NO342678B1 - Cyanoisokinolinforbindelser, farmasøytisk sammensetning som inneholder slike og anvendelse derav - Google Patents

Cyanoisokinolinforbindelser, farmasøytisk sammensetning som inneholder slike og anvendelse derav Download PDF

Info

Publication number
NO342678B1
NO342678B1 NO20083658A NO20083658A NO342678B1 NO 342678 B1 NO342678 B1 NO 342678B1 NO 20083658 A NO20083658 A NO 20083658A NO 20083658 A NO20083658 A NO 20083658A NO 342678 B1 NO342678 B1 NO 342678B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
cyano
mmol
mixture
amino
acetic acid
Prior art date
Application number
NO20083658A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20083658L (no
Inventor
Wen-Bin Ho
Eric D Turtle
Michael P Arend
Lee A Flippin
Min Wu
Shaojiang Deng
Original Assignee
Fibrogen Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fibrogen Inc filed Critical Fibrogen Inc
Publication of NO20083658L publication Critical patent/NO20083658L/no
Publication of NO342678B1 publication Critical patent/NO342678B1/no

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/26Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47Quinolines; Isoquinolines
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00Drugs for disorders of the respiratory system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02Ophthalmic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06Antianaemics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Abstract

Foreliggende oppfinnelse angår cyanoisokinolinforbindelser egnet for anvendelse ved behandling av hypoksiinduserbar faktormedierte og/eller erytropoietinassosierte tilstander. Cyanoisokinolinforbindelsene ifølge oppfinnelsen har følgende struktur:

Description

Foreliggende oppfinnelse angår forbindelser som er i stand til å redusere hypoksiinduserbar faktor (HIF) hydroksylaseenzymaktivitet, som derved øker stabiliteten og/eller aktiviteten til HIF. Særlig øker forbindelsene endogen erytropoetin, ex vivo og in vivo.
Hypoksiinduserbar faktor (HIF) er en grunnleggende heliks-loop-heliks (bHLH) PAS(Per/Amt/Sim) transkripsjonsaktivator som medierer forandringer i genekspresjon som respons på forandringer i cellulær oksygenkonsentrasjon. HIF er en heterodimer som inneholder en oksygenregulert a-enhet (HIFa) og en konstitutivt uttrykt Ø-underenhet(HIFP) også kjent som arylhydrokarbonreseptor nukleær transporter (ARNT). I oksygenerte (normoksiske) celler blir HIFa-underenheter raskt brutt ned med enmekanisme som involverer allesteds nærværenhet av von Hippel-Lindautumorsuppressor (pVHL) E3-ligasekomplekser. Under hypoksiske betingelser blirHIFa ikke brutt ned og et aktivt HIF a/Ø-kompleks akkumulerer i kjernen og aktivererekspresjon av flere gener som inkluderer glykolytiske enzymer, glukosetransportere, erytropoietin (EPO) og vaskulær endotel vekstfaktor (VEGE). (Jiang, et al., (1996) J. Biol. Chem, 271:17771-17778; Iliopoulus, et al., (1996) Proc. Natl. Acad. Sei. USA,93:10595-10599; Maxwell, et al., (1999), Nature, 399:271-275; Sutter, et al., (2000)Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 97:4748-4753; Cockman, et al., (2000) J. Biol. Chem.,275:25733-25741; og Tanimoto, et al., (2000) EMBO. J. 19:4298-4309).
Nivåer av HIFa blir hevet i de fleste celler som respons på hypoksi og HIFa blir indusert in vivo når dyr utsettes for anemi eller hypoksi. HIFa-nivåer heves i løpet av fåtimer etter utbrudd av hypoksi, og induserer et antall fordelaktige cellulære prosesser som inkluderer cytobeskyttende effekter, økt erytropoesi og fysiologisk tilpasning til iskemi eller hypoksiske tilstander. Induksjon av HIFa er potensielt fordelaktig i tilstander slik som myokardisk akutt iskemi og tidlig infarkt, lungehypertensjon, inflammasjon og anemi.
HIVa-nivåer økes også av et antall faktorer som etterligner hypoksi, som inkludererjemchelatorer slik som desferrioksamin (DFO) og divalente metallsalter slik som C0CI2. I tillegg har forbindelser opprinnelig identifisert som inhibitorer av prokollagen prolylhydroksylaseenzymer blitt funnet å stabilisere HIFa. Eksempler på slike forbindelser kan for eksempel finnes i Majamaa et al. (1984) Eur J Biochem 138:239245; Majamaa et al. (1985) Biochem J 229:127-133; Kivirikko og Myllyharju (1998)Matrix Biol 16:357-368; Bickel et al. (1998) Hepatology 28:404-411; Friedman et al.
(2000) Proc Natl Acad Sci USA 97:4736-4741; Franklin (1991) Biochem Soc Trans19:812-815; og Franklin et al. (2001) Biochem J 353:333-338. I tillegg har forbindelsersom stabiliserer HIFa blitt beskrevet i internasjonal publikasjonsnr. WO 03/049686, WO 02/074981, WO 03/080566, WO 2004/108681 og WO 2006/094292.
Det er behov for forbindelser som er effektive når det gjelder å hindre forstyrrelser assosiert med HIF, som inkluderer anemi, og vevsskade forårsaket av iskemi som forekommer for eksempel på grunn av aterosklerose, diabetes og lungesykdommer slik som lungeembolisme og lignende. Således er forbindelser som modulerer HIF, som kan anvendes for behandling og hindring av HIF-assosierte forstyrrelser som inkluderertilstander som involverer anemi, iskemi og hypoksi, tilveiebrakt heri.
Foreliggende oppfinnelse angår nye forbindelser for å modulere hydroksylering av HIFa og/eller øke endogent erytropoietin (EPO). Særlig angår foreliggende oppfinnelse isokinolinforbindelser med en cyanogruppe i C-l-posisjonen, hvilke forbindelser økerproduksjonen av endogent EPO (se for eksempel Tabell I).
I et aspekt tilveiebringer foreliggende oppfinnelse forbindelser med formel I:
■OR
N' H
N
I
hvori:
R er hydrogen;
R1, R2, R3 og R4 er uavhengig valgt fra gruppen som består av hydrogen, Cnio alkyl eventuelt substituert med aryl, og -OR7, hvori R7 er valgt fra gruppen som består av
Ce-i2 aryl eventuelt substituert med halo eller Cnio alkoksy, og heteroaryl med fra 1 til15 karbonatomer og 1 til 4 heteroatomer valgt fra gruppen som består av oksygen, nitrogen og svovel, substituert med Cnio alkyl eller Cnio dialkylamino; og
R5 og R6 er hydrogen;
eller et farmasøytisk akseptabelt salt, tautomer, stereoisomer eller solvat derav.
Oppfinnelsen tilveiebringer også farmasøytiske sammensetninger som innbefatter en eller flere forbindelser med formel I, og en farmasøytisk akseptabel eksipient. I noen utførelsesformer innbefatter sammensetningen ytterligere minst et ytterligere terapeutisk middel. I noen utførelsesformer er middelet valgt fra gruppen som består av vitamin B12, jemsulfat, folsyre og/eller erytropoietin eller et erytropoiesestimulerende protein (ESP).
Det beskrives også fremgangsmåter for inhibering av aktiviteten til minst et HIFhydroksylaseenzym, hvor fremgangsmåten innbefatter å bringe i kontakt HIFhydroksylaseenzymet og en inhiberende effektiv mengde av en forbindelse ifølge oppfinnelsen. I en utførelsesform er HIF-hydroksylaseenzymet enasparaginylhydroksylase slik somFaktorinhiberende HIF (FIH). I en annen utførelsesform er HIF-hydroksylaseenzymet en prolylhydroksylase som inkluderer, mener ikke begrenset til, en HIF-prolylhydroksylase valgt fra gruppen som består av humanEGEN1, EGEN2 eller EGEN3, eller et ortologt enzym fra en annen art.
Det beskrives også fremgangsmåter for behandling, forbehandling eller forsinke utbruddet av en tilstand assosiert med eller mediert i det minste delvis av hypoksiinduserbar faktor (HIF), hvor fremgangsmåten innbefatter administrering til en pasient av en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse med formel I, eller en farmasøytisk sammensetning fremstilt derfra. I en utførelsesform er tilstanden assosiert med eller mediert av HIF vevsskadeassosiert med iskemi eller hypoksi. I et aspekt er iskemien en akutt iskemisk hendelse som inkluderer, men er ikke begrenset til, en akutt iskemisk hendelse valgt fra gruppen som består av myokardisk infarkt, lungeembolisme, intestinalt infarkt, iskemisk slag og renal iskemi-reperfusjonsskade. Iet annet aspekt er iskemien en kronisk iskemisk hendelse som inkluderer, men er ikke begrenset til, en kronisk, iskemisk hendelse valgt fra gruppen som består av hjertecirrhose, makulær degenerering, kronisk nyresvikt og kongestiv hjertesvikt.
Det besrkives også fremgangsmåter for behandling, forhåndsbehandling eller forsinkning av utbruddet av en tilstand assosiert med eller mediert, i det minste delvis av, erytropoietin (EPO), hvor fremgangsmåten innbefatter administrering til en pasient en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse med formel I, eller en farmasøytisk sammensetning fremstilt derfra.
Det beskrives også fremgangsmåter for behandling, forbehandling eller forsinking av utbruddet av anemi, hvor fremgangsmåten innbefatter administrering til en pasient en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse med formel I, eller en farmasøytisk sammensetning fremstilt derfra.
Før foreliggende sammensetninger og fremgangsmåter beskrives, er det å forså at oppfinnelsen ikke er begrenset til de bestemte metodologiene, protokollene, cellelinjene, undersøkelsene og reagensene beskrevet, idet disse kan variere. Det er også å forstå at terminologien anvendt heri er tiltenkt for å beskrive særlige utførelsesformer ifølge oppfinnelsen, og er på ingen måte tiltenkt å begrense omfanget av oppfinnelsen slik den er fremsatt i vedlagte krav.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer forbindelser representert ved formel I:
■OR
N H
N
I
hvori:
R er hydrogen;
R1, R2, R3 og R4 er uavhengig valgt fra gruppen som består av hydrogen, Cnio alkyl eventuelt substituert med aryl, og -OR7, hvori R7 er valgt fra gruppen som består av
Ce-i2 aryl eventuelt substituert med halo eller Cnio alkoksy, og heteroaryl med fra 1 til15 karbonatomer og 1 til 4 heteroatomer valgt fra gruppen som består av oksygen, nitrogen og svovel, substituert med Cnio alkyl eller Cnio dialkylamino; og
R5 og R6 er hydrogen;
eller et farmasøytisk akseptabelt salt, tautomer, stereoisomer eller solvat derav.
I noen utførelsesformer tilveiebringer oppfinnelsen forbindelser med formel I, hvori minst to av R1, R2, R3 og R4 er hydrogen.
I noen utførelsesformer er R1, R2, R3 og R4 valgt fra hydrogen, benzyl, fenoksy, 4-fluorfenoksy, 3-metoksyfenoksy, 2-metylbenzotiazol-6-yloksy og2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy. I særlige utførelsesformer er R1, R2, R3 og R4valgt fra hydrogen, fenoksy og 4-halofenoksy.
I noen utførelsesformer er R1 og R2 hydrogen. I andre utførelsesformer er R3 og R4 hydrogen. I andre utførelsesformer er R2 og R3 hydrogen. I andre utførelsesformer er R1 og R4 hydrogen. I andre utførelsesformer er R1, R2, R3 og R4hydrogen.
I ytterligere andre utførelsesformer er R2, R3 og R4 hydrogen. I særlige utførelsesformer hvori R2, R3 og R4 er hydrogen, er R1 fenyl, fenoksy eller 4-fluorfenoksy.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen inkluderer, men er ikke begrenset til, følgende forbindelser:
{[ 1 -cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino} -eddiksyre,
{[ 1 -cyano-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3-karbonyl]-amino} -eddiksyre,
{[ 1 -cyano-7-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokino lin-3 -karbonyl] -amino } -eddiksyre,
{[ 1 -cyano-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karbonyl]-amino} -eddiksyre,[(l-cyano-4-hydroksy-6-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre,
{[ 1 -cyano-4-hydroksy-8-(3 -metoksyfenoksy)-isokino lin-3 -karbonyl] -amino } -eddiksyre,[(7-benzyl-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre,
{[ 1 -cyano-5 -(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokino lin-3 -karbonyl] -amino } -eddiksyre,
{[ 1 -cyano-4-hydroksy-6-(2-metylbenzotiazo l-6-yloksy)-isokino lin-3 -karbonyl] -amino } eddiksyre, og
{[ 1 -cyano-6-(2-dimetylaminobenzooksazol-5 -yloksy)-4-hydroksyisokino lin-3 karbonyl]-amino} -eddiksyre.
Det vil være selvsagt for fagmannen at mange av utførelsesformene beskrevet ovenfor ikke er innbyrdes eksklusive og kan kombineres for å gi ytterligere spesifikke utførelsesformer ifølge oppfinnelsen. Slike spesifikke utførelsesformer er spesifikt omfattet heri. Tilsvarende kan de uselvstendige kravene gjøres avhengige av et hvilket som helst foregående krav, forutsatt at utførelsesformene som er beskrevet ikke er gjensidig eksklusive.
Det er å forstå at slik det anvendes heri, og i de vedlagte kravene inkluderer enkeltformene "en", "ei" og "et" flertallsreferanser med mindre sammenhengen klart dikterer noe annet.
Med mindre annet er definert, har alle tekniske og vitenskapelige uttrykk anvendt heri samme betydninger som de som vanligvis forstås av fagmannen som oppfinnelsen tilhører. Selv om eventuelle fremgangsmåter og materialer tilsvarende ekvivalenter med de som er beskrevet heri kan anvendes ved utøvelse eller testing av foreliggende oppfinnelse, er de foretrukne fremgangsmåtene, innretningene og materialene som beskrevet. Alle publikasjoner sitert her er innbefattet heri med referanse i deres helhet for formålet å beskrive og fremlegge metodologiene, reagensene og verktøyene rapportert i publikasjonene som kan anvendes i forbindelse med oppfinnelsen. Ingenting heri er konstruert som en innrømmelse av at oppfinnelsen ikke er angitt for å antedere slik beskrivelse fra tidligere oppfinnelse.
Utførelse av oppfinnelsen vil anvende, med mindre annet er indikert, vanlige fremgangsmåter innen kjemi, biokjemi, molekylær biologi, cellebiologi, genetikk, immunologi og farmakologi, slik det er kjent for fagmannen. Slike teknikker er beskrevet fullt ut i litteraturen (se for eksempel Gennaro, A.R., red. (1990) Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18. utg., Mack Publishing Co.; Colowick, S. et al., red., Methods In Enzymology, Academic Press, Inc.; D.M. Weir, og C.C. Blackwell, red. (1986) Handbook of Experimental Immunology, Vol. I-IV (Blackwell ScientificPublications); Maniatis, T. et al., red. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2. utgave, Vol. I-III, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Ausubel, F. M. etal., red. (1999) Short Protocols in Molecular Biology, 4. utgave, John Wiley & Sons; Ream et al., red. (1998) Molecular Biology Techniques: An Intensive Laboratory
Course, Academic Press; Newton & Graham, red., 1997 PCR (Introduction to Biotechniques Series), 2. utg. (Springer Verlag).
Begrepet "anemi", slik det anvendes heri, refererer til en hvilken som helst abnormalitet i hemoglobin eller erytrocytter som fører til reduserte oksygennivåer i blodet. Anemi kan være assosiert med abnormal produksjon, prosessering eller oppførsel av erytrocytter og/eller hemoglobin. Begrepet anemi refererer til en hvilken som helst reduksjon i antallet røde blodceller og/eller nivået av hemoglobin i blod relativt til normale blodnivåer.
Anemi kan oppstå på grunn av tilstander slik som akutt eller kronisk nyresykdom, infeksjoner, inflammasjon, kreft, bestråling, toksiner, diabetes og kirurgi. Infeksjoner kan for eksempel være på grunn av virus, bakterie og/eller parasitter etc. Inflammasjon kan være på grunn av infeksjon eller autoimmune forstyrrelser, slik som reumatoid artritt etc. Anemi kan også være assosiert med blodtap på grunn av for eksempel mageulcer, tolvfingertarm ulcer, hemorrider, kreft i mage eller tykktarm, traume, skade, kirurgiske inngrep etc. Anemi er videre assosiert med strålebehandling, kjemoterapi og nyredialyse. Anemi er også assosiert med HIV-rammede pasienter som gjennomgårbehandling med azidotymidin (zidovudin) eller andre reverse transkriptaseinhibitorer og kan utvikles hos kreftpasienter som gjennomgår kjemoterapi, for eksempel med sykliske cisplatin- eller ikke-cisplatininneholdende kjemoterapeutiske midler. Aplastisk anemiog myelodysplastiske syndromer er sykdommer assosiert med benmargssvikt som resulterer i redusert produksjon av erytrocytter. Videre kan anemi komme som resultat av defekt eller abnormal hemoglobin eller erytrocytter, slik som vevsforstyrrelser som inkluderer mikrocyttisk anemi, hypokromisk anemi, etc. Anemi kan komme som resultat fra forstyrrelser vedrørende jemtransport, prosessering og anvendelse, se for eksempel sideroblastisk anemi, etc.
Begrepene "forstyrrelser", "sykdommer" og "tilstander" anvendes inklusivt og refererer til en hvilken som helst tilstand som avviker fra det normale.
Begrepene "anemiske tilstander" og "anemiske forstyrrelser" refererer til en hvilken som helst tilstand, sykdom eller forstyrrelse assosiert med anemi. Slike forstyrrelser inkluderer, men er ikke begrenset til, de forstyrrelsene som er listet ovenfor. Anemiske forstyrrelser inkluderer ytterligere, men er ikke begrenset til, aplastisk anemi, autoimmun, hemolyttisk anemi, benmargs tmasplantasjon, Churg-Strauss-syndrom,
Diamond Blackfan anemi, Fanconis anemi, Felty-syndrom, transplantasjon versusvertssykdom, hematopoietisk stamcelletransplantasjon, hemolyttisk uremisk syndrom, meylodysplastisk syndrom, noktumal paroksysmal hemoglobinuri, osteomyelofibrose, pancytopeni, ren rød celleaplasi, purpura Schoenlein-Henoch, sideroblastisk anemi,refraktær anemi med overskudd av støt, reumatoid artritt, Shwachman syndrom, sikelcelle sykdom, større thalassemi, mindre thalassemi, trombocytopeni purpura, etc.
Begrepet "erytropoietinassosierte tilstander" anvendes heri inklusivt og refererer til en hvilken som helst tilstand assosiert med under normal, abnormal eller ikke-passendemodulering av erytropoietin. Erytropoetinassosierte tilstander inkluderer en hvilken som helst tilstand hvori en økning i EPO-nivå vil tilveiebringe terapeutisk fordel.
Nivåer av erytropoetin-assosiert med slike tilstander kan bestemmes ved en hvilken somhelst metode som er akseptert og anvendes av fagmannen. Erytropoietinassosierte tilstander inkluderer anemiske tilstander slik som de som er beskrevet ovenfor.
Erytropoetinassosierte tilstander inkluderer ytterligere neurologiske forstyrrelser og/eller skader, som inkluderer tilfeller av slag, traume, epilepsi, neurodegenerativ sykdom og lignende, hvori erytropoietin kan tilveiebringe en neurobeskyttende effekt. Neurodegenerative sykdommer tiltenkt ved foreliggende oppfinnelse inkluderer Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, Huntingtons sykdom og lignende.
Begrepet "erytropoietin" refererer til en hvilken som helst rekombinant eller naturlig forekommende erytropoietin, eller ESP som for eksempel inkluderer human erytropoietin (GenBank aksesjonsnr. AAA52400; Lin et al. (1985) Proc Nat’l Acad. Sei USA 82:7580-7584), EPOETIN human recombinant erytropoietin (Amgen, Inc.,Thousand Oaks CA), ARANESP human rekombinant erytropoietin (Amgen), PROCRIT human rekombinant erytropoietin (Ortho Biotech Products, L.P., Raritan NJ), glykosylert erytropoietin slik som de som er beskrevet i US patentnr. 6 930 086 (som er innbefattet med referanse) etc.
Begrepet "HIVa" refererer til alfa-underenheten til hypoksiinduserbar faktorprotein.HIFa kan være et hvilket som helst humant eller annet pattedyrprotein, eller fragment derav, som inkluderer human HIF-la (Genbank aksesjonsnr. Q166654), HIF-2a(Genbank aksesjonsnr. AAB41495) og HIF-3a (Genbank aksesjonsnr. AAD 22668);murin HIF-la (Genbank aksesjonsnr. Q61221), HIF-2a (Genbank aksesjonsnr.BAA20130 og AAB41496), og HIF-3a (Genbank aksesjonsnr. AAC72734); rotte-HIF
la (Genbank aksesjonsnr. CAA70701), HIF-2a (Genbank aksesjonsnr. CAB96612), ogHIF-3a (Genbank aksesjonsnr. CAB96611); og bovine-HIF-la (Genbank aksesjonsnr.BAA78675). HIFa kan også være et hvilket som helst ikke-pattedyrprotein ellerfragment derav, som inkluderer Xenopus laevis HIF-la (Genbank aksesjonsnr.CAB96628), Drosophila melanogaster HIF-la (Genbank aksesjonsnr. JC4851), ogkylling-HIF-la (Genbank aksesjonsnr. BAA34234). HIFa-gensekvenser kan ogsåoppnås ved rutinemessige kloneteknikker, for eksempel ved anvendelse av hele eller del av en HIFa-gensekvens beskrevet ovenfor som en probe for å utvinne og bestemmesekvensen til et HIFa-gen hos en annen art.
Et fragment av HIFa inkluderer et hvilket som helst fragment som bibeholder minst en funksjonell eller strukturell karakteristikk til HIFa. Fragmenter av HIFa inkluderer for eksempel regionene definert av human HIF-la fra aminosyrene 401 til 603 (Huang etal., ovenfor), aminosyre 531 til 575 (Jiang et al. (1997), JBiol. Chem, 272:1925319260), aminosyre 556 til 575 (Tanimoto et al., ovenfor), aminosyre 557-571 (Srinivaset al. (1999), Biochem Biophys Res. Commun, 260:557-561), og aminosyre 556 til 575(Ivan og Kaelin (2001), Science, 292:464-468). Videre inkluderer HIFa-fragmenter ethvilket som helst fragment som inneholder minst en forekomst av motivet LXXLAP. (Se Genbank aksesjonsnr. Q16665).
Begrepet "fragment" kan referere til en hvilken som helst del av en sekvens som bibeholder minst en strukturell eller funksjonell karakteristikk av proteinet. Fragmenter er av en hvilken som helst lengde, men er foretrukket ca. 5 til 100 aminosyrer i lengde, særlig ca. 15 til 50 aminosyrer i lengde, og mer særlig ca. 20 aminosyrer i lengde. Der "aminosyresekvens" anvendes for å referere til polypeptidsekvensen til et naturlig forekommende proteinmolekyl, er "aminosyresekvens" og lignende begreper ikke ment å begrense aminosyresekvensen til den fullstendige opprinnelige sekvensen assosiert med det angitte proteinmolekylet.
Begrepet "relaterte proteiner", slik det anvendes heri, refererer for eksempel til proteiner relatert til HIFa-prolylhydroksylase, omfatter andre2-oksoglutaratdioksygenaseenzymer, særlig de familiemedlemmene som tilsvarendekrever Fe2+, 2-oksoglutarat og oksygen, for å opprettholde hydroksylaseaktivitet. Slikeenzymer inkluderer, men er ikke begrenset til, for eksempel prokollagen lysylhydroksylase, prokollagen propyl-4-hydroksylase og faktorinhiberende HIF (FIH),en asparaginylhydroksylase ansvarlig for regulering av transaktivering av HIFa
(Genbank aksesjonsnr. AAL27308; Mahon et al. (2001), Genes Dev, 15:2675-2686;Lando et al. (2002), Science, 295:858-861; og Lando et al. (2002), Genes Dev,16:1466-1471. SeogsåElkins et al. (2002), JBiolChem, C200644200, etcl).
Begrepet "HIF-hydroksylase" refererer til et hvilket som helst enzym som modifiserera-underenheten til HIF ved hydroksylering av et eller flere aminosyreresiduer. HIFhydroksylaser inkluderer faktorinhiberende HIF (FIH) (Genbank aksesjonsnr. AAF27308; Mahon et al. (2001), Genes Dev, 15:2675-2686; Fando et al. (2002),Science, 295:858-861; og Fando et al. (2002), Genes Dev, 16:1466-1471, sommodifiserer minst et asparaginresidu funnet i HIFa. (Se også Elkins et al. (2002), J Biol Chem, C200644200). HIF-hydroksylaser inkluderer også HIF-prolylhydroksylaser(HIF PHer) som modifiserer prolinresiduer funnet i HIFa.
Begrepene "HIF-prolylhydroksylase" og "HIF PH" refererer til et hvilket som helstenzym i stand til å hydroksylere et prolinresidu i HIF-proteinet. Foretrukket inkludererprolinresiduet hydroksylert med HIF PH, pro linet funnet i motivet EXXEAP. HIV PH inkluderer medlemmer av Egl-Nine (EGEN) genfamilien beskrevet av Taylor (2001,Gene, 275:125-132), og karakterisert av Aravind og Koonin (2001, Genome Biol, 2:RESEARCH 0007), Epstein et al. (2001, Cell, 107:43-54), og Bruick og McKnight(2001, Science, 294:1337-1340). Eksempler på HIF PH-enzymer inkluderer humanSM-20 (EGEN1) (Genbank aksesjonsnr. AAG33965; Dupuy et al. (2000), Genomics,69:348-54), EGEN2 isoform 1 (Genbank aksesjonsnr. CAC42510; Taylor, ovenfor),EGEN2 isoform 2 (Genbank aksesjonsnr. NP 060025), og EGEN3 (Genbank aksesjonsnr. CAC42511; Taylor, ovenfor); muse-EGENl (Genbank aksesjonsnr.CAC42515), EGEN2 (Genbank aksesjonsnr. CAC42511), og EGEN3 (SM-20)(Genbank aksesjonsnr. CAC42517); og rotte-SM-20 (Genbank aksesjonsnr.
AAA19321). I tillegg kan HIF PH inkludere Caenorhabditis elegans EGE-9 (Genbankaksesjonsnr. AAD56365) og Drosophila melanogaster CG1114 genprodukt (Genbank aksesjonsnr. AAF52050). HIF PH inkluderer også en hvilken som helst del av de foregående fullengde proteinene som bibeholder minst en strukturell eller funksjonell karakteristikk.
Begrepet "eksipient", slik det anvendes heri, betyr en inert eller inaktiv substans anvendt ved produksjon av farmasøytiske produkter eller andre tabletter, som inkluderer, uten begrensning, en hvilken som helst substans anvendt som et bindemiddel, desintegreringsmiddel, belegningsmiddel, sammenpresning/innkapslings
hjelpemiddel, krem eller lotion, smøremiddel, parenteralt middel, søtningsstoff eller smaksstoff, suspenderings/geleringsmiddel eller våtgranuleringsmiddel. Bindemidler inkluderer for eksempel karbopol, povidon, xantan gummi, etc.; belegningsmidler inkluderer for eksempel celluloseacetatftalat, etylcellulose, gellan gummi, maltodekstrin, etc.; kompresjon/innkapslingshjelpemidler inkluderer for eksempel kalsiumkarbonat, dekstrose, fruktose dc, honning dc, laktose (anhydrat eller monohydrat; eventuelt i kombinasjon med aspartam, cellulose eller mikrokrystallinsk cellulose), stivelse dc, sukkrose etc.; desintegreringsmidler inkluderer for eksempel kroskarmellosenatrium, gellan gummi, natriumstivelsesglykolat etc.; kremer og lotioner inkluderer for eksempel maltodekstrin, carrageenaner etc.; smøremidler inkluderer for eksempel magnesiumstearat, stearinsyre, natriumstearylfumarat etc.; materialer for tyggbare tabletter inkluderer for eksempel dekstrose, fruktose dc, laktose, monohydrat, eventuelt i kombinasjon med aspartam eller cellulose), etc.; parenterale midler inkluderer for eksempel mannitol, povidon, etc.; mykgjørere inkluderer for eksempel dibutylsebakat, polyvinylacetatftalat, etc., suspenderingsmidler/geleringsmidler inkluderer for eksempel carrageenan, natriumstivelsesglykolat, xantangummi etc.; søtningsstoffer inkluderer for eksempel aspartam, dekstrose, fruktose dc, sorbitol, sukkrose dc, etc.; og våtgranuleringsmidler inkluderer for eksempel kalsiumkarbonat, maltodekstrin, mikrokrystallinsk cellulose etc.
Begrepet "subjekt" anvendes heri i den bredeste betydningen. Subjekter kan inkludere isolerte celler, enten prokaryote eller eukaryote, eller vev dyrket i kultur. I visse utførelsesformer er et subjekt et dyr, særlig et dyr valgt fra en pattedyrart som inkluderer rotter, kanin, kveg, sauedyr, svinedyr, hundedyr, kattedyr, musedyr, hestedyr og primat, særlig menneske.
Begrepet "alkyl" refererer til monovalente hydrokarbylgrupper som har fra 1 til 10 karbonatomer, mer særlig fra 1 til 5 karbonatomer, og enda mer særlig 1 til 3 karbonatomer. Begrepet er eksemplifisert ved grupper slik som metyl, etyl, n-propyl,isopropyl, n-butyl, t-butyl, n-pentyl og lignende.
Begrepet "substituert alkyl" refererer til en hvilken som helst gruppe med fra 1 til 10 karbonatomer, særlig 1 til 5 karbonatomer, som har fra 1 til 5 substituenter, mer særlig 1 til 3 substituenter, hvor hver er uavhengig valgt fra gruppen som består av alkyl, alkoksy, substituert alkoksy, acyl, acylamino, acyloksy, amino, substitutert amino,
aminoacyl, aminokarbonylamino, aminotiokarbonylamino, aminokarbonyloksy, aryl, substitutert aryl, aryloksy, substitutert aryloksy, cyano (-CN), halogen, hydroksyl(-OH), nitro (-NO2), okso (=0), tiokso (=S), karboksyl, karboksylestere, sykloalkyl,substitutert sykloalkyl, tiol, alkyltio, substitutert alkyltio, aryltio, substituert aryltio, sykloalkyltio, substituert sykloalkyltio, heteroaryltio, substituert heteroaryltio, heterosyklisk tio, substituert heterosyklisk tio, heteroaryl, substituert heteroaryl, heterosyklisk, substituert heterosyklisk, sykloalkoksy, substituert sykloalkoksy, heteroaryloksy, substituert heteroaryloksy, heterosyklyloksy, substituert
heterosyklyloksy, oksykarbonylamino, oksytiokarbonylamino, -OS(O)2-alkyl, -OS(O)2substituert alkyl, -OS(O)2-aryl, -OS(O)2-substituert aryl, OS(O)2-heteroaryl, -OS(O)2substituert heteroaryl, -OS(O)2-heterosyklisk, -OS(O)2-substituert heterosyklisk,-NR40S(O)2-alkyl, -NR40S(O)2-substituert alkyl, -NR40S(O)2-aryl,-NR40S(O)2-substituert aryl, -NR40S(O)2-heteroaryl, -NR40S(O)2-substituert heteroaryl,-NR40S(O)2-heterosyklisk, -NR40S(O)2-substituert heterosyklisk, -OSO2-NR40R40,-NR40S(O)2-NR40-alkyl, -NR40S(O)2-NR40-substituert alkyl, -NR40S(O)2-NR40-aryl,-NR40S(O)2-NR40-substituert aryl, -NR40S(O)2-NR40-heteroaryl, -NR40S(O)2-NR40substituert heteroaryl, -NR40S(O)2-NR40-heterosyklisk og -NR40S(O)2-NR40-substituertheterosyklisk hvor hver R40 er er uavhengig valgt fra hydrogen eller alkyl.
Begrepet "haloalkyl" referer til en alkylgruppe substituert med fra 1 til 5, og særlig 1 til 3 halogenatomer. Foretrukket er halogenatomet fluor eller klor. Egnede haloalkylbestanddeler inkluderer, men er ikke begrenset til, CF3, -CH2CF3.
Begrepet "alkoksy" refererer til gruppen "alkyl-O-" som for eksempel inkluderermetoksy, etoksy, n-propoksy, iso-propoksy, n-butoksy, t-butoksy, sec-butoksy, npentoksy og lignende.
Begrepet "substituert alkoksy" refererer til gruppen "substituert alkyl-O".
Begrepet "acyl" refererer til gruppene H-C(O)-, alkyl-C(O)-, substituert alkyl-C(O)-,alkenyl-C(O)-, substituert alkenyl-C(O)-, alkynyl-C(O)-, substituert alkynyl-C(O)-,sykloalkyl-C(O)-, substituert sykloalkyl-C(O)-, aryl-C(O)-, substituert aryl-C(O)-,heteroaryl-C(O)-, substituert heteroaryl-C(O), heterosyklisk-C(O)- og substituertheterosyklisk-C(O)-, forutsatt at nitrogenatomet til den heterosykliske forbindelsen ellersubstituerte heterosykliske forbindelsen ikke er bundet til -C(O)-gruppen, hvori alkyl,substituert alkyl, alkenyl, substituert alkenyl, alkynyl, substituert alkynyl, sykloalkyl,
substituert sykloalkyl, aryl, substituert aryl, heteroaryl, substituert heteroaryl, heterosyklisk og substituert heterosyklisk er som definert heri.
Begrepet "aminoacyl" og prefikset "karbamoyl" eller "karboksamid" eller "substituert karbamoyl" eller "substituert karboksamid" refererer til gruppen -C(O)NR42R42 hvorhver R42 er uavhengig valgt fra gruppen som består av hydrogen, alkyl, substituert alkyl, alkenyl, substituert alkenyl, alkynyl, substituert alkynyl, aryl, substituert aryl, sykloalkyl, substituert sykloalkyl, heteroaryl, substituert heteroaryl, heterosyklisk og substituert heterosyklisk; og hvori hver R42 er bundet for å danne sammen med nitrogenatomet, en heterosyklisk eller substituert heterosyklisk forbindelse hvori alkyl, substituert alkyl, alkenyl, substituert alkenyl, alkynyl, substituert alkynyl, sykloalkyl, substituert sykloalkyl, aryl, substituert aryl, heteroaryl, substituert heteroaryl, heterosyklisk og substituert heterosyklisk er som definert heri.
Begrepet "acyloksy" refererer til bestanddelen -O-acyl, hvori oksygenatomet er bundettil karbonylet (-C(O)) til acylbestanddelen.
Begrepet "alkenyl" refererer til en vinylumettet monovalent hydrokarbylgruppe som har fra 2 til 6 karbonatomer, og foretrukket 2 til 4 karbonatomer, og som har minst 1, foretrukket fra 1 til 2 vinyl (>C=C<) umettethetsseter. Slike grupper er eksemplifisert ved vinyl (eten-1-yl), allyl, but-3-enyl og lignende.
Begrepet "substituert alkenyl" refererer til alkenylgrupper som har fra 1 til 3 substituenter, og foretrukket 1 til 2 substituenter, valgt fra gruppen som består av alkoksy, substituert alkoksy, acyl, acylamino, acyloksy, amino, substituert amino, aminoacyl, aryl, substituert aryl, aryloksy, substituert aryloksy, cyano, halogen, hydroksyl, nitro, karboksyl, karboksylestere, sykloalkyl, substituert sykloalkyl, heteroaryl, substituert heteroaryl, heterosyklisk og substituert heterosyklisk. Dette begrepet inkluderer både E (cis) og Z (trans)-isomerer, slik det er hensiktsmessig. Detinkluderer også blandinger av både E- og Z-komponenter.
Begrepet "alkynyl" refererer til en acetylinisk umettet, monovalent hydrokarbylgruppe som har fra 2 til 6 karbonatomer, og foretrukket 2 til 3 karbonatomer, og som har minst 1, og foretrukket fra 1 til 2 acetyleniske (-C=C-) umettethetsseter. Denne gruppen ereksemplifisert ved etyn-l-yl, propyn-l-yl, propyn-2-yl og lignende.
Begrepet "substituert alkynyl" refererer til alkynylgrupper som har fra 1 til 3 substituenter, foretrukket 1 til 2 substituenter, valgt fra de som er listet for substituert alkenyl.
Begrepet "amino" refererer til gruppen -NH2.
Begrepet "substituert amino" refererer til gruppen -NR41R41, hvor hver R41 eruavnengig valgt fra gruppen som består av hydrogen, alkyl, substituert alkyl, alkenyl, substituert alkenyl, alkynyl, substituert alkynyl, sykloalkyl, substituert sykloalkyl, aryl, substituert aryl, heteroaryl, substituert heteroaryl, heterosyklisk, substituert heterosyklisk, -SCh-alkyl, -SCh-substitucrt alkyl, -SCh-alkcnyl, -SCh-substitucrt alkenyl,-SCh-sykloalkyl, -SCh-substituert sykloalkyl, -SCh-aryl, -SCh-substituert aryl, -SO2heteroaryl, -SCh-substitucrt heteroaryl, -SCh-heterosyklisk, -SCh-substitucrtheterosyklisk, forutsatt at begge R4'-gruppene ikke er hydrogen; eller R4'-gruppen kanvære bundet sammen med nitrogenatomet for å danne en heterosyklisk eller substituert heterosyklisk ring.
Begrepet "acylamino" referer til gruppen -NR45C(O)alkyl, -NR45C(O)substituert alkyl,-NR45C(O)sykloalkyl, -NR45C(O)substituert sykloalkyl, -NR45C(O)alkenyl,-NR45C(O)substituert alkenyl, -NR45C(O)alkynyl, -NR45C(O)substituert alkynyl,-NR45C(O)aryl, -NR45C(O)substituert aryl, -NR45C(O)heteroaryl, -NR45C(O)substituertheteroaryl, -NR45C(O)heterosyklisk og -NR45C(O)substituert heterosyklisk, hvor R45 erhydrogen eller alkyl og hvori alkyl, substituert alkyl, alkenyl, substituert alkenyl, alkynyl, substituert alkynyl, sykloalkyl, substituert sykloalkyl, aryl, substituert aryl, heteroaryl, substituert heteroaryl, heterosyklisk og substituert heterosyklisk er som definert heri.
Begrepet "karbonyloksyamino" refererer til gruppen -NR46C(O)O-alkyl, -NR46C(O)Osubstituert alkyl, -NR46C(O)O-alkenyl, -NR46C(O)O-substituert alkenyl, -NR46C(O)Oalkynyl, -NR46C(O)O-substituert alkynyl, -NR46C(O)O-sykloalkyl, -NR46C(O)Osubstituert sykloalkyl, -NR46C(O)O-aryl, -NR46C(O)O-substituert aryl, -NR46C(O)Oheteroaryl, -NR46C(O)O-substituert heteroaryl, -NR46C(O)O-heterosyklisk og-NR46C(O)O-substituert heterosyklisk, hvori R46 er hydrogen eller alkyl og hvori alkyl,substituert alkyl, alkenyl, substituert alkenyl, alkynyl, substituert alkynyl, sykloalkyl, substituert sykloalkyl, aryl, substituert aryl, heteroaryl, substituert heteroaryl, heterosyklisk og substituert heterosyklisk er som definert heri. Det er å forstå at
gruppen "oksykarbonylamino" refererer til grupper tilsvarende de som akkurat er beskrevet, unntatt at bindingen til oksygen og karbonyl (-C(=O)-)-gruppen er byttet om.I tillegg er begrepet "oksytiokarbonylamino" tilsvarende de som akkurat er beskrevet; imidlertid blir en tiokarbonyl (-C(=S)-) anvendt i stedet for et karbonyl.
Begrepet "aminokarbonyloksy" som et prefiks "karbamoyloksy" eller "substituert karbamoyloksy" refererer til gruppen -OC(O)NR47R47 hvor hver R47 er uavhengig valgtfra gruppen som består av hydrogen, alkyl, substituert alkyl, alkenyl, substituert alkenyl, alkynyl, substituert alkynyl, sykloalkyl, substituert sykloalkyl, aryl, substituert aryl, heteroaryl, substituert heteroaryl, heterosyklisk og substituert heterosyklisk; eller hvor hver R47 er bundet for å danne, sammen med nitrogenatomet, en heterosyklisk eller substituert heterosyklisk forbindelse og hvori alkyl, substituert alkyl, alkenyl, substituert alkenyl, alkynyl, substituert alkynyl, sykloalkyl, substituert sykloalkyl, aryl, substituert aryl, heteroaryl, substituert heteroaryl, heterosyklisk og substituert heterosyklisk er som definert heri.
Begrepet "aminokarbonylamino" refererer til gruppen -NR49C(O)NR49 hvor hver R49 eruavhengig valgt fra gruppen som består av hydrogen og alkyl. Begrepet "aminotiokarbonylamino" referer til bestanddelen -NR49C(S)R49-, hvori R49 er somdefinert ovenfor.
Begrepet "aryl" eller "Ar" refererer til en monovalent, aromatisk, karbosyklisk gruppe med fra 6 til 14 karboantomer som har en enkel ring (for eksempel fenyl) eller multiple kondenserte ringer (for eksempel naftyl eller antryl), hvilke kondenserte ringer kan eller kan ikke være aromatiske (for eksempel 2-benzoksazolinon, 2H-l,4-benzokaszin3(4H)-on-7-yl og lignende), forutsatt at bindingspunktet er arylgruppen. Foretruknearylet inkluderer fenyl og naftyl.
Begrepet "substituert aryl" refererer til arylgrupper, som definert heri, som er substituert med fra 1 til 4, foretrukket 1 til 3, substituenter valgt fra de som er listet for substituert alkyl med unntak av at slik substitusjon ikke inkluderer okso eller tiokso.
Begrepet "aryloksy" refererer til gruppen aryl-O- som inkluderer f.eks. fenoksy,naftoksy og lignende.
Begrepet "substituert aryloksy" refererer til substituerte aryl-O-grupper.
Begrepet "aryloksyaryl" refererer til gruppen -aryl-O-aryl.
Begrepet "substituert aryloksyaryl" refererer til aryloksyarylgrupper substituert med fra 1 til 3 substituenter på en eller begge arylringene, slik det er definert ovenfor, for substituert aryl.
Begrepet "karboksyl" refererer til -COOH eller salter derav.
Begrepet "karboksylestere" eller "alkoksykarbonyl" refererer til gruppene -C(O)Oalkyl, -C(O)O-substituert alkyl, -C(O)O-aryl og -C(O)O-substituert aryl hvori alkyl,substituert alkyl, aryl og substituert aryl er som definert heri.
Begrepet "sykloalkyl" refererer til sykliske alkylgrupper med fra 3 til 10 karbonatomer som har enkle eller multiple sykliske ringer som for eksempel inkluderer adamantyl, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, syklooktyl og lignende.
Begrepet "substituert sykloalkyl" refererer til en sykloalkylgruppe som har fra 1 til 5 substituenter valgt fra de som er listet for substituert alkyl.
Begrepet "sykloalkoksy" refererer til -O-sykloalkylgrupper.
Begrepet "substituert sykloalkoksy" refererer til -O-substituerte sykloalkylgrupper.
Begrepet "halo" eller "halogen" refererer til fluor, klor, brom og jod, og er foretrukket fluor eller klor.
Begrepet "heteroaryl" refererer til en aromatisk gruppe med fra 1 til 15 karbonatomer, foretrukket fra 1 til 10 karbonatomer, og 1 til 4 heteroatomer valgt fra gruppen som består av oksygen, nitrogen og svovel i ringen. Slike heteroarylgrupper kan ha en enkelt ring (for eksempel pyridinyl eller furyl) eller multiple kondenserte ringer (for eksempel indolizinyl, benzotienyl, 2-benzoksazolinon, 2H-l,4-benzoksazin-3(4H)-on-7yl, benzofuran, 2,3-dihydrobenzofuran, benzotiazol, benzooksazol, benzo[l,3]dioksolyl,og lignende). Foretrukne heteroaryler inkluderer pyridinyl, pyrrolyl, indolyl, tiofenyl og furyl.
Begrepet "substituert heteroaryl" refererer til heteroarylgrupper som er substituert med fra 1 til 3 substituenter valgt fra samme gruppe substituenter definert for substituert aryl.
Begrepet "heteroaryloksy" refererer til gruppen -O-heteroaryl og "substituertheteroaryloksy" referer til gruppen -O-substituert heteroaryl.
Begrepet "heterosykel" eller "heterosyklisk" eller "heterosyklyl" refererer til en mettet eller umettet gruppe som har en enkelt ring eller multiple kondenserte ringer, med fra 1 til 10 karbonatomer og fra 1 til 4 heteroatomer valgt fra gruppen som består av nitrogen, svovel eller oksygen i ringen hvori, i sammensmeltede ringsystemer, en eller flere av ringene kan være aryl eller heteroaryl, forutsatt at bindingspunktet er heterosyklyl.
Begrepet "substituert heterosyklisk" eller "substituert heterosyklyl" refererer til heterosyklylgrupper som er substituert med fra 1 til 3 av de samme substituentene som definert for substituert sykloalkyl.
Eksempler på heterosykler og heteroaryler inkluderer, men er ikke begrenset til, acetidin, pyrrol, imidazol, pyrazol, pyridin, pyrazin, pyrimidin, pyridazin, indolizin, isoindol, indol, dihydroindol, indazol, purin, kinolizin, isokinolin, kino lin, ftalazin, napftylpyridin, kinoksalin, kinazolin, cinnolin, pteridin, karbazol, karbo lin, fenantridin, akridin, fenantrolin, isotiazol, fenazin, isoksazol, fenoksazin, fenotiazin, imidazolidin, imidazolin, piperidin, piperazin, indolin, ftalimid, 1,2,3,4-tetrahydroisokinoline, 4,5,6,7tetrahydrobenzo[b]tiofen, tiazol, tiazolidin, tiofen, benzo[b]tiofen, morfolinyl, tiomorfolinyl (også referert til somtiamorfolinyl), piperidinyl, pyrrolidin, tetrahydrofuranyl og lignende.
Begrepet "heterosyklyloksy" refererer til gruppen -O-heterosyklisk og "substituertheterosyklyloksy" referer til gruppen -O-substituert heterosyklisk.
Begrepet "tiol" refererer til gruppen -SH.
Begrepet "alkyltio" refererer til gruppene -S-alkyl hvor alkyl er som definert ovenfor.
Begrepet "substituert alkyltio" og "substituert alkylsulfonyl" refererer til gruppen -Ssubstituert alkyl, hvor substituert alkyl er som definert ovenfor.
Begrepet "sykloalkyltio" eller "sykloalkylsulfonyl" refererer til gruppene -S-sykloalkyl,hvor sykloalkyl er som definert ovenfor.
Begrepet "substituert sykloalkyltio" refererer til gruppen -S-substituert sykloalkyl hvorsubstituert sykloalkyl er som definert ovenfor.
Begrepet "aryltio" eller "arylsulfanyl" refererer til gruppen -S-aryl og "substituertaryltio" refererer til gruppen -S-substituert aryl, hvor aryl og substituert aryl er somdefinert ovenfor.
Begrepet "heteroaryltio" refererer til gruppen -S-heteroaryl og "substituertheteroaryltio" refererer til gruppen -S-substituert heteroaryl hvor heteroaryl ogsubstituert heteroaryl er som definert ovenfor.
Begrepet "heterosyklisk tio" refererer til gruppen -S-heterosyklisk og "substituertheterosyklisk tio" refererer til gruppen -S-substituert heterosyklisk hvor heterosykliskog substituert heterosyklisk er som definert ovenfor.
Begrepet "farmasøytisk akseptabelt salt" refererer til farmasøytisk akseptable salter av en forbindelse, hvilke salter av avledet fra et antall organiske og uorganiske motioner godt kjent i litteraturen og inkluderer kun som eksempel, natrium, kalium, kalsium, magnesium, ammonim, tetraalkylammonium og lignende; og når molekylet inneholder en basisk funksjonalitet, salter av organiske og uorganiske syrer, slik som hydroklorid, hydrobromid, tartrat, mesylat, acetat, maleat, oksalat og lignende.
Begrepet "solvater" refererer til et kompleks dannet ved kombinasjon av løsemiddelmolekyler med molekyler eller ioner i løsningen. Løsemiddelet kan være en organisk forbindelse, en uorganisk forbindelse eller en blanding av begge. Noen eksempler på løsemidler inkluderer, men er ikke begrenset til, metanol, N,Ndimetylformamid, tetrahydrofuran, dimetylsulfoksid og vann.
Begrepet "tautomer" refererer til alternative former av et molekyl som er forskjellig i posisjonen av et proton, slik som enol-ketol og imin-enamin tautomerer, ellertautomeriske former i heteroarylgrupper som inneholder et ringatom bundet til både en ring-NH-bestanddel og en ring=N-bestanddel slik som pyrazoler, imidazoler,benzimidazol, triazoler og tetrazoler.
Det er å forstå at i alle substituerte grupper definert ovenfor, er olymerer som oppnås ved å definere substituenter med ytterligere substituenter i tillegg til dem selv (for eksempel substituert aryl som har en substituert arylgruppe som en substituent som i seg selv er substituert med en substituert arylgruppe, etc.) ikke tiltenkt for inklusjon heri. I slike tilfeller er det maksimale antallet substituenter tre. Det vil si at hver av de ovenfor nevnte definisjonene er begrenset ved begrensningen om at for eksempel substituerte arylgrupper er begrenset til -substituert aryl (substituert aryl)-substituert aryl.
Tilsvarende er det forstå at de ovenfor angitte definisjonene ikke er begrenset til å inkludere ikke-tillatte substitusjonsmønstere (for eksempel metyl substituert med 5fluorgrupper eller en hydroksylgruppe alfa til etylenisk eller acetylenisk umettethet). Slike ikke-tillate substitusjonsmønstere er godt kjente for fagmannen.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer anvendelse av en forbindelse med formel I for fremstilling av et medikament for anvendelse ved behandling av forskjellige tilstander eller forstyrrelser slik de er beskrevet heri. I en utførelsesform er en farmasøytisk sammensetning tilveiebrakt som innbefatter en farmasøytisk akseptabel eksipient eller bærer og en terapeutisk effektiv mengde av minst en forbindelse med formel I.
Medikamentet eller sammensetningen kan ytterligere innbefatte minst et ytterligere terapeutisk middel valgt fra gruppen som inkluderer, men er ikke begrenset til, vitamin En, jemsulfat, folsyre og/eller rekombinant erytropoietin eller et erytropoiesestimulerende protein (ESP).
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen eller medikamenter eller sammensetninger som innbefatter forbindelsene kan anvendes for å modulere stabiliteten og/eller aktiviteten til HIF, og dermed aktivere HIF-regulert genekspresjon. Forbindelsen ellersammensetningen eller medikamentet derav kan anvendes i fremgangsmåter for å behandle, forhåndsbehandle eller forsinke progresjon eller utbrudd av tilstander assosiert med HIF som inkluderer, men er ikke begrenset til, anemiske, iskemiske og hypoksiske tilstander. I forskjellige utførelsesformer blir forbindelsen administrert umiddelbart etterfølgende en tilstand som gir akutt iskemi, for eksempel myokardisk infarkt, lungeembolisme, intestinalt infarkt, iskemisk slag og renal iskemiskreperfusjonsskade. I en annen utførelsesform blir forbindelsen, eller sammensetning eller medikament derav, administrert til en pasient diagnostisert med en tilstand
