 後反 Hoodia 種，該萃取物包括有一食慾抑制劑有效量之類固 醇類糖苷食慾抑制劑，其具有下式： 〇
該製程包括以下步驟： 以溶劑處理收集到的植物材料，該溶劑為一種或多種選 自二氣甲烧、水、曱醇、已烧、乙酸乙醋或其混合物； 萃取含有食慾抑制活性的部份， 將萃取溶液由植物材料分離出來， 去除萃取溶液的溶劑，以及 回收該萃取物。 2. —種製備選自亞羅漢（TWd(9C⑽/(9/7)屬及麗杯角 116 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------t 0 n ϋ ϋ n 1 n n 一-口4 ·ϋ _ n ϋ ϋ 0— I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1253932 A8 B8 C8 D8 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 六、申請專利範圍 屬之一植物之萃取物的製程，上述亞羅漢 (TrichocauJon)M ϋ ^ Trichocaulon piliferum if A Trichocaulonofficinale^，3^jLHP^PiUloodia)M^k 物為 Hoodia currorii M ^ Hoodia gordonii Hoodia 種，該萃取物包括有一食慾抑制劑有效量之類固 醇類糖苷食慾抑制劑，其具有下式： 〇
OMe OMe 該製程包括以下步驟·· 壓榨植物材料以由固態植物材料分離出汁液，以及 由該固悲植物材料回收該汁液以形成該卒取物。 3. 如申請專利範圍第1或2項所述之製程，其包括進一 步以溶劑萃取以濃縮該萃取物中的活性劑。 4. 如申請專利範圍第3項所述之製程，其中在進一步萃 取步驟中之溶劑為一種或多種選自二氯甲烷、水、曱醇、己 烷、乙酸乙酯或其混合物。 5. 如申請專利範圍第1或2項所述之製程，其中包括以 117 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------#------- 丨訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1253932 C8 D8 六、申請專利範圍 色層管柱分析分離法濃縮萃取物中之活性劑的步驟。 6. 如申請專利範圍第5項所述之製程，其中該色層管柱 分析分離法使用一種或多種選自氯仿、甲醇、乙酸乙酯、己 烧、或其混合物之溶劑作為沖堤液。 7. 如申請專利範圍第5項所述之製程，其中包括利用色 層分析管柱完成分離，分管收集來自色層分析管柱之沖堤 液，估量各管沖堤液以偵測其食慾抑制活性，以及挑選至少 一管含有食慾抑制劑之沖堤液。 8. 如申請專利範圍第1或2項所述之製程，其中該萃取 物是加工成自由流動的粉末。 9. 一種用於預防、治療以及對抗肥胖之藥學組合物，其 匕括選 U 生琢溪 QTrichocaulon)亀之 Trichocaulon piliferum^SLTrichocaulonofficinale^、SL%p^^i {Hoodia)% Hoodia currorii " Hoodia gordonii 价/z/gar/種之一植物之萃取物，該萃取物包括有一 食慾抑制劑有效量之類固醇類糖苷食慾抑制劑，其具有下 式： — III — — — — — — — — - I I I I I I I a — — — — — — — — (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印？衣 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1253932 A8 B8 C8 D8 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 、申請專利範圍
，且係由申請專利範圍第1項或第2項所述之製程所獲得。 10. 如申請專利範圍第9項所述之藥學組合物，係造成 或幫助投與該藥學組合物之人類或動物的體重減輕。 11. 如申請專利範圍第9項所述之藥學組合物，其係以 單位劑量形式製備。 12· —種選自亞羅漢屬及麗杯角 (价M/a)屬之一植物之萃取物的使用，上述亞羅漢 iTrichocaulon)亀復物為 Trichocaulon pi 1 iferum 綠反 o/77c//?a/(?種，及上述麗杯角（及液//a)屬植 物為 Hoodia currorii 後、Hoodia gordonii 後 Sl Hoodia 種，其係用於製備一種抑制人類或動物食慾之組 合物，其中該萃取物包括有一食慾抑制劑有效量之類固醇類 糖脊食慾抑制劑，其具有下式： 119 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------費--------tr------!.線· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1253932 A8 B8 C8 D8 、申請專利範圍 〇
^ 13·如申請專利範圍第12項所述之使用，其中該組合物 係用於造成或幫助食用該組合物的人類或動物獲得體重減 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 輕。 14.如申請專利範圍第12項所述之使用，其中該組合物 係用於治療、預防或對抗肥胖。 15·如申請專利範圍第12項所述之使用，其中該組合物 係一食品或飲品。 16·如申請專利範圍第13項所述之使用，其中該組合物 係一食品或飲品。 17·如申請專利範圍第14項所述之使用，其中該組合物 係一食品或飲品。 120 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
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Families Citing this family (70)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998046243A2 (en) * 1997-04-15 1998-10-22 Csir Pharmaceutical compositions having appetite suppressant activity
BR0012984A (pt) * 1999-08-04 2002-07-16 Millennium Pharm Inc Método para tratar um estado associado com o mc4-r em um mamìfero, composto de ligação ao mc4-r, e, composição farmacêutica
GB2355657B (en) * 1999-10-27 2004-07-28 Phytopharm Plc Inhibitors Of Gastric Acid Secretion
