JP5079379B2 - 二次沈殿が抑制された精製クロロゲン酸類の製法 - Google Patents

Description

本発明は、飲食品、保健衛生・医薬品などの天然抗酸化剤として有用な精製クロロゲン酸類の製造方法に関し、更に詳しくは、抽出物の状態において経時的に二次沈殿が実質的に発生しない精製クロロゲン酸類の製造方法に関する。

コーヒーは単に嗜好品としてだけではなく多くの機能性、生理学的効果を有することが判明しつつあり、その機能性成分としてクロロゲン酸類が注目されている。クロロゲン酸類の機能としては従来より抗酸化性(特許文献１、２）、抗変異原性（非特許文献１）、発ガン抑制（非特許文献２）、活性酸素消去能（非特許文献３）などが知られている。コーヒー豆からクロロゲン酸類を抽出・精製する提案はすでに幾つかなされており、例えば、生コーヒー豆粉の水性スラリーを蛋白質分解酵素および／または繊維素分解酵素の存在下で処理し、その水性抽出物を濃縮して濃厚溶液とするか、凍結乾燥又は噴霧乾燥することからなる食用天然抗酸化物質の製造方法（特許文献３）、生コーヒー豆粉を還流下に水抽出し、生成する水性抽出液を濃縮して濃厚溶液とするか、凍結乾燥又は噴霧乾燥することを特徴とする食用天然抗酸化物質の製造法（特許文献４）、生コーヒー豆を粗粉砕し、脱脂し、次いで平均粒径１００μｍ以下に微粉砕するか又は生コーヒー豆を直ちに平均粒径１００μｍ以下に微粉砕し、次いで脱脂し、得られた微粉末を熱水抽出し、抽出液を必要に応じて濃縮及び／又は乾燥することからなる、食品用天然抗酸化剤の製造方法（特許文献５）などが提案されている。さらに、コーヒーにはクロロゲン酸類以外の成分として、カフェインが含まれているが、カフェインを低減させたクロロゲン酸類の製造方法としてコーヒー生豆の水性溶媒抽出物を強陽イオン交換樹脂と接触させ、カフェインを除くことを特徴とするクロロゲン酸の精製方法（特許文献６）、コーヒー生豆の水性溶媒抽出物を合成吸着剤樹脂と接触処理し、吸着部を希アルカリ水溶液で脱着することを特徴とするクロロゲン酸の精製方法（特許文献７）、生コーヒー豆、コケモモの葉などの抽出物を架橋した修飾多糖類からなるモレキュラーシーブを用いたクロマトグラフィーを行いクロロゲン酸を精製する方法（特許文献８）、コーヒー生豆を含水エタノールにて抽出し、抽出液を塩酸分解し、さらに濃縮し、濃縮液をアルカリ性として有機溶媒洗浄を行い、中和後、多孔性重合樹脂にクロロゲン酸類を吸着させエタノールにて脱着し、エタノールを濃縮除去しクロロゲン酸類を精製する方法（特許文献９）、植物から得られるクロロゲン酸類を含む水溶性抽出物を活性炭処理後、活性炭に吸着した吸着物を有機溶媒あるいはそれらを含む水溶液によって溶離させる工程を備えることを特徴とする高濃度のクロロゲン酸類を含む組成物の製造方法（特許文献１０）などが提案されている。

しかしながら特許文献３〜５に記載の先行技術によって得られる抽出物は水性溶媒に可溶な成分が全て抽出される結果、クロロゲン酸の純度が低く、且つ、異味異臭及び着色物質を含有し、抗酸化剤としては満足できるものではなかった。また、特許文献６〜１０に記載の方法は、工程が長く操作が煩雑であり実用上は必ずしも満足のいく方法とはいえなかった。

そこで、コーヒー抽出物から簡便な方法でカフェインを除去する方法として、カフェインを含有する水溶液を活性白土または酸性白土と接触させることにより、水溶液から選択的にカフェインを除去する方法（特許文献１１）が提案されている。また、コーヒー抽出液を活性白土または酸性白土と接触させる方法では、その他の不純物も除去されることも知られている（特許文献１２、特許文献１３）。

Ｎｕｙｅｎ Ｖ．Ｃ．，Ａｒａｋｉ Ｙ．，Ｊｉｎｎｏｕｃｈｉ Ｔ．ａｎｄ Ｍｕｒａｉ Ｈ．：ＡＳＩＣ，１６ Ｃｏｌｌｏｑｕｅ，Ｋｙｏｔｏ，８８−９３（１９９５） Ｔ．Ｔａｎａｋａ ａｎｄ Ｈ．Ｍｏｒｉ：Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ １６ｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃｏｌｌｏｑｕｉｕｍ ｏｎ Ｃｏｆｆｅｅｅ １９９５，Ｖｏｌ．１，ｐｐ．７９−８７ Ａｒａｋｉ Ｙ．ａｎｄ Ｎｇｕｙｅｎ Ｖ．Ｃ．：ＡＳＩＣ，１６ Ｃｏｌｌｏｑｕｅ，Ｋｙｏｔｏ，１０４−１０８（１９９５） 特開平４−２７３７４号公報 特開平６−３８７２３号公報 特開昭５８−１３８３４７号公報 特公昭６１−３０５４９号公報 特開昭６２−１１１６７１号公報 特開平４−１４５０４８号公報 特開平４−１４５０４９号公報 特表昭６３−５０２４３４号公報 特許第２９８３３８６号公報 特開２００５−２６３６３２号公報 特開平６−１４２４０５号公報 特開２００６−８７３０６号公報 特開２００６−１１７６３１号公報

