JP2002522452A - 蛋白質キナーゼの調節剤３−メチリデニル−２−インドリノン - Google Patents

蛋白質キナーゼの調節剤３−メチリデニル−２−インドリノン

Info

Publication number
JP2002522452A
JP2002522452A JP2000563824A JP2000563824A JP2002522452A JP 2002522452 A JP2002522452 A JP 2002522452A JP 2000563824 A JP2000563824 A JP 2000563824A JP 2000563824 A JP2000563824 A JP 2000563824A JP 2002522452 A JP2002522452 A JP 2002522452A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
dihydroindol
group
hydrogen
indole
methoxybenzylidene
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
JP2000563824A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2002522452A5 (ja
Inventor
タン，ペン，チョー
サン，リー
ミラー，トッド・アンソニー
リャン，コンジン
トラン，エンゴク・マイ
ニュイエン，アン・ティー
ネマタラ，アサード
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sugen LLC
Original Assignee
Sugen LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sugen LLC filed Critical Sugen LLC
Publication of JP2002522452A publication Critical patent/JP2002522452A/ja
Publication of JP2002522452A5 publication Critical patent/JP2002522452A5/ja
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/32—Oxygen atoms
    • C07D209/34—Oxygen atoms in position 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Abstract

(57)【要約】 本発明は，蛋白質キナーゼの活性を調節し，このことにより蛋白質キナーゼに関連する細胞疾患，例えば癌の予防および治療に有用であると予測される，新規な３−メチリデニル−２−インドリノン化合物およびその生理学的に許容しうる塩およびプロドラッグに関する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】序 本発明は，一般に，有機化学，生化学，薬理学および医薬品に関する。より詳
細には，本発明は，蛋白質キナーゼ（"ＰＫ"）の活性を調節し，異常なＰＫ活性
に関連する疾患に対して有益な影響を及ぼすことが予測される，３−メチリデニ
ル−２−インドリノン誘導体，およびその生理学的に許容しうる塩およびプロド
ラッグに関する。
【０００２】発明の背景 以下は，背景情報としてのみ提供されるものであり，本発明に対する先行技術
であると認めるものではない。
【０００３】 ＰＫは，蛋白質のチロシン，セリンおよびトレオニン残基上のヒドロキシ基の
リン酸化を触媒する酵素である。この外観上は単純な活性の結果は圧倒的である
。細胞成長，分化および増殖，すなわち，細胞生命のほぼすべての観点が種々の
仕方でＰＫ活性に依存する。さらに，異常なＰＫ活性は，比較的生命を脅かさな
い疾患（例えば乾癬）から，非常に悪性の疾患（例えば神経膠細胞腫（脳癌））
までの範囲の疾患の宿主と関連づけられてきた。
【０００４】 ＰＫは，慣用的に２種類に分類することができる：蛋白質チロシンキナーゼ（
ＰＴＫ）およびセリン−トレオニンキナーゼ（ＳＴＫ）。
【０００５】 ＰＴＫ活性の主な観点は，成長因子レセプターへのその関与である。成長因子
レセプターは，細胞表面蛋白質である。成長因子リガンドが結合すると，成長因
子レセプターは活性型に変換され，これが細胞膜の内表面上の蛋白質と相互作用
する。これは，レセプターおよび他の蛋白質上のチロシン残基のリン酸化を引き
起こし，細胞内部で種々の細胞質シグナリング分子との複合体を形成し，次にこ
れは多くの細胞性応答，例えば，細胞***（増殖），細胞分化，細胞成長，細胞
外微細環境への代謝的効果の発現等を行う。さらに詳しい議論については，Ｓｃ
ｈｌｅｓｓｉｎｇｅｒ ａｎｄ Ｕｌｌｒｉｃｈ，Ｎｅｕｒｏｎ，９：３０３−
３９１（１９９２）（本明細書において完全に記載されているように，図面を含
め本明細書の一部としてここに引用する）を参照されたい。
【０００６】 ＰＴＫ活性を有する成長因子レセプターは，レセプターチロシンキナーゼ（"
ＲＴＫ"）として知られている。これらは，多様な生物学的活性を有する膜貫通
レセプターの大きなファミリーを含む。現在のところ，ＲＴＫの少なくとも１９
個の異なるサブファミリーが同定されている。これらのサブファミリーの例は，
"ＨＥＲ"ＲＴＫと称されるサブファミリーであり，これにはＥＧＦＲ（上皮成長
因子レセプター），ＨＥＲ２，ＨＥＲ３およびＨＥＲ４が含まれる。これらのＲ
ＴＫは，細胞外グリコシル化リガンド結合ドメイン，膜貫通ドメイン，および蛋
白質上のチロシン残基をリン酸化しうる細胞内細胞質触媒ドメインから構成され
る。
【０００７】 別のＲＴＫサブファミリーは，インスリンレセプター（ＩＲ），インスリン様
成長因子Ｉレセプター（ＩＧＦ−１Ｒ）およびインスリンレセプター関連レセプ
ター（ＩＲＲ）を含む。ＩＲおよびＩＧＦ−１Ｒはインスリン，ＩＧＦ−Ｉおよ
びＩＧＦ−ＩＩと相互作用して，２つの完全に細胞外グリコシル化されたαサブ
ユニットと２つのβサブユニットのヘテロ４量体を形成し，これは細胞膜を横切
り，チロシンキナーゼドメインを含有する。
【０００８】 第３のＲＴＫサブファミリーは，血小板由来成長因子レセプター（"ＰＤＧＦ
Ｒ"）群として表され，これにはＰＤＧＦＲα，ＰＤＧＦＲβ，ＣＳＦＩＲ，ｃ
−ｋｉｔおよびｃ−ｆｍｓが含まれる。これらのレセプターは，可変数のイムノ
グロビン様ループおよび細胞内ドメインからなるグリコシル化された細胞外ドメ
インから構成され，ここでチロシンキナーゼドメインは関連のないアミノ酸配列
により分断されている。
【０００９】 別の群は，そのＰＤＧＦＲサブファミリーとの類似性のため，しばしばＰＤＧ
ＦＲサブファミリーに包摂される，胎児肝キナーゼ（"ｆｌｋ"）レセプターサブ
ファミリーである。この群は，キナーゼ挿入ドメイン−レセプター胎児肝キナー
ゼ−１（ＫＤＲ／ＦＬＫ−１），ｆｌｋ−１Ｒ，ｆｌｋ−４およびｆｍｓ様チロ
シンキナーゼ１（ｆｌｔ−１）からなると考えられている。
【００１０】 チロシンキナーゼ成長因子レセプターファミリーの別の１つのメンバーは，繊
維芽細胞成長因子（"ＦＧＦ"）レセプター群である。この群は，４つのレセプタ
ー，ＦＧＦＲ１−４，および７つのリガンド，ＦＧＦ１−７から構成される。ま
だあまり明確にされていないが，ＦＧＦレセプターは，ＰＤＧＦレセプターと同
様に，可変数のイムノグロビン様ループおよび細胞内ドメインを含有するグリコ
シル化された細胞外ドメインから構成されるようであり，ここでチロシンキナー
ゼ配列は関係のないアミノ酸配列の領域により分断されている。
【００１１】 チロシンキナーゼ成長因子レセプターファミリーのさらに別のメンバーは，血
管内皮成長因子（ＶＥＧＦ"）レセプターサブグループである。ＶＥＧＦは，Ｐ
ＤＧＦに類似するダイマーの糖蛋白質であるが，異なる生物学的機能およびイン
ビボでの標的細胞特異性を有する。特に，ＶＥＧＦは，現在のところ，血管新生
および脈管形成において本質的な役割を果たすと考えられている。
【００１２】 既知のＲＴＫサブファミリーのより完全なリストは，Ｐｌｏｗｍａｎ ｅｔ
ａｌ．，ＤＮ＆Ｐ，７（６）：３３４−３３９（１９９４）（本明細書において
完全に記載されているように，図面を含め本明細書の一部としてここに引用する
）に記載されている。
【００１３】 ＲＴＫに加え，"非レセプターチロシンキナーゼ"または"細胞性チロシンキナ
ーゼ"と称される，完全に細胞内のＰＴＫのファミリーが存在する。本明細書に
おいては，"ＣＴＫ"と略されるこの後者の呼称を使用する。ＣＴＫは細胞外およ
び膜貫通ドメインを含有しない。現在のところ，１１個のサブファミリー（Ｓｒ
ｃ，Ｆｒｋ，Ｂｔｋ，Ｃｓｋ，Ａｂｌ，Ｚａｐ７０，Ｆｅｓ，Ｆｐｓ，Ｆａｋ，
ＪａｋおよびＡｃｋ）の２４個を越えるＣＴＫが同定されている。Ｓｒｃサブフ
ァミリーは，これまでのところ，ＣＴＫのもっとも大きい群であるようであり，
Ｓｒｃ，Ｙｅｓ，Ｆｙｎ，Ｌｙｎ，Ｌｃｋ，Ｂｌｋ，Ｈｃｋ，ＦｇｒおよびＹｒ
ｋを含む。ＣＴＫのより詳細な議論については，Ｂｏｌｅｎ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ
，８：２０２３−２０３１（１９９３）（本明細書において完全に記載されてい
るように，図面を含め本明細書の一部としてここに引用する）を参照されたい。
【００１４】 セリン／トレオニンキナーゼもしくはＳＴＫは，ＣＴＫと同様に，主として細
胞内にあるが，ＳＴＫタイプのレセプターキナーゼは少ない。ＳＴＫはもっとも
一般的なサイトゾルキナーゼである。すなわち，細胞質オルガネラおよび細胞骨
格以外の，細胞質のその部分でその機能を行うキナーゼである。サイトゾルは，
細胞の中間代謝および生合成活性のほとんどが生ずる細胞中の領域である。例え
ば，蛋白質がリボソーム上で合成されるのはサイトゾル内である。
【００１５】 ＲＴＫ，ＣＴＫおよびＳＴＫはすべて，病原性状態，特に癌を含む状態の宿主
であることが示唆されてきた。ＰＴＫと関連づけられてきた他の病原性状態には
，限定されるものではないが，乾癬，肝硬変，糖尿病，脈管形成，再狭窄，眼性
疾患，慢性関節リウマチおよび他の炎症性疾患，自己免疫疾患等の免疫疾患，ア
テローム性動脈硬化等の心血管疾患，および種々の腎臓疾患が含まれる。
【００１６】 癌に関しては，腫瘍の発達を推進する過剰な細胞増殖を説明する主要な仮説の
２つは，ＰＫにより制御されることが知られている機能に関連する。すなわち，
悪性細胞成長は細胞***および／または分化を調節するメカニズムの故障に起因
することが示唆されている。多数のプロトオンコジンの蛋白質産物は，細胞成長
および分化を制御するシグナル伝達経路に関与することが示されている。これら
のプロトオンコジンの蛋白質産物には，上で議論した，細胞外成長因子，膜貫通
成長因子ＰＴＫレセプター（ＲＴＫ），細胞質ＰＴＫ（ＣＴＫ）およびサイトゾ
ルＳＴＫが含まれる。
【００１７】 ＰＫに関連する細胞活性と広範な種類のヒト疾患との間の見かけ上の連結の観
点から，ＰＫ活性を調節する方法を同定しようとする試みに多大な努力が払われ
ていることは驚くべきことではない。これらのいくつかには，実際の細胞プロセ
スに関与する分子を模倣する大きな分子を用いるバイオミメティック方法が含ま
れる（例えば，変異体リガンド（米国特許４，９６６，８４９）；可溶性レセプ
ターおよび抗体（ＷＯ９４／１０２０２，Ｋｅｎｄａｌｌ ａｎｄ Ｔｈｏｍａ
ｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ'ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９０：１０７０５−０９（１
９９４），Ｋｉｍ，ｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：８４１−８４４（１９
９３））；ＲＮＡリガンド（Ｊｅｌｉｎｅｋ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ，３３：１０４５０−５６）；Ｔａｋａｎｏ，ｅｔａｌ．，Ｍｏｌ．Ｂ
ｉｏ．Ｃｅｌｌ４：３５８Ａ（１９９３）；Ｋｉｎｓｅｌｌａ，ｅｔａｌ．，Ｅ
ｘｐ．ＣｅｌｌＲｅｓ．１９９：５６６−６２（１９９２）；Ｗｒｉｇｈｔ，ｅ
ｔａｌ．，Ｊ．ＣｅｌｌｕｌａｒＰｈｙｓ．，１５２：４４８−５７）およびチ
ロシンキナーゼ阻害剤（ＷＯ９４／０３４２７；ＷＯ９２／２１６６０；ＷＯ９
１／１５４９５；ＷＯ９４／１４８０８；米国特許５，３３０，９９２；Ｍａｒ
ｉａｎｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ
．，３５：２２６８（１９９４））。
【００１８】 上述に加え，ＰＫ阻害剤として作用する小分子を同定する試みがなされている
。例えば，ビス単環，二環およびヘテロ環アリール化合物（ＰＣＴ ＷＯ９２／
２０６４２），ビニレンアザインドール誘導体（ＰＣＴ ＷＯ９４／１４８０８
）および１−シクロプロピル−４−ピリジルキノロン類（米国特許５，３３０，
９９２）が，チロシンキナーゼ阻害剤として記載されている。スチリル化合物（
米国特許５，２１７，９９９），スチリル置換ピリジル化合物（米国特許５，３
０２，６０６），キナゾリン誘導体（欧州特許出願０５６６２６６Ａｌ），セレ
ナインドール類およびセレニド類（ＰＣＴ ＷＯ９４／０３４２７），三環ポリ
ヒドロキシル化合物（ＰＣＴ ＷＯ９２／２１６６０）およびベンジルホスホン
酸化合物（ＰＣＴ ＷＯ９１／１５４９５）はすべて，癌の治療において有用な
ＰＴＫ阻害剤として記載されている。
【００１９】発明の概要 ＰＫ活性を調節し，したがって，異常なＰＫ活性が関与する疾患の治療および
予防に有用であると予測される小さい有機分子を同定しようとする我々自身の努
力により，ＰＫ調節能力を示し，したがって異常なＰＫ活性に関連する疾患に対
して有益な影響を有すると予測される，３−メチリデニル−２−インドリノン誘
導体のファミリーおよびそのプロドラッグおよび生理学的に許容しうる塩が発見
された。これらの化合物が本発明の主題である。
【００２０】 すなわち，本発明は一般に，レセプター蛋白質チロシンキナーゼ（ＲＴＫ），
非レセプター蛋白質チロシンキナーゼ（ＣＴＫ）およびセリン／トレオニン蛋白
質キナーゼ（ＳＴＫ）の活性を調節する，３−メチリデニル−２−インドリノン
およびそのプロドラッグおよび生理学的に許容しうる塩に関する。さらに，本発
明は，開示される化合物およびその生理学的に許容しうる塩およびプロドラッグ
の医薬組成物の製造，およびＰＫ誘導性疾患（例えば，限定されないが，癌，糖
尿病，肝硬変，アテローム性動脈硬化症等の心血管疾患，脈管形成，自己免疫疾
患などの免疫疾患，および腎臓疾患）の治療および予防におけるその使用に関す
る。
【００２１】 "２−インドリノン"，"インドリン−２−オン"および"２−オキシインドール"
との用語は，本明細書において互換的に用いられ，次の化学構造：
【化１５】 ［式中，Ａは炭素または窒素である］ を有する分子を表す。
【００２２】 "３−メチリデニル−２−インドリノン"とは，化学構造：
【化１６】 ［式中，Ａは炭素または窒素でありうる］ を有する分子を表す。
【００２３】 "医薬組成物"とは，本明細書に記載される１またはそれ以上の化合物，または
その生理学的に許容しうる塩またはプロドラッグと，他の化学成分，例えば生理
学的に許容しうる担体および賦形剤との混合物を表す。医薬組成物の目的は，化
合物の生物への投与を容易にすることである。
【００２４】 "プロドラッグ"とは，インビボで親薬剤に転換される薬剤を表す。プロドラッ
グは，場合により，親薬剤より投与が容易であるかもしれないため，しばしば有
用である。例えば，プロドラッグは経口投与により生物学的に利用可能であるが
，親薬剤はそうではないかもしれない。プロドラッグはまた，親薬剤よりも医薬
組成物中で改良された溶解性を有するかもしれない。プロドラッグの例は，限定
されるものではないが，エステル（"プロドラッグ"）として投与されて，水溶性
であることが移動に不利である細胞膜の通過を容易にし，次に，水溶性であるこ
とが有利である細胞内に入った後，代謝的に加水分解されて活性種のカルボン酸
となるような，本発明の化合物であろう。
【００２５】 プロドラッグのさらに別の例は，短いポリペプチドであろう。例えば，限定す
るものではないが，末端アミノ基を介して本発明の化合物のカルボキシ基に結合
している２−１０アミノ酸のポリペプチドは，インビボで加水分解または代謝さ
れて活性分子を放出する。
【００２６】 本明細書において用いる場合，"生理学的に許容しうる担体"または"薬学的に
許容しうる担体"とは，生物に顕著な刺激をもたらさず，投与される化合物の生
物学的活性および特性を排除しない担体または希釈剤を表す。
【００２７】 "担体"とは，所望の化合物の細胞または組織内への取り込みを容易にする化学
化合物を表す。担体の例には，限定されないが，ジメチルスルホキシド（ＤＭＳ
Ｏ）がある。
【００２８】 "希釈剤"とは，所望の化合物を溶解または分散させ，このことにより化合物の
濃度を化合物単独の場合よりも低下させる化学化合物，通常は液体を表す。
【００２９】 "賦形剤"とは，医薬組成物に加えて化合物の投与をさらに容易にする不活性の
物質を表す。賦形剤の例には，限定されないが，炭酸カルシウム，リン酸カルシ
ウム，種々の糖および各種のでんぷん，セルロース誘導体，ゼラチン，植物油，
およびポリエチレングリコールがある。
【００３０】 １．化学 Ａ．一般的な構造的特徴 １つの態様においては，本発明は次の化学構造１：
【化１７】 ［式中， Ａは，炭素および窒素からなる群より選択され； Ｑは，
【化１８】 からなる群より選択され； 結合ａおよびｂは，点線で表されるように，単結合であっても二重結合であって
もよいが，ただし，本発明の任意の１つの化合物において，ａおよびｂは両方と
も単結合であるかまたは両方とも二重結合であり； ａおよびｂが二重結合であるとき，ｒは１であり； ａおよびｂが単結合であるとき，ｒは２であり； Ｒ0は，水素，アルキル，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19および−Ｃ（Ｏ）Ｒ19からなる群よ
り選択され； Ｒ1は，水素，アルキル，アリール，アルコキシ，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−
（ＣＨ2）nＯＣ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＮＲ19および（ＣＨ2）nＲ20からなる群
より選択され， ここで，Ｒ19は，水素，アルキル，アルケニル，アルキニル，シクロアルキルお
よびアリールからなる群より選択され； ｎは，１，２，３または４であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，ハロ，−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ21Ｒ22；−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ21Ｒ22 ；−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＳＯ2Ｒ21，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−ＮＲ21Ｒ22，および環中
に少なくとも１つの窒素原子を含むヘテロ脂環式基であって環は窒素原子を介し
て隣接するＣＨ2基に結合している，からなる群より選択され； Ｒ2は，水素，アルキル，トリハロメチル，アリール，ヘテロアリール，ヘテロ
脂環式，アルコキシ，ハロ，−（ＣＨ2）nＲ20，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22，−Ｃ（Ｏ
）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ
（Ｏ）（ＣＨ2）nＲ20，−ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝ＣＲ23からなる群より選択さ
れ， ここで，Ｒ21およびＲ22は，水素，アルキル，アルケニル，アルキニル，シクロ
アルキル，アリール，ヘテロアリールおよびヘテロ脂環式からなる群より独立し
て選択され； Ｒ23は，アルキル，アルケニル，アルキニル，シクロアルキル，アリールおよび
ヘテロアリールからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，アルキル，トリハロメチル，アルコキシ，アリール，アリールオ
キシ，ヘテロアリール，ヘテロ脂環式，ヒドロキシ，ハロ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22
，−ＮＨＳＯ2Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−ＮＲ21Ｒ22および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ2 4 からなる群より選択され， ここで，Ｒ24は，アルキル，アルケニル，アルキニル，アリール，ヘテロアリー
ルおよびヘテロ脂環式からなる群より選択され； Ｒ4は，水素，アルキル，アルコキシおよびハロからなる群より選択され； Ｒ5は，水素，アルキル，シクロアルキル，ハロ，アリールおよびヘテロアリー
ルからなる群より選択され； Ｒ6は，水素，アルキル，アルコキシ，ハロ，シクロアルキル，アリールからな
る群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造：
【化１９】 ［式中，ｙおよびｙ'は，独立して，水素，アルキルおよびアリールからなる群
より選択される］ を有するヘテロ脂環式基であり； Ｒ7は，ＯＲ18であり，ここでＲ18は，アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20からなる群
より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって構造：
【化２０】 を有するヘテロ脂環式基であり； Ｒ8は，水素，アルキル，シクロアルキル，アルコキシ，ハロ，アリール，ヘテ
ロアリールからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造：
【化２１】 を有するヘテロ脂環式環であり； Ｒ9は，水素，アルキル，アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ21Ｒ22からなる群より
選択され； Ｒ10は，アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され； Ｒ11は，水素，アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され； Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ13は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または，そ
うでない場合には水素およびアルキルからなる群より選択される基であり； Ｒ14は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または，そ
うでない場合には，水素，アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択
される基であり； Ｒ15は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または，そ
うでない場合には水素であり； ただし，本発明の任意の１つの化合物において，Ｒ13，Ｒ14またはＲ15のいずれ
か１つのみが，Ｑを分子の残りに結合する結合であり； Ｒ16およびＲ17は，ａおよびｂが単結合であるとき，水素，アルキルおよびアリ
ールからなる群より独立して選択され，および，ａおよびｂが二重結合であると
き，Ｒ16は水素であり，Ｒ17は存在しない］ を有する２−インドリノン類，およびその生理学的に許容しうる塩およびプロド
ラッグに関する。
【００３１】 本明細書において用いる場合，"アルキル"との用語は，飽和脂肪族炭化水素を
表し，直鎖および分枝鎖基を含む。好ましくは，アルキル基は１−２０個の炭素
原子を含む。本明細書において数値範囲，例えば"１−２０"と記載される場合，
これはその基（この場合はアルキル基）が，１個の炭素原子，２個の炭素原子，
３個の炭素原子，以下同様に，２０個までの炭素原子を含んでいてもよいことを
意味する。より好ましくは，これは１−１０個の炭素原子を有する中程度のサイ
ズのアルキルである。最も好ましくは，これは１−４個の炭素原子を有する低級
アルキルである。アルキル基は，置換されていてもされていなくてもよい。置換
されている場合には，置換基は，好ましくは，ハロ；ヒドロキシ；非置換低級ア
ルコキシ；１またはそれ以上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非
置換低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリール；１またはそれ以
上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任
意に置換されていてもよいアリールオキシ；環中に１−３個の窒素原子を有する
６員のヘテロアリールであって，環中の炭素は，１またはそれ以上のハロ，ヒド
ロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置換されて
いてもよい；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個のヘテ
ロ原子を有する５員のヘテロアリールであって，基の炭素原子は１またはそれ以
上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任
意に置換されていてもよい；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される
１−３個のヘテロ原子を有する５員または６員のヘテロ脂環式基であって，基中
の炭素および窒素（存在する場合には）原子は，１またはそれ以上のハロ，ヒド
ロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置換されて
いてもよい；メルカプト；（非置換低級アルキル）チオ；１またはそれ以上のハ
ロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置
換されていてもよいアリールチオ；シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミ
ル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，
Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，Ｒ25Ｓ（Ｏ）
−，Ｒ25Ｓ（Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ25，Ｒ25Ｃ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ25
Ｒ26（ここで，Ｒ25およびＲ26は，独立して，水素，非置換低級アルキル，トリ
ハロメチル，非置換（Ｃ3−Ｃ6）シクロアルキル，非置換低級アルケニル，非置
換低級アルキニル，および１またはそれ以上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級ア
ルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より独立して選択される），からなる群より独立して選択される１また
はそれ以上の基で任意に置換されていてもよい。
【００３２】 "シクロアルキル"基は，３−８員の全炭素単環，全炭素の５員／６員または６
員／６員縮合二環式環または多環縮合環（"縮合"環系とは，系の各環が系の別の
環の互いに隣接する炭素原子対を共有することを意味する）基を表し，ここで，
環の１またはそれ以上は１またはそれ以上の二重結合を含んでいてもよいが，い
ずれの環も完全に共役したパイ電子系を有しない。シクロアルキル基の例として
は，シクロプロパン，シクロブタン，シクロペンタン，シクロペンテン，シクロ
ヘキサン，シクロヘキサジエン，アダマンタン，シクロヘプタンおよびシクロヘ
プタトリエンが挙げられるが，これらに限定されない。シクロアルキル基は置換
されていてもされていなくてもよい，置換されている場合には，置換基は，好ま
しくは，非置換低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，非置換低
級アルコキシ，１またはそれ以上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまた
は非置換低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリール，１またはそ
れ以上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基
で任意に置換されていてもよいアリールオキシ；１−３個の窒素原子を環中に有
する６員のヘテロアリールであって，環中の炭素は１またはそれ以上のハロ，ヒ
ドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置換され
ていてもよい；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個のヘ
テロ原子を有する５員のヘテロアリールであって，基の炭素原子は１またはそれ
以上のハロ，ヒドロキシ／非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で
任意に置換されていてもよい；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択され
る１−３個のヘテロ原子を有する５員または６員のヘテロ脂環式基であって，基
中の炭素および窒素（存在する場合には）原子は，１またはそれ以上のハロ，ヒ
ドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置換され
ていてもよい；メルカプト，（非置換低級アルキル）チオ，１またはそれ以上の
ハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に
置換されていてもよいアリールチオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバ
ミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド
，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，Ｒ25Ｓ（Ｏ
）−，Ｒ25Ｓ（Ｏ）2，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ25，Ｒ25Ｃ（Ｏ）Ｏ−および−ＮＲ25Ｒ2 6 （上で定義したとおりである）からなる群より独立して選択される１またはそ
れ以上の基である。
【００３３】 "アルケニル"基は，少なくとも２つの炭素原子および少なくとも１つの炭素−
炭素二重結合からなる，本明細書において定義されるアルキル基である。
【００３４】 "アルキニル"基は，少なくとも２つの炭素原子および少なくとも１つの炭素−
炭素三重結合からなる，本明細書において定義されるアルキル基である。
【００３５】 "アリール"基は，完全に共役したパイ電子系を有する，全炭素単環または縮合
多環（すなわち，隣接する炭素原子対を共有する環）基を表す。アリール基の例
としては，フェニル，ナフタレニルおよびアントラセニルが挙げられるが，これ
らに限定されない。アリール基は置換されていてもされていなくてもよい。置換
されている場合には，置換基は，好ましくは，非置換低級アルキル，トリハロア
ルキル，ハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルコキシ，メルカプト，（非置換低級
アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミ
ル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニト
ロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，Ｒ25Ｓ（Ｏ）−，Ｒ25Ｓ（Ｏ） 2 −，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ25，Ｒ25Ｃ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ25Ｒ26（Ｒ25および
Ｒ26は上で定義したとおりである），からなる群より独立して選択される１また
はそれ以上の基である。
【００３６】 本明細書において用いる場合，"ヘテロアリール"基は，環内に窒素，酸素およ
びイオウからなる群より選択される１またはそれ以上の原子を含み，かつ，完全
に共役したパイ電子系を有する単環式または縮合環（すなわち，隣接する１対の
原子を共有する複数の環）基を表す。ヘテロアリール基の例としては，ピロール
，フラン，チオフェン，イミダゾール，オキサゾール，チアゾール，ピラゾール
，ピリジン，ピリミジン，キノリン，イソキノリン，プリンおよびカルバゾール
が挙げられるが，これらに限定されない。ヘテロアリール基は，置換されていて
もされていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，非置換
低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルコキシ，
メルカプト，（非置換低級アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−
カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−
アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，Ｒ25 Ｓ（Ｏ）−，Ｒ25Ｓ（Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ25，Ｒ25Ｃ（Ｏ）Ｏ−，および
−ＮＲ25Ｒ26（Ｒ25およびＲ26は上で定義したとおりである），からなる群より
独立して選択される１またはそれ以上の基である。
【００３７】 "ヘテロ脂環式"基は，環中に窒素，酸素およびイオウからなる群より選択され
る１またはそれ以上の原子を有する単環式または縮合環基を表す。環はまた，１
またはそれ以上の二重結合を有していてもよい。しかし，環は完全に共役したパ
イ電子系を有しない。ヘテロ脂環式環は，置換されていてもされていなくてもよ
い。置換されている場合，置換基は，好ましくは，非置換低級アルキル，トリハ
ロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルコキシ，メルカプト，（非置換
低級アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カル
バミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，
ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，Ｒ25Ｓ（Ｏ）−，Ｒ25Ｓ（
Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ25，Ｒ25Ｃ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ25Ｒ26（Ｒ25お
よびＲ26は上で定義したとおりである），からなる群より独立して選択される１
またはそれ以上の基である。
【００３８】 "ヒドロキシ"基は−ＯＨ基を表す。
【００３９】 "アルコキシ"基は，−Ｏ−（非置換アルキル）および−Ｏ−（非置換シクロア
ルキル）基の両方を表す。
【００４０】 "アリールオキシ"基は，本明細書において定義される−Ｏ−アリールおよび−
Ｏ−ヘテロアリール基の両方を表す。
【００４１】 "メルカプト"基は−ＳＨ基を表す。
【００４２】 "アルキルチオ"基は，−Ｓ−（非置換アルキル）および−Ｓ−（非置換シクロ
アルキル）基の両方を表す。
【００４３】 "アリールチオ"基は，本明細書において定義される−Ｓ−アリールおよび−Ｓ
−ヘテロアリール基の両方を表す。
【００４４】 "アシル"基は，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ"基を表し，ここで，Ｒ"は，水素，非置換低級
アルキル，トリハロメチル，非置換シクロアルキル，１またはそれ以上の非置換
低級アルキル，トリハロメチル，非置換低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ25Ｒ 26 基で任意に置換されていてもよいアリール，１またはそれ以上の非置換低級ア
ルキル，トリハロアルキル，非置換低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ25Ｒ26基
で任意に置換されていてもよいヘテロアリール（環炭素を介して結合），および
１またはそれ以上の非置換低級アルキル，トリハロアルキル，非置換低級アルコ
キシ，ハロおよび−ＮＲ25Ｒ26基で任意に置換されていてもよいヘテロ脂環式基
（環炭素を介して結合）からなる群より選択される。
【００４５】 "アルデヒド"基は，Ｒ"が水素であるアシル基を表す。
【００４６】 "チオアシル"基は，−Ｃ（Ｓ）−Ｒ"基を表し，ここで，Ｒ"は本明細書におい
て定義されるとおりである。
【００４７】 "エステル"基は，−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ"基を表し，ここでＲ"は本明細書において
定義されるとおりであるが，ただしＲ"は水素ではありえない。
【００４８】 "アセチル"基は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3基を表す。
【００４９】 "ハロ"基は，フッ素，塩素，臭素またはヨウ素を表す。
【００５０】 "トリハロメチル"基は，−ＣＸ3基を表し，ここで，Ｘは本明細書において定
義されるハロ基である。
【００５１】 "トリハロメタンスルホニル"基は，Ｘ3ＣＳ（＝Ｏ）2−基を表し，ここで，Ｘ
は上で定義したとおりである。
【００５２】 "シアノ"基は−Ｃ≡Ｎ基を表す。
【００５３】 "メチレンジオキシ"基は，−ＯＣＨ2Ｏ−基を表し，ここで２つの酸素原子は
隣接する炭素原子に結合している。
【００５４】 "エチレンジオキシ"基は，−ＯＣＨ2ＣＨ2Ｏ−を表し，ここで，２つの酸素原
子は隣接する炭素原子に結合している。
【００５５】 "Ｏ−カルバミル"基は，−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ25Ｒ26基を表し，ここでＲ25および
Ｒ26は本明細書において定義されるとおりである。
【００５６】 "Ｎ−カルバミル"基は，Ｒ25ＯＣ（Ｏ）ＮＲ26−基を表し，ここでＲ25および
Ｒ26は本明細書において定義されるとおりである。
【００５７】 "Ｏ−チオカルバミル"基は，−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ25Ｒ26基を表し，ここでＲ25お
よびＲ26は本明細書において定義されるとおりである。
【００５８】 "Ｎ−チオカルバミル"基は，Ｒ25ＯＣ（Ｓ）ＮＲ26−基を表し，ここでＲ25お
よびＲ26は本明細書において定義されるとおりである。
【００５９】 "アミノ"基は，−ＮＲ25Ｒ26基を表し，ここでＲ25およびＲ26はいずれも水素
である。
【００６０】 "Ｃ−アミド"基は，−Ｃ（Ｏ）ＮＲ25Ｒ26基を表し，ここでＲ25およびＲ26は
本明細書において定義されるとおりである。
【００６１】 "Ｎ−アミド"基は，Ｒ25Ｃ（Ｏ）ＮＲ26−基を表し，ここでＲ25およびＲ26は
本明細書において定義されるとおりである。
【００６２】 "ニトロ"基は−ＮＯ2基を表す。
【００６３】 Ｂ．好ましい構造的特徴 本発明の現在好ましい観点は，Ｑが
【化２２】 である化合物である。
【００６４】 本発明の別の現在好ましい観点は，Ｑが
【化２３】 である化合物であり， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，低級
アルコキシ，−ＮＲ21Ｒ22，−（ＣＨ2）nＲ20および−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19から
なる群より選択され； Ｒ3は，水素，ヒドロキシ，ハロ，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル），−ＮＨ
ＳＯ2Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ24，トリハロメチル，および１またはそれ以上の
低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択さ
れ； Ｒ4は，水素であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択され； Ｒ21およびＲ22は，水素および低級アルキルからなる群より独立して選択され；
および， Ｒ24は，水素および低級アルキルからなる群より選択される。
【００６５】 同様に，現在好ましい本発明の態様は，Ｑが
【化２４】 である化合物であり， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，低級
アルコキシ，−ＮＲ21Ｒ22，−（ＣＨ2）nＲ20および−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19から
なる群より選択され； Ｒ3は，水素，ヒドロキシ，ハロ，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル），−ＮＨ
ＳＯ2Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ24，トリハロメチル，および１またはそれ以上の
低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択さ
れ； Ｒ4は，水素であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択され； Ｒ21およびＲ22は，水素および低級アルキルからなる群より独立して選択され；
Ｒ24は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ5は，水素，低級アルキル，ハロ，５員環ヘテロアリール，および低級アルキ
ル，ハロ，ヒドロキシ，−ＮＲ21Ｒ22および低級アルコキシからなる群より選択
される１またはそれ以上の基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群
より選択され； Ｒ6は，水素，低級アルキル，３−７員のシクロアルキル，低級アルコキシ，ハ
ロ，および低級アルキル，ハロ，ヒドロキシ，−ＮＲ21Ｒ22および低級アルコキ
シからなる群より独立して選択される１またはそれ以上の基で任意に置換されて
いてもよいアリールからなる群より選択され，または，Ｒ18と一緒になって，構
造：
【化２５】 ［式中，ｙおよびｙ'は，両方とも水素であるかまたは両方とも低級アルキルで
ある］ を有する基であり； Ｒ7は，−ＯＲ18であり，ここで，Ｒ18は，低級アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20か
らなる群より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって，構造：
【化２６】 を有する基であり； Ｒ8は，水素，低級アルキル，３−６員環のシクロアルキル，低級アルコキシ，
ハロ；低級アルキル，低級アルコキシ，ハロ，−ＮＲ21Ｒ22および−ＮＨＣ（Ｏ
）（低級アルキル）からなる群より選択される１またはそれ以上の基で任意に置
換されていてもよいアリール；環中に１−３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロ
アリール；および環中に１−３個のヘテロ原子を有する６員のヘテロアリールか
らなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造：
【化２７】 を有する基であり； Ｒ9は，水素，低級アルキルヒドロキシ，低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ21
Ｒ22からなる群より選択される。
【００６６】 さらに別の現在好ましい本発明の観点は，Ｑが
【化２８】 である化合物であり， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，低級
アルコキシ，−ＮＲ21Ｒ22，−（ＣＨ2）nＲ20および−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19から
なる群より選択され； Ｒ3は，水素，ヒドロキシ，ハロ，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル），−ＮＨ
ＳＯ2Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ24，トリハロメチル，および１またはそれ以上の
低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択さ
れ； Ｒ4は，水素であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択され； Ｒ21およびＲ22は，水素および低級アルキルからなる群より独立して選択され；
Ｒ24は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ5は，水素，低級アルキル，チエン−２−イル，チエン−３−イル，および１
またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールから
なる群より選択され； Ｒ6は，水素，低級アルキル，５員または６員のシクロアルキル，１またはそれ
以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より
選択され，またはＲ18と一緒になって，構造：
【化２９】 ［式中，ｙおよびｙ'は，両方とも水素であるかまたは両方とも低級アルキルで
ある］ を有する基であり； Ｒ7は，−ＯＲ18であり，ここでＲ18は，低級アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20から
なる群より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって，構造：
【化３０】 を有する基であり； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択され； Ｒ8は，水素，低級アルキル，５員または６員環のシクロアルキル，低級アルコ
キシ，−ＮＨＣ（Ｏ）（低級アルキル）基で任意に置換されていてもよいアリー
ル，チエン−２−イル，チエン−３−イル，ピリジン−２−イル，ピリジン−３
−イルからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造：
【化３１】 を有する基であり； Ｒ9は，水素および低級アルキルからなる群より選択される。
【００６７】 さらに別の現在好ましい本発明の観点は，Ｑが
【化３２】 である化合物である。
【００６８】 この化合物の現在好ましい観点においては，Ｑは
【化３３】 であり， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および
−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，および１またはそれ以上
の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択
され；および Ｒ4は水素である。
【００６９】 同様に，Ｑが
【化３４】 である化合物において，本発明の現在好ましい観点においては， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および
−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，および１またはそれ以上
の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択
され； Ｒ4は，水素であり； Ｒ10は，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され； Ｒ11は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され；
Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２または３であり；および Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択される。
【００７０】 Ｑが
【化３５】 である化合物において，さらに別の本発明の現在好ましい観点においては， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および
−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，および１またはそれ以上
の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択
され； Ｒ4は，水素であり； Ｒ10は，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル）からなる群より選択
され； Ｒ11は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され；
Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２であり；および， Ｒ20は，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−１−イル，ピペリジン−１−イル，ピペ
ラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−Ｎ（低級アルキル）2からな
る群より選択される。
【００７１】 また本発明の現在好ましい観点においては，Ｑは
【化３６】 であり， Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され；および， Ｒ4は，水素である。
【００７２】 本発明の現在好ましい観点においては，Ｑが
【化３７】 である化合物において， ａおよびｂは両方とも単結合であり； ｒは２であり； Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され； Ｒ4は水素であり； Ｒ13は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している共有結合であり； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
Ｒ15は，水素であり；および Ｒ16およびＲ17は，水素および低級アルキルからなる群より独立して選択される
。
【００７３】 直上の節に示される置換基を有する化合物において，Ｒ20が−ＮＲ21Ｒ22であ
り，ここで，Ｒ21およびＲ22が，水素および低級アルキルからなる群より独立し
て選択されることが，現在好ましい本発明の態様である。
【００７４】 さらに別の本発明の現在好ましい観点においては，Ｑが
【化３８】 である化合物において， ａおよびｂは両方とも二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され； Ｒ4は水素であり； Ｒ13は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している共有結合であり； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
Ｒ15およびＲ16は水素であり；および Ｒ17は存在しない。
【００７５】 別の現在好ましい本発明の観点においては，Ｑが
【化３９】 である化合物において， ａおよびｂは両方とも二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され； Ｒ4は水素であり； Ｒ13は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ14は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している共有結合であり； Ｒ15およびＲ16は水素であり；および， Ｒ17は存在しない。
【００７６】 本発明の現在好ましい観点においては，Ｑが
【化４０】 である化合物において， ａおよびｂは二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され； Ｒ4は水素であり； Ｒ13は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
Ｒ15は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している共有結合であり； Ｒ16は水素であり；および， Ｒ17は存在しない。
【００７７】 ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−［３−
（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３
−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド，３−（３，５−ジ
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−ヒドロキシ−１，３−ジヒド
ロインドール−２−オン，５−アセチル−３−（３，５−ジイソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３，
５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸メチルエステル，３−（３−イソプロ
ピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，
３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（５−イソプロピル−４−メ
トキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，
３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オン，３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）
−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３−シクロヘ
キシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
，５−ブロモ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフ
ラン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロ
ロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン，Ｎ−｛３−［３−シクロヘキシル−４−（２−モルホリ
ン−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１
Ｈ−インドール−６−イル｝−アセトアミド，３−（３，５−ジイソプロピル−
４−メトキシベンジリデン）−５−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン，Ｎ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）
−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミ
ド，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−メチル
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−アミノ−３−（３，５−ジイソ
プロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン，５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メト
キシベンジリデン）−６−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，
３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−５−フルオロ−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−［３，５−ジイソプロピル
−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベン
ジリデン）−７−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（４
−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−５−（２−モルホリン
−４−イルエチル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−［３−（５
−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−２−オキソ−２，
３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド，３−（３，５−
ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−エチル−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン，Ｎ−［２'−メトキシ−５'−（２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル）−ビフェニル−３−イル］−アセトア
ミド，５−フルオロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−［３−（４−メトキ
シ−３−チオフェン−２−イルベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ
−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド，６−アミノ−３−（３，５−
ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−
２−オン，Ｎ−［３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−２−
オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド，５
−ブロモ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン，３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イル
ベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−ブロモ−３−（
５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒド
ロインドール−２−オン，５−フルオロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−
イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３−イソプロ
ピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール
−２−オン，３−（４，５−ジメトキシ−２−チオフェン−２−イルベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−｛３−［４−（２−モルホ
リン−４−イルエトキシ）−３−チオフェン−２−イルベンジリデン］−２−オ
キソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル｝−アセトアミド，３−
（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン，３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメ
チレン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３−
シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒド
ロインドール−２−オン，５−フルオロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキ
シベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（５−イソプ
ロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［
２，３−ｂ］ピリジン−２−オン，３−（３'−エトキシ−６−メトキシビフェ
ニル−３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３
−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２
，３−ｂ］ピリジン−２−オン，３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベン
ジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（４，
５，２'−トリメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オン，Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）
−３−チオフェン−３−イルベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−
１Ｈ−インドール−６−イル｝−アセトアミド，５−クロロ−３−（３−シクロ
ヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン，［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキ
ソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ
−ブチルエステル，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−ブロモ−３−（
３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オン，Ｎ−｛３−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２−モルホリン
−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ
−インドール−６−イル｝−アセトアミド，３−（４−メトキシ−３，５−ジメ
チルベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オ
ン，５−ブロモ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン−４−
イルエトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３
−（３'−エトキシ−４，５−ジメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（４−メトキシ−３−
チオフェン−２−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
，５−クロロ−３−（４−メトキシ−３−ピリジン−３−イルベンジリデン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（４，５，３'−ト
リメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン，３−（４，５−ジメトキシ−２−ナフタレン−２−イルベンジリデン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−［３−（３'−アセチルアミノ
−６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒド
ロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド，６−メトキシ−３−（４−
メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オン，３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン，３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−
イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（
６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−
２−オン，３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチ
ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（２，３−ジヒドロベンゾフ
ラン−５−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン，３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロ
ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン，３−（６−メトキシビフェニル−３
−イルメチレン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン
，３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロ
ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン，３−（２，３−ジヒドロベンゾフラ
ン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２
−オン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン，５−ブロモ−３−（３−
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン，５−ブロモ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（３−シクロペン
チル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール
−２−オン，５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）
−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（５
−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−４−メチル−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５
−ジメチルベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−トリフ
ルオロメチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，６−クロロ−３−（３
，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オン，３−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリ
デン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−プロ
ピオン酸，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−
メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−ブチル−３−（３，５
−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール
−２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−４−カルボン酸，３−（３，
５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−メトキシフェニ
ル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，７−クロロ−３−（３，５−ジ
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−メチル−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オン，［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリ
デン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−カル
バミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル，５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロ
ロ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒド
ロインドール−２−オン，３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）
−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（５−イソプロピ
ル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン，５−ブロモ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５
−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−
（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
，５−クロロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−４−メ
チル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル
−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インド
ール−５−カルボン酸，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリ
デン）−５，６−ジメトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−［
３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−メタンスルホンアミド，Ｎ−
［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−
２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−ベンズアミド，３−（３，
５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−エトキシフェニ
ル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル
−４−メトキシベンジリデン）−６−フェニル−１，３−ジヒドロインドール−
２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−
フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−フルオロ−３−（４−
メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン，３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オンからなる群より選択される化合物もまた，本発明の好
ましい態様である。
【００７８】 同様に，５−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３−メチル−１Ｈ−イン
ドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−５−スルホン酸アミド，３（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチ
レン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メ
チルアミド，３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−
オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド
，３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸，５−アセチル−３−（３
−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オン，５−アセチル−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸
アミド，５−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン，３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）
−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸，６−ク
ロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オン，３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−ブロモ−３−（１Ｈ−
インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３
−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オン，３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（３−メチル−
１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン，５−ブロモ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン，４−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ
−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，
および３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−５［（１Ｈ−インドール
−２−イルメチレン）アミノ］−１，３−ジヒドロインドール−２−オンからな
る群より選択される化合物もまた本発明の好ましい態様である。
【００７９】 さらに，本発明の化学化合物に関して，現在好ましい態様は，３−［２−（２
−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６
，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，３−［２
−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメ
チル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロ
ピオン酸，３−２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール
−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル］−プロピオン酸，３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，３−［２−（５−メチル−２−
オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，３−［２−
（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチ
ル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピ
オン酸，３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドー
ル−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール
−３−イル］−プロピオン酸，Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［２−（２−オキソ−１
，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミド，３−［３−（３−
ジメチルアミノ−プロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−２−イルメチレン］−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン，３−［２
−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，
５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミド
，３−［３−（３−モルホリン−４−イル−３−オキソ−プロピル）−４，５，
６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１，３−ジヒ
ドロ−インドール−２−オン，Ｎ−メチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−
ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミド，Ｎ−（２−モルホリン−
４−イル−エチル）−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール
−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル］−プロピオンアミド，３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−
ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テト
ラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，３−｛２−［６−（
３−メトキシ−フェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−
イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル｝−プロピオン酸，３−｛２−［６−（４−メトキシ−フェニル）−２−オキ
ソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸，３−［２−（２
−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸，３−｛２−［６−（２−メトキシ−フェニル）−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸，３−［２−（５−イソプロピル
スルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメ
チル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロ
ピオン酸，３−［２−（６−モルホリン−４−イル−２−オキソ−１，２−ジヒ
ドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１
Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，３−［２−（５−クロロ−４−メ
チル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４
，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，
３−［２−（５−ブロモ−４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸，３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２
−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル
）−プロピオンアミド，３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒド
ロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ
−インドール−３−イル］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−プロ
ピオンアミド，および３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール
−３−イリデンメチル）−フェニル］−プロピオン酸からなる群より選択される
化合物を含む。
【００８０】 ２．合成／コンビナトリアルライブラリ 本発明のさらに別の観点は，構造５のオキシインドールを構造６，７または８
のアルデヒドと反応させることにより形成することができる，少なくとも１０個
の３−メチリデニル−２−インドリノン化合物のコンビナトリアルライブラリを
特徴とする：
【化４１】
【化４２】 ［式中，Ｒ1，Ｒ2，Ｒ3，Ｒ4，Ｒ5，Ｒ6，Ｒ7，Ｒ8，Ｒ9，Ｒ10，Ｒ11，Ｒ12，
Ｒ13，Ｒ14，Ｒ15，Ｒ16およびＲ17は，上述した意味を有する］。
【００８１】 本明細書において用いる場合，"コンビナトリアルライブラリ"とは，化合物の
多次元アレイにおいて，１つの次元の各化合物を他の次元の各化合物と反応させ
ることにより形成されるすべての化合物をを表す。本発明の文脈においては，ア
レイは２次元であり，１つの次元は本発明の全オキシインドールであり，第２の
次元は本発明の全アルデヒドである。置換３−メチリデニル−２−インドリノン
化合物を形成するために，各オキシインドールを，それぞれのそしてすべてのア
ルデヒドと反応させることができる。このようにして形成されるすべての置換３
−メチリデニル−２−インドリノン化合物は，本発明の範囲内である。また，い
くつかのオキシインドールとすべてのアルデヒド，すべてのオキシインドールと
いくつかのアルデヒド，またはいくつかのオキシインドールといくつかのアルデ
ヒドとの反応により形成されるより小さいコンビナトリアルライブラリも，本発
明の範囲内である。
【００８２】 上述のコンビナトリアルライブラリ中のオキシインドールは，好ましくは，オ
キシインドールそれ自体および置換オキシインドールからなる群より選択される
。非限定的例としては以下のものが挙げられる。６−ブロモオキシインドール，
５−ヒドロキシオキシインドール，５−メトキシオキシインドール，６−メトキ
シオキシインドール，５−フェニルアミノスルホニルオキシインドール，４−［
２−（２−イソプロピルフェノキシ）エチル］オキシインドール，４−［２−（
３−イソプロピルフェノキシ）−エチル］オキシインドール，４−［２−（４−
イソプロピルフェノキシ）エチル］オキシインドール，５−フルオロオキシイン
ドール，６−フルオロオキシインドール，７−フルオロオキシインドール，６−
トリフルオロメチルオキシインドール，５−クロロオキシインドール，６−クロ
ロオキシインドール，４−カルボキシインドール，５−ブロモオキシインドール
，５−ブロモ−４−メチルオキシインドール，６−（Ｎ−アセトアミド）オキシ
インドール，４−メチルオキシインドール，５−メチルオキシインドール，４−
メチル−５−クロロオキシインドール，５−エチルオキシインドール，６−ヒド
ロキシオキシインドール，５−アセチルオキシインドール，５−カルボキシイン
ドール，５−アミノオキシインドール，６−アミノオキシインドール，４−（２
−Ｎ−モルホリノエチル）オキシインドール，７−アザオキシインドール，オキ
シインドール−４−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル，オキシインドール−６−
カルバミン酸ｔ−ブチルエステル，４−（２−カルボキシエチル）オキシインド
ール，５−ｎ−ブチルオキシインドール，５，６−ジメトキシオキシインドール
，６−（メタンスルホンアミド）−オキシインドール，６−（ベンズアミド）オ
キシインドール，５−エトキシオキシインドール，６−フェニルオキシインドー
ル，６−（２−メトキシフェニル）オキシインドール，６−（３−メトキシフェ
ニル）オキシインドール，６−（４−メトキシフェニル）オキシインドール，５
−アミノスルホニルオキシインドール，５−イソプロピル−アミノスルホニルオ
キシインドール，５−ジメチルアミノスルホニルオキシインドール，５−（Ｎ−
モルホリノスルホニル）オキシインドール，４−（２−ヒドロキシエチル）オキ
シインドール，６−（３−エトキシフェニル）オキシインドール，６−（モルホ
リン−４−イル）オキシインドール，５−（２−（Ｎ−モルホリノ）エチル）オ
キシインドール，５−（メタンスルホンアミド）オキシインドール，５−メトキ
シカルボニルオキシインドールおよび５−カルボキシエチルオキシインドール。
【００８３】 上述のコンビナトリアルライブラリにおけるアルデヒドは，好ましくは，以下
の化合物からなる群より選択される：３−（１−ベンジル−５−ホルミル−２，
４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸，３−（５−ホルミル
−１−メトキシカルボニルメチル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イ
ル）プロピオン酸，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロ
ール−３−イル）プロピオン酸，３−［５−ホルミル−１−（３−メトキシベン
ジル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピオン酸メチルエ
ステル，３−（１−シクロヘキシルメチル−５−ホルミル−２，４−ジメチル−
１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸メチルエステル，３−［１−（２，２
−ジメチル−プロピル）−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−
３−イル］プロピオン酸メチルエステル，１，３，５−トリメチル−４−（３−
モルホリン−４−イル−３−オキソ−プロピル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボ
アルデヒド，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−
３−イル）−Ｎ−（２−モルホリン−４−イルエチル）プロピオンアミド，３−
（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−
フェニルプロピオンアミド，１，３，５−トリメチル−４−（３−オキソ−３−
ピペリジン−１−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，１
，３，５−トリメチル−４−（３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル
）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，３−（５−ホルミル−１，２，４
−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）プ
ロピオンアミド，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロー
ル−３−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）プロピオンアミド，Ｎ−（４−
フルオロフェニル）−３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピ
ロール−３−イル）−プロピオンアミド，３−（５−ホルミル−１，２，４−ト
リメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニ
ル）−プロピオンアミド，３−［５−ホルミル−１−（３−メトキシ−ベンジル
）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸，３−（１−
シクロヘキシルメチル−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３
−イル）プロピオン酸，３−［１−（３−フルオロベンジル）−５−ホルミル−
２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピオン酸メチルエステル，
３−（１−ベンジル−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−
イル）プロピオン酸，３−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ホルミル−２
，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピオン酸メチルエステル，３
−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−
ピロール−３−イル］−プロピオン酸，３−［１−（３−フルオロベンジル）−
５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピオン酸，
３，５−ジメチル−４−（３−モルホリン−４−イル−プロピル）−１Ｈ−ピロ
ール−２−カルボアルデヒド，４−（３−ジメチルアミノプロピル）−３，５−
ジメチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，５−ホルミル−２，４−ジ
メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸，３，５−ジメチル−４−（４−メチ
ルピペラジン−１−カルボニル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，５
−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジメチ
ルアミノエチル）アミド，３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル）プロピオン酸，３−（３−ジメチルアミノプロ
ピル）−２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール，イ
ンドール−２−カルボアルデヒドおよび３−メチルインドール−２−カルボアル
デヒド。
【００８４】 本発明の別の態様は，式１の３−メチリデニル−２−インドリノンを合成する
方法を提供する。該方法は，式５のオキシインドールを，溶媒中で，好ましくは
塩基の存在下で，式６，７または８のアルデヒドと反応させることを含む。
【００８５】 式６，７または８のアルデヒドと反応させて式１の置換３−メチリデニル−２
−インドリノンを得ることができる式５のオキシインドールの例は，オキシイン
ドールそれ自体および置換オキシインドールであり，例えば，限定するものでは
ないが，以下のものが挙げられる。６−ブロモオキシインドール，５−ヒドロキ
シオキシインドール，５−メトキシオキシインドール，６−メトキシオキシイン
ドール，５−フェニルアミノスルホニルオキシインドール，４−［２−（２−イ
ソプロピルフェノキシ）エチル］オキシインドール，４−［２−（３−イソプロ
ピルフェノキシ）−エチル］オキシインドール，４−［２−（４−イソプロピル
フェノキシ）エチル］オキシインドール，５−フルオロオキシインドール，６−
フルオロオキシインドール，７−フルオロオキシインドール，６−トリフルオロ
メチルオキシインドール，５−クロロオキシインドール，６−クロロオキシイン
ドール，４−カルボキシインドール，５−ブロモオキシインドール，５−ブロモ
−４−メチルオキシインドール，６−（Ｎ−アセトアミド）オキシインドール，
４−メチルオキシインドール，５−メチルオキシインドール，４−メチル−５−
クロロオキシインドール，５−エチルオキシインドール，６−ヒドロキシオキシ
インドール，５−アセチルオキシインドール，５−カルボキシインドール，５−
アミノオキシインドール，６−アミノオキシインドール，４−（２−Ｎ−モルホ
リノエチル）オキシインドール，７−アザオキシインドール，オキシインドール
−４−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル，オキシインドール−６−カルバミン酸
ｔ−ブチルエステル，４−（２−カルボキシエチル）オキシインドール，５−ｎ
−ブチルオキシインドール，５，６−ジメトキシオキシインドール，６−（メタ
ンスルホンアミド）−オキシインドール，６−（ベンズアミド）オキシインドー
ル，５−エトキシオキシインドール，６−フェニルオキシインドール，６−（２
−メトキシフェニル）オキシインドール，６−（３−メトキシフェニル）オキシ
インドール，６−（４−メトキシフェニル）オキシインドール，５−アミノスル
ホニルオキシインドール，５−イソプロピル−アミノスルホニルオキシインドー
ル，５−ジメチルアミノスルホニルオキシインドール，５−（Ｎ−モルホリノス
ルホニル）オキシインドール，４−（２−ヒドロキシエチル）オキシインドール
，６−（３−エトキシフェニル）オキシインドール，６−（モルホリン−４−イ
ル）オキシインドール，５−（２−（Ｎ−モルホリノ）エチル）オキシインドー
ル，５−（メタンスルホンアミド）オキシインドール，５−メトキシカルボニル
オキシインドールおよび５−カルボキシエチルオキシインドール。
【００８６】 構造２のオキシインドールと反応させることができる構造６，７または８のア
ルデヒドの例としては，限定されるものではないが，以下のものが挙げられる：
３−（１−ベンジル−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−
イル）プロピオン酸，３−（５−ホルミル−１−メトキシカルボニルメチル−２
，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオン酸，３−（５−ホル
ミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオン酸，
３−［５−ホルミル−１−（３−メトキシベンジル）−２，４−ジメチル−１Ｈ
−ピロール−３−イル］プロピオン酸メチルエステル，３−（１−シクロヘキシ
ルメチル−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロ
ピオン酸メチルエステル，３−［１−（２，２−ジメチルプロピル）−５−ホル
ミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸メチルエ
ステル，１，３，５−トリメチル−４−（３−モルホリン−４−イル−３−オキ
ソプロピル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，３−（５−ホルミル−
１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−（２−モルホリン
−４−イルエチル）プロピオンアミド，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリ
メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−フェニルプロピオンアミド，１，３
，５−トリメチル−４−（３−オキソ−３−ピペリジン−１−イルプロピル）−
１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，１，３，５−トリメチル−４−（３−
オキソ−３−ピロリジン−１−イル−プロピル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボ
アルデヒド，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−
３−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）プロピオンアミド，３−（５−ホル
ミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−（４−メト
キシフェニル）プロピオンアミド，Ｎ−（４−フルオロフェニル）−３−（５−
ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオン
アミド，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−
イル）−Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）プロピオンアミド，３−［５
−ホルミル−１−（３−メトキシ−ベンジル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロ
ール−３−イル］プロピオン酸，３−（１−シクロヘキシルメチル−５−ホルミ
ル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸，３−［１−
（３−フルオロベンジル）−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール
−３−イル］プロピオン酸メチルエステル，３−（１−ベンジル−５−ホルミル
−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸，３−［１−（
４−フルオロベンジル）−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−
３−イル］プロピオン酸メチルエステル，３−［１−（４−フルオロベンジル）
−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン
酸，３−［１−（３−フルオロベンジル）−５−ホルミル−２，４−ジメチル−
１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピオン酸，３，５−ジメチル−４−（３−モル
ホリン−４−イル−プロピル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，４−
（３−ジメチルアミノプロピル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−２−カ
ルボアルデヒド，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カル
ボン酸，３，５−ジメチル−４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）−
１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１
Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジメチルアミノエチル）アミド，３−（２
−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）プ
ロピオン酸，３−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−ホルミル−４，５，６
，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール，インドール−２−カルボアルデヒドお
よび３−メチルインドール−２−カルボアルデヒド。
【００８７】 本発明のある種の化合物の中間体である，以下の構造９のアミノプロピル−４
，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドールの合成も，本発明の別の観点で
ある：
【化４３】 工程１においては，塩基は無機塩基でも有機塩基でもよい。無機および有機塩
基の例は，本明細書において記載される。好ましくは，塩基は酢酸ナトリウムで
ある。"溶媒"は，塩基および他の反応物が，反応が進行するのに十分に可溶性で
ある任意の溶媒である。好ましい溶媒は，極性のプロトン性溶媒（本明細書にお
いて定義する），例えば水，メタノールおよびエタノールである。現在好ましい
溶媒は水である。反応は，約６０℃−約１８０℃の温度で行う。好ましくは，温
度は，約６０℃−１８０℃であり，より好ましくは，８０℃−１５０℃，最も好
ましくは，１００−１２０℃である。反応は，１−３０時間，好ましくは２−２
０時間，最も好ましくは４−１５時間進行させる。
【００８８】 工程２においては，カルボン酸基をアミド基に転換する。この転換を行う方法
は当該技術分野においてよく知られている。１，１'−カルボニルジイミダゾー
ルの存在下でアミンとカルボン酸を反応させることが現在好ましい方法である。
任意の非プロトン性溶媒を用いることができる。現在好ましい態様においては，
溶媒は非極性非プロトン性溶媒であり，特に好ましくは，ジクロロメタンである
。反応は，室温または約１００℃までの高温において行う。現在好ましい態様は
，反応をおよそ室温で行うことである。
【００８９】 工程３は，還元剤，例えば水素化リチウムアルミニウム（これに限定されない
）を用いる，ケトとアミド基との同時還元である。反応は，非プロトン性溶媒（
本明細書において定義する）中で行う。現在好ましい溶媒はテトラヒドロフラン
である。反応は，およそ室温から約８０℃，好ましくは約５０℃−約７０℃で進
行させ，最も好ましくは，反応はテトラヒドロフラン還流下で行う。
【００９０】 工程４は，オキシ塩化リンおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを用いる，よ
く知られる芳香族ピロール環のホルミル化である。
【００９１】 工程５は，アルデヒドとオキシインドールとを縮合させて本発明の３−メチリ
デニル−２−インドリノンを形成し，この反応は，塩基を含んでいてもよい溶媒
中で行う。塩基は，有機塩基であっても無機塩基であってもよい。有機塩基を用
いる場合，好ましくはこれは窒素塩基である。有機窒素塩基の例としては，ジイ
ソプロピルアミン，トリメチルアミン，トリエチルアミン，アニリン，ピリジン
，１，８−ジアザビシクロ−［５．４．１］ウンデカ−７−エン，ピロリジンお
よびピペリジンが挙げられるが，これらに限定されない。
【００９２】 無機塩基の例としては，アンモニア，アルカリ金属またはアルカリ土類金属の
水酸化物，リン酸塩，炭酸塩，重炭酸塩，酢酸塩，重硫酸塩およびアミドが挙げ
られるが，これらに限定されない。アルカリ金属には，リチウム，ナトリウムお
よびカリウムが含まれ，アルカリ土類金属にはカルシウム，マグネシウムおよび
バリウムが含まれる。
【００９３】 本発明の現在好ましい態様においては，溶媒がプロトン性溶媒，例えば水また
はアルコールであるとき，塩基はアルカリ金属またはアルカリ土類の無機塩基，
好ましくは，アルカリ金属またはアルカリ土類の水酸化物である。
【００９４】 当業者には，有機合成の既知の一般原則と本明細書の記載の両方に基づいて，
意図される反応にはいずれの塩基が最も適当であるかが明らかであろう。
【００９５】 反応を実施する溶媒は，プロトン性溶媒であっても非プロトン性溶媒であって
もよい。好ましくは，プロトン性溶媒である。"プロトン性溶媒"は，酸素または
窒素原子に共有結合した水素原子を有する溶媒であり，これは水素原子をかなり
酸性にし，このため水素結合を介して溶質と"共有"されることができる。プロト
ン性溶媒の例としては，水およびアルコールが挙げられるが，これらに限定され
ない。
【００９６】 "非プロトン性溶媒"は，極性であっても非極性であってもよいが，いずれの場
合も，酸性水素を含まず，したがって，溶質と水素結合を形成することができな
い。非極性非プロトン性溶媒の例としては，ペンタン，ヘキサン，ベンゼン，ト
ルエン，塩化メチレンおよび四塩化炭素が挙げられるが，これらに限定されない
。極性非プロトン性溶媒の例は，クロロホルム，テトラヒドロフラン，ジメチル
スルホキシドおよびジメチルホルムアミドである。
【００９７】 本発明の現在好ましい態様においては，溶媒はプロトン性溶媒，好ましくは，
水またはエタノール等のアルコールである。
【００９８】 反応は，室温より高い温度で行う。温度は一般に約３０℃−約１５０℃，好ま
しくは，約８０℃−約１００℃，最も好ましくは約７５℃−約８５℃であり，こ
れはおよそエタノールの沸点である。
【００９９】 "約"とは，本明細書に記載される温度範囲が，好ましくは示される温度の１０
℃以内，より好ましくは示される温度の５℃以内，最も好ましくは示される温度
の２℃以内であることを意味する。すなわち，例えば，"約７５℃"とは，７５℃
±１０℃，好ましくは７５℃±５℃，最も好ましくは７５℃±２℃である。
【０１００】 本発明のいくつかの代表的な化合物が表１に示される。示される化合物は，例
示にすぎず，いかなる意味においても本発明の範囲を限定するものと解釈すべき
ではない。
【０１０１】
【表１】
【０１０２】
【表２】
【０１０３】
【表３】
【０１０４】
【表４】
【０１０５】
【表５】
【０１０６】
【表６】
【０１０７】
【表７】
【０１０８】
【表８】
【０１０９】
【表９】
【０１１０】
【表１０】
【０１１１】
【表１１】
【０１１２】
【表１２】
【０１１３】
【表１３】
【０１１４】
【表１４】
【０１１５】
【表１５】
【０１１６】
【表１６】
【０１１７】
【表１７】
【０１１８】
【表１８】
【０１１９】
【表１９】
【０１２０】
【表２０】
【０１２１】
【表２１】
【０１２２】
【表２２】
【０１２３】
【表２３】
【０１２４】３． 生化学／薬物療法 本発明のもう一つの特徴は、 ＰＫの触媒活性を調節するための方法であって
、ＰＫを、本発明の化合物または生理学的に許容されるその塩またはプロドラッ
グと接触させることによる方法に関する。
【０１２５】 本文に用いられる場合、「ＰＫ」はレセプタータンパク質チロシンキナーゼ（
ＲＴＫ）、非レセプターまたは「細胞性」チロシンキナーゼ（ＣＴＫ）、および
セリン−トレオニンキナーゼ（ＳＴＫ）を指す。
【０１２６】 「方法」という用語は、所与の作業を遂行するための様式、手段、技術、およ
び手順を指し、化学、薬剤学、生物学、生化学、および医学的技術の従業者には
周知の、あるいは既に該従業者によって既知の様式、手段、技術、および手順か
ら開発された様式、手段、技術、および手順を含むがこれに限定されない。
【０１２７】 本文に用いられる場合、「調節」または「調節すること」という用語は、ＲＴ
Ｋ、ＣＴＫ、およびＳＴＫの触媒活性の変更を指す。特に、調節することは、Ｒ
ＴＫ、ＣＴＫ、およびＳＴＫの触媒活性の活性化を指し、好ましくは、 ＲＴＫ
、ＣＴＫ、およびＳＴＫに暴露される化合物または塩の濃度に依存したＲＴＫ、
ＣＴＫ、およびＳＴＫの触媒活性の活性化または阻害を指し、さらに好ましくは
、 ＲＴＫ、ＣＴＫ、およびＳＴＫの触媒活性の阻害を指す。
【０１２８】 本文に用いられている「触媒活性」という用語は、ＲＴＫおよび／またはＣＴ
Ｋの直接または間接的な影響下でのチロシンのリン酸化か、またはＳＴＫの直接
または間接的な影響下でのセリンおよびトレオニンのリン酸化の速度を指す。
【０１２９】 本文に用いられている「接触させること」という用語は、本発明の化合物と標
的ＰＫとを、当該化合物がＰＫの触媒活性を直接に、すなわちキナーゼ自体と相
互作用することによるか、または間接に、すなわち当該キナーゼの触媒活性が依
存している別の分子と相互作用することにより、影響することが可能な様式で一
緒に合わせることを指す。かかる「接触させること」は、「インヴィトロ」にお
いて、すなわち試験管、ペトリ皿、またはその他において行なわれることが可能
である。試験管内では、接触させることは、化合物と目的とするＰＫのみが関与
してよく、あるいは全細胞が関与してもよい。また細胞は培養皿内にて維持また
は成育され、その環境において化合物と接触してよい。このような状況において
は、特定の化合物がＰＫ関連障害に影響を及ぼす能力、すなわち当該化合物のＩ
Ｃ50（以下に定義される）を、より複雑な生体を用いてのインヴィヴォでの使用
が試みられる以前に、測定することが可能である。生体の外の細胞については、
ＰＫを当該化合物と接触させるための多様な方法が存在し、かつ当業者には周知
であり、直接の細胞微小注射法および多数の膜貫通担体法を含むがこれに限定さ
れない。
【０１３０】 本発明のさらなる特徴は、本発明の化合物を用いたＰＫの触媒活性の調節がイ
ンヴィトロまたはインヴィヴォにおいて行うことができることである。
【０１３１】 「インヴィトロ」は、これに限定されないが、たとえば試験管または培地の中
といった人工的な環境において行なわれる方法を指す。
【０１３２】 本文に用いられるように、「インヴィヴォ」は、これに限定されないがマウス
、ラット、ウサギ、またはヒト等の生体内で行なわれる方法を指す。
【０１３３】 本発明のまたさらなる特徴は、本発明の化合物によりその触媒活性が調節され
るプロテインキナーゼが、レセプタータンパク質チロシンキナーゼ、細胞性（ま
たは非レセプター）チロシンキナーゼ、およびセリン−トレオニンキナーゼから
成る群より選ばれることである。
【０１３４】 本発明の一つの特徴は、本発明の化合物によりその触媒活性が調節されるレセ
プタープロテインキナーゼが、ＥＧＦ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、ＩＲ、
ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲＲ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＣＤＦＩＲ、Ｃ−Ｋｉｔ
、Ｃ−ｆｍｓ、Ｆｌｋ−１Ｒ、Ｆｌｋ４、ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１、Ｆｌｔ−１、Ｆ
ＧＦＲ−１Ｒ、ＦＧＦＲ−２Ｒ、ＦＧＦＲ−３Ｒ、およびＦＧＦＲ−４Ｒから成
る群より選ばれることである。
【０１３５】 さらに、本発明の一つの特徴は、本発明の化合物によりその触媒活性が調節さ
れる細胞性チロシンキナーゼが、Ｓｒｃ、Ｆｒｋ、Ｂｔｋ、Ｃｓｋ、Ａｂｌ、Ｚ
ＡＰ７０、Ｆｅｓ／Ｆｐｓ、Ｆａｋ、Ｊａｋ、Ａｃｋ、Ｙｅｓ、Ｆｙｎ、Ｌｙｎ
、Ｌｃｋ、Ｂｌｋ、Ｈｃｋ、Ｆｇｒ、 およびＹｒｋから成る群より選ばれるこ
とである。
【０１３６】 本発明のもう一つの特徴は、本発明の化合物によりその触媒活性が調節される
セリン−トレオニンプロテインキナーゼが、ＣＤＫ２およびＲａｆから成る群よ
り選ばれることである。
【０１３７】 薬剤学的に許容される担体または賦形剤を含めた本発明の化合物の薬剤学的組
成物は、本発明のもう一つの特徴である。かかる薬剤学的組成物は、担体および
賦形剤の双方ならびに、薬剤学的組成物の製剤の熟練者に周知の他の組成物を含
んでよい。
【０１３８】 生物におけるプロテインキナーゼ関連障害を治療または予防する方法であって
、治療上有効な量の本発明の化合物、塩、またはプロドラッグを、かかる治療を
必要とする生物へ投与することを含む方法は、本発明のもう一つの特徴である。
【０１３９】 本文に用いられる場合、「ＰＫ関連障害」、「ＰＫ攻撃疾患」、および「異常
なＰＫ活性」はすべて不適切な、すなわち不完全な、あるいはより一般的には過
剰な、ＰＫ触媒活性によって特徴づけられる状態を指し、当該特定のＰＫはＲＴ
Ｋ、ＣＴＫ、またはＳＴＫであることが可能である。不適切な触媒活性は；（１
）正常にはＰＫを発現しない細胞におけるＰＫの発現、（２） 望ましくない細
胞増殖、分化および／または成長に導くＰＫ発現の亢進、または（３）細胞増殖
、分化および／または成長の望ましくない減少に導くＰＫ発現の減少、のいずれ
かの結果として生じることが可能である。ＰＫの過剰な活性は、特定のＰＫをコ
ード化している遺伝子の増幅か、または細胞増殖、分化および／または成長と相
互に関係することが可能なあるレベルのＰＫ活性の産生を指す（すなわち、ＰＫ
のレベルが亢進されると、細胞性障害による一つまたはそれより多い症状の激し
さが増す）。不完全な活性は、もちろんその逆であり、ＰＫのレベルが低下する
と、一つまたはそれより多い細胞性障害による症状の激しさが増加する。
【０１４０】 本文に用いられる場合、「予防する」、「予防すること」、および「予防」と
いう用語は、生物がＰＫ関連障害の獲得を最初の場所で妨げるための方法を指す
。
【０１４１】 本文に用いられる場合「治療する」、「治療すること」、および「治療」とい
う用語は、ＰＫを介する細胞性障害および／またはそれに付随する症状を緩和ま
たは除去するための方法を指す。特に癌に関しては、これらの用語は単に、癌に
よって影響を受けた生物の余命が増すこと、あるいは当該疾患の一つまたはそれ
より多い症状が減少することを意味する。
【０１４２】 「生物」という用語は、少なくとも一つの細胞を含む生きている実存物を指す
。生きている生物は、たとえばただ一つの真核細胞のように単純であるか、また
はヒトを含めた哺乳類のように複雑であることが可能である。
【０１４３】 本文に用いられているような「治療上有効な量」という用語は、治療される障
害の一つまたはそれより多い症状をある程度までやわらげることとなる、投与さ
れる化合物の量を指す。癌の治療に関しては、治療上有効な量は、（１）腫瘍の
大きさを減じる、（２）腫瘍の転移を阻害する（すなわち速度をある程度まで減
じること、好ましくは停止すること）、（３）腫瘍の成長をある程度阻害する（
すなわち速度をある程度まで減じる、好ましくは停止する）、および／または（
４）癌に関連した一つまたはそれより多い症状をある程度までやわらげる（また
は、好ましくは除去する）という効果を有する量を指す。
【０１４４】 本発明の一つの特徴は、前文に言及したプロテインキナーゼ関連障害が、レセ
プタータンパク質チロシンキナーゼ関連障害、細胞性チロシンキナーゼ障害、お
よびセリン−トレオニンキナーゼ関連障害から成る群より選ばれることである。
【０１４５】 本発明のもう一つの特徴においては、前文に言及したプロテインキナーゼ関連
障害が、ＥＧＦＲ関連障害、ＰＤＧＦＲ関連障害、ＩＧＦＲ関連障害、およびｆ
ｌｋ関連障害から成る群より選ばれる。
【０１４６】 本発明のさらなる特徴においては、前文に言及したプロテインキナーゼ関連障
害は、偏平上皮癌、カポジ肉腫等の肉腫、星状細胞腫、グリア芽細胞腫、肺癌、
膀胱癌、結腸直腸癌、胃腸癌、頭頚部癌、黒色腫、卵巣癌、前立腺癌、乳癌、小
細胞肺癌、および神経膠腫から成る群より選ばれる。
【０１４７】 本発明のまた別の特徴においては、前文において言及したプロテインキナーゼ
関連障害は、糖尿病、自己免疫異常、過剰増殖障害、フォンヒッペル−リンダウ
病、再狭窄、線維症、乾癬、変形性関節炎、慢性関節リウマチ、炎症性疾患、お
よび血管新生から成る群より選ばれる。
【０１４８】 本発明の化合物を用いて治療または予防されるさらに別の障害は、自己免疫疾
患（ＡＩＤＳ）等の自己免疫異常、およびアテローム性動脈硬化症等の心臓血管
障害である。
【０１４９】 前記プロテインキナーゼを発現している細胞を、本発明の化合物、塩、または
プロドラッグと接触させ、および次いで前記細胞について効果を監視することに
より、プロテインキナーゼの触媒活性を調節する化学的配合物を同定することが
できることは、本発明の一つの特徴である。
【０１５０】 「監視すること」は、化合物を特定のプロテインキナーゼＰＫを発現している
細胞と接触させることの影響を、観察または検出することを意味する。観察また
は検出された効果は、細胞の表現型における変化か、ＰＫの触媒活性においてか
、あるいはＰＫと天然の結合相手との相互作用における変化であることが可能で
ある。かかる効果を観察または検出するための技術は当業者に周知である。
【０１５１】 本発明の最後の特徴においては、前文に言及した効果は、細胞の表現型におけ
る変化の有無、前記プロテインキナーゼの触媒活性における変化の有無、または
前記プロテインキナーゼと天然の結合相手との相互作用における変化の有無から
選択される。
【０１５２】 「細胞表現型」は、細胞または組織の外面上の様相か、または当該細胞または
組織の生物学的機能を指す。細胞の表現型の例は、これに限定されないが、細胞
の大きさ、細胞成長、細胞増殖、細胞分化、細胞寿命、アポトーシス、および栄
養摂取と使用である。かかる表現型の特徴はこの技術において周知の技術による
計測が可能である。
【０１５３】 「天然の結合相手」は、細胞において特定のＰＫに結合するポリペプチドを指
す。天然の結合相手は、ＰＫを介するシグナル伝達過程において、シグナルの伝
播に役割を果たすことができる。天然の結合相手とＰＫとの相互作用における変
化は、ＰＫ／天然の結合相手複合体の濃度の増加または減少となって現われ、そ
の結果として、ＰＫのシグナルを伝達する能力に、観察可能な変化が生じる。
【０１５４】 本発明のもう一つの特徴は、本文に述べた化合物か、あるいはその塩またはプ
ロドラッグが、前文に議論した疾患または障害の治療のため、他の化学療法用薬
剤と組合わされてもよいことである。たとえば、本発明の化合物、塩、またはプ
ロドラッグは、フルオロウラシル（５−ＦＵ）等のアルキル化剤との、単独かま
たはロイコボリンとのさらなる組合せにおいて；あるいは、ＵＦＴ、カペシタビ
ン（capecitabine）、ジェムシタビン（gemsitabine）、およびシタラビン等の
他のピリミジン類似体、アルキルスルホン酸塩、たとえばブスルファン（慢性顆
粒球性白血病の治療に用いられる）、インプロスルファン、およびピポスルファ
ン、等のこれに限定されない他のアルキル化剤；アジリジン、たとえばベンゾデ
パ（benzodepa）、カルボコン、メツレデパ、およびウレデパ；エチレンイミン
およびメチルメラミン、たとえばアルトレタミン（altretamine）、トリエチレ
ンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、
およびトリメチロールメラミン；およびナイトロジェンマスタード、たとえばク
ロラムブシル（慢性リンパ球性白血病、原発性マクログロブリン血症、および非
ホジキンリンパ腫の治療に用いられる）、シクロホスファミド（ホジキン病、多
発性骨髄腫、神経芽細胞腫、乳癌、卵巣癌、肺癌、ウィルムス腫瘍、および横紋
筋肉腫の治療に用いられる）、エストラムスチン、イホスファミド、ノベンブリ
チン（novembrichin）、プレドニムスチン、およびウラシルマスタード（原発性
血小板増加症、非ホジキンリンパ腫、ホジキン病、および卵巣癌の治療に用いら
れる）；およびトリアジン、たとえばダカルバジン（dacarbazine）（軟部組織
肉腫の治療に用いられる）と組合せて用いられる。
【０１５５】 化合物と同様に、本発明の塩またはプロドラッグは、葉酸類似体、たとえばメ
トレキセート（急性リンパ球性白血病、絨毛上皮腫、菌状息肉腫、乳癌、頭頚部
癌、および骨肉腫の治療に用いられる）およびプテロプテリン；および急性顆粒
球性、急性リンパ球性、および慢性顆粒球性白血病の治療に用途が見い出される
メルカプトプリンおよびチオグアニン等のプリン類似体等の、これに限定されな
い他の代謝拮抗物質化学療法用薬剤との組合せにおいて有益な効果をもつことが
期待されてよいであろう。
【０１５６】 本発明の化合物、塩、またはプロドラッグは、ビンカアルカロイド、たとえば
ビンブラスチン（***および精巣の癌の治療に用いられる）、ビンクリスチン、
およびビンデシン；エピポドフィロトキシン（epipodophylotoxins）、たとえば
、いずれも精巣癌およびカポジ肉腫の治療に有用であるエトポシド（etoposide
）およびテニポシド（teniposide）；抗生物質化学療法用薬剤、たとえばダウノ
ルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン（epirubicin）、マイトマイシン（胃
、子宮頚、結腸、***、膀胱、および膵臓の癌を治療するべく用いられる）、ダ
クチノマイシン、テモゾロミド（temozolomide）、プリカマイシン、ブレオマイ
シン（皮膚、食道、および泌尿生殖路の癌の治療において用いられる）；および
Ｌ−アスパラギナーゼ等の酵素化学療法用薬剤といった、これに限定されない天
然の産物を主成分とする化学療法薬剤との組合せにおいて効果を生じることも期
待されてよいであろう。
【０１５７】 前述に加えて、本発明の化合物、塩、またはプロドラッグは、プラチナ配位複
合体（シスプラチンその他）；ヒドロキシ尿素等の置換された尿素；メチルヒド
ラジン誘導体、たとえばプロカルバジン；副腎皮質抑制剤、たとえばミトタン、
アミノグルテチミド；および、副腎皮質ホルモン（たとえばプレドニゾン）、プ
ロゲスチン（たとえばヒドロキシプロゲステロンカプロン酸塩）；エストロゲン
（たとえばジエチルスチルベストロール）；タモキシフェン等の抗エストロゲン
；アンドロゲン、たとえばプロピオン酸テストステロン；およびアロマターゼ阻
害剤（アナストロゾール（anastrozole）等）の、ホルモンおよびホルモン拮抗
薬、と組合せて用いられることにより有用な効果をもつことが期待されてもよい
。
【０１５８】 最後に、本発明の化合物の組合せは、充実性腫瘍癌、あるいは急性骨髄性（非
リンパ球性）白血病等の、これに限定されない白血病の治療のために、ミトキサ
ントロンまたはパクリタキセルとの組合わせにおいて特に有効であることが期待
されてもよい。
【０１５９】発明の詳細な説明 １． 表の簡単な説明 表１は、本発明のいくつかの代表的な化合物の化学構造を示している。化合物
の番号は、実施例の部分における実施例番号に相当する。すなわち、表１の化合
物１の合成は、実施例１に述べられている。表１に示された化合物は単に代表的
なものであって、決して本発明の範囲を限定していると解釈されるためのもので
はない。
【０１６０】 表２は、本発明のいくつかの代表的な化合物の生物学的検査の結果を示してい
る。結果はＩＣ50、すなわち検査化合物を何も加えられていない対照におけるＰ
ＴＫの活性に比較して、標的ＰＴＫの活性に５０％の変化を引起こす検査化合物
のマイクロモル（μＭ）濃度、で報告されている。具体的には、示された結果は
、標的ＰＴＫの活性の５０％減少を引起こすために必要な検査化合物の濃度を示
している。用いられた生物検定法は以下に詳細に述べられている。
【０１６１】２． 適用／標的疾患 本発明の化合物によってその触媒活性が調節されるＰＫは、タンパク質チロシ
ンキナーゼを含み、それには二つの型、レセプターチロシンキナーゼ（ＲＴＫ）
および細胞性チロシンキナーゼ（ＣＴＫ）と、セリン−トレオニンキナーゼ（Ｓ
ＴＫ）とがある。ＲＴＫを介するシグナル伝達は、特異的な成長因子（リガンド
）との細胞外の相互作用に始まり、レセプターの２量体化、内在タンパク質チロ
シンキナーゼ活性の一過性の刺激、およびリン酸化がそれに続く。それにより細
胞内シグナル伝達分子のための結合部位が造られ、適切な細胞の応答（たとえば
細胞***、細胞外の微小環境に対する代謝効果、その他）を容易にするある範囲
の細胞質シグナル分子との複合体形成に導かれる。Schlessinger & Ullrich, 19
92, Neuron 9 : 303 - 391参照。
【０１６２】 成長因子レセプター上のチロシンリン酸化部位は、シグナリング分子のＳＨ２
（Ｓｒｃホモロジー）ドメインのための高親和性結合部位として機能することが
示されている。Fantlら、1992, Cell 69: 413 - 423、Songyangら、1994, Mol.
Cell. Biol. 14 : 2777 - 2785）、 Songyangら、1993, Cell 72 :767 - 778）
、およびKoch ら、1991, Science 252 : 668 - 678。ＲＴＫと結合するいくつか
の細胞内基質タンパク質が同定されている。それらは二つの主要なグループに分
けられる：（１）触媒ドメインを有する基質、および（２）かかるドメインを欠
くが、アダプターとして役立ち、触媒活性のある分子と結合する。Songyangら、
1993, Cell 72 : 767 - 778。レセプターとその基質のＳＨ２ドメインとの間の
相互作用の特異性は、リン酸化されたチロシン残基を直接取囲んでいるアミノ酸
残基によって決められる。ＳＨ２ドメインと、特定のレセプターのホスホチロシ
ン残基を取囲んでいるアミノ酸配列との間の結合親和性の差異は、それらの基質
リン酸化のプロフィールに見られる差異と一致している。Songyangら、1993, Ce
ll 72 : 767 - 778。これらの観察は、各々のＲＴＫの機能が、その発現パター
ンならびにリガンド利用可能性によるだけでなく、特定のレセプターによって活
性化される下流のシグナル伝達経路によっても決定されることを示唆している。
したがって、リン酸化は特異的な成長因子レセプター、ならびに分化因子レセプ
ターによって活性化される、シグナリング経路の選択性を決定する重要な段階を
提供する。
【０１６３】 ＳＴＫは、本来細胞質ゾル性であり、しばしばＰＴＫ事象についてのダウン方
向の応答として、細胞内部の生化学に影響を及ぼす。ＳＴＫは、細胞増殖に導く
ＤＮＡ合成とそれに続く細胞***とを開始する、シグナリング過程に関係してい
る。
【０１６４】 したがって、ＰＫシグナル伝達は、数ある他の応答の中で特に、細胞増殖、分
化、成長、および代謝をもたらす。異常な細胞増殖は、癌腫、肉腫、グリア芽細
胞腫、および血管腫等の新生物、白血病、乾癬、動脈硬化症、関節炎、および糖
尿病性網膜炎、および制御されない血管新生（angiogenesis）および／または血
管形成（vasclogenesis）に関連する他の疾患を含む、広い範囲の障害および疾
患という結果をもたらしうる。
【０１６５】 本発明の化合物がＰＫを阻害する機構につての正確な理解は、本発明の実施の
ためには必要ではない。しかしながら、このことでいかなる特定の機構または定
理にも縛られるものではないが、当該化合物はＰＫの触媒領域のアミノ酸と相互
作用すると考えられている。ＰＫは典型的には２葉構造を有しており、ＡＴＰは
、ＰＫの中でアミノ酸が保存されている領域内の、２つの葉の間の裂け目に結合
するように見える。ＰＫの阻害剤は、前記のＡＴＰがＰＫに結合するのと同じ普
遍領域において、水素結合、ファン‐デル‐ワールス力、およびイオン相互作用
等の非共有結合によって結合すると信じられている。さらに具体的には、本発明
の化合物の２−インドリノン成分が、正常にはＡＴＰのアデニン環によって占め
られる普遍区域に結合すると考えられている。このように、ある特定の分子の特
定のＰＫに対する特異性は、２−インドリノンコアについての種々の置換基と、
特定のＰＫに特異的なアミノ酸ドメインとの間の、付加的な相互作用の結果とし
て生じてよい。したがって、異なるインドリノン置換基は、特定のＰＫに対する
優先的な結合に貢献してよい。異なるＡＴＰ（または他のヌクレオチド）結合部
位において活性のある化合物を選択する能力は、本発明の化合物を、かかる部位
を用いたタンパク質のターゲッティングにとって有用なものにする。したがって
本文において開示された化合物は、かかるタンパク質についてのインヴィトロで
のアッセイ用としての有用性をもつと同時に、かかるタンパク質との相互作用を
通じてインヴィヴォでの治療効果を示すものであってよい。
【０１６６】 もう一つの特徴においては、その触媒活性が本発明の化合物との接触によって
調節されるプロテインキナーゼは、タンパク質チロシンキナーゼであり、さらに
詳しくはレセプタータンパク質チロシンキナーゼである。レセプタータンパク質
チロシンキナーゼの中でも、本発明の化合物またはその塩によりその触媒活性が
調節されるレセプタータンパク質チロシンキナーゼは、これに限定されないが、