GB2363985B (en) * 2000-06-30 2004-09-29 Phytopharm Plc Extracts,compounds & pharmaceutical compositions having anti-diabetic activity and their use
KR20040015670A (ko) * 2001-01-24 2004-02-19 트리콘 호울딩즈 리미티드 탄탈륨 필름 침착방법
US7008648B2 (en) 2001-11-16 2006-03-07 Novartis Nutrition Ag Plant derived or derivable material with appetite suppressing activity
US20040265398A1 (en) * 2002-04-25 2004-12-30 Fleischner Albert M. Herbal composition for weight control
TW200505461A (en) * 2003-02-14 2005-02-16 Phytopharm Plc Moldulation of ATP production or content in the hypothalamus
US7060308B2 (en) * 2003-06-04 2006-06-13 Ramaswamy Rajendran Caralluma extract products and processes for making the same
US7976880B2 (en) * 2003-06-04 2011-07-12 Ramaswamy Rajendran Pregnane glycoside compositions and Caralluma extract products and uses thereof
US7265101B2 (en) * 2004-04-07 2007-09-04 Rutgers, The State University Of New Jersey Appetite-suppressing compositions and methods
GB0411703D0 (en) * 2004-05-25 2004-06-30 Phytopharm Plc Selective separation or extraction of steroidal glycosides
US20050276839A1 (en) * 2004-06-10 2005-12-15 Rifkin Calman H Appetite satiation and hydration beverage
US20050276869A1 (en) * 2004-06-14 2005-12-15 Century Systems Appetite-suppressing, lipase-inhibiting herbal composition
US7500679B2 (en) * 2004-10-08 2009-03-10 Wade James T Board for supporting front of snow vehicle
US20060083795A1 (en) * 2004-10-19 2006-04-20 Lima Shatkina Meal replacement products having appetite suppressing qualities
GB0425172D0 (en) * 2004-11-15 2004-12-15 Phyto Res Ltd Plant cells and uses thereof
CA2596311A1 (en) * 2005-01-20 2006-07-27 Stephen Holt Herbal compositions containing hoodia
AU2006279602B2 (en) * 2005-08-17 2009-06-04 Elc Management Llc Delivery system for appetite suppressant
US20070082085A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-12 Catani Steven J Compositions and methods for reducing food intake and controlling weight
US20070082029A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-12 Aimutis William R Fiber satiety compositions
US20070082108A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-12 Aimutis William R Jr Methods for reducing calorie intake
US20070082115A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-12 Aimutis William Ronald Jr Methods for inducing satiety, reducing food intake and reducing weight
US20070082025A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-12 Catani Steven J Methods for achieving and maintaining weight loss
US20070082028A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-12 Aimutis William R Jr Compositions and methods for inducing satiety and reducing caloric intake
US20070082114A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-12 Catani Steven J Methods for reducing weight
US20070082026A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-12 Aimutis William R Jr Compositions and methods for reducing food intake and controlling weight
US20070082084A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-12 Catani Steven J Methods for weight management
