NO332354B1

NO332354B1 - Pyrazolo[3,4-b]pyridin forbindelser, farmasoytisk preparat omfattende slike forbindelser samt anvendelse av disse for fremstilling av medikamenter for behandling av sykdom

Info

Publication number: NO332354B1
Application number: NO20053600A
Authority: NO
Inventors: Martin Redpath Johnson; Michael Dennis Dowle; Alison Judith Redgrave; Paul Spencer Jones; Caroline Mary Cook; Diane Mary Coe; Julie Nicole Hamblin; David George Allen; Christopher David Edlin; Mika Kristian Lindvall; Charlotte Jane Mitchell; Anthony William James Cooper
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 2002-12-23
Filing date: 2005-07-22
Publication date: 2012-09-03
Also published as: AU2010202035A1; AU2003293999B2; PL377880A1; CA2511340A1; ZA200605901B; MXPA05006923A; GB0230045D0; NZ540923A; IS2795B; DE60332396D1; US7528148B2; KR101088848B1; BR0317645A; NO20053600D0; TW200500364A; NO20053600L; CN1751042B; ES2345385T3; CN1751042A; ATE466012T1

Abstract

Oppfinnelsen angår en forbindelse med formel (I) eller et salt derav: hvor: Ri er C\. 4alkyl, C^fluoralkyl eller -(CH2)2OH; R2 er et hydrogenatom (H), metyl eller Cifluoralkyl; R^a er et hydrogenatom (H) eller Ci_3alkyl; R^ er eventuelt substituert forgrenet C3_6alkyl, eventuelt substituert C3_8cykloalkyl, eventuelt substituert mono-umettet-C5_7cykloalkenyl, eventuelt substituert fenyl eller en eventuelt substituert heterocyklisk gruppe med sub-formel (aa), (bb) eller (cc); hvor n^ og n^ uavhengig er 1 eller 2; og Y er O, S, SO2 eller NR^; og hvor Het har sub-formel (i), (ii), (iii), (iv) eller (v). Forbindelsene er fosfodiesterase- (PDE) inhibitorer, spesielt PDE4-inhibitorer. Oppfinnelsen angår også anvendelse av en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, ved fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av en inflammatorisk og/eller allergisk sykdom hos et pattedyr så som et menneske, for eksempel kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS), astma eller allergisk rhinitt.

Description

Foreliggende oppfinnelse angår pyrazolopyridin-forbindelser, farmasøytisk preapart omfattende slike forbindelser samt anvendelse av disse for fremstilling av medikamenter for behandlig av sykdom som inflammatoriske og/eller allergiske sykdommer så som kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS), astma, revmatoid artritt eller allergisk rhinitt.

US 3,979,399, US 3,840,546 og US 3,966,746 (E.R.Squibb & Sons) beskriver 4-amino-derivater av pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksamider hvor 4-aminogruppen NR3R4kan være en acyklisk aminogruppe hvor R3og R4hver kan være hydrogen, lavere alkyl (f.eks. butyl), fenyl, etc; NR3R4kan alternativt være en 3-6-leddet heterocyklisk gruppe så som pyrrolidino, piperidino og piperazino. Forbindelsene er beskrevet som sentralnervesystem-beroligende midler anvendelige som ataraktiske, analgetiske og hypotensive midler.

US 3,925,388, US 3,856,799, US 3,833,594 og US 3,755,340 (E.R.Squibb & Sons) beskriver 4-amino-derivater av pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylsyrer og estere. 4-aminogruppen NR3R4kan være en acyklisk aminogruppe hvor R3og R4hver kan være hydrogen, lavere alkyl (f.eks. butyl), fenyl, etc; NR3R4kan alternativt være en 5-6-leddet heterocyklisk gruppe hvor et ytterligere nitrogen er til stede så som pyrrolidino, piperidino, pyrazolyl, pyrimidinyl, pyridazinyl eller piperazinyl. Forbindelsene er nevnt som sentralnervesystem-beroligende midler anvendelige som ataraktiske midler eller beroligende midler, som har antiinflammatoriske og analgetiske egenskaper. Forbindelsene er angitt å øke den intracellulære konsentrasjon av adenosin-3',5'-cyklisk monofosfat og å lindre symptomene på astma.

H. Hoehn et al., J. Heterocycl. Chem., 1972, 9(2), 235-253 beskriver en serie av l//-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylsyrederivater med 4-hydroksy-, 4-klor-, 4-alkoksy-, 4-hydrazino- og 4-amino-substituenter.

CA 1003419, CH 553 799 og T.Denzel, Archiv der Pharmazie, 1974, 307(3), 177-186 beskriver 4,5-disubstituerte l//-pyrazolo[3,4-b]pyridiner usubstituert i 1-stilling.

US 3,833,598 og GB 1,417,489 (E.R.Squibb & Sons) beskriver 4-amino-derivater av pyrazolo[3,4-b]pyridin-6-karboksylsyrer og estere. 4-aminogruppen NR3R4kan være en acyklisk aminogruppe hvor R3og R4hver kan være hydrogen, lavere alkyl, Rg,R7-fenyl, etc; eller NR3R4kan være en 5-6-leddet heterocyklisk gruppe hvor et ytterligere nitrogen er til stede, dvs. eventuelt substituert pyrrolidino, piperidino, pyrazolyl, dihydropyridazinyl eller piperazinyl. I 5-stilling av pyrazolo[3,4-b]pyridinet er gruppen R5som er hydrogen, lavere alkyl, fenyl, fenyl-lavere-alkyl eller halogen; R5er fortrinnsvis hydrogen, metyl eller klor. Forbindelsene er nevnt som sentralnervesystem-beroligende midler, som berolignede eller ataraktiske midler for lindring av angst og spenningstilstander. Forbindelsene er også angitt å øke den intracellulære konsentrasjon av adenosin-3',5'-cyklisk monofosfat og å lindre symptomene på astma. Forbindelsene er også angitt å ha anti-inflammatoriske egenskaper og være anvendelige som anti-inflammatoriske midler, for eksempel for å redusere lokale inflammatoriske tilstander så som de av en ødematøs natur eller som er et resultat av proliferasjon av bindevev i forskjellige pattedyr-arter så som rotter og hunder.

US 4,115,394 og GB 1,511,006 (E.R.Squibb & Sons) beskriver 4-amino-derivater av 6-fenyl-pyrazolo[3,4-b]pyridiner. 4-aminogruppen NR3R4er en acyklisk aminogruppe hvor R3og R4hver kan være hydrogen, lavere alkyl, fenyl, fenyl-lavere-alkyl eller substituert fenyl. I 5-stilling av pyrazolo[3,4-b]pyridinet er gruppe R5som er hydrogen, lavere alkyl, fenyl eller fenyl-lavere-alkyl; R5er fortrinnsvis hydrogen. Forbindelsene er angitt å ha anti-inflammatoriske egenskaper og å være anvendelige som anti-inflammatoriske midler, for eksempel for å redusere lokale inflammatoriske tilstander så som de av ødematøs natur eller som er et resultat av proliferasjon av bindevev i forskjellige pattedyr-arter så som rotter og hunder. Forbindelsene er også angitt (a) å ha diuretisk aktivitet og (b) å øke den intracellulære konsentrasjon av adenosin-3',5'-cyklisk monofosfat og å lindre symptomene på astma.

Japansk utlagt patentsøknad JP-2002-20386-A (Ono Yakuhin Kogyo KK) publisert 23. januar 2002 beskriver pyrazolopyridin-forbindelser med den følgende formel:

hvor R<1>betyr 1) en gruppe -OR<6>,2) en gruppe -SR<7>, 3) en C2-8 alkynylgruppe, 4) en nitrogruppe, 5) en cyanogruppe, 6) en Cl-8 alkylgruppe substituert med en hydroksygruppe eller en Cl-8 alkoksygruppe, 7) en fenylgruppe, 8) en gruppe -C(0)R<8>, 9) en gruppe -S02NR<9>R<10>, 10) en gruppe -NR<n>S02R<12>, 11) en gruppe -NR<I3>C(0)R<14>eller 12) en gruppe -CH=NR15. R6 og R7 betyr i) et hydrogenatom, ii) en Cl-8 alkylgruppe, iii) en Cl-8 alkylgruppe substituert med en Cl-8 alkoksygruppe, iv) en trihalogenmetylgruppe, v) en C3-7 cykloalkylgruppe, vi) en Cl-8 alkylgruppe substituert med en fenylgruppe eller vii) en 3-15-leddet mono-, di- eller tricyklisk hetero-ring inneholdende 1-4 nitrogenatomer, 1-3 oksygenatomer og/eller 1-3 svovelatomer. R<2>betyr 1) et hydrogenatom eller 2) en Cl-8 alkoksygruppe. R<3>betyr 1) et hydrogenatom eller 2) en Cl-8 alkylgruppe. R<4>betyr 1) et hydrogenatom, 2) en Cl-8 alkylgruppe, 3) en C3-7 cykloalkylgruppe, 4) en Cl-8 alkylgruppe substituert med en C3-7 cykloalkylgruppe, 5) en fenylgruppe som kan være substituert med 1-3 halogenatomer eller 6) en 3-15-leddet mono-, di- eller tricyklisk heteroring inneholdende 1-4 nitrogenatomer, 1-3 oksygenatomer og/eller 1-3 svovelatomer. R<5>betyr 1) et hydrogenatom, 2) en Cl-8 alkylgruppe, 3) en C3-7 cykloalkylgruppe, 4) en Cl-8 alkylgruppe substituert med en C3-7 cykloalkylgruppe eller 5) en fenylgruppe som kan være substituert med 1-3 substituenter. I gruppen R<3>er et hydrogenatom foretrukket. I gruppen R^ er metyl, etyl, cyklopropyl, cyklobutyl eller cyklopentyl foretrukket. Forbindelsene i JP-2002-20386-A er angitt å ha PDE4-hemmende aktivitet og være anvendelige for forebygging og/eller behandling av inflammatoriske sykdommer og mange andre sykdommer.

EP 0 076 035 Al (ICI Americas) beskriver pyrazolo[3,4-b]pyridin-derivater som sentralnervesystem-beroligende midler anvendelige som beroligende midler eller ataraktiske midler for lindring av angst og spenningstilstander.

Forbindelsen cartazolat, etyl-1 -etyl-4-n-butylamino-1 H-pyrazolo [3,4-b]-pyridin-5-karboksylat, er kjent. J.W. Daly et al, Med. Chem. Res., 1994,4,293-306 og D. Shi et al, Drug Development Research, 1997,42,41-56 beskriver en serie av 4-(amino)substituerte 1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylsyrederivater, omfattende etyl-4-cyklopentylamino-1 -metyl-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylat og deres affiniteter og antagonist-aktiviteter ved Aj- og A2A-adenosin-reseptorer og den sistnevnte artikkel beskriver deres affiniteter ved forskjellige bindingsseter av GABAa-reseptor-kanalen. S. Schenone et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001,11, 2529-2531 og F. Bondavalli et al., J. Med. Chem., 2002, vol. 45 (utgivelse 22,24. oktober 2002, angivelig publisert på Web 24/09/2002), s. 4875-4887, beskriver en serie av 4-amino-l-(2-klor-2-fenyletyl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylsyre-etylestere som Al-adenosin-reseptor-ligander.

WO 02/060900 A2 synes å beskrive, som MCP-1 antagonister for behandling av allergiske, inflammatoriske eller autoimmune lidelser eller -sykdommer, en serie av bicykliske, heterocykliske forbindelser med en -C(0)-NR<4->C(0)-NR<5>R<6->substituent, omfattende isoksazolo[5,4-b]pyridiner og l//-pyrazolo[3,4-b]pyridiner (betegnet som pyrazolo[5,4-b]pyridiner) med en -C(0)-NR<4->C(0)-NR<5>R<6>-gruppe som 5-substituent og eventuelt substituert i 1-, 3-, 4- og/eller 6-stillinger. Bicykliske, heterocykliske forbindelser med en -C(0)NH2-substituent istedenfor -C(0)-NR4-C(0)-NR5R6 - substituent er angivelig beskrevet i WO 02/060900 som mellomprodukter i syntesen av de -C(0)-NR<4->C(0)-NR<5>R<6->substituerte forbindelser.

S.S.Chakravorti et al, Indian J. Chem., 1978,16B(2), 161-3 beskriver forbindelsene 4-hydroksy-l,3-difenyl-5-(3',4'-dihydroisokinol-r-yl)-pyrazolo[3,4-b]pyridin og l,3-difenyl-4-hydroksy-5-(3'-metyl-3',4'-dihydroisokinol-r-yl)-pyrazolo[3,4-b]pyridin. Disse to forbindelser ble testet for antifilarial aktivitet men ble funnet ikke å ha noen betydelig mikrofilaricid aktivitet.

G. Sabitha et al, Synthetic Commun., 1999,29(4), 655-665 beskriver en syntetisk rute til 5-substituerte-6-amino-l-fenyl-3-(metyl eller

fenyl)-pyrazolo[3,4-b]pyridiner hvor 5-substituenten i pyrazolo[3,4-b]pyridinet er benzimidazol-2-yl, 5-klor-benzoksazol-2-yl eller benzotiazol-2-yl. Selv om de er angitt å være "biologisk interessante molekyler", er det imidlertid ingen beskrivelse av at disse

forbindelser hadde vært testet i noen som helst farmakologiske tester og det er ingen beskrivelse av noen som helst generell eller spesifikk biologisk aktivitet til disse forbindelser. 8. april 2003 registrerte Chemical Abstracts (CAS) i deres database en forbindelse med CAS Registreringsnummer 502143-17-1, med det kjemiske navnet "lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-butyl-5-(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)-l-etyl-" og som har laboratoriekode NSC 235755. 5. november 2003 hadde CAS-posten for denne forbindelsen ingen assosierte litteratur-referanser og det synes derfor som om ingen kjemisk syntese og ingen anvendelse av forbindelsen er beskrevet frem til 5. november 2003. Strukturen av forbindelsen fra CAS-databasen er som følger:

Det er ønskelig å finne nye forbidelser som binder til og fortrinnsvis hemmer, fosfodiesterase type IV (PDE4).

Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en forbindelse med formel (I) eller et salt derav (spesielt et farmasøytisk akseptabelt salt derav):

hvor:

R<1>er Ci_3alkyl, C^fluoralkyl eller -(CH2)20H;

R<2>er et hydrogenatom (H), metyl eller Cifluoralkyl;

R<3>er eventuelt substituert C3_8cykloalkyl eller en eventuelt substituert heterocyklisk gruppe med sub-formel (aa), (bb) eller (cc):

hvor ni og n<2>uavhengig er 1 eller 2; og Y er O, S, SO2eller NR<4>; hvor R<4>er et hydrogenatom (H), Ci_2alkyl, Ci_2fluoralkyl, C(0)NH2, C(0)-Ci_2alkyl eller C(0)-Cifluoralkyl;

hvor i R<3>C3_8cykloalkyl eventuelt er substituert med én eller to substituenter som uavhengig er okso (=0); OH; C^alkoksy; Cjfluoralkoksy; NHR^l hvor R<2>^ er et hydrogenatom (H); Ci_2alkyl; Cifluoralkyl; -CH2OH; -CH2NHR<22>hvorR22 er H;

-C(0)OR2<3>hvorR23 er H; -C(0)NHR24 hvorR24 er H; -C(0)R25 hvorR25 er metyl; fluor; hydroksyimino (=N-OH); eller (Ci_2alkoksy)imino (=N-OR<2>^ hvor R<2>^ er Ci_2alkyl); og hvor hvilken som helst OH-, alkoksy-, fluoralkoksy- eller NHR<21->

substituent ikke er substituert i R<3>ringkarbonet tilknyttet (bundet) til -NH-gruppen i formel (I): og hvor R<3>i den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa), (bb) eller (cc) eventuelt er substituert med en eller to substituenter som er okso (=0);

og R3a er et hydrogenatom (H);

og hvor Het har sub-formel (i), (ii), (iii), (iv) eller (v):

hvor:

W1,W2, W4 og W<5>er N; og W<3>er NR<W>;

X1,X3 og X<4>er N eller CR<X>; X<2>er O, S eller NRX; og X<5>er CR^R*2 ellerCrX3rX4.

Y1,Y2 og Y3 er CR<Y>eller N; Y<4>er O, S eller NRY ; og Y$ er CRY1RY2;

Z<1>og Z5 er O, S eller NR<Z>; og Z<2>, Z<3>og Z<4>er N eller CRZ;

hvor:

r<W>er et hydrogenatom (H);

RX rX2, rY og r<Y2>er uavhengig:

et hydrogenatom (H); Ci_8alkyl; C3_6cykloalkyl eventuelt substituert med én eller to C^alkylgrupper og/eller med én okso (=0) gruppe; -(CH2)n<2a->C3_5cykloalkyl eventuelt substituert, i -(CH2)n<2a>-gruppen eller i C3_6cykloalkylgruppen, med en C\_ 2alkylgruppe eller eventuelt substituert i C3_6cykloalkylgruppen med en -CH2C(0)NHCi_2alkylgruppe, hvor n<2>a er 1,2 eller 3; -(CH2)n<3>-S(0)2-R<5>, -CH(C1.2alkyl)-S(0)2-R<5>, -CMe2-S(0)2-R<5>eller C3_5cykloalkyl substituert i det forbindende karbonatom med -S(0)2-R^,

hvor n<3>er 1 eller 2;

og R<5>er Ci_4alkyl, -NR^r<16>5fenyl, karbon-bundet pyridinyl eller benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to substituenter som uavhengig er fluor, klor,

Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy, Cifluoralkoksy eller OH og hvor pyridinyl eventuelt er substituert med én av metyl, metoksy eller OH (omfattende hvilken som helst tautomer derav));

hvor R.<15>er H, Ci_4alkyl, fenyl, benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to substituenter som uavhengig er fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy eller Cifluoralkoksy), CH(Me)Ph eller karbon-bundet pyridinyl eventuelt substituert med én av metyl, metoksy eller OH (omfattende hvilken som helst tautomer derav);

ogR16 er H eller C^alkyl;

eller hvorR15 ogR16 sammen er -(CH2)n3a-X3a-(CH2)n3b- hvor n3a og n<3b>uavhengig er 2 eller 3 og X<3a>er en binding, -CH2-, O eller NR8a hvor R^<a>er H eller Ci_2alkyl, acetyl, -S(0)2Me eller fenyl og hvor ringen dannet ved NR<15>r<16>eventuelt er substituert på et ringkarbon med én eller

to substituenter som uavhengig er metyl eller okso (=0);

-(CH2)n<4->NR6R7, -CH(Ci_2alkyl)-NR6R<7>, -CMe2-NR6R<7>eller C3_5cykloalkyl substituert i det forbindende karbonatom med -NR^R<7>, hvor n<4>er 0,1,2 eller 3; ogR6 og R<7>er uavhengig H, C^galkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, -C(0)R1<7>, -S(0)2R<18>, fenyl, benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to substituenter som uavhengig er fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy eller Cifluoralkoksy) eller karbon-bundet pyridinyl eventuelt substituert med én av metyl, metoksy eller OH (omfattende hvilken som helst tautomer derav);

og hvor R<I7>og R<l8>uavhengig er C^alkyl, C3_6cykloalkyl, eventuelt substituert 5-leddet heteroaryl som er furyl (furanyl) eller 1,3-oksazolyl eller isoksazolyl eller oksadiazolyl eller tienyl eller 1,3-tiazolyl eller isotiazolyl

eller pyrrolyl eller imidazolyl eller pyrazolyl (alle uavhengig eventuelt substituert med én okso og/eller én eller to metyl) eller fenyl eller benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to substituenter som uavhengig er fluor, klor, C^alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy, Cifluoralkoksy eller OH) eller karbon-bundet-pyridinyl eventuelt substituert med én metyl, metoksy eller OH (omfattende hvilken som helst tautomer derav);

eller R<6>og R<7>sammen er -(CH2)n<5->X<5->(CH2)n<6->hvor n<5>og n<6>

uavhengig er 2 eller 3 og X^ er en binding, -CH2-, O eller NR<&>hvor R<&>er H, Ci_2alkyl, acetyl, -S(0)2Me eller fenyl og hvor ringen dannet ved NR<6>r<7>eventuelt er substituert på et ringkarbon med én eller to substituenter

som uavhengig er metyl eller okso (=0);

-(C<H>2)n<7->0-R<9>; hvor n<7>er 0, 1, 2 eller 3 og R9 er H, C^alkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, -C(0)R<l7>, fenyl eller benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to av fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy eller Cifluoralkoksy); hvor n<7>er 0 bare når -(CH2)n<7->0-R<9>er bundet til et karbonatom i Het-ringen; og hvor n<7>ikke er 0 når Het har sub-formel (v) (dvs. n<7>er ikke 0 for RX2 og for RY2); -(CH2)n 11 -C(0)-NR 1 OR 11, -CH(Ci.2alkyl)-C(O)-NR!0Rl 1, -CMe2-C(0)-NR<10>R<11>eller C3_5cykloalkyl substituert i det forbindende karbonatom med -C(O)-NR10r! !, hvor n<11>er 0,1 eller 2;

og hvorRlO og Ri 1 uavhengig er H; C^<ga>lkyl; Cifluoralkyl;

C2-4alkyl substituert med én OH eller -OCi_2alkyl bortsett fra ved forbindelsespunktet; C3_6cykloalkyl eventuelt substituert med én eller to metylgrupper; -CH2-C3_6cykloalkyl eventuelt substituert med én metyl-,

NH2- eller NHMe-gruppe; -(CH2)n^<7->Het<2>; karbon-bundet pyridinyl eventuelt substituert med én metyl, metoksy eller OH (omfattende hvilken som helst tautomer derav); fenyl; benzyl; eller -CH(Cj.2alkyl)Ph [hvor fenyl, benzyl og -CH(Cj.2alkyl)Ph uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to substituenter som uavhengig er: fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, C^alkoksy, Cifluoralkoksy, OH,

_NR10aR10(hvorR10a er H eller Ci^alkyl ogR10b er H, Ci^alkyl, -C(0)-Ci_2alkyl eller -S(0)2-Ci_2alkyl), -C(O)-NR!0cRl0d(hvor R10c ogR10d uavhengig er H eller C\_ 2alkyl) eller -S(O)2-R<10e>(hvorR10<e>er Ci_2alkyl, NH2, NHMe eller NMe2)];

hvor n^<7>er 0,1 eller 2 og hvor Het<2>er en 4-, 5- eller 6- leddet mettet heterocyklisk ring inneholdende ett O- eller S-ringatom eller én NR<27->ringgruppe hvor R<27>er H, Ci^alkyl, -C(0)Me eller -S(0)2Me, hvor Het<2->ringen eventuelt er substituert på et ringkarbon med én eller to substituenter som uavhengig er metyl eller okso (=0);

og hvor når n^<7>er 2 da kan Het<2->ringen eventuelt inneholde ett ytterligere ring-N-atom i Het<2>ringstillingen bundet til -(CH2)n^<7->gnjppen;

forutsatt at når Het<2>inneholder én O eller S eller NR<27>ringatom/gruppe og ett ytterligere ring-N-atom, da er O/S/NR<27>ringatom/gruppe og det ene ytterligere ring-N-atom ikke direkte bundet til hverandre og er separert med mer enn ett karbonatom;

eller R1*) og R1<1>sammen er -(CH2)n8-X<6->(CH2)n<9->hvor n<®>og n<9>

uavhengig er 2 eller 3 og X^ er en binding, -CH2-, O eller NR<l2>hvor R^<2>er H, Ci_2alkyl, acetyl, -S(0)2Me eller fenyl og hvor ringen dannet ved NRIOrI 1 eventuelt er substituert på et ringkarbon med én eller to

substituenter som uavhengig er metyl eller okso (=0);

-(CH2)n1<2->C(0)-OR13 hvor n12 er 0, 1 eller 2; og hvor R13 er H, Ci_6<a>lkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, fenyl eller benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én

eller to av (uavhengig) fluor, klor, Cj.2alkyl, Cifluoralkyl, C^alkoksy eller Cifluoralkoksy);

-(CH2)n<13->C(0)-R13a hvor n13 er 0,1 eller 2; og hvor R<13a>er et hydrogenatom

(H), Ci_6alkyl, Cifluoralkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6<cy>kloalkyl, benzyl eller fenyl; hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på

den aromatiske ringen med én eller to av (uavhengig) fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy eller Cifluoralkoksy;

-(CH2)n1<4->Het1, -CH^i^alky^-Het1, -Clv^-Het1 eller C3.5cykloalkyl substituert i det forbindende karbonatom med Het^, hvor n^<4>er 0,1 eller 2 og hvor Het<l>er en 4-, 5-, 6- eller 7-leddet mettet heterocyklisk ring; hvor nevnte heterocykliske ring Het^ inneholder ett O- eller S-ringatom og/eller én NRl4-ringgruppe hvorR^4 er H, Ci_4<a>lkyl, C3_6cykloalkyl, benzyl, fenyl, -C(0)R<1>9 eller -S(0)2R<19>; hvor R^<9>, uavhengig av hvilke som helst andre R^<9>, er Ci_6alkyl, C3_6cykloalkyl, tienyl, furyl (furanyl) eller fenyl eller benzyl; hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert med én eller to (uavhengig) av fluor, metyl eller metoksy; og hvor nevnte heterocykliske ring Het<l>eventuelt er substituert (i en stilling eller stillinger forskjellig fra hvilken som helst NR l4-stilling) med én eller to okso- (=0) og/eller én Ci_4alkyl-substituenter; forutsatt at når den heterocykliske ringen Het<l>inneholder ett O- eller S-nngatom og en -ringgruppe: (a) O/S-ringatomet og NR<l4->ringgruppen er ikke bundet direkte til hverandre og (b) O/S-ringatomet og NR<I4->ringgruppen er separert med mer enn ett karbonatom hvis ikke Het^ inneholder en -NR<14->C(0)-0- eller -NR<14->C(0)-S- gruppe som del av ringen; eller -(CH2)n<10>-Ar, -CH(Ci_2alkyl)-Ar, -CMe2-Ar eller C3_5cykloalkyl substituert i det forbindende karbonatom med Ar, hvor n<lO>er 0, 1 eller 2 og (i) Ar er fenyl eventuelt substituert med én eller to substituenter som uavhengig er fluor, klor, brom, Cj^alkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy, Cifluoralkoksy, OH, -NR1 laR*lb (hvor R1 la er H eller Ci^alkyl og R1 lb er H, Ci_2alkyl, -C(0)-Ci_2alkyl eller -S(0)2-Ci.2alkyl), cyano, -C^-NR1 1cr! ld (hvor R1 lc og R1 ld uavhengig er H eller Ci^alkyl), -C^-OR1 le hvor R1 le er H eller Ci^alkyl eller -StO^-R1 lf (hvor R1 lf er Cj_2alkyl, NH2, NHMe eller NMe2); eller fenyl Ar eventuelt er substituert i to nabostilte Ar-ringatomer med de to ender av en kjede som er: -(CH2)4-, -(CH2)3- eller -CH=CH-CH=CH-; eller (ii) Ar er en eventuelt substituert 5- eller 6-leddet heterocyklisk aromatisk ring inneholdende 1, 2, 3 eller 4 heteroatomer valgt fra O, N eller S; og hvor når den heterocykliske aromatiske ring Ar inneholder 2, 3 eller 4 heteroatomer, ett er valgt fra O, N og S og det (de) resterende heteroatom(er) er N; og hvor den heterocykliske aromatiske ring Ar eventuelt er substituert med én eller to grupper som uavhengig er Cj.4alkyl eller OH (omfattende hvilken som helst keto-tautomer av en OH-substituert aromatisk ring) eller den heterocykliske aromatiske ring Ar er eventuelt substituert ved to nabostilte Ar-ringatomer med de to ender av en kjede som er: -(CH2)4~, -(CH2)3- eller -CH=CH-CH=CH-;

rXI og R<YI>er uavhengig et hydrogenatom (H), Cialkyl eller Cifluoralkyl;

R-X3 ogRX<4>sammen er -(CH2)n^-X7-(CH2)n^- hvor n^0g n^ uavhengig er 1

eller 2 og X<7>er en binding, -CH2-, O ellerNRX<5>hvor R<X5>er H, Ci^alkyl, acetyl eller -S(0)2Me; og

R<Z>er et hydrogenatom (H),

forutsatt at:

når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (bb), ni er 1 og Y er NR<4>, da erR<4>ikke Ci^alkyl eller Ci<fl>uoralkyl; når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa) og Y er NR<4>, da er R<4>ikke C(0)NH2, C(0)-Ci.2alkyl eller C(0)-Cifluoralkyl; forutsatt at: når R3 er den heterocykliske gruppen med sub-formel (cc), da er NR3R3amed sub-formel (L), (m), (ml) eller (m2), hvor -NH- forbindelsespunktet av NR<3>R<3a>gruppen til 4-stillingen av pyrazolopyridinet med formel (I) er understreket:

og forutsatt at:

hvor R<3>er eventuelt substituert C3-8cykloalkyl, da er hvilken som helst OH, alkoksy, fluoralkoksy, -CH2OH, -CH2NHR22, -C(0)OR23, -C(0)NHR24, -C(0)R25eller fluorsubstituent i 3-, 4- eller 5-stilling i R3 cykloalkylringen hvor, i denne forbindelse, 1-stillingen av R<3>cykloalkylringen er forbindelsespunktet til

-NH- i formel (I).

Et andre aspekt av foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en forbindelse med formel IA):

hvor:

R<1>er Ci_3alkyl, Cifluoralkyl eller -(CH2)20H; R<2>er et hydrogenatom (H), metyl eller Cifluoralkyl; r<3>er eventuelt C3_gcykloalkyl, eller en eventuelt substituert heterocyklisk gruppe med sub-formel (aa), (bb) eller (cc):

hvor n<1>og n<2>uavhengig er 1 eller 2; og Y er O, S, SO2eller NR<4>; hvor R<4>er et hydrogenatom (H), C^alkyl, Cifluoralkyl, C(0)NH2, C(0)-Cialkyl eller C(0)-Cifluoralkyl;

hvori R<3>C3_8cykloalkyl eventuelt er substituert med én eller to substituenter som er okso (=0), OH, C^alkoksy, Cifluoralkoksy eller Cialkyl; og hvor hvilken som helst OH-, alkoksy- eller fluoralkoksy-substituent ikke er substituert i R^-ringkarbonet tilknyttet (bundet) til -NH-gruppen i formel (IA); og hvor R<3>i den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa), (bb) eller (cc) eventuelt er substituert med en eller to substituenter som er okso (=0);

og hvor Het har sub-formel (i), (ii), (iii), (iv) eller (v):

hvor:

W1,W2,W4 og W<5>er N; og W<3>er NR<W>;

X1,X3 og X<4>er N eller CR<X>; X<2>er O, S eller NR<X>; og X<5>erCRX1RX2;

Y1,Y2 og Y<3>er CR<Y>eller N; Y<4>er O, S eller NR<Y>; og Y<5>er CRY1RY2;

Z<1>og Z<5>er O, S eller NR<Z>; og Z2 Z3 og Z<4>er N eller CR<Z>;

hvor:

r<W>er et hydrogenatom (H) eller Cj_2alkyl;

Rx,RX<2>, RY ogRY<2>er uavhengig:

et hydrogenatom (H); Ci-galkyl; C3_6cykloalkyl eventuelt substituert med en Cialkylgruppe; -(CH2)n<2a->C3_6cykloalkyl eventuelt substituert i -(CH2)n<2a>-gruppen eller i C3_6cykloalkylgruppen med en Cialkylgruppe, hvor n<2a>er 1,2 eller 3; -(CH2)n<3->S02-R5 hvor n<3>er 1 eller 2 og R5 er Cialkyl eller -NH-Ci^alkyl eller fenyl; -(CH2)n<4->NR<6>R<7>hvor n4 er 0, 1, 2 eller 3 og R<6>og R<7>uavhengig er H, Ci_6alkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, -C(0)-Ci_2<a>lkyl, -S02-Cj.2alkyl, fenyl eller benzyl (hvor fenyl eller benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én av fluor, klor, Cialkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy eller Cifluoralkoksy); eller R^ og R<7>sammen er -(CH2)n^-x^-(CH2)n^- hvor n^ og n^ uavhengig er 2 eller 3 og X<5>er en binding, -CH2-, O eller NR<8>hvor R<8>er H eller Ci^alkyl; -(CH2)n<7->0-R<9>; hvor n<7>er 0, 1, 2 eller 3 og R<9>er H eller Ci_6alkyl; hvor n<7>er 0 bare når -(CH2)n<7->0-R^ er bundet til et karbonatom i Het-ringen; og hvor n<7>ikke er 0 når Het har sub-formel (v) (dvs. n<7>er ikke 0 for R^<2>og forRY2);-C(O)-NR10Rl<1>hvorR10 og R1<1>uavhengig er H, C^galkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, fenyl eller benzyl (hvor fenyl eller benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én av fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy eller Ci<f>luoralkoksy); eller R<l>O og Ri 1 sammen er -(CH2)n<8->X<6->(CH2)n<9->hvor n<8>og n<9>uavhengig er 2 eller 3 og X<6>er en binding, -CH2-, O eller NR<12>hvor R12 er H eller Ci<a>lkyl; -C(0)-OR13 hvor R<13>er H, Ci_6alkyl,<C>3.6cykloalkyl, -CH2-C3.6<cy>kloalkyl, fenyl eller benzyl (hvor fenyl eller benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én av fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy eller Cifluoralkoksy); -C(0)-R<13a>hvor R13a er et hydrogenatom (H), Cialkyl, Cifluoralkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, benzyl eller fenyl; hvor fenyl eller benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én

av fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy eller Cifluoralkoksy; en 4-, 5-, 6- eller 7-leddet mettet heterocyklisk ring inneholdende ett O-ringatom eller énNRl<4->ringgruppe hvorRl4 er h eller Ci_4alkyl, idet nevnte heterocykliske ring eventuelt er substituert (i en stilling eller stillinger forskjellig fra hvilken som helst NR<l4->stilling) med én okso- (=0) og/eller én Ci_4alkylsubstituent; eller

-(CH2)n<10>-Ar hvor n^ er 0, 1 eller 2 og

(i) Ar er fenyl eventuelt substituert med én eller to substituenter som er fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy, Cifluoralkoksy eller cyano;

eller

(ii) Ar er en eventuelt substituert 5- eller 6-leddet heterocyklisk aromatisk ring inneholdende 1, 2 eller 3 heteroatomer valgt fra O, N eller S; og hvor når den heterocykliske aromatiske ring Ar inneholder 2 eller 3 heteroatomer, ett er valgt fra O, N og S og det (de) resterende heteroatom(er) er N; og hvor den heterocykliske aromatiske ring Ar eventuelt er substituert med én eller to C i _4alkylgrupper;

r<XI>og R<YI>er uavhengig et hydrogenatom (H), C^alkyl eller Cifluoralkyl; og R<z>er et hydrogenatom (H);

forutsatt at når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (bb), n^ er 1 og Y er NR<4>, da er R<4>ikke C^alkyl eller Cifluoralkyl;

når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa) og Y er NR<4>, da er R<4>ikke C(0)NH2, C(0)-Ci.2alkyl eller C(0)-d fluoralkyl;

forutsatt at:

når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (cc), da er NHR<3>med sub-formel (L), (m) eller (ml), hvor -NH- forbindelsespunktet til NHR<3>gruppen til 4-stillingen av pyrazolopyridinet med formel (IA) er understreket:

og forutsatt at:

hvor R<3>eventuelt er substituert C3-8cykloalkyl, er hvilken som helst OH, alkoksy eller fluoralkoksy substituent i 3-, 4- eller 5-stilling i R3 cykloalkylringen (hvor, i denne forbindelse, 1-stillingen av R<3>cykloalkylringen er forbindelsespunktet til

-NH- i formel (IA)).

Fortrinnsvis er R<2>et hydrogenatom (H) eller metyl, mer foretrukket et hydrogenatom (H).

Fortrinnsvis er Ri er C2_3alkyl, C2fluoralkyl eller -(CH^OH, ytterligere foretrukket etyl, n-propyl, C2fluoralkyl eller -CH2CH2OH, mer fortrukket etyl.

Fortrinnsvis er det i R<3>er én substituent eller ingen substituent, mer foretrukket er R<3>er eventuelt substituert C3_gcykloalkyl, eller den eventuelt substituerte heterosykliske gruppe med sub-formel (aa), (bb) eller (cc), ytterligere foretrukket er at når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa), (bb) eller (cc), da er Y O, ytterligere foretrukket er at når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa), (bb) eller (cc), da er R<3>den heterocykliske gruppen med sub-formel (bb) og n^ er 1, ytterligere foretrukket er at i R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa), (bb) eller (cc) usubstituert (hvor, når Y er NR<4>, R<4>ikke er klassifisert som en substituent).

Fortrinnsvis har NHR<3>eller NR<3>R<3a>sub-formel (a), (al), (b), (c), (c 1), (c 2), (c 3), (c 4), (c 5), (d), (e), (f), (g), (gl), (g2), (g3), (g4), (h), (i), ©, (k), (kl), (L), (m), (ml), (m2), (m3), (m5), (n), (o), (ol), (o2), (o3), (o4), (p), (p2), (p3), (p5), (p7) eller (q): hvor -NH- forbindelsespunktet av NHR<3>eller NR<3>R<3a>gruppen til 4-stillingen av pyrazolopyridinet med formel (I) eller (IA) er understreket: s^:;;r terfo^ eeuersaitTOm-^^-N RV. ermed

Merfore^eterforbl,delsedfersaitsomoverhTOrRier^

Foretrukket er forbindelse eller salt som beskrevet over kjennetegnet ved at Het har sub-formel (i), (ii) eller (v).

Mer foretrukket er forbindelse eller salt kjennetegnet ved at Het har sub-formel (ia), (ib), (ic), (id), (ie), (if), (ig), (va), (vb) eller (iia):

og ytterligere foretrukket forbindelse eller salt som beskrevet over kjennetgenet ved at, Het har sub-formel (ia), (ic) eller (id).

Det er spesielt foretrukket at forbindelsen med formel (I) eller saltet derav er: N-cyklopentyl-l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

N-cyklopenty 1-1 -etyl-5 - {5 -[(mety lsulfony l)mety 1] -1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-cyklopentyl-l-etyl-5-(5-isopropyl-13,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-cyklopenty 1-1 -ety 1-5 -(5 -metyl-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin,

N-cyklopentyl-1 -etyl-5- {5-[(metylsulfonyl)metyl]-1,3,4-tiadiazol-2-yl} -1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

N-cyklopentyl-1 -etyl-5-(5-isopropyl-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

l-etyl-5-(5-isopropyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-cykloheksyl-1 -etyl-5-(5-isopropyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4- amin, N-cykloheksyl-l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-(5-metyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5- (5-tert-butyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 -etyl-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5-(5-tert-butyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-cykloheksyl-l-etyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4- amin, 5- (5-tert-butyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-cyklopentyl-l-etyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4- amin, l-etyl-5-{5-[(metylsulfonyl)metyl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl}-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, N-cykloheksyl-1-etyl-5-{5-[(metylsulfonyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-(3-metyl-1,2,4-oksadiazol-5-yl)-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[3-(metoksymetyl)-l,2,4-oksadiazol-5-yl]-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

5- {3- [(Dimetylamino)mety 1]-1,2,4-oksadiazol-5 -yl} -1 -ety l-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin,

1-etyl-5-[3-(morfolin-4-ylmetyl)-1,2^ 1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin,

5-(5-cyklopropyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 -etyl-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

N-(l-acetylpiperidin-4-yl)-l-etyl-5-(5-metyl-l,3>4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

l-e1yl-5-[5-(3-metyloxetan-3-yl)-l,3>4-oksadiazol-2-yl]-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5- {5- [(4-metylpiperazin-1 -yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-isopropyl-1,3,4-oksadiazol-2-karboksamid, 4- {5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl} -1 -metylpyrrolidin-2-on, l-e1yl-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-5-(5-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(morfolin-4-ylmetyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

5- [5-(tert-butoksymetyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-1 -etyl-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, eller

metyl 2-[l-e1yl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-1,3 -oksazol-4-karboksy lat;

eller et salt derav.

Alternativt kan forbindelsen med formel (I) eller saltet derav fortrinnsvis være: Metyl-2 - [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-y lamino)-1 //-pyrazolo [3,4-é]pyridin-5 -y 1]-4,5 -dihydro-1,3 -oksazol-4-karboksy lat,

1 -etyl-5-(4-metyl-4,5-dihydro-1,3-oksazol-2-yl)-A'-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-\ H-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -(n-propyl)-5-(5 -metyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(tetrahydrofuran-2-yl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(dimetylamino)-13>4-oksadiazol-2-^ pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5 -(5 -metyl-1,2,4-triazol-3 -y l)-N-(tetrahy dro-2H-py ran-4-yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, N-(l-acetylpiperidin-4-yl)-l-etyl-5-(3-metyl-l,2,4-oksadiazol-5-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, eller N-(l -acetylpiperidin-4-yl)-1 -etyl-5-[3-(morfolin-4-ylmetyl)-1,2,4-oksadiazol-5-yl]-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin; eller et salt derav. Alternativt kan forbindelsen med formel (I) eller saltet derav fortrinnsvis være: 1 -etyl-5-[(4R)-4-fenyl-4,5-dihydro-1,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[(4S)-4-fenyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[(4S)-4-(fenylmetyl)-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[(4R)-4-(fenylmetyl)-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[(4S,5R)-5-metyl-4-fenyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-y 1)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-[(5R)-5-fenyl-4,5-dihydro-1,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1- etyl-5-[(5S)-5-fenyl-4,5-dmydro-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5-(4,4-dimetyl-4,5-dihydro-1,3-oksazol-2-yl)-1 -etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 2- [l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-l,3-oksazol-4-karboksylsyre, 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-(l-metyletyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid, l-etyl-5-[4-(4-morfolmylkarbonyl)-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, trans- 4- {[ 1 -etyl-5-(5-metyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-yl]amino} cykloheksanol, l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-lH-py razolo [3,4-b]pyridin-4-amin,

4- {[ 1 -ety 1-5 -(5 -metyl-1,3,4-oksadiazol-2-y 1)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-

yl]amino} cykloheksanon,

5- [5-(l, 1 -dimetyletyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-1 -etyl-6-metyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

1 -etyl-6-metyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-5 - [5-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1,3,4-oksadiazol-2 -yl]-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 5-(5-cyklobutyl-1,3,4-oksadiazol-2-y 1)-1 -etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl} -2-pyrrolidinon, N-( {5 - [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-5 -yl] - 1,3,4-oksadiazol-2-yl} mety l)acetamid, l-etyl-5-[5-(l-metyl-2-piperidmyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5- {5- [(4-metyl-1,2,5-oksadiazol-3-yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 3-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl} cyklopentanon, l-etyl-5-[5-(tetrahydro-3-furanyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, (4S)-4- {5- [ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5 -yl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1,3-tiazolidin-2-on, 5-[5-(2,2-dimetylcyklopropyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-( {5 - [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-5 -yl] - 1,3,4-oksadiazol-2-y 1} mety l)-N-mety lacetamid, l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylmetyl)-l,3,4-oksadiazol-2 -yl]-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(l-metylcyklobutyl)-13,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5 - [5 -(3 -mety 1-5 -isoksazolyl)-1,3,4-oksadiazol-2-y l]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-[5-( 1 -metyl- lH-pyrazol-5-yl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4- yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5- [5-(l -acetyl-4-piperidinyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-1 -etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5- {3- [(4-metyl-1 -piperazinyl)metyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -N-(tetrahydro-2H-py ran-4-y 1)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5-[3-(4-fluorfenyl)-1,2,4-oksadiazol-5-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, eller

1- etyl-5-{3-[2-okso-2-(l-pyrrolidinyl)etyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-N-(tetrahydro-2H-py ran-4-y 1)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin;

eller et salt derav.

For disse forbindelser / salter, er strukturene av hver, som en forbindelse, beskrevet i Eksempler 49 til 84 nedenfor.

