TW201609671A - 經取代之二胺基嘧啶基化合物、其組合物及使用其之治療方法 - Google Patents

經取代之二胺基嘧啶基化合物、其組合物及使用其之治療方法 Download PDF

Info

Publication number
TW201609671A
TW201609671A TW103144680A TW103144680A TW201609671A TW 201609671 A TW201609671 A TW 201609671A TW 103144680 A TW103144680 A TW 103144680A TW 103144680 A TW103144680 A TW 103144680A TW 201609671 A TW201609671 A TW 201609671A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
substituted
compound
amino
mmol
etoac
Prior art date
Application number
TW103144680A
Other languages
English (en)
Inventor
安德瑞 安東 卡拉布瑞斯
布蘭登 華德 懷特菲德
布萊恩 艾德溫 凱崔斯
布雷登 班奈特
丹尼爾 卡許恩
戴伯拉 摩坦森
得華 黃
伊杜艾多 托瑞斯
傑森 帕尼斯
約翰 沙潘茲
約書亞 漢森
凱特琳娜 萊芙特賀斯
馬修 寇瑞亞
瑪麗亞 莫塞迪斯 迪葛多
拉札 拉赫加
派翠克 帕派
索果 巴曼雅
薩伊 海吉
史蒂芬 諾瑞斯
特倫史蓋 維歐尼昆 普蘭特溫
Original Assignee
標誌製藥公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 標誌製藥公司 filed Critical 標誌製藥公司
Publication of TW201609671A publication Critical patent/TW201609671A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/48—Two nitrogen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Abstract

本發明提供具有以下結構之二胺基嘧啶基化合物： □其中X、L、R1及R2如本文中所定義；包含有效量之二胺基嘧啶基化合物之組合物；及用於治療或預防PKC-θ-介導之病症或可藉由抑制例如PKC-θ之激酶治療或預防之病狀的方法。

