JPH01163134A - Ｈｉｖ感染細胞に殺作用する抗体異種結合体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の技術的分野 本発明は新規な抗体異種結合体およびＨＩＶ感染の処置
においてヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）に感染された
細胞に殺作用する方法におけるそれらの使用に関する。

より詳しくは、本発明はＨＩＶ感染細胞の表面に存在す
るＨＩＶ抗原に特異性の抗体に架橋された、特定末梢血
エフェクター細胞に特異性の抗体を含む抗体異種結合体
の構築に関する。そのような抗体異種結合体はエフェク
ター細胞を殺作用をうける標的細胞に物理的に架橋し、
ＨＩＶ感染標的細胞に対する殺作用におけるエフェクタ
ー細胞の溶解機構を活性化することができる。本発明の
抗体異種結合体および方法は、内因性ＨＩＶ特異性エフ
ェクター機構の増幅によるＨ　Ｉ　Ｖ感染個体の処置に
対する新規方法を提供し、またＨＩＶウィルスに新たに
感染したかまたは偶然暴露さらされた個体におけるＨＩ
Ｖ免疫応答の発生前の予防に有用であることができる。

発明の背景 後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）およびその前駆期、
ＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ）、並びにリンパ節疾患症
候群（ＬＡＳ）の原因である感染性物質は近年ヒト免疫
不全ウィルス（Ｈｒｖｌおよび２）と称される新規なリ
ンパ趨向性レトロウィルスである。これらのウィルスの
分離株にはＬＡＶ−１、ＬＡＶ−２、ＨＴＬＶ−Ｉｌｌ
およびＡＲＶが包含される。

ＨＩＶの一般的構造は感染宿主細胞の膜からの出芽の過
程中にウィルスが取得する脂質含有エンベロープにより
囲まれたリボ核タンパク質コアの構造である。ウィルス
エンコード糖タンパク質がエンベロープ内に包埋され、
外へ突出ている。例えばＨＩＶ−１のエンベロープ糖タ
ンパク質は初めに感染細胞内に１５０，０００〜１６帆
０００　ドルトンの前駆体分子（ｇｐ１５０またはｇｐ
１６０）として合成され、次いでそれが細胞内で１１０
，０００〜１２０．０００　　ドルトンのＮ末端フラグ
メント　（ｇｐｌｌｏまたはｇｐ１２０として知られる
）にプロセシングされ、外部糖タンパク質、およびトラ
ンスメンプランエンベロープ糖タンパク質を表わす４１
、０００〜４６．０００ドルトンのＣ末端フラグメント
（ｇｐ４１）を生ずる。ＨＩＶの内部ウィルスタンパク
質にはｒｇａｇ　Ｊおよびｒｐｏｌ」タンパク質が含ま
れる。

ＨＩＶの蔓延が汎流行割合に達すると感染個体の治療お
よび暴露のおそれのある非感染個体へのウィルス伝達の
予防が主要問題であ゛る。種々の治療方策がウィルスの
生活環における種々の段階を標的にする、このことはミ
ツヤほか（！、ｌ　ｉ　ｔ　ｓ　ｕ　ｙ　ａａｎｄ　Ｂ
ｒｏｄｅｒ）　、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）　、　　
３２５゜ｐ、７７３（１９８７）に概説されている。１
方法にはＨＩＶ糖タンパク買上の抗原に特異性の抗体の
使用が含まれる。これらの抗体は宿主中へのウィルスの
侵入を妨害することにより、またはその他の機構により
ウィルス複製を阻止することができる。ウィルスタンパ
ク質または抗体介在され易いタンパク買上の抗原決定基
が確認されればウィルスの感染性の中和に十分な抗体力
価を種痘によるかまたは所望の抗原特異性の免疫グロブ
リンまたは単クローン性抗体の受動投与により起させる
ことができよう。

ＨＩＶ−１のｇｐＨＯａタンパク質はウィルスの感染性
を妨害するための潜在的標的として多くの研究の対象で
あった。ＨＩＶ感染個体の血清が試験管内でＨＩＶを中
和することが示され、精製ｇｐＨｏに結合する抗体が血
清中に存在する〔エム・ロバート・グリコ（！、！、Ｒ
ｏｂｅｒｔ−Ｇｕｒｏｆｆ）ほか、ネイチャー（Ｎａｔ
ｕｒｅ）　、　　３１６．　ｐｐ、　　７２〜７４　　
（１９８５）；ワイス（Ｒ，Ａ、　Ｗｅｉｓｓ）ほか、
ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）　、　　３１６．　ｐｐ、
　　６９〜７２　　（１９８５）；およびマシューズ（
Ｍａｔｈｅｗｓ）ほか、プロシーデイングズ・オフ・ザ
・ナショナル・アカデミイー・オフ・サイエンス（ｐｒ
ｏｃ。

Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　　Ｓｃｉ、）　　Ｕ、　　　
Ｓ、　　Ａ、　　、　　　８　３．　　ｐ、９７０９（
１９８６）参照〕。精製および組換ｇｐＨ。

は動物の免疫処置に用いたときに中和性血清抗体の生成
を刺激した〔ロベイ　（Ｒｏｂｅｙ）ほか、プロシーデ
イングズ・オフ・ザ・ナショナル・アカデミイー・オフ
・サイエンス（Ｐｒｏｃ、　　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ。

Ｓｃｉ、）Ｕ、　Ｓ、Ａ、、　　８３．ｆｌ、７０２３
（１９８６）およびラスキー　（Ｌａ５ｋｙ　）ほか、
サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、２３３．　ｐ、２０９
　　（１９８６）参照〕。

ＨＩＶｇｐＨＯおよびｇｐ４１を発現する組換ワクシニ
アウィルスによるヒトの免疫処置はＨＩＶ中和性抗体を
誘発した〔ザグリ−（Ｚａｇｕｒｙ）ほか、ネイチャー
（Ｎａｔｕｒｅ）　、　　３２６．　ｐ、　２４９（１
９８６）参照〕。ｇｐＨｏ分子のＣＤ４（Ｔ４）受容体
に対する結合もまた示され、ＣＤ４受容体の一定エピト
ープを認識する単クローン性抗体がＨＩＶ結合、シンシ
チウム形成および感染性を阻止することが示された〔マ
クドウガル（ＭｃＤｏｕｇａｌ　）ほか、サイエンス（
５ｃｉｅｎｃｅ　）　。

２３１、ｐ、３８２　　（１９８６）参照〕。パトニイ
（Ｐｕｔｎｅｙ　）ほか、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ
）、　　２３４゜ｐ、　１３９２　（１９８６）は動物
中の中和性血清抗体を、ｇｐＨＯ分子のカルボキシル末
端ハーフを含む組換融合タンパク質による免疫処置後に
誘発させ、サラニエンベローブタンパク質のグリコジル
化が中和性抗体応答に必要でないことを示した。さらに
、ＨＩＶＩＩタンパク質例えばｇｐｌｌｏおよびｇｐ４
１に対する単クローン性抗体が生成された〔例えば、ゴ
スチング（Ｌ、　Ｈ，Ｇｏｓｔｉｎｇ）ほか、ジャーナ
ル・オフ・クリニカル・ミクロビオロジ−（Ｊ、　Ｃｌ
１ｎ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、）　、　　２５．　　（
ｋ５）　。

ｐｐ、２４５〜２４８　　（１９８７）参照〕。

ＨＩＶは感染個体中で２方法で：体液中に存在する無細
胞ウィルスとして、または感染細胞と未感染細胞とが融
合してシンシチウムを形成することにより、拡がること
ができる。ＨＩＶに対する中和性抗体が無細胞ウィルス
の拡がりを低下できるけれども、ＨＩＶ感染細胞に対す
る殺作用には異なる方法が必要である。

通常、健全免疫系は個体を種々のウィルスにより起こさ
れた感染から回復させることができる。

ウィルス感染からの予防または回復において役割を果た
すことができる免疫機構には次のものが含まれる：第１
に中和性抗体が無細胞ウィルスの拡がりを防ぐことがで
きる。第２に、抗体によるウィルス感染細胞のコーティ
ングを含む抗体依存性細胞仲介細胞障害性（ＡＤＣＣ）
が末梢血白血球集団内のエフェクター細胞に感染細胞の
溶解を可能にする。第３に、補体依存性抗体細胞障害性
がウィルス感染細胞の溶解に寄与することができる。

第４に、Ｔ細胞仲介免疫もまたウィルス感染細胞に対す
る殺作用に含まれることができる〔ヒト免疫系の細胞お
よび機能の一般総説として免疫学概論（Ｉｎｔｒｏｄｕ
ｃｔｉｏｎ　　Ｔｏ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）　　（２
版）。

キンボール（Ｊ、　Ｗ、　Ｋｉｍｂａｌｌ　（編）、マ
クミラン・パブリジング社（ＭａｃＭｉｌｌａｎ　　Ｐ
ｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏ、）（１９８６＞参照〕。

しかし、ＨＩＶウィルス自体が免疫不全を起こす。従っ
て、ＨＩＶ感染者の大部分はＡＩＤＳを発生し続け、そ
れらの個体中のＨＩＶに対する免疫応答がこの致死性疾
患の発生の防止に適当でないことを示す。従って、殊に
ＨＩＶ感染の処置においてＨＩＶ感染細胞に殺作用する
エフェクター細胞機構を可能にするかまたは増大する新
規方法に対する大きな要求がある。