US20070082030A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-12 Aimutis William R Fiber satiety compositions
US20070104805A1 (en) * 2005-11-01 2007-05-10 Udell Ronald G Compositions of Hoodia Gordonii and Pinolenic Acid Derivatives
US8945652B2 (en) * 2005-11-23 2015-02-03 The Coca-Cola Company High-potency sweetener for weight management and compositions sweetened therewith
US20070207227A1 (en) * 2006-02-23 2007-09-06 Conopco, Inc., D/B/A Unilever, A Corporation Of New York Appetite suppressant compositions
US20070196436A1 (en) * 2006-02-23 2007-08-23 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Process for preparing an edible composition comprising steroidal glycosides
RU2009100892A (ru) * 2006-06-13 2010-07-20 Юнилевер Н.В. (Nl) Порционные композиции для подавления аппетита со стероидными гликозидами
JP5281234B2 (ja) * 2006-06-27 2013-09-04 ポーラ化成工業株式会社 毛様体過緊張による疲れ目の改善・予防のための経口投与組成物
MX2009001571A (es) 2006-08-17 2009-02-19 Unilever Nv Proceso para la produccion de la planta de hoodia que contiene glucosidos esteroides.
CA2661593A1 (en) * 2006-08-24 2008-02-28 Unilever Plc Process for preparing a composition comprising steroidal glycosides
US20080085354A1 (en) * 2006-10-06 2008-04-10 Teresa Marie Paeschke Controlled hydration of hydrocolloids
US20080138447A1 (en) * 2006-12-06 2008-06-12 Erin John Riggins Method for administering appetite suppressant and composition thereof
WO2008074656A1 (en) * 2006-12-21 2008-06-26 Unilever N.V. Process for harvesting plants of the apocynaceae family
US20080188447A1 (en) * 2007-02-02 2008-08-07 Svyatoslav Komarnytsky Glucocorticoid-lowering composition
US8580236B2 (en) * 2007-03-19 2013-11-12 Richard P. De Maria Hair sustaining formulation
EP2052727A3 (en) * 2007-10-02 2010-06-02 Unilever N.V. Hoodia extract oil compositions comprising unsaturated monoacylglycerides
US20100316736A1 (en) * 2007-10-24 2010-12-16 Desert Labs Agriculture Cooperative Association Ltd. Appetite suppressant
US20090110774A1 (en) * 2007-10-26 2009-04-30 The Hershey Company High antioxidant levels in cocoa-based beverages
ATE502620T1 (de) 2007-11-17 2011-04-15 Cognis Ip Man Gmbh Verfahren zur herstellung von wirkstoffkonzentraten
EP2080517A1 (en) * 2008-01-18 2009-07-22 Unilever N.V. Process for obtaining dried plant material
US20090324757A1 (en) * 2008-03-31 2009-12-31 Rutgers, The State University Of New Jersey Compositions and Methods for Modulating Visceral Sensation and/or Gastrointestinal Reflex Activity
JP5276885B2 (ja) * 2008-04-11 2013-08-28 株式会社耐熱性酵素研究所 キチン又はキトサンを含む分解性複合材料
US20090263510A1 (en) 2008-04-21 2009-10-22 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Process of making Hoodia plant extract with improved flavor
US7923435B2 (en) * 2008-04-21 2011-04-12 Phytopharm Plc Hoodia plant extract with improved flavor
AU2009325842A1 (en) 2008-12-08 2011-07-14 Bio-Mass Ltd. Method of treatment of diseases using Hoodia extracts
US20110003021A1 (en) 2009-07-01 2011-01-06 Jason Christian Grovenor Halford Composition and method for reducing food intake
EP2329836A1 (en) 2009-12-03 2011-06-08 I.R.B. Istituto Di Ricerche Biotecnologiche S.r.l. Extracts obtained from hoodia gordonii cells lines, their preparation and use