Description

經取代之二胺基嘧啶基化合物、其組合物及使用其之治療方法
本申請案主張2013年12月20日申請之美國臨時申請案第61/919,216號的權利，其全部內容以引用的方式併入本文中。
本文提供某些烷基雜芳基-二胺基嘧啶基化合物、包含有效量之該等化合物之組合物及用於治療或預防PKC-θ介導病症之方法，該等方法包括向有此需要之個體投與有效量之該等烷基雜芳基-二胺基嘧啶基化合物。
已知異常蛋白質磷酸化與疾病病因或結果之間的關係超過20年。因此，蛋白激酶已變為極重要藥物靶標群。[參見Cohen,Nature,1：309-315(2002),Gaestel等人Curr.Med.Chem.14：2214-223(2007)；Grimminger等人Nat.Rev.Drug Disc.9(12)：956-970(2010)]。各種蛋白激酶抑制劑已用於臨床上治療各種疾病，諸如癌症及慢性發炎疾病，包括類風濕性關節炎及牛皮癬。[參見Cohen,Eur.J.Biochem.,268：5001-5010(2001)；Protein Kinase Inhibitors for the Treatment of Disease：The Promise and the Problems,Handbook of Experimental Pharmacology,Springer Berlin Heidelberg,167(2005)]。
對蛋白激酶路徑之複雜性及各種蛋白激酶與激酶路徑之中及之間的關係及相互作用之複雜性的闡明強調研發能夠充當對多種激酶或多種激酶路徑具有有益活性的蛋白激酶調變劑、調節劑或抑制劑之醫藥劑的重要性。因此，仍需要新穎激酶調變劑。
蛋白激酶C(PKC)家族為包涵十二種相關同功酶之絲胺酸/蘇胺酸激酶群。PKC在大範圍組織及細胞類型中表現。PKC同功酶可分為三個群。群I(經典的PKC)包括Ca2+及DAG(二醯基甘油)依賴性同工酶：PKC-α、PKC-βI、PKC-βII及PKC-γ。群II(新穎PKC)包括Ca2+非依賴性同功酶：PKC-δ(或PKC-delta)、PKC-ε、PKC-η(或PKC-eta)及PKC-θ(或PKC-theta)。群III(非典型PKC)包括Ca2+及DAG非依賴性同功酶：PKC-、PKC-ζ及PKC-μ(蛋白激酶D)。蛋白激酶C之PKC-θ同功異型物選擇性地在T淋巴細胞中表現，且在成熟T細胞之T細胞抗原受體(TCR)-觸發活化及後續諸如IL-2之細胞激素釋放及T細胞增殖中發揮重要作用(Isakov及Altman,Annu.Rev.Immunol,2002,20,761-94)。 已明確T細胞在調節免疫反應中起重要作用(Powrie及Coffman,Immunology Today,1993,14,270)，且T細胞活化常常為多種免疫病症中之起始事件。在經由TCR活化後，T細胞產生細胞激素(包括IL-2)，導致細胞增殖、分化及效應功能。對IL-2抑制劑之臨床研究已顯示干擾T細胞活化及增殖有效地抑止活體內免疫反應(Waldmann,Immunology Today,1993,14,264)。因此，抑制T淋巴細胞活化及後續細胞激素產生之試劑治療上適用於選擇性地抑止需要免疫抑止免疫反應之患者中之免疫反應，且因此適用於治療諸如自體免疫及發炎疾病之免疫病症。白血病中亦涉及PKC-θ活化，且因此PKC-θ抑制劑可適用於治療白血病(Villalba及Altman,Current Cancer Targets,2002,2,125)。
PKC-δ與PKC-θ緊密相關，然而，其展現不同組織表現模式且提 供獨特細胞功能。儘管PKC-θ在T-淋巴細胞、NK細胞及骨胳肌(在較小程度上)中高度表現，然PKC-δ在骨髓細胞及B-淋巴細胞中高度表現(ExPasy資料庫；PRKCT及PRKCD)。PKC-δ對於調節B細胞耐受性很重要，以致缺乏PKC-δ之小鼠展現自我反應性B細胞數增加、IL-6升高、表現抗核抗原之自身抗體，且展現狼瘡樣病變(Mecklenbrauker等人,Nature,2002,416,860-865；Miyamoto等人,Nature,2002,416,865-869)。此外，對青少年發作狼瘡之同胞基因檢查鑑別出PKC-δ(PRCKD)基因中之突變(Belot等人,Arthritis&Rheumatism,2013,65,2161-2165)。出於此原因，抑制PKC-δ在治療自體免疫疾病中可為有害的，且對避免此酶之慢性抑制存在解釋。在缺血-再灌注損傷之急性治療之情形下，療法之PKC-δ的選擇性抑制已先前進行臨床評估(delcasertib；Kai Pharmaceuticals)。
仍需要研發用於與PKC-θ活化相關的大部分疾病及病症之有效治療劑(Chaudhary及Kasaian,Curr Opin Investig Drugs 2006 7(5)：432-437；Zhang,E.Y,Kong,K.,及Altman,A.,Adv Pharmacol 2013,第66卷,267-312；Chand,S.,等人.Curr Pharmaceut Design 212,第18(30)卷：4725-4746)。因此，提供適用作PKC-θ之選擇性抑制劑且因此在治療與PKC-θ活化相關的病症及疾病中有用之安全及有效化合物將為有益的。特定言之，仍需要有效治療劑，其為PKC-θ之選擇性抑制劑，但不影響PKC家族諸如PKC-δ及/或PKC-η之其他成員。
本申請案部分2中之任何參考文獻之引用或鑑別不應解釋為承認參考文獻為本申請案之先前技術。
本文提供具有以下式(I)之化合物：
或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、同位素物或立體異構體，其中L、X、R1及R2如本文中所定義。
在一個態樣中，本文提供如本發明中所描述之二胺基嘧啶基化合物，諸如式(I)化合物，或來自表1或表2之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、同位素物或立體異構體。
在一個態樣中，本文提供包含有效量之如本文中所描述之二胺基嘧啶基化合物及醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或媒劑之醫藥組合物。在一些實施例中，醫藥組合物適用於口服、非經腸、經黏膜、經皮或局部投與。
在一個態樣中，本文提供用於治療或預防PKC-θ介導病症之方法或供治療或預防PKC-θ介導病症之方法用的化合物，該等PKC-θ介導病症諸如移植物抗宿主病、器官移植排斥反應、牛皮癬、杜興氏肌肉萎縮症(Duchenne muscular dystrophy)、類風濕性關節炎、糖尿病、胰島素抗性、重症肌無力、多發性硬化症、結腸炎、牛皮癬性關節炎、僵直性脊椎炎、異位性皮膚炎、休格連氏症候群(Sjogren syndrome)、哮喘或狼瘡，其中方法包括向有此需要之個體投與有效量之如本文中所描述之二胺基嘧啶基化合物。
在一個態樣中，本文提供在表現激酶(例如，PKC-θ)之細胞中抑制該激酶的方法，其包含使該細胞與有效量之如本文中所描述之二胺基嘧啶基化合物接觸。在一些實施例中，二胺基嘧啶基化合物優於PKC-δ選擇性地抑制PKC-θ。在其他該等實施例中，二胺基嘧啶基化 合物優於PKC-δ及/或PKC-η選擇性地抑制PKC-θ。
在另一態樣中，本文提供用於製備如本文中所描述之二胺基嘧啶基化合物的方法。
參考實施方式及實例可更全面理解本實施例，實施方式及實例意欲例證非限制性實施例。
定義
「烷基」為具有1至10個碳原子、通常1至8個碳或在一些實施例中1至6、1至4或2至6個碳原子之飽和、部分飽和或不飽和直鏈或分支鏈非環烴。代表性烷基包括-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基及-正己基；而飽和分支鏈烷基包括-異丙基、-第二丁基、-異丁基、-第三丁基、-異戊基、-新戊基、第三戊基、-2-甲基戊基、-3-甲基戊基、-4-甲基戊基、-2,3-二甲基丁基及其類似基團。不飽和烷基之實例包括(但不限於)乙烯基、烯丙基、-CH=CH(CH3)、-CH=C(CH3)2、-C(CH3)=CH2、-C(CH3)=CH(CH3)、-C(CH2CH3)=CH2、-C≡CH、-C≡C(CH3)、-C≡C(CH2CH3)、-CH2C≡CH、-CH2C≡C(CH3)及-CH2C≡C(CH2CH3)以及其他。烷基可經取代或未經取代。當據稱本文中所描述之烷基「經取代」時，其可經見於本文中所揭示之例示性化合物及實施例之彼等任何取代基以及以下取代：鹵素(氯、碘、溴或氟)；烷基；羥基；烷氧基；烷氧基烷基；胺基；烷基胺基；羧基；硝基；氰基；巰基；硫醚；亞胺；醯亞胺；脒；胍；烯胺；胺基羰基；醯胺基；膦酸基；膦；硫羰基；亞碸基；碸；磺醯胺；酮；醛；酯；脲；胺基甲酸酯；肟；羥胺；烷氧基胺；芳烷氧基胺；N-氧化物；肼；醯肼；腙；疊氮化物；異氰酸酯；異硫氰酸酯；氰酸酯；硫氰酸酯；B(OH)2或O(烷基)胺基羰基。
「環烷基」為具有3至10個碳原子，具有單環或多稠合環或橋聯 環之飽和或部分飽和環烷基，其可視情況經1至3個烷基取代。在一些實施例中，環烷基具有3至8個環成員，然而在其他實施例中，環碳原子之數目在3至5，3至6或3至7範圍內。此類環烷基包括例如單環結構，諸如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環辛基、1-甲基環丙基、2-甲基環戊基、2-甲基環辛基及其類似基團；或多環或橋聯環結構，諸如1-雙環[1.1.1]戊基、雙環[2.1.1]己基、雙環[2.2.1]庚基、雙環[2.2.2]辛基、金剛烷基及其類似基團。不飽和環烷基之實例包括環己烯基、環戊烯基、環己二烯基、丁二烯基、戊二烯基、己二烯基以及其他。環烷基可經取代或未經取代。該等經取代之環烷基包括例如環己醇及其類似基團。
「芳基」為具有6至14個碳原子，具有單環(例如，苯基)或多稠合環(例如，萘基或蒽基)之芳族碳環基。在一些實施例中，芳基在基團之環部分中含有6至14個碳，且在其他實施例中含有6至12個或甚至6至10個碳原子。特定芳基包括苯基、聯苯基、萘基及其類似物。芳基可經取代或未經取代。片語「芳基」亦包括含有稠合環之基團，諸如稠合芳族-脂族環系統(例如，茚滿基、四氫萘基及其類似基團)。
「雜芳基」為具有一至四個雜原子作為雜芳環系統中之環原子的芳基環系統，其中原子之其餘部分為碳原子。在一些實施例中，雜芳基在基團之環部分中含有3至6個環原子，且在其他實施例中含有6至9個或甚至6至10個原子。適合雜原子包括氧、硫及氮。在某些實施例中，雜芳基環系統為單環或雙環。非限制性實例包括(但不限於)諸如吡咯基、吡唑基、咪唑基、***基、四唑基、噁唑基、異噁唑基、苯并異噁唑基(例如，苯并[d]異噁唑基)、噻唑基、吡咯基、嗒基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、吲哚基(例如，吲哚基-2-酮基或異吲哚啉-1-酮基)、氮雜吲哚基(吡咯并吡啶基或1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基)、吲唑基、苯并咪唑基(例如，1H-苯 并[d]咪唑基)、咪唑并吡啶基(例如，氮雜苯并咪唑基或1H-咪唑并[4,5-b]吡啶基)、吡唑并吡啶基、***并吡啶基、苯并***基(例如，1H-苯并[d][1,2,3]***基)、苯并噁唑基(例如，苯并[d]噁唑基)、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、異噁唑并吡啶基、噻萘基、嘌呤基、黃嘌呤基、腺嘌呤基、鳥嘌呤基、喹啉基、異喹啉基(例如，3,4-二氫異喹啉-1(2H)-酮基)、四氫喹啉基、喹喏啉基及喹唑啉基之基團。
「雜環基」為芳族(亦稱作雜芳基)或非芳族環烷基，其中一至四個環碳原子獨立地用由O、S及N組成之群的雜原子置換。在一些實施例中，雜環基包括3至10個環成員，然而其他此類基團具有3至5,3至6或3至8個環成員。雜環基亦可在任何環原子處(亦即，在雜環之任何碳原子或雜原子處)鍵結至其他基團。雜環烷基可經取代或未經取代。雜環基包涵不飽和、部分飽和及飽和環系統，諸如咪唑基、咪唑啉基及咪唑啶基(例如，咪唑啶-4-酮或咪唑啶-2,4-二酮基)。片語雜環基包括稠合環種類，包括包含稠合芳族及非芳族基之彼等者，諸如1-胺基四氫萘及2-胺基四氫萘、苯并***基(例如，1H-苯并[d][1,2,3]***基)、苯并咪唑基(例如，1H-苯并[d]咪唑基)、2,3-二氫苯并[1,4]二氧雜環己烯基及苯并[1,3]二氧雜環戊烯基。該片語亦包括含有雜原子之橋聯多環系統(諸如(但不限於)奎寧環基)。雜環基之代表性實例包括(但不限於)氮丙啶基、氮雜環丁基、氮雜環庚烷基、氧雜環丁基、吡咯啶基、咪唑啶基(例如，咪唑啶-4-酮基或咪唑啶-2,4-二酮基)、吡唑啶基、噻唑啶基、四氫噻吩基、四氫呋喃基、二氧雜環戊烯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、咪唑啉基、吡唑基、吡唑啉基、***基、四唑基、噁唑基、異噁唑基、苯并異噁唑基(例如，苯并[d]異噁唑基)、噻唑基、噻唑啉基、異噻唑基、噻二唑基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基(例如，哌嗪-2-酮基)、嗎啉基、硫嗎啉基、四氫哌喃基(例如，四氫-2H-哌喃基)、四氫硫代哌喃基、氧硫雜 環己烷基、二氧基(dioxyl)、二噻烷基、哌喃基、吡啶基、嘧啶基、嗒基、吡嗪基、三嗪基、二氫吡啶基、二氫二噻基、二氫二亞硫醯基(dihydrodithionyl)、1,4-二氧雜螺[4.5]癸基、高哌嗪基、奎寧環基、吲哚基(例如，吲哚基-2-酮基或異吲哚啉-1-酮基)、吲哚啉基、異吲哚基、異吲哚啉基、氮雜吲哚基(吡咯并吡啶基或1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基)、吲唑基、吲哚嗪基、苯并***基(例如1H-苯并[d][1,2,3]***基)、苯并咪唑基(例如，1H-苯并[d]咪唑基或1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮基)、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁二唑基、苯并噁嗪基、苯并二噻基、苯并噁噻基、苯并噻嗪基、苯并噁唑基(亦即，苯并[d]噁唑基)、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[1,3]二氧雜環戊烯基、吡唑并吡啶基(例如，1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、咪唑并吡啶基(例如，氮雜苯并咪唑基或1H-咪唑并[4,5-b]吡啶基)、***并吡啶基、異噁唑并吡啶基、嘌呤基、黃嘌呤基、腺嘌呤基、鳥嘌呤基、喹啉基、異喹啉基(例如，3,4-二氫異喹啉-1(2H)-酮基)、喹嗪基、喹喏啉基、喹唑啉基、啉基、酞嗪基、啶基、喋啶基、噻萘基、二氫苯并噻嗪基、二氫苯并呋喃基、二氫吲哚基、二氫苯并二氧雜環己烯基、四氫吲哚基、四氫吲唑基、四氫苯并咪唑基、四氫苯并***基、四氫吡咯并吡啶基、四氫吡唑并吡啶基、四氫咪唑并吡啶基、四氫***并吡啶基、四氫嘧啶-2(1H)-酮及四氫喹啉基。代表性非芳族雜環基不包括包含稠合芳族基之稠合環類。非芳族雜環基之實例包括氮丙啶基、氮雜環丁基、氮雜環庚烷基、吡咯啶基、咪唑啶基(例如，咪唑啶-4-酮基或咪唑啶-2,4-二酮基)、吡唑啶基、噻唑啶基、四氫噻吩基、四氫呋喃基、哌啶基、哌嗪基(例如，哌嗪-2-酮基)、嗎啉基、硫嗎啉基、四氫哌喃基(例如，四氫-2H-哌喃基)、四氫硫代哌喃基、氧硫雜環己烷基、二噻烷基、1,4-二氧雜螺[4.5]癸基、高哌嗪基、奎寧環基或四氫嘧啶- 2(1H)-酮。代表性經取代之雜環基可經單取代或經多次取代，諸如(但不限於)吡啶基或嗎啉基，其經諸如列於以下之多種取代基2-取代、3-取代、4-取代、5-取代或6-取代或雙取代。
「環烷基烷基」為下式之基團：-烷基-環烷基，其中烷基及環烷基如上文所定義。經取代之環烷基烷基可在基團之烷基、環烷基或烷基及環烷基部分經取代。代表性環烷基烷基包括(但不限於)甲基環丙基、甲基環丁基、甲基環戊基、甲基環己基、乙基環丙基、乙基環丁基、乙基環戊基、乙基環己基、丙基環戊基、丙基環己基及其類似基團。
「芳烷基」為下式之基團：-烷基-芳基，其中烷基及芳基如上文所定義。經取代之芳烷基可在基團之烷基、芳基或烷基及芳基部分經取代。代表性芳烷基包括(但不限於)苯甲基及苯乙基及稠合(環烷芳基)烷基，諸如4-乙基-茚滿基。
「雜環基烷基」為下式之基團：-烷基-雜環基，其中烷基及雜環基如上文所定義。經取代之雜環基烷基可在基團之烷基、雜環基或烷基及雜環基部分經取代。代表性雜環基烷基包括(但不限於)4-乙基-嗎啉基、4-丙基嗎啉基、呋喃-2-基甲基、呋喃-3-基甲基、吡啶-3-基甲基、四氫呋喃-2-基乙基及吲哚-2-基丙基。
「鹵素」為氟、氯、溴或碘。
「羥基烷基」為如上文所描述經一或多個羥基取代之烷基。
「烷氧基」為-O-(烷基)，其中烷基如上文所定義。
「烷氧基烷基」為-(烷基)-O-(烷基)，其中烷基如上文所定義。
「胺基」為下式之基團：-NH2。
「烷基胺基」為下式之基團：-NH-烷基或-N(烷基)2，其中各烷基獨立地如上文所定義。
「羧基」為下式之基團：-C(O)OH。
「胺基羰基」為下式之基團：-C(O)N(R#)2、-C(O)NH(R#)或-C(O)NH2，其中各R#獨立地為如本文中所定義之經取代或未經取代烷基、環烷基、芳基、芳烷基、雜環基或雜環基。
「醯胺基」為下式之基團：-NHC(O)(R#)或-N(烷基)C(O)(R#)，其中各烷基及R#獨立地如上文所定義。
「磺醯基胺基」為下式之基團：-NHSO2(R#)或-N(烷基)SO2(R#)，其中各烷基及R#如上文所定義。
「脲」基為下式之基團：-N(烷基)C(O)N(R#)2、-N(烷基)C(O)NH(R#)、-N(烷基)C(O)NH2、-NHC(O)N(R#)2、-NHC(O)NH(R#)或-NH(CO)NHR#，其中各烷基及R#獨立地如上文所定義。
當本文中所描述之基團(除烷基外)稱為「經取代」時，其可經任何適當取代基取代。取代基之例示性實例為見於本文中所揭示之例示性化合物及實施例之彼等者以及鹵素(氯、碘、溴或氟)；烷基；羥基；烷氧基；烷氧基烷基；胺基；烷基胺基；羧基；硝基；氰基；巰基；硫醚；亞胺；醯亞胺；脒；胍；烯胺；胺基羰基；醯胺基；膦酸基；膦；硫羰基；亞碸基；碸；磺醯胺；酮；醛；酯；脲；胺基甲酸酯；肟；羥胺；烷氧基胺；芳烷氧基胺；N-氧化物；肼；醯肼；腙；疊氮化物；異氰酸酯；異硫氰酸酯；氰酸酯；硫氰酸酯；氧(=O)；B(OH)2、O(烷基)胺基羰基；環烷基，其可為單環或稠合或非稠合多環(例如，環丙基、環丁基、環戊基或環己基)，或雜環基，其可為單環或稠合或非稠合多環(例如，吡咯啶基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基或噻嗪基)；單環或稠合或非稠合多環芳基或雜芳基(例如，苯基、萘基、吡咯基、吲哚基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、***基、四唑基、吡唑基、吡啶基、喹啉基、異喹啉基、吖啶基、吡嗪基、嗒基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基或 苯并呋喃基)；芳氧基；芳烷氧基；雜環基氧基；及雜環基烷氧基。
如本文中所使用，術語「二胺基嘧啶基化合物」係指式(I)化合物以及係指本文提供之其他實施例。在一個實施例中，「二胺基嘧啶基化合物」為表1或表2中所闡述之化合物。術語「二胺基嘧啶基化合物」包括本文提供之化合物之醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、同位素物及立體異構體。
如本文中所使用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指自包括無機酸及鹼及有機酸及鹼之醫藥學上可接受之無毒酸或鹼製備的鹽。式(I)化合物之適合醫藥學上可接受之鹼加成鹽包括(但不限於)由鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉及鋅製得之金屬鹽，或由離胺酸、N,N'-二苄基乙二胺、氯普魯卡因(chloroprocaine)、膽鹼、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基-還原葡糖胺)及普魯卡因(procaine)製得之有機鹽。適合無毒酸包括(但不限於)無機及有機酸，諸如乙酸、褐藻酸、鄰胺基苯甲酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、甲酸、反丁烯二酸、糠酸、半乳糖醛酸、葡萄糖酸、葡糖醛酸、麩胺酸、乙醇酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙基磺酸、乳酸、順丁烯二酸、蘋果酸、扁桃酸、甲磺酸、黏液酸、硝酸、雙羥萘酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、丙酸、柳酸、硬脂酸、丁二酸、對胺基苯磺酸、硫酸、酒石酸及對甲苯磺酸。特定無毒酸包括鹽酸、氫溴酸、順丁烯二酸、磷酸、硫酸及甲磺酸。因此，特定鹽之實例包括鹽酸鹽及甲磺酸鹽。其他為此項技術中熟知的，參見例如Remington's Pharmaceutical Sciences,第18版,Mack Publishing,Easton PA(1990)或Remington：The Science and Practice of Pharmacy,第19版,Mack Publishing,Easton PA(1995)。
如本文中所用且除非另外指明，否則術語「立體異構體」或「立體異構純」意謂二胺基嘧啶基化合物之一種立體異構體，其實質上不含彼化合物之其他立體異構體。舉例而言，具有一個對掌性中心 之立體異構純化合物實質上不含該化合物之相反對映異構體。具有兩個對掌性中心之立體異構純化合物將實質上不含該化合物之其他非對映異構體。典型立體異構純化合物包含大於約80wt%之該化合物之一種立體異構體及小於約20wt%之該化合物之其他立體異構體，大於約90wt%之該化合物之一種立體異構體及小於約10wt%之該化合物之其他立體異構體，大於約95wt%之該化合物之一種立體異構體及小於約5wt%之該化合物之其他立體異構體，或大於約97wt%之該化合物之一種立體異構體及小於約3wt%之該化合物之其他立體異構體。二胺基嘧啶基化合物可具有對掌性中心且可以外消旋體、個別對映異構體或非對映異構體及其混合物形式存在。所有該等異構體形式均包括於本文中所揭示之實施例內，包括其混合物。
本文中所揭示之實施例包涵此類二胺基嘧啶基化合物之立體異構純形式的用途以及彼等形式之混合物之用途。舉例而言，包含等量或不等量特定二胺基嘧啶基化合物之對映異構體的混合物可用於本文中所揭示之方法及組合物。此等異構體可經不對稱合成或使用標準技術(諸如，對掌性管柱或對掌性解析劑)解析。參見例如Jacques,J.,等人,Enantiomers,Racemates and Resolutions(Wiley-Interscience,New York,1981)；Wilen,S.H.,等人,Tetrahedron 33：2725(1977)；Eliel,E.L.,Stereochemistry of Carbon Compounds(McGraw-Hill,NY,1962)；及Wilen,S.H.,Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions第268頁(E.L.Eliel,編,Univ.of Notre Dame Press,Notre Dame,IN,1972)。
亦應注意二胺基嘧啶基化合物可包括E異構體及Z異構體或其混合物，及順式異構體及反式異構體或其混合物。在某些實施例中，二胺基嘧啶基化合物以E異構體或Z異構體形式經分離。在其他實施例中，二胺基嘧啶基化合物為E異構體及Z異構體之混合物。
「互變異構體」係指彼此平衡之化合物之異構體形式。異構形式之濃度將視化合物所存在之環境而定，且可視例如化合物為固體抑或呈有機溶液或水溶液形式而不同。舉例而言，在水溶液中，吡唑可展現以下異構體形式，其稱為彼此互變異構體：
如熟習此項技術者容易理解，多種官能基及其他結構可展現互變異構性且式(I)化合物之所有互變異構體在本發明範疇內。
亦應注意二胺基嘧啶基化合物在一或多個原子處可含有非天然比例之原子同位素。舉例而言，化合物可經放射性同位素放射性標記，該等放射性同位素諸如氚(3H)、碘-125(125I)、硫-35(35S)或碳-14(14C)，或可經同位素增濃，諸如經氘(2H)、碳-13(13C)或氮-15(15N)增濃。如本文中所使用，「同位素物」為經同位素增濃化合物。術語「經同位素增濃」係指原子具有除彼原子之天然同位素組成外之同位素組成。「經同位素增濃」亦可係指化合物含有至少一個具有除彼原子之天然同位素組成外之同位素組成的原子。術語「同位素組成」係指給定原子所存在之各同位素之量。經放射性標記及經同位素增濃之化合物適用作治療劑，例如癌症及發炎治療劑、研究試劑(例如，結合分析劑)及診斷劑(例如，活體內成像劑)。如本文中所描述之二胺基嘧啶基化合物之所有同位素變體(無論是否具有放射性)意欲包涵在本文提供之實施例的範疇內。在一些實施例中，提供二胺基嘧啶基化合物之同位素物，例如同位素物為氘、碳-13或氮-15增濃二胺基嘧啶基化合物。
應理解，獨立於用於各L、X、R1或R2、立體異構或同位素組成之取代基的選擇，本文中所提及之各二胺基嘧啶基化合物可以本文中論述之醫藥學上可接受之鹽中之任一形式提供。同樣，應理解同位素 組成可獨立於本文中所提及之各二胺基嘧啶基化合物之立體異構組成而改變。此外，雖然受存在於對應二胺基嘧啶基化合物或其鹽中之彼等元素限制，但同位素組成可以其他方式獨立於各L、X、R1或R2之取代基的選擇，或獨立於對應二胺基嘧啶基化合物之醫藥學上可接受之鹽的選擇而變化。
應注意若經描繪之結構與彼結構之名稱不一致，則更多考慮經描繪之結構。
如本文中所使用，「抑制(inhibit/inhibition)」意謂在二胺基嘧啶基化合物存在下指定活性(例如，激酶或磷酸化活性)之特定反應相對減少。激酶活性(例如，PKC-θ)活性之抑制可藉由本文中所描述之生物化學分析測定。
如本文中所使用，「選擇性的」或「選擇性地」意謂優於其他靶標(例如，諸如PKC-δ及/或PKC-η之激酶)對特定靶標(例如，諸如PKC-θ之激酶)具有活性偏好，其可基於表明激酶活性之分析定量，該等生物化學分析揭示於本文中。二胺基嘧啶基化合物之選擇性由在相關靶標處其IC50(或若使用生物分析，則EC50或ED50)之比較測定。舉例而言，對PKC-δ之IC50為50nM且對PKC-θ之IC50為10nM之二胺基嘧啶基化合物具有5：1之PKC-δ優於PKC-θ選擇性比，或對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ5倍。在一些實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ約5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約50倍、約100倍、約150倍、約200倍、約250倍、約300倍或約500倍。在其他實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ及PKC-η約5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約50倍、約100倍、約150倍、約200倍、約250倍、約300倍或約500倍。
已報導PKC-θ在病症中之作用。舉例而言，PKC-θ介導病症包括牛皮癬(Skvara等人,J Clin Invest.2008；118(9)：3151-3159)、杜興氏肌 肉萎縮症(Madaro等人,PLoS One 2012；7(2)：e31515)、類風濕性關節炎(Healy等人,J Immunol.2006；177(3)：1886-1893；Zanin-Zhorov等人,Science 2010；328(5976)：372-726)、2型糖尿病及胰島素抗性(Kim等人,J Clin Invest.2004；114(6)：823-7)、重症肌無力(Miles及Wagner,J Neurosci Res.2003；71(2)：188-195)、多發性硬化症(Salek-Ardakani等人,J Immunol.2005；175(11)：7635-41)及結腸炎(Zanin-Zhorov等人,Science 2010；328(5976)：372-726)。
如本文中所使用，「治療」意謂病症、疾病或病狀或與病症、疾病或病狀相關的一或多種症狀整個或部分緩解，或減緩或阻止彼等症狀之進一步發展或惡化，或緩解或根除病症、疾病或病狀本身之病因。在一個實施例中，病症為PKC-θ介導病症，諸如移植物抗宿主病、器官移植排斥反應、牛皮癬、杜興氏肌肉萎縮症、類風濕性關節炎、糖尿病、胰島素抗性、重症肌無力、多發性硬化症、結腸炎、牛皮癬性關節炎、僵直性脊椎炎、異位性皮膚炎、休格連氏症候群、哮喘或狼瘡。在一些實施例中，「治療」意謂病症、疾病或病狀或與病症、疾病或病狀相關的症狀整個或部分緩解，該病症、疾病或病狀例如PKC-θ介導病症，諸如移植物抗宿主病、器官移植排斥反應、牛皮癬、杜興氏肌肉萎縮症、類風濕性關節炎、糖尿病、胰島素抗性、重症肌無力、多發性硬化症、結腸炎、牛皮癬性關節炎、僵直性脊椎炎、異位性皮膚炎、休格連氏症候群、哮喘或狼瘡；或減緩或阻止彼等症狀之進一步發展或惡化。在另一實施例中，「治療」意謂病症、疾病或病狀或與病狀相關之症狀整個或部分緩解，其藉由抑制PKC-θ可治療或可預防。在另一實施例中，「治療」意謂病症、疾病或病狀或與病狀相關之症狀整個或部分緩解，其藉由選擇性優於PKC-δ抑制PKC-θ可治療或可預防。在另一實施例中，「治療」意謂病症、疾病或病狀或與病狀相關之症狀整個或部分緩解，其藉由選擇性優於 PKC-δ及/或PKC-η抑制PKC-θ可治療或可預防。
如本文中所使用，「預防」意謂整個或部分延遲及/或阻止病症、疾病或病狀之發作、復發或擴散；防止個體獲得病症、疾病或病狀；或減少個體獲得病症、疾病或病狀之風險的方法。在一個實施例中，病症為PKC-θ介導病症，諸如如本文中所描述之移植物抗宿主病、器官移植排斥反應、牛皮癬、杜興氏肌肉萎縮症、類風濕性關節炎、糖尿病、胰島素抗性、重症肌無力、多發性硬化症、結腸炎、牛皮癬性關節炎、僵直性脊椎炎、異位性皮膚炎、休格連氏症候群、哮喘或狼瘡或其症狀。
關於二胺基嘧啶基化合物之術語「有效量」意謂能夠治療或預防本文中所揭示之病症、疾病或病狀或其症狀的量。
術語「個體」包括動物，包括(但不限於)諸如母牛、猴、馬、綿羊、豬、雞、火雞、鵪鶉、貓、狗、小鼠、大鼠、兔或天竺鼠之動物，在一個實施例中包括哺乳動物，在另一實施例中包括人類，在另一實施例中包括來自前述動物中之任一者之細胞。在一個實施例中，個體為非人類動物，在另一實施例中為非人類哺乳動物。在一個實施例中，個體為患有導致肝臟纖維化病症之肝臟纖維化病症或糖尿病或代謝症候群或病狀或處於患有該等病症風險之人類，其藉由抑制激酶(例如，PKC-θ)或其症狀可治療或可預防。
二胺基嘧啶基化合物
本文提供具有以下式(I)之化合物：
其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、同位素物或立體異構體，其中：X為CN或CF3；L為(C1-4烷基)；R1為經取代或未經取代之雜芳基；及R2為經取代或未經取代之環烷基。
在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN。在其他實施例中，X為CF3。
在式(I)化合物一些實施例中，L為CH2。在另一實施例中，L為CH2CH2或CH2CH2CH2。在另一實施例中，L為CH2、CH2CH2或CH2CH2CH2。
在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN且L為CH2(C1烷基)。在其他實施例中，X為CF3且L為CH2(C1烷基)。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN且L為CH2CH2(C2烷基)。在其他實施例中，X為CF3且L為CH2CH2(C2烷基)。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN且L為CH2CH2CH2(C3烷基)。在其他實施例中，X為CF3且L為CH2CH2CH2(C3烷基)。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN且L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)。在其他實施例中，X為CF3且L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)。
在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2(C1烷基)且R1為經取代之雜芳基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2(C1烷基)且R1為經取代之雜芳基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2(C2烷基)且R1為經取代之雜芳基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2(C2烷基)且R1為經取代之雜芳基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2(C3烷基)且R1為經取代之雜 芳基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2(C3烷基)且R1為經取代之雜芳基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)且R1為經取代之雜芳基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)且R1為經取代之雜芳基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2(C1烷基)且R1為未經取代之雜芳基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2(C1烷基)且R1為未經取代之雜芳基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2(C2烷基)且R1為未經取代之雜芳基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2(C2烷基)且R1為未經取代之雜芳基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2(C3烷基)且R1為未經取代之雜芳基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2(C3烷基)且R1為未經取代之雜芳基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)且R1為未經取代之雜芳基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)且R1為未經取代之雜芳基。
在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2(C1烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2(C1烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2(C2烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2(C2烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2(C3烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2(C3烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷 基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2(C1烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2(C1烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2(C2烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2(C2烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2(C3烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2(C3烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為經取代之環烷基。
在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2(C1烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2(C1烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2(C2烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2(C2烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2(C3烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2(C3烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為未經取代之 環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)，R1為經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2(C1烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2(C1烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2(C2烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2(C2烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2(C3烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2(C3烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在式(I)化合物之一些實施例中，X為CN，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。在其他實施例中，X為CF3，L為CH2CH2CH2CH2(C4烷基)，R1為未經取代之雜芳基且R2為未經取代之環烷基。
在式(I)化合物之一些實施例中，R1為經取代或未經取代之吡啶基、吡啶基-1-氧化物或嘧啶基。在一些此類實施例中，R1經一或多個鹵素、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基取代，其中R3為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基。在一些此類實施例中，R1經一或多個鹵素、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基取代，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基。在一些實施例中，R1經一或多個F、Cl、Br、I、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、苯基、萘基、-CH2F、-CHF2、-CF3、-CHFCH3、-CF2CH3、-C(CH3)2F、-OCH3、-OCH2F、-OCHF2、-OCF3、-OCH2CH3、-OCH2CH2F、- OCH2CHF2、-OCH2CF3、-OCH2CH(CH3)F、-OCH2C(CH3)2F、-OCH2C(CH3)F2、-OCH2CH2CF3或-O-苯基取代，其中各苯基視情況經鹵素或經取代或未經取代之C1-4烷基取代。舉例而言，R1經一或多個F、甲基、乙基、異丙基、苯基、-CF3、-CF2CH3、-C(CH3)2F、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2C(CH3)F2、-OCH2CH2CF3或-O-苯基取代，其中各苯基視情況經F或甲基取代。
在其他實施例中，R1為經取代或未經取代之吡嗪基。在一些實施例中，R1為經取代或未經取代之吡啶基、吡啶基-1-氧化物、嘧啶基或吡嗪基。在一些此類實施例中，R1經一或多個Cl或-OCH2CF3取代。在其他此等實施例中，R1經一或多個F、Cl、甲基、乙基、異丙基、苯基、-CF3、-CF2CH3、-C(CH3)2F、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CF3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2C(CH3)F2、-OCH2CH2CF3或-O-苯基取代，其中各苯基視情況經F或甲基取代。
在式(I)化合物之一些實施例中，R1選自
其中Ra選自鹵素、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基，其中R3為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基；且p為0-3。在其他實施例中，Ra選自鹵素、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、經取代或未經取代之芳基，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基；且p為0-3。
在一些此類實施例中，Ra選自F、Cl、Br、I、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、苯基、萘基、-CH2F、- CHF2、-CF3、-CHFCH3、-CF2CH3、-C(CH3)2F、-OCH3、-OCH2F、-OCHF2、-OCF3、-OCH2CH3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2CF3、-OCH2CH(CH3)F、-OCH2C(CH3)2F、-OCH2C(CH3)F2、-OCH2CH2CF3或-O-苯基，其中各苯基視情況經鹵素或經取代或未經取代之C1-4烷基取代；且p為1-2。舉例而言，Ra選自F、甲基、乙基、異丙基、苯基、-CF3、-CF2CH3、-C(CH3)2F、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2C(CH3)F2、-OCH2CH2CF3或-O-苯基，其中各苯基視情況經F或甲基取代且p為1或2。
在式(I)化合物之一些其他實施例中，Ra選自Cl或-OCH2CF3。在式(I)化合物之一些實施例中，Ra選自F、Cl、甲基、乙基、異丙基、苯基、-CF3、-CF2CH3、-C(CH3)2F、-OCH3、-OCH2CH3、OCH2CF3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2C(CH3)F2、-OCH2CH2CF3或-O-苯基，其中各苯基視情況經F或甲基取代且p為1或2。
在式(I)化合物之一些實施例中，R1選自
其中Ra選自鹵素、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基；且p為0-3。舉例而言，Ra選自F、甲基、乙基、異丙基、苯基、-CF3、-CF2CH3、-C(CH3)2F、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2C(CH3)F2、-OCH2CH2CF3或-O-苯基，其中各苯基視情況經F或甲基取代且p為1或2。舉例而言，Ra選自甲基、-CF3或-OCH2CH3。
在式(I)化合物之一些實施例中，R1為經取代或未經取代之吲哚基、吲哚啉酮基、苯并噁唑基、吡咯并吡啶基、吲唑基、苯并咪唑 基、二氫苯并咪唑酮基或喹啉基。在一些此類實施例中，R1經一或多個鹵素、CN、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基取代，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基。在一些此類實施例中，R1經一或多個F、Cl、CN、甲基、乙基、-CH2SO2NHCH3、-OH、-OCH3或OCF3取代。
在式(I)化合物之一些實施例中，R1選自
其中Rc選自鹵素、CN、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基；R為H或C1-4烷基；且r為0-3。舉例而言，Rc選自F、Cl、CN、甲基、乙基、-CH2SO2NHCH3、-OH、-OCH3或-OCF3。
在式(I)化合物之一些實施例中，R1為經取代或未經取代之呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、吡唑基、咪唑基、噁二唑基或***基。在一些此類實施例中，R1經一或多個鹵素、CN、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基取代，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基。在一些此類實施例中，R1經一或多個CN、甲基、乙基、-CF3或-CH2OCH3取代。
在式(I)化合物之一些實施例中，R1選自
其中Rd選自鹵素、CN、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基；R獨立地為H或C1-4烷基；且s為0-3。舉例而言，Rc選自CN、甲基、乙基、-CF3或-CH2OCH3。
在一些實施例中，R1為經取代或未經取代之吡啶基、吡啶基-1-氧化物、嘧啶基、嗒基、吲哚基、吲哚啉酮基、苯并噁唑基、吡咯并吡啶基、吲唑基、苯并咪唑基、二氫苯并咪唑酮基、喹啉基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、吡唑基、咪唑基、噁二唑基或***基。在一些此類實施例中，R1經一或多個鹵素、CN、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基取代，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基。在一些此類實施例中，R1經一或多個F、Cl、CN、甲基、乙基、異丙基、苯基、-CF3、-CF2CH3、-C(CH3)2F、-CH2OCH3、-CH2SO2NHCH3、-OH、-OCH3、-OCF3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、-OCH2CF3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2C(CH3)F2、-OCH2CH2CF3或-O-苯基取代，其中各苯基視情況經F或甲基取代。
在式(I)化合物之一些實施例中，R2為經取代或未經取代之C3-12環烷基。舉例而言，R2為經取代或未經取代之環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基或金剛烷基。在一些此類實施例中，R2經一或多 個C1-4烷基、-OR4或-C(=O)NR2取代，其中R4為H或C1-6烷基，且各R獨立地為H或C1-4烷基。在其他此等實施例中，R2經一或多個C1-4烷基、-OR4或-C(=O)NR2取代，其中各R4獨立地為H或C1-6烷基，且各R獨立地為H或C1-4烷基。在其他實施例中，R2經一或多個甲基、乙基、丙基、異丙基、-CH2OH、-CH(CH3)OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3或-C(=O)N(CH3)2取代。舉例而言，R2經一或多個甲基、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3或-C(=O)NHCH3取代。
在式(I)化合物之一些實施例中，R2選自
其中Rb選自C1-4烷基、-OR4、或-C(=O)NR2，其中R4為H或C1-6烷基，各R獨立地為H或C1-4烷基且q為0-6。在其他實施例中，Rb選自C1-4烷基、-OR4或-C(=O)NR2，其中各R4獨立地為H或C1-6烷基，各R獨立地為H或C1-4烷基，且q為0-6。
在一些此類實施例中，Rb選自甲基、乙基、丙基、異丙基、-CH2OH、-CH(CH3)OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3或C(=O)N(CH3)2，且q為1-5。在其他實施例中，Rb選自甲基、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3或-C(=O)NHCH3，且q為1-5。在一些此類實施例中，Rb選自***基、-C(=O)NH2或-C(=O)N(CH3)2。在其他實施例中，Rb選自甲基、***基、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3或-C(=O)N(CH3)2。
在式(I)化合物之一些實施例中，R2選自
其中Rb選自C1-4烷基、-OR4或-C(=O)NR2，其中R4為H或C1-6烷基，各R獨立地為H或C1-4烷基，且t為0-5。在其他實施例中，其中Rb選自C1-4烷基、-OR4或-C(=O)NR2，其中各R4獨立地為H或C1-6烷基，各R獨立地為H或C1-4烷基，且t為0-5。
在一些此類實施例中，Rb選自甲基、乙基、丙基、異丙基、-CH2OH、-CH(CH3)OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3或-C(=O)N(CH3)2，且t為0-4。在其他實施例中，Rb選自甲基、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3或-C(=O)NHCH3，且t為0-4。
在式(I)化合物之一些其他實施例中，R2選自
其中Rb選自C1-4烷基、-OR4或-C(=O)NR2，其中R4為H或C1-6烷基，各R獨立地為H或C1-4烷基，且t為0-5。在其他實施例中，Rb選自C1-4烷基、-OR4或-C(=O)NR2，其中各R4獨立地為H或C1-6烷基，各R獨立地為H或C1-4烷基，且t為0-5。
在一些此類實施例中，Rb選自甲基、乙基、丙基、異丙基、-CH2OH、-CH(CH3)OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3或-C(=O)N(CH3)2，且t為0-4。在其他實施例中，Rb選自甲基、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3或-C(=O)NHCH3，且t為0-4。
在其他實施例中，Rb選自***基、C1-4烷基、-OR4、-C(=O)NR2，其中各R4獨立地為H或C1-6烷基，且各R獨立地為H或C1-4烷基，且t為0-5。舉例而言，Rb選自***基、-C(=O)NH2或-C(=O)N(CH3)2。在其他實施例中，Rb選自甲基、***基、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3或-C(=O)N(CH3)2。
在式(I)化合物之一些實施例中，R2選自
其中Re選自C1-4烷基、-OR4或-C(=O)NR2，其中各R4獨立地為H或C1-6烷基，各R獨立地為H或C1-4烷基，且u為0-4。舉例而言，Re選自甲基或-OH。
在R2之一些此類實施例中，R1選自
其中Ra選自鹵素、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基，其中R3為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基；且p為0-3。在其他實施例中，Ra選自鹵素、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基；且p為0-3。
在R2之其他此類實施例中，R1選自
其中Ra選自鹵素、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基；且p為0-3。
在R2之其他此等實施例中，R1選自
其中Rc選自鹵素、CN、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基；R獨立地為H或C1-4烷基；且r為0-3。
在R2之其他此等實施例中，R1選自
其中Rd選自鹵素、CN、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代 之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基；R獨立地為H或C1-4烷基；且s為0-3。
本文提供之其他實施例包括上文所闡述之特定實施例中之一或多個的組合。
代表性式(I)化合物闡述於表1中。
在其他實施例中，二胺基嘧啶基化合物選自表2。表1及表2中所闡述之二胺基嘧啶基化合物在本文中所描述之PKC分析中經測試，且發現其具有如PKC-θ抑制劑之活性。在一個實施例中，二胺基嘧啶基化合物為如本文所描述之化合物，其中該化合物在濃度為10μM時抑制PKC-θ至少約50%或大於50%。在實施例中，二胺基嘧啶基化合物為如本文所描述之化合物，其中該化合物在濃度為100nM時抑制PKC-θ至少約50%或大於50%。在一些此類實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ至少5倍。在一些此類實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ至少20倍。在一些此類實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ至少100倍。在一些此類實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ100倍以上。在其他實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ及PKC-η至少20倍。在其他實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ及PKC-η至少100倍。
用於製造二胺基嘧啶基化合物之方法
二胺基嘧啶基化合物可使用習知有機合成及市售可得起始物質製造。藉助於實例(且非限制)，式(I)之二胺基嘧啶基化合物可如流程1及流程2(顯示於下文)以及本文中所闡述之實例中概述來製備。應注意熟習此項技術者將知道如何修改說明性流程及實例中所闡述之程序以獲得所需產物。
流程1
式(I)化合物之合成顯示於流程1中，其中X、L、R1及R2如本文中所定義。在基質(例如，DIEA、TEA、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯、N-甲基嗎啉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸銫或磷酸鉀)存在下，在有機溶劑(例如，DMF、THF、乙醇、甲醇或異丙醇)中，用R2NH2處理含有2,4-二氯嘧啶之起始物質，引入R2側鏈。在高溫(例如，60℃至80℃)下，在基質(例如，DIEA、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯、N-甲基嗎啉、TEA、碳酸銫、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉或磷酸鉀)存在下，在有機溶劑(例如，THF、乙醇、NMP、DMF、DMSO、二噁烷、1-丁醇、甲醇或異丙醇)中用R1-L-NH2後續處理提供式(I)化合物。
流程2
或者，式(I)化合物可以4-氯-2-烷硫基嘧啶-甲腈(其中Rx為C1-2烷基)為起始物質，藉由在室溫或高溫(例如，25℃至70℃)下，在基質(例如，DIEA、TEA、N-甲基嗎啉、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸銫或磷酸鉀)存在下，在有機溶劑(例如，乙醇、正丁醇、NMP、DMF、DMSO或二噁烷)中用R2NH2處理來製備。烷基硫醇部分之氧化藉由在有機溶劑(諸如THF、 DCM、NMP、DMF或DMA)中用氧化劑(諸如mCPBA、過硫酸氫鉀、過氧化氫或3-苯基-2-(苯磺醯基)-1,2-噁吖丙啶)處理來達成。在有機基質(諸如DIEA、TEA、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯或N-甲基嗎啉)存在下，在溶劑(諸如二噁烷、DMSO、NMP、DMF、THF或正丁醇)中，在室溫下或高溫(例如，25℃至110℃)下用R1-L-NH2處理碸(m=1)與亞碸(m=2)之所得混合物，得到其中X為CN之式(I)化合物。
在一個態樣中，本文提供用於製備式(I)化合物之方法：
方法包含在有機溶劑中，在基質存在下，在適合於提供式(I)化合物之條件下使式(Ia)化合物與R1-L-NH2接觸 其中：X為CN或CF3；L為(C1-4烷基)；R1為經取代或未經取代之雜芳基；及R2為經取代或未經取代之環烷基。
在一個實施例中，溶劑為THF、乙醇、NMP、DMF、DMSO、二噁烷、1-丁醇、甲醇或異丙醇。在另一實施例中，基質為DIEA、1,8- 二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯、N-甲基嗎啉、TEA、碳酸銫、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉或磷酸鉀。在一些實施例中，接觸在高溫下進行，例如約60℃至約80℃。
在一些實施例中，方法進一步包含製備式(Ia)化合物： 方法包含在有機溶劑中，在基質存在下，在適合於提供式(Ia)化合物之條件下，使式(Ib)化合物與R2NH2接觸
在一個實施例中，溶劑為DMF、THF、乙醇、甲醇或異丙醇。在另一實施例中，基質為DIEA、TEA、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯、N-甲基嗎啉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸銫或磷酸鉀。
在一個態樣中，本文提供用於製備式(I)化合物之方法：
方法包含在有機溶劑中，在基質存在下，在適合於提供式(I)化合物之條件下，使式(Ic)化合物與R1-L-NH2接觸 其中：X為CN或CF3；L為(C1-4烷基)；R1為經取代或未經取代之雜芳基；及R2為經取代或未經取代之環烷基；Rx為C1-2烷基；及m為1或2。
在一個實施例中，溶劑為二噁烷、DMSO、NMP、DMF、THF或正丁醇。在另一實施例中，基質為DIEA、TEA、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯或N-甲基嗎啉。在一些實施例中，接觸在室溫或高溫下進行，例如約25℃至約110℃。
在一些實施例中，方法進一步包含製備式(Ic)化合物： 方法包含在溶劑中，在適合於提供式(Ic)化合物之條件下，用氧 化劑氧化式(Id)化合物
在一個實施例中，溶劑為THF、DCM、NMP、DMF或DMA。在另一實施例中，氧化劑為mCPBA、過硫酸氫鉀、過氧化氫或3-苯基-2-(苯磺醯基)-1,2-噁吖丙啶。
在一些實施例中，方法進一步包含製備式(Id)化合物： 方法包含在有機溶劑中，在基質存在下，在適合於提供式(Id)化合物之條件下使式(Ie)化合物與R2NH2接觸
在一個實施例中，溶劑為乙醇、正丁醇、NMP、DMF、DMSO或二噁烷。在另一實施例中，基質為DIEA、TEA、N-甲基嗎啉、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸銫或磷酸鉀。在一些實施例中，接觸在室溫或高溫下進行，例如約25℃至約 70℃。
使用方法
二胺基嘧啶基化合物具有作為治療、預防或改善動物或人類中之病狀之藥劑的效用。此外，二胺基嘧啶基化合物針對蛋白激酶(尤其PKC-θ)為活性的。因此，本文提供二胺基嘧啶基化合物之多種用途，包括治療或預防下文闡述之彼等疾病。本文提供之方法包括向有此需要之個體投與有效量之一或多種二胺基嘧啶基化合物。
在一個態樣中，本文提供用於供治療或預防PKC-θ介導病症用之方法的化合物，該等PKC-θ介導病症諸如移植物抗宿主病、器官移植排斥反應、牛皮癬、杜興氏肌肉萎縮症、類風濕性關節炎、糖尿病、胰島素抗性、重症肌無力、多發性硬化症、結腸炎、牛皮癬性關節炎、僵直性脊椎炎、異位性皮膚炎、休格連氏症候群、哮喘或狼瘡，其包括向有此需要之個體投與有效量之二胺基嘧啶基化合物。
在另一態樣中，本文提供用於治療或預防PKC-θ介導病症之方法及供用於治療或預防PKC-θ介導病症之方法用的化合物，該等PKC-θ介導病症諸如移植物抗宿主病、器官移植排斥反應、牛皮癬、杜興氏肌肉萎縮症、類風濕性關節炎、糖尿病、胰島素抗性、重症肌無力、多發性硬化症、結腸炎、牛皮癬性關節炎、僵直性脊椎炎、異位性皮膚炎、休格連氏症候群、哮喘或狼瘡。
在一個態樣中，本文提供在活體內、離體或活體外表現激酶之細胞中之抑制該激酶之方法及用於該等方法之化合物，其包含使該細胞與有效量之二胺基嘧啶基化合物接觸。在一個實施例中，激酶為PKC-θ。在一些實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ。在其他實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ及PKC-η。
在一些此類實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優 於PKC-δ至少5倍。在一些此類實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ至少20倍。在一些此類實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ至少100倍。在一些此類實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ100倍以上。在其他實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ及PKC-η至少20倍。在其他實施例中，二胺基嘧啶基化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ及PKC-η至少100倍。
舉例而言，二胺基嘧啶基化合物為來自表1或表2之化合物。
醫藥組合物及投與途徑
二胺基嘧啶基化合物可以習知製劑形式向個體經口、局部或非經腸投與，諸如膠囊、微囊、錠劑、顆粒、散劑、糖衣錠、丸劑、栓劑、注射劑、懸浮液、糖漿、貼片、乳膏、洗劑、軟膏、凝膠、噴霧、溶液及乳液。適合調配物可藉由常用方法，使用諸如以下之習知有機或無機添加劑來製備：賦形劑(例如，蔗糖、澱粉、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、葡萄糖、纖維素、滑石、磷酸鈣或碳酸鈣)；黏合劑(例如，纖維素、甲基纖維素、羥用基纖維素、聚丙基吡咯啶酮、聚乙烯吡咯啶酮、明膠、***膠、聚乙二醇、蔗糖或澱粉)；崩解劑(例如，澱粉、羧甲基纖維素、羥丙基澱粉、經低取代之羥丙基纖維素、碳酸氫鈉、磷酸鈣或檸檬酸鈣)；潤滑劑(例如，硬脂酸鎂、輕質無水矽酸、滑石或月桂基硫酸鈉)；調味劑(例如，檸檬酸、薄荷醇、甘胺酸或橙子粉)；防腐劑(例如，苯甲酸鈉、亞硫酸氫鈉、對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯)；穩定劑(例如，檸檬酸、檸檬酸鈉或乙酸)；懸浮劑(例如，甲基纖維素、聚乙烯吡咯啶酮或硬脂酸鋁)；分散劑(例如，羥丙基甲基纖維素)；稀釋劑(例如，水)；及底蠟(例如，可可脂、白凡士林或聚乙二醇)。醫藥組合物中之二胺基嘧啶基化合物之有效量可為將行使所需作用之含量；例如，對於口服及非 經腸投與，單位劑量為約0.005mg/kg個體體重至約10mg/kg個體體重。
投與個體之二胺基嘧啶基化合物之劑量變化相當廣泛，且可能受制於衛生保健從業者之判斷。一般而言，二胺基嘧啶基化合物可依約0.005mg/kg個體體重至約10mg/kg個體體重之劑量一日投與一至四次至個體體內，但上述劑量可視個體之年齡、體重及醫學病狀及投與類型而適當變化。在一個實施例中，劑量為約0.01mg/kg個體體重至約5mg/kg個體體重，約0.05mg/kg個體體重至約1mg/kg個體體重，約0.1mg/kg個體體重至約0.75mg/kg個體體重或約0.25mg/kg個體體重至約0.5mg/kg個體體重。在一個實施例中，每天給予一次劑量。在任何特定情況下，二胺基嘧啶基化合物之投與量將視諸如活性組分之溶解度、所用調配物及投與途徑之因素而定。在一個實施例中，所施用之局部濃度可提供約0.01μm至10μm之細胞內暴露或濃度。
在另一實施例中，本文提供用於治療或預防疾病或病症之方法，其包括向有此需要之個體投與約0.375毫克/天至約750毫克/天，約0.75毫克/天至約375毫克/天，約3.75毫克/天至約75毫克/天，約7.5毫克/天至約55毫克/天或約18毫克/天至約37毫克/天之二胺基嘧啶基化合物。
在另一實施例中，本文提供用於治療或預防疾病或病症之方法，其包括向有此需要之個體投與約1毫克/天至約1200毫克/天，約10毫克/天至約1200毫克/天，約100毫克/天至約1200毫克/天，約400毫克/天至約1200毫克/天，約600毫克/天至約1200毫克/天，約400毫克/天至約800毫克/天或約600毫克/天至約800毫克/天之二胺基嘧啶基化合物。在一特定實施例中，本文中所揭示之方法包括向有此需要之個體投與400毫克/天、600毫克/天或800毫克/天之二胺基嘧啶基化合物。
在另一實施例中，本文提供單位劑量調配物，其包含約1mg與200mg，約35mg與約1400mg，約125mg與約1000mg，約250mg與約1000mg或約500mg與約1000mg之間的二胺基嘧啶基化合物。
在一特定實施例中，本文提供包含約100mg或400mg二胺基嘧啶基化合物之單位劑量調配物。
在另一實施例中，本文提供單位劑量調配物，其包含1mg、5mg、10mg、15mg、20mg、30mg、35mg、50mg、70mg、100mg、125mg、140mg、175mg、200mg、250mg、280mg、350mg、500mg、560mg、700mg、750mg、1000mg或1400mg二胺基嘧啶基化合物。
二胺基嘧啶基化合物可每天投與一次、兩次、三次、四次或大於四次。在一特定實施例中，600mg或小於600mg劑量經一次日劑量投與，且大於600mg劑量以等於總日劑量之一半的量每天兩次投與。
二胺基嘧啶基化合物因便利性可經口投與。在一個實施例中，當經口投與時，二胺基嘧啶基化合物與餐食及水投與。在另一實施例中，二胺基嘧啶基化合物分散於水或果汁(例如蘋果汁或橙子汁)中且以懸浮液形式經口投與。
二胺基嘧啶基化合物亦可皮內、肌肉內、腹膜內、經皮膚、靜脈內、皮下、鼻內、硬膜外、舌下、顱內、***內、經皮、經直腸、經黏膜、藉由吸入或局部向耳朵、鼻子、眼腈或皮膚投與。投藥模式由衛生保健從業者之判斷決定，且部分可視醫學病狀之部位而定。
在一個實施例中，本文提供含有二胺基嘧啶基化合物而不含另外載劑、賦形劑或媒劑之膠囊。
在另一實施例中，本文提供包含有效量之二胺基嘧啶基化合物及醫藥學上可接受之載劑或媒劑之組合物，其中醫藥學上可接受之載劑或媒劑可包含賦形劑、稀釋劑或其混合物。在一個實施例中，組合 物為醫藥組合物。
組合物可呈錠劑、咀嚼錠、膠囊、溶液、非經腸溶液、糖衣錠、栓劑及懸浮液及其類似形式。組合物可經調配以在劑量單位中含有日劑量或日劑量之適宜部分，該劑量單位可為單一錠劑或膠囊或適宜體積之液體。在一個實施例中，溶液自水溶性鹽，諸如鹽酸鹽製備。一般而言，所有組合物均係根據醫藥化學中之已知方法製備。膠囊可藉由混合二胺基嘧啶基化合物與適合載劑或稀釋劑且在膠囊中填充適當量混合物來製備。常見載劑及稀釋劑包括(但不限於)惰性粉末狀物質，諸如許多不同種類之澱粉；粉末狀纖維素，尤其結晶及微晶纖維素；糖，諸如果糖、甘露糖醇及蔗糖；穀物粉及類似可食用粉末。
錠劑可藉由直接壓製、濕式造粒或乾式造粒來製備。其調配物通常併有稀釋劑、黏合劑、潤滑劑及崩解劑以及該化合物。典型稀釋劑包括，例如各種類型澱粉、乳糖、甘露糖醇、高嶺土、磷酸鈣或硫酸鈣、無機鹽(諸如氯化鈉)及粉末狀糖。粉末狀纖維素衍生物亦適用。典型錠劑黏合劑為諸如澱粉、明膠及糖(諸如乳糖、果糖、葡萄糖及其類似物)之物質。天然及合成樹膠亦適宜，包括***膠、海藻酸鹽、甲基纖維素、聚乙烯吡咯啶酮及其類似物。聚乙二醇、乙基纖維素及蠟亦可充當黏合劑。
