JPH03500407A - グリコシドのモノエステルおよびその酵素的製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 新規有機化合物及びその製造方法 本発明は新規なグリコシドエステル並びに該化合物の酵素的合成方法に関する。

主恩Ω背景 界面活性化合物は、極めて重要な種類の工業的有機薬品を構成し、多種多様の用 途、例えば洗浄の目的のための洗剤として、食品及び飼料製品に配合される乳化 剤として、あるいはまたシャンプー、保湿性クリーム等のような多くの個人的な 嗜好品における機能的成分としての用途が見い出されている。

基本的には、界面活性剤は分子レベルで、個々の界面活性剤分子内の疎水性及び 親水性領域の洗剤にそれらの性質が特徴づけられかつ負っている。この特定の集 団は多くの形式で確立出来、例えば硫酸残基、４級アンモニウム物質またはグリ セロール部分を、直鎖のアルキル界面活性剤、４級アルキルアミン及びモノグリ コシドにおけるごとくそれぞれアルキル鎖と結合させることによって確立される 。このような界面活性剤の実際の企画において、化合物の詳細な分子構造に対し て多くの考慮が払われており、重要な点は、界面活性剤分子の疎水性及び親水性 領域間の正確なバランス並びに分子のこれらの部分の実際の特定の配置にある。

さらに、界面活性剤を、高い収率を与えるプロセスで並びに合理的なコストで入 手可能な材料をもとにして実際に製造出来る可能性に対し考慮が払われるべきで ある。界面活性剤を周囲の環境に必然的に放出するような環境的問題は、最終的 に重要な関心事である。

これらのことを考慮して、垢及び脂肪酸を基礎にして界面活性剤分子、例えば糖 エステルを製造することに多年にわたって興味が持ち続けられてきている。これ らの縮合体は、親水性の糖領域及び親油性の脂肪酸残基の存在のため界面活性の 性質を示すことが期待された。バランス、すなわち縮合体の正確な割合は、糖及 び脂肪酸残基の性質の変化により変わりうるであろう；原料は非常に安い原材料 から製造することが出来；さらに天然の成分から構成されかつそれら６二分解し 、うる界面活性剤は、環境に悪影響を与えることはない。界面活性剤の特別な例 として、次の文献すなわち乃」土ｉ　、Ｊ、Ｃｏｃｏｎｕｔｓｔｕｄ、５（１９ ８０）、　５１等が参照され、ここにおいて、メチルグルコピラノシドのココナ ツツ脂肪酸エステルが記載されている。

しかし、この論文においてはこれらの界面活性剤が洗剤に対する添加剤として使 用されることに関しては記載されていない、洗剤に対する添加剤である、特別な 商業的に用いられる界面活性剤の例として、ベロウル社（スウェーデン）により 製造されているベロウル０６５及びベロウル１６０（脂肪アルコールエトキシレ ート）が言及される。多くの試みにもかかわらず、常法による純粋な媚エステル の合成及び製造は、非常に困難であることが判明している。この理由は、とりわ け、エステル化剤にさらされた場合いくつかの箇所でエステル化される糟分子内 でいくつかの化学的に類似な基が存在するためである。従って、化学的手段によ って製造される糖エステルは、通常エステル化の程度及び製品の炭水化物の部分 に関するアシル基の位置に関して異なっている化合物の混合物である。加えて、 化学的エステル化に対する化学的手順が極めてコスト高になることが判明し７て いるので、工業的規模で入手されうるような今日までに作られた糖エステルは、 その使用が相当に制限されている。

化学的手段による糟エステルの製造における困難性並びに工業的界面活性剤とし てのこれらの化合物の魅力のために、近年、糖エステルの合成に対する酵素の利 用の可能性に対して多くの注目が払われてきている。この興味の背後にある主な 理由の一つは次の点にある。すなわら酵素は、高度の位置選択性及びエナンチオ 選択性を示すことが知られており、これらの選択性は糟分子内の１個以上のヒド ロキシ基の選択的エステル化に対して利用出来る。安価な出発物質が酵素的プロ セスにおいて用いることが出来、従ってこのプロセスにより高品質の低価格の糖 エステルの生成が可能となろう、この種のプロセスにおいて触媒として考えられ る酵素は、主にリパーゼでありこれはエステル結合の加水分解を触媒しさらに該 リパーゼはまた原理的に逆反応すなわちエステル合成を触媒する。

しかるに糖エステルの有効な酵素的合成の開発に関する試みはこれまで成功して いない。この失敗に対する一つの主な理由は、エステル化反応の二種の基質、糖 及び脂肪酸またはその誘導体における大きな極性の相違にあり、さらにまた合成 に向けての酵素的反応をひきおこすために反応媒質中で水を除去する必要性にあ る。糖及び脂肪酸もしくはその誘導体の双方に対する良好な溶剤はほとんど入手 不可能でありさらにこれらの溶剤はしばしば酵素を不活化するであろう。

糖エステルの酵素的合成における固有のこれらの困難性は、例えば米国特許４， ６１４．７１８の実施例及びＪ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、１０Ｂ（１９８６） 、　５６３８−５６４０及び６４２１−６４２２並びに１０９（１９８７）、　 ３９７７−３９８１に報告されているように反映されている。これらの文献は、 ソルビトール及びソルビトールと脂肪酸とのエステル化に対するリパーゼの通用 並びにリパーゼを用いた遊離脂肪酸の活性化エステルから長鎖のグリコシドへの エステル交換に対するリパーゼの適用をそれぞれ教示している。明らかにされた プロセスにおいて用いられる溶剤の毒性、低収率及び反応の低選択性のため記載 されたプロセスの技術的有用性は排除される。

本発明の一つの目的は、新規な化合物を提供することにある。

本発明の別の目的は、秀れた効果を示す界面活性剤を提供することにある。

本発明のさらに別の目的は、洗剤中で使用した場合充分な効果を示す界面活性剤 を提供することにある。

本発明の別の目的は、より秀れた洗浄作用を有する洗浄剤を提供することにある 。

さらに本発明の別の目的は、グリコシドのエステルを製造する方法を提供するこ とにある。

本発明の別の目的は、グリコシドのモノエステルを提供することにある。

本発明のさらに別の目的は、単糖類のグリコシドのモノエステルを提供すること にある。

主恩皇■豊 今や驚くべきことに次式Ｉ： （Ｒ−ＣＯＯ）、、Ｘ　−ＯＲ’　（１）で表わされる化合物が見い出された； 前記式中、Ｒ１は、０２〜Ｃ，アルキル、フェニルまたは低級アルキルフェニル を表わし、これらの各々はヒドロキシ、ハロゲン、カルボキシアミノ、シアノ、 ニトロ、低級アルコキシ、低級アルキルカルボニルまたは硫黄によって置換され ることが出来、あるいはまたＲ１は次の基： （式中Ｙはメチレンまたはエチレンを表わす）で表わされる基の一種を表わし、 ｎは１．２または３を表わし、Ｘは末端のアノマー炭素原子で基−ＯＲ’を有し さらにｎ個のヒドロキシ基でＲＣＯＯ−基を有する１個、２個または３個のヘキ ソースまたはペントース単位を有する炭水化物残基を表わし、さらにＲは、ヒド ロキシまたはハロゲンによって置換されていてもよい、Ｃ４〜Ｃｔａのアルキル を表わす。親の炭水化物並びに式Ｉの化合物はα型またはβ型をとりうる。

上記アルキル基は直鎖でもあるいは技分かれしていてもよい。

語句「低級」はアルキル基及び同様の基に関して用いられる場合、該アルキル基 は、８個以下の炭素原子、好ましくは４個以下の炭素原子を含有する。

好ましくはＲ１は未置換のアルキル基である。好ましくは、基Ｒ１は２個、３個 または４個の炭素原子を有する。特定の、好ましい基Ｒ１の例は、エチル、プロ ピル、イソプロピル及びブチルであり、最も好ましいものはエチル及びイソプロ ピＸ及びＲ１は先に定義した意味である）のモノエステルに相当する。以下に記 載するプロセスは、唯一の公知のプロセスと思われ、このプロセスによれば許容 可能な収率のモノエステルの製造が可能である。従って式Ｉのモノエステルはこ れまで入手出来なかった。好ましくはＸは１個のヘキソースまたはペントース単 位を含有する炭水化物部分であり、親の炭水化物は単糖類である。部分χに対応 する好ましい炭水化物は、グルコース、フルクトース、リボース、アラビノース 、マンノース、ガラクトース及びキシロースであり、最も好ましい炭水化物はグ ルコース及びガラクトースである。部分Ｘに対応する好ましい三糖類は、スクロ ース、マルトース、セロビオース、バクドース及びイソマルトースである。

弐■中の基Ｒ−Ｃｏｏ−に相当する好ましい脂肪酸は、飽和の脂肪酸及び不飽和 の脂肪酸であり、好ましくは６〜２２個の炭素原子を含有する。このような脂肪 酸の例は、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ドデカ ン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデカン酸、エイコサン酸、トコ サン酸、シス−９−オクタデカン酸、シス、シス−９，１２−オクタデカン酸及 びシス、シス、シス−９，１２゜１５−オクタデカン酸エ酸である。

弐Ｉの、特定の好ましい化合物の例は次の如くである：エチル６−０−ヘキサノ イルグルコシド、エチル６−０−ヘプタノイルグルコシド、エチル６−０−オク タノイルグルコシド、エチル６−０−ノナノイルグルコシド、エチル６−０−デ カノイルグルコシド、エチル６−０−ドデカノイルグルコシド、エチル６−０− テトラデカノイルグルコシド、エチル６−０−ヘキサデカノイルグルコシド、エ チル６−０−オクタデカノイルグルコシド、エチル６−０−エイコサノイルグル コシド、エチル６−０−ドコサノイルグルコシド、エチル６−０−シス−９−オ クタデカノイルグルコシド、エチル６−０−シス、シス−９，１２−オクタデカ ノイルグルコシド、エチル６−０−シス、シス、シス−９，１２，１５−オクタ デカトリエノイルグルコシド、イソプロピル６−０−ヘキサノイルグルコシド、 イソプロピル６−０−ヘプタノイルグルコシド、イソプロピル６−０−オクタノ イルグルコシド、イソプロピル６−０−ノナノイルグルコシド、イソプロピル６ −〇−デカノイルグルコシド、イソプロピル６−０−ドデカノイルグルコシド、 イソプロピル６−０−テトラデカノイルグルコシド、イソプロピル６−０−ヘキ サデカノイルグルコシド、イソプロピル６−０−オクタデカノイルグルコシド、 イソプロピル６−０−エイコサノイルグルコシド、イソプロピル６−〇−ドコサ ノイルグルコシド、イソプロピル６−○−シスー９−オクタデカノイルグルコシ ド、イソプロピル６−〇−シス、シス−９，１２−オクタデカノイルグルコシド 、イソプロピル６−０−シス、シス、シス−９，’１２．１５−オクタデカトリ エノイルグルコシド、プロピル６−０−ヘキサノイルグルコシド、プロピル６− ０−ヘプタノイルグルコシド、プロピル６−０−オクタノイルグルコシド、プロ ピル６−０−ノナノイルグルコシド、プロピル６−０−デカノイルグルコシド、 プロピル６−０−ドデカノイルグルコシド、プロピル６−０−テトラデカノイル グルコシド、プロピル６−０−ヘキサデカノイルグルコシド、プロピル６−０− オクタデカノイルグルコシド、プロピル６−０−エイコサノイルグルコシド、プ ロピル６−０−ドコサノイルグルコシド、プロピル６−０−シス−９−オクタデ カノイルグルコシド、プロピル６−〇−シス、シス−９，１２−オクタデカノイ ルグルコシド及びプロピル６−０−シス、シス、シス−９，１２，１５〜オクタ デカトリエノイルグルコシド、ブチル６−０−ヘキサノイルグルコシド、ブチル ６−０−ヘプタノイルグルコシド、ブチル６−０−オクタノイルグルコシド、ブ チル６−０−ノナノイルグルコシド、ブチル６−０−デカノイルグルコシド、ブ チル６−０−ドデカノイルグルコシド、ブチル６−０−テトラデカノイルグルコ シド、ブチル６−０−ヘキサデカノイルグルコシド、ブチル６−０−オクタデカ ノイルグルコシド、ブチル６−０−エイコサノイルグルコシド、ブチル６−０− 　）’コサノイルグルコシド、ブチル６−○−シスー９−オクタデカノイルグル コシド、ブチル６−０−シス、シス−９，１２−オクタデカノイルグルコシド及 びブチル６−０−シス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイル グルコシド。

式Ｉの化合物は、驚くべきことに界面活性剤として良好な作用を示し、これは例 えば特に脂肪及びタン白質の汚れに対するそれらの洗浄効果により実証出来る。

式■の化合物を含有する洗浄剤は、通常の形態、例えば粉末または液体の形状を とりうる。

洗浄剤の典型的例は、洗濯用洗剤、食器洗い用洗剤及び堅い表面用のクリーナー である。より典型的な例は、液体の重質洗剤（ビルダー含有またはビルダー含有 せず）及び粉末重質洗剤（ホスフェートビルグー含有または含有せず）。

洗浄剤中の式Ｉの界面活性剤は、主に非イオンタイプであり（例えば約８０％） 、または非イオンタイプ（例えば２０〜８０％）並びに他のタイプの界面活性剤 （例えば２０〜８０％のアニオン、カチオン及び／または両性イオン）の組み合 わせである。アニオンタイプの例は、直鎖のアルキルベンゼンスルホネート（Ｌ ＡＳ）　、Ｊｌｉｆ肪アルコアルコールサルフェートアルコールエーテルサルフ ェ−１−（ＡＥＳ）　、アルファーオレフィンサルフェー）　（ＡＯＳ）及び石 鹸である。

