MXPA00009408A - Microparticula de liberacion sostenida y metodo para preparar la misma. - Google Patents

Abstract

Se describe un metodo para preparar microparticulas de liberacion sostenida que liberan una sustancia fisiologicamente activa durante periodos prolongados de tiempo. Las microparticulas de liberacion sostenida se preparan a traves de un proceso de varias emulsiones. Se disuelva o dispersa un farmaco de interes en cada uno de por lo menos dos aceites para dar al menos dos emulsiones o fases oleosas primarias. Cada fase oleosa o emulsion contiene un polimero biodegradable. Las por menos dos emulsiones o fases oleosas primarias se dispersan en una fase acuosa, de manera sincronica o en sucesion. De la solucion dispersada en el farmaco, los solventes organicos se remueven para producir microparticulas. Por lo tanto, los farmacos tales como las hormonas de liberacion de la hormona leutinizante se pueden liberar continuamente in vivo durante periodos prolongados de tiempo, llevando a una mejora en el efecto terapeutico.

Description

MICROPARTICULA DE LIBERACIÓN SOSTENIDA Y MÉTODO PARA PREPARAR LA MISMA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN 1. Campo de la invención La invención se refiere a una preparación de liberación sostenida que libera una sustancia fisiológicamente activa durante periodos prolongados de tiempo. 2. Descripción de la técnica anterior Para preparar sistemas de distribución de fármacos (DDS, por sus siglas en inglés) , del tipo de liberación sostenida, existen varios métodos comúnmente usados, incluyendo coacervación, separación de fases por emulsión, encapsulación dependiente del secado por aspersión y evaporación de solvente en fase orgánica o acuosa. De éstos, la evaporación de solvente en fase acuosa es la más extensivamente usada, gue se divide ampliamente en dos técnicas: doble emulsificación agua/aceite/agua y emulsificación simple aceite/agua. La técnica de agua/aceite/agua por lo general se utiliza para la encapsulación de fármacos solubles en agua tales como péptidos o proteínas. En esta técnica, se disuelve un fármaco soluble en agua y esta capa acuosa se 52/87 dispersa en una capa orgánica que contiene un polímero biodegradable, para dar una emulsión primaria (agua en aceite) . Nuevamente, esta emulsión primaria se dispersa en agua. La técnica de aceite/agua, que por lo general se utiliza para encapsular fármacos solubles en lipidos, se puede llevar a cabo al disolver un fármaco y un excipiente polimérico biodegradable en un solvente orgánico o una mezcla de solventes inorgánicos y dispersar la solución en una fase acuosa. En ambas, la solubilidad del polímero disminuye conforme se remueve el solvente orgánico a través de la extracción o evaporación, en el transcurso de la dispersión de una fase oleosa del polímero en una fase acuosa. Como resultado, el polímero se solidifica para formar micropartículas. En general, en comparación a aquellas obtenidas por la técnica de aceite/agua, las micropartículas obtenidas por la técnica de agua/aceite/agua son de una estructura más porosa con mayores áreas superficiales de modo que tengan una alta velocidad inicial de liberación de los fármacos. El periodo de tiempo de liberación de estas micropartículas de liberación sostenida se determina ampliamente por las propiedades físicas y químicas de los polímeros, composiciones de solventes, y las clases y concentraciones de los emulsionadores. De estos factores determinantes, los más importantes son las propiedades físicas y químicas, incluyendo las composiciones químicas, pesos moleculares e hidrofilicidad. Por ejemplo, el poli (láctido-co-glicólido) (PLGA) , un polímero que consiste de láctido y glicólido con una diferente relación molar entre ambos, se degrada a velocidades lentas conforme se incrementa el láctido en la relación molar o peso molecular. En este caso, los polímeros que son de un mayor contenido de láctido o de mayor peso molecular conducen a periodos prolongados en el tiempo de liberación. Sin embargo, donde se degrada el polímero durante un periodo prolongado de tiempo, la micropartícula libera difícilmente su fármaco encapsulado en algunos puntos de la etapa temprana o intermedia. Por lo tanto, el uso de un polímero en la preparación de micropartículas de liberación sostenida permite liberar continuamente los fármacos durante periodos deseados de tiempo (por ejemplo, uno, dos, tres, seis meses o más) requiere un esfuerzo extensivo y tiempo. A causa de este problema, la investigación se ha dirigido al empleo de combinaciones a polímeros que se pueden degradar rápida y lentamente en la encapsulación de fármacos. A partir de la cantidad del fármaco liberado de las micropartículas elaboradas los polímeros combinados, sin embargo, la velocidad de liberación del fármaco de las micropartículas no se puede determinar de forma exacta. Bajo la co-existencia de al menos dos diferentes polímeros en una micropartícula, el polímero que se puede degradar más lentamente tiende a ser degradado a una velocidad más rápida debido a que los productos de degradación del polímero que se degrada más rápido que bajo su sola existencia. Como resultado, la velocidad de liberación de los fármacos en el cuerpo también se afecta por el polímero que se degrada más rápido de esta manera, diferente del valor promedio de las velocidades de liberación de los fármacos encapsulados en polímeros individuales. Para evadir este problema, los mismos ingredientes activos se encapsulan en al menos dos polímeros individuales que son diferentes en la velocidad de degradación entre sí y las microcápsulas se combinan a relaciones apropiadas para dar una formulación de dosis de microcápsula que puede liberar los ingredientes activos durante un periodo deseado de tiempo, como se describe en la Patente de los Estados Unidos Número 4,897,268. Sin embargo, esta técnica es difícil ya que se necesitan dos o más tipos de microcápsulas para una forma de dosis de fármaco y de esta manera, es económicamente desfavorable.