潤滑劑在錠劑調配物中可能為需要的以防止錠劑及衝頭黏在模型中。潤滑劑可選自諸如滑石、硬脂酸鎂及硬脂酸鈣之光滑固體；硬脂酸及氫化植物油。錠劑崩解劑為潤濕時膨脹以使錠劑破碎且釋放化合物之物質。其包括澱粉、黏土、纖維素、褐藻素及樹膠。更特定言之，玉米及馬鈴薯澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、木纖維素、粉末狀天然海綿、陽離子交換樹脂、褐藻酸、瓜爾豆膠、柑桔渣及羧甲基纖維素例如可如月桂基硫酸鈉一般較好使用。錠劑可塗佈有作為調 味劑及密封劑之糖或成膜保護劑以改變錠劑之溶解特性。組合物亦可例如藉由在調配物中使用諸如甘露糖醇之物質調配成咀嚼錠。
當需要以栓劑形式投與二胺基嘧啶基化合物時，可使用典型的基質。可可脂為傳統的栓劑基質，其可藉由添加蠟以略微提高其熔點而得以修改。廣泛使用尤其包含具有各種分子量之聚乙二醇的水可混溶性栓劑基質。
二胺基嘧啶基化合物之作用可由適當調配物延遲或延長。舉例而言，可製備二胺基嘧啶基化合物之緩慢可溶性丸粒，且將其併入錠劑或膠囊或作為緩慢釋放可植入裝置。該技術亦包括製造若干不同溶解速率之丸粒且用該等丸粒之混合物填充膠囊。錠劑或膠囊可塗佈有抵抗溶解可預測時間段之膜。甚至可藉由使二胺基嘧啶基化合物溶解或懸浮於允許其緩慢分散於血清中之油性或乳化媒劑中而使非經腸製劑長效。
實例
藉助於說明而非限制來呈現以下實例。使用Chemdraw Ultra 9.0(Cambridgesoft)提供之自動名稱產生工具命名化合物，該工具在用於立體化學之Cahn-mgold-Prelog規則的支持下產生化學結構之系統名稱。熟習此項技術者可修改說明性實例中所闡述之程序以獲得所需產物，例如表1及表2中所列之化合物。
所用縮寫：
化合物合成 實例1：2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.7,7-二甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮. 在氮氣下，在0℃下向1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮(1.0當量)於無水THF(0.6M)中之溶液中添加氫化鈉(2.0當量，60%於礦物油中)。在室溫下攪拌所得反應混合物60min之後，添加碘甲烷(2.5當量)。在10℃下攪拌反應物隔夜。TLC(石油醚：乙酸乙酯=10：1)顯示反應完成。用飽和氯化銨水溶液淬滅反應物，且用乙酸乙酯萃取水層。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，且藉由矽膠管柱層析法(10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈無色油狀之7,7-二甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮(40%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)3.99(s,4H),2.55-2.58(m,2H),1.97-2.00(m,2H),1.87(s,2H),1.16(s, 6H)。
B.7,7-二甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇. 在氮氣下，在0℃下向7,7-二甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮(1.0當量)於MeOH(0.5M)中之溶液中緩慢添加硼氫化鈉(1.0當量)，且在室溫下攪拌所得反應混合物60min。TLC(石油醚：乙酸乙酯=10：1)顯示反應完成。添加水且在減壓下移除溶劑。用DCM萃取水層。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，得到7,7-二甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇(99%產率)，其不經進一步純化即用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)3.85-3.94(m,4H),3.37-3.40(m,1H),1.41-1.81(m,7H),0.97(s,6H)。
C.4-羥基-3,3-二甲基環己酮. 在室溫下攪拌7,7-二甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇(1.0當量)於2.0N鹽酸水溶液(3.7當量)及MeOH(0.9M)中之溶液隔夜。TLC(石油醚：乙酸乙酯=3：1)顯示反應完成。在減壓下移除溶劑，用飽和碳酸氫鈉水溶液鹼化所得殘餘物，且用乙酸乙酯萃取水層。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，得到4-羥基-3,3-二甲基環己酮(88%產率)，其不經進一步純化即用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)3.69-3.71(m,1H),2.42-2.45(m,2H),2.09-2.25(m,1H),2.04-2.08(m,4H),1.91-1.95(m,1H),0.98(s,6H)
D.(E)-4-羥基-3,3-二甲基環己酮肟. 在室溫下攪拌4-羥基-3,3-二甲基環己酮(1.0當量)、羥胺鹽酸鹽(2.0當量)及碳酸氫鈉(2.5當量)於MeOH(0.7M)中之混合物隔夜。移除溶劑且使殘餘物通過較短矽膠管柱(50%乙酸乙酯/石油醚)，得到呈無色油狀之粗(E)-4-羥基-3,3-二甲基環己酮肟(96%產率)。
E.4-胺基-2,2-二甲基環己醇. 向(E)-4-羥基-3,3-二甲基環己酮肟(1.0當量)於MeOH(0.8M)中之溶液中添加阮尼-鎳(10當量)。在氫氣 氛圍下，在室溫下攪拌反應混合物隔夜。TLC(DCM：MeOH=10：1)顯示反應完成。過濾混合物且在真空中濃縮濾液，得到4-胺基-2,2-二甲基環己醇(92%產率)，其不經進一步純化即用於下一步驟。
F.(4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基甲酸苯甲酯. 在0℃下，向4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.0當量)於1.7M碳酸鈉溶液(1.3當量)及THF(1.3M)中之混合物中緩慢添加氯甲酸苯甲酯(1.5當量)。在添加之後，在室溫下攪拌混合物隔夜。TLC(二氯甲烷：MeOH=10：1)顯示反應完成。過濾混合物且用乙酸乙酯萃取水層。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，得到粗外消旋產物，藉由矽膠管柱層析法(DCM：MeOH=20：1)將其純化，得到呈無色油狀之(4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基甲酸苯甲酯(110g，49.4%)。
G.(4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基甲酸苯甲酯. 藉由對掌性超臨界流體層析法(儀器；Thar 200製備型SFC，管柱：ChiralPak AD-10μm，300×50mm I.D，流動相：A：CO2及40% B；乙醇(0.1% NH3．H2O)，流速：240mL/min，背壓：100巴，管柱溫度：38℃，波長：210nm，循環時間：約4.0min)分離外消旋混合物(1.0當量)，分離峰1，得到(4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基甲酸苯甲酯之一種異構體(22%產率)。
H.(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇. 在氫氣球中，在室溫下攪拌於MeOH(0.37M)中之4-羥基-3,3-二甲基環己基胺基甲酸苯甲酯(峰1)(1.0當量)及鈀/碳(10%)隔夜。TLC(DCM：MeOH=10：1)顯示反應完成。經由矽藻土墊過濾混合物且在減壓下蒸發溶劑，提供呈白色固體之4-胺基-2,2-二甲基環己醇(95%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.70(s,2H),3.16(s,1H),2.65-2.71(m,1H),1.18-1.65(m,6H),0.83(m,6H)。
I.4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5- 甲腈. 向4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)與DIEA(3.0當量)於THF(0.05M)中之混合物中添加4-胺基-2,2-二甲基環己醇(峰1，上文所得)(1.2當量)。在50℃下攪拌混合物隔夜。在反應完成之後，在減壓下移除溶劑，且藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之標題化合物(82%產率)。MS(ESI)m/z 293.1[M+H]+。在裝備有Mo Kα輻射(λ=0.71073Å)之Bruker Kappa APEX-II CCD繞射儀上執行單晶X射線繞射研究。本發明化合物之晶體藉由戊烷蒸氣擴散至異丙醇溶液而生長。將0.215×0.183×0.055mm無色板安裝於具有帕拉頓油(paratone oil)之冷凍環上。使用φ及ω掃描，在90(2)K下，在氮氣流中收集資料。使用0.5°掃描寬度，晶體至偵測器距離為60mm，且曝露時間為5秒/幀。資料收集為99.9%完全的直至θ為25.00°。總共收集45590次反射，其涵蓋指數-53<=h<=56，-14<=k<=13，-23<=1<=27。發現21888次反射與對稱性無關，Rint為0.0549。標定指數及單位晶胞精修表明以C為中心之單斜晶格。發現空間群為C2。使用Bruker SAINT軟體程式整合資料且使用SADABS軟體程式按比例調整。藉由直接法之解決辦法(SHELXS)產生與所提議結構相符之完全定相模型。
藉由全矩陣最小平方(SHELXL-2013)各向異性地精修所有非氫原子。使用騎乘模型置放所有氫原子。使用SHELXL-2013中之適當HFIX命令，相對於其母原子限定其位置。絕對立體化學顯示為4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈。
J.4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在0℃下，向4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)於THF(0.1M)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，2.0當量)。隨後，在室溫下攪拌混合物2h。在反應 完成之後，在減壓下移除溶劑，且藉由矽膠層析法(50%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之標題化合物，MS(ESI)m/z 309.1,325.1[M+H]+，其不經進一步純化即用於下一步驟。
K.4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈. 用60% NaH(1.1當量)處理2,2-二氟丙-1-醇(1.2當量)於無水DMSO(1.0M)中之溶液。在室溫下攪拌所得混合物5min，之後一次性添加4-氯嘧啶-5-甲腈(1.0當量)。在室溫下攪拌反應混合物1h。添加乙酸乙酯且用水及鹽水分配反應物。濃縮有機層，得到黃色油狀物(4.19g)，藉由矽膠管柱層析法(0-75%乙酸乙酯/己烷，100g管柱)將其純化。合併所需溶離份且在減壓下移除揮發性溶劑。用己烷濕磨殘餘物且在減壓下移除揮發性溶劑，得到呈黃色油狀之4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈(72.4%產率)。MS(ESI)m/z 199.8[M+1]+。
L.(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺. 使4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)溶解於乙醇與乙酸乙酯之1：1混合物(0.2M)中。將海綿狀鎳催化劑(50%含水漿料)(19當量)及氫氧化銨(12當量)添加至反應容器，其經氫氣澈底吹掃且允許在室溫下攪拌16h。經由含有矽藻土之微纖維過濾器過濾反應混合物，用乙醇洗滌，且在減壓下移除揮發性溶劑。使用矽膠層析法(60-100%乙酸乙酯/己烷，之後1-20% MeOH/乙酸乙酯)純化殘餘物。合併所需溶離份，且在減壓下移除揮發性溶劑，得到(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺(82%產率)。MS(ESI)m/z 204.1[M+1]+。
M.2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在110℃下，加熱4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)及(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺(1.5當量)於二噁烷(0.15M)中之溶液1h。標準處理提供2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5- 基)甲基)胺基)-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈(69.6%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ(ppm)8.72(s,1H),8.26(s,1H),8.18(s,1H),7.99(t,J=5.66Hz,1H),7.17(d,J=7.81Hz,1H),4.64(t,J=12.89Hz,2H),4.39-4.49(m,2H),4.29(d,J=3.51Hz,1H),3.85-4.00(m,1H),3.12(br.s.,1H),1.73(t,J=19.14Hz,4H),1.42-1.55(m,3H),1.21-1.33(m,3H),1.10(br.s.,1H),0.59-0.78(m,5H)。MS(ESI)m/z 448.2[M+1]+。
實例2：4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-(5-甲基-1H-四唑-1-基)苯甲基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 向4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)與DIEA(3.0當量)於THF(0.05M)中之混合物中添加(1R,4S)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(立體化學如本文所描述測定)(1.2當量)。在50℃下攪拌混合物隔夜。在反應完成之後，在減壓下移除溶劑，且藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之標題化合物(82%產率)。MS(ESI)m/z 293.1[M+H]+。
B.4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈與4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈之混合物. 在0℃下，向4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)於THF(0.1M)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，2.0當量)。隨後，在室溫下攪拌混合物2h。 在反應完成之後，在真空下移除溶劑，且藉由矽膠層析法(50%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體之標題混合化合物，MS(ESI)m/z 309.1,325.1[M+H]+，其不經進一步純化即用於下一步驟。
C.N-(2-溴苯基)乙醯胺. 在0℃下，向2-溴苯胺(1.0當量)於DCM(0.2M)中之溶液中添加乙醯氯(1.5M)。在此溫度下攪拌所得混合物隔夜。添加1N鹽酸(0.4當量)以淬滅反應物。用DCM及碳酸氫鈉萃取混合物，且用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥，濃縮且自16%乙酸乙酯/石油醚濕磨，得到呈白色粉末狀之所需產物(73%產率)。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.33-8.31(m,1H),7.61(br,1H),7.54-7.52(m,1H),7.33-7.26(m,1H),6.99-6.95(m,1H),2.24(s,3H)；MS(ESI)m/z 203.2[M+H]+。
D.1-(2-溴苯基)-5-甲基-1H-四唑. 在-5℃下，向N-(2-溴苯基)乙醯胺(1.0當量)於乙腈(0.4M)中之溶液中逐滴添加三氟甲磺酸酐(2.0當量)，且攪拌混合物5min。緩慢添加三甲基矽烷基疊氮化物(4.0當量)，同時將溫度維持在-5℃，隨後在0℃下攪拌混合物80min。將混合物傾入冰冷碳酸氫鈉溶液中，用乙酸乙酯萃取，且用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。藉由矽膠管柱層析法(16%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(44%產率)。MS(ESI)m/z 239.1[M+H]+。
E.2-(5-甲基-1H-四唑-1-基)苯甲腈. 在90℃下攪拌1-(2-溴苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.0當量)、鋅粉(0.25M)、氰化鋅(0.65當量)、參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0.1當量)及1,1'-二茂鐵二基-雙(二苯基膦)(0.08當量)於乙二醇二甲醚(0.2M)中之混合物隔夜。在反應完成之後，在減壓下移除溶劑，且藉由矽膠層析法(50%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之標題化合物(65%產率)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.958-7.956(m,1H),7.94-7.87(m,1H),7.80-7.76(m, 1H),7.59-7.57(m,1H),2.63(s,3H)；MS(ESI)m/z 186.1[M+H]+。
F.(2-(5-甲基-1H-四唑-1-基)苯基)甲胺鹽酸鹽. 向2-(5-甲基-1H-四唑-1-基)苯甲腈(1.0當量)於MeOH(0.4M)中之溶液中添加披鈀木炭及濃鹽酸(1.0當量)。在氫氣氛圍(50psi)下，在室溫下攪拌反應混合物隔夜。在反應完成之後，經由矽藻土過濾混合物。在真空中濃縮濾液，得到粗產物(81%產率)，其不經進一步純化即用於下一步驟。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.85-7.75(m,3H),7.66-7.64(m,1H),3.96(s,2H),2.60(s,3H)；MS(ESI)m/z 190.1[M+H]+。
G.4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-(5-甲基-1H-四唑-1-基)苯甲基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 向4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈與4-(((1S,4R)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)於二噁烷(0.4M)中之混合物添加(2-(5-甲基-1H-四唑-1-基)苯基)甲胺鹽酸鹽(1.0當量)及DIEA(2.0當量)。在微波中在120℃下攪拌混合物2h。在反應完成及標準處理之後，獲得所需產物(37%產率)。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.12(s,1H),7.82-7.78(m,1H),7.63-7.61(m,1H),7.58-7.51(m,3H),7.02-6.92(m,1H),4.32-4.17(m,3H),4.01-3.99(m,1H),3.21-3.14(m,1H),2.41-2.36(m,3H),1.65-1.47(m,1H),1.36(br,1H),1.23-1.17(m,2H),0.81(s,3H),0.73(s,3H)；MS(ESI)m/z 434.2[M+H]+。
實例3：2-(((4-(4-氟苯基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1s,4s)-4-羥基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.4-(4-氟苯基)嘧啶-5-甲腈. 用氮氣吹掃4-氯嘧啶-5-甲腈(1.0當量)、(4-氟苯基)酸(1.2當量)、1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵-二氯化鈀(ii)二氯甲烷錯合物(10mol%)及碳酸鉀(3.0當量)於二噁烷/水3：1(0.5M)中之混合物3min。緊緊加蓋壓力反應容器且在100℃下加熱5h。添加乙酸乙酯及水，且分離各層。用鹽水洗滌有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到棕色、黏性油狀物，藉由矽膠管柱層析法(0-30%乙酸乙酯/己烷，100g管柱)將其純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(58%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)9.39(s,1H),9.06(s,1H),8.23-8.17(m,2 H),7.31-7.27(m,2 H)。MS(ESI)m/z 200.2[M+1]+。
B.(4-(4-氟苯基)嘧啶-5-基)甲胺. 在真空下使4-(4-氟苯基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)與阮尼-鎳(20mol%)於MeOH(0.1M)中之混合物脫氣，且之後添加30%氫氧化銨(10當量)。在室溫下，用氫氣氫化所得混合物隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，且用MeOH沖洗濾餅。濃縮且進一步乾燥濾液，得到棕色油狀物，藉由矽膠管柱層析法(0-10% MeOH/DCM，25g管柱)將其純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(32%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)9.19(s,1H),8.88(s,1H),7.71-7.78(m,2H),7.17-7.24(m,2H),3.99(s,2H),1.41(br.s.,2H)。MS(ESI)m/z 204.1[M+1]+。
2-(((4-(4-氟苯基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1s,4s)-4-羥基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在120℃下，藉由微波加熱4-(((1s,4s)-4-羥基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈與4-(((1s,4s)-4-羥基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈之混合物(1.0當量)及粗(4-(4-氟苯基)嘧啶-5-基)甲胺(2.0當量)於二噁烷(0.2M)中之懸浮液1h。添加水及乙酸乙酯。標準處理方法得到呈白色固體狀之標題化合物(10%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)9.12(s,1 H),8.75(s,1 H),8.24(t,J=5.7Hz,1 H),8.15(s,1 H),7.76(dd,J=5.5,8.6Hz,2 H),7.37(t,J= 8.8Hz,2 H),7.08(d,J=7.4Hz,1 H),4.64-4.54(m,2 H),4.37-4.27(m,1 H),3.66(br.s.,1 H),3.46(d,J=7.0Hz,1 H),1.72-1.52(m,2 H),1.52-1.37(m,3 H),1.24-1.08(m,3 H)。MS(ESI)m/z 420.1[M+1]+。
實例4：順-1-甲基-4-((2-(((4-(對甲苯氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)環己醇
A.4-(對甲苯氧基)嘧啶-5-甲腈. 將對甲酚(1.0當量)置放於具有DMSO(1.0M)及氫化鈉(0.9當量)之圓底燒瓶中。在環境溫度下攪拌反應混合物5min。向混合物中添加4-氯嘧啶-5-甲腈(1.0當量)。在25℃下攪拌反應物2小時。將反應混合物分配於乙酸乙酯與水之間。用鹽水(3×)洗滌有機層且用硫酸鈉乾燥。在減壓下移除揮發性有機溶劑，得到呈淺棕色固體之4-(對甲苯氧基)嘧啶-5-甲腈(41.6%產率)，其不經進一步純化即用於下一步驟。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)9.24(s,1H),8.94(s,1H),7.29(dd,J=0.8,8.6Hz,2H),7.21-7.16(m,2H),2.34(s,3H)。MS(ESI)m/z 211.7[M+1]+。
B.(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)嘧啶-5-基)甲胺. 向存於2-丙醇(0.3M)中之4-(對甲苯氧基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)中添加氫氧化銨(1.2當量)及阮尼鎳。反應容器經氫氣澈底吹掃且允許在室溫下攪拌16h。經由具有矽藻土之微纖維過濾器過濾反應混合物且用MeOH洗滌。在減壓下移除揮發性有機溶劑。將殘餘物裝載至矽膠管柱上並使用0-15% MeOH/DCM純化。合併所需溶離份且在減壓下移除溶劑，得到呈琥珀色油狀之(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)嘧啶-5-基)甲胺，其在16h之後變 為黃色固體。
C.4-氯-N-((4-(對甲苯氧基)嘧啶-5-基)甲基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺. 將(4-(對甲苯氧基)嘧啶-5-基)甲胺(1.0當量)置放於具有DIEA(1.0當量)及DMF(0.4M)之圓底燒瓶中。將燒瓶置放於冷卻浴中且冷卻至-10℃。向燒瓶添加2,4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶(1.0當量)，且在-10℃下持續攪拌。歷經3h，使反應混合物升溫至室溫。將反應混合物直接裝載至矽膠管柱(100g)上並使用5-27%乙酸乙酯/己烷，之後27%乙酸乙酯/己烷純化。合併含有所需產物(藉由薄層層析法之較低Rf斑點)之溶離份，且在減壓下移除溶劑，得到呈淺黃色固體之4-氯-N-((4-(對甲苯氧基)嘧啶-5-基)甲基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(27.0%產率)。MS(ESI)m/z 396.2[M+1]+。
D.(1s,4s)-1-甲基-4-((2-(((4-(對甲苯氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)環己醇. 將4-氯-N-((4-(對甲苯氧基)嘧啶-5-基)甲基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(1.0當量)置放於具有(1s,4s)-4-胺基-1-甲基環己醇(1.0當量)、DIEA(1.2當量)及THF(0.1M)之可密封燒瓶中。用氮氣吹掃燒瓶並密封。加熱反應混合物至60℃歷經18h。將反應混合物直接裝載至矽膠管柱上並使用0-10% MeOH/DCM純化。合併含有所需產物之溶離份，且在減壓下移除揮發性有機溶劑，得到灰白色發泡體。使用標準方法純化發泡體，得到呈白色固體之順-1-甲基-4-((2-(((4-(對甲苯氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)環己醇(40.0%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.51(s,1H),8.44(s,1H),7.99(s,1H),7.24(d,J=8.59Hz,2H),7.02-7.09(m,2H),4.67(s,2H),3.87(br.s.,1H),2.36(s,3H),1.56(br.s.,6H),1.27(br.s.,2H),1.12(br.s.,3H)。MS(ESI)m/z 489.3[M+1]+。
實例5：5-((4-((1R,1S)-4-羥基-3,3-二甲基環己胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基胺基)甲基)-2-甲基-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物
A.((6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯. 使6-甲基-4-(三氟甲基)菸鹼腈(1.0當量)溶解於MeOH(0.1M)中，添加潤濕阮尼鎳，之後添加氫氧化銨(32當量)。抽空反應容器三次，再用氫氣填充，且隨後裝備氫氣球，且在室溫下攪拌48h。經由用MeOH洗滌之較短矽藻土墊過濾混合物。在濃縮後添加乙醇以移除過量水。移除揮發性溶劑，得到溶解於DCM中之粗產物。添加DIEA(1.8當量)，之後添加BOC2O(0.95當量)。在室溫下攪拌反應物1h。移除揮發性溶劑，且經由拜泰齊層析法(Biotage chromatography)(10-100%乙酸乙酯/己烷)純化殘餘物，得到((6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(90%產率)；MS(ESI)m/z 290.3[M+1]+。
B.5-(胺基甲基)-2-甲基-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物. 向圓底燒瓶添加溶解於DCM(0.7M)中之((6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(1.0當量)。向此溶液添加間氯過氧苯甲酸(1.3當量)，且在室溫下攪拌混合物12h。移除溶劑，得到粗固體，將其溶解於MeOH中，且在室溫下添加存於二噁烷(4.2當量)中之4N HCl。攪拌混合物24h，且一些沈澱開始形成。在減壓下移除揮發性溶劑，得到粗殘餘物。使殘餘物溶解於甲醇中，且將所得混合物裝載至Strata離子交換管柱上。用水、乙腈、MeOH及存於MeOH中之7N氨水依次洗滌管柱。用存於MeOH溶離劑中之7N氨水溶離產物，且在減壓下濃縮含有溶離劑之產物，得到呈游離鹼形式之5-(胺基甲基)-2-甲基-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物(90%產率)；MS(ESI)m/z 207.0[M+1]+。
C.5-((4-((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基胺基)甲基)-2-甲基-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物. 在110℃下，加熱(1S,4R)-2,2-二甲基-4-((2-(甲亞磺醯基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)環己醇(1.0當量)及5-(胺基甲基)-2-甲基-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物(1.0當量)於二噁烷(0.15M)中之溶液14h。標準處理得到5-(((4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)甲基)-2-甲基-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物(30%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.06(s,1 H)7.81-7.99(m,3 H)5.94-6.14(m,1 H)4.53(m,2 H)4.24-4.42(m,1 H)3.91(m,1 H)2.98-3.24(m,1 H)2.23-2.39(m,3 H)1.28-1.75(m,4 H)0.83-1.24(m,3 H)0.74(s,3 H)0.57(s,3 H)；MS(ESI)m/z 494.3[M+1]+。
實例6：(1S,3R)-3-(2-((4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基胺基)-2,2-二甲基環丁醇
A.((4-異丙基嘧啶-5-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯. 將(4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺(1.0當量)、二碳酸二第三丁酯(1.0當量)及三乙胺(2.5當量)合併於THF(0.25M)中。在環境溫度下攪拌溶液。在90min之後，LCMS顯示所需產物混合物。將溶液直接傾析至100公克拜泰齊(biotage)管柱(0-20%乙酸乙酯/己烷，隨後20%乙酸乙酯/己烷，隨後30%乙酸乙酯/己烷)，得到((4-異丙基嘧啶-5-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(33.5%產率)。MS(ESI)m/z 252.0[M+1]+。
B.(4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺二鹽酸鹽. 使((4-異丙基嘧啶-5-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(1.0當量)在DCM(3.8M)中合併且冷卻至0℃。 隨後經由注射器添加存於二噁烷(3.1當量)中之氯化氫(4M)。允許在環境溫度下攪拌溶液。在5h之後，添加氯化氫(4M)於二噁烷中之另外溶液且持續攪拌。在另外2h之後，在減壓下移除揮發性有機溶劑，得到呈雙鹽酸鹽形式之(4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺二鹽酸鹽(95%產率)。MS(ESI)m/z 151.3[M+1]+。
C.2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸甲酯. 在氮氣下，向1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺(1.0當量)與三氟甲烷磺酸鋅(1.3當量)之攪拌混合物添加丙烯酸甲酯(1.2當量)。隨後音波處理所得混合物12h。在反應完成之後，添加碳酸氫鈉水溶液且用乙酸乙酯萃取混合物，用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之標題產物(37%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)3.76(s,3H),3.59-3.51(m,1H),3.15-3.06(m,1H),2.99-2.94(m,1H),1.32(s,3H),1.12(s,3H)。
D.2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸. 向2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸甲酯(1.0當量)於MeOH(1.1M)中之溶液中添加氫氧化鈉水溶液(4.48N，2.0當量)，且在50℃下攪拌所得混合物2h。起始物質如藉由用20%乙酸乙酯/石油醚溶離之薄層層析法所監測經消耗。在移除揮發性溶劑之後，將鹽酸鹽水溶液(2N，1.4當量)添加至反應混合物，且用乙酸乙酯萃取混合物。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，得到呈白色固體之產物(88%產率)，其不經進一步純化即用於下一步驟。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)12.4(br,1H),3.31-3.23(m,1H),3.17-3.08(m,1H),2.97-2.91(m,1H),1.22(s,3H),1.04(s,3H)。
E.(2,2-二甲基-3-側氧基環丁基)胺基甲酸第三丁酯. 在0℃下，向2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸(1.0當量)及三乙胺(1.5當量)於甲苯 (0.2M)中之溶液中緩慢添加磷酸二苯基磷醯基疊氮化物(1.5當量)。隨後，在100℃下攪拌混合物4h。使反應混合物冷卻至室溫且添加第三丁醇(2.5當量)。隨後使所得混合物回流15h。在反應物完成之後，添加碳酸氫鈉水溶液，且用乙酸乙酯萃取混合物，用碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法(7%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題產物(16%產率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)4.79(br,1H),4.03-4.01(m,1H),3.43(dd,J 1=18.0Hz,J 2 =9.0Hz,1H),2.94(dd,J 1 =18.0Hz,J 2 =6.9Hz,1H),1.48(s,9H),1.28(s,3H),1.13(s,3H)。
F.(3-羥基-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯. 在0℃下，以小份向(2,2-二甲基-3-側氧基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(1.0當量)於MeOH(0.1M)中之溶液中添加硼氫化鈉(1.0當量)。在添加之後，在室溫下攪拌混合物2h，隨後用丙酮淬滅混合物。在真空下移除溶劑，使殘餘物通過較短矽膠管柱層析(40%乙酸乙酯/石油醚)，得到粗標題產物(85%產率)，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS(ESI)m/z 216.2[M+H]+。
G.3-胺基-2,2-二甲基環丁醇. 在0℃下，向(3-羥基-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(1.0當量)於無水DCM(0.5M)中之溶液中添加TFA(1.4當量)，且在室溫下攪拌混合物30min。在移除揮發性溶劑之後，用氨的MeOH溶液中和殘餘物且濃縮最終所得混合物，得到粗標題產物，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS(ESI)m/z 116.2[M+H]+。
H.3-胺基-2,2-二甲基環丁醇鹽酸鹽. 藉由對掌性SFC(儀器：Thar200製備型SFC，管柱：ChiralPak IC-10μm，250×30mm I.D，流動相：A：CO2及25% B：異丙醇，流速：200mL/min，背壓：100巴，管柱溫度：38℃，波長：210nm，循環時間：約4.5min)分離3- 胺基-2,2-二甲基環丁醇。分離峰1，得到3-羥基-2,2-二甲基環丁基胺基甲酸酯之一種異構體。在0℃下，向經分離之化合物中添加HCl(g)/MeOH(4.0當量)，隨後在室溫下攪拌20min。在減壓下濃縮混合物，得到呈白色固體之3-胺基-2,2-二甲基環丁醇鹽酸鹽(22%產率)。1H NMR(DMSO-d6 400MHz)δ(ppm)8.26(s,3H),3.53-3.57(m,1H),2.84-2.85(m,1H),2.35-2.40(m,1H),1.85-1.88(m,1H),1.06(s,3H),0.99(s,3H)。
I.(1S,3R)-2,2-二甲基-3-((2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)環丁醇. 在圓底燒瓶中，將3-胺基-2,2-二甲基環丁醇鹽酸鹽(峰1，上文所得)(1.0當量)及DIEA(1.3當量)合併於THF(1.0M)及DMF(1.0M)中。在0℃下，向此溶液添加4-氯-2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶(1.0當量)。歷經2h，使混合物升溫至室溫；LCMS顯示所需產物。添加乙酸乙酯且分離有機相且用硫酸鈉乾燥。過濾有機相且將其濃縮成殘餘物。藉由矽膠層析法(拜泰齊管柱，0-50%己烷/乙酸乙酯；340gSNAP管柱)純化經乾燥之殘餘物。濃縮所需溶離份，得到標題化合物。藉由X射線結晶學如描述本文中所描述之其他中間體一般測定立體化學。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)8.22(d,J=0.63Hz,1 H)5.21(br.s.,1 H)4.08-4.23(m,1 H)3.78-3.91(m,1 H)2.80(dt,J=11.66,7.41Hz,1 H)2.52-2.57(m,3 H)1.79(ddd,J=11.66,9.46,7.88Hz,1 H)1.67(d,J=6.31Hz,1 H)1.24-1.32(m,3 H)0.97-1.06(m,3 H)。
J.(1S,3R)-3-(2-((4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基胺基)-2,2-二甲基環丁醇. 在圓底燒瓶中，將(1S,3R)-2,2-二甲基-3-((2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)環丁醇(1.0當量)及3-氯過氧苯甲酸(2.0當量)合併於THF(0.5M)中。在25℃下攪拌反應物45min。用乙酸乙酯稀釋混合物。向此溶液中添加碳酸鉀(4.0當量)。在 室溫下攪拌混合物30min，且隨後過濾。濃縮濾液，得到粗產物。將(1S,3R)-2,2-二甲基-3-((2-(甲磺醯基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)環丁醇(1.0當量)、DIEA(3.0當量)及(4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺二鹽酸鹽(1.5當量)之溶液合併於二噁烷(0.4M)中，且在環境溫度下攪拌。添加另外二噁烷以確保溶解度。在室溫下1h之後，LCMS表明一些產物之存在。在12h之後，加熱反應物至75℃歷經6h。標準處理得到標題化合物(39%產率)。1 H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.97(s,1 H)8.32-8.68(m,1 H)8.03(s,1 H)7.26-7.93(m,1 H)6.07(d,J=7.03Hz,1 H)4.79(m,1 H)4.54(br.s.,2 H)3.80-3.96(m,1 H)3.37-3.59(m,1 H)2.15-2.41(m,1 H)2.05(m,1 H)1.06-1.24(m,6 H)0.67-0.92(m,6 H)；MS(ESI)m/z 411.3[M+1]+。
實例7：4-((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基胺基)-2-((4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺基)嘧啶-5-甲腈；4-((1S,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基胺基)-2-((4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺基)嘧啶-5-甲腈
A.4-(3-乙氧基-2,2-二甲基環丁基胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 用碳酸鉀粉末(3.0當量)處理3-乙氧基-2,2-二甲基環丁胺(1.0當量)及4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.1當量)於第三丁醇/1,2-二氯乙烷(0.5M)中之溶液。隨後在氮氣下，在70℃下加熱所得反應混合物3h。冷卻之後，添加乙酸乙酯且劇烈攪拌混合物。藉由真空過濾移除固體。濃縮濾液且進一步乾燥，得到蠟質、黃色固體(100%產率)，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS(ESI)m/z 293.0[M+1]+。
B.4-(3-羥基-2,2-二甲基環丁基胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 用 存於DCM(3.0當量)中之1.0M三溴硼烷處理4-((3-乙氧基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)於DCM(0.7M)中之冷卻(0℃)、攪拌溶液。移除冷卻浴且在室溫下攪拌反應混合物1h。用MeOH淬滅反應物。添加DCM及飽和碳酸氫鈉。用DCM萃取經分離之水層。用硫酸鈉乾燥有機萃取物，過濾且濃縮，得到棕色油狀物，藉由矽膠管柱層析法(0-45%乙酸乙酯/己烷，25g管柱)將其純化，得到黃色固體(37%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)8.24(s,1H),5.42(d,J=7.03Hz,1H),4.09(dt,J=7.62,9.37Hz,1H),3.80-3.89(m,1H),2.77(dt,J=7.42,11.72Hz,1H),2.48-2.54(m,3H),1.84(ddd,J=8.20,9.47,11.62Hz,1H),1.74(d,J=6.25Hz,1H),1.23-1.28(m,3H),0.99-1.03(m,3H)。MS(ESI)m/z 264.8[M+1]+。
C.4-(3-羥基-2,2-二甲基環丁基胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在室溫下，用77% 3-氯過氧苯甲酸(2.0當量)分批及緩慢處理4-((3-羥基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)於THF(0.25M)中之溶液以保持溫度較低。在室溫下攪拌反應溶液1h，且LCMS顯示完全反應，形成上文兩種產物。用乙酸乙酯稀釋反應物且用碳酸鉀粉末(4.0當量)處理。劇烈攪拌混合物2h且過濾。用乙酸乙酯澈底沖洗濾餅。濃縮濾液，得到0.76g黃色發泡體(粗產物100%)，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS(ESI)m/z 297.1[M+1]+.MS(ESI)m/z 281.1[M+1]+。
D.(4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺. 在真空下使4-(2-氟丙-2-基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)與阮尼鎳於THF(0.5M)中之混合物脫氣。在室溫下，在全充氣氣球下氫化所得混合物隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，且用MeOH沖洗濾餅。濃縮且進一步乾燥濾液，得到棕色油狀物，藉由矽膠管柱層析法(0-20% MeOH/乙酸乙酯，50g管柱)將其純化，得到呈上文兩種產物3：2混合物之淺黃色油狀物(30%產率)。MS(ESI)m/z 152.0[M+1]+。MS(ESI)m/z 170.0[M+1]+。
E.4-((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基胺基)-2-((4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺基)嘧啶-5-甲腈及4-((1S,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基胺基)-2-((4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺基)嘧啶-5-甲腈. 在110℃下，藉由微波加熱粗(4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺(2.0當量)及4-((3-羥基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)於二噁烷(0.2M)中之溶液1h。濃縮反應物，得到固體殘餘物，藉由標準對掌性分離方法將其純化，從而產生以下兩種化合物。
4-((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基胺基)-2-((4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺基)嘧啶-5-甲腈. 如本文描述其他化合物一般測定絕對立體化學。99.5% ee。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.96-9.03(m,1H),8.43-8.54(m,1H),8.17-8.24(m,1H),8.11(t,J=5.66Hz,1H),7.29(d,J=7.42Hz,1H),4.81(d,J=5.47Hz,1H),4.50-4.62(m,2H),3.74-3.85(m,1H),3.39-3.54(m,1H),3.28(dt,J=6.69,13.57Hz,1H),2.19-2.36(m,1H),2.08-2.19(m,1H),1.18(d,J=5.47Hz,3H),1.20(d,J=5.47Hz,3H),1.14(s,1H),0.87(s,2H),0.78(s,3H)；MS(ESI)m/z 368.1[M+1]+。
4-((1S,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基胺基)-2-((4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺基)嘧啶-5-甲腈. 100% ee。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.98-9.03(m,1H),8.44-8.53(m,1H),8.17-8.24(m,1H),8.11(t,J=5.86Hz,1H),7.29(d,J=7.42Hz,1H),4.81(d,J=5.08Hz,1H),4.49-4.62(m,2H),3.74-3.85(m,1H),3.41-3.55(m,1H),3.28(dt,J=6.54,13.47Hz,1H),2.19-2.35(m,1H),2.09-2.19(m,1H),1.19(d,J=0.78Hz,3H),1.19(d,J=11.72Hz,3H),1.14(s,1H),0.87(s,2H),0.78(s,3H)；MS(ESI)m/z 368.1[M+1]+。
實例8：(1S,3R)-3-((2-(((4-(2-氟丙-2-基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-5-(三氟 甲基)嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁醇
A.((4-(2-氟丙-2-基)嘧啶-5-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯. 將(4-(2-氟丙-2-基)嘧啶-5-基)甲胺及(4-異丙基嘧啶-5-基)甲胺(1.0當量)、二碳酸二第三丁酯(1.0當量)及三乙胺(2.5當量)之混合物合併於THF(0.25M)中。在環境溫度下攪拌溶液。在90min之後，將溶液直接傾析至100公克拜泰齊管柱(0-20%乙酸乙酯/己烷(2.5L)，隨後20%乙酸乙酯/己烷，隨後30%乙酸乙酯/己烷)，得到所需氟(39%產率)。MS(ESI)m/z 270.0[M+1]+。
B.(4-(2-氟丙-2-基)嘧啶-5-基)甲胺二鹽酸鹽. 在環境溫度下，將((4-(2-氟丙-2-基)嘧啶-5-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(1.0當量)合併於DCM(1.5M)中，且經由注射器添加存於二噁烷中之4.0M氯化氫。允許在環境溫度下攪拌溶液。在16h之後，在減壓下使溶液壓縮，得到呈白色固體狀之標題化合物(100%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ ppm 9.17(d,J=1.56Hz,1 H),8.89(s,1 H),8.32(br.s.,2 H),4.22(dd,J=5.66,3.32Hz,2 H),1.59-1.84(m,6 H)；MS(ESI)m/z [M+1]+。
C.(1S,3R)-2,2-二甲基-3-((2-(甲磺醯基)-5-(三氟甲基)-嘧啶-4-基)胺基)環丁醇及(1S,3R)-2,2-二甲基-3-((2-(甲亞磺醯基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)環丁醇. 用3-氯過氧苯甲酸(2.0當量)分批處理(1S,3R)-2,2-二甲基-3-((2-(甲硫基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)環丁醇(1.0當量)於THF(0.5M)中之溶液30秒。在環境溫度下攪拌反應溶液。在45min之後，用乙酸乙酯稀釋溶液，之後添加顆粒狀碳酸鉀(4.0當量)。 允許在環境溫度下攪拌混合物30min。隨後經由紙濾片(paper frit)過濾溶液，且在減壓下使濾液壓縮，得到80%碸及20%亞碸白色發泡體(96%產率)。MS(ESI)m/z 324.0[M+1]+及MS(ESI)m/z 340.4[M+1]+。
D.(1S,3R)-3-((2-(((4-(2-氟丙-2-基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁醇. 將(1S,3R)-2,2-二甲基-3-((2-(甲磺醯基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)環丁醇(1.0當量)與(4-(2-氟丙-2-基)嘧啶-5-基)甲胺二鹽酸鹽(1.3當量)之溶液合併於二噁烷(0.4M)中且在環境溫度下攪拌。在1h之後，加熱溶液至75℃。在16h之後，在減壓下濃縮溶液，且在標準處理之後獲得標題化合物(50.9%產率)。使用對掌性中間體，如本文描述其他化合物一般測定絕對立體化學。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)9.01(s,1 H),8.47-8.67(m,1 H),7.94-8.14(m,1 H),7.78(br.s.,1 H),6.07(d,J=7.81Hz,1 H),4.66-4.91(m,2 H),3.35(br.s.,1 H),1.96-2.22(m,1 H),1.62-1.82(m,6 H),0.54-1.23(m,6 H)；MS(ESI)m/z 429.3[M+1]+。
實例9：3-(((5-氰基-4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物
A.3-(((5-氰基-4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物. 將3-(((4-氯-5-氰基嘧啶-2-基)胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物(1.0當量)置放於具有(1s,4s)-4-胺基-1-甲基環己醇(1.1當量)、DIEA(1.1當量)及THF(0.3M)之可密封燒瓶中。用氮氣吹掃燒瓶並密封。加熱反應混合物至60℃歷經18h。 在標準處理之後，獲得3-(((5-氰基-4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基) 胺基)嘧啶-2-基)胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物(57%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.26-8.35(m,1 H)8.15-8.25(m,2 H)7.94-8.09(m,1 H)7.70-7.81(m,1 H)7.31(d,J=7.42Hz,1 H)4.44-4.66(m,2 H)3.85-4.10(m,1 H)1.54-1.71(m,1 H)1.43(m,1 H)1.22(m,1 H)0.92-1.14(m,4 H)；MS(ESI)m/z 423.4[M+1]+。
實例10：2-(((2-氟-4-苯基嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在50℃下攪拌4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)、(1s,4s)-4-胺基-1-甲基環己醇(1.2當量)及DIEA(2.4當量)於THF(0.2M)中之混合物2h。在反應完成之後，在減壓下移除溶劑，藉由矽膠層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之標題化合物(83%產率)。MS(ESI)m/z 279.1[M+H]+。
B.4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈與4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈之混合物. 在0℃下，以小份向4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)於DCM(0.5M)中之冷卻溶液(0℃)添加3-氯過苯甲酸(1.1當量)。隨後在室溫下攪拌混合物1h。在反應完成之後，濃縮反應混合物。藉由矽膠管柱層析法(10% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到呈白色固體之所需產物，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS(ESI)m/z=295.2[M+1]+/311.2[M+1]+。
C.3-側氧基-3-苯基丙腈. 在氮氣下，向苯甲酸甲酯(1.0當量)及 甲基氰(2.0當量)於無水THF(1.0M)中之溶液中添加氫化鈉(60%於礦物油中，2當量)。在70℃下攪拌所得反應混合物隔夜之後，用冰-水淬滅反應混合物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮得到呈棕色固體狀之粗產物。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.94-7.92(m,2H),7.69-7.65(m,1H),7.55-7.54(m,2H),4.08(s,2H)。
D.2-胺基-4-苯基嘧啶-5-甲腈. 在氮氣下，在50℃下攪拌3-側氧基-3-苯基丙腈(1.0當量)於1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(2.2M)中之溶液隔夜。在反應完成之後，濃縮反應混合物。藉由矽膠管柱層析法(30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之2-苯甲醯基-3-(二甲胺基)丙烯腈(8%產率)。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.83(s,1H),7.61-7.60(m,2H),7.52-7.50(m,1H),7.47-7.45(m,2H),3.37(s,3H),3.28(s,3H)；MS(ESI)m/z=201.2[M+1]+。
在氮氣下，在80℃下攪拌2-苯甲醯基-3-(二甲胺基)丙烯腈(1.0當量)、碳酸鉀(2.0當量)及硝酸胍(1.3當量)於乙醇(0.2M)中之溶液隔夜。在反應完成之後，濃縮反應混合物。藉由矽膠管柱層析法(30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體之所需混合物產物(48%產率)，其不經進一步純化即用於下一步驟。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.73(s,1H),7.87-7.83(m,4H),7.58-7.56(m,3H)；MS(ESI)m/z=197.2[M+1]+。
E.5-(胺基甲基)-4-苯基嘧啶-2-胺. 向2-胺基-4-苯基嘧啶-5-甲腈(1.0當量)於THF(0.15M)中之溶液中添加氫氧化銨及阮尼鎳。在氫氣氛圍下在室溫下攪拌混合物隔夜，且隨後經由矽藻土過濾反應混合物。在真空中濃縮濾液，得到呈黃色固體之粗標題化合物(56%產率)。不經進一步純化即使用該產物。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.34(s,1H),7.69-7.65(m,2H),7.46-7.44(m,3H),6.50(br,2H), 3.54(s,2H),1.70(br,2H)；MS(ESI)m/z=201.2[M+1]+。
F.2-(((2-胺基-4-苯基嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在微波反應器中，在120℃下攪拌4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)、5-(胺基甲基)-4-苯基嘧啶-2-胺(1.0當量)及DIEA(1.7當量)於THF(0.2M)中之混合物2h。在反應完成之後，在減壓下移除溶劑，藉由矽膠層析法(5% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到呈黃色固體之所需產物(74%產率)。MS(ESI)m/z 431.2[M+H]+。
G.2-(((2-氟-4-苯基嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在0℃下，歷經30min向2-(((2-胺基-4-苯基嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)於四氟硼酸及丙酮中之懸浮液中逐滴添加亞硝酸鈉水溶液(1.7當量)，且隨後在室溫下攪拌反應混合物2h。用碳酸氫鈉粉末淬滅反應物，且標準處理得到呈白色固體狀之標題化合物(6%產率)。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.59(s,1H),7.97(s,1H),7.61-7.60(m,2H),7.47-7.46(m,3H),4.60(s,2H),3.55-3.53(m,1H),1.65-1.49(m,6H),1.40-1.35(m,2H),1.10(s,3H)；MS(ESI)m/z 433.2[M+H]+。
實例11：3-(((4-(((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物
A.3-(((4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物. 使3-(胺基甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物鹽酸鹽(1.0當量)溶解於DIEA(2.5當量)及DMF(0.4M)中。使用冰及鹽水浴使均質溶液冷卻至-20℃。向溶液中添加2,4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶(1.0當量)。在-20℃下攪拌溶液10min，且隨後升溫至環境溫度30min。在30min之後，用乙酸乙酯及水稀釋溶液。用乙酸乙酯(3×)分離且萃取水層。合併有機層且用硫酸鎂乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑，得到白色固體。經由拜泰齊層析法(0-60%乙酸乙酯/己烷，隨後60%乙酸乙酯)純化固體，得到呈白色固體狀之標題化合物(47%產率)。MS(ESI)m/z 372.8[M]+。
B.3-(((4-(((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物. 將3-(((4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物(1.0當量)、((1S,3R)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)MeOH及DIEA(1.2當量)合併於乙醇(0.1M)中。在85℃下，在螺旋加蓋閃爍瓶中攪拌溶液。在16h之後，在減壓下使溶液壓縮且藉由標準對掌性分離方法純化殘餘物，得到標題化合物(54%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.26(d,J=6.64Hz,1 H),8.07(s,1 H),7.96-8.03(m,1 H),7.89-7.96(m,1 H),7.75(d,J=6.64Hz,1 H),6.30(d,J=7.81Hz,1 H),4.61(br.s.,2 H),4.25-4.41(m,1 H),4.04-4.18(m,1 H),1.90-2.02(m,1 H),1.73-1.89(m,1 H),1.54-1.69(m,1 H),1.21(br.s.,1 H),0.68-0.92(m,6 H)；MS(ESI)m/z 466.2[M+1]
實例12：(1R,2R,5S)-2-甲基-5-(5-(三氟甲基)-2-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲胺基)嘧啶-4-基胺基)環己醇
A.4-氯-5-(三氟甲基)-N-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)嘧啶-2-胺. 將(4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲胺、HCl(1.0當量)置放於具有DIEA(2.5M)及DMF(0.6M)之圓底燒瓶中。使燒瓶冷卻至0℃，且分批緩慢添加2,4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶(1.0當量)。攪拌反應混合物隔夜且允許其升溫至室溫。將反應混合物直接裝載至矽膠管柱上，且使用0-20%乙酸乙酯/己烷，之後20%乙酸乙酯/己烷純化。合併含有所需異構體(藉由薄層層析法之較低Rf斑點)之溶離份，且在減壓下移除揮發性有機溶劑，得到呈白色固體之4-氯-5-(三氟甲基)-N-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)嘧啶-2-胺(17.2%產率)。MS(ESI)m/z 357.2[M+1]+。
