JPH03115292A - ４Ｇ―α―Ｄ―グルコピラノシルルチンとその製造方法並びに用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、式［Ｉ］： で示される新規物質４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　
ルチンおよびその製造方法並びに用途に関する。

［従来の技術］ ルチンは、式［１１］： で示される化学構造を有し、毛細血管の強化、出血予防
、血圧調整などの生理作用を持つビタミンＰとして、ま
た、黄色色素として古くから知られ、食品、医薬品、化
粧品などに利用されている。

ビタミンＰは、生体内で、ビタミンＣの生理活性、例え
ば、生体結合組織の主成分であるコラーゲンの合成に必
要なプロリンやリジンのヒドロキシル化反応に関与し、
また、例えば、チトクロームＣのＦｅ−“を還元してＦ
ｅ−にするなどの酸化還元反応に関与し、更には、白血
球増加にはる免疫増強作用に関与するなどの活性を増強
することが知られており、生体の健康維持、増進に重要
な役割をなしている。

ルチンの用途は、単に栄養素としてのビタミンＰ強化剤
にとどまらず、その化学構造、生理作用から、単独でま
たは他のビタミンなどと併用して、例えば、黄色着色剤
、酸化防止剤などとして飲食物などに、また、循環器疾
患など感受性疾患の予防剤、治療剤すなわち抗感受性疾
患剤に、更には、黄色着色剤、紫外線吸収剤などの美肌
剤、色白剤などとして化粧品にまで及び、その範囲は極
めて広い。

しかしながら、ルチンは水に難溶性で、室温では８Ｌの
水にわずか１ｇ程度（約０．ＯＩＶ／Ｖ％）しか溶けず
、使用上困難を極めている。

これを改善する方法としては、例えば、特公昭２５−１
６７７号公報に示されるごとく、ルチンにアミノ基を有
する脂肪族化合物を加えて水溶性を増大する方法、また
特公昭２６−２７２４号公報に示されることく、ルチン
にモノハロゲン酢酸を作用させ酢酸ソーダ化合物にして
水溶性を増大する方法、また、特公昭２９−１２８５号
公報に示されるごとく、ルチンにロンガリットを作用き
せ亜硫酸化合物にして水溶性を増大する方法などが知ら
れていた。

しかしながら、これらの方法は、いずれもアミノ化合物
、モノハロゲン酢酸、亜硫酸化合物などが用いられ、生
成物質に他の生理活性、毒性が懸念され、またその精製
も困難である。

そこで、本発明者等は、先に、特公昭５４−３２０７３
号公報で、より安全性の高い生合成反応を利用した水溶
化の方法として、糖転移酵素の作用により、ルチンに澱
粉部分加水分解物からグルコース残基を等モル以上転移
きせ、α−グリコジル　ルチンを生成せしめて、その水
溶性を改善する方法を提案した。

この方法で得られるα−グリコジル　ルチンは、特公昭
５４−３２０７３号公報で記載しているように、ルチン
の水溶性を向上きせるため゛に、ルチンにグルコース残
基を等モル以上結合きせたルチン配糖体混合物に変換し
たものであフて、配糖体それぞれの理化学的性質を解明
しているものではない。

このことは、同公報第３頁の表で、「配糖体温は推定で
あって、グルコースの新転移の位置は不明である。」と
していることからも明らかである。

α−グリコジル　ルチンのより広範な用途を拓く上で、
配糖体それぞれの理化学的性質の解明が待たれており、
化学構造の特定された新規配糖体の実現が鶴首されてい
る。

［発明が解決しようとする課題］ 上記したように、理化学的性質の解明された特定の新規
α−グリコジル　ルチンの工業化が待たれており、未だ
、その実現を見ていない。

し課題を解決するための手段］ 本発明は、上記課題を解決するためになきれなものであ
って、とりわけ、糖転移酵素により生成されるα−グリ
コジル　ルチンのうち、最も分子量の小きいα−グルコ
シル　ルチンに着目し、その理化学的性質を解明すると
ともにその製造方法並びに用途について鋭意研究した。

その結果、式［Ｉ］で示される新規物質４Ｇ−α−Ｄ−
グルコピラノシル　ルチンを明らかにするとともにそれ
らの製造方法並びに用途を確立して本発ＩＭを完成した
。

本発明の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンは、
水溶性が極めて高く、ルチンの場合と比較して、約３万
倍以上に高まり、その分子吸光係数（黄色度）は、ルチ
ンのそれと実質的に同一であり、強い抗酸化能を有して
おり、その上、生体内のα−グルコシダーゼによって容
易に加水分解きれてルチン本来の生理効果を発揮すると
いう理想的な物質であることが判明した。加えて　４　
Ｑ　＋α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの過飽和有機
溶媒溶液から晶出、分離することによる高純度の４Ｇ−
α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの製造方法を確立し
たことにより、より高純度で実質的に非吸湿性の安定し
た粉末の製造も容易となり、その工業的生産を極めて容
易にするものである。

本発明の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの製
造方法は、ルチンと澱粉質とを含有する溶液に糖転移酵
素とグルコアミラーゼとを作用きせ、４Ｇ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル　ルチンを生成せしめ、これを採取すれ
ばよいことが判明した。

以下、本発明の詳細な説明する。

本発明に用いるルチンは、一般に精ａきれたルチンが望
ましく、必要ならば、ルチンを含有している各Ｎ植物由
来の抽出物、またはその部分精製物などが適宜使用でき
る。

植物組織としては、例えば、ソバの葉茎、エンジュのつ
ぼみ（Ｉｌｉ花または塊米）、エニシダのっぽみ、ユー
カリの葉茎、イチョウの葉茎、柑橘類果実など、更には
これら植物の組織培養物などが有利に利用できる。

本発明に用いる澱粉質は、同時に用いる糖転移酵素によ
ってルチンにグルコース残基を等モル以上結合したα−
グリコジル　ルチンを生成することのできるものであれ
ばよく、例えば、アミロース、デキストリン、シクロデ
キストリン、マルトオリゴ糖などの澱粉部分加水分解物
、更には、液化澱粉、糊化澱粉などが適宜選ばれる。

従って、α−グリコジル　ルチンの生成を容易にするた
めには、糖転移の作用に好適な澱粉質が選ばれる。

例えば、糖転移酵素として、α−グルコシダーゼ（Ｅ　
Ｃ３，２，１，２０）を用いる際には、マルトース、マ
ルトトリオース、マルトテトラオースなどのマルトオリ
ゴ糖、またはＤＥ約１０乃至７０の澱粉部分加水分解物
などが好適であり、シクロマルトデキストリン　グルカ
ノトランスフェラーゼ（ＥＣ２゜４．１．１９）を用い
る際には、シクロデキストリンまたはＤＥ１以下の澱粉
糊化物からＤＥ約６０の澱粉部分加水分解物などが好適
である。α−アミラーゼ（ＥＣ３，２，１，１）を用い
る際には、ＤＥ１以下の澱粉糊化物からＤＥ約３０のデ
キストリン、澱粉部分加水分解物などが好適である。

また、反応時の澱粉質濃度は、ルチンに対して約０．５
乃至５０倍の範囲が好適である。

本発明でいうルチンと澱粉質とを含有する溶液とは、ル
チンをできるだけ高濃度に含有するものが望ましく、例
えば、懸濁状で高濃度に、または、ｐＨ７，０を越える
アルカリ側ｐＨで溶解若しくは有機溶媒水溶液で溶解さ
せた溶液状で高濃度に含有する溶液などが適しており、
その濃度は、ルチンとして約０．５Ｗ／Ｖ％以上の高濃
度、望ましくは、約１．０乃至２０．０ν／Ｖ％含有し
ている溶液が適している。

本発明に用いる糖転移酵素は、ルチンとこの酵素に好適
な性質の澱粉質とを含有する溶液に作用きせる時、ルチ
ンを分解せずにα−グリコジルルチンを生成するもので
あればよい。

例えば、α−グルコシダーゼは、ブタの肝臓、ソバの種
子などの動植物組織由来の酵素、または、ムコール（Ｍ
ｕｃｏｒ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ
）属などに属するカビ、またはサツカロミセス（Ｓａｃ
ｃｈａｒｏ■ｙｃｅｓ）属などに属する酵母などの微生
物を栄養培地で培養し得られる培養物由来の酵素が、シ
クロマルトデキストリン　グルカノトランスフェラーゼ
は、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、クレブシーラ（
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属などに属する細菌培養物由来
の酵素が、α−アミラーゼは、バチルス属などに属する
細菌、または、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ）属などに属するカビ培養物由来の酵素などが適宜選
択できる。