ＥＧＦ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、ＩＲ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲＲ、ＰＤＧ
ＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＣＤＦＩＲ、Ｃ−Ｋｉｔ、Ｃ−ｆｍｓ、Ｆｌｋ−１Ｒ、
Ｆｌｋ４、ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１、Ｆｌｔ−１、ＦＧＦＲ−１Ｒ、ＦＧＦＲ−２Ｒ
、ＦＧＦＲ−３Ｒ、およびＦＧＦＲ−４Ｒである。
【０１６７】 本発明の化合物、またはその塩あるいはプロドラッグとの接触により、その触
媒活性が調節されるタンパク質チロシンキナーゼは、非レセプターまたは細胞性
タンパク質チロシンキナーゼ（ＣＴＫ）であってもよい。したがって、Ｓｒｃ、
Ｆｒｋ、Ｂｔｋ、Ｃｓｋ、Ａｂｌ、ＺＡＰ７０、Ｆｅｓ、Ｆｐｓ、Ｆａｋ、Ｊａ
ｋ、Ａｃｋ、Ｙｅｓ、Ｆｙｎ、Ｌｙｎ、Ｌｃｋ、Ｂｌｋ、Ｈｃｋ、Ｆｇｒ、 お
よびＹｒｋ等の、これに限定されないＣＴＫの触媒活性は、本発明の化合物また
は塩との接触により調節されることができる。
【０１６８】 本発明の化合物との接触によってその触媒活性が調節されることができるまた
別のＰＫ群は、ＣＤＫ２およびＲａｆ等の（これに限定されない）セリン−トレ
オニンプロテインキナーゼである。
【０１６９】 もう一つの特徴においては、本発明は治療上有効な量の本発明の化合物か、ま
たはその塩またはプロドラッグを生物に投与することにより、ＰＫ関連障害を治
療または予防するための方法に関する。
【０１７０】 本発明の化合物か、またはその塩またはプロドラッグを含んでいる薬剤組成物
を、ＰＫ関連障害の予防または治療を目的として生物に投与することもまた、本
発明の一つの特徴である。
【０１７１】 したがって本発明は、ＲＴＫ、ＣＴＫ、および／またはＳＴＫの酵素活性に影
響を及ぼし、それによりかかるタンパク質によって伝達されるシグナルに干渉す
ことにより、ＰＫのシグナル伝達を調節する化合物に向けられたものである。さ
らに詳細には、本発明は癌腫、カポジ肉腫を含む肉腫、赤芽細胞腫、グリア芽細
胞腫、髄膜腫、星状細胞腫、黒色腫、および筋芽細胞腫を含むがこれに限定され
ない多くの種類の充実性腫瘍の治療に向けての治療用アプローチとしての、ＲＴ
Ｋ、ＣＴＫ、および／またはＳＴＫを介するシグナル伝達経路を調節する化合物
に向けられたものである。白血病等の非充実性腫瘍癌の治療または予防もまた本
発明により期待される。適用には、脳の癌、膀胱癌、卵巣癌、胃癌、膵臓癌、結
腸癌、血液の癌、肺癌、および骨の癌が含まれてよいが、これに限定されない。
【０１７２】 本文に述べた化合物がその予防、治療、および研究に有用であるかもしれない
不適切なＰＫ活性に関連した障害の型の、限定されないさらなる実例は、細胞増
殖性障害、線維性の障害、および代謝性障害である。
【０１７３】 本発明により予防、治療、またはさらに研究されることができる細胞増殖性障
害は、癌、血管増殖性障害、およびメサンギウム細胞増殖性障害を含む。
【０１７４】 血管増殖性障害は、異常な血管形成（血管の形成）および血管新生（血管の拡
散）を指す。血管形成および血管新生は胚発生、黄体形成、損傷治癒、および臓
器再生等の種々の正常な生理学的過程において重要な役割を果たすが、それらは
また腫瘍を生かしておくために必要な新しい毛細血管を形成する結果となる癌の
発生においても中枢的な役割を演じる。血管増殖障害の他の例は、新しい毛細血
管が関節に侵入して軟骨を破壊する関節炎、および糖尿病性網膜炎のように、網
膜内の新しい毛細血管が硝子体に侵入し、出血させ、さらに失明を引起す眼性疾
患を含む。
【０１７５】 高い親和性をもってＶＥＧＦと結合する構造的に関連性のある二つのＲＴＫが
同定されている：ｆｍｓ様チロシン１（ｆｉｔ−１）レセプター（Shibuyaら、1
990, Oncogene, 5 : 519 - 524；De Vriesら、1992, Science, 255 : 989 - 991
）、およびＶＥＧＨ−Ｒ２として知られているＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターで
ある。血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）は、インヴィトロでの細胞成長促進活性を
もつ、内皮細胞に特異的なマイトジェンであることが報告されている。Ferrara
＆ Henzel, 1989, Biochen. Biophys. Res. Comm., 161 : 851 - 858；Vaisman
ら、1990, J. Biol. Chem., 265 : 19461 - 19566。米国出願第０８／１９３,８
２９号、第０８／０３８,５９６号、および第０７／９７５,７５０号に発表され
た情報は、ＶＥＧＦが内皮細胞の増殖の原因となるばかりでなく、正常および病
的な血管新生の主要な調節因子であることを強く示唆している。全般的には、Kl
agsburn ＆ Soker, 1993, Current Biology, 3 (10) 699 - 702； Houckら、199
2. J. Biol. Chem., 267 : 26031 - 26037参照のこと。
【０１７６】 正常な血管形成および血管新生は、胚発生、損傷治癒、臓器再生等の種々の
生理学的過程、および***期の黄体における濾胞形成と妊娠後の胎盤の成長等の
女性の生殖過程において、重要な役割を演じている。Folkman ＆ Shing, 1992,
J. Biological Chem., 267 (16) : 10931 - 34。調節されない血管形成および／
または血管新生は、糖尿病等の疾患、ならびに血管形成に成長を依存している悪
性の充実性腫瘍と結付けられてきた。 Klagsburn ＆ Soker, 1993, Current Bio
logy, 3 (10) 699 - 702；Folkham, 1991, J. Natl. Cancer Inst.,82 : 4 - 6
；Weidnerら、1991, New Engl. J. Med., 324 : 1 - 5。
【０１７７】 血管新生および血管形成の間の内皮細胞の増殖および移動におけるＶＥＧＦの
推測される役割は、 これらの過程におけるＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターにつ
いての重要な役割を示している。真性糖尿病（Folkman, 198, XIth Congress of
Thrombosisand Haemostasis（第１１回血栓症および鬱血会議）、（Verstraeta
ら、編）、583~596頁、ルーベン大学出版（Leuven University Press）、ルーベ
ン））、および関節炎等の疾患、ならびに悪性腫瘍の増殖は、調節されない血管
新生からの結果でありうる。たとえば、Folkman, 1971, N. Engl. J. Med., 285
: 1182 - 1186参照のこと。ＶＥＧＦが特異的に結合するレセプターは、血管形
成および／または血管新生、ならびにかかる過程によって引起される異常な細胞
増殖を含む厳しい疾患の、制御および調節のための重要かつ有力な治療上の標的
である。Plowmanら、1994, DN&P, 7 (6) : 334 - 339。さらに詳しくは、新生血
管形成におけるＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターの高度に特異的な役割は、それを
癌および、調節されない血管形成を含む他の疾患の治療のための治療用アプロー
チの選択ターゲットにする。
【０１７８】 したがって、本発明の一つの特徴は、血管新生および／または血管形成を阻害
または促進するべく、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターを含むチロシンキナーゼシ
グナル伝達を制御および／または調節することのできる化合物、すなわちＶＥＧ
Ｆ等のリガンドにより活性化された場合、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１により伝達される
シグナルを阻害するか、妨げるか、または干渉する化合物に関する。本発明の化
合物は、チロシンキナーゼシグナル伝達経路に沿ったレセプターまたは他の成分
に作用すると信じられているが、調節されない血管新生の結果である腫瘍細胞に
直接作用してもよい。
【０１７９】 一般にいう「ｆｌｋ−Ｉ」レセプターの、ヒトおよびマウスの同等物の命名は
異なるが、それらは多くの点において交換可能である。マウスのレセプターＦｌ
ｋ−Ｉと、ヒトにおけるその同等物であるＫＤＲは、細胞内ドメインのうちの９
３．４％の配列相同性を共有している。同様に、マウスＦｌｋ−Ｉは、マウスＶ
ＥＧＦと同じ親和性をもってヒトＶＥＧＦと結合しており、したがっていずれの
種に由来するリガンドによっても活性化される。Millauerら、1993, Cell, 72 :
835 - 846；Quinnら、1993, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90 : 7533 - 7537
。Ｆｌｋ−Ｉはまた、２９３細胞（ヒト胚性腎臓の線維芽細胞）において同時発
現された場合、ヒトＲＴＫの基質（たとえばＰＬＣ−γまたはｐ８５）と結合し
、それに続いて、チロシンをリン酸化する。
【０１８０】 したがって、Ｆｌｋ−Ｉレセプターに依存したモデルは、ＫＤＲレセプターの
理解に直接適用することができる。たとえば、マウスのシグナル伝達経路を調節
する化合物を同定する方法においてマウスＦｌｋ−Ｉレセプターを使用すること
は、ヒトのシグナル伝達経路を調節するために用いることができる化合物、すな
わちＫＤＲレセプターに関連した活性を調節する化合物の同定に直接適用するこ
とができる。よってインヴィトロにおいてＫＤＲ／ＦＬＫ−１の阻害剤として同
定された化学的配合物は、適当なインヴィヴォのモデルにおいて確認されること
が可能である。インヴィヴォでのマウスおよびラット双方の動物モデルは、ＫＤ
Ｒ／ＦＬＫ−１に誘導されるシグナル伝達経路に作用する薬剤の、臨床上の潜在
能力についての調査にとって優れた価値があることが証明されている。
【０１８１】 したがって、一つの特徴において、本発明はＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターの
酵素活性に影響を及ぼすことにより、またＫＤＲ／ＦＬＫ−１により誘導される
シグナルに干渉することにより、血管形成および／または血管新生を制御、調節
および／または阻害する化合物に向けられたものである。もう一つの特徴におい
ては、本発明は、これに限定されないが、グリア芽細胞腫、黒色腫、カポジ肉腫
、および卵巣、肺、***、前立腺、膵臓、結腸、および扁平上皮の癌を含む多種
類の充実性腫瘍を治療するための治療用アプローチとして、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１
を介するシグナル伝達を制御、調節、および／または阻害する化合物に向けられ
たものである。さらに、データは、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１を介するシグナル伝達経
路を阻害する化合物の投与が、血管腫、再狭窄、および糖尿病性網膜症の治療に
も用いることができることを示唆している。
【０１８２】 本発明のさらなる特徴は、ｆｌｔ−１レセプターを含む経路を含め、他のレセ
プターを介する経路による血管形成および血管新生の阻害に関する。
【０１８３】 レセプターチロシンキナーゼを介するシグナル伝達は、特異的な成長因子（リ
ガンド）との細胞外相互作用によって開始され、レセプターの２量体化、内在タ
ンパク質チロシンキナーゼ活性の一過性の刺激、および自己リン酸化がそれに続
く。それにより細胞内シグナル伝達分子のための結合部位が造られ、そのことが
適切な細胞の応答、たとえば細胞***、細胞外の微小環境に対する代謝効果、そ
の他を容易にするある範囲の細胞質シグナリング分子との複合体形成に導く。Sc
hlessinger & Ullrich, 1992, Neuron 9 :1 - 20参照。
【０１８４】 ＫＤＲ／ＦＬＫ−１の細胞内領域と、ＰＤＧＦ−βレセプターのそれ（５０．
３％の相同性）、および／または関連するｆｌｔ−１レセプターとの緊密な相同
性は、重複したシグナル伝達経路の誘導を示している。たとえばＰＤＧＦ−βレ
セプターについては、ｓｒｃファミリーのメンバー（Twamleyら、1993, Proc. N
atl. Acad. Sci. USA, 90 : 7696 - 7700）、ホスファチジルイノシトール−３'
キナーゼ（Huら、1992, Mol. Cell. Biol. 12 : 981 - 990）、ホスホリパーゼ
ｃγ（Kashishian＆ Cooper, 1993, Mol. Cell. Biol. , 4 : 49 - 51）、ｒａ
ｓ−ＧＴＰアーゼ活性化タンパク質（Kashishianら、1992, EMBO J., 11 : 1373
- 1382）、ＰＴＰ−ＩＤ／ｓｙｐ（Kazulauskasら、1993, Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 10 90 : 6939 - 6943）、Ｇｒｂ２（Arvidssonら、1994, Mol. Cell.
Biol. ,14 : 6715 - 6726)、およびアダプター分子SｈｃおよびＮｕｋ（Nishim
uraら、1993, Mol. Cell. Biol. , 13 : 6889 - 6896）が、異なる自己リン酸化
部位を含んでいる領域に結合することが示されている。全般的には、Claesson-W
elsh, 1994, Prog. Growth Factor Res., 5 : 37 - 54参照のこと。したがって
、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１により活性化されるシグナル伝達経路が、ｒａｓ経路（Ro
zakisら、1992, Nature, 360 : 689 - 692）、ＰＩ−３'キナーゼ、ｓｒｃ介在
性、およびｐｌｃγ介在性の経路を含むと考えられる。これらの経路の各々は、
内皮細胞におけるＫＤＲ／ＦＬＫ−１の血管新生および／または血管形成効果に
おいて、重大な役割を演じることができる。したがって本発明のまたさらなる特
徴は、本文に述べた有機化合物を、血管新生および血管形成を調節するべく用い
ることに関するが、それはかかる過程がこれらの経路によって調節されるためで
ある。
【０１８５】 逆に、再狭窄などの、血管の収縮、狭窄、または閉鎖に関連した障害にも関与
することが示唆されており、本発明の方法により治療または予防することができ
る。
【０１８６】 線維性障害は細胞外マトリックスの異常な形成を表す。線維性障害の例は、肝
硬変およびメサンギウム細胞増殖障害を含む。肝硬変は、肝性瘢痕の形成を生じ
る結果となる細胞外マトリックス成分の増加によって特徴づけられる。肝性瘢痕
を生じる結果となる亢進された細胞外マトリックスは、肝炎等のウイルス感染に
よっても引起こされることが可能である。脂肪細胞は、肝硬変において重要な役
割を果たすらしい。他の関係する線維性障害はアテローム性動脈硬化症を含む。
【０１８７】 メサンギウム細胞の増殖性障害は、メサンギウム細胞の異常増殖によってもた
らされる障害を指す。メサンギウム増殖障害は、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、お
よび悪性腎硬化症等のヒトの腎疾患、ならびに血栓性細小血管症症候群、移植拒
絶反応、および糸球体症といった障害を含む。ＲＴＫ ＰＤＧＦＲはメサンギウ
ム細胞の増殖の維持に関与することが示唆されている。Floegeら、1993, Kidney
International 43 : 47s - 54s。
【０１８８】 多くの癌は細胞増殖性の障害であり、先に記したように、ＰＫは細胞増殖性障
害に関係づけられてきた。したがって、たとえばＲＴＫファミリーの仲間等のＰ
Ｋが癌の発生と関連づけられてきたことも意外なことではない。ＥＧＦＲ（Tuzi
ら、1991, Br. J. Cancer 63 : 227 - 233、Torpら、1992, APMIS 100 : 713 -
719）、ＨＥＲ２／ｎｅｕ（Slamonら、1989, Science 244 : 707 - 712）、およ
びＰＤＧＦ−Ｒ（Kumabeら、1992, Oncogene, 7 : 627 -633）等のこれらのレセ
プターのいくつかは多くの腫瘍において過剰発現され、および／またはオートク
リンループにより持続的に活性化される。事実、ほとんどの一般的かつ重い癌に
おいては、これらのレセプターの過剰発現（Akbasak & Suner-Akbasakら、1992,
J. Neurol. Sci., 111 : 119 - 133, Dicksonら、1992, Cancer Treatment Res
. 61 : 249 - 273, Korcら、1992, J. Clin. Invest. 90 1352 - 1360）、およ
びオートクリーンループ（Lee & Donoghue, 1992, J. Cell. Biol., 118 : 1057
- 1070, Korcら、前出、Akbasak & Suner-Akbasakら、前出）が証明されている
。たとえば、ＥＧＦＲは扁平上皮癌、星状細胞腫、グリア芽細胞腫、頭頚部癌、
肺癌、および膀胱癌と関連づけられている。ＨＥＲ２は***、卵巣、胃、肺、膵
臓、および膀胱の癌と結びつけられている。ＰＤＧＦＲはグリア芽細胞腫および
黒色腫、ならびに肺、卵巣、および前立腺の癌と関連づけられている。ＲＴＫ
ｃ−ｍｅｔもまた悪性の腫瘍形成と関連づけられている。たとえば、ｃ−ｍｅｔ
は他の癌の中でも、結腸直腸、甲状腺、膵臓、胃、および肝細胞の癌腫およびリ
ンパ腫と関連づけられている。加えてｃ−ｍｅｔは白血病に結びつけられている
。ｃ−ｍｅｔ遺伝子の過剰発現はまたホジキン病およびバーキット病の患者に検
出されている。
【０１８９】 ＩＧＦ−ＩＲは、栄養上の支持およびI I型糖尿病に関係づけられていること
に加えて、いくつかの型の癌に関係づけられている。たとえば、ＩＧＦ−Ｉはい
くつかの型の腫瘍、たとえばヒト乳癌の癌細胞（Arteagaら、1989, J. Clin. In
vest. 84 : 1418 - 1423）、および肺腫瘍小細胞（Macauleyら、1990, Cancer R
es., 50 : 2511 - 2517）に対するオートクリン成長刺激因子として関係づけら
れている。さらに、ＩＧＦ−Ｉは神経系の正常な成長および分化に完全に深くか
かわっていると共に、ヒトの神経膠腫のオートクリン刺激因子でもあるように見
える。Sandberg-Nordqvistら、1993, Cancer Res. 53 : 2475 - 2478。細胞増殖
におけるＩＧＦ−ＩＲとそのリガンドの重要性は、培養されている多くの細胞型
（線維芽細胞、上皮細胞、平滑筋細胞、Ｔリンパ球、骨髄性細胞、軟骨細胞、お
よび骨芽細胞（骨髄の幹細胞）がＩＧＦ−Ｉによって成長するべく刺激されると
いう事実によってさらに支持される。Goldring & Goldring, 1991, Eukaryotic
Gene Expression, 1 : 301 - 326。最近の一連の発表においてBasergaは、ＩＧ
Ｆ−ＩＲが形質転換の機構において中心的な役割を果たしていること、またそれ
自体がヒトの広範囲の悪性腫瘍に対する治療的介入のための好ましい標的となり
得ることを示唆している。Baseerga、1995, Cancer Res., 55 : 249 - 252, Ba
serga, 1994, Cell 79 : 927 - 939, Coppolaら、1994, Mol. Cell. Biol., 14
: 4588 - 4595。
【０１９０】 ＳＴＫは、特に乳癌を含む多くの型の癌に関係づけられている（Caneら、Int.
J. Cancer, 54 : 571 -77（1993））。
【０１９１】 異常なＰＫ活性と疾患との間の結びつきは癌に限らない。たとえば、ＲＴＫは
乾癬、真性糖尿病、子宮内膜症、血管新生、アテローム斑の発生、アルツハイマ
ー病、フォンヒッペル−リンダウ病、表皮の過剰増殖、神経変性疾患、年齢に関
連した黄斑部変性、および血管腫といった疾患と関連づけられている。たとえば
、ＥＧＦＲは角膜および皮膚の損傷治癒と関連づけられている。インスリン−Ｒ
およびＩＧＦ−Ｒの欠陥はI I型の真性糖尿病において示される。特異的なＲＴ
Ｋとそれらの治療上の指標との間のさらに完全な相関関係は、Plowmanら、1994,
DN&P 7 : 334 - 339において明らかにされている。
【０１９２】 先に記したように、ＲＴＫのみならず、ｓｒｃ、ａｂｌ、ｆｐｓ、ｙｅｓ、ｆ
ｙｎ、ｌｙｎ、ｌｃｋ、ｂｌｋ、ｈｃｋ、ｆｇｒ、およびｙｒｋを含むがこれに
限定されないＣＴＫ（Bolenらによる総説、1992, FASEB J., 6 : 3403 - 3409）
も、増殖および代謝のシグナル伝達経路に深くかかわっており、したがって本発
明が向けられている多くのＰＴＫを介する障害に深くかかわっていることが予想
でき、かつ示されてきた。たとえば突然変異したｓｒｃ（ｖ−ｓｒｃ）は、腫瘍
性タンパク質（ｐｐ６０v-src）であることがニワトリにおいて示されている。
さらに、その細胞性同等物であるプロト癌遺伝子ｐｐ６０c-srcは、多くのレセ
プターの発癌シグナルを伝達する。腫瘍におけるＥＧＦＲまたはＨＥＲ２／ｎｅ
ｕの過剰発現は悪性細胞に特徴的であるが正常細胞にはない、ｐｐ６０c-srcの
構造的活性化に導く。一方、ｃ−ｓｒｃの発現を欠如しているマウスは大理石骨
病の表現形を示し、破骨細胞機能におけるｃ−ｓｒｃの重要な関与と、関連する
障害における可能な関与とを暗示している。
【０１９３】 同様に、Ｚａｐ７０は自己免疫異常に関係してよいＴ細胞シグナリングに関係
づけられてきた。
【０１９４】 ＳＴＫは、炎症、自己免疫疾患、免疫応答、および、再狭窄、線維症、 乾癬
、変形性関節炎、およびリウマチ様関節炎といった過剰増殖障害と結びつけられ
てきた。
【０１９５】 ＰＫはまた着床にも関連づけられてきた。したがって本発明の化合物は、かか
る着床を防ぐ有効な方法を提供し、それにより受胎調節用薬剤として有用であり
うる。
【０１９６】 最後に、ＲＴＫおよびＣＴＫの双方は過免疫障害に深くかかわっていると一般
に考えられている。
【０１９７】 上で議論した一つまたはそれより多いプロテインキナーゼの触媒活性を調節す
る化学的配合物を同定するための方法は、本発明のもう一つの特徴である。当該
方法は、所望のプロテインキナーゼを発現している細胞を本発明の化合物（ある
いはその塩またはプロドラッグ）と接触させること、および当該細胞を、当該化
合物がそれらに対して及ぼす効果について監視することを含む。この効果は、肉
眼で、あるいは機械装備の使用を介して観察することができる、細胞表現型にお
けるどのような変化または無変化でもよい。監視された細胞表現型における変化
または無変化は、たとえば、これに限定されないが、細胞におけるプロテインキ
ナーゼの触媒活性の変化または無変化か、あるいはプロテインキナーゼと天然の
結合相手との相互作用の変化または無変化でもよい。
【０１９８】 種々のＰＫに対する本発明のいくつかの代表的な化合物の効果の実例は、表２
に示されている。表示された化合物ならびにデータは、いかなる方法によっても
本発明の範囲を限定するものと解釈されない。
【０１９９】３． 薬剤学的組成物および用途 本発明の化合物、そのプロドラッグ、または当該化合物とそのプロドラッグの
いずれかの生理学的に許容される塩は、それ自体をヒトの患者に投与するか、ま
たは前述の材料が適当な担体または賦形剤と混合された薬剤学的組成物として投
与することが可能である。薬物の製剤および投与の技術は、「Remingtons Pharm
cological Sciences」、マック出版社（Mack Publishing Co）、ペンシルベニア
州、イーストン、の最新版に見られるだろう。
【０２００】投与経路 本文において用いられる場合、「投与する」または「投与」は、本発明の化合
物、塩、またはプロドラッグを、あるいは本発明の化合物、塩、またはプロドラ
ッグを含んでいる薬剤学的組成物を、ＰＫ関連障害の予防または治療を目的とし
て生物に送達することに関する。
【０２０１】 適当な投与経路は、これに限定されないが、経口、直腸、経粘膜、または腸管
投与か、あるいは筋肉内、皮下、骨髄内、髄内、直接心室内、静脈内、硝子体内
、腹腔内、鼻腔内、または眼内の注射を含む。好ましい投与経路は、経口または
非経口である。
【０２０２】 別法として、全身性の方法ではなく局所に、たとえば当該化合物を充実性腫瘍
内へ直接に、しばしばデポ剤または持効性の製剤において、注射することにより
投与してもよい。
【０２０３】 さらに、当該薬物はターゲティングされたドラッグデリバリーシステムにおい
て、たとえば腫瘍に特異的な抗体によりコートされたリポソームにおいて投与さ
れてもよい。リポソームは当該腫瘍にターゲティングされ、取り込まれることと
なる。
【０２０４】組成物／製剤 本発明の薬剤学的組成物は、この技術に周知の工程、たとえば通常の混合、溶
解、顆粒化、糖衣作成、研和、乳化、カプセル封入、捕捉、または凍結乾燥の工
程により製造されてよい。
【０２０５】 本発明にしたがって使用するための薬剤学的組成物は、活性成分の薬剤学的に
使用可能な製品への加工を容易にする賦形剤および補助剤を含む、一つまたはそ
れより多い生理学的に許容される担体を用いる通常の方法で製剤されてよい。適
切な製剤は、選ばれた投与経路に依存する。
【０２０６】 注射用には、本発明の化合物は水溶性溶液、好ましくはハンクス溶液、リンガ
ー溶液、または生理的塩類緩衝液等の生理学的に適した緩衝液において製剤され
てよい。経粘膜投与用には、浸透されるべき障壁に適した浸透剤が製剤に用いら
れる。かかる浸透剤はこの技術において一般に周知である。
【０２０７】 経口投与用には、活性成分を、この技術において周知の薬剤学的に許容される
担体と組合せて製剤することができる。かかる担体は、本発明の化合物を、患者
による経口摂取のための錠剤、丸剤、トローチ、糖衣剤、カプセル、液体、ゲル
、シロップ、スラリー、懸濁液、その他として製剤されるようにする。経口使用
のための薬剤学的製品は、固形の賦形剤を用い、結果として得られた混合物を任
意に破砕し、所望であればさらに他の適当な補助剤を添加した後に、顆粒混合物
を加工して錠剤または糖衣剤のコアを得る。有用な賦形剤は、特に、ラクトース
、ショ糖、マンニトール、またはソルビトールを含む糖類、たとえばトウモロコ
シデンプン、小麦デンプン、米デンプン、およびジャガイモデンプン等のセルロ
ース製品、およびゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシ
プロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／
またはポリビニルピロリドン（ｐｖｐ）等の他の材料、といった増量剤である。
もし所望であれば、架橋されたポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギニン
酸等の崩壊剤が添加されてもよい。またアルギン酸ナトリウム等の塩も使用され
てよい。
【０２０８】 糖衣剤のコアは、適当なコーティングを供給される。この目的のためには、濃
縮された糖溶液が用いられてよいが、それはアラビアゴム、タルク、ポリビニル
ピロリドン、カルボポルゲル（carbopol gel）、ポリエチレングリコール、およ
び／または２酸化チタン、ラッカー溶液、および適当な有機溶媒または溶媒混合
物を任意に含んでよい。識別のため、あるいは活性成分の線量の異なる組合せを
特徴づけるため、染料または色素が錠剤または糖衣剤コーティングに添加されて
よい。
【０２０９】 経口的に用いられることが可能な薬剤学的組成物は、ゼラチンでできたプッシ
ュフィット（push-fit）カプセル、ならびにゼラチンおよびグリセロールやソル
ビトールといった可塑剤から成るソフトな密封カプセルを含む。プッシュフィッ
トカプセルは、活性成分を、ラクトース等の増量剤、デンプン等の結合剤、およ
び／またはタルクやステアリン酸マグネシウムといった潤滑剤、さらに任意に安
定剤と混合して含むことができる。ソフトカプセルにおいては、活性成分は脂肪
油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコール等の適当な液体中に溶
解または懸濁されてよい。安定剤もこれらの製剤に添加されてよい。
【０２１０】 吸入による投与用には、本発明に従って用いられる化合物は、加圧されたパッ
クまたはネブライザーと、噴射剤、たとえばこれに限定されないが、ジクロロジ
フルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、
または二酸化炭素とを用いたエアーゾルスプレイの形状にて便利に送達される。
加圧されたエアーゾルの場合、用量単位は計量された量を送達するべく備えられ
たバルブにより調節されてよい。たとえば吸入器または注入器において使用する
ためのゼラチン製のカプセルおよびカートリッジは、当該化合物の粉末混合物と
、ラクトースやデンプンといった適当な粉末基剤とを含んで製剤されてよい。
【０２１１】 また当該化合物は、たとえば大量注射または連続的な灌流による非経口投与用
に製剤されてもよい。注射用の製剤は、単位用量にて、たとえばアンプルにて、
あるいは多用量容器中に添加された保存料と共に提供されてよい。当該化合物は
油性または水性の媒体において、懸濁液、溶液、または乳濁液といった形状をと
ってよく、また懸濁、安定および／または分散剤といった製剤物質を含んでもよ
い。
【０２１２】 非経口投与用の薬剤組成物は、これに限定されないが、活性成分の塩等の、水
に可溶性の形状の水溶液を含む。さらに、活性成分の懸濁物は、親油性の媒体中
で調製されてよい。適切な親油性媒体は、脂肪油、ゴマ油等の脂肪油、オレイン
酸エチル等の合成脂肪酸エステル、およびトリグリセリド、またはリポソーム等
の物質を含む。水溶性の注射用懸濁液は、カルボキシメチルセルロースナトリウ
ム、ソルビトール、またはデキストラン等の当該懸濁液の粘度を増す物質を含ん
でよい。任意で、当該懸濁液はまた、高度に濃縮された溶液の調製を可能にする
べく、当該化合物の可溶性を亢進する適当な安定剤および／または薬剤を含んで
もよい。
【０２１３】 別法として、活性成分は、使用前に適当な媒体、たとえば無菌の、発熱物質な
しの水を用いて構成するための、粉末の形状であってもよい。
【０２１４】 当該化合物は、たとえばカカオバターまたは他のグリセリドといった通常の坐
剤基剤を用いて、坐剤または停留浣腸等の直腸用組成物に製剤されてもよい。
【０２１５】 先に述べた製剤に加えて、当該化合物はまたデポ製剤として製剤されてよい。
かかる長時間作用性の製剤は、埋込み（たとえば皮下または筋肉内への）による
か、または筋肉内注射により投与されてよい。この投与経路のためには、本発明
の組成物は適当な高分子性または疎水性物質と共に（たとえば薬理学的に許容さ
れる油剤による乳濁液にて）、イオン交換樹脂と共に、あるいはこれに限定され
ないがやや溶けにくい塩等のやや溶けにくい誘導体として、製剤されてよい。
【０２１６】 本発明の疎水性化合物のための薬剤学的担体の限定しない実例は、ベンジルア
ルコール、非極性界面活性剤、水混和性有機高分子、およびＶＰＤコソルベント
システム等の水相、を含むコソルベントシステムである。ＶＰＤは３％ｗ／ｖの
ベンジルアルコール、８％ｗ／ｖの非極性界面活性剤ポリソルベート（Polysorb
ate）８０TM，および６５％ｗ／ｖのポリエチレングリコール３００の、無水ア
ルコールで体積を合わせた溶液である。ＶＰＤコソルベントシステム（ＶＰＤ：
Ｄ５Ｗ）は５％デキストロース水溶液を用いて１：１に希釈されたＶＰＤから成
る。このコソルベントシステムは疎水化合物をよく溶解し、またそれ自体が全身
投与に際して低毒性を産生する。本来、かかるコソルベントシステムの割合は、
その可溶性および毒性の特性を破壊することなしに、かなり変えれられてよい。
さらに、コソルベント成分の正体は変えられてよい：たとえば、ポリソルベート
８０TMの代わりに他の低毒性の非極性界面活性剤が用いられてよく、ポリエチレ
ングリコールの比率の大きさは変えられてよく、他の生物適合性のポリマーがポ
リエチレングリコール、たとえばポリビニルピロリドンを置換してよく、また他
の糖類または多糖類がデキストロースを置換してもよい。
【０２１７】 別法として、疎水性の薬剤学的化合物用の他のデリバリーシステムが用いられ
てもよい。リポソームおよび乳濁液は、疎水性薬剤のためのデリバリー用の媒体
または担体としての周知の例である。さらに、ジメチルスルホキシド等のある有
機溶媒も用いてよいが、しばしば毒性がより大きい。
【０２１８】 さらに、当該化合物は、治療用薬剤を含んでいる固形の疎水性高分子から成る
半透性のマトリックスといった持続放出性システムを用いて送達されてよい。種
々の持続放出性物質が確立されており、当業者には周知である。持続放出性カプ
セルは、その化学的性質に依存して数週間から１００日を超えるまでにわたり、
当該化合物を放出してよい。治療用薬剤の化学的性質および生物学的安定性に依
存して、タンパク質安定化のための付加的な方策が用いられてよい。
【０２１９】 本文の薬剤学的組成物はまた、適当な固形またはゲル相の担体または賦形剤を
含んでよい。かかる担体または賦形剤の実例は、これに限定されないが、炭酸カ
ルシウム、リン酸カルシウム、種々の糖類、デンプン、セルロース誘導体、ゼラ
チン、およびポリエチレングリコール等のポリマーを含む。
【０２２０】 本発明のＰＫ調製化合物の多くは、生理学的に許容される塩類として提供され
てよいが、それにおいては、本発明の化合物は負または正に帯電された種を形成
してもよい。当該化合物が正に帯電した成分を形成している塩の実例は、これに
限定されないが、第４アンモニウム（本文の他の場所に定義されている）、塩酸
塩、硫酸塩、炭酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩等の、第４
アンモニウム基の窒素原子が、適当な酸と反応した本発明の選ばれた化合物の窒
素である塩類を含む。本発明の化合物が負に帯電した種を形成している塩類は、
これに制限されないが、当該化合物中のカルボン酸基と適当な塩基（たとえば水
酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）、水酸化カリウム（ＫＯＨ）、水酸化カルシウム（
Ｃａ（ＯＨ）2）、その他）との反応によって形成されるナトリウム、カリウム
、カルシウム、およびマグネシウム塩を含む。
【０２２１】用量 本発明における使用に適した薬剤学的組成物は、意図された目的、すなわちＰ
Ｋ活性の調節、またはＰＫ関連障害の治療または予防を遂行するべく充分な量の
活性物質が含まれている組成物を含む。
【０２２２】 さらに具体的には、治療上有効な量とは、疾患の症状を予防、緩和、または改
善するため、あるいは治療されている患者の生存を延長されるために有効な化合
物の量を意味する。
【０２２３】 治療上有効な量の決定は、特に本文において提供された詳細な開示に照らし合
われせば、当業者の能力で充分可能である。
【０２２４】 本発明の方法において用いられる化合物については、治療上有効な量または用
量は、最初は細胞培養検定から算定されることが可能である。したがって、動物
モデルにおける使用のために、用量は細胞培養において測定されるようなＩＣ50 （すなわちＰＫ活性の最大阻害の半分を成し遂げる試験化合物の濃度）を含む循
環濃度範囲を達成するべく公式化されてよい。かかる情報は次いで、ヒトにおけ
る有用な用量のさらに正確な決定のために用いられることが可能である。
【０２２５】 本文に述べた化合物の毒性ならびに治療上の有効性は、細胞培養物または実験
動物において、たとえば披検化合物についてＩＣ50およびＬＤ50（双方とも本文
の他の場所において議論されている）を測定することにより、標準的な薬剤学的
方法により測定されることが可能である。このような細胞培養物の検定および動
物研究から得られたデータは、ヒトにおいて使用するための用量範囲の公式化に
利用することができる。用量は、用いられる剤形と、利用される投与経路とに依
存して変えられてよい。正確な製剤、投与経路、および用量は、個々の医師によ
り、患者の状態を考慮して選択されることが可能である。（たとえば、Finglら
、1975, 「The Pharmacological Basis of Therapeutics」第１章、１頁を参照
のこと）。
【０２２６】 投薬用量および間隔は、活性をもつ種の、キナーゼ調節効果を維持するために
充分な血漿濃度を提供するべく、個々に調節されてよい。このような血漿濃度は
、最小有効濃度（ＭＥＣ）と呼ばれる。ＭＥＣは各々の化合物ごとに異なるであ
ろうが、インヴィトロのデータから算定されることは可能であり、たとえばキナ
ーゼの５０〜９０％阻害を達成するために必要な濃度は、本文に述べた検定法を
用いて確認されてよい。ＭＥＣを成遂げるために必要な用量は個体の特性および
投与経路に依存することとなる。ＨＰＬＣ検定法または生物学的検定法は、血漿
濃度を測定するべく使用されることが可能である。
【０２２７】 投薬間隔もまたＭＥＣ値を用いて測定することができる。化合物は、ＭＥＣよ
り高い血漿濃度が１０〜９０％の時間、このましくは３０〜９０％の間、最も好
ましくは５０〜９０％の間にわたって維持される投与計画を用いて投与されるこ
ととなる。
【０２２８】 局所投与または選択的摂取の場合には、薬剤の有効な局所濃度は血漿濃度に関
係なく、この技術において周知の他の方法を、正しい用量および間隔を決定する
べく用いてよい。 投与される化合物の量は、もちろん治療される患者、苦しみの激しさ、投与法
、処方している医師の判断、その他に依存する。
【０２２９】梱包 当該化合物は、もし所望であれば、 ＦＤＡ承認のキット等の、活性成分を含
んでいる一つまたはそれより多い単位剤形を含むパックまたは調剤装置にて提供
されてよい。パックはたとえばＰＴＰ包装等の金属またはプラスチックの箔でよ
い。パックまたは調剤装置には、投与のための使用説明書が添付されてよい。
【０２３０】 またパックまたは調剤装置は、薬剤の製造、用途、または販売を取締まる政府
機関によって規定された形式の、容器に関連した注意書が添付されてよく、その
注意書は当該組成物の形状について、あるいはヒトまたは獣医学的投与について
の当該機関による承認を反映するものである。かかる注意書は、たとえば米国食
品医薬品局により処方箋調剤薬として承認されたラベルによるものか、または承
認された製品に差込まれたものでもよい。適合した製剤学的担体中で製剤された
、本発明の化合物を含んでいる組成物もまた調製され、適当な容器内に設置され
、さらに指示された条件による処置のためにラベルされてよい。ラベルに示され
た適切な条件は、腫瘍の治療、血管新生の阻害、線維症、糖尿病、およびその他
の治療を含んでよい。
【０２３１】 ４．合成 本発明の化合物，ならびに前駆体のオキシインドールおよびアルデヒドは，化
学の技術分野でよく知られている技術を用いて容易に合成することができる。当
業者には，本発明の化合物を形成する他の合成経路が利用可能であり，以下の記
載は例示のためにのみ提供され，限定するものではないことが理解されるであろ
う
【０２３２】一般的合成方法 以下の一般的方法論を用いて，本発明の化合物およびその中間体を製造するこ
とができる。
【０２３３】置換オキシインドールの製造 ５−アミノ−２−オキシインドール ５−ニトロ−２−オキシインドール（６．３ｇ）をメタノール中で１０％パラ
ジウム担持炭素で水素化して，３．０ｇ（６０％収率）の表題化合物を白色固体
として得た。
【０２３４】５−ブロモ−２−オキシインドール ２０ｍＬアセトニトリル中の２−オキシインドール（１．３ｇ）を−１０℃に
冷却し，２．０ｇのＮ−ブロモスクシンイミドを撹拌しながらゆっくり加えた。
反応液を−１０℃で１時間および０℃で２時間撹拌した。沈殿物を回収し，水で
洗浄し，乾燥して，１．９ｇ（９０％収率）の表題化合物を得た。
【０２３５】４−メチル−２−オキシインドール ２０ｍＬの乾燥エーテル中のジエチルオキサレート（３０ｍＬ）を，撹拌しな
がら，５０ｍＬの乾燥エーテル中に懸濁した１９ｇのカリウムエトキシドに加え
た。混合物を氷浴中で冷却し，２０ｍＬの乾燥エーテル中の２０ｍＬの３−ニト
ロ−ｏ−キシレンをゆっくり加えた。粘稠な暗赤色混合物を０．５時間加熱還流
し，濃縮して暗赤色固体を得，ほぼすべての固体が溶解するまで１０％水酸化ナ
トリウムで処理した。暗赤色混合物を，赤色が黄色に変化するまで３０％過酸化
水素で処理した。暗赤色が存在しなくなるまで，混合物を１０％水酸化ナトリウ
ムと３０％過酸化水素で交互に処理した。固体を濾別し，濾液を６Ｎ塩酸で酸性
にした。得られた沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥し
て，９．８ｇ（４５％収率）の２−メチル−６−ニトロフェニル酢酸を灰白色固
体として得た。固体をメタノール中で１０％パラジウム担持炭素で水素化して，
９．０４ｇの表題化合物を白色固体として得た。
【０２３６】７−ブロモ−５−クロロ−２−オキシインドール ５−クロロ−２−オキシインドール（１６．８ｇ）および１９．６ｇのＮ−ブ
ロモスクシンイミドを１４０ｍＬのアセトニトリル中に懸濁し，３時間還流した
。２時間還流の時点において薄層クロマトグラフィー（シリカ，酢酸エチル）は
，５−クロロ−２−オキシインドールまたはＮ−ブロモスクシンイミド（Ｒｆ０
．８），生成物（Ｒｆ０．８５）および第２の生成物（Ｒｆ０，９）を示し，そ
の比率はさらに１時間還流しても変化しなかった。混合物を１０℃に冷却し，沈
殿物を真空濾過により回収し，２５ｍＬのエタノールで洗浄し，漏斗中で２０分
間吸引乾燥して，１４．１ｇの湿潤生成物（５６％収率）を得た。固体を２００
ｍＬの変性エタノールに懸濁し，１０分間撹拌し還流することによりスラリー洗
浄した。混合物を氷浴中で１０℃に冷却した。固体生成物を真空濾過により回収
し，２５ｍＬのエタノールで洗浄し，真空下で４０℃で乾燥して，１２．７ｇ（
５１％収率）の７−ブロモ−５−クロロ−２−オキシインドールを得た。
【０２３７】５−フルオロ−２−オキシインドール ５−フルオロイサチン（８．２ｇ）を５０ｍＬのヒドラジン水和物に溶解し，
１．０時間還流した。次に反応混合物を氷水に注加した。次に沈殿物を濾過し，
水で洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，表題化合物を得た。
【０２３８】５−ニトロ−２−オキシインドール ２−オキシインドール（６．５ｇ）を２５ｍＬ濃硫酸に溶解し，混合物を−１
０から−１５℃に保持し，その間に２．１ｍＬの発煙硝酸を滴加した。硝酸を加
えた後，反応混合物を０℃で０．５時間撹拌し，氷水に注加した。沈殿物を濾過
により回収し，水で洗浄し，５０％酢酸から結晶化した。次に結晶生成物を濾過
し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，６．３ｇ（７０％）の５−ニトロ−２−オ
キシインドールを得た。
【０２３９】５−アミノスルホニル−２−オキシインドール ２７ｍＬのクロロスルホン酸を入れた１００ｍＬのフラスコに１３．３ｇの２
−オキシインドールをゆっくり加えた。添加の間，反応温度は３０℃未満に維持
した。添加後，反応混合物を室温で１．５時間撹拌し，６８℃で１時間加熱し，
冷却し，水に注加した。沈殿物を水で洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，１１
．０ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドール（５０％収率）を得，こ
れをさらに精製することなく用いた。 ５−クロロスルホニル−２−オキシインドール（２．１ｇ）を１０ｍＬのエタ
ノール中の１０ｍＬの水酸化アンモニウムに加え，室温で一夜撹拌した。混合物
を濃縮し，固体を真空濾過により回収して，０．４ｇ（２０％収率）の表題化合
物を灰白色固体として得た。
【０２４０】５−メチルアミノスルホニル−２−オキシインドール ３．３８ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドールの，テトラヒドロ
フラン中の１０ｍＬの２Ｍメチルアミン中の懸濁液を室温で４時間撹拌し，この
間に白色固体が形成した。沈殿物を真空濾過により回収し，５ｍＬの水で２回洗
浄し，真空下で４０℃で一夜乾燥して，３．０ｇ（８８％収率）の５−メチルア
ミノスルホニル−２−オキシインドールを得た。
【０２４１】５−（４−トリフルオロメチルフェニルアミノスルホニル）−２−オキシインド
ール ２．１ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドール，１．６ｇの４−ト
リフルオロメチルアニリンおよび１．４ｇのピリジンの２０ｍＬのジクロロメタ
ン中の懸濁液を室温で４時間撹拌した。形成した沈殿物を真空濾過により回収し
，５ｍＬの水で２回洗浄し，真空下で４０℃で一夜乾燥して，薄層クロマトグラ
フィーによりある程度の不純物を含有する２．４ｇの粗生成物を得た。粗生成物
をシリカゲルでクロマトグラフィーを行い，酢酸エチル：ヘキサン（１：２）で
溶出して，１．２ｇ（３７％収率）の５−（４−トリフルオロメチルフェニル−
アミノスルホニル）−２−オキシインドールを得た。
【０２４２】５−（モルホリノスルホニル）−２−オキシインドール ２．３ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドールおよび２．２ｇのモ
ルホリンの５０ｍＬのジクロロメタン中の懸濁液を室温で３時間撹拌した。白色
沈殿物を真空濾過により回収し，酢酸エチルおよびヘキサンで洗浄し，真空下で
４０℃で一夜乾燥して，２．１ｇ（７４％収率）の５−（モルホリノスルホニル
）−２−オキシインドールを得た。
【０２４３】６−トリフルオロメチル−２−オキシインドール ジメチルスルホキシド（３３０ｍＬ）を，７．９ｇの水素化ナトリウムに加え
，次に４３．６ｇのジエチルオキサレートを滴加した。混合物を１００℃に１．
０時間加熱し，室温に冷却した。２−ニトロ−４−トリフルオロメチルトルエン
（３１．３ｇ）を加え，反応液を室温で３０分間撹拌し，次に１００℃に１時間
加熱した。反応液を冷却し，飽和水性塩化アンモニウム，酢酸エチルおよびヘキ
サンの混合物に注加した。有機層を飽和塩化アンモニウム，水およびブラインで
洗浄し，乾燥し，濃縮して，ジメチル２−（２−ニトロ−４−トリフルオロメチ
ルフェニル）マロネートを得た。 ジエステルを，１００ｍＬのジメチルスルホキシド中の６．４ｇの塩化リチウ
ムおよび２．７ｍＬの水の混合物に溶解し，１００℃に３時間加熱した。反応液
を冷却し，酢酸エチルおよびブラインの混合物に注加した。有機相をブラインで
洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮し，シリカゲル（１０％酢酸エチル，ヘ
キサン中）でクロマトグラフィーを行った。生成物を含む画分を蒸発させて，２
５．７ｇのメチル２−ニトロ−４−トリフルオロメチルフェニルアセテートを得
た。 メチル２−ニトロ−４−トリフルオロメチルフェニルアセテート（２６ｍｇ）
を１０％パラジウム担持炭素で水素化し，次に１００℃で３時間加熱した。触媒
を濾過により除去し，溶媒を蒸発させて，表題化合物を得た。
【０２４４】４−カルボキシ−２−オキシインドール トリメチルシリルジアゾメタンのヘキサン中の溶液（２Ｍ）を，２．０１ｇの
２−クロロ−３−カルボキシ−ニトロベンゼンの２０ｍＬメタノール中の溶液に
，ガスが発生しなくなるまで室温で滴加した。過剰のトリメチルシリルジアゾメ
タンを酢酸で急冷した。反応混合物をロータリーポンプにより乾燥し，残渣をさ
らに真空オーブン中で一夜乾燥した。生成物である（２−クロロ−３−メトキシ
カルボニル−ニトロベンゼン）は，以下の反応に用いるのに十分純粋であった。 ジメチルマロネート（６．０ｍＬ）を，１５ｍＬのＤＭＳＯ中の２．１ｇの水
素化ナトリウムの氷冷懸濁液に加えた。次に，反応混合物を１００℃で１．０時
間撹拌し，次に室温に冷却した。２−クロロ−３−メトキシカルボニル−ニトロ
ベンゼン（２．１５ｇ）を上述の混合物に一度に加え，混合物を１００℃に１．
５時間加熱した。次に反応混合物を室温に冷却し，氷水に注加し，ｐＨ５に酸性
にし，酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウム
で乾燥し，濃縮して，３．０ｇのジメチル２−メトキシカルボニル−６−ニトロ
フェニルマロネートを得た。 ジメチル２−メトキシカルボニル−６−ニトロフェニルマロネート（３．０ｇ
）を５０ｍＬの６Ｎ塩酸中で一夜還流した。混合物を濃縮乾固し，２０ｍＬのエ
タノール中の１．１ｇの塩化スズ（ＩＩ）とともに２時間還流した。混合物をセ
ライトを通して濾過し，濃縮し，シリカゲル（酢酸エチル：ヘキサン：酢酸）で
クロマトグラフィーを行い，０．６５ｇ（３７％収率）の４−カルボキシ−２−
オキシインドールを白色固体として得た。
【０２４５】５−カルボキシエチル−２−オキシインドール ２５ｍＬの濃塩酸を含む１０ｍＬの水中の５−シアノエチル−２−オキシイン
ドール（４．０２ｇ）を４時間還流した。混合物を冷却し，水を加え，得られた
固体を真空濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，１．９ｇ（４４％収率）
の表題化合物を黄色固体として得た。
【０２４６】５−（モルホリン−４−エチル）−２−オキシインドール ５−クロロエチル−２−オキシインドール（２．３ｇ），１．２ｍＬのモルホ
リンおよび１．２ｍＬのジイソプロピルエチルアミンを，１０ｍＬのジメチルス
ルホキシド中で１００℃で一夜加熱した。混合物を冷却し，水に注加し，酢酸エ
チルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し，乾燥し，蒸発させた。残渣をシリ
カゲル（５％メタノール，クロロホルム中）でクロマトグラフィーを行い，０．
９ｇ（３１％）の表題化合物を白色固体として得た。
【０２４７】５−（４−メトキシカルボニルベンズアミド）−２−オキシインドール ８２．０ｍｇの５−アミノ−２−オキシインドールおよび１３１．０ｍｇの塩
化４−メトキシカルボニルベンゾイルのピリジン中の混合物を室温で３時間撹拌
し，氷水に注加した。沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で乾燥して
，１３８．０ｍｇの５−（４−メトキシカルボニルベンズアミド）−２−オキシ
インドール（８１％収率）を得た。
【０２４８】５−メトキシ−２−オキシインドール 抱水クロラール（９．６ｇ）を，８３ｇの硫酸ナトリウムを含有する２００ｍ
Ｌの水に溶解した。溶液を６０℃に暖め，１１．４ｇのヒドロキシルアミン塩酸
塩の５０ｍＬの水中の溶液を加え，混合物を６０℃に保持した。別のフラスコで
，８０ｍＬの水中の６．４ｇの４−アニシジンおよび４．３ｍＬの濃塩酸を８０
℃に暖めた。第１の溶液を第二の溶液に加え，混合物を２分間還流し，その後，
室温までゆっくり冷却し，次に氷浴中で冷却した。褐色沈殿物を真空濾過により
回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，８．６ｇ（８５％収率）のＮ−（２−
ヒドロキシイミノアセチル）アニシジンを得た。 ５ｍＬの水を含む濃硫酸（４５ｍＬ）を６０℃に暖め，８．６ｇのＮ−（２−
ヒドロキシイミノアセチル）アニシジンを一度に加えた。撹拌した混合物を９３
℃に１０分間加熱し，次に放置して室温まで冷却した。混合物を５００ｇの氷に
注加し，酢酸エチルで３回抽出した。合わせた抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾
燥し，濃縮して，５．１ｇ（６５％収率）の５−メトキシ−イサチンを暗赤色固
体として得た。５−メトキシイサチン（５．０ｇ）および３０ｍＬのヒドラジン
水和物を１５分間加熱還流した。反応混合物を室温に冷却し，５０ｍＬの水を加
えた。混合物を各２５ｍＬの酢酸エチルで３回抽出し，有機層を合わせ，無水硫
酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，黄色固体を得た。固体を酢酸エチル中で撹拌
し，１．１ｇの不溶性物質を真空濾過により除去し，保存した。この物質は２−
ヒドラジノカルボニルメチル−４−アニシジンであることがわかった。濾液を濃
縮し，シリカゲルでクロマトグラフィーを行い，酢酸エチル：ヘキサン（１：１
）で溶出して，０．７ｇの５−メトキシ−２−オキシインドールを黄色固体とし
て得た。１．１ｇの２−ヒドラジノ−カルボニルメチル−４−アニシジンを２０
ｍＬの１Ｎ水酸化ナトリウム中で１時間還流した。混合物を冷却し，濃塩酸でｐ
Ｈ２に酸性にし，各２５ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。有機抽出物を合わせ
，ブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，０．８ｇの５−
メトキシ−２−オキシインドールを黄色固体として得た。合わせた収率は１．５
ｇ，すなわち３３％であった。
【０２４９】７−アザオキシインドール ３，３−ジブロモ−７−アザオキシインドール（２．９ｇ）を２０ｍＬの酢酸
および３０ｍＬのアセトニトリルの混合物に溶解した。この溶液に６．５ｇの亜
鉛粉末を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。混合物から固体を濾過し，溶
媒を蒸発させた。残渣を酢酸エチルでスラリー化した。不溶性固体を含有する酢
酸エチル溶液を，シリカゲルの短いカラムを通した。回収した酢酸エチル溶液を
蒸発させ，残渣を真空下で乾燥して，１．８ｇ（収率９１％）の７−アザオキシ
インドール酢酸塩を得た。
【０２５０】５−ジメチルアミノスルホニル−２−オキシインドール ２．３ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドールの，１０ｍＬのメタ
ノール中２Ｍジメチルアミン中の懸濁液を室温で４時間撹拌し，このとき白色固
体が形成した。沈殿物を真空濾過により回収し，５ｍＬの１Ｎ水酸化ナトリウム
および５ｍＬの１Ｎ塩酸で洗浄し，真空下で４０℃で一夜乾燥して，１．９ｇ（
７９％収率）の５−ジメチルアミノスルホニル−２−オキシインドールを得た。
【０２５１】６−フェニル−２−オキシインドール ２５ｍＬのジメチル−スルホキシド中のジメチルマロネート（１０ｍＬ）を，
２５ｍＬのジメチルスルホキシド中に懸濁した３．５ｇの水素化ナトリウムに滴
加し，混合物を１００℃で１０分間加熱した。混合物を室温に冷却し，２５ｍＬ
のジメチルスルホキシド中の４．７ｇの４−フルオロ−３−ニトロビフェニルを
加えた。混合物を１００℃で２時間加熱し，冷却し，３００ｍＬの飽和塩化アン
モニウム溶液で急冷した。混合物を酢酸エチルで３回抽出し，合わせた有機層を
水およびブラインで洗浄し，蒸発させて，粗ジメチル−３−ニトロビフェニル−
４−マロネートを黄色油状物として得た。 粗ジメチル−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを３０ｍＬの６Ｎ塩酸中
で２４時間還流した。沈殿物を濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，４．
５ｇの３−ニトロビフェニル−４−酢酸をクリーム色固体として得た。 ４０ｍＬの酢酸中の４．５ｇの３−ニトロビフェニル−４−酢酸に，鉄粉末（
２．６ｇ）を一度に加えた。混合物を２時間還流し，濃縮乾固し，酢酸エチル中
に取り出した。固体を濾過により除去し，濾液を１Ｎ塩酸およびブラインで２回
洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾液を濃縮して，３．４ｇ（９３％収
率）の６−フェニル−２−オキシインドールを淡褐色固体として得た。
【０２５２】６−（３−メトキシフェニル）−２−オキシインドール テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．８ｇ）を，５ｇの３
−メトキシフェニルボロン酸，５ｇの５−ブロモ−２−フルオロ−ニトロベンゼ
ンおよび１１ｍＬの２Ｍ炭酸ナトリウム溶液の１００ｍＬのトルエン中の混合物
に加えた。混合物を２時間還流し，水で希釈し，酢酸エチルで抽出した。酢酸エ
チルを飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄し，次に乾燥し，濃縮して
油状固体を得た。固体をシリカゲル（酢酸エチル：ヘキサン（１：６））でクロ
マトグラフィーを行い，４．３ｇ（７７％収率）の４−フルオロ−３'−メトキ
シ−３−ニトロビフェニルを得た。 ジメチルマロネート（９．７ｍＬ）を，５０ｍＬのジメチルスルホキシド中に
懸濁した２．０ｇの水素化ナトリウムに滴加した。混合物を１００℃に３５分間
加熱し，室温に冷却した。５０ｍＬのジメチルスルホキシド中の４−フルオロ−
２'−メトキシ−３−ニトロビフェニル（４．２ｇ）を加え，混合物を１００℃
で１時間加熱した。反応混合物を冷却し，３００ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶
液で急冷し，酢酸エチルで２回抽出した。抽出物を合わせ，ブラインで洗浄し，
無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，粗ジメチル３'−メトキシ−３−ニト
ロビフェニル−４−マロネートを淡黄色固体として得た。 粗ジメチル３'−メトキシ−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを４５ｍ
Ｌの６Ｎ塩酸中で１１０℃で４日間加熱し，次に冷却した。沈殿物を濾過により
回収し，水およびヘキサンで洗浄し，乾燥して，５．３ｇの３'−メトキシ−２
−ニトロビフェニル−４−酢酸を淡黄褐色固体として得た。 ３'−メトキシ−３−ニトロビフェニル−４−酢酸（５．２ｇ）をメタノール
に溶解し，０．８ｇの１０％パラジウム担持炭素で室温で３時間水素化した。触
媒を濾過により除去し，メタノールで洗浄し，濾液を合わせ，濃縮して，褐色固
体を得た。固体をシリカゲルで酢酸エチル：ヘキサン：酢酸（３３：６６：１）
でクロマトグラフィーを行い，３．０ｇの６−（３−メトキシフェニル）−２−
オキシインドールを桃色固体として得た。
【０２５３】５−アセチル−２−オキシインドール ２−オキシインドール（３ｇ）を１，２−ジクロロエタン中に懸濁し，３．２
ｍＬの塩化アセチルをゆっくり加えた。得られた懸濁液を５０℃に５時間加熱し
，冷却し，水に注加した。得られた沈殿物を真空濾過により回収し，豊富な水で
洗浄し，真空下で乾燥して，２．９ｇ（７３％収率）の表題化合物を褐色固体と
して得た。
【０２５４】５−シアノエチル−２−オキシインドール シアン酸カリウム（２．０ｇ）を，１５ｍＬのジメチル−スルホキシドに加え
，９０℃に加熱した。５ｍＬのジメチルスルホキシドに溶解した５−クロロエチ
ル−２−オキシインドール（３．０ｇ）を撹拌しながらゆっくり加え，反応液を
１５０℃に２時間加熱した。混合物を冷却し，氷水に注加し，沈殿物を真空濾過
により回収し，水で洗浄し，乾燥し，次にシリカゲル（５％メタノール，クロロ
ホルム中）でクロマトグラフィーを行い，１．２ｇ（４２％収率）の表題化合物
を得た。
【０２５５】６−（モルホリン−４−イル）−２−オキシインドール ６−アミノ−２−オキシインドール（２．２ｇ），４．０ｇの２，２'−ジブ
ロモエチルエーテルおよび７．９ｇの炭酸ナトリウムを２０ｍｌのエタノール中
で一夜還流し，濃縮し，５０ｍｌの水で希釈した。混合物を５０ｍｌの酢酸エチ
ルで３回抽出し，有機抽出物を合わせ，２０ｍｌのブラインで洗浄し，無水硫酸
ナトリウムで乾燥し，濃縮乾固した。固体をシリカゲルのカラム（酢酸エチル：
ヘキサン（１：１），０．７％酢酸を含有）でクロマトグラフィーを行い，１．
２ｇ（３７％収率）の表題化合物をベージュ色固体として得た。
【０２５６】フェノールのメチル化 適当なフェノール（１等量）を，１．３等量のヨウ化メチルおよび１．３等量
の炭酸カリウムを含む等容量のジメチルホルムアミドとともに室温で一夜撹拌す
る。混合物を水で希釈し，酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を水およびブラ
インで洗浄する。有機層を分離し，無水硫酸ナトリウムで洗浄し，蒸発乾固して
，アニソール誘導体を得る。
【０２５７】アニソールのホルミル化 アニソール（１等量），ジメチルホルムアミド（１−３等量）およびオキシ塩
化リン（１−３等量）を１００℃に１−３時間加熱する。反応混合物を室温に冷
却し，ジクロロメタンを加える。混合物を氷で冷却し，次に水を加え，続いて４
−１２等量の濃水酸化ナトリウムをｐＨが９−１０になるまで加える。有機層を
分離し，水で，次にブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，蒸発させ
て，粗アルデヒドを得る。粗アルデヒドを活性炭素を含む沸騰ヘキサンに溶解し
，ヘキサン溶液をデカントし，シリカゲルの層を通して熱濾過する。濾液を蒸発
乾固させて，ベンズアルデヒド誘導体を得る。
【０２５８】ピロールのホルミル化 ＰＯＣｌ3（１．１等量）を，ジクロロメタン中のジメチルホルムアミド（３
等量）に−１０℃で滴加し，続いて適当なピロールを加える。２時間撹拌した後
，反応混合物をＨ2Ｏで希釈し，１０ＮＫＯＨでｐＨ１１に塩基性にする。形成
した沈殿物を濾過により回収し，Ｈ2Ｏで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，
所望のアルデヒドを得る。
【０２５９】ピロールカルボン酸エステルのサポニン化 ピロールカルボン酸エステルおよびＫＯＨ（２−４等量）のＥｔＯＨ中の混合
物を，薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により反応の完了が示されるまで還流
する。冷却した反応混合物を１ＮＨＣｌでｐＨ３に酸性にする。形成した沈殿物
を濾過により回収し，Ｈ２Ｏで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，所望のピロ
ールカルボン酸を得る。
【０２６０】ピロールカルボン酸のアミド化 ジメチルホルムアミドに溶解したピロールカルボン酸（０．３Ｍ）の撹拌溶液
に，１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（１．２
等量），１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．２等量），およびトリエチル
アミン（２等量）を加える。適当なアミン（１等量）を加え，反応液を，ＴＬＣ
により完了が示されるまで撹拌する。反応液を飽和ＮａＨＣＯ3およびブライン
（過剰の塩を含む）で希釈し，無水ＭｇＳＯ4で乾燥し，濃縮して，所望のアミ
ドを得る。
【０２６１】ピロールおよびインドールカルボアルデヒドの製造 ３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸 ４−（２−カルボキシエチル）−３−エトキシカルボニル−２−メチルピロー
ル（Ｂｕｌｔｅｒ，Ａ．Ｒ．，ａｎｄ Ｇｅｏｒｇｅ，Ｓ．Ｄ．（１９９３）Ｔ
ｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ４９：７０１７−７０２６）を，エタノール（ＥｔＯＨ
）中で水酸化カリウム（ＫＯＨ）を用いて加水分解して，４−（２−カルボキシ
エチル）−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（６４％）を得た。1 HNMR (DMSO-d6) δ 11.63 (s, 1H, COOH), 10.81 (s, 1H, NH), 6.36 (s, 1H,
CH), 2.78, 2.45 (2 x t, 4H, CH2CH2), 2.34(s, 3H, CH3). MS m/z 225 [M+2].
【０２６２】 ４−（２−カルボキシエチル）−２−メチル−−１Ｈ−ピロール−３−カルボ
ン酸を２００℃で１時間加熱することにより脱炭酸して，３−（５−メチル−１
Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸を得た。1 HNMR (DMSO-d6) δ 10.07 (s, 1H, NH), 9.60 (br s, 1H, COOH), 6.30 (s, 1H
, CH), 5.56 (s, 1H, CH), 2.51, 2.36 (2 x t, 4H, CH2CH2), 2.10(s, 3H, CH 3 ). MS m/z 154 [M+1].
【０２６３】 ３−（５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸を，オキシ塩化
リン（ＰＯＣｌ3）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を用いてホ
ルミル化して，３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）
プロピオン酸を得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.09 (br s, 1H, COOH), 11.54 (br s, 1H, NH)
, 9.44 (s, 1H, CHO), 5.86 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 2.87 (t, J = 7.5 Hz, 2H,
CH2), 2.47 (t, J = 7.5 Hz, 2H, CH2), 2.16 (s, 3H, CH3). MS-EI m/z 181 [M+].
【０２６４】４−（２−カルボキシエチル）−５−ホルミル−３−メチル−１Ｈ−ピロール−
２−カルボン酸エチルエステル １０ｇ（３８．９ｍｍｏｌ）のエチル２，４−ジメチル−５−（エトキシカル
ボニル）−３−ピロールプロピオネート（市販）の，水（２５０ｍＬ）とメタノ
ールＭｅＯＨ）（５０ｍＬ）との混合物中の懸濁液に，５０ｍＬの水中の３．０
ｇのＫＯＨを加えた。混合物を７０℃で４時間撹拌した。反応混合物を冷却し，
真空下で混合物からメタノールを除去した。残りの溶液を濾過し，次に濾液を６
Ｎ塩酸でｐＨ３に酸性にした。形成した沈殿物を濾過により回収し，水とエタノ
ールの２：１混合物で洗浄し，真空下で乾燥して，７．５ｇの４−（２−カルボ
キシ−エチル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエ
ステルを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.03 (br s, 1H, COOH), 11.02 (br s, 1H, NH)
, 4.16 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.53 (t, J = 7.8 Hz, 2H, CH2CH2), 2
.25 (t, J = 7.8 Hz, 2H, CH2CH2), 2.16 (s, 3H, CH3), 2.11 (s, 3H, CH3), 1
.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 239 [M+].
【０２６５】 ７ｇの４−（２−カルボキシエチル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−
２−カルボン酸エチルエステルの各３５ｍＬのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ），
酢酸（ＡｃＯＨ）および水中の混合物に，−１０℃で，７０ｇの硝酸第二セリウ
ムアンモニウムを２０分間かけて少しずつ加え，反応温度を約５℃に維持した。
次に得られた混合物を０℃に冷却し，さらに２時間撹拌し，次に２５０ｍＬのブ
ラインで希釈した。次に混合物を２ｘ３００ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）中
１０％ＭｅＯＨで抽出した。有機抽出物を合わせ，無水硫酸マグネシウム（Ｍｇ
ＳＯ4）で乾燥し，濾過し，濃縮した。残渣をシリカゲルカラムでヘキサン（ｈ
ｅｘ）／酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）／ＡｃＯＨ（６：４：０．０５）で精製し，
続いてＥｔＯＡｃ中で結晶化して，１．５ｇの４−（２−カルボキシエチル）−
５−ホルミル−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステルを
白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.36 (br s, 1H, COOH), 12.01 (br s, 1H, NH)
, 9.77 (s, 1H, CHO), 4.27 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.89 (t, J = 7.6
Hz, 2H, CH2CH2), 2.37 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2CH2), 2.21 (s, 3H, CH3), 1
.30 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 253 [M+].
【０２６６】４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−ピロ
ール−３−カルボン酸エチルエステル ４−（２−カルボキシエチル）−３−エトキシカルボニル−２−メチルピロー
ル（２ｇ，８．８８ｍｍｏｌ）（Ｂｕｌｔｅｒ，Ａ．Ｒ．，ａｎｄＧｅｏｒｇｅ
，Ｓ．Ｄ．（１９９３）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ４９：７０１７−７０２６）
の１８ｍＬのＤＭＦ中の懸濁液に，１．７３ｇ（１０．６５ｍｍｏｌ）の１，１
'−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）を加え，続いてＴＨＦ中の８．９ｍＬ
（１７．７６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ中２Ｍジメチルアミンを滴加した。２時間撹拌
した後，反応液を水（２００ｍＬ）で希釈し，冷却した。形成した沈殿物を濾過
により回収し，水で洗浄し，乾燥して，１．０ｇの生成物を白色結晶固体として
得た。濾液をＥｔＯＡｃで抽出し，有機層をブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮し
て，さらに０．９ｇの生成物を得，合計して１．９ｇの４−（２−ジメチル−カ
ルバモイル−エチル）−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエ
ステル（８５％）を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.89 (br s, 1H, NH), 6.40 (d, J = 2.5 Hz, 1
H), 4.13 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.92 (s, 3H, NCH3), 2.79 (s, 3H,
NCH3), 2.75 (m, 2H, CH2CH2), 2.45 (m, 2H, CH2CH2), 2.35 (s, 3H, CH3), 1.
23 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 252 [M+].
【０２６７】 ４−（２−ジメチルカルバモイル−エチル）−２−メチル−１Ｈ−ピロール−
３−カルボン酸エチルエステル（１．０１ｇ，４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９ｍＬ）
の異成分混合物に，８ｍＬのボラン−テトラヒドロフラン複合体（１Ｍ，ＴＨＦ
中）を滴加した。混合物を一夜還流した。次に，９．０ｍＬのＭｅＯＨを反応液
にゆっくり加え，さらに２時間還流を続けた。反応混合物を冷却し，１ＮＨＣｌ
で急冷し，ＥｔＯＡｃで抽出した。水性層を水性ＫＯＨで塩基性にし，ＥｔＯＡ
ｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物をブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮して，６１
６ｍｇ（６５％）の４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−１Ｈ−
ピロール−３−カルボン酸エチルエステルをわずかに橙色の油状物として得た。 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.84 (br s, 1H, NH), 6.36 (d, J = 2.5 Hz, 1
H), 4.12 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.52 (m, 2H, CH2), 2.34 (s, 3H, C
H3), 2.17 (m, 2H, CH2), 2.08 (s, 6H, N(CH3)2), 1.57 (m, 2H, CH2CH2 CH2),
1.23 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 238 [M+].
【０２６８】 ４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カ
ルボン酸エチルエステル（６００ｍｇ，２．５ｍｍｏｌ）を，ＰＯＣＩおよびＤ
ＭＦを用いてホルミル化して，６４５ｍｇ（９６％）の４−（３−ジメチルアミ
ノ−プロピル）−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸
エチルエステルを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.15 (br s, 1H, NH), 9.59 (s, 1H, CHO), 4.1
9 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.93 (m, 2H, CH2), 2.41 (s, 3H, CH3), 2.
18 (m, 2H, CH2), 2.09 (s, 6H, N(CH3)2), 1.63 (m, 2H, CH2CH2 CH2), 1.27 (
t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 266 [M+].
【０２６９】３−（３−ジメチルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒ
ド エチルインドール−２−カルボキシレート（１０ｇ，５２．８ｍｍｏｌ）をＰ
ＯＣｌ3（１．３等量）およびＤＭＦ（１．３等量）を用いて上述のようにホル
ミル化して，３−ホルミル−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸エチルエステル
を白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.0 (br s, 1H, NH), 10.6 (s, 1H, CHO), 8.24
(dd, J = 0.7 & 8.0 Hz, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.38 (m, 1H), 7.26 (m, 1H), 4
.44 (q, J = 7.12 Hz, 2H, OCH2CH3), 1.39 (t, J = 7.12 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 217 [M+].
【０２７０】 ブチルリチウム（１．１等量）を，０℃で，ＴＨＦ中の臭化（２−ジメチルア
ミノエチル）トリフェニルホスホニウム（０．２Ｍ）の懸濁液に加えた。３０分
間撹拌した後，リチウムジエチルアミン（１．１等量）を滴加し，次に３−ホル
ミル−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸エチルエステル（３．９６ｇ，１８．
２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ中の冷懸濁液を加えた。得られた橙色懸濁液を１８時間撹
拌した。次に飽和塩化アンモニウムで反応を急冷し，ＤＣＭ中の１０％ＭｅＯＨ
で抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄し，乾燥し，濃縮して，３
−（３−ジメチルアミノプロペニル）−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸エチ
ルエステルを褐色を帯びた赤色のワックス状の固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.8 (br s, 1H, NH), 7.93 (d, 1H), 7.49 (d,
1H), 7.41 (d, 1H), 7.3 (t, 1H), 7.14 (t, 1H), 6.33-6.42 (m, 1H), 4.36 (q
, 2H, OCH2CH3), 3.38 (d, 2H, CH2), 2.44 (s, 6H, 2xCH3), 1.36 (t, 3H, OCH 2 CH3). MS-EI m/z 272 [M+].
【０２７１】 ３−（３−ジメチルアミノプロペニル）−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸
エチルエステルを，１０％パラジウム担持炭素を用いて水素化して，二重結合を
還元し，水素化リチウムアルミニウム（ＬＡＨ）でエステル基をアルコールに還
元して，［３−（３−ジメチルアミノ−プロピル）−１Ｈ−インドール−２−イ
ル］メタノールを橙色油状物として得た。
【０２７２】 二酸化マグネシウム（１０等量）を［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−
１Ｈ−インドール−２−イル］メタノール（２．２ｇ）のＤＣＭ中の溶液に加え
た。混合物を室温で１８時間撹拌した。不溶性物質を濾過により除去し，濾液を
濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーを行い，３−（３−ジメチルアミノ
プロピル）−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒドをクリーム色固体として
得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.58 (br s, 1H, NH), 10.0 (s, 1H, CHO), 7.7
2 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.29 (t, 1H), 7.07 (t, 1H), 3.08 (t, 2H, CH2),
2.20 (t, 2H), 2.12 (s, 6H, 2xCH3), 1.73 (t, 2H, CH2). MS-EI m/z 230 [M+].
【０２７３】アミノテトラヒドロインドールカルボアルデヒドの製造 ５−アミノレブリン酸塩酸塩（１等量），１，３−シクロヘキサンジオン（１
等量）および酢酸ナトリウム（２等量）の水（１Ｍ）中の混合物を１１０℃で４
−１２時間撹拌し，次に冷却する。形成した沈殿物を真空濾過により回収し，水
中３０％エタノールで洗浄し，真空下で乾燥して，アミド−ケト−テトラヒドロ
インドールを５０−７０％の収率で得る。 水素化リチウムアルミニウム（ＬＡＨ，４等量）を，適当なアミド−ケト−テ
トラヒドロインドール（１等量）のＴＨＦ中の懸濁液（０．５Ｍ）に滴加する。
混合物を一夜還流する。次に混合物を冷却し，ガスが発生しなくなるまで水を注
意深く加え，次に数滴の１５％ＮａＯＨ／水を加える。次に混合物を室温で０．
５時間撹拌し，濾過して不溶性物質を除去する。濾液を濃縮して，アミノ−テト
ラヒドロインドールを得る。アミノテトラヒドロインドールカルボアルデヒドの合成の例 以下のアミノテトラヒドロインドール−カルボアルデヒドの合成は，例示のた
めにのみ示され，いかなる意味においても本発明を限定するものと解釈すべきで
はない。３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル］−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 工程１：５−アミノレブリン酸塩酸塩（１．６８ｇ，１０ｍｍｏｌ），１，３−
シクロヘキサンジオン（１．１２ｇ，１０ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（１
．６４ｇ，２０ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）中の混合物を１１０℃で４時間撹拌
し，次に冷却した。形成した沈殿物を真空濾過により回収し，水中３０％エタノ
ールで洗浄し，真空下で乾燥して，１．７ｇ（８２％）の３−（４−オキソ−４
，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸を
得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.91 (br s, 1H, COOH), 10.99 (br s, 1H, NH)
, 6.45 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 2.76 (t, 2H, CH2), 2.69 (t, 2H, CH2), 2.44 (
t, 2H, CH2), 2.26 (t, 2H, CH2), 1.96 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 207 [M+].
【０２７４】 工程２：１０ｇの工程１の生成物（４８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６０ｍＬ
）中の懸濁液に，９．３ｇ（５７．６ｍｍｏｌ）の１，１'−カルボニルジイミ
ダゾールを加えた。混合物を室温で２時間撹拌し，次に５．３ｍＬ（４８ｍｍｏ
ｌ）の１−メチルピペラジンおよび８．４ｍＬ（４８ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジイ
ソプロピル−エチルアミンを加えた。次に暗赤色の反応混合物を室温で一夜撹拌
した。次に反応液を水に注加し，有機層を分離し，ブラインで洗浄し，乾燥し，
濃縮して，８ｇ（５７％）の３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
３−オキソ−プロピル］−１，５，６，７−テトラヒドロインドール−４−オン
を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.97 (br s, 1H, NH), 6.47 (d, J = 2.0 Hz, 1
H), 3.43 (m, 4H, 2xCH2), 2.67-2.75 (m, 4H, 2xCH2), 2.51 (m, 2H, CH2), 2.
27 (m, 2H, CH2), 2.20 (m, 4H, 2xCH2), 2.15 (s, 3H, CH3), 1.97 (m, 2H, CH 2 ). MS-EI m/z 289 [M+].
【０２７５】 工程３：ＬＡＨ（２．６ｇ，６８ｍｍｏｌ）を，３−［３−（４−メチルピペラ
ジン−１−イル）−３−オキソ−プロピル］−１，５，６，７−テトラヒドロイ
ンドール−４−オン（５ｇ，１７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３００ｍＬ）中の懸濁液
に滴加した。次に混合物を一夜還流した。次に混合物を冷却し，各２．６ｍＬの
水，続いて数滴の１５％ＮａＯＨを加えた。反応液を室温で３０分間撹拌し，次
に濾過して不溶性物質を除去した。濾液を濃縮して，４．５ｇ（１００％）の３
−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル］−４，５，６，７−テ
トラヒドロ−１Ｈ−インドールを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.79 (br s, 1H, NH), 6.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H
), 2.44 (m, 2H, CH2), 2.21-2.3 (m, 14H, 7xCH2), 2.12 (s, 3H, CH3), 1.65
(m, 4H, 2xCH2), 1.53 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 261 [M+].
【０２７６】 工程４：ＰＯＣｌ3（１．８ｍＬ，１８．９ｍｍｏｌ）を，Ｎ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド（ＤＭＦ，３．８ｍＬ，５１．６ｍｍｏｌ）に−５℃で滴加した。次
に混合物を室温になるまで放置し，次に３０分間撹拌し，その後，再び−５℃に
冷却した。３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−プロピル］−４，
５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール（４．５ｇ，１７．２ｍｍｏｌ）
のＤＭＦ（９ｍＬ）中の溶液を滴加した。混合物を再び室温になるまで放置し，
次にその温度で一夜撹拌した。次に反応を氷で急冷し，１０ＮＮａＯＨでｐＨを
１０−１１に調節した。室温で１時間撹拌した後，反応液を酢酸エチル（ＥｔＯ
Ａｃ）で抽出し，有機層を分離し，ブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮して，３．
１ｇ（６２％）の３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−プロピル］
−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒドを
得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.24 (br, s, 1H, NH), 9.42 (s, 1H, CHO), 2.
60 (t, 2H, CH2), 2.51 (m, 2H, CH2), 2.35 (m, 2H, CH2), 2.28 (m, 8H, 4xCH 2 ), 2.21 (m, 2H, CH2), 2.12 (s, 3H, CH3), 1.57-1.68 (m, 6H, 3xCH2). MS-EI m/z 289 [M+].
【０２７７】３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−
インドール−２−カルボアルデヒド 方法は実施例Ａで用いた方法と同じであるが，ただし，工程２のアミンはジメ
チルアミン（２．０Ｍ溶液，テトラヒドロフラン中）であった。 工程２：Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.0 (br s, 1H, NH), 6.48 (d, J = 1.6 Hz, 1H
), 2.95 (s, 3H, CH3), 2.79 (s, 3H, CH3), 2.71 (m, 4H, 2xCH2), 2.47 (m, 2
H, CH2), 2.27 (t, 2H, CH2), 1.96 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 234 [M+].
【０２７８】 工程３：ジメチル−［３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール
−３−イル）プロピル］アミン：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.83 (br s, 1H, NH), 6.22 (d, J = 2.3 Hz, 1H
), 2.43 (m, 2H, CH2), 2.28 (m, 2H, CH2), 2.14-2.25 (m, 4H, CH2), 2.08 (s
, 6H, N(CH3)2), 1.64 (m, 4H, 2xCH2), 1.53 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 206 [M+].
【０２７９】 工程４：３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.29 (br, s, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, CHO), 2.
59 (t, 2H, CH2), 2.5 (m, 2H, CH2), 2.34 (m, 2H, CH2), 2.16 (m, 2H, CH2),
2.08 (s, 6H, N(CH3)2), 1.67 (m, 4H, 2xCH2), 1.56 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 234 [M+].
【０２８０】３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 用いた方法は実施例Ａの方法と同じであるが，ただし，工程２で用いたアミン
はピロリジンであった。 工程２：３−（３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−１，５，６
，７−テトラヒドロインドール−４−オン：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.05 (br s, 1H, NH), 6.46 (d, J = 1.5 Hz, 1
H), 3.35 (m, 2H, CH2), 2.24 (m, 2H, CH2), 2.66-2.73 (m, 4H, 2xCH2), 2.44
(m, 2H, CH2), 2.26 (m, 2H, CH2), 1.96 (m, 2H, CH2), 1.82 (m, 2H, CH2),
1.73 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 260 [M+].
【０２８１】 工程３：３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，５，６，７−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−インドール：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.82 (br s, 1H, NH), 6.22 (s, 1H), 2.2-2.5 (
m, 12H, 6xCH2), 1.5-1.64(m, 10H, 5xCH2). MS-EI m/z 232 [M+].
【０２８２】 工程４：３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，５，６，７−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.28 (br, s, 1H, NH), 9.38 (s, 1H, CHO), 2.
59 (t, 2H, CH2), 2.46 (m, 2H, CH2), 2.3-2.44 (m, 8H, 4xCH2), 1.55-1.65 (
m, 10H, 5xCH2). MS-EI m/z 260 [M+].
【０２８３】３−（３−ジエチルアミノ−プロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ
−インドール−２−カルボアルデヒド 方法は実施例Ａの方法と同じであるが，ただし，用いたアミンはジエチルアミ
ンであった。 工程２：Ｎ，Ｎ−ジエチル−３−（４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.0 (br s, 1H, NH), 6.47 (d, J = 2.0 Hz, 1H
), 3.24 (m, 4H, N(CH2CH3)2), 2.69 (m, 4H, 2xCH2), 2.46 (m, 2H, CH2), 2.2
7 (m, 2H, CH2), 1.96 (m, 2H, CH2), 1.04 (t, J = 7.0 Hz, 3H, NCH2CH3), 0.
98 (t, J = 7.0 Hz, 3H, NCH2CH3).
【０２８４】 工程３：ジエチル−［３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール
−３−イル）−プロピル］−アミン：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.83 (br s, 1H, NH), 6.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H
), 2.19-2.44 (m, 12H, 6xCH2), 1.64(m, 4H, 2xCH2), 1.51 (m, 2H, CH2), 0.9
0 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). MS-EI m/z 234 [M+].
【０２８５】 工程４：３−（３−ジエチルアミノプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド：1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.24 (br, s, 1H, NH), 9.42 (s, 1H, CHO), 2.
59 (t, 2H, CH2), 2.34-2.53 (m, 10H, 5xCH2), 1.67 (m, 4H, 2xCH2), 1.57 (m
, 2H, CH2), 0.91 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). MS-EI m/z 262 [M+].
【０２８６】３−（３−ジエチルアミノプロピル）−６，６−ジメチル−４，５，６，７−テ
トラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 工程１：５−アミノレブリン酸塩酸塩（１．６８ｇ，１０ｍｍｏｌ），５，５−
ジメチル−１，３−シクロヘキサンジオン（１．４ｇ，１０ｍｍｏｌ）および酢
酸ナトリウム（１．６４ｇ，２０ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）中の混合物を，１
１０℃で４時間撹拌し，次に冷却した。形成した沈殿物を真空濾過により回収し
，水中３０％のエタノール（ＥｔＯＨ）で洗浄し，真空下で乾燥して，１．６ｇ
（６８％）の３−（４−オキソ−６−ジメチル−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル）プロピオン酸を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.89 (br s, 1H, COOH), 10.94 (br s, 1H, NH)
, 6.45 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 2.76 (t, 2H, CH2), 2.57 (s, 2H, CH2), 2.44 (
t, 2H, CH2), 2.16 (s, 2H, CH2), 0.99 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 235 [M+].
【０２８７】 工程２：１．１８ｇ（５ｍｍｏｌ）の工程１の生成物のジクロロメタン（２５ｍ
Ｌ）中の懸濁液に，０．９７ｇ（６ｍｍｏｌ）のＣＤＩを加えた。室温で２時間
撹拌した後，２．１ｍＬ（２０ｍｍｏｌ）のジエチルアミンを加えた。混合物を
室温で一夜撹拌した。反応液を濃縮し，残渣をジクロロメタンに溶解し，ブライ
ンで洗浄し，乾燥し，濃縮して，１．２ｇ（８３％）の３−（６，６−ジメチル
−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）
−Ｎ，Ｎ−ジエチルプロピオンアミドを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.91 (br s, 1H, NH), 6.46 (s, 1H), 3.20-3.2
9 (m, 4H, 2xCH2), 2.72-2.76 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 2H, CH2), 2.45 (m, 2H
, CH2), 2.17 (s, 2H, CH2), 0.96-1.06 (m, 12H, 4xCH3). MS-EI m/z 290 [M+].
【０２８８】 工程３：ＬＡＨ（０．５７ｇ，１５．１ｍｍｏｌ）を，３−（６，６−ジメチル
−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）
−Ｎ，Ｎ−ジエチルプロピオンアミド（１．１ｇ，３．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（
８０ｍＬ）中の懸濁液に滴加した。混合物を一夜還流した。反応液を冷却し，ガ
スが発生しなくなるまで氷を加えた。次に，数滴の水中１５％ＮａＯＨを加えた
。混合物を室温で３０分間撹拌し，次に濾過して不溶性物質を除去した。濾液を
濃縮して，０．９ｇの［３−（６，６−ジメチル−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピル］−ジエチル−アミンを淡黄色油
状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 2.19-2.44
(m, 14H, 7xCH2), 1.53 (m, 2H, CH2), 1.40 (m, 2H, CH2), 0.88-0.92 (m, 12
H, 4xCH3). MS-EI m/z 262 [M+].
【０２８９】 工程４：ＰＯＣｌ3（０．３５ｍＬ，３．７４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（０．８ｍＬ
，１０．３ｍｍｏｌ）に−５℃で滴加した。室温で３０分間撹拌した後，混合物
を−５℃に冷却した。次に，［３−（６，６−ジメチル−４，５，６，７−テト
ラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピル］−ジエチルアミン（０．
９ｇ，３．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）中の溶液を滴加した。混合物を室温
で３時間撹拌し，次に氷で急冷し，１０ＮＫＯＨでｐＨを１０−１１に調節した
。室温で１時間撹拌した後，混合物をＥｔＯＡｃで抽出し，ブラインで洗浄し，
乾燥し，濃縮して，０．５５ｇの３−（３−ジエチルアミノプロピル）−６，６
−ジメチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボア
ルデヒドを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.23 (br, s, 1H, NH), 9.41 (s, 1H, CHO), 2.
61 (t, 2H, CH2), 2.30-2.43 (m, 10 H, 5x CH2), 1.58 (m, 2H, CH2), 1.45 (t
, 2H, CH2), 0.93 (s, 6H, 2xCH3), 0.89 (t, 6H, N(CH2CH3)2). MS-EI m/z 290 [M+].
【０２９０】６，６−ジメチル−３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 用いた方法は実施例Ｅの方法と同じであるが，ただし，工程２で用いたアミン
はピロリジンであった。 工程２：６，６−ジメチル−３−（３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロ
ピル）−１，５，６，７−テトラヒドロインドール−４−オン1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.90 (br s, 1H, NH), 6.46 (s, 1H), 3.34 (t,
2H, CH2), 3.25 (t, 2H, CH2), 2.76 (m, 2H, CH2), 2.58 (s, 2H, CH2), 2.43
(m, 2H, CH2), 2.17 (s, 2H, CH2), 1.74-1-1.74 (m, 4H, 2xCH2), 1.00 (s, 6
H, 2xCH3). MS-EI m/z 288 [M+].
【０２９１】 工程３：６，６−ジメチル−３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，
５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.23 (d, 1H), 2.22-2.37
(m, 12H, 6xCH2), 1.55-1.66 (m, 6H, 3xCH2), 1.40 (m, 2H, CH2), 0.92 (s,
6H, 2xCH3). MS-EI m/z 260 [M+].
【０２９２】 工程４：６，６−ジメチル−３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，
５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (br, s, 1H, NH), 9.41 (s, 1H, CHO), 2.
64 (t, 2H, CH2), 2.31-2.38 (m, 10 H, 5x CH2), 1.59-1.67 (m, 6H, 3xCH2),
1.46 (t, 2H, CH2), 0.93 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 288 [M+].
【０２９３】６，６−ジメチル−３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−プロピル
］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド
用いた方法は実施例Ｅの方法と同じであるが，ただし，工程２のアミンは１− メチルピペラジンであった。 工程２：６，６−ジメチル−３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
３−オキソ−プロピル］−１，５．６．７−テトラヒドロインドール−４−オン 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.93 (br s, 1H, NH), 6.48 (s, 1H), 3.42 (m,
4H, 2xCH2), 3.73 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 2H, CH2), 2.48 (m, 2H, CH2), 2.
21 (m, 4H, 2xCH2), 2.17 (s, 2H, CH2), 2.15 (s, 3H, CH3), 1.00 (s, 6H, 2x
CH3). MS-EI m/z 317 [M+].
【０２９４】 工程３：６，６−ジメチル−３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
プロピル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.74 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 2.21-2.30
(m, 16H, 8xCH2), 2.12 (s, 3H, CH3), 1.56 (m, 2H, CH2), 1.40 (m, 2H, CH2 ), 0.92 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 289 [M+].
【０２９５】 工程４：６，６−ジメチル−３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
ピロリル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボア
ルデヒド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.21 (br, s, 1H, NH), 9.42 (s, 1H, CHO), 2.
62 (t, 2H, CH2), 2.18-2.37 (m, 14 H, 7x CH2), 2.12 (s, 3H, CH3), 1.61 (m
, 2H, CH2), 1.45 (t, 2H, CH2), 0.93 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 317 [M+].
【０２９６】６，６−ジメチル−３−（３−モルホリン−４−イルプロピル）−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 用いた方法は実施例Ｅの方法と同じであるが，ただし，用いたアミンはモルホ
リンであった。 工程２：６，６−ジメチル−３−（３−モルホリン−４−イル−３−オキソプロ
ピル）−１，５，６，７−テトラヒドロインドール−４−オン1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.94 (br s, 1H, NH), 6.49 (s, 1H), 3.42-3.5
0 (m, 8H, 4xCH2), 2.74 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 2H, CH2), 2.48 (m, 2H, CH2 ), 2.17 (s, 2H, CH2), 1.00 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 304 [M+].
【０２９７】 工程３：６，６−ジメチル−３−（３−モルホリン−４−イルプロピル）−４，
５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 3.54 (m,
4H, 2xCH2), 2.23-2.31 (m, 12H, 6xCH2), 1.58 (m, 2H, CH2), 1.40 (m, 2H, C
H2), 0.92 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 276 [M+].
【０２９８】 工程４：６，６−ジメチル−３−（３−モルホリン−４−−イルプロピル）−４
，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (br, s, 1H, NH), 9.43 (s, 1H, CHO), 3.
54 (m, 4H, 2xCH2), 2.63 (t, 2H, CH2), 2.20-2.37 (m, 10 H, 5xCH2), 1.62 (
m, 2H, CH2), 1.45 (t, 2H, CH2), 0.93 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 304 [M+].
【０２９９】３−（３−ジメチルアミノプロピル）−６，６−ジメチル−４，５，６，７−テ
トラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 方法は実施例Ｅの方法と同じであるが，ただし，用いたアミンはジメチルアミ
ンであった。 工程２：３−（６，６−ジメチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロピオンアミド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.93 (br s, 1H, NH), 6.48 (s, 1H), 2.94 (s,
3H, CH3), 2.79 (s, 3H, CH3), 2.72 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 2H, CH2), 2.48
(m, 2H, CH2), 2.17 (s, 2H, CH2), 1.00 (m, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 262 [M+].
【０３００】 工程３：［３−（６，６−ジメチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−３−イル）−プロピル］ジメチルアミン1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 3.36 (m,
2H, CH2), 2.07-2.3 (m, 14H, 7xCH2), 1.53 (m, 2H, CH2), 1.40 (m, 2H, CH2)
, 0.92 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 234 [M+].
【０３０１】 工程４：３−（３−ジメチルアミノプロピル）−６，６−ジメチル−４，５，６
，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (br s, 1H, NH), 9.41 (s, 1H, CHO), 2.6
2 (t, 2H, CH2), 2.36 (t, 2H, CH2), 2.30 (s, 2H, CH2), 2.21 (t, 2H, CH2),
2.12 (s, 6H, 2xCH3), 1.60 (m, 2H, CH2), 1.46 (t, 2H, CH2), 0.93 (s, 6H,
2xCH3). MS-EI m/z 262 [M+].
【０３０２】アルデヒドとカルボン酸置換基を含有するオキシインドールとの縮合 適当なオキシインドール（１等量），１等量の適当なアルデヒドおよび１−３
等量のピペリジン（またはピロリジン）のエタノール（０．４Ｍ）中の混合物を
９０−１００℃で，薄層クロマトグラフィーにより示して反応が完了するまで撹
拌する。次に混合物を濃縮し，残渣を希塩酸中で砕く。得られた沈殿物を真空濾
過により回収し，水およびエタノールで洗浄し，乾燥して，生成物を得る。
【０３０３】アルデヒドとカルボン酸置換基を含有しないオキシインドールとの縮合 適当なオキシインドール（１等量），１等量の適当なアルデヒドおよび１−３
等量のピペリジン（またはピロリジン）の，エタノール（０．４Ｍ）中の混合物
を９０−１００℃で，薄層クロマトグラフィーにより示して反応が完了するまで
撹拌する。混合物を室温に冷却し，形成した沈殿物を真空濾過により回収し，エ
タノールで洗浄し，乾燥して，生成物を得る。沈殿物が形成されない場合には，
混合物を濃縮し，生成物をカラムクロマトグラフィーにより単離する。
【０３０４】アルデヒドとアミノ置換基を含有するオキシインドールの縮合 最初にアミノオキシインドールをＢＯＣ基で保護する。適当なアルデヒドとの
縮合の後，形成した固体をトリフルオロ酢酸を用いて脱保護して，所望の生成物
を得る。
【０３０５】Ｃ．実施例−本発明の３−メチリデニル−２−インドリノンの合成 以下の本発明の代表的な化合物の合成は例示としてのみ示されるものであり，
いかなる意味においても本発明の範囲を限定するものと解釈すべきではない。
【０３０６】 実施例１：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−ヒドロキシベンズアルデヒドをメチル化して，
３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 6.9 (s, 2H, 芳香族), 3.9 (s, 3H,
OCH3), 3.2 (m, 2H, 2xCH), 1.2 (d, 12H, 4xCH3).
【０３０７】 次に３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを２−オキシイ
ンドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキ
シベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として
得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.54 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.59, 7.49, 7.21, 6.81-6.8
8 (多重線, 7H, =CH-, 芳香族), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.26-3.33 (m, 2H, 2x-C
H), 1.2 (d, J = 7.23Hz, 12H, 4xCH3). MS m/z 336.
【０３０８】 実施例２：５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリ
デン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−クロロ−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.69 (s, 1H, CONH), 7.67 (s, 1H, =CH-), 7.6 (d, J =
1.85Hz, 1H, H-4), 7.51 (s, 2H, 芳香族), 7.26 (dd, J = 1.85, 8.3Hz, 1H,
H-6), 6.89 (d, J = 8.3Hz, 1H, H-7), 3.74 (s, 3H, OCH3), 3.27-3.34 (m, 2H
, 2x-CH), 1.22 (d, J = 6.7Hz, 12H, 4xCH3).
【０３０９】 実施例３：Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）
−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミ
ド 塩化スズ二水和物（２２５ｇ）を２，４−ジニトロフェニル酢酸（２２．６ｇ
）のエタノール（４５０ｍｌ）中の溶液に加えた。混合物を９０℃で１０時間加
熱した。反応混合物を冷却し，１２Ｍ水酸化ナトリウムでｐＨ１１に調節した。
固体を濾過により除去し，濾液を濃縮した。残渣をエタノール（３００ｍｌ）で
処理した。不溶性物質を濾過により除去し，エタノール（５ｘ６０ｍｌ）で洗浄
した。合わせたエタノール溶液を蒸発させて，得られた固体を真空下で乾燥して
，１５ｇの６−アミノ−２−オキシインドールを褐色粉末として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.03 (s, br, NH), 6.78 (d, J = 8.55Hz, 1H,
H-4), 6.09-6.11 (m, 2H), 4.95 (s, br, 2H, NH2), 3.22 (s, 2H, H-3).MS (+
APCI) m/z (相対強度, %) MS m/z 147 ([M-1]+, 100).
【０３１０】 ６−アミノ−２−オキシインドール（１ｇ）および塩化アセチル（０．７９ｇ
）の１０ｍｌのジクロロメタン中の混合物に，０℃で，トリエチルアミン（１ｇ
）を加えた。混合物を室温にし，乾燥管を用いて大気水分から保護しながら，４
時間撹拌した。次に，溶媒を蒸発させ，残渣をメタノールから再結晶して，０．
９８ｇ（７７％）の６−アセチルアミノ−２−オキシインドールをベージュ色固
体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) (: 10.28 (s, br, NH), 9.83 (s, br, NH), 7.34 (d
, J = 1.4Hz, 1H, H-7), 7.06 (d, J = 7.9Hz, 1H, H-4), 6.97 (dd, J = 1.4,
7.9Hz, 1H, H-5), 3.37 (s, 2H, H-3), 2.01 (s, 3H, CH3).
【０３１１】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−アセトアミド
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇのＮ−［３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−
インドール−６−イル］−アセトアミドを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.48 (s, 1H, CONH), 9.99 (s, 1H, CONH), 7.51 (d, J
= 8Hz, 1H, H-4), 7.46 (s, 2H, 芳香族), 7.44 (s, 1H, =CH-), 7.41 (d, J =
2Hz, 1H, H-7), 6.91 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-5), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.26-3
.34 (m, 2H), 2.03 (s, 3H, CH3), 1.21 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH3). MS m/z 392.
【０３１２】 実施例４：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−
ヒドロキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−ヒドロキシ−
２−オキシインドールと縮合させて，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル
−４−メトキシベンジリデン）−６−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロインドール
−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.34 (s, 1H, CONH), 9.79 (s, 1H, OH), 7.42 (d, J =
8Hz, 1H, H-4), 7.43 (s, 2H, 芳香族), 7.33 (s, 1H, =CH-), 6.32 (d, J = 2H
z, 1H, H-7), 6.21 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-5), 3.72 (s, 3H, OCH3), 3.25-3.3
3 (m, 2H), 1.2 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH3). MS m/z 351.
【０３１３】 実施例５：５−アセチル−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジ
リデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−オキシインドール（３ｇ）を１，２−ジクロロエタン中に懸濁し，３．２
ｍｌの塩化アセチルでゆっくり処理した。得られた懸濁液を５０℃で５時間加熱
し，冷却し，水に注加した。得られた沈殿物を真空濾過により回収し，豊富な水
で洗浄し，真空下で乾燥して，２．９ｇ（７３％収率）の５−アセチル−２−オ
キシインドールを褐色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) (: 10.75 (s, br, NH), 7.83 (d, J = 8.23Hz, 1H),
7.78 (s, 1H, H-4), 6.88 (d, J = 8.23Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH2), 2.49 (s
, 3H, CH3).
【０３１４】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−アセチル−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−アセチル−３−（３，５−ジイ
ソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.95 (s, 1H, CONH), 8.22 (d, J = 2Hz, 1H, H-4), 7.9
3 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-6), 7.69 (s, 1H, =CH-), 7.53 (s, 2H, 芳香族), 6.
97 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.75 (s, 3H, OCH3), 3.24-3.34 (m, 2H), 2.48 (s
, 3H, CH3), 1.24 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH3). MS m/z 377.
【０３１５】 実施例６：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−
オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸メチルエステル ２−オキシインドール（８２．９ｇ）を機械的撹拌を備えた反応容器中で６３
０ｍｌの酢酸に懸濁し，混合物を氷水浴中で１０℃に冷却した。固体のＮ−ヨー
ドスクシンイミド（１７５ｇ）を１０分間かけて少しずつ加えた。添加が終了し
た後，混合物を１０℃で１時間撹拌した。常に存在していた懸濁固体は，このと
き非常に粘稠になった。固体を真空濾過により回収し，１００ｍｌの水中５０％
酢酸で，次に２００ｍｌの水で洗浄し，２０分間真空濾過して，部分乾燥した。
次に，生成物を真空下で乾燥して，プロトンＮＭＲにより約５％の２−オキシイ
ンドールを含む９３．５ｇ（３６％）の５−ヨード−２−オキシインドールを得
た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, 1H, NH-1), 7.49 (s, 1H, H-4), 7.4
8 (d, J = 8.10 Hz, 1H, H-6), 6.64 (d, J = 8.10 Hz, 1H, H-7), および 3.46
(s, 2H, CH2-3). MS (m/z (相対強度, %)) 258 ([M-1]+, 13).
【０３１６】 ５−ヨード−２−オキシインドール（１７ｇ）を２ｇの二酢酸パラジウム，１
８．２ｇのトリエチルアミン，１５０ｍｌのメタノール，１５ｍｌのジメチルス
ルホキシドおよび２．６ｇのＤＰＰＰとともに，一酸化炭素飽和雰囲気下で還流
した。２４時間後，反応物を濾過して触媒を除去し，濾液を濃縮した。濃縮物を
３０％酢酸エチル／ヘキサンを溶出剤として用いて，シリカゲルでクロマトグラ
フィーを行った。生成物を含む画分を濃縮し，放置した。沈殿した生成物を真空
濾過により回収して，０．８ｇ（７％）の５−メトキシカルボニル−２−オキシ
インドールを灰白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) (: 10.70 (s, br, 1H, NH-1), 7.83 (dd, J = 1.77,
8.29 Hz, 1H, H-6), 7.77 (s, br, 1H, H-4), 6.89 (d, J = 8.29 (Hz, 1H, H-
7), 3.80 (s, 3H, COOCH3-5), 3.51 (s, 2H, CH2-3).
【０３１７】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−メトキシカル
ボニル−２−オキシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３，５−ジイソ
プロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ
−インドール−５−カルボン酸メチルエステルを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.96 (s, 1H, CONH), 8.29 (d, J = 1Hz, 1H, H-4), 7.8
8 (dd, J = 1,8Hz, 1H, H-6), 7.7 (s, 1H, =CH-), 7.55 (s, 2H, 芳香族), 7.0
(d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.76 (s, 3H, OCH3), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.26-3.3
5 (m, 2H), 1.23 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH3). MS m/z 393.
【０３１８】 実施例７：３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン ２−イソプロピルフェノールをメチル化し，次にホルミル化して，３−イソプ
ロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを得た。３−イソプロピル−４−メトキ
シベンズアルデヒドを２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３−
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２
−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.6, 7.2, 7.1, 6.8 (多重線,
8H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.2 (d, 6H, 2xCH 3 ).
【０３１９】 実施例８：３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを２−オキシ
インドールと縮合して，０．２５ｇの３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−
２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固
体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.4, 7.3, 7.2, 6.9, 6.8, 6.
8 (多重線, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 2.3 (s
, 3H, CH3), 1.2 (d, 6H, 2xCH3).
【０３２０】 実施例９：５−クロロ−３−（５−イソプロピル−メトキシ−２−メチルベンジ
リデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−イソプロピル−５−メチルフェノールをメチル化し，次にホルミル化して
，５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 7.6, 6.9 (2xs, 2H, 芳香族), 3.9 (
s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 2.6 (s, 3H, CH3), 1.2 (d, 6H, 2xCH3).
【０３２１】 ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを５−クロロ
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（５−イソプ
ロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.65 (s, 1H, CONH), 7.73 (s, 1H,), 7.49 (s, 1H,), 7
.4 (d, J = 2Hz, 1H, H-4), 7.23 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-6), 6.98 (s, 1H), 6
.86 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.86 (s, 3H, OCH3), 3.23-3.3 (m, 2H), 2.33 (s
, 3H, CH3), 1.15 (d, J = 7Hz, 6H, 2xCH3). MS m/z 341.
【０３２２】 実施例１０：３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを２−オキシインドール
と縮合して，０．２５ｇの３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.5, 7.2, 7.1, 6.8 (多重線,
8H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.8 (多重線, 8H,
4xCH2).
【０３２３】 実施例１１：３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−５−フ
ルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−シクロペンチルフェノールをメチル化し，次にホルミル化して，３−シク
ロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 9.9 (s, 1H, CHO), 7.8, 7.7, 7.2 (多重線, 3H, 芳香族)
, 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.2 (多重線, 8H, 4xCH2).
【０３２４】 ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−フルオロ−２−オ
キシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−シクロペンチル−４−メト
キシベンジリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを
黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.6, 7.6, 7.4, 7.1, 7.0, 6.
8 (多重線, 7H, 芳香族, ビニル CH), 3.9 (s, 3H, CH3), 3.3 (m, 1H, CH), 2.
0-1.5 (多重線, 8H, 4xCH2). MS m/z 337.
【０３２５】 実施例１２：３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン ２−シクロヘキシルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。アルデヒ
ドをオキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３−シクロヘキシル−４−
メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体
として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.6, 7.6, 7.2, 7.1, 6.8, 6.
8 (多重線, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.0 (m, 1H, CH), 1.8, 1
.4 (多重線, 10H, 5xCH2).
【０３２６】 実施例１３：５−ブロモ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−フェニルアニソールをホルミル化して，４−メトキシ−３−フェニルベン
ズアルデヒドを得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 9.9 (s, 1H, CHO), 7.9, 7.8, 7.5, 7.4, 7.4, 7.3 (多
重線, 8H, 芳香族), 3.9 (s, 3H, OCH3. MS m/z 213.
【０３２７】 ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを５−ブロモ−２−オキシイン
ドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（６−メトキシ−ビフェニル−
３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体とし
て得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 7.8-6.8 (多重線, 12H, 芳香族, =C
H-), 3.9 (s, 3H, OCH3).
【０３２８】 実施例１４：５−クロロ−３−（２，３−ジヒドロ−ベンゾフラン−５−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルベンゾフランを５−クロロ−２−オキシイン
ドールと縮合して，０．２５ｇの５−クロロ−３−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ
フラン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.6, 8.2, 7.7, 7.6, 7.2, 6.9, 6.
8 (多重線, 7H, 芳香族, =CH-), 4.6 (t, 2H, OCH2), 3.2 (t, 2H, OCH2).
【０３２９】 実施例１５：５−クロロ−３−（２，２−ジメチル−クロマン−６−イルメチレ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマンを５−クロロ−２−オキシインドー
ルと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−
イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得
た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.61 (s, 1H, CONH), 8.31, 8.27, 7.76, 7.17, 6.79 (
多重線, 6H, 芳香族), 7.8 (s, 1H, =CH-), 2.78 (t, 2H, CH2), 1.81 (t, 2H,
CH2), 1.31 (s, 6H, 2xCH3). MS m/z 340.5 (M+1).
【０３３０】 実施例１６：Ｎ−｛３−［３−シクロヘキシル−４−（２−モルホリン−４−イ
ルエトキシ）−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インド
ール−６−イル｝−アセトアミド トリフェニルホスフィン（７．４７ｇ，１９．５８ｍｍｏｌ）を，２−シクロ
ヘキシル−４−クロロフェノール（６ｇ，２８．４８ｍｍｏｌ）および２−ヒド
ロキシエチルモルホリン（３．５９，２８．４８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラ
ン（５０ｍｌ）中の溶液に加え，次にジエチルアゾジカルボキシレート（４．５
ｍｌ，２８．４８ｍｍｏｌ）を滴加した。混合物を室温で１２時間撹拌した。反
応混合物を減圧下で濃縮し，ジクロロメタン／ヘキサン中で砕き，次にさらにヘ
キサンで洗浄した。クロマトグラフィー（シリカ，１０−２０−３０％酢酸エチ
ル／ヘキサン）により，８．４ｇ（９５％）の３−シクロヘキシル−４−モルホ
リノエトキシ−クロロベンゼンを黄色を帯びた油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 7.12 (m, 2H, 2xAr-H), 6.93 (d, J = 9Hz, 1H,
Ar-H), 4.04 (m, 2H, O-CH2CH2), 3.55 (m, 4H, 2x ringO-CH2CH2), 2.84 (m,
1H, CHシクロヘキシル), 2.68 (m, 2H, N-CH2CH2), 2.47 (m, 4H, 2x ringN-CH 2 CH2), 1.7 (m, 5H, シクロヘキシル), 1.3 (m, 5H, シクロヘキシル). MS m/z 324.4 および 325.4, [M+1]+ および [M+3]+.
【０３３１】 ナフタレン（３．４８ｇ，２７．２ｍｍｏｌ）を，テトラヒドロフラン（８０
ｍｌ）中の３０％リチウム分散物（３．２ｇ，１３８ｍｍｏｌ，テトラヒドロフ
ランであらかじめ洗浄）の懸濁液に加えた。懸濁液を緑色が現れるまで撹拌した
（約１時間）。反応液を−７８℃に冷却し，３−シクロヘキシル−４−モルホリ
ノエトキシ−クロロベンゼン（８ｇ，２４．７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン
（２０ｍｌ）中の溶液を加えた。１時間後，反応液を０℃に暖め，さらに１時間
撹拌した。ジメチルホルムアミド（９．６ｍｌ，１２３．５ｍｍｏｌ）を加え，
反応液を０℃でさらに１時間撹拌し，次に室温に暖め，さらに１時間撹拌した。
反応をメタノール（３０ｍｌ）で急冷し，１Ｎ塩酸（３００ｍｌ）に加え，酢酸
エチル（４００ｍｌ）で抽出した。有機層を水（３００ｍｌ），飽和炭酸ナトリ
ウム溶液（３００ｍｌ）およびブライン（３００ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシ
ウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，４０−６０％酢酸エチ
ル／ヘキサン）により，３ｇ（３４％）の３−シクロヘキシル−４−モルホリノ
エトキシベンズアルデヒドを淡黄色油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.83 (s, 1H, CHO), 7.12 (m, 2H, 2xAr-H), 7.
13 (d, J = 8Hz, 1H, Ar-H), 4.19 (m, 2H, O-CH2CH2), 3.55 (m, 4H, 2x ringO
-CH2CH2), 2.88 (m, 1H, CHシクロヘキシル), 2.74 (m, 2H, N-CH2CH2), 2.49
(m, 4H, 2x ringN-CH2CH2), 1.7 (m, 5H, シクロヘキシル), 1.3 (m, 5H, シク
ロヘキシル). MS m/z 318.4 [M+1]+.
【０３３２】 ３−シクロヘキシル−４−モルホリノエトキシベンズアルデヒド（３ｇ，９．
４５ｍｍｏｌ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（３．５ｇ，１８．
９ｍｍｏｌ）およびピペリジン（５ｍｌ，５０ｍｍｏｌ）のエタノール（３５ｍ
ｌ）中の混合物を，密封管中で１００℃で６時間保持した。反応混合物を冷却し
，酢酸エチル（５００ｍｌ）で希釈し，濾過して過剰の６−アセトアミド−２−
オキシインドールを除去した。濾液を０．５Ｎ塩酸（２００ｍｌ）およびブライ
ン（２Ｘ２００ｍｌ）で抽出した。酸性洗浄物を固体炭酸水素ナトリウムでｐＨ
９に塩基性にし，酢酸エチル（２ｘ２００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を
ブライン（２００ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。合わ
せた固体をジクロロメタン（２５ｍｌ）に溶解し，ジエチルエーテル（５００ｍ
ｌ）で沈殿させて，１．６ｇのからし色固体を得た。固体をメタノール（１００
ｍｌ）に溶解し，濾過して，黄色固体を得（これは別に保存しておいた），次に
水（４００ｍｌ）で沈殿させ，濾過した。固体残渣をメタノールに再溶解し，濃
縮して，固体とした。このプロセスを２回繰り返して，ＨＰＬＣにより約８２％
純粋な異性体１を得た。濾過した黄色固体は，ＨＰＬＣにより７７％異性体２で
あった。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, 1H, NH), 10.0 (s, 1H, NHAc), 7.55
(m, 3H, Ar-H), 7.44 (m, 2H, Ar-H および Ar-CH=C), 7.07 (d, 1H, J = 8Hz,
Ar-H), 6.89 (dd, 1H, J =2 および 8Hz, Ar-H), 4.16 (m, 2H, Ar-OCH2), 3.5
7 (m, 4H, OCH2CH2N), 2.92 (m, 1H, chexCH), 2.75 (m, 2H, ArOCH2-CH2N), 2.
51 (m, 4H, NCH2CH2O), 2.02 (s, 3H, NHCOCH3), 1.8 (m, 5H, chexCH2), 1.38
(m, 5H, chexCH2). 20% 異性体 1; 77% 異性体 21 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.39 (s, 1H, NH), 9.92 (s, 1H, NHAc), 8.37
(d, 1H, J = 2Hz, Ar-H), 8.24 (m, 1H, Ar-H), 7.55 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.52
(d, 1H, J = 8Hz, Ar-H), 7.36 (m, 1H, Ar-H), 7.03 (m, 2H, Ar-H), 4.16 (m
, 2H, Ar-OCH2), 3.57 (m, 4H, OCH2CH2N), 2.88 (m, 1H, chexCH), 2.74 (m, 2
H, ArOCH2-CH2N), 2.51 (m, 4H, NCH2CH2O), 2.03 (s, 3H, NHCOCH3), 1.8 (m,
5H, chexCH2), 1.38 (m, 5H, chexCH2).
【０３３３】 実施例１７：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５
−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−ヒドロキシベンズアルデヒドをメチル化して，
３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 6.9 (s, 2H, 芳香族), 3.9
(s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 2H, 2xCH), 1.2 (d, 12H, 4xCH3).
【０３３４】 １１．４ｇのヒドロキシルアミン塩酸塩の水（５０ｍｌ）中の溶液を，抱水ク
ロラール（９．６ｇ）および硫酸ナトリウム（８３ｇ）の水（２００ｍｌ）中の
溶液に６０℃で加えた。混合物を６０℃に保持し，この間に別のフラスコで，４
−アニシジン（６．４ｇ）および濃塩酸（４．３ｍｌ）の水（８０ｍｌ）中の溶
液を８０℃に暖めた。次に，第１の溶液を第２の溶液に加え，反応液を２分間還
流し，室温までゆっくり冷却し，次に氷浴中で冷却した。形成した黄褐色沈殿物
を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，８．６ｇ（８５％収
率）のＮ−（２−ヒドロキシイミノアセチル）−アニシジンを得た。
【０３３５】 水（５ｍｌ）を含む濃硫酸（４５ｍｌ）を６０℃に暖め，８．６ｇのＮ−（２
−ヒドロキシイミノアセチル）−アニシジンを一度に加えた。混合物を９３℃で
１０分間撹拌し，次に室温まで冷却させた。混合物を５００ｇの氷に注加し，酢
酸エチルで３回抽出した。合わせた抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮
して，５．１ｇ（６５％収率）の５−メトキシイサチンを暗赤色固体として得た
。
【０３３６】 ５−メトキシイサチン（５．０ｇ）および３０ｍｌのヒドラジン水和物を１５
分間還流した。反応混合物を室温に冷却し，５０ｍｌの水を加えた。混合物を２
５ｍｌの酢酸エチルで３回抽出し，有機層を合わせ，無水硫酸ナトリウムで乾燥
し，濃縮して，黄色固体を得た。固体を酢酸エチル中で撹拌し，１．１ｇの不溶
性物質を真空濾過により除去し，保存した。この物質は２−ヒドラジノカルボニ
ル−メチル−４−アニシジンであることがわかった。濾液を濃縮し，シリカゲル
でクロマトグラフィーを行い，酢酸エチル：ヘキサン１：１で溶出して，０．７
ｇの５−メトキシ−２−オキシインドールを濁った黄色固体として得た。１．１
ｇの２−ヒドラジノカルボニル−メチル−４−アニシジンを２０ｍｌの１Ｎ水酸
化ナトリウム中で１時間還流した。混合物を冷却し，濃塩酸でｐＨ２に酸性にし
，２５ｍｌの酢酸エチルで３回抽出した。有機抽出物を合わせ，ブラインで洗浄
し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，０．８ｇの５−メトキシ−２−オ
キシインドールを濁った黄色固体として得た。合わせた収率は１．５ｇすなわち
３３％であった。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.13 (s, 1H, NH-1), 6.84 (s, 1H, H-4), 6.7
2 (d, J = 9Hz, 1H, H-6), 6.69 (d, J = 9Hz, 1H, H-7), 3.68 (s, 3H, OCH3-5
), 3.41 (s, 2H, CH2-3). MS m/z 163 [M+1]+.
【０３３７】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−メトキシ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−５−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.34 (s, 1H, NH), 7.59 (s, 2H), 7.47 (s, 2
H), 7.15 (d, J = 2Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 2, 8Hz, 1H), 6.58 (d, J = 8Hz,
1H), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.63 (s, 3H, OCH3), 3.25-3.39 (m, 2H, 2 x (CH3) 2 CH), 1.2 (d, 12H, 2 x (CH3)2CH). MS APCI m/z 366.1 [M+1]+.
【０３３８】 実施例１８：Ｎ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデ
ン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセト
アミド テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１．３５ｇ）を，
４−メトキシ−３−ブロモベンズアルデヒド（６．７２ｇ）のトルエン（４５ｍ
ｌ）およびエタノール（４５ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナトリ
ウム（８０ｍｌ）を加えた。この混合物にチオフェン−３−ボロン酸（５ｇ）を
加えた。次に混合物を１２時間還流した。反応混合物を水（２００ｍｌ）に注加
し，酢酸エチル（２ｘ１５０ｍｌ）中に抽出した。有機層を飽和水性炭酸水素ナ
トリウム（１５０ｍｌ）およびブライン（１５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシ
ウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，２０％酢酸エチル／ヘ
キサン）により，６ｇ（８８％）の３（３−チオフェン）−４−メトキシベンズ
アルデヒドを黄色油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.92 (s, 1H, CHO), 8.04 (d, 1H, J = 2Hz, 1x
Ar-H), 7.8 (m, 2H, Ar-H), 7.58 (dd, 1H, J = 3 および 5Hz, thiophene およ
び Ar-H), 7.50 (dd, 1H, J = 2 および 5Hz, Ar-H), 7.28 (d, 1H, J = 9Hz, t
hiophene), 3.94 (s, 3H, OCH3). MS m/z 219.2 [M+1]+.
【０３３９】 ３（３−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデヒド（１．７２ｇ），６−
アセトアミド−２−オキシインドール（１．５ｇ）およびピペリジン（４ｍｌ）
のエタノール（２６ｍｌ）中の混合物を密封管中で１００℃で１２時間保持した
。反応液を冷却し，ジエチルエーテルに注加した。形成した沈殿物を濾過により
除去し，ジエチルエーテルで，次にヘキサンで洗浄し，乾燥して，０．９ｇ（２
９％）のＮ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）
−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミ
ドを黄褐色固体として得た。1 HNMR 360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.52 (s, 1H, NH), 10.22 (s, 1H, NHAc), 7.85
(m, 2H, 2xAr-H), 7.7 (dd, J = 2 および 9Hz, 1H, Ar-H), 7.6 (m, 2H, 2xAr
-H), 7.5 (dd, 1H, J = 1 および 5Hz, Ar-H), 7.47 (s, 2H, Ar-H および Ar-C
H=C), 7.25 (d, 1H, J =9Hz, Ar-H), 6.96 (dd, 1H, J =2 および 9Hz, Ar-H),
3.92 (s, 3H, OCH3), 2.04 (s, 3H, NHCOCH3). MS m/z 391.2 [M+1]+.
【０３４０】 実施例１９：３−［３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５
−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−メチルイサチン（１５．０ｇ）および６０ｍｌのヒドラジン水和物の混合
物を１４０−１６０℃で４時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し，３００ｍ
ｌの氷水に注加し，６Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。室温で２日間放置した後，
形成した沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，６．
５ｇ（４７％収率）の５−メチル−２−オキシインドールを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.20 (s, br, 1H, NH-1), 6.99 (s, 1H, H-4),
6.94 (d, J = 8 Hz, 1H, H-6), 6.68 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.39 (s, 2H, C
H2-3), および 2.22 (s, 3H, CH3-5).
【０３４１】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−メチル−２−
オキシインドールと縮合させて，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−５−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.41 (s, br, 1H, NH), 7.56 (s, 1H), 7.51 (
s, 2H), 7.50 (s, br, 1H), 7.03 (d, br, J = 8Hz, 1H), 6.76 (d, J = 8Hz, 1
H), 3.74 (s, 3H, OCH3), 3.26-3.35 (m, 2H, 2 x (CH3)2CH), 2.15 (s, 3H, CH 3 ), 1.22 (d, J = 7Hz, 12H, 2 x (CH3)2CH). MS APCI m/z 350.2 [M+1]+.
【０３４２】 実施例２０：５−アミノ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシ−ベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−オキシインドール（６．５ｇ）を濃硫酸（２５ｍｌ）に溶解し，混合物を
−１０から１５℃に保持し，この間に発煙硝酸（２．１ｍｌ）を滴加した。硝酸
を加えた後，反応混合物を０℃で０．５時間撹拌し，氷水に注加した。形成した
沈殿物を濾過により回収し，水で洗浄し，５０％酢酸から結晶化した。次に，最
終結晶生成物を濾過し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，６．３ｇ（７０％）の
５−ニトロ−２−オキシインドールを得た。
【０３４３】 ５−ニトロ−２−オキシインドール（６．３ｇ）をメタノール中１０％パラジ
ウム担持炭素で水素化して，３．０ｇ（６０％収率）の５−アミノ−２−オキシ
インドールを白色固体として得た。３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベン
ズアルデヒドを５−アミノ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−
アミノ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.62 (br s, 1H, NH), 8.31 (s, 2H), 7.8 (s,
1H), 7.65 (s, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 2, 8Hz, 1H
), 6.88 (d, J = 8Hz, 1H), 3.72 (3H, OCH3), 3.24-3.32 (m, 2H, 2 x (CH3)2C
H), 1.23 (d, J = 6.5Hz, 12H, 2 x (CH3)2CH).
【０３４４】 実施例２１：５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，６−ジメチルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.1(s, 1H, CHO), 6.9(s, 2H, 芳香族), 3.9(s, 3H, OCH 3 ), 2.6(s, 6H, 2xCH3).
【０３４５】 ３，５−ジメチル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−クロロ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−
ジメチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体
として得た。
【０３４６】 実施例２２：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６
−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン 水素化ナトリウム（２．６ｇ）およびジメチルマロネート（１４．５ｇ）のジ
メチルスルホキシド（１６０ｍｌ）中の懸濁液を１００℃で１時間撹拌した。混
合物を室温に冷却し，７．９５ｇの２，５−ジフルオロニトロベンゼンを加え，
３０分間撹拌を続けた。次に，混合物を１００℃に加熱し，さらに１時間撹拌し
，次に室温に冷却し，４００ｍｌの飽和塩化アンモニウムに注加した。混合物を
酢酸エチル（２００ｍｌ）で抽出し，有機層をブラインで洗浄し，無水硫酸ナト
リウムで乾燥し，真空下で濃縮した。残渣をメタノールから結晶化して，２４．
４ｇ（８０％収率）のジメチル４−フルオロ−２−ニトロフェニルマロネートを
白色固体として得た。濾液を濃縮し，シリカゲルのカラムでクロマトグラフィー
（酢酸エチル：ヘキサン１：８）を行って，５．０３ｇのジメチル４−フルオロ
−２−ニトロフェニルマロネート（合計２９．５ｇ（９６％収率））を得た。
【０３４７】 ジメチル４−フルオロ−２−ニトロフェニルマロネート（５．０ｇ）を２０ｍ
ｌの６Ｎ塩酸中で２４時間還流した。反応液を冷却し，形成した白色固体を真空
濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，３．３ｇ（８７％収率）の４−フル
オロ−２−ニトロフェニル酢酸を得た。
【０３４８】 酢酸（１５ｍｌ）中に溶解した４−フルオロ−２−ニトロフェニル酢酸（３．
３ｇ）を，０．４５ｇの１０％パラジウム担持炭素で６０ｐｓｉで２時間水素化
した。触媒を濾過により除去し，１５ｍｌのメタノールで洗浄した。合わせた濾
液を濃縮し，水で希釈した。沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥
して，１．６ｇ（７０％収率）の６−フルオロ−２−オキシインドールを得た。
濾液を濃縮して，最初の生成物と類似するＮＭＲスペクトルを有する紫色固体を
得た。紫色固体をクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン１：２，シリカゲ
ル）して，第２の生成物６−フルオロ−２−オキシインドールを白色固体として
得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.43 (s, 1H, NH-1), 7.17 (t, J = 8Hz, H-4)
, 6.69 (ddd, J = 2, 8, 10Hz, 1H, H-5), 6.6 (dd, J = 2, 9Hz, 1H, H-7), お
よび 3.42 (s, 2H, CH2-3). MS m/z 152.8 [M+1]+.
【０３４９】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−フルオロ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−６−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.69 (s, br, 1H, NH), 7.58 (s, 1H, ビニル)
, 7.55-7.59 (m, 1H), 7.47 (s, 2H), 6.68 (m, 2H), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.2
5-3.34 (m, 2H, 2 x (CH3)2CH), 1.2 (d, J = 7Hz, 12H, 2 x (CH3)2CH). MS m/z 353.
【０３５０】 実施例２３：３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−５−フル
オロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマン（市販）を５−フルオロ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．３ｇの３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イ
ルメチレン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。
【０３５１】 実施例２４：５−クロロ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリ
ン−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒドロインドール−２−
オン トリフェニルホスフィン（５．１４ｇ，１９．５８ｍｍｏｌ）を，３，５−ジ
イソプロピル−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（４ｇ，１９．５８ｍｍｏｌ）
のテトラヒドロフラン（４０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２−ヒドロキシエチ
ルモルホリン（２．５７ｇ，１９．５８ｍｍｏｌ）を加え，次にジエチルアゾジ
カルボキシレート（３．４１ｇ，１９．５８ｍｍｏｌ）を滴加した。混合物を室
温で１２時間撹拌した。反応液を減圧下で濃縮し，２Ｎ塩酸（２００ｍｌ）と酢
酸エチル（１５０ｍｌ）との間に分配した。水性層を酢酸エチル（２ｘ１５０ｍ
ｌ）で抽出し，固体炭酸水素ナトリウムでｐＨ９に塩基性にし，酢酸エチル（３
ｘ１５０ｍｌ）で抽出した。有機層を会わせ，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮
して，９００ｍｇ（１４％）の３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン
−４−イルエトキシ）−ベンズアルデヒドを黄色を帯びた油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.91 (s, 1H, CHO), 9.37 (s, 2H, 2xAr-H), 3.
85 (t, J = 5Hz, 2H, O-CH2CH2), 3.59 (m, J = 5 および 4Hz, 4H, 2x ringO-C
H2CH2), 3.39 (sept, J = 7Hz, 2H, 2xCHCH3), 2.72 (t, J = 5Hz, 2H, N-CH2C
H2), 2.4 (m on DMSO, 4H, 2x ringN-CH2CH2), 1.2 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH3).
【０３５２】 ３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベン
ズアルデヒド（０．４ｇ，１．２６ｍｍｏｌ），５−クロロ−２−オキシインド
ール（０．２１ｇ，１．２６ｍｍｏｌ）およびピロリジン（０．５ｍｌ，６．３
ｍｍｏｌ）のエタノール（２ｍｌ）中の混合物を，密封管中で１００℃で１２時
間保持した。次に，混合物を１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）に注加し，残った固体を濾
過し，さらに水（５０ｍｌ）で洗浄した。次に，固体を酢酸エチル（２００ｍｌ
）に溶解し，溶液を硫酸マグネシウムで乾燥し，濾過し，次に濃縮した。残った
固体をクロマトグラフィー（シリカ，４／４／１ジクロロメタン／ヘキサン／メ
タノール）を行い，６０ｍｇ（１０％）の５−クロロ−３−［３，５−ジイソプ
ロピル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−１，３
−ジヒドロインドール−２−オンを褐色を帯びた橙色の固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 9.43 (d, J = 10Hz, 1H, A
r-H), 7.58 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H), 7.46 (d, J = 5Hz, 2H, Ar-H), 7.3 (m,
1H, Ar-H), 7.19 (m, J = 9 および 10Hz, 1H, Ar-H), 6.99 (m, J = 9 および
9Hz, 1H, Ar-H), 6.83 (m, J = 9 および 1Hz, 1H, Ar-H), 3.61 (dd, J = 9 お
よび 22 HZ 1H, 1xCH2CH), 3.43 (m, 1H, CHCH3), 2.86 (dd, J = 4 および 22H
z, 1H, 1xCH2CH), 1.35 (d, J = 9Hz, 3H, CH3). MS m/z 262.0 [M+1]+.
【０３５３】 実施例２５：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−７
−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを７−フルオロ−２
−オキシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−
４−メトキシベンジリデン）−７−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２
−オンを黄橙色固体として得た。
【０３５４】 実施例２６：３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−
５−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン ５−クロロアセチル−２−オキシインドール（４．１８ｇ）のトリフルオロ酢
酸（３０ｍｌ）中の溶液を氷浴中で冷却し，４．６５ｇのトリエチルシランを加
えた。次に混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を１５０ｍｌの水に注加し，
形成した沈殿物を真空濾過により回収し，５０ｍｌの水で洗浄し，乾燥して，２
．５３ｇ（６５％収率）の５−（２−クロロエチル）−２−オキシインドールを
赤みを帯びた褐色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.26 (s, br, NH), 7.11 (s, 1H, H-4), 7.05
(d, J = 8Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8Hz, 1H), 3.77 (t, J = 7Hz, 2H, CH2), 3.4
2 (s, 2H, CH2), 2.94 (t, J = 7Hz, 2H, CH2).
【０３５５】 ５−（２−クロロエチル）−２−オキシインドール（２．３ｇ），モルホリン
（１．２ｍｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．２ｍｌ）のジメチルス
ルホキシド（１０ｍｌ）中の溶液を，１００℃で一夜加熱した。混合物を冷却し
，水に注加し，酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し，乾燥し，蒸
発させた。残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル，５％メタノール，クロロホ
ルム中）を行って，０．９ｇ（３１％）の５−（２−モルホリン−４−イル−エ
チル）−２−オキシインドールを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.21 (s, br, 1H, NH), 7.06 (s, br, 1H, H-4
), 7.0 (d, J = 8Hz, 1H, H-6), 6.71 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.55-3.58 (m,
4H), 3.41 (s, 2H, H-3), 2.63-2.68 (m, 2H), 2.39-2.47 (m, 6H).
【０３５６】 ３（３−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデヒド（０．２７ｇ，１．２
２ｍｍｏｌ），５−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−２−オキシインド
ール（０．３ｇ，１．２２ｍｍｏｌ）およびピペリジン（０．６ｍｌ，６．１ｍ
ｍｏｌ）のエタノール（４ｍｌ）中の混合物を，密封管中で１００℃で１２時間
保持した。反応液を冷却し，ジエチルエーテル（１５０ｍｌ）およびヘキサン（
１５０ｍｌ）に注加した。残った固体を濾過により除去し，ジエチルエーテルで
，次にヘキサンで洗浄し，乾燥して，０．２７ｇ（５０％）の３−（４−メトキ
シ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−５−（２−モルホリン−４−イ
ル−エチル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを橙黄色固体として得た
。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.41 (s, 1H, NH), 8.86 (d, J = 2.15Hz, 1H,
Ar-H), 8.39 (dd, J = 2 および 9Hz, 1H, Ar-H), 7.8 (dd, 1H, J = 1 および
3Hz, Ar-H), 7.7 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.6 (m, 1H, ArH), 7.5 (m, 2H, 2xArH),
7.21 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H), 7.02 (dd, 1H, J = 1 および 8Hz, Ar-H), 6.7
3 (d, 1H, J = 8Hz, Ar-H), 3.93 (s, 3H, OCH3), 3.58 (m, 4H, 2x OCH2CH2N),
2.7 (m, 2H, ArCH2CH2), 2.5 (m, 2H, ArCH2CH2N), 2.4 (m, 4H, 2xOCH2CH2N).
MS m/z 447.2 [M+1]+.
【０３５７】 実施例２７：Ｎ−［３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチル−ベン
ジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−
アセトアミド ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド（０．２５ｇ
，１．３ｍｍｏｌ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（０．２５ｇ，
１．３ｍｍｏｌ）およびピロリジン（０．５４ｍｌ，６．５ｍｍｏｌ）のエタノ
ール（４ｍｌ）中の混合物を密封管中で１００℃で１２時間保持した。反応液を
冷却し，次に水（１００ｍｌ）に注加した。形成した固体を濾過により除去し，
水で洗浄し，次に酢酸エチル（２００ｍｌ）に溶解した。酢酸エチル溶液を硫酸
マグネシウムで乾燥し，濃縮した。得られた固体をジクロロメタン／ヘキサン中
で砕いて，０．３３ｇ（７０％）のＮ−［３−（５−イソプロピル−４−メトキ
シ−２−メチルベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インド
ール−６−イル］−アセトアミドを褐色を帯びた黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.46 (s, 1H, NH), 7.49 (s, 1H, Ar-H), 7.46
(s, 1H, Ar-H), 7.41 (s, 1H, Ar-H), 6.93 (m, 1H, Ar-CH=C), 6.83 (dd, 1H,
J =2 および 8Hz, Ar-H), 3.83 (s, 3H, OCH3), 2.30 (s, 3H, Ar-CH3), 2.02
(s, 3H, NHCOCH3), 1.2 (m, 1H, CH(CH3)2), 1.1 (d, J = 7Hz, 6H, CH(CH3)2).
MS m/z 365.2 [M+1]+.
【０３５８】 実施例２８：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５
−エチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン １，２−ジクロロエタン中に懸濁した２−オキシインドール（３ｇ）を３．２
ｍｌの塩化アセチルでゆっくり処理した。得られた懸濁液を５０℃で５時間撹拌
し，冷却し，水に注加した。得られた沈殿物を真空濾過により回収し，豊富な水
で洗浄し，真空下で乾燥して，２．９ｇ（７３％収率）の５−アセチル−２−オ
キシインドールを褐色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ : 10.75 (s, br, NH), 7.83 (d, J = 8Hz, 1H),
7.78 (s, 1H, H-4), 6.88 (d, J = 8Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH2), 2.49 (s, 3H
, CH3).
【０３５９】 ５−アセチル−２−オキシインドール（２ｇ）および１５ｍｌのトリフルオロ
酢酸を，氷浴中で１．８ｇのトリエチルシランでゆっくり処理し，次に室温で５
時間撹拌した。１ｍｌのトリエチルシランを加え，一夜撹拌を続けた。反応混合
物を氷水に注加し，得られた沈殿物を真空濾過により回収し，豊富な水で洗浄し
，真空下で乾燥して，１．３ｇ（７１％収率）の５−エチル−２−オキシインド
ールを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.25 (s, br, NH-1), 7.03 (s, 1H, H-4), 6.9
7 (d, J = 8Hz, 1H, H-6), 6.69 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.40 (s, 2H, CH2-3)
, 2.51 (q, J = 8Hz, 2H, CH2CH3-5), および 1.12 (t, J = 7Hz, 3H, CH2CH3-5
).
【０３６０】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−エチル−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−５−エチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.42 (s, 1H, NH), 7.56 (s, 1H), 7.51 (s, 2
H), 7.49 (s, br, 1H), 7.08 (dd, J = 8Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8Hz, 1H), 3.7
4 (s, 3H, OCH3), 3.25-3.55 (m, 2H, 2 x (CH3)2CH), 2.44 (q, J = 8Hz, 2H,
CH3CH2), 1.22 (d, J = 7Hz, 12H, 2 x (CH3)2CH), 1.08 (t, J = 8Hz, 3H, CH 3 CH2). MS APCI m/z 364.3 [M+1]+.
【０３６１】 実施例２９：Ｎ−［２'−メトキシ−５'−（２−オキソ−１，２−ジヒドロイン
ドール−３−イリデンメチル）−ビフェニル−３−イル］−アセトアミド ３−ブロモ−ｐ−アニスアルデヒド（１ｇ，４．６５ｍｍｏｌ），ピロリジン
（１．９ｍｌ，２３．２ｍｍｏｌ）およびオキシインドール（０．６２ｇ，４．
６５ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（７ｍｌ）中の混合物を，密封管中で１
００℃で１２時間保持した。混合物を室温に冷却し，１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）に
注加した。形成した沈殿物を濾過し，水で洗浄した。次に沈殿物を酢酸エチル（
２００ｍｌ）に溶解し，溶液をブラインで洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，
次に濃縮した。得られた固体をクロマトグラフィー（シリカ，３０−４０％酢酸
エチル／ヘキサン）を行い，０．６３ｇ（４２％）の３−（３−ブロモ−４−メ
トキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄色固体とし
て得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (m, 1H, NH), 7.7 (m, 1H, Ar-H), 7.6 (m
, 1H, Ar-CH=C), 7.5 (m, 1H, Ar-H), 7.2 (m, 2H, 2xAr-H), 6.9 (m, 1H, Ar-H
), 6.8 (m, 1H, Ar-H), 3.9 (s, 3H, OCH3). MS m/z 330.0 および 332.0. [M]+ および [M+2]+.
【０３６２】 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ，０．
０２ｍｍｏｌ）を，３−（３−ブロモ−４−メトキシ−ベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン（０．２ｇ，０．６１ｍｍｏｌ）のトルエン（
１ｍｌ）およびエタノール（２ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナト
リウム（１．２ｍｌ，２．４ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に，３−アセトア
ミドフェニルボロン酸（０．１２ｇ，０．６７ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密封
管中で１００℃に加熱し，ここで１２時間保持した。次に，反応液を水（５０ｍ
ｌ）に注加し，酢酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽
和水性炭酸水素ナトリウム（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄した
。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ
，３０−４０％酢酸エチル／ヘキサン）により，ワックス状固体を得，これをジ
エチルエーテル／ヘキサン中で砕き，次に乾燥して，０．０５ｇ（２２％）のＮ
−［２'−メトキシ−５'−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イ
リデンメチル）−ビフェニル−３−イル］−アセトアミドを赤色を帯びた橙色固
体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.6 (m, 1H, NH), 9.88 (s, 1H, NHAc), 7.7 (
m, 1H, Ar-H), 7.5 (m, 3H, 2xAr-H および Ar-CH=C), 7.2 (m, 4H, Ar-H), 7.0
(m, 2H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, Ar-H), 3.9 (two s, 3H, OCH3), 2.02 (2, 3H, C
OCH3). MS m/z 385.2 [M+1]+.
【０３６３】 実施例３０：５−フルオロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチ
ル−ベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを５−フルオ
ロ−２−オキシインドールと縮合して，０．２５ｇの５−フルオロ−３−（５−
イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 7.72 (s, 1H), 7.47 (s, 1
H), 7.1 (dd, 1H), 7.04 (ddd, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.82-6.86 (m, 1H), 3.86
(s, 3H, OCH3), 3.25-3.28 (m, 1H, (CH3)2CH), 2.32 (s, 3H, CH3), 1.14 (d,
6H, (CH3)2CH). EI MS m/z 325 [M]+.
【０３６４】 実施例３１：Ｎ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−２−イルベンジリデ
ン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセト
アミド テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．２４ｇ）を，
４−メトキシ−３−ブロモベンズアルデヒド（１．５ｇ）のトルエン（１５ｍｌ
）およびエタノール（１５ｍｌ）中の溶液に加え，次に２Ｍ水性炭酸ナトリウム
（１４ｍｌ）を加えた。この混合物に，チオフェン−２−ボロン酸（０．９８ｇ
）を加え，混合物を加熱還流した。３時間後，反応液を水（１００ｍｌ）と酢酸
エチル（２５０ｍｌ）との間に分配した。有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウム
（７５ｍｌ）およびブライン（７５ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し
，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，２０％酢酸エチル／ヘキサン）によ
り，１．３ｇ（８７％）の３−（２−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデ
ヒドを黄色油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.92 (s, 1H, CHO), 8.2 (d, 1H, J = 3Hz, 1xA
r-H), 7.8 (dd, 1H, J = 10 および 10Hz, SCHCHCH), 7.65 (m, 1H, Ar-H), 7.6
0 (dd, 1H, J = 2 および 6Hz, Ar-H), 7.32 (d, 1H, J = 10Hz, SCHCHCH), 7.1
3 (d, 1H, J = 10 および 6Hz, SCHCHCH), 3.99 (s, 3H, OCH3).
【０３６５】 ３−（２−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデヒド（０．２５ｇ，１．
１５ｍｍｏｌ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（０．２２ｇ，１．
１５ｍｍｏｌ）およびピロリジン（０．４８ｍｌ，５．７５ｍｍｏｌ）のエタノ
ール（４ｍｌ）中の混合物を，密封管中で１００℃で１２時間保持した。反応液
を冷却し，形成した沈殿物を濾過により除去し，エタノール，続いてヘキサンで
洗浄し，乾燥して，０．１５ｇ（３３％）のＮ−［３−（４−メトキシ−３−チ
オフェン−２−イルベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−６−イル］−アセトアミドを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.49 (s, 1H, NH), 9.95 (s, 1H, NHAc), 8.99
(d, J = 2Hz, 1H, Ar-H), 8.28 (dd, J = 2 および 9Hz, 1H, Ar-H), 7.6 (m,
2H, 2xAr-H), 7.5 (m, 2H, Ar-H および Ar-CH=C), 7.38 (d, 1H, J =1Hz, Ar-H
), 7.22 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 7.14 (dd, 1H, J = 4 および 5Hz, Ar-H), 7
.05 (dd, 1H, J =2 および 9Hz, Ar-H), 3.97 (s, 3H, OCH3), 2.04 (s, 3H, NH
COCH3). MS m/z 391.3 [M]+ および [M+2]+.
【０３６６】 実施例３２：６−アミノ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシ−ベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−アミノ−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの６−アミノ−３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。
【０３６７】 実施例３３：Ｎ−［３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド ６−アセトアミド−２−オキシインドール（２８５ｍｇ），２，２−ジメチル
クロマン−６−カルボキシアルデヒド（２８５ｍｇ）およびピペリジン（０．２
ｍｌ）の混合物を９０℃で一夜撹拌した。反応混合物を冷却し，２０ｍｌの水で
希釈した。形成した粘稠な固体を濾過し，クロマトグラフィー（２％エタノール
，酢酸エチル中）を行って，２４０ｍｇ（４４％）のＮ−［３−（２，２−ジメ
チルクロマン−６−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−６−イル］−アセトアミドを橙赤色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.44 (s, 1H, NH), 10.0 (s, 1H, NH), 7.6, 7
.46, 7.42, 7.37, 6.93, 6.82 (m, 7H, 6 Ar-H および 1 ビニル-H), 2.8 (t, J
= 6Hz, 2H, CH2), 2.03 (s, 3H, CH3), 1.83 (t, J = 6Hz, 2H, CH2), 1.32 (s
, 6H, 2x CH3). MS m/z 363.1 [M+1]+.
【０３６８】 実施例３４：５−ブロモ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２０ｍｌのアセトニトリル中の２−オキシインドール（１．３ｇ）を−１０℃
に冷却し，２．０ｇのＮ−ブロモスクシンイミドを撹拌しながらゆっくり加えた
。反応液を−１０℃で１時間，次に０℃で２時間撹拌した。形成した沈殿物を回
収し，水で洗浄し，乾燥して，１．９ｇ（９０％収率）の５−ブロモ−２−オキ
シインドールを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.44 (s, br, 1H, NH-1), 7.32-7.36 (m, 2H),
6.76 (d, J = 8.5 Hz, 1H, H-7), 3.5 (s, 2H, CH2). MS m/z 212.1 および 214.1, [M]+ および [M+2]+.
【０３６９】 ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマン（市販）を５−ブロモ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（２，２−ジメチルクロマ
ン−６−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体
として得た。 異性体 1 (67%): 1HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.65 (s, br, 1H, NH), 7.73
(d, 1H), 7.6 (s, 1H, ビニル), 7.5 (s, br, 1H), 7,47 (dd, 1H), 7.37 (dd,
1H), 6.86 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 2.77-2.81 (m, 4H, 2 x CH2), 1.81-1.84
(m, 4H, 2 x CH2), 1.32 (s, 6H, 2 x CH3). 異性体 2 (33%): 1HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.63 (s, br, 1H, NH), 8.32
(dd, 1H), 8.27 (s, br, 1H), 7.89 (d, 1H), 7,81 (s, 1H, ビニル), 7.3 (dd
, 1H), 6.79 (d, 1H), 6.76 (d, 1H), 2.77-2.81 (m, 4H, 2 x CH2), 1.81-1.84
(m, 4H, 2 x CH2), 1.31 (s, 6H, 2 x CH3). MS APCI m/z 384.1 および 385.9, [M]+ および [M+2]+.
【０３７０】 実施例３５：３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ，０．
０２ｍｍｏｌ）を，３−（３−ブロモ−４−メトキシ−ベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン（０．２ｇ，０．６１ｍｍｏｌ）のトルエン（
１ｍｌ）およびエタノール（１ｍｌ）中の溶液に加え，次に２Ｍ水性炭酸ナトリ
ウム（１．２ｍｌ，２．４ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に，チオフェン−３
−ボロン酸（０．０９ｇ，０．６７ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密封管中で１０
０℃で１２時間保持した。次に，反応液を水（５０ｍｌ）に注加し，酢酸エチル
（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウム
（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し
，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，塩化メチレン，次に３０−４０％酢
酸エチル／ヘキサン）により，０．１ｇ（５０％）の３−（４−メトキシ−３−
チオフェン−３−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 7.8 (m, 2H, 2xAr-H), 7.6
(m, 5H, 4xAr-H および Ar-CH=C), 7.2 (m, 2H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, Ar-H), 3
.92 (s, 3H, OCH3). MS m/z 334.3 [M+1]+.
【０３７１】 実施例３６：５−ブロモ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチル
−ベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを５−ブロモ
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（５−イソプ
ロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.6, 7.5, 7.4, 7.0, 6.8 (m,
6H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.3 (m, 1H, CH), 2.3 (s, 3H, CH3)
, 1.2 (d, 6H, 2xCH3).
【０３７２】 実施例３７：５−フルオロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを５−フルオロ−２−オキシイ
ンドールと縮合して，０．３ｇの５−フルオロ−３−（６−メトキシビフェニル
−３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体と
して得た。
【０３７３】 実施例３８：３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチ
ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２０ｍｌの乾燥エーテル中のジエチルオキサレート（３０ｍｌ）を，撹拌しな
がら，５０ｍｌの乾燥エーテル中に懸濁した１９ｇのカリウムエトキシドに加え
た。混合物を氷浴中で冷却し，２０ｍｌの乾燥エーテル中の２０ｍｌの３−ニト
ロ−ｏ−キシレンをゆっくり加えた。形成した粘稠な暗赤色混合物を０．５時間
還流し，濃縮して暗赤色固体を得，ほぼすべての固体が溶解するまで１０％水酸
化ナトリウムで処理した。暗赤色混合物を，赤色が黄色に変化するまで，３０％
過酸化水素で処理した。次に，水酸化ナトリウムの添加により暗赤色が形成され
なくなるまで，混合物を１０％水酸化ナトリウムと３０％過酸化水素で交互に処
理した。残りの固体を濾過し，濾液を６Ｎ塩酸で酸性にした。得られた沈殿物を
真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，９．８ｇ（４５％収率
）の１−メチル−６−ニトロフェニル酢酸を灰白色固体として得た。固体をメタ
ノール中で，１０％パラジウム担持炭素で水素化して，９．０４ｇの４−メチル
−２−オキシインドールを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.27 (s, br, 1H, NH), 7.06 (t, J = 8Hz, 1H
, H-6), 6.74 (d, J = 8Hz, H-5), 6.63 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.36 (s, 2H
, CH2), 2.18 (s, 3H, CH3).
【０３７４】 ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−２−オキシ
インドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−イソプロピル−４−メトキシベ
ンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固
体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.4(s, 1H, NH), 8.2, 8.1, 7.6, 7.2, 7.1, 6.8, 6.7 (
m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 2.6 (m, 1H, CH
), 1.2 (d, 6H, 2xCH3).
【０３７５】 実施例３９：３−（４，５−ジメトキシ−２−チオフェン−２−イルベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ６−ブロモベラトルムアルデヒド（１ｇ，４．０８ｍｍｏｌ），オキシインド
ール（０．５４ｇ，４．０８ｍｍｏｌ）およびピロリジン（１．７ｍｌ，２０．
４ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（６ｍｌ）中の混合物を，密封管中で１０
０℃で１２時間保持した。反応混合物を冷却し，１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）に加え
た。形成した沈殿物を濾過し，水で洗浄した。次に，沈殿物を酢酸エチル（２０
０ｍｌ）に溶解し，溶液をブラインで洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮
した。得られた固体をクロマトグラフィー（シリカ，３０−４−％酢酸エチル／
ヘキサン）を行い，１．２ｇ（８１％）の３−（３−ブロモ−４，５−ジメトキ
シベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄色固体として得
た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (s, 1H, NH), 7.4 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.3
(m, 2H, 2xAr-H), 7.2 m, 1H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, 2xAr-H), 3.8 (s, 3H, OCH 3 ), 3.7 (s, 3H, OCH3). MS m/z 360.5 および 362.5, [M]+ および [M+2]+.
【０３７６】 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０３ｇ，０．
０３ｍｍｏｌ）を３−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシベンジリデン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン（０．３２ｇ，０．８９ｍｍｏｌ）のトルエ
ン（２ｍｌ）およびエタノール（２ｍｌ）中の溶液に加え，次に２Ｍ水性炭酸ナ
トリウム（１．８ｍｌ，３．６ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に，チオフェン
−２−ボロン酸（０．１３ｇ，０．９８ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密封管中で
１００℃で１２時間保持した。反応混合物を水（５０ｍｌ）に注加し，酢酸エチ
ル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウ
ム（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥
し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，３０−４０％酢酸エチル／ヘキサ
ン）により橙色固体を得，これを塩化メチレン中で砕き，乾燥して，０．１９ｇ
（５９％）の３−（４，５−ジメトキシ−２−チオフェン−２−イルベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (m, 1H, NH), 7.6 (m, 1H, Ar-H), 7.5 (m
, 2H, Ar-H), 7.3 (m, 1H, Ar-CH=C), 7.2 (m, 4H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, Ar-H),
6.8 (m, 2H, Ar-H), 3.9 (two s, 3H, OCH3), 3.7 (two s, 3H, COCH3). MS m/z 364.0 [M+1]+.
【０３７７】 実施例４０：Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−３−チ
オフェン−２−イルベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−６−イル｝−アセトアミド トリフェニルホスフィン（６．８５ｇ）を，３−ブロモ−４−ヒドロキシベン
ズアルデヒド（５ｇ）のテトラヒドロフラン（４０ｍｌ）中の溶液に加え，続い
て２−ヒドロキシエチルモルホリン（３．０１ｍｌ）を加え，次にジエチルアゾ
ジカルボキシレート（４．１１ｍｌ）を滴加した。１２時間後，反応液を減圧下
で濃縮し，２Ｎ塩酸（２００ｍｌ）に注加し，酢酸エチル（２ｘ１５０ｍｌ）で
抽出した。水性層を固体炭酸水素ナトリウムでｐＨ９に塩基性にし，酢酸エチル
（２ｘ１５０ｍｌ）で抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮して
，４．４ｇ（５６％）の４−モルホリノエトキシ−３−ブロモベンズアルデヒド
を赤みを帯びた油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.84 (s, 1H, NH), 8.07 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-
H), 7.90 (dd, 1H, J = 2 および 8Hz, Ar-H), 7.32 (d, 1H, J = 8Hz, Ar-H),
4.29 (t, 2H, J = 6Hz, Ar-OCH2), 3.56 (m, 4H, OCH2CH2N), 2.76 (t, 2H, J =
6Hz, ArOCH2-CH2N), 2.50 (m, 4H, NCH2CH2O).
【０３７８】 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．２３）を，４
−モルホリノエトキシ−３−ブロモベンズアルデヒド（２．１３ｇ）のトルエン
（１０ｍｌ）およびエタノール（１０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭
酸ナトリウム（１３ｍｌ）を加えた。この混合物にチオフェン−２−ボロン酸（
１．１３ｇ）を加え，混合物を１２時間還流した。次に反応混合物を水（１００
ｍｌ）に注加し，酢酸エチル（３ｘ１００ｍｌ）中に抽出した。生成物を１Ｎ塩
酸（２ｘ１００ｍｌ）中に抽出し，固体炭酸水素ナトリウムで水性層をｐＨ９に
塩基性にし，酢酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。有機層をブライン（７
５ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮して，１．７ｇ（７５％）
の３−（２−チオフェン）−４−モルホリノエトキシベンズアルデヒドを緑色を
帯びた黄色油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.93 (s, 1H, CHO), 8.2 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-
H), 7.82 (dd, 1H, J = 2 および 8Hz, Ar-H), 7.76 (dd, 1H, J = 1 および 4H
z, Ar-H), 7.59 (dd, 1H, J = 1 および 5Hz, Ar-H), 7.35 (d, 1H, J = 9Hz, A
r-H), 7.14 (dd, 1H, J = 4 および 5Hz, Ar-H), 4.34 (t, J = 6Hz, 2H, O-CH2 CH2), 3.56 (m, 4H, 2x ringO-CH2CH2), 2.82 (t, J = 6Hz, 2H, N-CH2CH2), 2.
5 (m on DMSO, 4H, 2x ringN-CH2CH2). MS m/z 318.2 [M+1]+.
【０３７９】 ３（２−チオフェン）−４−モルホリノエトキシ−ベンズアルデヒド（１．７
４ｇ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（１ｇ）およびピペリジン（
２．６ｍｌ）のエタノール（１１ｍｌ）中の混合物を密封管中で１００℃で１２
時間保持した。反応液を冷却し，ジエチルエーテルに加え，エーテルをデカント
した。油状残渣を塩化メチレン（１０ｍｌ）に溶解し，エーテル（２００ｍｌ）
およびヘキサン（１００ｍｌ）中で沈殿させた。沈殿物を濾過により除去し，エ
ーテルで，次にヘキサンで洗浄し，乾燥して，褐色を帯びた固体を得た。クロマ
トグラフィー（シリカ，５％メタノール／ジクロロメタン）により，Ｎ−｛３−
［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−３−チオフェン−２−イルベン
ジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル｝−
アセトアミドを暗黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.49 (s, 1H, NH), 10.01 (s, 1H, NHAc), 8.0
5 (d, J = 2Hz, 1H, Ar-H), 7.72 (m, 1H, Ar-H), 7.65 (m, 1H, Ar-H), 7.48 (
m, 2H, 2xAr-H), 7.47 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.45 (d, 1H, J =2Hz, Ar-H), 7.29
(d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 7.13 (m, 1H, Ar-H), 6.90 (dd, 1H, J =2 および 9H
z, Ar-H), 4.32 (m, 2H, ArOCH2CH2N), 3.58 (m, 4H, 2xOCH2CH2N), 2.84 (m, 2
H, ArOCH2CH2N), 2.5 (m under DMSO, 4H, 2xOCH2CH2N), 2.03 (s, 3H, NHCOCH3 ). MS m/z 490.0 [M+1]+.
【０３８０】 実施例４１：３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−４−メチ
ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマン（市販）を４−メチル−２−オキシ
インドールと縮合して，０．２５ｇの３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イ
ルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固
体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, br, 1H, NH), 8.17 (dd, J = 2, 8HZ
, 1H), 8.02 (d, J = 2Hz, 1H), 7.6 (s, 1H, ビニル), 7.05 (t, J = 8Hz, 1H)
, 6.75 (t, 2H), 6.67 (d, J = 8Hz, 1H), 2.77 (t, J = 7Hz, 2H, CH2), 2.55
(s, 3H, CH3), 1.8 (t, J = 7Hz, 2H, CH2), 1.31 (s, 6H, 2 x CH3). MS APCI m/z 320.2 [M+1]+.
【０３８１】 実施例４２：３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−５−
フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルベンゾフラン（市販）を５−フルオロ−２−
オキシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（２，３−ジヒドロベンゾフラ
ン−５−イルメチレン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ンを黄橙色固体として得た。
【０３８２】 実施例４３：３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−５−フ
ルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−シクロヘキシルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。アルデヒ
ドを５−フルオロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３−シ
クロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０３８３】 実施例４４：５−フルオロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−フルオロ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．２５ｇの５−フルオロ−３−（３−イソプロピル
−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙
色固体として得た。
【０３８４】 実施例４５：３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン
）−１，３−ジヒドロ−ピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン 亜鉛粉末（６．５ｇ）を，３，３−ジブロモ−７−アザオキシインドール（２
．９ｇ）の酢酸（２０ｍｌ）およびアセトニトリル（３０ｍｌ）中の溶液に加え
た。混合物を室温で２時間撹拌した。固体を濾過により除去し，溶媒を蒸発させ
た。残渣を酢酸エチルで処理した。不溶性固体を含有する酢酸エチル溶液を，シ
リカゲルの短いカラムを通した。回収した酢酸エチル溶液を蒸発させ，残渣を真
空下で乾燥して，１．８ｇ（９１％収率）の７−アザ−２−オキシインドール酢
酸塩を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.90 (s, br, 1H, NH), 8.01, 7.52, 6.91 (m,
3H), 3.52 (s, 2H, CH2). MS APCI 135 (M+1).
【０３８５】 ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを７−アザ−
２−オキシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（５−イソプロピル−４−
メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ
］ピリジン−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5(s, 1H, CONH), 8.3-6.8(m, 6H, 芳香族, =CH-), 3.9
(s, 3H, OCH3), 3.3(m, 1H, CH), 2.3(s, 3H, CH3), 1.2(d, 6H, 2xCH3).
【０３８６】 実施例４６：３−（３'−エトキシ−６−メトキシビフェニル−３−イルメチレ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ，０．
０２ｍｍｏｌ）を，３−（ブロモ−４−メトキシ−ベンジリデン）−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン（０．２ｇ，０．６１ｍｍｏｌ）のトルエン（１ｍ
ｌ）およびエタノール（１ｍｌ）中の溶液に加え，２Ｍ水性炭酸ナトリウム（１
．２ｍｌ，２．４ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に３−エトキシフェニルボロ
ン酸（０．１１ｇ，０．６７ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密封管中で１００℃で
１２時間保持した。反応混合物を水（４０ｍｌ）に加え，酢酸エチル（７５ｍｌ
）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウム（５０ｍｌ）およ
びブライン（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮
した。得られた固体をジクロロメタン／ヘキサン中で砕いて，０．９ｇ（３９％
）の３−（３'−エトキシ−６−メトキシ−ビフェニル−３−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.57 (s, 1H, NH), 7.65 (m, 5H, 4xAr-H およ
び Ar-CH=C), 7.3 (m, 3H, 4xAr-H), 7.15 (m, 2H, Ar-H), 6.9 (m, 2H, Ar-H),
4.05 (q, 2H, OCH2CH3), 3.85 (s, 3H, OCH3), 1.35 (t, 3H, OCH2CH3). MS m/z 372.5 [M+1]+.
【０３８７】 実施例４７：３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを７−アザ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−シクロペンチル−４−メトキシ
ベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オンを
黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 1.1 (s, 1H, CONH), 8.3-6.8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.
9(s, 3H, OCH3), 3.2(m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H, 4xCH2).
【０３８８】 実施例４８：３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−４−メ
チル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−２−オキ
シインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−シクロペンチル−４−メトキ
シベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙
色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.4 (s, 1H, CONH), 8.3, 8.1, 7.6, 7.0, 7.0, 6.8, 6.
6 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H,
4xCH2).
【０３８９】 実施例４９：３−（４，５，２'−トリメトキシビフェニル−２−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ，０．
０２ｍｍｏｌ）を，３−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシベンジリデン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン（０．２０ｇ，０．５６ｍｍｏｌ）のトル
エン（１ｍｌ）およびエタノール（１ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭
酸ナトリウム（１．１ｍｌ，２．２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に，２−メ
トキシフェニルボロン酸（０．０９ｇ，０．６２ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密
封管中で１００℃で１２時間保持した。反応混合物を水（５０ｍｌ）に加え，酢
酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナ
トリウム（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を硫酸マ
グネシウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，３０−４０％酢
酸エチル／ヘキサン）により，０．１４ｇ（６４％）の３−（４，５，２'−ト
リメトキシ−ビフェニル−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−
２−オンを橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.4 (m, 1H, NH), 7.5 (m, 1H, Ar-H), 7.3 (m
, 2H, Ar-H および Ar-CH=C), 7.2 (m, 4H, Ar-H), 6.9 (m, 4H, Ar-H), 3.8 (t
wo s, 3H, COCH3), 3.7 (two s, 3H, OCH3), 3.5 (two s, 3H, COCH3). MS m/z 388.2 [M+1]+.
【０３９０】 実施例５０：Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−３−チ
オフェン−３−イルベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−６−イル｝−アセトアミド テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．２１ｇ）を，
４−モルホリノエトキシ−３−ブロモベンズアルデヒド（１．９２ｇ）のトルエ
ン（１０ｍｌ）およびエタノール（１０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性
炭酸ナトリウム（１２ｍｌ）を加えた。この混合物にチオフェン−３−ボロン酸
（１．０２ｇ）を加え，混合物を加熱還流した。１２時間後，反応混合物を水（
１００ｍｌ）に加え，酢酸エチル（３ｘ１００ｍｌ）中に抽出した。次に生成物
を１Ｎ塩酸（２ｘ１００ｍｌ）中に抽出し，水性層を固体炭酸水素ナトリウムで
ｐＨ９に塩基性にし，酢酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。有機層をブラ
イン（７５ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮して，１．７ｇ（
８３％）の３−（３−チオフェン）−４−モルホリノエトキシベンズアルデヒド
を赤みを帯びた油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.91 (s, 1H, CHO), 8.08 (m, 2H, Ar-H), 7.83
(dd, 1H, J = 2 および 9Hz, Ar-H), 7.76 (dd, 1H, J = 1 および 4Hz, Ar-H)
, 7.59 (dd, 1H, J = 1 および 5Hz, Ar-H), 7.35 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 7.
64 (dd, 1H, J = 1 および 5Hz, Ar-H), 7.58 (dd, 1H, J = 3 および 5Hz, Ar-
H), 7.31 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 4.27 (t, J = 5Hz, 2H, O-CH2CH2), 3.56 (
m, 4H, 2x ringO-CH2CH2), 2.75 (t, J = 6Hz, 2H, N-CH2CH2), 2.48 (m on DMS
O, 4H, 2x ringN-CH2CH2). MS m/z 318.2 [M+1]+.
【０３９１】 ３−（３−チオフェン）−４−モルホリノエトキシ−ベンズアルデヒド（１．
７４ｇ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（１ｇ）（実施例１で記載
したように製造）およびピペリジン（２．６ｍｌ）のエタノール（１１ｍｌ）中
の混合物を，密封管中で１００℃で１２時間保持した。反応液を冷却し，ジエチ
ルエーテル（２００ｍｌ）に加えた。溶媒をデカントし，残った油状固体をジク
ロロメタン（１５ｍｌ）に溶解し，ジエチルエーテル（２００ｍｌ）およびヘキ
サン（２００ｍｌ）で沈殿させ，濾過し，ジエチルエーテルで，次にヘキサンで
洗浄し，乾燥して，からし黄色固体を得た。クロマトグラフィー（シリカ，５％
メタノール／ジクロロメタン）により，Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４
−イルエトキシ）−３−チオフェン−３−イルベンジリデン］−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル｝−アセトアミドを黄色泡状物と
して得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.47 (s, 1H, NH), 10.00 (s, 1H, NHAc), 8.0
7 (m, 1H, Ar-H), 7.91 (d, J = 2Hz, 1H, Ar-H), 7.63 (m, 2H, 2xAr-H), 7.58
(m, 2H, 2xAr-H), 7.48 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.45 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-H), 7.
26 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 6.90 (dd, 1H, J =2 および 9Hz, Ar-H), 4.26 (m
, 2H, ArOCH2CH2N), 3.58 (m, 4H, 2xOCH2CH2N), 2.76 (m, 2H, ArOCH2CH2N), 2
.48 (m under DMSO, 4H, 2xOCH2CH2N), 2.03 (s, 3H, NHCOCH3). MS m/z 490.0 [M+1]+.
【０３９２】 実施例５１：５−クロロ−３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−シクロヘキシルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。アルデヒ
ドを５−クロロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３
−（３−シクロヘキシル−４−メトキシ−ベンジリデン）−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6(s, 1H, CONH), 7.7-6.8(m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9
(s, 3H, OCH3), 3.0 (m, 1H, CH), 1.8, 1.4 (m, 10H, 5xCH2).
【０３９３】 実施例５２：［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−カルバミン酸
ｔｅｒｔ−ブチルエステル ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−ｔｅｒｔ−ブ
チルオキシカルボニルアミノ−２−オキシインドールと縮合して，０．３５ｇの
［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−
２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブ
チルエステルを黄橙色固体として得た。
【０３９４】 実施例５３：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４
−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.41 (s, 1H, CONH), 8.0 (s, 2H), 7.66 (s, 1H), 7.07
(t, 1H), 6.76 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 3.7 (s, 3H, OCH3), 3.21-3.3 (m, 1H
), 1.21 (d, 12H, 4 x CH3).
【０３９５】 実施例５４：５−ブロモ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシ−ベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−ブロモ−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。
【０３９６】 実施例５５：Ｎ−｛３−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２−モルホリン−４−
イルエトキシ）−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イン
ドール−６−イル｝−アセトアミド トリフェニルホスフィン（５．８９ｇ，２２．４４ｍｍｏｌ）を３−ｔｅｒｔ
−ブチル−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（４ｇ，２２．４４ｍｍｏｌ）のテ
トラヒドロフラン（４０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２−ヒドロキシエチルモ
ルホリン（２．９４ｇ，２２．４４ｍｍｏｌ）を加え，次にジエチルアゾジカル
ボキシレート（３．９１ｇ，２２．４４ｍｍｏｌ）を滴加した。混合物を室温で
３日間撹拌した。反応液を減圧下で濃縮し，２Ｎ塩酸（２００ｍｌ）と酢酸エチ
ル（１５０ｍｌ）との間に分配した。水性層を酢酸エチル（２ｘ１５０ｍｌ）で
抽出し，固体炭酸水素ナトリウムでｐＨ９に塩基性にし，固体塩化ナトリウムで
飽和し，酢酸エチル（３ｘ１５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグ
ネシウムで乾燥し，濃縮して，２．８ｇ（４４％）の３−ｔｅｒｔ−ブチル−４
−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）ベンズアルデヒドを黄色を帯びた油状
物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.8 (s, 1H, CHO), 7.75 (m, 2H, 2xAr-H), 7.1
6 (d, J = 10Hz, 1H, Ar-H), 4.19 (t, J = 7Hz, 2H, O-CH2CH2), 3.55 (m, 4H,
2x ringO-CH2CH2), 2.75 (t, J = 7Hz, 2H, N-CH2CH2), 2.4 (m on DMSO, 4H,
2x ringN-CH2CH2), 1.36 (s, 9H, C(CH3)3). MS m/z 292.0 [M+1]+.
【０３９７】 ３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベンズ
アルデヒド（０．２５ｇ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（０．１
６ｇ）およびピペリジン（０．４３ｍｌ）のエタノール（３ｍｌ）中の混合物を
，密封管中で１００℃で１２時間保持した。反応液を冷却し，酢酸エチル（２５
０ｍｌ）に加え，１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄
し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。一部の生成物は酸洗浄を行い，した
がって，固体炭酸水素ナトリウムでｐＨ９に塩基性にし，酢酸エチル（２ｘ１５
０ｍｌ）で抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し，最初の生成物からの
油状物と合わせ，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，４０％酢酸エチル，
続いて５−１０％メタノール／塩化メチレン）により，１００ｍｇ（２７％）の
Ｎ−｛３−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ
）ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イ
ル｝−アセトアミドを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.46 (s, 1H, NH), 9.99 (s, 1H, NHAc), 7.58
(m, 3H, Ar-H), 7.41 (m, 2H, Ar-H および Ar-CH=C), 7.12 (d, 1H, Ar-H), 6
.92 (dd, 1H, J =2 および 8Hz, Ar-H), 4.18 (m, 2H, Ar-OCH2), 3.57 (m, 4H,
OCH2CH2N), 2.77 (m, 2H, ArOCH2-CH2N), 2.49 (m, 4H, NCH2CH2O), 2.02 (s,
3H, NHCOCH3), 1.38 (s, 9H, Ar-tBu). MS m/z 464.0 [M+1]+.
【０３９８】 実施例５６：３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３−
ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン ２，６−ジメチルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 6.9 (s, 2H, 芳香族), 3.9 (s, 3H,
OCH3), 2.6 (s, 6H, 2xCH3).
【０３９９】 アルデヒドを７−アザ−２−オキシインドールと縮合して，０．２ｇの３−（
４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２
，３−ｂ］ピリジン−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 1.5(s, 1H, CONH), 8.2-6.8(m, 6H, 芳香族, =CH-), 3.8(
s, 3H, OCH3), 2.5(s, 6H, 2xCH3), 2.4(s, 3H, CH3).
【０４００】 実施例５７：５−ブロモ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリ
ン−４−イルエトキシ）ベンジリデン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン ３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベン
ズアルデヒド（０．４ｇ），５−ブロモ−２−オキシインドール（０．２７ｇ）
およびピロリジン（０．５ｍｌ）のエタノール（２ｍｌ）中の混合物を密封管中
で１００℃で１２時間保持した。次に混合物を１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）に加え，
固体を濾過により除去し，さらに水（５０ｍｌ）で洗浄した。次に，固体を酢酸
エチル（２００ｍｌ）に溶解し，溶液を１Ｎ塩酸（７５ｍｌ）およびブライン（
７５ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。粗固体をクロマト
グラフィー（シリカ，４：４：１ジクロロメタン：ヘキサン：メタノール）を行
い，８０ｍｇ（１３％）の５−ブロモ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（
２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オンを赤みを帯びた褐色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 9.43 (d, J = 10Hz, 1H, A
r-H), 7.58 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H), 7.46 (d, J = 5Hz, 2H, Ar-H), 7.3 (m,
1H, Ar-H), 7.19 (m, J = 9 および 10Hz, 1H, Ar-H), 6.99 (m, J = 9 および
9Hz, 1H, Ar-H), 6.83 (m, J = 9 および 1Hz, 1H, Ar-H), 3.61 (dd, J = 9 お
よび 22Hz 1H, 1xCH2CH), 3.43 (m, 1H, CHCH3), 2.86 (dd, J = 4 および 22Hz
, 1H, 1xCH2CH), 1.35 (d, J = 9 Hz, 3H, CH3). MS m/z 262.0 [M+1]+.
【０４０１】 実施例５８：３−（３'−エトキシ−４，５−ジメトキシビフェニル−２−イル
メチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ，０．
０２ｍｍｏｌ）を３−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシベンジリデン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン（０．２ｇ，０．５６ｍｍｏｌ）のトルエン
（１ｍｌ）およびエタノール（１ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナ
トリウム（１ｍｌ，２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に，３−エトキシフェニ
ルボロン酸（０．１ｇ，０．６２ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密封管中で１００
℃で１２時間保持した。次に反応混合物を水（４０ｍｌ）に加え，酢酸エチル（
２ｘ７５ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウム（５
０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃
縮した。得られた固体を塩化メチレン／ヘキサン中で砕いて，０．１４ｇ（６４
％）の３−（３'−エトキシ−４，５−ジメトキシビフェニル−２−イルメチレ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (s, 1H, NH), 7.6 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H
), 7.2 (m, 4H, 3xAr-H および Ar-CH=C), 7.08 (s, 2H, Ar-H), 6.8 (m, 5H, 5
xAr-H), 4.0 (q, J = 8Hz, 2H, OCH2CH3), 3.89 (s, 3H, OCH3), 3.77 (s, 3H,
OCH3), 1.29 (t, J = 8Hz, 3H, OCH2CH3). MS m/z 402.5 [M+1]+.
【０４０２】 実施例５９：５−クロロ−３−（４−メトキシ−３−チオフェン−２−イルベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−（２−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデヒド（０．２１ｇ），５
−クロロ−２−オキシインドール（０．１６ｇ）およびピロリジン（０．４ｍｌ
）のエタノール（１ｍｌ）中の混合物を密封管に入れ，１００℃に加熱した。沈
殿物が１０分以内に形成したため，反応液をさらに１０ｍｌのエタノールで希釈
し，再び加熱した。４時間後，反応液を冷却し，形成した固体を濾過により除去
し，エタノールで，次にヘキサンで洗浄して，０．２１ｇ（６０％）の５−クロ
ロ−３−（４−メトキシ−３−チオフェン−２−イルベンジリデン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.7 (s, 1H, NH), 7.8-9.1 (m, 3H, Ar-H), 7.
6 (m, 3H, 2xAr-H および Ar-CH=C), 7.2 (m, 3H, Ar-H), 6.9 (m, 1H, Ar-H),
3.9 (m, 3H, OCH3). MS m/z 368.1 および 369.9 [M]+ および [M+2]+.
【０４０３】 実施例６０：５−クロロ−３−４−メトキシ−３−ピリジン−３−イルベンジリ
デン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．２ｇ）を，３
−ブロモ−４−メトキシベンズアルデヒド（１．２５ｇ）のトルエン（１０ｍｌ
）およびエタノール（１０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナトリウ
ム（１１ｍｌ）を加えた。この混合物に，ピリジン−３−ボロン酸プロパンジオ
ール（１ｇ）を加え，混合物を加熱還流した。２時間後，反応液を水（７５ｍｌ
）に加え，酢酸エチル（２ｘ７５ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性
炭酸水素ナトリウム（１００ｍｌ）およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄し，硫
酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，２０−５０
％酢酸エチル／ヘキサン）により，１．０８ｇ（８７％）の３−（３−ピリジル
）−４−メトキシベンズアルデヒドを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.93 (s, 1H, CHO), 8.7 (d, 1H, J = 3Hz, Ar-
H), 8.56 (dd, 1H, J = 1 および 6Hz, Ar-H), 7.9 (m, 3H, 3xAr-H), 7.46 (dd
, 1H, J = 6 および 9Hz, Ar-H), 7.35 (d, 1H, J = 10Hz, Ar-H), 3.89 (s, 3H
, OCH3).
【０４０４】 ３−（３−ピリジル）−４−メトキシベンズアルデヒド（０．２５ｇ），５−
クロロ−２−オキシインドール（０．２ｇ）およびピロリジン（０．５ｍｌ）の
エタノール（２ｍｌ）中の混合物を密封管に入れ，１００℃に加熱した。沈殿物
が１０分以内に形成したため，反応液をさらに１０ｍｌのエタノールで希釈し，
再び加熱した。４時間後，反応液を冷却し，固体を濾過により除去し，エタノー
ルで，次にヘキサンで洗浄して，０．２７ｇ（６１％）の５−クロロ−３−（３
−（３−ピリジル）−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 0.67 (s, 1H, NH), 8.6 (m, 3H, 2xAr-H および
Ar-CH=C), 7.8 (m, 4H, Ar-H), 7.4 (m, 1H, Ar-H), 7.35 (m, 2H, Ar-H), 6.8
5 (m, 1H, Ar-H), 3.88 (s, 3H, OCH3). MS m/z 363.0 および 365.1, [M]+ および [M+2]+.
【０４０５】 実施例６１：５−クロロ−３−（４，５−３'−トリメトキシビフェニル−２−
イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．３６ｇ）を，
４，５−ジメトキシ−２−ブロモベンズアルデヒド（２．５ｇ）のトルエン（２
０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナ
トリウム（２０ｍｌ）を加えた。この混合物に，３−メトキシフェニルボロン酸
（１．７ｇ）を加え，混合物を加熱還流した。１時間後，反応液を水（１５０ｍ
ｌ）と酢酸エチル（３００ｍｌ）との間に分配した。有機層を飽和水性炭酸水素
ナトリウム（１５０ｍｌ）およびブライン（１５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネ
シウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，２０−３０−４０％
酢酸エチル／ヘキサン）により，２．７ｇ（９８％）の２−（３−メトキシフェ
ニル）−４，５−ジメトキシベンズアルデヒドを黄色油状物として得，これは放
置すると固化した。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.71 (s, 1H, CHO), 7.38 (m, 2H, 2xAr-H), 7.
0 (m, 4H, 4xAr-H), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.84 (s, 3H, OCH3), 3.8 (s, 3H, O
CH3). MS m/z 273.5 [M+1]+.
【０４０６】 ２−（３−メトキシフェニル）−４，５−ジメトキシ−ベンズアルデヒド（０
．２５ｇ），５−クロロ−２−オキシインドール（０．ｌ５ｇ）およびピロリジ
ン（０．４ｍｌ）のエタノール（１ｍｌ）中の混合物を密封管に入れ，１００℃
に加熱した。沈殿物が１０分以内に形成したため，反応液をさらに１０ｍｌのエ
タノールで希釈し，再び加熱した。２．５時間後，反応液を冷却し，固体を濾過
により除去し，エタノール，次にヘキサンで洗浄して，０．３６ｇ（９２％）の
３−（４，５−３'−トリメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オンを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.67 (s, 1H, NH), 7.6 (d, J = 2.5Hz, 1H, A
r-H), 7.3 (m, 4H, Ar-H), 7.12 (s, 1H, Ar-CH=C), 6.9 (m, 4H, Ar-H), 3.9 (
s, 3H, OCH3), 3.79 (s, 3H, OCH3), 3.75 (s, 3H, OCH3). MS m/z 422.0 および 424.1 [M]+ および [M+2]+.
【０４０７】 実施例６２：３−（４，５−ジメトキシ−２−ナフタレン−２−イルベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ）を，
３−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オン（０．２０ｇ）のトルエン（１ｍｌ）およびエタノール（１ｍ
ｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナトリウム（１．１ｍｌ）を加えた。
この混合物に，ナフタレン−２−ボロン酸（０．１１ｇ）を加え，混合物を密封
管中で１００℃で１２時間保持した。形成した沈殿物を濾過し，エタノールで洗
浄し，次に２０％メタノール／トルエンに溶解し，濾過し，濃縮した。得られた
固体をヘキサン中で砕き，乾燥して，０．０７ｇ（２９％）の３−（４，５−ジ
メトキシ−２−ナフタレン−２−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オンを橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (m, 1H, NH), 7.9 (m, 4H, Ar-H), 7.7 (m
, 1H, Ar-H), 7.5 (m, 3H, Ar-H), 7.4 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.2 (m, 3H, Ar-H),
6.9 (m, 2H, Ar-H), 3.9 (two s, 3H, COCH3), 3.8 (two s, 3H, OCH3). MS m/z 408.0 [M+1]+.
【０４０８】 実施例６３：Ｎ−［３−（３'−アセチルアミノ−６−メトキシビフェニル−３
−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イ
ル］−アセトアミド ３−ブロモ−４−メトキシベンズアルデヒドを６−アセトアミド−２−オキシ
インドールと縮合して，Ｎ−［３−（３−ブロモ−４−メトキシ−ベンジリデン
）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトア
ミドを得た。
【０４０９】 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０１ｇ）を，
Ｎ−［３−（３−ブロモ−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−
ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド（０．１４ｇ）のトル
エン（１ｍｌ）およびエタノール（１ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭
酸ナトリウム（０．７２ｍｌ）を加えた。この混合物に３−アセチルアミノ−フ
ェニルボロン酸（０．０７ｇ）を加え，混合物を密封管中で１００℃で１２時間
保持した。反応混合物を水（５０ｍｌ）に加え，酢酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）
で抽出した。
【０４１０】 合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウム（５０ｍｌ）およびブライン（
５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィ
ー（シリカ，ジクロロメタン，次に５−１０％メタノール／ジクロロメタン）に
より，０．０７ｇ（４３％）のＮ−［３−（３'−アセチルアミノ−６−メトキ
シビフェニル−３−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−６−イル］−アセトアミドを黄色固体として得た。1ＨＮＭＲにより
，約２６％の異性体であった。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.49 (s, 1H, NH), 10.42 (s, 1H, NHAc), 9.9
5 (s, 1H, NHAc), 7.76 (m, 2H, 2xAr-H), 7.58 (m, 3H, 3xAr-H), 7.4 (m, 2H,
Ar-H および Ar-CH=C), 7.3 (m, 2H, Ar-H), 7.18 (m, 1H, Ar-H), 6.9 (dd, 2
H, J = 2 および 8.5Hz, Ar-H), 3.84 (s, 3H, OCH3), 2.05 (s, 3H, NHCOCH3),
2.03 (s, 3H, NHCOCH3). MS m/z 442.2 [M+1]+.
【０４１１】 実施例６４：６−メトキシ−３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベ
ンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３（３−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデヒド（０．５３ｇ，２．４
５ｍｍｏｌ），６−メトキシ−２−オキシインドール（０．４ｇ，２．４５ｍｍ
ｏｌ）およびピペリジン（１．２ｍｌ，１２．２５ｍｍｏｌ）の５ｍｌのエタノ
ール中の混合物を，密封管中で１００℃で１２時間保持した。反応液を冷却し，
ジエチルエーテル（１５０ｍｌ）およびヘキサン（１５０ｍｌ）に加えた。形成
した沈殿物を濾過により除去し，ジエチルエーテル，次にヘキサンで洗浄し，乾
燥して，０．５７ｇ（６４％）の６−メトキシ−３−（４−メトキシ−３−チオ
フェン−３−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンをか
らし黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, 1H, NH), 8.78 (d, J = 2Hz, 1H, Ar
-H), 8.30 (dd, J = 2 および 9Hz, 1H, Ar-H), 7.8 (dd, 1H, J = 1.5 および
3Hz, Ar-H), 7.5 (m, 3H, 2xAr-H および Ar-CH=C), 7.18 (d, J = 9Hz, 1H, Ar
-H), 6.55 (dd, 1H, J = 2 および 8.5Hz, Ar-H), 6.39 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-H
), 3.91 (s, 3H, OCH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 2.04 (s, 3H, NHCOCH3). MS m/z 364.1 [M+1]+.
【０４１２】 実施例６５：３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを２−オキシインドールと縮合
して，０．３ｇの３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5(s, 1H, CONH), 8.5, 8.5, 7.8, 7.7, 7.5, 7.5, 7.4
, 7.4, 7.3, 7.2, 7.2, 7.0, 6.8(m, 13H, 芳香族, =CH-), 3.9(s, 3H, OCH3).
【０４１３】 実施例６６：３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルベンゾフラン（市販）を２−オキシインドー
ルと縮合して，０．２５ｇの３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.4 (s, 1H, CONH), 8.6, 8.2, 7.7, 7.6, 7.2, 7.0, 6.
9, 6.8 (m, 8H, 芳香族, =CH-), 4.6(t, 2H, OCH2), 3.2 (t, 2H, OCH2).
【０４１４】 実施例６７：５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを５−クロロ−２−オキシイン
ドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３
−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として
得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 11.5 (s, 1H, CONH), 7.8-6.8 (m, 12H, 芳香族, =CH-),
3.9 (s, 3H, OCH3).
【０４１５】 実施例６８：３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−４−メ
チル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−シクロヘキシル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−２−オキ
シインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシ
ベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 7.7-6.8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3
.9 (s, 3H, OCH3), 3.0 (m, 1H, CH), 2.5 (s, 3H, CH3), 1.8-1.4 (m, 10H, 5x
CH2).
【０４１６】 実施例６９：３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−４−
メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルベンゾフラン（市販）を４−メチル−２−オ
キシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン
−５−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを
黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5(s, 1H, CONH), 8.4-6.6 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 4.
6 (t, 2H, OCH2), 3.2 (t, 2H, OCH2), 2.5 (s, 3H, CH3).
【０４１７】 実施例７０：３−（３−イソプロピル−４−メエトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを７−アザ−２−オキシイ
ンドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−イソプロピル−４−メトキシベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オンを黄橙
色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 11.5(s, 1H, CONH), 8.0-6.8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.
7 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.2 (d, 6H, 2xCH3).
【０４１８】 実施例７１：３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジ
ヒドロピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを７−アザ−２−オキシインド
ールと縮合して，０．２５ｇの３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレ
ン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オンを黄橙色固体
として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 8.5-6.8 (m, 12H, 芳香族, =CH-),
3.9 (s, 3H, OCH3).
【０４１９】 実施例７２：３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン ３−シクロヘキシル−４−メトキシベンズアルデヒドを７−アザ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシ
ベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オンを
黄橙色固体として得た。
【０４２０】 実施例７３：３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，
３−ジヒドロピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルベンゾフラン（市販）を７−アザ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．２ｇの３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５
−イルメチレン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン
を黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.4 (s, 1H, CONH), 8.3-6.8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 4
.6 (t, 2H, OCH2), 3.2 (t, 2H, OCH2).
【０４２１】 実施例７４：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドをメチル化し，次に
ホルミル化した。アルデヒドを７−アザ−２−オキシインドールと縮合して，０
．２ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オンを黄橙色固体として得た。 1 HNMR (d6-DMSO) δ: 11.5 (s, 1H, CONH), 8.0-6.8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3
.7 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 2H, 2xCH), 1.2 (m, 12H, 4xCH3).
【０４２２】 実施例７５： ５−ブロモ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−ブロモ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（３−イソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体
として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.5, 8.4, 7.9, 7.9, 7.3, 7.1, 6.
8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (m, 3H, OCH3), 3.3 (m, 1H, CH), 1.2 (d, 6H,
2xCH3).
【０４２３】 実施例７６：５−ブロモ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−ブロモ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（３−シクロペンチル−
４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.6-6.7 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3
.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H, 4xCH2).
【０４２４】 実施例７７：５−クロロ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシ−ベンジリ
デン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３．０ｇの４−メチル−２−オキシインドールの懸濁液を５０ｍｌのアセトニ
トリル中で室温で撹拌しながら，３．３ｇのＮ−クロロスクシンイミドを少しず
つ加えた。次にトリフルオロ酢酸（１ｍｌ）を加えた。懸濁液を室温で３日間撹
拌し，その間常に固体が存在した。固体を真空濾過により回収し，少量のアセト
ンで洗浄し，真空オーブン中で４０℃で一夜乾燥して，２．５ｇ（６８％）の５
−クロロ−４−メチル−２−オキシインドールを得た。
【０４２５】 ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−５−クロ
ロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（３−シク
ロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４２６】 実施例７８：５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）
−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを４−メチル−５−クロロ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（６−メトキシビ
フェニル−３−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２
−オンを黄橙色固体として得た。
【０４２７】 実施例７９：５−クロロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチル
−ベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを４−メチル
−５−クロロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−
（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−４−メチル−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４２８】 実施例８０：５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，６−ジメチルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。アルデヒド