B.(1R,2R,5S)-2-甲基-5-(5-(三氟甲基)-2-((4-(三氟甲基)-吡啶-3-基)甲胺基)嘧啶-4-基胺基)環己醇. 將4-氯-5-(三氟甲基)-N-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)嘧啶-2-胺(1.0當量)置放於具有(1R,2R,5S)-5-胺基-2-甲基環己醇(1.1當量)、DIEA(2.0當量)及THF(0.1M)之可密封燒瓶中。用氮氣吹掃燒瓶並密封。加熱反應混合物至60℃歷經18h。標準處理得到呈白色固體之(1R,2R,5S)-2-甲基-5-(5-(三氟甲基)-2-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲胺基)嘧啶-4-基胺基)環己醇(47.3%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.65-8.76(m,2 H)8.01-8.14(m,1 H)7.71(d,J=5.08Hz,1 H)5.74(br.s.,1 H)4.67-4.80(m,1 H)4.57-4.67(m,1 H)4.54(br.s.,1 H)4.39(d,J=4.30Hz,1 H)4.14(br.s.,1 H)3.21-3.31(m,1 H)1.78(br.s.,1 H)1.54(br.s.,1 H)1.41(br.s.,1 H)1.33(br.s.,1 H)1.10-1.24(m,1 H)0.96(br.s.,1 H)0.81-0.89(m,2 H)。MS(ESI)m/z 450.2[M+1]+。
實例13：順-4-((5-氰基-2-(((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)-N-甲基環己烷甲醯胺
A.4-氯-2-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲胺基)嘧啶-5-甲腈. 向存於DMF(1.0M)中之(4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲胺鹽酸鹽(1.0當量)中添加DIEA(2.5當量)。使反應物冷卻至-20℃(冰/鹽水浴)，隨後添加2,4-二氯嘧啶-5-甲腈(1.0當量)。攪拌反應混合物10min，隨後自冰浴移除且允許攪拌30min。用乙酸乙酯稀釋反應混合物且用水分配。分離有機層且在減壓下移除揮發性溶劑。使用矽膠層析法(5-50%乙酸乙酯/己烷)純化殘餘物。合併所需溶離份且在減壓下移除揮發性溶劑。在含10%乙酸乙酯之己烷中濕磨殘餘物，過濾，用己烷洗滌，且在真空中乾燥，得到呈淺茶色固體之4-氯-2-(((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)胺基)嘧啶-5-甲腈(43.0%產率)；MS(ESI)m/z 314.0[M+1]+
B.順-4-((5-氰基-2-(((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)-N-甲基環己烷甲醯胺. 將4-氯-2-(((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)胺基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)置放於具有(1s,4s)-4-胺基-N-甲基環己烷甲醯胺(1.0當量)、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯(1.2當量)及THF(0.1M)之可密封燒瓶中。用氮氣吹掃燒瓶並密封。加熱反應混合物至60℃歷經18h。標準處理得到呈白色固體之順-4-((5-氰基-2-(((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)-N-甲基環己烷甲醯胺(48.2%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.73(d,J=5.08Hz,1H),8.64-8.69(m,1H),8.29(t,J=5.66Hz,1H),8.21(s,1H),7.72(d,J=5.08Hz,1H),7.53-7.66(m,1H),7.00-7.12(m,1H), 4.62-4.73(m,2H),3.69(br.s.,1H),2.53-2.61(m,3H),2.15-2.30(m,1H),1.70-1.97(m,2H),1.42-1.62(m,3H),1.15-1.27(m,3H)。MS(ESI)m/z 434.3[M+1]+
實例14：3-((4-(3-羥基-2,2,4,4-四甲基環丁基胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物
A.3-((4-(3-羥基-2,2,4,4-四甲基環丁基胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物. 將DIEA(3.0當量)置放於具有3-(((4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物(1.0當量)、3-胺基-2,2,4,4-四甲基環丁醇(2.0當量)(製備參見J.Med.Chem. 2011,54,7693-7704)及乙醇之可密封燒瓶中。用氮氣吹掃燒瓶並密封。加熱反應混合物至80℃歷經9h。標準處理得到以下化合物。基於與本文中所描述之生物化學分析中提供之其他化合物類似的活性賦值立體化學。
3-((4-((1R,3R)-3-羥基-2,2,4,4-四甲基環丁基胺基)-5-(三氟甲基嘧啶-2-基胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ ppm 8.28(d,J=6.25Hz,1 H)8.09-8.18(m,1 H)8.00-8.08(m,1 H)7.96(s,1 H)7.75(m,1 H)5.26(m,1 H)4.60(m,2 H)3.77(m,1 H)3.34(s,1 H)0.71-1.15(m,12 H)；MS(ESI)m/z 480.0[M+1]+。
3-((4-((1S,3S)-3-羥基-2,2,4,4-四甲基環丁基胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基胺基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶1-氧化物. 1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ(ppm)8.27(d,J=6.64Hz,1 H)8.06-8.17(m,2 H)8.00(s,1 H)7.75(m,1 H)5.12(m,1 H)4.90(br.s.,1 H)4.60(m,2 H)3.65-3.86(m,1 H)3.26(br.s.,1 H)3.14(m,1 H)0.68-0.93(m,12 H)；MS(ESI)m/z 480.0[M+1]+。
實例15：2-(((4-乙基嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1S,3R)-3-羥基-2,2,3-三甲基環丁基)胺基)嘧啶-5-甲腈、2-(((4-乙基嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2,3-三甲基環丁基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.4-乙基嘧啶-5-甲腈. 在室溫下攪拌3-側氧基戊腈(1.0當量)與1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(4.3M)於THF(1.6M)中之混合物隔夜。在反應完成之後，在真空下移除溶劑，得到粗2-((二甲胺基)亞甲基)-3-側氧基戊腈(0.98當量)，其不經進一步純化即用於下一步驟。 MS(ESI)m/z 152.1[M+H]+。
使粗2-((二甲胺基)亞甲基)-3-側氧基戊腈(0.98當量)、甲脒鹽酸鹽(2.0當量)及三乙胺(2.0當量)於乙醇(1.0M)中之混合物回流36h。移除溶劑且藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題產物(35%產率)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)9.20(s,1H),8.83(s1H),2.98(d,J=7.6Hz,2H),1.32(t,J=7.6Hz,3H)；MS(ESI)m/z 134.1[M+H]+。
B.(4-乙基嘧啶-5-基)甲胺. 向4-乙基嘧啶-5-甲腈(1.0當量)於MeOH(0.4M)中之溶液中添加氫氧化銨及阮尼鎳。在氫氣氛圍下在室溫下攪拌混合物隔夜，且隨後經由矽藻土過濾反應混合物。在真空中濃縮濾液，得到粗標題化合物(59%)，其不經進一步純化即用於下一 步驟。MS(ESI)m/z 138.1/[M+H]+。
C.4-氯-2-(((4-乙基嘧啶-5-基)甲基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 向2,4-二氯嘧啶-5-甲腈(1.0當量，61.4)與(4-乙基嘧啶-5-基)甲胺(1.0當量)於異丙醇(0.2M)中之混合物中添加DIEA(2.0當量)。在氮氣下在室溫下攪拌混合物隔夜。用乙酸乙酯萃取反應混合物，用氯化銨溶液洗滌有機層且在真空下濃縮，得到粗產物，藉由矽膠層析法(30%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈棕色固體狀之標題化合物(11.4%產率)。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)9.95(d,J=3.2Hz,1H),8.64(d,J=12.0Hz,1H),8.58(d,J=19.6Hz,1H),4.70(d,J=20.4Hz,2H),2.97-2.87(m,2H),1.33-1.27(m,3H)；MS(ESI)m/z 275.1[M+H]+。
D.2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸甲酯. 在氮氣氛圍下，伴隨攪拌向1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺(1.0當量)與三氟甲烷磺酸鋅(1.3當量)之混合物中添加丙烯酸甲酯(1.3當量)。隨後音波處理所得混合物12h。用水淬滅混合物且用DCM萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在減壓下蒸發濾液且藉由矽膠層析法(8%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀之標題化合物(37%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)3.76(s,3H),3.59-3.51(m,1H),3.15-3.06(m,1H),2.99-2.94(m,1H),1.32(s,3H),1.12(s,3H)。
E.2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸. 向2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸甲酯(1.0當量)於MeOH(1.1M)中之溶液中添加氫氧化鈉水溶液(4.48N，2.0當量)，且在50℃下攪拌所得混合物2h。在反應完成之後，在減壓下移除過量MeOH，且用***萃取混合物，隨後用鹽酸(4N，2.9當量)中和水溶液。用乙酸乙酯萃取混合物，用鹽水洗滌有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，得到呈白色固體狀之標題產物(88%產率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)12.4(br,1H),3.31-3.23(m,1H),3.17-3.08(m,1H),2.97-2.91(m,1H),1.22 (s,3H),1.04(s,3H)。
F.(2,2-二甲基-3-側氧基環丁基)胺基甲酸第三丁酯. 在冰-水浴下，向2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸(1.0當量)及三乙胺(1.5當量)於甲苯(0.2M)中之溶液中緩慢添加二苯基磷醯基疊氮化物(2.0當量)。隨後在100℃下攪拌混合物4h。使反應混合物冷卻至室溫，且添加第三丁醇(2.2當量)。使所得混合物回流15h。在冷卻混合物之後，添加碳酸氫鈉水溶液及乙酸乙酯。分離有機層且用乙酸乙酯萃取水溶液。用碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法(7%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題產物(16%產率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)4.81-4.70(m,1H),4.05-3.93(m,1H),3.37(dd,J 1 =18.0Hz,J 2 =9.0Hz,1H),2.89(dd,J 1 =18.0Hz,J 2 =6.9Hz,1H),1.48(s,9H),1.28(s,3H),1.13(s,3H)。
G.(3-羥基-2,2,3-三甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯. 在氮氣下，向(2,2-二甲基-3-側氧基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(1.0當量)於無水THF(0.15M)中之溶液中逐滴添加甲基鋰(1.6M於醚中，4.0當量),保持溫度低於-70℃。在此溫度下攪拌混合物1h。用氯化銨水溶液淬滅混合物，且用乙酸乙酯萃取混合物，用碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法(5%至25%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題產物(30%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)4.65-4.52(m,1H),3.60-3.49(m,1H),2.37-2.28(m,1H),1.84-1.76(m,1H),1.66(s,1H),1.44(s,9H),1.28(s,3H),1.06(s,3H),1.01(s,3H)；MS(ESI)m/z 230.2[M+H]+。
H.3-胺基-1,2,2-三甲基環丁醇. 在0℃下，向(3-羥基-2,2,3-三甲基環丁基胺基甲酸第三丁酯(1.0當量)於無水DCM(0.5M)中之溶液中 添加三氟乙酸(1.0M)，且在室溫下攪拌混合物30min。在移除揮發性溶劑之後，藉由氨的MeOH溶液中和殘餘物，且濃縮最終所得混合物，得到粗標題產物，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS(ESI)m/z 130.1[M+H]+。
I.2-(((4-乙基嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1S,3R)-3-羥基-2,2,3-三甲基環丁基)胺基)嘧啶-5-甲腈及2-(((4-乙基嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2,3-三甲基環丁基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在微波反應器中，在120℃下加熱乙基二異丙胺(2.0當量)、3-胺基-1,2,2-三甲基環丁醇(1.0當量)及4-氯-2-(((4-乙基嘧啶-5-基)甲基)胺基)嘧啶-5-甲腈(2.0當量)於二噁烷(0.2M)中之混合物2h。在反應完成之後，在減壓下移除溶劑且藉由標準對掌性分離方法純化殘餘物，得到標題化合物。基於與本文中所描述之生物化學分析中提供之其他化合物類似的活性賦值立體化學。
2-(((4-乙基嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1S,3R)-3-羥基-2,2,3-三甲基環丁基)胺基)嘧啶-5-甲腈(對掌性HPLC 100% e.e.，滯留時間=2.63min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,T=323K)δ(ppm)8.96(s,1H),8.48(s,1H),8.19(s,1H),7.98(s,1H),6.91(s,1H),4.55(d,J=5.6Hz,2H),4.37(s,1H),3.92-3.83-(m,1H),2.81(q,J=7.2Hz,2H),2.24(t,J=10.4Hz,1H),2.02(s,1H),1.23(t,J=1.6Hz,3H),1.13(s,3H),0.87(s,3H),0.80(s,3H)；MS(ESI)m/z 368.2[M+H]+。
2-(((4-乙基嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2,3-三甲基環丁基)胺基)嘧啶-5-甲腈(對掌性HPLC 99% e.e.，r.t.=6.16min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,T=323 K)δ 8.95(s,1H),8.47(s,1H),8.19(s,1H),7.98(s,1H),6.90(s,1H),4.54(d,J=6.4Hz,2H),4.37(s,1H),3.90-3.83(m,1H),2.82(q,J=7.6Hz,2H),2.24(t,J=10.0Hz,1H),2.02(s,1H),1.23(t,J=7.6Hz,3H),1.13(s,3H),0.87(s,3H), 0.80(s,3H)；MS(ESI)m/z 368.2[M+H]+。
實例16：4-(((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸甲酯. 攪拌丙烯酸甲酯(1.3當量)、1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺(1.0當量)及三氟甲烷磺酸鋅(0.25當量)之懸浮液以在室溫下在N2下摻合其內含物15min。隨後在36℃至39℃下音波處理(100W)混合物24h。將THF：H2O=10：1之混合物添加至混合物且音波處理。濃縮混合物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在減壓下蒸發濾液，且藉由矽膠層析法(石油醚；石油醚：乙酸乙酯=50：1，10：1)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀之標題化合物2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸甲酯(29%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)3.73(s,3H),3.51(dd,J=7.6Hz,18.4Hz,1H),3.07(q,J=9.2Hz,18Hz 1H),2.94(t,J=7.2Hz,8.8Hz,1H),1.29(s,3H),1.09(s,3H)。
B.3-(羥亞胺基)-2,2-二甲基-環丁烷甲酸甲酯. 使2,2-二甲基-3-側氧基丁烷甲酸甲酯(1.0當量)、羥胺鹽酸鹽(1.4當量)及碳酸氫鈉(2.5當量)之混合物懸浮於MeOH(0.6M)中，且在11℃下攪拌12h。在減壓下移除溶劑且添加水。用乙酸乙酯萃取混合物，用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在減壓下濃縮溶劑，得到呈黃色油狀之粗標題產物3-(羥亞胺基)-2,2-二甲基-環丁烷甲酸甲酯(92.7%產率)，其不經進一步純化即用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)3.73(s,3H),3.27(dd,J=7.6Hz,18.4Hz,1H),3.04(q,J=9.2Hz,18Hz 1H),2.89(t,J=7.2Hz,8.8Hz,1H),1.57(s,1H),1.40(s,2H),1.28(s,1H),1.19(s,2H)。
C.3-胺基-2,2-二甲基環丁烷甲酸甲酯. 向3-(羥亞胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲酸甲酯(1.0當量)於MeOH(0.4M)中之溶液中添加氫氧化銨(0.2M)及阮尼鎳(20wt%)。在50℃，50psi氫氣大氣壓下攪拌混合物約6h。在反應完成之後，經由矽藻土過濾混合物。在真空中濃縮濾液，得到呈綠色液體之粗標題化合物3-胺基-2,2-二甲基環丁烷甲酸甲酯(82.3%產率)。不進一步純化即使用該產物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.56(s,3H),2.50(s,0.4H),2.14(s,0.24H),1.94(s,0.35H),1.71(s,0.73H),1.05(s,2.0H),0.76(s,2H)。
D.(3-胺基-2,2-二甲基環丁基)甲醇. 在0℃下，向氫化鋰鋁(2.8當量)於無水THF(1.7M)中之懸浮液中添加粗3-胺基-2,2-二甲基環丁烷甲酸甲酯(1.0當量)於無水THF(0.7M)中之溶液。隨後在10℃下劇烈攪拌混合物0.5h，且隨後加熱至35℃至40℃歷經12h。在0℃下藉由緩慢添加水、氫氧化鈉水溶液(3N)及水淬滅反應物。在10℃下攪拌混合物20min，經由矽藻土過濾，且用乙酸乙酯洗滌。用無水硫酸鈉乾燥有機相且過濾。在真空中濃縮濾液，得到呈外消旋混合物形式之粗標題化合物(3-胺基-2,2-二甲基環丁基)甲醇(89.7%產率)。
E.3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯. 在0℃下，向4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.0當量)於飽和碳酸鈉水溶液(1.3當量)於水(1.7M)及THF(1.4M)中之混合物中緩慢添加氯甲酸苯甲酯(2.1當量)。在10℃下攪拌反應混合物0.5h。移除水性溶劑且使殘餘物溶解於H2O中，用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(5% MeOH/DCM)將其純化，得到呈外消旋混合物形式之3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯(59%產率)。藉由使用20%乙醇 /CO2，流速=200mL/min，循環時間3min之對掌性超臨界流體層析法(管柱：對掌性Pak AY-H，300×50mm I.D.)純化外消旋混合物以分離異構體。第一溶離峰用於下一反應。
F.3-胺基-2,2-二甲基環丁基)甲醇鹽酸鹽. 在H2，40psi下，在室溫下攪拌存於MeOH(0.4M)中之3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯(峰1，上文所得)(1.0當量)及鈀/碳(10%)12h。在反應完成之後，經由矽藻土墊過濾混合物且用MeOH洗滌。在減壓下蒸發溶劑提供呈白色固體狀之粗產物3-胺基-2,2-二甲基環丁基)MeOH，其未經純化即用於下一步驟。在0℃下，使粗產物溶解於HCl/MeOH(4N，10.0當量)中，在18℃下攪拌2h，移除溶劑，得到呈固體之3-胺基-2,2-二甲基環丁基)MeOH鹽酸鹽之單個異構體(85%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.21(s,1H),3.96(s,1H),3.29-3.40(m,2H),3.12-3.16(m,1H),2.06-2.09(m,1H),1.87-1.88(m,1H),1.61-1.67(m,1H),1.02(d,J=25.2Hz,6H)；MS(ESI)m/z(M+H)+ 130.0
G.4-(((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 使上文經分離之化合物、3-胺基-2,2-二甲基環丁基)MeOH鹽酸鹽(1.0當量)及4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)溶解於DIEA(3.0當量)及乙醇(0.4M)中。加熱溶液至40℃歷經1h。在減壓下濃縮反應物，且經由拜泰齊層析法(0-60%乙酸乙酯/己烷，隨後60%乙酸乙酯/己烷)純化黃色殘餘物，得到標題化合物(96%產率)。MS(ESI)m/z 278.6[M]+。
在裝備有Cu Kα輻射(λ=1.5478)之Bruker D8 Smart APEX CCD繞射儀上執行單晶X射線繞射研究。本發明化合物之晶體藉由戊烷蒸氣擴散至二氯乙烷溶液而生長。將0.115×0.087×0.082mm無色塊安裝於具有帕拉頓油之冷凍環上。使用φ及ω掃描，在100(2)K下，在氮氣流中收集資料。使用視掃描寬度為1.0°之θ而定之變化曝露時間 (2s至10s)，晶體至偵測器距離為50mm。資料收集為98.2%完全的直至θ為68.00°。總共收集23976次反射，其涵蓋指數-13<=h<=13，-8<=k<=9，-28<=1<=28。發現7222次反射與對稱性無關，Rint為0.0328。標定指數及單位晶胞精修表明原始，單斜晶格。發現空間群為P21。使用Bruker SAINT軟體程式整合資料且使用SADABS軟體程式按比例調整。藉由直接法之解決辦法(SHELXS)產生與所提議結構相符之完全定相模型。所有非氫原子均採用全矩陣最小平方(SHELXL-2013)按各向異性進行精細修正。使用騎式模型置放所有氫原子。使用SHELXL-2013中之適當HFIX命令，相對於其母原子限定其位置。絕對立體化學經測定與4-(((1R,3S)-3-羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈相符。
H.4-(((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 將4-(((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)及3-氯過氧苯甲酸(2.2當量)合併於DCM(0.2M)中，且允許在環境溫度下攪拌。在16h之後，將溶液添加至具有另外DCM之分液漏斗，且用飽和亞硫酸氫鈉，之後飽和碳酸氫鈉及最後飽和氯化鈉溶液洗滌有機層。用硫酸鎂乾燥有機層，過濾且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物(71%產率)。MS(ESI)m/z 311.3[M+1]+。
I.4-(((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 將4-(((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈(1.0當量)、(4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲胺鹽酸鹽(1.0當量)及DIEA(3.0當量)之混合物合併於乙醇(0.1M)中，且加熱至80℃。在2h之後，使用標準方法 處理所混合之反應物，得到標題化合物(45%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.71(d,J=5.08Hz,1 H),8.57-8.65(m,1 H),8.15-8.25(m,2 H),7.65-7.75(m,1 H),7.19-7.32(m,1 H),4.70(d,J=5.08Hz,2 H),4.23(t,J=4.88Hz,1 H),3.96(q,J=8.33Hz,1 H),3.20-3.29(m,1 H),1.73-1.96(m,2 H),1.53-1.68(m,1 H),1.20(s,1 H),0.86(s,1 H),0.62-0.77(m,6 H)：MS(ESI)m/z 407.3[M+1]+。
實例17：2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,4R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基甲酸第三丁酯. 在0℃下，向(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.00g，6.99mmol)於THF(22mL)中之溶液中緩慢添加二碳酸二第三丁酯(1.81g，8.39mmol)。 在55℃下攪拌所得混合物2h。用水稀釋反應混合物，且用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。用鹽水(100mL)洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在減壓下蒸發濾液，得到呈黃色油狀之粗產物(2.00g粗產物)，其未經純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 244.2[M+H]+。
B.(R)-(3,3-二甲基-4-側氧基環己基)胺基甲酸第三丁酯. 向((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基甲酸第三丁酯(2g粗產物)於DCM(110mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(Dess-Martin periodinane)(4.24g，10mmol)，保持溫度低於5℃。在室溫下攪拌所 得混合物1h。用DCM稀釋反應物且用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機層且過濾。在減壓下蒸發濾液，且藉由矽膠層析管柱(6%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之標題化合物(1.10g，4.56mmol，兩個步驟65%產率)。MS(ESI)m/z 242.2[M+H]+。
C.((1R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基甲酸第三丁酯. 在氮氣下，在-30℃至-40℃下向(R)-(3,3-二甲基-4-側氧基環己基)胺基甲酸第三丁酯(550mg，2.28mmol)於***(15mL)中之溶液中添加甲基溴化鎂(3M，3.00mL)。在此溫度下攪拌混合物0.5h，且用飽和氯化銨水溶液(150mL)淬滅。用乙酸乙酯(300mL×3)萃取水層。用鹽水(150mL)洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在減壓下蒸發濾液。藉由矽膠層析管柱(12%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之標題化合物(520mg，5.02mmol，88%產率)。MS(ESI)m/z 258.2[M+H]+。
D.(4R)-4-胺基-1,2,2-三甲基環己醇. 在0℃下，向((1R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基甲酸第三丁酯(520mg，2.15mmol)於DCM(6.00mL)中之溶液中添加TFA(3.00mL)。在室溫下攪拌所得混合物1h。在真空中濃縮反應物，得到粗產物(450mg，粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 158.1[M+H]+。
E.4-(((1R,4R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 向(4R)-4-胺基-1,2,2-三甲基環己醇(323mg，2.06mmol)與4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(450mg，粗產物)於異丙醇(5.00mL)中之混合物中添加DIEA(800mg，6.60mmol)。在90℃下攪拌所得溶液1.5h。蒸發溶劑且藉由矽膠層析法(30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題化合物(380mg，1.24mmol，60%產率)。藉由超臨界流體層 析法(管柱：AD，0.46cm ID.×15cm L；流動相：CO2/EtOH/DEA=70/30/0.1(v/v/v)；流速：1.5ml/min；WL：UV 254nm；T=35℃)進一步分離該標題化合物，得到標題化合物。
4-(((1R,4R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(120mg，0.391mmol，對掌性SFC：d.e.=100%)。
4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(240mg，0.782mmol，對掌性SFC：d.e.=100%)。
F.4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈. 在0℃下，向氫化鈉(60%分散於礦物油中，315mg，7.88mmol)於THF(20mL)中之懸浮液中添加2,2-二氟丙-1-醇(757mg，7.88mmol)，且攪拌所得混合物1h。隨後，分批添加4-氯嘧啶-5-甲腈(1.00g，7.16mmol)，且在室溫下攪拌混合物30min。用飽和氯化銨水溶液淬滅反應物，且用乙酸乙酯(500mL×2)萃取。乾燥且濃縮經合併之有機層，且藉由矽膠層析管柱(12%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之標題化合物(850mg，4.27mmol，58%產率)。MS(ESI)m/z 200.0[M+H]+。
G.(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺. 向4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈(850mg，4.27mmol)於THF(30mL)中之溶液中添加阮尼-鎳(600mg)。使混合物在真空下脫氣10分鐘，且隨後在室溫下，在全充氣氣球中氫化隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，且用乙酸乙酯(200mL)洗滌濾餅。在真空下移除濾液，且藉由製備型HPLC(5%至60%乙腈/水)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之產物(260mg，1.28mmol，30%產率)。MS(ESI)m/z 204.0[M+H]+。
H.4-(((1R,4R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴下，向4-(((1R,4R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(80mg，0.261mmol)於DCM(3.00mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，114mg，0.653mmol)。在室溫 下攪拌混合物2h。用DCM稀釋反應物，且用硫代硫酸鈉水溶液，隨後碳酸鉀水溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機層且濃縮，得到粗標題化合物(90mg粗產物)。MS(ESI)m/z 323.1,339.1[M+H]+。
I.2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,4R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 向4-(((1R,4R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(90mg，粗產物)於THF(2.8mL)中之溶液中添加(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺(50mg，0.246mmol)及DIEA(100mg，0.738mmol)。在微波反應器中，在100℃下攪拌所得混合物2h。蒸發溶劑，且經由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(34.2mg，0.074mmol，30%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.70(s,1H),8.34-8.32(m,1H),8.13(s,1H),4.70(t,J=12.0Hz,1H),4.64-4.59(m,2H),4.18-4.15(m,1H),1.81-1.74(m,3H),1.68-1.41(m,6H),1.32-1.30(s,3H),0.92-0.85(s,6H)。MS(ESI)m/z 462.2[M+H]+。
實例18：2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基甲酸第三丁酯. 在0℃下，向(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.00g，6.99mmol)於THF(22mL)中之溶液中緩慢添加二碳酸二第三丁酯(1.81g，8.39mmol)。在55℃下攪拌所得混合物2h。用水稀釋反應混合物，且用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。用鹽水(100mL)洗滌經合併之有機層，用無水硫 酸鈉乾燥且過濾。在減壓下蒸發濾液，得到呈黃色油狀之粗產物(2.00g粗產物)，其未經純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 244.2[M+H]+。
B.(R)-(3,3-二甲基-4-側氧基環己基)胺基甲酸第三丁酯. 向((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基甲酸第三丁酯(2g粗產物)於DCM(110mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(4.24g，10mmol)，保持溫度低於5℃。在室溫下攪拌所得混合物1h。用DCM稀釋反應物且用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機層且過濾。在減壓下蒸發濾液，且藉由矽膠層析管柱(6%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之標題化合物(1.10g，4.56mmol，兩個步驟65%產率)。MS(ESI)m/z 242.2[M+H]+。
C.((1R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基甲酸第三丁酯. 在氮氣下，在-30℃至-40℃下向(R)-(3,3-二甲基-4-側氧基環己基)胺基甲酸第三丁酯(550mg，2.28mmol)於***(15mL)中之溶液中添加甲基溴化鎂(3M，3.00mL)。在此溫度下攪拌混合物0.5h，且用飽和氯化銨水溶液溶液(150mL)淬滅。用乙酸乙酯(300mL×3)萃取水層。用鹽水(150mL)洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在減壓下蒸發濾液。藉由矽膠層析管柱(12%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之標題化合物(520mg，5.02mmol，88%產率)。MS(ESI)m/z 258.2[M+H]+。
D.(4R)-4-胺基-1,2,2-三甲基環己醇. 在0℃下，向((1R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基甲酸第三丁酯(520mg，2.15mmol)於DCM(6.00mL)中之溶液中添加TFA(3.00mL)。在室溫下攪拌所得混合物1h。在真空中濃縮反應物，得到粗產物(450mg，粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 158.1[M+H]+。
E.4-(((1R,4R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶 -5-甲腈及4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 向(4R)-4-胺基-1,2,2-三甲基環己醇(323mg，2.06mmol)與4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(450mg，粗產物)於異丙醇(5.00mL)中之混合物中添加DIEA(800mg，6.60mmol)。在90℃下攪拌所得溶液1.5h。蒸發溶劑且藉由矽膠層析法(30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題化合物(380mg，1.24mmol，60%產率)。藉由超臨界流體層析法(管柱：AD，0.46cm I.D.×15cm L；流動相：CO2/EtOH/DEA=70/30/0.1(v/v/v)；流速：1.5ml/min；WL：UV 254nm；T=35℃)進一步分離該標題化合物，得到標題化合物。
4-(((1R,4R)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(120mg，0.391mmol，對掌性SFC：d.e.=100%)。
4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(240mg，0.782mmol，對掌性SFC：d.e.=100%)。
F.4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈. 在0℃下，向氫化鈉(60%分散於礦物油中，315mg，7.88mmol)於THF(20mL)中之懸浮液中添加2,2-二氟丙-1-醇(757mg，7.88mmol)，且攪拌所得混合物1h。隨後，分批添加4-氯嘧啶-5-甲腈(1.00g，7.16mmol)，且在室溫下攪拌混合物30min。用飽和氯化銨水溶液淬滅反應物，且用乙酸乙酯萃取(500mL×2)萃取。乾燥且濃縮經合併之有機層，且藉由矽膠層析管柱(12%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之標題化合物(850mg，4.27mmol，58%產率)。MS(ESI)m/z 200.0[M+H]+。
G.(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺. 向4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈(850mg，4.27mmol)於THF(30mL)中之溶液中添加阮尼-鎳(600mg)。使混合物在真空下脫氣10分鐘，且隨後在室溫下，在全充氣氣球中氫化隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，且用乙酸乙酯(200mL)洗滌濾餅。在真空下移除濾液，且藉由製備型HPLC(5%至60%乙 腈/水)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之產物(260mg，1.28mmol，30%產率)。MS(ESI)m/z 204.0[M+H]+。
H.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴下，向4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(80mg，0.261mmol)於DCM(3.00mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，114mg，0.653mmol)。在室溫下攪拌混合物2h。用DCM稀釋反應物，且用硫代硫酸鈉水溶液，隨後碳酸鉀水溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機層且濃縮，得到粗化合物(90mg粗產物)。MS(ESI)m/z 323.1,339.1[M+H]+。
I.2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 向4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3,4-三甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(90mg，粗產物)於THF(2.8mL)中之溶液中添加(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺(50mg，0.246mmol)及DIEA(100mg，0.738mmol)。在微波反應器中，在100℃下攪拌所得混合物2h。蒸發溶劑且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(38.7mg，0.084mmol，34%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.90(s,1H),8.57-8.54(s,1H),8.34(s,1H),4.92(t,J=12.0Hz,1H),4.81-4.78(m,2H),4.34-4.28(m,1H),2.04-1.95(m,3H),1.92-1.68(m,6H),1.47-1.45(m,3H),1.09-1.01(m,6H)。MS(ESI)m/z 462.2[M+H]+。
實例19：2-((4-氰基-3-(三氟甲氧基)苯乙基)胺基)-4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.4-胺基-3-(三氟甲氧基)苯甲酸甲酯. 在室溫下攪拌4-胺基-3-(三氟甲氧基)苯甲酸(8.88g，40.2mmol)、MeOH(142mL)及鹽酸於1,4-二噁烷(4.0M，142mL，568mmol)中之混合物72h。在移除有機溶劑之後，將殘餘物之pH值調節至pH8，且用乙酸乙酯(50mL×3)萃取水層。乾燥經合併之有機層且在真空下濃縮，得到標題化合物(9.3g，39.6mmol，95%產率)。MS(ESI)m/z 236.1[M+1]+。
B.4-溴-3-(三氟甲氧基)苯甲酸甲酯. 向4-胺基-3-(三氟甲氧基)苯甲酸甲酯(9.3g，39.6mmol)與亞硝酸第三丁酯(6.77mL，57.6mmol)於乙腈(300mL)及水(30mL)中之混合物中添加溴化銅(10.3g，46.2mmol)。在75℃下攪拌所得反應混合物1.5h。用水處理反應物且用乙酸乙酯萃取。用飽和碳酸氫鈉洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下蒸發濾液，得到標題化合物(10.6g，35.6mmol，90%產率)。MS(ESI)m/z 299.1,300.1[M+1]+。
C.(4-溴-3-(三氟甲氧基)苯基)甲醇. 在0℃下，向硼氫化鋰(1.16g，53.4mmol)於THF(100mL)中之溶液中添加4-溴-3-(三氟甲氧基)苯甲酸甲酯(10.6g，35.6mmol)，且在氮氣氛圍下在70℃下加熱所得溶液3h。用水淬滅反應物且用乙酸乙酯萃取混合物。用飽和鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下蒸發濾液，得到粗標題產物(9.17g，34mmol)。MS(ESI)m/z 270.1[M]+,272.1[M+2]+。
D.1-溴-4-(溴甲基)-2-(三氟甲氧基)苯. 在-10℃下，向(4-溴-3-(三 氟甲氧基)苯基)MeOH(5g，18.5mmol)與三苯膦(8.24g，31.45mmol)於無水DCM(50mL)中之混合物中添加N-溴代丁二醯亞胺(5.83g，32.92mmol)。在氮氣下，在室溫下攪拌所得反應混合物0.5h。添加水且用DCM(3×40mL)萃取混合物。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下蒸發濾液，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(5%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到標題化合物(4.3g，12.9mmol，67%產率，歷經兩個步驟)。MS(ESI)m/z 332.8,334.8,336.8[M+H]+。
E.2-(4-溴-3-(三氟甲氧基)苯基)乙腈. 向1-溴-4-(溴甲基)-2-(三氟甲氧基)苯(1g，3.0mmol)於EtOH(20mL)及水(5mL)中之混合物中添加氰化鉀(390mg，6mmol)。在85℃下攪拌所得混合物2h。添加碳酸氫鈉且用乙酸乙酯萃取混合物。用鹽水洗滌有機層，乾燥且濃縮，得到粗標題產物(800mg，2.86mmol)。MS(ESI)m/z 279.9[M]+,281.1[M+2]+。
F.2-(4-溴-3-(三氟甲氧基)苯基)乙胺. 在0℃下，向2-(4-溴-3-(三氟甲氧基)苯基)乙腈(800mg，2.86mmol)於THF(40mL)中之溶液中添加硼烷二甲硫錯合物於THF中之溶液(2M，2.15mL，4.3mmol)。 在氮氣氛圍下，在75℃下加熱所得溶液2h。在0℃下用MeOH(10mL)淬滅反應物，且在真空下濃縮，得到粗標題產物(720mg，2.54mmol)。MS(ESI)m/z 283.9[M]+,291.1[M+2]+。
G.4-溴-3-(三氟甲氧基)苯乙基胺基甲酸第三丁酯. 向2-(4-溴-3-(三氟甲氧基)苯基)乙胺(720mg，2.54mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(575mg，2.66mmol)。在75℃下攪拌所得反應混合物2h。濃縮反應混合物，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法純化(5%乙酸乙酯之石油醚溶液)，得到呈黃色固體狀之標題化合物(460mg，1.2mmol，40%產率，歷經三個步驟)。MS(ESI)m/z 384.1[M+1]+。
H.4-氰基-3-(三氟甲氧基)苯乙基胺基甲酸第三丁酯. 在氮氣下，在160℃下攪拌4-溴-3-(三氟甲氧基)苯乙基胺基甲酸第三丁酯(460mg，1.2mmol)、氰化鋅(463mg，1.56mmol)及肆(三苯基膦)鈀(69mg，0.06mmol)於DMF(10mL)中之混合物1h。用飽和碳酸氫鈉處理反應物且用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，乾燥，濃縮，且藉由製備型薄層層析法(2.9% MeOH/DCM)純化，得到標題化合物(150mg，0.45mmol，38%產率)。MS(ESI)m/z 331.1[M+1]+。
I.4-(2-胺基乙基)-2-(三氟甲氧基)苯甲腈. 向4-氰基-3-(三氟甲氧基)苯乙基胺基甲酸第三丁酯(150mg，0.45mmol)於DCM(3mL)中之溶液中添加TFA(1.5mL)。在室溫下攪拌所得反應混合物1.5h。濃縮混合物，得到粗製標題產物(120mg，粗產物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 231.1[M+H]+。
J.4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在85℃下攪拌(1S,3R)-3-胺基-2,2-二甲基環丁醇(550mg粗產物)、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(887mg，4.78mmol)及DIEA(1.12g，8.7mmol)於異丙醇(20mL)中之混合物3h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且藉由矽膠管柱層析法(0.6% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到標題化合物(760mg，2.88mmol，66.3%產率)。MS(ESI)m/z 265.1[M+1]+。
K.4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 向4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(760mg，2.88mmol)於DCM(10mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(85%，1.25g，6.18mmol)。在室溫下攪拌所得混合物1h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應混合物且用DCM萃取。用碳酸鉀水溶 液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到標題化合物(550mg，粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 281.1,297.1[M+1]+。
L.2-((4-氰基-3-(三氟甲氧基)苯乙基)胺基)-4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在微波反應器中，在100℃下攪拌4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(80mg，0.27mmol)、4-(2-胺基乙基)-2-(三氟甲氧基)苯甲腈(60rmg，粗產物))及DIEA(105mg，0.81mmol)於THF(2mL)中之混合物1.5h。冷卻至室溫之後。濃縮反應混合物且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(34.4mg，0.077mmol，40%產率，歷經兩個步驟)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.14-8.07(m,1H),7.82-7.80(m,1H),7.45-7.43(m,2H),3.97-3.93(m,1H),3.83-3.70(m,2H),3.68-3.59(m,1H),3.10-2.01(m,2H),2.58-2.54(m,1H),2.15-2.06(m,1H),1.21(s,3H),0.95(s,3H)。MS(ESI)m/z 447.2[M+1]+
實例20：2-((4-(2,2-二氟丙氧基)苯乙基)胺基)-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.4-羥基苯乙基第三丁酯. 向4-(2-胺基乙基)酚(1.00g，7.30mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加焦碳酸二第三丁酯(1.89g，8.79mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物16h。濃縮混合物以移除溶劑，用乙酸乙酯稀釋，過濾且濃縮，得到粗標題產物(1.65g，6.96mmol，95%產率)。MS(ESI)m/z 238.1[M+H]+。
B.甲磺酸2,2-二氟丙酯. 在0℃下，向2,2-二氟丙-1-醇(2.00g，20.8mmol)與TEA(3.16g，31.25mmol)於無水DCM(20mL)中之混合物中添加甲磺醯氯(2.84g，24.96mmol)。在rt下攪拌所得反應混合物1.5h。添加水且用DCM(3×100mL)萃取混合物。用飽和氯化銨水溶液、鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下蒸發濾液，得到標題產物(2.70g，15.52mmol，75%產率)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。
C.4-(2,2-二氟丙氧基)苯乙基胺基甲酸第三丁酯. 在微波反應器中，在115℃下攪拌4-羥基苯乙基胺基甲酸第三丁酯(700g，2.94mmol)、甲磺酸2,2-二氟丙酯(668mg，3.84mmol)及碳酸銫(1.92g，5.88mmol)於DMF(5mL)中之混合物3h。冷卻至室溫之後，添加水且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下蒸發濾液，得到粗產物，藉由製備型薄層層析法(22%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到標題化合物(130mg，0.41mmol，14%產率)。MS(ESI)m/z 316.1[M+H]+。
D.2-(4-(2,2-二氟丙氧基)苯基)乙胺. 在0℃至5℃下，向4-(2,2-二氟丙氧基)苯乙基胺基甲酸第三丁酯(95mg，0.30mmol)於DCM(2mL)中之溶液中添加TFA(1mL)。在室溫下攪拌所得反應混合物1.5h。濃縮反應混合物，得到粗產物，其不經進一步純化即直接用於下一步驟(70mg粗產物)。MS(ESI)m/z 216.1[M+H]+。
E.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在100℃下，加熱4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(2.15g，11.6mmol)、(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.51g，10.5mmol)及DIEA(2.72mg，21.1mmol)於異丙醇(30mL)中之混合物3h。在減壓下移除有機溶劑之後，用水處理殘餘物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析 法(15%乙酸乙酯/石油)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(2.2g，7.53mmol，產率：72%)。MS(ESI)m/z 293.2[M+H]+。
F.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.02g，3.48mmol)於無水DCM(20mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(85%，1.78g，8.79mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應物且用DCM萃取。用碳酸鉀水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(0.9g，粗產物)。MS(ESI)m/z 309.2,325.2[M+H]+。
J.2-((4-(2,2-二氟丙氧基)苯乙基)胺基)-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在微波反應器中，在100℃下攪拌4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(90mg，0.28mmol)、2-(4-(2,2-二氟丙氧基)苯基)乙胺(70mg粗產物)及DIEA(85mg，0.66mmol)於THF(2mL)中之混合物1.5h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題產物(38.6mg，0.084mmol，28%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.15-7.97(m,1H),7.15(d,J=8.4Hz,2H),6.87(d,J=8.4Hz,2H),4.39-4.22(m,1H),4.12(t,J=11.6Hz,2H),3.66-3.49(m,2H),3.41-3.35(m,1H),2.88-2.77(t,J=7.2Hz,2H),1.96-1.82(m,1H),1.80-1.42(m,8H),1.03-0.95(m,6H)。MS(ESI)m/z 460.2[M+H]+。
實例21：3-氯-5-(2-((5-氰基-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)乙基)吡啶1-氧化物
A.(5-氯-吡啶-3-基)-甲醇. 在0℃下，向5-氯-菸鹼酸(2g，12.7mmol)及TEA(1.52g，15mmol)於THF(30mL)中之溶液中緩慢添加氯甲酸甲酯(1.42g，15mmol)。在室溫下攪拌所得混合物隔夜。用乙酸乙酯稀釋反應物，用飽和氯化氨洗滌且用無水硫酸鈉乾燥。濃縮有機層，得到粗產物(2.8g，粗產物)，其溶解於THF(40mL)中且冷卻至-78℃。分批添加氫化鋰鋁(570mg，15mmol)。攪拌所得混合物30min。用氫氧化鈉水溶液淬滅反應物且用乙酸乙酯萃取。用無水硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(30%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到標題化合物(1.4g，9.72mmol，76%產率)。MS(ESI)m/z 144.1[M+H]+。
B.甲烷磺酸(5-氯吡啶-3-基)甲酯. 在0℃下，向(5-氯吡啶-3-基)MeOH(1.60g，11.3mmol)與TEA(1.7g，16.8mmol)於無水DCM(30mL)中之混合物添加甲磺醯氯(1.53g，13.4mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物1.5h。添加水且用DCM(3×100mL)萃取混合物。用飽和氯化銨水溶液、鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下蒸發濾液，得到呈黃色油狀之粗標題化合物(2.09g，粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 222.0[M+H]+。
C.3-氯-5-(異氰基甲基)吡啶. 向甲磺酸(5-氯吡啶-3-基)甲酯(2.09g，粗產物)於EtOH(45mL)及水(5mL)中之混合物中添加氰化鉀(926mg，14.3mmol)，且在85℃下攪拌所得混合物2h。添加碳酸氫鈉且 用乙酸乙酯萃取混合物，用鹽水洗滌有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(50%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之標題化合物(820mg，5.43mmol，48%產率，2個步驟)。MS(ESI)m/z 153.1[M+H]+。
D.2-(5-氯吡啶-3-基)乙胺. 向3-氯-5-(異氰酸甲基)吡啶(810mg，5.36mmol)於MeOH(15mL)中之溶液中添加阮尼-鎳及氨水。在氫氣下，在室溫下攪拌所得反應混合物5h。過濾反應混合物且濃縮濾液，得到粗標題化合物(780mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 157.0[M+H]+。
E.(2-(5-氯吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯. 在0℃下，向2-(5-氯吡啶-3-基)乙胺(780mg，粗產物)於THF(10mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(1.1g，5.1mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物2h。在真空中濃縮反應混合物且藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之標題化合物(650mg，2.54mmol，48%產率，2個步驟)。MS(ESI)m/z 257.1[M+H]+。
F.3-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)乙基)-5-氯吡啶1-氧化物. 在0℃下，向(2-(5-氯吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(93mg，0.36mmol)於DCM(4mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，94.8mg，0.54mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物1.5h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應物且用DCM萃取。用碳酸鉀水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，其不經進一步純化即直接用於下一步驟(90mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 273.1[M+H]+。
G.3-(2-胺基乙基)-5-氯吡啶1-氧化物. 在0℃下，向3-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)乙基)-5-氯吡啶1-氧化物(90mg，粗產物)於DCM(3mL)中之溶液中添加TFA(1.5mL)。在室溫下攪拌所得反應混合物1.5h。濃縮反應混合物，得到粗標題產物，其不經進一步純化即直接用 於下一步驟(80mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 173.1[M+H]+。
H.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在100℃下，加熱4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(2.15g，11.6mmol)、(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.51g，10.5mmol)及DIEA(2.72mg，21.1mmol)於異丙醇(30mL)中之混合物3h。在減壓下移除有機溶劑之後，用水處理殘餘物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(15%乙酸乙酯/石油)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(2.2g，7.53mmol，72%產率)。MS(ESI)m/z 293.2[M+H]+。
I.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.02g，3.48mmol)於無水DCM(20mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(85%，1.78g，8.79mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應物且用DCM萃取。用碳酸鉀水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(0.9g，粗產物)。MS(ESI)m/z 309.2,325.2[M+H]+。
J.3-氯-5-(2-((5-氰基-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)乙基)吡啶1-氧化物. 在微波反應器中，在85℃下攪拌4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(80mg，粗產物)、3-(2-胺基乙基)-5-氯吡啶1-氧化物(80mg，粗產物)及DIEA(169mg，1.31mmol)於THF(2mL)中之混合物1h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題產物(32.6mg，0.08mmol，22%產率，歷經三個步驟)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.30(s,1H),8.16(s,1H),8.08(s,1H),7.51(s,1H),4.32-4.25(m,1H),3.77-3.65(m,2H),3.42-3.40(s,1H),2.99-2.93 (m,2H),1.95-1.50(m,6H),1.03(s,3H),0.99(s,3H)。MS(ESI)m/z 417.2[M+H]+。
實例22：4-(((1S,3S)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-((3-氯苯乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈
4-(((1R,3R)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-((3-氯苯乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈
4-(((1S,3R)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-((3-氯苯乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈
4-(((1R,3S)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-((3-氯苯乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸甲酯. 向1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺(15mL，114mmol)與三氟甲烷磺酸鋅(9.3g，142mmol)之混合物中添加丙烯酸甲酯(12.6mL，142mmol)，同時在氮氣下攪拌。隨後，超音波處理所得混合物12h。用碳酸氫鈉水溶液淬滅反應混合物且用乙酸乙酯萃取混合物。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，且藉由矽膠管柱層析法(5-8%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之標題化合物(5.8g，37.2mmol，33%產率)。1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ 3.76(s,3H),3.59-3.51(m,1H),3.15-3.06(m,1H),2.99-2.94(m,1H),1.32(s,3H),1.12(s,3H)。
B.2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸. 向2,2-二甲基-3-側氧基丁烷甲酸甲酯(5.0g，32.1mmol)於MeOH(37.5mL)中之溶液中添加氫氧化鈉水溶液(4.48N，18.5mL，84mmol)。在50℃下攪拌所得混合物2h。在完成之後，在減壓下移除過量MeOH且用***(15mL)萃取混合物。用鹽酸(4N，30mL)中和水溶液，且用乙酸乙酯(100mL×2)萃取混合物。用鹽水(15mL)洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，得到呈白色固體狀之標題產物(3.9g，27.5mmol，86%產率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)12.4(br,1H),3.31-3.23(m,1H),3.17-3.08(m,1H),2.97-2.91(m,1H),1.22(s,3H),1.04(s,3H)。
C.(2,2-二甲基-3-側氧基環丁基)胺基甲酸第三丁酯. 在冰-水浴 中冷卻下，向2,2-二甲基-3-側氧基環丁烷甲酸(3.9g，27.5mmol)及TEA(5.75g，57mmol)於甲苯(160mL)中之溶液中緩慢添加二苯基磷醯基疊氮化物(11.5mL，57mmol)。在100℃下攪拌混合物4h。冷卻反應混合物至室溫，且添加第三丁醇(82mL，925mmol)。使所得混合物回流隔夜。用碳酸氫鈉水溶液(150mL)處理反應混合物，且用乙酸乙酯(50mL×3)萃取水溶液。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法(2-7%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之標題化合物(650mg，3.05mmol，11%產率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)4.81-4.70(m,1H),4.05-3.93(m,1H),3.37(dd,J 1 =18.0Hz,J 2 =9.0Hz,1H),2.89(dd,J 1 =18.0Hz,J 2 =6.9Hz,1H),1.48(s,9H),1.28(s,3H),1.13(s,3H)。
D.(3-(羥亞胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯肟. 在室溫下攪拌(2,2-二甲基-3-側氧基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(645mg，3.00mmol)、羥胺鹽酸鹽(312mg，4.50mmol)及碳酸鈉(240mg，2.25mmol)於MeOH及水(7mL及7mL)中之混合物隔夜。用水處理反應物且用乙酸乙酯萃取。用硫酸鈉乾燥經合併之有機層且過濾。在真空下濃縮濾液，得到呈白色固體狀之粗標題化合物(730mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 229.2[M+H]+。
E.(3-胺基-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯. 向(3-(羥亞胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯肟(730mg，粗產物)於MeOH及氨水(12.5mL及2.5mL)中之溶液中添加阮尼-鎳(430mg，粗產物)。在氫氣氛圍下，在室溫下攪拌反應混合物隔夜。經由矽藻土過濾反應物且在真空中濃縮濾液。藉由矽膠管柱層析法(2-5% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到標題化合物(490mg，2.29mmol，76%產率，兩個步驟)。MS(ESI)m/z 215.2[M+H]+。
F.4-氯-2-((3-氯苯乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在50℃下攪拌2,4-二氯嘧啶-5-甲腈(5.0g，28.90mmol)、2-(3-氯苯基)乙胺(4.78g，28.9mmol)及DIEA(7.45g，57.8mmol)於THF(50mL)中之混合物3h。冷卻至室溫之後，添加水(80mL)且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取水層。 用飽和氯化銨水溶液、鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空中蒸發濾液，得到粗產物，其用乙酸乙酯(30mL)處理且攪拌30min。過濾且乾燥混合物，得到標題化合物(3.20g，10.92mmol，38%產率)。MS(ESI)m/z 293.1,294.1[M+H]+。
G.((1S,3S)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯、((1R,3R)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯、((1R,3S)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯及((1S,3R)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯. 向4-氯-2-((3-氯苯乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈(600mg，2.04mmol)與(3-胺基-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(490mg，2.29mmol)於二噁烷(20mL)中之混合物中添加DIEA(738mg，5.73mmol)。在微波照射下，在125℃下攪拌所得混合物5h。在減壓下移除有機溶劑之後，用乙酸乙酯稀釋殘餘物且用氯化氨水溶液洗滌有機層。分離有機層且用硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮，得到粗產物，藉由矽膠層析法(10%至33%乙酸乙酯/石油)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(610mg，1.30mmol，63%產率)。藉由對掌性製備型超臨界流體層析法(對掌性管柱：OJ，管柱尺寸：0.46cm I.D.×25cm L，5μm；流動相：CO2：MeOH：DEA=60：40：0.1，流速：2.5mL/min，220nm，T=35℃)分離外消旋產物(500mg，1.06mmol)，得到四種異構體：((1S,3S)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺 基甲酸第三丁酯(峰1，100mg，0.21mmol，20%產率，RT=7.88min，d.e.=100%，e.e.=100%)、((1R,3R)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(峰3，102mg，0.22mmol，20%產率，RT=9.37min，d.e.=100%，e.e.=100%)、((1R,3S)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(峰2，85mg，0.18mmol，17%產率，RT=8.29min，d.e.=100%，e.e.=100%)及((1S,3R)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(峰4，82mg，0.17mmol，17%產率，RT=10.96min，d.e.=100%，e.e.=100%)。MS(ESI)m/z 471.2[M+H]+。
H.4-(((1S,3S)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-((3-氯苯乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向((1S,3S)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(100mg，0.21mmol)於無水DCM(2mL)中之溶液中逐滴添加TFA(1.5mL)。在室溫下攪拌所得混合物30min。在移除有機溶劑之後，用氨水中和殘餘物且用DCM萃取。用無水硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，藉由標準方法將其純化，得到標題化合物(49.7mg，0.13mmol，64%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.06(s,1H),7.29-7.15(m,4H),4.33(dd,J 1 =5.6Hz,J 2 =9.2Hz,1H),3.72-3.50(m,2H),3.18-3.12(m,1H),2.93-2.86(m,2H),2.45-2.39(m,1H),2.17-2.12(m,1H),1.20(s,3H),0.98(s 3H)。MS(ESI)m/z 371.2[M+H]+。
4-(((1R,3R)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-((3-氯苯乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向((1R,3R)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(102mg，0.22mmol)於無水DCM(2mL)中之溶液中逐滴添加TFA(1.5 mL)。在室溫下攪拌所得混合物30min。在移除有機溶劑之後，用氨水中和殘餘物且用DCM萃取。用無水硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，藉由標準方法將其純化，得到標題化合物(43.8mg，0.118mmol，54%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.06(s,1H),7.29-7.15(m,4H),4.33(dd,J 1 =5.6Hz,J 2 =9.2Hz,1H),3.72-3.50(m,2H),3.18-3.12(m,1H),2.93-2.86(m,2H),2.45-2.39(m,1H),2.17-2.12(m,1H),1.20(s,3H),0.98(s 3H)。MS(ESI)m/z 371.2[M+H]+。
4-(((1S,3R)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-((3-氯苯乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中，向((1S,3R)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(85mg，0.18mmol)於無水DCM(2mL)中之溶液中逐滴添加TFA(1.5mL)。在室溫下攪拌所得混合物30min。在移除有機溶劑之後，用氨水中和殘餘物且用DCM萃取。用無水硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，藉由標準方法將其純化，得到標題化合物(48.7mg，0.131mmol，73%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.04(s,1H),7.27-7.14(m,4H),4.16-3.97(m,1H),3.74-3.49(m,2H),2.90-2.85(m,3H),2.60-2.49(m,1H),1.92-1.86(m,1H),1.22(s,3H),0.92(s 3H)。 MS(ESI)m/z 371.2[M+H]+。
4-(((1R,3S)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)胺基)-2-((3-氯苯乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向((1R,3S)-3-((2-((3-氯苯乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(82mg，0.17mmol)於無水DCM(2mL)中之溶液中逐滴添加三氟乙酸(1.5mL)。在室溫下攪拌所得混合物30min。在移除有機溶劑之後，用氨水中和殘餘物且用DCM萃取。用無水硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，藉由標準方法將其純化，得到標題化合物 (34.3mg，0.092mmol，55%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.04(s,1H),7.27-7.14(m,4H),4.16-3.97(m,1H),3.74-3.49(m,2H),2.90-2.85(m,3H),2.60-2.49(m,1H),1.92-1.86(m,1H),1.22(s,3H),0.92(s 3H)。MS(ESI)m/z 371.2[M+H]+。
實例23：4-((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基胺基)-2-(3-(5-甲基-1H-四唑-1-基)苯乙基胺基)嘧啶-5-甲腈
A.(3-胺基-苯基)-乙腈. 在85℃下使(3-硝基-苯基)-乙腈(2.00g，12.35mmol)、鐵粉(2.07g，37.03mmol)及氯化氨(1.96g，37.03mmol)於EtOH(20mL)及水(4mL)中之混合物回流1h。經由矽藻土過濾反應混合物且用EtOH沖洗。濃縮經合併之濾液，且藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(1.57g，11.89mmol，96%產率)。MS(ESI)m/z 133.1[M+H]+。
B.N-(3-氰基甲基-苯基)-乙醯胺. 在0℃下，向(3-胺基-苯基)-乙腈(500mg，3.79mmol)與TEA(498mg，4.93mmol)之混合物中緩慢添加乙醯氯(387mg，4.93mmol)。在室溫下攪拌所得混合物10min。 用飽和氯化銨水溶液淬滅反應混合物且用DCM萃取兩次。用氯化氨水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(558mg，3.20mmol，85%產率)。MS(ESI)m/z 175.1[M+H]+。
C.[3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-乙腈. 在-5℃下，向N-(3-氰基甲 基-苯基)-乙醯胺(500mg，2.87mmol)於無水乙腈(5mL)中之溶液中緩慢添加三氟甲磺酸酐(1.62g，5.74mmol)。攪拌所得混合物5min，緩慢添加三甲基矽烷基疊氮化物(1.32g，11.48mmol)，保持溫度低於-5℃。 在-5℃下攪拌所得混合物1h。將反應物傾入經冷卻之氯化氨水溶液中且用乙酸乙酯萃取三次。用硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(1-2% MeOH/DCM)將其純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(260mg，1.31mmol，45%產率)。MS(ESI)m/z 199.9[M+H]+。
D.2-[3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-乙胺. 在0℃下，向[3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-乙腈(180mg，0.90mmol)於THF(3mL)中之溶液中緩慢添加硼烷-甲硫醚錯合物於THF中之溶液(2M，0.8mL，1.60mmol)，且在氮氣下在80℃下使所得混合物回流2h。用MeOH淬滅反應物且在室溫下攪拌1h。濃縮混合物，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(10-26%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到標題化合物(85mg，0.42mmol，46%產率)。MS(ESI)m/z 204.1[M+H]+。
F.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在100℃下，加熱4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(2.15g，11.6mmol)、(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.51g，10.5mmol)及DIEA(2.72g，21.1mmol)於異丙醇(30mL)中之混合物3h。在減壓下移除有機溶劑之後，用水處理殘餘物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(15%乙酸乙酯/石油)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(2.2g，7.53mmol，72%產率)。MS(ESI)m/z 293.2[M+H]+。
G.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基 環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.02g，3.48mmol)於無水DCM(20mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(85%，1.78g，8.79mmol)。 在室溫下攪拌所得混合物3h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應物且用DCM萃取。用碳酸鉀水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(0.9g，粗產物)。 MS(ESI)m/z 309.2,325.2[M+H]+。
H.4-((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基胺基)-2-(3-(5-甲基-1H-四唑-1-基)苯乙基胺基)嘧啶-5-甲腈. 在微波照射下，在100℃下攪拌2-(2-(5-甲基-1H-四唑-1-基)苯基)乙胺(85mg，0.42mmol)、4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈(90mg，0.27mmol)及DIEA(105mg，0.81mmol)之混合物1.5h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(44.3mg，0.073mmol，21%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)7.92(m,1H),7.50-7.40(m,2H),7.34-7.25(m,2H),4.25-4.15(m,1H),3.68-3.49(m,2H),3.25-3.22(m,1H),3.00-2.87(m,2H),2.46(s,3H),1.79-1.22(m,6H),0.88-0.83(m,6H)。MS(ESI)m/z 448.2[M+H]+。
實例24：2-((3-氯-2-(三氟甲基)苯乙基)胺基)-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.(3-氯-2-(三氟甲基)苯基)甲醇. 在0℃至5℃下，向3-氯-2-(三 氟甲基)苯甲酸(0.15g，0.668mmol)於THF(5mL)中之溶液中逐滴添加硼烷甲硫醚錯合物於THF中之溶液(2M，0.70mL，1.40mmol)。在氮氣氛圍下，在75℃下加熱所得溶液2h。在0℃下用MeOH(1mL)淬滅反應物，且在真空下濃縮，得到粗標題產物(0.12g)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.66-7.64(m,1H),7.48-7.44(m,2H),4.90(d,J=2.0Hz,2H),3.70(t,J=2.0Hz,1H)。
B.甲磺酸3-氯-2-(三氟甲基)苯甲酯. 在0℃下，向(3-氯-2-(三氟甲基)苯基)MeOH(0.12g，粗產物)與TEA(0.115g，1.14mmol)於無水DCM(5mL)中之混合物中逐滴添加甲磺醯氯(98.0mg，0.855mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物2h。添加水且用DCM(10mL×3)萃取混合物。用飽和氯化銨水溶液、鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空下蒸發濾液，得到粗標題產物(0.150g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.62-7.43(m,3H),5.41(d,J=1.8Hz,2H),3.03(s,3H)。
C.2-(3-氯-2-(三氟甲基)苯基)乙腈. 向甲磺酸3-氯-2-(三氟甲基)苯甲酯(0.150g，粗產物)與三甲基矽烷甲腈(119mg，1.2mmol)於乙腈(5mL)中之混合物中添加氟化四丁銨於THF中之溶液(1M，1.2mL，1.2mmol)。在室溫下攪拌反應物2h。用乙酸乙酯及水處理反應物，且用鹽水洗滌經分離之有機層，乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(10%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(0.10g，3.03mmol，三個步驟68%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.56-7.48(m,3H),3.99(d,J=2.0Hz,2H)。
D.2-(3-氯-2-(三氟甲基)苯基)乙胺. 向2-(3-氯-2-(三氟甲基)苯基)乙腈(0.10g，3.03mmol)於MeOH(5mL)中之溶液中添加阮尼-鎳(100mg)。使混合物在真空下脫氣10min，且隨後在室溫下，在全充氣氣球中氫化隔夜。經由矽藻土墊過濾混合物，且用MeOH(10mL)洗滌 濾餅。在真空下濃縮濾液，得到粗產物(100mg)。MS(ESI)m/z 224.1[M+H]+。
E.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在100℃下，加熱4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(2.15g，11.6mmol)、(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.51g，10.5mmol)及DIEA(2.72mg，21.1mmol)於異丙醇(30mL)中之混合物3h。在減壓下移除有機溶劑之後，用水處理殘餘物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(15%乙酸乙酯/石油)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(2.2g，7.53mmol，72%產率)。MS(ESI)m/z 293.2[M+H]+。
F.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.02g，3.48mmol)於無水DCM(20mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(85%，1.78g，8.79mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應物且用DCM萃取。用碳酸鉀水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈淺黃色固體狀之粗產物(0.9g，粗產物)。MS(ESI)m/z 309.2,325.2[M+H]+。
G.2-((3-氯-2-(三氟甲基)苯乙基)胺基)-4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在微波反應器中，在100℃下攪拌4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(75mg，0.23mmol)、2-(3-氯-2-(三氟甲基)苯基)乙胺(100mg，粗產物)及DIEA(85mg，0.66mmol)於THF(2mL)中之混合物1.5h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(42.2mg，0.090mmol，39%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.10-8.03(m,1H),7.48-4.41(m,2H),7.30(m,1H), 4.31-4.28(m,1H),3.73-3.69(m,1H),3.63-3.56(m,1H),3.39-3.37(m,1H),3.17-3.14(m,2H),1.88-1.44(m,6H),0.97(s,3H),0.96(s,3H)。 MS(ESI)m/z 468.1[M+H]+。
實例25：4-氯-2-(2-(5-氰基-4-((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基胺基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯磺醯胺
A.N-[2-(3-氯-苯基)-乙基]-乙醯胺. 在0℃下，向2-(3-氯-苯基)-乙胺(3.00g，19.28mmol)及TEA(2.9g，28.92mmol)於無水DCM(30mL)中之溶液中逐滴添加乙醯氯(2.27g，28.92mmol)。在室溫下攪拌所得混合物1h。用水淬滅反應物且用乙酸乙酯萃取混合物。用飽和氯化銨水溶液、鹽水洗滌經合併之有機層且濃縮，得到呈黃色油狀之標題化合物(3.60g，18.27mmol，94%產率)。MS(ESI)m/z 198.1,200.1[M+H]+。
B.2-(2-乙醯胺基-乙基)-4-氯-苯磺醯氯. 在0℃至5℃下，將N-[2-(3-氯-苯基)-乙基]-乙醯胺(400mg，2.02mmol)緩慢添加至氯磺酸(4mL)中。在室溫下攪拌所得混合物2h。將反應混合物傾入冰-水中且攪拌10min。用DCM萃取混合物。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈棕色固體狀之標題化合物(288mg，0.97mmol，48%產率)。MS(ESI)m/z 296.0,298.0,300.0[M+H]+。
C.N-[2-(5-氯-2-胺磺醯基-苯基)-乙基]-乙醯胺. 在0℃至5℃下，向2-(2-乙醯胺基-乙基)-4-氯-苯磺醯氯(288mg，1.04 mmol)於無水DCM(4mL)中之溶液中緩慢添加氨水溶液(2mL)。在室溫下攪拌所 得反應混合物1h。添加水且用氯仿/異丙醇(3：1)萃取混合物。用無水硫酸鈉乾燥經合併之有機層，且濃縮，得到粗產物，其藉由矽膠層析法純化(209mg，0.76mmol，78%產率)。MS(ESI)m/z 277.0,279.0[M+H]+。
D.2-(2-胺基-乙基)-4-氯-苯磺醯胺. 在100℃下攪拌N-[2-(5-氯-2-胺磺醯基-苯基)-乙基]-乙醯胺(209mg，0.76mmol)與氫氧化鉀水溶液(2mol/L,3mL，6mmol)之混合物4h。冷卻至室溫之後，用2N鹽酸水溶液中和反應物。使混合物濃縮至乾燥且用溶劑(3% MeOH/DCM，200mL)稀釋殘餘物並攪拌1h。過濾混合物且濃縮濾液，得到呈灰色固體狀之標題化合物(150mg，0.64mmol，85%產率)。MS(ESI)m/z 235.1,237.1[M+H]+。
E.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在100℃下，加熱4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(2.15g，11.6mmol)、(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.51g，10.5mmol)及DIEA(2.72g，21.1mmol)於異丙醇(30mL)中之混合物3h。在減壓下移除有機溶劑之後，用水處理殘餘物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(15%乙酸乙酯/石油)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(2.2g，7.53mmol，72%產率)。MS(ESI)m/z 293.2[M+H]+。
F.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.02g，3.48mmol)於無水DCM(20mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(85%，1.78g，8.79mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應物且用DCM萃取。用碳酸鉀水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(0.9g，粗產物)。MS(ESI) m/z 309.2,325.2[M+H]+。
4-氯-2-(2-(5-氰基-4-((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基胺基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯磺醯胺. 在微波反應器中，在100℃下攪拌4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(100mg，0.31mmol)、2-(2-胺基-乙基)-4-氯-苯磺醯胺(150mg，0.64mmol)及DIEA(80mg，0.62mmol)於THF(4mL)中之混合物1h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(53.3mg，0.060mmol，26%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.18-8.00(m,1H),7.96(d,J=8.0Hz,1H),7.50-7.34(m,2H),4.41-4.23(m,1H),3.89-3.51(m,2H),3.41-3.33(m,2H),3.29-3.22(m,1H),2.04-1.80(m,1H),1.80-1.68(m,2H),1.67-1.38(m,3H),1.05-0.93(m,6H)。MS(ESI)m/z 479.1,481.1[M+H]+。
實例26：2-氯-4-(2-(5-氰基-4-((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基胺基)嘧啶-2-基胺基)乙基)苯磺醯胺
A.N-苯乙基乙醯胺. 在0℃下，向2-苯乙胺(5.00g，41.32mmol)及TEA(6.26g，61.98mmol)於無水DCM(50mL)中之溶液中逐滴添加乙醯氯(3.57g，45.45mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物30min。添加水且用DCM萃取混合物。用飽和氯化銨水溶液、鹽水洗滌經合併之有機層且濃縮，得到呈黃色油狀之標題產物(6.06g，37.19mmol，90%產率)。MS(ESI)m/z 164.1[M+H]+。
B.4-(2-乙醯胺基乙基)苯-1-磺醯氯. 在0℃至5℃下，將N-苯乙基乙醯胺(4.50g，27.6mmol)緩慢添加至氯磺酸(30mL)中。在室溫下攪拌所得反應混合物2h。將反應混合物傾入冰-水中且攪拌10min。用DCM萃取混合物。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈棕色固體狀之標題化合物(3.30mg，12.64mmol，45%產率)。MS(ESI)m/z 262.1[M+H]+。
C.N-[2-(4-胺磺醯基-苯基)-乙基]-乙醯胺. 在0℃至5℃下，向4-(2-乙醯胺基乙基)苯-1-磺醯氯(3.30mg，12.64mmol)於無水DCM(30mL)中之溶液中添加氨水溶液(15mL)。在室溫下攪拌所得反應混合物1h。添加水且用氯仿/異丙醇(3：1)萃取混合物。用無水硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，其藉由矽膠層析法(1-2% MeOH/DCM)純化，為棕色固體(2.5g，10.33mmol，82%產率)。MS(ESI)m/z 243.1[M+H]+。
D.N-[2-(3-氯-4-胺磺醯基-苯基)-乙基]-乙醯胺. 在0℃下，向N-[2-(4-胺磺醯基-苯基)-乙基]-乙醯胺(780mg，3.21mmol)、N-氯丁二醯亞胺(216mg，1.60mmol)、過硫酸鈉(573mg，2.41mmol)及二乙酸鈀(108mg，0.48mmol)於二氯乙烷(30mL)中之混合物中添加三氟甲磺酸(843mg，5.62mmol)。在密封管中，在75℃下攪拌所得混合物7h。用氨水中和反應混合物且用DCM萃取混合物。用無水硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠層析法(1-3% MeOH/DCM)將其純化，得到呈棕色固體狀之標題化合物(350mg，1.27mmol，39%產率)。MS(ESI)m/z 276.0[M+H]+。
E.4-(2-胺基-乙基)-2-氯-苯磺醯胺. 在100℃下攪拌N-[2-(3-氯-4-胺磺醯基-苯基)-乙基]-乙醯胺(350mg，1.27mmol)與氫氧化鉀水溶液(2mol/L，8mL，16mmol)之混合物4h。冷卻至室溫之後，用2N鹽酸水溶液中和反應物。使混合物濃縮至乾燥且用溶劑(3% MeOH/DCM，200mL)稀釋殘餘物並攪拌1h。過濾混合物且濃縮濾液，得到呈淺綠色固體狀之標題化合物(240mg，1.03mmol，81%產率)。MS(ESI)m/z 235.1[M+H]+。
F.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在100℃下，加熱4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(2.15g，11.6mmol)、(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.51g，10.5mmol)及DIEA(2.72g，21.1mmol)於異丙醇(30mL)中之混合物3h。在減壓下移除有機溶劑之後，用水處理殘餘物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(15%乙酸乙酯/石油)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(2.2g，7.53mmol，72%產率)。MS(ESI)m/z 293.2[M+H]+。
G.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.02g，3.48mmol)於無水DCM(20mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(85%，1.78g，8.79mmol)。 在室溫下攪拌所得混合物3h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應物且用DCM萃取。用碳酸鉀水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(0.9g，粗產物)。 MS(ESI)m/z 309.2,325.2[M+H]+。
H.2-氯-4-{2-[5-氰基-4-(4-羥基-3,3-二甲基-環己胺基)-嘧啶-2-基胺基]-乙基}-苯磺醯胺. 在微波反應器中，在100℃下攪拌4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(90mg，0.28mmol)及4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈、4-(2-胺基-乙基)-2-氯-苯磺醯胺(90mg，0.38mmol)及DIEA(72mg，0.56mmol)於THF(4mL)中之混合物1h。冷卻至室 溫之後，濃縮反應混合物且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(28.6mg，0.060mmol，26%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)7.93(s,1H),7.85(d,J=8.0Hz,1H),7.35(s,1H),7.20(d,J=8.0Hz,1H),4.26-4.12(m,1H),3.66-3.46(m,2H),3.31-3.25(m,1H),2.87(t,J=6.8Hz,2H),1.86-1.35(m,6H),0.90(s,3H),0.88(s,3H)。 MS(ESI)m/z 479.1[M+H]+。
實例27：2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1S,3R)-3-羥基-3-甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈. 在0℃下，向氫化鈉(60%分散於礦物油中，1.84g，46mmol)於THF(30.0mL)中之懸浮液中添加2,2-二氟丙-1-醇(4.42g，46.0mmol)。在室溫下攪拌所得混合物1h，隨後在0℃下分批添加4-氯嘧啶-5-甲腈(6g，43.2mmol)。在添加之後，在室溫下攪拌反應混合物30min。用飽和氯化銨水溶液淬滅反應物，且用乙酸乙酯萃取。用硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(10%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(4.40g，22.1mmol，51%產率)。MS(ESI)m/z 200.0[M+H]+。
B.(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺. 向4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈(1.7g，8.54mmol)於THF(30mL)中之溶液中添加阮尼鎳(500mg，粗產物)。在氫氣氛圍下，在室溫下攪拌所得混合物隔夜。 過濾反應物且在真空中濃縮濾液，且藉由矽膠管柱層析法(5% MeOH/DCM)純化，得到呈黃色固體狀之所需產物(650mg，3.20mmol，37%產率)。MS(ESI)m/z 204.1[M+H]+。
C.(3-羥基環己基)胺基甲酸第三丁酯. 向3-胺基環己醇(3.0g，26.0mol)於THF(30mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(6.74g，31.2mmol)。在50℃下攪拌所得混合物16h。隨後，在真空中濃縮反應混合物，且藉由矽膠管柱層析法(30%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到所需化合物(4.40g，20.46mmol，78%產率)。MS(ESI)m/z 216.1[M+H]+。
D.(3-側氧基環己基)胺基甲酸第三丁酯. 在冰浴中冷卻下，向(3-羥基環己基)胺基甲酸第三丁酯(4.40g，20.46mmol)於DCM(250mL)中之溶液中分批添加戴斯-馬丁高碘烷(13.0g，30.70mmol)。在室溫下攪拌混合物2h。用DCM稀釋反應物且用碳酸鈉水溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機層且濃縮。藉由矽膠管柱層析法(40%乙酸乙酯/石油醚)純化粗化合物，得到標題化合物(4.0g，18.78mmol，91%產率).MS(ESI)m/z 214.1[M+H]+。
E.(3-羥基環己基)胺基甲酸第三丁酯. 在-75℃下，向(3-側氧基環己基)胺基甲酸第三丁酯(4.0g，18.78mmol)於無水THF(200mL)中之脫氣懸浮液中添加甲基鋰於THF中之溶液(3M，25.0mL，75mmol)。在-75℃下攪拌所得反應混合物1h。在-75℃下添加甲基鋰於THF中之溶液(3M，25.0mL，75mmol)且攪拌混合物1h。逐滴添加氯化氨水溶液以淬滅反應物。在室溫下繼續攪拌所得反應混合物2h。用乙酸乙酯(150mL×3)萃取反應混合物。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮，得到粗產物(4.0g，粗產物)，其不經純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 230.1[M+H]+。
F.3-胺基-1-甲基環己醇. 在冰浴中冷卻下，向粗(3-羥基環己基)胺基甲酸第三丁酯(4.0g，粗產物)於DCM(40mL)中之溶液中添加 TFA(20mL)。在室溫下攪拌所得反應混合物2h。濃縮混合物，得到粗產物(3.0g，粗產物)，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS(ESI)m/z 130.1[M+H]+。
G.4-(((1S,3R)-3-羥基-3-甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1R,3S)-3-羥基-3-甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在100℃下，加熱4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(3.71g，20mmol)、3-胺基-1-甲基環己醇(3.0g，粗產物)、DIEA(3.23g，25mmol)於異丙醇(30mL)中之混合物3h。在減壓下移除有機溶劑。用水處理殘餘物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油)將其純化，得到順式異構體(0.90g，3.24mmol，3個步驟17%產率)及反式異構體(1.80g，6.47mmol，3個步驟34%產率)。藉由對掌性SFC(管柱IF；方法：70-30-CO2-MeOH；CO2流速：2.1；管柱溫度=40℃)分離順式異構體(0.90g，3.24mmol)，得到4-(((1S,3R)-3-羥基-3-甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(峰1：300mg，1.08mmol，33%產率，100% e.e.)及4-(((1R,3S)-3-羥基-3-甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(峰2：310mg，1.12mmol，34%產率，100%e.e.)，MS(ESI)m/z 279.1[M+H]+。
H.4-(((1S,3R)-3-羥基-3-甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1S,3R)-3-羥基-3-甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(峰1：250mg，0.90mmol)於無水DCM(5mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(85%，366mg，1.80mmol)。在室溫下攪拌所得混合物1h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應物且用DCM萃取。用碳酸鉀水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥並濃縮，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(230mg，粗產物)。 MS(ESI)m/z 311.2[M+H]+。
I.2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1S,3R)-3-羥基-3-甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在微波反應器中，在100℃下攪拌4-(((1S,3R)-3-羥基-3-甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(80mg，粗產物)、(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺(50mg，0.246mmol)及DIEA(85mg，0.66mmol)於THF(2mL)中之混合物1h。冷卻反應物至室溫且濃縮混合物。藉由標準方法純化殘餘物，得到所需產物(26.1mg，0.060mmol，24%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.69(s,1H),8.41(s,1H),8.11(s,1H),4.73-4.50(m,4H),4.34-4.23(m,1H),1.92-1.08(m,14H)。MS(ESI)m/z 434.2[M+H]+。
實例28：(1s,3s)-3-((2-((2-(1H-吲哚-3-基)乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)環丁烷甲醯胺
A.(1s,3s)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)環丁烷-甲酸甲酯. 在0℃下，向(1s,3s)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)環丁烷-甲酸(600mg，2.79mmol)與碳酸鉀(577mg，4.18mmol)於DMF(4mL)中之混合物中添加碘甲烷(593mg，4.18mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物3h。用水及乙酸乙酯處理反應混合物。用鹽水洗滌經分離之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈黃色固體狀之標題化合物(590mg，2.58mmol，92%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)4.85-4.68(brs,1H),4.16-4.08(m,1H),3.68(s,3H),2.82-2.71(m,1H),2.67-2.54(m,2H),2.14-2.04(m,2H)。
B.(1s,3s)-3-胺基環丁烷甲酸甲酯. 在約0℃至5℃下，向(1s,3s)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)環丁烷甲酸甲酯(590mg，2.58mmol)於 DCM(5mL)中之溶液中添加TFA(2.5mL)。在室溫下攪拌所得反應混合物1.5h。濃縮反應混合物，得到產物，其不經進一步純化即用於下一步驟(300mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 130.1[M+H]+。
C.4-氯-2-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙胺基]-嘧啶-5-甲腈. 在50℃下攪拌2,4-二氯-嘧啶-5-甲腈(2.0g，11.5mmol)、2-(1H-吲哚-3-基)-乙胺(1.83g，11.4mmol)及DIEA(1.94g，15.0mmol)於THF(50mL)中之混合物3h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且用乙酸乙酯(150mL)稀釋殘餘物。用飽和氯化銨水溶液、鹽水洗滌有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空中蒸發濾液，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈棕色固體狀之標題化合物(1.3g，4.38mmol，38%產率)。MS(ESI)m/z 298.1[M+H]+。
D.(1s,3s)-3-((2-((2-(1H-吲哚-3-基)乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)環丁烷甲酸甲酯. 在微波反應器中，在125℃下攪拌2-((2-(1H-吲哚-3-基)乙基)胺基)-4-氯嘧啶-5-甲腈(713mg，2.40mmol)、(1s,3s)-3-胺基環丁烷甲酸甲酯(300mg，粗產物)及DIEA(619mg，4.80mmol)於DMA(5mL)中之混合物4h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且用乙酸乙酯(100mL)稀釋殘餘物。用飽和氯化銨水溶液、鹽水洗滌有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在真空中蒸發濾液，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(0.6% MeOH/DCM)將其純化，得到呈棕色固體狀之標題化合物(720mg，1.85mmol，75%產率)。MS(ESI)m/z 391.1[M+H]+。
E.(1s,3s)-3-((2-((2-(1H-吲哚-3-基)乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)環丁烷甲醯胺. 在密封管中，在65℃下攪拌(1s,3s)-3-((2-((2-(1H-吲哚-3-基)乙基)胺基)-5-氰基嘧啶-4-基)胺基)環丁烷甲酸甲酯(130mg，0.33mmol)於氨之MeOH溶液(5mL，5mol/L)中之溶液72h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且藉由標準方法純化殘餘物， 得到所需產物(27.5mg，0.073mmol，22%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.02(s,1H),7.59(d,J=8.0Hz,1H),7.33(J=7.2Hz,1H),7.11-6.98(m,3H),4.55-4.40(m,1H),3.68(t,J=7.2Hz,2H),3.03(t,J=7.2Hz,2H),2.78-2.69(m,4H),2.55-2.49(m,2H),2.26-2.18(m,2H)。MS(ESI)m/z 376.2[M+H]+。
實例29：4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-(3-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.(2-(2-側氧基-2,3-二氫-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯. 在0℃下，向1-(2-胺基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮鹽酸鹽(180mg，0.84mmol)及TEA(255mg，2.52mmol)於THF(15mL)中之溶液中添加焦碳酸二第三丁酯(218mg，1.01mmol)。在50℃下攪拌所得反應混合物3h。冷卻至室溫之後，濃縮混合物以移除溶劑，用乙酸乙酯稀釋殘餘物，將其過濾且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到標題化合物(198mg，0.72mmol，85%產率)。MS(ESI)m/z 278.1[M+H]+。
B.(2-(3-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯. 在密封管中，在氮氣下，在0℃下向(2-(2-側氧基-2,3-二氫-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(190mg，0.69mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加氫化鈉(34.5mg，0.86mmol，60%於礦物油中)。在室溫下攪拌所得反應混合物20min之後，在氮氣下，在0℃下添加存於THF(2mL)中之碘甲烷(112mg，0.79mmol)。在室溫下攪拌反應物4h。用飽和氯化銨水溶液淬滅反應物，且用乙 酸乙酯萃取水層。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。真空下之濃縮提供粗產物，藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到標題化合物(100mg，0.345mmol，50%產率)。MS(ESI)m/z 292.1[M+H]+。
C.1-(2-胺基-乙基)-3-甲基-1,3-二氫-苯并咪唑-2-酮. 在0℃至5℃下，向(2-(3-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(100mg，0.345mmol)於DCM(3mL)中之溶液中添加TFA(1.5mL)。在室溫下攪拌所得反應混合物2h。濃縮反應混合物，得到粗產物，其不經進一步純化即用於下一步驟(140mg粗產物)。 MS(ESI)m/z 192.1[M+H]+。
D.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在100℃下，加熱4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(2.15g，11.6mmol)、(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.51g，10.5mmol)及DIEA(2.72mg，21.1mmol)於異丙醇(30mL)中之混合物3h。在減壓下移除有機溶劑之後，用水處理殘餘物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(15%乙酸乙酯/石油)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之所需化合物(2.2g，7.53mmol，72%產率)。MS(ESI)m/z 293.2[M+H]+。
E.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.02g，3.48mmol)於無水DCM(20mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(85%，1.78g，8.79mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應物且用DCM萃取。用碳酸鉀水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈淺黃色固體狀之所需化合物(0.9g，粗產物)。MS(ESI)m/z 309.2,325.2[M+H]+。
F.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-(2-側氧基-2,3-二氫-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在微波反應器中，在100℃下攪拌4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(100mg，0.308mmol)、1-(2-胺基-乙基)-3-甲基-1,3-二氫-苯并咪唑-2-酮(140mg，粗產物)及DIEA(85mg，0.66mmol)於THF(3mL)中之混合物1.5h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且藉由製備型標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(36.7mg，0.084mmol，2個步驟24%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.08-7.94(m,1H),7.11-7.08(m,4H),4.26-4.10(m,3H),3.89-3.66(m,2H),3.40-3.35(m,4H),1.96-1.51(m,6H),1.05-0.99(m,6H)。MS(ESI)m/z 436.2[M+H]+。
實例30：4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.(2-(1H-吲哚-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯. 向2-(1H-吲哚-3-基)乙胺(1.00g，6.25mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(1.42g，6.56mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物16h。 濃縮混合物，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(1.50g，5.77mmol，92%產率)。MS(ESI)m/z 261.1[M+H]+。
B.(2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯. 在氮氣下，在0℃下向(2-(1H-吲哚-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(1.50g，5.77mmol)於無水THF(15mL)中之溶液中添加氫化鈉(300mg，7.50 mmol，60%於礦物油中)。在室溫下攪拌所得反應混合物15min之後，在0℃下緩慢添加存於THF(5mL)中之碘甲烷(982mg，6.92mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3h，且用飽和氯化銨水溶液淬滅。 用乙酸乙酯萃取水層。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。在減壓下移除有機溶劑，且藉由矽膠管柱層析法(0.6% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到呈棕色固體狀之標題化合物(1.29g，4.71mmol，81%產率)。MS(ESI)m/z 275.1[M+H]+。
C.2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺. 在約0℃至5℃下，向(2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(1.29g，4.71mmol)於DCM(15mL)中之溶液中添加TFA(7mL)。在室溫下攪拌所得反應混合物1h。濃縮反應混合物，得到粗產物，其經DCM稀釋且經碳酸氫鈉水溶液洗滌。用鹽水洗滌有機層，乾燥且濃縮，得到呈黃色油狀之所需產物(700mg，4.02mmol，85%產率)。MS(ESI)m/z 175.1[M+H]+。
D.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在100℃下，加熱4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(2.15g，11.6mmol)、(1S,4R)-4-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.51g，10.5mmol)及DIEA(2.72g，21.1mmol)於異丙醇(30mL)中之混合物3h。在減壓下移除有機溶劑之後，用水處理殘餘物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(15%乙酸乙酯/石油)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(2.2g，7.53mmol，72%產率)。MS(ESI)m/z 293.2[M+H]+。
E.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.02g，3.48mmol)於無水DCM(20mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(85%，1.78g，8.79mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3h。用硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應物且用DCM 萃取。用碳酸鉀水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈淺黃色固體狀之所需化合物(0.9g，粗產物)。MS(ESI)m/z 309.2,325.2[M+H]+。
F.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在微波反應器中，在100℃下攪拌4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(90mg，粗產物)、2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺(60mg，0.34mmol)及DIEA(72mg，0.56mmol)於THF(3mL)中之混合物1h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(21.5mg，0.051mmol，15%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.00(s,1H),7.52(d,J=8.0Hz,1H),7.30(d,J=8.0Hz,1H),7.14(t,J=7.6Hz,1H),7.00(t,J=8.0Hz,1H),6.94(s,1H),4.28-4.23(m,1H),3.75(s,3H),3.75-3.62(m,2H),3.02(t,J=7.6Hz,1H),1.82-1.26(m,6H),1.02-0.87(m,6H)。MS(ESI)m/z 419.2[M+H]+。
實例31：順-2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)嘧啶-5-甲腈
反-2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.(6-側氧基螺[3.3]庚-2-基)胺基甲酸第三丁酯. 在約0℃至10℃下，向(6-羥基螺[3.3]庚-2-基)胺基甲酸第三丁酯(1.00g，4.40mmol)於DCM(10mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(2.80g，6.60mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物1.5h。用碳酸氫鈉水溶液處理反應混合物且用DCM萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。真空下之濃縮提供粗產物，藉由矽膠管柱層析法(22%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(800mg，3.55mmol，80%產率)。MS(ESI)m/z 226.1[M+H]+。
B.(6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基甲酸第三丁酯. 在氮氣下，在-78℃下向(6-側氧基螺[3.3]庚-2-基)胺基甲酸第三丁酯(800mg，3.55mmol)於無水THF(15mL)中之溶液中添加甲基鋰於THF中之溶液(2.36mL，3mol/L,7.50mmol)。在室溫下攪拌所得混合物2h。用飽和氯化銨水溶液淬滅反應混合物，且用乙酸乙酯萃取混合物。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥，且在真空下濃縮，得到呈棕色固體狀之標題化合物(760mg，粗產物)，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS(ESI)m/z 242.2[M+H]+。
C.6-胺基-2-甲基螺[3.3]庚-2-醇. 在約0℃至5℃下，向(6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基甲酸第三丁酯(760mg，粗產物)於DCM(7mL)中之溶液中添加TFA(3.5mL)。在室溫下攪拌所得反應混合物1h。濃縮反應混合物，得到呈棕色油狀之粗產物(500mg，粗產物),其不經進一步純化即用於下一步驟。MS(ESI)m/z 142.1[M+H]+。
D.順-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈及反-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在回流下攪拌存於異丙醇(8mL)中之6-胺基-2-甲基螺[3.3]庚-2-醇(500mg，粗產物)、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(656mg，3.54mmol)及DIEA(913mg，7.08mmol)2h。冷卻至室溫之後，濃縮反應混合物 且藉由矽膠管柱層析法(22%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈棕色固體狀之外消旋化合物(700mg，2.41mmol，三個步驟68%產率)。 MS(ESI)m/z 291.1[M+H]+。藉由對掌性製備型超臨界流體層析法(管柱：Chirlpak IF 5μm，管柱尺寸4.6*250mm；流動相己烷：乙醇=70：30；流速：1.0mL/min 230nm，T=30℃)分離外消旋化合物，得到順-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(160mg，0.55mmol，100% e.e.)及反-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(160mg，0.55mmol，99.4% e.e.)。
