BRPI0707302A2 - compostos de cianoisoquinolina e métodos de uso dos mesmos - Google Patents

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Lee A Flippin
Min Wu
Eric D Turtle
Wen-Bin Ho
Shaojiang Deng
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Abstract

COMPOSTOS DE CIANOISOQUINOLINA E MéTODOS DE USO DOS MESMOS. A presente invenção relaciona-se a compostos de cianoisoquinolina adequados para uso no tratamento de condições mediadas por fator induzível por hipóxia e/ou associadas com eritropoietina. Os compostos de cianoisoquinolina da invenção têm a seguinte estrutura: Fórmula (I).

Description

COMPOSTOS DE CIANOISOQUINOLINA E MÉTODOS DE USO DOS MESMOSReferência Cruzada A Pedidos Relacionados
Este pedido reivindica o benefício de prioridade sob35 U.S. C. § 119 (e) de Pedido Provisório United States N0de série 60/762.780, depositado em 27 de janeiro de 2006,que é aqui incorporado em sua totalidade por referência.
Fundamento da invenção
Campo da Invenção
A presente invenção relaciona-se a métodos e compostoscapazes de diminuir a atividade da enzima hidrolase defator induzível por hipóxia (HIF), assim aumentando aestabilidade e/ou atividade de HIF. Em particular, oscompostos aumentam a eritropoietina endógena, ex vivo e invivo.
Estado da Técnica
Fator induzível por hipóxia (HIF) é um ativador datranscrição de hélice-alça-hélice básica (bHLH) PAS(Per/Arnt/Sim) que medeia mudanças na expressão de gene emresposta a mudanças na concentração de oxigênio celular.HIF é um heterodímero que contém uma α-subunidade reguladapor oxigênio (HIFa) , e uma J3-subunidade constitutivamenteexpressa (HIFp), também conhecida como transportadornuclear de receptor de aril hidrocarboneto (ARNT). Emcélulas oxigenadas (normóxicas), subunidades HIFa sãorapidamente degradadas por um mecanismo que envolveubiquitinação pelo complexo de E3 ligase de supressor detumor de von Hippel-Lindau (pVHL). Sob condições hipóxicas,HIFa não é degradado, e um complexo ativo HIFa/J3 se acumulano núcleo, e ativa a expressão de vários genes incluindoenzimas glicolíticas, transportadores de glicose,eritropoietina (EPO), e fator de crescimento vascularendotelial (VEGF) (Jiang, e cols., (1996) J. Biol. Chem.,271:17771-17778; lliopoulus, e cols., (1996) Proc. Natl.Acad. Sei. USA, 93:10595-10599; Maxwell, e cols., (1999),Nature, 399:271-275; Sutter, e cols., (2000) Proc. Natl.Acad. Sei. USA, 97:4748-4753; Cockman, e cols., (2000) J.Biol. Chem., 275:25733-25741; e Tanimoto, e cols., (2000)EMBO. J. 19:4298-4309).
Níveis de HIFa são elevados na maioria das células emresposta a hipóxia, e HIFa é induzido in vivo quandoanimais são submetidos a anemia ou hipóxia. Os níveis deHIFa se elevam em poucas horas após o surgimento dehipóxia, e induzem numerosos processos celulares benéficosque incluem efeitos citoprotetores, eritropoiese aumentada,e adaptação fisiológica a estados isquêmicos ou hipóxicos.A indução de HIFa é potencialmente benéfica em condiçõescomo isquemia miocárdica aguda e infarto precoce,hipertensão pulmonar, inflamação e anemia.
Os níveis de HIFa são também aumentados por inúmerosfatores que imitam hipóxia, incluindo quelantes de ferrocomo desferrioxamina (DFO), e sais de metal divalente comoCoCl2. Adicionalmente, compostos originalmenteidentificados como inibidores de enzimas de pró-colãgenoprolil hidroxilase estabilizam HIFa. Exemplos de taiscompostos podem ser encontrados, por exemplo, em Majamaa ecols. (1984) Eur J Biochem 138:239-245; Majamaa e cols.(1985) Biochem J 229:127-133; Kivirikko and Myllyharju(1998) Matrix Biol 16:357-368; Bickel e cols. (1998)Hepatology 28:404-411; Friedman e cols. (2000) Proc Natl30 Acad Sci USA 97:4736-4741; Franklin (1991) Biochem SocTrans 19:812-815; e Franklin e cols. (2001) Biochem J353:333-338. Adicionalmente, compostos que estabilizam HIFaforam descritos, por exemplo, nas PublicaçõesInternacionais Nos. WO 03/049686, WO 02/074981, WO03/080566, WO 2004/108681 e WO 2006/094292.
Permanece uma necessidade por compostos que sejameficazes na prevenção de distúrbios associados a HIF,incluindo anemia e dano tecidual causado por isquemia queocorre devido a, por exemplo, aterosclerose, diabetes edistúrbios pulmonares como embolia pulmonar e outros.Assim, compostos que modulam HIF, que podem ser usados paratratar e evitar distúrbios associados a HIF que incluemcondições que envolvem anemia, isquemia, e hipóxia, sãoaqui fornecidos.
Sumário da invenção
A presente invenção é direcionada a novos compostos emétodos de uso dos compostos para modular a hidroxilação deHIFa e/ou aumentar a eritropoietina endógena (EPO). Emparticular, esta invenção é direcionada a compostos deisoquinolina com um grupo ciano na posição C-1, compostosesses que aumentam a produção de EPO endógena (veja, porexemplo, Tabela 1).
Em um aspecto, a invenção fornece compostos de fórmula I
<formula>formula see original document page 19</formula>em que:
R é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio,alquil e alquil substituído;
R1, R2, R3 e R4 são independentemente selecionados dogrupo que consiste em hidrogênio, halo, ciano, hidroxil,alquil, alquil substituído, aril, aril substituído,heteroaril, heteroaril substituído, amino, aminosubstituído, -OR7, -SR7, -SOR7 e -SO2R7, em que R7 éselecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, cicloalquil, cicloalquil substituído, aril,aril substituído, heteroaril e heteroaril substituído; e
R5 e R6 são independentemente selecionados do grupoque consiste em hidrogênio ou Ci_3 alquil;
ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.
Em uma modalidade, a invenção é direcionada acompostos de fórmula Ia:
<formula>formula see original document page 5</formula>
em que :
q é 0 ou 1;
R21, R22, R23 e R24 são independentemente selecionados dogrupo que consiste em hidrogênio, halo, hidroxi, alquil,alquil substituído, haloalquil, alcoxi, alcoxi substituído,aril, aril substituído, ariloxi, ariloxi substituído,heteroaril, heteroaril substituído, heteroariloxi,heteroariloxi substituído, heterociclil, heterociclilsubstituído, heterocicliloxi, amino e amino substituído, emque pelo menos dois de R21, R22, R23 e R24 são hidrogênio; e
R25 é selecionado de hidrogênio ou metil;
ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.
Em um outro aspecto, a invenção fornece compostos defórmula II
<formula>formula see original document page 6</formula>
em que:
R31, R32, R33 e R34 são independentemente selecionadosdo grupo que consiste em hidrogênio, halo, hidroxil,alquil, alquil substituído, aril, aril substituído,heteroaril, heteroaril substituído, amino, aminosubstituído, -OR37, -SR37, -SOR37 e -SO2R37, em que R37 éselecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, cicloalquil, cicloalquil substituído, aril,aril substituído, heteroaril e heteroaril substituído; e
R35 é hidrogênio ou metil;
ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.
Em uma modalidade, a invenção é direcionada acompostos de fórmula II, em que
R31, R32, R33 e R34 são independentemente selecionadosdo grupo que consiste em hidrogênio, halo, hidroxi, alquil,alquil substituído, haloalquil, alcoxi, alcoxi substituído,aril, aril substituído, ariloxi, ariloxi substituído,heteroariloxi, heteroariloxi substituído, cicloariloxi,cicloariloxi substituído, araino e amino substituído; e
R35 é hidrogênio ou metil;ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.
Em algumas modalidades, a invenção fornece compostosde fórmula II em que pelo menos três de R31, R32, R33 e R34são hidrogênio.
A invenção também fornece composições farmacêuticasque compreendem um ou mais compostos de fórmula I e/ou II,e um excipiente farmaceuticamente aceitável. Em algumasmodalidades, a composição também compreende pelo menos umagente terapêutico adicional. Em algumas modalidades, oagente é selecionado do grupo que consiste em vitamina B12,sulfato ferroso, ácido fólico e/ou eritropoietina ou umaproteína de estímulo da eritropoiese (ESP).
A invenção é também direcionada a métodos de inibiçãoda atividade de pelo menos uma HIF hidroxilase enzima, ométodo compreendendo o contato da HIF hidroxilase enzima euma quantidade inibidora eficaz de um composto da invenção.Em uma modalidade, a HIF hidroxilase enzima é umaasparaginil hidroxilase como Fator de inibição de HIF(FIH). Em uma outra modalidade, a HIF hidroxilase enzima éuma prolil hidroxilase que inclui, sem limitação, uma HIFprolil hidroxilase selecionada do grupo que consiste emEGLNl , EGLN2, ou EGLN3 humana, ou uma enzima ortóloga deuma outra espécie.
A invenção é também direcionada a métodos detratamento, pré-tratamento ou retardo do surgimento de umacondição associada a ou mediada pelo menos em parte porfator induzível por hipóxia (HIF), o método compreendendo aadministração a um paciente de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de um composto de fórmula I e/ou IIou uma composição farmacêutica produzida a partir deles. Emuma modalidade, a condição associada a ou mediada por HIF éassociada a dano tecidual com isquemia ou hipóxia. Em umaspecto, a isquemia é um evento isquêmico agudo que inclui,mas não se limita a, um evento isquêmico agudo selecionadodo grupo que consiste em infarto do miocárdio, emboliapulmonar, infarto intestinal, AVC isquêmico, e danoisquêmico de reperfusão renal. Em um outro aspecto, aisquemia é um evento isquêmico crônico que inclui, mas nãose limita a, um evento isquêmico crônico selecionado dogrupo que consiste em cirrose cardíaca, degeneraçãomacular, insuficiência renal crônica e insuficiênciacardíaca congestiva.
A invenção é também direcionada a métodos detratamento, pré-tratamento ou retardo do surgimento de umacondição associada a ou mediada pelo menos em parte poreritropoietina (EPO), o método compreendendo aadministração a um paciente de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de um composto de fórmula I e/ou IIou uma composição farmacêutica produzida a partir deles.
A invenção é também direcionada a métodos detratamento, pré-tratamento ou retardo do surgimento deanemia, o método compreendendo a administração a umpaciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de umcomposto de fórmula I e/ou II ou uma composiçãofarmacêutica produzida a partir deles.
Descrição detalhada da invenção
Antes de as presentes composições e métodos seremdescritas, deve-se compreender que a invenção não élimitada às metodologias, protocolos, linhas de células,ensaios e reagentes particulares descritos, uma vez queesses podem variar. É também compreendido que aterminologia aqui usada deve descrever modalidadesparticulares da presente invenção, e não deve, de modoalgum, limitar o escopo da presente invenção comoapresentado nas reivindicações em apêndice.
A. Compostos da invenção
A presente invenção fornece compostos representadospela fórmula I:
<formula>formula see original document page 9</formula>
em que: I
R é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio,alquil e alquil substituído;
R1, R2, R3 e R4 são independentemente selecionados dogrupo que consiste em hidrogênio, halo, ciano, hidroxil,alquil, alquil substituído, aril, aril substituído,heteroaril, heteroaril substituído, amino, aminosubstituído, -OR7, -SR7, -SOR7 e -SO2R7, em que R7 éselecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, cicloalquil, cicloalquil substituído, aril,aril substituído, heteroaril e heteroaril substituído; eR5 e R6 são independentemente selecionados do grupoque consiste em hidrogênio ou C1^ alquil;
ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.
Em algumas modalidades, a invenção fornece compostosde fórmula I em que pelo menos dois de R1, R2, R3 e R4 sãohidrogênio.
Em algumas modalidades, a invenção fornece compostosde fórmula I em que o nitrogênio no anel de isoquinolina éN-óxido.
Em algumas modalidades, R1, R2, R3 e R4 sãoindependentemente selecionados do grupo que consiste emhidrogênio, hidroxil, halo, alquil substituído incluindohaloalquil e trif luormetil, aril, -OR7, -SR7 e -SO2R7, emque R7 é selecionado do grupo que consiste em alquil,alquil substituído, cicloalquil, aril, aril substituído,heteroaril e heteroaril substituído. Em modalidadesparticulares, R1, R2, R3 e R4 são selecionados do grupo queconsiste em hidrogênio, hidroxil, fenil, cloro,trifluormetil, benzil, benziloxi, metoxi, butoxi,isopropoxi, fenoxi, 4-fluorfenoxi, 2-metoxifenoxi, 3-metoxifenoxi, 4-metoxifenoxi, 2,6-dimetilfenoxi, 2-etil-6-metilfenoxi, 2,4,6-trimetilfenoxi, 4-cloro-2,6-
dimetilfenoxi, 4-propoxifenoxi, 2,3-dihidro-benzofuran-5 -iloxi, 2-metilbenzotiazol-6-iloxi, 2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi, 2-morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi,2-metil-benzooxazol-6-iloxi, benzo[1,3]dioxo-5-iloxi,fenilsulfanil, fenilsulfonil e ciclohexiloxi.
Em algumas modalidades, R1, R2, R3 e Rselecionados de hidrogênio, halo, haloalquil, alquil,alcoxi, ariloxi e ariloxi substituído. Em modalidadesparticulares, R1, R2, R3 e R4 são selecionados dehidrogênio, cloro, metoxi, trifluormetil, fenoxi e 4-fluorfenoxi.
Em algumas modalidades, R1 e R2 são hidrogênio. Emoutras modalidades, R3 e R4 são hidrogênio. Em outrasmodalidades, R2 e R3 são hidrogênio. Em outras modalidades,R1 e R4 são hidrogênio. Em outras modalidades, R1, R2, R3 eR4 são hidrogênio.
Ainda em outras modalidades, R2, R3 e R4 sãohidrogênio. Em modalidades particulares em que R2, R3 e R4são hidrogênio, R1 é fenil, fenoxi ou 4 -fluorfenoxi.
Ainda em outras modalidades, R1, R2, e R4 sãohidrogênio. Em algumas modalidades, R3 é selecionado dogrupo que consiste em hidroxil, halo, haloalquil, alquilsubstituído, -OR7, -SR7, -SOR7 e -SO2R7, em que R7 éselecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, aril, aril substituído, heteroaril eheteroaril substituído. Em modalidades particulares, R3 éselecionado do grupo que consiste em trifluormetil, cloro,hidroxil, benzil, metoxi, isopropoxi, butoxi, benziloxi,fenoxi, 4-flúorfenoxi, 2,6-dimetilfenoxi, 4-metoxifenoxi,2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi, benzo[1,3]dioxo-5 -iloxie f enilsulf anil. Em certas modalidades em que R1, R2 e R4são hidrogênio, R3 é fenoxi, 4-fluorfenoxi, trifluormetilou cloro.
Ainda em outras modalidades, R1, R2 e R3 sãohidrogênio. Em algumas modalidades, R4 é selecionado dogrupo que consiste em fenil, fenoxi, 2-metoxifenoxi, 3-metoxifenoxi, 4-metoxifenoxi e 4-fluorfenoxi. Em certasmodalidades em que R1, R2 e R3 são hidrogênio, R4 é fenoxiou 4 - flúorfenoxi.
Em algumas modalidades, R1, R3 e R4 são hidrogênio. Emalgumas modalidades, R2 é selecionado do grupo que consisteem halo, ciano, hidroxil, alquil, alquil substituído, aril,aril substituído, heteroaril, heteroaril substituído,amino, amino substituído, -OR7, -SR7, -SOR7 e -SO2R7, em queR7 é selecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, cicloalquil, cicloalquil substituído, aril,aril substituído, heteroaril e heteroaril substituído. Emmodalidades particulares, R2 é selecionado do grupo queconsiste em halo, -OR7, -SR7, -SOR7 e -SO2R7, em que R7 éselecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, cicloalquil, aril, aril substituído,heteroaril e heteroaril substituído. Em certas modalidades,R2 é selecionado do grupo que consiste em cloro, metoxi,isopropoxi, fenoxi, 4 -fluorfenoxi, 4-metoxifenoxi, 2,6-dimetilfenoxi, 2-etil-6- metilfenoxi, 2,4,6-trimetilfenoxi,4-cloro-2,6-dimetilfenoxi, 4-propoxifenoxi, 2,3-dihidro-benzofuran-5-iloxi, 2-metil-benzotiazol-6-iloxi, 2-dimetilaminobenzooxazol-5-iloxi, 2-morfolin-4-il-benzot iazol - 6 -iIoxi, 2-metil-benzooxazol-6-iIoxi,benzo[1,3]dioxo-5-iloxi, fenilsulfonil, fenilsulfanil eciclohexiloxi. Em certas modalidades em que, R1, R3 e R4 sãohidrogênio, R2 é metoxi, fenoxi ou 4 - fluorfenoxi.
Em algumas modalidades, R5 é hidrogênio. Em outrasmodalidades, R5 é metil.
Em algumas modalidades, R6 é hidrogênio. Em outrasmodalidades, R6 é metil.
Em algumas modalidades, R é hidrogênio. Em outrasmodalidades, R é metil.
Em um aspecto, a invenção fornece compostos de fórmulaII:
<formula>formula see original document page 13</formula>
em que
R31, R32, R33 e R34 são independentemente selecionadosdo grupo que consiste em hidrogênio, ciano, hidroxil, halo,alquil, alquil substituído, aril, aril substituído,heteroaril, heteroaril substituído, amino, aminosubstituído, -OR37, -SR37, -SOR37 e -SO2R37, em que R37 éselecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, cicloalquil, cicloalquil substituído, aril,aril substituído, heteroaril e heteroaril substituído; e
R35 é hidrogênio ou metil;
ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.
Em algumas modalidades, a invenção fornece compostosde fórmula II em que pelo menos três de R31, R32, R33 e R34são hidrogênio.
Em uma modalidade, a invenção é direcionada acompostos de fórmula II, em que R31, R32, R33 e R34 sãoindependentemente selecionados do grupo que consiste emhidrogênio, halo, hidroxi, alquil, alquil substituído,haloalquil, alcoxi, alcoxi substituído, aril, arilsubstituído, ariloxi, ariloxi substituído, heteroariloxi,heteroariloxi substituído, cicloalcoxi, cicloalcoxisubstituído, amino e amino substituído; eR35 é hidrogênio ou metil;
ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.
Em uma outra modalidade, a invenção é direcionada acompostos de fórmula II, em que R31, R32, R33 e R34 sãoindependentemente selecionados do grupo que · consiste emhidrogênio, alquil substituído, aril, ariloxi e ariloxisubstituído; e
R35 é hidrogênio;ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.
Compostos da invenção incluem, sem limitação, osseguintes compostos: ácido { [l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido 2-(S)-[(l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-7-fenoxiisoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido 2-(S) - [ (l-ciano-4-hidroxi-7-fenoxiisoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico, ácido 2-(R) -[(l-ciano-4-hidroxi-7-fenoxiisoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico, ácido {[l-ciano-7-(4-fluorfenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido {[1-ciano-4-hidroxi-7-(trifluormetil)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido {[l-ciano-4-hidroxi-7-cloro-isoquinolina-3- carbonil]-amino}-acético, ácido { [1-ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-8-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido [ (l-ciano-4-hidroxi-6-metoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido [(1-ciano-4-hidroxi-6-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido { [l-ciano-6-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3 -carbonil]-amino}-acético, ácido { [1-ciano-4-hidroxi-6-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil] -amino}-acético, ácido [(l-ciano-4-hidroxi-6-fenilsulfanil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido [(l-ciano-4-hidroxi-7-fenilsulfanil-isoquinolina-3-carbonil)-amino] -acético, ácido {[l-ciano-6-(2,6-dimetilfenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino]-acético, ácido [(l-ciano-4-hidroxi-5-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-8-(4-metoxifenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido {[l-ciano-4-hidroxi-8-(3-metoxifenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-8-(2-metoxifenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido [(7-benzil-l-ciano-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido { [1-ciano-5-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil] -amino}-acético, ácido { [l-ciano-7-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido { [1-ciano-6-(2-etil-6-metil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido {[l-ciano-4-hidroxi-6-(2,4, 6-trimetil-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido { [6-(4-cloro-2,6-dimetilfenoxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido {[1-ciano-4-hidroxi-7-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido [(l-ciano-6- ciclohexiloxi-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido[(6-benzenossulfonil-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido {[l-ciano-4-hidroxi-6-(4-propoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido { [7-(benzo [1,3]dioxol-5-iloxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido {[6(benzo[1,3]dioxol-5 -iloxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido { [l-ciano-6-(2,3-dihidrobenzofuran-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil] -amino}-acético, metil éster de ácido [ (l-ciano-4-metoxi-8fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido [(1ciano-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino] -acético, ácido (S)-2-[(l-ciano-4-hidroxi-8-fenoxiisoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico, ácido (R)-2[(l-ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico, ácido { [l-ciano-4-hidroxi-6-(2-metilbenzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido {[l-ciano-6-(2-dimetilamino-benzooxazol-5iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido { [l-ciano-7-(2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4hidroxiisoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido {[1ciano-4-hidroxi-6-(2-morfolin-4-ilbenzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido {[l-ciano-4hidroxi-6-(2-metil-benzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido [(6-cloro-lciano-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido [(7-butoxil-ciano-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-6,7-difenoxiisoquinolina-3carbonil)-amino]-acético, ácido [(l-ciano-4-hidroxi-7metoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido [(1ciano-4-hidroxi-7-isopropoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido [ (l-ciano-4-hidroxi-6-isopropoxiisoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético, ácido [(l-ciano-4hidroxi-5-fenil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-8-fenil-isoquinolina-3-carbonil)amino]-acético, ácido [(7-benziloxi-1-ciano-4-hidroxi-isoquinolinc-3-carbonil)-amino]-acético e ácido [ (1-ciano-4 , 7-dihidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético.
Estará claro para a pessoa habilitada que várias dasmodalidades acima descritas não são mutuamente exclusivas,e podem ser combinadas para fornecer modalidadesespecíficas adicionais da invenção. Tais modalidadesespecíficas são explicitamente contempladas nestaespecificação. De modo similar, as reivindicaçõesdependentes podem ser feitas dependentes de qualquerreivindicação anterior, desde que as modalidades descritasnão sejam mutuamente exclusivas.
B. Definições
Deve-se observar que, como aqui usado e nasreivindicações em apêndice, as formas singulares "um","uma" e "o/a" incluem referências no plural, a menos que ocontexto dite claramente em contrário.
A menos que definido de outra forma, todos os termostécnicos e científicos aqui usados têm o mesmo significadoque o comumente compreendido por pessoa de habilidade comumna técnica à qual esta invenção pertence. Embora váriosmétodos e materiais similares ou equivalentes àqueles aquidescritos possam ser usados na prática ou teste da presenteinvenção, os métodos, dispositivos e materiais preferidossão agora descritos. Todas as publicações aqui citadas sãoaqui incorporadas em sua totalidade por referência para osobjetivos de descrição e revelação das metodologias,reagentes, e ferramentas relatados nas publicações quepodem ser usadas junto com a invenção. Nada aqui deve serinterpretado como uma afirmação de que a invenção não édesignada para antecipar tais revelações em virtude deinvenção prévia.
A prática da presente invenção empregará, a menos queindicado de outra forma, métodos convencionais de química,bioquímica, biologia molecular, biologia celular, genética,imunologia e farmacologia, dentro da habilidade da técnica.Tais técnicas são explicadas completamente na literatura(veja, por exemplo, Gennaro, A.R., ed. (1990) Remington1SPharmaceutical Sciences, 18a ed., Mack Publishing Co.;Colowick, S. e cols., eds., Methods in Enzymology, AcademicPress, Inc.; D. M. Weir, and. C.C. Blackwell, eds. (1986)Handbook of Experimental Immunology, Vols. I-IV (BlackwellScientific Publicações); Maniatis, T. e cols., eds. (1989)Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd edition, Vols.I-III, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Ausubel, F. M.e cols., eds. (1999) Short Protocols in Molecular Biology,4a edition, John Wiley & Sons; Ream e cols., eds. (1998)Molecular Biology Techniques: An Intensive LaboratoryCourse, Academic Press; Newton & Graham eds., 1997 PCR(Introduction to Biotechniques Series), 2a ed. (SpringerVerlag).
O termo "anemia" como aqui usado refere-se a qualqueranormalidade na hemoglobina ou eritrócitos que leva aníveis reduzidos de oxigênio no sangue. Anemia pode serassociada com produção, processamento ou performanceanormal de eritrócitos e/ou hemoglobina. O termo anemiarefere-se a qualquer redução no número de hemácias e/ounível de hemoglobina no sangue em relação aos níveissangüíneos normais.
Anemia pode surgir devido a condições como doençarenal aguda ou crônica, infecções, inflamação, câncer,irradiação, toxinas, diabetes e cirurgia. Infecções podemser devido a, por exemplo, vírus, bactérias e/ou parasitasetc. Inflamação pode ser por infecção ou distúrbiosautoimunes, como artrite reumatóide etc. A anemia tambémpode ser associada com perda sangüínea devido, por exemplo,a úlcera gástrica, úlcera duodenal, hemorróida, câncergástrico ou do intestino grosso, trauma, ferimento,procedimentos cirúrgicos etc. Anemia é também associada comterapia por radiação, quimioterapia e diálise renal. Anemiaé também associada a pacientes infectados com HIV que sesubmetem a tratamento com azidotimidina (zidovudina) ououtros inibidores da transcriptase reversa, e podem sedesenvolver em pacientes com câncer que se submetem aquimioterapia, por exemplo, com cisplatina cíclica ouquimioterápicos que não contêm cisplatina. Anemia aplásicae síndromes mielodisplásicas são doenças associadas comfalência da medula óssea que resulta na produção diminuídade eritrócitos. Além disso, anemia pode resultar dehemoglobina ou eritrócitos defeituosos ou anormais, como emdistúrbios que incluem anemia microcítica, anemiahipocrômica etc. A anemia pode resultar de distúrbios notransporte, processamento e utilização de ferro; veja, porexemplo, anemia sideroblástica etc.
Os termos "distúrbios", "doenças" e "condições" sãousados inclusivamente e referem-se a qualquer condição quedesvie do normal.
Os termos "condições anêmicas" e "distúrbios anêmicos"referem-se a qualquer condição, doença ou distúrbioassociado com anemia. Tais distúrbios incluem, mas não sãolimitados àqueles distúrbios acima listados. Distúrbiosanêmicos também incluem, mas não são limitados a, anemiaaplásica, anemia hemolítica autoimune, transplante demedula óssea, sindrome de Churg-Strauss, anemia de DiamondBlackfan, anemia de Fanconi, sindrome de Felty, doença deenxerto versus hospedeiro, transplante de célula troncohematopoiética, sindrome urêmica hemolítica, sindromemielodisplásica, hemoglobinúria paroxismal noturna,osteomielofibrose, pancitopenia, aplasia de hemácia pura,púrpura de Schoenlein-Henoch, anemia sideroblástica, anemiarefratária com excesso de blastos, artrite reumatóide,sindrome de Shwachman, doença falciforme, talassemia maior,talassemia menor, púrpura trombocitopênica etc.
0 termo "condições associadas a eritropoietina" éusado inclusivamente e refere-se a qualquer condiçãoassociada com modulação de eritropoietina abaixo do normal,anormal ou inadequada. As condições associadas aeritropoietina incluem qualquer condição em que um aumentono nível de EPO deve fornecer benefício terapêutico. Níveisde eritropoietina associados com tais condições podem serdeterminados por qualquer medida aceita e utilizada poraqueles de habilidade na técnica. As condições associadas aeritropoietina incluem condições anêmicas como aquelasacima descritas.
As condições associadas a eritropoietina tambémincluem distúrbios e/ou danos neurológicos, incluindo casosde AVC, trauma, epilepsia, doença neurodegenerativa eoutras, em que a eritropoietina pode fornecer um efeitoneuroprotetor. Doenças neurodegenerativas contempladas pelainvenção incluem doença de Alzheimer, doença de Parkinson,doença de Huntington e outras.
O termo "eritropoietina" refere-se a qualquereritropoietina recombinante ou de ocorrência natural ou ESPque inclui, por exemplo, eritropoietina humana (AcessoGenBank No. AAA52400; Lin e cols. (1985) Proc Nat' 1 Acad.Sci USA 82:7580-7584), eritropoietina recombinante humanaEPOETIN (Amgen, Inc., Thousand Oaks CA), eritropoietinarecombinante humana ARANESP (Amgen), eritropoietinarecombinante humana PROCRIT (Ortho Biotech Products, L.P.,Raritan NJ) , eritropoietina glicosilada como aquelasdescritas na Patente US No. 6.930.086 (que é incorporadapor referência) etc.
O termo "HIFa" refere-se à subunidade alfa de proteínade fator induzível por hipóxia. HIFa pode ser qualquerproteína humana ou de outro mamífero, ou fragmento desta,incluindo HIF-Ia humano (Acesso Genbank No. Q16665), HIF-2a(Acesso Genbank No. AAB414 95) e HIF-3a (Acesso Genbank No.AAD22668); HIF-Ia de murídeo (Acesso Genbank No. Q61221),HIF-2a (Acesso Genbank No. BAA20130 e AAB41496) e HIF-3a(Acesso Genbank No. AAC72734); HIF-Ia de rato (AcessoGenbank No. CAA70701), HIF-2a (Acesso Genbank No. CAB96612)e HIF-3a (Acesso Genbank No. CAB96611); e HIF-Ia bovino(Acesso Genbank No. BAA78675). HIFa também pode serqualquer proteína não derivada de mamífero ou fragmentodesta, incluindo HIF-Ia de Xenopus laevis (Acesso GenbankNo. CAB96628), HIF-Ia Drosophila melanogaster (AcessoGenbank No. JC4851) e HIF-Ia de galinha (Acesso Genbank No.BAA34234) . Seqüências de gene de HIFa também podem serobtidas por técnicas de clonagem rotineiras, por exemplo,pelo uso de toda ou parte de uma seqüência de gene de HIFaacima descrita como um marcador para recuperar e determinara seqüência de um gene de HIFa em uma outra espécie.
Um fragmento de HIFa inclui qualquer fragmento queretém pelo menos uma característica funcional ou estruturalde HIFa. Fragmentos de HIFa incluem, por exemplo, asregiões definidas por HIF-Ia humano de aminoácidos 4 01 a603 (Huang e cols., supra), aminoácidos 531 a 575 (Jiang ecols (1997) J Biol. Chem 272:19253-19260), aminoácidos 556a 575 (Tanimoto e cols., supra), aminoácidos 557 a 571(Srinivas e cols. (1999) Biochem Biophys Res. Commun260:557-561) e aminoácidos 556 a 575 (Ivan and Kaelin(2001) Science 292:464-468). Além disso, fragmentos de HIFaincluem qualquer fragmento que contém pelo menos umaocorrência do motivo LXXLAP (veja Acesso Genbank No.Q16665).
0 termo "fragmento" pode se referir a qualquer porçãode uma seqüência que retém pelo menos uma característicaestrutural ou funcional da proteína. Fragmentos são dequalquer comprimento, mas preferivelmente são de cerca de 5a 100 aminoácidos de comprimento, particularmente de cercade 15 a 50 aminoácidos de comprimento, e maisparticularmente de cerca de 20 aminoácidos de comprimento.Quando "seqüência de aminoácido" é usada para referir-se àseqüência de polipeptídeos de uma molécula de proteína deocorrência natural, "seqüência de aminoácidos" e termossemelhantes não devem limitar a seqüência de aminoácidos àseqüência nativa completa associada com a molécula deproteína citada.
0 termo "proteínas relacionadas", como aqui usado, porexemplo, para referir-se a proteínas relacionadas a HIFaprolil hidroxilase, engloba outras enzimas de 2-oxoglutarato dioxigenase, especialmente aqueles membros dafamília que requerem de modo similar Fe2+, 2-oxoglutarato eoxigênio para manter a atividade de hidroxilase. Taisenzimas incluem, sem limitação, por exemplo, pró-colágenolisil hidroxilase, pró-colágeno prolil 4-hidroxilase, eFator de inibição de HIF (FIH), uma asparaginil hidroxilaseresponsável por regulação de transativação de HIFa (AcessoGenbank No. AAL27308; Mahon e cols. (2001) Genes Dev15:2675-2686; Lando e cols. (2002) Science 295:858-861; eLando e cols. (2002) Genes Dev 16:1466-1471. Veja tambémElkins e cols. (2002) J Biol Chem C200644200, etc.).
O termo "hidroxilase de HIF" refere-se a qualquerenzima que modifica a subunidade alfa de HIF porhidroxilação de um ou mais resíduos de aminoácido.Hidroxilases de HIF incluem Fator de inibição de HIF (FIH)(Acesso Genbank AAL27308; Mahon e cols. (2001) Genes Dev15:2675-2686; Lando e cols. (2002) Science 295:858-861; eLando e cols. (2002) Genes Dev 16:1466-1471, que modificapelo menos um resíduo de asparagina encontrado em HIFa(veja também Elkins e cols. (2002) J Biol Chem C200644200).Hidroxilases de HIF também incluem HIF prolil hidroxilases(HIF PHs), que modificam resíduos de prolina encontrados emHIFa.
Os termos "HIF prolil hidroxilase" e "HIF PH" referem-se a qualquer enzima capaz de hidroxilação de um resíduo deprolina na proteína de HIF. Preferivelmente, o resíduo deprolina hidroxilada por HIF PH inclui a prolina encontradano motivo LXXLAP. HIF PH inclui membros da família do geneEgl-Nine (EGLN) descritos por Taylor (2001, Gene 275:125-132) e caracterizados por Aravind and Koonin (2001, GenomeBiol 2: RESEARCH 0007), Epstein e cols (2001, Cell 107:43-54), e Bruick e McKnight (2001, Science 294:1337-1340).Exemplos de enzimas de HIF PH incluem SM-2 0 humana (EGLN 1)(Acesso Genbank No. AAG33965; Dupuy e cols. (2000) Genomics69:348-54), EGLN2 isoforma 1 (Acesso Genbank No. CAC42510;Taylou7 supra), EGLN2 isoforma 2 (Acesso Genbank No. NP060025) e EGLN3 (Acesso Genbank No. CAC42511; Taylou,supra) ; EGLNl de camundongo (Acesso Genbank No. CAC42515) ,EGLN2 (Acesso Genbank No. CAC42511) e EGLN3 (SM-20) (AcessoGenbank No. CAC42517) ; e SM-20 de rato (Acesso Genbank No.AAA19321) . Adicionalmente, HIF PH pode incluir EGL-9 deGaenorhabditis elegans (Acesso Genbank No. AAD56365) eproduto de gene de CG1114 de Drosophila melanogaster(Acesso Genbank No. AAF52050). HIF PH também incluiqualquer porção das proteínas de comprimento totalanteriores que retêm pelo menos uma característicaestrutural ou funcional.