を４−メチル−５−クロロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−
クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−４−メチル−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４２９】 実施例８１：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６
−トリフルオロメチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−トリフルオロ
メチル−２−オキシインドールと縮合して，０．３５ｇの３−（３，５−ジイソ
プロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−トリフルオロメチル−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４３０】 実施例８２：６−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジ
リデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−クロロ−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの６−クロロ−３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。
【０４３１】 実施例８３：３−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン
）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−プロピオ
ン酸 シアン酸カリウム（２．０ｇ）を，１５ｍｌのジメチルスルホキシドに加え，
９０℃に加熱した。５ｍｌのジメチルスルホキシドに溶解した５−クロロエチル
−２−オキシインドール（３．０ｇ）を，撹拌しながらゆっくり加え，反応液を
１５０℃に加熱し，２時間撹拌した。混合物を冷却し，氷水に注加し，形成した
沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，粗生成物を得た。粗生
成物をシリカゲルでクロマトグラフィー（５％メタノール，クロロホルム中）を
行って，１．２ｇ（４２％）の５−シアノエチル−２−オキシインドールを得た
。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.28 (s, br, NH), 7.12 (s, 1H, H-4), 7.07
(d, J = 8Hz, 1H), 6.74 (d, J = 8Hz, 1H), 3.43 (s, 2H, CH2), 2.71-2.82 (m
, 4H, 2xCH2).
【０４３２】 ２５ｍｌの濃塩酸を含む１０ｍｌの水中の５−シアノエチル−２−オキシイン
ドール（４．０２ｇ）を４時間還流した。混合物を冷却し，水を加え，得られた
固体を真空濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，１．９ｇ（４４％収率）
の５−カルボキシエチル−２−オキシインドールを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 12.00 (s, br, 1H, 5-CH2CH2COOH), 10.21 (s,
1H, NH-1), 7.05 (s, 1H, H-4), 6.99 (d, J = 9Hz, 1H, H-6), 6.69 (d, J = 9
Hz, 1H, H-7), 3.40 (s, 2H, CH2-3), 2.74 (t, J = 7Hz, 2H, 5-CH2CH2COOH)
および 2.46 (t, J = 7Hz, 2H, 5-CH2CH2COOH).
【０４３３】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−（２−カルボ
キシエチル）−２−オキシインドールと縮合して，０．３５ｇの３−［３−（３
，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジ
ヒドロ−−１Ｈ−インドール−５−イル］−プロピオン酸を黄橙色固体として得
た。
【０４３４】 実施例８４：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６
−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−メトキシ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−６−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。
【０４３５】 実施例８５：５−ブチル−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシ−ベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３０ｍｌの１，２−ジクロロエタンに懸濁した１５ｇの塩化アルミニウムに，
氷浴中で，７．５ｇの２−オキシインドールを加え，次に１２ｇの塩化ブチリル
を加えた。得られた懸濁液を５０℃で一夜撹拌した。混合物を氷水に注加し，酢
酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層をブラインで洗浄し，硫酸ナト
リウムで乾燥し，濃縮乾固して，褐色固体を得た。固体をシリカゲルでクロマト
グラフィー（５０％酢酸エチル，ヘキサン中）を行い，４．３ｇ（３８％）の５
−ブタノイル−２−オキシインドールを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.67 (s, br, NH), 7.84 (d, J =8.39Hz, 1H),
s, 1H, H-4), 6.88 (d, J = 8.39Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH2), 2.88 (t, J =
7.16Hz, 2H, CH2), 1.58-1.64 (m, 2H), 0.9 (t, J = 7.58Hz, 3H, CH3).
【０４３６】 トリエチルシラン（２．３ｇ）を，２０ｍｌのトリフルオロ酢酸中の２ｇの５
−ブタノイル−２−オキシインドールに室温で加え，溶液を３時間撹拌した。反
応液を氷水に注加して，赤色油状物を得，これを放置して固化させた。固体を真
空濾過により回収し，水およびヘキサンで洗浄し，乾燥して，１．７ｇ（９１％
収率）の５−ブチル−２−オキシインドールを灰白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.19 (s, br, NH), 7.01 (s, 1H, H-4), 6.95
(d, J = 8Hz, 1H), 6.69 (d, J = 8Hz, 1H), 3.4 (s, 2H, CH2), 2.49 (t, J =
8Hz, 2H, CH2), 1.48-1.52 (m, 2H), 1.25-1.31 (m, 2H), 0.88 (t, J = 7Hz, 3
H).
【０４３７】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−ブチル−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−ブチル−３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。
【０４３８】 実施例８６：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−４−カルボン酸 ヘキサン中のトリメチルシリルジアゾメタン（２Ｍ）を２−クロロ−３−カル
ボキシニトロベンゼン（２．０１ｇ）のメタノール（２０ｍｌ）中の溶液に，室
温で，さらにガスが発生しなくなるまで滴加した。過剰のトリメチルシリル−ジ
アゾメタンを酢酸で急冷した。反応混合物をロータリーポンプにより乾燥し，残
渣をオーブン中でさらに一夜乾燥した。生成物（２−クロロ−３−メトキシカル
ボニル−ニトロベンゼン）は，以下の反応に用いるのに十分純粋であった。
【０４３９】 ジメチルマロネート（６．０ｍｌ）を水素化ナトリウム（２．１ｇ）のジメチ
ルスルホキシド（１５ｍｌ）中の氷冷懸濁液に加えた。反応混合物を１００℃に
加熱し，１時間撹拌し，次に室温に冷却した。２−クロロ−３−メトキシカルボ
ニルニトロベンゼン（２．１５ｇ）を一度に加え，混合物を１００℃で１．５時
間撹拌した。次に，反応混合物を室温に冷却し，氷水に注加し，ｐＨ５に酸性に
し，酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウムで
乾燥し，濃縮して，３．０ｇのジメチル２−メトキシカルボニル−６−ニトロフ
ェニルマロネートを得た。
【０４４０】 ジメチル２−メトキシカルボニル−６−ニトロフェニルマロネート（３．０ｇ
）を５０ｍｌの６Ｎ塩酸中で一夜還流した。混合物を濃縮乾固し，２０ｍｌのエ
タノール中の１．１ｇの塩化スズ（ＩＩ）中で２時間還流した。混合物をセライ
トを通して濾過し，濃縮し，シリカゲルでクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘ
キサン：酢酸）を行い，０．６５ｇ（３７％収率）の４−カルボキシ−２−オキ
シインドールを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 12.96 (s, br, 1H, COOH), 10.74 (s, br, 1H,
NH), 7.53 (d, J = 8Hz, 1H), 7.39 (t, J = 8Hz, 1H, H-6), 7.12 (d, J = 8Hz
, 1H, H-7), 3.67 (s, 2H, H-3).
【０４４１】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−カルボキシ−
２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−
４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−４−カルボン酸を黄橙色固体として得た。
【０４４２】 実施例８７：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６
−（３−メトキシフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−（３−メトキ
シフェニル）−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの３−（３，５−ジ
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−メトキシフェニル）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４４３】 実施例８８：７−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジ
リデン）−５−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−メチル−７−
クロロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３５ｇの７−クロロ−３−（３
，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−メチル−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４４４】 実施例８９：［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−カルバミン酸
ｔｅｒｔ−ブチルエステル ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−ｔｅｒｔ−ブ
チルオキシ−カルボニルアミノ−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの
［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−
２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブ
チルエステルを黄橙色固体として得た。
【０４４５】 実施例９０：５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−クロロ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体
として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.5, 8.4, 7.9, 7.8, 7.2, 7.1, 6.
8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.3 (m, 1H, CH), 1.2(d, 6H,
2xCH3).
【０４４６】 実施例９１：５−クロロ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシ−ベンジリ
デン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−クロロ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（３−シクロペンチル−
４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.5, 8.3, 7.9, 7.8, 7.2, 7.1, 6.
8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.3 (m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H,
4xCH2).
【０４４７】 実施例９２：３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−４−メチル
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを４−メチル−２−オキシイン
ドールと縮合して，０．３ｇの３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレ
ン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として
得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 8.3-6.7 (m, 12H, 芳香族, =CH-),
3.9 (s, 3H, OCH3), 2.6 (s, 3H, CH3).
【０４４８】 実施例９３：３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを４−メチル
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（５−イソプロピル−４−
メトキシ−２−メチルベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.3 (s, 1H, CONH), 8.2, 7.8, 7.1, 6.8, 6.8, 6.7 (m,
6H, 芳香族, =CH-), 3.8 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 2.5 (s, 3H, CH3)
, 2.4 (s, 3H, CH3), 1.2 (d, 6H, 2xCH3).
【０４４９】 実施例９４：５−ブロモ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチ
レン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルイルベンゾフラン（市販）を５−ブロモ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（２，３−ジヒド
ロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.64 (s, 1H, CONH), 7.71 (d, 1H), 7.62(ビニル, 1H),
7.61 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.37 (dd, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.984 (d, 1H),
4.64 (t, 2H, CH2), 3.22 (t, 2H, CH2).
【０４５０】 実施例９５：５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−５−クロロ
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（３−イソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４５１】 実施例９６：５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジ
リデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−５−
クロロ−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの５−クロロ−３−（３，
５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４５２】 実施例９７：５−クロロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマン（市販）を４−メチル−５−クロロ
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（２，２−ジ
メチル−クロマン−６−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４５３】 実施例９８：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸 ２−オキシインドール（６．７ｇ）を，氷浴中で冷却した塩化アルミニウム（
２３ｇ）のジクロロエタン（３０ｍｌ）中の懸濁液に加えた。塩化クロロアセチ
ル（１１．３ｇ）をゆっくり加え，塩素ガスが発生した。１０分間撹拌した後，
反応液を４０−５０℃に１．５時間暖めた。混合物を室温に冷却し，氷水に注加
した。沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，１０．
３ｇ（９８％）の５−クロロアセチル−２−オキシインドールを灰白色固体とし
て得た。
【０４５４】 ９．３ｇの５−クロロアセチル−２−オキシインドールの懸濁液を９０ｍｌピ
リジン中で８０−９０℃で３時間撹拌し，次に室温に冷却した。沈殿物を真空濾
過により回収し，２０ｍｌのエタノールで洗浄した。固体を９０ｍｌの２．５Ｎ
水酸化ナトリウムに溶解し，７０−８０℃で３時間撹拌した。混合物を室温に冷
却し，０．５Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を真空濾過により回収し，水
でよく洗浄して，粗５−カルボキシ−２−オキシインドールを暗褐色固体として
得た。一夜放置した後，濾液から２ｇの５−カルボキシ−２−オキシインドール
を黄色固体として得た。粗暗褐色生成物を熱メタノールに溶解し，不溶性物質を
濾過により除去し，濾液を濃縮して，５．６ｇの５−カルボキシ−２−オキシイ
ンドールを褐色固体として得た。合わせた収率は９７％であった。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 2.56 (s, br, 1H, COOH-5), 10.70 (s, 1H, NH-
1), 7.82 (dd, J = 2, 8Hz, 1H, H-6), 7.74 (s, br, 1H, H-4), 6.87 (d, J =
8Hz, 1H, H-7), および 3.53 (s, 2H, CH2-3). MS m/z 178 [M+1]+.
【０４５５】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−カルボキシ−
２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−
４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−５−カルボン酸を黄橙色固体として得た。
【０４５６】 実施例９９：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５
，６−ジメトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５，６−ジメトキ
シ−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの３−（３，５−ジイソプロピ
ル−４−メトキシベンジリデン）−５，６−ジメトキシ−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４５７】 実施例１００：Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデ
ン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−メタン
スルホンアミド ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−メチルスルホ
ニルアミノ−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇのＮ−［３−（３，５
−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒド
ロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−メタンスルホンアミドを黄橙色固体として
得た。
【０４５８】 実施例１０１：Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデ
ン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−ベンズ
アミド ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−ベンズアミド
−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇのＮ−［３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−
インドール−６−イル］−ベンズアミドを黄橙色固体として得た。
【０４５９】 実施例１０２：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
６−（３−エトキシフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．８ｇ）を，４．２ｇ
の３−エトキシフェニルボロン酸，５．０ｇの５−ブロモ−２−フルオロニトロ
ベンゼンおよび２２ｍｌの２Ｍ炭酸ナトリウム溶液の，５０ｍｌのトルエンおよ
び５０ｍｌのエタノール中の混合物に加えた。混合物を２時間加熱還流した。冷
却した混合物を濃縮し，水を加え，混合物を酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エ
チル層を水，ブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮した。残渣をシリカゲル（５％酢
酸エチル，ヘキサン中）でクロマトグラフィーを行い，５．３ｇ（９０％収率）
の粗４−フルオロ−３'−エトキシ−３−ニトロビフェニルを黄色油状物として
得た。
【０４６０】 ジメチルマロネート（１１．４ｍｌ）を２０ｍｌのジメチルスルホキシド中に
懸濁した４．０ｇの水素化ナトリウムに滴加した。混合物を１００℃に１０分間
加熱し，室温に冷却した。２５ｍｌのジメチルスルホキシド中の粗４−フルオロ
−３'−エトキシ−３−ニトロビフェニル（５．３ｇ）を加え，混合物を１００
℃で２時間撹拌した。反応混合物を冷却し，３００ｍｌの飽和塩化アンモニウム
溶液で急冷し，酢酸エチルで３回抽出した。抽出物を合わせ，水およびブライン
で洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，粗ジメチル３'−エトキシ
−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを黄色油状物として得た。
【０４６１】 ６０ｍｌの６Ｎ塩酸中の粗ジメチル３'−エトキシ−３−ニトロビフェニル−
４−マロネートを１００℃で４日間撹拌し，次に冷却した。形成した沈殿物を濾
過により回収し，水およびヘキサンで洗浄し，乾燥して，４．７ｇ（５−ブロモ
−２−フルオロニトロベンゼンに基づき７７％）の粗３'−エトキシ−３−ニト
ロビフェニル−４−酢酸を淡黄褐色固体として得た。
【０４６２】 鉄チップ（２．４ｇ）を，氷酢酸（４０ｍｌ）中の４．６ｇの３'−エトキシ
−３−ニトロビフェニル−４−酢酸に一度に加えた。混合物を２時間還流した。
反応混合物を冷却し，濃縮乾固した。残渣を酢酸エチルで繰り返し処理し，濾過
して不溶性物質を除去した。濾液を１Ｎ塩酸およびブラインで２回洗浄し，無水
硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，３．５ｇ（９１％）の６−（３−エトキシ
フェニル）−２−オキシインドールを淡褐色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.4 (s, br, 1H, NH), 7.33 (t, J = 8Hz, 1H,
H-3'), 7.35 (d, J = 8Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 1, 8Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8
Hz, 1H), 7.07-7.08 (m, 1H), 7.0 (s, br, 1H), 6.9 (dd, J = 3, 8Hz, 1H), 4
.08 (q, J = 7Hz, 2H, O CH2CH3), 3.49 (s, 2H, CH2), 1.34 (t, J = 7Hz, 3H,
OCH2CH3). MS m/z 254.2 [M+1]+.
【０４６３】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−（３−エトキ
シフェニル）−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの３−（３，５−ジ
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−エトキシフェニル）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４６４】 実施例１０３：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
６−フェニル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．８ｇ）を，３．１ｇ
のベンゼンボロン酸，５ｇの５−ブロモ−２−フルオロニトロベンゼンおよび２
２ｍｌの２Ｍ水性炭酸ナトリウムの，５０ｍｌのトルエンおよび５０ｍｌのエタ
ノール中の混合物に加えた。混合物を２時間還流し，濃縮し，残渣を酢酸エチル
で２回抽出した。酢酸エチル層を水およびブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮して
，黄色油状物を得た。油状物をシリカゲル（５％酢酸エチル，ヘキサン中）でク
ロマトグラフィーを行い，４．７５ｇ（９６％）の４−フルオロ−３−ニトロビ
フェニルを黄色油状物として得た。
【０４６５】 ２５ｍｌのジメチルスルホキシド中のジメチルマロネート（１０ｍｌ）を，２
５ｍｌのジメチルスルホキシド中に懸濁した３．５ｇの水素化ナトリウムに滴加
し，混合物を１００℃で１０分間撹拌した。混合物を室温に冷却し，２５ｍｌの
ジメチルスルホキシド中の４．７ｇの４−フルオロ−３−ニトロビフェニルを加
えた。混合物を１００℃で２時間撹拌し，冷却し，３００ｍｌの飽和塩化アンモ
ニウム溶液で急冷した。混合物を酢酸エチルで３回抽出し，合わせた有機層を水
およびブラインで洗浄し，蒸発させて，粗ジメチル−３−ニトロビフェニル−４
−マロネートを黄色油状物として得た。
【０４６６】 粗ジメチル−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを３０ｍｌの６Ｎ塩酸中
で２４時間還流した。沈殿物を濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，４．
５ｇ（４−フルオロ−３−ニトロビフェニルに基づき８０％）の３−ニトロビフ
ェニル−４−酢酸をクリーム色固体として得た。
【０４６７】 鉄チップ（２．６ｇ）を，４０ｍｌの酢酸中の４．５ｇの３−ニトロビフェニ
ル−４−酢酸に一度に加えた。混合物を２時間還流し，濃縮乾固し，残渣を酢酸
エチル中に取り出した。固体を濾過により除去し，濾液を１Ｎ塩酸およびブライ
ンで２回洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾液を濃縮して，３．４ｇ（
９３％収率）の６−フェニル−２−オキシインドールを淡褐色固体として得た。 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.4 (s, br, 1H, NH-1), 7.57-7.6 (m, 2H), 7
.42-7.46 (m, 2H), 7.32-7.37 (m, 1H), 7.27 (d, J = 8, 1H, H-4), 7.19 (dd,
J = 2 および 8Hz, 1H, H-5), 7.01 (d, J = 2Hz, 1H, H-7), 3.49 (s, 2H, CH 2 ). MS m/z 210 [M+1]+.
【０４６８】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−フェニル−２
−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−６−フェニル−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。
【０４６９】 実施例１０４：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−フルオロ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。
【０４７０】 実施例１０５：５−フルオロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリ
デン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジメチル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−フルオロ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．３ｇの５−フルオロ−３−（４−メトキシ−３，
５−ジメチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。
【０４７１】 実施例１０６：３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマン（市販）を２−オキシインドールと
縮合して，０．３ｇの３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。
【０４７２】 実施例１０７：３−｛２−［６−（４−フルオロフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル］−５−メチル−１Ｈ−ピロール
−３−イル｝プロピオン酸 ６−（４−フルオロフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（７
０ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ）を３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロー
ル−３−イル）−プロピオン酸（５６ｍｇ）と縮合して，表題化合物を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.38 (s, br, 1H, COOH), 12.08 (s, br, 1H, N
H), 10.87 (s, br, 1H, NH), 7.79 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.63-7.69 (m, 3H),
7.23-7.29 (m, 3H), 7.07 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 2
.96 (t, J= 7.2 Hz, 2H, CH2), 2.52 (t, J = 7.2 Hz, 2H, CH2), 2.32 (s, 3H,
CH3). MS-EI m/z 390 [M+].
【０４７３】 実施例１０８：４−（２−カルボキシエチル）−５−［６−（４−フルオロフェ
ニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−
２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル ６−（４−フルオロフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（６
０ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）を４−（２−カルボキシエチル）−５−ホルミル−
２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（６５ｍｇ）（４
−（２−カルボキシエチル）−３−エトキシカルボニル−２−メチルピロールの
ホルミル化により製造（Ｂｕｌｔｅｒ，Ａ．Ｒ．，ａｎｄＧｅｏｒｇｅ，Ｓ．Ｄ
．（１９９３）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ４９：７０１７−７０２６））と縮合
して，表題化合物を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 12.03 (s, br, 1H, COO
H), 11.05 (s, br, 1H, NH), 7.83 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.66-7.70 (m, 2H), 7.25-7.30 (m, 3H), 7.08 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.2
2 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.20 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2), 2.54 (s,
3H, CH3), 2.45 (m, 2H, CH2), 4.22 (t, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), MS-EI m/z 462 [M+].
【０４７４】 実施例１０９：３−｛２−［６−（２−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル］−５−メチル−１Ｈ−ピロール
−３−イル｝−プロピオン酸 ６−（２−メトキシフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（７
１ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ）を３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロール
−３−イル）−プロピオン酸（５４ｍｇ）と縮合して，表題化合物を得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.33 (s, br, 1H, NH), 12.07 (s, br, 1H, COO
H), 10.74 (s, br, 1H, NH), 7.68 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.25-7.28 (m, 2H), 6.94-7.05 (m, 4H), 5.99 (br s, 1H), 3.70 (s, 3H,
OCH3), 2.89 (m, 2H, CH2), 2.45 (m, 2H, CH2), 2.26 (s, 3H, CH3). MS-EI m/z 402 [M+].
【０４７５】 実施例１１０：４−（２−カルボキシエチル）−５−［６−（２−メトキシフェ
ニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−
２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 12.07 (s, br, 1H, COO
H), 10.99 (s, br, 1H, NH), 7.77 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.28-7.36 (m, 2H), 7.07-7.1 (m, 2H), 6.99-7.04 (m, 2H), 4.21 (q, J
= 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 3.19 (m, 2H, CH2), 2.54 (s,
3H, CH3), 2.50 (m, 2H, CH2), 1.04 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 474 [M+].
【０４７６】 実施例１１１：３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピ
オン酸 ５−クロロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（６１ｍｇ，０．３６ｍ
ｍｏｌ）を３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プ
ロピオン酸（６６ｍｇ）と縮合して，表題化合物を得た。 MS-EI m/z 300 および 302 [M-1 および M+1].
【０４７７】 実施例１１２：４−（２−カルボキシエチル）−５−（５−クロロ−２−オキソ
−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２−メチル−１Ｈ−ピ
ロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 12.04 (s, br, 1H, COO
H), 11.08 (s, br, 1H, NH), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.15 (dd, J = 2.0, 8.3 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.20 (q,
J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.21 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2), 2.53 (s, 3H, CH 3 ), 2.45 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 402 および 404 [M-1 および M+1].
【０４７８】 実施例１１７：４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ
−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−
カルボン酸エチルエステル オキシインドール（０．２５ｇ，１．８８ｍｍｏｌ）を４−（２−カルボキシ
エチル）−５−ホルミル−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチル
エステル（０．５ｇ，１．９７ｍｍｏｌ）と縮合して，０．４５ｇ（６５％）の
表題化合物を得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 12.12 (s, br, 1H, COO
H), 10.99 (s, br, 1H, NH), 7.78 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.17 (m 1H), 6.99 (m, 1H), 4.25 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.93
(t, J = 7.4 Hz, 2H, CH2), 2.38 (t, J = 7.4 Hz, 2H, CH2), 2.24 (s, 3H, CH 3 ), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 368 [M+].
【０４７９】 実施例１１８：２−メチル−５−（５−メチルスルファモイル−２−オキソ−１
，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４−（３−モルホリン−４
−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル ２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルア
ミドを５−ホルミル−２−メエチル−４−（３−モルホリン−４−イルプロピル
）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステルと室温で一夜撹拌して，表
題化合物を得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.86 (s, br, 1H, NH), 11.39 (s, br, 1H, NH)
, 8.16 (d, J = 1.6 Hz, 1H, H-4), 7.82 (s, 1H, H-ビニル), 7.57 (dd, J = 1
.6 & 6.9 Hz, 1H, H-6), 7.21 (m, 1H, CH3NHSO2), 7.07 (d, J = 6.9 Hz, 1H,
H-7), 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.52 (m, 4H, 2xCH2), 3.03 (m, 2
H, CH2), 2.55 (s, 3H, CH3), 2.40 (d, J = 5.0 Hz, 3H, CH3NHSO2), 2.25 (m,
6H, 3xCH2), 1.69 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 516 [M+].
【０４８０】 実施例１１９：２−メチル−４−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
プロピル］−５−（５−メチルスルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ
インドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエ
ステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 11.38 (s, br, 1H, NH)
, 8.16 (d, J = 1.6 Hz, 1H, H-4), 7.79 (s, 1H, H-ビニル), 7.57 (dd, J = 1
.6 & 6.6 Hz, 1H, H-6), 7.21 (m, 1H, CH3NHSO2), 7.05 (d, J = 6.6 Hz, 1H,
H-7), 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.01 (m, 2H, CH2), 2.55 (s, 3H,
CH3), 2.40 (d, J = 5.4 Hz, 3H, CH3NHSO2), 2.57 (m, 10H, 5xCH2), 2.09 (s
, 3H, CH3N), 1.67 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 529 [M+].
【０４８１】 実施例１２０：４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−（５−メトキシ−２
−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２−メチル−
１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.95 (s, br, 1H, NH), 10.76 (s, br, 1H, NH)
, 7.70 (s, 1H, H-ビニル), 7.31 (d, J = 2.2 Hz, 1H, H-4), 6.78 (d, J = 8.
3 Hz, 1H, H-7), 6.73 (dd, J = 2.2 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 4.21 (q, J = 7.0 H
z, 2H, OCH2CH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 2.98 (m, 2H, CH2), 2.53 (s, 3H, CH3 ), 2.19 (m, 2H, CH2), 2.11 (s, 6H, N(CH3)2), 1.64 (m, 2H, CH2), 1.30 (t,
J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 411 [M+].
【０４８２】 実施例１２１：５−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール
−３−イリデンメチル）−２−メチル−４−（３−モルホリン−４−イルプロピ
ル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.0 (s, br, 1H, NH), 10.77 (s, br, 1H, NH),
7.65 (s, 1H, H-ビニル), 7.40 (m, 1H), 6.76 (m, 2H), 4.2 (q, J = 7.0 Hz,
2H, OCH2CH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 3.54 (m, 4H, 2xCH2), 2.99 (m, 2H, CH2 ), 2.52 (s, 3H, CH3), 2.25 (m, 6H, 3xCH2), 1.67 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J
= 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 453 [M+].
【０４８３】 実施例１２２：５−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール
−３−イリデンメチル）−２−メチル−４−［３−（４−メチルピペラジン−１
−イル）−プロピル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.99 (s, br, 1H, NH), 10.78 (s, br, 1H, NH)
, 7.63 (s, 1H, H-ビニル), 7.39 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 6.76 (m, 2H), 4
.2 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.77 (s, 3H, OCH3), 2.97 (m, 2H, CH2),
2.52 (s, 3H, CH3), 2.25 (m, 10H, 5xCH2), 2.08 (s, 3H, NCH3), 1.66 (m, 2H
, CH2), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 466 [M+].
【０４８４】 実施例１２３：２−メチル−４−（３−モルホリン−４−イルプロピル）−５−
（２−オキソ−５−スルファモイル−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデ
ンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 11.33 (s, br, 1H, NH)
, 8.19 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 7.75 (s, 1H, H-ビニル), 7.63 (dd, J = 1
.8 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 7.16 (s, 2H, H2NSO2), 7.02 (d, J = 8.3 Hz, 1H, H-
7), 4.21 (q, J = 7.3 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.53 (m, 4H, 2xCH2), 3.01 (m, 2H,
CH2), 2.55 (s, 3H, CH3), 2.28 (m, 6H, 3xCH2), 1.68 (m, 2H, CH2), 1.29 (
t, J = 7.3 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 502 [M+].
【０４８５】 実施例１２４：２−メチル−４−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
プロピル］−５−（２−オキソ−５−スルファモイル−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 11.31 (s, br, 1H, NH)
, 8.18 (d, J = 1.5 Hz, 1H, H-4), 7.74 (s, 1H, H-ビニル), 7.63 (dd, J = 1
.5 & 8.1 Hz, 1H, H-6), 7.15 (s, 2H, H2NSO2), 7.01 (d, J = 8.1 Hz, 1H, H-
7), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.0 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H, CH 3 ), 2.26 (m, 10H, 5xCH2), 2.09 (s, 3H, NCH3), 1.67 (m, 2H, CH2), 1.29 (t
, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 515 [M+].
【０４８６】 実施例１２５：３−［４−エトキシカルボニル−５−メチル−３−（３−モルホ
リン−４−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン］−２−オキソ
−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 11.03 (s, br, 1H, COO
H), 8.17 (s, 1H, H-4), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-6), 7.59 (s, 1H, H-ビ
ニル), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-7), 4.21 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH2CH3),
3.54 (m, 4H, 2xCH2), 2.98 (m, 2H, CH2), 2.49 (s, 3H, CH3), 2.29 (m, 6H,
3xCH2), 1.64 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 467 [M+].
【０４８７】 実施例１２６：２−メチル−５−（５−メチルスルファモイル−２−オキソ−１
，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４−（３−ピロリジン−１
−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.84 (s, 1H, NH), 11.28 (br s, 1H, NH), 8.0
6 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H, H-ビニル), 7.57 (dd, J = 2.1 & 8.3 H
z, 1H), 7.20 (m, 1H, HNCH3), 7.06 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.22 (q, J = 7.0
Hz, 2H, OCH2CH3), 3.04 (m, 2H, CH2), 2.55 (s, 3H, CH3), 2.40 (d, J = 4
.8 Hz, 3H, HNCH3), 2.3-2.36 (m, 6H, 3xCH2), 1.66-1.71 (m, 6H, 3xCH2), 1
.30 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 500 [M+].
【０４８８】 実施例１２７：５−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール
−３−イリデンメチル）−２−メチル−４−（３−ピロリジン−１−イルプロピ
ル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.96 (s, 1H, NH), 10.75 (br s, 1H, NH), 7.6
5 (s, 1H, H-ビニル), 7.28 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.71-6.79 (m, 2H), 4.20 (
q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.75 (s, 3H, OCH3), 3.0 (m, 2H, CH2), 2.52
(s, 3H, CH3), 2.26-2.35 (m, 6H, 3xCH2), 1.65-1.71 (m, 6H, 3xCH2), 1.29
(t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 437 [M+].
【０４８９】 実施例１２８：３−［４−エトキシカルボニル−５−メチル−３−（３−ピロリ
ジン−１−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン］−２−オキソ
−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.80 (s, 1H, NH), 11.26 (br s, 1H, NH), 8.2
(s, 1H), 7.77 (m, 2H), 6.92 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.23 (q, J = 6.9 Hz, 2
H, OCH2CH3), 3.03 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H, CH3), 2.40 (m, 6H, 3xCH2),
1.68 (m, 6H, 3xCH2), 1.29 (t, J = 6.9 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 451 [M+].
【０４９０】 実施例１３０：２−メチル−５−（２−オキソ−５−スルファモイル−１，２−
ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４−（３−ピロリジン−１−イル
プロピル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.98 (s, 1H, NH), 11.30 (br s, 1H, NH), 8.1
0 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H, H-ビニル), 7.63 (dd, J = 1.9 & 8.2 H
z, 1H), 7.16 (br s, 2H, H2NSO2), 7.02 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.21 (q, J =
6.9 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.03 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H, CH3), 2.33 (m, 6H
, 3xCH2), 1.68 (m, 6H, 3xCH2), 1.29 (t, J = 6.9 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 486 [M+].
【０４９１】 実施例１３１：５−［４−（２−ヒドロキシエチル）−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル］−２−メチル−４−（３−モルホリン
−４−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.93 (s, 1H, NH), 10.95 (br s, 1H, NH), 7.6
5 (s, 1H, H-ビニル), 7.06 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 7.6 Hz, 1H),
6.77 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.85 (br s, 1H, OH), 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2H,
OCH2CH3), 3.73 (m, 2H, CH2), 3.53 (m, 4H, 2xCH2), 3.09 (m, 2H, CH2), 2.
92 (m, 2H, CH2), 2.53 (s, 3H, CH3), 2.31 (m, 6H, 3xCH2), 1.68 (m, 2H, C
H2), 1.29 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 467 [M+].
【０４９２】 実施例１３２：５−［４−（２−ヒドロキシエチル）−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル］−２−メチル−４−（３−ピロリジン
−１−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.93 (s, 1H, NH), 10.94 (br s, 1H, NH), 7.6
8 (s, 1H, H-ビニル), 7.06 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 7.3 Hz, 1H),
6.77 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.87 (br s, 1H, OH), 4.21 (q, J = 7.2 Hz, 2H,
OCH2CH3), 3.72 (m, 2H, CH2), 3.09 (m, 2H, CH2), 2.94 (m, 2H, CH2), 2.53
(s, 3H, CH3), 2.38 (m, 6H, 3xCH2), 1.67 (m, 6H, 3xCH2), 1.29 (t, J = 7
.2 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 451 [M+].
【０４９３】 実施例１３３：４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−５−（２−
オキソ−５−スルファモイル−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチ
ル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.73 (s, 1H, NH), 11.25 (br s, 1H, NH), 8.0
9 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H, H-ビニル), 7.62 (dd, J = 1.6 & 8.1 H
z, 1H), 7.20 (br s, 2H, H2NSO2), 7.02 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.21 (q, J =
7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.01 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H, CH3), 2.16 (m, 2H,
CH2), 2.11 (s, 6H, N(CH3)2), 1.66 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H
, OCH2CH3). MS-EI m/z 460 [M+].
【０４９４】 実施例１３４：３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４−エトキシカル
ボニル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン］−２−オキソ−２，
３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.77 (s, 1H, NH), 11.25 (br s, 1H, NH), 8.2
4 (s, 1H), 7.85 (s, 1H, H-ビニル), 7.76 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 4.21 (q,
J = 6.9 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.0 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H, CH3), 2.20 (m,
2H, CH2), 2.14 (s, 6H, N(CH3)2), 1.64 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 6.9 Hz,
3H, OCH2CH3). MS m/z 426.2 [M+H].
【０４９５】 実施例１３５：４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−［４−（２−ヒドロ
キシエチル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
］−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.95 (s, 1H, NH), 10.97 (br s, 1H, NH), 7.6
9 (s, 1H, H-ビニル), 7.05 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 7.7 Hz, 1H),
6.75 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.90 (br s, 1H, OH), 4.20 (q, J = 7.2 Hz, 2H,
OCH2CH3), 3.72 (m, 2H, CH2), 3.09 (m, 2H, CH2), 2.90 (m, 2H, CH2), 2.52
(s, 3H, CH3), 2.20 (m, 2H, CH2), 2.07 (s, 6H, N(CH3)2), 1.63 (m, 2H, CH 2 ), 1.28 (t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 425 [M+].
【０４９６】 実施例１３６：５−［４−（２−ヒドロキシエチル）−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル］−２−メチル−４−［３−（４−メチ
ルピペラジン−１−イル）−プロピル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチ
ルエステル1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 14.0 (s, 1H, NH), 10.94 (br s, 1H, NH), 7.70
(s, 1H, H-ビニル), 7.06 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 7.4 Hz, 1H),
6.76 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.77 (br s, 1H, OH), 4.22 (q, J = 7.21 Hz, 2H,
OCH2CH3), 3.72 (m, 2H, CH2), 3.36 (m, 2H, CH2), 3.13 (m, 4H, 2xCH2), 2.
56 (m, 2H, CH2), 2.53 (s, 3H, CH3), 2.09 (m, 8H, 4xCH2), 1.28 (t, J = 7.
1 Hz, 3H, OCH2CH3).
【０４９７】 実施例１３７：４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−５−（５−
メチルスルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデ
ンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル ２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルア
ミド（１１３ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）を４−（３−ジメチルアミノ−プロピル）
−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル
（１３３ｍｇ）と縮合して，９６ｍｇ（４０％）の表題化合物を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.73 (s, br, 1H, NH), 11.32 (s, br, 1H, NH)
, 8.05 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 7.92 (s, 1H, H-ビニル), 7.57 (dd, J = 1
.8 & 8.1 Hz, 1H, H-6), 7.22 (m, 1H, CH3NHSO2), 7.05 (d, J = 8.1 Hz, 1H,
H-7), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.01 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H,
CH3), 2.41 (d, J = 4.0 Hz, 3H, CH3NHSO2), 2.14 (s, 8H, CH2 & N(CH3)2),
1.66 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 474 [M+].
【０４９８】 実施例１３８：４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−５−（５−
メチルスルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデ
ンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸 ４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−ピ
ロール−３−カルボン酸エチルエステル（３００ｍｇ，１．１３ｍｍｏｌ）およ
び水酸化ナトリウムのＭｅＯＨ（４ｍＬ）／水（２ｍＬ）中の混合物を８０℃で
１９時間撹拌した。次に反応をＥｔＯＡｃで希釈した。水性層を分離し，中和し
，濃縮した。残渣をＭｅＯＨに溶解し，濾過し，濾液を濃縮して，２５１ｍｇ（
９４％）の４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−ホルミル−２−メチル−
１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸を得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.88 (br s, 1H, NH), 9.50 (s, 1H, CHO), 2.9
6 (m, 2H, CH2), 2.39 (s, 3H, CH3), 2.22 (m, 2H, CH2), 2.14 (s, 6H, N(CH3 )2), 1.68 (m, 2H, CH2CH2 CH2). MS-EI m/z 238 [M+].
【０４９９】 ２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルア
ミド（１１３ｍｇ）を４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−ホルミル−２
−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１１９ｍｇ）と縮合して，５０ｍ
ｇの４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−５−（５−メチルスル
ファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル
）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.52 (s, br, 1H, NH), 11.25 (s, br, 1H, COO
H), 8.01 (d, J = 1.7 Hz, 1H, H-4), 7.84 (s, 1H, H-ビニル), 7.52 (dd, J =
1.7 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 7.22 (m, 1H, CH3NHSO2), 7.05 (d, J = 8.3 Hz, 1H
, H-7), 3.08 (m, 2H, CH2), 2.56 (s, 3H, CH3), 2.40 (m, 3H, CH3NHSO2), 2.
17 (m, 8H, CH2 & N(CH3)2), 1.72 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 446 [M+].
【０５００】 実施例１３９：４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（４−メチル
−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピ
ロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.97 (s, br, 1H, NH), 12.15 ( br s, 1H, CO
OH ), 11.03 (s, 1H, NH), 7.69 (s, 1H, H-ビニル), 7.10 (t, J = 7.5 Hz, 1H
), 6.83 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.28 (q, J = 7.0
Hz, 2H, OCH2CH3), 2.88 (t, 2H, CH2), 2.62 (s, 3H, CH3), 2.43 (t, 2H, CH2 ), 2.26 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 382 [M+].
【０５０１】 実施例１４０：４−（２−カルボキシエチル）−５−（５−メトキシ−２−オキ
ソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.97 (s, br, 1H, NH), 12.14 (br s, 1H, COO
H ), 10.81 (s, 1H, NH), 7.71 (s, 1H, H-ビニル), 7.46 (m, 1H), 6.78 (m, 2
H), 4.28 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 2.97 (t, 2H,
CH2), 2.40 (t, 2H, CH2), 2.26 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH3). MS-EI m/z 398 [M+].
【０５０２】 実施例１４１：４−（２−カルボキシエチル）−５−（６−メトキシ−２−オキ
ソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.70 (s, br, 1H, NH), 12.11 ( br s, 1H, COO
H ), 10.95 (s, 1H, NH), 7.0 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-4), 7.55 (s, 1H, H-ビ
ニル), 6.59 (dd, J = 2.7 & 8.4 Hz, 1H, H-5), 6.45 (d, J = 2.7 Hz, 1H, H-
7), 4.27 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 2.92 (t, 2H,
CH2), 2.39 (t, 2H, CH2), 2.25 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH3). MS-EI m/z 398 [M+].
【０５０３】 実施例１４２：５−（６−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−
３−イリデンメチル）−４−（２−カルボキシ−エチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.77 (s, br, 1H, NH), 12.13 ( br s, 1H, COO
H ), 11.14 (s, 1H, NH), 7.77 (br s, 2H), .12 (m, 2H), 4.28 (m, 2H, OCH2C
H3), 2.95 (m, 2H, CH2), 2.40 (m, 2H, CH2), 2.26 (s, 3H, CH3), 1.29 (m, 3
H, OCH2CH3). MS-EI m/z 446 & 448 [M-1 & M+1].
【０５０４】 実施例１４３：５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−
３−イリデンメチル）−４−（２−カルボキシ−エチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.86 (s, br, 1H, NH), 12.2 ( br s, 1H, COOH
), 11.12 (s, 1H, NH), 8.11 (d, J = 2.0 Hz, 1H, H-4), 7.83 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.33 (dd, J = 2.0 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 6.83 (d, J = 8.3 Hz, 1H, H-7)
, 4.28 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.98 (t, 2H, CH2), 2.39 (m, 2H, CH2 ), 2.25 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 446 & 448 [M-1 & M+1].
【０５０５】 実施例１４４：４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ
−６−フェニル−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.86 (s, br, 1H, NH), 12.2 ( br s, 1H, COOH
), 11.11 (s, 1H, NH), 7.89 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H, H-ビニル),
7.65 (m, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.12 (d, J = 1.6 Hz, 1H)
, 4.29 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.97 (m, 2H, CH2), 2.42 (m, 2H, CH2 ), 2.27 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 444 [M+].
【０５０６】 実施例１４５：４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ
−５−スルファモイル−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）
−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.84 (s, br, 1H, NH), 11.0 ( br s, 2H), 8.2
6 (d, J = 1.6 Hz, 1H, H-4), 7.88 (s, 1H, H-ビニル), 7.67 (dd, J = 1.6 &
8.4 Hz, 1H, H-6), 7.22 (br m, 2H, H2NSO2), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-7)
, 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.97 (t, 2H, CH2), 2.37 (m, 2H, CH2 ), 2.26 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 447 [M+].
【０５０７】 実施例１４６：４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（５−メチル
スルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチ
ル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.89 (s, br, 1H, NH), 12.2 ( br s, 1H, COOH
), 11.43 (s, 1H, NH), 8.25 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 7.94 (s, 1H, H-ビ
ニル), 7.62 (dd, J = 1.8 & 8.4 Hz, 1H, H-6), 7.27 (m, 1H, HNSO2), 7.07 (
d, J = 8.4 Hz, 1H, H-7), 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.01 (t, 2H,
CH2), 2.45 (m, 2H, CH2), 2.42 (d, J = 5.3 Hz, 3H, NCH3), 2.27 (s, 3H, C
H3), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 461 [M+].
【０５０８】 実施例１４７：４−（２−カルボキシエチル）−５−（５−ジメチルスルファモ
イル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−３
−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 12.14 ( br s, 1H, COO
H ), 11.47 (s, 1H, NH), 8.26 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 8.0 (s, 1H, H-ビ
ニル), 7.58 (dd, J = 1.8 & 7.9 Hz, 1H, H-6), 7.10 (d, J = 7.9 Hz, 1H, H-
7), 4.29 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.03 (t, 2H, CH2), 2.61 (s, 6H, N
(CH3)2), 2.42 (t, 2H, CH2), 2.26 (s, 3H, CH3), 1.32 (t, J = 7.2 Hz, 3H,
OCH2CH3). MS-EI m/z 489 [M+].
【０５０９】 実施例１４８：４−（２−カルボキシエチル）−５−（５−イソプロピルスルフ
ァモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）
−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.84 (s, br, 1H, NH), 11.0 ( br s, 2H, COOH
& NH), 8.23 (d, J = 1.5 Hz, 1H, H-4), 7.92 (s, 1H, H-ビニル), 7.64 (dd,
J = 1.5 & 8.4 Hz, 1H, H-6), 7.43 (br m, 1H, HNC(CH3)2), 7.05 (d, J = 8.
4 Hz, 1H, H-7), 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.96 (t, 2H, CH2), 2.
34 (t, 2H, CH2), 2.25 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3), 0
.95 (d, J = 6.6 Hz, 6H, HNC(CH3)2). MS-EI m/z 489 [M+].
【０５１０】 実施例１４９：３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール
−２−イルメチレン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５
−スルホン酸メチルアミド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.90 (s, 1H, NH), 11.40 (br s, 1H, NH), 8.1
7 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H, H-ビニル), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H),
7.63 (dd, J = 1.5 & 8.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.30 (m, 2H)
, 7.08 (m, 2H), 3.15 (t, J = 6.6 Hz, 2H, CH2), 2.43 (d, J = 4.2 Hz, 3H,
NCH3), 2.17 (t, J = 6.6 Hz, 2H, CH2), 2.14 (s, 6H, N(CH3)2), 1.78 (m, 2H
, CH2). MS-EI m/z 438 [M+].
【０５１１】 実施例１５０：３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール
−２−イルメチレン］−４−（２−ヒドロキシエチル）−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オン1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, 1H, NH), 11.01 (br s, 1H, NH), 7.9
5 (s, 1H, H-ビニル), 7.66 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 7.9 Hz, 1H),
7.26 (t, J = 7.54 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.06 (t, J = 7.4 H
z, 1H), 6.87 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.91 (br s,
1H, OH), 3.79 (m, 2H, CH2), 3.16 (m, 2H, CH2), 3.04 (m, 2H, CH2), 2.21 (
m, 2H, CH2), 2.09 (s, 6H, N(CH3)2), 1.77 (m, 2H, CH2). MS m/z 389 [M+].
【０５１２】 実施例１５１：３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール
−２−イルメチレン］−５−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H, NH), 10.84 (br s, 1H, NH), 7.9
2 (s, 1H, H-ビニル), 7.65 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.1 Hz, 1H),
7.44 (s, 1H), 7.26 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.05 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.79
(s, 2H), 3.79 (s, 3H, OCH3), 3.11 (m, 2H, CH2), 2.20 (m, 2H, CH2), 2.12
(s, 6H, N(CH3)2), 1.76 (m, 2H, CH2). MS m/z 375 [M+].
【０５１３】 実施例１５２：５−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ３−メチルインドール−２−カルボアルデヒドは，文献に記載のように製造し
た（（１）Ｄａｖｉｄ Ｗ．Ｍ．Ｂｅｎｚｉｅｓ，Ｐｉｌａｒ Ｍａｔｉｎｅｚ
Ｆｒｅｓｎｅｄａ ａｎｄ Ｒ．Ａｌａｎ Ｊｏｎｅｓ，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ
Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１６（１４），１７９９−１８０７（１９８
６）および（２）Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ，Ａ．ａｎｄ Ｂｉｓｗａｓ，Ｋ．Ｍ．
，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９７３，３８，４００２）。
【０５１４】 ５−メチル−２−オキシインドール（５９ｍｇ），３−メチルインドール−２
−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）およびピペリジン（３０ｍｇ）のエタノール（
１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９０℃で一夜保持した。混合物を室温に冷却
した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で
乾燥して，７２ｍｇ（７４％）の５−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インド
ール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 13.03 (s, br, 1H, NH), 10.88 (s, br, 1H, NH),
7.84 (s, 1H, ビニル), 7.71 (s, br, 1H), 6.62 (d, J= 8Hz, 1H), 7.48 (d, J
= 8Hz, 1H), 7.26 (t, J= 7Hz, 1H), 7.06 (t, J= 7Hz, 1H), 7.0 (d, J= 8Hz,
1H), 6.78 (d, J= 8Hz, 1H), 2.59 (s, 3H, CH3), 2.32 (s, 3H, CH3). MSm/z 289 [M+1]+.
【０５１５】 実施例１５３：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド ５−アミノスルホニル−２−オキシインドール（８４ｍｇ），３−メチルイン
ドール−２−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕ
ｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペ
リジン（３０ｍｇ）のエタノール（１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９０℃で
一夜保持した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタ
ノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，８８ｍｇ（７１％収率）の３−（
３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジ
ヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミドを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.86 (s, br, 1H, NH), 11.3 (s, br, 1H, NH), 8
.3 (d, J= 2Hz, 1H), 7.97 (s, 1H, ビニル), 7.63 (dd, J= 2 および 8Hz, 1H)
, 7.6 (d, J= 8Hz, 1H), 7.47 (d, J= 8Hz, 1H), 7.24 (t, J= 7.5Hz, 1H), 7.1
2 (s, br, 2H, NH2), 7.02 (t, J= 7.5Hz, 1H), 6.98 (d, J= 8Hz, 1H), 2.57 (
s, 3H, CH3). MS m/z 354.1 [M+1]+
【０５１６】 実施例１５４：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中の２Ｍメチルアミン中の５−クロロスルホ
ニル−２−オキシインドール（３．３８ｇ）の懸濁液を，室温で４時間撹拌し，
このとき白色固体が形成した。固体を真空濾過により回収し，５ｍＬの水で２回
洗浄し，真空下で４０℃で乾燥して，３．０ｇ（８８％収率）の５−メチルアミ
ノスルホニル−２−オキシインドールを得た。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.87 (s, br, 1H, NH-1), 7.86 (s, br, 1H, 5
-SO2NHCH3),7.61 (d, J= 8Hz 1H, H-6), 7.32 (d, J= 5Hz, 1H, H-4), 6.97 (d,
J= 8Hz, 1H, H-7), 2.53 (s, 2H, CH2-3), および 2.36 (s, 3H, 5-SO2NHCH 3).
MS m/z 226.
【０５１７】 ５−メチルアミノスルホニル−２−オキシインドール（９０ｍｇ），３−メチ
ルインドール−２−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏ
ｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およ
びピペリジン（３０ｍｇ）のエタノール（１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９
０℃で一夜保持した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，
冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，９０ｍｇ（７０％収率）の
３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，
３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド（異性体の混合
物）を得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 11.13 (s, br, 1H, NH), 10.94 (s, br, 1H, NH),
8.84 (d, J= 16Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 6.97-7.66 (m, 6H, Ar-H), 2.6 (s, 3H
, CH3), 2.4 (d, J= 5Hz, 3H, CH3N.
【０５１８】 実施例１５５：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミ
ド ５−ジメチルアミノスルホニル−２−オキシインドール（９６ｍｇ），３−メ
チルインドール−２−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃ
ｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）お
よびピペリジン（３０ｍｇ）のエタノール（１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で
９０℃で一夜保持した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し
，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，７６ｍｇ（５７％収率）
の３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド（異性体の
混合物）を得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 11.09 (s, br, 1H, NH), 10.95 (s, br, 1H, NH),
8.78 (d, J= 16Hz, 1H), 7.8 (s, 1H, ビニル), 7.45-7.54 (m, 2H), 7.32 (d,
J= 8Hz, 1H), 7.1 (t, 1H), 6.98 (d, J= 8Hz, 1H), 6.93 (t, 1H), 2.56 (s, 6
H, 2 x CH3), 2.39 (s, 3H, CH3)
【０５１９】 実施例１５６：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（ピペリジン
塩） ５−カルボキシ−２−オキシインドール（１１３ｍｇ），３−メチルインドー
ル−２−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉ
ｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジ
ン（３０ｍｇ）のエタノール（１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９０℃で一夜
保持した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノー
ルで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，７５ｍｇ（５８％収率）の３−（３−
メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒド
ロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（ピペリジン塩）を得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 13.0 (s, br, 1H, NH), 8.35 (d, J= 1.5Hz, 1H, H
-4), 7.91 (s, 1H, ビニル), 7.82 (dd, J= 1.5 および 8Hz, 1H, H-6), 7.63 (
d, J= 8Hz, 1H), 7.49 (d, J= 8Hz, 1H), 7.26 (t, J= 7.5Hz, 1H), 7.06 (t, J
= 7.5Hz, 1H), 6.87 (d, J= 8Hz, 1H), 2.91 (t, 4H, ピペリジン), 2.6 (s, 3H
, CH3), 1.6 (m, 4H, ピペリジン), 1.54 (m, 2H, ピペリジン).
【０５２０】 実施例１５７：５−アセチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル
メチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−オキシインドール（３ｇ）を１，２−ジクロロエタン中に懸濁し，３．２
ｍＬの塩化アセチルをゆっくり加えた。得られた懸濁液を５０℃で５時間撹拌し
，冷却し，水に注加した。得られた沈殿物を真空濾過により回収し，豊富な水で
洗浄し，真空下で乾燥して，２．９ｇ（７３％収率）の５−アセチル−２−オキ
シインドールを褐色固体として得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, br, NH), 7.83 (d, J= 8Hz, 1H), 7.
78 (s, 1H, H-4), 6.88 (d, J= 8Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH2), 2.49 (s, 3H, C
H3).
【０５２１】 ５−アセチル−２−オキシインドール（７０ｍｇ），３−メチルインドール−
２−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａ
ｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジン（
３０ｍｇ）のエタノール（１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９０℃で一夜保持
した。混合物を室温に冷却し，固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗
浄し，真空下で乾燥して，８３ｍｇ（７５％収率）の５−アセチル−３−（３−
メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ−インドー
ル−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.86 (s, br, 1H, NH), 11.29 (s, br, 1H, NH),
8.43 (d, J= 1.5Hz, 1H, H-4), 8.01 (s, 1H, ビニル), 7.78 (dd, J= 1.5 およ
び 8Hz, 1H, H-6), 7.58 (d, J= 8Hz, 1H), 7.45 (d,J= 8Hz, 1H), 7.23 (t, 1H
), 7.01 (t, 1H), 6.92 (d, J= 8Hz, 1H), 2.58 (s, 3H, CH3), 2.54 (s, 3H, C
H3). MS m/z 317.2 [M+1]+.
【０５２２】 実施例１５８：５−アセチル−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン インドール−２−カルボアルデヒドは，文献に記載のように製造した（Ｍｉｃ
ｈｅｌ Ｂａｒｂｉｅｒ，Ｍｉｃｈｅｌ Ｄｅｖｙｓ，Ｃｈｒｉｓｔｉａｎｅ
Ｔｅｍｐｅｔｅ，Ａｌｂｅｒｔ Ｋｏｌｌｍａｎｎ ａｎｄ Ｊｅａｎ−Ｆｒａ
ｎｃｏｉｓ Ｂｏｕｓｑｕｅｔ，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉ
ｏｎｓ，２３（２２），３１０９−３１１７（１９９３））。
【０５２３】 エタノール（２ｍＬ）中の５−アセチル−２−オキシインドール（８８ｍｇ）
，インドール−２−カルボアルデヒド（８７ｍｇ）およびピペリジン（４ｍｇ）
の混合物を，密封管中で９０℃で３時間保持した。混合物を室温に冷却した。形
成した固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で
乾燥して，１３３ｍｇ（８８％収率）の５−アセチル−３−（１Ｈ−インドール
−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オンを橙色固体と
して得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.81 (s, br, 1H, NH), 11.38 (s, br, 1H, NH),
8.38 (d, J= 1Hz, H-4), 8.17 (s, 1H, ビニル), 7.88 (dd, J= 1 および 8Hz,
1H, H-6), 7.69 (d, J= 8Hz, 1H), 7.58 (d, J= 8Hz, 1H), 7.29 (t, 1H), 7.21
(s, 1H), 7.09 (t, 1H), 7.0 (d, J= 8Hz, 1H), 2.59 (s, 3H, CH3). MS m/z 303.1 [M+1]+.
【０５２４】 実施例１５９：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド ５−アミノスルホニル−２−オキシインドール（１０６ｍｇ），インドール−
２−カルボアルデヒド（８７ｍｇ）（ＳｙｎｔｈｅｔｉｃＣｏｍｍｎｉｃａｔｉ
ｏｎｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（４ｍ
ｇ）のエタノール（２ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９０℃で３時間保持した
。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄
し，真空オーブン中で乾燥して，１４０ｍｇ（８３％収率）の３−（１Ｈ−イン
ドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−５−スルホン酸アミドを橙色固体として得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.81 (s, br, 1H, NH), 11.38 (s, br, 1H, NH),
8.18 (d, J= 1Hz, H-4), 8.12 (s, 1H, ビニル), 7.7 (m, 2H), 7.6 (d, J= 8Hz
, 1H), 7.26-7.29 (m, 2H), 7.2 (s, 2H, NH2), 7.05-7.11 (m, 2H). MS m/z 340 [M+1]+.
【０５２５】 実施例１６０：５−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−オキシインドール（１２４ｍ
ｇ），インドール−２−カルボアルデヒド（８７ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ
Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）
およびピペリジン（４ｍｇ）のエタノール（２ｍＬ）中の混合物を，密封管中で
９０℃で３時間保持した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収
し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，１９６ｍｇの５−ｔｅ
ｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オンを明るい橙色固体として得た。次
に，生成物をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（各２ｍＬ）に溶解し，室温で
１時間撹拌した。次に反応混合物を濃縮した。残渣を水に溶解し，飽和炭酸水素
ナトリウム溶液で塩基性にした。固体を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真
空オーブン中で乾燥して，１２９ｍｇの５−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−
２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを褐色固体として
得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 13.1 (s, br, 1H, NH), 10.57 (s, br, 1H, NH), 7
.65 (s, 1H, ビニル), 7.64 (d, J= 8Hz, 1H), 7.54 (d, J= 8Hz, 1H), 7.24 (t
, 1H), 7.1 (s, 1H), 7.06 (t, 1H), 6.93 (d, J= 2Hz, 1H), 6.61 (d, J= 8Hz,
1H), 6.5 (dd, J= 2 および 8Hz, 1H), 4.8 (s, br, 2H, NH2). MS m/z 276.1 [M+1]+.
【０５２６】 実施例１６１：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸 ５−カルボキシ−２−オキシインドール（８８．５ｍｇ），インドール−２−
カルボアルデヒド（８７ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉ
ｏｎｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１滴
）のエタノール（３ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。
混合物を室温に冷却した。固体を濾過し，２Ｎ塩酸で酸性にした。得られた固体
を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，
６０ｍｇ（４０％収率）の３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−
オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸をからし色固体
として得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.8 (s, br, 1H, NH), 12.69 (s, 1H, COOH), 11.
35 (s, br, 1H, NH), 8.33 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.86 (dd, J= 1 および 8H
z, 1H), 7.68 (d, J= 8Hz, 1H), 7.59 (d, J= 8Hz, 1H), 7.28 (t, 1H), 7.21 (
s, 1H), 7.08 (t, 1H), 6.99 (d, J= 8Hz, 1H). MS m/z 304 [M]+.
【０５２７】 実施例１６２：６−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ６−クロロ−２−オキシインドール（４１ｍｇ）（市販），インドール−２−
カルボアルデヒド（４２ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉ
ｏｎｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１滴
）のエタノール（３ｍＬ）中の混合物を密封管中で９５℃で３時間保持した。混
合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，
真空オーブン中で乾燥して，６２ｍｇ（８７％収率）の６−クロロ−３−（１Ｈ
−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを
光沢のある橙色固体として得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.83 (s, br, 1H, NH), 11.17 (s, br, 1H, NH),
7.98 (s, 1H), 7.74 (d, J= 8Hz, 1H), 7.67 (d, J= 8Hz, 1H), 7.58 (d, J= 8H
z, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.15 (s, br, 1H), 7.08 (m, 2H), 6.91 (d, J= 2Hz, 1
H). MS m/z 293 および 295.
【０５２８】 実施例１６３：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒド
ロ−インドール−２−オン ２−オキシインドール（１３３ｍｇ），インドール−２−カルボアルデヒド（
１７４ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９９３
，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１０ｍｇ）のエタノー
ル中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。混合物を室温に冷却した
。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥
して，３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ−イン
ドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.97 (s, br, 1H, NH), 11.01 (s, br, 1H, NH
), 7.92 (s, 1H, H-ビニル), 7.72 (d, J= 7Hz, 1H), 7.66 (d, J= 7Hz, 1H), 7
.57 (dd, J= 1, 8Hz, 1H), 7.27 (dt, J= 1, 7Hz, 1H), 7.21 (dt, J= 1, 8Hz,
1H), 7.13 (s, 1H), 7.01-7.1 (m, 2H), 6.91 (d, J= 8Hz, 1H). MS El 260.
【０５２９】 実施例１６４：５−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ５−クロロ−２−オキシインドール（１６７ｍｇ），インドール−２−カルボ
アルデヒド（１７４ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ
ｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１０ｍｇ
）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。混合物を室
温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オー
ブン中で乾燥して，５−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.88 (s, br, 1H, NH), 11.12 (s, br, 1H, NH
), 8.07 (s, 1H, H-ビニル), 7.86 (d, J= 2Hz, 1H), 7.68 (d, J= 8Hz, 1H), 7
.59 (dd, J= 1, 8Hz, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.24 (dd, J= 2, 8Hz, 1H), 7.14 (s
, 1H), 7.09 (dt, J= 1, 8Hz, 1H), 6.90 (d, J= 8Hz, 1H). MS El 294 および 296.
【０５３０】 実施例１６５：５−ブロモ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ５−ブロモ−２−オキシインドール（２１２ｍｇ），インドール−２−カルボ
アルデヒド（１７４ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ
ｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１０ｍｇ
）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。混合物を室
温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オー
ブン中で乾燥して，５−ブロモ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.87 (s, br, 1H, NH), 11.12 (s, br, 1H, NH)
, 8.07 (s, 1H, H-ビニル), 7.98 (d, J= 2Hz, 1H), 7.68 (d, J= 8Hz, 1H), 7.
59 (d, J= 8Hz, 1H), 7.36 (dd, J= 2, 8Hz, 1H), 7.28 (dt, J= 1, 8Hz, 1H),
7.14 (s, 1H), 7.08 (dt, J= 1, 8Hz, 1H), 6.86 (d, J= 8Hz, 1H). MS El 338 および 340.
【０５３１】 実施例１６６：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−４−メチル−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ４−メチル−２−オキシインドール（１４７ｍｇ），インドール−２−カルボ
アルデヒド（１７４ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ
ｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１０ｍｇ
）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。混合物を室
温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オー
ブン中で乾燥して，３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−４−メチル
−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, br, 1H, NH), 11.02 (s, br, 1H, NH
), 7.79 (s, 1H, H-ビニル), 7.64 (d, J= 8Hz, 1H), 7.57 (d, J= 8Hz, 1H), 7
.27 (d, J= 7Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.05- 7.14 (m, 2H), 6.84 (d, J= 8Hz,
1H), 6.78 (d, J= 8Hz, 1H), 2.61 (s, 3H, CH3). MS El 274.
【０５３２】 実施例１６７：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ２−オキシインドール（１３３ｍｇ），３−メチルインドール−２−カルボア
ルデヒド（１９０ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ
，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジン（１０ｍｇ）
のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。混合物を室温
に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブ
ン中で乾燥して，３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.01 (s, br, 1H, NH), 10.99 (s, br, 1H, NH
), 7.89 (s, 1H, H-ビニル), 7.88 (d, J= 7Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8Hz, 1H), 7
.49 (d, J= 8Hz, 1H), 7.27 (dt, J= 1, 8Hz, 1H), 7.2 (dt, J= 1, 8Hz, 1H),
7.01-7.08 (m, 2H), 6.9 (d, J= 8Hz, 1H), 2.59 (s, 3H, CH3). MS El 274.
【０５３３】 実施例１６８：５−クロロ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ５−クロロ−２−オキシインドール（１６７ｍｇ），３−メチルインドール−
２−カルボアルデヒド（１９０ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃ
ａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジン
（１０ｍｇ）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。
混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し
，真空オーブン中で乾燥して，５−クロロ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドー
ル−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.96 (s, br, 1H, NH), 11.09 (s, br, 1H, NH
), 8.09 (d, J= 2Hz, 1H), 8.02 (s, 1H, H-ビニル), 7.63 (d, J= 8Hz, 1H), 7
.5 (d, J= 8Hz, 1H), 7.29 (dt, J= 1, 7Hz, 1H), 7.21 (dd, J= 2, 8Hz, 1H),
7.07 (dt, J= 1, 7Hz, 1H), 6.89 (d, J= 8Hz, 1H), 2.61 (s, 3H, CH3). MS El 308.
【０５３４】 実施例１６９：５−ブロモ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ５−ブロモ−２−オキシインドール（２１２ｍｇ），３−メチル−インドール
−２−カルボアルデヒド（１９０ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉ
ｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジ
ン（１０ｍｇ）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した
。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄
し，真空オーブン中で乾燥して，５−ブロモ−３−（３−メチル−１Ｈ−インド
ール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オンを得た。 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.96 (s, br, 1H, NH), 11.09 (s, br, 1H, NH
), 8.21 (d, J= 2Hz, 1H), 8.02 (s, 1H, H-ビニル), 7.63 (d, J= 8Hz, 1H), 7
.5 (d, J= 8Hz, 1H), 7.33 (dd, J= 2, 8Hz, 1H), 7.29 (dt, J= 1, 7Hz, 1H),
7.07 (dt, J= 1, 7Hz, 1H), 6.84 (d, J= 8Hz, 1H), 2.62 (s, 3H, CH3). MS El 352 および 354.
【０５３５】 実施例１７０：４−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ４−メチル−２−オキシインドール（１４７ｍｇ），３−メチル−インドール
−２−カルボアルデヒド（１９０ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉ
ｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジ
ン（１０ｍｇ）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した
。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄
し，真空オーブン中で乾燥して，４−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インド
ール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オンを得た。 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.07 (s, br, 1H, NH), 11.0 (s, br, 1H, NH)
, 7.78 (s, 1H, H-ビニル), 7.64 (d, J= 8Hz, 1H), 7.51 (d, J= 8Hz, 1H), 7.
27 (dt, J= 1, 8Hz, 1H), 7.04- 7.12 (m, 2H), 6.85 (d, J= 8Hz, 1H), 6.78 (
d, J= 8Hz, 1H), 2.64 (s, 3H, CH3), 2.52 (s, 3H, CH3). MS El 288.
【０５３６】 実施例１７１：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−５−［（１Ｈ−
インドール−２−イルメチレン）−アミノ］−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン ５−アミノ−２−オキシインドール（７４ｍｇ），インドール−２−カルボア
ルデヒド（８７ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，
１９８３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（４ｍｇ）のエ
タノール（２ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９５℃で３時間保持した。混合物
を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空
オーブン中で乾燥した。次に粗固体をシリカゲルでクロマトグラフィーを行って
，５０ｍｇ（２５％収率）の３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−５
−［（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−アミノ］−１，３−ジヒドロ−
インドール−２−オンを得た。
【０５３７】 実施例１７２：３−（１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.03 (br, s, 1H, NH), 10.80 (br, s, 1H, NH)
, 9.37 (s, 1H), 8.09-8.24 (m, 3H), 7.51 (m, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.13 (m,
2H), 7.03 (s, 2H, NH2), 6.85 (d, J = 7.8 Hz, 1H). MS-EI m/z 339 [M]+.
【０５３８】 実施例１７３：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (br, s, 1H, NH), 11.40 (br, s, 1H, NH)
, 8.15 (s, 1H, H-ビニル), 8.10 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.54-7.65 (m, 3H), 7
.20-7.27 (m, 3H), 7.02-7.06 (m, 2H), 2.38 (d, J = 4.8 Hz, 3H, CH3). MS-EI m/z 353 [M]+.
【０５３９】 実施例１７４：３−（１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.13 (br, s, 1H, NH), 10.88 (br, s, 1H, NH)
, 8.22-8.50 (m, 2H), 7.66-7.94 (m, 2H), 7.52 (m, 1H), 7.23 (m, 2H), 6.94
(m, 1H). MS-EI m/z 304 [M]+.
【０５４０】 実施例１７５：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.92 (br, s, 1H, NH), 11.35 (br, s, 1H, NH)
, 8.36 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H, H-ビニル), 7.67 (m, 2H), 7.53 (
d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.30 (m, 1H), 7.16 (s, 2H, NH2), 7.08 (m, 1H), 7.03
(d, J = 8.6 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H, CH3). MS-EI m/z 353 [M]+.
【０５４１】 実施例１７６：３−（１Ｈ−インドール−５−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.38 (br, s, 1H, NH), 10.85 (br, s, 1H, NH)
, 8.11 (m, 1H), 8.01 (m, 1H), 7.90 (m, 1H), 7.78 (m, 1H), 7.37-7.53 (m,
3H), 7.10 (m, 1H), 6.95 (m, 1H), 6.4 (m, 1H), 2.28 (s, 3H, CH3). MS-EI m/z 353 [M]+.
【０５４２】 実施例１７７：３−（１Ｈ−インドール−５−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.54 (br, s, 1H, NH), 10.86 (br, s, 1H, NH)
, 8.56, 7.76, 7.46, 6.91 (m, 9H).
【０５４３】 実施例１７８：３−（１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.03 (br, s, 1H, NH), 10.84 (br, s, 1H, NH)
, 9.39 (s, 1H), 8.25 (s, 1H, H-ビニル), 8.22 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.16 (
m, 1H), 7.40-7.46 (m, 2H), 7.06-7.15 (m, 2H), 7.04 (m, 1H, CH3NH), 6.88
(d, J = 7.8 Hz, 1H), 2.32 (d, J = 5.1 Hz, 3H, CH3). MS-EI m/z 355 [M]+.
【０５４４】 実施例１７９：５−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−５−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン MS-EI m/z 275 [M]+.
