TW202229268A

TW202229268A - Ｃｄｋ２抑制劑及其製備方法

Info

Publication number: TW202229268A
Application number: TW110148178A
Authority: TW
Inventors: 鄒昊; 劉浩淼; 李雲飛; 龔紅龍; 張超; 龐夏明; 張芳
Original assignee: 大陸商上海拓界生物醫藥科技有限公司
Priority date: 2020-12-22
Filing date: 2021-12-22
Publication date: 2022-08-01
Also published as: WO2022135442A1

Abstract

本揭露提供了CDK2抑制劑及其製備方法。具體而言，本揭露提供一種式I所示化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中各基團如本揭露定義。該式I所示化合物可作為細胞週期蛋白-依賴性激酶抑制劑，用於預防和/或治療與蛋白依賴性激酶或細胞週期蛋白相關的疾病，例如細胞增殖性疾病，癌症或免疫性疾病。

Description

CDK2抑制劑及其製備方法

本揭露屬於醫藥領域，且關於一種CDK2抑制劑。

細胞週期蛋白-依賴性激酶(CDK)是絲胺酸/蘇胺酸激酶亞家族的成員，每個CDK/細胞週期蛋白複合物負責細胞週期內特定期的轉換或進展，其在調節真核細胞***和增殖中發揮重要作用。細胞週期蛋白-依賴性激酶催化單元被稱為細胞週期蛋白的調節亞基啟動。已經鑑定出至少16種哺乳動物細胞週期蛋白(Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.(1999)39：295-312)。細胞週期蛋白B/CDK1、細胞週期蛋白A/CDK2、細胞週期蛋白E/CDK2、細胞週期蛋白D/CDK4、細胞週期蛋白D/CDK6和可能的其他heterodynes是細胞週期進展的重要調節因子。細胞週期蛋白/CDK heterodynes的其他功能包括轉錄調節、DNA修復、分化和凋亡(Annu.Rev.Cell.Dev.Biol.(1997)13：261-291)。

近年來，乳腺癌治療領域最大的進展無疑是CDK4/6單用或聯合內分泌治療在激素受體陽性晚期乳腺癌，如帕博西尼(palbociclib)、瑞博西尼(ribociclib)和玻瑪西尼(abemaciclib)已被批准與芳香酶抑制劑組合用於治療絕經後婦女的激素受體(HR)-陽性、人類表皮生長因子受體2 (HER2)-陰性晚期或轉移性乳腺癌，並且帕博西尼和玻瑪西尼(abemaciclib)已被批准與氟維司群組合用於在內分泌療法後疾病進展後治療絕經後婦女的激素受體(HR)-陽性、人類表皮生長因子受體2(HER2)-陰性晚期或轉移性乳腺癌(Nature Reviews(2016)13：417-430、J Clin Oncol 2017,35,2875-2884)。儘管CDK4/6抑制劑在***受體ER陽性轉移性乳腺癌中顯示出顯著的臨床功效，但與其他激酶一樣，它們的作用可能隨著時間的推移被原發性或獲得性抗性的發展限制。

CDK2的過表達與細胞週期的異常調節有關。細胞週期蛋白E/CDK2複合物在調節G1/S轉換、組蛋白生物合成和中心體複製中起重要作用。細胞週期蛋白D/Cdk4/6和細胞週期蛋白E/Cdk2對Rb的進行性磷酸化釋放G1轉錄因子E2F，並促進S期進入。在早期S期期間細胞週期蛋白A/CDK2的啟動促進內源性受質的磷酸化，其允許DNA複製和E2F的失活，以完成S期(Nat.Rev.Drug.Discov.2015；14(2)：130-146)。細胞週期蛋白E在多種癌症中過度表達，特別是乳腺癌、肺癌、白血病、淋巴瘤(郭翠萍等，細胞週期蛋白E的調控與惡性腫瘤.國際腫瘤學雜誌，2012,39(005)：337-340)，細胞週期蛋白E的擴增或過表達也與卵巢癌、胃癌、子宮內膜癌和其他癌症的不良預後有關。

研究表明，抑制CDK2激酶會誘導腫瘤細胞調亡，但對於正常細胞只會造成較小的損傷。CDK激酶的單體形式是無活性的，而細胞週期蛋白A/E與CDK2結合並促發磷酸化的結合啟動CDK2。CDK2還可結合細胞週期蛋白A用於S期的整個進展並參與DNA修復。近幾年各大公司分別鑑定發現了一系列選擇性抑制CDK 2的抑制劑，用於治療癌症等疾病，如Seliciclib、Dinaciclib等，但是為了達到更好的癌症治療效果的目的，更好的滿足市場需求，仍需要開發出新一代的高效低毒的選擇性CDK2抑制劑。

本揭露提供式I化合物或其可藥用鹽、互變異構體：

其中，-L₁-、-L₂-各自獨立選自鍵、C₁-C₆亞(伸)烷基、-O-和-NH-，該C_1-6亞烷基(伸)視需要地被一個或多個選自羥基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、鹵素、羥基、氰基、胺基和硝基的取代基取代；

R₁選自環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要地被一個或多個Z取代；

一些實施方案中，R₂、R₃各自獨立選自氫、氘、鹵素、烷基、氰基、羥基、硝基、側氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、烷基、烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、羧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基的取代基取代；

一些實施方案中，R₂、R₃共同構成3-8員環，該3-8員環視需要地被一個或多個Z取代；

一些實施方案中，R₄選自單環和多環，視需要地被一個或多個Z取代，且R₅選自氫、氘、烷基和鹵素，其中該烷基視需要被一個或多個選自鹵素、烷基、烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、羧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基的取代基取代，

條件是，當R₄選自單環時，R₄選自

，且R₁選自

或

R₆選自氫、氘、鹵素和烷基；

R₇相同或不同，且R₇各自獨立選自氫、氘、鹵素、羥基、硝基、氰基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、SR'、SOR'、SO₂R'、SO₂NR'(R")、NR'(R")、COOR'、CONR'(R")和-(P=O)R'(R")，該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、羥基、側氧、硝基、氰基、SR'、SOR'、SO₂R'、SO₂NR'(R")、NR'(R")、COR'、COOR'、CONR'(R")或-(P=O)R'(R")的取代基取代；或任意兩個相鄰R₇共同構成3-8員環，該3-8員環視需要地被一個或多個Z取代；

一些實施方案中，R₄、R₅與它們所連接的N原子共同構成多環，視需要地被一個或多個Z取代；

Z選自鹵素、氰基、羥基、硝基、側氧基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、SR'、SOR'、SO₂R'、SO₂NR'(R")、NR'(R")、COR'、COOR'、CONR'(R")和-(P=O)R'(R")；

每個R'或R"獨立地選自氫、氘、羥基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、羥基、側氧、硝基和氰基的取代基取代；

本揭露中，式I所示的化合物不是

和

一些實施方案中，化合物I為：

其中，R₇相同或不同，且R₇各自獨立選自氫、氘、鹵素、C_1-6烷基、C_3-7環烷基、3-7員雜環基、5-12員芳基、5-12員雜芳基和-(P=O)R'(R")，該C_3-7環烷基、3-7員雜環基、5-12員芳基、5-12員雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、羥基、側氧、硝基、烷基和烷氧基的取代基取代。

一些實施方案中，化合物IIa包括：

和

；

化合物IIb包括：

和

。

一些實施方案中，R₇相同或不同，且R₇各自獨立選自氫、氘、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、異丙基、-(P=O)R'(R")、

和

；其中，

R'或R"獨立地選自氫、氘、甲基、乙基、丙基、異丙基和苯基；

X選自-CH和N；

Y選自-CH₂-、-CH(CH₃)-、-NH-、-N(CH₃)-和-O-。

一些具體的實施方案中R₇相同或不同，且R₇各自獨立選自氫、氘、甲基、-(P=O)(CH₃)₂、

和

。

一些實施方案中，化合物I為：

其中，環A選自C_3-7環烷基、5-8員芳基和5-8員雜環基，該C_3-7環烷基、5-8員芳基、5-8員雜環基視需要地被一個或多個Z取代。

一些實施方案中，化合物IIc包括：

和

；

該化合物IId包括：

和

。

一些實施方案中，環A選自5-8員雜環基，該5-8員雜環基視需要地被選自鹵素、羥基、側氧、硝基、烷基和烷氧基中的一個或多個取代基所取代。

一些實施方案中，環A選自

和

；其中，Y選自-CH₂-、-CH(CH₃)-、-NH-、-N(CH₃)-和-O-。

一些具體的實施方案中，環A選自

和

。

一些實施方案中，R₆選自氫、氘、鹵素和C_1-6烷基，例如氫、氘、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基和異丙基。

一些具體的實施方案中，R₆選自甲基。

另一些實施方案中，當R₄選自多環時，R₁選自C₆-C₁₂芳基和5-10員雜芳基，其中該C₆-C₁₂芳基或5-10員雜芳基視需要地被一個或多個Z取代。

一些具體的實施方案中，C₆-C₁₂芳基或5-10員雜芳基選自吡唑基、***基、異噁唑基(isoxazolyl)、噁唑基(oxazolyl)、噻唑基、噻二唑基(thiadiazolyl)、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、吲唑基、苯并咪唑基和苯基，較佳異噁唑基，其中該C₆-C₁₂芳基或5-10員雜芳基視需要地被一個或多個Z取代。

一些實施方案中，化合物I為：

一些實施方案中，化合物III包括

和

。

一些實施方案中Z選自氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、異丙基、氰基、羥基、鹵烷基、-(P=O)R'(R")、

和

的取代基取代；其中，

X選自-CH和N；

Y選自-CH₂-、-CH(CH₃)-、-NH-、-N(CH₃)-和-O-。

一些具體的實施方案中，Z選自甲基、-(P=O)(CH₃)₂、

和

的取代基取代。

一些具體的實施方案中，Z選自甲基。

一些實施方案中，化合物III為

。

一些實施方案中，R₄選自螺環、稠環和橋環，並視需要地被一個或多個Z取代，該螺環、稠環或橋環由任一個的碳或氮原子連接到式I結構中。

一些實施方案中，螺環包括螺環烷基或螺雜環基，選自[3.3]、[3.4]、[3.5]、[3.6]、[4.4]、[4.5]、[4.6]、[5.5]、[5.6]和[6.7]螺環。

一些具體的實施方案中，螺環選自

、

、

、

、

、

、

、

、

和

，螺環藉由任一*表示的連接位點連接到式I結構，並視需要地進一步被一個或多個Z取代。

一些具體的實施方案中，螺環選自

和

，該螺環藉由*表示的連接位點連接到式I結構中。

一些實施方案中，稠環包括稠環烷基或稠雜環基，選自二環和三環，視需要地進一步被一個或多個Z取代。

一些具體的實施方案中，稠環選自

、

、

、

、

和

，稠環藉由任一*表示的連接位點連接到式I結構中，視需要地進一步被一個或多個Z取代。

一些具體的實施方案中，稠環選自

，藉由*表示的連接位點連接到式I結構中。

一些實施方案中，橋環包括橋環烷基或橋雜環基，選自二環和三環，每條橋上碳原子數為0-3個，視需要地被一個或多個Z取代。

一些具體的實施方案中，橋環選自

、

、

、

和

，藉由任一*表示的連接位點連接到式I結構中，視需要地進一步被一個或多個Z取代。

一些具體的實施方案中，橋環選自

和

，藉由*表示的連接位點連接到式I結構中。

一些實施方案中，R₅選自氫、氘、鹵素和C_1-6烷基。

一些實施方案中，R₅選自氫、氘、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基和異丙基。

一些具體的實施方案中，R₅選自氫。

另一些實施方案中，當R₄、R₅與它們所連接的N原子共同構成的多環時，該化合物I為

，

其中環C選自

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

和

；視需要地被一個或多個Z取代。

一些實施方案中，化合物IV化合物包括

和

。

一些實施方案中，R₁選自C₆-C₁₂芳基和5-10員雜芳基，其中該C₆-C₁₂芳基或5-10員雜芳基視需要地被一個或多個Z取代。

一些具體的實施方案中，R₁選自吡唑基、***基、異噁唑基(isoxazolyl)、噁唑基(oxazolyl)、噻唑基、噻二唑基(thiadiazolyl)、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、吲唑基、苯并咪唑基和苯基，視需要地被一個或多個Z取代。

