KR20170021351A - 히알루론산과 무기 나노입자를 기재로 하는 항종양 조성물, 그 제조 방법 및 용도 - Google Patents

히알루론산과 무기 나노입자를 기재로 하는 항종양 조성물, 그 제조 방법 및 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20170021351A
KR20170021351A KR1020177002613A KR20177002613A KR20170021351A KR 20170021351 A KR20170021351 A KR 20170021351A KR 1020177002613 A KR1020177002613 A KR 1020177002613A KR 20177002613 A KR20177002613 A KR 20177002613A KR 20170021351 A KR20170021351 A KR 20170021351A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
nanoparticles
composition
hyaluronan
spion
acylated
Prior art date
Application number
KR1020177002613A
Other languages
English (en)
Inventor
다니엘라 스메즈카로바
크리스티나 네스포로바
마르티나 테플라
야쿠프 시로바트카
글로리아 후에르타-앤젤레스
마르티나 포스피실로바
비트 마투스카
지리 므라제크
안드레아스 갈리소바
다니엘 지라크
블라디미르 벨레브니
Original Assignee
콘티프로 에이.에스.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 콘티프로 에이.에스. filed Critical 콘티프로 에이.에스.
Publication of KR20170021351A publication Critical patent/KR20170021351A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/728—Hyaluronic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A61K9/1075—Microemulsions or submicron emulsions; Preconcentrates or solids thereof; Micelles, e.g. made of phospholipids or block copolymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/26—Iron; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/30—Zinc; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
    • A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
    • A61K49/10—Organic compounds
    • A61K49/12—Macromolecular compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
    • A61K49/18—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes
    • A61K49/1806—Suspensions, emulsions, colloids, dispersions
    • A61K49/1809—Micelles, e.g. phospholipidic or polymeric micelles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
    • A61K49/18—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes
    • A61K49/1818—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles
    • A61K49/1821—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles
    • A61K49/1824—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised nanoparticles
    • A61K49/1827—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised nanoparticles having a (super)(para)magnetic core, being a solid MRI-active material, e.g. magnetite, or composed of a plurality of MRI-active, organic agents, e.g. Gd-chelates, or nuclei, e.g. Eu3+, encapsulated or entrapped in the core of the coated or functionalised nanoparticle
    • A61K49/1833—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised nanoparticles having a (super)(para)magnetic core, being a solid MRI-active material, e.g. magnetite, or composed of a plurality of MRI-active, organic agents, e.g. Gd-chelates, or nuclei, e.g. Eu3+, encapsulated or entrapped in the core of the coated or functionalised nanoparticle having a (super)(para)magnetic core coated or functionalised with a small organic molecule
    • A61K49/1839—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised nanoparticles having a (super)(para)magnetic core, being a solid MRI-active material, e.g. magnetite, or composed of a plurality of MRI-active, organic agents, e.g. Gd-chelates, or nuclei, e.g. Eu3+, encapsulated or entrapped in the core of the coated or functionalised nanoparticle having a (super)(para)magnetic core coated or functionalised with a small organic molecule the small organic molecule being a lipid, a fatty acid having 8 or more carbon atoms in the main chain, or a phospholipid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
    • A61K49/18—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes
    • A61K49/1818—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles
    • A61K49/1887—Agglomerates, clusters, i.e. more than one (super)(para)magnetic microparticle or nanoparticle are aggregated or entrapped in the same maxtrix
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5115—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

본 발명은, 소수성화된 히알루로난과 올레산에 의해 안정화된 무기 나노입자를 포함하는 항종양 조성물에 관한 것이다. 아실화 히알루로난 형태의 소수성화된 히알루로난은 조성물에서 무기 나노입자에 대한 담체로서 제공된다. 조성물은, 무기 나노입자들 중에서 초상자성 나노입자, ZnO 나노입자 및 아울러 업-컨버전 나노입자를 포함할 수 있다. 본 조성물은 현탁 및 부착성 종양 세포주, 특히 결장직장 암종 및 선암종, 폐 암종, 간세포암 및 유방 선암종의 종양 세포주에 대해 선택적으로 세포독성을 나타낸다. 최대 세포독성 효과는 히알루로난의 올레일 유도체와 SPION을 포함하는 조성물에서 관찰되었다. 또한, 아실화 히알루로난과 SPION으로 된 조성물 역시 체내, 바람직하게는 종양 또는 간내 조성물의 축적으로 인 비보 (in vivo)로 검출하는데 유익하게 사용될 수 있다. 본 조성물은 최종 제품 형태로 멸균처리 가능하다.