SUMARIO DE A INVENCIÓN Es un objeto de la presente invención proporcionar un método para preparar una formulación de liberación sostenida de fármaco compuesta de varias micropartículas que retienen sus propiedades de liberación de fármaco en su integridad, por lo cual el periodo de tiempo de liberación de la formulación se puede anticipar fácilmente y se puede controlar al variar las composiciones y pesos moleculares de los polímeros, composiciones y concentraciones de los solventes; y clases y cantidades de aditivos . Es otro objeto de la presente invención proporcionar una formulación de liberación sostenida de fármaco que pueda liberar fármacos de interés durante un periodo deseado de tiempo. De acuerdo con la presente invención, se puede preparar una formulación de liberación sostenida de fármaco usando un proceso de varias emulsiones, que comprende los pasos de: disolver o dispersar un fármaco en cada uno de por lo menos dos aceites para dar al menos dos emulsiones o fases oleosas primarias, cada una que contiene un polímero biodegradable; dispersar las por lo menos dos emulsiones o fases oleosas primarias en una fase acuosa, de manera sincronizada o en sucesión; y remover los solventes orgánicos de la solución dispersada en el fármaco para producir las micropartículas. En la presente invención, se pueden encapsular análogos de LHRH en un excipiente elaborado de un poliéster alifático biodegradable y liberar continuamente in vivo durante un periodo deseado de tiempo.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Los objetos anteriores y otros, características, y otras ventajas de la presente invención se entenderán más claramente a partir de la siguiente descripción detallada tomada en unión con los dibujos anexos, en los cuales: La Figura la es una fotografía óptica de las micropartículas preparadas de acuerdo con el ejemplo I. La Figura Ib es una fotografía óptica de las micropartículas preparadas de acuerdo con el ejemplo comparativo la de la presente invención. La Figura le es una fotografía óptica de las micropartículas preparadas de acuerdo con el ejemplo comparativo Ib. La Figura Id es una fotografía óptica de las micropartículas preparadas de acuerdo con el ejemplo comparativo le. La Figura 2a es una microfotografía electrónica de exploración de las micropartículas preparadas de acuerdo con el ejemplo IIA de la presente invención, aumentada por 100 veces. La Figura 2b es una microfotografía electrónica de exploración de las micropartículas preparadas de acuerdo con el ejemplo IIA de la presente invención, aumentada 800 veces . La Figura 3 es una gráfica que muestra los resultados de la prueba de liberación in vitro de varias micropartículas, incluyendo Leuplina (-B) y micropartículas preparadas en el ejemplo comparativo IIA (-?-) , Ejemplo comparativo IIB (-V-) , Ejemplo IIA (-0-), y Ejemplo IIB (-O-) . La Figura 4 es una gráfica que muestra los resultados de la prueba de liberación in vivo de varias micropartículas, incluyendo Leuplina (-0) y micropartículas preparadas en el ejemplo IIA (-0-), y Ejemplo IIB (-?-) . La Figura 5 es una gráfica que muestra los efectos de represión de testosterona in vivo de un control (-0-) , Leuplina (-0) , y micropartículas preparadas en el Ejemplo IIA (-?-) y Ejemplo IIB (-V-) .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención contempla la dispersión sincrónica o sucesiva de varias emulsiones o fases oleosas primarias en una fase acuosa para preparar una mezcla de micropartículas que mantienen sus propiedades de liberación individuales de manera intacta y de esta manera permite la preparación de un sistema de distribución de fármaco capaz de liberar continuamente fármacos durante un periodo prolongado de tiempo. Con respecto a los métodos convencionales, la presente invención tiene la ventaja de controlar factores que se relacionan al periodo de tiempo de liberación con facilidad, especialmente la velocidad inicial de liberación sin alterar el periodo de tiempo de liberación total. En la presente invención, se introduce un proceso para controlar las composiciones y pesos moleculares de polímeros adecuados, las composiciones y concentraciones de solventes y aditivos en una variedad de niveles, conduciendo a la preparación de micropartículas de liberación sostenida que se resumen en los siguientes tres pasos : Primer paso: Al menos dos fases oleosas, primarias (aceites) o emulsiones (agua-en-aceite) se preparan que son diferentes entre sí en por lo menos dos de las clases, composiciones y concentraciones de ingredientes activos y polímeros biodegradables. Segundo paso: Las fases oleosas primarias o las emulsiones agua-en-aceite se dispersan en una fase acuosa (agua) . Tercer paso : El solvente inorgánico se remueve de la dispersión para dar micropartículas. A pesar de la dispersión del segundo paso, las dos o más fases oleosas primarias o emulsiones se dispersan, en sucesión, en una fase acuosa. t Alternativamente, una de las fases oleosas primarias o emulsiones se dispersa primero en una fase acuosa, se deja que sufra un cambio en sus factores físicos o químicos, y en seguida se dispersa la o las otras fases oleosas en la fase acuosa. El término "factores físicos o químicos" como se usa en la presente significa velocidades del mezclador, cantidades de la fase acuosa y las concentraciones de los emulsionadores o los aditivos contenidos en la fase acuosa. Los ejemplos concretos, pero no limitantes de los polímeros biodegradables adecuados para el uso de la presente invención incluye un acetato de celulosa, acetato- propionato de celulosa, butirato de celulosa, propionato de celulosa, valerato de celulosa, polímero de cumaronaindeno, dibutilaminohidroxipropil-éter, etilcelulosa, copolímero de etileno-acetato de vinilo, di estearato de glicerol, ftalato de hidroxipropilmetil-celulosa, copolímero de metacrilato de 2-metil-5-vinil-piridina-ácido metacrílico, poliaminoácidos, polianhídridos, policaprolactona, policarbonato, polibutadieno, poliésteres, poliésteres alifáticos, polibutadieno, poliésteres, ácido polihidroxibutírico, metacrilato de polimetilo, éster de ácido polimetacrílico, poliolésteres, polipropileno, polisacáridos tal como ácido algínico, quitina, quitosana, condroitina, dextrina, dextrano, ácido hialurónico, heparina, sulfato de queratan, almidón y así sucesivamente, poliestireno, acetato de polivinil-acetal-dietilamino, acetato de polivinilo, alcohol polivinílico, polivinilbutiral, polivinil-formal, proteínas tales como albúmina, caseína, colágeno, fibrina, fibrinógeno, gelatina, hemoglobina, transferina, zeína, y así por el estilo, copolímero de cloruro de vinilo-propileno-acetato de vinilo, polímero de cloruro de vinilo-acetato de vinilo, ceras tales como sebo de res, cera de ballena, cera de abeja, cera parafina, cera de ricino y así sucesivamente, y ácidos lipidíeos superiores tales como ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido behénico, y así por el estilo con preferencia a los poliésteres alifáticos. Más preferibles son los poliláctidos, poliglicólidos, copolímeros de los mismos (PLGA) . Se dará una descripción más detallada de la presente invención al tomar un ejemplo de PLGA. Finalmente degradado en el ácido láctico y ácido glicólico in vivo, el PLGA se reconoce que es biocompatible e inocuo al cuerpo. Con esta ventaja, el PLGA, que adquirió el permiso de la FDA, U.S.A para su uso en el cuerpo, se aplica para sistemas de distribución sostenida de fármacos para análogos de la hormona de liberación de la hormona leutenizante (LHRH) que se usan en el tratamiento de cáncer prostático y para la hormona de crecimiento humana que se administra a pacientes que sufren de enanismo infantil. Existen varias formas dependiendo de sus propiedades físicas tales como proporciones entre los monómeros constituyentes, ácido láctico y ácido glicólico, peso molecular1 e hidrofilicidad, el PLGA se degrada in vivo durante un periodo de dos semanas a varios meses . En el primer paso del método de acuerdo con la presente invención, se preparan por lo menos dos emulsiones o fases oleosas primarias. Estas fases oleosas o emulsiones tiene propiedades físicas y químicas diferentes al PLGA. Por ejemplo, una de las emulsiones o fases oleosas primarias se puede elaborar al disolver en un aceite un fármaco y un PLGA que se degrada en un periodo de tiempo relativamente corto, in vivo . Este PLGA, que se degrada rápido se puede preparar a partir de una mezcla de por ejemplo, ácido láctico .-ácido glicólico 50:50. El PLGA altamente hidrófilo, por ejemplo, el PLGA que contiene residuos terminales de carboxilo como RG502H y RG503H (Boehringer Ingelheim) , y el PLGA de bajo peso molecular muestran altas velocidades de degradación. Por otra parte, para la preparación de otra fase primaria o emulsión, se pueden emplear el mismo fármaco y PLGA que se degrada de una forma relativamente lenta. Por lo que respecta al PLGA que se degrada de una manera relativamente lenta, se puede preparar a partir de una mezcla de por ejemplo, ácido 52/87 láctico : ácido glicólico 75:25. El PLGA de baja hidrofilicidad, por ejemplo, el PLGA cuyos grupos terminales de carboxilo están sustituidos por dedecilo, tal como RG502 y RG503 (Boehringer Ingelheim) , y el PLGA de alto peso molecular muestran bajas velocidades de degradación. Cuando se usa un fármaco soluble en agua, se disuelve en una fase acuosa y luego se emulsiona en las fases oleosas que contienen los polímeros respectivos, produciendo de este modo por lo menos dos emulsiones primarias. También, las fases oleosas o emulsiones pueden ser diferentes por los fármacos que retienen, aunque se puede emplear el mismo polímero. En detalle, donde se usa la LHRH como un ingrediente activo, se pueden obtener dos diferentes fases oleosas primarias al disolver una LHRH antagonística en una fase oleosa y un análogo de LHRH agonístico en otra fase oleosa primaria. Además, pueden prepararse por lo menos dos emulsiones o fases oleosas primarias, física o químicamente diferentes con un sólo fármaco y un sólo polímero y no con dos clases distintas de fármacos y polímeros.. En este caso, los parámetros que determinan la diferencia en las propiedades física y/o químicas entre las dos o' más emulsiones o fases oleosas primarias incluyen la relación en peso del fármaco al polímero, la relación en peso del 52/87 fármaco al polímero al solvente orgánico, la relación en peso entre solventes orgánicos (si se usan dos o más solventes orgánicos) , y la relación en peso de un solvente orgánico a un solvente acuoso (si el fármaco es soluble en agua, es decir, cuando se usa la agua/aceite/agua) . Las micropartículas preparadas con diferentes parámetros son diferentes entre sí en la estructura y morfología así como en la velocidad de liberación del fármaco. Por ejemplo, si la relación en peso del polímero al solvente orgánico se incrementa, la fase oleosa primaria o emulsión tiene una viscosidad incrementada y de este modo, muestra una eficiencia mejorada de encapsulación, dando por resultado la producción de micropartículas agrandadas. Como otro ejemplo, en el caso que el fármaco sea soluble en agua, la velocidad de liberación tiende a incrementarse conforme se incrementa la proporción del contenido