一些實施方案中，化合物IV為：

一些實施方案中，化合物IVa化合物包括：

和

。

和

的取代基取代；其中，

X選自-CH和N；

Y選自-CH₂-、-CH(CH₃)-、-NH-、-N(CH₃)-和-O-。

一些具體的實施方案中，Z選自甲基、-(P=O)(CH₃)₂、

和

的取代基取代。

一些具體的實施方案中，Z選自甲基。

一些實施方案中，-L₂-選自鍵、-CH₂-、-CH(CH₃)-、-CH₂-CH₂-、-O-和-NH-。

一些具體的實施方案中，-L₂-選自-CH₂-和-CH(CH₃)-。

一些實施方案中，R₂、R₃各自獨立選自氫、氘、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、異丙基、苯基、氰基、羥基和側氧基。

一些具體的實施方案中，R₂、R₃各自獨立選自氫、氘、氟、氯和甲基。

一些具體的實施方案中，R₂、R₃各自獨立選自氫。

另一些實施方案中，R₂、R₃共同構成3-8員環，該3-8員環選自C_3-7環烷基、3-8員雜環基、5-8員芳基和5-8員雜芳基，該3-8員環視需要地被一個或多個Z取代。

一些具體的實施方案中，R₂、R₃共同構成的3-8員環選自環丙基、環丁基、環戊基，該3-8員環視需要地被一個或多個Z取代，其中Z選自氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、異丙基、苯基、氰基、羥基和側氧基。

一些具體的實施方案中，R₂、R₃共同構成的3-8員環選自被一個Z取代的環丙基、環丁基、環戊基，其中Z選自氟、氯和甲基。

一些具體的實施方案中，R₂、R₃共同構成環丙基、環丁基或環戊基。

一些具體的實施方案中，R₂、R₃共同構成環丙基。

一些實施方案中，-L₁-選自鍵、-CH₂-、-CH(CH₃)-、-CH₂-CH₂-、-O-和-NH-。

一些具體的實施方案中，-L₁-選自-CH₂-和-O-。

第二方面，本揭露還提供一系列化合物，選自：

、

和

，或其可藥用鹽、互變異構體。

一些具體的實施方案中，本揭露還提供一系列化合物，選自：

和

，

或其可藥用鹽、互變異構體。

協力廠商面，本揭露還提供第一或第二方面所述化合物或其可藥用鹽、互變異構體的製備方法。

一些實施方案中，包括如下步驟：

；其中，

式I-5所示化合物與式I-6所示化合物在鹼性條件下，經取代反應，然後脫去保護基團LG₁，得到式I所示化合物；

鹼性條件的試劑選自有機鹼或無機鹼，該有機鹼選自三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉和第三丁醇鉀；該無機鹼選自氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、甲醇鈉、乙醇鈉、第三丁醇鈉、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰；

LG₁選自保護基^tBu、S(=O)^tBu、Cbz、Boc、Bn、PMB、SEM、THP；

LG₃選自苯氧基、4-硝基苯氧基。

一些具體的實施方案中，當式I中-L₁-選自-O-時，包括如下步驟：

另一些實施方案中，當式I中-L₁-選自-O-時，包括如下步驟：

；其中，

式I-4所示化合物與式I-6所示化合物在醯化試劑存在條件下，經胺基甲酸酯化反應，然後脫去保護基團LG₁，得到式I所示化合物；

該醯化試劑選自三光氣、1,1'-羰基二咪唑；

LG₁選自保護基^tBu、S(=O)^tBu、Cbz、Boc、Bn、PMB、SEM、THP。

一些實施方案中，式I-4由式I-3所示化合物經還原反應得到：

一些實施方案中，式I-3所示化合物由式I-1所示的化合物與式I-2所示化合物在縮合劑存在條件下，或者在鹼性條件下，經醯化反應得到：

，其中，LG₂選自羥基、烷氧基、鹵素。

一些實施方案中，該縮合劑選自二環己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺、HATU、HBTU、TBTU、HCTU、TSTU、TNTU、PyBOP、1-丙基磷酸酐。

一些實施方案中，鹼性條件試的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼選自三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉和第三丁醇鉀，該無機鹼選自氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、甲醇鈉、乙醇鈉、第三丁醇鈉、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰。

第四方面，本揭露還提供一種醫藥組成物，其包含第一或第二方面所述的化合物或其可藥用鹽，和至少一種藥學上可接受的載體、稀釋劑或者賦形劑。

在一些實施方案中，該醫藥組成物的單位劑量為0.001mg-1000mg。

在某些實施方案中，基於組成物的總重量，該醫藥組成物含有0.01-99.99%的前述化合物或其可藥用的鹽。在某些實施方案中，該醫藥組成物含有0.1-99.9%的前述化合物或其可藥用的鹽。在某些實施方案中，該醫藥組成物含有0.5%-99.5%的化合物或其可藥用的鹽。在某些實施方案中，該醫藥組成物含有1%-99%的化合物或其可藥用的鹽。在某些實施方案中，該醫藥組成物含有2%-98%的化合物或其可藥用的鹽。

在某些實施方案中，基於組成物的總重量，該醫藥組成物含有0.01%-99.99%的藥學上可接受的賦形劑。在某些實施方案中，該醫藥組成物含有0.1%-99.9%的藥學上可接受的賦形劑。在某些實施方案中，該醫藥組成物含有0.5%-99.5%的藥學上可接受的賦形劑。在某些實施方案中，該醫藥組成物含有1%-99%的藥學上可接受的賦形劑。在某些實施方案中，該醫藥組成物含有2%-98%的藥學上可接受的賦形劑。

第五方面，本揭露還提供一種預防和/或治療患有與蛋白依賴性激酶相關疾病的患者的方法，其藉由向該患者施用治療有效量的本揭露所述的化合物或其可藥用的鹽或前述醫藥組成物。

另一方面，本揭露還提供一種預防和/或治療患有與細胞週期蛋白相關疾病的患者的方法，其藉由向該患者施用治療有效量的本揭露所述的化合物或其可藥用的鹽或前述醫藥組成物。

在一些實施方案中，該與蛋白依賴性激酶相關疾病或與細胞週期蛋白相關疾病選細胞增殖性疾病，癌症或免疫性疾病。

在一些實施方案中，該與蛋白依賴性激酶相關疾病或與細胞週期蛋白相關疾病選自乳腺癌、卵巢癌、***癌、黑色素瘤、腦瘤、食道癌、胃癌、肝癌(包括HCC)、胰腺癌、結直腸癌、肺癌(包括NSCLC、SCLC、鱗狀細胞癌或腺癌)、腎癌(包括RCC)、皮膚癌、成膠質細胞瘤、神經母細胞瘤、肉瘤、脂肪肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、子宮癌、頭頸癌、多發性骨髓瘤、惡性淋巴瘤、真性紅細胞增多症、白血病、甲狀腺癌、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌或兒科腫瘤。

一些具體的實施方案中，該癌症選自細胞週期蛋白E1和/或細胞週期蛋白E2擴增的癌症。

本揭露還提供一種預防和/或治療患有癌症的患者的方法，其藉由向該患者施用治療有效量的本揭露所述的化合物或其可藥用的鹽或前述醫藥組成物，該癌症選自乳腺癌、卵巢癌、***癌、黑色素瘤、腦瘤、食道癌、胃癌、肝癌(包括HCC)、胰腺癌、結直腸癌、肺癌(包括NSCLC、 SCLC、鱗狀細胞癌或腺癌)、腎癌(包括RCC)、皮膚癌、成膠質細胞瘤、神經母細胞瘤、肉瘤、脂肪肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、子宮癌、頭頸癌、多發性骨髓瘤、惡性淋巴瘤、真性紅細胞增多症、白血病、甲狀腺癌、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌或兒科腫瘤。

本揭露提供了治療有效量的本揭露所述的化合物或其可藥用的鹽或前述醫藥組成物在製備用於預防和/或治療與蛋白依賴性激酶相關疾病的藥物中的用途，

一些具體的實施方案中，蛋白依賴性激酶選自CDK2，與蛋白依賴性激酶相關疾病選自細胞增殖性疾病，癌症或免疫性疾病。

另一方面，本揭露提供了治療有效量的本揭露所述的化合物或其可藥用的鹽或前述醫藥組成物在製備用於預防和/或治療與細胞週期蛋白相關疾病的藥物中的用途。

一些具體的實施方案中，細胞週期蛋白選自細胞週期蛋白E，例如細胞週期蛋白E1、細胞週期蛋白E2。與細胞週期蛋白相關疾病選自細胞增殖性疾病，癌症或免疫性疾病。

在一些實施方案中，本揭露提供了治療有效量的本揭露所述的化合物或其可藥用的鹽或前述醫藥組成物在製備治療癌症的藥物中的用途。

一些具體的實施方案中，該癌症選自選自乳腺癌、卵巢癌、***癌、黑色素瘤、腦瘤、食道癌、胃癌、肝癌(包括HCC)、胰腺癌、結直腸癌、肺癌(包括NSCLC、SCLC、鱗狀細胞癌或腺癌)、腎癌(包括RCC)、皮膚癌、成膠質細胞瘤、神經母細胞瘤、肉瘤、脂肪肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、子宮癌、頭頸癌、多發性骨髓瘤、惡性淋巴瘤、真性紅細胞增多症、白血病、甲狀腺癌、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌或兒科腫瘤。

本揭露中所述化合物可藥用鹽選自無機鹽或有機鹽，本揭露所述化合物可與酸性或鹼性物質反應成相應鹽。

另一方面，本揭露化合物可以存在特定的幾何或立體異構體形式。本揭露設想所有的這類化合物，包括順式和反式異構體、(-)-和(+)-對對映體、(R)-和(S)-對映體、非對映異構體、(D)-異構體、(L)-異構體，及其外消旋混合物和其他混合物，例如對映異構體或非對映體富集的混合物，所有這些混合物都屬於本揭露的範圍之內。烷基等取代基中可存在另外的不對稱碳原子。所有這些異構體以及它們的混合物，均包括在本揭露的範圍之內。

另外，本揭露的化合物和中間體還可以以不同的互變異構體形式存在，並且所有這樣的形式包含於本揭露的範圍內。術語“互變異構體”或“互變異構體形式”是指可經由低能壘互變的不同能量的結構異構體。例如，質子互變異構體(也稱為質子轉移互變異構體)包括經由質子遷移的互變，如酮-烯醇及亞胺-烯胺、內醯胺-內醯亞胺異構化、吡唑基異構化。