assosiert med utvikling av kronisk iskemi, for eksempel hjertecirrhose, makulær degenerering, lungeembolisme, akutt respiratorisk svikt, neonatal respiratorisk stressyndrom og kongestiv hjertesvikt. I en ytterligere annen utførelsesform blir forbindelsen, eller sammensetningen eller medikament derav administrert umiddelbart etter et traume eller skade. I andre utførelsesformer kan forbindelsen, eller sammensetning eller medikament derav, administreres til et subjekt basert på forhåndsdisponerende tilstander, for eksempel hypertensjon, diabetes, okklusiv arterial sykdom, kronisk venøs utilstrekkelighet, Raynauds sykdom, kronisk hudulcer, cirrhose, kongestiv hjertesvikt og systemisk sklerose. I ytterligere andre utførelsesformer kan forbindelsen administreres for å forhåndsbehandle et subjekt for å redusere eller hindre utvikling av vevsskade assosiert med iskemi eller hypoksi.
Forbindelsen ifølge oppfinnelsen, eller sammensetninger eller medikamenter derav, kan også anvendes for å øke endogent erytropoietin (EPO). Forbindelsene eller sammensetning eller medikament derav, kan administreres for å hindre, forhåndsbehandle eller behandle EPO-assosierte tilstander, som for eksempel inkluderertilstander assosiert med anemi og neurologiske forstyrrelser. Tilstander assosiert med anemi inkluderer forstyrrelser slike som akutt eller kronisk nyresykdom, diabetes, kreft, ulcere, infeksjon med virus, for eksempel HIV, bakterie eller parasitter; inflammasjon etc. Anemi tilstander kan ytterligere inkludere de som er assosiert med inngrep eller behandlinger som for eksempel inkluderer strålebehandling, kjemoterapi, dialyse og kirurgi. Forstyrrelser assosiert med anemi inkluderer i tillegg abnormalt hemoglobin og/eller erytrocytter, slik som finnes i forstyrrelser slik som mikrocytisk anemi, hypokromisk anemi, aplastisk anemi etc.
Forbindelsene kan anvendes for å øke endogen EPO hos et subjekt som gjennomgår en spesifikk behandling eller inngrep, profylaktisk eller samtidig, for eksempel en HIVrammet anemisk pasient som behandles med azidotymidin (zidovudin) eller andre reverse transkriptaseinhibitorer, en anemisk kreftpasient som mottar syklisk cisplatin og ikke-cisplatininneholdende kjemoterapetuiske midler, eller en anemisk eller ikkeanemisk pasient som skal gjennomgå kirurgi. I tillegg kan forbindelsene anvendes for å øke endogene EPO-nivåer hos en anemisk eller ikke-anemisk pasient som skalgjennomgå kirurgi for å redusere behovet for allogene blodtransfusjoner eller for å lette baking av blod før kirurgi.
Oppfinnelsen angår også anvendelse av en forbindelse, eller sammensetning eller medikament derav, for behandling, forhåndsbehandling eller forsinkning av utbrudd av en tilstand assosiert med en forstyrrelse valgt fra gruppen som består av anemiske forstyrrelser, neurologiske forstyrrelser og/eller skader som inkluderer tilfeller av slag, traume, epilepsi og neurodegenerativ sykdom; hjerteiskemi som inkluderer, men er ikke begrenset til, myokardisk infarkt og kongestiv hjertesvikt, leveriskemi som inkluderer, men ikke er begrenset til, hjertecirrhose, renal iskemi som inkluderer, men er ikke begrenset til, akutt nyresvikt og kronisk nyresvikt; periferale, vaskulære forstyrrelser, ulcere, brannskader og kroniske sår; lungeembolisme og iskemisk-reperfusjonsskade.
Det beskrives også en fremgangsmåte for inhibering av aktiviteten til minst et hydroksylaseenzym som modifiserer alfa-underenheten til hypoksiinduserbar faktor.HIF-hydroksylaseenzymet kan være en asparaginylhydroksylase slik somfaktorinhiberende HIF (FIH); og/eller en prolylhydroksylase som inkluderer, men er ikke begrenset til, gruppen som består av EGLN1, EGLN2 og EGLN3.
Fremgangsmåten innbefatter å bringe enzymet i kontakt med en inhiberende effektiv mengde av en eller flere forbindelser valgt fra gruppen som består av forbindelser med formel I.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan fremstilles fra lett tilgjengelige utgangsmaterialer ved anvendelse av følgende generelle metoder og fremgangsmåter. Det vil være å forstå at der typiske eller foretrukne prosessbetingelser (for eksempel reaksjonstemperaturer, tider, mol-forhold mellom reaktanter, løsemidler, trykk etc.) er gitt, kan andreprosessbetingelser også anvendes med mindre annet er angitt. Optimale reaksjonsbetingelser kan variere med de bestemte reaktantene eller løsemidlene som anvendes, men slike betingelser kan bestemmes av fagmannen ved rutineoptimaliseringsprosedyrer.
I tillegg, slik det vil være nærliggende for fagmannen, kan vanlige beskyttende grupper være nødvendige for å hindre at visse funksjonelle grupper gjennomgår uønskede reaksjoner. Egnede beskyttende grupper for forskjellige funksjonelle grupper, så vel som egnede betingelser for beskyttelse og avbeskyttelse av spesielle funksjonelle grupper er godt kjent i litteraturen. For eksempel er et antall beskyttende grupper beskrevet i T.W. Greene og G.M. Wuts, "Protccting Groups in Organic Synthesis", tredje utgave, Wiley, New York, 1999 og referanser sitert deri.
Videre kan forbindelsene ifølge oppfinnelsen inneholde et eller flere kirale sentere. Følgelig, hvis ønskelig, kan slike forbindelser fremstilles eller isoleres som rene stereoisomerer, dvs. som individuelle enantiomerer eller diastereomerer, eller som stereoisomer-anrikede blandinger. Alle slike stereoisomerer (og anrikede blandinger) erinkludert innenfor omfanget av oppfinnelsen, med mindre annet er indikert. Rene stereoisomerer (eller anrikede blandinger) kan for eksempel fremstilles ved anvendelse av optisk aktive utgangsmaterialer eller stereoselektive reagenser godt kjente i litteraturen. Alternativt kan racemiske blandinger av slike forbindelser separeres for eksempel ved anvendelse av kiral kolonnekromatografi, kiralt oppløsende midler og lignende.
Utgangsmaterialene for de følgende reaksjonene er generelt kjente forbindelser eller kan fremstilles ved kjente fremgangsmåter eller nærliggende modifikasjoner derav. For eksempel er mange av utgangsmaterialene tilgjengelige fra kommersielle leverandører slik som Aldrich Chemical Co., (Milwaukee, Wisconsin, USA), Bachem (Torrance, California, USA), Emka-Chemce eller Sigma (St. Louis, Missouri, USA). Andre kanfremstilles ved fremgangsmåter, eller nærliggende modifikasjoner derav, beskrevet i standard referansetekster slik som Fieser og Fiesefs "Reagents for Organic Synthesis", Volum 1-15 (John Wiley, and Sons, 1991), Rodd's "Chemistry of Carbon Compounds",Volum 1-5 og supplementer (Elsevier Science Publishers, 1989), "Organic Reactions",Volum 1-40 (John Wiley, and Sons, 1991), March’s "Advanced Organic Chemistry",(John Wiley, and Sons, 5, utgave, 2001) og Larock's "Comprchcnsivc Organic Transformations" (VCH Publishers Inc., 1989).
Isokinolinene 300, 1000 og 1100 ifølge oppfinnelsen kan fremstilles ved synteseprotokollene illustrert i Skjema 1.
Skjema 1
R5
R1 OH O R5 Rk/U./^/X.,
OH
H2N Y
200 O
OH
OPG1
CN
PG2
R1
Rk/X
R1 OH O R5
OH
OH
R4 1100
CN
OH
H2N 200 O
PG2
R1 Rk^Å.
OPG3
R1
Rk^X
OH O
OPG1
R4 CN
1000
p4
500 K
A h2n
OPG3
900 O
PG2
R1 O O
PG2 i
O
PG2
6 o
R1
Rk/X
OH
R3 [
600 R4 X
800 R4 CN
R4 CN 700
5 R1, R2, R3, R4 og R5 er som definert heri. Forbindelse 100 (hvori PG1 refererer til en
passende beskyttende gruppe slik som metyl, etyl, butyl etc.) omsettes med minst en
støkiometrisk mengde og foretrukket et overskudd av en passende alfa-aminosyre,
forbindelse 200 (særlig, men ikke begrenset til, glysin). Reaksjonen utføres under
vanlige koblingsbetingelser kjente i litteraturen. I en utføreIsesform blir reaksjonen
io utført under nærvær av natriummetoksid eller en annen passende base i metanol eller annet egnet løsemiddel under hevede reaksjonstemperaturer, og særlig ved refluks.
Reaksjonen fortsetter til den i det vesentlige er fullstendig, som typisk skjer i løpet av 172 timer. Alternativt kan reaksjonen utføres ved hevede temperaturer i en mikrobølgeovn. Etter fullstendig reaksjon kan forbindelsen 300 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende.
Alternativt kan kobling av forbindelse 100 (typisk som den korresponderende frie syren) med forbindelse 200 (typisk som esterderivater) skje via vanlig peptidkoblingsffemgangsmåter kjente i litteraturen. Denne koblingsreaksjonen blir typisk utført ved anvendelse av godt kjente koblingsreagenser slik som karbodiimider, BOP-reagens (benzotriazol-1 -yloksy-tris(dimetylamino)-fosfoniumheksafluorfosfonat)og lignende. Egnede karbodiimider inkluderer for eksempel disykloheksylkarbodiimid (DCC), l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid (DECI) og lignende. Hvisønskelig kan polymerstøttede former av karbodiimidkoblingsreagenser også anvendes som for eksempel inkluderer de som er beskrevet i Tetrahedron Letters, 34(48), 7685 (1993). I tillegg kan godt kjente koblingspromotere, slik som N-hydroksysuksinimid, 1hydroksybenzotriazol og lignende anvendes for å lette koblingsreaksjonen. Denne koblingsreaksjonen blir typisk utført ved å bringe de korresponderende frie syrene til forbindelsen 100 i kontakt med ca. 1 til ca. 2 ekvivalenter av koblingsreagenset, og minst en ekvivalent, foretrukket ca. 1 til 1,2 ekvivalenter, av en ester av forbindelse 200, i et inert fortynningsmiddel slik som diklormetan, kloroform, acetonitril, tetrahydrofiiran, N,N-dimetylformamid og lignende. Generelt blir denne reaksjonenutført ved en temperatur varierende fra ca. 0°C til ca. 37°C i ca. 12 til ca. 24 timer. Etter fullstendig reaksjon blir den korresponderende esteren til forbindelse 300 utvunnet ved vanlige fremgangsmåter som inkluderer nøytralisering, ekstraksjon, preispitasjon, kromatografi, filtrering og lignende, og blir deretter omdannet til forbindelse 300 ved hydrolyse.
Alternativt kan forbindelse 100 (typisk som den korresponderende frie syre) bli omdannet til et syrehalid og syrehalidet koblet med esteren til forbindelse 200 for å gi estrene til forbindelse 300. Syrehalidet i forbindelse 100 kan fremstilles ved å bringe forbindelse 100 (typisk som den korresponderende frie syren) i kontakt med et uorganisk syrehalid slik som tionylklorid, fosfortriklorid, fosfortribromid eller fosforpentaklorid eller, særlig, med oksalylklorid under vanlige betingelser. Generelt blir denne reaksjonen utført ved anvendelse av ca. 1 til 5 molare ekvivalenter av det uorganiske syrehalidet eller oksalylkloridet, enten rent eller i et inert løsemiddel slik
som diklormetan eller karbontetraklorid, ved en temperatur i området fra ca. 0°C til ca. 80°C i ca. 1 til ca. 48 timer. En katalysator, slik som DMF, kan også anvendes i denne reaksjonen.
Syrehalidet (ikke vist) blir deretter brakt i kontakt med minst en ekvivalent, foretrukket ca. 1,1 til ca. 1,5 ekvivalenter, av en ester av forbindelse 200, i et inert fortynningsmiddel slik som diklormetan, ved en temperatur varierende fra ca. -70°C tilca. 40°C i ca. 1 til ca. 24 timer. Foretrukket blir denne reaksjonen utført under nærvær av en passende base for å fange opp syren som genereres i løpet av reaksjonen. Egnede baser inkluderer for eksempel tertinære aminer slik som trietylamin, diisopropyletylamin, N-metylmorfolin og lignende. Alternativt kan reaksjonen utføresved anvendelse av Schotten-Baumann-type betingelser ved anvendelse av vandig alkalislik som natriumhydroksid og lignende. Etter fullstendig reaksjon blir esteren til forbindelse 300 utvunnet ved vanlige fremgangsmåter som inkluderer nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende, og blir deretter omdannet til forbindelse 300 ved hydrolyse.
Forbindelse 100 kan oppnås ved cyanering av forbindelse 500 (hvori X er Cl, Br eller I; og PG1 refererer til en passende beskyttende gruppe slik som metyl, etyl, butyl etc.) med en passende cyanidkilde slik som for eksempel Cu’CN, Zn(CN)2 etc. Cyaneringen kan skje under nærvær av en passende katalysator slik som for eksempel palladiumkatalysator slik som fris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0) (se for eksempel Sundermeier et al., (2003), Eur. J. Inorg. Chem., 2003(19):3513-3526) og/eller additiverved anvendelse av et passende løsemiddel slik som for eksempel DMF eller N,Ndimetylacetamid. Etter fullstendig reaksjon kan forbindelse 100 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt bli anvendt i neste trinn uten rensing og/eller isolering. Forbindelse 100 oppnådd i denne fremgangsmåten, kan ytterligere forandres ved å modifisere dens R1, R2, R3 og/eller R4-bestanddeler, for eksempel hvis R3 er OCH2PH,kan R3-bestanddelen omdannes til OH ved anvendelse av vanlige reduksjonsteknikker(særlig ved hydrogenering katalysert med palladium på karbon etc.).
Alternativt kan forbindelse 400 (hvori X er valgt fra Cl, Br eller I) omsettes med en passende cyanidkilde slik som for eksempel CuCn, Zn(CN)2, etc. for å gi forbindelse 300. Cyaneringen kan utføres slik det er beskrevet ovenfor. Etter fullstendig reaksjon kan forbindelse 300 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon,
presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering. Forbindelse 400 kan oppnås ved reaksjon mellom forbindelse 500 (hvori X er valgt fra Cl, Br eller I; og PG1 refererer til en passende beskyttende gruppe slik som metyl, etyl, butyl etc.) og forbindelse 200 analogt med de korresponderende reaksjoner mellom forbindelse 100 og forbindelse 200 (Skjema 1; se også US patentnr. 6 093 730 og US patentpublikasjon nr. 2006/217416, som er innbefattet heri ved referanse).
Alternativt kan 4-hydroksygruppen til forbindelse 500 alkyleres med passendereagenser slik som for eksempel alkylhalider, alkylsulfater, benzylhalider, diazoforbindelser etc. Alkyleringen kan også finne sted under nærvær av passende baser slik som CS2CO3 og/eller additiver ved anvendelse av et passende løsemiddel slik som for eksempel DMF for å gi forbindelse 600 (hvori PG2 er foretrukket men ikke begrenset til, metyl). Etter fullstendig reaksjon kan forbindelse 600 omdannes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering.
Forbindelse 600 (hvori X er valgt fra Cl, Br eller I) kan omsettes med en passende cyanidkilde slik som for eksempel CuCN, Zn(CN)2 etc., for å gi forbindelse 700. Cyaneringen kan utføres slik det er beskrevet ovenfor. Hydrolyse av forbindelse 700 ved anvendelse av vanlige standardbetingelser i forbindelse 800. Etter fullstendig reaksjon kan forbindelse 800 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering.
Kobling av forbindelse 800 med forbindelse 900 (hvori PG3 refererer til en passende beskyttende gruppe slik som metyl, etyl, butyl, etc.; utført eller generert in situ fra dens salter ved tilsetting av en passende base) kan skje via vanlige peptidkoblingsfremgangsmåter godt kjente i litteraturen og slik det er beskrevet ovenfor. Koblingsreaksjonen blir typisk utført ved å bringe forbindelse 800 i kontakt med ca. 1 til ca. 2 ekvivalenter av koblingsreagenset og minst en ekvivalent, foretrukket ca. 1 til ca. 1,2 ekvivalenter, av forbindelse 900, i et inert fortynningsmiddel slik som diklormetan, kloroform, acetonitril, tetrahydrofiiran, N,N-dimetylformamid og lignende,og hvis ønskelig, under nærvær av en passende base. Generelt blir denne reaksjonen utført ved en temperatur varierende fra ca. 0°C til ca. 37°C i ca. 12 til ca. 24 timer. Etter
fullstendig reaksjon blir forbindelse 1000 utvunnet ved vanlige fremgangsmåter som inkluderer nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende, og kan deretter omdannes til forbindelse 1100 ved hydrolyse.
Alternativt kan forbindelse 800 omdannes til et syrehalid, og syrehalidet kobles med forbindelse 900 for å gi forbindelse 1000. Syrehalidet til forbindelse 800 kan fremstilles ved å bringe forbindelse 800 i kontakt med et uorganisk syrehalid eller med oksalylklorid under vanlige betingelser, for eksempel slik det er beskrevet ovenfor. Syrehalidet (ikke vist) blir deretter brakt i kontakt med minst en ekvivalent, foretrukket ca. 1,1 til ca. 1,5 ekvivalenter av forbindelse 900 i et inert fortynningsmiddel slik som diklormetan, ved en temperatur varierende fra ca. -70°C til ca. 40°C i ca. 1 til ca. 24timer. Foretrukket blir denne reaksjonen utført under nærvær av en passede base for å fange opp syren generert i løpet av reaksjonen. Egnede baser inkluderer tertiæraminer slik som trietylamin, diisopropyletylamin, N-metylmorfolin og lignende. Alternativtkan reaksjonen utføres under Schotten-Baumann-type betingelser ved anvendelse avvandig alkali slik som natriumhydroksid og lignende. Etter fullstendig reaksjon blir forbindelse 1000 utvunnet ved vanlige fremgangsmåter som inkluderer nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende og kan deretter omdannes til forbindelse 1100 ved hydrolyse (Skjema 1).
Forbindelse 500, for anvendelse i reaksjonene ovenfor, kan fremstilles i henhold til synteseruten angitt i Skjema 2.
Skjema 2
OH
1200
OH
O
.2
OPG
'OPG
R1, R2, R3og R4 er som definert heri. Behandling av forbindelse 1200 med fosforoksyklorid eller fosforoksybromid ved anvendelse av et passende løsemiddel slik som acetonitril eller toluen, særlig ved reflukstemperatr i forbindelse 500 hvori X er Cl eller Br, respektivt. Reaksjonen skjer typisk i løpet av ca. 1 til 72 timer. Alternativt kan reaksjonen utføres ved hevede temperaturer i en mikrobølgeovn. Etter fullstendig reaksjon kan forbindelse 500 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller, alternativt, anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering.
Alternativt kan forbindelse 1300 halogeneres ved anvendelse av vanlige fremgangsmåter for å gi forbindelse 500 hvori X er Cl, Br eller I. Halogeneringen av forbindelse 1300 kan utføres med en støkiometrisk mengde eller svakt overskudd av for eksempel N-bromsuksinimid under nærvær av en katalytisk mengde benzoylperoksid,azobisisobutyronitril eller en annen egnet fri radikalinitiator, i CCU, benzen eller et annet egnet løsemiddel kjent for fagmannen typisk ved reflukstemperatur eller høyere temperaturer ved anvendelse av en mikrobølgeovn. Etter fullstendig reaksjon kan forbindelsene 500 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering. Alternativt kan forbindelse 1300 oppnås ved å halogenere forbindelse 1200 slik det er beskrevet ovenfor, fulgt av reduksjon ved anvendelse av vanlige fremgangsmåter slik som hydrogenering katalysert med palladium på karbon, etc.
Syntesen av substituerte isokinolinkarboksylsyrer er generelt kjente i litteraturen og for eksempel beskrevet av Weidmann et al., US patentnr. 6 093 730, som er innbefattet heri med referanse i sin helhet. Forbindelse 1200, for anvendelse i reaksjonene ovenfor, kan oppnås ved anvendelse av fremgangsmåtene angitt i Skjema 3 (se US 2006/217416, som er innbefattet heri med referanse).
Skjema 3
Cl
CN
NH
Cl CN
1800
ArOH
2400
ArO
■CN Ph
OH
bromeddiksyreester
ArO'
'CN
2000
1900
glysin eller OH glysinestersalt
OH
1400
ORG
OR
1200
1500
OH
bromeddiksyreester
ArOH
ArX
•CN
ArO
NH
v CN
1700
X =o, s
2200
ArO Na
bromeddiksyre.
-ester O2N
ArOH
OoN^/
OoN
OR
•CN
NH
‘CN
1600
2300
2100
5 R1, R2, R3 og R4 er som definert heri. Forbindelse 1200 kan oppnås fra forbindelse
1500 (særlig hvori R er metyl, etyl eller butyl) ved Gabriel-Colman omleiring med enløsning av 2 ekvivalenter natrium i en passende alkohol slik som n-butanol ved en hevettemperatur på ca. 95-100°C i ca. 1-4 timer. Forbindelse 1500 er enten kommersielttilgjengelig eller blir enkelt oppnådd ved omsetting av ftalsyren, forbindelse 1400 eller io dens derivater (særlig de korresponderende syreanhydridene) med en ekvimolar mengde av glysin eller salter av glysinestere (særlig hydrokloridsalter av glysinmetyl, etyl eller butylester) rent typisk ved 150 til 250°C i 15 til 90 minutter til ikke lenger vann frigis. Hvis glysin anvendes, blir produktet (R = H) forestret ved anvendelse av vanlige fremgangsmåter, for eksempel ved refluksering i en passende alkohol slik som metanol is eller etanol under nærvær av en konsentrert svovelsyre, etc. Forbindelse 1400 og dens
derivater, for eksempel de korresponderende syreanhydridene, er enten kommersielt tilgjengelige eller kan lett oppnås ved omsetting av forbindelse 1600 med et overskudd av fenol ArOH i et passende løsemiddel slik som for eksempel DMF, under nærvær av en base slik som for eksempel et overskudd av kaliumkarbonat. Den resulterende forbindelsen 1700 blir lett hydrolysert ved refluksering i en løsning av KOH i vann/metnaol (typisk 1 til 3 dager) for å gi forbindelsen 1400.
Alternativt kan forbindelse 1400 oppnås ved analoge fremgangsmåter fra forbindelse 1800. Reaksjon mellom forbindelse 1800 og fenol ArOH gir forbindelse 1900, som lett kan hydrolyseres til den korresponderende ftalsyren, forbindelse 1400. Bifenyl-2,3dikarboksylsyre kan oppnås ved oksidasjon av forbindelse 2000 med kaliumpermanganat under nærvær av en faseoverføringskatalysator. Alternativt kan forbindelse 1500 oppnås ved omsetting av forbindelse 2100 med et overskudd av et fenolat slik som for eksempel natriumfenolater ArONa, typisk ved oppvarming i DMF. Det resulterende ftalimidet, forbindelse 2200, kan omdannes til forbindelse 1500 vedNalkylering med et overskudd av en haloeddiksyreester slik som for eksempel metyleller etylestere av bromeddiksyre, ved anvendelse av vanlige fremgangsmåter slik som refluksering i et passende løsemiddel slik som aceton under nærvær av en passende base slik som kaliumkarbonat. Forbindelse 1500 kan oppnås analogt med N-alkylering avkommersielt tilgjengelig ftalimider, forbindelse 2400. Alternativt kan forbindelse 1500 oppnås ved N-alkylering av forbindelse 2100 ved anvendelse av fremgangsmåterbeskrevet ovenfor. Den resulterende forbindelsen 2300 kan omdannes til forbindelse 1500 ved reaksjon med fenoler ArOH i et passende løsemiddel, slik som dimetylacetamid ved 105°C, under nærvær av en passende base slik som kaliumkarbonat. Alternativt kan forbindelse 1500 med en fenolisk OH-gruppeomdannes til de korresponderende fenoletrene ved O-alkylering ved anvendelse avvanlige fremgangsmåter slik som for eksempel refluksering med elektrofiler slik som metyljodid (Mel), isopropyljodid (iPrl), butyljodid (Bul), etc., under nærvær av en base eller ved alkylering av den fenoliske OH-gruppen med en alkohol slik somsykloheksanol ved anvendelse av en variant av Mitsunobu-reaksjonen.
Forbindelse 1300, for anvendelse i reaksjonene ovenfor, kan oppnås ved anvendelse av fremgangsmåtene angitt i Skjema 4 (se også US 2006/217416).
Skjema 4
PG4
OH
HN^/CO2PG1
co2pg1
OR
2600
2800
2700
2500
OH
CO2PG1
1300
R1, R2, R3 og R4 er som definert heri. Forbindelse 2500 (særlig hvori R er metyl eller etyl og X er Cl, Br eller I; forhåndsdannet eller generert in situ ved anionebytting ved anvendelse av natriumjodid) omsettes med en beskyttet glysinester, forbindelse 2600 (særlig hvori PG1 er metyl eller etyl og PG4 er toluen-4-sulfonyl eller 2,4dimetoksybenzyl), under nærvær av en passende base slik som kaliumkarbonat, eventuelt under nærvær av natriumjodid, i et passende løsemiddel slik som DMF ved for eksempel romtemperatur i ca. 2 til 24 timer. Etter fullstendig reaksjon kan den resulterende forbindelsen 2700 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, interaksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering. Alternativt kan forbindelse 2700 med en fenolisk OH-gruppe omdannes til de korresponderende fenoletrene ved O-alkyleringved anvendelse av vanlige fremgangsmåter slik som for eksempel refluksering med elektrofiler slik som benzylbromid, etc., under nærvær av en base.
Forbindelse 2700, hvori PG4 for eksempel er 2,4-dimetoksybenzyl, kan sykliseres tilforbindelse 2800 ved behandling med en passende base slik som for eksempel 2 ekvivalenter av kalium-tert-butoksid, i THF ved 100°C i ca. 1 time, og deretter vedromtemperatur i ca. 3 timer. Etter fullstendig reaksjon kan den resulterende forbindelsen 2800 omdannes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering. Forbindelse 2800 blir deretter behandlet med
tionylklorid, for eksempel ca. 1,5 ekvivalenter, i et passende løsemiddel slik som diklormetan ved 0°C i ca. 1 time, og deretter ved romtemperatur i ca. 3 timer. Etter fullstendig reaksjon kan den resulterende forbindelsen 1300 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering. Alternativt kan forbindelse 2700, hvori PG4 er for eksempel toluen-4-sulfonyl,sykliseres ved behandling med en passende base slik som for eksempel 3-4 ekvivalenternatriummetoksid i metanol ved romtemperatur i 3 timer til 3 dager. Etter fullstendig reaksjon kan den resulterende forbindelsen 1300 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrerin og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering.
Forbindelse 1300 kan ytterligere forandres ved å modifisere dens R1, R2, R3 og/eller R4 bestanddeler. For eksempel er R2 SPh, da kan R2-bestanddelen omdannes til SChPh vedanvendelse av vanlige oksidasjonsteknikker slik som for eksempel behandling med mklorperoksybenzosyre i metylenklorid ved romtemperatur. Alternativt, hvis R4 for eksempel er jod, kan jodatomet substitueres med fenoler ArOH slik som for eksempel orto-, meta- og para-metoksyfenol, for å gi de korresponderende 8aryloksyisokinolinene ved omsetting av jod-isokinolinet med ArOH, for eksempel 5ekvivalenter i et passende løsemiddel slik som DMF ved reflukstemperatur under nærvær av en passende base, slik som 5 ekvivalenter cesiumkarbonat og en passende katalysator, slik som 1 ekvivalent CuCl og 0,4 ekvivalenter 2,2,6,6-tetrametylheptan3,5-dion, i ca. 15 min. Etter fullstendig reaksjon kan den resulterende forbinddelsen1300 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering.
Forbindelse 2500, for anvendelse i reaksjonene beskrevet ovenfor, kan oppnås ved anvendelse av fremgangsmåten angitt i Skjema 5 (se også US 2006/217416).
Skjema 5
OAr O
Cl O
II
PK)
II
Br
3200
3700
3500
3000
2900
BnZnBr
v
i-CI
OAr O
Si| 3800
'2i
OAr 3400
I 3300
3600
3100
R2'
‘OR
2500
R1, R2, R3 og R4 er som definert heri. Forbindelse 2500, særlig orto-toluenstyreestereslik som 3100, 3300, 3400 eller 3800, hvori R for eksempel er metyl eller etyl, kan halogeneres for eksempel ved tilsetting av en støkiometrisk mengde eller et svakt overskudd av N-bromsuksinimid under nærvær av en katalytisk mengdebenzoylperoksid, azobisisobutyronitril, eller en annen egnet fri radikalinitiator i CCh, benzen eller et annet passende løsemiddel ved for eksempel reflukstemperatur. Etter fullstendig reaksjon kan forbindelse 2500 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering.
Forbindelse 3100 kan oppnås typisk ved omsetting av en blanding av natriumsaltet av forbindelse 2900, et svakt overskudd av et natriumfenolat ArONa, en katalytisk mengde kobberbronse og 1,2-diklorgbenzen ved for eksempel reflukstemperatur i eva. 2 timer.Etter fullstendig reaksjon kan forbindelse 3000 utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering. Forbindelser 3000 og
3200 kan lett omdannes til de korresponderende estrene, forbindelsene 3100 og 3300, respektivt, ved anvendelse av vanlige fremgangsmåter slik som refluksering i en passende alkohol slik som metanol eller etanol under nærvær av konsentrert svovelsyre; eller refluksering sammen med et alkyleringsreagens slik som dimetylsulfat under nærvær av en base slik som kaliumkarbonat i et passende løsemiddel slik som dietylketon. Forbindelse 3400 kan oppnås ved tilsetting av forbindelse 3300, et overskudd fenol, et overskudd cesiumkarbonat og et overskudd 1-naftalensyre,molekylsikter, en katalytisk mengde etylacetat og et passende løsemiddel slik som vannfri toluen til en katalytisk mengde kobber(I)trifLuormetansulfonatbenzenkompleks ved romtemperatur. Blandingen reflukseres under nitrogen i ca. 2 dager før den avkjøles til romtemperatur og filtreres. Forbindelse 3400 kan utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering. Alternativt kan en blanding av forbindelse 3300, et overskudd av en passende substituert fenol, et overskudd av cesiumkarbonat, et overskudd av 2,2,6,6tetrametylheptan-3,5-dion og kobber(I)klorid i N-metyl-2-pyrrolidon varmes opp til 100til 150°C i 1-5 dager, avkjøles til romtemperatur og reaksjonen stoppes med vann.Forbindelse 3400 kan deretter utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering. Forbindelse 3800 kan enkelt oppnås ved behandling av 3700 med tert-butyl-dimetylsilylklorid.
Alternativt blir forbindelse 2500 oppnådd ved omsetting av passende substituerte ftalider slik som forbindelse 3600 med egnede halogeneringsreagenser slik som for eksempel 1,3 ekvivalenter av tionylklorid under nærvær av passende katalysatorer slik som borsyre og trifenylfosfinoksid ved 130 til 140°C i ca. 18 timer fulgt av behandling med en passende alkohol slik som metanol. Forbindelse 2500 kan utvinnes ved vanlige teknikker slik som nøytralisering, ekstraksjon, presipitasjon, kromatografi, filtrering og lignende; eller alternativt anvendes i neste trinn uten rensing og/eller isolering. Forbindelse 3600 blir enkelt oppnådd ved omsetting av 3500 med benzylsinkbromid ved anvendelse av en variant av Negishi-koblingen.
Den biologiske aktiviteten til forbindelsen ifølge oppfinnelsen kan bestemmes ved anvendelse av hvilke som helst vanlige kjente fremgangsmåter. Egnede undersøkelsesfremgangsmåter er godt kjente i litteraturen. De følgende undersøkelsene
er presentert kun som eksempler og er ikke tiltenkt som noen begrensning. Forbindelsene ifølge oppfinnelsen er aktive i minst en av følgende undersøkelser.
Det er tiltenkt at på grunn av cyanosubstitusjonen i C-l-posisjonen tilisokinolinforbindelsene, viser forbindelsene ifølge oppfinnelsen overraskende og uventet forbedret effektivitet i forhold til de sammenlignbare forbindelser som ikke fremviser cyano i C-l-posisjonen. For eksempel er forbindelser som har en cyano i C1-posisjonen til isokino limingen, sammenlignet med de korresponderende forbindelsenesom for eksempel har hydrogen, metyl eller halogen i C-l-posisjonen, mer enn 2ganger, mer foretrukket mer enn 4 ganger, og enda mer foretrukket mer enn 10 ganger eller 50 ganger mer potente når det gjelder å øke sirkulerende erytropoietinnivåer. Eksempler på dette er mer fullt ut beskrevet i Eksempel 54.
a. Cellebasert HIFa-stabiliseringsundersøkelse
Humane celler avledet fra forskjellige vev ble separat sådd i 35 mm dyrkningsskåler og dyrket ved 37°C, 20% O2, 5% CO2 i standard dyrkningsmedium, for eksempel DMEM, 10% FBS. Når cellelagene når konfluens blir mediet erstattet med OPTI-MEM-mediet(Invitrogen Life Technologies, Carslbad, CA) og cellelagene innkuberes i ca. 24 timer i 20% O2, 5% CO2 ved 37°C. Forbindelse eller 0,013% DMSO blir deretter tilsatt til det eksisterende mediet og innkubering fortsetter over natten.
Etterfølgende innkubering blir mediet ijemet, sentrifugert og lagret for analyse (se VEGE og EPO-undersøkelsene nedenfor). Cellene vaskes to ganger i kald fosfatbufretsaltvann (PBS) og lyseres deretter i 1 ml 10 mM Tris 8Ph 7,4), 1 mM EDTA, 150 mM NaCl, 0,5% IGEPAL (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) og en proteaseinhibitorblanding(Roche Molecular Biochemicals) i 15 minutter på is. Cellelysatene sentrifugeres ved 3 000 x g i 5 minutter ved 4°C og de cytosoliske fraksjonene (supematant) samles opp. Kjernene (pellets) resuspenderes og lyseres i 100 pl 20 mM HEPES (pH 7,2), 400 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM ditiotreitol og en proteaseblanding (Roche Molecular Biochemicals), sentrifugeres ved 13 000 x g i 5 minutter ved 4°C og nukleær proteinfraksjoner (supematant) samles opp.
Nukleærffaksjonene analyseres for HIF-la ved anvendelse av en QUANTIKINEimmunoundersøkelse (R & D Systems, Inc., Minneapolis, MN) i henhold til produsentens instruksjoner.
b. Cellebaserte VEGF og EPO ELISA-undersøkelser
Kondisjonert media samlet opp fra cellekulturene slik det er beskrevet ovenfor analyseres for vaskulær, endotel vekstfaktor (VEGF) og/eller erytropoietin (EPO)ekspresjon ved anvendelse av en passende QUANTIKINE-immunoundersøkelse (R&DSystems) i henhold til produsentens instruksjoner.
c. HIF-PH-undersøkelse
Ketogluarsyre-a-[l 14C]-natriumsalt, ketoglutarsyre-[l 14-C]-natriumsalt, aketoglutarsyrenatriumsalt og HPLC-renset peptid kan oppnås fra kommersielle kilder,for eksempel Perkin-Elmer (Wellesley MA), Sigma-Aldrich og SynPrep Corp. (DublinCA), respektivt. Peptider for anvendelse i undersøkelsen kan være fragmenter av HIFa, slik det er beskrevet ovenfor, eller slik det er beskrevet i internasjonal publikasjon WO 2005/118836, innbefattet med referanse heri. HIV-PH, for eksempel HIF-PH2(EGLN1) kan uttrykkes for eksempel i innsekt Hi5-celler og delvis renses, for eksempelgjennom en SP-ionebytter kromatografikolonne. Enzymaktivitet bestemmes vedoppfangning av 14CO2 ved anvendelse av en undersøkelse beskrevet av Kivirikko og Myllyla (1982, Methods Enzymol, 82:245-304). Undersøkelses reaksjonsblandingerinneholder 50 mM HEPES (pH 7,4), 100 uM a-ketoglutarsyrenatriumsalt, 0,30 uCi/mlketoglutarsyre a-[l-14C]-nafriumsalt; 40 uM FeSCE, 1 mM askorbat, 1541,8 enheter/mlkatalase, med eller uten 50 uM peptidsubstrat og forskjellige konsentrasjoner av forbindelsen ifølge oppfinnelsen. Reaksjoner blir initiert ved tilsetting av HIF-PHenzym.
Den peptidavhengige prosentvise tumoveren beregnes ved å subtrahere prosent turnover under fravær av peptid fra prosent turnover under nærvær av substratpeptid. Prosent inhibering og ICso beregnes ved anvendelse av peptidavhengig prosent turnover ved gitte inhibitorkonsentrasjoner. Beregninger av ICso-verdier for hver inhibitor utføres,for eksempel ved anvendelse av GraFit software (Erithacus Software Ltd., Surrey UK).
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen, når de testes i undersøkelser, viser forbedret aktivitet sammenlignet med ikke-cyano forbindelser, slik det er vist i Tabell 1 nedenfor. Tabell1 kan finnes i eksempel 54.
Forbindelsen ifølge oppfinnelsen kan leveres direkte eller i farmasøytiske sammensetninger sammen med egnede bærere eller eksipienter, slik det er kjent i litteraturen. Forskjellige behandlinger omfattet heri kan innbefatte administrasjon av en
effektiv mengde av en forbindelse ifølge oppfinnelsen til et subjekt som trenger det, for eksempel et subjekt som har risiko for anemi på grunn av for eksempel kronisk nyresvikt, diabetes, kreft, AIDS, bestrålingsbehandling, kjemoterapi, nyredialyse eller kirurgi. I en foretrukket utførelsesform er subjektet et pattedyrsubjekt, og i en mest foretrukket utførelsesform er subjektet et menneske.
En effektiv mengde av en forbindelse kan lett bestemmes ved rutineeksperimentering, i tillegg til den mest effektive og hensiktsmessige administrasjonsruten og den mest passende formuleringen. Forskjellige formuleringer og legemiddelleveringssystemer er tilgjengelige i litteraturen. Se for eksempel Gennaro, A.R., red. (1995) "Remington’s Pharmaceutical Sciences", ovenfor.
Egnede administrasjonsruter kan for eksempel inkludere oral, rektal, transmukosal, nasal eller intestinal administrasjon og parenteral levering, som inkluderer intramuskulær, subkutan, intramedullære injeksjoner, så vel som intratekal, direkte intraventrikulær, intravenøs, interperitoneal, intranasal eller intraokulære injeksjoner. Forbindelsen eller sammensetningen derav kan administreres på en lokal, snarere enn en systemisk måte. For eksempel kan en forbindelse eller sammensetning derav leveres ved injeksjon eller i et målrettet legemiddelleveringssystem, slik som et depot eller vedvarende frigivelsesformulering.
De farmasøytiske sammensetningene ifølge oppfinnelsen kan fremstilles ved en hvilken som helst av fremgangsmåtene godt kjente i litteraturen, slik som vanlig sammenblanding, oppløsning, granulering, dragefremstilling, finpulverisering, emulgering, innkapsling, innfangning eller lyofiliseringsprosesser. Slik det er angitt ovenfor, kan sammensetningene ifølge oppfinnelsen inkludere en eller flere fysiologisk akseptable bærere slik som eksipienter og hjelpeforbindelser som letter prosessering av aktive molekyler til preparater for farmasøytisk anvendelse.
Passende formulering er avhengig av den valgte adminsitrasjonsruten. For injeksjon kan for eksempel sammensetningene formuleres i vandige løsninger, foretrukket i fysiologisk kompatible buffere slik som Hanks løsning, Ringers løsning eller fysiologisk saltvannsbuffer. For transmukosal eller nasal administrasjon, blir penetranter passende for barrieren som skal trenges gjennom anvendt i formuleringen. Slike penetranter er generelt kjente i litteraturen. I en foretrukket utførelsesform ifølge oppfinnelsen blir de foreliggende forbindelsene fremstilt i en formulering tiltenkt for
oral administrasjon. For oral administrasjon kan forbindelsene formuleres lett ved å kombinere de aktive forbindelsene med farmasøytisk akseptable bærere godt kjente i litteraturen. Slike bærere muliggjør at forbindelsen ifølge oppfinnelsen blir formulert som tabletter, piller, drageer, kapsler, væsker, geler, siruper, slurrier, suspensjoner og lignende, for oralt inntak av et subjekt. Forbindelsene kan også formuleres i rektale sammensetninger slik som stikkpiller eller retensjonsklyster, som for eksempel inneholder vanlige stikkpillebaser slik som kakaosmør eller andre glyserider.
Farmasøytiske preparater for oral anvendelse kan oppnås som faste eksipienter, eventuelt oppmaling av en resulterende blanding og prosessere blandingen av granuler, etter tilsetting av passende hjelpeforbindelser, hvis ønskelig, for å oppnå tabletter eller drageekjemer. Egnede eksipienter er særlig fyllstoffer slike som sukker, som inkluderer laktose, sukkrose, mannitol eller sorbitol; cellulosepreparater slik som for eksempel maisstivelse, hvetestivelse, risstivelse, potetstivelse, gelatin, gummi tragakant, metylcellulose, hydroksypropylmetylcellulose, natriumkarboksymetylcellulose og/eller polyvinylpyrrolidon (PVP). Hvis ønskelig kan disintegreringsmidler tilsettes, slik som tverrbundet polyvinylpyrrolidon, agar eller algininsyre, eller et salt derav, slik som natriumalginat. I tillegg kan fuktemidler slik som natriumdodecylsulfat inkluderes.
Drageekjemer blir tilveiebrakt med passende belegg. For dette formålet kan konsentrerte sukkerløsninger anvendes, som eventuelt kan inneholde gummi arabikum, talkum, polyvinylpyrrolidon, karbopolgel, polyetylenglykol og/eller titandioksid, lakkløsninger og passende organiske løsemidler eller løsemiddelblandinger.
Fargestoffer eller pigmenter kan tilsettes til tablettene eller drageebeleggene for identifikasjon eller for å karakterisere forskjellige kombinasjoner av aktive forbindelsesdoser.
Farmasøytiske preparater for oral administrasjon inkluderer "push-fit"-kapsler fremstiltav gelatin, så vel som myke, forseglede kapsler fremstilt av gelatin og en mykgjører, slik som glyserol eller sorbitol. "Push-fit"-kapslene kan inneholde de aktiveingrediensene blandet med fyllstoff slik som laktose, bindemidler slik som stivelser og/eller smøremidler slik som talkum eller magnesiumstearat og eventuelt stabilisatorer. I myke kapsler kan de aktive forbindelsene løses opp eller suspenderes i passende væsker slik som fettoljer, flytende parafin eller flytende polyetylenglykoler. I tillegg kan stabilisatorer tilsettes. Alle formuleringer for oral administrasjon bør være i doseringer egnet for slik administrasjon.
I en utførelsesform kan forbindelsene ifølge oppfinnelsen administreres transdermalt, slik som gjennom et hudplaster, eller topisk. I et aspekt kan de transdermale eller topiske formuleringene ifølge oppfinnelsen i tillegg innbefatte en eller flere penetreringsforsterkere eller andre hjelpesubstanser, som inkluderer midler for å øke migrering av den leverte forbindelsen. Transdermal eller topisk administrasjon kan for eksempel være foretrukket i situasjoner hvori lokal spesifikk levering er ønskelig.
For administrasjon ved inhalasjon blir forbindelsene for anvendelse ifølge oppfinnelsen hensiktsmessig levert i form av en aerosolspraypresentasjon fra trykksatte beholdere eller en forstøver, ved anvendelse av et passende drivemiddel, for eksempel diklordifluormetan, triklorfluormetan, diklortetrafluoretan, karbondioksid eller en hvilken som helst annen passende gass. I tilfellet en trykksatt aerosol kan den passende doseringsenheten bestemmes ved å tilveiebringe en ventil for levering av en oppmålt mengde. Kapsler og beholdere av for eksempel gelatin, for anvendelse i en inhalerer eller insufflator kan formuleres. Disse inneholder typisk en pulverblanding av forbindelsen og en passende pulverbase slik som laktose eller stivelse.
Sammensetningene formulert for parenteral administrasjon ved injeksjon, for eksempel ved bolusinjeksjon eller kontinuerlig infusjon kan presenteres i enhets doseringsform, for eksempel i ampuller eller i multidose beholdere, med et tilsatt konserveringsmiddel. Sammensetningene kan ha slike former som suspensjoner, løsninger eller emulsjoner i olje eller vandige vehikler og kan inneholde formuleringsmidler slik som suspenderings-, stabiliserings- og/eller dispergeringsmidler. Formuleringer forparenteral administrasjon inkluderer vandige løsninger eller andre sammensetninger i vannløselig form.
Suspensjoner av de aktive forbindelsene kan også fremstilles som passende oljeinjeksjonssuspensjoner. Egnede lipofile løsemidler eller vehikler inkluderer fettoljer slik som sesamolje og syntetiske fettsyreerstere, slik som etyloleat eller triglyserider eller liposomer. Vandige injeksjonssuspensjoner kan inneholde substanser som øker viskositeten til suspensjonen, slik som natriumkarboksymetylcellulose, sorbitol eller dekstran. Eventuelt kan suspensjonen også inneholde egnede stabilisatorer eller midler som øker løseligheten av forbindelsene for å muliggjøre fremstilling av svært konsentrerte løsninger. Alternativt kan den aktive ingrediensen være i pulverform for
konstitusjon med en passende vehikkel, for eksempel sterilt, pyrogenfritt vann, før anvendelse.
Slik det er nevnt ovenfor kan sammensetningene ifølge oppfinnelsen også formuleres som et depotpreparat. Slike langtidsvirkende formuleringer kan administreres ved implantasjon (for eksempel subkutant eller intramuskulært) eller ved intramuskulær injeksjon. Således kan for eksempel foreliggende forbindelser formuleres med passende polymere eller hydrofobe materialer (for eksempel som en emulsjon i en akseptabel olje) eller ionebytterharpikser, eller som dårlig løselige derivater, for eksempel som et dårlig løselig salt.
Egnede bærere for de hydrofobe molekylene ifølge oppfinnelsen er godt kjente i litteraturen og inkluderer ko-løsemiddelsystemer som for eksempel innbefatterbenzylalkohol, en ikke-polar surfaktant, en vannblandbar organisk polymer og envannfase. Ko-løsemiddelsystemet kan være VPD ko-løsemiddelsystemet. VPD er enløsning av 3% vekt/volum benzylalkohol, 8% vekt/volum av den ikke-polaresurfaktanten polysorbat 80 og 65% vekt/volum polyetylenglykol 300, opp til volumet i absolutt etanol. VPD ko-løsemiddelsystemet (VPD:5W) består av VPD-fortynnet 1:1med en 5% dekstrose i vannløsning. Dette ko-løsemiddelsystemet er effektivt foroppløsning av hydrofobe forbindelser og gir lav toksisitet etter systemisk administrasjon. Naturlig kan proporsjonene av et ko-løsemiddelsystem varieresbetydelig uten å ødelegge dets løselighet og toksiske karakteristikker. Videre kan identiteten til ko-løsemiddelkomponentene variere. For eksempel kan andre lavtoksisitets ikke-polare surfaktanter anvendes i stedet for polysorbat 80, hvorffaksjonsstørrelsen av polyetylenglykol kan varieres, andre biokompatible polymerer kan erstatte polyetylenglykol, for eksempel polyvinylpyrrolidon, og andre sukker- ellerpolysakkarider kan anvendes i stedet for dekstrose.