del fármaco. Por otra parte, la velocidad de liberación del fármaco soluble en lípidos tiene una tendencia hacia la disminución cuando se incrementa la proporción de contenido del fármaco. Diferentes propiedades químicas y físicas también pueden resultar del uso de una mezcla de diferentes solventes. Puesto que diferentes solventes muestran diferencia en la solubilidad en agua así como en el punto de ebullición entre sí, los solventes se remueven o evaporan a diferentes velocidades de la emulsión dispersada 52/87 en la fase acuosa, secundaria. Como resultado, las micropartículas muestran diferentes propiedades suficientes para afectar sus velocidades de liberación de fármaco. En el segundo paso del método de acuerdo con la presente invención, las dos o más emulsiones o fases oleosas primarias preparadas anteriormente se dispersan en una fase acuosa. La dispersión de las emulsiones o fases oleosas primarias se puede llevar a cabo de manera sincrónica o en sucesión. En este último, caso, la fase oleosa secundaria se puede dispersar en poco tiempo después de la dispersión de la primera fase oleosa primaria o emulsión en una fase acuosa. Estas técnicas de dispersión deben usar una cantidad suficiente de la fase acuosa tal como para extraer o evaporar el solvente orgánico presente en la fase oleosa primaria o emulsión. Además, la dispersión sucesiva de las emulsiones o fases oleosas primarias se puede lograr al introducir el paso de cambiar a los factores físicos y químicos de la fase acuosa entre los pasos de dispersión de la primera fase oleosa, primaria o emulsión y la segunda fase oleosa, primaria o emulsión. Como se menciona anteriormente, los factores físicos y químicos de la fase acuosa incluyen velocidades del mezclador, cantidades de la fase acuosa, y las concentraciones de los emulsionadores o aditivos contenidos en la fase acuosa. En la totalidad, el incremento de la 52/87 velocidad de mezclado reduce el tamaño de las micelas emulsionadas, dando por resultado la disminución en el tamaño de las micropartículas. Una gran cantidad de la fase acuosa permite que los solventes orgánicos se extraigan a una mayor velocidad de la emulsión, ocasionando una alta velocidad en la solidificación del polímero biodegradable. Como resultado, se forman micropartículas de tamaño grande. La temperatura de la fase acuosa también se debe tomar en consideración debido a que tiene influencia en la velocidad de evaporación de los solventes orgánicos. Conforme se aumenta la temperatura, llega a ser más rápida la evaporación. Como resultado, la velocidad de solidificación del polímero biodegradable y el tamaño de las micropartículas determina la velocidad de liberación del fármaco. Después de la dispersión de la primera fase oleosa primaria o emulsión en una fase acuosa, el incremento de la cantidad o temperatura de la fase acuosa conduce a la extracción de una cantidad suficiente del solvente orgánico contenido en la segunda fase oleosa, primaria o emulsión. Al dispersar por lo menos dos emulsiones o fases oleosas primarias en una fase acuosa, por lo tanto, se debe tomar en consideración la clase y cantidad del solvente orgánico presente en cada una de las fases oleosas, primarias o emulsiones así como la cantidad y temperatura de la fase acuosa . 52/87 A manera de ejemplos, de manera enunciativa, los fármacos adecuados para el uso en la presente invención incluyen péptidos y/o proteínas fisiológicamente activas, agentes anticáncer, antibióticos, antifebriles, acesodinas, agentes anti-inflamatorios, expectorantes, abirritantes, relajantes musculares, remedios para la epilepsia, agentes anti-ulcerativos, agentes anti-hipocondríacos, agentes anti-alérgicos, cardiantes, agentes anti-arrítmicos, agentes vasodilatadores, hidrágogos hipotensivos, agentes curativos de la diabetes, remedios contra la hiperlipemia, anticoagulantes, agentes hemolíticos, agentes antituberculosos, hormonas, antagonistas anestésicos, supresores osteoclásticos, promotores osteogénicos, supresores de la angiogénesis, y mezclas de los mismos. Compuestos de al menos dos aminoácidos, los péptidos y/o proteínas fisiológicamente activos varían en el peso molecular de 200 a 100,000 y se pueden ejemplificar por la hormona de crecimiento humana, la hormona de liberación de la hormona de crecimiento, péptido de liberación de la hormona de crecimiento, interferón, factores de estimulación de la colonia, interleucina, factores de activación de macrófagos, péptido macrófago, factores de las células B, factores de las células T, proteína A, represores de alergia, glicoproteínas de necrosis celular, inmunotoxinas , linfotoxinas, factores de 52/87 necrosis tumoral, factores de represión tumoral, factores de crecimiento de metástasis, a-antitripsina, albúmina y sus fragmentos polipeptídicos, apolipoproteína-E, eritropoyetina, Factor VII; Factor VIII, Factor IX, factores de activación del plasminógeno, urocinasa, estreptocinasa, proteína C, proteína C-reactiva, supresores de renina, supresores de colagenasa, dismutasa superóxido, factores de crecimiento derivado de plaquetas, factores de crecimiento epidérmico, factores de crecimiento osteogénicos, proteínas de promoción osteogénica, calcitonina, insulina, atriopeptina, factores de inducción de catilledge, factores de activación del tejido conectivo, hormona de estimulación de folículo, hormona leutenizante, hormona de liberación de la hormona leutenizante, factores de crecimiento nervioso, hormona paratiroidea, relaxina, secretina, somatomedina, factores de crecimiento tipo insulina, hormona adrenocoticotrófica, glucagones, colecistocinina, polipéptidos pancreáticos, hormona de liberación de gastrina, factores de liberación de coticotrofina, hormonas de estimulación de la tiroides, anticuerpos mono-y poli-clónales contra varios virus, bacterias y toxinas, varias vacunas derivadas de los virus, y mezclas de los mismos. Los ejemplos concretos, no limitantes de los agentes anticáncer incluyen bleomicina, metotrexato, 52/87 actinomicina D, mitomicina C, sulfato de binblastina, sulfato de bincristina, daunorubicina, adriamicina, neocartinostatina, citocinaarabinósido, fluorouracilo, tetrahidrofuril-5-furouracilo, crestina, picibanil, lentinan, levamisol, bestatina, azimexon, glicirrizina, polilos tal como polil:C, polilA:U, polilCLC. Los ejemplos concretos de antibióticos útiles en la presente invención incluyen gentamicina, dibecacina, canendomicina, lividomiscina, tobramicina, amicacina, fradiomicina, sisomicina, clorhidrato de tetraciclina, clorhidrato de oxitetraciclina, rolitetraciclina, clorhidrato de doxiciclina, ampicilina, peperacilina, ticarcilina, ceflotina, cefaloridina, cefotiam, cefsulodina, cefmenoxina, cefmetazol, cefazolina, cefotaxima, cefoperazon, ceftizoxima, mochisalctam, tienamicina, sulfazecina y asetreonam. Los antifebriles aplicables en la presente invención se ejemplifican por analgésicos, agentes antiinflamatorios que contienen ácido salicílico, sulpirina, ácido flufenánico, diclofenac, indometacina, morfina, clorhidrato de petidina, tartarato de levorfanol, y oximorfona, pero de manera enunciativa. Los ejemplos concretos y no limitantes de las acesodinas útiles en la presente invención incluyen clorhidrato de efedrina, clorhidrato de metilfedrina, 52/87 clorhidrato de noscapina, fosfato de codeína, fosfato de hidrocodeína, clorhidrato de alocramida, clorhidrato de clofedanol, clorhidrato de picoperidamina, cloperastina, clorhidrato de protocilol, clorhidrato de isoproterenol, sulfato de sulbutamol y sulfato de terbutalina. En cuanto a los abirritantes, se ejemplifican por clorpromazina, proclorperazina, trifltioperazina, sulfato de atropina, y bromuro de metilescopolamina. Como ejemplos de los relajantes musculares, están el metanosulfonato de pridinol cloruro de tubocurarina, bromuro de pancuronio. Como ejemplos de los remedios para la epilepsia, están los antiepilépticos que contienen fenitonina, etosuximida, clordiazepóxido sódico de acetazolamida. Los ejemplos de los agentes anti -ulcerativos incluyen clorhidrato de histidina y metoclopramida. Los ejemplos de agentes anti-hipocondriacos incluyen imipramina, clomipramina, noxiptilina y sulfato de fenerdina . Los ejemplos de los agentes anti -alérgicos incluyen clorhidrato de difenhidramina, maleato de clorfeniramina, clorhidrato de tripelenamina, clorhidrato de metdilazina, clorhidrato de clemizol, clorhidrato de difenilpiralina y clorhidrato de metoxifenamina. Como ejemplos de los cardiantes, están trans- 52/87 paioxocamfor, teofilol, aminofilina, y clorhidrato de etilefrina. Los agentes anti-arrítmicos se pueden ejemplificar por propranol, alprenolol, bufetolol, y oxprenolo. Los ejemplos de agentes vasodilatadores útiles en la presente invención incluyen clorhidrato de oxifedrina, diltiazem, clorhidrato de tolazolina, hexobendina, y sulfato de bametan. Los ejemplos de hidrágogos hipotensivos incluyen bromuro de hexametonio, pentolinio, clorhidrato de mecamilamina, clorhidrato de ecarazina y clonidina. Como ejemplos de los curativos de la diabetes, están glimidina sódica, glipizida, clorhidrato de fenformina, clorhidrato de buformina y metformina. Como ejemplos de los remedios de la hiperlipemia, están pravastatina sódica, simvastatina, clinofibrato, clofibrato, simfibrato y bezafibrato. Útil como el anticoagulante es la heparina sódica. Los ejemplos de agentes hemolíticos incluyen tromboplastina, trombina, sulfito ácido sódico de menadiona acetomenaftona, ácido tranexámico, sulfonato sódico de carboxocromo y metanosulfonato de adenocromo-monoaminoguanidina . 52/87 Los ejemplos de agentes antituberculosos incluyen isoniazida, etambutol y ácido p-aminosalicílico. Disponibles como hormonas de la presente invención están la predonisolona, fosfato sódico de predonisolona, sulfato sódico de dexametasona, fosfato sódico de betametasona, fosfato de hexestrol, acetato de hexestrol, y metimazol . Los antagonistas anestésicos se pueden ejemplificar por tartrato de levalorfan, clorhidrato de nalorfina y clorhidrato de naloxona. Como un supresor osteoclástico se puede aplicar ipriflavona para la presente invención. Como los promotores osteogénicos disponibles en la presente invención, péptidos tal como BMP, PTH, TGF-beta e IGF-1. Los ejemplos de supresores de la angiogénesis incluyen esteroides, fumagilina y fumagilol. Los fármacos fisiológicamente activos anteriores pueden estar en la forma de sal farmacéuticamente aplicable. Por ejemplo, para los fármacos fisiológicamente activos que contienen radicales básicos tales como grupos amina, son útiles los ácidos inorgánicos como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico y ácido nítrico y los ácidos orgánicos como ácido carbónico y ácido succínico. Donde los fármacos fisiológicamente activos contienen radicales ácidos tales como ácidos carboxílicos, sales inorgánicas 52/87 tales como compuestos orgánicos de sodio y potasio y básicos tales como trietilamina y arginina son útiles para cambiar los fármacos de interés en las sales farmacéuticamente aceptables. Se puede obtener un mejor entendimiento de la presente invención en vista de los siguientes ejemplos que se exponen para ilustrar, aunque no se deben considerar para limitar la presente invención.

