KR20170098334A - 3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체 - Google Patents

3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체 Download PDF

Info

Publication number
KR20170098334A
KR20170098334A KR1020177023122A KR20177023122A KR20170098334A KR 20170098334 A KR20170098334 A KR 20170098334A KR 1020177023122 A KR1020177023122 A KR 1020177023122A KR 20177023122 A KR20177023122 A KR 20177023122A KR 20170098334 A KR20170098334 A KR 20170098334A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
pyrrolo
pyrimidin
pyrazol
propanenitrile
hydroxy
Prior art date
Application number
KR1020177023122A
Other languages
English (en)
Other versions
KR101921850B1 (ko
Inventor
제임스 디. 로저스
아담 실링
아르기리오스 지. 알바니티스
스테이시 쉐팔드
로린 지. 갈리야
메이 리
프랭크 엠. 네드자
Original Assignee
인사이트 홀딩스 코포레이션
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 인사이트 홀딩스 코포레이션 filed Critical 인사이트 홀딩스 코포레이션
Publication of KR20170098334A publication Critical patent/KR20170098334A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101921850B1 publication Critical patent/KR101921850B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4155—1,2-Diazoles non condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/26—Acyclic or carbocyclic radicals, substituted by hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/02—Heterocyclic radicals containing only nitrogen as ring hetero atoms

Abstract

본 발명은 3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체를 제공한다.