0 termo "excipiente" como aqui usado significa umasubstância inerte ou inativa usada na produção de produtosfarmacêuticos ou outros comprimidos, que incluem, semlimitação, qualquer substância usada como ligante,desintegrante, revestimento, auxiliar decompressão/encapsulação, creme ou loção, lubrificante,parenteral, adoçante ou flavorizante, agente desuspensão/de gelação, ou agente de granulação úmida.Ligantes incluem, por exemplo, carbopol, povidona, gomaxantana etc.; revestimentos incluem, por exemplo, acetatoftalato de celulose, etilcelulose, goma gelana,maltodextrina etc.; auxiliares de compressão/encapsulaçãoincluem, por exemplo, carbonato de cálcio, dextrose,frutose dc, mel dc, lactose (anidrato ou monohidrato;opcionalmente em combinação com aspartame, celulose oucelulose microcristalina), amido dc, sacarose etc.;desintegrantes incluem, por exemplo, croscarmelose sódica,goma gelan, sódio amido glicolato etc.; cremes e loçõesincluem, por exemplo, maltodextrina, carragenanas etc.;lubrificantes incluem, por exemplo, estearato de magnésio,ácido esteárico, sódio estearil fumarato etc.; materiaispara comprimidos mastigáveis incluem, por exemplo,dextrose, frutose dc, lactose (monohidrato, opcionalmenteem combinação com aspartame ou celulose) etc.; parenteraisincluem, por exemplo, manitol, povidona etc.;plastificantes incluem, por exemplo, dibutil sebacato,polivinilacetato ftalato etc.; agentes de suspensão/gelaçãoincluem, por exemplo, carragenana, sódio amido glicolato,goma xantana etc.; adoçantes incluem, por exemplo,aspartame, dextrose, frutose dc, sorbitol, sacarose dcetc.; e agentes de granulação úmida incluem, por exemplo,carbonato de cálcio, maltodextrina, celulosemicrocristalina etc.
O termo "indivíduo" é aqui usado em seu sentido maisamplo. Indivíduos podem incluir células isoladas,procarióticas ou eucarióticas, ou tecidos que crescem emcultura. Em certas modalidades, um indivíduo é um animal,particularmente um animal selecionado de uma espécie demamífero incluindo rato, coelho, bovino, ovino, suíno,canino, felino, murídeo, eqüino e primata, particularmentehumano.
O termo "alquil" refere-se a grupos hidrocarbilmonovalentes tendo de 1 a 10 átomos de carbono, maisparticularmente de 1 a 5 átomos de carbono, e ainda maisparticularmente 1 a 3 átomos de carbono. Esse termo éexemplificado por grupos como metil, etil, n-propil, iso-propil, n-butil, t-butil, n-pentil e outros.
O termo "alquil substituído" refere-se a um grupoalquil, de 1 a 10 átomos de carbono, particularmente 1 a 5átomos de carbono, tendo de 1 a 5 substituintes, maisparticularmente 1 a 3 substituintes, cada um destes sendoindependentemente selecionado do grupo que consiste emalquil, alcoxi, alcoxi substituído, acil, acilamino,aciloxi, amino, amino substituído, aminoacil,aminocarbonilamino, aminotiocarbonilamino,aminocarboniloxi, aril, aril substituído, ariloxi, ariloxisubstituído, ciano (-CN), halogênio, hidroxil (-OH), nitro(-NO2), oxo (=0), tioxo (=S), carboxil, ésteres decarboxil, cicloalquil, cicloalquil substituído, tiol,alquiltio, alquiltio substituído, ariltio, ariltiosubstituído, cicloalquiltio, cicloalquiltio substituído,heteroariltio, heteroariltio substituído, heterocíclicotio,heterocíclicotio substituído, heteroaril, heteroarilsubstituído, heterocíclico, heterocíclico substituído,cicloalcoxi, cicloalcoxi substituído, heteroariloxi,heteroariloxi substituído, heterocicliloxi, heterocicliloxisubstituído, oxicarbonilamino, oxitiocarbonilamino,OS (0) 2-alquil, -OS (0) 2.alquil substituído, -OS (O) 2-aril, -OS (O) 2-aril substituído, OS(O)2-heteroaril, -OS(O)2-heteroaril substituído, -OS (O) 2-heterocíclico, -OS(O)2-heterocíclico substituído, -NR40S (0) 2-alquil, -NR40S(O)2-alquil substituído, -NR40S (O) 2-aril, -NR40S (O) 2-arilsubstituído, -NR40S (O) 2-heteroaril, -NR40S (O) 2-heteroarilsubstituído, -NR40S (O) 2-heterocíclico e -NR40S(O)2-
heterocíclico substituído, em que cada R40 éindependentemente selecionado de hidrogênio ou alquil.
O termo "haloalquil" refere-se a um grupo alquilsubstituído com de 1 a 5, e particularmente 1 a 3 átomos dehalogênio. Preferivelmente, o átomo de halogênio é flúor oucloro. Porções haloalquil adequadas incluem, mas não sãolimitadas a, -CF3, -CH2CF3.
O termo "alcoxi" refere-se ao grupo "alquil-O" queinclui, por via de exemplo, metoxi, etoxi, n-propoxi, iso-propoxi, n-butoxi, t-butoxi, sec-butoxi, n-pentoxi eoutros.
O termo "alcoxi substituído" refere-se ao grupo"alquil-0- substituído".
O termo "acil" refere-se aos grupos H-C(O)-, alquil-C(O)-, alquil-C(O) - substituído, alquenil-C(O) -, alquenil-C(O)- substituído, alquinil-C(O) - , alquinil-C(O) -substituído, cicloalquil-C(O) -, cicloalquil-C(O) -substituído, aril-C(O) -, aril-C(O)- substituído,heteroaril-C(O)-, heteroaril-C(O) substituído,heterocíclico-C(O) - e heterocíclico-C(O) - substituído,desde que um átomo de nitrogênio do heterocíclico ouheterocíclico substituído não seja ligado ao grupo -C(O)-,em que alquil, alquil substituído, alquenil, alquenilsubstituído, alquinil, alquinil substituído, cicloalquil,cicloalquil substituído, aril, aril substituído,heteroaril, heteroaril substituído, heterocíclico eheterocíclico substituído são como aqui definidos.
O termo "aminoacil" e o prefixo "carbamoil" ou"carboxamida" ou "carbamoil substituído" ou "carboxamidasubstituída" refere-se ao grupo -C(O)NR42R42 em que cada R42é independentemente selecionado do grupo que consiste emhidrogênio, alquil, alquil substituído, alquenil, alquenilsubstituído, alquinil, alquinil substituído, aril, arilsubstituído, cicloalquil, cicloalquil substituído,heteroaril, heteroaril substituído, heterocíclico eheterocíclico substituído; ou em que cada R42 é ligado paraformar junto com o átomo de nitrogênio um heterocíclico ouheterocíclico substituído, em que alquil, alquilsubstituído, alquenil, alquenil substituído, alquinil,alquinil substituído, cicloalquil, cicloalquil substituído,aril, aril substituído, heteroaril, heteroaril substituído,heterocíclico e heterocíclico substituído são como aquidefinidos.
0 termo "aciloxi" refere-se à porção —0-acil, em que oátomo de oxigênio é anexado ao carbonil (-C(O)) da porçãoacil.
0 termo "alquenil" refere-se a um grupo hidrocarbilmonovalente insaturado com vinil tendo de 2 a 6 átomos decarbono e preferivelmente 2 a 4 átomos de carbono, e tendopelo menos 1, e pref erivelmente de 1 a 2 sítios deinstauração de vinil (>C=C<). Tais grupos sãoexemplificados por vinil (eten-l-il), alil, but-3-enil eoutros.
0 termo "alquenil substituído" refere-se a gruposalquenil que têm de 1 a 3 substituintes, e pref erivelmente1 a 2 substituintes, selecionados do grupo que consiste emalcoxi, alcoxi substituído, acil, acilamino, aciloxi,amino, amino substituído, aminoacil, aril, arilsubstituído, ariloxi, ariloxi substituído, ciano,halogênio, hidroxil, nitro, carboxil, ésteres de carboxil,cicloalquil, cicloalquil substituído, heteroaril,heteroaril substituído, heterocíclico,e heterocíclicosubstituído. Esse termo inclui tanto isômeros E (eis)quanto isômeros Z (trans) como adequado. Ele também incluimisturas de ambos componentes E e Z.
0 termo "alquinil" refere-se a um grupo hidrocarbilmonovalente insaturado acetilínico que tem de 2 a 6 átomosde carbono e preferivelmente 2 a 3 átomos de carbono, etendo pelo menos 1, e pref erivelmente de 1 a 2 sítios deinstauração acetilênica (-C=C-). Esse grupo é exemplificadopor etin-l-il, propin-l-il, propin-2-il e outros.
0 termo "alquinil substituído" refere-se a gruposalquinil que têm de 1 a 3 substituintes, e pref erivelmente1 a 2 substituintes, selecionados daqueles listados paraalquenil substituído.
O termo "amino" refere-se ao grupo -NH2.
0 termo "amino substituído" refere-se ao grupoNR41R41, em que cada R41 é independentemente selecionado dogrupo que consiste em hidrogênio, alquil, alquilsubstituído, alquenil, alquenil substituído, alquinil,alquinil substituído, cicloalquil, cicloalquil substituído,aril, aril substituído, heteroaril, heteroaril substituído,heterocíclico, heterocíclico substituído, -S02-alquil,S02-alquil substituído, -S02-alquenil, -S02-alquenilsubstituído, -S02-cicloalquil, -S02-cicloalquilsubstituído, -S02-aril, -S02-aril substituído, -SO2-heteroaril, -S02-heteroaril substituído, -SO2-heterocíclico, -S02-heterocíclico substituído, desde queambos grupos R41 não sejam hidrogênio; ou os grupos R41podem ser ligados junto com o átomo de nitrogênio paraformar um anel heterocíclico ou heterociclico substituído.
0 termo "acilamino" refere-se ao grupo —NR45C (O) alquil, -NR45C (O) alquil substituído, -NR45C (O) cicloalquil, -NR45C (O) cicloalquil substituído, -NR45C (O) alquenil, -NR45C (O) alquenil substituído, -NR45C (O) alquinil, -NR45C (O) alquinil substituído, -NR45C (O) aril, -NR45C(O) aril substituído, -NR45C (O) heteroaril,NR45C (0) heteroaril substituído, -NR45C (0) heterocíclico e —NR45C(O)heterocíclico substituído, em que R45 é hidrogênioou alquil, e em que alquil, alquil substituído, alquenil,alquenil substituído, alquinil, alquinil substituído,cicloalquil, cicloalquil substituído, aril, arilsubstituído, heteroaril, heteroaril substituído,heterocíclico e heterocíclico substituído são aquidefinidos.
0 termo "carboniloxiamino" refere-se aos grupos —NR46C (O)O-alquil, -NR46C(O)O- alquil substituído, -NR46C(O)O-alquenil, -NR46C (0) 0-alquenil substituído, -NR46C(O)O-alquinil, -NR46C (0) 0-alquinil substituído, -NR46C(O)O-cicloalquil, -NR46C (0) 0-cicloalquil substituído, -NR46C(O)O-aril, -NR46C (0) 0-aril substituído, -NR46C (0) 0-heteroaril, -NR46C(0)0-heteroaril substituído, -NR46C (0) 0-heterocíclico e-NR46C (O) 0-heterocíclico substituído, em que R46 éhidrogênio ou alquil, e em que alquil, alquil substituído,alquenil, alquenil substituído, alquinil, alquinilsubstituído, cicloalquil, cicloalquil substituído, aril,aril substituído, heteroaril, heteroaril substituído,heterocíclico e heterocíclico substituído são como aquidefinidos. Deve-se compreender que o grupo"oxicarbonilamino" refere-se a grupos similares àquelesrecém descritos, exceto pelo fato de que as anexações dooxigênio e do grupo carbonil (-C(=0)-) são trocadas.
Também, o termo "oxitiocarbonilamino" é similar àquelesrecém descritos; no entanto, um tiocarbonil (-C(=S)-) éusado no lugar de um carbonil.
O termo "aminocarboniloxi" ou como um prefixo"carbamoiloxi" ou "carbamoiloxi substituído" refere-se aosgrupos -OC(O)NR47R47, em que cada R47 é independentementeselecionado do grupo que consiste em hidrogênio, alquil,alquil substituído, alquenil, alquenil substituído,alquinil, alquinil substituído, cicloalquil, cicloalquilsubstituído, aril, aril substituído, heteroaril, heteroarilsubstituído, heterocíclico e heterocíclico substituído; ouem que cada R47 é ligado para formar, junto com o átomo denitrogênio, um heterocíclico ou heterocíclico substituído,e em que alquil, alquil substituído, alquenil, alquenilsubstituído, alquinil, alquinil substituído, cicloalquil,cicloalquil substituído, aril, aril substituído,heteroaril, heteroaril substituído, heterocíclico eheterocíclico substituído são como aqui definidos.
O termo "aminocarbonilamino" refere-se ao grupo —NR49C (O) NR49, em que cada R49 é independentemente selecionadodo grupo que consiste em hidrogênio e alquil. 0 termo"aminotiocarbonilamino" refere-se à porção—NR49C (S) R49-, emque R49 é como acima definido.
O termo "aril" ou "Ar" refere-se a um grupocarbocíclico aromático monovalente de 6 a 14 átomos decarbono que têm um anel único (por exemplo, fenil) ou anéismúltiplos condensados (por exemplo, naftil ou antril) cujosanéis condensados podem ou não ser aromáticos (por exemplo,2-benzoxazolinona, 2H-1,4-benzoxazin-3(4H)-ona-7-il, eoutros) desde que o ponto de anexação seja o grupo aril.Grupos aril preferidos incluem fenil e naftil.
O termo "aril substituído" refere-se a grupos aril,como aqui definido, que são substituídos com de 1 a 4,preferivelmente 1 a 3, substituintes selecionados daqueleslistados para alquil substituído, com a exceção de que talsubstituição não inclui oxo ou tioxo.
O termo "ariloxi" refere-se ao grupo aril-O- queinclui, por via de exemplo, fenoxi, naftoxi e outros.
0 termo "ariloxi substituído" refere-se a grupos aril-0- substituído.
0 termo "ariloxiaril" refere-se ao grupo -aril-O-aril.
0 termo "ariloxiaril substituído" refere-se a gruposariloxiaril substituídos com de 1 a 3 substituintes em cadaanel aril ou em ambos, como acima definido para arilsubstituído.
0 termo "carboxil" refere-se a -COON ou sais deste.
0 termo "ésteres de carboxil" ou "alcoxicarbonil"refere-se aos grupos —C(O)0-alquil, -C(0)0-alquilsubstituído, -C(0)0-aril e —C(0)0-aril substituído, em quealquil, alquil substituído, aril e aril substituído sãocomo aqui definidos.
0 termo "cicloalquil" refere-se a grupos alquilcíclicos de 3 a 10 átomos de carbono tendo anéis cíclicosúnicos ou múltiplos, incluindo, por via de exemplo,adamantil, ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil, ciclooctile outros.O termo "cicloalquil substituído" refere-se a um grupocicloalquil, tendo de 1 a 5 substituintes selecionadosdaqueles listados para alquil substituído.
O termo "cicloalcoxi" refere-se a grupos -0-cicloalquil.
O termo "cicloalcoxi substituído" refere-se a grupos -O-cicloalquil substituídos.
O termo "halo" ou "halogênio" refere-se a flúor,cloro, bromo e iodo, e preferivelmente é flúor ou cloro.
O termo "heteroaril" refere-se a um grupo aromático de1 a 15 átomos de carbono, preferivelmente de 1 a 10 átomosde carbono, e 1 a 4 heteroátomos selecionados do grupo queconsiste em oxigênio, nitrogênio e enxofre no anel. Taisgrupos heteroaril podem ter um anel único (por exemplo,piridinil ou furil) ou anéis múltiplos condensados (porexemplo, indolizinil, benzotienil, 2-benzoxazolinona, 2H-1,4-benzoxazin-3(4H)-ona-7-il, benzofurano, 2,3-dihidrobenzofurano, benzotiazol, benzooxazol,benzo[1,3]dioxolil e outros). Grupos heteroaril preferidosincluem piridinil, pirrolil, indolil, tiofenil e furil.
O termo "heteroaril substituído" refere-se a gruposheteroaril que são substituídos com de 1 a 3 substituintesselecionados do mesmo grupo de substituintes definidos paraaril substituído.
O termo "heteroariloxi" refere-se ao grupo -0-heteroaril, e "heteroariloxi substituído" refere-se aogrupo -O-heteroaril substituído.
O termo "heterociclo" ou "heterocíclico," ou"heterociclil" refere-se a um grupo saturado ou insaturadoque tem anel único ou anéis múltiplos condensados, de 1 a10 átomos de carbono e de 1 a 4 heteroátomos selecionadosdo grupo que consiste em nitrogênio, enxofre ou oxigênio noanel, em que, em sistemas de anel fundido, um ou mais dosanéis podem ser um aril ou heteroaril desde que o ponto deanexação seja no heterociclo.
O termo "heterocíclico substituído" ou "heterociclilsubstituído" refere-se a grupos heterociclo que sãosubstituídos com de 1 a 3 dos mesmos substituintes comodefinido para cicloalquil substituído.
Exemplos de heterociclos e heteroaril incluem, semlimitação, azetidina, pirrol, imidazol, pirazol, piridina,pirazina, pirimidina, piridazina, indolizina, isoindol,indol, dihidroindol, indazol, purina, quinolizina,isoquinolina, quinolina, ftalazina, naftilpiridina,quinoxalina, quinazolina, cinolina, pteridina, carbazol,carbolina, fenantridina, acridina, fenantrolina, isotiazol,fenazina, isoxazol, fenoxazina, fenotiazina, imidazolidina,imidazolina, piperidina, piperazina, indolina, ftalimida,1,2,3, 4-tetrahidro-isoquinolina, 4,5,6,7-tetrahidrobenzo[b]tiofeno, tiazol, tiazolidina, tiofeno, benzo[b]tiofeno,morfolinil, tiomorfolinil (também referido comotiamorfolinil), piperidinil, pirrolidina, tetrahidrofuranile outros.
0 termo "heterocicliloxi" refere-se ao grupo -0-heterocíclico, e "heterocicliloxi substituído" refere-se aogrupo -O-heterocíclico substituído.
0 termo "tiol" refere-se ao grupo -SH.
0 termo "alquiltio" refere-se aos grupos -S-alquil, emque alquil é como acima definido.
Os termos "alquiltio substituído" e "alquilsulfanilsubstituído" referem-se ao grupo -S-alquil substituído, emque alquil substituído é como acima definido.
0 termo "cicloalquiltio" ou "cicloalquilsulfanil"refere-se aos grupos -S-cicloalquil, em que cicloalquil écomo acima definido.
0 termo "cicloalquiltio substituído" refere-se aogrupo -S-cicloalquil substituído, em que cicloalquilsubstituído é como acima definido.
0 termo "ariltio" ou "arilsulfanil" refere-se ao grupo-S-aril e "ariltio substituído" refere-se ao grupo -S-arilsubstituído, em que aril e aril substituído são como acimadefinidos.
O termo "heteroariltio" refere-se ao grupo -S-heteroaril e "heteroariltio substituído" refere-se ao grupo-S-heteroaril substituído, em que heteroaril e heteroarilsubstituído são como acima definidos.
0 termo "heterociclicotio" refere-se ao grupo -S-heterocíclico e "heterociclicotio substituído" refere-se aogrupo -S-heterocíclico substituído, em que heterocíclico eheterocíclico substituído são como acima definidos.
0 termo "sal farmaceuticamente aceitável" refere-se asais farmaceuticamente aceitáveis de um composto, cujossais são derivados de uma variedade de contra íonsorgânicos e inorgânicos bem conhecidos na técnica, eincluem, por via de exemplo apenas, sódio, potássio,cálcio, magnésio, amônio, tetraalquilamônio e outros; e,quando a molécula contém uma funcionalidade básica, sais deácidos orgânicos ou inorgânicos, como cloridrato,hidrobrometo, tartrato, mesilato, acetato, maleato, oxalatoe outros.O termo "pró-fármaco" refere-se a compostos de fórmulaI e/ou II desta invenção que incluem grupos químicos que,in vivo, podem ser convertidos no grupo carboxilato nacadeia lateral de aminoácido dos compostos e/ou podem serconvertidos no grupo carbonil amida e/ou podem serdivididos do N-átomo da amida e/ou podem ser divididos doátomo 4-0 da isoquinolina e/ou podem ser convertidos nogrupo 1-ciano e/ou podem ser divididos do N-átomo do anelde isoquinolina para fornecer o medicamento ativo, um salfarmaceuticamente aceitável deste ou um metabólitobiologicamente ativo deste. Grupos adequados são bemconhecidos na técnica e incluem particularmente: para aporção de ácido carboxílico no substituinte de glicina oualanina, um pró-fármaco selecionado de, por exemplo,ésteres que incluem, sem limitação, aqueles derivados deálcoois de alquil, álcoois de alquil substituído, hidroxiaril e heteroaril substituído, e outros; amidas,particularmente amidas derivadas de aminas de fórmulaHNR20R21, em que R20 e R21 são independentemente hidrogênio,alquil, alquil substituído, aril, aril substituído, eoutros; hidroximetil, aldeído e derivados destes; e, para oN-átomo de isoquinolina, um pró-fármaco selecionado de, porexemplo, derivados de N-óxidos e N-alquil.
O termo "solvatos," refere-se a um complexo formadopor combinação de moléculas de solvente com moléculas ouíons do soluto. 0 solvente pode ser um composto orgânico,um composto inorgânico ou uma mistura de ambos. Algunsexemplos de solventes incluem, mas não são limitados a,metanol, N,N-dimetilformamida, tetrahidrofurano,dimetilsulfóxido e água.O termo "tautômero" refere-se a formas alternativas deuma molécula que difere na posição de um próton, comotautômeros de enol-cetol e imina-enamina, ou a formastautoméricas de grupos heteroaril contendo um átomo de anelanexado a uma porção -NH- do anel e uma porção do anel comopirazol, imidazol, benzimidazol, triazol e tetrazol.
Compreende-se que, em todos os grupos substituídosacima definidos, polímeros com uma definição desubstituintes com substituintes adicionais a eles (porexemplo, aril substituído tendo um grupo aril substituídocomo um substituinte que é em si substituído com um grupoaril substituído etc.) não devem ser incluídos aqui. Emtais casos, o número máximo de tais substituintes é três.Ou seja, cada uma das definições acima é constrita por umalimitação que, por exemplo, grupos aril substituído sãolimitados a aril substituído-(aril substituído)-arilsubstituído.
De forma similar, entende-se que as definições acimanão devem incluir padrões não permissíveis de substituição(por exemplo, metil substituído com 5 grupos flúor ou umgrupo hidroxil alfa para instauração etenílica ouacetilênica). Tais padrões não permissíveis de substituiçãosão bem conhecidos pelo profissional habilitado.
C. Composições e Métodos da invenção
A invenção fornece o uso de um composto de fórmula Ie/ou II para a manufatura de um medicamento para uso notratamento de várias condições ou distúrbios como aquidescrito. Em uma modalidade, é fornecida uma composiçãofarmacêutica que compreende um excipiente ou veículofarmaceuticamente aceitável, e uma quantidadeterapeuticamente eficaz de pelo menos um composto defórmula I e/ou II.
0 medicamento ou composição também pode compreenderpelo menos um agente terapêutico adicional selecionado dogrupo que inclui, mas não é limitado a, vitamina B12,sulfato ferroso, ácido fólico, e/ou eritropoietinarecombinante ou uma proteína de estímulo da eritropoiese(ESP).
Os compostos da presente invenção, ou medicamentos oucomposições que compreendem os compostos, podem ser usadospara modular a estabilidade e/ou atividade de HIF, e assimativar a expressão de gene regulada por HIF. 0 composto, oucomposição ou medicamento deste, pode ser usado em métodospara tratar, pré-tratar ou retardar a progressão ousurgimento de condições associadas com HIF, incluindo, semlimitação, condições anêmicas, isquêmicas e hipóxicas. Emvárias modalidades, o composto é administrado imediatamenteapós a condição que produz a isquemia aguda, por exemplo,infarto do miocárdio, embolia pulmonar, infarto intestinal,AVC isquêmico, e dano de reperfusão isquêmico renal. Em umaoutra modalidade, o composto, ou composição ou medicamentodeste, é administrado a um paciente diagnosticado com umacondição associada com o desenvolvimento de isquemiacrônica, por exemplo, cirrose cardíaca, degeneraçãomacular, embolia pulmonar, insuficiência respiratóriaaguda, síndrome do estresse respiratório neonatal, einsuficiência cardíaca congestiva. Ainda em uma outramodalidade, o composto, ou composição ou medicamento deste,é administrado imediatamente após um trauma ou dano. Emoutras modalidades, o composto, ou composição oumedicamento deste, pode ser administrado a um indivíduo combase em condições de predisposição, por exemplo,hipertensão, diabetes, doença arterial oclusiva,insuficiência venosa crônica, doença de Raynaud, úlcerascutâneas crônicas, cirrose, insuficiência cardíacacongestiva, e esclerose sistêmica. Ainda em outrasmodalidades, compostos podem ser administrados para pré-tratar um indivíduo para diminuir ou prevenir odesenvolvimento de dano tecidual associado com isquemia ouhipóxia.
Os compostos da presente invenção, ou composições oumedicamentos destes, também podem ser usados para aumentara eritropoietina endógena (EPO). Os compostos, oucomposição ou medicamento destes, podem ser administradospara prevenir, pré-tratar ou tratar condições associadascom EPO, incluindo, por exemplo, condições associadas comanemia e distúrbios neurológicos. Condições associadas comanemia incluem distúrbios como doença renal aguda oucrônica, diabetes, câncer, úlceras, infecção com vírus, porexemplo, HIV, bactérias ou parasitas; inflamação etc.Condições anêmicas também podem incluir aquelas associadascom procedimentos ou tratamentos que incluem, por exemplo,terapia por radiação, quimioterapia, diálise e cirurgia.Distúrbios associados a anemia incluem adicionalmentehemoglobina e/ou eritrócitos anormais, como encontrado emdistúrbios como anemia microcítica, anemia hipocrômica,anemia aplásica etc.
Os compostos podem ser usados para aumentar EPOendógena em um indivíduo que se submete a um tratamento ouprocedimento específico, profilaticamente ouconcomitantemente, por exemplo, um paciente anêmicoinfectado com HIV sendo tratado com azidotimidina(zidovudina) ou outros inibidores da transcriptase reversa,um paciente com câncer anêmico que recebe quimioterápicosque contêm cisplatina cíclica ou quimioterápicos que nãocontêm cisplatina, ou um paciente anêmico ou não anêmicoque se submete à cirurgia. Adicionalmente, os compostospodem ser usados para aumentar os níveis de EPO endógena emum paciente anêmico ou não anêmico que se submete àcirurgia para reduzir a necessidade por transfusões desangue alogênico ou para facilitar o estoque de sangueantes da cirurgia.
A invenção é também direcionada ao uso de um composto,ou composição ou medicamento deste, para tratar, pré-tratarou retardar o surgimento de uma condição associada com umdistúrbio selecionado do grupo que consiste em distúrbiosanêmicos; distúrbios neurológicos e/ou danos que incluemcasos de AVC, trauma, epilepsia e doença neurodegenerativa;isquemia cardíaca que inclui, sem limitação, infarto domiocárdio e insuficiência cardíaca congestiva; isquemiahepática incluindo, sem limitação, cirrose cardíaca;isquemia renal que inclui, sem limitação, insuficiênciarenal aguda e insuficiência renal crônica; distúrbiosvasculares periféricos, úlceras, queimaduras e feridascrônicas; embolia pulmonar; e dano isquêmico-de reperfusão.
A invenção é também direcionada a um método deinibição da atividade de pelo menos uma enzima hidroxilaseque modifica a subunidade alfa de fator induzível porhipóxia. A enzima hidroxilase de HIF pode ser umaasparaginil hidroxilase como Fator de inibição de HIF(FIH) ; e/ou uma prolil hidroxilase que inclui, semlimitação, o grupo que consiste em EGLNl, EGLN2 e EGLN3. Ométodo compreende o contato da enzima com uma quantidadeinibidora eficaz de um ou mais compostos selecionados dogrupo que compreende os compostos de fórmula I e/ou II.D. Síntese de Compostos da invenção
Os compostos desta invenção podem ser preparados apartir de materiais de iniciação facilmente disponíveis como uso dos seguintes métodos e procedimentos gerais. Deve-seperceber que, quando condições de processo típicas oupreferidas (ou seja, temperaturas de reação, tempos,proporções molares de reagentes, solventes, pressões etc.)são dadas, outras condições de processo também podem serusadas, a menos que determinado de outro modo. Condições dereação ótimas podem variar com os reagentes ou solventesparticulares usados, mas tais condições podem serdeterminadas por pessoa habilitada na técnica porprocedimentos rotineiros de otimização.
Adicionalmente, como será aparente para aqueleshabilitados na técnica, grupos de proteção convencionaispodem ser necessários para prevenir certos gruposfuncionais de passar por reações indesejáveis. Grupos deproteção adequados para vários grupos funcionais bem comocondições adequadas para proteção e desproteção de gruposfuncionais particulares são bem conhecidos na técnica. Porexemplo, numerosos grupos de proteção são descritos em T.W. Greene and G. M. Wuts, Protecting Groups in OrganicSynthesis, Terceira edição, Wiley, New York, 1999, ereferências aqui citadas.
Além disso, os compostos desta invenção podem conterum ou mais centros quirais. Portanto, se desejado, taiscompostos podem ser preparados ou isolados comoestereoisômeros puros, ou seja, como enantiômeros oudiastereômeros individuais, ou como misturas enriquecidasde estereoisômeros. Todos tais estereoisômeros (e misturasenriquecidas) são incluídos no escopo desta invenção, amenos que indicado de outra forma. Estereoisômeros puros(ou misturas enriquecidas) podem ser preparados com o uso,por exemplo, de materiais de iniciação oticamente ativos oureagentes estereo-seletivos bem conhecidos na técnica.Alternativamente, misturas racêmicas de tais compostospodem ser separadas com o uso, por exemplo, decromatografia em coluna quiral, agentes de resolução quirale outros.
Os materiais de partida para as seguintes reações sãogeralmente compostos conhecidos ou podem ser preparados porprocedimentos conhecidos ou modificações óbvias destes. Porexemplo, vários dos materiais de iniciação são disponíveisa partir de fornecedores comerciais como Aldrich ChemicalCo. (Milwaukee, Wisconsin, USA) , Bachem (Torrance,Califórnia, USA), Emka-Chemce ou Sigma (St. Louis,Missouri, USA). Outros podem ser preparados porprocedimentos, ou modificações óbvias destes, descritos emtextos de referência padrão como Fieser and Fieser'sReagents for Organic Synthesis, Volumes 1-15 (John Wiley, eSons, 1991), Rodd1S Chemistry of Carbon Compounds, Volumes1-5, e Supplementals (Elsevier Science Publishers, 1989),Organic Reactions, Volumes 1-40 (John Wiley, e Sons, 1991),March1S Advanced Organic Chemistry, (John Wiley, e Sons, 5aedição, 2001) e Larock1S Comprehensive OrganicTransformations (VCH Publishers Inc., 1989).
As isoquinolinas 300, 1000 e 1100 desta invenção podemser preparadas pelos protocolos sintéticos ilustrados noEsquema 1.
<formula>formula see original document page 43</formula>
Esquema 1
R1, R2, R3, R4 e R5 são como aqui definido. Composto100 (em que PG1 refere-se a um grupo de proteção adequadocomo metil, etil, butil etc.) reage com pelo menos umaquantidade estoiquiométrica e preferivelmente um excesso deum alfa-aminoácido adequado, composto 200 (particularmente,sem limitação, glicina). A reação é conduzida sob condiçõesde ligação convencionais bem conhecidas na técnica. Em umamodalidade, a reação é conduzida na presença de metóxido desódio ou uma outra base adequada em metanol ou outrosolvente adequado sob temperaturas de reação elevadas eparticularmente em refluxo. A reação é continuada até queesteja substancialmente completa, o que ocorre tipicamenteem cerca de 1 a 72 horas. Alternativamente, a reação podeser realizada em temperaturas elevadas em um forno demicroondas. Após o fim da reação, o composto 300 pode serrecuperado por técnicas convencionais como neutralização,extração, precipitação, cromatografia, filtração e outros.
Alternativamente, a ligação do composto 100(tipicamente como o ácido livre correspondente) comcomposto 200 (tipicamente como derivados de éster) podeprosseguir via procedimentos convencionais de ligação depeptídeo bem conhecidos na técnica. Essa reação de ligaçãoé tipicamente conduzida com o uso de reagentes de ligaçãobem conhecidos como carbodiimidas, reagente BOP(benzotriazol-l-iloxitris(dimetilamino)-fosfôniohexafluorfosfonato) e outros. Carbodiimidas adequadasincluem, por via de exemplo, diciclohexilcarbodiimida(DCC) , 1-(3-dimetilamino-propil)-3-etilcarbodiimida (DECT)e outros. Se desejado, formas sustentadas de polímero decarbodiimida que ligam reagentes também podem ser usadas,incluindo, por exemplo, aquelas descritas em TetrahedronLetters, 34(48), 7685 (1993). Adicionalmente, promotores deligação bem conhecidos, como N-hidroxisuccinimida, 1-hidroxibenzotriazol e outros, podem ser usados parafacilitar a reação de ligação. Essa reação de ligação étipicamente conduzida por contato dos ácidos livrescorrespondentes do composto 100 com cerca de 1 a cerca de 2equivalentes do reagente de ligação e pelo menos umequivalente, preferivelmente cerca de 1 a cerca de 1,2equivalente, de um éster do composto 200, em um diluenteinerte como diclorometano, clorofórmio, acetonitrila,tetrahidrofurano, N,N-dimetilformamida e outros.
Geralmente, essa reação é conduzida em uma temperatura quevaria de cerca de 0°C a cerca de 37°C por cerca de 12 acerca de 24 horas. Após o fim da reação, o éstercorrespondente do composto 3 00 é recuperado por métodosconvencionais que incluem neutralização, extração,precipitação, cromatografia, filtração e outros, e é entãotransformado no composto 300 por hidrólise.
Alternativamente, composto 100 (tipicamente como oácido livre correspondente) pode ser convertido em umhaleto ácido e o haleto ácido ligado com o éster docomposto 200 para fornecer os ésteres do composto 300. 0haleto ácido do composto 100 pode ser preparado por contatodo composto 100 (tipicamente como o ácido livrecorrespondente) com um haleto ácido inorgânico como cloretode tionila, tricloreto de fósforo, tribrometo de fósforo oupentacloreto de fósforo, ou, particularmente, com cloretode oxalila sob condições convencionais. Geralmente, essareação é conduzida com o uso de cerca de 1 a 5 equivalentesmolares do haleto ácido inorgânico ou cloreto de oxalila,isoladamente ou em um solvente inerte como diclorometano outetracloreto de carbono, em temperatura na faixa de cercade 0°C a cerca de 80°C por cerca de 1 a cerca de 48 horas.Um catalisador, como DMF, também pode ser usado nessareação.
O haleto ácido (não mostrado) faz então contato compelo menos um equivalente, preferivelmente cerca de 1,1 acerca de 1,5 equivalente, de um éster do composto 200, emum diluente inerte como diclorometano, em uma temperaturaque varia de cerca de -70°C a cerca de 4O0C por cerca de 1a cerca de 24 horas. Preferivelmente, essa reação éconduzida na presença de uma base adequada neutralizar oácido gerado durante a reação. Bases adequadas incluem, porvia de exemplo, aminas terciárias como trietilamina,diisopropiletilamina, N-metil-morfolino e outras.Alternativamente, a reação pode ser conduzida sob condiçõesde tipo Schotten-Baumann com o uso de álcali aquoso comohidróxido de sódio e outros. Após o fim da reação, o ésterdo composto 300 é recuperado por métodos convencionais queincluem neutralização, extração, precipitação,
cromatografia, filtração e outros, e é então transformadono composto 300 por hidrólise.
0 composto 100 pode ser obtido por cianação docomposto 500 (em que X é Cl, Br, ou I; e PG1 refere-se a umgrupo de proteção adequado como metil, etil, butil etc.)com uma fonte de cianeto adequada como, por via de exemplo,CuCN, Zn(CN)2 etc. A cianação pode ocorrer na presença deum catalisador adequado como, por via de exemplo,catalisador de paládio comotris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(O) (veja, por exemplo,Sundermeier e cols. (2003) Eur. J. Inorg. Chem2003 (19) : 3513-3526) e/ou aditivos com o uso de um solventeadequado como, por via de exemplo, DMF ou N, N-dimetilacetamida. Após o fim da reação, composto 100 podeser recuperado por técnicas convencionais comoneutralização, extração, precipitação, cromatografia,filtração e outros; ou, alternativamente, usado na próximaetapa sem purificação e/ou isolação. Composto 100 obtidopor esse método também pode ser alterado por modificação desuas porções R1i R2, R3 e/ou R4, por exemplo, se R3 é OCH2Ph7a porção R3 pode ser transformada em OH com o uso detécnicas convencionais de redução (particularmente porhidrogenação catalisada por paládio em carbono etc.).