EJEMPLO I PREPARACIÓN DE LA MEZCLA DE MICROPARTÍCULAS DE ENCAPSULACIÓN DE AZUL BRILLANTE Y MICROPARTÍCULAS QUE CONTIENEN RODAMINA (1:1) POR UNA EMULSIFICACIÓN DOBLE Se disolvieron 0.1 g de Azul Brillante en 1.5 g de metanol y se dispersaron a una solución de 0.5 g de RG502H (Boehringer Ingelheim) en 2.0 g de cloruro de metileno para dar una emulsión primaria de DPI. De manera separada, se dispersó una solución de 0.1 g de rodamina en 1.5 g de metanol en 2.0 g de cloruro de metileno que contiene 0.5 g de RG502H para dar una emulsión primaria DP2. Las emulsiones primarias DPI y DP2 se dispersaron en sucesión en 250 ml de una solución al 0.5% de alcohol polivinílico en agua precalentada a 25°C en tanto que se agita a 3500 rmp mediante el uso de un homogenizador. Después de que se llevó a cabo la agitación a 3000 rpm 52/87 durante 15 minutos adicionales para dar una emulsión, el solvente orgánico se evaporó a 40°C durante una hora para producir micropartículas solidificadas. Se muestran en la microfotografía óptica de la Figura la.