Alternativt kan andre leveringssystemer for hydrofobe molekyler anvendes. Liposomer og emulsjoner er godt kjente eksempler på leveringsvehikler eller bærere for hydrofobe legemidler. Liposomale leveringssystemer er diskutert ovenfor i sammenheng med genleveringssystemer. Visse organiske løsemidler, slik som dimetylsulfoksid kan også anvendes, selv om dette vanligvis skjer med større toksisitet som kostnad. I tillegg kan forbindelsene leveres ved anvendelse av vedvarende frigivelsessystemer, slik som semipermeable matrikser av faste hydrofobe polymerer som inneholder den effektive mengden av sammensetningen som skal administreres. Forskjellige vedvarende
frigivelsesmaterialer er etablert og tilgjengelige for fagmannen. Vedvarende frigivelseskapsler kan, avhengig av deres kjemiske natur, frigi forbindelsene i noen uker opp til over 100 dager. Avhengig av den kjemiske naturen og den biologiske stabiliteten til det terapeutiske reagenset, kan ytterligere strategier for proteinstabilisering anvendes.
For en hvilken som helst sammensetning anvendt i de forskjellige behandlingene omfattet heri, kan en terapeutisk effektiv dose estimeres initielt ved anvendelse av et antall teknikker kjent i litteraturen. For eksempel, i en celledyrkningsundersøkelse, kan en dose formuleres i dyremodeller for å oppnå et sirkulerende konsentrasjonsområde som inkluderer ICso slik det bestemmes i cellekultur. Doseringsområdene passende for humane subjekter kan for eksempel bestemmes ved anvendelse av data oppnådd fra celledyrkningsundersøkelser og andre dyrestudier.
En terapeutisk effektiv dose av en forbindelse refererer til den mengden av forbindelsen som resulterer i lindring av symptomer eller en forlengelse av overlevelse hos et subjekt. Toksisitet og terapeutisk effektivitet av slike molekyler kan bestemmes ved standard farmasøytiske prosedyrer i cellekulturer eller eksperimentelle dyr, for eksempel ved å bestemme LDso (dosen dødelig for 50% av populasjonen) oe EDso (dosen terapeutisk effektiv for 50% av populasjonen). Doseringsforholdet mellom toksiske og terapeutiske effekter er den terapeutiske indeksen, som kan uttrykkes som forholdet LD50/ED50. Forbindelser som fremviser høy terapeutisk indeks er foretrukket.
Doseringer faller foretrukket innenfor området med sirkulerende konsentrasjoner som inkluderer ED50 med liten eller ingen toksisitet. Doseringer kan variere innenfor dette området avhengig av doseringsformen som anvendes og administrasjonsruten som anvendes. Den eksakte formuleringen, administrasjonsruten og doseringen bør velges i henhold til fremgangsmåter kjente i litteraturen, i lys av detaljer som gjelder subjektets tilstand.
Doseringsmengde og intervall kan justeres individuelt for å tilveiebringe plasmanivåer av den aktive bestanddelen som er tilstrekkelig til å modulere en ønsket parameter, for eksempel endogene erytropoietinplasmanivåer, dvs. minimal effektiv konsentrasjon (MEC). MEC vil variere for hver forbindelse som kan for eksempel estimeres fra in vitro-data. Doseringer nødvendige for å oppnå MEC vil avhenge av individuellekarakteristikker og adminstrasjonsrute. Forbindelser eller sammensetninger derav bør
administreres ved anvendelse av et regime som opprettholder plasmanivåer over MEC i ca. 10-90% av behandlingsvarigheten, foretrukket ca. 30-90% avbehandlingsvarigheten, og mest foretrukket mellom 50-90%. I tilfeller med lokaladministrasjon eller selektivt opptak, trenger den effektive lokale konsentrasjonen av legemiddelet ikke å være relatert til plasmakonsentrasjon. Alternativt kan modulering av en ønsket parameter, for eksempel stimulering av endogent erytropoetin oppnås ved
1) administrering av en tilsetningsdose fulgt av en opprettholdende dose,
2) administrering av en induksjonsdose for raskt å oppnå den ønskede parameteren, for eksempel erytropoietinnivåer, innenfor et målområde, fulgt av en lavere opprettholdende dose for å opprettholde, for eksempel hematokritt, innenfor et ønsket målområde, eller
3) gjentatt periodevis dosering.
Mengden av forbindelse eller sammensetning som administreres vil selvfølgelig avhenge av et antall faktorer som inkluderer kjønn, alder og vekt til subjektet som behandles, hvor alvorlig subjektet er berørt, adminsitrasjonsmåte og vurdering av ansvarlig lege.
De foreliggende sammensetningene kan hvis ønskelig presenteres i en pakke eller dispenserinnretning som inneholder en eller flere enhetsdoseringsformer som inneholder den aktive ingrediensen. Slik pakke eller innretning kan for eksempel innbefatte metall eller plastfolie, slik som en blemmepakke. Pakken eller dispenserinnretningen kan ledsages av instruksjoner for administrasjon. Sammensetningene som innbefatter en forbindelse ifølge oppfinnelsen formulert i en kompatibel farmasøytisk bærer kan også fremstilles, plasseres i en passende beholder og merkes for behandling av en indiker tilstand. Egnede tilstander indikert på merket kan inkludere behandling av tilstander, forstyrrelser eller sykdommer hvori anemi er en hovedindikasj on.
Disse og andre utførelsesformer ifølge oppfinnelsen vil være nærliggende for fagmannen i lys av beskrivelsen heri, og er særlig tiltenkt.
EKSEMPLER
Oppfinnelsen vil ytterligere forstås med referanse til følgende eksempler, som er tiltenkt kun som eksempel på oppfinnelsen. Foreliggende oppfinnelse er ikke begrenset i omfang av de eksemplifiserte utførelsesformene, som kun er tiltenkt som illustrasjoner
5 av enkeltaspekter av oppfinnelsen. Hvilke som helst fremgangsmåter som er funksjonelt ekvivalente er innenfor omfanget av oppfinnelsen. Forskjellige modifikasjoner av oppfinnelsen i tillegg til de som er beskrevet heri, vil være nærliggende for fagmannen fra foregående beskrivelse og ledsagende figurer. Slike modifikasjoner faller innenfor omfanget av vedlagte krav.
o
Med mindre annet er angitt, er alle temperaturer i grader celsius. I tillegg, i disse eksemplene og ellers, har forkortelser følgende betydninger:
bs = bred singlett
DMSO = dimetylsulfoksid
d = dublett
dd = dublett av dubletter
dppf 1,1 '-bis(difenylfosfino)ferroceno
DMF = dimetylformamid
DMEM = Dulbecco’s modifiserte Eagle medium
EtOAc = etylacetat
EDTA = etylendiaminetetraeddiksyre
FBS = foster bovineserum
g = gram
h = timer
HPLC = Høyytelses væskekromatografi
Hz = hertz
MS = Massespektroskopi
MeONa = natriummetoksid
MeOH = metanol
MHz = megaHertz
(_iM = mikromolar
uL = mikroliter
mg = milligram
mL = milliliter
mM = millimolar
mm = millimeter
mmol = millimolar
min = minutt
M = molar
mol = mol
m = multiplett
N = normal
NMR = Kjememagnetisk resonnans
Pd/C = palladium over karbon
Pd2(dba)3 = tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0)
q = kvartett
s = singlett
Ts = toluen-4-sulfonyl
t = triplett
Eksempel 1
[(l-Cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
s a. l-Cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
En blanding av l-brom-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (1,621 g, 5mmol; fremstilt som vist i Skjema 2, i henhold til US 2004/0254215 Al; 'H NMR (200 MHz, CDsOD) 5 11,89 (s,lH), 8,41 (m, 1H), 8,25 (m, 1H), 7,84 (m, 2H), 4,49 (t, J=7,0 Hz, 2H), 1,87 (m, 2H), 1,47 (m, 2H), 1,00 (t, J=7,2 Hz, 3H)), CuCN (905 mg, 10 mmol)
10 og dimetylformamid (20 ml) ble refluksert med røring under nitrogen i 5 minutter. Etter
avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen fortynnet med vann (200 ml). Deretter ble etylacetat (150 ml) tilsatt og blandingen ble ristet kraftig i 5 minutter før den ble filtrert gjennom en celitepute. Den organiske fasen av filtratet ble separert og tørket over MgSO4 før silikagel ble tilsatt. Blandingen ble konsentrert i vakuum. Residuet ble tilsatt på toppen av en kort kolonne fylt med silikagel. Eluering med diklormetan ga tittelforbindelsen som et gulaktig faststoff (627 mg); MS-(-)-ion: M-a =
269.2.
b. [(l-Cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (89 mg, 0,33mmol), glysin (375 mg, 5 mmol) og en 0,5 N løsning av MeONa i MeOH (8 ml, 4 mmol) ble refluksert med røring i 48 timer før konsentrering i vakuum. Residuet ble løst i vann (20 ml). Løsningen ble vasket med dietyleter før dens pH ble justert ti 2 til 3 ved tilsetting av vandig 6N HC1. Den resulterende suspensjonen ble ekstrahert med etylacetat (1 x 30 ml). Den organiske fasen ble tørket over MgSCh og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som et gulaktig faststoff (72 mg); MS-(-)-ion: M-a =
270.2.
Eksempel 2 (referanseeksempel) 2-(S)-[(l-Cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-propionsyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (135 mg, 0,5mmol, se Eksempel 1 (a)), (S)-alanin (225 mg, 2,5 mmol) og en 0,5 N løsning avMeONa i metanol (5 ml, 2,5 mmol) ble varmet opp i en mikrobølgeovn med røring i 40 minutter ved 120°C før blandingen ble konsentrert i vakuum. Til residuet ble det tilsatt vann (10 ml) og blandingen ble vasket med dietyleter (4 x 40 ml). pH til den rensede løsningen ble justert til ca. 2 ved tilsetting av vandig 6N HC1. Den resulterende suspensjonen ble ekstrahert med etylacetat (1 x 40 ml). Den organiske fasen ble tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som et gulaktig faststoff (101 mg); MS-(-)-ion: M-l = 284,1.
Eksempel 3 [(l-Cyano-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a. l-Cyano-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
En blanding av l-brom-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (624mg, 1,5 mmol; fremstilt som vist i Skjema 2, og i henhold til US 2004/0254215 Al, 'H
NMR (CDCk): 8 = 11,89 (s, 1 H), 8,35 (d, 1 H), 7,63 (d, 1 H), 7,08 til 7,52 (m, 6 H), 4,47 (t, 2 H), 1,84 (m, 2 H), 1,48 (m, 2 H), 0,99 (t, 3 H)), CuCN (271 mg, 3 mmol) og dimetylformamid (6 ml) ble refluksert med røring under nitrogen i 15 minutter. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen fortynnet med etyalcetat (100 ml). Den resulterende suspensjonen ble filtrert gjennom en celitepute. Filtratet ble vasket med vann (2 x 250 ml) og tørket over MgSO4 før silikagel ble tilsatt. Deretter ble blandingen konsentrert i vakuum. Residuet ble tilsatt til toppen av en kort kolonne fylt med silikagel. Eluering med diklormetan ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (313 mg); MS-(-)-ions: M-a = 361,2.
b. [(l-Cyano-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra l-cyano-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester og glysin analog med Eksempel 1 (b)); MS-(-)-ion: M-a =362,0.
Eksempel 4 (referanseeksempel) 2-(S)-[(l-Cyano-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-propionsyreTittelforbindelsen ble oppnådd fra l-cyano-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3ckarboksylsyrebutylester (se Eksempel 3a) og (S)-alanin analogt med Eksempel 2; MS(-)-ion: M-l = 376,0.
Eksempel 5 (referanseeksempel)
2- (R)-[(l-Cyano-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-propionsyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra l-cyano-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester (se Eksempel 3a) og (R)-alanin analogt med Eksempel 2; MS(-)-ion: M-l =376,1.
Eksempel 6 {[l-Cyano-7-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}-eddiksyre
a. l-Cyano-7-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Denne forbindelsen ble syntetisert fra l-brom-7-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin
3- karboksylsyrebutylester (fremstilt som vist i Skjema 2, i henhold til US 2004/0254215Al, 'H NMR (CDCI3) 8 = 11,89 (s, 1 H), 8,36 (d, 1 H), 7,57 (d, 1 H), 7,44 til 7,50 (m, 1
H), 7,08 to 7,16 (m, 4 H), 4,47 (t, 2 H), 1,78 to 1,93 (m, 2 H), 1,38 to 1,58 (m, 2 H), 0,99 (t, 3 H)) og CuCN analogt til Eksempel 3(a)); MS-(-)-ion: M-l = 379,2.
b. {[l-Cyano-7-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra l-cyano-7-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester og glysin analogt med Eksempel lb); MS-(-)-ion: M-l = 380,0.
Eksempel 7 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4-hydroksy-7-trifluormetylisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a. l-Cyano-4-hydroksy-7-trifluormetylisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
Denne forbindelsen ble syntetisert fra l-brom-4-hydroksy-7-trifluormetylisokinolin-3karboksylsyrebutylester (fremstilt som vist i Skjema 2, i henhold til US 2004/0254215 Al, 'HNMR (CDCb): 8 = 11,96 (s, 1 H), 8,52 til 8,56 (m, 2 H), 7,99 (dd, 1 H), 4,51 (t, 2 H), 1,86 (m, 2 H), 1,48 (m, 2 H), 1,00 (t, 3 H)) og CuCN analogt med Eksempel 1 (a)); MS-(-)-ion: M-l = 337,1.
b. [(l-Cyano-4-hydroksy-7-trifluormetylisokinolin-3-karbonyl)-amino]eddiksyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra l-cyano-4-hydroksy-7-trifluormetylisokinolin-3karboksylsyrebutylester og glysin analogt med Eksempel 1 (b)); MS-(-)-ion: M-l =338,0.
Eksempel 8 (referanseeksempel) [(7-Klor-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a. 7-Klor-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
Denne forbindelsen ble syntetisert fra l-brom-7-klor-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester (fremstilt som vist i Skjema 2, i hehold til US 2004/0254215 Al, 'H NMR (CDCb): 8 = 11,92 (s, 1 H), 8,34 (d, 1 H), 8,25 (d, 1 H), 7,75 (dd, 1 H), 4,49 (t, 2 H), 1,86 (m, 2 H), 1,48 (m, 2 H), 1,00 (t, 3 H)) og CuCN analogt med Eksempel l(a)); MS-(-)-ion: M-l = 303,2.
b) [(7-Klor-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyretittelforbindelsen ble oppnådd fra 7-klor-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester og glysin analog med Eksempel l(b)); MS-(-)-ion: M-l =303,9.
Eksempel 9 [(l-Cyano-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a. 3-Jod-2-metylbenzosyreetylester
Til en rørt løsning av 3-jod-2-metylbenzosyre (30 g, 0,11 mol) i etanol (425 ml) ble dettilsatt tionylklorid (42 ml, 0,57 mol) ved 0°C. Blandingen ble refluksert i 4,5 timer før den ble avkjølt til romtemperatur og konsentrert i vakuum. Residuet ble fordelt mellom etyleter og mettet natriumbikarbonat løsning. Det organiske sjiktet ble vasket med saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som en gul olje (32,28 g): 'H NMR (CDCk, 200 MHz): 6 = 7,94 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,90 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,35 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,65 (s, 3H), 1,38 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
b. 2-Metyl-3-fenoksybenzosyreetylester
Til en blanding av 3-jod-2-metylbenzosyreetylester (30,04 g, 0,10 mol), fenol (14,62 g,0,16 mol), cesiumkarbonat (50,6 g, 0,16 mol), 1-naftalensyre (26,7 g, 0,16 mol),molekylsikt (25,6 g, 4 ångstrøm, 4-8 mesh), etylacetat (505 pl, 5 mmol) og vannfrito luen (108 ml) ble det tilsatt et kobber(I)trifLuormetansulfonat-benzenkompleks (5,21g, 0,01 mol) ved romtemperatur. Blandingen ble refluksert under nitrogen i 43 timer før den ble avkjølt til romtemperatur og filtrert. Filterkaken ble suspendert i etylacetat (250 ml) og slurrien ble rørt i 0,5 timer. De faste komponentene ble deretter separert ved filtrering og tatt ut. Filtratene ble kombinert, vasket med vann, vandig 0,5 N natriumhydroksidløsning (2x) og saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og heksan. Fraksjoner som inneholder både tittelforbindelsen og utgangsmaterialet 3-jod-2-metylbenzosyreetylester ble samlet oppog konsentrert i vakuum som ga en gul olje (15,9 g); fraksjoner som kun inneholder tittelforbindelsen ble samlet opp og konsentrert i vakuum som ga en gul olje (5,25 g): 'H NMR (CDCI3, 200 MHz): 6 = 7,63 (m, 1H), 7,24 (m, 3H), 7,05 (m, 2H), 6,87 (m, 2H), 4,37 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,45 (s, 3H), 1,40 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
c. 2-Brommetyl-3-fenoksybenzosyreetylester
En blanding av 2-metyl-3-fenoksybenzosyreetylester (5,23 g, 0,02 mol), Nbromsuksinimid (3,82 g, 0,02 mol) og benzoylperoksid (247,5 mg, 1,1 mmol) i karbontetraklorid (80 ml) ble refluksert i 4 timer før den ble avkjølt til romtemperatur og filtrert. Filtratet ble vasket med vann, mettet vandig natriumbikarbonatløsning og saltvann før den ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som en gul olje (7,08 g): 'H NMR (CDCb, 200 MHz): 6 = 7,66 (m, 1H), 7,24 (m, 3H), 7,03 (m, 1H), 6,98 (m, 3H), 5,09 (s, 3H), 4,42 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,44 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
d. 2-{[Metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino]-metyl}-3fenoksybenzosyreetylester
En blanding av 2-brommetyl-3-fenoksybenzosyreetylester (6,83 g, 0,02 mol), (toluen-4sulfonylamino)-eddiksyremetylester (4,97 g, 0,02 mol), natriumjodid (4,59 g, 0,03 mol),kaliumkarbonat (4,24 g, 0,03 mol) og vannfri dimetylformamid (50 ml) ble rørt ved romtemperatur i 4 timer før blandingen ble fortynnet med vann og ekstrahert med etylacetat. Det organiske sjiktet ble separert og vasket med vann og saltvann. Deretter ble det tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og heksan som ga tittelforbindelsen som en gul olje (5,10 g): MS: (+) m/z 497,8 (M+l).
e. 4-Hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
Til en rørt løsning av 2-{[metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino]-metyl}-3fenoksybenzosyreetylester (5,07 g, 0,01 mol) i vannfri metanol (22 ml) ble det dråpevis tilsatt en blanding av natriummetoksid løsning (30 vekt-%, 5,6 ml) og vannfri metanol(4 ml) ved 0°C. Blandingen ble rørt ved 0°C i 10 minutter og deretter ved romtemperatur i ytterligere 3 timer før den ble konsentrert i vakuum. Vann ble tilsatt og pH til slurrien ble justert med vandig IN HC1 i pH =10. Det dannede presipitatet ble separert ved filtrering, vasket med vann, mettet natriumbikarbonatløsning og vann før det ble tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (2,21 g): 1H NMR (CDCI3, 200 MHz): 6 = 11,73 (s, 1H), 9,21 (s, 1H), 8,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,40(m, 2H), 7,13 (m, 4H), 4,10 (s, 3H).
f. l-Brom-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
En blandig av 4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester (103 mg,0,35 mmol), N-bromsuksinimid (65 mg, 0,37 mmol), benzoylperoksid (4,2 mg, 0,02mmol) og karbontetraklorid (2,5 ml) ble refluksert i 4 timer før den ble avkjølt til romtemperatur og filtrert. Filtratet ble vasket med vann, mettet vandig natriumbikarbonatløsning og saltvann før den ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga titteIforbindelsen som et gult faststoff (128 mg): MS: (+) m/z 374,0, 376,0 (M+l, 79Br/ 81Br), MS: (-) m/z 372,1, 374,1 (M-l, 79Br/ 81Br).
g. l-Cyano-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
En blanding av l-brom-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester(1,22 g, 3,3 mmol), kobber(I)cyanid (585 mg, 6,6 mmol) og vannfri dimetylformamid (16 ml) ble refluksert i 10 minutter før den ble avkjølt til romtemperatur og fortynnet med vann. Til den resulterende slurrien ble det tilsatt en kloroform/isopropanolblanding (3:1, 150 ml). Etter røring i 10 minutter ble de faste komponentene separert ved filtrering og tatt ut. Det organiske sjiktet av filtratet ble vasket med vann og saltvann før det ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av metanol og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (574 mg): 1H NMR (CDCb, 200 MHz): 6 = 12,26 (s, 1H), 8,15 (m, 1H), 7,71 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,38 (m, 2H), 7,17 (m,4H), 4,12 (s, 3H).
h. [(l-Cyano-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester(322 mg, 1,0 mmol), glysin (1,51 g, 20,1 mmol) og en 0,5 M natriummetoksidløsning i metanol (38,2 ml) ble refluksert i 31 timer før den ble avkjølt til romtemperautr og konsentrert i vakuum. Vann (75 ml) ble tilsatt og pH til den gule suspensjonen ble justert til 10 med vandig IN HC1. En klar gul løsning ble oppnådd etter 5 minutter med lydbehandling. Løsningen ble vasket med diklormetan (2 x 50 ml). Det gjenværende vannsjiktet ble surgjort til pH = 3 med vandig IN HC1. Det hvite presipitatet som ble dannet ble separert ved filtrering, vasket med vann og tørket med vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (354 mg): 'H NMR (DMSO-de, 200 MHz): 6 =12,86 (bs, 1H), 9,56 (t, 1H), 8,09 (m, 1H), 7,88 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,47 (m, 2H), 7,21 (m, 4H), 4,05 (d, J = 5,8 Hz, 2H).
Eksempel 10 {[l-Cyano-8-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}-eddiksyre
a. 3-(4-Fluorfenoksy)-2-metylbenzosyreetylester
En blanding av 3-jod-2-metylbenzosyreetylester (6,29 g, 0,02 mol), para-fluorfenol(4,86 g, 0,04 mol), cesiumkarbonat (14,14 g, 0,04 mol), 2,2,6,6-tetrametylheptan-3,5dion (447 pl, 2 mmol) og kobber(I)klorid (1,07 g, 0,01 mol) i vannfri N-metyl-2pyrrolidon (38 ml) ble varmet opp til 130°C i 3 dager før blandingen ble avkjølt til romtemperatur og reaksjonen stoppet med vann og blandingen filtrert. Filtratet ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske sjiktet ble vasket to ganger med 0,5 N natriumhydroksid, saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og heksan som ga tittelforbindelsen som en matt, grønn olje (2,99 g): 1H NMR (CDCI3, 200 MHz): 6 = 7,63 (m, 1H), 7,18 (m, 2H), 6,98 (m, 2H), 6,85 (m, 2H), 4,37 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,45 (s, 3H), 1,40 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
b. 2-Brommetyl-3-(4-fluorfenoksy)-benzosyremetylester
En blanding av 3-(4-fluorfenoksy)-2-metylbenzosyreetylester (2,63 g, 9,60 mmol), Nbromsuksinimid (1,79 g, 10,08 mmol) og benzoylperoksid (116 mg, 0,48 mmol) i karbontetraklorid (35 ml) ble refluksert i 4 timer før avkjøling til romtemperatur og fordeling mellom diklormetan og vann. Det organiske sjiktet ble vasket med mettet, vandig natriumbikarbonatløsning, saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som en gul olje (3,44 g): 1H NMR (CDCb, 200 MHz): 6 = 7,67 (m, 1H), 7,27 (m, 2H), 7,01 (m, 4H), 5,09 (s, 3H), 4,42 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,44 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
c. 3-(4-Fluorfenoksy)-2- {[metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino] metyl}-benzosyreetylester
En blanding av 2-brommetyl-3-(4-fluorfenoksy)-benzosyreetylester (3,37 g, 9,57mmol), (toluen-4-sulfonylamino)-eddiksyremetylester (2,33 g, 9,57 mmol),natriumjodid (2,15 g, 14,36 mmol) og kaliumkarbonat (1,98 g, 14,36 mmol) i vannfri dimetylformamid (22 ml) ble rørt ved romtemperatur i 24 timer før reaksjonen ble stoppet med vann og blandingen ekstrahert med etylacetat. Det organiske sjiktet ble vasket med vann, saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av
etylacetat og heksan som ga tittelforbindelsen som en gul olje (2,67 g): MS: (+) m/z 538,13 (M+Na1).
d. 8-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
Til en rørt løsning av 3-(4-fLuorfenoksy)-2-{[metoksykarbonylmetyl-(toluen-4sulfonyl)-amino]-metyl}-benzosyreetylester (2,66 g, 5,17 mmol) i vannfri metanol (8ml) ble det dråpevis tilsatt en løsning av natriummetoksid (30 vekt-%, 2,8 ml) ogmetanol (2 ml) ved 0°C. Blandingen ble rørt ved 0°C i 10 minutter og deretter i 3 timer ved romtemperatur før den ble konsentrert i vakuum. Vann ble tilsatt og pH til slurrien ble justert med IN HC1 til pH = 10. Det resulterende presipitatet ble samlet opp ved filtrering, vasket med vann, mettet natriumbikarbonat og vann, og ble tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (1,51 g): MS: (+) m/z 314,07 (M+l).
e. l-Brom-8-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
En blanding av 8-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester(1,21 g, 3,87 mmol), N-bromsuksinimid (723 mg, 4,06 mmol) og benzoylperoksid (47mg, 0,19 mmol) i karbontetraklorid (20 ml) ble refluksert i 4 timer før blandingen ble avkjølt til romtemperatur og fordelt mellom diklormetan og vann. Det organiske sjiktet ble vasket med mettet, vandig natriumbikarbonat, saltvann og ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av diklormetan og heksan som ga tittelforbindelsen som et matt, gult faststoff (843 mg): MS: (+) m/z 392,00, 393,93 (M+l, 79Br/81Br).
f. l-cyano-8-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
En blanding av l-brom-8-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyremetylester (400 mg, 1,02 mmol) og kobber(I)cyanid (183 mg, 2,04 mmol) i vannfri dimetylformamid (4 ml) ble refluksert i 10 minutter før blandingen ble avkjølt til romtemperatur og reaksjonen stoppet med vann. Slurrien ble rørt med kloroform/isopropanol (3:1, 70 ml) og vann i 10 minutter og filtrert. Det organiske sjiktet ble vasket med vann, saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av metanol og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (158 mg): MS: (+) m/z 339,07 (M+l).
g. {[l-Cyano-8-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
En blanding av l-cyano-8-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyremetylester (112 mg, 0,33 mmol), glysin (496 mg, 6,6 mmol) og en 0,5 M løsning av natriummetoksid i metanol (12,5 ml, 6,25 mmol) ble refluksert i 39 timer før den ble avkjølt til romtemperatur og konsentrert i vakuum. Vann (75 ml) ble tilsatt og pH til den gule suspensjonen ble justert til pH = 10 med IN HC1. Suspensjonen ble vasket med metylenklorid (2 x 50 ml). Det gjenværende vannsjiktet ble surgjort til pH = 3 med IN HC1. Det resulterende, hvite presipitatet ble samlet opp ved filtrering, vasket med vann og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (109 mg): 'H NMR (DMSO-de, 200 MHz): 6 = 12,85 (bs, 1H), 9,57 (br s, 1H), 8,09 (d, 1H),7,83 (t, 1H), 7,27 (m, 5H), 4,05 (d, J = 5,8 Hz, 2H); MS: (+) m/z 382,00 (M+l).
Eksempel 11 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4-hydroksy-6-metoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a. l-Brom-4-hydroksy-6-metoksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
En blanding av l,4-dihydroksy-6-metoksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (1,53 g,5,26 mmol, fremstilt i henhold til US 2004/0254215 Al eller skjema 2), fosforoksybromid (6,04 g, 21,05 mmol) og acetonitril (40 ml) ble refluksert i 16 timer før den ble avkjølt til romtemperatur og eluert mellom diklormetan og vandig, mettet bikarbonatløsning i 20 minutter. Blandingen ble deretter filtrert. Det organiske sjiktet til filtratet ble separert, vasket med vann og saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og ble konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (290 mg): 'H NMR (CDC13, 200 MHz): 6 = 11,84 (s, 1H), 8,14(d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,83 (dd, J= 8,0 Hz, 2,7 Hz, 1H), 4,48 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,86 (m, 1H), 1,55 (m, 1H), 0,99 (t, J = 7,4 Hz).
b. l-Cyano-4-hydroksy-6-metoksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
En blanding av l-brom-4-hydroksy-6-metoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester(290 mg, 0,82 mmol) og kobber(I)cyanid (147 mg, 1,64 mmol) i vannfri dimetylformamid (4 ml) ble refluksert i 10 minutter før den ble avkjølt til romtemperatur og reaksjonen stoppet med vann. Den resulterende slurrien ble rørt med kloroform/isopropanol (3:1, 40 ml) og vann i 10 minutter og ble deretter filtrert. Det organiske sjiktet av filtratet ble separert, vasket med vann og saltvann, før det ble tørket
over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av metanol og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (120 mg): MS: (+) m/z 301,01 (M+l).
c. [(l-Cyano-4-hydroksy-6-metoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksy-6-metoksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester(104 mg, 0,35 mmol), glysin (523 mg, 6,97 mmol) og en 0,5 M løsning av natriummetoksid i metanol (13,2 ml, 6,6 mmol) ble refluksert i 3 dager før den ble avkjølt til romtemperatur og konsentrert i vakuum. Residuet ble løst i vann (30 ml) og løsningen ble ekstrahert med metyl-tert-butyleter (2 x 25 ml). Det gjenværendevannsjiktet ble surgjort til pH = 3 med IN HC1 (10 ml). Det resulterende hvite presipitatet ble samlet opp ved filtrering, vasket med vann og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (82 mg): 'H NMR (DMSO-de, 200 MHz): 6 =9,53 (t, 1H), 8,10 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,57 (m, 2H), 4,02 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 3,98 (s, 3H); MS: (+) m/z 302,00 (M+l).
Eksempel 12 [(l-Cyano-4-hydroksy-6-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a. l-Cyano-4-hydroksy-6-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
Syntetisert fra 1 -brom-4-hydroksy-6-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester(fremstilt i henhold til US 2004/0254215 Al eller skjema 2, 'H NMR (CDCk): 5 = 11,76 (s, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,68 (d, 1 H), 7,10 til 7,55 (m, 6 H), 4,46 (t, 2 H), 1,85 (m, 2 H), 1,48 (m, 2 H), 0,99 (t, 3 H)) og CuCN analogt med Eksempel 3a,; MS-(-)-ion: M1 =361,3.
b. [(l-Cyano-4-hydroksy-6-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra l-cyano-4-hydroksy-6-fenoksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester og glysin analogt med Eksempel lb; MS-(-)-ion: M-l = 362,1.
Eksempel 13 {[l-Cyano-6-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}-eddiksyre
a. l-Brom-6-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
En blanding av 6-(4-fluorfenoksy)-l,4-dihydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester(7,43 g, 20 mmol, fremstilt i henhold til US 2004/0254215 Al eller skjema), POBn
(17,38 g, 60 mmol) og vannfri acetonitril (140 ml) ble refluksert med røring i 60 minutter før den ble konsentrert i vakuum. Til residuet ble det tilsatt etylacetat (400 ml), NaHCCh (60 g) og deretter vann i små porsjoner (400 ml) med røring. Etter røring i 30 minutter ved romtemperatur ble blandingen filtrert gjennom en celitepute. Den organiske fasen til filtratet ble separert og tørket over MgSCU Deretter ble silikagel tilsatt og blandingen ble konsentrert i vakuum. Residuet ble tilsatt til toppen av en kort kolonne fylt med silikagel. Eluering ved anvendelse av CH2CI2 som løsemiddelet, ga tittelforbindelsen som et off-white faststoff (930 mg); 1H NMR (CDCb, 200 MHz): 6 =11,76 (s, 1 H), 8,22 (d, J =9,4 Hz, 1 H), 7,61 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,50 (dd, J = 9,0, 2,3 Hz, 1 H), 7,10 to 7,13 (m, 4 H), 4,46 (t, J = 7,0 Hz, 2 H), 1,85 (m, 2 H), 1,45 (m, 2 H), 0,99 (t, J = 7,4 Hz, 3 H).
b. l-Cyano-6-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Syntetisert fra l-brom-6-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester og CuCN analogt med Eksempel 3a; MS-(-)-ion: M-l = 379,2.
c. {[l-Cyano-6-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra l-cyano-6-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester og glysin analogt med Eksempel lb; MS-(-)-ion: M-l = 380,0.
Eksempel 14 {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a. l-Brom-4-hydroksy-6-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
Til en blanding av 4-hydroksy-6-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester (1,837 g, 5 mmol; for fremstilling se eksempel 28b) og Nbromsuksinimid (1,079 g, 6 mmol) ble det tilsatt vannfri MeCN med røring. Etter ca. 10 minutter ble en ytterligere porsjon MeCN (3 ml) tilsatt og røring fortsatte i 20 minutter. Blandingen ble deretter fordelt mellom vann (100 ml) og CCk (100 ml). Den organiske fasen ble separert, tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum. Residuet ble rekrystallisert fra EtOAc som g atittelforbindelsen som hvite nåler (1,345 g); MS-(+)ion: M+l, 79Br/81Br = 445,8 og 447,8.
b. l-Cyano-4-hydroksy-6-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-brom-4-hydroksy-6-(4-metoksyfenoksy)isokinolin-3-karboksylsyrebutylester og CuCN analogt med eksempel 3a; MS-(+)-ion:M+l = 392,9.
c. {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(4-metoksyfenoksy)-isokinoling-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-4-hydroksy-6-(4-metoksyfenoksy)isokinolin-3-karboksylsyrebutylester og glysin analogt med eksempel lb; MS-(-)-ion:M-l = 391,9.
Eksemepl 15 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4-hydroksy-6-fenylsulfanylisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a. l-Cyano-4-hydroksy-6-fenylsulfanylisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-brom-4-hydroksy-6-fenylsulfanylisokinolin-3karboksylsyrebutylester (fremstilt som vist i Skjema 2, i henhold til US 2004/0254215 Al) og CuCN analogt med eksempel 3a; MS-(+)-ion: M+l = 378,9.
b. [(l-Cyano-4-hydroksy-6-fenylsulfanylisokinolin-3-karbonyl)-amino]eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-4-hydroksy-6-fenylsulfanylisokinolin-3karboksylsyrebutylester og glysin analogt med eksempel lb; MS-(-)-ion: M-l = 377,9.
Eksempel 16 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4-hydroksy-7-fenylsulfanylisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a. l-Cyano-4-hydroksy-7-fenylsulfanylisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-brom-4-hydroksy-7-fenylsulfanylisokinolin-3karboksylsyrebutylester (fremstilt som vist i Skjema 2, i henhold til US 2004/0254215 Al) og CuCN analogt med eksempel 3a; MS-(+)-ion: M+l = 378,9.
b. [(l-Cyano-4-hydroksy-7-fenylsulfanylisokinolin-3-karbonyl)-amino]eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-4-hydroksy-7-fenylsulfanylisokinolin-3karboksylsyrebutylester og glysin analogt med eksempel lb; MS-(-)-ion: M-l = 378,0.
Eksempel 17 (referanseeksempel) {[l-Cyano-6-(2,6-dimetylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a. 4-(2,6-Dimetylfenoksy)-ftalonitril
En blanding av 4-nitroftalnonitril (1 ekv.), 2,6-dimetylfenol (1,2 ekv.), K2CO3 (2 ekv.)og DMF (1 ml/mmol 4-nitroftalonitril) ble varmet opp under nitrogen til 60°C i 3 timermed røring. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen helt over i vann (6 ml/ml DMF) med røring. Blandingen ble ekstrahert to ganger med EtOAc. De kombinerte organiske fasene ble tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum. Residuet ble rekrystallisert fra EtOH som ga tittelforbindelsen som et gyllenbrunt faststoff (utbytte: 87%); 'H NMR (CDCI3, 200 MHz): 6 = 7,70 (d, 1 H), 7,05 to 7,16 (m, 5 H), 2,08 (s, 6 H).
b. 4-(2,6-Dimetylfenoksy)-ftalsyre
En blanding av 4-(2,6-dimetylfenoksy)-ftalonitril, vandig KOH (45 vekt-% KOH; 0,5ml/mmol) og MeOH (0,5 ml/mmol) ble refluksert i 4 dager med røring før den ble fortynnet med vann (5 ml/mmol) og surgjort ved tilsetting av konsentrert saltsyre. Den resulterende blandingen ble ekstrahert med EtOAc. Den organiske fasen ble tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som et gyllenbrunt faststoff (utbytte: 99%); MS-(-)-ion: M-l = 285,5.
c. [5-(2,6-Dimetylfenoksy)-1,3-diokso-1,3-dihydr oisoindol-2-yl] -eddiksyre4-(2,6-Dimetylfenoksy)-ftalsyre og en ekvimolar mengde glysin ble malt opp godtsammen i en morter. Blandingen ble deretter varmet opp til 220 til 240°C i et oljebad i vakuum til dannelse av vann stoppet opp (ca. 30 min) som ga tittelforbindelsen som et mørkt glass (utbytte: 99%); MS-(-)-ion: M-l = 324,5.
d. [5-(2,6-Dimetylfenoksy)-1,3-diokso-1,3-dihydr oisoindol-2-yl] eddiksyremetylester
Til en løsning av [5-(2,6-dimetylfenoksy)-l,3-diokso-l,3-dihydroisomdol-2-yl]eddiksyre i MeOH (1 ml/mmol) ble det tilsatt konsentrert svovelsyre (35 ul/mmol) og blandingen ble refluksert med røring i 16 timer før den ble fortynnet med vann (6,5 ml/mmol) og ekstrahert to ganger med EtOAc. De kombinerte, organiske fasene ble vasket med mettet NaHCCh-løsning, tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum somga titteIforbindeIsen som et gyllenbrunt faststoff (utbytte: 96%); MS-(+)-ion: M+l =340,5.
e. 6-(2,6-Dimetylfenoksy)-l,4-dihydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
Natrium (1 ekv.) ble løst i n-butanol (1,6 ml/mmol) med røring ved 70°C. Deretter bletemperaturen hevet til 95°C før en løsning av [5-(2,6-dimetylfenoksy)-l,3-diokso-l,3dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyremetylester (0,5 ekv.) i varm n-butanol (2,3 ml/mmol)ble tilsatt i en porsjon med røring. Røring fortsatte ved 95°C i 3 timer før blandingen ble konsentrert i vakuum. Til residuet ble det tilsatt 2N saltsyre (1,3 ekv.) og EtOAc (ca. 4-ganger volum) og blandingen ble rørt kraftig i 45 minutter. Deretter ble den fastekomponenten behandlet med sug, vasket med vann og tørket i vakuum før den ble suspendert i EtOAc (ca. 20 ml/g) og blandingen ble refluksert med røring i 2 timer.
Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble den faste komponenten behandlet med sug, vasket med EtOAc og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et off-whitefaststoff (utbytte: 43%); MS-(+)-ion: M+l = 382,5.
f. l-Brom-6-(2,6-dimetylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av 6-(2,6-dimetylfenoksy)-l,4-dihydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester (4 mmol, 1,53 g), POBn (16 mmol, 4,63 g), MeCN (30 ml) ble refluksert forsiktig med røring før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble løst i CH2CI2 (100 ml). Til løsningen ble det tilsatt NaHCO3 (20 g) og deretter vann (100 ml) i små porsjoner med røring. Blandingen ble rørt i 1 time ved omgivelsestemperatur før den organiske fasen ble separert og tørket over MgSO4. Konsentrering og rensing av residuet med flashkolonnekromatografi på silikagel ved anvendele av CH2CI2 som eluenten ga tittelforbindelsen som en gulaktig olje (640 mg); MS-(+)-ion: M+l,79Br/81Br = 443,9 og 445,0.
g. l-Cyano-6-(2,6-dimetylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-brom-6-(2,6-dimetylfenoksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og CuCN analogt med eksempel 3a; MS(+)-ion: M+l = 390,9.
h. {[l-Cyano-6-(/2,6-dimetylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-"amino}-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-6-(2,6-dimetylfenoksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og glysin analogt med eksempel lb; MS(-)-ion: M-l = 390,0.
Eksempel 18 [(l-Cyano-4-hydroksy-5-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a. 2-Metyl-6-fenoksybenzosyre
2-Klor-6-metylbenzosyre (30 mmol, 5,22 g) og fenol (40 mmol, 3,8 g) ble løst i enløsning av NaOMe (30 vekt-%) i MeOH (ca. 66 mmol, 12 ml). Til løsningen ble dettilsatt kobberbronse (3 mmol, 193 mg) før blandingen ble konsentrert i vakuum.
Deretter ble 1,2-diklorbenzen (24 ml) tilsatt og blandingen ble refluksert under nitrogeni 2 timer med røring. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble vann (200 ml) og Et2O (150 ml) tilsatt, og blandingen ble rørt kraftig i 30 minutter før den organiske fasen ble separert og tatt ut. Vannfasen ble vasket med Et2O (150 ml) før den ble surgjort ved tilsetting av 5N saltsyre. Den resulterende blandingen ble ekstrahert med etylacetat (1 x 100 ml). Den organiske fasen ble tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum. Residuet ble rekrystallisert fra heksan/toluen som ga tittelforbindelsen som et gyllenbrunt faststoff (4,55 g); MS-(-)-ion: M-l = 226,8.
b. 2-Metyl-6-fenoksybenzosyremetylester
En blanding av 2-metyl-6-fenoksybenzosyre (19,9 mmol, 4,54 g), metanol (20 ml) ogkonsentrert svovelsyre (1,5 ml) ble refluksert med røring i 18 timer før den ble konsentrert i vakuum. Til residuet ble det tilsatt vann (50 ml) og blandingen ble nøytralisert ved tilsetting av små porsjoner NaHCCE med røring. Deretter ble blandingen ekstrahert med etylacetat (1x50 ml). Den organiske fasen ble tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum. Rensing av residuet med flashkolonnekromatografi
på silikagel ved anvendelse av heksan:etylacetat = 7:3 som eluent ga tittelforbindelsensom en gulaktig olje (2,16 g); MS-(+)-ion: M+l = 242,8.
c. 2{[Metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino]-metyl-6fenoksybenzosyremetylester
En blanding av 2-metyl-6-fenoksybenzosyremetylester (8,9 mmnol, 2,15 g), Nbromsuksinimid (9,1 mmol, 1,64 g), benzoylperoksid (0,44 mmol, 110 mg) og CCU (35 ml) ble refluksert med røring i 6 timer. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen filtrert og filtratet konsentrert i vakuum som ga en gulaktig olje (3,01 g). Oljen (3,00 g) ble løst i tørr DMF (8 ml). Nal (2,42 g), K2CO3 (2,21 g) og (toluen-4sulfonylaminoj-eddiksyremetyelster (2,04 g) ble tilsatt og blandingen ble rørt vedomgivelsestemperatur i 18 timer før vann ble tilsatt med røring. Vannfasen ble deretter dekantert fra det oljeaktige presipitatet som ble dannet. Oljen ble løst i etylacetat (70 ml) og løsningen ble vakset med konsentrert, vandig NaHCO3-løsning før den ble tørketover MgSO4 og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som en mørk olje (3,87 g). Det urene produktet ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensing; MS-(+)-ion:M+23 = 506,0.
d. 4-Hydroksy-5-fenoksyisokinoln-3-karboksylsyremetylester
Til en løsning av uren 2-{[metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino]-metyl}-6fenoksybenzosyremetylester (3,87 g) i metanol (24 ml) ble det tilsatt en løsning av NaOMe (30 vekt-%) i metanol (4 ml) med røring. Etter røring i 3 dager vedomgivelsestemperatur ble blandingen konsentrert i vakuum. Til residuet ble det tilsatt IN saltsyre (20 ml) og blandingen ble ekstrahert med etylacetat (1 x 100 ml). Den organiske fasen ble deretter vasket med konsentrert, vandig NaHCO3-løsning (3 x 100ml), tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum. Residuet ble rekrystallisert fra etylacetat som ga tittelforbindelsen som et gulaktig faststoff (630 mg); MS-(+)-ion:M+l =295,8.
e. l-Brom-4-hydroksy-5-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
En blanding av 4-hydroksy-5-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester (1,55 mmol,458 mg), N-bromsuksinimid (1,7 mmol, 306 mg), benzoylperoksid (0,08 mmol, 19 mg)og CCI4 (10 ml) ble refluksert med røring i 2 timer. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen filtrert og filtratet konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel ved anvendelse av
61 heksan:etylacetat = 9:1 som eluent som ga tittelforbindelsen som et off-white faststoff(225 mg); MS-(+)-ion: M+l, 79Br/81Br = 373,9 og 375,8.
f. l-Cyano-4-hydroksy-5-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-brom-4-hydroksy-5-fenoksyisokinolin-3karboksylsyremetylester og CuCN analogt med eksempel 3a; MS-(+)-ion: M+l = 320,8.
g. [(l-Cyano-4-hydroksy-5-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-4-hydroksy-5-fenoksyisokinolin-3karboksylsyremetylester og glysin analogt med eksempel lb; MS-(+)-ion: M+l = 363,9.
Eksempel 19 {[l-Cyano-4-hydroksy-8-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a. 3-Jod-2-metylbenzosyremetylester