しかしながら、上記発明はいずれもクロロゲン酸類の抽出効率、抽出物中の純度、不純物に着目した発明であるが、二次沈殿に着目したものではなかった。

したがって、本発明の課題は、抽出物の状態で安定で沈殿が生じず、さらに経時変化を受けた後においても二次沈殿が発生しない精製クロロゲン酸類の、簡便かつ工業的に有利な製造方法を提供することを目的とする。

本発明者などはこのような実情に鑑み、鋭意研究を行ったところ、コーヒーの水抽出物を固形分濃度として屈折糖度（２０℃）Ｂｘ８°以上に濃縮した後に、酸性白土および／または活性白土と接触させることにより、製造直後において安定で沈殿が生じず、また、抽出物を加熱殺菌しても、さらに長期間保存しても二次沈殿が発生しないことを見出し、本発明を完成するに至った。
かくして、本発明は、焙煎したコーヒー豆の水抽出物を固形分濃度として屈折糖度（２０℃）Ｂｘ１０°〜Ｂx６０°に濃縮した後、屈折糖度（２０℃）Ｂｘ１０°〜Ｂx６０°にて酸性白土および／または活性白土と接触させることを特徴とする、精製クロロゲン酸類（但し、本発明でいうクロロゲン酸類としては、クロロゲン酸、カフェー酸、フェルラ酸、イソクロロゲン酸、ネオクロロゲン酸ならびにこれらの酸のナトリウム、カリウムの水溶性塩類を意味する。以下同じ。）の製造方法を提供するものである。
また、本発明は、焙煎したコーヒー豆の水抽出濃縮物と酸性白土および／または活性白土との接触処理をｐＨ２〜７の酸性条件下で行うことを特徴とする、前記の精製クロロゲン酸類の製造方法を提供するものである。
さらに、本発明は、二次沈殿が発生しないことを特徴とする、前記の精製クロロゲン酸類の製造方法を提供するものである。
さらにまた、本発明は、焙煎したコーヒー豆の水抽出物が、高濃度濃縮の後、酸性条件下でエタノール水溶液またはエタノールにて抽出されたものであることを特徴とする、前記の精製クロロゲン酸類の製造方法を提供するものである。
さらにまた、本発明は前記のいずれかに記載の方法により得られた精製クロロゲン酸類を高濃度濃縮後、酸性条件下、エタノール水溶液またはエタノールにて抽出することを特徴とする、精製クロロゲン酸類の製造方法を提供するものである。
本発明では、さらに、焙煎したコーヒー豆の水抽出物が中性からアルカリ条件下で合成吸着樹脂処理されたものであることを特徴とする、前記の精製クロロゲン酸類の製造方法も提供する。
さらにまた、本発明は、焙煎したコーヒー豆の水抽出物が陽イオン交換樹脂処理されたものであることを特徴とする、前記の精製クロロゲン酸類の製造方法をも提供する。

本発明の精製クロロゲン酸類抽出物は、製造直後において安定で沈殿が生じず、また、抽出物を加熱殺菌しても、さらに長期間保存しても二次沈殿が発生せず安定である。したがって、本発明品を工業的に製造する際には充填を均一に行うことが可能である。また、本発明品を工業的に使用する場合においては、容器の底に沈殿物が多量に付着することが無いため、容器をよく振ってから使用するという手間が省け、また、仕込み時において容器からの流出性が良いため、容器の底からスパチェラで掻き出すなどの余計な作業を行う必要が無く、作業性が極めて良好である。また、本発明の方法では、カフェインが低減されるため、子供や老人でも安心して使用することができる。さらにまた、本発明の方法では人体に有用なクロロゲン酸類やトリゴネリンは低減しない。さらにまた、本発明の方法では、有機酸組成のバランスは処理前と変わらないため、風味的に優れている。本発明では、これらの効果を併せ持つ、有用なクロロゲン酸類の製造方法を、簡便な方法で、かつ、工業的に有利な方法で提供することができる。

以下に、本発明をその実施の形態に即して詳細に説明する。

本発明でいうクロロゲン酸類としては、クロロゲン酸、カフェー酸、フェルラ酸、イソクロロゲン酸、ネオクロロゲン酸ならびにこれらの酸のナトリウム、カリウムのごとき水溶性塩類などのクロロゲン酸類を挙げることができる。

本発明に使用するコーヒー豆は、例えば、アラビカ種、ロブスタ種、リベリカ種などのいずれでも良く、その種類、産地を問わずいかなるコーヒー豆でも利用することができる。

本発明におけるコーヒー豆抽出物は、コーヒー豆から抽出したものを使用しても良いが、市販のコーヒーエキスを濃縮しても良く、また、コーヒーエキス粉末、インスタントコーヒーなども使用することができる。

コーヒー豆から抽出する場合は、特に、クロロゲン酸類が生豆に対し実質的に減少しない範囲の浅い焙煎、すなわちＬ値として３０〜５５、好ましくはＬ値４５〜５５の焙煎を行うと生豆特有の生臭みが消失するため、本発明の原料として好ましく例示できる。

Ｌ値とはコーヒーの焙煎の程度を表す指標で、コーヒー焙煎豆の粉砕物の明度を色差計で測定した値である。黒をＬ値０で、白をＬ値１００で表す。従って、コーヒー豆の焙煎が深いほど数値は低い値となり、浅いほど高い値となる。

参考までに、通常飲用に利用される焙煎豆のＬ値はほぼ次に示す程度である。イタリアンロースト：１６〜１９、フレンチロースト：１９〜２１、フルシティーロースト：２１〜２３、シティーロースト：２３〜２５、ハイロースト：２５〜２７，ミディアムロースト：２７〜２９。これより浅い焙煎は通常の飲用では一般的にはあまり使用されない。