これらの糖転移酵素は、前記の条件を満足しざえすれば
、必ずしも精製して使用する必要はなく、通常は、粗酵
素で本発明の目的を達成することができる。

必要ならば、公知の各種方法で精製して使用してもよい
。また、市販の糖転移酵素を利用することもできる。

反応時のＰＨと温度は、糖転移酵素が作用してα−グリ
コジル　ルチンが生成すればよく、通常、ｐＨ３乃至１
０、温度１０乃至９０℃から選ばれる。

使用酵素量と反応時間とは、密接な関係があり、通常は
、経済性の点から約５乃至８０時間で反応を終了するよ
うに酵素量が選ばれる。

また、固定化された糖転移酵素をパッチ式で繰り返し、
または速続式で反応に利用することも適宜選択で伊る。

更に、必要ならば、糖転移酵素を有する微生物や動物、
植物の組織を、澱粉質とルチンとを含有する培地に培養
してα−グリコジル　ルチンを生成させることもできる
。

本発明の反応方法は、ルチンと澱粉質とを含有する溶液
に糖転移酵素とグルコアミラーゼ（ＥＣ３，２，１，３
）とを作用させればよい。

グルコアミラーゼとしては、微生物、植物など各種起源
のものが利用できる。通常、アスペルギルス（Ａｓｐｅ
ｒｇｉｌｌｕｓ）属、リゾーブス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）
属に属する微生物起源の市販のグルコアミラーゼが有利
に利用できる。

４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを生成きせる
に際しては、糖転移酵素とグルコアミラーゼとを同時に
作用させることもできる。

一般的には、使用する澱粉質を有効に利用するため、予
め、糖転移酵素を作用させてグルコース残基を等モル以
上転移させたα−グリコジル　ルチンを生成せしめ、次
いで、グルコアミラーゼを作用ぎせて４Ｇ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル　ルチンを蓄積生成きせるのが望ましい
。また、グルコアミラーゼとともにβ−アミラーゼ（Ｅ
Ｃ３，２゜１．２）を併用することも随意である。

まず、糖転移酵素の反応方法について説明する。

反応に際しては、ルチンをできるだけ高濃度に含有させ
て反応させるのが工業的に有利である。

例えば、ルチンを高濃度懸濁状で反応せしめる場合には
、約０．５１Ｊ／Ｖ％以上、望ましくは、約１．０乃至
５．０Ｗ／Ｖ％の１！！濁拭ルチンと適量の澱粉質とを
含有するルチン高含有液を、ｐＨ約４．５乃至６．５と
し、糖転移酵素の作用しうるできるだけ高温、具体的に
は、約６５乃至９０℃に維持し、これに糖転移酵素を作
用させると、ルチンがα−グリコジルルチンに変換する
につれて懸濁状ルチンが徐々に溶解し、同時に、ルチン
にグルコースが等モル以上結合したα−グリコジル　ル
チンが容易に高濃度に生成する。

また、例えば、ルチンをｐＨ７，０を越えるアルカリ側
で溶解させた高濃度溶液状で反応せしめる場合には、ｐ
Ｈ約７．５乃至１０．０ノ水に約０．５Ｗ／Ｖ％以上、
望ましくは、約１．０乃至５．０１／Ｖ％のルチンを加
熱溶解し、これに適量の澱粉質を溶解して得られるルチ
ン高含有液を、糖転移酵素の作用しうるで営るだけ高ｐ
Ｈｓ高温、具体的には、ｐＨ約７．５乃至１０．０、温
度約５０乃至８０℃に維持し、これに糖転移酵素を作用
させるとα−グリコジル　ルチンが容易に高濃度に生成
する。

この際、アルカリ性溶液中のルチンは、分解を起しやす
いので、これを防ぐため、できるだけ遮光、嫌気下に維
持するのが望ましい。

また、例えば、ルチンを有機溶媒水溶液中で溶解させた
高濃度溶液状で反応せしめる場合には、ルチンを、予め
、有機溶媒に加熱溶解し、次いで、これを澱粉質水溶液
と混合し、これに糖転移酵素を加えるか、または、ルチ
ンと澱粉質とを有機溶媒水溶液に加熱して溶解きせ、所
定温度に冷却し、これに糖転移酵素を加えるなどして反
応させるとα−グリコジル　ルチンが高濃度に生成する
。

更に、前記条件を組み合せる方法、例えば、約２．０乃
至２０．ＯＩＪ／Ｖ％の１！！濁状ルチンと適量の澱粉
質とを含有するルチン高含有液をｐＨ約７．５乃至１０
゜Ｏ１温度約５０乃至８０℃に維持し、これに糖転移酵
素を作用きせると、同様に、α−グリコジル　ルチンが
容易に高濃度に生成する。

また、ルチンとして、例えば約０．１乃至１．０規定の
カセイソーダ水溶液、カセイカリ水溶液、炭酸ソーダ水
溶液、水酸化カルシウム水、アンモニア水などの強アル
カリ性水溶液に約５，０乃至２０．０Ｗ／Ｖ％の高濃度
に溶解させたものを用い、これに塩酸、硫酸などの酸性
水溶液を加えて酵素の作用しうるｐＨに調整するととも
に澱粉質を加え、直ちに糖転移酵素を作用させることは
、α−グリコジルルチンを容易に高濃度に生成させるこ
ととなるので極めて好都合である。

このようにして糖転移反応により生成せしめたα−グリ
コジル　ルチンから本発明の４Ｇ−α−〇−グルコピラ
ノシル　ルチンを製造するには、糖転移反応液にそのま
ま、または、糖転移酵素を加熱失活した後などにグルコ
アミラーゼを作用させればよい。グルコアミラーゼの作
用によって、α−グリコジル　ルチンの高分子物が加水
分解を受け、Ｄ−グルコースと４Ｇ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル　ルチンとを蓄積生成する。

このようにして、４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ル
チンを生成せしめた反応溶液は、通常、４Ｇ−α−Ｄ−
グルコピラノシル　ルチンとともに比較的少量の未反応
ルチンおよび大量のグルコースを含有しており、そのま
まで４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン製品にす
ることもできる。

一般的には、反応溶液を濾過、濃縮してシラツブ状の、
更には、乾燥、粉末化して粉末状の４Ｇ　＋α−Ｄ−グ
ルコピラノシル　ルチン製品にする。

本製品は、ビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全
性の高い天然型の黄色着色剤、抗酸化剤、安定剤、品質
改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲
食物、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、化粧品、
プラスチック製品などの用途に有利に利用できる。更に
、精製された４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン
製品を製造する場合には、例えば、多孔性合成吸着剤に
よる吸着性の差を利用して４Ｇ−α−Ｄ−グルコビラノ
シル　ルチンとグルコースなどの夾雑物とを分離、精製
すればよい。

本発明でいう多孔性合成吸着剤とは、多孔性で広い吸着
表面積を有し、かつ非イオン性のスチレン−ジビニルベ
ンゼン重合体、フェノール−ホルマリン樹脂、アクリレ
ート樹脂、メタアクリレート樹脂などの合成樹脂であり
、例えば、市販されているＲｏｈｍ　＆　　Ｈａａｓ社
製造の商品名アンバーライトＸ　Ａ　Ｄ−１、アンバー
ライトＸＡＤ−２、アンバーライトＸ　Ａ　Ｄ−４、ア
ンバーライトＸＡＤ−７、アンバーライトＸ　Ａ　Ｄ−
８、アンバーライトＸＡＤ−１１，７ンハーライ）ＸＡ
Ｄ−１２、三菱化成工業株式会社製造の商品名ダイヤイ
オンＨＰ−１０、ダイヤイオンＨＰ−２０，ダイヤイオ
ンＨＰ−３０、ダイヤイオンＨＰ−４Ｇ、ダイヤイオン
ＨＰ−５０、ＩＭＡＣＴＩ社製造の商品名イマクティ５
ｙｎ−４２、イマクティ５ｙｎ−４４、イマクティ５ｙ
ｎ−４６などがある。