腫瘍細胞に殺作用する抗体異種結合体くまた異種凝集体
または異種抗体として知られる）の使用が知られている
。例えば、セガル（Ｄ、　Ｍ、　Ｓｅｇａｌ）ほかに対
して発行された米国特許第４，６７６．９８０号；ユン
グ（Ｇ、Ｊｕｎｇ　）ほか、プロシーディングズ・オプ
・ザ・ナショナル・アカデミイー・オプ・サイエンス（
Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、）　　
Ｕ、Ｓ、Ａ、＋８３　、　ｐｐ、　４４７９〜４４８３
　（１９８３）　　；ベレッ（Ｐ、　Ｐｅｒｅｚ）ほか
、ジャーナル・オプ・イムノロジー（Ｊ、　Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ、）　、　　１３７．　ＮｋＬｌ、　ｐｐ、　２０
６９〜２０７２　（１９８６）　　；および　チタス（
Ｊ、　Ａ。

Ｔｉ　ｔｕｓ）ほか、ジャーナル・オフ・イムノロジー
（Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、）　、　　１３８．　Ｎａｌ
　１．　ｐｐ、　４０１８〜４０２２　（１９８７）参
照。例えば１．ペレッ（Ｐｅｒｅｚ　）ほか、前掲、に
は抗Ｔ３（Ｔリンパ球上のＴ受容体に対する単クローン
性抗体）の種々の抗腫瘍単クローン性抗体に対する架橋
が開示されている。生じた異種凝集体がヒト腫瘍系およ
び新腫瘍細胞の細胞障害性Ｔリンパ球による溶解を促進
することが示された。またカルボフスキイ（Ｂ、　Ｋａ
ｒｐｏｖｓｋｙ　）ほか、ジャーナル・オフ・エクスペ
リメンタル・メディシン（Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、）
。

１６０、　ｐｐ、　１６８６〜１７０１　（１９８４）
参照、それには腫瘍細胞の溶解のための、ＴＮＰ処理腫
瘍細胞に対する抗体に架橋されたＡＤＣＣエフェクター
細胞上のＦｃ受容体に対する抗体を含む異種凝集体が開
示されている。

しかし、技術のどこにも、エフェクター細胞例えば細胞
障害性Ｔリンパ球または大顆粒リンパ球に架橋されたＨ
ＩＶ抗原抗原特異性コクローン性抗体ＩＶ感染の処置に
おけるＨＩＶ感染細胞に対する殺作用のためにいかに選
択し、使用するかに関して示唆または教示が存在しない
。さらに、ＨＩＶウィルスにより起こされる免疫不全の
ために、これまでの研究によってだれもＡＩＤＳ患者に
おいて異種結合体の方法を使用することに導かれなかっ
たであろう。

発明の概要 本発明はＨＩＶ感染個体の処置に対する新規抗体異種結
合体の使用に関する。本発明の異種抗体は、ＨＩＶ感染
標的細胞に対して殺作用できる末梢血のエフェクター細
胞に特異性の抗体に架橋されたＨＩＶ感染細胞上に発現
されるＨＩＶ抗原に特異性の抗体からなる。本発明の方
法によれば、異種結合体の抗ＨＩＶ抗体がＨＩＶ感染細
胞、すなわち殺作用すべき標的細胞、に結合し、異種結
合体の抗エフェクター抗体がエフェクター細胞例えば末
梢血リンパ球（ＰＢＬ）集団内に認められるもの、例え
ば細胞障害性Ｔリンパ球（またＴ細胞として示される）
または大顆粒リンパ球（ＬＧＬ）に結合する。従って、
異種結合体の抗体成分がエフェクターと標的細胞とを架
橋し、細胞障害性エフェクター細胞による標的細胞に対
する殺作用を促進する。

本発明の好ましい態様によれば、ＨＩＶ−１のｇｐＨＯ
またはｇｐ４１に対する単クローン性抗体が１９２８球
上に認められるＣＤ３／Ｔ細胞受容体複合体に特異性の
単クローン性抗体または一定白血球上に認められるＦｃ
受容体に対する単クローン性抗体に架橋されてＨＩＶ血
清反応陽性または血清反応陰性ヒトのそれぞれのエフェ
クター細胞（例えばＴリンパ球またはＬＧＬ）を標的し
、ＨＩＶ惑染感染して殺作用する異種結合体を形成する
。

本発明の異種結合体は抗ＨＩ　Ｖ組成物、例えば本発明
の少くとも１種の異種結合体を薬学的に有効な量含む組
成物、中に使用できる。本発明はまた個体を薬学的に許
容される方法で、本発明の組成物の薬学的に有効な量で
処置する段階を含むＨＩＶ感染個体を処置する組合せお
よび方法を包含する。ＨＩＶ感染個体の異種結合体の生
体内処置に加えて、ＨＩＶ惑染感染を処置する本発明の
方法はエフェクター細胞例えば末梢血リンパ球の試験管
内活性化並びにＨＩＶ惑染感染に対する活性化エフェク
ター細胞および異種結合体の投与を包含する。

本発明の方法、異種結合体、薬学的組成物および組合せ
はＨＩＶ感染を患う個体中のＨＩＶ感染細胞に対する殺
作用に有用であり、異種結合体がＨＩＶ感染性を中和す
る１種またはそれ以上の抗体を含むならば、または異種
結合体がＨＩＶ中相性抗体とともに投与されれば殊に有
用であることができる。さらに、これらの方法および異
種結合体は新たにまたは偶然ＨＩＶに感染する個体の処
置において予防的に有用であることができる。

発明の詳細な説明 記載した発明が一層十分に理解されるために次に詳細な
説明が示される。

本発明は新規な抗体異種結合体およびＨＩＶ感染細胞に
殺作用する方法におけるそれらの使用に関する。より詳
しくは、本発明は互いに架橋された少くとも２種の抗体
を含む異種結合体に関する。

１抗体はＨＩＶ感染細胞上に発現されるｔＶ抗原に特異
性でそれと反応性である。他の抗体はＨＩＶ感染標的細
胞に殺作用できる末梢血のエフェクター細胞上に認めら
れる抗原に特異性でそれと反応性である。そのようなエ
フェクター細胞には細胞障害性Ｔ細胞、単球（またはマ
クロファージ）、顆粒球、およびナチュラルキラー（Ｎ
Ｋ）細胞活性またはＡＤＣＣ活性を有する細胞を含むＬ
ＧＬが包含されることができる。異種結合体のＨＩＶ特
異性抗体がＨＩＶ感染細胞に結合し、異種結合体のエフ
ェクター細胞特異性抗体が細胞障害性エフェクター細胞
に結合するので、本発明の異種結合体は２つの細胞を架
橋する手段を与え、細胞障害性エフェクター細胞を感染
標的細胞に接触させ、従って標的細胞の溶解を促進する
。

理論に拘束されないが、記載される異種結合体が細胞障
害性エフェクター細胞をＨＩ　Ｖ感染標的細胞に架橋す
るだけでなく、またエフェクター細胞の溶解機構を活性
化すると思われる〔例えばリウ（Ｌｉｕ）ほか、プロシ
ーデイングズ・オフ・ザ・ナショナル・アカデミ−・オ
フ・サイエンス（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、　
Ｓｃｉ、）　Ｕ、　Ｓ、　Ａ、　、　８２゜ｐｐ、　８
６４８〜８６５２　（１９８５）およびペレツ（Ｐ。

Ｐｅｒｅｚ　）ほか、ジャーナル・オフ・エクスペリメ
ンタル・メデイシン（Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、　）、
　１６３　。

ｐｐ、１６６〜１７８　（１９８６）参照〕。従って、
エフェクター細胞例えばＴ細胞がそれ自体の抗原特異性
を有することができるけれども、それは本発明の異種結
合体との相互作用により再標的して異種結合体により結
合されたＨＩＶ惑染感染に殺作用することができる。本
発明の異種結合体の方法は従って、エフェクター細胞例
えば細胞障害性Ｔ細胞またはＬＧＬを活性化し、次いで
それらを、抗体異種結合体架橋を経て殺作用されるＨＩ
Ｖ惑染感染に極めて接近させることによりＨＩＶ感染感
染中体中強ＨＩＶ特異性エフェクター細胞応答を与える
。さらに、そのような異種結合体は、自生エフェクター
細胞が本発明の異種結合体により標的されてＨＩＶ惑染
感染に殺作用することができるので、まだ抗ＨＩＶ免疫
を生じていない個体（例えば新たに感染した個体）のエ
フェクター細胞を細胞毒性にすることができる。

本発明の異種結合体に含まれる抗体は多クローン性、ま
たは好ましくは単クローン性であることができる。本出
願に用いた「抗体」という語には無傷抗体分子、あるい
はＦａｂおよびＦ（ａｂ′）２フラグメントが包含され
る。単クローン性抗体が使用されれば、抗体はマウスま
たはヒト由来、あるいはキメラ抗体であることができる
。本発明の異種結合体に含まれる抗体はよく知られた方
法、例えば異種二官能性架橋試薬５ＰＤＰ　ＣＮ−スク
シンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオナ
ート〕の使用により互いに共有的に結合させることがで
きる〔例えばカルポフスキイ　（Ｂ。

Ｋａｒｐｏｖｓｋｙ　）ほか、前掲、参照〕。あるいは
、抗体を、バーデイ（ＲｌＲ，Ｈａｒｄｙ　）、　　Ｍ
ｅｔｈｏｄｓＩｍｍｕｎｏｌ、、　　４版、ウェア（Ｒ
ｏＤ、　Ｗｅｉｒ）　（編）。