吡唑基平衡實例是在如下所示的E和F之間：

本發明中的所有化合物可以被畫成E型或F型，例如：

所有的互變異構形式在本發明的範圍內。化合物的命名不排除任何互變異構體。

本揭露化合物可以是不對稱的，例如，具有一個或多個立體異構體。除非另有說明，所有立體異構體都包括，如對映異構體和非對映異構體。本揭露的含有不對稱碳原子的化合物可以以光學活性純的形式或外消旋形式被分離出來。光學活性純的形式可以從外消旋混合物拆分，或藉由使用手性原料或手性試劑合成。

可以藉由的手性合成或手性試劑或者其他常規技術製備光學活性的(R)-和(S)-異構體以及D和L異構體。如果想得到本揭露某化合物的一種對映體，可以藉由不對稱合成或者具有手性助劑的衍生作用來製備，其中將所得非對映體混合物分離，並且輔助基團裂開以提供純的所需對映異構體。或者，當分子中含有鹼性官能團(如胺基)或酸性官能團(如羧基)時，與適當的光學活性的酸或鹼形成非對映異構體的鹽，然後藉由本領域所公知的常規方法進行非對映異構體拆分，然後回收得到純的對映體。此外，對映異構體和非對映異構體的分離通常是藉由使用色譜法完成的，該色譜法採用手性固定相，並視需要地與化學衍生法相結合(例如由胺生成胺基甲酸鹽)。

本揭露還包括一些與本文中記載的那些相同的，但一個或多個原子被原子量或質量數不同於自然中通常發現的原子量或質量數的原子置換的同位素標記的本揭露化合物。可結合到本揭露化合物的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，諸如分別為²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F、¹²³I、¹²⁵I和³⁶Cl等。

除另有說明，當一個位置被特別地指定為氘(D)時，該位置應理解為具有大於氘的天然豐度(其為0.015%)至少1000倍的豐度的氘(即，至少10%的氘摻入)。示例中化合物的具有大於氘的天然豐度可以是至少1000倍的豐度的氘、至少2000倍的豐度的氘、至少3000倍的豐度的氘、至少4000倍的豐度的氘、至少5000倍的豐度的氘、至少6000倍的豐度的氘或更高豐度的氘。本揭露還包括各種氘化形式的式I化合物。與碳原子連接的各個可用的氫原子可獨立地被氘原子替換。所屬技術領域具有通常知識者能夠參考相關文獻合成氘化形式的式I化合物。在製備氘代形式的式I化合物時可使用市售的氘代起始物質，或它們可使用常規技術採用氘代試劑合成，氘代試劑包括但不限於氘代硼烷、三氘代硼烷四氫呋喃溶液、氘代氫化鋰鋁、氘代碘乙烷和氘代碘甲烷等。

“視需要地”或“視需要”是指意味著隨後所描述的事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生的場合。例如“視需要的被鹵素或者氰基取代的C_1-6烷基”是指鹵素或者氰基可以但不必須存在，該說明包括烷基被鹵素或者氰基取代的情形和烷基不被鹵素和氰基取代的情形。

本發明所述化合物的化學結構中，鍵“／”表示未指定構型，即如果化學結構中存在手性異構體，鍵“／”可以為“

”或“

”，或者同時包含“

”和“

”兩種構型。雖然為簡便起見將全部上述結構式畫成某些異構體形式，但是本發明可以包括所有的異構體，如互變異構體、旋轉異構體、幾何異構體、非對映異構體、外消旋體和對映異構體。本揭露所述化合物的化學結構中，鍵“

”並未指定構型，即鍵“

”的構型可以為E型或Z型，或者同時包含E和Z兩種構型。

術語解釋：

術語“醫藥組成物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物的目的是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。

術語“可藥用賦形劑”或“藥學上可接受的賦形劑”包括但不限於任何已經被美國食品和藥物管理局批准對於人類或家畜動物使用可接受的任何助劑、載體、賦形劑、助流劑、甜味劑、稀釋劑、防腐劑、染料/著色劑、增香劑、表面活性劑、潤濕劑、分散劑、助懸劑、穩定劑、等滲劑、溶劑或乳化劑。

術語“有效量”或“有效治療量”包含足以改善或預防醫學病症的症狀或病症的量。有效量還意指足以允許或促進診斷的量。用於特定患者或獸醫學受試者的有效量可依據以下因素而變化：如待治療的病症、患者的總體健康情況、給藥的方法途徑和劑量以及副作用嚴重性。有效量可以是避免顯著副作用或毒性作用的最大劑量或給藥方案。

術語“烷基”指飽和脂肪族烴基團，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，較佳含有1至12個碳原子的烷基。非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各種支鏈異構體等。更佳的是含有1至6個碳原子的烷基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、羧基或羧酸酯基。

術語“亞(伸)烷基”表示烷烴分子中去除2個氫原子後餘下的部分，包括1至20個碳原子的直鏈和支鏈亞(伸)基團。含有1至6個碳原子的亞(伸)烷基，非限制性實施例包括亞甲基(-CH₂-)、亞(伸)乙基(如-CH₂CH₂-或-CH(CH₃)-)、亞(伸)丙基(如-CH₂CH₂CH₂-或-CH(CH₂CH₃)-)、亞(伸)丁基(如-CH₂CH₂CH₂CH₂-)。如無特殊說明，亞(伸)烷基可以是取代的或未取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，較佳一個或多個以下基團，獨立地選自氘、芳基、雜芳基、鹵素所取代。

術語“環烷基”或“碳環”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，環烷基環包含3至20個碳原子，較佳包含3至7個碳原子。單環環烷基的非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基等；多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。環烷基可以是取代的或未取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，較佳一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基，該C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基所取代。

該環烷基環可以稠合於芳基或雜芳基環上，其中與母體結構連接在一起的環為環烷基，非限制性實例包括茚滿基、四氫萘基、苯并環庚烷基等。環烷基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基，該C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基所取代。

術語“雜環烷基”或“雜環”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包含3至20個環原子，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)_m(其中m是整數0至2)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。較佳包含3至12個環原子，其中1~4個是雜原子；更佳包含3至7個環原子。單環雜環烷基的非限制性實例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、二氫咪唑基、二氫呋喃基、二氫吡唑基、二氫吡咯基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、高哌嗪基等。多環雜環烷基包括螺環、稠環和橋環的雜環烷基。“雜環烷基”非限制性實例包括：

，

和

，等等。

該雜環烷基環可以稠合於芳基或雜芳基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜環烷基，其非限制性實例包括：

和

等。

雜環烷基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基，該C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基所取代。

術語“芳基”指具有共軛的π電子體系的6至14員全碳單環或稠合多環(也就是共用毗鄰碳原子對的環)基團，較佳為6至12員，例如苯基和萘基。該芳基環可以稠合於雜芳基、雜環烷基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，其非限制性實例包括：

和

；

芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基、C_1-6烷基、 C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基，該C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基所取代。

術語“雜芳基”指包含1至4個雜原子、5至14個環原子的雜芳族體系，其中雜原子選自氧、硫和氮。雜芳基較佳為6至12員，更佳為5員或6員。例如。其非限制性實例包括：咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基(oxazolyl)、異噁唑基(isoxazolyl)、吡咯基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基、***基、吲唑基、苯并咪唑基、

，

、

等。

該雜芳基環可以稠合於芳基、雜環烷基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，其非限制性實例包括：

和

。

雜芳基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基，該C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基所取代。

術語“螺環”指兩環共用一個原子的化合物。

術語“螺環烷基”指5至20員的單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)的多環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺環烷基、雙螺環烷基或多螺環烷基，較佳為單螺環烷基和雙螺環烷基。更佳為4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺環烷基。“螺碳環”指的是螺環烷基中的環系。螺環烷基的非限制性實例包括：

和

。

術語“螺雜環基”指5至20員的單環之間共用一個原子(稱螺原子)的多環雜環基團，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)_m(其中m是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺雜環基分為單螺雜環基、雙螺雜環基或多螺雜環基，較佳為單螺雜環基和雙螺雜環基。更佳為4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺雜環基。“螺雜環”指的是螺雜環基中的環系。螺雜環基的非限制性實例包括：

和

。

術語“稠環”指兩個或兩個以上環藉由共用兩個相鄰的原子稠合而成的化合物。

術語“稠環烷基”指5至20員，系統中的每個環與體系中的其他環共用毗鄰的一對碳原子的全碳多環基團，其中一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠環烷基，較佳為雙環或三環，更佳為5員/5員或5員/6員雙環烷基。“稠碳環”指的是稠環烷基中的環系。稠環烷基的非限制性實例包括：

和

。

術語“稠雜環基”指5至20員，系統中的每個環與體系中的其他環共用毗鄰的一對原子的多環雜環基團，一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)_m(其中m是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠雜環基，較佳為雙環或三環，更佳為5員/5員或5員/6員雙環稠雜環基。“稠雜環”指的是稠雜環基中的環系。稠雜環基的非限制性實例包括：

和

。

術語“稠雜芳基”可以是含有5-14個環原子(其中至少含有一個雜原子)由兩個或兩個以上環狀結構彼此共用兩個相鄰的原子連接起來形成的不飽和的具有芳香性的稠環結構，同時包括碳原子、氮原子和硫原子可以被側氧，較佳"5-12員稠雜芳基"、"7-12員稠雜芳基"、"9-12員稠雜芳基"等，例如苯并呋喃基、苯并異呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、異吲哚、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并***基、喹啉基、2-喹啉酮、4-喹啉酮、1-異喹啉酮、異喹啉基、吖啶基、菲啶基、苯并噠嗪基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、酚嗪基、喋啶基、嘌呤基、萘啶基、吩嗪、吩噻嗪等。“稠雜芳環”指的是稠雜芳基中的環系。

稠雜芳基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、羧基或羧酸酯基。

術語“橋環”指兩個或兩個以上環狀結構彼此共用兩個非相鄰的環原子所形成的結構。

術語“橋環烷基”指5至20員，任意兩個環共用兩個不直接連接的碳原子的全碳多環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基，較佳為雙環、三環或四環，更佳為雙環或三環。橋環烷基的非限制性實例包括：

和

。

術語“橋雜環基”指5至14員，任意兩個環共用兩個不直接連接的原子的多環雜環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)_m(其中m是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋雜環基，較佳為雙環、三環或四環，更佳為雙環或三環。橋雜環基的非限制性實例包括：

和

。

術語“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的環烷基)，其中烷基的定義如上所述。烷氧基的非限制性實例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基、環己氧基。烷氧基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基，該C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯氧基、C_2-6炔氧基、C_3-6環烷氧基、3至6員雜環烷氧基、C_3-8環烯氧基、5至6員芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、氘、羥基、側氧、硝基、氰基所取代。同理，“炔氧基”、“烯氧基”、“環烷氧基”、“雜環烷氧基”、“環烯氧基”的定義如上述“烷氧基”定義。

術語“羥基”指-OH基團。

術語“鹵素”指氟、氯、溴或碘。

術語“鹵烷基”指被鹵素取代的烷基，其中烷基如上所定義。

術語“氰基”指-CN。

術語“硝基”指-NO₂。

術語“側氧”指=O基團。例如，碳原子與氧原子藉由雙鍵連接，其中形成酮或醛基。

術語“胺基”指-NH₂。

術語“氰基”指-CN。

術語“硝基”指-NO₂。

術語“羧基”指-C(O)OH。

術語“醛基”指-CHO。

術語“取代的”指基團中的一個或多個氫原子，較佳為最多5個，更佳為1~3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學位置，所屬技術領域具有通常知識者能夠在不付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。