抽出溶媒としては、水が好ましい。

水は通常コーヒー豆粉砕物１重量部に対して約２〜約５０重量部を使用し、温度約２０℃〜約１００℃にて抽出を行う。抽出操作はバッチ式またはカラムによる連続式などの従来既知の抽出方法をそのまま採用することができる。

コーヒー抽出液は引き続き、固形分濃度として屈折糖度（２０℃）でＢｘ８°〜Ｂx６０°、好ましくはＢｘ１０°〜５０°、さらに好ましくはＢｘ１０°〜４０°に濃縮する。濃縮物の濃度がこの範囲より低い場合、酸性白土および／または活性白土と接触処理後において、二次沈殿の発生が十分抑制されない。また、濃縮物濃度がこの範囲を超えて高い場合、粘度により、酸性白土および／または活性白土と接触処理が困難となり、また、作業性上効率が悪くなり、工業的に有利な方法とはならない。濃縮物の濃度がこの範囲内においてのみ、本発明の優れた効果である、二次沈殿の発生抑制効果が得られる。かかる濃縮方法は濃縮することができればいかなる方法を用いても良く、例えば、常圧濃縮、減圧濃縮、ＲＯ膜濃縮、凍結濃縮などを例示することができる。また、カラム抽出やインスタントコーヒーの希釈などでは、濃縮工程を経なくとも、この濃度範囲内とすることも可能であり、その場合は濃縮工程は不要である。

次いで、この濃縮物を酸性白土および／または活性白土と接触処理する。本発明に用いる活性白土は、天然に産出する酸性白土（モンモリロナイト系粘土）を硫酸などの鉱酸で処理したものであり、大きい比表面積と吸着能を有する多孔質構造をもった化合物である。酸性白土を更に、酸処理することにより比表面積が変化し、脱色能の改良および物性が変化することが知られている。通常活性白土は、油脂の脱色能、不純物吸着能を有することから主として、油脂及び石油鉱物油の精製に使用される。活性白土、酸性白土は、共に一般的な化学成分として、ＳｉＯ２、Ａｌ２Ｏ３ 、Ｆｅ2Ｏ３、ＣａＯ、ＭｇＯなどを有するが、本発明に使用する場合、ＳｉＯ２／Ａｌ２Ｏ３比は、３．０〜６．０、好ましくは、４．０〜５．０のものが適する。また、比表面積は、５０〜３５０ｍ2 ／ｇが好ましく、ｐＨ（５％サスペンジョン）は、５〜１０の範囲のものが好ましく、特に６〜９．８が好ましい。

濃縮物と酸性白土および／または活性白土との接触処理はバッチ式、カラムによる連続処理などのいかなる方法も採用することができる。一般的には粉末状酸性白土および／または活性白土を添加、攪拌し、濾過操作により酸性白土および／または活性白土を除去した濾液を得る方法、あるいは顆粒状の酸性白土および／または活性白土を充填したカラムを用いて連続処理する方法が採用される。上記接触処理の条件は、濃縮液の濃度などに応じて適宜選択することができるが、例えば、バッチ式による処理の場合、濃縮物の固形分重量に対し、粉末状の酸性白土および／または活性白土を１０〜２００重量部、好ましくは２０〜１００重量部添加し、約１０℃〜約４０℃にて、約３０分〜約５時間攪拌操作後、濾過操作により粉末状の酸性白土および／または活性白土を除去した濾液を得る方法が例示できる。

また、コーヒー豆抽出濃縮物と酸性白土および／または活性白土との接触処理はｐＨ２〜７の酸性条件下で行うことが好ましい。ｐＨが７を越えた条件、または、ｐＨが２を下回った条件で処理を行った場合、二次沈殿の発生が十分に抑えきれない。

コーヒー抽出濃縮物を酸性白土および／または活性白土と接触処理する前または後に、酸性条件下、エタノール水溶液またはエタノールにて抽出することによる、不純物除去工程を行っても良い。一般にコーヒー豆は焙煎することにより、焙煎香が生じる。この焙煎香は、コーヒー豆より抽出して得られるクロロゲン酸類を有効成分として、飲料のフレーバー、色素などの安定性（抗酸化性）を目的として使用する場合には、香りの面でも、好ましくない為除く必要がある。また、風味劣化の原因ともなる。この焙煎香は分子量１５０以下のフェノール、ポリフェノール類と予想される。また、この、酸性条件下、エタノール水溶液またはエタノールにて抽出することにより、カフェイン含量についても低減させることが可能である。酸性条件下、エタノール水溶液またはエタノールによる抽出は以下に記載する方法で行う。まず、コーヒー抽出物を高濃度となるまで濃縮する。高濃度の範囲としては、水分含量が５０％以下であることが好ましく、また、乾燥粉末の形態でも使用することができる。かかる濃縮または乾燥方法は高濃度まで濃縮することができればいかなる方法を用いても良く、例えば、常圧濃縮、減圧濃縮、ＲＯ膜濃縮、凍結濃縮、噴霧乾燥、真空乾燥、凍結乾燥などを例示することができる。高濃度濃縮コーヒーエキスの抽出に使用するエタノール水溶液またはエタノールの水／エタノールの重量比の好ましい範囲としては３０／７０〜０／１００、好ましくは２０／８０〜０／１００、より好ましく１０／９０〜０／１００を挙げることができる。水がこの範囲を超えて多い場合、劣化原因となる不純物の除去率は高くなるが、クロロゲン酸類自体が抽出されてしまい、その収量が低下する。また、抽出温度としては２０℃〜７０℃、好ましくは２５℃〜６０℃を例示することができる。抽出温度がこれより低いと、劣化原因成分の除去率が下がってしまい効果が少ない。抽出温度がこれより高いと、劣化原因成分の除去率は高くなるが、クロロゲン酸類自体が抽出されてしまい、その収量が低下する。エタノール水溶液またはエタノールの使用量としては高濃度濃縮コーヒーエキス１重量部に対し、約１倍量〜約１０倍量を挙げることができる。この操作により飲食品に添加し保存を行った場合に、品質劣化が起こりにくく、また刺激臭が生成しない精製クロロゲン酸類が得られる。

