ITTO20110428A1 - Esteri dell'acido ialuronico, loro preparazione ed uso in dermatologia - Google Patents

Esteri dell'acido ialuronico, loro preparazione ed uso in dermatologia Download PDF

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Description

"Esteri dell'acido ialuronico, loro preparazione ed uso in dermatologia"
DESCRIZIONE
La presente invenzione rivendica nuovi derivati esterei di glicosaminoglicani (GAG) quali l'acido ialuronico (HA) con dei derivati dell'acido idrossi-cinnamico quali l'acido ferulico e l'acido caffeico .
HA à ̈ un GAG costituito da una sequenza ripetitiva di un'unità disaccaridica formata da acido glucuronico ed N-acetil-glucosammina.
HA svolge molteplici ruoli biologici che vanno dalla regolazione dell'acqua presente nei tessuti alla motilità cellulare, nonché nel derma svolge funzioni di impalcatura di sostegno legandosi con altre sostanze a formare complessi macromolecolari che conferiscono compattezza alla cute.
I derivati idrossi-cinnamici quali acido ferulico ed acido caffeico sono largamente distribuiti nei semi e nelle foglie del mondo vegetale sia in forma libera che legati covalentemente con lignina o altri biopolimeri. Grazie al loro nucleo fenolico ed alla coniugazione estesa alla catena laterale, formano dei fenossi-radicali stabilizzati per risonanza che spiegano la loro potente funzione antiossidante e protettiva in varie patologie infiammatorie e nella capacità protettiva di cellule esposte a radiazioni ultraviolette.
L'acido ialuronico à ̈ una sostanza umettante che· a livello della pelle agisce trattenendo l'acqua trans-epidermica. Esso à ̈ tuttavia una molecola fortemente idrofila che penetra con difficoltà lo strato corneo fortemente lipidico ed inoltre à ̈ una sostanza che va incontro a rapida degradazione. Uno dei vantaggi dei composti oggetto della presente invenzione à ̈ che la presenza dei sostituenti idrossi-cinnamici del polimero modificato protegge dalla degradazione enzimatica operata dalle ialuronidasi presenti nei tessuti; inoltre, l'esterificazione di HA con questi derivati ha permesso di ottenere dei composti con aumentate caratteristiche lipofile rispetto al polimero nativo e quindi maggiormente bio-assorbibili attraverso l'epidermide.
In considerazione delle sue caratteristiche chimico fisiche e biologiche HA Ã ̈ stato particolarmente studiato ed oggetto di modificazioni strutturali e numerose sono le pubblicazioni ed i brevetti relativi a tali nuovi derivati.
Molti lavori hanno riguardato processi di reticolazione di HA in modo di ottenere prodotti viscoelastici da utilizzare soprattutto per somministrazione intrarticolare nella terapia dell'artrosi, secondo quanto descritto ad esempio dal brevetto EP 0 341 745, oppure da utilizzare anche come antiadesivo post-chirurgico, vedi ad esempio il brevetto US 4582 865.
Relativamente meno numerosi sono i brevetti o le pubblicazioni riguardanti gli esteri ottenuti sui gruppi ossidrilici di HA con acidi organici.
Tra questi citiamo US 5 679 567, in cui si descrive la preparazione di HA acetilato con vari gradi di sostituzione. W02005/092929 e Inv. New Drugs (2004), 22 (3), 207-217, descrivono derivati esterei di HA con l'acido butirrico, dotati di attività antiprolif erative e quindi potenzialmente utili per un impiego anti-tumorale, mentre in WO2008/081255 si descrivono altri derivati esterei di HA con l'acido butirrico, ma con un elevato grado di reticolazione e da impiegarsi quindi soprattutto come agenti visco-elasticizzanti per impiego intrarticolare. Altri derivati esterei di HA sono descritti da Picotti et al. in W02009/080220, in cui HA à ̈ esterificato con l'acido lipoico a dare derivati per uso dermocosmetico oppure come dispositivo medico per trattamento intrarticolare.
A nostra conoscenza non sono stati fino ad ora descritti esteri di polisaccaridi, e più specificatamente esteri di HA con derivati dell'acido idrossi-cinnamico, quali l'acido ferulico e l'acido caffeico, per l'utilizzo dermoprotettivo come composti ad attività elasticizzante, idratante, emolliente o come dispositivi medici ad attività anti-arrossante e lenitiva degli stati eritematogeni indotti da radiazioni, oppure come agenti di visco-supplementazione .