Description

히알루론산과 무기 나노입자를 기재로 하는 항종양 조성물, 그 제조 방법 및 용도 {ANTITUMOR COMPOSITION BASED ON HYALURONIC ACID AND INORGANIC NANOPARTICLES, METHOD OF PREPARATION THEREOF AND USE THEREOF}
본 발명은 종양 질환을 치료하는데 사용될 수 있는 히알루론산을 기재로 하는 조성물에 관한 것이다. 이 조성물은, 히알루론산의 소수성화된 유도체 (hydrophobized derivative) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 올레산을 이용해 안정화된 나노입자, 바람직하게는 초상자성 철 나노입자, 아연 나노입자 또는 업-컨버전 (up-conversion) 나노입자를 포함하는, 폴리머 나노마이셀 (polymeric nanomicell)을 포함한다.
종양 질환의 치료에는, 신체 전역으로 분산되는 시스템인 약제 물질을 환자에게 정맥내 또는 경구로 투여하는, 화학요법이 가장 흔히 사용된다. 그러나, 항종양 물질은 종양 세포 뿐만 아니라 건강한 세포에도 매우 유해하다. 그래서, 전신 분산의 결과로, 종양 질환이 발생된 부위 뿐 아니라 건강한 조직과 세포 영역에도 항종양 치료제는 독성을 발휘하게 된다. 더욱이, 약물의 비-선택적인 분산은 종양 세포에 최종적으로 도달하는 약제 물질의 양을 감소시켜, 치료의 유효성을 떨어뜨린다.
전술한 측면들로 인해, 종양 세포에 대한 화학요법의 효능은 강화하면서 동시에 치료제의 부적절한 전신 독성은 억제할 수 있는, 적절한 전략을 발굴하는데 엄청난 관심이 쏠리고 있다. 약물이 담체 시스템의 매트릭스에 병합되면, 약제 물질의 부적절한 부작용이 상당 수준 억제되고, 때로는 심지어 소거되는 것으로 밝혀졌다. 이런 목적으로, 연구는 담체 시스템을 종양 세포로 타겟팅하는 것을 목표로 한다.
오늘날, 타겟팅에 사용되는 가장 일반적인 전략은 2가지이다. 그 중 한가지는 종양 조직의 투과성과 체류성 증가가 적용되는 소위 수동 타겟팅 (passive targeting)을 기초로 한다 (소위 EPR 효과) (Maeda, 2001). 종양 세포는, 건강한 조직과는 반대로, 나노미터 크기의 분자를 혈류에서 종양으로 취해할 수 있게 하는 천공된 혈관 구조가 특징적이다. 그러나, 수동 타겟팅은, 다른 요인들 외에도, 종양 세포가 약제 물질을 가진 담체 시스템을 포착하는데 다소 비-효율적이고 비-특이적인 한계가 있다 (Duncan & Gaspar, 2011; El-Dakdouki, Pure & Huang, 2013). 그러나, 만일 담체 시스템이 수동 타겟팅에 적합한 크기를 가진다면, 이런 타겟팅 방법은 담체의 다른 특성들로 인한 해당 치료제의 종양 세포에 대한 항종양 효과 강화를 겸비할 수 있다. 예를 들어, 특허 출원 WO2008/130121은 수용액에서 폴리머 마이셀을 형성하는 종양-선택적인 생분해성 사이클로트리포스파젠-플래티늄 (II) 접합체를 청구하는데, 이것은 US2001/6333422의 비슷한 접합체와 비교해 종양 조직에 대한 수동 타겟팅에 있어 선택성 강화를 보인다. 수동 타겟팅에서 종양 세포의 선택성 강화는, 또한, 신속하게 절단되는 에스테르 페놀 결합에 의해 결합된 약제 물질 (SN-38, PI-103, 에토포시드 (etoposide), 펜레티니드 (phenretinide))과 레티노에이트의 접합체를 포함하는 페길화된 생분해성 나노입자를 개시한, 특허 출원에도 언급되어 있다. 이들 양자 모두에서, 선택성 강화는 유사 시스템과 비교하는 경우 실험 데이타를 기초로 검출되었다.
약물의 타겟팅, 즉 선택성 작용을 보다 효과적이게 하기 위한 또 다른 방법은, 치료제를 종양 세포의 표면에 위치한 수용체에 고친화성인 리간드에 의해 변형시켰을 때 가능하다 (Duncan & Gaspar, 2011; Ruoslahti, Bhatia & Sailor, 2010). 2번째 전략은 능동 타겟팅이라고 하는데, 종양 세포로의 선택적인 치료제 공급을 보장하여야 한다. 그 예로는, LPL 수용체 발현이 증가된 흑색종 세포에 대한 선택적인 거동이 검출된, 티아졸리디논 아미드와 티아졸리디닌 아미드의 카르복시산 유도체를 청구하고 있는, US2007/0155807에 개시된 해법이 예시될 수 있다. 이 해법과 이와 유사한 해법의 문제점은, LPL 수용체가 건강한 세포, 예를 들어 심근세포에서도 물론 발현되어, 건강한 조직에도 역시 선택적으로 작용할 수 있다는 것이다. 이 해법과 이와 유사한 다른 해법(예, WO 2012/173677, US 2013/02742200)의 또 다른 문제점은, 종양 세포 수용체의 발현이 시기 및 환자에 따라 가변적이라는 것이다 (Duncan & Gaspar, 2011). 능동 타겟팅용으로 선택된 결합된 리간드는 종양 질환의 특정 단계의 세포에만 효과가 있거나 또는 일부 환자에만 효과가 있을 수 있다.
능동 타겟팅의 또 다른 가능성은, 시스템이 공유결합으로 또는 비-공유결합으로 결합된 자기 나노입자를 포함하는 경우에, 외부 자기장을 이용하여 담체 시스템을 타겟팅하는 것이다. 이 경우, 바람직하게는 초상자성 나노입자 (SPION)가 사용될 수 있다. 가장 일반적으로는, 이것은 임의의 의도된 약리학적 기능이 없는 MRI 비활성 조영 수단으로서 간주되는 Fe3O4 나노입자이다 (Huang et al., 2013). 지금까지 SPION과 관련하여 세포내 내재화된 후 단기 또는 장기 독성은 보고된 바 없다 (Huang et al., 2013). SPION은, MRI 조영 및 자기 타겟팅 외에도, 세포 증식 억제제로서 또는 기타 약제 물질과 조합하여 담체로서 사용될 수 있다. 다른 바람직한 용도는 SPION이 교번 자기장 에너지를 흡수하여 이를 열로 변환하는 자기장 온열치료 (magnetic fluid hyperthermia)이다. 따라서, SPION이 위치된 영역의 온도를 선택적으로 승온시키는 것이 가능하다. SPION이 종양 영역에 위치한다면, 종양 세포가 건강한 세포 보다 훨씬 온도에 민감하기 때문에 승온된 온도를 이용해 종양 세포를 파괴할 수 있다 (Laurent, Dutz, Hafeli & Mahmoudi, 2011).
치료제의 선택성을 강화하기 위해, 수동 타겟팅 또는 능동 타겟팅과 조합하여, 건강한 세포와 비교되는 종양 세포의 몇가지 구분되는 특성들이 사용된다 (Fleige, Quadir & Haag, 2012). 이러한 특성으로는, 예를 들어, 더 높은 산성 pH 또는 활성 산소 형태 (ROS)의 농도 증가가 있다. 특허 출원 US2013/0230542는 ROS가 존재하는 환경에서 활성화되는 치료 성분 (페놀 유도체)을 개시하고 있는데, 즉 ROS 농도가 증가된 종양 세포에서 선택적으로 작용할 것이다. 이런 해법의 문제점은 ROS 농도 증가가 건강한 특정 세포에서도 물론 이루어진다는 점이다. 그 예가, 고수준의 ROS로 인해 파고좀 (phagozome)에서 병원체 소거가 이루어지는, 대식세포이다. 또한, 증가된 ROS 농도는 다른 세포들에서는 저산소증에 대한 천연 방어 기전으로서, 그리고 또한 다수의 생리학적 기능에 작용하는 신호 분자로서 기능한다.
문헌에 따르면, 시험관내에서 일부 타입의 종양 세포에 항종양 방식으로 작용하는 점에서 기대되는 항종양 조성물들이 있다. 그 예는 하기 군으로부터 선택되는 1 내지 3개의 성분을 포함하는 US 2005/0255173의 조성물이다: 시트르산, 아연 및 알부민. 이 조성물은 대조군 세포 WI38 (정상적인 인간 폐 섬유모세포) 보다 선암종 NIH:OV-CAR-3 및 SKOV-3로부터 유래되는 인간 세포주에 대해 시험관내 세포독성이 더 높았다. 이 조성물의 단점은 이의 항종양 효과가 각 성분의 농도 함량에 따라 결정된다는 것이다 (US 2005/0255173). 성분이 신체-내인성 (body-innate) 물질이기 때문에, 청구된 조성물의 효과는 제공된 투여 부위내 개개 성분의 국소 농도 (예, 혈중 알부민 고농도)에 의해 영향을 받을 수 있다.
인용된 문헌들에 따르면 항종양 치료제에 대한 연구는 전세계적으로 이루어지고 있다. 그러나, 제안된 해법에 대한 임상적인 사용 성공은, 특히 해법의 대부분이 생분해성이 아닌 유기 폴리머를 포함하고 있고 종양 세포에 대해 충분한 선택성을 가지고 있지 않다는 점으로 인해, 여전히 도전 대상이 되고 있다. 이런 이유로, 종양 세포에 선택적인 효과를 가지는 새로운 조성물을 발굴하고자 하는 관심은 여전한 실정이다.
Duncan, R., & Gaspar, R. (2011). Nanomedicine(s) under the Microscope. Molecular Pharmaceutics, 8(6), 2101-2141. El-Dakdouki, M. H., Pure, E., & Huang, X. (2013). Development of drug loaded nanoparticles for tumor targeting. Part 1: synthesis, characterization, and biological evaluation in 2D cell cultures. Nanoscale, 5(9), 3895-3903. El-Dakdouki, M. H., Zhu, D. C., El-Boubbou, K., Kamat, M., Chen, J., Li, W., & Huang, X. (2012). Development of Multifunctional Hyaluronan-Coated Nanoparticles for Imaging and Drug Delivery to Cancer Cells. Biomacromolecules, 13(4), 1144-1151. Fleige, E., Quadir, M. A., & Haag, R. (2012). Stimuli-responsive polymeric nanocarriers for the controlled transport of active compounds: Concepts and applications. Advanced Drug Delivery Reviews, 64(9), 866-884. Huang, G., Chen, H., Dong, Y., Luo, X., Yu, H., Moore, Z., Bey, E. A., Boothman, D. A., & Gao, J. (2013). Superparamagnetic iron oxide nanoparticles: amplifying ROS stress to improve anticancer drug efficacy. Theranostics, 3(2), 116-126. Laurent, S., Dutz, S., Hafeli, U. O., & Mahmoudi, M. (2011). Magnetic fluid hyperthermia: focus on superparamagnetic iron oxide nanoparticles. Advances in Colloid and Interface Science, 166(1-2), 8-23. Li, M., Kim, H. S., Tian, L., Yu, M. K., Jon, S., & Moon, W. K. (2012). Comparison of Two Ultrasmall Superparamagnetic Iron Oxides on Cytotoxicity and MR Imaging of Tumors. Theranostics, 2(1), 76-85. Maeda, H. (2001). The enhanced permeability and retention (EPR) effect in tumor vasculature: the key role of tumor-selective macromolecular drug targeting. Advances in Enzyme Regulation, 41(1), 189-207. Ruoslahti, E., Bhatia, S. N., & Sailor, M. J. (2010). Targeting of drugs and nanoparticles to tumors. The Journal of Cell Biology, 188(6), 759-768.
본 발명의 내용은 선택적인 항종양 치료제로서 무기 나노입자와 조합된 히알루로난 나노마이셀에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 결장직장 암종 또는 선암종, 폐 암종, 간세포암 및 유방 암종으로부터 유래되는 세포에 선택적으로 작용하는, 소수성화된 히알루론산 및 무기 나노입자를 기재로 하는 조성물에 관한 것이다. 이 조성물은, 또한, 인 비보 (in vivo) 조영 매질로도 이용될 수 있다. 나아가, 본 발명은 상기 조성물의 제조 방법에 관한 것이다.
본 조성물은 올레산에 의해 안정화된 무기 나노입자를 소수성화된 히알루로난 나노마이셀에 탑재 (loading)하는 것을 기반으로 한다. 탑재는 유기 용매 중의 나노입자 용액을 소수성화된 히알루로난 수용액과 함께 초음파 처리함으로써 수행될 수 있다. 무기 나노입자를 포함하는 제조된 나노마이셀은, 그런 후, 원심분리를 적용하여, 유리형 무기 나노입자로부터 분리하여, 종양 세포에 대한 선택적인 효능을 위해 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물의 주요하고 독특한 이점은, 종양 세포와 대조군 세포의 혼합물에 처리되더라도, 종양 세포에 대한 시험관내 선택적인 활성을 나타낸다는 것이다. 본 조성물은 올레산에 의해 안정화된 무기 나노입자를 포함하며, 이때 무기 나노입자의 본래 목적은 이를 체내 투여한 후 조성물의 인 비보 (in vivo) 검출을 가능하게 하기 위함이었다. 그러나, 놀랍게도, 상기 조성물이, 소수성화된 히알루론산, 특히 히알루론산의 올레일 유도체와 조합되었을 때, 어떠한 세포 증식 억제 물질 또는 기타 치료학적 물질 없이도, 종양 세포에 대해 시험관내에서 선택적으로 세포독성을 나타내는 것으로 밝혀졌다. 지금까지 예상하지도 설명된 바도 없는 효과는 SPION 나노입자, 아연 산화물 나노입자 및 업-컨버전 나노입자에서 관찰되었는데, 이들은 올레산에 의해 안정화된 것이다. 예상치 못한 효과는 히알루로난에 특이적인 CD44 수용체를 통해 매개되는 수용체-매개 효과로서 명확하게 설명될 수 없을 뿐만 아니라, 지금까지 수집된 데이타에 따른 관찰된 선택성을 ROS 생산 증가에 따른 효과와 관련지을 수도 없다. 그러나, 선택성은 나노입자 이온의 또 다른 세포내 방출 기전에 의해 유발될 수 있다. 종양 세포에 대한 선택적인 효과는, 다당류 또는 기타 폴리머 매트릭스 기반의 담체에 병합된 SPION이 비-세포독성으로서 해석되게 사용된다는 점에서 오히려 더 놀랍다 (El-Dakdouki et al., 2012; Li, Kim, Tian, Yu, Jon & Moon, 2012).
본 조성물의 다른 이점으로는 생리학적 용액과의 양립성 (compatibility), 인 비보 (in vivo) 정맥내 투여 가능성 및 생리학적 pH에서 적정 시간 동안의 나노마이셀 안정성 등이 있다. 이 조성물의 또 다른 이점은 나노마이셀 시스템을 둘러싼 외막을 형성하는 담체 폴리머로서 히알루로난을 사용한다는 점이며, 이로써 조성물의 인 비보 (in vivo) 투여 적합성이 보장된다. 바람직하게는, 히알루로난은 CD44 수용체 발현 증가가 특징적인 종양 세포에 조성물이 결합되게 지원해줄 수 있다. 조성물내 SPION의 존재는 바람직하게는 자기장을 이용해 담체를 체내 원하는 위치로 타겟팅하는데 이용될 수 있다. 교번 자기장은 온열치료를 유도하는데 사용되어, 종양 조직의 파괴를 이끌 수 있다. 또 다른 이점은, 주어진 조성물이 세포 분열 억제제와 같은 다른 활성 물질과 조합될 수 있다는 것이다. SPION 및 아연 산화물 나노입자와 마찬가지로, 업-컨버전 나노입자의 존재도 바람직하게는 조직내 조성물을 인 비보 (in vivo)로 검출하는데 이용될 수 있다. 아울러, 특정 조성을 가진 업-컨버전 나노입자는 광역학 요법 (photodynamic therapy) 또는 조성물로부터 약제를 조절-방출하는데 이용될 수 있다. 아연 산화물 나노입자의 존재는 바람직하게는 산성 pH가 더 높은 종양 조직에 사용되는데, 이곳에서 ZnO 나노입자는 용해되어 Zn2 + 이온을 방출시키고 고 농도 부위에서 국소 세포독성을 나타낸다.
따라서, 본 발명은 아실화된 히알루로난과, 올레산에 의해 안정화되며 초상자성 나노입자, 업-컨버전 나노입자 또는 아연 산화물 나노입자, 특히 초상자성 나노입자를 포함하는 군으로부터 선택되는, 무기 나노입자를 포함하는, 항종양 조성물에 관한 것이다. 아실화된 히알루로난은 포화 결합 및 불포화 결합을 가진 히알루론산의 C6-C18-아실화 유도체, 특히 히알루론산의 C18:1 아실화 유도체일 수 있으며, 아실화된 히알루로난은 무기 나노입자의 담체로서 사용된다. 본 발명에 따른 조성물이 초상자성 나노입자를 포함하는 경우, 나노입자는, 바람직하게는 조성물내 Fe의 양이 0.3 - 3 중량%, 바람직하게는 1.0 중량%인 철 산화물을 기재로 하는, 나노입자이다. 초상자성 나노입자의 크기는 5 내지 20 nm, 바람직하게는 5-7 nm, 더 바람직하게는 5 nm이다. 항종양 조성물이 아연 산화물 나노입자를 포함하는 경우, 조성물내 Zn의 함량은 바람직하게는 0.3 - 3 중량%로 존재한다. 항종양 조성물이 업-컨버전 나노입자를 포함하는 경우, 바람직하게는 조성물내 희토류 원소들의 총량이 0.3 내지 3% hm이 되는 함량으로 존재한다. 업-컨버전 나노입자는 예를 들어 Er, Yb 및 Y를 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 조성물의 이점은 또한 자동멸균을 이용해 최종 제품 형태로 살균처리가능하다는 것이다.
본 발명에 따른 항종양 조성물은 특히 결장직장 암종 및 선암종, 폐 암종, 간세포암, 유방 암종, 바람직하게는 결장직장 암종 및 선암종으로부터 유래되는 부착 및 현탁 (suspension)성 인간 종양 세포주 둘다의 증식을 저해하기 위해 사용될 수 있다. 나아가, 초상자성 나노입자를 포함하는 항종양 조성물은 인 비보 (in vivo) 조영 물질로서, 즉, 체내, 특히 간 및 병변 발생부, 예를 들어 종양내 조성물의 축적을 검출하기 위해 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 종양 및 비-종양 세포에서, 특히 인간 결장직장 선암종 (=종양) 및 인간 진피 섬유모세포 (=비-종양)로부터 유래된 세포에서 금속 이온 방출에 서로 다른 양상을 나타내는 것으로 확인되었다.