E.4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈. 在0℃下，向氫化鈉(60%分散於礦物油中，1.84g，46mmol)於THF(30.0mL)中之懸浮液中添加2,2-二氟丙-1-醇(4.42g，46.0mmol)。在室溫下攪拌所得混合物1小時，隨後在0℃下分批添加4-氯嘧啶-5-甲腈(6g，43.2mmol)。在添加之後，在室溫下攪拌反應混合物30min。用飽和氯化銨水溶液淬滅反應物，且用乙酸乙酯萃取。用硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(10%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(4.40g，22.1mmol，51%產率)。MS(ESI)m/z 200.0[M+H]+。
F.(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺. 向4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-甲腈(1.7g，8.54mmol)於THF(30mL)中之溶液中添加阮尼鎳(500mg，粗產物)。在氫氣氛圍下，在室溫下攪拌所得混合物隔夜。 過濾反應物，且在真空中濃縮濾液，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(5% MeOH/DCM)將其純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(650mg，3.20mmol，37%產率)。MS(ESI)m/z 204.1[M+H]+。
G.順-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 向順-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(80mg，0.276mmol)於DCM(3mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲 酸(85%，113mg，0.552mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物1h。 添加硫代硫酸鈉水溶液，且用DCM(50mL×2)萃取混合物。用碳酸鈉水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈灰色固體狀之標題化合物(80mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 323.1[M+H]+。
H.反-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 向反-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(80mg，0.276mmol)於DCM(3mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，113mg，0.552mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物1h。 添加硫代硫酸鈉水溶液，且用DCM(50mL×2)萃取混合物。用碳酸鈉水溶液及鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到呈灰色固體狀之標題化合物(80mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 323.1[M+H]+。
I.順-2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 向順-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(80mg，粗產物)於THF(2.0mL)中之溶液中添加(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺(56mg，0.276mmol)及DIEA(71mg，0.55mmol)。在微波反應器中，在100℃下攪拌所得混合物1h。蒸發溶劑且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(33.9mg，0.076mmol，兩個步驟28%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.68(s,1H),8.36(s,1H),8.10(s,1H),4.70(t,J=12.0Hz,2H),4.61(s,2H),4.50-4.20(m,1H),2.50-1.95(m,8H),1.74(t,J=18.8Hz,3H),1.26(s,3H)。MS(ESI)m/z 446.1[M+H]+。
J.反2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 向反-4-((6-羥基-6-甲基螺[3.3]庚-2-基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(80mg，粗產物)於THF(2.0 mL)中之溶液中添加(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺(100mg，粗產物)及DIEA(71mg，0.55mmol)。在微波反應器中，在100℃下攪拌所得混合物1h。蒸發溶劑，且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(36.9mg，0.083mmol，兩個步驟30%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.68(s,1H),8.36(s,1H),8.10(s,1H),4.70(t,J=12.0Hz,2H),4.61(s,2H),4.50-4.20(m,1H),2.50-1.95(m,8H),1.74(t,J=18.8Hz,3H),1.26(s,3H)。MS(ESI)m/z 446.1[M+H]+。
實例32：2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.2,2-二甲基環己烷-1,3-二酮. 使環己烷-1,3-二酮(10.0g，89.3mmol)、碳酸鉀(24.6g，178.6mmol)及碘甲烷(28.5g，201mmol)於丙酮(50mL)中之混合物回流隔夜。濃縮反應混合物，且藉由矽膠管柱層析法(5-10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題化合物(3.5g，25.0mmol，28%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)2.69(t,J=6.8Hz,4H),1.52(m,2H)1.31(s,6H)。
B.3-羥基-2,2-二甲基環己酮. 在0℃下，向2,2-二甲基環己烷-1,3-二酮(2.00g，14.3mmol)於MeOH(20mL)中之溶液中分批添加硼氫化鈉(135mg，3.58mmol)。在室溫下攪拌所得溶液1h。用水淬滅反應物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到標題化合物(1.6g，粗產物)。MS(ESI)m/z 143.2[M+H]+。
C.3-羥基-2,2-二甲基環己酮肟. 在25℃下攪拌3-羥基-2,2-二甲基 環己酮(1.6g，粗產物)、羥胺鹽酸鹽(2.98g，42.9mmol)及碳酸鈉(4.54g，42.9mmol)於EtOH(30mL)及水(3mL)中之混合物6h。在減壓下移除有機溶劑，且用乙酸乙酯(2×200mL)萃取殘餘物。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到標題化合物(1.8g，粗產物)。MS(ESI)m/z 158.2[M+H]+。
D.3-胺基-2,2-二甲基環己醇. 在氫氣氛圍下，在25℃下攪拌3-羥基-2,2-二甲基環己酮肟(1.8g，粗產物)與阮尼鎳(1.5g)於MeOH(50mL)及氨水(5mL)中之混合物隔夜。經由矽藻土過濾反應混合物，且用MeOH(50mL)沖洗濾餅。濃縮濾液，得到標題化合物(1.30g，粗產物)。MS(ESI)m/z 144.2[M+H]+。
E.4-((3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在90℃下攪拌3-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.30g，粗產物)及4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.35g，7.27mmol)及DIEA(1.93g，15.0mmol)於異丙醇(14mL)中之混合物1h。在移除溶劑之後，藉由矽膠管柱層析法(10%至30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題化合物(820mg，2.81mmol，38%產率)，其藉由對掌性管柱(Superchiral S-AD，0.46cm I.D.×25cm L，5μl，CO2/MeOH/DEA=80/20/0.05(v/v/v)；流速：2.5ml/min，254nm，T=35℃)，隨後藉由對掌性管柱：(Chiralpak IC，0.46cm I.D.×25cm L，5μl，CO2/MeOH/DEA=70/30/0.05(v/v/v)；流速：2.5ml/min，254nm，T=35℃)分離，得到四種異構體(峰1：90mg，d.e.=100%，e.e=100%；峰2：220mg，d.e.=99.7%，e.e.=100%；峰3：210mg，d.e=100%，e.e=97.3%；峰4：125mg，d.e.=99.6%，e.e=100%。藉由2D-NMR，峰1及峰4經測定為順式異構體，且峰2及峰3經測定為反式異構體)。MS(ESI)m/z 293.1[M+H]+。
F.4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶 -5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(120mg，0.411mmol)於DCM(2.00mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，168mg，0.822mmol)。在室溫下攪拌混合物2h。用DCM稀釋反應物且用硫代硫酸鈉水溶液，隨後碳酸鉀水溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機物，且濃縮，得到粗化合物(130mg粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 325.1[M+H]+。
G.2-(((4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲基)胺基)-4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 向4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(130mg，粗產物)於THF(3.0rnL)中之溶液中添加(4-(2,2-二氟丙氧基)嘧啶-5-基)甲胺(84mg，0.411mmol)及DIEA(158mg，1.23mmol)。在微波反應器中，在100℃下攪拌所得混合物1h。蒸發溶劑，且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(33.6mg，0.075mmol，兩個步驟20%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.69(s,1H),8.40(s,1H),8.13(s,1H),4.72(t,J=12.0Hz,2H),4.57(s,2H),4.05-3.91(m,1H),3.45-3.42(m,1H),1.82-1.72(m,5H),1.70-1.50(m,2H),1.50-1.30(m,2H),1.03-0.91(m,6H)。MS(ESI)m/z 448.2[M+H]+。
實例33：4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-((S)-3-甲基-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈
4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-((R)-3-甲基-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.2-(2-(2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮. 3-(2-胺基乙基)吲哚啉-2-酮鹽酸鹽(3.20g，15.06mmol)、鄰苯二甲酸酐(3.34g，22.59mmol)及TEA(4.56g，45.18mmol)於甲苯/NMP(20mL/10mL)中之混合物。在回流下加熱混合物3h。濃縮反應混合物，且用飽和氯化銨水溶液及鹽水洗滌所得混合物。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機層且過濾。真空下之濃縮提供粗產物，藉由矽膠管柱層析法(30%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈棕色固體狀之標題化合物(2.60g，8.50mmol，56%產率)。MS(ESI)m/z 307.2[M+H]+。
B.3-(2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)乙基)-2-側氧基吲哚啉-1-甲酸第三丁酯. 向2-(2-(2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮(2.60g，8.50mmol)與碳酸鈉(1.35g，12.75mmol)於無水THF(30mL)中之混合物中添加焦碳酸二第三丁酯(2.02g，9.35mmol)。在室溫下攪拌所得混合物20h。用水處理混合物且用乙酸乙酯萃取。用無水硫酸鈉乾燥經合併之有機層，且在真空下濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(10-20%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(2.00g，4.93mmol，58%產率)。MS(ESI)m/z 407.1[M+H]+。
C.3-(2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)乙基)-3-甲基-2-側氧基吲哚啉-1-甲酸第三丁酯. 在約0℃至5℃下，向3-(2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)乙基)-2-側氧基吲哚啉-1-甲酸第三丁酯(1.00g，2.46mmol)與碳酸鉀(679mg，4.92mmol)於DME(5mL)中之混合物中添加碘甲烷(524mg，3.69mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物16h。用水處理 所得混合物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(10-25%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈棕色固體狀之標題化合物(700mg，1.66mmol，67%產率)。MS(ESI)m/z 421.1[M+H]+。
D.3-(2-胺基乙基)-3-甲基吲哚啉-2-酮鹽酸鹽. 在100℃下，攪拌3-(2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)乙基)-3-甲基-2-側氧基吲哚啉-1-甲酸第三丁酯(600mg，1.43mmol)與鹽酸(5mL)於密封管中之混合物72h。冷卻至室溫之後，用乙酸乙酯萃取反應混合物。使水層濃縮至乾燥，得到呈黃色固體狀之粗產物(350mg，粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 191.1[M+H]+。
E.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-((S)-3-甲基-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-((R)-3-甲基-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在80℃下攪拌4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(350mg，1.08mmol)、3-(2-胺基乙基)-3-甲基吲哚啉-2-酮(350mg，粗產物)及DIEA(557mg，4.32mmol)於DMA(4mL)中之混合物2h。冷卻至室溫之後，向反應混合物中添加飽和氯化銨水溶液，且用乙酸乙酯萃取混合物。用鹽水洗滌經合併之有機層，乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(0.6% MeOH/DCM)將其純化，產生呈棕色固體狀之外消旋化合物(340mg，0.78mmol，74%產率)。MS(ESI)m/z 435.2[M+H]+。藉由標準方法分離外消旋化合物(340mg，0.78mmol)，得到4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-((S)-3-甲基-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈(峰1：80.5mg，0.185mmol，24%產率，100% e.e.)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)7.85(s,1H),7.13(d,J=7.6Hz,1H),7.10(t,J=7.2Hz,1H),6.94(t,J=7.6Hz,1H),6.76(d,J=8.0 Hz,1H),4.08-3.98(m,1H),3.27-3.20(m,2H),2.91-2.86(m,1H),2.20-1.26(m,8H),1.25(s,3H),0.84-0.82(m,6H)。MS(ESI)m/z 435.2[M+H]+及4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-((R)-3-甲基-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈(峰2：22.4mg，0.052mmol，6.6%產率，99.1% e.e.)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)7.85(s,1H),7.13(d,J=7.6Hz,1H),7.10(t,J=7.2Hz,1H),6.94(t,J=7.6Hz,1H),6.76(d,J=8.0Hz,1H),4.08-3.98(m,1H),3.27-3.20(m,2H),2.91-2.86(m,1H),2.20-1.26(m,8H),1.25(s,3H),0.84-0.82(m,6H)。MS(ESI)m/z 435.2[M+H]+。
實例34：2-((2-(6-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)-4-(((1S,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
2-((2-(6-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)-4-(((1R,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
2-((2-(6-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)-4-(((1S,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
2-((2-(6-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)-4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2- 二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.2,2-二甲基環己烷-1,3-二酮. 使環己烷-1,3-二酮(10.0g，89.3mmol)、碳酸鉀(24.6g，178.6mmol)及碘甲烷(28.5g，201mmol)於丙酮(50mL)中之混合物回流隔夜。完成之後，在減壓下移除溶劑且藉由矽膠管柱層析法(5-10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題化合物(3.5g，25.0mmol，28%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)2.69(t,J=6.8Hz,4H),1.52(m,2H)1.31(s,6H)。
B.3-羥基-2,2-二甲基環己酮. 在0℃下，向2,2-二甲基環己烷-1,3-二酮(2.00g，14.3mmol)於MeOH(20mL)中之溶液中分批添加硼氫化鈉(135mg，3.58mmol)。在室溫下攪拌所得溶液1小時。用水淬滅反應物且用乙酸乙酯萃取混合物。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到標題化合物(1.6g，粗產物)。MS(ESI)m/z 143.2[M+H]+。
C.3-羥基-2,2-二甲基環己酮肟. 在25℃下攪拌3-羥基-2,2-二甲基環己酮(1.6g，粗產物)、羥胺鹽酸鹽(2.98g，42.9mmol)及碳酸鈉(4.54g，42.9mmol)於EtOH(30mL)及水(3mL)中之混合物6h。在移除EtOH之後，用乙酸乙酯(2×200mL)萃取殘餘物。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到標題化合物(1.8g，粗產物)。MS(ESI)m/z 158.2[M+H]+。
D.3-胺基-2,2-二甲基環己醇. 在氫氣氛圍下，在25℃下攪拌3-羥基-2,2-二甲基環己酮肟(1.8g，粗產物)與阮尼鎳(1.5g)於MeOH(50mL)及氨水(5mL)中之混合物隔夜。經由矽藻土過濾反應混合物，且 用MeOH(50mL)沖洗濾餅。濃縮濾液，得到標題化合物(1.30g，粗產物)。MS(ESI)m/z 144.2[M+H]+。
E.4-(((1S,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈、4-(((1R,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈、4-(((1S,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈及4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在90℃下攪拌3-胺基-2,2-二甲基環己醇(1.30g，粗產物)及4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(1.35g，7.27mmol)及DIEA(1.93g，15.0mmol)於異丙醇(14mL)中之混合物1h。在移除溶劑之後，矽膠管柱層析法(10%至30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題化合物(820mg，2.81mmol，38%產率)，其藉由對掌性管柱(Superchiral S-AD，0.46cm I.D.×25cm L，5μl，CO2/MeOH/DEA=80/20/0.05(v/v/v)；流速：2.5ml/min，254nm，T=35℃)，隨後藉由對掌性管柱：(Chiralpak IC，0.46cm I.D.×25cm L，5μl，CO2/MeOH/DEA=70/30/0.05(v/v/v)；流速：2.5ml/min，254nm，T=35℃)分離，得到四種異構體(峰1：90mg，d.e.=100%，e.e.=100%；峰2：220mg，d.e.=99.7%，e.e.=100%；峰3：210mg，d.e.=100%，e.e=97.3%；峰4：125mg，d.e.=99.6%，e.e=100%。藉由2D-NMR，峰1及峰4經測定為順式異構體，且峰2及峰3經測定為反式異構體)。MS(ESI)m/z 293.1[M+H]+。
F.4-(((1S,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1S,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(峰1：85mg，0.291mmol)於DCM(2.00mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，119mg，0.582mmol)。在室溫下攪拌混合物2h。用DCM稀釋反應物且用硫代硫酸鈉水溶液，隨後碳酸鉀水溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機物 且濃縮，得到粗化合物(90mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 325.1[M+H]+。
4-(((1R,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(峰4：85mg，0.291mmol)於DCM(2.00mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，119mg，0.582mmol)。在室溫下攪拌混合物2h。用DCM稀釋反應物且用硫代硫酸鈉水溶液，隨後碳酸鉀水溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機物且濃縮，得到粗標題化合物(92mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 325.1[M+H]+。
4-(((1S,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1S,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(峰2；100mg，0.342mmol)於DCM(2.00mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，139mg，0.684mmol)。在室溫下攪拌混合物2h。用DCM稀釋反應物且用硫代硫酸鈉水溶液，隨後碳酸鉀水溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機物且濃縮，得到粗標題化合物(110mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 325.1[M+H]+。
4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(峰3：100mg，0.342mmol)於DCM(2.00mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，139mg，0.684mmol)。在室溫下攪拌混合物2h。用DCM稀釋反應物且用硫代硫酸鈉水溶液，隨後碳酸鉀水溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機物且濃縮，得到粗標題化合物(110mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 325.1[M+H]+。
G.3-(2-胺基乙基)-6-氟吲哚啉-2-酮鹽酸鹽. 向2-(6-氟-1H-吲哚- 3-基)乙胺鹽酸鹽(500mg，2.3mmol)於DMSO(0.8mL)中之溶液中添加鹽酸(36%，1.3g，12.8mmol)。在50℃下，在密封管中攪拌所得反應混合物6h，冷卻至室溫之後，過濾反應混合物。在EtOH(5mL)中攪拌所得濾餅。過濾混合物且乾燥，得到呈黃色固體狀之所需產物(250mg，1.28mmol，47%產率)。MS(ESI)m/z 195.1[M+H]+。
H.2-((2-(6-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)-4-(((1S,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在90℃下攪拌4-(((1S,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(90mg，粗產物)、3-(2-胺基乙基)-6-氟吲哚啉-2-酮鹽酸鹽(95mg，0.41mmol)及DIEA(122mg，0.94mmol)於DMA(2mL)中之混合物1h。蒸發溶劑，且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(23.7mg，0.054mmol，兩個步驟19%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.05(s,1H),7.34-7.29(m,1H),6.79-6.69(m,1H),6.69-6.61(m,1H),4.67-4.59(m,1H),3.60-3.44(m,4H),2.29-2.08(m,2H),1.93-1.67(m,3H),1.67-1.49(m,3H),1.02-0.97(m,6H)。MS(ESI)m/z 439.2[M+H]+。
2-((2-(6-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)-4-(((1R,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在90℃下攪拌4-(((1R,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(92mg，粗產物)、3-(2-胺基乙基)-6-氟吲哚啉-2-酮鹽酸鹽(95mg，0.41mmol)及DIEA(122mg，0.94mmol)於DMA(2mL)中之混合物1h。蒸發溶劑，且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(36.7mg，0.083mmol，兩個步驟29%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.05(s,1H),7.34-7.29(m,1H),6.79-6.69(m,1H),6.69-6.61(m,1H),4.67-4.59(m,1H),3.60-3.44(m,4H),2.29-2.08(m,2H),1.93-1.67(m,3H),1.67-1.49(m,3H),1.02-0.97(m,6H)。MS(ESI)m/z 439.2[M+H]+。
2-((2-(6-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)-4-(((1S,3R)-3-羥基- 2,2-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在90℃下攪拌4-(((1S,3R)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(110mg，粗產物)、3-(2-胺基乙基)吲哚啉-2-酮鹽酸鹽(95mg，0.41mmol)及DIEA(122mg，0.94mmol)於N,N-二甲基乙醯胺(2mL)中之混合物1h。蒸發溶劑，且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(27.3mg，0.062mmol，兩個步驟18%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.05(s,1H),7.31-7.28(m,1H),6.77-6.73(m,1H),6.68(d,J=8.0Hz,1H),4.11-4.08(m,1H),3.56-3.46(m,4H),2.23-2.10(m,2H),1.84-1.31(m,6H),1.02(s,3H),1.00(s,3H)。MS(ESI)m/z 439.2[M+H]+。
2-((2-(6-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)-4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在90℃下攪拌4-(((1R,3S)-3-羥基-2,2-二甲基環己基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(110mg，粗產物)、3-(2-胺基乙基)吲哚啉-2-酮鹽酸鹽(95mg，0.41mmol)及DIEA(122mg，0.94mmol)於N,N-二甲基乙醯胺(2mL)中之混合物1h。蒸發溶劑，且藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(27.3mg，0.062mmol，兩個步驟18%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.05(s,1H),7.31-7.28(m,1H),6.77-6.73(m,1H),6.68(d,J=8.0Hz,1H),4.11-4.08(m,1H),3.56-3.46(m,4H),2.23-2.10(m,2H),1.84-1.31(m,6H),1.02(s,3H),1.00(s,3H)。MS(ESI)m/z 439.2[M+H]+。
實例35：4-(((1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1H-1,2,4-***-3-基)環丁基)胺基)-2-((2-(2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯. 在0℃下，向((1S,3R)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)MeOH鹽酸鹽(1.8g，10.9mmol)與碳酸鈉(2.31g，21.8mmol)於乙酸乙酯(54mL)及水(18mL)中之混合物中緩慢添加氯甲酸苯甲酯(2.23g，13.1mmol)。在室溫下攪拌所得混合物2h。分離有機層且用乙酸乙酯萃取水溶液。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(10%至20%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(2.75g，10.4mmol，95%產率)。MS(ESI)m/z 264.2[M+H]+。
B.(1S,3R)-3-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲酸. 在室溫下，向((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯(2.75g，10.4mmol)於四氯化碳(14mL)中之溶液中添加過碘酸鈉(6.68g，31.2mmol)、水(21mL)及乙腈(14mL)，之後添加氯化釕(III)水合物(52mg，0.2mmol，於0.5mL水中)。在室溫下劇烈攪拌所得兩相混合物1h。用水稀釋反應混合物且用DCM(2×150mL)萃取。用硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到標題化合物(2.6g，粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 278.1[M+H]+。
C.((1R,3S)-3-胺甲醯基-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯. 在室溫下攪拌(1S,3R)-3-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲酸(2.6g，9.38mmol)、氯化銨(2.0g，37.5mmol)、TEA(2.84g，28.2mmol)及六氟磷酸2-(7-氮雜-1H-苯并***-1-基)-1,1,3,3-四甲(5.35 g，14.1mmol)於無水DMF(52mL)中之混合物1h。用水淬滅反應物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由HPLC(10-50%乙腈/水)將其純化，得到標題化合物(1.86g，6.71mnmol，兩個步驟66%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ(ppm)7.40-7.30(m,5H),5.51-5.37(m,1H),5.27-5.17(m,1H),5.15-4.96(m,3H),3.96-3.87(m,1H),2.48-2.39(m,1H),2.37-2.27(m,1H),2.15-2.05(m,1H),1.31(s,3H),0.96(s,3H)。MS(ESI)m/z 277.1[M+H]+。
D.((1R,3S)-3-((E)-((二甲胺基)亞甲基)胺甲醯基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯. 在120℃下攪拌((1R,3S)-3-胺甲醯基-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯(638mg，2.30mmol)於N,N-二甲基二甲醇縮甲醛(13mL)中之混合物隔夜。在真空中，在50℃下濃縮反應混合物，得到呈黃色油狀之粗產物(850mg)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 332.2[M+H]+。
E.((1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1H-1,2,4-***-3-基)環丁基)-胺基甲酸苯甲酯. 在80℃下攪拌((1R,3S)-3-((E)-((二甲胺基)亞甲基)胺甲醯基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸酯(850mg，粗產物)、肼(0.5mL)及乙酸(0.5mL)於EtOH(10mL)中之混合物2h。移除有機溶劑且藉由矽膠層析法(10% MeOH/DCM)純化殘餘油狀物，得到標題化合物(380mg，1.26mmol，兩個步驟55%產率)。MS(ESI)m/z 301.4[M+H]+。
F.((1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-***-3-基)環丁基)胺基甲酸苯甲酯. 向((1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1H-1,2,4-***-3-基)環丁基)胺基甲酸苯甲酯(380mg，1.26mmol)與3,4-二氫-2H-哌喃(127mg，1.51mmol)於無水DCM(10mL)中之混合物中添加4-甲基苯磺酸吡錠(476mg，1.89mmol)。使混合物回流隔夜。在移除溶劑之後，藉由矽膠管柱層析法(12%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到 標題化合物(438mg，1.14mmol，90%產率)。MS(ESI)m/z 385.4[M+H]+。
G.(1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-***-3-基)環丁胺. 在氫氣氛圍下，在25℃下攪拌((1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-***-3-基)環丁基)胺基甲酸酯(438mg，1.14mmol)與鈀/活性碳(10% Pd，50mg)於MeOH(15mL)中之混合物5h。經由矽藻土過濾反應混合物且濃縮濾液，得到粗標題化合物(340mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 251.2[M+H]+。
H.4-(((1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-***-3-基)環丁基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈. 在90℃下攪拌(1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-***-3-基)環丁胺(340mg，粗產物)及4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(210mg，1.14mmol)及DIEA(450mg，3.50mmol)於異丙醇(5mL)中之混合物1h。在移除溶劑之後，藉由矽膠管柱層析法(10%至30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題化合物(290mg，0.727mmol，兩個步驟65%產率)。MS(ESI)m/z 400.2[M+H]+。
I.4-(((1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-***-3基)環丁基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈. 在冰-水浴中冷卻下，向4-(((1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-***-3-基)環丁基)胺基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(150mg，0.376mmol)於NMP(2.0mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，154mg，0.752mmol)。在室溫下攪拌混合物2h。用DCM稀釋反應物且用硫代硫酸鈉水溶液，隨後碳酸鉀水溶液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥經分離之有機物且濃縮，得到粗標題化合物(140mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 432.2[M+H]+。
J.3-(2-胺基乙基)吲哚啉-2-酮鹽酸鹽. 向2-(1H-吲哚-3-基)乙胺 (6.00g，37.50mmol)於DMSO(8.0mL，112.50mmol)中之溶液中緩慢添加濃鹽酸(9.5mL，112.50mmol)。在50℃下，在密封管中攪拌所得反應混合物16h，冷卻至室溫之後，過濾反應混合物。在EtOH(15mL)中攪拌所得濾餅。過濾混合物且乾燥，得到呈棕色固體狀之所需標題化合物(5.00g，23.64mmol，63%產率)。MS(ESI)m/z 177.2[M+H]+。
K.4-(((1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1H-1,2,4-***-3-基)環丁基)胺基)-2-((2-(2-側氧基吲哚啉-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 在100℃下攪拌4-(((1R,3S)-2,2-二甲基-3-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-***-3-基)環丁基)胺基)-2-(甲磺醯基)嘧啶-5-甲腈(140mg，粗產物)、3-(2-胺基乙基)吲哚啉-2-酮鹽酸鹽(80mg，0.376mmol)及DIEA(194mg，1.50mmol)於NMP(2.0mL)中之混合物1h。用水稀釋反應物且用乙酸乙酯萃取。用無水硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，其溶解於鹽酸鹽於MeOH(2N，5mL)中之溶液中且在室溫下攪拌5h。用氨水中和反應物且濃縮。藉由標準方法純化殘餘物，得到標題化合物(33.4mg，0.075mmol，兩個步驟20%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)13.49(brs,1H),10.24(s,1H),8.52-7.41(m,3H),7.29(t,J=7.6Hz,1H),7.25-7.07(m,2H),7.01-6.93(m,1H),6.87-6.82(m,1H),4.41-4.29(m,1H),3.59-3.43(m,2H),3.42-3.25(m,1H),3.10-2.96(m,1H),2.81-2.66(m,1H),2.49-2.34(m,1H),2.16-1.94(m,2H),1.49-1.00(m,3H),0.63-0.62(m,3H)。MS(ESI)m/z 444.2[M+H]+。
實例36：(1S,3R)-3-(5-氰基-2-(2-(1-甲基-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙胺基)嘧啶-4-基胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲醯胺
A.(2-(1H-吲哚-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯. 向2-(1H-吲哚-3-基)乙胺(3.00g，18.75mmol)於THF(30mL)中之溶液中添加焦碳酸二第三丁酯(4.36g，20mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物16h。濃縮混合物，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(20%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(4.70g，18.01mmol，95%產率)。MS(ESI)m/z 261.1[M+H]+。
B.(2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯. 在氮氣下，在0℃下向(2-(1H-吲哚-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(4.70g，18.01mmol)於無水THF(50mL)中之溶液中添加氫化鈉(800mg，20mmol，60%於礦物油中)。在室溫下攪拌所得反應混合物15min之後，在0℃下緩慢添加存於THF(15mL)中之碘甲烷(2.84mg，20mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3h，且用飽和氯化銨水溶液淬滅。用乙酸乙酯萃取水層。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且過濾。真空下之濃縮提供粗產物，藉由矽膠管柱層析法(0.6% MeOH/DCM)將其純化，得到呈棕色固體狀之標題化合物(4g，14.6mmol，80%產率)。MS(ESI)m/z 275.1[M+H]+。
C.2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺. 在約0℃至5℃下，向(2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(4g，14.6mmol)於DCM(30mL)中之溶液中添加TFA(15mL)。在室溫下攪拌所得反應混合物1h。濃縮反應混合物，得到呈黃色油狀之粗標題化合物(2.5g，粗產物)。MS(ESI)m/z 175.1[M+H]+。
D.3-(2-胺基乙基)-1-甲基吲哚啉-2-酮鹽酸鹽. 向2-(1-甲基-1H-吲 哚-3-基)乙胺(2.5g粗產物)於DMSO(1.33g，17.0mmol)中之溶液中緩慢添加濃鹽酸(1.2mL)。在密封反應器中，在室溫下攪拌所得反應混合物16h。濃縮反應混合物，且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之標題化合物(1.5g，6.59mmol，兩個步驟45%產率)。 MS(ESI)m/z 191.1[M+H]+。
E.((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯. 在0℃下，向((1S,3R)-3-胺基-2,2-二甲基環丁基)MeOH鹽酸鹽(1.8g，10.9mmol)與碳酸鈉(2.31g，21.8mmol)於乙酸乙酯(54mL)及水(18mL)中之混合物中緩慢添加氯甲酸苯甲酯(2.23g，13.1mmol)。在室溫下攪拌所得混合物2h。分離有機層且用乙酸乙酯萃取水溶液。用鹽水洗滌經合併之有機層，用硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法(10%至20%乙酸乙酯/石油醚)將其純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(2.75g，10.4mmol，95%產率)。MS(ESI)m/z 264.2[M+H]+。
F.(1S,3R)-3-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲酸. 在室溫下，向((1R,3S)-3-(羥甲基)-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯(2.75g，10.4mmol)於四氯化碳(14mL)中之溶液中添加過碘酸鈉(6.68g，31.2mmol)、水(21mL)及乙腈(14mL)，之後添加氯化釕(III)水合物(52mg，0.2mmol，於0.5mL水中)。在室溫下劇烈攪拌所得兩相混合物1h。用水稀釋反應混合物且用DCM(2×150mL)萃取。用硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到標題化合物(2.6g，粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 278.1[M+H]+。
G.((1R,3S)-3-胺甲醯基-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯. 在室溫下攪拌(1S,3R)-3-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲酸(2.6g，9.38mmol)、氯化銨(2.0g，37.5mmol)、TEA(2.84g，28.2mmol)及六氟磷酸2-(7-氮雜-1H-苯并***-1-基)-1,1,3,3-四甲(5.35 g，14.1mmol)於無水DMF(52mL)中之混合物1h。用水淬滅反應物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌經合併之有機層，用無水硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由HPLC(10-50%乙腈/水)將其純化，得到標題化合物(1.86g，6.71mnmol，兩個步驟66%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ(ppm)7.40-7.30(m,5H),5.51-5.37(m,1H),5.27-5.17(m,1H),5.15-4.96(m,3H),3.96-3.87(m,1H),2.48-2.39(m,1H),2.37-2.27(m,1H),2.15-2.05(m,1H),1.31(s,3H),0.96(s,3H)。MS(ESI)m/z 277.1[M+H]+。
H.(1S,3R)-3-胺基-2,2-二甲基環丁烷甲醯胺. 在氫氣氛圍下，在25℃下攪拌((1R,3S)-3-胺甲醯基-2,2-二甲基環丁基)胺基甲酸苯甲酯(193mg，0.70mmol)與鈀/活性碳(10% Pd，30mg)於MeOH(5mL)中之混合物5h。經由矽藻土過濾反應混合物且濃縮濾液，得到粗標題化合物(120mg，粗產物)。MS(ESI)m/z 143.1[M+H]+。
I.(1S,3R)-3-((5-氰基-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲醯胺. 在80℃下攪拌(1S,3R)-3-胺基-2,2-二甲基環丁烷甲醯胺(120mg，粗產物)、氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲腈(130mg，0.70mmol)及DIEA(129mg，1.0mmol)於異丙醇(5mL)中之混合物2h。在移除溶劑之後，藉由矽膠管柱層析法(10%至30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到標題化合物(160mg，0.55mmol，兩個步驟78%產率)。MS(ESI)m/z 292.2[M+H]+。
J.(1S,3R)-3-((5-氰基-2-(甲磺醯基)嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲醯胺. 在冰-水浴中冷卻下，向(1S,3R)-3-((5-氰基-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲醯胺(150mg，0.51mmol)於NMP(1.5mL)中之溶液中添加3-氯過苯甲酸(85%，230mg，1.12mmol)。在室溫下攪拌混合物2h。反應混合物不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ESI)m/z 324.2[M+H]+。
K.(1S,3R)-3-(5-氰基-2-(2-(1-甲基-2-側氧基吲哚啉-3-基)乙胺基)嘧啶-4-基胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲醯胺. 在0℃下，將3-(2-胺基乙基)-1-甲基吲哚啉-2-酮(231mg，1.02mmol)及DIEA(197mg，1.53mmol)添加至(1S,3R)-3-(5-氰基-2-(甲磺醯基)嘧啶-4-基胺基)-2,2-二甲基環丁烷甲醯胺之反應混合物(如上文描述所製備)中，且在90℃下攪拌1h。用水稀釋反應物且用乙酸乙酯萃取。用硫酸鈉乾燥經合併之有機層且濃縮，得到粗產物，藉由標準方法將其純化，得到標題化合物(17.7mg，0.041mmol，兩個步驟8%產率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.12-8.01(m,1H),7.42-7.33(m,2H),7.17-6.93(m,2H),4.36-4.09(m,1H),3.62-3.60(m,2H),3.23-3.13(m,4H),2.60-2.25(m,5H),1.39-0.88(m,6H)。MS(ESI)m/z 433.8[M+H]+。
實例37：4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈
A.(2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯. 向裝備有隔蓋及攪拌棒之20mL小瓶中饋入碳酸銫(977mg，3.00mmol)、3-溴-5-甲氧基吡啶(188mg，1.00mmol)、[2-(第三丁氧基羰基胺基)乙基]三氟硼酸鉀(301mg，1.20mmol)、二(1-金剛烷基)-正丁基膦(35.8mg，0.100mmol)及乙酸鈀(II)(11.2mg，0.050mmol)。添加甲苯(3mL)及水(2mL)，且用氮氣吹掃小瓶並密封。在80℃下劇烈攪拌混合物24h，冷卻至室溫且移除水層。用硫酸鈉乾燥有機層，且藉由矽膠層析法(0-10% MeOH/DCM)純化粗產物溶液，提供呈無色糖漿狀之(2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(153mg，0.606mmol， 61%)。1H NMR(CDCl3,500MHz)：δ(ppm)8.21(d,J=6.14Hz,1 H),8.09(d,J=1.58Hz,1 H),6.98-7.16(m,1 H),4.53-4.90(m,1 H),3.87(s,3 H),3.33-3.47(m,2 H),2.82(t,J=6.78Hz,2H),1.46 ppm(s,9 H)。
B.2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-胺二鹽酸鹽. 向(2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(153mg，0.606mmol)於異丙醇(2mL)中之溶液中添加存於二噁烷(2mL)中之4M HCl，且在室溫下攪拌混合物16h。濃縮混合物，用***洗滌殘餘固體且在真空中乾燥，提供呈白色固體狀之標題化合物(103mg，0.458mmol，75%)。1H NMR(500MHz,CD3OD)：δ(ppm)8.56(d,.7=2.52Hz,1 H),8.51(s,1 H),8.27(s,1 H),4.15(s,3 H),3.23-3.38ppm(m,4 H)。
C.4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-((2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙基)胺基)嘧啶-5-甲腈. 向裝備有隔蓋之1打蘭小瓶中饋入4-(((1R,4S)-4-羥基-3,3-二甲基環己基)胺基)-2-(甲亞磺醯基)嘧啶-5-甲腈(55.0mg，0.178mmol)、2-(5-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-胺二鹽酸鹽(56.3mg，0.214mmol)及DMSO(1.4mL)。用DIEA(0.125mL，0.715mmol)處理所得溶液，且在60℃下密封小瓶並震盪(250rpm)14h。冷卻混合物至室溫，用DMSO(1.5mL)稀釋且過濾。藉由標準方法純化溶液，提供標題化合物。MS(ESI)m/z 379.2[M+1]+。
分析 生物化學分析
PKC-θ分析. 使用384孔時間解析螢光分析監測PKC-θ活性。PKC-θ分析在以下分析緩衝液中執行：50mM HEPES pH 7.6、10mM MgCl2、1mM DTT、0.01% Triton X-100、0.01% BSA及0.1mM EDTA。為起始反應，使200nM Fam-標記S6-衍生肽(Molecular Devices)及10μM ATP與142 pM His-PKC-θ(Invitrogen)混合以獲得各孔中25μL總分析體積。在室溫下培育分析板2小時，且使用偵測結合 溶液：70% IMAP漸進式結合緩衝液A、30% IMAP漸進式結合緩衝液B、1：600漸進式結合試劑及1：400 TR-FRET Tb供體(Molecular Devices)之60微升/孔混合物終止。隨後，在室溫下培育分析板隔夜，且在Perkin-Elmer Envision讀數器上讀取讀數。IC50值計算為螢光信號位準減小至信號窗之50%時化合物之濃度。
PKC δ分析. 使用384孔時間解析螢光分析監測PKC δ活性。PKC δ分析在以下分析緩衝液中執行：50mM HEPES pH 7.6、10mM MgCl2、1mM DTT、0.01% Triton X-100、0.01% BSA及0.1mM EDTA。為起始反應，使200nM Fam-標記S6-衍生肽(Molecular Devices)及10μM ATP與1.5nM PKC δ(Invitrogen)混合，以獲得各孔中25μL總分析體積。在室溫下培育分析板2小時，且使用偵測結合溶液：70% IMAP漸進式結合緩衝液A、30% IMAP漸進式結合緩衝液B、1：600漸進式結合試劑及1：400 TR-FRET Tb供體(Molecular Devices)之60微升/孔混合物終止。隨後，在室溫下培育分析板隔夜，且在Perkin-Elmer Envision讀數器上讀取讀數。IC50值計算為螢光信號位準減小至信號窗之50%時化合物之濃度。
表1顯示二胺基嘧啶基化合物在PKC激酶酶分析中之作用。表1之某些二胺基嘧啶基化合物在PKC激酶酶分析中顯示作用，PKC-θ之IC50值範圍介於0.0001μM至10μM且PKC-θ優於PKC-δ之選擇性範圍介於5倍至>100倍。
表2顯示某些化合物在PKC激酶酶分析中之作用。表2之某些化合物在PKC激酶酶分析中顯示作用，PKC-θ之IC50值範圍介於0.001μM至10μM且PKC-θ優於PKC-δ之選擇性範圍介於5倍至>100倍。
細胞分析
Jurkat細胞分析：經CD3/CD8刺激之IL-2分泌. 在人類Jurkat細胞中藉由量測IL-2細胞激素產生來評估在一系列測試化合物濃度範圍 內對PKC θ之細胞內抑制。使用來自ATCC之人類Jurkat純系E6-1用於此等研究。用抗-CD3(Life Technologies/Invitrogen)及抗人類CD28(BD Biosciences)活體外活化細胞以表現促發炎細胞激素。Jurkat細胞在補充有1.0mM丙酮酸鈉、2mM L-麩醯胺酸、10mM Hepes、1.0mM非必需胺基酸、100IU/mL青黴素、100μg/mL鏈黴素及10%胎牛血清之RPMI 1640培養基中培養。在RPMI完全培養基中以每孔50萬個細胞之密度將細胞塗佈至透明96孔圓底板(200微升/孔)。
自10mM儲備液藉由在100% DMSO中首先稀釋至適當濃度，且隨後1：50稀釋至無血清RPMI培養基來製備化合物稀釋液。然後，以1：10稀釋度將化合物添加至指定孔；化合物之最終稀釋度為1：500且各孔板中最終DMSO濃度為0.2%。在37℃下一式三份地以0μM、0.01μM、0.03μM、0.1μM、0.3μM、1μM、3μM及10μM給藥30分鐘而使細胞暴露於化合物。最後，細胞藉由每孔添加25μL含有15μL抗-CD3戴諾磁珠(Dynabead)及在無血清RPMI培養基中製備之2μg/mL經純化之抗-CD28抗體活化，且在37℃下培育20小時。在培育之後，自各孔收集100μL培養基。根據製造商之協定，使用用於人類IL-2之MesoScale Discovery(MSD)單叢細胞激素分析量測經分泌之IL-2含量。使用來自IDBS之XLfit分析原始數據，計算各濃度下之抑制百分比。XLfit中用於測定IC50之公式為模型編號205，其利用S形劑量-反應模型計算IC50值。自多個實驗獲得之IC50值必須在彼此之2倍內以作為有效IC50被接受(對於n=3)。IC50值報導為平均值。
來自表1及表2之某些二胺基嘧啶基化合物在此分析中之IC50值範圍介於0.01μM至10μM。
人類全血：經CD3/CD8刺激之IL-2分泌。在人類全血中藉由量測IL-2細胞激素產生來評估在一系列測試化合物濃度範圍內對PKC θ之細胞內抑制。人類全血在IRB協定下自正常健康供體獲得。用CD3 (R&D Systems)與CD28(BD Biosciences)之交聯抗體活體外活化全血以表現促發炎細胞激素。
為製備經CD3ε塗佈之板，將50μL於無菌D-PBS(無Ca++/Mg++)中為1μg/ml之抗人類CD3ε(純系UCHT1)添加至96孔CovaLinkNH模組板(Fisher Scientific)之各孔，且在4℃下培育16至20小時。移除CD3且在將經預處理之血液傳送至板之前用100μL D-PBS洗滌孔。
為製備人類全血，用無血清RPMI培養基以1：1稀釋血液且輕輕地混合。將經稀釋之血液塗佈至96孔U底板(160微升/孔)。自10mM儲備液藉由在100% DMSO中首先稀釋至適當濃度，且隨後1：50稀釋至無血清RPMI培養基來製備化合物稀釋液。然後，以1：10稀釋將化合物添加至指定孔。化合物之最終稀釋度為1：500且各孔中之最終DMSO濃度為0.2%。在37℃下一式三份地以0μM、0.01μM、0.03μM、0.1μM、0.3μM、1μM、3μM及10μM給藥30分鐘而使經稀釋之全血暴露於化合物。將經預處理之血液傳送至經預塗佈之CD3ε板之指定孔。最後，血液藉由每孔添加20μL具有在無血清RPMI培養基中製備之2μg/mL經純化之抗-CD28抗體活化，且在37℃下培育20小時。在培育之後，自各孔收集100μL培養基。根據製造商之協定，使用用於人類IL-2之MesoScale Discovery(MSD)超敏單叢細胞激素分析量測IL-2含量。使用來自IDBS之XLfit分析原始數據計算各濃度下之抑制百分比。XLfit中用於測定IC50之公式為模型編號205，其利用S形劑量-反應模型計算IC50值。自多實驗獲得之IC50值必須在彼此之2倍內以作為有效IC50被接受(n=3)。IC50值報導為平均值。
來自表1及表2之某些二胺基嘧啶基化合物在此分析中之IC50值範圍介於0.01μM至10μM。
動物模型
急性T細胞活化模型：小鼠中之SEB介導細胞激素釋放。葡萄球 菌腸毒素(Staphylococcal Enterotoxin)(SEA、B、C、D及E)由於其對廣泛範圍T細胞之深遠作用而被稱為超抗原(sAg)。其細胞***成人類、鼠類及兔T細胞，且使諸如IL-2、IFN-g及IL-6之細胞激素大量釋放。小鼠及大鼠中之SEB介導T細胞活化模型為鑑別抑制T細胞活化之化合物的快速及穩定模型。
測試物或媒劑藉由口服、靜脈內(i.v.)、腹膜內(i.p.)或皮下(s.c.)途徑至多提前24小時經投與。用25μg至100μg SEB腹膜內注射雄性C57/B16小鼠。在使用標準商業ELISA套組量測SEB及IL-2細胞激素含量2小時之後，收集諸如脾或淋巴結(LN)之血漿或淋巴器官。
如本文所描述之某些二胺基嘧啶基化合物具有或預期具有<100mg/kg之ED50值，一些化合物之ED50<10mg/kg且其他化合物之ED50<1mg/kg。
移植物抗宿主疾病模型. 被稱為移植物抗宿主疾病(GVHD)(主要由T細胞介導)之非所需免疫反應為同種異體器官移植接受者中移植失敗之主要原因。此現象在嚙齒動物中藉由將同種異體脾或經分離之T細胞注射至供者且後續量測彼GVHD反應來建模，其允許鑑別抑止T細胞活化之治療化合物。
C57B1/6小鼠用作供者細胞源，且B6D2F1(C57B1/6×DBA/2之F1)用作接受者。脾自供者動物(C57B1/6)移除，且在磷酸鹽緩衝鹽水中製備細胞懸浮液。將總共20-30×106個細胞注射至接受者(B6D2F1)動物左腳腳趾底部之疏鬆足底皮下組織。製備來自接受者動物細胞株之細胞懸浮液，且類似地在接受者動物之右腳注射，作為同基因型對照組。在注射4天之後自左側及右側兩者移除膕淋巴結，去除黏著脂肪組織並稱量。測試物或媒劑藉由口服、靜脈內、腹膜內或皮下途徑至多提前脾細胞注射24小時經投與。用測試物處理時產生之淋巴結腫大與用媒劑處理產生之淋巴結腫大相比的差異表述為抑制%。
如本文所描述之某些二胺基嘧啶基化合物具有或預期具有<100mg/kg之ED50值，一些化合物之ED50<10mg/kg且其他化合物之ED50<1mg/kg。
活性表
表1及表2中之各化合物在一或多種生物化學分析中經測試，且發現在其中具有活性，所有化合物在PKC-θ分析中具有低於10μM之IC50，一些化合物具有低於100nM之IC50(活性位準D)，一些化合物之IC50在100nM與800nM之間(活性位準C)，一些化合物之IC50在800nM與2μM之間(活性位準B)，且其他化合物具有2μM與10μM之間的IC50(活性位準A)。亦發現化合物對於PKC-θ之選擇性優於PKC-δ，一些化合物顯示>100倍之選擇性(選擇性位準=IC50 PKC-δ/IC50 PKC-θ之比率)(選擇性位準E)，一些化合物選擇性在20倍與100倍之間(選擇性位準F)，一些化合物選擇性在5倍與20倍之間(選擇性位準G)且其他化合物具有5倍或小於5倍之選擇性位準(選擇性位準H)。
已引用多種參考文獻，其揭示內容以全文引用的方式併入本文中。