また、コーヒー抽出濃縮物を酸性白土および／または活性白土と接触処理する前に中性からアルカリ条件下での合成吸着樹脂処理または陽イオン交換樹脂処理などの公知の脱カフェイン処理を行っても良い。アルカリ条件下での合成吸着樹脂による脱カフェイン処理方法としては以下の方法を例示することができる。コーヒー抽出液を、水抽出の場合はそのまま、また、含水親水性有機溶媒抽出液の場合は、蒸留などの手段によって該有機溶媒の含有量を、例えば、約５重量％以下とする。その後、抽出液のｐＨを約７〜約１２の中性からアルカリ性とした後、合成吸着樹脂と接触処理することによってコーヒー豆抽出液中のカフェイン及びトリゴネリンなどの抽出成分を該合成吸着樹脂に吸着せしめる。かかるアルカリ性物質としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどを挙げることができる。合成吸着樹脂としては、例えば、比表面積約３００ｍ２／ｇ〜約７００ｍ２／ｇ；細孔容積約０．７〜約１．１ｍｌ／ｇ；細孔半径約５ｎｍ〜約１３０ｎｍの範囲の物性を有するスチレン・ジビニルベンゼン系多孔性合成吸着樹脂を挙げることができる。このような合成吸着樹脂は市場で容易に入手することができ、例えば、ダイヤイオンＨＰ１０、同ＨＰ２０、同ＨＰ３０、同ＨＰ４０、同ＨＰ５０；、同ＳＰ２０６、同ＳＰ２０７、同ＳＰ−７０（以上三菱化学（株））；アンバーライトＸＡＤ−２、同ＸＡＤ−４（以上ローム アンド ハース社）；日立ゲル＃３０１０、同＃３０１１、同＃３０１９（以上日立化成工業（株））などを挙げることができる。また、上記スチレン・ジビニルベンゼン系合成吸着樹脂と同程度の比表面積、細孔容積及び細孔半径を有するメタクリル酸エステル系多孔性合成吸着樹脂を例示することができ、かかる樹脂の市販品としては、例えば、ダイヤイオンＨＰ１ＭＧ、同２ＭＧ（以上三菱化学（株））；アンバーライトＸＡＤ−７、同ＸＡＤ−８ｉ（以上ローム アンド ハース社）などを挙げることができる。このような合成吸着樹脂との接触処理はバッチ式、カラムによる連続処理などのいかなる態様も採用することができるが、一般的には該合成吸着樹脂を充填したカラムによる連続処理が採用される。

また、陽イオン交換樹脂処理による脱カフェイン処理方法としては以下の方法を例示することができる。コーヒー抽出液を、水抽出の場合はそのまま、また含水親水性有機溶媒抽出液の場合は、蒸留などの手段によって該有機溶媒の含有量を、例えば、約５重量％以下とした後、陽イオン交換樹脂と接触処理することによってコーヒー抽出液中のカフェインを吸着除去することができる。かかる陽イオン交換樹脂としては、例えば、ＳＫ−１１６、ＳＫ−１Ｂ（以上三菱化学（株））；アンバーライトＩＲ−１２０、同２００（以上ローム アンド ハース社）などを挙げることができる。このような陽イオン交換樹脂との接触処理はバッチ式、カラムによる連続処理などのいかなる態様も採用することができるが、一般的には該樹脂を充填したカラムによる連続処理が採用される。かかる接触処理の条件は、コーヒー豆の種類、抽出液の濃度などに応じて適宜に選択することができるが、例えば、カラムによる連続処理の条件としては、陽イオン交換樹脂１容量に対して約１容量〜約５０容量のコーヒー抽出液を、液温約１０℃〜約３０℃、ＳＶ約０．５〜約５０程度の流速で通液するごとき条件を例示することができる。かくして得られた脱カフェインコーヒー抽出液は、陽イオン交換樹脂との接触処理により酸性となっているため、既知のアルカリ性物質を用いて中和することができる。アルカリ性物質としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどを例示することができる。また、中和処理に代えて、予めＯＨ型にしておいた陰イオン交換樹脂と接触させて、該溶液の液性を中性とすることによって中和による生成塩を含有しない、脱カフェインコーヒー抽出液とすることができる。

本発明の、酸性白土および／または活性白土と接触処理により精製したクロロゲン酸類抽出物は、先に記載した方法により得た後、さらに減圧または常圧にて濃縮し、濃縮物とすることができる。また、濃縮の途中あるいは濃縮後にグリセリン、プロピレングリコール、エタノールなどの保留剤を添加することにより、状態の安定化をはかり、また、クロロゲン酸類の含有濃度の調整を行うこともできる。また、該濃縮液はそのまま、あるいはデキストリン類、デンプン類、天然ガム類、糖類その他の賦形剤を添加して、既知の方法により乾燥して、粉末状、顆粒状その他任意の固体形態とすることもできる。

かくして得られた精製クロロゲン酸類抽出物は、安定で沈殿が生じず、また、抽出物を保存した後も二次沈殿を生じず安定である。さらにコーヒー飲料やその他の清涼飲料などに添加した後であっても沈殿を生じず安定で、また、加熱殺菌、保存、光などの影響による経時変化後においても二次沈殿が発生せず、安定である。また、本発明の方法では、カフェインが低減されるため、子供や老人でも安心して使用することができる。さらにまた、本発明の方法では人体に有用なクロロゲン酸類やトリゴネリンは低減しない。さらにまた、本発明の方法では、有機酸組成のバランスは処理前と変わらないため、風味的に優れている。本発明では、これらの効果を併せ持つ、有用な精製クロロゲン酸類の製造方法を、簡便な方法で、かつ、工業的に有利な方法で提供することができる。
以下、本発明を実施例により本発明を更に具体的に説明する。