CA2827050A1 (en) * 2010-02-18 2011-08-25 The Hershey Company Cocoa-based exercise recovery beverages
WO2012022880A2 (fr) 2010-07-29 2012-02-23 Universite De Strasbourg Procede de synthese de steroïdes
CN102462690B (zh) * 2010-11-11 2013-04-17 中国科学院上海药物研究所 3，8，12，14，17，20位氧取***甾烯糖苷类化合物在制备抑制食欲的药物中的用途
CA2923351C (en) 2010-12-20 2019-01-22 Hill's Pet Nutrition, Inc. Pet food compositions for inducing a satiety response
HUE051738T2 (hu) 2011-01-07 2021-03-29 Anji Pharma Us Llc Kemoszenzoros receptorligandum-alapú terápiák
WO2013103384A1 (en) 2012-01-06 2013-07-11 Elcelyx Therapeutics, Inc. Biguanide compositions and methods of treating metabolic disorders
US9795792B2 (en) 2011-02-25 2017-10-24 Medtronic, Inc. Emergency mode switching for non-pacing modes
BR112014016810A8 (pt) 2012-01-06 2017-07-04 Elcelyx Therapeutics Inc composições e métodos para tratamento de distúrbios metabólicos
US9456916B2 (en) 2013-03-12 2016-10-04 Medibotics Llc Device for selectively reducing absorption of unhealthy food
AR091739A1 (es) 2012-07-11 2015-02-25 Elcelyx Therapeutics Inc Composiciones y metodos para reducir el riesgo cardiometabolico
US20140193498A1 (en) 2013-01-05 2014-07-10 Elcelyx Therapeutics, Inc. Compositions and Methods for Treating Metabolic Disorders
US9067070B2 (en) 2013-03-12 2015-06-30 Medibotics Llc Dysgeusia-inducing neurostimulation for modifying consumption of a selected nutrient type
US9011365B2 (en) 2013-03-12 2015-04-21 Medibotics Llc Adjustable gastrointestinal bifurcation (AGB) for reduced absorption of unhealthy food
US20160176914A1 (en) * 2013-05-29 2016-06-23 Northeastern University Glycosylated cardiotonic steroids
CN103755762B (zh) * 2014-01-30 2016-06-01 中国科学院上海有机化学研究所 果同尼皂苷f及其衍生物的中间体、制备方法和用途及果同尼皂苷f衍生物
GB2544416B (en) * 2015-11-13 2017-11-01 Lykke Res Ltd A method for producing a medium containing steroidal glycosides from plant cells of the genus Hoodia

Family Cites Families (78)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4062950A (en) * 1973-09-22 1977-12-13 Bayer Aktiengesellschaft Amino sugar derivatives
FR2348655A1 (fr) 1976-04-20 1977-11-18 Sopharga Lab Nouvelle substance alimentaire ou dietetique ayant une structure alveolaire et son procede de preparation
US4185116A (en) 1976-09-28 1980-01-22 Pfizer Inc. L- and DL- Phenylglycines to treat diseases or conditions attributable to reduced carbohydrate metabolism
USPP4199P (en) 1977-01-18 1978-01-24 B. L. Cobia, Inc. Milkweed plant family
DE2719912C3 (de) * 1977-05-04 1979-12-06 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Verfahren zur Isolierung von 0- |4,6-Dideoxy-4- [JJl S-O,4,6/5)-4,5,6-trihydroxy-3-hydroxymethyl-2cyclohexen-1-yl] -amino] - a -D-glucopyranosyl} -(I Pfeil nach rechts 4)-0- a D-glucopyranosyl-(l Pfeil nach rechts 4)-D-glucopyranose aus Kulturbrühen
US4130714A (en) * 1977-05-23 1978-12-19 Pfizer Inc. Hydantoin therapeutic agents
NO154918C (no) * 1977-08-27 1987-01-14 Bayer Ag Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive derivater av 3,4,5-trihydroksypiperidin.