En blanding av 3-jod-2-metylbenzosyre (90 mmol, 23,6 g), metanol (250 ml) ogkonsentrert svovelsyre (13 ml) ble refluksert med røring i 40 timer før blandingen ble konsentrert i vakuum. Residuet ble løst i etylacetat og blandingen ble nøytralisert ved tilsetting av små porsjoner av en mettet vandig NaHCCh-løsning med røring. Denorganiske fasen ble tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som en gulaktig olje (24,3 g); 'H NMR (CDCb, 200 MHz): 6 = 7,96 (d, 1 H), 7,71 (d, 1 H), 6,91 (t, 1 H), 3,89 (s, 3 H), 2,66 (s, 3 H).
b. 3-Jod-2-{|metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino]-metyl}benzosyremetylester
En blanding av 3-jod-2-metylbenzosyremetylester (75 mmol, 20,7 g), Nbromsuksinimid (76,6 mmol, 13,8 g), benzoylperoksid (890 mg) og CCk (300 ml) ble refluksert med røring i 15 timer. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen filtrert og filtratet konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som en gyllenbrun olje. Oljen (26,3 g ble Ist i tørr DMF (75 ml). Nal (22,4 g), K2CO3 (20,5 g) og (toluen-4-sulfonylamino)-eddiksyremetylester (19 g) ble tilsatt og blandingen blerørt ved omgivelsestemperatur i 24 timer før den ble helt over i vann (900 ml). Blandingen ble ekstrahert med etylacetat (2 x 250 ml). De kombinerte, organiske fasene ble vasket med en løsning av natrium-metabisulfat (20 g) i vann (300 ml) ogvann (2 x 300 ml) før de ble tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum som ga
tittelforbindelsen som en mørk gummi (38,1 g). Det urene produktet ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensing; MS-(+)-ion: M+23 = 539,9.
c. 4-Hydroksy-8-jodisokinolin-3-karboksylsyremetylester
Til en løsning av uren 3-jod-2-{[metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino]mctyl [-bcnzosyrcmctylcstcr (37,8 g) i metanol (220 ml) ble det tilsatt en løsning avNaOMe (30 vekt-%) i metanol (40 ml) med røring. Etter røring i 18 timer vedomgivelsestemperatur ble blandingen konsentrert i vakuum. Til residuet ble det tilsatt 1 N saltsyre (200 ml) og blandingen ble ekstrahert med van metylacetat (1 x 300 ml). Den organiske fasen ble deretter vasket med konentrert, vandig NaHCCh-løsning (3 x200 ml), tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum. Residuet ble rekrystallisert fra etylacetat som ga tittelforbindelsen som et gyllenbrunt faststoff (10,1 g); MS-(+)-ion:M+l = 329,8.
d. 4-Hydroksy-8-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karboksylsyremetylester
En blanding av 4-hydroksy-8-jodisokinolin-3-karboksylsyremetylester (7 mmol, 2,3 g),4-metoksyfenol (35 mmol, 4,39 g), CS2CO3 (35 mmol, 11,42 g), 2,2,6,6tetrametylheptan-3,5-dion (2,8 mmol, 0,59 ml), CuCl (7 mmol, 0,70 g) og vannfri DMF(42 ml) ble refluksert under nitrogen med røring i 15 minutter, før blandingen ble helt over i etylacetat (700 ml). Vann (700 ml) og 5N saltsyre (5 ml) ble tilsatt og blandingen ble rørt i 15 minutter. Den organiske fasen ble separert og vasket med vann (2 x 700 ml) før den ble tørket over MgSCh og konsentrert i vakuum. Rensing av residuet med flashkolonnekromatografi på silikagel ved anvendelse av heksamEtOAc = 75:25 som eluent ga tittelforbindelsen som et gyllenbrunt faststoff (234 mg); MS-(+)-ion: M+l =326,4.
e. l-Brom-4-hydroksy-8-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyremetylester
En blanding av 4-hydroksy-8-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karboksylsyremetylester(1,17 mmol, 381 mg), N-bromsuksinimid (1,3 mmol, 234 mg), benzoylperoksid (0,06mmol, 15 mg) og CCh (8 ml) ble refluksert med røring i 2,5 timer. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble silikagel tilsatt og blandingen ble konsentrert i vakuum. Residuet ble tilsatt til toppen av en kromatografikolonne fylt med silikagel. Eluering med CH2CI2 ga tittelforbindelsen som et gyllenbrunt faststoff (403 mg); MS-(+)-ion:M+l, 79Br/81Br = 404,3 og 406,3.
f. l-Cyano-4-hydroksy-8-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyremetylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-brom-4-hydroksy-8-(4-metoksyfenoksy)isokinolin-3-karboksylsyremetylester og CuCN analogt med eksepmel 3a; MS(+)-ion:M+l =351,4.
g. {[l-Cyano-4-hydroksy-8-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]-aminoeddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-4-hydroksy-8-(4-metoksyfenoksy)isokinolin-3-karboksylsyremetylester og glysin analogt med eksempel lb; MS-(-)-ion:M-l = 392,4.
Eksempel 20 {[l-Cyano-4-hydroksy-8-(3-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a. 4-Hydroksy-8-(3-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karboksylsyremetylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra 4-hydroksy-8-jodisokinolin-3karboksylsyremtylester og 3-metoksyfenol analogt med eksempel 19d; MS-(+)-ion:M+l = 326,4.
b. l-Brom-4-hydroksy-8-(3-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyremetylester
En blanding av 4-hydroksy-8-(3-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karboksylsyremetylester(1,75 mmol, 569 mg), N-bromsuksinimid (2 mmol, 360 mg), benzoylperoksid (0,09mmol, 22 mg) og CCk (12 ml) ble refluksert med røring i 4 timer. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen filtrert, silikagel ble tilsatt til filtratet og blandingen ble konsentrert i vakuum. Residuet ble tilsatt til toppen av en kromatografikolonne fylt med silikagel. Eluering med CH2CI2 ga et gulaktig faststoff (435 mg). En blanding av dette faste stoffet (283 mg), CuCN (127 mg) og vannfri DMF (2,8 ml) ble refluksert med røring under nitrogen i 15 minutter. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen fortynnet med etylacetat (200 ml). Den resulterende blandingen ble rørt i 15 minutter og deretter filtrert gjennom en celitepute. Filtratet ble vasket med 0,1 N saltsyre (1 x 300 ml) og vann (2 x 300 ml) og tørket over MgSO4. Deretter ble blandingen konsentrert i vakuum som ga et gyllenbrunt faststoff (178 mg). En blanding av dette faste stoffet (175 mg), natriumacetat (49 mg), Pd/C (10
vekt-% Pd, 50 vekt-% vann, 100 mg), metanol (10 ml) og etylacetat (20 ml) ble rørtunder en hydrogenatmosfære (omgivelsestrykk) 118 timer før den ble filtrert gjennom en celitepute. Filtratet ble konsentrert i vakuum. Til residuet ble det tilsatt mettet, vandig NaHCCfi-løsning (20 ml) og blandingen ble ekstrahert med etyalcetat (1 x 40ml). Den organiske fasen ble tørket over MgSCfi og konsentrert i vakuum. Rensing av residuet med flashkolonnekromatografi på silikagel ved anvendelse av CH2CI2: etyalcetat = 98:2 som eluent, ga titteIforbindelsen som et off-white faststoff (101 mg);MS-(-)-ion: M-l = 349,4.
c. {[l-Cyano-4-hydroksy-8-(3-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-4-hydroksy-8-(3-metoksyfenoksy)isokinolin-3-karboksylsyremetylester og glysin analogt med eksempel lb; MS-(-)-ion:M-l = 392,4.
Eksempel 21 {[l-Cyano-4-hydroksy-8-(2-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a. l-Brom-4-hydroksy-8-(2-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyremetylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra 4-hydroksy-8-jodisokinolin-3karboksylsyremetylester og 2-metoksyfenol analogt med eksempel 19d; MS-(+)-ion:M+l = 326,4.
b. l-Brom-4-hydroksy-8-(2-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyremetylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra 4-hydroksy-8-(2-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyremetyelster og N-bromsuksinimid analogt med eksempel 19e; MS-(+)-ion,79Br/81Br = 404,3 og 406,3.
c. l-Cyano-4-hydroksy-8-(2-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyremetylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-brom-4-hydroksy-8-(2-metoksyfenoksy)isokinolin-3-karboksylsyremetylester og CuCN analogt med eksempel 3a; MS-(+)-ion:M+l ) 351,4.
d. {[l-Cyano-4-hydroksy-8-(2-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-4-hydroksy-8-(2-metoksyfenoksy)isokinolin-3-karboksylsyremetylester og glysin analogt med eksempel lb; MS-(-)-ion:M-l = 392,5.
Eksempel 22 [(7-Benzyl-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a. 5-Benzyl-3H-isobenzofuran-l-on
En blanding av 5-brom-3H-isobenzofuran-l-on (14 mmol, 30,4 g),benzylsinkbromidløsning (0,5 M i THE, 28 mmol, 56 ml), [l,rbis(difenylfosfino)ferrocen]diklorpalladium(II) l:l-kompleks med CH2CI2 (0,07 mmmol, 57 mg) ogvannfri 1,4-dioksan (70 ml) ble refluksert med røring under nitrogen i 40 timer. Etteravkjøling til omgivelsestemperatur ble silikagel tilsatt og blandingen ble konsentrert i vakuum. Residuet ble tilsatt til toppen av en kromatografikolonne fylt med silikagel. Eluering med heksametylaceatt = 9:1 ga et gult faststoff. Ytterligere rensing med rekrystallisering fra etylacetat/heksan ga tittelforbindelsen (1,37 g) som hvite nåler; 1H NMR (CDCb, 200 MHz): 6 = 7,83 (d, 1 H), 7,16 to 7,39 (m, 7 H), 5,26 (s, 2 H), 4,11 (s, 2H).
b. 4-Benzyl-2-{[metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino]-metyl}benzosyremetylester
En blanding av 5-benzyl-3H-isobenzofuran-l-on (6 mmol, 1,35 g), borsyre (0,18 mmol,11 mg), trifenylfosfinoksid (0,18 mmol, 61 mg) og tionylklorid (7,8 mmol, 0,59 ml) ble refluksert i et oljebad (badetemperatur 130 til 140°C) i 18 timer med røring. Deretter ble metanol (6 ml) tilsatt og blandingen ble rørt i 15 minutter før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble løst i etylacetat (40 ml). Løsningen ble vasket med mettet, vandig NaHCCh-løsning (2 x 20 ml), tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum somga en gulaktig olje (1,51 g). Oljen (906 mg) ble løst i vannfri DMF (5 ml). Nal (1,0 g), K2CO3 (912 mg) og (toluen-4-sulfonylamino)-eddiksyremetylester (803 mg) ble tilsattog blandingen ble rørt ved omgivelsestemperatur i 15 timer før den ble helt over i vann (50 ml). Spor av jod ble fjernet ved tilsetting av en liten mengde natrium-metabisulfittfør ekstrahering av blandingen med etylacetat (1 x 50 ml). Den organiske fasen ble deretter vasket med vann (1 x 50 ml), tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum som
ga den urene tittelforbindelsen som en mørk gummi (1,58 g) som ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensing; MS-(+)-ion: M+l =481,1.
c. 7-Benzyl-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
Til en løsning av uren 4-benzyl-2-{[metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino]mctyl [-bcnzosyrcmctylcstcr (1,54 g) i metanol (1,75 ml) ble det tilsatt en løsning avNaOMe (30 vekt-%) i metanol (1,75 ml) med røring. Etter røring i 5 timer vedomgivelsestemperatur ble blandingen konsentrert i vakuum og vann (20 ml) ble tilsatt. pH til blandingen ble justert til 7 til 8 ved tilsetting av 6n saltsyre før blandingen ble ekstrahert med etyalcetat (2 x 25 ml). De kombinerte, organiske fasene ble deretter tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel ved anvendelse av heksametylacetat = 7:3 som eluenten som ga tittelforbindelsen som et off-white faststoff (451 mg); MS-(+)-ion:M+l =294,0.
d. 7-Benzyl-l-brom-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
En blanding av 7-benzyl-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester (1 mmol, 293mg), N-bromsuksisnimid (1,2 mmol, 214 mg) og vannfri MeCN (10 ml) ble rørt vedomgivelsestemperatur i 4 dager før silikagel ble tilsatt og blandingen ble konsentrert i vakuum. Residuet ble tilsatt til toppen av en kromatografikolonne fylt med silikagel. Eluering med heksametylacetat = 75:25 ga tittelforbindelsen som et off-white faststoff(48 mg); MS-(+)-ion: M+l, 79Br/81Br = 372,4 og 374,4.
e. 7-Benzyl-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra 7-benzyl-l-brom-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyremetylester og CuCN analogt med eksempel 3a; MS-(-)-ion: M-l = 317,4.
f. [(7-Benzyl-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra 7-benzyl-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyremetylester og glysin analogt med eksempel lb; MS-(-)-ion: M-l = 360,5.
Eksempel 23 {[l-Cyano-5-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}-eddiksyre
a. 2-(4-Fluorfenoksy)-6-metylbenzosyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra 2-klor-6-metylbenzosyre og 4-fluorfenol analogtmed eksempel 18a; MS-(-)-ion: M-l = 245,5.
b. 2-(4-Fluorfenoksy)-6-metylbenzosyremetylester
En blanding av 2-(4-fLuorfenoksy)-6-metylbenzosyre (21,6 mmol, 5,32 g), dimetylsulfat(43,2 mmol, 4,2 ml), K2CO3 (43,2 mmol, 6 g) og dietylketon (80 ml) ble refluksert med røring 118 timer før konsentrering i vakuum. Til residuet ble det tilsatt vann (50 ml) og blandingen ble ekstrahert med etylacetat (1 x 100 ml). Den organiske fasen ble tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som en gyllenbrun olje (5,5 g); 'H NMR (CDCI3, 200 MHz): 6 = 7,20 (t, 1 H), 6,92 to 7,04 (m, 5 H), 6,66 (d, 1 H), 3,84 (s, 3 H), 2,35 (s, 3 H).
c. 2-(4-Fluorfenoksy)-6- {[metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino]metyl}-benzosyremetylester
Den urene tittelforbindelsen ble syntetisert fra 2-(4-fluorfenksy)-6metylbenzosyremetylester, N-bromsuksinimid og (toluen-4-sulfonylamino)eddiksyremetylester analogt med eksempel 18c og ble anvendt i etterfølgende trinn uten ytterligere rensing; MS-(+)-ion: M+23 = 524,4.
d. 5-(4-Fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra uren 2-(4-fluorfenoksy)-6{[metoksykarbonylmetyl-(toluen-4-sulfonyl)-amino]-metyl}-benzosyremetylesteranalogt med eksempel 18d; MS-(+)-ion: M+l = 314,4.
e. l-Brom-5-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra 5-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyremetylester og N-bromsuksinimid analogt med eksempel 18c; MS-(+)-ion:M+l, 79Br/81Br = 392,4 og 394,3.
f. l-Cyano-5-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyremetylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-brom-5-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyremetylester og CuCN analogt med eksemoel 3a; MS-(-)-ion: M-l = 337,4.
g. {[l-cyano-5-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-5-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokinolin3-karboksylsyremetylester og glysin, analogt med eksempel lb; MS-(-)-ion: M-l =380,4.
Eksempel 24 (referanseeksempel) {[l-Cyano-7-(2,6-dimetylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a. l-Cyano-7-(2,6-dimetylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Syntetisert fra 1 -brom-7-(2,6-dimetylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester (for syntese se US 2004/0254215 Al) og CuCN analogt med eksempel 3a; MS-(-)-ion: M-l = 389,5.
b. {[l-Cyano-7-(2,6-dimetylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra l-cyano-7-(2,6-dimetylfenoksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og glysin analogt med eksempel lb; MS(-)-ion: M-l = 390,5.
Eksempel 25 (referanseeksempel) {[l-Cyano-6-(2-etyl-6-metylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a. 4-(2-Etyl-6-metylfenoksy)-ftalonitril
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra 4-nitroftalonitril og 2-etyl-6-metylfenol analogt medeksempel 17a; MS-(+)-ion: M+l = 263,5.
b. 4-(2-Etyl-6-metylfenoksy)-ftalsyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra 4-(2-etyl-6-metylfenoksy)-ftalnonitril analogt medeksempel 17b; MS-(-)-ion: M-l = 299,4.
c. [5-(2-Etyl-6-metylfenoksy)-l,3-diokso-l,3-dihydroisoindol-2-yl]eddiksyremetylester
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra 4-(2-etyl-6-metylfenoksy)-ftalsyre og glysin analogtmed eksempel 17c; MS-(-)-ion: M-l = 338,4.
d. [5-(2-Etyl-6-metylfenoksy)-l,3-diokso-l,3-dihydroisoindol-2-yl]eddiksyremetylester
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra [5-(2-etyl-6-metylfenoksy)-l,3-diokso-l,3dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyre og metanol analogt med eksempel 17d; MS-(+)-ion:M+l = 354,4.
e. 6-(2-Etyl-6-metylfenoksy)-l,4-dihydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Til en løsning av [5-(2-etyl-6-metylfenoksy)-l,3-diokso-l,3-dihydroisoindol-2-yl]eddiksyremetylester (22 mmol, 7,77 g) i vannfri n-butanol (150 ml) ble det tilsatt en INløsning av natrium i n-butanol (45 mmol, 45 ml) ved 95°C i en porsjon med røring.Røring fortsatte ved 95°C i 3 timer før blandingen ble konsentrert i vakuum. Til residuet ble det tilsatt 2N saltsyre (60 mmol, 30 ml) og EtOAc (150 ml) og blandingen ble rørt kraftig i 45 minutter. Deretter ble den faste komponenten behandlet med sug, vasket med vann og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et gyllenbrunt faststoff (623 mg); MS-(+)-ion: M+l = 396,5.
f. l-Brom-6-(2-etyl-6-metylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av 6-(2-etyl-6-metylfenoksy)-l,4-dihydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester (2,83 mmol, 1,12 g), POBn (11 mmol, 3,19 g), MeCN (20 ml) ble refluksert forsiktig med røring i 1 time før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble løst i CHCE (50 ml). Vann (10 ml) og deretter små porsjoner med NaHCCh (6 g) ble tilsatt med røring. Blandingen ble rørt i 30 minutter ved omgivelsestemperatur før den ble filtrert gjennom en celitepute. Filtratet ble tørket over MgSO4. Konsentrering og rensing av residuet med flashkolonnekromatografi på silikagel ved anvendelse av
CH2CI2 som eluenten ga tittelforbindelsen som en gyllenbrun olje (450 mg); MS-(+)ion: M+l, 79Br/81Br = 458,4 og 460,6.
g. l-Cyano-6-(2-etyl-6-metylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-brom-6-(2-etyl-6-metylfenoksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og CuCN analogt med eksempel 3a; MS(-)-ion: M-l =403,5.
h. {[l-Cyano-6-(2-etyl-6-metylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-6-(2-etyl-6-metylfenoksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og glysin analogt med eksempel lb; MS(-)-ion: M-l = 404,4.
Eksempel 26 (referanseeksempel) {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(2,4,6-trimetylfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a. 4-(2,4,6-Trimetylfenoksy)-ftalnonitril
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra 4-nitroftalonitril og 2,4,6-trimetylfenol analogt medeksempel 17a; MS-(-)-ion: M-l =261,5.
b. 4-(2,4,6-Trimetylfenoksy)-ftalsyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra 4-(2,4,6-trimetylfenoksy)-ftalonitril analogt medeksempel 17b; MS-(-)-ion: M-l = 299,4.
c. [ 1,3-Diokso-5-(2,4,6-trimetylfenoksy)-1,3-dihydroisoindol-2-yl] -eddiksyre
Tittelforbindelsel ble oppnådd fra 4-(2,4,6-trimetylfenoksy)-ftalsyre og glysin analogtmed eksempel 17c; MS-(-)-ion: M-l = 338,4.
d. [ 1,3-Diokso-5-(2,4,6-trimetylfenoksy)-1,3-dihydroisoindol-2-yl] eddiksyremetylester
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra [l,3-diokso-5-(2,4,6-trimetylfenoksy)-l,3dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyre og metanol analogt med eksempel 17d; MS-(+)-ion:M+l = 354,4.
e. l,4-Dihydroksy-6-(2,4,6-trimetylfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra [l,3-diokso-5-(2,4,6-trimetylfenoksy)-l,3dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyremetylester analogt med eksempel 25e; MS-(+)-ion:M+l = 396,4.
f. l-Brom-4-hydroksy-6-(2,4,6-trimetylfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra l,4-dihydroksy-6-(2,4,6-trimetylfenoksy)-isokinolin3-karboksylsyrebutylester og POBn analogt med eksempel 25f; MS-(+)-ion: M+l,79Br/81Br = 458,4 og 460,4.
g. l-Cyano-4-hydroksy-6-(2,4,6-trimetylfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra l-brom-4-hydroksy-6-(2,4,6-trimetylfenoksy)isokinolin-3-karboksylsyrebutylester og CuCN analogt med eksempel 3a; MS-(-)-ion:M-l =403,4.
h. {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(2,4,6-trimetylfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-cyano-4-hydroksy-6-(2,4,6-trimetylfenoksy)isokinolin-3-karboksylsyrebutylester og glysin analogt med eksempel lb; MS-(-)-ion:M-l =404,4.
Eksempel 27 (referanseeksempel) {[6-4-Klor-2,6-dimetylfenoksy)-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a. 4-(4-Klor-2,6-dimetylfenoksy)-ftalonitril
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra 4-nitroftalonitril og 4-klor-2,6-dimetylfenol analogtmed eksempel 17a; MS-(+)-ion: M+l = 283,4.
b. 4-(4-Klor-2,6-dimetylfenoksy)-ftalsyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra 4-(4-klor-2,6-dimetylfenoksy)-ftalonitril analogt medeksempel 17b; MS-(-)-ion: M-l = 319,4.
c. [5-(4-Klor-2,6-dimetylfenoksy)-1,3-diokso-1,3-dihydroisoindol-2-yl] eddiksyre
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra 4-(4-klor-2,6-dimetylfenoksy)-ftalsyre og glysinanalogt med eksempel 17b; MS-(-)-ion: M-l = 319,4.
d. [5-(4-Klor-2,6-dimetylfenoksy)-1,3-diokso-1,3-dihydroisoindol-2-yl] eddiksyremetylester
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra [5-(4-klor-2,6-dimetylfenoksy)-l,3-diokso-l,3dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyre og metanol analogt med eksempel 17d; MS-(-)-ion: M1 = 372,4.
e. 6-(4-Klor-2,6-dimetylfenoksy)-l,4-dihydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra [5-(4-klor-2,6-dimetylfenoksy)-l,3-diokso-l,3dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyremetylester analogt med eksempel 25e; MS-(+)-ion:M+l =416,4.
f. l-Brom-6-(4-klor-2,6-dimetylfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble oppnådd fra 6-(4-klor-2,6-dimetylfenoksy)-l,4dihydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og POBn analogt med eksempel 25 f;MS-(+)-ion: M+l, 79Br/81Br ? 478,3 og 480,3.
g. 6-(4-Klor-2,6-dimetylfenoksy)-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra l-brom-6-(4-klor-2,6-dimetylfenoksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og CuCN analogt med eksempel 3a; MS(-)-ion: M-l = 423,4.
h. {[6-(4-Klor-2,6-dimetylfenoksy)-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonylJamino}-eddiksyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert fra 6-(4-klor-2,6-dimetylfenoksy)-l-cyano-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og glysin analogt med eksempel lb; MS(-)-ion: M-l = 424,3.
Eksempel 28 {[l-Cyano-4-hydroksy-7-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a) 6- og 7-(4-Metoksyfenoksy)-l-klor-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
POCh (1,2 g, 7,8 mmol) ble tilsatt til en blanding av 6- og 7-(4-metoksyfenoksy)-l,4dihydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (se US patentsøknad publikasjon nr.2004/0254215) (3,0 g, 7,8 mmol) i vannfri toluen (40 ml). Den resulterende blandingen ble mikrobølgebehandlet ved 130°C i 15 minutter (trinntid 20 minutter).
Reaksjonsblandingen ble konsentrert og reaksjonen forsiktig stoppet med mettet NaHCCh-løsning (150 ml). Etter røring ved romtemperatur i 10 minutter bleblandingen ekstrahert med EtOAc (2 x 200 ml). De kombinerte, organiske sjiktene ble vasket med vann og saltvann, tørket over MgSO4, filtrert og konsentrert som ga en blanding av titelforbindelsene (2,4 g). MS-(+)-ion: M+l = 402,25.
b) 7-(4-Metoksyfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
Til en løsning av en 6- og 7-(4-metoksyfenoksy)-l-klor-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylesterblanding (10 g, 24,9 mmol) i EtOAc (160 ml) ble det tilsatt 10% Pd/C (50% våt) (3,7 g) og deretter ammoniumformat (15,7 g, 249 mmol). Den resulterende blandingen ble refluksert i 4 timer. Etter avkjøling ble blandingen fortynnet med EtOAc (100 ml) og deretter filtrert. Filtratet ble konsentrert og residuet renset med silikagel kromatografi (eluering med 20%-80% etylacetat i heksan) som gatittelforbindelsen (3,2 g); MS-(+)-ion: M+l = 368,16. I tillgg ble 6-(4metoksyfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester også isolert (5,04 g).MS-(+)-ion: M+l = 368,17.
c) l-Brom-4-hydroksy-7-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
Til en fast blanding av 7-(4-metoksyfenoksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester (305 mg, 0,83 mmol) og N-bromsuksinimid (162 mg, 0,91mmol) avkjølt med isbad ble det tilsatt acetonitril (6 ml). Den resulterende blandingen ble rørt ved 0°C i 1,5 timer og ble konsentrert. Residuet ble renset med silikagel kromatografi (eluering med 10%-40% etylacetat i heksan) som ga tittelforbindelsen(217 mg). 'H NMR (200 MHz, CDCb) 6 11,88 (s, 1 H), 8,32 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,54 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 7,46 (dd, J = 9,0, 2,4 Hz, 1 H), 7,08 (d, J = 9,4 Hz, 2 H), 6,95 (d, J
= 9,8 Hz, 2 H), 4,46 (t, J = 7,0 Hz, 2 H), 3,85 (s, 3 H), 1,85 (m, 2 H), 1,47 (m, 2 H), 0,98 (t, J = 7,4 Hz, 3 H).
d) l-Cyano-4-hydroksy-7-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av l-brom-4-hydroksy-7-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester (190 mg, 0,43 mmol), kobber(I)cyanid (76,3 g, 0,85 mmol) og N-metylpyrrolidin (3 ml) ble varmet opp til 130°C i 1 time. Etter avkjøling blereaksjonsblandingen fordelt mellom etylacetat og vann. Det organiske sjiktet ble vasket med saltvann, tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert. Det urene produktet ble renset med silikagel kromatografi (eluering med 2% - 25% etylacetat imetylenklorid) som ga tittelforbindelsen (129 mg). MS-(+)-ion: M+l = 392,80.
e) {[l-Cyano-4-hydroksy-7-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksy-7-(4-metoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester (110 mg, 0,28 mmol) og glysin (275 mg, 2,82 mmol) i en løsning av natriummetoksid (0,5 M i metanol, 5,7 ml) ble refluksert over natten. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og løst opp i vann (50 ml). Den ble vasket med etylacetat (10 ml). Det vandige sjiktet ble surgjort med IN HC1 til pH = 3-4 ogekstrahert med etylacetat. Det organiske sjiktet ble vasket med saltvann, tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert. Det urene produktet ble triturert med metanol (3 ml) og faststoff ble samlet opp og tørket som ga tittelforbindelsen (72 mg). MS-(+)ion: M+l = 394,32.
Eksempel 29 (referanseeksempel) [(l-Cyano-6-sykloheksyloksy-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a) l-Cyano-6-sykloheksyloksy-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av l-brom-6-sykloheksyloksy-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester (se US patentsøknad publikasjon nr. 2004/0254215; 350 mg, 0,83 mmol), CuCN (149 mg, 1,66 mmol) og N-metylpyrrolidin (2,5 ml) ble varmet opptil 130°C i 2 timer. Etter avkjøling ble reaksjonsblandingen helt over i vann (50 ml) med røring. Presipitatet ble samlet opp og renset med vann. Det resulterende faste stoffet ble fordelt mellom etylacetat og 10% vandig NH4OH (50 ml) og rørt kraftig i 15
minutter. Blandingen ble surgjort med vandig konsentrert HC1 og deretter IN HC1løsning til pH = 4. Den organiske fasen ble separert og vannfasen ekstrahert med etylacetat. De kombinerte, organiske sjiktene ble vasket med saltvann, tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert som ga tittelproduktet (234 mg). MS-(+)-ion:M+l = 369,43.
b) [(l-Cyano-6-sykloheksyloksy-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]eddiksyre
Fremstilt fra l-cyano-6-sykloheksyloksy-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester og glysin analogt med eksempel 28c (94% utbytte). MS-(+)ion: M+l = 370,32.
Eksempel 30 (referanseeksempel) [(6-Benzensulfonyl-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a) 6-Benzensulfonyl-l-brom-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
Til en blanding av 6-benzensulfonyl-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester(100 mg, 0,26 mmol; se US patentsøknad publikasjon nr. 2004/0254215) og benzen (4,5 ml) ble det tilsatt benzoylperoksid (6,3 mg, 0,026 mmol). Den resulterende blandingen ble refluksert i 15 minutter før tilsetting av N-bromsuksinimid (51 mg, 0,29 mmol).Reaksjonsblandingen ble refluksert over natten. Den ble konsentrert og det urene produktet renset med silikagel kromatografi (eluert med 20% - 80%) etylacetat/heksansom ga tittelforbindelsen (91 mg). MS-(+)-ion: M+l = 466,18, 464,14.
b) 6-Benzensulfonyl-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
Fresmtilt fra 6-benzensulfonyl-1 -brom-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylesterog CuCN analogt med eksempel 29a. Urent produkt ble renset med silikagel kromatografi (2% - 20% etylacetat i metylenklorid) som ga tittelforbindelsen (49%utbytte). MS-(+)-ion: M+l = 411,30.
c) [(6-Benzensulfonyl-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]eddiksyre
Fremstilt fra 6-benzensulfonyl-1 -cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylesterog glysin analogt med eksempel 28e (56% utbytte). MS-(+)-ion: M+l = 412,26.
Eksempel 31 {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(4-propoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]-amino}eddiksyre
a) 4-(4-Benzyloksyfenoksy)-ftalonitril
En blanding av 4-benzyloksyfenol (14,53 g, 72,6 mmol), 4-nitroftalonitril (10,47 g, 60,5mmol), kaliumkarbonat (16,69 g, 120,9 mmol) og aceton (170 ml) ble refluksert over natten; reaksjonsblandingen ble avkjølt og de faste stoffene ble filtrert fra og renset med EtOAc. Alle væskene ble kombinert og konsentrert i vakuum. Det resulterende residuet ble fordelt mellom EtOAc og 2M NaOH-løsning i en 500 ml skilletrakt. Denorganiske fasen ble deretter vasket med 1M HC1, mettet NaCl-løsning, tørket overnatriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga den urene tittelforbindelsen (22,1 g) som ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensing. 1H NMR (200 MHz, CDCb): 5 (ppm) = 7,7-6,6 (m, 12 H), 5,08 (s, 2 H).
b) 4-(4-Benzyloksyfenoksy)-ftalsyre
En blanding av 4-(4-benzyloksyfenoksy)-ftalonitril (22,1 g), KOH (50 ml, 45 vekt-% ivann) og MeOH (50 ml) ble refluksert i 3 dager. Deretter ble vann tilsatt og den resulterende løsningen ble surgjort til pH 3-4 med 6M HC1. Det dannede presipitatetble samlet opp ved filtrering, vasket med vann og deretter tørket i vakuum som ga den urene tittelforbindelsen som et faststoff (23,5 g) som ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensing. 'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): 5 (ppm) = 7,7-6,6 (m, 12 H), 5,10(s, 2 H).
c) [5-(4-Benzyloksyfenoksy)-1,3-diokso-1,3-dihydr oisoindol-2-yl] eddiksyreetylester og
[5-(4-Hydroksyfenoksy)-1,3-diokso-1,3-dihydroisoindol-2-yl] eddiksyreetylester
En blanding av 4-(4-benzyloksyfenoksy)-ftalsyre (23,5 g, 60,47 mmol) og etylglysinHCl-salt (8,44 g, 60,47 mmol) ble smeltet med en varmemantel og rørt i 30 minutter.Mens blandingen var varm, ble deretter diklormetan tilsatt som ga en løsning. Etter avkjøling ble løsningen passert gjennom en silikagel plugg. Eluering fortsatte med en blanding av EtOAc og diklormetan (1:1, v/v). De kombinerte fraksjonene ble konsentrert i vakuum som ga en brun olje som ble renset med kolonnekromatografi som ga to tittelforbindelser: [5-(4-benzyloksyfenoksy)-l,3-diokso-l,3-dihydroisoindol-2-yl]eddiksyreetylester (9,41 g) og [5-(4-benzyloksyfenoksy)-l,3-diokso-l,3
77 dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyreetylester (8,6 g). [5-(4-Benzyloksyfenoksy)-l,3-dioksol,3-dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyreetylester: 'H NMR (200 MHz, CDCI3): 5 (ppm) =7,9-7,2 (m, 12 H), 5,07 (s, 2 H), 4,38 (s, 2 H), 4,21 (q, 2 H, J = 7,2 Hz), 1,27 (t, 3 H, J =7,2 Hz); [5-(4-hydroksyfenoksy)-1,3-diokso-1,3-dihydroisoindol-2-yl]eddiksyreetylester: 'H NMR (200 MHz, CDCI3): 5 (ppm) = 7,9-7,2 (m, 12 H), 4,40 (s, 2H), 4,21 (q, 2 H, J = 7,2 Hz), 1,28 (t, 3 H, J = 7,2 Hz).
d) [ 1,3-diokso-5-(4-propoksyfenoksy)-1,3-dihydr oisoindol-2-yl] eddiksyreetylester
En blanding av [5-(4-hydroksyfenoksy)-l,3-diokso-l,3-dihydroisoindol-2-yl]eddiksyreetylester (2,479 g, 7,26 mmol), 1-brompropan (1,32 ml, 14,32 mmol),kaliumkarbonat (2,01 g, 14,52 mmol) og aceton (25 ml) ble refluksert over natten. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen konsentrert i vakuum og residuet fordelt mellom EtOAc og vann. Den organiske fasen ble vasket med mettet NaCl, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen (2,485 g). 'H NMR (200 MHz, CDCb): 8 (ppm) = 7,77 (q, 1 H, J = 8,1 Hz), 7,3-6,8 (m,6 H), 4,38 (s, 2 H), 4,20 (q, 2 H, J = 7,0 Hz), 3,93 (t, 2 H, J = 6,4 Hz), 1,82 (q, 2 H, 6,6 Hz), 1,28 (t, 3 H, J = 7,0 Hz), 1,06 (t, 3 H, J = 7,5 Hz).
e) 4-Hydroksy-l-okso-6-(4-propoksyfenoksy)-l,2-dihydroisokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av [l,3-diokso-5-(4-propoksyfenoksy)-l,3-dihydroisoindol-2-yl]eddiksyreetylester (2,485 g, 6,48 mmol), natriumbutoksid og butanol (14,3 mmol, 27 ml butanol) ble varmet opp til 90°C til 100°C i 2 timer. Deretter ble reaksjonsblandingen avkjølt til omgivelsestemperatur, surgjort med 2M HC1 til pH 3-4 og ekstrahert medEtOAc. Den organiske fasen ble deretter vasket med vann og mettet NaCl-løsning,tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med kolonnekromatografi som ga tittelforbindelsen (722 mg). ESI MS (m/z) : 412 (M+H)1.
f) l-Brom-4-hydroksy-6-(4-propoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av 4-hydroksy-l-okso-6-(4-propoksyfenoksy)-l,2-dihydroisokinolin-3karboksylsyrebutylester (495 mg, 1,20 mmol), POBn (379 mg, 1,32 mmol) og toluen ble mikrobølgebehandlet ved 110°C i 25 minutter. Deretter ble blandingen fortynnet med EtOAc, vasket med vandig NaHCO3 og mettet NaCl-løsning før den ble tørketover vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga det urene tittelproduktet
(509 mg) som ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensing. 1H NMR (200 MHz, CDCk): 8 (ppm) = 11,74 (s, 1 H), 8,19 (d, 1 H, J = 9,2 Hz), 7,60-7,46 (m, 2 H), 7,076,92 (m, 4 H), 4,46 (t, 2 H, =7,1 Hz), 3,94 (t, 2 H, J = 6,6 Hz), 1,83 (m, 4 H), 1,45 (m, 2H), 1,10-0,94 (m, 6 H).
g) l-Cyano-4-hydroksy-6-(4-propoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av l-brom-4-hydroksy-6-(4-propoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester (315 mg, 0,664 mmol), CuCN (66 mg, 0,730 mmol) og Nmetylpyrrolidinon (2 ml) ble rørt ved 120°C i 4 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen helt over i EtOAc (20 ml) og mettet ammoniumhydroksidløsning (~1 ml) ble tilsatt. Blandingen ble raskt rørt i 2 minutter. Deretter ble den surgjort med konsentrert HC1, vasket med vann og mettet NaCl-løsning før den ble tørket overvannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med kolonnekromatografi som ga tittelforbindelsen (206 mg). ESI MS (m/z): 421 (M+H)+.
h) {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(4-propoksyfenoksy)-isokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksy-6-(4-propoksyfenoksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester (200 mg, 0,422 mmol), glysin (633 mg, 8,43 mmol) og NaOMe/MeOH-løsning (12,7 ml, 6,33 mmol) ble refluksert over natten. Deretter bleblandingen konsentrert i vakuum og residuet løst i vann. Løsningen ble surgjort med 2M HC1 til pH = 3~4. Det resulterende presipitatet ble samlet opp ved filtrering, vasket med vann og frysetørket som ga tittelforbindelsen som et pulver (209 mg); ESI MS (m/z): 422 (M+H)+.
Eksempel 32 {[7-(Benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
a) 4-(Benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-ftalonitril
Fremstilt analog med eksempel 31a fra benzo[l,3]dioksol-5-ol. 'H NMR (200 MHz,CDCb): 8 (ppm) = 7,8-6,5 (m, 8 H).
b) 4-(Benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-ftalsyre
Fremstilt analogt med eksempel 31b fra 4-(benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-ftalonitril. 'HNMR (200 MHz, DMSO-d6): 5 (ppm) = 7,95 (d, 1 H, 8,7 Hz), 7,3-6,5 (m, 7 Hz).
c) [5-(Benzo [1,3] dioksol-5-yloksy)-1,3-diokso-1,3-dihydroisoindol-2-yl] eddiksyreetylester
Fremstilt analogt med eksempel 31c fra 4-(benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-ftalsyre. 'HNMR (200 MHz, CDCh): 8 (ppm) = 7,78 (d, 1 H, J = 7,4 Hz), 7,29-7,21 (m, 2 H), 6,81(d, 1 H, J = 6,4 Hz), 6,60-6,52 (m, 2 H), 4,39 (s, 2 H), 4,21 (q, 2 H, J = 6,8 Hz), 1,28 (t,3 H, J = 6,8 Hz).
d) 7-(Benzo [1,3] dioksol-5-yloksy)-4-hydroksy- 1-okso-1,2-dihydroisokinolin-3karboksylsyrebutylester og
6-(Benzo [1,3] dioksol-5-yloksy)-4-hydroksy- 1-okso-1,2-dihydroisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Fremstilt analog med eksempel 3le fra [5-(benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-l,3-diokso-l,3dihydroisoindo 1-2-yl] -eddiksyreetylester. 7-(Benzo [1,3] dioksol-5 -yloksy)-4-hydroksyl-okso-l,2-dihydroisokinolin-3-karboksylsyrebutylester: 1H NMR (200 MHz, CDCb):8 (ppm) = 10,56 (br, s, 1 H), 8,30 (br, s, 1 H), 8,2-6,5 (m, 6 H), 6,01 (s, 2 H), 4,39 (t, 2H), 1,78 (m, 2 H), 1,50 (m, 2 H), 0,99 (t, 3 H, J = 7,3 Hz); 6-(benzo[l,3]dioksol-5yloksy)-4-hydroksy-1 -okso-1,2-dihydroisokinolin-3-karboksylsyrebutylester: 1H NMR(200 MHz, CDCb): 8 (ppm) = 10,4 (br, s, 1 H), 8,4-6,5 (m, 7 H), 6,02 (s, 2 H), 4,40 (t, 2H, J = 6,6 Hz), 1,85-1,40 (m, 4 H), 0,99 (t, 3 H, J = 7,3 Hz).
e) 7-(Benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-l-klor-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Fremstilt analogt med eksempel 31 f fra 7-(benzo[l,3]dioksol-5-ylolksy)-4-hydroksy-lokso-l,2-dihydroisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og POCI3. 'H NMR (200 MHz,CDCb): 8 (ppm) = 11,89 (s, 1 H), 8,35 (d, 1 H, J = 9,2 Hz), 7,57 (d, 1 H, J = 1,9 Hz), 7,50 (m, 1 H), 6,83 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 6,65-6,56 (m, 2 H), 6,03 (s, 2 H), 4,47 (t, 2 H, J= 7,1 Hz), 1,9-1,4 (m, 4 H), 0,99 (t, 3 H, J = 7,3 Hz).
f) 7-(Benzo [1,3] dioksol-5-yloksy)- l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av 7-(benzo [1,3] dioksol-5 -yloksy)-1 -klor-4-hydroksyisokino lin-3 karboksylsyrebutylester (118 mg, 0,284 mmol), sinkcyanid (20 mg, 0,17 mmol), sink
(2,2 mg), Pd2(dba)3 (13 mg, 0,0142 mmol), dppf (15,7 mg, 0,0284 mmol) og dimetylacetamid (1 ml) ble rørt ved 120°C i 90 minutter. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble reaksjonsblandingen fortynnet med EtOAc, vasket med vann og mettet NaCl-løsning før den ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert ivakuum. Residuet ble renset med kolonnekromatografi som ga tittelforbindelsen (50 mg). ESI MS (m/z): 407 (M+H)+.
g) {[7-(Benzo[l,3]diokso-5-yloksy)-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3karbonyl]-amino}-eddiksyre
Fremstilt analogt med eksempel 3lh fra 7-(benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-l-cyano-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og glysin. ESI MS (m/z): 406 (M-H)’.
Eksempel 33 {[6-(Benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
a) 6-(Benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-l-brom-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Fremstilt analogt med eksempel 31 f fra 6-(benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-4-hydroksy-lokso-l,2-dihydroisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og POBn. ESI MS (m/z): 460(M+H)+.
b) 6-(Benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Fremstilt analogt med eksempel 3lg fra 6-(benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-l-brom-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og CuCN. ESI MS (m/z): 407 (M+H)+.
c) {[6-(Benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
Fremstilt analogt med eksempel 3lh fra 6-(benzo[l,3]dioksol-5-yloksy)-l-cyano-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og glysin. ESI MS (m/z): 408 (M+H)+.
Eksempel 34 {[l-Cyano-6-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
a) 4-(2,3-Dihydrobenzofuran-5-yloksy)-ftalonitril
Fremstilt analogt med eksempel 3la fra 2,3-dihydrobenzofuran-5-ol. 1H NMR (200MHz, CDCh): 8 (ppm) = 7,7-6,7 (m, 6 H), 4,65 (t, 2 H, J = 7,8 Hz), 3,25 (t, 2 H, J = 7,8Hz).
b) 4-(2,3-Dihydrobenzofuran-5-yloksy)-ftalsyre
Fremstilt analogt med eksempel 31b fra 4-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-ftalonitril.'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): 8 (ppm) = 14-13 (br, 2 H), 7,78-6,77 (m, 6 H), 4,55(m, 2 H), 3,19 (m, 2 H).
c) [5-(2,3-Dihydr obenzofuran-5-yloksy)-1,3-diokso-1,3-dihydroisoindol-2-yl] eddiksyreetylester
Fremstilt analogt med eksempel 31c fra 4-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-ftalsyre.'H NMR (200 MHz, CDCh): 8 (ppm) = 7,8-6,8 (m, 6 H), 4,63 (m, 2 H), 4,38 (s, 2 H),4,20 (m, 2 H), 3,24 (t, 2 H, J = 4,4 Hz), 1,28 (t, 3 H, J = 7,1 Hz).
d) 7-(2,3-Dihydrobenzofuran-5-yloksy)-4-hydroksy- 1-okso-1,2dihydroisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og6-(2,3-Dihydrobenzofuran-5-yloksy)-4-hydroksy- 1-okso-1,2dihydroisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
Fremstilt analogt med eksempel 3le fra [5-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-l,3diokso-1,3-dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyreetylester. 7-(2,3-Dihydrobenzofuran-5yloksy)-4-hydroksy-1 -okso-1,2-dihydroisokinolin-3-karboksylsyrebutylester: ESI MS(m/z) 396 (M+H)+; 6-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-4-hydroksy-l-okso-l,2dihydroisokinolin-3-karboksylsyrebutylester: ESI MS (m/z): 396 (M+H)+.
e) l-Brom-6-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Fremstilt analogt med eksempel 31 f fra 6-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-4hydroksy-1 -okso-1,2-dihydroisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og POBn. ESI MS(m/z): 458 (M+H)+.
f) l-Cyano-6-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Fremstilt analogt med eksempel 3lg fra l-brom-6-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og CuCN. ESI MS (m/z): 405 (M+H)+.
g) {[l-Cyano-6-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin-3karbonyl]-amino}-eddiksyre
Fremstilt analogt med eksempel 3lh fra l-cyano-6-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yloksy)-4hydrokdyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og glysin. ESI MS (m/z): 404 (M-H)’.
Eksempel 35 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4-metoksy-8-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyremetylester
a) l-Brom-4-metoksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
En blanding av l-brom-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester(1,89 g, 5,07 mmol), jodmetan (632 pl, 10,13 mmol), cesiumkarbonat (3,3 g, 10,13 mmol) og dimetylformamid (15 ml) ble rørt ved 45°C i 16 timer før reaksjonen ble stoppet med vann og blandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske sjiktet ble vasket med vann, saltvann, tørket over natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og heksan som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (1,03 g): MS: (+) m/z 387,64, 389,75 (M+l, 79Br/81Br).
b) l-Cyano-4-metoksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester
En blanding av l-brom-4-metoksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester (1,02g, 2,63 mmol), kobber(I)cyanid (470 mg, 5,25 mmol) og vannfri dimetylformamid (8,8 ml) ble refluksert i 10 mnutter før avkjøling til romtemperatur og reaksjonen ble stoppet med vann og etylacetat. Slurrien ble filtrert. Det organiske sjiktet ble vasket med vann, saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet renset ved flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og heksan som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (727 mg): MS: (+) m/z 334,83 (M+l).
c) l-Cyano-4-metoksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyre
Til en blanding av l-cyano-4-metoksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester(727 mg, 2,18 mmol) og metanoFtetrahydrofuran (12,5 ml, 1:1,5) ble det tilsatt 2N natriumhydroksid (5,4 ml, 10,89 mmol) ved romtemperatur. Den gule løsningen ble
rørt ved den temperaturen i 70 minutter før blandingen ble konsentrert. Vann (20 ml) ble tilsatt og blandingen ble juster til pH = 2 med IN HC1 (13 ml). Blandingen ble deretter ekstrahert med diklormetan og etylacetat. De kombinerte, organiske sjiktene ble vasket med saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (647 mg): MS: (+) m/z 320,80 (M+l).