La presente invenzione descrive nuovi derivati esterei dell'acido ialuronico con dei derivati dell'acido idrossi-cinnamico, quali l'acido ferulico e l'acido caffeico, differenti dai derivati polisaccaridici precedentemente citati, che erano esterificati con acidi diversi, quali l'acido acetico, butirrico, lipoico.
Il grado di sostituzione dell'acido ialuronico esterificato secondo l'invenzione à ̈ modulabile e dipende dalle condizioni di reazione utilizzate, quali ad esempio i rapporti stechiometrici tra l'acido ialuronico ed il derivato idrossi-cinnamico preattivato con il carbonil-di-imidazolo, la quantità di base catalitica utilizzata ed il tempo di reazione ed à ̈ compreso, nell'ambito delle condizioni sperimentali studiate, tra il 2% ed il 20%.
Variando quindi il grado di esterificazione dell'acido ialuronico con la componente idrossicinnamica, variano le caratteristiche chimicofisiche e reologiche dei derivati ottenuti secondo l'invenzione. Tali derivati possono essere impiegati topicamente quali agenti idratanti, elasticizzanti, anti-invecchiamento, antiacne, o anche per trattare lesioni cutanee di varia natura, quali ferite, dermatiti atopiche, ipertermie cutanee indotte da radiazioni di varia natura.
L'invenzione rivendica anche il metodo di preparazione di tali derivati che à ̈ diverso ed innovativo rispetto a quanto noto. Tale metodo infatti prevede un recupero dei prodotti di reazione mediante precipitazione con acetone e successiva purificazione per trattamento con metanolo, filtrazione ed essiccamento sotto vuoto, che consente di allontanare le impurità del processo sintetico, senza la necessità di utilizzare dei procedimenti più lunghi e dispendiosi quali la dialisi o la filtrazione tangenziale, con successivo recupero del prodotto finale desiderato mediante liofilizzazione o spray drying.
ESEMPI
Gli esperimenti NMR sono stati registrati utilizzando uno strumento Bruker Avance 400. I campioni sono stati sciolti in D20 a pH 12 con l'ausilio di una goccia di KOD ad una concentrazione di circa 5 mg/ml.
Nella zona aromatica compresa tra 6 e 8 ppm si possono osservare i segnali aromatici dovuti all'esterificazione , mentre il segnale molto forte del singoletto del metile dell'acido ialuronico à ̈ visibile a circa 1.8 ppm. L'integrazione di questi segnali fornisce il grado di esterificazione dei campioni .
Esempio 1: Preparazione di estere ferulico dell'acido ialuronico con un grado medio di sostituzione (Composto 1)
3 g di Na ialuronato (mw 404; 7,9 meq. in unità monomerica, peso molecolare di 300 kD) sono sciolti a 90°C in 60 mi di formamide. Si raffredda a temperatura ambiente e si aggiunge alla soluzione densa così ottenuta 1,05 mi di trietilammina (7,5 meq.) e 0,5g di feruloylimidazolide (mw 244; 1,99 meq.), sospesi in 10 mi di formamide, e preparato secondo quanto descritto in Molecules 2007, 12, p. 2540 244, composto 12.
Si lascia in reazione una notte a temperatura ambiente e si diluisce con 15 mi di NaCl al 5%. La soluzione inizialmente molto vischiosa, diventata così più fluida, viene gocciolata in 1 litro di acetone anidro. Il precipitato così ottenuto,viene filtrato, rimesso in agitazione con 400 mi di acetone anidro, rifiltrato e rimesso nuovamente in agitazione con 200 mi di metanolo anidro.
Si filtra ed essicca sotto vuoto a 40°C; si recuperano 3,1 g di campione anidro.
Il composto così ottenuto viene analizzato mediante spettroscopia IR, NMR, analisi elementare.
Un grado di sostituzione (esterificazione) del 8% Ã ̈ stato ottenuto, calcolando il rapporto dei segnali d'integrazione (NMR) tra il segnale del gruppo metile di HA ed i segnali doppietto dell'acido ferulico. (vedi NMR figura 1).
Esempio 2: Preparazione di estere ferulico dell'acido ialuronico con un grado basso di sostituzione.
Si procede come nell'esempio 1, riducendo però il tempo di reazione prima dell'aggiunta di NaCl a sole 2 ore. Si sono così ottenuti 2,8 g di composto anidro, con un grado di esterificazione del 4% (vedi NMR figura 2).