Alternativamente, composto 400 (em que X é selecionadode Cl, Br ou I) pode reagir com uma fonte de cianetoadequada como, por via de exemplo, CuCN, Zn(CN)2 etc. paragerar o composto 300. A cianação pode ser realizada comoacima descrito. Após o fim da reação, o composto 300 podeser recuperado por técnicas convencionais comoneutralização, extração, precipitação, cromatografia,filtração e outros; ou, alternativamente, usado na próximaetapa sem purificação e/ou isolação. 0 composto 400 podeser obtido por reação entre composto 500 (em que X éselecionado de Cl, Br ou I; e PG1 refere-se a um grupo deproteção adequado como metil, etil, butil etc.) e composto200 em analogia às reações correspondentes entre composto100 e composto 200 (Esquema 1; também, veja Patente U.S.
No. 6.0 93.73 0 e Publicação de Pedido de Patente U.S. No.2006/217416, que são aqui incorporadas por referência).
Alternativamente, o grupo 4-hidroxi do composto 500pode ser alquilado com reagentes adequados como, por via deexemplo, haletos de alquila, sulfatos de alquila, haletosde benzila, compostos diazo etc. A alquilação pode ocorrerna presença de bases adequadas como Cs2CO3 e/ou aditivosusando um solvente adequado como, por via de exemplo, DMF,para gerar composto 600 (em que PG2 é preferivelmente, semlimitação, metil) . Após o fim da reação, composto 600 podeser recuperado por técnicas convencionais comoneutralização, extração, precipitação, cromatografia,filtração e outros; ou, alternativamente, usado na próximaetapa sem purificação e/ou isolação.
Composto 600 (em que X é selecionado de Cl, Br ou I)pode reagir com uma fonte de cianeto adequada como, por viade exemplo, CuCN, Zn(CN)2 etc., para gerar composto 700. Acianação pode ser realizada como acima descrito. Hidrólisedo composto 7 00 com o uso de condições padrão convencionaisfornece composto 800. Após o fim da reação, composto 800pode ser recuperado por técnicas convencionais comoneutralização, extração, precipitação, cromatografia,filtração e outros; ou, alternativamente, usado na próximaetapa sem purificação e/ou isolação.
A ligação do composto 800 com composto 900 (em que PG3refere-se a um grupo de proteção adequado como metil, etil,butil etc.; pré-formado ou gerado in si tu a partir de seussais por adição de uma base adequada) pode prosseguir viaprocedimentos convencionais de ligação de peptideo bemconhecidos na técnica e como acima descrito. A reação deligação é tipicamente conduzida por contato do composto 800com cerca de 1 a cerca de 2 equivalentes do reagente deligação e pelo menos um equivalente, preferivelmente cercade 1 a cerca de 1,2 equivalente, de composto 900, em umdiluente inerte como diclorometano, clorofórmio,acetonitrila, tetrahidrofurano, N, N-dimetilformamida eoutros, e, se necessário, na presença de uma base adequada.Geralmente, essa reação é conduzida em uma temperatura quevaria de cerca de 0°C a cerca de 37°C por cerca de 12 acerca de 24 horas. Após o fim da reação, composto 1.000 érecuperado por métodos convencionais que incluemneutralização, extração, precipitação, cromatografia,filtração e outros, e pode ser então transformado emcomposto 1.100 por hidrólise.
Alternativamente, composto 800 pode ser convertido emum haleto ácido e o haleto ácido ligado com composto 900para fornecer composto 1.000. O haleto ácido do composto800 pode ser preparado por contato do composto 800 com umhaleto ácido inorgânico ou com cloreto de oxalila sobcondições convencionais, por exemplo, como acima descrito.
O haleto ácido (não mostrado) faz então contato com pelomenos um equivalente, preferivelmente cerca de1,1 a cerca de 1,5 equivalente de composto 900 em umdiluente inerte como diclorometano, em uma temperaturaque varia de cerca de -70°C a cerca de 40°C por cerca de 1a cerca de 24 horas. Preferivelmente, essa reação éconduzida na presença de uma base adequada paraneutralizar o ácido gerado durante a reação. Basesadequadas incluem aminas terciárias como trietilamina,diisopropiletilamina, N-metilmorfolino e outros.
Alternativamente, a reação pode ser conduzida sobcondições de tipo Schotten-Baumann usando álcaliaquoso como hidróxido de sódio e outros. Após ofim da reação, composto 1.000 é recuperado por métodosconvencionais que incluem neutralização, extração,precipitação, cromatografia, filtração e outros, e podeser então transformado em composto 1.100 por hidrólise(Esquema 1).
0 composto 500, para uso nas reações acima, pode serpreparado de acordo com vias sintéticas como mostrado noEsquema 2 .<formula>formula see original document page 50</formula>
Esquema 2
R1, R2, R3 e R4 são como aqui definido. Tratamento decomposto 1.200 com oxicloreto de fósforo ou oxibrometo defósforo usando um solvente adequado como acetonitrila outolueno particularmente em temperatura de refluxo gera ocomposto 500, em que X é Cl ou Br, respectivamente. Areação tipicamente ocorre em cerca de 1 a 72 h.
Alternativamente, a reação pode ser realizada emtemperaturas elevadas em um forno de microondas. Após o fimda reação, composto 500 pode ser recuperado por técnicasconvencionais como neutralização, extração, precipitação,cromatografia, filtração e outros; ou, alternativamente,usado na próxima etapa sem purificação e/ou isolação.
Alternativamente, composto 1.3 00 pode ser halogenadocom o uso de métodos convencionais para gerar composto 500,em que X é Cl, Br ou I. A halogenação do composto 1.300pode ser realizada com uma quantidade estoiquiométrica ouleve excesso, por exemplo, de N-bromossuccinimida, napresença de uma quantidade catalítica de benzoilperóxido,azobisisobutironitrila, ou um outro iniciador de radicallivre adequado, em CCl4, benzeno, ou outro solventeadequado conhecido por pessoa habilitada na técnicatipicamente em temperatura de refluxo ou maiorestemperaturas com o uso de um forno de microondas. Após ofim da reação, compostos 500 podem ser recuperados portécnicas convencionais como neutralização, extração,precipitação, cromatografia, filtração e outros; ou,alternativamente, usado na próxima etapa sem purificaçãoe/ou isolação. Alternativamente, composto 1.300 pode serobtido por halogenação do composto 1.200 como acimadescrito seguido por redução com o uso de métodos convencionaiscomo hidrogenação catalisada por paládio em carbono etc.
A síntese de ácido isoquinolina carboxílicosubstituído é geralmente conhecida na técnica e é descrita,por exemplo, por Weidmarm, e cols., Patente U.S. No.6.093.730, que é aqui incorporada por referência em suatotalidade. Composto 1.200, para uso nas reações acima,pode ser obtido com o uso dos métodos mostrados no Esquema3 (veja US2006/217416, que é aqui incorporado por referência) .
<formula>formula see original document page 51</formula>Esquema 3
R1, R2, R3 e R4 são como aqui definido. Composto 1.200pode ser obtido a partir de composto 1.500 (particularmenteem que R é metil, etil ou butil) por rearranjo de Gabriel-Colman com uma solução de 2 equivalentes de sódio em umálcool adequado como n-butanol em uma temperatura elevadade cerca de 95-100°C por cerca de 1 a 4 h. Composto 1.500 écomercialmente disponível ou é facilmente obtido por reaçãodo ácido itálico, composto 1.400 ou seus derivados(particularmente os anidridos ácidos correspondentes) comuma quantidade equimolar de glicina ou sais de ésteres deglicina (particularmente sais de hidrocloreto de glicinametil, etil ou butil éster) tipicamente a 150 a 250°C pora 90 min até que nenhuma água seja liberada. Se glicinaé usada, o produto (R=H) é esterificado usando métodosconvencionais, por exemplo, por refluxo em um álcooladequado como metanol ou etanol na presença de um ácidosulfúrico concentrado etc. Composto 1.400 e seus derivados,por exemplo, os anidridos ácidos correspondentes, sãocomercialmente disponíveis ou são facilmente acessíveis porreação do composto 1.600 com um excesso de fenol ArOH em umsolvente adequado como, por exemplo, DMF, na presença deuma base como, por exemplo, um excesso de carbonato depotássio. 0 composto resultante 1.700 é facilmentehidrolisado por refluxo em uma solução de KOH emágua/metanol (tipicamente 1 a 3 dias) para gerar o composto1.400.
Alternativamente, composto 1.4 00 pode ser obtido pormétodos análogos de composto 1.800. A reação entre composto1.800 e fenol ArOH fornece composto 1.900, que pode serfacilmente hidrolisado ao ácido itálico correspondente,composto 1.400. Ácido bifenil-2,3-dicarboxíIico pode serobtido por oxidação do composto 2.000 com permanganato depotássio na presença de um catalisador de transferência defase. Alternativamente, o composto 1.500 pode ser obtidopor reação do composto 2.100 com um excesso de um fenolatocomo, por via de exemplo, fenolatos de sódio ArONa,tipicamente por aquecimento em DMF. A ftalamida resultante,composto 2.200, pode ser transformada ao composto 1.500 porN-alquilação com um excesso de um éster de ácidohaloacético como, por via de exemplo, os metil ou etilésteres de ácido bromoacético, usando métodos convencionaiscomo refluxo em um solvente adequado como acetona napresença de uma base adequada como carbonato de potássio.Composto 1.500 pode ser obtido de modo análogo por N-alquilação de ftalimidas comercialmente disponíveis,composto 2.400. Alternativamente, composto 1.500 pode serobtido por N-alquilação de composto 2.100 usando métodoscomo acima descrito. 0 composto resultante 2.300 pode sertransformado ao composto 1.500 por reação com fenóis ArOHem um solvente adequado, como dimetilacetamida a 105°C, napresença de uma base adequada como carbonato de potássio.Alternativamente, composto 1.500 com um grupo OH fenólicopode ser transformado aos éteres de fenol correspondentespor O-alquilação usando métodos convencionais como, por viade exemplo, refluxo com eletrófilos como iodeto de metila(Mel), iodeto de isopropila (iPrl), iodeto de butila (BuI)etc. na presença de uma base ou por alquilação do grupo OHfenóli co com um álcool como ciclohexanol usando umavariante da reação de Mitsunobu.Composto 1.300, para uso nas reações acima, pode serobtido com o uso dos métodos mostrados no Esquema 4 (vejatambém US2006/217416).
<formula>formula see original document page 54</formula>
Esquema 4
R1, R2, R3 e R4 são como aqui definido. Composto 2.500(particularmente em que R é metil ou etil, e X é Cl, Br ouI; pré-formado ou gerado in si tu por troca aniônica usandoiodeto de sódio) reage com um éster de glicina protegido,composto 2.600 (particularmente em que PG1 é metil ou etile PG4 é tolueno-4-sulfonil ou 2,4-dimetoxibenzil) napresença de uma base adequada como carbonato de potássio,opcionalmente na presença de iodeto de sódio, em umsolvente adequado como DMF, por exemplo, em temperaturaambiente por cerca de 2 a 24 h. Após o fim da reação, ocomposto resultante 2.700 pode ser recuperado por técnicasconvencionais como neutralização, extração, precipitação,cromatografia, filtração e outros; ou, alternativamente,usado na próxima etapa sem purificação e/ou isolação.Alternativamente, composto 2.700 com um grupo OH fenólicopode ser transformado aos éteres de fenol correspondentespor O-alquilação usando métodos convencionais como, por viade exemplo, refluxo com eletrófilos como brometo de benzilaetc. na presença de uma base.Composto 2.7 00 em que PG4 é, por exemplo, 2,4-dimetoxibenzil, pode ser ciclizado ao composto 2.800 portratamento com uma base adequada como, por via de exemplo,
2 equivalentes de terc-butóxido de potássio, em THF a 0°Cpor cerca de 1 h e então temperatura ambiente por cerca de
3 h. Após o fim da reação, o composto resultante 2.800 podeser recuperado por técnicas convencionais comoneutralização, extração, precipitação, cromatografia,filtração e outros; ou, alternativamente, usado na próximaetapa sem purificação e/ou isolação. Composto 2.800 é entãotratado com cloreto de tionila, por exemplo, cerca de 1,5equivalente, em um solvente adequado como diclorometano a0°C por cerca de 1 h e então temperatura ambiente por cercade 3 h. Após o fim da reação, o composto resultante 1.300pode ser recuperado por técnicas convencionais comoneutralização, extração, precipitação, cromatografia,filtração e outros; ou, alternativamente, usado na próximaetapa sem purificação e/ou isolação. Alternativamente,composto 2.700 em que PG+ é, por exemplo, tolueno-4-sulfonil, pode ser ciclizado por tratamento com uma baseadequada como, por via de exemplo, 3 a 4 equivalentes demetóxido de sódio em metanol em temperatura ambiente por 3h a 3 dias. Após o fim da reação, o composto resultante1.300 pode ser recuperado por técnicas convencionais comoneutralização, extração, precipitação, cromatografia,filtração e outros; ou, alternativamente, usado na próximaetapa sem purificação e/ou isolação.
Composto 1.3 00 também pode ser alterado pormodificação de suas porções R1f R2, R3 e/ou R4. Por exemplo,R2 é SPh então a porção R2 pode ser transformada em SO2Phusando técnicas de oxidação convencionais como, por via deexemplo, tratamento com ácido m-cloroperoxibenzóico emmetilenocloreto em temperatura ambiente. Alternativamente,se R4 é, por exemplo, iodo, o átomo de iodo pode sersubstituído com fenóis ArOH como, por exemplo, orto, meta,e para-metoxifenol, para gerar as 8-ariloxi isoquinolinascorrespondentes por reação da iodo-isoquinolina com ArOH,por exemplo, 5 equivalentes em um solvente adequado comoDMF em temperatura de refluxo na presença de uma baseadequada, como 5 equivalentes de carbonato de césio, e umcatalisador adequado, como 1 equivalente de CuCl e 0,4equivalente de 2,2,6,6-tetrametilheptano-3,5-diona, porcerca de 15 min. Após o fim da reação, o compostoresultante 1.300 pode ser recuperado por técnicasconvencionais como neutralização, extração, precipitação,cromatografia, filtração e outros; ou, alternativamente,usado na próxima etapa sem purificação e/ou isolação.
Composto 2.500, para uso nas reações acima descritas,pode ser obtido com o uso dos métodos apontados no Esquema5 (veja também US2006/217416).
<formula>formula see original document page 56</formula>Esquema 5
R1, R2i R3 e R4 são como aqui definido. Composto 2.500,particularmente ésteres de ácido orto-toluico como 3.100,3.300, 3.400, ou 3.800 em que R é, por exemplo, metil ouetil, pode ser halogenado, por via de exemplo, por adiçãode uma quantidade estoiquiométrica ou um leve excesso de N-bromossuccinimida na presença de uma quantidade cataliticade benzoilperóxido, azobisisobutironitrila, ou um outroiniciador de radical livre adequado em CCl4, benzeno ou umoutro solvente adequado, por exemplo, em temperatura derefluxo. Após o fim da reação, composto 2.500 pode serrecuperado por técnicas convencionais como neutralização,extração, precipitação, cromatografia, filtração e outros;ou, alternativamente, usado na próxima etapa sempurificação e/ou isolação.
Composto 3.100 é acessível tipicamente por reação deuma mistura do sal de sódio de composto 2.900, um leveexcesso de fenolato de sódio ArONa, uma quantidadecatalitica de cobre bronze, e 1,2-diclorobenzeno, porexemplo, em temperatura de refluxo por cerca de 2 h. Após ofim da reação, composto 3.000 pode ser recuperado portécnicas convencionais como neutralização, extração,precipitação, cromatografia, filtração e outros; ou,alternativamente, usado na próxima etapa sem purificaçãoe/ou isolação. Compostos 3.000 e 3.200 são facilmenteconvertidos aos ésteres correspondentes, compostos 3.100 e3.300, respectivamente, usando métodos convencionais comorefluxo em um álcool adequado como metanol ou etanol napresença de ácido sulfúrico concentrado; ou refluxo juntocom um reagente de alquilação como dimetilsulfato napresença de uma base como carbonato de potássio em umsolvente adequado como dietilcetona. Composto 3.400 podeser obtido por adição do composto 3.300, um excesso defenol, um excesso de carbonato de césio, e um excesso deácido 1-naftóico, peneiras moleculares, uma quantidadecatalitica de acetato de etila, e um solvente adequado comotolueno anidro a uma quantidade catalitica de complexocobre (I) trifluormetanossulfonato-benzeno em temperaturaambiente. A mistura é refluída sob nitrogênio por cerca de2 dias antes de ser resfriada até a temperatura ambiente efiltrada. Composto 3.400 pode ser recuperado por técnicasconvencionais como neutralização, extração, precipitação,cromatografia, filtração e outros; ou, alternativamente,usado na próxima etapa sem purificação e/ou isolação.Alternativamente, uma mistura de composto 3.300, um excessode um fenol substituído adequado, um excesso de carbonatode césio, um excesso de 2,2,6,6-tetrametilheptano-3,5-dionae cobre (I) cloreto em N-metil-2-pirrolidona pode seraquecida a 100 a 150°C por 1-5 dias, resfriada até atemperatura ambiente, e extinta com água. Composto 3.400pode ser então recuperado por técnicas convencionais comoneutralização, extração, precipitação, cromatografia,filtração e outros; ou, alternativamente, usado na próximaetapa sem purificação e/ou isolação. Composto 3.800 éfacilmente accessível por tratamento de 3.700 com terc-butildimetilsililcloreto.
Alternativamente, composto 2.500 é obtido por reaçãode ftalamidas adequadamente substituídas como composto3.600 com reagentes adequados de halogenação como, por viade exemplo, 1,3 equivalente de tionilcloreto na presença decatalisadores adequados como ácido bórico e óxido detrifenilfosfino a 130 a 140°C por cerca de 18 h seguido portratamento com um álcool adequado como metanol. Composto2.500 pode ser recuperado por técnicas convencionais comoneutralização, extração, precipitação, cromatografia,filtração e outros; ou, alternativamente, usado na próximaetapa sem purificação e/ou isolação. Composto 3.600 éfacilmente obtido por reação de 3.500 com brometo debenzilzinco usando uma variante da ligação de Negishi.
E. Teste de Composto
A atividade biológica dos compostos da invenção podeser avaliada com o uso de quaisquer métodos convencionaisconhecidos. Métodos de ensaio adequados são bem conhecidosna técnica. Os seguintes ensaios são apresentados apenascomo exemplos e não devem ser limitantes. Os compostos dainvenção são ativos em pelo menos um dos seguintes ensaios.
É contemplado que devido à substituição de ciano naposição C-I dos compostos de isoquinolina, os compostos dainvenção mostram eficácia surpreendente e inesperadamentemelhorada sobre compostos comparáveis que não possuem cianona posição C-I. Por exemplo, compostos que têm um ciano naposição C-I do anel de isoquininolina, quando comparados acompostos correspondentes que têm, por exemplo, hidrogênio,metil, ou halogênio, na posição C-I são mais que 2 vezes,mais particularmente, mais que 4 vezes, ainda maisparticularmente mais que 10 vezes ou 50 vezes mais potentesno aumento dos níveis de eritropoietina circulante.Exempl os disso sao mais completamente discutidos no Exemplo54 .
a. Ensaio de estabilização de HIFa com base em célulaCélulas humanas derivadas de vários tecidos sãoseparadamente semeadas em placas de cultura de 3 5 mm ecrescem a 37°C, 20% O2, 5% CO2 em meio de cultura padrão,por exemplo, DMEM, 10% FBS. Quando as camadas de célulasatingem confluência, o meio é trocado por meio OPTI-MEM(Invitrogen Life Technologies, Carlsbad CA) e as camadas decélulas são incubadas por aproximadamente 24 horas em 2 0%O2, 5% CO2 a 37°C. Composto ou 0,013% DMSO é entãoadicionado ao meio existente, e a incubação é continuada deum dia para o outro.
Após incubação, o meio é removido, centrifugado, eestocado para análise (veja ensaios de VEGF e EPO abaixo).As células são lavadas duas vezes em solução salinatamponada por fosfato fria (PBS) e então lisadas em 1 mL de10 mM Tris (pH 7,4), 1 mM EDTA, 150 mM NaCl, 0,5% IGEPAL(Sigma-Aldrich, St. Louis MO), e uma mistura de inibidor deprotease (Roche Molecular Biochemicals) por 15 minutos emgelo. Os lisados de células são centrifugados a 3.000 xgpor 5 minutos a 4 °C, e as frações citosólicas(sobrenadante) são coletadas. Os núcleos (pélete) sãoressuspensos e lisados em 100 μL de 20 mM HEPES (pH 7,2),400 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM ditiotreitol, e uma mistura deprotease (Roche Molecular Biochemicals), centrifugados a13.000 xg por 5 minutos a 4°C, e as frações de proteínanuclear (sobrenadante) são coletadas.
As frações nucleares são analisadas para HIF-Ia usandoum imunoensaio QUANTIKINE (R&D Systems, Inc., MinneapolisMN) de acordo com as instruções do fabricante,b. Ensaios de ELISA de EPO e VEGF copm base em célulaMeio condicionado coletado de culturas de células comoacima descrito é analisado para expressão de fator decrescimento vascular endotelial (VEGF) e/ou eritropoietina(EPO) com o uso de um imunoensaio adequado QUANTIKINE (R&DSystems) de acordo com as instruções do fabricante.
c. Ensaio de HIF-PH
Ácido cetoglutárico sal de a- [I-14C] -sódio, sal deácido cetoglutárico- [I-14C] -sódio, sal de sódio de ácidoalfacetoglutárico, e peptideo purificado por HPLC podem serobtidos de fontes comerciais, por exemplo, Perkin-Elmer(Wellesley MA), Sigma-Aldrich, e SynPep Corp. (Dublin CA),respectivamente. Peptideos para uso no ensaio podem serfragmentos de HIFa, como acima descrito ou como reveladona Publicação Internacional WO 2005/118836, aquiincorporada por referência. HIF-PH, por exemplo, HIF-PH2(EGLNl) pode ser expresso, por exemplo, em células Hi5 deinseto e parcialmente purificado, por exemplo, através umacoluna de cromatografia de troca iônica SP. A atividade daenzima é determinada por captura de 14CO2 usando um ensaiodescrito por Kivirikko and Myllyla (1982, Methods Enzymol82:245-304). As reações do ensaio contêm 50 mM HEPES (pH7,4), 100 μΜ de sal de sódio de ácido a-cetoglutárico, 0,30μ0ί/ηΛ sal de a- [I-14C] -sódio de ácido a-cetoglutárico; 40μΜ FeSO4, ImM ascorbato, 1541,8 unidades/mL Catalase, comou sem 50 μΜ substrato de peptideo e várias concentraçõesde composto da invenção. Reações são iniciadas por adiçãode enzima de HIF-PH.
A modificação percentual peptídeo-dependente écalculada por subtração da modificação percentual naausência de peptideo da modificação percentual na presençade peptideo de substrato. A inibição percentual e IC50 sãocalculadas com o uso de modificação percentual peptídeo-dependente em concentrações inibidoras dadas. 0 cálculo devalores de IC50 para cada inibidor é conduzido, porexemplo, com o uso de programa GraFit (Erithacus SoftwareLtd., Surrey UK).
Os compostos da presente invenção quando testados emensaios, demonstraram melhor atividade quando comparados acompostos não ciano, como mostrado na Tabela 1 abaixo. Atabela 1 pode ser encontrada no exemplo 54.F. Formulações farmacêuticas e vias de administração
Os compostos da presente invenção podem ser liberadosdiretamente ou em composições farmacêuticas junto comveículos ou excipientes adequados, como é bem conhecido natécnica. Vários tratamentos aqui englobados podemcompreender a administração de uma quantidade eficaz de umcomposto da invenção a um indivíduo em necessidade, porexemplo, um indivíduo que está em risco de ter anemiadevido, por exemplo, a insuficiência renal crônica,diabetes, câncer, AIDS, terapia de radiação, quimioterapia,diálise renal, ou cirurgia. Em uma modalidade preferida, oindivíduo é um mamífero, e em uma modalidade maispreferida, o indivíduo é um ser humano.
Uma quantidade eficaz de um composto pode serfacilmente determinada por experimentação rotineira, assimcomo a via de administração mais eficaz e conveniente e aformulação mais adequada. Várias formulações e sistemas deliberação de medicamento são disponíveis na técnica. Veja,por exemplo, Gennaro, A.R., ed. (1995) Remington1SPharmaceutical Sciences, supra.
Vias de administração adequadas podem incluir, porexemplo, administração oral, retal, transmucosa, nasal, ouintestinal e liberação parenteral, incluindo intramuscular,subcutânea, injeção intramedular, bem como intratecal,direta intraventricular, intravenosa, intraperitoneal,intranasal, ou injeção intra-ocular. 0 composto oucomposição desse pode ser administrado em uma maneira localem vez de sistêmica. Por exemplo, um composto ou composiçãodesse pode ser liberado via injeção ou em um sistema deliberação de medicamento direcionado, como uma formulaçãode depósito ou de liberação sustentada.
As composições farmacêuticas da presente invençãopodem ser manufaturadas por qualquer um dos métodos bemconhecidos na técnica, como por processos de misturaconvencional, dissolução, granulação, confecção de drágeas,transformar em pó, emulsificação, encapsulação,aprisionamento ou Iiofilização. Como acima notado, ascomposições da presente invenção podem incluir um ou maisveículos fisiologicamente aceitáveis como excipientes eauxiliares que facilitam o processamento de moléculasativas em preparações para uso farmacêutico.
Formulação adequada é dependente da via deadministração escolhida. Para injeção, por exemplo, acomposição pode ser formulada em soluções aquosas,preferivelmente em tampões fisiologicamente compatíveiscomo solução de Hanks, solução de Ringer ou tampão desolução salina fisiológica. Para administração transmucosaou nasal, penetrantes adequados para a barreira a serpermeada são usados na formulação. Tais penetrantes sãogeralmente conhecidos na técnica. Em uma modalidadepreferida da presente invenção, os presentes compostos sãopreparados em uma formulação para administração oral. Paraadministração oral, os compostos podem ser formuladosfacilmente por combinação dos compostos ativos com veículosfarmaceuticamente aceitáveis bem conhecidos na técnica.Tais veículos capacitam os compostos da invenção a seremformulados como comprimidos, pílulas, drágeas, cápsulas,líquidos, géis, xaropes, caldos, suspensões e outros, paraingestão oral por um indivíduo. Os compostos também podemser formulados em composições retais como supositórios ouenemas de retenção, por exemplo, contendo basesconvencionais de supositório como manteiga de cacau ououtros glicerídeos.
As preparações farmacêuticas para uso oral podem serobtidas como excipientes sólidos, opcionalmente moendo amistura resultante, e processando uma mistura de grânulos,após adição de auxiliares adequados, se desejado, paraobter núcleos de comprimidos ou drágeas. Excipientesadequados sao, em particular, preenchedores como açúcares,incluindo lactose, sacarose, manitol, ou sorbitol;preparações de celulose como, por exemplo, amido de milho,amido de trigo, amido de arroz, amido de batata, gelatina,goma tragacanto, metil celulose, hidroxipropilmetil-celulose, sódio carboximetilcelulose, e/ou
polivinilpirrolidona (PVP). Se desejado, agentes dedesintegração podem ser adicionados, como a polivinilpirrolidona entrecruzada, agar, ou ácido algínico ou um saldesse como alginato de sódio. Também, agentes umectantescomo sódio dodecil sulfato podem ser incluídos.
Núcleos de drágeas são fornecidos com revestimentosadequados. Para esse objetivo, soluções concentradas deaçúcar podem ser usadas, que podem conter opcionalmentegoma arábica, talco, polivinil pirrolidona, carbopol gel,polietileno glicol, e/ou dióxido de titânio, soluções deIaca, e solventes orgânicos adequados ou misturas desolventes. Corantes ou pigmentos podem ser adicionados aoscomprimidos ou revestimentos de drágeas para identificaçãoou para caracterizar diferentes combinações de doses decomposto ativo.
Preparações farmacêuticas para administração oralincluem cápsulas push-fit feitas de gelatina, bem comocápsulas macias, seladas feitas de gelatina e umplastificante, como glicerol ou sorbitol. As cápsulas push-fit podem conter os ingredientes ativos em mistura compreenchedores como lactose, ligantes como amidos, e/oulubrificantes como talco ou estearato de magnésio e,opcionalmente, estabilizantes. Em cápsulas macias, oscompostos ativos podem ser dissolvidos ou suspensos emlíquidos adequados, como óleos graxos, parafina líquida, oupolietileno glicóis líquidos. Em adição, estabilizantespodem ser adicionados. Todas as formulações paraadministração oral devem estar em dosagens adequadas paratal administração.
Em uma modalidade, os compostos da presente invençãopodem ser administrados por via transdérmica, como atravésde um emplastro cutâneo, ou por via tópica. Em um aspecto,as formulações transdérmicas ou tópicas da presenteinvenção podem compreender adicionalmente um ou múltiplosintensificadores de penetração ou outros efetores,incluindo agentes que aumentam a migração do compostoliberado. A administração transdérmica ou tópica pode serpreferida, por exemplo, em situações em que a liberação alocalização específica é desejada.
Para administração por inalação, os compostos para usode acordo com a presente invenção são convenientementeliberados na forma de uma apresentação de spray em aerossolde embalagens pressurizadas ou um nebulizador, com o uso deum propelente adequado, por exemplo, diclorodifluormetano,triclorofluormetano, diclorotetrafluoretano, dióxido decarbono, ou qualquer outro gás adequados. No caso de umaerossol pressurizado, a unidade de dosagem adequada podeser determinada por fornecimento de uma válvula paraliberar uma quantidade medida. Cápsulas e cartuchos, porexemplo, de gelatina, para uso em um inalador ou insufladorpodem ser formuladas. Essa contêm tipicamente uma misturade pó do composto e uma base adequada de pó como Iactose ouamido.
Composições formuladas para administração parenteralpor injeção, por exemplo, por injeção em bolo ou infusãocontínua podem ser apresentadas em forma de dosagemunitária, por exemplo, em ampolas ou em recipientes demultidose, com um conservante adicionado. As composiçõespodem ter tais formas como suspensões, soluções, ouemulsões em veículos oleosos ou aquosos, e podem conteragentes formuladores como agentes de suspensão,estabilizantes e/ou agentes de dispersão. Formulações paraadministração parenteral incluem soluções aquosas ou outrascomposições em forma hidrossolúvel.
Suspensões dos compostos ativos também podem serpreparadas como suspensões de injeção oleosa adequada.Solventes lipofílicos adequados ou veículos incluem óleosgraxos como óleo de gergelim e ésteres de ácido graxosintéticos, como oleato de etila ou triglicerídeos, oulipossomos. Suspensões de injeção aquosa podem contersubstâncias que aumentam a viscosidade da suspensão, comosódio carboximetil celulose, sorbitol, ou dextrana.Opcionalmente, a suspensão também pode conterestabilizantes adequados ou agentes que aumentam asolubilidade dos compostos para permitir a preparação desoluções altamente concentradas. Alternativamente, oingrediente ativo pode estar em forma de pó paraconstituição com um veículo adequado, por exemplo, águaestéril livre de pirógeno, antes do uso.
Como acima mencionado, as composições da presenteinvenção também podem ser formuladas como uma a preparaçãode depósito. Tais formulações de longa ação podem seradministradas por implante (por exemplo, subcutâneo ouintramuscular) ou por injeção intramuscular. Portanto, porexemplo, os presentes compostos podem ser formulados commatérias poliméricos ou hidrofóbicos adequados (por exemplocomo uma emulsão em um óleo aceitável) ou resinas de trocaiônica, ou como derivados pouco solúveis, por exemplo, comouma sal pouco solúvel.
Veículos adequados para as moléculas hidrofóbicas dainvenção são bem conhecidos na técnica e incluem sistemasde co-solvente que compreendem, por exemplo, álcoolbenzílico, um tensoativo não polar, um polímero orgânicomiscível em água, e uma fase aquosa. 0 sistema de co-solvente pode ser o sistema VPD de co-solvente. VPD é umasolução de 3% w/v álcool benzílico, 8% w/v do tensoativonão polar polissorbato 80, e 65% w/v polietileno glicol300, até volume em etanol absoluto. O sistema VPD de co-solvente (VPD:5W) consiste em VPD diluído a 1:1 com 5%dextrose em solução de água. Esse sistema de co-solvente éeficaz na dissolução de compostos hidrofóbicos e produzbaixa toxicidade com administração sistêmica. Naturalmente,as proporções de um sistema de co-solvente podem variarconsideravelmente sem destruir suas características desolubilidade e toxicidade. Além disso, a identidade doscomponentes do co-solvente pode ser variada. Por exemplo,outros tensoativos não polares de baixa toxicidade podemser usados em vez de polissorbato 80, o tamanho da fraçãode polietileno glicol pode variar, outros polímerosbiocompatíveis podem substituir polietileno glicol, porexemplo, polivinil pirrolidona, e outros açúcares oupolissacarídeos podem substituir dextrose.
Alternativamente, outros sistemas de liberação paramoléculas hidrofóbicas podem ser empregados. Lipossomos eemulsões são exemplos bem conhecidos de veículos outransportadores de liberação para medicamentoshidrofóbicos. Sistemas de liberação lipossomais sãodiscutidos acima no contexto de sistemas de liberação degene. Certos solventes orgânicos como dimetilsulfóxidotambém podem ser empregados, embora comumente ao custo demaior toxicidade. Adicionalmente, os compostos podem serliberados com o uso de sistemas de liberação sustentada,como matrizes semipermeáveis de polímeros hidrofóbicossólidos contendo a quantidade eficaz da composição a seradministrada. Vários materiais de liberação sustentada sãoestabelecidos e disponível para aqueles de habilidade natécnica. Cápsulas de liberação sustentada podem, dependendode sua natureza química, liberar os compostos por algumassemanas até por 100 dias. Dependendo da natureza química eda estabilidade biológica do reagente terapêutico,estratégias adicionais para a estabilização de proteínapodem ser empregadas.
Para qualquer composição usada nos vários tratamentosaqui englobados, uma dose terapeuticamente eficaz pode serestimada inicialmente com o uso de uma variedade detécnicas bem conhecidas na técnica. Por exemplo, em umensaio de cultura de células, a dose pode ser formulada emmodelos animais para atingir uma faixa concentraçãocirculante que inclui a IC50 como determinado em cultura decélulas. As faixas de dosagem adequadas para seres humanospodem ser determinadas, por exemplo, pelo uso de dadosobtidos de ensaios de cultura de células e de outrosestudos animais.
A dose terapeuticamente eficaz de um composto refere-se àquela quantidade do composto que resulta em melhoria desintomas ou um prolongamento da sobrevivência em umindivíduo. A toxicidade e eficácia terapêutica de taismoléculas podem ser determinadas por procedimentosfarmacêuti cos padrao em culturas de células ou animaisexperimentais, por exemplo, por determinação da LD50 (adose letal para 50% da população) e a ED50 (a doseterapeuticamente eficaz em 50% da população). A proporçãode dose de efeitos tóxicos para terapêuticos é o índiceterapêutico, que pode ser expresso como a proporçãoLD50/ED50. Compostos que exibem altos índices terapêuticossão preferidos.
As dosagens estão preferivelmente dentro de uma faixade concentrações circulantes que incluem a ED50 com poucaou nenhuma toxicidade. As dosagens podem variar nessa faixadependendo da forma de dosagem empregada e da via deadministração utilizada. A formulação exata, via deadministração, e dosagem devem ser escolhidas, de acordocom métodos conhecidos na técnica, em vista dacaracterísticas específicas da condição do indivíduo.