実施例１
５ＬカラムにＬ値５１．５に焙煎したコーヒー豆の粉砕物１０００ｇを充填し（カラム内径１４．５ｃｍ、高さ３１ｃｍ）、９５℃に加温した軟水３７００ｇをカラム上部から送り込み、１時間静置後抽出液を抜き取り、抽出液（収量２５００ｇ、Ｂｘ１１．５°）を得た。得られたコーヒー抽出液を２５℃に冷却後、抽出液にミズカエースＮｏ６００（水澤化学工業（株））を１４３．８ｇ（Ｂｘ換算の固形分量の５０％）加え、２５℃にて３０分間攪拌した後、Ｎｏ．２６（２１０ｍｍ）濾紙（東洋濾紙（株））にケイソウ土５０ｇをプレコートしたヌッチェにて吸引濾過し、濾液２４５０ｇ（Ｂｘ１０．０°）を得た。この濾液をロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、Ｂｘ５０°の濃縮物４９０ｇ（本発明品１）を得た。

比較例１
５ＬカラムにＬ値５１．５に焙煎したコーヒー豆の粉砕物１０００ｇを充填し（カラム内径１４．５ｃｍ、高さ３１ｃｍ）、９５℃に加温した軟水３７００ｇをカラム上部から送り込み、１時間静置後抽出液を抜き取り、抽出液（収量２５００ｇ、Ｂｘ１１．５°）を得た。得られたコーヒー抽出液をＮｏ．２６（２１０ｍｍ）に濾紙ケイソウ土５０ｇをプレコートしたヌッチェにて吸引濾過し、濾液２４５０ｇ（Ｂｘ１１．２°）を得た。この濾液をロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、Ｂｘ５０°の濃縮物５４９ｇ（比較品１）を得た。

比較例２
５ＬカラムにＬ値５１．５に焙煎したコーヒー豆の粉砕物１０００ｇを充填し（カラム内径１４．５ｃｍ、高さ３１ｃｍ）、９５℃に加温した軟水７４００ｇをカラム上部から送り込み、１時間静置後抽出液を抜き取り、抽出液（収量６２００ｇ、Ｂｘ５．２°）を得た。得られたコーヒー抽出液を２５℃に冷却後、抽出液にミズカエースＮｏ６００（水澤化学工業（株））を１６１．２ｇ（Ｂｘ換算の固形分量の５０％）加え、２５℃にて３０分間攪拌した後、Ｎｏ．２６（２１０ｍｍ）に濾紙ケイソウ土５０ｇをプレコートしたヌッチェにて吸引濾過し、濾液６１００g（Ｂｘ４．５°）を得た。この濾液をロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、Ｂｘ５０°の濃縮物５４９ｇ（比較品２）を得た。

実施例２
本発明品１または比較品を９０℃、１０分間加熱殺菌した後１００ｍｌ透明容器に充填し、５℃暗所６ヶ月および５０℃暗所３ヶ月の２条件にて保管し、経時的な沈殿の状態を観察した。結果を表１に示す。

表１に示した通り、コーヒー豆抽出物を濃縮のみ行いそのまま添加した比較品１は製造直後は沈殿が認められないものの、保存試験開始後まもなくすぐに沈殿を発生し始めた。一方、酸性白土処理した本発明品１および比較品２は、比較品１と比べて明らかに沈殿の発生が少なかった。比較品２は抽出液のＢｘ５．２°の濃度にて酸性白土処理したものであるが、比較品２は、保存により沈殿が発生する傾向が見られた。一方、本発明品１を添加した飲料は、５℃暗所１ヶ月および５０℃暗所３週間の範囲内で沈殿の発生は全く認められず、５℃暗所６ヶ月および５０℃暗所３ヶ月でも沈殿はわずかであり、保存安定性が良いことが確認された。

実施例３
実施例１と全く同様の方法の抽出を１０回繰り返し、抽出液２５，０００ｇを得た（Ｂｘ１１．７°）。得られた抽出液をロータリーエバポレーターによる濃縮を行いＢｘ５０°の濃縮液５８００ｇを得た。この濃縮液を希釈し、Ｂｘ１°の希釈液２５，０００ｇ、Ｂｘ５°の希釈液５，０００ｇ、Ｂｘ１０°の希釈液２，５００ｇ、Ｂｘ２０°の希釈液１、２５０ｇ、Ｂｘ３０°の希釈液８３３ｇ、Ｂｘ４０°の希釈液６２５ｇ（各コーヒー豆８６２ｇ相当）を調製した。これらの希釈液またはＢｘ５０°濃縮液５００ｇを温度２５℃とした後、各抽出液にミズカエースＮｏ６００（水澤化学工業（株））を１２５ｇ（Ｂｘ換算の固形分量の５０％）加え、２５℃にて３０分間攪拌した後、Ｎｏ．２６（２１０ｍｍ）に濾紙ケイソウ土５０ｇをプレコートしたヌッチェにて吸引濾過し、濾液を得た。それぞれの濾液をロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、Ｂｘ５０°の濃縮物を得た。Ｂｘ１°の希釈液からの処理品を比較品３、Ｂｘ５°希釈液からの処理品を比較品４、Ｂｘ１０°希釈液からの処理品を本発明品２、Ｂｘ２０°希釈液からの処理品を本発明品３、Ｂｘ３０°希釈液からの処理品を本発明品４、Ｂｘ４０°希釈液からの処理品を本発明品５とした。しかしながら、Ｂｘ５０°からの処理は、酸性白土の濾過にきわめて時間がかかり、作業性が極めて悪く、効率的ではなかった。
それぞれの実施品の各種成分分析値を表２に示す。