EJEMPLO COMPARATIVO I A; Preparación de micropartículas de encapsulación de azul brillante Se disolvieron 0.1 g de azul brillante en 1.5 g de metanol y se dispersaron en una solución de 1 g de RG502H (Boehringer Ingelheim) en 2.0 g de cloruro de metileno para dar una emulsión primaria. La emulsión primaria se dispersó en 250 ml y una solución al 0.5% de alcohol polivinílico en agua precalentada a 25 °C en tanto que se agita a 3,500 rpm mediante el uso de un homogeneizador. Después de que se llevo a cabo la agitación a 3,000 rmp durante 15 minutos adicionales para dar una emulsión, el solvente orgánico se evaporó a 40 °C durante una hora para producir micropartículas solidificadas. La Figura Ib es una microfotografía óptica de las micropartículas .

B. Preparación de micropartículas de encapsulación de Rodamina Se disolvieron 0.2 g de rodamina en 3 g de 52/87 metanol y se dispersaron en una solución de 1 g de RG502H (Boehringer Ingelheim) en 2.0 g del cloruro de metileno para dar una emulsión primaria. La emulsión primaria se dispersó en 250 ml de una solución al 0.5% de alcohol polivinílico en agua precalentada a 25 °C en tanto que se agita a 3,500 rpm por el uso de un homogeneizador. Después de que se llevó a cabo la agitación a 3,000 rmp durante 15 minutos adicionales para dar una emulsión, el solvente orgánico se evaporó a 40 °C durante una hora para producir micropartículas solidificadas. La Figura le es una microfotografía óptica de las micropartículas.

C; Preparación de micropartículas de encapsulación de azul brillante/rodamina (1; 1) por el método de mezclado de polímero Junto con 0.1 g de azul brillante, 0.1 g de rodamina se disolvieron en 3 g de metanol, seguido por la dispersión de la solución de metanol en una solución polimérica de 1 g de RH502H en 2.0 g de cloruro de metileno para dar una emulsión primaria. La emulsión primaria se dispersó en 250 ml de una solución al 0.5% de alcohol polivinílico en agua precalentada a 25 °C en tanto que se agitó a 3,500 rpm por el uso de un homogeneizador. Después de que se llevó a cabo la agitación a 3,000 rpm durante 15 minutos adicionales para dar una emulsión, el solvente 52/87 orgánico se evaporó a 40 °C durante una hora para producir micropartículas solidificadas. La Figura le es una microfotografía óptica de las micropartículas. Como se muestra en las microfotografías ópticas respectivas de las Figura la a Id para el Ejemplo I y Ejemplos Comparativos IA a IC, las micropartículas preparadas en el Ejemplo I están en la mezcla de cantidades iguales de aquellas preparadas en los Ejemplos comparativos IA y IB en tanto que las micropartículas preparadas por el método de mezclado de polímero del Ejemplo Comparativo IC toman un color mezclado de las dos.

EJEMPLO II PREPARACIÓN DE MICROPARTÍCULA BIODEGRADABLE DE ENCAPSULACIÓN DE ACETATO DE LEUPROLIDO CON CAPACIDAD DE LIBERACIÓN CONTINUA DE FÁRMACO DURANTE 28 DÍAS O MÁS Tipo A : En 0 . 28 g de metanol se disolvieron 62 . 5 mg de acetato de leuprolido . Esta solución de metanol se dispersó en 1 . 125 g de cloruro de metileno que contiene 0 . 438 g de un PLGA (RG502H, Boehringer Ingelheim) que tiene un peso molecular de 8600 con láctido : glicólido 50 : 50 para dar una emulsión primaria DPI . De manera separada, se disolvieron 62 . 5 mg de acetato de leuprolido en 0 . 37 g de metanol , seguido por la dispersión de la solución de metanol en 1 . 313 de cloruro de metileno que contiene 0 . 438 52/87 g de un PLGA (RG503H, Boehringer Ingelheim) que tiene un peso molecular de 33,000 con láctido :glicólido 50:50 para dar una emulsión primaria de DP2. Las emulsiones primarias DPI y DP2 se dispersaron en sucesión en 250 ml de una solución al 0.3% de alcohol polivinílico en agua precalentada a 25 °C en tanto que se agita a 3,500 rpm por el uso de un homogeneizador. Después de que la agitación se llevó a cabo a 3,000 rpm durante 15 minutos adicionales para dar una emulsión, el solvente orgánico se evaporó a 40 °C durante dos horas para producir micropartículas solidificadas . Las mícropartículas se muestran en las microfotografías electrónicas de exploración de la Figura 2, aumentadas por 100 veces (a) y 800 veces (b) . En la SEM de la Figura 2b, se observa que las micropartículas de la derecha tienen poros derivados del polímero 502H de la emulsión DPI, en tanto que las micropartículas de la izquierda se ven sin poros, derivadas de 503H de la emulsión DP2. Tipo B: 75 mg de acetato de leuprolido se disolvieron en 0.27 g de metanol y se dispersaron en 1.093 g de cloruro de metileno que contiene 0.425 g de RH502H para dar una emulsión primaria DPI. De manera separada, una solución de 75 mg de acetato de leuprolido en 0.36 g de metanol se dispersó en una solución polimérica de 0.425 g 52/87 de RG503H en 1.275 g del cloruro de metileno para dar una emulsión primaria DP2. Posteriormente, las micropartículas se prepararon al seguir el procedimiento restante para el tipo A del Ejemplo 2.