Description

3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체{HYDROXYL, KETO, AND GLUCURONIDE DERIVATIVES OF 3-(4-(7H-PYRROLO[2,3-D]PYRIMIDIN-4-YL)-1H-PYRAZOL-1-YL)-3-CYCLOPENTYLPROPANENITRILE}
관련 출원
본 출원은 2009년 10월 9일 출원된 미국 임시출원 제61/250,387호 및 2010년 3월 22일 출원된 미국 임시출원 제61/316,218호를 우선권으로 주장하며, 이들 문헌의 내용은 그의 전체가 본 원에 참고로 원용된다.
발명의 분야
본 발명은 3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체를 제공한다.
단백질 키나제(PK)는 특히 세포 성장, 생존 및 분화, 기관 형성 및 발생, 신혈관형성, 조직 회복 및 재생을 비롯한 다양하고 중요한 생물학적 과정을 조절하는 일단의 효소이다. 단백질 키나제는 단백질(또는 기질)의 인산화를 촉매화 함으로써 그 생물학적 기능을 발휘하고, 이로써 다양한 생물학적 맥락에서 기질의 세포 활성을 조정한다. 정상 조직/기관에서의 기능 이외에도, 많은 단백질 키나제는 또한 암을 비롯한 인체 질환의 숙주에서 보다 특수한 역할도 한다. 단백질 키나제의 하위집단(종양 단백질 키나제로도 언급함)은, 조절되지 않을 경우에, 종양 형성 및 성장을 유발하고, 또한 종양의 지속 및 진행에도 기여할 수 있다(Blume-Jensen P et al, Nature 2001, 411(6835):355-365). 따라서, 종양 단백질 키나제는 암 조정 및 약물을 개발하는데 가장 크고 가장 관심이 가는 단백질 표적 군중 하나를 대표한다.
야누스 키나제(Janus Kinase, JAK) 부류는 면역 반응에 관여하는 세포의 증식 및 작용의 사이토카인 의존 조절에 있어서 중요한 역할을 한다. 현재, 다음과 같은 4종의 포유류 JAK 부류 구성원이 알려져 있다: JAK1(야누스 키나제-1으로도 알려짐), JAK-2(야누스 키나제-2로도 알려짐), JAK3(야누스 키나제, 백혈구; JAKL; L-JAK 및 야누스 키나제-3으로도 알려짐) 및 TYK2(단백질-티로신 키나제 2로도 알려짐). JAK 단백질의 크기는 120 kDa 내지 140 kDa 범위이며, 7개의 보존된 JAK 상동성(JH) 도메인을 포함하고, 이중 하나는 기능성 촉매 키나제 도메인이고, 다른 하나는 잠재적으로 조절 기능을 하고/하거나 STAT에 대한 도킹(docking) 부위로서 기능할 수 있는 슈도키나제 도메인이다(Scott, Godshall et al. 2002, supra).
JAK 키나제 수준에서 신호 형질도입을 차단하는 것은 인체의 암 치료제를 개발하는데 가능성을 갖는다. 또한, JAK 키나제를 억제하는 것도 건선 및 피부 민감화과 같은 피부 면역 질환에 걸린 환자에서 치료적 이점을 가질 것으로 생각된다. 따라서, 야누스 키나제 또는 관련 키나제에 대한 억제제들을 광범위하게 찾고 있으며, 몇가지 문헌들은 유효한 부류의 화합물들을 보고하였다. 예를 들면, 하기 (R)-3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸프로판니트릴을 포함한 특정 JAK 억제제가 2006년 12월 12일 출원된 U.S.S.N. 11/637,545(US 2007/0135461); 2009년 7월 16일 출원된 U.S.S.N. 12/138,082(US 2009/0181959)호에 보고되어 있고; 화합물 I의 특정 대사물이 2008년 6월 12일 출원된 U.S.S.N. 12/137,883(US 2008/0312258)호에 보고되어 있으며, 이들은 각각 그의 전체가 본 원에 참고로 원용된다:
Figure pat00001
따라서, 암 및 기타 질환의 치료에 보다 효과적인 신규 의약품을 개발하기 위해 야누스 키나제와 같은 키나제를 억제하는 신규 또는 개선된 약제에 대한 필요성이 계속되고 있다. 본 원에 기술된 대사물, 조성물 및 방법은 이와 같은 필요성 및 다른 목적을 추구한다.
발명의 요약
본 발명은 그중에서도 특히, 하기 화학식 I의 화합물의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체 또는 그의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pat00002
즉, 일 측면으로, 본 원에서는 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:
Figure pat00003
상기 식에서,
n개의 C-H 그룹은 각각 독립적으로 C-OH로 대체되거나; 또는
하나의 CH2 그룹이 독립적으로 C=O로 대체되거나; 또는
하나의 C-H 그룹이
Figure pat00004
로 대체되거나; 또는
두개의 C-H 그룹이 각각 독립적으로 C-OH로 대체되고, 하나의 C-H 그룹은
Figure pat00005
로 대체되고:
n은 1, 2, 3, 또는 4이나;
단,
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-옥소사이클로펜틸)프로판니트릴;
및 이들의 약학적으로 허용되는 염중에서 선택되는 화합물은 제외된다.
화학식 I의 일 구체예로,
시아노 그룹에 대해 알파 위치인 탄소원자는 C-OH 또는 C=O 그룹으로 대체되지 않고;
시아노 그룹에 대해 베타 위치인 탄소원자는 C-OH 그룹으로 대체되지 않는다.
상기 화합물의 다른 구체예로, n개의 C-H 그룹이 각각 독립적으로 C-OH로 대체된다. 다른 구체예로, n은 1이다. 또 다른 구체예로, n은 2이다. 또 다른 구체예로, n은 3이다. 다른 구체예로, n은 4이다.
화학식 I의 다른 구체예로, 하나의 CH2 그룹은 독립적으로 C=O로 대체된다. 또 다른 구체예로, 하나의 C-H 그룹은
Figure pat00006
로 대체된다.
다른 구체예로, 하나의 포화된 C-H 그룹은
Figure pat00007
로 대체된다.
또 다른 구체예로, 두 C-H 그룹은 각각 독립적으로 C-OH로 대체되고, 하나의 C-H 그룹은
Figure pat00008
로 대체된다.
본 발명은 또한 본 원에 기재된 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염, 및 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한 JAK를 본 원에 기재된 특정 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염과 접촉시키는 것을 포함하여 JAK의 활성을 조절하는 방법을 제공한다. 본 발명은 그밖에도 본 원에 기재된 특정 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염의 치료적 유효량을 환자에 투여하는 것을 포함하여, 상기 환자에서 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 특정 구체예에 있어서, 질환은 JAK 활성과 관련된다. 이러한 질환으로서는, 예를 들면 동종이식거부반응 또는 이식편대숙주반응을 들 수 있다. 상기 질환은, 또한 자가면역 질환, 예컨대 피부 질환, 다발성 경화증, 류마티스 관절염, 연소성 관절염, I형 당뇨병, 루푸스, 염증성 장 질환, 크론병(Crohn's disease), 중증근무력증, 면역글로불린 신증, 심근염 또는 자가면역 갑상선 질환일 수 있으나, 이들에만 제한되는 것은 아니다. 자가면역 질환은 또한 수포성 피부 질환, 예컨대 심상성천포창(PV) 또는 수포성유천포창(BP)일 수 있다. 피부 질환은 아토피 피부염, 건선, 피부 민감화, 피부 자극, 피부 발진, 접촉성 피부염 또는 알레르기성 접촉성 민감화일 수 있다.
다른 구체예에 있어서, 질환은 바이러스 질환이다. 본 원에 기재된 화합물로 치료될 수 있는 바이러스 질환의 예로는 엡스타인 바 바이러스(Epstein Barr Virus, EBV), B형 간염, C형 간염, HIV, HTLV 1, 수두대상포진 바이러스(Varicella-Zoster Virus, VZV) 또는 인간유두종 바이러스(Human Papilloma Virus, HPV)를 들 수 있다.
또 다른 구체예에 있어서, 질환은 암, 예를 들면 고형 종양이다. 치료할 암은 전립선암, 신장암, 간암, 유방암, 폐암, 갑상선암, 카포시 육종, 캐슬만(Castleman) 병 또는 췌장암이다, 특정 구체예에 있어서, 암은 전립선암이다. 암은 혈액암일 수 있다. 암은 또한 림프종, 백혈병 또는 다발성 골수종일 수 있다. 또 다른 구체예에 있어서, 암은 피부암, 예컨대 피부 T세포 림프종 또는 피부 B세포 림프종이다. 또 다른 구체예에 있어서, 암은 다발성 골수종이다. 치료할 질환은 또한 암에 의하거나 암과 관련된 피로, 또는 암에 의하거나 암과 관련된 식욕부진 또는 악액질일 수 있다.
또 다른 구체예에 있어서, 치료하여야 할 질환은 골수증식성 질환, 예컨대 진성적혈구증가증(PV), 진성혈소판증가증(ET), 특발성 골수섬유증(MMM), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수단구성 백혈병(CMML), 과호산구 증후군(HES) 또는 전신성 비만 세포 질환(SMCD)이다.
그밖의 다른 구체예에 있어서, 치료할 질환은 염증성 질환이다. 염증성 질환은 눈의 염증성 질환, 예를 들면, 홍채염, 포도막염, 공막염 또는 결막염일 수 있다. 염증성 질환은 또한 기도, 예를 들면 상부 기도 또는 하부 기도의 염증성 질환일 수 있다. 염증성 질환은 또한 염증성 근병증 또는 심근염일 수 있다.
또 다른 구체예에 있어서, 질환은 허혈 재관류 또는 허혈 이벤트와 관련된 질환이다.
본 발명에 따르면, JAK 활성 억제 효과가 우수한 3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 글루쿠로나이드 유도체가 제공된다.
상세한 설명
본 발명은 특히, 3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체를 제공한다. 일부 구체예에서, 화합물은 화합물 I의 대사물이다. 일부 구체예에서, 화합물은 하나 이상의 JAK 활성을 조절할 수 있으며, 예를 들어, JAK 발현 또는 활성과 관련된 질환을 치료하는데 유용할 수 있는 활성 대사물이다. 일부 구체예에서, 의사들이 화학식 I의 화합물의 용량 수준을 조정하는 것을 돕기 위해서 본 원에 기재된 대사 화합물의 수준이 측정되고 프로파일링된다.
따라서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pat00009
상기 식에서,
n개의 C-H 그룹은 각각 독립적으로 C-OH로 대체되거나; 또는
하나의 CH2 그룹이 독립적으로 C=O로 대체되거나; 또는
하나의 C-H 그룹이
Figure pat00010
로 대체되거나; 또는
두개의 C-H 그룹이 각각 독립적으로 C-OH로 대체되고, 하나의 C-H 그룹은
Figure pat00011
로 대체되고;
n은 1, 2, 3, 또는 4이나;
단,
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-옥소사이클로펜틸)프로판니트릴;
및 이들의 약학적으로 허용되는 염중에서 선택되는 화합물은 제외된다.
일부 구체예에서, n개의 C-H 그룹이 각각 독립적으로 C-OH로 대체된다. 일부 구체예에서, n은　1이다. 일부 구체예에서, n은　2이다. 일부 구체예에서, n은　3이다. 일부 구체예에서, n은　4이다.
일부 구체예에서, 하나의 CH2 그룹은 독립적으로 C=O로 대체된다.
일부 구체예에서, 하나의 C-H 그룹은
Figure pat00012
로 대체된다.
일부 구체예에서, 하나의 포화된 C-H 그룹은
Figure pat00013
로 대체된다.
일부 구체예에서, 두개의 C-H 그룹은 각각 독립적으로 C-OH로 대체되고, 하나의 C-H 그룹은
Figure pat00014
로 대체된다.
일부 구체예에 있어서:
시아노 그룹에 대해 알파 위치인 탄소원자는 C-OH, C=O, 또는
Figure pat00015
그룹으로 대체되지 않고;
시아노 그룹에 대해 베타 위치인 탄소원자는 C-OH 또는
Figure pat00016
그룹으로 대체되지 않는다.
일부 구체예에 있어서:
시아노 그룹에 대해 알파 위치인 탄소원자는 C-OH 또는 C=O 그룹으로 대체되지 않고;
시아노 그룹에 대해 베타 위치인 탄소원자는 C-OH 그룹으로 대체되지 않는다.
다른 구체예로, 본 발명은 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pat00017
상기 식에서,
탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 1, 2, 3, 또는 4개는 각각 독립적으로 OH로 치환되거나; 또는
탄소 h, i, j, k, 또는 m중 1개는 독립적으로 =O로 치환되거나; 또는
탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 1개는
Figure pat00018
로 치환되거나; 또는
탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 2개는 각각 독립적으로 OH 및
Figure pat00019
로 치환되나,
단,
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-옥소사이클로펜틸)프로판니트릴;
이들의 약학적으로 허용되는 염중에서 선택되는 화합물은 제외된다.
화학식 II의 일부 구체예에 있어서, 탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 1, 2, 3, 또는 4개는 각각 독립적으로 OH로 치환된다. 일부 구체예에서, 탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 1개는 OH로 치환된다. 일부 구체예에서, 탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 2개는 각각 독립적으로 OH로 치환된다. 일부 구체예에서, 탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 3개는 각각 독립적으로 OH로 치환된다. 일부 구체예에서, 탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 4개는 각각 독립적으로 OH로 치환된다.
일부 구체예에서, 탄소 h, i, j, k, 또는 m중 1개는 =O로 치환된다.
일부 구체예에서, 탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 1개는
Figure pat00020
로 치환된다.
일부 구체예에서, 탄소 f, g, h, i, j, k 또는 m중 1개는
Figure pat00021
로 치환된다.
일부 구체예에서, 탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 2개는 각각 독립적으로 OH로 치환되고, 탄소 a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, k 또는 m중 1개는
Figure pat00022
로 치환된다.
일부 구체예에 있어서:
탄소 m은 OH, =O, 또는
Figure pat00023
그룹으로 치환되지 않고;
탄소 f는 OH 또는
Figure pat00024
그룹으로 치환되지 않는다.
일부 구체예에 있어서:
탄소 m은 OH 또는 =O 그룹으로 치환되지 않고;
탄소 f는 OH 그룹으로 치환되지 않는다.
상기 언급된 각 구체예는 정당한 원자가 규칙을 지킬 것으로 생각된다.
일부 구체예에서, 상기 화합물은
6-(3-(1-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-2-시아노에틸)사이클로펜틸옥시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산;
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1,2-디하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴; 및
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
또는 상기 언급된 어느 하나의 약학적으로 허용되는 염중에서 선택된다.
일부 구체예에서, 상기 화합물은
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸-3-하이드록시프로판니트릴;
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸-2-하이드록시프로판니트릴;
3-사이클로펜틸-3-(5-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
3-사이클로펜틸-3-(3-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
3-사이클로펜틸-3-(4-(5-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
3-사이클로펜틸-3-(4-(6-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
3-사이클로펜틸-3-(4-(2-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1,2-디하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
3-사이클로펜틸-3-(4-(5,6-디하이드록시-6,7-디하이드로-5H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴; 및
6-(4-(1-(2-시아노-1-사이클로펜틸에틸)-1H-피라졸-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산;
또는 상기 언급된 어느 하나의 약학적으로 허용되는 염중에서 선택된다.
일부 구체예에서, 본 원에 기재된 화합물은 하기 차트 1-7에 나타낸 화합물, 및 이들의 에난티오머, 디아스테레오머 및 라세메이트를 포함할 수 있다:
차트 1
Figure pat00025
차트 2
Figure pat00026
차트 3
Figure pat00027
차트 4
Figure pat00028
차트 5
Figure pat00029
차트 6
Figure pat00030
차트 7
Figure pat00031
특정 대사물을 하기 표 1에 나타내었다. 구조는 모든 가능한 입체이성체를 포함하고자 한다.
Figure pat00032
Figure pat00033
* 괄호안의 숫자는 (이후) 표 2의 화합물을 가리킨다.
본 원에 기재된 화합물은 (R)-3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 대사물이다. 본 발명의 대사물은 JAK 억제제 (R)-3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸프로판니트릴 (화합물 I)의 약동학 및 독성역학 조사로부터 수집한 인간, 래트 또는 개의 뇨 샘플에서 분리된다. 특정 대사물은 JAK 억제제일 수 있으며, 화합물 I에 비해 인간 마이크로좀에서 더 높은 대사 안정성과 상당히 높은 자유 분획과 관련된 유리한 성질을 가질 수 있다. 본 발명의 대사물은 유리하게도 화합물 I 보다 더 긴 제거 반감기를 가질 수 있다.
일부 구체예에서, 본 발명의 대사물은 실질적으로 분리된다. "실질적으로 분리된다"라는 표현은 화합물이 그것이 형성되거나 검출된 환경으로부터 적어도 부분적으로 또는 실질적으로 분리된다는 것을 의미한다. 부분적인 분리는 예컨대 본 발명의 화합물이 농후한 조성물을 포함할 수 있다. 실질적인 분리는 대사물을 약 50 중량％ 이상, 약 60 중량％ 이상, 약 70 중량％ 이상, 약 80 중량％ 이상, 약 90 중량％ 이상, 약 95 중량％ 이상, 약 97 중량％ 이상, 또는 약 99 중량％ 이상으로 함유하는 조성물을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 본 원에 기재된 화합물의 약학적으로 허용되는 염을 포함한다. 본 원에 사용한 "약학적으로 허용되는 염"이란 존재하는 산 또는 염기 부분을 그의 염 형태로 전환시킴으로써 모 화합물을 개질시킨, 본 원에 기재된 화합물의 유도체를 가리킨다. 약학적으로 허용되는 염의 예로서는, 아민과 같은 염기성 잔기의 무기산 또는 유기산 염; 카복실산과 같은 산성 잔기의 알칼리 염 또는 유기 염 등을 들 수 있으나, 이들에만 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적으로 허용되는 염에는, 비독성 무기산 또는 유기산으로부터 형성된 모 화합물의 통상적인 비독성 염이 포함된다. 본 발명의 약학적으로 허용되는 염은 통상적인 화학적 방법에 의해 염기성 또는 산성 부분을 함유하는 모 상기 화합물로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이와 같은 염은 이러한 화합물의 유리 산 또는 염기 형태를 화학양론적 양의 적절한 염기 또는 산과 수중에서 또는 유기 용매중에서, 또는 물과 유기 용매의 혼합물 중에서(일반적으로는 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴(ACN) 등의 비수성 매질이 바람직함) 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 적당한 염의 목록은, 본 원에서 각각 그 전체를 참고로 원용하는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418] 및 [Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977)]에서 찾아볼 수 있다.
"약학적으로 허용되는"이라는 표현은 본 원에서 타당한 의료적 판단의 범위내에서, 합당한 이익/위험 비율에 상응하도록, 과다한 독성, 자극, 알레르기 반응 또는 다른 문제나 합병증 없이 인체 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여 제형을 가리키는 것이다.
본 원에 기재된 화합물은 비대칭(예컨대, 하나 이상의 입체중심을 가짐)이다. 모든 입체이성체, 예컨대 에난티오머 및 디아스테레오머도 특별한 언급이 없는 한 포함된다. 광학 활성 출발 물질로부터 광학 활성 형태를 제조하는 방법이 당분야에 잘 알려져 있으며, 그 예로는 라세미 혼합물을 분할하는 방법 또는 입체선택적 합성 방법을 들 수 있다.
본 원에 기재된 화합물은 대사물에서 발생하는 모든 원자의 동위원소를 포함할 수 있다. 동위원소는 원자번호는 동일하지만 질량수가 다른 원자들을 포함한다. 예를 들면, 수소의 동위원소는 삼중수소와 중수소를 포함한다. 상기 화합물은 또한 화합물 또는 염 형태의 수화물 및 용매화물을 포함할 수 있다.
본 원에 사용된 용어 "화합물"은 도시한 구조의 모든 입체이성체, 기하 이성체, 호변이성체 및 동위원소를 포함하고자 한다.
합성
본 원에 기재된 화합물(그의 염 포함)은 공지의 유기 합성 기법을 사용해서 제조할 수 있으며, 여러 가지 가능한 합성 경로중 어느 한 경로에 따라 합성될 수 있다.
본 원에 기재된 화합물을 제조하기 위한 반응은 유기 합성 분야의 숙련자들에 의해 용이하게 선택될 수 있는 적당한 용매 중에서 수행할 수 있다. 적당한 용매는 반응을 수행하는 온도, 예를 들면 용매의 어는점부터 용매의 비등점까지의 범위일 수 있는 온도에서, 출발 물질(반응물), 중간체 또는 생성물과 실질적으로 비반응성인 것일 수 있다. 주어진 반응은 한 용매 중에서, 또는 1종 초과의 용매의 혼합물중에서 수행할 수 있다. 특정 반응 단계에 따라서, 특정 반응 단계에 적합한 용매는 당업자들에 의해 선택될 수 있다.
본 원에 기재된 화합물의 제조는 다양한 화학 그룹들의 보호 및 탈보호를 포함할 수 있다. 보호 및 탈보호에 대한 필요성, 및 적절한 보호기의 선택은 당업자들에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 보호 그룹의 화학이론에 대해서는, 예컨대 본 원에 그 전체가 참고로 원용되는 문헌 [T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., Wiley & Sons, Inc., New York (1999)]을 참조할 수 있다.
당분야에 알려진 임의의 적당한 방법에 따라서 반응을 모니터할 수 있다. 예를 들면, 생성물의 형성은 분광학적 수단, 예컨대 핵자기 공명 분광분석(예: 1H 또는 13C), 적외선 분광분석, 분광광도분석(예: UV-가시광선), 질량 분석, 또는 크로마토그래피 방법, 예를 들면 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 또는 박막 크로마토그래피(TLC)에 의해 모니터할 수 있다.
본 원에 기재된 화합물은 문헌에 공지된 다수의 제조 경로에 따라 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 원에 기재된 화합물은 각각 본 원에 그 전체가 참고로 원용되는, 2006년 12월 12일자 미국등록출원된 제 11/637,545호(US 2007/0135461); 2009년 7월 16일자 미국등록출원된 제 12/138,082호(US 2009/0181959); 및 2008년 6월 12일자 미국등록출원된 제 12/137,883호(US 2008/0312258)에 기재된 것과 유사한 방법으로 제조될 수 있다. 본 원에 기재된 화합물을 제조하기 위한 합성 방법의 예를 이하 반응식에 나타내었다.
반응식 1에 예시된 바와 같이, 화합물 32의 합성은 4-클로로 피롤로피리미딘 S1으로부터 출발한다. S1을 염기성 조건하에 Pd(0) 촉매의 존재하에서 피라졸 보로네이트 S2와 스즈키 커플링(Suzuki coupling)하여 트리사이클릭 화합물 S3을 제공할 수 있으며, 이어 이를 N-요오도숙신이미드를 사용해서 요오도 화합물 S4로 선택적으로 전환시킬 수 있다. 요오도 화합물 S4를 상응하는 아세테이트 S5로 변환시킨다. S5를 아세트산중에서 4M 브롬화수소로 처리하여 피롤 환에서 소정 산화시키고, 메톡시 그룹을 탈보호하여 자유 하이드록실으로 전환시킴으로써 S6을 제공한다. S6을 트리클로로아세틸 클로라이드 및 트리에틸아민으로 처리하여 탈수 시킴으로써 상기 조건하에서 아미드로 가수분해된 시아노 그룹을 32에 재생성시킨다.