“被一個或多個……取代”是指可以被單個或多個取代基取代。當被多個取代基取代時，可以是複數個相同取代基，也可以是一個或複數個不同取代基的組合。

以下結合實施例進一步描述本揭露，但這些實施例並非限制著本揭露的範圍。

本揭露實施例中未註明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件，或按照原料或商品製造廠商所建議的條件。未註明具體來源的試劑，為市場購買的常規試劑。

化合物的結構是藉由核磁共振(NMR)或/和質譜(MS)來確定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的單位給出。NMR的測定是用Bruker AVANCE-400核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d₆)，氘代氯仿(CDCl₃)，氘代甲醇(CD₃OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)。

MS的測定用Shimadzu 2010 Mass Spectrometer或Agilent 6110A MSD質譜儀。

HPLC的測定使用Shimadzu LC-20A systems、Shimadzu LC-2010HT series或安捷倫Agilent 1200 LC高壓液相色譜儀(Ultimate XB-C18 3.0*150mm色譜管柱或Xtimate C18 2.1*30mm色譜管柱)。

手性HPLC分析測定使用Chiralpak IC-3 100×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AD-3 50×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AS-3 150×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AS-3 100×4.6mm I.D.,3μm、ChiralCel OD-3 150×4.6mm I.D.,3um、Chiralcel OD-3 100×4.6mm I.D.,3μm、ChiralCel OJ-H 150×4.6mm I.D.,5um、Chiralcel OJ-3 150×4.6mm I.D.,3um色譜管柱；

薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，薄層色譜法(TLC)使用的矽膠板採用的規格是0.15mm~0.2mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm~0.5mm。

管柱層析一般使用煙臺黃海矽膠100~200目、200~300目或300~400目矽膠為載體。

手性製備管柱使用DAICEL CHIRALPAK IC(250mm*30mm,10um)或Phenomenex-Amylose-1(250mm*30mm,5um)。

CombiFlash快速製備儀使用Combiflash Rf150(TELEDYNE ISCO)。

激酶平均抑制率及IC₅₀值的測定用NovoStar酶標儀(德國BMG公司)。

本揭露的已知的起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或可購買自ABCR GmbH & Co.KG，Acros Organics，Aldrich Chemical Company，韶遠化學科技(Accela ChemBio Inc)、達瑞化學品等公司。

實施例中無特殊說明，反應能夠均在氬氣氛或氮氣氛下進行。

氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氬氣或氮氣氣球。

氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。

加壓氫化反應使用Parr 3916EKX型氫化儀和清藍QL-500型氫氣發生器或HC2-SS型氫化儀。

氫化反應通常抽真空，充入氫氣，重複操作3次。

微波反應使用CEM Discover-S 908860型微波反應器。

實施例中無特殊說明，溶液是指水溶液。

實施例中無特殊說明，反應的溫度為室溫，為20℃~30℃。

實施例中的反應進程的監測採用薄層色譜法(TLC)，反應所使用的展開劑，純化化合物採用的管柱層析的沖提劑的體系和薄層色譜法的展開劑體系包括：A：二氯甲烷/甲醇體系，B：正己烷/乙酸乙酯體系，C：石油醚/乙酸乙酯體系，D：石油醚/乙酸乙酯/甲醇，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等鹼性或酸性試劑進行調節。

實施例1

順式-3-(5-(2-(3-甲基異噻唑-5-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯異構體

第一步

甲基3,3-二甲氧基環戊烷-1-羧酸酯1b

將化合物1a(15g,0.12mol)溶於200mL甲醇中，在室溫下加入原甲酸三甲酯(76.8mL,0.70mol)和對甲苯磺酸(0.4g,2.3mmol)，並在室溫下攪拌20小時。反應完畢後，加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)，用乙酸乙酯萃取(80mL×3)，合併有機相，用水洗滌(150mL)，飽和氯化鈉溶液洗滌(150mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到標題化合物1b(23g，產率：84%)。

第二步

3-羰基-3-(3-羰基環戊基)丙腈1c

在-65℃和氮氣氛下，依次將n-BuLi(98mL,0.24mmol)和乙腈(13mL,0.24mol)滴入100mL THF中，反應1h後，將化合物1b(23g,0.12mol)的THF溶液(100mL)緩慢滴入反應液中，待反應完畢後，加入飽和氯化銨溶液淬滅反應，隨後加入3M HCl至pH為2，充分攪拌後，用乙酸乙酯萃取(80mL×3)，合併有機相，用水洗滌(150mL)，飽和氯化鈉溶液洗滌(150mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到標題化合物1c(30g，產率：87%)。

第三步

3-(5-胺基-1-(第三-丁基)-1H-吡唑-3-基)環戊烷-1-酮1d

室溫下，將氫氧化鈉(0.5g,13mmol)加入到第三丁基肼(1.6g,13mmol)的乙醇(10mL)溶液中，攪拌1h後，將化合物1c(3.0g,20mmol)的乙醇溶液(10mL)加入到上述反應液中，在75℃下，攪拌15h至反應完全，反應液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法層析石油醚和乙酸乙酯沖提純化，減壓濃縮得到標題化合物1d(3.0g，產率：68%)。

MS(ESI)m/z 222.3[M+H]⁺

第四步

N-(1-(第三-丁基)-3-(3-羰基環戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基異噻唑-5-基)乙醯胺1f

氮氣氛下，依次將化合物1d(0.90g，4.1mmol)、2-(3-甲基異噻唑-5-基)乙酸(0.69g，4.9mmol)、N,N-二異丙基乙胺(1.5g,11mmol)溶於16mL二氯甲烷中。在室溫下加入1-丙基磷酸酐溶液(50%wt，6.5g,10mmol)並在室溫下攪拌2小時。加入100mL飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應。用100mL二氯甲烷萃取，有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌(100mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用C-18反相色譜法水和乙腈沖提純化得到標題化合物1f(760mg，產率：54%)。

MS(ESI)m/z 345.4[M+H]⁺

第五步

N-(1-(第三-丁基)-3-(3-羥基環戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基異噻唑-5-基)乙醯胺1g

氮氣氛下，將化合物1f(760mg，2.2mmol)溶於16mL四氫呋喃中。降溫至-60℃，將三乙基硼氫化鋰(1mol/L，4.4mL，4.4mmol)滴加到反應中，並在-60℃條件下反應2小時。加入80mL飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應。用乙酸乙酯萃取(80mL×3)，合併有機相，用飽和氯化銨溶液洗滌(150mL)，用飽和氯化鈉溶液洗滌(150mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到標題化合物1g(836mg，產率：100%)。

MS(ESI)m/z 347.5[M+H]⁺

第六步

3-(1-(第三-丁基)-5-(2-(3-甲基異噻唑-5-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(4-硝基苯基)碳酸酯1h

氮氣氛下，依次將化合物1g(836mg，2.4mmol)、吡啶(570mg，7.2mmol)、4-二甲胺基吡啶(29mg,0.24mmol)、氯化酯4-硝基苯基(677mg,3.4mmol)溶於16mL二氯甲烷中。在室溫下攪拌3小時。將溶劑旋乾，加入100mL乙酸乙酯，用飽和氯化銨溶液洗滌(100mL)，用飽和氯化鈉溶液洗滌(100mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用C-18反相色譜法水和乙腈沖提純化得到標題化合物1h(900mg，產率：72%)。

MS(ESI)m/z 512.5[M+H]⁺

第七步

3-(1-(第三-丁基)-5-(2-(3-甲基異噻唑-5-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯1i

氮氣氛下，依次將化合物1h(45mg，0.09mmol)、N,N-二異丙基乙胺(46mg,0.35mmol)、二環[1.1.1]戊烷-1-胺鹽酸鹽(9.5mg,0.11mmol)溶於5mL四氫呋喃中。在60℃條件下反應3小時。將溶劑旋乾，加入20mL飽和碳酸氫鈉溶液，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到標題化合物1i(42mg，產率：100%)。

MS(ESI)m/z 456.5[M+H]⁺

第八步

3-(5-(2-(3-甲基異噻唑-5-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯1

氮氣氛下，依次將化合物1i(42mg，0.09mmol)溶於1mL甲酸中。在75℃條件下反應4小時。將溶劑旋乾，加入20mL飽和碳酸氫鈉溶液，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用Waters Xbridge C-18(OBD®；19*150mm,Eluent of 50~70%乙腈/水(0.05%FA)gradient @ 15mL/min)反相色譜法純化得到，第一個流出物(t_R=6.91min)凍乾得到11.8mg，產率：32%)；第二個流出物(t_R=7.35min)凍乾得到3.5mg，產率：9.5%)

保留時間為6.91min的異構體：

MS(ESI)m/z 400.4[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ=12.09(br s,1H),10.67(br s,1H),7.77(br s,1H),6.28(s,1H),6.22(s,1H),4.98(br s,1H),3.83(s,2H),3.04(br t,J=8.0Hz,1H),2.49-2.41(m,1H),2.34(br s,1H),2.20(s,3H),2.05-1.96(m,1H),1.89(br s,7H),1.76-1.51(m,3H)

保留時間為7.35min的異構體：

MS(ESI)m/z 400.4[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ=10.68(br s,1H),7.79(br s,1H),6.28(s,1H),6.22(s,1H),5.05(br s,1H),3.83(s,2H),2.36(s,1H),2.20(s,3H),2.16-1.97(m,3H),1.91(s,7H),1.82(ddd,J=6.0,10.5,13.6Hz,1H),1.59(br d,J=8.8Hz,3H)

實施例2

順式-3-(5-(2-(3-甲基異噻唑-5-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基螺[3.3]庚烷-2-基胺基甲酸酯異構體

實施例2的合成步驟參見實施例1，其中以化合物螺[3.3]庚烷-2-胺鹽酸鹽替換二環[1.1.1]戊烷-1-胺鹽酸鹽製備獲得實施例2。

分離方法：Waters Xbridge C-18(OBD®；30*150mm,Eluent of 40~55%乙腈/水(0.1%NH₄OH)gradient @ 30mL/min)反相色譜法純化，第一個流出物(t_R=7.48min)2a(10.2mg，產率：24%)；第二個流出物(t_R=8.15min)2b(2.2mg，產率：5.2%)。

保留時間為7.48min的異構體：

MS(ESI)m/z 428.5[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=12.11(s,1H),10.63(s,1H),7.28(br d,J=7.8Hz,1H),6.28(s,1H),6.22(s,1H),4.96(br s,1H),3.82(s,2H),3.80-3.73(m,1H),3.11-2.94(m,1H),2.46-2.37(m,1H),2.20(s,3H),2.17(br s,1H),2.05-1.92(m,3H),1.91-1.61(m,10H),1.61-1.49(m,1H)

保留時間為8.15min的異構體：

MS(ESI)m/z 428.5[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=12.14(s,1H),10.63(s,1H),7.27-7.27(m,1H),7.30(br d,J=8.0Hz,1H),6.28(s,1H),6.21(s,1H),5.02(br s,1H),3.82(s,2H),3.80-3.75(m,1H),3.23-3.14(m,1H),2.19(s,3H),2.14-2.04(m,2H),2.03-1.93(m,1H),1.97(br t,J=7.2Hz,3H),1.88-1.73(m,8H),1.66-1.52(m,2H)

實施例3

順式-3-(5-(2-(3-甲基異噻唑-5-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基螺[2.3]己烷-4-基胺基甲酸酯異構體

實施例3的合成步驟參見實施例1，其中以化合物螺[2.3]己烷-4-胺鹽酸鹽替換二環[1.1.1]戊烷-1-胺鹽酸鹽製備獲得實施例3。

分離方法：Waters Xbridge C-18(OBD®；30*150mm,Eluent of 30~95%乙腈/水(0.1%FA)gradient @ 30mL/min)反相色譜法純化，第一個流出物(t_R=7.50min)(5.8mg，產率：16%)；第二個流出物(t_R=7.89min)2b(2.0mg，產率：5.5%)。

保留時間為7.50min的異構體：

MS(ESI)m/z 414.4[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=12.11(s,1H),10.64(s,1H),7.23(d,J=8.3Hz,1H),6.28(s,1H),6.22(s,1H),4.93(d,J=6.9Hz,1H),4.20-4.06(m,1H),3.83(s,2H),3.11-2.96(m,1H),2.46-2.37(m,1H),2.20(s,4H),2.06-1.80(m,4H),1.68(q,J=7.6,7.1Hz,3H),0.53(dt,J=10.2,5.0Hz,1H),0.36(tq,J=10.0,4.8Hz,2H),0.29-0.18(m,1H).