液体及び粉末の洗剤は、「フレーム　フォーミュレーションフォー　リキッド／ パウダー　へビー−デユー　ディタージエン）Ｊ（ｊ、フォルデユサーファクタ ント　イン　コンシューマ−プロダクツ　セオリ、テクノロジー　アンド　アプ リケーション、スブリンゲルーフォルラーク　１９８７年）に準じて、非イオン 界面活性剤の全部または一部（例えば５０％）を式Ｉの化合物によって置換する ことにより製剤化出来る。

従って、液体の重質洗剤は、式Ｉの化合物に加えて、アニオン界面活性剤、非イ オン界面活性剤、石鹸水の泡制御剤、発泡助剤、酵素、ビルグー、配合助剤、光 沢剤、安定化剤、布帛柔軟剤、芳香剤、染料及び水を含んでなる。同様に、粉末 の重質洗浄剤は、アニオン界面活性剤、非イオン界面活性剤、石鹸水の泡制御剤 、発泡助剤、キレート剤、イオン交換剤、アルカリ剤、コビルダー、坑再沈着剤 、漂白活性化剤、漂白安定化剤、布帛柔軟剤、坑再沈着剤、酵素、光沢剤、腐蝕 防止剤、香料、染料及び青味剤、配合助剤、充填剤及び水と含有する。弐■の化 合物の秀れた効果は以下の実施例３７によって示される。加えて以下の内容が見 い出された。すなわち酵素的エステル化に対する基質として、末端アノマー炭素 原子で水酸基で２〜６個の炭素原子を有するアルキル基、フェニルまたはアルキ ルフェニルを有する炭水化物及び反応に対する他の基質として遊離脂肪酸または そのエステルを用いて極めて高収率で糖エステルの酵素的合成により式１の化合 物が製造出来ることが可能である０反応の生成物は、アノマー炭素原子でヒドロ キシ基でアルキル基を存する糖エステルである。以下の内容は非常に驚くべきこ とでありかつ予知されなかったことである。すなわち、糟のアノマー炭素で糖分 子のわずかな変化は、基質としてのそれらの挙動を劇的に改善しかつ位置特異性 酵素エステル化並びに高収率を与える。このプロセスを用い、８０％、好ましく は９０％以上、さらに好ましくは９５％以上の式■の化合物を含有する製剤を調 製することが可能である。このような製剤は、界面活性剤として秀れたかつ驚く べき性質を有している。

本発明のプロセスにより通用されうる酵素は、エステル結合を形成しうる酵素で ある。このグループの酵素は、ヒドロラーゼ、例えばエストラーゼ及びリパーゼ を含んでなる。本発明のプロセスが適用される酵素は、可溶性の状態で使用出来 、あるいはまた酵素は所望により固定化されうる。また、酵素は興味のある特異 的反応に関してそれらの反応性を最適化するために化学的もしくは遺伝子工学的 方法により変形されうる。

本発明のプロセスにより使用されうる特定の酵素の例は、豚の膵臓リパーゼ並び に例えばアスベルギラス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、リゾプス（Ｒｈ　１ｚｏ ｐｕｓ）、プソイドモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）　、エンテロバクテリウ ム（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）　、クロモバクテリウム（Ｃｈｒｏｍｏ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ）　、ゲオトリシウム（Ｇｅｏｔｒｉｃｉｕｍ）、ペニシリ ウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｖ＋）　、ムコール（Ｍｕｃｏｒ）　、カンディダ （Ｃａｎｄｉｄａ）及びヒュミクラ（ＨｕＩＩｌｉｃｕｌａ）の菌株から得られ る微生物リパーゼである。好ましい菌株の例は、ムコールマイヘイ（Ｍｕｃｏｒ 　Ｍｉｅｈｅｉ）、カンディダアンタルクティカ（Ｃａｎｄｉｄａ−ａｎｔａｒ ｃｔｉｃａ）　、ブソイドモナスセバチカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｃｅｐａ ｃｉａ）及びヒミコララムギノザ（）Ｉｕｍｉｃｏｌａ　ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ ）である、カンディダアンタルクティカ（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｎｔａｒｃｔｉｃ ａ）は、ブタペスト条約に基づき、１９８６年９月２９日、１９８６年１２月８ 日、および１９８６年１２月８日にそれぞれ寄託番号ＤＳＭ　３８５５　、　Ｄ ＳＭ　３９０８及ヒＤＳＭ　３９０９の番号のもとにドイチェザンルンクボンマ イクロオルガニズメン（ＤＳＭ）に寄託された。

プソイドモナスセバチカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｃｅｐａｃｉａ）は、１９ ８７年１月３０日に寄託番号３９５９の番号のもとＤＳＭに寄託されさらにヒミ コララムギノザ（Ｈｕｍｉｅｏｌａ　ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）は、１９８６年８ 月１３日及び１９８７年５月４日にそれぞれ寄託番号３８１９及び４１０９の番 号のもとでＤＳＭに寄託された。

さらにリパーゼは、それぞれ１９８７年５月４日、１９８７年５月４日及び１９ ８１年１０月１日にそれぞれ寄託番号４１１０　、４１１１及び１８００の番号 のもとでＤＳＭに寄託されたヒュミコーラプレビスボラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ　ｂ ｒｅｖｉｓｐｏｒａ）　、プレビスバールサーモイデア（ｂｒｅｖｉｓ　ｖｅｒ 、　ｔｈｅｒａｏｉｄｅａ）及びインソレンス（ｉｎｓｏｌｅｎｓ）からうるこ とが出来る。別のリパーゼは、以下の菌株から入手出来、すなわち体の菌株はセ ントラルビューロー　フォアジンメルカルチエラム（ＣＢＳ）　、アメリカンタ イプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）　、アグリカルチエラル　リサーチ　 カルチュア　コレクシコン（ＮＲＲＬ）及びインスティテユート　オブフアーメ ンテーシッン大阪（）ＦＯ）から以下に示す寄託番号のもとの菌株から公衆に対 して自由に入手出来る：カンディダアンタルクティカ（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｎｔ ａｒｃｔｉｃａ）　：　ＣＢＳ　５９５５＋　ＡＴＣＣ３４８８８、ＮＲＲＬ　 Ｙ−８２９５，ＣＢＳ　６６７８．　ＡＴＣＣ２８３２３，ＣＢＳ　６８２１及 びＮＲＲＬ　Ｙ−７９５４；カンディダツクバエンシス（Ｃａｎｄｉｄａ　Ｔｓ ｕｋｕｂａ−ｅｎｓｉｓ）　：　ＣＢ５６３８９．　ＡＴＣＣ２４５５５、及び ＮＲＲＬ　Ｙ−７７９２；カンディダアウリカラリエ（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｕｒ ｉｃｕｌａｒｉａｅ）　：　ＣＢＳ　６３７！Ｌ　ＡＴＣＣ２４１２１及びＩＦ Ｏ１５８０；カンディダヒュミコラ（Ｃａｎｄｆｄａ　ｈｕｍｉ−ｃｏｌａ）　 ：　ＣＢＳ　５７１．　ＡＴＣＣ１４４３８，ＩＦＯ０７６０，ＣＢＳ　２０４ １．　ＡＴＣＣ９９４９、ＮＲＲＬ　Ｙ−１２６６、ＩＦＯ０７５３及びＩＦＯ １５２７及びカンディダフォリオラム（Ｃａｎｄｉｄａ　ｆｏｌｉｏｒｕ＋ｗ） 　：　ＣＢＳ　５２３４及びＡＴＣＣ１８８２０゜本発明のこのプロセスは、式 ■のグリコシドを単に式■の酸またはそのエステルと、酵素の存在下で単に混合 することによって行なわれ、さらに所望により、反応は酵素が所望の活性を示す 溶剤中で行うことが出来る。好ましくは溶剤は添加しない。もしも有機溶剤を用 いる場合、該溶剤は酵素に対して有害な作用を与えるべきではない。このような 溶剤の例は、ケトン、炭化水素及びエーテルである。好ましい溶剤は、ペンタン 、ヘキサン、ヘプタン及び２−ブタノンである。好ましくは、反応媒質は非水溶 性であるかまたは適用される酵素の良好な反応性及び耐用年数を確保するために 必要な適当量の水のみを含有する。

好都合には、反応温度は約２０〜１００°Ｃの範囲内であり、好ましくは約３０ 〜８０°Ｃの範囲内である。好ましくは、反応は低圧力下で、好ましくは、約０ ．０５バール以下で行なわれる。

本発明を次の実施例により説明するが、この実施例は何ら本発明の範囲を制限す るものではない。

ｍｌγ和嗅 内部標準としてＴＭＳを用いブリュッケルＷＭ　４００及びブリュッケルＡＭ　 ５００分光光度計を用いてＩＨ及び１３ＣＮＭＲスペクトルを記録した。１６ｍ キューペットを用い、パーキンエレマ−２４１旋光計を用いて旋光度を測定した 。融点は修正しない。

ＨＰＬＣ−分析をメルクリコソーブＮＨ２−カラム及び溶離剤としての９６％エ タノールを用い、シマズＬＣ−４Ａ機（屈折率測定機）により行なった。臨界ミ セル濃度をクルーゼテンシオメーターＫＩＯを用いて測定した。レイボルドヘレ ウスからＫＤＬ　１単位に関し分子量分布を測定した。イソプロピルα−Ｄ−グ ルコピラノシドｎ−プロピルβ−Ｄ−グルコピラノシド及びフェニルα−ローグ ルコピラノシドは、デンマークテクニカルユニバーシイティ賀機化学科からギフ トとして得られた。調製液体クロマトグラフィーを、溶離剤としてヘキサン−エ チルアセテート及びエタノールの勾配によりシリカゲルについて行なった。

■−上 エチル６−０−ドー゛カッイルーＤ−グルコピーノシドの礼１１７０°Ｃの撹拌 バッチ反応器内の粗製エチルＤ−グルコピラノシド（５７８ｇ　、　２．７８ｍ ｏｆ、例１０に従って調製）及びドデカン酸（７５１ｇ　、　３．７５＋ｗｏｆ ）の混合物に、カンディダアンタルクティカ（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｎｔａｒｃｔ ｉｃａ）由来の固定化リパーゼ（２９ｇ　、デンマーク特許出８３２５０／８Ｂ に記載したごとく調製）を添加した。

減圧下＜０．０５ｂａｒ）のもとで撹拌を継続し、ついでエステル合成の過程を 、１（ＰＬＣによりモニターした。２３時間後、酵素を濾過して除去した（７０ °Ｃで）。過剰の脂肪酸を、分子蒸留（１０５の粗製生成物及び２％のエチルＤ −グリコシド及び２％のディエステル混合物（ＨＰＬＣ分析）を得た。粗製生成 物をクロマトグラフィー法により精製した。　’ＨＩＤＩＲ−分析による同定は α及びβアノマー１＝１混合物を示した（第４表）。

エチルＤ−グルコピラノシド（６２５ｇ　、　３．０ｍｏｆ）　、デカン酸（６ ４６ｇ　、　３．７５ａ＋ｏｆ　）及び固定化酵素（３１，５ｇ　）を用い、例 １に従い表題化合物を粗製生成物（１０３０ｇ、９３％のモノエステル、５％の エチルＤ−グルコピラノシド、２％ジエステル）として得た。反応は４８時間で 完結した。クロマトグラフィー法により精製した生成物のＮＭＲスペクトルを第 ４表に示す。

璽製 エチル−Ｄ−グルコピラノシド（６０９ｇ　、　２．９ａ＋ｏｊ！　）　、テト ラデカン酸（８３４ｇ　、　３．７　ｍｏｌ　）及び固定化酵素（３０，５ｇ　 ）を用い例１に従い表題化合物を粗製生成物（１１６０ｇ、９３％のモノエステ ル、４％のエチルＤ−グルコピラノシド、３％のジエステル）として得た。反応 は４６時間で完結した。クロマトグラフィー法より精製した生成物のＮＭＲスペ クトルは、”Ｈ及び１３ＣＮＭＲスペクトルに従い表４ａ／４ｂに示すごとく純 粋なα及びβアノマーに対して与えられた。

朶Ｌ−（ 五％／Ｌ」二ゴヨ：と七九乙友り工匹二」二）１≦し＊とム辷し■即１ エチルＤ−グルコピラノシド（６０３ｇ　、　２．９ｍｏｊ２）　、ヘキサデカ ン酸（１００１ｇ　、　３．９１ａ＋ｏｆ　）及び固定化リパーゼ（３０，５ｇ ）を用い例１に従い表題化合物を粗製生成物（１２２０ｇ、９１％のモノエステ ル、７％のエチルＤ−グルコピラノシド、２％のジエステル）として得た。反応 は４８時間で完結した。クロマトグラフィー法により精製した生成物のＮＭＲス ペクトルは、ＩＨ及び”ＣＮｌ’ｌＲスペクトルに従い表４　ａ　／　４　ｂに おいて純粋なα及びβアノマーに対して与えられた。

■−エ エチル６−０−　シス−９−オフ　デセノイル　−Ｄ−グルコビーノシドのｆ′ エチルＤ−グルコピラノシド（６０６ｇ　、　２．９ｍｏｉ！、）　、シス−９ −オクタデセン酸（１１１１ｇ　、　３．９　ｍｏｌ！、　）及び固定化酵素（ ３０，５ｇ）を用い、例１に従い粗製生成物（１３０５ｇ、　９０％のモノエス テル、５％のエチルＤ−グルコピラノシド、５％のジエステル）として表題化合 物を得た０反応は４８時間で完結した。