본 발명에 따른 항종양 조성물은 비경구 또는 국소 투여, 예를 들어 정맥내 투여용 제형으로 적용될 수 있다. 약학적 조성물에 사용되는 다른 첨가제, 바람직하게는 염화나트륨, 덱스트로스 또는 완충성 염 (buffering salt)을 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 다음과 같은 방식으로 제조될 수 있다: 히알루론산의 아실화 유도체의 수용액을 제조한 다음 할라이드 용매, 예를 들어 클로로포름에 분산시킨 무기 입자를 첨가하고, 제조되는 현탁액을 균질한 혼합물이 형성될 때까지 초음파 처리한 후 원심분리 및 후속적인 여과를 통해 나노마이셀에 탑재된 무기 나노입자로부터 유리형의 무기 나노입자를 분리시키며, 이때 무기 입자는 올레산에 의해 안정화된 것이며, 초상자성 나노입자, 업-컨버전 나노입자 또는 아연 산화물 나노입자로 이루어진 군으로부터 선택된다. 이후, 여과물은 장기 보관을 위해 동결건조하거나 또는 자동멸균에 의해 멸균 처리할 수 있다. 동결건조물은 이후 수용액에 용해시켜, 자동멸균으로 멸균 처리할 수 있다.
본 발명의 목적에서, 올레산으로 안정화된 상업적으로 구입가능한 SPION이 사용될 수 있다.
도 1. 소수성화된 히알루로난 캡슐로 둘러싸인 나노입자 (SPION)의 TEM 사진.
도 2A, 2B, 2C. 대조군 NHDF 섬유모세포 및 마우스 비-종양 3T3 세포주에서 양성/중성 효과 대비, 종양 HT-29 세포주에서의 아실화된 히알루로난과 SPION으로 구성된 조성물의 생존 저해.
도 3. 대조군 NHDF 섬유모세포 및 마우스 비-종양 3T3 세포주에서 양성 효과 대비, 다양한 종양 세포주에서 아실화된 히알루로난과 SPION으로 구성된 조성물의 생존 저해 효과.
도 4A, 4B, 4C. 종양 세포 HT-29와 건강한 세포 NHDF 및 3T3의 생존성에 대한, 아실화 히알루로난으로 캡슐화된 5nm, 10nm, 20nm SPION 조성물의 효과 비교.
도 5A, 5B, 5C. 대조군 NHDF 섬유모세포 및 마우스 비-종양 3T3 세포주에서 양성/중성 효과 대비, 종양 HT-29 세포주에서 아실화 히알루로난과 아연 나노입자로 된 조성물에 의한 생존성 저해.
도 6A, 6B, 6C. 대조군 NHDF 섬유모세포 및 마우스 비-종양 3T3 세포주에서 양성/중성 효과 대비, 종양 HT-29 세포주에서 아실화 히알루로난과 업-컨버전 나노입자로 된 조성물에 의한 생존성 저해.
도 7. 아실화 히알루로난 및 SPION으로 된 조성물 첨가 하의, 건강한 NHDF 섬유모세포와 대조군 HT-29 세포의 공동-배양.
도 8. 유세포 측정에 의해 측정된 NHDF, MCF-7 및 MDA-MB-231 세포의 표면 상에서의 CD44 수용체의 발현.
도 9. NHDF 및 HT-29에서 아실화 히알루로난 및 SPION으로 된 조성물에 의한 ROS 형성 유도.
도 10. 아실화 히알루로난 및 SPION으로 된 조성물 (스케일: 10 ㎛)과 함께 배양 후, 종양 HT-29 및 대조군 NHDF 세포에 대한 세포내 Fe 염색.
도 11. 정맥내 투여 후 아실화 히알루로난 내에 탑재된 SPION의 종양내 경시적인 축적에 대한 MRI 검출 (교모세포종 종양, 1.1 mg Fe/kg).
도 12. 아실화 히알루로난 내에 탑재된 SPION 조성물의 정맥내 투여 후 간에 대한 MRI 조영술 (1.1 mg Fe/kg).
도 13. 프러시안 블루로 염색한 후 종양의 조직 단편에서의 Fe 검출 (SPION 조성물 투여한 지 2시간 및 24시간째).
도 14. 프러시안 블루로 염색한 후 간 조직 단편에서의 Fe 검출 (SPION 조성물 투여한 지 2시간 및 24시간째).
도 15. 멸균 처리 후 소수성화된 히알루로난 내에 캡슐화된 나노입자 (SPION)의 TEM 사진.
도 16. 자동멸균에 의한 멸균 처리 전과 후의 SPION 조성물의 선택적인 세포독성.
도 17A, 17B, 17C. 마우스 종양 림프종 세포주 EL4에서 SPION 조성물에 의한 세포자살 유도.
실시예
SS = 치환도 = 100　% * 결합된 치환기의 몰 량 / 총 다당류 다이머의 몰 량
본원에 사용되는 용어 당량 (eq)은 달리 언급되지 않은 경우 히알루론산 다이머에 대한 것이다. 퍼센트는 달리 언급되지 않은 경우 중량%이다.
히알루론산 (소스: Contipro Pharma, a.s., Dolni Dobrouc, CZ)의 분자량은 SEC-MALLS에 의해 측정하였다.
용어 무기 나노입자는 진단 기능을 가진 무기 나노입자를 의미하는데, 진단 기능은 본 발명에 따른 조성물에 사용되는 무기 나노입자의 공통적인 기본 특성이다. 진단 기능은 의학에서 이용가능한 방법을 통해 이 입자를 검출할 수 있는 가능성을 의미하는 것으로 의도된다. SPION은 자기 공명을 이용해, ZnO 및 업-컨버전 나노입자는 발광 영상화를 이용해 검출될 수 있으며, 이들 입자 모두 검출에 맞게 최적화되며, 이것이 사용 이유이다. 이에, 무기 나노입자 세트에서 인 비보 (in vivo) 또는 인 비트로 (in vitro) (마이셀) 검출이 가능한 것으로 선택하였다.
용어 업-컨버전 나노입자는 업-컨버전 란타노이드 나노입자, 즉 효율적인 에너지 업-컨버전이 가능한 다른 무기 나노입자는 알려진 바 없으므로, 희토류 군으로부터 유래되는 원소를 함유한 나노입자를 의미한다.
실시예 1 소수성화된 히알루론산, 특히 무수 벤조산 및 올레산 혼합물을 이용한 히알루론산의 올레일 유도체 (C18:1)의 제조.
소듐 히알루로난 100 g (250 mmol, 15 kDa)을 탈염수 2000 ml에 용해하였다. 그런 후, 이소프로판올 1000 ml을 천천히 첨가하였다. 그 후, TEA (70 ml, 3 eq.)와 DMAP (1.52　g, 0.05 eq.)를 이 용액에 첨가하였다. 동시에, 올레산 (35.3 g 0.5 eq)을 이소프로판올　1000 ml에 용해한 다음 이 용액에 TEA (70 ml, 3 eq.)와 벤조일 클로라이드 (14.4 ml, 0.5　eq.)를 첨가하였다. 산 활성화 후, 석출물을 HA 용액으로 여과 추출하였다. 실온에서 3시간 반응을 진행하였다. 그런 후, 반응 혼합물을 제거하고, NaCl 95 g이 첨가된 탈염수 1000 ml에 희석하였다. 무수 이소프로판올을 4배로 사용하여 석출시켜, 반응 혼합물로부터 아실화 유도체를 단리하였다. 이를 디캔팅한 후, 석출물을 이소프로판올 수용액 (85% vol.)으로 반복적으로 헹구었다.
SS 13　% (NMR에서 측정됨).
1H NMR (D2O): δ 0.88 (t, 3H, -CH2-CH 3 ), δ 1.22-1.35 (m, 20H, (-CH2-)10), δ 1.60 (m, 2H, -CH 2 -CH2-CO-), δ 2.0 (4H, (-CH2-)2), δ 2.41 (t, 2H, -CH2-CO-), δ 5.41 (d, 2H, CH=CH)
본 실시예는 히알루론산의 소수성화된 유도체에 대한 일반적인 합성 방법을 기술한다. 그러나, 이 공정은 올레일 유도체만으로 한정되는 것은 아니다. 소수성화된 유도체의 합성에 대한 상세 내용은 특허 출원 번호 CZ PV2012-842에 언급되어 있다.
실시예 2. 평균 5 nm 크기의 SPION 제조
패릭 올리에이트 1.80 g, 올레산 0.35 ml 및 1-옥타데센 13.35 ml을 50 ml 부피의 3구 플라스크에 넣었다. 혼합물을 진공 하에 100℃까지 가열하고, 휘발성 물질을 증발시키면서 30분간 유지하였다. 그런 다음, 혼합물을 약한 아르곤 흐름 하에 280℃로 가열하여, 60분간 이 온도에서 유지하였다. 혼합물을 280℃에서 반응시키면서 아르곤 기포를 처리하였다. 실온으로 냉각시킨 다음, 반응 혼합물에 아세톤을 첨가하고, 원심분리를 통해 나노입자를 분리하였다. 침전된 SPION을 헥산/아세톤 혼합물 (1:4에서 1:1까지 순차적으로)로 4번 헹구고, 마지막으로 이를 톨루엔에 분산시켜, 4℃ 암조건에서 보관하였다.
수율: 78%
나노입자의 크기: 5.2 ± 0.8 nm (전자현미경 사진에 따른 결과).
실시예 3. 평균 10 nm 크기의 SPION 제조
패릭 올리에이트 1.80 g, 올레산 0.35 ml 및 1-옥타데센 13.35 ml을 50 ml 부피의 3구 플라스크에 넣었다. 혼합물을 진공 하에 100℃까지 서서히 가열하여, 휘발성 물질을 증발시키기 위해 30분간 유지하였다. 이후, 혼합물은 약한 아르곤 흐름 하에 끓는 점 (~317℃)까지 가열하고, 그 온도에서 60분간 유지하였다. 실온으로 냉각 후, 실시예 2와 동일한 방법으로 SPION을 분리하였다.
수율: 74%
나노입자의 크기: 9.8 ± 0.5 nm (전자현미경 사진의 결과임).
실시예 4. 평균 20 nm 크기의 SPION 제조
패릭 올리에이트 1.80 g, 올레산 0.35 ml, 1-옥타데센 5.34 ml 및 n-도코산 6 g을 50 ml 부피의 3구 플라스크에 넣었다. 혼합물을 진공 하에 100℃까지 서서히 가열하여, 휘발성 물질을 증발시키기 위해 30분간 유지하였다. 이후, 혼합물은 약한 아르곤 흐름 하에 315℃까지 가열하고, 그 온도에서 60분간 유지하였다. 실온으로 냉각 후, 실시예 2와 동일한 방법으로 SPION을 분리하였다.
수율: 56%
나노입자의 크기: 21.1 ± 3.1 nm (전자현미경 사진의 결과임)
실시예 5. ZnO 나노입자의 제조
아연 아세테이트 이수화물 (1185.30 mg; 5.4 mmol)을 250 ml 부피의 3구 플라스크에 넣고, 실온에서　메탄올 (90 ml)에 용해하였다. 한편, 메탄올 (22.39 ml) 중의 테트라메틸 암모늄 하이드록사이드 (1622.91 mg; 8.96 mmol) 용액을 2구 플라스크에서 준비하였다. 이들 2가지 용액을 초음파 조에서 15분간 아르곤으로 버블링하면서 탈기시켰다 (수조 온도 50℃, 출력 120 W). 아연 아세테이트의 메탄올 용액을 오일 조 (조 온도 60℃)에서 환류 가열하였다. 올레산 (310 ㎕; 0.99 mmol)을 첨가한 후, 혼합물을 끓는 점 (조 온도 85℃)까지 승온시켰다. 메탄올 중의 테트라메틸 암모늄 하이드록사이드 용액을 환류 가열 (조 온도 75℃)하고, 신속하게 아연 아세테이트와 올레산이 들어 있는 3구 플라스크에 투입하였다. 반응 혼합물을 일정한 속도 (600 rpm)로 교반하면서 환류하고, 2분간 (조 온도 85℃) 아르곤으로 버블링을 수행하였다. 이후, 혼합물을 메탄올 (90 ml)로 희석하고, 얼음조 위에서 15분간 냉각시켰다. 냉각된 혼합물을 15분간 원심분리하였다 (4000 xg, 4℃). 입자들을 에탄올 (3 x 25 ml)로 헹구고, 각 헹굼 단계 다음에는 10분간 원심분리를 수행하였다 (4000 xg, 25℃). 입자를 클로로포름 (45 ml)에 분산시켜, 암조건 하 4℃에 보관하였다.
형광의 양자 효율: 34% (상대적인 방법으로 측정됨, 기준 물질 = norharman)
나노입자의 크기: 3.4 ± 0.3 nm (전자현미경 사진의 결과임)
실시예 6. 업- 컨버전 나노입자의 제조
1.60 mmol 이트륨 (III) 아세테이트, 0.36　mmol 이테르븀 (III) 아세테이트 및 0.04 mmol 에르븀 (III) 아세테이트에 해당되는 몰 량을 100 ml 부피의 3구 플라스크에 넣고, 옥타덱-1-엔 (34 ml)과 올레산 (12.0 ml)을 첨가하였다. 강하게 교반 (600 rpm)하면서 혼합물에 진공처리하고, 오일 조에서 서서히 80℃로 가열하였다. 이 온도에서, 전체적으로 투명해질 때까지 혼합물은 진공 하에 교반하고, 투명해진 시점부터 90분 더 교반하였다. 혼합물이 든 플라스크에 아르곤을 충진하고, 아르곤 분위기 하에 실온으로 냉각시킨 다음 메탄올 (20 ml) 중의 NaOH (200 mg) 및 NH4F (296.3　mg) 용액을 첨가하였으며, 이때 혼합물은 탁해졌다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 65℃에서 메탄올을 천천히 증발시켰다 (오일조). 그런 다음, 혼합물이 든 플라스크를 PID-컨트롤러에 의해 제어되는 가열 맨틀로 이동시켰다. 혼합물에 점차적으로 진공을 가하였으며, 진공 하에 112℃까지 천천히 가열한 후 이 온도에서 30분간 탈기시켰다. 그런 다음, 혼합물이 든 플라스크에 아르곤을 충진하고, 공기 환류 하에 약한 아르곤 흐름 하에 2℃/분 속도로 305℃까지 가열하였다. 305℃에서 혼합물을 110분간 둔 다음 가열 조건에서 꺼내 자연적으로 실온까지 냉각되게 하였다.
반응 혼합물로부터 에탄올 (반응 혼합물의 2배 부피)을 사용해 업-컨버전 나노입자를 침전시킨 다음, 원심분리 (RCF 3000 xg; 10분)에 의해 분리하였다. 나노입자 (침전물)를　헥산 (5 ml)에 분산시키고, 에탄올 (10 ml)로 침전시킨 다음 원심분리 (RCF 3000 xg; 7분)에 의해 분리하였다. 이런 방식으로 헥산/에탄올 시스템으로 3번, 그리고 헥산/아세톤 시스템으로 3번 나노입자를 정제하였다. 마지막으로, 나노입자를 클로로포름 (10 ml)에 분산시켜, 실온에 보관하였다.
나노입자 조성 (ICP-OES):NaYF4:Yb/Er (80 mol.% Y, 18 mol.% Yb, 2 mol.% Er
유기 성분 비율 (TGA): 7%
나노입자의 크기 (전자 현미경): 34 ± 2 nm
실시예 7. SPION과 히알루론산의 카프로닐 유도체 ( HAC6 )로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC6, DS = 60%, Mw = 38 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 실시예 2에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 5 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 (sonotrode) S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 SPION 5 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 1.1% (wt.)
실시예 8. 히알루론산의 카프릴릴 유도체 ( HAC8 )와 SPION으로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC8, DS = 22%, Mw = 20 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 실시예 2에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 5 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 SPION 5 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 1.1% (wt.)
실시예 9. 히알루론산의 카프리닐 유도체 ( HAC10 )와 SPION으로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC10, DS = 15%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 실시예 2에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 5 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 SPION 5 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 1.2% (wt.)
실시예 10. 히알루론산의 팔미토일 유도체 ( HAC16 )와 SPION으로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC16, DS = 9%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 실시예 2에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 5 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 SPION 5 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 1.2% (wt.)
실시예 11. 히알루론산의 스테아릴 유도체 ( HAC18 )와 SPION으로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC18, DS = 9%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 실시예 2에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 5 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 SPION 5 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 1.0% (wt.)
실시예 12. 히알루론산의 올레일 유도체 ( HAC18:1)와 SPION으로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC18:1, DS = 12%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 실시예 2에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 5 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 SPION 5 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 1.0% (wt.)
폴리머 마이셀에 군집된 나노입자의 형태는 도 1에 나타낸다.
실시예 13. 히알루론산의 올레일 유도체 ( HAC18:1)와 SPION으로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조된 히알루로난의 아실화 유도체 120 mg (HAC18:1, DS = 12%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 12 ml에 용해하였다. 실시예 2에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 5 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 4 ml에 분산된 SPION 7.25 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 1.8% (wt.)