JPS5953920B2 (ja) * 1977-12-28 1984-12-27 東洋醸造株式会社 新規なアミノ糖化合物およびその製法
IE47592B1 (en) * 1977-12-29 1984-05-02 Ici Ltd Enzyme inhibitory phthalazin-4-ylacetic acid derivatives, pharmaceutical compositions thereof,and process for their manufacture
US4273763A (en) 1978-01-23 1981-06-16 Efamol Limited Pharmaceutical and dietary compositions
JPS5745185A (en) * 1980-07-21 1982-03-13 Eisai Co Ltd Hydantoin derivative and its preparation
JPS5740478A (en) * 1980-08-22 1982-03-06 Ono Pharmaceut Co Ltd Rhodanine derivative, its preparation and aldose reductase inhibitor containing rhodanine derivative
US4791126A (en) * 1980-08-22 1988-12-13 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Rhodanine derivatives, process for their preparation, and aldose reductase inhibitor containing the rhodanine derivatives as active ingredients
EP0056194B1 (en) * 1981-01-05 1984-09-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. N-substituted pseudo-aminosugars, their production and use
CA1176269A (en) * 1981-03-02 1984-10-16 Kazimir Sestanj N-naphthoylglycine derivatives
US4377500A (en) 1981-07-08 1983-03-22 The Standard Oil Co. Catalysts
US4436745A (en) * 1982-04-15 1984-03-13 Alcon Laboratories, Inc. Method of inhibiting aldose reductase activity
US4438272A (en) * 1982-04-15 1984-03-20 Alcon Laboratories, Inc. Spiro-(fluoren-9,4'-imidazolidine)-2',5'-diones
JPS58194818A (ja) 1982-05-10 1983-11-12 Iwasaki Shuzo サボテン中の水溶性多糖及び繊維の取得方法
ES524614A0 (es) 1982-08-12 1984-05-01 Nativelle Sa Ets Procedimiento de preparacion de nuevos amino-14 esteroides.
AU570439B2 (en) 1983-03-28 1988-03-17 Compression Labs, Inc. A combined intraframe and interframe transform coding system
HU201675B (en) 1983-08-26 1990-12-28 Ivan Balkanyi Process for producing oral pharmaceutical compositions with unappetizing effect
US5066659A (en) * 1984-10-30 1991-11-19 Pfizer Inc. Spiro-heteroazalones for treatment of diabetic complications
US4634765A (en) * 1984-12-18 1987-01-06 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Homodisaccharide hypoglycemic agents
US5246960A (en) 1984-12-21 1993-09-21 Hoffmann-La Roche Inc. Oxetanones
CA1270837A (en) 1984-12-21 1990-06-26 Hoffmann-La Roche Limited Oxetanones
IT1207504B (it) 1985-09-26 1989-05-25 Crinos Industria Farmaco Composizione moderatrice dell'appetito ed antigastrica.
