KR20210048439A - 테르펜 글리코사이드 유도체 및 그의 용도 - Google Patents

테르펜 글리코사이드 유도체 및 그의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20210048439A
KR20210048439A KR1020207028283A KR20207028283A KR20210048439A KR 20210048439 A KR20210048439 A KR 20210048439A KR 1020207028283 A KR1020207028283 A KR 1020207028283A KR 20207028283 A KR20207028283 A KR 20207028283A KR 20210048439 A KR20210048439 A KR 20210048439A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
glucosylated
rebaudioside
compound
formula
mono
Prior art date
Application number
KR1020207028283A
Other languages
English (en)
Inventor
단-팅 인
셴-원 간
Original Assignee
피르메니히 에스아
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 피르메니히 에스아 filed Critical 피르메니히 에스아
Publication of KR20210048439A publication Critical patent/KR20210048439A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/18—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a glycosyl transferase, e.g. alpha-, beta- or gamma-cyclodextrins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D7/00—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/005—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines characterised by ingredients other than fatty acid triglycerides
    • A23D7/0053—Compositions other than spreads
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D7/00—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/005—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines characterised by ingredients other than fatty acid triglycerides
    • A23D7/0056—Spread compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G1/00—Cocoa; Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/30—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/50—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by shape, structure or physical form, e.g. products with an inedible support
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G1/00—Cocoa; Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/30—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/56—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor making liquid products, e.g. for making chocolate milk drinks and the products for their preparation, pastes for spreading, milk crumb
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G4/00—Chewing gum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/52—Adding ingredients
    • A23L2/60—Sweeteners
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L23/00—Soups; Sauces; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/30—Artificial sweetening agents
    • A23L27/33—Artificial sweetening agents containing sugars or derivatives
    • A23L27/36—Terpene glycosides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L7/00—Cereal-derived products; Malt products; Preparation or treatment thereof
    • A23L7/10—Cereal-derived products
    • A23L7/117—Flakes or other shapes of ready-to-eat type; Semi-finished or partly-finished products therefor
    • A23L7/135—Individual or non-extruded flakes, granules or shapes having similar size, e.g. breakfast cereals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Pediatric Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Seasonings (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명은 일반적으로 스테비아 레바우디아나 베르토니(Stevia rebaudiana Bertoni), 루부스 수아비시무스(Rubus suavissimus ), 또는 시라이티아 그로스베노리(Siraitia grosvenorii)로부터 추출한 특정 화합물과 같은 테르펜 글리코사이드 (terpene glycoside)에 관한 것이다. 본 발명은 또한 식품 성분, 향미료 및 감미료와 같은 화합물의 용도 및 이와 관련된 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 이러한 화합물을 포함하는 섭취 가능한 조성물 뿐만 아니라 특정 식물 공급원으로부터 이러한 화합물을 선택적으로 추출하는 방법을 제공한다.

Description

테르펜 글리코사이드 유도체 및 그의 용도
관련 출원들과의 상호 인용
본 출원은 2018 년 8 월 22 일자로 출원한 PCT 출원 제 PCT/CN2018/101661 호의 우선권 이익을 주장하며, 해당 출원은 본 명세서에 전체적으로 참고로 포함된다.
본 발명은 일반적으로 스테비아 레바우디아나 베르토니(Stevia rebaudiana Bertoni), 루부스 수아비시무스(Rubus suavissimus), 또는 시라이티아 그로스베노리(Siraitia grosvenorii)로부터 추출한 특정 화합물과 같은 테르펜 글리코사이드 (terpene glycoside)에 관한 것이다. 본 발명은 또한 식품 성분, 향미료 및 감미료와 같은 화합물의 용도 및 이와 관련된 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 이러한 화합물을 포함하는 섭취 가능한 조성물뿐만 아니라 특정 식물 공급원으로부터 이러한 화합물을 선택적으로 추출하는 방법을 제공한다.
미각 시스템은 외부 세계의 화학적 조성에 대한 감각 정보를 제공한다. 미각 변환은 동물에서 화학적으로 유발되는 감각의 보다 정교한 형태 중 하나이다. 미각의 신호는 단순한 후생 동물에서부터 가장 복잡한 척추 동물에 이르기까지 동물계 전체에서 발견된다. 포유류는 단맛, 쓴맛, 신맛, 짠맛 및 감칠맛의 다섯 가지 기본 미각 양상을 갖고 있는 것으로 믿어진다.
단맛은 당분이 풍부한 음식을 먹을 때 가장 흔히 느끼는 맛이다. 포유류는 일반적으로 과량을 제외하곤 단맛을 즐거운 감각으로 인식한다. 수크로스 및 과당과 같은 열량이 있는 감미료는 단맛 물질의 전형적인 예이다. 다양한 무 열량 및 저열량 대체물질들이 존재하지만 이러한 열량의 감미료는 여전히 식용 제품의 소비시 단맛을 느끼도록 유도하는 주요 수단이다.
비만, 당뇨병 및 심혈관 질환과 같은 대사 장애 및 관련 질환들은 전 세계적으로 중요한 공중 보건 관심사이다. 또한, 그들의 전파는 거의 모든 선진국에서 놀라운 속도로 증가하고 있다. 열량이 있는 감미료는 다양한 포장 식품 및 음료 제품에 포함되어 소비자의 입맛을 높이기 때문에 상기 증가 추세의 주요 원인이다. 많은 경우에 있어서, 무 열량 또는 저열량 대체물은 수크로스나 과당을 대신하여 음식과 음료에 사용될 수 있다. 그럼에도 불구하고 이러한 화합물들은 열량 감미료와는 다르게 단맛을 부여하므로 많은 소비자들이 적절한 대안으로서 인식하지 않고 있다. 더욱이, 이러한 화합물들은 특정 제품에 배합하기가 어려울 수도 있다. 어떤 경우에는 열량 감미료의 일부 대체물로서 사용될 수 있지만, 상기 화합물의 존재만으로도 많은 소비자로 하여금 불쾌한 떫은 맛을 느끼게 할 수 있다. 따라서, 저열량 감미료는 그의 채택에 있어서 여전히 특정 문제에 직면해 있다.
스테비아(Stevia rebaudiana Bertoni) 추출물로부터의 스테비올 글리코사이드(steviol glycoside), 블랙베리 잎(Rubus suavissimus) 추출물로부터의 루부소사이드(rubusoside) 및 수도승 열매(시라이티스 그로스베노리) 추출물로부터의 모그로사이드(mogroside)와 같은 테르펜 글리코사이드는 천연 저열량 감미료이다. 그러나, 다른 많은 저열량 설탕 대체물과 마찬가지로 이러한 제품들은 쓴맛, 여운 뒷맛 또는 감초 향미와 같은 부정적인 미각 속성을 가지고 있다. 트랜스글루코실화는 이러한 부정적인 미각 속성의 일부를 완화시키는 방식을 제공한다. 그러나, 현재 공개된 많은 글루코실화 저열량 감미료는 널리 채택될 수 없는 부정적인 미각 속성을 지속적으로 나타내고 있다. 따라서, 부정적인 미각 속성의 보다 효과적인 완화를 제공할 수 있는 글루코실화 제품 및 트랜스글루코실화 방법을 지속적으로 개발할 필요가 있다.
본 발명은 트랜스글루코실화 방법, 및 감미료와 같은 화합물의 다른 글루코실화 유도체에 비해 개선된 미각 프로파일을 갖는 글루코실화 천연 저열량 감미료를 제공한다.
제 1 태양에서, 본 발명은 글리코실화 테르펜 글리코사이드의 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은 (a) α-글루코실 당 화합물, 테르펜 글리코사이드 및 트랜스글루코시다아제 효소를 포함하는 수성 조성물을 제공하는 단계; 및 (b) 트랜스글루코시다아제 효소의 존재하에 α-글루코실 당 화합물을 테르펜 글리코사이드와 반응시켜 테르펜 글리코시딜 반응물 및 하나 이상의 α-글루코실 당 반응물을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 형성하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 테르펜 글리코사이드 반응물과 하나 이상의 α-글루코실 당 반응물 중 하나의 사이에서 하나의 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는다. 일부 구현예에서, 상기 반응은 수성 조성물을 배양하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 수성 조성물은 수용액이다.
제 2 태양에서, 본 발명은 테르펜 글리코사이드의 불쾌한 맛을 감소시키는 방법을 제공하며, 상기 방법은 (a) α-글루코실 당 화합물, 테르펜 글리코사이드 및 트랜스글루코시다아제 효소를 포함하는 수성 조성물을 제공하는 단계; 및 (b) 트랜스글루코시다아제 효소의 존재하에 α-글루코실 당 화합물을 테르펜 글리코사이드와 반응시켜 테르펜 글리코시딜 반응물 및 하나 이상의 α-글루코실 당 반응물을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 형성하고, 여기서 상기 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 테르펜 글리코사이드 반응물과 하나 이상의 α-글루코실 당 반응물 중 하나의 사이에서 하나의 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는다. 일부 구현예에서, 상기 반응은 수성 조성물을 배양하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 수성 조성물은 수용액이다.