Esempio 3: Preparazione di estere ferulico dell'acido ialuronico con un alto grado di sostituzione.
Si procede come nell'esempio 1, aumentando però il tempo di reazione prima dell'aggiunta di NaCl a 24 ore e la quantità dell'imidazolide a 1,9 g (7,9 meq.) Si sono così ottenuti 3,3 g di composto anidro, con un grado di esterificazione del 17% (vedi NMR figura 3).
Esempio 4; Preparazione di estere caffeico dell'acido ialuronico.
Ad una soluzione di acido caffeico (0,51 g, 2,83 mmoli) in THF anidro (10 mL) à ̈ stato aggiunto 1,1 '-carbonildiimidazolo (CDI, 0,92 g, 5,67 mmoli). La miscela risultante à ̈ stata mantenuta a riflusso per 1 h e la miscela di reazione à ̈ stata utilizzata direttamente nel passaggio successivo.
In un pallone a 2 colli posto in bagno di sabbia, il sodio ialuronato (3,0 g, 7,92 mmoli in unità monomerica) à ̈ stato solubilizzato in formammide (60 mL) a 70°C in 1 h. La soluzione viscosa ed incolore così ottenuta à ̈ stata raffreddata a temperatura ambiente ed addizionata di TEA (1,1 mL, 7,92 mmoli) e della soluzione in THF dell'imidazolide (circa 2,8 mmoli). La miscela à ̈ stata agitata fino ad ottenere una soluzione omogenea aranciorossastra. La viscosità e la consistenza della soluzione aumentano a tal punto da portare in pochi minuti alla formazione di un agglomerato gelatinoso arancio-rossastro (gommoso ed elastico). Dopo una notte a riposo a temperatura ambiente, l'agglomerato à ̈ stato addizionato di una soluzione di NaCl 5% p/v (15 mL).
Il gel ottenuto à ̈ stato trattato con 200 mi di acetone, filtrato, risospeso sotto agitazione per due volte con 100 mi di metanolo, filtrato ed essiccato sotto vuoto. Si sono così ottenuti 2,5 g di prodotto anidro, color giallo ocra.
Un campione di circa 6 mg del polimero à ̈ stato fatto rigonfiare in 0,7 mL di D20 per ottenere un gel perfettamente trasparente ed incolore. Il gel à ̈ stato trasferito in un tubo da NMR e l'analisi (figura 4) ha rivelato i segnali doppietto tra 6 e 7,2 ppm, attribuibili agli idrogeni aromatici dell'acido caffeico esterificato ed il forte segnale singoletto del gruppo metile a 1,8 ppm. L'aggiunta di una goccia di NaOD al 40% in D20 ha permesso di quantificare il grado di derivatizzazione del sodio ialuronato, che à ̈ risultato essere pari allo 7%. Esempio 5: Valutazione della resistenza alla degradazione enzimatica
La presenza di microrganismi sull'epidermide determina una notevole attività biologica sulla pelle, attività che appare sotto forma di varie funzioni enzimatiche, tra cui quella svolta dall'enzima ialuronidasi. L'acido ialuronico (HA) à ̈ degradato naturalmente a causa della presenza di questo enzima, che ne catalizza la degradazione mediante idrolisi dei legami glicosidici 1,4 beta fra le unità monomeriche della catena polisaccaridica. L'HA cross-linkato à ̈ maggiormente resistente a questa azione enzimatica della ialuronidasi e tale resistenza aumenta all'aumentare del grado di reticolazione. L'esterificazione di HA con molecole aventi una struttura chimica opportuna quali i derivati dell'acido idrossi-cinnamico oggetto della presente invenzione ha permesso di ottenere dei composti con caratteristiche reologiche paragonabili agli HA reticolati, pur mantenendo un buon grado di solubilità in acqua.
Si sono usati 1'HA sale sodico commerciale (Peso molecolare 300 kD) usato nelle sintesi descritte precedentemente e due campioni di HA esterificato con acido ferulico a basso ed alto grado di esterificazione secondo quanto descritto rispettivamente agli esempi 2 e 3 sopra riportati.
L'esperimento à ̈ stato condotto secondo metodiche convenzionali.