Alternativt kan forbindelsen med formel (I) eller saltet derav fortrinnsvis være: 2- {5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}-7V-fenylacetamid,

2- {5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yi]-1,2,4-oksadiazol-3-yl} - N-( 1 -fenyletyl)acetamid,

1- etyl-5-{3-[2-okso-2-(l-pipeirdmyl)etyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-^-(tetrahydro-2/f-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

2- {5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}-7V-(fenylmetyl)acetamid,

2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}-A^^V-dimetylacetamid,

N-etyl-2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/f-pyran-4-yk^ yl]-1,2,4-oksadiazol-3-yl} acetamid, l-e1yl-5-{3-[l-(4-morfolinyl)e1yl]-l,2,4-oksadi^ yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 5- [3 -(cykloheksy lmety 1)-1,2,4-oksadiazol-5 -yl] -1 -ety l-7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-y 1)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, l-etyl-5-{3-[2-okso-2-(l-piperidinyl)etyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-^-(tetrahydro-2/f-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-{3-[2-(4-metyl-1 -piperazinyl)-2-oksoetyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-5- [5-( 1H-1,2,3-triazol-1 -y lmetyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 5- {5-[(2,4-dimetyl-1,3-tiazol-5-yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} - l-etyl-N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(2-furanylmetyl)-l,3,4-ok^ pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(3-isoksazolylmetyl)-13,4-oksadiazol-2-yl]-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, l-etyl-5-(5-{[4-(metyloksy)fenyl]metyl}^^ pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin, 1 -etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-5-[5-( l//-tetrazol-1 -ylmetyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl] -1 //-pyrazolo [3,4-6]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(5-isotiazolylmetyl)-13,4-oksadiazol-2-yl]-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin,

1-etyl-5 - {5-[(3-mety 1-5-isoksazoly l)mety ^ pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin,

5-(5- {[4-(dimetylamino)fenyl]metyl} -1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin (1:1),

1- etyl-5- {5-[(2-metyl-l ,3-tiazol-4-yl)metyl]-l ,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

2- [l-({5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/f-pyran-4-yk^ l,3,4-oksadiazol-2-yl}metyl)cyklopentyl]-7V-metylacetamid,

A^-({5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylammo)-l/f-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl}metyl)cyklopropankarboksamid,

1 -etyl-5- {5- [(5-metyl-3-isoksazolyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -Af-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5 - {5- [(5 -mety 1-3 -isoksazoly l)mety 1]-1,3,4-oksadiazol-2 -yl} -7Vr-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, l-etyl-5- {5-[2-(4-metyl-l ,3-tiazol-5-yl)etyl]-l ,3,4-oksadiazol-2-yl} -7V-(tetrahydro-2#-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 5- {5-[(3,5-dimetyl-4-isoksazolyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1 -etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, A^-(l-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/f-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} etyl)acetamid, 5- {5-[( 1 -acetyl-4-piperidinyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} - l-etyl-A^-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5- {5- [(4-metylfenyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

1- etyl-5-[5-(4-metylfenyl)-13,4-oksadiazol-2-y^ pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin,

5-[5-(3,4-dimetylfenyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-1 -etyl-^-(tetrahydro-2i/-pyran-4-yl)- IH-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

5-[5-(2,4-dimetylfenyl)-13,4-oksadiazol-2-y^ pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

5- {5-[(4-bromfenyl)metyl]-l ,3,4-oksadiazol-2-yl} -1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin,

2- [l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyarn-4-ylamino)-l/f-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-iV-(fenylmetyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2-[l -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-5-yl]-N- {[4-(metyloksy)fenyl]metyl} -1,3-oksazol-4-karboksamid,

2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-[(2-metylfenyl)metyl]-1,3 -oksazol-4-karboksamid,

2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-[(4-metylfenyl)metyl]-1,3 -oksazol-4-karboksamid,

2- [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]py ridin-5-y 1] -N- [(3 - metylfenyi)metyl]-1,3 -oksazol-4-karboksamid,

N- [(4-klorfeny l)metyl] -2- [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid,

N-[(2,3-dimetylfenyl)metyl]-2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid,

N- [(3,5 -dimetylfenyl)metyl]-2-[ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid,

N- [(3,4-dimetylfenyl)metyl]-2-[ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylammo)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-(l-fenyletyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2- [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-5-yl] -N- {(1 R) - 1 -[4-(metyloksy)fenyl]etyl} -1,3-oksazol-4-karboksamid,

2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-[(lR)-1 -fenylpropyl]-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-(4-metylfenyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylammo)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-({4-[(metylsulfonyl)amino]fenyl} metyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid, 2-[1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-5-yl]-N- {[4-(metylsulfonyl)fenyl]metyl} -1,3-oksazol-4-karboksamid,

N-( 1 -acetyl-4-piperidinyl)-2- [ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-(tetrahydro-2-furanylmetyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-[2-(4-metyl-1 -piperazinyl)etyl]-1,3-oksazol-4-karboksamid,

N-[l-(aminometyl)cykloheksyl]-2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-py razolo [3,4-b]pyridin-5 -yl] -N-mety 1-1,3 -oksazol-4-karboksamid, N-(2,6-dimetylfenyl)-2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid,

N- {[4-(aminokarbony i)fenyl]metyl} -2- [ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2- {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l/f-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-1,2,4-oksadiazol-3-yl}-7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)acetamid,

5-{3-[2-(2,6-dimetyl-4-morfolinyl)-2-oksoetyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -1 -etyl-A'-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-{3-[2-(4-metyl-1 -piperidinyl)-2-oksoetyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

2- {5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l/f-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yi]-1,2,4-oksadiazol-3-yl} - N-[ l -metyl-2-(metyloksy)etyl]acetamid,

5- {3-[2-(3,5-dimetyl- l-piperidinyl)-2-oksoetyl]-l ,2,4-oksadiazol-5-yl} - 1-etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-{3-[2-(3-metyl-1 -piperidinyl)-2-oksoetyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamm^ oksadiazol-3-yl}-N-3-pyridinylacetamid,

6- {5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l/f-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -2-piperidinon,

1-etyl-5- {5-[(3-metyl-l#-1,2,4-triazol-5-yl)metyl]-l ,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)acetamid,

AK{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylam l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)benzamid,

N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-fenylacetamid,

N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-metylpropanamid,

A^-({5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l/f-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-3-metylbutanamid,

AK{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylammo l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)cykloheksanekarboksamid, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-furankarboksamid,

N-( {5 - [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-y lamino)- l//-pyrazolo [3,4-é]py irdin-5-yl] - l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)metansulfonamid,

N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)benzensulfonamid,

N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-l-fenylmetansulfonamid,

A^-({5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylammo)-l/f-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-propansulfonamid,

N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-l-propansulfonamid,

N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)cyklopropansulfonamid,

N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-tiofensulfonamid,

l-({5-[l -ety l-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo [3,4-é]pyridin-5 -yl] - l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-pyrrolidinon, 1 -({5-[ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-piperidinon, 5- {3-[( 1 -acetyl-4-piperidinyi)metyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -1 -etyl-A^-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5 -(3- {[ 1 -(3-metylbutanoy l)-4-pipeirdinyl]metyl} -1,2,4-oksadiazol-5-yl)-iV-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, l-etyl-5-(3-{[l-(metylsulfonyl)-4-pipeirdinyl]metyl}-l,2,4-oksadiazol-5-yl)-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5- {3- [1 -(fenylsulfonyl)cyklopropyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -A^-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5- [3-(fenylmetyl)-1,2,4-oksadiazol-5-yl] -^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)- IH-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5- [3-( 1 -fenyletyl)-1,2,4-oksadiazol-5-yl] -^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)- 1H-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-(3-{[4-(metyloksy)fenyl]metyl} -1,2,4-oksadiazol-5-yl)-^-(tetarhydro-2//- pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 5-(3-{[4-(dimetylammo)fenyl]metyl}-l,2,4-oksa pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin, 5-(3- {[3-(dimetylamino)fenyl]metyl} -1,2,4-oksadiazol-5-yl)-1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin, 5-(3- {[4-(dimetylamino)fenyl]metyl} -1,2,4-oksadiazol-5-yl)-1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin, l-etyl-5-{3-[(fenyloksy)metyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-5-[3-(5,6,7,8-tetrahydro[ 1,2,4]triazolo[4,3-a]pyricun-3-ylmetyl)-1,2,4-oksa& 1 -etyl-5- {3- [(4-fenyl-1 -piperazinyl)metyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -N-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, l-etyl-5-(5-etyl-l,2,4-oksadiazol-3-yl)-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l/f-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin,

5-(5- {[4-(dimetylamino)fenyl]metyl} -1,2,4-oksadiazol-3-yl)-1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin,

l-etyl-5-(5-{[4-(metyloksy)fenyl]metyl}-l,2,4-o^^ pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin, eller

5-(3,8-dioksa-1 -azaspiro[4,5]dec-1 -en-2-yl)-1 -etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)- IH-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin;

eller et salt derav.

Strukturene av hver av forbindelsene listet opp ovenfor er beskrevet i Eksempler 85 til 191 nedenfor.

Fortrinnsvis er forbindelsen med formel (I) eller saltet derav: 1 -etyl-5-(5-metyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)- 1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 14), 5-(5-tert-butyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 -ety l-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-y 1)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 17), 1 -etyl-5- {5- [(metylsulfonyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 23), 1 -etyl-5 - [5 -(3 -mety loxetan-3 -yl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl] -N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 34), 1 -etyl-5- {5- [(4-metylpiperazin-1 -yi)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 35), 1- etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-l,3,4-oksadiazol-2- yl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 38),

også betegnet: l-etyl-5-[5-(morfolin-4-ylmetyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 39), l-etyl-5-[5-(tetrahydrofuran-2-yl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 44), l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylmetyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 77), eller l-etyl-5-{3-[2-okso-2-(l-pyrrolidinyl)etyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyirdin-4-amin (forbindelsen i eksempel 84);

eller et salt derav.

Ytterligere foretrukket er forbindelse som beskrevet over, som er l-etyl-5-(5-metyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-7V-(tetrahydro-2/fpyran-4-yl)- l/f-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

eller et salt derav.

Ytterligere foretrukket er forbindelse som beskrevet over, som er 5-(5-cyklopropyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 -etyl-N-tetrahydro-2Hpyran-

eller et salt derav.

Ytterligere foretrukket er forbindelse som beskrevet over, som er l-etyl-7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylmetyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl] -1 //-pyrazolo [3,4-6]pyridin-4-amin

eller et salt derav.

Ytterligere foretrukket er forbindelse som beskrevet over, som er 5-{5-[(2,4-dimetyl-1,3-tiazol-5-yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1 -etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

eller et salt derav. Ytterligere foretrukket er forbindelse som beskrevet over, som er 5-{5-[(2,4-dimetyl-1,3-tiazol-5-yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1 -etyl-N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

Ytterligere foretrukket er forbindelse som beskrevet over, som er 5-{5-[(2,4-dimetyl-1,3-tiazol-5-yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1 -etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

Eksemplene 1-48 er eksempler på forbindelser eller salter av det andre aspekt av oppfinnelsen (Formel (IA)).

De foretrukne eller eventuelle trekk for forbindelsen med formel (IA) eller saltet derav er like eller lignende de foretrukne eller eventuelle trekk for forbindelsen eller saltet med formel (I), med alle nødvendige endringer (for eksempel i formelen, i R-gruppene og/eller i substituenter) som er gjort. Generelt, når formel (I) er nevnt her, da gjelder i alternative utførelsesformer, angivelsen gitt for formel (I) for formel (IA), med alle nødvendige endringer som er gjort.

Salter, solvater, isomerer, tautomere former, molekylvekter, etc.

På grann av deres potensielle anvendelse i medisin er saltene av forbindelsene med formel (I) fortrinnsvis farmasøytisk akseptable. Egnede farmasøytisk akseptable salter kan omfatte syre- eller baseaddisjonssalter.

Et farmasøytisk akseptabelt syreaddisjonssalt kan dannes ved omsetning av en forbindelse med formel (I) med en egnet uorganisk eller organisk syre (så som bromhydrogensyre, saltsyre, svovelsyre, salpetersyre, fosforsyre, ravsyre, maleinsyre, maursyre, eddiksyre, propionsyre, fumarsyre, sitronsyre, vinsyre, melkesyre, benzosyre, salicylsyre, glutaminsyre, asparaginsyre, p-toluensulfonsyre, benzensulfonsyre, metansulfonsyre, etansulfonsyre, naftalensulfonsyre så som 2-naftalensulfonsyre eller heksansyre), eventuelt i et egnet løsningsmiddel så som et organisk løsningsmiddel, hvilket gir saltet som vanligvis blir isolert for eksempel ved krystallisasjon og filtrering. Et farmasøytisk akseptabelt syreaddisjonssalt av en forbindelse med formel (I) kan for eksempel være et hydrobromid, hydroklorid, sulfat, nitrat, fosfat, succinat, maleat, formiat, acetat, propionat, fumarat, citrat, tartrat, laktat, benzoat, salicylat, glutamat, aspartat, p-toluensulfonat, benzensulfonat, metansulfonat, etansulfonat, naftalensulfonat (f.eks. 2- naftalensulfonat) eller heksanoat. I én utførelsesform kan det farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalt være et hydrobromid, hydroklorid, sulfat, nitrat, fosfat, succinat, maleat, acetat, fumarat, citrat, tartrat, benzoat, p-toluensulfonat, metansulfonat eller naftalensulfonat.

Et farmasøytisk akseptabelt baseaddisjonssalt kan dannes ved omsetning av en forbindelse med formel (I) med en egnet uorganisk eller organisk base (f.eks. trietylamin, etanolamin, trietanolamin, cholin, arginin, lysin eller histidin), eventuelt i et egnet løsningsmiddel så som et organisk løsningsmiddel, hvilket gir baseaddisjonssaltet som vanligvis blir isolert for eksempel ved krystallisasjon og filtrering.

Andre egnede farmasøytisk akseptable salter omfatter farmasøytisk akseptable metallsalter, for eksempel farmasøytisk akseptable alkali-metall- eller jordalkali-metallsalter så som natrium-, kalium-, kalsium- eller magnesiumsalter; spesielt farmasøytisk akseptable metallsalter av én eller flere karboksylsyregrupper som kan være til stede i forbindelsenn med formel (I).

Andre ikke-farmasøytisk akseptable salter, f.eks. oksalater, kan anvendes, for eksempel for isolering av forbindelser ifølge oppfinnelsen og omfattes av omfanget av foreliggende oppfinnelse.

Oppfinnelsen omfatter innenfor sitt omfang alle mulige støkiometriske og ikke-støkiometriske former av saltene av forbindelsene med formel (I).

Også omfattet innenfor omfanget av oppfinnelsen er alle solvater, hydrater og komplekser av forbindelser og salter ifølge oppfinnelsen.

Visse grupper, substituenter, forbindelser eller salter omfattet av foreliggende oppfinnelse kan være til stede som isomerer. Foreliggende oppfinnelse omfatter innenfor sitt omfang alle slike isomerer, omfattende racemater, enantiomerer og blandinger derav.

Visse av gruppene, f.eks. heteroaromatiske ringsystemer, omfattet i forbindelser med formel (I) eller deres salter kan eksistere i én eller flere tautomere former. Foreliggende oppfinnelse omfatter innenfor sitt omfang alle slike tautomere former, omfattende blandinger. Når for eksempel Het har sub-formel (i) er CR.Y og X<l>er CR<x>hvor Rx er OH, da omfatter forbindelsene med formel (I) eller deres salter keto-formen (Kl), enol-formen (El) og blandinger derav, som vist nedenfor, hvis ikke annet er angitt; og når Het har sub-formel (i) og Y^ er CR<Y>hvor RY er OH, da omfatter forbindelsene med formel (I) eller deres salter keto-formen (K2), enol- eller hydroksy-imin-formen (E2) og blandinger derav, som vist nedenfor, hvis ikke annet er angitt:

Spesielt når ment for oral medisinsk anvendelse kan forbindelsen med formel (I) eventuelt ha en molekylvekt på 1000 eller mindre, for eksempel 800 eller mindre, spesielt 650 eller mindre eller 600 eller mindre. Molekylvekt angir her den til den usolvaterte "fri base" forbindelse, som utelukker eventuell molekylvekt som skyldes eventuelle addisjonssalter, løsningsmiddel- (f.eks. vann) molekyler, etc.

Synteseprosess-ruter

De følgende prosesser kan anvendes for å fremstille forbindelsene med formel (I). Metodene er noen ganger illustrert for tilfellene hvor R<2>er H eller Me. Imidlertid er noen eller alle disse prosesser antatt å være anvendelige med passende modifikasjon, f.eks. av utgangsmaterialer og reagenser, for fremstilling av forbindelser med formel (I) hvor R<2>er Cifluoralkyl.

Prosess A

Forbindelser med formel (I) som er forbindelser med formel I(ia) (dvs. forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (ia)) kan fremstilles ved en cykliseringsreaksjon av en forbindelse med formel II, for eksempel i nærvær av et dehydratiseringsmiddel så som fosforoksyklorid (POCI3) eller Burgess reagens [(Metoksykarbonylsulfamoyl)trietylammoniumhydroksyd] og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel (f.eks. organisk løsningsmiddel, fortrinnsvis vannfritt) så som acetonitril (f.eks. for POCI3) eller THF og/eller DMF (f.eks. for Burgess reagens). Reaksjonen kan kreve oppvarmning, for eksempel oppvarmning til fra ca. 70 til ca. 150<*>0 eller oppvarmning til fira ca. 70 til ca. ^O^C eller oppvarmning til fra ca. 70 til ca. 90°C:

For Formel II til Formel I(ia) cykliseringsreaksjonen, kan betingelsene for eksempel være som beskrevet i (a) Eksempler 1-3 eller 43 (POCI3og acetonitril) eller (b) i Eksempler 32, 34-37, 35 (alternativ syntese), 38-40, 44, 66 eller 97-125 (Burgess reagens, med THF og/eller DMF).

Forbindelser med formel II kan selv fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel III med et hensiktsmessig substituert hydrazin-derivat med formel R<Y>CONHNH2, under standard koblingsbetingelser. For eksempel kan et koblingsreagens så som l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydroklorid (EDC) anvendes f.eks. i nærvær av hydroksybenzotriazol (HOBT), for eksempel i et egnet løsningsmiddel så som DMF:

Når det nødvendige hydrazin-derivat R<Y>CONHNH2ikke er lett tilgjengelig, kan forbindelser med formel II alternativt fremstilles ved initiell omsetning av en forbindelse med formel III med et karbazat ROCONHNH2så som t-butylkarbazat<t>BuOCONHNH2under koblingsbetingelser for å danne en forbindelse med formel IV. For eksempel kan et koblingsreagens så som EDC anvendes, f.eks. i nærvær av hydroksybenzotriazol, for eksempel i et egnet løsningsmiddel så som DMF: Påfølgende Boc-avbeskyttelse av det resulterende syrehydrazid-derivat (forbindelse med formel IV) for å gi et hydrazid-derivat med formel V, kan oppnås ved anvendelse av en fortynnet syre så som 2M saltsyre i et organisk løsningsmiddel så som dioksan.

Forbindelsen med formel V kan omdannes til forbindelsen med formel II (det ønskede hydrazid-derivat). Dette kan oppnås ved omsetning av forbindelsen med formel V med en syre med formel rTcC^H under koblingsbetingelser. For eksempel kan et koblingsmiddel så som EDC anvendes f.eks. i nærvær av hydroksybenzotriazol (HOBT), for eksempel i et egnet løsningsmiddel så som DMF. Alternativt kan et aktivert syrederivat med formel R<Y>CO-X<lO>hvor X er en utgående gruppe så som klor (syreklorid) eller -O-CO-R30 eller -O-SO2-R3<0>(hvorR30 f.eks. kan være RY eller alkyl eller aryl så som metyl, t-butyl eller p-metylfenyl) anvendes for å bevirke dannelse av et hydrazid med formel II, gjennom omsetning med et hydrazid-derivat med formel

V.

Forbindelser med formel III kan fremstilles ved hydrolyse av en ester med formel VI (for eksempel kan R^ være C^alkyl så som Et), for eksempel i henhold til metoden beskrevet av Yu et. al. i J. Med Chem., 2001,44, 1025-1027. Denne hydrolyse-prosedyre involverer vanligvis omsetning med en base så som natriumhydroksyd eller kaliumhydroksyd i et løsningsmiddel så som etanol eller dioksan (f.eks. NaOH i EtOH), idet ett eller begge løsningsmidler fortrinnsvis inneholder noe vann:

Forbindelser med formel VI kan fremstilles, f.eks. i henhold til metoden beskrevet av Yu et. al. i J. Med Chem., 2001, 44, 1025-1027, ved omsetning av en forbindelse med formel VII med et amin med formel R<3>R<3a>NH. Reaksjonen blir best utført i nærvær av en base så som trietylamin eller diisopropyletylamin i et løsningsmiddel så som etanol eller dioksan (f.eks. NEt3i EtOH) og kan kreve oppvarmning:

Mange aminer med formel R^R^<a>NH, f.eks. de aminer hvor R^R^n har sub-formlene (a) til (t2), er enten kommersielt tilgjengelige eller synteser for dem er publisert og/eller beskrevet her eller de kan fremstilles fra kommersielt tilgjengelige eller syntetiserbare forbindelser, f.eks. fra andre aminer med formelen R^R^<a>NH eller derivater derav. For aminer R<3>R<3a>NH, hvis fremstilling og/eller spesifikke kommersielle kilder er beskrevet her, se f.eks. Mellomprodukter 21, 21A, 25, 50, 54-57 og 140-163.

Forbindelser med formel VII er også beskrevet i referansen ovenfor og kan fremstilles først ved omsetning av en forbindelse med formel VIII med for eksempel dietyl-(etoksymetylen)malonat (R<2>= H, hvilket gir R^ = Et) eller dietyl-2-(l-etoksyetyliden)malonat (R<2>= Me, hvilket gir R A = Et), f.eks. med oppvarmning, fulgt av omsetning med fosforoksyklorid, igjen fortrinnsvis med oppvarmning. Se for eksempel Mellomprodukt 1 syntese og G. Yu et. al., J. Med Chem., 2001,44, 1025-1027 nedenfor, hvor R<2>= H og R* = etyl; og se Mellomprodukt 58 syntese nedenfor hvor R<2>= Me og Ri = etyl:

Når for eksempel den ønskede aminopyrazol med formel VIII ikke er kommersielt tilgjengelig, kan fremstilling av pyrazolen med Formel VIII oppnås, for eksempel ved anvendelse av metoder beskrevet av Dorgan et. al. i J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1980, 1 (4), 938-42, som involverer omsetning av cyanoetyl-hydrazin med et egnet aldehyd R<la>CHO i et løsningsmiddel så som etanol, med oppvarmning, fulgt av reduksjon, for eksempel reduksjon med natrium i et løsningsmiddel så som t-butanol. R^<a>må velges slik at den inneholder ett færre karbonatom enn Ri, for eksempel vil R^<a=>metyl gi ~ R\ = etyl.

Alternativt, når f.eks. den ønskede aminopyrazol med formel VIII ikke er kommersielt tilgjengelig, kan fremstilling av forbindelsen med formel VI oppnås fra forbindelsen med formel VII (f.eks. Mellomprodukt 1 hvor R.<1>= etyl), ved anvendelse av en generalisert versjon av reaksjonsskjemaet vist i Eksempel 43, spesielt den del som angår omdannelse av Mellomprodukt 1 til Mellomprodukt 38. Ved denne metoden blir 4-klor-pyrazolopyridin med formel VII (f.eks. Mellomprodukt 1) eventuelt omdannet til 4-alkoksy- (f.eks. Ci_4alkoksy så som etoksy) pyrazolopyridin (f.eks. Mellomprodukt 35); R1 -gruppen blir fjernet (til f.eks. Mellomprodukt 36 hvor Ri er H heller enn alkyl),4-amino R^R<3a>N gruppe blir innsatt ved fortrenging av 4-klor- eller 4-alkoksy-gruppen ved omsetning med R<3>R<3a>NH (f.eks. til Mellomprodukt 37); og pyrazolopyridinet blir alkylert ved N-l ved omsetning av det med R<l->X^<O>hvor X<4>^ er en gruppe utskiftbar av N-l nitrogen i pyrazolopyridinet for reinsersjon av den ønskede Ri -gruppe (f.eks. Mellomprodukt 38 syntese). X<40>kan for eksempel være et halogen, f.eks. Cl, Br eller I; ellerX40 kan være -0-S02-R4<0>hvor R<4>0 er C^alkyl, Cifluoralkyl eller fenyl eventuelt substituert med Cialkyl.

Prosess B

Forbindelser med formel (I) som er forbindelser med formel I(ia) (dvs. forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (ia)) kan alternativt fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel IX med et amin med formel R<3>R<3a>NH, fortrinnsvis i et løsningsmiddel (f.eks. organisk løsningsmiddel) så som etanol eller acetonitril og/eller fortrinnsvis i nærvær av en base så som DIPEA. Oppvarmning kan være nødvendig for å bevirke omdannelsen:

For omsetning av en forbindelse med formel IX med et amin med formel R<3>R<3a>NH for å fremstille forbindelsen med formel I(ia), kan reaksjonsbetingelsene, f.eks. løsningsmidler, molforhold, temperaturer og/eller reaksjonstider, eventuelt være som beskrevet i Eksempler 9,10-11 og/eller 12-27.

Omsetning av formel IX med R^R^<a>^n for å gi Formel I(ia) kan generaliseres for hvilken som helst forbindelse med formel (I), inneholdende hvilken som helst Het-gruppe som definert her, ved å starte fra en forbindelse med formel IXa:

Forbindelser med formel IX kan selv fremstilles ved cyklisering av en forbindelse med formel X, fortrinnsvis i nærvær av et dehydratiseirngsmiddel så som fosforoksyklorid eller Burgess reagens [(Metoksykarbonylsulfamoyl)trietylarnmoniumliydroksyd], i et egnet løsningsmiddel (f.eks. organisk løsningsmiddel, fortrinnsvis vannfritt) så som acetonitril (f.eks. for POCI3) eller THF og/eller DMF (f.eks. for Burgess reagens). Reaksjonen kan kreve oppvarmning, for eksempel oppvarmning til fra ca. 70 til ca. lSO^C eller oppvarmning til fra ca. 70 til ca. 120* 0 eller oppvarmning til fra ca. 70 til ca. 90°C:

Forbindelser med formel X kan fremstilles ved innledende aktivering av en syre med formel XI, for eksempel med et amid-koblingsreagens så som EDC/HOBT eller med tionylklorid, fulgt av omsetning av det således dannede aktiverte mellomprodukt med et syrehydrazid med formel R<Y>CONHNH2:

Eksempler på reaksjoner for forbindelsen med formel XI til Formel X og for forbindelsen med formel X til Formel IX er presentert i Mellomprodukter 12 til 15.

Syrer med formel XI kan selv fremstilles ved hydrolyse av en ester med formel VII (f.eks. som beskrevet i Prosess A) ved anvendelse av en base så som kaliumhydroksyd i et løsningsmiddel så som vandig dioksan dioksan/vann):

Prosess C

Forbindelser med formel XII (dvs. forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (ib)) kan fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel II med et reagens som er i stand til å innsette svovel, så som Lawesson's reagens, vanligvis i et egnet løsningsmiddel så som acetonitril. Reaksjonen kan kreve oppvarmning: ReaksjonsbetingeIsene, f.eks. løsningsmidler, molforhold, temperaturer og/eller reaksjonstider, kan eventuelt være som beskrevet i Eksempler 4, 5 eller 6.

Prosess D

Forbindelser med formel XIII [som er forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (ic)] kan fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel VI (R^ kan være C^alkyl så som Et) med et amidoksim med formelen RxC(=NOH)NH2 , fortrinnsvis i nærvær av en base så som natriumetoksyd og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel (f.eks. vannfritt og/eller organisk løsningsmiddel) så som etanol og fortrinnsvis i nærvær av molekylsikter (f.eks. 4 Ångstrom og/eller pulveriserte molekylsikter) eller under andre betingelser effektive for fjerning av vann. Reaksjonsblandingen kan eventuelt oppvarmes, for eksempel til tilbakeløp:

Reaksjonsbetinge Isene, f.eks. løsningsmidler, molforhold, temperaturer og/eller reaksjonstider, kan eventuelt være som beskrevet i Eksempler 7,28-29,30, 31,48, 82-84, 92, 93 og/eller 178-187.

Prosess E

Forbindelser med formel XIV (som er forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (lf)) kan fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel XV med et egnet acetimidat rX<->C(=NH)OR<E>, hvor RE er C^alkyl f.eks. metyl, (så som metylacetimidat (Rx = Me)), fortrinnsvis i nærvær av en base (så som trietylamin eller natriumetoksyd) og/eller i et egnet løsningsmiddel (f.eks. vannfri og/eller organisk løsningsmiddel) så som etanol:

Forbindelser med formel XV kan selv fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel III med et hensiktsmessig substituert hydrazinderivat med formelen R<Z>NHNH2, under koblingsbetingelser. For eksempel kan et koblingsmiddel så som EDC anvendes, f.eks. i nærvær av hydroksybenzotriazol (HOBT), i et egnet løsningsmiddel så som

DMF:

Prosess F

For å fremstille en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (id)

(eventuelt substituert l,3-oksazol-2-yl), kan metoder kjent for fagfolk anvendes.

For eksempel kan 5-karboksylsyre-forbindelsen med formel III omdannes direkte eller indirekte til en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (id)

(dvs. til 5-(eventuelt-substituert l,3-oksazol-2-yl)-pyrazolopyridin). Alternativt eller i tillegg kan en forbindelse med formel (I), hvor Het har sub-formel (va) hvor R<xl>ogr<yi>er H og r<XI>er Rx og R<YI>er RY [dvs. det tilsvarende 5-(eventuelt-substituerte 4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl)-pyrazolopyridin], dehydrogeneres til en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (id); f.eks. ved metoden vist i Eksempel 41 (DBU, CCI4, CH3CN, pyridin) eller en modifikasjon av denne metoden eller ved en analog metode, for eksempel ved anvendelse av et oksyderende middel.

Dehydrogenering (oksydasjon) av 4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-ylforbindelsen med formel (I) (hvor Het har sub-formel (va) hvor R<X1>og R<Y1>er H og R<X1>er Rx og RY1 erRY) til den tilsvarende l,3-oksazol-2-ylforbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (id) kan utføres ved anvendelse av reagenser og betingelser kjent for fagfolk (se for eksempel de følgende oversikter: T.G. Gant et al, Tetrahedron, 1994, 50(8), 2297-2360; M.Reuman et al., Tetrahedron, 1985, 41(5), 837-860). For denne dehydrogeneringsreaksjon blir fortrinnsvis et oksyderende middel anvendt så som nikkelperoksyd, mangandioksyd (MnC«2) eller 2,3-diklor-5,6-dicyano-l,4-benzokinon

(DDQ).

En forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (va) kan fremstilles ved cyklisering av en forbindelse med formel XXVIII, for eksempel i nærvær av Burgess reagens og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel (f.eks. organisk løsningsmiddel, fortrinnsvis vannfritt) så som THF.

Forbindelsen med formel XXVIII kan fremstilles fra forbindelsen med formel III ved omsetning med forbindelsen med formel XXIX under koblingsbetingelser (f.eks. EDC med eller uten HOBT), eventuelt i nærvær av en base så som Et3N og fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel så som DMF.

Prosess G

Forbindelser ifølge oppfinnelsen med formel XVI (1,2,4-oksadiazoler), som er forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (ic) og Rx er -CH2C(O)NR<10>R<11>kan fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formelen XVII med et amin med formelen rIOrI ^NH, under koblingsbetingelser. Standard koblingsbetingelser kan anvendes, kjent for fagfolk. For eksempel kan et koblingsmiddel så som TBTU anvendes, fortrinnsvis i nærvær av hydroksybenzotriazol. Det er imidlertid mer foretrukket at koblingsmidlet er oksalylklorid, som i reaksjonen danner det tilsvarende syreklorid fra karboksylsyren i forbindelsen med formel XVII; i denne utførelsesform er det foretrukket at syrekloridet ikke blir isolert, dvs. løsningsmidlet hvor det blir dannet blir fortrinnsvis ikke fjernet i noen vesentlige grad. Fortrinnsvis, uansett koblingsmiddel / koblingsbetingelser, blir reaksjonen utført i nærvær av en base så som diisopropyletylamin og/eller i et egnet løsningsmiddel (f.eks. organisk løsningsmiddel, fortrinnsvisvannfritt) så som DMF og/eller diklormetan.

Reaksjonsbetingelsene for Formel XVII til Formel XVI reaksjonen, f.eks. løsningsmidler, molforhold, temperaturer og/eller reaksjonstider, kan eventuelt være som beskrevet i Eksempler 85-90, 95-96 og/eller 148-155.

Forbindelser med formel XVII kan selv fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel XVIII (R^ er fortrinnsvis<*>Bu) med et hydrolyserende middel (f.eks. en syre så som trifluoreddiksyre) i et løsningsmiddel så som diklormetan: Forbindelser med formel XVIII kan fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel VI (RA = H) med et amidoksim med formel R<G>OC(=0)CH2C(=NOH)NH2og et koblingsmiddel, for eksempel TBTU, fortrinnsvis i nærvær av hydroksybenzotriazol, fortrinnsvis i nærvær av en base så som diisopropyletylamin og/eller i et egnet løsningsmiddel så som DMF, fulgt av omsetning med l,r-karbonyldiimidazol:

Prosess H

Forbindelser med formel XIX, som er forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (ic) og Rx er -CH2-NR<6>R<7>hvor R<7>er C(0)R<17>, kan fremstilles fra forbindelser med formel XX. For eksempel kan dette skje ved omsetning av forbindelsen med formel XX med en karboksylsyre R<l7>COOH i nærvær av et koblingsmiddel, for eksempel TBTU, fortrinnsvis med hydroksybenzotriazol og

fortrinnsvis i nærvær av en base så som diisopropyletylamin i et egnet løsningsmiddel så som DMF. Alternativt eller i tillegg kan forbindelsen med formel XX omsettes med et aktivert derivat av karboksylsyregruppen i R<l7>COOH (f.eks. ved omsetning med et

syreklorid R^C(O)Cl), fortrinnsvis i nærvær av en base så som diisopropyletylamin og/eller i et egnet løsningsmiddel (f.eks. organisk) så som diklormetan og/eller kloroform.

Reaksjonsbetingelsene for Formel XX til Formel XIX reaksjonen, f.eks. løsningsmidler, molforhold, temperaturer og/eller reaksjonstider, kan eventuelt være som beskrevet i hvilket som helst av Eksempler 159-165.

Forbindelser med formel XX, som er forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (ic) og Rx er -CH2-NR<6>r<7>hvor R<7>er H, kan fremstilles ved avbeskyttelse av forbindelser med formel XXI hvor R^ er benzyl eller Ci_6alkyl så som<*>Bu, f.eks.

ved omsetning med en syre så som trifluoreddiksyre (f.eks. hvor R^ er Ci_6alkyl så

som<t>Bu) eller ved hydrogenering (f.eks. hvor RH er benzyl), fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel så som diklormetan:

Forbindelser med formel XXI kan fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel VI (men hvor R A er OH) med et amidoksim med formelen RHOC(=0)N(R6)CH2C(=NOH)NH2 og et koblingsmiddel, for eksempel TBTU, fortrinnsvis i nærvær av hydroksybenzotriazol og fortrinnsvis i nærvær av en base så som diisopropyletylamin og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel så som DMF, fulgt av omsetning med en base så som l,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-en:

Prosess I

Forbindelser med formel XXII, som er forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (ic) og Rx er -CH2-NR<6>R<7>hvor R<7>er -S(0)2R<18>, kan fremstilles fra forbindelser med formel XX ved omsetning med et sulfonylklorid r<18>S(0)2C1, fortrinnsvis i nærvær av en base så som trietylamin og/eller pyridin og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel (f.eks. organisk) så som diklormetan og/eller kloroform:

Reaksjonsbetingelsene, f.eks. løsningsmidler, molforhold, temperaturer og/eller reaksjonstider, kan eventuelt være som beskrevet i hvilket som helst av Eksempler 166-172.

Prosess J

Forbindelser med formel XXIII er forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (ic) og Rx er -CH2-NR<6>r<7>5hvor R^ og R<7>sammen er -(CH2)n^-X<5->(CH2)n^- hvor n^ og n<*>>uavhengig er 2 eller 3 og hvor ringen dannet ved NR<6>r<7>er substituert med én okso- (=0) substituent på et karbonatom i (CH2)n<*>\ hvilket karbonatom er bundet til nitrogenet. Forbindelser med formel XXIII kan fremstilles ved omsetning av en forbindelse av typen Formel XX hvor R^ = H med syreklorider av typen x<J->(CH2)n^-X^-(CH2)(n^-l)-COCl, hvor X^ er en utgående gruppe, fortrinnsvis i nærvær av en base så som trietylamin og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel, for eksempel diklormetan eller tetrahydrofuran, fortrinnsvis fulgt av behandling med en base så som natriumhydrid i et egnet løsningsmiddel så som DMF. Den utgående gruppe x<J>kan for eksempel være et halogenatom så som Cl, Br eller I; eller X^ kan for eksempel være -O-SO2-R<J>hvor RJ er Ci_4alkyl, Cifluoralkyl eller fenyl eventuelt substituert med Cialkyl, f.eks. 4-metylfenyl.

For eksempler på reaksjonsbetingelser for Formel XX til Formel XXIII reaksjonen, se for eksempel Mellomprodukter 119 og/eller 120 og/eller påfølgende Eksempler 173 og/eller 174.

Prosess K

Forbindelser av typen Formel XXIV, som er forbindelser med formel (I) hvor Het har sub-formel (iia), kan fremstilles fra forbindelser av typen Formel XXV ved omsetning med r<Y>c(0)X^ hvor X^ er en utgående gruppe, fortrinnsvis i et løsningsmiddel så som eddiksyre, pyridin, diglym og/eller diklormetan. X^ kan for eksempel være klor; eller r<Y>c(0)X^ kan være et anhydrid så som [R<Y>(C=0)]20; eller R<Y>C(0)X<K>kan være et aktivert karboksylsyrederivat fremstilt ved omsetning av R<Y>c(0)OH med et koblingsreagens så som EDC eller TBTU med eller uten tilstedeværelse av HOBT.

For Formel XXV til Formel XXIV reaksjonen kan reaksjonsbetingelsene for eksempel være som beskrevet i Eksempler 188,189 og/eller 190.

Forbindelser av typen Formel XXV kan fremstilles fra forbindelser av typen Formel XXVI ved omsetning med hydroksylamin eller et hydroksylaminsalt, fortrinnsvis i nærvær av en base så som kaliumkarbonat, natriumalkoksyd eller et tertiært amin og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel så som etanol eller metanol: Forbindelser av typen Formel XXVI kan selv fremstilles fra forbindelser med formel XXVII ved omsetning med et dehydratiseringsmiddel så som Burgess Reagens, fortrinnsvis i et løsningsmiddel, for eksempel tetrahydrofuran:

Forbindelser av typen Formel XXVII kan fremstilles fra karboksylsyre-forbindelser med formel III, for eksempel ved omsetning med tionylklorid fulgt av ammoniakk i et egnet løsningsmiddel så som dioksan:

Prosess L - Omdannelse av en forbindelse med formel (I) eller et salt derav til en forskjellig forbindelse med formel (I) eller et salt derav Én forbindelse med formel (I) eller salt derav kan omdannes til en annen forbindelse med formel (I) eller salt derav. Denne omdannelsen omfatter eller er én eller flere av de følgende prosesser LI til LI0: LI. En oksydasjonsprosess. For eksempel kan oksydasjonsprosessen omfatte eller være oksydasjon av en alkohol til et keton (f.eks. ved anvendelse av Jones reagens) eller oksydasjon av en alkohol eller et keton til en karboksylsyre.

L2. En reduksjonsprosess, for eksempel reduksjon av et keton eller en karboksylsyre til en alkohol.

L3. Acylering, for eksempel acylering av et amin eller av en hydroksygruppe.

IA. Alkylering, for eksempel alkylering av et amin eller av en hydroksygruppe.

L5. Hydrolyse, f.eks. hydrolyse av en ester til den tilsvarende karboksylsyre eller salt derav, for eksempel i nærvær av base (f.eks. alkali-metallhydroksyd, fortrinnsvis også i nærvær av vann) eller i nærvær av syre (f.eks. vandig HC1 eller HC1 i et vannfritt organisk løsningsmiddel så som dioksan).

Hydrolysen kan for eksempel være hydrolyse av en esterforbindelse, hvor Rx,R*2, RY ellerRY<2>er -(CH2)n<12->C(0)-OR13 hvor R<1>3 ikke er et hydrogenatom (H),

til den tilsvarende karboksylsyre hvor R^<3>er et hydrogenatom (H). Se for eksempel Eksempel 57 og Mellomprodukt 83.

Hydrolysen kan for eksempel være hydrolyse av en esterforbindelse, hvor R<3>er substituert med -C(0)OR23 hvor R23 er Ci^alkyl (f.eks. NHR3 eller NR3R3a har sub-formel (p8)), til den tilsvarende karboksylsyre eller salt derav hvor R<23>er H (f.eks. NHR3 eller NR<3>R<3a>har sub-formel (p7)).

L6. Avbeskyttelse, f.eks. avbeskyttelse (f.eks. deacylering eller t-butyloksykarbonyl-(BOC) fjerning eller benzyloksykarbonyl-fjerning) av en amingruppe.

L7. Dannelse av en ester eller amid, for eksempel fra den tilsvarende karboksylsyre og/eller et aktivert derivat av karboksylsyren (f.eks. syreklorid eller syreanhydrid eller karboksylsyre aktivert av et koblingsmiddel).

Amiddannelsen kan være dannelse av en amidforbindelse, hvor én eller flere av Rx,RX2, RY ogRY<2>er -(CH2)n11-C(O)-NR10Rll, -CHt<C>ialkylørOVNRWR11,

-CMe2-C(O)-NR10R11 eller cykloalkyl substituert med -C(O>NR10r11, fra den

tilsvarende karboksylsyre og/eller et aktivert derivat av karboksylsyren. For eksempler på denne amiddannelse, se Eksempler 58-59 og/eller 126-147 for Het = sub-formel (id) og/eller Prosess G her for Het = sub-formel (ic) (f.eks. Eksempler 85-90, 95-96 og/eller 148-155).

Amiddannelsen kan alternativt være dannelse av en amidforbindelse, hvor én eller flere av Rx,RX2, RY ogRY2 er -(CH2)n<4-N>R6R7,-CH(Ci_2<a>lkyl)-NR6R7, -CMe2-NR<6>R<7>eller cykloalkyl substituert med -NR<6>R<7>, hvor R<6>er C(0)R<17>, fra den tilsvarende karboksylsyre og/eller et aktivert derivat av karboksylsyren. For ett eksempel hvor Het har sub-formel (ic) se Prosess H og/eller Eksempler 159-165.

L8. Omdannelse av et keton til det tilsvarende oksim eller oksimer. Dette kan for eksempel omfatte omdannelse av en okso- (=0) substituent i R<3>, f.eks. i NHR<3>eller NR<3>R<3a>sub-formel (o), til en hydroksyimino- (=N-OH) eller (Ci_4alkoksy)imino-(=N-OR26) substituent i R<3>, f.eks. i NHR<3>eller NR<3>R<3a>sub-formel (o2), (o3), (o4) eller (o5). Denne omdannelsen kan utføres i tilfellet av et oksim (hydroksyimino, =N-OH) ved omsetning av hydroksylamin eller et salt derav (f.eks. hydroksylamin-hydroklorid) med ketonet eller i tilfellet av oksimer (Ci_4alkoksy)imino, =N-OR<2>^) ved omsetning av Ci_4alkoksylamin eller et salt derav (f.eks. hydrokloridsalt) med ketonet. Reaksjonen blir fortrinnsvis utført i nærvær av en base så som vannfritt kaliumkarbonat eller diisopropyletylamin og/eller i et egnet løsningsmiddel så som acetonitril. Blandingen kan oppvarmes f.eks. til tilbakeløp.

L9. Sulfonylering, f.eks. sulfonamid-dannelse ved omsetning av et amin med et sulfonylhalogenid f.eks. et sulfonylklorid (f.eks. se også Prosess I).

og/eller

L10. Beckmann-omleiring av én forbindelse med formel (I) til en annen forbindelse med formel (I). Fortrinnsvis anvender denne cyanurklorid (2,4,6-triklor-l,3,5-triazin) sammen med et formamid så som DMF, f.eks. ved romtemperatur (se L.D. Luca, J. Org. Chem., 2002, 67, 6272-6274). Beckmann-omleiringen kan for eksempel omfatte omdannelse av en (hydroksyimino)cykloalkylforbindelse med formel (I), f.eks. hvor

NHR<3>ellerNR3R3a har sub-formel (o2)

til en enkel-atom ring-utvidet laktam-forbindelse med formel (I), f.eks. hvor NHR<3>eller NR<3>R<3a>har sub-formel (m3)

Forbindelser med formel (I) eller et salt derav, kan også fremstilles som følger: (a) cyklisering av en forbindelse med formel II til en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (ia) (dvs.: til en forbindelse med formel I(ia), dvs. til et eventuelt substituert l,3,4-oksadiazol-2-yl-derivat i 5-stilling avpyrazolopyridin-ringsystemet), for eksempel i nærvær av et dehydratiseirngsmiddel så som fosforoksyklorid eller Burgess reagens eller (b) omsetning av en forbindelse med formel IXa med et amin med formel R<3>R<3a>NH for å danne en forbindelse med formel (I), fortrinnsvis i et løsningsmiddel (f.eks. organisk løsningsmiddel) og/eller fortrinnsvis i nærvær av en base, eller (c) cyklisering av en forbindelse med formel II til en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (ib) (dvs. til en forbindelse med formel XII dvs. til et eventuelt substituert l,3,4-tiadiazol-2-yl-derivat i 5-stilling av pyrazolopyridin-ringsystemet), for eksempel i nærvær av et middel som er i stand til å innføre svovel så som Lawesson's reagens, eller (d) omsetning av en forbindelse med formel VI, hvor RA er Ci_6alkyl så som Et, med et amidoksim med formel R<x>C(=NOH)NH2eller et salt derav, fortrinnsvis i nærvær av en base så som natriumetoksyd og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel (f.eks. vannfritt og/eller organisk løsningsmiddel) så som etanol; eller (e) omsetning av en forbindelse med formel XV med et acetimidat rX<->C(=NH)OR<E>, hvor RE er Ci.galkyl, for å fremstille en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (lf) (dvs. til en forbindelse med formel XIV, dvs. til et eventuelt substituert 1,2,4-triazol- 3-yl- eller 5-yl-derivat i 5-stilling av pyrazolopyridin-ringsystemet), fortrinnsvis i nærvær av en base (så som trietylamin eller natriumetoksyd) og/eller i et egnet løsningsmiddel (f.eks. vannfritt og/eller organisk løsningsmiddel) så som etanol; eller (f) (i) omdannelse direkte eller indirekte av en forbindelse med formel III til en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (id); og/eller (f)(ii) dehydrogenering av en forbindelse med formel (I), hvor Het har sub-formel (va) hvor R<x*>og R<Y>^ er H og r<XI>er Rx og R<Y>^ er RY, til en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (id); eller (f) (iii) cyklisering av en forbindelse med formel XXVIII, for eksempel i nærvær av Burgess reagens og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel, for å fremstille en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (va); eller (g) omsetning av en forbindelse med formel XVII med et amin med formel R<1>O<r>^NH under koblingsbetingelser, for å fremstille en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (ic) og Rx er -CH2C(O)NR10r1 1 (dvs. for å fremstille en forbindelse med formel XVI), idet reaksjonen fortrinnsvis utføres i nærvær av en base så som diisopropyletylamin og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel (f.eks. organisk

løsningsmiddel, fortrinnsvis vannfritt) så som DMF og/eller diklormetan og/eller fortrinnsvis i nærvær av oksalylklorid; eller

(h) omdannelse av en forbindelse med formel XX til en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (ic) og Rx er -CH2-NR<6>R<7>hvor R<7>er C(0)R<17>(dvs. til en forbindelse med formel XIX), fortrinnsvis enten ved omsetning av forbindelsen med formel XX med en karboksylsyre R<l7>COOH i nærvær av et koblingsmiddel og/eller ved omsetning av forbindelsen med formel XX med et aktivert derivat av karboksylsyregruppen i R<l7>COOH (f.eks. r17C(0)O), fortrinnsvis i nærvær av en base og/eller et egnet løsningsmiddel; eller

(i) omsetning av en forbindelse med formel XX med et sulfonylklorid R^<8>S(0)2C1 for å fremstille en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (ic) og Rx er

-CH2-NR<6>R<7>hvor R<7>er -S(0)2R<18>(dvs. for å fremstille en forbindelse med formel XXII), fortrinnsvis i nærvær av en base så som trietylamin og/eller pyridin og/eller fortrinnsvis i et egnet løsningsmiddel så som diklormetan og/eller kloroform; eller

(j) omsetning av en forbindelse med formel XX hvor R<*>>= H med et syreklorid med formel x<J->(CH2)n<5->X<5->(C<H>2)(n<6->l)-COCl, hvor X<J>er en utgående gruppe (idet X<J>

fortrinnsvis er et halogenatom eller -O-SO2-R<J>hvor RJ er Ci_4alkyl, Cifluoralkyl eller fenyl eventuelt substituert med Cialkyl), for å fremstille en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (ic) og Rx er -CH2-NR<6>R<7>, hvor R^ og R<7>sammen er -(CH2)n^-X<5->(CH2)n^- hvor n^ og n^ uavhengig er 2 eller 3 og hvor ringen dannet ved NR<6>r<7>er substituert med én okso- (=0) substituent på et karbonatom i (CH2)n^, hvilket karbonatom er bundet til nitrogenet (dvs. for å fremstille en forbindelse med formel XXIII); idet omsetningen fortrinnsvis skjer i nærvær av en base og/eller i et egnet løsningsmiddel og/eller fortrinnsvis blir fulgt av behandling med en base; eller

(k) omsetning av en forbindelse med formel XXV med R<Y>C(0)x<K>hvor X^ er en utgående gruppe, for å fremstille en forbindelse med formel (I) hvor Het har sub-formel (iia) (dvs. for å fremstille en forbindelse med formel XXIV); eller (L) omdannelse av en forbindelse med formel (I) eller et salt derav til en forskjellig forbindelse med formel (I) eller et salt derav;

og eventuelt omdannelse av forbindelsen med formel (I) til et salt, f.eks. et farmasøytisk akseptabelt salt.