本発明の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを生
成せしめた反応液の精製方法は、反応液を、例えば、多
孔性合成吸着剤を充填したカラムに通液すると、４Ｇ−
α−Ｄ−グルコピラノシルルチンおよび比較的少量の未
反応ルチンが多孔性合成吸着剤に吸着するのに対し、多
量に共存するグルコースなどの水溶性糖類は吸着される
ことなくそのまま流出する。

とりわけ、反応溶液に有機溶媒を含有している場合には
、その有機溶媒濃度を低減せしめて、その溶液と多孔性
合成吸着剤とを接触きせ、同様に、反応溶液に含まれる
４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンとルチンとを
吸着きせて精製すればよい。

必要ならば、糖転移酵素とグルコアミラーゼとの反応を
終了後、多孔性合成吸着剤に接触きせるまでの間に、例
えば、反応液を加熱して生じる不溶物を濾過して除去し
たり、ケイ酸アルミン酸マグネシウム、アルミン酸マグ
ネシウムなどで処理して反応液中の蛋白性物質などを吸
着除去したり、強酸性イオン交換樹脂（Ｈ型）、中塩基
性または弱塩基性イオン交換樹脂（ＯＨ型）などで処理
して脱塩するなどの精製方法を組み合せて利用すること
も随意である。

前述のようにして、多孔性合成吸着剤カラムに選択的に
吸着した大量の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチ
ンと比較的少量の未反応ルチンとは、希アルカリ、水な
どで洗浄した後、比較的少量の有機溶媒または有機溶媒
と水との混合液、例えば、メタノール水、エタノール水
などを通液すれば、まず　４ｏ−α−Ｄ−グルコピラノ
シルルチンが溶出し、通液量を増すか有機溶媒濃度を高
めるかすれば未反応ルチンが溶出してくるので、この４
Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン高含有画分を採
取すればよい。

この４Ｑ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン高含有溶
出液を蒸溜処理して、まず有機溶媒を情夫した後、適当
な濃度にまで濃縮すれば４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル　ルチンを主成分とするシラツブ状製品が得られる。

更に、これを乾燥し粉末化することによって、４Ｇ−α
−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを主成分とする粉末状
製品が得られる。

この有機溶媒による４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　
ルチンおよび未反応ルチンの溶出操作は、同時に、多孔
性合成吸着剤の再生操作にもなるので、この多孔性合成
吸着剤の繰り返し使用を可能にする。

また、本発明の多孔性合成吸着剤による精製は、グルコ
ースなどの水溶性糖類だけでなく、水溶性の塩類などの
夾雑物も同時に除去できる特長を有している。

また、必要ならば、４Ｑ−α−Ｄ−グルコピラノシル　
ルチンの精製に際して、前述の多孔性合成吸着剤を利用
する方法とは別の方法、例えば、溶解度分別法、分子量
分画法、膜分離法、高速液体クロマトグラフィー、カラ
ムクロマトグラフィーなどの方法を採用するか、または
、これらの１榎または２８以上の方法を多孔性合成吸着
剤を利用する方法と併用して、更に高純度の４Ｇ−α−
Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを調製することも随意で
ある。

次に　４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを過飽
和有機溶媒溶液から晶出させ、この結晶を分離して更に
高純度の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを製
造する方法について述べる。

本発明で使用する晶出用４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル　ルチン有機溶媒溶液は、それが過飽和溶液であって
、４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンが晶出すれ
ばよく、４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの製
造方法は問わない。

通常、過飽和度が、１．０５乃至１．５程度で具体的に
述べれば純度８０％以上の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノ
シル　ルチンを望ましくは、濃度約１５乃至５０Ｗ／Ｉ
Ｊ％有機溶媒溶液とし、その溶液温度は製造工程上熱損
失および有機溶媒損失の比較的少ない０乃至８０℃の範
囲が望ましい。有機溶媒溶液としては、例えば、メタノ
ール、エタノール、アセトンなどが適宜選ばれるが、必
要に応じて水を適量併用することも随意である。

また晶出方法は、通常、比較的高温の過飽和液を助晶缶
にとり、これに種晶を望ましくは、０．１乃至５．ＯＷ
／Ｗ％共存せしめて、ゆっくり撹拌しつつ徐冷し、晶出
を促してマスキットにすればよい。

このようにして、晶出ぎせたマスキットから高純度４Ｇ
−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン粉末を採取する方
法は、例えば、分蜜方法によって、マスキットをバスケ
ット型遠心分離機にかけ、結晶性４Ｇ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル　ルチンと畜（母液）とを分離する方法で、
必要により、該結晶量に少量の冷有機溶媒などをスプレ
ーして洗浄することも容易であり、より高純度の結晶性
４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを採取し、更
に、加熱乾燥するなどして有機溶媒を完全に除去し、高
純度の４ｑ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチン粉末を採
取すればよい。このようにして得られる高純度４ｑ−α
２Ｄ−グルコピラノシルルチンは、その純度によって多
少変動するものの、実質的に非吸湿性であり、流動性で
あり、粘着、囲者の懸念もなく、その優れた特長は次の
通りである。

（１）室温での水溶性は、１糺の水に約４．３ｇも溶解
し、ルチンが８Ｌの水にわずかＩｇしか溶けないのと比
較して、約３万倍以上に向上している。

（２）分子吸光係数（黄色度）は、ルチンのそれと実質
的に同一である。

（３）強い抗酸化能を有している。抗酸化剤として、油
性飲食物、油性抗感受性疾患剤、油性化粧品などの酸化
防止に有利に利用できる。

とりわけ、抗感受性疾患剤に利用きれる場合には、抗酸
化剤として、活性酸素の除去、過酸化脂質の生成抑制な
どの効果を発揮し、各種感受性疾患の予防、治療、健康
の維持、増進に好都合である。また、ビタミンＥ１ビタ
ミンＣなど他の抗酸化剤の場合とは違って、実質的に無
味、無臭であって、変色、褐変、異臭の懸念もなく安心
して利用できる。

（４）体内の酵素により、ルチンとグルコースとに加水
分解され、ルチン本来の生理活性（ビタミンＰ）を示す
。ビタミンＣとの併用によりそれらの持つ生理活性を増
強することができる。

（５）グルコースを含有する製品の場合には４Ｇ−α−
Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの効果を発揮するのみな
らず、グルコースが賦形、増量効果や、甘味効果を発揮
することができ、また、グルコースを除去した精製製品
の場合には、はとんど賦形、増量することなく４Ｇ−α
−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの効果を発揮すること
ができ、また、実質的に無味、無臭なので自由に調味、
調香することができる。

これらの特長から　４ａ−α−Ｄ−グルコピラノシル　
ルチンば安全性の高い天然型のビタミンＰ強化剤として
ばかりでなく、単独でまたは他の１１１類若しくは２．
ｆＩ類以上の成分と併用して、黄色着色剤、抗酸化剤、
安定剤、品質改良剤、ウィルス性疾患、細菌性疾患、循
環器疾患、悪性ｔａｇなど感受性疾患の予防剤、治療剤
、紫外線吸収、剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、
餌料、抗感受性疾患剤、美肌剤、色白剤など化粧品、更
には、プラスチック製品などに配合して、望ましくは０
゜００１Ｗ／Ｗ％以上配合して、有利に利用することが
できる。この際、４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチ
ンとともに、ケルセチン、ルチン、マルトシル　ルチン
、マルトトリオシル　ルチン、マルトトリオシル　ルチ
ン、マルトペンタオシルルチンなどから選ばれる１種ま
たは２種以上と併用することも有利に実施できる。