Claims (34)

  1. 一種式(I)化合物， 或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、同位素物或立體異構體，其中：X為CN或CF3；L為(C1-4烷基)；R1為經取代或未經取代之雜芳基；及R2為經取代或未經取代之環烷基。
  2. 如請求項1之化合物，其中X為CN。
  3. 如請求項1之化合物，其中X為CF3。
  4. 如請求項1之化合物，其中L為CH2、CH2CH2或CH2CH2CH2。
  5. 如請求項1之化合物，其中R1為經取代或未經取代之吡啶基、吡啶基-1-氧化物或嘧啶基。
  6. 如請求項5之化合物，其中R1經一或多個鹵素、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基取代，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基。
  7. 如請求項5之化合物，其中R1經一或多個F、Cl、Br、I、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、苯基、萘基、-CH2F、-CHF2、-CF3、-CHFCH3、-CF2CH3、-C(CH3)2F、- OCH3、-OCH2F、-OCHF2、-OCF3、-OCH2CH3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2CF3、-OCH2CH(CH3)F、-OCH2C(CH3)2F、-OCH2C(CH3)F2、-OCH2CH2CF3或-O-苯基取代，其中各苯基視情況經鹵素或經取代或未經取代之C1-4烷基取代
  8. 如請求項5之化合物，其中R1經一或多個F、Cl、甲基、乙基、異丙基、苯基、-CF3、-CF2CH3、-C(CH3)2F、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CF3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2C(CH3)F2、-OCH2CH2CF3或-O-苯基取代，其中各苯基視情況經F或甲基取代。
  9. 如請求項1之化合物，其中R1為經取代或未經取代之吲哚基、吲哚啉酮基、苯并噁唑基、吡咯并吡啶基、吲唑基、苯并咪唑基、二氫苯并咪唑酮基或喹啉基。
  10. 如請求項9之化合物，其中R1經一或多個鹵素、CN、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基取代，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基。
  11. 如請求項9之化合物，其中R1經一或多個F、Cl、CN、甲基、乙基、-CH2SO2NHCH3、-OH、-OCH3或OCF3取代。
  12. 如請求項1之化合物，其中R1為經取代或未經取代之呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、吡唑基、咪唑基、噁二唑基或***基。
  13. 如請求項12之化合物，其中R1經一或多個鹵素、CN、-OR3、經取代或未經取代之C1-4烷基、或經取代或未經取代之芳基取代，其中各R3獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、或經取代或未經取代之芳基。
  14. 如請求項12之化合物，其中R1經一或多個CN、甲基、乙基、- CF3或-CH2OCH3取代。
  15. 如請求項1之化合物，其中R2為經取代或未經取代之C3-12環烷基。
  16. 如請求項15之化合物，其中R2為經取代或未經取代之環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基或金剛烷基。
  17. 如請求項15之化合物，其中R2經一或多個C1-4烷基、-OR4或-C(=O)NR2取代，其中各R4獨立地為H或C1-6烷基，且各R獨立地為H或C1-4烷基。
  18. 如請求項15之化合物，其中R2經一或多個甲基、乙基、丙基、異丙基、-CH2OH、-CH(CH3)OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3或-C(=O)N(CH3)2取代。
  19. 如請求項15之化合物，其中R2經一或多個甲基、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3或-C(=O)NHCH3取代。
  20. 如請求項15之化合物，其中R2為經取代或未經取代之螺[3.3]庚基或雙環辛基。
  21. 如請求項15之化合物，其中R2經一或多個C1-4烷基、-OR4、-C(=O)NR2或***基取代，其中各R4獨立地為H或C1-6烷基，且各R獨立地為H或C1-4烷基。
  22. 如請求項15之化合物，其中R2經一或多個甲基、***基、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-OH、-OCH3、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3或-C(=O)N(CH3)2取代。
  23. 如請求項1之化合物，其中該化合物在濃度為10μM時抑制PKC-θ至少約50%。
  24. 如請求項20之化合物，其中該化合物選自表1。
  25. 一種化合物，其選自表2。
  26. 一種醫藥組合物，其包含有效量之如請求項1、24或25之化合物 或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、同位素物或立體異構體，及醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或媒劑。
  27. 一種在表現激酶之細胞中抑制該激酶之方法，其包括使該細胞與有效量之如請求項1、24或25之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、同位素物或立體異構體接觸。
  28. 如請求項27之方法，其中該激酶為PKC-θ。
  29. 如請求項28之方法，其中該化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ。
  30. 如請求項28之方法，其中該化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ及PKC-η。
  31. 如請求項29之方法，其中該化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ至少5倍。
  32. 如請求項29之方法，其中該化合物對PKC-θ之選擇性優於PKC-δ100倍以上。
  33. 一種用於治療或預防PKC-θ介導之病症之方法，該等方法包括向有此需要之個體投與有效量之如請求項1、24或25之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、同位素物或立體異構體。
  34. 如請求項33之方法，其中該PKC-θ介導之病症選自移植物抗宿主病、器官移植排斥反應、牛皮癬、杜興氏肌肉萎縮症(Duchenne muscular dystrophy)、類風濕性關節炎、糖尿病、胰島素抗性、重症肌無力、多發性硬化症、結腸炎、牛皮癬性關節炎、僵直性脊椎炎、異位性皮膚炎、休格連氏症候群(Sjogren syndrome)、哮喘或狼瘡。
TW103144680A 2013-12-20 2014-12-19 經取代之二胺基嘧啶基化合物、其組合物及使用其之治療方法 TW201609671A (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361919216P 2013-12-20 2013-12-20