Saltdannelse-prosesser kan eventuelt være som beskrevet andre steder her.

Foretrukne trekk ved metoder (a), (b), (c), (d), (e), (f)(i), (f)(ii), (f)(iii), (g), (h), (i), (j), (k) og (L), uavhengig av hver andre, er fortrinnsvis som beskrevet ovenfor for Prosesser A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K og L med alle nødvendige endringer gjort. For eksempel omfatter eller er omdannelsesprosessen (L) fortrinnsvis én eller flere av prosesser LI til L10 beskrevet her, f.eks. ovenfor.

Ved hvilken som helst av metodene som involverer omsetning av en

karboksylsyre og/eller et aktivert karboksylsyrederivat med et amin for å danne et amid, omfatter det aktiverte karboksylsyrederivat fortrinnsvis en -C(0)XH -gruppe istedenfor COOH, hvor X^ 1 er en utgående gruppe som kan erstattes av et amin. For eksempel kan XH være Cl (hvor det aktiverte derivat = syrekloridet) eller -OC(0)R (hvor det aktiverte derivat = et anhydrid). Alternativt kan det aktiverte karboksylsyrederivat være en aktivert ester hvor den utgående gruppe Xl 1 er

Det sistnevnte aktiverte karboksylsyrederivat kan dannes fra karboksylsyren (X^ 1 = OH) enten:

(a) ved omsetning av karboksylsyren med et karbodiimid så som EDC, som er l-etyl-3-(3'-dimetylaminopropyl)karbodiimid og er også l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid eller et salt derav f.eks. hydrokloridsalt, fortrinnsvis fulgt av omsetning av det resulterende produkt med 1-hydroksybenzotriazol (HOBT); idet reaksjon (a) vanligvis blir utført i nærvær av et løsningsmiddel (fortrinnsvis vannfritt) så som dimetylformamid (DMF) eller acetonitril og/eller fortrinnsvis under vannfrie betingelser og/eller vanligvis ved romtemperatur (f.eks. ca. 20 til ca. 25°C);

eller

(b) ved omsetning med 2-(lH-benzotriazol-l-yl)-l,l,3,3-tetrametyluronium-tetrafluorborat (TBTU) eller 0-(7-azabenzotriazol-l-yl)-N,N,N',N'-tetrametyluronium-heksafluorfosfat (HATU), fortrinnsvis i nærvær av en base så som diisopropyletylamin ^P^NEt = DIPEA) og vanligvis i nærvær av et løsningsmiddel så som dimetylformamid (DMF) eller acetonitril og/eller fortrinnsvis under vannfrie betingelser og/eller vanligvis ved romtemperatur (f.eks. ca. 20 til ca. 25°C).

Et farmasøytisk akseptabelt salt av en forbindelse med formel (I) kan fremstilles ved omdannelse av forbindelsen med formel (I) eller et salt derav til det ønskede farmasøytisk akseptable salt derav.

Medisinske anvendelser

Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav for anvendelse som en aktiv terapeutisk substans for et pattedyr så som et menneske. Forbindelsen eller saltet kan være for anvendelse ved behandling og/eller forebygging av hvilken som helst av sykdommene/lidelsene beskrevet her (f.eks. for anvendelse ved behandling og/eller forebygging av en inflammatorisk og/eller allergisk sykdom hos et pattedyr) og/eller for anvendelse som en fosfodiesterase-inhibitor f.eks. for anvendelse som en fosfodiesterase 4- (PDE4) inhibitor. "Terapi" kan omfatte behandling og/eller forebygging.

Det tilveiebringes også anvendelse av en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav ved fremstilling av et medikament (f.eks. farmasøytisk preparat) for behandling og/eller forebygging av hvilken som helst av sykdommene/lidelsene beskrevet her hos et pattedyr så som et menneske, f.eks. for behandling og/eller forebygging av en inflammatorisk og/eller allergisk sykdom hos et pattedyr så som et menneske.

Fosfodiesterase 4-inhibitorer er antatt å være anvendelige ved behandling og/eller forebygging av en rekke sykdommer/lidelser, spesielt inflammatoriske og/eller allergiske sykdommer, hos pattedyr så som mennesker, for eksempel: astma, kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS) (f.eks. kronisk bronkitt og/eller emfysem), atopisk dermatitt, urtikaria, allergisk rhinitt, allergisk konjunktivitt, vernal konjunktivitt, eosinofilt granulom, psoriasis, revmatoid artritt, septisk sjokk, ulcerativ kolitt, Crohn's sykdom, reperfusjonsskade i myokardium og hjerne, kronisk glomerulonefritt, endotoksisk sjokk, voksen åndenødssyndrom, multippel sklerose, kognitiv svekkelse (f.eks. ved en nevrologisk lidelse så som Alzheimers sykdom), depresjon eller smerte. Ulcerativ kolitt og/eller Crohns sykdom er kollektivt ofte referert til som inflammatorisk tarmsykdom.

Ved behandling og/eller forebygging er den inflammatoriske og/eller allergiske sykdom fortrinnsvis kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS), astma, revmatoid artritt eller allergisk rhinitt hos et pattedyr (f.eks. menneske). Mer foretrukket er behandling og/eller forebygging av KOLS eller astma hos et pattedyr (f.eks. menneske). PDE4-inhibitorer er antatt å være effektive ved behandling av astma (se f.eks. M.A.Giembycz, Drugs, Feb. 2000, 59(2), 193-212; Z. Huang et al, Current Opinion in ChemicalBiology, 2001, 5: 432-438; H.J.Dyke et al., Expert Opinion on Investigational Drugs, januar 2002,11(1), 1-13; C.Burnouf et al, Current Pharmaceutical Design, 2002, 8(14), 1255-1296; A.M.Doherty, Current Opinion Chem. Biol, 1999, 3(4), 466-473).

PDE4-inhibitorer er antatt å være effektive ved behandling av KOLS (se f.eks. S.L. Wolda, Emerging Drugs, 2000, 5(3), 309-319; Z. Huang et al, Current Opinion in Chemical Biology, 2001, 5: 432-438; H.J.Dyke et al., Expert Opinion on Investigational Drugs, januar 2002,11(1), 1-13; C.Burnouf et al, Current Pharmaceutical Design, 2002, 8(14), 1255-1296; A.M.Doherty, Current Opinion Chem. Biol, 1999,3(4), 466-473). KOLS er oftekarakterisert vedtilstedeværelse av luftstrøm-obstruksjon på grunn av kronisk bronkitt og/eller emfysem (SL Wolda, Emerging Drugs, 2000, 5(3), 309-319).

PDE4-inhibitorer er antatt å være effektive ved behandling av allergisk rhinitt (se f.eks. B.M. Schmidt et al, J. Allergy & Clinical Immunology, 108(4), 2001, 530-536).

PDE4-inhibitorer er antatt å være effektive ved behandling av revmatoid artritt og multippel sklerose (se f.eks. H.J.Dyke et al., Expert Opinion on Investigational Drugs, januar 2002, 11(1), 1-13; C.Burnouf et al., Current Pharmaceutical Design, 2002, 8(14), 1255-1296; og A.M.Doherty, Current Opinion Chem. Biol, 1999, 3(4), 466-473). Se f.eks. A.M.Doherty, Current Opinion Chem. Biol, 1999, 3(4), 466-473 for anvendelse for atopisk dermatitt.

PDE4-inhibitorer er foreslått å ha analgetiske egenskaper og således være effektive ved behandling av smerte (A.Kumar et al., Indian J. Exp. Biol, 2000, 38(1), 26-30).

Behandling og/eller forebygging være for kognitiv svekkelse f.eks. kognitiv svekkelse ved en nevrologisk lidelse så som Alzheimers sykdom. For eksempel kan behandling og/eller forebygging omfatte kognitiv forbedring ved f.eks. en nevrologisk lidelse. Se for eksempel: H.T.Zhang et al. i: Psychopharmacology, juni 2000, 150(3), 311-316 og Neuropsychopharmacology, 2000, 23(2), 198-204; og T. Egawa et al., JapaneseJ. Pharmacol, 1997, 75(3), 275-81.

PDE4-inhibitorer så som rolipram er foreslått å ha antidepressive egenskaper (f.eks. J. Zhu et al, CNS Drug Reviews, 2001, 7(4), 387-398; 0'Donnell, Expert Opinion on Investigational Drugs, 2000,9(3), 621-625; og H.T. Zhang et al, Neuropsychopharmacology, Oktober 2002,27(4), 587-595).

Farmasøytiske preparater og dosering

For anvendelse i medisin blir forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse vanligvis administrert som et farmasøytisk preparat.

Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer derfor i et ytterligere aspekt et farmasøytisk preparat omfattende en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav og én eller flere farmasøytisk akseptable bærere og/eller tilsetningsmidler.

Det farmasøytiske preparatet kan være for anvendelse for behandling og/eller forebygging av hvilken som helst av lidelsene beskrevet her.

Farmasøytiske preparater omfattende en forbindelse med formel (I), som her definert eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav og én eller flere farmasøytisk akseptable bærere og/eller tilsetningsmidler, tillages gjennom blanding av forbindelsen eller saltet med én eller flere farmasøytisk akseptable bærere og/eller tilsetningsmidler.

Oppfinnelsen tilveiebringer også et farmasøytisk preparat fremstilt ved nevnte metode.

Forbindelsene med formel (I) og/eller det farmasøytiske preparatet kan administreres, for eksempel ved oral, parenteral (f.eks. intravenøs, subkutan eller intramuskulær), inhalasjon eller nasal administrering. Følgelig er det farmasøytiske preparatet fortrinnsvis egnet for oral, parenteral (f.eks. intravenøs, subkutan eller intramuskulær), inhalasjon eller nasal administrering. Mer foretrukket er det farmasøytiske preparatet egnet for inhalasjon eller oral administrering, f.eks. til et pattedyr så som et menneske. Inhalasjons-administrering involverer topisk administrering til lungene av f.eks. aerosol- eller tørrpulver-preparat. Oral administrering til et menneske er mest foretrukket.

Et farmasøytisk preparat egnet for oral administrering kan være flytende eller fast; for eksempel kan det være en sirup, suspensjon eller emulsjon, en tablett, en kapsel eller en pastill.

En flytende formulering vil generelt bestå av en suspensjon eller løsning av forbindelsen eller farmasøytisk akseptabelt salt i en egnet farmasøytisk akseptabel flytende bærer, for eksempel et vandig løsningsmiddel så som vann, etanol eller glycerin eller et ikke-vandig løsningsmiddel, så som polyetylenglykol eller en olje. Formuleringen kan også inneholde et suspenderingsmiddel, konserveringsmiddel, smaksmiddel og/eller fargemiddel.

I én foretrukket utførelsesform er det farmasøytiske preparatet i enhetsdoseform så som en tablett eller kapsel for oral administrering, f.eks. for oral administrering til et menneske.

Et farmasøytisk preparat egnet for oral administrering som er en tablett kan omfatte én eller flere farmasøytisk akseptable bærere og/eller tilsetningsmidler egnet for fremstilling av tablett-formuleringer. Bæreren kan for eksempel være eller omfatte laktose, cellulose (for eksempel mikrokrystallinsk cellulose) eller mannitol. Tabletten kan også eller istedet inneholde ett eller flere farmasøytisk akseptable tilsetningsmidler, for eksempel et bindemiddel så som hydroksypropylmetylcellulose eller povidon (polyvinylpyrollidon), et glattemiddel f.eks. et jordalkalimetall-stearat så som magnesiumstearat og/eller et tablett-desintegrerende middel så som natrium-stivelse-glykollat, croscarmellose-natrium eller crospovidon (kryssbundet polyvinylpyrollidon). Det farmasøytiske preparatet som er en tablett kan fremstilles ved en metode omfattende trinnene: (i) blanding av forbindelsen med formel (I), som her definert eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, med én eller flere farmasøytisk akseptable bærere og/eller tilsetningsmidler, (ii) sammenpressing av den resulterende blandingen (som vanligvis er i pulverform) til tabletter og (iii) eventuelt belegge tabletten med et tablett-filmbeleggingsmateriale.

Et farmasøytisk preparat egnet for oral administrering som er en kapsel kan fremstilles ved anvendelse av innkapslingsprosedyrer. For eksempel kan pellet eller pulver inneholdende den aktive bestanddel fremstilles ved anvendelse av en egnet farmasøytisk akseptabel bærer og deretter fylles i en hard gelatinkapsel. Alternativt kan en dispersjon eller suspensjon fremstilles ved anvendelse av hvilken som helst egnet farmasøytisk akseptabel bærer, for eksempel en vandig gummi eller en olje og dispersjonen eller suspensjonen deretter fylles i en myk gelatinkapsel.

Et parenteralt preparat kan omfatte en løsning eller suspensjon av forbindelsen eller et farmasøytisk akseptabelt salt i en steril vandig bærer eller parenteralt akseptabel olje. Alternativt kan løsningen lyofiliseres; idet det lyofiliserte parenterale farmasøytiske preparat kan rekonstitueres med et egnet løsningsmiddel like før administrering.

Preparater for nasal eller inhalert administrering kan hensiktsmessig formuleres som aerosol-preparater, dråper, geler eller tørre pulvere.

Aerosol-formuleringer, f.eks. for inhalert administrering, kan omfatte en løsning eller fin suspensjon av den aktive substans i et farmasøytisk akseptabelt vandig eller ikke-vandig løsningsmiddel. Aerosol-formuleringer kan presenteres i enkle eller multidose-mengder i steril form i en forseglet beholder, som kan være i form av en patron eller refill for anvendelse med en atomiserende anordning eller inhalator.

Alternativt kan den forseglede beholder være en enhets-dispenseringsanordning så som en enkel dose nasal inhalator eller en aerosol-dispenser utstyrt med en oppmålingsventil (oppmålt dose inhalator) som er ment for kasting når innholdet av beholderen er oppbrukt.

Når doseformen omfatter en aerosol-dispenser inneholder den fortrinnsvis et egnet drivmiddel under trykk så som sammenpresset luft, karbondioksyd eller et organisk drivmiddel så som klorfluorkarbon (CFC) eller hydrofluorkarbon (HFC). Egnede CFC drivmidler omfatter diklordifluormetan, triklorfluormetan og diklortetrafluoretan. Egnede HFC-drivmidler omfatter 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropan og 1,1,1,2-tetrafluoretan. Aerosoldoseformer kan også være i form av en pumpe-atomisør.

Partikkelstørrelse- reduksjon av en forbindelse med formel ( I) eller salt derav

For farmasøytiske preparater egnet og/eller tilpasset for inhalasjons-administrering er det foretrukket at forbindelsen eller saltet med formel (I) er i en partikkel-størrelse-redusert form og mer foretrukket blir den størrelse-reduserte form oppnådd eller kan oppnås ved mikronisering. Mikronisering involverer vanligvis å underkaste forbindelsen/saltet kollisjons- og abrasjons-krefter i en raskt-strømmende sirkulær eller spiral/virvelformet luftstrøm ofte omfattende en syklon-komponent. Den foretrukne partikkelstørrelse (f.eks. D50 verdi) av den størrelse-reduserte (f.eks. mikroniserte) forbindelse eller salt er ca. 0,5 til ca. 10 mikron, f.eks. ca. 1 til ca. 5 mikron (f.eks. som målt ved anvendelse av laser-diffraksjon). For eksempel er det foretrukket at forbindelsen eller saltet med formel (I) har en partikkelstørrelse definert ved: D10 på ca. 0,3 til ca. 3 mikron (f.eks. ca. 1 mikron) og/eller D50 på ca. 1 til ca. 5 mikron (f.eks. ca. 2-5 eller ca. 2-3 mikron) og/eller D90 på ca. 2 til ca. 20 mikron eller ca. 3 til ca. 10 mikron (f.eks. ca. 5-8 eller ca. 5-6 mikron); for eksempel som målt ved anvendelse av laser-diffraksjon. Laser-diffraksjonsmåling kan anvende en tørr metode (suspensjon av forbindelse/salt i luftstrøm som krysser laserstråle) eller en våt metode [suspensjon av forbindelse/salt i flytende dispergeringsmedium, så som isooktan eller (f.eks. hvis forbindelsen er oppløselig i isooktan) 0,1% Tween 80 i vann som krysser laserstråle]. Ved laserdiffraksjon blir partikkelstørrelsen fortrinnsvis beregnet ved anvendelse av Fraunhofer beregning; og/eller fortrinnsvis blir Malvern Mastersizer eller Sympatec apparat anvendt for måling.

Et illustrativt eksempel på små-skala mikroniseringsprosess er nå gitt:

Mikroniseringseksempel

• Formål: Å mikronisere en forbindelse med formel (I) eller et salt derav - spesielt et av eksemplene ifølge oppfinnelsen (beskrevet nedenfor) - vanligvis i en mengde på

omtrent 600-1000 mg, ved anvendelse av en Jetpharma MCI micronizer.

• De parentale (umikroniserte) og mikroniserte materialer blir analysert for partikkelstørrelse ved laserdiffraksjon og krystallinitet ved PXRD.

Utstyr og materiale

Jetpharma MCI Micronizer omfatter et horisontalt skiveformet malingshus som har: et rørformet forbindelsesinnløp (f.eks. vinklet ca. 30 grader til horisontalen) for innføring av en suspensjon av umikronisert forbindelse med formel (I) eller salt i en gasstrøm, et separat gassinnløp for innføring av gasser, et gassutløp for utslipp av gasser og et oppsamlingskar for oppsamling av mikronisert materiale. Malingshuset har to kammere: et ytre ringformet kammer i gass-forbindelse med gassinnløpskammeret som mottar gass under trykk (f.eks. luft eller nitrogen), et skive-formet indre malingskammer i og koaksialt på det ytre kammer for mikronisering av den tilførte forbindelse / salt, idet de to kammere er separert ved en ringformet vegg. Den ringformede vegg (ring R) har en rekke tett-borede hull som forbinder de indre og ytre kammere og periferert fordelt rundt den ringformede veggen. Hullene åpner til det indre kammer i en vinkel (rettet halvveis mellom radialt og tangentialt) og ved anvendelse virker som dyser som styrer gass under trykk med høy hastighet fra det ytre kammer til det indre kammer og i en innoverrettet spiralbane (virvel) rundt det indre kammer (syklon). Forbindelseinnløpet er i gass-kommunikasjon med det indre kammer via en dyse rettet tangentialt på det indre kammer, inne i og nær den ringformede vegg. Øvre og nedre bred-diameter utløpsavløp i den sentrale akse av det indre malingskammer forbindes til (a) (nedre utløp) oppsamlingskaret som ikke har noe luftutløp og (b) (øvre utløp) gassutløp som fører til en oppsamlingspose, filter og gassavløp. Inne i det rørformede forbindelseinnløp og longitudinalt bevegbart inni det er posisjonert et venturi-innløp (V) for innføring av gasser. Forbindelseinnløpet har også forgrening som forbinder det til en oppoverrettet materiale-innføringsport for innføring av materiale.

Ved anvendelse blir det smale hodet av venturiinnløpet (V) fortrinnsvis posisjonert nedenfor og litt foran materiale-innløpsporten slik at når venturirøret leverer gass under trykk (f.eks. luft eller nitrogen) blir matematerialet suget inn i gass-strømmen gjennom forbindelseinnløpet og akselererer inn i det indre malingskammer tangentialt med en subsonisk hastighet. Inne i malingskammeret blir materialet ytterligere akselerert til en supersonisk hastighet av hull/dyse-systemet rundt ringen (R )

(den ringformede vegg) av malingskammeret. Dysene er litt vinklet slik at akselerasjons-mønsteret av materialet er i form av en innoverrettet virvel eller syklon. Materialet inne i malingskammeret sirkulerer raskt og partikkelkollisjoner skjer under prosessen, som forårsaker at større partikler blir brutt opp i mindre. "Sentrifugal" akselerasjon i virvelen forårsaker at de større partikler forblir i periferien av det indre

kammer mens progressivt mindre partikler beveger seg nærmere senteret inntil de går ut av malingskammeret, generelt gjennom det lavere utløp, ved lavt trykk og lav hastighet. Partiklene som kommer ut av malingskammeret er tyngre enn luft og setter seg nedover gjennom det nedre utløp og inn i oppsamlingskaret, mens avløpsgassen stiger (sammen med en minoritet av små partikler av mikronisert materiale) og utslipper i atmosfæren ved lavt trykk og lav hastighet.

Prosedyre:

Mikronisereren blir satt sammen. Venturirørets fremspringsavstand fra innløpsporten blir regulert til 1,0 cm (f.eks. slik at det smale hodet til venturi-innløpet er posisjonert nedenfor og litt foran materiale-innløpsporten) og blir målt med en mikro-krumpasser for å sikre at det blir innsatt korrekt. Ring- (R) og venturi- (V) trykk blir regulert i henhold til verdiene spesifisert i den eksperimentelle utforming (refererer til det eksperimentelle avsnittet nedenfor) ved å regulere ventiler på trykkmålere på mikronisereren. Oppsettet blir kontrollert for lekkasje ved å observere om det er noen fluktuasjon i avlesing på trykkmåleren.

Bemerk at venturi- (V) trykk blir holdt minst 2 bar større enn ring- (R) trykket for å forhindre regurgitasjon av materiale, f.eks. utover fra material-innløpsporten.

Vekt-ytelse blir kontrollert med kalibreringsvekter. Spesifisert mengde av det parentale materiale (se avsnitt om eksperimentell kjøring) blir veiet i en plast vektskål. Materialet blir deretter matet inn i mikronisereren ved anvendelse av en vibrasjons-spatel (f.eks. V-formet i tverrsnitt) med en spesifisert matehastighet. Material-matetid og utstyrs-trykk blir overvåket under mikroniseringsprosessen.

Etter fullføring av mikroniseringen blir nitrogentilførselen stanset og oppsamlingsposen banket for å la partikler sette seg i gjenvinnings/oppsamlings-karet på bunnen av mikronisereren. Oppsamlingsposen blir fjernet og satt vekk. Det mikroniserte pulver i gjenvinningskaret (oppsamlingskaret) og syklonen (over gjenvinningskaret) blir oppsamlet separat i forskjellige veiede+merkede oppsamlingsglass. Vekten av det mikroniserte materiale blir registrert. Mikronisereren blir tatt fra hverandre og resterende PDE4-forbindelse på mikronisererens indre overflate blir skyllet med 70/30 isopropylalkohol/vann og oppsamlet i en kolbe. Mikronisereren blir deretter grundig renset ved skylling og tørking med egnet løsningsmiddel og tørket før påfølgende kjøringer blir utført.

Foretrukne eksperimentelle parametere

Vekt(er) anvendt: Sartorius analytical

Venturi-utløp insersjonsdybde: 10,0 mm

De foretrukne eller eventuelle parametere ovenfor kan varieres ved anvendelse av fagfolks kunnskap.

Utbytte- beregninger

% utbytte = [(Materiale fra kar + Materiale fra syklon)/Materiale-innførselsmengde] x 100 Generelt er nokså nær 50-75 % utbytter oppnåelig ved anvendelse av denne metoden.

Tørrpulver inhalerbare preparater

For farmasøytiske preparater egnet og/eller tilpasset for inhalert administrering er det foretrukket at det farmasøytiske preparatet er et tørrpulver inhalerbart preparat. Et slikt preparat kan omfatte en pulverbase så som laktose eller stivelse, forbindelsen med formel (I) eller salt derav (fortrinnsvis i partikkelstørrelse-redusert form, f.eks. i mikronisert form) og eventuelt en ytelsemodifikator så som L-leucin, mannitol, trehalose og/eller magnesiumstearat. Fortrinnsvis omfatter det tørrpulver inhalerbare preparat en tørr pulverblanding av laktose og forbindelsen med formel (I) eller salt derav. Laktose er fortrinnsvis laktose-hydrat, f.eks. laktose-monohydrat og/eller er fortrinnsvis inhalerings-kvalitet og/eller fin-kvalitet laktose. Fortrinnsvis er partikkelstørrelsen av laktosen definert ved at 90% eller mer (etter vekt eller etter volum) av laktose-partiklene er mindre enn 1000 mikron (mikrometer) (f.eks. 10-1000 mikron f.eks. 30-1000 mikron) i diameter og/eller 50% eller mer av laktosepartiklene er mindre enn 500 mikron (f.eks. 10-500 mikron) i diameter. Mer foretrukket er partikkelstørrelsen av laktosen definert ved at 90% eller mer av laktosepartiklene er mindre enn 300 mikron (f.eks. 10-300 mikron f.eks. 50-300 mikron) i diameter og/eller 50% eller mer av laktosepartiklene er mindre enn 100 mikron i diameter. Eventuelt er partikkelstørrelsen av laktosen definert ved at 90% eller mer av laktosepartiklene er mindre enn 100-200 mikron i diameter og/eller 50% eller mer av laktosepartiklene er mindre enn 40-70 mikron i diameter. Viktigst er det foretrukket at ca. 3 til ca. 30%

(f.eks. ca. 10%) (etter vekt eller etter volum) av partiklene er mindre enn 50 mikron eller mindre enn 20 mikron i diameter. For eksempel, uten begrensning, er en egnet inhalerings-kvalitet laktose E9334 laktose (10% finstoff) (Borculo Domo Ingredients, Hanzeplein 25, 8017 JD Zwolle, Nederland).

I det tørrpulver inhalerbare preparat er fortrinnsvis forbindelsen med formel (I) eller salt derav til stede i ca. 0,1% til ca. 70% (f.eks. ca. 1% til ca. 50%, f.eks. ca. 5% til ca. 40%, f.eks. ca. 20 til ca. 30%) etter vekt av preparatet.

Et illustrativt ikke-begrensende eksempel på et tørrpulver inhalerbart preparat følger:

Tørrpulver- formuleringseksempel - Tørrpulver laktose- blandingspreparat

Ved anvendelse av en størrelse-redusert, f.eks. mikronisert form av forbindelsen med formel (I) eller salt derav (f.eks. som fremstilt i Mikroniseringseksemplet ovenfor), blir tørrpulver-blandingen fremstilt ved blanding av den nødvendige mengden av forbindelse/salt (f.eks. 10 mg, 1% vekt/vekt) med inhalerings-kvalitet laktose inneholdende 10% finstoff (f.eks. 990 mg, 99% vekt/vekt) i et Teflon™

(polytetrafluoreten) kar i en Micro-dismembrator kule-mølle (men uten kulelager) ved % hastighet (ca. 2000-2500 rpm) i ca. 4 timer ved hver blandekonsentrasjon. Micro-dismembrator (tilgjengelig fra B. Braun Biotech International, Schwarzenberger Weg 73-79, D-34212 Melsungen, Tyskland; vvww.bbraunbiotech.com) omfatter en base med en oppoverrettet og sideveis vibrerbar arm til hvilken Teflon TM -karet blir tilknyttet. Vibrering av armen medfører blanding.

Andre blandinger: 10% vekt/vekt forbindelse/salt (50 mg) + 90% vekt/vekt laktose (450 mg, inhalerings-kvalitet laktose inneholdende 10% finstoff).

Seriefortynning av 1% vekt/vekt blandingen kan oppnå f.eks. 0,1% og 0,3% vekt/vekt blandinger.

Tørrpulver inhaleringsanordninger

Eventuelt kan, spesielt for tørrpulver inhalerbare preparater, et farmasøytisk preparat for inhalert administrering innføres i en rekke lukkede dosebeholdere (f.eks. inneholdende tørrpulver-preparatet) montert i lengderetningen på en strimmel eller bånd inne i en egnet inhaleringsanordning. Beholderen er bristbar eller kan åpnes ved skrelling ved etterspørsel og dosen, f.eks. av tørrpulver-preparatet, kan administreres ved inhalering via en anordning så som DISKUS TM anordning, markedsført av GlaxoSmithKline. DISKUS TM inhaleringsanordningen er vanligvis hovedsakelig som beskrevet i GB 2,242,134 A og i en slik anordning er minst én beholder for det farmasøytiske preparatet i pulverform (idet den minst ene beholder fortrinnsvis er en rekke forseglede dosebeholdere montert i lengderetningen på en strimmel eller bånd) definert mellom to elementer som avskallbart er festet til hverandre; idet anordningen omfatter: anordning som definerer et åpningspunkt for nevnte minst ene beholder; anordning for å dele elementene fra hverandre ved åpningspunktet for å åpne beholderen; og en åpning som kommuniserer med den åpnede beholder, gjennom hvilken en bruker kan inhalere det farmasøytiske preparatet i pulverform fra den åpnede beholder.

Enhetsdoseform og doseringsregimer

Fortrinnsvis er preparatet i enhetsdoseform så som en tablett eller kapsel for oral administrering, f.eks. for oral administrering til et menneske.

I det farmasøytiske preparatet inneholder én eller hver doseenhet for oral eller parenteral administrering fortrinnsvis fra 0,01 til 3000 mg, mer foretrukket 0,5 til 1000 mg, av en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, beregnet som den frie basen. En eller hver doseenhet for nasal eller inhalert administrering inneholder fortrinnsvis fra 0,001 til 50 mg, mer foretrukket 0,01 til 5 mg, av en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, beregnet som den frie basen.

En farmasøytisk akseptabel forbindelse eller salt ifølge oppfinnelsen blir

fortrinnsvis administrert til et pattedyr (f.eks. menneske) i en daglig oral eller parenteral dose på 0,001 mg til 50 mg pr. kg kroppsvekt pr. dag (mg/kg/dag), for eksempel 0,01 til 20 mg/kg/dag eller 0,03 til 10 mg/kg/dag eller 0,1 til 2 mg/kg/dag, av forbindelsen med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, beregnet som den frie basen.

En farmasøytisk akseptabel forbindelse eller salt ifølge oppfinnelsen blir fortrinnsvis administrert til et pattedyr (f.eks. menneske) i en daglig nasal eller inhalert dose på: 0,0001 til 5 mg/kg/dag eller 0,0001 til 1 mg/kg/dag, f.eks. 0,001 til 1 mg/kg/dag eller 0,001 til 0,3 mg/kg/dag eller 0,001 til 0,1 mg/kg/dag eller 0,005 til 0,3 mg/kg/dag, av forbindelsen med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, beregnet som den frie basen.

De farmasøytisk akseptable forbindelser eller salter ifølge oppfinnelsen blir fortrinnsvis administrert i en daglig dose (for en voksen pasient) av for eksempel en oral eller parenteral dose på 0,01 mg til 3000 mg pr. dag eller 0,5 til 1000 mg pr. dag f.eks. 2 til 500 mg pr. dag eller en nasal eller inhalert dose på 0,001 til 300 mg pr. dag eller 0,001 til 50 mg pr. dag eller 0,01 til 30 mg pr. dag eller 0,01 til 5 mg pr. dag eller 0,02 til 2 mg pr. dag, av forbindelsen med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, beregnet som den frie basen.

Kombinasjoner

Forbindelsene, salter og/eller farmasøytiske preparater ifølge oppfinnelsen kan også anvendes i kombinasjon med et annet terapeutisk aktivt middel, for eksempel en fø adrenoreseptor-agonist, et anti-histamin, et anti-allergisk eller et anti-inflammatorisk middel.

En slik kombinasjon omfatter en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav sammen med et annet terapeutisk aktivt middel, for eksempel en (52-adrenoreseptor-agonist, et anti-histamin, et anti-allergisk middel, et anti-inflammatorisk middel eller et antiinfektivt middel.

Fortrinnsvis er (52-adrenoreseptor-agonisten salmeterol (f.eks. som racemat eller en enkel enantiomer så som R-enantiomeren), salbutamol, formoterol, salmefamol, fenoterol eller terbutalin eller et salt derav (f.eks. farmasøytisk akseptabelt salt derav), for eksempel xinafoatsalt av salmeterol, sulfatsalt eller fri base av salbutamol eller fumaratsaltet av formoterol. Langtidsvirkende p2-adrenoreseptor-agonister er foretrukket, spesielt de som har en terapeutisk effekt over en 12-24 timers periode så som salmeterol eller formoterol. Fortrinnsvis er (52-adrenoreseptor-agonisten for inhalert administrering, f.eks. én gang pr. dag og/eller for samtidig inhalert administrering; og mer foretrukket er p2-adrenoreseptor-agonisten i partikkel-størrelse-redusert form f.eks. som definert her. Fortrinnsvis er p2-adrenoreseptor-agonist-kombinasjonen for behandling og/eller forebygging av KOLS eller astma. Salmeterol eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, f.eks. salmeterol-xinofoat, blir fortrinnsvis administrert til mennesker med en inhalert dose på 25 til 50 mikrogram to ganger pr. dag (målt som den frie basen). Kombinasjonen med en (52-adrenoreseptor-agonist kan være som beskrevet i WO 00/12078.

Foretrukne langtidsvirkende (52-adrenoreseptor-agonister omfatter de beskrevet i WO 02/066422A, WO 03/024439, WO 02/070490 og WO 02/076933.

Spesielt foretrukne langtidsvirkende (52-adrenoreseptor-agonister omfatter forbindelser med formel (X) (beskrevet i WO 02/066422) (bemerk at R-gruppene der er definert uavhengig av de tilsvarende R-grupper i formel (I)):

eller et salt eller solvat derav, hvor i formel (X):

m er et helt tall på fra 2 til 8;

n er et helt tall på fra 3 til 11,

med det forbehold at m + n er 5 til 19,

R<n>er -XS02NR<I6>R<17>hvor X er -(CH2)P- eller C2-6alkenylen;

R16og R<17>er uavhengig valgt fra hydrogen, Ci_6alkyl, C3.7cykloalkyl, C(0)NR<18>R<19>, fenyl og fenyl (Ci^alkyl)-,

eller R<16>og R<17>, sammen med nitrogenet som de er bundet til, danner en 5-, 6- eller 7-leddet nitrogen-inneholdende ring ogR16og R<17>er hver eventuelt substituert med én eller to grupper valgt fra halogen, Ci-6alkyl, Ci-6halogenalkyl, Ci-6alkoksy, hydroksy-substituert Ci.6alkoksy, -C02R<18>, -S02NR<I8>R<19>, -CONR<I8>R<19>, -NR<I8>C(0)R<19>eller en 5-, 6- eller 7-leddet heterocyklisk ring;

R18og R<19>er uavhengig valgt fra hydrogen, Ci-6alkyl, C3-6Cykloalkyl, fenyl og fenyl-(Ci^alkyl)-; og

p er et helt tall på fra 0 til 6, fortrinnsvis fra 0 til 4;

R<12>og R<13>er uavhengig valgt fra hydrogen, Ci-6alkyl, Ci-6alkoksy, halogen, fenyl og Ci.

6halogenalkyl; og

R<14>og R<15>er uavhengig valgt fra hydrogen og Ci^alkyl, med det forbehold at det totale antall karbonatomer i R14og R<15>ikke er mer enn 4.

Foretrukne (52-adrenoreseptor-agonister beskrevet i WO 02/066422 omfatter: 3-(4- {[6-( {(2R)-2-hydroksy-2-[4-hydroksy-3-(hydroksymetyl)-fenyl]etyl} amino)heksyl]oksy}butyl)benzensulfonamid og

3- (3-{[7-({(2R)-2-hydroksy-2-[4-hydroksy-3-hydroksymetyl)fenyl]etyl}-amino)hepty 1] oksy} propy l)benzensulfonamid.

En foretrukket (52-adrenoreseptor-agonist beskrevet i WO 03/024439 er: 4- {(lÆ)-2-[(6- {2-[(2,6-diklorbenzyl)oksy]etoksy} heksyl)amino]-1 -hydroksyetyl} -2-(hydroksymetyl)fenol.

En kombinasjon av en forbindelse med formel (I) eller salt sammen med et anti-histamin er fortrinnsvis for oral administrering (f.eks. som et kombinert preparat så som en kombinert tablett) og kan være for behandling og/eller forebygging av allergisk rhinitt. Eksempler på anti-histaminer omfatter metapyrilen eller Hl-antagonister så som cetirizin, loratadin (f.eks. Clarityn<TM>), desloratadin (f.eks. Clarinex<TM>) etøer fexofenadin (f.eks. Allegra TM)

En annen kombinasjon omfatter en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav sammen med en anticholinerg forbindelse, f.eks. en muskarin (M) reseptorantagonist spesielt en M\, M2, M1/M2eller M3reseptorantagonist, mer foretrukket en M3reseptorantagonist, enda mer foretrukket en M3reseptorantagonist som selektivt antagoniserer (f.eks. antagoniserer 10 ganger eller sterkere) M3-reseptor fremfor M\-og/eller M2-reseptor. For kombinasjoner av anticholinerge forbindelser / muskarine (M) reseptorantagonister med PDE4-inhibitorer, se for eksempel WO 03/011274 A2 og WO 02/069945 A2 / US 2002/0193393 Al og US 2002/052312 Al og noen eller alle disse publikasjoner gir eksempler på anticholinerge forbindelser / muskarine reseptorantagonister som kan anvendes med forbindelsene med formel (I) eller salter og/eller egnede farmasøytiske preparater. For eksempel kan den muskarine reseptorantagonist omfatte eller være et ipratropiumsalt (f.eks. ipratropiumbromid), et oxitropiumsalt (f.eks. oxitropiumbromid) eller mer foretrukket et tiotropiumsalt (f.eks. tiotropiumbromid); se f.eks. EP 418 716 Al for tiotropium.

Den anticholinerge forbindelse eller muskarine (M) reseptorantagonist, f.eks. M3reseptorantagonist, er fortrinnsvis for inhalert administrering, mer foretrukket i partikkelstørrelse-redusert form f.eks. som definert her. Mer foretrukket er både den muskarine (M) reseptorantagonist og forbindelsen med formel (I) eller det farmasøytisk akseptable salt derav for inhalert administrering. Fortrinnsvis er den anticholinerge forbindelse eller muskarine reseptorantagonist og forbindelsen med formel (I) eller salt for samtidig administrering. Den muskarine reseptorantagonist-kombinasjon er fortrinnsvis for behandling og/eller forebygging av KOLS.

Andre egnede kombinasjoner omfatter for eksempel en kombinasjon omfattende en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav sammen med et annet anti-inflammatorisk middel så som et anti-inflammatorisk kortikosteroid; eller et ikke-steroid anti-inflammatorisk medikament (NSAID) så som en leukotrien-antagonist (f.eks. montelukast), en iNOS-inhibitor, en tryptase-inhibitor, en elastase-inhibitor, en beta-2 integrin-antagonist, en adenosin 2a-agonist, en CCR3-antagonist eller en 5-lipoksogenase-inhibitor; eller et antiinfektivt middel (f.eks. et antibiotisk eller antiviralt middel). En iNOS-inhibitor er fortrinnsvis for oral administrering. Egnede iNOS-inhibitorer (induserbare nitrogenoksyd-syntase-inhibitorer) omfatter de beskrevet i WO 93/13055, WO 98/30537, WO 02/50021, WO 95/34534 og WO 99/62875. Egnede CCR3-inhibitorer omfatter de beskrevet i WO 02/26722.

I en kombinasjon omfattende en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav sammen med et anti-inflammatorisk kortikosteroid (som fortrinnsvis er for behandling og/eller forebygging av astma, KOLS eller allergisk rhinitt), er fortrinnsvis det anti-inflammatoriske kortikosteroid fluticason, fluticason-propionat (se f.eks. US patent 4,335,121), beclomethason, beclomethason-17-propionat-ester, beclomethason-17,21-dipropionat-ester, dexamethason eller en ester derav, mometason eller en ester derav, ciclesonid, budesonid, flunisolid eller en forbindelse som beskrevet i WO 02/12266 Al (f.eks. ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 22 der) eller et farmasøytisk akseptabelt salt av hvilke som helst av de ovenstående. Hvis det anti-inflammatoriske kortikosteroid er en forbindelse som beskrevet i WO 02/12266 Al, da er den fortrinnsvis Eksempel 1 der {som er 6a,9a-difluor-17a-[(2-furanylkarbonyi)oksy]-11 (}-hydroksy-16a-metyl-3-okso-androsta-1,4-dien-17(5-karbotioinsyre-iS-fluormetylester} eller Eksempel 41 der {som er 6a,9a-difluor-ll(5-hydroksy-16a-metyl-17a-[(4-metyl-l,3-tiazol-5-karbonyl)oksy]-3-okso-androsta-l,4-dien-17p-karbotioinsyre-S-fluormetylester} eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. Det anti-inflammatoriske kortikosteroid er fortrinnsvis for intranasal eller inhalert administrering. Fluticason-propionat er foretrukket og er fortrinnsvis for inhalert administrering til et menneske enten (a) i en dose på 250 mikrogram én gang pr. dag eller (b) i en dose på 50 til 250 mikrogram to ganger pr. dag.

En annen kombinasjon omfatter en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav sammen med en (52-adrenoreseptor-agonist og et anti-inflammatorisk kortikosteroid, for eksempel som beskrevet i WO 03/030939 Al. Fortrinnsvis er denne kombinasjonen for behandling og/eller forebygging av astma, KOLS eller allergisk rhinitt. (52-adrenoreseptor-agonisten og/eller det anti-inflammatoriske kortikosteroid kan være som beskrevet ovenfor og/eller som beskrevet i WO 03/030939 Al. Mest foretrukket er i denne "trippel" kombinasjonen, (52-adrenoreseptor-agonist salmeterol eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav (f.eks. salmeterol-xinafoat) og det anti-inflammatoriske kortikosteroid er fluticason-propionat.

Kombinasjonene referert til ovenfor kan hensiktsmessig presenteres for anvendelse i form av et farmasøytisk preparat og således representerer et farmasøytisk preparat omfattende en kombinasjon som definert ovenfor sammen med én eller flere farmasøytisk akseptable bærere og/eller tilsetningsmidler et ytterligere aspekt ved oppfinnelsen.

De individuelle forbindelser i slike kombinasjoner kan administreres enten sekvensielt eller samtidig i separate eller kombinerte farmasøytiske preparater.

I én utførelsesform kan kombinasjonen som definert her være for samtidig inhalert administrering og er plassert i en kombinasjons-inhaleringsanordning. En slik kombinasjons-inhaleringsanordning er et annet aspekt ved oppfinnelsen. En slik kombinasjons-inhaleringsanordning kan omfatte et kombinert farmasøytisk preparat for samtidig inhalert administrering (f.eks. tørrpulver-preparat), idet preparatet omfatter alle de individuelle forbindelser i kombinasjonen og preparatet er innført i en rekke forseglede dosebeholdere montert longitudinalt i en strimmel eller bånd inne i inhaleringsanordningen, idet beholderene er bristbare eller kan skrelles åpne ved behov; for eksempel kan en slik inhaleringsanordning være hovedsakelig som beskrevet i GB 2,242,134 A (DISKUS ™) og/eller som beskrevet ovenfor. Alternativt kan kombinasjons-inhaleringsanordningen være slik at de individuelle forbindelser i kombinasjonen er administrerbare samtidig, men blir lagret separat (eller helt eller delvis lagret separat for trippel-kombinasjoner), f.eks. i separate farmasøytiske preparater, for eksempel som beskrevet i PCT/EP03/00598 innlevert 22 . januar 2003 (f.eks. som beskrevet i kravene der, f.eks. krav 1).

Kombinsjonene kan fremstilles som følger

(a) fremstilling av et separat farmasøytisk preparat for administrering av de individuelle forbindelser av kombinasjonen enten sekvensielt eller samtidig eller (b) fremstilling av et kombinert farmasøytisk preparat for administrering av de individuelle forbindelser av kombinasjonen samtidig,

hvor det farmasøytiske preparatet omfatter kombinasjonen sammen med én eller flere farmasøytisk akseptable bærere og/eller tilsetningsmidler.

Biologiske testmetoder

PDE 3, PDE 4B, PDE 4D, PDE 5, PDE 6 primære f or seks metoder

Aktiviteten av forbindelsene kan måles ved forsøksmetodene vist nedenfor. Foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen er selektive PDE4-inhibitorer, dvs. de hemmer PDE4 (f.eks. PDE4B og/eller PDE4D, fortrinnsvis PDE4B) sterkere enn de hemmer PDE3 og/eller sterkere enn de hemmer PDE5 og/eller sterkere enn de hemmer PDE6.

PDE- enzymkilder og litteraturreferanser

Human rekombinant PDE4B, spesielt 2B spleisevariant derav (HSPDE4B2B) er beskrevet i WO 94/20079 og også M.M. McLaughlin et al., "A low Km, rolipram-sensitive, cAMP-specific phosphodiesterase from human brain: cloning and expression of cDNA, biochemical characterisation of recombinant protein and tissue distribution of mRNA", J. Biol. Chem., 1993,268, 6470-6476. Human rekombinant PDE4B ble uttrykt i PDE-manglende gjær Saccharomyces cerevisiae stamme GL62. 100,000 x g supernatant-fraksjoner av gjærcellelysater ble anvendt for PDE4B-forsøk og inhibitor undersøkelser.