실시예 14. 히알루론산의 리놀레일 유도체 ( HAC18:2)와 SPION으로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC18:2, DS = 12%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 4시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 실시예 2에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 5 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 SPION 5 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 0.98% (wt.)
실시예 15. 히알루론산의 리놀레닐 유도체 ( HAC18:3)와 SPION으로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC18:3, DS = 3%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 4시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 실시예 2에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 5 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 SPION 5 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 1.0% (wt.)
실시예 16. 히알루론산의 올레일 유도체 ( HAC18:1)와 SPION으로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC18:1, DS = 12%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 실시예 3에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 10 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 SPION 5 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 0.4% (wt.)
실시예 17. 히알루론산의 올레일 유도체 ( HAC18:1)와 SPION으로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC18:1, DS = 12%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 실시예 4에 따라 제조된 SPION (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 20 nm)을 톨루엔 매질에서 클로로포름 매질로 이동시켰다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 SPION 5 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 1.7% (wt.)
실시예 18. 히알루론산의 올레일 유도체 ( HAC18:1 ), SPION 및 파클리탁셀로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC18:1, DS = 12%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다. 그런 후, 실시예 2에 따라 제조된 SPION 5 mg (올레산에 의해 안정화됨, 나노입자의 크기: 5 nm)을 톨루엔에서 클로로포름으로 옮겼다. 이런 방식으로 제조된 나노입자를 클로로포름 3 ml에 용해된 파클리탁셀 6 mg과 혼합하였다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 나아가, CHCl3 중의 SPION 5 mg 및 파클리탁셀 6 mg을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자와 파클리탁셀을 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자와 파클리탁셀이 탑재된 히알루로난 마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Fe의 양 (ICP 측정): 1.5% (wt.)
탑재된 PTX의 양 (HPLC 측정): 0.3% (wt.)
실시예 19. 히알루론산의 올레인 유도체 ( HAC18:1)와 ZnO 나노입자로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC18:1, DS = 12%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 ZnO 5 mg (실시예 5)을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
탑재된 Zn의 양 (ICP 측정): 1.6% (wt.)
실시예 20. 히알루론산의 올레인 유도체 ( HAC18:1)와 업- 컨버전 나노입자로 된 조성물의 제조
실시예 1에 따라 제조한 히알루로난의 아실화 유도체 150 mg (HAC18:1, DS = 12%, Mw = 15 kDa)을 자기 교반기 위에서 일정하게 교반하면서 2시간 동안 탈염수 15 ml에 용해하였다.
아실화 히알루로난 용액을 얼음조에 침지된 로제트 초음파조 (RZ 1, 부피: 25 ml)로 옮겼다. 먼저, 용액을 60초간 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 또한, CHCl3 3 ml에 분산된 업-컨버전 나노입자 SPION 5 mg (실시예 6)을 이 용액에 점차 첨가하였다 (초음파 파라미터: 200 W, 진폭 85%, 주기 0.8 s 및 소노트로드 S2). 균질화된 현탁액을 15분간 추가로 초음파 처리하였다 (초음파 파라미터: 진폭 65%, 주기 0.5 s 및 소노트로드 S2). 유리형 나노입자를 반복적인 원심분리(3 x 4500RPM, 10분)를 통해 분리하고, 나노입자가 탑재된 히알루로난 나노마이셀이 함유된 수득되는 상층물을 취하여, 1.0 ㎛으로 여과하고, 동결건조하였다.
Er; Y; Yb의 탑재량 (ICP 측정): 0.02; 0.50; 0.19% (wt.)
실시예 21. 아실화 히알루로난 및 SPION으로 된 조성물의 시험관내 세포독성
초대 세포 (primary cell), 비-종양 세포 및 종양 세포 (표 1)를 96웰 패널에 접종하여, 37℃/5 % CO2에서 24시간 배양하였다. 그런 후, 세포에, 실시예 7-14, 14 및 15에서 수득된 아실화 히알루로난과 SPION으로 된 조성물 용액을 10, 100, 200 및 500 ㎍/ml 농도 (배양 배지내 폴리머 마이셀의 농도)로 처리하였다. 동시에, 아실화 히알루로난 단독과 SPION 단독 처리시의 생존성도 (각 농도에서) 측정하였다. 세포의 생존성은 MTT 방법을 이용해 0, 24, 48 및 72시간에 모니터링하였으며, 수득되는 값은 해당 시간대에 세포 생존의 저해 또는 활성화를 나타낸다. 다양한 아실화 HA 유도체 및 SPION으로 된 조성물이 처리된 세포의 세포 생존 저해 (도 2A-C) 및 다양한 종양 세포주에 대한 조성물 HAC18:1+SPION (실시예 12)의 영향을 모니터링하였다 (도 3). 도 4A-C는 SPION 5, 10 및 20 nm이 포함된 조성물 (실시예 12, 16, 17)의 세포독성 작용을 비교하여 도시한다. 세포주는 표 1에 나타낸다.
표 1. 테스트한 부착 세포주의 목록
세포주의 명칭 세포 타입/기원
대조군 세포주
NHDF 초대 인간 진피 섬유모세포
3T3 마우스 섬유모세포주
종양 세포주
HT29 인간 결장직장 선암종
A2058 인간 흑색종
A549 인간 폐 암종
C3A 인간 간세포암
MCF7 인간 유방 선암종
HCT116 인간 결장직장 암종
MDA-MB231 인간 유방 선암종
Caco2 인간 결장직장 선암종
도 2A-C의 결과는, 대조군 세포주 (NHDF 및 3T3)와는 다르게, 종양 세포주 HT29의 경우, 세포 증식에 현저한 저해가 있음을 보여준다. 최대 저해는 C18 및 C18:1 아실화 유도체를 기재로 한 조성물에서 나타났다. C18:1 유도체와 SPION을 기재로 포함하는 조성물은 NHDF와 3T3 세포의 생존성에 대해서는 보다 강력한 지지를 나타내었다. 아실화 히알루로난 단독과 SPION은 어떠한 테스트 세포에서도 생존에 영향을 미치지 않았다 (데이타 도시안됨).
HAC18:1과 SPION으로 된 조성물을 다른 종양 세포주에 처리하였다 (도 3). 실험 데이타는, 종양 세포주 A549, HCT116, C3A, MCF7, MDA-MB231 및 Caco2의 증식을 늦추는 것으로 나타났다. 흑색종 세포주 A2058은 예외였는데, 이 세포주의 경우 조성물을 최고 농도 (500 ㎍/ml)로 처리한 경우에만 저해가 약간 나타났다. 대조군 섬유모세포 (NHDF와 3T3)는, 이와는 반대로, 조성물에 의해 현저하게 자극되었으며, 심지어 최고 농도 500 ㎍/ml에서도 어떠한 세포독성 특성은 나타나지 않았다.
도 4A-C는 5nm SPION을 포함하는 조성물의 선택적인 항종양 활성을 검증해준다. 이런 효과는 10nm SPION 함유 조성물과 20nm SPION 함유 조성물에서는 상기한 수준으로 관찰되지 않는다.
실시예 22. 아실화 히알루로난과 아연 산화물 나노입자로 된 조성물의 시험관내 세포독성
초대 인간 섬유모세포 (NHDF), 장의 종양 세포 HT-29 및 마우스 섬유모세포 3T3를 96웰 패널에 접종하고, 37℃/5 % CO2에서 24시간 배양하였다. 그런 후, 세포에, 실시예 19에서 수득된 아실화 히알루로난과 아연 산화물 나노입자로 된 조성물 용액을 10, 100, 200 및 500 ㎍/ml 농도 (폴리머 마이셀의 농도)로 처리하였다. 세포의 생존성은 MTT 방법을 이용해 0, 24, 48 및 72시간에 모니터링하였으며, 수득되는 값은 해당 시간대에 세포 생존의 저해 또는 활성화를 나타낸다 (도 5A-C).
도 5A-C의 결과는, 대조군 세포주 (NHDF 및 3T3)와는 다르게, 배양 시간이 증가함에 따라 폴리머 마이셀의 고 농도에서 종양 세포주의 증식 저해가 발생됨을 보여준다. 그러나, 이 때, 3T3 세포에서도 500 ㎍/ml로 처리한 경우에는 증식 저해가 관찰되었다. 더 낮은 농도의 조성물과 대조군 NHDF 세포주에서는 저해가 관찰되지 않았다.
실시예 23. 아실화 히알루로난과 업-컨버전 나노입자로 된 조성물의 시험관내 세포독성
초대 인간 섬유모세포 (NHDF), 장의 종양 세포 HT-29 및 마우스 섬유모세포 3T3를 96웰 패널에 접종하고, 37℃/5 % CO2에서 24시간 배양하였다. 그런 후, 세포에, 실시예 20에서 수득된 업-컨버전 나노입자를 포함하는 폴리머 마이셀 용액을 10, 100, 200 및 500 ㎍/ml 농도 (폴리머 마이셀의 농도)로 처리하였다. 세포의 생존성은 MTT 방법을 이용해 0, 24, 48 및 72시간에 모니터링하였으며, 수득되는 값은 해당 시간대에 세포 생존의 저해 또는 활성화를 나타낸다 (도 6A-C).
도 6A-C의 결과는, 생존성이 고도로 증가된 대조군 세포주 NHDF와는 다르게, 배양 시간이 증가함에 따라 종양 세포에서는 증식이 저해됨을 보여준다. 그러나, 비-종양 세포인 3T3에서도 약간의 저해가 관찰된다.
실시예 24. 아실화 히알루로난과 SPION으로 된 조성물의 시험관내 선택적인 세포독성
DiO(녹색)로 표지된 초대 인간 섬유모세포와 DiI (적색)로 표시된 종양 세포 HT-29는 3:1의 비율이었으며, 전체 농도 50,000 세포/웰로 24웰 패널의 각 웰에서 RPMI 1640 (Roswell Park Memorial Institut) 배지 1 ml에 접종하였다. 세포 단일층의 min 80% 컨플루언스에 도달한 후, 세포에 실시예 12의 SPION을 포함하는 조성물 용액 200　㎍/ml을 처리하였다. 72시간 배양한 후, 형광 현미경 Nikon Ti-Eclipse를 사용해 세포 사진을 촬영하였다 (도 7).
대조군 세포 및 종양 세포에 대한 가능성있는 차별적인 활성 기전을 해명하기 위해, 히알루로란에 대한 CD44 수용체의 발현을 NHDF, MCF-7 및 MDA-MB-231 세포들에서 유세포 측정을 통해 분석하였다. 80% 컨플루언스에 도달한 후, 세포를 PBS로 헹군 다음 anti-CD44-FITC 항체와 함께 15분간 인큐베이션하였고, 인큐베이션이 끝나면 이를 PBS로 2번 헹군 다음 유세포 측정기 MACSQuant Analyzer (Miltenyi Biotec)로 분석하였다. 그 결과는 형광 세기 (RFU)로 표시된다 (도 8).
또한, NHDF 세포와 HT-29 세포의 경우, 실시예 12의 아실화 히알루로난과 SPION으로 된 조성물로 처리한 다음 산화적 스트레스를 측정하였다. 세포를 6웰 패널에서 배양하고, 80% 컨플루언스에 도달한 후 여기에 SPION이 포함된 조성물 용액 200 ㎍/ml을 24시간 처리하였다. 대조군 세포의 경우에는 테스트 조성물을 첨가하지 않고, 배지만 신선한 배지로 한번 교체하였다. 배양 후, 세포를 헹구고, DCF-DA (세포내 ROS에 의해 산화되어 형광성 DCF가 되는 비-형광 물질, 최종 농도: 1 uM)를 20분/37℃/암조건 하에 처리하였다. PBS로 헹군 다음, 세포를 유세포 측정기 MACSQuant Analyzer (Miltenyi Biotec)에서 분석하였다. 그 결과는 세포 내부의 DCF의 상대적인 형광 세기 (비-처리 대조군 대비 %)로 표시된다 (도 9).
도 7의 결과는 종양 세포주 HT-29에 대한 선택적인 증식 저해와, 이와는 반대로 대조군 섬유모세포인 NHDF에서는 부정적인 영향이 없고 컨플루언스에 도달함을 검증해준다. 이런 효과는 차별적인 ROS 형성 유도에 의해 야기된 것이 아니었으며, ROS 형성 유도는 2가지 세포 타입들 모두에서 증가되고, 동일한 수준으로 증가하였다 (도 9). 그에 대한 설명으로, NHDF 및 HT-29 세포에서 ROS 생성 증가에 대한 차별적인 반응 수준을 언급할 수 있다.
대조군 세포와 종양 세포에 대한 활성 차이가, 히알루로난에 대한 주요 표면 수용체, CD44의 발현과 연관된 것은 아니다. 도 8은 조성물에 의해 생존성이 증가된 대조군 NHDF 섬유모세포에서는 CD44의 발현이 높고, 현저한 생존성 저해가 관찰되는 종양 세포주 MCF-7과 MDA-MB-231에서는 발현 수준이 낮다는 것을 검증해준다 (도 3).
실시예 12의 아실화 히알루로난과 SPION으로 된 조성물과 함께 인큐베이션한 세포를 염색한 후 (프러시안 블루를 이용한 Fe 존재 검출), Fe 이온의 차별적인 분포를 관찰하였는데, 종양 세포에서는 용해된 Fe가 검출된 반면, 대조군 세포에서는 철 응집체가 검출되었다 (도 10). 이 현상이 종양 세포에서 조성물의 선택적인 활성의 원인일 수 있었다.
실시예 25. 정맥내 투여용 조성물의 제조
멸균 0.9% NaCl 650 ㎕를 무균 방식으로 제조한 실시예 12의 아실화 히알루로난 및 SPION으로 된 조성물 20-30 mg에 첨가하고, 용액을 동결건조물이 완전히 용해될 때까지 가끔 교반한다. 이 용액은 문제없이 인 비보 (in vivo)로 주사가능하다.
이 방식으로 제조된 용액은 입자의 수력학적 크기 (hydrodynamic size)에 대한 한 적어도 2일간 안정적이다.
실시예 26. 정맥내 투여용 조성물의 제조
멸균 5% 덱스트로스 650 ㎕를 무균 방식으로 제조한 실시예 12의 아실화 히알루로난 및 SPION으로 된 조성물 20-30 mg에 첨가하고, 용액을 동결건조물이 완전히 용해될 때까지 가끔 교반한다. 이 용액은 문제없이 인 비보 (in vivo)로 주사가능하다.
이 방식으로 제조된 용액은 입자의 수력학적 크기에 대한 한 적어도 2일간 안정적이다.
실시예 27. 아실화 히알루로난 및 SPION으로 된 조성물의 인 비보 (in vivo) 검출
교모세포종 종양을 가진 루이스 브라운 노르웨이 랫을 생체내 검사에 이용하였다. 이 종양은 3 x 106개의 교모세포종 세포를 다리 근육에 주사하여 확립하였으며, 9일 후 아실화 히알루로난 (HAC18:1) 및 SPION으로 된 조성물 (0.9% NaCl 중의 용액 750 ㎕, Fe 함량 1.1 mg/kg)을 정맥내 투여하였다. 그런 다음, Bruker Biospec (4.7　T)을 이용해 랫을 분석하였다.
조성물을 정맥내 투여한 후 종양내 SPION의 축적은 도 11에서 검증되었는데, 특히 종양의 가장자리에서 어두운 부분이 검출된 부분이다. 가시적인 SPION 축적은 간에서도 검출되었으며 (도 12), 따라서, 이 조성물은 간의 조영제로서 사용될 수 있다.
SPION 축적은 동물 안락사 후 종양 (도 13)과 간 (도 14)의 조직 단편에서도 검증되었는데, Fe의 존재는 프러시안 블루 착색으로 검출되었다 (도에서 청색 염색). 블루 착색은 어떤 대조군 샘플에서도 검출되지 않았다.
실시예 28. 자동멸균에 의한 아실화 히알루로난 및 SPION으로 된 조성물의 멸균
실시예 12에 따라 제조된 조성물 (농도: 0.9% NaCl 중의 30 mg/ml)의 멸균을 121℃에서 15분간 자동멸균기에서 수행하였다.
용액은 멸균 후 안정적이었으며, SPION은 히알루로난 나노마이셀 내에 군집된 상태로 유지되었고 (도 15), 종양 세포에 대한 선택적인 세포독성 효과가 유지되었다.
실시예 21에 기술된 공정에 따라 종양 세포 HT-29와 대조군 초대 NHDF 섬유모세포에 대해 세포독성을 측정하였다. 도 16은 실시예 12의 조성물을 자동멸균에 의한 멸균 전과 멸균 이후에 비교한 결과를 보여주는데, 종양 세포에 대한 선택적인 세포독성이 자동멸균에 의해 멸균 이후에도 유지되었다.
실시예 29. 마우스 종양 현탁 림프종 세포주 EL4에서의 세포자살 유도
마우스 림프종 세포주 EL4 (마우스의 발암 실험 모델에서 종양 유도를 위해 사용됨)를 RPMI 1640 (Roswell Park Memorial Institut) 배지에서 배양하였다. 지수 증식기에, 5 x 105 세포/ ml(RPMI 배지) 농도의 세포 배양물로부터 분액들을 준비하였고, 여기에 실시예 9의 SPION이 포함된 조성물 용액을 100, 200 및 500 ㎍/ml로 처리하였다. 72시간 인큐베이션한 다음, 세포를 헹구고, 세포 사멸의 형광 마커 (프로피듐 아이오다이드, 아넥신 V-FITC)를 이용해 특이적으로 발색시키고, 유세포 측정기 MACSQuant (Miltenyi Biotec)에서 검출하였다.
도 17A-C에서, 실시예 12의 SPION을 포함하는 조성물 용액을 100 ㎍/ml 처리 후 명백한 세포자살 유도 (우측 하단 사분위 세포 집단, 도 17B)와 세포괴사의 일부 증가 유도 (좌/우측 상단 사분위, 도 17B)가 존재하였다. 조성물을 각각의 농도로 처리한 후 살아있는 세포, 세포자살 세포 및 괴사 세포를 그래프에 표시한다 (도 17C).