EJEMPLO COMPARATIVO II A: Preparación de micropartícula de RH502H de encapsulación de acetato de leuprolido Se disolvieron 62.5 g de acetato de leuprolido en 0.28 g de metanol y se dispersaron en 1.125 g de cloruro de metileno que contiene 0.438 g de RG502H para dar la emulsión primaria. La emulsión primaria se dispersó en 125 ml de una solución al 0.3% de alcohol polivinílico en agua precalentada a 25 °C en tanto que se agita a 3,500 rpm por el uso de un homogeneizador. Posteriormente, las micropartículas se prepararon al seguir el procedimiento restante para el tipo A del Ejemplo 2.

B: Preparación de micropartículas de RG503H de encapsulación de acetato de leuprolido Se disolvieron 62.5 g de acetato de leuprolido en 0.378 g de metanol y se dispersaron en 1.313 g de cloruro de metileno que contiene 0.438 g de RG503H para dar una emulsión primaria. La emulsión primaria se dispersó en 125 ml de una solución al 0.3% de alcohol polivinílico en agua 52/87 destilada precalentada a 25 °C en tanto que se agita a 3,500 rpm mediante el uso de un homogeneizador. Posteriormente, las micropartículas se prepararon al seguir el procedimiento restante para el tipo A del Ejemplo 2.

G: Preparación de micropartículas de RG502G/RG503H (1:1) de encapsulación de acetato de leuprolido En 0.65 g de metanol se disolvieron 125 g de acetato de leuprolido que luego se dispersó en una solución de 0.438 g RG502H y 0.438 g de RG503H en 2.438 g del cloruro de metileno para obtener una emulsión primaria. Esta emulsión se dispersó en 250 ml de una solución al 0.3% de alcohol polivinílico en agua destilada precalentada a 25 °C en tanto que se agita a 3,500 rpm mediante el uso de un homogeneizador. Posteriormente, las micropartículas se prepararon al seguir el procedimiento restante para el tipo A del Ejemplo 2.

EJEMPLO DE PRUEBA I LIBERACIÓN IN VITRQ DE FÁRMACO DE MICROPARTÍCULAS Las micropartículas biodegradables preparadas en el Ejemplo II y Ejemplo Comparativo II se probaron, junto con leuplina comercialmente disponible (Takeda, Japón) como un control, para la liberación in vi tro del fármaco como sigue. 5 mg de cada una de las micropartículas liofilizadas se dispersaron en 35 frascos, cada uno que contiene amortiguador de fosfato 0.033 m (pH 7), y se dejó librar el fármaco a 37°C. En un día de la prueba y el primer día, el cuarto, el séptimo día, el catorceavo día, el veintiunavo día, y el veintiochoavo día después de la prueba, cada una de las muestras de prueba se tomaron a partir de 5 frascos y se centrifugaron. Las micropartículas obtenidas de esta manera se extrajeron con un amortiguador de cloruro de metileno/acetato (1:1 v/v) y el leuprolido transferido hacia la capa de acetato se cuantificó por HPLC a 280 nm con una fase móvil de una solución de acetonitrilo acuosa al 28% que contiene 0.1% de ácido trifluoroacético a una velocidad de flujo de 1.0 ml/min. Los resultados se muestran en la Figura 3.

EJEMPLO DE PRUEBA II NIVEL DE LEUPRQLELINA EN SANGRE Las micropartículas biodegradables preparadas en el Ejemplo II se probaron, junto con leuplina comercialmente disponible (Takeda, Japón) como un control, para la liberación in vivo del fármaco como sigue. Para la determinación de la capacidad de la liberación del fármaco, se cuantificaron los niveles sanguíneos de Leuprolelina. Se usaron 10 ratas SD machos para esta prueba. Las micropartículas preparadas en el ejemplo II se introdujeron en cinco de las ratas SD machos vía inyección intramuscular en tanto que la Leuprina se inyectó intramuscularmente en las otras cinco ratas. Las micropartículas se administraron a una dosis de 0.9 mg por rata. Se tomaron muestras sanguíneas de una vena de la cola de cada una de las ratas en los días uno, tres, siete, catorce, 21, 28 y 35 después de la inyección y se midió para el nivel de leuprolelina. Los resultados se muestran en la Figura 4.

EJEMPLO DE PRUEBA III NIVEL DE TESTOSTERONA EN SANGRE Las micropartículas biodegradables preparadas en el Ejemplo II se probaron, junto con leuplina comercialmente disponible (Takeda, Japón) como un control, para la actividad in vivo del fármaco como sigue. Para la determinación de la actividad del fármaco, se cuantificaron los niveles sanguíneos de Testosterona. Se usaron 10 ratas SD macho para esta prueba. Las micropartículas preparadas en el ejemplo II se introdujeron en cinco de las ratas SD machos vía inyección intramuscular en tanto que la Leuplina se inyectó intramuscularmente en las otras cinco ratas. Las micropartículas se administraron a una dosis de 0.9 mg por rata. Se tomaron muestras sanguíneas de una vena de la cola de cada una de las ratas en el día uno, tres, siete, catorce, 21, 28 y 35 después de la inyección y se midió para el nivel de leuprolelina. Los resultados se muestran en la Figura 4.