Human rekombinant PDE4D (HSPDE4D3A) er beskrevet i P. A. Baecker et al, "Isolation of a cDNA encoding a human rolipram-sensitive cyclic AMP phoshodiesterase (PDE IVD)", Gene, 1994,138,253-256.

Human rekombinant PDE5 er beskrevet i K. Loughney et al, "Isolation and characterisation of cDNAs encoding PDE5A, a human cGMP-binding, cGMP-specific 3',5'-cyclic nukleotide phosphodiesterase", Gene, 1998, 216, 139-147.

PDE3 ble renset fra bovin aorta som beskrevet av H. Coste og P. Grondin, "Characterisation of a novel potent and specific inhibitor of type V phosphodiesterase", Biochem. Pharmacol, 1995, 50, 1577-1585.

PDE6 ble renset fra bovin retina som beskrevet av: P. Catty og P. Deterre, "Activation and solubilization of the retinal cGMP-specific phosphodiesterase by limited proteolysis", Eur. J. Biochem., 1991,199, 263-269; A. Tar et al. "Purification of bovine retinal cGMP phosphodiesterase", Methods in Enzymology, 1994, 238, 3-12; og/eller D. Srivastava et al. "Effects of magnesium on cyclic GMP hydrolysis by the bovine retinal rod cyclic GMP phosphodiesterase", Biochem. J., 1995,308, 653-658.

Hemning av PDE 3, PDE 4B, PDE 4D, PDE 5 eller PDE 6 aktivitet: radioaktiv scintillasjon proksimitetsforsøk ( SPA)

Evnen til forbindelser til å hemme katalytisk aktivitet ved PDE4B eller 4D (human rekombinant), PDE3 (fra bovin aorta) eller PDE5 (human rekombinant) eller PDE6 (fra bovin retina) ble bestemt ved scintillasjon proksimitetsforsøk (SPA) i 96-brønn format. Testforbindelser (fortrinnsvis som en løsning i DMSO, f.eks. ca. 2 mikroliter (ul) volum av DMSO løsning) ble preinkubert ved omgivelsestemperatur (romtemperatur, f.eks. 19-23°C) i Wallac Isoplates (code 1450-514) med PDE-enzym i 50 mM Tris-HCl-buffer pH 7,5 , 8,3 mM MgCl2, 1,7 mM EGTA, 0,05% (vekt/volum) bovint serumalbumin i 10-30 minutter (vanligvis 30 minutter). Enzymkonsentrasjonen ble regulert slik at ikke mer enn 20% hydrolyse av substratet definert nedenfor skjedde i kontrollbrønner uten forbindelse, under inkuberingen. For PDE3-, PDE4B- og PDE4D-forsøk ble [5\8-<3>H]adenosin-3',5'-cyklisk fosfat (Amersham Pharmacia Biotech , code TRK,559; eller Amersham Biosciences UK Ltd, Pollards Wood, Chalfont St Giles, Buckinghamshire HP8 4SP, UK) tilsatt, hvilket ga 0,05 uCi pr. brønn og~10 nM endelig konsentrasjon. For PDE5- og PDE6-forsøk ble [8-<3>H]guanosin-3',5'-cyklisk fosfat (Amersham Pharmacia Biotech , code TRK,392) tilsatt, hvilket ga 0,05 uCi pr. brønn og~36 nM endelig konsentrasjon. Plater, fortrinnsvis inneholdende ca. 100 ul volum av forsøksblanding, ble blandet på en orbital-shaker i 5 minutter og inkubert ved omgivelsestemperatur i 1 time. Fosfodiesterase SPA-kuler (Amersham Pharmacia Biotech, code RPNQ 0150) ble tilsatt (~1 mg pr. brønn) for å avslutte forsøket. Plater ble lukket og ristet og fikk stå ved omgivelsestemperatur i 35 minutter til 1 time

(fortrinnsvis 35 minutter) for å tillate at kulene satte seg. Bundet radioaktivt produkt ble målt ved anvendelse av en WALLAC TRILUX 1450 Microbeta scintillasjonsteller. For hemningskurver ble 10 konsentrasjoner (1,5-M - 30 uM) av hver forbindelse undersøkt. Kurver ble analysert ved anvendelse av ActivityBase og XLfit (ID Businesss solutions

Limited, 2 Ocean Court, Surrey Research Park, Guildford, Surrey GU2 7QB, UK). Resultater ble uttrykt som pICso-verdier.

Ved et alternativ til det radioaktive SPA-forsøk ovenfor, kan PDE4B- eller PDE4D-hemning måles i det følgende Fluorescence Polarisation (FP) assay: Hemning av PDE4B- eller PDE4D- aktivitet: Fluorescence Polarisation ( FP) assay

Evnen til forbindelser til å hemme katalytisk aktivitet ved PDE4B (human rekombinant) eller PDE4D (human rekombinant) ble bestemt ved IMAP Fluorescence Polarisation (FP) assay (IMAP Explorer sett, tilgjengelig fra Molecular Devices Corporation, Sunnydale, CA, USA; Molecular Devices code: R8062) i 384-brønn format. IMAP FP-forsøk kan måle PDE-aktivitet i et homogent, ikke-radioaktivt forsøksformat. FP-forsøket anvender evnen til immobiliserte trivalente metallkationer, belagt på nanopartikler (små kuler), til å binde fosfat-gruppen i Fl-AMP som blir produsert ved hydrolyse av fluorescein-merket (Fl) cyklisk adenosin mono-fosfat (Fl-cAMP) til den ikke-cykliske Fl-AMP-form. Fl-cAMP binder ikke. Binding av Fl-AMP-produkt til kulene (belagt med de immobiliserte trivalente kationer) sinker rotasjonen av bundet Fl-AMP og fører til en økning i fluorescens-polairseringsforhold fra parallelt til perpendikulært lys. Hemning av PDE reduserer/hemmer denne signal-økning.

Testforbindelser (lite volum, f.eks. ca. 0,5 til 1 ul, fortrinnsvis ca. 0,5 ul, av løsning i DMSO) ble preinkubert ved omgivelsestemperatur (romtemperatur, f.eks. 19-23°C) i sorte 384-brønn mikrotiter-plater (leverandør: NUNC, code 262260) med PDE-enzym i 10 mM Tris-HCl-buffer pH 7,2,10 mM MgCl2,0,1% (vekt/volum) bovint serumalbumin og 0,05% NaN3i 10-30 minutter. Enzymnivået ble satt ved eksperimentering slik at reaksjonen ble lineær gjennom hele inkuberingen. Fluorescein-adenosin-3',5'-cyklisk fosfat (fra Molecular Devices Corporation, Molecular Devices code: R7091) ble tilsatt, hvilket ga ca. 40 nM endelig konsentrasjon (endelig forsøks-volum vanligvis ca. 20-40 ul, fortrinnsvis ca. 20 ul). Plater ble blandet på en orbital-shaker i 10 sekunder og inkubert ved omgivelsestemperatur i 40 minutter. IMAP bindingsreagens (som beskrevet ovenfor, fra Molecular Devices Corporation, Molecular Devices code: R7207) ble tilsatt (60ul av en 1 i 400 fortynning i bindingsbuffer av sett- stamløsningen) for å avslutte forsøket. Plater fikk stå ved omgivelsestemperatur i 1 time. Fluorescens-polarisering (FP) forhold av parallelt til perpendikulært lys ble målt ved anvendelse av en Analyst^<M>piateleser (fra Molecular Devices Corporation). For hemningskurver ble 10 konsentrasjoner (1,5 nM - 30 uM) av hver forbindelse undersøkt. Kurver ble analysert ved anvendelse av ActivityBase og XLfit (ID Businesss Solutions Limited, 2 Ocean Court, Surrey Research Park, Guildford, Surrey GU2 7QB, UK). Resultater ble uttrykt som pICso-verdier.

I FP-forsøket ble alle reagenser fordelt ved anvendelse av Multidrop<TM>(tilgjengelig fra Thermo Labsystems Oy, Ratastie 2, PO Box 100, Vantaa 01620, Finland).

For en gitt PDE4-inhibitor kan PDE4B- (eller PDE4D) hemningsverdier målt ved anvendelse av SPA- og FP-forsøk avvike litt. I en regresjonsanalyse av 100 testforbindelser, er imidlertid pIC5ø-hemningsverdier målt ved anvendelse av SPA- og FP-forsøk funnet generelt å overensstemme innen 0,5 log enheter, for PDE4B og PDE4D (lineær regresjonskoeffisient 0,966 for PDE4B og 0,971 for PDE4D; David R.Mobbs et al., "Comparison of the IMAP Fluorescence Polarisation Assay with the Scintillation Proximity Assay for Phosphodiesterase Activity", oppslag presentert ved 2003 Molecular Devices UK & Europe User Meeting, 2. oktober 2003, Down Hall, Harlow, Essex, UK).

Biologiske data oppnådd for noen av eksemplene (PDE4B-hemmende aktivitet, enten som én lesning eller som et gjennomsnitt av ca. 2-6 avlesninger) er som følger, basert bare på aktuelle målinger. I hvert av SPA- og FP-forsøkene er absolutt målingsnøyaktighet ikke mulig og avlesningene gitt er nøyaktige bare opptil omtrent 0,5 log enhet, avhengig av antallet avlesninger gjort og tatt gjennomsnitt for:

Mange, men ikke alle, eksemplene er testet for PDE4B-hemning. Av eksemplene testet for PDE4B-hemning ble noen testet ved det radioaktive SPA-forsøk, noen ble testet ved FP-forsøket.

De fleste eller hovedsakelig alle Eksempler 1-45,47-55, 57-81, 83 og 84 har PDE4B-hemmende aktiviteter i området pICso= ca. 6 (± ca. 0,5) til ca. 9,1 (± 0,5).

Eksemplene hvor R<3>= cykloheksyl (NHR<3>eller NR<3>R<3a>= sub-formel (c)), tetrahydro-2H-pyran-4-yl (NHR<3>eller NR<3>R<3a>= gruppe (h)) eller visse andre typer av substituerte cykloheksyl- eller visse heterocykliske grupper eller Eksempler hvor NHR<3>eller NR<3>R<3a>= sub-formel (s), har vanligvis eller ofte (basert på data for Ri = etyl) et høyere nivå av selektivitet for PDE4B fremfor PDE5, som målt i enzym-hemningsforsøket ovenfor, sammenlignet med selektiviteten til sammenlignbare Eksempler hvor R<3>= cyklopropyl (NHR<3>eller NR<3>R<3a>= sub-formel (b)).

Brekning: Noen kjente PDE4-inhibitorer kan forårsake brekning og/eller kvalme i større eller mindre grad (se f.eks. se Z. Huang et al., Current Opinion in Chemical Biology, 2001, 5: 432-438, se spesielt sider 433-434). Derfor ville det være foretrukket, men ikke essensielt, om en spesiell PDE4-hemmende forbindelse eller salt ifølge oppfinnelsen forårsaket bare begrenset eller overkommelige emetiske bivirkninger. Emetiske bivirkninger kan for eksempel måles ved det emetogene potensiale av forbindelsen eller saltet når administrert til fritter; for eksempel kan én måle tiden til begynnelse, omfang, hyppighet og/eller varighet av oppkast, brekning og/eller vridning i fritter etter oral eller parenteral administrering av forbindelsen eller saltet. Se for eksempel In vivo Forsøk 4 nedenfor for en målingsmetode for anti-inflammatorisk effekt, emetiske bivirkninger og terapeutisk indeks (TI) i fritten. Se også for eksempel A. Robichaud et al., "Emesis induced by inhibitors of [PDE IV] in the ferret", Neuropharmacology, 1999, 38, 289-297, erratum Neuropharmacology, 2001, 40, 465-465. Imidlertid kan eventuelt emetiske bivirkninger og terapeutisk indeks (TI) i rotter hensiktsmessig måles ved overvåkning av pica spiseadferd hos rotter etter administrering av forbindelsen eller saltet ifølge oppfinnelsen (se In vivo Forsøk 2 nedenfor).

Andre bivirkninger: Noen kjente PDE4-inhibitorer kan forårsake andre bivirkninger så som hodepine og andre sentralnervesystem- (CNS-) medierte bivirkninger; og/eller gastrointestinal- (GI) kanal-forstyrrelser. Derfor, ville det være foretrukket, men ikke essensielt om en spesiell PDE4-hemmende forbindelse eller salt ifølge oppfinnelsen forårsaket bare begrensede eller overkommelige bivirkninger i én eller flere av disse bivirkningskategorier.

In vivo biologisk forsøk

In vitro enzymatisk PDE4B-hemningsforsøk beskrevet ovenfor skal betraktes som den primære test av biologisk aktivitet. Imidlertid er ytterligere in vivo biologiske tester, som er valgfrie og som ikke er et essensielt mål for effektivitet eller bivirkninger, beskrevet nedenfor.

In vivo Forsøk 1. LPS- fremkaltpulmonal nøytrofili i rotter: effekt av oralt administrerte PDE4- inhibitorer

Pulmonal nøytrofil-tilstrømning er vist å være en betydelig komponent i familien av pulmonale sykdommer så som kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS) som kan involvere kronisk bronkitt og/eller emfysem (G.F. Filley, Chest. 2000; 117(5); 25 ls-260s). Formålet med denne nøytrofilimodell er å undersøke de potensielle anti-inflammatoriske effekter in vivo av oralt administrerte PDE4-inhibitorer på nøytrofili fremkalt ved inhalering av aerosolisert lipopolysakkarid (LPS), som er modell for nøytrofil inflammatorisk(e) komponent(er) ved KOLS. Se litteraturavsnittet nedenfor for vitenskapelig bakgrunn.

Lewis hannrotter (Charles River, Raleigh, NC, USA) som veier omtrent 300-400 gram blir forhåndsbehandlet med enten (a) testforbindelse suspendert i 0,5% metylcellulose (som kan oppnås fra Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA) i vann eller (b) bare konstituent, levert oralt i et dosevolum på 10 ml/kg. Generelt blir doserespons-kurver dannet ved anvendelse av de følgende doser av PDE4-inhibitorer: 10,0, 2,0, 0,4, 0,08 og 0,016 mg/kg. Tretti minutter etter forbehandlingen blir rottene eksponert for aerosolisert LPS (Serotype E. Coli 026:B6 fremstilt ved trikloreddiksyre-ekstraksjon, som kan oppnås fra Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA), dannet fra en forstøver inneholdende en 100 fig/ml LPS-Løsning. Rotter blir eksponert for LPS-aerosolen med en hastighet på 4 L/min i 20 minutter. LPS-eksponering blir utført i et lukket kammer med indre dimensjoner på 45 cm lengde x 24 cm bredde x 20 cm høyde. Forstøver og eksponeringskammer blir inneholdt i en sertifisert damphette. 4 timer etter LPS-eksponering blir rottene avlivet ved en overdose av pentobarbital på 90 mg/kg, administrert intraperitonealt. Bronkoalveolær skylling (BAL) blir utført gjennom en 14 gauge butt nål i det eksponerte luftrør. Fem, 5 ml vaskinger blir utført for å oppsamle totalt 25 ml BAL-væske. Totale celletellinger og leukocytt-differensialer blir utført på BAL-væske for å beregne nøytrofil-tilstrømning til lungen. Prosent nøytrofil-hemning ved hver dose (kfr. konstituent) blir beregnet og en variabel helning, sigmoidal doserespons kurve blir dannet, vanligvis ved anvendelse av Prism Graph-Pad. Doseresponskurven blir anvendt for å beregne en ED50-verdi (i mg pr. kg kroppsvekt) for hemning av PDE4-inhibitor av LPS-fremkalt nøytrofili.

Resultater: Basert på aktuelle målinger viste forbindelsene i Eksempler 14,17, 23, 35 og 38, administrert oralt i prosedyren ovenfor, nøytrofili-hemning ED50-verdier i området ca. 0,03 mg/kg til ca. 1 mg/kg, avhengig av test-unøyaktigheter.

Alternativ metode og resultater: I en alternativ utførelsesform av metoden, blir en enkel oral dose på 10 mg/kg eller 1 mg/kg av PDE4-inhibitor (eller konstituent) administrert til rottene og prosent nøytrofil-hemning blir beregnet og angitt for den spesifikke dose. I denne utførelsesform, basert på aktuelle målinger, viste forbindelsene i Eksempler 2, 14,23 og 38, administrert oralt ved denne alternative prosedyre i en enkel dose på 10 mg/kg, prosent nøytrofili-hemning i området ca. 74% til ca. 86%, avhengig av test-unøyaktigheter.

Litteratur:

Filley G.F. Comparison of the structural and inflammatory features of COPD andasthma. Chest. 2000; 117(5) 251 s-260s.

Howell RE, Jenkins LP, Fielding LE, and Grimes D. Inhibition of antigen-induced pulmonary eosinophilia and neutrophilia by selective inhibitors of phosphodiesterase types 3 and 4 in brown Norway rats. Pulmonary Pharmacology. 1995; 8: 83-89.

Spond J, Chapman R, Fine J, Jones H, Kreutner W, Kung TT, Minnicozzi M. Comparison of PDE 4 inhibitors, Rolipram and SB 207499 (Ariflo™), in a rat model of pulmonary neutrophilia. Pulmonary Pharmacology and Therapeutics. 2001; 14: 157-164.

Underwood DC, Osborn RR, Bochnowicz S, Webb EF, Rieman DJ, Lee JC, Romanic AM, Adams JL, Hay DWP, and Griswold DE. SB 239063, a p38 MAPK inhibitor, reduces neutrophilia, inflammatory cytokines, MMP-9, and fibrosis in lung. Am JPhysiol Lung Cell Mol Physiol. 2000; 279: L895-L902.

In vivo Forsøk 2. Rotte pica- modell for brekning

Bakgrunn: Selektive PDE4-inhibitorer er vist å hemme inflammasjon i forskjellige in vitro og in vivo modeller ved å øke intracellulære nivåer av cAMP i mange immunceller (f.eks. lymfocytter, monocytter). Imidlertid er bivirkning av noen PDE4-inhibitorer hos mange arter brekning. Fordi mange rottemodeller av inflammasjon er godtkarakteriserthar de vært anvendt i prosedyrer (se f.eks. In vivo Forsøk 1 ovenfor) for å vise fordelaktige anti-inflammatoriske effekter av PDE 4-inhibitorer. Imidlertid har rotter ingen brekningsrespons (de har ingen oppkastrefleks), slik at relasjonen mellom fordelaktige anti-inflammatoriske effekter av PDE 4-inhibitorer og brekning er vanskelige å undersøke direkte i rotter.

Imidlertid, i 1991, demonstrerte Takeda et al. (se Litteratur-avsnittet nedenfor) at pica spiserespons er analog med brekning hos rotter. Pica-spising er en adferdsmessig respons på sykdom i rotter hvor rotter spiser ikke-næringssubstanser så som jord eller spesielt leire (f.eks. kaolin) som kan hjelpe til å absorbere toksiner. Pica-spising kan fremkalles av bevegelse og kjemikalier (spesielt kjemikalier som er emetiske hos mennesker) og kan hemmes farmakologisk med medikamenter som hemmer brekning hos mennesker. Rotte Pica Modell, In vivo Forsøk 2, kan bestemme nivået av pica-respons hos rotter på PDE 4-hemning ved farmakologisk relevante doser i parallelt med in vivo anti-inflammatorisk forsøk i (et separat sett av) rotter (f.eks. In vivo Forsøk 1 ovenfor). Anti-inflammatoriske og pica forsøk på samme arter kan sammen gi data for "terapeutisk indeks" (TI) i rotte av forbindelsene/saltene ifølge oppfinnelsen. Rotte-TI kan for eksempel beregnes som forholdet av a) den potensielt emetiske Pica-Respons ED50dose fira Forsøk 2 til b) rotte anti-inflammatorisk ED50dose (f.eks. målt ved rotte nøytrofili-hemning i f.eks. In vivo Forsøk 1), idet større TI-forhold sannsynligvis indikerer mindre brekning ved mange anti-inflammatoriske doser. Dette kan tillate valg av en ikke-emetisk eller minimalt emetisk farmasøytisk dose av forbindelsene eller saltene ifølge oppfinnelsen som har en anti-inflammatorisk effekt. Det er imidlertid erkjent at å oppnå lav-emetiske PDE4-hemmende forbindelser ikke er essensielt for oppfinnelsen.

Prosedyre: På den første dag av forsøket blir rottene holdt individuelt i bur uten underlag eller "utsmykning". Rottene blir holdt vekk fra burgulvet med en trådduk. Forhånds-veiede matkopper inneholdende standard rottekost og leire-pellet blir plassert i burene. Leirepellet, som kan oppnås fra Languna Clay Co, City of Industry, CA, USA, har lik størrelse og form som matpelleten. Rottene blir akklimatisert til leiren i 72 timer, i løpet av hvilken tid koppene og mat- og leire-rester fra buret blir veiet daglig på en elektronisk vekt som kan måle nærmeste 0,1 gram. Ved slutten av 72 timers akklimatiseringsperioden viser rottene generelt ingen interesse for leire-pelleten.

Etter 72 timer blir rottene plassert i rene bur og matkoppene veiet. Rotter som fortsatt spiser leire regelmessig fjernes fra undersøkelsen. Umiddelbart før mørkecyklus (tiden når dyrene er aktive og skulle spise) blir dyrene delt i behandlingsgrupper og dosert oralt med en dose av forbindelsen/saltet ifølge oppfinnelsen (forskjellige doser for forskjellige behandlingsgrupper) eller med konstituent alene, i et dosevolum på 2 ml/kg. Ved denne orale dosering er forbindelsen/saltet i form av en suspensjon i 0,5% metylcellulose (som kan oppnås fra Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) i vann. Mat- og leire-kopper og bur-avfall blir veiet den følgende dag og den totale leire og mat oppbrukt den natten av hvert individuelle dyr blir beregnet.

En doserespons blir beregnet ved først å konvertere dataene til kvante-respons, hvor dyrene enten er positive eller negative for pica-respons. En rotte er "pica-positiv" hvis den forbruker mer enn eller lik 0,3 gram leire over gjennomsnittet; vanligvis beregnet ved anvendelse av logistisk regresjon utført med Statistica Software statistiske programpakke. En Pica-respons ED50-verdi i mg pr. kg kroppsvekt kan deretter beregnes.

Pica-respons ED5o-verdi kan sammenlignes med de nøytrofili-hemmende ED5o-verdier for samme forbindelse administrert oralt til rotten (målbar ved In vivo Forsøk 1 ovenfor), slik at en terapeutisk indeks (TI) for rotter kan beregnes således:

Generelt er den terapeutiske indeksen (TI) beregnet på denne måten ofte vesentlig forskjellig fra, for eksempel kan den ofte være vesentlig høyere enn, TI (D20/D50) beregnet for fritten (se In vivo Forsøk 4 nedenfor).

Resultater: Ved anvendelse av prosedyren ovenfor og i henhold til aktuelle målinger, viste forbindelsene i Eksempler 14, 17, 23, 35 og 38 en Pica-respons ED5oi området ca. 2 mg/kg til mer enn ca. 50 mg/kg, avhengig av test-unøyaktigheter. Ved å ta de spesifikke pica-respons ED5o-verdier for disse forbindelser sammen med de spesifikke rotte nøytrofili-hemmende ED5o-verdier målt i In vivo Forsøk 1 for Eksempler 14,17,23, 35 og 38, ble rotte terapeutisk indeks (TI) for oralt administrerte Eksempler 14, 17, 23, 35 og 38 beregnet ved anvendelse av ligningen ovenfor å være i området fra ca. 12 til ca. 470, i henhold til aktuelle målinger, avhengig av test-unøyaktigheter.

Litteratur:

Beavo JA, Contini, M, Heaslip, R.J. Multiple cyclic nucleotide phosphodiesterases. Mol Pharmacol. 1994;46:399-405.

Spond J, Chapman R, Fine J, Jones H, Kreutner W, Kung TT, Minnicozzi M. Comparison of PDE 4 inhibitors, Rolipram and SB 207499 (Ariflo™), in a rat model of pulmonary neutrophilia. Pulmonary Pharmacology and Therapeudtics. 2001; 14:157-164.

Takeda N, Hasegawa S, Morita M, and Matsunaga T. Pica in rats is analogous to emesis: an animal model in emesis research. Pharmacology, Biochemistry and Behavior. 1991;45:817-821.

Takeda N, Hasegawa S, Morita M, Horii A, Uno A, Yamatodani A and Matsunaga T. Neuropharmacological mechanisms of emesis. I. Effects of antiemetic drugs on motion- and apomorphine-induced pica in rats. Meth Find Exp Clin Pharmacol. 1995; 17(9) 589-596.

Takeda N, Hasegawa S, Morita M, Horii A, Uno A, Yamatodani A and Matsunaga T. Neuropharmacological mechanisms of emesis. II. Effects of antiemetic drugs on cisplatin-induced pica in rats. Meth Find Exp Clin Pharmacol. 1995; 17(9) 647-652.

In vivo Forsøk 3. LPS- fremkaltpulmonal nøytrofili i rotter: effekt av intratrakealt administrerte PDE4- inhibitorer

Dette forsøket er en dyremodell av inflammasjon i lungen - spesifikt nøytrofili fremkalt av lipopolysakkarid (LPS) - og tillater undersøkelse av antatt hemning av slik nøytrofili (anti-inflammatorisk effekt) av intratrakealt (i.t.) administrerte PDE4-inhibitorer. PDE4-inhibitorene er fortrinnsvis i form av tørt pulver eller våt suspensjon. I.t. administrering er én modell for inhalert administrering, som tillater topisk levering til lungen.

Dyr: CD- (Sprague Dawley avledet) hannrotter levert av Charles River, Raleigh, NC, USA blir holdt i grupper av 5 rotter pr. bur, akklimatisert etter levering i minst 7 dager med underlag/redemateriale regelmessig endret, matet med SDS diett RI pelletert mat gitt ad Ub og tilført daglig endret pasteurisert dyrekvalitet drikkevann.

Anordning for tørrpulver- administrering: Engangs 3-veis kran mellom doseringsnål og sprøyte. En 3-veis steril kran (Vycon Ref 876,00) blir veiet, medikamentblandingen eller inhaleringskvalitet laktose (konstituent kontroll) blir deretter satt til kranen, kranen lukket for å forhindre tap av medikament og kranen blir veiet igjen for å bestemme vekten til medikament i kranen. Etter dosering blir kranen veiet igjen for å bestemme vekten til medikament som hadde forlatt kranen. Nålen, en Sigma Z21934-7 sprøytenål 19-gauge 152 mm (6 tommer) lang med "luer hub", blir kuttet til omtrent 132 mm (5,2 inches), en butt ende er laget for å forhindre at den skader rottens luftrør og nålen blir veiet før og etter medikament-levering for å bekrefte at intet medikament er beholdt i nålene etter dosering.

Anordning for administrering av våt suspensjon: Dette er lignende ovenfor, men en butt doseringsnål, hvis forover ende er svakt vinklet i forhold til nålaksen blir anvendt, med en fleksibel plast portex-kanyle innsatt i nålen.

Medikamenter og materialer: Lipopolysakkarid (LPS) (Serotype:0127:B8)

(L3129 Lot 61K4075) ble oppløst i fosfat-bufret saltløsning (PBS). PDE4-inhibitorer blir anvendt i størrelse-redusert (f.eks. mikronisert) form, for eksempel i henhold til Mikroniseringseksemplet gitt ovenfor. For tørrpulver-administrering av medikamentet, kan tørrpulverformuleringseksemplet gitt ovenfor, omfattende medikament og inhalerings-kvalitet laktose, anvendes. Inhalerings-kvalitet laktose vanligvis anvendt (Lot E98L4675 Batch 845120) har 10% finstoff (10% av materiale under 15 um partikkelstørrelse målt ved Malvern partikkelstørrelse).

Våte suspensjoner av medikamentet kan fremstilles ved tilsetning av det nødvendige volum av konstituent til medikamentet, hvor konstituenten som anvendes er en blanding av saltløsning/Tween (0,2% Tween 80). Den våte suspensjonen ble ultralydbehandlet i 10 minutter før anvendelse.

Fremstilling og dosering av PDE 4- inhibitor: Rotter blir anestetisert ved å plassere dyrene i et lukket Perspex-kammer og eksponere dem for en gassformig blanding av isoflouran (4,5 %), dinitrogenoksyd (3 liter.minutt"<1>) og oksygen (1 liter.minutt"1). Når de er anestetisert blir dyrene plassert på en rustfritt stål i.t. doserings-støtte bord. De blir plassert på ryggen med omtrent 35° vinkel. Et lys blir rettet mot utsiden av strupen for å belyse luftrøret. Munnen blir åpnet og åpningen av den øvre luftvei visualisert. Metoden varierer for våt suspensjon og tørt pulver administrering av PDE4-inhibitorer som følger: Dosering med en våt suspensjon: En portex-kanyle blir innført via en butt metall-doseringsnål som forsiktig var innsatt i rotte-luftrøret. Dyrene blir intratrakealt dosert med konstituent eller PDE4-inhibitor via doseringsnålen med en ny innvendig kanyle anvendt for hver forskjellige medikamentgruppe. Formulering blir langsomt (10 sekunder) dosert inn i luftrøret ved anvendelse av en sprøyte bundet til doseringsnålen.

Dosering med et tørt pulver: Treveis kran-anordning og nål blir innsatt i rotte-luftrøret opptil et forhånds-bestemt punkt etablert å være lokalisert omtrent 1 cm ovenfor den primære forgrening. En annen operatør holder nålen i den spesifiserte stilling mens 2x 4 ml luft blir levert gjennom tre-veis kranen ved å presse sprøytene (ideelt sammenfallende med dyrets innpusting), med målet å drive ut hele medikament-mengden fra kranen. Etter dosering blir nålen og kranen fjernet fra luftveiene og kranen blir lukket for å forhindre at eventuelt gjenværende medikament utgår fra kranen.

Etter dosering med enten våt suspensjon eller tørt pulver blir dyrene deretter fjernet fra bordet og observert konstant inntil de har kommet seg fra virkningene av anestesi. Dyrene blir returnert til oppholdsburene og gitt fri tilgang til mat og vann; de blir observert og eventuelle uvanlige adferdsendringer registrert.

Eksponering for LPS: Ca. 2 timer etter i.t. dosering med konstituent-kontroll eller PDE4-inhibitor, blir rottene plassert i lukkede Perspex-beholdere og eksponert for en aerosol av LPS (forstøver-konsentrasjon 150 ng.ml"<1>) i 15 minutter. Aerosol-preparater av LPS blir dannet med en forstøver (DeVilbiss, USA) og denne blir rettet inn i Perspex-eksponeringskammeret. Etter den 15-minutters LPS-eksponeringsperiode, blir dyrene returnert til oppholdsburene og gitt fri tilgang til både mat og vann.

[I en alternativ utførelsesform kan rottene eksponeres for LPS mindre enn 2 timer etter i.t. dosering. I en annen alternativ utførelsesform kan rottene eksponeres for LPS mer enn 2 timer (f.eks. ca. 4 eller ca. 6 timer) etter i.t. dosering med konstituent eller PDE4-inhibitor, for å teste hvorvidt eller ikke PDE4-inhibitoren har lang virkningsvarighet (som ikke er essensielt).]

Bronkoalveolær skylling: 4 timer etter LPS-eksponering blir dyrene avlivet med overdose av natrium-pentobarbiton (i.p.). Luftrøret blir kanylert med polypropylenslange og lungene skyllet (vasket ut) med 3 x 5 ml heparinisert (25 enheter.ml"<1>) fosfatbufret saltløsning (PBS).

Nøytrofll celletelling: De bronkoalveolære skyllings- (BAL) prøver blir sentrifugert ved 1300 rpm i 7 minutter. Supernatanten blir fjernet og den resulterende cellepellet resuspendert i 1 ml PBS. Et celle-objektglass av resuspensjonsvæsken blir fremstilt ved å plassere 100fxl av resuspendert BAL-væske i cytospinn-holdere og deretter spinne ved 5000 rpm i 5 minutter. Objektglassene får lufttørke og blir deretter merket med Leishmans-merking (20 minutter) for å tillate differensiell celletelling. De totale celler blir også tellet fra resuspensjonen. Fra disse to tellinger blir det totale antall nøytrofiler i BAL bestemt. For et mål for PDE4-inhibitor-fremkalt hemning av nøytrofili, blir en sammenligning av nøytrofil-tall hos rotter behandlet med konstituent og rotter behandlet med PDE4-inhibitorer utført.

Ved å variere dosen av PDE4-inhibitor anvendt i doseringstrinnet (f.eks. 0,2 eller 0,1 mg PDE4-inhibitor pr. kg kroppsvekt, ned til f.eks. 0,01 mg/kg) kan en doserespons-kurve dannes.

In vivo Forsøk 4. Evaluering av terapeutisk indeks for oralt administrert PDE 4-inhibitorer i bevisst fritte

1. 1 Materialer

De følgende materialer blir anvendt for disse undersøkelser:

PDE4-inhibitorer blir fremstilt for oral (p.o.) administrering ved oppløsning i et bestemt volum (1 ml) av aceton og deretter tilsetning av cremophor til 20% av det endelige volum. Aceton blir inndampet ved å sende en strøm av nitrogengass til løsningen. Når acetonet er fjernet blir løsningen fylt opp til endelig volum med destillert vann.

LPS blir oppløst i fosfatbufret saltløsning.

1. 2 Dyr

Hannfritter (Mustela Pulorius Furo, som veier 1-2 kg) blir transportert og får akklimatiseres i ikke mindre enn 7 dager. Dietten omfatter SDS diett C pelletert mat gitt ad Ub med Whiskers^<M>kattemat gitt 3 ganger pr. uke. Dyrene får tilført pasteurisert dyrekvalitet drikkevann endret daglig.

1. 3 Eksperimentell ( e) protokoll( er)

1. 3. 1 Dosering med PDE4- inhibitorer

PDE4 inhibitorer blir administrert oralt (p.o.), ved anvendelse av et dosevolum på 1 ml/kg.

Frittene blir fastet natten over men tillatt fri tilgang til vann. Dyrene blir oralt dosert med konstituent eller PDE 4-inhibitor ved anvendelse av en 15 cm doseringsnål som blir passert ned på baksiden av strupen inn i spiserøret. Etter dosering blir dyrene returnert til oppholdsburene utstyrt med perspex-dører for å tillate observasjon og gitt fri tilgang til vann. Dyrene blir konstant observert og eventuelle emetiske episoder (brekning og oppkast) eller adferdsendringer blir registrert. Dyrene får tilgang til mat 60 - 90 minutter etter p.o. dosering.

1. 3. 2 Eksponering for LPS

Tretti minutter etter oral dosering med forbindelse eller konstituent-kontroll blir frittene plassert i lukkede perspex-beholdere og eksponert for en aerosol av LPS (30 ug/ml) i 10 minutter. Aerosol-preparater av LPS blir dannet med en forstøver (DeVilbiss, USA) og denne blir rettet inn i perspex eksponeringskammeret. Etter en 10-minutters eksponeringsperiode blir dyrene returnert til oppholdsburene og gitt fri tilgang til vann og på et senere stadium, mat. Generell observasjon av dyrene fortsetter i en periode på minst 2,5 timer etter oral dosering. Alle emetiske episoder og adferdsendringer blir registrert.

1. 3. 3 Bronhoalveolær skylling og celletelling

Seks timer etter LPS-eksponering blir dyrene avlivet med overdose av natrium-pentobarbiton administrert intraperitonealt. Luftrøret blir deretter kanylert med polypropylenslange og lungene skyllet to ganger med 20 ml heparinisert (10 enheter/ml) fosfatbufret saltløsning (PBS). De bronkoalveolære skyllings- (BAL) prøver blir sentrifugert ved 1300 rpm i 7 minutter. Supernatanten blir fjernet og den resulterende cellepellet resuspendert i 1 ml PBS. Et celleutstryk av resuspendert væske blir gjort og merket med Leishmans merking for å tillate differensiell celletelling. Total celletelling blir utført ved anvendelse av den resterende resuspenderte prøve. Fra dette blir det totale antall av nøytrofiler i BAL-prøven bestemt.

1. 3. 4 Farmakodynamiske utlesninger

De følgende parametere blir registrert:

a) % hemning av LPS-fremkalt pulmonal nøytrofili for å bestemme dosen av PDE4-inhibitor som gir 50% hemning (D50). b) Emetiske episoder - antallet oppkast og brekninger blir tellet for å bestemme dosen av PDE4-inhibitor som gir en 20% forekomst av brekning (D20). c) En terapeutisk indeks (TI), ved anvendelse av dette forsøket, blir deretter beregnet for hver PDE4-inhibitor ved anvendelse av den følgende ligning:

Det er registrert at fritte terapeutisk indeks (TI) (D20/D50) beregnet ved anvendelse av dette in vivo Forsøk 4 ofte er vesentlig forskjellig fra og for eksempel ofte er vesentlig lavere enn, rotte TI (50/50) beregnet ved anvendelse av oral inflammasjon hos rotter og pica-spise-Forsøk 1+2.

Beregningen av TI ved anvendelse av den kjente PDE4-inhibitor roflumilast i dette forsøk 4 er: D20 for brekning = 0,46 mg/kg p.o., D50 for fritte-nøytrofili = 0,42 mg/kg p.o., Fritte TI = 1,1.

EKSEMPLER

De forskjellige aspekter ved oppfinnelsen vil nå bli beskrevet med referanse til de følgende eksemplerl dette avsnitt representerer "Mellomprodukter" synteser av mellomprodukt-forbindelser ment for anvendelse ved syntesen av "Eksemplene".

Forkortelser anvendt her:

BEMP 2 -t-buty limino-2 -diety lamino-1,3 -dimety lperhydro-1,3,2 -diazafosfazin CDI l,l'-karbonyldiimidazol

DBU 1,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-en

DCM diklormetan

DMF dimetylformamid

DMSO dimetylsulfoksyd

EtOAc etylacetat

Et20 dietyleter

EDC 1 -(3-dimet<y>lammopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydroklorid

h timer

HOBT hydroksybenzotriazol = 1-hydroksybenzotriazol

HATU 0-(7-azabenzotriazol-1 -yl)-N,N,N',N'-tetrametyluronium-heksafluorfosfat HBTU 0-(benzotriazol-1 -yl)-N,N,N',N'-tetrametyluronium-heksafluorfosfat HPLC Høyytelse væskekromatografi

LCMS væskekromatografi / massespektroskopi

MeCN acetonitril

MeOH metanol

NMR kjernemagnetisk resonans (hvor: s = singlett, d = dublett, t = triplett, q =

kvartett, dd = dublett av dubletter, m = multiplett, n H betyr at n er antallet

protoner)

DIPEA N,N-diisopropyletylamin (<ip>^NEt)

SPE fastfase-ekstraksjon

TBTU 0-(benzotriazol-1 -yl)-N,N,N',N'-tetrametyluronium-tetrafluorborat

THF Tetrahydrofuran

TRETretensjonstid (fra LCMS)

TLC tynnskiktskromatografi

Lawessons reagens 2,4-bis(4-metoksyfenyl)-l ,3-ditia-2,4-difosfetan-2,4-disulfid Burgess reagens (Metoksykarbonylsulfamoyl)trietylammoniumhydroksyd Romtemperatur = omgivelsestemperatur: denne er vanligvis i området ca. 15 til

ca. 25°C eller ca. 20 til ca. 25°C.

Maskinmetoder anvendt her:

LCMS ( væskekromatografi / massespektroskopi)

Waters ZQ massespektrometer som opererer i positiv ion elektrospray-modus, masse område 100-1000 amu.

UV bølgelengde: 215-330nM

Kolonne: 3,3cm x 4,6mm ID, 3^im ABZ+PLUS

Strømningshastighet: 3 ml/min

Injeksjonsvolum: 5|xl

Løsningsmiddel A: 95% acetonitril + 0,05% maursyre

Løsningsmiddel B: 0,1% maursyre +10 mmolar ammoniumacetat Gradient: 0% A/0,7min, 0-100% A/3,5min, 100% A/l,lmin, 100-0% A/0,2min

Massedirigert autoprep HPLC

Prep-kolonnen anvendt var en Supelcosil ABZplus (10 cm x 2,12 cm) (vanligvis 10 cm x 2,12 cm x 5fxm).

UV-bølgelengde: 200-320nM

Strømning: 20 ml/min

Injeksjonsvolum: 1 ml; eller mer foretrukket 0,5 ml

Løsningsmiddel A: 0,1% maursyre (eller 0,1% trifluoreddiksyre)

Løsningsmiddel B: 95% acetonitril + 5% av (maursyre eller trifluoreddiksyre); eller mer vanlig 99,95% acetonitril + 0,05% av (maursyre eller trifluoreddiksyre)

Gradient: 100% A/lmin, 100-80% A/9min, 80-1% A/3,5min, 1%A/I,4min, 1-100%A/0,lmin

Mikrobølge

CEM Discover Focused Microwave Synthesis system ble anvendt.

Mellomprodukter og Eksempler

Alle reagenser som ikke er detaljert angitt i teksten nedenfor er kommersielt tilgjengelige fra etablerte leverandører så som Sigma-Aldrich. Adressene til leverandører for noen av utgangsmaterialene nevnt i mellomproduktene og Eksemplene nedenfor eller forsøkene ovenfor er som følger:

- ABCR GmbH & CO. KG, P.O. Box 21 01 35, 76151 Karlsruhe, Germany

- Aceto Color Intermediates (katalognavn), Aceto Corporation, One Hollow Lane, Lake Success, NY, 11042-1215, USA - Acros Organics, A Division of Fisher Scientific Company, 500 American Road, Morris Plains, NJ 07950, USA

- Apin Chemicals Ltd., 82 C Milton Park, Abingdon, Oxon 0X14 4RY, UK

- Apollo Scientific Ltd., Unit IA, Bingswood Industrial Estate, Whaley Bridge,

Derbyshire SK23 7LY, UK

- Aldrich (katalognavn), Sigma-Aldrich Company Ltd., Dorset, UK, telefon: +44 1202 733114; Fax: +44 1202 715460; [email protected]; eller - Aldrich (katalognavn), Sigma-Aldrich Corp., P.O. Box 14508, St. Louis, MO 63178-9916, USA; telefon: 314-771-5765; fax: 314-771-5757; [email protected]; eller - Aldrich (katalognavn), Sigma-Aldrich Chemie Gmbh, Mtinchen, Tyskland; telefon: +49 89 6513 0; Fax: +49 89 6513 1169; [email protected]. - Alfa Aesar, A Johnson Matthey Company, 30 Bond Street, Ward Hill, MA 01835-8099, USA - Amersham Biosciences UK Ltd, Pollards Wood, Chalfont St Giles, Buckinghamshire HP8 4SP, UK

- Array Biopharma Inc., 1885 33rd Street, Boulder, CO 80301, USA

- AstaTech, Inc., 8301 Torresdale Ave., 19C, Philadelphia, PA 19136, USA

- Austin Chemical Company, Inc., 1565 Barclay Blvd., Buffalo Grove, IL 60089, USA

- Avocado Research, Shore Road, Port of Heysham Industrial Park, Heysham Lancashire LA3 2XY, UK

- Bayer AG, Business Group Basic and Fine Chemicals, D-51368 Leverkusen, Tyskland

- BerkUnivar plc, Berk House, P.O.Box 56, Basing View, Basingstoke, Hants RG21 2E6, UK

- Butt Park Ltd., Braysdown Works, Peasedown St. John, Bath BA2 8LL, UK

- Chemical Building Blocks (katalognavn), Ambinter, 46 quai Louis Bleriot, Paris, F-75016, Frankrike - ChemBridge Europe, 4 Clarks Hill Rise, Hampton Wood, Evesham, Worcestershire WR11 6FW, UK

- ChemService Inc., P.O.Box 3108, West Chester, PA 19381, USA

- Combi-Blocks Inc., 7949 Silverton Avenue, Suite 915, San Diego, CA 92126, USA

- Dynamit Nobel GmbH, Germany; også tilgjengelig fra: Saville Whittle Ltd (UK-agenter for Dynamit Nobel), Vickers Street, Manchester M40 8EF, UK

- E. Merck, Germany; eller E. Merck (Merck Ltd), Hunter Boulevard,

Magna Park, Lutterworth, Leicestershire LE 17 4XN, UK

- Esprit Chemical Company, Esprit Plaza, 7680 Matoaka Road, Sarasota, FL 34243, USA

- Exploratory Library (katalognavn), Ambinter, 46 quai Louis Bleriot, Paris, F-75016, Frankrike

- Fluka Chemie AG, Industriestrasse 25, P.O. Box 260, CH-9471 Buchs, Sveits

- Fluorochem Ltd., Wesley Street, Old Glossop, Derbyshire SKI 3 7RY, UK

- ICN Biomedicals, Inc., 3300 Hyland Avenue, Costa Mesa, CA 92626, USA

- Interchim Intermediates (catalogue name), Interchim, 213 Avenue Kennedy, BP 1140, Montlucon, Cedex, 03103, Frankrike

- Key Organics Ltd., 3, Highfield Indusrial Estate, Camelford, Cornwall PL32 9QZ, UK

- Lancaster Synthesis Ltd., Newgate, White Lund, Morecambe, Lancashire LA3 3DY, UK

- Manchester Organics Ltd., Unit 2, Ashville Industrial Estate, Sutton Weaver, Runcorn, Cheshire WA7 3PF, UK

- Matrix Scientific, P.O. Box 25067, Columbia, SC 29224-5067, USA

- Maybridge Chemical Company Ltd., Trevillett, Tintagel, Comwall PL34 OHW, UK

- Maybridge Reactive Intermediates (katalognavn), Maybridge Chemical Company Ltd., Trevillett, Tintagel, Cornwall PL34 OHW, UK - MicroChemistry Building Blocks (katalognavn), MicroChemistry-RadaPharma, Shosse Entusiastov 56, Moscow, 111123, Russland

- Miteni S.p.A., Via Mecenate 90, Milano, 20138, Italia

- Molecular Devices Corporation, Sunnydale, CA, USA

- N.D. Zelinsky Institute, Organic Chemistry, Leninsky prospect 47, 117913 Moskva B-334, Russland - Optimer Building Block (katalognavn), Array BioPharma, 3200 Walnut Street, Boulder, CO 80301, USA - Peakdale Molecular Ltd., Peakdale Science Park, Sheffield Road, Chapel-en-le-Frith, High Peak SK23 0PG, UK

- Pfaltz & Bauer, Inc., 172 East Aurora Street, Waterbury, CT 06708, USA

- Rare Chemicals (catalogue name), Rare Chemicals GmbH, Schulstrasse 6,24214 Gettorf, Tyskland - SALOR (catalogue name) (Sigma Aldrich Library of Rare Chemicals), Aldrich Chemical Company Inc, 1001 West Saint Paul Avenue, Milwaukee, WI53233, USA - Sigma (katalognavn), Sigma-Aldrich Corp., P.O. Box 14508, St. Louis, MO 63178-9916, USA; se "Aldrich" ovenfor for andre ikke-US-adresser og andre kontakt-detaljer

- SIGMA-RBI, One Strathmore Road, Natick, MA 01760-1312, USA

- Synchem OHG Heinrich-Plett-Strasse 40, Kassel, D-34132, Tyskland

- Syngene International Pvt Ltd, Hebbagodi, Hosur Road, Bangalore, India.