ｐｐ、３１．１〜３１．１２　　（１９８６）に記載さ
れるようにＧＭＢＳ　（マレイミドブチルオキシスクシ
ンイミド）を用いて互いに共有的に結合させることがで
きる。さらに、本発明の態様は２種以上の抗体を含む異
種結合体を含むことができる。例えば、本発明の異種結
合体はエフェクター細胞に特異性の２種の抗体および標
的ＨＩＶ感染細胞に特異性の１抗体を含むことができる
。あるいは、異　゛種結合体は標的細胞に特異性の２種
の抗体およびエフェクター細胞に特異性の１抗体を含む
ことができる。これらの異種結合体は前記のように公知
の方法により互いに共有的に結合される。

異種結合体のＨＩＶ特異性抗体はＨＴＶ感染細胞の表面
上に十分に露出または発現されるＨＩＶ抗原に特異性で
それと反応性である抗体であることができる。抗体はさ
らに細胞表面上のＨＩＶ抗原に対する親和性を有し、抗
体異種結合体が感染標的細胞とエフェクター細胞との間
に安定な架橋を形成すべきである。抗体は、好ましくは
約１０−８〜約１０−＋２程度の親和性会合定数を有す
べきである。

異種結合体のエフェクター特異性抗体はＨＩＶ惑染感染
に殺作用できる末梢血のエフェクター細胞に特異性でそ
れと反応できる任意の抗体であることができる。好まし
くは、抗体はエフェクター細胞の表面上の抗原と反応し
、エフェクター細胞の溶解機構を活性化するものである
。そのような抗体はＴリンパ球上のエピトープ例えばＣ
Ｄ３〔モイエル（Ｓ、　Ｃ，Ｍｅｕｅｒ）ほか、ジャー
ナル・オフ・エクスペリメンタル・メデイシン（Ｊ、　
Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、）、　　１５７．　ｐ、７０５　（
１９８３）参照）、ＣＤ２８（またＴｐ、４４として知
られる）〔レドベター（Ｊ、　Ａ、　Ｌｅｄｂｅｔｔｅ
ｒ）ほか、ジャーナル・オフ・イムノロジー（Ｊ、　Ｉ
ｍｍｕｎｏｌ、）＋１３７　、　ｐｐ、　３２９９〜３
３０５　（１９８６）およびリューコサイト・タイピン
グ（Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　Ｔｙｐｉｎｇ）■、マクマイ
クル（Ａ、　Ｊ、ＭｃＭｉｃｈａｅｌ）　（ｍ）　、オ
フスフオード・ユニバシティー・プレス（Ｏｘｆｅｒｄ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　　Ｐｒｅｓｓ、　０ｘｆｏｒｄ
　）　　（印刷中）参照〕およびＣＤ２（シュン（Ｃ，
ｋｌ、　Ｊｕｎｅ）ほか、ジャーナル・オフ・クリニカ
ル・インベステイゲーシラン（Ｊ、　Ｃ１１ｎ、　Ｉｎ
ｖｅｓｔ、　）　、　　７７．　ｐ、１２２４（１９８
６）およびリューコサイト・タイピング（Ｌｅｕｋｏｃ
ｙｔｅ　Ｔｙｐｉｎｇ）、パーナート（Ａ、　Ｂｅｒｎ
ａｒｄ）ほか（編）、スプリンガー・フェルラグ（Ｓｐ
ｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ　、　Ｎｅ１ｖ　Ｙｏｒｋ
　）　（１９８４）参照〕と反応する抗体を包含するこ
とができる。あるいは、異種結合体のエフェクター特異
性抗体成分には一定エフェクター細胞例えばＬＧＬ、顆
粒球または単球のＦｃ受容体上のエピトープと反応する
抗体が包含されることができる。そのような抗体の例に
はＴリンパ球上のＣＤ３／Ｔ細胞受容体複合体に特異性
の抗体例えばＧｌ　９−４抗体〔例えばレドベター（Ｊ
、Ａ、　Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒ　）ほか、ジャーナル・オ
フ・イムノロジー（Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　）＋１３
５　、　ｐｐ、　２３３１〜２３３６　（１９８５）参
照〕、およびＬＧＬのＣＤ１６Ｆｃ受容体と反応する抗
体例えばＦｃ２抗体〔例えばレドベター（Ｊ、　Ａ。

Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒ）　、免疫遺伝学および組織適合性
の展望（Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ　Ｉｎ　Ｉｍｍｕｎ
ｏｇｅｎｅｔｉｃｓ　　Ａｎｄ　　Ｈｉｓ−ｔｏｃｏｍ
ｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ）、　Ｖｏｌ、６．　ヘイス（Ｅ
、　Ｈｅ１ｓｅ　）（編）、リンパ球表面抗原（Ｌｙｍ
ｐｈｏｃｙｔｅ　　Ｓｕｒ−ｆａｃｅＡｎｔｔｇｅｎｓ
）＋　　１９８４．　ｐｐ、　　３２５〜３４０゜アメ
リカン・ソサイエティ・フオ・ヒストコンパティビリテ
ィ・アンド・イムノジエネテイクス（Ａｍｍｅｒｉｃａ
ｎ　５ｏｃｉｅｔｙ　Ｆｏｒ　　ｔｌｔｓｔｏｃｏｍｐ
ａｔｉｂｉｌｉｔｙＡｎｄ　Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉ
ｃｓ、　Ｎｅｗ　　Ｙｏｒｋ　）　　（１９８４）参照
〕が包含される。抗ＣＤ３および抗ＣＤ１６単クローン
性抗体はともに市販されている〔例えばそれぞれＬｅｕ
　４およびＬｅｕ　　１１抗体、ベクトン・デイキンソ
ン（Ｂｅｃｔｏｎ　Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ　。

Ｍｏｕｎｔａｉｎｖｉｅｗ　、　ＣＡ　）製〕。

本発明の１つの好ましい態様によれば、ＨＩＶ−１糖タ
ンパク質ｇｐ１１ｏに対する単クローン性抗体（１１０
，４）をＴ細胞受容体上にδ忍められるＣＤ３抗原に対
する単クローン性抗体（Ｇ１９−４）に架橋させた。該
異種結合体は血清反応陽性および血清反応陰性ヒトのＰ
ＢＬのＴ細胞を標的し、ＨＩＶ感染細胞に殺作用する。

我々の実験プロトコルによれば、ＰＢＬを放射性標識ク
ロム（”Ｃｒ）　ＨＩ　Ｖ感染標的細胞とともに本発明
の１１０．４×Ｇ１９−４異種結合体の存在下にインキ
ュベートし、標的細胞の溶解を培地中への５１Ｃｒ標識
の遊離により測定した。我々はＰＢＬが異種結合体の存
在下にＨＩＶ感染細胞を溶解したが、異種結合体を構成
した個々の単クローン性抗体の単なる混合物の存在下に
溶解が殆んど起らないか又は全く起らないことを認めた
。

さらに、我々はまた抗ＣＤ３とともに前インキュベート
し、次いで１１０．４×Ｇ１９−４異種結合体の存在下
に標的細胞に暴露したＰＢＬが非処理ＰＢＬよりもＨＩ
Ｖ感染細胞に対し一層細胞毒性であったことを認めた。

この結果はＴ細胞上のＴ３抗原に対する抗体による前処
理がＴ細胞の溶解機構を刺激または増大することが報告
された腫瘍細胞に対する異種結合体の使用を指向した研
究と一致した〔例えばユング（Ｇ、Ｊｕｎｇ　）ほか、
前掲、参照〕。

非常に重要なことは、無症候ＨＩＶ怒染、すなわち血清
反応陽性個体、のＰＢＬもまた１１０．４×Ｇ１９−４
異種結合体の存在下にＨＩＶ惑染感染を溶解することが
できた事実であった。従って、本発明の異種結合体およ
び方法は既にＨｒＶ惑染感染個体の血液中のエフェクタ
ー細胞のＨＩＶ感染細胞に対する殺作用を可能にし、ま
たはその能力を増大する手段を与えることができる。

さらに、我々はＣＤ８”細胞（ＣＤ８は細胞障害性Ｔ細
胞に対する抗原標識である）に対して濃縮した抗ＣＤ３
活性化ＰＢＬが非分画ＰＢＬよりも細胞毒性であること
を認めた。この観察はＰＢＬ集団内のＣＤ８＋細胞障害
性Ｔ細胞がＨＩＶ感染細胞の溶解に対して１１０．４　
ｘ　Ｇ　１９−４異種結合体により標的されることを示
唆する。

第２の好ましい態様において、ｑｐＨＯに対する単クロ
ーン性抗体（１１０，４）をＦｃ２、ＣＤ１６　　（Ｌ
ＧＬおよび頚粒球上に発現されるＦｃ受容体として確認
された抗原）に対する単クローン性抗体、に架橋させた
。ＬＧＬはＡＤＣＣおよび自然殺伐用を仲介するエフェ
クター細胞である〔例えばオウランダー（Ｃ，０ｈｌａ
ｎｄｅｒ　）ほか、スカンジナビアン・ジャーナル・オ
フ・イムノロジー（５ｃａｎｄ　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ
、）、　１５．　ｐｐ、　　４０９〜４１５　（１９８
２）参照〕。該異種結合体は血清反応陽性および血清反
応陰性個体のＰＢＬのＬＧＬを標的し、ＨＩＶ感染細胞
に殺作用した。