반응식 1
Figure pat00034
모노-하이드록실화된 화합물 42 (대사물 8)는 2008년 6월 12일 출원된 U.S.S.N. 12/137,883호에 보고되었다. 또한, 사이클로펜틸 환상에 하이드록실 그룹을 가지는 화합물은 반응식 2에서와 같이 합성될 수 있다. 예를 들어, 시판 라세믹 S14에서 카복실산 에스테르를 알데하이드로 환원시켜 알콜을 보호한 후, 알데하이드를 올레핀화하여 S17을 제공한다. S9를 염기성 조건하에서 S17에 공액 부가하여 S18을 제공하고, 알콜 및 피롤 환상의 보호 그룹을 순차적으로 제거하여 디아스테레오머의 혼합물을 제공한 다음, 다중 키랄 HPLC 칼럼을 이용하여 분리함으로써 S19의 4 디아스테레오머를 제공한다. 일부 구체예에서, 본 발명은 반응식 2에서의 하나 이상의 단계를 포함하여, 화합물 42 또는 그의 약학적으로 허용되는 염을 제조하는 방법을 제공한다.
반응식 2
Figure pat00035
모노-하이드록실화 화합물 36의 또 다른 예가 반응식 3에 예시된 과정으로 수득된다. 보호된 시아노하이드린 S31을 DIBAL로 환원시켜 상응하는 알데하이드를 제공한 후, S7과 같은 포스포네이트로 올레핀화하여 크로토니트릴 S33을 제공할 수 있다. 염기성 조건하에서 S9를 S33에 공액 부가하여 S34를 제공하고, 이로부터 피롤 환상의 보호 그룹을 제거하여 디아스테레오머의 혼합물을 제공한 다음, 다중 키랄 HPLC 칼럼으로 분리하여 36의 개별 입체이성체를 제공할 수 있다.
반응식 3
Figure pat00036
반응식 4에 예시된 것과 유사한 방식으로 디하이드록실화된 대사물을 수득할 수 있다: 사이클로펜텐 카복스알데하이드 S6A를 일라이드 S7로 직접 처리하여 크로토니트릴 유도체 S8을 제공할 수 있다. 이어, 니트릴 S8을 DBU와 같은 염기의 존재하에서 피라졸 S9와 반응시켜 디아스테레오머의 혼합물로서 S10을 제공한 뒤, 사산화오스뮴을 디하이드록실화하고 SEM 그룹을 제거하여 시스-알콜 시스-S12A를 제공할 수 있다. 이 혼합물의 개별 입체이성체(시스-S12A)를 키랄 크로마토그래피로 분리하여 에난티오머적으로 순수한 알콜을 제공할 수 있다. 먼저 올레핀을 m-CPBA로 에폭시화한 후, 에폭사이드를 산성 조건하에서 개환하여 트랜스-S12A를 수득할 수 있다. 상기 혼합물의 개별 입체이성체(트랜스-S12A)를 키랄 크로마토그래피로 분리하여 에난티오머적으로 순수한 알콜을 제공할 수 있다. 출발 알데하이드 S6A를 S6B 및 S6C로 대체하고 동일한 합성 경로를 적용하여 이성체 S12B 및 S12C를 수득할 수 있다.
반응식 4
Figure pat00037
상술된 방법과 그의 전체내용이 본 원에 참고로 원용되는 2006년 12월 12일자 미국 특허 출원 제11/637,545호; 및 2008년 6월 12일자 미국 특허 출원 제12/137,883호에 기재된 방법을 조합하여 본 발명의 트리하이드록시 화합물을 수득할 수 있다. 예를 들어, 본 원에 기재된 하이드록시 및 디하이드록시 화합물을 2008년 6월 12일자 미국 특허 출원 제12/137,883호에 기술된 스원(Swern) 산화 조건하에서 산화시킬 수 있다. 하이드록실 그룹을 함유하는 대사물의 글루쿠로나이드는 스즈키(Suzuki) 등의 방법에 따라 합성될 수 있다 (Bioorg. Med. Chem. Lett. (1999), 9(5), 659-662, 전체내용이 본 원에 참고로 원용됨).
방법
본 원에 기재된 특정 화합물은 하나 이상의 야누스 키나제(JAK)의 활성을 조절할 수 있다. 용어 "조절한다"는 JAK 부류의 키나제중 하나 이상의 구성원의 활성을 증가 또는 감소시킬 수 있는 능력을 가리키는 것이다. 따라서, 본 원에 기재된 특정 화합물은, JAK와 본 원에 기재된 어느 하나 이상의 화합물 또는 조성물을 접촉시킴으로써 JAK를 조절하는 방법에 사용될 수 있다. 일부 구체예에서, 특정 화합물은 하나 이상의 JAK의 억제제로서 작용할 수 있다. 일부 구체예에서, 특정 화합물은 하나 이상의 JAK의 활성을 자극하도록 작용할 수 있다. 다른 구체예에서, 특정 화합물은 조절량의 본 발명의 화합물을 투여함으로써 수용체의 조절을 필요로 하는 개체에서 JAK의 활성을 조절하는데 사용될 수 있다.
상기 화합물이 결합 및/또는 조절하는 JAK는 JAK 부류중 임의의 구성원을 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, JAK는 JAK1, JAK2, JAK3 또는 TYK2이다. 일부 구체예에서, JAK는 JAK1 또는 JAK2이다. 일부 구체예에서, JAK는 JAK2이다. 일부 구체예에서, JAK는 JAK3이다.
일부 구체예에서, 활성 화합물은 선택적일 수 있다. "선택적"이란 화합물이 각각 적어도 하나의 다른 JAK에 비해 더 큰 친화성 또는 효능으로 JAK에 결합하거나 이를 억제함을 의미한다(예를 들면, JAK3 및/또는 TYK2에 비해 선택적인 JAK1 또는 JAK2의 억제제). 일부 구체예에서, 선택적은 (예를 들면, JAK1, JAK3 및 TYK2 보다) JAK2를 선택적으로 억제함을 의미한다. 이론적인 결부없이, JAK3의 억제제는 면역억제 효과에 이를 수 있기 때문에, JAK3 보다 JAK2에 선택적이고, 암 (예컨대 다발성 골수종 등) 치료에 유용한 화합물은 면역억제 부작용이 적으면서 추가의 이점을 제공할 수 있다. 선택성은 적어도 약 5-배, 적어도 약 10-배, 적어도 약 20-배, 적어도 약 50-배, 적어도 약 100-배, 적어도 약 200-배, 적어도 약 500-배 또는 적어도 약 1000-배일 수 있다. 선택성은 업계에 일반적인 방법으로 측정될 수 있다. 일부 구체예에서, 선택성은 각 효소의 Km에서 시험될 수 있다. 일부 구체예에서, JAK3에 대한 JAK2의 선택성은 세포 ATP 농도로 결정될 수 있다.
본 발명의 다른 측면은 JAK 관련 질환 또는 장애의 치료를 필요로 하는 개체에게 치료적 유효량 또는 용량의 본 원에 기재된 특정 화합물 또는 그의 약학 조성물을 투여함으로써, 상기 개체(예: 환자)에서 JAK 관련 질환 또는 장애을 치료하는 방법에 관한 것이다. JAK 관련 질환으로서는, JAK의 발현 또는 활성, 예를 들면 과발현 및/또는 비정상적인 활성도와 직접 또는 간접적으로 연관된 임의의 질환, 장애 또는 증상을 들 수 있다. 또한, JAK 관련 질환으로는, JAK 활성을 조절함으로써 예방, 경감 또는 치유될 수 있는 질환, 장애 또는 증상을 들 수 있다.
JAK 관련 질환의 예로서는, 면역계 관련 질환, 예를 들면 기관 이식 거부반응(예: 동종이식거부반응 및 이식편대숙주반응)을 들 수 있다.
JAK 관련 질환의 또 다른 예로서는, 자가면역 질환, 예컨대 다발성 경화증, 류마티스 관절염, 연소성 관절염, I형 당뇨병, 루푸스, 건선, 염증성 장 질환, 궤양성 대장염, 크론병, 중증근무력증, 면역글로불린 신증, 자가면역 갑상선 질환 등을 들 수 있다. 일부 구체예에서, 자가면역 질환은 자가면역 수포성 피부 질환, 예컨대 심상성천포창(PV) 또는 수포성유천포창(BP)이다.
JAK 관련 질환의 또 다른 예로서는, 알레르기 증상, 예컨대 천식, 음식 알레르기, 아토피 피부염 및 비염을 들 수 있다. JAK 관련 질환의 또 다른 예로서는, 바이러스 질환, 예컨대 엡스타인 바 바이러스(Epstein Barr Virus, EBV), B형 간염, C형 간염, HIV, HTLV 1, 수두대상포진 바이러스(Varicella-Zoster Virus, VZV) 및 인간유두종 바이러스(Human Papilloma Virus, HPV)를 들 수 있다.
JAK 관련 질환 또는 증상의 또 다른 예로서는, 피부 질환, 예컨대 건선(예: 심상성 건선), 아토피 피부염, 피부 발진, 피부 자극, 피부 민감화(예: 접촉성 피부염, 알레르기성 접촉성 피부염 또는 알레르기성 접촉성 민감화)을 들 수 있다. 예를 들면, 몇 가지 의약품을 비롯한 특정의 물질은 국소 도포되었을 때 피부 민감화을 유발할 수 있다. 일부 구체예에서, 적어도 하나의 JAK 억제제를 원하지 않는 민감화를 유발할 수 있는 약제와 함께 동시 투여하거나 순차적으로 투여하는 것이 이와 같은 원치 않는 민감화 또는 피부염을 치료하는데 도움이 될 수 있다. 일부 구체예에서, 이러한 피부 질환은 적어도 하나의 JAK 억제제를 국소 투여함으로써 치료된다.
또 다른 구체예에서, JAK 관련 질환은 고형 종양을 특징으로 하는 것을 포함하는 암(예: 전립선암, 신장암, 간암, 췌장암, 위암, 유방암, 폐암, 두경부암, 갑상선암, 교아종, 카포시 육종, 캐슬만(Castleman)병, 흑색종 등), 혈액암(예: 림프종, 백혈병, 예컨대 급성 림프성 백혈병, 급성 골수성 백혈병(AML) 또는 다발성 골수종), 및 피부암, 예컨대 피부 T세포 림프종(CTCL) 및 피부 B세포 림프종을 들 수 있다. 피부 T세포 림프종의 예로서는 세저리(Sezary) 증후군 및 균상식육종을 들 수 있다.
JAK 관련 질환의 또 다른 예로는, JAK2 돌연변이, 예를 들면 슈도키나제 도메인에 적어도 하나의 돌연변이를 갖는 것과 같은 JAK2 돌연변이(예: JAK2V617F); 슈도키나제 도메인 외부에 적어도 하나의 돌연변이를 갖는 JAK2 돌연변이; JAK1 돌연변이; JAK3 돌연변이; 에리스로포이에틴 수용체(EPOR) 돌연변이; 또는 CRLF2의 탈조절 발현을 특징으로 하는 것을 포함할 수 있다.
또한, JAK 관련 질환으로서는, 골수증식성 질환(MPD), 예컨대 진성적혈구증가증(PV), 진성혈소판증가증(ET), 특발성 골수섬유증(MMM), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수단구성 백혈병(CMML), 과호산구 증후군(HES), 전신성 비만 세포 질환(SMCD) 등을 들 수 있다.
또 다른 JAK 관련 질환으로서는, 염증 및 염증성 질환을 들 수 있다. 염증성 질환의 예로서는, 사르코이드증, 눈의 염증성 질환(예: 안구건조증, 홍채염, 포도막염, 공막염, 결막염 또는 관련 질환), 기도의 염증성 질환(예: 코 및 부비동을 포함한 상부 기도, 예컨대 비염 또는 부비동염, 또는 기관지, 만성 폐색성 폐 질환 등을 비롯한 하부 기도 질환), 염증성 근병증, 예컨대 심근염 및 기타 염증성 질환을 들 수 있다. JAK 억제제로 치료가 가능한 다른 염증성 질환은 전신성 염증성 반응 증후군(SIRS) 및 패혈증 쇼크를 포함한다.
본 원에서 사용한 "안구건조증"이란 건조안 워크샵(Dry Eye Workshop, DEWS)의 최근 공식 보고서에 요약된 질병 상태들을 모두 포함시키고자 사용된 용어이며, 상기 보고서는 건조안을 "눈의 표면에 손상을 미칠 가능성이 있는 불편함, 시각 방해 및 눈물막 불안정성을 유발하는 눈물 및 눈 표면의 다인자성 질병"으로 정의하였다. 또한, 건조안은 눈물막의 삼투압 증가 및 눈 표면의 염증을 수반한다. 이에 관해서는 전체내용이 본 원에 참고로 원용되는 문헌 [Lemp, "The Definition and Classification of Dry Eye Disease: Report of the Definition and Classification Subcommittee of the International Dry Eye Workshop", The Ocular Surface, 5(2), 75-92 April 2007]을 참조할 수 있다. 일부 구체에에서, 건조안 질환은 수성층 눈물 부족 건조안(ADDE) 또는 증발성 건조안 질환 또는 이들의 적절한 조합으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 건조안 질환은 쇼그렌 증후군 건조안(SSDE)이다. 일부 구체예에서, 건조안 질환은 비-쇼그렌 증후군 건조안(NSSDE)이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 그를 필요로 하는 환자에게 치료적 유효량의 본 발명의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하여, 환자에서 결막염, 포도막염(만성 포도막염 포함), 맥락막염, 망막염, 모양체염, 공막염, 상공막염 또는 홍채염을 치료하는 방법; 각막 이식, LASIK(라식, 레이저 가막절삭가공성형술), 굴절교정레이저각막절제술, 또는 LASEK(laesr assisted sub-epithelial keratomileusis, 라섹)과 관련된 염증 또는 통증을 치료하는 방법; 각막 이식, 라식, 엑시머레이저각막절제술, 또는 라섹과 관련된 시력 상실을 억제하는 방법; 또는 이식 거부를 억제하는 방법을 제공한다.
JAK 억제제는 또한 허혈 재관류 손상 또는 졸중 또는 심장 정지와 같은 염증성 허혈 사례와 관련된 질환 또는 증상을 치료하는 데에도 사용될 수 있다. JAK 억제제는 암으로부터 유발되거나 암과 관련된 식욕부진, 악액질 또는 피로를 치료하는 데에도 사용될 수 있다. 이외에도, JAK 억제제는 협착증, 경피성 피부염 또는 섬유증을 치료하는 데에도 사용될 수 있다. 또한, JAK 억제제는 저산소증 또는 성상교세포증, 예컨대 당뇨병성 망막증, 암 또는 신경퇴화와 관련된 증상을 치료하는 데에도 사용될 수 있다. 이에 관해서는 문헌 [Dudley, A.C. et al. Biochem . J. 2005, 390(Pt 2):427-36] 및 [Sriram, K. et al. J. Biol . Chem. 2004, 279(19): 19936-47. Epub 2004 Mar 2]을 참조할 수 있다.
JAK 억제제는 통풍, 및 예를 들면 양성 전립선 비대증 또는 전립선 비대에 기인한 전립선 크기 증가를 치료하는 데에도 사용될 수 있다.
그밖의 JAK 관련 질환으로는 골흡수 질환, 예컨대 골다공증, 골관절염을 들 수 있다. 골흡수는 또한 다른 증상, 예컨대 호르몬 불균형 및/또는 호르몬 요법, 자가면역질환 (예를 들면, 사르코이드증), 또는 암 (예를 들면, 골수종)과 연관될 수 있다. JAK 억제제에 의한 골흡수 감소는 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 또는 약 90%일 수 있다.
본 원에서 사용한, "접촉시킨다"는 용어는 지정된 부분들을 시험관내 시스템 또는 생체내 시스템에서 함께 있도록 하는 것을 말한다. 예를 들면, JAK를 화합물과 "접촉시킨다"고 하는 것은 화합물을 JAK를 가진 개체 또는 환자, 예를 들면 사람에게 투여하는 것 뿐만 아니라, 예컨대 화합물을 JAK를 함유하는 세포 또는 정제된 제제를 포함하는 샘플내로 도입하는 것을 포함한다.
본 원에서 사용한 용어 "개체" 또는 "환자"는 호환적으로 사용되며, 포유류를 비롯한 동물, 바람직하게는 마우스, 래트, 다른 설치류, 토끼, 개, 고양이, 돼지, 소, 양, 말 또는 영장류, 가장 바람직하게는 인간을 가리킨다.
본 원에서 사용한 "치료적 유효량"이라는 표현은 조직, 시스템, 동물, 개체 또는 인간에서 조사자, 수의사, 의료진 또는 다른 임상전문의에 의해 추구되는 생물학적 또는 의학적 반응을 나타내는 활성 화합물 또는 약제의 양을 말한다.
본 원에서 사용한 용어 "치료한다" 또는 "치료"는 다음중 하나 이상을 가리키는 것이다: (1) 질환을 예방하는 것, 예를 들면 질환, 증상 또는 장애 성향을 가질 수 있지만 당해 질병의 병리학 또는 징후학적 특징을 아직 경험하거나 나타내지 않는 개인에서 당해 질환, 증상 또는 장애를 예방하는 것; (2) 질환을 억제하는 것, 예를 들면 질환, 증상 또는 장애의 병리학적 또는 징후학적 특징을 경험하거나 나타내는 환자에서 당해 질환, 증상 또는 장애를 억제하는 것; 및 (3) 질환을 경감시키는 것, 예를 들면 질환, 증상 또는 장애의 병리학적 또는 징후학적 특징을 경험하거나 나타내는 환자에서 당해 질환, 증상 또는 장애를 경감시키는 것(즉, 병리학적 및/또는 징후학적 특징을 역전시키는 것), 예컨대 질병의 정도를 감소시키는 것.
개체에 화합물 I을 투여한 후 환자에서 대사물 수준을 측정하고 프로파일링 할 수 있다. 이어, 상기 대사물 프로파일을 이용하여 개체에서 (예를 들면, 화합물 I의 투여를 위해) 용량 요법을 조정할 수 있다. 예를 들어, 주어진 기간 후 다양한 대사물 수준으로 입증된 화합물 I의 신속한 클리리어런스(clearance)는 초기 용량이 상향 조정되어야 함을 의미할 수 있다.
병용 요법
하나 이상의 추가의 약제, 예를 들면 화학요법제, 항염증제, 스테로이드, 면역억제제 및 Bcr-Abl, Flt-3, RAF 및 FAK 키나제 억제제, 예컨대 WO 2006/056399호에 개시된 것들, 또는 다른 약제를 본 원에 기재된 특정화합물과 함께, JAK 관련 질환, 장애 또는 증상을 치료하는데 사용할 수 있다. 상기 하나 이상의 추가의 약제는 환자에게 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다.
화학요법제의 예로서는, 프로테오좀(proteosome) 억제제(예: 보르테조밉(bortezomib)), 탈리도미드(thalidomide), 레블리미드(revlimid) 및 DNA 손상제, 예컨대 멜팔란, 독소루비신, 사이클로포스파미드, 빈크리스틴, 에토포시드, 카르무스틴 등을 들 수 있다.
스테로이드의 예로서는, 코르티코스테로이드, 예컨대 덱사메타손 또는 프레드니손을 들 수 있다.
Bcr-Abl 억제제의 예로서는 미국 특허 제 5,521,184호, WO 04/005281호 및 U.S.S.N. 60/578,491호에 개시된 종 및 속에 속하는 화합물 및 그의 약학적으로 허용되는 염을 들 수 있다.
적당한 Flt-3 억제제의 예로서는, WO 03/037347호, WO 03/099771호 및 WO 04/046120호에 개시된 바와 같은 화합물 및 그의 약학적으로 허용되는 염을 들 수 있다.
적당한 RAF 억제제의 예로서는, WO 00/09495호 및 WO 05/028444호에 개시된 바와 같은 화합물 및 그의 약학적으로 허용되는 염을 들 수 있다.
적당한 FAK 억제제의 예로서는, WO 04/080980호, WO 04/056786호, WO 03/024967호, WO 01/064655호, WO 00/053595호 및 WO 01/014402호에 개시된 바와 같은 화합물 및 그의 약학적으로 허용되는 염을 들 수 있다.
일부 구체예에서, 하나 이상의 본 원에 기재된 화합물을 하나 이상의 다른 키나제 억제제, 예를 들면 이마티닙(imatinib)과 함께, 특히 이마티닙 또는 다른 키나제 억제제에 대해 내성인 환자를 치료하기 위해 사용할 수 있다.
일부 구체예에서, 하나 이상의 화합물을 화학요법제와 함께, 암, 예컨대 다발성 골수종을 치료하는데 사용할 수 있으며, 화학요법제만을 사용한 경우의 반응에 대비하여 독성 효과를 악화시키는 일 없이 치료 반응을 향상시킬 수 있다. 다발성 골수종의 치료에 사용되는 추가의 약제의 예로서는, 멜팔란, 멜팔란+프레드니손(MP), 독소루비신, 덱사메타손 및 벨카드(Velcade)(보르테조밉)을 들 수 있으나, 이들에 제한되는 것은 아니다. 다발성 골수종의 치료에 사용되는 또 다른 약제로서는, Bcr-Abl, Flt-3, RAF 및 FAK 키나제 억제제를 들 수 있다. 본 발명의 화합물과 다른 약제를 병용하면 바람직한 부가 또는 상승 효과를 나타낸다. 또한, 덱사메타손과 같은 약제에 대한 다발성 골수종 세포의 내성은 본 발명의 화합물로 치료할 때 가역적으로 될 수 있다. 상기 약제는 jak 억제제와 함께 단일 또는 연속 투여 형태로 병용될 수 있거나, 상기 약제를 별도의 투여 형태로서 동시에 또는 순차적으로 투여할 수 있다.
일부 구체예에서, 덱사메타손과 같은 코르티코스테로이드가 적어도 하나의 JAK 억제제와 함께 환자에게 투여되며, 이 때 덱사메타손은 연속적이 아니라 간헐적으로 투여된다.
또 다른 구체예에서, 하나 이상의 본 발명의 화합물과 다른 치료제의 배합물을 골수 이식 또는 줄기 세포 이식 전, 도중 및/또는 이후에 환자에게 투여할 수 있다.
약학 제제 및 투여 형태
의약으로서 사용할 경우, 본 원에 기재된 화합물은 약학 조성물의 형태로 투여될 수 있다. 이러한 조성물은 제약 분야에 잘 알려진 방식으로 제조될 수 있으며, 국소 치료 또는 전신 치료가 바람직한지, 그리고 치료하고자 하는 부위에 따라서, 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다. 투여는 국소 투여(예: 경피, 상피, 눈 및 비강내, 질내 및 직장 전달을 비롯한 점막 포함), 폐(예: 네뷸라이저 등을 포함여 분말 또는 에어로졸을 흡입 또는 통기; 기도내 또는 비강내), 경구 또는 비경구 투여일 수 있다. 일부 구체예에서, 조성물은 경구 투여에 적합하다. 비경구 투여로는 정맥내, 동맥내, 피하, 복강내, 근육내 주사 또는 주입; 또는 뇌내, 예를 들면 척수강내 또는 뇌실내 투여를 들 수 있다. 비경구 투여는 단일 볼루스(bolus) 투여의 형태이거나, 또는 예를 들면 연속 관류 펌프에 의한 투여일 수 있다. 국소 투여용 약학 조성물 및 제제는 경피 패취, 연고, 로션, 크림, 겔, 점적액, 좌약, 분무제, 액체 및 분말을 들 수 있다. 통상의 약학 담체, 수성, 분말 또는 오일 기재, 증점제 등이 필요하거나 요구될 수 있다. 코팅된 콘돔, 장갑 등도 유용할 수 있다.
또한, 본 발명은 활성 성분으로서 하나 이상의 본 원에 기재된 화합물을 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체(부형제)와 함께 함유하는 약학 조성물을 포함한다. 본 발명의 조성물을 제조함에 있어서, 상기 활성 성분을 일반적으로 부형제와 혼합하고, 부형제로 희석하거나, 예를 들면 캡슐, 낭, 종이 또는 다른 용기 형태의 담체 내부에 봉입한다. 상기 부형제가 희석제로서 작용할 경우에, 부형제는 고형, 반고형 또는 액상 물질일 수 있으며, 활성 성분에 대한 비히클(vehicle), 담체 또는 매질로서 작용한다. 따라서, 상기 조성물은 정제, 환약, 분말, 로젠지, 낭, 카세제(cachet), 엘릭시르(elixir), 현탁액, 에멀젼, 용액, 시럽, 에어로졸(고체로서 또는 액상 매질중), 예컨대 10 중량％ 이하의 활성 화합물을 함유하는 연고, 연질 및 경질 젤라틴 캡슐, 좌약, 멸균 주사 용액, 및 멸균 포장 분말의 형태로 존재할 수 있다.
제제를 제조함에 있어서, 활성 화합물을 분쇄하여 다른 성분과 혼합하기 전에 적절한 입자 크기를 제공할 수 있다. 활성 화합물이 실질적으로 불용성인 경우, 200 메쉬 미만의 입자 크기로 분쇄할 수 있다. 활성 화합물이 실질적으로 수용성인 경우, 분쇄를 통해서 입자 크기를 조정하여 제제에 실질적으로 균일한 분포, 예컨대 약 40 메쉬를 제공할 수 있다.
활성 성분은 공지의 분쇄 절차, 예를 들면 습식 분쇄법을 사용해서 분쇄하여 정제 성형 및 다른 제제 유형에 적절한 입자 크기를 얻을 수 있다. 미세하게 분쇄된(나노입자) 활성 성분의 제제는 당분야에 알려진 방법에 의해 제조할 수 있으며, 예컨대 국제 특허 출원 번호 WO 2002/000196호를 참조할 수 있다.
적당한 부형제의 몇가지 예로는, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 전분, 아카시아검, 인산칼슘, 알기네이트, 트라가칸트, 젤라틴, 칼슘 실리케이트, 미소결정질 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스, 물, 시럽 및 메틸 셀룰로오스를 들 수 있다. 제제는 다음과 같은 성분을 추가로 포함할 수 있다: 윤활제, 예컨대 탈크, 스테아르산마그네슘 및 미네랄 오일; 습윤제; 유화제 및 현탁제; 방부제, 예컨대 메틸- 및 프로필하이드록시벤조에이트; 감미제; 및 향미제. 본 발명의 조성물은 당분야에 알려진 절차를 사용하여 환자에게 투여한 후에 활성 성분을 신속 방출, 지속방출 또는 지연 방출되도록 제제화될 수 있다.
조성물은 단위 투여 제형으로 제제화할 수 있으며, 각 투여 제형은 활성 성분을 약 5 내지 약 1000 mg(1 g), 더욱 일반적으로는 약 100 내지 약 500 mg 함유한다. "단위 투여 제형"이라는 용어는 인간 대상 및 다른 포유류에게 1회분 투약량으로 적합한 물리적 불연속 단위를 말하며, 각 단위는 목적하는 치료 효과를 내도록 계산된 예정된 양의 활성 물질을 적당한 제약 부형제와 함께 함유한다.
일부 구체예에서, 본 발명의 조성물은 약 5 mg 내지 약 50 mg의 활성 성분을 함유한다. 당업자라면 이것이 약 5 mg 내지 약 10 mg, 약 10 mg 내지 약 15 mg, 약 15 mg 내지 약 20 mg, 약 20 mg 내지 약 25 mg, 약 25 mg 내지 약 30 mg, 약 30 mg 내지 약 35 mg, 약 35 mg 내지 약 40 mg, 약 40 mg 내지 약 45 mg, 또는 약 45 mg 내지 약 50 mg의 활성 성분을 함유하는 화합물 또는 조성물을 구현하는 것임을 알 것이다.
일부 구체예에서, 본 발명의 조성물은 약 50 mg 내지 약 500 mg의 활성 성분을 함유한다. 당업자라면 이것이 약 50 mg 내지 약 100 mg, 약 100 mg 내지 약 150 mg, 약 150 mg 내지 약 200 mg, 약 200 mg 내지 약 250 mg, 약 250 mg 내지 약 300 mg, 약 350 mg 내지 약 400 mg, 또는 약 450 mg 내지 약 500 mg의 활성 성분을 함유하는 화합물 또는 조성물을 구현하는 것임을 알 것이다.
일부 구체예에서, 본 발명의 조성물은 약 500 mg 내지 약 1,000 mg의 활성 성분을 함유한다. 당업자라면 이것이 약 500 mg 내지 약 550 mg, 약 550 mg 내지 약 600 mg, 약 600 mg 내지 약 650 mg, 약 650 mg 내지 약 700 mg, 약 700 mg 내지 약 750 mg, 약 750 mg 내지 약 800 mg, 약 800 mg 내지 약 850 mg, 약 850 mg 내지 약 900 mg, 약 900 mg 내지 약 950 mg, 또는 약 950 mg 내지 약 1,000 mg의 활성 성분을 함유하는 화합물 또는 조성물을 구현하는 것임을 알 것이다.