- TCI America, 9211 North Harborgate Street, Portland, OR 97203, USA

- TimTec Building Blocks A, TimTec, Inc., P O Box 8941, Newark, DE 19714-8941, USA

- Trans World Chemicals, Inc., 14674 Southlawn Lane, Rockville, MD 20850, USA

- Ubichem PLC, Mayflower Close, Chandlers Ford Industrial Estate, Eastleigh, Hampshire S053 4AR, UK - Ultrafine (UFC Ltd.), Synergy House, Guildhall Close, Manchester Science Park, Manchester M15 6SY,UK

Mellomprodukt 1: Etyl-4-klor-l-etyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylat Fremstilt fra kommersielt tilgjengelig 5-amino-l-etyl-pyrazol som beskrevet av G. Yu et. al. iJ. Med Chem., 2001, 44, 1025-1027: Mellomprodukt 2: Etyl-4-(cyklopentylamino)-l-etyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylat

Mellomprodukt 1 (0,051 g) og cyklopentylamin (0,019 g) ble suspendert i etanol (2 ml) og trietylamin (0,14 ml) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt under nitrogen og oppvarmet ved 80°C i 16 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble etanol fjernet ved inndampning under en strøm av nitrogen og residuet fordelt mellom DCM og vann. Det organiske laget ble fylt direkte på en SPE-patron (silika, 5 g) og eluert sekvensielt med (i) DCM, (ii) DCM : Et20 (2:1), (iii) DCM : Et20 (1:1), (iv) Et20, (v) EtOAc og (vi) MeOH. Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 2 (0,074 g). LCMS viste MH<+>= 303; TRET= 3,45 min

Mellomprodukt 3: 4-(cyklopentylamino)-l-etyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylsyre

En løsning av Mellomprodukt 2 (2,2 g) i etanol: vann (95:5,16,85 ml) ble behandlet med natriumhydroksyd (1,2 g) og oppvarmet ved 50°C i 16 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet gjenoppløst i vann (0,85 ml). Løsningen ble surgjort til pH4 ved anvendelse av eddiksyre og det resulterende hvite presipitat ble oppsamlet ved filtrering og tørket under vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 3 (1,9 g). LCMS viste MH<+>= 275; TRET = 2,65min Mellomrodukt 4: Nt<->acetvl-4-(cvkloentvlamino)-l-etvl-lH-<py>razolof3,4-b]pyridin-5-karbohydrazid

Mellomprodukt 3 (0,066 g), EDC (0,06 g) og HOBT (0,035 g) ble suspendert i DMF (2 ml) og blandingen ble omrørt i 15 minutter. Eddiksyrehydrazid (0,02 g) ble deretter tilsatt og blandingen ble omrørt under nitrogen i 18 timer. Løsningsmidler ble fjernet ved konsentrasjon i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og vann. Lagene ble separert og den organiske fasen ble vasket med mettet vandig natriumbikarbonat-løsning, deretter konsentrert og påført på en SPE-patron (aminopropyl, 1 g) som ble eluert med metanol. Konsentrasjon i vakuum ga Mellomprodukt 4 (0,043 g). LCMS viste MH<+>= 331; TRET= 2,38 min.

Mellomprodukt 5: 4-(cyklopentylamino)-l-etyl-NW(metylsttlfonyl)acetyll-lH-pyrazolo [3,4-b] pyridin-5-karbohydrazid

Mellomprodukt 3 (0,12 g), EDC (0,12 g) og HOBT (0,072 g) ble suspendert i DMF (2 ml) og omrørt i 15 minutter. Mellomprodukt 8 (0,082 g) ble deretter tilsatt og blandingen omrørt under nitrogen i 18 timer. Reaksjonen var ufullstendig så en ytterligere porsjon av Mellomprodukt 8 ble tilsatt (0,040 g) og omrøring fortsatt i ytterligere 66 timer. Løsningsmidler ble fjernet i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og vann. Den vandige fasen ble videre ekstrahert med DCM og de samlede organiske lag påført på en SPE-patron (silika, 5 g) som ble eluert sekvensielt med en gradient av Et20: MeOH (1:0, 9:1, 8:2, 7:3 og 6:4). Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 5 (0,154 g). LCMS viste MH<+>= 409; Tret= 2,42 min.

Mellomrodukt 6: Etyl-4-(4-fluorfenylamino)-l-etyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylat

Mellomprodukt 1 (0,051 g) og 4-fluoranilin (0,024 g) ble suspendert i etanol (2 ml) og trietylamin (0,14 ml) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt under nitrogen og oppvarmet ved 80°C i 16 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble etanol fjernet ved inndampning under en strøm av nitrogen og residuet fordelt mellom DCM og vann. Det organiske laget ble påført direkte på en SPE-patron (silika, 5 g) og eluert sekvensielt med; (i) DCM, (ii) DCM : Et20 (2:1), (iii) DCM : Et20 (1:1), (iv) Et20, (v) EtOAc, (vi) MeOH. Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 6 (0,077 g). LCMS viste MH<+>= 328; TRET= 3,36 min.

Mellomprodukt 7: 4-(cyklopentylamino)-l-etyl-N-[metyll-lH-pyrazolo[3.,4-b]pyridin-5-karbohydrazid

Mellomprodukt 3 (0,10 g) ble oppløst i DMF (2 ml) og behandlet med HBTU (0,136 g) og DIPEA (0,116 g). En separat porsjon av Mellomprodukt 3 (0,10 g) ble oppløst i DMF (2 ml) og behandlet med EDC (0,096 g) og HOBT (0,058 g). De resulterende suspensjoner ble begge omrørt under nitrogen i 15 min, deretter ble metylhydrazin (0,017 g) satt til hver og omrøring fortsatt under nitrogen i 18 timer. Blandingene ble uavhengig konsentrert i vakuum og residuene fordelt mellom DCM og vann. De organiske lag ble konsentrert og hvert påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g) som ble eluert med metanol, fulgt av 10% ammoniakk i metanol. De to porsjoner av Mellomprodukt 7 således oppnådd ble samlet (0,16 g). LCMS viste MH<+>= 303; Tret= 2,22 min.

Mellomprodukt 8: Metansulfonyl-eddiksyrehydrazid

Fremstilt fra kommersielt tilgjengelig etyl-metylsulfonylacetat som beskrevet av D. E. Bays et. al. i EP 50407 :

Mellomprodukt 9: Acetamidoksim

Kan fremstilles fra vandig hydroksylamin og acetonitril som beskrevet av J. J. Sahbari et. al. i WO 00/032565.

Mellomprodukt 10: 4-(cvklopentvlamino)-l-etvl-Nt-isobtttvrvl-lH-pyrazolof3.(4-b]pyridin-5-karbohydrazid

Mellomprodukt 3 (0,060 g), EDC (0,06 g) og HOBT (0,035 g) ble suspendert i DMF (2 ml) og omrørt under nitrogen i 15 minutter. Isosmørsyrehydrazid (0,027 g) ble deretter tilsatt og blandingen omrørt under nitrogen i 18 timer. Løsningsmidler ble fjernet i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og vann. Den organiske fasen ble vasket med mettet vandig natriumbikarbonat-Løsning, deretter konsentrert i vakuum og påført på en SPE-patron (aminopropyl, 1 g) som ble eluert med metanol. Konsentrasjon i vakuum ga Mellomprodukt 10. LCMS viste MH<+>= 359; Tret= 2,70 min. Mellomprodukt 11: 4-klor-l-etyl-lH-pyrazolo[3,4-blpyridin-5-karboksylsyre

En løsning av Mellomprodukt 1 (3,5 g) i dioksan (28 ml) ble behandlet med kaliumhydroksyd (6,3 g) som en løsning i vann (20 ml). Blandingen ble omrørt i 2 timer, deretter konsentrert i vakuum, surgjort til pH 3 med 2M vandig saltsyre og ekstrahert med etylacetat. Lagene ble separert, det organiske laget tørket over natriumsulfat, deretter konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 11 som et hvitt, fast stoff (2,4 g). LCMS viste MH<+>= 226; TRET = 2,62 min.

Mellomprodukt 12: 4-klor-l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-py razolo [3,4-b] pyridin

Mellomprodukt 11 (0,4 g) ble oppløst i tionylklorid (3 ml) og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp (95°C) med omrøring i 1 time. Etter avkjøling til romtemperatur ble overskudd av tionylklorid fjernet ved inndampning under redusert trykk og det resulterende faste stoffet oppløst i vannfri acetonitril (2 ml). Denne løsningen ble satt til en løsning av eddiksyrehydrazid (0,145 g) og diisopropyletylamin (0,465 ml) i vannfri acetonitril (2 ml) og blandingen omrørt i ytterligere 2 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet behandlet direkte med fosforoksyklorid (4 ml). Den resulterende løsningen ble omrørt og oppvarmet ved tilbakeløp (120°C) i 0,5 time, fikk deretter avkjøles og ble renset ved Biotage (silika, 40 g), under eluering med cykloheksan : EtOAc (1:1), hvilket ga Mellomprodukt 12 (0,32 g). LCMS viste MH<+>= 264; TRET= 2,55 min.

Mellomprodukt 13: 4-klor-l-etyl-5-(5-isopropyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-py razolo [3,4-b] pyridin

Mellomprodukt 11 (0,05 g) ble oppløst i tionylklorid (1 ml) og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp (95°C) med omrøring i 1 time. Etter avkjøling til romtemperatur ble overskudd av tionylklorid fjernet ved inndampning under redusert trykk og det resulterende faste stoffet oppløst i vannfri acetonitril (0,5 ml). Denne løsningen ble satt til en løsning av isosmørsyrehydrazid (0,025 g) og diisopropyletylamin (0,058 ml) i vannfri acetonitril (1 ml) og blandingen ble omrørt i ytterligere 1,5 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet behandlet direkte med fosforoksyklorid (2 ml). Den resulterende løsningen ble omrørt og oppvarmet ved tilbakeløp (120°C) i 2 timer, fikk deretter avkjøles og ble konsentrert i vakuum. Residuet ble påført på en SPE-patron (silika, 5 g) som ble eluert sekvensielt med en gradient av EtOAc : cykloheksanl (i) 1:16, (ii) 1:8, (iii) 1:4, (iv) 1:2, (v) 1:1 og (vi) 1:0. Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 13 (0,049 g). LCMS viste MH<+>= 292; TRET = 2,96 min.

Mellomprodukt 14: 5-(5-tert-btttyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-4-klor-l-etyl-lH-py razolo [3,4-b] pyridin

Mellomprodukt 11 (0,40 g) ble oppløst i tionylklorid (3 ml) og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp (95°C) med omrøring i 1 time. Etter avkjøling til romtemperatur ble overskudd av tionylklorid fjernet ved inndampning under redusert trykk og det resulterende faste stoffet oppløst i vannfri acetonitril (2 ml). Denne løsningen ble satt til en løsning av pivalinsyrehydrazid (0,228 g) og diisopropyletylamin (0,465 ml) i vannfri acetonitril (2 ml) og blandingen ble omrørt i ytterligere 1,5 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet behandlet direkte med fosforoksyklorid (5 ml). Den resulterende løsningen ble omrørt og oppvarmet ved tilbakeløp (120°C) i 1,5 timer, fikk deretter avkjøles, ble konsentrert i vakuum og renset ved Biotage (silika, 40 g), under eluering med petroleter (40/60): EtOAc (1:1), hvilket ga Mellomprodukt 14 (0,388 g). LCMS viste MFf = 306; TRET = 3,14 min.

Mellomprodukt 15: 4-klor-l-etyl-5-{5-[(metylsnlfonyl)metyl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl}-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin

Mellomprodukt 11 (0,68 g) ble oppløst i tionylklorid (4 ml) og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp (95°C) med omrøring i 1 time. Etter avkjøling til romtemperatur ble overskudd av tionylklorid fjernet ved inndampning under redusert trykk og det resulterende faste stoffet oppløst i vannfri acetonitril (3 ml). Denne løsningen ble satt dråpevis over 5 minutter til en løsning av Mellomprodukt 8 (0,504 g) og diisopropyletylamin (0,787 ml) i vannfri acetonitril (12 ml) og blandingen ble deretter omrørt i ytterligere 1 time. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet behandlet direkte med fosforoksyklorid (8 ml). Den resulterende løsningen ble omrørt og oppvarmet ved tilbakeløp (120°C) i 2,5 timer, fikk deretter avkjøles, ble konsentrert i vakuum og renset ved Biotage (silika, 40 g), under eluering først med petroleter (40/60) : EtOAc (2:1), deretter med petroleter (40/60): EtOAc (1:1). Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet, konsentrert i vakuum og residuet ytterligere renset ved utgnidning med dietyleter, hvilket ga Mellomprodukt 15 (0,41 g). LCMS viste MH<+>= 342; Tret = 2,46 min.

Mellomprodukt 16: Etyl-l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylat

Mellomprodukt 1 (0,20 g) og trietylamin (0,55 ml) ble suspendert i etanol (8 ml) og

4-aminotetrahydropyran (Mellomprodukt 21, 0,088 g) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt under nitrogen, oppvarmet ved 80°C i 16 timer, deretter konsentrert i vakuum. Residuet ble fordelt mellom DCM og vann. Lagene ble separert og det organiske laget ble påført direkte på en SPE-patron (silika, 5 g) som ble eluert sekvensielt med (i) DCM, (ii) DCM

: Et20 (2:1), (iii) DCM : Et20 (1:1), (iv) Et20 og (v) EtOAc. Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 16 (0,21 g). LCMS viste MH<+>= 319; Tret= 2,93 min.

Mellomprodukt 17: l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b] pyridin-5-karb oksylsyr e

En løsning av Mellomprodukt 16 (0,21 g) i etanol: vann (95:5,10 ml) ble behandlet med natriumhydroksyd (0,12 g). Blandingen ble oppvarmet ved 50°C i 8 timer, deretter konsentrert i vakuum, oppløst i vann og surgjort til pH 4 med eddiksyre. Det resulterende hvite, faste stoff ble fjernet ved filtrering og tørket under vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 17 som et gråhvitt, fast stoff (0,16 g). LCMS viste MH<+>= 291; TRET= 2,11 min.

En alternative fremstilling av Mellomprodukt 17 er som følger:

En løsning av Mellomprodukt 16 (37,8 g) i etanol: vann (4:1, 375 ml) ble behandlet med natriumhydroksyd (18,9 g). Blandingen ble oppvarmet ved 50 °C i 5 timer, deretter konsentrert i vakuum, oppløst i vann og surgjort til pH 2 med vandig saltsyre (2M). Det resulterende hvite, faste stoff ble fjernet ved filtrering og tørket under vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 17 som et gråhvitt, fast stoff (29,65 g). LCMS viste MH<+>= 291; Tret = 2,17 min.

Mellomprodukt 18: Tert-butyl-2-{[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]karbonyl}hydrazinkarboksylat

En suspensjon av Mellomprodukt 17 (1,48 g), EDC (1,34 g) og HOBT (0,83 g) i DMF (20 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 30min. t-butyl-karbazat (0,68 g) ble deretter tilsatt og omrøring fortsatt under nitrogen i ytterligere 66 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet delt opp i to porsjoner for rensning. Hver porsjon ble påført på en SPE-patron (aminopropyl, 10 g) som ble eluert med metanol og de samlede eluenter ble konsentrert i vakuum. Ytterligere rensning ble utført ved Biotage (silika, 40 g), under eluering med cykloheksan : etylacetat (1:4). Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 18 (1,39 g).

LCMS viste MH<+>= 405; Tret= 2,64 min.

Mellomprodukt 19: l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karbohydrazid-dihydroklorid

Mellomprodukt 18 (1,39 g) ble behandlet med en 4M løsning av saltsyre i dioksan (8 ml) og blandingen omrørt under nitrogen i 1 time. Konsentrasjon i vakuum ga Mellomprodukt 19 som et hvitt, fast stoff (1,17 g). LCMS viste MH<+>= 305; TRET = 2,04 min.

Mellomprodukt 20: Nt<->(cyklopropylkarbonyl)-l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karbohydrazid

En løsning av Mellomprodukt 19 (0,045 g) i THF (2 ml) ble behandlet med DIPEA (0,045 ml), deretter med cyklopropylkarbonylklorid (0,013 g) og omrørt ved romtemperatur i 16 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet fordelt mellom diklormetan og vann. Lagene ble separert og det organiske laget konsentrert i vakuum, deretter påført på en SPE-patron (aminopropyl, 1 g). Kolonnen ble eluert med metanol, hvilket ga Mellomprodukt 20 som et hvitt, fast stoff (0,02 g). LCMS viste MlT = 373; TRET= 2,15 min.

Mellomprodukt 21: 4-aminotetrahydropyran

Kommersielt tilgjengelig fra Combi-Blocks Inc., 7949 Silverton Avenue, Suite 915, San Diego, CA 92126. CAS (Chemical Abstracts) Registreringsnummer 38041-19-9.

Mellomprodukt 21A: Tetrahydro-2H-pyran-4-amin-hydroklorid = 4-aminotetrahydropyran-hydroklorid

Trinn 1: N, N- dibenzyltetrahydro- 2H- pyran- 4- amin

Dibenzylamin (34,5 g) og eddiksyre (6,7 ml) ble satt til en omrørt løsning av tetrahydro-4H-pyran-4-on (16,4 g, kommersielt tilgjengelig fra f.eks. Aldrich) i diklormetan (260 ml) ved 0°C til 5°C. Etter 2,5 timer ved 0°C til 5°C ble natrium-triacetoksyborhydrid

(38,9 g) tilsatt porsjonsvis og blandingen fikk oppvarmes til romtemperatur. Etter

omrøring ved romtemperatur natten over ble reaksjonsblandingen vasket suksessivt med 2M natriumhydroksyd (200 ml og 50 ml), vann (2 x 50 ml) og saltvann (50 ml), deretter tørket og inndampet, hvilket ga en gul olje (45 g). Denne oljen ble omrørt med metanol (50 ml) ved 4°C i 30 min, hvilket ga produktet som et hvitt, fast stoff (21,5 g). LCMS viste MH<+=>282; TRET= 1,98 min.

Trinn 2: Tetrahydro- 2H- pyran- 4- amin- hydroklorid

AyV-dibenzyltetrahydro-2/f-pyarn-4-amin (20,5 g) ble oppløst i etanol (210 ml) og hydrogenert over 10% palladium på karbon-katalysator (4 g) ved 7 kg/cm<2>i 72 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble filtrert og filtratet ble regulert til pH 1 med 2M hydrogenklorid i dietyleter. Inndampning av løsningsmidler ga et fast stoff som ble utgnidd med dietyleter, hvilket ga produktet som et hvitt, fast stoff (9,23 g). ^H NMR (400MHz, d6-DMSO, 8 ppm) 8,24 (br. s, 3H), 3,86 (dd, 12, 4Hz, 2H), 3,31 (dt, 2, 12Hz, 2H), 3,20 (m, 1H), 1,84 (m, 2H), 1,55 (dq, 4, 12Hz, 2H).

Mellomrodukt 22: N '-hydroksy-2-metoksyetanimidamid

En løsning av metoksyacetonitril (12,26 g) i etanol (220 ml) ble behandlet med hydroksylamin-hydroklorid (11,95 g) fulgt av kaliumkarbonat (22,9 g) og oppvarmet under tilbakeløp i 2 dager. Blandingen ble konsentrert i vakuum, deretter fordelt mellom etylacetat og vann. Det organiske laget ble konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 22 som en fargeløs væske (7,6 g).<]>H NMR (CDC13) 7,16 (3H, s), 7,67 (s, 2H), 9,32 (brs, 2H), 13,08 (1H, s).

Mellomprodukt 23: 2-(dimetylamino)-N '-hydroksyetanimidamid

Kan fremstilles på analog måte som Mellomprodukt 9, ved å starte fra dimetylamino-acetonitril.

Mellomprodukt 24: N'-hydroksy-2-morfolin-4-yletanimidamid

Kan fremstilles på analog måte som Mellomprodukt 9, ved å starte fra morfolino-acetonitril (selv kommersielt tilgjengelig fra TCI America, 9211 North Harborgate Street, Portland, OR 97203, USA).

Mellomprodukt 25: l-acetyl-4-aminopiperidin-hydroklorid Fremstilt fra kommersielt tilgjengelig Nl-benzyl-4-aminopiperidin som beskrevet av Yamada et. al. I WO 00/42011: Mellomrodukt 26: 3-metyloksetan-3-karboksylsyre

Kan fremstilles ved oksydasjon av 3-metyl-3-oksetanmetanol (kommersielt tilgjengelig fra f.eks. Fluka, CAS (Chemical Abstracts) Registreringsnummer 3143-02-0) i henhold til metoden beskrevet av H. Fiege et. al. i DE3618142.

Mellomprodukt 27: (4-metylpiperazin-l-yl)eddiksyre

Kommersielt tilgjengelig fra ChemPacific USA Sales Marketing and Research Center, 6200 Freeport Centre, Baltimore, MD 21224, USA (CAS Registreringsnummer 54699-92-2).

Mellomprodukt 28: (Tsopropylamino)(okso)eddiksyre

Kommersielt tilgjengelig fra Austin Chemical Company, Inc., 1565 Barclay Blvd., Buffalo Grove, IL 60089, USA. CAS (Chemical Abstracts) Registreirngsnummer 3338-22-5.

Mellomprodukt 29:1-metyl-5-oksopyrrolidin-3-karboksylsyre

Kommersielt tilgjengelig fra MicroChemistry-RadaPharma, Shosse Entusiastov 56, Moskva 111123, Russland. CAS (Chemical Abstracts) Registreirngsnummer 42346-68-9.

Mellomprodukt 30: Tetrahydro-2H-pyran-4-karboksylsyre

Kommersielt tilgjengelig fra Combi-Blocks Inc., 7949 Silverton Avenue, Suite 915, San Diego, CA 92126, USA. CAS (Chemical Abstracts) Registreringsnummer 5337-03-1.

Mellomprodukt 31: Morfolin-4-yleddiksyre

Kan fremstilles fra etylbromacetat som beskrevet av Z. Dega-Szafran et. al. i J. Molecular Structure, 2001, 560, 261-273.

Mellomprodukt 32: Tert-butoksyeddiksyre

En suspensjon av natrium-t-butoksyd (24,1 g) i t-butanol (150 ml) ble avkjølt i et vannbad og behandlet dråpevis med en løsning av kloreddiksyre (11,4 g) i t-butanol (30 ml). Blandingen ble oppvarmet under tilbakeløp i 5 timer og deretter konsentrert i vakuum. Det resulterende hvite, faste stoff ble tørket i vakuum i 16 timer, deretter ble vann (100 ml) tilsatt og blandingen ble filtrert. Filtratet ble behandlet med dietyleter (150 ml), deretter avkjølt i et isbad, omrørt og surgjort til pH 1 med 2N svovelsyre. Lagene ble separert og det vandige laget ble videre ekstrahert med dietyleter. De samlede organiske ekstrakter ble tørket (MgSCu) og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 32 (11,1 g).<]>H NMR (400MHz, CDC13,8 ppm) 1,27 (9H, s), 4,04 (2H, s).

Mellomprodukt 33: Metyl-(25<r>>-2-({[l-etyl-4-(tetrahydro-2/y<->pyran-4-ylamino)-l/<y->pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yl]karbonyl}amino)-3-hydroksypropanoat

Reaksjonsskjema:

Mellomprodukt 17 (0,1 g, 0,34 mmol), EDC (0,066 g, 0,34 mmol) og HOBT (0,05 g, 0,37 mmol) ble suspendert i DMF (2 ml) og omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 15 minutter. L-Serin-metylester-hydroklorid (0,054 g, 0,34 mmol) og trietylamin (0,036 g, 0,36 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 18 timer. Løsningsmidler ble fjernet i vakuum og residuet ble fordelt mellom DCM og vann. Det organiske laget ble konsentrert i vakuum og påført på en SPE-patron (aminopropyl, 5 g), som ble eluert med metanol. Konsentrasjon i vakuum ga et urent residuum som ble ytterligere renset ved SPE-patron (silika, 5 g), under eluering med etylacetat fulgt av 5% metanol/etylacetat. De ønskede fraksjoner ble konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 33 (0,055 g). LCMS viste MH<+>= 393; Tret= 2,22 min.

Mellomprodukt 34: l-etyl-A^2-hydroksy-l-metyletyl)-4-(tetrahydro-2/7-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo [3,4-6] pyridin-5-karboksamid

Mellomprodukt 17 (0,1 g, 0,34 mmol), EDC (0,066 g, 0,34 mmol) og HOBT (0,05 g, 0,37 mmol) ble suspendert i DMF (2 ml) og omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 15 min. 2-aminopropan-l-ol (0,026 g, 0,34 mmol) og trietylamin (0,036 g, 0,36 mmol) ble tilsatt og blandingen ble omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 6 timer. Løsningsmidler ble fjernet i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og vann. Det organiske laget ble konsentrert og påført på en SPE-patron (aminopropyl, 5 g), som ble eluert med metanol. Konsentrasjon i vakuum ga Mellomprodukt 34 (0,095 g). LCMS viste MH<+>= 348, TREt=2,15 min.

Mellomprodukt 35: Etyl-4-etoksy-l-etyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylat

Natrium (0,55 g, 23,7 mmol) ble satt porsjonsvis til vannfri etanol (25 ml) ved 20°C under en atmosfære av nitrogen. Etter omrøring i 1 time ble løsningen satt til Mellomprodukt 1 (4,622 g, 18,22 mmol) og reaksjonsblandingen oppvarmet ved tilbakeløp i 2 timer. Blandingen ble inndampet i vakuum og residuet fordelt mellom diklormetan og vann. Den organiske fasen ble vasket med saltvann, tørket (Na2SC*4) og inndampet i vakuum. Residuet ble renset på SPE-patroner (silika, 4 x 20 g) under eluering med diklormetan, etylacetat:petroleter (1:4,1:2 deretter 1:1) fulgt av etylacetat). Passende fraksjoner ble samlet og inndampet i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 35 som hvitt fast stoff (4,33 g). LCMS viste MH<+>= 264, TRET=2,77 min.

Mellomprodukt 36: Etyl-4-etoksy-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-karboksylat

En blanding av Mellomprodukt 35 (1,0 g, 3,8 mmol) og N-bromsuccinimid (1,49 g, 8,4 mmol) i karbontetraklorid (35 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt i et isbad og fellingen filtrert. Filtratet ble konsentrert i vakuum og residuet oppløst i tetrahydrofuran (12,5 ml). Vann (3,5 ml) og mettet natriumkarbonat-løsning (3 ml) ble tilsatt og blandingen ble omrørt ved 20°C i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med vann og ekstrahert med etylacetat. De samlede organiske faser ble tørket (Na2SC>4) og inndampet i vakuum. Residuet ble renset på en SPE-patron (silika, 20 g) under eluering med diklormetan, kloroform, deretter kloroform:metanol (99:1,49:1,19:1 deretter 9:1). Passende fraksjoner ble samlet og inndampet i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 36 som et gråhvitt, fast stoff (0,45 g). LCMS viste MH<+>= 236, Tret=2,46 min.

Mellomprodukt 37: Etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b] pyridin-5-karb oksylat

Metode 1: Mellomprodukt 36 (0,035 g) ble plassert i en Reactivial™ og behandlet med 4-aminotetrahydropyran (0,05 ml). Blandingen ble oppvarmet ved 90°C i 1,5 timer, fikk deretter avkjøles til romtemperatur og ble fordelt mellom kloroform (2 ml) og vann (1 ml). Lagene ble separert og den organiske fasen ble konsentrert. Råproduktet ble renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Mellomprodukt 37 som et gråhvitt, fast stoff (0,011 g). LCMS viste MH<+=>291; Tret = 2,08 min.

Alternativ Metode 2: Mellomprodukt 36 (2 g) ble suspendert i 4-aminotetrahydropyran (2 g) og blandingen ble oppvarmet ved 90°C i 6 timer. Den gjenværende blanding fikk avkjøles til romtemperatur og ble fordelt mellom kloroform (50 ml) og vann (50 ml). Fasene ble separert og den organiske fasen ble inndampet til tørrhet. Residuet ble utgnidd med Et20 (30 ml) og det uoppløselige faste stoff ble oppsamlet og tørket, hvilket ga Mellomprodukt 37 som et kremfarget, fast stoff (2,24 g). LCMS viste MH<+=>291; Tret= 2,19 min.

Mellomprodukt 38: Etyl-l-n-propyl-4-(tetrahydro-2/7-pyran-4-ylamino)-l//- py razolo [3,4-6] pyridin-5-karb oksylat

Natriumhydrid (0,067 g, 60% dispersjon i olje) ble satt til en omrørt løsning av Mellomprodukt 37 (0,47 g) i DMF (19 ml), fulgt av n-propyljodid (0,17 ml). Blandingen ble omrørt ved 23°C i 16 timer, deretter konsentrert, fortynnet med kloroform (30 ml) og vasket med 1:1 vann:saltvann løsning (30 ml), separert og det organiske laget konsentrert. Residuet ble renset på en SPE-patron (silika, 10 g) under eluering med 10 ml volumer av diklormetan, 1:1 dietyleter: cykloheksan og dietyleter. De samlede 1:1 dietyleter: cykloheksan og dietyleter fraksjoner ble konsentrert, hvilket ga Mellomprodukt 38 som en klar gummi (0,23 g). LCMS viste MH<+>= 333; TREt= 3,14 min.

Mellomprodukt 39: l-n-propyl-4-(tetrahydro-2/y<->pyran-4-ylamino)-l//- py razolo [3,4-6] pyridin-5-karb oksylsyre

2M natriumhydroksyd-løsning (0,7 ml) ble satt til en omrørt suspensjon av Mellomprodukt 38 (0,23 g) i etanol (5 ml) og vann (1,5 ml). Etter omrøring natten over ved romtemperatur ble en ytterligere mengde av 2M natriumhydroksyd-løsning (0,7 ml) tilsatt og reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 43<*>C i 2,5 timer. Reaksjonsløsningen ble konsentrert, fortynnet med vann (5 ml) og surgjort med 2M saltsyre. Det resulterende utfelte stoff ble oppsamlet ved filtrering, vasket med vann og tørket, hvilket ga Mellomprodukt 39 som et hvitt, fast stoff (0,14 g). LCMS viste MH<+>= 305; TRET= 2,42 min. Mellomprodukt 40: Nf<->acetyl-l-n-propyl-4-(tetrahydro-2/y<->pyran-4-ylamino)-l//- pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-karbohydrazid

Mellomprodukt 40 kan fremstilles fra Mellomprodukt 39 på en lignende måte som fremgangsmåten beskrevet for Mellomprodukt 4, for eksempel ved anvendelse av lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler.

Mellomprodukt 41: Etyl-4-[(l-acetyl-4-piperidmyl)amino]-l-etyl-l//-pyrazolo[3,4-b] pyridin-5-karboksylat

Mellomprodukt 1 (0,079 g, 0,56 mmol), Mellomprodukt 25 (0,129 g, 0,51 mmol) og diisopropyletylamin (0,45 ml, 2,55 mmol) i acetonitril (2 ml) ble oppvarmet ved 85°C i 36 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og vann. Fasene ble separert ved anvendelse av en hydrofob fritte (Whatman). Den organiske fasen ble inndampet i vakuum og residuet påført på en SPE-patron (silika, 5 g). Patronen ble eluert med EtOAc og deretter DCM / MeOH (1:1). Fraksjoner inneholdende det ønskede materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 41 (0,1 g). LCMS viste MH<+>= 360; TRET = 2,63 min.

Mellomrodukt 42: 1-etyl-iV- [(lÆ)-2-hydroksy-l-fenyletyl]-4-(tetrahydro-2Z/- pyran-4-ylamino)-l/f-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-karboksamid

Mellomprodukt 17 (0,25 g, 0,86 mmol), EDC (0,23 g, 1,2 mmol) og HOBT (0,139 g, 1,03 mmol) ble suspendert i DMF (5 ml) og suspensjonen ble omrørt ved romtemperatur. Etter 25 min ble (2Æ)-2-amino-2-fenyletanol (0,13 g, 0,95 mmol, kommersielt tilgjengelig fra Aldrich) tilsatt og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 20 timer. Løsningsmidler ble fjernet i vakuum og residuet ble oppløst i DCM (50 ml) og vasket suksessivt med vann (25 ml) og 5% natriumhydrogenkarbonat-løsning (25 ml). Det organiske laget ble tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i diklormetan (5 ml) og påført på en SPE-patron (silika, 10 g), som ble eluert med en gradient av etylacetat - petroleter (1:2, 1:1 og 1:0). Fraksjoner inneholdende det ønskede materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 42 som et hvitt skum (0,318 g). LCMS viste MH<+>= 410; Tret= 2,55 min.

Mellomrodukt 43: 1-etyl-iV- [(15)-2-hydroksy-l-fenyletyl]-4-(tetrahydro-2Æ-pyran-4-ylamino)-l/f-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-karboksamid

Mellomprodukt 43 ble fremstilt fra Mellomprodukt 17 og (25)-2-amino-2-fenyletanol (kommersielt tilgjengelig fra Lancaster Synthesis) ved anvendelse av en analog metode som den for Mellomprodukt 42. LCMS viste MH<+>= 410; TRET= 2,55 min.

Mellomrodukt 44 1-etyl-iV- [(15)-2-hydroksy-l-(fenylmetyl)etyl] -4-(tetrahydro-2/7-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo [3,4-6] pyridin-5-karboksamid

Mellomprodukt 44 ble fremstilt fra Mellomprodukt 17 og (25)-2-amino-3-fenyl-l-propanol (kommersielt tilgjengelig fra Aldrich) ved anvendelse av en analog metode som den for Mellomprodukt 42. LCMS viste MH<+>= 424; TREt = 2,60 min.

Mellomprodukt 45: 1-etyl-iV-[( IR)-2-hydroksy-l-(fenylmetyl)etyl]-4-(tetrahydro-2/y-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo [3,4-6] pyridin-5-karboksamid

Mellomprodukt 45 ble fremstilt fra Mellomprodukt 17 og (2Æ)-2-amino-3-fenyl-l-propanol (kommersielt tilgjengelig fra Aldrich) ved anvendelse av en analog metode som den for Mellomprodukt 42. LCMS viste MH<+>= 424; TRET= 2,59 min.

Mellomprodukt 46: l-etyl-A'-[(15,2if)-2-hydroksy-l-fenylpropyl]-4-(tetrahydro-2/7-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo [3,4-6] pyridin-5-karboksamid

Mellomprodukt 46 ble fremstilt fra Mellomprodukt 17 og (lS,2Æ)-l-amino-l-fenyl-2-propanol-hydroklorid (kommersielt tilgjengelig fra Arch Corporation, 100 Jersey Avenue, Building D, New Brunswick, NJ 08901, USA) ved anvendelse av en analog metode som den for Mellomprodukt 42. LCMS viste MH<+>= 424; TREt= 2,58 min.

Mellomrodukt 47: l-etyl-iV-[(2Æ)-2-hydroksy-2-fenyletyl]-4-(tetrahydro-2//- pyran-4-ylammo)-l/7-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-karboksamid

Mellomprodukt 47 ble fremstilt fra Mellomprodukt 17 og (l/?)-2-amino-l-fenyletanol (kommersielt tilgjengelig fra Aldrich) ved anvendelse av en analog metode som den for Mellomprodukt 42. LCMS viste MH<+>= 410; TW = 2,62 min.

Mellomrodukt 48: l-etyl-iV-[(25)-2-hydroksy-2-fenyletyl]-4-(tetrahydro-2//- pyran-4-ylamino)-lif-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-karboksamid

Mellomprodukt 48 ble fremstilt fra Mellomprodukt 17 og (lS)-2-amino-l-fenyletanol (kommersielt tilgjengelig fra Fluka) ved anvendelse av en analog metode som den for Mellomprodukt 42. LCMS viste MFf = 410; Tret = 2,62 min.

Mellomrodukt 49: l-etyl-Af-(2-hydroksy-l,l-dimetyletyl)-4-(tetrahydro-2//- pyran-4-ylammo)-l/7-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-karboksamid

Mellomprodukt 49 ble fremstilt fra Mellomprodukt 17 og 2-amino-2-metyl-l-propanol (kommersielt tilgjengelig fra Aldrich) ved anvendelse av en analog metode som den for Mellomprodukt 42. LCMS viste MH<+>= 362; Tret= 2,28 min.

Mellomprodukt 50:7V-metyltetrahydro-2//-pyran-4-amin

Kan fremstilles fra tetrahydro-4H-pyran-4-on (kommersielt tilgjengelig fra f.eks. Sigma Aldich; CAS (Chemical Abstracts) Registreringsnummer 29943-42-8) i henhold til metoden beskrevet av H.Hashimoto et al. i Organic Process Research and Development 2002, 6, 70.

Mellomprodukt 51: Etyl-l-etyl-4-[metyl(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)amino]-l//- py razolo [3,4-6] pyridin-5-karb oksylat

Mellomprodukt 1 (1,2 g, 4,76 mmol), Mellomprodukt 50 (0,79 g, 5,2 mmol) og diisopropyletylamin (4 ml, 24 mmol) i MeCN (8 ml) ble oppvarmet ved 70°C i 24

timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og vann. Den organiske fasen ble konsentrert i vakuum og residuet kromatografert på silika (50

g) under eluering med cykloheksan:etylacetat (2:1 fulgt av 1:1 deretter 1:2). Passende fraksjoner ble samlet og inndampet, hvilket ga Mellomprodukt 51 som en brun olje

(1,21 g). LCMS viste MH<+>= 334; Tret = 2,61 min.

Mellomprodukt 52: l-etyl-4- [metyl(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)amino]- 1H-py razolo [3,4-6] pyridin-5-karb oksylsyre

Natriumhydroksyd (0,43 g, 10,8 mmol) ble satt til en løsning av Mellomprodukt 51 i etanol (10 ml, 95%). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 50°C i 18 timer.

Løsningsmidlet ble avdampet i vakuum og residuet oppløst i vann og surgjort til pH 3 ved tilsetning av vandig saltsyre. Løsningen ble ekstrahert med DCM. Den organiske fasen ble separert ved anvendelse av en hydrofob fritte (Whatman PTFE Folter Media med polypropylen-kasse 5(*M porestørrelse) og løsningsmidlet inndampet i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 52 som et hvitt, fast stoff (0,65 g). LCMS viste MH<+>= 305; Tret= 1,97 min.

Mellomprodukt 53: Nt<->acetyl-l-etyl-4-fmetyl(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)aminol-lH-pyrazolo [3,4-b] py ridin-5-karbohydrazid

Mellomprodukt 53 ble fremstilt fra Mellomprodukt 52 ved anvendelse av en analog metode som den for Mellomprodukt 4. LCMS viste MH<+>= 361; Tret= 1,91 min.

Mellomprodukt 54:fra/is-4-aminocykloheksanol

Kommersielt tilgjengelig fra f.eks. Acros. CAS (Chemical Abstracts) Registreringsnummer 27489-62-9.

Mellomprodukt 55: Tetrahydro-2/f-pyran-3-amin-hydroklorid

Fremstilt som beskrevet i Anales De Quimica, 1988, 84, 148.

Mellomprodukt 56: 4-aminocykloheksanon-hydroklorid

En løsning av hydrogenklorid i dioksan (0,5 ml, 2,0 mmol, 4M) ble satt til en omrørt løsning av ter^butyl-4-oksocykloheksylkarbamat (0,043 g, 0,20 mmol, kommersielt tilgjengelig fra Astatech Inc., Philadelphia, USA) i dioksan (0,5 ml) og blandingen ble omrørt ved romtemperatur. Etter 1 time ble reaksjonsblandingen inndampet, hvilket ga Mellomprodukt 56 som et kremfarget, fast stoff (34 mg).<!>H NMR (400MHz i d6-DMSO, 27°C, 8 ppm) 8,09 (br. s, 3H), 3,51 (tt, 11, 3,5Hz, 1H), 2,45 (m, 2H, delvis utydelig), 2,29 (m, 2H), 2,16 (m, 2H), 1,76 (m, 2H).

Mellomprodukt 57: iV-propyltetrahydro-2//-pyran-4-amiii

Kan fremstilles fra tetrahydro-4H-pyran-4-on (kommersielt tilgjengelig fra f.eks. Sigma Aldrich CAS 29943-42-8) som beskrevet av C. Zagar i WO 99/07702.

Mellomprodukt 58: Etyl-4-klor-l-etyl-6-metyl-l/f-pyrazolo[3,4-61pyridiii-5-karboksylat

En blanding av 5-amino-l-etylpyrazol (1,614 g, 14,5 mmol) og dietyl-2-(l-etoksyetyliden)malonat (3,68 g, 16,0 mmol, som beskrevet av P.P.T. Sah, J. Amer. Chem. Soc, 1931, 53, 1836) ble oppvarmet ved lSO^C under Dean Stark betingelser i 5 timer. Fosforoksyklorid (25 ml) ble forsiktig satt til blandingen og den resulterende løsningen ble oppvarmet ved DO^C under tilbakeløp i 18 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum, deretter ble den resterende oljen forsiktig tilsatt, med avkjøling, til vann (100 ml). Den resulterende blandingen ble ekstrahert med DCM (3x100 ml) og de samlede organiske ekstrakter ble tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Den gjenværende oljen ble renset ved Biotage kromatografi (silika, 90 g) under eluering med etylacetat-petrol (1:19). Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 58 (1,15 g). LCMS viste MH<+>= 268; Tret= 3,18 min.

Mellomprodukt 59: Etyl-l-etyl-6-metyl-4-(tetrahydro-2/f-pyran-4-ylamiiio)-l//- py razolo [3,4-6] pyridin-5-karb oksylat

4-aminotetrahydropyran-hydroklorid (Mellomprodukt 21, 0,413 g, 3,0 mmol) ble satt til en blanding av Mellomprodukt 58 (0,268 g, 1,0 mmol) og N,N-diisopropyletylamin (0,87 ml, 5,0 mmol) i acetonitril (3 ml). Den resulterende blandingen ble oppvarmet ved 85<*>C i 24 timer. Flyktige stoffer ble fjernet i vakuum og residuet ble oppløst i kloroform (1,5 ml) og påført på en SPE-patron (silika, 5 g). Patronen ble eluert suksessivt med Et20, EtOAc og EtOAc-MeOH (9/1). Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga det ønskede produkt forurenset med utgangsmateriale (Mellomprodukt 51). Ytterligere rensning ved anvendelse av en SPE-patron (silika, 5 g) under eluering med etylacetat-cykloheksan (1:3) ga Mellomprodukt 59 (0,248 g). LCMS viste MH<+>= 333; TRET= 2,75 min. Mellomprodukt 60: l-etyl-6-metyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//- py razolo [3,4-6] pyridin-5-karb oksylsyre

2M natriumhydroksyd-løsning (0,75 ml, 1,5 mmol) ble satt til Mellomprodukt 59 (0,248 g, 0,75 mmol) i etanol (2 ml) og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 16 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, fortynnet med vann (1 ml) og surgjort med 2M

saltsyre (0,75 ml) for å felle ut et fast stoff som ble oppsamlet ved filtrering, hvilket ga Mellomprodukt 60 (0,168 g). LCMS viste MH<+>= 305; Tret= 1,86 min.

Mellomprodukt 61: A^2,2-dimetylpropanoyl)-l-etyl-6-metyl-4-(tetrahydro-2/y<->pyran-4-ylamino)-l/7-pyrazolo[3,4-£]pyridin-5-karbohydrazid

Mellomprodukt 60 (0,255 g, 0,84 mmol), EDC (0,225 g, 1,17 mmol) og HOBT (0,136 g, 1,0 mmol) i DMF (5 ml) ble omrørt ved 20°C i 75 minutter. Pivalinsyrehydrazid (0,107 g, 0,92 mmol) ble tilsatt og omrøring fortsatt i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og vann. Den organiske fasen ble vasket med vandig natriumhydrogenkarbonat og deretter inndampet i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 61 som et hvitt, fast stoff (0,27 g). ). LCMS viste MH<+>= 403; Tret = 2,13 min.

Mellomprodukt 62: l,l-dimetyletyl-2-{[l-etyl-6-metyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo [3,4-6] py ridin-5-yl] karbonyl} hy drazi nkarboksylat

Mellomprodukt 60 (0,253 g, 0,83 mmol), EDC (0,223 g, 1,17 mmol) og HOBT (0,135 g, 1,0 mmol) i DMF (5 ml) ble omrørt ved 20°C i 30 minutter, t-butyl-karbazat (0,110 g, 0,83 mmol) ble tilsatt og omrøring fortsatt i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet oppløst i DMF (5 ml) og ytterligere EDC (0,159 g0) og HOBT (0,112 g) tilsatt. Etter 30 minutter ble t-butyl-karbazat (0,019 g) tilsatt og omrøring fortsatt i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og vann. Den organiske fasen ble vasket med vandig natriumhydrogenkarbonat og deretter inndampet i vakuum. Materialet ble påført på en SPE-patron (silika, 10 g) og eluert med cykloheksan: etylacetat (1:1 fulgt av 2:1), hvilket ga Mellomprodukt 62 som et hvitt, fast stoff (0,19 g). LCMS viste MH<+>= 419; Tret = 2,35 min.