劃−」− エチル６−０−オフ　−゛カツイルーＤ−グルコピーノシド星袈 エチルＤ−グルコピラノシド（６０３ｇ　、　２．９ｓｏｉ、）　、オクタデカ ン酸（１１１２ｇ　、　３．９ｍｏ７り及び固定化リパーゼ（３０ｇ）を用い、 ８０°Ｃの反応温度で、反応を行い粗製生成物（１３１０ｇ　。

９０％のモノエステル、５％のエチルＤ−グルコピラノシド、５％のジエステル ）として表題化合物を得た。反応は４８時間で完結した。クロマトグラフィー処 理により精製した生成物のＮＭＲスペクトルはＩＨ及びＩ３ＣＮＭＲスペクトル に従って、表４ａ／４ｂに示すように純粋なα及びβアノマーに対してココ　・ ツｔ　ヒ　６−０−エスール　エチルＤ−ルコビ立ム之ヱ■握製 触媒として３０ｇの固定化リパーゼを用い、例１に記載した手順に従いココナツ ツ油脂肪酸の混合物（合計量３．０ｍｏｊ！のうち１％のデカン酸、５１％のド デカン酸、２４％のテトラデカン酸、１３％のヘキサデカン酸、４％のオクタデ カン酸、５％のシス−９−オクタデカン酸及び２％のシス、シス−９，１２−オ クタデカンジエン酸を含有する）を用いて、エチルＤ−グルコピラノシド（６０ ０ｇ　、　２．９ｍｏｆｆｉ　）をエステル化した。７２時間後、反応は完結し 、１２００　ｇの生成物（９１％のモノエステル、６％のジエステル及び３％の エチルＤ−グルコピラノシド）エチル６−０−オフ　ノイル−Ｄ−グルコピラノ シドの量固定化酵素（５ｇのりボザイム（登録商標）、ムコールマイヘイ（Ｍｕ ｃｏｒ　Ｍｉｅｈｅｉ）から産生されるリパーゼでノボ社から商業的に入手可能 ）を、７０°Ｃの撹拌バッチ反応器（リフラックス）中のヘキサン（１００Ｍ） に懸濁させたエチルＤ−グルコピラノシド（５００ｇ　、　２．４ｔｎｏ１例１ ０に従って調製される）及びオクタン酸（５２０ｇ　、　３．６ａ＋ｏｆ　）の 懸濁液に添加した。撹拌を継続しついで生じた水を共沸蒸留により除去した０反 応の程度を、ＨＰＬＣにより追跡した。生成物が得られた場合、懸濁液は除々に 均質な溶液となった（１２時間後）。５２時間後、酵素を濾過して除去しついで 溶剤を真空除去した。過剰の脂肪酸を繰り返えし分子蒸留により除去し、粗製生 成物（７９０ｇ、９１％のモノエステル、８％のジエステル及び１％のエチルＤ −グルコピラノシド）を得た。精製した生成物の１）（及び１３ＣＮＭＲ−スペ クトルは、表４　ａ　／　４　ｂに与えられた純粋なα及びβ−アノマーに対す るスペクトルに一致していた。

工又プＰピル６−０−−レプ込不土−ｍ二を血工くｉス之工■與１ イソプロピルＤ−グルコピラノシド（例１１に従って調製した４４６ｇ　、　２ ．０１ｍｏｊｌ！　）を用い、例１に従い表題化合物を調製した。２４時間後に 反応は完結し、ついで粗製生成物を単離した（５６１．１ｇ、７３．４％のモジ エステル及び９．２％のジエステル）。

五−刊 エチルＤ−グルコＩ：ｉＬ乞１’（７）恩製グルコース（５００ｇ　、　２．７ ８ｍｏｊ！　）及び強酸カチオン交換樹脂（１００ｇアンバーライト１５　、　 ＢＤＨケミカルズ）を、エタノールＣ２０００ｉｄ１３４．３ｍｏ　ｌ　）に懸 濁させた。混合物を８０″Ｃで１６時間撹拌した。反応の過程を）ＩＰＬＣによ り追跡した。イオン交換樹脂を濾過して除去し、ついで溶液を活性炭（１０ｇ） で処理した。濾過後、エタノールを真空除去し、シロップ（５７８ｇ、定量的収 率）としてエチルＤ−グルコピラノシド（α及びβアノマーのｌ＝１混合物）を 得た。

イソプロパツール（２０００１１１，、２６ｍｏ　ｆ　）及びグルコース（５０ ０ｇ　。

２、７８ｍｏ　１２　）を用い、例１０に記載した手順により表題化合物を定量 的収率で得た。

エチルβ−Ｄ−グルコピラノシド（３−Ｏｇ　＋　１４　ｍｍｏ　ｆ　ｓ例２４ に従って調製）を、７０°Ｃで溶融脂肪酸に溶融または懸濁させた。固定化リパ ーゼ（典型的には０．５ｇのりポザイム（登録商標）、例８参照）を添加しつい で混合物を減圧下（０，０５ｂａｒ）で撹拌した。反応の過程を、ＨＰＬＣで追 跡した。この混合物の反応物を、アセトンで希釈し、ついで酵素を濾別した。溶 剤を真空除去しついで生成物を、シリカゲルによりクロマトグラフィー処理によ り回収した。′Ｈ及び′３ＣＮＭＲ（表４ａ参照）に対し、さらに融点（ｍ、ｐ 、）、旋光度（〔α〕ｐ）及び臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）の測定によりさらに特 徴づけられた（表３に示す）。種々の実施例から得られた詳細は第１表に示す。

第１表 実験の詳細は、純粋なβ−Ｄ−グルコピラノシドの６−〇−エステルの調製を示 している。

ｆｉｌｆｉ二益 なα−Ｄ−ゲルコピｌ叉り」の６−〇−エスールの富、に瓜煎王里上 エチルα−Ｄ−グルコピラノシド（２，０ｇ　、　９　ｖａｒａｏｌｌ、例２５ に従って調製）を、溶融脂肪酸（典型的には１８ｍｍｏｆ）に溶解または懸濁さ せた。固定化酵素（典型的には０９３３ｇ）を、例１２〜１７におけるごとく添 加した。′Ｈ及び１３ＣＮＭＲ（表４ｂ参照）、融点（ａ、ｐ、）、旋光度（〔 α）ｏ）及び臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）の測定値を第３表に示す０種々の実施例 から得られた実験的データを第２表に示す。

第２表 実験的な詳細は、純粋なα−Ｄ−グルコピラノシドの６−０−エステルの調製を 示す。

第３表 例１２〜２３から得られる生成物の物理的データ：＊　）　１０−’ｍｏｊ！　 ／　ｌ、全てりｏ　ｏ　＊　／Ｌ／ム中Ｔ：ｍ定。

＊＊）生成物は非常に不溶性である。

五−Ｕ エチル　−Ｄ−グルコビーノシドの８９炭酸銀（３０ｇ　、　０．１１ｍｏｆ　 ）の懸濁液に、２，３，４．６−チトラー〇〜アセチル−ご−Ｄ−グルコピラノ シルブロミド（４１，１ｇ　、　０．１　ｍｏｂ　）を少量ずつ４０分にわたっ て添加した。

混合物を日夜撹拌し、ついでジクロロメタン（４０ｄ）　で希釈しついでセライ ト及び活性炭で濾過した。濃縮してエチル２゜３．４．５−テトラ−０−アセチ ル−β−Ｄ−グルコピラノシド（２３，４ｇ　、　６２％）を結晶化させた。

ｘチル２．３．４．６−テトラ−０−アセチル−グルコピラノシドを、メタノー ル（８０ｍ）に溶解した１ｍｏＡのナトリウムメトキシド（２ｄ）を用い２０時 間室温で脱アセチル化した。

混合物をアンバーライ）　ＩＲ−１２０（Ｈ”−型）を用いて中性化しついで減 圧濃縮して吸湿性固体として生成物を定量的な割α：βが１：１であるアノマー 比を存するエチルＤ−グルコピラノシド（３０ｇ、例１２に記載したごとく調製 ）を、３０℃で０．０５ｇ１ｏｆのアセテート緩衝液（４００１ＲＩ１．　ｐＨ ４，５）に溶解した。

β−グルコシダーゼ（５０■、アルモンド、シグマ社から入手）を添加しついで 混合物を一週間撹拌した。溶液を減圧下で蒸発させついでクロマトグラフィー法 により精製し、結晶性固体（’８．２　ｇ　、　５５％）として生成物を得た。

■−匹 イソプロピル６−０−オフ　ノイル−α−Ｄ−グルコピラノ之ヱ■握製 １００ｄの２−ブタノンに溶解したイソプロピル−α−Ｄ−グルコピラノシド（ １，１ｇ　、　５　ｍｍｏｊ２）及びオクタン酸（０，９ｇ　、　６．２５　ｔ ｎｗｌｏ１２　）の撹拌溶液に、固定化酵素（０，，５ｇ、リボザイム（登録商 標）、例８参照）を添加した。６０°Ｃで、４８時間撹拌を継続した。酵素を濾 過して除去しついで溶剤を真空下で除去し、カラムクロマトグラフィー法により 、１．２ｇ（７０％）の生成物を得た：　’ＨＮＭＲ（４００ＭＦＩＺ、ＣＤＣ １３）δ：　０．８８（ｔ、Ｊ＝　６．７Ｈｚ、３Ｈ）　；　１．１９（ｄ、Ｊ ＝６．１）１ｚ、３Ｈ）　；　１．２４（ｄ、Ｊ＝６．２Ｈｚ。

３Ｂ）；１．２Ｂ（ｍ、８Ｂ）　；　１．６２（ｍ、２Ｈ）　；　２．３４（＊ 、２［１）　；　３．３５（ｔ、Ｊ＝９．４Ｈｚ。

ＩＨ）：３．５０（ｄｄ、Ｊ＝４．０　ａｎｄ　９．５Ｈｚ、ＩＦり　ｉ　３． ７３（ｔ、Ｊ＝９．３Ｈｚ、１）１）　；３．８５（ａ＋、１１）　；　３．９ ２（ａ＋、ＩＨ）４．３５（＋ａ、２４１）　；　４．９６（ｄ、Ｊ＝３．９Ｈ ｚ、ＩＨ）。

■−釘 ｎニブｆＪＬｉ５−二見二ｊｊ」Ｌと土四二Ｊ二」Σニゲムコ」むＬム乞工■旧 製 ２−ブタノン（５０ｄ）に溶解した（ｎ−ブチル）−β−Ｄ−グルコピラノシド （１，０ｇ　、　４．２　＋＋ｕ＋＋ｏｆ）を用い、例２６に記載した方法に従 い、表題化合物を２４時間後に２５％の収率で得た： ”ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ５）　δ　：　０．９０（ｍ、６Ｈ）　； 　１．２９（Ｍ、８Ｂ）　；　１．３７（ａ＋、２１（）　；　１．６１（ｓ、 ４Ｍ）　；　２．３５（ｍ、２Ｂ）　；　３．３５（ｍ、２）！）　；　３．５ ０（ｍ、３Ｈ）　；３．８５（＋＋＋、ＩＨ）　；　４．２７（ｄ、Ｊ＝８１（ ｚ、ＩＨ）　；　４．２８（ｍ、ＩＨ）　；　４．３８（ａ＋、ＩＨ）。

貫Ｌ」１ エチル６−０−オフ　ノイル−α−Ｄ−グルコピーノシドの璽製 フッイドモナスセパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｃｅｐａｃｉａ）由来の固 定化酵素（０，５ｇ、デンマーク特許出＠３９９３／８７に記載したごとく調製 ）及びエチルα−Ｄ−グルコピラノシド（１，０４ｇ。

５１０！、例２５に記載したごとく調製）を用い、例２６に従い、４８時間の反 応時間後表題化合物を収率７０％で得た。’ＨＮＭＲに対しては、表４６を参照 のこと。

五−益 エチル６−０−ドデカノイル−Ｄ−グルコ’　７　／　”　Ｆ　旦Ｌ　’触媒と してヒュミコララムギノザ（Ｈｕｎ＋１ｃｏｌａ　ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）由来 の固定化酵素（３，Ｏｇ、デンマーク特許出願３１８３．０００／ＤＫに記載し たごとく調製）及び１／１０　ｍｏｂ量を用い、例１に従って表題化合物を粗製 生成物（８３％のモジエステル及び１５％のジエステル及び２％のエチルＤ−グ ルコピラノシドを含有する１００ｇ）として１６時間の反応時間後に得た。

式１で表わされるエチル６−０−アシルグルコピラノシドに対する’Ｈ−ＮＭＲ 及びＩ３Ｃ−ＮＭＲのデーターを表４ａ及び表４ｂに示す。

表４ｂ 表４ａ及び４ｂにおける欄は、化合物に対するデーターを示しており、ここにお いて親指肪酸（ＲＣＯＯＨ）は、欄のタイトルＣｓ、Ｃ３゜、Ｃ１□、Ｃ１ａ、 ＣＨ及びＣ１１にそれぞれ対応する炭素原子８．１０．１２．１４．１６及び１ ８を含有する。Ｃ８〜Ｃ−は、グリコシド中の炭素を示し、さらにＨ１〜Ｈ６ｂ はグリコシド中の水素原子を示しこれに対し”ＣＮＭＲ及び’ＨＮＭＲがそれぞ れこれらの表中に示される。

エチルＤ−ガラクトシド（１１，５ｇ　、　５６　ｍ＋ｓｏｆ、例３１に従って 調製）、オクタン酸（１６ｇ　、　１１１ｍ＋＋＋ｏｊり及びリポザイム（２ｇ 、例８参照）を用い、表題化合物を例１２に従って調製した。