d) [(l-Cyano-4-metoksy-8-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]eddiksyremetylester
Til en blanding av l-cyano-4-metoksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyre (483 mg,1,51 mmol), trietylamin (466 pl, 3,32 mmol) og diklormetan (12 ml) ble det tilsatt isobutylklorformat (211 pl, 1,62 mmol) ved 0°C. Blandingen ble rørt ved 0°C i 25 minutter før glysinmetylesterhydroklorid (208 mg, 1,66 mmol) ble tilsatt. Blandingen ble rørt ved 0°C i 25 minutter og ved romtemperatur i 5,5 timer før den ble konsentrert. Residuet ble fordelt mellom etylacetat og IN HC1. Det organiske sjiktet ble vasket med mettet natriumbikarbonat, saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagle med en gradient av etylacetat og heksan som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (343 mg): MS: (+) m/z 391,95 (M+l).
Eksempel 36 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4-metoksy-8-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
Til en blanding av [(l-cyano-4-metoksy-8-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]eddiksyremetylester (21 mg, 0,05 mmol) og metanol/tetrahydrofuran (0,9 ml, 1:3,5) ble det tilsatt 2N natriumhydroksid (29,2 pl, 0,06 mmol) ved romtemperatur. Den gule løsningen ble rørt ved denne temperaturen i 55 minutter før den ble surgjort med IN HC1 (69,1 pl) til pH = 3 og konsentrert i vakuum. Residuet ble fordelt mellom etylacetat og vann. Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av metanol, diklormetan og eddiksyre (0,1%) som ga tittelforbindelsen som et matt, brunt faststoff (15 mg): MS: (+) m/z 378,00 (M+l).
Eksempel 37 (referanseeksempel) (S)-2-[(l-Cyano-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-propansyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester(101 mg, 0,31 mmol) og L-alanin (561 mg, 6,29 mmol) i 0,5 Mnatriummetoksid/metanol (12 ml) ble refluksert i 4 dager før den ble avkjølt til
romtemperatur og konsentrert i vakuum. Residuet ble løst i vann (20 ml) og ekstrahert med metyl-t-butylester (2 x 30 ml). Det gjenværende vannsjiktet ble surgjort til pH = 3med IN HC1 (8 ml). Den resulterende hvite suspensjonen ble ekstrahert med etylacetat (30 ml), tørket og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (117 mg): 'HNMR (DMSO-de, 200 MHz): 6 = 13,52 (bs, 1H), 10,11 (br s, 1H), 8,30(d, 1H), 8,07 (m, 1H), 7,67 (t, J = 8 Hz, 1H), 7,42 (m, 2H), 7,17 (m, 3H), 4,83 (q, 1H), 1,68 (d, J = 7,4 Hz); MS: (+) m/z 378,29 (M+l).
Eksempel 38 (referanseeksempel) (R)-2-[(l-Cyano-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-propionsyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester (95mg, 0,30 mmol), D-alanin (529 mg, 5,94 mmol) og 0,5 M natriummetoksid/metanol(11,3 ml) ble refluksert i 3 dager før den ble avkjølt til romtemperatur og konsentrert i vakuum. Residuet ble løst i vann (25 ml) og ekstrahert med diklormetan (3 x 30 ml). Det gjenværende vannsjiktet ble surgjort til pH = 3 med IN HC1 (8 ml). Den hvite suspensjonen ble ekstrahert med etylacetat (30 ml) og diklormetan (30 ml). De kombinerte, organiske sjiktene ble vasket med saltvann, tørket over MgSO4 og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (90 mg): 1H NMR (DMSO-de, 200 MHz): 6 = 13,52 (bs, 1H), 9,15 (br s, 1H), 8,30 (d, 1H), 8,10 (m, 1H),7,67 (t, J = 8 Hz, 1H), 7,42 (m, 2H), 7,17 (m, 3H), 4,83 (q, 1H), 1,68 (d, J = 7,0 Hz, 3H)); MS: (+) m/z 378,29 (M+l).
Eksempel 39 {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(2-metylbenzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
a) 2-Metylbenzotiazol-6-ol
En blanding av 6-metoksy-2-metylbenzotiazol (19,71 g, 0,11 mol),tetrabutylfosfoniumbromid (3,73 g, 0,01 mol) og 48% HBr (120 ml) ble rørt ved 105°C i 28 timer før avkjøling til romtemperatur, nøytralisering med 10N NaOH (90 ml) og IN NaOH (45 ml) til pH = 4. Det resulterende presipitatet ble filtrert, vasket med vann (3 x 100 ml), tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et matt, brunt faststoff (14,81 g): 'H NMR (CDCE, 200 MHz): 6 = 7,77 (m, 1H), 7,24 (m, 1H), 6,94 (m, 1H), 5,28 (s, 1H), 2,79 (s, 3H).
b) 5-Nitro-(l ,3-diokso-1,3-dihydroisoindol-2-yl)-eddiksyr eetylester
En blanding av 4-nitroftalimid (82,54 g, 0,43 mol), etylbromacetat (78,92 g, 0,47 mol)og kaliumkarbonat (130,6 g, 0,94 mol) og aceton (1,5 1) ble refluksert i 18 timer før avkjøling til romtemperatur, filtrering og konsentrering i vakuum. Residuet ble fordelt mellom diklormetan og vann. Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (107,39 g): MS: (+)m/z 279,25 (M+l).
c) [5-(2-Metylbenzotiazol-6-yloksy)-1,3-diokso-1,3-dihydr oisoindol-2-yl] eddiksyreetylester
En blanding av 2-metylbenzotiazol-6-ol (2,30 g, 13,92 mmol), 5-nitro-(l,3-diokso-l,3dihydroisoindol-2-yl)-eddiksyreetylester (4,26 g, 15,31 mmol), kaliumkarbonat (2,3 g,16,64 mmol) og dimetylacetamid (30 ml) ble rørt ved 105°C i 20 timer før den ble avkjølt til romtemperatur og fordelt mellom etylacetat og vann. Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (2,35 g): MS: (+) m/z 307,19 (M+l).
d) l,4-Dihydroksy-6-(2-metylbenzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester og l,4-Dihydroksy-7-(2-metylbenzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
Natrium (1,56 g, 0,07 mol) ble løst i vannfri 1-butanol (70 ml) og rørt ved 80°C i 1 time.Den resulterende løsningen ble tilsatt til en løsning av [5-(2-metylbenzotiazol-6yloksy)-l,3-diokso-l,3-dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyreetylester (12,79 g, 0,03 mol) ivannfri 1-butanol (90 ml). Blandingen ble rørt ved 105°C i 2 timer før den ble avkjølttil romtemperatur, surgjort med 5N HC1 (13,5 ml) til pH = 5. Presipitatet ble filtrert, vasket med vann, tørket i vakuum som ga den 6,7-isomere blandingen avtittelforbindelsen som et gult faststoff (9,9 g): MS. (+) m/z 425,33 (M+l).
e) l-Klor-4-hydroksy-6-(2-metylbenzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
En løsning av den regioisomere blandingen av l,4-dihydroksy-6-(2-metylbenzotiazol-6yloksy)-isokino lin-3 -karboksylsyrebutylester/1,4-dihydroksy-7-(2-metylbenzotiazo 1-6yloksy)-isokinolin-3-karboksylsyrebutylester oppnådd ovenfor (3 g, 7,08 mmol) ogfosforoksyklorid (791 pl, 8,49 mmol) i dikloretan (35 ml) ble rørt ved 120°C i en CEM
mikrobølgeapparatur i 30 minutter. Fremgangsmåten ble gjentatt tre ganger. De kombinerte reaksjonsblandingene ble filtrert, mettet natriumbikarbonatløsning ble tilsatt og blandingen ble rørt i 1 time. Det organiske sjiktet ble vasket med saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga et gult faststoff (7,05 g). Det ble krystallisert fra etylacetat (230 ml) som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (3,42 g): MS: (+) m/z 443,24 (M+l).
f) l-Cyano-4-hydroksy-6-(2-metylbenzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av l-klor-4-hydroksy-6-(2-metylbenzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester (369 mg, 0,84 mmol), tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0) (38 mg, 0,04 mmol), l,r-bis(difenylfosfm)ferrocen (46 mg, 0,08 mmol), sinkcyanid(59 mg, 0,50 mmol), sink (6 mg, 0,10 mmol) og dimetylacetamid (2 ml) ble rørt ved 120°C i 2 timer og 20 minutter før avkjøling til romtemperatur, fordeling mellom etylacetat og vann og filtrering. Filtratet ble vasket med vann og saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (245 mg): MS: (+) m/z 434,30 (M+l).
g) {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(2-metylbenzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karbonyl]-amino}-eddiksyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksy-6-(2-metylbenzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester (113 mg, 0,26 mmol) og glysin (390 mg, 5,20 mmol) i 0,5 M natriummetoksid/metanol (9,9 ml) ble refluksert i 45 timer før avkjøling til romtemperatur og konsentrering i vakuum. Residuet ble løst i vann (35 ml) og ekstrahert med metyl-tert-butyleter (2 x 25 ml). Det gjenværende vannsjiktet blesurgjort til pH = 3 med IN HC1 (7,4 ml). Det hvite presipitatet ble filtrert, vasket med vann og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (92 mg): MS: (+) m/z 434,93 (M+l), (-) m/z 432,87 (M-l).
Eksempel 40 {[l-Cyano-6-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin-3karbonyl]-amino}-eddiksyre
a) 2-Amino-4-metoksyfenol
En blanding av 4-metoksy-2-nitrofenol (30,2 g, 0,18 mol), 10% Pd/C, etanol (200 ml)og etylacetat (200 ml) ble hydrogenert ved omgivelsestrykk og temperatur i 3 dager før filtrering og konsentrering i vakuum som ga tittelforbindelsen som et mørkt brunt faststoff (20,78 g): 'H NMR (CDC13, 200 MHz): 6 = 6,64 (m, 1H), 6,32 (m, 1H), 6,21 (m, 1H), 3,71 (s, 3H).
b) 5-Metoksybenzooksazol-2-tiol
En blanding av 2-amino-4-metoksyfenol (20,7 g, 0,15 mol), kalium-O-etylxantat (26,2g, 0,16 mol) og vannfri pyridin ble refluksert i 2 timer før den ble avkjølt til romtemperatur og iskald IN HC1 (600 ml) ble tilsatt. Presipitatet ble filtrert, vasket med vann og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et matt, rødt faststoff (22,36 g): 'H NMR (CDCb, 200 MHz): 6 = 7,20 (m, 1H), 6,78 (m, 2H), 3,82 (s, 3H).
c) 2-Klor-5-metoksybenzooksazol
Til en blanding av 5-metoksybenzooksazol-2-tiol (12,14 g, 0,07 mol) og tionylklorid bledet tilsatt 2 dråper DMF. Blandingen ble rørt ved 68°C i 40 minutter og dannelsen av gass hadde stoppet opp. Blandingen ble fortynnet med diklormetan, konsentrert og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et grønt faststoff (14,31 g): 1H NMR (CDCb, 200 MHz): 6 = 7,36 (m, 1H), 7,13 (m, 1H), 6,92 (m, 1H), 3,84 (s, 3H).
d) (5-Metoksybenzooksazol-2-yl)-dimetylamin
En blanding av 2-klor-5-metoksybenzooksazol (1,52 g, 8,31 mmol) og en 40% løsningav dimetylamin i vann (15 ml) ble refluksert i to timer før den ble avkjølt til romtemperatur og fordelt mellom etylacetat og vann. Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som en svart olje (1,14 g): MS: (-) m/z 397,19 (M+l).
e) 2-Dimetylaminobenzooksazol-5-ol
En blanding av (5-metoksybenzooksazol-2-yl)-dimetylamin (6,41 g, 0,03 mol),tetrabutylfosfoniumbromid (1,13 g, 3,34 mmol) og 48% HBr (40 ml) ble rørt ved 105°C i 25 timer før avkjøling til romtemperatur, nøytralisering med 10N NaOh (30 ml) til pH
= 8. Det resulterende presipitatet ble filtrert, vasket med vann og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et matt, brunt faststoff (4,94 g): 1H NMR (CDCb, 200 MHz): 6 = 7,05 (m, 1H), 6,86 (m, 1H), 6,48 (m, 1H), 3,19 (s, 6H).
f) [5-(2-Dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-1,3-diokso-1,3-dihydroisoindol2-yl] -eddiksyreetylester
En blanding av 2-dimetylaminobenzooksazol-5-ol (4,82 g, 0,03 mmol), 5-nitro-l,3diokso-l,3-dihydroisoindol-2-yl)-eddiksyreetylester (8,66 g, 0,03 mmol),kaliumkarbonat (4,49 g, 0,03 mmol) og dimetylacetamid (30 ml) ble rørt ved 105°C i 22 timer før avkjøling til romtempratur og fordeling mellom kloroform og vann. Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et oransje faststoff (4,24 g): MS: (+) m/z 410,2 (M+l).
g) 6-(2-Dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-l,4-dihydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester og 7-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-l,4-dihydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
Natrium (475 mg, 20,65 mmol) ble løst i vannfri 1-butanol (24 ml) ved 85°C. Denresulterende nylige fremstilte løsningen ble tilsatt til en løsning av [5-(2dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-l,3-diokso-l,3-dihydroisoindol-2-yl]eddiksyreetylester (4,23 g, 0,01 mol) i vannfri 1-butanol (30 ml). Blandingen ble rørtved 105°C i 1 time og 45 minutter før den ble avkjølt til romtemperautr, surgjort med 2N HC1 (10 ml) til pH = 5. Presipitatet ble filtrert, vasket med vann, tørket i vakuum som ga en regioisomer blanding av tittelforbindelsen som et gult faststoff (1,2 g): MS: (+) m/z 438,2 (M+l). Filtratet ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan. Fraksjoner som korresponderer til ren 7-regioisomer ble samlet opp og konsentrert somga et gult faststoff (452 mg): MS: (+) m/z 438,2 (M+l).
h) l-Klor-6-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
En løsning av den regioisomere blandingen av 6-(2-dimetylaminobenzooksazol-5yloksy)-1,4-dihydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester og 7-(2
dimetylaminobenzooksazol-5 -yloksy)-1,4-dihydroksyisokino lin-3 karboksylsyrebutylester oppnådd slik det er beskrevet ovenfor (1,05 g, 2,41 mmol) og fosforoksyklorid (286 pl, 3,13 mmol) i diklormetan (18 ml) ble rørt ved 120°C i en CEM-mikrobølgeapparatur 130 minutter. Blandingen ble rørt med mettetnatriumbikarbonatløsning i 20 minutter. Det organiske sjiktet ble vasket med saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Rensing med fLashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan ga et faststoff (463 mg). Rekrystallisering fra etylacetat (190 ml) ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (219 mg): MS: (+) m/z 456,31 (M+l).
i) l-Cyano-6-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av l-klor-6-(2-dimetylamionobenzooksazol-5-yloksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (115 mg, 0,25 mmol),tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0) (12 mg, 0,01 mmol), 1,1’bis(difenylfosfino)ferrocen (14 mg, 0,02 mmol), sinkcyanid (18 mg, 0,15 mmol), sink (2 mg, 0,03 mmol) og dimetylacetamid (0,6 ml) ble rørt ved 120°C i 2 timer før den ble avkjølt til romtemperatur, fordelt mellom etylacetat og vann og filtrert. Filtratet ble vasket med vann og saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (53 mg): MS: (+) m/z 447,00 (M+l); (-)- m/z 445,20 (M-l).
j) {[l-Cyano-6-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin3-karbonyl]-amino}-eddiksyre
En blanding av l-cyano-6-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (55 mg, 0,12 mmol), glysin (186 mg,2,47 mmol) og 0,5 M natriummetoksid/metanol (4,7 ml) ble refluksert i 25 timer før avkjøling til romtemperatur og konsentrering i vakuum. Residuet ble løst i vann (35 ml) og vasket med diklormetan (2 x 25 ml). Det gjenværende vannsjiktet ble surgjort til pH = 3 med IN HC1 (3,5 ml). Det hvite presipitatet ble filtrert, vasket med van nog tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (44 mg): MS: (+) m/z 448,27 (M+l).
Eksempel 41 {[l-Cyano-7-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin-3karbonyl]-amino}-eddiksyre
a) l-Klor-7-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av 7-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-l,4-dihydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester (364 mg, 0,83 mmol), fosforoksyklorid (92 pl, 1,00 mmol) og dikloretan (4,5 ml) ble rørt ved 120°C i en CEM-mikrobølgeapparatur i 30 minutter.Blandingen ble deretter rørt med mettet natriumbikarbonat i 15 minutter ved omgivelsestemperatur. Det organiske sjiktet ble vasket med saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet ble renset med fLashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (220 mg): MS: (+) m/z 456,32 (M+l).
b) l-Cyano-7-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av l-klor-7-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyremetylester (92 mg, 0,20 mmol),tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0) (9 mg, 0,01 mmol), 1,1’bis(difenylfosfino)ferrocen (11 mg, 0,02 mmol), sinkcyanid (14 mg, 0,12 mmol), sink (2 mg, 0,02 mmol) og dimetylacetamid (0,5 ml) ble rørt ved 120°C i 2 timer før blandingen ble avkjølt til romtemperatur, fordelt mellom etylacetat og vann og filtrert. Filtratet ble vasket med vann og saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med fLashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (32 mg): MS: (+) m/z 447,0 (M+l); (-) m/z 445,20 (M-l).
c) {[l-Cyano-7-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4-hydroksyisokinolin3-karbonyl]-amino}-eddiksyre
En blanding av l-cyano-7-(2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy)-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (37 mg, 0,08 mmol), glysin (126 mg,1,68 mmol) og 0,5 M natriummetoksid/metanol (3,2 ml) ble refluksert i 25 timer før avkjøling til romtemperatur og konsentrering i vakuum. Residuet ble løst i vann (20 ml) og ekstrahert med diklormetan (2 x 25 ml). Det gjenværende vannsjiktet ble surgjort til pH = 3 med IN HC1 (2,4 ml). Det hvite presipitatet ble filtrert, vasket med vann og
tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (24 mg): MS: (+) m/z 448,27 (M+l).
Eksempel 42 (referanseeksempel) {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(2-morfolin-4-yl-benzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karbonyl]-amino}-eddiksyre
a) 2-Klor-6-metoksybenzotiazol
Til en blanding av isoamylnitritt (17,55 g, 0,15 mol), kobber(II)klorid (16,1 g, 0,12 mol) og vannfri acetonitril (400 ml) ble det tilsatt 2-amino-6-metoksybenzotiazol (18 g, 0,10mol) i løpet av en periode på 40 minutter ved romtemperatur. Blandingen ble rørt ved 65°C i 3 timer, reaksjonen stoppet med 4N HC1 (400 ml) og blandingen ekstrahert med dietyleter (2 x 300 ml). Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og heksan som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (9,97 g): 'HNMRtCDCb, 200 MHz): 6 = 7,80 (m, 1H), 7,19 (m, 1H), 7,06 (m, 1H), 3,86 (s, 3H).
b) 6-Metoksy-2-morfolin-4-yl-benzotiazol
En blanding av 2-klor-6-metoksybenzotiazol (9,96 g, 0,5 mol), morfolin (10,86 ml, 0,12mol) og trietylamin (13,9 ml, 0,10 mol) i etanol (75 ml) ble refluksert i 21 timer før avkjøling til romtemperatur og konsentrering i vakuum. Residuet ble fordelt mellom diklormetan og vann. Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som et lys gult faststoff (12,23 g): MS: (+) m/z 251 (M+l).
c) 2-Morfolin-4-yl-benzotiazol-6-ol
En blanding av 6-metoksy-2-morfolin-4-yl-benzotiazol (12,20 g, 48,7 mmol),tetrabutylfosfoniumbromid (1,65 g, 4,87 mmol) og 48% HBr (80 ml) ble rørt ved 100°C i 20 timer før avkjøling til romtemperatur, nøytralisering med 10N NaOH (60 ml) til pH = 5-6. Blandingen ble ekstrahert med diklormetan. Det organiske sjiktet ble tørketover vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (10,69 g): 'H NMR (CDC13, 200 MHz): 6 = 7,28 (m, 1H), 7,15 (m, 1H), 6,75 (m, 1H), 3,70 (m, 4H), 3,43 (m, 4H).
d) [5-(2-Morfolin-4-yl-benzotiazol-6-yloksy)-1,3-diokso-1,3-dihydroisoindol-2yl] -eddiksyreetylester
En blanding av 2-morfolin-4-yl-benzotiazol-6-ol (238 mg, 1,01 mmol), 5-nitro-l,3diokso-l,3-dihydroisoindol-2-yl)-eddiksyreetylester (294 mg, 1,06 mmol),kaliumkarbonat (167 mg, 1,21 mmol) og dimetylacetamid (6 ml) ble rørt ved 105°C i 22 timer før avkjling til romtemperatur og fordeling mellom kloroform og vann. Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (259 mg): MS: (+) m/z 468,21 (M+l).
e) l,4-Dihydroksy-6-(2-morfolin-4-yl-benzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester og l,4-Dihydroksy-7-(2-morfolin-4-yl-benzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
Natrium (703 mg, 30,6 mmol) ble løst i vannfri 1-butanol (35 ml) ved 85°C. Denresulterende nylig fremstilte løsningen ble tilsatt til en løsning av [5-(3-morfolin-4-ylbenzotiazol-6-yloksy)-l,3-diokso-l,3-dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyreetylester (7,14 g,15,3 mmol) i vannfri 1-butanol (55 ml). Blandingen ble rørt ved 110°C i 90 minutter føravkjøling til romtemperatur og surgjøring med 4N HC1 (8 ml) til pH = 5. Det resulterende presipitatet ble filtrert, vasket med vann og tørket i vakuum som ga den regioisomere blandingen av tittelforbindelsen som et gult faststoff (6,13 g): MS: (+) m/z 496,10 (M+l).
f) l-Klor-4-hydroksy-6-(2-morfolin-4-yl-benzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
En løsning av den regioisomere blandingen av l,4-dihydroksy-6-(2-morfolin-4-ylbenzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3-karboksylsyrebutylester og 1,4-dihydroksy-7-(2morfo lin-4-yl-benzotiazo l-6-yloksy)-isokino lin-3 -karboksylsyrebutylester syntetisertslik det er beskrevet ovenfor (1,51 g, 3,04 mmol) og fosforoksyklorid (417 pl, 4,56 mmol) i dikloretan (23 ml) ble rørt ved 120°C i en CEM-mikrobølgeapparatur i 30minutter. Blandingen ble deretter rørt ved omgivelsestemperatur med mettet natriumbikarbonatløsning i 1 time. Det organiske sjiktet ble vasket med saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som
ga et faststoff (1,05 g). Dette ble rekrystallisert fra etylacetat som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (484 mg): MS. (+) m/z 514,17 (M+l).
g) l-Cyano-4-hydroksy-6-(2-morfolin-4-yl-benzotiazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av l-klor-4-hydroksy-6-(2-morfolin-4-yl-benzotiazol-6-yloksy)-isokinolin3-karboksylsyrebutylester (200 mg, 0,39 mmol), tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0) (18 mg, 0,02 mmol), l,r-bis(difenylfosfino)ferrocen (22 mg, 0,04mmol), sinkcyanid (27 mg, 0,23 mmol), sink (3 mg, 0,05 mmol) og dimetylacetamid (0,93 ml) ble rørt ved 120°C i 2 timer før avkjøling til romtemperatur, fordeling mellom etylacetat og vann og filtrering. Filtratet ble vasket med vann og saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (137 mg): MS: (+) m/z 505,31 (M+l); (-) m/z503,31 (M-l).
h) {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(2-morfolin-4-yl-benzotiazol-6-yloksy)-isokinolin3-karbonyl]-amino}-eddiksyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksy-6-(2-morfolin-4-yl-benzotiazol-6-yloksy)isokinolin-3-karboksylsyrebutylester (137 mg, 0,27 mmol), glysin (408 mg, 5,43 mmol)og 0,5 M natriummetoksid/metanol (10,3 ml) ble refluksert i 26 timer før avkjøling til romtemperatur og konsentrering i vakuum. Residuet ble løst i vann (40 ml) og ekstrahert med diklormetan (2x35 ml). Det gjenværende vannsjiktet ble surgjort til pH = 3 med IN HC1 (7,5 ml). Det hvite presipitatet ble filtrert, vasket med vann og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (119 mg): MS: (+) m/z 506,26 (M+l); (-) m/z 504,24 (M-l).
Eksempel 43 {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(2-metylbenzooksazol-6-yloksy)-isokinolin-3-karbonyl]amino}-eddiksyre
a) l-(2,4-Dihydroksyfenyl)-etanonoksim
En blanding av 2,4-dihydroksyacetofenon (25 g, 0,16 mol), hydroksylaminhydroklorid(14,8 g, 0,21 mol), natriumacetat (20 g, 0,24 mol) og vann/dioksan (300 ml, 1:1) ble rørt ved romtemperatur i 3 dager før blandingen ble fordelt mellom kloroform og vann. Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet
renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (11,67 g): 'H NMR (CD3OD, 200 MHz): 6 = 7,26 (m, 1H), 6,28 (m, 2H), 4,88 (s, 2H), 3,29 (m, 1H), 2,24 (s, 3H).
b) 2-Metylbenzooksazol-6-ol
Til enblanding av l-(2,4-dihydroksyfenyl)-etanonoksim (4,2 g, 25 mmol) ogacetonitril/dimetylacetamid (20 ml, 3:1) avkjølt med et vannbad (20-25°C) ble det tilsattdråpevis fosforklorid (2,4 ml, 26,2 mmol) i løpet av en periode på 15 minutter. Blandingen ble rørt i ytterligere 30 minutter før den ble helt over i isvann som inneholder natriumacetat (6 g). Blandingen ble rørt i 10 minutter, filtrert og filterkaken vasket med vann og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (3,15 g): 'H NMR (CDCI3, 200 MHz): 6 = 7,45 (m, 1H), 6,96 (m, 1H), 6,80 (m, 1H), 2,60 (s, 3H).
c) [5-(2-metylbenzooksazol-6-yl)-1,3-diokso-1,3-dihydr oisoindol-2-yl] eddiksyreetylester
En blanding av 2-metylbenzooksazol-6-ol (8,41 g, 56 mmol), 5-nitro-l,3-diokso-l,3dihydroisoindol-2-yl)-eddiksyreetylester (17,23 g, 62 mmol), kaliumkarbonat (9,36 g,67,7 mmol) og dimetylacetamid (120 ml) ble rørt ved 105°C i 20 timer før den ble avkjølt til romtemperatur og fordelt mellom kloroform og vann. Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (9,18 g): MS: (+) m/z 381,27 (M+l).
d) l,4-dihydroksy-6-(2-metylbenzooksazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester og l,4-Dihydroksy-7-(2-metylbenzooksazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
Natrium (1,11 g, 48,2 mmol) ble løst i vannfri 1-butanol (60 ml) ved 90°C. Denresulterende nylig fremstilte løsningen ble tilsatt til en løsning av [5-(2metylbenzooksazol-6-yloksy)-1,3-diokso-1,3-dihydroisoindol-2-yl]-eddiksyreetylester(9,16 g, 24,1 mmol) i vannfri 1-butanol (70 ml). Blandingen ble rørt ved 110°C i 2timer før den ble avkjølt til romtemperatur og surgjort med 2N HC1 (24 ml) til pH = 4. Presipitatet ble filtrert, vasket med vann og tørket i vakuum som ga den 6,7-isomere
blandingen av tittelforbindelsen som et gult faststoff (6,63 g): MS: (+) m/z 409,34 (M+l).
e) l-Klor-4-hydroksy-6-(2-metylbenzooksazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
En løsning av den regioisomere blandingen av l,4-dihydroksy-6-(2-metylbenzooksazol6-yloksy)-isokinolin-3-karboksylsyrebutylesteren og 1,4-dihydroksy-7-(2metylbenzooksazol-6-yloksy)-isokino lin-3 -karboksylsyrebutylesteren syntetisert sombeskrevet ovenfor (2,5 g, 6,12 mmol) og fosforoksyklorid (685 gl, 7,35 mmol) i diklormetan (30 ml) ble rørt ved 120°c i en CEM-mikrobølgeapparatur i 30 minutter.Blandingen ble rørt ved omgivelsestemperatur med en mettet natriumbikarbonatløsning i 30 minutter. Det organiske sjiktet ble vasket med saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga et faststoff (1,72 g). Det ble rekrystallisert fra etylacetat (130 ml) som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (844 mg): MS: (+) m/z 427,16 (M+l).
f) l-Cyano-4-hydroksy-6-(2-metylbenzooksazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester
En blanding av l-klor-4-hydroksy-6-(2-metylbenzooksazol-6-yloksy)-isokino lin-3 karboksylsyrebutylester (199 mg, 0,47 mmol), tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0) (21 mg, 0,02 mmol), l,r-bis(difenylfosfino)ferrocen (26 mg, 0,04 mmol), sinkcyanid(33 mg, 0,29 mmol), sink (4 mg, 0,06 mmol) og dimetylacetamid (1,1 ml) ble rørt ved 120°C i 2 timer før avkjøling til romtemperatur, fordeling mellom etylacetat og vann, og filtrering. Filtratet ble vasket med vann og saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (80 mg): MS: (+) m/z 418,38 (M+l).
g) {[l-Cyano-4-hydroksy-6-(2-metylbenzooksazol-6-yloksy)-isokinolin-3karbonyl]-amino}-eddiksyre
En blanding av l-cyano-4-hydroksy-6-(2-metylbenzooksazol-6-yloksy)-isokinolin-3karboksylsyrebutylester (81 mg, 0,19 mmol), glysin (292 mg, 3,89 mmol) og 0,5 M natriummetoksid/metanol (7,4 ml) ble refluksert i 26 timer før avkjøling til romtemperatur og konsentrering i vakuum. Residuet ble løst i vann (25 ml) og ekstrahert med diklormetan (2 x 35 ml). Det gjenværende, vandige sjiktet ble surgjort
til pH = 3 med IN HC1 (5,5 ml). Presipitatet ble filtrert, vasket med vann og tørket i vakuum som ga tittelforbindelsen som et brunt faststoff (72 mg): MS: (+) m/z 419,30 (M+l); (-) m/z 417,28 (M-l).
Eksempel 44 (referanseeksempel) [(6-Klor-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a) 6-Klor-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester
En blanding av l-brom-6-klor-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (509mg, 1,43 mmol; fremstilt i henhold til US 2004/0254215 Al), kobber(I)cyanid (255 mg, 2,85 mmol) og vannfri dimetylformamid (6 ml) ble refluksert i 25 minutter før blandingen ble avkjølt til romtemperatur og reaksjonen stoppet med vann. Kloroform/2-propanol (75 ml, 3:1) ble tilsatt og blandingen ble rørt i 10 minutter førfiltrering. Det organiske sjiktet ble vasket med vann, saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat, konsentrert i vakuum og residuet renset med flashkolonnekromatografi på silikagel med en gradient av etylacetat og diklormetan som ga tittelforbindelsen som et gult faststoff (280 mg): MS: (-) m/z 303,20 (M-l).
b) [(6-Klor-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
En blanding av 6-klor-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyrebutylester (99 mg,0,33 mmol) og glysin (1,84 g, 24,49 mmol) i 0,5 M natriummetoksid/metanol (32,6 ml) ble refluksert i 21 timer før avkjøling til romtemperatur og konsentrering i vakuum. Residuet ble løst i vann (40 ml) og løsningen vasket med diklormetan (3 x 50 ml). Det gjenværende vandige sjiktet ble surgjort til pH = 3 med IN HC1. Suspensjonen ble ekstrahert med etyalcetat (50 ml). Det organiske sjiktet ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum som ga tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (84 mg): MS: (+) m/z 306,27 (M+l); (-) m/z 304,26 (M-l).
Eksempel 45 (referanseeksempel) [(7-Butoksy-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre[(7-Butoksy-1 -cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre ble fremstiltved tilsetting av 135 mg (0,383 mmol) [(7-butoksy-l-klor-4-hydroksyisokinolin-3karbonyl)-amino]-eddiksyre (fremstilt i henhold til US 6093730), 18 mg (0,02 mmol)tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0), 22,2 mg (0,04 mmol) 1,1’bis(difenylfosfino)ferrocen, 3 mg (0,04 mmol) sinkstøv og 27 mg (0,23 mmol) sinkcyanid til 0,80 ml N,N-dimetylacetamid. Den resulterende blandingen ble varmet
opp til 115°C i 3 timer under nitrogenatmosfære, og deretter avkjølt til romtemperatur. Blandingen ble fortynnet med etylacetat og ekstrahert tre ganger med vandig natriumbikarbonatløsning. De vandige ekstraktene ble surgjort med konsentrert HC1, og det resulterende hvite presipitatet ble samlet opp: 28 mg av tittelforbindelsen; MS (ESI-): m/z 342,0 (M-l).
Eksempel 46 [(l-Cyano-4-hydroksy-6,7-difenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre[(l-Cyano-4-hydroksy-6,7-difenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre blefremstilt ved tilsetting av 76 mg (0,164 mmol) [(l-klor-4-hydroksy-6,7difenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre (fremstilt i henhold til US2006/0217416), 7,3 mg (0,008 mmol) tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0), 9,0 mg (0,016 mmol) l,r-bid(difenylfosfmo)ferrocen, 1,3 mg (0,20 mmol) sinkstøv og 12 mg(0,10 mmol) sinkcyanid til 0,35 ml N,N-dimetylacetamid. Den resulterende blandingenble varmet opp til 115°C i 3 timer under en nitrogenatmosfære og ble deretter avkjølt til romtemperatur. Blandingen ble fortynnet med etylacetat og ekstrahert tre ganger med vandig natriumbikarbonat og to ganger med IN NaOH-løsninger. De basiske, vandigeekstraktene ble sugjort med konsentrert HC1 og ekstrahert tre ganger med etylacetat. De organiske ekstraktene ble tørket over natriumsulfat og konsentrert som ga 29 mg av tittelforbindelsen som et hvitt faststoff; MS (ESI-): m/z 454,0 (M-l).
Eksempel 47 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4-hydroksy-7-metoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
[(1 -Cyano-4-hydroksy-7-metoksyisokino lin-3 -karbonyl)-amino] -eddiksyre ble fremstiltved å tilsette 158 mg (0,511 mmol) [(l-klor-4-hydroksy-7-metoksyisokinolin-3karbonyl)-amino]-eddiksyre (fremstilt i henholdt il US 6093730), 24 mg (0,025 mmol)tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0), 28 mg (0,051 mmol) 1,1’bis(difenylfosfino)ferrocen, 4 mg (0,06 mmol) sinkstøv og 36 mg (0,306 mmol) sinkcyanid til 1,0 ml N,N-dimetylacetamid. Den resulterende blandingen ble varmetopp til 115°C i 3 timer under en nitrogenatmosfære og ble deretter avkjølt til romtemperatur. Blandingen ble fortynnet med etylacetat og halvmettet vandig natriumbikarbonatløsning og filtrert gjennom en celitepute. Tofaseblandingen ble separert og det basiske, vandige ekstraktet ble surgjort med konsentrert HC1 og ekstrahert tre ganger med etylacetat. De organiske ekstraktene ble tørket over natriumsulfat og konsentrert som ga 107 mg av tittelforbindelsen som et hvitt faststoff; MS (ESI+): m/z 302,3 (M+l).
Eksempel 48 (referanseeksempel)
[(l-Cyano-4-hydroksy-7-isopropoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
[(1 -Cyano-4-hydroksy-7-isopropoksyisokino lin-3 -karbonyl)-amino] -eddiksyre blefremstilt fra [(1 -klor-4-hydroksy-7-isopropoksyisokino lin-3 -karbonyl)-amino] eddiksyre (fremstilt i henhold til US 6093730) under betingelser analoge med eksempel 47a; MS (ESI+): m/z 330,3 (M+l).
Eksempel 49 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4-hydroksy-6-isopropoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre[(l-Cyano-4-hydroksy-6-isopropoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre blefremstilt fra [(1 -klor-4-hydroksy-6-isopropoksyisokino lin-3 -karbonyl)-amino] eddiksyre (fremstilt i henhold til US 2006/217416) under betingelser analoge med eksempel 47a; MS (ESI+): m/z 330,3 (M+l).
Eksempel 50 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4-hydroksy-5-fenylisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre[(l-Cyano-4-hydroksy-5-fenylisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre ble fremstilt fra[(l-klor-4-hydroksy-5-fenylisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre (fremstilt ihenhold til US 2006/217416) under betingelser analoge med eksempel 47a; MS (ESI0): m/z 348,3 (M+l).
Eksempel 51 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4-hydroksy-8-fenylisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre[(l-Cyano-4-hydroksy-8-fenylisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre ble fremstilt fra[(l-klor-4-hydroksy-8-fenylisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre (fremstilt ihenhold til US 2006/217416) under betingelser analoge med eksempel 47a; MS (ESI+): m/z 348,3 (M+l).
Eksempel 52 (referanseeksempel) [(7-Benzyloksy-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a) (2,4-Dimetoksybenzylamino)-eddiksyreetylester
En blanding av 2,4-dimetoksybenzaldehyd (50 g, 0,30 mol), glysinetylesterhydroklorid(44 g, 0,32 mol) og trietylamin (43,9 ml, 0,32 mol) i dikloretan ble rørt i 1 time før natriumtriacetoksyborhydrid (100 g, 0,47 mol) ble tilsatt i fire porsjoner. Blandingen
ble rørt i 3 dager før reaksjonen ble stoppet med mettet natriumbikarbonat. Det organiske sjiktet ble ekstrahert med 3N HC1 (2 x 400 ml, 2,4 mol). De vandige sjiktene ble kombinert, justert med fast natriumhydroksid (97,68 g, 2,4 mol) til pH = 8 og ekstrahert med etylacetat (500 ml). Etylacetatekstraktet ble vasket med saltvann, tørket over natriumsulfat og konsentrert. Residuet ble renset med flashkolonnekromatografi med en gradient av metanol og diklormetan på silikagel (120 g) som ga tittelforbindelsen som en gul olje (42,77 g). 'H NMR (CDCk, 200 MHz): 6 = 7,11 (m, 1H), 6,41 (m, 2H), 4,15 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,74 (s, 2H), 3,37 (s, 2H), 1,27 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
b) 4-(tert-Butyldimetylsilanyloksy)-2-metylbenzosyreetylester
En blandig av 18 g (100 mmol) 4-hydroksy-2-metylbenzosyreetylester (fremstilt ihenhold til Sen, et al. (1987), Indian J. Chem Sec B, 26:679-682), 10,2 g (150 mmol)imidazol og 17,2 g (115 mmol) tert-butyldimetylsilylklorid i 110 ml vannfri DMF blerørt i 24 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med vann og ekstrahert med etylacetat. Den organiske fraksjonen ble vasket med vann, 0,1 N HC1 og saltvann, og deretter tørket over vannfri magnesiumsulfat og konsentrert til 28,8 g av tittelforbindelsen; MS (ESI+): m/z 295,5 (M+l).
c) N-(2,4-dimetoksybenzyl-N-(2-etoksykarbonyl-5hydroksybenzyl)glysinetylester
En blanding av 20 g (68 mmol) 4-(tert-butyldimetylsilanyloksy)-2metylbenzosyreetylester (12,1 g (68 mmol) N-bromsuksinimid, 1,5 g (6,8 mmol)benzoylperoksid i 230 ml karbontetraklorid ble varmet opp til refluks i 5 timer. Den resulterende blandingen ble avkjølt, filtrert gjennom en silikagel plugg og konsentrert under redusert trykk. Til resudiet (12,2 g) ble det tilsatt 8,0 g (28,7 mmol) N-(2,4dimetoksybenzyljglysinetylester, 3,96 g (28,7 mmol) kaliumkarbonat og 65 ml vannfri DMF, og blandingen ble rørt i 6,5 timer. Blandingen ble deretter fordelt i en tofase vann-etylacetatblanding og det isolerte, organiske sjiktet ble vasket med saltvann, tørketover vannfri magnesiumsulfat og konsentrert. Residuet ble renset med flashkromatografi: eluering av det ønskede produktet fra silikagel med en gradient på 10-90% etylacetat i heksan. 5,33 g av tittelforbindelsen (gul olje) ble isolert; MS(ESI+): 432,2 (M+l).
d) N-(2,4-dimetoksybenzyl)-N-(5-benzyloksy-2etoksykarbonylbenzyl)glysinetylester
En løsning av 5,3 g (12,3 mmol) N-(2,4-dimetoksybenzxyl)-N-(2-etoksykarbonyl-5hydroksybenzyl)glysinetylester, 1,8 ml (15,4 mmol) benzylbromid og 4,4 g (13,5 mmol) cesiumkarbonat i 35 ml vannfri DMF ble rørt i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble fordelt mellom dietyleter og vann og den organiske fraksjonen ble vasket med mettet, vandig natriumbikarbonat, saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat, filtrert gjennom en silikagelpute og konsentrert under redusert trykk til 6,4 g av tittelforbindelsen. MS (ESI+) 522,5 e/z (M+l).
e) 7-Benzyloksy-2-(2,4-dimetoksybenzyl)-4-hydroksy-l,2-dihydroisokinolin-3karboksylsyreetylester
En løsning av 6,4 g (12,3 mmol) N-(2,4-dimetoksybenzyl)-N-(5-benzyloksy-2etoksykarbonylbenzyl)glysinetylester i 140 ml vannfri THE ble avkjølt på et isbad. 24,6 ml IN kalium-tert-butoksid i THE ble sakte tilsatt til den rørte, kalde løsningen.Reaksjonsblandingen ble rørt ved 0°C i 1 time og ble deretter varmet opp til romtemperatur og rørt i 4 timer. Blandingen ble helt over i en tofase blanding av etylacetat og mettet, vandig ammoniumklorid. Den organiske fraksjonen ble vasket to ganger med saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert under redusert trykk som ga 5,7 g av tittelforbindelsen; MS (ESI+): 476,3 e/z (M+l).
f) 7-Benzyloksy-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyreetylester
Diklormetan (100 ml) ble avkjølt til 0°C og 5,7 g (12 mmol) 7-benzyloksy-2-(2,4dimetoksybenzyl)-4-hydroksy-1,2-dihydroisokinolin-3-karboksylsyreetylester og 1,31ml (18 mmol) tionylklorid ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble rørt i 1 time og ble deretter varmet opp til romtemperatur og rørt i ytterligere 3 timer. 60 ml heksan ble tilsatt til den resulterende slurrien og det hvite, faste stoffet ble samlet opp ved filtrering gjennom et middels glassfiber med slipp. Det faste stoffet ble fordelt mellom etylacetat og mettet natriumbikarbonatløsning og den organiske fasen ble vasket med saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert som ga tittelforbindelsen (2,7 g, hvitt faststoff); MS (ESI+): 324,3 e/z (M+l).
g) 7-Benzyloksy-l-brom-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyreetylester
En suspensjon av 2,48 g (Jfil mmol) 7-benzyloksy-4-hydroksyisokinolin-3karboksylsyreetylester og 1,43 g (8,0 mmol) N-bromsuksinimid i 25 ml acetonitril blevarmet opp til 70°C i 10 minutter. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og et hvitt faststoff
presipiterte ut av løsningen. Det faste stoffet ble samlet opp ved filtrering gjennom et middels glassfilter med slipp, og vasket med kald acetonitril som ga 2,3 g av tittelforbindelsen; MS (ESI+): 402,2, 404,2 e/z (M+l, 79Br/81Br).
h) 7-Benzyloksy-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyreetylester7-Benzyloksy-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyreetylester ble fremstilt vedå varme opp en blanding av 1,76 g (4,4 mmol) 7-benzyloksy-l-brom-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyreetylester, 201 mg (0,20 mmol)tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0), 243 mg (0,44 mmol) 1,1’bis(difenylfosfino)ferrocen, 34 mg (0,53 mmol) sinkstøv, 309 mg (2,64 mmol) sinkcyanid og 9,0 ml N,N-dimetylacetamid til 115°C i 3 timer. Den resulterendeblandingen ble fortynnet med etylacetat og mettet, vandig ammoniumklorid og filtrert gjennom en celitepute. Den organiske fraksjonen ble vasket med mettet ammoniumklorid, vann, saltvann, tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset med flashkromatografi eluert med silikagel med en 10 til 90% gradient av etylacetat i heksan som ga 1,18 g av tittelforbindelsen; MS (ESI+): 349,3 e/z (M+l).
i) [(7-Benzyloksy-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]eddiksyre
[(7-Benzyloksy-1 -cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre blefremstilt ved oppvarming av en løsning av 110 mg (0,316 mmol) 7-benzyloksy-lcyano-4-hydroksyisokinolin-3-karboksylsyreetylester og 210 mg (2,8 mmol) glysin i 5ml 0,5 N NaOMe i metanol til reflukstemperatur i 28 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og surgjort med 3 ml IN HC1. Et hvitt faststoff ble samlet opp på et middels glassfilter med slipp som ga 115 mg av tittelforbindelsen; MS (ESI+): 378,2 e/z (M+l).
Eksempel 53 (referanseeksempel) [(l-Cyano-4,7-dihydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre
a) l-Cyano-4,7-dihydroksyisokinolin-3-karboksylsyreetylesterl-Cyano-4,7-dihydroksyisokinolin-3-karboksylsyreetylester ble fremstilt vedoppvarming av en blanding av 175 mg (0,50 mmol) 7-benzyloksy-l-cyano-4hydroksyisokinolin-3-karboksylsyreetylester (eksempel 52h), 630 mg (10 mmol)ammoniumformat og 40 mg 10% Pd/C i 3 ml 1:1 EtOAc og EtOH ved reflukstemperatur i 40 minutter. Den resulterende blandingen ble avkjølt, filtrert
gjennom en celitepute for å fjerne faste stoffer og konsentrert til et urent faststoff Det faste stoffet ble triturert med varm etanol som ga 56 mg av et off-white faststoff ettertørking; MS (ESI+): 259,3 c/z (M+l).
b) [(l-Cyano-4,7-dihydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre[(l-Cyano-4,7-dihydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre ble fremstilt vedoppvarming av en blanding av 42 mg (0,162 mmol) l-cyano-4,7-dihydroksyisokinolin3-karboksylsyreetylester og 97 mg (1,29 mmol) glysin i 2,25 ml 0,5 N NaOMe imetanol ved reflukstemperatur i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og surgjort med 3 ml IN HC1 og vann. Et hvitt faststoff ble samlet opp på et middels glassfilter med slipp som ga 40 mg av tittelforbindelsen; MS (ESI+): 288,2 e/z (M+l).
Eksempel 54
Sammenligningsøndersøkelse av forbindelser med klor, brom, hydrogen eller metyl i stedet for cyano i C-l-posisjon
Forbindelser ble testet for aktivitet ved anvendelse av følgende undersøkelse. Forbindelser ble løst i vandig løsning som inneholder dobbelt så mye natriumhydroksid, mol-for-mol, som forbindelsen og dekstrose som et tonisitetsjusterende middel.Hannkjønn sveitsiske Webster-mus ble dosert ved haleveneninjeksjon medforbindelsen, og blodprøver ble samlet opp i EDTA og herapin 4 timer etter IVdosering. Prøvene ble analysert ved anvendelse av et muse-erytropoietinQUANTIKINE ELISA-kit (R&D Systems Inc., Minneapolis MN) i henhold tilprodusentens instruksjoner. Forbindelser ifølge oppfinnelsen viste målbar økning i plasma erytropoietinnivåer. Videre ga forbindelser som inneholder cyanosubstitusjon ved C-l, slik tilfellet er med foreliggende oppfinnelse, overraskende høyere, foreksempel minst to ganger høyere, plasma-erytropoetinnivåer enn en sammenlignbarforbindelse som inneholder et hydrogen, klor, brom eller metyl i C-l-posisjonen ved engitt dose. Tabell 1 nedenfor illustrerer ganger forskjell (dvs. forbedringsgrad) mellom erytropoietinnivåer oppnådd med forbindelsen ifølge oppfmneslen sammenlignet med erytropoetinnivåer oppnådd med forbindelser som har den samme strukturen, unntatt at cyanogruppen i C-l-posisjonen er erstattet slik det er vist nedenfor, testet under sammebetingelser og ved samme konsentrasjon.
Tabell 1
Eksempel
Sammenlignende substituenter
Ganger forskjell
-Cl
4,7x
-ch3
2,5x
-Cl
31x
-ch3
2,4x
-Cl
449x
-Br
362x
-ch3
178x
-H
81x
-H
23x
-H
26x
-H
277x