従って、ＰＢＬを５１［ｒ標識ＨＩＶ感染細胞とともに
１１０．４×Ｆｃ２異種結合体の存在下にインキュベー
トし、５１　［：　ｒの遊離により溶解を測定した。

ＰＢＬは異種結合体の存在下にＨＩＶ感染細胞を溶解し
た。１１０．４×Ｆｃ異種結合体を構成する単クローン
性抗体の単なる混合物の存在下にＰＢＬを標的細胞とと
もにインキュベートした対照実験でほとんど溶解が認め
られなかった。さらに、前記態様と同様に、ＨＩＶ血清
反応陽性ヒトのＰＢＬもまた１１０．４×Ｆｃ２異種結
合体の存在下にＨＩＶ惑染感染を標的し、溶解した。

ＰＢＬ集団内のどの細胞がこの異種結合体により実際に
標的されたかを測定するためにＣＤ８”Ｔ細胞濃縮ＰＢ
ＬおよびＣＤ１６”細胞濃縮ＰＢＬを、それらのＨＩＶ
感染細胞を溶解する能力について試験した。ＣＤ１６＋
細胞？Ｊｌ！１ＩＰＢｔ、、主にＬＧＬ、は非分画ＰＢ
ＬよりもＨＩＶ感染細胞に対して一層細胞毒性であった
。実際にＣＤ８”細胞濃縮ＰＢＬは非分画集団よりも細
胞毒性が低かった。従って、ＰＢＬ集団内に存在するＣ
　Ｄ１６”ＬＧＬが１１０．４×Ｆｃ２異種結合体の存
在下にＨＩＶ感染細胞を溶解した。

本発明はまた、本発明の異種結合体を含む薬学的組成物
でＨＩＶ感染個体を処置する方法を包含する。この処置
法は本発明の少くとも１種の抗体異種結合体の薬学的に
有効な量をＨＩＶ惑染感染に投与することにより生体内
で行なうことができる。異種結合体を、β−インターフ
エロン（β−ＩＦＮ）、インターロイキン２　（ＩＬ−
２）　、他のインターフェロン例えばα−またはγ−イ
ンターフエロン、インターフェロン誘発因子、あるいは
他の免疫修飾物質とともに、またはそれらによる処理後
に投与すると処置の有効性を増大させることができる。

例えば、我々の実験はβ−ＩＦＮまたはＩＬ−２−によ
るＰＢＬの前処理が非処理ＰＢＬで認められた溶解より
も本発明の異種結合体の存在下にＨＩＶ感染細胞の一層
多くの溶解を生じたことを示した。異種結合体自体がＨ
ＩＶ中相性抗体を含む（すなわち異種結合体のＨＩＶ特
異性抗体成分とした）本発明の異種結合体で、あるいは
異種結合体でＨＩＶ中相性抗体とともにＨＩＶ感染個体
を処置してＨＩＶウィルスに対する身体全体の攻撃を増
強することもまた望ましいことができる。

あるいは、ＨＩＶ感染個体を処置する本発明の方法は、
抹消血のエフェクター細胞例えばＰ　Ｂ　Ｌ。

を試験管内で本発明の少くとも１種の異種結合体で処理
する段階、並びにエフェクター細胞および異種結合体を
ＨＩＶ感染個体に投与する段階を含むことができる。こ
の処置法はまたエフェクター細胞とβ−ＩＦＮまたはＩ
Ｌ−２、他のインターフェロン例エバα−またはｒ−イ
ンターフエロン、インターフェロン誘発因子あるいは他
の免疫修飾物質との試験管内共インキュベーションまた
は前インキュベーションおよび活性化エフェクター細胞
と異種結合体とのＨＩＶ感染個体に対する投与を含むこ
とができる。あるいは、エフェクター細胞を、使用され
る個々のエフェクター細胞に特異性でそれと反応性の抗
体、好ましくはエフェクター細胞の溶解機構を刺激する
抗体とともに、試験管内で共インキュベートまたは前イ
ンキュベートし、細胞を活性化させることができる。例
えば細胞障害性Ｔ細胞に対する抗体を含む異種結合体を
用いるとき、そのような処理がさらに細胞障害性Ｔ細胞
の溶解機構を刺激できることを示す研究により、処置は
エフェクター細胞とＴ細胞に特異性の抗体との共インキ
ュベートまたは前インキュベートを含むことができる。

最後に、エフェクター細胞はまた異種結合体とともにＨ
ＩＶ感染患者に投与する前に、***促進因子例えばＰＨ
Ａまたは［：ｏｎ　Ａで前処理することができる。処理
の方法に関係なく、抗体フラグメント例えばＦａｂまた
はＦ　（ａｂ’　）２　　あるいはキメラ抗体を含む異
種結合体を用いることが有用であることができる。

本発明の異種結合体は普通の投与法を用いて投与するこ
とができ、それには静脈内、経口、皮下、腹腔内または
リンパ内が包含され、それらに限定されない。静脈内投
与が好ましい。

本発明の異種結合体を含む薬学的組成物は種々の剤形で
あることができ、それには固体、半固体および液体剤形
例えば錠剤、丸剤、粉末、液体溶液または懸濁液、座剤
、高分子マイクロカプセルまたはマイクロベシクル、リ
ポソームおよび注射可能または注入可能溶液が含まれ、
しかしそれらに限定されない。好ましい形態は投与の方
式および治療適用による。

異種結合体は公知の普通の薬学的に許容される担体例え
ば、血清タンパク質例えばヒト血清アルブミン、緩衝物
質例えばリン酸塩、水または塩あるいは電解質、を含む
ことができる。

本発明の異種結合体組成物に対する最も有効な投与の方
式および用法は疾患の容態および経過、患者の健康およ
び治療に対する応答、並びに処置医師の判断による。従
って、異種結合体および付随化合物例えばβ−ＩＦＮま
たはＩＬ−２の薬量は個々の患者に対して決定すべきで
ある。

しかし、本発明の異種結合体の有効量は約１〜約１００
ｍｇ／ｎ（の範囲内にあることができる。エフェクター
細胞の試験管内処理には異種結合体約２００μｇ〜２ｍ
ｇ／１０９投与細胞の用量を用いることができる。β−
ＩＦＮ、α−ｒＦＮまたはγ−ＩＦＮの有効量は約３Ｘ
１０６〜 約３６０Ｘ１０６Ｕ／患者の範囲内にあることができ、
ｌＸ１０’Ｕ／患者が最適用量である。

β−ＴＦＮを用いるとき静脈内投与が好ましいが、α−
またはγ−ＩＦＮを用いるとき皮下投与が好ましい。ま
た、ＩＬ−２の有効量は約１．０００〜約１００、００
００　／　ｋｇ体重の範囲内にあることができる。

定注入を用いるときに有効量は約１〜７Ｘ１０’Ｕ毎体
表面平方メートル毎日であることができる〔ウェスト（
Ｗ、　Ｈ，Ｗｅｓｔ　）ほか、ニュー・イングランド・
ジャーナル・オプ・メデイシン（ＮｅｗＥｎｇ、Ｊ、　
Ｍｅｄ、）　、　　３１６　（ｔｌｈ１５）　、　ｐｐ
、　　８９８〜９０５　（１９８７）参照〕。最後に、
ＨＩＶ中相性抗体の有効量は約１〜１００ｍｇ／ｒｒｒ
の範囲内にあることができる。

記載した本発明が一層十分に理解されることができるた
めに、次に実施例が示される。これらの実施例が単に例
示のためであり、決して本発明の範囲を限定すると解す
べきでないことが理″解されよう。

実施例　１ 次の実施例はＨＩＶ感染細胞の溶解に対する本発明の異
種結合体によるＨＩＶ血清反応陽性および血清反応陰性
個体のＰＢＬの標的化を示す。

本発明による異種結合体を形成するために架橋された単
クローン性抗体はＨＩＶ特異性抗体１１０．４およびＴ
細胞特異性抗ＣＤ３抗体Ｇ１９−４であった。抗体１１
０．４はサブクラスＩｇＧ。

に属し、ＬＡＶのヌクレオチド６５９８〜７１７８によ
りコードされる領域内のＬＡＶのｇｐＩＩＯ糖タンパク
質と反応し〔ゴスチング（Ｌ、　Ｈ，Ｇｏｓｔｉｎｇ　
）ほか、前掲）、ＨＩＶの感染性を中和する。

Ｇ１９−４はＩｇ　Ｇ、に属し、Ｔリンパ球のＴ細胞受
容体上のＣＤ３抗原に特異性である。

単クローン性抗体１１０．４は次のように調製した：感
染したＣＥＭ細胞（Ａ、Ｔ、Ｃ，Ｃ，隘ＣＲＬ８９０４
）から精製したＬＡＶ−１ウイルス〔エフ・バレ・ジノ
ウシ（Ｆ、Ｂａｒｒｅ−Ｓｉｎｏｕｓｓｉ　）ほか、サ
イエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）　　２２０．　ｐｐ、　　
８６８〜８７１（１９８３）参照〕を５０ｍＭ）リス、
ｐＨ７，４，０、１５Ｍ−ＮａＣ１，１，０％アプロチ
ニン、２．０％ノニデソト　（Ｎｏｎｉｄｅｔ）　Ｐ　
−４００（ＮＰ−４０）（オクチルフェノキシポリエト
キシエタノール）中で破壊させた。抽出物を２回遠心分
離により清澄化し、ＮＰ−４０を含まない破壊緩衝液３
容量を添加して０．５％ＮＰ−４０に調整した。ヒラマ
メ（１ｅｎｔｉｌ　）レクチンセファロース（５ｅｐｈ
ａｒｏｓｅ　）〔ファルマシア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ、
　Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、　Ｎ、Ｊ、）製〕をＮＰ−４
０を含まない破壊緩衝液中で前洗浄し、次いで吸着緩衝
液（５０ｍＭ）リス、ｐＨ７，４，０，１５Ｍ−ＮａＣ
１，１，０％アプロチニン、０．５％ＮＰ−４０）中で
平衡させた。清澄化したウィルス抽出物をヒラマメレク
チンセファロースで４℃で４２時間吸着させた。非吸着
物質を過剰の吸着緩衝液による洗浄により除去した。吸
着物質の溶離を吸着緩衝液中の０．２Ｍα−メチルマン
ノシドで行なった。溶出液をＰＢＳに対して透析して糖
を除き、物質を再びヒラマメレクチンセファロースに吸
着させた。