分析方法
クロロゲン酸類の分析方法：
適当量の試料（約０．０５ｇ）を１００ｍｌメスフラスコに精秤し、イオン交換水にて１００ｍｌとする。その５ｍｌを１００ｍｌメスフラスコにとり、イオン交換水を加えて１００ｍｌに希釈し、希釈液の波長３２５ｎｍの吸光度を測定する。ここで測定した吸光度をＡ、試料採取量をＢとしたとき、次式によりクロロゲン酸類量を算出する（クロロゲン酸類の３２５ｎｍにおける吸光係数を５２０００として計算する）。
クロロゲン酸類（ｇ）＝｛Ａ×（１００÷５）×（５０÷Ｂ）｝÷５２０００
カフェイン、トリゴネリンおよび有機酸の分析方法：ＨＰＬＣ法
表３に示したとおり、酸性白土処理により収量およびカフェイン含量は低減するが、その他の成分は若干増加するが、これは、カフェインおよび固形分が減少したため、相対的に増加したものと考えられる。また、有機酸類の組成は処理前とそれほど大きく変化しておらず、未処理のものとほぼ同様の組成比であった。

実施例４（官能評価）
本発明品２〜５、比較品１、比較品３または比較品４のいずれか１品を水に０．２％添加し、１０名の良く訓練されたパネラーにより官能評価を行った。官能評価の結果を表３に示す。

表３に示したとおり、酸性白土処理をＢｘ１°で行った比較品３およびＢｘ５°で行った比較品４は雑味が感じられたが、Ｂｘ１０°〜Ｂｘ４０°で行った本発明品２、３、４、５はいずれも雑味が無く、すっきりしていた。
したがって、本発明品の精製クロロゲン酸類は、さまざまな飲料、食品に雑味を与えずに、クロロゲン酸類の持つ有用な効果を与えることができる。

実施例５
本発明品２〜５、比較品１、比較品３または比較品４のそれぞれを９０℃、１０分間加熱殺菌後１００ｍｌ透明容器に充填し、５℃暗所６ヶ月および５０℃暗所３ヶ月２条件にて保管し、経時的な沈殿の状態を観察した。結果を表４に示す。

表４に示した通り、酸性白土処理をＢｘ１°またはＢｘ５°にて行った比較品３または比較品４と比べ、Ｂｘ１０°、Ｂｘ２０°、Ｂｘ３０°、Ｂｘ４０°で行った本発明品２〜５は、明らかに沈殿の発生が少なかった。したがって、コーヒー抽出物をある一定濃度以上濃縮した状態で酸性白土処理することにより、２次的に沈殿が発生せず、風味的にもすっきりとした精製クロロゲン酸類が製造できることが認められた。

実施例６
５ＬカラムにＬ値５１．５に焙煎したコーヒー豆の粉砕物１０００ｇを充填し（カラム内径１４．５ｃｍ、長さ３１ｃｍ）、９５℃に加温した軟水を３７００ｇをカラム上部から送り込み、１時間静置後抽出液を抜き取り、抽出液（抽出液収量２５００ｇ、Ｂｘ１１．７゜）を得た。得られたコーヒー抽出液は２０℃に冷却後、ロータリーエバポレーターにて濃縮し、Ｂｘ７２．５°の高濃度濃縮コーヒーエキスを得た（収量４０１．８ｇ、固形分６０．４％、ｐＨ５．７４、クロロゲン酸類１６．７％、カフェイン５．９％）。濃縮液に４Ｎ塩酸約３５．０ｇを加え、ｐＨを４．５とした後、さらに水１１．５ｇを加え、Ｂｘ６６．０゜（全液量４４８．３ｇ、水分含量４５．０％）とした。このものを室温下で攪拌しながら、一級９５％エタノール（日本アルコール販売、エタノール含量９２Ｗ／Ｗ％）５８３．０ｇを３０分かけて滴下し、さらに６０分間攪拌を続けた（最終の水／エタノール＝２９．２／７０．８）。その後、不溶物を、濾紙（Ｎｏ．２、１５０ｍｍ）にて吸引濾過し、濾液９３５．２ｇを得た。濾液をロータリーエバポレーターにて濃縮し、濃縮物２１８．６ｇ（Ｂx７８．０゜、固形分６５％、クロロゲン酸類２６．８％、カフェイン５．４％）を得た。濃縮物に水を加えＢx２０゜に希釈し（Ｂx２０゜希釈液量８５２．５ｇ）、ミズカエースＮｏ６００（水澤化学工業（株））を８５．２ｇ（Ｂｘ換算の固形分量の５０％）加え、２５℃にて３０分間攪拌した後、Ｎｏ．２６（２１０ｍｍ）に濾紙ケイソウ土５０ｇをプレコートしたヌッチェにて吸引濾過し、濾液８０６．１g（Ｂｘ１７．４°）を得た。この濾液をロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、Ｂｘ５０°の濃縮物３５０．６ｇ（本発明品６：固形分４０．０％、クロロゲン酸類１５．７％、カフェイン２．６％）を得た。