EJEMPLO III PREPARACIÓN DE MICROPARTÍCULA BIODEGRADABLE DE ENCAPSULACIÓN DE ADRIAMICINA CON CAPACIDAD DE LIBERACIÓN CONTINUA DE FÁRMACO DE DOS MESES O MÁS En 0.563 g de metanol se disolvieron 20 mg de adriamicina. Esta solución de metanol se dispersó en 2.253 g de cloruro de metileno que contiene 0.875 g de RG502H para dar una emulsión primaria de DPI. De manera separada, se disolvieron 15 mg de adriamicina en 0.735 g de metanol seguido por la dispersión de la solución de metanol en 2.624 g de cloruro de metileno que contiene 0.875 g de un PLGA (RG502, Boehringer Ingelheim) que tiene un peso molecular de 14,500 con láctido .-glicólido 50:50, para dar una emulsión primaria DP2. Las emulsiones primarias DPI y DP2 se dispersaron de manera sincrónica en 500 ml de una solución al 0.3% de alcohol polivinílico en agua precalentada a 25 °C en tanto que se agita a 3,500 rpm mediante el uso de un homogeneizador. Posteriormente, las micropartículas se prepararon al seguir el procedimiento restante para el tipo A del Ejemplo 2. 52/87 EJEMPLO IV PREPARACIÓN DE MICROPARTÍCULA BIODEGRADABLE DE ENCAPSULACIÓN DE ACETATO DE LEUPROLIDO CON CAPACIDAD DE LIBERACIÓN CONTINUA DE FÁRMACO DE TRES MESES O MÁS Tipo A: En 0.282 g de metanol se disolvieron 62.5 mg de acetato de leuprolido. Esta solución de metanol se dispersó en 1.127 g de cloruro de metileno que contiene 0.438 g de RG502H para una emulsión primaria DPI. De manera separada, se disolvieron 187.5 mg de acetato de leuprolido en 0.492 g de metanol seguido por la dispersión de la solución de metanol en 1.97 g de cloruro de metileno que contiene 1.3 g de poliláctido (PLA0015, Wako, Japón) que tiene un peso molecular de 15,000, para dar una emulsión primaria DP2. Las emulsiones primarias DPI y DP2 se dispersaron en sucesión en 500 ml de una solución al 0.3% de alcohol polivinílico de agua precalentada a 25 °C en tanto que se agita a 3,500 rpm por el uso de un homogeneizador. Posteriormente, las micropartículas se prepararon al seguir el procedimiento restante para el tipo A del Ejemplo 2. Tipo B: se disolvieron 125 mg de acetato de leuprolido en 0.328 g de metanol y se dispersaron en 1.3 g de cloruro de metileno que contiene 0.875 g de PLA0015 para dar una emulsión primaria. La mitad de la emulsión primaria se dispersó en 125 ml de una solución al 0.1% de alcohol 52/87 polivinílico en agua destilada en tanto que se agita a 3,500 rpm con la ayuda de un homogeneizador. En esta dispersión, 125 ml de una solución al 0.3% de alcohol polivinílico de agua destilada se adicionó lentamente, después de lo cual la temperatura se controló a 25 °C y la otra mitad de la emulsión primaria se dispersó. Posteriormente, se prepararon micropartículas al seguir el procedimiento restante para el tipo A del Ejemplo 2.

EJEMPLO V PREPARACIÓN DE MICROPARTÍCULA BIODEGRADABLE DE ENCAPSULACIÓN DE ACETATO DE LEUPRQLIDO CON CAPACIDAD DE LIBERACIÓN CONTINUA DE FÁRMACO DE CUATRO MESES O MÁS En 0.282 g de metanol se disolvieron 62.5 mg de acetato de leuprolido. Esta solución de metanol se dispersó en 1.127 g de cloruro de metileno que contiene 0.438 g de RG502H para dar una emulsión primaria DPI. De manera separada, se disolvieron 187.5 mg de acetato de leuprolido en 0.492 g de metanol, seguido por la dispersión de la solución de metanol en 1.97 g de cloruro de metileno que contiene 1.3 g de un PLGA (RG502, Boehringer Ingelheim) que tiene un peso molecular de 14,500, con láctido: glicólico 50:50, para dar una emulsión primaria DP2. Las emulsiones primarias DPI y DP2 se dispersaron en sucesión en 500 ml de una solución al 0.3% de alcohol polivinílico en agua 52/87 precalentada a 25 °C en tanto que se agita a 3,500 rpm por el uso de un homogeneizador. Posteriormente, las micropartículas se prepararon al seguir el procedimiento restante para el tipo A del Ejemplo 2.

EJEMPLO VI PREPARACIÓN DE MICROPARTÍCULA BIODEGRADABLE DE ENCAPSULACIÓN DE ACETATO DE LEUPROLIDO CON CAPACIDAD DE LIBERACIÓN CONTINUA DE FÁRMACO DE SEIS MESES O MÁS En 0.328 g de metanol se disolvieron 125 mg de acetato de leuprolido. Esta solución de metanol se dispersó en 1.313 g de cloruro de metileno que contiene 0.875 g de PLA0015 para dar una emulsión primaria DPI. De manera separada, se disolvieron 125 mg de acetato de leuprolido en 0.735 g de metanol, seguido por la dispersión de la solución de metanol en 2.624 g de cloruro de metileno que contiene 0.875 g de un PLGA (RG858, Boehringer Ingelheim), que tiene un peso molecular de 220,000 con láctido: glicólido 85:15, para dar una emulsión primaria DP2. Las emulsiones primarias DPI y DP2 se dispersaron en sucesión en 500 ml y una solución al 0.3% de alcohol polivinílico en agua precalentada a 25 °C en tanto que se agita a 3,500 rpm por el uso de un homogeneizador. Posteriormente, se prepararon micropartículas al seguir el procedimiento restante para el tipo A del Ejemplo 2. 52/87 EJEMPLO VII PREPARACIÓN DE MICROPARTÍCULAS BIODEGRADABLES QUE ENCAPSULAN DIFERENTES POLÍMEROS Se obtuvieron emulsiones primarias usando polímeros biodegradables como se indica en la siguiente Tabla y se usaron para preparar las micropartículas de manera similar a aquella del tipo A del Ejemplo II.

Número Polímeros (peso molecular promedio en peso) de Lote DPI DP2 DKLP134 Polibutadieno (8000) Poliláctido (10000) DKLP141 Polihidroxibutireno (9000) Polivinilacetato (12000) DKLP146 Polipropileno (6000) Polibutadieno (15000) D LP153 Polivinilacetato (9000) Polipropileno (18000) DKLP155 Policaprolactona (8500) Polibutadieno (13000) D LP162 Polivinilbutilal(7000) Poliestireno (9000) DKLP167 Poliestireno (6000) Polihidroxibutireno (11000) En los ejemplos anteriores, las combinaciones de dos emulsiones primarias que fueron de diferentes propiedades físicas y químicas entre sí se combinaron en relaciones predeterminadas para preparar micropartículas que podrían liberar continuamente fármacos durante periodos deseados de tiempo. 52/87 En la tabla posterior, se resumen combinaciones teóricas de dos emulsiones, que son capaces de liberar continuamente fármacos durante periodos prolongados de tiempo de acuerdo a los polímeros (peso molecular, hidrofilicidad, polímero/solvente orgánico, y láctido/glicólido) , fármacos, y aditivos.