また４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンは、酸味
、塩から味、渋味、旨味、苦味などの呈味を有する各種
物質ともよ（調和し、耐酸性、耐熱性も大きいので、普
通一般の飲食物、嗜好物、例えば、醤油、粉末醤油、味
噌、粉末味噌、もろみ、ひしお、フリカケ、マヨネーズ
、ドレッシング、食酢、三杯酢、粉末すし酢、中華の素
、天つゆ、麺つゆ、ソース、ケチャツプ、焼肉のタレ、
カレールウ、シチューの素、スープの素、ダシの素、複
合調味料、みりん、新みりん、テーブルシュガー、コー
ヒーシュガーなどの各種調味料、せんべい、あられ、お
こし、カリントウ、求肥、餠類、まんじゅう、ういろう
、あん類、羊美、水羊舞、錦玉、ゼリー、カステラ、飴
玉などの各種和菓子、パン、ビスケット、クラッカー、
クツキー、パイ、プリン、シュークリーム、ワツフル、
スポンジケーキ、ドーナツ、チョコレート、チューイン
ガム、キャラメル、キャンデーなどの各種洋菓子、アイ
スクリーム、シャーベットなどの氷菓、果実のシロップ
漬、水蜜などのシロップ類、パタークリーム、カスター
ドクリーム、フラワーペースト、ビーナツツペースト、
フラーペーストなどのスプレッド、ペースト類、ジャム
、マーマレード、シロップ潰、果糖などの果実、野菜の
加工食品類、パン類、ｗ１頚、米飯類、人造肉などの穀
類加工食品類、サラダオイル、マーガリンなどの油脂食
品類、福神漬、べったら潰、千枚漬、らっきょう潰など
の漬物類、たくあん漬の素、白菜漬の素などの漬物の索
類、ハム、ソーセージなどの畜肉製品類、魚肉ハム、魚
肉ソーセージ、カマボコ、チクワ、パンペンなどの魚肉
製品、ウニ、イカの塩辛、酢コンブ、ききするめ、ふぐ
のみりん干しなどの各種珍味類、のり、山菜、するめ、
小魚、貝などで製造されるつくだ煮頚、煮豆、ポテトサ
ラダ、コンブ巻、天ぷらなどのそう菜食品、錦糸卵、乳
飲料、パター、チーズなどの卵、乳製品、魚肉、畜肉、
果実、野菜などのビン詰、缶詰類、合成酒、増醸酒、果
実酒、洋酒などの酒類、コーヒー、ココア、ジュース、
炭酸飲料、乳酸飲料、乳ｗｉ圓飲料などの清涼飲料水、
プリンミックス、ホットケーキミックス、即席ジュース
、即席コーヒー、即席しるこ、即席スープなど即席飲食
品などに、ビタミンＰ強化剤、黄色着色剤、抗酸化剤、
品質改良剤、安定剤などの目的で有利に利用することが
できる。また、家畜、家禽、蜜蜂、蚕、魚などの飼育動
物のための飼料、餌料などにビタミンＰ強化剤、抗酸化
剤、嗜好性向上などの目的で配合して利用することも好
都合である。

その他、タバコ、トローチ、肝油ドロップ、複合ビタミ
ン剤、口中清涼剤、口中香錠、うがい薬、経管栄養剤、
内服薬、注射剤、線面みがき、口紅、アイシャドウ、乳
液、化粧水、クリーム、ファウンデーション、日焼は止
め、シャンプー、リンスなど各榎固状、ペースト状、液
状の嗜好物、感受性疾患の予防剤、治療剤すなわち抗感
受性疾患剤、美肌剤、色白剤などの化粧品などに配合し
て利用することも有利に実施でき、更には、紫外線吸収
剤、劣化防止剤などとしてプラスチック製品などに配合
して利用することも有利に実施できる。

また、本発明でいう感受性疾患とは、４Ｑ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル　ルチンによって予防され、若しくは治
療きれる疾患であり、それが、例えばウィルス性疾患、
細菌性疾患、外傷性疾患、免疫疾患、リューマチ、糖尿
病、循環器疾患、悪性腫瘍などであってもよい。４Ｇ−
α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの感受性疾患予防剤
、治療剤は、その目的に応じてその形状を自由に選択で
きる。

例えば、噴震剤、点眼剤、点鼻剤、うがい剤、注射剤な
どの液剤、軟膏、はっぷ剤、クリームのようなペースト
剤、粉剤、顆粒、カプセル剤、錠剤などの固剤などであ
る。製剤に当たっては、必要に応じて、他の成分、例え
ば、治療剤、生理活性物質、抗生物質、補助剤、増量剤
、安定剤、着色剤、看香剤などの１種または２８１１以
上と併用することも随意である。

投与量は、含量、投与経路、投与頻度などによって適宜
調節することができる。通常、４Ｇ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル　ルチンとして、成人１日当り、約０．００１
乃至５０．０ｇの範囲が好適である。

また、化粧品の場合も、大体、前述の予防剤、治療剤に
準じて利用することができる。

４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを利用する方
法としては、それらの製品が完成するまでの工程で、例
えば、混和、混捏、溶解、浸漬、浸透、散布、塗布、噴
霧、注入など公知の方法が適宜選ばれる。

以下、本発明の４Ｑ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチ
ンについて実験で詳細に説明する。

実　験１　４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの
調製 ルチン１重量部およびデキストリン（ＤＥ１２）１０重
量部を８０℃の熱水１００重量部に混合して！！！濁状
のルチン窩含有液とし、これにバチルス・ステアロサー
モフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒ
ｍ。

ｐｈｉｌｕｓ）由来のシクロマルトデキストリン　グル
カノトランスフェラーゼ（株式会社林原生物化学研究所
販売）をデキストリングラム当り２０単位加え、ｐＨａ
、ｏ、７５℃に維持し撹拌しつつ６４時間反応させた。

反応液を薄層クロマトグラフィーで分析したところ、ル
チンの大部分が、グルコース残基を等モル以上結合した
α−グリコジル　ルチンに転換していた。反応液を加熱
して酵素を失活させ、濾過し、濾液を濃度約３０Ｖ／Ｗ
％に濃縮し、ｐｔ−＋ｓ、ｏに調整し、これにグルコア
ミラーゼ（ＥＣ３，２，１，３、生化学工業株式会社販
売）を固形物ダラム当り１００単位加え、５０℃、５時
間反応させた。反応液を薄層クロマトグラフィーで分析
したところ、大量のＤ−グルコース、４Ｇ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル　ルチンおよび少量のルチンを含有して
いた。

反応液を加熱して酵素を失活させ、濾過し、濾液を多孔
性合成吸着剤、商品名ダイヤイオンＨＰ−１０（三菱化
成工業株式会社販売）のカラムにＳＶｌ、５でかけた。

この方ラムを水で通液、洗浄してグルコースなどの夾雑
物を除去した後、エタノール水溶液を通液し、４Ｇ−α
−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンおよびルチンを）容器
、採取し、減圧濃縮し、粉末化した。本粉末を熱水で濃
度約４ＧＷ／Ｗ％に加熱溶解し、これに種晶として少量
のルチン結晶を加え撹拌しつつ２日間徐冷し、遠心分離
して結晶ルチンを除去し、上清を濃縮、粉末化して、４
Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン高含有粉末を固
形物当り原料のルチン重量に対して約７０％の収率で得
た。

本品は、固形物当り約９４％の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル　ルチンを含有していた。

実　験２　高純度４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ル
チンの調製 実験１の方法で得た４Ｑ−α−Ｄ−グルコピラノシル　
ルチン粉末をガラス製容器にとり、エタノール水溶液（
エタノール：水＝４４１）で濃度約３５Ｗ／ＩＪ％にな
るよう加温溶解し、室温に５日間保ったところ、その内
壁に結晶が析出した。

この結晶を種晶として、同様にエタノール水溶液で調製
した濃度約４Ｇ１Ｊ／Ｖ％の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル　ルチン溶液に加え、ゆっくり撹拌しながら２日
間助晶し、得られるマスキットを分蜜し、結晶に少量の
エタノール水溶液をスプレーして洗浄し、結晶性４ｑ−
α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを得た。本品を同様
にエタノール水溶液に溶解、処理して再結晶化させ、分
蜜して結晶性４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン
を採取し、８０℃で一夜真空乾燥して純度９９．８％の
４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン粉末を得た。

この粉末の理化学的性質を調べたところ、従来全く知ら
れていない４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンで
あることが判明した。

以下、本発明物質４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ル
チンの理化学的性質について述べる。

（１）元素分析 測定値　　Ｃ＝５１．２％　　　Ｈ＝５．３％理論値　
　Ｃ＝５１．３０％　　Ｈ＝５．２２％（分子式：　Ｃ
３３Ｈ４Ｇ０２１） ％式％） ） 紫外線吸収スペクトル 本発明物質を、濃度０．０４１Ｍに酢酸酸性エタノール
（酢酸；エタノール＝Ｃ１，０００）で溶解して測定し
た。結果は、第１図に示す。