A quantidade da dosagem e intervalo podem serajustados individualmente para fornecer níveis plasmáticosda porção ativa que são suficientes para modular umparâmetro desejado, por exemplo, níveis plasmáticos deeritropoietina endógena, ou seja concentração mínima eficaz(MEC) . A MEC irá variar para cada composto mas pode serestimada a partir de, por exemplo, dados in vitro. Asdosagens necessárias para atingir a MEC dependerão dascaracterísticas individuais e da via de administração.Compostos ou composições desses devem ser administrados como uso de um regime que mantém os níveis plasmáticos acimada MEC por cerca de 10-90% da duração do tratamento,preferivelmente cerca de 30-90% da duração do tratamento, emais preferivelmente entre 50-90%. Em casos deadministração local ou captação seletiva, a concentraçãolocal eficaz do medicamento pode não estar relacionada àconcentração plasmática. Alternativamente, a modulação deum parâmetro desejado, por exemplo, estímulo deeritropoietina endógena, pode ser atingida por 1)administração de uma dose de carga seguida por uma dose demanutenção, 2) administração de uma dose de indução paraatingir rapidamente o parâmetro desejado, por exemplo,níveis de eritropoietina, em uma faixa alvo, seguida poruma dose menor de manutenção para manter, por exemplo,hematócrito, em uma faixa alvo desejada, ou 3) dosagemrepetida intermitente.
A quantidade de composto ou composição administradaserá, de fato, dependente de uma variedade de fatores,incluindo o sexo, idade, e peso so indivíduo sendo tratado,da severidade da condição, do modo de administração, e dojulgamento do médico.
A presente composições pode, se desejado, serapresentada em uma embalagem ou dispositivo de distribuiçãoque contém uma ou mais formas de dosagem unitária quecontêm o ingrediente ativo. Tal embalagem ou dispositivopode, por exemplo, compreender folha de metal ou plástico,como um "blister pack". A embalagem ou dispositivo dedistribuição pode ser acompanhado por instruções paraadministração. As composições que compreendem um compostoda invenção formuladas em um veículo farmacêuticocompatível também podem ser preparadas, colocadas em umrecipiente adequado, e rotuladas para o tratamento de umacondição indicada. As condições adequadas indicadas norótulo podem incluir tratamento de condições, distúrbios,ou doenças em que a anemia é uma indicação principal.
Essas e outras modalidades da presente invençãoocorrerão facilmente para aqueles de habilidade comum natécnica em vista dessa revelação, e são especificamentecontempladas.
EXEMPLOS
A invenção é também compreendida por referência aosseguintes exemplos, que são puramente exemplares dainvenção. A presente invenção não é limitada em escopopelas modalidades exemplificadas, que devem ser ilustraçõesde aspectos únicos da invenção apenas. Quaisquer métodosque sejam funcionalmente equivalentes estão dentro doescopo da invenção. Várias modificações da invenção emadição àquelas aqui descritas serão aparentes para aqueleshabilitada na técnica a partir da descrição antecedente efiguras que acompanham. Tais modificações estão dentro doescopo das reivindicações em anexo.
A menos que determinado de outro modo, todas astemperaturas estão em graus Celsius. Também, nessesexemplos e em outras partes, as abreviações têm osseguintes significados:bs = singleto amploDMSO = dimetil sulfóxidod = dupletodd = duplo dupletodppf = 1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocenoDMF = dimetil formamidaDMEM = meio de Eagle modificado por DulbeccoEtOAc = acetato de etilaEDTA = ácido etileno diaminatetraacéticoFBS = soro bovino fetalg = gramah = horaHPLC = Cromatografia Líquida de alta performanceHz = hertzMS = espectroscopia de MassaMeONa = metóxido de sódioMeOH = metanolMHz = mega HertzμΜ =micromolar
pL = microlitro
mg = miligrama
mL = mililitro
mM = milimolar
mm = milímetro
mmol = milimolar
min = minuto
M = molar
mol = moles
m = multipleto
N = normal
NMR = ressonância magnética nuclear
Pd/C = paládio sobre carbono
Pd2(dba)3 = tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(O)
q = quarteto
s = singleto
Ts = tolueno-4-sulfonil
t = tripleto
Exemplo 1
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino] -acético
a. Butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico
Uma mistura de butil éster de ácido 1-bromo-4-hidroxi-isoquinolina-3 -carboxí Iico (1,621 g, 5 mmol; preparada comomostrado no Esquema 2, de acordo com US 2004/0254215 Al; 1HRMN (200 MHz, CD3OD) δ 11,89 (s,lH), 8,41 (m, 1H), 8,25 (m,1H) , 7,84 (m, 2H) , 4,49 (t, J=7,0 Hz, 2H) , 1,87 (in, 2H) ,1,47 (m, 2H) , 1,00 (t, J=7,2 Hz, 3H) ) , CuCN (905 mg, 10mmol) e dimetilformamida (20 mL) foi refluída com agitaçãosob nitrogênio por 5 min. Após resfriamento até atemperatura ambiente a mistura foi diluída com água (3 00mL) . Então acetato de etila (150 mL) foi adicionado e amistura foi agitada completamente por 5 min antes de serfiltrada através de um absorvente de Celite. A faseorgânica do filtrado foi separada, e seca sobre MgSO4 antesda adição de sílica gel. A mistura foi concentrada invácuo. O resíduo foi adicionado no topo de uma coluna curtapreenchida com sílica gel. Eluição com diclorometano gerouo composto de título como um sólido amarelo (627 mg); MS-(-)-íon: M-I= 269,2.
b. ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
Uma mistura de butil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (89 mg, 0,33 mmol), glicina (375mg, 5 mmol), e uma solução de 0,5 N de MeONa em MeOH (8 mL,4 mmol) foi refluída com agitação por 4 8 h antes de serconcentrada in vácuo. 0 resíduo foi dissolvido em água (2020 mL) . A solução foi lavada com éter dietílico antes de seupH ser ajustado a 2 a 3 por adição de 6N de HCl aquoso. Asuspensão resultante foi extraída com acetato de etila (1 χ3 0 mL) . A fase orgânica foi seca sobre MgSO= e concentradain vácuo para gerar o composto de título como um sólidoamarelo (72 mg); MS-(-)-íon: M-I = 270,2.
Exemplo 2
Ácido 2-(S) -[(l-Ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico
Uma mistura de butil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (135 mg, 0,5 mmol, veja Exemplol(a)), (S)-alanina (225 mg, 2,5 mmol) e uma solução de 0,5N de MeONa em metanol (5 mL, 2,5 mmol) foi aquecida em umforno de microondas com agitação por 40 min a 120°C antesda mistura ser concentrada in vácuo. Ao resíduo foiadicionada água (10 mL) e a mistura foi lavada com éterdietílico (4 χ 40 mL) . 0 pH da solução purificada foiajustado a cerca de 2 pela adição de 6N de HCl aquoso. Asuspensão resultante foi extraída com acetato de etila (1 χ4 0 mL) . A fase orgânica foi seca sobre MgSO4 e concentradain vácuo para gerar o composto de título como um sólidoamarelo (101 mg); MS-(-)-íon: M-I = 284,1.
Exemplo 3
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-7-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a. Butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-7-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido l-bromo-4-hidroxi-7-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (624 mg, 1,5 mmol;preparada como mostrado no Esquema 2, e de acordo com US2004/0254215 Al, +H RMN (CDCl3): δ = 11,89 (s, 1 Η) , 8,35(d, 1 Η) , 7,63 (d, 1 Η) , 7,08 a 7,52 (m, 6 Η) , 4,47 (t, 2Η), 1,84 (m, 2 Η), 1,48 (m, 2 Η), 0,99 (t, 3 H)), CuCN (271mg, 3 mmol) e dimetilf ormamida (6 mL) foi refluída comagitação sob nitrogênio por 15 min. Após resfriamento até atemperatura ambiente a mistura foi diluída com acetato deetila (100 mL). A suspensão resultante foi filtrada atravésde um absorvente de Celite. O filtrado foi lavado com água(2 χ 250 mL) , e seco sobre MgSO4 antes da adição de sílicagel. Subseqüentemente, a mistura foi concentrada in vácuo.0 resíduo foi adicionado no topo de uma coluna curtapreenchida com sílica gel. Eluição com diclorometano gerouo composto de título como um sólido branco (313 mg); MS-(-)-íon: M-I = 361,2.
b. ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-7-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
O composto de título foi obtido de butil éster deácido 1-ciano-4-hidroxi-7 -fenoxi-isoquinoIina-3-carboxíIicoe glicina análogo ao Exemplo 1(b)); MS-(-)-íon: M-I362,O.
Exemplo 4
Ácido 2-(S) -[(l-Ciano-4-hidroxi-7-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico
O composto de título foi obtido de butil éster deácido 1-ciano-4-hidroxi- 7 -fenoxi-isoquinolina-3 -carboxíIico15 (veja Exemplo 3a) e (S)-alanina em analogia ao exemplo 2;MS-(- )-íon: M-I = 376,0.
Exemplo 5
Ácido 2-(R) -[(l-Ciano-4-hidroxi-7-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico
O composto de título foi obtido de butil éster deácido 1-ciano-4-hidroxi-7-fenoxi-isoquinolina-3-carboxíIico(veja Exemplo 3a) e (R)-alanina em analogia ao exemplo 2;MS-(- )-íon: M-I = 376,1.
Exemplo 6
Ácido {[l-Ciano-7-(4 - flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a. butil éster de ácido l-Ciano-7-(4 - flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico
Esse composto foi sintetizado a partir de butil ésterde ácido l-bromo-7-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carboxílico (preparada como mostrado no Esquema 2, deacordo com US 2004/0254215 Al, 1H RMN (CDCl3) δ = 11,89 (s,1 Η) , 8,36 (d, 1 Η) , 7,57 (d, 1 Η) , 7,44 a 7,50 (m, 1 Η) ,7,08 a 7,16 (m, 4 Η) , 4,47 (t,. 2 Η) , 1,78 a 1,93 (m, 2 Η) ,5 1,38 a 1,58 (m, 2 Η), 0,99 (t, 3 H)) e CuCN em analogia aoexemplo 3(a)); MS-(-)-íon: M-I = 379,2.
b. ácido { [l-Ciano-7-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}acético
0 composto de título foi obtido de butil éster deácido l-ciano-7-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3 -carboxílico e glicina em analogia ao exemplo lb); MS-(-)-íon: M-I = 380,0.Exemplo 7
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-7-trifluormetil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a. butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-7-trifluormetil-isoquinolina-3-carboxílico
Esse composto foi sintetizado a partir de butil ésterde ácido 1-bromo-4-hidroxi- 7 -trifluormetilisoquinolina-3 -carboxílico (preparada como mostrado no Esquema 2, deacordo com US 2004/0254215 Al, 1H RMN (CDCl3): δ = 11,96(s, 1 Η), 8,52 a 8,56 (m, 2 Η), 7,99 (dd, 1 Η), 4,51 (t, 2Η), 1,86 (m, 2 Η), 1,48 (m, 2 Η), 1,00 (t, 3 H)) e CuCN emanalogia ao exemplo 1(a)); MS-(-)-íon: M-I = 337,1.
b. ácido [ (l-Ciano-4-hidroxi-7-trifluormetil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
0 composto de título foi obtido de butil éster deácido 1-ciano-4-hidroxi-7-trifluormetilisoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemplo 1(b)); MS-(-)-ion: M-I = 338,0.Exemplo 8
Ácido [(7-Cloro-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil) -amino]-acético
a. butil éster de ácido 7-Cloro-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Esse composto foi sintetizado a partir de butil ésterde ácido l-bromo-7-cloro-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (preparada como mostrado no Esquema 2, deacordo com US 2004/0254215 Al, 1H RMN (CDCl3): δ = 11,92(S, 1 Η) , 8,34 (d, 1 Η) , 8,25 (d, 1 Η) , 7,75 (dd, 1 Η) ,4,49 (t, 2 Η), 1,86 (m, 2 Η), 1,48 (m, 2 Η), 1,00 (t, 3 H))e CuCN em analogia ao exemplo 1 (a) ) ; MS-(-)- ion: M-I =303,2.
b. ácido [(7-Cloro-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
O composto de título foi obtido de butil éster deácido 7-cloro-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílicoe glicina em analogia ao exemplo 1(b)); MS-(-)-íon: M-I =303, 9
Exemplo 9
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a. etil éster de ácido 3-Iodo-2-metil-benzóico
A uma solução agitada de ácido 3 - iodo-2-metil-benzóico(30 g, 0,11 mol) em etanol (425 mL) foi adicionado cloretode tionila (42 mL, 0,57 mol) a O0C. A mistura foi refluídapor 4,5 h antes de ser resfriada até a temperatura ambientee concentrada in vácuo. O resíduo foi dividido entre éteretílico e solução saturada de bicarbonato de sódio. Acamada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre sulfatode sódio anidro e foi concentrada in vácuo para gerar ocomposto de título como um óleo amarelo pálido (32,28 g) :1H RMN (CDCl3, 200 MHz): δ = 7,94 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,70(d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,90 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,35 (q, J =7,2 Hz, 2H), 2,65 (s, 3H), 1,38 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
b. etil éster de ácido 2-Metil-3-fenoxi-benzóico
A uma mistura de etil éster de ácido 3-iodo-2-metil-benzóico (30,04 g, 0,10 mol), fenol (14,62 g, 0,16 mol) ,carbonato de césio (50,6 g, 0,16 mol), ácido 1-naftóico(26,7 g, 0,16 mol), peneiras moleculares (25,6 g, 4angstrom, trama 4-8) , acetato de etila (505 gL, 5 mmol) , etolueno anidro (108 mL) foi adicionado um complexo cobre (I)trifluormetanossulfonato-benzeno (5,21 g, 0,01 mol) emtemperatura ambiente. A mistura foi refluída sob nitrogêniopor 4 3 h antes de ser resfriada até a temperatura ambientee filtrada. O bolo do filtro foi suspenso em acetato deetila (250 mL) e o caldo foi agitado por 0,5 h. Oscomponentes sólidos foram então separados por filtração edescartados. Os filtrados foram combinados, lavados comágua, solução aquosa de 0,5 N de hidróxido de sódio (2 χ) ,e salmoura, secos sobre sulfato de sódio anidro econcentrados in vácuo. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de acetato de etila e hexanos. As fraçõescontendo tanto o composto de título quanto o material deiniciação etil éster de ácido 3-iodo-2-metil-benzóico foramreunidas e concentradas in vácuo para gerar um óleo amarelo(15,9 g) ; frações contendo apenas o composto de títuloforam reunidas e concentradas in vácuo para gerar um óleoamarelo (5,25 g) : 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ = 7,63 (m,1Η) , 7,24 (m, 3Η) , 7,05 (m, 2Η) , 6,87 (m, 2Η) , 4,37 (q, J =7,0 Hz, 2Η), 2,45 (s, 3Η), 1,40 (t, J= 7,0 Hz, 3Η).
c. etil éster de ácido 2-Bromometil-3-fenoxi-benzóicoUma mistura de etil éster de ácido 2-metil-3-fenoxi-benzóico (5,23 g, 0,02 mol), N-bromossuccinimida (3,82 g,0,02 mol) e peróxido de benzoila (247,5 mg, 1,1 mmol) emtetracloreto de carbono (80 mL) foi refluída por 4 h antesde ser resfriada até a temperatura ambiente e filtrada. Ofiltrado foi lavado com água, solução saturada aquosa debicarbonato de sódio, e salmoura antes de ser seca sobresulfato de sódio anidro e concentrada in vácuo para gerar ocomposto de título como um óleo amarelo (7,08 g) : 1H RMN(CDCl3, 200 MHz) : δ = 7,66 (m, 1H) , 7,24 (m, 3H) , 7,03 (m,1H), 6,98 (m, 3H), 5,09 (s, 3H), 4,42 (q, J = 7,2 Hz, 2H),1,44 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
d. etil éster de ácido 2-{ [Metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]-metil}-3-fenoxi benzóico
Uma mistura de etil éster de ácido 2-bromometil-3-fenoxi-benzóico (6,83 g, 0,02 mol), metil éster de ácido(tolueno-4-sulfonilamino)-acético (4,97 g, 0,02 mol),iodeto de sódio (4,59 g, 0,03 mol), carbonato de potássio(4,24 g, 0,03 mol), e dimetilformamida anidra (50 mL) foiagitada em temperatura ambiente por 4 h antes de serdiluída com água e extraída com acetato de etila. A camadaorgânica foi separada e lavada com água e salmoura. Entãoela foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada invácuo. O resíduo foi purificado, por cromatografia emcoluna flash em sílica gel com um gradiente de acetato deetila e hexanos para gerar o composto de título como umóleo amarelo (5,10 g): MS: (+) m/z 497,8 (M+l).e. metil éster de ácido 4-Hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxíIico
A uma solução agitada de etil éster de ácido 2-{[metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]-metil}-3-fenoxi-benzóico (5,07 g, 0,01 mol) em metanol anidro (22mL) foi adicionada em gotas uma mistura de solução demetóxido de sódio (30% em peso, 5,6 mL) e metanol anidro (4mL) a 0°C. A mistura foi agitada a O0C por 10 minutos eentão em temperatura ambiente por mais 3 h antes de serconcentrada in vslcuo. Água foi adicionada e o pH do caldofoi ajustado com IN HCl aquoso ao pH = 10. 0 precipitadoformado foi separado por filtração, lavado com água,solução saturada de bicarbonato de sódio, e água antes deser seco in vácuo para gerar o composto de título como umsólido branco (2,21 g) : 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ = 11,73(s, 1H) , 9,21 (s, 1H) , 8,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H) , 7,61 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 7,40(m, 2H), 7,13 (m, 4H), 4,10 (s, 3H).
f. metil éster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de metil éster de ácido 4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (103 mg, 0,35 mmol), N-bromossuccinimida (65 mg, 0,37 mmol), peróxido de benzoila(4,2 mg, 0,02 mmol), e tetracloreto de carbono (2,5 mL) foirefluída por 4 h antes de ser resfriada até a temperaturaambiente e filtrada. O filtrado foi lavado com água,solução saturada aquosa de bicarbonato de sódio, e salmouraantes de ser seco sobre sulfato de sódio anidro econcentrado in vácuo para gerar o composto de título comoum sólido amarelo (128 mg): MS: (+) m/z 374,0, 376,0 (M+l,79Br/81Br) , MS: (-) m/z 372,1, 374,1 (M-l, 79Br/81Br) .g. metil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de metil éster de ácido l-bromo-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxilico (1,22 g, 3,3 mmol),cianeto de cobre(I) (585 mg, 6,6 mmol), e dimetilformamidaanidra (16 mL) foi refluída por dez minutos antes de serresfriada até a temperatura ambiente e diluída com água. Aocaldo resultante foi adicionada uma mistura declorofórmio/isopropanol (3:1, 150 mL) . Depois de agitaçãopor 10 minutos os componentes sólidos foram separados porfiltração e descartados. A camada orgânica dO filtrado foilavado com água, e salmoura antes de ser seca sobre sulfatode sódio anidro e concentrada in vácuo. 0 resíduo foipurificado por cromatografia em coluna flash em sílica gelcom um gradiente de metanol e diclorometano para gerar ocomposto de título como um sólido branco (574 mg) : 1H RMN(CDCl3, 200 MHz): δ = 12,26 (s, 1H), 8,15 (m, 1H), 7,71 (t,J = 8,2 Hz, 1H), 7,38 (m, 2H), 7,17 (m, 4H), 4,12 (s, 3H).
h. ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acéticoUma mistura de metil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (322 mg, 1,0 mmol),glicina (1,51 g, 20,1 mmol), e uma solução de 0,5 Mmetóxido de sódio em metanol (38,2 mL) foi refluída por 31h antes de ser resfriada até a temperatura ambiente econcentrada in vácuo. Água (75 mL) foi adicionada e o pH dasuspensão amarela foi ajustado a 10 com IN HCl aquoso. Foiobtida uma solução amarela clara depios de 5 minutos desonificação. A solução foi lavada com diclorometano (2 χ 50mL). A camada aquosa restante foi acidifiçada ao pH = 3 comIN HCl aquoso. 0 precipitado branco formado foi separadopor filtração, lavado com água e seco in vácuo para gerar ocomposto de título como um sólido branco (354 mg) : 1H RMN(DMSO-d6, 200 MHz): δ = 12,86 (bs, 1H), 9,56 (t, 1H), 8,09(m, 1H) , 7,88 (t, J = 8,2 Hz, 1H) , 7,47 (m, 2H) , 7,21 (m,4H), 4,05 (d, J = 5,8 Hz, 2H).
Exemplo 10
Ácido {l[-Ciano-8-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a. etil éster de ácido 3-(4-flúor-fenoxi)-2-metil-benzóico
Uma mistura de etil éster de ácido 3-iodo-2-metil-benzóico (6,29 g, 0,02 mol), parafluorfenol (4,86 g, 0,04mol) , carbonato de césio (14,14 g, 0,04 mol), 2,2,6,6-tetrametilheptano-3,5-diona (447 μΙ, , 2 mmol) e cloreto decobre (I) (1,07 g, 0,01 mol) em N-metil-2-pirrolidonaanidra (38 raL) foi aquecida a 130°C por 3 dias antes de serresfriada até a temperatura ambiente, extinta com água efiltrada. 0 filtrado foi extraído com acetato de etila. Acamada orgânica foi lavada duas vezes com 0,5 N hidróxidode sódio, salmoura, seca sobre sulfato de sódio anidro econcentrada in vácuo. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de acetato de etila e hexanos para gerar ocomposto de título como um óleo verde pálido (2,99 g) : 1HRMN (CDCl3, 200 MHz): δ = 7,63 (m, 1H), 7,18 (m, 2H), 6,98(m, 2H) , 6,85 (m, 2H) , 4,37 (q, J = 7,0 Hz, 2H) , 2,45 (s,3H), 1,40 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
b. etil éster de ácido 2-Bromometil-3-(4-flúor-fenoxi)-benzóicoUma mistura de etil éster de ácido 3-(4-flúor-fenoxi)-2-metil-benzóico (2,63 g, 9,60 mmol), N-bromossuccinimida(1,79 g, 10,08 mmol) e peróxido de benzoila (116 mg, 0,48mmol) em tetracloreto de carbono (35 mL) foi refluída por 4h antes de ser resfriada até a temperatura ambiente edividida entre diclorometano e água. A camada orgânica foilavada com solução saturada aquosa de bicarbonato de sódio,salmoura, seca sobre sulfato de sódio anidro e concentradain vácuo para gerar o composto de título como um óleoamarelo (3,44 g) : 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ = 7,67 (m,1H), 7,27 (m, 2H), 7,01 (m, 4H), 5,09 (s, 3H), 4,42 (q, J =7,2 Hz, 2H), 1,44 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
c. etil éster de ácido 3 -(4 - flúor-fenoxi)-2 -{[metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]metil}-benzóico
Uma mistura de etil éster de ácido 2-bromometil-3-(4 -flúor-fenoxi)-benzóico (3,37 g, 9,57 mmol), metil éster deácido (tolueno-4-sulfonilamino)-acético (2,33 g, 9,57mmol), iodeto de sódio (2,15 g, 14,36 mmol) e carbonato depotássio (1,98 g, 14,36 mmol) em dimetilformamida anidra(22 mL) foi agitada em temperatura ambiente por 24 h antesde ser extinta, com água, e extraída com acetato de etila.A camada orgânica foi lavada com água, salmoura, seca sobresulfato de sódio anidro e concentrada in vácuo. O resíduofoi purificado por cromatografia em coluna flash em sílicagel com um gradiente de acetato de etila e hexano paragerar o composto de título como um óleo amarelo (2,67 g) :
MS: ( + ) m/z 538,13 (M+Na1) .
d. metil éster de ácido 8-(4 - flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílicoA uma solução agitada de etil éster de ácido 3- (4-flúor-fenoxi)-2-{[metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]-metil}-benzóico (2,66 g, 5,17 mmol) em metanolanidro (8 mL) foi adicionada em gotas uma solução demetóxido de sódio (3 0% em peso, 2,8 mL) e metanol (2 mL) a0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 10 minutos e então 3 hem temperatura ambiente antes de ser concentrada in vácuo.Água foi adicionada e o pH do caldo foi ajustado com 1 NHCl ao pH = 10. 0 precipitado resultante foi coletado porfiltração, lavado com água, bicarbonato de sódio saturado,e água, e foi seco in vácuo para gerar o composto de títulocomo um sólido branco (1,51 g): MS: (+) m/z 314,07 (M+l).
e. metil éster de ácido l-Bromo-8-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-i soquinolina-3 -carboxíIicoUma mistura de metil éster de ácido 8-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxí Iico (1,21 g, 3,87mmol), N-bromossuccinimida (723 mg, 4,06 mmol) e peróxidode benzoila (47 mg, 0,19 mmol) em tetracloreto de carbono(20 mL) foi refluída por 4 h antes de ser resfriada até atemperatura ambiente e dividida entre diclorometano e água.A camada orgânica foi lavada com bicarbonato de sódiosaturado aquoso, salmoura, e foi seca sobre sulfato desódio anidro e concentrada in vácuo. 0 resíduo foipurificado por cromatografia em coluna flash em sílica gelcom um gradiente de diclorometano e hexano para gerar ocomposto de título como um sólido amarelo pálido (84 3 mg) :MS: ( + ) m/z 392,00, 393,93 (M+l, 79Br/ 81Br).
f. metil éster de ácido l-Ciano-8-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIicoUma mistura de metil éster de ácido 1-bromo-8 -(4 -flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (400 mg,1,02 mmol) e cinaeto de cobre (I) (183 mg, 2,04 mmol) emdimetilformamida anidra (4 mL) foi refluída por dez minutosantes de ser resfriada até a temperatura ambiente e extintacom água. O caldo foi agitado com clorofórmio/isopropanol(3:1, 70 mL) e água por dez minutos e filtrado. A camadaorgânica foi lavada com água, salmoura, seca sobre sulfatode sódio anidro, concentrada in vácuo, e purificada porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de metanol e diclorometano para gerar o compostode título como um sólido branco (158 mg) : MS: ( + ) m/z339,07 (M+l).
g. ácido {[l-Ciano-8-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}acético
Uma mistura de metil éster de ácido l-ciano-8-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (112 mg,0,33 mmol), glicina (496 mg, 6,6 mmol), e uma solução 0,5 Mde metóxido de sódio em metanol (12,5 mL, 6,25 mmol) foirefluída por 39 h antes de ser resfriada até a temperaturaambiente e concentrada in vácuo. Água (75 mL) foiadicionada e o pH da suspensão amarela foi ajustado ao pH= 10 com 1 N HCl. A suspensão foi lavada com cloreto demetileno (2 χ 50 mL). A camada aquosa restante foiacidif içada ao pH = 3 com 1 N HCl. 0 precipitado brancoresultante foi coletado por filtração, lavado com água, eseco in vácuo para gerar o composto de título como umsólido branco (109 mg) : 1H RMN (DMS0-d6, 200 MHz) : δ =12,85 (bs, 1H) , 9,57 (br s, 1H) , 8,09 (d, 1H) , 7,83 (t,1H) , 7,27 (m, 5H) , 4,05 (d, J = 5,8 Hz, 2H) ; MS: ( + ) m/z382, 00 (M+l) .Exemplo 11
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-6-metoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a. Butil éster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-6-metoxi-isoçfuinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido 1,4-dihidroxi-6-metoxi-isoquinolina-3-carboxílico (1,53 g, 5,26 mmol,preparada de acordo com US 2 004/0254215 Al ou esquema 2),oxibtrometo de fósforo (6,04 g, 21,05 mmol), e acetonitrila(40 mL) foi refluída por 16 h antes de ser resfriada até atemperatura ambiente e dividida entre diclorometano esolução saturada aquosa de bicarbonato de sódio por vinteminutos. A mistura foi então filtrada. A camada orgânica dofiltrado foi separada, lavada com água, e salmoura, secasobre sulfato de sódio anidro e foi concentrada in vácuo. 0resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash emsílica gel com um gradiente de acetato de etila ediclorometano para gerar o composto de título como umsólido amarelo (290 mg): 1H RMN (CDCl3, 200 MHz): δ = 11,84(s, 1H) , 8,14(d, J = 9,4 Hz, 1H) , 7,62 (d, J = 2,3 Hz, 1H) ,7,83 (dd, J- 8,0 Hz, 2,7 Hz, 1H), 4,48 (t, J = 7,0 Hz, 2H),1,86 (m, 1H), 1,55 (m, 1H), 0,99 (t, J = 7,4 Hz).
b. butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6-metoxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido l-bromo-4-hidroxi-6-metoxi-isoquinolina-3-carboxílico (290 mg, 0,82 mmol) ecianeto de cobre (I) (14 7 mg, 1,64 mmol) em dimetilformamidaanidra (4 mL) foi refluída por dez minutos antes de serresfriada até a temperatura ambiente e extinta com água. Ocaldo resultante foi agitado com clorofórmio/isopropanol(3:1, 40 mL) e água por dez minutos e foi então filtrado. Acamada orgânica do filtrado foi separada, lavada com água,e salmoura, antes de ser seca sobre sulfato de sódio anidroe concentrada in vácuo. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de metanol e diclorometano para gerar o compostode título como um sólido branco (120 mg) : MS: ( + ) m/z301,01 (M+l).
c. ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-6-metoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
Uma mistura de butil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-6-metoxi-isoquinolina-3-carboxílico (104 mg, 0,35 mmol),glicina (523 mg, 6,97 mmol), e uma solução de 0,5 M demetóxido de sódio em metanol (13,2 mL, 6,6 mmol) foirefluída por 3 dias antes de ser resfriada até atemperatura ambiente e concentrada in vácuo. 0 resíduo foidissolvido em água (30 mL) e a solução foi extraída commetil terc-butil éter (2 χ 25 mL) A camada aquosa restantefoi acidifiçada ao pH = 3 com IN HCl (10 mL). O precipitadobranco resultante foi coletado por filtração, lavado comágua e seco in vácuo para gerar o composto de título comoum sólido branco (82 mg) : 1H RMN (DMS0-d6, 200 MHz) : δ =9,53 (t, 1H) , 8,10 (d, J - 9,0 Hz, 1H) , 7,57 (m, 2H) , 4,02(d, J = 6,2 Hz, 2H) , 3,98 (s, 3H) ; MS: ( + ) m/z 302,00(M+l).
Exemplo 12
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-6-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a. butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílicoSintetizado a partir de butil éster de ácido 1-bromo-4-hidroxi-6-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (preparado deacordo com US 2004/0254215 Al ou esquema 2, 1H RMN (CDCl3) :δ = 11,76 (s, 1 Η) , 8,22 (d, 1 Η) , 7,68 (d, 1 Η) , 7,10 a7,55 (m, 6 Η) , 4,46 (t, 2 Η) , 1,85 (m, 2 Η) , 1,48 (m, 2 Η) ,0,99 (t, 3 H) ) e CuCN em analogia ao exemplo 3a,; MS-(-)-ion: M-I = 361,3.
b. ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-6-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
O composto de título foi obtido de butil éster deácido l-ciano-4-hidroxi-6-fenoxi-isoquinolina3-carboxílicoe glicina em analogia ao exemplo Ib.; MS-(-)-íon: M-I =362,1.
Exemplo 13
Ácido {[l-Ciano-6-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a. butil éster de ácido l-Bromo-6-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido 6-(4-flúor-fenoxi)-1,4-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (7,43 g,20 mmol, preparada de acordo com US 2004/0254215 Al ouesquema), POBr3 (17,38 g, 60 mmol), e acetonitrila anidra(14 0 mL) foi refluída com agitação por 60 minutos antes deser concentrada in vácuo. Ao resíduo foi adicionado acetatode etila (400 mL) , NaHCO3 (60 g) , e então água em pequenasporções (400 mL) com agitação. Depois de agitação por 30min em temperatura ambiente a mistura foi filtrada atravésde um absorvente de Celite. A fase orgânica do filtrado foiseparada, e seca sobre MgSO4. Então sílica gel foiadicionada e a mistura foi concentrada in vácuo. O resíduofoi adicionado no topo de uma coluna curta preenchida comsílica gel. Eluição using CH2Cl2 como o solvente gerou ocomposto de título como um sólido quase branco (93 0 mg); 1HRMN (CDCl3, 200 MHz) : δ = 11,76 (s, 1 Η) , 8,22 (d, J =9,4Hz, 1 Η), 7,61 (d, J = 2,3 Hz, 1 Η), 7,50 (dd, J = 9,0, 2,3Hz, 1 Η) , 7,10 a 7,13 (m, 4 Η) , 4,46 (t, J = 7,0 Hz, 2 Η) ,1,85 (m, 2 Η) , 1,45 (m, 2 Η) , 0,99 (t, J = 7,4 Hz, 3 H) .
b. butil éster de ácido l-Ciano-6-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico
Sintetizado a partir de butil éster de ácido 1-bromo-6-(4 - flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico eCuCN em analogia ao exemplo 3a.; MS-(-)-íon: M-I = 3 7 9,2.
c. ácido { [l-Ciano-6-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}acético
O composto de título foi obtido de butil éster deácido l-ciano-6-(4 - flúor-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemplo Ib.; MS-(-)-íon: M-I = 380,0.
Exemplo 14
Ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-6-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acêtico
a. butil éster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-6-(4-metoxi-fenoxi) -isoquinolina-3-carboxílico
A uma mistura de butil éster de ácido 4-Hidroxi-6-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico (1,837 g, 5 mmol;para preparação, veja Exemplo 2 8b) e N-bromossuccinimida(1,079 g, 6 mmol) foi adicionado MeCN anidro com agitação.Após cerca de 10 min uma outra porção de MeCN (3 mL) foiadicionada e a agitação foi continuada por 2 0 min. Amistura foi então dividida entre água (100 mL) e CCl4 (100mL) . A fase orgânica foi separada, seca sobre MgSO4 econcentrada in vácuo. 0 resíduo foi recristalizado de EtOAcpara gerar o composto de título como agulhas brancas (1,345g) ; MS-( + )-íon: M+l, 79Br/ 81Br = 445,8 e 447,8.
b. butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-6-(4-metoxifenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico e CuCN em analogia ao exemplo3a; MS-(+)-íon: M+l = 392,9.
c. ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-6-(4-metoxi-fenoxi) -isoquinolina-3-carbonil]-amino}acético
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6-(4-metoxifenoxi) -isoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemploIb; MS-(-)-íon: M-I = 3 91,9.
Exemplo 15
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-6-fenilsulfanil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a. butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6-fenilsulfanil-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-6-fenilsulfanilisoquinolina-3-carboxílico (preparado como mostrado noEsquema 2, de acordo com US 2004/0254215 Al) e CuCN emanalogia ao exemplo 3a; MS-(+)-íon: M+l = 378,9.
b. ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-6-fenilsulfanil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6-fenilsulfanilisoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemploIb; MS-(-)-Ion: M-I = 377,9.
Exemplo 16
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-7-fenilsulfanil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a. butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-7-fenilsulfanil-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-7-fenilsulfanilisoquinolina-3-carboxílico (preparado como mostrado noEsquema 2, de acordo com US 2004/0254215 Al) -e CuCN emanalogia ao exemplo 3a; MS-(+)-íon: M+l = 378,9.
b. ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-7-fenilsulfanil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-7-fenilsulfanilisoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemplolb; MS-(-)-íon: M-I = 378,0.