Mellomprodukt 63: l-etyl-6-metyl-4-(tetrahydro-2/7-pyran-4-ylamino)-l/7-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-karbohydrazid-hydroklorid

Mellomprodukt 62 (0,19 g, 0,46 mmol) ble oppløst i 4M hydrogenklorid i dioksan (5 ml) og reaksjonsblandingen omrørt natten over ved 20°C. Konsentrasjon i vakuum ga Mellomprodukt 63 som et hvitt, fast stoff (0,161 g). LCMS viste MH<+>= 319; TRET= 1,72 min.

Mellomrodukt 64:1 -etyl-6-metyl-4-(tetrahydro-2/T-pyran-4-ylamino)-A^f-(tetrahydro-2/T-pyran-4-ylkarbonyl)-l/r-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-karbohydrazid

Mellomprodukt 30 (0,06 g, 0,45 mmol) og TBTU (0,146 g, 0,45 mmol) i DMF (5 ml) ble omrørt ved 20°C i 30 minutter. En blanding av Mellomprodukt 63 (0,16 g, 0,45 mmol) og diisopropyletylamin (0,32 ml, 1,82 mmol) i DMF (1 ml) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt natten over under nitrogen. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og vann. Fasene ble separert ved anvendelse av en hydrofob fritte (Whatman PTFE Folter Media med polypropylen-kasse 5^iM porestørrelse) og den organiske fasen inndampet i vakuum. Residuet ble påført på en SPE-patron (aminopropyl, 10 g) og eluert med MeOH. Passende fraksjoner ble konsentrert i vakuum og deretter påført på en ytterligere SPE-patron (silika, 2 g) som ble eluert sekvensielt med en gradient av MeOH i DCM (i) 2%, (ii) 4%, (iii) 6% og (iv) 10%. Fraksjoner inneholdende det ønskede materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 64 som et hvitt, fast stoff (0,048 g). LCMS viste MH<+=>431; Tret= 1,87 min.

Mellomprodukt 65: A^cyklobtttylkarbonyl)-l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo [3,4-6] py ridin-5-karbohydrazid

TBTU (0,050 g, 0,15 mmol) og diisopropyletylamin (0,04 ml, 0,26 mmol) i DMF (0,5 ml) ble satt til cyklobutylkarboksylsyre (R<Y>COOH, 0,015 g, 0,15 mmol).

Reaksjonsblandingen ble omrørt i 40 minutter ved 20°C. En blanding av Mellomprodukt 19 (0,045 g, 0,13 mmol) og diisopropyletylamin (0,04 ml, 0,26 mmol) i DMF (0,5 ml) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt i 18 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og residuet påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g). Patronen ble eluert med metanol, hvilket ga Mellomprodukt 65 (0,052 g). LCMS viste MH<+>= 387; Tret = 2,28 min.

Tilsvarende ble de følgende fremstilt ved anvendelse av samme eller lignende antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler:

Mellomprodukt 80: (l£/Z)-A^-hydroksy-2-(4-metyl-l-piperazinyl)etanimidamid (4-metyl-l-piperazinyl)acetonitril (1,08 g, 7,7 mmol) ( J. Med. Chem., 1999, 42,2870) ble satt til en suspensjon av kaliumkarbonat (3,2 g, 23,1 mmol) og hydroksylamin-hydroklorid (1,06 g, 15,4 mmol) i etanol (10 ml). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 9 timer og fikk deretter avkjøles. Reaksjonsblandingen ble filtrert og løsningsmidlet inndampet i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 80 (1,53 g). ^H NMR (400MHz i de-DMSO, 27°C, 8 ppm) 9,02 (br s, 1H), 5,17 (br s, 2H), 2,78 (s, 2H), 2,31 (brs,8H), 2,13 (s, 3H). Mellomprodukt 81: 4-fmor-iV-hydroksybenzeiikarboksimidamid

Kommersielt tilgjengelig fra Sigma-Aldrich, CAS (Chemical Abstracts) Registreringsnummer 22179-78-8.

Mellomprodukt 82: (l£/Z)-7V-hydroksy-3-okso-3-(l-pyrrolidinyl)propanimidamid

Kommersielt tilgjengelig fra Maybridge Chemical Company, CAS (Chemical Abstracts) Registreringsnummer 57399-51-6.

Mellomprodukter 83 og 84

Strukturene av Mellomprodukter 83 og 84 og deres fremstilling er som følger:

Mellomprodukt 83: {5- [l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//- pyrazolo[3,4-Z>]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}eddiksyre

Vannfri hydrogenklorid i dioksan (8 ml, 4M løsning) ble satt til Mellomprodukt 84 (0,807 g, 1,88 mol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur og deretter inndampet i vakuum. Residuet ble suspendert i eter og blandingen filtrert, hvilket ga Mellomprodukt 83 som et brunt, fast stoff (0,525 g). LCMS viste MH<+>= 373; Tret = 2,62 min.

Mellomrodukt 84: l,l-dimetyletyl-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/y<->pyran-4-ylamino)-l/7-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}acetat

Diisopropyetylamin (8,3 ml, 47,5 mmol) ble satt til en blanding av Mellomprodukt 17 (2,76 g, 9,5 mmol), TBTU (3,050 g, 9,5 mmol) og hydroksybenzotriazol (1,28 g, 9,5 mmol) i N,N-dimetylformamid (40 ml) ved romtemperatur. Etter omrøring i 10 minutter ble Mellomprodukt 85 (2,318 g, 13,3 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 50 minutter, deretter ble l,l'-karbonyldiimidazol (1,54 g, 9,5 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 100°C i 16 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og residuet fordelt mellom diklormetan og vann. Den organiske fasen ble vasket med vandig natriumhydrogenkarbonat (5%) og deretter tørket (Na2SC«4) og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved kromatografi ved anvendelse av Biotage-system (100 g, silika) under eluering med cykloheksan:etylacetat (1:1). Mellomprodukt

84 ble oppnådd som et brunt, fast stoff (0,97 g). LCMS viste MH<+>= 429 TRET= 3,26 min. Mellomrodukt 85: l,l-dimetyletyl-(3£'/Z)-3-(hydroksyamino)-3-iminopropanoat

Reaksjonsskjemaet var som følger:

En løsning av natriummetoksyd i metanol (50 ml, 0,5M) ble satt til hydroksylamin-hydroklorid (1,78 g, 25,62 mmol) ved romtemperatur. Etter omrøring i 15 minutter ble løsningen filtrert og filtratet satt til t-butyl-cyanoacetat (3,0 g, 21,25 mmol, tilgjengelig fra Aldrich). Løsningen ble tilbakeløpskokt i 1,75 timer, deretter avkjølt og inndampet i vakuum. Residuet ble fordelt mellom etylacetat og vann. Den vandige fasen ble ekstrahert med etylacetat og de samlede organiske faser vasket med saltvann, tørket (MgSCu) og inndampet i vakuum. Residuet ble suspendert i cykloheksan: eter (1:1) og deretter filtrert, hvilket ga Mellomprodukt 85 som et hvitt, fast stoff (1,883 g). lU NMR (400MHz i CDC13, 27°C, 8ppm) 8,34 (br s, 1H), 5,05 (br s, 2H), 3,09 (s, 2H), 1,47 (s, 9H).

Mellomprodukt 86: iV?'-{[l-etyl-4-(tetrahydr o-2//-pyran-4-ylamino)-LH-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]karbonyl}-A^^V^Vf^V-tetrametylkarbonohydrazoii-diamid

Mellomprodukt 19 (0,1 g, 0,29 mmol), TBTU (0,094 g, 0,29 mmol) og diisopropyletylamin (0,204 ml, 1,17 mmol) i N,N-dimetylformamid (1 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Løsningsmidlet ble avdampet i vakuum og residuet oppløst i metanol og påført på en SPE-patron (aminopropyl, 5 g). Patronen ble eluert med metanol og passende fraksjoner inndampet i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 86 som et gult, fast stoff (0,113 g). LCMS viste MH<+>= 403; TRET= 1,99 min.

Mellomrodukt 87: Etyl-(2-metyl-l,3-tiazol-4-yl)acetat

Fremstilt som beskrevet av K. Arakawa et. al., Chem Pharm Bull, 1972, 20 (5), 1041

Mellomprodukt 88: 2-metyl-l,3-tiazol-4-yl eddiksyre

Til en løsning av Mellomprodukt 87 (6 g, 32,4 mmol) i dioksan (15 ml) ble satt en løsning av litiumhydroksyd-monohydrat (1,53 g, 36,4 mmol) i vann (15 ml). Blandingen ble omrørt i 17 timer, deretter vasket med dietyleter (20 ml), deretter med etylacetat (20 ml) og surgjort med konsentrert saltsyre under etylacetat (50 ml). De samlede vandige faser ble regulert til pH 2,7 ved tilsetning av natriumbikarbonat og ekstrahert med ytterligere etylacetat (2x50 ml). De samlede organiske faser ble vasket med vann (20 ml) og mettet saltvann (20 ml), deretter konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 88 som et hvitt, fast stoff (1,69 g).<!>H NMR (400MHz i CDC13,27°C, 8ppm) 2,74 (s, 3H), 3,85 (s, 2H), 5,8-6,2 (br, s, 1H), 7,02 (s, 1H).

Mellomrodukt 89: l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-iVf-(l//-l,2,3-triazol-l-ylacetyl)-l//-pyrazolo [3,4-6] pyridin-5-karbohydrazid

Generell prosedyre for mellomprodukter 89 til 114:

En blanding av karboksylsyre RYCC*2H (0,2 mmol), diisopropyletylamin (0,105 ml, 0,6 mmol) og TBTU (0,071 g, 0,22 mmol) i N,N-dimetylformamid (0,5 ml) fikk stå i 10 minutter. En blanding av Mellomprodukt 19 (0,2 mmol) og diisopropyletylamin (0,035 ml, 0,2 mmol) i N,N-dimetylformamid (0,5 ml) ble tilsatt. Etter agitering fikk reaksjonen stå i 16 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og residuet ble påført på en SPE-patron (aminopropyl, 0,5 g). Patronen ble eluert med kloroform, etylacetatkloroform (1:1), etylacetat, etylacetat:metanol (9:1,2 ml). Passende fraksjoner ble inndampet i vakuum, hvilket ga mellomproduktene nedenfor. Mellomprodukt 115: 4-(aminometyl)benzamid

Kan fremstilles i henhold til metoden beskrevet av L.W.Jones et. al. WO 02/085860.

Mellomprodukt 116: l,l-dimetyletyl-[(2Z)-2-(hydroksyamino)-2-iminoetyl] karbamat

Fremstilt fra kommersielt tilgjengelig N-(tert-butoksykarbonyl)-2-aminoacetonitril som beskrevet av M. Schwarz et. al. WO 02/102799.

Mellomrodukt 117: l,l-dimetyletyl-({5-fl-etyl-4-(tetrahydro-2£T-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo [3,4-6] pyridin-5-yl] -l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)karbamat

Diisopropyletylamin (6,0 ml, 34,4 mmol) ble satt til en omrørt blanding av Mellomprodukt 17 (2,0 g, 6,89 mmol), TBTU (2,212 g, 6,89 mmol) og HOBT (0,931 g, 6,89 mmol) i tørr dimetylformamid (45 ml). Etter lOmin ble den resulterende klare løsning behandlet med Mellomprodukt 116 (1,89 g, 10 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. DBU (5,14 ml, 34,5 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved SO^C. Etter 3,5 timer ved SO^C ble reaksjonsblandingen inndampet i vakuum og residuet ble oppløst i diklormetan (150 ml) og vasket suksessivt med 5% natriumhydrogenkarbonat (50 ml) og vann (50 ml). Den organiske løsningen ble tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet, hvilket ga råproduktet. Rensning ved Biotage kromatografi (silika, 100 g) under eluering med etylacetat-petroleter (1:1) ga Mellomprodukt 117 som et hvitt, fast stoff (2,70 g). LCMS viste MH<+>=444, TREt = 3,06 min.

Mellomprodukt 118: 5-[3-(aminometyl)-l,2,4-oksadiazol-5-yl]-l-etyl-iV-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo [3,4-6] pyridin-4-amin

Trifluoreddiksyre (5 ml) ble satt til en omrørt løsning av Mellomprodukt 117 (1,774 g, 4,0 mmol) i tørr diklormetan (20 ml) ved O^C. Etter 2 timer ble reaksjonsblandingen nøytralisert ved forsiktig tilsetning av 5% natriumhydrogenkarbonat-løsning (150 ml) og fast natriumhydrogenkarbonat. Den resulterende blandingen ble ekstrahert med kloroform (2 x 100 ml). De samlede organiske ekstrakter ble tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet, hvilket ga Mellomprodukt 118 som et hvitt, fast stoff (1,358 g). LCMS viste MH<+>=344, Tret= 1,95 min.

Mellomprodukt 119:4-klor-A^{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//- pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)butanamid

4-klorbutanoylklorid (0,12 mmol) ble satt til en omrørt løsning av Mellomprodukt 118 (0,1 mmol) og diisopropyletylamin (0,3 mmol) i kloroform (1 ml) ved romtemperatur. Etter omrøring ved romtemperatur i 16 timer ble reaksjonsblandingen påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g) og patronen ble eluert sekvensielt med kloroform, etylacetat og metanol. Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble samlet og blåst ned under nitrogen. Det resulterende residuet ble ytterligere renset på en SPE-patron (silika, 1 g) under eluering med en gradient av 30-100% etylacetat i petroleter, hvilket ga Mellomprodukt 119 som et hvitt, fast stoff (45 mg).). LCMS viste MH<+>=448, TRET= 2,77 min. Mellomprodukt 120: 5-klor-/V-({5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//- pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)pentanamid

5-klorpentanoylklorid (0,12 mmol) ble satt til en omrørt løsning av Mellomprodukt 118 (0,1 mmol) og diisopropyletylamin (0,3 mmol) i kloroform (1 ml) ved romtemperatur. Etter omrøring ved romtemperatur i 16 timer ble reaksjonsblandingen påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g) og patronen ble eluert sekvensielt med kloroform, etylacetat og metanol. Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble samlet og blåst ned under nitrogen. Det resulterende residuet ble ytterligere renset på en SPE-patron (silika, 1 g) under eluering med en gradient av 30-100% etylacetat i petroleter, hvilket ga Mellomprodukt 120 som et hvitt, fast stoff (46 mg). LCMS viste MH<+>=462, TRET= 2,86 min.

Mellomprodukt 121: (l£'/Z)-A^-hydroksy-2-(4-morfolinyl)propanimidamid

Fremstilt fra a-metyl-4-morfolinacetonitril ved anvendelse av en lignende prosess som den beskrevet for hvilket som helst av Mellomproduktene 9, 22 eller 80 ved anvendelse av lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler. 1H NMR (27°C, d4-MeOH) 3,70-3,60 (m, 5H), 3,13-3,07 (m, 2H), 2,83-2,76 (m, 2H), 1,84

(d, J = 5Hz, 3H)

a-metyl-4-morfolinacetonitril kan fremstilles i henhold til metoden beskrevet av H.R.Henze et. al. J. Am. Chem. Soc 1957, 79, 6230.

Mellomrodukt 122: QZ?/Z)-2-cvkloheksvl-7V-hvdroksvetanimidamid

Kan fremstilles fra cykloheksyleddiksyre (kommersielt tilgjengelig fra f.eks. Aldrich) i henhold til metoden beskrevet av T.R. Alessi et al. i US 4895860.

Mellomprodukt 123: l,l-dimetyletyl-4-[(2Z)-2-(hydroksyamino)-2-iminoetyll-l-piperidinkarboksylat

Fremstilt fra l,l-dimetyletyl-4-(cyanometyl)-l-piperidinkarboksylat ved anvendelse av en lignende prosess som den beskrevet for hvilket som helst av Mellomproduktene 9,22 eller 80 ved anvendelse av lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler.

1 J-dime1yle1yl-4-(cyanometyl)-l-piperidinkarboksylat kan fremstilles fra kommersielt tilgjengelig l,l-dimetyletyl-4-okso-l-piperidinkarboksylat i henhold til metoden beskrevet av A.M.Wilson i WO 00/006159. Mellomprodukt 124: l,l-dimetyletyl-4-({5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/T-pyran-4-ylamino)-l/7-pyrazolo[3,4-6]pyridm-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-l-piperidinkarboksylat

En blanding av Mellomprodukt 16 (0,064 g, 0,2 mmol), Mellomprodukt 80 (0,257 g, 1 mmol), en løsning av natriumetoksyd i EtOH (0,19 ml, 21% løsning) og pulverisert 4Å molekylsikter (0,38 g) i EtOH (2 ml) ble omrørt ved 82°C under en atmosfære av nitrogen i 18 timer. Ytterligere natriumetoksyd i etanol (0,19 ml, 21% løsning), molekylsikter (0,38 g) og etanol (4 ml) ble tilsatt og reaksjonsblandingen oppvarmet i ytterligere 72 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert, løsningsmidlet ble avdampet i vakuum og residuet ble påført på en SPE-patron (silika, 2 g). Patronen ble eluert med cykloheksan: etylacetat (4:1,2:1,1:1), deretter etylacetat, hvilket ga Mellomprodukt 124 som en fargeløs olje (0,052 g). LCMS viste MH<+>= 512; Tret = 3,51 min.

Mellomprodukt 125: l-etyl-5-[3-(4-piperidinylmetyl)-l,2,4-oksadiazol-5-yl]-A^-(tetrahydro-2/r-pyran-4-yl)-l/r-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin-hydroklorid

En løsning av hydrogenklorid i dioksan (1 ml) ble satt til Mellomprodukt 124 (0,052 g, 0,1 mmol) og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 20°C i 2 timer. Løsningen ble inndampet i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 125 som et gult, fast stoff (0,047 g). LCMS viste MFT = 412; TW = 2,21 min.

Mellomprodukt 126: Ar<->hydroksy-l-(fenylsulfonyl)cyklopropankarboksimidamid

Fremstilt fra l-(fenylsulfonyl)cyklopropankarbonitril (kommersielt tilgjengelig fra Menai Organics Ltd, Menai Technology Centre, Deiniol Roas, Bangor, Gwynedd, Wales, LL57 UP, UK eller beskrevet i Bull. Chem. Soc. Jpn. 1985 58(2), 765) ved anvendelse av en lignende prosess som den beskrevet for hvilket som helst av Mellomproduktene 9, 22 eller 80 ved anvendelse av lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler. LCMS viste MH<+>= 241; Tret=1,71 min.

Mellomprodukt 127: (lÆ/Z)-AT-hydroksy-2-fenyletanimidamid

Kommersielt tilgjengelig fra Maybridge Chemical Company Ltd, Trevillett, Tintagel, Cornwall, PL34 OHW, UK.

Mellomprodukt 128: (l£<y>Z)-Af-hydroksy-2-fenylpropanimidamid

Kan fremstilles fra a-metylfenylacetonitiril i henhold til metoden beskrevet av J. Rheineimer EP 323864.

Mellomrodukt 129: (i£/Z)-iV-h<y>droks<y>-2-[4-(met<y>loks<y>)fen<y>l] etanimidamid

Kommersielt tilgjengelig fra Exploratory Library, Ambinter, 46 quai Louis Bleriot, Paris, F-75016, Frankrike.

Mellomrodukt 130: (i£/Z)-iV-hydroksy-2-[3-(metyloksy)fenyl]etanimidamid

Kan fremstilles i henhold til metoden beskrevet av S.Borg et. Al European J.Med Chem. 1993,28(10,) 801.

Mellomprodukt 131: ( lE/ Z)- 2-[4-(dimetylamino)fenyl]-7V-hydroksyetanimidamid

Fremstilt fra 4-(dimetylamino)benzenacetonitril (beskrevet av Borovicka et al. Collect. Czech. Chem. Commun 1955, 20,437) ved anvendelse av en lignende prosess som den beskrevet for hvilket som helst av Mellomproduktene 9,22 eller 80 ved anvendelse av lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler. LCMS viste MH<+>= 194; Tret= 0,38 min.

Mellomprodukt 132: ( lE/ Z)- 2-[3-(dimetylamino)fenyl]-Ar-hydroksyetanimidamid

Fremstilt fra 3-(dimetylamino)benzenacetonitril (beskrevet av M.L. Sznaidman et al. Bioorganic Medicinal Chemistry Letters 1996, 6(5), 565) ved anvendelse av en lignende prosess som den beskrevet for hvilket som helst av Mellomproduktene 9, 22 eller 80 ved anvendelse av lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler. LCMS viste MH<+>= 194; Tret= 0,46 min

Mellomprodukt 133: (iÆ/Z)-A^-hydroksy-2-(fenyloksy)etanimidamid

Kommersielt tilgjengelig fra Pfaltz & Bauer Inc.

Mellomrodukt 134: (lJB/Z)-A^-hydroksy-2-(5,6,7,8-tetrahydro[l,2,4]triazolo[4,3-a] pyridin-3-yl)etanimidamid

Fremstilt fra 5,6,7,8-tetrahydro-l,2,4-triazolo[4,3-a]pyridin-3-acetonitril (kommersielt tilgjengelig fra Interchim, 213 Avenue Kennedy, BP 1140, Montlucon, Cedex 03103, Frankrike eller Exploratory Library, Ambinter, 46 quai Louis Bleriot, Paris, F-75016, Frankrike) ved anvendelse av en lignende prosess som den beskrevet for hvilket som helst av Mellomproduktene 9,22 eller 80 ved anvendelse av lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler. LCMS viste MH<+>= 198; TREt= 0,32 min.

Mellomprodukt 135: (i£/Z)-Af<->hydroksy-2-(4-fenyl-l-piperazinyl)etanimidamid

Fremstilt fra 4-fenyl-l-piperazinacetonitril (kommersielt tilgjengelig fra Interchim, 213 Avenue Kennedy, BP 1140, Montlucon, Cedex 03103, Frankrike eller Exploratory

Library, Ambinter, 46 quai Louis Bleriot, Paris, F-75016, Frankrike) ved anvendelse av en lignende prosess som den beskrevet for hvilket som helst av Mellomproduktene 9,22 eller 80 ved anvendelse av lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler. LCMS viste MH<+>= 235; TRET= 1,09 min.

Mellomprodukt 136: l-etyl-4-(tetrahydro-2/7-pyran-4-ylamino)-l/7-pyrazolo[3,4-b] pyridin-5-karboksamid

En løsning av Mellomprodukt 17 (3,263 g, 11,25 mmol) i tionylklorid (17 ml) ble oppvarmet ved 60°C i 2 timer. Løsningen ble konsentrert i vakuum og deretter sam-inndampet med diklormetan. Residuet ble suspendert i en løsning av ammoniakk i dioksan (45 ml, 0,5M løsning) og den resulterende blandingen ble omrørt i 18 timer. Etter konsentrasjon i vakuum ble residuet resuspendert i ammoniakk i dioksan (45 ml, 0,5M) og omrørt i ytterligere 16 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og det faste stoffet suspendert i en blanding av diklormetan (40 ml) og vann (40 ml). Det faste stoffet ble filtrert, vasket med vann og tørket i vakuum over P2O5, hvilket ga Mellomprodukt 136 som et kremfarget, fast stoff (2,50 g). LCMS viste MH<+>= 290; Tret = 2,12 min Mellomprodukt 137: l-etyl-4-(tetrahydro-2/7-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-b] pyridin-5-karbonitril

Burgess reagens (4,53 g, 19,0 mmol) ble satt til en suspensjon av Mellomprodukt 136 (5,0 g, 17,3 mmol) i THF (80 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer og deretter ble en ytterligere porsjon av Burgess Reagens (0,9 g, 1,8 mmol) tilsatt og omrøring fortsatt i 5 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet fordelt mellom diklormetan og vann. Den organiske fasen ble vasket med vann, tørket og inndampet i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 137 som et gråhvitt, fast stoff (4,43 g). LCMS viste MH<+>= 272; TW = 2,40 min

Mellomprodukt 138: l-etyl-Af-hydroksy-4-(tetrahydro-2/7-pyran-4-ylamino)-l//- pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-karboksimidamid

Mellomprodukt 137 (3,50 g, 12,9 mmol), hydroksylamin-hydroklorid (3,30 g, 47,8 mmol) og natriumhydrogenkarbonat (4,01 g, 47,8 mmol) i EtOH (45 ml) ble oppvarmet ved 45°C i 1,5 timer, deretter ved 50°C i 2,5 timer. Suspensjonen ble konsentrert i vakuum og det faste stoffet omrørt i diklormetan (80 ml) i 0,5 time. Blandingen ble filtrert og det faste stoffet omrørt i EtOH, den resulterende blandingen ble filtrert og filtratet inndampet. Det faste stoffet ble deretter vasket med diklormetan tre ganger, hvilket ga Mellomprodukt 138 som et hvitt, fast stoff (1,62 g). LCMS viste MH<+>= 305; Tret — 1,85 min

Mellomprodukt 139: l-etyl-A'-[4-(hydroksymetyl)tetrahydro-2/r-pyran-4-yl]-4-(tetrahydro-21T-pyran-4-ylamino)-lir-pyrazolo[3,4-6]pyridiii-5-karboksamid

Mellomprodukt 139 ble fremstilt fra Mellomprodukt 17 og (4-aminotetrahydro-2//- pyran-4-yi)metanol (kommersielt tilgjengelig fra PharmaCore Inc., 4170 Mendenhall Oaks Pkwy, Suite 140, High point, NC, USA) ved anvendelse av en analog metode som den for Mellomprodukt 42. LCMS viste MH<+>= 404, TRET= 2,19 min.

Mellomprodukt 140: (R)-(+)-3-amino-tetrahydrofuran-4-toluensulfoiiat Kommersielt tilgjengelig fra Fluka Chemie AG, Tyskland (CAS 111769-27-8)

Mellomprodukt 141: (S)-(-)-3-amino-tetrahydrofuran-4-toluensulfoiiat Kommersielt tilgjengelig fra E. Merck, Tyskland; eller fra E. Merck (Merck Ltd), Hunter Boulevard, Magna Park, Lutterworth, Leicesterehire LE 17 4XN, UK (CAS 104530-80-5)

Mellomprodukt 142: Tetrahydro-2H-tiopyran-4-amin

Fremstilt fra kommersielt tilgjengelig tetrahydrotiopyran-4-on som beskrevet av Subramanian et. al, J. Org. Chem., 1981,46,4376-4383. Påfølgende fremstilling av hydrokloridsaltet kan oppnås ved konvensjonelle metoder.

Mellomprodukt 143: Tetrahydro-3-tiofenamin

Fremstilt på analog måte som Mellomprodukt 142 fra kommersielt tilgjengelig tetrahydrotiofen-4-on. Oksimdannelse er beskrevet av Grigg et.al, Tetrahedron, 1991, 47, 4477-4494 og oksimreduksjon av Unterhalt et. al., Arch. Pharm., 1990, 317-318.

Mellomprodukt 144: Tetrahydro-3-tiofenamin 1,1-dioksyd-hydroklorid Kommersielt tilgjengelig fra Sigma Aldrich Library of Rare Chemicals (SALOR) (CAS-6338-70-1). Fremstilling av hydrokloridsaltet av aminet kan oppnås ved konvensjonelle metoder.

Mellomprodukt 145: Tetrahydro-2H-tiopyran-4-amin-l,l-dioksyd-hydroklorid Fremstilt på analog måte som Mellomprodukt 11 fra kommersielt tilgjengelig tetrahydrotiofen-4-on. Oksydasjon til l,l-diokso-tetrahydro-lX6-tiopyran-4-on er beskrevet av Rule et. al., iJ. Org. Chem., 1995, 60,1665-1673. Oksimdannelse er beskrevet av Truce et.al, i J. Org. Chem., 1957, 617, 620 og oksimreduksjon av Barkenbus et. al., J. Am. Chem. Soc, 1955, 77, 3866. Påfølgende fremstilling av hydrokloridsaltet av aminet kan oppnås ved konvensjonelle metoder.

Mellomprodukt 146:1,1-dimetyletyl (4,4-difluorcykloheksyl)karbamat

(Dietylamino)svovel-trifluorid (DAST), (0,06 ml, 0,47 mmol), ble satt til en omrørt løsning av l,l-dimetyletyl(4-oksocykloheksyl)karbamat, (250 mg, 1,17 mmol, kommersielt tilgjengelig fra AstaTech Inc., Philadelphia, USA) i vannfri diklormetan (5 ml) og blandingen ble omrørt under nitrogen ved 20°C. Etter 22 timer ble reaksjonsblandingen avkjølt til 0°C, behandlet med mettet natriumhydrogenkarbonat-løsning (4 ml) og fikk deretter oppvarmes til omgivelsestemperatur. Fasene ble separert ved passasje gjennom en hydrofob fritte og den vandige fasen ble videre ekstrahert med DCM (5 ml). De samlede organiske faser ble konsentrert i vakuum, hvilket ga et oransje, fast stoff (369 mg) som ble ytterligere renset ved kromatografi ved anvendelse av en SPE-patron (silika, 10 g), under eluering med DCM, hvilket ga Mellomprodukt 62 (140 mg) inneholdende 20% av 1,1-dimetyletyl (4-fluor-3-cykloheksen-l-yl)karbamat.<]>H NMR (400MHz i CDC13, 2TC, 8 ppm)

Mindre komponent: 85,11 (dm, 16Hz, 1H), 4,56 (br, 1H), 3,80 (br, 1H) 2,45-1,45 (m'er, 6H overskudd), 1,43 (s, 9H). Hoved-komponent: 8 4,43 (br, 1H), 3,58 (br, 1H), 2,45-1,45 (m'er, 8H overskudd av), 1,45 (s, 9H).

Mellomprodukt 147: (4,4-difluorcykloheksyl)amin-hydroklorid

En løsning av hydrogenklorid i dioksan (4M, 1,6 ml) ble ved 20°C satt til en omrørt løsning av Mellomprodukt 146 (140 mg, 0,6 mmol) i dioksan (1,6 ml). Etter 3 timer ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum, hvilket ga Mellomprodukt 147 (96,5 mg) inneholdende 4-fluor-3-cykloheksen-l-amin.<]>H NMR (400MHz i de-DMSO, 27°C, 8 ppm) Mindre komponent: 88,22 (br, 3H overskudd), 5,18 (dm, 16Hz, 1H), 3,28-3,13 (m, 1H overskudd), 2,41-1,53 (m'er, 6H overskudd). Hovedkomponent: 8 8,22 (br, 3H overskudd), 3,28-3,13 (m, 1H overskudd), 2,41-1,53 (m'er, 8H overskudd). Urenheter er også til stede.

Mellomprodukter 148 til 163: forskjellige typer av R^R^NH

Eksempel 1: N-cyklopentyl-l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 4 (0,043 g) ble oppløst i acetonitril (2 ml) og deretter behandlet med fosforoksyklorid (0,101 g) og omrørt under nitrogen og oppvarmet ved 90°C i 2 timer.

Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og mettet vandig natriumbikarbonat-løsning. Det organiske laget ble konsentrert i vakuum og påført på en SPE-patron (aminopropyl, 1 g), som ble eluert med metanol. Konsentrasjon i vakuum ga Eksempel 1 (0,032 g). LCMS viste MH<+>= 313; TRET = 3,13 min.

Tilsvarende ble fremstilt, for eksempel uten begrensning, ved anvendelse av samme eller lignende antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler, men med en forlenget reaksjonstid (se tabell):

Eksempel 3: N-cyklopentyl-l-etyl-5-(5-isopropyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 10 ble oppløst i acetonitril (2 ml) og deretter behandlet med fosforoksyklorid (0,101 g) og omrørt under nitrogen ved 90°C i 3,5 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet fordelt mellom DCM og mettet vandig natriumbikarbonat-løsning. Det organiske laget ble konsentrert i vakuum og residuet påført på en SPE-patron (silika, 5 g), som ble eluert med cykloheksan : Et20 (1:2). Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Eksempel 3 (0,034 g). LCMS viste MH<+>= 341; TRET = 3,39 min.

Eksempel 4: N-cyklopentyl-l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b] pyridin-4-amin

En løsning av Mellomprodukt 4 (0,09 g) i acetonitril (5 ml) ble omrørt under nitrogen og behandlet med Lawesson's reagens (0,116 g). Blandingen ble oppvarmet ved 65 °C i 16 timer, deretter konsentrert i vakuum. Residuet ble påført på en SPE-patron (silika, 5 g) og eluert med en gradient av cykloheksan : Et20 (1:2 deretter 1:3,1:4,1:5, 0:1). Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum. Ytterligere rensning ble oppnådd ved anvendelse av massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 4 (0,002 g). LCMS viste MH<+>= 339; Tret = 3,23 min.

Eksempel 5: N-cyklopentyl-l-etyl-5-{5-[(metylsulfonyl)metyl]-l,3,4-tiadiazol-2-yl}-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

En løsning av Mellomprodukt 5 (0,07 g) i acetonitril (3 ml) ble omrørt under nitrogen og behandlet med Lawesson's reagens (0,085 g). Blandingen ble oppvarmet ved 65 °C i 136 timer, deretter konsentrert i vakuum. Residuet ble fordelt mellom DCM og vann og det organiske laget konsentrert i vakuum. Ytterligere rensning ble oppnådd ved anvendelse av massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 5 (0,008 g). LCMS viste MH<+>= 407; TRET = 2,98 min.

Eksempel 6: N-cyklopentyl-l-etyl-5-(5-isopropyl-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 10 ble oppløst i acetonitril (5 ml) og deretter behandlet med Lawesson's reagens (0,125 g) og oppvarmet under nitrogen ved 65°C i 66 timer. Flyktige stoffer ble fjernet i vakuum og residuet ble renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 6. LCMS viste MH<+>= 357; TRET = 3,59 min.

Eksempel 9: l-etyl-5-(5-isopropyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-lH-pyrazolo [3,4-b ] pyridin-4-amin

Mellomprodukt 13 (0,016 g) ble oppløst i vannfri acetonitril (1 ml). 4-aminotetrahydropyran-hydroklorid (Mellomprodukt 2 IA, 0,008 g) ble deretter tilsatt, fulgt av diisopropyletylamin (0,05 ml) og blandingen ble omrørt under nitrogen ved 75°C i 19 timer. En ytterligere porsjon av 4-aminotetrahydropyran (0,002 g) ble tilsatt og omrøring fortsatt ved 85 °C i 16 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og fordelt mellom DCM og vann. Den organiske fasen ble konsentrert i vakuum og påført på en SPE-patron (silika, 1 g), som ble eluert sekvensielt med en gradient av EtOAc: cykloheksan (i) 1:8, (ii) 1:4, (iii) 1:2, (iv) 1:1 og (v) 1:0. Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Eksempel 9 (0,013 g). LCMS viste MH<+>= 357; TRET = 2,89 min.

Eksempel 10: N-cykloheksyl-l-etyl-5-(5-isopropyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 13 (0,016 g, 0,055 mmol) ble oppløst i vannfri acetonitril (1 ml). Cykloheksylamin (0,007 ml, 0,061 mmol) ble deretter tilsatt, fulgt av diisopropyletylamin (0,05 ml, 0,29 mmol) og blandingen ble omrørt under nitrogen ved 75 °C i 16 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og fordelt mellom DCM og vann. Den organiske fasen ble konsentrert i vakuum og påført på en SPE-patron (silika, 1 g), som ble eluert sekvensielt med en gradient av EtOAc: cykloheksan (i) 1:16, (ii) 1:8, (iii) 1:4, (iv) 1:2 og (v) 1:1. Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Eksempel 10 (0,015 g). LCMS viste MH<+>= 355; TREt= 3,59 min.

Referanseeksempel 12: l-etyl-N-isobutyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 12 (0,026 g, 0,1 mmol) ble oppløst i etanol (1,5 ml) og behandlet med en løsning av isobutylamin (0,007 g, 0,1 mmol) også i etanol (1 ml). Blandingen ble deretter behandlet med diisopropyletylamin (0,075 ml, 0,4 mmol, 4 mol ekvivalenter) og omrørt ved 75 °C i 16 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og påført på en SPE-patron (silika, 0,5 g) som ble eluert sekvensielt med (i) kloroform, (ii) Et20 og (iii) metanol. Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Eksempel 12 (0,024 g). LCMS viste MH<+>= 301; Tret= 2,90 min

Tilsvarende ble de følgende fremstilt ved anvendelse av samme eller lignende antall mol av reagenser og volumer av løsningsmidler:

Eksempel 14: l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-A^-(tetrahydro-2£T-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

En alternativ metode for fremstilling av Eksempel 14 blir nå beskrevet:

EDC (0,823 g, 5,3 mmol) og HOBT (0,614 g, 4,55 mmol) ble satt til Mellomprodukt 17 (1,10 g, 3,80 mmol) i N,N'-dimetylformamid (10 ml). Blandingen ble omrørt i 1,5 timer og deretter ble eddiksyrehydrazid (0,421 g, 5,7 mmol) (kommersielt tilgjengelig f.eks. fra Aldrich) tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved 20°C i 48 timer. Reaksjonsblandingen ble inndampet og residuet fordelt mellom kloroform og vann. Den vandige fasen ble ekstrahert med kloroform og de samlede organiske faser ble vasket med mettet vandig natriumklorid-løsning deretter tørket (Na2S04) og inndampet. Fosforoksyklorid (10 ml) ble satt til residuet og blandingen oppvarmet ved 120°C i 0,5 time. Reaksjonsblandingen ble inndampet i vakuum og residuet påført på en SPE-patron (silika, 20 g). Patronen ble eluert med diklormetan, cykloheksan:etylacetat (2:1 deretter 1:1), etylacetat, kloroform:metanol (19:1 fulgt av 9:1). Fraksjoner inneholdende de ønskede forbindelser ble samlet og inndampet i vakuum. Residuet ble deretter kromatografert på Biotage (silika, 50 g) ved anvendelse av cykloheksan:etylacetat (2:1 deretter 1:1), etylacetat fulgt av etylacetatetanol (19:1, 9:1 deretter 9:2). Residuet ble fordelt mellom diklormetan og vandig natriumhydrogenkarbonat-løsning. Den organiske fasen ble tørket (Na2S04) og inndampet i vakuum, hvilket ga Eksempel 14 som et blekgult, fast stoff (0,93 g). LCMS viste MH<+>= 329, Tret= 2,54 min.<!>h NMR (400MHz i CDC13, 27°C, 8 ppm) 9,12 (br m, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 4,52 (q, 2H), 4,24 (m, 1H), 4,08 (m, 2H), 3,67 (m, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,20 (m, 2H), 1,86 (m, 2H), 1,53 (t, 3H).

Eksempel 17: 5-[5-(l,l-dimetyletyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-l-etyl-A^-(tetrahydro-2^-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-ft]pyridin-4-amin

En alternativ metode for fremstilling av Eksempel 17 blir nå beskrevet:

EDC (1,30 g, 6,76 mmol) og HOBT (0,782 g, 5,80 mmol) ble satt til Mellomprodukt 17 (1,40 g, 4,83 mmol) i N,N'-dimetylformamid (20 ml). Blandingen ble omrørt i 0,5 time og deretter ble pivalinsyrehydrazid (0,616 g, 5,3 mmol) (kommersielt tilgjengelig fra Fluorochem Ltd, Wesley Street, Glossop, Derbyshire SKI 3 9RY, UK eller kan fremstilles i henhold til metoden ifølge K. Ohmoto et al. i J. Med. Chem., 2001,44(8), 1268) tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 20°C i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble inndampet og residuet fordelt mellom diklormetan og vann. Den organiske fasen ble vasket med vann, mettet vandig natriumhydrogenkarbonat-løsning fulgt av mettet vandig natriumklorid-løsning og deretter inndampet i vakuum. Fosforoksyklorid (10 ml) ble satt til residuet og blandingen ble oppvarmet ved 120°C i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble inndampet i vakuum og residuet fordelt mellom diklormetan og vann. Den organiske fasen ble vasket med vandig natriumhydrogenkarbonat-løsning, deretter tørket og inndampet i vakuum. Residuet ble påført på en SPE-patron og eluert med cykloheksan: etylacetat (3:1 fulgt av 7:3). Løsningsmidlet ble avdampet i vakuum, hvilket ga Eksempel 17 som et hvitt, fast stoff (0,65 g). LCMS viste MH<+>= 371, Tret = 3,05 min. lU NMR (400MHz i CDC13, 2TC, 8 ppm) 9,18 (br m, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 4,52 (q, 2H), 4,25 (m, 1H), 4,08 (m, 2H), 3,67 (m, 2H), 2,20 (m, 2H), 1,84 (m, 2H), 1,57-1,49 (m, 12H). Eksempel 28: l-etyl-5-(3-metyl-l,2,4-oksadiazol-5-yl)-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

En løsning av Mellomprodukt 16 (0,05 g, 0,157 mmol) i etanol (2 ml) ble omrørt over

pulverisert 4Å molekylsikter (0,30 g) og behandlet med en løsning av Mellomprodukt 9 (0,059 g, 0,8 mmol) og natriumetoksyd (0,027 g, 0,4 mmol) i etanol (1 ml). Blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 18 timer under nitrogen, deretter avkjølt og filtrert. Etter konsentrasjon av filtratet i vakuum ble residuet påført på en SPE-patron (silika, 5 g) som ble eluert med cykloheksan : EtOAc (1:1). Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Eksempel 28 (0,024 g). LCMS viste MH<+>= 329; Tret = 2,86 min.

Tilsvarende ble den følgende fremstilt ved anvendelse av samme eller lignende antall mol av reagenser og volumer av løsningsmidler:

Eksempel 30: 5-{3-[(dimetylamino)metyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-l-etyl-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-lH-pyrazolo [3,4-b] pyridin-4-amin

En løsning av Mellomprodukt 16 (0,05 g) i etanol (2 ml) ble omrørt over pulverisert 4Å molekylsikter (0,30 g) og behandlet med en løsning av Mellomprodukt 23 (0,094 g) og natriumetoksyd (0,027 g) i etanol (1 ml). Blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 18 timer under nitrogen, deretter avkjølt og filtrert. Etter konsentrasjon av filtratet i vakuum ble residuet påført på en SPE-patron (silika, 5 g) som ble eluert med 2-5% metanol i DCM. Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, deretter påført på en ytterligere SPE-patron (aminopropyl, 1 g) som ble eluert med metanol, hvilket ga Eksempel 30 (0,02 g). LCMS viste MH<+>= 372; TRET= 2,10 min.

Eksempel 31: l-etyl-5-f3-(morfolin-4-ylmetyl)-l,2,4-oksadiazol-5-yll-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

En løsning av Mellomprodukt 16 (0,05 g) i etanol (2 ml) ble omrørt over pulverisert 4Å molekylsikter (0,30 g) og behandlet med en løsning av Mellomprodukt 24 (0,128 g) og natriumetoksyd (0,027 g) i etanol (1 ml). Blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 18 timer under nitrogen, deretter avkjølt og filtrert. Etter konsentrasjon av filtratet i vakuum ble residuet påført på en SPE-patron (silika, 5 g) som ble eluert med 2-5% metanol i DCM. Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble samlet og konsentrert i vakuum, hvilket ga Eksempel 31 (0,025 g). LCMS viste MH<+>= 415; TRET = 2,46 min.

Eksempel 32: 5-(5-c<y>kloro<py>l-l,3.,4-oksadiazol-2-<y>l)-l-et<y>l-N-tetrah<y>dro-2H-pyran-4-yl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

En løsning av Mellomprodukt 20 (0,020 g) i THF (0,2 ml) ble behandlet med Burgess reagens (0,026 g) og oppvarmet i en mikrobølgeovn ved 120°C (100W) i 5min. Blandingen ble konsentrert ved inndampning under en strøm av nitrogen og residuet påført på en SPE-patron (silika, 1 g) som ble eluert med 2% metanol i DCM, hvilket ga Eksempel 32 som et hvitt, fast stoff (0,014 g). LCMS viste MH<+>= 355; Tret = 2,78 min.

Eksempel 33: N-(l-acetylpiperidin-4-yl)-l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 12 (0,03 g) ble oppløst i acetonitril (2 ml) og behandlet med DIPEA (0,1 ml) og Mellomprodukt 25 (0,022 g). Blandingen ble omrørt ved 85°C i 18 timer deretter konsentrert i vakuum og fordelt mellom DCM og vann. Lagene ble separert og det organiske laget konsentrert i vakuum, deretter renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 33 (0,01 g). LCMS viste MH<+>= 370; TRET = 2,48 min.

Eksempel 34: l-eryl-5-[5-(3-met<y>loksetan-3-<y>D-l,3,4-oksadiazol-2-<y>ll-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-lH-pyrazolo [3,4-b] pyridin-4-amin

En løsning av Mellomprodukt 19 (0,05 g, 0,133 mmol), TBTU (0,045 g, 0,14 mmol) og DIPEA (0,1 ml, ca. 0,5 mmol) i DMF (1 ml) blir omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 5 min. En løsning av Mellomprodukt 26 (0,024 g, 0,21 mmol) i DMF (1 ml) blir deretter tilsatt og omrøring fortsatt i 18 timer. Reaksjonen kan finnes å være ufullstendig etter denne tid så en ytterligere porsjon av Mellomprodukt 26 (0,012 g, 0,10 mmol) blir tilsatt og omrøring fortsatt under nitrogen i ytterligere 18 timer. Blandingen blir konsentrert i vakuum, deretter blir residuet påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g), som blir eluert med metanol (2x3 ml). Fraksjoner inneholdende ønsket materiale blir konsentrert i vakuum.

Det delvis rensede mellomprodukt blir anvendt videre uten ytterligere karakterisering og blir oppløst i THF (0,5 ml) og deretter behandlet med Burgess reagens (0,025 g, ca. 0,1 mmol). Blandingen blir oppvarmet under mikrobølge-betingelser ved 120°C (120W) i 5 min. Blandingen blir deretter konsentrert i vakuum og renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket gir Eksempel 34.