활성 화합물은 넓은 용량 범위에 걸쳐서 효과적일 수 있으며, 일반적으로 약학적 유효량으로 투여된다. 그러나, 실제로 투여되는 화합물의 양은 관련된 환경, 예를 들면 치료하고자 하는 증상, 선택된 투여 경로, 투여되는 실제 화합물, 각 환자의 연령, 체중 및 반응, 환자의 증상 정도 등에 따라서 전문의에 의해 결정될 것이다.
정제와 같은 고형 조성물을 제조하기 위해서, 주요 활성 성분을 약학 부형제와 혼합하여 본 발명의 화합물의 균일한 혼합물을 함유하는 고형 예비제제 조성물을 제조한다. 이러한 예비제제 조성물을 균일하다고 언급한 경우, 이것은 활성 성분이 일반적으로 조성물 전체에 걸쳐 균일하게 분산됨으로써 조성물이 정제, 환약 및 캡슐과 같은 동등한 효능을 갖는 단위 투여 제형으로 용이하게 분할될 수 있다는 것을 의미한다. 이어서, 이러한 고형 예비제제를 예컨대 본 발명의 활성 성분 약 0.1 내지 약 1000 mg을 함유하는 전술한 유형의 단위 투여 제형으로 분할한다.
*본 발명의 정제 또는 환약은 장기 작용의 이점을 제공하는 투여 제형을 제공하도록 코팅되거나 다른 방식으로 배합될 수 있다. 예를 들면, 정제 또는 환약은 내부 투여 및 외부 투여 성분을 포함할 수 있으며, 외부 투여 성분은 내부 투여 성분 위를 감싸고 있는(envelope) 형태로 존재한다. 이러한 두 성분들은 장용층에 의해 분리될 수 있으며, 상기 장용층은 위에서의 분해를 저지하고 내부의 성분을 그대로 십이지장내로 통과시키거나 방출을 지연시키는 역할을 한다. 여러 가지 물질을 이와 같은 장용층 또는 코팅에 사용할 수 있으며, 그러한 물질로서는 다수의 중합체 산 및 중합체 산과 쉘락, 세틸 알콜 및 셀룰로오스 아세테이트의 물질과의 혼합물을 들 수 있다.
화합물과 조성물이 경구 또는 주사에 의해 투여되도록 혼입될 수 있는 액상 제제로는 수용액, 적당하게는 착향(flavored) 시럽, 수성 또는 오일 현탁액, 및 식용유, 예컨대 면실유, 참깨유, 코코넛유 또는 땅콩유를 사용한 착향 에멀젼, 및 엘릭시르 및 유사한 제약 비히클을 들 수 있다.
흡입 또는 통기용 조성물로서는, 약학적으로 허용되는 수성 또는 유기 용매, 또는 이들의 혼합물중의 용액 및 현탁액, 및 분말을 들 수 있다. 상기 액상 또는 고형 조성물은 전술한 바와 같은 약학적으로 허용되는 적당한 부형제를 함유할 수 있다. 일부 구체예에서, 조성물은 경구 또는 코 호흡 경로를 통해 국소 또는 전신 효능을 위해 투여된다. 조성물은 비활성 기체를 사용하여 분무할 수도 있다. 분무 용액은 네뷸라이저 장치로부터 직접 호흡되거나, 네뷸라이저 장치를 안면 마스크 텐트 또는 간헐적 양압(positive pressure) 호흡 기기에 부착시킬 수 있다. 용액, 현탁액 또는 분말 조성물은 적절한 방식으로 제제를 전달하는 장치로부터 경구 또는 코를 경유해서 투여할 수 있다.
환자에게 투여되는 화합물 또는 조성물의 양은 투여되는 것, 투여 목적, 예를 들면 예방 또는 치료, 환자의 상태, 투여 방식 등에 따라달라질 것이다. 치료 용도에 있어서, 조성물은 이미 질병에 걸린 환자에게 그 질환 및 합병증의 증상을 치유하거나 적어도 부분적으로 억제하는데 충분한 양으로 투여될 수 있다. 유효 용량은 치료하고자 하는 질환 증상 및 질환의 정도, 환자의 연령, 체중 및 전반적인 상태와 같은 요인들에 따라 담당 전문의의 판단에 의해 결정될 것이다.
환자에게 투여되는 조성물은 전술한 바와 같은 약학 조성물의 형태로 존재할 수 있다. 이러한 조성물은 통상의 멸균 기법에 의해 멸균되나, 멸균 여과될 수 있다. 수용액은 그대로 또는 동결 건조해서 사용되도록 포장될 수 있으며, 이 때 동결 건조된 제제는 투여하기 전에 멸균 수성 담체와 혼합된다. 화합물 제제의 pH는 일반적으로 3 내지 11, 더욱 바람직하게는 5 내지 9, 가장 바람직하게는 7 내지 8일 것이다. 전술한 부형제, 담체 또는 안정화제중 일부를 사용하여 약학적 염을 형성할 수 있음을 잘 알 것이다.
화합물의 치료 용량은 예컨대 치료가 이루어지는 특정의 용도, 화합물의 투여 방식, 환자의 건강 및 상태, 그리고 처방 전문의의 판단에 따라 달라질 수 있다. 약학 조성물중 화합물의 비율 또는 농도는 여러 가지 요인, 예를 들면 용량, 화학적 특성(예: 소수성) 및 투여 경로에 따라 달라질 수 있다. 예를 들면, 화합물은 비경구 투여의 경우 화합물 약 0.1 내지 약 10％ w/v를 함유하는 수성 생리 완충 용액에 제공될 수 있다. 몇가지 전형적인 용량 범위는 1 일당 약 1 ㎍/kg(체중) 내지 약 1 g/kg(체중)이다. 일부 구체예에서, 용량 범위는 1 일당 약 0.01 mg/kg(체중) 내지 약 100 mg/kg(체중)이다. 용량은 질병 또는 질환의 진행 형태 및 정도, 특정 환자의 전반적인 건강 상태, 선택된 화합물의 상대적인 생물학적 효능, 부형제의 제제화 및 그의 투여 경로와 같은 변수들에 좌우될 것이다. 유효 용량은 시험관내 또는 동물 모델 테스트 시스템으로부터 유도된 용량-반응 곡선으로부터 추론할 수 있다.
본 발명의 조성물은 하나 이상의 추가의 약학적 제제, 예컨대 화학요법제, 스테로이드, 항염증성 화합물 또는 면역억제제를 더 포함할 수 있으며, 그 예들은 앞에 열거한 바와 같다.
일부 구체예에서, 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염은 안과용 조성물로서 투여된다. 따라서, 일부 구체예에서, 상기 방법은 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 및 안과학적으로 허용되는 담체의 투여를 포함한다. 일부 구체예에서, 안과용 조성물은 액상 조성물, 반고형 조성물, 삽입물, 필름, 미립자 또는 나노입자이다.
일부 구체예에서, 안과용 조성물은 액상 조성물이다. 일부 구체예에서, 안과용 조성물은 반고형 조성물이다. 일부 구체예에서, 안과용 조성물은 국소 투여용 조성물이다. 국소투여용 조성물은 액상 및 반고형 조성물을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 일부 구체예에서, 안과용 조성물은 국소 투여용 조성물이다. 일부 구체예에서, 국소 투여용 조성물은 수용액, 수성 현탁액, 연고 또는 겔을 포함한다. 일부 구체예에서, 안과용 조성물은 일반적으로 눈의 전면(front), 윗쪽 눈꺼풀 아래, 아래쪽 눈꺼풀 위, 및 맹낭(cul-de-sac)에 국소 투여된다. 일부 구체예에서, 안과용 조성물은 멸균된다. 멸균은 잘 알려진 기법, 예를 들면 용액의 멸균 여과 또는 즉석 사용 용도의 앰플내 용액을 가열하는 방법에 의해 수행할 수 있다. 본 발명의 안과용 조성물은 안과용 제제의 제조에 적합한 약학적 부형제를 더 함유할 수 있다. 이와 같은 부형제의 예로서는, 방부제, 완충제, 킬레이트제, 항산화제 및 삼투압 조절용 염을 들 수 있다.
본 원에서 사용한 용어 "안과학적으로 허용되는 담체"는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염을 함유하고 방출할 수 있으며, 눈에 사용하기에 적합한 임의의 물질을 말한다. 일부 구체예에서, 안과학적으로 허용되는 담체는 물 또는 수용액 또는 수성 현탁액이지만, 오일, 예컨대 연고를 제조하는데 사용되는 오일 및 안내 삽입물에 사용되는 것과 같은 중합체 매트릭스도 포함한다. 일부 구체예에서, 조성물은 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염를 포함하는 수성 현탁액일 수 있다. 액상 안과용 조성물(연고 및 현탁액 포함)은 선택된 투여 경로에 적합한 점도를 가질 수 있다. 일부 구체예에서, 안과용 조성물은 약 1,000 내지 약 30,000 센티포아즈 범위의 점도를 갖는다.
일부 구체예에서, 안과용 조성물은 하나 이상의 계면활성제, 보조제, 완충제, 항산화제, 등장성 조절제, 방부제(예: EDTA, BAK(벤즈알코늄 클로라이드), 아염소산나트륨, 과붕산나트륨, 폴리쿼터륨-1), 증점제 또는 점도 조절제(예: 카복시메틸 셀룰로오스, 하이드록시메틸 셀룰로오스, 폴리비닐 알콜, 폴리에틸렌 글리콜, 글리콜 400, 프로필렌 글리콜 하이드록시메틸 셀룰로오스, 하이드록시프로필-구아, 히알루론산 및 하이드록시프로필 셀룰로오스) 등을 더 포함할 수 있다. 제제중의 첨가제로는 염화나트륨, 중탄산나트륨, 소르브산, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로르헥시딘, 피마자유 및 과붕산나트륨을 들 수 있으나, 이들에 제한되는 것은 아니다.
수성 안과용 조성물(용액 또는 현탁액)은 일반적으로 생리학적 또는 안과학적으로 유해한 성분들을 함유하지 않는다. 일부 구체예에서, 정제수 또는 탈이온수가 조성물에 사용된다. pH는 생리적 및 안과학적으로 허용되는 임의의 pH 조절 산, 염기 또는 완충제를 첨가함으로써 약 5.0 내지 8.5의 범위내에서 조정될 수 있다. 안과학적으로 허용되는 산의 예로는, 아세트산, 붕산, 시트르산, 락트산, 인산, 염산 등을 들 수 있으며, 염기의 예로서는 수산화나트륨, 인산나트륨, 붕산나트륨, 시트르산나트륨, 아세트산나트륨, 락트산나트륨, 트로메타민, 트리스하이드록시메틸아미노메탄 등을 들 수 있다. 염과 완충제로서는, 시트르산염/덱스트로오스, 중탄산나트륨, 염화암모늄 및 이러한 산과 염기들의 혼합물을 들 수 있다.
일부 구체예에서, 본 발명의 방법은 눈의 외부 표면과 접촉하는 치료제의 데포(depot)를 형성하거나 제공하는 것을 포함한다. 데포란 눈물이나 눈 소거 메카니즘에 의해 쉽게 제거되지 않는 치료제의 공급원을 말한다. 이에 의하면, 1 회 적용으로 눈의 외부 표면상의 유체에 고농도의 치료제가 계속적으로 서서히 방출되는 방식으로 존재할 수 있게 된다. 특정한 이론의 결부없이, 흡수와 침투는 용해된 약물 농도 및 약물 함유 유체와 외부 조직의 접촉 지속 기간 둘 다에 좌우될 수 있는 것으로 생각된다. 약물이 눈의 체액의 소거 및/또는 눈 조직내로의 흡수에 의해 제거됨에 따라서, 보다 많은 약물이 데포로부터 보충된 눈의 체액내로 제공, 예를 들면 용해된다. 따라서, 데포를 사용하면 불용성이 큰 치료제가 눈 조직에 좀 더 용이하게 부하될 수 있다. 일부 구체예에서, 데포는 8 시간 이상에 이르는 시간동안 유지될 수 있다. 일부 구체예에서, 안과용 데포 제형은 수성 중합체 현탁액, 연고 및 고형 삽입물을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다.
일부 구체예에서, 안과용 조성물은 연고 또는 겔이다. 일부 구체예에서, 안과용 조성물은 유성 전달 비히클이다. 일부 구체예에서, 조성물은 석유 또는 라놀린 염기를 포함하고, 여기에 활성 성분이 일반적으로 0.1 내지 2％로, 그리고 부형제가 첨가된다. 통상의 기재로서는 미네랄 오일, 바셀린 및 이들의 혼합물을 들 수 있으나, 이들에 제한되는 것은 아니다. 일부 구체예에서, 연고는 아래 눈꺼풀상에 리본 형태로 도포된다.
일부 구체예에서, 안과용 조성물은 안과용 삽입물이다. 일부 구체예에서, 안과용 삽입물은 생물학적으로 비활성이고, 연질이며, 생체 붕괴가능하고, 점탄성이 있고, 치료제에 노출후 멸균 안정성이 있으며, 공기중 세균으로부터의 감염에 대해 내성이 있고, 생체 붕괴가능하고, 생체 적합성이고, 및/또는 점탄성이 있다. 일부 구체예에서, 상기 삽입물은 안과학적으로 허용되는 매트릭스, 예를 들면 중합체 매트릭스를 포함한다. 상기 매트릭스는 일반적으로 중합체이고, 치료제가 일반적으로 중합체 매트릭스에 분산되거나 이에 결합된다. 일부 구체예에서, 치료제는 공유결합의 용해 또는 가수분해를 통해서 매트릭스로부터 서서히 방출될 수 있다. 일부 구체예에서, 중합체는 생체 붕괴성(가용성)이고 그 용해 속도는 내부에 분산된 치료제의 방출 속도를 조절할 수 있다. 다른 형태에서, 중합체 매트릭스는 예를 들면 가수분해에 의해 분해되어 그 매트릭스에 결합되거나 매트릭스내에 분산된 치료제를 방출시키는 생분해성 중합체이다. 다른 구체예에서, 매트릭스와 치료제가 추가의 중합체 코팅으로 둘러싸여 방출을 더 조절할 수 있다. 일부 구체예에서, 삽입물은 생분해성 중합체, 예컨대 폴리카프로락톤(PCL), 에틸렌/비닐 아세테이트 공중합체(EVA), 폴리알킬 시아노아크릴레이트, 폴리우레탄, 나일론, 또는 폴리(dl-락타이드-co-글리콜라이드)(PLGA), 또는 이들의 임의 공중합체를 포함한다. 일부 구체예에서, 치료제는 매트릭스 물질내로 분산되거나, 중합 전에 매트릭스 물질을 제조하는데 사용되는 단량체 조성물중에 분산된다. 일부 구체예에서, 치료제의 양은 약 0.1 내지 약 50％, 또는 약 2 내지 약 20％이다. 다른 구체예에서, 생분해성 또는 생체 붕괴성 중합체 매트릭스는, 소모된 삽입물을 제거할 필요가 없도록 사용된다. 생분해성 또는 생체 붕괴성 중합체가 분해 또는 용해됨에 따라서, 치료제가 방출된다.
다른 구체예에서, 상기 안과용 삽입물은 중합체를 포함하며, 그 예로서는 본 원에 그 전체가 참고로 원용되는 문헌 [Wagh, et al., "Polymers used in ocular dosage form and drug delivery systems", Asian J. Pharm., pages 12-17 (Jan. 2008)]에 개시된 것들을 들 수 있으나, 이들에 제한되는 것은 아니다. 일부 구체예에서, 삽입물은 폴리비닐피롤리돈(PVP), 아크릴레이트 또는 메타크릴레이트 중합체 또는 공중합체(예: 유드라짓(Eudragit®) 부류의 중합체, 롬(Rohm) 또는 데구사(Degussa)에서 시판함), 하이드록시메틸 셀룰로오스, 폴리아크릴산, 폴리(아미도아민) 덴드리머, 폴리(디메틸실록산), 폴리에틸렌 옥사이드, 폴리(락타이드-co-글리콜라이드), 폴리(2-하이드록시에틸메타크릴레이트), 폴리(비닐 알콜) 또는 폴리(프로필렌 푸마레이트)로부터 선택된 중합체를 포함한다. 일부 구체예에서, 삽입물은 겔포옴(Gelfoam®) R을 포함한다. 일부 구체예에서, 삽입물은 450 kDa-시스테인 복합체의 폴리아크릴산이다.
일부 구체예에서, 안과용 조성물은 안과용 필름이다. 이와 같은 필름에 적합한 중합체로서는, 상기 문헌[Wagh 등에 의한 것]에 개시된 것들을 들 수 있으나, 이들에 제한되는 것은 아니다. 일부 구체예에서, 필름은 소프트 콘택트 렌즈, 예컨대 에틸렌글리콜 디메타크릴레이트로 가교된 N,N-디에틸아크릴아미드와 메타크릴산의 공중합체로 제조된 것이다.
일부 구체예에서, 안과용 조성물은 미소구 또는 나노입자를 포함한다. 일부 구체예에서, 미소구는 젤라틴을 포함한다. 일부 구체예에서, 미소구는 눈의 뒷부분, 맥락막 또는 공막에 유리체내로 또는 망막하로 주입된다. 일부 구체예에서, 미소구 또는 나노입자는 중합체를 포함하고, 이러한 중합체의 예로서는 본 원에 그 전체가 참고로 원용되는 문헌 [Wagh 등에 의한 것]에 개시된 것들을 들 수 있으나, 이들에 제한되는 것은 아니다. 일부 구체예에서, 중합체는 키토산, 폴리아크릴산과 같은 폴리카복실산, 알부민 입자, 히알루론산 에스테르, 폴리이타콘산, 폴리(부틸)시아노아크릴레이트, 폴리카프로락톤, 폴리(이소부틸)카프로락톤, 폴리(락트산-co-글리콜산) 또는 폴리(락트산)이다. 일부 구체예에서, 미소구 또는 나노입자는 고형 지질 입자를 포함한다.
일부 구체예에서, 안과용 조성물은 이온 교환 수지를 포함한다. 일부 구체예에서, 이온 교환 수지는 무기 제올라이트 또는 합성 유기 수지이다. 일부 구체예에서, 이온 교환 수지로서는 본 원에 그 전체가 참고로 원용되는 문헌 [Wagh 등에 의한 것]에 개시된 것들을 들 수 있으나, 이들에 제한되는 것은 아니다. 일부 구체예에서, 이온 교환 수지는 부분적으로 중화된 폴리아크릴산이다.
일부 구체예에서, 안과용 조성물은 수성 중합체 현탁액이다. 일부 구체예에서, 치료제 또는 중합체 현탁제는 수성 매체에 현탁된다. 일부 구체예에서, 수성 중합체 현탁액은 눈에 투여하기 전에 현탁액이 가졌던 것과 동일하거나, 실질적으로 동일한 점도를 눈에서 유지할 수 있도록 제제화될 수 있다. 일부 구체예에서, 수성 중합체 현탁액은 누액과 접촉시 겔화가 증가되도록 제제화될 수 있다.
표지화된 화합물 및 검정 방법
본 발명의 또 다른 측면은 영상화 기술뿐만 아니라 인간을 포함한 조직 샘플에서 JAK를 국한하고 정량화하고 표지된 화합물의 결합을 억제하여 JAK 리간드를 확인하기 위한 시험관내 및 생체내 검사에 유용할 수 있는 본 원에 기재된 특정 화합물의 표지 (방사표지, 형광표지 등)된 것에 관한 것이다. 따라서, 본 발명은 이러한 표지된 화합물을 포함하는 JAK 검정을 포함한다.
본 발명은 또한 동위원소적으로 표지된 화합물을 포함한다. "동위원소적" 또는 "방사-표지된" 화합물은 하나 이상의 원자가 원자 질량 또는 질량수가 자연에서 보통 발견되는 (즉, 자연 발생) 원자 질량 또는 질량수와 상이한 원자로 대체되거나, 치환된 본 원에 기재된 화합물이다. 본 원에 기재된 화합물에 도입될 수 있는 적합한 방사성핵종은 2H (또한 중수소로 D로 쓰일 수 있다), 3H (또한 삼중수소로 T로 쓰일 수 있다), 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 18F, 35S, 36Cl, 82Br, 75Br, 76Br, 77Br, 123I, 124I, 125I 및 131I를 포함하나, 이들로만 한정되지는 않는다. 본 발명의 방사-표지된 화합물에 도입되는 방사성핵종은 방사-표지된 화합물의 특정 응용에 따라 달라질 것이다. 예를 들어, 시험관내 금속프로테아제 표지 및 경쟁 어세이를 위해서는, 3H, 14C, 82Br, 125I , 131I, 35S가 도입된 화합물이 일반적으로 가장 유용할 것이다. 방사 영상화 용도를 위해서는 11C, 18F, 125I, 123I, 124I, 131I, 75Br, 76Br 또는 77Br이 일반적으로 가장 유용할 것이다.
"방사-표지" 또는 "표지된 화합물"은 적어도 하나의 방사성핵종이 도입된 화합물로 이해된다. 일부 구체예에서 방사성핵종은 3H, 14C, 125I , 35S 및 82Br로 구성된 그룹중에서 선택된다.
본 발명은 또한 방사-동위원소를 본 원에 기재된 화합물에 도입하기 위한 합성 방법을 포함할 수 있다. 방사-동위원소를 유기 화합물에 도입하기 위한 합성 방법은 당업계에 주지되었으며, 당업자들이라면 본 원에 기재된 화합물에 적용가능한 방법을 알고 있을 것이다.
본 발명의 표지된 화합물은 화합물의 동정 및/또는 평가를 위한 스크리닝 검정에 이용될 수 있다. 예를 들어, JAK와 접촉시 라벨링 추적을 통해 표지된 새로 합성되거나 동정된 화합물 (즉, 시험 화합물)에 대한 농도 변화를 관찰함으로써 상기 화합물의 JAK 결합능이 평가될 수 있다. 예를 들어, JAK에 결합하는 것으로 알려진 다른 화합물 (즉, 표준 화합물)의 결합을 감소시키기 위한 시험 화합물 (표지된)의 능력에 대해 평가될 수 있다. 따라서, JAK와 결합하기 위해 표준 화합물과 경쟁하는 시험 화합물의 능력은 그의 결합 친화성과 직접 연관된다. 반대로, 일부 다른 스크리닝 검정에서는, 표준 화합물이 표지되고, 시험 화합물이 비표지된다. 이에 따라, 표준 화합물과 시험 화합물 간 경쟁을 평가하기 위해 표지된 표준 화합물의 농도가 관찰되며, 이에 따라 시험 화합물의 상대적인 결합 친화성이 확인된다.
키트
본 발명은 또한, 치료적 유효량의 활성 화합물을 포함하는 약학 조성물을 함유하는 하나 이상의 컨테이너를 포함하고, JAK 관련 질환 또는 장애 예를 들어, 암을 치료하거나 예방하는데 유용한 의학적 키트를 포함한다. 이러한 키트는 필요에 따라 하나 이상의 다양한 통상의 의학적 키트 요소, 예컨대, 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 함유한 컨테이너, 추가 컨테이너 등을 추가로 포함할 수 있으며, 이는 당업자들이라면 용이하게 알 수 있을 것이다. 투여 성분의 양, 투여 지침 및/또는 성분 혼합에 대한 지침을 표시하는 설명서가 또한 삽입물 또는 라벨로서 키트에 포함될 수 있다.
이하에서는 구체적인 실시예를 들어 본 발명을 좀 더 상세히 설명하고자 한다. 후술하는 실시예는 예시적인 것일뿐, 어떤 식으로도 본 발명을 제한하는 것으로 해석해서는 안된다. 당업자라면 실질적으로 동일한 결과를 산출하도록 변경 또는 조정할 수 있는 광범위한 비임계적 변수들을 잘 알 것이다.
실시예
실시예 1: ( R )-3- 사이클로펜틸 -3-[4-(2- 하이드록시 -5-옥소-6,7- 디하이드로 -5H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴
Figure pat00038
단계 1. (R)-3- 사이클로펜틸 -3-[4-(2- 메톡시 -7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴
Figure pat00039
4-클로로-2-메톡시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.4 g, 2.18 mmol, Toronto Research Chemicals) 및 (R)-3-사이클로펜틸-3-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴 (0.824 g, 2.61 mmol, 문헌[Org. Lett., 2009, 11(9), 1999-2002]에 기술된 바와 같이 제조)을 1,4-디옥산 (4 mL)에 용해시키고, 물 (2 mL) 중의 탄산칼륨 (0.903 g, 6.54 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기시키고, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (0.126 g, 0.109 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 16 시간동안 100 ℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트로 분배하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 세번 추출하였다. 추출물을 합해 황산나트륨에서 건조시키고, 경사분리한 뒤, 농축하였다. 메틸렌 클로라이드중 0-10% MeOH의 구배 용출로 플래쉬 칼럼 크로마토그래피하여 생성물을 정제하였다 (670 mg, 91%). 1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.59 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.24 (d, 1H), 6.81 (d, 1H), 4.47 (dt, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.21 (dd, 1H), 3.10 (dd, 1H), 2.62-2.44 (m, 1H), 2.02-1.86 (m, 1H), 1.81-1.20 (m, 7H); LCMS (M+H)+: 337.0.
단계 2. (R)-3- 사이클로펜틸 -3-[4-(5- 요오도 -2- 메톡시 -7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴
Figure pat00040
테트라하이드로푸란 (20 mL) 중의 3-사이클로펜틸-3-[4-(2-메톡시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴 (0.532 g, 1.58 mmol)의 용액에 N-요오도숙신이미드 (0.36 g, 1.6 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 30 분동안 교반하고, 용매를 진공중에 제거하였다. 잔사를 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에서 헥산중 0-65% 에틸 아세테이트의 구배 용출로 정제하여 황색 고체 (250 mg, 34%)를 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.31 (br s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 4.34-4.21 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.14 (dd, 1H), 3.03-2.90 (m, 1H), 2.66-2.49 (m, 1H), 2.02-1.17 (m, 8H); LCMS (M+H)+: 463.0.
단계 3. (R)-4-[1-(2- 시아노 -1- 사이클로펜틸에틸 )-1H- 피라졸 -4-일]-2- 메톡시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일 아세테이트
Figure pat00041
아세트산 (3 mL) 중의 3-사이클로펜틸-3-[4-(5-요오도-2-메톡시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴 (0.25 g, 0.54 mmol)의 용액을 실버아세트산은 (0.27 g, 1.6 mmol)으로 처리하고, 16 시간동안 70 ℃로 가열하였다. 혼합물을 여과하여 MeCN으로 세척하고, 물을 여액에 첨가한 뒤, 혼합물을 20 분동안 교반하였다. 고체 염화나트륨을 이 용액에 첨가하였다. 이 수성 혼합물을 에틸 아세테이트로 세번 추출하여 생성물을 얻었다. 추출물을 합해 황산나트륨에서 건조시키고, 경사분리한 뒤, 농축하였다. 생성물의 일부를 추가의 정제없이 가수분해 단계 (단계 4)에 사용하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.87 (br s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 4.22 (dt, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.14 (dd, 1H), 2.94 (dd, 1H), 2.64-2.47 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.03-1.86 (m, 1H), 1.79-1.12 (m, 7H); LCMS (M+H)+: 395.1.