상기 제 1 또는 제 2 태양의 일부 구현예에서, 상기 테르펜 글리코사이드는 스테비오사이드(stevioside), 레바우디오사이드 A(rebaudioside A), 레바우디오사이드 B, 레바우디오사이드 C, 레바우디오사이드 D, 레바우디오사이드 E, 레바우디오사이드 F, 레바우디오사이드 G, 레바우디오사이드 M, 둘코사이드 A(dulcoside A), 스테비올비오사이드(steviolbioside), 루부소사이드, 스테비아 레바우디아나 베르토니 식물의 테르펜 글리코사이드, 루부스 수아비시무스 식물의 테르펜 글리코사이드, 시라이티스 그로스베노리 식물의 테르펜 글리코사이드, 및 이들의 임의의 조합으로 구성된 군으로부터 선택된다.
제 1 또는 제 2 태양의 일부 구현예에서, 상기 알파-글루코실 당 화합물은 말토오스, 말토트리오스, 말토테트라오스, 전분의 부분 가수 분해물, 말토덱스트린, 글루코스 및 수크로스로 이루어진 군으로부터 선택된다.
제 1 또는 제 2 태양의 일부 구현예에서, 트랜스글루코시다아제 효소는 트랜스글루코시다아제 L이다.
제 1 또는 제 2 태양의 일부 구현예에서, 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 모노 α-1,6 글루코실화 스테비오사이드, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 A, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 B, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 C, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 D, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 E, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 F, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 G, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 M, 모노 α-1,6 글루코실화 둘코사이드 A, 모노 α-1,6 글루코실화 스테비올비오사이드, 모노 α-1,6 글루코실화 루부소사이드, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
제 3 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물을 제공한다:
Figure pct00001
제 4 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 II의 화합물을 제공한다:
Figure pct00002
제 5 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 III의 화합물을 제공한다:
Figure pct00003
제 6 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 IV의 화합물을 제공한다:
Figure pct00004
제 7 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 V의 화합물을 제공한다:
Figure pct00005
제 8 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 VI의 화합물을 제공한다:
Figure pct00006
제 9 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 VII의 화합물을 제공한다:
Figure pct00007
제 10 태양에서, 본 발명은하기 하기 화학식 Ⅷ의 화합물을 제공한다:
Figure pct00008
제 11 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 IX의 화합물을 제공한다:
Figure pct00009
제 12 태양에서, 본 발명은 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 적어도 하나의 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 포함하는 조성물을 제공하며, 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 모노 α-1,6 글루코실화 스테비오사이드, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 A, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 B, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 C, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 D, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 E, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 F, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 G, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 M, 모노 α-1,6 글루코실화 둘코사이드 A, 모노 α-1,6 글루코실화 스테비올비오사이드, 및 모노 α-1,6 글루코실화 루부소사이드로 이루어진 군으로부터 선택된다. 제 12 태양의 추가적인 일부 구현예에서, 상기 조성물은 제 3 내지 제 11 태양들 중 임의의 하나 이상의 화합물들을 포함한다. 다른 일부 구현예에서, 상기 조성물은 제 1 또는 제 2 태양의 방법에 의해 제조된 하나 이상의 화합물들을 포함한다. 추가적인 일부 구현예에서, 상기 조성물은 화학식 I의 화합물, 화학식 II의 화합물, 화학식 III의 화합물, 또는 화학식 VIII의 화합물을 포함한다. 상기 구현예들 중 임의의 추가적인 일부 구현예에서, 상기 조성물 중의 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 향미 제품의 단 맛을 부여하거나, 향상시키거나, 개선시키거나 또는 변성시킨다. 이러한 일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드는 상기 조성물의 단맛을 부여하거나, 향상시키거나, 개선시키거나 또는 변성시킨다. 일부 구현예에서, 상기 조성물은 향미 제품이다. 일부 구현예에서, 상기 조성물은 자연 발생 조성물이 아니다.
제 13 태양에서, 본 발명은 섭취 가능한 조성물과 같은 조성물의 단맛을 향상시키기 위한 제 3 내지 제 11 태양 중 임의의 화합물의 용도 또는 제 1 또는 제 2 태양에 따라서 제조된 임의의 화합물의 용도를 제공한다. 제 13 태양의 일부 구현예에서, 상기 조성물은 무 열량 또는 열량이 있는 감미료와 같은 감미료를 포함한다.
본 발명의 추가 태양 및 구현예는 발명의 상세한 설명, 도면 및 특허 청구 범위에 기재되어 있다.
하기 도면들은 본 명세서에 개시된 조성물 및 방법의 다양한 구현예들을 예시하는 목적으로 제공된다. 도면들은 예시 목적으로만 제공되며, 임의의 바람직한 조성물 또는 바람직한 방법을 설명하거나 또는 청구된 발명의 범위에 대한 제한의 근원으로 작용하기 위한 것이 아니다.
도 1은 루부소사이드(Rubu) 및 기질로서 덱스트로오스 18 당량 (DE)의 옥수수 말토덱스트린을 사용하여 트랜스글루코시다아제에 의해 효소적으로 생성된 생성물의 HPLC 크로마토그램을 나타낸다.
도 2는 루부소사이드 (Rubu) 및 기질로서 말토오스를 사용하여 트랜스글루코시다아제에 의해 효소적으로 생성된 생성물의 HPLC 크로마토그램을 나타낸다.
도 3은 레바우디오사이드 A (RebA) 및 기질로서 덱스트로오스 18 당량 (DE)의 옥수수 말토덱스트린을 사용하여 트랜스글루코시다아제에 의해 효소적으로 생성된 생성물의 HPLC 크로마토그램을 나타낸다.
도 4는 스테비올 글리코사이드 (Layn, 60 %의 RebA) 및 기질로서 덱스트로오스 18 당량 (DE)의 옥수수 말토덱스트린의 90 % 순수 조성을 갖는 트랜스글루코시다아제에 의해 효소적으로 생성된 생성물의 HPLC 크로마토그램을 나타낸다.
도 5는 화학식 I의 화합물과 화학식 II의 화합물의 혼합물에 대한 1H NMR 스펙트럼을 나타낸다.
도 6은 화학식 I의 화합물과 화학식 II의 화합물의 혼합물에 대한 13C NMR 스펙트럼을 나타낸다.
도 7은 화학식 III의 화합물에 대한 1H NMR 스펙트럼을 나타낸다.
도 8은 화학식 III의 화합물에 대한 13C NMR 스펙트럼을 나타낸다.
도 9는 화학식 VIII의 화합물에 대한 1H NMR 스펙트럼을 나타낸다.
도 10은 화학식 VIII의 화합물에 대한 13C NMR 스펙트럼을 나타낸다.
하기의 설명에서, 실시될 수 있는 특정 구현예들은 참고로 기재되며, 이는 예시적으로 나타낸다. 이들 구현예들은 당업자가 본 명세서에 설명된 발명을 실시할 수 있도록 상세하게 기재되어 있으며, 다른 구현예들이 이용될 수 있고 본 문에 제시된 태양들의 범위를 벗어남이 없이 논리적인 변경이 이루어질 수 있음을 이해해야 한다. 따라서, 예시적인 구현예들에 대한 하기 설명은 한정된 의미로 받아들여서는 안되며, 본 문에 제시된 다양한 태양들의 범위는 첨부된 특허 청구 범위에 의해 한정되어야 한다. 요약서는 독자로 하여금 기술 공개의 성격과 요지를 빠르게 확인할 수 있게 하기 위하여 제공된다. 요약서는 특허 청구의 범위나 의미를 해석하거나 제한하기 위해 사용되지 않는다는 이해를 바탕으로 제출된다.
방법
특정 태양에서, 본 발명은 글리코실화 테르펜 글리코사이드의 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은 (a) α-글루코실 당 화합물, 테르펜 글리코사이드 및 트랜스글루코시다아제 효소를 포함하는 수성 조성물을 제공하는 단계; 및 (b) 트랜스글루코시다아제 효소의 존재하에 α-글루코실 당 화합물을 테르펜 글리코사이드와 반응시켜 테르펜 글리코시딜 반응물 및 하나 이상의 α-글루코실 당 반응물을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 형성하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 테르펜 글리코사이드 반응물과 하나 이상의 α-글루코실 당 반응물 중 하나의 사이에서 하나의 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는다. 이러한 일부 태양에서, 상기 방법은 테르펜 글리코사이드의 불쾌한 맛을 감소시키는 방법이다.
상기 태양의 일부 구현예에서, 본 발명은 스테비오사이드, 레바우디오사이드 A, 레바우디오사이드 B, 레바우디오사이드 C, 레바우디오사이드 D, 레바우디오사이드 E, 레바우디오사이드 F, 레바우디오사이드 M, 둘코사이드 A, 스테비올비오사이드, 루부소사이드, 스테비아 레바우디아나 베르토니 식물의 테르펜 글리코사이드, 루부스 수아비시무스 식물의 테르펜 글리코사이드, 시라이티스 그로스베노리 식물의 테르펜 글리코사이드, 또는 이들의 임의의 조합의 글루코실화 형태를 포함하는 조성물을 제조하기 위한 효소 공정을 제공한다.
일부 구현예에서, 효소 공정을 위한 출발 물질은 스테비아 레바우디아나 베르토니 식물의 추출물, 또는 루부스 수아비시무스 식물의 추출물, 또는 시라이티스 그로스베노리 식물의 추출물이다. 추가적인 일부 구현예에서, 상기 식물 추출물은 하나 이상의 테르펜 글리코사이드를 함유한다.