【０５４５】 実施例１８０：５−アミノ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.13 (br, s, 1H, NH), 10.57 (br, s, 1H, NH)
, 7.63 (s, 1H, H-ビニル), 7.61 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.6 Hz,
1H), 7.25 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.03-7.06 (m, 2H), 6.61 (d, J = 8.3 Hz,
1H), 6.49 (dd, J = 1.4 & 8.3 Hz, 1H), 4.70 (br s, 2H, NH2), 2.55 (s, 3H,
CH3). MS-EI m/z 289 [M]+.
【０５４６】 実施例１８２：３−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.0 (br, s, 1H, NH), 10.85 (br, s, 1H, NH),
7.90 (s, 1H, H-ビニル), 7.79 (dd, 1H), 7.41-7.44 (m, 2H), 7.02-7.18 (m,
3H), 6.91 (d, 1H), 2.45 (s, 3H, CH3). MS-EI m/z 318 [M]+.
【０５４７】 実施例１８３：３−（１Ｈ−インドール−５−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド MS-EI m/z 367 [M]+.
【０５４８】 実施例１８４：３−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミ
ド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.95 (br, s, 1H, NH), 10.86 (br, s, 1H, NH)
, 7.84 (s, 1H, H-ビニル), 7.41 (dd, J = 1.8 & 8.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J =
8.4 Hz, 1H), 7.04 (m, 1H), 6.85-6.95 (m, 4H). MS-EI m/z 381 [M]+.
【０５４９】 実施例１８５：３−（１Ｈ−インドール−５−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド MS-EI m/z 339 [M]+.
【０５５０】 実施例１８６：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.80 (br, s, 1H, NH), 11.44 (br, s, 1H, NH)
, 8.30 (s, 1H, H-ビニル), 8.15 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 7.2 Hz,
1H), 7.60 (m, 2H), 7.30 (m, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.07-7.12 (m, 2H), 2.63
(s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 367 [M]+.
【０５５１】 実施例１８７：５−アミノ−３−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン MS-EI m/z 289 [M]+.
【０５５２】 実施例１８８：３−（１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.11 (br, s, 1H, NH), 10.94 (br, s, 1H, NH)
, 9.50 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.33 (m, 2H), 7.51-7.53 (m, 2H), 7.25 (m,
2H), 7.03 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 2.63 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 367 [M]+.
【０５５３】 実施例１８９：３−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド MS-EI m/z 353 [M]+.
【０５５４】 実施例１９０：３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−
イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル］−プロピオン酸 １−（モルホリン−４−イル）シクロヘキセン（３００ｇ），２１４ｇのトリ
エチルアミンおよび１４００ｍＬのジクロロメタンを１５分間還流し，次に水浴
中で１５−２０℃に冷却した。５００ｍＬのジクロロメタンに溶解した塩化エチ
ルスクシニル（２６６ｇ）を３０分間かけて加えた。混合物を３０分間還流し，
水浴中で周囲温度に冷却した。固体を真空濾過により回収し，１００ｍＬのジク
ロロメタンで洗浄し，廃棄した。濾液をフラスコに戻し，溶媒を蒸留により除去
して，４５４ｇの粗４−（２−モルホリン−４−イル−シクロヘキセ−１−ニル
）−４−オキソ−酪酸エチルエステルを油状物として得た。
【０５５５】 粗４−（２−モルホリン−４−イルシクロヘキセ−１−ニル）−４−オキソ−
酪酸エチルエステル（４５４ｇ），３９８ｇのジエチルアミノマロネート塩酸塩
，１６２ｇの酢酸ナトリウムおよび３５０ｍＬの氷酢酸を１０８℃に３０分間加
熱した。混合物を１００−１０８℃で２時間保持し，次に水浴中で約５０℃に冷
却した。水（２５００ｍＬ）および７００ｍＬの酢酸エチルを加えた。酢酸エチ
ル層を分離し，ブラインで３回，飽和炭酸水素ナトリウム溶液で２回，ブライン
で１回洗浄した。溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し，酢酸エチルをロータリー
エバポレーターを用いて除去して，４９４ｇ（１０５％収率）の粗３−（２−エ
トキシカルボニルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール
−２−カルボン酸エチルエステルを油状物として得た。粗混合物をシリカゲルカ
ラムで酢酸エチル：ヘキサンの１：１０混合物を溶出剤として用いてクロマトグ
ラフィーを行い，１２２．１ｇの純粋な３−（２−エトキシカルボニルエチル）
−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸エチルエ
ステルを低融点固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 11.0 (s, 1H, ピロール NH), 4.2, 4.0 (t, それぞれ 4H
, COCH2), 2.8, 2.4 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH2 -), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).
【０５５６】 精製した３−（２−エトキシカルボニルエチル）−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸エチルエステル（１２２．１ｇ）およ
び３２８ｍＬの５Ｎ水酸化ナトリウムを８０分間還流した。加熱を止め，激しく
撹拌している混合物に，１６５ｍＬの１０Ｎ塩酸を，還流冷却器を備えた滴加ロ
ートを用いて注意深く加えた。塩酸はｐＨが２−３となるまで加えた。次に，混
合物を氷浴中で冷却し，この間に，混合物中の油状物は固化した。固体を真空濾
過により回収し，水で３回洗浄し，真空下で５０−６０℃で乾燥して，５４．９
ｇ（７１％収率）の３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル）−プロピオン酸を暗褐色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 11.8 (br s, 1H, COOH),
9.8 (s, 1H, CH), 2.5, 2.3 (t, 4H, -CH2CH2CO-), 2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH2-)
, 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).
【０５５７】 ２４ｇのジメチルホルムアミドおよび３００ｍＬのジクロロメタンの混合物を
−９℃に冷却した。オキシ塩化リン（５０ｇ）を，滴加ロートにより急速に加え
た。３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プ
ロピオン酸（５４．９ｇ）を，激しく撹拌しながら少しずつ加えた。混合物を室
温に暖め，次に１０分間還流した。次にこれを５℃に冷却し，３００ｍＬの水で
希釈した。１０Ｎ水酸化ナトリウムを用いてｐＨを１０に調節した。層を分離し
た。水性層を１０℃に冷却し，約１３０ｍＬの１０Ｎ塩酸を用いてｐＨを２−３
に調節した。形成した油状物を固化し，真空濾過により回収し，水で３回洗浄し
，真空下で５０℃で乾燥して，５２．８ｇ（９３％収率）の３−（２−ホルミル
−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン
酸を暗褐色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 11.7 (br s, 1H, COOH),
9.4 (s, 1H, CHO), 2.8, 2.5(t, 4H, -CH2CH2CO-), 2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH2-)
, 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).
【０５５８】 ２５ｍＬのエタノール中の３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．６ｇの２
−オキシインドールおよび２．７ｇのピペリジン（または２．２ｇのピロリジン
）を４時間還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると，沈殿物が形成した。
混合物を５分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，
２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬのエタノール中で還流してス
ラリー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し
，真空下で乾燥して，５．５ｇ（６８％収率）の３−［２−（２−オキソ−１，
２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た：ｍｐ
２６３−２６５℃。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.1, 6.9, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.6 (s,
1H, -CH=), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH 2 -), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).
【０５５９】 実施例１９１：３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸 ２５ｍＬのエタノール中の３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．７ｇの５
−クロロ−２−オキシインドールおよび２．７ｇのピペリジン（または２．２ｇ
のピロリジン）を４時間還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると沈殿物が
形成した。混合物を５分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過によ
り回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬのエタノール中で
還流することによりスラリー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬ
のエタノールで洗浄し，高真空下で乾燥して，６．５ｇ（８０％収率）の３−［
２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメ
チル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロ
ピオン酸を橙色固体として得た。ｍｐ３７０−３８４℃1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.8, 7.1, 6.8 (m, それぞれ 3H, 芳香族), 7.7 (s, 1H, -
CH=), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, CH2CH2CO), 2.5 (m, 4H, -CH2-, -CH2-), 1.
7 (m, 4H, -CH2CH2-).
【０５６０】 実施例１９２：３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸 ３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）−プロピオン酸（３．４ｇ），２．７ｇの５−ブロモ−２−オキシイン
ドールおよび１．４ｇのピロリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物を４時間
還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると沈殿物が形成した。混合物を５分
間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエ
タノールで洗浄した。固体を３０ｍＬのエタノール中で還流することによりスラ
リー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，
真空下で乾燥して，５．２ｇ（９８％収率）の３−［２−（５−ブロモ−２−オ
キソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を赤橙色固体とし
て得た。ｍｐ２８６−２８９℃1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.9, 7.1, 6.8 (m, それぞれ 3H, 芳香族), 7.7 (s, 1H, -
CH=), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.5 (m, 4H, -CH2-, -CH2-),
1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).
【０５６１】 実施例１９３：３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸 ２０ｍＬの乾燥エーテル中のジエチルオキサレート（３０ｍＬ）を，５０ｍＬ
の乾燥エーテル中に懸濁した１９ｇのカリウムエトキシドに撹拌しながら加えた
。混合物を氷浴中で冷却し，２０ｍＬの乾燥エーテル中の２０ｍＬの３−ニトロ
−ｏ−キシレンをゆっくり加えた。粘稠な暗赤色混合物を０．５時間還流し，濃
縮し，ほぼすべての固体が溶解するまで１０％水酸化ナトリウムで処理した。次
に，赤色が黄色に変化するまで，過酸化水素（３０％）を暗赤色混合物に加えた
。暗赤色がもはや存在しなくなるまで，混合物を１０％水酸化ナトリウムと３０
％過酸化水素で交互に処理した。固体を濾別し，濾液を６Ｎ塩酸で酸性にした。
得られた沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，９．
８ｇ（４５％収率）の１−メチル−６−ニトロフェニル酢酸を灰白色固体として
得た。固体をメタノール中で１０％パラジウム担持炭素で水素化して，９．０４
ｇの４−メチル−２−オキシインドールを白色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz) δ 10.27 (s, br, 1H, NH-1), 7.06 (t, 7.71 Hz,
1H, H-6), 6.74 (d, 7.73 Hz, H-5), 6.63 (d, 7.73 Hz, 1H, H-7), 3.36 (s,
2H, CH2), 2.18 (s, 3H, CH3).
【０５６２】 ３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．２ｇの４−メチル−２−オキシイン
ドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物を４時間
還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると沈殿物が形成した。混合物を５分
間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエ
タノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中でスラリー洗浄し，冷
却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空下で乾燥し
て，６．２ｇ（８０％収率）の３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−
ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7 (s, 1H, -CH=), 7.0, 6.8 (m, それぞれ 2H, 芳香族),
2.8, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.6 (s, 1H, CH3), 2.5 (m, 4H, -C
H2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).
【０５６３】 実施例１９４：３−［２−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸 ３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．２ｇの５−メチル−２−オキシイン
ドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物を４時間
還流した。酢酸（８ｍＬ）を加えると沈殿物が形成した。混合物を５分間還流し
，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノール
で洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノールでスラリー洗浄し，冷却し，真空
濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，６．２ｇ（
８０％収率）の３−［２−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7 (s, 1H, -CH=), 7.0, 6.8 (m, それぞれ 3H 芳香族),
2.8, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.6 (s, 1H, CH3), 2.5 (m, 4H, -CH 2 -, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 349.
【０５６４】 実施例１９５：３−［２−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸 ３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．７ｇの６−クロロ−２−オキシイン
ドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物を４時間
還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると，沈殿物が形成した。混合物を５
分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬの
エタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中でスラリー洗浄し，
真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，６．５
ｇ（８０％）の３−［２−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.0, 6.9 (m, それぞれ 3H, 芳香族), 7.6 (s, 1H, -
CH=), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH2-),
1.7(m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 371.
【０５６５】 実施例１９６：３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロイン
ドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インド
ール−３−イル］−プロピオン酸 ３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．６ｇの６−メトキシ−２−オキシイ
ンドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物を４時
間還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると沈殿物が形成した。混合物を５
分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬの
エタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中でスラリー洗浄し，
冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して
，６．４ｇ（８０％収率）の３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−
ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た。ｍｐ２６
３−２６６℃1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.0 (s, 1H, ピロール NH), 12.0(s, 1H, COOH), 10.7
(s, 1H, CONH), 7.6, 6.5, 6.4 (m, それぞれ 3H, 芳香族), 7.4 (s, 1H, -CH=)
, 3.7 (s, 3H, CH3), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.5 (m, 4H -C
H2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 365.
【０５６６】 実施例１９７：Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ
インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−３−イル］−プロピオンアミド ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸（１０ｇ）を１００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。カルボニルジ
イミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌した。ジメチ
ルアミン（２．７ｇ）および３０ｍＬのジメチルホルムアミドを加え，室温で一
夜撹拌を続けた。５０ｍＬの水を混合物に加え，１０分間撹拌を続けた。沈殿物
を真空濾過により回収し，２０ｍＬの水で，次に２０ｍＬのエタノールで洗浄し
た。固体を３０ｍＬの還流エタノール中で５分間スラリー洗浄し，室温に冷却し
た。固体を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥し
て，８．９ｇ（８３％収率）のＮ，Ｎ−ジメチル−３−［２−（２−オキソ−１
，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミドを得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 10.7 (s, 1H, CONH), 7.7,
7.1, 6.9, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.6 (s, 1H, -CH=), 3.3 (s, 6H,
CH3), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.5 (m, 4H -CH2-, -CH2-), 1
.7(m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 364.
【０５６７】 実施例１９８：３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オン １００ｍＬのテトラヒドロフラン中の３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸（９．７ｇ）を８．１ｇのカルボ
ニルジイミダゾールとともに１時間撹拌した。ジメチルアミン（２．５ｇ）を加
え，混合物を２時間撹拌した。溶媒を蒸発させ，残渣を酢酸エチル中に取り，水
，０．１Ｎ塩酸，水，およびブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥し，蒸発
させて，７．７ｇ（７０％収率）の３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ
−インドール−３−イル）−プロピオン酸ジメチルアミドを得た。
【０５６８】 ５０ｍＬのテトラヒドロフラン中の３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１
Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸ジメチルアミド（７．７ｇ）および
１３ｇのボラン−テトラヒドロフラン複合体を３時間還流した。反応をアセトン
で，次に水で急冷し，蒸発乾固させた。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー
を行い，２ｇ（２０％収率）の３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，
６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドールを黄色油状物として得た。
【０５６９】 ジメチルホルムアミド（０．８ｇ）および１３ｍＬのジクロロメタンを−９℃
に冷却した。オキシ塩化リン（１．７ｇ）を滴加ロートにより急速に加えた。３
−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール（２ｇ）を，激しく撹拌しながら少しずつ加えた。混合物を室温に暖め
，次に１０分間還流した。次にこれを５℃に冷却し，２０ｍＬの水で希釈した。
１０Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨを１０に調節した。層を分離した。有機層を水お
よびブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，蒸発させて，１．８ｇ（
８０％）の３−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−ホルミル−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドールを暗色油状物として得て，これを固化した
。 １０ｍＬのエタノール中の３−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−ホルミ
ル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール（１．８ｇ），１ｇの２
−オキシインドールおよび０．１ｇのピペリジンを４時間還流し，次に室温に冷
却した。形成した沈殿物を真空濾過により回収し，４ｍＬのエタノールで洗浄し
た。固体を８ｍＬの還流エタノールでスラリー洗浄し，冷却し，真空濾過により
回収し，３ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，１．８ｇ（７０％収率）
の３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 10.7 (s, 1H, CONH), 7.6,
7.1, 7.0, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.6 (s, 1H, -CH=), 3.3 (s, 6H,
CH3), 2.7 (m, 4H, -CH2-, -CH2-), 2.5, 2.3, 1.4 (t, それぞれ 6H, -CH2CH2C
H2N-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 350.
【０５７０】 実施例１９９：３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオンアミド ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸（１０ｇ）を１００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。カルボニルジ
イミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌した。３０ｍ
Ｌのジメチルホルムアミド中のアンモニア（１ｇ）を加え，一夜撹拌を続けた。
５０ｍＬの水を混合物に加え，１０分間撹拌を続けた。形成した沈殿物を真空濾
過により回収し，２０ｍＬの水で，次に２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体
を３０ｍＬの還流エタノールで５分間スラリー洗浄し，室温に冷却した。固体を
真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，１１ｇ
（８３％収率）の３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−
イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル］−プロピオンアミドを得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.1, 6.9, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.6 (s,
1H, -CH=), 7.2, 6.7 (s, それぞれ 2H, NH2), 2.9, 2.7 (t, 4H, -CH2CH2CO-),
2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 336.
【０５７１】 実施例２００：３−［３−（３−モルホリン−４−イル−３−オキソプロピル）
−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸（１０ｇ）を１００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。カルボニルジ
イミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌した。３０ｍ
Ｌのジメチルホルムアミド中のモルホリン（５．２ｇ）を加え，一夜撹拌を続け
た。５０ｍＬの水を混合物に加え，１０分間撹拌を続けた。沈殿物を真空濾過に
より回収し，２０ｍＬの水で，次に２０ｍＬのエタノールで洗浄した。形成した
固体を３０ｍＬの還流エタノール中で５分間スラリー洗浄し，室温に冷却した。
固体を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，
９．６ｇ（８０％）の３−［３−（３−モルホリン−４−イル−３−オキソプロ
ピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン
］−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.1, 6.9, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.6 (s,
1H, -CH=), 3.3 (多重線, 8H, モルホリン CH2), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -
CH2CH2CO-), 2.5 (m, 4H, CH2, CH2), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 406.
【０５７２】 実施例２０１：Ｎ−メチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル−プロピオンアミド ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸（１０ｇ）を１００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。カルボニルジ
イミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌した。３０ｍ
Ｌのジメチルホルムアミド中のメチルアミン（１．８ｇ）を加え，一夜撹拌を続
けた。５０ｍＬの水を混合物に加え，１０分間撹拌を続けた。沈殿物を真空濾過
により回収し，２０ｍＬの水で，次に２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を
３０ｍＬの還流エタノール中で５分間スラリー洗浄し，室温に冷却した。固体を
真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，８．３
ｇ（８０％収率）のＮ−メチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロイ
ンドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−イン
ドール−３−イル］−プロピオンアミドを橙色固体として得た。 MS: m/z 350.
【０５７３】 実施例２０２：Ｎ−（２−モルホリン−４−イルエチル）−３−［２−（２−オ
キソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミド ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸（１０ｇ）を１００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。カルボニルジ
イミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌した。４−（
２−アミノエチル）モルホリン（７．７ｇ）および３０ｍＬのジメチルホルムア
ミドを加え，一夜撹拌を続けた。５０ｍＬの水を混合物に加え，１０分間撹拌を
続けた。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬの水で，次に２０ｍＬのエタ
ノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中で５分間スラリー洗浄し
，室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄
し，真空乾燥して，１ｇ（８３％）のＮ−（２−モルホリン−４−イルエチル）
−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチ
ル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピ
オンアミドを得た。ｍｐ２５６−２５８℃1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 10.7 (s, 1H, -CONH-), 7.
7 (t, 1H, -CONHCH2-), 7.6, 7.1, 6.9, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.5 (
s, 1H, -CH=), 3.5 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2-), 3.1, 2.8 (m, それぞれ 2H,
-CH2NCH2-), 2.7, 2.5 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.3, 2.2 (m, それぞれ
4H, -NHCH2CH2N-), 2.2 (m, 4H, -CH2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).
【０５７４】 実施例２０３：３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ
］ピリジン−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−３−イル］−プロピオン酸 ７−アザオキシインドール（９９ｍｇ），１１０ｍｇの３−（２−ホルミル−
４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸
および２滴のピペリジンの２ｍＬのエタノール中の混合物を５時間還流した。反
応混合物を冷却し，濃縮した。残渣を酢酸でｐＨ６に酸性にした。得られた沈殿
物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空オーブン中で４０℃で乾燥して，
２５．４ｍｇ（１３％収率）の３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロピロ
ロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を得た。 MS: m/z 338.
【０５７５】 実施例２０４：３−｛２−［６−（３−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸 １０３ｍｇの６−（３−メトキシフェニル）−２−オキシインドール，９５ｍ
ｇの３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル）−プロピオン酸およびピペリジン（３滴）のエタノール（２ｍＬ）中
の混合物を密封管中で９０℃に加熱し，ここで一夜保持した。反応混合物を濃縮
し，６Ｎ塩酸で酸性にした。形成した沈殿物を濾過により回収し，水およびヘキ
サンで洗浄して，１５６ｍｇの３−｛２−［６−（３−メトキシフェニル）−２
−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸を褐色固体と
して得た（８２％）。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz): δ 13.26 (s, br, 1H, NH-1 ) 1.78 (s, br, 1H,
NH-1), 7.72 (d, 8.1 Hz, 1H, H-4), 7.65 (s, 1H, H-ビニル), 7.35 (d, 7.9 H
z, 1H), 7.26 (dd, 1.3 Hz, 8.1 Hz, 1H, H-5), 7.18 (d, 7.9 Hz 1H), 7.13 (t
, 2.0 Hz, 1H ), 7.09 (d, 1.3 Hz, 1H, H-7), 6.90 (dd,, 2.0 Hz, 1H), 3.82
(s, 3H, OCH3), 2.91 (t, 7.4 Hz, 2H, CH2CH2COOH), 2.66 (t, 5.9 Hz, 2H, H
-7'), 2.38-2.46 (m, 4H, CH2CH2COOH および H-4'), 1.69-1.76 (m, 4H, H-5',
6'). MS: m/z 443.2.
【０５７６】 実施例２０５：３−｛２−［６−（４−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸 １０３ｍｇの６−（４−メトキシフェニル）−２−オキシインドール，９５ｍ
ｇの３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル）−プロピオン酸およびピペリジン（３滴）のエタノール（２ｍＬ）中
の混合物を密封管中で９０℃に加熱し，ここで４時間保持した。反応混合物を濃
縮し，６Ｎ塩酸で酸性にした。酢酸エチルを加えると，水性層から固体が沈殿し
た。沈殿物を濾過により回収し，水およびヘキサンで洗浄して，５７ｍｇの３−
｛２−［６−（４−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル｝−プロピオン酸を褐色固体（３０％）として得た。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz): δ 13.24 (s, br, 1H, NH-1), 11.61 (s, br, 1H,
COOH), 10.76 (s, br, 1H, NH-1), 7. (d, 8.1 Hz, 1H, H-4), 7.61 (s, 1H, H
-ビニル), 7.56 (d, 8.8 Hz, 2H, H-3, 5), 7.21 (dd, 1.5 Hz, 8.1 Hz, 1H, H-
5), 7.04 (d, J = 1.5 Hz, 1H, H-7), 7.01 (d, 8.8 Hz, 2H, H-2",6" ), 3.79
(s, 3H, OCH3), 2.91 (t, 7.4 Hz, 2H, CH2CH2COOH ), 2.67 (t, 5.9 Hz, 2H,
H-7'), 2.40-2.46 (m, 4H, CH2CH2COOH および H-4'), 1.72-1.78 (m, 4H, H-5'
,6'). MS: m/z 441.2.
【０５７７】 実施例２０６：３−［２−（２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロイン
ドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インド
ール−３−イル］−プロピオン酸 ９０ｍｇの６−フェニル−２−オキシインドール，９５ｍｇの３−（２−ホル
ミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピ
オン酸およびピペリジン（３滴）のエタノール（２ｍＬ）中の混合物を密封管中
で９０℃で４時間保持した。反応混合物を濃縮し，６Ｎ塩酸で酸性にした。沈殿
物を濾過により回収し，水およびヘキサンで洗浄して，５９ｍｇの３−［２−（
２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチ
ル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピ
オン酸を褐色固体として得た（３１％収率）。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz): δ 13.27 (s, br, 1H, NH-1'), 12.06 (s, v br,
1H, COOH), 10.80 (s, br, 1H, NH-1), 7.74 (d, 7.9 Hz, 1H, H-4), 7.64 (s,
1H, H-ビニル), 7.62 (d, 7.7 Hz, 2H), 7.44 (t, 7.7 Hz, 2H), 7.32 (dd, 7.7
Hz, 1H), 7.27 (dd, 1.1, 7.9 Hz 1H, H-5), 7.10 (d, 1.1 Hz, 1H, H-7), 2.9
2 (t, 7.3 Hz, 2H, CH2CH2COOH), 2.67 (t, 5.5 Hz, 2H, H-7'), 2.41-2.46 (m,
4H, CH2CH2COOH および H-4'), 1.73-1.76 (m, 4H, H-5',6'). MS: m/z 411.2.
【０５７８】 実施例２０７：３−｛２−［６−（２−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１ｇ）を，５ｇの２−メ
トキシフェニルボロン酸，６．６ｇの５−ブロモ−２−フルオロニトロベンゼン
および３０ｍＬの２Ｍ炭酸ナトリウム溶液の，５０ｍＬのトルエンおよび５０ｍ
Ｌのエタノール中の混合物に加えた。混合物を２時間還流し，濃縮し，残渣を酢
酸エチルで２回抽出した。酢酸エチル層を水およびブラインで洗浄し，乾燥し，
濃縮して，暗緑色油状物を得て，これを放置して固化させて，粗４−フルオロ−
２'−メトキシ−３−ニトロビフェニルを得た。
【０５７９】 ジメチルマロネート（１４ｍＬ）を，５０ｍＬのジメチルスルホキシド中に懸
濁した２．９ｇの水素化ナトリウムに滴加した。混合物を１００℃で１５分間撹
拌し，室温に冷却した。６０ｍＬのジメチルスルホキシド中の粗４−フルオロ−
２'−メトキシ−３−ニトロビフェニルを加え，混合物を１００℃で２時間撹拌
した。反応混合物を冷却し，３００ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶液で急冷し，
酢酸エチルで２回抽出した。抽出物を合わせ，飽和塩化アンモニウム，水，およ
びブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，粗ジメチル２'
−メトキシ−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを黄色油状物として得た。
【０５８０】 粗２'−メトキシ−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを５０ｍＬの６Ｎ
塩酸中で１００℃で２４時間撹拌し，冷却した。形成した沈殿物を濾過により回
収し，水およびヘキサンで洗浄し，乾燥して，９．８ｇの２'−メトキシ−２−
ニトロビフェニル−４−酢酸を淡黄褐色固体として得た。
【０５８１】 鉄チップ（５ｇ）を５０ｍＬの氷酢酸中の９．８ｇの２'−メトキシ−３−ニ
トロビフェニル−４−酢酸に一度に加え，混合物を１００℃で３時間撹拌した。
反応混合物を濃縮乾固し，酢酸エチル中で超音波処理し，濾過して不溶性物質を
除去した。濾液を１Ｎ塩酸で２回，次に水およびブラインで洗浄し，無水硫酸ナ
トリウムで乾燥し，濃縮した。残渣をシリカゲルで酢酸エチル：ヘキサン１：２
を溶出剤として用いてクロマトグラフィーを行って，５．４ｇ（５−ブロモ−２
−フルオロニトロベンゼンに基づき６９％）の６−（２−メトキシフェニル）−
２−オキシインドールをバラ色固体として得た。
【０５８２】 １０３ｍｇの６−（２−メトキシフェニル）５−２−オキシインドール，９５
ｍｇの３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール
−３−イル）−プロピオン酸およびピペリジン（３滴）のエタノール（２ｍＬ）
中の混合物を，密封管中で９０℃で４時間保持した。反応混合物を濃縮し，６Ｎ
塩酸で酸性にした。沈殿物を濾過により回収し，水およびヘキサンで洗浄して，
６７ｍｇの３−｛２−［６−（２−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−
ジヒドロインドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸を褐色固体として得た（３５％収
率）。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz): δ 13.26 (s, br, 1H, H1, 20, vr H OH) 10.71 (
s, br, 1H, NH-1), 7.67 (d, 7.7 Hz, 1H, H-4), 7.61 (s, 1H, H-ビニル), 7.2
7-7.34 (m, 2H,), 7.01-7.10 (m, 2H), 7.05 (dd, 1.2, 7.7 Hz, 1H, H-5), 6.9
9 (d, 1.2 Hz, 1H, H-7), 3.75 (s, 3H, OCH3), 2.91 (t, 7.5 Hz, 2H, CH2CH2C
OOH), 2.68 (t, 7 Hz, 2H, H-7'), 2.40-2.46 (m, 4H, CH2CH2COOH および H-4'
), 1.71-1.78 (m, 4H, H-5',6'). MS m/z 441.2.
【０５８３】 実施例２０８：３−［２−（５−イソプロピルアミノスルホニル−２−オキソ−
１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸 ２７ｍＬのクロロスルホン酸を入れた１００ｍＬのフラスコに，１３．３ｇの
２−オキシインドールをゆっくり加えた。添加の間，反応温度は３０℃未満に維
持した。添加後，反応混合物を室温で１．５時間撹拌し，６８℃に加熱し，さら
に１時間撹拌し，冷却し，水に注加した。沈殿物を水で洗浄し，真空オーブン中
で乾燥して，１１．０ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドール（５０
％収率）を得，これをさらに精製することなく用いた。
【０５８４】 ３ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドール，１．１５ｇのイソプロ
ピルアミンおよび１．２ｍＬのピリジンの５０ｍＬのジクロロメタン中の懸濁液
を室温で４時間撹拌し，このとき白色固体が存在した。固体を真空濾過により回
収し，熱エタノールでスラリー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，４０℃
で真空乾燥して，１．５ｇ（４５％）の５−イソプロピルアミノ−スルホニル−
２−オキシインドールを得た。1 H NMR (d6-DMSO, 300 MHz) δ 10.69 (s, br, 1H, NH), 7.63 (dd, 1.8 Hz, 1H
, H-6), 7.59 (d, 1 Hz, 1H, H-4), 7.32 (d, 7 Hz, 1H, NH-SO2-), 6.93 (d, 8
Hz, 1H, H-7), 3.57 (s, 2H, H-3), 3.14-3.23 (m, 1H, CH-(CH3)2), 0.94 (d,
7 Hz, 6H, CH3).
【０５８５】 （２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル）−プロピオン酸（５．４ｇ），５．７ｇの５−イソプロピルアミノ−スルホ
ニル−２−オキシインドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノー
ル中の混合物を４時間還流した。酢酸（８ｍＬ）を加えると，沈殿物が形成した
。混合物を５分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し
，２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中でスラ
リー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，
真空乾燥して，８．１ｇ（８０％収率）の３−［２−（５−イソプロピルアミノ
−スルホニル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸を橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 8.1, 7.5, 7.3, 7.0 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.7 (s,
1H, -CH=), 2.3 (m, 1H, -CH-), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.4
(m, 4H, -CH2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-), 0.9 (d, 6H, CH3). MS m/z 458.
【０５８６】 実施例２０９：３−［２−（６−モルホリン−４−イル−２−オキソ−１，２−
ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸 ４ｇの６−（モルホリン−４−イル）−２−オキシインドール，３．７５ｇの
３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−
イル）プロピオン酸，および１．８ｍＬのピペリジンのエタノール（６０ｍＬ）
中の混合物を６時間還流した。反応混合物を濃縮し，６Ｎ塩酸でｐＨ６に酸性に
した。沈殿物を濾過により回収し，水で１回，酢酸エチルで２回，およびメタノ
ールで２回洗浄して，２．６ｇの３−［２−（６−モルホリン−４−イル−２−
オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４．５，６，７
−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］プロピオン酸を橙色固体として
得た（３４％収率）。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz): δ 13.04 (s, br, 1H, NH-1'), 12.05 (s, vbr, 1
H, COOH), 10.60 (s, br, 1H, NH-1), 7.50 (d, 8.0 Hz, 1H, H-4), 7.39 (s, 1
H, H-ビニル), 6.60 (d, 8.0 Hz, 1H, H-5), 6.43 (s, 1H, H-7), 3.73 (d, 4.7
, 4H, H-2'', 6''), 3.09 (s, 4H, H-3'', 5''), 2.86 (t, 7.1 Hz, 2H, CH2CH2 COOH), 2.64 (s, br, 2H, H-7'), 2.37-2.43 (m, 4H, CH2CH2COOH および H-4')
, 1.71-1.75 (m, 4H, H-5',6'). MS m/z 422.3.
【０５８７】 実施例２１０：３−［２−（５−クロロ−４−メチル−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸 ３．０ｇの４−メチル−２−オキシインドールの懸濁液をを５０ｍＬのアセト
ニトリル中で室温で撹拌しながら，３．３ｇのＮ−クロロスクシンイミドを少し
ずつ加えた。次にトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を加えた。白色沈殿物が形成した
。懸濁液を室温で３日間撹拌した。白色固体を真空濾過により回収し，少量の冷
アセトンで洗浄し，真空オーブンで４０℃で一夜乾燥して，２．５ｇ（６８％）
の５−クロロ−４−メチル−２−オキシインドールを得た。
【０５８８】 （２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル）−プロピオン酸（５．４ｇ），４．０ｇの５−クロロ−４−メチル−２−オ
キシインドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物
を４時間還流した。酢酸（８ｍＬ）を加えると沈殿物が形成した。混合物を５分
間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエ
タノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノールでスラリー洗浄し，冷却
し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，６
．８ｇ（８０％）の３−（２−（５−クロロ−４−メチル−２−オキソ−１，２
−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.6 (s, 1H, -CH=), 7.3, 6.7(m, それぞれ 2H, 芳香族),
2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.7 (s, 3H, CH3), 2.4(m, 4H, -CH2 -, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).
【０５８９】 実施例２１１：３−［２−（５−ブロモ−４−メチル−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１
Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸 （２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル）−プロピオン酸（５．４ｇ），５．０ｇの５−ブロモ−４−メチル−２−オ
キシインドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物
を４時間還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加え，沈殿物が形成した。混合物
を５分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍ
Ｌエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中でスラリー洗浄し
，冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥し
て，７．６ｇ（８０％）の３−［２−（５−ブロモ−４−メチル−２−オキソ−
１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を赤橙色固体として得た
。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.8 (s, 1H, -CH=), 7.3, 6.7, (m, それぞれ 2H, 芳香族)
, 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.7 (s, 3H, CH3), 2.4 (m, 4H -C
H2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 427,429.
【０５９０】 実施例２１２：３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イルエチル）−プロピオンアミド ３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオン酸（１２．３ｇ）を１５０ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解し
た。カルボニルジイミダゾール（６．３９）を加え，混合物を周囲温度で１時間
撹拌した。４−（２−アミノエチル）モルホリン（７．７ｇ）および３０ｍＬの
ジメチルホルムアミドを加え，室温で一夜撹拌を続けた。５０ｍＬの水を混合物
に加え，１０分間撹拌を続けた。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬの水
で，次に２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中
で５分間スラリー洗浄し，室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，２０
ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，１２．５ｇ（８０％）の３−［２−
（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−（２
−モルホリン−４−イルエチル）−プロピオンアミドを得た。
【０５９１】 実施例２１３：３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イルエチル）−プロピオンアミド ３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオン酸（１１ｇ）を１５０ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。
カルボニルジイミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌
した。４−（２−アミノエチル）モルホリン（７．７ｇ）および３０ｍＬのジメ
チルホルムアミドを加え，室温で一夜撹拌を続けた。５０ｍＬの水を混合物に加
え，１０分間撹拌を続けた。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬの水で，
次に２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中で５
分間スラリー洗浄し，室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，２０ｍＬ
のエタノールで洗浄し，真空乾燥して，１１．５ｇ（８０％）の３−［２−（５
−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−
４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−（２−モ
ルホリン−４−イルエチル）−プロピオンアミドを得た。
【０５９２】 実施例２１４：３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イ
リデンメチル）−フェニル］−プロピオン酸 １００ｍＬのジクロロメタン中の１３．４ｇのフタル酸ジカルボキシアルデヒ
ドの溶液に，３５ｇのエチル（トリフェニルホスホランイリデン）アセテートを
５分間かけて少しずつ加えた。反応混合物を室温で一夜撹拌し，濃縮した。残渣
を５００ｍＬのヘキサン：酢酸エチルの６：１混合物中で１時間撹拌した。固体
を濾過により除去し，濾液を濃縮した。生成物をシリカゲルカラムでクロマトグ
ラフィーを行い，１０ｇのエチル３−（２−ホルミルフェニル）プロペネートを
ＥおよびＺ異性体の混合物として得た。
【０５９３】 上述の混合物を１００ｍｇの５％パラジウム担持炭素を含有する１００ｍＬの
酢酸エチルに溶解し，水素（バルーン圧）下で１０時間撹拌した。混合物をセラ
イトのベッドを通して濾過し，酢酸エチルで洗浄した。合わせた濾液を濃縮して
，８ｇのエチル３−（２−ホルミルフェニル）プロピオネートを得た。
【０５９４】 １ｇのエチル３−（２−ホルミルフェニル）プロペネート，５００ｍｇのオキ
シインドールおよび０．１ｍＬのピペリジンの５ｍＬのエタノール中の混合物を
９０℃で一夜撹拌した。混合物を蒸発させ，シリカゲルカラムで精製して，４５
０ｍｇのエチル（Ｅ）−３−［（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３
−イリデンメチル）フェニル］−プロピオネートを得た（Ｍ＋ｌ＝３２２）。
【０５９５】 ３ｍＬのエタノール中の３００ｍｇのエチル（Ｅ）−３−［（２−オキソ−１
，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）フェニル］−プロピオネート
に，２ｍＬの２Ｎ水酸化ナトリウムを加えた。混合物を９０℃で２時間撹拌し，
冷却し，６Ｎ塩酸でｐＨ３に酸性にした。固体を濾過により回収し，冷エタノー
ルで洗浄して，３０ｍｇの３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドー
ル−３−イリデンメチル）−フェニル］−プロピオン酸を黄色固体として得た。 1 H NMR (d6-DMSO): δ 12.1 (s, 1H, COOH),10.6 (S, 1H, CONH), 7.7 (s, 1H,
=CH) 7.6, 7.4, 7.3, 7.2, 7.0, 6.8 ,6.7 (m, 8H, 芳香族), 2.9, 2.5 (t, そ
れぞれ 4H, CH2CH2). MS: m/z 294.
【０５９６】 実施例２１５：３−［４−メチル−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸 ３，５−ジメチル−４−（２−メトキシカルボニルエチル）−１Ｈ−ピロール
−２−カルボン酸エチルエステル（１２７ｇ）を酢酸（１９００ｍＬ），水（１
９００ｍＬ）およびテトラヒドロフラン（１９００ｍＬ）に溶解し，−３０℃に
冷却した。硝酸第二セリウムアンモニウム（１０９７ｇ）を撹拌しながら少しず
つ加え，赤みを帯びた橙色懸濁液を得た。懸濁液を０℃で２時間撹拌し，炭酸水
素ナトリウムで中和してｐＨ７とし，酢酸エチル（２０００ｍＬ）で抽出した。
酢酸エチル層を分離し，ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し，無水硫酸ナトリウム
（２０ｇ）で乾燥した。溶媒を除去して，８０．２ｇ（６０％）の５−ホルミル
−４−（２−メトキシ−カルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２
−カルボン酸エチルエステルを油状物として得た。
【０５９７】 ５−ホルミル−４−（２−メトキシカルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（８０．２ｇ），２−オキシインドー
ル（３７．９ｇ）およびエタノール（３００ｍＬ）を，機械的撹拌および還流冷
却器を備えた５００ｍＬの三ツ口丸底フラスコ中で７０℃に暖めた。ピペリジン
（１．３ｇ）を加え，混合物を４時間還流した。混合物を１０℃に冷却し，橙色
沈殿物を真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を１５
０ｍＬの還流エタノール中でスラリー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，
３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，８１．７ｇ（７５％）の４−（
２−メトキシカルボニルエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エ
チルエステルを橙色固体として得た。
【０５９８】 ４−（２−メトキシカルボニルエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ−１
，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カ
ルボン酸エチルエステル（８１．７ｇ）），５６．５ｇの水酸化カリウム，２０
０ｍＬのエタノールおよび２００ｍＬの水を，機械的撹拌および温度計を備えた
１Ｌの三ツ口丸底フラスコに入れた。混合物を９０℃で９０分間撹拌し，室温に
冷却し，酢酸で沈殿物が形成するまで酸性にした。沈殿物を真空濾過により回収
し，５０ｍＬの水で洗浄し，真空乾燥して，６９．１ｇ（８５％）の４−（２−
カルボキシエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を赤色固体とし
て得た。
【０５９９】 ５０ｍＬのエチレングリコール（ｂ．ｐ．１９８℃）に懸濁した４−（２−カ
ルボキシエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドー
ル−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（１０ｇ）を１Ｌ
の加圧反応器中に密封し，反応器を窒素で１２０ｐｓｉに加圧し，次に１５０℃
に３時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し，次に５０ｍＬの水で希釈した。
得られた沈殿物を真空濾過により回収し，１００ｍＬの水で２回洗浄して，３−
［４−メチル−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデン
メチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸と３−［４−メチル−２
−（２−オキソ−ｌ，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−
ピロール−３−イル］−プロピオン酸２−ヒドロキシエチルエステルとの混合物
を暗橙色固体として得た。この固体は乾燥せずに次の工程で用いた。1 H NMR (d6-DMSO) δ 13.3 (s, br, 1H, NH), 10.77 (s, 1 H, NH), 7.6 (s, 1
H, H-ビニル), 7.67, 7.08, 6.97, 6.85 (m, 4 H, Ar-H), 4.73 (t, J = 6Hz, 1
H, OH), 3.97-4.0 (m, 2H, CH2), 3.5-3.55 (m, 2 H, CH2), 2.98 (t, J = 7.5
Hz, 2 H, CH2), 2.51 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.04 (s, 3 H, CH3). MS m/z 341 (M+1).
【０６００】 ５００ｍＬの三ツ口丸底フラスコ中の，３−［４−メチル−２−（２−オキソ
−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−
イル］−プロピオン酸および３−［４−メチル−２−（２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸２−ヒドロキシエチルエステル，１．９ｇの水酸化カリウム，５０ｍＬ
の水，および５０ｍＬのエタノールを７０℃で１時間撹拌した。混合物を室温に
冷却し，２Ｎ塩酸で沈殿物が形成するまで酸性にした。沈殿物を真空濾過により
回収し，エタノール：水混合物（１：１，１００ｍＬ）で洗浄した。固体を酢酸
エチル：エタノール混合物（１：１，１００ｍＬ）で７０℃で３０分間スラリー
洗浄し，次に室温に冷却した。生成物を真空濾過により回収し，４０℃で一夜真
空乾燥して，７．８ｇ（９０％総収率）の３−［４−メチル−２−（２−オキソ
−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−
イル］−プロピオン酸を暗橙色固体として得た。（Ｒ．Ｂ．Ｗｏｏｄｗａｒｄ
ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １９９０，４６（２２），７５９９−
７６５９）。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.28 (s, br, 1 H, NH), 12.05 (s, 1 H, COOH), 10.78 (
s, 1 H, NH), 7.68 (d, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H), 7.64 (s, 1 H, H-ビニル), 7.1
1 (t, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H), 7.11 (s, 1 H), 6.97 (t, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H)
, 6.86 (d, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H), 2.94 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.41 (t
, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.04 (s, 3H, CH3).
【０６０１】 実施例２１６：３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸 エタノール（２ｍＬ）中の，５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエ
チル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１
ｍｇ），５−クロロ−２−オキシインドール（１６８ｍｇ），およびピペリジン
（２滴）を２時間還流した。反応混合物を冷却し，形成した沈殿物を濾過し，エ
タノールおよびヘキサンで洗浄し，乾燥して，３６９ｍｇ（８６％）の４−（２
−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−５−（５−クロロ−２−オキソ−
１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−
カルボン酸エチルエステルを淡黄色針状結晶として得た。
【０６０２】 ４−（２−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−５−（５−クロロ−２
−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロー
ル−２−カルボン酸エチルエステル（３４６ｍｇ）および水酸化カリウム（５６
０ｍｇ）のエタノール（５ｍＬ）中の混合物を９５℃に加熱し，次に冷却した。
このとき，赤色結晶が形成した。結晶を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性に
した。沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，２９９ｍ
ｇ（１００％）の４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（５−クロ
ロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸を褐色固体として得た。
【０６０３】 エチレングリコール（５ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３
−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を，密封管中で，予熱し
た油浴中で２００℃で２時間加熱した。反応混合物を９０℃に冷却し，水酸化カ
リウム（２ペレット）を加えた。次に混合物を９０℃で３０分間加熱し，その後
冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。形成した沈殿物を濾過し
，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，７７ｍｇ（２９％）の３−［２
−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチ
ル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.31 (s, br. 1 H, NH), 12.05 (s, 1 H, COOH), 10.89(s
, br, 1 H, NH), 7.85 (d, J = 2 Hz, 1 H, H-4), 7.75 (s, 1 H, H-ビニル), 7
.16 (d, J = 3 Hz, 1 H), 7.11 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 6.84 (d, J = 8
Hz, 1 H, H-7), 2.97 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.41 (t, J = 7.5 Hz, 2 H,
CH2), 2.04 (s, 3 H, CH3). MS m/z 331 (M+1).
【０６０４】 実施例２１７：３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロイン
ドール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プ
ロピオン酸 エタノール（４ｍＬ）中の，５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエ
チル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（５９１
ｍｇ），６−メトキシ−２−オキシインドール（３３３ｍｇ）およびピペリジン
（０．１ｍＬ）を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（５３７ｍｇ）を混
合物に加え，次にこれを９５℃でさらに１時間撹拌した。反応混合物を冷却し，
濃縮し，水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗
浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，７３０ｍｇ（９９％）の４−（２−カル
ボキシエチル）−３−メチル−５−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒ
ドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を得
た。
【０６０５】 エチレングリコール（１０ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）
−３−メチル−５−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール
−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（５０１ｍｇ）を，
密封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間加熱した。反応混合物を９０℃
に冷却し，水酸化カリウム（２ペレット）を加えた。次に混合物を９０℃で３０
分間撹拌し，その後冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿
物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，２２１ｍｇ（４８％
）の３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−
３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン
酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.09 (s, 1 H, NH), 12.05 (s, 1 H, COOH), 10.74 (s, 1
H, NH), 7.58 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.48 (s, 1 H, H-ビニル), 7.04 (d,
J = 2 Hz, 1 H), 6.56 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-5), 6.43 (d, J = 2 Hz, 1 H
), 3.75 (s, 3 H, OCH3), 2.91 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.4 (t, J = 7.5
Hz, 2 H, CH2), 2.03 (s, 3 H, CH3). MS m/z 325 (M-1).
【０６０６】 実施例２１８：３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸 ５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１ｍｇ），４−メチル−２−オ
キシインドール（１４７ｍｇ）およびピペリジン（２滴）のエタノール（２ｍＬ
）中の混合物を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（２１３ｍｇ）を加え
，温度を９５℃に上げ，ここで１時間保持した。反応混合物を冷却し，濃縮した
。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗
浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，３３７ｍｇ（９５％）の４−（２−カル
ボキシエチル）−３−メチル−５−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒド
ロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を得た
。
【０６０７】 エチレングリコール（５ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３
−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（３００ｍｇ）を，密封
管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間加熱した。反応混合物を９０℃に冷
却し，水酸化カリウム（１ペレット）を加えた。次にこれを９０℃で３０分間撹
拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈
殿物を濾過し，水で洗浄し，シリカゲルカラムで精製して，１１５ｍｇ（４４％
収率）の３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−
３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン
酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.37 (s, 1 H, NH), 12.04 (s, 1 H, COOH), 10.81 (s, 1
H, NH), 7.69 (s, 1 H, H-ビニル), 7.09 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 7.01 (t, J
= 7.5 HZ, 1 H, Ar-H), 6.79 (d, J = 7.5 Hz, 1 H, Ar-H), 6.74 (d, J = 7.5
Hz, 1 H, Ar-H), 2.88 (t, J = 7.2 Hz, 2 H, CH2), 2.61 (s, 3 H, CH3-4), 2.
44 (t, J = 7.2 Hz, 2 H, CH2), 2.04 (s, 3 H, CH3). MS m/z 309 (M-1).
【０６０８】 実施例２１９：３−［２−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸 エタノール（２ｍＬ）中の，５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエ
チル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１
ｍｇ），６−クロロ−２−オキシインドール（１６８ｍｇ）およびピペリジン（
２滴）を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（５３７ｍｇ）を混合物に加
え，次にこれを９５℃でさらに１時間撹拌した。反応混合物を冷却し，濃縮した
。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗
浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，２７０ｍｇ（７２％）の４−（２−カル
ボキシ−エチル）−３−メチル−５−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒ
ドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を得
た。
【０６０９】 エチレングリコール（５ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−
３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（２４０ｍｇ）を，密
封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間保持した。反応混合物を９０℃に
冷却し，水酸化カリウム（２ペレット）を加えた。次にこれを９０℃で３０分間
撹拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。
沈殿物を濾過し，水で洗浄し，シリカゲルカラムで酢酸エチル：ヘキサン：氷酢
酸５０：５０：１０を溶出剤として用いて精製して，４５ｍｇ（２１％）の３−
［２−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデン
メチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.2 (s, 1H, NH), 12.04 (s, 1 H, COOH), 10.92 (s, 1 H
, NH), 7.72 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.68 (s, 1 H, H-ビニル), 7.15 (d, J
= 2.4 HZ, 1 H), 7.01 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 6.86 (d, J = 2 Hz, 1 H
, H-7), 2.94 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.4 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2
.03 (s, 3 H, CH3). MS m/z 329 (M-1).
【０６１０】 実施例２２０：３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸 ５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１ｍｇ），５−ブロモ−２−オ
キシインドール（２２０ｍｇ），およびピペリジン（２滴）のエタノール（２ｍ
Ｌ）中の混合物を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（５３７ｍｇ）を加
え，温度を９５℃に１時間上昇させた。反応混合物を冷却し，濃縮した。残渣を
水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。形成した沈殿物を濾過し，水で洗
浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，４１１ｍｇ（９８％）の４−（２−カル
ボキシエチル）−３−メチル−５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒド
ロ−インドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を得
た。
【０６１１】 エチレングリコール（５ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−
３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（３８０ｍｇ）を，密
封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間保持した。反応混合物を９０℃に
冷却し，水酸化カリウム（１ペレット）を加えた。次にこれを９０℃で３０分間
撹拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。
沈殿物を濾過し，水で洗浄し，シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精
製して，１６８ｍｇ（４９％収率）の３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１
，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロー
ル−３−イル］−プロピオン酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.32 (s, 1 H, NH), 12.0 (s, 1 H, COOH), 10.9 (s, 1 H
, NH), 7.97 (d, J = 2 HZ, 1 H, h-4), 7.75 (s, 1 H, H-ビニル), 7.23 (dd,
v = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 7.16 (d, v = 2.6 Hz, 1 H), 6.8 (d, J = 8 Hz, 1 H,
H-7), 2.97 (t, J = 7.7 Hz, 2 H, CH2), 2.41 (t, J = 7.7 Hz, 2 H, CH2), 2
.04 (s, 3 H, CH3). MS m/z 375/377.
【０６１２】 実施例２２１：３−［２−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸 ５−メチルイサチン（１５．０ｇ）および６０ｍＬのヒドラジン水和物を１４
０−１６０℃に４時間加熱した。薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサ
ン１：２，シリカゲル）は，出発物質が残っていないことを示した。反応混合物
を室温に冷却し，３００ｍＬの氷水に注加し，６Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。
室温で２日間放置した後，沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下
で乾燥して，６．５ｇ（４７％）の５−メチル−２−オキシインドールを得た。 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.20 (s, br, 1 H, NH-1), 6.99 (s, 1 H, H-4)
, 6.94 (d, J = 8.11 Hz, 1 H, H-6), 6.68 (d, J = 8.11 Hz, 1 H, H-7), 3.39
(s, 2 H, CH2-3), および 2.22 (s, 3 H, CH3-5).
【０６１３】 エタノール（４ｍＬ）中の，５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエ
チル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（５６０
ｍｇ），５−メチル−２−オキシインドール（３００ｍｇ），およびピペリジン
（４滴）を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（５３７ｍｇ）を混合物に
加え，次にこれを９５℃でさらに１時間撹拌した。反応混合物を冷却し，濃縮し
た。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で
洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，４９６ｍｇの４−（２−カルボキシエ
チル）−３−メチル−５−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−イン
ドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を得た。
【０６１４】 エチレングリコール（２ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３
−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（４９６ｍｇ）を，密封
管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間保持した。反応混合物を９０℃に冷
却し，水酸化カリウム（１５７ｍｇ）を加えた。次にこれを９０℃で３０分間撹
拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈
殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，１２８ｍｇ（２９
％）の３−［２−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３
−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸
を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.31 (s, 1 H, NH), 12.07 (s, 1 H, COOH), 10.68 (s, 1
H, NH), 7.59 (s, 1 H), 7.51 (br s, 1 H, H-4), 7.09 (d, J = 2.7 Hz, 1H),
6.91 (br d, J = 8 HZ, 1 H, H-6), 6.73 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-7), 2.93 (t,
J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.41 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.3 (s, CH3-5),
2.04 (s, 3 H, CH3). MS m/z 311 (M+1).
【０６１５】 実施例２２２：３−［２−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロイン
ドール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プ
ロピオン酸 ５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（５６２ｍｇ），５−メトキシ−２−
オキシインドール（３２６ｍｇ），およびピペリジン（２滴）のエタノール（２
ｍＬ）中の混合物を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（５３７ｍｇ）を
加え，温度を９５℃に上昇し，ここで１時間保持した。反応混合物を冷却し，濃
縮した。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，
水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，２４０ｍｇ（６５％）の４−（２
−カルボキシ−エチル）−３−メチル−５−（５−メトキシ−２−オキソ−１，
２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボ
ン酸を得た。
【０６１６】 エチレングリコール（２ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−
３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（２４０ｍｇ）を，密
封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間保持した。反応混合物を９０℃に
冷却し，水酸化カリウム（１ペレット）を加えた。次にこれを９０℃で３０分間
撹拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。
沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，３０．５ｍｇ（
１４％）の３−［２−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドー
ル−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピ
オン酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.38 (s, 1 H, NH), 12.07 (s, 1 H, COOH), 10.59 (s, 1
H, NH), 7.63 (s, 1 H, H-ビニル), 7.1 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 6.75 (d, J =
8 Hz, 1 H, H-7), 6.69 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 3.76 (s, 3 H, OCH3),
2.96 (t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH2), 2.41 (t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH2), 2.04 (s,
3 H, CH3). MS m/z 327 (M+1).
【０６１７】 実施例２２３：３−｛２−［６−（３−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４−メチル−１Ｈ−ピロー
ル−３−イル｝−プロピオン酸 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．７ｇ）を，５ｇの３
−メトキシフェニルボロン酸，３．８ｇの５−ブロモ−２−フルオロニトロベン
ゼン，および１１ｍＬの２Ｍ炭酸ナトリウム溶液の１００ｍＬのトルエン中の混
合物に加えた。混合物を２時間還流し，水で希釈し，酢酸エチルで抽出した。酢
酸エチルを飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮して
，油状固体を得た。この固体をシリカゲルカラムで酢酸エチル：ヘキサンの１：
６混合物を溶出剤として用いて精製して，４．３ｇ（７７％）の４−フルオロ−
３'−メトキシ−３−ニトロビフェニルを得た。
【０６１８】 ジメチルマロネート（９．７ｍＬ）を，５０ｍＬのジメチルスルホキシドに懸
濁した２．０ｇの水素化ナトリウムに滴加した。混合物を１００℃で３５分間撹
拌し，室温に冷却した。５０ｍＬのジメチルスルホキシド中の４−フルオロ−２
'−メトキシ−３−ニトロビフェニル（４．２ｇ）を加え，混合物を１００℃で
１時間撹拌した。反応混合物を冷却し，３００ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶液
で急冷し，酢酸エチルで２回抽出した。抽出物を合わせ，ブラインで洗浄し，無
水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，粗ジメチル３'−メトキシ−３−ニトロ
ビフェニル−４−マロネートを淡黄色固体として得た。
【０６１９】 粗３'−メトキシ−３−ニトロ−ビフェニル−４−マロネートを４５ｍＬの６
Ｎ塩酸中で１１０℃で４日間撹拌し，次に冷却した。形成した沈殿物を濾過によ
り回収し，水およびヘキサンで洗浄し，乾燥して，５．３ｇの３'−メトキシ−
２−ニトロビフェニル−４−酢酸を淡黄褐色固体として得た。
【０６２０】 ３'−メトキシ−３−ニトロビフェニル−４−酢酸（５．２ｇ）をメタノール
に溶解し，０．８ｇの１０％パラジウム担持炭素で室温で３時間水素化した。触
媒を濾過により除去し，メタノールで洗浄し，濾液を合わせ，濃縮して，褐色固
体を得た。この固体をシリカゲルカラムで酢酸エチル：ヘキサン：酢酸の混合物
（３３：６６：１）を溶出剤として用いて精製して，３．０ｇ（４−フルオロ−
３'−メトキシ−３−ニトロビフェニルに基づき７５％）の６−（３−メトキシ
フェニル）−２−オキシインドールを桃色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.39 (s, br, 1 H, NH), 7.35 (t, J = 7.85 Hz
, 1 H), 7.26 (d, J = 7.78 Hz, 1 H), 7.19 (dd, J = 1.22, 7.8 Hz, 1 H), 7.
13-7.16 (m, 1 H), 7.09-7.1 (m, 1 H), 7.01 (d, J = 1.48 Hz, 1 H), 6.90-6.
93 (m, 1 H), 3.8 (s, 3 H, OCH3), 3.49 (s, 2H, CH2). MS m/z (相対強度, %) 240.0 ([M+1]+, 100).
【０６２１】 エタノール（５ｍＬ）中の，５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエ
チル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１
ｍｇ），６−（３−メトキシ−フェニル）−２−オキシインドール（２８７ｍｇ
），およびピペリジン（２滴）を９０℃で一夜撹拌した。沈殿物を濾過し，エタ
ノールで洗浄した。黄橙色固体および水酸化カリウム（４ペレット）をエタノー
ル（３ｍＬ）中で９０℃で２．５時間撹拌した。反応混合物を冷却し，濃縮した
。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗
浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，４１３ｍｇの４−（２−カルボキシエチ
ル）−５−［６−（３−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロイ
ンドール−３−イリデンメチル］−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン
酸を得た。
【０６２２】 エチレングリコール（５ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
５−［６−（３−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドー
ル−３−イリデンメチル］−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（４
１３ｍｇ）を，密封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２．５時間保持した。
反応混合物を９０℃に冷却し，水酸化カリウム（４ペレット）を加えた。次にこ
れを１００℃でさらに２時間撹拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ
塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一
夜乾燥した。粗固体をシリカゲルカラムで酢酸エチル：ヘキサン：氷酢酸（３３
：６６：１）を溶出剤として用いて，７５ｍｇ（２０％）の３−｛２−［６−（
３−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリ
デンメチル］−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル｝−プロピオン酸を橙赤
色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.27 (s, 1 H, NH), 12.06 (s, 1 H, COOH), 10.86 (s, 1
H, NH), 7.76 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.68 (s, 1 H, H-ビニル), 7.36 (t,
J = 8 Hz, 1 H), 7.29 (dd, J = 1.5, 8 Hz, 1 H), 6.92, 7.09, 7.13,7.2 (m,
5 H, Ar-H), 3.82 (s, 3 H, OCH3), 2.96 (t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH2), 2.42 (
t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH2), 1.97 (s, 3H, CH3).
【０６２３】 実施例２２４：３−｛２−［６−（３−エトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４−メチル−１Ｈ−ピロー
ル−３−イル｝−プロピオン酸 ５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１ｍｇ），６−（３−エトキシ
フェニル）−２−オキシインドール（３０４ｍｇ），およびピペリジン（２滴）
のエタノール（５ｍＬ）中の混合物を９０℃で一夜保持した。形成した沈殿物を
濾過し，エタノールで洗浄した。沈殿物である橙色固体を水酸化カリウム（４ペ
レット）とともにエタノール（３ｍＬ）中で９０℃で２．５時間撹拌した。反応
混合物を冷却し，濃縮した。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした
。沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，３７０ｍｇの
４−（２−カルボキシエチル）−５−［６−（３−エトキシフェニル）−２−オ
キソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル］−３−メチル−１Ｈ
−ピロール−２−カルボン酸を得た。
【０６２４】 エチレングリコール（５ｍＬ）に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−５
−［６−（３−エトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール
−３−イリデンメチル］−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（３５
０ｍｇ）を，密封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２．５時間保持した。反
応混合物を１００℃に冷却し，水酸化カリウム（４ペレット）を加えた。次にこ
れを１００℃で２時間撹拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸で
ｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥
した。粗固体をシリカゲルカラムで酢酸エチル：ヘキサン：氷酢酸（３３：６６
：１）を用いて精製して，１４０ｍｇ（４４％）の３−｛２−［６−（３−エト
キシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチ
ル］−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル｝−プロピオン酸を褐色固体とし
て得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.28 (s, 1 H, NH), 12.04 (s, 1 H, COOH), 10.86 (s, 1
H, NH), 7.76 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.68 (s, 1 H, H-ビニル), 7.34 (t,
J = 8 Hz, 1 H), 7.28 (dd, J = 2, 8 Hz, 1 H, H-5), 7.08 (d, J = 2 Hz, 1
H, H-7), 7.18, 7.13, 6.9 (m, 4 H, Ar-H), 4.1 (q, J = 7 Hz, 2 H, OCH 2CH3)
, 2.96 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.43 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.05 (
s, 3 H, CH3), 1.35 (t, J = 7 Hz, 3 H, OCH2CH 3).
【０６２５】 ５．生物学的評価 任意の所定の一連の化合物において，生物学的活性のスペクトルが与えられる
ことが理解されるであろう。好ましい態様においては，本発明は，ＲＴＫ，ＣＴ
Ｋ，およびＳＴＫ活性を調節する能力を示す３−メチリデニル−２−インドリノ
ン類に関する。所望の活性を示す化合物を選択するために用いられるアッセイが
以下に記載される。表２は，記載されるアッセイを用いる，本発明の化合物の試
験の結果を示す。示される結果はいかなる意味においても本発明の範囲を限定す
るものと解釈すべきではない。
【０６２６】
【表２４】
【０６２７】
【表２５】
【０６２８】
【表２６】
【０６２９】
【表２７】
【０６３０】
【表２８】
【０６３１】
【表２９】
【０６３２】 Ａ．アッセイ方法 以下のインビトロアッセイを用いて，本発明の種々の化合物の１つまたはそれ
以上のＰＫに対する活性および効果のレベルを決定することができる。同様にし
て，当該技術分野においてよく知られる技術を用いて，任意のＰＫについて類似
のアッセイを設計することができる。
【０６３３】 本明細書に記載される細胞／触媒アッセイは，ＥＬＩＳＡフォーマットで実施
する。一般的方法は以下のとおりである：天然にまたは組換え的に試験キナーゼ
を発現する細胞に化合物を導入する。選択された時間が経過した後，試験キナー
ゼがレセプターである場合には，レセプターを活性化することが知られているリ
ガンドを加える。細胞を溶解し，あらかじめ酵素的リン酸化反応の基質を認識す
る特異的抗体でコーティングしたＥＬＩＳＡプレートのウエルに溶解物を移す。
細胞溶解物の非基質成分を洗い流し，ホスホチロシンを特異的に認識する抗体で
基質のリン酸化の量を検出し，試験化合物と接触させていない対照細胞と比較す
る。本明細書に記載される細胞／生物学的アッセイは，試験キナーゼの活性化に
応答して生成したＤＮＡの量を測定し，これは一般的な増殖性応答の測定である
。このアッセイの一般的方法は次のとおりである：天然にまたは組換え的に試験
キナーゼを発現する細胞に化合物を導入する。選択された時間が経過した後，試
験キナーゼがレセプターである場合にはレセプターを活性化することが知られて
いるリガンドを加える。少なくとも一夜インキュベーションした後，ＤＮＡ標識
試薬，例えばブロモデオキシ−ウリジン（ＢｒｄＵ）または３Ｈ−チミジンを加
える。抗ＢｒｄＵ抗体でまたは放射活性を測定することにより標識されたＤＮＡ
の量を検出し，試験化合物と接触させていない対照細胞と比較する。
【０６３４】 １．細胞／触媒アッセイ 酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）を用いて，ＰＫ活性の存在
を検出し測定することができる。ＥＬＩＳＡは，例えば，Ｖｏｌｌｅｒ，ｅｔ
ａｌ．，１９８０（"Ｅｎｚｙｍｅ−Ｌｉｎｋｅｄ Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎ
ｔ Ａｓｓａｙ，" Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ
ｏｇｙ，第２版，Ｒｏｓｅ ａｎｄ Ｆｒｉｅｄｍａｎ編，ｐｐ３５９−３７１
Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ
．Ｃ．）に記載の既知のプロトコルに従って実施することができる。 開示されるプロトコルを，特定のＰＫに関する活性を検出するように適合させ
ることができる。例えば，特定のＰＫに関するＥＬＩＳＡ実験を実施するための
好ましいプロトコルは以下に記載される。しかし，ＲＴＫファミリーの他のメン
バー，ならびにＣＴＫおよびＳＴＫに対する化合物の活性を検出するためにこれ
らのプロトコルを適合させることは，当業者の知識の範囲内である。
【０６３５】ＦＬＫ−１アッセイ ＥＬＩＳＡアッセイを実施して，ＦＬＫ−１レセプターのキナーゼ活性，より
詳細にはＦＬＫ−１レセプター上のＴＫ活性の阻害または活性化を測定する。詳
細には，以下のアッセイを実施して，Ｆｌｋ−１を発現するように遺伝子工学処
理された細胞において，ＦＬＫ−１レセプターのキナーゼ活性を測定することが
できる。
【０６３６】材料および方法 ａ． Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇカタログ
Ｎｏ．２５８０５−９６）； ｂ． Ｃａｐｐｅｌヤギ抗ウサギＩｇＧ（カタログＮｏ．５５６４１）； ｃ． ＰＢＳ（ＧｉｂｃｏカタログＮｏ．４５０−１３００ＥＢ）； ｄ． ＴＢＳＷ緩衝液（５０ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ７．２），１５０ｍＭＮａＣｌ
および０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０）； ｅ． エタノールアミン保存液（１０％エタノールアミン（ｐＨ７．０），４℃
で保存）； ｆ． ＨＮＴＧ緩衝液（２０ｍＭＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．５），１５０ｍＭ
ＮａＣｌ，０．２％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００，および１０％グリセロール）； ｇ． ＥＤＴＡ（０．５Ｍ（ｐＨ７．０）１００Ｘ保存液として）； ｈ． オルトバナジウム酸ナトリウム（０．５Ｍ，１００Ｘ保存液として）； ｉ． ピロリン酸ナトリウム（０．２Ｍ，１００Ｘ保存液として）； ｊ． ＮＵＮＣ９６ウエルＶ底ポリプロピレンプレート（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃ
ｉｅｎｔｉｆｉｃカタログＮｏ．ＡＳ−７２０９２）； ｋ． ＮＩＨ３Ｔ３ Ｃ７＃３細胞（ＦＬＫ−１発現細胞）； ｌ． ＤＭＥＭ，１Ｘ高グルコースＬ−グルタミン含有（カタログＮｏ．１１９
６５−０５０）； ｍ． ＦＢＳ，Ｇｉｂｃｏ（カタログＮｏ．１６０００−０２８）； ｎ． Ｌ−グルタミン，Ｇｉｂｃｏ（カタログＮｏ．２５０３０−０１６）； ｏ． ＶＥＧＦ，ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．（カタログＮｏ．１００−２０
）Ｍｉｌｌｉ−ＱｄＨ2Ｏ中１μｇ／１００μｌ保存液として保持し，−２０℃
で保存； ｐ． アフィニティー精製抗ＦＬＫ−１抗血清； ｑ． ホスホチロシン特異的ＵＢ４０モノクローナル抗体（Ｆｅｎｄｌｅｙ，ｅ
ｔ ａｌ．，１９９０，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５０：１５５０−１
５５８を参照）； ｒ． ＥＩＡ等級ヤギ抗マウスＩｇＧ−ＰＯＤ（ＢｉｏＲａｄカタログＮｏ．１
７２−１０１１）； ｓ． ２，２−アジノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−硫酸（ＡＢＴ
Ｓ）溶液（１００ｍＭクエン酸（無水），２５０ｍＭＮａ2ＨＰＯ4（ｐＨ４．０
），０．５ｍｇ／ｍｌＡＢＴＳ（ＳｉｇｍａカタログＮｏ．Ａ−１８８８）），
溶液は，使用まで暗所で４℃で保存しなければならない； ｔ． Ｈ2Ｏ2（３０％溶液）（ＦｉｓｈｅｒカタログＮｏ．Ｈ３２５）； ｕ． ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2（１５ｍｌＡＢＴＳ溶液，２μｌＨ2Ｏ2）使用の５分間
に調製，室温に保持； ｖ． ０．２ＭＨＣｌ保存液，Ｈ2Ｏ中； ｗ． ジメチルスルホキシド（１００％）（ＳｉｇｍａカタログＮｏ．Ｄ−８４
１８）；および ｙ． トリプシン−ＥＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬカタログＮｏ．２５２００−
０４９）
【０６３７】プロトコル １． Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートを，ウエルあたり１．０μ
ｇの，０．１ＭＮａ2ＣＯ3（ｐＨ９．６）中Ｃａｐｐｅｌ抗ウサギＩｇＧ抗体，
でコーティングする。最終容量をウエルあたり１５０μｌとする。プレートを４
℃で一夜コーティングする。プレートは，４℃で保存したとき，２週間まで保存
することができる。 ２． 細胞を適当な培養皿中で成長培地（ＤＭＥＭ，２．０ｍＭＬ−グルタミン
，１０％ＦＢＳを補充）中で，コンフルエントとなるまで３７℃，５％ＣＯ2で
成長させる。 ３． トリプシン処理により細胞を回収し，Ｃｏｒｎｉｎｇ２５８５０ポリスチ
レン９６ウエル丸底細胞プレートに，２００μｌの成長培地中２５，０００細胞
／ウエルで播種する。 ４． 細胞を３７℃，５％ＣＯ2で少なくとも１日成長させる。 ５． 細胞をＤ−ＰＢＳ １Ｘで洗浄する。 ６． ２００μｌ／ウエルの飢餓培地（ＤＭＥＭ，２．０ｍＭ ｌ−グルタミン
，０．１％ＦＢＳ）を加える。３７℃，５％ＣＯ2で一夜インキュベートする。
７． 化合物をポリプロピレン９６ウエルプレート中で飢餓培地を用いて１：２
０に希釈する。対照ウエルで使用するために，ジメチルスルホキシドを１：２０
に希釈する。 ８． ９６ウエル細胞培養プレートから飢餓培地を除去し，１６２μｌの新たに
調製した飢餓培地を各ウエルに加える。 ９． １：２０に希釈された化合物希釈物１８μｌ（工程７より）を各ウエルに
加え，１：２０ジメチルスルホキシド希釈物を対照ウエルに加え（＋／−ＶＥＧ
Ｆ），細胞刺激の後，１：２００の最終希釈とする。最終ジメチルスルホキシド
は０．５％である。プレートを３７℃，５％ＣＯ2で２時間インキュベートする
。 １０． プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合抗体をＥＬＩ
ＳＡプレートから除去する。ＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミン，ｐＨ７．０
で３回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて，過剰の液体およ
び気泡を除去する。 １１． ウエルあたり１５０μｌのＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミン，ｐＨ
７．０でプレートをブロッキングする。プレートをマイクロタイタープレート振
盪器で振盪しながら，３０分間インキュベートする。 １２． プレートを工程１０で記載したように３回洗浄する。 １３． ０．５μｇ／ウエルのアフィニティー精製抗ＦＬＵ−１ポリクローナル
ウサギ抗血清を加える。ＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミンｐＨ７．０で最終
容量を１５０μｌ／ウエルとする。プレートを振盪しながら３０分間インキュベ
ートする。 １４． 細胞に１８０μｌの飢餓培地を加え，２０μｌ／ウエルの１０．０ｍＭ
オルトバナジウム酸ナトリウムおよび５００ｎｇ／ｍｌＶＥＧＦ（最終濃度；ウ
エルあたり１．０ｍＭオルトバナジウム酸ナトリウムおよび５０ｎｇ／ｍｌＶＥ
ＧＦ）で３７℃，５％ＣＯ2で８分間細胞を刺激する。陰性対照ウエルには飢餓
培地のみを加える。 １５． ８分後，培地を細胞から除去し，２００μｌ／ウエルのＰＢＳで１回洗
浄しなければならない。 １６． １５０μｌ／ウエルのＨＮＴＧ中で室温で５分間振盪しながら細胞を溶
解させる。ＨＮＴＧ配合物はオルトバナジウム酸ナトリウム，ピロリン酸ナトリ
ウムおよびＥＤＴＡを含む。 １７． ＥＬＩＳＡプレートを工程１０に記載したように３回洗浄する。 １８． 細胞溶解物を細胞プレートからＥＬＩＳＡプレートに移し，振盪しなが
ら２時間インキュベートする。細胞溶解物を移すには，ウエルを掻きながらピペ
ットアップおよびダウンを行う。 １９． プレートを工程１０に記載したように３回洗浄する。 ２０． ＥＬＩＳＡプレートを０．０２μｇ／ウエルのＴＢＳＷ＋０５％エタノ
ールアミン中のＵＢ４０とともにインキュベートする。最終容量を１５０μｌ／
ウエルとする。振盪しながら３０分間インキュベートする。 ２１． プレートを工程１０に記載したように３回洗浄する。 ２２． ＥＬＩＳＡプレートを，ＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミン，ｐＨ７
．０中で１：１０，０００に希釈したＥＩＡ等級ヤギ抗マウスＩｇＧコンジュゲ
ート西洋ワサビペルオキシダーゼとともにインキュベートする。最終容量を１５
０μｌ／ウエルとする。振盪しながら３０分間インキュベートする。 ２３． 工程１０で記載したようにプレートを洗浄する。 ２４． １００μｌのＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液をウエルに加える。振盪しながら１
０分間インキュベートする。 ２５． １００μｌの０．２ＭＨＣｌを０．１ＭＨＣｌ最終濃度となるように加
えて，発色反応を停止する。室温で１分間振盪する。ゆっくりした空気の流れで
気泡を除去し，ＥＬＩＳＡプレートをＥＬＩＳＡプレートリーダーで４１０ｎｍ
で読む。
【０６３８】全細胞におけるＥＧＦレセプター−ＨＥＲ２キメラレセプターアッセイ ＥＧＦＲ−ＮＩＨ３Ｔ３全細胞中のＨＥＲ２キナーゼ活性を以下に記載するよ
うにして測定した。
【０６３９】材料および試薬 ａ． ＥＧＦ：保存液濃度：１６．５ＩＬＭ；ＥＧＦ２０１，ＴＯＹＯＢＯ，Ｃ
ｏ．，Ｌｔｄ．Ｊａｐａｎ ｂ． ０５−１０１（ＵＢＩ）（ＥＧＦＲ細胞外ドメインを認識するモノクロー
ナル抗体） ｃ． 抗ホスホチロシン抗体（抗Ｐｔｙｒ）（ポリクローナル）（Ｆｅｎｄｌｅ
ｙ，ｅｔ ａｌ．，（上掲）を参照） ｄ． 検出抗体：ヤギ抗ウサギｌｇＧ西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲー
ト，ＴＡＧＯ，Ｉｎｃ．，Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ ｅ． ＴＢＳＴ緩衝液： Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．２ ５０ｍＭ ＮａＣｌ １５０ｍＭ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．１ ｆ． ＨＮＴＧ ５Ｘ保存液： ＨＥＰＥＳ ０．１Ｍ ＮａＣｌ ０．７５Ｍ グリセロール ５０％ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ １．０％ ｇ． ＡＢＴＳ保存液： クエン酸 １００ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4 ２５０ｍＭ ＨＣｌ（濃） ０．５ｍＭ ＡＢＴＳ* ０．５ｍｇ／ｍｌ ＊（２，２'−アジノビス（３−エチルベンズチアゾリンスルホン酸）） 溶液は使用するまで暗所で４℃で保存する。 ｈ． 試薬保存液： ＥＤＴＡ １００ｍＭ ｐＨ７．０ Ｎａ3ＶＯ4 ０．５Ｍ Ｎａ4（Ｐ2Ｏ7） ０．２Ｍ
【０６４０】方法 ＥＬＩＳＡプレートのプレコート １． ＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ，９６ウエル，Ｃａｔ．＃２５８０
５−９６）をウエルあたりＰＢＳ中０．５μｇの０５−１０１抗体で１００μｌ
の最終容量／ウエルでコーティングし，４℃で一夜保存する。コーティングした
プレートは４℃で保存した場合，１０日間まで良好である。 ２． 使用の日，コーティング緩衝液を除去し，１００μｌのブロッキング緩衝
液（ＰＢＳ中５％Ｃａｒｎａｔｉｏｎインスタント脱脂乾燥ミルク）で置き換え
る。プレートを室温で（約２３℃から２５℃）振盪しながら３０分間インキュベ
ートする。使用の直前に，ブロッキング緩衝液を除去し，プレートをＴＢＳＴ緩
衝液で４回洗浄する。
【０６４１】細胞播種 １． このアッセイには，ＥＧＦＲ細胞外ドメインおよび細胞内ＨＥＲ２キナー
ゼドメインを含有するキメラレセプターを過剰発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞株を用
いることができる。 ２． ８０−９０％コンフルエントの培養皿を実験用に選択する。細胞をトリプ
シン処理し，１０％ウシ胎児血清を加えることにより反応を停止させる。細胞を
ＤＭＥＭ培地（１０％ＣＳ ＤＭＥＭ培地）中に懸濁し，１５００ｒｐｍで室温
で５分間１回遠心分離する。 ３． 細胞を播種培地（ＤＭＥＭ，０．５％ウシ血清）に再懸濁し，トリパンブ
ルーを用いて細胞を計数する。９０％より高い生存性が許容される。細胞をＤＭ
ＥＭ培地（０．５％ウシ血清）中で，ウエルあたり１０，０００細胞の密度で，
ウエルあたり１００μｌで，９６ウエルマイクロタイタープレートに播種する。
播種した細胞を５％ＣＯ2中で３７℃で約４０時間インキュベートする。
【０６４２】アッセイ方法 １． 播種した細胞を，倒立顕微鏡を用いてコンタミネーションについて検査す
る。薬剤保存液（ＤＭＳＯ中１０ｍｇ／ｍｌ）をＤＭＥＭ培地で１：１０に希釈
し，次に５μｌを，最終薬剤希釈１：２００および最終ＤＭＳＯ濃度１％となる
ように，ＴＢＳＴウエルに移す。対照ウエルにはＤＭＳＯのみを加える。５％Ｃ
Ｏ2中で３７℃で２時間インキュベートする。 ２． ＥＧＦリガンドの調製：保存液ＥＧＦを，１０μｌ希釈ＥＧＦ（１：１２
希釈）を移したときに１００ｎＭの最終濃度が得られるように，ＤＭＥＭ中で希
釈する。 ３． ウエルあたり１００μｌに十分なように新たにＨＮＴＧ*を調製し，氷上
に置く。 ＨＮＴＧ*（１０ｍｌ）： ＨＮＴＧ保存液 ２．０ｍｌ ｍｉｌｌｉ−ＱＨ2Ｏ ７．３ｍｌ ＥＤＴＡ，１００ｍＭ，ｐＨ７．０ ０．５ｍｌ Ｎａ3ＶＯ4，０．５Ｍ ０．１ｍｌ Ｎａ4（Ｐ2Ｏ7），０．２Ｍ ０．１ｍｌ ４． 薬剤とともに１２０分間インキュベーションした後，調製したＳＧＦリガ
ンドを，ウエルあたり１０μｌ，最終濃度１００ｎＭとなるように細胞に加える
。対照ウエルにはＤＭＥＭのみを加える。室温で５分間振盪しながらインキュベ
ートする。 ５． 薬剤，ＥＧＦ，およびＤＭＥＭを除去する。細胞をＰＢＳで２回洗浄する
。ウエルあたり１００μｌのＨＮＴＧ*を細胞に移す。氷上に５分間放置する。
この間に，ブロッキング緩衝液を他のＥＬＩＳＡプレートから除去し，上述した
ようにＴＢＳＴで洗浄する。 ６． マイクロピペッターにぴったりと固定したピペットチップを用いて，細胞
をプレートからはがし，ＨＮＴＧ*溶解緩衝液を繰り返し吸引および分配するこ
とにより，細胞物質をホモジナイズする。コーティングし，ブロッキングし，洗
浄したＥＬＩＳＡプレートに溶解物を移す。振盪しながら室温で１時間インキュ
ベートする。 ７． 溶解物を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに希釈した抗Ｐｔｙｒ抗
体をウエルあたり１００μｌでＥＬＩＳＡプレートに移す。抗Ｐｔｙｒ抗血清（
ＴＢＳＴ中１：３０００希釈）の存在下で，振盪しながら室温で３０分間インキ
ュベートする。 ８． 抗Ｐｔｙｒ抗体を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに希釈したＴＡ
ＧＯ抗ウサギＩｇＧ抗体をＥＬＩＳＡプレートにウエルあたり１００μｌで移す
。振盪しながら室温で３０分間インキュベートする（抗ウサギＩｇＧ抗体：ＴＢ
ＳＴ中１：３０００希釈）。 ９． ＴＡＧＯ検出抗体を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに調製したＡ
ＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液をウエルあたり１００μｌでＥＬＩＳＡプレートに移す。振
盪しながら室温で２０分間インキュベートする（ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液：１０ｍ
ｌＡＢＴＳ保存液中１．０μｌの３０％Ｈ2Ｏ2）。 １０． ５０μｌの５Ｎ Ｈ2ＳＯ4を加えることにより反応を停止し（任意），
４１０ｎｍでＯ．Ｄ．を測定する。 １１． 最大ホスホチロシンシグナルは，陰性対照の値を陽性対照の値から差し
引くことにより決定する。次に，抽出物含有ウエルについて、陰性対照を差し引
いた後にホスホチロシン含有量のパーセント阻害を計算する。
【０６４３】ＰＤＧＦ−Ｒアッセイ すべての細胞培養培地，グルタミンおよびウシ胎児血清は，特に記載しないか
ぎり，Ｇｉｂｃｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌ
ａｎｄ，ＮＹ）から購入した。すべての細胞は，９０−９５％空気および５−１
０％ＣＯ2の湿潤雰囲気下で３７℃で成長させた。すべての細胞株は，日常的に
１週間に２回サブカルチャーし，Ｍｙｃｏｔｅｃｔ法（Ｇｉｂｃｏ）によりマイ
コプラズマがないことを確認した。 ＥＬＩＳＡアッセイについては，細胞（Ｕ１２４２，Ｊｏｓｅｐｈ Ｓｃｈｌ
ｅｓｓｉｎｇｅｒ，ＮＹＵから入手）を成長培地（ＭＥＭ，１０％ＦＢＳ，ＮＥ
ＡＡ，１ｍＭ ＮａＰｙｒおよび２ｍＭＧＬＮ含有）で８０−９０％コンフルエ
ントまで成長させ，９６ウエル組織培養プレートに０．５％血清中で，ウエルあ
たり２５，０００−３０，０００細胞を播種する。０．５％血清含有培地で一夜