단계 4. (R)-3- 사이클로펜틸 -3-[4-(2- 하이드록시 -5-옥소-6,7- 디하이드로 -5H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판아미드
Figure pat00042
아세트산 (2 mL, 8 mmol) 중 4M HBr을 4-[1-(2-시아노-1-사이클로펜틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-2-메톡시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일 아세테이트 (0.050 g, 0.13 mmol)에 첨가하고, 반응물을 1 시간동안 교반하였다. 휘발물을 진공중에 제거하였다. 잔사를 재구성하고, 분취용 HPLC-MS (0.15% NH4OH를 함유하는 MeCN/H2O로 구배 용출)에 적용하여 정제된 생성물 (12 mg, 26%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, d6-DMSO): δ 9.20 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.49 (dt, 1H), 3.89 (s, 2H), 2.80 (dd, 1H), 2.64 (dd, 1H), 2.36-2.26 (m, 1H), 1.83-1.74 (m, 1H), 1.63-1.36 (m, 4H), 1.32-1.20 (m, 2H), 1.15-1.05 (m, 1H); LCMS (M+H)+: 357.0.
단계 5. (R)-3- 사이클로펜틸 -3-[4-(2- 하이드록시 -5-옥소-6,7- 디하이드로 -5H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴
트리에틸아민 (20 TL, 0.2 mmol)을 함유하는 메틸렌 클로라이드 (0.5 mL) 중의 3-사이클로펜틸-3-[4-(2-하이드록시-5-옥소-6,7-디하이드로-5H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판아미드 (0.006 g, 0.02 mmol)의 용액에 트리클로로아세틸 클로라이드 (20 TL, 0.2 mmol)를 첨가하였다. 반응이 완료되면, 분취용 HPLC-MS (0.15% NH4OH를 함유하는 MeCN/H2O)에 적용하여 정제된 생성물 (3 mg, 52%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 11.39 (br s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 4.68-4.59 (m, 1H), 3.94 (s, 2H), 3.19-3.15 (m, 2H), 2.42-2.30 (m, 1H), 1.86-1.75 (m, 1H), 1.69-1.20 (m, 6H), 1.18-1.05 (m, 1H); LCMS (M+H)+: 339.1.
실시예 2: (3 R )- 및 (3 S )-3-[( 1 R ,2 R )-2- 하이드록시사이클로펜틸 ]-3-[4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴 및 (3R)- 및 (3S)-3-[(1S,2S)-2-하이드록시사이클로펜틸]-3-[4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴
Figure pat00043
단계 1. ( 1S,2R )-에틸 2-( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 사이클로펜탄카복실레이트 및 (1R,2S)-에틸 2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)사이클로펜탄카복실레이트
Figure pat00044
N,N-디메틸포름아미드 (15 mL) 중의 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (0.524 g, 3.48 mmol) 및 1H-이미다졸 (0.473 g, 6.95 mmol)의 용액에 에틸 시스-2-하이드록시-1-사이클로펜탄카복실레이트 (라세미체, Acros) (0.50 g, 0.0032 mol)를 첨가하였다. 반응물을 16 시간동안 교반하였다. 추가의 이미다졸 (0.40 g, 5.8 mmol) 및 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (0.50 g, 3.3 mmol)를 나누어 첨가하고, 반응물을 24 시간동안 교반하였다. 생성물을 헥산으로 추출하였다. 추출물을 물로 세척하여 황산나트륨에서 건조시키고, 여과한 다음, 증발시켜 라세미 TBS-보호 하이드록시에스테르 (0.9 g)를 수득하고, 추가 정제없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.46 (ddd, 1H), 4.19 (dq, 1H), 4.01 (dq, 1H), 2.72 (dt, 1H), 2.22-2.11 (m, 1H), 1.96-1.49 (m, 5H), 1.26 (t, 3H), 0.84 (s, 9H), 0.03 (s, 3H), 0.01 (s, 3H).
단계 2. ( 1S,2R )-2-( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 사이클로펜탄카브알데하이드 및 (1R,2S)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)사이클로펜탄카브알데하이드
Figure pat00045
-78 ℃에서 헥산 (40 mL) 중의 단계 1로부터 얻은 (1S,2R)-에틸 2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)사이클로펜탄카복실레이트 및 (1R,2S)-에틸 2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)사이클로펜탄카복실레이트 (0.86 g, 3.2 mmol)의 용액에 톨루엔 (3.5 mL, 3.5 mmol) 중의 1.0M 디이소부틸알루미늄 하이드라이드의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 1 시간동안 교반하고, 메탄올 (2 mL)을 적가하여 이 온도를 해제하였다. 냉각을 중단하고, 혼합물을 주변 온도에 이르게 하였다. 로셸 염의 수용액을 첨가하였다. 2상 혼합물을 2 시간동안 격렬히 교반하고, 생성된 층을 분리하였다. 수성층을 헥산으로 한차례 추출하고, 에틸 아세테이트로 세번 추출하였다. 추출물을 합해 염수로 세척하여 황산나트륨에서 건조시키고, 경사분리한 뒤, 농축하여 라세미 알데하이드 생성물을 얻고, 추가 정제없이 사용하였다 (0.7 g, 97%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.74 (d, 1H), 4.62 (ddd, 1H), 2.68-2.61 (m, 1H), 2.22-2.11 (m, 1H), 1.95-1.83 (m, 1H), 1.80-1.57 (m, 4H), 0.85 (s, 9H), 0.05 (s, 3H), 0.04 (s, 3H).
단계 3. (E)- 및 (Z)-3-(( 1R,2R )-2-( tert - 부틸디메틸실릴옥시 } 사이클로펜틸)아크릴로니트릴 및 (E)- 및 (Z)-3-((1S,2S)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시}사이클로펜틸)아크릴로니트릴
Figure pat00046
톨루엔 (9 mL) 중의 (1S,2R)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)사이클로펜탄카브알데하이드 및 (1R,2S)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)사이클로펜탄카브알데하이드 (0.36 g, 1.6 mmol, 단계 2에서 수득한 것)의 용액에 (트리페닐포스포라닐리덴)아세토니트릴 (0.475 g, 1.58 mmol)을 첨가하고, 반응물을 2 시간동안 80 ℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 물을 첨가하였다. 생성물을 에틸 에테르로 세번 추출하였다. 추출물을 염수로 세척하여 황산나트륨에서 건조시키고, 경사분리한 뒤, 농축하여 E- 및 Z-올레핀 이성체의 라세미 혼합물을 얻고, 추가 정제없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.82 (dd, 1H, 트랜스 올레핀), 6.63 (dd, 1H, 시스 올레핀), 5.307 (dd, 1H, 트랜스 올레핀), 5.305 (dd, 1H, 시스 올레핀), 4.24 (ddd, 1H), 4.20 (ddd, 1H), 2.96-2.86 (m, 1H), 2.53-2.43 (m, 1H), 1.95-1.56 (m, 12H), 0.87 (s, 9H), 0.86 (s, 9H), 0.04-0.01 (단일선, 합하여 12H).
단계 4. (3R)- 및 (3S)-3-[( 1R,2R )-2- 하이드록시사이클로펜틸 ]-3-[4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴 및 (3R)- 및 (3S)-3-[(1S,2S)-2-하이드록시사이클로펜틸]-3-[4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴
아세토니트릴 (20 mL) 중의 (E)- 및 (Z)-3-((1R,2R)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)사이클로펜틸)아크릴로니트릴 및 (E)- 및 (Z)-3-((1S,2S)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)사이클로펜틸)아크릴로니트릴 (0.40 g, 1.6 mmol, 단계 3으로부터의 조 생성물)의 용액에 4-(1H-피라졸-4-일)-7-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.50 g, 1.6 mmol) 및 1,8-디아자비사이클로[5.4.0]운덱-7-엔 (DBU, 0.24 mL, 1.6 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2 시간동안 교반하고, DBU (0.24 mL, 1.6 mmol)를 추가하였다. 반응물을 3 일동안 교반하고, 농축하였다. 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (10-40% 에틸 아세테이트/헥산의 구배 용출)에 적용하여 생성물을 정제한 후, DCM중의 20% TFA로 3 시간 처리하고, 증발시킨 다음, 메탄올중 과량의 에틸렌디아민 용액으로 밤새 처리하였다. SEM 보호 그룹의 제거가 완료되면, EtOH/H2O/c.HCl(10:4:3 부피비)과 3 시간동안 교반하여 남은 모든 TBS 보호 그룹을 제거하였다. 완전 탈보호된 생성물을 분취용 HPLC-MS (0.15% NH4OH와 MeCN/H2O 구배)로 정제하였다. 모든 M+H=323 분획을 모으고, 증발시켰다 (약 80 mg). 생성물을 다음과 같은 일련의 키랄 크로마토그래피 정제에 적용하였다: Chiral Technologies Chiralcel OJ-H (3 × 25 cm, 5 Tm)에서 20% EtOH/80% 헥산을 25 mL/분의 유속으로 용출하여 피크 1 (19 mg)을 얻고, 다음의 마이너 피크는 수집하지 않았다; 피크 2 (60 mg), 피크 3 (6 mg). 피크 2는 혼합물로서, Chiral Technologies Chiralpak IA (2 × 25 cm, 5 Tm)에서 70% EtOH/30% 헥산을 8 mL/분 유속의 구배 용출로 3 성분으로 추가 분리되었다. 이들은 표지된 피크 2-1 (실행 2, 피크 1, 32 mg)로서, 생성물, 피크 2-2 (6.5 mg) 및 피크 2-3 (13.7 mg)의 혼합물이다. 피크 2-1을 Chiral Technologies Chiralpak IA (2 × 25 cm, 5 Tm)에서 25% EtOH/75% 헥산을 12 mL/분의 유속으로 구배 용출하여 3 성분을 분리하였다. 분리된 생성물은 표지된 피크 2-1-1 (10.5 mg); 2-1-2 (13 mg); 및 2-1-3 (2.3 mg)이었다.
피크 1: 1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 8.65 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.71 (ddd, 1H), 4.28 (br t, 1H), 3.26 (dd, 1H), 3.21 (dd, 1H), 2.53-2.45 (m, 1H), 1.98-1.73 (m, 3H), 1.62-1.47 (m, 2H), 1.38-1.29 (m, 1H); LCMS (M+H)+: 323.
피크 2-1- 1: 1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.64 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.90-4.78 (m, 1H), 3.64 (br t, 1H), 3.21 (dd, 1H), 3.07 (dd, 1H), 2.55-2.40 (m, 1H), 2.01-1.58 (m, 6H); LCMS (M+H)+: 323.
피크 2-1- 2: 1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 8.65 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.71 (ddd, 1H), 4.28 (br t, 1H), 3.26 (dd, 1H), 3.21 (dd, 1H), 2.53-2.45 (m, 1H), 1.98-1.73 (m, 3H), 1.62-1.48 (m, 2H), 1.38-1.26 (m, 1H); LCMS (M+H)+: 323.
피크 2- 3: 1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.64 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.48 (d, 1H), 6.93 (d, 1H), 4.90-4.78 (m, 1H), 3.64 (br t, 1H), 3.21 (dd, 1H), 3.07 (dd, 1H), 2.55-2.40 (m, 1H), 2.01-1.58 (m, 6H); LCMS (M+H)+: 323.
실시예 3: 라세미 3-(1- 하이드록시사이클로펜틸 )-3-[4-(7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴 트리플루오로아세테이트 염
Figure pat00047
단계 1. 1-[(트리메틸실릴)옥시]사이클로펜탄카브알데하이드
Figure pat00048
반응을 문헌[Tetrahedron, 50(9), 2821-30; 1994]에 기술된 것과 유사한 방법으로 수행하였다: -45 ℃에서 톨루엔 (18 mL) 중의 1-[(트리메틸실릴)옥시]사이클로펜탄카보니트릴 (2.25 g, 12.3 mmol, 문헌[Organometallics, 3(11), 1660-5; 1984]에 기술된 바와 같이 제조)의 용액에 헥산 (17.2 mL, 17.2 mmol) 중의 1.0M 디이소부틸알루미늄 하이드라이드를 적가하였다. 이어, 용액을 0 ℃로 가온하고, 이 온도에서 1 시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르 (25 mL)와 염화암모늄 (25 mL, 포화)의 혼합물에 부었다. 15 ℃에서 생성된 혼합물에 묽은 황산 용액 (진한 H2SO4 1.53 mL에 50 mL 물을 첨가하여 제조)을 첨가하였다. 이어서, 용액을 5 ℃의 온도에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 디에틸 에테르로 세번 추출하고, 추출물을 합해 염수로 세척한 다음, 황산나트륨에서 건조시키고, 경사분리한 뒤, 농축하여 생성물 (0.84 g, 36%)을 얻고, 추가 정제없이 단계 2에 사용하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.47 (s, 1H), 1.88-1.46 (m, 8H), 0.00 (s, 9H).
단계 2. (2E)- 및 (2Z)-3-{1-[( 트리메틸실릴 ) 옥시 ] 사이클로펜틸 }아크릴로니트릴
Figure pat00049
디에틸 시아노메틸포스포네이트 (0.912 mL, 5.64 mmol)를 0 ℃에서 테트라하이드로푸란 (10 mL) 중의 수소화나트륨 (0.198 g, 4.96 mmol) 현탁액에 적가하였다. 적가 후, 반응물을 실온으로 가온하고, 45 분동안 교반하였다. 혼합물을 0 ℃로 재냉각하고, 테트라하이드로푸란 (20 mL) 중의 1-[(트리메틸실릴)옥시]사이클로펜탄카브알데하이드 (0.84 g, 4.5 mmol)를 도입하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 2 시간동안 교반하였다. 반응물에 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하고, 층을 분리하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 두번 추출하였다. 유기 추출물을 합해 염수로 세척하고, 황산나트륨에서 건조시킨 뒤, 경사분리하고, 농축하여 생성물을 올레핀 이성체의 혼합물로 얻고, 추가 정제없이 단계 3에 사용하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.80 (d, 1H, 트랜스/주 생성물), 6.53 (d, 1H, 시스/마이너 생성물), 5.52 (d, 1H, 트랜스), 5.28 (d, 1H, 시스), 2.06-0.76 (m, 두 이성체에 대해 총 16H), 0.18 (s, 9H, 마이너 생성물), 0.13 (s, 9H, 주 생성물).
단계 3. 라세미 3-(1- 하이드록시사이클로펜틸 )-3-(4-(7-((2-( 트리메틸실릴 )에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴
Figure pat00050
아세토니트릴 (20 mL) 중의 (2E)- 및 (2Z)-3-{1-[(트리메틸실릴)옥시]사이클로펜틸}아크릴로니트릴 (0.94 g, 4.5 mmol) 및 4-(1H-피라졸-4-일)-7-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (1.4 g, 4.5 mmol)의 현탁액에 1,8-디아자비사이클로[5.4.0]운덱-7-엔 (0.67 mL, 4.5 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 6 일동안 교반하였다. 아세토니트릴을 증발시켰다. 비보호 알콜 및 TMS-보호된 알콜 생성물의 혼합물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에서 헥산중 0-80% 에틸 아세테이트 (890 mg, 44%)의 구배 용출을 이용하여 목적하는 비보호 알콜 생성물을 분리하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.87 (s, 1H), 8.56 (br s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 6.84 (d, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.40 (dd, 1H), 4.03 (s, 1H), 3.55 (dd, 2H), 3.46 (dd, 1H), 2.97 (dd, 1H), 2.04-1.27 (m, 8H), 0.93 (dd, 2H), -0.05 (s, 9H); LCMS (M+H)+: 453.1.
단계 4. 라세미 3-(1- 하이드록시사이클로펜틸 )-3-[4-(7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴 트리플루오로아세테이트 염
메틸렌 클로라이드 (4 mL) 및 트리플루오로아세트산 (1 mL) 중의 라세미 3-(1-하이드록시사이클로펜틸)-3-[4-(7-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]프로판니트릴 (0.100 g, 0.221 mmol)의 용액을 2 시간동안 교반한 다음, 용매를 증발시켰다. 잔사를 메탄올 (4.5 mL) 중에서 에틸렌디아민 (0.1 mL, 2 mmol)과 1 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 조 생성물을 메탄올에서 재구성하고, 분취용 HPLC-MS (0.15% NH4OH를 함유하는 아세토니트릴/H2O 구배로 일차 용출 수행, 이어 0.1% TFA를 함유하는 아세토니트릴/H2O 구배로 이차 용출 수행)를 이용하여 2 연속 크로마토그래피 단계로 정제하여 라세믹 생성물을 트리플루오로아세테이트 염으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 12.72 (br s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 4.80 (dd, 1H), 3.51 (dd, 1H), 3.22 (dd, 1H), 1.79-1.42 (m, 7H), 1.25-1.15 (m, 1H); LCMS (M+H)+: 323.1.
실시예 A
약동학 및 독성역학 조사와 관련하여 화합물 I의 투여 후, 인간, 래트 또는 개의 요, 혈장 또는 대변으로부터 대사물 1-39를 분리하였다. HPLC 방법을 이용하여 대사물을 분리한 후 대사물의 실체를 확인하였다. 사용 방법 및 상응하는 대사물의 체류 시간을 표 2에 나타내었다. 필요에 따라 구조적 정보를 밝히기 위해 텐덤(Tandem) MS/MS 분석 및 고차 MSn 실험을 행하였다.
화합물 I는 m/z 307에서 프로톤화된 분자 이온으로 입증되었고, 생성물 이온 스펙트럼은 m/z 266, 186 및 159에서 시그널을 나타내었다. m/z 266에서의 단편 이온은 카보니트릴 부분의 손실과 일치한다. m/z 186에서 진단 단편 이온은 온전한 사이클로펜틸프로판니트릴 부분이 손실되었음을 제시한다. m/z 159에서의 단편 이온은 화합물 I의 피라졸 환을 통한 절단과 함께 사이클로펜틸프로판니트릴이 손실되었음을 제시한다.
대사 화합물 1, 2, 27 및 29는 주로 인간 대상의 요에서 관찰되었으며, 미량 수준의 화합물 27 및 29가 혈장에서 관찰되었다. 풀 스캔(full scan) 질량 분석법으로 m/z 339에서 프로톤화된 분자 이온을 확인하였고, 이는 화합물 I의 비스-하이드록실화에 해당한다. 이들 m/z 339 이온의 생성물 이온 분열은 이들 대사물에 대해 m/z 321, 186, 159 및 154에서 관찰된 이온과 실질적으로 동일한 스펙트럼을 산출한다. m/z 321에서의 이온은 물 손실에 해당하며, 이는 적어도 하나의 하이드록실화가 사이클로펜틸 환에서 있었을 수 있음을 제시한다. m/z 186 및 m/z 159에서의 이온은 온전한 피라졸-피롤로피리미딘과 일치한다. m/z 154에서의 이온은 완전 비변형된 피라졸/피롤로피리미딘 부분의 중성 손실과 일치한다. m/z 298 및 m/z 280에서의 마이너 단편 이온은 용이한 물의 손실 수반 및 수반 없이 아세토니트릴 원소의 손실을 제시하며, 사이클로펜틸 부분에 대한 하이드록실화 위치를 추가로 제한한다. 이는 m/z 237에서의 이온으로 추가 입증되며, 변형된 사이클로펜틸이 없고 분자가 변형되지 않은 채로 남아 있는 것에 부합한다.
화합물 31은 인간 대상의 요에서 발견되었다. 풀 스캔 질량 분석법으로 m/z 339에서 프로톤화된 분자 이온을 확인하였고, 화합물 I에 32 amu 부가와 일치한다. m/z 339 이온의 생성물 이온 분열로 m/z 311, 218 및 191에서 단편 이온이 산출된다. m/z 218에서 일차 단편은 피라졸-피롤로피리미딘 부분에 32 amu 부가와 일치한다. m/z 191에서의 단편 이온은 추정상 비스 하이드록실화된 피라졸-피롤로피리미딘의 피라졸 부분으로부터 CHN이 손실된 것과 일치하며, 피롤로피리미딘에 대한 변형(들) 위치를 제한한다. m/z 311에서의 단편 이온은 아미드 결합의 초기 절단 후 피롤리디논으로부터 CO가 손실된 것에 기인한 것으로 여겨진다. 질량 분석법 단독을 이용한 화합물 31의 구조 할당으로는 결과가 확실치 않아, 화합물 31을 인간 요로부터 분리하여 1H 및 13C NMR로 분석하였다. 31의 구조는 화합물 I의 포화된 피롤로피리미딘 부분의 아미드-알콜 대사물로 확인되었다. 31의 프로톤 NMR 스펙트럼에 따르면 δ 3.56에 2H 강도의 단일선이 있었다. 이 단일선은 δ 177.9에서의 탄소와 장거리상관이 있으며 아미드와 일치한다. 또한, H3와 H9 사이에 핵오버하우저증강(nOe)이 일어난다.
화합물 32는 인간 대상으로부터의 혈장 및 요에서 발견되었다. 풀 스캔 질량 분석법으로 m/z 339에서 프로톤화된 분자 이온을 확인하였고, 이는 화합물 I에 32 amu 부가와 일치한다. m/z 339 이온의 생성물 이온 분열로 m/z 218 및 191에서 단편 이온이 산출된다. m/z 218에서 일차 단편은 피라졸-피롤로피리미딘 부분에 32 amu 부가와 일치한다. m/z 191에서의 단편 이온은 추정상 비스 하이드록실화된 피라졸-피롤로피리미딘의 피라졸 부분으로부터 CHN이 손실된 것과 일치하며, 피롤로피리미딘에 대한 변형(들) 위치를 제한한다. 질량 분석법 단독을 이용한 화합물 32의 구조 할당으로는 결과가 확실치 않아, 화합물 32를 인간 요로부터 분리하여 1H 및 13C NMR로 분석하였다. 32의 구조는 화합물 I의 포화된 피롤로피리미딘 부분의 케토-알콜 대사물로 확인되었다. 32의 프로톤 NMR 스펙트럼에 따르면 δ 3.82에 2H 강도의 단일선이 있었으며, 이 단일선은 δ 191.5에서의 탄소와 장거리상관이 있으며 케톤과 일치한다. H2로부터 다른 프로톤에 대한 핵오버하우저증강(nOe)은 없었다.