예를 들어, 비 제한적인 예시로서, 스테비아 레바우디아나 베르토니는 스테비오사이드, 레바우디오사이드 A, 레바우디오사이드 B, 레바우디오사이드 C, 레바우디오사이드 D, 레바우디오사이드 E, 레바우디오사이드 F, 레바우디오사이드 G, 레바우디오사이드 M, 둘코사이드 A 및 스테비올비오사이드를 포함하는 다수의 디테르펜 글리코사이드를 생성한다. 다른 비 제한적인 실례로서, 루부소사이드는 루부소사이드라고 불리는 단일 테르펜 글리코사이드를 실질적으로 함유하는 블랙베리 잎 (루부스 수아비시무스)으로부터 얻을 수 있다. 어떤 경우에는 루부소사이드가 스테비아 잎에도 소량으로 존재한다. 어떤 경우에는 루부소사이드가 스테비아 잎의 추출물 (스테비아 레바우디아나 베르토니)에도 존재한다.
일부 구현예에서, 효소 공정을 위한 출발 물질은 스테비아 레바우디아나 베르토니 식물의 추출물, 또는 루부스 수아비시무스 식물의 추출물, 또는 시라이티스 그로스베노리 식물의 추출물로부터 정제된 테르펜 글리코사이드이다.
일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드 출발 물질은 스테비오사이드, 레바우디오사이드 A, 레바우디오사이드 B, 레바우디오사이드 C, 레바우디오사이드 D, 레바우디오사이드 E, 레바우디오사이드 F, 레바우디오사이드 G, 레바우디오사이드 M, 둘코사이드 A, 스테비올비오사이드, 루부소사이드, 및 이들의 임의의 조합으로 구성된 군으로부터 선택된다. 추가적인 일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드 출발 물질은 스테비오사이드, 레바우디오사이드 A, 레바우디오사이드 B, 레바우디오사이드 C 및 루부소사이드로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드 출발 물질은 미국 특허 제 8,257,948 호에 개시된 디테르펜 글리코사이드이다. 다른 일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드 출발 물질은 PCT 공개 제 WO 2017/089444 호에 개시된 테르펜 글리코사이드이다. 다른 일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드 출발 물질은 PCT 공개 제 WO 2013/019050 호에 개시된 테르펜 글리코사이드이다. 다른 일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드 출발 물질은 유럽 특허 출원 공개 제 EP 3003058 호에 개시된 테르펜 글리코사이드이다.
본 원에서 사용된 용어 "글리코사이드"는 하나 이상의 당 단위가 화학 구조의 하나 이상의 부위에서 공유 결합된 유기 화합물을 지칭한다.
위에서 언급한 바와 같이, 상기 반응은 수용액과 같은 수성 조성물내에서 수행된다. 이러한 일부 구현예에서, 수성 조성물은 탈이온수를 포함한다. 택일적으로, 다른 일부 구현예에서, 수성 조성물은 아세트산 나트륨의 수용액을 포함한다. 추가적인 이러한 일부 구현예에서, 수용액 중의 아세트산 나트륨의 농도는 0.2 M이다.
수성 조성물은 테르펜 글리코사이드, 반응하는 당 및 사용된 효소의 특성에 따라 임의의 적합한 pH를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 수성 조성물의 pH는 4.0 내지 7.0의 범위이다. 추가적인 일부 구현예에서, 수성 조성물의 pH는 4.0 내지 6.0의 범위이다. 추가적인 일부 구현예에서, 수성 조성물의 pH는 4.0 내지 5.0의 범위이다. 다른 일부 구현예에서, 수성 조성물의 pH는 5.0 내지 7.0의 범위이다. 다른 일부 구현예에서, 수성 조성물의 pH는 6.0 내지 7.0의 범위이다. 일부 구현예에서, 수성 조성물의 pH는 4.0, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5.0, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6.0, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 또는 7.0 이다. 일부 구현예에서, 수성 조성물의 pH는 약 5.0 이다.
반응을 수행함에 있어서, 테르펜 글리코사이드는 임의의 적절한 농도로 첨가 될 수 있다. 일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드는 0.005 g/mL 내지 0.5 g/mL 범위의 농도로 수성 조성물에 존재한다. 추가적인 일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드는 0.05 g/mL 내지 0.25 g/mL 범위의 농도로 수성 조성물에 존재한다. 추가적인 일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드는 0.1 내지 0.2 g/ml의 양으로 수용액에 첨가된다.
위에서 언급한 바와 같이, 본 원에 개시된 방법은 α-글루코실 당 화합물을 사용한다. 본 원에서 사용되는 용어 "α-글루코실 당 화합물"이란 적어도 하나의 알파-글루코실 잔기를 함유하는 당류를 말한다. 비 제한적인 일부 구현예에서, α-글루코실 당 화합물은 말토오스, 말토트리오스, 말토테트라오스, 전분의 부분 가수 분해물, 말토덱스트린, 글루코스, 수크로스 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, α-글루코실 당 화합물은 말토덱스트린이다. 일부 구현예에서, α-글루코실 당 화합물은 말토오스이다. 일부 구현예에서, α-글루코실 당 화합물은 영국 특허 공개 제 2027432 호에 개시된 α-글루코실 당 화합물들로부터 선택된다.
본 원에서 사용하기 위해 고려되는 α-글루코실 당 화합물들은 이들의 덱스트로오스 당량에 대해 임의의 적합한 값을 가질 수 있다. 일부 구현예에서, α-글루코실 당 화합물은 10 내지 25 또는 12 내지 20의 범위의 덱스트로오스 당량을 갖는다. 일부 구현예에서, α-글루코실 당 화합물은 약 18의 덱스트로오스 당량을 갖는다.
본 원에서 고려되는 방법에서, α-글루코실 당 화합물은 수성 조성물에서 임의의 적합한 농도를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 수성 조성물 내에서 α-글루코실 당 화합물의 농도는 10 중량% (w/w) 내지 40 중량%, 또는 20 중량% 내지 30 중량%의 범위이다. 일부 구현예에서, 수성 조성물 내에서 α-글루코실 당 화합물의 농도는 0.005 g/mL 내지 0.5 g/mL의 범위이다. 일부 구현예에서, 수성 조성물 내에서 α-글루코실 당 화합물의 농도는 약 0.2 g/mL이다.
본 원에서 고려되는 방법에서, 테르펜 글리코사이드 및 α-글루코실 당은 서로에 대해 임의의 적합한 비율로 수성 조성물에 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, 수성 조성물 내의 α-글루코실 당 화합물에 대한 테르펜 글리코사이드의 비율 (w/w)은 100 : 1 내지 1 : 100, 또는 10 : 1 내지 1:10의 범위이다. 일부 구현예에서, 수성 조성물 내의 α-글루코실 당 화합물에 대한 테르펜 글리코사이드의 비율 (w/w)은 약 1 : 1이다.
본 원에 개시된 방법에서, 트랜스글루코시다아제는 트랜스글루코실화 반응을 수행하며, 이에 의해 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 생성한다. 택일적으로, 상기 방법의 일부 구현예에서, 트랜스글루코시다아제는 트랜스글루코실화 반응을 수행하며, 이에 의해 α-1,6 글루코사이드 결합을 통해 테르펜 글리코사이드에 공유 결합된 하나 이상의 글루코스 잔기를 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 생성한다. 일부 구현예에서, 테르펜 글리코사이드에 첨가되는 글루코스 잔기의 수는, 예를 들어, 반응 지속 시간, 반응 온도, 테르펜 글리코사이드의 농도, α-글루코실 당 화합물 등과 같은 매개 변수들에 의해 조절될 수 있다.
일부 구현예에서, 트랜스글루코시다아제는 기질로서 말토오스 또는 말토덱스트린을 사용하여 트랜스글루코실화 반응을 수행하며, 이에 의해 단일 말토오스 잔기가 α-1,6 글루코사이드 결합을 통해 테르펜 글리코사이드에 첨가되거나 또는 대안적으로 2 개의 글루코스 단위가 α-1,6 글루코사이드 결합을 통해 테르펜 글리코사이드에 첨가되는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 생성한다.
트랜스글루코시다아제는 임의의 적절한 방식으로 제공될 수 있다. 일부 구현예에서, 트랜스글루코시다아제는 무 세포 배양액, 농축된 무 세포 배양액, 분무 건조 또는 동결 건조된 무 세포 배양액, 또는 고순도 단백질의 형태로 되어 있다. 일부 구현예에서, 유리 및 고정화 효소 제제가 사용된다. 일부 구현예에서, 트랜스글루코시다아제는 트랜스글루코시다아제 L이다. 그의 특정 구현예에서, 트랜스글루코시다아제의 활성은 문헌[Hale W. S., Rawlins L.C. (1951) Amylase of Bacillus macerans. Cereal Chem. 28, 49-58]에 기재된 절차에 따라서 결정될 수 있다.
본 발명에 의해 고려되는 방법에서, 트랜스글루코시다아제는 임의의 적합한 농도로 수성 조성물에 존재한다. 일부 구현예에서, 트랜스글루코시다아제는 α-글루코실 당 화합물 그램 당 0.2 내지 0.4 단위 범위의 양으로 혼합물에 존재한다.
본 원에 고려되는 방법에서, 효소는 테르펜 글리코사이드에 대해 임의의 적합한 비율로 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, 효소의 양(중량%) 대 테르펜 글리코사이드의 양(중량%)의 비율은 1 : 1000 내지 1 : 1의 범위이다. 추가적인 일부 구현예에서, 효소의 양(중량%) 대 테르펜 글리코사이드의 양(중량%)의 비율은 1 : 100 내지 1 : 2의 범위이다. 일부 구현예에서, 효소의 양(중량%) 대 테르펜 글리코사이드의 양(중량%)의 비율은 1 : 10 내지 1 : 5의 범위이다.