糖タンパク質−ヒラマメレクチンセファロース複合体を
用い、２〜３週離し、アジュバントなしの３回の腹腔内
注入によりＢＡＬＢ／Ｃマウスに免疫処置した。イムノ
プロット、放射免疫沈降ふよび（または）ＥＬＩＳＡに
よりＨＩＶの糖タンバク質に対する循環抗体を示した免
疫処置マウスから膵臓をとり出した。

ハイブリドーマ細胞系の発生に用いた操作は大体におい
てゴールドスティン（Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ）ほか、イン
フエクシラン・アンド・イムニティー（Ｉｎｆｅｃｔ、
Ｉｍｍｕｎ、）、３８．　　ｐ、　　２７３　（１９８
２）の変形によるコーラ−ほか（）（ｏｌｌｌｅｒ　ａ
ｎｄＭｉｌｓｔｅｉｎ　）　＋　　ネイチャー（Ｎａｔ
ｕｒｅ　）　、　　２５６゜ｐ、４９５　　（１９７５
）の方法であった。免疫処置マウスの牌１１ｉ１ＢＩＪ
ンパ球を４０％（Ｗ／Ｖ）ポリエチレングリコールを用
いてＭＳ−１骨髄腫細胞と融合させた。融合後、細胞混
合物を再びＨＡＴ培地（１５％胎仔ウシ血清、ｌＸｌ０
−’ヒボキサンチン、４ｘｌＯ−’Ｍアミノプテリンお
よび１．６Ｘ１０−’Ｍチミジンを補足したＲＰＭＩ−
１６４０培地）中に懸濁させてハイブリッド細胞の増殖
について選択し、次いで９６ウエルミクロ培養トレイ中
へ、１〜３×１０６細胞／−の濃度で分配し、６％Ｃ０
２を含む増湿雰囲気中で３７℃でインキュベートした。

培養は上澄みのＡを新ＨＡＴ培地で置換することにより
フィードした。

倒立顕微鏡を用いてウェルを細胞増殖の徴候について観
察し、細胞が十分な密度であったときに上澄みを抗ＬＡ
Ｖ抗体について試験した。

ＬＡＶに対する抗体を生ずるハイブリッド細胞を含むウ
ェルを、ＥＬＩＳＡにより精製全破壊ウィルスまたは生
物学的に発現された融合タンパク質に対する結合を測定
して確認した。破壊ウィルスを用いるＥＬＩＳＡ検定は
ＬＡＶ　　ＥＩＡプレート〔ジェネチック・システムズ
（ＧｎｅｔｉｃＳｙｓｔｅｍｓ、　５ｅａｔｔｌｅ　、
　Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ　）製〕で行なった。プレート
を細胞培養液とともに３７°Ｃで４５分間インキュベー
トし、次いでリン酸塩緩衝食塩水中の０．０５％ツイー
ン２０（ＰＢＳ−ツイーン）で３回洗浄した。

ペルオキシダーゼヤギ抗マウスＩｇＧ（ＰＢＳ−ツイー
ン中に１：２，０００希釈；ザイムド・ラボラトリーズ
社（Ｚｙｍｅｄ　　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ　、　Ｉ
ｎｃ、　。

５ｏｕｔｈ　Ｓａｎ　Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、　Ｃａ１ｉ
ｆｏｒｎｉａ　）製〕を加え（１００μβ毎ウエル）、
プレートを３７℃で４５分間インキュベートし、前記の
ように洗浄した。基質（０，０２５Ｍクエン酸、０．０
５Ｍリン酸二水素ナトリウム、ｐＨ５，０、毎５０ｍ１
中に０−）二二レンジアミン１４ｍｇおよび３０％過酸
化水素１０μβを含む）を加え、プレートを暗所で室温
で３０分間インキュベートした。反応を３Ｎ硫酸で停止
させ、比色反応を自動ミクロプレートリーダーで定量し
た。陽性結果を与えたウェルを限界希釈によりサブクロ
ーンし、特異性について再試験し、次いで膨張させた。

生じたハイブリッド細胞系により分泌された単クローン
性抗体をさらに特異性および反応性に関してイムノブロ
ッティング、免疫沈降およびＥＬＩＳＡにより、破壊ウ
ィルス、組換ＬＡＶ融合タンパク質および合成ＬＡＶペ
プチドを用いて確認した。抗体はすべてＩｇＧ＋アイソ
タイプであると決定された。この態様に用いた１１０．
４抗体を生じたハイブリドーマは、共通に所有される係
属米国特許出願第８９８．２７３号に関連してアメリカ
ン・タイプ・カルチャー・コレクション（Ａｍｅｒｉｃ
ａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏ
ｎ　）にＡ、Ｔ、Ｃ，Ｃ，患ＨＢ９４０５のもとで寄託
されている。さらに、ＨＩＶ−１のｇｐＨｏおよびｇｐ
４１ｔ！タンパク質に対する単クローン性抗体の生成は
ゴスチング（Ｌ、　Ｈ，Ｇｏｓｔｉｎｇ　）ほか、ジャ
ーナル・オフ・クリニカル・ミクロビオロジ（Ｊ、　Ｃ
ｌ１ｎ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　）＋　　２５　（Ｎ
１５）　＋ｌ）ｐ。

２４５〜２４８　　（１９８７）により記載されている
。抗ＣＤ３単クローン性抗体Ｇ１９−４はレドベターほ
か（Ｊ、　Ａ、　Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒ　ａｎｄ　Ｅ、　
Ｃ１ａｒｋ　）＋ヒユーマン・イムノロジー（Ｈｕｍａ
ｎ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）；１５、ｐｐ、３０〜４３
　　（１９８６）により記載されたように調製した。さ
らに、ＣＤ３抗原に対する単クローン性抗体はまた市販
されている〔例えばペレツ（Ｐ、Ｐｅｒｅｚ　）ほか、
１９８６．前掲参照〕。本発明のこの態様に用いた特定
抗ＣＤ３単クローン性抗体（すなわち、Ｇ１９−４）を
生ずるハイブリドーマは本出願の提出前にアメリカン・
タイプ・カルチャー・コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ　
）に寄託された。

１１０．４およびＧ１９−４単クロ一ン性抗体を、カル
ポフスキイ　（Ｂ、Ｋａｒｐｏｖｓｋｙ　）ほか、前掲
、の方法により５ＰＤＰを用いて架橋し、セファクリル
（Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ）　Ｓ　３００サイズ排除クロマ
トグラフイーにより遊離抗体から分離した。〉３００ｋ
ｄの高分子量結合体を含む両分を免疫けい光検定〔例え
ばレドベター（Ｊ、　Ａ、　Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒ）ほか
、ジャーナル・オフ・エクスペリメンタル・メデイシ７
　（Ｊ、Ｅｘｐ９Ｍｅｄ、　）、　１５２．　ｐｐ、　
２８０〜２９５　（１９８０）参照〕で、ａ）生ヒトＰ
ＢＬ上のＣＤ３およびｂ）ＬＡＶ−１に感染させたアセ
トン固定ＣＥＭ細胞との反応性について試験した。ＣＤ
３およびＨＩＶ抗原の両方に対して最高結合活性を有す
る両分を、次いで５１　Ｃｒ遊離細胞毒性検定に用いて
ＨＩＶ血清反応陽性または血清反応陰性個体のＰＢＬの
、１１０．４×Ｇ１９−４異種結合体の存在下にＨＩＶ
感染ＣＥＭ細胞を溶解する能力を試験した。

細胞毒性検定は次のように行なった：ＣＥＭ細胞をＬＡ
Ｖ−１分離株で４８時間、単クローン性抗体１１０．４
次いでフルオレセインイソチオシアネート標識ヤギ抗マ
ウス免疫グロブリンＧＦ（ａｂ’）２［ザイムド　（２
ｙｍｅｄ）製〕による処理を用い間接免疫けい光により
測定して事実上１００％の細胞がｇｐＨＯを発現するま
で感染させた。

感染細胞を”Ｃｒ　ＣＮａ、　Ｃｒｙ、　、ニュー・イ
ングランド・ニュークリア（Ｎｅ１ｙ　Ｅｎｇｌａｎｄ
　Ｎｕｃｌｅａｒ　。

Ｂｏｓｔｏｎ　、　ＭＡ）製〕で１時間標識し、検定に
おける標的細胞として用いた。

エフェクター細胞はＨＩＶ血清反応陰性または血清反応
陽性個体のフィコール・ハイパツク精製ＰＢＬであった
。ＰＢＬを単量体技ＣＤ３　（Ｇ１９−４）とともに、
またはそれなしで固相で３日間、次いでＣＤ３のない培
地中で２４時間培養した。次いで非処理および処理ＰＢ
Ｌと３Ｘ１０’５ＩＣｒ標識標的ＣＥＭ細胞とを９６ウ
エルミクロタイタープレート中、５０：１のエフエクタ
ー二標的細胞（ＥＡＴ）比で、種々の濃度の１１０．４
ＸＧ１９−４異種結合体または対照としての個々の１１
０．４およびＧ１９−４抗体の単なる混合物とともに３
７℃で４時間インキュベートした。上澄みを収集し、ガ
ンマカウンター中で計数した。