Factores físicos y químicos Emulsiones que afectan Emulsión 1 Emulsión 2 Combinación Propiedades de liberación Rápida Periodo de Liberación velocidad de liberación continuamente liberación prolongado durante periodos Liberación prolongados de inicial lenta tiempo Peso Molecular Pequeño Grande Polimero Hidrofilicidad Grande Pequeño Polímero/Solvente Pequeño Grande Orgánico Aditivos Láctido/Glicólido1 Pequeño Grande de Fármaco/Polímero Grande Pequeño Fármaco2 Contenido Grande Pequeño (o ninguno) 1 Poli (Láctido-co-glicólido) 2 Sales como Na+ y Ca2+, ácidos como ácido cítrico y ácido tartárico y aminoácidos Las emulsiones primarias se pueden combinar en muchos casos. Por ejemplo, cuatro emulsiones, que tienen un peso molecular grande, un peso molecular pequeño, una relación descompensada entre un polímero y un aditivo, respectivamente, se pueden dispersar en combinación de manera sincrónica o sucesivamente para producir las 52/87 micropartículas de solvente orgánico con periodos de tiempo de liberación adecuados. Como se describe anteriormente, las combinaciones de micropartículas en las cuales las micropartículas constituyentes retienen sus propiedades de liberación de fármaco en su integridad se pueden preparar en un proceso simple de acuerdo con la presente invención. Por lo tanto, una combinación apropiada de las micropartículas puede liberar fármacos de forma efectiva durante un periodo deseado de tiempo. La presente invención se ha descrito de una manera ilustrativa, y se va a entender que la terminología usada se propone para que sea de la naturaleza de la descripción y de ninguna manera limitante. En vista de las enseñanzas anteriores son posibles muchas modificaciones y variaciones de la presente invención. Por lo tanto, se debe entender que dentro del alcance de las reivindicaciones anexas, la invención se puede practicar de modo distinto al descrito específicamente. 52/87

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES : 1. Un método para preparar micropartículas de liberación sostenida usando un proceso de varias emulsiones, que comprende los pasos de: disolver o dispersar un fármaco en cada uno de por lo menos dos aceites para dar por lo menos dos emulsiones o fases oleosas primarias, donde cada una contiene un polímero biodegradable; dispersar las por lo menos dos emulsiones o fases oleosas primarias en una fase acuosa, de manera sincrónica o en sucesión; y remover los solventes orgánicos de la solución dispersada de fármaco para producir micropartículas. 2. El método según la reivindicación 1, en donde el paso de dispersión de las emulsiones o fases oleosas primarias en una fase acuosa se lleva a cabo dispersando una de las fases oleosas primarias en una fase acuosa y, luego, dispersando inmediatamente las otras emulsiones o fases oleosas en la fase acuosa, o bien dispersando una de las fases oleosas primarias en una fase acuosa, de manera que haya cambios en los factores físicos y/o químicos de la fase acuosa y, después, dispersando la otra de las fases oleosas primarias en esa fase acuosa. 3. El método según la reivindicación 2 , en donde el cambio de los factores físicos y/o químicos se 52/87 lleva a cabo por la agitación de la fase acuosa a una velocidad de 100 - 5,000 rpm, incrementando la cantidad de fase acuosa entre 20 y 1,000 veces más que las emulsiones o fases oleosas primarias, adicionando un emulsificador en una cantidad de 1 al0% en la fase acuosa, este emulsificador se selecciona del grupo que consiste de polisorbato y alcohol polivinílico, adicionando un aditivo a una cantidad de entre 0.1 y 5 en la fase acuosa, el aditivo se selecciona del grupo que consiste de gelatina, carboximetilcelulosa y calcio, y/o controlando la temperatura de la fase acuosa en el intervalo de 5-40 °C. 4. El método según la reivindicación 1, en donde las emulsiones o fases oleosas primarias se preparan por un proceso de emulsificación doble agua/aceite/agua en el cual se dispersa una solución acuosa disuelta en fármaco en un solvente orgánico que contiene un polímero biodegradable y luego en una fase acuosa, o por un proceso de emulsificación individual d aceite/agua en el cual se disuelven conjuntamente un fármaco o un polímero biodegradable en un solvente orgánico o una mezcla de solvente orgánico y luego se dispersan en una fase acuosa. 5. El método según la reivindicación 1, en donde el polímero biodegradable se selecciona del grupo que consiste de poliláctido, poliglicólido, poli (láctido-co-glicólido) y mezclas de los mismos. 52/87 6. El método según la reivindicación 1, en donde el polímero biodegradable se selecciona del grupo que consiste de acetato de celulosa, acetato-propionato de celulosa, butirato de celulosa, propionato de celulosa, valerato de celulosa, polímero de cumaronaindeno, dibutilaminohidroxipropil-éter, etilcelulosa, copolímero de etileno-acetato de vinilo, diestearato de glicerol, ftalato de hidroxipropilmetil-celulosa, copolímero de metacrilato de 2-metil-5-vinil-piridina-ácido metacrílico, poliaminoácidos, polianhídridos, policaprolactona, policarbonato, polibutadieno, poliésteres, poliésteres alifáticos, polibutadieno, poliésteres, ácido polihidroxibutírico, metacrilato de polimetilo, éster de ácido polimetacrílico, poliolésteres, polipropileno, polisacáridos, poliestireno, acetato de polivinil-acetal-dietilamino, acetato de polivinilo, alcohol polivinílico, polivinil-butiral, polivinil-formal, proteínas, copolímero de cloruro de vinilo-propileno-acetato de vinilo, polímero de cloruro de vinilo-acetato de vinilo, ceras, y ácidos lipidíeos superiores. 7. El método según la reivindicación 1, en donde el fármaco está en una forma de sal seleccionada del grupo que consiste de péptidos y/o proteínas fisiológicamente activas, agentes anticáncer, antibióticos, antifebriles, acesodinas, agentes anti-inflamatorios, 52/87 expectorantes, abirritantes, relajantes musculares, remedios para la epilepsia, agentes anti-ulcerativos, agentes anti-hipocondriacos, agentes anti-alérgicos, cardiantes, agentes anti-arrítmicos, agentes vasodilatadores, hidragogos hipotensivos, agentes curativos de la diabetes, remedios contra la heperlipemia, anticoagulantes, agentes hemolíticos, agentes antituberculosos, hormonas, antagonistas anestésicos, supresores osteoclásticos, promotores osteogénicos, supresores de la angiogénesis, y mezclas de los mismos. 8. El método según la reivindicación 1, en donde cada una de las emulsiones o fases oleosas primarias comprenden un fármaco en una cantidad de 1-50% y un polímero de una cantidad de 5-50%. 9. El método según una de las reivindicaciones 1-7, en donde el fármaco se selecciona del grupo que consiste de acetato de goserelina, acetato de naferalina, acetato de buserelina, acetato de leuprolelina, y mezclas de los mismos. 10. El método según una de las reivindicaciones 1-5, en donde los polímeros biodegradables tienen respectivamente un peso molecular promedio en peso de 6,00-10,000 y 25,000-35,000 con una relación molar de láctido,-glicólido que varía desde 45:55 a 55:45 y se dispersan en la fase acuosa, de manera sincrónica o en 52/87 sucesión, por lo cual las micropartículas pueden liberar fármacos durante periodos prolongados de tiempo. 11. Micropartículas de liberación sostenida, preparadas por el método de la reivindicación 1. 52/87