２４時間後生成物は収率８０％で回収された。

ガラクトースを用い、例１０に従い表題化合物を得た。生成物（エチルＤ−ガラ クトピラノシド及びエチルＤ−ガラクトフラノシドの混合物である）を定量的収 率で単離した。

■−共 ２．３−イソプロピレン−グリセ１ル６−０−ヘキサ−゛カッイルーα−Ｄ−ガ ークトピーノシドの　１例２６に記載したと同様の方法で、１６時間の反応のの ち表題化合物を収率７０％で得た。

■−刹 フェニル６−０−オフ　ノイル−α−Ｄ−グルコピーノシド見」製 例２７に記載したごとく行い表題化合物を２４時間の反応ののち収率２５％で得 た。

、例−」Ｈ プ！ざ±７　ｆ　ｊじヒシＬ／６二仄二上ｆオノ／」公」と二外乞ジ旦旦ノ」山 修膿１袈 プロピレングリコールＤ−グルコピラノシド（４０，０ｇ　、　０．１７ｏｎｏ ｎ、プロピレングリコールを用い例１０に従って調製）、ドデカン酸（４５ｇ　 、　０．２３ｍｏｊ！　）及び固定化酵素（４ｇ）を用い例１に従って表題化合 物を調製した。４８時間後、粗製生成物を単離しついでカラムクロマトグラフィ ー法により精製し収率１６％を得た。

■−粒 エスール六　・による６−０−オフ　ノイル−α−Ｄ−グルコビーノシ゛のｉ′ 基質としてエチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（１，０４ｇ。

５ｓ＊ｏＡ）及びメチルオクタノニー）　（１，８ｇ　、１１　＋ｕ＋ｏｊりを 用い例２６に従い表題化合物を得た。２４時間の反応後表題化合物を収率１０％ で単離した。

■−銭 エチルジ−ヘキサ−゛カッイルーＤ−グルコビーノシドの°　１固定化カンデイ ダアンタルクテイカ（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）（６ｇ１例１参 照）及び４倍量のドデカン酸（３００ｇ　、　１．５ｓ＋ｏｊりを用い、例２９ に従って表題化合物を得た。６日の反応時間後、粗製生成物は５０％のジエステ ル含有を示した（ＨＰＬＣ分析）。

１−鉦 以下の条件を用いトルク計で実験を行なった：洗浄時間：２０分 温　度：２５℃ 水　：９°ｄＢ 試験物質：　ＥＭＰＡ　１１２　（７，７α）洗　剤：ナトリウムトリホスペー ド　１．７５ｇ／／！ナトリウムメタシリケー）　０．４０ｇ／ｊＩＣＭＣ０， ０５ｇ＃！ ＥＤＴＡ　０．０１　ｇ　／　ｆ ナトリウムスルヘート　２．００ｇ／ｊ！テンシト　０．６０ｇ／ｊ！ 用いたテンシトは、７５％の直鎖アルキルベンゼンスルホネー）　（ＬＡＳ　、 　Ｎａｎ５ａ　３８０）及び２５％の式Ｉの化合物であった。得られた結果を以 下の第５表に示す： 第５表 補正音の翻訳文提出書 （特許法第１８４条の８） 平成２年２月刀日 特許庁長官　吉　１）文　毅　殿 １　特許出願の表示 ＰＣＴ／ＤＫ８　Ｂ１０　Ｏ１３５ ２発明の名称 住　所　デンマーク国、デーコー−２８８０バグスバエルト。

ノボ　アレ（番地なし） 名　称　ノボ−ノルディスク　アクティーゼルスカブ４代理人 明　細　書 グリコシドのモノエステルおよびその酵素的合成方法主皿夏！ｈ 本発明は新規なグリコシドモジエステル並びに該化合物の酵素的合成方法に関す る。

１里Ω宣量 界面活性化合物は、極めて重要な種類の工業的有機薬品を構成し、多種多様の用 途、例えば洗浄の目的のための洗剤として、食品及び飼料製品に配合される乳化 剤として、あるいはまたシャンプー、保湿性クリーム等のような多くの個人的な 嗜好品における機能的成分としての用途が見い出されている。

基本的には、界面活性剤は分子レベルで、個々の界面活性剤分子内の疎水性及び 親水性領域の洗剤にそれらの性質が特徴づけられかつ負っている。この特定の集 団は多くの形式で確立出来、例えば硫酸残基、４級アンモニウム物質またはグリ セロール部分を、直鎖のアルキル界面活性剤、４級アルキルアミン及びモノグリ コシドにおけるごとくそれぞれアルキル鎖と結合させることによって確立される 。このような界面活性剤の実際の企画において、化合物の詳細な分子構造に対し て多くの考慮が払われており、重要な点は、界面活性剤分子の疎水性及び親水性 領域間の正確なバランス並びに分子のこれら部分の実際の特定の配置にある。さ らに、界面活性剤を、高い収率を与えるプロセスで並びに合理的なコストで入手 可能な材料をもとにして実際に製造出来る可能性に対し考慮が払われるべきであ る。界面活性剤を周囲の環境に必然的に放出するような環境的問題は、最終的に 重要な関心事である。

これらのことを考慮して、糖及び脂肪酸を基礎にして界面活性剤分子、例えば糖 エステルを製造することに多年にわたって興味が持ち続けられてきている。これ らの縮合体は、親水性の糖類域及び親油性の脂肪酸残基の存在のため界面活性の 性質を示すことが期待された。バランス、すなわち縮合体の正確な割合は、糖及 び脂肪酸残基の性質の変化により変わりうるであろう；原料は非常に安い原材料 から製造することが出来；さらに天然の成分から構成されかつそれらに分解しう る界面活性剤は、環境に悪影響を与えることはない、界面活性剤の特別な例とし て、次の文献すなわちＰｈ１ｌｌｉ　、Ｊ、Ｃｏｃｏｎｕｔｓｔｕｄ、５（１９ ８０）、　５１等が参照され、ここにおいて、メチルグルコピラノシドのココナ ツツ脂肪酸エステルが記載されている。

しかし、この論文においてはこれらの界面活性剤が洗剤に対する添加剤として使 用されることに関しては記載されていない、洗剤に対する添加剤である、特別な 商業的に用いられる界面活性剤の例として、ベロウル社（スウェーデン）により 製造されているベロウル０６５及びベロウル１６０　（ｍ　肪７　ＪＬｔ　：２ −ルエトキシレート）が言及される。多くの試みにもかかわらず、常法による純 粋な糖エステルの合成及び製造は、非常に困難であることが判明している。この 理由は、とりわけ、エステル化剤にさらされた場合いくつかの箇所でエステル化 される塘分子内でいくつかの化学的に類似な基が存在するためである。従って、 化学的手段によって製造される糟エステルは、通常エステル化の程度及び製品の 炭水化物の部分に関するアシル基の位置に関して異なっている化合物の混合物で ある。加えて、化学的エステル化に対する化学的手順が極めてコスト高になるこ とが判明しているので、工業的規模で入手されうるような今日までに作られた糖 エステルは、その使用が相当に制限されている。

化学的手段による糖エステルの製造における困難性並びに工業的界面活性剤とし てのこれらの化合物の魅力のために、近年、糖エステルの合成に対する酵素の利 用の可能性に対して多（の注目が払われてきている。この興味の背後にある主な 理由の一つは次の点にある。すなわち酵素は、高度の位置選択性及びエナンチオ 選択性を示すことが知られており、これらの選択性は糖分予肉の１個以上のヒド ロキシ基の選択的エステル化に対して利用出来る。安価な出発物質が酵素的プロ セスにおいて用いることが出来、従ってこのプロセスにより高品質の低価格の糖 エステルの生成が可能となろう、この種のプロセスにおいて触媒として考えられ る酵素は、主にリパーゼでありこれはエステル結合の加水分解を触媒しさらに該 リパーゼはまた原理的に逆反応すなわちエステル合成を触媒する。

しかるに糖エステルの有効な酵素的合成の開発に関する試みはこれまで成功して いない、この失敗に対する一つの主な理由は、エステル化反応の二種の基質、糖 及び脂肪酸またはその誘導体における大きな極性の相違にあり、さらにまた合成 に向けての酵素的反応をひきおこすために反応媒質中で水を除去する必要性にあ る。Ｉ！及び脂肪酸もしくはその誘導体の双方に対する良好な溶剤はほとんど入 手不可能でありさらにこれらの溶剤はしばしば酵素を不活化するであろう。

糖エステルの酵素的合成における固有のこれらの困難性は、例えば米国特許４， ６１４，７１８の実施例及びＪ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、１０８（１９８６） 、　５６３８−５６４０及び６４２１−６４２２並びに担（１９８７）、　３９ ７７−３９８１に報告されているように反映されている。これらの文献は、ソル ビトール及びソルビトールと脂肪酸とのエステル化に対するリパーゼの適用並び にリパーゼを用いた遊離脂肪酸の活性化エステルから長鎖のグリコシドへのエス テル交換に対するリパーゼの適用をそれぞれ教示している。明らかにされたプロ セスにおいて用いられる溶剤の毒性、低収率及び反応の低選択性のため記載され たプロセスの技術的有用性は排除される。

米国特許第４．６１４．７１８号明細書は、グリコシドのエステルに関するもの ではなく、糖もしくは高級脂肪酸の糖アルコールエステルに関する。

国際公開番号ｔ＋０８６１０５１８６を有するＰＣＴ出願は、グリコシドのエス テルに関するものではなく、出発物質がわずか１個の遊離水酸基を有するプロセ スに関する。

米国特許第２，７５９，９２２号明細書は、グリコシドのジエステル、トリエス テルおよびテトラエステルの調製方法に関する。

該特許は、グリコシドの純粋なモノエステルの調製は記載していない、該特許中 には、酵素反応は何ら記載されていない。

***公開公報第２．３６０．３６８は、１．１〜４のグリコシド化の程度を有す るポリグリコシドを有するポリグリコシドのエステルに関する。この***公開公 報には、酵素反応は開示されていない０本発明の一つの目的は、新規な化合物を 提供することにある０本発明の別の目的は、秀れた効果を示す界面活性剤を提供 することにある。

本発明のさらに別の目的は、洗剤中で使用した場合充分な効果を示す界面活性剤 を提供することにある。

本発明の別の目的は、より秀れた洗浄作用を有する洗浄剤を提供することにある 。

さらに本発明の別の目的は、グリコシドのエステルを製造する方法を提供するこ とにある。

本発明のさらに別の目的は、単糖類のグリコシドのモノエステルを提供すること にある。

生五曵■豊 今や驚くべきことに次式ｌ： Ｒ−ＣＯＯＸ−ＯＲ’　（Ｉ　） で表わされる化合物が、界面活性剤として秀れた作用を示すことが見出された； 前記式中、Ｒ１は、０２〜Ｃ，アルキル又は次の基： （式中Ｙはメチレンまたはエチレンを表わす）で表わされる基の一種を表わし、 Ｘは末端のアノマー炭素原子で基−ＯＲ”を有しさらに第１級のヒドロキシ基で ＲＣＯＯ−基を有する炭Ｉｉ類残基を表わす０式Ｉにおける全ての炭糖類におい て（フルクトースは別として）、−〇Ｒ１を示す基はアノマー炭素原子に結合し ている。親の単Ｗ類並びに式Ｉの化合物はα型またはβ型をとりうる。

アルキル基は直鎖でもあるいは技分かれしていてもよい０語句「低級」はアルキ ル基及び同様の基に関して用いられる場合、該アルキル基は、８個以゛下の炭素 原子、好ましくは４個以下の炭素原子を含有する。

好ましくはＲ１はアルキル基である。好ましくは、基Ｒ′は２個、３個または４ 個の炭素原子を有する。特定の、好ましい基Ｒ＠の例は、エチル、プロピル、イ ソプロピル及びブチルであり、最も好ましいものはエチル及びイソプロピルであ る。

以下に記載するプロセスは、唯一の公知のプロセスと思われ、このプロセスによ れば許容可能な収率のモノエステルの製造が可能である。従って式Ｉのモノエス テルはこれまで入手出来なかった。Ｘは１個のヘキソースまたはペントース単位 からなる単糖類残基である０部分Ｘに対応する好ましい単糖類ハ、クルコース、 フルクトース、リボース、マンノース、ガラクトース及びキシロースであり、最 も好ましい単糖類はグルコース及びガラクトースである。

弐Ｉ中の基Ｒ−ＣＯＯ−に相当する好ましい脂肪酸は、飽和の脂肪酸及び不飽和 の脂肪酸であり、好ましくは６〜２２個の炭素原子を含有する。このような脂肪 酸の例は、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ドデカ ン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデカン酸、エイコサン酸、トコ サン酸、シス−９−オクタデカン酸、シス、シス−９，１２−オクタデカン酸及 びシス、シス、シス−９，１２゜１５−オクタデカン酸エ酸である。