화합물 40은 인간 대상으로부터의 혈장 및 요에서 관찰되었다. 풀 스캔 질량 분석법으로 m/z 341에서 프로톤화된 분자 이온을 확인하였고, 이는 화합물 I에 32 amu의 부가와 일치한다. m/z 341 이온의 생성물 이온 분열로 m/z 323, 220, 202 및 175에서 단편 이온이 산출된다. m/z 323에서의 단편 이온은 피롤리딘 디올에서 물 손실로 일어난 것이다. m/z 220 및 202에서의 단편 이온은 용이한 물 손실의 수반 관찰 및 관찰없이 이중 하이드록실화된 포화 피롤로피리미딘과 일치한다. m/z 175에서 관찰된 이온은 용이한 수분 손실 후 이중 하이드록실화된 포화 피라졸 피롤로피리미딘 부분의 피라졸 부분으로부터 CHN이 손실된 것과 일치한다. 화합물 40은 3-사이클로펜틸-3-(4-(5,6-디하이드록시-6,7-디하이드로-5H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴로 확인되었다.
m/z 499가 관찰된 화합물 I의 단일 하이드록실화된 대사물의 콘쥬게이트가 인간의 요에서 관찰되었으며, 7개 콘쥬게이트중 2개가 또한 인간 혈장에서 미량 관찰되었다. 초기 생성물 이온 분열은 이들 대사물의 6개에 대해 m/z 323에서 관측된 이온과 실질적으로 동일한 스펙트럼을 산출하며, 글루쿠로나이드 콘쥬게이트 손실과 일치한다. 이들 m/z 323 단편 이온의 생성물 이온 분열 (MS3)이 다시 한번 m/z 305, 186 및 159에서의 단편 이온과 실질적으로 동일한 질량 스펙트럼을 보여주었다. m/z 305에서 확인된 단편 이온은 물 (18 amu) 손실과 일치하며, 하이드록실화에 이어 분자의 포화된 부분상에서 충돌로 유도된 분열을 제시하는 것이며, 사이클로펜틸 부분에 대한 변형 자리를 제한한다. m/z 186 및 m/z 159에서의 단편 이온은 비변형 피라졸-피롤로피리미딘과 일치한다. 추가의 마이너 단편 이온은 어떤 확실성을 배정하기에는 너무 약하다. 분리된 글루쿠로나이드 콘쥬게이트를 β-글루쿠로니다제로 가수분해하여 아글리콘을 유리시키고, 이를 HPLC-MS로 분석하여 이들 추정 대사물의 정체를 확인하였으며, 상기 유리된 아글리콘의 체류 시간 및 질량 스펙트럼은 단일 하이드록실화된 대사물 표준과 일치하였다. 이들 글루쿠로나이드 콘쥬게이트 대사물의 아글리콘은 2-하이드록실 대사물 (대사물 9, 표 1) 및 3-하이드록실 대사물 (대사물 8, 표 1)에 상응한다. 화합물 42인 7번째 글루쿠로나이드 콘쥬게이트 대사물의 아글리콘은 화합물 I의 피라졸-피롤로피리미딘 부분의 단일 하이드록실화된 대사물에 상응하며, 이는 인간 대상의 혈장 또는 요에서 독립적으로 관찰되지는 않았다. 풀 스캔 질량 분석법에 의해, m/z 323에서 프로톤화된 분자 이온이 입증되었고, 화합물 I에 16 amu 부가와 일치하는 것이다. m/z 323 이온의 생성물 이온 분열은 m/z 202에서 일차 단편을 산출하며, 이는 피라졸-피롤로피리미딘 부분에 16 amu 부가와 일치한다. m/z 175에서의 단편 이온은 추정상 하이드록실화된 피라졸-피롤로피리미딘의 피라졸 부분으로부터 CHN이 손실된 것과 일치하며, 피롤로피리미딘에 대한 변형(들) 위치를 제한한다. 대사 화합물 42의 구조는 화합물 I의 단일 하이드록실화된 피롤로피리미딘 부분의 글루쿠로나이드 콘쥬게이트로서 확인되었다.
대사 화합물 41이 인간 대상의 요에서 발견되었다. 풀 스캔 질량 분석법으로 m/z 583에서 프로톤화된 분자 이온을 확인하였고, 이는 비변형 화합물 I의 글루쿠로나이드 콘쥬게이션과 일치한다. m/z 583 이온의 생성물 이온 분열은 m/z 307에서 일차 단편을 산출하였으며, 이는 온전한 글루쿠로나이드가 손실된 것과 일치한다. m/z 186 및 m/z 159에서의 마이너 단편 이온은 화합물 I에 대해서 관찰된 것과 일치한다. m/z 307 단편 이온의 MS3 분열이 또한 m/z 186 및 m/z 159에서 단편 이온을 나타내었다. 화합물 41은 화합물　I의 N-연결 글루쿠로나이드 콘쥬게이트로서 인정된다.
Figure pat00051
Figure pat00052
Figure pat00053
방법 A1: 인간, 개 및 마우스의 혈장, 요 및 대변 샘플에서 14 C-화합물 I의 생체내 변화
대사물 프로파일링을 위한 샘플 준비:
혈장:
모든 대상으로부터의 혈장 샘플을 대상 및/또는 시점별로 모았다. 모은 혈장 샘플을 다음과 같이 HPLC-방사측정 분석용으로 준비하였다:
모은 혈장 샘플의 분취액을 먼저 HPLC-급 아세토니트릴중 약 2 당량(W/V) 부피의 1% 포름산으로 추출한 뒤, 격렬하게 와동시키고, 원심분리하여 변성 혈장 단백질을 제거하였다. 상등액을 제거하여 예비-컨디셔닝시킨 Waters C-18 고상 추출 캐트리지에 통과시키고, 여액을 보관하였다. SPE 캐트리지를 보관하였다. 잔류 혈장 펠렛을 HPLC-급 아세토니트릴/물 (90/10) 중 1% 포름산으로 3회 추출하고, 각각의 추출후 원심분리하였다. 모든 상등액을 보관하였다. 각 포름산/아세토니트릴/물 추출 상등액을 사용하여 SPE 캐트리지에 용출시켰다. 이어, SPE 캐트리지를 메탄올중의 1% 포름산으로 세척하였다. 모든 용리액을 수집하여 모으고, 30 ℃에서 질소 스트림하에 증발시켰다. 나머지 추출물을 수중 0.1% 포름산 약 0.6 ml에서 재구성하고, 와동시킨 다음, 원심분리하여 미립자 물질을 제거하였다. 그 다음에, 상등액을 HPLC-플로우 방사측정 및 HPLC-MS로 분석하였다.
요:
투여후 적절한 시간 간격에 상당하도록 각 대상으로부터 거의 동일량의 요 분취액을 모았다. HPLC-방사측정 분석전에, 모은 각 요 샘플을 10 분간 4,000 rpm으로 원심분리하여 미립자 물질을 제거한 후, 직접 분석하였다.
대변:
투여후 적절한 시간 간격에 상당하도록 각 대상으로부터 대변 균질 분취물을 모았다. 모은 대변 균질 샘플을 다음과 같이 HPLC-방사측정 분석용으로 준비하였다:
약 5 g의 대변 균질 분취물을 먼저 약 2 당량(W/V) 부피의 밀리포어수로 추출한 뒤, 원심분리하여 고형 물질을 제거하였다. 상등액은 남겨 예비-컨디셔닝시킨 Waters C-18 고상 추출 캐트리지에 통과시켰다. SPE 캐트리지를 보관하였다. 잔류 대변 펠렛을 HPLC-급 아세토니트릴/물 (90/10) 중 1% 포름산으로 3회 추출하고, 각각의 추출후 원심분리하였다. 모든 상등액을 보관하였다. 각 포름산/아세토니트릴/물 추출 상등액을 사용하여 SPE 캐트리지에 용출시켰다. 모든 용리액을 수집하여 모으고, 30 ℃에서 질소 스트림하에 증발시켰다. 나머지 추출물을 수중 약 2.0 ml의 0.1% 포름산에서 재구성하고, 와동시킨 다음, 원심분리하여 미립자 물질을 제거하였다. 그 다음에, 상등액을 HPLC-플로우 방사측정 및 HPLC-MS로 분석하였다.
HPLC-플로우 방사측정 분석 방법:
모든 샘플을 가능한 동일한 분석 시스템을 사용하여 HPLC-플로우 방사측정 또는 HPLC-MS 중 어느 하나로 분석하였다. HPLC-플로우 방사측정 시스템은 Agilent HP1100 시리즈 4원 펌프, 오토샘플러 및 500 ㎕ 액체 섬광 셀을 갖춘 Raytest Ramona-90 플로우 섬광 검출기가 연결된 UV 검출기로 구성되었다. 화합물 I 및 그의 대사물의 분리는 Waters Symmetry C-18 HPLC 칼럼, 4.6 × 250 mm, 5 ㎛ 입자 크기 HPLC 칼럼으로 행하였다. 이동상 "A"는 HPLC-급 물중의 0.1% 포름산으로 구성되고, 이동상 "B"는 HPLC-급 메탄올 /아세토니트릴 (1:1)로 구성되었다. 이동상 "B"를 선형 증가 구배로 이용하여 분석물 용출을 수행하였다. 필요에 따라 두가지 상이한 구배 용출 방법을 다양한 시간대에 사용하였다. 이들 두 방법에 대한 크로마토그래피 조건은 하기 표 3 및 4에 나타내었다.
HPLC-질량 분석법에 의한 분석 방법:
HPLC-플로우 방사측정 시스템은 Agilent HP1100 시리즈 4원 펌프 및 양이온 검출 모드로 작동하는 Applied Biosystem API 4000 Qtrap이 연결된 Leap Technologies CTC-PAL 오토샘플러로 구성되었다. 풀 스캔 (MS) 및 데이터 의존 생성물 이온 스캔 (MS2)을 이용하여 화합물 I의 대사물을 특정하였다. 선택적 MRM 전이가 또한 사전에 확인되고 특정된 대사물을 스캔하고 확인하기 위해서 이용되었다. 화합물 I 및 그의 대사물의 분리는 Waters Symmetry C-18 HPLC 칼럼, 4.6 × 250 mm, 5 ㎛ 입자 크기 HPLC 칼럼으로 행하였다. 이동상 "A"는 HPLC-급 물중의 0.1% 포름산으로 구성되고, 이동상 "B"는 HPLC-급 메탄올/아세토니트릴 (1:1)로 구성되었다. 이동상 "B"를 선형 증가 구배로 이용하여 분석물 용출을 수행하였다. 필요에 따라 두가지 상이한 구배 용출 방법을 다양한 시간대에 사용하였다. 이들 두 방법에 대한 크로마토그래피 조건은 하기 표 3 및 4에 나타내었다.
Figure pat00054
Figure pat00055
방법 A2: 화합물 I의 생체내 변환: 대사물 분리
인간 요로부터 대사물 분리:
20cc Waters HLB SPE 캐트리지 (흡착제 1 g)를 사용한 고상 추출로 모은 요 샘플로부터 화합물 I의 대사물을 농축하였다. 캐트리지를 먼저 100% HPLC 급 메탄올, 이어서 밀리포어수로 컨디셔닝하였다. 이어서, 캐트리지에 비가공 생뇨 최대 10 ml를 즉시 로딩하였다. 캐트리지를 여러가지 농도의 수중 HPLC 급 메탄올을 사용하여 연속 용출시켰다 (표 5).
Figure pat00056
초기 요, 최종 로딩 부피 및 모든 세척/용출 부피의 분취액에 대해서 LC-MS로 화합물 I 및 대상 대사물 존재에 대해 분석하였다. 어떤 로딩 부피 또는 세척/밀리포어수중 25% 이하 메탄올 용출에서도 유의적인 양의 화합물 I, 또는 그의 대사물은 존재하지 않았다. 100% 메탄올 용출 분취액에서 유의적인 양의 약물 또는 대사물이 관찰되지 않았다. 대상 대사물의 분획 수집을 위해 LC-MS 상에 연속 주입하기 전에, 제네박(Genevac) 원심분리 증발기를 사용하여 50% 및 75% 메탄올 용출로부터의 용출 부피를 각각 대폭 감소시키고, 최종 부피 약 2 mL로 재구성하였다.
분석 조건:
샘플을 Sil-HTC 오토샘플러 및 시스템 제어기로 구성된 Shimadzu 2원 HPLC 스택과 두개의 Sil 10ADVp 고압 LC 펌프가 연결된 Finnigan LCQ Deca XP를 사용하여 LC-MS로 분석하였다. 질량 분석기를 데이터 의존 스캐닝을 이용하여 양이온 검출 모드로 작동시켜 MS 및 데이터 의존 MS2 데이터를 산출하였다. Shimadzu UV 검출기, Sil SPD10 AVp를 254 nm의 검출 파장에서 사용하여 HPLC 용리액을 질량 분석기와 함께 관찰하였다.
이동상 "A"는 pH가 포름산 (약 0.1 부피%)으로 pH 3.2로 조정된 5 mM 포름산암모늄으로 이루어졌다. 이동상 "B"는 90% 아세토니트릴/10% 메탄올로 이루어졌다. HPLC 칼럼으로는 Zobax XDB C-18, 3.0 mm × 150 mm, 5.0 Tm 입자 크기를 사용하였다. 이동상 "B"를 선형적으로 증가 구배하여 분석물을 용출하였다. 분석 규모의 분석을 위한 크로마토그래피 조건을 하기 표 6에 나타내었다.
Figure pat00057
반분취용 분석 조건:
샘플을 다음과 같은 변형을 적용하여 상술된 LC-MS로 분석하였다:
HPLC 칼럼으로 Phenomenex Polar RP 10 mm × 150 mm 5 Tm 입자 크기를 사용하였다
"A" 상으로 중성 아세트산암모늄을 사용하여 초기 분류를 수행하고, 개별 수집된 피크의 제2 클린업 단계를 "A" 상으로서 수중 0.025% 포름산을 사용하여 수행하였다. 이동상 "B"는 90% 아세토니트릴/10% 메탄올로 이루어졌다.
분석물의 초기 용출 및 자동 분획 수집은 이동상 "B"를 선형적으로 증가 구배하여 행하였다. 초기 반분취용 분석을 위한 크로마토그래피 조건을 하기 표 7에 나타내었으나, %B는 필요에 따라서 제2 클린업 단계에서 각 개별 대사물에 대해 최적화되었다.
Figure pat00058
* 제2 분류 단계에서 각 개별 대사물에 대해 최적화됨.
반분취 분석물의 용리제 스트림을 PEEK 티(tee) 및 튜빙(tubing)을 이용하여 분리하였는데, 약 1.65 ml/분의 용리제 스트림이 분획 수집을 위해 이용되었으며, 나머지는 질량 분석기로 보냈다. 용리제 스트림 조성을 MS 및 선택적 MS-MS 실험으로 관찰하였다. 분획 수집기와 함께 디버트 밸브(divert valve)를 이용하여 해당 분석물을 함유하는 분획을 자동 수집하였다.
방법 A3: 인간 및 래트의 혈장 및 요 샘플에서 화합물 I의 생체내 변환
샘플 준비:
화합물 I를 경구 투여한 동물 및 인간 대상으로부터의 혈장 및 요 샘플을 구해 단일 용량 및/또는 다중 용량 연구를 행하였다. 각 대상의 잔여 혈장 샘플을 시간가중평균 풀링으로 모았다. 모은 혈장 샘플 분취액 (150 ㎕)을 2 부피의 아세토니트릴로 침전시키고, 와동 혼합한 후, 원심분리하였다. 상등액을 제거하고, LC-MS 분석에 사용하였다. 인간에 대해, 임상 조사 1 일 (단일 용량 조사) 및 10 일 (다중 용량 조사)에 0-12 시간에 해당하도록 연구중인 각 개체로부터 인간 요 샘플을 모았다. 분석전에 요 샘플을 10 분간 ~15000 × g로 원심분리하고 직접 주입하였다.
샘플 분석:
샘플을 Thermo Finnigan LCQ Deca-XP + 이온-트랩 질량 분석기 (Thermo-Fisher Scientific Waltham MA, USA)를 갖추고 양이온화 방식으로 작동하는 전자분무이온화 LC-MS를 사용하여 분석하였다. 데이터 의존 스캐닝을 이용하여 초기 MS-MS2 데이터를 생성하였다. 필요에 따라 구조적 정보를 밝히기 위해 고차 MSn 실험을 행하였다. 질량 분석기를 Shimadzu LC-10A 2원 구배 펌프 시스템 (Shimadzu Scientific Instruments, Columbia, MD, USA)이 연결된 Shimadzu Sil HT-C 결합 오토샘플러/제어기에 결합하였다. 구배 조건은 표 8에 나타내었다. Zorbax XDB C-18 HPLC 칼럼 (3.0 × 150 mm, 3.5 ㎛) (Agilent, SantClara, CA USA)에서 이동상을 300 ㎕/분의 유속으로 사용하여 화합물 I 및 그의 대사물을 분리하였다. 이동상 "A"는 pH가 포름산으로 pH 3.2로 조정된 밀리포어수중의 5 mM 포름산암모늄으로 이루어졌다. 이동상 "B"는 90% 아세토니트릴/10% 메탄올로 이루어졌다.
Figure pat00059
방법 A4: 래트 담즙, 혈장 및 요의 대사물 특정 방법
화합물 I를 투여한 래트로부터 요, 대변 및 담즙 샘플을 모았다. 각 시점에 각 샘플의 약 30%를 모아 한 래트로부터 배출된 용량의 90%가 단일 샘플내에 함유되도록 하였다. 각 래트로부터의 샘플을 별도로 분석하였다. 대변 샘플을 아세토니트릴로 추출하고, 추출물의 액체 섬광 계수 (LSC)와, 비추출 펠렛의 연소 및 LSC로 추출 회수율을 측정하였다. 이용가능한 경우, 대사물 표준을 이용하여 구조를 확인하였다. 달리 언급이 없으면, 투여 용량의 5% 미만에 해당하는 피크는 보고하지 않았다.
요, 대변, 담즙 및/또는 혈장 샘플을 HPLC 및 질량 분석법으로 분석하여 방사물질로 표지된 대사물의 분자량을 측정하고 이들 대사물의 구조 정보를 구하였다.
방법 A5: 분리 방법
화합물 I의 약동학 및 독성역학 연구 요 샘플을 동일 종의 개별 동물, 즉 개 또는 래트별로 함께 모았다.　요 샘플을 에틸 아세테이트로 1:1의 부피비로 3회 추출하였다.　에틸 아세테이트 추출 분획을 모으고, 로타뱁(rotavap)을 이용하여 휘발물질을 제거하였다.　생성된 잔사를 아세토니트릴:물 (1:1 v/v)에 용해시키고, 용액을 분취용 HPLC로 정제하였다. 이후 세가지 HPLC 조건을 순차적으로 사용하여 각 대사물을 분리하였다.
수중 0.1% TFA (용매 A) 및 아세토니트릴중 0.1% TFA (용매 B)로 구성된 이동상을 Zobax SB C18 칼럼 (19 × 150 mm, 5 Tm)에서 20 분간 5% - 60% 용매 B 구배로 15 mL/분의 유속으로 사용하여 농축 추출물을 정제하였다.
1. 수중 0.1% TFA (용매 A) 및 메탄올 (용매 B)로 구성된 이동상을 Zobax SB C18 칼럼 (9.6 × 150 mm, 5 Tm)에서 25 분간 5% - 95% 용매 B 구배로 4 mL/분의 유속으로 사용하여 일차 HPLC 정제로부터 수집한 분획을 추가로 정제하였다.
2. [M+H]+가 321 및 323인, 이차 정제로부터 수집한 각 분획을 15% 에탄올 및 85% 헥산 또는 30% 에탄올 및 70% 헥산으로 구성된 이동상을 키랄 칼럼 (ChiralCel OD-H, 20 × 250 mm, 5 Tm)에서 15 mL/분의 유속으로 사용하여 키랄상 분리하였다.
방법 A6: 분석 방법
40 ℃ 칼럼 온도의 Zorbax SB C18 칼럼 (4.6 × 150 mm, 80Å, 3.5 Tm)에서 수중 0.05% TFA (용매 A) 및 아세토니트릴중의 0.05% TFA (용매 B)로 구성된 이동상을 표 9에 나타낸 구배 용출 방안에 따라 1 mL/분의 유속으로 사용하여 HPLC 분석함으로써 35, 37 및 38에 대한 체류 시간을 구하였다. 인라인 UV 검출을 220 nm에서 수행하였다.
Figure pat00060
방법 A7: 대체 분석 방법
Waters Atlantis® T-3 HPLC 칼럼 (4.6 × 150 mm, 3.5 ㎛) (Waters Corporation, Milford, MA, USA)에서 이동상을 400 ㎕/분의 유속으로 사용하여 HPLC 분석함으로써 40, 41 및 42에 대한 체류 시간을 구하였다. 이동상 "A"는 pH가 포름산으로 pH 3.2로 조정된 5 mM 포름산암모늄으로 이루어졌다. 이동상 "B"는 100% 메탄올로 이루어졌다. 초기 이동상 조건은 90% 이동상 "A"/10% 이동상 "B"를 1 분간 27% 이동상 "B"로 단계적 구배하는 것으로 구성된다. 이어 초기 구배를 선형 방식에 의해 52% 이동상 "B"로 57 분 진행한 후, 95% 이동상 "B"로 10 분간 이차 선형 구배를 진행한다. 95% 이동상 "B"로 5 분 칼럼 세척 시간이 이어진 후, 출발 조건으로 되돌리고, 다음 분석 주입전에 8 분 칼럼 재평형이 이어졌다. 칼럼 용리액 100%를 λ254 nm를 추적하는 시마주(Shimadzu) 고정 파장 UV 검출기, SPD-10Avp (Shimadzu Scientific Instruments, Columbia, MD, USA)에 통과시켰다. UV 검출기를 통과하면, 용리액 스트림을 용리액 약 100 ㎕가 전자분무 이온화를 통해 질량 분석기에 도입되도록 PEEK 티로 분리하였다. 전자분무원 전압을 4.5 kV로, 모세관 온도를 325 ℃로, 시스(sheath) 및 스윕(sweep) 가스를 각각 50 및 30 (임의 단위)으로 설정하였다. 초기 데이터 의존 MS/MS 세팅은 2.0 amu의 분리폭 및 42의 충돌 에너지 세팅을 포함한다. 그밖의 다른 모든 장비 세팅 및 전위는 화합물 I에 대해 최대 시그널 대 노이즈 비가 되도록 최적화하였다
방법 A8: 화합물 I의 글루쿠로나이드 대사물의 효소적 가수분해
화합물 I의 분리된 글루쿠로나이드 콘쥬게이트 대사물을 β-글루쿠로니다제와 함께 모든 경우 반응 진행이 완료될 때까지 인큐베이션하여 조합된 아글리콘을 수득하고, 상술된 것과 동일한 LC-MS 방법으로 분석하였다. 유리된 아글리콘의 체류 시간 및 질량 스펙트럼을 화합물 I의 단일 하이드록실화 대사물 표준에 대한 체류 시간 및 질량 스펙트럼과 비교하여 콘쥬게이트의 정체를 밝혔다.
실시예 B:
분자량 323의 대사물 샘플을 하이드록실 함유 대사물로 간주하고, Isotec에서 입수한 200 ㎕의 CD3OD에 용해시켰다. 분자량 321의 샘플을 케톤 부분을 함유하는 것으로 간주하고, Isotec에서 입수한 200 ㎕의 CDCl3에 용해시켰다. 상술된 것 이외의 분자량을 갖는 샘플은 Isotec에서 입수한 200 ㎕의 DMSO-d6에 용해시켰다. 용해 후, 각 샘플을 Wilmad Glass에서 입수한 3 mm NMR 튜브에 놓았다. 분석 직전에 샘플을 준비하였다.
1H에 대해 500 MHz 및 13C에 대해 125 MHz에서 작동하는 Varian INOVA NMR 분광계를 사용하여 샘플을 분석하였다. 3 mm 삼중 공명 역검출 구배 프로브가 이용되었다. 샘플은 모든 데이터 획득이 일어나는 시간동안 30 ℃에서 유지하였다. 각 샘플에 프로브를 끼워 삽입하였다. 기타 NMR 실험을 수행하여 구조를 결정하는데 필요한 데이터를 얻었다.
화합물 31 1H(500 MHz, DMSO-D6): δ 8.58 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 4.47 (td, 1H), 3.56 (s, 2H), 3.18 (dd, 1H), 3.13 (dd, 1H), 2.35 (m, 1H), 1.79 (m, 2H), 1.59-1.39 (m, 4H), 1.29 (m, 2H).
화합물 32 1H(500 MHz, DMSO-D6): δ 9.24 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 4.56 (td, 1H), 3.82 (s, 2H), 3.17 (dd, 1H), 3.11 (dd, 1H), 2.35 (m, 1H), 1.79-1.12 (m, 4H), 1.61-1.45 (m, 4H).
화합물 35 1H(500 MHz, DMSO-D6): δ 12.25 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.08 (m, 1H), 4.93 (dd, J=11.6, 3.3, 1H), 3.76 (d, J=4.8, 1H), 3.52 (dd, J=17.2, 11.7, 1H), 3.08 (dd, J=17.4, 3.6), 2.04 (m, 1H), 1.76 (m,1H), 1.63 (m, 1H), 1.54 (m, 2H), 0.95 (m, 1H).
화합물 37 1H(500 MHz, CDCl3): δ 8.71 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 4.22 (td, J=9.6, 3.7, 1H), 3.71 (s, 2H), 3.09 (dd, J=17.0, 9.1, 1H), 2.91 (dd, J=16.8, 3.7, 1H), 2.55 (m, 1H), 1.94 (m, 1H), 1.80-1.45 (m, 5H), 1.27 (m, 1H), 1.19 (m, 1H).
화합물 38 1H(500 MHz, DMSO-D6): δ 11.35 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 4.55 (td, J=9.8, 3.8, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.79 (s, 2H), 3.19 (dd, J=16.9, 9.5, 1H), 3.13 (dd, J=17.5, 4.5, 1H), 2.39 (m, 1H), 2.01 (m, 1H), 1.58 (m, 1H), 1.48-1.07 (m, 4H).
실시예 C:
대사물 1 내지 39의 활성 데이터와 유리 분획 및 고유 클리어런스 데이터를 모 화합물인 화합물 I와 비교하였다. JAK 활성 검정, 유리 분획 검정 및 고유 클리어런스 검정에 대해서는 후술한다. 대사물 1 내지 39의 개별 입체이성체에 대한 데이터 점을 수득할 수 있다. 대사물은 화합물 I와 같이 JAK1, JAK2 및 JAK3의 강력한 억제제이다.
시험관내 JAK 키나제 검정
본 원에 기재된 화합물을 문헌[참조: Park et al., Analytical Biochemistry 1999, 269, 94-104]에 기재된 시험관내 검정에 따라 JAK 표적의 억제 활성에 대해 시험하였다. N-말단 His 태그를 가진 인간 JAK1(a.a. 837-1142), JAK2(a.a. 828-1132) 및 JAK3(a.a. 781-1124)의 촉매 도메인을 곤충 세포에서 바큘로바이러스를 사용하여 발현시키고, 정제하였다. JAK1, JAK2 또는 JAK3의 촉매 활성을 비오티닐화된 펩타이드의 인산화를 측정하여 검정하였다. 인산화된 펩타이드를 동종 시간 분해 형광법(HTRF)으로 검출하였다. 화합물의 IC50을 100 mM NaCl, 5 mM DTT 및 0.1 mg/mL(0.01%) BSA를 함유하는 50 mM 트리스(pH 7.8) 완충제 중에 효소, ATP 및 500 nM 펩타이드를 함유하는 반응에서 각 키나제에 대해 측정하였다. 반응에서 ATP 농도는 JAK1에 대해 90 μM, JAK2에 대해 30 μM, JAK3에 대해 3 μM이다. 반응을 실온에서 1 시간동안 수행한 다음, 검정 완충제(Perkin Elmer, Boston, MA) 중의 45 mM EDTA, 300 nM SA-APC, 6 nM Eu-Py20 20 ㎕로 정지시켰다. 유로퓸 표지된 항체에 대한 결합이 40 분동안 일어났으며, HTRF 시그널을 퓨젼 플레이트 리더(Fusion plate reader; Perkin Elmer, Boston, MA) 상에서 측정하였다. 상기 언급된 임의의 JAK 표적에 대해 10 μM 이하의 IC50을 갖는 화합물을 활성적인 것으로 간주하였다.
유리 분획 검정
시험 화합물의 단백질 결합을 하버드 장치(Harvard Apparatus; Holliston, MA)로부터의 디아놈 시스템(Dianorm system)을 사용하여 평형 투석으로 측정하였다. 투석은 37 ℃에서 2 시간동안 인간 혈청에서 수행하였다. 대사물을 3 μM로 배양하고, 화합물 I를 3 μM 및 10 μM로 배양하였다. 투석-후 혈청 및 완충제 중의 화합물 농도를 LC/MS/MS 분석으로 측정하였다. 유리 분획을 완충제 대 혈청 농도의 비율로서 정의하였다.
고유 클리어런스 검정
고유 클리어런스는 37 ℃에서 1 mM NADPH의 존재하에 인간 혼합된 성별 간 마이크로솜(0.5 mg/㎖ 단백질) 중에서 시험 화합물 1 μM을 배양함으로써 측정하였다. 시험 화합물의 사라짐을 0, 5, 10, 20 및 30 분에 LC/MS로 모니터링하였다. 화합물 농도에서 감소 기울기를 문헌에 보고된 표준 방법을 사용하여 인간 고유 클리어런스를 계산하는데 사용하였다.
당업자라면, 상기 설명을 통해 본 원에 기술된 것 외에, 본 발명의 다양한 변형예들을 명확히 파악할 수 있을 것이다. 이러한 변형 또한 하기 청구범위에 포함하고자 한다. 본 명세서에 인용된 각 참조 문헌들은 그 전체가 본 원에 참고로 원용된다.