Claims (27)

Patentkrav
1.
Forbindelse, karakterisert ved formell:
,5
Rx
■OR
hvori:
R er hydrogen;
R1, R2, R3 og R4 er uavhengig valgt fra gruppen som består av hydrogen, Cnio alkyl eventuelt substituert med aryl, og -OR7, hvori R7 er valgt fra gruppen som består avCe-i2 aryl eventuelt substituert med halo eller Cnio alkoksy, og heteroaryl med fra 1 til15 karbonatomer og 1 til 4 heteroatomer valgt fra gruppen som består av oksygen, nitrogen og svovel, substituert med Cnio alkyl eller Cnio dialkylamino; og
R5 og R6 er hydrogen;
eller et farmasøytisk akseptabelt salt, tautomer, stereoisomer eller solvat derav.
2.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at minst to av R1, R2, R3 og R4 er hydrogen.
3.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R1, R2 R3 og R4 er uavhengig valgt fra gruppen som består av hydrogen, benzyl, fenoksy, 4-fluorfenoksy, 3-metoksyfenoksy, 2-metylbenzotiazol-6-yloksy og2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy.
4.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R1, R2 R3 og R4 er valgt fra gruppen som består av hydrogen, fenoksy og 4-halofenoksy.
5.
Forbindelse ifølge krav 1, k a r a k R4 er hydrogen.
6.
Forbindelse ifølge krav 1, k a r a k og R4 er hydrogen.
7.
Forbindelse ifølge krav 1, k a r a k og R3 er hydrogen.
8.
Forbindelse ifølge krav 1, k a r a k og R4 er hydrogen.
9.
Forbindelse ifølge krav 1, k a r a k og R4 er hydrogen.
10.
Forbindelse ifølge krav 1, k a r a k R3 og R4 er hydrogen.
terisert ved at R1 og
terisert ved at R1, R3
terisert ved at R1, R2
terisert ved at R1, R2
terisert ved at R2, R3
terisert ved at R1, R2,
11.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R1 er
-OR7, hvori R7 er Ce-i2 aryl substituert med halo.
12.
Forbindelse ifølge krav 11, karakterisert ved at R1 er
4-fluorfenoksy.
13.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R2 er -OR7, hvori R7 er valgt fra gruppen som består av Ce-i2 aryl og heteroaryl med fra 1 til15 karbonatomer og 1 til 4 heteroatomer valgt fra gruppen som består av oksygen, nitrogen og svovel, substituert med Ci-io alkyl eller Cnio dialkylamino.
14.
Forbindelse ifølge krav 13, karakterisert ved at R2 er valgt fra gruppen som består av fenoksy, 2-metylbenzotiazol-6-yloksy og2-dimetylaminobenzooksazol-5-yloksy.
15.
Forbindelse ifølge krav 14, karakterisert ved at R2 er fenoksy.
16.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R3 er valgt fra gruppen som består av Cnio alkyl substituert med Ce-12 aryl, og -OR7, hvori R7er Ce-12 aryl eventuelt substituert med halo.
17.
Forbindelse ifølge krav 16, karakterisert ved at R3 er valgt fra gruppen som består av benzyl, fenoksy og 4-fluorfenoksy.
18.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R4 er
-OR7, hvori R7 er Ce-12 aryl eventuelt substituert med Cnio alkoksy.
19.
Forbindelse ifølge krav 18, karakterisert ved at R4 er valgt fra gruppen som består av fenoksy og 3-metoksyfenoksy.
20.
Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er valgt fra gruppen som består av:
{[ 1 -cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl]-amino} -eddiksyre,
{[ 1 -cyano-4-hydroksy-7-fenoksyisokinolin-3-karbonyl]-amino} -eddiksyre,
{[ 1 -cyano-7-(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokino lin-3 -karbonyl] -amino } -eddiksyre,
{[ 1 -cyano-4-hydroksy-8-fenoksyisokinolin-3-karbonyl]-amino} -eddiksyre,[(l-cyano-4-hydroksy-6-fenoksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre,
{[ 1 -cyano-4-hydroksy-8-(3 -metoksyfenoksy)-isokino lin-3 -karbonyl] -amino } -eddiksyre,[(7-benzyl-l-cyano-4-hydroksyisokinolin-3-karbonyl)-amino]-eddiksyre,
{[ 1 -cyano-5 -(4-fluorfenoksy)-4-hydroksyisokino lin-3 -karbonyl] -amino } -eddiksyre,
{[ 1 -cyano-4-hydroksy-6-(2-metylbenzotiazo l-6-yloksy)-isokino lin-3 -karbonyl] -amino } eddiksyre, og
{[ 1 -cyano-6-(2-dimetylaminobenzooksazol-5 -yloksy)-4-hydroksyisokino lin-3 karbonyl] -amino } -eddiksyre,
eller et farmasøytisk akseptabelt salt, tautomer, stereoisomer eller solvat derav.
21.
Farmasøytisk sammensetning, karakterisert ved at den innbefatter en eller flere forbindelser ifølge krav 1, og en farmasøytisk akseptabel eksipient.
22.
Sammensenting ifølge krav 21, karakterisert ved at den ytterligere innbefatter minst et ytterligere terapeutisk middel.
23.
Sammensetning ifølge krav 22, karakterisert ved at middelet er valgt fra gruppen som består av vitamin B12, folsyre, jemsulfat, human erytropoetin og et erytropoiesestimulerende protein (ESP).
24.
Sammensetning ifølge krav 21 for behandling, forhåndsbehandling eller forsinkning av utbrudd av en tilstand assosiert med hypoksiinduserbar faktor (HIF), der tilstanden
5 assosiert med HIF er en vevsskade assosiert med iskemi eller hypoksi.
25.
Sammensetning ifølge krav 24, der iskemien er en akutt, iskemisk hendelse valgt fra gruppen som består av myokardisk infarkt, lungeembolisme, intestinalt infarkt, io iskemisk slag og renal iskemisk-reperfusjonsskade.
26.
Sammensetning ifølge krav 24, der iskemien er en kronisk iskemisk hendelse valgt fra gruppen som består av hjertecirrhose, makulær degenerering, kronisk nyresvikt og is kongestiv hjertesvikt.
27.
Sammensetning ifølge krav 21 for behandling, forhåndsbehandling eller forsikning av utbrudd av anemi.
NO20083658A 2006-01-27 2008-08-25 Cyanoisokinolinforbindelser, farmasøytisk sammensetning som inneholder slike og anvendelse derav NO342678B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US76278006P 2006-01-27 2006-01-27
PCT/US2007/061171 WO2007090068A2 (en) 2006-01-27 2007-01-26 Cyanoisoquinoline compounds that stabilize hypoxia inducible factor (hif)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20083658L NO20083658L (no) 2008-10-27
NO342678B1 true NO342678B1 (no) 2018-06-25