対照として、ルチンを同一濃度に溶解、測定し、結果を
第２図に示す。

この第１図および第２図の結果から、本発明物質の極大
吸収３６２．５ｎｍでの分子吸光係数はε＝３．５０Ｘ
１０４であって、この値は、対照ルチンのそれと実質的
に同一である。

赤外線吸収スペクトル ＫＢｒ錠剤法で測定した。結果は、第３図で示（７） （８） （９） （１０） （１１） す。

本発明物質の赤外線吸収スペクトルを（Ｉ）で示し、対
照のルチンのそれを（ＩＩ）で示す。

薬剤に対する溶解性 水、酢酸、０．ＩＮ−水酸化ナトリウム、０、ＩＮ−塩
酸に易溶。メタノール、エタノールに可溶。クロロホル
ム、酢酸エチルにｍ溶。

溶解性 ２５℃で１■Ｌの水に約４．３ｇ溶ける。対照のルチン
の場合には、８Ｌの水に約１ｇＬか溶けない。従って、
本発明物質は、ルチンの場合と比較して、その溶解性が
約３万倍以上に向上している。

物性、物質の色 はとんど無味、無臭の黄色粉末。吸湿性なく潮解しない
。水溶液は中性乃至微酸性を示す。

安定性 水溶液の安定性はｐＨ３〜７で優れている。

呈色反応 アントロン−硫酸反応で緑色を呈する。

フェーリング圧液還元反応は陰性。

（１２）構造 （ａ）加水分解 １）ＩＮ−塩酸で加水分解すると、ケルセチン１モルに
対し、Ｌ−ラムノース１干ル、Ｄ−グルコース２モルを
生成する。

！りブタの肝臓由来のα−グルコシダーゼで加水分解す
ると、ルチン１モルに対し、Ｄ−グルコース１モルを生
成する。

（ｂ）　Ｎ　Ｍ　Ｒ 本発明物質とルチンとについて、ＮＭＲｉｌｌ定装置（
米ＩＥＩＶａｒｉａｎ社製、Ｖ　Ｘ　Ｒ−５００）を用
いて測定した。測定溶媒は、ジメチルスルフオキシド（
ＤＭＳＯ）を用いた。

結果は第１表にまとめた。

（注１）文献値は、ケー・アール・マーカム（に、Ｒ，
Ｍａｒｋｈａ■）、テトラヘドロン第１表の結果から、
ルチンのグルコース残基の４位の炭素にのみ、大きなケ
ミカルシフトが見いたされたことより、糖転移したグル
コースの結合は、ルチンの糖部分ルチノース残基のうち
、グルコース残基の４位の炭素のアルコール基にエーテ
ル結合しているものと判断される。

以上の理化学的性質から、本発明物質は、式［１１： で示される新規物質４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　
ルチンであることが判明した。

また、これらの結果から、ルチンと澱粉質とを含有する
溶液にシクロマルトデキストリングルカノトランスフェ
ラーゼを作用させて生成されるルチンにグルコース残基
が等モル以上結合したα−グリコジル　ルチンは、 式［Ｉｌｌ　］　： で示される構造を有しているものと判断される。

実 験３ ４Ｑ−α−Ｄ−グルコピラノシル ル チンの抗酸化作用 酸化を受は易い油性食品の例として、ピーナツツバター
粉末を用いて、これに与える４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル　ルチンの抗酸化作用を調べた。

すなわち、ピーナツツバター１００重量部に無水結晶マ
ルトース（林原株式会社製造、登録商標ファイントース
）８３重量部、水９．６重量部および抗酸化剤として、
実施例Ａ−４の方法で調製した高純度４Ｇ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシルルチン粉末０６５重量部またはその４Ｇ
−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン粉末０．５重量部
およびクエン酸０．２重量部を加えて混合し、バットに
採り密封して３５℃に１日放置して固化させ、これを粉
末化してピーナツツバター粉末を得、これをアルミ製カ
ップに採り、非密封のままで、３５℃の恒温室に放置し
、経時的に過酸化物価を測定した。過酸化物価（ｍｅｑ
／Ｋｇ）は、デイ−・エイチφウィーラー（Ｄ、ＨＪｈ
ｅｅｌｅｒ）、オイル・アンド・ソープ（Ｏｉｌ　ａｎ
ｄ　５ｏａｐ）、第９巻、第８９頁乃至９７頁（１９３
２年）に記載される方法に準じて測定した。

なお、対照として抗酸化剤の無添加区を設けた。

結果は第２表に示す。

第２表の結果から明らかなように、４Ｇ−α−Ｄ−グル
コピラノシル　ルチンは、対照と比較して強い抗酸化作
用を有しており、しかも、その抗酸化作用は、クエン酸
との併用により増強されることが判明した。

実　験４　急性毒性 ７周齢のｄｄ系マウスを使用して、実施例Ａ−３の方法
で調製した粉末状４Ｑ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ル
チン製品を経口投与して急性毒性テストをしたところ、
５ｇまで死亡例は見られず、これ以上の投与は困難であ
った。

従って、本物質の毒性は極めて低い。

また、実施例Ａ−４の方法で調製した高純度４Ｇ−α−
Ｄ−グルコピラノシル　ルチン粉末を用いて本テストを
行ったところ、同様の結果を得、毒性は極めて低いこと
が判明した。

以下、本発明の実施例として、４Ｇ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル　ルチンの製造例を実施例Ａで、４Ｇ−α−Ｄ
−グルコピラノシル　ルチンの用途例を実施例Ｂで述べ
る。

実施例　Ａ−１４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチ
ン ルチン１重量部を５０Ｖ／Ｖ％エタノール水溶液５重量
部に加温懸濁し、別にデキストリン（ＤＥ８）８重量部
を水４５重量部に加熱溶解し、次いで、これら溶液を混
合し、これに、バチルス・ステアロサーモフィルス（Ｂ
ａｃｉｌｌｕｓ　５ｔｅａｒｏｔｈｅｒａ＋ｏｐｈｆｌ
ｕｓ）由来のシクロマルトデキストリン　グルカノトラ
ンスフェラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）を
デキストリングラム当り１０単位加え、ｐＨ６，０に調
整して５０℃で４８時間反応させた。反応液を、薄層ク
ロマトグラフィーで分析したところ、大部分がグルコー
ス残基を等モル以上結合した４Ｑ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル　ルチンに転換していた。

反応液を、減圧濃縮してエタノールを情夫した後、酵素
を加熱失活させ、ｐＨｓ、ｏに調整し、これにグルコア
ミラーゼ（Ｅ　Ｃ３，２，１，３、生化学工業株式会社
販売）を固形物ダラム当り１００単位加え、５０℃で５
時間反応させた。更に、この反応液を加熱して酵素を失
活きせ、濾過し、濾液をイオン交換樹脂（Ｈ型およびＯ
Ｈ型）にて脱塩、精製、濃縮し、固形物当り約１０Ｗ／
Ｗ％の４（１−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンとと
もに少量のルチンおよび大量のグルコースを含有するシ
ラツブ状製品を固形物当り原料重量に対して約９５％の
収率で得た。

本品は、水溶性の高いビタミンＰ強化剤として、また、
安全性の高い天然型の黄色着色剤、抗酸化剤、品質改良
剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食物
、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、化粧品、プラ
スチック製品などの用途に有利に利用できる。

また、本品は、大量のグルコースを含有していることか
ら、甘味料としても利用できる。

実施例　Ａ−２４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチ
ン （１）α−グルコシダーゼ標品の調製 マルトース４Ｍ／Ｖ％、リン酸１カリウム０，１ν／Ｖ
％、硝酸アンモニウム０．１Ｖ／Ｖ％、硫酸マグネジｆ
）　ム０．０５Ｗ／Ｖ％、塩化力Ｉ）　’７　ム０．０
５Ｖ／Ｖ％、ポリペプトン０．２１Ｊ／Ｖ％、炭酸カル
シウムＩＷ／Ｖ％（別に乾熱滅菌して植菌時に無菌的に
添加）および水からなる液体培地５００重量部にムコー
ルジャバニカス（Ｍｕｃｏｒ　ｊａｖａｎｉｃｕｓ）　
Ｉ　Ｆ　０４５７０を温度３０℃で４４時間振盪培養し
た。培養終了後、菌糸体を採取し、その湿菌糸体４８重
量部に対し、０．５Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ５，３）に溶解
した４Ｍ尿素液５００重量部を加え、３０℃で４Ｇ時間
静置した後、遠心分離した。この上清を流水中で一夜透
析した後、硫安０．９飽和とし、４℃で一夜放置して生
成した塩析物を濾取し、　０．０１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ
５，３）５０重量部に懸濁溶解した後、遠心分離して上
清を採取し、α−グルコシダーゼ標品とした。