５１叶遊離％によって表わした溶解％は次のように計算
した： たゾし、自然遊離＝培地単独中の標的細胞からの遊離ｃ
ｐｍ　、最大遊離＝界面活性剤中の標的細胞からの遊離
ｃｐｍ　、である。自然Ｓ　Ｉ　Ｃｒ遊離は通常、最大
遊離の１５％未満であった。示される結果は４複製ウエ
ル中の細胞からの５１　Ｃｒ遊離％の平均値である。

第１図は、１１０．４ＸＧ１９−４異種結合体の存在下
の血清反応陰性固体の処理及び非処理ＰＢＬによるＨＩ
Ｖ感染標的細胞の溶解％を示す。

図に示されるように、非処理ＰＢＬは異種結合体２０〜
２００ｎｇ／ｉｆ’の存在下にＨＩＶ感染標的細胞を溶
解した。抗ＣＤ３により前処理したＰＢＬは非処理ＰＢ
Ｌよりも一層細胞毒性であった。

第２図ＡはＨＩＶ血清反応陽性または血清反応陰性個体
の抗ＣＤ３前処理ＰＢＬによる、１１０．４×Ｇ１９−
４異種結合体の存在下または個々の１１０．４およびＧ
ｌ　９−４抗体の混合物の存在下にＨＩＶ感染細胞の溶
解％を非感染細胞と比較して表形態で示す。ＨＩＶ血清
反応陽性および血清反応陰性供与体のＰＢＬを単量体技
ＣＤ３（Ｇ１９−４）とともに固相で３日間培養し、次
いで抗ＣＤ３を含まない培地中で２４時間培養した。次
いでＰＢＬを５０：１（７）Ｅ：Ｔ比で、２００ｎｇ／
ｍｊ！の１１０．４×Ｇ１９−４異種結合体または１１
０．４およびＧｌ　９−４抗体の混合物の存在下にＨＩ
Ｖ惑染感染び非感染ＯＥＭ細胞に対する細胞毒性につい
て試験した。

データは、混合物の存在下よりも高度の溶解が異種結合
体の存在下のＰＢＬにより仲介されたが、抗体混合物に
比べた異種結合体の存在下に非感染細胞の溶解の水準の
差異は無視できるものであった。従ってＰＢＬは異種結
合体により標的されＨＩＶ感染細胞に殺伐用した。ＨＩ
Ｖ感染または非感染細胞の溶解％は抗体の混合物の存在
下で抗体の不在下よりも高くなかった。さらに第２図Ａ
は無症候ＨＩＶ血清反応陽性個体のＰＢＬが１１０．４
ＸＧ１９−４異種抗体の存在下にＨｒＶ感染細胞を溶解
できることを示す。

第２図Ｂは非分離血清反応陰性ＰＢＬと比較したＣＤ８
“濃縮ＰＢＬによる、１１０．４　Ｘ　Ｇ１９−４異種
結合体の存在下のＨＩＶ惑染感染の溶解％を示す。ＰＢ
Ｌの濃縮は次のように行なった。血清反応陰性ＰＢＬを
、ジー（Ｔ、　Ｌｅａ　）ほか、スカンジナビアン・ジ
ャーナル・オプ・イムノロジー（Ｓｃａｎｄ、　ｊ、　
Ｉｖｓｕｎｏｌ、　）　、　　２２．　ｐｐ、　　２０
７〜２１６（１９８５）により記載された負の選択によ
りＣＤ８°細胞に対して濃縮した。簡単に記載すると、
固相で抗ＣＤ３で３日間活性化したＰＢＬをＤＲ，ＣＤ
２０．ＣＤＩ　６、ＣＤ１１、ＣＤ４およびＣＤｗ１４
で処理してＢ細胞、単球、ＬＣ；Ｌ　（例えばＮＫまた
はに細胞）およびＣＤ４細胞をコートした。抗体コート
した細胞を、次いでヒツジ抗マウスＩｇ（ダイナル社（
Ｄｙｎａｌ　Ｉｎｃ、＋Ｆｏｒｔ　Ｌｅｅ　、　Ｎ、Ｊ
、　）製〕でコートした磁性粒子とともにインキュベー
トし、ダイナル（Ｄｙｎａｌ　）Ｍ−４５０磁石により
除去した。用いたすべての単クローン性抗体−・・ＤＲ
（ＨＢ　１０　ａ）　、ＣＤ　２０（ＩＦ５）　、ＣＤ
１６　　（Ｆｃ２．２）　、ＣＤＩＩ（６０，１）　、
ＣＤ４　（Ｇｌ　９−２）およびＣＤｗ１４（ｆ１３）
、は既に記載されている〔例えばリューコサイト・タイ
ピング（Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　Ｔｙｐｉｎｇ）パーナー
ト　（Ａ、　Ｂｅｒｎａｒｄ　）ほか（編）、スブリン
ガーφフェルラグ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ　
。

Ｎｅｗ　　Ｙｏｒｋ　　（１９８４）　　；リューコサ
イト・タンピング（Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　Ｔｙｐｉｎｇ
　）ＩＩ、レインヘルツ（Ｅ、　Ｒｅ１ｎｈｅｒｚ　）
はか（編）、スフリンカ−・フェルラグ（Ｓｐｒｉｎｇ
ｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ　、　Ｎｅｗ　　Ｙｏｒｋ（１９８
６）；およびリューコサイト・タイピング（Ｌｅｕｋｏ
ｃｙｔｅ　Ｔｙｐｉｎｇ　）　［［、マクマイクル（Ａ
。

Ｊ、　ＭｃＭｉｃｈａｅｌ）　　（編）、オフスフオー
ト・ユニバーシティ０プレス　（０ｘｆｏｒｄ　　Ｕｎ
ｉｖｅｒｓｉｔｙ　　Ｐｒｅｓｓ。

０ｘｆｏｒｄ　）　（印刷中）参照〕。細胞分離法は非
分離ＰＢＬ集団中の２３％ＣＤ８＋細胞から濃縮集団中
の６２％　ＣＤ８＋細胞に、ＣＤ８”細胞について約３
倍濃縮を生じた。次いで１１０．４　ｘ　ＣＤ　３異種
結合体とともに細胞毒性について試験する前に抗ＣＤ３
処理した非分離およびＣＤ８”ｔＭ縮細胞を抗ＣＤ３の
存在なく一層インキユベートした。

第２図ＢはＣＤ３活性化ＣＤ８”濃縮細胞が非分離細胞
よりも標的細胞に対して一層細胞毒性であることを示し
、ＰＢＬ集団内のＣＤ８”細胞（すなわち細胞障害性Ｔ
細胞）がＨＩＶ惑染感染の溶解に主に関与することを示
唆する。

従ってこの実施例は、本発明の１１０．４ＸＧ１９−４
異種結合体の、ＨＩＶ血清反応陽性または血清反応陰性
個体の非処理および抗ＣＤ３処理ＰＢＬをともに標的し
てＨＩＶ感染細胞を溶解する能力を示す。与えられたデ
ータは明らかにＨＩＶ感染個体の処置に対するこの方法
の有用性を示す。

実施例　２ この実施例は一層エフェクター細胞（例えばＬＧＬ）の
Ｆｃ受容体に特異性の単クローン性抗体に架橋された単
クローン性抗体１１０．４を含む本発明の異種結合体の
ＰＢＬを標的してＨＩＶ感染細胞を溶解する能力を示す
。

この実施例において、前記抗体１１０．４は前記方法に
より、ＬＧＬおよび顆粒球上に発現されたＦｃ受容体と
して確認されたＣＤ１６抗原に特異性である抗体Ｆｃ２
に架橋される。Ｆｃ２はレドベター（Ｊ、　Ａ、　Ｌｅ
ｄｂｅｔｔｅｒ　）ほかにより免疫遺伝学および組織適
応性の展望（ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓＩｎ　Ｉｍｍｕ
ｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ　Ａｎｄ　Ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａ
ｔｉｂｉｌｉｔｙ　）。

前掲、に記載されたように調製した。さらに、Ｆｃ２抗
体を生成するハイブリドーマはこの出願の提出前にアメ
リカン・タイプ・カルチャー・コレクション（Ａ＋ｎｅ
ｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃ
ｔｉｏｎ）に寄託された。生じた異種結合体はＬ　１０
．４ｘ　Ｆｃ　２と名づけだ。

実施例１の記載と同様のＳ　Ｉ　Ｃｒ遊離細胞毒性検定
を用いて、我々はこの異種結合体の、ａ）ヒトＩＬ−２
〔ｌ　００Ｕ／蔵、バイオテスト・ダイグノステイクス
（Ｂｉｏｔｅｓｔ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、　Ｆａｉ
ｒｆｉｅｌｄ。

Ｎ、　Ｊ、　）製〕とともに、またはそれなしで２日間
培養したか、あるいはｂ）β−ＩＦＮ（３００Ｕ／ｍｌ
、　ＨＥＭ、　Ｍａｒｙｌａｎｄ製）とともにまたはそ
れなしで−夜培養した血清反応陰性ＰＢＬを標的しＨＩ
Ｖ感染細胞に殺伐用する能力を試験した。非処理および
処理ＰＢＬは５０：１のＥＡＴ比で、種々の濃度の異種
結合体または抗体混合物とともに３Ｘ１０３　”Ｃｒ標
識ＨＩＶ惑感染ＥＭと３７℃で４時間インキュベートし
、溶解％を実施例１のように測定した。