インキュベーションした後，細胞を無血清培地に移し，５％ＣＯ2，３７℃イン
キュベーター中で試験化合物で２時間処理する。次に細胞をリガンドで５−１０
分間刺激し，ＨＮＴＧ（２０ｍＭＨｅｐｅｓ，１５０ｍＭＮａＣｌ，１０％グリ
セロール，５ｍＭＥＤＴＡ，５ｍＭＮａ3ＶＯ4，０．２％ＴｒｉｔｏｎＸ−１０
０，および２ｍＭＮａＰｙｒ）で溶解する。細胞溶解物（ＰＢＳ中０．５ｍｇ／
ウエル）をレセプター特異的抗体であらかじめ被覆し，ＴＢＳＴ（５０ｍＭＴｒ
ｉｓ−ＨＣｌｐＨ７．２，１５０ｍＭＮａＣｌおよび０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−
１００）中５％ミルクで室温で３０分間ブロッキングしたＥＬＩＳＡプレートに
移す。溶解物を振盪しながら室温で１時間インキュベートする。プレートをＴＢ
ＳＴで４回洗浄し，次にポリクローナル抗ホスホチロシン抗体とともに室温で３
０分間インキュベートする。プレートをＴＢＳＴで４回すすぐことにより過剰の
抗ホスホチロシン抗体を除去する。ＥＬＩＳＡプレートにヤギ抗ウサギＩｇＧ抗
体を室温で３０分間加え，次にＴＢＳＴでさらに４回すすぐ。ＡＢＴＳ（１００
ｍＭクエン酸，２５０ｍＭＮａ2ＨＰＯ4および０．５ｍｇ／ｍＬ２，２'−アジ
ノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−硫酸）），およびＨ2Ｏ2（１．２
ｍＬ３０％Ｈ2Ｏ2を１０ｍｌＡＢＴＳに加える）をＥＬＩＳＡプレートに加えて
発色を開始させる。ＡＢＴＳ添加の約１５から３０分後，４１０ｎｍおよび６３
０ｎｍの参照波長における吸光度を記録する。
【０６４４】ＩＧＦ−Ｉレセプターアッセイ 以下のプロトコルを用いて，ＩＧＦ−Ｉレセプター上のホスホチロシンレベル
を測定することができ，これはＩＧＦ−Ｉレセプターチロシンキナーゼ活性を示
す。
【０６４５】材料および試薬 ａ． このアッセイにおいて用いる細胞株は，ＩＧＦ−１レセプターを過剰発現
するように遺伝子工学処理された細胞株３Ｔ３／ＩＧＦ−１Ｒである。 ｂ． ＮＩＨ３Ｔ３／ＩＧＦ−１Ｒを，５％ＣＯ2，３７℃のインキュベーター
で成長させる。成長培地はＤＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ（熱不活性化）＋２ｍＭＬ−
グルタミンである。 ｃ． アフィニティー精製抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体１７−６９ ｄ． Ｄ−ＰＢＳ： ＫＨ2ＰＯ4 ０．２０ｇ／ｌ Ｋ2ＨＰＯ4 ２．１６ｇ／ｌ ＫＣｌ ０．２０ｇ／ｌ ＮａＣｌ ８．００ｇ／ｌ（ｐＨ７．２） ｅ． ブロッキング緩衝液：ＴＢＳＴプラス５％ミルク（Ｃａｒｎａｔｉｏｎイ
ンスタント脱脂乾燥ミルク） ｆ． ＴＢＳＴ緩衝液： Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ５０ｍＭ ＮａＣｌ １５０ｍＭ（ｐＨ７．２／ＨＣｌ １０Ｎ） ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．１％ ＴＢＳ（１０Ｘ）の保存溶液を調製し，希釈の間に緩衝液にＴｒｉｔｏｎＸ−１
００を加える。 ｇ． ＨＮＴＧ緩衝液： ＨＥＰＥＳ ２０ｍＭ ＮａＣｌ １５０ｍＭ（ｐＨ７．２／ＨＣｌ １Ｎ） グリセロール １０％ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．２％ 保存溶液（５Ｘ）を調製し，４℃で保存する。 ｈ． ＥＤＴＡ／ＨＣｌ：０．５ＭｐＨ７．０（ＮａＯＨ），１００Ｘ保存液と
して ｉ． Ｎａ3ＶＯ4：１００Ｘ保存液として０．５Ｍ，アリコートは−８０℃で保
存する。 ｊ． Ｎａ4Ｐ2Ｏ7：１００Ｘ保存液として０．２Ｍ ｋ． インスリン様成長因子−１，Ｐｒｏｍｅｇａ（Ｃａｔ＃Ｇ５１１１） ウサギポリクローナル抗ホスホチロシン抗血清 ｍ． ヤギ抗ウサギＩｇＧ，ＰＯＤコンジュゲート（検出抗体），Ｔａｇｏ（Ｃ
ａｔ．Ｎｏ．４５２０，ＬｏｔＮｏ．１８０２）：Ｔａｇｏ，Ｉｎｃ．，Ｂｕｒ
ｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ ｎ． ＡＢＴＳ（２，２'−アジノビス（３−エチルベンズチアゾリン硫酸））
溶液： クエン酸 １００ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4 ２５０ｍＭ（ｐＨ４．０／１ＮＨＣｌ） ＡＢＴＳ ０．５ｍｇ／ｍｌ ＡＢＴＳ溶液は暗所で４℃で保存しなければならない。溶液は緑色に変色したと
きは廃棄しなければならない。 ｏ． 過酸化水素：３０％溶液を暗所で４℃で保存する。
【０６４６】方法 以下のすべての工程は，特に記載しないかぎり，室温で実施する。すべてのＥ
ＬＩＳＡプレート洗浄は，プレートを水道水で３回すすぎ，ＴＢＳＴで１回すす
ぐことにより実施する。プレートを軽くたたいてペーパータオルで乾燥させる。
【０６４７】細胞播種 ： １． 組織培養皿（Ｃｏｒｎｉｎｇ２５０２０−１００）で８０−９０％コンフ
ルエントまで成長させた細胞を，トリプシン−ＥＤＴＡ（０．２５％，０．５ｍ
ｌ／Ｄ−１００，ＧＩＢＣＯ）で回収する。 ２． 細胞を新鮮なＤＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ＋２ｍＭＬ−グルタミン中に再懸濁
し，９６ウエル組織培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ，２５８０６−９６）に２０
，０００細胞／ウエル（１００μｌ／ウエル）で移す。１日インキュベートし，
次に培地を無血清培地（９０／μｌ）で置き換え，５％ＣＯ2，３７℃で一夜イ
ンキュベートする。
【０６４８】ＥＬＩＳＡプレートコーティングおよびブロッキング ： １． ＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ２５８０５−９６）を，１００μｌ
ＰＢＳ中の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体で０．５μｇ／ウエルで少なくとも２時間コーテ
ィングする。 ２． コーティング溶液を除去し，１００μｌのブロッキング緩衝液で置き換え
，３０分間振盪する。ブロッキング緩衝液を除去し，溶解物を加える直前にプレ
ートを洗浄する。
【０６４９】アッセイ方法 ： １． 薬剤は，無血清条件で試験する。 ２． 薬剤保存液（１００％ＤＭＳＯ中）を９６ウエルポリプロピレンプレート
中でＤＭＥＭで１：１０に希釈し，１０μｌ／ウエルのこの溶液を細胞に移して
，最終薬剤希釈１：１００，最終ＤＭＳＯ濃度１．０％とする。細胞を５％ＣＯ 2 中で３７℃で２時間インキュベートする。 ３． 新鮮な細胞溶解緩衝液（ＨＮＴＧ＊）を調製する。 ＨＮＴＧ ２ｍｌ ＥＤＴＡ ０．１ｍｌ Ｎａ3ＶＯ4 ０．１ｍｌ Ｎａ4（Ｐ2Ｏ7） ０．１ｍｌ Ｈ2Ｏ ７．３ｍｌ ４． 薬剤を２時間インキュベートした後，１０μｌ／ウエルのＰＢＳ中２００
ｎＭＩＧＦ−１リガンドを細胞に移し（最終濃度２０ｎＭ），５％ＣＯ2で３７
℃で１０分間インキュベートする。 ５． 培地を除去し，１００μｌ／ウエルのＨＮＴＧ＊を加え，１０分間振盪す
る。細胞を顕微鏡下で観察して，これらが適切に溶解したか否かを見る。 ６． １２チャネルピペットを用いて細胞をプレートから掻き取り，吸引と分配
を繰り返すことにより溶解物をホモジナイズする。すべての溶解物を抗体コーテ
ィングＥＬＩＳＡプレートに移し，１時間振盪する。 ７． 溶解物を除去し，プレートを洗浄し，抗ｐＴｙｒ（ＴＢＳＴ中１：３，０
００）を１００μｌ／ウエルで移し，３０分間振盪する。 ８． 抗ｐＴｙｒを除去し，プレートを洗浄し，ＴＡＧＯ（ＴＢＳＴ中１：３，
０００）を１００μｌ／ウエルで移し，３０分間振盪する。 ９． 検出抗体を除去し，プレートを洗浄し，新鮮なＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2（１．２
μｌＨ2Ｏ2を１０ｍｌＡＢＴＳに加える）を１００μｌ／ウエルでプレートに移
して，発色を開始させる。 １０． ＤｙｎａｔｅｃＭＲ５０００で参照波長６３０ｎｍで４１０ｎｍのＯＤ
を測定する。
【０６５０】ＥＧＦＲアッセイ ヒトＥＧＦ−Ｒを発現するよう遺伝子工学処理された細胞中のＥＧＦレセプタ
ーキナーゼ活性を以下に記載するように測定することができる。
【０６５１】材料および試薬 ａ． ＥＧＦリガンド：保存液濃度＝１６．５μＭ；ＥＧＦ２０１，ＴＯＹＯＢ
Ｏ，Ｃｏ．，Ｌｔｄ．Ｊａｐａｎ ｂ． ０５−１０１（ＵＢＩ）（ＥＧＦＲ細胞外ドメインを認識するモノクロー
ナル抗体） ｃ． 抗ホスホチロシン抗体（抗Ｐｔｙｒ）（ポリクローナル） ｄ． 検出抗体：ヤギ抗ウサギｌｇＧ西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲー
ト，ＴＡＧＯ，Ｉｎｃ．，Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ ｅ． ＴＢＳＴ緩衝液： Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７ ５０ｍＭ ＮａＣｌ １５０ｍＭ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．１ ｆ． ＨＮＴＧ ５Ｘ保存液： ＨＥＰＥＳ ０．１Ｍ ＮａＣｌ ０．７５Ｍ グリセロール ５０ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ １．０％ ｇ． ＡＢＴＳ保存液： クエン酸 １００ｍＭ ＮａＶＯ4 ２５０ｍＭ ＨＣｌ（濃） ４．０ｐＨ ＡＢＴＳ* ０．５ｍｇ／ｍｌ 溶液は使用するまで暗所で４℃で保存する。 ｈ． 試薬保存液： ＥＤＴＡ １００ｍＭ ｐＨ７．０ Ｎａ3ＶＯ4 ０．５Ｍ Ｎａ4（Ｐ2０7） ０．２Ｍ
【０６５２】方法 ＥＬＩＳＡプレートのプレコート １． ＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ，９６ウエル，Ｃａｔ．＃２５８０
５−９６）をウエルあたりＰＢＳ中０．５μｇ，１５０μｌ最終容量／ウエルの
０５−１０１抗体でコーティングし，４℃で一夜保存する。コーティングしたプ
レートは４℃で保存した場合１０日間まで良好に使用しうる。 ２． 使用の日，コーティング緩衝液を除去し，ブロッキング緩衝液（ＰＢＳ中
５％Ｃａｒｎａｔｉｏｎインスタント脱脂乾燥ミルク）で置き換える。プレート
を振盪しながら室温（約２３℃−２５℃）で３０分間インキュベートする。使用
の直前に，ブロッキング緩衝液を除去し，プレートをＴＢＳＴ緩衝液で４回洗浄
する。
【０６５３】細胞播種 １． このアッセイにはＮＩＨ３Ｔ３／Ｃ７細胞株（Ｈｏｎｅｇｇｅｒ，ｅｔ
ａｌ．，Ｃｅｌｌ５１：１９９−２０９，１９８７）を用いることができる。 ２． ８０−９０％コンフルエントの皿を実験用に選択する。細胞をトリプシン
処理し，１０％ＣＳ ＤＭＥＭ培地を加えることにより反応を停止させる。細胞
をＤＭＥＭ培地（１０％ＣＳ ＤＭＥＭ培地）中に懸濁し，１０００ｒｐｍで室
温で５分間，１回遠心分離する。 ３． 細胞を播種培地（ＤＭＥＭ，０．５％ウシ血清）に再懸濁し，トリパンブ
ルーを用いて細胞を計数する。９０％を越える生存率が許容範囲である。細胞を
９６ウエルマイクロタイタープレート上で，ＤＭＥＭ培地（０．５％ウシ血清）
中に，ウエルあたり１０，０００細胞の密度でウエルあたり１００μｌで播種す
る。播種した細胞を５％ＣＯ2，３７℃で約４０時間インキュベートする。
【０６５４】アッセイ方法 １． 倒立顕微鏡を用いて，播種した細胞のコンタミネーションを調べる。試験
化合物保存液（ＤＭＳＯ中１０ｍｇ／ｍｌ）をＤＭＥＭ培地中で１：１０に希釈
し，次に５μｌを試験ウエルに移して，１：２００の最終薬剤希釈および１％の
最終ＤＭＳＯ濃度とする。対照ウエルにはＤＭＳＯのみを加える。５％ＣＯ2，
３７℃で１時間インキュベートする。 ２． ＥＧＦリガンドの調製：保存液ＥＧＦを，１０μｌの希釈ＥＧＦ（１：１
２希釈）を移したときに２５ｎＭの最終濃度が得られるように，ＤＭＥＭ中で希
釈する。 ３． ウエルあたり１００μｌに十分なように新鮮なＨＮＴＧ*１０ｍｌを調製
する。ＨＮＴＧ＊は以下のものを含む：ＨＮＴＧ保存液（２．０ｍｌ），ｍｉｌ
ｌｉ−ＱＨ2Ｏ（７．３ｍｌ），ＥＤＴＡ，１００ｍＭ，ｐＨ７．０（０．５ｍ
ｌ），Ｎａ3ＶＯ4０．５Ｍ（０．１ｍｌ）およびＮａ4（Ｐ2Ｏ7），０．２Ｍ（
０．１ｍｌ） ４． 氷上に置く。 ５． 薬剤とともに２時間インキュベーションした後，調製したＥＧＦリガンド
を，ウエルあたり１０μｌで，２５ｎＭの最終濃度となるように細胞に加える。
対照ウエルにはＤＭＥＭのみを加える。振盪しながら室温で５分間インキュベー
トする。 ６． 試験化合物，ＥＧＦおよびＤＭＥＭを除去する。細胞をＰＢＳで２回洗浄
する。ＨＮＴＧ*をウエルあたり１００μｌで細胞に移す。氷上に５分間置く。
その間に，他のＥＬＩＳＡプレートからブロッキング緩衝液を除去し，上述した
ようにＴＢＳＴで洗浄する。 ７. マイクロピペッターにぴったりと固定したピペットチップを用いて，細胞
をプレートからはがし，ＨＮＴＧ*溶解緩衝液を繰り返し吸引および分配するこ
とにより，細胞物質をホモジナイズする。コーティングし，ブロッキングし，洗
浄したＥＬＩＳＡプレートに溶解物を移す。振盪しながら室温で１時間インキュ
ベートする。 ８． 溶解物を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに希釈した抗Ｐｔｙｒ抗
体をウエルあたり１００μｌでＥＬＩＳＡプレートに移す。抗Ｐｔｙｒ抗血清（
ＴＢＳＴ中１：３０００希釈）の存在下で，振盪しながら室温で３０分間インキ
ュベートする。 ９． 抗Ｐｔｙｒ抗体を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに希釈したＴＡ
ＧＯ３０抗ウサギＩｇＧ抗体をＥＬＩＳＡプレートにウエルあたり１００μｌで
移す。振盪しながら室温で３０分間インキュベートする（抗ウサギＩｇＧ抗体：
ＴＢＳＴ中１：３０００希釈）。 １０． 検出抗体を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに調製したＡＢＴＳ
／Ｈ2Ｏ2溶液をウエルあたり１００μｌでＥＬＩＳＡプレートに移す。室温で２
０分間インキュベートする（ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液：１０ｍｌＡＢＴＳ保存液中
１．２μｌの３０％Ｈ2Ｏ2）。 １１． ５０μｌの５ＮＨ2ＳＯ4を加えることにより反応を停止し（任意），４
１０ｎｍでＯ．Ｄ．を測定する。 １２． 最大ホスホチロシンシグナルは，陰性対照の値を陽性対照の値から差し
引くことにより決定する。次に，陰性対照を差し引いた後，抽出物含有ウエルに
ついてのホスホチロシン含有量のパーセント阻害を計算する。
【０６５５】Ｍｅｔ自己リン酸化アッセイ このアッセイは，Ｍｅｔレセプター上のＭｅｔ蛋白質チロシンキナーゼレベル
を分析することにより，Ｍｅｔチロシンキナーゼ活性を決定する
【０６５６】試薬 ａ． ＨＮＴＧ（５Ｘ保存溶液）：２３．８３ｇＨＥＰＥＳおよび４３．８３ｇ
ＮａＣｌを約３５０ｍｌｄＨ2Ｏに溶解する。ＨＣｌまたはＮａＯＨでｐＨを７
．２に調節し，５００ｍｌグリセロールおよび１０ｍｌＴｒｉｔｏｎＸ−１００
を加え，混合し，ｄＨ2Ｏを加えて総容量を１Ｌとする。１Ｘ作業溶液１Ｌを作
成するためには，２００ｍｌの５Ｘ保存溶液を８００ｍｌｄＨ2Ｏに加え，必要
に応じてｐＨを調べて調節し，４℃で保存する。 ｂ． ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水），Ｇｉｂｃｏ Ｃａｔ．＃４５
０−１３００ＥＢ（１Ｘ溶液） ｃ． ブロッキング緩衝液：５００ｍｌｄＨ2Ｏ中に，１００ｇＢＳＡ，１２．
１ｇＴｒｉｓ−ｐＨ７．５，５８．４４ｇＮａＣｌおよび１０ｍｌＴｗｅｅｎ−
２０を加え，希釈して総容量１Ｌとする。 ｄ． キナーゼ緩衝液：５００ｍｌｄＨ2Ｏに，１２．１ｇＴＲＩＳ（ｐＨ７．
２），５８．４ｇＮａＣｌ，４０．７ｇＭｇＣｌ2および１．９ｇＥＧＴＡを加
え，ｄＨ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｅ． ＰＭＳＦ（フッ化フェニルメチルスルホニル），Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃
Ｐ−７６２６，４３５．５ｍｇに１００％エタノールを総容量２５ｍｌとなるよ
うに加え，ボルテックスする。 ｆ． ＡＴＰ（細菌起源），Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃Ａ−７６９９，粉末を−２
０℃で保存する；作業溶液を作成するためには，３．３１ｍｇを１ｍｌｄＨ2Ｏ
中に溶解する。 ｇ． ＲＣ−２０Ｈ ＨＲＰＯコンジュゲート化抗ホスホチロシン，Ｔｒａｎｓ
ｄｕｃｔｉｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｃａｔ．＃Ｅ１２０Ｈ ｈ． Ｐｉｅｒｃｅ １−Ｓｔｅｐ（商標）Ｔｕｒｂｏ−ＴＭＢ−ＥＬＩＳＡ（
３，３'，５，５'−テトラメチルベンジジン），Ｐｉｅｒｃｅ Ｃａｔ．＃３４
０２２ ｉ． Ｈ2ＳＯ4，濃硫酸１ｍｌ（１８Ｎ）を３５ｍｌｄＨ2Ｏに加える。 ｊ． ＴＲＩＳ ＨＣＬ，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ１５２−５；材料１
２１．１４ｇに６００ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏを加え，ＨＣｌでｐＨを７．
５（または７．２）に調節し，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで容量を１Ｌとする。 ｋ． ＮａＣｌ，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ２７１−１０，５Ｍ溶液を作成
する。 ｌ． Ｔｗｅｅｎ−２０，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ３３７−５００ ｍ． Ｎａ3ＶＯ4，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ４５４−５０，材料１．８ｇ
に８０ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏを加え，ＨＣｌまたはＮａＯＨでｐＨを１０
．０に調節し，電子レンジで沸騰させ，冷却し，ｐＨを調べ，ｐＨが１０．０で
安定となるまでこの工程を繰り返し，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏを加えて総容量１０
０ｍｌとし，１ｍｌアリコートを作成し，−８０℃で保存する。 ｎ． ＭｇＣｌ2，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｍ３３−５００，１Ｍ溶液を作
成する。 ｏ． ＨＥＰＥＳ，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ３１０−５００，２００ｍ
ｌＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，材料５９．６ｇを加え，ｐＨを７．５に調節し，総
容量２５０ｍｌとし，濾過滅菌する。 ｐ． アルブミン，ウシ（ＢＳＡ），Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃Ａ−４５０３，材
料３０ｇに滅菌蒸留水を加えて総容量３００ｍｌとし，４℃で保存する。 ｑ． ＴＢＳＴ緩衝液：１Ｌの目盛り付きシリンダー中の約９００ｍｌのｄＨ2
Ｏに６．０５７ｇＴＲＩＳおよび８．７６６ｇＮａＣｌを加え，溶解したとき，
ＨＣｌでｐＨを７．２に調節し，１．０ｍｌＴｒｉｔｏｎＸ−１００を加え，ｄ
Ｈ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｒ． ヤギアフィニティー精製抗体ウサギＩｇＧ（全分子），Ｃａｐｐｅｌ Ｃ
ａｔ．＃５５６４１ ｓ． 抗ｈ−Ｍｅｔ（Ｃ−２８）ウサギポリクローナルＩｇＧ抗体，Ｓａｎｔａ
Ｃｒｕｚ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃａｔ．＃ＳＣ−１６１ ｔ． 過渡的にトランスフェクションされたＥＧＦＲ／Ｍｅｔキメラ細胞（ＥＭ
Ｒ）（Ｋｏｍａｄａ，ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，８：２３８１−２３９
０（１９９３） ｕ． 炭酸ナトリウム緩衝液，（Ｎａ2ＣＯ4，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ４
９５）：材料１０．６ｇに８００ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏを加え，溶解した
とき，ＮａＯＨでｐＨを９．６に調節し，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１Ｌと
し，濾過し，４℃で保存する。
【０６５７】方法 以下の工程は，特に記載のない限り，全て室温で実施する。ＥＬＩＳＡプレー
ト洗浄は全てＴＢＳＴで４回すすぐことにより行う。
【０６５８】ＥＭＲ溶解 この方法は，レセプター捕捉の開始の前夜または直前に実施することができる
。 １． 溶解物を３７℃の水浴中で渦巻き動作により最後の結晶が消失するまで急
速に溶解する。 ２． 細胞ペレットを１ｍＭＰＭＳＦを含有する１Ｘ ＨＮＴＧ中で溶解する。
１５ｃｍ皿の細胞あたり３ｍｌのＨＮＴＧを用いる。計算したＨＮＴＧ容量の１
／２を加え，管を１分間ボルテックスし，残量のＨＮＴＧを加え，さらに１分間
ボルテックスする。 ３． 管の釣り合いをとり，１０，０００ｘｇ，１０分間，４℃で遠心分離する
。 ４． 上清をプールし，アリコートを除去して蛋白質測定を行う。 ５． プールしたサンプルをドライアイス／エタノール浴中で急速凍結する。こ
の工程は，溶解物を一夜保存するか蛋白質測定後に直ちに使用するかにかかわら
ず実施する。 ６． 標準的ビシンコニン酸（ＢＣＡ）法を用いて蛋白質測定を実施する（ＢＣ
Ａアッセイ試薬キット，Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃａｔ．＃２３２２
５）。
【０６５９】ＥＬＩＳＡ法 １． Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートを，総ウエル容量５０μｌ
、ウエルあたり５μｇの炭酸塩緩衝液中のヤギ抗ウサギ抗体でコーティングする
。４℃で一夜保存する。 ２． プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合ヤギ抗ウサギ抗
体を除去する。 ３． １５０μｌのブロッキング緩衝液を各ウエルに加える。振盪しながら３０
分間インキュベートする。 ４． ＴＢＳＴで４回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて過
剰の液体および気泡を除去する。 ５． ウエル総容量１００μｌに対して，ＴＢＳＴ中で希釈したウサギ抗Ｍｅｔ
抗体をウエルあたり１μｇ加える。 ６． 溶解物をＨＮＴＧで希釈する（９０μｇ溶解物／１００μｌ）。 ７． 希釈した溶解物１００μｌを各ウエルに加える。６０分間振盪する。 ８． ＴＢＳＴで４回洗浄する。ペーパータオル上で軽くたたいて過剰の液体お
よび気泡を除去する。 ９． ウエルあたり５０μｌの１Ｘ溶解物緩衝液を加える。 １０． 化合物／抽出物をポリプロピレン９６ウエルプレート中で１Ｘキナーゼ
緩衝液中で１：１０に希釈する。 １１． 希釈した化合物５．５μｌをＥＬＩＳＡプレートウエルに移す。振盪し
ながら室温で２０分間インキュベートする。 １２． ウエルあたり５．５μｌの６０μＭＡＴＰ溶液を加える。陰性対照には
ＡＴＰを加えない。振盪しながら９０分間インキュベートする。 １３． ＴＢＳＴで４回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて
過剰の液体および気泡を除去する。 １４． ウエルあたり１００μｌのＲＣ２０（ブロッキング緩衝液中１：３００
０希釈）を加える。振盪しながら３０分間インキュベートする。 １５． ＴＢＳＴで４回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて
過剰の液体および気泡を除去する。 １６． ウエルあたり１００μｌのＴｕｒｂｏ−ＴＭＢを加える。振盪しながら
３０−６０分間インキュベートする。 １７． ウエルあたり１００μｌの１ＭＨ2ＳＯ4を加えて反応を停止させる。 １８． Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡリーダーでアッセイを読
む。試験フィルター＝４５０ｎｍ，参照フィルター＝４１０ｎｍ。
【０６６０】生化学的ｓｒｃアッセイ このアッセイを用いて，ビオチニル化ペプチドのリン酸化を読出しとして測定
することにより，ｓｒｃ蛋白質キナーゼ活性を決定する。
【０６６１】材料および試薬： ａ． ｓｒｃでトランスフォームした酵母（Ｓｕｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｒｅｄｗｏ
ｏｄＣｉｔｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ） ｂ． 細胞溶解物：ｓｒｃを発現する酵母細胞をペレット化し，水で１回洗浄し
，再びペレット化して，使用するまで−８０℃で保存する。 ｃ． Ｎ−末端ビオチニル化ＥＥＥＹＥＥＹＥＥＥＹＥＥＥＹＥＥＥＹは，当業
者に周知の標準的な方法により調製する。 ｄ． ＤＭＳＯ：Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ ｅ． ９６ウエルＥＬＩＳＡプレート：Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥａｓｙ Ｗ
ａｓｈ，改変平底プレート，Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃａｔ．＃２５８０５−９６ ｆ． ＮＵＮＣ９６ウエルＶ−底ポリプロピレンプレート，化合物の希釈用：Ａ
ｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃａｔ．＃Ａ−７２０９２ ｇ． Ｖｅｃａｓｔａｉｎ ＥＬＩＴＥ ＡＢＣ試薬：Ｖｅｃｔｏｒ，Ｂｕｒｌ
ｉｎｇａｍｅ，ＣＡ ｈ． 抗ｓｒｃ（３２７）ｍａｂ：Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ
Ｐｏｍｂｅを用いて組換えＳｒｃを発現させる（Ｓｕｐｅｒｔｉ−Ｆｕｒｇａ，
ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．，１２：２６２５−２６３４；Ｓｕｐｅｒｔｉ−
Ｆｕｒｇａ，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１４：６００−
６０５）。Ｓ．Ｐｏｍｂｅ ＳＰ２００株（ｈ−ｓ ｌｅｕｌ．３２ ｕｒａ４
ａｄｅ２１０）を記載されたように増殖させ，酢酸リチウム法（Ｓｕｐｅｒｔ
ｉ−Ｆｕｒｇａ，（上掲））によりｐＲＳＰ発現プラスミドでトランスフォーム
する。細胞は１μＭチアミンの存在下で増殖させてｎｍｔｌプロモーターの発現
を抑制するか，またはチアミンの非存在下で増殖させて発現を誘導する。 ｉ． モノクローナル抗ホスホチロシン，ＵＢＩ０５−３２１（代わりにＵＢ４
０を用いることができる） ｊ． Ｔｕｒｂｏ ＴＭＢ−ＥＬＩＳＡペルオキシダーゼ基質：Ｐｉｅｒｃｅ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ
【０６６２】緩衝液溶液： ａ． ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水）：ＧＩＢＣＯ ＰＢＳ，ＧＩＢ
ＣＯ Ｃａｔ．＃４５０−１３００ＥＢ ｂ． ブロッキング緩衝液：５％無脂乳（Ｃａｒｎａｔｉｏｎ），ＰＢＳ中 ｃ 炭酸塩緩衝液：Ｎａ2ＣＯ4，Ｆｉｓｃｈｅｒ，Ｃａｔ．＃Ｓ４９５，１００
ｍＭ保存溶液を作成する。 ｄ． キナーゼ緩衝液：１．０ｍｌ（１Ｍ保存溶液から）ＭｇＣｌ2；０．２ｍ
ｌ（１Ｍ保存溶液から）ＭｎＣｌ2；０．２ｍｌ（１Ｍ保存溶液から）ＤＴＴ；
５．０ｍｌ（１Ｍ保存溶液から）ＨＥＰＥＳ；０．１ｍｌＴＸ−１００；Ｍｉｌ
ｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１０ｍｌとする。 ｅ． 溶解緩衝液：５．０ＨＥＰＥＳ（１Ｍ保存溶液から）；２．７４ｍｌＮａ
Ｃｌ（５Ｍ保存溶液から）；１０ｍｌグリセロール；１．０ｍｌＴＸ−１００；
０．４ｍｌＥＤＴＡ（１００ｍＭ保存溶液から）；１．０ｍｌＰＭＳＦ（１００
ｍＭ保存溶液から）；０．１ｍｌＮａ3ＶＯ4（０．１Ｍ保存溶液から）；Ｍｉｌ
ｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１００ｍｌとする。 ｆ． ＡＴＰ：Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃Ａ−７６９９，１０ｍＭ保存溶液（５．
５１ｍｇ／ｍｌ）を作成する。 ｇ ＴＲＩＳ−ＨＣｌ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ１５２−５，６００ｍ
ｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに１２１．１４ｇの物質を加え，ＨＣｌでｐＨを７．
５に調節し，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｈ． ＮａＣｌ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ２７１−１０，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで５Ｍ保存溶液を作成する。 ｉ． Ｎａ3ＶＯ4：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ４５４−５０；８０ｍｌのＭ
ｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，１．８ｇの物質を加える；ＨＣｌまたはＮａＯＨでｐＨ
を１０．０に調節する；電子レンジ中で沸騰させる；冷却する；ｐＨを調べ，加
熱／冷却サイクルの後にｐＨが安定に維持されるまでｐＨ調節を繰り返す；Ｍｉ
ｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１００ｍｌとする；１ｍｌのアリコートを作成し，−
８０℃で保存する。 ｊ． ＭｇＣｌ2：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｍ３３−５００，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで１Ｍ保存溶液を作成する。 ｋ． ＨＥＰＥＳ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ３１０−５００；２００ｍ
ｌＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，５９．６ｇの物質を加え，ｐＨを７．５に調節し，
ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量２５０ｍｌとし，濾過滅菌する（１Ｍ保存溶液）
。 ｌ． ＴＢＳＴ緩衝液：ＴＢＳＴ緩衝液：９００ｍｌのｄＨ2Ｏに，６．０５７
ｇＴＲＩＳおよび８．７６６ｇＮａＣｌを加える；ＨＣｌでｐＨを７．２に調節
し，１．０ｍｌＴｒｉｔｏｎ−Ｘ１００を加える；ｄＨ2Ｏで総容量１Ｌとする
。 ｍ． ＭｎＣｌ2：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｍ８７−１００，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで１Ｍ保存溶液とする。 ｎ． ＤＴＴ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ１７２−５ ｏ． ＴＢＳ（ＴＲＩＳ緩衝化食塩水）：９００ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに
，６．０５７ｇＴＲＩＳおよび８．７７７ｇＮａＣｌを加える；ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで総容量を１Ｌとする。 ｐ． キナーゼ反応混合物：アッセイプレート（１００ウエル）１枚あたりの量
：１．０ｍｌキナーゼ緩衝液，２００μｇＧＳＴ−ζ，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで
最終容量８．０ｍｌとする。 ｑ． ビオチン標識ＥＥＥＹＥＥＹＥＥＥＹＥＥＥＹＥＥＥＹ：水中のペプチド
保存溶液（１ｍＭ，２．９８ｍｇ／ｍｌ）を使用の直前に新たに作成する。 ｒ． Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ ＥＬＩＴＥ ＡＢＣ試薬：１４ｍｌの作業用試薬
を調製するためには，１滴の試薬Ａを１５ｍｌＴＢＳＴに加え，管を数回逆さに
して混合する。次に１滴の試薬Ｂを加える。管を室温で環状振盪器に入れ，３０
分間混合する。
【０６６３】方法： ｓｒｃでコーティングしたＥＬＩＳＡプレートの調製 １． ＥＬＩＳＡプレートを１００μｌの炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ９．６）
中の０．５μｇ／ウエルの抗ｓｒｃモノクローナル抗体で，４℃で一夜コーティ
ングする。 ２． ウエルをＰＢＳで１回洗浄する。 ３． プレートをＰＢＳ中５％ミルク０．１５ｍｌで，室温で３０分間ブロッキ
ングする。 ４． プレートをＰＢＳで５回洗浄する。 ５． 溶解緩衝液中で希釈した，ｓｒｃでトランスフォームした酵母の溶解物を
１０μｇ／ウエルで加える（ウエルあたり総容量０．１ｍｌ）。（溶解物の量は
，バッチにより異なるであろう）。プレートを室温で２０分間振盪する。ホスホチロシン抗体でコーティングしたＥＬＩＳＡプレートの調製 １． ４Ｇ１０プレート：１００μｌＰＢＳ中の０．５μｇ／ウエルの４Ｇ１０
で４℃で一夜コーティングし，１５０μｌのＰＢＳ中５％ミルクで室温で３０分
間ブロッキングする。 キナーゼアッセイ法 １． 未結合蛋白質をプレートから除去し，プレートをＰＢＳで５回洗浄する。
２． ウエルあたり０．０８ｍｌのキナーゼ反応混合物（ウエルあたり１０μｌ
の１０Ｘキナーゼ緩衝液および１０μＭ（最終濃度）のビオチン−ＥＥＥＹＥＥ
ＹＥＥＥＹＥＥＥＹＥＥＥＹ，水中に希釈）を加える。 ３． １０％ＤＭＳＯを含有する水中に希釈した１０μｌの化合物を加え，室温
で１５分間プレインキュベートする。 ４． １０μｌ／ウエルの水中０．０５ｍＭＡＴＰ（最終５μＭＡＴＰ）を加え
ることにより，キナーゼ反応を開始させる。 ５． ＥＬＩＳＡプレートを室温で１５分間振盪する。 ６． ウエルあたり１０μｌの０．５ＭＥＤＴＡを加えることによりキナーゼ反
応を停止させる。 ７． ９０μｌの上清を，ブロッキングした４Ｇ１０コーティングＥＬＩＳＡプ
レートに移す。 ８． 振盪しながら室温で３０分間インキュベートする。 ９． プレートをＴＢＳＴで５回洗浄する。 １０． Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ ＥＬＩＴＥ ＡＢＣ試薬（１００μｌ／ウエル
）とともに室温で３０分間インキュベートする。 １１． ウエルをＴＢＳＴで５回洗浄する。 １２． Ｔｕｒｂｏ ＴＭＢで発色させる。
【０６６４】生化学的ｌｃｋアッセイ このアッセイを用いて，ＧＳＴ−ζのリン酸化を読出しとして測定することに
より，ｌｃｋ蛋白質キナーゼ活性を決定する
【０６６５】材料および試薬： ａ． ｌｃｋでトランスフォームした酵母：Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙ
ｃｅｓ Ｐｏｍｂｅを用いて組換えＬｃｋを発現させる（Ｓｕｐｅｒｔｉ−Ｆｕ
ｒｇａ，ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ，１２：２６２５−２６３４；Ｓｕｐｅｒ
ｔｉ−Ｆｕｒｇａ，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，１４：６
００−６０５）。Ｓ．Ｐｏｍｂｅ ＳＰ２００株（ｈ−ｓ ｌｅｕｌ．３２ ｕ
ｒａ４ ａｄｅ２１０）を記載されたように増殖させ，ｐＲＳＰ発現プラスミド
で酢酸リチウム法によりトランスフォームする（Ｓｕｐｅｒｔｉ−Ｆｕｒｇａ，
（上掲））。細胞を１μＭチアミンの存在下で増殖させ，発現を誘導する。 ｂ． 細胞溶解物：ｌｃｋを発現する酵母細胞をペレット化し，水で１回洗浄し
，再ペレット化し，使用するまで−８０℃で凍結保存する。 ｃ． ＧＳＴ−ζ：細菌中で発現させるためのＧＳＴ−ζ融合蛋白質をコードす
るＤＮＡは，Ｈｏｗａｒｄ Ｈｕｇｈｅｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔ
ｅ，ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｓａｎ Ｆ
ｒａｎｃｉｓｃｏのＡｒｔｈｕｒ Ｗｅｉｓｓから入手する。トランスフォーム
した細菌を振盪しながら２５℃で一夜増殖させる。ＧＳＴ−ζは，グルタチオン
アフィニティークロマトグラフィー（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ａｌａｍｅｄａ，Ｃ
Ａ）により精製する。 ｄ． ＤＭＳＯ：Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ ｅ． ９６ウエルＥＬＩＳＡプレート：Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥａｓｙ Ｗ
ａｓｈ，改変平底プレート，Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃａｔ．＃２５８０５−９６ ｆ． ＮＵＮＣ９６ウエルＶ−底ポリプロピレンプレート，化合物希釈用：Ａｐ
ｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃａｔ．＃ＡＳ−７２０９２ ｇ． 精製ウサギ抗ＧＳＴ抗血清：Ａｍｒａｄ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ａｕ
ｓｔｒａｌｉａ）Ｃａｔ．＃９０００１６０５ ｈ． ヤギ抗ウサギ−ＩｇＧ−ＨＲＰ：Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｃａｔ．＃Ｖ０１０
３０１ ｉ． ヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）：Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｓ Ｃａｔ．＃
５２１５−００５−００３ ｊ． 抗Ｌｃｋ（３Ａ５）モノクローナル抗体：Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏ
ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣａｔ＃ｓｃ−４３３ ｋ． 抗ホスホチロシンモノクローナル抗体ＵＢＩ０５−３２１（代わりにＵＢ
４０を用いてもよい）
【０６６６】緩衝液溶液： ａ． ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水）１Ｘ溶液：ＧＩＢＣＯＰＢＳ，
ＧＩＢＣＯ Ｃａｔ．＃４５０−１３００ＥＢ ｂ． ブロッキング緩衝液：１００ｇＢＳＡ，１２．１ｇＴＲＩＳ−ｐＨ７．５
，５８．４４ｇＮａＣｌ，１０ｍｌＴｗｅｅｎ−２０，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで
総容量１Ｌとする。 ｃ． 炭酸緩衝液：Ｎａ2ＣＯ4，Ｆｉｓｃｈｅｒ，Ｃａｔ．＃Ｓ４９５；Ｍｉｌ
ｌｉＱ Ｈ2Ｏで１００ｍＭ溶液とする。 ｄ． キナーゼ緩衝液：１．０ｍｌ（１Ｍ保存溶液より）ＭｇＣｌ2；０．２ｍ
ｌ（１Ｍ保存溶液より）ＭｎＣｌ2；０．２ｍｌ（１Ｍ保存溶液より）ＤＴＴ；
５．０ｍｌ（１Ｍ保存溶液より）ＨＥＰＥＳ；０．１ｍｌＴＸ−１００；Ｍｉｌ
ｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１０ｍｌとする。 ｅ． 溶解緩衝液：５．０ＨＥＰＥＳ（１Ｍ保存溶液より）；２．７４ｍｌＮａ
Ｃｌ（５Ｍ保存溶液より）；１０ｍｌグリセロール；１．０ｍｌＴＸ−１００；
０．４ｍｌＥＤＴＡ（１００ｍＭ保存溶液より）；１．０ｍｌＰＭＳＦ（１００
ｍＭ保存溶液より）；０．１ｍｌＮａ3ＶＯ4（０．１Ｍ保存溶液より）；Ｍｉｌ
ｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１００ｍｌとする。 ｆ． ＡＴＰ：Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃Ａ−７６９９，１０ｍＭ保存溶液（５．
５１ｍｇ／ｍｌ）を作成する。 ｇ ＴＲＩＳ−ＨＣｌ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ１５２−５，６００ｍ
ｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，１２１．１４ｇの物質を加え，ＨＣｌでｐＨを７
．５に調節し，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｈ． ＮａＣｌ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ２７１−１０，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで５Ｍ保存溶液を作成する。 ｉ Ｎａ3ＶＯ4：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ４５４−５０；８０ｍｌのＭｉ
ｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，１．８ｇの物質を加える；ＨＣｌまたはＮａＯＨでｐＨを
１０．０に調節する；電子レンジ中で沸騰させる；冷却する；ｐＨを調べ，加熱
／冷却サイクルの後にｐＨが安定となるまでｐＨ調節を繰り返す；ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１００ｍｌとする；１ｍｌのアリコートを作成し，−８０℃で
保存する。 ｊ． ＭｇＣｌ2：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｍ３３−５００，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで１Ｍ保存溶液を作成する。 ｋ． ＨＥＰＥＳ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ３１０−５００；２００ｍ
ｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，５９．６ｇの物質を加え，ｐＨを７．５に調節し
，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量２５０ｍｌとし，濾過滅菌する（１Ｍ保存溶液
）。 ｌ． アルブミン，ウシ（ＢＳＡ），Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃Ａ４５０３；１５
０ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，３０ｇの物質を加え，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで
総容量３００ｍｌとし，０．２２μｍフィルターを通して濾過し，４℃で保存す
る。 ｍ． ＴＢＳＴ緩衝液：９００ｍｌのｄＨ2Ｏに，６．０５７ｇＴＲＩＳおよび
８．７６６ｇＮａＣｌを加える；ＨＣｌでｐＨを７．２に調節する；１．０ｍｌ
Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００を加える；ｄＨ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｎ． ＭｎＣｌ2：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｍ８７−１００，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで１Ｍ保存溶液を作成する。 ｏ． ＤＴＴ；Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ１７２−５ ｐ． ＴＢＳ（ＴＲＩＳ緩衝化食塩水）：９００ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに
，６．０５７ｇＴＲＩＳおよび８．７７７ｇＮａＣｌを加える；ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｑ キナーゼ反応混合物：アッセイプレート（１００ウエル）１枚あたりの量：
１．０ｍｌキナーゼ緩衝液，２００μｇＧＳＴ−ζ，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで最
終容量８．０ｍｌとする。
【０６６７】方法： ＬｃｋでコーティングしたＥＬＩＳＡプレートの調製 １． １００μｌの炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ９．６）中のヤギ抗マウスＩｇ
Ｇ２．０μｇ／ウエルで，４℃で一夜コーティングする。 ２． ウエルをＰＢＳで１回洗浄する。 ３． プレートを０．１５ｍｌのブロッキング緩衝液で室温で３０分間ブロッキ
ングする。 ４． プレートをＰＢＳで５回洗浄する。 ５． ０．１ｍｌＰＢＳ中の抗ｌｃｋ（モノクローナル抗体３Ａ５）を０．５μ
ｇ／ウエルで室温で１−２時間加える。 ６． プレートをＰＢＳで５回洗浄する。 ７． 溶解緩衝液中に希釈した，ｌｃｋでトランスフォームした酵母の溶解物を
２０μｇ／ウエルで加える（ウエルあたり総容量０．１ｍｌ）。プレートを４℃
で一夜振盪して活性の喪失を防止する。
【０６６８】ホスホチロシン抗体でコーティングしたＥＬＩＳＡプレートの調製 １． ＵＢ４０プレート：１００μｌＰＢＳ中の１．０μｇ／ウエルＵＢ４０を
４℃で一夜加え，１５０μｌのブロッキング緩衝液で少なくとも１時間ブロッキ
ングする。キナーゼアッセイ法 １． 未結合蛋白質をプレートから除去し，プレートをＰＢＳで５回洗浄する。
２． ウエルあたり０．０８ｍｌのキナーゼ反応混合物（ウエルあたり，水で希
釈した１０μｌの１０Ｘキナーゼ緩衝液および２μｇＧＳＴ−ζを含む）を加え
る。 ３． １０％ＤＭＳＯを含有する水中で希釈した化合物１０μｌを加え，室温で
１５分間プレインキュベートする。 ４． 水中０．１ｍＭＡＴＰ（最終濃度１０μＭＡＴＰ）を１０μｌ／ウエルで
加えることによりキナーゼ反応を開始させる。 ５． ＥＬＩＳＡプレートを室温で６０分間振盪する。 ６． ウエルあたり１０μｌの０．５ＭＥＤＴＡを加えることによりキナーゼ反
応を停止させる。 ７． ９０μｌの上清を，上述のＢ節からのブロッキングした４Ｇ１０コーティ
ングＥＬＩＳＡプレートに移す。 ８． 振盪しながら室温で３０分間インキュベートする。 ９． プレートをＴＢＳＴで５回洗浄する。 １０． １００μｌＴＢＳＴ中１：５０００に希釈したウサギ抗ＧＳＴ抗体とと
もに室温で３０分間インキュベートする。 １１． ウエルをＴＢＳＴで５回洗浄する。 １２． １００μｌのＴＢＳＴ中１：２０，０００に希釈したヤギ抗ウサギ−Ｉ
ｇＧ−ＨＲＰとともに室温で３０分間インキュベートする。 １３． ウエルをＴＢＳＴで５回洗浄する。 １４． Ｔｕｒｂｏ ＴＭＢで発色させる。
【０６６９】ＲＡＦのリン酸化機能を測定するアッセイ 以下のアッセイは，ＲＡＦにより触媒される，その標的蛋白質ＭＥＫならびに
ＭＥＫの標的であるＭＡＰＫのリン酸化の量を測定する。ＲＡＦ遺伝子配列は，
Ｂｏｎｎｅｒら（１９８５，Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５：１４００−
１４０７）に記載されており，多くの遺伝子配列データバンクにおいて容易にア
クセス可能である。核酸ベクターの構築および本発明のこの部分において用いら
れる細胞株は，Ｍｏｒｒｉｓｏｎら（１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ
．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８５：８８５５−８８５９）にすべて記載されている。
【０６７０】材料および試薬 １． Ｓｆ９（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）細胞；ＧＩＢＣ
Ｏ−ＢＲＬ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ ２． ＲＩＰＡ緩衝液：２０ｍＭＴｒｉｓ／ＨＣ１ｐＨ７．４，１３７ｍＭＮａ
Ｃｌ，１０％グリセロール，１ｍＭＰＭＳＦ，５ｍｇ／Ｌアプロテニン，０．５
％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００； ３． チオレドキシン−ＭＥＫ融合蛋白質（Ｔ−ＭＥＫ）：Ｔ−ＭＥＫ 発現およびアフィニティークロマトグラフィーによる精製は，製造元の方法に従
って実施する。カタログ＃Ｋ３５０−０１およびＲ３５０−４０，Ｉｎｖｉｔｒ
ｏｇｅｎＣｏｒｐ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ ４． Ｈｉｓ−ＭＡＰＫ（ＥＲＫ２）；Ｈｉｓ−タグＭＡＰＫは，Ｈｉｓ−ＭＡ
ＰＫをコードするｐＵＣ１８ベクターによりトランスフォームしたＸＬ１ Ｂｌ
ｕｅ細胞中で発現させる。Ｈｉｓ−ＭＡＰＫはＮｉ−アフィニティークロマトグ
ラフィーにより精製する。Ｃａｔ＃２７−４９４９−０１，Ｐｈａｒｍａｃｉａ
，Ａｌａｍｅｄａ，ＣＡ，本明細書に記載されたとおり。 ５． ヤギ抗マウスＩｇＧ：Ｊａｃｋｓｏｎ ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｗｅ
ｓｔ Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ．カタログ，＃５１５−００６−００８，Ｌｏｔ＃２８
５６３ ６． ＲＡＦ−１蛋白質キナーゼ特異的抗体：ＵＲＰ２６５３，ＵＢＩ ７． コーティング緩衝液：ＰＢＳ；リン酸緩衝化食塩水，ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ
，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ ８． 洗浄緩衝液：ＴＢＳＴ−５０ｍＭＴｒｉｓ／ＨＣＬｐＨ７．２，１５０ｍ
ＭＮａＣｌ，０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ９． ブロッキング緩衝液：ＴＢＳＴ，０．１％エタノールアミンｐＨ７．４ １０． ＤＭＳＯ，Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ １１． キナーゼ緩衝液（ＫＢ）：２０ｍＭＨＥＰＥＳ／ＨＣｌ（ｐＨ７．２）
，１５０ｍＭＮａＣｌ，０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００，１ｍＭＰＭＳＦ，５
ｍｇ／Ｌアプロテニン，７５ｍＭオルトバナジウム酸ナトリウム，０．５ＭＭＤ
ＴＴおよび１０ｍＭＭｇＣｌ2 １２． ＡＴＰ混合物：ｌ００ｍＭＭｇＣｌ2，３００ｍＭＡＴＰ，１０ｍＣｉ
γ33ＰＡＴＰ（ＤｕＰｏｎｔ−ＮＥＮ）／ｍＬ １３ 停止溶液：１％リン酸；Ｆｉｓｈｅｒ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ １４． Ｗａｌｌａｃリン酸セルロースフィルターマット；Ｗａｌｌａｃ，Ｔｕ
ｒｋｕ，Ｆｉｎｎｌａｎｄ １５． フィルター洗浄溶液：１％リン酸，Ｆｉｓｈｅｒ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇ
ｈ，ＰＡ １６． Ｔｏｍｔｅｃプレート回収機，Ｗａｌｌａｃ，Ｔｕｒｋｕ，Ｆｉｎｎｌ
ａｎｄ １７． Ｗａｌｌａｃベータプレートリーダー＃１２０５，Ｗａｌｌａｃ，Ｔｕ
ｒｋｕ，Ｆｉｎｎｌａｎｄ １８． 化合物用に，ＮＵＮＣ９６ウエルＶ底ポリプロピレンプレート，Ａｐｐ
ｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ＃ＡＳ−７２０９２
【０６７１】方法 以下のすべての工程は，特に指示しないかぎり，室温で実施する。 １． ＥＬＩＳＡプレートコーティング：ＥＬＩＳＡウエルを１００ｍｌのヤギ
抗マウスアフィニティー精製抗血清（１ｍｇ／ｌ００ｍＬコーティング緩衝液）
で４℃で一夜コーティングする。ＥＬＩＳＡプレートは，４℃で保存したとき，
２週間使用することができる。 ２． プレートを逆さにして液体を除去する。１００ｍＬのブロッキング溶液を
加え，３０分間インキュベートする。 ３． ブロッキング溶液を除去し，洗浄緩衝液で４回洗浄する。プレートをペー
パータオル上で軽くたたいて過剰の液体を除去する。 ４． 各ウエルに１ｍｇのＲＡＦ−１特異的抗体を加え，１時間インキュベート
する。工程３に記載したように洗浄する。 ５． ＲＡＳ／ＲＡＦで感染させたＳｆ９細胞からの溶解物を解凍し，ＴＢＳＴ
で１０ｍｇ／１００ｍＬに希釈する。１０ｍｇの希釈溶解物をウエルに加え，１
時間インキュベートする。インキュベーションの間，プレートを振盪する。陰性
対照には溶解物を加えない。各ウイルスにつきＭＯＩ５で細胞を組換えバキュロ
ウイルスで感染させた後，ＲＡＳ／ＲＡＦで感染させたＳｆ９昆虫細胞からの溶
解物を調製し，４８時間後に回収する。細胞をＰＢＳで１回洗浄し，ＲＩＰＡ緩
衝液中で溶解する。不溶物質を遠心分離（５分間，１００００ｘｇ）により除去
する。溶解物のアリコートをドライアイス／エタノール中で凍結し，使用まで−
８０℃で保存する。 ６． 非結合物質を除去し，上に簡単に述べたように洗浄する（工程３）。 ７． ウエルあたり２ｍｇのＴ−ＭＥＫおよび２ｍｇのＨｉｓ−ＭＡＥＰＫを加
え，キナーゼ緩衝液で容量を４０ｍＬに調節する。細胞抽出物からＴ−ＭＥＫお
よびＭＡＰＫを精製する方法は，本明細書の実施例に記載される。 ８． 化合物（保存溶液１０ｍｇ／ｍＬＤＭＳＯ）または抽出物をＴＢＳＴプラ
ス１％ＤＭＳＯ中であらかじめ２０倍に希釈する。５ｍＬのあらかじめ希釈した
化合物／抽出物を工程６に記載したウエルに加える。２０分間インキュベートす
る。対照には薬剤を加えない。 ９． ５ｍＬＡＴＰミックスを加えることによりキナーゼ反応を開始する。イン
キュベーションの間，ＥＬＩＳＡプレート振盪器でプレートを振盪する。 １０． ６０分後，３０ｍＬの停止溶液を各ウエルに加えることによりキナーゼ
反応を停止する。 １１． ホスホセルロースマットおよびＥＬＩＳＡプレートをＴｏｍｔｅｃプレ
ート回収機中に置く。フィルターを回収し，フィルター洗浄溶液で製造元の推奨
にしたがってこれを洗浄する。フィルターマットを乾燥する。フィルターマット
を密封し，ケース中に置く。ケースを放射活性検出装置に入れ，フィルターマッ
ト上の放射活性リンを定量する。 あるいは，アッセイプレートの個々のウエルからの４０ｍＬのアリコートを，
ホスホセルロースフィルターマットの対応する位置に移すことができる。フィル
ターを風乾した後，フィルターをトレイ中に置く。トレイを穏やかにロックし，
洗浄溶液を１５分間ごとに１時間交換する。フィルターマットを風乾する。フィ
ルターマットを密封し，サンプル中の放射活性リンを測定するのに適当なケース
中に入れる。ケースを検出装置に入れ，フィルターマット上の放射活性リンを定
量する。
【０６７２】ＣＤＫ２／サイクリンＡ−阻害アッセイ このアッセイは，外部基質中のＣＤＫ２の蛋白質キナーゼ活性を測定する。
【０６７３】試薬： Ａ． 緩衝液Ａ（８０ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ７．２），４０ｍＭＭｇＣｌ2）：４
．８４ｇＴｒｉｓ（Ｆ．Ｗ．＝１２１．１ｇ／ｍｏｌ），４．０７ｇＭｇＣｌ2
（Ｆ．Ｗ．＝２０３．３１ｇ／ｍｏｌ），５００ｍｌＨ2Ｏ中に溶解。ＨＣｌで
ｐＨを７．２に調節する。 Ｂ． ヒストンＨ１溶液（０．４５ｍｇ／ｍｌヒストンＨ１および２０ｍＭＨＥ
ＰＥＳ（ｐＨ７．２）：１１．１１１ｍｌの２０ｍＭＨＥＰＥＳｐＨ７．２（４
７７ｍｇＨＥＰＥＳ（Ｆ．Ｗ．＝２３８．３ｇ／ｍｏｌ））中の５ｍｇヒストン
Ｈ１（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ），１００ｍｌｄｄＨ2Ｏ中に
溶解する。１ｍｌアリコートとして−８０℃で保存する。 Ｃ． ＡＴＰ溶液（６０μＭＡＴＰ，３００μｇ／ｍｌＢＳＡ，３ｍＭＤＴＴ）
：１２０μｌの１０ｍＭＡＴＰ，６００μｌの１０ｍｇ／ｍｌＢＳＡで２０ｍｌ
とし，１ｍｌアリコートとして−８０℃で保存する。 Ｄ． ＣＤＫ２溶液：ｃｄｋ２／サイクリンＡ，１０ｍＭＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．
２，２５ｍＭＮａＣｌ，０．５ｍＭＤＴＴ，１０％グリセロール中。９μｌアリ
コートとして−８０℃で保存する。
【０６７４】プロトコル １． 阻害剤の溶液を，ｄｄＨ2Ｏ／１５％ＤＭＳＯ（ｖ／ｖ）で所望の最終ア
ッセイ濃度の３倍で調製する。 ２． ２０μｌの阻害剤をポリプロピレンの９６ウエルプレートのウエルに加え
る（または陽性および陰性対照については２０μｌの１５％ＤＭＳＯ）。 ３． ヒストンＨ１溶液（１ｍｌ／プレート），ＡＴＰ溶液（１ｍｌ／プレート
プラス陰性対照について１アリコート），およびＣＤＫ２溶液（９μｌ／プレー
ト）を解凍する。ＣＤＫ２は使用まで氷上に保存する。ＣＤＫ２溶液を適当にア
リコートに分けて，凍結解凍サイクルの繰り返しを避ける。 ４． ９μｌＣＤＫ２溶液を２．１ｍｌ緩衝液Ａ（プレートあたり）で希釈し，
混合し，２０μｌを各ウエルに加える。 ５． １ｍｌヒストンＨ１溶液を１ｍｌＡＴＰ溶液（プレートあたり）と混合し
て，１０ｍｌねじ蓋管に入れる。γ33Ｐ ＡＴＰを０．１５μＣｉ／２０μｌ（
アッセイ中，０．１５μＣｉ／ウエル）の濃度となるよう加える。ＢＳＡの泡を
避けるよう注意深く混合する。２０μｌを適当なウエルに加える。プレートをプ
レート振盪器上で混合する。陰性対照については，等量の２０ｍＭＨＥＰＥＳ（
ｐＨ７．２）とＡＴＰ溶液とを混合し，γ33Ｐ ＡＴＰを０．１５μＣｉ／２０
μｌ溶液の濃度となるように加える。２０μｌを適当なウエルに加える。 ６． 反応を６０分間進行させる。 ７． ３５μｌの１０％ＴＣＡを各ウエルに加える。プレートをプレート振盪器
上で混合する。 ８． ４０μｌの各サンプルをＰ３０フィルターマットの升目上にスポットする
。マットを乾燥させる（約１０−２０分間）。 ９． フィルターマットを２５０ｍｌの１％リン酸（ｄｄＨ2Ｏ １ｌあたり１
０ｍｌリン酸）で４Ｘ１０分間洗浄する。 １０． フィルターマットをベータプレートリーダーで計数する。
【０６７５】細胞／生物学的アッセイ ＰＤＧＦ−誘導性ＢｒｄＵ取り込みアッセイ 材料および試薬 ： （１） ＰＤＧＦ：ヒトＰＤＧＦ Ｂ／Ｂ；１２７６−９５６，Ｂｏｅｈｒｉｎ
ｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （２） ＢｒｄＵ標識試薬：１０ｍＭ，ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中，Ｃａｔ．Ｎｏ
．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ
（３） ＦｉｘＤｅｎａｔ：固定溶液（即使用可），Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２
２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （４） 抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ：ペルオキシダーゼとコンジュゲート化したマウス
モノクローナル抗体，Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （５） ＴＭＢ基質溶液：テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ），即使用可，Ｃａ
ｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒ
ｍａｎｙ （６） ＰＢＳ洗浄溶液：１ＸＰＢＳ，ｐＨ７．４（Ｓｕｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｒ
ｅｄｗｏｏｄ Ｃｉｔｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ） （７） アルブミン，ウシ（ＢＳＡ）：画分Ｖ粉末；Ａ−８５５１，Ｓｉｇｍａ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，ＵＳＡ （８）株ヒトＰＤＧＦ−Ｒを発現するよう遺伝子工学処理された３Ｔ３細胞
【０６７６】プロトコル （１） 細胞をＤＭＥＭ，１０％ＣＳ，２ｍＭＧｌｎ中で，９６ウエルプレート
に８０００細胞／ウエルで播種する。細胞を５％ＣＯ2中で３７℃で一夜インキ
ュベートする。 （２） ２４時間後，細胞をＰＢＳで洗浄し，次に無血清培地（０％ＣＳ ＤＭ
ＥＭ，０．１％ＢＳＡ）中で２４時間血清飢餓とする。 （３） 第３日に，リガンド（ＰＤＧＦ，３．８ｎＭ，ＤＭＥＭ，０．１％ＢＳ
Ａ中で調製）および試験化合物を細胞に同時に加える。陰性対照ウエルには，無
血清ＤＭＥＭおよび０．１％ＢＳＡのみを加える；陽性対照細胞には，リガンド
（ＰＤＧＦ）を加えるが試験化合物を加えない。試験化合物は，９６ウエルプレ
ート中で無血清ＤＭＥＭ中でリガンドとともに調製し，連続希釈して７種類の試
験濃度とする。 （４） リガンド活性化の２０時間後，希釈ＢｒｄＵ標識試薬（ＤＭＥＭ，０．
１％ＢＳＡ中１：１００）を加え，細胞をＢｒｄＵ（最終濃度＝１０μＭ）とと
もに１．５時間インキュベートする。 （５） 標識試薬とともにインキュベーションした後，デカントし，逆さにした
プレートをペーパータオル上で軽くたたくことにより，培地を除去する。Ｆｉｘ
Ｄｅｎａｔ溶液を加え（５０μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器上で室
温で４５分間インキュベートする。 （６） デカントし，逆さにしたプレートをペーパータオル上で軽くたたくこと
により，ＦｉｘＤｅｎａｔ溶液をよく除去する。ブロッキング溶液としてミルク
を加え（ＰＢＳ中５％脱水ミルク，２００μｌ／ウエル），プレートをプレート
振盪器上で室温で３０分間インキュベートする。 （７） デカントによりブロッキング溶液を除去し，ウエルをＰＢＳで１回洗浄
する。抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ溶液（ＰＢＳ，１％ＢＳＡ中１：１００希釈）を加え
（１００μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器上で室温で９０分間インキ
ュベートする。 （８） デカントし，ウエルをＰＢＳで５回すすぐことにより抗体コンジュゲー
トをよく除去し，プレートを逆さにしてペーパータオル上で軽くたたくことによ
り乾燥させる。 （９） ＴＭＢ基質溶液を加え（１００μｌ／ウエル），プレート振盪器で室温
で２０分間，発色が光度計による検出に十分となるまでインキュベートする。 （１０） サンプルの吸光度は，Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＥＬＩＳＡプレートリーダ
ーで４１０ｎｍで測定する（参照波長として４９０ｎｍで読みとるフィルターを
用いる"二波長"モード）。
【０６７７】ＥＧＦ−誘導性ＢｒｄＵ取り込みアッセイ 材料および試薬 （１） ＥＧＦ：マウスＥＧＦ，２０１；Ｔｏｙｏｂｏ，Ｃｏ．，Ｌｔｄ．Ｊａ
ｐａｎ （２） ＢｒｄＵ標識試薬：１０ｍＭ，ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中，Ｃａｔ．Ｎｏ
．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ
（３） ＦｉｘＤｅｎａｔ：固定溶液（即使用可），Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２
２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （４） 抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ：ペルオキシダーゼとコンジュゲート化したマウス
モノクローナル抗体，Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （５） ＴＭＢ基質溶液：テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ），即使用可，Ｃａ
ｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒ
ｍａｎｙ （６） ＰＢＳ洗浄溶液：１ＸＰＢＳ，ｐＨ７．４（Ｓｕｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｒ
ｅｄｗｏｏｄＣｉｔｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ） （７） アルブミン，ウシ（ＢＳＡ）：画分Ｖ粉末；Ａ−８５５１，Ｓｉｇｍａ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，ＵＳＡ （８） ヒトＥＧＦ−Ｒを発現するよう遺伝子工学処理された３Ｔ３細胞株
【０６７８】プロトコル （１） 細胞をＤＭＥＭ中１０％ＣＳ，２ｍＭＧｌｎで，９６ウエルプレート中
で８０００細胞／ウエルで播種する。細胞を５％ＣＯ2中で３７℃で一夜インキ
ュベートする。 （２） ２４時間後，細胞をＰＢＳで洗浄し，次に無血清培地（０％ＣＳ ＤＭ
ＥＭ，０．１％ＢＳＡ）中で２４時間血清飢餓とする。 （３） 第３日に，リガンド（ＥＧＦ，２ｎＭ，ＤＭＥＭ，０．１％ＢＳＡ中で
調製）および試験化合物を細胞に同時に加える。陰性対照ウエルには０．１％Ｂ
ＳＡを含む無血清ＤＭＥＭのみを加える。陽性対照細胞には，リガンド（ＥＧＦ
）を加えるが試験化合物を加えない。試験化合物は，９６ウエルプレート中で，
無血清ＤＭＥＭ中でリガンドとともに調製し，連続希釈して７種類の試験濃度と
する。 （４） リガンド活性化の２０時間後，希釈したＢｒｄＵ標識試薬（ＤＭＥＭ中
１：１００，０．１％ＢＳＡ）を加え，細胞をＢｒｄＵ（最終濃度＝１０μＭ）
とともに１．５時間インキュベートする。 （５） 標識試薬とともにインキュベートした後，デカントして逆さにしたプレ
ートをペーパータオル上で軽くたたくことにより培地を除去する。ＦｉｘＤｅｎ
ａｔ溶液を加え（５０μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器で室温で４５
分間インキュベートする。 （６） デカントして逆さにしたプレートをペーパータオル上で軽くたたくこと
によりＦｉｘＤｅｎａｔ溶液をよく除去する。ブロッキング溶液としてミルクを
加え（ＰＢＳ中５％脱水ミルク，２００μｌ／ウエル），プレートをプレート振
盪器で室温で３０分間インキュベートする。 （７） デカントによりブロッキング溶液を除去し，ウエルをＰＢＳで１回洗浄
する。抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ溶液（ＰＢＳ中１：１００希釈，１％ＢＳＡ）を加え
（１００μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器で室温で９０分間インキュ
ベートする。 （８） デカントし，ウエルをＰＢＳで５回すすぐことにより抗体コンジュゲー
トをよく除去し，プレートを逆さにしてペーパータオル上で軽くたたくことによ
り乾燥させる。 （９） ＴＭＢ基質溶液を加え（１００μｌ／ウエル），プレート振盪器で室温
で２０分間，発色が高度計検出に十分となるまでインキュベートする。 （１０） サンプルの吸光度は，Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＥＬＩＳＡプレートリーダ
ーで，４１０ｎｍ（参照波長として４９０ｎｍを読むフィルターを用いる"二波
長"モード”で）測定する。
【０６７９】ＥＧＦ−誘導性Ｈｅｒ２−推進ＢｒｄＵ取り込み 材料および試薬 ： （１） ＥＧＦ：マウスＥＧＦ，２０１；Ｔｏｙｏｂｏ，Ｃｏ．，Ｌｔｄ．Ｊａ
ｐａｎ （２）ＢｒｄＵ標識試薬：１０ｍＭ，ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中，Ｃａｔ．Ｎｏ．
１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （３） ＦｉｘＤｅｎａｔ：固定溶液（即使用可），Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２
２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （４） 抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ：ペルオキシダーゼとコンジュゲート化したマウス
モノクローナル抗体，Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （５） ＴＭＢ基質溶液：テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ），即使用可，Ｃａ
ｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒ
ｍａｎｙ （６） ＰＢＳ洗浄溶液：１ＸＰＢＳ，ｐＨ７．４，自社製。 （７） アルブミン，ウシ（ＢＳＡ）：画分Ｖ粉末；Ａ−８５５１，Ｓｉｇｍａ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，ＵＳＡ （８） ＥＧＦ−Ｒの細胞外ドメインおよびＨｅｒ２の細胞内ドメインを有する
キメラレセプターを発現するよう遺伝子工学処理された３Ｔ３細胞株
【０６８０】プロトコル ： （１） 細胞をＤＭＥＭ，１０％ＣＳ，２ｍＭＧｌｎ中で９６−ウエルプレート
に８０００細胞／ウエルで播種する。細胞を３７℃で５％ＣＯ2中で一夜インキ
ュベートする。 （２） ２４時間後，細胞をＰＢＳで洗浄し，次に無血清培地（０％ＣＳ ＤＭ
ＥＭ，０．１％ＢＳＡを含む）中で２４時間血清飢餓とする。 （３） 第３日に，リガンド（ＥＧＦ＝２ｎＭ，０．１％ＢＳＡを含むＤＭＥＭ
中で調製）および試験化合物を細胞に同時に加える。陰性対照ウエルには無血清
ＤＭＥＭ，０．１％ＢＳＡのみを加える；陽性対照細胞にはリガンド（ＥＧＦ）
を加えるが試験化合物は加えない。試験化合物は，無血清ＤＭＥＭ中でリガンド
とともに９６ウエルプレート中で調製し，連続希釈して７種類の試験濃度とする
。 （４） リガンド活性化の２０時間後，希釈ＢｒｄＵ標識試薬（ＤＭＥＭ中１：
１００，０．１％ＢＳＡ）を加え，細胞をＢｒｄＵ（最終濃度＝１０μＭ）とと
もに１．５時間インキュベートする。 （５） 標識試薬とともにインキュベートした後，デカントして逆さにしたプレ
ートをペーパータオル上で軽くたたくことにより培地を除去する。ＦｉｘＤｅｎ
ａｔ溶液を加え（５０μｌ／ウエル），プレートを室温でプレート振盪器で４５
分間インキュベートする。 （６） デカントし，逆さにしたプレートをペーパータオル上で軽くたたくこと
により，ＦｉｘＤｅｎａｔ溶液をよく除去する。ブロッキング溶液としてミルク
を加え（ＰＢＳ中５％脱水ミルク，２００μｌ／ウエル），プレートをプレート
振盪器上で室温で３０分間インキュベートする。 （７） デカントによりブロッキング溶液を除去し，ウエルをＰＢＳで１回洗浄
する。抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ溶液（ＰＢＳ，１％ＢＳＡ中１：１００希釈）を加え
（１００μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器上で９０分間室温でインキ
ュベートする。 （８） デカントし，ウエルをＰＢＳで５回すすぐことにより抗体コンジュゲー
トをよく除去し，プレートを逆さにしてペーパータオル上で軽くたたくことによ
り乾燥させる。 （９） ＴＭＢ基質溶液を加え（１００μｌ／ウエル），プレート振盪器で室温
で２０分間，発色が光度計検出に十分となるまでインキュベートする。 （１０） サンプルの吸光度を，Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＥＬＩＳＡプレートリーダ
ーで，４１０ｎｍで（参照波長として４９０ｎｍで読むフィルターを用いる"二
波長"モードで）測定する。
【０６８１】ＩＧＦ１−誘導性ＢｒｄＵ取り込みアッセイ 材料および試薬 ： （１） ＩＧＦ１リガンド：ヒト，組換え；Ｇ５１１，Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒ
ｐ，ＵＳＡ （２） ＢｒｄＵ標識試薬：１０ｍＭ，ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中，Ｃａｔ．Ｎｏ
．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ
（３） ＦｉｘＤｅｎａｔ：固定溶液（即使用可），Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２
２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （４） 抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ：ペルオキシダーゼとコンジュゲート化したマウス
モノクローナル抗体，Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （５） ＴＭＢ基質溶液：テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ），即使用可，Ｃａ
ｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒ
ｍａｎｙ （６） ＰＢＳ洗浄溶液：１ＸＰＢＳ，ｐＨ７．４（Ｓｕｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｒ
ｅｄｗｏｏｄ Ｃｉｔｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ） （７） アルブミン，ウシ（ＢＳＡ）：画分Ｖ粉末；Ａ−８５５１，Ｓｉｇｍａ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，ＵＳＡ （８） ヒトＩＧＦ−１レセプターを発現するよう遺伝子工学処理された３Ｔ３
細胞株
【０６８２】プロトコル ： （１） 細胞をＤＭＥＭ，１０％ＣＳ，２ｍＭＧｌｎ中で９６−ウエルプレート
に８０００細胞／ウエルで播種する。細胞を５％ＣＯ2中，３７℃で一夜インキ
ュベートする。 （２） ２４時間後，細胞をＰＢＳで洗浄し，次に無血清培地（０％ＣＳ ＤＭ
ＥＭ，０．１％ＢＳＡ）中で２４時間血清飢餓とする （３） 第３日に，リガンド（ＩＧＦ１＝３．３ｎＭ，０．１％ＢＳＡを含むＤ
ＭＥＭ中で調製）および試験化合物を細胞に同時に加える。陰性対照ウエルには
０．１％ＢＳＡを含む無血清ＤＭＥＭのみを加える。陽性対照細胞にはリガンド
（ＩＧＦ１）を加えるが試験化合物を加えない。試験化合物は，９６ウエルプレ
ートで無血清ＤＭＥＭ中でリガンドとともに調製し，連続希釈して７種類の試験
濃度とする。 （４） リガンド活性化の１６時間後，希釈ＢｒｄＵ標識試薬（ＤＭＥＭ，０．
１％ＢＳＡ中１：１００）を加え，細胞をＢｒｄＵ（最終濃度＝１０μＭ）とと
もに１．５時間インキュベートする。 （５） 標識試薬とともにインキュベーションした後，デカントし，逆さにした
プレートをペーパータオル上で軽くたたくことにより培地を除去する。ＦｉｘＤ
ｅｎａｔ溶液を加え（５０μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器上で室温
で４５分間インキュベートする。 （６） デカントし，逆さにしたプレートをペーパータオル上で軽くたたくこと
によりＦｉｘＤｅｎａｔ溶液をよく除去する。ブロッキング溶液としてミルクを
加え（ＰＢＳ中５％脱水ミルク，２００μｌ／ウエル），プレートをプレート振
盪器上で室温で３０分間インキュベートする。 （７） ブロッキング溶液をデカントにより除去し，ウエルをＰＢＳで１回洗浄
する。抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ溶液（ＰＢＳ，１％ＢＳＡ中１：１００希釈）を加え
（１００μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器上で室温で９０分間インキ
ュベートする。 （８） デカントし，ウエルをＰＢＳで５回すすぐことにより抗体コンジュゲー
トをよく除去し，プレートを逆さにしペーパータオル上で軽くたたくことにより
乾燥する。 （９） ＴＭＢ基質溶液を加え（１００μｌ／ウエル），プレート振盪器上で室
温で２０分間，発色が光度計検出に十分となるまでインキュベートする。 （１０） サンプルの吸光度は，Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＥＬＩＳＡプレートリーダ
ーで，４１０ｎｍ（参照波長として４９０ｎｍで読むフィルターを用いる"二波
長"モード）で測定する。
【０６８３】ＦＧＦ−誘導性ＢｒｄＵ取り込みアッセイ このアッセイは，外来性ＦＧＦレセプターを発現する３Ｔｃ７／ＥＧＦｒ細胞
におけるＦＧＦ誘導性ＤＮＡ合成を測定する。
【０６８４】材料および試薬： １．ＦＧＦ：ヒトＦＧＦ２／ｂＦＧＦ（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ，Ｎｏ．１３２５６
−０２９） ２．ＢｒｄＵ標識試薬，（１０ｍＭＰＢＳ（ｐＨ７．４），Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅ
ｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ ＣａｔＮｏ．１６４７２２９） ３．Ｆｉｘｄｅｎａｔ固定溶液（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ Ｃ
ａｔ Ｎｏ．１６４７２２９） ４．抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ（ペルオキシダーゼとコンジュゲートしたマウスモノク
ローナル抗体，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ ＭａｎｎｈｅｉｍＣａｔ：．Ｎｏ．１６
４７２２９） ５．ＴＭＢ（テトラメチルベンジジン，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉ
ｍＣａｔ．Ｎｏ．１６４７２２９） ６．ＰＢＳ洗浄溶液，ｐＨ７．４（Ｓｕｇｅｎ，Ｉｎｃ．） ７．アルブミン，ウシ（ＢＳＡ），画分Ｖ粉末（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ
Ｃｏ．，Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ−８５５１）
【０６８５】方法 １．３Ｔ３遺伝子工学処理細胞株：３Ｔ３ｃ７／ＥＧＦｒ ２．細胞は，ＤＭＥＭ，１０％ＣＳおよび２ｍＭＧｌｎで，９６ウエルプレート
に８，０００細胞／ウエルで播種する。５％ＣＯ2中で３７℃で２４時間インキ
ュベートする。 ３．２４時間後，細胞をＰＢＳで洗浄し，次に，無血清培地（０％ＤＭＥＭ，０
．１％ＢＳＡ）中で２４時間血清飢餓とする。 ４．リガンド（ＦＧＦ２（ＤＭＥＭ中１．５ｎＭ，０．１％ＢＳＡ）および試験
化合物を同時に加える。陰性対照ウエルには０．１％ＢＳＡを含む無血清ＤＭＥ
Ｍのみを加え，陽性対照ウエルにはＦＧＦ２リガンドを加えるが試験化合物は加
えない。試験化合物は，９６ウエルプレート中で無血清ＤＭＥＭ中でリガンドと
ともに調製し，連続希釈して７種類の試験濃度とする。 ５．２０時間後，希釈ＢｒｄＵ標識試薬を細胞に加え（１：１００ＢｒｄＵ：Ｄ
ＭＥＭ，０．１％ＢＳＡ，最終濃度１０μＭ），１．５時間インキュベートする
。 ６．培地をデカントする。ペーパータオルで痕跡量の物質を除去する。ＦｉｘＤ
ｅｎａｔを加え（５０μｌ／ウエル），プレート振盪器で室温で４５分間インキ
ュベートする。 ７．Ｆｉｘｄｅｎａｔ溶液を除去する。ブロッキング溶液（ＰＢＳ中５％脱水ミ
ルク（２００μｌ／ウエル））を加え，プレート振盪器で室温で３０分間インキ
ュベートする。 ８．ブロッキング溶液をデカントし，ウエルをＰＢＳで１回洗浄する。抗Ｂｒｄ
Ｕ−ＰＯＤ溶液（ＰＢＳ中１：１００希釈，０．１％ＢＳＡ）を加え，プレート
振盪器で室温で９０分間インキュベートする。 ９．抗体コンジュゲートをデカントし，ウエルをＰＢＳで５回すすぐ。ペーパー
タオル上で逆さにして軽くたたくことによりプレートを乾燥する。 １０．ＴＭＢ溶液を加え（１００μｌ／ウエル），プレート振盪器で室温で２０
分間，発色が光度検出に十分となるまでインキュベートする。 １１．Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＥＬＩＳＡプレートリーダーで"二波長"モードを用い
，４９０ｎＭのフィルターを用いて，４１０ｎＭで吸光度を測定する。
【０６８６】生化学的ＥＧＦＲアッセイ このアッセイは，ＥＬＩＳＡを用いてＥＧＦＲのインビトロキナーゼ活性を測
定する
【０６８７】材料および試薬 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥｌｉｓａプレート（ＣｏｒｎｉｎｇカタログＮ
ｏ．２５８０５−９６） ２．ＳＵＭ０１モノクローナル抗ＥＧＦＲ抗体（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌ
ａｂ，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．） ３．ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水，ＧｉｂｃｏカタログＮｏ．４５０
−１３００ＥＢ） ４．ＴＢＳＴ緩衝液
【表３０】 ５．ブロッキング緩衝液：
【表３１】 ６．Ａ４３１細胞溶解物（Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｌａｂ，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．
）７．ＴＢＳ緩衝液：
【表３２】 ８．ＴＢＳ＋１０％ＤＭＳＯ
【表３３】 ９．アデノシン−５'−三リン酸（ウマ筋肉からのＡＴＰ，Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ
．Ｎｏ．Ａ−５３９４） ｄＨ2Ｏ中１．０ｍＭ溶液を調製する。この試薬は使用の直前に作成し，氷上に
保存する。 １０．ＭｎＣｌ2 ｄＨ2Ｏ中１．０Ｍの保存溶液を調製する。 １１．ＡＴＰ／ＭｎＣｌ2リン酸化混合物
【表３４】 この試薬は，使用直前に調製し，氷上に保存しなければならない。 １２．ＮＵＮＣ９６ウエルＶ底ポリプロピレンプレート（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃ
ｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＳ−７２０９２） １３．エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ） ｄＨ2Ｏ中２００ｍＭの作業溶液を調製する。１０ＮＮａＯＨでｐＨ８．０に調
製する。 １４．ウサギポリクローナル抗ホスホチロシン血清（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
Ｌａｂ，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．） １５．ヤギ抗ウサギＩｇＧペルオキシダーゼコンジュゲート（Ｂｉｏｓｏｕｒｃ
ｅ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＬＴ０４０４） １６．ＡＢＴＳ（２，２'−アジノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−
硫酸），Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ−１８８８）
【表３５】 最初に，約９００ｍｌのｄＨ2Ｏ中で２つの成分を混合する。リン酸でｐＨを４
．０に調製する。ＡＢＴＳを加え，カバーし，約０．５時間放置し，濾過する。
溶液は使用前まで暗所で４℃で保存すべきである。 １７．過酸化水素３０％溶液（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｈ３２５） １８．ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2 １５ｍｌのＡＢＴＳ溶液と２．０μｌのＨ2Ｏ2を混合する。使用の５分前に調製
する。 １９．０．２ＭＨＣｌ
【０６８８】方法 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートをウエルあたり１００μｌＰ
ＢＳ中０．５μｇのＳＵＭ０１でコーティングし，４℃で一夜保存する。 ２．プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合ＳＵＭ０１をウエ
ルから除去する。ｄＨ2Ｏで１回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽く
たたいて過剰の液体を除去する。 ３．１５０μｌのブロッキング緩衝液を各ウエルに加える。振盪しながら室温で
３０分間インキュベートする。 ４．プレートを脱イオン水で３回，次にＴＢＳＴで１回洗浄する。プレートをペ
ーパータオル上で軽くたたいて，過剰の液体および気泡を除去する。 ５．溶解物をＰＢＳ中で希釈する（７μｇ溶解物／１００μｌＰＢＳ）。 ６．１００μｌの希釈溶解物を各ウエルに加える。室温で６０分間振盪する。 ７．上述の工程４に記載したようにプレートを洗浄する。 ８．１２０μｌのＴＢＳを，捕捉ＥＧＦＲを含有するＥＬＩＳＡプレートに加え
る。 ９．試験化合物を９６ウエルポリプロピレンプレート中でＴＢＳで１：１０に希
釈する（すなわち，１０μｌ化合物＋９０μｌＴＢＳ）。 １０．１３．５μｌの希釈試験化合物をＥＬＩＳＡプレートに加える。対照ウエ
ルには１３．５μｌＴＢＳ＋１０％ＤＭＳＯを加える（ウエルには試験化合物を
加えない）。 １１．振盪しながら室温で３０分間インキュベートする。 １２．１５μｌリン酸化混合物を陰性対照ウエルを除くすべてのウエルに直接加
える。陰性対照ウエルにはＡＴＰ／ＭｎＣｌ2を加えない。（最終ウエル容量は
約１５０μｌ，各ウエル中３μＭＡＴＰ／５ｍＭＭｎＣｌ2の最終濃度となるは
ずである）。振盪しながら５分間インキュベートする。 １３．５分後，１６．５μｌの２００ｍＭＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）を各ウエルに
加えることにより反応を停止させ，振盪を続ける。ＥＤＴＡを加えた後，１分間
振盪する。 １４．脱イオン水で４回，ＴＢＳＴで２回洗浄する。 １５．ウエルあたり１００μｌの抗ホスホチロシン（ＴＢＳＴ中１：３０００希
釈）を加える。振盪しながら室温で３０−４５分間インキュベートする。 １６．上述の工程４に記載したように洗浄する。 １７．１００μｌのＢｉｏｓｏｕｒｃｅヤギ抗ウサギＩｇＧペルオキシダーゼコ
ンジュゲート（ＴＢＳＴ中１：２０００希釈）を各ウエルに加える。振盪しなが
ら室温で３０分間インキュベートする。 １８．上述の工程４に記載したように洗浄する。 １９．１００μｌのＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液を各ウエルに加える。 ２０．振盪しながら５−１０分間インキュベートする。気泡を除去する。 ２１．必要ならば，ウエルあたり１００μｌの０．２ＭＨＣｌを加えて，反応を
停止させる。 ２２．アッセイをＤｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡリーダーで読む
；試験フィルター：４１０ｎＭ参照フィルター：６３０Ｎｍ。
【０６８９】生化学的ＰＤＧＦＲアッセイ このアッセイは，ＥＬＩＳＡを用いてＰＤＧＦＲのインビトロキナーゼ活性を
測定する。
【０６９０】材料および試薬 特に記載しないかぎり，以下の試薬の作業溶液の調製は，上述の生化学的ＥＧ
ＦＲアッセイと同じである。 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥｌｉｓａプレート（ＣｏｒｎｉｎｇカタログＮ
ｏ．２５８０５−９６） ２．２８Ｄ４Ｃ１０モノクローナル抗ＰＤＧＦＲ抗体（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ Ｌａｂ，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．） ３．ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水，ＧｉｂｃｏカタログＮｏ．４５０
−１３００ＥＢ） ４．ＴＢＳＴ緩衝液 ５．ブロッキング緩衝液 ６．ＰＤＧＦＲ−β発現ＮＩＨ３Ｔ３細胞溶解物（Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｌａｂ
，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．） ７．ＴＢＳ緩衝液 ８．ＴＢＳ＋１０％ＤＭＳＯ ９．アデノシン−５'−三リン酸（ＡＴＰ，ウマ筋肉由来，Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ
．Ｎｏ．Ａ−５３９４） １０．ＭｎＣｌ2 １１．キナーゼ緩衝液リン酸化混合物
【表３６】 １２．ＮＵＮＣ９６ウエルＶ底ポリプロピレンプレート（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃ
ｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＳ−７２０９２） １３．エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ） １４．ウサギポリクローナル抗ホスホチロシン血清（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
Ｌａｂ，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．） １５．ヤギ抗ウサギＩｇＧペルオキシダーゼコンジュゲート（Ｂｉｏｓｏｕｒｃ
ｅ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＬＩ０４０４） １６．２，２'−アジノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−硫酸）（Ａ
ＢＴＳ，Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ−１８８８） １７．過酸化水素３０％溶液（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｈ３２５） １８．ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2 １９．０．２ＭＨＣｌ
【０６９１】方法 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートをウエルあたり１００μｌＰ
ＢＳ中の０．５μｇの２８Ｄ４Ｃ１０でコーティングする。４℃で一夜保存する
。 ２．プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合２８Ｄ４Ｃ１０を
ウエルから除去する。ｄＨ2Ｏで１回洗浄する。プレートをペーパータオル上で
軽くたたいて過剰の液体を除去する。 ３．１５０μｌのブロッキング緩衝液を各ウエルに加える。振盪しながら室温で
３０分間インキュベートする。 ４．プレートを脱イオン水で３回，次にＴＢＳＴで１回洗浄する。プレートをペ
ーパータオル上で軽くたたいて，過剰の液体および気泡を除去する。 ５．溶解物をＨＮＴＧ中で希釈する（１０μｇ溶解物／１００μｌＨＮＴＧ） ６．１００μｌの希釈溶解物を各ウエルに加える。室温で６０分間振盪する。 ７．プレートを上述の工程４に記載したように洗浄する。 ８．８０μｌの作業用キナーゼ緩衝液混合物を捕捉ＰＤＧＦＲを含有するＥＬＩ
ＳＡプレートに加える。 ９．試験化合物を９６ウエルポリプロピレンプレート中でＴＢＳで１：１０に希
釈する（１０μｌ化合物＋９０μｌＴＢＳ）。 １０．１０μｌの希釈試験化合物をＥＬＩＳＡプレートに加える。対照ウエル（
試験化合物を加えないウエル）には１０μｌＴＢＳ＋１０％ＤＭＳＯを加える。
１１．振盪しながら室温で３０分間インキュベートする。 １２．１０μｌのＡＴＰを陰性対照ウエルを除く全てのウエルに直接加える。（
各ウエル中最終ウエル容量は２０μＭＡＴＰを含む約１００μｌとなるはずであ
る）。振盪しながら３０分間インキュベートする。 １３．３０分後，１０μｌの２００ｍＭＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）を各ウエルに加
えることにより反応を停止する。 １４．脱イオン水で４回，ＴＢＳＴで２回洗浄する。 １５．ウエルあたり１００μｌの抗ホスホチロシン（ＴＢＳＴ中１：３０００希
釈）を加える。振盪しながら室温で３０−４５分間インキュベートする。 １６．上述の工程４に記載したように洗浄する。 １７．１００μｌのＢｉｏｓｏｕｒｃｅヤギ抗ウサギＩｇＧペルオキシダーゼコ
ンジュゲート（ＴＢＳＴ中１：２０００希釈）を各ウエルに加える。振盪しなが
ら室温で３０分間インキュベートする。 １８．上述の工程４に記載したように洗浄する。 １９．１００μｌのＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液を各ウエルに加える。 ２０．振盪しながら１０−３０分間インキュベートする。気泡を除去する。 ２１．必要ならば，ウエルあたり１００μｌの０．２ＭＨＣｌを加えて反応を停
止する。 ２２．Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡリーダーでアッセイを読む
：試験フィルター：４１０ｎＭ，参照フィルター：６３０ｎＭ。
【０６９２】生化学的ＦＧＦＲアッセイ このアッセイは，ＥＬＩＳＡを用いてＭｙｃ−ＧｙｒＢ−ＦＧＦＲ融合蛋白質
のキナーゼ活性をインビトロで測定する。
【０６９３】材料および試薬 １．ＨＮＴＧ
【表３７】 １リットルの５ｘ保存溶液を作成するためには，ＨＥＰＥＳおよびＮａＣｌを
約３５０ｍｌのｄＨ2Ｏに溶解し，ＨＣｌまたはＮａＯＨでｐＨを７．２に調節
し（用いるＨＥＰＥＳによる），グリセロール，ＴｒｉｔｏｎＸ１００を加え，
次にｄＨ2Ｏを加えて最終容量とする。 ２．ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水，Ｇｉｂｃｏカタログ＃４５０−１
３００ＥＢ） ３．ブロッキング緩衝液 ４．キナーゼ緩衝液
【表３８】 ５．フッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ，Ｓｉｇｍａ，Ｃａｔ．Ｎｏ．
Ｐ−７６２６） 作業溶液：エタノール中１００ｍＭ ６．ＡＴＰ（細菌起源，Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ−７６９９） ６ｍＭの濃度の保存液のためには，１ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏあたり３．３
１ｍｇを用いる。 ７．ビオチンコンジュゲート化抗ホスホチロシンモノクローナル抗体（クローン
４Ｇ１０，Ｕｐｓｔａｔｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ．Ｃａｔ．Ｎ
ｏ．１６−１０３，Ｓｅｒ．Ｎｏ．１４４９５） ８．Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ Ｅｌｉｔｅ ＡＢＣ試薬（アビジンペルオキシダー
ゼコンジュゲート，Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｃａｔ．Ｎｏ．
ＰＫ−６１００） ９．ＡＢＴＳ溶液 １０．過酸化水素３０％溶液（Ｆｉｓｈｅｒカタログ＃Ｈ３２５） １１．ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2 １２．０．２ＭＨＣｌ １３．ＴＲＩＳ ＨＣｌ（Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＢＰ１５２−５） ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中の１．０ｍＭ溶液を調製し，ＨＣｌでｐＨを７．２に調
節する １４．ＮａＣｌ（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｓ２７１−１０） ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中の５Ｍ溶液を調製する １５．ＭｇＣｌ2（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｍ３３−５００） ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中の１Ｍ溶液を調製する １６．ＨＥＰＥＳ（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＢＰ３１０−５００） ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中の１Ｍ溶液を調製し，ｐＨを７．５に調節し，濾過滅菌
する。 １７．ＴＢＳＴ緩衝液 １８．炭酸ナトリウム緩衝液（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｓ４９５） ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中に０．１Ｍ溶液を調製し，ＮａＯＨでｐＨを９．６に調
製し，濾過する。 １９．ジチオスレイトール（ＤＴＴ，Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＢＰ１７２
−２５） 使用直前にＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中に０．５ｍＭの作業溶液を調製する。使用す
るまで−２０℃で保存し，残りは廃棄する。 ２０．ＭｎＣｌ2 ２１．ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ２２．ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｃａｐｐｅｌ） ２３．アフィニティー精製ウサギ抗ＧＳＴ ＧｙｒＢ（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ Ｌａｂ．ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．）
【０６９４】方法 以下の全ての工程は，特に記載しない限り，室温で実施する。 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートを，ウエルの総容量が１００
μｌとなるように，ウエルあたり２μｇの炭酸緩衝液中のヤギ抗ウサギ抗体でコ
ーティングする。４℃で一夜保存する。 ２．プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合ヤギ抗ウサギ抗体
を除去する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて，過剰の液体および気
泡を除去する。 ３．１５０μｌのブロッキング緩衝液（ＰＢＳ中５％低脂肪ミルク）を各ウエル
に加える。マイクロタイタープレート振盪器で振盪しながら３０分間インキュベ
ートする。 ４．ＴＢＳＴで４回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて，過
剰の液体および気泡を除去する。 ５．ウエルあたり０．５μｇのウサギ抗ＧｙｒＢ抗体を加える。抗体をＤＰＢＳ
中で希釈して最終容量をウエルあたり１００μｌとする。マイクロタイタープレ
ート振盪器で振盪しながら室温で１時間インキュベートする。 ６．工程４に記載したようにＴＢＳＴで４回洗浄する。 ７．ＨＮＴＧ中の２μｇのＣＯＳ／ＦＧＦＲ細胞溶解物（Ｍｙｃ−ＧｙｒＢ−Ｆ
ＧＦＲ源）を各ウエルに加えて，ウエルあたり１００μｌの最終容量とする。マ
イクロタイタープレート振盪器で振盪しながら１時間インキュベートする。 ８．工程４に記載したようにＴＢＳＴで４回洗浄する。 ９．ウエルあたり８０μｌの１ｘキナーゼ緩衝液を加える。 １０．ポリプロピレン９６ウエルプレート中で試験化合物を１ｘキナーゼ緩衝液
＋１％ＤＭＳＯで１：１０に希釈する。 １１．希釈した試験化合物溶液および対照ウエルの１０μｌをポリプロピレンプ
レートウエルから対応するＥＬＩＳＡプレートウエルに移し，マイクロタイター
プレート振盪器で振盪しながら２０分間インキュベートする。 １２．キナーゼ緩衝液中で希釈した７０μＭＡＴＰの１０μｌを陽性対照および
試験ウエル（最終ＡＴＰ濃度は７μＭ／ウエル）に加える。１０μｌの１ｘキナ
ーゼ緩衝液を陰性対照ウエルに加える。マイクロタイタープレート振盪器で振盪
しながら１５分間インキュベートする。 １３．５μｌの０．５ＭＥＤＴＡをすべてのウエルに加えることによりキナーゼ
反応を停止する。 １４．工程４に記載したようにＴＢＳＴで４回洗浄する。 １５．ＴＢＳＴ中で希釈したビオチンコンジュゲート化抗ホスホチロシンモノク
ローナル抗体（ｂ４Ｇ１０）１００μｌを各ウエルに加える。マイクロタイター
プレート振盪器で振盪しながら３０分間インキュベートする。 １６．Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ ＡＢＣ試薬を調製する。１滴の試薬Ａを１５ｍｌ
のＴＢＳＴに加える。管を数回逆さにすることにより混合する。１滴の試薬Ｂを
加え，再び混合する。 １７．工程４に記載したようにＴＢＳＴで４回洗浄する。 １８．１００μｌのＡＢＣ ＨＲＰ試薬を各ウエルに加える。マイクロタイター
プレート振盪器で振盪しながら３０分間インキュベートする。 １９．工程４に記載したようにＴＢＳＴで４回洗浄する。 ２０．１００μｌのＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液を各ウエルに加える。 ２２．振盪しながら５−１５分間インキュベートする。気泡を除去する。 ２３．必要ならば，１００μｌの０．２ＭＨＣｌ／ウエルを加えることにより 反応を停止させる。 ２４．アッセイをＤｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡプレートリーダ
ーで読む；試験フィルター：４１０ｎＭ，参照フィルター：６３０ｎＭ。
【０６９５】生化学的ＦＬＫ−１アッセイ このアッセイは，ＥＬＩＳＡを用いて，ｆｌｋ−１自己リン酸化活性をインビ
トロで評価する。
【０６９６】材料および試薬 １．１５ｃｍ組織培養皿 ２．Ｆｌｋ−１／ＮＩＨ細胞：ヒトｆｌｋ−１クローン３（ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ
．，ＭＰＩ，Ｍａｒｔｉｎｓｒｉｅｄ，Ｇｅｒｍａｎｙより入手）を過剰発現す
るＮＩＨ繊維芽細胞株 ３．成長培地：ＤＭＥＭプラス熱不活性化１０％ＦＢＳおよび２ｍＭグルタミン
（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ） ４．飢餓培地：ＤＭＥＭプラス０．５％熱不活性化ＦＢＳ，２ｍＭグルタミン（
Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ） ５．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃａｔ．
Ｎｏ．２５８０５−９６） ６．ｆｌｋ−１に特異的なＬ４またはＥ３８モノクローナル抗体；蛋白質−Ａア
ガロースアフィニティークロマトグラフィーにより精製（ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．
） ７．ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水）Ｇｉｂｃｏ Ｃａｔ．Ｎｏ．４５
０−１３００ＥＢ） ８．ＨＮＴＧ（調製については生化学的ＦＧＦＲを参照） ９．ＰｉｅｒｃｅＢＣＡ蛋白質検定キット １０．ブロッキング緩衝液 １１．ＴＢＳＴ（ｐＨ７．０） １２．キナーゼ緩衝液 １３．キナーゼ停止溶液：２００ｍＭＥＤＴＡ １４．ビオチニル化４Ｇ１０，ホスホチロシンに特異的（ＵＢＩ，Ｃａｔ．Ｎｏ
．Ｎｏ．１６−１０３） １５．ＡＢキット（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｃａｔ．Ｎｏ．
ＰＫ４０００） １６．ＤＭＳＯ １７．ＮＵＮＣ９６ウエルＶ底ポリプロピレンプレート（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃ
ｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＳ−７２０９２） １８．Ｔｕｒｂｏ−ＴＭＢ（Ｐｉｅｒｃｅ） １９．Ｔｕｒｂｏ−ＴＭＢ停止溶液：１Ｍ Ｈ2ＳＯ4 ２０．ＡＴＰ（Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ−７６９９） ２１．２０％ＤＭＳＯ，ＴＢＳ（ｐＨ７．０）中
【０６９７】方法 細胞成長および溶解物調製 １．細胞を成長培地中に播種し，３７℃，５％ＣＯ2で９０−１００％コンフル
エントとなるまで２−３日間成長させる。２０継代を越えないこと。 ２．培地を除去し，細胞をＰＢＳで２回洗浄する。ＨＮＴＧ溶解緩衝液で溶解す
る。すべての溶解物を回収し，２０−３０秒間ボルテックス混合する。 ３．遠心分離（５−１０分間，約１０，０００ｘｇ）により不溶性物質を除去す
る。 ４．ＢＣＡキットを用いて蛋白質濃度を決定する。 ５．溶解物を１ｍｇのアリコートに分配し，−８０℃で保存する。アッセイ方法 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートを，１００μｌのＰＢＳ中の
２μｇ／ウエルの精製Ｌ４（またはＥ３８）でコーティングする。４℃で一夜保
存する。 ２．プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合蛋白質をウエルか
ら除去する。ｄＨ2Ｏで１回洗浄し，プレートをペーパータオル上で軽くたたい
て過剰の液体を除去する。 ３．プレートをウエルあたり１５０μｌのブロッキング緩衝液でブロッキングす
る。４℃で振盪しながら４５−６０分間インキュベートする。 ４．ブロッキング緩衝液を除去し，ＥＬＩＳＡプレートをｄＨ2Ｏで３回，ＴＢ
ＳＴで１回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて過剰の液体を
除去する。 ５．溶解物をＰＢＳ中で希釈して，最終濃度を５０μｇ／１００μｌとする。１
００μｌの希釈溶解物を各ウエルに加える。振盪しながら４℃で一夜インキュベ
ートする。 ６．プレートを逆さにすることにより未結合蛋白質をウエルから除去する。工程
４と同様に洗浄する。 ７．８０μｌのキナーゼ緩衝液をウエルに加える（陰性対照ウエルには９０μｌ
）。 ８．試験化合物をＴＢＳ中２０％ＤＭＳＯを含むポリプロピレンプレートのウエ
ル中で希釈する（通常は１０倍）。 ９．１０μｌの希釈化合物を固定化ｆｌｋ−１を含むＥＬＩＳＡウエルに加え，
振盪する。対照ウエルには化合物を加えない。 １０．１ｍＭＡＴＰ保存液から，ｄＨ2Ｏ中０．３ｍＭＡＴＰ溶液を調製する（
あるいは，キナーゼ緩衝液を用いてもよい）。 １１．陰性対照を除くすべてのウエルに１０μｌの０．３ｍＭＡＴＰを加える。
振盪しながら室温で６０分間インキュベートする。 １２．１時間後，１１μｌの２００ｍＭＥＤＴＡを加えることにより，キナーゼ
反応を停止させる。１−２分間振盪する。 １３．ＥＬＩＳＡプレートをｄＨ2Ｏで４回，ＴＢＳＴで２回洗浄する。 １４．１００μｌの１：５０００ビオチニル化４Ｇ１Ｏ：ＴＢＳＴをすべてのウ
エルに加える。振盪しながら室温で４５分間インキュベートする。 １５．上述のものをインキュベートしている間，ＡＢＣキットからの５０μｌの
溶液ＡおよびＢを１０ｍｌのＴＢＳＴに加える。これらの溶液は，使用の約３０
分前に混合しなければならない。 １６．工程４と同様にプレートを洗浄する。 １７．あらかじめ形成したＡとＢの複合体１００μｌをすべてのウエルに加える
。振盪しながら室温で３０分間インキュベートする。 １８．工程４と同様にプレートを洗浄する。 １９．１００μｌのＴｕｒｂｏ−ＴＭＢを加える。室温で１０−１５分間振盪す
る。 ２０．陽性対照ウエルの色が吸光度約０．３５−０．４に達したとき，１００μ
ｌのＴｕｒｂｏ−ＴＭＢ停止溶液で反応を停止する。 ２１．Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡリーダーでプレートを読む
。試験フィルター：４５０ｎＭ，参照フィルター：４１０ｎＭ。
【０６９８】ＨＵＶ−ＥＣ−Ｃアッセイ また，以下のプロトコルを用いて，ＰＤＧＦ−Ｒ，ＦＧＦ−Ｒ，ＶＥＧＦ，ａ
ＦＧＦまたはＦｌｋ−１／ＫＤＲ（これらはすべてＨＵＶ−ＥＣ細胞により天然
に発現されている）に対する化合物の活性を測定することができる。
【０６９９】第０日 １． ＨＵＶ−ＥＣ−Ｃ細胞（ヒト臍静脈内皮細胞，（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙ
ｐｅ Ｃｕｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ；カタログＮｏ．１７３０ＣＲＬ）
を洗浄し，トリプシン処理する。ダルベッコリン酸緩衝化食塩水（Ｄ−ＰＢＳ；
Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ；カタログＮｏ．１４１９０−０２９から入手）で２回，約
１ｍｌ／１０ｃｍ2組織培養フラスコで洗浄する。非酵素細胞解離溶液（Ｓｉｇ
ｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ；カタログＮｏ．Ｃ−１５４４）中で
０．０５％トリプシン−ＥＤＴＡでトリプシン処理する。０．０５％トリプシン
は，０．２５％トリプシン／１ｍＭＥＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ；カタログＮｏ．２５
２００−０４９）を細胞解離溶液中で希釈することにより作成する。約１ｍｌ／
２５−３０ｃｍ2組織培養フラスコで３７℃で約５分間トリプシン処理する。細
胞をフラスコからはがした後，等量のアッセイ培地を加え，５０ｍｌ滅菌遠心分
離管（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；カタログＮｏ．０５−５３９−６
）に移す。 ２． ５０ｍｌ滅菌遠心分離管中にアッセイ培地を加えることにより，細胞を約
３５ｍｌのアッセイ培地で洗浄し，約２００ｇで１０分間遠心分離し，上清を吸
引し，３５ｍｌのＤ−ＰＢＳに再懸濁する。Ｄ−ＰＢＳでさらに２回洗浄し，細
胞を約１ｍｌ／組織培養フラスコ１５ｃｍ2のアッセイ培地に再懸濁する。アッ
セイ培地は，Ｆ１２Ｋ培地（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ；カタログＮｏ．２１１２７−
０１４）＋０．５％熱不活性化ウシ胎児血清からなる。Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｃｏｕ
ｎｔｅｒ（商標）（Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．）で細
胞を計数し，アッセイ培地を細胞に加えて０．８−１．０ｘ１０5細胞／ｍｌの
濃度とする。 ３． 細胞を９６ウエル平底プレートに１００μｌ／ウエルまたは０．８−１．
０ｘ１０4細胞／ウエルで加える；３７℃，５％ＣＯ2で約２４時間インキュベー
トする。
【０７００】第１日 １． 試験化合物の２倍滴定を別々の９６ウエルプレート中に作成する。一般に
，５０μＭから０μＭまで。上述の第０日，工程２と同じアッセイ培地を用いる
。滴定は，９０μｌ／ウエルの試験化合物を２００μＭ（４Ｘ最終ウエル濃度）
で特定のプレートカラムの最上のウエルに加えることにより行う。試験化合物保
存液濃度は通常ＤＭＳＯ中２０ｍＭであるため，２００μＭの薬剤濃度は２％Ｄ
ＭＳＯを含む。 ＤＭＳＯ濃度を一定に保持しながら薬剤を希釈するために，アッセイ培地中（
Ｆ１２Ｋ＋０．５％ウシ胎児血清）２％ＤＭＳＯとした希釈剤を，試験化合物滴
定の希釈剤として用いる。この希釈物をカラム中の残りのウエルに６０μｌ／ウ
エルで加える。カラムの最上ウエル中の１２０μｌの２００μＭ試験化合物希釈
物から６０μｌを採取し，カラムの第２のウエル中の６０μｌと混合する。この
ウエルから６０μｌを採取し，カラム中の第３のウエル中の６０μｌと混合し，
２倍滴定が完了するまでこれを続ける。最後から２番目のウエルが混合されたと
き，このウエル中の１２０μｌの６０μｌを採取し，これを廃棄する。最後のウ
エルには薬剤非含有対照として６０μｌのＤＭＳＯ／培地希釈物を加える。以下
のアッセイの，滴定する試験化合物の三重のウエルに十分な９つのカラムを作成
する：（１）ＶＥＧＦ（Ｐｅｐｒｏ Ｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，から入手，カタログ
Ｎｏ．１００−２００，（２）内皮細胞成長因子（ＥＣＧＦ）（酸性繊維芽細胞
成長因子またはａＦＧＦとしても知られる）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎ
ｈｅｉｍ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａから入手，カタログＮｏ．１４３９６００）；
または（３）ヒトＰＤＧＦ Ｂ／Ｂ（１２７６−９５６，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）およびアッセイ培地対照。ＥＣＧＦはヘ
パリンナトリウムを有する調製物として得た。 ２． ５０μｌ／ウエルの試験化合物希釈物を，第０日からのＨＵＶ−ＥＣ−Ｃ
細胞０．８−１．０ｘ１０4細胞／１００μｌ／ウエルを含む９６ウエルアッセ
イプレートに移し，３７oＣ，５％ＣＯ2で約２時間インキュベートする。 ３． 三重に，８０μｇ／ｍｌＶＥＧＦ，２０ｎｇ／ｍｌＥＣＧＦ，または各試
験化合物の条件に対する培地対照を５０μｌ／ウエルで加える。試験化合物につ
いては，成長因子濃度は所望の最終濃度の４倍である。第０日，工程２からのア
ッセイ培地を用いて，成長因子の濃度を調節する。３７℃，５％ＣＯ2で約２４
時間インキュベートする。各ウエルに５０μｌの試験化合物希釈物，５０μｌの
成長因子または培地，および１００μｌの細胞を加え，総量２００μｌ／ウエル
とする。すなわち，すべてをウエルに加えたとき，４倍濃度の試験化合物および
成長因子は１倍となる。
【０７０１】第２日 １． 3Ｈ−チミジン（Ａｍｅｒｓｈａｍ；カタログＮｏ．ＴＲＫ−６８６）を
１μＣｉ／ウエル（ＲＰＭＩ培地＋１０％熱不活性化ウシ胎児血清中で調製した
１００μＣｉ／ｍｌ溶液を１０μｌ／ウエル）で加え，３７℃，５％ＣＯ2で約
２４時間インキュベートする。ＲＰＭＩはＧｉｂｃｏ ＢＲＬから入手する，カ
タログＮｏ．１１８７５−０５１
【０７０２】第３日 １． プレートを−２０℃で一夜凍結する。
【０７０３】第４日 １． プレートを融解し，９６ウエルプレート回収器（Ｔｏｍｔｅｃ Ｈａｒｖ
ｅｓｔｅｒ９６（登録商標））でフィルターマット（Ｗａｌｌａｃ；カタログＮ
ｏ．１２０５−４０１）上に回収する；Ｗａｌｌａｃ Ｂｅｔａｐｌａｔｅ（商
標）液体シンチレーション計数機で計数する。
【０７０４】インビボ動物モデル 異種移植片動物モデル ヒト腫瘍が無胸腺マウス（例えば，Ｂａｌｂ／ｃ，ｎｕ／ｎｕ）中で異種移植
片として成長する能力は，ヒト腫瘍の治療に対する生物学的応答を研究するのに
有用なインビボモデルを提供する。ヒト腫瘍の無胸腺マウスへの最初の成功的な
異種移植（Ｒｙｇａａｒｄ ａｎｄ Ｐｏｖｌｓｅｎ，１９６９，Ａｃｔａ Ｐ
ａｔｈｏｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ．Ｓｃａｎｄ．７７：７５８−７６０）以来，
多くの異なるヒト腫瘍細胞株（例えば，***，肺，尿生殖器，胃腸，頭頸部，神
経膠芽細胞腫，骨，および悪性黒色腫）が移植され，ヌードマウス中での成長に
成功してきた。以下のアッセイを用いて，本発明の種々の化合物の活性，特異性
および効果のレベルを決定することができる。３種類の一般的アッセイ，すなわ
ち細胞／触媒，細胞／生物学的およびインビボアッセイが化合物の評価に有用で
ある。細胞／触媒アッセイの目的は，ＴＫが細胞中の既知の基質上のチロシンを
リン酸化する能力に及ぼす化合物の影響を判定することである。細胞／生物学的
アッセイの目的は，細胞中でＴＫにより刺激される生物学的応答に及ぼす化合物
の影響を判定することである。インビボアッセイの目的は，特定の疾患，例えば
癌の動物モデルにおける化合物の影響を判定することである。
【０７０５】 皮下異種移植片実験に適した細胞株としては，Ｃ６細胞（神経膠腫，ＡＴＣＣ
＃ＣＣＬ１０７），Ａ３７５細胞（黒色腫，ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１６１９），Ａ４
３１細胞（類表皮癌腫，ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１５５５），Ｃａｌｕ６細胞（肺，Ａ
ＴＣＣ＃ＨＴＢ５６），ＰＣ３細胞（前立腺，ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１４３５），お
よびＥＧＦＲ，ＰＤＧＦＲ，ＩＧＦ−１Ｒまたは任意の他の試験キナーゼを過剰
発現するように遺伝子工学処理されたＳＫＯＶ３ＴＰ５細胞およびＮＩＨ３Ｔ３
繊維芽細胞が挙げられる。以下のプロトコルを用いて異種移植片実験を行うこと
ができる。
【０７０６】 雌無胸腺マウス（ＢＡＬＢ／ｃ，ｎｕ／ｎｕ）はＳｉｍｏｎｓｅｎ Ｌａｂｏ
ｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｇｉｌｒｏｙ，ＣＡ）から入手する。すべての動物は，クリ
ーンルーム条件下で，マイクロアイソレーターケージでアルファドライ敷きわら
で維持する。動物には，滅菌齧歯類食および水を任意に与える。
【０７０７】 細胞株は，適当な培地（例えば，ＭＥＭ，ＤＭＥＭ，Ｈａｍ'ｓＦ１０，また
はＨａｍ'ｓＦ１２プラス５％−１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）および２ｍＭグ
ルタミン（ＧＬＮ））中で成長させる。すべての細胞培養培地，グルタミン，お
よびウシ胎児血清は，特に断らない限り，Ｇｉｂｃｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏ
ｌｏｇｉｅｓ（Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ）から購入する。すべての細胞
は，９０−９５％空気および５−１０％ＣＯ2の湿潤環境下で３７℃で成長させ
る。すべての細胞株は，週に２回，定期的に継代し，Ｍｙｃｏｔｅｃｔ法（Ｇｉ
ｂｃｏ）により判定して，マイコプラズマについては陰性である。
【０７０８】 細胞は，コンフルエント，またはそれに近い状態で，０．０５％トリプシン−
ＥＤＴＡで回収し，４５０ｘｇで１０分間ペレット化する。ペレットを滅菌ＰＢ
Ｓまたは培地（ＦＢＳなし）中に懸濁して特定の濃度とし，細胞をマウス（１群
あたり，８−１０匹のマウス，２−１０ｘ１０6細胞／動物）の後側腹部内に移
植する。腫瘍成長は，ベニエカリパスを用いて３−６週間にわたり測定する。腫
瘍体積は，とくに記載のないかぎり，長さｘ幅ｘ高さの積として計算する。Ｐ値
は，スチューデントｔ−テストを用いて計算する。５０−１００μｌの賦形剤（
ＤＭＳＯ，またはＶＰＤ：Ｄ５Ｗ）中の試験化合物は，通常は移植後の第１日か
ら初めて，異なる濃度でＩＰ注入により輸送することができる。
【０７０９】腫瘍侵襲モデル 以下の腫瘍侵襲モデルが開発されており，ＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターを選
択的に阻害すると同定された化合物の治療的価値および有効性を評価するために
用いることができる。
【０７１０】方法 ８週齢のヌードマウス（雌）（ＳｉｍｏｎｓｅｎＩｎｃ．）を実験動物として
用いる。腫瘍細胞の移植は，層流フード内で行うことができる。麻酔用に，キシ
ラジン／ケタミンカクテル（１００ｍｇ／ｋｇケタミンおよび５ｍｇ／ｋｇキシ
ラジン）を腹膜内に投与する。中線切開を行って，腹腔を露出して（約１．５ｃ
ｍの長さ），容量１００μｌの培地中の１０7個の腫瘍細胞を注入する。細胞は
，膵臓の十二指腸葉または結腸の漿膜下に注入する。腹膜および筋肉を６−０絹
連続縫糸により縫合し，皮膚は創傷クリップを用いて縫合する。動物は毎日観察
する。
【０７１１】分析 動物の全体的所見により２−６週間後，マウスを殺し，局所腫瘍の種々の臓器
（肺，肝臓，脳，胃，脾臓，心臓，筋肉）への転移を調べ，分析する（腫瘍サイ
ズ，侵襲の程度，免疫化学，およびインサイチオハイブリダイゼーション測定）
。
【０７１２】細胞毒性の測定 治療用化合物は，細胞毒性効果を発揮するよりも，蛋白質キナーゼ活性の阻害
においてより強力であるべきである。ある化合物の有効性および細胞毒性の尺度
は，治療指数，すなわちＩＣ50／ＬＤ50を決定することにより得ることができる
。５０％阻害を達成するのに必要な用量ＩＣ50は，標準的な技術，例えば本明細
書に記載される技術を用いて測定することができる。５０％毒性を与える用量Ｌ
Ｄ50もまた，標準的な技術を用いて（Ｍｏｓｓｍａｎ，１９８３，Ｊ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，６５：５５−６３），放出されたＬＤＨの量を測定す
ることにより（Ｋｏｒｚｅｎｉｅｗｓｋｉ ａｎｄ Ｃａｌｌｅｗａｅｒｔ，１
９８３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，６４：３１３；Ｄｅｃｋｅｒ
ａｎｄ Ｌｏｈｍａｎｎ−Ｍａｔｔｈｅｓ，１９８８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ，１１５：６１），または動物モデルにおける致死量を測定するこ
とにより，測定することができる。高い治療指数を有する化合物が好ましい。治
療指数は，２より大きくなくてはならず，好ましくは少なくとも１０，より好ま
しくは少なくとも５０である。
【０７１３】例−生物学的活性 本発明の化合物のインビトロの効力の例は，表２に示される。示される例は，
いかなる意味においても，本発明を限定するものと解釈すべきではない。
【０７１４】結論 本発明の化合物，方法および医薬組成物は，ＰＫ活性を調節するのに有効であ
り，したがって，ＲＴＫ，ＣＴＫ，およびＳＴＫ関連疾患に対する治療薬として
有効であると予測されることが理解されるであろう。 当業者は，本発明は，その目的を実施し，記載される結果および利点，ならび
に本明細書に固有のものを得るのによく適合していることを容易に理解するであ
ろう。本明細書に記載される分子複合体および方法，手順，処理，分子，特定の
化合物は，現在のところ好ましい態様の代表的なものであり，例示的なものであ
って，本発明の範囲を限定することを意図するものではない。当業者は，特許請
求の範囲において定義される本発明の精神の中に包含される変更および他の用途
をなすであろう。
【０７１５】 当業者は，本発明の範囲および精神から逸脱することなく，本明細書に開示さ
れる本発明に対して置換基および修飾の変更をなすことが可能であることを容易
に理解するであろう。
【０７１６】 本明細書において言及されるすべての特許および刊行物は，本発明の属する技
術分野の技術者のレベルを示す。すべての特許および刊行物は，それぞれの刊行
物が特定的に個々に本明細書の一部としてここに引用されることと同じ程度に，
本明細書の一部として引用される。
【０７１７】 本明細書に例示的に記載されている発明は，本明細書に特定的に開示されてい
ない任意の要素または限定なしでも適切に実施することができる。すなわち，例
えば，本明細書における各例において，”・・・を含む"，"・・・から本質的に
なる"および"・・・からなる"との用語は，他の２つのいずれかと置き換えるこ
とができる。本明細書において用いた用語および表現は，説明の用語として用い
るものであり，限定ではない。そのような用語および表現の使用においては，示
されかつ記載されている特徴またはその一部の等価物を排除することを意図する
ものではなく，特許請求の範囲に記載される本発明の範囲中で種々の変更が可能
であることが理解される。すなわち，好ましい態様および任意の特徴により本発
明を特定的に開示してきたが，当業者には本明細書に記載される概念の変更およ
び変種が可能であり，そのような変更および変種も特許請求の範囲に定義される
本発明の範囲内であると考えられることが理解されるべきである。 さらに，発明の特徴および局面がマーカッシュグループの用語で記載されてい
る場合，当業者は，本発明が，マーカッシュグループのメンバーの個々のメンバ
ーまたはサブグループに関してもまた記載されていることを認識するであろう。
例えば，Ｘが，臭素，塩素およびヨウ素からなる群より選択されるとして記載さ
れている場合，Ｘが臭素である特許請求の範囲およびＸが臭素および塩素である
特許請求の範囲も完全に記載されている。
【０７１８】 他の態様も特許請求の範囲の範囲内である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/5377 Ａ６１Ｋ 31/5377 Ａ６１Ｐ 9/00 Ａ６１Ｐ 9/00 17/06 17/06 19/02 19/02 29/00 29/00 １０１ １０１ 35/00 35/00 37/00 37/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ Ｃ０７Ｄ 401/10 Ｃ０７Ｄ 401/10 403/06 403/06 405/06 405/06 409/10 409/10 471/04 １０４ 471/04 １０４Ｚ (31)優先権主張番号 ６０／１０２，１７８ (32)優先日 平成10年９月28日(1998．9．28) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ６０／１１６，１０７ (32)優先日 平成11年１月15日(1999．1．15) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，Ｇ Ｈ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ， ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，Ｍ Ｗ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ， ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (71)出願人 230 Ｅａｓｔ Ｇｒａｎｄ Ａｖｅｎｕ ｅ，Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓ ｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ 94080，Ｕ ｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅ ｒｉｃａ (72)発明者 ミラー，トッド・アンソニー アメリカ合衆国カリフォルニア州94587， ユニオン・シティー，コルサ・ストリート 4928 (72)発明者 リャン，コンジン アメリカ合衆国カリフォルニア州94087， サニーヴェイル，ウエスト・レミントン・ ドライブ 729 (72)発明者 トラン，エンゴク・マイ アメリカ合衆国カリフォルニア州94065， レッドウッド・シティー，シャノン・ウェ イ 550，エスピーティー6306 (72)発明者 ニュイエン，アン・ティー アメリカ合衆国カリフォルニア州94539， フレモント，ベカド・プレイス 503 (72)発明者 ネマタラ，アサード アメリカ合衆国カリフォルニア州94596， ウォルナット・クリーク，ボデガ・プレイ ス 1324 Ｆターム(参考） 4C063 AA01 AA03 BB03 BB06 BB08 CC06 CC11 CC34 CC76 CC79 CC92 DD04 DD06 EE01 4C065 AA04 BB04 CC01 DD02 EE02 HH01 JJ01 KK04 LL01 PP03 PP04 QQ05 4C086 AA01 AA02 AA03 AA04 BA05 BA08 BB02 BC05 BC07 BC50 BC73 GA02 GA04 GA07 GA08 GA09 MA02 MA05 NA14 ZA36 ZA89 ZB01 ZB11 ZB15 ZB26 4C204 AB02 BB01 BB09 CB03 DB04 DB30 DB31 DB40 EB03 FB01 GB01 GB15 GB26 GB32 GB40