본 원에서 고려되는 방법에서, 반응은 임의의 적합한 방식으로 수행될 수 있다. 일부 구현예에서, 수성 조성물은 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 생성하기에 충분한 시간 및 온도 동안 배양된다. 이러한 일부 구현예에서, 온도는 30 ℃ 내지 90 ℃, 또는 70 ℃ 내지 90 ℃의 범위이다. 일부 구현예에서, 온도는 약 60 ℃이다.
반응은 임의의 적절한 시간의 길이동안 진행될 수 있다. 일부 구현예에서, 소요 시간은 24 시간 이상, 예컨대 24 내지 48 시간이다. 대안적으로, 다른 일부 구현예에서, 소요 시간은 4 내지 24 시간과 같은 24 시간 이하이다. 일부 구현예에서, 소요 시간은 24 시간, 23 시간, 22 시간, 21 시간, 20 시간, 19 시간, 18 시간, 17 시간, 16 시간, 15 시간, 14 시간, 13 시간, 12 시간, 11 시간, 10 시간, 9 시간, 8 시간, 7 시간, 6 시간, 5 시간, 4 시간, 3 시간, 2 시간, 또는 1 시간이다. 일부 구현예에서, 소요 시간은 약 24 시간이다.
일부 구현예에서, 상기 반응 단계 후에, 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 함유하는 혼합물은 추가로 처리된다. 이러한 추가 처리는, 예를 들어, 불활성화 단계 또는 정제 단계를 포함할 수 있으며, 여기서 글루코실화 테르펜 글리코사이드가 단리 또는 정제된다. 정제 단계의 비 제한적인 실시예로는, 예를 들어, 글루코실화 테르펜 글리코사이드의 농축, 단리 또는 정제를 들 수 있거나 또는 반응 혼합물로부터 고체의 제거를 들 수 있다. 예를 들어, 고체는 여과, 원심 분리 또는 당업자에게 공지된 다른 기술과 같은 수단에 의해 반응 혼합물로부터 제거될 수 있다. 다른 실시예에서, 탄수화물은 흡착 수지, 침전 또는 당업자에게 알려진 다른 기술을 사용하여 혼합물로부터 제거될 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 추가적인 처리는 트랜스글루코시다아제를 불활성화하는 것을 포함한다. 비 제한적인 한 실시예에서, 트랜스글루코시다아제는 열을 가함으로써 불활성화된다. 일부 구현예에서, 트랜스글루코시다아제는 트랜스글루코시다아제를 불활성화시키기에 충분한 온도로 반응 혼합물을 가열함으로써 불활성화된다. 일부 구현예에서, 온도는 적어도 100 ℃이다.
미국 특허 제 8,257,948 호는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 단리 또는 정제하기 위하여 본 발명 내용의 일부 태양에서 이용될 수 있는 정제 단계의 일부 실례를 기술하고 있다. PCT 공개 제 WO 2017/089444 호는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 단리 또는 정제하기 위하여 본 발명의 일부 태양에서 이용될 수 있는 정제 단계의 다른 실례를 개시하고 있다. PCT 공개 제 WO 2013/019050 호는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 단리 또는 정제하기 위하여 본 발명의 일부 태양에서 이용될 수 있는 정제 단계의 다른 실례를 개시하고 있다. 유럽 특허 출원 공개 제 3003058 호는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 단리 또는 정제하기 위해 본 발명의 일부 태양에서 이용될 수 있는 정제 단계의 다른 실례를 개시하고 있다. 미국 특허 제 8,257,948 호는 본 발명의 일부 태양에서 이용될 수 있는 불활성화 단계의 일부 실례를 개시한다. PCT 공개 제 WO 2017/089444 호는 본 발명의 일부 태양에서 이용될 수 있는 불활성화 단계의 다른 실례를 개시한다.
글루코실화 테르펜 글리코사이드
일부 구현예에서, 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 모노 α-1,6 글루코실화 스테비오사이드, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 A, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 B, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 C, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 D, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 E, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 F, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 G, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 M, 모노 α-1,6 글루코실화 둘코사이드 A, 모노 α-1,6 글루코실화 스테비올비오사이드, 모노 α-1,6 글루코실화 루부소사이드, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 디 α-1,6 글루코실화 스테비오사이드, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 A, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 B, 디 α-1, 6 글루코실화 레바우디오사이드 C, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 D, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 E, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 F, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 G, 디 α-1, 6 글루코실화 레바우디오사이드 M, 디 α-1,6 글루코실화 둘코사이드 A, 디 α-1,6 글루코실화 스테비올비오사이드, 디 α-1,6 글루코실화 루부소사이드, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 모노 α-1,6 말토실화 스테비오사이드, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 A, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 B, 모노 α-1, 6 말토실화 레바우디오사이드 C, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 D, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 E, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 F, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 G, 모노 α-1, 6 말토실화 레바우디오사이드 M, 모노 α-1,6 말토실화 둘코사이드 A, 모노 α-1,6 말토실화 스테비올비오사이드, 모노 α-1,6 말토실화 루부소사이드, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물을 제공한다:
Figure pct00010
일부 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 II의 화합물을 제공한다:
Figure pct00011
일부 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 III의 화합물을 제공한다:
Figure pct00012
일부 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 IV의 화합물을 제공한다:
Figure pct00013
일부 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 V의 화합물을 제공한다:
Figure pct00014
일부 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 VI의 화합물을 제공한다:
Figure pct00015
일부 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 VII의 화합물을 제공한다:
Figure pct00016
일부 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 Ⅷ의 화합물을 제공한다:
Figure pct00017
일부 태양에서, 본 발명은 하기 화학식 IX의 화합물을 제공한다:
Figure pct00018
본 원에 개시된 적어도 하나의 태양에서, 본 발명은 모노 α-1,6 글루코실화 스테비오사이드, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 A, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 B, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 C, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 D, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 E, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 F, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 G, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 M, 모노 α-1,6 글루코실화 둘코사이드 A, 모노 α-1,6 글루코실화 스테비올비오사이드, 모노 α-1,6 글루코실화 루부소사이드, 디 α-1,6 글루코실화 스테비오사이드, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 A, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 B, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 C, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 D, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 E, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 F, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 G, 디 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 M, 디 α-1,6 글루코실화 둘코사이드 A, 디 α-1,6 글루코실화 스테비올비오사이드, 디 α-1,6 글루코실화 루부소사이드, 모노 α-1,6 말토실화 스테비오사이드, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 A, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 B, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 C, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 D, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 E, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 F, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 G, 모노 α-1,6 말토실화 레바우디오사이드 M, 모노 α-1,6 말토실화 둘코사이드 A, 모노 α-1,6 말토실화 스테비올비오사이드, 및 모노 α-1,6 글루코실화 루부소사이드로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 포함하는 조성물을 제공한다.
적어도 또 다른 태양에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물, 화학식 II의 화합물, 화학식 III의 화합물, 화학식 IV의 화합물, 화학식 V의 화합물, 화학식 VI의 화합물, 화학식 VII의 화합물, 화학식 VIII의 화합물, 및 화학식 IX의 화합물로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 하나의 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 포함하는 조성물을 제공한다. 상기 태양의 추가적인 구현예에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물, 화학식 II의 화합물, 화학식 III의 화합물 및 화학식 VIII의 화합물을 포함하는 조성물을 제공한다.
감미료 및/또는 감미 강화제
본 원에 기술된 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 다양한 향미 제품에서 감미 강화제, 향미 강화제 또는 감미료로서 사용될 수 있다. 이의 일부 구현예에서, 본 발명은 향미 제품의 단맛을 부여하거나, 향상시키거나, 개선시키거나 또는 변성시키기 위한 이러한 글루코실화 테르펜 글리코사이드의 용도를 제공한다.
일부 구현예에서, 향미 제품의 단맛을 부여하거나, 향상시키거나, 개선시키거나 또는 변성시키는데 효과적인 농도는 1 ppm 내지 1000 ppm, 또는 1 ppm 내지 500 ppm, 또는 1 ppm 내지 200 ppm, 1ppm 내지 100 ppm, 1 ppm 내지 75 ppm, 또는 1 ppm 내지 50 ppm의 범위이다. 일부 구현예에서, 향미 제품의 단맛을 부여하거나, 향상시키거나, 개선시키거나 또는 변성시키는데 효과적인 농도는 약 40 ppm이다. 일부 태양에서, 향미 제품의 단맛을 부여하거나, 향상시키거나, 개선시키거나 또는 변성시키는데 효과적인 양은 40 ppm 미만이다. 일부 태양에서, 향미 제품의 단맛을 부여하거나, 향상시키거나, 개선시키거나 또는 변성시키는데 효과적인 양은 40 ppm을 초과한다. 일부 태양에서, 향미 제품의 단맛을 부여하거나, 향상시키거나, 개선시키거나 또는 변성시키는데 효과적인 양은 0 내지 1000 ppm이다.