実施例７
本発明品３（Ｂｘ５０゜）５８５ｇを調製し（コーヒー豆１０００ｇ相当）、ロータリーエバポレーターにて濃縮し、Ｂｘ７２．５°の高濃度濃縮コーヒーエキスを得た（収量４０３．４ｇ、固形分６０．４％、ｐＨ５．７４、クロロゲン酸類１６．６％、カフェイン５．９％）。濃縮液に４Ｎ塩酸約２９．９ｇを加え、ｐＨを４．５とした後、さらに水６．１ｇを加え、Ｂｘ６６．０゜（全液量３８１．１ｇ、水分含量４５．０％）とした。このものを室温下で攪拌しながら、一級９５％エタノール（日本アルコール販売、エタノール含量９２Ｗ／Ｗ％）５７１．７ｇを３０分かけて滴下し、さらに６０分間攪拌を続けた（最終の水／エタノール＝２９．２／７０．８）。その後、不溶物を、濾紙（Ｎｏ．２、１５０ｍｍ）にて吸引濾過し、濾液９１５．４ｇを得た。濾液をロータリーエバポレーターにて濃縮し、Ｂx５０゜の濃縮物４０７．６ｇ（本発明品７：固形分３９．８％、クロロゲン酸類１４．４％、カフェイン２．８％）を得た。

実施例８
５ＬカラムにＬ値５１．５に焙煎したコーヒー豆の粉砕物１０００ｇを充填し（カラム内径１４．５ｃｍ、長さ３１ｃｍ）、９５℃に加温した軟水を３７００ｇをカラム上部から送り込み、１時間静置後抽出液を抜き取り、抽出液（抽出液収量２５００ｇ、Ｂｘ１１．７゜）を得た。得られたコーヒーエキスは２０℃に冷却後、Ｎｏ．２６（２１０ｍｍ）に濾紙ケイソウ土５０ｇをプレコートしたヌッチェにて吸引濾過し、濾液２４５０gを得た。この抽出液に１０％水酸化ナトリウム水溶液５８gを加え、ｐＨを１０に調整した。この溶液を、合成吸着樹脂（ＳＰ−７０）６００ｍｌを充填したカラムにＳＶ＝２．５で通液してカフェインを吸着させた。得られた通過液はｐＨを酸性とするため、陽イオン交換樹脂（ＳＫ−１１６）２００ｍｌを充填したカラムに通液し（ナトリウムイオンも除かれる）、さらに水押して、脱カフェインコーヒー抽出液２７５０ｇ（Ｂｘ７．７゜、ｐＨ４．２、クロロゲン酸類２．２８％、カフェイン不検出）を得た。引き続き、ロータリーエバポレーターにて濃縮し、Ｂｘ２０゜の濃縮液１０５８ｇを得た（ｐＨ４．４、クロロゲン酸類５．９３％、カフェイン不検出）。引き続き、ミズカエースＮｏ６００（水澤化学工業（株））を１０５．８ｇ（Ｂｘ換算の固形分量の５０％）加え、２５℃にて３０分間攪拌した後、Ｎｏ．２６（２１０ｍｍ）に濾紙ケイソウ土５０ｇをプレコートしたヌッチェにて吸引濾過し、濾液１０１５g（Ｂｘ１７．４°）を得た。この濾液をロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、Ｂｘ５０°の濃縮物３５３．２ｇ（本発明品８：固形分３９．６％、クロロゲン酸類１５．２％、カフェイン不検出、ｐＨ４．５）を得た。

実施例９
実施例８において、陽イオン交換樹脂処理を行わない以外は実施例８と全く同様の操作を行い、Ｂｘ５０゜の濃縮物３６２．４ｇ（本発明品９：固形分４０．０％、クロロゲン酸類１４．９％、カフェイン不検出、ｐＨ１０．２）を得た。

実施例１０
５ＬカラムにＬ値５１．５に焙煎したコーヒー豆の粉砕物１０００ｇを充填し（カラム内径１４．５ｃｍ、長さ３１ｃｍ）、９５℃に加温した軟水を３７００ｇをカラム上部から送り込み、１時間静置後抽出液を抜き取り、抽出液（抽出液収量２５００ｇ、Ｂｘ１１．７゜）を得た。得られたコーヒーエキスは２０℃に冷却後、Ｎｏ．２６（２１０ｍｍ）に濾紙ケイソウ土５０ｇをプレコートしたヌッチェにて吸引濾過し、濾液２４５０gを得た。この抽出液を陽イオン交換樹脂（ＳＫ−１１６）１５００ｍｌを充填したカラムに通液してカフェインを除き、さらに水押して、脱カフェインコーヒー抽出液２８５５ｇ（Ｂｘ７．５゜、ｐＨ２．２、クロロゲン酸類２．３５％、カフェイン不検出）を得た。引き続き、ロータリーエバポレーターにて濃縮し、Ｂｘ２０°（ｐＨ２．２、クロロゲン酸類６．１％、カフェイン不検出）のコーヒーエキス１０７０ｇを得た。濃縮液に、ミズカエースＮｏ６００（水澤化学工業（株））を１０３．５ｇ（Ｂｘ換算の固形分量の５０％）加え、２５℃にて３０分間攪拌した後、Ｎｏ．２６（２１０ｍｍ）に濾紙ケイソウ土５０ｇをプレコートしたヌッチェにて吸引濾過し、濾液１０２０g（Ｂｘ１７．４°）を得た。この濾液をロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、Ｂｘ５０°の濃縮物３５８．６ｇ（本発明品１０：固形分４０．０％、クロロゲン酸類１５．４％、カフェイン不検出）を得た。

実施例１１
実施例１０において、陽イオン交換樹脂（ＳＫ−１１６）にて脱カフェインコーヒー抽出液（ｐＨ２．２）を１０％水酸化ナトリウム水溶液にてｐＨ１０．０に調製した以外は実施例９と全く同様の操作を行い、Ｂｘ５０゜の濃縮物３７０．５ｇ（本発明品１１：固形分４０．０％、クロロゲン酸類１５．１％、カフェイン不検出、ｐＨ１０．６）を得た。