第３図は検定の結果を示す。ＰＢＬは処理および非処理
のどちらも１５ｎｇ／ｍｆｆ１の低い異種結合体濃度の
異種結合体の存在下に標的細胞を溶解することができた
。第３図Ａに示されるように、ＩＬ−２活性化細胞は異
種結合体の存在下に非処理ＰＢＬよりもＨＩＶ惑染感染
に対し多少−層細胞毒性であった。抗体混合物のみの存
在下に、認められる溶解が起こらなかった。同様に、第
３図Ｂはβ−ＩＦＮによるＰＢＬの前処理が異種結合体
の存在下に非処理ＰＢＬよりも多少−層溶解性である細
胞を生じた。

第４図はさらに、β−ＩＦＮによる前処理の、１１０．
４×Ｆｃ２異種結合体の存在下のＰＢＬの細胞毒性を増
強する能力を示す。血清反応陰性供与体のＰＢＬをフィ
コール・ハイパツク遠心分離により分離し、１０％熱失
活ヒト血清および０．３００または１，０００　Ｕ／−
のβ−ＩＦＮを補足したＲＰＭＩ−１６４０培地中にｌ
Ｘｌ０”細胞／−に懸濁し、３７℃で３時間インキュベ
ートした。

次いでＰＢＬを洗浄し、１５％熱失活ウシつ仔血清を補
足したＲＰＭＩ−１６４０培地に再び懸濁した後５１Ｃ
ｒ標識ＨＩＶ惑染ＣＥＭ細胞に対する細胞毒性について
試験した。検定は５０：１のＥＡＴ細胞比で、４時間検
定で、２００ｎｇ／−の１１０．４×Ｆｃ２異種結合体
、異種結合体の個々の抗体の混合物、単一抗体の存在下
または抗体の存在なく前記のように行なった。第４図中
の表が示すように、β−ＩＦＮによるＰＢＬの短時間処
理が異種結合体の存在下のＰＢＬの細胞毒性を増大させ
、従って、β−ＩＦＮによる一夜処理は必要でない。

第５図はＨＩＶ血清反応陽性および血清反応陰性固体の
ＩＬ−２前処理ＰＢＬによる、１１０．４×Ｆｃ２異種
結合体の存在下のＨＩ　Ｖ感染細胞の溶解％を表形態で
示す。ＨＩＶ血清反応陽性および血清反応陰性供与体の
ＰＢＬをＩ　Ｌ−２（１００Ｕ／ｍ１）とともに３７℃
で２日間培養し、５０：１のＥＡＴ比で、２００ｎｇ／
ｄの１１０．４×Ｆｃ２異種結合体または２抗体の混合
物の存在下にＨＩＶ惑染感染び非感染ＣＥＭ細胞に対す
る細胞毒性について試験した。この図は標的される血清
反応陽性（並びに血清反応陰性）個体のＰＢＬの、本発
明の異種結合体により標的されＨＩＶ感染細胞を溶解す
る能力を示す。異種結合体の存在下の非感染細胞の溶解
の増大は認められなかった。

ＰＢＬ集団内のどの細胞が１１０．４×Ｆｃ２で認めら
れた溶解に寄与したかを測定するために、我々はＰＢＬ
を実施例１に記載した方法によりＣＤ１６’細胞に対し
て濃縮したが、しかしＰＢＬのコーティングに用いた単
クローン性抗体はすべて前記リューコサイト・タンピン
グ（Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　Ｔｙｐｉｎｇ　）刊行物に記
載されたＣＤ２８　　（９，３）　、ＣＤ５　　（１０
，２）　、ＣＤ４（Ｃ１９−２）　、ＤＲ（ＨＢ’ｌ　
Ｏａ）　、ＣＤ２０（ＩＦ５）およびＣＤｗｌ　４　（
ｆ　１３）であった。

この方法によりＰＢＬは非分離ＰＢＬ集団中の１７％Ｃ
Ｄ１６＋細胞から濃縮集団中の６６％ＣＤ　１６”細胞
に濃縮された。非分離およびＣＤ１６＋濃縮細胞は、Ｉ
Ｌ−２とともに２日間培養した後種々のＥＡＴ比で２０
０　ｎｇ／　ｍｌの１１０．４×Ｆｃ２の存在下に細胞
毒性について試験した。第６図に示されるように、ＣＤ
１６＋細胞について濃縮したＩＬ−２処理ＰＢＬが非分
離細胞よりもＨＩＶ感染細胞に対し一層細胞毒性であり
、ＰＢＬ集団内のＣＤ１６”ＬＧＬ細胞がＨＩＶ惑染感
染の溶解に対してこの異種結合体により標的されること
を示唆する。

従ってこの実施例は、本発明の異種結合体の、抹消血の
第２エフエクターすなわちＬＧＬ細胞をＨＩＶ感染細胞
の殺作用に対して標的する能力を示す。さらに、我々は
エフェクター細胞のＩＬ−２またはβ−ＩＦＨによる前
処理がエフェクター細胞を標的してＨＩＶ感染細胞を溶
解する異種結合体の能力を増強することを示した。

実施例　３ この実施例は単クローン性抗体Ｇｌ　９−４に架橋され
た第２ＨＩＶ糖タンパク’Ｉｇｐ４１に対する単クロー
ン性抗体を含む本発明の他の異種結合体の、ＰＢＬを標
的してＨＩＶ惑染感染を溶解する能力を示す。

この実施例において、我々は異種結合体のＨＩＶ特異性
抗体として単クローン性抗体４１．１を用いた。４１．
１はサブクラスＩｇ　Ｇ、の抗体であり、ＬＡＶ−１の
ヌクレオチド７１７８〜７６９８によりエンコードされ
るｇｐ４１の高保存領域上のエピトープと反応する。こ
の単クローン性抗体の生成はゴスチング（Ｌ、　Ｈ，Ｇ
ｏｓｔｉｎｇ　）ほか、前掲、中に詳細に記載され、抗
体を生ずるハイブリドーマは本出願の提出前にアメリカ
ン・タイプ・カルチャー〇コレクション（八ｍｅｒｉｃ
ａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ
　）に寄託されている。

４１．１と０１９−４とを実施例１記載のように架橋さ
せ、生じた異種結合体を４１．１×Ｇ　１９−４と名づ
けた。実施例１におけるように、異種結合体をサイズ排
除クロマトグラフィーによりセファクリル５３００を用
いて遊離抗体から分離し、次いでＨＩＶ感染細胞上のｇ
ｐ４１およびヒトＰＢＬ上のＣＤ３抗原の両方に対して
最高結合活性を有する両分を実施例１に記載された細胞
毒性検定で試験した。簡単に記載すると、エフェクター
細胞は抗ＣＤ３とともに固相で３日間培養し、次いで抗
ＣＤ３を含まない培地中で一層インキユベートした血清
反応陰性供与体のＰＢＬであった。

次いでエフェクター細胞を実施例１に記載したように３
Ｘ１０３　”Ｃｒ標識標的ＣＥＭ細胞とともに、５０：
１のＥ：Ｔ比で、ａ）　４１．１　ｘ　０１９−４異種
結合体ｉ　ｂ）　４１．１とＧｌ　９−４との抗体混合
物；ｃ）４１．１単独またはｄ）Ｇ１９−４単独、の存
在下に３７℃で４時間インキュベートし、ＣＥＭ１１１
胞の溶解％を測定した。この検定の結果は第７図に示さ
れる。図は４１．ｌＸＧ１９−４異種結合体のＰＢＬを
標的してＨＩＶ感染細胞に殺作用する能力を示す。ＰＢ
Ｌは約５０〜２００ｎｇ／−の異種結合体の存在下に刺
激されてＨＩＶ感染細胞を溶解した。抗体混合物または
個々の抗体単独の存在下の溶解は無視できた。

従って、ＨＩＶ感染細胞の殺作用に対する本発明の異種
結合体の方法は任意の多くのエフェクター細胞特異性抗
体に架橋されたＨＩＶ特異性抗体を用いることができる
。実際に４１．１単クロ一ン性抗体は、それが世界の種
々の地理的領域から誘導された試験したＨＩＶの分離株
の大部分（１３中１０）と反応性であったので、この方
法に殊に有用である。

記載した方法により調製されたハイブリドーマはアメリ
カン・タイプ・カルチャー・コレクション（Ａｍｅｒｉ
ｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉ
ｏｎＲｏｃｋｖｉｌｌｅ　、　Ｍａｒｙｌａｎｄ　）に
寄託された培養株により例示される。該培養株は１９８
７年９月１５日に寄託され、次のように確認される： ハイブリドーマＧ　１９−４　：　ＡＴＣＣＮｏ、ＨＢ
　　９５３６ハイブリドー７Ｆｃ２　　　　：八ＴＣＣ
Ｎｏ、ＨＢ　９５３５バイブリド−７４１，１：　ＡＴ
ＣＣＮｏ、ＨＢ　　９５３４我々は本発明の多くの態様
を示したけれども、我々の基本構成を改変して本発明の
方法および異種結合体を用いる他の態様を与えることが
できることは明らかである。例えば、他のＨＩＶ抗原例
えばｒｇａｇ　Ｊ抗原またはＴｍｍ上上他の抗原に対す
る他の単クローン性抗体、ＬＧＬまたは血液中の他のエ
フェクター細胞を異種結合体の構築および本発明の方法
の実施に用いることができる。従って、本発明の範囲が
、実施例として前に示した特定態様によるよりはむしろ
特許請求の範囲により示されることを理解すべきである
。