일부 구현예에서, 본 조성물은 (상기 구현예들 중 임의의 것에 따라서) 글루코실화 테르펜 글리코사이드 및 식료품 베이스를 포함한다. 적합한 식료품의 비 제한적인 실례, 예를 들어, 식품 또는 음료도 본 원에 제공된다. 본 발명의 목적을 위해, "식품 베이스"란 식용 제품, 예를 들어, 식품이나 음료를 의미한다. 그러므로, 본 명세서에서 제공되는 향미 제품은 맛있는 큐브(savory cube)와 같은 원하는 식용 제품에 대응하는 기능성 제형뿐만 아니라 선택적으로 부가적인 유익성 제제, 및 본 명세서에 기재된 적어도 하나의 글루코실화 테르펜 글리코사이드의 풍미 유효량을 포함한다.
본 조성물은 임의의 적합한 감미료 또는 감미료의 조합을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 감미료는 수크로스, 과당, 글루코스와 같은 일반적인 당류 감미료, 및 옥수수 시럽(고과당 옥수수 시럽을 포함) 또는 다른 시럽, 또는 천연 과일 및 채소 공급원으로부터 유래되는 감미료 농축물과 같은 천연 당을 포함하는 감미료 조성물이다. 일부 구현예에서, 감미료는 수크로스, 과당 또는 이들의 조합이다. 일부 구현예에서, 감미료는 수크로스이다. 다른 일부 구현예에서, 감미료는 D-알로 오스, D-사이코스(D-psicose), L-리보오스, D-타가토오스, L-글루코스, L-푸코오스, L-아르비노오스, D-투라노오스 및 D-류크로오스를 포함하는 희귀한 천연당으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 감미료는 에리트리톨, 이소말트(isomalt), 락티톨, 만니톨, 소르비톨, 자일리톨, 말토덱스트린 등과 같은 반합성 "당 알코올" 감미료로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 감미료는 아스파탐, 사카린, 아세설팜-K, 사이클라메이트(cyclamate), 수크랄로오스 및 알리탐(alitame)과 같은 인공 감미료로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 감미료는 사이클람산, 모그로사이드, 타가토오스, 말토오스, 갈락토오스, 만노오스, 수크로스, 과당, 락토오스, 네오탐과 기타 아스파탐 유도체, 글루코스, D-트립토판, 글리신, 말티톨, 락티톨, 이소말트, 수소 첨가된 글루코스 시럽 (HGS), 수소 첨가된 전분 가수 분해물 (HSH), 스테비오사이드, 레바우디오사이드 A와 기타 감미 스테비아 주성분의 글리코사이드, 및 카르렐라메(carrelame)와 기타 구아니딘 주성분의 감미료로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 감미료는 본 단락에서 제시된 감미료들 중 2 이상의 조합이다. 일부 구현예에서, 감미료는 본 원에 개시된 바와 같이 2, 3, 4 또는 5 개의 감미료의 조합일 수 있다. 일부 구현예에서, 감미료는 당일 수 있다. 일부 구현예에서, 감미료는 하나 이상의 당과 기타 천연 및 인공 감미료의 조합일 수 있다. 일부 구현예에서, 감미료는 당이다. 일부 구현예에서, 당은 감자당(cane sugar)이다. 일부 구현예에서, 당은 첨채당이다. 일부 구현예에서, 당은 수크로스, 과당, 글루코스 또는 이들의 조합일 수 있다. 일부 구현예에서, 당은 수크로스일 수 있다. 일부 구현예에서, 당은 과당과 글루코스의 조합일 수 있다.
감미료는 또한, 예를 들어, 옥수수 시럽, 고 과당 옥수수 시럽, 고 말토오스 옥수수 시럽, 글루코스 시럽, 수크랄로오스 시럽, 수소 첨가된 글루코스 시럽 (HGS), 수소 첨가된 전분 가수 분해물 (HSH), 천연 과일 및 채소 공급원에서 추출한 기타 시럽 또는 감미료 농축물, 또는 폴리올과 같은 반합성 "당 알코올" 감미료와 같은 하나 이상의 천연 또는 합성 탄수화물을 포함하는 감미료 조성물을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서 폴리올의 비 제한적인 실례로는 에리트리톨, 말티톨, 만니톨, 소르비톨, 락티톨, 자일리톨, 이소말트, 프로필렌 글리콜, 글리세롤 (글리세린), 트레이톨, 갈락티톨, 팔라티노오스, 환원된 이소말토-올리고당, 환원된 자일로-올리고당, 환원된 젠티오-올리고당, 환원된 말토오스 시럽, 환원된 글루코스 시럽, 이소말툴로오스, 말토덱스트린 등, 및 맛에 악영향을 미치지 않고 환원될 수 있는 당 알코올 또는 임의의 기타 탄수화물 또는 이들의 조합을 들 수 있다.
감미료는 아가베 이눌린(agave inulin), 아가베 넥타(agave nectar), 아가베 시럽, 아마자케(amazake), 브라제인(brazzein), 현미 시럽, 코코넛 결정, 코코넛 당, 코코넛 시럽, 대추 당(date sugar), 프룩탄(또한 이눌린 섬유, 프룩토-올리고당 또는 올리고과당이라고도 함), 녹색 스테비아 분말, 스테비아 레바우디아나, 레바우디오사이드 A, 레바우디오사이드 B, 레바우디오사이드 C, 레바우디오사이드 D, 레바우디오사이드 E, 레바우디오사이드 F, 레바우디오사이드 I, 레바우디오사이드 H, 레바우디오사이드 L, 레바우디오사이드 K, 레바우디오사이드 J, 레바우디오사이드 N, 레바우디오사이드 O, 레바우디오사이드 M 과 기타 감미 스테비아 주성분의 글리코사이드, 스테비오사이드, 스테비오사이드 추출물, 꿀, 예루살렘 아티초크(Jerusalem artichoke) 시럽, 감초, 루오 한 구오(luo han guo; 과일, 분말 또는 추출물), 루쿠마(과일, 분말 또는 추출물), 단풍 나무 수액[예를 들어, 사탕 단풍(Acer saccharum), 아세르 니그럼(Acer nigrum), 아세르 루브럼(Acer rubrum), 은단풍(Acer saccharinum), 아세르 플라타노이즈(Acer platanoides), 네군도단풍(Acer negundo), 아세르 매크로필륨(Acer macrophyllum), 아세르 그랑덴타뉴(Acer grandidentatum), 아세르 글라브륨(Acer glabrum), 고로쇠나무(Acer mono)에서 추출한 수액을 포함함], 단풍 시럽, 단풍 당, 호두 수액[예를 들어, 주글란스 시네리아(Juglans cinerea), 혹호도(Juglans nigra), 주글란스 아일라티폴리아(Juglans ailatifolia), 페르시아 호두(Juglans regia)에서 추출한 수액을 포함함], 자작나무 수액[예를 들어, 베툴라 파피리페라(Betula papyrifera), 베툴라 알레한니엔시스(Betula alleghaniensis), 베툴라 렌타(Betula lenta), 베툴라 니그라(Betula nigra), 베툴라 포퓰리폴리아(Betula populifolia), 베툴라 펜둘라(Betula pendula)에서 추출한 수액을 포함함], 플라타너스 수액[예를 들어, 양버즘 나무(Platanus occidentalis)에서 추출한 수액], 철나무 수액[예를 들어, 오스트리야 버지니아나(Ostrya virginiana)에서 추출한 수액], 마스코바도(mascobado), 당밀(예를 들어, 블랙스트랩 당밀), 당밀 설탕, 모나틴, 모넬린, 감자당(천연 설탕, 정제되지 않은 감자당 또는 수크로스라고도 함), 야자 당, 파노차, 필론칠로, 라파두라, 생설탕, 쌀 시럽, 수수, 수수 시럽, 카사바 시럽(타피오카 시럽이라고도 함), 타우마틴, 야콘 뿌리, 맥아 시럽, 보리 맥아 시럽, 보리 맥아 분말, 첨채당, 감자당, 결정형 주스 결정, 카라멜, 카르비톨, 캐롭 시럽, 피마자 설탕, 수소 첨가된 전분 가수 분해물, 가수 분해된 캔 주스, 가수 분해된 전분, 전화당, 아네톨, 아라비노갈락탄, 아르로프, 시럽, P-4000, 아세설팜 칼륨[아세설팜 K 또는 에이스-K (ace-K)라고도 함], 알리탐[아클레메이(aclame)라고도 함], 어드벤탐, 아스파탐, 바이유노사이드(baiyunoside), 네오탐, 벤즈아미드 유도체, 베르나담, 칸데렐, 카렐람(carrelame)과 기타 구아니딘 주성분의 감미료, 식물성 섬유, 옥수수 당, 커플링 설탕, 커쿨린(curculin), 사이클라메이트(cyclamate), 사이클로카리오사이드 I(cyclocarioside I), 데메라라(demerara), 덱스트란, 덱스트린, 당화성 맥아, 둘신(dulcin), 수크롤, 발진(valzin), 둘코사이드 A, 둘코사이드 B, 에뮬린, 에녹솔론, 말토덱스트린, 사카린, 에스트라골(estragole), 에틸 말톨, 글루신, 글루콘산, 글루코노-락톤, 글루코사민, 글루코론산, 글리세롤, 글리신, 글리시필린(glycyphillin), 글리시리진(glycyrrhizin), 황금 당(golden sugar), 황 당(yellow sugar), 황금 시럽, 과립 설탕, 지노스템마(gynostemma), 헤르난둘신(hernandulcin), 이성질화 액당, 잘랍(jallab), 치커리 뿌리 식이섬유, 키누레닌 유도체(N'-포르밀-키누레닌, N'-아세틸-키누레닌, 6-클로로-키누레닌을 포함함), 갈락티톨, 리테세(litesse), 리가칸(ligicane), 라이카신(lycasin), 러그두남(lugduname), 구아니딘 , 팔러넘(falernum), 마빈린 I(mabinlin I), 마빈린 II, 말톨, 말티소브(maltisorb), 말토덱스트린, 말토트리올, 마노사민(mannosamine), 미라쿨린(miraculin), 미주암(mizuame), 모그로사이드(mogroside; 예를 들어, 모그로사이드 IV, 모그로사이드 V 및 네오모그로사이드를 포함함), 무쿠로지오사이드(mukurozioside), 나노 설탕, 나링린 디하이드로찰콘(naringin dihydrochalcone), 네오헤스페리딘 디하이드로찰콘(neohesperidine dihydrochalcone), 니브 설탕(nib sugar), 니게로(nigero)-올리고당, 노르부(norbu), 오르가트(orgeat) 시럽, 오슬라딘(osladin), 페크메즈(pekmez), 펜타딘, 페리안드린 I(periandrin I), 페릴알데하이드(perillaldehyde), 페릴라틴(perillartine), 펩필륨(petphyllum), 페닐알라닌, 플롬이소사이드 I(phlomisoside I), 플로로디진(phlorodizin), 필로둘신(phyllodulcin), 폴리글리시톨 시럽, 폴리포도사이드 A(polypodoside A), 프테로카리오사이드 A(pterocaryoside A), 프테로카리오사이드 B, 레비아나(rebiana), 정제 시럽, 러브 시럽(rub syrup), 루부소사이드, 셀리그인 A(selligueain A), 당, 시아메노사이드 I(siamenoside I), 시라이티아 그로스베노리, 대두 올리고당, 스플렌다(Splenda), SRI 옥심 V, 스테비올 글리코사이드, 스테비올비오사이드, 스테비오사이드, 스트로긴(strogin) 1, 2 및 4, 수크론산, 수크로노네이트(sucrononate), 당, 수오산(suosan), 플로리진(phloridzin), 슈퍼아스파탐(superaspartame), 테트라사카라이드, 트레이톨, 당밀, 트릴롭테인(trilobtain), 트립토판 과 유도체 (6-트리플루오로메틸-트립토판, 6-클로로-D-트립토판), 바닐라 당, 볼레미톨(volemitol), 자작나무 시럽, 아스파탐-아세설팜, 아수그린(assugrin), 및 이들의 임의의 두 개 이상의 조합 또는 혼련물을 포함하는 천연 또는 합성 감미료일 수 있으며, 이에 한정되어 있지 않다.