實施例4

順式-3-(3-(2-(3-(二甲基磷基)苯基)乙醯胺基)-1H-吡唑-5-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯異構體

第一步

2-(3-(二甲基磷基)苯基)乙酸4b

氮氣氛圍下，將化合物4a(500mg,2.0mmol)，二甲基氧化膦(240.8mg,3.1mmol)，Xantphos(238.0mg,0.41mmol)，K₃PO₄(654.89mg,3.1mmol)和Pd(OAc)₂(46.2mg,0.2mmol)溶於5mL DMF中，在135℃下微波反應1.5h。反應完畢後，加入水洗滌(10mL×3)，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合併有機相，用水洗滌(20mL)，飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到粗品(520mg)。將該粗品溶解於THF(3mL)和水(1mL)中，將3M NaOH(2mL)加入到上述溶液中，室溫攪拌6h。反應完畢後，加入2N HCl調pH至酸性，用C-18反相色譜法純化得到標題化合物4b(200mg，產率：45%)。

MS(ESI)m/z 213.2[M+H]⁺

第二步

順式-3-(1-(第三-丁基)-3-(2-(3-(二甲基磷基)苯基)乙醯胺基)-1H-吡唑-5-基)環戊基(1-methylcyclopropyl)胺基甲酸酯4d

氮氣氛下，依次將化合物4b(200mg,0.94mmol)、順式-3-(3-胺基-1-(第三-丁基)-1H-吡唑-5-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯4c(302mg,0.94mmol，採用專利申請“WO 2020/157652 A2”公開的方法製備而得)、N,N-二異丙基乙胺(0.31mL,1.89mmol)溶於5mL二氯甲烷中。在室溫下加入1-丙基磷酸酐溶液(50%wt，600mg,1.89mmol)，在室溫下攪拌2小時。加入100mL飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應。用100mL二氯甲烷萃取，有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌(100mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用C-18反相色譜法純化得到標題化合物1f(102mg，產率：21%)。

MS(ESI)m/z 515.3[M+H]⁺

第三步

順式-3-(3-(2-(3-(二甲基磷基)苯基)乙醯胺基)-1H-吡唑-5-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯4e

氮氣氛下，依次將化合物4d(50mg，0.1mmol)溶於1mL甲酸中。在75℃條件下反應4小時。將溶劑旋乾，加入20mL飽和碳酸氫鈉溶液，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，用C-18反相色譜法純化得到標題化合物4e(20mg，產率：42%)。

MS(ESI)m/z 459.3[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=12.07(s,1H),10.59(s,1H),7.74(dd,J=11.9,1.7Hz,1H),7.61(ddt,J=11.3,7.0,1.6Hz,1H),7.53-7.40(m,2H),7.34(s,1H),6.26(s,1H),4.96(s,1H),4.13(d,J=5.6Hz,1H),3.65(s,2H),3.01(d,J=9.4Hz,1H),2.42(dd,J=14.2,7.1Hz,1H),1.96(d,J=9.4Hz,1H),1.68(s,1H),1.65(s,3H),1.62(s,3H),1.21(s,3H),0.57(s,2H),0.49-0.41(m,2H)

第四步

化合物4e(12mg，0.027mmol)藉由手性拆分(Column：DAICEL CHIRALPAK IG(250mm * 30mm,10μm)Condition：60% EtOH(0.1% NH₃．H₂O)in CO2；FlowRate：80ml/min.)得到實施例4異構體。

保留時間為2.653min(分析方法：Column：Chiralpak IG-3(50mm * 4.6mm,3μm)Gradient：40% EtOH(0.05% DEA)in CO₂；FlowRate：4ml/min；ABPR：1500psi；Temperature：35℃)的異構體(2.1mg，產率：17%)。

MS(ESI)m/z 459.2[M+H]⁺

保留時間為4.489min(分析方法：Column：Chiralpak IG-3(50mm * 4.6mm,3μm)Gradient：40% EtOH(0.05% DEA)in CO₂；FlowRate：4ml/min；ABPR：1500psi；Temperature：35℃)的異構體(2.0mg，產率：16%)。

MS(ESI)m/z 459.3[M+H]⁺

實施例5

順式-3-(3-(2-(4-(二甲基磷基)苯基)乙醯胺基)-1H-吡唑-5-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯異構體

實施例5的合成步驟參見實施例4，其中以化合物乙基2-(4-碘苯基)乙酸酯替換化合物4a製備獲得實施例5。手性拆分條件：Column： Phenomenex-Cellulose-2(250mm * 30mm,10μm)Condition：45% EtOH in CO2；FlowRate：80ml/min.

保留時間為6.249min(分析方法：Column：Cellulose 2(150mm * 4.6mm,5μm)Gradient：40% EtOH(0.05% DEA)in CO₂；FlowRate：2.5ml/min；ABPR：1500psi；Temperature：35℃)的異構體：

MS(ESI)m/z 459.2[M+H]⁺

保留時間為8.351min(分析方法：Column：Cellulose 2(150mm * 4.6mm,5μm)Gradient：40% EtOH(0.05% DEA)in CO₂；FlowRate：2.5ml/min；ABPR：1500psi；Temperature：35℃)的異構體：

MS(ESI)m/z 459.2[M+H]⁺

實施例6

順式-3-(3-(2-(4-(2-羰基噁唑烷-3-基)苯基)乙醯胺基)-1H-吡唑-5-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯

第一步

順式-3-(1-(第三-丁基)-5-(2-(4-(2-羰基噁唑烷-3-基)苯基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯6b

氮氣氛下，將2-(4-(2-羰基噁唑烷-3-基)苯基)乙酸(參照專利WO20110037780合成，50mg，0.2mmol)、(順式-3-(5-胺基-1-(第三-丁基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯(參照專利US2020247784合成，80mg，0.2mmol)、2-(7-偶氮苯并***)-N,N,N',N'- 四甲基脲六氟磷酸鹽(129mg，0.3mmol)、三乙胺(69mg，0.7mmol)溶於2mL N,N-二甲基甲醯胺中。在20℃條件下反應1小時，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取，合併有機相，將有機相洗滌，乾燥，反應液減壓濃縮後殘餘物用矽膠正相色譜法純化得到標題化合物6b(80mg，產率：68%)。

MS(ESI)m/z 524.4[M+H]⁺

第二步

順式-3-(3-(2-(4-(2-羰基噁唑烷-3-基)苯基)乙醯胺基)-1H-吡唑-5-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯6

氮氣氛下，將化合物順式-3-(1-(第三-丁基)-5-(2-(4-(2-羰基噁唑烷-3-基)苯基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯(30mg，0.06mmol)溶於1.5mL甲酸中。在80℃條件下微波反應1.5小時。將溶劑旋乾，加入20mL飽和碳酸氫鈉溶液，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用C-18反相色譜法純化得到標題化合物6(14mg，產率：52%)，其為一對對映異構體。

MS(ESI)m/z 468.3[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ=12.05(br s,1H),10.48(br s,1H),7.49(d,J=8.5Hz,2H),7.39-7.26(m,3H),6.26(br s,1H),4.96(br s,1H),4.42(t,J=8.0Hz,2H),4.03(t,J=7.9Hz,2H),3.55(s,2H),3.01(br d,J=8.3Hz,1H),2.43(br d,J=6.8Hz,1H),1.96(br d,J=8.6Hz,1H),1.90-1.81(m,1H),1.73-1.60(m,2H),1.52(br s,1H),1.22(br s,3H),0.57(br s,2H),0.51-0.38(m,2H)

實施例7

順式-3-(3-(2-(4-(2-羰基吡咯烷-1-基)苯基)乙醯胺基)-1H-吡唑-5-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯

參照實施例6合成，其中化合物2-(4-(2-羰基吡咯烷-1-基)苯基)乙酸7a參照專利WO2015145371合成，得到的7是一對對映異構體。

MS(ESI)m/z 466.2[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=12.04(br s,1H),10.47(s,1H),7.57(d,J=8.6Hz,2H),7.34(br s,1H),7.29(d,J=8.8Hz,2H),6.26(br s,1H),4.96(br s,1H),3.80(t,J=7.1Hz,2H),3.54(s,2H),2.12-1.98(m,4H),1.96-1.79(m,2H),1.77-1.41(m,4H),1.27-1.17(m,4H),0.57(br s,2H),0.49-0.42(m,2H)

實施例8

(1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基-2-羰基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-5-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-5-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯

第一步

2-(2-側氧-2,3-二氫苯并[d]噁唑-5-基)乙酸甲酯INT-2

氮氣氛下，常溫將化合物INT-1(2.5g,13.81mmol)溶於25mL無水四氫呋喃中，加入羰基二咪唑(3.3g,20.72mmol)，60℃條件下加熱反應10小時，反應液冷卻至室溫，減壓濃縮後殘餘物用矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯體系)得到題化合物INT-2(2.5g，產率：87.7%)。

MS(ESI)m/z 208.1[M+H]⁺

第二步

2-(3-甲基-2-側氧-2,3-二氫苯并[d]噁唑-5-基)乙酸甲酯INT-3

氮氣氛下，常溫將化合物INT-2(2.5g,12.07mmol)溶於20mL無水N,N-二甲基甲醯胺中，加入碳酸鉀(2.5g,18.11mmol)，繼續攪拌20分鐘，接著降溫到0℃並滴加碘甲烷(2.1g,14.48mmol)，滴畢後升溫至室溫並繼續攪拌5小時。反應液用飽和氯化鈉溶液淬滅，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，減壓濃縮後殘餘物用矽膠管柱層析(正庚烷/乙酸乙酯體系)得到標題化合物INT-3(2.3g，產率：86.5%)。

MS(ESI)m/z 222.1[M+H]⁺

第三步

2-(3-甲基-2-側氧-2,3-二氫苯并[d]噁唑-5-基)乙酸INT-4

氮氣氛下，常溫將化合物INT-3(300mg,1.36mmol)懸浮於20mL 6N鹽酸水溶液中，100℃條件下加熱反應3小時，反應液冷卻至室溫，過濾得到化合物INT-4(200mg，產率：71.4%)。