IT1190400B (it) 1985-10-04 1988-02-16 Istituto Biochimico Italiano Derivati dell'acido 19,20-bis,nor-prostanoico ad attivita' antiulcera e anoressivca,procedimento per la loro preparazione e composizioni farmaceutiche
GB8524663D0 (en) * 1985-10-07 1985-11-13 Fujisawa Pharmaceutical Co Quinazoline derivatives
US4939140A (en) * 1985-11-07 1990-07-03 Pfizer Inc. Heterocyclic oxophthalazinyl acetic acids
US4757151A (en) 1985-11-14 1988-07-12 Warner-Lambert Company 2-substituted-[2-substituted-amino]-N-arylalkyl-3-[indol-3-yl]
US4652553A (en) * 1985-11-25 1987-03-24 Merck & Co., Inc. Steroidal glycolipids as host resistance stimulators
GB8600489D0 (en) 1986-01-09 1986-02-12 Erba Farmitalia Aminoglycoside steroids
AU602641B2 (en) * 1986-04-17 1990-10-18 Senju Pharmaceutical Co., Ltd. Thiolactam-N-acetic acid derivatives, their production and use
EP0264586B1 (en) 1986-08-28 1991-04-03 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. Hydantoin derivatives for treating complications of diabetes
ZA883929B (en) 1987-06-22 1990-02-28 Hoffmann La Roche Cholecystokinin analogs for controlling appetite
US5175154A (en) * 1987-11-25 1992-12-29 Research Corporation Technologies, Inc. 5 α-pregnan-20-ones and 5-pregnen-20-ones and related compounds
US5192772A (en) * 1987-12-09 1993-03-09 Nippon Shinyaku Co. Ltd. Therapeutic agents
GB8801037D0 (en) * 1988-01-18 1988-02-17 Plessey Co Ltd Improvements relating to fuel supply systems
US5252572A (en) * 1988-02-03 1993-10-12 Chinoin Gyogyszer- Es Vegyeszeti Termekek Gyara Rt. Pyridopyrimidine derivatives, pharmaceutical compositions containing them and process for preparing same
EP0344383A1 (en) * 1988-06-02 1989-12-06 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Novel alpha-Glucosidase inhibitors
DE3836675A1 (de) * 1988-10-28 1990-05-03 Hoechst Ag Glykosidase-inhibitor salbostatin, verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung
US4978669A (en) 1989-06-08 1990-12-18 Neurex Corporation Method of suppressing appetite by administration of tetrahydro-beta-carboline derivatives
JPH03120227A (ja) 1989-10-02 1991-05-22 Shigeo Ochi 飲食物消化分解産物吸収抑制剤
US4980357A (en) * 1990-03-01 1990-12-25 Pfizer Inc. Azolidinedione derivatives
US5037831A (en) * 1990-05-21 1991-08-06 American Home Products Corporation Spiro-isoquinoline-pyrrolidines and analogs thereof useful as aldose reductase inhibitors
US5504078A (en) * 1990-06-08 1996-04-02 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. α-glucosidase inhibitors
GB9016978D0 (en) * 1990-08-02 1990-09-19 Ici Plc Acetamide derivatives
US5217877A (en) * 1990-09-28 1993-06-08 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of α-glucosidase inhibitor, pradimicin Q
US5091418A (en) * 1990-09-28 1992-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Novel alpha-glucosidase inhibitor, pradimicin Q
US6100048A (en) 1992-04-10 2000-08-08 Oregon Health Sciences University Methods and reagents for discovering and using mammalian melanocortin receptor agonists and antagonists to modulate feeding behavior in animals
AU683620B2 (en) * 1992-09-28 1997-11-20 Pfizer Inc. Substituted pyrimidines for control of diabetic complications
RU2115255C1 (ru) 1992-09-30 1998-07-10 Моторола, Инк. Способ доставки сообщений, система связи и портативный приемник селективного вызова для осуществления способа
GB9307833D0 (en) 1993-04-15 1993-06-02 Glaxo Inc Modulators of cholecystokinin and gastrin
FR2706255B1 (fr) 1993-06-17 1995-10-27 Univ Rennes Composition à usage alimentaire et/ou pharmaceutique pauvre en polyamines et applications thérapeutiques.