Claims (18)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염:
    Figure pat00061

    상기 식에서,
    n개의 C-H 그룹은 각각 독립적으로 C-OH로 대체되거나; 또는
    하나의 CH2 그룹이 독립적으로 C=O로 대체되거나; 또는
    하나의 C-H 그룹이
    Figure pat00062

    로 대체되거나; 또는
    두개의 C-H 그룹이 각각 독립적으로 C-OH로 대체되고, 하나의 C-H 그룹은
    Figure pat00063

    로 대체되고;
    n은 1, 2, 3, 또는 4이나;
    단,
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-옥소사이클로펜틸)프로판니트릴;
    및 이들의 약학적으로 허용되는 염중에서 선택되는 화합물은 제외된다.
  2. 제1항에 있어서, 시아노 그룹에 대해 알파 위치인 탄소원자는 C-OH 또는 C=O 그룹으로 대체되지 않으며; 시아노 그룹에 대해 베타 위치인 탄소원자는 C-OH 그룹으로 대체되지 않는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, n개의 C-H 그룹이 각각 독립적으로 C-OH로 대체된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, n이　1인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, n이　2인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, n이　3인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, n이　4인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  8. 제1항 또는 제2항에 있어서, 하나의 CH2 그룹이 독립적으로 C=O로 대체된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  9. 제1항 또는 제2항에 있어서, 하나의 C-H 그룹이
    Figure pat00064

    로 대체된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  10. 제1항 또는 제2항에 있어서, 하나의 포화된 C-H 그룹이
    Figure pat00065

    로 대체된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  11. 제1항 또는 제2항에 있어서, 두개의 C-H 그룹이 각각 독립적으로 C-OH로 대체되고, 하나의 C-H 그룹은
    Figure pat00066

    로 대체된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  12. 제1항에 있어서,
    6-(3-(1-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-2-시아노에틸)사이클로펜틸옥시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1,2-디하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴; 및
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴 중에서 선택되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  13. 제1항에 있어서,
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸-3-하이드록시프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸-2-하이드록시프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(5-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(3-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(4-(5-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(4-(6-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(4-(2-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1,2-디하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1,3-디하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-2-하이드록시-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-하이드록시-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(3-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(2-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(5-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(6-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(5-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-2-하이드록시-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2,3-디하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2,4-디하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2,5-디하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-하이드록시-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(3-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(2-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(5-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(6-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(5-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-2-하이드록시-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3,4-디하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-하이드록시-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(5-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(3-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(2-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(5-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(6-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(3-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(2-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(5-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(6-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(3-하이드록시사이클로펜틸)프로판니트릴;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-사이클로펜틸-2,3-디하이드록시프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-하이드록시-3-(3-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-하이드록시-3-(4-(2-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-하이드록시-3-(4-(5-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-하이드록시-3-(4-(6-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-하이드록시-3-(5-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-2-하이드록시-3-(3-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-2-하이드록시-3-(4-(2-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-2-하이드록시-3-(4-(5-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-2-하이드록시-3-(4-(6-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-2-하이드록시-3-(5-하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(3,5-디하이드록시-4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(3-하이드록시-4-(2-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(3-하이드록시-4-(5-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(3-하이드록시-4-(6-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(4-(2,5-디하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(4-(2,6-디하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(4-(5,6-디하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(5-하이드록시-4-(2-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(5-하이드록시-4-(5-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(5-하이드록시-4-(6-하이드록시-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    2-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-2-사이클로펜틸아세틸 시아나이드;
    3-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(2-옥소사이클로펜틸)프로판니트릴;
    6-(1-(1-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-2-시아노에틸)사이클로펜틸옥시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산;
    6-(1-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-2-시아노-1-사이클로펜틸에톡시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산;
    6-(2-(1-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-2-시아노에틸)사이클로펜틸옥시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산;
    6-(2-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-1-시아노-2-사이클로펜틸에톡시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산; 및
    6-(3-(1-(4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)-2-시아노에틸)사이클로펜틸옥시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산중에서 선택되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  14. 3-사이클로펜틸-3-(4-(2,6-디옥소-3,5,6,7-테트라하이드로-2H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(4-(2-하이드록시-6-옥소-6,7-디하이드로-5H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(4-(6-옥소-6,7-디하이드로-5H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-(3-하이드록시사이클로펜틸)-3-(4-(6-옥소-6,7-디하이드로-5H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴;
    3-사이클로펜틸-3-(4-(5,6-디하이드록시-6,7-디하이드로-5H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴; 및
    6-(4-(1-(2-시아노-1-사이클로펜틸에틸)-1H-피라졸-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산 중에서 선택되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  15. 6-(4-(1-(2-시아노-1-사이클로펜틸에틸)-1H-피라졸-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일옥시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산;
    6-(4-(1-(2-시아노-1-사이클로펜틸에틸)-1H-피라졸-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-일옥시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산;
    6-(4-(1-(2-시아노-1-사이클로펜틸에틸)-1H-피라졸-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일옥시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산; 및
    6-(4-(1-(2-시아노-1-사이클로펜틸에틸)-1H-피라졸-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일옥시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산 중에서 선택되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 실질적으로 분리된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  17. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염 및 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물.
  18. 제17항에 있어서, 경구 투여용으로 적합한 조성물.
KR1020177023122A 2009-10-09 2010-10-08 3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체 KR101921850B1 (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US25038709P 2009-10-09 2009-10-09
US61/250,387 2009-10-09
US31621810P 2010-03-22 2010-03-22
US61/316,218 2010-03-22
PCT/US2010/052011 WO2011044481A1 (en) 2009-10-09 2010-10-08 Hydroxyl, keto, and glucuronide derivatives of 3-(4-(7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1h-pyrazol-1-yl)-3-cyclopentylpropanenitrile

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020127009995A Division KR101805936B1 (ko) 2009-10-09 2010-10-08 3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020187033300A Division KR20180126619A (ko) 2009-10-09 2010-10-08 3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20170098334A true KR20170098334A (ko) 2017-08-29
KR101921850B1 KR101921850B1 (ko) 2018-11-23

Family

ID=43037845

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020127009995A KR101805936B1 (ko) 2009-10-09 2010-10-08 3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체
KR1020177023122A KR101921850B1 (ko) 2009-10-09 2010-10-08 3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체
KR1020187033300A KR20180126619A (ko) 2009-10-09 2010-10-08 3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020127009995A KR101805936B1 (ko) 2009-10-09 2010-10-08 3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020187033300A KR20180126619A (ko) 2009-10-09 2010-10-08 3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체

Country Status (14)

Country Link
US (3) US8486902B2 (ko)
EP (1) EP2486041B1 (ko)
JP (3) JP5946768B2 (ko)
KR (3) KR101805936B1 (ko)
CN (2) CN102596960B (ko)
BR (1) BR112012008267B1 (ko)
CA (1) CA2777114C (ko)
EA (1) EA021478B1 (ko)
ES (1) ES2435491T3 (ko)
HK (1) HK1174899A1 (ko)
MX (1) MX2012004180A (ko)
PL (1) PL2486041T3 (ko)
PT (1) PT2486041E (ko)
WO (1) WO2011044481A1 (ko)