Brevemente, una soluzione di polisaccaride (1 mg/ml) mantenuta a 37°C e contenente l'enzima in quantità pari a 0,1 mg/ml (Ialuronidasi testicolare bovina, tipo I-S, Sigma, 1000 U/mg) viene incubata a 37°C. Ad intervalli di tempo regolari nell'intervallo 0-2 h si prelevano campioni da 0,5 mi che vengono messi a 100°C per 5', filtrati al fine di eliminare l'enzima e successivamente analizzati mediante analisi cromatografica per esclusione dimensionale: una rielaborazione del cromatogramma permette di determinare la distribuzione dei pesi molecolari .
Dopo 30 minuti d'incubazione con l'enzima, 1'HA commerciale non esterificato ha subito una profonda degradazione, passando da un peso molecolare medio di circa 300 kD ad un valore circa dieci volte inferiore. Il campione relativo all'esempio 2, con un grado di esterificazione di circa il 4%, ha subito una degradazione di circa il 60%, mentre il campione relativo all'esempio3, con un grado di esterificazione elevato, ha subito solamente un limitato processo degradativo passando ad un peso molecolare medio di circa 250 kD.
Esempio 6: Studio reologico su un campione di HA esterificato con acido ferulico
Si à ̈ voluto confrontare il comportamento reologico di un composto secondo l'invenzione (campione relativo all'esempio 1) con quello del HA sale sodico (peso molecolare 300 kDalton) usato come materia prima di partenza per la preparazione degli esteri secondo l'invenzione.
Le misure reologiche sono state fatte utilizzando il reometro Rotovisco 1 Haake, sistema piatto/piatto, software Rheowin 323. La viscosità à ̈ stata misurata mediante gradiente di velocità del disco "shear rate" da 0,01 s(-l) a 500 s(-l) ed i campioni sono stati sciolti al 2% in soluzione salina di NaCl al 5%.
Il campione relativo all'esempio 1 ha dimostrato un comportamento reologico di tipo pseudoplastico in cui la velocità diminuisce con l'aumentare della shear rate (vedi figure 5a e 5b). I parametri calcolati della curva di flusso, ottenuti applicando la relazione di Ostwald de Waele sono stati rispettivamente: K (Pa.s), cioà ̈ indice di consistenza di flusso eguale a 9,97 /- 0,53 (n=3) ed n=0,47 (indice comportamento di flusso, ovvero la pendenza della curva di viscosità, in scala logaritmica, al variare del gradiente di velocità).
In pratica questo risultato fa ritenere che l'esterificazione di HA con l'acido ferulico porti ad avere delle catene che a bassi "shear" assumono conformazioni d'ingombro non lineare non trascurabili , in grado di interagire tra loro. Aumentando lo sforzo applicato, le catene tendono ad allinearsi con il flusso, riportando il sistema al comportamento nativo.
Al contrario 1'HA nativo non modificato presenta un profilo tipico delle soluzioni, con un valore di K molto basso (K=0,40 Pa.s).
Esempio7 : Attività anti-ROS del composto HA ferulato (Esempio 1) su neutrofili umani attivati
Si à ̈ voluto valutare se i composti secondo l'invenzione potevano conservare l'attività antiossidante, anti-radicalica (scavanger) dei substrati acidi idrossi-cinnamici impiegati per l'esterificazione di HA.
Si à ̈ quindi studiato la capacità del composto 1 nell 'inibire in vitro l'attività di molecole reattive dell'ossigeno (ROS) prodotte da leucociti neutrofili umani, attivati dal Forbolo-miristato-acetato (PMA), in presenza di Luminol, una sostanza che in presenza di ossidanti come ad esempio H2O2 esibisce chemiluminescenza.
Pertanto aliquote di sospensioni cellulari di leucociti (10<Λ>6 cellule /mi) sono state incubate con il composto 1, sciolto in opportuno tampone in presenza di Luminol (5 microM). Le cellule sono state incubate a 37° per 10 minuti con il composto 1 oppure con HA sale sodico nativo alla concentrazione di 0,02 e 0,2 mM. Successivamente le cellule sono state attivate con 0,1 microM di PMA e la chemiluminescenza à ̈ stata monitorata per 20 minuti ad intervalli di 4 minuti con il lettore di fluorescenza HTS7000 (Perkin Elmer).
Il Composto 1 ha esibito un massimo di inibizione del 78% alla concentrazione maggiore testata, mentre l'HA à ̈ risultato praticamente inattivo, a dimostrazione che l'inserimento dell'acido ferulico nel polisaccaride non ha diminuito l'attività antiradicalica del substrato di partenza.