Claims (23)

  1. 일반식 (I)에 따른 히알루론산의 C6-C18 아실화 유도체를 포함하는 항종양 조성물로서,
    안정화 올레산을 함유하는 무기 나노입자를 더 포함하며,
    상기 무기 나노입자가 초상자성 나노입자, 업-컨버전 (upconversion) 나노입자 또는 아연 산화물 나노입자로 이루어진 군으로부터 선택되고, 특히 초상자성 나노입자로부터 선택되는, 항종양 조성물:
    Figure pct00001
    (I)
    상기 식에서,
    R은 H+ 또는 Na+이고;
    R1은 H 또는 -C(=O)CxHy 또는 -C(=O)CH=CH-het이며, 여기서 x는 5-17 범위의 정수이고, y는 11-35 범위의 정수이고, CxHy는 선형 또는 분지형의, 포화 또는 불포화된 C5-C17 체인이고, het는 선택적으로 N, S 또는 O 원자를 포함하는 헤테로사이클릭 또는 헤테로방향족 잔기이고;
    적어도 하나의 반복 단위에서, 하나 이상의 R1이 -C(=O)CxHy 또는 -C(=O)CH=CH-het이고;
    n은 12 - 4000의 범위임.
  2. 제1항에 있어서,
    아실화 히알루로난이 포화 결합과 불포화 결합을 가진 히알루론산의 C6-C18 아실화 유도체이고, 특히 C18:1 아실화 히알루론산 유도체인, 항종양 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    아실화 히알루로난이 무기 나노입자의 담체로서 사용되는, 항종양 조성물.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한항에 있어서,
    상기 무기 나노입자가 초상자성 나노입자인, 항종양 조성물.
  5. 제4항에 있어서,
    철 산화물계의 초상자성 나노입자를 포함하며,
    조성물내 Fe 함량이 0.3 - 3% wt., 바람직하게는 1.0 % wt.인, 항종양 조성물.
  6. 제4항 또는 제5항에 있어서,
    5 - 20 nm 크기를 가진 초상자성 나노입자를 포함하는, 항종양 조성물.
  7. 제4항 또는 제5항에 있어서,
    5 - 7 nm 크기를 가진 초상자성 나노입자를 포함하는, 항종양 조성물.
  8. 제4항 또는 제5항에 있어서,
    5 nm 크기를 가진 초상자성 나노입자를 포함하는, 항종양 조성물.
  9. 제1항 내지 제3항 중 어느 한항에 있어서,
    아연 산화물 나노입자를 0.3 - 3% wt. 함량으로 포함하는, 항종양 조성물.
  10. 제1항 내지 제3항 중 어느 한항에 있어서,
    상기 조성물내 희토류 원소의 총 함유량이 0.3 - 3% wt.이 되는 함량으로 업-컨버전 나노입자를 포함하는, 항종양 조성물.
  11. 제10항에 있어서,
    Er, Yb 및 Y를 함유하는 업-컨버전 나노입자를 포함하는, 항종양 조성물.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한항에 있어서,
    종양 세포의 부착성 증식 (adherent growth)과 현탁성 증식 (suspension growth)을 저해하는데 사용하기 위한 것인, 항종양 조성물.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한항에 있어서,
    결장직장 암종 및 선암종, 폐 암종, 간세포암, 유방 선암종, 바람직하게는 결장직장 암종 및 선암종으로부터 유래되는 종양 세포의 증식을 저해하는데 사용하기 위한 것인, 항종양 조성물.
  14. 제4항 내지 제8항 중 어느 한항에 있어서,
    상기 조성물의 체내 축적을 인 비보 (in vivo)로 검출하는데, 특히 종양 및 간내 축적을 인 비보로 검출하는데 사용하기 위한 것인, 항종양 조성물.
  15. 제4항 내지 제8항 중 어느 한항에 있어서,
    체내 병변 형성 (pathological formation), 특히 종양 형성을 인 비보로 검출하는데 사용하기 위한 것인, 항종양 조성물.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한항에 있어서,
    비경구 투여 또는 국소 투여 (local administration)용 제형으로 적용가능한, 항종양 조성물.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한항에 있어서,
    약학적 조성물에 사용되는 다른 첨가제, 바람직하게는 염화나트륨, 덱스트로스 또는 완충성 염 (buffering salt)을 더 포함하는, 항종양 조성물.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한항에 있어서,
    의학적 물질, 바람직하게는 세포증식 억제제 (cytostatic)를 더 포함하는, 항종양 조성물.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한항에 있어서,
    자동멸균 (autoclaving)에 의해 최종 제품 형태 (final casing)로 멸균가능한, 항종양 조성물.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한항에 따른 조성물의 제조 방법으로서,
    히알루론산의 아실화 유도체의 수용액을 제조하는 단계,
    유기 할라이드 용매에 분산되고 올레산에 의해 안정화된 무기 입자를 첨가하는 단계;
    형성된 현탁액을, 균질한 혼합물이 형성될 때까지 초음파 처리하는 단계; 및
    원심분리와 후속적인 여과를 통해, 나노마이셀에 탑재된 나노입자로부터 유리형 무기 나노입자를 분리하는 단계를 포함하며,
    상기 무기 입자가 초상자성 나노입자, 업-컨버전 나노입자 또는 아연 산화물 나노입자로 이루어진 군으로부터 선택되는, 제조 방법.
  21. 제20항에 있어서,
    여과물은 이후 동결건조되는, 제조 방법.
  22. 제20항에 있어서,
    여과물은 이후 최종 제품 형태로 자동멸균에 의해 멸균처리되는, 제조 방법.
  23. 제21항에 있어서,
    동결건조물은 이후 수용액에 용해되며, 최종 제품 형태로 자동멸균에 의해 멸균처리되는, 제조 방법.
KR1020177002613A 2014-06-30 2015-06-30 히알루론산과 무기 나노입자를 기재로 하는 항종양 조성물, 그 제조 방법 및 용도 KR20170021351A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZPV2014-451 2014-06-30
CZ2014-451A CZ2014451A3 (cs) 2014-06-30 2014-06-30 Protinádorová kompozice na bázi kyseliny hyaluronové a anorganických nanočástic, způsob její přípravy a použití
PCT/CZ2015/000068 WO2016000669A2 (en) 2014-06-30 2015-06-30 Antitumor composition based on hyaluronic acid and inorganic nanoparticles, method of preparation thereof and use thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20170021351A true KR20170021351A (ko) 2017-02-27

Family

ID=54754397

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020177002613A KR20170021351A (ko) 2014-06-30 2015-06-30 히알루론산과 무기 나노입자를 기재로 하는 항종양 조성물, 그 제조 방법 및 용도

Country Status (11)

Country Link
US (1) US10617711B2 (ko)
EP (1) EP3160509B1 (ko)
JP (1) JP6556765B2 (ko)
KR (1) KR20170021351A (ko)
CZ (1) CZ2014451A3 (ko)
DK (1) DK3160509T3 (ko)
ES (1) ES2768798T3 (ko)
HU (1) HUE049244T2 (ko)
PL (1) PL3160509T3 (ko)
RU (1) RU2686679C2 (ko)
WO (1) WO2016000669A2 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200080094A (ko) * 2018-12-26 2020-07-06 서울대학교산학협력단 페로토시스를 통한 암세포의 선택적 사멸을 위한 나노 입자, 이의 제조 방법 및 이의 용도

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112442355B (zh) * 2020-11-28 2022-04-05 江西师范大学 一种稀土-透明质酸配位聚合物包覆的vs2纳米结构及其制备方法和应用