또 다른 구현예에서, 감미료는 화학적으로 또는 효소적으로 변성된 천연 고효능 감미료일 수 있다. 변성된 천연 고효능 감미료는 1 내지 50 개의 글리코사이드 잔기를 함유하는 글루코실-, 갈락토실-또는 프룩토실-유도체와 같은 글리코실화 천연 고효능 감미료를 포함한다. 글리코실화 천연 고효능 감미료는 트랜스글리코실화 활성을 갖는 다양한 효소에 의해 촉매되는 효소 트랜스글리코실화 반응에 의해 제조될 수 있다. 일부 구현예에서, 변성된 감미료는 치환되거나 비치환될 수 있다.
부가적인 감미료는 또한 상기 언급된 감미료들 중 임의의 2 개 이상의 조합을 포함한다. 일부 구현예에서, 감미료는 본 원에 개시된 바와 같이 2, 3, 4 또는 5 개의 감미료의 조합을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 감미료는 당일 수 있다. 일부 구현예에서, 감미료는 하나 이상의 당과 다른 천연 및 인공 감미료의 조합일 수 있다. 일부 구현예에서, 감미료는 수크로스, 과당, 자일리톨, 에리트리톨 또는 이들의 조합과 같은 열량 감미료이다. 일부 구현예에서, 섭취 가능한 조성물은 스테비올 글리코사이드, 글루코실화 스테비올 글리코사이드, 또는 레바우디오사이드와 같은 스테비아-유래된 감미료가 없거나 또는 (일부 구현예에서는) 실질적으로 없다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 섭취 가능한 조성물은 스테비아-유래된 감미료가 없거나, 또는 1000 ppm 이하, 500 ppm 이하, 200 ppm 이하, 100 ppm 이하, 50 ppm 이하, 20 ppm 이하, 10 ppm 이하, 5 ppm 이하, 3 ppm 이하, 또는 1 ppm 이하의 농도로 스테비아-유래된 감미료를 포함한다.
본 원에서 개시된 섭취 가능한 조성물은 임의의 종류의 식료품으로 제형화될 수 있다. 본 원에서 제공되는 조성물 및 방법은 식품 또는 음료 제품의 용도를 갖는다. 식품이 미립 또는 분말 식품인 경우에는 건식 혼합에 의해 건조 입자들을 식품에 쉽게 첨가할 수 있다. 전형적인 식품은 인스턴트 수프 또는 소스, 아침 시리얼, 분유, 이유식, 분말 음료, 분말 초콜릿 음료, 스프레드, 분말 시리얼 음료, 츄잉 껌, 발포정, 시리얼 바, 및 초콜릿 바로 구성된 군으로부터 선택된다. 분말 식품 또는 음료는 물, 우유 및/또는 주스 또는 다른 수성 액체로 제품을 재구성한 후에 섭취하도록 의도될 수 있다.
식품은 조미료, 제빵류, 분말 식품, 제과류 충전재 및 유동성 유제품으로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다. 조미료로는 케첩, 마요네즈, 샐러드 드레싱, 우스터 소스, 과일향 소스, 초콜릿 소스, 토마토 소스, 칠리 소스 및 겨자를 들 수 있으며, 이에 제한되어 있지 않다.
제빵 제품으로는 케이크, 쿠키, 페이스트리, 빵, 도넛 등을 들 수 있으며, 이에 제한되어 있지 않다.
베이커리 충전재로는 낮은 또는 중성 pH 충전재, 높거나 중간 또는 낮은 고체 충전재, 과일 또는 우유 주성분 (푸딩형 또는 무스형)의 충전재, 뜨겁거나 차가운 보충 충전재, 및 무 지방에서부터 완전 지방 충전재를 들 수 있다.
유동성 유제품으로는, 예를 들어, 우유, 아이스크림, 셔벗 및 요구르트와 같은 비 냉동, 부분 냉동 및 냉동 유동성 유제품을 들 수 있으며, 이에 제한되어 있지 않다. 음료 제품으로는 콜라, 레몬-라임, 루트 맥주, 헤비 시트러스("이슬 유형"), 과일향 및 크림 소다를 포함하는 탄산 청량 음료; 분말 청량 음료뿐만 아니라, 분수 시럽 및 코디얼과 같은 액체 농축물; 커피 및 커피 주성분 음료, 커피 대용품 및 시리얼 기반 음료; 드라이 믹스 제품 및 바로 마실 수 있는 차(허벌 및 찻잎 기반)를 포함한 차; 과일 주스, 야채 주스 및 주스향 음료뿐만 아니라, 주스 음료, 과즙, 농축액, 펀치 및 "에이드(ades)"; 단맛과 향이 첨가된 탄산수와 증류수; 스포츠/에너지/건강 음료; 알코올성 음료와, 맥주 및 맥아 음료, 사이다, 및 와인(증류, 스파클링, 강화 와인 및 와인 쿨러)을 포함한 무 알코올 및 기타 저 알코올 제품; 가열(주입, 저온 살균, 초 고온, 옴 가열 또는 상업용 무균성 살균) 및 고온 충전 포장으로 처리된 기타 음료; 및 여과 또는 기타 보존 기술을 통해 만들어진 냉장 제품을 들 수 있으며, 이에 제한되어 있지 않다.
식료품 또는 음료의 구성 성분들의 특성 및 유형은 본 명세서에서 더 자세한 설명을 하지 않으며, 이는 어떤한 경우라도 완전하지 않지만, 숙련된 자라면 자신의 일반적인 지식을 기초로 하여 제품의 성질에 따라 상기 구성 성분들의 특성 및 유형을 선택할 수 있다.
본 원에 기술된 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 하나 이상의 글루코실화 테르펜 글리코사이드가 전술한 다양한 제품 또는 조성물에 배합될 수 있는 비율은 광범위한 값 내에서 다양하게 변한다. 이러한 값은 본 발명에 따른 화합물이 당 업계에서 일반적으로 사용되는 향미 보조 성분, 용매 또는 첨가제와 혼합되는 경우에 향미를 가할 제품의 특성 및 원하는 관능 효과뿐만 아니라 주어진 기반에서 보조 성분의 특성에 따라 좌우된다. .
향료 조성물의 경우, 전형적인 농도는 이들이 배합되는 소비자 제품의 중량을 기준으로 본 명세서에 기재된 적어도 하나의 글루코실화 테르펜 글리코사이드의 0.0001 중량% 내지 1 중량%, 또는 그 이상의 정도이다. 0.001 중량% 내지 0.5 중량% 정도와 같은 이들보다 낮은 농도는 본 원에 기술된 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 적어도 하나의 글루코실화 테르펜 글리코사이드가 향미 제품에 포함될 때 사용될 수 있으며, 여기서 백분율은 제품의 중량에 비례한다.
본 발명은 하기 실시예들에서 가장 잘 예시되어 있지만, 이들 실시예에 제한되지 않는다.