本発明品３および６〜１１の固形分、クロロゲン酸類およびカフェイン分析値を表５に示す。

表５に示したとおり、コーヒー抽出物を高濃度濃縮の後、酸性条件下でエタノール水溶液にて抽出した後、Ｂｘ２０゜まで濃縮し、酸性白土処理した本発明品６およびコーヒー抽出物をＢｘ２０゜まで濃縮し、酸性白土処理した後、高濃度濃縮し、酸性条件下でエタノール水溶液にて抽出した濃縮物である本発明品７は本発明品３と比べて、クロロゲン酸類含量が高く、かつ、カフェイン含量が少なく、クロロゲン酸類が精製されていた。また、コーヒー豆抽出物をアルカリ条件下で合成吸着樹脂処理し、脱カフェインした後Ｂｘ２０゜まで濃縮し、酸性白土処理した本発明品８およびコーヒー豆抽出物を陽イオン交換樹脂処理し、脱カフェインした後Ｂｘ２０゜まで濃縮し、酸性白土処理した本発明品９は本発明品３と比べて、クロロゲン酸類含量が高く、かつ、カフェインに関しては全く含まれておらず、高純度のクロロゲン酸類が得られていた。また、アルカリ性での合成吸着剤処理による脱カフェイン処理の後、ｐＨ調整を行わずアルカリ性にて酸性白土処理を行った本発明品９はｐＨ調整を行い酸性で酸性白土処理を行った本発明品８と成分量はほぼ同様であった。陽イオン交換樹脂処理による脱カフェイン処理液（ｐＨ２．２）を酸性白土処理した本発明品９と、陽イオン交換樹脂処理による脱カフェイン処理液を水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１０に調整してから酸性白土処理を行った本発明品１１についても成分量はほぼ同様であった。

実施例１２
本発明品３または本発明品６〜１１のいずれか１品を水に０．２％添加し、１０名の良く訓練されたパネラーにより官能評価を行った。官能評価の結果を表６に示す。

表６に示したとおり、本発明品３、本発明品６〜１１はいずれも雑味が無く、すっきりしていた。したがって、本発明品の精製クロロゲン酸類は、さまざまな飲料、食品に雑味を与えずに、クロロゲン酸類の持つ有用な効果を与えるものと考えられる。

実施例１３
本発明品３または本発明品６〜１１のそれぞれを９０℃、１０分間加熱殺菌後１００ｍｌ透明容器に充填し、５℃暗所６ヶ月および５０℃暗所３ヶ月２条件にて保管し、経時的な沈殿の状態を観察した。結果を表７に示す。

表７に示した通り、コーヒー抽出物をＢｘ２０゜まで濃縮して酸性白土処理のみを行った本発明品３は、５０℃、１ヶ月または５℃３ヶ月の保存でわずかに沈殿が発生した。しかしながら、酸性白土処理をコーヒー抽出物を高濃度濃縮の後、酸性条件下でエタノール水溶液にて抽出した後、Ｂｘ２０゜まで濃縮し、酸性白土処理した本発明品６、コーヒー抽出物をＢｘ２０゜まで濃縮し、酸性白土処理した後、高濃度濃縮し、酸性条件下でエタノール水溶液にて抽出した濃縮物である本発明品７、コーヒー豆抽出物をアルカリ条件下で合成吸着樹脂処理し、脱カフェインした後Ｂｘ２０゜まで濃縮し、酸性白土処理した本発明品８およびコーヒー豆抽出物を陽イオン交換樹脂処理し、脱カフェインした後Ｂｘ２０゜まで濃縮し、酸性白土処理した本発明品１０は保存を行っても全く二次沈殿が発生せず、非常に安定であることが認められた。

一方、酸性白土処理をｐＨ１０のアルカリ性条件下にて行った本発明品９および本発明品１１は保存により二次沈殿が発生した。

Claims (7)

1. 焙煎したコーヒー豆の水抽出物を固形分濃度として屈折糖度（２０℃）Ｂｘ１０°〜Ｂx６０°に濃縮した後、屈折糖度（２０℃）Ｂｘ１０°〜Ｂx６０°にて酸性白土および／または活性白土と接触させることを特徴とする、精製クロロゲン酸類（但し、本発明でいうクロロゲン酸類としては、クロロゲン酸、カフェー酸、フェルラ酸、イソクロロゲン酸、ネオクロロゲン酸ならびにこれらの酸のナトリウム、カリウムの水溶性塩類を意味する。以下同じ。）の製造方法。
2. 焙煎したコーヒー豆の水抽出濃縮物と酸性白土および／または活性白土との接触処理をｐＨ２〜７の酸性条件下で行うことを特徴とする、請求項１に記載の精製クロロゲン酸類の製造方法。
3. 二次沈殿が発生しないことを特徴とする、請求項１または請求項２に記載の精製クロロゲン酸類の製造方法。
4. 焙煎したコーヒー豆の水抽出物が、高濃度濃縮の後、酸性条件下でエタノール水溶液またはエタノールにて抽出されたものであることを特徴とする、請求項１〜請求項３のいずれか１項に記載の精製クロロゲン酸類の製造方法。
5. 請求項１〜請求項３のいずれか１項に記載の方法により得られた精製クロロゲン酸類を高濃度濃縮後、酸性条件下、エタノール水溶液またはエタノールにて抽出することを特徴とする、精製クロロゲン酸類の製造方法。
6. 焙煎したコーヒー豆の水抽出物が中性からアルカリ条件下で合成吸着樹脂処理されたものであることを特徴とする、請求項１〜請求項３のいずれか１項に記載の精製クロロゲン酸類の製造方法。
7. 焙煎したコーヒー豆の水抽出物が陽イオン交換樹脂処理されたものであることを特徴とする、請求項１〜請求項３のいずれか１項に記載の精製クロロゲン酸類の製造方法。