【図面の簡単な説明】

第１図は血清反応陰性供与体の抗ＣＤ３前処理または非
処理ＰＢＬによるＨＩＶ感染細胞の溶解％の、本発明の
１態様の１１０．４ＸＧ１９−４異種結合体または異種
結合体を構成する個々の抗体の対照混合物の抗体濃度に
対する比較グラフであり、 第２図Ａは血清反応陽性および血清反応陰性供与体の抗
ＣＤ３前処理ＰＢＬによる、本発明の１態様の１１０．
４ＸＧ１９−４異種結合体または異種結合体を構成する
個々の抗体の対照混合物の存在下のＨＩＶ感染および非
感染細胞の溶解％を表形態で示す（ＮＴ−試験せず）図
であり、第２図Ｂは血清反応陰性供与体の抗ＣＤ３前処
理した非分離またはＣＤ８＋濃縮ＰＢＬによる、本発明
の１態様の１１０．４ＸＧ１９−４異種結合体の存在下
のＨＩＶ感染細胞の溶解％を表形態で示す図であり、 第３図は血清反応陰性供与体の非処理あるいは（Ａ）イ
ンターロイキン−２（ＩＬ−２）前処理ｔＪ：１ｔ（Ｂ
）β−インターフエロン（β−ＩＦＮ）前処理ＰＢＬに
よるＨＩＶ感染細胞の溶解％の、本発明の１態様の１１
０．４ｘＦｃ２異種結合体または異種結合体を構成する
個々の抗体の対照混合物の抗体濃度に対する比較グラフ
であり、第４図はβ−ＩＦＮの種々の濃度により３時間
前処理した血清反応陰性供与体のＰＢＬによる、本発明
の１態様の１１０゜４×Ｆｃ２異種結合体、異種結合体
を構成する個々の抗体の混合物、結合体の各個々の抗体
単独の存在下の、あるいは異種結合体または抗体の存在
のないＨＩＶ感染細胞の溶解％を表形態で示す図であり
、 第５図はＩＬ−２前処理血清反応陽性および血清反応陰
性ＰＢＬによる、本発明の１態様の１１０．４ｘＦｃ２
異種結合体または異種結合体を構成する個々の抗体の対
照混合物の存在下のＨＩＶ感染および非感染細胞の溶解
％を表形態で示す図であり、 第６図はＩＬ−２で前処理したＣＤ１６＋濃縮血清反応
陰性ＰＢＬ、ＩＬ−２で前処理した非分離血清反応陰性
ＰＢＬ、および非処理分離血清反応陰性ＰＢＬによる、
１１０．４×Ｆｃ２異種結合体の一連のエフェクター二
標的（ＦＡＴ）細胞比にわたる存在下のＨＩＶ感染細胞
の溶解％の比較グラフであり、 第７図は血清反応陰性供与体のＰＢＬによる、本発明の
１態様の４１．１×Ｇ１９−４異種結合体、異種結合体
を構成する個々の抗体の混合物または異種結合体の各個
々の抗体単独の種々の濃度の存在下のＨＩＶ感染細胞の
溶解％を表形態で示す図である。 第１図 ＣＤ３活性化ＰＢＬ 抗体濃度（ｎｇ／ｍｌ） 第３ （Ａ） ＩＬ−２活性化ＰＢＬ 里　　　　　　　（ 尿プ 領　　　　非活性化ＰＢＬ　　　　　。 〉 抗体濃度（ｎｇ／ｍ１） （Ｂ） ＩＦＮ処理ＰＢＬ ※ 喉　　　　非処理ＰＢＬ 〉 ＋５０　　　　３７．５　　　　９．４抗体濃度（ｎｇ
／ｍ叉） 抗体（２００口ｇ／ｍ　ｌ　） な　　し 第　　４　　図 ４１．３２６．９１８．７　　３７．６４４．０２７．
４９．７−７．１　　２３．４１６．４１２．３２．１
７．３２．４　　１８．６７．９９．７１１．６７．３
３．１　　１８．０１１．１１２．７１０．２５．１２
．４　　１５．０８．０５．８４ら フ 一。 第６図 Ｅ：Ｔ比

Claims (28)

【特許請求の範囲】
1. （１）ＨＩＶ感染細胞に殺作用できる末梢血のエフェク
   ター細胞と反応性の少くとも１種の抗体に架橋された、
   ＨＩＶ感染細胞の表面上に発現されるＨＩＶ抗原と反応
   性の少くとも１種の抗体を含む抗体異種結合体。
2. （２）ＨＩＶ抗原がＨＩＶエンベロープ糖タンパク質上
   に認められるものである、請求項（１）記載の抗体異種
   結合体。
3. （３）エフェクター細胞がＴリンパ球、大顆粒リンパ球
   、顆粒球、単球およびマクロファージからなる群から選
   ばれる、請求項（１）記載の抗体異種結合体。
4. （４）エフェクター細胞反応性抗体がＴリンパ球上のＴ
   細胞受容体および白血球上のＦｃ受容体と反応性の抗体
   からなる群から選ばれる、請求項（１）記載の抗体異種
   結合体。
5. （５）エフェクター細胞反応性抗体がＴリンパ球のＴ細
   胞受容体上のＣＤ３抗原に対する抗体である、請求項（
   １）記載の抗体異種結合体。
6. （６）エフェクター細胞反応性抗体が大顆粒リンパ球お
   よび顆粒球のＣＤ１６Ｆｃ受容体に対する抗体である、
   請求項（１）記載の抗体異種結合体。
7. （７）抗体がＦａｂおよびＦ（ａｂ′）＿２フラグメン
   トからなる群から選ばれる抗体フラグメントである、請
   求項（１）記載の抗体異種結合体。
8. （８）抗体がキメラ抗体である、請求項（１）記載の抗
   体異種結合体。
9. （９）ＨＩＶ感染細胞に殺作用できる末梢血のエフェク
   ター細胞と反応性の第２抗体に架橋された、ＨＩＶ感染
   細胞の表面上に発現されるＨＩＶ抗原と反応性の第１抗
   体を含む抗体異種結合体。
10. （１０）１１０．４×Ｇ１９−４、１１０．４×Ｆｃ２
    および４１．１×Ｇ１９−４からなる群から選ばれる抗
    体異種結合体。
11. （１１）ＨＩＶ感染細胞と末梢血のエフェクター細胞と
    を、請求項（１）記載の少くとも１種の抗体異種結合体
    の存在下に接触させる段階を含む、 ＨＩＶ感染細胞に殺作用する方法。
12. （１２）エフェクター細胞が末稍血リンパ球、顆粒球、
    単球およびマクロファージからなる群から選ばれる、請
    求項（１１）記載の方法。
13. （１３）エフェクター細胞がＨＩＶ血清反応陽性または
    血清反応陰性個体から得られる、請求項（１１）記載の
    方法。
14. （１４）エフェクター細胞がインターロイキン−２、β
    −インターフエロン、α−インターフエロンおよびγ−
    インターフエロンからなる群から選ばれる化合物で前処
    理される、請求項（１１）記載の方法。
15. （１５）エフェクター細胞がエフェクター細胞に特異性
    の抗体で前処理される、請求項（１１）記載の方法。
16. （１６）抗体がエフェクター細胞の溶解機構を刺激する
    ものである、請求項（１５）記載の方法。
17. （１７）抗体が抗ＣＤ３抗体である、請求項（１６）記
    載の方法。
18. （１８）エフェクター細胞が細胞障害性Ｔリンパ球であ
    り、抗体異種結合体が１１０．４×Ｇ１９−４および４
    １．１×Ｇ１９−４からなる群から選ばれる、請求項（
    １１）または（１４）記載の方法。
19. （１９）エフェクター細胞が大顆粒Ｔリンパ球であり、
    抗体異種結合体が１１０．４×Ｆｃ２である、請求項（
    １１）または（１４）記載の方法。
20. （２０）請求項（１）記載の少くとも１種の抗体異種結
    合体の薬学的に有効な量を含む、ＨＩＶ感染の処置に有
    用な薬学的に許容される組成物。
21. （２１）請求項（２０）記載の少くとも１種の組成物の
    薬学的に有効な量を個体に投与する段階を含む、ＨＩＶ
    感染を処置する方法。
22. （２２）個体がさらに、インターロイキン−２、β−イ
    ンターフエロン、α−インターフエロンおよびγ−イン
    ターフエロンからなる群から選ばれる化合物の薬学的に
    有効な量を含む第２の薬学的に許容される組成物で処置
    される、請求項（２１）記載の方法。
23. （２３）ＨＩＶ感染細胞に殺作用できる末梢血のエフェ
    クター細胞を試験管内で請求項（１）記載の少くとも１
    種の抗体異種結合体で処理する段階、並びにエフェクタ
    ー細胞および異種結合体をＨＩＶ感染個体に投与する段
    階を含む、ＨＩＶ感染を処置する方法。
24. （２４）エフェクター細胞がＴリンパ球、大顆粒リンパ
    球、顆粒球、単球およびマクロファージからなる群から
    選ばれる、請求項（２３）記載の方法。
25. （２５）エフェクター細胞がインターロイキン−２、β
    −インターフエロン、α−インターフエロンおよびγ−
    インターフエロンからなる群から選ばれる化合物で前処
    理される、請求項（２３）記載の方法。
26. （２６）エフェクター細胞がエフェクター細胞に特異性
    の抗体で前処理される、請求項（２３）記載の方法。
27. （２７）抗体がエフェクター細胞の溶解機構を刺激する
    ものである、請求項（２６）記載の方法。
28. （２８）抗体が抗ＣＤ３抗体である、請求項（２７）記
    載の方法。