실시예
실시예 1: 본 원에서 제시된 일부 태양에 따른 방법에 의해 출발 물질로서 루부소사이드 및 말토덱스트린을 사용하여 모노 α-1,6- 글루코실화 스테비오사이드 화합물(화합물 I 및 II)의 생성
루부소사이드 (2 g) 및 덱스트로오스 당량 (DE) 18의 옥수수 말토덱스트린 (2 g)을 실온에서 10 ml NaOAc-HOAc(pH = 6.0, 0.2 M, 10 ml) 완충액 또는 탈이온수에 용해시켰다. 이어서, 100 μl의 트랜스글루코시다아제 L(Amano)을 혼합물에 첨가 하였다. 효소를 함유한 혼합물을 60 ℃로 가열하고 60 ℃에서 24 시간 동안 배양하여 트랜스글루코사이드화 반응을 진행하게 하였으며, 이에 의해 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 생성하였다. 반응 혼합물을 100 ℃에서 30 분 동안 배양함으로써 트랜스글루코시다아제를 불활성화시켜 반응을 종결하였다.
생성된 반응 혼합물을 UPLC-UV로 분석한 바, 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 함유하는 혼합물인 것으로 확인되었다 (도 1 참조). 확인된 혼합물을 prep-LC를 통해 정제하였다. 혼합물 내의 화합물은 화학식 I의 화합물 및 화학식 II의 화합물로서 확인되었다. 도 5 및 도 6은 2 개의 화합물의 혼합물에 대한 1H 및 13C NMR 스펙트럼을 각각 나타낸다.
실시예 2: 본 원에서 제시된 일부 태양에 따른 방법에 의해 출발 물질로서 루부소사이드 및 말토오스를 사용하여 모노 α-1,6-글루코실화 스테비오사이드 화합물(화합물 I 및 II)의 생성
루부소사이드 (2 g) 및 말토오스 (2 g)를 실온에서 10 ml NaOAc-HOAc (pH = 6.0, 0.2 M, 10 ml) 완충액 또는 탈이온수에 용해시켰다. 이어서, 100 μL의 트랜스글루코시다아제 L(Amano)을 혼합물에 첨가하였다. 효소를 함유한 혼합물을 60 ℃로 가열하고 60 ℃에서 24 시간 동안 배양하여 트랜스글루코사이드화 반응을 진행하게 하였으며, 이에 의해 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 생성하였다. 반응 혼합물을 100 ℃에서 30 분 동안 배양함으로써 트랜스글루코시다아제를 불활성화하시켜 반응을 종결하였다.
생성된 반응 혼합물을 UPLC-UV로 분석한 바, 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 함유하는 혼합물인 것으로 확인되었다 (도 2 참조). 확인된 혼합물을 prep-LC를 통해 정제하였다. 혼합물 내의 화합물은 화학식 I의 화합물 및 화학식 II의 화합물로서 확인되었다.
실시예 3: 본 원에서 제시된 일부 태양에 따른 방법에 의해 출발 물질로서 레바우디오사이드를 사용하여 모노 α-1,6-글루코실화 레바우디오사이드 A(화합물 III)의 생성
레바우디오사이드 A (2 g) 및 덱스트로오스 18 당량 (DE)의 옥수수 말토덱스트린 (2 g)을 실온에서 탈이온수 10 ml에 용해시켰다. 이어서, 100 μl의 트랜스글루코시다아제 L(Amano)을 혼합물에 첨가하였다. 효소를 함유한 혼합물을 60 ℃로 가열하고 60 ℃에서 24 시간 동안 배양하여 트랜스글루코사이드화 반응을 진행하게 하였으며, 이에 의해 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 생성하였다. 반응 혼합물을 100 ℃에서 30 분 동안 배양시킴으로써 트랜스글루코시다아제를 불활성화시켜 반응을 종결하였다.
생성된 반응 혼합물을 UPLC-UV로 분석한 바, 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드인 것으로 확인되었다 (도 3 참조). 확인된 혼합물을 prep-LC를 통해 정제하였다. 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 화학식 III의 화합물 및 화학식 VIII의 화합물로서 확인되었다. 도 7 및 도 8은 각각 화학식 III의 화합물에 대한 1H 및 13C NMR 스펙트럼을 나타낸다.
실시예 4: 본 원에서 제시된 일부 태양에 따른 방법에 의해 출발 물질로서 레바우디오사이드를 사용하여 모노 α-1,6-글루코실화 레바우디오사이드 A(화합물 III)의 생성
스테비올 글리코사이드 (90 %w/w) (1 g) 및 덱스트로오스 18 당량 (DE)의 옥수수 말토덱스트린 (1 g)의 조성물을 실온에서 탈이온수 5 ml에 용해시켰다. 이어서, 100 μl의 트랜스글루코시다아제 L(Amano)을 혼합물에 첨가하였다. 효소가 함유된 혼합물을 60 ℃로 가열하고 60 ℃에서 24 시간 동안 배양하여 트랜스글루코사이드화 반응을 진행하게 하였으며, 이에 의해 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 생성하였다. 반응 혼합물을 100 ℃에서 30 분 동안 배양시킴으로써 트랜스글루코시다아제를 불활성화시켜 반응을 종결하였다.
생성된 반응 혼합물을 UPLC-UV로 분석한 바, 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드인 것으로 확인되었다 (도 4 참조). 확인된 혼합물을 prep-LC를 통해 정제하였다. 단일 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 화학식 III의 화합물 및 화학식 VIII의 화합물로서 확인되었다. 도 9 및 도 10은 각각 화학식 VIII의 화합물에 대한 1H 및 13C NMR 스펙트럼을 나타낸다.
실시예 5: 모노 α-1,6-글루코실화 스테비오사이드로서 화학식 I의 화합물 및 화학식 II의 화합물을 포함하는 조성물의 감각적 특성
화합물 I 및 II를 포함하는 조성물을 실시예 1에 기재된 방법에 따라서 생성 하였다. 상기 조성물을 (i) 물 또는 (ii) 2 %w/w의 수크로스 용액에 용해 시켰으며, 여기서 용액중의 조성물의 최종 농도는 40 ppm이었다. 또한, (i) 1.5 % 또는 (ii) 2 %w/w의 수크로스의 상응하는 대조군 용액도 생성시켰다. 3-AFC (3-Alternative Forced Choice) 및 단맛 강도 척도 방법을 사용하여 6 명의 전문가 패널이 시험 조성물의 용액과 수크로스 용액 간의 차이를 평가하였다. 모든 샘플은 무작위 순서로 블라인드 테스트되었다.
화합물 I 및 II를 포함하는 조성물 40 ppm을 함유하는 용액의 단맛 강도는 3-AFC 방법에 기초하여 1.5 % 수크로스 용액과 동일하였다. 이는 수용액 내에서 화합물 I 및 II를 포함하는 조성물 40 ppm을 함유하는 용액의 단맛 강도가 거의 단맛의 임계치에서 낮음을 시사한다. 화학식 I의 화합물 및 화학식 II의 화합물을 포함하는 조성물 40 ppm을 2 % 수크로스 용액에 첨가함으로 인해 단맛 강도가 단맛 강도 척도(척도 범위: 0 내지 10)를 기준으로 3 에서 5로 상당히 증가했다. 이는 화합물 I 및 II를 포함하는 조성물 40 ppm을 함유하는 용액이 빈약한 단맛에서 적당한 단맛까지 수크로스의 단맛 강도를 향상시킨다는 것을 시사한다. 결과적으로, 화합물 I 및 II를 포함하는 조성물 40 ppm을 함유하는 용액은 수크로스에 대해 효과적으로 단맛을 향상시켰다.
실시예 6: 본 원에서 제시된 적어도 하나의 모노 α-1,6-글루코실화 테르펜 글리코사이드를 포함하는 조성물의 감각적 특성
적어도 하나의 글루코실화 테르펜 글루코사이드를 포함하는 조성물을 이전 실시예에서 기재된 방법에 따라서 생성시켰다. 화합물들을 물에 용해시켰으며 (택일적으로, 화합물들을 2 %(w/w) 또는 4 %(w/w) 수크로스 용액 또는 7 %(w/w) 역당과 0.15 %(w/w) 구연산의 용액에 배합함), 여기서 용액 내 조성물의 최종 농도는 1 내지 1000 ppm의 범위일 수 있다. 미각 전문가 패널들이 과제들을 평가했다.
화학식 I의 화합물 및 화학식 II의 화합물을 포함하는 혼합물: 정제된 화합물의 샘플을 물 기반 중 500 ppm의 농도로 맛을 보았을 때 수크로스보다 약 100 내지 200 배 더 단맛이 나는 적당한 단맛이 감지되었다.
화학식 III의 화합물: 정제된 화합물의 샘플을 물 기반 중 500 ppm의 농도로 맛을 보았을 때 수크로스보다 약 200 내지 300 배 더 단맛이 나는 강한 단맛이 감지되었다.
화학식 VIII의 화합물: 정제된 화합물의 샘플을 물 기반 중 500 ppm의 농도로 맛을 보았을 때 수크로스보다 약 200 내지 300 배 더 단맛이 나는 강한 단맛이 감지되었다.