Claims (35)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 次の化学構造： 【化１】 ［式中， Ａは，炭素および窒素からなる群より選択され； Ｑは， 【化２】 からなる群より選択され 結合ａおよびｂは点線により表されるように単結合または二重結合のいずれであ
    ってもよく，ただし，本発明のいずれか１つの化合物においてａおよびｂは両方
    とも単結合であるかまたは両方とも二重結合であり； ａおよびｂが二重結合であるときｒは１であり； ａおよびｂが単結合であるときｒは２であり； Ｒ0は，水素，アルキル，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19および−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群よ
    り選択され； Ｒ1は，水素，アルキル，アルコキシ，ハロ，アリール，−（ＣＨ2）nＯＣ（Ｏ
    ）Ｒ19；−Ｃ（Ｏ）ＮＲ19；−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19および−（ＣＨ2）nＲ20からなる
    群より選択され， ここで，Ｒ19は，水素，アルキル，アルケニル，アルキニル，シクロアルキルお
    よびアリールからなる群より選択され； ｎは，１，２，３または４であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ21Ｒ22；−Ｏ
    Ｃ（Ｓ）ＮＲ21Ｒ22，−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＳＯ2Ｒ21Ｒ22；−ＮＲ21Ｒ22，および
    環中に少なくとも１つの窒素原子を含むヘテロ脂環式基であって環は窒素原子を
    介して隣接するＣＨ2基に結合している，からなる群より選択され； Ｒ2は，水素，アルキル，シクロアルキル，アリール，ヘテロアリール，ヘテロ
    脂環式，トリハロメチル，アルコキシ，ハロ，−（ＣＨ2）nＲ20，−ＳＯ2ＮＲ2 1 Ｒ22，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19，−ＮＲ21
    Ｒ22および−Ｎ＝ＣＲ23からなる群より選択され， ここで，Ｒ21およびＲ22は，独立して，水素，アルキル，アルケニル，アルキニ
    ル，シクロアルキル，アリール，ヘテロアリール，ヘテロ脂環式からなる群より
    選択され； Ｒ23は，アルキル，アルケニル，アルキニル，シクロアルキル，アリールおよび
    ヘテロアリールからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，アルキル，トリハロメチル，アルコキシ，アリール，アリールオ
    キシ，ヘテロアリール，ヘテロ脂環式，ヒドロキシ，ハロ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22
    ，−ＮＨＳＯ2Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−ＮＲ21Ｒ22および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ2 4 からなる群より選択され， ここで，Ｒ24は，アルキル，アルケニル，アルキニル，アリール，ヘテロアリー
    ルおよびヘテロ脂環式からなる群より選択され； Ｒ4は，水素，アルキル，アルコキシおよびハロからなる群より選択され； Ｒ5は，水素，アルキル，シクロアルキル，ハロ，アリールおよびヘテロアリー
    ルからなる群より選択され； Ｒ6は，水素，アルキル，アルコキシ，ハロ，シクロアルキル，アリールからな
    る群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造： 【化３】 ［式中，ｙおよびｙ'は，独立して，水素，アルキルおよびアリールからなる群
    より選択される］ を有するヘテロ脂環式基であり； Ｒ7は，ＯＲ18であり，ここでＲ18は，アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20からなる群
    より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって，構造： 【化４】 を有するヘテロ脂環式基であり； Ｒ8は，水素，アルキル，シクロアルキル，アルコキシ，ハロ，アリール，ヘテ
    ロアリールからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造： 【化５】 を有するヘテロ脂環式環であり； Ｒ9は，水素，アルキル，アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ21Ｒ22からなる群より
    選択され； Ｒ10は，アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され； Ｒ11は，水素，アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され； Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ13は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または水素
    およびアルキルからなる群より選択される基であり； Ｒ14は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または水素
    ，アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択される基であり； Ｒ15は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または水素
    であり； ただし，本発明のいずれか１つの化合物において，Ｒ13，Ｒ14またはＲ15のいず
    れか１つのみが，Ｑを分子の残りに結合している結合であり； Ｒ16およびＲ17は，ａおよびｂが単結合であるとき，水素，アルキルおよびアリ
    ールからなる群より独立して選択され，ａおよびｂが二重結合であるとき，Ｒ16 は，水素であり，Ｒ17は存在しない］ を有する化合物またはその生理学的に許容される塩。
  2. 【請求項２】 Ｑが 【化６】 である，請求項１記載の化合物または塩。
  3. 【請求項３】 Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる
    群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，低級
    アルコキシ，−ＮＲ21Ｒ22，−（ＣＨ2）nＲ20および−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19から
    なる群より選択され； Ｒ3は，水素，ヒドロキシ，ハロ，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル），−ＮＨ
    ＳＯ2Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ24，トリハロメチル，および１またはそれ以上の
    低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択さ
    れ； Ｒ4は水素であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
    −イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
    なる群より選択され； Ｒ21およびＲ22は，独立して，水素および低級アルキルからなる群より選択され
    ；および， Ｒ24は，水素および低級アルキルからなる群より選択される，請求項２記載の化
    合物または塩。
  4. 【請求項４】 Ｒ5は，水素，低級アルキル，ハロ，５員環ヘテロアリール
    ，および低級アルキル，ハロ，ヒドロキシ，−ＮＲ21Ｒ22および低級アルコキシ
    からなる群より選択される１またはそれ以上の基で任意に置換されていてもよい
    アリールからなる群より選択され； Ｒ6は，水素，低級アルキル，３−７員のシクロアルキル，低級アルコキシ，ハ
    ロ，および低級アルキル，ハロ，ヒドロキシ，−ＮＲ21Ｒ22および低級アルコキ
    シからなる群より独立して選択される１またはそれ以上の基で任意に置換されて
    いてもよいアリールからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって構造： 【化７】 ［式中，ｙおよびｙ'は両方とも水素であるかまたは両方とも低級アルキルであ
    る］ を有する基であり； Ｒ7は，−ＯＲ18であり，ここでＲ18は，低級アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20から
    なる群より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって，構造： 【化８】 を有する基であり； Ｒ8は，水素，低級アルキル，３−６員環のシクロアルキル，低級アルコキシ，
    ハロ，および低級アルキル，低級アルコキシ，ハロ，−ＮＲ21Ｒ22および−ＮＨ
    Ｃ（Ｏ）（低級アルキル）からなる群より選択される１またはそれ以上の基で任
    意に置換されていてもよいアリール，環中に１−３個のヘテロ原子を有する５員
    のヘテロアリール，および環中に１−３個のヘテロ原子を有する６員のヘテロア
    リールからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造： 【化９】 を有する基であり； Ｒ9は，水素，低級アルキル；ヒドロキシ，低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ2 1 Ｒ22からなる群より選択される， 請求項３記載の化合物または塩。
  5. 【請求項５】 Ｒ5は，水素，低級アルキル，チエン−２−イル，チエン−
    ３−イル，および１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていて
    もよいアリールからなる群より選択され； Ｒ6は，水素，低級アルキル，５員または６員のシクロアルキル，および１また
    はそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる
    群より選択され，またはＲ18と一緒になって構造： 【化１０】 ［式中，ｙおよびｙ'は両方とも水素であるかまたは両方とも低級アルキルであ
    る］ を有する基であり； Ｒ7は，−ＯＲ18であり，ここで，Ｒ18は，低級アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20か
    らなる群より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって，構造： 【化１１】 を有する基であり； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
    −イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
    なる群より選択され； Ｒ8は，水素，低級アルキル，５員または６員環のシクロアルキル，低級アルコ
    キシ，および−ＮＨＣ（Ｏ）（低級アルキル）基で任意に置換されていてもよい
    アリール，チエン−２−イル，チエン−３−イル，ピリジン−２−イル，および
    ピリジン−３−イルからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造
    ： 【化１２】 を有する基であり；および Ｒ9は，水素および低級アルキルからなる群より選択される，請求項３記載の化
    合物または塩。
  6. 【請求項６】 Ｑが 【化１３】 である，請求項１記載の化合物または塩。
  7. 【請求項７】 Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からな
    る群より選択され； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および
    −Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，および１またはそれ以上
    の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択
    され；および， Ｒ4は水素である，請求項６記載の化合物または塩。
  8. 【請求項８】 Ｒ10は，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群よ
    り選択され； Ｒ11は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され；
    Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２または３であり；および， Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
    −イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
    なる群より選択される，請求項７記載の化合物または塩。
  9. 【請求項９】 Ｒ10は，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル）
    からなる群より選択され； Ｒ11は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され；
    Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは２であり；および， Ｒ20は，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−１−イル，ピペリジン−１−イル，ピペ
    ラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−Ｎ（低級アルキル）2からな
    る群より選択される， 請求項７記載の化合物または塩。
  10. 【請求項１０】 Ｑは， 【化１４】 であり； Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
    Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
    Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
    ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
    １またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
    らなる群より選択され；および， Ｒ4は，水素である，請求項１記載の化合物または塩。
  11. 【請求項１１】 ａおよびｂはいずれも単結合であり； ｒは２であり； Ｒ13は，共有結合であって，Ｑはこれを介して分子の残りに結合しており； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
    Ｒ15は，水素であり； Ｒ16およびＲ17は，独立して，水素および低級アルキルからなる群より選択され
    る，請求項１０記載の化合物または塩。
  12. 【請求項１２】 Ｒ20は，−ＮＲ21Ｒ22であり，ここでＲ21およびＲ22は，
    水素および低級アルキルからなる群より独立して選択される，請求項１１記載の
    化合物または塩。
  13. 【請求項１３】 ａおよびｂはいずれも二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ13は，共有結合であって，Ｑはこれを介して分子の残りに結合しており； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
    Ｒ15およびＲ16は水素であり；および， Ｒ17は存在しない，請求項１０記載の化合物または塩
  14. 【請求項１４】 ａおよびｂはいずれも二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ13は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ14は，共有結合であって，Ｑはこれを介して分子の残りに結合しており； Ｒ15およびＲ16は水素であり；および， Ｒ17は存在しない，請求項１０記載の化合物または塩。
  15. 【請求項１５】 ａおよびｂは二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ13は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
    Ｒ15は，共有結合であって，Ｑはこれを介して分子の残りに結合しており； Ｒ16は，水素であり；および， Ｒ17は存在しない，請求項１０記載の化合物または塩。
  16. 【請求項１６】 請求項１記載の化合物または塩および薬学的に許容しうる
    担体または賦形剤を含む医薬組成物。
  17. 【請求項１７】 蛋白質キナーゼの触媒活性を調節する方法であって，前記
    蛋白質キナーゼを請求項１記載の化合物または塩と接触させることを含む方法。
  18. 【請求項１８】 前記蛋白質キナーゼが，レセプターチロシンキナーゼ，非
    レセプターチロシンキナーゼおよびセリン−トレオニンキナーゼからなる群より
    選択される，請求項１７記載の方法。
  19. 【請求項１９】 生物において蛋白質キナーゼ関連疾患を治療または予防す
    る方法であって，治療的有効量の請求項１記載の化合物または塩を前記生物に投
    与することを含む方法。
  20. 【請求項２０】 前記蛋白質キナーゼ関連疾患が，レセプターチロシンキナ
    ーゼ関連疾患，非レセプターチロシンキナーゼ関連疾患およびセリン−トレオニ
    ンキナーゼ関連疾患からなる群より選択される，請求項１９記載の方法。
  21. 【請求項２１】 前記蛋白質キナーゼ関連疾患が，ＥＧＦＲ関連疾患，ＰＤ
    ＧＦＲ関連疾患，ＩＧＦＲ関連疾患およびｆｌｋ関連疾患からなる群より選択さ
    れる，請求項１９記載の方法。
  22. 【請求項２２】 前記蛋白質キナーゼ関連疾患が，扁平上皮癌，星状細胞腫
    ，カポジ肉腫，神経膠芽細胞腫，肺癌，膀胱癌，頭頚部癌，黒色腫，卵巣癌，前
    立腺癌，乳癌，小細胞肺癌，神経膠腫，直腸結腸癌，尿生殖器癌および胃腸癌か
    らなる群より選択される癌である，請求項１９記載の方法。
  23. 【請求項２３】 前記蛋白質キナーゼ関連疾患が，糖尿病，自己免疫疾患，
    過増殖疾患，再狭窄，線維症，乾癬，フォン・ヒッペル−リンダウ症候群，変形
    性関節症，慢性関節リウマチ，脈管形成，炎症性疾患，免疫疾患および心血管疾
    患からなる群より選択される，請求項１９記載の方法。
  24. 【請求項２４】 前記生物がヒトである，請求項１９記載の方法。
  25. 【請求項２５】 ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデ
    ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキ
    ソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−ヒドロキシ
    −１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−アセチル−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
    １，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２
    ，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸メチルエステル， ３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイン
    ドール−２−オン， ３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−
    ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン
    ）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイ
    ンドール−２−オン， ３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−１，
    ３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイ
    ンドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジ
    ヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，
    ３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−
    ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−｛３−［３−シクロヘキシル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）
    −ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イ
    ル｝−アセトアミド， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−メトキシ−
    １，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−２−オ
    キソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−メチル−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−アミノ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３−
    ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−フルオロ−
    １，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−５−フルオロ−１，３
    −ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン−４−イル
    エトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−７−フルオロ−
    １，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−５−（２−モ
    ルホリン−４−イルエチル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−２
    −オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−エチル−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［２'−メトキシ−５'−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−
    イリデンメチル）−ビフェニル−３−イル］−アセトアミド， ５−フルオロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデ
    ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−２−イルベンジリデン）−２−オ
    キソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド， ６−アミノ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−２−オキソ−２
    ，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド， ５−ブロモ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−
    ジヒドロインドール−２−オン， ３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−１，３−ジヒ
    ドロインドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン
    ）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−フルオロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−
    ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−
    ジヒドロインドール−２−オン，３−（４，５−ジメトキシ−２−チオフェン−
    ２−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−３−チオフェン−２
    −イルベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６
    −イル｝−アセトアミド， ３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−４−メチル−１，３−
    ジヒドロインドール−２−オン， ３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−５−フルオロ−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−１，
    ３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−フルオロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
    −ジヒドロインドール−２−オン， ３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−
    ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（３'−エトキシ−６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３
    −ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロピ
    ロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３
    −ジヒドロインドール−２−オン， ３−（４，５，２'−トリメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−１，３−
    ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−３−チオフェン−３
    −イルベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６
    −イル｝−アセトアミド， ５−クロロ−３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
    −ジヒドロインドール−２−オン， ［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−
    ２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブ
    チルエステル， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−｛３−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ
    ）−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−
    イル｝−アセトアミド， ３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロ
    ロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ５−ブロモ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン−４−イル
    エトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３'−エトキシ−４，５−ジメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−
    １，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（４−メトキシ−３−チオフェン−２−イルベンジリデン）−
    １，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（４−メトキシ−３−ピリジン−３−イルベンジリデン）−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（４，５，３'−トリメトキシビフェニル−２−イルメチレン
    ）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（４，５−ジメトキシ−２−ナフタレン−２−イルベンジリデン）−１，３
    −ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（３'−アセチルアミノ−６−メトキシビフェニル−３−イルメチレ
    ン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセト
    アミド， ６−メトキシ−３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）
    −１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインド
    ール−２−オン， ３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
    インドール−２−オン， ５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジ
    ヒドロインドール−２−オン， ３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３
    −ジヒドロインドール−２−オン， ３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−４−メチル−１，
    ３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロ
    ロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロピロロ
    ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロピ
    ロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
    ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒド
    ロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ５−ブロモ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−
    ジヒドロインドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
    −ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−４−メ
    チル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−４−メチル
    −１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン
    ）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−４−メチ
    ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−トリフルオ
    ロメチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ６−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキ
    ソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−プロピオン酸， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−メトキシ−
    １，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−ブチル−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２
    ，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−４−カルボン酸， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−メト
    キシフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ７−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５
    −メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−
    ２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブ
    チルエステル， ５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−
    ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
    −ジヒドロインドール−２−オン， ３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジ
    ヒドロインドール−２−オン， ３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−４−メチ
    ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，
    ３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチ
    ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４
    −メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−４−メチ
    ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２
    ，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５，６−ジメト
    キシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキ
    ソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−メタンスルホンアミド
    ， Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキ
    ソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−ベンズアミド， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−エト
    キシフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−フェニル−
    １，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−
    １，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−フルオロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３
    −ジヒドロインドール−２−オン， ３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−ジヒドロイン
    ドール−２−オン からなる群より選択される，請求項１記載の化合物またはその塩。
  26. 【請求項２６】 ５−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−
    イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，
    ３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド， ３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，
    ３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド， ３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，
    ３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド， ３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，
    ３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸， ５−アセチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
    ，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−アセチル−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒド
    ロインドール−２−オン， ３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ
    −１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド， ５−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
    インドール−２−オン， ３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ
    −１Ｈ−インドール−５−カルボン酸， ６−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
    インドール−２−オン， ３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−
    ２−オン， ５−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
    インドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
    インドール−２−オン， ３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロ
    インドール−２−オン， ３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
    インドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，
    ３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，
    ３−ジヒドロインドール−２−オン， ４−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，
    ３−ジヒドロインドール−２−オン，および ３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−５［（１Ｈ−インドール−２−
    イルメチレン）アミノ］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン からなる群より選択される，請求項１記載の化合物またはその生理学的に許容し
    うる塩。
  27. 【請求項２７】 ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール
    −３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
    ３−イル］−プロピオン酸， ３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
    リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
    ］−プロピオン酸， ３−２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリ
    デンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］
    −プロピオン酸， ３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
    リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
    ］−プロピオン酸， ３−［２−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
    リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
    ］−プロピオン酸， ３−［２−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
    リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
    ］−プロピオン酸， ３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−
    イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
    ル］−プロピオン酸， Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−
    ３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
    −イル］−プロピオンアミド， ３−［３−（３−ジメチルアミノ−プロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
    −１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１，３−ジヒドロ−インドール−２
    −オン， ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル
    ）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
    ンアミド， ３−［３−（３−モルホリン−４−イル−３−オキソ−プロピル）−４，５，６
    ，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１，３−ジヒド
    ロ−インドール−２−オン， Ｎ−メチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
    リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
    ］−プロピオンアミド， Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−３−［２−（２−オキソ−１，２
    −ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒド
    ロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミド， ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−
    ３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
    −イル］−プロピオン酸， ３−｛２−［６−（３−メトキシ−フェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ
    −インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−
    インドール−３−イル｝−プロピオン酸， ３−｛２−［６−（４−メトキシ−フェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ
    −インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−
    インドール−３−イル｝−プロピオン酸， ３−［２−（２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−インドール−３−
    イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
    ル］−プロピオン酸， ３−｛２−［６−（２−メトキシ−フェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ
    −インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−
    インドール−３−イル｝−プロピオン酸， ３−［２−（５−イソプロピルスルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ
    −インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−
    インドール−３−イル］−プロピオン酸， ３−［２−（６−モルホリン−４−イル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−イン
    ドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インド
    ール−３−イル］−プロピオン酸， ３−［２−（５−クロロ−４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インド
    ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
    ル−３−イル］−プロピオン酸， ３−［２−（５−ブロモ−４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インド
    ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
    ル−３−イル］−プロピオン酸， ３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
    リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
    ］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−プロピオンアミド， ３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
    リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
    ］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−プロピオンアミド，および ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル
    ）−フェニル］−プロピオン酸 からなる群より選択される，請求項１記載の化合物またはその生理学的に許容し
    うる塩。
  28. 【請求項２８】 ３−（３−（Ｒ27Ｒ28Ｎ）プロピル）−４，５，６，７−
    テトラヒドロ−１Ｈ−インドールを製造する方法であって， ５−アミノレブリン酸またはその塩酸塩を，５位においてアルキルおよびアリー
    ルからなる群より独立して選択される１または２個の基で任意に置換されていて
    もよい１，３−シクロヘキサジオンと，第１の溶媒中，塩基の存在下で，約６０
    ℃−約１８０℃の温度で反応させて，任意に置換されていてもよい３−（４−オ
    キソ−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）プロピオ
    ン酸を得； 前記３−（４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
    −イル）プロピオン酸を，Ｒ27Ｒ28ＮＨ基（式中，Ｒ27およびＲ28は，水素，ア
    ルキル，アルケニル，アルキニルおよびアリールからなる群より独立して選択さ
    れるか，またはＲ27およびＲ28は一緒になって，窒素原子とともに５員ヘテロア
    リール基を形成し，または窒素原子とともに５員または６員のヘテロ脂環式基を
    形成する）と反応させて，任意に置換されていてもよい３−（３−（Ｒ27Ｒ28Ｎ
    ）−３−オキソプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−インドール−４−
    オンを得；そして 前記３−（３−（Ｒ27Ｒ28Ｎ）−３−オキソプロピル）−４，５，６，７−テト
    ラヒドロインドール−４−オンを，第２の溶媒中で，およそ室温から約８０℃の
    温度で，金属水素化物還元剤で還元して，３−（３−Ｒ27Ｒ28Ｎ）プロピル−４
    ，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドールを得る， の各工程を含む方法。
  29. 【請求項２９】 前記５−アミノレブリン酸またはその塩酸塩と前記任意に
    置換されていてもよい１，３−シクロヘキサジオンとの反応を，前記第１の溶媒
    として水を用いて行う，請求項２８記載の方法。
  30. 【請求項３０】 前記５−アミノレブリン酸またはその塩酸塩と前記任意に
    置換されていてもよい１，３−シクロヘキサジオンとの反応を，前記塩基として
    酢酸ナトリウムを用いて行う，請求項２８記載の方法。
  31. 【請求項３１】 前記５−アミノレブリン酸またはその塩酸塩と前記任意に
    置換されていてもよい１，３−シクロヘキサジオンとの反応を，約１００℃−約
    １２０℃の温度で行う，請求項２８記載の方法。
  32. 【請求項３２】 Ｒ27およびＲ28基として，独立して低級アルキル，および
    一緒になって−（ＣＨ2）4−，−（ＣＨ2）5−，−（ＣＨ2）2Ｏ（ＣＨ2）2−お
    よび−（ＣＨ2）2Ｎ（ＣＨ2）2−からなる群より選択される基を用いる，請求項
    ２８記載の方法。
  33. 【請求項３３】 前記Ｒ27Ｒ28ＮＨと前記３−（４−オキソ−４，５，６，
    ７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）プロピオン酸との前記反応を
    ，１，１−カルボニルジイミダゾールを用いて行う，請求項２８記載の方法。
  34. 【請求項３４】 前記３−（３−（Ｒ27Ｒ28Ｎ）−３−オキソプロピル）−
    ４，５，６，７−テトラヒドロインドール−４−オンの還元を，水素化リチウム
    アルミニウムを用いて行う，請求項２８記載の方法。
  35. 【請求項３５】 前記３−（３−（Ｒ27Ｒ28Ｎ）−３−オキソプロピル）−
    ４，５，６，７−テトラヒドロインドール−４−オンの還元を，前記第２の溶媒
    としてテトラヒドロフランを用いて，およそ室温から前記テトラヒドロフランの
    還流温度までの温度で行う，請求項２８記載の方法。
JP2000563824A 1998-08-04 1999-08-04 蛋白質キナーゼの調節剤３−メチリデニル−２−インドリノン Withdrawn JP2002522452A (ja)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12925698A 1998-08-04 1998-08-04
US9547098P 1998-08-05 1998-08-05
US10217898P 1998-09-28 1998-09-28
US11610799P 1999-01-15 1999-01-15
US09/129,256 1999-01-15
US60/102,178 1999-01-15
US60/116,107 1999-01-15
US60/095,470 1999-01-15
PCT/US1999/017845 WO2000008202A2 (en) 1998-08-04 1999-08-04 3-methylidenyl-2-indolinone modulators of protein kinase