MS(ESI)m/z 206.1[M-H]^-

第四步

(1R,3S)-3-(5-(((苄氧基)羰基)胺基)-1-(第三-丁基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯

在室溫下，將苯甲基(1-(第三-丁基)-3-((1S,3R)-3-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)環戊基)-1氫-吡唑-5-基)胺基甲酸酯8a(3.00g,5.74mmol)溶於30mL N,N-二甲基甲醯胺中，加入二環[1.1.1]戊烷-1-胺鹽酸8b(686mg，5.74mmol)和N,N-二異丙基乙胺(2226mg,17.22mmol)，將反應液升溫至60℃氬氣下攪拌反應16小時。反應結束後將反應液倒入200mL水中，用乙酸乙酯萃取(80mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(100mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘留物用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到標題化合物8c(2.50g，產率：93.3%)。

MS(ESI)m/z 467.5[M+H]⁺

第五步

(1R,3S)-3-(5-胺基-1-(第三-丁基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯

在室溫下，將(1R,3S)-3-(5-(((苄氧基)羰基)胺基)-1-(第三-丁基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯8c(2.50g,5.36mmol)溶於20mL二氯甲烷和16mL甲醇中，加入濕鈀/碳(500mg)，將反應液氫氣球下攪拌反應16小時。反應結束後將反應液過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，得到標題化合物8d(1.50g，產率：74.4%)。

MS(ESI)m/z 377.5[M+H]⁺

第六步

(1R,3S)-3-(1-(第三-丁基)-5-(2-(3-甲基-2-羰基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-5-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯

在室溫下，將(1R,3S)-3-(5-胺基-1-(第三-丁基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯8d(100mg,0.301mmol)和2-(3-甲基-2-羰基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-5-基)乙酸INT-4(62.4mg，0.301mmol)溶於2mL二氯甲烷中，加入N,N-二異丙基乙胺(116.6mg，0.902mmol)和丙基磷酸三環酸酐溶液(574mg,0.902mmol，50%品質含量)，將反應液在氬氣球保護下攪拌反應2小時。反應結束後將反應液使用二氯甲烷(40mL)稀釋，用飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，得到標題化合物8e(130mg，產率：82.8%)。

MS(ESI)m/z 521.6[M+H]⁺

第七步

在室溫下，將(1R,3S)-3-(1-(第三-丁基)-5-(2-(3-甲基-2-羰基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-5-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯8e(130mg,0.249mmol)溶於2mL甲酸中，將反應液在85℃下氬氣球保護下攪拌反應16小時。反應8h結束後將反應液減壓濃縮，使用C18反相管柱得到標題化合物8(85mg，產率：73.3%)。

MS(ESI)m/z 466.6[M+H]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ=10.70(s,1H),7.73(s,1H),7.25(dd,J=7.7,1.5Hz,1H),7.15-7.05(m,2H),6.26(s,1H),4.96(s,1H),3.94(s,2H),3.58(s,3H),3.04(d,J=10.0Hz,1H),2.48-2.39(m,1H),2.37-2.24(m,1H),1.98(d,J=9.8Hz,1H),1.92-1.80(m,7H),1.62(d,J=52.7Hz,3H).

實施例9

(1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基-2-羰基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-7-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-5-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯

第一步

2-(2-羥基-3-硝基苯基)乙酸甲酯INT-6

氮氣氛下，常溫將化合物INT-5(1.5g,9.03mmol)溶於12mL石油醚中，降溫到0℃左右滴加HNO₃(0.9mL)/AC₂O(9mL)溶液，繼續攪拌20分鐘。用冰水淬滅反應，用乙酸乙酯萃取(25mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(30mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，減壓濃縮後殘餘物用矽膠管柱層析(正庚烷/乙酸乙酯體系)得到標題化合物INT-6(0.95g，產率：49.8%)。

第二步

2-(3-胺基-2-羥基苯基)乙酸甲酯INT-7

常溫將化合物INT-6(0.8g,3.79mmol)溶於20mL甲醇中，加入0.2g 10%Pd/C、氫氣置換三次，繼續攪拌12小時。過濾，濾餅用甲醇(20mL×3)洗滌，收集濾液，減壓濃縮後得到標題化合物INT-7(0.66g，產率：96%)。

MS(ESI)m/z 182.1[M+H]⁺

第三步

2-(2-側氧-2,3-二氫苯并[d]噁唑-7-基)乙酸甲酯INT-8

參照化合物INT-2的合成方法，以化合物INT-7(0.7g,3.86mmol)為原料得到化合物INT-8(0.65g，產率：81.2%)。

MS(ESI)m/z 208.1[M+H]⁺

第四步

2-(3-甲基-2-側氧-2,3-二氫苯并[d]噁唑-7-基)乙酸甲酯INT-9

參照化合物INT-3的合成方法，以化合物INT-8(0.5g,2.41mmol)為原料得到化合物INT-9(0.5g，產率：78.5%)。

MS(ESI)m/z 222.1[M+H]⁺

第五步

2-(3-甲基-2-側氧-2,3-二氫苯并[d]噁唑-7-基)乙酸INT-10

參照化合物INT-4的合成方法，以化合物INT-9(0.3g,1.36mmol)為原料得到化合物INT-10(0.2g，產率：72%)。

MS(ESI)m/z 206.1[M-H]^-

第六步

(1R,3S)-3-(1-(第三-丁基)-5-(2-(3-甲基-2-羰基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-7-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯

在室溫下，將(1R,3S)-3-(5-胺基-1-(第三-丁基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯8d(80mg,0.241mmol)和2-(3-甲基-2-羰基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-7-基)乙酸INT-10(50.0mg，0.241 mmol)溶於2mL二氯甲烷中，加入N,N-二異丙基乙胺(93.3mg，0.772mmol)和丙基磷酸三環酸酐溶液(459mg,0.722mmol，50%品質含量)，將反應在氬氣球下攪拌反應2小時。反應結束後將反應液使用二氯甲烷(40mL)稀釋，用飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，得到標題化合物9a(110mg，產率：87.6%)。

MS(ESI)m/z 521.6[M+H]⁺

第七步

在室溫下，將(1R,3S)-3-(1-(第三-丁基)-5-(2-(3-甲基-2-羰基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-7-基)乙醯胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基二環[1.1.1]戊烷-1-基胺基甲酸酯9a(110mg,0.211mmol)溶於2mL甲酸中，將反應液在85℃氬氣球下攪拌反應16小時。反應結束後將反應液減壓濃縮，使用C18反相管柱得到標題化合物9(85mg，產率：86.6%)。

MS(ESI)m/z 466.6[M+H]⁺

實施例10

(1R,3S)-3-(5-(2-(2-氯-4-(2-氧吡咯烷-1-基)苯基)丙胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯

第一步

2-(2-氯-4-硝基苯基)-2-甲基丙二酸二乙酯10C

氮氣氛下，在0℃，60% NaH(3.1g,77.9mmol)加到DMF(100mL)，保持0℃逐滴加入化合物10B(11.8mL,68.4mmol)，滴畢0℃攪拌0.5小時。加入化合物10A(10g,56.9mmol)，將混合物加熱至70℃並攪拌3小時。將反應混合物倒入飽和NH₄Cl溶液中。用二氯甲烷萃取，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得到化合物10C(17g，產率：99%)。

LCMS(ESI)m/z 330.2[M+H]⁺。

第二步

2-(2-氯-4-硝基苯基)丙酸10D

將化合物10C(11g,33.3mmol)加入水(27mL)，乙酸(37mL)和硫酸(10mL)的混合溶液中回流反應24小時。反應液減壓濃縮，DCM萃取，有機層用飽和Na₂CO₃水溶液洗滌，用1N HCl酸化水層後用DCM萃取，乾燥濃縮得化合物10D(6.6g，產率：86%)。

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ 8.33(d,J=2.4Hz,1H),8.18(dd,J=8.6,2.4Hz,1H),7.60(d,J=8.6Hz,1H),4.38(q,J=7.2Hz,1H),1.63(d,J=7.2Hz,3H)。

第三步

2-(2-氯-4-硝基苯基)丙酸甲酯10E

將化合物10D(6.6g,28.8mmol)溶於甲醇(100mL)，在濃硫酸(0.1g，1.1mmol)催化下回流3h。冷卻至室溫後，減壓濃縮反應液。MTBE(100×3mL)萃取，用飽和NaHCO₃水溶液和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉乾燥，濃縮得化合物10E(7.0g，產率：100%)。

第四步

2-(2-氯-4-胺基苯基)丙酸甲酯10F

氮氣氛下，將化合物10E(7g,28.6mmol)溶於甲醇(35mL)和水(28mL)的混合液中，加入NH₄Cl(1.2mL,34.3mmol)和鐵粉(4.8g,85.9mmol)。將混合物加熱至68℃，繼續攪拌2小時。將反應物冷卻至室溫並過濾，濾餅用甲醇(50mL×3)洗滌。濃縮濾液除MeOH，水相用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，用鹽水(40mL×3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得化合物10F(5.8g，產率：94%)。

LCMS(ESI)m/z 214.2[M+H]⁺。

第五步

2-(2-氯-4-(4-氯丁胺基)苯基)丙酸甲酯10G

氮氣氛下，將化合物10F(3.2g,15.1mmol)溶於二氯甲烷(32mL)，加入三乙胺(3.1mL，22.5mmol)，在0℃下逐滴加入4-氯丁醯氯(3.7mL，32.9mmol)，在室溫反應3h。用水(30mL)淬滅，二氯甲烷萃取(100mL×3).鹽水(100mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得化合物10G(4.6g，產率：96%)。

LCMS(ESI)m/z 318.2[M+H]⁺。

第六步

2-(2-氯-4-(2-氧吡咯烷-1-基)苯基)丙酸甲酯10H

氮氣氛下，將化合物10G(4.6g,14.5mmol)溶於DMF(20mL)，在室溫下滴加DBU(1.5mL，10mmol)。反應在100℃下加熱攪拌過夜。用水(50mL)淬滅反應，並用二氯甲烷萃取(50mL×3)，用鹽水(50mL)洗滌，在無水硫酸鈉乾燥，濃縮得化合物10H(3.80g，產率：99%)。

LCMS(ESI)m/z 282.3[M+H]⁺。

第七步

2-(2-氯-4-(2-氧吡咯烷-1-基)苯基)丙酸10I

氮氣氛下，常溫將化合物10H(520mg,1.8mmol)懸浮於20mL 6N鹽酸水溶液中，100℃條件下加熱反應3小時，反應液冷卻至室溫，過濾得到化合物10I(460mg，產率：92%)。

LCMS(ESI)m/z 268.4[M+H]⁺。

第八步

(1R,3S)-3-(1-(第三丁基)-5-(2-(2-氯-4-(2-氧吡咯烷-1-基)苯基)丙胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯10J

氮氣氛下，將化合物10I(100mg,0.37mmol))和(1R,3S)-3-(3-胺基-1-(第三-丁基)-1H-吡唑-5-基)(46mg，採用專利申請“WO 2020/157652 A2”公開的方法製備而得)溶於DMF(20mL)，加入三乙胺(0.52mL，3.6mmol)，然後分批滴加T₃P(50% in EA，952mg)。在 80℃攪拌16小時。用Na₂CO₃水溶液(5ml)淬滅，EA萃取(15mL×3)，鹽水(10mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮管柱層析得化合物10J(125mg，產率：71%)。

LCMS(ESI)m/z 570.5[M+H]⁺。

第九步

(1R,3S)-3-(5-(2-(2-氯-4-(2-氧吡咯烷-1-基)苯基)丙胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯10

氮氣氛下，將化合物10J(125mg,0.21mmol)溶於4mL甲酸中，75℃條件下加熱反應20小時，反應液冷卻至室溫，減壓濃縮後殘餘物用飽和碳酸氫鈉溶液調至pH=7，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，減壓濃縮後殘餘物用矽膠管柱層析得到題化合物10(54mg，產率：47.9%)，為一對異構體。

LCMS(ESI)m/z 514.5[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 10.51(s,1H),7.91(d,J=2.2Hz,1H),7.60-7.41(m,2H),7.36(s,1H),6.31(s,1H),5.00(s,1H),4.21(d,J=7.1Hz,1H),3.85(t,J=7.1Hz,2H),3.05(d,J=9.4Hz,1H),2.08(p,J=7.6Hz,3H),1.90(dt,J=9.0,4.8Hz,1H),1.71(s,2H),1.42(d,J=7.0Hz,3H),1.25(s,3H),0.61(s,2H),0.49(q,J=4.5Hz,2H).