I henhold til en alternativ og mer foretrukket utførelsesform ble reaksjonen utført som følger. En løsning av karboksylsyre Mellomprodukt 26 (0,024 g, 0,21 mmol), TBTU (0,045 g, 0,14 mmol) og DIPEA (0,1 ml, ca. 0,5 mmol) i DMF (1 ml) ble omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 5 min. En løsning av Mellomprodukt 19 (0,05 g, 0,133 mmol) i DMF (1 ml) ble deretter tilsatt og omrøring fortsatt i 18 timer. Reaksjonen ble funnet å være ufullstendig etter denne tid så en ytterligere porsjon av Mellomprodukt 26 (0,012 g, 0,10 mmol) ble tilsatt og omrøring fortsatt under nitrogen i ytterligere 18 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og deretter ble residuet påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g), som ble eluert med metanol (2x3 ml). Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble konsentrert i vakuum. Det delvis rensede mellomprodukt ble anvendt videre uten ytterligere karakterisering og ble oppløst i THF (0,5 ml) og deretter behandlet med Burgess reagens (0,025 g, ca. 0,1 mmol). Blandingen ble oppvarmet under mikrobølgebetingelser ved 120°C (120W) i 5 min. Blandingen ble deretter konsentrert i vakuum og renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 34 (0,006 g). LCMS viste MH<+>= 385; TRET = 2,65 min.

Tilsvarende ble de følgende fremstilt, via den opprinnelige eller alternative utførelsesform beskrevet ovenfor og ved anvendelse av samme eller lignende antall mol av reagenser og volumer av løsningsmidler:

Eksempel 35: l-etyl-5-{5-[(4-metyl-l-piperazinyl)metyl]-l,3?4-oksadiazol-2-yl}-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l/7-pyrazolo [3,4-6] pyridin-4-amin

En alternativ metode for fremstilling av Eksempel 35 er nå beskrevet:

En løsning av Mellomprodukt 27 (0,463 g, 2,93 mmol), TBTU (0,941 g, 2,93 mmol) og DIPEA (1,53 ml, 8,79 mmol) i tørr dimetylformamid (7 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 15 min. En løsning av Mellomprodukt 19 (1,0 g, 2,93 mmol) i tørr dimetylformamid (5 ml) ble deretter tilsatt og omrøring ble fortsatt i 1 time. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet ble oppløst i metanol (5 ml) og påført likt på to SPE-patroner (aminopropyl, 10 g). Patronene ble eluert med metanol. Produkt-inneholdende fraksjoner ble samlet og inndampet, hvilket ga en gul olje (1,56 g) som ble oppløst i diklormetan (10 ml) og påført på en SPE-patron (silika, 10 g). Patronen ble eluert med kloroform-metanol-trietylamin (9/0,2/0,1). Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble samlet og inndampet, hvilket ga et blekgult skum (1,17 g). Dette produktet ble suspendert i tørr tetrahydrofuran (45 ml) og behandlet med Burgess reagens (1,244 g, 5,22 mmol) ved romtemperatur under nitrogen. Den resulterende løsningen ble oppvarmet ved 70°C. Etter 2 timer ble reaksjonsblandingen inndampet og den gjenværende oljen ble oppløst i diklormetan (5 ml) og påført på en SPE-patron (silika, 20 g). Patronen ble eluert med kloroform-metanol-trietylamin (9/0,2/0,1). Fraksjoner inneholdende det ønskede materiale ble samlet og inndampet, hvilket ga et kremfarget, fast stoff. Ytterligere rensning ved passasje gjennom en SCX-patron (20 g) under eluering med metanol fulgt av 10% ammoniakk i metanol ga Eksempel 35 som et brungult farget fast stoff (0,72 g). LCMS viste MH<+>= 427, Tret = 2,02 min. lU NMR (400 MHz i CDC13, 27°C, 8 ppm) 9,11 (d, 7Hz, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 4,52 (q, 2H), 4,24 (m, 1H), 4,08 (m, 2H), 3,93 (s, 2H) 3,66 (m, 2H), 2,8 - 2,5 (br m's, 4H), 2,31 (s, 3H), 2,20 (m, 2H), 1,85 (m, 2H), 1,52 (t, 3H). Eksempel 38: l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

En løsning av Mellomprodukt 19 (0,05 g, 0,133 mmol), TBTU (0,045 g, 0,14 mmol) og DIPEA (0,1 ml, ca. 0,5 mmol) i DMF (1 ml) blir omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 5 min. En løsning av Mellomprodukt 30 (0,018 g, 0,14 mmol) i DMF (1 ml) blir deretter tilsatt og omrøring fortsatt i 18 timer. Reaksjonen kan finnes å være ufullstendig etter denne tid så en ytterligere porsjon av Mellomprodukt 30 (0,009 g, 0,07 mmol) blir tilsatt og omrøring fortsatt under nitrogen i ytterligere 18 timer. Blandingen blir konsentrert i vakuum og deretter blir residuet påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g), som blir eluert med metanol (2x3 ml). Fraksjoner inneholdende ønsket materiale blir konsentrert i vakuum. Det delvis rensede mellomprodukt blir anvendt videre uten ytterligere karakterisering og blir oppløst i THF (0,5 ml) og deretter behandlet med Burgess reagens (0,025 g, ca. 0,1 mmol). Blandingen blir oppvarmet under mikrobølge-betingelser ved 120°C (120W) i 5 min. Reaksjonen kan synes ufullstendig så en ytterligere porsjon av Burgess Reagens (0,012 g, ca. 0,05 mmol) blir tilsatt og blandingen oppvarmet under mikrobølge-betingelser ved 140°C (120W) i ytterligere 10 min. Blandingen blir deretter konsentrert i vakuum og renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket gir Eksempel 38.

I henhold til en alternativ og mer foretrukket utførelsesform ble reaksjonen utført som følger. En løsning av karboksylsyre Mellomprodukt 30 (0,018 g, 0,14 mmol), TBTU (0,045 g, 0,14 mmol) og DIPEA (0,1 ml, ca. 0,5 mmol) i DMF (1 ml) ble omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 5 min. En løsning av Mellomprodukt 19 (0,05 g, 0,133 mmol) i DMF (1 ml) ble deretter tilsatt og omrøring fortsatt i 18 timer. Reaksjonen ble funnet å være ufullstendig etter denne tid så en ytterligere porsjon av Mellomprodukt 30 (0,009 g, 0,07 mmol) ble tilsatt og omrøring fortsatt under nitrogen i ytterligere 18 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum og deretter ble residuet påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g), som ble eluert med metanol (2x3 ml). Fraksjoner inneholdende ønsket materiale ble konsentrert i vakuum. Det delvis rensede mellomprodukt ble anvendt videre uten ytterligere karakterisering og ble oppløst i THF (0,5 ml) og deretter behandlet med Burgess reagens (0,025 g, ca. 0,1 mmol). Blandingen ble oppvarmet under mikrobølge-betingelser ved 120°C (120W) i 5 min. Reaksjonen syntes ufullstendig så en ytterligere porsjon av Burgess Reagens (0,012 g, ca. 0,05 mmol) blir tilsatt og blandingen oppvarmet under mikrobølge-betingelser ved 140°C (120W) i ytterligere 10 min. Blandingen ble deretter konsentrert i vakuum og renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 38 (0,006 g). LCMS viste MH<+>= 399; Tret = 2,64 min.

Eksempel 38: l-etyl-A^-(tetrahydro-2/r-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2/r-pyran-4-yl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-l/7-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin

En alternativ metode for fremstilling av Eksempel 38 blir nå beskrevet:

En blanding av Mellomprodukt 30 (0,325 g, 2,5 mmol), TBTU (0,803 g, 2,5 mmol) og DIPEA (1,75 ml, 10,04 mmol) i N,N-dimetylformamid (10 ml) ble omrørt ved 20°C i 20 minutter. En suspensjon av Mellomprodukt 19 (1,024 g, 3,00 mmol) i N,N-dimetylformamid ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt i 18 timer. Løsningsmidlet ble avdampet og residuet påført på SPE-patroner (2 x 50 g, aminopropyl). Patronene ble eluert med diklormetan metanol (0 -100% metanol over 17 minutter ved 25 ml/min). Passende fraksjoner ble inndampet i vakuum og residuet oppløst i tetrahydrofuran (10 ml). Burgess Reagens (0,746 g, 3,13 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 2,5 timer. Ytterligere Burgess Reagens (0,284 g) ble tilsatt og oppvarmning fortsatt i 1,5 timer. Løsningsmidlet ble avdampet i vakuum. Residuet ble påført på en SPE-patron (silika, 100 g) og eluert med cykloheksan:etylacteat (gradient av 0 til 100% etylacetat over 25 minutter med 25 ml/min) fulgt av etylacetat deretter etylacetatmetanol (4:1). Passende fraksjoner ble samlet og inndampet, hvilket ga Eksempel 38 som et hvitt, fast stoff (0,503 g). LCMS viste MH<+>= 399, TRET = 2,67 min.<!>h NMR (400MHz i CDC13, 2TC, 8 ppm) 9,14 (br m, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 4,52 (q, 2H), 4,24 (m, 2H), 4,10 (m, 4H), 3,64 (m, 4H), 3,27 (m, 1H), 2,25-1,96 (m, 6H), 1,85 (m, 2H), 1,53 (t, 3H).

Eksempel 40A: Metyl-2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/f-pyran-4-ylamino)-l//- pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yl]-4,5-dihydro-l,3-oksazol-4-karboksylat

Mellomprodukt 33 (0,055 g, 0,14 mmol) og Burgess reagens (0,037 g, 0,16 mmol) ble suspendert i THF (2 ml) og oppvarmet ved tilbakeløp i 4 timer. Løsningsmidler ble fjernet i vakuum og residuet påført på en SPE-patron (silika, 2 g), som ble eluert med cykloheksan:etylacetat (1:2). Konsentrasjon i vakuum ga Eksempel 40A (0,03 g). LCMS viste MH<+>= 374, Tret = 2,78 min.

Eksempel 41: Metyl- 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//- pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,3-oksazol-4-karboksylat

Forbindelsen i eksempel 41 ble syntetisert ved anvendelse av den følgende rute, reagenser og løsningsmidler:

I én utførelsesform er en egnet detaljert prosedyre for de første to trinn gitt ovenfor i "Mellomprodukt 33" og "Eksempel 40A". I én utførelsesform er en egnet detaljert prosedyre for syntetisering av Eksempel 41 fra Eksempel 40A som følger: Eksempel 40A (0,023 g, 0,062 mmol) og DBU (0,028 g, 0,18 mmol) ble oppløst i karbontetraklorid/acetonitril/pyridin (2:3:3, 1,6 ml) og omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 48 timer. Løsningsmidler ble fjernet i vakuum og residuet ble renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 41 (0,0017 g). LCMS viste MH<+>= 372, Tret= 9,24 min. Eksempel 42: l-etyl-5-(4-metyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl)-A^-(tetrahydro-2/r-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 34 (0,095 g, 0,27 mmol) og Burgess reagens (0,071 g, 0,30 mmol) ble oppløst i THF (2 ml) og oppvarmet ved tilbakeløp i 4 timer. Løsningsmidler ble fjernet i vakuum og residuet påført på SPE (silika, 5 g), som ble eluert med etylacetat, hvilket ga Eksempel 42 (0,045 g). LCMS viste MF<f>= 330, Tret = 2,84 min.

Eksempel 43: l-n-propyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Eksempel 43 ble syntetisert i henhold til det følgende reaksjonsskjema:

Detaljerte betingelser som kan anvendes for de første seks reaksjoner fra Mellomprodukt 1 til Mellomprodukt 40 er gitt i "Mellomprodukt" syntesene ovenfor for Mellomprodukter 35, 36,37, 38, 39 og 40.

Eksempel 43 kan fremstilles fra Mellomprodukt 40 ved anvendelse av en lignende prosess som den beskrevet for Eksempel 1,2, 3, ved anvendelse av et lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler. LCMS viste MH<*>= 343, Tret = 2,70 min.

Eksempel 44: l-etyl-5-[5-(tetrahydrofuran-2-yl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

En løsning av tetrahydro-2-furoinsyre = 2-(tetrahydrofuran)karboksylsyre (kommersielt tilgjengelig fra Sigma-Aldrich) (0,012 ml, 0,12 mmol), TBTU (0,039 g, 0,12 mmol) og DIPEA (0,084 ml, 0,48 mmol) i DMF (2 ml) ble omrørt ved romtemperatur under nitrogen. Mellomprodukt 19 (0,045 g, 0,12 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i 2 dager. Blandingen ble konsentrert i vakuum og deretter ble residuet påført på en SPE-patron (aminopropyl, 5 g), som ble eluert med metanol. Fraksjoner inneholdende det ønskede materiale ble konsentrert i vakuum. Halvparten av det delvis rensede materialet ble oppløst i THF (0,1 ml) og behandlet med Burgess reagens (0,015 g, 0,06 mmol). Blandingen ble oppvarmet under mikrobølge-betingelser ved 120°C (100W) i 5 minutter. Blandingen ble deretter konsentrert i vakuum og påført på en SPE-patron (silika, 0,5 g). Patronen ble eluert med diklormetan: metanol (19:1), fraksjoner inneholdende det ønskede materiale ble konsentrert i vakuum. Prøven ble deretter fordelt mellom diklormetan og vann, den organiske fasen ble inndampet, hvilket ga Eksempel 44 (0,0065 g). LCMS viste MH<+>=385, TRET= 2,69 min.

Eksempel 45: l-etyl-5-[5-(dimetylamino)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 86 (0,113 g, 0,28 mmol) og Burgess Reagens (0,133 g, 0,56 mmol) i THF (1 ml) ble oppvarmet under mikrobølger 5 minutter ved 120°C, SmithCreator Microwave. Prøven ble inndampet i vakuum og residuet renset ved massedirigert autoprep HPLC...LCMS viste MH<+>= 358; TRET = 2,57 min Eksempel 46: l-etyl-5-(5-metyl-l,2,4-triazol-3-yl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

En løsning av mellomprodukt 19 (0,1 g, 0,29 mmol), diisopropyletylamin (0,3 ml, 1,74 mmol) og metylacetimidat-hydroklorid (0,095 g, 0,87 mmol, kommersielt tilgjengelig fra Aldrich) i etanol (3 ml) ble oppvarmet under tilbakeløp. Etter 17 timer ble reaksjonsblandingen inndampet til et oljeaktig residuum som ble fordelt mellom diklormetan (10 ml) og vann (2 ml). Fasene ble separert og den organiske fasen ble tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet til et voksaktig fast stoff (0,053 g). Rensning av en porsjon av dette faste stoffet (0,025 g) ved massedirigert autoprep HPLC ga Eksempel 46 (0,005 g). LCMS viste MH<+>= 328; TRET = 2,25 min.

Eksempel 47: N-(l-acetylpiperidin-4-yl)-l-etyl-5-(3-metyl-l,2,4-oksadiazol-5-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

En blanding av Mellomprodukt 41 (0,049 mg, 0,14 mmol), Mellomprodukt 9 (0,051 g, 0,68 mmol), natriumetoksyd (0,13 ml, 21% løsning i etanol, kommersielt tilgjengelig fra Aldrich) og pulverisert 4Å molekylsikter (0,3 g) i etanol (2 ml) ble oppvarmet ved 80°C i 16 timer under nitrogen. Blandingen ble avkjølt og filtrert og filtratet konsentrert i vakuum. Residuet ble påført på en SPE-patron (silika, 5 g) og eluert med cykloheksan, cykloheksan:etylacetat (1:1) og deretter etylacetat. De ønskede fraksjoner ble samlet og inndampet, hvilket ga Eksempel 47 (0,005 g). LCMS viste MH<+>= 370; Tret = 2,77 min Eksempel 48: N-(l-acetylpiperidin-4-yl)-l-etyl-5-[3-(morfolin-4-ylmetyl)-l,2,4-oksadiazol-5-yl] - lH-pyrazolo [3,4-b ] pyridin-4-amin

Eksempel 48 ble fremstilt fra Mellomprodukt 41 og Mellomprodukt 24 ved anvendelse av en analog metode som den for Eksempel 47. LCMS viste MH<+>= 455; TREt= 2,59 min.

Eksempel 49 1-etyl-5- [(4/?)-4-fenyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl] -7V-(tetrahydro-2/y<->pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin

Burgess reagens (0,189 g, 0,79 mmol) ble tilsatt porsjonsvis, over 3 min, til en omrørt løsning av Mellomprodukt 42 (0,293 g, 0,72 mmol) i tørr tetrahydrofuran (13 ml) ved romtemperatur under nitrogen. Den resulterende løsningen ble oppvarmet ved 70°C under nitrogen i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble inndampet, hvilket ga et gråhvitt, fast stoff som ble oppløst i diklormetan (5 ml) og påført på en SPE-patron (silika, 10 g). Patronen ble eluert sekvensielt med en gradient av etylacetat-petroleter (1:8,1:4,1:2, 1:1,1:0). Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble samlet og inndampet, hvilket ga Eksempel 49 som et hvitt, krystallinsk fast stoff (0,169 g). LCMS viste MH<+>= 392; Tret= 3,31 min.

Eksempel 50 l-etyl-5-[(45)-4-fenyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-A^-(tetrahydro-2/y<->pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin

Eksempel 50 ble fremstilt fra Mellomprodukt 43 ved anvendelse av en analog metode som den for Eksempel 49. LCMS viste MH<+>= 392; TREt = 3,32 min.

Eksempel 51 l-etyl-5- [(4S)-4-(fenylmetyl)-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl] - N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l/7-pyrazolo [3,4-6] pyridin-4-amin

Eksempel 51 ble fremstilt fra Mellomprodukt 44 ved anvendelse av en analog metode som den for Eksempel 49. LCMS viste MH* = 406; TRET = 3,38 min Eksempel 52 l-etyl-5- [(4Æ)-4-(fenylmetyl)-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl] - N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l.£r-pyrazolo [3,4-6] pyridin-4-amin

Eksempel 52 ble fremstilt fra Mellomprodukt 45 ved anvendelse av en analog metode som den for Eksempel 49. LCMS viste MH* = 406; TRET= 3,38 min.

Eksempel 53 l-etyl-5- [(45r,5Æ)-5-metyl-4-fenyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl] - N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l.£r-pyrazolo [3,4-6] pyridin-4-amin

Eksempel 53 ble fremstilt fra Mellomprodukt 46 ved anvendelse av en analog metode som den for Eksempel 49. LCMS viste MH<+>= 406; TREt = 3,37 min.

Eksempel 54 l-etyl-5-[(5/f)-5-fenyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-A^-(tetrahydro-2/y<->pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

Eksempel 54 ble fremstilt fra Mellomprodukt 47 ved anvendelse av en analog metode som den for Eksempel 49. LCMS viste MH<+>= 392; TRET = 3,29 min.

Eksempel 55 l-etyl-5-[(55)-5-fenyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-A^-(tetrahydro-2/7-pyran-4-yl)-l/7-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

Eksempel 55 ble fremstilt fra Mellomprodukt 48 ved anvendelse av en analog metode som den for Eksempel 49. LCMS viste MH<+>= 392; TRET = 3,29 min.

Eksempel 56 5-(4,4-dimetyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl)-l-etyl-A'-(tetrahydro-2/7-pyran-4-yl)-l/7-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

Eksempel 56 ble fremstilt fra Mellomprodukt 49 ved anvendelse av en analog metode som den for Eksempel 49. LCMS viste MH+ = 344; TRET = 2,95 min.

Eksempel 57: 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-l,3-oksazol-4-karboksylsyre

En løsning av litiumhydroksyd (0,12 g, 5,2 mmol) i vann (6 ml) ble satt til en suspensjon av Eksempel 41 (0,48 g, 1,3 mmol) i metanol (20 ml) og den resulterende blandingen oppvarmet ved 50°C i 2 timer. Løsningsmidlet ble avdampet i vakuum og residuet oppløst i vann (50 ml), avkjølt i et isbad og surgjort til pH 3 ved tilsetning av vandig saltsyre. Fellingen ble filtrert, vasket med vann og tørket i vakuum ved 40°C, hvilket ga Eksempel 57 som et hvitt, fast stoff (0,3 g). LCMS viste MH<+>= 358; Tret= 2,62 min

Eksempel 58: 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-(l-metyletyl)-l,3-oksazol-4-karboksamid

En blanding av Eksempel 57 (0,05 g, 0,14 mmol), HOBT (0,023 g, 0,17 mmol), EDC (0,038 g, 0,2 mmol) i DMF (2 ml) ble omrørt ved 20°C i 20 minutter. Isopropylamin (0,013 ml, 0,15 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt natten over. Løsningsmidlet ble konsentrert i vakuum og residuet oppløst i DCM. Den organiske fasen ble vasket med vann og deretter vandig natriumhydrogenkarbonat-løsning. De vandige fasene ble ekstrahert med DCM og de samlede organiske faser konsentrert i vakuum. Residuet ble påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g) og eluert med MeOH, passende fraksjoner ble samlet og inndampet i vakuum. Residuet ble ytterligere renset ved kromatografi på SPE (silika, 0,5 g) under eluering med cykloheksan:etylacetat (2:1 fulgt av 1:1), hvilket ga Eksempel 58 som et hvitt, fast stoff (0,012 g). LCMS viste MH<+>= 399; TRET= 2,78 min

Tilsvarende ble de følgende fremstilt ved anvendelse av samme eller lignende antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler: Eksempel 61:/ra/is-4-{[l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b] pyridin-4-yl] amino} cykloheksanol

Mellomprodukt 54 (0,072 g, 0,63 mmol), Mellomprodukt 12 (0,150 g, 0,57 mmol) og diisopropyletylamin (0,51 ml) i acetonitril (3 ml) ble oppvarmet ved 85°C i 18 timer og deretter inndampet i vakuum. Residuet ble fordelt mellom DCM og vann og den organiske fasen konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 61 (0,004 g). LCMS viste MH<+>= 343; TRET= 2,48 min

Tilsvarende ble de følgende fremstilt ved anvendelse av samme eller lignende antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler: Eksempel 65: 5-[5-(l,l-dimetyletyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-l-etyl-6-metyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 61 (0,266 g, 0,56 mmol) i fosforoksyklorid (10 ml) ble oppvarmet ved 120°C i 1,5 timer og deretter inndampet i vakuum. Residuet ble fordelt mellom DCM og vann og den organiske fasen konsentrert i vakuum. Residuet ble renset på en SPE-patron (silika, 5 g) under eluering med cykloheksan: etylacetat (2:1,1:1 deretter 2:3), hvilket ga Eksempel 65 (0,042 g). LCMS viste MH<+>= 385; Tret = 3,05 min.

Eksempel 66: l-etyl-6-metyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 64 (0,05 g, 0,11 mol) og Burgess Reagens (0,053 g, 0,22 mol) i en blanding av THF / DMF (1 ml, 1:1) ble oppvarmet under mikrobølge-betingelser ved 120°C (120W) i 5 minutter. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 150°C i fire 10 minutters intervaller, idet en ytterligere porsjon av Burgess reagens (0,025 g) ble tilsatt etter den første og tredje periode av ytterligere mikrobølge oppvarmning. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og renset ved SPE (silika, 0,5 g) under eluering med cykloheksan, cykloheksan: etylacetat (2:3 deretter 1:4) deretter etylacetat. Fraksjoner inneholdende det ønskede materiale ble inndampet i vakuum, hvilket ga Eksempel 66 (0,010 g). LCMS viste MH<+>= 413; TRET = 2,63 min.

Eksempel 67: 5-(5-cyklobutyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 65 (0,05 g, 0,13 mmol) og Burgess Reagens (0,07 g, 0,3 mmol) i THF (2 ml) ble oppvarmet ved 80°C i 7 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og en ytterligere porsjon av Burgess Reagens (0,07 g, 0,3 mmol) i THF (0,5 ml) ble tilsatt og reaksjonsblandingen tilbakeløpskokt i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og fordelt mellom DCM og vann. Fasene ble separert ved anvendelse av en hydrofob fritte (Whatman PTFE Filter Media med polypropylen-hus 5^iM porestørrelse). Den organiske fasen ble konsentrert i vakuum og residuet renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 67 (0,018 g). LCMS viste MH<+>= 369; TRET= 3,03 min.

Tilsvarende ble de følgende fremstilt ved anvendelse av samme eller lignende antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler: Eksempel 77: l-etyl-A^-(tetrahydro-2£T-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2£T-pyran-4-ylmetyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-l/7-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

Alternativ prosedyre:

Burgess Reagens (0,168 g, 0,74 mmol) ble satt til en løsning av Mellomprodukt 75 (0,141 g, 0,33 mmol) i tetrahydrofuran (2 ml). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 1,5 timer og deretter inndampet. Residuet ble påført på en SPE-patron (silika, 10 g) og eluert med cykloheksan:etylacteat (gradient av 0 til 100% etylacetat over 15 minutter ved 15 ml/min) fulgt av etylacetat og deretter etylacetat:metanol (4:1). Passende fraksjoner ble samlet og inndampet, hvilket ga Eksempel 77 som et hvitt, fast stoff (0,099 g). LCMS viste MH<+>= 413, TRET= 2,72 min.<!>h NMR (400MHz i CDC13, 27°C, 8ppm) 9,12 (br m, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 4,52 (q, 2H), 4,245 (m, 1H), 4,08 (m, 2H), 4,00 (m, 2H), 3,67 (m, 2H), 3,44 (m, 2H), 2,91 (m, 2H), 2,20 (m, 3H), 1,93-1,70 (m, 4H), 1,57-1,40 (m, 5H).

Eksempel 81: 5-f5-(l-acetyl-4-ieridin<y>l)-l.,3,4-oksadiazol-2-<y>ll-l-et<y>l-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

Mellomprodukt 79 (0,18 mmol) og Burgess Reagens (0,14 g, 0,6 mmol) i THF (0,75 ml) ble oppvarmet ved 80°C under en atmosfære av nitrogen i 16 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert ved anvendelse av en strøm av nitrogen og residuet oppløst i DCM (8 ml). Løsningen ble omrørt med vann og fasene separert ved anvendelse av en hydrofob fritte (Whatman). Den organiske fasen ble konsentrert i vakuum og materialet ble renset ved massedirigert auotprep HPLC, hvilket ga Eksempel 81 (0,005 g). LCMS viste MH<+>= 440; TRET = 2,52 min.

Eksempel 82: l-etyl-5-{3-[(4-metyl-l-piperazinyl)metyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin

En blanding av Mellomprodukt 16 (0,064 g, 0,2 mmol), Mellomprodukt 80 (0,172 g, 1 mmol), en løsning av natriumetoksyd i EtOH (0,19 ml, 21% løsning) og pulverisert 4Å molekylsikter (0,38 g) i EtOH (2 ml) ble omrørt ved 82°C under en atmosfære av nitrogen i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert, løsningsmidlet ble avdampet i vakuum og residuet ble påført på en SPE-patron (silika, 2 g). Patronen ble eluert med (i) cykloheksan, (ii) cykloheksan: etylacetat (4:1, 3:2,1:1,2:3, 1:4), (iii) EtOAc, (iv) MeOH og (v) 10% vandig NH3løsning i MeOH, hvilket ga Eksempel 82 som et hvitt, fast stoff (0,038 g). LCMS viste MH+ = 427; TRET = 2,10 min.

Tilsvarende ble de følgende fremstilt fra Mellomprodukt 16, ved anvendelse av samme eller lignende antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler:

Eksempler 85 til 96 - forskjellige 5-{3-[substituerte]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-aminer

Eksempler 85 til 96 kan fremstilles fra Mellomprodukt 16 ved anvendelse av lignende prosesser som de beskrevet for hvilket som helst av Eksempler 28-31 eller 82-84, ved anvendelse av lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler.

Alternativt kan Eksempler 85 til 90 og Eksempler 95 til 96 (alle amider) fremstilles fra den tilsvarende karboksylsyre-forbindelse Mellomprodukt 83, ved å aktivere karboksylsyregruppen (f.eks. ved anvendelse av et koblingsmiddel så som EDC, HATU eller mer foretrukket TBTU) og omsette den aktiverte karboksylsyre med det passende amin rIOrI InH. Denne reaksjonen, foretrukne reagenser og strukturen av

Mellomprodukt 83 er vist i det følgende skjema (Mellomprodukt 83 har samme struktur som Eksempel 84 men 1,2,4-oksadiazol-sidekjeden Rx er -CH2-C(0)OH):

Som vist i skjemaet ovenfor kan Mellomprodukt 83 fremstilles ved hydrolyse av den tilsvarende t-butylester-forbindelse Mellomprodukt 84 (hvor 1,2,4-oksadiazol-sidekjeden Rx er -CH2-C(0)-0-<t>Bu). Mellomprodukt 84 kan fremstilles fra Mellomprodukt 17 og Mellomprodukt 85 som vist i skjemaet ovenfor. Fremstilling av Mellomprodukt 85 er vist tidligere.

I en alternativ utførelsesform kan Eksempler 85 til 90 og Eksempler 95 til 96 fremstilles ved omsetning av karboksylsyre Mellomprodukt 83 med rIOrI InH som vist ovenfor, men mellomproduktet 83 (hvor 1,2,4-oksadiazol-sidekjeden Rx er -CH2-C(0)OH) kan fremstilles fra Eksempel 84, ved å hydrolysere amidbindingen i Rx i Eksempel 84 for å danne karboksylsyre Mellomprodukt 83.

Eksempel-nummere og tilsvarende strukturer i Eksempler 85 til 96 er som følger: Eksempel 85: 2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/7-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}-iV-fenylacetamid

Generell prosedyre for Eksempler 85 til 90:

N,N-dimetylformamid (0,1 ml) ble satt dråpevis til en omrørt blanding av Mellomprodukt 83 (0,525 g, 1,40 mmol) og oksalylklorid (0,18 ml, 2,1 mmol) i diklormetan (15 ml) ved 0°C under en atmosfære av nitrogen. Den resulterende blandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time.

En aliquot av løsningen ovenfor (1,1 ml) ble satt til en løsning av aminet r<IO>rnH (0,6 mmol) i diklormetan (0,5 ml). Reaksjonsblandingen fikk stå ved romtemperatur i 2 timer og ble deretter påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g). Patronen ble eluert med kloroform, deretter etylacetat / metanol (9:1). Fraksjoner inneholdende produktet ble konsentrert og residuet renset med SPE-patron (silika, 5 g) under eluering med diklormetan, eter, etylacetat, deretter etylacetat / metanol (9:1). De ønskede fraksjoner ble konsentrert, hvilket ga eksemplene gitt nedenfor.

Eksempel 92: l-etyl-5-{3-[l-(4-morfohnyl)etyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l/7-pyrazolo [3,4-6] pyridin-4-amin

En blanding av Mellomprodukt 16 (0,059 g, 0,2 mmol), Mellomprodukt 121 (0,161 g, 1,54 mmol), en løsning av natriumetoksyd i EtOH (0,21 ml, 21% løsning) og pulverisert 4Å molekylsikter (0,43 g) i EtOH (1,5 ml) ble omrørt ved 82°C under en atmosfære av nitrogen i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert og residuet renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 92 (0,007 g). LCMS viste MH<+>= 428; Tret = 2,46 min.

Eksempel 93: 5-f3-(cykloheksylmetyl)-l,2,4-oksadiazol-5-yll-l-etyl-A^-(tetrahydro-2/y-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

En blanding av Mellomprodukt 16 (0,098 g, 0,31 mmol), Mellomprodukt 122 (0,24 g, 0,93 mmol), en løsning av natriumetoksyd i EtOH (0,21 ml, 21% løsning) og pulverisert 4Å molekylsikter (0,43 g) i EtOH (1,5 ml) ble omrørt ved 82°C under en atmosfære av nitrogen i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert og residuet renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 93 (0,079 g). LCMS viste MH<+>= 411; Tret= 3,80 min.

Eksempel 95: l-etyl-5-{3-[2-okso-2-(l-piperidinyl)etyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l/7-pyrazolo [3,4-6] pyridin-4-amin

Generell prosedyre for Eksempel 95 til 96:

En aliquot av løsningen ovenfor (1,1 ml) ble satt til en løsning av rIOrI ^NH amin (0,6 mmol) i diklormetan (0,5 ml). Reaksjonsblandingen fikk stå ved romtemperatur i 2 timer og ble deretter påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g). Patronen ble eluert med kloroform og deretter etylacetat / metanol (9:1). Fraksjoner inneholdende produktet ble konsentrert og residuet renset med SPE-patron (silika, 5 g) under eluering med diklormetan, eter, etylacetat deretter etylacetat / metanol (9:1). De ønskede fraksjoner ble konsentrert, hvilket ga eksemplene gitt nedenfor.

Eksempler 97 til 125 - forskjellige 5-{5-[substituerte]-l,3,4-oksadiazol-2-yl}-l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-aminer

Eksempler 97 til 125 kan fremstilles ved anvendelse av prosesser lignende de beskrevet for hvilket som helst av Eksempler 9,14, 32-40,44-45, 60-64, 65-66 og 67-81, ved anvendelse av et lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler.

Eksempel 97: l-etyl-A^-(tetrahydro-2^-pyran-4-yl)-5-[5-(m-l,2,3-triazol-l-ylmetyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-l/7-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

Generell prosedyre for fremstilling av eksempler 97 til 125:

En blanding av diacyl-hydrazid Mellomprodukt (et av Mellomprodukter 89-114) og Burgess Reagens (2 ekvivalenter) i N,N-dimetylformamid (1 ml) ble oppvarmet i en mikrobølgeovn i 10 minutter ved 120°C ved 150 Watt. Den resulterende løsningen ble konsentrert i vakuum og fordelt mellom kloroform og vann. Den organiske fasen ble separert ved anvendelse av en hydrofob fritte (Whatman PTFE Filter Media med polypropylen-hus 5^iM porestørrelse) og deretter konsentrert. Residuet ble renset ved massedirigert auto-prep HPLC.

Ettersom enten maursyre eller trifluoreddiksyre blir anvendt i løsningsmidlene ved den massedirigerte auto-prep HPLC-prosedyre (se avsnittet "Maskin-metoder" ovenfor), ble noen av eksemplene isolert som formiatsaltet eller trifluoracetatsaltet som vist nedenfor.

Eksempelnummere og tilsvarende strukturer av Eksempler 97 til 125 er som følger:

Eksempler 126 til 147 - forskjellige 5-{4-[substituerte]-oksazol-2-yl}-l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo [3,4-b] pyridin-4-aminer

Eksempler 126 til 147 (alle amider) kan fremstilles ved omsetning av Eksempel 57 og det passende amin for å danne amidbindingen ved anvendelse av en fremgangsmåte lignende den beskrevet for Eksempel 58, bortsett fra at HATU fortrinnsvis blir anvendt istedenfor EDC som koblingsmiddel og anvendelse av en lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler som i Eksempel 58.

Eksempel 126: 2- [l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo [3,4-6]pyridin-5-yl]-Af-(fenylmetyl)-l,3-oksazol-4-karboksamid

Generell prosedyre for Eksempler 126 til 147:

En blanding av Eksempel 57 (0,014 g, 0,04 mmol), diisopropyletylamin (0,0017 ml, 0,096 mmol) og HATU (0,016 g, 0,042 mmol) i N,N-dimetylformamid (0,4 ml) fikk stå i 10 minutter. Den resulterende løsningen ble satt til det passende amin rOr<II>nh (0,05 mmol) og blandingen ble omrørt med ultralydbehandling. Etter henstand i 18 timer ble løsningsmidlet fjernet i vakuum. Residuet ble påført på en SPE-patron (aminopropyl, 0,5 g) og patronen eluert med kloroform (1,5 ml) fulgt av etylacetat: metanol (9:1,2 ml). Passende fraksjoner ble inndampet i vakuum og residuet renset ved massedirigert auto-prep HPLC.

Eksempelnummere og tilsvarende strukturer av Eksempler 126 til 147 er som følger:

Eksempel 148: 2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2£T-pyran-4-ylamino)-LH-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}-A^-(tetrahydro-2£T-pyran-4-yl)acetamid

Generell prosedyre for Eksempler 148- 155 og for alternativ fremstilling av Eksempel 84: N,N-dimetylformamid (0,1 ml) ble satt dråpevis til en omrørt blanding av Mellomprodukt 83 og oksalylklorid (0,18 ml, 2,1 mmol) i diklormetan (15 ml) ved 0°C under en atmosfære av nitrogen. Den resulterende blandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time.

En aliquot av løsningen ovenfor (1,1 ml) ble satt til en løsning av aminet r<IO>r<II>nH (0,6 mmol) i diklormetan (0,5 ml). Reaksjonsblandingen fikk stå ved romtemperatur i 2 timer og ble deretter påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g). Patronen ble eluert med kloroform, deretter etylacetat / metanol (9:1). Fraksjoner inneholdende produktet ble konsentrert og residuet renset med SPE-patron (silika, 5 g) under eluering med diklormetan, eter, etylacetat, deretter etylacetat / metanol (9:1). De ønskede fraksjoner ble konsentrert, hvilket ga eksemplene gitt nedenfor.

Eksempel 157: 6-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl}-2-piperidinon

Generell prosedyre for Eksempler 157 til 158:

En blanding av diacylhydrazid Mellomprodukt 104 eller 105 og Burgess Reagens (2 ekvivalenter) i N,N-dimetylformamid (1 ml) ble oppvarmet i en mikrobølgeovn i 10 minutter ved 120°C ved 150 Watt. Den resulterende løsningen ble konsentrert i vakuum og fordelt mellom kloroform og vann. Den organiske fasen ble separert ved anvendelse av en hydrofob fritte (Whatman PTFE Filter Media med polypropylen-hus 5^iM porestørrelse), og deretter konsentrert. Residuet ble renset ved massedirigert auto-prep HPLC

Eksempel 159: iV-({5- [l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo [3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)acetamid

GenereU prosedyre for Eksempler 159 til 165:

Det passende karboksylsyreklorid R^<7>C(0)C1 (0,12 mmol) ble satt til en omrørt løsning av amin Mellomprodukt 118 (0,1 mmol) og diisopropyletylamin (0,3 mmol) i kloroform (1 ml) ved romtemperatur. Etter omrøring ved romtemperatur i 16 timer ble reaksjonsblandingen påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g) og patronen ble eluert sekvensielt med kloroform, etylacetat og metanol. Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble samlet og blåst ned under nitrogen. Det resulterende residuet ble ytterligere renset på en SPE-patron (silika, 1 g) under eluering med en gradient av 30-100% etylacetat i petroleter. Passende fraksjoner ble samlet og løsningsmidlene ble avdampet, hvilket ga produktet.

Eksempel 166: iV-({5- [l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo [3,4-£]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)metansulfonamid

Generell prosedyre for Eksempler 166 til 172:

Det passende sulfonylklorid R.18S(0)2C1 (0,12 mmol) ble satt til en omrørt løsning av amin Mellomprodukt 118 (0,1 mmol) og pyridin (0,2 mmol) i kloroform (1 ml) ved romtemperatur. Etter omrøring ved romtemperatur i 16 timer ble reaksjonsblandingen påført på en SPE-patron (aminopropyl, 2 g,) og patronen ble eluert sekvensielt med kloroform, etylacetat og metanol. Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble samlet og blåst ned under nitrogen. Det resulterende residuet ble ytterligere renset på en SPE-patron (silika, 1 g) under eluering med en gradient av 30-100% etylacetat i petroleter. Passende fraksjoner ble samlet og løsningsmidlene ble avdampet, hvilket ga produktet. Eksempel 173: l-({5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-pyrrolidinon

En løsning av Mellomprodukt 119 (45 mg, 0,1 mmol) i tørr dimetylformamid (2 ml) ble satt til natriumhydrid (60% dispersjon i mineralolje, 4,4 mg, 0,11 mmol) og den resulterende blandingen ble omrørt ved romtemperatur. Etter 16 timer ble reaksjonsblandingen fortynnet med vann (2 ml) og ekstrahert med kloroform (3x5 ml). De samlede organiske ekstrakter ble tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet, hvilket ga råproduktet. Rensning av råproduktet på en SPE-patron (silika, 2 g) ved anvendelse av en gradient av etylacetat i petroleter ga Eksempel 173. LCMS viste MH<+>=412, Tret= 2,59 min.

Eksempel 174: l-({5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/T-pyran-4-ylamino)-l/T-pyrazolo[3,4-b] pyridin-5-yl] -1,2,4-oksadiazol-3-yl} metyl)-2-pip eridinon

En løsning av Mellomprodukt 120 (46 mg, 0,1 mmol) i tørr dimetylformamid (2 ml) ble satt til natriumhydrid (60% dispersjon i mineralolje, 4,4 mg, 0,11 mmol) og den resulterende blandingen ble omrørt ved romtemperatur. Etter 16 timer ble reaksjonsblandingen fortynnet med vann (2 ml) og ekstrahert med kloroform (3x5 ml). De samlede organiske ekstrakter ble tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet, hvilket ga råproduktet. Rensning av råproduktet på en SPE-patron (silika, 2 g) ved anvendelse av en gradient av etylacetat i petroleter ga Eksempel 174. LCMS viste MH<+>=426, Tret= 2,66 min.

Eksempel 175 5-{3-[(l-acetyl-4-piperidinyl)metyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-l-eryl-A^

(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l/7-pyrazolo [3,4-6] pyridin-4-amin

Acetylklorid (0,04 mmol) ble satt til en omrørt løsning av Mellomprodukt 125 (0,033

mmol) og diisopropyletylamin (0,1 mmol) i kloroform (1 ml) ved romtemperatur. Etter omrøring ved romtemperatur i 1,5 timer ble en ytterligere mengde av acetylklorid (0,04 mmol) og diisopropyletylamin (0,1 mmol) satt til reaksjonsblandingen. Etter 3,5 timer ble reaksjonsblandingen påført på en SPE-patron (aminopropyl, 1 g,) og patronen ble eluert sekvensielt med kloroform, etylacetat og metanol. Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble samlet og blåst ned under nitrogen. Det resulterende residuet ble ytterligere renset på en SPE-patron (silika, 1 g) under eluering med en gradient av 30-

100% etylacetat i petroleter, hvilket ga Eksempel 175 LCMS viste MH<+>= 454, TRET= 2,79 min.

Eksempel 176 l-etyl-5-(3-{[l-(3-metylbutanoyl)-4-piperidinyl]metyl}-l,2,4-oksadiazol-5-yl)-A'-(tetrahydro-2/r-pyran-4-yl)-l/r-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

Isovalerylklorid (0,04 mmol) ble satt til en omrørt løsning av Mellomprodukt 125 (0,033 mmol) og diisopropyletylamin (0,1 mmol) i kloroform (1 ml) ved romtemperatur. Etter omrøring ved romtemperatur i 1,5 timer ble reaksjonsblandingen påført på en SPE-patron (aminopropyl, 1 g,) og patronen ble eluert sekvensielt med kloroform, etylacetat og metanol. Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble samlet og blåst ned under nitrogen. Det resulterende residuet ble ytterligere renset på en SPE-patron (silika, 1 g) under eluering med en gradient av 30-100% etylacetat i petroleter, hvilket ga Eksempel 176. LCMS viste MH<+>= 496, Tret= 3,17 min.

Eksempel 177: l-etyl-5-(3-{[l-(metylsulfonyl)-4-piperidinyl]metyl}-l,2,4-oksadiazol-5-yl)-A'-(tetrahydro-2/r-pyran-4-yl)-l/r-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

Metansulfonylklorid (1,16 mmol) ble satt til en omrørt løsning av Mellomprodukt 125 (0,033 mmol) og pyridin (0,5 ml) i kloroform (1 ml) ved romtemperatur. Etter omrøring ved romtemperatur i 31 timer ble reaksjonsblandingen påført på en SPE-patron (aminopropyl, 5 g) og patronen ble eluert sekvensielt med kloroform, etylacetat og metanol. Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble inndampet i vakuum. Det resulterende residuet ble ytterligere renset på en SPE-patron (silika, 1 g) under eluering med en gradient av 30-100% etylacetat i petroleter, hvilket ga Eksempel 176. LCMS viste MH<+>= 490, TRET = 2,97 min.

Eksempel 178:

En blanding av Mellomprodukt 16 (0,067 g, 0,26 mmol), amidoksim Mellomprodukt 126 (0,255 g, 1,06 mmol), en løsning av natriumetoksyd i EtOH (0,87 ml, 21% løsning) og pulverisert 4Å molekylsikter (0,68 g) i EtOH (2 ml) ble omrørt ved 82°C under en atmosfære av nitrogen i 12 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert og løsningsmidlet ble avdampet i vakuum. Residuet ble påført på en SPE-patron (silika, 5 g) og eluert med etylacetat: cykloheksan (0 til 70% med 10% økninger). Passende fraksjoner ble samlet og inndampet, residuet ble renset ytterligere ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 178 (0,011 g) LCMS viste MH<+>= 495; TRET = 3,2 min.

Eksempel 188: l-etyl-5-(5-etyl-l,2,4-oksadiazol-3-yl)-A^-(tetrahydro-2/T-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

Propionsyreanhydrid (0,015 ml, 0,12 mmol) ble satt til Mellomprodukt 138 (0,030 g, 0,1 mmol) i iseddik (1,5 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer og deretter oppvarmet ved 80°C i 5 timer. Løsningsmidlet ble konsentrert i vakuum og residuet påført på en SPE-patron (silika, 1 g). Patronen ble eluert med cykloheksan og deretter cykloheksan:etylacetat (7:3). Passende fraksjoner ble samlet og inndampet, hvilket ga Eksempel 188 som et hvitt, fast stoff (0,015 g). LCMS viste MH<+>= 343; Tret = 2,92 min

Eksempel 189: 5-(5-{[4-(dimetylamino)fenyl]metyl}-l,2,4-oksadiazol-3-yl)-l-etyl-A'-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l/7-pyrazolo [3,4-6] pyridin-4-amin

4-(dimetylamino)fenyleddiksyre (0,09 g, 0,504 mmol) og l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydroklorid (0,097 g, 0,51 mmol) i diklormetan (1 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og deretter ble Mellomprodukt 138 (0,07 g, 0,23 mmol) og diglym (1 ml) tilsatt. Etter omrøring ved 20°C i 18 timer ble iseddik (0,07 ml) og ytterligere diglym (0,5 ml) tilsatt og blandingen ble oppvarmet ved 60°C i 2 timer og deretter ved 75°C i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble påført på en SPE-patron (SCX, 2 g) og patronen eluert med metanol, deretter 10% ammoniakk i metanol. De metanoliske ammoniakk-fraksjoner ble inndampet i vakuum og residuet renset ved massedirigert autoprep HPLC, hvilket ga Eksempel 189 som et beige, fast stoff (0,004 g). LCMS viste MH<+>= 448; TRET = 3,24 min. Eksempel 190: l-etyl-5-(5-{[4-(metyloksy)fenyl]metyl}-l,2,4-oksadiazol-3-yl)-iV-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l.£r-pyrazolo [3,4-6] pyridin-4-amin

Fremstilt fra Mellomprodukt 138 og 4-metoksyfenyleddiksyre ved anvendelse av en lignende prosess som den beskrevet for Eksempel 189 ved anvendelse av lignende eller samme antall mol av reagenser og/eller volumer av løsningsmidler. LCMS viste MH<+>= 435; Tret = 3,26 min

Eksempel 191: 5-(3,8-dioksa-l-azaspiro[4,5]dec-l-en-2-yl)-l-etyl-A^tetrahydro-2/7-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

Eksempel 191 ble fremstilt fra Mellomprodukt 139 ved anvendelse av en analog metode som den for Eksempel 49. LCMS viste MH<+>= 386, TREt = 2,71 min.