Exemplo 17
Ácido [[l-Ciano-6-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]amino}-acético
a. 4-(2,6-Dimetil-fenoxi)-ftalonitrila
Uma mistura de 4-nitro-ftalonitrila (1 eq) , 2,6-dimetilfenol (1,2 eq) , K2CO3 (2 eq) , e DMF (1 mL/mmol 4-nitro-ftalonitrila) foi aquecida sob nitrogênio a 60°C por3 h com agitação. Após resfriamento até a temperaturaambiente a mistura foi despejada em água (6 mL/mL DMF) comagitação. A mistura foi extraída duas vezes com EtOAc. Asfases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4 econcentradas in vácuo. 0 resíduo foi recristalizado de EtOHpara gerar o composto de título como um sólido (rendimento:87%); 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ = 7,70 (d, 1 Η) , 7,05 a7,16 (m, 5 Η), 2,08 (s, 6 H).
b. ácido 4-(2,6-Dimetil-fenoxi)-ftálico
Uma mistura de 4-(2,6-dimetil-fenoxi)-ftalonitrila,KOH aquoso (455 em peso KOH; 0,5 mL/mmol) , e MeOH (0,5mL/mmol) foi refluída por 4 dias com agitação antes de serdiluída com água (5 mL/mmol) e acidifiçada pela adição deácido clorídrico concentrado. A mistura resultante foiextraída com EtOAc. A fase orgânica foi seca sobre MgSO4 econcentrada in vácuo para gerar o composto de título comoum sólido (rendimento: 99%); MS-(-)-íon: M-I = 285,5.
c. ácido [5-(2,6-Dimetil-fenoxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il]acético
Ácido 4-(2,6-Dimetil-fenoxi)-ftálico e uma quantidadeeqüimolar de glicina foram moídos compleamente juntos em ummoedor. A mistura foi então aquecida a 220 a 240°C em umbanho de óleo in vácuo até a formação de água ter cessado(cerca de 3 0 minutos) para gerar o composto de título comoum vidro escuro (rendimento: 99%); MS-(-)-íon: M-I = 324,5.
d. metil éster de ácido [5-(2,6-Dimetil-fenoxi)-1, 3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético
A uma solução de ácido [5-(2,6-Dimetil-fenoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético em MeOH (1mL/mmol) foi adicionado ácido sulfúrico concentrado (35μΐ/mmol) e a mistura foi refluída com agitação por 16 hantes de ser diluída com água (6,5 mL/mmol) e extraída duasvezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foramlavadas com solução saturada de NaHCO3, secas sobre MgSO4,e concentradas in vácuo para gerar o composto de títulocomo um sólido (rendimento: 96%); MS-(+)-ion: M+l = 340,5.
e. butil éster de ácido 6-(2,6-Dimetil-fenoxi)-1,4-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Sódio (1 eq) foi dissolvido em n-butanol (1,6 mL/mmol)com agitação a 70°C. Subseqüentemente, a temperatura foielevada a 95°C antes de uma solução de metil éster de ácido[5-(2,6-Dimetilfenoxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético (0,5 eq) em n-butanol quente (2,3 mL/mmol) seradicionada em uma porção com agitação. A agitação foicontinuada a 950C por 3 h antes da mistura ser concentradain vácuo. Ao resíduo foi adicionado 2 N de ácido clorídrico(1,3 eq) e EtOAc (cerca de 4 vezes o volume) e a misturafoi agitada vigorosamente por 45 min. Subseqüentemente, ocomponente sólido foi sugado, lavado com água e seco invácuo antes de ser suspenso em EtOAc (cerca de 20 mL/g) e amistura foi refluída com agitação por 2h. Após resfriamentoaté a temperatura ambiente o componente sólido foi sugado,lavado com EtOAc e seco in vácuo para gerar o composto detítulo como um sólido quase branco (rendimento: 43%) ; MS-(+)-íon: M+l = 382,5.
f. butil éster de ácido l-Bromo-6-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido 6-(2,6-Dimetil-fenoxi) -1, 4 -dihidroxi -isoquinolina-3 -carboxílico (4 mmol,1,53 g), POBr3 (16 mmol, 4,63 g), MeCN (30 mL) foi refluídalevemente com agitação antes de ser concentrada in vácuo. 0resíduo foi dissolvido em CH2Cl2 (100 mL) . À solução foiadicionado NaHCO3 (20 g) e então água (100 mL) em pequenasporções com agitação. A mistura foi agitada por 1 h emtemperatura ambiente antes da fase orgânica ser separada eseca sobre MgSO4. Concentração e purificação do resíduo porcromatografia em coluna flash em sílica gel usando CH2Cl2como o eluente gerou o composto de título como um óleoamarelado (640 mg); MS-( + )-íon: M+l, 79Br/ 81Br = 443,9 e445,9.
g. butil éster de ácido l-Ciano-6-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-Bromo-6-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e CuCN em analogia ao exemplo3a; MS-(+)-íon: M+l = 390,9.
h. ácido {[l-Ciano-6-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]amino}-acético
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-Ciano-6-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemplolb; MS-(-)-íon: M-I = 390,0.
Exemplo 18
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-5-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a. ácido 2-Metil-6-fenoxi-benzóico
Ácido 2-Cloro-6-metil-benzóico (30 mmol, 5,22 g) efenol (4 0 mmol, 3,8 g) foram dissolvidos em uma solução deNaOMe (30% em peso) em MeOH (ca. 66 mmol, 12 mL). À soluçãofoi adicionado cobre bronze (3 mmol, 193 mg) antes de serconcentrada in vácuo. Então, 1,2-diclorobenzeno (24 mL) foiadicionado e a mistura foi refluída sob nitrogênio por 2 hcom agitação. Após resfriamento até a temperatura ambienteágua (200 mL) e Et2O (150 mL) foram adicionados e a misturafoi agitada vigorosamente por 3 0 minutos antes da faseorgânica ser separada e descartada. A fase aquosa foilavada com Et2O (150 mL) antes de ser acidif içada pelaadição de 5 N ácido clorídrico. A mistura resultante foiextraída com acetato de etila (1x100 mL) . A fase orgânicafoi seca sobre MgSO4 e concentrada in vácuo. 0 resíduo foirecristalizado de hexanos / tolueno para gerar o compostode título como um sólido (4,55 g); MS-(-)-íon: M-I = 226,8.
b. metil éster de ácido 2-Metil-6-fenoxi-benzóico
Uma mistura de ácido 2-metil-6-fenoxi-benzóico (19,9mmol, 4,54 g) , metanol (20 mL) , e ácido sulfúricoconcentrado (1,5 mL) foi refluída com agitação por 18 hantes de ser concentrada in vácuo. Ao resíduo foiadicionada água (50 mL) e a mistura foi neutralizada poradição de pequenas porções de NaHCO3 com agitação.
Subseqüentemente, a mistura foi extraída com acetato deetila (1x50 mL) A fase orgânica foi seca sobre MgSO4 econcentrada in vácuo. Purificação do resíduo porcromatografia em coluna flash em sílica gel usandohexanos:acetato de etila = 7:3 como o eluente gerou ocomposto de título como um óleo amarelado (2,16 g); MS-(+)-íon: M+l = 242,8.
c. metil éster de ácido 2-1[Metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]-metil}-6-fenoxi benzóico
Uma mistura de metil éster de ácido 2-metil-6-fenoxi-benzóico (8,9 mmol, 2,15 g), N-bromossuccinimida (9,1 mmol,1,64 g), peróxido de benzoila (0,44 mmol, 110 mg), e CCl4(35 mL) foi refluída com agitação por 6 h. Apósresfriamento até a temperatura ambiente a mistura foifiltrada e o filtrado foi concentrado in vácuo para gerarum óleo amarelado (3,01 g). 0 óleo (3,00 g) foi dissolvidoem DMF seco (8 mL) . NaI (2,42 g) , K2CO3 (2,21 g) , e metiléster de ácido (tolueno-4-sulfonilamino)-acético (2,04 g)foram adicionados e a mistura foi agitada em temperaturaambiente por 18 h antes da água ser adicionada comagitação. A fase aquosa foi então decantada do precipitadooleoso formado. 0 óleo foi dissolvido em acetato de etila(70 mL) e a solução foi lavada com solução concentradaaquosa de NaHCO3 antes de ser seco sobre MgSO4 econcentrado in vácuo para gerar o composto de título comoum óleo escuro (3,87 g) . 0 produto bruto foi usado napróxima etapa sem purificação adicional; MS-(+.)-íon: M+23 =506,0.
d. metil éster de ácido 4-Hidroxi-5-fenoxi-isoquinolina-3-carboxíIico
A uma solução de metil éster de ácido 2-{[Metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]-metill-6-fenoxi-benzóico bruto (3,87 g) em metanol (24 mL) foiadicionada uma solução de NaOMe (30% em peso) em metanol (4mL) com agitação. Depois de agitação por 3 dias emtemperatura ambiente a mistura foi concentrada in vácuo. Aoresíduo foi adicionado 1 N ácido clorídrico (20 mL) e amistura foi extraída com acetato de etila (1x100 mL) . Afase orgânica foi então lavada com solução concentradaaquosa de NaHCO3 (3x 100 mL) , seca sobre MgSO4 econcentrada in vácuo. 0 resíduo foi recristalizado deacetato de etila para gerar o composto de título como umsólido amarelo (63 0 mg); MS-(+)-íon: M+l = 2 95,8.
e. metil éster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-5-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de metil éster de ácido 4-hidroxi-5-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (1,55 mmol, 458 mg), N-bromossuccinimida (1,7 mmol, 306 mg), peróxido de benzoila(0,08 mmol, 19 mg), e CCl4 (10 mL) foi refluída comagitação por 2 h. Após resfriamento até a temperaturaambiente a mistura foi filtrada e o filtrado foiconcentrado in vácuo. 0 resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel usando hexanos: acetato de etila = 9:1 como o eluente para gerar ocomposto de título como um sólido quase branco (225 mg) ;MS-( + )-íon: M+l, 79Br/ 81Br = 373,9 e 375,8.
f. metil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-5-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-5-fenoxiisoquinolina-3-15 carboxílico e CuCN em analogia ao exemplo 3a; MS-(+)-íon:M+l 320,8.
g. ácido [ (l-Ciano-4-hidroxi-5-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-5-fenoxiisoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemplo lb; MS-(+)-íon: M+l = 363,9.
Exemplo 19
Ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-8-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a. metil éster de ácido 3-lodo-2-metil-benzõico
Uma mistura de ácido 3-iodo-2-metil-benzóico (90 mmol,23,6 g) , metanol (250 mL) , e ácido sulfúrico concentrado(13 mL) foi refluída com agitação por 4 0 h antes de serconcentrada in vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetatode etila e a mistura foi neutralizada por adição depequenas porções de ua solução saturada aquosa de NaHCO3com agitação. A fase orgânica foi seca sobre MgSO4 econcentrada in vácuo para gerar o composto de titulo comoum óleo amarelado (24,3 g) ; 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ =7,96 (d, 1 Η), 7,71 (d, 1 Η) , 6,91 (t, 1 Η) , 3,89 (s, 3 Η) ,2,66 (s, 3 H).
b. metil éster de ácido 3-Iodo-2-{[metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]-metil}-benzóico
Uma mistura de metil éster de ácido 3-iodo-2-metil-benzóico (75 mmol, 20,7 g), N-bromossuccinimida (76,6 mmol,13,8 g), peróxido de benzoila (890 mg), e CCl4 (300 mL) foirefluída com agitação por 15 h. Após resfriamento até atemperatura ambiente a mistura foi filtrada e o filtradofoi concentrado in vácuo para gerar o composto de títulocomo um óleo castanho. 0 óleo (26,3 g) foi dissolvido emDMF seco (75 mL) . NaI (22,4 g) , K2CO3 (20,5 g) , e metiléster de ácido (tolueno-4-sulfonilamino)-acético (19 g)foram adicionados e a mistura foi agitada em temperaturaambiente por 24 h antes de ser despejada em água (900 mL) .
A mistura foi extraída com acetato de etila (2x250 mL). Asfases orgânicas combinadas foram lavadas com uma solução desódio meta-bissulfito (20 g) em água (300 mL) e água (2x300mL) antes de serem secas sobre MgSO4 e concentrada in vácuopara gerar o composto de título como uma goma escura (38,1g). O produto bruto foi usado na próxima etapa sempurificação adicional; MS-(+)-íon: M+23 = 539,9.
c. metil éster de ácido 4-Hidroxi-8-iodo-isoquinolina-3-carboxílico
A uma solução de metil éster de ácido 3-Iodo-2-{[metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]metil}-benzóico bruto (37,8 g) em metanol (220 mL) foi adicionadauma solução de NaOMe (30% em peso) em metanol (40 mL) comagitação. Depois de agitação por 18 h em temperaturaambiente a mistura foi concentrada in vácuo. Ao resíduo foiadicionado 1 N ácido clorídrico (200 mL) e a mistura foiextraída com acetato de etila quente (1x300 mL) . A faseorgânica foi então lavada com solução concentrada aquosa deNaHCO3 (3x200 mL), seca sobre MgSO4 e concentrada in vácuo.
O resíduo foi recristalizado de acetato de etila para geraro composto de título como um sólido (10,1 g) ; MS-( + )-íon:M+l = 329,8.
d. metil éster de ácido 4-Hidroxi-8-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de metil éster de ácido 4-Hidroxi-8-iodo-isoquinolina-3-carboxílico (7 mmol, 2,3 g) , 4-metoxi-fenol(35 mmol, 4,39 g) , Cs2CO3 (35 mmol, 11,42 g) , 2,2,6,6-tetrametilheptano-3,5-diona (2,8 mmol, 0,59 mL) , CuCl (7mmol, 0,70 g), e DMF anidro (42 mL) foi refluída sobnitrogênio com agitação por 15 minutos antes de serdespejada em acetato de etila (700 mL). Água (700 mL) e 5 Nácido clorídrico (5 mL) foram adicionados e a mistura foiagitada por 15 min. A fase orgânica foi então separada elavada com água (2x700 mL) antes de ser seca sobre MgSO4 econcentrada in vácuo. Purificação do resíduo porcromatografia em coluna flash em sílica gel usando hexanosEtOAc = 75 : 25 como o eluente gerou o composto de títulocomo um sólido (234 mg); MS-(+)-íon: M+l = 326,4.
e. metil éster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-8-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílicoUma mistura de metil éster de ácido 4-hidroxi-8-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico (1,17 mmol, 381mg), N-bromossuccinimida (1,3 mmol, 234 mg), peróxido debenzoila (0,06 mmol, 15 mg), e CCl4 (8 mL) foi refluída comagitação por 2,5 h. Após resfriamento até a temperaturaambiente sílica gel foi adicionada e a mistura foiconcentrada in vácuo. O resíduo foi adicionado no topo deuma coluna de cromatografia preenchida com sílica gel.Eluição com CH2Cl2 gerou o composto de título como umsólido (403 mg); MS-( + )-íon: M+l, 79Br/ 81Br = 404,3 e406,3.
f. metil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-8-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
0 composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido l-bromo-4-hidroxi-8-(4-metoxifenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico e CuCN em analogia ao exemplo3a; MS-(+)-íon: M+l = 351,4.
g. ácido { [I-Ciano-4-hidroxi-8-(4-metoxi-fenoxi) -isoquinolina-3-carbonil]amino}acético
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido l-ciano-4-hidroxi-8-(4-metoxifenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemploIb; MS-(-)-íon: M-I = 3 92,4.
Exemplo 2 0
Ácido { [1 -Ciano-4-hidroxi-8 -(3-mefcoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a. metil éster de ácido 4-Hidroxi-8-(3-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
0 composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido 4-hidroxi-8-iodo-isoquinolina-3-carboxílicoe 3-metoxi-fenol em analogia ao exemplo 19d; MS-(+)-íon:M+l = 326,4.
b. metil éster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-8-(3-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de metil éster de ácido 4-hidroxi-8-(3-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico (1,75 mmol, 569mg) , N-bromossuccinimida (2 mmol, 360 mg) , peróxido debenzoila (0,09 mmol, 22 mg), e CCl4 (12 mL) foi refluídacom agitação por 4 h. Após resfriamento até a temperaturaambiente a mistura foi filtrada, sílica gel foi adicionadaao filtrado e a mistura foi concentrada in vácuo. 0 resíduofoi adicionado no topo de uma coluna de cromatograf iapreenchida com sílica gel. Eluição com CH2Cl2 gerou umsólido amarelado (435 mg) . Uma mistura desse sólido (283mg), CuCN (127 mg), e DMF anidro (2,8 mL) foi refluída comagitação sob nitrogênio por 15 min. Após resfriamento até atemperatura ambiente a mistura foi diluída com acetato deetila (200 mL). A mistura resultante foi agitada por 15 mine então filtrada através de um absorvente de Celite. 0filtrado foi lavado com 0,1 N ácido clorídrico (1x300 mL) eágua (2x300 mL) , e seco sobre MgSO4. Subseqüentemente, amistura foi concentrada in vácuo para gerar um sólidocastanho (178 mg) . Uma mistura desse sólido (175 mg) ,acetato de sódio (49 mg) , PdJC (10% em peso Pd, 50 % empeso água; 100 mg), metanol (10 mL), e acetato de etila (20mL) foi agitado sob uma atmosfera de hidrogênio (pressãoambiente) por 18 h antes de ser filtrada através de umabsorvente de Celite. O filtrado foi concentrado in vácuo.Ao resíduo foi adicionada solução saturada aquosa de NaHCO3(20 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etila (1x40mL) . A fase orgânica foi seca sobre MgSO4 e concentrada invácuo. Purificação do resíduo por cromatografia era colunaflash em sílica gel usando CH2Cl2 : acetato de etila = 98 :como o eluente gerou o composto de título como um sólidoquase branco (101 mg); MS-(-)-íon: M-I = 349,4.
c. ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-8-(3-metoxi-fenoxi) -isoquinolina-3-carbonil]-amino}acético
0 composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido l-ciano-4-hidroxi-8 -(3-metoxifenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemploIb; MS-(-)-íon: M-I = 392,4.
Exemplo 21
Ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-8-(2-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acéticoa. metil éster de ácido 4-Hidroxi-8-(2-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido 4-hidroxi-8-iodo-isoquinolina-3-carboxílicoe 2-raetoxi-fenol em analogia ao exemplo 19d; MS-(+)-íon:
M+l = 326,4.
b. metil éster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-8-(2-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido 4-hidroxi-8-(2-metoxi-fenoxi)- isoquinolina-3-carboxílico e N-bromossuccinimida em analogia ao exemplo19e; MS- (+) - íon: M+l, 79Br/ 81Br = 404,3 e 406,3.
c. metil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-8-(2-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílicoO composto de título foi sintetizado a partir de metil éster de ácido l-bromo-4-hidroxi-8-(2-metoxifenoxi)-isoquinolina-3-carboxíIico e CuCN em analogia ao exemplo3a; MS-(+)-íon: M+l = 351,4.
d. ácido {[I-Ciano-4-hidroxi-8-(2-metoxi-fenoxi) -isoquinolina-3-carbonil]-amino} acético
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido l-ciano-4-hidroxi-8-(2-metoxifenoxi) -isoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemploIb; MS-(-)-íon: M-I = 392,5.
Exemplo 22
Ácido t(7-Benzil-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a. 5-Benzil-3H-isobenzofuran-l-ona
Uma mistura de 5-bromo-3H-isobenzofuran-l-ona (14mmol, 3,04 g), solução de brometo de benzilzinco (0,5 M emTHF, 28 mmol, 56 mL) , [1,1' -bis (difenilfosfino) -ferroceno]dicloropaládio(II) 1:1 complexo com CH2Cl2 (0,07mmol, 57 mg), e 1,4-dioxano anidro (70 mL) foi refluída comagitação sob nitrogênio por 4 0 h. Após resfriamento até atemperatura ambiente sílica gel foi adicionado e a misturafoi concentrada in vácuo. 0 resíduo foi adicionado no topode uma coluna de cromatografia preenchida com sílica gel.Eluição com hexanos : acetato de etila =9:1 gerou umsólido amarelo. Purificação adicional por recristalizaçãode acetato de etila/hexanos gerou o composto de título(1,37 g) como agulhas brancas; 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ =7,83 (d, 1 Η) , 7,16 a 7,39 (m, 7 Η) , 5,26 (s, 2 Η) , 4,11(s, 2 H).
b. metil éster de ácido 4-Benzil-2-{[metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]-metil}benzóico
Uma mistura de 5-benzil-3H-isobenzofuran-l-ona (6mraol, 1,35 g) , ácido bórico (0,18 mmol, 11 mg), óxido detrifenilfosfino (0,18 mmol, 51 mg), e cloreto de tionila(7,8 mmol, 0,59 mL) foi refluída em um óleo de banho(temperatura do banho 13 0 a 14O0C) por 18 h com agitação.
Subseqüentemente, metanol (6 mL) foi adicionado e a misturafoi agitada, por 15 min antes de ser concentrada in vácuo.O resíduo foi dissolvido em acetato de etila (40 mL) . Asolução foi lavada com solução saturada aquosa de NaHCO3(2x20 mL), seca sobre MgSO4 e foi concentrada in vácuo paragerar um óleo amarelado (1,51 g) . 0 óleo (906 mg) foidissolvido em DMF anidro (5 mL) . NO (1,0 g) , K2CO3 (912mg) , e metil éster de ácido (tolueno-4-sulfonilamino)-acético (8 03 mg) foram adicionados e a mistura foi agitadaem temperatura ambiente por 15 h antes de ser despejada emágua (50 mL). Traços de iodo foram removidos por adição deuma pequena quantidade de meta-bissulfito de sódio antes daextração da mistura com acetato de etila (1x50 mL). A faseorgânica foi então lavada com água (1x50 mL) , seca sobreMgSO4 e concentrada in vácuo para gerar o composto detítulo bruto como uma goma escura (1,58 g) que foi usada napróxima etapa sem purificação adicional; MS-(+)-íon: M+l =481,8.
c. metil éster de ácido 7-Benzil-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
A uma solução de metil éster de ácido 4-benzil-2-{ [metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino] -metil}-benzóico (1,54 g) em metanol (1,75 mL) foi adicionada umasolução de NaOMe (30 % em peso) em metanol (1,75 mL) comagitação. Depois de agitação por 5 h em temperaturaambiente a mistura foi concentrada in vácuo e água (20 mL)foi adicionada. O pH da mistura foi ajustado a 7 a 8 poradição de 6N ácido clorídrico antes da mistura ser extraídacom acetato de etila (2x25 mL). As fases orgânicascombinadas foram então secas sobre MgSO4 e concentradas invácuo. 0 resíduo foi purificado por cromatografia em colunaflash em sílica gel usando hexanos : acetato de etila = 7 :3 como o eluente para gerar o composto de título como umsólido quase branco (451 mg); MS-(+)-íon: M+l = 294,0.
d. metil éster de ácido 7-Benzil-l-bromo-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de metil éster de ácido 7-benzil-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (1 mmol, 293 mg), N-bromossuccinimida (1,2 mmol, 214 mg) e MeCN anidro (10 mL)foi agitada em temperatura ambiente por 4 dias antes daadição de sílica gel e a mistura foi concentrada in vácuo.
O resíduo foi adicionado no topo de uma coluna decromatografia preenchida com sílica gel. Eluição comhexanos : acetato de etila = 75 : 25 gerou o composto detítulo como um sólido quase branco (48 mg); MS-(+)-íon:M+l, 79Br/ 81Br = 372,4 e 374,4.
e. metil éster de ácido 7-Benzil-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido 7-benzil-l-bromo-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e CuCN em analogia ao exemplo 3a; MS-(-)-íon:M-I = 317,4.
f. ácido [ (7-Benzil-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido 7-benzil-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemplo lb; MS-(-)-íon: M-I = 360,5.
Exemplo 23
Ácido {[l-Ciano-5-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a. ácido 2-(4-flúor-fenoxi)-6-metil-benzóico
O composto de título foi sintetizado a partir de ácido2-cloro-6-metil-benzóico e 4- fluorfenol em analogia aoexemplo 18a; MS-(-)-íon: M-I = 245,5.
b. metil éster de ácido 2-(4-flúor-fenoxi)-6-metil-benzóico
Uma mistura de ácido 2-(4-flúor-fenoxi)-6-metil-benzóico (21,6 mmol, 5,32 g) , dimetilsulfato (43,2 mmol,4,2 mL), K2CO3 (43,2 mmol, 6 g) , e dietil cetona (80 mL)foi refluída com agitação por 18 h antes de ser concentradain vácuo. Ao resíduo foi adicionada água (50 mL) e amistura foi extraída com acetato de etila (1x100 mL) . Afase orgânica foi seca sobre MgSO4 e concentrada in vácuopara gerar o composto de título como um óleo castanho (5,5g) ; 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ = 7,20 (t, 1 Η) , 6,92 a 7,04(in, 5 Η), 6,66 (d, 1 Η), 3,84 (s, 3 Η), 2,35 (s, 3 H).
c. metil éster de ácido 2-(4-flúor-fenoxi)-6-{[metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]-metil}-benzóico
0 composto de título bruto foi sintetizado a partir demetil éster de ácido 2-(4-flúor-fenoxi)-6-metilbenzóico, N-bromossuccinimida, e metil éster de ácido (tolueno-4-sulfonilamino)-acético em analogia ao exemplo 18c e foiusado na próxima etapa sem purificação adicional; MS-(+)-íon: M+23 524,4.d. metil éster de ácido 5-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido 2-(4-flúor-fenoxi)-6-{[metoxicarbonilmetil-(tolueno-4-sulfonil)-amino]-metil}-benzóico bruto emanalogia ao exemplo 18d; MS-(+)-íon: M+l = 314,4.
e. metil éster de ácido l-Bromo-5-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-i soquinolina-3 -carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido 5 -(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carboxílico e N-bromossuccinimida em analogia ao exemplo18c; MS- ( + ) -íon: M+l, 79Br/ 81Br = 392,4 e 394,3.
f. metil éster de ácido l-Ciano-5-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido l-bromo-5-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carboxílico e CuCN em analogia aoexemplo 3a; MS-(-)-íon: M-I = 337,4.
g. ácido { [l-Ciano-5-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-aminol-acético
0 composto de título foi sintetizado a partir de metiléster de ácido l-ciano-5-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia aoexemplo Ib; MS-(-)-íon: M-I = 3 80,4.
Exemplo 24
Ácido {[l-Ciano-7-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonili-amino}-acético
a. butil éster de ácido l-Ciano-7-(2,6-dimetil-fenoxi)-4 -hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Sintetizado a partir de butil éster de ácido 1-bromo-7-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (para síntese, veja US 2004/0254215 Al) e CuCNem analogia ao exemplo 3a; MS-O-íon: M-I 389,5.
b. ácido {[l-Ciano-7-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]amino}-acético
O composto de título foi obtido de butil éster deácido l-ciano-7-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemplo lb; MS-(-)-íon: M-I = 390,5.
Exemplo 25
Ácido {[l-Ciano-6- (2-etil-6-metil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a. 4-(2-Etil-6-metil-fenoxi)-ftalonitrila
O composto de título foi obtido de 4-nitro-ftalonitrila e 2-etil-6-metilfenol em analogia ao exemplo17a; MS-(+)-íon: M+l = 263,5.
b. ácido 4-(2-Etil-6-metil-fenoxi)-ftálico
O composto de título foi obtido de 4-(2-Etil-6-metil-fenoxi)-ftalonitrila em analogia ao exemplo 17b; MS-(-)-íon: M-I = 299,4.
c. ácido [5-(2-Etil-6-metil-fenoxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético
O composto de título foi obtido de ácido 4-(2-Etil-6-metil-fenoxi)-ftálico e glicina em analogia ao exemplo 17c;MS-(-)-íon: M-I = 338,4.
d. metil éster de ácido [5-(2-Etil-6-metil-fenoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético
O composto de título foi obtido de ácido [5- (2-Etil-6-metil-fenoxi)-1,3-dioxo-l,3- dihidro-isoindol-2-il]-acéticoe metanol em analogia ao exemplo 17d; MS-(+)-íon: M+l =354,4.
e. butil éster de ácido 6-(2-Etil-6-metil-fenoxi)-1,4-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
A uma solução de metil éster de ácido [5-(2-Etil-6-metil-fenoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il] -acético(22 mmol, 7,77 g) em n-butanol anidro (150 mL) foiadicionado a 1 N solução de sódio em n-butanol (45 mmol, 45mL) a 950C em uma porção com agitação. Agitação foicontinuada a 950C por 3 h antes da mistura ser concentradain vácuo. Ao resíduo foi adicionado 2 N ácido clorídrico(60 mmol, 30 mL) e EtOAc (150 mL) e a mistura foi agitadavigorosamente por 4 5 min. Subseqüentemente, o componentesólido foi sugado, lavado com água e seco in vácuo paragerar o composto de título como um sólido (623mg) ; MS- ( + ) -íon: M+l = 396,5.
f. butil éster de ácido l-Bromo-6-(2-etil-6-metil-f enoxi)-4 -hi droxi-i soquinoIina-3 -c arboxíIico
Uma mistura de butil éster de ácido 6-(2-Etil-6-metil-fenoxi)-1,4-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (2,83mmol, 1,12 g) , POBr3 (11 mmol, 3,19 g) , MeCN (20 mL) foirefluída levemente com agitação por 1 h antes de serconcentrada in vácuo. 0 resíduo foi dissolvido em CHCl3 (50mL) água (10 mL) e subseqüentemente pequenas porções deNaHCO3 (6 g) foram adicionadas com agitação. A mistura foiagitada por 3 0 min em temperatura ambiente antes de serfiltrada através de um absorvente de Celite. 0 filtrado foiseco sobre MgSO4. Concentração e purificação do resíduo porcromatografia em coluna flash em sílica gel usando CH2Cl2como o eluente gerou o composto de título como um óleocastanho (450 mg); MS-( + )-íon: M+l, 79Br/ 81Br = 458,4 e460,6.
g. butil éster de ácido l-Ciano-6-(2-etil-6-metil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico
0 composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-Bromo-6-(2-etil-6-metil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e CuCN em analogia aoexemplo 3a; MS-(- )-íon: M-I = 4 03,5.
h. ácido {[l-Ciano-6-(2-etil-6-metil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil] amino}-acético
0 composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-Ciano-6-(2-etil-6-metil-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico e glicina em analogia ao exemploIb; MS-(-)-ion: M-I = 404,4.
Exemplo 2 6
Ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-6 -(2,4,6-trimetil-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a. 4-(2,4,6-Trimetil-fenoxi)-ftalonitrila
0 composto de título foi obtido de 4-nitro-ftalonitrila e 2,4,6- trimetilfenol em analogia ao exemplo17a; MS-O-íon: M-I = 261,5.
b. ácido 4-(2,4,6-Trimetil-fenoxi)-ftálico
0 composto de título foi obtido de 4-(2,4,6-trimetil-fenoxi)-ftalonitrila em analogia ao exemplo 17b; MS-(-)-íon: M-I = 299,4.
c. ácido [1,3-DÍOXO-5-(2,4,6-trimetil-fenoxi)-1,3 -dihidro-isoindol-2-il]-acético
0 composto de título foi obtido de ácido 4-(2,4,6-trimetil-fenoxi)-ftálico e glicina em analogia ao exemplo17c; MS-(-)-íon: M-I = 338,4.
d. metil éster de ácido [1,3-Dioxo-5-(2,4,6-trimetil-fenoxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético
O composto de título foi obtido de ácido [1,3-dioxo-5 -(2,4,6 -trimetil-fenoxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acéticoe metanol em analogia ao exemplo 17d; MS-(+)-íon: M+l =354,4.
e. butil éster de ácido 1,4-Dihidroxi-6-(2,4,6-trimetil-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi obtido de metil éster deácido [1,3-dioxo-5-(2,4,6-trimetil-fenoxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético em analogia ao exemplo 25e; MS-( + ) -íon: M+l = 396,4.
f. butil éster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-6-(2,4,6 -trimetil-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi obtido de butil éster deácido 1,4-dihidroxi-6 -(2,4,6-trimetil-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico e POBr3 em analogia ao exemplo25f; MS- ( + ) -íon: M+l, 79Br/ 81Br = 458,4 e 460,4.
g. butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6-(2,4,6-trimetil-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-bromo-4-hidroxi-6-(2,4,6-trimetilfenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico e CuCN em analogia ao exemplo3a; MS-(-)-íon: M-I = 403,4.
h. ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-6-(2,4,6-trimetil-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil] amino}-acético
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido l-ciano-4-hidroxi-6-(2,4,6-trimetilfenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia ao exemploIb; MS-(-)-íon: M-I = 4 04,4.
Exemplo 27Ácido {[6-(4-Cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]amino}-acético
a. 4-(4-Cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-ftalonitrila
0 composto de título foi obtido de 4-nitro-ftalonitrila e 4-cloro-2,6-dimetil-fenol em analogia aoexemplo 17a; MS-(+)-íon: M+l = 2 83,4.
b. ácido 4-(4-Cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-ftálico
0 composto de titulo foi obtido de 4-(4-cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-ftalonitrila em analogia ao exemplo 17b;MS-(-)-íon: M-I = 319,4.
c. ácido [5 -(4-Cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-1,3-dioxo-1,3 -dihidro-isoindol-2-il]-acético
O composto de título foi obtido de ácido 4-(4-cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-ftálico e glicina em analogia aoexemplo 17c; MS-(-)-íon: M-I = 358,4.
d. metil éster de ácido [5 -(4-Cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-
1.3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético
O composto de título foi obtido de ácido [5-(4-cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il] -acético e metanol em analogia ao exemplo 17d; MS-(-)-íon:M-I = 372,4 .
e. butil éster de ácido 6-(4-Cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-1.4-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi obtido de metil éster deácido [5-(4-cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético em analogia ao exemplo 25e;MS-(+)-íon: M+l = 416,4.
f. butil éster de ácido l-Bromo-6-(4-cloro-2,6-dimetil-fenoxi )-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi obtido de butil éster deácido 6 -(4-cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-1,4-dihidroxi-
isoquinolina-3-carboxílico e POBr3 em analogia ao exemplo25f; MS- (+) - íon: M+l, 79Br/ 81Br = 478,3 e 480,3.g. butil éster de ácido 6-(4-Cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-1-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido 1-bromo-6-(4-cloro-2,6-dimetilfenoxi)-4 -hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e CuCN em analogia aoexemplo 3a; MS-(-)-íon: M-I = 423,4.
h. ácido { [6-(4-Cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
O composto de título foi sintetizado a partir de butiléster de ácido 6 -(4-Cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e glicina em analogia aoexemplo Ib; MS-(-)-íon: M-I = 424,3.