式１の、特定の好ましい化合物の例は次の如くである：エチル６−０−ヘキサノ イルグルコシド、エチル６−０−ヘプタノイルグルコシド、エチル６−０−オク タノイルグルコシド、エチル６−０−ノナノイルグルコシド、エチル６−０−デ カノイルグルコシド、エチル６−０−ドデカノイルグルコシド、エチル６−０− テトラデカノイルグルコシド、エチル６−０−ヘキサデカノイルグルコシド、エ チル６−０−オクタデカノイルグルコシド、エチル６−０−エイコサノイルグル コシド、エチル６−０−ドコサノイルグルコシド、エチル６−０−シス−９−オ クタデカノイルグルコシド、エチル６−０−シス、シス−９，１２−オクタデカ ノイルグルコシド、エチル６−０−シス、シス、シス−９，１２，１５−オクタ デカトリエノイルグルコシド、イソプロピル６−０−ヘキサノイルグルコシド、 イソプロピル６−０−ヘプタノイルグリコシド、イソプロピル６−０−オクタノ イルグルコシド、イソプロピル６−０−ノナノイルグルコシド、イソプロピル６ −０−デカノイルグルコシド、イソプロピル６−０−ドデカノイルグルコシド、 イソプロピル６−０−テトラデカノイルグルコシド、イソプロピル６−０−ヘキ サデカノイルグルコシド、イソプロピル６−０−オクタデカノイルグルコシド、 イソプロピル６−０−エイコサノイルグルコシド、イソプロピル６−〇−ドコサ ノイルグルコシド、イソプロピル６−０−シス−９−オクタデカノイルグルコシ ド、イソプロピル６−ｏ−シス、シス−９，１２−オクタデカノイルグルコシド 、イソプロピル６−０−シス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデカトリエ ノイルグルコシド、プロピル６−０−ヘキサノイルグルコシド、プロピル６−０ −ヘプタノイルグルコシド、プロピル６−０−オクタノイルグルコシド、プロピ ル６−０−ノナノイルグルコシド、プロピル＆−０−デカノイルグルコシド、プ ロピル６−０−ドデカノイルグルコシド、プロピル６−〇−テトラデカノイルグ ルコシド、プロピル６−０−ヘキサデカノイルグルコシド、プロピル６−０−オ クタデカノイルグルコシド、プロピル６−０−エイコサノイルグルコシド、プロ ピル６−０−ドコサノイルグルコシド、プロピル６−０−シス−９−オクタデカ ノイルグルコシド、プロピル６−０−シス、シス−９，１２−オクタデカノイル グルコシド及びプロピル６−０−シス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデ カトリエノイルグルコシド、ブチル６−０−ヘキサノイルグルコシド、ブチル６ −０−ヘプタノイルグルコシド、ブチル６−Ｏ−オクタノイルグルコシド、ブチ ル６−０−ノナノイルグルコシド、ブチル６−０−デカノイルグルコシド、ブチ ル６−０−ドデカノイルグルコシド、ブチル６−０−テトラデカノイルグルコシ ド、ブチル６−０−ヘキサデカノイルグルコシド、ブチル６−０−オクタデカノ イルグルコシド、ブチル６−０−エイコサノイルグルコシド、ブチル６−０−ド コサノイルグルコシド、ブチル６−０−シス−９−オクタデカノイルグルコシド 、ブチル６−０−シス、シス−９，１２−オクタデカノイルグルコシド及びブチ ル６−０−シス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイルグルコ シド。

式ｌの化合物は、驚くべきことに界面活性剤として良好な作用を示し、これは例 えば特に脂肪及びタン白質の汚れに対するそれらの洗浄効果により実証出来る。

式Ｉの化合物を含有する洗浄剤は、通常の形態、例えば粉末または液体の形状を とりうる。

洗浄剤の典型的例は、洗濯用洗剤、食器洗い用洗剤及び堅い表面用のクリーナー である。より典型的な例は、液体の重質洗剤（ビルグー含有またはビルグー含有 せず）及び粉末重質洗剤（ホスフェートビルグー含有または含有せず）。

洗浄剤中の界面活性剤は、主に非イオンタイプであり（例えば約８０％）、また は非イオンタイプ（例えば２０〜８０％）並びに他のタイプの界面活性剤（例え ば２０〜８０％のアニオン、カチオン及び／または両性イオン）の組み合わせで ある。アニオンタイプの例は、直鎖のアルキルベンゼンスルボネート（ＬＡＳ） 　、ＩＩ！肪アシアルコールサルフェート肪アルコールエ−チルサルフェート（ ＾ＥＳ）　、アルファーオレフィンサルフェー）　（ＡＯ５）及び石鹸である。

液体及び粉末の洗剤は、「フレーム　フォーミュレーションフォー　リキッド／ パウダー　へビー−デユー　ディタージェントＪ　（Ｊ、フォルデユサーファク タント　イン　コンシューマ−プロダクツ　セオリ、テクノロジー　アンド　ア プリケーション、スプリンゲルーフォルラーク　１９８７年）に準じて、非イオ ン界面活性剤の全部または一部（例えば５０％）を式Ｉの化合物によって置換す ることにより製剤化出来る。

従って、液体の重質洗剤は、式Ｉの化合物に加えて、アニオン界面活性剤、非イ オン界面活性剤、石鹸水の泡制御剤、発泡助剤、酵素、ビルグー、配合助剤、光 沢剤、安定化剤、布帛柔軟剤、芳香剤、染料及び水を含んでなる。同様に、粉末 の重質洗浄剤は、アニオン界面活性剤、非イオン界面活性剤、石鹸水の泡制御剤 、発泡助剤、キレート剤、イオン交換剤、アルカリ剤、コビルダー、坑再沈着剤 、漂白活性化剤、漂白安定化剤、布帛柔軟剤、坑再沈着剤、酵素、光沢剤、腐蝕 防止剤、香料、染料及び青味剤、配合助剤、充填剤及び水と含有する０式Ｉの化 合物の秀れた効果は以下の実施例３４　、３７および３８によって示される。更 に驚（べきことに、吹下の内容が見出された。すなわち、次式Ｉ： Ｒ−ＣＯＯ−Ｘ−ＯＲ’　（Ｉ　） （式中、Ｒ１は０２〜Ｃ，アルキルを表わすか、又はＲ１は次の基 （基中、Ｙはメチレンまたはエチレンを表わす）で表わされる一種を表わし、Ｘ はアノマー炭素原子で１−ＯＲ’を有しかつ第一級ヒドロキシ基で基ＲＣＯＯ− を有する単ＩＩ類部分を表わし、更にＲはＣ４〜Ｃｔａアルキルを表わす）で表 わされる化合物が、 次式■： Ｒ−ＣＯＯＲ”　（ＩＩ　） （式中、Ｒは先に定義した意味であり、更にＲ２は水素もしくは低級アルキルを 表わす） で表わされる酸またはエステルを、次式■：ＨＯ−Ｘ　−ＯＲ’　（ＩＩＩ） （式中、ＸおよびＲ’は各々先に定義した意味と同じである）で表わされるグリ コシドと触媒の存在下で縮合させることを含んでなり、該触媒がヒドラーゼであ ることを特徴とする。

簡単に言えば、式Ｉの化合物は、酵素的エステル化に対する基質として、モノマ ー炭素原子で水酸基で０２〜Ｃｈアルキル基を有する単糖体を用い並びに反応に 対する他の基質として遊離脂肪酸又はそのエステルを用いて極めて高収率で酵素 的合成法により製造される０反応の生成物は、アノマー炭素原子でヒドロキシ基 でアルキル基を有する糖エステルである。

以下の内容は非常に驚くべきことでありかつ予知されながうたことである。すな わち、糖のアノマー炭素で糖分子のわずかな変化は、基質としてのそれらの挙動 を劇的に改善しかつ位置特異性酵素エステル化並びに高収率を与える。このプロ セスを用い、８０％、好ましくは９０％以上、さらに好ましくは９５％以上の式 ｌの化合物を含有する製剤を調製することが可能である。このような製剤は、界 面活性剤として秀れたかつ驚くべき性質を有している。

本発明のプロセスにより適用されうる酵素は、ヒドロラーゼ、例えばエストラー ゼ及びリパーゼである０本発明のプロセスが適用される酵素は、可溶性の状態で 使用出来、あるいはまた酵素は所望により固定化されうる。また、酵素は興味の ある特異的反応に関してそれらの反応性を最適化するために化学的もしくは遺伝 子工学的方法により変形されうる。

本発明のプロセスにより使用されうる特定の酵素の例は、豚の膵臓リパーゼ並び に例えばアスペルギラス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、リゾプス（Ｒｈｉｚｏｐ ｕｓ）、プソイドモナス（Ｐｓｅｕｄｏａ＋ｏｎａｓ）　、エンテロバクテリウ ム（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）　、、クロモバクテリウム（Ｃｈｒｏｇ ＊ｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）　、ゲオトリシウム（Ｇｅｏｔｒｉｃｔｕｍ）、ペニ シリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｓ＋）　、ムコール（Ｍｕｃｏｒ）　、カンデ ィダ（Ｃａｎｄｉｄａ）及びヒュミクラ（Ｈｕ＋５ｉｃｕｌａ）の菌株から得ら れる微生物リパーゼである。好ましい菌株の例は、ムコールマイヘイ（Ｍｕｃｏ ｒ　Ｍｉｅｈｅｉ）、カンディダアンタルクティカ（Ｃａｎｄｉｄａａｎｔａｒ ｃｔｉｃａ）　、プソイドモナスセパチカ（Ｐｓｅｕｄｏｓｏｎａａ　ｃｅｐａ −ｃｉａ）及びヒミコララムギノザ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ　ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ ）である。

カンディダアンタルクティカ（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）は、ブ タペスト条約に基づき、１９８６年９月２９日、１９８６年１２月８日、および １９８６年１２月８日にそれぞれ寄託番号ＤＳＭ　３８５５　、　ＤＳＭ　３９ ０８及びＤＳＭ　３９０９の番号のもとにドイチェザンルンクボンマイクロオル ガニズメン（ＤＳＭ）に寄託された。

ブソイドモナスセバチカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｃｅｐａｃｉａ）は、１９ ８７年１月３０日に寄託番号３９５９の番号のもとＤＳＭに寄託されさらにヒミ コララムギノザ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ　ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）は、１９８６年８ 月１３日及び１９８７年５月４日にそれぞれ寄託番号３８１９及び４１０９の番 号のもとでＤＳＭに寄託された。

さらにリパーゼは、それぞれ１９８７年５月４日、１９８７年５月４日及び１９ ８１年１０月１日にそれぞれ寄託番号４１１０　、４１１１及び１８０００番号 のもとて別々にＤＳＭに寄託されたヒエミコーラプレビスボラ（Ｉ（ｕｍｉｃｏ ｌａ　ｂｒｅｖｉｓｐｏｒａ）　、プレビスバールサーモイデア（ｂｒｅｖｉｓ 　ｖｅｒ、ｔｈｅｒｍｏｉｄｅａ）及びインソレンス（ｉｎｓｏ−１ｅｎｓ　） からうることが出来る。別のリパーゼは、以下の菌株から入手出来、すなわち体 の菌株はセントチルビューロー・フォア　ジンメルカルチュラム（ＣＢＳ）　、 アメリカンタイプカルチャーコレクシラン（ＡＴＣＣ）、アグリカルチユラル　 リサーチ　カルチュア　コレクション（ＮＲＲＬ）及びインスティテユート　オ ブフアーメンテーシッン大阪（ＩＦＯ）から以下に示す寄託番号のもとの菌株か ら公衆に対して自由に入手出来る：カンディダアンタルクティカ（Ｃａｎｄｉｄ ａ　ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）　：　ＣＢＳ　５９５５＋ＡＴＣＣ３４８８８，Ｎ ＲＲＬ　Ｙ−８２９５，ＣＢＳ　６６７８．　ＡＴＣＣ２Ｂ３２３．　ＣＢＳ　 ６８２１及びＮＲＲＬ　Ｙ−７９５４ｉカンディダツクバエンシス（Ｃａｎｄｉ ｄａＴｓｕｋｕｂａｅｎｓｉｓ）　：　ＣＢ５６３８９．　ＡＴＣＣ２４５５５ 、及びＮＲＲＬ　Ｙ−７７９２；カンディダアウリカラリエ（Ｃａｎｄｉｄａ　 ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａｅ）　：　ＣＢＳ　６３７９＋ＡＴＣＣ２４１２１及び ＩＰｏ　１５８０：カンデイダヒュミコラ（Ｃａｎｄｉｄａｈｕｓｉｃｏｌａ） 　：ＣＢＳ　５７Ｌ　ＡＴＣＣ１４４３Ｂ、　ＩＦＯ０７６０，ＣＢＳ　２０４ １゜ＡＴＣＣ９９４９，ＮＲＲＬ　Ｙ−１２６６、ＴＦＯ０７５３及びＩＰＯ１ ５２７及びカンディダ　フオリオラム（Ｃａｎｄｉｄａ　ｆｏｌｉｏｒｕｍ）　 ：　ＣＢＳ　５２３４及びＡＴＣＣ１８８２０゜ 本発明のこのプロセスは、式■のグリコシドを単に式■の酸またはそのエステル と、酵素の存在下で単に混合することによって行なわれ、さらに所望により、反 応は酵素が所望の活性を示す溶剤中で行うことが出来る。好ましくは溶剤側よ添 加しない、もしも有機溶剤を用いる場合、該溶剤は酵素に対して有害な作用を与 えるべきではない、このような溶剤の側番よ、ケトン、炭化水素及びエーテルで ある。好ましし）溶剤側よ、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン及び２−ブタノンで ある。好ましくは、反応媒質は非水溶性であるかまたは適用される酵素の良好な 反応性及び耐用年数を確保するために必要な適当量の水のみを含有する。

好都合には、反応温度は約２０〜１００℃の範囲内であり、好ましくは約３０〜 ８０℃の範囲内である。好ましくは、反応は低圧力下テ、好ましくは、約０．０ ５バール以下で行なわれる０本発明を次の実施例により説明するが、この実施例 は何ら本発明の範囲を制限するものではない。

二股五王里 内部標準としてＴＭＳを用いブリニッケル非４００及びブリュッケルＡＭ　５０ ０分光光度計を用いてＩＨ及びＩ３ＣＮＭＲスペクトルを記録したｅｌｄｍキュ ーペットを用い、パーキンエレマ−２４１旋光計を用いて旋光度を測定した。融 点は修正しない。