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW201609671A true TW201609671A (zh) 2016-03-16

Family

ID=53399293

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW103144680A TW201609671A (zh) 2013-12-20 2014-12-19 經取代之二胺基嘧啶基化合物、其組合物及使用其之治療方法

Country Status (16)

Country Link
US (3) US9556126B2 (zh)
EP (2) EP3736268A1 (zh)
JP (1) JP6483707B2 (zh)
KR (1) KR20160095159A (zh)
CN (1) CN106170290A (zh)
AR (1) AR099376A1 (zh)
AU (1) AU2014369031A1 (zh)
BR (1) BR112016014412A2 (zh)
CA (1) CA2934061A1 (zh)
ES (1) ES2812605T3 (zh)
IL (1) IL246252A0 (zh)
MX (1) MX2016007898A (zh)
RU (1) RU2016129380A (zh)
SG (1) SG11201604821YA (zh)
TW (1) TW201609671A (zh)
WO (1) WO2015095679A1 (zh)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI681952B (zh) 2011-04-22 2020-01-11 美商標誌製藥公司 經取代之二胺基甲醯胺及二胺基甲腈嘧啶、其組合物、及以該等治療之方法
WO2014149819A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Kalyra Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic analgesic compounds
WO2015089170A1 (en) 2013-12-12 2015-06-18 Kalyra Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic alkyl compounds and synthesis
EP3736268A1 (en) * 2013-12-20 2020-11-11 Signal Pharmaceuticals, LLC Process for the preparation of substituted diaminopyrimidyl compounds
NZ715903A (en) * 2014-01-30 2017-06-30 Signal Pharm Llc Solid forms of 2-(tert-butylamino)-4-((1r,3r,4r)-3-hydroxy-4-methylcyclohexylamino)-pyrimidine-5-carboxamide, compositions thereof and methods of their use
JP6741343B2 (ja) 2014-03-07 2020-08-19 リキュリウム アイピー ホールディングス リミテッド ライアビリティー カンパニー プロペラン誘導体および合成
CA2961605C (en) 2014-09-17 2023-01-10 Kalyra Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic compounds
US10697760B2 (en) 2015-04-15 2020-06-30 General Electric Company Data acquisition devices, systems and method for analyzing strain sensors and monitoring component strain
CA2993173C (en) 2015-07-24 2023-10-03 Celgene Corporation Methods of synthesis of (1r,2r,5r)-5-amino-2-methylcyclohexanol hydrochloride and intermediates useful therein
US20190060257A1 (en) * 2016-03-16 2019-02-28 Zeno Royalties & Milestones, LLC Analgesic compounds
CN105906569B (zh) * 2016-05-24 2018-04-24 杰达维（上海）医药科技发展有限公司 一种嘧啶衍生物的制备方法
CA3060416A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Epizyme, Inc. Combination therapies with ehmt2 inhibitors
CA3063729A1 (en) 2017-05-15 2018-11-22 Recurium Ip Holdings, Llc Analgesic compounds
JP2021500327A (ja) * 2017-10-18 2021-01-07 エピザイム，インコーポレイティド 免疫療法にｅｈｍｔ２阻害剤を使用する方法
CN107759477A (zh) * 2017-11-20 2018-03-06 阿里化学(常州)有限公司 一种对硝基苯乙胺盐酸盐的生产制备方法
CN108395408B (zh) * 2018-03-23 2021-03-09 杰达维（上海）医药科技发展有限公司 一种药物中间体及其制备方法
WO2020210521A2 (en) 2019-04-12 2020-10-15 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for increasing muscle mass and oxidative metabolism
CN112574123A (zh) * 2019-09-30 2021-03-30 武汉朗来科技发展有限公司 Jnk抑制剂、其药物组合物和用途
CA3166936A1 (en) 2020-02-04 2021-08-12 Abdelmalik Slassi Psilocin derivatives as serotonergic psychedelic agents for the treatment of cns disorders
KR20230130664A (ko) * 2021-01-08 2023-09-12 캄테크, 인크. 보호 알킬 트립타민 및 이의 치료적 용도
KR20240024063A (ko) 2021-05-06 2024-02-23 엑스사이언티아 에이아이 리미티드 Pkc-세타 조정제
CA3213703A1 (en) 2021-05-06 2022-11-10 Peter Ray Pkc-theta modulators

Family Cites Families (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
YU73300A (sh) 1998-05-26 2003-08-29 Warner-Lambert Company Biciklični pirimidini i biciklični 3,4-dihidropirimidini kao inhibitori ćelijske proliferacije
AU5108000A (en) 1999-06-10 2001-01-02 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Novel nitrogen-contaiing heterocyclic derivatives or salts thereof
GB0016877D0 (en) 2000-07-11 2000-08-30 Astrazeneca Ab Chemical compounds
CA2451128A1 (en) 2001-06-26 2003-01-09 Bristol-Myers Squibb Company N-heterocyclic inhibitors of tnf-alpha expression
JPWO2003082855A1 (ja) 2002-03-28 2005-08-04 協和醗酵工業株式会社 抗炎症剤
DE602004021558D1 (de) * 2003-01-17 2009-07-30 Warner Lambert Co 2-aminopyridin-substituierteheterocyclen als inhibitoren der zellulären proliferation
CA2514612A1 (en) 2003-01-30 2004-08-12 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. 2,4-diaminopyrimidine derivatives useful as inhibitors of pkc-theta
AU2005225471B2 (en) 2004-03-26 2011-05-12 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
WO2006014482A1 (en) 2004-07-08 2006-02-09 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine derivatives useful as inhibitors of pkc-theta
EP1794134A1 (de) 2004-09-29 2007-06-13 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Substituierte 2-anilinopyrimidine als zellzyklus -kinase oder rezeptortyrosin-kinase inhibitoren, deren herstellung und verwendung als arzneimittel
WO2006091737A1 (en) * 2005-02-24 2006-08-31 Kemia, Inc. Modulators of gsk-3 activity
ES2324837T3 (es) 2005-03-28 2009-08-17 Boehringer Ingelheim International Gmbh Derivados de piridina utiles como inhibidores de la pkc-theta.
US20070032514A1 (en) * 2005-07-01 2007-02-08 Zahn Stephan K 2,4-diamino-pyrimidines as aurora inhibitors
JP2009521488A (ja) 2005-12-21 2009-06-04 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｐｋｃ−シータのインヒビターとして有益なピリミジン誘導体
DE102005062742A1 (de) * 2005-12-22 2007-06-28 Bayer Schering Pharma Ag Sulfoximin substituierte Pyrimidine, Verfahren zu deren Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
PE20080068A1 (es) * 2006-05-15 2008-03-17 Boehringer Ingelheim Int Compuestos derivados de pirimidina como inhibidores de la quinasa aurora
DE102007010801A1 (de) 2007-03-02 2008-09-04 Bayer Cropscience Ag Diaminopyrimidine als Fungizide
CA2704266A1 (en) * 2007-11-02 2009-06-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated [1h- pyrazolo [3, 4-b] pyridine-4-yl] -phenyle or -pyridin-2-yle derivatives as protein kinase c-theta
WO2009071535A1 (en) 2007-12-03 2009-06-11 Boehringer Ingelheim International Gmbh Diaminopyridines for the treatment of diseases which are characterised by excessive or anomal cell proliferation
CL2009000600A1 (es) 2008-03-20 2010-05-07 Bayer Cropscience Ag Uso de compuestos de diaminopirimidina como agentes fitosanitarios; compuestos de diaminopirimidina; su procedimiento de preparacion; agente que los contiene; procedimiento para la preparacion de dicho agente; y procedimiento para combatir plagas de animales y/u hongos dañinos patogenos de plantas.
JP5302389B2 (ja) 2008-04-29 2013-10-02 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー Ｊｎｋのピリミジニルピリドンインヒビター
GB0810902D0 (en) 2008-06-13 2008-07-23 Astex Therapeutics Ltd New compounds
WO2010024430A1 (ja) * 2008-09-01 2010-03-04 アステラス製薬株式会社 2,4-ジアミノピリミジン化合物
JP2012501981A (ja) 2008-09-03 2012-01-26 バイエル・クロップサイエンス・アーゲー 殺菌剤としてのヘテロ環置換アニリノピリミジン類
CN102203086A (zh) 2008-09-03 2011-09-28 拜尔农作物科学股份公司 作为杀真菌剂的噻吩基氨基嘧啶类化合物
WO2010025831A1 (de) 2008-09-03 2010-03-11 Bayer Cropscience Ag Heterozyklisch substituierte anilinopyrimidine als fungizide
EP2331512A1 (de) * 2008-09-03 2011-06-15 Bayer CropScience AG Alkoxy- und alkylthio-substituierte anilinopyrimidine
US8377924B2 (en) 2009-01-21 2013-02-19 Rigel Pharmaceuticals Inc. Protein kinase C inhibitors and uses thereof
JP2012148977A (ja) 2009-05-20 2012-08-09 Astellas Pharma Inc アミノシクロヘキシルアルキル基を有する２，４−ジアミノピリミジン化合物
TW201100441A (en) 2009-06-01 2011-01-01 Osi Pharm Inc Amino pyrimidine anticancer compounds
JP2011173853A (ja) 2010-02-26 2011-09-08 Astellas Pharma Inc 置換アミノアダマンチルアルキル基を有する２，４−ジアミノピリミジン化合物
JP2011173854A (ja) 2010-02-26 2011-09-08 Astellas Pharma Inc ビシクロ環置換アルキル基を有する２，４−ジアミノピリミジン化合物
HUE046617T2 (hu) 2010-11-10 2020-03-30 Genentech Inc Pirazol-aminopirimidin-származékok mint LRRK2 modulátorok
RU2013132683A (ru) 2010-12-16 2015-01-27 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед Ингибиторы репликации вирусов гриппа
TWI681952B (zh) 2011-04-22 2020-01-11 美商標誌製藥公司 經取代之二胺基甲醯胺及二胺基甲腈嘧啶、其組合物、及以該等治療之方法
GB201108225D0 (en) * 2011-05-17 2011-06-29 Amakem Nv Novel KBC inhibitors
EP2751093A1 (en) 2011-08-29 2014-07-09 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
CA2856306A1 (en) 2011-11-23 2013-05-30 Portola Pharmaceuticals, Inc. Selective kinase inhibitors
AR089182A1 (es) 2011-11-29 2014-08-06 Hoffmann La Roche Derivados de aminopirimidina como moduladores de lrrk2
AU2012357038B2 (en) * 2011-12-23 2016-05-12 Cellzome Limited Pyrimidine-2,4-diamine derivatives as kinase inhibitors
WO2013164323A1 (en) 2012-05-03 2013-11-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Pyrazole aminopyrimidine derivatives as lrrk2 modulators for use in the treatment of parkinson's disease
MX363118B (es) 2012-05-03 2019-03-11 Genentech Inc Derivados de pirazol aminopirimidina como moduladores de cinasa 2 de repeticion rica en leucina (lrrk2).
WO2014044025A1 (zh) 2012-09-20 2014-03-27 山东亨利医药科技有限责任公司 嘧啶胺衍生物及其制备方法和应用
US9145387B2 (en) 2013-02-08 2015-09-29 Celgene Avilomics Research, Inc. ERK inhibitors and uses thereof
US20150087673A1 (en) 2013-09-26 2015-03-26 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Methods for using and biomarkers for ampk-activating compounds
EP3736268A1 (en) * 2013-12-20 2020-11-11 Signal Pharmaceuticals, LLC Process for the preparation of substituted diaminopyrimidyl compounds

Also Published As

Publication number Publication date
WO2015095679A1 (en) 2015-06-25
CA2934061A1 (en) 2015-06-25
CN106170290A (zh) 2016-11-30
US9156798B2 (en) 2015-10-13
IL246252A0 (en) 2016-07-31
KR20160095159A (ko) 2016-08-10
US20150175557A1 (en) 2015-06-25
US20160354374A1 (en) 2016-12-08
SG11201604821YA (en) 2016-07-28
JP6483707B2 (ja) 2019-03-13
US9556126B2 (en) 2017-01-31
AU2014369031A1 (en) 2016-07-07
EP3082819B1 (en) 2020-06-17
EP3082819A1 (en) 2016-10-26
BR112016014412A2 (pt) 2017-08-08
US9783505B2 (en) 2017-10-10
EP3082819A4 (en) 2017-08-23
ES2812605T3 (es) 2021-03-17
JP2017500325A (ja) 2017-01-05
RU2016129380A (ru) 2018-01-25
US20150246890A1 (en) 2015-09-03
MX2016007898A (es) 2016-10-07
AR099376A1 (es) 2016-07-20
EP3736268A1 (en) 2020-11-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TW201609671A (zh) 經取代之二胺基嘧啶基化合物、其組合物及使用其之治療方法
JP7076432B2 (ja) Ｈｐｋ１調節薬としてのピラゾロピリジン誘導体及びがんの治療のためのその用法
JP6502302B2 (ja) 置換されたジアミノカルボキサミドおよびジアミノカルボニトリルピリミジン、その組成物、ならびに、それを用いた治療方法
EP3299368B1 (en) Novel amino pyrimidine derivatives
TWI603977B (zh) 作為激酶抑制劑之化合物及組合物
CN107001372B (zh) 取代的氨基嘌呤化合物、其组合物及其治疗方法
US20220306611A1 (en) Substituted 4-aminoisoindoline-1,3-dione compounds, compositions thereof, and methods of treatment therewith
TW202128675A (zh) 作為鈉通道調節劑之經取代四氫呋喃
TW202039435A (zh) 經取代之3-((3-胺基苯基)胺基)哌啶-2,6-二酮化合物、其組合物及使用彼等之治療方法
JP2021505598A (ja) 心不全およびそれに関連する障害の治療または予防に有用なβ−３アドレナリン受容体のモジュレーター
US20170369492A1 (en) 1,3-substituted 2-amino-indole derivatives and analogues useful in the treatment or prevention of diabetes mellitus, obesity, and inflammatory bowel disease
JP2020526557A (ja) ムスカリン性アセチルコリン受容体ｍ４のアンタゴニスト
JP7043483B2 (ja) 二環式プロリン化合物
TWI601726B (zh) 吡唑並吡啶衍生物作爲ｔｔｘ－ｓ阻斷劑
KR20200097694A (ko) 통증 및 통증 관련 상태를 치료하기 위한 신규한 알콕시아미노 유도체
TW202220990A (zh) 雜芳基取代的螺哌啶基衍生物及其藥物用途
EP3837251B1 (en) Ask1 inhibiting agents
TW202308998A (zh) 經甲基取代的吡啶及嗒𠯤化合物、其衍生物及其使用方法
TW202031264A (zh) 用於治療疼痛和疼痛相關疾病的新穎烷氧基氨基吡啶衍生物
EA045967B1 (ru) Замещенные соединения 4-аминоизоиндолин-1,3-диона, их композиции и способы лечения ими
EA041710B1 (ru) Сульфон-, пиридин-, алкил-, амидзамещенные гетероарильные соединения
TW201247669A (en) New compounds as JAK inhibitors