（２）　４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの調
製 ルチン４重量部を０．５規定力セイソーダ溶液４Ｇ重量
部に加熱溶解し、これを５規定塩酸溶液でｐＨ６，５に
調整し、別にデキストリン（ＤＥ３０）２０１１量部を
水１０１１量部に加熱溶解し、次いで、これら溶液を混
合して＠濁状のルチン高含有液とし、これに（１）の方
法で調製したα−グルコシダーゼ漂品１０重量部を加え
、ｐＨａ、ｓに維持して撹拌しつつ５５℃で４Ｇ０時間
反応せた。

反応液を、実施例Ａ−１と同様に、酵素を加熱失活させ
、］）Ｈ５，Ｏに１４整し、これにグルコアミラーゼを
作用させた。更に、この反応液を加熱して酵素を失活さ
せ、濾過し、濾液を多孔性合成吸着剤、商品名ダイヤイ
オンＨＰ−１０（三菱化成工業株式会社販売）のカラム
にＳＶ２で通液した。その結果、溶液中の大量の４Ｇ　
＋α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンと少量の未反応ル
チンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、グルコース、塩類
などは吸着することなく流出した。次いで、カラムを水
で通液、洗浄した後、メタノール水溶液を通液し、４Ｇ
−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンおよびルチンを溶
出、採取し、減圧濃縮、粉末化して固形物当り約７５ｖ
／Ｖ％の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンとと
もにルチンを含有する粉末製品を原料のルチン重量に対
して約９０％の収率で得た。

本品は、水溶性の高いビタミンＰ強化剤として、また、
安全性の高い天然型の黄色着色剤、抗酸化剤、安定剤、
品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤、劣化防止
剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、杭感受性
疾患剤、化粧品、プラスチック製品などの用途に有利に
利用できる。

実施例　Ａ−３ ４Ｑ−α−Ｄ−グルコピラノシ ル　ルチン ルチン１重量部およびデキストリン（ＤＥ１２）１０重
量部を８０℃の熱水９８重量部に混合して！！閏状のル
チン高含有液とし、これにシクロマルトデキストリン　
グルカノトランスフェラーゼをデキストリングラム当り
２０単位加え、ｐＨａ、ｏ、７５℃に維持し撹拌しつつ
６４時間反応きせた。反応液を薄層クロマトグラフィー
で分析したところ、大部分が、グルコース残基を等モル
以上結合したα−グリコジル　ルチンに転換していた。

反応液を、実施例Ａ−１と同様に、加熱失活きせ、ｐＨ
５，０に調整し、これにグルコアミラーゼを反応させた
。

反応液を加熱失活し、濾過し、濾液を多孔性合成吸着剤
、商品名ダイヤイオンＨＰ　−２Ｏ（三菱化成工業株式
会社販売）のカラムにＳＶｌ、５で通液した。その結果
、溶液中の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンと
未反応ルチンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、グルコー
ス、塩類などは吸着することなく流出した。次いで、カ
ラムを水で通液、洗浄した後、メタノール水溶液を通液
し、４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチンおよびルチ
ンを溶出、採取し、減圧濃縮し、粉末化した。本粉末を
熱水で、濃度約５０Ｗ／Ｗ％に加熱溶解し、これに種晶
として少量のルチン結晶を加え撹拌しつつ助晶し、遠心
分離して結晶ルチンを除去し、上清を濃縮、粉末化して
、純度的９５％の粉末状の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノ
シル　ルチン製品を固形物当り原料のルチン重量に対し
て約９０％の収率で得た。

本品は、実施例Ａ−２の場合と同様に、水溶性の高いビ
タミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全性の高い天然
型の黄色着色剤、抗酸化剤、安定剤、品質改良剤、予防
剤、治療剤、紫外線吸収剤、劣化防止剤などとして、飲
食物、嗜好物、飼料、餌料、杭感受性疾患剤、化粧品、
プラスチック製品などの用途に有利に利用できる。

実施例　Ａ−４高純度４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル
　ルチン 実施例Ａ−３の方法で得た４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノ
シル　ルチン製品をガラス製容器にとり、メタノールで
２５Ｗ／Ｖ％になるよう加温１容解し、室温で３日間保
ったところ、その内壁に結晶が析出した。この結晶を、
同様に調製した４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチ
ン製品の濃度約３０Ｗ／Ｖ％メタノール溶液に、種晶と
して加え、ゆっくり撹拌しながら２日間助晶し、得られ
るマスキットを分蜜し、結晶に少量のメタノールをスプ
レーして洗浄し、得られる結晶性４Ｇ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル　ルチンを７０℃で一夜真空乾燥して純度約
９９％の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン粉末
を得た。

本品は、高純度の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ル
チンであって、水溶性の高いビタミンＰ強化剤としてば
かりでなく、安全性の高い天然型の黄色着色剤、抗酸化
剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収
剤、劣化防止剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌
料、杭感受性疾患剤、化粧品、プラスチック製品などの
用途に有利に利用できる。

なお、本実施例でメタノール溶液から晶出中の結晶写真
の一例を第４図に示す。

また、この結晶を粉末Ｘ線回折装置（理学電機株式会社
製造、商品名ガイガーフレックスＲＡＤ−ＩＩＢＳＣｕ
Ｋａ線使用）により、調べたところ、主な回折角（２θ
）は、４．４Ｇ、８．４Ｇ、１１．５°、１８．２°で
あった。また、この結晶は、加熱乾燥により、これら回
折角を容易に消失し非晶質粉末になることから　４Ｇ−
α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンとメタノールとの複
合結晶と考えられる。

実施例　Ａ−５４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチ
ン ルチン１重量部およびデキストリン（ＤＥ８）５重量部
、水５０重量部を加え、加熱してできるだけ溶解させた
懸濁状ルチン高含有液を７５℃に冷却し、これにシクロ
マルトデキストリン　グルカノトランスフェラーゼをデ
キストリングラム当り３０単位加え、ｐＨ６，５，７０
℃に維持して撹拌しつつ４Ｇ時間反応させた。

反応液を、実施例Ａ−１と同様に、酵素を失活させ、ｐ
Ｈｓ、ｏに調製し、これにグルコアミラーゼを反応させ
た。この反応液を加熱失活し、濾過し、濾液を多孔性合
成吸着剤、商品名アンバーライトＸＡＤ−７（Ｒｏｈｍ
　＆’　Ｈａａｓ社製造）のカラムにＳＶｌ、５で通液
した。

その結果、溶液中の４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　
ルチンと未反応ルチンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、
グルコース、塩類などは吸着することなく流出した。

このカラムを水で通液、洗浄した後、エタノール水溶液
の濃度を段階的に高めながら通液し、４Ｇ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル　ルチン高含有画分を採取し、これを濃
細し、粉末化して、純度約９３％の粉末状４Ｇ−α−Ｄ
−グルコピラノシル　　ルチン製品を原料のルチン重量
に対して約８５％の収率で得た。

本品は、実施例Ａ−２の場合と同様に、水溶性の高いビ
タミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全性の高い天然
型の黄色着色剤、抗酸化剤、安定剤、品質改良剤、予防
剤、治療剤、紫外線吸収剤、劣化防止剤などとして、飲
食物、嗜好物、飼料、飼料、杭感受性疾患剤、化粧品、
プラスチック製品などの用途に有利に利用できる。

実施例　Ａ−６高純度４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル
　ルチン 実施例Ａ−５の方法で得た４ｑ−α−Ｄ−グルコピラノ
シル　ルチン製品をエタノール水溶液（エタノール：水
＝４：１）で濃度４３Ｗ／Ｗ％になるよう加ｖｉＬ溶解
し、これに実験２の方法で得た結晶を種晶として、０．
５Ｗ／Ｖ％加え、ゆっくり撹拌しながら２日間助晶し、
得られるマスキットを分蜜し、結晶に少量のエタノール
水ｉｇ液をスプレーして洗浄し、得られる結晶性４Ｇ−
α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを８０℃で一夜真空
乾燥して純度約９８％の４ａ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル　ルチン粉末を得た。