CA2165200A1 (en) 1993-06-18 1995-01-05 Ambikaipakan Balasubramaniam Neuropeptide y antagonists and agonists
US5516516A (en) 1993-10-19 1996-05-14 Cherksey; Bruce D. Method of preparing muira puama extract and its use for decreasing body fat percentage and increasing lean muscle mass
JPH07184548A (ja) 1993-12-28 1995-07-25 Meiji Seito Kk 口腔用組成物
US6309853B1 (en) * 1994-08-17 2001-10-30 The Rockfeller University Modulators of body weight, corresponding nucleic acids and proteins, and diagnostic and therapeutic uses thereof
US5698199A (en) 1995-03-10 1997-12-16 Kao Corporation Lipolysis acceleration method
ATE205477T1 (de) 1995-06-06 2001-09-15 Pfizer Substituierte n-(indol-2-carbonyl)-amide und derivate als glycogen phosphorylase inhibitoren
MX9709875A (es) 1995-06-06 1998-03-31 Pfizer N-(indol-2-carbonil)-glicinamidas substituidas y derivados como inhibidores de glicogeno fosforilasa, composiciones que las contienen y uso de las mismas.
JPH08332028A (ja) 1995-06-12 1996-12-17 Takashi Mizuno サボテン成分入り冷菓とその製法
US5693327A (en) 1995-07-12 1997-12-02 Shah; Eladevi Herbal compositions
EP0862631A1 (en) 1995-10-26 1998-09-09 The Board Of Regents, The University Of Texas System Luminal cholecystokinin-releasing factor
US5824668A (en) 1996-11-07 1998-10-20 Supergen, Inc. Formulation for administration of steroid compounds
TW432073B (en) 1995-12-28 2001-05-01 Pfizer Pyrazolopyridine compounds
US5932779A (en) * 1996-06-10 1999-08-03 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Screening methods for compounds useful in the regulation of body weight
US5908609A (en) 1996-06-10 1999-06-01 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Screening methods for compounds useful in the regulation of body weight
AU5243798A (en) 1996-11-06 1998-05-29 Children's Medical Center Corporation Transgenic animal expressing a syndecan in the regions of hypothalamus
WO1998027113A2 (en) * 1996-12-17 1998-06-25 Quadrant Holdings Cambridge Limited Melanocortin derivatives for specific binding of melanocortin receptor 3, 4 or 5
CA2217698A1 (en) 1996-12-20 1998-06-20 Eli Lilly And Company Anti-obesity proteins
US5798101A (en) 1997-01-22 1998-08-25 Hpf, L.L.C. Herbal appetite suppressant and weight loss composition
EP0971957A1 (en) 1997-03-26 2000-01-19 Novo Nordisk A/S Polypeptide with appetite regulating activity
WO1998046243A2 (en) * 1997-04-15 1998-10-22 Csir Pharmaceutical compositions having appetite suppressant activity
FR2771105A1 (fr) 1997-11-20 1999-05-21 Vitasterol Utilisation du fusarium monoliforme pour la preparation des derives 7alpha-hydroxyles de la dehydroepiandrosterone et de la pregnenolone
GB2355657B (en) 1999-10-27 2004-07-28 Phytopharm Plc Inhibitors Of Gastric Acid Secretion
GB2363985B (en) * 2000-06-30 2004-09-29 Phytopharm Plc Extracts,compounds & pharmaceutical compositions having anti-diabetic activity and their use

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Publication number Publication date
GT199800076A (es) 1999-12-01
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EP1598054A2 (en) 2005-11-23
GB0117041D0 (en) 2001-09-05
NZ516695A (en) 2003-08-29
AP9901673A0 (en) 1999-12-31
IL158466A0 (en) 2004-05-12
US20040234634A1 (en) 2004-11-25
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GT199800076AA (es) 1999-12-01
SG120054A1 (en) 2006-03-28
WO1998046243A3 (en) 1999-02-25
EP1438965A1 (en) 2004-07-21
EP0973534B1 (en) 2006-11-02
KR100510614B1 (ko) 2005-08-30

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