１（ＰＬＣ−分析をメルクリコソーブ（登録商標）　ＮＨ，−カラム及び溶離剤 としての９６％エタノールを用い、シマズＬＣ−４Ａ機（屈折率測定機）により 行なった。臨界ミセル濃度をクルーゼテンシオメーターＫＩＯを用いて測定した 。レイボルドヘレウスからＫＤＬ　１単位に関し分子量分布を測定した。イソプ ロピルα−Ｄ−グルコピラノシドｎ−プロピルβ−Ｄ−グルコピラノシド及びフ ェニルα−ローグルコピラノシドは、デンマークテクニカルユニバーシイティ有 機化学科からギフトとして得られた。調製液体クロマトグラフィーを、溶離剤と してヘキサン−エチルアセテート及びエタノールの勾配によりシリカゲルについ て行なった。

１−」− エチル６−０−ドー°カッイルーＤ−グルコピーノシドの量７０℃の撹拌バッチ 反応器内の粗製エチルＤ−グルコピラノシド（５７８ｇ　、　２．７８ｓｏｆｆ ｉ、例１０に従って調製）及びドデカン酸（７５１ｇ　、　３．７５ｍｏｆ）の 混合物に、カンディダアンタルクティカ（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｎｔａｒｃｔｉｃ ａ）由来の固定化リパーゼ（２９ｇ　、デンマーク特許出願３２５０／８Ｂに記 載したごとく調製）を添加した。

減圧下（０，０５ｂａｒ）のもとて撹拌を継続し、ついでエステル合成の過程を 、ＨＰＬＣによりモニターした。２３時間後、酵素を濾過して除去した（７０℃ で）、過剰の脂肪酸を、分子蒸留（１０５”Ｃ、０，０４ミリバール）を繰り返 えして除去し、９６％（１０５０ｇ）の粗製生成物及び２％のエチルＤ−グリコ シド及び２％のディエステル混合物（ＨＰＬＣ分析）を得た。粗製生成物をクロ マトグラフィー法により精製した。’ＨＮＭＲ−分析による同定はα及びβアノ マー１＝１混合物を示した（第４表）。

反応を第１図に示す。

ＩＬｕ エチル６−０−−゛カッイルーＤ−グルコピーノシドの“　１エチルＤ−グルコ ピラノシド（６２５ｇ　、　３．　Ｏｍｏｊり　、デカン酸（６４６ｇ　、　３ ．７５ｍｏｊ！　）及び固定化酵素（３１，５ｇ　）を用い、例１に従い表題化 合物を粗製生成物（１０３０ｇ、９３％のモノエステル、５％のエチルローグル コピラノシド、２％ジエステル）として得た０反応は４８時間で完結した。クロ マトグラフィー法により精製した生成物のＮＭＲスペクトルを第４表に示す。

五−主 エチル６−０−−トーー’カッイルーＤ−グルコピーノシ′の韮 エチル−Ｄ−グルコピラノシド（６０９ｇ　、　２．’ｌｌ＋ｏｊり　、テトラ デカン酸（８３４ｇ　、　３．７＠ｏｊり及び固定化酵素（３０，５ｇ　）を用 い例１に従い表題化合物を粗製生成物（１１６０ｇ、９３％のモノエステル、４ ％のエチルローグルコピラノシド、３％のジエステル）として得た０反応は４６ 時間で完結した。クロマトグラフィー法により精製した生成物のＮＭＲスペクト ルは、１１（及び”ＣＮ？ＩＲスペクトルに従い表４ａ／４ｂに示すごとく純粋 なα及びβアノマーに対して与えられた。

伍り−１ 叢１ エチルローグルコピラノシド（６０３ｇ　、　２．９ｍｏｆｆｉ　）　、ヘキサ デカン酸（１００１ｇ　、　３．９１ｍｏｆ　）及び固定化リーパーゼ（３０， ５ｇ）を用い例１に従い表題化合物を粗製生成物（１２２０ｇ、９１％のモノエ ステル、７％のエチルローグルコピラノシド、２％のジエステル）として得た０ 反応は４８時間で完結した。クロマトグラフィー法により精製した生成物のＮＭ Ｒスペクトルは、ＩＨ及び”ＣＮＭＲスペクトルに従い表４ａ／４ｂにおいて純 粋なα及びβアノマーに対して与えられた。

エチル６−０−　シス−９−オフ　−セノイル　−Ｄ−グルコビーノシドの骨 エチルＤ−グルコピラノシド（６０６ｇ　、　２．９ｍｏｆ）　、シス−９−オ クタデセン酸（ｌｌｌ１ｇ　、　３．９ｍｏｊ！　）及び固定化酵素（３０，５ ｇ　）を用い、例１に従い粗製生成物（１３０５ｇ、９０％のモノエステル、５ ％のエチルローグルコピラノシド、５％のジエステル）として表題化合物を得た ０反応は４８時間で完結エチル６−０−オフ　−カノイルーＤ−グルコビーノシ ゛の璽製 エチルローグルコピラノシド（６０３ｇ　、　２．９ｍｏｊ！　）オクタデカン 酸（１１１２ｇ　、　３．９５ｏｉｌ　）及び固定化リパーゼ（３０ｇ）を用い 、８０°Ｃの反応温度で、反応を行い粗製生成物（１３１０ｇ　、　９０％のモ ノエステル、５％のエチルＤ−グルコピラノシド、５％のジエステル）として表 題化合物を得た。反応は４８時間で完結した。クロマトグラフィー処理により精 製した生成物のＮＭＲスペクトルはＩＨ及びＩ′ＣＬＭＲスペクトルに従って、 表４　ａ　／　４　ｂに示すように純粋なα及びβアノマーに対して与えられた 。

立ｌ之上■Ｈ製 触媒として３０ｇの固定化リパーゼを用い、例１に記載した手順に従いココナツ ツ油脂肪酸の混合物（合計量３、Ｏｍｏｊｌ！のうち１％のデカン酸、５１％の ドデカン酸、２４％のテトラデカン酸、１３％のヘキサデカン酸、４％のオクタ デカン酸、５％のシス−９−オクタデカン酸及び２％のシス、シス−９，１２− オクタデカンジエン酸を含有する）を用いて、エチルＤ−グルコピラノシド（６ ００ｇ　、　２．９ｍｏｆｆｉ　）をエステル化した。７２時間後、反応は完結 し９．１２００　ｇの生成物（９１％のモノエステル、６％のジエステル及び３ ％のエチルＤ−グルコピラノシド）を得た。

■−ｌ エチル６−（λココを久タシ！イノ！く一二−Ｄ−−ニグノヒシーくラージ−？ −ド！と晒Ｉ説。

固定化酵素（５ｇのりボザイム（登録商標）７．ムコールマイヘイ（Ｍｕｃｏｒ 　Ｍｉｅｌｖｅｉ）から産生されるリパーゼでノボ社から商業的に入手可能）を 、７０℃の撹拌バッチ反応器（リフラックス）中のヘキサン（１０００ｍ）に懸 濁させたエチルＤ−グルコピラノシド（５００ｇ　、　２．４Ｉａｏ１例１０に 従って調製される）及びオクタン酸（５２０ｇ　、　３．６ｏ＋ｏｌ）の懸濁液 に添加した。撹拌を継続し２ついで生じた水を共沸蒸留により除去した０反応の 程度を、ＨＰＬＣにより追跡した。生成物が得られた場合、懸濁液は徐々に均質 な溶液となった（１２時間後）、５２時間後、酵素を濾過して除去しついで溶剤 を真空除去した。過剰の脂肪酸を繰り返えし分子蒸留により除去し、粗製生成物 （７９０ｇ、９１％のモノエステル、８％のジエステル及び１％のエチルＤ−グ ルコピラノシド）を得た。精製した生成物の１）（及び”ＣＮＭＲ−・スペクト ルは、表４　ａ　／　４　ｂに与えられた純粋なα及びβ−アノマーに対するス ペクトルに一致していた。

■皿製 イソプロピルＤ−グルコピラノシド（例１１に従って調製した４４６ｇ　、　２ ．０１ｍｏｊ！　）を用い、例１に従い表題化合物を調製した。２４時間後に反 応は完結し、ついで粗製生成物を単離した（５６１．１　ｇ、７３．４％のモジ エステル及び９．２％のジエステル）。

グルコース（５００ｇ　、　２．７８ｓｏｆ　）及び強酸カチオン交換樹脂（１ ００ｇアンバーライト１５　、８ＤＨケミカルズ）を、エタノール（２０００ｄ 　、　３４．３ｓｏｊ！　）に懸濁させた。混合物を８０℃で１６時間撹拌した ０反応の過程をＨＰＩ、Ｃにより追跡した。イオン交換樹脂を濾過して除去し、 ついで溶液を活性炭（ｉｏｇ）で処理した。濾過後、エタノールを真空除去し、 シロツブ（５７８ｇ、定量的収率）としてエチルＤ−グルコピラノシド（α及び βアノマーの１：１混合物）を得た。

イソプロパツール（２０００ｄ　、　２６ｍｏ　ｉ！　）及びグルコース（５０ ０ｇ　。

２．７８ｓ＋ｏｆ）を用い、例１０に記載した手順により表題化合物を定量的収 率で得た。

■■二■ 読Ｊ１３ＪＬ二」ｋｚ乙弘ジ旦ラうシドの辷すニ活ノｊソヒλ遁製。

二瓜煎王皿エ エチルβ−ローグルコピラノシド（３，０ｇ　、　１４　ｔｒ＋ｍｏｌ、例２４ に従って調製）を、７０℃で溶融脂肪酸に溶融または懸濁させた。固定化リパー ゼ（典型的には０．５ｇのりボザイム（登録商標）、例８参照）を添加しついで 混合物を減圧下（０，０５ｂａｒ）で撹拌した０反応の過程を、ＨＰＬＣで追跡 した。この混合物の反応物を、アセトンで希釈し、ついで酵素を濾別した。溶剤 を真空除去しついで生成物を、シリカゲルによりクロマトグラフィー処理により 回収した　Ｉ）（及び１３ＣＮＭＲ（表４ａ参照）に対し、さらに融点（ｓｅ、 ｐ、）、旋光度（〔α〕、）及び臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）の測定によりさらに 特徴づけられた（表３に示す）０種々の実施例から得られた詳細は第１表に示す 。

第１表 実験の詳細は、純粋なβ−Ｄ−グルコピラノシドの６−〇−エステルの調製を示 している。

■旦二ｎ なα−Ｄ−グルコビーノシドの６−０−エスールの量二瓜煎王皿上 エチルａ−Ｄ−グルコピラノシド（２，０ｇ　、　９　ｍｔａｏＩ！、、例２５ に従って調製）を、溶融脂肪酸（典型的には１８　ｍｒａｏ１２　）に溶解また は懸濁させた。固定化酵素（典型的には０．３３ｇ）を、例１２〜１７における ごとく添加した。ＩＨ及び”ＣＮＭＲ（表４ｂ参照）、融点（ｗ＋、ｐ、）、旋 光度（〔α）ｏ）及び臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）の測定値を第３表に示す０種々 の実施例から得られた実験的データを第２表に示す。

第２表 実験的な詳細は、純粋なα−Ｄ−グルコピラノシドの６−〇−エステルの調製を 示す、゛ 第３表 例１２〜２３から得られる生成物の物理的データ：＊　＞　１０−５蒙ｏ　ｊ！ 　／　ｊ！、全てクロロホルム中で測定。

＊＊）生成物は非常に不溶性である。

炭酸銀（３０ｇ　、　０．１１蒙０２）の懸濁液に、２．３．４．６−チトラー 〇−アセチルーα−Ｄ−グルコビラノシルブロミド（４１，１ｇ　、　０．１− 〇りを少量ずつ４０分にわたって添加した。

混合物を日夜撹拌し、ついでジクロロメタン（４０ｄ）で希釈しついでセライト 及び活性炭で濾過した。濃縮してエチル２゜３．４．５−テトラ−０−アセチル −β−Ｄ−グルコピラノシド（２３，４ｇ　、　６２％）を結晶化させた。

エチル２．３，４．６−テトラ−０−アセチル−グルコピラノシドを、メタノー ル（８ＯＮ！１）に溶解した１ｍｏ１２のナトリウムメトキシド（２ｍ）を用い ２０時間室温で脱アセチル化した。

混合物をアンバーライトＩＲ−１２０（Ｈ”−型）を用いて中性化しついで減圧 濃縮して吸湿性固体として生成物を定量的な割合で得た。

■−跋 エチルα−Ｄ−グルコピーノシドの１１α：βが１＝１であるアノマー比を有す るエチルＤ−グルコピラノシド（３０ｇ、例１２に記載したごとく調製）を、３ ０℃で０．０５＋＋ｏｊ！のアセテート緩衝液（４００ｄ　、　ｐ）１４．５　 ）に溶解した。

β−クルコシダーゼ（５０■、アルモンド、シグマ社から入手）を添加しついで 混合物を一週間撹拌した。溶液を減圧下で蒸発させついでクロマトグラフィー法 により精製し、結晶性固体（８，２ｇ、５５％）として生成物を得た。

■−匹 イソプロビル６−０−オフ　ノイル−α−Ｄ−グルコビーノ之工曵里製 １００ｍの２−ブタノンに溶解したイソプロピル−α−Ｄ−グルｈピラノシド（ １，１ｇ　、　５　ｍｍｏｊり及びオクタン酸（０，９ｇ　、　６．２５　ｔａ ｖａｏｌ　）の撹拌溶液に、固定化酵素（０，５ｇ、リポザイム（登録商標）、 例８参照）を添加した。６０℃で、４８時間撹拌を継続した。酵素を濾過して除 去しついで溶剤を真空下で除去し、カラムクロマトグラフィー法により、１．２ ｇ（７０％）の生成物を得た：　’ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣ１ａ）δ： 　０．８８（ｔ、Ｊ＝　６．７Ｈｚ、３Ｈ）；］、、１９（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ 、３１（）　；　１．２４（ｄ、Ｊ＝６．２Ｈｚ。