Esempio 8: Preparazione di una crema emolliente 0/W con filtro solare
Si à ̈ voluto preparare un esempio, non limitante l'invenzione, di formulato in crema contenente un derivato estereo secondo l'invenzione, rinforzata con l'aggiunta di una sostanza dotata di un fattore di protezione solare (UVB) come il gamma-orizanolo, onde integrare l'azione della "moiety" cromofora del polisaccaride modificato.
Il preparato contiene il composto 1 descritto nell'esempio 1 alla concentrazione del 2%, miscelato con comuni eccipienti usati in dermatologia, quali emulsionanti, conservanti, emollienti solventi ed un prodotto ad attività protettiva contro le radiazioni solari, il gamma-orizanolo.
Brevemente, il procedimento di preparazione à ̈ stato il seguente:
a) fase grassa: in un dissolutore sono stati sciolti sotto agitazione scaldando a circa 80°C il di-caprilil carbonato, il coco-caprilato, il poligliceril-2-dipoli-idrossistearato ed il fenossietanolo; a dissoluzione della massa avvenuta si à ̈ aggiunto il gamma-orizanolo;
b) fase acquosa: in un turboemulsore si à ̈ caricato l'acqua, il sodio deidroacetato ed il compostol; si à ̈ scaldato a circa 60°C fino a dissoluzione, quindi si sono aggiunti sempre sotto leggera agitazione gli altri componenti e cioà ̈ il sodio lauril glucosio carbossilato/lauril glucoside miscela emulsionante ed il metilpropandiolo/ fenilpropanolo miscela conservante;
c) emulsione: la fase grassa à ̈ stata versata sotto agitazione nella fase acquosa, quindi si à ̈ azionato la turbina per circa 10 minuti, e infine si à ̈ raffreddato lentamente sempre sotto agitazione fino alla temperatura di 20/25°C la massa di reazione.
Si à ̈ così ottenuta una crema con la composizione seguente (% in peso):
Compostol 2 Dicaprilil carbonato Emolliente 10 Coco-caprilato Emolliente 10 Poliglic. -dipolidrossistearato Emulsionante 8 Fenossi-etanolo Conservante 1 Gamma-Or izanolo Filtro UVB 4 Sodio-deidroacetato Conservante 0,5 Metilpropandiolo/Fenilpropanolo Conservante 1,5 Sodiolaurilglucosio carbossilato Emulsionante 1,5 Lauril glucoside Emulsionante 1,5 Acqua quanto basta a 100.
Esempio 9: Saggio funzionale di attività dermocosmetica
Con la formulazione prototipo illustrata nell'esempio precedente si sono investigate delle attività funzionali dermocosmetiche quali idratazione ed elasticità cutanea eseguito da un panel di volontari appositamente addestrato. In tale studio si à ̈ paragonata l'attività del formulato dell'esempio 8 con lo stesso formulato privo dell'ingrediente attivo (Bianco) su due gruppi di volontari trattati due volte al giorno per un periodo di 4 settimane (tempi TO e T4w).
a) Elasticità cutanea: la valutazione dell'elasticità cutanea à ̈ stata effettuata con il "cutometro", uno strumento di misura che tramite una sonda applicata alla pelle produce all'interno della sonda stessa una pressione negativa (aspirazione) della durata di un secondo seguita da un rilascio. L'elasticità viene calcolata dal rapporto tra la deformazione residua e l'estensione massima della pelle. Tale rapporto noto in letteratura come parametro R2 indica la capacità della pelle di ritornare al suo stato originale di riposo in seguito ad un evento stressante. Più il valore tende a 1 maggiormente elastica sarà la pelle.
Il trattamento con il gruppo relativo al formulato dell'esempio 8 ha dato una variazione % del parametro R2 al tempo T4w verso il tempo iniziale TO del 27,5% (p<0,05 t test), mentre la stessa variazione % per il gruppo di trattamento Bianco à ̈ risultata non significativa. Questo risultato ha evidenziato come il Composto 1 secondo l'invenzione possiede una notevole attività elasticizzate, esplicata mediante l'incremento del parametro R2, che non si à ̈ riscontrata nel gruppo di confronto preparato con gli stessi eccipienti,
b) Idratazione cutanea: il livello di idratazione della cute del viso à ̈ stato misurato con un corneometro, uno strumento che misura 1'idratazione cutanea basandosi sul principio fisico della capacitanza. L'apparecchio à ̈ costituito da un sensore quadrato di 49 mm 2 di area. Premendo la superficie del sensore su una zona piana della cute del viso, lo strumento fornisce un numero proporzionale al contenuto di acqua dello strato corneo. Tale cifra fornisce pertanto la misura del livello di idratazione della superficie cutanea, espressa come unità corneometriche (da 0 a 150 u.c.), unità arbitrarie dello strumento.