Exemplo 2 8
Ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-7-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a) butil éster de ácido 6- e 7-(4-Metoxi-fenoxi)-1-cloro-4 -hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
POCl3 (1,2 g, 7,8 mmol) foi adicionado a uma misturade butil éster de ácido 6- e 7-(4-metoxi-fenoxi)-1,4-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (veja Publicacao dePedido de Patente U.S. No. 2004/0254215) (3,0 g, 7,8 mmol)em tolueno anidro (40 mL). A mistura resultante foicolocada em microondas a 130°C por 15 min (ramp time 20min) . A mistura de reação foi concentrada e cuidadosamenteextinta com solução saturada de NaHCO3 (150 mL) . Depois deser agitada em temperatura ambiente por 10 min, it foiextraída com EtOAc (2 χ 200 mL) . As camadas orgânicascombinadas foram lavadas com água e salmoura, secas sobreMgSO4, filtradas, e concentradas para gerar uma mistura deo composto de títulos (2,4 g). MS-(+)-íon: M+l = 402,25.
b) butil éster de ácido 7-(4-Metoxi-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
A uma solução de uma mistura de butil éster de ácido6- e 7-(4-metoxi-fenoxi)-l-cloro-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (10 g, 24,9 mmol) em EtOAc (160 mL) foiadicionado 10% Pd/C (50% úmido) (3,7 g) e então formato deamônio (15,7 g, 249 mmol) . A mistura resultante foirefluída por 4 h. Depois de resfriada, ela foi diluída comEtOAc (100 mL) e então filtrada. 0 filtrado foi concentradae o resíduo foi purificado por cromatografia com sílica gel(eluição com 20% - 80% acetato de etila em hexanos) parafornecer o composto de título (3,2 g) ; MS-( + )-íon: M+l =368,16. Em adição, butil éster de ácido 6-(4-metoxi-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico, foi tambémisolado (5,04 g) . MS-( + )-íon: M+l = 368,17.
c) butil éster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-7-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
A uma mistura sólida de butil éster de ácido 7-(4-metoxi-fenoxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (305mg, 0,83 mmol) e N-bromossuccinimida (162 mg, 0,91 mmol)resfriada com um banho de gelo foi adicionada acetonitrila(6 mL). A mistura resultante foi agitada a O0C por 1,5 h efoi concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografiacom sílica gel (eluição com 10% - 40% acetato de etila emhexanos) para fornecer o composto de título (217 mg) . 1HRMN (200 MHz, CDCl3) δ 11,88 (s, 1 Η), 8,32 (d, J = 9,0 Hz,1 Η), 7,54 (d, J = 2,4 Hz, 1 Η), 7,46 (dd, J 9,0, 2,4 Hz, 1Η), 7,08 (d, J = 9,4 Hz, 2 Η), 6,95 (d, J = 9,8 Hz, 2 Η),4.46 (t, J = 7,0 Hz, 2 Η), 3,85 (s, 3 Η), 1,85 (m, 2 Η),1.47 (τη, 2 Η), 0,98 (t, J = 7,4 Hz, 3 Η).
d) butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-7-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido l-bromo-4-hidroxi-7 -(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxilico (190 mg,0,4 3 mmol) , cianeto de cobre (I) (76,3 mg, 0,85 mmol) e N-metilpirrolidina (3 mL) foi aquecida a 130°C por 1 h.Depois de resfriada, a mistura de reação foi dividida entreacetato de etila e água. A camada orgânica foi lavada comsalmoura, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada, econcentrada. O produto bruto foi purificado porcromatografia com sílica gel (eluição com 2% - 25% acetatode etila em cloreto de metileno) para gerar o composto detítulo (129 mg). MS-(+)-íon: M+l = 392,80.
e) ácido { [l-Ciano-4-hidroxi-7^(4-metoxi-fenoxi) -isoquinolina-3-carbonil]-amino}acético
Uma mistura de butil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-7-(4-metoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico (110 mg,0,28 mmol) e glicina (275 mg, 2,82 mmol) em uma solução demetóxido de sódio (0,5 M em metanol; 5,7 mL) foi refluídade um dia para o outro. A mistura de reação foi concentradae dissolvida em água (50 mL). Ela foi lavada com acetato deetila (10 mL). A camada aquosa foi acidifiçada com 1 N HClao pH = 3-4 e extraída com acetato de etila. A camadaorgânica foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato demagnésio, filtrada, e concentrada. 0 produto bruto foitriturado com metanol (3 mL) e o sólido foi coletado e secopara gerar o composto de título (72 mg). MS-(+)-íon: M+l =394,32.
Exemplo 29
Ácido [(l-Ciano-6-ciclohexiloxi-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a) butil éster de ácido l-Ciano-6-ciclohexiloxi-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido l-bromo-6-ciclohexiIoxi-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (vej aPublicação de Pedido de Patente U.S. No. 2004/0254215; 350mg, 0,83 mmol) , CuCN (149 mg, 1,66 mmol) e N-metil-pirrolidina (2,5 mL) foi aquecida a 130°C por 2 h. Depoisde resfriada, mistura de reação foi despejada em água (50mL) com agitação. 0 precipitado foi coletado e enxaguadocom água. 0 sólido resultante foi dividido entre acetato deetila e 10% NH4OH aquoso (50 mL) , e vigorosamente agitadopor 15 min. A mistura foi acidif içada por HCl aquosoconcentrado e então 1 N de solução de HCl em pH = 4. A faseorgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída comacetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foramlavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio,filtradas e concentradas para gerar o produto de título(234 mg). MS-(+)-íon: M+l = 369,43.
b) ácido [(l-Ciano-6-ciclohexiloxi-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
Preparado a partir de butil éster de ácido l-Ciano-6-ciclohexiloxi-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico eglicina em analogia ao exemplo 28c (94% de rendimento). MS-(+)-íon: M+l = 370,32.
Exemplo 30
Ácido [(6-Benzenossulfonil-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a) butil éster de ácido 6-Benzenossulfonil-l-bromo-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico
A uma mistura de butil éster de ácido 6-benzenossulfonil-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (100mg, 0,2 6 mmol; veja Publicação de Pedido de Patente U.S.No. 2004/0254215) e benzeno (4.5 mL) foi adicionadoperóxido de benzoila (6,3 mg, 0,026 mmol). A misturaresultante foi refluída por 15 minutos antes da adição deN-bromossuccinimida (51 mg, 0,29 mmol). A mistura de reaçãofoi refluída de um dia para o outro. Ela foi concentrada eo produto bruto foi purificado por cromatografia com sílicagel (eluição com 20% - 80%) acetato de etila / hexanos parafornecer o composto de título (91 mg). MS-(+)-íon: M+l =466,18, 464,14.
b) butil éster de ácido 6-Benzenossulfonil-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico
Preparado a partir de butil éster de ácido 6-benzenossulfonil-l-bromo-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico e CuCN em analogia ao exemplo 2 9a. 0 produtobruto foi purificado por cromatografia com sílica gel (2% -20% acetato de etila em cloreto de metileno) para gerar ocomposto de título (49% de rendimento). MS-(+)-íon.: M+l =411,30.
c) ácido [(6-Benzenossulfonil-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
Preparado a partir de butil éster de ácido 6-benzenossulfonil-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico e glicina em analogia ao exemplo 28e (56% derendimento). MS-(+)-íon: M+l = 412,26.Exemplo 31
Ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-6-(4-propoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a) 4-(4-Benziloxi-fenoxi)-ftalonitrila
Uma mistura de 4-benziloxifenol (14,53 g, 72,6 mmol),4-nitroftalonitrila (10,47 g, 60,5 mmol), carbonato depotássio (16,69 g, 120,9 mmol), e acetona (170 mL) foirefluída de um dia para o outro; a mistura de reação foiresfriada, e os sólidos foram filtrados e enxaguados comEtOAc. Todos os líquidos foram combinados e concentrados invácuo. 0 resíduo resultante foi dividido entre EtOAc e 2 Mde solução de NaOH em um funil de separação de 5 00-mL. Afase orgânica foi subseqüentemente lavada com 1 M HCl,solução saturada de NaCl, seca sobre sulfato de sódio, econcentrada in vácuo para gerar o composto de título bruto(22,1 g) que foi usado na próxima etapa sem purificaçãoadicional. 1H RMN (200 MHz, CDCl3): δ (ppm) = 7,7-6,6 (m,12 Η), 5,08 (s, 2 H).
b) ácido 4-(4-Benziloxi-fenoxi)-ftálico
Uma mistura de 4-(4-benziloxi-fenoxi)-ftalonitrila(22,1 g), KOH (50 mL, 45% em peso em água), e MeOH (50 mL)foi refluída por 3 dias. Então água foi adicionada e asolução resultante foi acidifiçada ao pH 3-4 com 6 M HCl. 0precipitado formado foi coletado por filtração, lavado comágua, e subseqüentemente seco in vácuo para gerar ocomposto de título bruto como solido (23,5 g) que foi usadona próxima etapa sem purificação adicional. 1H RMN (200MHz, DMS0-d6) : δ (ppm) = 7,7-6,6 (m, 12 Η) , 5,10 (s, 2 H).
c) etil éster de ácido [5-(4-Benziloxi-fenoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético e etil éster de ácido[5-(4-Hidroxi-fenoxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il] -acético
Uma mistura de ácido 4-(4-Benziloxi-fenoxi)-itálico(23,5 g, 60,47 mmol) e sal de etil glicina HCl (8,44 g,60,47 mmol) foi fundida com um manto de aquecimento eagitada por 3 0 minutos. Então enquanto a mistura estavaquente, diclorometano foi adicionado para gerar umasolução. Após resfriamento a solução foi passada através deum plugue de sílica gel. Eluição foi continuada com umamistura de EtOAc e diclorometano (1:1, v/v) . As fraçõescombinadas foram concentradas in vácuo para gerar um óleomarrom, que foi purificado por cromatografia em coluna paragerar os dois compostos de título: etil éster de ácido [5-(4-benziIoxi-fenoxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il] -acético (9,41 g) e etil éster de ácido [5-(4-hidroxi-fenoxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético (8,6g) . Etil éster de ácido [5-(4-Benziloxi-fenoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético: 1H RMN (200 MHz,CDCl3): δ (ppm) 7,9-7,2 (m, 12 Η) , 5,07 (s, 2 Η) , 4,38 (s,2 Η), 4,21 (q, 2 H, J = 7,2 Hz), 1,27 (t, 3 H, J = 7,2 Hz);Etil éster de ácido [5 -(4-Hidroxi-fenoxi)-1,3-dioxo-1,3 -dihidro-isoindol-2-il]-acético: 1H RMN (200 MHz, CDCl3): δ(ppm) = 7,9-7,2 (m, 12 Η), 4,40 (s, 2 Η), 4,21 (q, 2 H, J =7,2 Hz), 1,28 (t, 3 H, J = 7,2 Hz);d) Etil éster de ácido [1,3-Dioxo-5-(4-propoxi-fenoxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético
Uma mistura de etil éster de ácido [5-(4-hidroxi-fenoxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético (2,479g, 7,26 mmol), 1-bromopropano (1,32 mL, 14,52 mmol),carbonato de potássio (2,01 g, 14,52 mmol), e acetona (25mL) foi refluída de um dia para o outro. Após resfriamentoaté a temperatura ambiente a mistura foi concentrada invácuo e o resíduo foi dividido entre EtOAc e água. A faseorgânica foi lavada com NaCl saturado, seca sobre sulfatode sódio anidro, e concentrada in vácuo para gerar ocomposto de título (2,485 g) . 1H RMN (200 MHz, CDCl3): δ(ppm) 7,77 (q, 1 H, J = 8,1 Hz), 7,3-6,8 (m, 6 Η), 4,38 (s,2 Η) , 4,20 (q, 2 H, J 7,0 Hz), 3,93 (t, 2 H, J = 6,4 Hz),1,82 (q, 2 H, 6,6 Hz), 1,28 (t, 3 H, J = 7,0 Hz), 1,06 (t,3 H, J 7, 5 Hz).
e) butil éster de ácido 4-Hidroxi-1-oxo-6-(4-propoxi-fenoxi)-1,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de etil éster de ácido [1,3-dioxo-5-(4-propoxi-fenoxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético (2,485g, 6,48 mmol) , butóxido de sódio, e butanol (14,3 mmol, 27mL butanol) foi aquecida a 90°C a 100°C por 2 h. então amistura de reação foi deixada para resfriar até atemperatura ambiente, acidifiçada com 2 M HCl ao pH 3-4, eextraída com EtOAc. A fase orgânica foi então lavada comágua e solução saturada de NaCl, seca sobre sulfato desódio anidro, e concentrada in vácuo. 0 resíduo foipurificado por cromatografia em coluna para gerar ocomposto de título (722 mg). ESI MS (m/z): 412 (M+H)1.
f) butil éster de ácido l-Bromo-4-hidroxi-6-(4-propoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido 4-hidroxi-1-oxo-6-(4 -propoxi-fenoxi)-1,2-dihidro-i soquinolina-3 -carboxí1i co(495 mg, 1,20 mmol), POBr3 (379 mg, 1,32 mmol), e toluenofoi colocado em microondas a IlO0C por 25 min. Subseqüentemente, a mistura foi diluída com EtOAc, lavadacom NaHCO3 aquoso e solução saturada de NaCl antes de serseca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada in vácuopara gerar o produto de título bruto (509 mg) que foi usadona próxima etapa sem purificação adicional. 1H RMN (200MHz, CDCl3): δ (ppm) = 11,74 (s, 1 Η) , 8,19 (d, 1 H, J =9,2 Hz), 7,60-7,46 (m, 2 Η), 7,07-6,92 (m, 4 Η), 4,46 (t, 2H, = 7,1 Hz), 3,94 (t, 2 H, J = 6,6 Hz), 1,83 (m, 4 Η) ,I,45 (m, 2 Η), 1,10-0,94 (m, 6 H).
g) butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6-(4-propoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido l-bromo-4-hidroxi-6-(4-propoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico (315 mg,0,664 mmol) , CuCN (66 mg, 0,730 mmol) , e N-metilpirrolidinona (2 mL) foi agitada a 120°C por 4 h. Apósresfriamento até a temperatura ambiente a mistura foidespejada em EtOAc (20 mL) e solução saturada de hidróxidode amônio (~1 mL) foi adicionada. A mistura foi rapidamenteagitada por 2 min. Então ela foi acidif içada com HClconcentrado, lavada com água, e solução saturada de NaClantes de ser seca sobre sulfato de sódio anidro, econcentrada in vácuo. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna para gerar o composto de título(206 mg) . ESI MS (m/z) : 421 (M+ H+) .
h) ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-6-(4-propoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}acético
Uma mistura de butil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-6-(4-propoxi-fenoxi)-isoquinolina-3-carboxílico (200 mg,0,422 mmol), glicina (633 mg, 8,43 mmol) e solução deNaOMe/MeOH (12,7 mL, 6,33 mmol) foi refluída de um dia parao outro. Então a mistura foi concentrada in vácuo e oresíduo foi dissolvido em água. A solução foi acidifiçadacom 2 M HCl ao pH = 3-4. 0 precipitado resultante foicoletado por filtração, lavado com água, e liofilizado paragerar o composto de título como um pó (209 mg) ; ESI MS(m/z): 422 (M+H)+.
Exemplo 32
Ácido {[7 -(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a) 4-(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-ftalonitrila
Preparado em analogia ao exemplo 31a a partir debenzo[1,3]dioxol-5-ol. 1H RMN (200 MHz, CDCl3): δ (ppm) =7,8-6,5 (m, 8 H).
b) ácido 4-(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-ftálico
Preparado em analogia ao exemplo 31b a partir de 4-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-ftalonitrila. 1H RMN (200 MHz,DMS0-d6) : δ (ppm) = 7,95 (d, 1 H, 8,7 Hz), 7,3-6,5 (m, 7 Hz).
c) etil éster de ácido [5-(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-ill-acético
Preparado em analogia ao exemplo 31c a partir de ácido4-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-ftálico. 1H RMN (200 MHz,CDCl3): δ (ppm) = 7,78 (d, 1 H, J = 7,4 Hz), 7,29-7,21 (m,2 Η), 6,81 (d, 1 H, J = 6,4 Hz), 6,60-6,52 (m, 2 Η), 4,39(s, 2 Η), 4,21 (q, 2 H, J = 6,8 Hz), 1,28 (t, 3 H, J = 6,8 Hz).
d) butil éster de ácido 7 -(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-4 -hidroxi-1-oxo-1,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico ebutil éster de ácido 6-(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-4-hidroxi-1-oxo-1,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico
Preparado em analogia ao exemplo 3Ie a partir de etiléster de ácido [5-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-1,3-dioxo-l, 3-dihidro-isoindol-2-il]-acético. Butil éster de ácido 7-(benzo[1,3]dioxol- 5 -iloxi)-4-hidroxi-Ioxo-1,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico : 1H RMN (200 MHz, CDCl3) : δ(ppm) = 10,56 (br, s, 1 Η), 8,30 (br, s, 1 Η), 8,2-6,5 (m,6 Η), 6,01 (s, 2 Η), 4,39 (t, 2 Η), 1,78 (m, 2 Η), 1,50 (m,2 Η) , 0,99 (t, 3 H, J = 7,3 Hz); butil éster de ácido 6-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-4-hidroxi-loxo-l,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico: 1H RMN (200 MHz, CDCl3) : δ(ppm) = 10,4 (br, s, 1 Η) , 8,4-6,5 (m, 7 Η) , 6,02 (s, 2 Η) ,4,40 (t, 2 H, J = 6,6 Hz), 1,85-1,40 (m, 4 Η), 0,99 (t, 3H, J = 7,3 Hz).
e) butil éster de ácido 7-(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-Ι-ο Ioro-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Preparado em analogia ao exemplo 3If a partir de butiléster de ácido 7-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-4-hidroxi-l-oxo-l, 2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico e POCl3. 1H RMN(200 MHz, CDCl3): δ (ppm) = 11,89 (s, 1 Η) , 8,35 (d, 1 H, J= 9,2 Hz), 7,57 (d, 1 H, J = 1,9 Hz), 7,50 (m, 1 Η), 6,83(d, 1 H, J-= 7,8 Hz), 6,65-6,56 (in, 2 Η) , 6,03 (s, 2 Η) ,4,47 (t, 2 H, J = 7,1 Hz), 1,9- 1,4 (m, 4 Η), 0,99 (t, 3 H,J = 7,3 Hz).
f) butil éster de ácido 7-(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-1-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido 7-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-1-cloro-4-hidroxi-isoquinolina-3- carboxílico (118 mg, 0,284 mmol), cianeto de zinco (20mg, 0,17 mmol), zinco (2,2 mg), Pd2(dba)3 (13 mg, 0,0142mmol), dppf (15,7 mg, 0,0284 mmol), e dimetilacetamida (1mL) foi agitada a 120°C por 90 min. Após resfriamento até aOs sais correspondentes do composto do título no Exemplo 1 atemperatura ambiente a mistura de reação foi diluída comEtOAc, lavada com água, e solução saturada de NaCl antes deser seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada invácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em colunapara gerar o composto de título (50 mg) . ESI MS (m/z) : 407(M+H)+.
g) ácido{[7-(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]amino}-acético
Preparado em analogia ao exemplo 3Ih a partir de butiléster de ácido 7-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e glicina. ESI MS (m/z):406 (M-H)".
Exemplo 33
Ácido {[6-(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]amino}-acético
a) butil éster de ácido 6-(Benzo[1,31dioxol-5-iloxi)-1-bromo-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Preparado em analogia ao exemplo 31f a partir de butiléster de ácido 6-(benzo [1,3]dioxol-5-iloxi)-4-hidroxi-Ioxo-1,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico e POBr3. ESI MS(m/z): 460 (M+H)+.
b) butil éster de ácido 6-(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-1-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Preparado em analogia ao exemplo 31g a partir de butiléster de ácido 6-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-l-bromo-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e CuCN. ESI MS (m/z):407 (M+H) +.
c) ácido {[6-(Benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
Preparado em analogia ao exemplo 3Ih a partir de butiléster de ácido 6-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e glicina. ESI MS (m/z):408 (M+H) +.Exemplo 34
Ácido {[l-Ciano-6-(2,3-dihidro-benzofuran-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a) 4-(2,3-Dihidro-benzofuran-5-iloxi)-ftalonitrila
Preparado em analogia ao exemplo 31a a partir de 2,3-dihidro-benzofuran-5-ol. 1H RMN (200 MHz7 CDCl3): δ (ppm) =7,7-6,7 (m, 6 Η), 4,65 (t, 2 H, J = 7,8 Hz), 3,25 (t, 2 H,J = 7,8 Hz).
b) ácido 4-(2,3-Dihidro-benzofuran-5-iloxi)-ftálico
Preparado em analogia ao exemplo 3 Ib a partir de 4-(2,3-dihidro-benzofuran-5-iIoxi)-ftalonitrila. 1H RMN (200MHz, DMSO-d6) : δ (ppm) = 14-13 (br, 2 Η) , 7,78-6,77 (m, 6Η), 4,55 (m, 2 Η), 3,19 (m, 2 H).
c) etil éster de ácido [5-(2,3-Dihidro-benzofuran-5-iloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-ãcético
Preparado em analogia ao exemplo 31c a partir de ácido4 -(2,3-dihidro-benzofuran-5 -iIoxi)-ftálico. 1H RMN (200MHz, CDCl3): δ (ppm) = 7,8-6,8 (m, 6 Η) , 4,63 (m, 2 Η) ,4,38 (s, 2 Η) , 4,20 (m, 2 Η) , 3,24 (t, 2 H, J = 4,4 Hz),1,28 (t, 3 H, J = 7,1 Hz).
d) butil éster de ácido 7 -(2,3-Dihidro-benzofuran-5-iloxi)-4-hidroxi-l-oxo-l,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico e butil éster de ácido 6 -(2,3-Dihidro-benzofuran- 5-iloxi)-4-hidroxi-l-oxo-l,2-dihidro-isoquinolina-3 -carboxí lico
Preparado em analogia ao exemplo 3Ie a partir de etiléster de ácido [5-(2,3-Dihidro-benzofuran-5-iloxi)-1, 3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético. Butil éster deácido 7 -(2,3-Dihidro-benzofuran-5-iIoxi)- 4-hidroxi-1-oxo-1,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico: ESI MS (m/z) 396(M+H)+; butil éster de ácido 6-(2,3-dihidro-benzofuran-5-iloxi)-4-hidroxi-l-oxo-l,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico: ESI MS (m/z): 396 (M+H)+.
e) butil éster de ácido l-Bromo-6-(2,3-dihidro-benzofuran-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3 -carboxíIico
Preparado em analogia ao exemplo 3If a aprtir de butiléster de ácido 6-(2,3-dihidro-benzofuran-5-iloxi)-4-hidroxi-1-oxo-1,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxíIico ePOBr3. ESI MS (m/z): 458 (M+H)+.
f) butil éster de ácido l-Ciano-6-(2,3-dihidro-benzofuran-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3 -carboxíIico
Preparado em analogia ao exemplo 31 g a partir de 1-bromo-6-(2,3-dihidro-benzofuran-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e CuCN. ESI MS (m/z): 405(M+H)+.
g) ácido {[l-Ciano-6-(2,3-dihidro-benzofuran-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
Preparado em analogia ao exemplo 3Ih a partir de butiléster de ácido 1-ciano-6-(2,3-dihidro-benzofuran-5- iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e glicina. ESI MS(m/z) : 404 (M-H)".
Exemplo 35
Metil éster de ácido [ (l-Ciano-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a) metil éster de ácido l-Bromo-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxíIico
Uma mistura de metil éster de ácido 1-bromo-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (1,89 g, 5,07 mmol),iodometano (632 μ!·, 10,13 mmol), carbonato de césio (3,3 g,10,13 mmol) e dimetilformamida (15 mL) foi agitado a 45°Cpor dezesseis horas antes de ser extinta com água, extraídacom acetato de etila. A camada orgânica foi lavada comágua, salmoura, seca sobre sulfato de sódio, concentrada invácuo e o resíduo foi purificado por cromatograf ia emcoluna flash em sílica gel com um gradiente de acetato deetila e hexanos para gerar o composto de título como umsólido amarelo (1,03 g): MS: (+) m/z 387,64, 389,75 (M+l,79Br/ 81Br) .
b)metil éster de ácido l-Ciano-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de metil éster de ácido l-bromo-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (1,02 g, 2,63 mmol),cianeto de cobre (I) (470 mg, 5,25 mmol) e dimetilformamidaanidra (8,8 mL) foi refluída por dez minutos antes de serresfriada até a temperatura ambiente extinta com água eacetato de etila. O caldo foi filtrado. A camada orgânicafoi lavada com água, salmoura, seca sobre sulfato de sódioanidro, concentrada in vácuo e o resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de acetato de etila e hexanos para gerar ocomposto de título como um sólido amarelo (727 mg): MS: (+)m/z 334,83 (M+l).
c) ácido l-Ciano-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxíIico
A uma mistura de metil éster de ácido l-ciano-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (727 mg, 2,18mmol) e metanol/tetrahidrofurano (12,5 mL, 1:1,5) foiadicionado 2N hidróxido de sódio (5,4 mL, 10,89 mmol) emtemperatura ambiente. A solução amarela foi agitada naqulatemperatura por setenta minutos antes de ser concentrada.Água (20 mL) foi adicionada e a mistura foi ajustada ao pH=2 com IN HCl (13 mL) . A mistura foi então extraída comdiclorometano e acetato de etila. As camadas orgânicascombinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfatode sódio anidro, concentradas in vácuo para gerar ocomposto de título como um sólido amarelo (64 7 mg): MS: (+)m/z 320,80 (M+l).
d) metil éster de ácido [(l-Ciano-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
A uma mistura de ácido l-ciano-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (483 mg, 1,51 mmol),trietilamina (466 μL, 3,32 mmol), e diclorometano (12 mL)foi adicionado isobutilcloroformato (211 μL, 1,62 mmol) aO0C. A mistura foi agitada a 0°C por vinte e cinco minutosantes de cloridrato de éster de metil glicina (208 mg, 1,66mmol) ser adicionado. A mistura foi agitada a 0°C por vintee cinco minutos e em temperatura ambiente por 5,5 horasantes de ser concentrada. 0 resíduo foi dividido entreacetato de etila e IN HCl. A camada orgânica foi lavada combicarbonato de sódio saturado, salmoura, seca sobre sulfatode sódio anidro, concentrada in vácuo e o resíduo foipurificado por cromatografia em coluna flash em sílica gelcom um gradiente de acetato de etila e hexanos para gerar ocomposto de título como um sólido amarelo (343 mg): MS: (+)m/z 391,95 (M+l).
Exemplo 36
Ácido [(l-Ciano-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
A uma mistura de metil éster de ácido [(l-ciano-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]acético (21mg, 0,05 mmol), e metanol/tetrahidrofurano (0,9 mL, 1:3,5)foi adicionado 2N hidróxido de sódio (29,2 μΐΐι, 0,06 mmol)em temperatura ambiente. A solução amarela foi agitada emtemperatura por cinqüenta e cinco minutos antes de seracidificada com IN HCl (69,1 μΜ a pH = 3 e concentrada invácuo. O resíduo foi dividido entre acetato de etila eágua. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódioanidro, concentrada in vácuo e o resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de metanol, diclorometano e ácido acético (0,1%)para gerar o composto de título como um sólido marrompálido (15 mg): MS: (+) m/z 378,00 (M+l).
Exemplo 37
Ácido (S)-2-[(l-Ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico
Uma mistura de metil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (101 mg, 0,31 mmol) eL-Alanina (561 mg, 6,29 mmol) em 0,5 M metóxido de sódio/metanol (12 mL) foi refluída por quatro dias antes de serresfriada até a temperatura ambiente e concentrada invácuo. O resíduo foi dissolvido em água (20 mL) e extraídocom metil t-butil éter (2 χ 30 mL) . A camada aquosarestante foi acidificada ao pH = 3 com IN HCl (8 mL) . Asuspensão branca resultante foi extraída com acetato deetila (30 mL) , seca e concentrada in vácuo para gerar ocomposto de título como um sólido branco (117 mg) : 1H RMN(DMSO- d6, 200 MHz) : δ = 13,52 (bs, 1H) , 10,11 (br s, 1H) ,8,30 (d, 1H) , 8,07 (m, 1H) , 7,67 (t, J = 8 Hz, 1H) , 7,42(m, 2H) , 7,17 (m, 3H) , 4,83 (q, 1H) , 1,68 (d, J = 7,4 Hz);MS: (+) m/z 378,29 (M+l).
Exemplo 38
Ácido (R)-2-[(l-Ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico
Uma mistura de metil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3-carboxílico (95 mg, 0,30 mmol), D-Alanina (529 mg, 5,94 mmol) e 0,5 M metóxido de sódio/metanol (11,3 mL) foi refluída por três dias antes de serresfriada até a temperatura ambiente e concentrada invácuo. O resíduo foi dissolvido em água (25 mL) e extraídocom diclorometano (3 χ 30 mL). A camada aquosa restante foiacidifiçada ao pH = 3 com IN HCl (8 mL). A suspensão brancafoi extraída com acetato de etila (30 mL) e diclorometano(30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas comsalmoura, secas sobre MgSO4 e concentradas in vácuo paragerar o composto de título como um sólido branco (90 mg) :1H RMN (DMS0-d6, 200 MHz) : δ = 13,52 (bs, 1H) , 9,15 (br s,1H), 8,30 (d, 1H) , 8,10 (m, 1H) , 7,67 (t, J = 8 Hz, 1H) ,7,42 (m, 2H), 7,17 (m, 3H), 4,83 (q, 1H), 1,68 (d, J = 7,0Hz, 3H)); MS: (+) m/z 378,29 (M+l).
Exemplo 39
Ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-6- (2-metil-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a) 2-Metil-benzotiazol-6-ol
Uma mistura de 6-metoxi-2-metil-benzotiazol (19,71 g,0,11 mol), brometo de tetrabutilfosfônio (3,73 g, 0,01mol), e 48% HBr (120 mL) foi agitado a 105°C por vinte eoito horas antes de ser resfriada até a temperaturaambiente, neutralizada com 10 N NaOH (90 mL) e IN NaOH (45mL) ao pH = 4. O precipitado resultante foi filtrado,lavado com água (3 χ 100 mL) , seco in vácuo para gerar ocomposto de título como um sólido marrom pálido (14,81 g):1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ = 7,77 (m, 1H) , 7,24 (m, 1H) ,6,94 (m, 1H), 5,28 (s, 1H), 2,79 (s, 3H).
b) etil éster de ácido 5-Nitro-(1, 3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il)-acético
Uma mistura de 4-nitroftalimida (82,54 g, 0,43 mol) ,bromoacetato de etila (78,92 g, 0,47 mol) e carbonato depotássio (130,6 g, 0,94 mol), e acetona (1,5 1) foirefluída por dezoito horas antes de ser resfriada até atemperatura ambiente, filtrada e concentrada in vácuo. 0resíduo foi dividido entre diclorometano e água. A camadaorgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro econcentrada in vácuo para gerar o composto de título comoum sólido amarelo (107,39 g): MS: (+) m/z 279,25 (M+l).
c) etil éster de ácido [5-(2-Metil-benzotiazol-6-iloxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético
Uma mistura de 2-metil-benzotiazol-6-ol (2,30 g, 13,92mmol), etil éster de ácido 5-nitro-(l, 3-dioxo-l, 3-dihidro-isoindol-2-il)-acético (4,26 g, 15,31 mmol),carbonato de potássio (2,3 g, 16,64 mmol) edimetilacetamida (30 mL) foi agitada a 105°C por vintehoras antes de ser resfriada até a temperatura ambiente edividida entre acetato de etila e água. A camada orgânicafoi seca sobre sulfato de sódio anidro, concentrada invácuo e o resíduo foi purificado por cromatograf ia emcoluna flash em sílica gel com um gradiente de acetato deetila e diclorometano para gerar o composto de título comoum sólido amarelo (2,35 g): MS: (+) m/z 397,19 (M+l).
d) butil éster de ácido 1,4-Dihidroxi-6-(2-metil-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico e butiléster de ácido 1,4-Dihidroxi-7-(2-metil-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3- carboxílico
Sódio (1,56 g, 0,07 mol) foi dissolvido em 1-butanolanidro (70 mL) e agitado a 80°C por uma hora. A soluçãoresultante foi adicionada a uma solução de etil éster deácido [5-(2-metilbenzotiazol-6-iloxi)-1,3-dioxo-l, 3-dihidro-isoindol-2-il] -acético (12,79 g, 0,03 mol) em 1-butanol anidro (90 mL). A mistura foi agitada a 105°C porduas horas antes de ser resfriada até a temperaturaambiente, acidifiçada com 5N HCl (13,5 mL) ao pH = 5. Oprecipitado foi filtrado, lavado com água, seco in vácuopara gerar a mistura 6,7-isomérica de composto de títulocomo um sólido amarelo (9,9 g): MS: (+) m/z 425,33 (M+l).
e) butil éster de ácido l-Cloro-4-hidroxi-6- (2-metil-benzotiazol- 6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma solução da mistura regioisomérica de butil ésterde ácido 1,4-dihidroxi-6 -(2-metil-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico/ butil éster de ácido 1,4-dihidroxi-7-(2-metil-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico obtido acima (3 g, 7,08 mmol), e oxicloreto defósforo (791 μL, 8,49 mmol) em dicloroetano (35 mL) foiagitada a 120°C em um aparelho de microondas CEM por trintaminutos. O procedimento foi repetido três vezes. Asmisturas de reação combinadas foram filtradas, soluçãosaturada de bicarbonato de sódio foi adicionada e amistura foi agitada por uma hora. A camada orgânica foilavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio anidro,concentrada in vácuo e o resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de acetato de etila e diclorometano para gerar umsólido amarelo (7,05 g). Ele foi recristalizado de acetatode etila (230 mL) para gerar o composto de título como umsólido amarelo (3,42 g): MS: (+) m/z 443,24 (M+l).
f) butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6- (2-metil-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido l-cloro-4-hidroxi-6-(2-metil-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico(369 mg, 0,84 mmol), tris(dibenzilideneacetona)dipaládio(0)(38 mg, 0,04 mmol), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (46mg, 0,08 mmol), cianeto de zinco (59 mg, 0,50 mmol), zinco(6 mg, 0,10 mmol) e dimetilacetamida (2 mL) foi agitado a120°C por duas horas e vinte minutos antes de ser resfriadaaté a temperatura ambiente, dividida entre acetato de etilae água, e filtrada. O filtrado foi lavado com água esalmoura, seco sobre sulfato de sódio anidro e concentradoin vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia emcoluna flash em sílica gel com um gradiente de acetato deetila e diclorometano para gerar o composto de título comoum sólido branco (245 mg): MS: (+) m/z 434,30 (M+l).
g) ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-6- (2-metil-benzotiazol-6 -iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
Uma mistura de butil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-6-(2-metil-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico(113 mg, 0,26 mmol) e glicina (390 mg, 5,20 mmol) em 0,5 Mmetóxido de sódio/metanol (9,9 mL) foi refluída porquarenta e cinco horas antes de ser resfriada até atemperatura ambiente e concentrada in vácuo. O resíduo foidissolvido em água (35 mL) e extraída com metil terc-butiléter (2 χ 25 mL). A camada aquosa restante foi acidifiçadaao pH = 3 com IN HCl (7,4 mL). 0 precipitado branco foifiltrado, lavado com água e seco in vácuo para gerar ocomposto de título como um sólido branco (92 mg) : MS: ( + )m/z 434,93 (M+l), (-) m/z 432,87 (M-I).