Family

ID=38042727

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20083658A NO342678B1 (no) 2006-01-27 2008-08-25 Cyanoisokinolinforbindelser, farmasøytisk sammensetning som inneholder slike og anvendelse derav

Country Status (16)

Country Link
US (5) US7928120B2 (no)
EP (2) EP2476669A1 (no)
JP (1) JP5161793B2 (no)
KR (2) KR20140089446A (no)
CN (3) CN101374815B (no)
AU (1) AU2007211077B2 (no)
BR (1) BRPI0707302B8 (no)
CA (1) CA2640435C (no)
DK (1) DK2044028T3 (no)
HK (1) HK1129114A1 (no)
IL (1) IL193047A (no)
MX (1) MX2008009581A (no)
NO (1) NO342678B1 (no)
RU (1) RU2457204C2 (no)
WO (1) WO2007090068A2 (no)
ZA (1) ZA200806752B (no)

Families Citing this family (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8614204B2 (en) * 2003-06-06 2013-12-24 Fibrogen, Inc. Enhanced erythropoiesis and iron metabolism
DK1644336T3 (da) 2003-06-06 2011-05-09 Fibrogen Inc Nitrogenholdige heteroarylforbindelser og deres anvendelse til forøgelse af endogent erythropoietin
EP2476669A1 (en) * 2006-01-27 2012-07-18 Fibrogen, Inc. Cyanoisoquinoline compounds and methods of use thereof
EP1991269A1 (en) * 2006-02-16 2008-11-19 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of stroke
JP5111491B2 (ja) * 2006-04-04 2013-01-09 フィブロジェン, インコーポレイテッド ピロロ−およびピラゾロ−ピリミジン化合物、およびそれらの使用方法
US8962530B2 (en) * 2007-06-27 2015-02-24 Regents Of The University Of Colorado Inflammatory bowel disease therapies
WO2009058403A1 (en) * 2007-11-02 2009-05-07 Fibrogen, Inc. Methods for reducing blood pressure
WO2009073669A1 (en) 2007-12-03 2009-06-11 Fibrogen, Inc. Isoxazolopyridine derivatives for use in the treatment of hif-mediated conditions
EP2231157A1 (en) * 2007-12-06 2010-09-29 Fibrogen, Inc. Methods for increasing endothelial progentior cells
EP2231156A1 (en) * 2007-12-07 2010-09-29 Fibrogen, Inc. Methods for increasing white blood cells
EP2252619B1 (en) 2008-01-11 2013-10-09 Fibrogen, Inc. Isothiazole-pyridine derivatives as modulators of hif (hypoxia inducible factor) activity
WO2009100250A1 (en) 2008-02-05 2009-08-13 Fibrogen, Inc. Chromene derivatives and use thereof as hif hydroxylase activity inhibitors
JP5557832B2 (ja) * 2008-03-18 2014-07-23 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 置換4−ヒドロキシピリジン−5−カルボキサミド
WO2009134754A1 (en) 2008-04-28 2009-11-05 Janssen Pharmaceutica Nv Benzoimidazole glycinamides as prolyl hydroxylase inhibitors
CN102264740B (zh) 2008-08-20 2014-10-15 菲布罗根有限公司 一种吡咯[1,2-b]哒嗪衍生物及其作为hif调节剂的用途
WO2010024911A1 (en) * 2008-08-26 2010-03-04 Fibrogen, Inc. Methods for increasing neurogenesis
WO2010056767A1 (en) 2008-11-14 2010-05-20 Fibrogen, Inc. Thiochromene derivatives as hip hydroxylase inhibitors
CN102869775A (zh) 2009-09-30 2013-01-09 哈佛大学校长及研究员协会 通过调节自噬抑制基因产物调节自噬的方法
CN103608346B (zh) * 2011-02-02 2016-06-15 菲布罗根有限公司 作为缺氧诱导因子(hif)羟化酶抑制剂的萘啶衍生物
GB201102659D0 (en) 2011-02-15 2011-03-30 Isis Innovation Assay
WO2012150208A1 (de) 2011-05-04 2012-11-08 Bayer Cropscience Ag Verwendung von substituierten benzylalkoholestern der cyclopropancarbonsäure zur bekämpfung von insektizid-resistenten insekten
WO2012150221A2 (de) 2011-05-04 2012-11-08 Bayer Cropscience Ag Neue halogenierte benzylalkoholester der cyclopropancarbonsäure als schädlingsbekämpfungsmittel
EP2734504B1 (en) * 2011-07-22 2016-09-14 Beijing Betta Pharmaceuticals Co., Ltd Polymorphic forms of compounds as prolyl hydroxylase inhibitor, and uses thereof
GB201113101D0 (en) 2011-07-28 2011-09-14 Isis Innovation Assay
BR112014009910B1 (pt) 2011-10-25 2020-06-30 Janssen Pharmaceutica N.V. sal di-hidrato de meglumina de ácido 1-(5,6-dicloro-1h-benzo[d]imidazol-2-il)-1h-pirazol-4-carboxílico, composição farmacêuticae pomada tópica
WO2013134660A1 (en) 2012-03-09 2013-09-12 Fibrogen, Inc. 4 -hydroxy- isoquinoline compounds as hif hydroxylase inhibitors
EP3470397B1 (en) 2012-07-16 2021-12-29 Fibrogen, Inc. Crystalline forms of a prolyl hydroxylase inhibitor
US8883823B2 (en) 2012-07-16 2014-11-11 Fibrogen, Inc. Crystalline forms of a prolyl hydroxylase inhibitor
WO2014014834A1 (en) * 2012-07-16 2014-01-23 Fibrogen, Inc. Process for making isoquinoline compounds
SG11201500339XA (en) * 2012-07-27 2015-02-27 Biogen Ma Inc Atx modulating agents
DK2951159T3 (en) * 2013-01-24 2018-11-19 Fibrogen Inc CRYSTALLIC FORMS OF {[1-CYANO-5- (4-CHLORPHENOXY) -4-HYDROXY-ISOQUINOLIN-3-CARBONYL] -AMINO} ACETIC ACID
ES2786924T3 (es) 2013-06-06 2020-10-14 Fibrogen Inc Formulaciones farmacéuticas que comprenden un inhibidor de hidroxilasa del HIF
EP2915878A1 (en) 2014-03-07 2015-09-09 Institut Pasteur Method and device for conserving viable and functional human polymorphonuclear neutrophils
ES2898476T3 (es) 2014-09-02 2022-03-07 Sunshine Lake Pharma Co Ltd Compuesto de quinolona y uso del mismo
NZ733135A (en) 2014-12-24 2018-06-29 Gilead Sciences Inc Fused pyrimidine compounds for the treatment of hiv
TW202237569A (zh) 2014-12-24 2022-10-01 美商基利科學股份有限公司 喹唑啉化合物
BR112017013440A2 (pt) * 2014-12-24 2018-01-09 Gilead Sciences, Inc. compostos de isoquinolina para o tratamento de hiv
CN106146395B (zh) 2015-03-27 2019-01-01 沈阳三生制药有限责任公司 3-羟基吡啶化合物、其制备方法及其制药用途
CN104892509B (zh) * 2015-06-04 2018-03-09 苏州明锐医药科技有限公司 诺得司他的制备方法
KR102333180B1 (ko) * 2015-08-05 2021-11-30 삼성전자주식회사 플렉서블 디스플레이 장치를 구비한 전자 장치
CN109180580B (zh) * 2016-02-28 2021-01-12 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种取代的杂芳基化合物及包含该化合物的组合物及其用途
CN106478503A (zh) * 2016-09-29 2017-03-08 上海勋和医药科技有限公司 Roxadustat中间体的制备方法
CN107954931B (zh) * 2016-10-17 2021-06-22 上海医药集团青岛国风药业股份有限公司 一种诺得司他的制备方法
CN108017583B (zh) * 2016-11-01 2021-04-06 徐州万邦金桥制药有限公司 一种可博美的制备方法
CN110878096A (zh) * 2018-09-05 2020-03-13 石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司 一种1,7-萘啶类衍生物及其制备方法和用途
IT201800009318A1 (it) * 2018-10-10 2020-04-10 Luigi Frati Composizioni antiossidanti
BR112021008741A2 (pt) 2018-11-09 2021-08-10 Vivace Therapeutics, Inc. compostos bicíclicos
AU2020228119A1 (en) 2019-02-26 2021-09-16 Bayer Aktiengesellschaft Condensed bicyclic heterocyclic derivatives as pest control agents
WO2020173860A1 (en) 2019-02-26 2020-09-03 Bayer Aktiengesellschaft Fused bicyclic heterocycle derivatives as pesticides
KR20220016456A (ko) 2019-04-16 2022-02-09 비바체 테라퓨틱스, 인크. 바이사이클릭 화합물
TW202120490A (zh) 2019-07-30 2021-06-01 德商拜耳動物保健有限公司 新穎異喹啉衍生物
WO2023111985A1 (en) * 2021-12-17 2023-06-22 Akebia Therapeutics, Inc. Picolinamide compounds as selective phd1 inhibitors, compositions, and methods of use

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004108681A1 (en) * 2003-06-06 2004-12-16 Fibrogen, Inc. Nitrogen-containing heteroaryl compounds and their use in increasing endogenous erythropoietin

Family Cites Families (57)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4036964A (en) 1973-10-11 1977-07-19 Beecham Group Limited Isocarbostyril-3-carboxylic acid derivatives for the prophylaxis of asthma, hayfever and rhinitis
US3989704A (en) 1973-10-30 1976-11-02 Sandoz, Inc. 3-Substituted-4-aryl isoquinolines
DE2818423A1 (de) 1978-04-27 1979-11-08 Hoechst Ag Neue isochinolinderivate und verfahren zu ihrer herstellung
DE3233424A1 (de) 1982-09-09 1984-03-15 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Isochinolinderivate, verfahren zu ihrer herstellung, pharmazeutische praeparate auf basis dieser verbindungen und ihre verwendung
US4559403A (en) 1983-05-19 1985-12-17 Hoffmann-La Roche Inc. Substituted isoquinolines
US4584379A (en) 1985-01-22 1986-04-22 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Isoquinoline thromboxane synthetase inhibitors
US4822800A (en) 1986-06-09 1989-04-18 Ortho Pharmaceutical Corporation Isoquinolinol compounds having cardiotonic and phosphodiesterase fraction III inhibiting properties and/or renal vasodilating properties
US4966906A (en) 1987-11-27 1990-10-30 Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Inc. 1-aryl-3-isoquinolinecarboxamides
US4952588A (en) 1987-11-27 1990-08-28 Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Inc. 1-aryl-3-quinoline-and 1-aryl-3-isoquinoline-carboxamides
EP0532466A3 (en) 1991-09-12 1993-06-16 Ciba-Geigy Ag Derivatives of 5-amino-4-hydroxy-hexanoic acid and their therapeutical use
EP0626178A1 (de) 1993-05-17 1994-11-30 Ciba-Geigy Ag Verwendung von Hemmstoffen von HIV-Aspartatproteasen zur Bekämpfung von Tumorerkrankungen
EP0650961B1 (de) 1993-11-02 1997-03-05 Hoechst Aktiengesellschaft Substituierte heterocyclische Carbonsäureamide, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE59401923D1 (de) 1993-11-02 1997-04-10 Hoechst Ag Substituierte heterocyclische Carbonsäureamidester, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
TW406076B (en) 1993-12-30 2000-09-21 Hoechst Ag Substituted heterocyclic carboxamides, their preparation and their use as pharmaceuticals
US5563143A (en) 1994-09-21 1996-10-08 Pfizer Inc. Catechol diether compounds as inhibitors of TNF release
WO1996018616A1 (en) 1994-12-12 1996-06-20 Merck & Co., Inc. Substituted 2-aminopyridines as inhibitors of nitric oxide synthase
US6297269B1 (en) * 1995-06-06 2001-10-02 Pfizer Inc. Substituted n-(indole-2-carbonyl-) amides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors
IL135495A (en) 1995-09-28 2002-12-01 Hoechst Ag Intermediate compounds for the preparation of quinoline-converted amines - 2 - carboxylic acid
ATE342262T1 (de) 1996-11-27 2006-11-15 Bristol Myers Squibb Pharma Co Neue integrin rezeptor antagonisten
GB9707830D0 (en) 1997-04-18 1997-06-04 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
AU7526798A (en) 1997-04-18 1998-11-27 Smithkline Beecham Plc Acetamide and urea derivatives, process for their preparation and their use in the treatment of cns disorders
DE19746287A1 (de) 1997-10-20 1999-04-22 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Substituierte Isochinolin-2-Carbonsäureamide, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
FR2779963A1 (fr) 1998-06-22 1999-12-24 Centre Nat Rech Scient Utilisation d'un compose possedant une affinite pour le recepteur mitochondrial des benzodiazepines en therapie du cancer
IT1302677B1 (it) 1998-10-15 2000-09-29 Zambon Spa Derivati benzazinici inibitori della fosfodiesterasi 4
AU4802500A (en) 1999-04-26 2000-11-10 Neurogen Corporation 2-aminoquinolinecarboxamides: neurokinin receptor ligands
IT1320162B1 (it) 2000-02-09 2003-11-18 Rotta Research Lab Derivati della tirosina ad attivita' anti leucotrienica, procedimentoper la loro preparazione e loro uso farmaceutico.
US7622503B2 (en) 2000-08-24 2009-11-24 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
FI20002044A0 (fi) 2000-09-15 2000-09-15 Orion Yhtymae Oyj Comt-entsyymiä estäviä naftaleenijohdannaisia
DE10110750A1 (de) 2001-03-07 2002-09-12 Bayer Ag Neuartige Aminodicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
US20040146964A1 (en) 2001-03-21 2004-07-29 Maxwell Patrick Henry Assays, methods and means
WO2002101073A2 (en) 2001-06-13 2002-12-19 Genesoft Pharmaceuticals, Inc. Aryl-benzimidazole compounds having antiinfective activity
JP2005505507A (ja) 2001-06-13 2005-02-24 ジーンソフト ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 抗感染活性を有するイソキノリン化合物
US7105544B2 (en) * 2001-07-05 2006-09-12 Synaptic Pharmaceutical Corporation Substituted alkyl amido piperidines
US6841566B2 (en) 2001-07-20 2005-01-11 Boehringer Ingelheim, Ltd. Viral polymerase inhibitors
EP2335700A1 (en) 2001-07-25 2011-06-22 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C virus polymerase inhibitors with a heterobicylic structure
US7294457B2 (en) 2001-08-07 2007-11-13 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Direct binding assay for identifying inhibitors of HCV polymerase
US6930086B2 (en) 2001-09-25 2005-08-16 Hoffmann-La Roche Inc. Diglycosylated erythropoietin
US6762318B2 (en) 2001-12-03 2004-07-13 Novo Nordisk A/S Glucagon antagonists
EP2324834B1 (en) 2001-12-06 2019-05-08 Fibrogen, Inc. Methods of Increasing Endogenous Erythropoietin (EPO)
GB0206711D0 (en) 2002-03-21 2002-05-01 Isis Innovation HIF Inhibitor
US7618940B2 (en) 2002-12-06 2009-11-17 Fibrogen, Inc. Fat regulation
US8124582B2 (en) 2002-12-06 2012-02-28 Fibrogen, Inc. Treatment of diabetes
US8614204B2 (en) 2003-06-06 2013-12-24 Fibrogen, Inc. Enhanced erythropoiesis and iron metabolism
US20060251638A1 (en) 2003-06-06 2006-11-09 Volkmar Guenzler-Pukall Cytoprotection through the use of hif hydroxylase inhibitors
EP1646611A1 (en) 2003-07-15 2006-04-19 Merck & Co., Inc. Hydroxypyridine cgrp receptor antagonists
CA2531796A1 (en) 2003-08-08 2005-02-17 Transtech Pharma, Inc. Aryl and heteroaryl compounds, compositions, and methods of use
US7208601B2 (en) 2003-08-08 2007-04-24 Mjalli Adnan M M Aryl and heteroaryl compounds, compositions, and methods of use
WO2005118836A2 (en) 2004-05-28 2005-12-15 Fibrogen, Inc. Hif prolyl hydroxylase activity assay
US7248053B2 (en) 2004-07-15 2007-07-24 Powerprecise Solutions, Inc. One time operating state detecting method and apparatus
EP1676834A1 (en) 2004-12-30 2006-07-05 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Fused bicyclic carboxamide derivates for use as CXCR2 inhibitors in the treatment of inflammation
ATE513833T1 (de) * 2005-03-02 2011-07-15 Fibrogen Inc Thienopyridinverbindungen und verfahren zu ihrer verwendung
WO2006133391A2 (en) 2005-06-06 2006-12-14 Fibrogen, Inc. Improved treatment for anemia using a hif-alpha stabilising agent
US8530404B2 (en) 2005-06-15 2013-09-10 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of cancer
EP2476669A1 (en) * 2006-01-27 2012-07-18 Fibrogen, Inc. Cyanoisoquinoline compounds and methods of use thereof
JP5111491B2 (ja) 2006-04-04 2013-01-09 フィブロジェン, インコーポレイテッド ピロロ−およびピラゾロ−ピリミジン化合物、およびそれらの使用方法
US7713986B2 (en) 2006-06-15 2010-05-11 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of chemotherapy-induced anemia
US20070293575A1 (en) 2006-06-15 2007-12-20 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of cancer-related anemia

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004108681A1 (en) * 2003-06-06 2004-12-16 Fibrogen, Inc. Nitrogen-containing heteroaryl compounds and their use in increasing endogenous erythropoietin

Also Published As

Publication number Publication date
BRPI0707302A2 (pt) 2011-05-03
US20110212959A1 (en) 2011-09-01
WO2007090068A2 (en) 2007-08-09
AU2007211077A1 (en) 2007-08-09
AU2007211077B2 (en) 2012-09-20
KR20080101938A (ko) 2008-11-21
IL193047A (en) 2014-01-30
CN102351791A (zh) 2012-02-15
NO20083658L (no) 2008-10-27
US20070298104A1 (en) 2007-12-27
DK2044028T3 (da) 2012-08-20
JP5161793B2 (ja) 2013-03-13
CA2640435C (en) 2011-11-01
CN103382216B (zh) 2016-04-20
WO2007090068A3 (en) 2008-09-18
CN102351791B (zh) 2014-10-29
IL193047A0 (en) 2009-02-11
US8759373B2 (en) 2014-06-24
RU2457204C2 (ru) 2012-07-27
BRPI0707302B1 (pt) 2020-03-10
CN101374815A (zh) 2009-02-25
MX2008009581A (es) 2009-01-07
RU2008134664A (ru) 2010-03-10
US7928120B2 (en) 2011-04-19
AU2007211077A8 (en) 2008-09-04
JP2009524694A (ja) 2009-07-02
US20150031696A1 (en) 2015-01-29
US20120178755A1 (en) 2012-07-12
EP2476669A1 (en) 2012-07-18
EP2044028A2 (en) 2009-04-08
US20160009653A1 (en) 2016-01-14
BRPI0707302B8 (pt) 2021-05-25
CN101374815B (zh) 2013-07-17
EP2044028B1 (en) 2012-05-16
CN103382216A (zh) 2013-11-06
CA2640435A1 (en) 2007-08-09
HK1129114A1 (en) 2009-11-20
KR20140089446A (ko) 2014-07-14
US9174976B2 (en) 2015-11-03
ZA200806752B (en) 2009-10-28
KR101446499B1 (ko) 2014-10-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO342678B1 (no) Cyanoisokinolinforbindelser, farmasøytisk sammensetning som inneholder slike og anvendelse derav
US9149476B2 (en) Thiochromene derivatives as HIF hydroxylase inhibitors
US9387200B2 (en) Isothiazole-pyridine derivatives as modulators of HIF (hypoxia inducible factor) activity
EP2670750B1 (en) Naphthyridine derivatives as inhibitors of hypoxia inducible factor
US7696223B2 (en) Pyrrolo- and Thiazolo-pyridine compounds, and methods of use thereof
EP2334682B1 (en) Pyrrolo [ 1, 2 -b] pyridazine derivatives and their use as hif modulators