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2002522452A true JP2002522452A (ja) 2002-07-23
JP2002522452A5 JP2002522452A5 (ja) 2006-09-14

Family

ID=27492796

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2000563824A Withdrawn JP2002522452A (ja) 1998-08-04 1999-08-04 蛋白質キナーゼの調節剤３−メチリデニル−２−インドリノン

Country Status (4)

Country Link
JP (1) JP2002522452A (ja)
AU (1) AU5468499A (ja)
CA (1) CA2383623A1 (ja)
WO (1) WO2000008202A2 (ja)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006512400A (ja) * 2002-11-27 2006-04-13 アラーガン、インコーポレイテッド 疾患の治療のためのキナーゼ阻害剤
JP2011037848A (ja) * 2009-08-04 2011-02-24 Lab Servier 新規なジヒドロインドロン化合物、それらの調製方法及びそれらを含む薬学的組成物
JP2012522729A (ja) * 2009-04-06 2012-09-27 ユニバーシティ・ヘルス・ネットワーク キナーゼインヒビターおよびこれを用いた癌の治療方法
US9139563B2 (en) 2010-04-06 2015-09-22 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer
US20160250220A1 (en) 2013-10-18 2016-09-01 University Health Network Treatment for pancreatic cancer
JP2018533600A (ja) * 2015-11-12 2018-11-15 エルジー・ケム・リミテッド ７−アザインドリン−２−オン誘導体又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6569868B2 (en) 1998-04-16 2003-05-27 Sugen, Inc. 2-indolinone derivatives as modulators of protein kinase activity
CN1158283C (zh) 1998-12-17 2004-07-21 霍夫曼-拉罗奇有限公司 作为蛋白激酶抑制剂的4-和5-吡嗪基羟吲哚
TR200101860T2 (tr) * 1998-12-17 2001-12-21 F.Hoffmann-La Roche Ag Sikline bağlı kinaz inhibitörleri olarak 4-alkenil (ve alkinil) oksidoller
US6153634A (en) 1998-12-17 2000-11-28 Hoffmann-La Roche Inc. 4,5-azolo-oxindoles
AU760039B2 (en) 1998-12-17 2003-05-08 F. Hoffmann-La Roche Ag 4-aryloxindoles as inhibitors of JNK protein kinases
US6878733B1 (en) 1999-11-24 2005-04-12 Sugen, Inc. Formulations for pharmaceutical agents ionizable as free acids or free bases
PT1233943E (pt) * 1999-11-24 2011-09-01 Sugen Inc Formulações para agentes farmacêuticos ionizáveis como ácidos livres ou bases livres
US6313310B1 (en) 1999-12-15 2001-11-06 Hoffmann-La Roche Inc. 4-and 5-alkynyloxindoles and 4-and 5-alkenyloxindoles
CA2407799A1 (en) 2000-05-02 2001-11-08 Sugen, Inc. (2-oxindol-3-ylidenyl)acetic acid derivatives and their use as protein kinase inhibitors
TWI270545B (en) * 2000-05-24 2007-01-11 Sugen Inc Mannich base prodrugs of 3-(pyrrol-2-ylmethylidene)-2-indolinone derivatives
CA2410509A1 (en) 2000-06-02 2001-12-13 Sugen, Inc. Indolinone derivatives as protein kinase/phosphatase inhibitors
PE20020776A1 (es) * 2000-12-20 2002-08-22 Sugen Inc Indolinonas 4-aril sustituidas
US7186745B2 (en) 2001-03-06 2007-03-06 Astrazeneca Ab Indolone derivatives having vascular damaging activity
US7081454B2 (en) 2001-03-28 2006-07-25 Bristol-Myers Squibb Co. Tyrosine kinase inhibitors
US6797725B2 (en) 2001-04-09 2004-09-28 Sugen, Inc. Prodrugs of a 3-(pyrrol-2-ylmethylidene)-2-indolinone derivatives
CA2448076A1 (en) * 2001-05-24 2002-11-28 Masahiko Hayakawa 3-quinoline-2-(1h)-ylideneindolin-2-one derivatives
AU2002303892A1 (en) 2001-05-30 2002-12-09 Jingrong Cui 5-aralkylsulfonyl-3- (pyrrol-2-ylmethylidene)-2-indolinone derivatives as kinase inhibitors
CA2459879A1 (en) * 2001-09-10 2003-03-20 Sugen, Inc. 3-(4,5,6,7-tetrahydroindol-2-ylmethylidiene)-2-indolinone derivatives as kinase inhibitors
JP2005508337A (ja) * 2001-09-27 2005-03-31 スミスクライン ビーチャム コーポレーション 化合物
AU2003284572A1 (en) * 2002-11-22 2004-06-18 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. 2-oxoindoline derivatives
US7517697B2 (en) * 2003-02-05 2009-04-14 Applied Biosystems, Llc Compositions and methods for preserving RNA in biological samples
US7312215B2 (en) 2003-07-29 2007-12-25 Bristol-Myers Squibb Company Benzimidazole C-2 heterocycles as kinase inhibitors
GT200500321A (es) * 2004-11-09 2006-09-04 Compuestos y composiciones como inhibidores de proteina kinase.
WO2006119148A2 (en) * 2005-04-29 2006-11-09 The Ohio State University Research Foundation Keratinocyte growth factor receptor - tyrosine specific inhibitors for the prevention of cancer metastatis
WO2009030270A1 (en) * 2007-09-03 2009-03-12 Novartis Ag Dihydroindole derivatives useful in parkinson's disease
JP2011506494A (ja) 2007-12-21 2011-03-03 ユニバーシティ・ヘルス・ネットワーク 癌の治療に有用なキナーゼ阻害剤としてのインダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル置換インドルモン誘導体
WO2012048411A1 (en) * 2010-10-13 2012-04-19 University Health Network Plk-4 inhibitors and method of treating cancer with same
WO2012142029A2 (en) * 2011-04-10 2012-10-18 Florida A&M University Serms for the treatment of estrogen receptor-mediated disorders
AU2013314417B2 (en) 2012-09-13 2016-01-21 F. Hoffmann-La Roche Ag 2-oxo-2,3-dihydro-indoles for the treatment of CNS disorders
US9296730B2 (en) 2012-10-26 2016-03-29 Regents Of The University Of Minnesota Aurora kinase inhibitors
US10487054B2 (en) 2017-04-21 2019-11-26 Regents Of The University Of Minnesota Therapeutic compounds
CA3115000A1 (en) * 2018-10-05 2020-04-09 Ichnos Sciences S.A. Indolinone compounds for use as map4k1 inhibitors
GR1010103B (el) * 2020-07-02 2021-10-18 Uni-Pharma Κλεων Τσετης Φαρμακευτικα Εργαστηρια Αβεε, 3-ινδολ-2-υλομεθυλιδενο-ινδολιν-2-ονες με δραση αναστολης της αυτοταξινης
WO2022006412A2 (en) * 2020-07-02 2022-01-06 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Conjugates of ampk inhibitors and protac degraders and related uses

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9004483D0 (en) * 1990-02-28 1990-04-25 Erba Carlo Spa New aryl-and heteroarylethenylene derivatives and process for their preparation
FR2678911A1 (fr) * 1991-07-10 1993-01-15 Prospection & Inventions Cartouche tubulaire de stockage et d'application d'un produit non solide et ensemble d'entrainement et de poussee pour la cartouche.
GB9115160D0 (en) * 1991-07-12 1991-08-28 Erba Carlo Spa Methylen-oxindole derivatives and process for their preparation
FR2694004B1 (fr) * 1992-07-21 1994-08-26 Adir Nouvelles 3-(Hydroxybenzylidényl)-indoline-2-ones et 3-(hydroxybenzylidényl)-indoline-2-thiones, leurs procédés de préparation, et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
US5650415A (en) * 1995-06-07 1997-07-22 Sugen, Inc. Quinoline compounds

Cited By (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006512400A (ja) * 2002-11-27 2006-04-13 アラーガン、インコーポレイテッド 疾患の治療のためのキナーゼ阻害剤
JP2011225582A (ja) * 2002-11-27 2011-11-10 Allergan Inc 疾患の治療のためのキナーゼ阻害剤
JP4879492B2 (ja) * 2002-11-27 2012-02-22 アラーガン、インコーポレイテッド 疾患の治療のためのキナーゼ阻害剤
JP2012522729A (ja) * 2009-04-06 2012-09-27 ユニバーシティ・ヘルス・ネットワーク キナーゼインヒビターおよびこれを用いた癌の治療方法
US8999968B2 (en) 2009-04-06 2015-04-07 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer with same
USRE47731E1 (en) 2009-04-06 2019-11-19 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer with same
JP2011037848A (ja) * 2009-08-04 2011-02-24 Lab Servier 新規なジヒドロインドロン化合物、それらの調製方法及びそれらを含む薬学的組成物
JP2013116908A (ja) * 2009-08-04 2013-06-13 Lab Servier 新規なジヒドロインドロン化合物、それらの調製方法及びそれらを含む薬学的組成物
US9907800B2 (en) 2010-04-06 2018-03-06 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer
US9579327B2 (en) 2010-04-06 2017-02-28 University Health Network Synthesis of chiral 2-(1H-indazol-6-yl)-spiro[cyclopropane-1,3′-indolin]-2′-ones
US9796703B2 (en) 2010-04-06 2017-10-24 University Health Network Synthesis of chiral 2-(1H-indazol-6-yl)-spiro[cyclopropane-1,3′-indolin]-2′-ones
US10077255B2 (en) 2010-04-06 2018-09-18 University Health Network Synthesis of chiral 2-(1H-indazol-6-yl)-spiro[cyclopropane-1,3′-indolin]-2′-ones
US10358436B2 (en) 2010-04-06 2019-07-23 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer
US9139563B2 (en) 2010-04-06 2015-09-22 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer
US9642856B2 (en) 2013-10-18 2017-05-09 University Health Network Treatment for pancreatic cancer
US20160250220A1 (en) 2013-10-18 2016-09-01 University Health Network Treatment for pancreatic cancer
JP2018533600A (ja) * 2015-11-12 2018-11-15 エルジー・ケム・リミテッド ７−アザインドリン−２−オン誘導体又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物

Also Published As

Publication number Publication date
WO2000008202A9 (en) 2000-07-27
CA2383623A1 (en) 2000-02-17
WO2000008202A2 (en) 2000-02-17
WO2000008202A3 (en) 2000-05-18
AU5468499A (en) 2000-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2002522452A (ja) 蛋白質キナーゼの調節剤３−メチリデニル−２−インドリノン
US7119090B2 (en) Pyrrole substituted 2-indolinone protein kinase inhibitors
EP1259514B9 (en) 3-(pyrolyllactone)-2-indolinone compounds as kinase inhibitors
JP3663382B2 (ja) ピロール置換２−インドリノン蛋白質キナーゼ阻害剤
WO2000056709A1 (en) Indolinone compounds as kinase inhibitors
JP2002511852A (ja) 蛋白質キナーゼ活性の調節剤としての２−インドリノン誘導体
WO2004014368A1 (en) 3-pyrrolyl-pyridopyrazoles and 3-pyrrolyl-indazoles as novel kinase inhibitors
US6114371A (en) 3-(cyclohexanoheteroarylidenyl)-2-indolinone protein tyrosine kinase inhibitors
JP2003535847A (ja) 蛋白質キナーゼ／ホスファターゼ阻害剤としてのインドリノン誘導体
JP2002523455A (ja) 蛋白質キナーゼ活性の調節剤としての幾何学的に制限された２−インドリノン誘導体
JP2004502686A (ja) ４−ヘテロアリール−３−ヘテロアリーリデニル−２−インドリノンおよび蛋白質キナーゼ阻害剤としてのその使用
US6689806B1 (en) Indolinone compounds as kinase inhibitors
US6531502B1 (en) 3-Methylidenyl-2-indolinone modulators of protein kinase
US6130238A (en) 3-(cyclohexanoheteroarylidenyl)-2-indolinone protein tyrosine kinase inhibitors
WO2005016875A2 (en) Geometrically restricted 3-cyclopentylidene-1,3-dihydroindol-2-ones as potent protein kinase inhibitors
MXPA00011770A (en) Pyrrole substituted 2-indolinone protein kinase inhibitors
CZ20004412A3 (cs) Pyrrolem substituované 2-indoIinony jako inhibitory proteinkinázy

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20060711

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20060711

A761 Written withdrawal of application

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A761

Effective date: 20070205