Families Citing this family (63)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY162590A (en) 2005-12-13 2017-06-30 Incyte Holdings Corp Heteroaryl substituted pyrrolo[2,3-b] pyridines and pyrrolo[2,3-b] pyrimidines as janus kinase inhibitors
CL2008001709A1 (es) 2007-06-13 2008-11-03 Incyte Corp Compuestos derivados de pirrolo [2,3-b]pirimidina, moduladores de quinasas jak; composicion farmaceutica; y uso en el tratamiento de enfermedades tales como cancer, psoriasis, artritis reumatoide, entre otras.
EP3495369B1 (en) 2007-06-13 2021-10-27 Incyte Holdings Corporation Use of salts of the janus kinase inhibitor (r)-3-(4-(7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1h- pyrazol-1-yl)-3- cyclopentylpropanenitrile
CL2009001884A1 (es) * 2008-10-02 2010-05-14 Incyte Holdings Corp Uso de 3-ciclopentil-3-[4-(7h-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1h-pirazol-1-il)propanonitrilo, inhibidor de janus quinasa, y uso de una composición que lo comprende para el tratamiento del ojo seco.
JOP20190230A1 (ar) 2009-01-15 2017-06-16 Incyte Corp طرق لاصلاح مثبطات انزيم jak و المركبات الوسيطة المتعلقة به
MX2011012262A (es) 2009-05-22 2012-01-25 Incyte Corp 3-[4-(7h-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1h-pirazol-1-il] octano-o heptano-nitrilo como inhibidores de cinasas janus (jak).
EA025520B1 (ru) 2009-05-22 2017-01-30 Инсайт Холдингс Корпорейшн N-(ГЕТЕРО)АРИЛПИРРОЛИДИНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРАЗОЛ-4-ИЛ-ПИРРОЛО[2,3-d]ПИРИМИДИНОВ И ПИРРОЛ-3-ИЛ-ПИРРОЛО[2,3-d]ПИРИМИДИНОВ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ЯНУС-КИНАЗЫ
TW201113285A (en) 2009-09-01 2011-04-16 Incyte Corp Heterocyclic derivatives of pyrazol-4-yl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidines as janus kinase inhibitors
PT2486041E (pt) * 2009-10-09 2013-11-14 Incyte Corp Derivados hidroxilo, ceto e glucuronido de 3-(4-(7h-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1h-pirazol-1-il)-3-ciclopentil-propanonitrilo
EA023444B1 (ru) * 2010-02-18 2016-06-30 Инсайт Холдингс Корпорейшн Циклобутановые и метилциклобутановые производные, композиции на их основе и способы их применения
SI3354652T1 (sl) * 2010-03-10 2020-08-31 Incyte Holdings Corporation Derivati piperidin-4-il azetidina kot inhibitorji JAK1
SG10201910912TA (en) 2010-05-21 2020-01-30 Incyte Corp Topical Formulation for a JAK Inhibitor
BR112013012502A2 (pt) 2010-11-19 2019-03-06 Incyte Corporation pirrolopiridina ciclobutil substituída e derivados de pirrolopirimidina derivativos como inibidores de jak
US9034884B2 (en) 2010-11-19 2015-05-19 Incyte Corporation Heterocyclic-substituted pyrrolopyridines and pyrrolopyrimidines as JAK inhibitors
WO2012112847A1 (en) 2011-02-18 2012-08-23 Novartis Pharma Ag mTOR/JAK INHIBITOR COMBINATION THERAPY
MY165963A (en) 2011-06-20 2018-05-18 Incyte Holdings Corp Azetidinyl phenyl, pyridyl or pyrazinyl carboxamide derivatives as jak inhibitors
EP2741747A1 (en) 2011-08-10 2014-06-18 Novartis Pharma AG JAK P13K/mTOR COMBINATION THERAPY
TW201313721A (zh) 2011-08-18 2013-04-01 Incyte Corp 作為ｊａｋ抑制劑之環己基氮雜環丁烷衍生物
UA111854C2 (uk) 2011-09-07 2016-06-24 Інсайт Холдінгс Корпорейшн Способи і проміжні сполуки для отримання інгібіторів jak
US9089574B2 (en) 2011-11-30 2015-07-28 Emory University Antiviral JAK inhibitors useful in treating or preventing retroviral and other viral infections
US9193733B2 (en) 2012-05-18 2015-11-24 Incyte Holdings Corporation Piperidinylcyclobutyl substituted pyrrolopyridine and pyrrolopyrimidine derivatives as JAK inhibitors
EA201590272A1 (ru) 2012-07-27 2015-05-29 Рациофарм Гмбх Пероральные дозированные формы для модифицированного высвобождения, содержащие руксолитиниб
SG10201703533VA (en) 2012-11-01 2017-06-29 Incyte Corp Tricyclic fused thiophene derivatives as jak inhibitors
SG11201503695XA (en) 2012-11-15 2015-06-29 Incyte Corp Sustained-release dosage forms of ruxolitinib
US20160123982A1 (en) 2013-02-04 2016-05-05 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for assaying jak2 activity in red blood cells and uses thereof
EA030705B1 (ru) 2013-03-06 2018-09-28 Инсайт Холдингс Корпорейшн Способы и промежуточные соединения при получении ингибитора jak
PE20160126A1 (es) 2013-05-17 2016-02-24 Incyte Corp Derivados del bipirazol como inhibidores jak
ES2792549T3 (es) 2013-08-07 2020-11-11 Incyte Corp Formas de dosificación de liberación sostenida para un inhibidor de JAK1
AU2015253192B2 (en) 2014-04-30 2019-05-16 Incyte Holdings Corporation Processes of preparing a JAK1 inhibitor and new forms thereto
WO2015184305A1 (en) 2014-05-30 2015-12-03 Incyte Corporation TREATMENT OF CHRONIC NEUTROPHILIC LEUKEMIA (CNL) AND ATYPICAL CHRONIC MYELOID LEUKEMIA (aCML) BY INHIBITORS OF JAK1
JP6149810B2 (ja) * 2014-06-13 2017-06-21 株式会社島津製作所 代謝物解析システム及び代謝物解析方法
ES2921875T3 (es) 2014-08-11 2022-09-01 Acerta Pharma Bv Combinaciones terapéuticas de un inhibidor BTK, un inhibidor PD-1 y/o un inhibidor PD-L1
HRP20211813T1 (hr) 2014-08-11 2022-03-04 Acerta Pharma B.V. Terapeutske kombinacije inhibitora btk i inhibitora bcl-2
TW201618773A (zh) 2014-08-11 2016-06-01 艾森塔製藥公司 Ｂｔｋ抑制劑、ｐｉ３ｋ抑制劑、ｊａｋ－２抑制劑、及／或ｃｄｋ４／６抑制劑的治療組合物
CN105777754B (zh) * 2014-12-16 2019-07-26 北京赛林泰医药技术有限公司 吡咯并嘧啶化合物
LT3380486T (lt) 2015-11-24 2020-05-11 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Jak inhibitoriaus junginio provaistai, skirti virškinimo trakto uždegiminės ligos gydymui
CN107513067A (zh) * 2016-06-16 2017-12-26 北京赛林泰医药技术有限公司 含有取代环戊基的吡咯并嘧啶化合物
CN107759623B (zh) * 2016-08-23 2020-08-14 苏州旺山旺水生物医药有限公司 Jak抑制剂的中间体及其制备方法
US10472366B2 (en) 2017-03-08 2019-11-12 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Glucuronide prodrugs of tofacitinib
WO2018167283A1 (en) 2017-03-17 2018-09-20 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the diagnosis and treatment of pancreatic ductal adenocarcinoma associated neural remodeling
EP3610264A1 (en) 2017-04-13 2020-02-19 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the diagnosis and treatment of pancreatic ductal adenocarcinoma
CN108794480A (zh) * 2017-04-28 2018-11-13 天津药物研究院有限公司 吡咯并嘧啶类化合物、其制备方法和用途
CA3063963A1 (en) * 2017-05-23 2018-11-29 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Glucuronide prodrugs of janus kinase inhibitors
WO2018217699A1 (en) 2017-05-23 2018-11-29 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Thiocarbamate prodrugs of tofacitinib
US10596161B2 (en) 2017-12-08 2020-03-24 Incyte Corporation Low dose combination therapy for treatment of myeloproliferative neoplasms
PL3746429T3 (pl) 2018-01-30 2022-06-20 Incyte Corporation Procesy do otrzymywania (1-(3-fluoro-2-(trifluorometylo)izonikotynoilo)piperydyn-4-onu)
SG11202007805SA (en) 2018-02-16 2020-09-29 Incyte Corp Jak1 pathway inhibitors for the treatment of cytokine-related disorders
US11584961B2 (en) 2018-03-30 2023-02-21 Incyte Corporation Biomarkers for inflammatory skin disease
WO2019191684A1 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Incyte Corporation Treatment of hidradenitis suppurativa using jak inhibitors
MX2020010815A (es) 2018-04-13 2020-12-11 Incyte Corp Biomarcadores para enfermedad de injerto contra hospedero.
KR102653681B1 (ko) 2018-07-31 2024-04-03 록쏘 온콜로지, 인코포레이티드 (s)-5-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)-1h-피라졸-4-카르복스아미드의분무-건조된 분산물 및 제제
KR20210074291A (ko) 2018-09-06 2021-06-21 아레나 파마슈티칼스, 인크. 자가면역 및 염증성 장애의 치료에 유용한 화합물
US11324749B2 (en) 2018-10-31 2022-05-10 Incyte Corporation Combination therapy for treatment of hematological diseases
WO2020092015A1 (en) 2018-11-02 2020-05-07 University Of Rochester Therapeutic mitigation of epithelial infection
EP3898615A1 (en) 2018-12-19 2021-10-27 Array Biopharma, Inc. 7-((3,5-dimethoxyphenyl)amino)quinoxaline derivatives as fgfr inhibitors for treating cancer
CN113490666A (zh) 2018-12-19 2021-10-08 奥瑞生物药品公司 作为fgfr酪氨酸激酶的抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
CN110538183B (zh) * 2019-10-09 2021-05-04 吉林大学 一种预防和治疗小儿湿疹的组合物及其制备方法
KR20220107213A (ko) 2019-11-22 2022-08-02 인사이트 코포레이션 Alk2 억제제 및 jak2 억제제를 포함하는 병용 요법
US11685731B2 (en) 2020-06-02 2023-06-27 Incyte Corporation Processes of preparing a JAK1 inhibitor
US11833155B2 (en) 2020-06-03 2023-12-05 Incyte Corporation Combination therapy for treatment of myeloproliferative neoplasms
EP4200278A1 (en) 2020-08-18 2023-06-28 Incyte Corporation Process and intermediates for preparing a jak1 inhibitor
CR20230129A (es) 2020-08-18 2023-07-13 Incyte Corp Proceso e intermediarios para preparar un inhibidor de jak
KR20230118118A (ko) 2020-12-08 2023-08-10 인사이트 코포레이션 백반증의 치료를 위한 jak1 경로 저해제

Family Cites Families (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3036390A1 (de) 1980-09-26 1982-05-13 Troponwerke GmbH & Co KG, 5000 Köln Neue pyrrolo-pyrimidine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung bei der herstellung von biologischen wirkstoffen
US5521184A (en) 1992-04-03 1996-05-28 Ciba-Geigy Corporation Pyrimidine derivatives and processes for the preparation thereof
CN1105113C (zh) 1995-07-05 2003-04-09 纳幕尔杜邦公司 杀真菌嘧啶酮
SI9620103A (sl) 1995-07-06 1998-10-31 Novartis Ag Pirolopirimidini in postopki za njihovo pripravo
SK18542000A3 (sk) 1998-06-04 2001-12-03 Abbott Laboratories Protizápalové zlúčeniny inhibujúce bunkovú adhéziu
US6232320B1 (en) 1998-06-04 2001-05-15 Abbott Laboratories Cell adhesion-inhibiting antiinflammatory compounds
PA8474101A1 (es) 1998-06-19 2000-09-29 Pfizer Prod Inc Compuestos de pirrolo [2,3-d] pirimidina
ID26698A (id) 1998-06-19 2001-02-01 Pfizer Prod Inc SENYAWA-SENYAWA PIROLO [2,3-d] PIRIMIDINA
ATE459616T1 (de) 1998-08-11 2010-03-15 Novartis Ag Isochinoline derivate mit angiogenesis-hemmender wirkung
US6133031A (en) 1999-08-19 2000-10-17 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense inhibition of focal adhesion kinase expression
GB9905075D0 (en) 1999-03-06 1999-04-28 Zeneca Ltd Chemical compounds
DK1235830T3 (da) * 1999-12-10 2004-03-29 Pfizer Prod Inc Pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-forbindelser som proteinkinaseinhibitorer
CN1615873A (zh) 1999-12-24 2005-05-18 阿文蒂斯药物有限公司 氮杂吲哚类化合物
GB0004890D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
US6335342B1 (en) 2000-06-19 2002-01-01 Pharmacia & Upjohn S.P.A. Azaindole derivatives, process for their preparation, and their use as antitumor agents
ATE465756T1 (de) 2000-06-23 2010-05-15 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Antitumoreffekt-verstärker
EE200200711A (et) 2000-06-26 2004-06-15 Pfizer Products Inc. Pürrolo[2,3-d]pürimidiinühendid kui immunosupressiivsed vahendid
CN1321628C (zh) 2000-06-28 2007-06-20 史密斯克莱·比奇曼公司 湿磨方法
GB0100622D0 (en) 2001-01-10 2001-02-21 Vernalis Res Ltd Chemical compounds V111
EP1363702A4 (en) 2001-01-30 2007-08-22 Cytopia Pty Ltd PROCESS FOR INHIBITING KINASES
US7301023B2 (en) 2001-05-31 2007-11-27 Pfizer Inc. Chiral salt resolution
US6852727B2 (en) 2001-08-01 2005-02-08 Merck & Co., Inc. Benzimisazo[4,5-f]isoquinolinone derivatives
DE60230890D1 (de) 2001-09-19 2009-03-05 Aventis Pharma Sa Indolizine als kinaseproteinhemmer
IL161156A0 (en) 2001-10-30 2004-08-31 Novartis Ag Staurosporine derivatives as inhibitors of flt3 receptor tyrosine kinase activity
GT200200234A (es) 2001-12-06 2003-06-27 Compuestos cristalinos novedosos
TW200403058A (en) 2002-04-19 2004-03-01 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclo inhibitors of potassium channel function
PE20040522A1 (es) 2002-05-29 2004-09-28 Novartis Ag Derivados de diarilurea dependientes de la cinasa de proteina
GB0215676D0 (en) 2002-07-05 2002-08-14 Novartis Ag Organic compounds
CA2506773A1 (en) 2002-11-04 2004-05-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Heteroaryl-pyramidine derivatives as jak inhibitors
AR042052A1 (es) 2002-11-15 2005-06-08 Vertex Pharma Diaminotriazoles utiles como inhibidores de proteinquinasas
EP1572213A1 (en) 2002-11-26 2005-09-14 Pfizer Products Inc. Method of treatment of transplant rejection
UA80767C2 (en) 2002-12-20 2007-10-25 Pfizer Prod Inc Pyrimidine derivatives for the treatment of abnormal cell growth
US7407962B2 (en) 2003-02-07 2008-08-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Heteroaryl compounds useful as inhibitors or protein kinases
GB0305929D0 (en) 2003-03-14 2003-04-23 Novartis Ag Organic compounds
SE0301372D0 (sv) 2003-05-09 2003-05-09 Astrazeneca Ab Novel compounds
SE0301373D0 (sv) 2003-05-09 2003-05-09 Astrazeneca Ab Novel compounds
US20050043346A1 (en) 2003-08-08 2005-02-24 Pharmacia Italia S.P.A. Pyridylpyrrole derivatives active as kinase inhibitors
PE20050952A1 (es) 2003-09-24 2005-12-19 Novartis Ag Derivados de isoquinolina como inhibidores de b-raf
BRPI0416909A (pt) 2003-11-25 2007-01-16 Pfizer Prod Inc método de tratamento de aterosclerose
CA2549485A1 (en) 2003-12-17 2005-07-07 Pfizer Products Inc. Pyrrolo [2,3-d] pyrimidine compounds for treating transplant rejection
US20050165029A1 (en) 2004-01-13 2005-07-28 Ambit Biosciences Corporation Pyrrolopyrimidine derivatives and analogs and their use in the treatment and prevention of diseases
PL2332940T3 (pl) 2004-03-30 2013-03-29 Vertex Pharma Azaindole użyteczne jako inhibitory JAK i innych kinaz białkowych
US7558717B2 (en) 2004-04-28 2009-07-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystal structure of human JAK3 kinase domain complex and binding pockets thereof
US20060106020A1 (en) 2004-04-28 2006-05-18 Rodgers James D Tetracyclic inhibitors of Janus kinases
JP2007536310A (ja) 2004-05-03 2007-12-13 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト Ｓ１ｐ受容体アゴニストおよびｊａｋ３キナーゼ阻害剤を含む、組合せ剤
WO2005110410A2 (en) 2004-05-14 2005-11-24 Abbott Laboratories Kinase inhibitors as therapeutic agents
PE20060426A1 (es) 2004-06-02 2006-06-28 Schering Corp DERIVADOS DE ACIDO TARTARICO COMO INHIBIDORES DE MMPs, ADAMs, TACE Y TNF-alfa
WO2006013114A1 (en) 2004-08-06 2006-02-09 Develogen Aktiengesellschaft Use of a timp-2 secreted protein product for preventing and treating pancreatic diseases and/or obesity and/or metabolic syndrome
MY179032A (en) 2004-10-25 2020-10-26 Cancer Research Tech Ltd Ortho-condensed pyridine and pyrimidine derivatives (e.g.purines) as protein kinase inhibitors
UY29177A1 (es) 2004-10-25 2006-05-31 Astex Therapeutics Ltd Derivados sustituidos de purina, purinona y deazapurina, composiciones que los contienen métodos para su preparación y sus usos
AU2005309019A1 (en) 2004-11-24 2006-06-01 Novartis Ag Combinations of JAK inhibitors and at least one of Bcr-Abl, Flt-3, FAK or RAF kinase inhibitors
AR054416A1 (es) 2004-12-22 2007-06-27 Incyte Corp Pirrolo [2,3-b]piridin-4-il-aminas y pirrolo [2,3-b]pirimidin-4-il-aminas como inhibidores de las quinasas janus. composiciones farmaceuticas.
KR101390563B1 (ko) * 2005-01-31 2014-04-30 밀란 인크. 글루쿠로니드화된 네비볼롤
KR20070104641A (ko) 2005-02-03 2007-10-26 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 단백질 키나제의 억제제로 유용한 피롤로피리미딘
US7019626B1 (en) * 2005-03-03 2006-03-28 Omnitek Engineering, Inc. Multi-fuel engine conversion system and method
MX2007014619A (es) 2005-05-20 2009-02-13 Vertex Pharma Pirrolopiridinas de utilidad como inhibidores de proteina quinasa.
US20070049591A1 (en) 2005-08-25 2007-03-01 Kalypsys, Inc. Inhibitors of MAPK/Erk Kinase
EP1926735A1 (en) 2005-09-22 2008-06-04 Incyte Corporation Tetracyclic inhibitors of janus kinases
AU2006297351A1 (en) 2005-09-30 2007-04-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Deazapurines useful as inhibitors of janus kinases
MY162590A (en) * 2005-12-13 2017-06-30 Incyte Holdings Corp Heteroaryl substituted pyrrolo[2,3-b] pyridines and pyrrolo[2,3-b] pyrimidines as janus kinase inhibitors
JP2009521504A (ja) 2005-12-22 2009-06-04 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション Ａｋｔ活性阻害剤
BRPI0706537A2 (pt) 2006-01-17 2011-03-29 Vertex Pharma azaindóis úteis como inibidores de janus cinases
MX2008012860A (es) 2006-04-05 2009-01-07 Vertex Pharma Desazapurinas de utilidad como inhibidores de janus cinasas.
US8513270B2 (en) 2006-12-22 2013-08-20 Incyte Corporation Substituted heterocycles as Janus kinase inhibitors
CL2008001709A1 (es) 2007-06-13 2008-11-03 Incyte Corp Compuestos derivados de pirrolo [2,3-b]pirimidina, moduladores de quinasas jak; composicion farmaceutica; y uso en el tratamiento de enfermedades tales como cancer, psoriasis, artritis reumatoide, entre otras.
EP3495369B1 (en) * 2007-06-13 2021-10-27 Incyte Holdings Corporation Use of salts of the janus kinase inhibitor (r)-3-(4-(7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1h- pyrazol-1-yl)-3- cyclopentylpropanenitrile
SI2288610T1 (sl) * 2008-03-11 2016-11-30 Incyte Holdings Corporation Derivati azetidina in ciklobutana kot inhibitorji jak
CL2009001884A1 (es) * 2008-10-02 2010-05-14 Incyte Holdings Corp Uso de 3-ciclopentil-3-[4-(7h-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1h-pirazol-1-il)propanonitrilo, inhibidor de janus quinasa, y uso de una composición que lo comprende para el tratamiento del ojo seco.
JOP20190230A1 (ar) * 2009-01-15 2017-06-16 Incyte Corp طرق لاصلاح مثبطات انزيم jak و المركبات الوسيطة المتعلقة به
EA025520B1 (ru) * 2009-05-22 2017-01-30 Инсайт Холдингс Корпорейшн N-(ГЕТЕРО)АРИЛПИРРОЛИДИНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРАЗОЛ-4-ИЛ-ПИРРОЛО[2,3-d]ПИРИМИДИНОВ И ПИРРОЛ-3-ИЛ-ПИРРОЛО[2,3-d]ПИРИМИДИНОВ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ЯНУС-КИНАЗЫ
TW201113285A (en) * 2009-09-01 2011-04-16 Incyte Corp Heterocyclic derivatives of pyrazol-4-yl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidines as janus kinase inhibitors
PT2486041E (pt) * 2009-10-09 2013-11-14 Incyte Corp Derivados hidroxilo, ceto e glucuronido de 3-(4-(7h-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1h-pirazol-1-il)-3-ciclopentil-propanonitrilo
EA023444B1 (ru) * 2010-02-18 2016-06-30 Инсайт Холдингс Корпорейшн Циклобутановые и метилциклобутановые производные, композиции на их основе и способы их применения

Also Published As

Publication number Publication date
PL2486041T3 (pl) 2014-01-31
CA2777114C (en) 2018-10-23
EP2486041B1 (en) 2013-08-14
US9512161B2 (en) 2016-12-06
KR101921850B1 (ko) 2018-11-23
EA201200565A1 (ru) 2012-09-28
WO2011044481A1 (en) 2011-04-14
US8486902B2 (en) 2013-07-16
CN102596960B (zh) 2016-01-20
HK1174899A1 (ko) 2013-06-21
US20110086810A1 (en) 2011-04-14
US8748401B2 (en) 2014-06-10
JP2016056183A (ja) 2016-04-21
PT2486041E (pt) 2013-11-14
ES2435491T3 (es) 2013-12-19
CN105541847B (zh) 2019-08-16
EA021478B1 (ru) 2015-06-30
EP2486041A1 (en) 2012-08-15
AU2010303245A1 (en) 2012-05-10
JP5946768B2 (ja) 2016-07-06
CA2777114A1 (en) 2011-04-14
JP2017226695A (ja) 2017-12-28
MX2012004180A (es) 2012-07-17
US20140378400A1 (en) 2014-12-25
KR101805936B1 (ko) 2017-12-07
JP2013507390A (ja) 2013-03-04
US20130345157A1 (en) 2013-12-26
JP6251232B2 (ja) 2017-12-20
CN102596960A (zh) 2012-07-18
CN105541847A (zh) 2016-05-04
BR112012008267A2 (ko) 2021-11-03
KR20180126619A (ko) 2018-11-27
KR20120102604A (ko) 2012-09-18
BR112012008267B1 (pt) 2022-10-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101921850B1 (ko) 3-（4-（7Ｈ-피롤로〔2,3-ｄ〕피리미딘-4-일）-1Ｈ-피라졸-1-일）-3-사이클로펜틸프로판니트릴의 하이드록실, 케토 및 글루쿠로나이드 유도체
US10463667B2 (en) Metabolites of the janus kinase inhibitor (R)-3-(4-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-3-cyclopentylpropanenitrile
AU2010303245B2 (en) Hydroxyl, keto, and glucuronide derivatives of 3-(4-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-3-cyclopentylpropanenitrile

Legal Events

Date Code Title Description
A107 Divisional application of patent
AMND Amendment
AMND Amendment
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant