JPS5815120B2 - セイブツガクテキカスイブンカイニヨル ユウキサンルイ ノ セイゾウホウ - Google Patents

セイブツガクテキカスイブンカイニヨル ユウキサンルイ ノ セイゾウホウ

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JPS5815120B2
JPS5815120B2 JP49108288A JP10828874A JPS5815120B2 JP S5815120 B2 JPS5815120 B2 JP S5815120B2 JP 49108288 A JP49108288 A JP 49108288A JP 10828874 A JP10828874 A JP 10828874A JP S5815120 B2 JPS5815120 B2 JP S5815120B2
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AJANSU NASHONARU DO BARORIZASHION DO RA RUSHERUSHE
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Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、対応するニトリルの生物学的な加水分解によ
る有機酸類の製造法に関する。
たとえば乳酸やアミノ酸類のような、経済的に重要な有
機酸類の製造については、対応するニトリルの化学的加
水分解により製造することがすでに提案されている。
しかし、この方法は、とくにつぎの理由から、必らすし
も常に適用できない。
すなわち、ニトリルのうちには化学的加水分解に応じな
いものがあり、この場合、この作用を実現するためには
迂回した方法による必要があり、たとえば、α−アミノ
酸類の場合、ヒダントインを通すことが考えらたるか、
この方法は有効であっても、プロセス上経費がかかる。
その他の場合は、化学的加水分解の生成物は、反応培地
の他成分からの分離が困難である。
本発明は、こわれやすい化合物を取扱う場合にとくに好
ましい緩やかな条件下で、実際上すべてのニトリル類の
加水分解を可能にする方法を提案するものであり、この
方法自体が実施きわめて容易で、かつ、生成された酸の
反応培地からの分離を容易に行なうことができる。
本発明の方法においては、対応するニトリルを水溶液状
で、ニトリル活性（ａｃｔｉｖｉ ｔｅ ｎｉ ｔｒｉ
ｌａｓｔｉｇｎｅ）示すバクテリアと反応させ、つぎに
バクテリアを酸溶液から分離することによって、上記ニ
トリルから有機酸が得られる。
本発明の方法で使用されたニトリル活性を有するバクテ
リアはバチルス属、ｐｒｅｖｏｔの意味でのバクテリジ
ウム属、ミクロコツカス属、Ｂｅｒｇｅｙの意味でのブ
レビバクテリウム属の中から選ぶのが好ましい。
より望ましくは、モントペリエの国立農業高等学校の遺
伝学講座のコレクションに係官番号Ｒ３３２、Ｒ３４０
、Ｒ，３４１、Ａ１１１ 、Ｂ２２２゜Ａ１１２．Ａ１
３．Ａ１４１．Ａ１４２．Ｂ２１１゜Ｂ２１２．Ｂ２２
１．Ｃ２１１，Ｒ２１，Ｒ２２゜Ｒ３１１、Ｒ３１２，
Ｒ３３１で係官されている、第１表および第■表に記載
の形態学的、生理学的特徴を示す菌株の中から選ぶ。
ニトリル溶液は、バクテリアと反応させる前に、たとえ
ば苛性カリまたはアンモニアにより調節して弱い塩基性
のｐＨにするとよい。
本発明の方法においては、培地で培養後のニトリル活性
を有する菌株を二ｌ−ＩＪル水溶液中に懸浮させ、これ
らの菌株により数時間で上記溶液の加水分解が実現され
る。
溶液のｐＨは弱い塩基性（たとえば、ｐＨ８）または中
性に保持するが、加水分解を完全なものにするためには
、約１時間後に溶液のｐＨを弱い酸性にすることが、し
ばしば、必要となる。
加水分解が完了すると、すなわち、概して数時間後に、
生物学的方法で既知のあらゆる手段で、たとえば遠心分
離で、バクテリアを除去する。
一方、酸は既知の方法で、たとえば抽出、沈澱などによ
り溶液から抽出する。
本発明の好ましい実施法によれば、土、水または工業廃
棄物のような各種の細菌源により、ベトり皿に注入した
、Ｙｅａｓｔ ｃａｒｂｏｎ ｂａｓｅ Ｄｉｆｃ。
１．１７％、アセトニトリル０．１％、ゲロース２．５
％を含む培地に接種することによってニトリル活性を有
するバクテリアの菌株を選択する。
形成されるコロニーを分離し、ついで培養物を稀釈し同
一培地上に塗布して浄化する。
こうして得られたクローンを研究する。
選択した菌株は、たとえばグルコース化したＹｅａｓｔ
ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｂａｓｅ Ｄｉｆｃｏのような、
鉱物質とアンモニア、ビタミン、グルコースを含む培地
に保存することができる。
前記のプロセスにより選択した菌株のニトリル活性はき
わめて一般的である。
すなわち、本明細書に記載した菌株は次のような化合物
をほぼ一様に加水分解することができる。
Ｏアセトニトリルのような単純なニトリル類０ α−ア
ミノプロピオニトリル、α−アミノ−−メチルチオブチ
ロニｌ−ＩＪル、α−アミノブチロニトリル、アミノア
セトニトリルのようなα−アミノニトリル類 ○ ラクトニトリル、ヒドロキシアセトニトリルのよう
なα−ヒドロキシルニトリル類 Ｏアミノ−３−プロピオニトリルのようなβ−アミノニ
トリル類 ０７０ニトリルのようなジニトリル類 Ｏアクリロニトリルのようなα−不飽和二トリル類 Ｏホモベラトリンニトリルのようなα−ベンゼンニトリ
ル類 前記の選択プロセスにより、出願人は１８の菌株を分離
したが、これらの菌株は出願人の方法を実施する上でと
くに好ましいニトリル活性を示し、つぎの共通した特徴
を有する。
０ グラム陽性、耐アルコール・酸性陰性Ｏ好気性きび
しい、カタラーゼ陽性 ○ ガスを生成せず、かつ酸性化することなく酸化法に
よるグルコース、サッカローズ、マルトーズ、ラクトー
ズの利用可能。
どの菌株もアルコールを形成しない。
でん粉は加水分解しないが、じゃがいもで生長。
○ じゃがいもによるチロシナーゼ検査陰性。
Ｏビタミン要求あり、 ０ ゼラチンの加水分解なし。
Ｏアンモニアおよび唯一の窒素源としての硝酸塩で成長
。
０ 硫化水素の発生なし。
Ｏ塩分過多な気泡の存在下での成長なし。
全菌株が硝酸塩による培養末期にアンモニアを生じるほ
か、Ｂ２２１ 、Ｂ２１１ 、Ｂ２１２゜Ｃ２１１を除
き、亜硝酸塩を生じる。
Ｂ２２２菌株は硝酸塩からガスを発生する。
Ｃ２１１，Ｒ３１２，Ｂ２２２．Ａ１１１゜Ｒ３４０，
Ｒ３３２が下記番号の下にＣｅｎｔｒａａｌＢｕｒｅａ
ｕ ｖｏｏｒ Ｓｈｉｍｍｅｌ−ｃｕｌｔｕｒｅｓ （
オランダ）に保管された。
Ｃ２１１：ＣＢ５ Ｒ３１２：ＣＢ５７１７−７３ Ｂ２２２：ＣＢ５ Ａ１１１：ＣＢ５ Ｒ３４］ ：ＣＢ５ Ｒ３４０：ＣＢ５ Ｒ３３２：ＣＢ５ Ｒ３３２ｉ１株はＢａｃｉｌｌｕｓ類に属するが、たん
ばく質分解性が弱い。
Ｒ３４０，Ｒ３４１菌株はＰｒｅｖｏｔの意味での１３
ａＣｊｅｒｉｄｉｕｍ類に近い。
その他の菌株は無胞子である。
Ａ１１１菌株はＭｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓである。
その他のすべての菌株はＢｅ ｒ ｇｅ ｙの意味での
Ｂｒｅｖｉｂａｃｓｅｒ ｉｕｍ類に近い。
Ｂ２２２菌株がＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｉｍｐｅ
ｒｉａｌｅにきわめて近いことは注目を要する。
前記の菌株の種々の特性を整理すると、次の通りである
。
（ａ）形態 １）小枠状態（１，８〜３．６ ） 、、、Ｘｏ、９
、、。
２）目だった多形性なし ３）低運動性（運動性試験） ４）胞子あり、（９５℃で２０分間の耐性）５）ダラム
陽性 ６）抗酸性及び抗アルコールなし くｂ） 次の各培地における生育状態 １）培養旧中のゲロース処理培地での培養において、コ
ロニーは円形、平滑、凸状、もも色であり、且つ多数の
稜を有する。
２）傾斜寒天において波形培養 ３）液体培地において被膜培養 ４）ゼラチンを加水分解せず。
（ｃ） 生理的特性 １）硝酸塩の還元：＋ ２）脱窒反応：＋ ３）ＲＭテストニー ４）ＶＰテスト二強十 ５）インドールを生成せず ６）硫化水素を生成せず ７）デンプンを加水分解しないが、じゃがいもで生長 ８）クエン酸を使用せず ９）唯一の窒素源であるアンモニアおよび硝酸塩で生長 １０）培地内に拡散しない細胞内もも色色素を生成 １１）ウレアーゼ゛：十 １２）オキシダーゼニー １３）カタラーゼ：＋ １４）最適ｐＨ＝６．５、最適温度＝約３０℃１５）完
全に好気性 １６）糖類からガス及び酸類を生成せず （ｄ） 新種の特徴を示す性質 １）アルコール、ガス及び酸類を生成せず２）過塩性培
地では成長せず ３）シアン化カリウムに対する耐性あり ４）ビタミン要求 ５）（イ）卵白を加水分散せず （ロ）じゃがいものチロシナーゼ（Ｔｙｒｏｓｉｎ−ａ
ｓｅ）調査テスト：陰性 （ハ）酸化手段によりグルコース、スクロース、マルト
ース及び乳糖を利用 に）ニトリルを加水分散 （ホ）硝酸塩での培養の終了時にアンモニアを生成し、
さらに窒化物を生成。
菌株バチルスＲ３４０（ＦＥＲＭ−Ｐ） （ａ）形態 ■）小桿状２７μ×０．９μ ２）目だった多形性なし ３）運動性なしく運動性試験） ４）胞子あり（９５°Ｃで２０分間の耐性）５）ダラム
陽性 ６）抗酸性及び坑アルコール性なし くｂ） 次の各培地における生育状態 １）培養面中のゲ脳−ス処理培地での培養において コ
ロニーは円形で小さく、白色且つ多数の稜を有する。
２）傾斜寒天において波形培養 ３）液体培地において被膜状培養 ４）ゼラチンを加水分解せず （ｃ） 生理的特性 １）硝酸塩の還元：＋ ２）脱窒反応：＋ ３）ＲＭテストニー ４）ＶＰテストニー ５）インドールを生成 ６）硫化水素を生成せず ７）デンプンを加水分解しないが、じゃがいもで成長 ８）クエン酸を使用 ９）唯一の窒素源であるアンモニアおよび硝酸塩で成長 １０）生長の終了時（古い培地）において現れ且つ培地
内に拡散しない細胞内もも色色素を生成 １１）ウレアーゼ：十 １２）オキシダーゼニー １３）カタラーゼ：＋ １４）最適ｐＨ＝６．５、最適温度＝約３０℃１５）完
全に好気性 １６）糖類からガス及び酸類を生成せず （ａ） 新種の特徴を示す性質 ■）アルコール、ガス及び酸類を生成せず２）過塩性培
地では生長せず ３）シアン化カリウムに対する耐性あり ４）ビタミン要求 ５）（イ）卵白を加水分解せず （ロ）じゃがいものチロシナーゼ調査テスト：陰性 （ハ）酸化手段によりクルコース、クルロース、マルト
ース及び乳糖を利用 に）ニトリルを加水分解 （羽 硝酸塩での培養の終了時にアンモニアを生成し、
さらに窒化物を生成。
菌株バクテリジウム Ｒ３４，１（ＦＥＲＭ−Ｐ２７１
９）（ａ）形態 １）小桿状２．７４μ×０．９μ ２）目だった多形性なし ３）運動性なしく運動性試験） ４）胞子あり（９５℃で２０分間の耐性）５）ダラム陽
性 ６）抗酸性及び坑アルコール性なし くｂ） 次の各培地における生育状態 １）培養皿中のゲロース処理培地での培養において、コ
ロニーは大きく、非常に粗状であり白く、且つ平担であ
る。
２ 傾斜寒天において波形培養 ３）液体培地において被膜状培養 ４）ゼラチンを加水分解せず （ｃ） 生理的特性 １）硝酸塩の還元：十 ２）脱窒反応：＋ ３）ＲＭテストニー ４）ＶＰテストニー ５）インドールを生成 ６）硫化水素を生成せず ７）デンプンを加水分解しないが、じゃがいもで成長 ８）クエン酸を使用せず ９）唯一の窒素源であるアンモニアおよび硝酸塩で成長 １０）生長の終了時（古い培地）において現われ且つ培
地内に拡散しない細胞内ピンク色素を生成 １１）ウレアーゼ：＋ １２）オキシダーゼニー １３）カタラーゼ：＋ １４）最適ｐＨ＝６．０、最適温度＝約３０℃１５）完
全に好気性 １６）糖類からガス及び酸類を生成せず （ｄ） 新種の特徴を示す性質 １）アルコール、ガス及び酸類を生成せず２）過塩性培
地では生長せず ３）シアン化カリウムに対する耐性あり ４）ビタミン要求 ５）（イ）卵白を加水分解せず （ロ）じゃがいものチロシナーゼ調査テスト：陰性 （ハ）酸化手段によりグルコース、スクロース、マルト
ース及び乳糖を利用 に）ニトリルを加水分解 （ホ）硝酸塩での培養の終了時にアンモニアを生成し、
さらに窒化物を生成。
菌株ミクロコツカスＡ１１１ （ＦＥＲＭ−Ｐ ２７２
０）（ａ）形態 １）小球状０９μ〜１．８μ ２）目だった多形性なし ３）運動性なしく運動性試験） ４）胞子なし ５）ダラム陽性 ６）抗酸性及び坑アルコール性なし くｂ）次の各培地における生育状態 １）培養皿中のゲロース処理培地での培養において、コ
ロニーは円形で、小さく、ひだがあり、凸状で、もも色
で、且つ丸い稜を有する。
２）傾斜寒天において波形培養 ３）液体培地において被膜状培養 ４）ゼラチンを加水分解せず （ｃ） 生理的特性 １）硝酸塩の還元：＋ ２）脱窒反応：十 ３） Ｒ，Ｍテストニー ４）ＶＰテスト：剥土 ５）インドールを生成 ６）硫化水素を生成せず ７）デンプンを加水分解しないが、じゃがいもで生長 ８）クエン酸を使用 ９）唯一の窒素源であるアンモニアおよび硝酸塩で生長 １０）培地内に拡散しない細胞内もも色色素を生成 １１）ウレアーゼ゛：十 １２）オキシダーゼニー １３）カタラーゼ：＋ １４）最適ｐＨ＝６．５、最適温度二約３０℃１５）完
全に好気性 １６）糖類からガス及び酸類を生成せず （ｄ） 新種の特徴を示す性質 ■）アルコール、ガス及び酸類を生成せす２）過塩性培
地では成長せず ３）シアン化カリウムに対する耐性あり ４）ビタミン要求 ５）（イ）卵白をわずかに加水分散 （ロ）じゃがいものチロシナーゼ調査テスト：陰性 （ハ）酸化手段によりグルコース、スクロース、マルト
ース及び乳糖を利用 に）ニトリルを加水分散 （羽 硝酸塩での培養の終了時にアンモニアを生成し、
さらに窒化物を生成。
菌株ブレビバクテリウム・インペリアル Ｂ２２２（Ｆ
ＥＲＭ−Ｂ２７２１） （ａ）形態 ■）小桿伏態（３，６〜４．５）μ×０．９μ２）目だ
った多形性なし ３）運動性あり（運動性試験）。
鞭毛は確認されず。
４）胞子なし。
８０℃で１０分間の加熱により細胞死滅 ５）ダラム陽性 ６）抗酸性及び坑アルコール性なし くｂ） 次の各培地における生育状態 １）培養皿中のゲロース処理培地での培養において、コ
ロニーは円形で小さく、且つ色は澄黄色である。
２）傾斜寒天において波形培養 ３）液体培地において被膜培養 ４）セラチンを加水分解せず。
（ｃ） 生理的特性 １）硝酸塩の還元：± 硝酸塩からガスを発生 ２）脱窒反応：＋ ３）ＲＭテストニー ４）ＶＰテストニー ５）インドールを生成せず ６）硫化水素を生成せず ７）デンプンを加水分解しないが、じゃがいもで生長 ８）クエン酸を使用 ９）唯一の窒素源であるアンモニアおよび硝酸塩で生長 １０）培地内に拡散しない細胞内もも色色素を生成 １１）ウレアーゼ：＋ １２）オキシダーゼニー １３）カタラーゼ：＋ １４）最適ｐＨ＝６０、最適温度＝約３０℃１５）完全
に好気性 １６）糖類からガス及び酸類を生成せず （ｄ） 新種の特徴を示す性質 １）アルコール、ガス及び酸類を生成せす２）過塩性培
地では成長せず ３）シアン化カリウムに対する耐性あり ４）ビタミン要求 ５）（イ）卵白を加水分散せず （ロ）じゃがいものチロシナーゼ（Ｔｙｒｏｓｉ−ｎａ
ｓｅ ）調査テスト：陰性 （ハ）ｉ［ｌＺ手段によりグルコース、スクロース、マ
ルトース及び乳糖を利用 に）ニトリルを加水分散 （ホ）硝酸塩での培養の終了時にアンモニアを生成し、
さらに窒化物を生成。
また硝酸塩からガスを発生 菌株ブレビバクテリウム Ｒ３１２（ＦＥＲＩＶｉ−Ｂ
２７２２） （ａ）形態 １）小桿状（４５）μ×０．９μ ２）目だった多形性なし ３）運動性なしく運動性試験） ４）胞子なし。
８０°Ｃで１０分間の加熱により細胞死滅 ５）ダラム陽性 ６）抗酸性及び坑アルコール性なし くｂ） 次の各培地に生育状態 ■）培養皿中のゲロース処理培地での培養において、コ
ロニーは円形、凸状且つ黄色であり、さらに多数の稜を
有する。
２）傾斜寒天において波形培養 ３）液体培地において被膜培養 ４）ゼラチンを加水分解せず （ｃ） 生理的特性 １）硝酸塩の還元：＋ ２）脱窒反応：＋ ３）ＲＭテストニー ４）ＶＰテストニー ５）インドールを生成せず ６）硫化水素を生成せず ７）デンプンを加水分解しないが、じゃがいもで生長 ８）クエン酸を使用 ９）唯一の窒素源であるアンモニアおよび硝酸塩で生長 １０）培地内に拡散しない細胞内もも色色素を生成 １１）ウレアーゼ：＋ １２）オキシダーゼニー １３）カフラーゼ：＋ １４）最適ｐＨ＝６．０、最適温度＝約３０℃１５）完
全に好気性 １６）糖類からガス及び酸類を生成せず （ｄ） 新種の特徴を示す性質 １）アルコール、ガス及び酸類を生成せす２）過塩性培
地では成長せず ３）シアン化カリウムに対する耐性あり ４）ビタミン要求（チアミン） ５）（イ）卵白をわずかに加水分解 （ロ）じゃがいものチロシナーゼ調査テスト：陰性 （ハ）酸化手段によりグルコース、スクロースマルトー
ス及び乳糖を利用 に）ニトリルを加水分散 （ホ）硝酸塩での培養の終了時にアンモニアを生成し、
さらに窒化物を生成。
菌株ブレビバクテリウム Ｃ２１１（ＦＥＲＭ −Ｐ２
７２３） （ａ）形態 １）小桿伏（３，６−８，１）μ×０．９μ２）目だっ
た多形性なし ３）低運動性（運動性試験） ４）胞子なし。
８０℃で１０分間の加熱により細胞死滅 ５）ダラム陽性 ６）抗酸性及び抗酸性アルコール性なし くｂ） 次の各培地に生育状態 １）培養皿中のゲロース処理培地での培養において、コ
ロニーは円形で、なめらかで、光沢があり、もも色であ
り、且つ多数の稜を有する。
２）傾斜寒天において波形培養 ３）液体培地において被膜状培養 ４）ゼラチンを加水分解せず （ｃ） 生理的特性 １）硝酸塩の還元：＋ ２）脱窒反応二十 ３）ＲＭテストニー ４）ＶＰテストニー ５）インドールを生成 ６）硫化水素を生成せず ７）デンプンを加水分解しないが、じゃがいもで生長 ８）クエン酸を使用 ９）唯一の窒素源であるアンモニアおよび硝酸塩で生長 １０）培地内に拡散しない細胞内もも色色素を生成 １１）ウレアーゼ：＋ １２）オキシダーゼニー １３）カタラーゼ゛：十 １４）最適ｐＨ＝６．０、般的温度−約３０℃１５）完
全に好気性 １６）糖類からガス及び酸類を生成せず （ｄ）新種の特徴を示す性質 １）アルコール、ガス及び酸類を生成せす２）過塩性培
地では生長せず ３）シアン化カリウムに対する耐性あり ４）ビタミン要求 ５）（イ）卵白を加水分解せず （ロ）じゃがいものチロシナーゼ調査テスト：陰性 （ハ）酸化手段によりグルコース、クルロース、マルト
ース及び乳糖を利用 に）ニトリルを加水分解 （ホ）硝酸塩での培養の終了時にアンモニアを生成する
が、さらに窒化物を生成せず。
場合により（たとえば、ホモベラトリンニトリル）ニト
リルの水溶性が弱いことが問題になるが、本発明の方法
に使用されるバクテリアのニトリル活性はさほど損われ
ない。
本発明の方法の一つの利点は、工程終期になお活性を有
するバクテリアをリサイクルさせることが可能であり、
このためある程度半連続的に作業し、つぎの反応の開始
に必要な苛性カリとアンモニアの供給量を減らすことが
できることである。
以下、本発明の方法の工業的応用例を若干示し、実癩の
態様を明らかにするが、本発明は何らこれによって限定
されない。
すなわち、本発明による菌株は、とくに炭素を含む培養
基としてヘキサデカンまたは「ガス油」を使用（これは
ガス油の脱パラフィン（ｄｅｐａｒ−ａｆｆｉｎａｇｅ
）を可能にする）するか、または完全な培地として脱脂
乳を使用することにより低コストの培地で培養すること
ができる。
本発明の方法のこれらの実施例はすべて、モントペリエ
の国立農業高等学校の遺伝学講座のコレクションならび
に保管番号ＣＢ５７１７−７３でＣｅｎｔｒａａｌ Ｂ
ｕｒｅａｕ Ｖｏｏｒ Ｓｃｈｉｍｍｅｌ Ｃｕ１ｔ−
ｕｒｅｓ （オランダ）に保管されているＲ３１２菌株
を使用して実施したものであり、選定した菌株の非特殊
性を証明することをとくに目的としている。
これは、実施例は全部Ｒ３１２菌株によったが、はとん
ど全部の選定菌株が以下に記述する加水分解を実現する
ことができるからである。
実施例 １ ラセミ体乳酸の製造 Ｒ３１２菌株を、炭素源としてグルコースを含む培地で
培養した。
成長後、細胞を遠心分離し、Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ
Ｗａｔｅｒで水洗してから、化学的合成で得られたラク
トニトリルの１０重量％溶液により構成した反応培地に
懸浮させた。
苛性カリまたはアンモニアでｐＨ８に調節した。
ｌ当たり約２０〜４０ｇの乾燥物であるバクテリア細胞
がかく押下２５℃で２〜３時間でニトリルの完全な加水
分解を行なった。
ここでバクテリア細胞を遠心分離により除去した。
表面に浮上ったものは、乾燥により定量的収率で回収可
能な乳酸アンモニウムを含む。
この生成物はここままで利用可能である。
すなわち、その用途は多く、たとえば、灰汁における石
灰抑制剤として利用できる。
また、既知のあらゆる方法で乳酸を回収することも可能
であり、たとえは、酸性化後に、エチルエーテルまたは
その他の適切な有機溶剤でもって定量的収率で連続抽出
が可能である。
この乳酸は食品工業で利用される一方、化学または薬品
工業で利用される。
実施例 ２ 実施例１の方法の変形 この方法においては、シアン酸の水溶液にアセトアルデ
ヒドの水溶液を前と同じ濃度でモル対モルで反応させる
ことにより、現場でラクトニトリルを合成した。
溶液のｐＨは、反応進行のため濃縮アンモニアを加えて
５の付近に調節した。
つぎに第２工程として、溶液のｐＨをアンモニアにより
８に調節し、バクテリア細胞を、ｌ当たり乾燥重量２０
〜４０ｇの割合で培地に懸濁させ、前記実施例と同様、
２〜３時間で加水分解を実現した。
実施例 ３ グリココルの製造 前記諸例と同じく、Ｒ３１２菌株を、炭素源としてグル
コースを含む培地で培養した。
成長後、細胞を遠心分離し、Ｒｈｙｓ ｉｏｌｏｇｉｃ
Ｗａｔｅｒで水洗してから、グリシノニトリル（塩化
水素の形）の６％水溶液で構成した反応培地に懸浮させ
た。
溶液のｐＨは苛性カリまたはアンモニアで８付近に設定
した。
ｌ当たり６０〜８０ｇの乾燥物であるバクテリア細胞が
２５℃で約５時間でｐＨ８で約１時間、ｐＨ７で次の４
時間ニトリルを酸に完全に転化する。
ここで細胞を遠心分離により除去し、ついで得られた溶
液の量を１１５に減らし、メタノールを冷態で加えてグ
ルココールを析出した。
実施例 ４ ラセミ体α−アラニンの製造 Ｒ３１２菌株を、炭素源としてグルコースを含む培地で
培養した。
成長後、細胞を遠心分離し、Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ
Ｗａｔｅｒで水洗してから、塩酸α−アミノプロピオニ
ｌ−ＩＪルの５重量％水溶液で構成した反応培地に懸浮
させた。
ｐＨを８に調節し、２時間この値に保持した。
ｌ当たり２０〜４０ｇの乾燥物であるバクテリア細胞が
かく押下に２５℃で２〜３時間で溶液の完全な加水分解
を実現した。
遠心分離による細胞の除去後、溶液はぎ当たり約４０ｇ
のα−アラニンを含み、これを既知の方法で回収した。
実施例 ５ β−アラニンの製造 Ｒ３１２菌株を前と同様に培養し回収した。
アミノ−３−プロピオニトリルの５車量％水溶液により
構成した反応培地にこれを懸浮させ、ｐＨを８にし、３
０分間この値に保持した。
つぎにｐＨを７にし、かく押下で２５℃で５時間この値
に保持した。
ｌ当たり６０〜８０ｇの乾燥物であるバクテリア細胞が
これらの条件の下で完全な加水分解を実現した。
遠心分離による細胞の除去後、溶液はｌ当たり６０ｇの
β−アラニンを含み、これを既知の方法で回収した。
実施例 ６ ラセミ体メチオニンの製造 Ｒ３１２菌株を前と同様に培養し回収した。
水中で６重量％のα−アミノ−−メチルオブチロニトリ
ルの硫酸塩で構成した反応培地に菌株を懸浮させ、ｐＨ
を８に調節した。
ｌ当たり２０〜４０ｇの乾燥物であるバクテリア細胞が
かく押下に２５℃で３時間後加水分解を実現した。
遠心分離による細胞除去後、溶液の量を１／３に減らし
ｐＨ７にした。
メチオニンが析出された。収率は８０％台であった。
実施例 ７ 実施例２と同様に、正規組成割合（Ｐｒｏｐｏｒｔ−ｉ
ｏｎｓ ｓｔｏｅｃｈｉｏｍｅｔｒｉｇｕｅｓ）のメチ
ルメルカプトプロピオンアルデヒド、アンモニア、アル
カリシアン化物からα−アミツー−メチルチオブチロニ
トリルを現場で製造することができた。
反応が完了したとき、バクテリアを懸浮させ、実施例６
と同様に操作した。
シアン化物の有毒性を考慮して、反応平衡について若干
指摘する必要がある。
加水分解されたニトリルがシアン酸と平衡状態に入る場
合、一方では、測定した定数はすべての場合ニトリルに
きわめて好適であり、また他方では、加水分解反応によ
り平衡が崩れ、培地中に存在するシアン化物が消滅し完
全に利用される。
ただし、あらゆる事故を防止するため生成物中のシアン
化物の濃度コントロールを恒常的に確実にする必要があ
る（当初における正規組成割合不良は常に可能である。
）。以上により、この方法は緩やかな条件下で簡単な反
応培地により多数のニトリルを加水分解し、きわめて純
粋な化合物をほぼ定量的収率をもって得ることを可能に
する。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. １ バチルス属、バクテリジウム属、ミクロコツカス属
    及びブレビバクテリウム属から選ばれたニトリル加水分
    解活性を有するバクテリアを、水溶性のニトリルと反応
    させることを特徴とする、対応するニトリルの加水分解
    による有機酸類の製造法。
JP49108288A 1973-09-19 1974-09-19 セイブツガクテキカスイブンカイニヨル ユウキサンルイ ノ セイゾウホウ Expired JPS5815120B2 (ja)

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