Exemplo 40
Ácido {[l-Ciano-6-(2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a) 2-Amino-4-metoxi-fenol
Uma mistura de 4-metoxi-2-nitrofenol (30,2 g, 0,18mol), 10% Pd/C, etanol (200 mL), e acetato de etila (200mL) foi hidrogenada em pressão e temperatura ambiente portrês dias antes de ser filtrada e concentrada in vácuo paragerar o composto de título como um sólido marrom escuro(20,78 g) : 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ = 6,64 (m, 1H) , 6,32(m, 1H), 6,21 (m, 1H), 3,71 (s, 3H).
b) 5-Metoxi-benzooxazol-2-tiol
Uma mistura de 2-amino-4-metoxi-fenol (20,7 g, 0,15mol), O-etilxantato de potássio (26,2 g, 0,16 mol) epiridina anidra foi refluída por duas horas antes de serresfriada até a temperatura ambiente e IN HCl gelado (600mL) foi adicionado. O precipitado foi filtrado, lavado comágua e seco in vácuo para gerar o composto de título comoum sólido vermelho pálido (22,36 g) : 1H RMN (CDCl3, 200MHz): δ = 7,20 (m, 1H), 6,78 (m, 2H), 3,82 (s, 3H).
c) 2-Cloro-5-metoxi-benzooxazol
A uma mistura de 5-metoxi-benzooxazol-2-tiol (12,14 g,0,07 mol) e cloreto de tionila foram adicionadas duas gotasde DMF. A mistura foi agitada a 680C por quarenta minutos ea formação de gás foi interrompida. A mistura foi diluídacom diclorometano, concentrada, e seca in vácuo para geraro composto de título como um sólido verde (14,31 g): 1H RMN(CDCl3, 200 MHz): δ = 7,36 (m, 1H), 7,13 (m,ll-l), 6,92 (m,1H), 3,84 (s, 3H).
d) (5-Metoxi-benzooxazol-2-il)-dimetil-amina
Uma mistura de 2-cloro-5-metoxi-benzooxazol (1,52 g,8,31 mmol) e uma solução a 40% de dimetilamina em água (15mL) foi refluída por duas horas antes de ser resfriada atéa temperatura ambiente e dividida entre acetato de etila eágua. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódioanidro e concentrada in vácuo para gerar o composto detítulo como um óleo preto (1,14 g) : MS: ( + ) m/z 397,19(M+l)
e) 2-Dimetilamino-benzooxazol-5-ol
Uma mistura de (5-metoxi-benzooxazol-2-il)-dimetil-amina (6,41 g, 0,03 mol) , brometo de tetrabutilfosfônio(1,13 g, 3,34 mmol), e 48% HBr (40 mL) foi agitado a 105°Cpor vinte e cinco horas antes de ser resfriada até atemperatura ambiente, neutralizada com 10 N NaOH (30 mL) aopH = 8. O precipitado resultante foi filtrado, lavado comágua, e seco in vácuo para gerar o composto de título comoum sólido marrom pálido (4,94 g) : 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) :δ = 7,05 (m, 1H), 6,86 (m, 1H), 6,48 (m, 1H), 3,19 (s, 6H).f) etil éster de ácido [5 -(2-Dimetilamino-benzooxazol-5 -iloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético
Uma mistura de 2-dimetilamino-benzooxazol-5-ol (4,82g, 0,03 mmol), etil éster de ácido 5-nitro-l,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il)-acético (8,66 g, 0,03 mmol),carbonato de potássio (4,49 g, 0,03 mmol) edimetilacetaraida (30 mL) foi agitada a 105°C por vinte eduas horas antes de ser resfriada até a temperaturaambiente e dividida entre clorofórmio e água. A camadaorgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro,concentrada in vácuo e purificada por cromatografia emcoluna flash em sílica gel com um gradiente de acetato deetila e diclorometano para gerar o composto de titulo comoum sólido laranja (4,24 g): MS: (+) m/z 410,2 (M+l).g) butil éster de ácido 6-(2-Dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-1,4-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e butiléster de ácido 7-(2-Dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-1,4-dihi droxi i soquinoIina-3 -c arboxiIico
Sódio (475 mg, 20,65 mmol) foi dissolvido em 1-butanolanidro (24 mL) a 85°C. a solução resultante recém preparadafoi adicionada a uma solução de etil éster de ácido [5- (2-dimetilaminobenzooxazol-5-iloxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético (4,23 g, 0,01 mol) em 1-butanolanidro (30 mL). A mistura foi agitada a 1050C por uma horae quarenta e cinco minutos antes de ser resfriada até atemperatura ambiente, acidifiçada com 2N HCl (10 mL) ao pH= 5. O precipitado foi filtrado, lavado com água, seco invácuo para gerar uma mistura regioisomérica de compostos detítulo como um sólido amarelo (1,2 g) : MS: ( + ) m/z 438,2(M+l). O filtrado foi extraído com acetato de etila. Acamada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro,concentrada in vácuo e o resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de acetato de etila e diclorometano. As fraçõesque correspondem a 7-regioisômero puro foram coletadas econcentradas para gerar um sólido amarelo (4 52 mg): MS: (+)m/z 438, 2 (M+l).
h) butil éster de ácido l-Cloro-6-(2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico
Uma solução da mistura regioisomérica de butil ésterde ácido 6-(2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-1,4-dihidroxi-isoquinolinc-3-carboxílico e butil éster de ácido7-(2-dimetilaminobenzooxazol-5-iloxi)-1,4-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico obtida como acima descrito (1,05g, 2,41 mmol), e oxicloreto de fósforo (286 μ!·, 3,13 mmol)em dicloroetano (18 mL) foi agitada a 120°C em um aparelhode microondas CEM por trinta minutos. A mistura foi agitadacom solução saturada de bicarbonato de sódio por vinteminutos. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secasobre sulfato de sódio anidro, concentrada in vácuo.Purificação por cromatografia em coluna flash em sílica gelcom um gradiente de acetato de etila e diclorometano gerouum sólido (463 mg). Recristalização de acetato de etila(190 mL) gerou o composto de título como um sólido amarelo(219 mg): MS: (+) m/z 456,31 (M+l).
i) butil éster de ácido l-Ciano-6- (2-dimetilamino-benzooxazol-5 -iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3 -carboxíIico
Uma mistura de butil éster de ácido l-cloro-6- (2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4-hidroxiisoquinolina-3 -carboxílico (115 mg, 0,25 mmol), tris(dibenzilidenoacetona) dipaládio (O) (12 mg, 0,01 mmol), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (14 mg, 0,02 mmol), cianeto dezinco (18 mg, 0,15 mmol), zinco (2 mg, 0,03 mmol) edimetilacetamida (0,6 mL) foi agitada a 120°C por duashoras antes de ser resfriada até a temperatura ambiente,dividida entre acetato de etila e água, filtrada. 0filtrado foi lavado com água e salmoura, seco sobre sulfatode sódio anidro e concentrado in vácuo. 0 resíduo foipurificado por cromatografia em coluna flash em sílica gelcom um gradiente de acetato de etila e diclorometano paragerar o composto de título como um sólido branco (53 mg) :MS: (+) m/z 447,00 (M+l); (-) m/z 445,20 (M-I).j) ácido 1[l-Ciano-6-(2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
Uma mistura de butil éster de ácido l-ciano-6- (2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carboxílico (55 mg, 0,12 mmol), glicina (186 mg, 2,47 mmol)e 0,5 M metóxido de sódio/metanol (4,7 mL) foi refluída porvinte e cinco horas antes de ser resfriada até atemperatura ambiente e concentrada in vácuo. 0 resíduo foidissolvido em água (35 mL) e lavado com diclorometano (2 χ25 mL). A camada aquosa restante foi acidificada ao pH = 3com IN HCl (3,5 mL) . O precipitado branco foi filtrado,lavado com água e seco in vácuo para gerar o composto detítulo como um sólido branco (44 mg) : MS: ( + ) m/z 448,27(M+l).
Exemplo 41
Ácido {[l-Ciano-7-(2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acéticoa) butil éster de ácido l-Cloro-7-(2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxíIico
Uma mistura de butil éster de ácido 7-(2-dimetilamino-benzooxazol-5 -iIoxi)-1,4-dihidroxi-isoquinolina-3 -carboxílico (364 mg, 0,83 mmol), oxicloreto de fósforo (92μL( 1,00 mmol) e dicloroetano (4.5 mL) foi agitada a 120°Cem um aparelho de microondas CEM por trinta minutos. Amistura foi então agitada com bicarbonato de sódio saturadopor quinze minutos em temperatura ambiente. A camadaorgânica foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato desódio anidro, concentrada in vácuo e o resíduo foipurificado por cromatografia em coluna flash em sílica gelcom um gradiente de acetato de etila e diclorometano paragerar o composto de título como um sólido branco (22 0 mg):MS: (+) m/z 456,32 (M+l).
b) butil éster de ácido l-Ciano-7- (2-dimetilamino-benzooxazol-5 -iloxi)-4-hidroxi-i soquinolina-3 -carboxí1ico
Uma mistura de butil éster de ácido l-cloro-7-(2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4 -hidroxiisoquinolina-3 -carboxílico (92 mg, 0,20 mmol),tris(dibenzilideneacetona)dipalãdio(0) (9 mg, 0,01 mmol),1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (11 mg, 0,02 mmol),cianeto de zinco (14 mg, 0,12 mmol), zinco (2 mg, 0,02mmol) e dimetilacetamida (0,5 mL) foi agitada a 120°C porduas horas antes de ser resfriada até a temperaturaambiente, dividida entre acetato de etila e água, efiltrada. O filtrado foi lavado com água e salmoura, secosobre sulfato de sódio anidro e concentrado in vácuo. 0resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash emsílica gel com um gradiente de acetato de etila ediclorometano para gerar o composto de título como umsólido branco (32 mg): MS: ( + ) m/z 447,00 (M+l); (-) m/z445,20 (M-I).
c) ácido {[l-Ciano-7- (2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
Uma mistura de butil éster de ácido l-ciano-7- (2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carboxílico (37 mg, 0,08 mmol), glicina (126 mg, 1,68 mmol)e 0,5 M metóxido de sódio/metanol (3,2 mL) foi refluída porvinte e cinco horas antes de ser resfriada até atemperatura ambiente e concentrada in vácuo. O resíduo foidissolvido em água (20 mL) e extraído com diclorometano (2χ 25 mL) . A camada aquosa restante foi acidificada ao pH =3 com IN HCl (2,4 mL) . 0 precipitado branco foi filtrada,lavado com água e seco in vácuo para gerar o composto detítulo como um sólido branco (24 mg): MS: ( + ) m/z 448,27(M+l).Exemplo 42
Ácido {[I-Ciano-4-hidroxi-6- (2-morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
a) 2-Cloro-6-metoxi-benzotiazol
A uma mistura de isoamil nitrito (17,55 g, 0,15 mol),cloreto de cobre (II) (16,1 g, 0,12 mol) e acetonitrilaanidra (400 mL) foi adicionado 2-amino-6-metoxibenzotiazol(18 g, 0,10 mol) por um período de quarenta minutos emtemperatura ambiente. A mistura foi agitada a 65°C por trêshoras, extinta com 4N HCl (400 mL) e extraída com éterdietílico (2 χ 3 00 mL) . A camada orgânica foi seca sobresulfato de sódio anidro, concentrada in vácuo e o resíduofoi purificado por cromatografia em coluna flash em sílicagel com um gradiente de acetato de etila e hexanos paragerar o composto de título como um sólido amarelo (9,97 g):1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ = 7,80 (m, 1H) , 7,19 (m, 1H) ,7,06 (m, 1H), 3,86 (s, 3H).b) 6-Metoxi-2-morfolin-4-il-benzotiazol
Uma mistura de 2-cloro-6-metoxi-benzotiazol (9,96 g,0,05 mol), morfoline (10,86 mL, 0,12 mol) e trietilamina(13,9 raL, 0,10 mol) em etanol (75 mL) foi refluída porvinte e uma horas antes de ser resfriada até a temperaturaambiente e concentrada in vácuo. O resíduo foi divididoentre diclorometano e água. A camada orgânica foi secasobre sulfato de sódio anidro e concentrada in vácuo paragerar o composto de título como um sólido amarelo claro(12,23 g): MS: (+) m/z 251 (M+l)
c) 2-Morfolin-4-il-benzotiazol-6-ol
Uma mistura de 6-metoxi-2-morfolin-4-il-benzotiazol(12,20 g, 48,7 mmol), brometo de tetrabutilfosfônio (1,65g, 4,87 mmol) e 48% HBr (80 mL) foi agitada a 100°C porvinte horas antes de ser resfriada até a temperaturaambiente, neutralizada com ION NaOH (60 mL) ao pH = 5-6. Amistura foi extraída com diclorometano. A camada orgânicafoi seca sobre sulfato de sódio anidro, concentrada invácuo para gerar o composto de título como um sólido branco(10,69 g) : 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : S = 7,28 (m, 1H) , 7,15(m, 1H), 6,75 (m, 1H), 3,70 (m, 4H), 3,43 (m, 411).d) etil éster de ácido [5-(2-Morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi)-1,3-dioxo-l, 3-dihidro-isoindol-2-il]-acêtico
Uma mistura de 2-morfolin-4-il-benzotiazol-6-ol (238mg, 1,01 mmol), etil éster de ácido 5-nitro-l,3- dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-acético (294 mg, 1,06 mmol),carbonato de potássio (167 mg, 1,21 mmol) edimetilacetamida (6 mL) foi agitada a 105°C por vinte eduas horas antes de ser resfriada até a temperaturaambiente e dividida entre clorofórmio e água. A camadaorgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro,concentrada in vácuo e o resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de acetato de etila e diclorometano para gerar ocomposto de título como um sólido amarelo (259 mg): MS: (+)m/z 468,21 (M+l).
e) butil éster de ácido 1,4-Dihidroxi-6- (2-morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico e butiléster de ácido 1,4-Dihidroxi-7-(2-morfolin-4-il-benzotiazol-6 - iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico
] Sódio (703 mg, 30,6 mmol) foi dissolvido em 1-10 butanol anidro (35 mL) a 85°C. A solução resultante recémpreparada foi adicionada a uma solução de etil éster deácido [5-(2-morfolin-4-ilbenzotiazol-6-iloxi)-1,3-dioxo-l,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético (7,14 g, 15,3 mmol) em 1-butanol anidro (55 mL) . A mistura foi agitada a 110°C por90 minutos antes de ser resfriada até a temperaturaambiente, acidif içada com 4N HCl (8 mL) ao pH = 5. Oprecipitado resultante foi filtrado, lavado com água, secoin vácuo para gerar a mistura regioisomérica do composto detítulo como um sólido amarelo (6,13 g): MS: (+) m/ζ 496,19(M+l).
f) butil éster de ácido l-Cloro-4-hidroxi-6-(2-morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma solução da mistura regioisomérica de butil ésterde ácido 1,4-dihidroxi-6-(2-morfolin-4-ilbenzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico e butil éster de ácido1,4-dihidroxi-7-(2- morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi) -isoquinolina-3-carboxílico sintetizada como acima descrito(1,51 g, 3,04 mmol), e oxicloreto de fósforo (417 μL, 4,56mmol) em dicloroetano (23 mL) foi agitada a 120°C em umaparelho de microondas CEM por trinta minutos. A misturafoi então agitada em temperatura ambiente com soluçãosaturada de bicarbonato de sódio por uma hora. A camadaorgânica foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato desódio anidro, concentrada in vácuo e o resíduo foipurificado por cromatografia em coluna flash em sílica gelcom um gradiente de acetato de etila e diclorometano paragerar um sólido (1,05 g). Ele foi recristalizado de acetatode etila para gerar o composto de título como um sólidobranco (484 mg): MS: (+) m/z 514,17 (M+l).g) butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6-(2-morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido l-Cloro-4-hidroxi-6-(2-morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico (200 mg, 0,39 mmol),tris(dibenzilideneacetona)-dipaládio(0) (18 mg, 0,02 mmol),1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (22 mg, 0,04 mmol),cianeto de zinco (27 mg, 0,23 mmol), zinco (3 mg, 0,05mmol) e dimetilacetamida (0,93 mL) foi agitado a 120°C porduas horas antes de ser resfriada até a temperaturaambiente, dividida entre acetato de etila e água, filtrada.O filtrado foi lavado com água e salmoura, seco sobresulfato de sódio anidro e concentrado in vácuo. 0 resíduofoi purificado por cromatografia em coluna flash em sílicagel com um gradiente de acetato de etila e diclorometanopara gerar o composto de título como um sólido branco (137mg): MS: (+) m/z 505,31 (M+l); (-) m/z 503,31 (M-I).h) ácido { [l-Ciano-4-hidroxi-6-(2-morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
Uma mistura de butil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-6-(2-morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico (137 mg, 0,27 mmol) , glicina (408 mg, 5,43mmol) e 0,5 M metóxido de sódio/metanol (10,3 mL) foirefluída por vinte e seis horas antes de ser resfriada atéa temperatura ambiente e concentrada in vácuo. O resíduofoi dissolvido em água (4 0 mL) e extraído com diclorometano(2 χ 35 mL). A camada aquosa restante foi acidifiçada ao pH= 3 com IN HCl (7.5 mL). O precipitado branco foi filtrado,lavado com água e seco in vácuo para gerar o composto detítulo como um sólido branco (119 mg): MS: ( + ) m/z 506,26(M+l); (-) m/z 504,24 (M-I).
Exemplo 43
Ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-6- (2-metil-benzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino)-acético
a) 1-(2,4-Dihidroxi-fenil)-etanona oxima
Uma mistura de 2,4-dihidroxiacetofenona (25 g, 0,16mol) , cloridrato de hidroxilamina (14,8 g, 0,21 mol) ,acetato de sódio (20 g, 0,24 mol) e água/dioxano (3 00 mL,1:1) foi agitada em temperatura ambiente por três diasantes da mistura ser dividida entre clorofórmio e água. Acamada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro,concentrada in vácuo e o resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de acetato de etila e diclorometano para gerar ocomposto de título como um sólido branco (11,67 g) : 1H RMN(CD3OD, 200 MHz) : δ = 7,26 (m, 1H) , 6,28 (m, 2H) , 4,88 (s,2H), 3,29 (m, 1H), 2,24 (s, 3H).
b) 2-Metil-benzooxazol-6-ol
A uma mistura de 1-(2,4-dihidroxi-fenil)-etanona oxima(4,2 g, 25 mmol) e acetonitrila/dimetilacetamida (20 mL,3:1) resfriada por um banho de água (20-25°C) foiadicionado em gotas cloreto de fósforo (2,4 mL, 26,2 mmol)por um periodo de quinze minutos. A mistura foi agitada pormais trinta minutos antes de ser despejada em água geladacontendo acetato de sódio (6 g). A mistura foi agitada pordez minutos, filtrada, e o bolo do filtro foi lavado comágua e seco in vácuo para gerar o composto de título comoum sólido amarelo (3,15 g) : 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ =7,45 (m, 1H), 6,96 (m, 1H), 6,80 (m, 1H), 2,60 (s, 3H).
c) etil éster de ácido [5-(2-Metil-benzooxazol-6-iloxi)-1,3-dioxo-l, 3-dihidro-isoindol-2-il]acético
Uma mistura de 2-metil-benzooxazol-6-ol (8,41 g, 56mmol), etil éster de ácido 5-nitro-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-acético (17,23 g, 62 mmol), carbonato depotássio (9,36g, 67,7 mmol), e dimetilacetamida (120 mL)foi agitada a 1050C por vinte horas antes de ser resfriadaaté a temperatura ambiente e dividida entre clorofórmio eágua. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódioanidro, concentrada in vácuo e o resíduo foi purificado porcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de acetato de etila e diclorometano para gerar ocomposto de título como um sólido amarelo (9,18 g): MS: (+)m/z 381,27 (M+l).
d) butil éster de ácido 1,4-Dihidroxi - 6-(2-metil-benzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico e butiléster de ácido 1,4-Dihidroxi-7-(2-metil-benzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3- carboxílico
Sódio (1,11 g, 48,2 mmol) foi dissolvido em 1-butanolanidro (60 mL) a 90°C. A solução resultante recém preparadafoi adicionada a uma solução de etil éster de ácido [5- (2-metil-benzooxazol-6 -iloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-acético (9,16 g, 24,1 mmol) em 1-butanol anidro (70mL). A mistura foi agitada a IlO0C por duas horas antes deser resfriada até a temperatura ambiente, acidifiçada com2N HCl (24 mL) ao pH = 4. O precipitado foi filtrado,lavada com água, seca in vácuo para gerar a mistura 6,7-isomérica do composto de título como um sólido amarelo(6,63 g): MS: (+) m/z 409,34 (M+l).
e) butil éster de ácido l-Cloro-4-hidroxi-6- (2-metil-benzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma solução da mistura regiosomérica de butil éster deácido 1,4-dihidroxi-6-(2-metil-benzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico e butil éster de ácido 1,4-dihidroxi-7-(2-metilbenzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico sintetizado como acima descrito (2,5 g, 6,12mmol), e oxicloreto de fósforo (685 μΐ^, 7,35 mmol) emdicloroetano (30 mL) foi agitada a 120°C em um aparelho demicroondas CEM por trinta minutos. A mistura foi agitada emtemperatura ambiente com uma solução saturada debicarbonato de sódio por trinta minutos. A camada orgânicafoi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódioanidro, concentrada in vácuo e o resíduo foi purificado pórcromatografia em coluna flash em sílica gel com umgradiente de acetato de etila e diclorometano para gerar umsólido (1,72 g). Ele foi recristalizado de acetato de etila(13 0 mL) para gerar o composto de título como um sólidobranco (844 mg): MS: (+) m/z 427,16 (M+l).
f) butil éster de ácido l-Ciano-4-hidroxi-6- (2-metil-benzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido l-cloro-4-hidroxi-6-(2-metil-benzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxílico(199 mg, 0,47 mmol), tris(dibenzilideneacetona)dipaládio(0)(21 mg, 0,02 mmol), 1,11-bis(difenilfosfino)ferroceno (26mg, 0,04 mmol), cianeto de zinco (33 mg, 0,28 mmol), zinco(4 mg, 0,06 mmol) e dimetilacetamida (1,1 mL) foi agitado a120°C por duas horas antes de ser resfriada até atemperatura ambiente, dividida entre acetato de etila eágua, filtrada. O filtrado foi lavado com água e salmoura,seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado in vácuo.
O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flashem sílica gel com um gradiente de acetato de etila ediclorometano para gerar o composto de título como umsólido branco (80 mg): MS: (+) m/z 418,38 (M+l).
g) ácido {[l-Ciano-4-hidroxi-6-(2-metil-benzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético
Uma mistura de butil éster de ácido l-ciano-4-hidroxi-6-(2-metil-benzooxazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carboxíIico(81 mg, 0,19 mmol), glicina (292 mg, 3,89 mmol), e 0,5 Mmetóxido de sódio/metanol (7,4 mL) foi refluída por vinte eseis horas antes de ser resfriada até a temperaturaambiente e concentrada in vácuo. O resíduo foi dissolvidoem água (25 mL) e extraído com diclorometano (2 χ 35 mL). Acamada aquosa restante foi acidificada ao pH = 3 com IN HCl(5,5 mL). 0 precipitado foi filtrado, lavado com água eseco in vácuo para gerar o composto de título como umsólido marrom (72 mg): MS: ( + ) m/z 419,30 (M+l); (-) m/z417,28 (M-I).
Exemplo 44
Ácido [(6-Cloro-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acéticoa) butil éster de ácido 6-Cloro-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma mistura de butil éster de ácido l-bromo-6-cloro-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (509 mg, 1,43 mmol ;preparado de acordo com US 2004/0254215 Al) , cianeto decobre (I) (255 mg, 2,85 mmol) e dimetilformamida anidra (6mL) foi refluída por vinte e cinco minutos antes de serresfriada até a temperatura ambiente e extinta com água.Clorofórmio/2-propanol (75 mL, 3:1) foi adicionado e amistura foi agitada por dez minutos antes de ser filtrada.
A camada orgânica foi lavada com água, salmoura, seca sobresulfato de sódio anidro, concentrada in vácuo e o resíduofoi purificado por cromatografia em coluna flash em sílicagel com um gradiente de acetato de etila e diclorometanopara gerar o composto de título como um sólido amarelo (280mg): MS: (-) m/z 303,20 (M-I).
b) ácido [(6-Cloro-l-ciano-4-hidroxi-lsoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
Uma mistura de butil éster de ácido 6-cloro-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico (99 mg, 0,33 mmol) eglicina (1,84 g, 24,49 mmol) em 0,5 M metóxido desódio/metanol (32,6 mL) foi refluída por vinte e uma horasantes de ser resfriada até a temperatura ambiente econcentrada in vácuo. 0 resíduo foi dissolvido em água (4 0mL) e a solução lavada com diclorometano (3 χ 50 mL) . Acamada aquosa restante foi acidificada ao pH = 3 com INHCl. A suspensão foi extraída com acetato de etila (50 mL)a camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro econcentrada in vácuo para gerar o composto de título comoum sólido branco (84 mg): MS: (+) m/z 306,27 (M+l); (-) m/z304,26 (M-I).Exemplo 45
Ácido [(7-Butoxi-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amina]-acético
Ácido [(7-Butoxi-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético foi preparado por adição de 135 mg(0,383 mmol) de [(7-butoxi-l-cloro-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético (preparado de acordo comUS6093 73 0), 18 mg (0,02 mmol) tris(dibenzilideneacetona)dipaládio(0), 22,2 mg (0,04 mmol) 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno, 3 mg (0,04 mmol) poeira de zinco, e 27 mg (0,23mmol) cianeto de zinco a 0,80 mL de N,N-dimetilacetamida. Amistura resultante foi aquecida a 1150C por 3 horas sob umaatmosfera de nitrogênio, e então resfriada até atemperatura ambiente. A mistura foi diluída com acetato deetila e extraída três vezes com solução aquosa debicarbonato de sódio. Os extratos aquosos foramacidifiçados com HCl concentrado, e o precipitado brancoresultante foi coletado: 28 mg do composto de título; MS(ESI -): m/z 342,0 (M-I)
Exemplo 46
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-6,7-difenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
Ácido [(I-Ciano-4-hidroxi-6,7-difenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético foi preparado por adição de 76 mg(0,164 mmol) de ácido [(l-cloro-4-hidroxi-6,7-difenoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético (preparado deacordo com US 2006/0217416), 7,3 mg (0,008 mmol)tris(dibenzilideneacetona)dipaládio(0), 9,0 mg (0,016 mmol)1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno, 1,3 mg (0,020 mmol)poeira de zinco, e 12 mg (0,10 mmol) cianeto de zinco a0,35 mL de N,N-dimetilacetamida. A mistura resultante foiaquecida a 115 0C por 3 horas sob uma atmosfera denitrogênio, e então resfriada até a temperatura ambiente. Amistura foi diluída com acetato de etila e extraída trêsvezes com bicarbonato de sódio aquoso e duas vezes comsoluções de 1 N NaOH. Os extratos básicos aquosos foramacidificados com HCl concentrado, e extraídos três vezescom acetato de etila. Os extratos orgânicos foram secossobre sulfato de sódio e concentrados para gerar 29 mg docomposto de título como um sólido branco; MS (ESI -) : m/ζ454,0 (M-I)
Exemplo 47
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-7-metoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-7-metoxi-isoquinolina-3 -carbonil)-amino]-acético foi preparado por adição de 159 mg(0,511 mmol) de ácido [ (l-cloro-4-hidroxi-7-metoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético (preparado deacordo com US6093730), 24 mg (0,025 mmol)tris(dibenzilideneacetona)dipaládio(0), 28 mg (0,051 mmol)1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno, 4 mg (0,06 mmol) poeirade zinco, e 36 mg (0,306 mmol) cianeto de zinco a 1,0 mL deN,N-dimetilacetamida. A mistura resultante foi aquecida a115°C por 3 horas sob uma atmosfera de nitrogênio, e entãoresfriada até a temperatura ambiente. A mistura foi diluídacom acetato de etila e solução meio-saturada aquosa debicarbonato de sódio e filtrada através de um absorvente decelite. A mistura bifásica foi separada, e o extrato básicoaquoso foi acidifiçado com HCl concentrado e extraído trêsvezes com acetato de etila. Os extratos orgânicos foramsecos sobre sulfato de sódio e concentrados para gerar 107mg do composto de titulo como um sólido branco; MS (ESI +) :m/z 302,3 (M+l)
Exemplo 48
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi~7-isopropoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acêtico
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-7-isopropoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético foi preparado a partir de ácido[(l-cloro-4-hidroxi-7-isopropoxi-isoquinolina-3-carbonil) -amino]-acético (preparado de acordo com US6093 73 0) sobcondições análogas ao Exemplo 4 7a; MS (ESI +) : m/z 330,3(M+l).
Exemplo 49
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-6-isopropoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-6- isopropoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético foi preparado a partir de ácido[(l-cloro-4-hidroxi-6-isopropoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético (preparado de acordo com US2006/217416) sobcondições análogas ao Exemplo 47a; MS (ESI +) : m/z 330,3(M+l)
Exemplo 50
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-5-fenil-isoquinolina-3-carbonil) -amino]-acético
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-5-fenil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético foi preparado a partir de ácido[(l-cloro-4-hidroxi-5-fenil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético (preparado de acordo com US2006/217416) sobcondições análogas ao Exemplo 47a; MS (ESI +) : m/z 34 8,3(M+l)
Exemplo 51
Ácido [(l-Ciano-4-hidroxi-8-fenil-isoquinolina-3-carbonil) -amino]-acético
Ácido [ (l-Ciano-4-hidroxi-8-fenil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético foi preparado a partir de ácido[(l-Cloro-4-hidroxi-8-fenil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético (preparado de acordo com US2006/217416) sobcondições análogas ao Exemplo 47a; MS (ESI +) : m/z 348,3(M+l).
Exemplo 52
Ácido [(7-Benziloxi-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino}-acético
a) etil éster de ácido (2,4-Dimetoxi-benzilamino)-acético
Uma mistura de 2,4-dimetoxi-benzaldeído (50 g, 0,30mol), cloridrato de etil éster de glicina (44 g, 0,32 mole)e trietilamina (43,9 mL, 0,32 mol) em dicloroetano foiagitada por uma hora antes de triacetoxiborohidreto desódio (lOOg, 0,47 mole) ser adicionado em quatro porções. Amistura foi agitada por três dias antes de ser extinta combicarbonato de sódio saturado. A camada orgânica foiextraída com 3N HCl (2 χ 400 mL, 2,4 mole) . As camadasaquosas foram combinadas, ajustadas com hidróxido de sódiosólido (97,68 g, 2,4 mol) ao pH = 8 e extraídas com acetatode etila (500 mL). O extrato de acetato de etila foi lavadocom salmoura, seco sobre sulfato de sódio, e concentrado. Oresíduo foi purificado por cromatografia em coluna flashcom um gradiente de metanol e diclorometano em sílica gel(12 0 g) para gerar o composto de título como um óleoamarelo (42,77 g) 1H RMN (CDCl3, 200 MHz) : δ = 7,11 (m, 1H) ,6,41 (m, 2Η) , 4,15 (q, J = 7,2 Hz, 2Η) , 3,81 (s, 31-1),3,80 (s, 3H), 3,74 (s, 2H), 3,37 (s, 2H), 1,27 (t, J = 7,2Hz, 3H).
b) etil éster de ácido 4-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi) -2-metil-benzóico
Uraa mistura de 18 g (100 mmol) de etil éster de ácido4-hidroxi-2-metil-benzóico (preparado de acordo com Sen, ecols. (1987), Indian J. Chem. Sec B, 26: 679-682), 10,2 g(150 mmol) de imidazol, e 17,2 g (115 mmol) de terc-butildimetilsilil cloreto em 110 mL de DMF anidro foiagitada por 24 horas em temperatura ambiente. A reação foidiluída com água e extraída cora acetato de etila. A fraçãoorgânica foi lavada cora água, 0,1 N HCl, e salmoura, entãoseca sobre sulfato de magnésio anidro e concentrada a 28,8g do composto de título; MS (ESI +): m/z 295,5 (M+l).
c) etil éster de N-(2,4-dimetoxi-benzil),N-(2-etoxicarbonil- 5-hidroxi-benzi1)glicina
Uma mistura de 20 g (68 mmol) de etil éster de ácido4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-2-metil-benzóico, 12,1 g(68 mmol) de N-bromossuccinimida, 1,5 g (6,8 mmol) deperóxido de benzoila em 23 0 mL de tetracloreto de carbonofoi aquecida em temperatura de refluxo por 5 horas. Amistura resultante foi resfriada, filtrada através de umplugue de sílica gel, e concentrada sob pressão reduzida.Ao resíduo (12,2 g) foi adicionado 8,0 g (28,7 mmol) deetil éster de N-(2,4-dimetoxibenzil)glicina, 3,96 g (28,7mmol) de carbonato de potássio, e 65 mL de DMF anidro e amistura foi agitada por 6,5 horas. A mistura foi entãodividida em uma mistura bifásica de água -acetato de etilae a camada orgânica isolada foi lavada com salmoura, secasobre sulfato de magnésio anidro, e concentrada. 0 resíduofoi purificado por cromatografia flash: eluição do produtodesejado de sílica gel com um gradiente de 10-90% acetatode etila em hexanos. 5,33 g do composto de título (óleoamarelo) foi isolado; MS (ESI +): 432,2 (M+l)
d) etil éster de N-(2,4-dimetoxi-benzil),N-(5-benziloxi-2-etoxicarbonil-benzil)glicina
Uma solução de 5,3 g (12,3 mmol) de etil éster N-(2,4-dimetoxi-benzil),N-(2-etoxicarbonil-5-hidroxi-benzil)glicina, 1,8 mL (15,4 mmol) benzilbrometo, e 4,4 g (13,5mmol) carbonato de césio em 35 mL de DMF anidro foi agitadapor 18 horas. A mistura de reação foi dividida entre éterdietílico e água, e a fração orgânica lavada combicarbonato de sódio saturado aquoso, salmoura, seca sobresulfato de sódio anidro, filtrada através de um absorventede sílica gel, e concentrada sob pressão reduzida a 6,4 g do composto de título. MS (ESI +) 522,5 m/z (M+l)
e) etil éster de ácido 7-Benziloxi-2-(2,4-dimetoxi-benzil ) -4-hidroxi-1,2-dihidro-isoquinolina-3 -carboxíIico
Uma solução de 6,4 g (12,3 mmol) de etil éster de N-(2,4-dimetoxi-benzil),N-(5-benziloxi-2-etoxicarbonil-benzil)glicina em 140 mL de THF anidro foi resfriada em umbanho de gelo. 24,6 mL de 1 N potássio terc-butóxido em THFfoi adicionado lentamente à solução fria em agitação. Amistura de reação foi agitada a O0C por 1 hora e entãodeixada para aquecer até a temperatura ambiente e agitadapor 4 horas. A mistura foi despejada em uma misturabifásica de acetato de etila e cloreto de amônio saturadoaquoso. A fração orgânica foi lavada duas vezes comsalmoura, seca sobre sulfato de sódio anidro, e concentradasob pressão reduzida para gerar 5,7 g do composto detítulo; MS (ESI +): 476,3 m/z (M+l)
f) etil éster de ácido 7-Benziloxi-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Diclorometano (100 mL) foi resfriado a O0C e 5,7 g (12mmol) de etil éster de ácido 7-benziloxi-2-(2,4-dimetoxi-benzil)-4-hidroxi-l,2-dihidro-isoquinolina-3-carboxílico e1,31 mL (18 mmol) de cloreto de tionila foram adicionados.A reação foi agitada por uma hora e então deixada paraaquecer até a temperatura ambiente e agitada por mais 3horas. 60 mL de hexanos foi adicionado ao caldo resultantee o sólido branco foi coletado por filtração através de umfiltro fritted de vidro médio. 0 sólido foi dividida entreacetato de etila e solução saturada de bicarbonato desódio e a fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobresulfato de sódio anidro, e concentrada para gerar ocomposto de título (2,7 g, sólido branco); MS (ESI +) :324,3 e/z (M+l)
g) etil éster de ácido 7-Benziloxi-l-bromo-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Uma suspensão de 2,48 g (7,67 mmol) de etil éster deácido 7-benziloxi-4-hidroxi-isoquinolina-3- carboxílico e1,43 g (8,0 mmol) de N-bromossuccinimida em 25 mL deacetonitrila foi aquecida a 700C por dez minutos. A reaçãofoi resfriada e um sólido branco se precipitou da solução.0 sólido foi coletado por filtração através de um filtrofritted de vidro médio e lavado com acetonitrila frio paragerar 2,3 g do composto de título; MS (ESI +) : 402,2, 404,2m/z (M+l, 79Br/81Br)h) etil éster de ácido 7-Benziloxi-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Etil éster de ácido 7-Benziloxi-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carboxílico foi preparado por aquecimento deuma mistura de 1,76 g (4,4 mmol) de etil éster de ácido 7-benziloxi-l-bromo-4-hidroxiisoquinolina-3-carboxílico, 201mg (0,20 mmol) tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0), 243mg (0,44 mmol) 1,1'-bis(difenilfosfino) ferroceno, 34 mg(0,53 mmol) poeira de zinco, 309 mg (2,64 mmol) cianeto dezinco, e 9,0 mL de N, N-dimetilacetamida a 115°C por 3horas. A mistura resultante foi diluída com acetato deetila e cloreto de amônio saturado aquoso e filtradaatravés de um absorvente de celite. A fração orgânica foilavada com cloreto de amônio saturado, água, salmoura, secasobre sulfato de sódio anidro, e concentrada in vácuo. Oresíduo foi purificado por flash cromatografia, eluição desílica gel com um gradiente de 10 a 90 por cento de acetatode etila em hexanos para gerar 1,18 g do composto detítulo; MS (ESI +): 349,3 e/z (M+l)
i) ácido [(7-Benziloxi-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
Ácido [(7-Benziloxi-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético foi preparado por aquecimento deuma solução de 110 mg (0,316 mmol) de etil éster de ácido7-benziloxi-l-ciano-4-hidroxiisoquinolina-3-carboxílico e210 mg (2,8 mmol) de glicina em 5 mL de 0,5 N NaOMe emmetanol em temperatura de refluxo por 28 horas. A misturade reação foi resfriada e acidifiçada com 3 mL de 1 N HCl.Um sólido branco foi coletado em um filtro fritted de vidromédio para fornecer 115 mg do composto de título; MS (ESI+) : 378,2 e/z (M+l)Exemplo 53
Ácido [(l-Ciano-4,7-dihidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
a) Etil éster de ácido l-Ciano-4,7-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico
Etil éster de ácido l-Ciano-4,7-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico foi preparado por aquecimento deuma mistura de 175 mg (0,50 mmol) de etil éster de ácido 7-Benziloxi-1-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-carboxílico(exemplo 52h), 63 0 mg (10 mmol) de formato de amônio, e 4 0mg de 10% Pd/C em 3 mL de 1:1 EtOAc e EtOH em temperaturade refluxo por 40 min. A mistura resultante foi resfriada,filtrada através de um absorvente de celite para removersólidos, e concentrada a um sólido bruto. 0 sólido foitriturado com etanol quente para gerar 56 mg de sólidoquase branco com secagem; MS (ESI +): 259,3 c/z (M+l)
b) ácido [ (l-Ciano-4,7-dihidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético
Ácido [ (l-Ciano-4,7-dihidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]acético foi preparado por aquecimento deuma mistura de 42 mg (0,162 mmol) de etil éster de ácido 1-Ciano-4,7-dihidroxi-isoquinolina-3-carboxílico e 97 mg(1,29 mmol) de glicina em 2,25 mL de 0,5 N NaOMe em metanolem temperatura de refluxo por 26 horas. A mistura de reaçãofoi resfriada e acidifiçada com 3 mL de 1 N HCl e água. Umsólido branco foi coletado em um filtro fritted de vidromédio para fornecer 4 0 mg do composto de título; MS (ESI+): 288,2 m/z (M+l)
Exemplo 54
Ensaio comparativo de compostos com Cloro, Bromo,Hidrogênio, ou Metil no lugar de Ciano na Posição C-I
Os compostos foram testados para atividade com o usodo seguinte ensaio. Compostos foram dissolvidos em soluçãoaquosa contendo duas vezes mais hidróxido de sódio, mol-para-mol, como composto e dextrose como agente detonicidade. Camundongos machos Swiss Webster foram dosadospor injeção na veia da cauda com o composto, e amostras desangue foram coletadas em EDTA e heparina 4 horas após adosagem IV. As amostras foram analisadas com o uso de umkit de ELISA QUANTIKINE de eritropoietina de camundongo(R&D Systems Inc., Minneapolis MN) de acordo com asinstruções do fabricante. Compostos da presente invençãomostraram aumento mensurável nos níveis plasmáticos deeritropoietina. Além disso, os compostos contendo asubstituição de ciano em C-1, como aqui reivindicado,surpreendentemente produzem maior, por exemplo, pelo menosduas vezes maiores, níveis plasmáticos de eritropoietinaque um composto comparável contendo um hidrogênio, cloro,bromo, ou metil na posição C-I em uma dada dose. A Tabela 1abaixo ilustra a diferença em vezes (ou seja, o nível demelhoria) entre os níveis de eritropoietina atingidos porcompostos da invenção comparados aos níveis deeritropoietina atingidos por compostos que têm a mesmaestrutura exceto pelo grupo ciano na posição C-I sersubstituído como mostrado abaixo, testados sob as mesmascondições e na mesma concentração.