本品は、高純度の４Ｇ−α−Ｄ−グルコビラノシル　ル
チンであって、水溶性の窩いビタミンＰ強化剤としてば
かりでなく、安全性の高い天然型の黄色着色剤、抗酸化
剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収
剤、劣化防止剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌
料、抗感受性疾患剤、化粧品、プラスチック製品などの
用途に有利に利用で営る。

なお、本実施例で有機溶媒溶液（エタノール：水＝４：
１）から晶出中の結晶写真の一例を第５図に示す。

また、この結晶を、実施例Ａ−４と同様に粉末Ｘ１１回
折装置により調べたところ、主な回折角（２θ）は、６
．８°、８．１°、１５．４Ｇ、１７．８°であって、
実施例Ａ−２で得たメタノールから晶出した結晶とは異
なっている。

また、この結晶は、加熱乾燥により、これら回折角を容
易に消失し非晶質粉末になることから、４Ｇ−α−Ｄ−
グルコピラノシル　ルチンとエタノールとの複合結晶と
考えられる。

実施例　Ｂ−１ハードキャンデイ− 還元麦芽糖水飴（林原商事株式会社販売、登録商標マビ
ット）１．５００重量部を加熱し、減圧下で水分約２％
以下になるまで濃縮し、これにクエン酸１５重量部およ
び実施例Ａ−３の方法で得た粉末状４Ｑ−α−Ｄ−グル
コピラノシル　ルチン製品１！量部および少量のレモン
香料を混和し、次いで、常法に従って、成形、包装して
ハードキャンデイ−を得た。

本品は、ビタミンＰを強化した黄色のレモンキャンデイ
−であって、低う触性、低カロリーである。

実施例　Ｂ−２フキの水煮 フキを皮むきし、適当な長ざに切断して、薄い食塩水に
数時間浸し、これを実施例Ａ−５の方法で得た粉末状α
−グリコジル　ルチン製品と冑色１号とを配合して調製
した緑色看色科を含有する液で煮込んで、緑色の鮮かな
フキの水煮を得た。

本品は、各種和風料理の材料として色どりを添えるとと
もに、食物繊維としての生理効果をも発揮する。

実施例　Ｂ−３求　肥 モチｓｍ粉１重量部に水１．２！量部を混合し、加熱糊
化しつつ、これに砂糖１．５重量部、結晶性β−マルト
ース（林原株式会社製造、登録商標サンマルト）０．７
重量部、水飴０．３重量部および実施例Ａ−２の方法で
得た粉末状４ｑ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン製
品０．０２重量部を混和し、以後、常法に従って、成形
、包装して求肥を製造した。

本品は、風味、口当りとも良好な求肥で、きびだんご風
の和菓子である。

実施例　Ｂ−４混合甘味料 はちみつ１００重量部、異性化糖５０重量部、黒砂糖２
重量部および実施例Ａ−１の方法で得たシラツブ状４Ｇ
−α−Ｄ−グルコピラノシルルチン製品１重量部を混合
して混合甘味料を得た。

本品はビタミンＰを強化した甘味料で健康食品として好
適である。

実施例　Ｂ−５サンドクリーム 結晶性α−マルトース（林原株式会社製造、登録商標フ
ァイントース）１．２００１１量部、ショートニング１
　、０００重量部、実施例Ａ−５の方法で得た粉末状４
Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチン製品１０重量部、
レシチン１重量部、レモンオイル１重量部、バニラオイ
ル１重量部を常法により混和してサンドクリームを製造
した。

本品は、ビタミンＰ強化、黄色着色したサンドクリーム
で、油脂の酸化が防止され、口当り、溶は具合、風味と
も良好である。

実施例　Ｂ−６オレンジジュース オレンジ果汁５０！量部、クエン酸０．１重量部、砂糖
５重量部、実施例Ａ−６の方法で得た高純度４Ｑ−α−
Ｄ−グルコピラノシル　ルチン粉末０．１重量部、Ｌ−
アスコルビン＃（ビタミンＣ）０．１重量部、香料適量
および水４６重量部を混合し、次いで、常法に従って、
容器に充填、殺菌してオレンジジュース製品を得た。

本品は、ビタミンＰ、ビタミンＣを強化したオレンジジ
ュースであって、色調、風味とも良好である。

実施例　Ｂ−７錠　　剤 アスコルビン酸２０重量部に結晶性β−マルトース１３
重量部、コーンスターチ４重量部および実施例Ａ−２の
方法で得た粉末状α−グルコシルルチン製品３重量部を
均一に混合した後、直径１２■■、２０Ｒ杵を用いて、
打錠し錠剤を得た。

本品は、アスコルビン酸と４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノ
シル　ルチンとの複合ビタミン剤で、アスコルビン酸の
安定性もよく、飲み易い錠剤である。

実施例　Ｂ−８カプセル剤 酢酸カルシウム・−水塩１０重量部、Ｌ−乳酸マグネシ
ウム・三水塩５０重量部、マルトース５７重量部、実施
例Ａ−３の方法で得た粉末状４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル　ルチン製品２０重量部及びエイコサペンタエン
酸２０％含有グーシクロデキストリン包接化合物１２重
量部を均一に混合し、顆粒成形機にかけて顆粒とした後
、常法に従って、ゼラチンカプセルに封入して、−カプ
セル１５０ｍｇ人のカプセル剤を製造した。

本品は、エイコサペンタエン酸の酸化を防止し、高品質
の血中コレステロール低下剤、免疫賦活剤、美肌剤など
として、感受性疾患の予防剤、治療剤、健康増進用食品
などとして有利に利用できる。

実施例　Ｂ−９軟　膏 酢酸ナトリウム・三水塩１重量部、ＤＬ−乳酸カルシウ
ム４重量部をグリセリン１０重量部と均一に混合し、こ
の混合物を、ワセリン５０重量部、木ａつ１０！ｉ量部
、ラノリン１帽１部、ゴマ油１４゜５重量部、実施例Ａ
−４の方法で得た高純度４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル　ルチン粉末１重量部及びハツカ油０．５重量部の混
合物に加えて、更に均一に混和して軟膏を製造した。

本品は、抗酸化性を有し、安定性が高く、高品質の日焼
は止め、美肌剤、色白剤などとして、更には外傷、火傷
の治癒促進剤などとして有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１０注　射　剤 実施例Ａ−４の方法で得た高純度４Ｇ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル　ルチン粉末を水に１ｆｆｆｆし、常法に従
って、精製濾過してパイロゲンフリーとし、この溶液を
２０−し容アンプルに４Ｇ　＋α−Ｄ−グルコピラノシ
ル　ルチン２００ｍｇになるように分注し、これを減圧
乾燥し、封入して注射剤を製造した。

本注射剤は、単体で、または、他のビタミン、ミネラル
などと混合して筋肉内又は静脈内に投与で診る。また、
本品は、低温貯蔵の必要もなく、使用に際しての生理食
塩水などへの溶解性は極めて良好である。

本品は、ビタミンＰ補給としてだけでなく、抗酸化剤と
して活性酸素の除去、過酸化脂質の生成抑制などの効果
を発揮し、ウィルス性疾患、細菌性疾患、循環器疾患、
悪性腫瘍など各種疾患の予防剤、治療剤に有利に利用で
診る。

実施例　Ｂ−１１注　射　剤 塩化ナトリウム６重量部、塩化カリウム０゜３重量部、
塩化カルシウム０，２１量部、乳酸ナトリウム３．１重
量部、マルトース４５重量部及び実施例Ａ−６の方法で
得た高純度４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン粉
末２重量部を水１　、０００重量部に溶解し、常法に従
って、精９１ａ過してパイロゲンフリーとし、この溶液
を滅菌したプラスチック容器に２５０禦りずつ充填して
注射剤を製造した。