Family Cites Families (207)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2001633A (en) 1934-09-22 1935-05-14 Crispin B Segovia Geographical clock
US3075527A (en) 1960-06-02 1963-01-29 Chemway Corp Sterile medicated strips
US3720662A (en) 1971-09-13 1973-03-13 Nat Starch Chem Corp Preparation of starch esters
US3728223A (en) 1971-10-08 1973-04-17 Amano Pharma Co Ltd Production of hyaluronidase from a strain of streptomyces
GB1527592A (en) 1974-08-05 1978-10-04 Ici Ltd Wound dressing
CH628088A5 (en) 1975-09-17 1982-02-15 Dresden Arzneimittel Process for obtaining streptococcal metabolic products
US4205025A (en) 1975-12-22 1980-05-27 Champion International Corporation Synthetic polymeric fibrids, fibrid products and process for their production
JPS6033474B2 (ja) 1978-05-11 1985-08-02 藤沢薬品工業株式会社 新規なヒアルロニダ−ゼｂｍｐ−８２３１およびその製造法
US4716224A (en) 1984-05-04 1987-12-29 Seikagaku Kogyo Co. Ltd. Crosslinked hyaluronic acid and its use
US4713448A (en) 1985-03-12 1987-12-15 Biomatrix, Inc. Chemically modified hyaluronic acid preparation and method of recovery thereof from animal tissues
US4851521A (en) 1985-07-08 1989-07-25 Fidia, S.P.A. Esters of hyaluronic acid
GB8519416D0 (en) 1985-08-01 1985-09-04 Unilever Plc Oligosaccharides
JPS62104579A (ja) 1985-10-30 1987-05-15 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd ヒアルロニダ−ゼの製造法
JPH0751064B2 (ja) 1986-08-13 1995-06-05 生化学工業株式会社 新規なヒアルロニダ−ゼｓｄ−６７８およびその製造法
IT1219587B (it) 1988-05-13 1990-05-18 Fidia Farmaceutici Polisaccaridi carbossiilici autoreticolati
JPH0214019A (ja) 1988-06-30 1990-01-18 Tonen Corp 繊維状成形物及びその製造方法
JPH0755961B2 (ja) 1989-04-18 1995-06-14 工業技術院長 新規なヒアルロン酸誘導体及びその製造方法
IT1248666B (it) 1990-05-30 1995-01-26 Fidia Spa Gel in forma di film autosupportanti altamente idrati, processo per laloro preparazione e impiego nella terapia di lesioni e/o patologie cutanee
US5522879A (en) 1991-11-12 1996-06-04 Ethicon, Inc. Piezoelectric biomedical device
IT1254704B (it) 1991-12-18 1995-10-09 Mini Ricerca Scient Tecnolog Tessuto non tessuto essenzialmente costituito da derivati dell'acido ialuronico
US5824335A (en) 1991-12-18 1998-10-20 Dorigatti; Franco Non-woven fabric material comprising auto-crosslinked hyaluronic acid derivatives
JP2855307B2 (ja) 1992-02-05 1999-02-10 生化学工業株式会社 光反応性グリコサミノグリカン、架橋グリコサミノグリカン及びそれらの製造方法
FR2689131B1 (fr) 1992-03-30 1994-05-20 Oreal Procede de preparation de monoesters majoritairement en position 6' du d-maltose et leur utilisation dans les domaines cosmetique, bucco-dentaire, pharmaceutique et alimentaire.
JPH0625306A (ja) 1992-04-21 1994-02-01 Shiseido Co Ltd 溶媒不溶化ヒアルロン酸及びその製造方法
IT1263316B (it) 1993-02-12 1996-08-05 Fidia Advanced Biopolymers Srl Tessuto non tessuto multistrato in cui uno degli strati e' costituito essenzialmente da esteri dell'acido ialuronico
NL9700003A (nl) 1993-09-28 1997-07-01 House Foods Corp Werkwijze voor het inoculeren van Fistulina hepatica.
US5616568A (en) 1993-11-30 1997-04-01 The Research Foundation Of State University Of New York Functionalized derivatives of hyaluronic acid
AU697739B2 (en) 1994-03-14 1998-10-15 Seikagaku Corporation Material to be worn on the eyeball
US5455349A (en) 1994-05-13 1995-10-03 Polaroid Corporation Vinylbenzyl thymine monomers
DK0783325T3 (da) * 1994-09-27 2000-05-01 Nycomed Imaging As Kontrastmiddel
JP3308742B2 (ja) 1994-11-17 2002-07-29 生化学工業株式会社 光架橋性ヒアルロン酸誘導体とその架橋体およびそれらの製造方法
US6025444A (en) 1994-11-17 2000-02-15 Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) Cinnamic acid derivative
US5690961A (en) 1994-12-22 1997-11-25 Hercules Incorporated Acidic polysaccharides crosslinked with polycarboxylic acids and their uses
AU708454B2 (en) 1995-03-07 1999-08-05 Novartis Ag Photochemically cross-linked polysaccharide derivatives as supports for the chromatographic separation of enantiomers
IT1281877B1 (it) 1995-05-10 1998-03-03 Fidia Advanced Biopolymers Srl Sali di metalli pesanti di succinil derivati dell'acido ialuronico e loro impiego come potenziali agenti terapeutici
IT1281886B1 (it) 1995-05-22 1998-03-03 Fidia Advanced Biopolymers Srl Processo per la preparazione di idrogel ottenuti da derivati chimici dell'acido ialuronico mediante irradiazioni ultraviolette e loro
RU2177332C2 (ru) 1995-08-29 2001-12-27 Фидиа Адвансд Биополимерз, С.Р.Л. Биоматериал для предотвращения послеоперационных спаек, включающий производные гиалуроновой кислоты (варианты) и способ предотвращения послеоперационных спаек ткани
US5789462A (en) 1995-09-13 1998-08-04 Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) Photocured crosslinked-hyaluronic acid contact lens
DE19604706A1 (de) 1996-02-09 1997-08-14 Merck Patent Gmbh Vernetzungsprodukte von Aminogruppen-haltigen Biopolymeren
DE19616010C2 (de) 1996-04-23 1998-07-09 Seitz Filter Werke Verfahren und Vorrichtung zur Herstellung von Fibrets (Fibriden) aus Zellulosederivaten
IT1287698B1 (it) 1996-08-29 1998-08-18 Fidia Advanced Biopolymers Srl Fili da sutura essenzialmente costituiti da derivati esterei dello acido ialuronico
US6632802B2 (en) 1996-08-29 2003-10-14 Fidia Advanced Biopolymers S.R.L. Hyaluronic acid esters, threads and biomaterials containing them, and their use in surgery
US6162537A (en) 1996-11-12 2000-12-19 Solutia Inc. Implantable fibers and medical articles
CA2294756C (en) 1997-07-03 2008-04-29 Orquest, Inc. Cross-linked polysaccharide drug carrier
ITPD980037A1 (it) 1998-02-25 1999-08-25 Fidia Advanced Biopolymers Srl Acido ialuronico solfatato e i suoi derivati legati covalentemente a polimeri sintetici pe la preparazione di biomateriali e per il rivesti
WO1999057301A1 (fr) 1998-04-30 1999-11-11 Maruha Corporation Composes dont la structure comporte des derives d'acide glucuronique et des derives de glucosamine, leur procede de preparation et d'utilisation
HUP0101777A3 (en) 1998-05-07 2003-04-28 Tno Process for selective oxidation of primary alcohols
ITPD980169A1 (it) * 1998-07-06 2000-01-06 Fidia Advanced Biopolymers Srl Ammidi dell'acido ialuronico e dei suoi derivati e processo per la loro preparazione.
US6630457B1 (en) 1998-09-18 2003-10-07 Orthogene Llc Functionalized derivatives of hyaluronic acid, formation of hydrogels in situ using same, and methods for making and using same
US6472541B2 (en) 1998-11-20 2002-10-29 The Regents Of The University Of California Protecting groups with increased photosensitivities
IT1302534B1 (it) 1998-12-21 2000-09-05 Fidia Advanced Biopolymers Srl Composizioni iniettabili, biocompatibili e biodegradabili comprendentialmeno un derivato dell'acido ialuronico, cellule condrogeniche, per
ES2203230T3 (es) 1998-12-23 2004-04-01 Esparma Gmbh Hialuronatoliasa como promotor de penetracion en agentes topicos.
DE19917614C2 (de) 1999-04-19 2001-07-05 Thueringisches Inst Textil Verfahren zur Herstellung von cellulosischen Formkörpern mit hohem Adsorptionsvermögen
US6288043B1 (en) 1999-06-18 2001-09-11 Orquest, Inc. Injectable hyaluronate-sulfated polysaccharide conjugates
US7033603B2 (en) 1999-08-06 2006-04-25 Board Of Regents The University Of Texas Drug releasing biodegradable fiber for delivery of therapeutics
US6592794B1 (en) 1999-09-28 2003-07-15 Organogenesis Inc. Process of making bioengineered collagen fibrils
CO5231217A1 (es) 1999-11-08 2002-12-27 Sca Hygiene Prod Zeist Bv Procedimiento de oxidacion de alcoholes primarios
US6180087B1 (en) 2000-01-18 2001-01-30 Mallinckrodt Inc. Tunable indocyanine dyes for biomedical applications
DE10003397A1 (de) 2000-01-27 2001-08-09 Hartmann Paul Ag Polyelektrolyt-Feststoffsystem, Verfahren zur Herstellung desselben sowie Wundverband
DE10009996B4 (de) 2000-03-02 2005-10-13 Cognis Ip Management Gmbh Feststoffgranulate mit monodisperser Korngrößenverteilung, ein Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung
IT1317359B1 (it) 2000-08-31 2003-06-16 Fidia Advanced Biopolymers Srl Polisaccaridi percarbossilati, quali l'acido ialuronico, processo perla loro preparazione e loro impiego in campo farmaceutico e
IT1317358B1 (it) 2000-08-31 2003-06-16 Fidia Advanced Biopolymers Srl Derivati cross-linkati dell'acido ialuronico.
US6669926B1 (en) 2000-10-16 2003-12-30 Mallinckrodt, Inc. Hydrophilic light absorbing indole compounds for determination of physiological function in critically ill patients
US6498269B1 (en) 2000-10-17 2002-12-24 The University Of Connecticut Method for the oxidation of aldehydes, hemiacetals and primary alcohols
AU2002219718A1 (en) 2000-12-13 2002-06-24 Sca Hygiene Products Zeist B.V. Process for oxidising primary alcohols
DE60117502T2 (de) 2000-12-19 2006-08-24 Seikagaku Corp. Photohärtbare Derivate von Hyaluronsäure, Verfahren zu deren Herstellung, vernetztes und photogehärtetes Derivat der Hyaluronsäure und diese enthaltendes medizinisches Material
FR2819808B1 (fr) 2001-01-19 2003-04-18 Simafex Compositions stabilisees d'acide o-iodoxybenzoique et leur procede de preparation
EP1369441A4 (en) 2001-01-31 2004-12-08 Seikagaku Kogyo Co Ltd NETWORKED POLYSACCHARIDE SPONGE
US6902548B1 (en) 2001-03-19 2005-06-07 Ed Schuler Use of Streptomyces hyalurolyticus enzyme in ophthalmic treatments
US6673919B2 (en) 2001-03-30 2004-01-06 Chisso Cororation Chemically modified hyaluronic acid or salts thereof, and a process for producing thereof
US6946284B2 (en) 2001-11-16 2005-09-20 University Of Massachusetts Solubilizing cross-linked polymers with photolyase
FR2833493B1 (fr) 2001-12-18 2005-09-23 Ioltechnologie Production Forme galenique solide et soluble pour l'administration occulaire de principes actifs et procede de fabrication d'un insert ophtalmique solide et soluble
US20060189516A1 (en) 2002-02-19 2006-08-24 Industrial Technology Research Institute Method for producing cross-linked hyaluronic acid-protein bio-composites
ITPD20020064A1 (it) 2002-03-12 2003-09-12 Fidia Advanced Biopolymers Srl Derivati esterei dell'acido ialuronico per la preparazione di idrogelda utilizzare in campo biomedico, sanitario e chirurgico e come sistem
WO2003077899A1 (en) 2002-03-16 2003-09-25 Seog-Nyeon Bae Anticancer composition
JP3975267B2 (ja) 2002-06-03 2007-09-12 独立行政法人産業技術総合研究所 多糖物質のアシル化方法
US20040101546A1 (en) 2002-11-26 2004-05-27 Gorman Anne Jessica Hemostatic wound dressing containing aldehyde-modified polysaccharide and hemostatic agents
JP4323148B2 (ja) 2002-09-30 2009-09-02 チッソ株式会社 ｎ−アルカノイル化ヒアルロン酸もしくはその塩およびその製造法
US6965040B1 (en) 2002-11-04 2005-11-15 Xiaolian Gao Photogenerated reagents
US20040116018A1 (en) 2002-12-17 2004-06-17 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Method of making fibers, nonwoven fabrics, porous films and foams that include skin treatment additives
US7550136B2 (en) 2002-12-20 2009-06-23 University Of Massachusetts Photo-reactive polymers and devices for use in hair treatments
US7465766B2 (en) 2004-01-08 2008-12-16 The Cleveland Clinic Foundation Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof
US6982298B2 (en) 2003-01-10 2006-01-03 The Cleveland Clinic Foundation Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof
US20050126338A1 (en) 2003-02-24 2005-06-16 Nanoproducts Corporation Zinc comprising nanoparticles and related nanotechnology
FR2852012B1 (fr) 2003-03-04 2006-06-23 Oreal Procede de preparation de derives o-acyles du glucose
US7365059B2 (en) 2003-03-11 2008-04-29 Seikagaku Corporation Photocrosslinked-polysaccharide composition and production process of the same
US7947766B2 (en) 2003-06-06 2011-05-24 The Procter & Gamble Company Crosslinking systems for hydroxyl polymers
ES2226567B1 (es) 2003-06-20 2006-07-01 Universidad De Santiago De Compostela Nanoparticulas de acido hialuronico.
DE10331342B4 (de) 2003-07-11 2009-03-12 Thüringisches Institut für Textil- und Kunststoff-Forschung e.V. Thermostabile Form- oder Spinnmasse
WO2005014655A2 (en) 2003-08-08 2005-02-17 Fresenius Kabi Deutschland Gmbh Conjugates of hydroxyalkyl starch and a protein
US7235295B2 (en) 2003-09-10 2007-06-26 Laurencin Cato T Polymeric nanofibers for tissue engineering and drug delivery
WO2005028632A2 (en) 2003-09-19 2005-03-31 Colorado State University Research Foundation (Csurf) Hyaluronan (ha) esterification via acylation technique for moldable devices
EP1692121A1 (en) 2003-11-18 2006-08-23 University of Tennessee Research Foundation Thiazolidinone amides, thiazolidine carboxylic acid amides, methods of making, and uses thereof
US20100330143A1 (en) 2003-12-04 2010-12-30 University Of Utah Research Foundation Modified macromolecules and methods of making and using thereof
US8313765B2 (en) 2003-12-04 2012-11-20 Industrial Technology Research Institute Biodegradable hyaluronic acid derivative, biodegradable polymeric micelle composition and pharmaceutical or bioactive composition
GB2408741B (en) 2003-12-04 2008-06-18 Ind Tech Res Inst Hyaluronic acid derivative with urethane linkage
GB0406013D0 (en) 2004-03-17 2004-04-21 Chiron Srl Analysis of saccharide vaccines without interference
EP2329852A1 (en) 2004-03-26 2011-06-08 SurModics, Inc. Composition and method for preparing biocompatible surfaces
ITMI20040605A1 (it) 2004-03-29 2004-06-29 Coimex S C R L United Companie Esteri butirrici dell'acido ialuronico a basso grado di sostituzione procedimento per la loro preparazione ed uso
EP1773943B1 (en) 2004-07-09 2016-03-09 The Cleveland Clinic Foundation Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof
US7323425B2 (en) 2004-08-27 2008-01-29 Stony Brook Technology And Applied Research Crosslinking of hyaluronan solutions and nanofiberous membranes made therefrom
US8143391B2 (en) 2004-09-07 2012-03-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Process for producing water-soluble hyaluronic acid modification
US7214759B2 (en) 2004-11-24 2007-05-08 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Biologically absorbable coatings for implantable devices based on polyesters and methods for fabricating the same
PL1817347T3 (pl) 2004-11-24 2017-10-31 Albumedix As Sposób sieciowania kwasu hialuronowego za pomocą diwinylosulfonu
WO2006078914A1 (en) 2005-01-21 2006-07-27 Washington University In St. Louis Compounds having rd targeting motifs
AU2006227112A1 (en) 2005-03-22 2006-09-28 Tyco Healthcare Group Lp Bioactive wide-weave mesh
US7680038B1 (en) 2005-04-25 2010-03-16 Electronic Arts, Inc. Dynamic bandwidth detection and response for online games
EP1738774A1 (de) * 2005-06-29 2007-01-03 Schering AG Magnetische Eisenoxidpartikel enthaltende Zusammensetzungen und deren Verwendung in bildgebenden Verfahren
GB0513552D0 (en) 2005-07-01 2005-08-10 Bristol Myers Squibb Co Bandage
CN101217982B (zh) 2005-07-06 2012-10-10 生化学工业株式会社 药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶
ITPD20050206A1 (it) 2005-07-07 2007-01-08 Fidia Advanced Biopolymers Srl Biomateriali in forma di fibra da impiegarsi come dispositivi medici nel trattamento delle ferite e loro processi di produzione
ITMI20051415A1 (it) 2005-07-22 2007-01-23 Fidia Advanced Biopolymers Srl Biomateriali a base di corbossimetilcellulosa salificata con zinco associata a derivati dell'acido ialuronico da impiegarsi come dispositivi medici con attivita' antimicrobica ed antifungina e loro processo di produzione
US8183214B2 (en) 2005-09-21 2012-05-22 Kode Biotech Limited Cell surface coating with hyaluronic acid oligomer derivative
US7993678B2 (en) 2005-09-26 2011-08-09 Novozymes Biopolymer A/S Hyaluronic acid derivatives
EP1968499A1 (en) 2005-12-14 2008-09-17 Anika Therapeutics Inc. Bioabsorbable implant of hyaluronic acid derivative for treatment of osteochondral and chondral defects
EP1826274A1 (en) 2006-02-24 2007-08-29 Kikkoman Corporation Enzyme composition, low molecular weight hyaluronan and process for preparing the same
JP2009528438A (ja) 2006-02-28 2009-08-06 ノボザイムス バイオポリマー アクティーゼルスカブ ヒアルロン酸誘導体
JP4892679B2 (ja) 2006-03-27 2012-03-07 国立大学法人弘前大学 ゲル紡糸によるヒアルロン酸繊維およびその製造方法
KR20070118730A (ko) 2006-06-13 2007-12-18 주식회사 코오롱 보습성이 우수한 창상피복재 및 그의 제조방법
US20080124395A1 (en) 2006-06-22 2008-05-29 Weiliam Chen Formulations and devices for treatment or prevention of neural ischemic damage
WO2008008481A2 (en) 2006-07-12 2008-01-17 Georgia Tech Research Corporation Deprotection of functional groups by multi-photon induced electron transfer
CA2657823A1 (en) 2006-08-04 2008-02-07 Novozymes Biopolymer A/S Branched hyaluronic acid and method of manufacture
US20080063617A1 (en) 2006-09-07 2008-03-13 Abrahams John M Cosmetics formulations
ITMI20061726A1 (it) 2006-09-11 2008-03-12 Fidia Farmaceutici Derivati crosslinkati a base di acido ialuronico reticolato via click chemistry
CZ302856B6 (cs) 2006-09-27 2011-12-14 Cpn Spol. S R. O. Zpusob prípravy derivátu polysacharidu
US8979931B2 (en) 2006-12-08 2015-03-17 DePuy Synthes Products, LLC Nucleus replacement device and method
US9597277B2 (en) 2006-12-22 2017-03-21 Croma-Pharma Gesellschaft M.B.H. Use of polymers
EP1942117A1 (en) 2006-12-29 2008-07-09 Sigea S.R.L. Derivatives of acid polysaccharides
KR20080062092A (ko) 2006-12-29 2008-07-03 주식회사 핸슨바이오텍 세포전달체로서의 히알루론산 유도체 및 이의 제조 방법
WO2008089478A2 (en) * 2007-01-19 2008-07-24 Triton Biosystems, Inc. Thermotherapy susceptors and methods of using same
JP5329767B2 (ja) 2007-02-26 2013-10-30 帝人株式会社 芳香族コポリアミド繊維の製造装置
WO2008115799A1 (en) 2007-03-21 2008-09-25 William Marsh Rice University Novel gene delivery vectors for human mesenchymal stem cells
KR100807358B1 (ko) 2007-04-18 2008-02-28 (주)나노하이브리드 암조직 선택성과 생분해성을 갖는 고리형 삼합체포스파젠-백금(ｉｉ) 착물 컨쥬게이트 항암제 및 그 제조방법
CZ2007299A3 (cs) 2007-04-24 2009-02-04 Cpn Spol. S R. O. Príprava nanovláken z polysacharidu a jejich smesí s polyvinylalkoholem
JP5165281B2 (ja) 2007-06-01 2013-03-21 株式会社バイオベルデ ２反応剤型の医療用含水ゲル形成剤、及び、これより得られるヒアルロン酸ゲル
US8288142B2 (en) 2007-06-19 2012-10-16 Uvarkina Tamara P Hyaluronidase and method of use thereof
KR101226851B1 (ko) 2007-06-20 2013-01-25 (주)엘지하우시스 이중노즐을 이용한 나노섬유의 제조방법
EP2160484A2 (en) 2007-06-22 2010-03-10 Innovative Surface Technologies, Inc. Nanofibers containing latent reactive groups
US8268638B2 (en) * 2007-07-18 2012-09-18 Advantageous Systems, Llc Methods and apparatuses for detecting analytes in biological fluid of an animal
FR2920786B1 (fr) 2007-09-07 2010-09-10 Univ Claude Bernard Lyon Fibres creuses, notamment multi membranaires, leur procede de preparation par filage et dispositif pour la mise en oeuvre dudit procede
FR2921675B1 (fr) 2007-09-28 2010-03-19 Univ Claude Bernard Lyon Filament a base d'acide hyaluronique et son procede d'obtention.
US20130136784A1 (en) 2007-10-11 2013-05-30 Robert J. Staab Methods for delivery of medication using dissolvable devices
US7976825B2 (en) * 2007-12-06 2011-07-12 Janos Borbely Cancer cell diagnosis by targeting delivery of nanodevices
CN101970555B (zh) 2008-02-11 2014-05-28 巴斯夫欧洲公司 由合成聚合物制备多孔结构的方法
CN101952491A (zh) 2008-02-14 2011-01-19 博爱科罗温有限公司 双组分纤维,纺织片材及其用途
WO2009108100A1 (en) 2008-02-29 2009-09-03 Ipr-Systems Sweden Ab Composition for the formation of gels
US8758727B2 (en) 2008-03-31 2014-06-24 University Of Louisville Research Foundation, Inc. Site specific fluorescence and contrast marker for same
WO2009122330A2 (en) * 2008-04-03 2009-10-08 Koninklijke Philips Electronics N. V. Biocompatible products for magnetic particle imaging
JP5563563B2 (ja) 2008-06-05 2014-07-30 エージェンシー フォー サイエンス， テクノロジー アンド リサーチ ペルオキシダーゼおよび低濃度の過酸化水素の存在下でのヒドロゲルの形成方法
JP2010014784A (ja) 2008-07-01 2010-01-21 Fuji Xerox Co Ltd 光書込型表示装置、書込装置、及び光書き込み方法
IT1391734B1 (it) 2008-07-29 2012-01-27 Anika Therapeutics Srl Nuovi biomateriali, loro preparazione per elettrospinning e loro uso in campo biomedico e chirurgico.
FR2934999B1 (fr) 2008-08-13 2011-07-29 Adocia Polysaccharides fonctionnalises par des derives du tryptophane
EP2324064B1 (en) 2008-09-02 2017-11-08 Tautona Group LP Threads of hyaluronic acid and/or derivatives thereof, methods of making thereof and uses thereof
CZ301555B6 (cs) 2008-11-06 2010-04-14 Cpn S. R. O. Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace
ITRM20080636A1 (it) 2008-11-28 2010-05-29 Univ Palermo Procedimento per la produzione di derivati funzionalizzati dell acido ialuronico e relativi idrogeli.
JP2010154842A (ja) 2008-12-03 2010-07-15 Koji Kawakami Ｅｇｆｒを標的にした新規抗がんキメラペプチド
JP2010138276A (ja) 2008-12-11 2010-06-24 Nipro Corp ヒアルロン酸単糸の製造方法
CA2753165A1 (en) 2009-02-21 2010-08-26 Sofradim Production Compounds and medical devices activated with solvophobic linkers
US8648144B2 (en) 2009-02-21 2014-02-11 Sofradim Production Crosslinked fibers and method of making same by extrusion
EP2398850B1 (en) 2009-02-21 2018-08-22 Sofradim Production Medical devices with an activated coating
CZ2009168A3 (cs) * 2009-03-17 2010-07-21 Contipro C, A.S. Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu
US8551378B2 (en) 2009-03-24 2013-10-08 North Carolina State University Nanospinning of polymer fibers from sheared solutions
CN102361651A (zh) * 2009-03-25 2012-02-22 法码科思莫斯控股有限公司 稳定的铁寡糖复合物
US20120219554A2 (en) 2009-05-14 2012-08-30 Fidia Farmaceutici S.P.A. Extracellular yaluronidase from streptomyces koganeiensis
WO2010138074A1 (en) 2009-05-29 2010-12-02 Hilborn Joens Hyaluronic acid based delivery systems
WO2010144194A1 (en) 2009-06-09 2010-12-16 Lux Biosciences, Inc. Topical drug delivery systems for ophthalmic use
WO2011014432A1 (en) 2009-07-30 2011-02-03 Carbylan Biosurgery, Inc. Modified hyaluronic acid polymer compositions and related methods
KR101103423B1 (ko) 2009-09-04 2012-01-06 아주대학교산학협력단 생체 주입형 조직 접착성 하이드로젤 및 이의 생의학적 용도
EP3067069B1 (en) 2009-11-11 2023-07-26 Hy2Care B.V. Hydrogels based on polymers of dextran tyramine and tyramine conjugates of natural polymers
WO2011059325A2 (en) 2009-11-11 2011-05-19 University Of Twente, Institute For Biomedical Technology And Technical Medicine (Mira) Dextran-hyaluronic acid based hydrogels
US20110111012A1 (en) 2009-11-12 2011-05-12 Hemcon Medical Technologies, Inc. Nanomaterial wound dressing assembly
CZ302503B6 (cs) 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové oxidovaného v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd a zpusob jeho modifikace
CZ302504B6 (cs) 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Derivát kyseliny hyaluronové oxidovaný v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd, zpusob jeho prípravy a zpusob jeho modifikace
US8197849B2 (en) 2010-02-12 2012-06-12 National Health Research Institutes Cross-linked oxidated hyaluronic acid for use as a vitreous substitute
US20110229551A1 (en) 2010-03-17 2011-09-22 Notus Laboratories, Inc. Drug delivery compositions and methods using nanofiber webs
IT1399202B1 (it) 2010-03-30 2013-04-11 Corbelli Metodo per la produzione di manufatti elastomerici funzionalizzati e manufatti cosi' ottenuti
WO2011163572A2 (en) 2010-06-24 2011-12-29 University Of Kansas Bifunctional conjugate compositions and associated methods
CN101897976A (zh) 2010-07-16 2010-12-01 沈阳药科大学 一种药物增溶载体及其制备方法和应用
CZ305040B6 (cs) 2010-09-14 2015-04-08 Contipro Biotech S.R.O. Způsob přípravy vysoce substituovaných amidů kyseliny hyaluronové
CZ20101001A3 (cs) 2010-12-31 2012-02-08 Cpn S.R.O. Hyaluronová vlákna, zpusob jejich prípravy a použití
US9200271B2 (en) 2011-02-03 2015-12-01 Empire Technology Development Llc Selective 3D biopatterning
WO2012173677A2 (en) 2011-03-23 2012-12-20 Indiana University Research And Technology Corporation Anticancer therapeutic agents
KR101201412B1 (ko) 2011-04-19 2012-11-14 한양대학교 에리카산학협력단 다공성 코어쉘 나노웹의 제조방법
CZ304072B6 (cs) 2011-04-26 2013-09-25 Contipro Biotech S.R.O. Amfoterní materiál na bázi sítované kyseliny hyaluronové, zpusob jeho prípravy, materiály obsahující aktivní cinidla uzavrené v síti hyaluronanu, zpusob jejich prípravy a jejich pouzití
CN102154738B (zh) 2011-05-10 2012-08-01 青岛大学 一种红藻琼胶纤维的制备方法
DK2707396T3 (en) * 2011-05-12 2019-01-28 Gnosis Spa Biotechnological sulfated chondroitin sulfate at position 4 or 6 on the same polysaccharide chain and process for its preparation
ITTO20110428A1 (it) 2011-05-13 2012-11-14 Rottapharm Spa Esteri dell'acido ialuronico, loro preparazione ed uso in dermatologia
BR112014009292B1 (pt) 2011-10-18 2021-06-15 Heiq Pty Ltd Processo para a preparação de fibras
KR20130085294A (ko) 2012-01-19 2013-07-29 충남대학교산학협력단 림프노드 탐지용 형광 고분자 나노젤 및 이를 이용한 림프노드 확인 방법
US10987436B2 (en) * 2012-01-27 2021-04-27 Soluciones Nanotecnológicas, S.L. Superparamagnetic nanoparticles as a contrast agent for magnetic resonance imaging (MRI) of magnetic susceptibility (T2*)
CZ2012136A3 (cs) 2012-02-28 2013-06-05 Contipro Biotech S.R.O. Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití
CA2866080C (en) 2012-03-01 2021-01-19 University Of Cincinnati Ros-activated compounds as selective anti-cancer therapeutics
CZ2012282A3 (cs) 2012-04-25 2013-11-06 Contipro Biotech S.R.O. Zesítovaný derivát hyaluronanu, zpusob jeho prípravy, hydrogel a mikrovlákna na jeho bázi
WO2013171764A2 (en) 2012-04-30 2013-11-21 Rubicon Research Private Limited Ophthalmic formulations
CZ304651B6 (cs) 2012-05-11 2014-08-20 Contipro Biotech S.R.O. Způsob přípravy mikrovláken, způsob výroby krytů ran, kryty ran a zařízení pro přípravu polysacharidových vláken
US20150119388A1 (en) 2012-06-15 2015-04-30 The Children's Hospital Philadelphia Novel pro- and codrug derivatives for nanoparticle delivery of select anticancer agents formed using rapidly cleavable phenolic ester bridges
CZ304512B6 (cs) 2012-08-08 2014-06-11 Contipro Biotech S.R.O. Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití
CZ304267B6 (cs) 2012-11-27 2014-02-05 Contipro Biotech S.R.O. Fotoreaktivní derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, 3D síťovaný derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy a použití
CZ2012843A3 (cs) 2012-11-27 2014-02-05 Contipro Biotech S.R.O. Nekonečná vlákna na bázi hyaluronanu, selektivně oxidovaného v poloze 6 N-acetyl-D-glukosaminové části, jejich příprava, použití, nitě, střiže, příze, textilie a způsob jejich úpravy
CZ2012842A3 (cs) * 2012-11-27 2014-08-20 Contipro Biotech S.R.O. Nanomicelární kompozice na bázi C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy nanomicelární kompozice a stabilizované nanomicelární kompozice a použití
CZ304303B6 (cs) 2012-11-27 2014-02-19 Contipro Biotech S.R.O. Vlákna založená na hydrofobizovaném hyaluronanu, způsob jejich přípravy a použití, textilie na jejich bázi a použití
KR101386096B1 (ko) 2013-02-28 2014-04-21 강원대학교산학협력단 음이온성 단백질 약물 전달을 위한 키토산 나노섬유, 그 제조방법 및 그 키토산 나노섬유를 포함하는 경점막 투여제
CN103505736A (zh) * 2013-09-23 2014-01-15 天津大学 基于改性透明质酸的高分子脂质体及其制备方法
CN103789874B (zh) 2014-01-23 2016-02-10 北京化工大学常州先进材料研究院 平行电场诱导相分离法制备核壳结构天然聚电解质纳米纤维
EP2899214A1 (en) 2014-01-27 2015-07-29 Basf Se Ethylenically unsaturated polysaccharides, method for their production and their use
CZ305153B6 (cs) 2014-03-11 2015-05-20 Contipro Biotech S.R.O. Konjugáty oligomeru kyseliny hyaluronové nebo její soli, způsob jejich přípravy a použití
GB201411294D0 (en) * 2014-06-25 2014-08-06 Trw Ltd An electric power assisted steering system