實施例11

(1R,3S)-3-(5-(2-(3-氯-4-(2-氧吡咯烷-1-基)苯基)丙胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯

第一步

2-(3-氯-4-硝基苯基)-2-甲基丙二酸二乙酯11C

25℃，NaOH(2.4g，59.8mmol)，10B(10.3mL，59.8mmol)和11A(10g,96mmol)，加到N,N-二甲基甲醯胺(65mL)，混合物室溫攪拌14小時。將反應混合物用甲基第三丁基醚稀釋，用稀鹽酸調pH=7，萃取，用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得到化合物11C(17g，產率：90%)。

LCMS(ESI)m/z 330.4[M+H]⁺。

第二步

2-(3-氯-4-硝基苯基)丙酸11D

參照化合物10D的合成方法，以化合物11C(17g,51.5mmol)為原料得到化合物11D(8.5g，產率：71%)。

LCMS(ESI)m/z 228.0[M-H]⁺。

第三步

2-(3-氯-4-硝基苯基)丙酸甲酯11E

參照化合物10E的合成方法，以化合物11D(5g,21.8mmol)為原料得到化合物11E(4.8g，產率：90%)。

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ 7.90(d,J=8Hz,1H),7.53(s,1H),7.39(d,J=8Hz,1H),3.82(q,J=8Hz,16Hz,1H),3.74(s,3H),1.57(d,J=8Hz,3H)。

第四步

2-(4-胺基-3-氯苯基)丙酸甲酯11F

參照化合物10F的合成方法，以化合物11E(4.8g,19.7mmol)為原料得到化合物11F(4.2g，產率：99%)。

第五步

2-(3-氯-4-(4-氯丁胺基)苯基)丙酸甲酯11G

參照化合物10G的合成方法，以化合物11F(2g,9.4mmol)為原料得到化合物11G(2.9g，產率：97%)。

LCMS(ESI)m/z 318.2[M+H]⁺。

第六步

2-(3-氯-4-(2-側氧吡咯烷-1-基)苯基)丙酸甲酯11H

參照化合物10H的合成方法，以化合物11G(2.9g，9.1mmol)為原料得到化合物11H(1.6g，產率：62%)。

LCMS(ESI)m/z 282.3[M+H]⁺。

第七步

2-(3-氯-4-(2-側氧吡咯烷-1-基)苯基)丙酸11I

參照化合物10I的合成方法，以化合物11H(760mg,2.6mmol)為原料得到化合物11I(650mg，產率：90%)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 12.51(s,1H),7.50(s,1H),7.39-7.33(m,2H),3.81-3.75(m,1H),3.70(t,J=8Hz,2H),2.44(t,J=4Hz,2H),2.20-2.12(m,2H),1.40(d,J=4Hz,3H)。

第八步

(1R,3S)-3-(1-(第三丁基)-5-(2-(3-氯-4-(2-氧吡咯烷-1-基)苯基)丙胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯11J

參照化合物10J的合成方法，以化合物11I(89mg，0.33mmol)為原料得到化合物11J(140mg，產率：88%)。

LCMS(ESI)m/z 570.6[M+H]⁺。

第九步

(1R,3S)-3-(5-(2-(3-氯-4-(2-側氧吡咯烷-1-基)苯基)丙胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯11

參照化合物10的合成方法，以化合物11J(140mg,0.25mmol)為原料得到化合物11(70mg，產率：55%)，為一對異構體。

MS(ESI)m/z 514.6[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ 8.36(s,1H),7.47(s,1H),7.29-7.26(m,2H),6.51(s,1H),5.23-5.20(m,1H),3.80(t,J=8Hz,2H),3.72-3.67(m,1H),3.17(s,1H),2.62(t,J=8Hz,2H),2.48(s,1H),2.32-2.25(m,2H),2.17-2.06(m,1H),1.99-1.79(m,4H),1.57(d,J=8Hz,3H),1.34-1.24(m,3H),0.78(s,2H),0.64(s,2H)。

實施例12

(1R,3S)-3-(3-((S)-2-(2-氯-4-(2-側氧吡咯烷-1-基)苯基)丙醯胺)-1H-吡唑-5-基)環戊(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯異構體1

(1R,3S)-3-(3-((R)-2-(2-氯-4-(2-側氧吡咯烷-1-基)苯基)丙醯胺)-1H-吡唑-5-基)環戊(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯異構體2

藉由實施例10的方法製備得到(1R,3S)-3-(5-(2-(2-氯-4-(2-側氧吡咯烷-1-基)苯基)丙胺基)-1H-吡唑-3-基)環戊基(1-甲基環丙基)胺基甲酸酯10 100mg，藉由手性拆分[Column：DAICEL CHIRALPAK AD(250mm*30mm,10um),Condition：0.1%胺水IPA,Begin B：45%；End B：45%；FlowRate(ml/min)：80)]得到標題化合物異構體1(40mg，產率：40%)和標題化合物異構體2(40mg，產率：40%)。

分析方法：

Column：DAICEL CHIRALCEL AD-3(100mm * 4.6mm,3μm)；

Mobile phase：40% of iso-propanol(0.05% DEA)in CO₂；

FlowRate：2.5mL/min；

ABPR：1500psi；

Temperature：35℃。

將保留時間為3.829min的化合物定義為異構體1；

MS(ESI)m/z 514.2[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ 8.05(br s,1H),7.77(d,J=2.4Hz,1H),7.54-7.48(m,1H),7.46-7.40(m,1H),6.51(br s,1H),5.17(br s,2H),4.18(q,J=7.2Hz,1H),3.83(t,J=7.2Hz,2H),3.13(br s,1H),2.62(t,J=8.4Hz,2H),2.45(br s,1H),2.18(quin,J=7.6Hz,2H), 2.09(br s,1H),1.93-1.78(m,4H),1.65(br s,1H),1.55(d,J=7.2Hz,3H),1.34(br s,3H),0.74(br s,2H),0.60(br s,2H).

將保留時間為5.777min的化合物定義為異構體2；

MS(ESI)m/z 514.2[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ 8.01(br s,1H),7.77(d,J=2.4Hz,1H),7.55-7.49(m,1H),7.45-7.40(m,1H),6.51(br s,1H),5.16(br s,2H),4.18(q,J=7.2Hz,1H),3.83(t,J=7.2Hz,2H),3.13(br s,1H),2.62(t,J=8.4Hz,2H),2.45(br s,1H),2.18(quin,J=7.6Hz,2H),2.09(br d,J=7.6Hz,1H),1.98-1.76(m,5H),1.55(d,J=7.2Hz,3H),1.34(br s,3H),0.74(br s,2H),0.60(br s,2H).

生物學評價

以下結合測試例進一步描述解釋本揭露，但這些實施例並非意味著限制本揭露的範圍。

本揭露化合物對細胞週期蛋白-依賴性激酶活性檢測。

1.實驗材料及儀器

2.實驗步驟

使用Echo 550將化合物稀釋液轉移到測定板的每個孔中(784075，Greiner)。密封測定板，以1000g離心測定板1分鐘；在1x激酶緩衝液(由1體積的5X激酶緩衝液和4體積的蒸餾水及50uM DTT製備得到)中準備2x酶，將2.5μl 2x酶加入384孔測定板，將板在1000g下離心30s，在室溫放置10分鐘。在1x激酶緩衝液中製備2x受質和ATP混合物，加入2.5μl 2x受質和ATP混合物開始反應。將板以1000g離心30秒，密封測定板，室溫反應1小時。加入4μl ADP-Glo試劑，在室溫下孵育40分鐘，再加入8μl激酶檢測試劑，在室溫下孵育40分鐘。

在Envision 2104讀板器上讀取每個孔發光信號。

抑制百分率計算如下：

抑制百分率=100-(cmpd信號-Ave_PC信號)/(Ave_VC信號-Ave_PC信號)×100。

使用GraphPad 8.0藉由將抑制百分率值和化合物濃度的對數擬合為非線性回歸(劑量回應-可變斜率)來計算IC50。

Y=Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope))

X：抑制劑濃度的對數；Y：%抑制。

測得的IC₅₀值見表1。

表1中NA表示未測。

Claims

一種式I所示的化合物或其可藥用鹽、互變異構體，

其中，-L₁-、-L₂-各自獨立選自鍵、C₁-C₆亞(伸)烷基、-O-和-NH-，該C_1-6亞(伸)烷基視需要被一個或多個選自羥基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、鹵素、羥基、氰基、胺基和硝基的取代基取代；

R₁選自環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基各自獨立視需要被一個或多個Z取代；

R₂、R₃各自獨立選自氫、氘、鹵素、烷基、氰基、羥基、硝基、側氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、烷基、烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、羧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基的取代基取代；或R₂、R₃共同構成3-8員環，該3-8員環視需要地被一個或多個Z取代；

R₄選自單環、多環，視需要地被一個或多個Z取代，且R₅選自氫、氘、烷基和鹵素，其中該烷基視需要被一個或多個選自鹵素、烷基、烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、羧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基的取代基取代，條件是，當R₄選自單環時，R₄選自
，且R₁ 選自
或
；

R₆選自氫、氘、鹵素、烷基；

R₇各自獨立選自氫、氘、鹵素、羥基、硝基、氰基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、SR'、SOR'、SO₂R'、SO₂NR'(R")、NR'(R")、COOR'、CONR'(R")和-(P=O)R'(R")，該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、羥基、側氧、硝基、氰基、SR'、SOR'、SO₂R'、SO₂NR'(R")、NR'(R")、COR'、COOR'、CONR'(R")和-(P=O)R'(R")的取代基取代；或任意兩個相鄰R₇共同構成3-8員環，該3-8員環視需要地被一個或多個Z取代；

或R₄、R₅與它們所連接的N原子共同構成多環，並視需要地被一個或多個Z取代；

Z選自鹵素、氰基、羥基、硝基、側氧基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、SR'、SOR'、SO₂R'、SO₂NR'(R")、NR'(R")、COR'、COOR'、CONR'(R")和-(P=O)R'(R")；

每個R'或R"獨立地選自氫、氘、羥基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、羥基、側氧、硝基、氰基的取代基取代；

條件是，式I所示的化合物不是
和
如請求項1所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，當R₄選自單環時，其中該化合物I為，

或
，其中，

R₇各自獨立選自氫、氘、鹵素、C_1-6烷基、C_3-7環烷基、3-7員雜環基、5-12員芳基、5-12員雜芳基和-(P=O)R'(R")，該C_3-7環烷基、3-7員雜環基、5-12員芳基、5-12員雜芳基視需要被一個或多個選自鹵素、羥基、側氧、硝基、烷基和烷氧基的取代基取代；

-L₁-、-L₂-、R₂、R₃、R₅、R₆、R'或R"如請求項1中所定義。
如請求項2所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該化合物IIa選自，

和
；

該化合物IIb選自：

和

-L₁-、-L₂-、R₂、R₃、R₅、R₆、R₇、R'或R"如請求項2中所定義。
如請求項2或3所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該R₇選自氫、氘、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、異丙基、-(P=O)R'(R")、
和
；其中，

R'或R"獨立地選自氫、氘、甲基、乙基、丙基、異丙基和苯基；

X選自-CH和N；

Y選自-CH₂-、-CH(CH₃)-、-NH-、-N(CH₃)-和-O-；較佳地，該R₇選自氫、氘、甲基、-(P=O)(CH₃)₂、
和
。
如請求項1所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該化合物I為：

或
，其中，環A選自C_3-7環烷基、5-8員芳基和5-8員雜環基，該C_3-7環烷基、5-8芳基、5-8雜芳基視需要地被一個或多個Z取代；

-L₁-、-L₂-、R₂、R₃、R₅、R₆、Z如請求項1中所定義。
如請求項5所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中

該化合物IIc選自：

和
；

該化合物IId選自：

和
；

其中，環A、-L₁-、-L₂-、R₂、R₃、R₅、R₆、Z如請求項5中所定義。
如請求項5或6所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該環A選自5-8員雜環基，該5-8員雜環基視需要地被一個或多個選自鹵素、羥基、側氧、硝基、烷基和烷氧基的取代基取代。
如請求項7所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該環A選自
和
；

其中，

Y選自-CH₂-、-CH(CH₃)-、-NH-、-N(CH₃)-和-O-；較佳地，該環A選自
和
。
如請求項1至8中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，R₆選自氫、氘、鹵素和C_1-6烷基；較佳選自氫、氘、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基和異丙基，更佳甲基。
如請求項1或2所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，當R₄選自多環時，R₁選自C₆-C₁₂芳基和5-10員雜芳基，其中該C₆-C₁₂芳基或5-10員雜芳基視需要地被一個或多個Z取代；

Z如請求項1中所定義；較佳地，該C₆-C₁₂芳基或5-10員雜芳基選自吡唑基、***基、異噁唑基(isoxazolyl)、噁唑基(oxazolyl)、噻唑基、噻二唑基(thiadiazolyl)、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、吲唑基、苯并咪唑基和苯基，最佳異噁唑基，其中該C₆-C₁₂芳基或5-10員雜芳基視需要地被一個或多個Z取代；

Z如請求項1中所定義。
如請求項10所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該化合物I為：

，-L₁-、-L₂-、R₂、R₃、R₄、R₅、Z如請求項1中所定義。
如請求項11所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該化合物III選自

和
；

-L₁-、-L₂-、R₂、R₃、R₄、R₅、Z如請求項11中所定義。
如請求項10至12中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該Z選自氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、異丙基、氰基、羥基、鹵烷基、-(P=O)R'(R")、
和
的取代基取代；其中，

R'或R"獨立地選自氫、氘、甲基、乙基、丙基、異丙基和苯基；

X選自-CH和N；

Y選自-CH₂-、-CH(CH₃)-、-NH-、-N(CH₃)-和-O-；較佳地，該Z選自甲基、-(P=O)(CH₃)₂、
和
的取代基取代，最佳甲基。
如請求項11至13中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，該化合物III為

，-L₁-、-L₂-、R₂、R₃、R₄、R₅如請求項11中所定義。
如請求項1、10至14中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，當R₄選自多環時，R₄選自螺環、稠環和橋環，並視需要地被一個或多個Z取代；

該螺環選自螺環烷基和螺雜環基，選自[3.3]、[3.4]、[3.5]、[3.6]、[4.4]、[4.5]、[4.6]、[5.5]、[5.6]和[6.7]螺環；

該稠環選自稠環烷基、稠雜環基和稠雜芳基，選自二環和三環；

該橋環選自橋環烷基和橋雜環基，選自二環和三環，每條橋上碳原子數為0-3個；

該螺環、稠環或橋環由任一個的碳或氮原子連接到式I結構中；

Z如請求項1中所定義。
如請求項15所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中

該螺環選自
、
、
、
、
、
、
、
、
和
，視需要地進一步被一個或多個Z取代；

該螺環藉由任一*表示的連接位點連接到式I結構中；

Z如請求項1中所定義；較佳地，該螺環選自
和
，該螺環藉由*表示的連接位點連接到式I結構中。
如請求項15所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該稠環選自
、
、
、
、
和
，視需要地進一步被一個或多個Z取代；

該稠環藉由任一*表示的連接位點連接到式I結構中；

Z如請求項1中所定義；較佳地，該稠環選自
，藉由*表示的連接位點連接到式I結構中。
如請求項15所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該橋環選自
、
、
、
和
，視需要地進一步被一個或多個Z取代；

該橋環藉由任一*表示的連接位點連接到式I結構中；

Z如請求項1中所定義；較佳地，該橋環選自
和
，藉由*表示的連接位點連接到式I結構中。
如請求項1至18中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，R₅選自氫、氘、鹵素和C_1-6烷基；較佳選自氫、氘、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基和異丙基，更佳氫。
如請求項1所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，當R₄、R₅與它們所連接的N原子共同構成的多環時，該化合物I為

其中環C選自
、
、
、
、
、
、
、

、
、
、
、
、
和
；視需要地被一個或多個Z取代；

-L₁-、-L₂-、R₁、R₂、R₃如請求項1中所定義。
如請求項20所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該化合物IV化合物選自

和
；

-L₁-、-L₂-、R₁、R₂、R₃、環C如請求項20中所定義。
如請求項20或21所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該R₁選自C₆-C₁₂芳基和5-10員雜芳基，其中該C₆-C₁₂芳基或5-10員雜芳基視需要地被一個或多個Z取代；

Z如請求項1中所定義；較佳地，該C₆-C₁₂芳基或5-10員雜芳基選自吡唑基、***基、異噁唑基(isoxazolyl)、噁唑基(oxazolyl)、噻唑基、噻二唑基(thiadiazolyl)、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、吲唑基、苯并咪唑基和苯基，較佳異噁唑基，其中該C₆-C₁₂芳基或5-10員雜芳基視需要地被一個或多個Z取代；

Z如請求項1中所定義。
如請求項20至22中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該化合物IV為：

，-L₁-、-L₂-、R₂、R₃、R₄、R₅、Z如請求項1中所定義，環C如請求項20中所定義。
如請求項23所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該化合物IVa化合物選自：

和
；

-L₁-、-L₂-、R₂、R₃、R₄、R₅、Z、環C如請求項23中所定義。
如請求項20至24中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該Z選自氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、異丙基、氰基、羥基、鹵烷基、-(P=O)R'(R")、
和
的取代基取代；其中，

R'或R"獨立地選自氫、氘、甲基、乙基、丙基、異丙基和苯基；

X選自-CH和N；

Y選自-CH₂-、-CH(CH₃)-、-NH-、-N(CH₃)-和-O-；較佳地，該Z選自甲基、-(P=O)(CH₃)₂、
和
的取代基取代，較佳甲基。
如請求項1至25中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該-L₂-選自鍵、-CH₂-、-CH(CH₃)-、-CH₂-CH₂-、-O-和-NH-，較佳-CH₂-和-CH(CH₃)-。
如請求項1至26中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該R₂、R₃各自獨立選自氫、氘、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、異丙基、苯基、氰基、羥基和側氧基，較佳選自氫、氘、氟、氯和甲基，更佳氫。
如請求項1至27中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該R₂、R₃共同構成3-8員環，該3-8員環選自C_3-7環烷基、3-8員雜環基、5-8員芳基和5-8員雜芳基，該3-8員環視需要地被一個或多個Z取代；

Z如請求項1中所定義；較佳地，該3-8員環選自環丙基、環丁基和環戊基，該3-8員環視需要地被一個或多個Z取代，該Z選自氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、異丙基、苯基、氰基、羥基和側氧基，較佳選自氟、氯和甲基。
如請求項1至28中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，該-L₁-選自鍵、-CH₂-、-CH(CH₃)-、-CH₂-CH₂-、-O-和-NH-，較佳選自-CH₂-和-O-，更佳-O-。
如請求項1所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體，其中該化合物選自：

和
，或其可藥用鹽、互變異構體。
一種如請求項1至30中任一項所述的化合物的同位素取代物，較佳地，該同位素取代物為氘原子取代。
一種醫藥組成物，包括至少一種治療有效量的如請求項1至30中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體或如請求項31所述的同位素取代物以及藥學上可接受的賦形劑。
一種如請求項1至30中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體或如請求項31所述的同位素取代物或如請求項32所述的醫藥組成物在製備用於預防和/或治療與蛋白依賴性激酶相關疾病的藥物中的用途，該蛋白依賴性激酶較佳CDK2，該與蛋白依賴性激酶相關疾病較佳細胞增殖性疾病，癌症或免疫性疾病。
一種如請求項1至30中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體或如請求項31所述的同位素取代物或如請求項32所述的醫藥組成物在製備用於預防和/或治療與細胞週期蛋白相關疾病的藥物中的用途，該細胞週期蛋白較佳細胞週期蛋白E，更佳細胞週期蛋白E1、細胞週期蛋白E2，該與細胞週期蛋白相關疾病較佳細胞增殖性疾病，癌症或免疫性疾病。
一種如請求項1至30中任一項所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體或如請求項31所述的同位素取代物或如請求項32所述的醫藥組成物在製備用於預防和/或治療癌症的藥物中的用途，該癌症選自乳腺癌、卵巢癌、***癌、黑色素瘤、腦瘤、食道癌、胃癌、肝癌(包括HCC)、胰腺癌、結直腸癌、肺癌(包括NSCLC、SCLC、鱗狀細胞癌或腺癌)、腎癌(包括RCC)、皮膚癌、成膠質細胞瘤、神經母細胞瘤、肉瘤、脂肪肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、子宮癌、頭頸癌、多發性骨髓瘤、惡性淋巴瘤、真性紅細胞增多症、白血病、甲狀腺癌、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌或兒科腫瘤。
一種製備如請求項1所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體的方法，包括如下步驟：

；其中，

式I-5所示化合物與式I-6所示化合物在鹼性條件下，經取代反應，然後脫去保護基團LG₁，得到式I所示化合物；

LG₁選自保護基^tBu、S(=O)^tBu、Cbz、Boc、Bn、PMB、SEM、THP；

LG₃選自苯氧基、4-硝基苯氧基；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、L₁、L₂如請求項1中定義。
一種製備如請求項1所述的化合物或其可藥用的鹽、互變異構體的方法，當-L₁-選自-O-時，包括如下步驟：

；其中，

式I-4所示化合物與式I-6所示化合物在醯化試劑存在條件下，經胺基甲酸酯化反應，然後脫去保護基團LG₁，得到式I所示化合物；

該醯化試劑選自三光氣、1,1'-羰基二咪唑；

LG₁選自保護基^tBu、S(=O)^tBu、Cbz、Boc、Bn、PMB、SEM、THP；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、L₂如請求項1中定義。