本品は、ビタミンＰ補給としてだけでなく、カロリー補
給、ミネラル補給、更には、活性酸素の除去、過酸化脂
質の生成抑制のための注射剤で、病中、病後の治療促進
、回復促進、更には、ウィルス性疾患、細菌性疾患、循
環器疾患、悪性腫瘍など各種疾患の予防剤、治療剤など
に有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１２ｉＩ管栄養剤 結晶性α−マルトース２０重量部、グリシン１゜１重量
部、グルタミン酸ナトリウム０．１８重量部、食塩１．
２重量部、クエン酸１重量部、乳酸カルシウム０．４重
量部、炭酸マグネシウム０．１重量部、実施例Ａ−５の
方法で得た粉末状４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ル
チン製品０．１重量部、チアミン０，０１重量部及びリ
ボフラビン０．０１重量部からなる配合物を調製する。

この配合物２４ｇずつをラミネートアルミ製小袋に充填
し、ヒートシールして経営栄養剤を調製した。

本縫官栄養剤は、−袋を約３００乃至５００ａＬの水に
溶解し、経営方法により鼻腔、胃、腸などへの経口的又
は非経口的栄養補給液としても有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１３浴　用　剤 ＤＬ−乳酸ナトリウム２１重量部、ピルビン酸ナトリウ
ム８重量部、実施例Ａ−３の方法で得た粉末状４Ｇ−α
−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン製品５！量部及びエタ
ノール４Ｇ！ｉ量部を、精製水２６重量部及び着色料、
香料の適量と混合し、浴用剤を製造した。

氷晶は、美肌剤、色白剤として好適であり、入浴用の湯
に１００乃至１０，０００倍に希釈して利用すればよい
。氷晶は、入浴用の湯の場合と同様に、洗顔用水、化粧
水などに希釈して利用することも有利に実施できる。

実施例　Ｂ−１４乳　液 ポリオキシエチレンベヘニルエーテル０．５重量部、テ
トラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール１重量
部、親油型モノステアリン酸グリセリン１重量部、ピル
ビンｍｏ、ｓ重量部、ベヘニルアルコール０．５重量部
、アボガド油１重量部、実施例Ａ−４の方法で得た高純
度４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチン粉末１重量
部、ビタミンＥ及び防腐剤の適量を、常法に従って加熱
溶解し、これにＬ−乳酸ナトリウム１重量部、１．３−
ブチレンゲリコール５重量部、カルボキシビニルポニマ
ー０．１重量部及び精製水８５．３重量部を加え、ホモ
ゲナイぜ−にかけ乳化し、更に香料の適量を加えて撹拌
混合し乳液を製造した。

氷晶は、抗酸化性を有し、安定性が高く高品質の日焼は
止め、美肌剤、色白剤などとして有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１５クリーム モノステアリン酸ポリオキシエチレングリコール２重量
部、自己乳化型モノステアリン酸グリセリン５Ｍ量部、
実施例Ａ−８の方法で得た高純度４Ｇ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル　ルチン粉末２重量部、流動パラフィン１重
量部、トリオクタン酸グリセリル１０重量部及び防腐剤
の適量を、常法に従って加熱溶解し、これにＬ−乳酸２
重量部、１，３−ブチレンゲリコール５重量部及び精製
水８８１１１部を加え、ホモゲナイザーにかけ乳化し、
更に香料の適量を加えて撹拌混合しクリームを製造した
。

氷晶は、抗酸化性を有し、安定性が高く、高品質の日焼
は止め、美肌剤、色白剤などとして有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１６抗酸化剤 実施例Ａ−３の方法で得た粉末状４ｑ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル　ルチン製品１０重量部、ビタミンＥ２重量
部、レシチン０．１！量部およびクエン酸ナトリウム０
．５重量部を混和し、抗酸化剤を得た。

氷晶は、マーガリン、パタークリームなど油性食品、不
飽和脂肪酸、油性ビタミン、油性ホルモンなど杭感受性
疾患剤、乳液、クリームなど化粧品などに約０．０１乃
至５．０Ｖ／ν％配合して、抗酸化剤、安定剤、品質改
良剤などとして有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１７抗酸化剤 実施例Ａ−６の方法で得た高純度４Ｇ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル　ルチン粉末１０重量部およびクエン酸ナト
リウム０．２重量部を混和し、抗酸化剤を得た。

氷晶は、マーガリン、パタークリームなど油性食品、不
飽和脂肪酸、油性ビタミン、油性ホルモンなど抗感受性
疾患剤、乳液、クリームなど化粧品などに約０，０１乃
至５．ＯＷ／Ｖ％配合して、更には、退色し易い天然色
素を含有する飲食物などに約０．０１乃至２．ＯＩＪ／
ＩＪ％配合して、抗酸化剤、安定剤、退色防止剤、品質
改良剤などとして有利に利用できる。

［発明の効果］ 本文で述べたごとく、本発明の新規物質４Ｇ−α−Ｄ−
グルコピラノシル　ルチンは、ルチンの分子吸光係数（
黄色度）を保持しつつ、水溶性を３万倍以上に高め、し
かも、実質的に無味無臭で、毒性の懸念もなく、生体内
で容易にルチンとＤ−グルコースとに加水分解きれ、ル
チン本来の生理活性を発揮する。

また、この４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチンが、
ルチンと澱粉質とを含有する溶液に、糖転移酵素とグル
コアミラーゼとを作用させる生化学的手法により容易に
生成できることより、経済性に優れ、その工業実施も容
易である。

また、ルチンの仕込濃度を高めて反応させることができ
、４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを容易に高
濃度に生成しうろことを見い出し、併せて、この反応液
の精製に際して、反応液を多孔性合成吸着剤と接触きせ
て４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンを精製でき
ることも見い出したことにより、４Ｇ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル　ルチンの大量製造を容易にするものである
。

更に、４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの過飽
和溶液から晶出、分離することにより、より高純度の４
Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチンの製造方法を確立
したことにより、その工業的実現を極めて容易にするも
のである。

また、このようにして得られる４ｑ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル　ルチンは、安全性の高い天然型のビタミンＰ
強化剤としてばかりでなく、黄色着色剤、酸化防止剤、
安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤、
劣化防止剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、
抗感受性疾患剤、美肌剤、色白剤など化粧品、更には、
プラスチック製品などに有利に利用される。

従って、本発明による４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル
　ルチンの確立とその工業的製造法並びに用途の確立は
、飲食品、化粧品、医薬品、プラスチック産業における
工業的意義が極めて大きい。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ル
チンの紫外線吸収スペクトル図。 第２図は、対照ルチンの紫外線吸収スペクトル図Ｏ 第３図は、赤外線吸収スペクトル図を示し、（Ｉ）は本
発明４Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシル　ルチンの赤外線
吸収スペクトルを示し、（ＩＩ）は対照ルチンのそれを
示す。 第４図は、メタノール溶液から本発明４Ｇ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル　ルチンが晶出している結晶写真（４Ｇ
倍に拡大）０ 第５図は、エタノール溶液から本発明４Ｇ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル　ルチンが晶出している結晶写真（４Ｇ
倍に拡大）。

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. （１）式［ I ］： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される４＾Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチン。
2. （２）ルチンと澱粉質とを含有する溶液に糖転移酵素と
   グルコアミラーゼとを作用させ、４＾Ｇ−α−Ｄ−グル
   コピラノシルルチンを生成せしめ、これを採取すること
   を特徴とする４＾Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチン
   の製造方法。
3. （３）ルチンと澱粉質とを含有する溶液に糖転移酵素と
   グルコアミラーゼとを作用させて４＾Ｇ−α−Ｄ−グル
   コピラノシルルチンを生成せしめ、次いで、この溶液を
   多孔性合成吸着剤に接触させて精製し、４＾Ｇ−α−Ｄ
   −グルコピラノシルルチンを採取することを特徴と する４＾Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチンの製造方
   法。
4. （４）４＾Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチンの過飽
   和有機溶媒溶液から晶出せしめ、これを採取することを
   特徴とする高純度４＾Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルル
   チンの製造方法。
5. （５）４＾Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチンを含有
   せしめた飲食物。
6. （６）４＾Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチンを有効
   成分として含有せしめた抗感受性疾患剤。
7. （７）４＾Ｇ−α−Ｄ−グルコピラノシルルチンを有効
   成分として含有せしめた化粧品。（８）４＾Ｇ−α−Ｄ
   −グルコピラノシルルチンを含有せしめることを特徴と
   する酸化防止方法。