３Ｈ）；１．２８（ｍ、８Ｈ）　；　１．６２（＋ｗ、２１（）　；　２．３４ （ｍ、２８）　；　３．３５（ｔ、Ｊ＝９．４Ｈｚ。

ＩＨ）；３．５０（ｄｄ、Ｊ−４，０ａｎｄ　９．５Ｈｚ、ＩＨ）　；　３．７ ３（ｔ、Ｊ＝９．３Ｈｚ、ＩＨ）　；３．８５（＋＋＋、１［１）　：　３．９ ２（＋ｉ、ＬＨ）４．３５（ｍ、２Ｈ）　；　４．９６（ｄ、Ｊ＝３．９１１ｚ 、ＩＨ）。

工ｑ皿製 ２−ブタノン（５０ｄ）に溶解したｎ−ブチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（１ ，０ｇ　、　４．２　ａ＋ｅ＊ｏｊりを用い、例２６に記載した方法に従い、表 題化合物を２４時間後に２５％の収率で得た：’ＨＮＩＩＲ（４００ＭＩＩｚ、 ＣＤＣｈ）δ：　０．９０（＋ｓ、６Ｈ）　；　１．２９（Ｍ、８１１）　：　 １．３７（ｍ、２Ｈ）　；　１．６１（＊、４Ｂ）　；　２．３５（ｍ、２Ｈ） 　；　３．３５（ｍ、２Ｈ）　；　３．５０（ｌＩ、３Ｈ）；３．８５（０１， ＩＨ）：　４．２７（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、ＩＨ）；　４．２８（ｍ、ｉＨ）；　４ ．３Ｂ（＠、Ｉｎ）。

星製 フッイドモナスセパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｃｅｐａｃｉａ）由来の固 定化酵素１０．５　ｇ、デンマーク特許出願３９９３／８７に記載したごとく調 製）及びエチルα−Ｄ−グルコピラノシド（１，０４ｇ　、　５ｍｓｏ　ｎ、例 ２５に記載したごと（調製）を用い、例２６に従い、４８時間の反応時間後表題 化合物を収率７ｏ％で得た。’ＨＮＭＲに対しては、表４６を参照のこと。

■−益 エチル６−０−）’乙たＬ工水ユ旦ニゲ丑λｘｊ／＞ヱ■皿製触媒としてヒュミ コララムギノザ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ　ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）由来ノ固定化酵素 （３，０ｇ、テンマーク特許出願３１Ｂ３．０００／ＤＸに記載したごとく調製 ）及び１／１０　ｍｏｆ！量を用い、例１に従って表題化合物を粗製生成物（８ ３％のモジエステル及び１５％のジエステル及び２％のエチルＤ−グルコピラノ シドを含有する１００ｇ）として１６時間の反応時間後に得た。

式Ｉで表わされるエチル６−０−アシルグルコピラノシドに対する”　Ｈ−ＮＭ Ｒ及び羞’（、−ＮＭＲのデーターを表４ａ及び表４ｂに示す。

表４ａ 表４ｂ 表４８及び４ｂにおける欄は、化合物に対するデーターを示しており、ここにお いて粗脂肪酸（ＲＣＯＯＨ）は、欄のタイトルＣｓ　＊　Ｃ１＠　＋　ＣＩ！　 ＋　Ｃｒａ　＋　Ｃｒａ及びＣ１，にそれぞれ対応する炭素原子８．１０，１２ ．１４．１６及び１８を含有する。Ｃ，−Ｃ。

は、グリコシド中の炭素を示し、さらにＨ１〜Ｈ６ｂはグリコシド中の水素原子 を示しこれに対し１３０　ＮＭＲ及び’ＨＮＭＲがそれぞれこれらの表中に示さ れる。

エチルローガラクトシド（１１，５ｇ　、　５６　ｓ＋ｍｏｆ、例３１に従って 調製）、オクタン酸（１６ｇ　、　１１１ｍ５ｏｆ）及びリボザイム（２ｇ、例 ８参照）を用い、表題化合物を例１２に従って調製した。

２４時間後生成物は収率８０％で回収された。

ガラクトースを用い、例１０に従い表題化合物を得た。生成物（エチルＤ−ガラ クトピラノシド及びエチルＤ−ガラクトフラノシドの混合物である）を定量的収 率で単離した。

■−皿 ２．３−イソブロビレンーグ１セ１ル６−０−ヘキサ−゛カッイルーα−Ｄ−ガ ークトピーノシドのし１１１例２６に記載したと同様の方法で、１６時間の反応 ののち表題化合物を収率７０％で得た。

■−益 エスール六　によるエチル６−０−オフ　ノイル−α−Ｄ−グルコピーノシドの 富 基質としてエチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（１，０４ｇ、５ミリモル）およ びメチルオクタル−ト（１，８ｇ、１１ミリモル）を用い例２６に従って表現化 合物を得た。２４時間の反応後、生成物を収率１０％で単離した。

勇−且 以下の条件を用いトルク針で実験を行なった：洗浄時間：２０分 温　度：２５°Ｃ 水　：９”ｄＨ 試験物質：　ＥＭＰＡ　１１２　（７，７ａｍ　）洗　剤：ナトリウムトリホス ペード　１．７５ｇ／／！ナトリウムメタシリケート　０．４０ｇ／ｊＩＣＭＣ ０，０５ｇ／／！ ＥＤＴＡ　０．０１　ｇ　／　Ｉ！。

ナトリウムスルヘ−）　２．００ｇ／ｊ！テンシト　０．６０ｇ／ｊ！ 用いたテンシトは、７５％の直鎖アルキルベンゼンスルホネー）　（ＬＡＳ　、 　Ｎａｎ５ａ　３８０）及び２５％の式Ｉの化合物であった。得られた結果を以 下の第５表に示す： 第５表 ｎ−ブタノール（３００，ｄ　、　３．２８ｄ）およびグルコース（２０ｇ、０ ．１１モル）を用い、例１０の手順に従い、表題化合物を定量的収率で得た。

ｎ−ブチル６−０−ドー゛カッイルーＤ−グルコピラノシドの璽盃 ｎ−ブチルローグルコピラノシド（２２゜６ｇ、０．１０モル）を用い、例１の 方法に従い、表題化合物を得た。２４時間後、反応は完結し、粗製生成物を単離 した（４０ｇ、８４％のモノニスヘキサン（１０（ｌｄ　）に溶解したｎ−プロ ピルローグルコピラノシド（５，６ｇ　、０．０２５モル、イソプロパツールの 代りにｎ−プロパツールのみを用いて例１１に従って得た）およびメチルドデカ ノエート（１０，８ｇ、　０．０５モル）の撹拌混合物に、カンデイダ　アンタ ルクチイカ（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）　（１，０ｇ　）由来の 固定化酵素を添加した。反応混合物をリフラックスし、次いで反応中に生じたメ タノールを共沸蒸留により除去した。

１６時間後、表題化合物を７２％の収率（７，３ｇ）で単離した。

■−鉦 ホスフェートビルグーを有しない重質粉末を次のように製剤化した： 界面活性剤を有しない塩基性洗浄剤： ゼオライトＡ２６５　、ニトリロトリ酢酸１０６、炭酸ナトリウム１０６、メタ シリケートナトリウム８５、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）１１　、Ｅ ＤＴＡ２．１、硫酸ナトリウム４２５（塩基性洗剤１ｋｇ当たりのｇ数としての 表示量）。

これに界面活性剤を添加し、最終濃度１２．５％（Ｗ／Ｗ）とした、用いた界面 活性剤は、７５％の直鎖のベンゼンスルホネート（ＬＡＳ、　Ｎａｎ５ａ　Ｓ　 ８０）および２５％の以下の試験化合物であった・ 最終洗剤組成物を、４．８ｇ／／！の濃度で適用した。洗浄実験を、例３４で示 した条件下トルク針を用いて行った。洗浄後、脂肪の残留量をシックレット（Ｓ ｏｘｈｌｅｔ）　（登録商標）による抽象径測定し、スワッチの脂肪％（Ｗ／Ｗ ）として表わした。

以下の結果を得た： ベロール１６０　２．４９ ホダッグＣＢ−６２，５４ グルカーテＤｏ　２．５０ グルカーテＳＳ　２．５６ エチル６−０−ドデカイル−Ｄ−グルコピラノシド　２．３９エチル６−０−ド デカイル−Ｄ−グルコピラノシド　２．４０エチル６−０−ヘキサデカノイル− 〇−グルコピラノシド　２．４３エチル６−０−オクタデカノイル−Ｄ−グルコ ピラノシド　２．４４エチル６−０−（シス−９−オクタデカノイル）−Ｄ−２ ，３７グルコビラノシド エチル６−０−　（、ココナツツ脂肪アシル）　−Ｄ−２゜４２グルコビラノシ ド ベロール０６５および１６０は、スウェーデンの会社ベロールＡＢ製の商業的ア ルコールエトキシレートでありｓ　Ｃ１＆−１＠およびＣＩ！−＋ａの脂肪アル コール部分に鎖長を有しかつそれぞれ１０ＥＯおよび６ＥＯのエトキシル化の程 度を有する。ホダッグＣＢ−６は、ココナツツ油からの脂肪酸に蟇づ（メチルグ リコシドエステル混合物であり、これは未特定のモノ−、ジー、トリー等のエス テルの混合物であり、ホダフグ社（スコーキ、イリノイス、ＵＳＡから入手可能 である。アメルコールグルカーテ、ＤＯおよびＳＳはメチルグルコースセスキス テラ−）　（ＣＡＳ番号３２９３３−９９−１）およびメチルグルコースジオレ エートＣＣＡＳ番号６８９３６−９５−８）である、エチルＤ−グルコピラノシ ドの６−０−エステルは例１，２、および４−７によって得た。

五−皿 先の実施例におけると同様にホスフェート洗浄なしで洗浄実験を行ったが、試験 化合物は全て３３対６７（試験化合物対しＡＳ）の割合で混合し、全界面活性剤 は、洗浄混合物の１１．３％であり、これは全て洗液Ｉｔ当たり４．８ｇの濃度 で適用した。

得られた結果を表に示す。

残留脂肪（％） 試験化合物　重量／重量 ベロール０６５　２．１３ ベロール１６０　２．０３ リゴウト０−１５７０　２．０２ リツウトＬ−１６９５２，０１ ＡＰＧ　３２５　２．０９ ＡＰＧ　５５０　１．９６ エチル６−０−（ココナツツ脂肪酸）−Ｄ−１，９０グルコビラノシド リョウト０−１５７０およびＬ−１６９５は、それぞれオレイン酸およびラウリ ン酸の商業的に入手可能なスクロースエステルであり、その両者は種々の程度の エステル化度を有するエステルの混合物である。　ＡＰＧ３２５および５５０は 、それぞれ８−１１およヒ１２−１５の脂肪アルコールの鎖長分布を有するアル キルポリグリコシド（１〜１０の間でグルコース単位が変化する重合度をもつ炭 水化物部分と脂肪アルコール混合物のグリコシド）であり、それぞれホリゾンケ ミカル社（テキサス州、ＵＳＡ）から入手可能である。エチル６−０−（ココナ ツツ脂肪アシル）−Ｄ−グルコピラノシドを例７に従って製造した。

請求の範囲 １、　次式Ｉ： Ｒ−ＣＯＯ−Ｘ　−ＯＲ’　（夏　） （式中、Ｒ１はＣ３−Ｃ１，アルキルを表わすか、又はＲ１は次の基 （基中、Ｙはメチレンまたはエチレンを表わす）で表わされる一種を表わし、Ｘ はアノマー炭素原子で基−ＯＲ″を有しかつ第一級ヒドロキシ基で基ＲＣＯＯ− を有する単糖類部分を表わし、更にＲは０４〜Ｃｔａアルキルを表わす）で表わ される化合物の製法であって、 次式■： Ｒ−ＣＯＯＲ”　（Ｉｔ　） （式中、Ｒは先に定義した意味であり、更にＲ２は水素もしくは低級アルキルを 表わす） で表わされる酸またはエステルを、次式■：８Ｏ−Ｘ−ＯＲ’　（Ｉ［［） （式中、ＸおよびＲ１は各々先に定義した意味と同じである）で表わされるグリ コシドと触媒の存在下で縮合させることを含んでなり、該触媒がヒドラーゼであ ることを特徴とする前記方法。

２、部分Ｘに対応する単Ｉ！類が末端アノマー炭素原子で基−ＯＲ’を有する、 請求の範囲第１項記載の方法。

３、Ｒ’が未置換アルキル基である、請求の範囲第１項又は第２項記載の方法。

４、Ｒ’が２．３又は４個の炭素原子を有する、請求の範囲第１〜第３項のいず れかに記載の方法。

５、Ｒ’がエチル、プロピル、イソプロピルまたはブチル、好ましくはエチルま たはイソプロピルである、前記請求の範囲第１〜第４項のいずれか１項に記載の 方法。

６、　残基Ｘに対応する単糖類がグルコース、フルクトース、リボース、マンノ ース、又はガラクトース、好ましくはグルコースまたはガラクトースである、請 求の範囲第１〜第５項のいずれか１項に記載の方法。

７、残基Ｒ−ＣＯＯ−に相当する脂肪酸が、６〜２２個の炭素原子を含有する前 記請求の範囲第１〜第６項のいずれか１項記載の化合物。

８、脂肪酸がヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ドデ カン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデカン酸、エイコサン酸、ト コサン酸、シス−９−オクタデカン酸、シス、シス−９，１２−オクタデカン酸 、またはシス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデカトリエン酸である請求 の範囲第７項記載の方法。