Claims (13)

  1. 글리코실화 테르펜 글리코사이드(glucosylated terpene glycoside)의 제조 방법으로서,
    (a) α-글루코실 당 화합물, 테르펜 글리코사이드 및 트랜스글루코시다아제 효소를 포함하는 수성 조성물을 제공하는 단계; 및
    (b) 트랜스글루코시다아제 효소의 존재하에 α-글루코실 당 화합물을 테르펜 글리코사이드와 반응시켜 테르펜 글리코시딜 반응물 및 하나 이상의 α-글루코실 당 반응물을 갖는 글루코실화 테르펜 글리코사이드를 형성하는 단계를 포함하며,
    상기 글루코실화 테르펜 글리코사이드는 상기 테르펜 글리코사이드 반응물과 하나 이상의 α-글루코실 당 반응물 중 하나의 사이에서 하나의 α-1,6 글루코사이드 결합을 갖는,
    방법.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 반응이 상기 수성 조성물을 배양하는 것을 포함하는,
    방법.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
    상기 테르펜 글리코사이드가 스테비오사이드(stevioside), 레바우디오사이드 A(rebaudioside A), 레바우디오사이드 B, 레바우디오사이드 C, 레바우디오사이드 D, 레바우디오사이드 E, 레바우디오사이드 F, 레바우디오사이드 G, 레바우디오사이드 M, 둘코사이드 A(dulcoside A), 스테비올비오사이드(steviolbioside), 루부소사이드(rubusoside), 스테비아 레바우디아나 베르토니(Stevia rebaudiana Bertoni) 식물의 테르펜 글리코사이드, 루부스 수아비시무스(Rubus suavissimus) 식물의 테르펜 글리코사이드, 시라이티스 그로스베노리(Siraitis grosvenorii) 식물의 테르펜 글리코사이드, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는,
    방법.
  4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 알파-글루코실 당 화합물이 말토오스, 말토트리오스, 말토테트라오스, 전분의 부분 가수 분해물, 말토덱스트린, 글루코스, 수크로스, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는,
    방법.
  5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 트랜스글루코시다아제가 트랜스글루코시다아제 L 인,
    방법.
  6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 글루코실화 테르텐 글리코사이드가 모노 α-1,6 글루코실화 스테비오사이드, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 A, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 B, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 C, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 D, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 E, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 F, 모노 α-1,6 글루코실화 레바우디오사이드 M, 모노 α-1,6 글루코실화 둘코사이드 A, 모노 α-1,6 글루코실화 스테비올비오사이드, 모노 α-1,6 글루코실화 루부소사이드, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는,
    방법.
  7. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 글루코실화 테르펜 글리코사이드가 화학식 I의 화합물, 화학식 II의 화합물, 화학식 III의 화합물, 화학식 IV의 화합물, 화학식 V의 화합물, 화학식 VI의 화합물, 화학식 VII의 화합물, 화학식 VIII의 화합물, 및 화학식 IX의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는,
    방법.
  8. 제 7 항에 있어서,
    상기 글루코실화 테르펜 글리코사이드가 화학식 I의 화합물, 화학식 II의 화합물, 화학식 VII의 화합물, 화학식 VIII의 화합물, 및 화학식 IX의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는,
    방법.
  9. 제 7 항에 있어서,
    상기 글루코실화 테르펜 글리코사이드가 화학식 III의 화합물, 화학식 IV의 화합물, 화학식 V의 화합물, 및 화학식 VI의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는,
    방법.
  10. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항의 방법에 의해 형성된 글루코실화 테르펜 글리코사이드 화합물의 향미 제품의 단맛을 향상시키기 위한 용도.
  11. 제 10 항에 있어서,
    상기 화합물이 1 ppm 내지 1000 ppm 범위의 농도로 상기 향미 제품에 존재하는,
    용도.
  12. 제 10 항 또는 제 11 항에 있어서,
    상기 향미 제품이 열량이 있는(caloric) 감미료, 저열량(low-caloric) 감미료 또는 무 열량(non-caloric) 감미료와 같은 감미료를 포함하는,
    용도.
  13. 제 12 항에 있어서,
    상기 감미료가 수크로스, 과당, 에리트리톨, 자일리톨, 스테비올 글리코사이드, 레바우디오사이드, 모그로사이드(mogroside), 수크랄로오스, 아세설팜 K, 아스파탐, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는,
    용도.
KR1020207028283A 2018-08-22 2019-08-21 테르펜 글리코사이드 유도체 및 그의 용도 KR20210048439A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2018101661 2018-08-22
CNPCT/CN2018/101661 2018-08-22
PCT/EP2019/072356 WO2020038990A2 (en) 2018-08-22 2019-08-21 Terpene glycoside derivatives and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20210048439A true KR20210048439A (ko) 2021-05-03

Family

ID=67810581

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020207028283A KR20210048439A (ko) 2018-08-22 2019-08-21 테르펜 글리코사이드 유도체 및 그의 용도

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20210147892A1 (ko)
EP (1) EP3759228A2 (ko)
JP (1) JP2021533729A (ko)
KR (1) KR20210048439A (ko)
CN (1) CN112639116A (ko)
BR (1) BR112020020365A2 (ko)
WO (1) WO2020038990A2 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021252814A1 (en) * 2020-06-11 2021-12-16 Corn Products Development, Inc. Production and uses of oligosaccharides and steviol glycosides

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2826560C2 (de) * 1978-06-16 1984-01-12 Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo, Okayama Verfahren zur Herstellung von Süßungsmitteln
GB2027423B (en) * 1978-06-16 1983-03-02 Hayashibara Biochem Lab Sweetener coposition and proces for its preparation
US4178183A (en) 1978-07-27 1979-12-11 Eastman Kodak Company Thiazolyl coupler compositions and photographic elements suited to forming integral sound tracks
JPH04149191A (ja) * 1990-10-09 1992-05-22 Nakano Vinegar Co Ltd ステビオサイド糖転移化合物及びその製造方法
US6042823A (en) * 1998-07-02 2000-03-28 Amano Pharmaceuticals Co., Ltd. Enzyme composition and use thereof
CN1937928B (zh) * 2004-04-05 2010-11-17 味之素株式会社 改善含淀粉食品特性的方法和特性改良剂
US9386797B2 (en) * 2011-02-17 2016-07-12 Purecircle Sdn Bhd Glucosyl stevia composition
US8257948B1 (en) 2011-02-17 2012-09-04 Purecircle Usa Method of preparing alpha-glucosyl Stevia composition
CN101720910B (zh) * 2008-10-23 2012-07-25 大闽食品（漳州）有限公司 一种甜菊糖甙的制备方法
JP5220813B2 (ja) * 2010-08-10 2013-06-26 長谷川香料株式会社 飲食品の呈味改善剤
US20140030381A1 (en) * 2011-02-17 2014-01-30 Purecircle Usa Inc. Glucosyl stevia composition
KR20130014227A (ko) * 2011-07-29 2013-02-07 한국생명공학연구원 신규한 α-글루코실 스테비오사이드 및 이의 제조 방법
CN105682467A (zh) 2013-06-07 2016-06-15 谱赛科美国股份有限公司 含有选择的甜叶菊醇糖苷作为香、咸和甜度特征修饰物的甜叶菊提取物
MX2016004036A (es) * 2013-09-30 2016-12-08 Purecircle Usa Inc Composicion de glucosil estevia.
CN107532189B (zh) * 2015-03-10 2021-12-17 格罗宁根大学 甜菊醇糖苷的酶修饰的方法、由此可获得的修饰的甜菊醇糖苷及其作为甜味剂的用途
US11129401B2 (en) * 2015-11-24 2021-09-28 Firmenich Sa Glucosylated terpene glycosides
CN105732740A (zh) * 2016-03-28 2016-07-06 南京诺云生物科技有限公司 一种新型甜味剂的制备方法
WO2018114995A1 (en) * 2016-12-22 2018-06-28 Dsm Ip Assets B.V. Fermentation process for producing steviol glycosides

Also Published As

Publication number Publication date
CN112639116A (zh) 2021-04-09
WO2020038990A3 (en) 2020-04-16
US20210147892A1 (en) 2021-05-20
JP2021533729A (ja) 2021-12-09
BR112020020365A2 (pt) 2021-03-02
WO2020038990A2 (en) 2020-02-27
EP3759228A2 (en) 2021-01-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7364246B2 (ja) 甘味料組成物、およびそれを含む食品
US20200054058A1 (en) Sweetness and Taste Improvement of Steviol Glycoside and Mogroside Sweeteners with Dihydrochalcones
US20160331011A1 (en) Glycoside blends
WO2016144175A1 (en) Methods for the enzymatic modification of steviol glycosides, modified steviol glycosides obtainable thereby, and the use thereof as sweeteners
CA2783621A1 (en) Sweetness enhancers, compositions thereof, and methods for use
EP3823469B1 (en) Sweetener formulations and uses
CN114364265A (zh) 黄烷酮衍生物及其作为甜味增强剂的用途
JP2024056814A (ja) テルペングリコシド誘導体およびその使用
KR20210048439A (ko) 테르펜 글리코사이드 유도체 및 그의 용도
US11919920B2 (en) Terpene glycoside derivatives and uses thereof
US20220304348A1 (en) Triterpene glucuronides and their use as flavor modifiers
US11812767B2 (en) Beverage having Reb D and Reb M
US20230015092A1 (en) Composition comprising stevia glycosides, method of making and use thereof
JP2023182635A (ja) グルコシル化テルペングリコシド、テルペングリコシドおよびシクロデキストリンを含む組成物
JPWO2019162509A5 (ko)