Non-Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Duncan, R., & Gaspar, R. (2011). Nanomedicine(s) under the Microscope. Molecular Pharmaceutics, 8(6), 2101-2141.
El-Dakdouki, M. H., Pure, E., & Huang, X. (2013). Development of drug loaded nanoparticles for tumor targeting. Part 1: synthesis, characterization, and biological evaluation in 2D cell cultures. Nanoscale, 5(9), 3895-3903.
El-Dakdouki, M. H., Zhu, D. C., El-Boubbou, K., Kamat, M., Chen, J., Li, W., & Huang, X. (2012). Development of Multifunctional Hyaluronan-Coated Nanoparticles for Imaging and Drug Delivery to Cancer Cells. Biomacromolecules, 13(4), 1144-1151.
Fleige, E., Quadir, M. A., & Haag, R. (2012). Stimuli-responsive polymeric nanocarriers for the controlled transport of active compounds: Concepts and applications. Advanced Drug Delivery Reviews, 64(9), 866-884.
Huang, G., Chen, H., Dong, Y., Luo, X., Yu, H., Moore, Z., Bey, E. A., Boothman, D. A., & Gao, J. (2013). Superparamagnetic iron oxide nanoparticles: amplifying ROS stress to improve anticancer drug efficacy. Theranostics, 3(2), 116-126.
Laurent, S., Dutz, S., Hafeli, U. O., & Mahmoudi, M. (2011). Magnetic fluid hyperthermia: focus on superparamagnetic iron oxide nanoparticles. Advances in Colloid and Interface Science, 166(1-2), 8-23.
Li, M., Kim, H. S., Tian, L., Yu, M. K., Jon, S., & Moon, W. K. (2012). Comparison of Two Ultrasmall Superparamagnetic Iron Oxides on Cytotoxicity and MR Imaging of Tumors. Theranostics, 2(1), 76-85.
Maeda, H. (2001). The enhanced permeability and retention (EPR) effect in tumor vasculature: the key role of tumor-selective macromolecular drug targeting. Advances in Enzyme Regulation, 41(1), 189-207.
Ruoslahti, E., Bhatia, S. N., & Sailor, M. J. (2010). Targeting of drugs and nanoparticles to tumors. The Journal of Cell Biology, 188(6), 759-768.

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200080094A (ko) * 2018-12-26 2020-07-06 서울대학교산학협력단 페로토시스를 통한 암세포의 선택적 사멸을 위한 나노 입자, 이의 제조 방법 및 이의 용도
US11819477B2 (en) 2018-12-26 2023-11-21 Seoul National University R & Db Foundation Nanoparticles for selective death of cancer cells through ferroptosis, method of preparing the same, and use of the nanoparticles

Also Published As

Publication number Publication date
HUE049244T2 (hu) 2020-09-28
DK3160509T3 (da) 2020-02-10
US20170143756A1 (en) 2017-05-25
RU2016151263A (ru) 2018-07-30
WO2016000669A2 (en) 2016-01-07
WO2016000669A3 (en) 2016-02-25
EP3160509A2 (en) 2017-05-03
PL3160509T3 (pl) 2020-07-13
ES2768798T3 (es) 2020-06-23
US10617711B2 (en) 2020-04-14
JP6556765B2 (ja) 2019-08-07
RU2016151263A3 (ko) 2018-12-12
CZ2014451A3 (cs) 2016-01-13
JP2017519785A (ja) 2017-07-20
EP3160509B1 (en) 2019-12-18
RU2686679C2 (ru) 2019-04-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Xiong et al. A NIR light triggered disintegratable nanoplatform for enhanced penetration and chemotherapy in deep tumor tissues
Xia et al. pH-responsive gold nanoclusters-based nanoprobes for lung cancer targeted near-infrared fluorescence imaging and chemo-photodynamic therapy
Sasikala et al. An implantable smart magnetic nanofiber device for endoscopic hyperthermia treatment and tumor-triggered controlled drug release
Yang et al. Red fluorescent ZnO nanoparticle grafted with polyglycerol and conjugated RGD peptide as drug delivery vehicles for efficient target cancer therapy
Huang et al. Amphiphilic prodrug-decorated graphene oxide as a multi-functional drug delivery system for efficient cancer therapy
CN109310702A (zh) 用于化学疗法、靶向疗法、光动力疗法、免疫疗法和它们的任何组合的纳米颗粒
US9233163B2 (en) Hydrolytically releasable prodrugs for sustained release nanoparticle formulations
Pooja et al. Nanomedicines for targeted delivery of etoposide to non-small cell lung cancer using transferrin functionalized nanoparticles
Zhang et al. Magnetofluorescent photothermal micelles packaged with GdN@ CQDs as photothermal and chemical dual-modal therapeutic agents
Zhu et al. Rational design of multi-stimuli-responsive gold nanorod–curcumin conjugates for chemo-photothermal synergistic cancer therapy
Ma et al. Novel Pt-loaded layered double hydroxide nanoparticles for efficient and cancer-cell specific delivery of a cisplatin prodrug
Gao et al. Multiple functionalized carbon quantum dots for targeting glioma and tissue imaging
Li et al. A macromolecular prodrug strategy for combinatorial drug delivery
KR102395946B1 (ko) 마이셀 복합체 및 이를 포함하는 약물전달체
Sivasubramanian et al. Carboxymethyl dextran-cyclodextrin conjugate as the carrier of doxorubicin
KR20200080094A (ko) 페로토시스를 통한 암세포의 선택적 사멸을 위한 나노 입자, 이의 제조 방법 및 이의 용도
Xie et al. Modification of magnetic molybdenum disulfide by chitosan/carboxymethylcellulose with enhanced dispersibility for targeted photothermal-/chemotherapy of cancer
Pucek et al. Phosphatidylcholine with conjugated linoleic acid in fabrication of novel lipid nanocarriers
KR20170021351A (ko) 히알루론산과 무기 나노입자를 기재로 하는 항종양 조성물, 그 제조 방법 및 용도
Yadav et al. Chondroitin sulphate decorated nanoparticulate carriers of 5-fluorouracil: development and in vitro characterization
Hong et al. Hyaluronan-fullerene/AIEgen nanogel as CD44-targeted delivery of tirapazamine for synergistic photodynamic-hypoxia activated therapy
Cui et al. RGDS covalently surfaced nanodiamond as a tumor targeting carrier of VEGF-siRNA: synthesis, characterization and bioassay
Ruan et al. Non-invasive imaging of breast cancer using RGDyK functionalized fluorescent carbonaceous nanospheres
Park et al. Bile acid conjugated chitosan oligosaccharide nanoparticles for paclitaxel carrier
Huang et al. Chitosan-derived nanoparticles impede signal transduction in T790M lung cancer therapy

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application