Al termine del test il gruppo trattato con il formulato dell'esempio 8 ha registrato un aumento della variazione % dei valori di idratazione cutanea pari al 4,8% contro nessuna variazione del gruppo di trattamento Bianco di confronto. Tale aumento à ̈ risultato essere tuttavia proprio al limite della significatività, risultato probabilmente legato alla relativamente bassa numerosità (n=10) del panel utilizzato.

Claims (16)

  1. RIVENDICAZIONI 1. Esteri dell'acido ialuronico con derivati dell'acido idrossi-cinnamico.
  2. 2. Esteri dell'acido ialuronico secondo la rivendicazione 1, in cui i derivati dell'acido idrossicinnamico sono l'acido ferulico e l'acido caffeico.
  3. 3. Esteri dell'acido ialuronico in accordo con la rivendicazione 1, in cui il peso molecolare dell'acido ialuronico à ̈ compreso tra 200mila e 400mila Daltons .
  4. 4. Esteri dell'acido ialuronico secondo la rivendicazione 2, in cui il grado di sostituzione degli acidi ferulico e caffeico sul polisaccaride à ̈ compreso tra il 2% ed il 20%.
  5. 5. Procedimento per la preparazione degli esteri dell'acido ialuronico (HA) secondo la rivendicazione 1, che consiste nel sciogliere l'acido ialuronico sale sodico in formamide, farlo reagire, in presenza di una quantità equivalente di una base terziaria, con un derivato dell'acido idrossicinnamico precedentemente attivato con carbonil-diimidazolo (CDI) a temperatura ambiente, diluire la massa viscosa con una soluzione acquosa di NaCl, recuperare il prodotto di reazione per precipitazione con acetone, successiva purificazione con me tanolo, filtrazione ed essiccamento sotto vuoto.
  6. 6. Procedimento secondo la rivendicazione 5, in cui il derivato idrossi-cinnamico à ̈ l'acido ferulico.
  7. 7. Procedimento secondo la rivendicazione 5, in cui il derivato idrossi-cinnamico à ̈ l'acido caffeico.
  8. 8. Procedimento secondo la rivendicazione 5, in cui l'acido attivato con CDI Ã ̈ presente in un rapporto rispetto ad HA compreso tra 0,25 ed 1 equivalenti a seconda del grado di esterificazione che si desidera ottenere, compreso tra il 2% ed il 20%.
  9. 9. Procedimento secondo la rivendicazione 5, in cui HA Ã ̈ fatto reagire con l'acido attivato con CDI per un tempo compreso tra 1 e 24 ore a seconda del grado di esterificazione che si desidera ottenere, compreso tra il 2% ed il 20%.
  10. 10. Esteri dell'acido ialuronico secondo la rivendicazione 1 per l'uso nel trattamento topico di lesioni cutanee come ferite, ulcere, dermatiti, psoriasi, ipertermie indotte da irraggiamento.
  11. 11. Esteri dell'acido ialuronico secondo la rivendicazione 1 per l'uso nel trattamento topico come idratanti, elasticizzati, anti-invecchiamento, anti-acne .
  12. 12. Esteri dell'acido ialuronico secondo la rivendicazione 1 per l'uso nel trattamento intrarticolare come agente di visco-supplementazione.
  13. 13. Composizioni topiche comprendenti esteri dell'acido ialuronico secondo la rivendicazione 1 ed eccipienti inerti dermatologicamente accettabili.
  14. 14. Composizioni topiche secondo la rivendicazione 13, che comprendono una percentuale di estere dell'acido ialuronico compresa tra lo 0,1% e 5% in peso della composizione.
  15. 15. Composizioni topiche secondo la rivendicazione 13, in forma di crema, gel, pomata, lozione acquosa o idro-alcolica, emulsione olio/acqua o acqua/olio.
  16. 16. Esteri dell'acido ialuronico secondo la rivendicazione 1, in cui il gruppo carbossilico à ̈ salificato con sodio.
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