Claims

1. Forbindelse,karakterisert vedformel (I) eller et salt derav:

hvor: R<1>er C^alkyl, Cifluoralkyl eller -(CH2)20H; R<2>er et hydrogenatom (H), metyl eller Cifluoralkyl; R<3>er eventuelt substituert C3_gcykloalkyl eller en eventuelt substituert heterocyklisk gruppe med sub-formel (aa), (bb) eller (cc):

hvor ni og n<2>uavhengig er 1 eller 2; og Y er O, S, SO2eller NR<4>; hvor R<4>er et hydrogenatom (H), Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, C(0)NH2, C(0)-Ci_2alkyl eller C(0)-Cifluoralkyl; hvor i R<3>C3_8cykloalkyl eventuelt er substituert med én eller to substituenter som uavhengig er okso (=0); OH; C^alkoksy; Cifluoralkoksy; NHR^<l>hvor R<21>er et hydrogenatom (H); Ci_2alkyl; Cifluoralkyl; -CH2OH; -CH2NHR<22>hvor R22 er H; -C(0)OR23 hvor R<23>er H; -C(0)NHR24 hvor R24 er H; -C(0)R25 hvorR25 er metyl; fluor; hydroksyimino (=N-OH); eller (Ci_2alkoksy)imino (=N-OR<2>^ hvor R2** er Ci_2alkyl); og hvor hvilken som helst OH-, alkoksy-, fluoralkoksy- eller NHR<21->substituent ikke er substituert i R<3>ringkarbonet tilknyttet (bundet) til -NH-gruppen i formel (I): og hvor R<3>i den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa), (bb) eller (cc) eventuelt er substituert med en eller to substituenter som er okso (=0); og R<3a>er et hydrogenatom (H); og hvor Het har sub-formel (i), (ii), (iii), (iv) eller (v):

hvor: W1,W2,W<4>og W<5>er N; ogW3 er NRW; X1,X3 og X<4>er N eller CR<X>; X<2>er O, S eller NRX; og X<5>er CR^R*2 ellerCrX3rX4. Y1,Y2 og Y3 er CR<Y>eller N;Y4 er O, S eller NRY ; og Y$ erCRY1RY2; Z<1>og Z<5>er O, S eller NR<Z>; og Z<2>,Z3 og Z<4>er N eller CRZ; hvor: r<W>er et hydrogenatom (H); Rx,Rx2, RY og R<Y2>er uavhengig: et hydrogenatom (H); Ci_8alkyl; C3_6cykloalkyl eventuelt substituert med én eller to Cj.2alkylgrupper og/eller med én okso (=0) gruppe; -(CH2)n<2a->C3_6cykloalkyl eventuelt substituert, i -(CH2)n<2a>-gruppen eller i C3_6cykloalkylgruppen, med en Cj_2alkylgruppe eller eventuelt substituert i C3_6cykloalkylgruppen med en -CH2C(0)NHCi_2alkylgruppe, hvor n<2>a er 1,2 eller 3; -(CH2)n<3->S(0)2-R<5>, -CH(Ci_2alkyl)-S(0)2-R<5>, -CMe2-S(0)2-R<5>eller C3_5cykloalkyl substituert i det forbindende karbonatom med -S(0)2-R^, hvor n<3>er 1 eller 2; og R5 er Cj_4alkyl, -NR^R^, fenyl, karbon-bundet pyridinyl eller benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to substituenter som uavhengig er fluor, klor, Cj.2alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy, Cifluoralkoksy eller OH og hvor pyridinyl eventuelt er substituert med én av metyl, metoksy eller OH (omfattende hvilken som helst tautomer derav)); hvor RIS er H, Ci_4alkyl, fenyl, benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to substituenter som uavhengig er fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy eller Cifluoralkoksy), CH(Me)Ph eller karbon-bundet pyridinyl eventuelt substituert med én av metyl, metoksy eller OH (omfattende hvilken som helst tautomer derav); ogR16 er H eller Ci_2alkyl; eller hvorR15 ogR16 sammen er -(CH2)n3a-X3a.(CH2)n3b- hvor n3a og n<3>^ uavhengig er 2 eller 3 og X<3a>er en binding, -CH2-, O eller NR8a hvor R<8a>er H eller Ci_2alkyl, acetyl, -S(0)2Me eller fenyl og hvor ringen dannet ved NR<15>r<16>eventuelt er substituert på et ringkarbon med én eller to substituenter som uavhengig er metyl eller okso (=0); -(CH2)n<4->NR6R7, -CH(Ci_2alkyl)-NR6R<7>, -CMe2-NR6R7 eller C3_5cykloalkyl substituert i det forbindende karbonatom med -NR^R<7>, hvor n<4>er 0,1,2 eller 3; og R6 og R<7>er uavhengig H, C^alkyl, C3_6cykloalkyl, -C<H>2-C3.6cykloalkyl, -C(0)R1<7>, -S(0)2R<18>, fenyl, benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to substituenter som uavhengig er fluor, klor, Cj.2alkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy eller Cifluoralkoksy) eller karbon-bundet pyridinyl eventuelt substituert med én av metyl, metoksy eller OH (omfattende hvilken som helst tautomer derav); og hvor R.17 og R<*8>uavhengig er Ci.galkyl, C3_6cykloalkyl, eventuelt substituert 5-leddet heteroaryl som er furyl (furanyl) eller 1,3-oksazolyl eller isoksazolyl eller oksadiazolyl eller tienyl eller 1,3-tiazolyl eller isotiazolyl eller pyrrolyl eller imidazolyl eller pyrazolyl (alle uavhengig eventuelt substituert med én okso og/eller én eller to metyl) eller fenyl eller benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to substituenter som uavhengig er fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy, Cifluoralkoksy eller OH) eller karbon-bundet-pyridinyl eventuelt substituert med én metyl, metoksy eller OH (omfattende hvilken som helst tautomer derav); eller R<6>og R<7>sammen er -(CH2)n<5>-X<5->(CH2)n<6->hvor n<5>ogn6 uavhengig er 2 eller 3 og X^ er en binding, -CH2-, O eller NR<8>hvor R<8>er H, Cj_2alkyl, acetyl, -S(0)2Me eller fenyl og hvor ringen dannet ved NR<6>r<7>eventuelt er substituert på et ringkarbon med én eller to substituenter som uavhengig er metyl eller okso (=0); -(C<H>2)n<7->0-R<9>; hvor n<7>er 0, 1, 2 eller 3 og R9 er H, Ci_6alkyl, C3.6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, -C(0)R<l7>, fenyl eller benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to av fluor, klor, Ci_2alkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy eller Cifluoralkoksy); hvor n<7>er 0 bare når -(CH2)n<7->0-R<9>er bundet til et karbonatom i Het-ringen; og hvor n<7>ikke er 0 når Het har sub-formel (v) (dvs. n<7>er ikke 0 for RX2 og for RY2); -(CFJ^n1 ^CCOVNRiOR11, -CHCCi^alkylVCCOVNR^R<11>, -CMe2-C(0)-NR<10>R<11>eller C3_5cykloalkyl substituert i det forbindende karbonatom med -C^-NR^R1!, hvor n<1>1 er 0, 1 eller 2; og hvor RIO og Ri 1 uavhengig er H; Ci_6<a>lkyl; Cifluoralkyl; C2_4alkyl substituert med én OH eller -OCi_2alkyl bortsett fra ved forbindelsespunktet; C3_6cykloalkyl eventuelt substituert med én eller to metylgrupper; -CH2-C3_6cykloalkyl eventuelt substituert med én metyl-, NH2- eller NHMe-gruppe; -(CH2)n^-Het<2>; karbon-bundet pyridinyl eventuelt substituert med én metyl, metoksy eller OH (omfattende hvilken som helst tautomer derav); fenyl; benzyl; eller -CH(Cj.2alkyl)Ph [hvor fenyl, benzyl og -CH(Ci_2alkyl)Ph uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to substituenter som uavhengig er: fluor, klor, Cj.2alkyl, Cifluoralkyl, Cj^alkoksy, Cifluoralkoksy, OH, .NRlOaRlOb (hvor R^a er h eller Ci_2alkyl ogR10b er H, C^alkyl, -C(0)-C1.2alkyl eller -S(0)2-C1.2alkyl), -C(O)-NR!0cRl0d(hVOr R^c0gR10d uavhengig er H eller Ci_2alkyl) eller -S(O)2-R<10e>(hvorR10<e>er Ci_2alkyl, NH2, NHMe eller NMe2)]; hvor n<!7>er 0,1 eller 2 og hvor Het<2>er en 4-, 5- eller 6- leddet mettet heterocyklisk ring inneholdende ett O- eller S-ringatom eller én NR<27->ringgruppe hvor R<27>er H, Ci^alkyl, -C(0)Me eller -S(0)2Me, hvor Het<2->ringen eventuelt er substituert på et ringkarbon med én eller to substituenter som uavhengig er metyl eller okso (=0); og hvor når n^<7>er 2 da kan Het<2->ringen eventuelt inneholde ett ytterligere ring-N-atom i Het<2>ringstillingen bundet til -(CH2)n ^-gruppen; forutsatt at når Het<2>inneholder én O eller S eller NR<27>ringatom/gruppe og ett ytterligere ring-N-atom, da er O/S/NR<27>ringatom/gruppe og det ene ytterligere ring-N-atom ikke direkte bundet til hverandre og er separert med mer enn ett karbonatom; ellerR1*) ogR11 sammen er -(CH2)n<8->X<6->(CH2)n<9->hvor n<8>ogn9 uavhengig er 2 eller 3 og X^ er en binding, -CH2-, O eller NR^<2>hvor R^<2>er H, Cj_2alkyl, acetyl, -S(0)2Me eller fenyl og hvor ringen dannet ved NRIOrI 1 eventuelt er substituert på et ringkarbon med én eller to substituenter som uavhengig er metyl eller okso (=0); -(CH2)n1<2->C(0)-OR13 hvor n<*2>er 0, 1 eller 2; og hvorRI3 er H, C^alkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, fenyl eller benzyl (hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to av (uavhengig) fluor, klor, C\_ 2alkyl, Cifluoralkyl, Ci_2alkoksy eller Cifluoralkoksy); -(CH2)n<13->C(0)-R13a hvor n13 er 0,1 eller 2; og hvor R<13a>er et hydrogenatom (H), Ci_$alkyl, Cifluoralkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3 ^cykloalkyl, benzyl eller fenyl; hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én eller to av (uavhengig) fluor, klor, Cialkyl, Cifluoralkyl, Ci^alkoksy eller Cifluoralkoksy; -(CH2)n1<4->Het1,-CH(Ci_2alkyl)-Het<1>, -CN^-Het1 eller C3_5cykloalkyl substituert i det forbindende karbonatom med Het<l>, hvor n^<4>er 0,1 eller 2 og hvor Het<l>er en 4-, 5-, 6- eller 7-leddet mettet heterocyklisk ring; hvor nevnte heterocykliske ring Het<l>inneholder ett O- eller S-ringatom og/eller én NRl4-ringgruppe hvorR^4 er H, Ci_4<a>lkyl, C3_6cykloalkyl, benzyl, fenyl, -C(0)R19 eller -S(0)2R<19>; hvor R<I9>, uavhengig av hvilke som helst andre R<*9>, er Ci_6alkyl, C3_6cykloalkyl, tienyl, furyl (furanyl) eller fenyl eller benzyl; hvor fenyl og benzyl uavhengig er eventuelt substituert med én eller to (uavhengig) av fluor, metyl eller metoksy; og hvor nevnte heterocykliske ring Het<l>eventuelt er substituert (i en stilling eller stillinger forskjellig fra hvilken som helst NR<l4->stilling) med én eller to okso- (=0) og/eller én Ci_4alkyl-substituenter; forutsatt at når den heterocykliske ringen Het<l>inneholder ett O- eller S-nngatom og én NR14 -ringgruppe: (a) O/S-ringatomet og NR<l4->ringgruppen er ikke bundet direkte til hverandre og (b) O/S-ringatomet og NR<I4->ringgruppen er separert med mer enn ett karbonatom hvis ikke Het<l>inneholder en -NR1<4->C(0)-0- eller -NR<14->C(0)-S- gruppe som del av ringen; eller -(CH2)n10-Ar, -CH(Ci_2alkyl)-Ar, -CMe2-Ar eller C3.5 cykloalkyl substituert i det forbindende karbonatom med Ar, hvor n<lO>er 0,1 eller 2 og (i) Ar er fenyl eventuelt substituert med én eller to substituenter som uavhengig er fluor, klor, brom, Cialkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy, Cifluoralkoksy, OH, -NR1 laR!lb (hvor R1 la er H eller Ci_2<a>lkyl og Ri lb er H, Cialkyl, -C(0)-Cialkyl eller -S(0)2-Cialkyl), cyano, -C^-NR1!c<r>1ld (hvor R1 le og Ri ld uavhengig er H eller C1.2<a>lkyl), -C(0)-ORUe hvor Rlle er H eller Cialkyl eller -S(0)2-R<llf>(hvorRllf er Cialkyl, NH2, NHMe eller NMe2); eller fenyl Ar eventuelt er substituert i to nabostilte Ar-ringatomer med de to ender av en kjede som er: -(CH2)4-, -(CH2)3- eller -CH=CH-CH=CH-; eller (ii) Ar er en eventuelt substituert 5- eller 6-leddet heterocyklisk aromatisk ring inneholdende 1, 2,3 eller 4 heteroatomer valgt fra O, N eller S; og hvor når den heterocykliske aromatiske ring Ar inneholder 2, 3 eller 4 heteroatomer, ett er valgt fra O, N og S og det (de) resterende heteroatom(er) er N; og hvor den heterocykliske aromatiske ring Ar eventuelt er substituert med én eller to grupper som uavhengig er Cj.4alkyl eller OH (omfattende hvilken som helst keto-tautomer av en OH-substituert aromatisk ring) eller den heterocykliske aromatiske ring Ar er eventuelt substituert ved to nabostilte Ar-ringatomer med de to ender av en kjede som er: -(CH2)4-, -(CH2)3- eller -CH=CH-CH=CH-; RXl og R<YI>er uavhengig et hydrogenatom (H), Cialkyl eller Cifluoralkyl; rX3 og rX<4>sammen er -(CH2)n^-X7-(CH2)n^- hvornl5 og n<l6>uavhengig er 1 eller 2 og X<7>er en binding, -CH2-, O ellerNRX<5>hvor R<X5>er H, Cialkyl, acetyl eller -S(0)2Me; og R<z>er et hydrogenatom (H), forutsatt at: når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (bb), n^ er 1 og Y er NR<4>, da erR<4>ikke Cialkyl eller Cifluoralkyl; når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa) og Y er NR<4>, da er R<4>ikke C(0)NH2, C(0)-Ci-2alkyl eller C(0)-Cifluoralkyl; forutsatt at: når R3 er den heterocykliske gruppen med sub-formel (cc), da er NR3R3amed sub-formel (L), (m), (ml) eller (m2), hvor -NH- forbindelsespunktet av NR<3>R<3a>gruppen til 4-stillingen av pyrazolopyridinet med formel (I) er understreket:

og forutsatt at: hvor R<3>er eventuelt substituert C3-8cykloalkyl, da er hvilken som helst OH, alkoksy, fluoralkoksy, -CH2OH, -CH2NHR22, -C(0)OR23, -C(0)NHR24, -C(0)R25eller fluorsubstituent i 3-, 4- eller 5-stilling i R3 cykloalkylringen hvor, i denne forbindelse, 1-stillingen av R<3>cykloalkylringen er forbindelsespunktet til -NH- i formel (I).

2. Forbindelse eller salt ifølge krav 1,karakterisert vedformel (IA) eller et salt derav:

hvor: R<1>er Cialkyl, Cifluoralkyl eller -(CF^OH; R<2>er et hydrogenatom (H), metyl eller Cifluoralkyl; r<3>er eventuelt C3.gcykloalkyl, eller en eventuelt substituert heterocyklisk gruppe med sub-formel (aa), (bb) eller (cc):

hvor ni og n<2>uavhengig er 1 eller 2; og Y er O, S, SO2eller NR<4>; hvor R<4>er et hydrogenatom (H), Cialkyl, Cifluoralkyl, C(0)NH.2, C(0)-Cialkyl eller C(0)-Cifluoralkyl; hvor i R<3>C3_8cykloalkyl eventuelt er substituert med én eller to substituenter som er okso (=0), OH, Cjalkoksy, Cifluoralkoksy eller Cj.2alkyl; og hvor hvilken som helst OH-, alkoksy- eller fluoralkoksy-substituent ikke er substituert i R<3->ringkarbonet tilknyttet (bundet) til -NH-gruppen i formel (IA); og hvor R<3>i den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa), (bb) eller (cc) eventuelt er substituert med en eller to substituenter som er okso (=0); og hvor Het har sub-formel (i), (ii), (iii), (iv) eller (v):

hvor: W1,W2, W4 og W<5>er N; og W<3>er NR<W>; X1,X3 og X<4>er N ellerCR<X>; X<2>er O, S eller NR<X>; ogX5 er CRX1RX2;Y1,Y2 og Y3 er CR<Y>eller N; Y<4>er O, S eller NR<Y>; og Y<$>er CRY1RY2;Z<1>og Z<5>er O, S eller NR<Z>; og Z2 Z3 og Z<4>er N eller CR<Z>; hvor: r<W>er et hydrogenatom (H) eller Cj_2alkyl; RxRX2, RY og R<Y2>er uavhengig: et hydrogenatom (H); Ci_8alkyl; C3_6cykloalkyl eventuelt substituert med en Ci_2alkylgruppe; -(CH2)n^<a->C3-6cykloalkyl eventuelt substituert i -(CH2)n^<a->gnappen eller i C3_6cykloalkylgruppen med en Ci_2alkylgruppe, hvorn2a er 1,2 eller 3; -(CH2)n3-SC»2-R5 hvor n<3>er 1 eller 2 og R<5>er Cialkyl eller -NH-Ci_2alkyl eller fenyl; -(CH2)n<4->NR<6>R<7>hvor n4 er 0, 1, 2 eller 3 og R<6>og R<7>uavhengig er H, Cialkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, -C(0)-Ci_2<a>lkyl, -S02-Ci_2alkyl, fenyl eller benzyl (hvor fenyl eller benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én av fluor, klor, Cialkyl, Cjfluoralkyl, Ci_2alkoksy eller Cifluoralkoksy); eller R^ og R<7>sammen er -(CH2)n^-X<5->(CH2)n^- hvor n^ og n<*>>uavhengig er 2 eller 3 og X<5>er en binding, -CH-2-, O eller NR<8>hvor R<8>er H eller Cialkyl; -(CH2)n<7->0-R<9>; hvor n<7>er 0, 1, 2 eller 3 og R<9>er H eller Cialkyl; hvor n<7>er 0 bare når -(CH2)n<7->0-R<9>er bundet til et karbonatom i Het-ringen; og hvor n<7>ikke er 0 når Het har sub-formel (v) (dvs. n<7>er ikke 0 for R^<2>og forRY2);-CXCO-NRiOR1<1>hvorR10 og R1<1>uavhengig er H, Cialkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, fenyl eller benzyl (hvor fenyl eller benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én av fluor, klor, Cialkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy eller Ci<f>luoralkoksy); eller R<l>O og Ri 1 sammen er -(CH2)n<8->X<6->(CH2)n<9->hvor n<8>og n<9>uavhengig er 2 eller 3 og X<6>er en binding, -CH2-, O eller NR<12>hvor R12 er H eller Ci<a>lkyl; -C(0)-OR13 hvor R<13>er H, Cialkyl,<C>3.6cykloalkyl, -CH2-C3.6<cy>kloalkyl, fenyl eller benzyl (hvor fenyl eller benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én av fluor, klor, Cialkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy eller Cifluoralkoksy); -C(0)-R<13a>hvor R13a er et hydrogenatom (H), Cialkyl, Cifluoralkyl, C3_6cykloalkyl, -CH2-C3_6cykloalkyl, benzyl eller fenyl; hvor fenyl eller benzyl uavhengig er eventuelt substituert på den aromatiske ringen med én av fluor, klor, Cj.2alkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy eller Cifluoralkoksy; en 4-, 5-, 6- eller 7-leddet mettet heterocyklisk ring inneholdende ett O-ringatom eller énNRl<4->ringgruppe hvorRl4 er h eller Cialkyl, idet nevnte heterocykliske ring eventuelt er substituert (i en stilling eller stillinger forskjellig fra hvilken som helst NR<l4->stilling) med én okso- (=0) og/eller én Ci_4alkylsubstituent; eller -(CH2)n<10>-Ar hvor n1*) er 0, 1 eller 2 og (i) Ar er fenyl eventuelt substituert med én eller to substituenter som er fluor, klor, Cialkyl, Cifluoralkyl, Cialkoksy, Cifluoralkoksy eller cyano; eller (ii) Ar er en eventuelt substituert 5- eller 6-leddet heterocyklisk aromatisk ring inneholdende 1, 2 eller 3 heteroatomer valgt fra O, N eller S; og hvor når den heterocykliske aromatiske ring Ar inneholder 2 eller 3 heteroatomer, ett er valgt fra O, N og S og det (de) resterende heteroatom(er) er N; og hvor den heterocykliske aromatiske ring Ar eventuelt er substituert med én eller to C i _4alkylgrupper; rXI og R<YI>er uavhengig et hydrogenatom (H), Cialkyl eller Cifluoralkyl; og R<z>er et hydrogenatom (H); forutsatt at når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (bb), ni er 1 og Y er NR<4>, da er R<4>ikke Cialkyl eller Ci<fl>uoralkyl; når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa) og Y er NR<4>, da er R<4>ikke C(0)NH2, C(0)-Ci.2alkyl eller C(0)-d fluoralkyl; forutsatt at: når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (cc), da er NHR<3>med sub-formel (L), (m) eller (ml), hvor -NH- forbindelsespunktet til NHR<3>gruppen til 4-stillingen av pyrazolopyridinet med formel (IA) er understreket:

og forutsatt at: hvor R<3>eventuelt er substituert C3-8cykloalkyl, er hvilken som helst OH, alkoksy eller fluoralkoksy substituent i 3-, 4- eller 5-stilling i R cykloalkylringen (hvor, i denne forbindelse, 1-stillingen av R<3>cykloalkylringen er forbindelsespunktet til -NH- i formel (IA)).

3. Forbindelse eller salt ifølge krav 1 eller 2,karakterisert vedat R<2>er et hydrogenatom (H) eller metyl.

4. Forbindelse eller salt ifølge krav 1,2 eller 3,karakterisert vedat Ri er C2_3alkyl, C2fluoralkyl eller -(CH2)2OH.

5. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat R<1>eretyl,n-propyl,C2fluoralkyleller-CH2CH2OH.

6. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat Ri er etyl.

7. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat det i R<3>er én substituent eller ingen substituent.

8. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat R3 er eventuelt substituert C3_gcykloalkyl, eller den eventuelt substituerte heterosykliske gruppe med sub-formel (aa), (bb) eller (cc).

9. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa), (bb) eller (cc), da er Y O.

10. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat når R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa), (bb) eller (cc), da er R<3>den heterocykliske gruppen med sub-formel (bb) og ni er 1.

11. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat i R<3>er den heterocykliske gruppen med sub-formel (aa), (bb) eller (cc) usubstituert (hvor, når Y er NR<4>, R<4>ikke er klassifisert som en substituent).

12. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat NHR<3>eller NR<3>R<3a>har sub-formel (a), (al), (b), (c), (c 1), (c 2), (c 3), (c 4), (c 5), (d), (e), (f), (g), (gl), (g2), (g3), (g4), (h), (i), 0), (k), (kl), (L), (m), (ml), (m2), (m3), (m5), (n), (o), (ol), (o2), (o3), (o4), (p), (p2), (p3), (p5), (p7) eller (q): hvor -NH- forbindelsespunktet av NHR<3>eller NR<3>R<3a>gruppen til 4-stillingen av pyrazolopyridinet med formel (I) eller (IA) er understreket:

13. Forbindelse eller salt ifølge krav 12, hvor NHR<3>eller NR<3>R<3a>er med sub-formel (h):

14. Forbindelse eller salt ifølge krav 13, hvor R<1>er etyl.

15. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat Het har sub-formel (i), (ii) eller (v).

16. Forbindelse eller salt ifølge krav 15,karakterisert vedat Het har sub-formel (ia), (ib), (ic), (id), (ie), (if), (ig), (va), (vb) eller (iia):

17. Forbindelse eller salt ifølge krav 16,karakterisert vedat Het har sub-formel (ia), (ic) eller (id).

18. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat den er: N-cyklopentyl-l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-cyklopentyl-1 -etyl-5- {5-[(metylsulfonyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-cyklopentyl-l-etyl-5-(5-isopropyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-cyklopentyl-1 -etyl-5 -(5 -metyl-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, N-cyklopentyl-1 -etyl-5- {5-[(metylsulfonyl)metyl]-1,3,4-tiadiazol-2-yl} -1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-cyWopentyl-l-etyl-5-(5-isopropyl-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5-(5-isopropyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-cykloheksyl-1 -etyl-5-(5-isopropyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4- amin, N-cyWoheksyl-l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5-(5-metyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

5- (5-tert-butyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 -etyl-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5-(5-tert-butyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-cykloheksyl-l-etyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4- amin,

5- (5-tert-butyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-cyklopentyl-1 -etyl-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4- amin,

1 -etyl-5- {5- [(metylsulfonyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-cykloheksyl-1 -etyl-5- {5-[(metylsulfonyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-(3-metyl-l,2,4-oksadiazol-5-yl)-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5-[3-(metoksymetyl)-1,2,4-oksadiazol-5-yl]-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

5- {3-[(Dimetylamino)metyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -1 -etyl-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[3-(morfolin-4-ylmetyl)-l,2,4-oksadiazol-5-yl]-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 5-(5-cyklopropyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 -etyl-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-(l-acetylpiperidin-4-yl)-l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-^ b]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5 - [5 -(3 -mety loxetan-3 -yl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl] -N-tetrahydro-2H-pyran-4-y 1-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5- {5- [(4-metylpiperazin-1 -yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-isopropyl-1,3,4-oksadiazol-2-karboksamid,

4- {5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridm-5-yl]-l,3 oksadiazol-2-yl} -1 -metylpyrrolidin-2-on, l-etyl-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-5-(5-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(morfolin-4-ylmetyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

5- [5-(tert-butoksymetyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-1 -etyl-N-tetrahydro-2H-pyran-4-yl-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, eller metyl 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/f-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksylat; eller et salt derav.

19. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 17,karakterisert vedat den er: Metyl-2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/f-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-4,5 -dihydro-1,3 -oksazol-4-karboksy lat,

1 -etyl-5-(4-metyl-4,5-dihydro-1,3-oksazol-2-yl)-AHtetrahydro-2//-pyran-4-yl)-\ H-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

1 -(n-propyl)-5-(5 -metyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(tetrabydrofuran-2-yl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(dimetylamino)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5-(5-metyl-1,2,4-triazol-3-yl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, N-( 1 -acetylpiperidin-4-y 1)-1 -ety l-5-(3 -metyl-1,2,4-oksadiazol-5 -yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, eller N-(l -acetylpiperidin-4-yl)-1 -etyl-5-[3-(morfolin-4-ylmetyl)-1,2,4-oksadiazol-5-yl]-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin; eller et salt derav.

20. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 17,karakterisert vedat den er: 1 -etyl-5-[(4R)-4-fenyl-4,5-dihydro-1,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[(4S)-4-fenyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[(4S)-4-(fenylmetyl)-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[(4R)-4-(fenylmetyl)-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[(4S,5R)-5-metyl-4-fenyl-4,5-dihydro-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-py ran-4-y 1)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-[(5R)-5-fenyl-4,5-dihydro-1,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1- etyl-5-[(5S)-5-fenyl-4,5-dmydro-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5-(4,4-dimetyl-4,5-dihydro-1,3-oksazol-2-yl)-1 -etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 2- [l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-l,3-oksazol-4-karboksylsyre, 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-(l-metyletyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid, l-etyl-5-[4-(4-morfolmylkarbonyl)-l,3-oksazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, trans- 4- {[ 1 -etyl-5-(5-metyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-yl]amino} cykloheksanol, l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-lH-py razolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 4- {[ 1 -etyl-5 -(5-metyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-yl]amino} cykloheksanon, 5- [5-(l, 1 -dimetyletyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-1 -etyl-6-metyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-6-metyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-5 - [5-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1,3,4-oksadiazol-2 -yl]-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 5-(5-cyklobutyl-1,3,4-oksadiazol-2-y 1)-1 -etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl} -2-pyrrolidinon, N-( {5 - [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-5 -yl] - 1,3,4-oksadiazol-2-yl} mety l)acetamid, l-etyl-5-[5-(l-metyl-2-piperidmyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5- {5- [(4-metyl-1,2,5-oksadiazol-3-yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 3-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl} cyklopentanon, l-etyl-5-[5-(tetrahydro-3-furanyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, (4S)-4- {5- [ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5 -yl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1,3-tiazolidin-2-on, 5-[5-(2,2-dimetylcyklopropyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, N-( {5 - [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-5 -yl] - 1,3,4-oksadiazol-2-y 1} mety l)-N-mety lacetamid, l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylmetyl)-l,3,4-oksadiazol-2 -yl]-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(l-metylcyklobutyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N^ 1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5 - [5 -(3 -mety 1-5 -isoksazolyl)-1,3,4-oksadiazol-2-y l]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-[5-( 1 -metyl- lH-pyrazol-5-yl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4- yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 5- [5-(l -acetyl-4-piperidinyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-1 -etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, 1- etyl-5- {3- [(4-metyl-1 -piperazinyl)metyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -N-(tetrahydro-2H-py ran-4-y 1)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-[3-(4-fluorfenyl)-1,2,4-oksadiazol-5-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin, eller 1 -etyl-5- {3- [2-okso-2-(l -pyrrolidinyl)etyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -N-(tetrahydro-2H-py ran-4-y 1)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-4-amin; eller et salt derav.

21. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 17,karakterisert vedat den er:

2- {5- [ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2//-py ran-4-y lamino)-1 //-pyrazolo [3,4-6]pyridin-5 -y 1] -1,2,4-oksadiazol-3-yl}-7V-fenylacetamid, 2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl} - N-( 1 -fenyletyl)acetamid,

1- etyl-5-{3-[2-okso-2-(l-pipeirdmyl)etyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-^-(tetrahya^o-2/f-pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin,

2- {5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}-7V-(fenylmetyl)acetamid, 2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}-A^^V-dimetylacetamid, A^-etyl-2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2/f-pyran-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5^yl]-1,2,4-oksadiazol-3-yl} acetamid, l-etyl-5-{3-[l-(4-morfolmyl)etyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-iV-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 5-[3-(cykloheksylmetyl)-1,2,4-oksadiazol-5-yl]-1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, l-etyl-5-{3-[2-okso-2-(l-pipeirdmyl)etylH pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin,

1 -etyl-5-{3-[2-(4-metyl-1 -piperazinyl)-2-oksoetyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-5- [5-(\ H-1,2,3-triazol-1 -y lmetyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

5- {5-[(2,4-dimetyl-1,3-tiazol-5-yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} - l-etyl-^-(tetrahydro-2/f-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-4-arnin, l-etyl-5-[5-(2-furanylmetyl)-l,3,4-otø pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(3-isoksazolylmetyl)-13,4-oksadiazol-2-yl]-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, l-etyl-5-(5-{[4-(metyloksy)fenyl]metyl^^ pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, l-etyl-^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-5-[5-( 1/Metrazol-1 -ylmetyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl] -1 //-pyrazolo [3,4-6]pyridin-4-amin, l-etyl-5-[5-(5-isotiazolylmetyl)-13,4-oksadiazol-2-yl]-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5- {5- [(3-metyl-5-isoksazolyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -A^-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin,

5-(5- {[4-(dimetylamino)fenyl]nietyl} -1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin (1:1),

1- etyl-5- {5-[(2-metyl-l ,3-tiazol-4-yl)metyl]-l ,3,4-oksadiazol-2-yl} -A^-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

2- [l -({5-[ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl}metyl)cyklopentyl]-7V-metylacetarnid, A^-({5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)-l/f-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl}metyl)cyklopropankarboksarriid, l-etyl-5-{5-[(5-metyl-3-isoksazolyl)metyl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl}-A^-(tetarhydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5- {5- [(5-metyl-3-isoksazolyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -Af-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, l-etyl-5- {5-[2-(4-metyl-l ,3-tiazol-5-yl)etyl]-l ,3,4-oksadiazol-2-yl} -#-(tetrahydro-2#-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

5- {5-[(3,5-dimetyl-4-isoksazolyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1 -etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, N-(l-{5-[l-etyl-4-(tetrahycu"0-2/f-pyran-4-ylam l,3,4-oksadiazol-2-yl}etyl)acetamid,

5- {5- [(1 -acetyl-4-piperidinyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-y 1} -1 -etyl-N-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5- {5- [(4-metylfenyl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

1- etyl-5-[5-(4-metylfenyl)-13,4-oksadiazol-2-y^ pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 5-[5-(3,4-dimetylfenyl)-1,3,4-oksadiazol-2-yl]-1 -etyl-7V-(tetrahydro-2#-pyran-4-yl)-\ H-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 5-[5-(2,4-dimetylfenyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-l-etyl-^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l/f-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin,

5- {5-[(4-bromfenyl)metyl]-l ,3,4-oksadiazol-2-yl} -1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

2- [l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyarn-4-ylamino)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-5-yl]-7V-(fenylmetyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2- [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]py ridin-5 -yl] -N- {[4-(metyloksy)fenyl]metyl} -1,3-oksazol-4-karboksamid, 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-[(2-metylfenyl)metyl]-1,3 -oksazol-4-karboksamid, 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-[(4-metylfenyl)metyl]-1,3 -oksazol-4-karboksamid,

2- [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]py ridin-5-y 1] -N- [(3 - metylfenyl)metyl]-1,3 -oksazol-4-karboksamid, N- [(4-klorfeny l)metyl] -2- [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid, N-[(23-dimetylfenyl)metyl]-2-[l-etyl-^ pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid,

N-[(3,5 -dimetylfenyl)metyl]-2-[ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid, N- [(3,4-dimetylfenyl)metyl]-2-[ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1H-py razolo [3,4-b]pyridin-5 -yl] -1,3 -oksazol-4-karboksamid, 2-[l -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-( 1 - fenyletyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2- [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin-5-yl] -N- {(1 R) -

1- [4-(metyloksy)fenyl]etyl}-l,3-oksazol-4-karboksamid,

2- [l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-[(lR)-1 -fenylpropyl]-1,3-oksazol-4-karboksamid, 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-(4-metylfenyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid, 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-({4-[(metylsulfonyl)amino]fenyl}metyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid,

2- [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-y lamino)-1 H-pyrazolo [3,4-b]py ridin-5 -yl] -N- {[4-(metylsulfonyl)fenyl]metyl} -1,3-oksazol-4-karboksamid, N-( 1 -acetyl-4-piperidinyl)-2- [ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid, 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1,3-oksazol-4-karboksamid, 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-(tetrahydro-2-furanylmetyl)-1,3-oksazol-4-karboksamid, 2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-N-[2-(4-metyl-1 -piperazinyl)etyl]-1,3-oksazol-4-karboksamid, N- [ 1 -(aminometyl)cykloheksyl] -2-[ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1H-py razolo [3,4-b]pyridin-5 -yl] -N-mety 1-1,3 -oksazol-4-karboksamid, N-(2,6-dimetylfenyl)-2-[l-etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid, N- {[4-(aminokarbony l)fenyl]metyl} -2- [ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl]-1,3-oksazol-4-karboksamid, 2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino^ oksadiazol-3-yl}-iV-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)acetamid,

5- {3-[2-(2,6-dimetyl-4-morfolinyl)-2-oksoetyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -1 -etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-{3-[2-(4-metyl-1 -piperidinyl)-2-oksoetyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino^ oksadiazol-3-yl} - N-[ 1 -metyl-2-(metyloksy)etyl]acetamid,

5- {3-[2-(3,5-dimetyl- l-piperidinyl)-2-oksoetyl]-l ,2,4-oksadiazol-5-yl} - 1-etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5-{3-[2-(3-metyl-1 -piperidinyi)-2-oksoetyi]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 2-{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamm^ oksadiazol-3-yl}-7V-3-pyridinylacetamid,

6- {5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamm^ oksadiazol-2-yl} -2-piperidinon, l-etyl-5- {5-[(3-metyl-l#-1,2,4-triazol-5-yl)metyl]-l ,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)acetamid, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)benzamid, AK{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylam l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-fenylacetamid, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-metylpropanamid, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-3-metylbutanamid, A^-({5-[l-etyl-4-(tetrabydro-2//-pyran-4-ylamino)-l/f-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)cykloheksanekarboksamid, AK{5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamm^ l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-furankarboksamid, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)metansulfonamid, N-( {5 - [ 1 -ety l-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-y lamino)- l//-pyrazolo [3,4-é]py irdin-5-yl] - l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)benzensulfonamid, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-l-fenylmetansulfonamid, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-propansulfonamid, A^-({5-[l-etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylammo)-l/f-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-5-yl]-1,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-1 -propansulfonamid, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)cyklopropansulfonamid, N-( {5-[l -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yi]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-tiofensulfonamid,

1 -({5-[ 1 -etyl-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-5-yl]-l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-pyrrolidinon, l-({5-[l -ety l-4-(tetrahydro-2//-pyran-4-ylamino)- l//-pyrazolo [3,4-é]pyridin-5 -yl] - l,2,4-oksadiazol-3-yl}metyl)-2-piperidinon,

5- {3-[( 1 -acetyl-4-piperidinyl)metyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -1 -etyl-A^-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5-(3- {[1 -(3-metylbutanoyl)-4-pipeirdinyl]metyl} -1,2,4-oksadiazol-5-yl)-7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, 1 -etyl-5 -(3- {[ 1 -(metylsulfonyl)-4-pipeirdinyl]metyl} -1,2,4-oksadiazol-5-yl)-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5- {3- [1 -(fenylsulfonyl)cyklopropyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -A^-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyirdin-4-amin, l-etyl-5-[3-(fenylmetyl)-l,2,4-oksadiazol-5-yl]-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//- pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

1 -etyl-5- [3-( 1 -fenyletyl)-1,2,4-oksadiazol-5-yl] -^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)- 1H-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin, l-etyl-5-(3-{[4-(metyloksy)fenyl]metyl}-l,2,4-oksadiazol-5-yl)-^-(tetarhydro-2^ pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin,

5-(3- {[4-(dimetylamino)fenyl]metyl} -1,2,4-oksadiazol-5-yl)-1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 5-(3-{[3-(dimetylammo)fenyl]metyl}-l,2,4^ pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin,

5-(3- {[4-(dimetylamino)fenyl]metyl} -1,2,4-oksadiazol-5-yl)-1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin,

1 -etyl-5- {3- [(fenyloksy)metyl]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, 1-etyl-AKtetrahydro-2#-py a]pyridin-3-ylmetyl)-l,2,4-oksadiazol-5-y^^ 1 -etyl-5- {3- [(4-fenyl-1 -piperazinyi)metyi]-1,2,4-oksadiazol-5-yl} -A^-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, l-etyl-5-(5-etyl-l,2,4-oksacuazol-3-yl)-Af-(tetrah^ é]pyridin-4-amin,

5-(5- {[4-(dimetylamino)fenyl]metyl} -1,2,4-oksadiazol-3-yl)-1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//- pyran-4-yl)- l//-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin, l-etyl-5-(5-{[4-(metyloksy)fenyl]metyl}-l^ pyran-4-yl)-l//-pyrazolo[3,4-é]pyirdin-4-amin, eller 5-(3,8-dioksa-1 -azaspiro[4,5]dec-1 -en-2-yl)-1 -etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)- IH-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin; eller et salt derav.

22. Forbindelse eller salt ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 17,karakterisert vedat den er: 1 -etyl-5-(5-metyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)- 1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 14), 5-(5-tert-butyl-1,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 -ety l-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-y 1)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 17), l-etyl-5-{5-[(metylsulfonyl)metyl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl}-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 23), l-etyl-5-[5-(3-metyloxetan-3-yl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 34), 1 -etyl-5- {5- [(4-metylpiperazin-1 -yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyirdin-4-amin (forbindelsen i eksempel 35), 1- etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-l,3,4-oksadiazol- 2- yl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 38), også betegnet: l-etyl-5-[5-(morfolin-4-ylmetyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 39), l-etyl-5-[5-(tetrahydrofuran-2-yl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 44), l-etyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-5-[5-(tetrahydro-2H-pyran-4-ylmetyl)-l,3,4-oksadiazol-2-yl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 77), eller 1- etyl-5-{3-[2-okso-2-(l-pyrrolidinyl)etyl]-l,2,4-oksadiazol-5-yl}-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amin (forbindelsen i eksempel 84); eller et salt derav.

23. Forbindelse eller salt ifølge krav 22, som er l-etyl-5-(5-metyl-l,3,4-oksadiazol- 2- yl)-7V-(tetrahydro-2/fpyran-4-y 1)- l/f-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

eller et salt derav.

24. Forbindelse eller salt ifølge krav 18, som er 5-(5-cyklopropyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)-1 -etyl-N-tetrahydro-2Hpyran-

eller et salt derav.

25. Forbindelse eller salt ifølge krav 20, som er l-etyl-7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-5 - [5 -(tetrahydro-2//-pyran-4-y lmetyl)-1,3,4-oksadiazol-2-y 1] -1 /f-pyrazolo [3,4-6]pyridin-4-amin

eller et salt derav.

26. Forbindelse eller salt ifølge krav 21, som er 5-{5-[(2,4-dimetyl-l,3-tiazol-5-yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-1 H-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

eller et salt derav.

27. Forbindelse eller salt ifølge krav 21, som er 5-{5-[(2,4-dimetyl-l,3-tiazol-5-yl)metyl]-1,3,4-oksadiazol-2-yl} -1 -etyl-7V-(tetrahydro-2//-pyran-4-y 1)- l/f-pyrazolo[3,4-6]pyridin-4-amin

eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

28. Forbindelse eller salt ifølge krav 21, som er 5-{5-[(2,4-dimetyl-l,3-tiazol-5-yl)metyl]-l,3,4-oksadiazol-2-yl}-l-etyl-A^-(tetrahydro-2//-pyran-4-yl)-l/f-pyrazolo[3,4-é]pyridin-4-amin

29. Forbindelse eller farmasøytisk akseptabelt salt derav ifølge hvilket som helst av de foregående krav, for anvendelse som en aktiv terapeutisk substans for et pattedyr så som et menneske.

30. Farmasøytisk preparat,karakterisert vedat det omfatter en forbindelse, som definert i hvilket som helst av kravene 1 til 28 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav og én eller flere farmasøytisk akseptable bærere og/eller tilsetningsmidler.

31. Farmasøytisk preparat ifølge krav 30,karakterisert vedat det er egnet for og/eller tilpasset for oral administrering.

32. Farmasøytisk preparat ifølge krav 30 eller 31, for behandling og/eller forebygging av en inflammatorisk og/eller allergisk sykdom eller kognitiv svekkelse hos et pattedyr så som et menneske.

33. Anvendelse av en forbindelse, som definert i hvilket som helst av kravene 1 til 28 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, ved fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av en inflammatorisk og/eller allergisk sykdom eller kognitiv svekkelse hos et pattedyr så som et menneske.

34. Anvendelse av en forbindelse som definert i hvilket som helst av kravene 1 til 28 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av: astma, kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS), atopisk dermatitt, urtikaria, allergisk rhinitt, allergisk konjunktivitt, vernal konjunktivitt, eosinofilt granulom, psoriasis, revmatoid artritt, septisk sjokk, ulcerativ kolitt, Crohn's sykdom, reperfusjonsskade i myokardium og hjerne, kronisk glomerulonefritt, endotoksisk sjokk, voksen åndenødssyndrom, multippel sklerose, kognitiv svekkelse ved en nevrologisk lidelse, depresjon eller smerte; hos et menneske.

35. Farmasøytisk preparat ifølge krav 30, for anvendelse i behandling og/eller forebygging av: astma, kronisk obstruktiv pulmonal sykdom (KOLS), atopisk dermatitt, urtikaria, allergisk rhinitt, allergisk konjunktivitt, vernal konjunktivitt, eosinofilt granulom, psoriasis, revmatoid artritt, septisk sjokk, ulcerativ kolitt, Crohn's sykdom, reperfusjonsskade i myokardium og hjerne, kronisk glomerulonefritt, endotoksisk sjokk, voksen respiratorisk åndenødssyndrom, multippel sklerose, kognitiv svekkelse ved en nevrologisk lidelse, depresjon eller smerte; hos et menneske.

36. Forbindelse eller farmasøytisk akseptabelt salt derav, ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 28, for behandlingen og/eller forebygging av depresjon hos et menneske.

37. Forbindelse eller farmasøytisk akseptabelt salt derav, ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 28, forbehandlingen og/eller forebygging av kognitiv svekkelse hos et menneske.

38. Forbindelse eller farmasøytisk akseptabelt salt derav, ifølge krav 37, hvor den kognitive svekkelse er i forbindelse med en nevrologisk lidelse.

39. Forbindelse eller farmasøytisk akseptabelt salt derav, ifølge krav 38, hvor den nevrologiske lidelsen er Alzheimer's sykdom.

40. Anvendelse av en forbindelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 28, ved fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av depresjon hos et menneske.

41. Anvendelse av en forbindelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 28, ved fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av kognitiv svekkelse hos et menneske.

42. Anvendelse av en forbindelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, ifølge krav 41, hvor den kognitiv svekkelse er i forbindelse med en nevrologisk lidelse.

43. Anvendelse av en forbindelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, ifølge krav 42, hvor den nevrologiske lidelse er Alzheimer's sykdom.