TABELA 1
<table>table see original document page 159</column></row><table><table>table see original document page 160</column></row><table>

Claims (47)

1. Composto caracterizado pelo fato de serrepresentado pela fórmula I:<formula>formula see original document page 161</formula>em que: ΪRé selecionado do grupo que consiste em hidrogênio,alquil e alquil substituído;R1, R2i R3 e R4 são independentemente selecionados dogrupo que consiste em hidrogênio, halo, ciano, hidroxil,alquil, alquil substituído, aril, aril substituído,heteroaril, heteroaril substituído, amino, aminosubstituído, -OR7, -SR7, -SOR7 e -SO2R7, em que R7 éselecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, cicloalquil, cicloalquil substituído, aril,aril substituído, heteroaril e heteroaril substituído;R5 e R6 são independentemente selecionados do grupoque consiste em hidrogênio ou C1.3 alquil;ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que pelo menos dois de R1, R2, R3e R4 são hidrogênio.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que R1, R2, R3 e R4 sãoindependentemente selecionados do grupo que consiste emhidrogênio, hidroxil, halo, alquil substituído, aril, -OR7,-SR7, e -SO2R7, em que R7 é selecionado do grupo queconsiste em alquil, alquil substituído, cicloalquil, aril,aril substituído, heteroaril, e heteroaril substituído.
4. Composto, de acordo com a reivindicação 3,caracterizado pelo fato de que R1, R2, R3 e R4 sãoselecionados do grupo que consiste em hidrogênio, halo,haloalquil, alquil, alcoxi, ariloxi e ariloxi substituído.
5. Composto, de acordo com a reivindicação 3,caracterizado pelo fato de que R1, R2, R3 e R4 sãoindependentemente selecionados do grupo que consiste emhidrogênio, hidroxil, fenil, cloro, trifluormetil, benzil,benziloxi, metoxi, butoxi, isopropoxi, fenoxi, 4-fluorfenoxi, 2-metoxifenoxi, 3-metoxifenoxi, 4-metoxifenoxi, 2,6-dimetilfenoxi, 2-etil-6-metilfenoxi,- 2,4,6-trimetilfenoxi, 4-cloro-2,6-dimetilfenoxi, 4-propoxifenoxi, 2, 3-dihidrobenzofuran-5-iloxi, 2-metil-benzotiazol-6-iloxi, 2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi, 2-morfolin-4-il-benzotiazol-6-iloxi, 2-metil-benzooxazol-6-iloxi, benzo[1,3]dioxo-5-iloxi, fenilsulfanil,fenilsulfonil, e ciclohexiloxi.
6. Composto, de acordo com a reivindicação 5,caracterizado pelo fato de que R1, R2, R3 e R4 sãoselecionados do grupo que consiste em hidrogênio, cloro,metoxi, trifluormetil, fenoxi, e 4-fluorfenoxi.
7. Composto, de acordo com a reivindicação 5,caracterizado pelo fato de que R1 e R4 são hidrogênio.
8. Composto, de acordo com a reivindicação 5,caracterizado pelo fato de que R1, R3 e R4 são hidrogênio.
9. Composto, de acordo com a reivindicação 5,caracterizado pelo fato de que R1, R2, e R3 são hidrogênio.
10. Composto, de acordo com a reivindicação 5,caracterizado pelo fato de que R1, R2 e R4 são hidrogênio.
11. Composto, de acordo com a reivindicação 5,caracterizado pelo fato de que R2, R3 e R4 são hidrogênio.
12. Composto, de acordo com a reivindicação 5,caracterizado pelo fato de que R1, R2, R3 e R4 sãohidrogênio.
13. Composto, de acordo com a reivindicação 11,caracterizado pelo fato de que R1 é selecionado do grupoque consiste em fenil, fenoxi e 4-fluorfenoxi.
14. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que R2 é selecionado do grupoque consiste em halo, ciano, hidroxil, alquil, alquilsubstituído, aril, aril substituído, heteroaril, heteroarilsubstituído, amino, amino substituído, -OR7, -SR7, -SOR7 e -SO2R7, em que R7 é selecionado do grupo que consiste emalquil, alquil substituído, cicloalquil, cicloalquilsubstituído, aril, aril substituído, heteroaril, eheteroaril substituído.
15. Composto, de acordo com a reivindicação 14,caracterizado pelo fato de que R2 é selecionado do grupoque consiste em halo, -OR7, -SR7, -SOR7 e -SO2R7, em que R7 éselecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, cicloalquil, aril, aril substituído,heteroaril, e heteroaril substituído.
16. Composto, de acordo com a reivindicação 14,caracterizado pelo fato de que R2 é selecionado do grupoque consiste em cloro, metoxi, isopropoxi, fenoxi, 4-fluorofenoxi, 4-metoxifenoxi, 2,6-dimetilfenoxi, 2-etil-6-metilfenoxi, 2,4,6-trimetilfenoxi, 4-cloro-2,6-dimetilfenoxi, 4-propoxifenoxi, 2,3-dihidro-benzofuran-5 -iloxi, 2-metil-benzotiazol-6-iloxi, 2-dimetilamino-benzooxazol- 5 -iloxi, 2-raorfolin-4-il-benzotiazol- 6-iloxi,-2-metilbenzooxazol-6-iloxi, benzo[1,3]dioxo-5-iloxi,fenilsulfonil, fenilsulfanil, e ciclohexiloxi.
17. Composto, de acordo com a reivindicação 14,caracterizado pelo fato de que R2 é metoxi, fenoxi, ou 4-fluorofenoxi.
18. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que R3 é selecionado do grupoque consiste em hidroxil, halo, haloalquil, alquilsubstituído, -OR7, -SR7, -SOR7 e -SO2R7, em que R7 éselecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, aril, aril substituído, heteroaril, eheteroaril substituído.
19. Composto, de acordo com a reivindicação 18,caracterizado pelo fato de que R3 é selecionado do grupoque consiste em trifluormetil, cloro, hidroxil, benzil,metoxi, isopropoxi, butoxi, benziloxi, fenoxi, 4-fluorfenoxi, 2,6-dimetilfenoxi, 4-metoxifenoxi, 2-dimetilamino-benzooxazol-5-iloxi, benzo [1,3]dioxo-5-iloxi,e fenilsulfanil.
20. Composto, de acordo com a reivindicação 18,caracterizado pelo fato de que R3 é fenoxi, 4-fluorfenoxi,trifluormetil ou cloro.
21. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que R4 é selecionado do grupoque consiste em fenil, fenoxi, 2-metoxifenoxi, 3-metoxifenoxi, 4-metoxifenoxi, e 4-fluorfenoxi.
22. Composto, de acordo com a reivindicação 21,caracterizado pelo fato de que R4 é fenoxi ou 4-fluorfenoxi.
23. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que R5 é hidrogênio.
24. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que R5 é metil.
25. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que R6 é hidrogênio.
26. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que R5 é metil.
27. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que R é hidrogênio.
28. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que R é metil.
29. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de ser de fórmula II:<formula>formula see original document page 165</formula>em que:R31, R32 ,R33 e R34 são independentemente selecionados dogrupo que consiste em hidrogênio, ciano, hidroxil, halo,alquil, alquil substituído, aril, aril substituído,heteroaril, heteroaril substituído, amino, aminosubstituído, -OR37, -SR37, -SOR37 e -SO2R37, em que R37 éselecionado do grupo que consiste em alquil, alquilsubstituído, cicloalquil, cicloalquil substituído, aril,aril substituído, heteroaril e heteroaril substituído; eR35 é hidrogênio ou metil;ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.
30. Composto, de acordo com a reivindicação 29,caracterizado pelo fato de que pelo menos três de R31, R32,R33 e R34 são hidrogênio.
31. Composto, de acordo com a reivindicação 29 j_caracterizado pelo fato de que R31, R32, R33 e R34 asindependentemente selecionados do grupo que consiste emhidrogênio, halo, hidroxi, alquil, alquil substituído,haloalquil, alcoxi, alcoxi substituído, aril, arilsubstituído, ariloxi, ariloxi substituído, heteroariloxi,heteroariloxi substituído, cicloalcoxi, cicloalcoxisubstituído, amino, e amino substituído; eR35 é hidrogênio ou metil;ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis desses.
32. Composto, de acordo com a reivindicação 29,caracterizado pelo fato de que R31, R32, R33 e R34 sãoindependentemente selecionados do grupo que consiste emhidrogênio, alquil substituído, aril, ariloxi, e ariloxisubstituído; eR35 é hidrogênio ou metil;ou sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis desses.
33. Composto caracterizado por ser selecionado dogrupo que consiste em:ácido {[l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}acético,ácido 2-(S) -[(l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico,ácido { [l-ciano-4-hidroxi-7-fenoxi-isoquinolina-3carbonil]-amino}-acético,ácido 2-(S) - [ (l-ciano-4-hidroxi-7-fenoxi-isoquinolina3-carbonil)-amino]-propiônico,ácido 2-(R) -[(l-ciano-4-hidroxi-7-fenoxiisoquinolina3-carbonil)-amino]-propiônico,ácido { [l-ciano-7-(4-fluorfenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-7-(trifluormetil)isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido { [l-ciano-4-hidroxi-7-cloro-isoquinolina-3carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-8-fenoxi-isoquinolina-3carbonil]-amino}-acético,ácido { [l-ciano-8-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-6-metoxi-isoquinolina-3carbonil)-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-6-fenoxi-isoquinolina-3carbonil)-amino]-acético,ácido { [l-ciano-6-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3 -carbonil]-amino}-acético,ácido { [l-ciano-4-hidroxi-6-(4-metoxi-fenoxi)isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-6-fenilsulfanilisoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-7-fenilsulfanilisoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido { [l-ciano-6-(2,6-dimetilfenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil]-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-5-fenoxi-isoquinolina-3carbonil)-amino]-acético,ácido { [l-ciano-4-hidroxi-8-(4-metoxifenoxi)isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-8-(3-metoxifenoxi)isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-8-(2-metoxifenoxi)isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido [(7-benzil-l-ciano-4-hidroxiisoquinolina-3carbonil)-amino]-acético,ácido {[l-ciano-5-(4-flúor-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-7-(2,6-dimetil-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-6-(2-etil-6-metil-fenoxi)-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-6-(2,4,6-trimetil-fenoxi)isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético, ácido {[6-(4-cloro-2,6-dimetil-fenoxi)-l-ciano-4hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-7-(4-metoxi-fenoxi)isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido [(l-ciano-6-ciclohexiloxi-4-hidroxiisoquinolina3-carbonil)-amino]-acético,ácido [(6-benzenossulfonil-l-ciano-4-hidroxiisoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-6-(4-propoxi-fenoxi)isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[7-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-l-ciano-4hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[6-(benzo[1,3]dioxol-5-iloxi)-l-ciano-4hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-6-(2,3-dihidro-benzofuran-5-iloxi)-4hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,metil éster de ácido [(l-ciano-4-metoxi-8-fenoxiisoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-metoxi-8-fenoxi-isoquinolina-3carbonil)-amino]-acético,ácido (S)-2-[ (l-ciano-4-hidroxi-8-fenoxiisoquinolina3-carbonil)-amino]-propiônico,ácido (R)-2- [ (l-ciano-4-hidroxi-8-fenoxiisoquinolina-3-carbonil)-amino]-propiônico,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-6-(2-metil-benzotiazol-6iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido { [l-ciano-6-(2-dimetilamino-benzooxazol-5iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido { [l-ciano-7-(2-dimetilamino-benzooxazol-5iloxi)-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido { [l-ciano-4-hidroxi-6-(2-morfolin-4-ilbenzotiazol-6-iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido {[l-ciano-4-hidroxi-6-(2-metil-benzooxazol-6iloxi)-isoquinolina-3-carbonil]-amino}-acético,ácido [ (6-cloro-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3carbonil)-amino]-acético,ácido [(7-butoxi-l-ciano-4-hidroxiisoquinolina-3carbonil)-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-6,7-difenoxiisoquinolina-3carbonil)-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-7-metoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-7-isopropoxi-isoquinolina-3-carbonil)- amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-6-isopropoxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-5-fenil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido [(l-ciano-4-hidroxi-8-fenil-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético,ácido [(7-benziloxi-l-ciano-4-hidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético eácido [(l-ciano-4,7-dihidroxi-isoquinolina-3-carbonil)-amino]-acético.e sais, tautômeros, estereoisômeros, solvatos e/oupró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis desses.
34. Composição farmacêutica caracterizada pelo fatode compreender um ou mais compostos da reivindicação 1 e umexcipiente farmaceuticamente aceitável.
35. Composto, de acordo com a reivindicação 34,caracterizada pelo fato de compreender ainda pelo menos umagente terapêutico adicional.
36. Composto, de acordo com a reivindicação 35,caracterizada pelo fato de que o agente é selecionado dogrupo que consiste em vitamina B12, ácido fólico, sulfatoferroso, eritropoietina humana e uma proteína de estímuloda eritropoiese (ESP).
37. Método para inibição da atividade de uma enzimahidroxilase de HIF caracterizado pelo fato de compreender ocontato entre a enzima hidroxilase de HIF e uma quantidadeinibidora eficaz de um Composto da reivindicação 1.
38. Método, de acordo com a reivindicação 37,caracterizado pelo fato de que a enzima hidroxilase de HIFé uma asparaginil hidroxilase.
39. Método, de acordo com a reivindicação 38,caracterizado pelo fato de que a asparaginil hidroxilase éum Fator de inibição de HIF.
40. Método, de acordo com a reivindicação 37,caracterizado pelo fato de que a enzima hidroxilase de HIFé uma prolil hidroxilase.
41. Método, de acordo com a reivindicação 40,caracterizado pelo fato de que a prolil hidroxilase éselecionada do grupo que consiste em EGLNl, EGLN2, e EGLN3humanas.
42. Método para o tratamento, pré-tratamento, ouretardo do surgimento de uma condição associada com fatorinduzível por hipóxia (HIF) caracterizado pelo fato decompreender a administração a um paciente de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de um Composto da reivindicação 34.
43. Método, de acordo com a reivindicação 42,caracterizado pelo fato de que a condição associada com HIFé dano tecidual associado com isquemia ou hipóxia.
44. Método, de acordo com a reivindicação 43,caracterizado pelo fato de que a isquemia é um eventoisquêmico agudo selecionado do grupo que consiste eminfarto do miocárdio, embolia pulmonar, infarto intestinal,AVC isquêmico, e dano de reperfusão isquêmico renal.
45. Método, de acordo com a reivindicação 43,caracterizado pelo fato de que a isquemia é um eventoisquêmico crônico selecionado do grupo que consiste emcirrose cardíaca, degeneração macular, insuficiência renalcrônica, e insuficiência cardíaca congestiva.
46. Método para o tratamento, pré-tratamento, ouretardo do surgimento de uma condição associada comeritropoietina (EPO) caracterizado pelo fato de compreendera administração a um paciente de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de um Composto da reivindicação 34.
47. Método para o tratamento, pré-tratamento, ouretardo do surgimento de anemia caracterizado pelo fato decompreender a administração a um paciente de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de um Composto da reivindicação 34.
BRPI0707302A 2006-01-27 2007-01-26 compostos de cianoisoquinolina que atuam no dano tecidual associado com isquemia, hipóxia e anemia, bem como composição farmacêutica que os compreende BRPI0707302B8 (pt)

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PCT/US2007/061171 WO2007090068A2 (en) 2006-01-27 2007-01-26 Cyanoisoquinoline compounds that stabilize hypoxia inducible factor (hif)

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Families Citing this family (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8614204B2 (en) * 2003-06-06 2013-12-24 Fibrogen, Inc. Enhanced erythropoiesis and iron metabolism
DK1644336T3 (da) 2003-06-06 2011-05-09 Fibrogen Inc Nitrogenholdige heteroarylforbindelser og deres anvendelse til forøgelse af endogent erythropoietin
EP2476669A1 (en) * 2006-01-27 2012-07-18 Fibrogen, Inc. Cyanoisoquinoline compounds and methods of use thereof
EP1991269A1 (en) * 2006-02-16 2008-11-19 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of stroke
JP5111491B2 (ja) * 2006-04-04 2013-01-09 フィブロジェン， インコーポレイテッド ピロロ−およびピラゾロ−ピリミジン化合物、およびそれらの使用方法
US8962530B2 (en) * 2007-06-27 2015-02-24 Regents Of The University Of Colorado Inflammatory bowel disease therapies
WO2009058403A1 (en) * 2007-11-02 2009-05-07 Fibrogen, Inc. Methods for reducing blood pressure
WO2009073669A1 (en) 2007-12-03 2009-06-11 Fibrogen, Inc. Isoxazolopyridine derivatives for use in the treatment of hif-mediated conditions
EP2231157A1 (en) * 2007-12-06 2010-09-29 Fibrogen, Inc. Methods for increasing endothelial progentior cells
EP2231156A1 (en) * 2007-12-07 2010-09-29 Fibrogen, Inc. Methods for increasing white blood cells
EP2252619B1 (en) 2008-01-11 2013-10-09 Fibrogen, Inc. Isothiazole-pyridine derivatives as modulators of hif (hypoxia inducible factor) activity
WO2009100250A1 (en) 2008-02-05 2009-08-13 Fibrogen, Inc. Chromene derivatives and use thereof as hif hydroxylase activity inhibitors
JP5557832B2 (ja) * 2008-03-18 2014-07-23 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 置換４−ヒドロキシピリジン−５−カルボキサミド
WO2009134754A1 (en) 2008-04-28 2009-11-05 Janssen Pharmaceutica Nv Benzoimidazole glycinamides as prolyl hydroxylase inhibitors
CN102264740B (zh) 2008-08-20 2014-10-15 菲布罗根有限公司 一种吡咯[1,2-b]哒嗪衍生物及其作为hif调节剂的用途
WO2010024911A1 (en) * 2008-08-26 2010-03-04 Fibrogen, Inc. Methods for increasing neurogenesis
WO2010056767A1 (en) 2008-11-14 2010-05-20 Fibrogen, Inc. Thiochromene derivatives as hip hydroxylase inhibitors
CN102869775A (zh) 2009-09-30 2013-01-09 哈佛大学校长及研究员协会 通过调节自噬抑制基因产物调节自噬的方法
CN103608346B (zh) * 2011-02-02 2016-06-15 菲布罗根有限公司 作为缺氧诱导因子(hif)羟化酶抑制剂的萘啶衍生物
GB201102659D0 (en) 2011-02-15 2011-03-30 Isis Innovation Assay
WO2012150208A1 (de) 2011-05-04 2012-11-08 Bayer Cropscience Ag Verwendung von substituierten benzylalkoholestern der cyclopropancarbonsäure zur bekämpfung von insektizid-resistenten insekten
WO2012150221A2 (de) 2011-05-04 2012-11-08 Bayer Cropscience Ag Neue halogenierte benzylalkoholester der cyclopropancarbonsäure als schädlingsbekämpfungsmittel
EP2734504B1 (en) * 2011-07-22 2016-09-14 Beijing Betta Pharmaceuticals Co., Ltd Polymorphic forms of compounds as prolyl hydroxylase inhibitor, and uses thereof
GB201113101D0 (en) 2011-07-28 2011-09-14 Isis Innovation Assay
BR112014009910B1 (pt) 2011-10-25 2020-06-30 Janssen Pharmaceutica N.V. sal di-hidrato de meglumina de ácido 1-(5,6-dicloro-1h-benzo[d]imidazol-2-il)-1h-pirazol-4-carboxílico, composição farmacêuticae pomada tópica
WO2013134660A1 (en) 2012-03-09 2013-09-12 Fibrogen, Inc. 4 -hydroxy- isoquinoline compounds as hif hydroxylase inhibitors
EP3470397B1 (en) 2012-07-16 2021-12-29 Fibrogen, Inc. Crystalline forms of a prolyl hydroxylase inhibitor
US8883823B2 (en) 2012-07-16 2014-11-11 Fibrogen, Inc. Crystalline forms of a prolyl hydroxylase inhibitor
WO2014014834A1 (en) * 2012-07-16 2014-01-23 Fibrogen, Inc. Process for making isoquinoline compounds
SG11201500339XA (en) * 2012-07-27 2015-02-27 Biogen Ma Inc Atx modulating agents
DK2951159T3 (en) * 2013-01-24 2018-11-19 Fibrogen Inc CRYSTALLIC FORMS OF {[1-CYANO-5- (4-CHLORPHENOXY) -4-HYDROXY-ISOQUINOLIN-3-CARBONYL] -AMINO} ACETIC ACID
ES2786924T3 (es) 2013-06-06 2020-10-14 Fibrogen Inc Formulaciones farmacéuticas que comprenden un inhibidor de hidroxilasa del HIF
EP2915878A1 (en) 2014-03-07 2015-09-09 Institut Pasteur Method and device for conserving viable and functional human polymorphonuclear neutrophils
ES2898476T3 (es) 2014-09-02 2022-03-07 Sunshine Lake Pharma Co Ltd Compuesto de quinolona y uso del mismo
NZ733135A (en) 2014-12-24 2018-06-29 Gilead Sciences Inc Fused pyrimidine compounds for the treatment of hiv
TW202237569A (zh) 2014-12-24 2022-10-01 美商基利科學股份有限公司 喹唑啉化合物
BR112017013440A2 (pt) * 2014-12-24 2018-01-09 Gilead Sciences, Inc. compostos de isoquinolina para o tratamento de hiv
CN106146395B (zh) 2015-03-27 2019-01-01 沈阳三生制药有限责任公司 3-羟基吡啶化合物、其制备方法及其制药用途
CN104892509B (zh) * 2015-06-04 2018-03-09 苏州明锐医药科技有限公司 诺得司他的制备方法
KR102333180B1 (ko) * 2015-08-05 2021-11-30 삼성전자주식회사 플렉서블 디스플레이 장치를 구비한 전자 장치
CN109180580B (zh) * 2016-02-28 2021-01-12 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种取代的杂芳基化合物及包含该化合物的组合物及其用途
CN106478503A (zh) * 2016-09-29 2017-03-08 上海勋和医药科技有限公司 Roxadustat中间体的制备方法
CN107954931B (zh) * 2016-10-17 2021-06-22 上海医药集团青岛国风药业股份有限公司 一种诺得司他的制备方法
CN108017583B (zh) * 2016-11-01 2021-04-06 徐州万邦金桥制药有限公司 一种可博美的制备方法
CN110878096A (zh) * 2018-09-05 2020-03-13 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 一种1,7-萘啶类衍生物及其制备方法和用途
IT201800009318A1 (it) * 2018-10-10 2020-04-10 Luigi Frati Composizioni antiossidanti
BR112021008741A2 (pt) 2018-11-09 2021-08-10 Vivace Therapeutics, Inc. compostos bicíclicos
AU2020228119A1 (en) 2019-02-26 2021-09-16 Bayer Aktiengesellschaft Condensed bicyclic heterocyclic derivatives as pest control agents
WO2020173860A1 (en) 2019-02-26 2020-09-03 Bayer Aktiengesellschaft Fused bicyclic heterocycle derivatives as pesticides
KR20220016456A (ko) 2019-04-16 2022-02-09 비바체 테라퓨틱스, 인크. 바이사이클릭 화합물
TW202120490A (zh) 2019-07-30 2021-06-01 德商拜耳動物保健有限公司 新穎異喹啉衍生物
WO2023111985A1 (en) * 2021-12-17 2023-06-22 Akebia Therapeutics, Inc. Picolinamide compounds as selective phd1 inhibitors, compositions, and methods of use

Family Cites Families (58)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4036964A (en) 1973-10-11 1977-07-19 Beecham Group Limited Isocarbostyril-3-carboxylic acid derivatives for the prophylaxis of asthma, hayfever and rhinitis
US3989704A (en) 1973-10-30 1976-11-02 Sandoz, Inc. 3-Substituted-4-aryl isoquinolines
DE2818423A1 (de) 1978-04-27 1979-11-08 Hoechst Ag Neue isochinolinderivate und verfahren zu ihrer herstellung
DE3233424A1 (de) 1982-09-09 1984-03-15 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Isochinolinderivate, verfahren zu ihrer herstellung, pharmazeutische praeparate auf basis dieser verbindungen und ihre verwendung
US4559403A (en) 1983-05-19 1985-12-17 Hoffmann-La Roche Inc. Substituted isoquinolines
US4584379A (en) 1985-01-22 1986-04-22 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Isoquinoline thromboxane synthetase inhibitors
US4822800A (en) 1986-06-09 1989-04-18 Ortho Pharmaceutical Corporation Isoquinolinol compounds having cardiotonic and phosphodiesterase fraction III inhibiting properties and/or renal vasodilating properties
US4966906A (en) 1987-11-27 1990-10-30 Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Inc. 1-aryl-3-isoquinolinecarboxamides
US4952588A (en) 1987-11-27 1990-08-28 Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Inc. 1-aryl-3-quinoline-and 1-aryl-3-isoquinoline-carboxamides
EP0532466A3 (en) 1991-09-12 1993-06-16 Ciba-Geigy Ag Derivatives of 5-amino-4-hydroxy-hexanoic acid and their therapeutical use
EP0626178A1 (de) 1993-05-17 1994-11-30 Ciba-Geigy Ag Verwendung von Hemmstoffen von HIV-Aspartatproteasen zur Bekämpfung von Tumorerkrankungen
EP0650961B1 (de) 1993-11-02 1997-03-05 Hoechst Aktiengesellschaft Substituierte heterocyclische Carbonsäureamide, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE59401923D1 (de) 1993-11-02 1997-04-10 Hoechst Ag Substituierte heterocyclische Carbonsäureamidester, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
TW406076B (en) 1993-12-30 2000-09-21 Hoechst Ag Substituted heterocyclic carboxamides, their preparation and their use as pharmaceuticals
US5563143A (en) 1994-09-21 1996-10-08 Pfizer Inc. Catechol diether compounds as inhibitors of TNF release
WO1996018616A1 (en) 1994-12-12 1996-06-20 Merck & Co., Inc. Substituted 2-aminopyridines as inhibitors of nitric oxide synthase
US6297269B1 (en) * 1995-06-06 2001-10-02 Pfizer Inc. Substituted n-(indole-2-carbonyl-) amides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors
IL135495A (en) 1995-09-28 2002-12-01 Hoechst Ag Intermediate compounds for the preparation of quinoline-converted amines - 2 - carboxylic acid
ATE342262T1 (de) 1996-11-27 2006-11-15 Bristol Myers Squibb Pharma Co Neue integrin rezeptor antagonisten
GB9707830D0 (en) 1997-04-18 1997-06-04 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
AU7526798A (en) 1997-04-18 1998-11-27 Smithkline Beecham Plc Acetamide and urea derivatives, process for their preparation and their use in the treatment of cns disorders
DE19746287A1 (de) 1997-10-20 1999-04-22 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Substituierte Isochinolin-2-Carbonsäureamide, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
FR2779963A1 (fr) 1998-06-22 1999-12-24 Centre Nat Rech Scient Utilisation d'un compose possedant une affinite pour le recepteur mitochondrial des benzodiazepines en therapie du cancer
IT1302677B1 (it) 1998-10-15 2000-09-29 Zambon Spa Derivati benzazinici inibitori della fosfodiesterasi 4
AU4802500A (en) 1999-04-26 2000-11-10 Neurogen Corporation 2-aminoquinolinecarboxamides: neurokinin receptor ligands
IT1320162B1 (it) 2000-02-09 2003-11-18 Rotta Research Lab Derivati della tirosina ad attivita' anti leucotrienica, procedimentoper la loro preparazione e loro uso farmaceutico.
US7622503B2 (en) 2000-08-24 2009-11-24 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
FI20002044A0 (fi) 2000-09-15 2000-09-15 Orion Yhtymae Oyj Comt-entsyymiä estäviä naftaleenijohdannaisia
DE10110750A1 (de) 2001-03-07 2002-09-12 Bayer Ag Neuartige Aminodicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
US20040146964A1 (en) 2001-03-21 2004-07-29 Maxwell Patrick Henry Assays, methods and means
WO2002101073A2 (en) 2001-06-13 2002-12-19 Genesoft Pharmaceuticals, Inc. Aryl-benzimidazole compounds having antiinfective activity
JP2005505507A (ja) 2001-06-13 2005-02-24 ジーンソフト ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 抗感染活性を有するイソキノリン化合物
US7105544B2 (en) * 2001-07-05 2006-09-12 Synaptic Pharmaceutical Corporation Substituted alkyl amido piperidines
US6841566B2 (en) 2001-07-20 2005-01-11 Boehringer Ingelheim, Ltd. Viral polymerase inhibitors
EP2335700A1 (en) 2001-07-25 2011-06-22 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C virus polymerase inhibitors with a heterobicylic structure
US7294457B2 (en) 2001-08-07 2007-11-13 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Direct binding assay for identifying inhibitors of HCV polymerase
US6930086B2 (en) 2001-09-25 2005-08-16 Hoffmann-La Roche Inc. Diglycosylated erythropoietin
US6762318B2 (en) 2001-12-03 2004-07-13 Novo Nordisk A/S Glucagon antagonists
EP2324834B1 (en) 2001-12-06 2019-05-08 Fibrogen, Inc. Methods of Increasing Endogenous Erythropoietin (EPO)
GB0206711D0 (en) 2002-03-21 2002-05-01 Isis Innovation HIF Inhibitor
US7618940B2 (en) 2002-12-06 2009-11-17 Fibrogen, Inc. Fat regulation
US8124582B2 (en) 2002-12-06 2012-02-28 Fibrogen, Inc. Treatment of diabetes
DK1644336T3 (da) 2003-06-06 2011-05-09 Fibrogen Inc Nitrogenholdige heteroarylforbindelser og deres anvendelse til forøgelse af endogent erythropoietin
US8614204B2 (en) 2003-06-06 2013-12-24 Fibrogen, Inc. Enhanced erythropoiesis and iron metabolism
US20060251638A1 (en) 2003-06-06 2006-11-09 Volkmar Guenzler-Pukall Cytoprotection through the use of hif hydroxylase inhibitors
EP1646611A1 (en) 2003-07-15 2006-04-19 Merck & Co., Inc. Hydroxypyridine cgrp receptor antagonists
CA2531796A1 (en) 2003-08-08 2005-02-17 Transtech Pharma, Inc. Aryl and heteroaryl compounds, compositions, and methods of use
US7208601B2 (en) 2003-08-08 2007-04-24 Mjalli Adnan M M Aryl and heteroaryl compounds, compositions, and methods of use
WO2005118836A2 (en) 2004-05-28 2005-12-15 Fibrogen, Inc. Hif prolyl hydroxylase activity assay
US7248053B2 (en) 2004-07-15 2007-07-24 Powerprecise Solutions, Inc. One time operating state detecting method and apparatus
EP1676834A1 (en) 2004-12-30 2006-07-05 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Fused bicyclic carboxamide derivates for use as CXCR2 inhibitors in the treatment of inflammation
ATE513833T1 (de) * 2005-03-02 2011-07-15 Fibrogen Inc Thienopyridinverbindungen und verfahren zu ihrer verwendung
WO2006133391A2 (en) 2005-06-06 2006-12-14 Fibrogen, Inc. Improved treatment for anemia using a hif-alpha stabilising agent
US8530404B2 (en) 2005-06-15 2013-09-10 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of cancer
EP2476669A1 (en) * 2006-01-27 2012-07-18 Fibrogen, Inc. Cyanoisoquinoline compounds and methods of use thereof
JP5111491B2 (ja) 2006-04-04 2013-01-09 フィブロジェン， インコーポレイテッド ピロロ−およびピラゾロ−ピリミジン化合物、およびそれらの使用方法
US7713986B2 (en) 2006-06-15 2010-05-11 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of chemotherapy-induced anemia
US20070293575A1 (en) 2006-06-15 2007-12-20 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of cancer-related anemia

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Publication number Publication date
US20110212959A1 (en) 2011-09-01
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RU2457204C2 (ru) 2012-07-27
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US20150031696A1 (en) 2015-01-29
US20120178755A1 (en) 2012-07-12
EP2476669A1 (en) 2012-07-18
EP2044028A2 (en) 2009-04-08
US20160009653A1 (en) 2016-01-14
BRPI0707302B8 (pt) 2021-05-25
CN101374815B (zh) 2013-07-17
EP2044028B1 (en) 2012-05-16
CN103382216A (zh) 2013-11-06
CA2640435A1 (en) 2007-08-09
HK1129114A1 (en) 2009-11-20
KR20140089446A (ko) 2014-07-14
US9174976B2 (en) 2015-11-03
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