９、Ｒ’がエチル、イソプロピル又はブチルであり、更にＸはグルコース単位で ある、請求の範囲第８項記載の方法。

１０、ヒドラーゼが、リパーゼ、エステラーゼもしくはプロテアーゼである、請 求の範囲第１〜第９項のいずれか１項に記載の方法。

１１、リパーゼが、ムコール（Ｍｕｃｏｒ）　、ヒエミコラ（Ｈｕ＊１ｃｏｌａ ）プサイトモナス（Ｐｓｅｕｄｏｓ＋ｏｎａｓ）またはカンディダ（Ｃａｎｄｉ ｄａ）の種により産生されうるちのであることを特徴とする請求の範囲第１項〜 第１０項のいずれか１項に記載の方法。

１２、酵素が固定化された形で適用される、請求の範囲第１項〜第１１項のいず れか１項に記載の方法。

１３、溶剤を用いない、請求の範囲第１〜第１２項のいずれかに記載の方法。

１４、次式Ｉ： Ｒ−Ｃｏｏ）、　Ｘ　−ＯＲ’　（１）（式中、Ｒ１は０２〜Ｃ，アルキルを表 わすか、又はＲ１は次の基 （基中、Ｙはメチレンまたはエチレンを表わす）で表わされる一種を表わし、Ｘ はアノマー炭素原子で基−ＯＲ’を有しかつ第一級ヒドロキシ基で基ＲＣＯＯ− を有する単糖類部分を表わし、更にＲは０４〜Ｃ２４アルキルを表わす）で表わ される化合物。

１５、部分Ｘに対応する単ＩＩ類が、末端アノマー炭素原子で基−ＯＲ’を有す る、請求の範囲第１４項記載の化合物。

１６、　ＲＩが未置換アルキル基である、請求の範囲第１４項又は第１５項記載 の方法。

）・　１７．Ｒ１が２．３又は４個の炭素原子を有する、請求の範囲第１４〜第 １６項のいずれか１項に記載の化合物。

１Ｂ、　Ｒ１がエチル、プロピル、イソプロピルまたはブチル、好ましくはエチ ルまたはイソプロピルである、前記請求の範囲第１４〜第１７項のいずれが１項 に記載の化合物。

１９、残基Ｘに対応する単ＩＩ類がグルコース、フルクトース、リボース、マン ノース、又はガラクトース、好ましくはグルコースまたはガラクトースである、 前記請求の範囲第１４〜第１８項のいずれが１項に記載の化合物。

２０、残基Ｒ−ＣＯＯ−に相当する脂肪酸が、６〜２２個の炭素記載の化合物。

２１、脂肪酸がヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ド デカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデカン酸、エイコサン酸、 トコサン酸、シス−９−オクタデカン酸、シス、シス−９，１２−オクタデカン 酸、またはシス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデカトリエン酸である請 求の範囲第２０項記載の化合物。

２２、エチル６−０−ヘキサノイルグルコシド、エチル６−〇−ヘプタノイルグ ルコシド、エチル６−ｏ−オクタノイルグルコシド、エチル６−０−ノナノイル グルコシド、エチル６−〇−デカノイルグルコシド、エチル６−０−ドデカノイ ルグルコシド、エチル６−０−テトラデカハルグルコシド、エチル６−０−ヘキ サデカノイルグルコシド、エチル６−ｏ。

−オクタデカノイルグルコシド、エチル６−０−エイコサノイルグルコシド、エ チル６−０−ドコサノイルグルコシド、エチル６−０−シス−９−オクタデカノ イルグルコシド、エチル６−０−シス、シス−９，１２−オクタデカノイルグル コシド、エチル６−〇−シス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデカトリエ ノイルグルコシド、イソプロピル６−０〜ヘキサノイルグルコシド、イソプロピ ル６−０−ヘプタノイルグルコシド、イソプロピル６−０−オクタノイルグルコ シド、イソプロピル６−０−ノナノイルグルコシド、イソプロピル６−０−デカ ノイルグルコシド、イソプロピル６−０−ドデカノイルグルコシド、イソプロピ ル６−０−テトラデカノイルグルコシド、イソプロピル６−０−ヘキサデカノイ ルグルコシド、イソプロピル６−０−オクタデカノイルグルコシド、イソプロピ ル６−０−エイコサノイルグルコシド、イソプロピル６−０−ドコサノイルグル コシド、イソプロピル６−０−シス−９−オクタデカノイルグルコシド、イン１ ０ビル６−０−シス、シス−９，１２−オクタデカノイルグルコシド、イソプロ ピル６−０−シス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイルグル コシド、プロピル６−０−ヘキサノイルグルコシド、プロピル６−０−ヘプタノ イルグルコシド、プロピル６−０−オクタノイルグルコシド、プロピル６−０− ノナノイルグルコシド、プロピル６−０−デカノイルグルコシド、プロピル６− ０−ドデカノイルグルコシド、プロピル６−０−テトラデカノイルグルコシド、 ブＵビル６−ｏ−ヘキサデカノイルグルコシド、プロピル６−０−オクタデカノ イルグルコシド、プロピル６−０−エイコサノイルグルコシト、フロビル６−０ −ドコサノイルグルコシド、プロピル６−０−シス−９−オクタデカノイルグル コシド、プロピル６−０−シス、シス−９，１２−オクタデカノイルグルコシド 及びプロピル６−０−シス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノ イルグルコシド、ブチル６−０−ヘキサノイルグルコシド、ブチル６−０−ヘプ タノイルグルコシド、ブチル６−０−オクタノイルグルコシド、ブチル６−０− ノナノイルグルコシド、ブチル６−０−デカノイルグルコシド、ブチル６−０− ドデカノイルグルコシド、ブチル６−０−テトラデカノイルグルコシド、ブチル ６−０−ヘキサデカノイルグルコシド、ブチル６−０−オクタデカノイルグルコ シド、ブチル６−０−エイコサノイルグルコシド、ブチル６−ｏ−ドコサノイル グルコシド、ブチル６−０−シス−９−オクタデカノイルグルコシド、ブチル６ −０−シス、シス−９，１２−オクタデカノイルグルコシド又はブチル６−０− シス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイルグルコシドである 、請求の範囲第１４項記載の化合物。

第１図 国際調査報告 一一一−＾−１−”””’　ＰＣＴ／ＤＫ８［１１００１３５

Claims (18)

【特許請求の範囲】
1. １．一般式Ｉ： （Ｒ−ＣＯＯ）ｎＸ−ＯＲ１（Ｉ） （式中、Ｒ，ｎ，Ｘ及びＲ１の各々は先に定数した意味である） で表わされる化合物。
2. ２．Ｒ１が未置換アルキル基である、請求の範囲第１項記載の化合物。
3. ３．Ｒ１が２個、３個または４個の炭素原子を有する、請求の範囲第１項または 第２項記載の化合物。
4. ４．Ｒ１がエチル、プロピル、イソプロピルまたはブチル、好ましくはエチルま たはイソプロピルである、前記請求の範囲のいずれか１項に記載の化合物。
5. ５．ｎが１である、前記請求の範囲のいずれか１項に記載の化合物。
6. ６．Ｘが１個のみのヘキソースまたはペントース単位を含有する炭水化物残基で ある、前記請求の範囲のいずれか１項に記載の化合物。
7. ７．残基Ｘに対応する炭水化物がグルコース、フルクトース、リボース、アラビ ノース、マンノース、ガラクトース及びキシロース、好ましくはグルコースまた はガラクトースである、請求の範囲第６項記載の化合物。
8. ８．残基Ｘに対応する炭水化物はスクロース、マルトース、セルビオース、ラク トースまたはイソマルトースである、請求の範囲第１項〜第５項のいずれか１項 に記載の化合物。
9. ９．残基Ｒ−ＣＯＯ−に相当する脂肪酸が、６〜２２個の炭素原子を含有する前 記請求の範囲のいずれか１項記載の化合物。
10. １０．脂肪酸がヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ド デカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデカン酸、エイコサン酸、 ドコサン酸、シス−９−オクタデカン酸、シス、シス−９，１２−オクタデカン 酸、またはシス、シス、シス−９，１２，１５−オクタデカトリエン酸である請 求の範囲第９項記載の化合物。
11. １１．エチル６−Ｏ−ヘキサノイルグルコシド、エチル６−Ｏ−ヘプタノイルグ ルコシド、エチル６−Ｏ−オクタノイルグルコシド、エチル６−Ｏ−ノナノイル グルコシド、エチル６−Ｏ−デカノイルグルコシド、エチル６−Ｏ−ドデカノイ ルグルコシド、エチル６−Ｏ−テトラデカノイルグルコシド、エチル６−Ｏ−ヘ キサデカノイルグルコシド、エチル６−０−オクタデカノイルグルコシド、エチ ル６−Ｏ−エイコサノイルグルコシド、エチル６−Ｏ−ドコサノイルグルコシド 、エチル６−Ｏ−シス−９−オクタデカノイルグルコシド、エチル６−Ｏ−シス 、シス−９，１２−オクタデカノイルグルコシド、エチル６−Ｏ−シス、シス、 シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイルグルコシド、イソプロピル６− Ｏ−ヘキサノイルグルコシド、イソプロピル６−Ｏ−ヘプタノイルグルコシド、 イソプロピル６−Ｏ−オクタノイルグルコシド、イソプロピル６−Ｏ−ノナノイ ルグルコシド、イソプロピル６−Ｏ−デカノイルグルコシド、イソプロピル６− Ｏ−ドデカノイルグルコシド、イソプロピル６−Ｏ−テトラデカノイルグルコシ ド、イソプロピル６−Ｏ−ヘキサデカノイルグルコシド、イソプロピル６−Ｏ− オクタデカノイルグルコシド、イソプロピル６−Ｏ−エイコサノイルグルコシド 、イソプロピル６−Ｏ−ドコサノイルグルコシド、イソプロピル６−０−シス− ９−オクタデカノイルグルコシド、イソプロピル６−Ｏ−シス、シス−９．１２ −オクタデカノイルグルコシド、イソプロピル６−Ｏ−シス、シス、シス−９， １２，１５−オクタデカトリエノイルグルコシド、プロピル６−Ｏ−ヘキサノイ ルグルコシド、プロピル６−Ｏ−ヘプタノイルグルコシド、プロピル６−Ｏ−オ クタノイルグルコシド、プロピル６−０−ノナノイルグルコシド、プロピル６− Ｏ−デカノイルグルコシド、プロピル６−Ｏ−ドデカノイルグルコシド、プロピ ル６−Ｏ−テトラデカノイルグルコシド、プロピル６−Ｏ−ヘキサデカノイルグ ルコシド、プロピル６−Ｏ−オクタデカノイルグルコシド、プロピル６−Ｏ−エ イコサノイルグルコシド、プロピル６−Ｏ−ドコサノイルグルコシド、プロピル ６−Ｏ−シス−９−オクタデカノイルグルコシド、プロピル６−Ｏ−シス、シス −９，１２−オクタデカノイルグルコシド及びプロピル６−Ｏ−シス、シス、シ ス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイルグルコシド、ブチル６−Ｏ−ヘキ サノイルグルコシド、ブチル６−Ｏ−ヘプタノイルグルコシド、プチル６−Ｏ− オクタノイルグルコシド、ブチル６−Ｏ−ノナノイルグルコシド、ブチル６−Ｏ −デカノイルグルコシド、ブチル６−Ｏ−ドデカノイルグルコシド、ブチル６− Ｏ−テトラデカノイルグルコシド、ブチル６−Ｏ−ヘキサデカノイルグルコシド 、ブチル６−Ｏ−オクタデカノイルグルコシド、ブチル６−Ｏ−エイコサノイル グルコシド、ブチル６−Ｏ−ドコサノイルグルコシド、ブチル６−Ｏ−シス−９ −オクタデカノイルグルコシド、ブチル６−Ｏ−シス、シス−９，１２−オクタ デカノイルグルコシド及びブチル６−Ｏ−シス、シス、シス−９，１２，１５− オクタデカトリエノイルグルコシドである、請求の範囲第１項記載の化合物。
12. １２．請求の範囲第１項記載の式Ｉの化合物の製造方法であって、次式ＩＩ：Ｒ −ＣＯＯＲ２（ＩＩ）（式中、Ｒは先に定義した意味と同じてある。さらにＲ２ は水素または低級アルキルを表わす）で表わされる酸またはエステルを、次式Ｉ ＩＩ：（ＨＯ）ｎＸ−ＯＲ１（ＩＩＩ）（式中、ｎ，Ｘ及びＲ１は各々先に定義 した意味を表わす）で表わされるグリコシドと、触媒の存在下で縮合させること を含んでなる、該触媒が酵素であることを特徴とする前記方法。
13. １３．調製された式Ｉの化合物が、請求の範囲第２項〜第１１項のいずれかに特 異的に言及されたものである、請求の範囲第１２項記載の方法。
14. １４．酵素がヒドロラーゼである、請求の範囲第１２項または第１３項記載の方 法。
15. １５．ヒドロラーゼがリパーゼ、エステラーゼまたはプロテアーゼである、請求 の範囲第１４項記載の方法。
16. １６．リパーゼが、ムコール（Ｍｕｃｏｒ）、ヒュミコラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ） 、プサイドモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）またはカンディダ（Ｃａｎｄｉｄ ａ）の種により産生されうるものであることを特徴とする、請求の範囲第１２項 〜第１６項のいずれか１項に記載の方法。
17. １７．酵素が固定化された形で適用される、請求の範囲第１２項〜第１６項のい ずれか１項に記載の方法。
18. １８．本発明で記載される特徴の新規な事項または組み合わせ。