JP2002522452A - Regulator of protein kinase 3-methylidenyl-2-indolinone - Google Patents

Regulator of protein kinase 3-methylidenyl-2-indolinone

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JP2002522452A JP2000563824A JP2000563824A JP2002522452A JP 2002522452 A JP2002522452 A JP 2002522452A JP 2000563824 A JP2000563824 A JP 2000563824A JP 2000563824 A JP2000563824 A JP 2000563824A JP 2002522452 A JP2002522452 A JP 2002522452A
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Abstract

(57)【要約】 本発明は，蛋白質キナーゼの活性を調節し，このことにより蛋白質キナーゼに関連する細胞疾患，例えば癌の予防および治療に有用であると予測される，新規な３−メチリデニル−２−インドリノン化合物およびその生理学的に許容しうる塩およびプロドラッグに関する。   (57) [Summary] The present invention relates to a novel 3-methylidenyl-2-indolinone compound which regulates the activity of a protein kinase, and thereby is expected to be useful for the prevention and treatment of cell diseases related to the protein kinase such as cancer. It relates to physiologically acceptable salts and prodrugs.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】序 本発明は，一般に，有機化学，生化学，薬理学および医薬品に関する。より詳
細には，本発明は，蛋白質キナーゼ（"ＰＫ"）の活性を調節し，異常なＰＫ活性
に関連する疾患に対して有益な影響を及ぼすことが予測される，３−メチリデニ
ル−２−インドリノン誘導体，およびその生理学的に許容しうる塩およびプロド
ラッグに関する。[0001] Introduction The present invention relates generally to organic chemistry, biochemistry, pharmacology and medicine. More specifically, the present invention modulates the activity of protein kinases ("PKs") and is expected to have a beneficial effect on diseases associated with abnormal PK activity, 3-methylidenyl-2- The present invention relates to indolinone derivatives, and physiologically acceptable salts and prodrugs thereof.

【０００２】発明の背景 以下は，背景情報としてのみ提供されるものであり，本発明に対する先行技術
であると認めるものではない。BACKGROUND OF THE INVENTION The following is provided only as background information and is not admitted to be prior art to the present invention.

【０００３】 ＰＫは，蛋白質のチロシン，セリンおよびトレオニン残基上のヒドロキシ基の
リン酸化を触媒する酵素である。この外観上は単純な活性の結果は圧倒的である
。細胞成長，分化および増殖，すなわち，細胞生命のほぼすべての観点が種々の
仕方でＰＫ活性に依存する。さらに，異常なＰＫ活性は，比較的生命を脅かさな
い疾患（例えば乾癬）から，非常に悪性の疾患（例えば神経膠細胞腫（脳癌））
までの範囲の疾患の宿主と関連づけられてきた。[0003] PK is an enzyme that catalyzes the phosphorylation of hydroxy groups on tyrosine, serine and threonine residues of proteins. The result of this apparently simple activity is overwhelming. Almost every aspect of cell growth, differentiation and proliferation, ie, cell life, depends in various ways on PK activity. In addition, abnormal PK activity can range from relatively life-threatening diseases (eg, psoriasis) to very malignant diseases (eg, gliomas (brain cancer)).
Up to a range of disease hosts.

【０００４】 ＰＫは，慣用的に２種類に分類することができる：蛋白質チロシンキナーゼ（
ＰＴＫ）およびセリン−トレオニンキナーゼ（ＳＴＫ）。[0004] PKs can be conventionally classified into two classes: protein tyrosine kinases (
PTK) and serine-threonine kinase (STK).

【０００５】 ＰＴＫ活性の主な観点は，成長因子レセプターへのその関与である。成長因子
レセプターは，細胞表面蛋白質である。成長因子リガンドが結合すると，成長因
子レセプターは活性型に変換され，これが細胞膜の内表面上の蛋白質と相互作用
する。これは，レセプターおよび他の蛋白質上のチロシン残基のリン酸化を引き
起こし，細胞内部で種々の細胞質シグナリング分子との複合体を形成し，次にこ
れは多くの細胞性応答，例えば，細胞***（増殖），細胞分化，細胞成長，細胞
外微細環境への代謝的効果の発現等を行う。さらに詳しい議論については，Ｓｃ
ｈｌｅｓｓｉｎｇｅｒ ａｎｄ Ｕｌｌｒｉｃｈ，Ｎｅｕｒｏｎ，９：３０３−
３９１（１９９２）（本明細書において完全に記載されているように，図面を含
め本明細書の一部としてここに引用する）を参照されたい。[0005] A major aspect of PTK activity is its involvement in growth factor receptors. Growth factor receptors are cell surface proteins. Upon binding of the growth factor ligand, the growth factor receptor is converted to the active form, which interacts with proteins on the inner surface of the cell membrane. This causes phosphorylation of tyrosine residues on receptors and other proteins, forming complexes with various cytoplasmic signaling molecules inside the cell, which in turn is responsible for many cellular responses, such as cell division ( Proliferation), cell differentiation, cell growth, and expression of metabolic effects on the extracellular microenvironment. For further discussion, Sc
hlessinger and Ulrich, Neuron, 9: 303-
391 (1992), which is hereby incorporated by reference as if fully set forth herein, including the drawings.

【０００６】 ＰＴＫ活性を有する成長因子レセプターは，レセプターチロシンキナーゼ（"
ＲＴＫ"）として知られている。これらは，多様な生物学的活性を有する膜貫通
レセプターの大きなファミリーを含む。現在のところ，ＲＴＫの少なくとも１９
個の異なるサブファミリーが同定されている。これらのサブファミリーの例は，
"ＨＥＲ"ＲＴＫと称されるサブファミリーであり，これにはＥＧＦＲ（上皮成長
因子レセプター），ＨＥＲ２，ＨＥＲ３およびＨＥＲ４が含まれる。これらのＲ
ＴＫは，細胞外グリコシル化リガンド結合ドメイン，膜貫通ドメイン，および蛋
白質上のチロシン残基をリン酸化しうる細胞内細胞質触媒ドメインから構成され
る。[0006] Growth factor receptors with PTK activity are known as receptor tyrosine kinases (""
RTKs "). These comprise a large family of transmembrane receptors with diverse biological activity. At present, at least 19
Distinct subfamilies have been identified. Examples of these subfamilies are
A subfamily called "HER" RTKs, which includes EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor), HER2, HER3 and HER4. These R
TK is composed of an extracellular glycosylation ligand binding domain, a transmembrane domain, and an intracellular cytoplasmic catalytic domain that can phosphorylate tyrosine residues on proteins.

【０００７】 別のＲＴＫサブファミリーは，インスリンレセプター（ＩＲ），インスリン様
成長因子Ｉレセプター（ＩＧＦ−１Ｒ）およびインスリンレセプター関連レセプ
ター（ＩＲＲ）を含む。ＩＲおよびＩＧＦ−１Ｒはインスリン，ＩＧＦ−Ｉおよ
びＩＧＦ−ＩＩと相互作用して，２つの完全に細胞外グリコシル化されたαサブ
ユニットと２つのβサブユニットのヘテロ４量体を形成し，これは細胞膜を横切
り，チロシンキナーゼドメインを含有する。[0007] Another RTK subfamily includes the insulin receptor (IR), the insulin-like growth factor I receptor (IGF-1R) and the insulin receptor-related receptor (IRR). IR and IGF-1R interact with insulin, IGF-I and IGF-II to form a heterotetramer of two fully extracellular glycosylated α-subunits and two β-subunits, Crosses the cell membrane and contains the tyrosine kinase domain.

【０００８】 第３のＲＴＫサブファミリーは，血小板由来成長因子レセプター（"ＰＤＧＦ
Ｒ"）群として表され，これにはＰＤＧＦＲα，ＰＤＧＦＲβ，ＣＳＦＩＲ，ｃ
−ｋｉｔおよびｃ−ｆｍｓが含まれる。これらのレセプターは，可変数のイムノ
グロビン様ループおよび細胞内ドメインからなるグリコシル化された細胞外ドメ
インから構成され，ここでチロシンキナーゼドメインは関連のないアミノ酸配列
により分断されている。[0008] The third RTK subfamily is the platelet-derived growth factor receptor ("PDGF").
R ") group, which includes PDGFRα, PDGFRβ, CSFIR, c
-Kit and c-fms are included. These receptors are composed of a glycosylated extracellular domain consisting of a variable number of immunoglobin-like loops and an intracellular domain, where the tyrosine kinase domain is interrupted by an unrelated amino acid sequence.

【０００９】 別の群は，そのＰＤＧＦＲサブファミリーとの類似性のため，しばしばＰＤＧ
ＦＲサブファミリーに包摂される，胎児肝キナーゼ（"ｆｌｋ"）レセプターサブ
ファミリーである。この群は，キナーゼ挿入ドメイン−レセプター胎児肝キナー
ゼ−１（ＫＤＲ／ＦＬＫ−１），ｆｌｋ−１Ｒ，ｆｌｋ−４およびｆｍｓ様チロ
シンキナーゼ１（ｆｌｔ−１）からなると考えられている。[0009] Another group is often PDGs because of their similarity to the PDGFR subfamily.
It is a fetal liver kinase ("flk") receptor subfamily that is subsumed into the FR subfamily. This group is believed to consist of the kinase insertion domain-receptor fetal liver kinase-1 (KDR / FLK-1), flk-1R, flk-4 and fms-like tyrosine kinase 1 (flt-1).

【００１０】 チロシンキナーゼ成長因子レセプターファミリーの別の１つのメンバーは，繊
維芽細胞成長因子（"ＦＧＦ"）レセプター群である。この群は，４つのレセプタ
ー，ＦＧＦＲ１−４，および７つのリガンド，ＦＧＦ１−７から構成される。ま
だあまり明確にされていないが，ＦＧＦレセプターは，ＰＤＧＦレセプターと同
様に，可変数のイムノグロビン様ループおよび細胞内ドメインを含有するグリコ
シル化された細胞外ドメインから構成されるようであり，ここでチロシンキナー
ゼ配列は関係のないアミノ酸配列の領域により分断されている。[0010] Another member of the tyrosine kinase growth factor receptor family is the fibroblast growth factor ("FGF") receptor family. This group is composed of four receptors, FGFR1-4 and seven ligands, FGF1-7. Although not well defined, the FGF receptor, like the PDGF receptor, appears to be composed of a variable number of immunoglobin-like loops and a glycosylated extracellular domain containing an intracellular domain, where The tyrosine kinase sequence is interrupted by regions of unrelated amino acid sequence.

【００１１】 チロシンキナーゼ成長因子レセプターファミリーのさらに別のメンバーは，血
管内皮成長因子（ＶＥＧＦ"）レセプターサブグループである。ＶＥＧＦは，Ｐ
ＤＧＦに類似するダイマーの糖蛋白質であるが，異なる生物学的機能およびイン
ビボでの標的細胞特異性を有する。特に，ＶＥＧＦは，現在のところ，血管新生
および脈管形成において本質的な役割を果たすと考えられている。[0011] Yet another member of the tyrosine kinase growth factor receptor family is the vascular endothelial growth factor (VEGF ") receptor subgroup.
A dimeric glycoprotein similar to DGF, but with different biological functions and target cell specificity in vivo. In particular, VEGF is currently believed to play an essential role in angiogenesis and angiogenesis.

【００１２】 既知のＲＴＫサブファミリーのより完全なリストは，Ｐｌｏｗｍａｎ ｅｔ
ａｌ．，ＤＮ＆Ｐ，７（６）：３３４−３３９（１９９４）（本明細書において
完全に記載されているように，図面を含め本明細書の一部としてここに引用する
）に記載されている。A more complete list of known RTK subfamilies can be found in Plowman et.
al. , DN & P, 7 (6): 334-339 (1994), which are hereby incorporated by reference as if fully set forth herein, including the drawings.

【００１３】 ＲＴＫに加え，"非レセプターチロシンキナーゼ"または"細胞性チロシンキナ
ーゼ"と称される，完全に細胞内のＰＴＫのファミリーが存在する。本明細書に
おいては，"ＣＴＫ"と略されるこの後者の呼称を使用する。ＣＴＫは細胞外およ
び膜貫通ドメインを含有しない。現在のところ，１１個のサブファミリー（Ｓｒ
ｃ，Ｆｒｋ，Ｂｔｋ，Ｃｓｋ，Ａｂｌ，Ｚａｐ７０，Ｆｅｓ，Ｆｐｓ，Ｆａｋ，
ＪａｋおよびＡｃｋ）の２４個を越えるＣＴＫが同定されている。Ｓｒｃサブフ
ァミリーは，これまでのところ，ＣＴＫのもっとも大きい群であるようであり，
Ｓｒｃ，Ｙｅｓ，Ｆｙｎ，Ｌｙｎ，Ｌｃｋ，Ｂｌｋ，Ｈｃｋ，ＦｇｒおよびＹｒ
ｋを含む。ＣＴＫのより詳細な議論については，Ｂｏｌｅｎ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ
，８：２０２３−２０３１（１９９３）（本明細書において完全に記載されてい
るように，図面を含め本明細書の一部としてここに引用する）を参照されたい。In addition to RTKs, there is a completely intracellular family of PTKs called "non-receptor tyrosine kinases" or "cellular tyrosine kinases." In this specification, this latter designation, abbreviated as "CTK", is used. CTK does not contain extracellular and transmembrane domains. At present, 11 subfamilies (Sr
c, Frk, Btk, Csk, Abl, Zap70, Fes, Fps, Fak,
Jak and Ack) have been identified. The Src subfamily appears to be the largest group of CTK so far,
Src, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr and Yr
k. For a more detailed discussion of CTK, see Bolen, Oncogene.
, 8: 2023-2031 (1993), which is hereby incorporated by reference as if fully set forth herein, including the drawings.

【００１４】 セリン／トレオニンキナーゼもしくはＳＴＫは，ＣＴＫと同様に，主として細
胞内にあるが，ＳＴＫタイプのレセプターキナーゼは少ない。ＳＴＫはもっとも
一般的なサイトゾルキナーゼである。すなわち，細胞質オルガネラおよび細胞骨
格以外の，細胞質のその部分でその機能を行うキナーゼである。サイトゾルは，
細胞の中間代謝および生合成活性のほとんどが生ずる細胞中の領域である。例え
ば，蛋白質がリボソーム上で合成されるのはサイトゾル内である。[0014] Serin / threonine kinase or STK, like CTK, is mainly in the cell, but there are few STK-type receptor kinases. STK is the most common cytosolic kinase. That is, a kinase that performs its function in that part of the cytoplasm other than the cytoplasmic organelle and cytoskeleton. The cytosol is
A region in a cell where most of the cell's intermediate metabolic and biosynthetic activities occur. For example, it is in the cytosol that proteins are synthesized on ribosomes.

【００１５】 ＲＴＫ，ＣＴＫおよびＳＴＫはすべて，病原性状態，特に癌を含む状態の宿主
であることが示唆されてきた。ＰＴＫと関連づけられてきた他の病原性状態には
，限定されるものではないが，乾癬，肝硬変，糖尿病，脈管形成，再狭窄，眼性
疾患，慢性関節リウマチおよび他の炎症性疾患，自己免疫疾患等の免疫疾患，ア
テローム性動脈硬化等の心血管疾患，および種々の腎臓疾患が含まれる。[0015] RTKs, CTKs and STKs have all been suggested to be hosts in pathogenic conditions, particularly those involving cancer. Other pathogenic conditions that have been associated with PTK include, but are not limited to, psoriasis, cirrhosis, diabetes, angiogenesis, restenosis, ocular disease, rheumatoid arthritis and other inflammatory diseases, self It includes immune diseases such as immune diseases, cardiovascular diseases such as atherosclerosis, and various kidney diseases.

【００１６】 癌に関しては，腫瘍の発達を推進する過剰な細胞増殖を説明する主要な仮説の
２つは，ＰＫにより制御されることが知られている機能に関連する。すなわち，
悪性細胞成長は細胞***および／または分化を調節するメカニズムの故障に起因
することが示唆されている。多数のプロトオンコジンの蛋白質産物は，細胞成長
および分化を制御するシグナル伝達経路に関与することが示されている。これら
のプロトオンコジンの蛋白質産物には，上で議論した，細胞外成長因子，膜貫通
成長因子ＰＴＫレセプター（ＲＴＫ），細胞質ＰＴＫ（ＣＴＫ）およびサイトゾ
ルＳＴＫが含まれる。With regard to cancer, two of the key hypotheses that explain excessive cell proliferation driving tumor development relate to functions known to be controlled by PK. That is,
Malignant cell growth has been suggested to result from failure of mechanisms that regulate cell division and / or differentiation. Many protooncodin protein products have been shown to be involved in signaling pathways that control cell growth and differentiation. These protooncodin protein products include extracellular growth factor, transmembrane growth factor PTK receptor (RTK), cytoplasmic PTK (CTK) and cytosolic STK, discussed above.

【００１７】 ＰＫに関連する細胞活性と広範な種類のヒト疾患との間の見かけ上の連結の観
点から，ＰＫ活性を調節する方法を同定しようとする試みに多大な努力が払われ
ていることは驚くべきことではない。これらのいくつかには，実際の細胞プロセ
スに関与する分子を模倣する大きな分子を用いるバイオミメティック方法が含ま
れる（例えば，変異体リガンド（米国特許４，９６６，８４９）；可溶性レセプ
ターおよび抗体（ＷＯ９４／１０２０２，Ｋｅｎｄａｌｌ ａｎｄ Ｔｈｏｍａ
ｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ'ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９０：１０７０５−０９（１
９９４），Ｋｉｍ，ｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：８４１−８４４（１９
９３））；ＲＮＡリガンド（Ｊｅｌｉｎｅｋ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ，３３：１０４５０−５６）；Ｔａｋａｎｏ，ｅｔａｌ．，Ｍｏｌ．Ｂ
ｉｏ．Ｃｅｌｌ４：３５８Ａ（１９９３）；Ｋｉｎｓｅｌｌａ，ｅｔａｌ．，Ｅ
ｘｐ．ＣｅｌｌＲｅｓ．１９９：５６６−６２（１９９２）；Ｗｒｉｇｈｔ，ｅ
ｔａｌ．，Ｊ．ＣｅｌｌｕｌａｒＰｈｙｓ．，１５２：４４８−５７）およびチ
ロシンキナーゼ阻害剤（ＷＯ９４／０３４２７；ＷＯ９２／２１６６０；ＷＯ９
１／１５４９５；ＷＯ９４／１４８０８；米国特許５，３３０，９９２；Ｍａｒ
ｉａｎｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ
．，３５：２２６８（１９９４））。[0017] Significant efforts have been made in an attempt to identify ways to modulate PK activity in terms of the apparent link between PK-associated cellular activity and a wide variety of human diseases. Is not surprising. Some of these include biomimetic methods using large molecules that mimic those involved in actual cellular processes (eg, mutant ligands (US Pat. No. 4,966,849); soluble receptors and antibodies (WO94). / 10202, Kendall and Thomas
s, Proc. Nat'l. Acad. Sci. , 90: 10705-09 (1
994), Kim, et al. , Nature, 362: 841-844 (19).
93)); RNA ligands (Jelinek, et al., Biochemi).
story, 33: 10450-56); Takano, et al. , Mol. B
io. Cell 4: 358A (1993); Kinsella, et al. , E
xp. Cell Res. 199: 566-62 (1992); Wright, e.
tal. , J. et al. CellularPhys. , 152: 448-57) and tyrosine kinase inhibitors (WO94 / 03427; WO92 / 21660; WO9
WO 15/14808; US Patent 5,330,992; Mar.
iani, et al. Proc. Am. Assoc. Cancer Res
. , 35: 2268 (1994)).

【００１８】 上述に加え，ＰＫ阻害剤として作用する小分子を同定する試みがなされている
。例えば，ビス単環，二環およびヘテロ環アリール化合物（ＰＣＴ ＷＯ９２／
２０６４２），ビニレンアザインドール誘導体（ＰＣＴ ＷＯ９４／１４８０８
）および１−シクロプロピル−４−ピリジルキノロン類（米国特許５，３３０，
９９２）が，チロシンキナーゼ阻害剤として記載されている。スチリル化合物（
米国特許５，２１７，９９９），スチリル置換ピリジル化合物（米国特許５，３
０２，６０６），キナゾリン誘導体（欧州特許出願０５６６２６６Ａｌ），セレ
ナインドール類およびセレニド類（ＰＣＴ ＷＯ９４／０３４２７），三環ポリ
ヒドロキシル化合物（ＰＣＴ ＷＯ９２／２１６６０）およびベンジルホスホン
酸化合物（ＰＣＴ ＷＯ９１／１５４９５）はすべて，癌の治療において有用な
ＰＴＫ阻害剤として記載されている。In addition to the above, attempts have been made to identify small molecules that act as PK inhibitors. For example, bis monocyclic, bicyclic and heterocyclic aryl compounds (PCT WO92 /
20642), vinylene azaindole derivatives (PCT WO 94/14808)
) And 1-cyclopropyl-4-pyridylquinolones (U.S. Pat.
992) have been described as tyrosine kinase inhibitors. Styryl compounds (
U.S. Pat. No. 5,217,999), styryl-substituted pyridyl compounds (U.S. Pat.
02,606), quinazoline derivatives (European Patent Application 0566266 Al), selenaindoles and selenides (PCT WO94 / 03427), tricyclic polyhydroxyl compounds (PCT WO92 / 21660) and benzylphosphonic acid compounds (PCT WO91 / 15495). All have been described as PTK inhibitors useful in the treatment of cancer.

【００１９】発明の概要 ＰＫ活性を調節し，したがって，異常なＰＫ活性が関与する疾患の治療および
予防に有用であると予測される小さい有機分子を同定しようとする我々自身の努
力により，ＰＫ調節能力を示し，したがって異常なＰＫ活性に関連する疾患に対
して有益な影響を有すると予測される，３−メチリデニル−２−インドリノン誘
導体のファミリーおよびそのプロドラッグおよび生理学的に許容しうる塩が発見
された。これらの化合物が本発明の主題である。[0019] Adjust the overview PK activity of the invention, therefore, by our own efforts to identify small organic molecules that abnormal PK activity is expected to be useful in the treatment and prevention of diseases involving, PK regulated A family of 3-methylidenyl-2-indolinone derivatives and their prodrugs and physiologically acceptable salts have been discovered that show potential and thus are expected to have a beneficial effect on diseases associated with abnormal PK activity Was done. These compounds are the subject of the present invention.

【００２０】 すなわち，本発明は一般に，レセプター蛋白質チロシンキナーゼ（ＲＴＫ），
非レセプター蛋白質チロシンキナーゼ（ＣＴＫ）およびセリン／トレオニン蛋白
質キナーゼ（ＳＴＫ）の活性を調節する，３−メチリデニル−２−インドリノン
およびそのプロドラッグおよび生理学的に許容しうる塩に関する。さらに，本発
明は，開示される化合物およびその生理学的に許容しうる塩およびプロドラッグ
の医薬組成物の製造，およびＰＫ誘導性疾患（例えば，限定されないが，癌，糖
尿病，肝硬変，アテローム性動脈硬化症等の心血管疾患，脈管形成，自己免疫疾
患などの免疫疾患，および腎臓疾患）の治療および予防におけるその使用に関す
る。That is, the present invention generally relates to receptor protein tyrosine kinase (RTK),
The present invention relates to 3-methylidenyl-2-indolinone and its prodrugs and physiologically acceptable salts, which regulate the activity of non-receptor protein tyrosine kinase (CTK) and serine / threonine protein kinase (STK). In addition, the present invention relates to the preparation of pharmaceutical compositions of the disclosed compounds and physiologically acceptable salts and prodrugs thereof, and to PK-induced diseases such as, but not limited to, cancer, diabetes, cirrhosis, atherosclerosis, and the like. And its use in the treatment and prevention of cardiovascular diseases such as sclerosis, angiogenesis, immune diseases such as autoimmune diseases, and kidney diseases).

【００２１】 "２−インドリノン"，"インドリン−２−オン"および"２−オキシインドール"
との用語は，本明細書において互換的に用いられ，次の化学構造：“2-indolinone”, “indolin-2-one” and “2-oxindole”
The terms are used interchangeably herein and have the following chemical structure:

【化１５】 ［式中，Ａは炭素または窒素である］ を有する分子を表す。Embedded image Wherein A is carbon or nitrogen.

【００２２】 "３−メチリデニル−２−インドリノン"とは，化学構造：“3-Methylidenyl-2-indolinone” has the chemical structure:

【化１６】 ［式中，Ａは炭素または窒素でありうる］ を有する分子を表す。Embedded image Wherein A can be carbon or nitrogen.

【００２３】 "医薬組成物"とは，本明細書に記載される１またはそれ以上の化合物，または
その生理学的に許容しうる塩またはプロドラッグと，他の化学成分，例えば生理
学的に許容しうる担体および賦形剤との混合物を表す。医薬組成物の目的は，化
合物の生物への投与を容易にすることである。“Pharmaceutical composition” refers to one or more of the compounds described herein, or a physiologically acceptable salt or prodrug thereof, and another chemical moiety, eg, a physiologically acceptable salt. And mixtures with the possible carriers and excipients. The purpose of a pharmaceutical composition is to facilitate administration of a compound to an organism.

【００２４】 "プロドラッグ"とは，インビボで親薬剤に転換される薬剤を表す。プロドラッ
グは，場合により，親薬剤より投与が容易であるかもしれないため，しばしば有
用である。例えば，プロドラッグは経口投与により生物学的に利用可能であるが
，親薬剤はそうではないかもしれない。プロドラッグはまた，親薬剤よりも医薬
組成物中で改良された溶解性を有するかもしれない。プロドラッグの例は，限定
されるものではないが，エステル（"プロドラッグ"）として投与されて，水溶性
であることが移動に不利である細胞膜の通過を容易にし，次に，水溶性であるこ
とが有利である細胞内に入った後，代謝的に加水分解されて活性種のカルボン酸
となるような，本発明の化合物であろう。“Prodrug” refers to a drug that is converted into the parent drug in vivo. Prodrugs are often useful because, in some cases, they may be easier to administer than the parent drug. For example, a prodrug may be bioavailable by oral administration while the parent drug may not. Prodrugs may also have improved solubility in pharmaceutical compositions than the parent drug. Examples of prodrugs include, but are not limited to, being administered as esters ("prodrugs") to facilitate passage through cell membranes where water solubility is disadvantageous for migration, and The compounds of the present invention will advantageously be metabolically hydrolyzed to the active carboxylic acid after entering the cell where it is advantageous.

【００２５】 プロドラッグのさらに別の例は，短いポリペプチドであろう。例えば，限定す
るものではないが，末端アミノ基を介して本発明の化合物のカルボキシ基に結合
している２−１０アミノ酸のポリペプチドは，インビボで加水分解または代謝さ
れて活性分子を放出する。Yet another example of a prodrug would be a short polypeptide. For example, but not limited to, a 2-10 amino acid polypeptide linked to the carboxy group of a compound of the invention via a terminal amino group is hydrolyzed or metabolized in vivo to release the active molecule.

【００２６】 本明細書において用いる場合，"生理学的に許容しうる担体"または"薬学的に
許容しうる担体"とは，生物に顕著な刺激をもたらさず，投与される化合物の生
物学的活性および特性を排除しない担体または希釈剤を表す。As used herein, “physiologically acceptable carrier” or “pharmaceutically acceptable carrier” refers to a biological activity of the administered compound that does not cause significant irritation to the organism. And a carrier or diluent that does not exclude properties.

【００２７】 "担体"とは，所望の化合物の細胞または組織内への取り込みを容易にする化学
化合物を表す。担体の例には，限定されないが，ジメチルスルホキシド（ＤＭＳ
Ｏ）がある。“Carrier” refers to a chemical compound that facilitates the incorporation of a desired compound into cells or tissues. Examples of carriers include, but are not limited to, dimethyl sulfoxide (DMS
O).

【００２８】 "希釈剤"とは，所望の化合物を溶解または分散させ，このことにより化合物の
濃度を化合物単独の場合よりも低下させる化学化合物，通常は液体を表す。“Diluent” refers to a chemical compound, usually a liquid, that dissolves or disperses a desired compound, thereby reducing the concentration of the compound compared to the compound alone.

【００２９】 "賦形剤"とは，医薬組成物に加えて化合物の投与をさらに容易にする不活性の
物質を表す。賦形剤の例には，限定されないが，炭酸カルシウム，リン酸カルシ
ウム，種々の糖および各種のでんぷん，セルロース誘導体，ゼラチン，植物油，
およびポリエチレングリコールがある。“Excipient” refers to an inert substance that, in addition to a pharmaceutical composition, makes the administration of a compound easier. Examples of excipients include, but are not limited to, calcium carbonate, calcium phosphate, various sugars and starches, cellulose derivatives, gelatin, vegetable oils,
And polyethylene glycol.

【００３０】 １．化学 Ａ．一般的な構造的特徴 １つの態様においては，本発明は次の化学構造１：[0030] 1. Chemistry A. General Structural Features In one aspect, the invention provides the following chemical structure 1 :

【化１７】 ［式中， Ａは，炭素および窒素からなる群より選択され； Ｑは，Embedded image Wherein A is selected from the group consisting of carbon and nitrogen;

【化１８】 からなる群より選択され； 結合ａおよびｂは，点線で表されるように，単結合であっても二重結合であって
もよいが，ただし，本発明の任意の１つの化合物において，ａおよびｂは両方と
も単結合であるかまたは両方とも二重結合であり； ａおよびｂが二重結合であるとき，ｒは１であり； ａおよびｂが単結合であるとき，ｒは２であり； Ｒ0は，水素，アルキル，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19および−Ｃ（Ｏ）Ｒ19からなる群よ
り選択され； Ｒ1は，水素，アルキル，アリール，アルコキシ，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−
（ＣＨ2）nＯＣ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＮＲ19および（ＣＨ2）nＲ20からなる群
より選択され， ここで，Ｒ19は，水素，アルキル，アルケニル，アルキニル，シクロアルキルお
よびアリールからなる群より選択され； ｎは，１，２，３または４であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，ハロ，−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ21Ｒ22；−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ21Ｒ22 ；−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＳＯ2Ｒ21，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−ＮＲ21Ｒ22，および環中
に少なくとも１つの窒素原子を含むヘテロ脂環式基であって環は窒素原子を介し
て隣接するＣＨ2基に結合している，からなる群より選択され； Ｒ2は，水素，アルキル，トリハロメチル，アリール，ヘテロアリール，ヘテロ
脂環式，アルコキシ，ハロ，−（ＣＨ2）nＲ20，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22，−Ｃ（Ｏ
）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ
（Ｏ）（ＣＨ2）nＲ20，−ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝ＣＲ23からなる群より選択さ
れ， ここで，Ｒ21およびＲ22は，水素，アルキル，アルケニル，アルキニル，シクロ
アルキル，アリール，ヘテロアリールおよびヘテロ脂環式からなる群より独立し
て選択され； Ｒ23は，アルキル，アルケニル，アルキニル，シクロアルキル，アリールおよび
ヘテロアリールからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，アルキル，トリハロメチル，アルコキシ，アリール，アリールオ
キシ，ヘテロアリール，ヘテロ脂環式，ヒドロキシ，ハロ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22
，−ＮＨＳＯ2Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−ＮＲ21Ｒ22および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ2 4 からなる群より選択され， ここで，Ｒ24は，アルキル，アルケニル，アルキニル，アリール，ヘテロアリー
ルおよびヘテロ脂環式からなる群より選択され； Ｒ4は，水素，アルキル，アルコキシおよびハロからなる群より選択され； Ｒ5は，水素，アルキル，シクロアルキル，ハロ，アリールおよびヘテロアリー
ルからなる群より選択され； Ｒ6は，水素，アルキル，アルコキシ，ハロ，シクロアルキル，アリールからな
る群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造：Embedded image Bonds a and b may be a single bond or a double bond, as represented by the dotted line, provided that in any one compound of the present invention, a And b are both single or both double bonds; r is 1 when a and b are double bonds; r is 2 when a and b are single bonds R 0 is selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, —C (O) OR 19 and —C (O) R 19 ; R 1 is hydrogen, alkyl, aryl, alkoxy, halo, —C (O ) OR 19 , −
Selected from the group consisting of (CH 2 ) n OC (O) R 19 , —C (O) NR 19 and (CH 2 ) n R 20 , wherein R 19 is hydrogen, alkyl, alkenyl, alkynyl, cyclo It is selected from the group consisting of alkyl and aryl; n is 1, 2, 3 or 4; R 20 is hydroxy, halo, -OC (O) NR 21 R 22; -OC (S) NR 21 R 22 -OC (O) NHSO 2 R 21 , -C (O) OR 19 , -NR 21 R 22 , and a heteroalicyclic group containing at least one nitrogen atom in the ring, wherein the ring is connected via a nitrogen atom. It is attached to adjacent CH 2 groups Te, is selected from the group consisting of; R 2 is hydrogen, alkyl, trihalomethyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, alkoxy, halo, - (CH 2) n R 20, -SO 2 NR 21 R 22, -C (O
) OR 19 , —C (O) R 19 , —NHC (O) OR 19 , —NHC (O) R 19 , —C
(O) (CH 2 ) n R 20 , selected from the group consisting of —NR 21 R 22 and —N ＝ CR 23 , wherein R 21 and R 22 are hydrogen, alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, R 23 is independently selected from the group consisting of aryl, heteroaryl and heteroalicyclic; R 23 is selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, aryl and heteroaryl; R 3 is hydrogen, alkyl , trihalomethyl, alkoxy, aryl, aryloxy, heteroaryl, heteroalicyclic, hydroxy, halo, -SO 2 NR 21 R 22
, -NHSO 2 R 19, is selected from the group consisting of -C (O) OR 19, -NR 21 R 22 and -NHC (O) R 2 4, wherein, R 24 is alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl R 4 is selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, alkoxy and halo; R 5 is hydrogen, alkyl, cycloalkyl, halo, aryl and heteroaryl R 6 is selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, alkoxy, halo, cycloalkyl, aryl, or together with R 18 has the structure:

【化１９】 ［式中，ｙおよびｙ'は，独立して，水素，アルキルおよびアリールからなる群
より選択される］ を有するヘテロ脂環式基であり； Ｒ7は，ＯＲ18であり，ここでＲ18は，アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20からなる群
より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって構造：Embedded image Wherein y and y ′ are independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl and aryl; R 7 is OR 18 , wherein R 18 is is alkyl, - (CH 2) is selected from the group consisting of n R 20, or together with R 6 or R 8 structure:

【化２０】 を有するヘテロ脂環式基であり； Ｒ8は，水素，アルキル，シクロアルキル，アルコキシ，ハロ，アリール，ヘテ
ロアリールからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造：Embedded image R 8 is selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, cycloalkyl, alkoxy, halo, aryl, heteroaryl, or together with R 18 has the structure:

【化２１】 を有するヘテロ脂環式環であり； Ｒ9は，水素，アルキル，アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ21Ｒ22からなる群より
選択され； Ｒ10は，アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され； Ｒ11は，水素，アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され； Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ13は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または，そ
うでない場合には水素およびアルキルからなる群より選択される基であり； Ｒ14は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または，そ
うでない場合には，水素，アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択
される基であり； Ｒ15は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または，そ
うでない場合には水素であり； ただし，本発明の任意の１つの化合物において，Ｒ13，Ｒ14またはＲ15のいずれ
か１つのみが，Ｑを分子の残りに結合する結合であり； Ｒ16およびＲ17は，ａおよびｂが単結合であるとき，水素，アルキルおよびアリ
ールからなる群より独立して選択され，および，ａおよびｂが二重結合であると
き，Ｒ16は水素であり，Ｒ17は存在しない］ を有する２−インドリノン類，およびその生理学的に許容しうる塩およびプロド
ラッグに関する。Embedded image R 9 is selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, alkoxy, halo and —NR 21 R 22 ; R 10 is a group consisting of alkyl and —C (O) OR 19 is more selective; R 11 is hydrogen, is selected from the group consisting of alkyl and -C (O) oR 19; R 12 is - (CH 2) be n R 20; R 13 is Q is through this R 14 is a group selected from the group consisting of hydrogen and alkyl; or R 14 is a group through which Q is bonded to the rest of the molecule. R 15 is a group selected from the group consisting of hydrogen, alkyl and — (CH 2 ) n R 20 ; R 15 is a group through which Q Is a bond that is connected to the rest of The hydrogen; however, in any one of the compounds of the present invention, only one of R 13, R 14 or R 15 is a bond that binds the Q to the rest of the molecule; R 16 and R 17, when a and b is a single bond, hydrogen, are independently selected from the group consisting of alkyl and aryl, and when a and b is a double bond, R 16 is hydrogen, R 17 Does not exist], and physiologically acceptable salts and prodrugs thereof.

【００３１】 本明細書において用いる場合，"アルキル"との用語は，飽和脂肪族炭化水素を
表し，直鎖および分枝鎖基を含む。好ましくは，アルキル基は１−２０個の炭素
原子を含む。本明細書において数値範囲，例えば"１−２０"と記載される場合，
これはその基（この場合はアルキル基）が，１個の炭素原子，２個の炭素原子，
３個の炭素原子，以下同様に，２０個までの炭素原子を含んでいてもよいことを
意味する。より好ましくは，これは１−１０個の炭素原子を有する中程度のサイ
ズのアルキルである。最も好ましくは，これは１−４個の炭素原子を有する低級
アルキルである。アルキル基は，置換されていてもされていなくてもよい。置換
されている場合には，置換基は，好ましくは，ハロ；ヒドロキシ；非置換低級ア
ルコキシ；１またはそれ以上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非
置換低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリール；１またはそれ以
上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任
意に置換されていてもよいアリールオキシ；環中に１−３個の窒素原子を有する
６員のヘテロアリールであって，環中の炭素は，１またはそれ以上のハロ，ヒド
ロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置換されて
いてもよい；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個のヘテ
ロ原子を有する５員のヘテロアリールであって，基の炭素原子は１またはそれ以
上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任
意に置換されていてもよい；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される
１−３個のヘテロ原子を有する５員または６員のヘテロ脂環式基であって，基中
の炭素および窒素（存在する場合には）原子は，１またはそれ以上のハロ，ヒド
ロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置換されて
いてもよい；メルカプト；（非置換低級アルキル）チオ；１またはそれ以上のハ
ロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置
換されていてもよいアリールチオ；シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミ
ル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，
Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，Ｒ25Ｓ（Ｏ）
−，Ｒ25Ｓ（Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ25，Ｒ25Ｃ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ25
Ｒ26（ここで，Ｒ25およびＲ26は，独立して，水素，非置換低級アルキル，トリ
ハロメチル，非置換（Ｃ3−Ｃ6）シクロアルキル，非置換低級アルケニル，非置
換低級アルキニル，および１またはそれ以上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級ア
ルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より独立して選択される），からなる群より独立して選択される１また
はそれ以上の基で任意に置換されていてもよい。As used herein, the term “alkyl” refers to a saturated aliphatic hydrocarbon, including straight and branched chain groups. Preferably, the alkyl group contains 1-20 carbon atoms. In this specification, when a numerical range, for example, "1-20" is described,
This means that the group (in this case, an alkyl group) has one carbon atom, two carbon atoms,
It means that it may contain up to 3 carbon atoms, and similarly up to 20 carbon atoms. More preferably, it is a medium sized alkyl having 1-10 carbon atoms. Most preferably, it is a lower alkyl having 1-4 carbon atoms. An alkyl group can be substituted or unsubstituted. If substituted, the substituents are preferably halo; hydroxy; unsubstituted lower alkoxy; optionally substituted with one or more halo, hydroxy, unsubstituted lower alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups. Aryl; optionally substituted with one or more halo, hydroxy, unsubstituted lower alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups; 6-membered having 1-3 nitrogen atoms in the ring. A heteroaryl, wherein the carbons in the ring are optionally substituted with one or more halo, hydroxy, unsubstituted lower alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups; from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur Selected 5-membered heteroaryl having 1-3 heteroatoms, wherein the carbon atom of the group is one or more halo, hydride Optionally substituted with xy, unsubstituted lower alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups; 5- or 6-membered hetero having 1-3 heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur A cycloaliphatic radical wherein the carbon and nitrogen (if present) atoms in the radical are optionally substituted with one or more halo, hydroxy, unsubstituted lower alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups. Mercapto; (unsubstituted lower alkyl) thio; arylthio optionally substituted with one or more halo, hydroxy, unsubstituted lower alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups; cyano, acyl, thioacyl, O -Carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide,
N-amide, nitro, N-sulfonamide, S-sulfonamide, R 25 S (O)
—, R 25 S (O) 2 —, —C (O) OR 25 , R 25 C (O) O—, and —NR 25
R 26 wherein R 25 and R 26 are independently hydrogen, unsubstituted lower alkyl, trihalomethyl, unsubstituted (C 3 -C 6 ) cycloalkyl, unsubstituted lower alkenyl, unsubstituted lower alkynyl, and Independently selected from the group consisting of one or more halo, hydroxy, unsubstituted lower alkyl or aryl optionally substituted with unsubstituted lower alkoxy groups). May be optionally substituted with one or more groups.

【００３２】 "シクロアルキル"基は，３−８員の全炭素単環，全炭素の５員／６員または６
員／６員縮合二環式環または多環縮合環（"縮合"環系とは，系の各環が系の別の
環の互いに隣接する炭素原子対を共有することを意味する）基を表し，ここで，
環の１またはそれ以上は１またはそれ以上の二重結合を含んでいてもよいが，い
ずれの環も完全に共役したパイ電子系を有しない。シクロアルキル基の例として
は，シクロプロパン，シクロブタン，シクロペンタン，シクロペンテン，シクロ
ヘキサン，シクロヘキサジエン，アダマンタン，シクロヘプタンおよびシクロヘ
プタトリエンが挙げられるが，これらに限定されない。シクロアルキル基は置換
されていてもされていなくてもよい，置換されている場合には，置換基は，好ま
しくは，非置換低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，非置換低
級アルコキシ，１またはそれ以上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまた
は非置換低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリール，１またはそ
れ以上のハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基
で任意に置換されていてもよいアリールオキシ；１−３個の窒素原子を環中に有
する６員のヘテロアリールであって，環中の炭素は１またはそれ以上のハロ，ヒ
ドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置換され
ていてもよい；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個のヘ
テロ原子を有する５員のヘテロアリールであって，基の炭素原子は１またはそれ
以上のハロ，ヒドロキシ／非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で
任意に置換されていてもよい；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択され
る１−３個のヘテロ原子を有する５員または６員のヘテロ脂環式基であって，基
中の炭素および窒素（存在する場合には）原子は，１またはそれ以上のハロ，ヒ
ドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に置換され
ていてもよい；メルカプト，（非置換低級アルキル）チオ，１またはそれ以上の
ハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルキルまたは非置換低級アルコキシ基で任意に
置換されていてもよいアリールチオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバ
ミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド
，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，Ｒ25Ｓ（Ｏ
）−，Ｒ25Ｓ（Ｏ）2，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ25，Ｒ25Ｃ（Ｏ）Ｏ−および−ＮＲ25Ｒ2 6 （上で定義したとおりである）からなる群より独立して選択される１またはそ
れ以上の基である。A “cycloalkyl” group is a 3-8 membered all carbon monocyclic, 5/6 membered or 6 membered all carbon
Membered 6-membered fused bicyclic or polycyclic fused ring (a "fused" ring system means that each ring of the system shares adjacent pairs of carbon atoms of another ring of the system) Where,
One or more of the rings may contain one or more double bonds, but neither ring has a fully conjugated pi-electron system. Examples of cycloalkyl groups include, but are not limited to, cyclopropane, cyclobutane, cyclopentane, cyclopentene, cyclohexane, cyclohexadiene, adamantane, cycloheptane, and cycloheptatriene. A cycloalkyl group may be substituted or unsubstituted, and if substituted, the substituent is preferably unsubstituted lower alkyl, trihaloalkyl, halo, hydroxy, unsubstituted lower alkoxy, 1 or Aryl optionally substituted with further halo, hydroxy, unsubstituted lower alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups, optionally with one or more halo, hydroxy, unsubstituted lower alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups Optionally substituted aryloxy; a 6-membered heteroaryl having 1-3 nitrogen atoms in the ring, wherein the carbon in the ring is one or more halo, hydroxy, unsubstituted lower alkyl or non-substituted lower alkyl. Optionally substituted with a substituted lower alkoxy group; 1-3 selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur 5-membered heteroaryl having a heteroatom, wherein the carbon atoms of the group are optionally substituted with one or more halo, hydroxy / unsubstituted lower alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups; nitrogen, oxygen A 5- or 6-membered heteroalicyclic group having 1-3 heteroatoms selected from the group consisting of: and sulfur, wherein the carbon and nitrogen (if present) atoms are Or more optionally substituted with halo, hydroxy, unsubstituted lower alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups; mercapto, (unsubstituted lower alkyl) thio, one or more halo, hydroxy, unsubstituted lower. Arylthio, cyano, acyl, thioacyl, O-carbamyl, N-cal, optionally substituted with alkyl or unsubstituted lower alkoxy groups Mill, O- thiocarbamyl, N- thiocarbamyl, C-amido, N- amido, nitro, N- sulfonamido, S- sulfonamido, R 25 S (O
) -, R 25 S (O ) 2, -C (O) OR 25, R 25 C (O) O- , and -NR 25 R 2 6 (independently from the group consisting of is as defined above) One or more groups selected.

【００３３】 "アルケニル"基は，少なくとも２つの炭素原子および少なくとも１つの炭素−
炭素二重結合からなる，本明細書において定義されるアルキル基である。An “alkenyl” group is at least two carbon atoms and at least one carbon-
An alkyl group as defined herein consisting of a carbon double bond.

【００３４】 "アルキニル"基は，少なくとも２つの炭素原子および少なくとも１つの炭素−
炭素三重結合からなる，本明細書において定義されるアルキル基である。An “alkynyl” group is at least two carbon atoms and at least one carbon-
An alkyl group as defined herein consisting of a carbon triple bond.

【００３５】 "アリール"基は，完全に共役したパイ電子系を有する，全炭素単環または縮合
多環（すなわち，隣接する炭素原子対を共有する環）基を表す。アリール基の例
としては，フェニル，ナフタレニルおよびアントラセニルが挙げられるが，これ
らに限定されない。アリール基は置換されていてもされていなくてもよい。置換
されている場合には，置換基は，好ましくは，非置換低級アルキル，トリハロア
ルキル，ハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルコキシ，メルカプト，（非置換低級
アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミ
ル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニト
ロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，Ｒ25Ｓ（Ｏ）−，Ｒ25Ｓ（Ｏ） 2 −，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ25，Ｒ25Ｃ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ25Ｒ26（Ｒ25および
Ｒ26は上で定義したとおりである），からなる群より独立して選択される１また
はそれ以上の基である。An “aryl” group is an all-carbon monocyclic or fused ring having a fully conjugated pi-electron system
Represents a polycyclic (ie, a ring sharing adjacent pairs of carbon atoms) group. Examples of aryl groups
Include phenyl, naphthalenyl and anthracenyl, which
It is not limited to them. An aryl group may be substituted or unsubstituted. Replace
When substituted, the substituents are preferably unsubstituted lower alkyl, trihalo
Alkyl, halo, hydroxy, unsubstituted lower alkoxy, mercapto, (unsubstituted lower
Alkyl) thio, cyano, acyl, thioacyl, O-carbamyl, N-carbami
, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, nitro
B, N-sulfonamide, S-sulfonamide, Rtwenty fiveS (O)-, Rtwenty fiveS (O) Two -, -C (O) ORtwenty five, Rtwenty fiveC (O) O-, and -NRtwenty fiveR26(Rtwenty fiveand
R26Is as defined above), one or more independently selected from the group consisting of
Is a further group.

【００３６】 本明細書において用いる場合，"ヘテロアリール"基は，環内に窒素，酸素およ
びイオウからなる群より選択される１またはそれ以上の原子を含み，かつ，完全
に共役したパイ電子系を有する単環式または縮合環（すなわち，隣接する１対の
原子を共有する複数の環）基を表す。ヘテロアリール基の例としては，ピロール
，フラン，チオフェン，イミダゾール，オキサゾール，チアゾール，ピラゾール
，ピリジン，ピリミジン，キノリン，イソキノリン，プリンおよびカルバゾール
が挙げられるが，これらに限定されない。ヘテロアリール基は，置換されていて
もされていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，非置換
低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルコキシ，
メルカプト，（非置換低級アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−
カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−
アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，Ｒ25 Ｓ（Ｏ）−，Ｒ25Ｓ（Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ25，Ｒ25Ｃ（Ｏ）Ｏ−，および
−ＮＲ25Ｒ26（Ｒ25およびＲ26は上で定義したとおりである），からなる群より
独立して選択される１またはそれ以上の基である。As used herein, a “heteroaryl” group is one or more atoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur in a ring and is a fully conjugated pi-electron system. Represents a monocyclic or fused ring (that is, a plurality of rings sharing one pair of adjacent atoms) group. Examples of heteroaryl groups include, but are not limited to, pyrrole, furan, thiophene, imidazole, oxazole, thiazole, pyrazole, pyridine, pyrimidine, quinoline, isoquinoline, purine, and carbazole. Heteroaryl groups can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituents are preferably unsubstituted lower alkyl, trihaloalkyl, halo, hydroxy, unsubstituted lower alkoxy,
Mercapto, (unsubstituted lower alkyl) thio, cyano, acyl, thioacyl, O-
Carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-
Amide, N- amido, nitro, N- sulfonamido, S- sulfonamido, R 25 S (O) - , R 25 S (O) 2 -, - C (O) OR 25, R 25 C (O) O -, and -NR 25 R 26 (R 25 and R 26 are as defined above), independently from the group consisting of 1 or more groups selected.

【００３７】 "ヘテロ脂環式"基は，環中に窒素，酸素およびイオウからなる群より選択され
る１またはそれ以上の原子を有する単環式または縮合環基を表す。環はまた，１
またはそれ以上の二重結合を有していてもよい。しかし，環は完全に共役したパ
イ電子系を有しない。ヘテロ脂環式環は，置換されていてもされていなくてもよ
い。置換されている場合，置換基は，好ましくは，非置換低級アルキル，トリハ
ロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，非置換低級アルコキシ，メルカプト，（非置換
低級アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カル
バミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，
ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，Ｒ25Ｓ（Ｏ）−，Ｒ25Ｓ（
Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ25，Ｒ25Ｃ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ25Ｒ26（Ｒ25お
よびＲ26は上で定義したとおりである），からなる群より独立して選択される１
またはそれ以上の基である。A “heteroalicyclic” group refers to a monocyclic or fused ring group having one or more atoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur in the ring. The ring is also 1
Or it may have a double bond more than that. However, rings do not have a fully conjugated pi-electron system. A heteroalicyclic ring may be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituents are preferably unsubstituted lower alkyl, trihaloalkyl, halo, hydroxy, unsubstituted lower alkoxy, mercapto, (unsubstituted lower alkyl) thio, cyano, acyl, thioacyl, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide,
Nitro, N-sulfonamide, S-sulfonamide, R 25 S (O) —, R 25 S (
O) 2 —, —C (O) OR 25 , R 25 C (O) O—, and —NR 25 R 26 (where R 25 and R 26 are as defined above). 1 to be selected
Or more groups.

【００３８】 "ヒドロキシ"基は−ＯＨ基を表す。A “hydroxy” group refers to an —OH group.

【００３９】 "アルコキシ"基は，−Ｏ−（非置換アルキル）および−Ｏ−（非置換シクロア
ルキル）基の両方を表す。An “alkoxy” group refers to both an —O- (unsubstituted alkyl) and an —O- (unsubstituted cycloalkyl) group.

【００４０】 "アリールオキシ"基は，本明細書において定義される−Ｏ−アリールおよび−
Ｏ−ヘテロアリール基の両方を表す。An “aryloxy” group is an —O-aryl and — as defined herein.
Represents both O-heteroaryl groups.

【００４１】 "メルカプト"基は−ＳＨ基を表す。A “mercapto” group refers to a —SH group.

【００４２】 "アルキルチオ"基は，−Ｓ−（非置換アルキル）および−Ｓ−（非置換シクロ
アルキル）基の両方を表す。An “alkylthio” group refers to both a —S- (unsubstituted alkyl) and a —S- (unsubstituted cycloalkyl) group.

【００４３】 "アリールチオ"基は，本明細書において定義される−Ｓ−アリールおよび−Ｓ
−ヘテロアリール基の両方を表す。An “arylthio” group refers to an —S-aryl and —S as defined herein.
-Represents both heteroaryl groups.

【００４４】 "アシル"基は，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ"基を表し，ここで，Ｒ"は，水素，非置換低級
アルキル，トリハロメチル，非置換シクロアルキル，１またはそれ以上の非置換
低級アルキル，トリハロメチル，非置換低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ25Ｒ 26 基で任意に置換されていてもよいアリール，１またはそれ以上の非置換低級ア
ルキル，トリハロアルキル，非置換低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ25Ｒ26基
で任意に置換されていてもよいヘテロアリール（環炭素を介して結合），および
１またはそれ以上の非置換低級アルキル，トリハロアルキル，非置換低級アルコ
キシ，ハロおよび−ＮＲ25Ｒ26基で任意に置換されていてもよいヘテロ脂環式基
（環炭素を介して結合）からなる群より選択される。An “acyl” group refers to a —C (O) —R ″ group, where R ″ is hydrogen, unsubstituted lower.
Alkyl, trihalomethyl, unsubstituted cycloalkyl, one or more unsubstituted
Lower alkyl, trihalomethyl, unsubstituted lower alkoxy, halo and -NRtwenty fiveR 26 Aryl optionally substituted with a group, one or more unsubstituted lower
Alkyl, trihaloalkyl, unsubstituted lower alkoxy, halo and -NRtwenty fiveR26Base
Heteroaryl optionally substituted with (bonded via a ring carbon), and
One or more unsubstituted lower alkyl, trihaloalkyl, unsubstituted lower alcohols
Xy, halo and -NRtwenty fiveR26A heteroalicyclic group optionally substituted with a group
(Bonded via a ring carbon).

【００４５】 "アルデヒド"基は，Ｒ"が水素であるアシル基を表す。An “aldehyde” group refers to an acyl group where R ”is hydrogen.

【００４６】 "チオアシル"基は，−Ｃ（Ｓ）−Ｒ"基を表し，ここで，Ｒ"は本明細書におい
て定義されるとおりである。A “thioacyl” group refers to a —C (S) —R ″ group, where R ″ is as defined herein.

【００４７】 "エステル"基は，−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ"基を表し，ここでＲ"は本明細書において
定義されるとおりであるが，ただしＲ"は水素ではありえない。An “ester” group refers to a —C (O) O—R ″ group, where R ″ is as defined herein, except that R ″ cannot be hydrogen.

【００４８】 "アセチル"基は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3基を表す。An “acetyl” group refers to a —C (O) CH 3 group.

【００４９】 "ハロ"基は，フッ素，塩素，臭素またはヨウ素を表す。A “halo” group represents fluorine, chlorine, bromine or iodine.

【００５０】 "トリハロメチル"基は，−ＣＸ3基を表し，ここで，Ｘは本明細書において定
義されるハロ基である。A “trihalomethyl” group refers to a —CX 3 group, where X is a halo group as defined herein.

【００５１】 "トリハロメタンスルホニル"基は，Ｘ3ＣＳ（＝Ｏ）2−基を表し，ここで，Ｘ
は上で定義したとおりである。A “trihalomethanesulfonyl” group refers to an X 3 CS (＝ O) 2 — group, where X
Is as defined above.

【００５２】 "シアノ"基は−Ｃ≡Ｎ基を表す。A “cyano” group refers to a —C≡N group.

【００５３】 "メチレンジオキシ"基は，−ＯＣＨ2Ｏ−基を表し，ここで２つの酸素原子は
隣接する炭素原子に結合している。A “methylenedioxy” group refers to a —OCH 2 O— group, where two oxygen atoms are bonded to adjacent carbon atoms.

【００５４】 "エチレンジオキシ"基は，−ＯＣＨ2ＣＨ2Ｏ−を表し，ここで，２つの酸素原
子は隣接する炭素原子に結合している。An “ethylenedioxy” group refers to —OCH 2 CH 2 O—, where two oxygen atoms are attached to adjacent carbon atoms.

【００５５】 "Ｏ−カルバミル"基は，−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ25Ｒ26基を表し，ここでＲ25および
Ｒ26は本明細書において定義されるとおりである。An “O-carbamyl” group refers to a —OC (O) NR 25 R 26 group, where R 25 and R 26 are as defined herein.

【００５６】 "Ｎ−カルバミル"基は，Ｒ25ＯＣ（Ｏ）ＮＲ26−基を表し，ここでＲ25および
Ｒ26は本明細書において定義されるとおりである。An “N-carbamyl” group refers to an R 25 OC (O) NR 26 — group, where R 25 and R 26 are as defined herein.

【００５７】 "Ｏ−チオカルバミル"基は，−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ25Ｒ26基を表し，ここでＲ25お
よびＲ26は本明細書において定義されるとおりである。An “O-thiocarbamyl” group refers to a —OC (S) NR 25 R 26 group, where R 25 and R 26 are as defined herein.

【００５８】 "Ｎ−チオカルバミル"基は，Ｒ25ＯＣ（Ｓ）ＮＲ26−基を表し，ここでＲ25お
よびＲ26は本明細書において定義されるとおりである。An “N-thiocarbamyl” group refers to an R 25 OC (S) NR 26 — group, where R 25 and R 26 are as defined herein.

【００５９】 "アミノ"基は，−ＮＲ25Ｒ26基を表し，ここでＲ25およびＲ26はいずれも水素
である。An “amino” group refers to a —NR 25 R 26 group, where R 25 and R 26 are both hydrogen.

【００６０】 "Ｃ−アミド"基は，−Ｃ（Ｏ）ＮＲ25Ｒ26基を表し，ここでＲ25およびＲ26は
本明細書において定義されるとおりである。A “C-amido” group refers to a —C (O) NR 25 R 26 group, where R 25 and R 26 are as defined herein.

【００６１】 "Ｎ−アミド"基は，Ｒ25Ｃ（Ｏ）ＮＲ26−基を表し，ここでＲ25およびＲ26は
本明細書において定義されるとおりである。An “N-amido” group refers to an R 25 C (O) NR 26 — group, where R 25 and R 26 are as defined herein.

【００６２】 "ニトロ"基は−ＮＯ2基を表す。A “nitro” group refers to a —NO 2 group.

【００６３】 Ｂ．好ましい構造的特徴 本発明の現在好ましい観点は，ＱがB. Preferred Structural Features A currently preferred aspect of the invention is that Q

【化２２】 である化合物である。Embedded image Is a compound.

【００６４】 本発明の別の現在好ましい観点は，ＱがAnother currently preferred aspect of the invention is that Q is

【化２３】 である化合物であり， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，低級
アルコキシ，−ＮＲ21Ｒ22，−（ＣＨ2）nＲ20および−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19から
なる群より選択され； Ｒ3は，水素，ヒドロキシ，ハロ，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル），−ＮＨ
ＳＯ2Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ24，トリハロメチル，および１またはそれ以上の
低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択さ
れ； Ｒ4は，水素であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択され； Ｒ21およびＲ22は，水素および低級アルキルからなる群より独立して選択され；
および， Ｒ24は，水素および低級アルキルからなる群より選択される。Embedded image R 1 is selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl and —C (O) OH; R 2 is hydrogen, lower alkyl, halo, —C (O) R 19 , —C ( O) oR 19, lower alkoxy, -NR 21 R 22, - ( CH 2) n R 20 and -NHC (O) is selected from the group consisting of oR 19; R 3 is hydrogen, hydroxy, halo, -NHC ( O) O (lower alkyl), -NH
R 4 is hydrogen; selected from the group consisting of SO 2 R 19 , —NHC (O) R 24 , trihalomethyl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; R 19 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; n is 2 or 3; R 20 is hydroxy, —C (O) OH, morpholin-4-yl, piperidin-1
-Yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl and -NR 21 R 22 ; R 21 and R 22 are independently selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl;
And R 24 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl.

【００６５】 同様に，現在好ましい本発明の態様は，ＱがSimilarly, a presently preferred embodiment of the invention provides that Q is

【化２４】 である化合物であり， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，低級
アルコキシ，−ＮＲ21Ｒ22，−（ＣＨ2）nＲ20および−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19から
なる群より選択され； Ｒ3は，水素，ヒドロキシ，ハロ，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル），−ＮＨ
ＳＯ2Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ24，トリハロメチル，および１またはそれ以上の
低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択さ
れ； Ｒ4は，水素であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択され； Ｒ21およびＲ22は，水素および低級アルキルからなる群より独立して選択され；
Ｒ24は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ5は，水素，低級アルキル，ハロ，５員環ヘテロアリール，および低級アルキ
ル，ハロ，ヒドロキシ，−ＮＲ21Ｒ22および低級アルコキシからなる群より選択
される１またはそれ以上の基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群
より選択され； Ｒ6は，水素，低級アルキル，３−７員のシクロアルキル，低級アルコキシ，ハ
ロ，および低級アルキル，ハロ，ヒドロキシ，−ＮＲ21Ｒ22および低級アルコキ
シからなる群より独立して選択される１またはそれ以上の基で任意に置換されて
いてもよいアリールからなる群より選択され，または，Ｒ18と一緒になって，構
造：Embedded image R 1 is selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl and —C (O) OH; R 2 is hydrogen, lower alkyl, halo, —C (O) R 19 , —C ( O) oR 19, lower alkoxy, -NR 21 R 22, - ( CH 2) n R 20 and -NHC (O) is selected from the group consisting of oR 19; R 3 is hydrogen, hydroxy, halo, -NHC ( O) O (lower alkyl), -NH
R 4 is hydrogen; selected from the group consisting of SO 2 R 19 , —NHC (O) R 24 , trihalomethyl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; R 19 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; n is 2 or 3; R 20 is hydroxy, —C (O) OH, morpholin-4-yl, piperidin-1
-Yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl and -NR 21 R 22 ; R 21 and R 22 are independently selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl;
R 24 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 5 comprises hydrogen, lower alkyl, halo, 5-membered heteroaryl, and lower alkyl, halo, hydroxy, —NR 21 R 22 and lower alkoxy R 6 is selected from the group consisting of aryl optionally substituted with one or more groups selected from the group: R 6 is hydrogen, lower alkyl, 3-7 membered cycloalkyl, lower alkoxy, halo, And selected from the group consisting of aryl optionally substituted with one or more groups independently selected from the group consisting of lower alkyl, halo, hydroxy, —NR 21 R 22 and lower alkoxy, or , R 18 together with the structure:

【化２５】 ［式中，ｙおよびｙ'は，両方とも水素であるかまたは両方とも低級アルキルで
ある］ を有する基であり； Ｒ7は，−ＯＲ18であり，ここで，Ｒ18は，低級アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20か
らなる群より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって，構造：Embedded image Wherein y and y ′ are both hydrogen or both are lower alkyl; R 7 is —OR 18 , wherein R 18 is lower alkyl, Selected from the group consisting of-(CH 2 ) n R 20 , or together with R 6 or R 8 , the structure:

【化２６】 を有する基であり； Ｒ8は，水素，低級アルキル，３−６員環のシクロアルキル，低級アルコキシ，
ハロ；低級アルキル，低級アルコキシ，ハロ，−ＮＲ21Ｒ22および−ＮＨＣ（Ｏ
）（低級アルキル）からなる群より選択される１またはそれ以上の基で任意に置
換されていてもよいアリール；環中に１−３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロ
アリール；および環中に１−３個のヘテロ原子を有する６員のヘテロアリールか
らなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造：Embedded image R 8 is hydrogen, lower alkyl, 3-6 membered cycloalkyl, lower alkoxy,
Halo; lower alkyl, lower alkoxy, halo, -NR 21 R 22 and -NHC (O
A) optionally substituted with one or more groups selected from the group consisting of: (lower alkyl); 5-membered heteroaryl having 1-3 heteroatoms in the ring; Selected from the group consisting of 6-membered heteroaryl having 1-3 heteroatoms, or together with R 18 , the structure:

【化２７】 を有する基であり； Ｒ9は，水素，低級アルキルヒドロキシ，低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ21
Ｒ22からなる群より選択される。Embedded image R 9 is hydrogen, lower alkylhydroxy, lower alkoxy, halo and —NR 21
It is selected from the group consisting of R 22.

【００６６】 さらに別の現在好ましい本発明の観点は，ＱがYet another currently preferred aspect of the invention is that Q is

【化２８】 である化合物であり， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，低級
アルコキシ，−ＮＲ21Ｒ22，−（ＣＨ2）nＲ20および−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19から
なる群より選択され； Ｒ3は，水素，ヒドロキシ，ハロ，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル），−ＮＨ
ＳＯ2Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ24，トリハロメチル，および１またはそれ以上の
低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択さ
れ； Ｒ4は，水素であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択され； Ｒ21およびＲ22は，水素および低級アルキルからなる群より独立して選択され；
Ｒ24は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ5は，水素，低級アルキル，チエン−２−イル，チエン−３−イル，および１
またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールから
なる群より選択され； Ｒ6は，水素，低級アルキル，５員または６員のシクロアルキル，１またはそれ
以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より
選択され，またはＲ18と一緒になって，構造：Embedded image R 1 is selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl and —C (O) OH; R 2 is hydrogen, lower alkyl, halo, —C (O) R 19 , —C ( O) oR 19, lower alkoxy, -NR 21 R 22, - ( CH 2) n R 20 and -NHC (O) is selected from the group consisting of oR 19; R 3 is hydrogen, hydroxy, halo, -NHC ( O) O (lower alkyl), -NH
R 4 is hydrogen; selected from the group consisting of SO 2 R 19 , —NHC (O) R 24 , trihalomethyl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; R 19 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; n is 2 or 3; R 20 is hydroxy, —C (O) OH, morpholin-4-yl, piperidin-1
-Yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl and -NR 21 R 22 ; R 21 and R 22 are independently selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl;
R 24 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 5 is hydrogen, lower alkyl, thien-2-yl, thien-3-yl, and 1
R 6 is hydrogen, lower alkyl, 5- or 6-membered cycloalkyl, one or more lower alkoxy groups, or an aryl optionally substituted with lower alkoxy groups; Selected from the group consisting of optionally substituted aryl with or together with R 18 have the structure:

【化２９】 ［式中，ｙおよびｙ'は，両方とも水素であるかまたは両方とも低級アルキルで
ある］ を有する基であり； Ｒ7は，−ＯＲ18であり，ここでＲ18は，低級アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20から
なる群より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって，構造：Embedded image Wherein y and y ′ are both hydrogen or both are lower alkyl; R 7 is —OR 18 , where R 18 is lower alkyl, — Selected from the group consisting of (CH 2 ) n R 20 , or together with R 6 or R 8 , the structure:

【化３０】 を有する基であり； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択され； Ｒ8は，水素，低級アルキル，５員または６員環のシクロアルキル，低級アルコ
キシ，−ＮＨＣ（Ｏ）（低級アルキル）基で任意に置換されていてもよいアリー
ル，チエン−２−イル，チエン−３−イル，ピリジン−２−イル，ピリジン−３
−イルからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造：Embedded image N is 2 or 3; R 20 is hydroxy, —C (O) OH, morpholin-4-yl, piperidin-1
R 8 is selected from the group consisting of —yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl and —NR 21 R 22 ; R 8 is hydrogen, lower alkyl, 5- or 6-membered cycloalkyl, lower alkoxy, — Aryl optionally substituted with an NHC (O) (lower alkyl) group, thien-2-yl, thien-3-yl, pyridin-2-yl, pyridin-3
Selected from the group consisting of yl, or together with R 18 , the structure:

【化３１】 を有する基であり； Ｒ9は，水素および低級アルキルからなる群より選択される。Embedded image R 9 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl.

【００６７】 さらに別の現在好ましい本発明の観点は，ＱがYet another currently preferred aspect of the invention is that Q is

【化３２】 である化合物である。Embedded image Is a compound.

【００６８】 この化合物の現在好ましい観点においては，ＱはIn a currently preferred aspect of this compound, Q is

【化３３】 であり， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および
−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，および１またはそれ以上
の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択
され；および Ｒ4は水素である。Embedded image R 1 is selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl and — (CH 2 ) n R 20 ;
n is 2 or 3; R 20 is selected from the group consisting of hydroxy and —C (O) OH; R 2 is hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, —SO 2 NR 21 R 22 and R 3 is selected from the group consisting of hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups. And R 4 is hydrogen.

【００６９】 同様に，ＱがSimilarly, if Q is

【化３４】 である化合物において，本発明の現在好ましい観点においては， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および
−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，および１またはそれ以上
の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択
され； Ｒ4は，水素であり； Ｒ10は，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され； Ｒ11は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され；
Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２または３であり；および Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択される。Embedded image In a currently preferred aspect of the invention, R 1 is selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl and — (CH 2 ) n R 20 ;
n is 2 or 3; R 20 is selected from the group consisting of hydroxy and —C (O) OH; R 2 is hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, —SO 2 NR 21 R 22 and R 3 is selected from the group consisting of hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups. R 4 is hydrogen; R 10 is selected from the group consisting of lower alkyl and —C (O) OR 19 ; R 11 is selected from hydrogen, lower alkyl and —C (O) OR 19 Selected from the group;
R 12 is — (CH 2 ) n R 20 ; R 19 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; n is 2 or 3; and R 20 is hydroxy, —C (O ) OH, morpholin-4-yl, piperidin-1
- yl, piperazin-1-yl, selected from the group consisting of pyrrolidin-1-yl and -NR 21 R 22.

【００７０】 ＱがQ is

【化３５】 である化合物において，さらに別の本発明の現在好ましい観点においては， Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および
−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，および１またはそれ以上
の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択
され； Ｒ4は，水素であり； Ｒ10は，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル）からなる群より選択
され； Ｒ11は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され；
Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２であり；および， Ｒ20は，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−１−イル，ピペリジン−１−イル，ピペ
ラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−Ｎ（低級アルキル）2からな
る群より選択される。Embedded image In yet another currently preferred aspect of the invention, R 1 is selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl, and — (CH 2 ) n R 20 ;
n is 2 or 3; R 20 is selected from the group consisting of hydroxy and —C (O) OH; R 2 is hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, —SO 2 NR 21 R 22 and R 3 is selected from the group consisting of hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups. R 4 is hydrogen; R 10 is selected from the group consisting of lower alkyl and —C (O) O (lower alkyl); R 11 is hydrogen, lower alkyl and —C (O) OR Selected from the group consisting of 19 ;
R 12 is - (CH 2) be n R 20; R 19 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; n is 2; and, R 20 is, -C (O) OH, It is selected from the group consisting of morpholin-1-yl, piperidin-1-yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl and -N (lower alkyl) 2 .

【００７１】 また本発明の現在好ましい観点においては，ＱはIn a currently preferred aspect of the invention, Q is

【化３６】 であり， Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され；および， Ｒ4は，水素である。Embedded image R 1 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 2 is hydrogen, lower alkyl, halo, —C (O) OR 19 , —C (O) R 19 , —N
R 21 R 22 , selected from the group consisting of —SO 2 NR 21 R 22 and —N ＝ C—R 23 ;
R 3 is hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, morpholin-4-yl,
R 4 is selected from the group consisting of piperidin-1-yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; Hydrogen.

【００７２】 本発明の現在好ましい観点においては，ＱがIn a currently preferred aspect of the invention, Q is

【化３７】 である化合物において， ａおよびｂは両方とも単結合であり； ｒは２であり； Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され； Ｒ4は水素であり； Ｒ13は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している共有結合であり； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
Ｒ15は，水素であり；および Ｒ16およびＲ17は，水素および低級アルキルからなる群より独立して選択される
。Embedded image Wherein a and b are both single bonds; r is 2; R 1 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 2 is hydrogen, lower alkyl, halo, -C (O) OR 19 , -C (O) R 19 , -N
R 21 R 22 , selected from the group consisting of —SO 2 NR 21 R 22 and —N ＝ C—R 23 ;
R 3 is hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, morpholin-4-yl,
R 4 is hydrogen; selected from the group consisting of piperidin-1-yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; ; R 13 is Q is a covalent bond attached to the remainder of the molecule through this; R 14 is hydrogen, lower alkyl and - (CH 2) is selected from the group consisting of n R 20;
R 15 is hydrogen; and R 16 and R 17 are independently selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl.

【００７３】 直上の節に示される置換基を有する化合物において，Ｒ20が−ＮＲ21Ｒ22であ
り，ここで，Ｒ21およびＲ22が，水素および低級アルキルからなる群より独立し
て選択されることが，現在好ましい本発明の態様である。In the compounds having the substituents set forth in the immediately preceding section, R 20 is —NR 21 R 22 , wherein R 21 and R 22 are independently selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl. Is a presently preferred embodiment of the present invention.

【００７４】 さらに別の本発明の現在好ましい観点においては，ＱがIn yet another currently preferred aspect of the invention, Q is

【化３８】 である化合物において， ａおよびｂは両方とも二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され； Ｒ4は水素であり； Ｒ13は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している共有結合であり； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
Ｒ15およびＲ16は水素であり；および Ｒ17は存在しない。Embedded image Wherein a and b are both double bonds; r is 1; R 1 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 2 is hydrogen, lower alkyl, halo,- C (O) OR 19 , -C (O) R 19 , -N
R 21 R 22 , selected from the group consisting of —SO 2 NR 21 R 22 and —N ＝ C—R 23 ;
R 3 is hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, morpholin-4-yl,
R 4 is hydrogen; selected from the group consisting of piperidin-1-yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; ; R 13 is Q is a covalent bond attached to the remainder of the molecule through this; R 14 is hydrogen, lower alkyl and - (CH 2) is selected from the group consisting of n R 20;
R 15 and R 16 are hydrogen; and R 17 is absent.

【００７５】 別の現在好ましい本発明の観点においては，ＱがIn another presently preferred aspect of the invention, Q is

【化３９】 である化合物において， ａおよびｂは両方とも二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され； Ｒ4は水素であり； Ｒ13は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ14は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している共有結合であり； Ｒ15およびＲ16は水素であり；および， Ｒ17は存在しない。Embedded image Wherein a and b are both double bonds; r is 1; R 1 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 2 is hydrogen, lower alkyl, halo,- C (O) OR 19 , -C (O) R 19 , -N
R 21 R 22 , selected from the group consisting of —SO 2 NR 21 R 22 and —N ＝ C—R 23 ;
R 3 is hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, morpholin-4-yl,
R 4 is hydrogen; selected from the group consisting of piperidin-1-yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; R 13 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 14 is a covalent bond through which Q is attached to the remainder of the molecule; R 15 and R 16 are hydrogen; , R 17 are not present.

【００７６】 本発明の現在好ましい観点においては，ＱがIn a currently preferred aspect of the invention, Q is

【化４０】 である化合物において， ａおよびｂは二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され； Ｒ4は水素であり； Ｒ13は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
Ｒ15は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している共有結合であり； Ｒ16は水素であり；および， Ｒ17は存在しない。Embedded image Wherein a and b are double bonds; r is 1; R 1 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 2 is hydrogen, lower alkyl, halo, —C ( O) OR 19, -C (O ) R 19, -N
R 21 R 22 , selected from the group consisting of —SO 2 NR 21 R 22 and —N ＝ C—R 23 ;
R 3 is hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, morpholin-4-yl,
R 4 is hydrogen; selected from the group consisting of piperidin-1-yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; ; R 13 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 14 is hydrogen, lower alkyl and - (CH 2) is selected from the group consisting of n R 20;
R 15 is a covalent bond through which Q is attached to the rest of the molecule; R 16 is hydrogen; and R 17 is absent.

【００７７】 ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−［３−
（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３
−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド，３−（３，５−ジ
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−ヒドロキシ−１，３−ジヒド
ロインドール−２−オン，５−アセチル−３−（３，５−ジイソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３，
５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸メチルエステル，３−（３−イソプロ
ピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，
３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（５−イソプロピル−４−メ
トキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，
３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オン，３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）
−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３−シクロヘ
キシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
，５−ブロモ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフ
ラン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロ
ロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン，Ｎ−｛３−［３−シクロヘキシル−４−（２−モルホリ
ン−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１
Ｈ−インドール−６−イル｝−アセトアミド，３−（３，５−ジイソプロピル−
４−メトキシベンジリデン）−５−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン，Ｎ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）
−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミ
ド，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−メチル
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−アミノ−３−（３，５−ジイソ
プロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン，５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メト
キシベンジリデン）−６−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，
３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−５−フルオロ−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−［３，５−ジイソプロピル
−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベン
ジリデン）−７−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（４
−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−５−（２−モルホリン
−４−イルエチル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−［３−（５
−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−２−オキソ−２，
３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド，３−（３，５−
ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−エチル−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン，Ｎ−［２'−メトキシ−５'−（２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル）−ビフェニル−３−イル］−アセトア
ミド，５−フルオロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−［３−（４−メトキ
シ−３−チオフェン−２−イルベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ
−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド，６−アミノ−３−（３，５−
ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−
２−オン，Ｎ−［３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−２−
オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド，５
−ブロモ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン，３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イル
ベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−ブロモ−３−（
５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒド
ロインドール−２−オン，５−フルオロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−
イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３−イソプロ
ピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール
−２−オン，３−（４，５−ジメトキシ−２−チオフェン−２−イルベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−｛３−［４−（２−モルホ
リン−４−イルエトキシ）−３−チオフェン−２−イルベンジリデン］−２−オ
キソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル｝−アセトアミド，３−
（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン，３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメ
チレン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３−
シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒド
ロインドール−２−オン，５−フルオロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキ
シベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（５−イソプ
ロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［
２，３−ｂ］ピリジン−２−オン，３−（３'−エトキシ−６−メトキシビフェ
ニル−３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３
−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２
，３−ｂ］ピリジン−２−オン，３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベン
ジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（４，
５，２'−トリメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オン，Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）
−３−チオフェン−３−イルベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−
１Ｈ−インドール−６−イル｝−アセトアミド，５−クロロ−３−（３−シクロ
ヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン，［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキ
ソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ
−ブチルエステル，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−ブロモ−３−（
３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オン，Ｎ−｛３−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２−モルホリン
−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ
−インドール−６−イル｝−アセトアミド，３−（４−メトキシ−３，５−ジメ
チルベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オ
ン，５−ブロモ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン−４−
イルエトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３
−（３'−エトキシ−４，５−ジメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（４−メトキシ−３−
チオフェン−２−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
，５−クロロ−３−（４−メトキシ−３−ピリジン−３−イルベンジリデン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（４，５，３'−ト
リメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン，３−（４，５−ジメトキシ−２−ナフタレン−２−イルベンジリデン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−［３−（３'−アセチルアミノ
−６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒド
ロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド，６−メトキシ−３−（４−
メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オン，３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン，３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−
イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（
６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−
２−オン，３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチ
ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（２，３−ジヒドロベンゾフ
ラン−５−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン，３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロ
ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン，３−（６−メトキシビフェニル−３
−イルメチレン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン
，３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロ
ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン，３−（２，３−ジヒドロベンゾフラ
ン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２
−オン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン，５−ブロモ−３−（３−
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン，５−ブロモ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（３−シクロペン
チル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール
−２−オン，５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）
−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（５
−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−４−メチル−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５
−ジメチルベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−トリフ
ルオロメチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，６−クロロ−３−（３
，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オン，３−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリ
デン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−プロ
ピオン酸，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−
メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−ブチル−３−（３，５
−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール
−２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−４−カルボン酸，３−（３，
５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−メトキシフェニ
ル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，７−クロロ−３−（３，５−ジ
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−メチル−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オン，［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリ
デン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−カル
バミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル，５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロ
ロ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒド
ロインドール−２−オン，３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）
−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（５−イソプロピ
ル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン，５−ブロモ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５
−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−
（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
，５−クロロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−４−メ
チル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル
−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インド
ール−５−カルボン酸，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリ
デン）−５，６−ジメトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，Ｎ−［
３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−メタンスルホンアミド，Ｎ−
［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−
２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−ベンズアミド，３−（３，
５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−エトキシフェニ
ル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル
−４−メトキシベンジリデン）−６−フェニル−１，３−ジヒドロインドール−
２−オン，３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−
フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−フルオロ−３−（４−
メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン，３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オンからなる群より選択される化合物もまた，本発明の好
ましい態様である。3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-
Methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, N- [3-
(3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3
-Dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamido, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6-hydroxy-1,3-dihydroindol-2-one, 5-acetyl-3-. (3,5-diisopropyl-4-
Methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3,
5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid methyl ester, 3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole -2-one,
3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one,
3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene)
-5-fluoro-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (6-methoxy Biphenyl-3-ylmethylene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (2,2-dimethylchroman -6-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, N- {3- [3-cyclohexyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzylidene] -2-oxo-2,3- Dihydro-1
H-indol-6-yl} -acetamide, 3- (3,5-diisopropyl-
4-methoxybenzylidene) -5-methoxy-1,3-dihydroindole-2
-One, N- [3- (4-methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene)
-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamido, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5-methyl-1,3-dihydroindole-2- On, 5-amino-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -1,
3-dihydroindol-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6-fluoro-1,3-dihydroindol-2-one,
3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -5-fluoro-1,3
-Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- [3,5-diisopropyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzylidene] -1,3-dihydroindol-2-one, 3- ( 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -7-fluoro-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (4
-Methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene) -5- (2-morpholin-4-ylethyl) -1,3-dihydroindol-2-one, N- [3- (5
-Isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -2-oxo-2,
3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide, 3- (3,5-
Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5-ethyl-1,3-dihydroindol-2-one, N- [2'-methoxy-5 '-(2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -Biphenyl-3-yl] -acetamido, 5-fluoro-3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, N- [3- (4- Methoxy-3-thiophen-2-ylbenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamido, 6-amino-3- (3,5-
Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole-
2-one, N- [3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -2-
Oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide, 5
-Bromo-3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (4-methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene) -1,3- Dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (
5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-fluoro-3- (6-methoxybiphenyl-3-
Ilmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (4,5-dimethoxy -2-thiophen-2-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, N- {3- [4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -3-thiophen-2-ylbenzylidene]- 2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl} -acetamide, 3-
(2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -5-fluoro-1,3 -Dihydroindol-2-one, 3- (3-
Cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -5-fluoro-1,3-dihydroindol-2-one, 5-fluoro-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one , 3- (5-Isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [
2,3-b] pyridin-2-one, 3- (3'-ethoxy-6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3
-Cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2
, 3-b] pyridin-2-one, 3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (4
5,2'-trimethoxybiphenyl-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, N- {3- [4- (2-morpholin-4-ylethoxy)
-3-thiophen-3-ylbenzylidene] -2-oxo-2,3-dihydro-
1H-Indol-6-yl} -acetamide, 5-chloro-3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, [3- (3,5-diisopropyl-4) -Methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -carbamic acid tert
-Butyl ester, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (
3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, N- {3- [3-tert-butyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzylidene]- 2-oxo-2,3-dihydro-1H
-Indol-6-yl} -acetamide, 3- (4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 5-bromo-3- [3,5-diisopropyl-4- (2-morpholine-4-
Ilethoxy) -benzylidene] -1,3-dihydroindol-2-one, 3
-(3'-ethoxy-4,5-dimethoxybiphenyl-2-ylmethylene) -1
, 3-Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (4-methoxy-3-
Thiophene-2-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (4-methoxy-3-pyridin-3-ylbenzylidene)-
1,3-dihydroindole-2-one, 5-chloro-3- (4,5,3'-trimethoxybiphenyl-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindole-2
-One, 3- (4,5-dimethoxy-2-naphthalen-2-ylbenzylidene)
-1,3-dihydroindol-2-one, N- [3- (3'-acetylamino-6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-6 Yl] -acetamide, 6-methoxy-3- (4-
Methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3
-Dihydroindol-2-one, 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-
Ilmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (
6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-dihydroindole-
2-one, 3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -4-methyl -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 3- (6-methoxy Biphenyl-3
-Ylmethylene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridine -2-one, 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridine-2
-One, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 5-bromo-3- (3-
Isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole-2
-One, 5-bromo-3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene)
-1,3-Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene)
-4-Methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (5
-Isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -4-methyl-1,
3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (4-methoxy-3,5
-Dimethylbenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindole-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6-trifluoromethyl-1,3-dihydroindole-2- On, 6-chloro-3- (3
, 5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro- 1H-Indol-5-yl] -propionic acid, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6
Methoxy-1,3-dihydroindol-2-one, 5-butyl-3- (3,5
-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-4-carboxylic acid, 3- (3,
5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6- (3-methoxyphenyl) -1,3-dihydroindol-2-one, 7-chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5 -Methyl-1,3-dihydroindol-2-one, [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-5-yl] -carbamine Acid tert-butyl ester, 5-chloro-3- (3-isopropyl-4
-Methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (6-methoxy Biphenyl-3-ylmethylene)
-4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5- Bromo-3- (2,3-dihydrobenzofuran-5
-Ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3-
(3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-
(Methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindole-2 -One, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) ) -5,6-Dimethoxy-1,3-dihydroindol-2-one, N- [
3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indol-6-yl] -methanesulfonamide, N-
[3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-
2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -benzamide, 3- (3,
5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6- (3-ethoxyphenyl) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6-phenyl-1 , 3-Dihydroindole-
2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5
Fluoro-1,3-dihydroindol-2-one, 5-fluoro-3- (4-
Methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -1,3-dihydroindole-2
A compound selected from the group consisting of -one, 3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one is also a preferred embodiment of the present invention.

【００７８】 同様に，５−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（３−メチル−１Ｈ−イン
ドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−５−スルホン酸アミド，３（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチ
レン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メ
チルアミド，３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−
オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド
，３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸，５−アセチル−３−（３
−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オン，５−アセチル−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３−（１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸
アミド，５−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン，３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）
−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸，６−ク
ロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オン，３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−ブロモ−３−（１Ｈ−
インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，３
−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オン，３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，５−クロロ−３−（３−メチル−
１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン，５−ブロモ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン，４−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ
−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン，
および３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−５［（１Ｈ−インドール
−２−イルメチレン）アミノ］−１，３−ジヒドロインドール−２−オンからな
る群より選択される化合物もまた本発明の好ましい態様である。Similarly, 5-methyl-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3-methyl-1H-indole-2- Ilmethylene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonamide, 3 (3-methyl-1H-indole-2-ylmethylene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H- Indole-5-sulfonic acid methylamide, 3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -2-
Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid dimethylamide, 3- (3-methyl-1H-indole-2-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid, 5-acetyl-3- (3
-Methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-acetyl-3- (1H-indol-2-ylmethylene)-
1,3-dihydroindol-2-one, 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonamide, 5-amino-3- ( 1H-indole-2-ylmethylene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, 3- (1H-indol-2-ylmethylene)
-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid, 6-chloro-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- ( 1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-bromo -3- (1H-
Indole-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3
-(1H-Indol-2-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindole-2 -One, 5-chloro-3- (3-methyl-
1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene)-
1,3-dihydroindol-2-one, 4-methyl-3- (3-methyl-1H
-Indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one,
And a compound selected from the group consisting of 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -5 [(1H-indol-2-ylmethylene) amino] -1,3-dihydroindol-2-one. This is a preferred embodiment.

【００７９】 さらに，本発明の化学化合物に関して，現在好ましい態様は，３−［２−（２
−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６
，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，３−［２
−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメ
チル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロ
ピオン酸，３−２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール
−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル］−プロピオン酸，３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，３−［２−（５−メチル−２−
オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，３−［２−
（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチ
ル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピ
オン酸，３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドー
ル−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール
−３−イル］−プロピオン酸，Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［２−（２−オキソ−１
，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミド，３−［３−（３−
ジメチルアミノ−プロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−２−イルメチレン］−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン，３−［２
−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，
５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミド
，３−［３−（３−モルホリン−４−イル−３−オキソ−プロピル）−４，５，
６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１，３−ジヒ
ドロ−インドール−２−オン，Ｎ−メチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−
ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミド，Ｎ−（２−モルホリン−
４−イル−エチル）−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール
−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル］−プロピオンアミド，３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−
ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テト
ラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，３−｛２−［６−（
３−メトキシ−フェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−
イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル｝−プロピオン酸，３−｛２−［６−（４−メトキシ−フェニル）−２−オキ
ソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸，３−［２−（２
−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸，３−｛２−［６−（２−メトキシ−フェニル）−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸，３−［２−（５−イソプロピル
スルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメ
チル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロ
ピオン酸，３−［２−（６−モルホリン−４−イル−２−オキソ−１，２−ジヒ
ドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１
Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，３−［２−（５−クロロ−４−メ
チル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４
，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸，
３−［２−（５−ブロモ−４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸，３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２
−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル
）−プロピオンアミド，３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒド
ロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ
−インドール−３−イル］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−プロ
ピオンアミド，および３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール
−３−イリデンメチル）−フェニル］−プロピオン酸からなる群より選択される
化合物を含む。Further, with respect to the chemical compounds of the present invention, a currently preferred embodiment is 3- [2- (2
-Oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6
, 7-Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3- [2
-(5-Chloro-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3-2- ( 5-bromo-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-
3-yl] -propionic acid, 3- [2- (4-methyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-
1H-Indol-3-yl] -propionic acid, 3- [2- (5-methyl-2-
Oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6
7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3- [2-
(6-Chloro-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3- [2- ( 6-methoxy-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, N, N-dimethyl-3 -[2- (2-oxo-1
, 2-Dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide, 3- [3- (3-
Dimethylamino-propyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-2-ylmethylene] -1,3-dihydro-indol-2-one, 3- [2
-(2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,
5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide, 3- [3- (3-morpholin-4-yl-3-oxo-propyl) -4,5.
6,7-tetrahydro-1H-indol-2-ylmethylene] -1,3-dihydro-indol-2-one, N-methyl-3- [2- (2-oxo-1,2-
Dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide, N- (2-morpholine-
4-yl-ethyl) -3- [2- (2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-
3-yl] -propionamide, 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydro-
Pyrrolo [2,3-b] pyridin-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3- {2- [6- (
3-methoxy-phenyl) -2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-
Ilidenemethyl] -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl} -propionic acid, 3- {2- [6- (4-methoxy-phenyl) -2-oxo-1,2-dihydro -Indole-3-ylidenemethyl] -4,5,6,7-
Tetrahydro-1H-indol-3-yl} -propionic acid, 3- [2- (2
-Oxo-6-phenyl-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3- {2- [6- (2-methoxy-phenyl) -2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl] -4,5,6,7-tetrahydro-
1H-Indol-3-yl} -propionic acid, 3- [2- (5-isopropylsulfamoyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7- Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3- [2- (6-morpholin-4-yl-2-oxo-1,2-dihydro-indol-3-ylidenemethyl) -4,5,6 , 7-Tetrahydro-1
H-Indol-3-yl] -propionic acid, 3- [2- (5-chloro-4-methyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4
, 5,6,7-Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid,
3- [2- (5-bromo-4-methyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl]- Propionic acid, 3- [2- (5-bromo-2-oxo-1,2
-Dihydro-indol-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -N- (2-morpholin-4-yl-ethyl) -propionamide, 3- [2 -(5-chloro-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H
-Indol-3-yl] -N- (2-morpholin-4-yl-ethyl) -propionamide and 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -phenyl ] -Propionic acid.

【００８０】 ２．合成／コンビナトリアルライブラリ 本発明のさらに別の観点は，構造５のオキシインドールを構造６，７または８
のアルデヒドと反応させることにより形成することができる，少なくとも１０個
の３−メチリデニル−２−インドリノン化合物のコンビナトリアルライブラリを
特徴とする：2. Synthesis / Combinatorial Libraries Yet another aspect of the present invention relates to the use of oxindoles of structure 5 to structures 6,7 or 8
Characterized by a combinatorial library of at least 10 3-methylidenyl-2-indolinone compounds that can be formed by reacting with an aldehyde of:

【化４１】 Embedded image

【化４２】 ［式中，Ｒ1，Ｒ2，Ｒ3，Ｒ4，Ｒ5，Ｒ6，Ｒ7，Ｒ8，Ｒ9，Ｒ10，Ｒ11，Ｒ12，
Ｒ13，Ｒ14，Ｒ15，Ｒ16およびＲ17は，上述した意味を有する］。Embedded image [Wherein R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 , R 6 , R 7 , R 8 , R 9 , R 10 , R 11 , R 12 ,
R 13 , R 14 , R 15 , R 16 and R 17 have the meaning described above].

【００８１】 本明細書において用いる場合，"コンビナトリアルライブラリ"とは，化合物の
多次元アレイにおいて，１つの次元の各化合物を他の次元の各化合物と反応させ
ることにより形成されるすべての化合物をを表す。本発明の文脈においては，ア
レイは２次元であり，１つの次元は本発明の全オキシインドールであり，第２の
次元は本発明の全アルデヒドである。置換３−メチリデニル−２−インドリノン
化合物を形成するために，各オキシインドールを，それぞれのそしてすべてのア
ルデヒドと反応させることができる。このようにして形成されるすべての置換３
−メチリデニル−２−インドリノン化合物は，本発明の範囲内である。また，い
くつかのオキシインドールとすべてのアルデヒド，すべてのオキシインドールと
いくつかのアルデヒド，またはいくつかのオキシインドールといくつかのアルデ
ヒドとの反応により形成されるより小さいコンビナトリアルライブラリも，本発
明の範囲内である。As used herein, a “combinatorial library” refers to a compound in a multidimensional array of compounds that is formed by reacting each compound of one dimension with each compound of another dimension. Represent. In the context of the present invention, the array is two-dimensional, one dimension is all oxindoles of the invention and the second dimension is all aldehydes of the invention. Each oxindole can be reacted with each and every aldehyde to form a substituted 3-methylidenyl-2-indolinone compound. All substitutions 3 thus formed
-Methylidenyl-2-indolinone compounds are within the scope of the present invention. Also, smaller combinatorial libraries formed by the reaction of some oxindoles and all aldehydes, all oxindoles and some aldehydes, or some oxindoles and some aldehydes are within the scope of the invention. Is within.

【００８２】 上述のコンビナトリアルライブラリ中のオキシインドールは，好ましくは，オ
キシインドールそれ自体および置換オキシインドールからなる群より選択される
。非限定的例としては以下のものが挙げられる。６−ブロモオキシインドール，
５−ヒドロキシオキシインドール，５−メトキシオキシインドール，６−メトキ
シオキシインドール，５−フェニルアミノスルホニルオキシインドール，４−［
２−（２−イソプロピルフェノキシ）エチル］オキシインドール，４−［２−（
３−イソプロピルフェノキシ）−エチル］オキシインドール，４−［２−（４−
イソプロピルフェノキシ）エチル］オキシインドール，５−フルオロオキシイン
ドール，６−フルオロオキシインドール，７−フルオロオキシインドール，６−
トリフルオロメチルオキシインドール，５−クロロオキシインドール，６−クロ
ロオキシインドール，４−カルボキシインドール，５−ブロモオキシインドール
，５−ブロモ−４−メチルオキシインドール，６−（Ｎ−アセトアミド）オキシ
インドール，４−メチルオキシインドール，５−メチルオキシインドール，４−
メチル−５−クロロオキシインドール，５−エチルオキシインドール，６−ヒド
ロキシオキシインドール，５−アセチルオキシインドール，５−カルボキシイン
ドール，５−アミノオキシインドール，６−アミノオキシインドール，４−（２
−Ｎ−モルホリノエチル）オキシインドール，７−アザオキシインドール，オキ
シインドール−４−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル，オキシインドール−６−
カルバミン酸ｔ−ブチルエステル，４−（２−カルボキシエチル）オキシインド
ール，５−ｎ−ブチルオキシインドール，５，６−ジメトキシオキシインドール
，６−（メタンスルホンアミド）−オキシインドール，６−（ベンズアミド）オ
キシインドール，５−エトキシオキシインドール，６−フェニルオキシインドー
ル，６−（２−メトキシフェニル）オキシインドール，６−（３−メトキシフェ
ニル）オキシインドール，６−（４−メトキシフェニル）オキシインドール，５
−アミノスルホニルオキシインドール，５−イソプロピル−アミノスルホニルオ
キシインドール，５−ジメチルアミノスルホニルオキシインドール，５−（Ｎ−
モルホリノスルホニル）オキシインドール，４−（２−ヒドロキシエチル）オキ
シインドール，６−（３−エトキシフェニル）オキシインドール，６−（モルホ
リン−４−イル）オキシインドール，５−（２−（Ｎ−モルホリノ）エチル）オ
キシインドール，５−（メタンスルホンアミド）オキシインドール，５−メトキ
シカルボニルオキシインドールおよび５−カルボキシエチルオキシインドール。The oxindole in the combinatorial library described above is preferably selected from the group consisting of oxindole itself and substituted oxindole. Non-limiting examples include: 6-bromooxindole,
5-hydroxyoxyindole, 5-methoxyoxyindole, 6-methoxyoxyindole, 5-phenylaminosulfonyloxyindole, 4- [
2- (2-isopropylphenoxy) ethyl] oxindole, 4- [2- (
3-isopropylphenoxy) -ethyl] oxindole, 4- [2- (4-
Isopropylphenoxy) ethyl] oxindole, 5-fluorooxindole, 6-fluorooxindole, 7-fluorooxindole, 6-
Trifluoromethyloxindole, 5-chlorooxindole, 6-chlorooxindole, 4-carboxyindole, 5-bromooxindole, 5-bromo-4-methyloxindole, 6- (N-acetamido) oxindole, 4 -Methyloxyindole, 5-methyloxyindole, 4-
Methyl-5-chlorooxyindole, 5-ethyloxyindole, 6-hydroxyoxyindole, 5-acetyloxyindole, 5-carboxyindole, 5-aminooxyindole, 6-aminooxyindole, 4- (2
-N-morpholinoethyl) oxindole, 7-azaoxindole, oxindole-4-carbamic acid t-butyl ester, oxindole-6
Carbamic acid t-butyl ester, 4- (2-carboxyethyl) oxindole, 5-n-butyloxyindole, 5,6-dimethoxyoxyindole, 6- (methanesulfonamido) -oxindole, 6- (benzamide) Oxindole, 5-ethoxyoxindole, 6-phenyloxindole, 6- (2-methoxyphenyl) oxindole, 6- (3-methoxyphenyl) oxindole, 6- (4-methoxyphenyl) oxindole, 5
-Aminosulfonyloxyindole, 5-isopropyl-aminosulfonyloxyindole, 5-dimethylaminosulfonyloxyindole, 5- (N-
Morpholinosulfonyl) oxindole, 4- (2-hydroxyethyl) oxindole, 6- (3-ethoxyphenyl) oxindole, 6- (morpholin-4-yl) oxindole, 5- (2- (N-morpholino) Ethyl) oxindole, 5- (methanesulfonamido) oxindole, 5-methoxycarbonyloxindole and 5-carboxyethyloxindole.

【００８３】 上述のコンビナトリアルライブラリにおけるアルデヒドは，好ましくは，以下
の化合物からなる群より選択される：３−（１−ベンジル−５−ホルミル−２，
４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸，３−（５−ホルミル
−１−メトキシカルボニルメチル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イ
ル）プロピオン酸，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロ
ール−３−イル）プロピオン酸，３−［５−ホルミル−１−（３−メトキシベン
ジル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピオン酸メチルエ
ステル，３−（１−シクロヘキシルメチル−５−ホルミル−２，４−ジメチル−
１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸メチルエステル，３−［１−（２，２
−ジメチル−プロピル）−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−
３−イル］プロピオン酸メチルエステル，１，３，５−トリメチル−４−（３−
モルホリン−４−イル−３−オキソ−プロピル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボ
アルデヒド，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−
３−イル）−Ｎ−（２−モルホリン−４−イルエチル）プロピオンアミド，３−
（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−
フェニルプロピオンアミド，１，３，５−トリメチル−４−（３−オキソ−３−
ピペリジン−１−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，１
，３，５−トリメチル−４−（３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル
）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，３−（５−ホルミル−１，２，４
−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）プ
ロピオンアミド，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロー
ル−３−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）プロピオンアミド，Ｎ−（４−
フルオロフェニル）−３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピ
ロール−３−イル）−プロピオンアミド，３−（５−ホルミル−１，２，４−ト
リメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニ
ル）−プロピオンアミド，３−［５−ホルミル−１−（３−メトキシ−ベンジル
）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸，３−（１−
シクロヘキシルメチル−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３
−イル）プロピオン酸，３−［１−（３−フルオロベンジル）−５−ホルミル−
２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピオン酸メチルエステル，
３−（１−ベンジル−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−
イル）プロピオン酸，３−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ホルミル−２
，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピオン酸メチルエステル，３
−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−
ピロール−３−イル］−プロピオン酸，３−［１−（３−フルオロベンジル）−
５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピオン酸，
３，５−ジメチル−４−（３−モルホリン−４−イル−プロピル）−１Ｈ−ピロ
ール−２−カルボアルデヒド，４−（３−ジメチルアミノプロピル）−３，５−
ジメチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，５−ホルミル−２，４−ジ
メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸，３，５−ジメチル−４−（４−メチ
ルピペラジン−１−カルボニル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，５
−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジメチ
ルアミノエチル）アミド，３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル）プロピオン酸，３−（３−ジメチルアミノプロ
ピル）−２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール，イ
ンドール−２−カルボアルデヒドおよび３−メチルインドール−２−カルボアル
デヒド。The aldehyde in the above combinatorial library is preferably selected from the group consisting of: 3- (1-benzyl-5-formyl-2,
4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl) propionic acid, 3- (5-formyl-1-methoxycarbonylmethyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl) propionic acid, 3- (5- Formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrol-3-yl) propionic acid, 3- [5-formyl-1- (3-methoxybenzyl) -2,4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl ] Propionic acid methyl ester, 3- (1-cyclohexylmethyl-5-formyl-2,4-dimethyl-
1H-pyrrol-3-yl) propionic acid methyl ester, 3- [1- (2,2
-Dimethyl-propyl) -5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-
3-yl] propionic acid methyl ester, 1,3,5-trimethyl-4- (3-
Morpholin-4-yl-3-oxo-propyl) -1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 3- (5-formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrole-
3-yl) -N- (2-morpholin-4-ylethyl) propionamide, 3-
(5-formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrol-3-yl) -N-
Phenylpropionamide, 1,3,5-trimethyl-4- (3-oxo-3-
Piperidin-1-ylpropyl) -1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 1
, 3,5-Trimethyl-4- (3-oxo-3-pyrrolidin-1-ylpropyl) -1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 3- (5-formyl-1,2,4
-Trimethyl-1H-pyrrol-3-yl) -N- (4-methoxyphenyl) propionamide, 3- (5-formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrol-3-yl) -N- ( 4-methoxyphenyl) propionamide, N- (4-
Fluorophenyl) -3- (5-formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrol-3-yl) -propionamide, 3- (5-formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrole- 3-yl) -N- (4-trifluoromethylphenyl) -propionamide, 3- [5-formyl-1- (3-methoxy-benzyl) -2,4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl) Propionic acid, 3- (1-
Cyclohexylmethyl-5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-3
-Yl) propionic acid, 3- [1- (3-fluorobenzyl) -5-formyl-
2,4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl] propionic acid methyl ester,
3- (1-benzyl-5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-3-
Yl) propionic acid, 3- [1- (4-fluorobenzyl) -5-formyl-2
, 4-Dimethyl-1H-pyrrol-3-yl] propionic acid methyl ester, 3
-[1- (4-Fluorobenzyl) -5-formyl-2,4-dimethyl-1H-
Pyrrole-3-yl] -propionic acid, 3- [1- (3-fluorobenzyl)-
5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl] propionic acid,
3,5-dimethyl-4- (3-morpholin-4-yl-propyl) -1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 4- (3-dimethylaminopropyl) -3,5-
Dimethyl-1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid, 3,5-dimethyl-4- (4-methylpiperazine-1-carbonyl) -1H -Pyrrole-2-carbaldehyde, 5
-Formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid (2-dimethylaminoethyl) amide, 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl ) Propionic acid, 3- (3-dimethylaminopropyl) -2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole, indole-2-carbaldehyde and 3-methylindole-2-carbaldehyde.

【００８４】 本発明の別の態様は，式１の３−メチリデニル−２−インドリノンを合成する
方法を提供する。該方法は，式５のオキシインドールを，溶媒中で，好ましくは
塩基の存在下で，式６，７または８のアルデヒドと反応させることを含む。Another aspect of the present invention provides a method for synthesizing 3-methylidenyl-2-indolinone of Formula 1. The method comprises reacting an oxindole of formula 5 with an aldehyde of formula 6, 7 or 8 in a solvent, preferably in the presence of a base.

【００８５】 式６，７または８のアルデヒドと反応させて式１の置換３−メチリデニル−２
−インドリノンを得ることができる式５のオキシインドールの例は，オキシイン
ドールそれ自体および置換オキシインドールであり，例えば，限定するものでは
ないが，以下のものが挙げられる。６−ブロモオキシインドール，５−ヒドロキ
シオキシインドール，５−メトキシオキシインドール，６−メトキシオキシイン
ドール，５−フェニルアミノスルホニルオキシインドール，４−［２−（２−イ
ソプロピルフェノキシ）エチル］オキシインドール，４−［２−（３−イソプロ
ピルフェノキシ）−エチル］オキシインドール，４−［２−（４−イソプロピル
フェノキシ）エチル］オキシインドール，５−フルオロオキシインドール，６−
フルオロオキシインドール，７−フルオロオキシインドール，６−トリフルオロ
メチルオキシインドール，５−クロロオキシインドール，６−クロロオキシイン
ドール，４−カルボキシインドール，５−ブロモオキシインドール，５−ブロモ
−４−メチルオキシインドール，６−（Ｎ−アセトアミド）オキシインドール，
４−メチルオキシインドール，５−メチルオキシインドール，４−メチル−５−
クロロオキシインドール，５−エチルオキシインドール，６−ヒドロキシオキシ
インドール，５−アセチルオキシインドール，５−カルボキシインドール，５−
アミノオキシインドール，６−アミノオキシインドール，４−（２−Ｎ−モルホ
リノエチル）オキシインドール，７−アザオキシインドール，オキシインドール
−４−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル，オキシインドール−６−カルバミン酸
ｔ−ブチルエステル，４−（２−カルボキシエチル）オキシインドール，５−ｎ
−ブチルオキシインドール，５，６−ジメトキシオキシインドール，６−（メタ
ンスルホンアミド）−オキシインドール，６−（ベンズアミド）オキシインドー
ル，５−エトキシオキシインドール，６−フェニルオキシインドール，６−（２
−メトキシフェニル）オキシインドール，６−（３−メトキシフェニル）オキシ
インドール，６−（４−メトキシフェニル）オキシインドール，５−アミノスル
ホニルオキシインドール，５−イソプロピル−アミノスルホニルオキシインドー
ル，５−ジメチルアミノスルホニルオキシインドール，５−（Ｎ−モルホリノス
ルホニル）オキシインドール，４−（２−ヒドロキシエチル）オキシインドール
，６−（３−エトキシフェニル）オキシインドール，６−（モルホリン−４−イ
ル）オキシインドール，５−（２−（Ｎ−モルホリノ）エチル）オキシインドー
ル，５−（メタンスルホンアミド）オキシインドール，５−メトキシカルボニル
オキシインドールおよび５−カルボキシエチルオキシインドール。The substituted 3-methylidenyl-2 of formula 1 is reacted with an aldehyde of formula 6, 7 or 8
Examples of oxindoles of formula 5 from which indolinone can be obtained are oxindole itself and substituted oxindoles, including but not limited to: 6-bromooxyindole, 5-hydroxyoxyindole, 5-methoxyoxyindole, 6-methoxyoxyindole, 5-phenylaminosulfonyloxyindole, 4- [2- (2-isopropylphenoxy) ethyl] oxindole, 4- [2- (3-isopropylphenoxy) -ethyl] oxindole, 4- [2- (4-isopropylphenoxy) ethyl] oxindole, 5-fluorooxindole, 6-
Fluorooxyindole, 7-fluorooxyindole, 6-trifluoromethylindole, 5-chlorooxyindole, 6-chlorooxyindole, 4-carboxyindole, 5-bromooxyindole, 5-bromo-4-methyloxyindole , 6- (N-acetamido) oxindole,
4-methyloxyindole, 5-methyloxyindole, 4-methyl-5-
Chlorooxindole, 5-ethyloxindole, 6-hydroxyoxindole, 5-acetyloxindole, 5-carboxyindole, 5-
Aminooxyindole, 6-aminooxyindole, 4- (2-N-morpholinoethyl) oxindole, 7-azaoxindole, oxindole-4-carbamic acid t-butyl ester, oxindole-6-carbamic acid t- Butyl ester, 4- (2-carboxyethyl) oxindole, 5-n
-Butyloxyindole, 5,6-dimethoxyoxindole, 6- (methanesulfonamido) -oxindole, 6- (benzamido) oxindole, 5-ethoxyoxyindole, 6-phenyloxyindole, 6- (2
-Methoxyphenyl) oxindole, 6- (3-methoxyphenyl) oxindole, 6- (4-methoxyphenyl) oxindole, 5-aminosulfonyloxyindole, 5-isopropyl-aminosulfonyloxyindole, 5-dimethylaminosulfonyl Oxindole, 5- (N-morpholinosulfonyl) oxindole, 4- (2-hydroxyethyl) oxindole, 6- (3-ethoxyphenyl) oxindole, 6- (morpholin-4-yl) oxindole, 5- (2- (N-morpholino) ethyl) oxindole, 5- (methanesulfonamido) oxindole, 5-methoxycarbonyloxindole and 5-carboxyethyloxindole.

【００８６】 構造２のオキシインドールと反応させることができる構造６，７または８のア
ルデヒドの例としては，限定されるものではないが，以下のものが挙げられる：
３−（１−ベンジル−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−
イル）プロピオン酸，３−（５−ホルミル−１−メトキシカルボニルメチル−２
，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオン酸，３−（５−ホル
ミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオン酸，
３−［５−ホルミル−１−（３−メトキシベンジル）−２，４−ジメチル−１Ｈ
−ピロール−３−イル］プロピオン酸メチルエステル，３−（１−シクロヘキシ
ルメチル−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロ
ピオン酸メチルエステル，３−［１−（２，２−ジメチルプロピル）−５−ホル
ミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸メチルエ
ステル，１，３，５−トリメチル−４−（３−モルホリン−４−イル−３−オキ
ソプロピル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，３−（５−ホルミル−
１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−（２−モルホリン
−４−イルエチル）プロピオンアミド，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリ
メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−フェニルプロピオンアミド，１，３
，５−トリメチル−４−（３−オキソ−３−ピペリジン−１−イルプロピル）−
１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，１，３，５−トリメチル−４−（３−
オキソ−３−ピロリジン−１−イル−プロピル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボ
アルデヒド，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−
３−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）プロピオンアミド，３−（５−ホル
ミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−Ｎ−（４−メト
キシフェニル）プロピオンアミド，Ｎ−（４−フルオロフェニル）−３−（５−
ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオン
アミド，３−（５−ホルミル−１，２，４−トリメチル−１Ｈ−ピロール−３−
イル）−Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）プロピオンアミド，３−［５
−ホルミル−１−（３−メトキシ−ベンジル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロ
ール−３−イル］プロピオン酸，３−（１−シクロヘキシルメチル−５−ホルミ
ル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸，３−［１−
（３−フルオロベンジル）−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール
−３−イル］プロピオン酸メチルエステル，３−（１−ベンジル−５−ホルミル
−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸，３−［１−（
４−フルオロベンジル）−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−
３−イル］プロピオン酸メチルエステル，３−［１−（４−フルオロベンジル）
−５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン
酸，３−［１−（３−フルオロベンジル）−５−ホルミル−２，４−ジメチル−
１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピオン酸，３，５−ジメチル−４−（３−モル
ホリン−４−イル−プロピル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，４−
（３−ジメチルアミノプロピル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−２−カ
ルボアルデヒド，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カル
ボン酸，３，５−ジメチル−４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）−
１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１
Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジメチルアミノエチル）アミド，３−（２
−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）プ
ロピオン酸，３−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−ホルミル−４，５，６
，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール，インドール−２−カルボアルデヒドお
よび３−メチルインドール−２−カルボアルデヒド。Examples of aldehydes of structure 6, 7 or 8 that can be reacted with oxindole of structure 2 include, but are not limited to:
3- (1-benzyl-5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-3-
Yl) propionic acid, 3- (5-formyl-1-methoxycarbonylmethyl-2
, 4-Dimethyl-1H-pyrrol-3-yl) -propionic acid, 3- (5-formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrol-3-yl) -propionic acid,
3- [5-formyl-1- (3-methoxybenzyl) -2,4-dimethyl-1H
-Pyrrol-3-yl] propionic acid methyl ester, 3- (1-cyclohexylmethyl-5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl) propionic acid methyl ester, 3- [1- (2 , 2-Dimethylpropyl) -5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid methyl ester, 1,3,5-trimethyl-4- (3-morpholin-4-yl- 3-oxopropyl) -1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 3- (5-formyl-
1,2,4-trimethyl-1H-pyrrol-3-yl) -N- (2-morpholin-4-ylethyl) propionamide, 3- (5-formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrole- 3-yl) -N-phenylpropionamide, 1,3
, 5-Trimethyl-4- (3-oxo-3-piperidin-1-ylpropyl)-
1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 1,3,5-trimethyl-4- (3-
Oxo-3-pyrrolidin-1-yl-propyl) -1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 3- (5-formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrole-
3-yl) -N- (4-methoxyphenyl) propionamide, 3- (5-formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrol-3-yl) -N- (4-methoxyphenyl) propionamide , N- (4-Fluorophenyl) -3- (5-
Formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrol-3-yl) -propionamide, 3- (5-formyl-1,2,4-trimethyl-1H-pyrrol-3-
Yl) -N- (4-trifluoromethylphenyl) propionamide, 3- [5
-Formyl-1- (3-methoxy-benzyl) -2,4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl] propionic acid, 3- (1-cyclohexylmethyl-5-formyl-2,4-dimethyl-1H- Pyrrol-3-yl) propionic acid, 3- [1-
(3-Fluorobenzyl) -5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl] propionic acid methyl ester, 3- (1-benzyl-5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrole -3-yl) propionic acid, 3- [1- (
4-fluorobenzyl) -5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-
3-yl] propionic acid methyl ester, 3- [1- (4-fluorobenzyl)
-5-Formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid, 3- [1- (3-fluorobenzyl) -5-formyl-2,4-dimethyl-
[1H-pyrrol-3-yl] propionic acid, 3,5-dimethyl-4- (3-morpholin-4-yl-propyl) -1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 4-
(3-dimethylaminopropyl) -3,5-dimethyl-1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 5-formyl-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid, 3,5-dimethyl-4- (4-methylpiperazine-1-carbonyl)-
1H-pyrrole-2-carbaldehyde, 5-formyl-2,4-dimethyl-1
H-pyrrole-3-carboxylic acid (2-dimethylaminoethyl) amide, 3- (2
-Formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) propionic acid, 3- (3-dimethylaminopropyl) -2-formyl-4,5,6
, 7-Tetrahydro-1H-indole, indole-2-carbaldehyde and 3-methylindole-2-carbaldehyde.

【００８７】 本発明のある種の化合物の中間体である，以下の構造９のアミノプロピル−４
，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドールの合成も，本発明の別の観点で
ある：Aminopropyl-4 of structure 9 below, which is an intermediate of certain compounds of the invention
The synthesis of 5,5,6,7-tetrahydro-1H-indole is another aspect of the present invention:

【化４３】 工程１においては，塩基は無機塩基でも有機塩基でもよい。無機および有機塩
基の例は，本明細書において記載される。好ましくは，塩基は酢酸ナトリウムで
ある。"溶媒"は，塩基および他の反応物が，反応が進行するのに十分に可溶性で
ある任意の溶媒である。好ましい溶媒は，極性のプロトン性溶媒（本明細書にお
いて定義する），例えば水，メタノールおよびエタノールである。現在好ましい
溶媒は水である。反応は，約６０℃−約１８０℃の温度で行う。好ましくは，温
度は，約６０℃−１８０℃であり，より好ましくは，８０℃−１５０℃，最も好
ましくは，１００−１２０℃である。反応は，１−３０時間，好ましくは２−２
０時間，最も好ましくは４−１５時間進行させる。Embedded image In step 1, the base may be an inorganic base or an organic base. Examples of inorganic and organic bases are described herein. Preferably, the base is sodium acetate. "Solvent" is any solvent in which the base and other reactants are sufficiently soluble for the reaction to proceed. Preferred solvents are polar protic solvents (as defined herein), such as water, methanol and ethanol. The currently preferred solvent is water. The reaction is performed at a temperature from about 60C to about 180C. Preferably, the temperature is between about 60C and 180C, more preferably between 80C and 150C, most preferably between 100 and 120C. The reaction is carried out for 1-30 hours, preferably 2-2.
Run for 0 hours, most preferably 4-15 hours.

【００８８】 工程２においては，カルボン酸基をアミド基に転換する。この転換を行う方法
は当該技術分野においてよく知られている。１，１'−カルボニルジイミダゾー
ルの存在下でアミンとカルボン酸を反応させることが現在好ましい方法である。
任意の非プロトン性溶媒を用いることができる。現在好ましい態様においては，
溶媒は非極性非プロトン性溶媒であり，特に好ましくは，ジクロロメタンである
。反応は，室温または約１００℃までの高温において行う。現在好ましい態様は
，反応をおよそ室温で行うことである。In step 2, a carboxylic acid group is converted to an amide group. Methods for performing this conversion are well-known in the art. Reacting an amine with a carboxylic acid in the presence of 1,1'-carbonyldiimidazole is a currently preferred method.
Any aprotic solvent can be used. In a currently preferred embodiment,
The solvent is a non-polar aprotic solvent, particularly preferably dichloromethane. The reaction is performed at room temperature or at elevated temperatures up to about 100 ° C. The currently preferred embodiment is to carry out the reaction at about room temperature.

【００８９】 工程３は，還元剤，例えば水素化リチウムアルミニウム（これに限定されない
）を用いる，ケトとアミド基との同時還元である。反応は，非プロトン性溶媒（
本明細書において定義する）中で行う。現在好ましい溶媒はテトラヒドロフラン
である。反応は，およそ室温から約８０℃，好ましくは約５０℃−約７０℃で進
行させ，最も好ましくは，反応はテトラヒドロフラン還流下で行う。Step 3 is a simultaneous reduction of the keto and amide groups using a reducing agent such as, but not limited to, lithium aluminum hydride. The reaction is carried out in an aprotic solvent (
(As defined herein). The currently preferred solvent is tetrahydrofuran. The reaction proceeds at about room temperature to about 80 ° C., preferably at about 50 ° C. to about 70 ° C., and most preferably, the reaction is carried out at reflux of tetrahydrofuran.

【００９０】 工程４は，オキシ塩化リンおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを用いる，よ
く知られる芳香族ピロール環のホルミル化である。Step 4 is the formylation of the well-known aromatic pyrrole ring using phosphorus oxychloride and N, N-dimethylformamide.

【００９１】 工程５は，アルデヒドとオキシインドールとを縮合させて本発明の３−メチリ
デニル−２−インドリノンを形成し，この反応は，塩基を含んでいてもよい溶媒
中で行う。塩基は，有機塩基であっても無機塩基であってもよい。有機塩基を用
いる場合，好ましくはこれは窒素塩基である。有機窒素塩基の例としては，ジイ
ソプロピルアミン，トリメチルアミン，トリエチルアミン，アニリン，ピリジン
，１，８−ジアザビシクロ−［５．４．１］ウンデカ−７−エン，ピロリジンお
よびピペリジンが挙げられるが，これらに限定されない。Step 5 condenses the aldehyde and oxindole to form the 3-methylidenyl-2-indolinone of the present invention, which reaction is performed in a solvent that may include a base. The base may be an organic base or an inorganic base. If an organic base is used, it is preferably a nitrogen base. Examples of organic nitrogen bases include, but are not limited to, diisopropylamine, trimethylamine, triethylamine, aniline, pyridine, 1,8-diazabicyclo- [5.4.1] undec-7-ene, pyrrolidine and piperidine. .

【００９２】 無機塩基の例としては，アンモニア，アルカリ金属またはアルカリ土類金属の
水酸化物，リン酸塩，炭酸塩，重炭酸塩，酢酸塩，重硫酸塩およびアミドが挙げ
られるが，これらに限定されない。アルカリ金属には，リチウム，ナトリウムお
よびカリウムが含まれ，アルカリ土類金属にはカルシウム，マグネシウムおよび
バリウムが含まれる。Examples of inorganic bases include ammonia, alkali metal or alkaline earth metal hydroxides, phosphates, carbonates, bicarbonates, acetates, bisulfates and amides. Not limited. Alkali metals include lithium, sodium and potassium, and alkaline earth metals include calcium, magnesium and barium.

【００９３】 本発明の現在好ましい態様においては，溶媒がプロトン性溶媒，例えば水また
はアルコールであるとき，塩基はアルカリ金属またはアルカリ土類の無機塩基，
好ましくは，アルカリ金属またはアルカリ土類の水酸化物である。In a currently preferred embodiment of the invention, when the solvent is a protic solvent, such as water or an alcohol, the base is an alkali metal or alkaline earth inorganic base,
Preferably, it is an alkali metal or alkaline earth hydroxide.

【００９４】 当業者には，有機合成の既知の一般原則と本明細書の記載の両方に基づいて，
意図される反応にはいずれの塩基が最も適当であるかが明らかであろう。[0094] Based on both the known general principles of organic synthesis and the description herein, one of ordinary skill in the art
It will be clear which base is most appropriate for the intended reaction.

【００９５】 反応を実施する溶媒は，プロトン性溶媒であっても非プロトン性溶媒であって
もよい。好ましくは，プロトン性溶媒である。"プロトン性溶媒"は，酸素または
窒素原子に共有結合した水素原子を有する溶媒であり，これは水素原子をかなり
酸性にし，このため水素結合を介して溶質と"共有"されることができる。プロト
ン性溶媒の例としては，水およびアルコールが挙げられるが，これらに限定され
ない。The solvent for carrying out the reaction may be a protic solvent or an aprotic solvent. Preferably, it is a protic solvent. A "protic solvent" is a solvent that has a hydrogen atom covalently bonded to an oxygen or nitrogen atom, which makes the hydrogen atom quite acidic, and thus can be "shared" with solutes via hydrogen bonds. Examples of protic solvents include, but are not limited to, water and alcohol.

【００９６】 "非プロトン性溶媒"は，極性であっても非極性であってもよいが，いずれの場
合も，酸性水素を含まず，したがって，溶質と水素結合を形成することができな
い。非極性非プロトン性溶媒の例としては，ペンタン，ヘキサン，ベンゼン，ト
ルエン，塩化メチレンおよび四塩化炭素が挙げられるが，これらに限定されない
。極性非プロトン性溶媒の例は，クロロホルム，テトラヒドロフラン，ジメチル
スルホキシドおよびジメチルホルムアミドである。“Aprotic solvents” can be polar or non-polar, but in each case do not contain acidic hydrogen and, therefore, cannot form hydrogen bonds with solutes. Examples of non-polar aprotic solvents include, but are not limited to, pentane, hexane, benzene, toluene, methylene chloride and carbon tetrachloride. Examples of polar aprotic solvents are chloroform, tetrahydrofuran, dimethylsulfoxide and dimethylformamide.

【００９７】 本発明の現在好ましい態様においては，溶媒はプロトン性溶媒，好ましくは，
水またはエタノール等のアルコールである。In a currently preferred embodiment of the present invention, the solvent is a protic solvent, preferably
Water or alcohol such as ethanol.

【００９８】 反応は，室温より高い温度で行う。温度は一般に約３０℃−約１５０℃，好ま
しくは，約８０℃−約１００℃，最も好ましくは約７５℃−約８５℃であり，こ
れはおよそエタノールの沸点である。The reaction is performed at a temperature higher than room temperature. The temperature is generally from about 30C to about 150C, preferably from about 80C to about 100C, and most preferably from about 75C to about 85C, which is about the boiling point of ethanol.

【００９９】 "約"とは，本明細書に記載される温度範囲が，好ましくは示される温度の１０
℃以内，より好ましくは示される温度の５℃以内，最も好ましくは示される温度
の２℃以内であることを意味する。すなわち，例えば，"約７５℃"とは，７５℃
±１０℃，好ましくは７５℃±５℃，最も好ましくは７５℃±２℃である。“About” means that the temperature range described herein is preferably at or below the stated temperature.
C., more preferably within 5.degree. C. of the indicated temperature, most preferably within 2.degree. C. of the indicated temperature. That is, for example, “about 75 ° C.” means 75 ° C.
It is ± 10 ° C., preferably 75 ° C. ± 5 ° C., most preferably 75 ° C. ± 2 ° C.

【０１００】 本発明のいくつかの代表的な化合物が表１に示される。示される化合物は，例
示にすぎず，いかなる意味においても本発明の範囲を限定するものと解釈すべき
ではない。Some representative compounds of the present invention are shown in Table 1. The compounds shown are illustrative only and should not be construed as limiting the scope of the invention in any way.

【０１０１】[0101]

【表１】 [Table 1]

【０１０２】[0102]

【表２】 [Table 2]

【０１０３】[0103]

【表３】 [Table 3]

【０１０４】[0104]

【表４】 [Table 4]

【０１０５】[0105]

【表５】 [Table 5]

【０１０６】[0106]

【表６】 [Table 6]

【０１０７】[0107]

【表７】 [Table 7]

【０１０８】[0108]

【表８】 [Table 8]

【０１０９】[0109]

【表９】 [Table 9]

【０１１０】[0110]

【表１０】 [Table 10]

【０１１１】[0111]

【表１１】 [Table 11]

【０１１２】[0112]

【表１２】 [Table 12]

【０１１３】[0113]

【表１３】 [Table 13]

【０１１４】[0114]

【表１４】 [Table 14]

【０１１５】[0115]

【表１５】 [Table 15]

【０１１６】[0116]

【表１６】 [Table 16]

【０１１７】[0117]

【表１７】 [Table 17]

【０１１８】[0118]

【表１８】 [Table 18]

【０１１９】[0119]

【表１９】 [Table 19]

【０１２０】[0120]

【表２０】 [Table 20]

【０１２１】[0121]

【表２１】 [Table 21]

【０１２２】[0122]

【表２２】 [Table 22]

【０１２３】[0123]

【表２３】 [Table 23]

【０１２４】３． 生化学／薬物療法 本発明のもう一つの特徴は、 ＰＫの触媒活性を調節するための方法であって
、ＰＫを、本発明の化合物または生理学的に許容されるその塩またはプロドラッ
グと接触させることによる方法に関する。[0124] 3. Another feature of the biochemical / drug therapy present invention provides a method for modulating the catalytic activity of the PK, the PK, is contacted with a compound or a physiologically acceptable salt thereof or prodrug of the present invention By the method.

【０１２５】 本文に用いられる場合、「ＰＫ」はレセプタータンパク質チロシンキナーゼ（
ＲＴＫ）、非レセプターまたは「細胞性」チロシンキナーゼ（ＣＴＫ）、および
セリン−トレオニンキナーゼ（ＳＴＫ）を指す。[0125] As used herein, "PK" refers to the receptor protein tyrosine kinase (
RTK), non-receptor or "cellular" tyrosine kinase (CTK), and serine-threonine kinase (STK).

【０１２６】 「方法」という用語は、所与の作業を遂行するための様式、手段、技術、およ
び手順を指し、化学、薬剤学、生物学、生化学、および医学的技術の従業者には
周知の、あるいは既に該従業者によって既知の様式、手段、技術、および手順か
ら開発された様式、手段、技術、および手順を含むがこれに限定されない。The term “method” refers to the manner, means, techniques, and procedures for performing a given task, and is intended for practitioners of chemistry, pharmacy, biology, biochemistry, and medical technology. Including, but not limited to, forms, means, techniques, and procedures that are known or have been developed from forms, means, techniques, and procedures already known by the employee.

【０１２７】 本文に用いられる場合、「調節」または「調節すること」という用語は、ＲＴ
Ｋ、ＣＴＫ、およびＳＴＫの触媒活性の変更を指す。特に、調節することは、Ｒ
ＴＫ、ＣＴＫ、およびＳＴＫの触媒活性の活性化を指し、好ましくは、 ＲＴＫ
、ＣＴＫ、およびＳＴＫに暴露される化合物または塩の濃度に依存したＲＴＫ、
ＣＴＫ、およびＳＴＫの触媒活性の活性化または阻害を指し、さらに好ましくは
、 ＲＴＫ、ＣＴＫ、およびＳＴＫの触媒活性の阻害を指す。As used herein, the term “modulating” or “modulating” refers to RT
Refers to altering the catalytic activity of K, CTK, and STK. In particular, adjusting R
Refers to the activation of catalytic activity of TK, CTK and STK, preferably RTK
, CTK, and RTK depending on the concentration of compound or salt exposed to STK,
Refers to activation or inhibition of the catalytic activity of CTK and STK, and more preferably refers to inhibition of the catalytic activity of RTK, CTK, and STK.

【０１２８】 本文に用いられている「触媒活性」という用語は、ＲＴＫおよび／またはＣＴ
Ｋの直接または間接的な影響下でのチロシンのリン酸化か、またはＳＴＫの直接
または間接的な影響下でのセリンおよびトレオニンのリン酸化の速度を指す。The term “catalytic activity” as used herein refers to RTK and / or CT
Refers to the rate of phosphorylation of tyrosine under the direct or indirect effect of K or of serine and threonine under the direct or indirect effect of STK.

【０１２９】 本文に用いられている「接触させること」という用語は、本発明の化合物と標
的ＰＫとを、当該化合物がＰＫの触媒活性を直接に、すなわちキナーゼ自体と相
互作用することによるか、または間接に、すなわち当該キナーゼの触媒活性が依
存している別の分子と相互作用することにより、影響することが可能な様式で一
緒に合わせることを指す。かかる「接触させること」は、「インヴィトロ」にお
いて、すなわち試験管、ペトリ皿、またはその他において行なわれることが可能
である。試験管内では、接触させることは、化合物と目的とするＰＫのみが関与
してよく、あるいは全細胞が関与してもよい。また細胞は培養皿内にて維持また
は成育され、その環境において化合物と接触してよい。このような状況において
は、特定の化合物がＰＫ関連障害に影響を及ぼす能力、すなわち当該化合物のＩ
Ｃ50（以下に定義される）を、より複雑な生体を用いてのインヴィヴォでの使用
が試みられる以前に、測定することが可能である。生体の外の細胞については、
ＰＫを当該化合物と接触させるための多様な方法が存在し、かつ当業者には周知
であり、直接の細胞微小注射法および多数の膜貫通担体法を含むがこれに限定さ
れない。As used herein, the term “contacting” refers to the ability of a compound of the invention and a target PK to interact directly with the catalytic activity of PK, ie, with the kinase itself, Or indirectly, ie, by interacting with another molecule upon which the catalytic activity of the kinase is dependent, to bring them together in a manner that can affect them. Such "contacting" can be performed "in vitro", ie, in a test tube, petri dish, or the like. In vitro, contacting may involve only the compound and the PK of interest, or may involve whole cells. Cells may also be maintained or grown in culture dishes and contacted with the compound in that environment. In such a situation, the ability of a particular compound to affect a PK-related disorder, i.
C 50 (defined below) can be measured before attempting to use it in vivo with more complex organisms. For cells outside the body,
There are a variety of methods for contacting a PK with the compound and are well known to those skilled in the art, including, but not limited to, direct cell microinjection and multiple transmembrane carrier methods.

【０１３０】 本発明のさらなる特徴は、本発明の化合物を用いたＰＫの触媒活性の調節がイ
ンヴィトロまたはインヴィヴォにおいて行うことができることである。A further feature of the present invention is that the modulation of PK catalytic activity with the compounds of the present invention can be performed in vitro or in vivo.

【０１３１】 「インヴィトロ」は、これに限定されないが、たとえば試験管または培地の中
といった人工的な環境において行なわれる方法を指す。“In vitro” refers to a method performed in an artificial environment, such as, but not limited to, in a test tube or medium.

【０１３２】 本文に用いられるように、「インヴィヴォ」は、これに限定されないがマウス
、ラット、ウサギ、またはヒト等の生体内で行なわれる方法を指す。As used herein, “in vivo” refers to a method performed in vivo, such as, but not limited to, a mouse, rat, rabbit, or human.

【０１３３】 本発明のまたさらなる特徴は、本発明の化合物によりその触媒活性が調節され
るプロテインキナーゼが、レセプタータンパク質チロシンキナーゼ、細胞性（ま
たは非レセプター）チロシンキナーゼ、およびセリン−トレオニンキナーゼから
成る群より選ばれることである。A still further feature of the invention is that the protein kinase whose catalytic activity is modulated by a compound of the invention comprises the receptor protein tyrosine kinase, cellular (or non-receptor) tyrosine kinase, and serine-threonine kinase. It is to be chosen more.

【０１３４】 本発明の一つの特徴は、本発明の化合物によりその触媒活性が調節されるレセ
プタープロテインキナーゼが、ＥＧＦ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、ＩＲ、
ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲＲ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＣＤＦＩＲ、Ｃ−Ｋｉｔ
、Ｃ−ｆｍｓ、Ｆｌｋ−１Ｒ、Ｆｌｋ４、ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１、Ｆｌｔ−１、Ｆ
ＧＦＲ−１Ｒ、ＦＧＦＲ−２Ｒ、ＦＧＦＲ−３Ｒ、およびＦＧＦＲ−４Ｒから成
る群より選ばれることである。One feature of the present invention is that the receptor protein kinase whose catalytic activity is modulated by the compounds of the present invention is EGF, HER2, HER3, HER4, IR, IR,
IGF-1R, IRR, PDGFRα, PDGFRβ, CDFIR, C-Kit
, C-fms, Flk-1R, Flk4, KDR / Flk-1, Flt-1, F
To be selected from the group consisting of GFR-1R, FGFR-2R, FGFR-3R, and FGFR-4R.

【０１３５】 さらに、本発明の一つの特徴は、本発明の化合物によりその触媒活性が調節さ
れる細胞性チロシンキナーゼが、Ｓｒｃ、Ｆｒｋ、Ｂｔｋ、Ｃｓｋ、Ａｂｌ、Ｚ
ＡＰ７０、Ｆｅｓ／Ｆｐｓ、Ｆａｋ、Ｊａｋ、Ａｃｋ、Ｙｅｓ、Ｆｙｎ、Ｌｙｎ
、Ｌｃｋ、Ｂｌｋ、Ｈｃｋ、Ｆｇｒ、 およびＹｒｋから成る群より選ばれるこ
とである。Furthermore, one feature of the present invention is that the cellular tyrosine kinase whose catalytic activity is regulated by the compounds of the present invention is Src, Frk, Btk, Csk, Abl, Zl.
AP70, Fes / Fps, Fak, Jak, Ack, Yes, Fyn, Lyn
, Lck, Blk, Hck, Fgr, and Yrk.

【０１３６】 本発明のもう一つの特徴は、本発明の化合物によりその触媒活性が調節される
セリン−トレオニンプロテインキナーゼが、ＣＤＫ２およびＲａｆから成る群よ
り選ばれることである。Another feature of the present invention is that the serine-threonine protein kinase whose catalytic activity is modulated by a compound of the present invention is selected from the group consisting of CDK2 and Raf.

【０１３７】 薬剤学的に許容される担体または賦形剤を含めた本発明の化合物の薬剤学的組
成物は、本発明のもう一つの特徴である。かかる薬剤学的組成物は、担体および
賦形剤の双方ならびに、薬剤学的組成物の製剤の熟練者に周知の他の組成物を含
んでよい。A pharmaceutical composition of a compound of the present invention, including a pharmaceutically acceptable carrier or excipient, is another feature of the present invention. Such pharmaceutical compositions may include both carriers and excipients as well as other compositions well known to those skilled in the formulation of pharmaceutical compositions.

【０１３８】 生物におけるプロテインキナーゼ関連障害を治療または予防する方法であって
、治療上有効な量の本発明の化合物、塩、またはプロドラッグを、かかる治療を
必要とする生物へ投与することを含む方法は、本発明のもう一つの特徴である。A method of treating or preventing a protein kinase-related disorder in an organism, comprising administering a therapeutically effective amount of a compound, salt, or prodrug of the invention to an organism in need of such treatment. The method is another feature of the invention.

【０１３９】 本文に用いられる場合、「ＰＫ関連障害」、「ＰＫ攻撃疾患」、および「異常
なＰＫ活性」はすべて不適切な、すなわち不完全な、あるいはより一般的には過
剰な、ＰＫ触媒活性によって特徴づけられる状態を指し、当該特定のＰＫはＲＴ
Ｋ、ＣＴＫ、またはＳＴＫであることが可能である。不適切な触媒活性は；（１
）正常にはＰＫを発現しない細胞におけるＰＫの発現、（２） 望ましくない細
胞増殖、分化および／または成長に導くＰＫ発現の亢進、または（３）細胞増殖
、分化および／または成長の望ましくない減少に導くＰＫ発現の減少、のいずれ
かの結果として生じることが可能である。ＰＫの過剰な活性は、特定のＰＫをコ
ード化している遺伝子の増幅か、または細胞増殖、分化および／または成長と相
互に関係することが可能なあるレベルのＰＫ活性の産生を指す（すなわち、ＰＫ
のレベルが亢進されると、細胞性障害による一つまたはそれより多い症状の激し
さが増す）。不完全な活性は、もちろんその逆であり、ＰＫのレベルが低下する
と、一つまたはそれより多い細胞性障害による症状の激しさが増加する。As used herein, “PK-related disorder”, “PK aggressive disease”, and “abnormal PK activity” are all inappropriate, ie, incomplete, or more generally excessive, PK catalysis Refers to a condition characterized by activity, where the particular PK is RT
It can be K, CTK, or STK. Inappropriate catalytic activity is; (1
) Expression of PK in cells that normally do not express PK, (2) enhanced PK expression leading to undesirable cell proliferation, differentiation and / or growth, or (3) undesirable reduction of cell proliferation, differentiation and / or growth. , Resulting in a decrease in PK expression. Excessive activity of a PK refers to the amplification of the gene encoding a particular PK or the production of a level of PK activity that can be correlated with cell proliferation, differentiation and / or growth (ie, PK
Increased levels increase the severity of one or more symptoms of cellular damage). Incomplete activity is, of course, the converse, with decreasing levels of PK increasing the severity of symptoms due to one or more cellular disorders.

【０１４０】 本文に用いられる場合、「予防する」、「予防すること」、および「予防」と
いう用語は、生物がＰＫ関連障害の獲得を最初の場所で妨げるための方法を指す
。As used herein, the terms “prevent”, “preventing”, and “prevention” refer to a method by which an organism prevents the acquisition of a PK-related disorder in the first place.

【０１４１】 本文に用いられる場合「治療する」、「治療すること」、および「治療」とい
う用語は、ＰＫを介する細胞性障害および／またはそれに付随する症状を緩和ま
たは除去するための方法を指す。特に癌に関しては、これらの用語は単に、癌に
よって影響を受けた生物の余命が増すこと、あるいは当該疾患の一つまたはそれ
より多い症状が減少することを意味する。As used herein, the terms “treat,” “treating,” and “treatment” refer to a method for alleviating or eliminating a PK-mediated cellular disorder and / or its attendant symptoms. . With particular reference to cancer, these terms simply mean that the survival of the organism affected by the cancer is increased, or that one or more symptoms of the disease are reduced.

【０１４２】 「生物」という用語は、少なくとも一つの細胞を含む生きている実存物を指す
。生きている生物は、たとえばただ一つの真核細胞のように単純であるか、また
はヒトを含めた哺乳類のように複雑であることが可能である。The term “organism” refers to a living entity that contains at least one cell. Living organisms can be as simple as, for example, a single eukaryotic cell, or as complex as mammals, including humans.

【０１４３】 本文に用いられているような「治療上有効な量」という用語は、治療される障
害の一つまたはそれより多い症状をある程度までやわらげることとなる、投与さ
れる化合物の量を指す。癌の治療に関しては、治療上有効な量は、（１）腫瘍の
大きさを減じる、（２）腫瘍の転移を阻害する（すなわち速度をある程度まで減
じること、好ましくは停止すること）、（３）腫瘍の成長をある程度阻害する（
すなわち速度をある程度まで減じる、好ましくは停止する）、および／または（
４）癌に関連した一つまたはそれより多い症状をある程度までやわらげる（また
は、好ましくは除去する）という効果を有する量を指す。The term “therapeutically effective amount” as used herein refers to an amount of a compound administered that will alleviate to some extent one or more symptoms of the disorder being treated. . For the treatment of cancer, therapeutically effective amounts include (1) reduce the size of the tumor, (2) inhibit the metastasis of the tumor (ie, reduce the rate to some extent, preferably stop), (3) ) Inhibits tumor growth to some extent (
Ie, reduce the speed to some extent, preferably stop), and / or (
4) Refers to an amount that has the effect of alleviating (or preferably eliminating) one or more symptoms associated with cancer to some extent.

【０１４４】 本発明の一つの特徴は、前文に言及したプロテインキナーゼ関連障害が、レセ
プタータンパク質チロシンキナーゼ関連障害、細胞性チロシンキナーゼ障害、お
よびセリン−トレオニンキナーゼ関連障害から成る群より選ばれることである。One feature of the present invention is that the protein kinase-related disorder referred to in the preamble is selected from the group consisting of a receptor protein tyrosine kinase-related disorder, a cellular tyrosine kinase-related disorder, and a serine-threonine kinase-related disorder. .

【０１４５】 本発明のもう一つの特徴においては、前文に言及したプロテインキナーゼ関連
障害が、ＥＧＦＲ関連障害、ＰＤＧＦＲ関連障害、ＩＧＦＲ関連障害、およびｆ
ｌｋ関連障害から成る群より選ばれる。In another aspect of the invention, the protein kinase-related disorder referred to in the preamble is an EGFR-related disorder, a PDGFR-related disorder, an IGFR-related disorder, and f
selected from the group consisting of lk-related disorders.

【０１４６】 本発明のさらなる特徴においては、前文に言及したプロテインキナーゼ関連障
害は、偏平上皮癌、カポジ肉腫等の肉腫、星状細胞腫、グリア芽細胞腫、肺癌、
膀胱癌、結腸直腸癌、胃腸癌、頭頚部癌、黒色腫、卵巣癌、前立腺癌、乳癌、小
細胞肺癌、および神経膠腫から成る群より選ばれる。In a further aspect of the invention, the protein kinase-related disorder mentioned in the preamble is squamous cell carcinoma, sarcoma such as Kaposi's sarcoma, astrocytoma, glioblastoma, lung cancer,
It is selected from the group consisting of bladder cancer, colorectal cancer, gastrointestinal cancer, head and neck cancer, melanoma, ovarian cancer, prostate cancer, breast cancer, small cell lung cancer, and glioma.

【０１４７】 本発明のまた別の特徴においては、前文において言及したプロテインキナーゼ
関連障害は、糖尿病、自己免疫異常、過剰増殖障害、フォンヒッペル−リンダウ
病、再狭窄、線維症、乾癬、変形性関節炎、慢性関節リウマチ、炎症性疾患、お
よび血管新生から成る群より選ばれる。In another aspect of the invention, the protein kinase-related disorder mentioned in the preamble is diabetes, autoimmune disorders, hyperproliferative disorders, von Hippel-Lindau disease, restenosis, fibrosis, psoriasis, osteoarthritis. , Rheumatoid arthritis, inflammatory diseases, and angiogenesis.

【０１４８】 本発明の化合物を用いて治療または予防されるさらに別の障害は、自己免疫疾
患（ＡＩＤＳ）等の自己免疫異常、およびアテローム性動脈硬化症等の心臓血管
障害である。Still other disorders that are treated or prevented using the compounds of the present invention are autoimmune disorders such as autoimmune diseases (AIDS) and cardiovascular disorders such as atherosclerosis.

【０１４９】 前記プロテインキナーゼを発現している細胞を、本発明の化合物、塩、または
プロドラッグと接触させ、および次いで前記細胞について効果を監視することに
より、プロテインキナーゼの触媒活性を調節する化学的配合物を同定することが
できることは、本発明の一つの特徴である。A chemical that modulates the catalytic activity of a protein kinase by contacting the cell expressing the protein kinase with a compound, salt, or prodrug of the present invention, and then monitoring the effect on the cell. The ability to identify a formulation is one feature of the present invention.

【０１５０】 「監視すること」は、化合物を特定のプロテインキナーゼＰＫを発現している
細胞と接触させることの影響を、観察または検出することを意味する。観察また
は検出された効果は、細胞の表現型における変化か、ＰＫの触媒活性においてか
、あるいはＰＫと天然の結合相手との相互作用における変化であることが可能で
ある。かかる効果を観察または検出するための技術は当業者に周知である。“Monitoring” means observing or detecting the effect of contacting a compound with a cell that expresses a particular protein kinase PK. The observed or detected effect can be a change in the phenotype of the cell, in the catalytic activity of PK, or in the interaction of PK with a natural binding partner. Techniques for observing or detecting such effects are well known to those skilled in the art.

【０１５１】 本発明の最後の特徴においては、前文に言及した効果は、細胞の表現型におけ
る変化の有無、前記プロテインキナーゼの触媒活性における変化の有無、または
前記プロテインキナーゼと天然の結合相手との相互作用における変化の有無から
選択される。In a last aspect of the invention, the effect referred to in the preamble is the presence or absence of a change in the phenotype of the cell, the presence or absence of a change in the catalytic activity of said protein kinase, or the binding of said protein kinase to a natural binding partner. It is selected based on whether there is a change in the interaction.

【０１５２】 「細胞表現型」は、細胞または組織の外面上の様相か、または当該細胞または
組織の生物学的機能を指す。細胞の表現型の例は、これに限定されないが、細胞
の大きさ、細胞成長、細胞増殖、細胞分化、細胞寿命、アポトーシス、および栄
養摂取と使用である。かかる表現型の特徴はこの技術において周知の技術による
計測が可能である。“Cellular phenotype” refers to a feature on the outer surface of a cell or tissue or the biological function of the cell or tissue. Examples of cell phenotypes include, but are not limited to, cell size, cell growth, cell proliferation, cell differentiation, cell life, apoptosis, and nutrition and use. Such phenotypic features can be measured by techniques known in the art.

【０１５３】 「天然の結合相手」は、細胞において特定のＰＫに結合するポリペプチドを指
す。天然の結合相手は、ＰＫを介するシグナル伝達過程において、シグナルの伝
播に役割を果たすことができる。天然の結合相手とＰＫとの相互作用における変
化は、ＰＫ／天然の結合相手複合体の濃度の増加または減少となって現われ、そ
の結果として、ＰＫのシグナルを伝達する能力に、観察可能な変化が生じる。“Natural binding partner” refers to a polypeptide that binds to a particular PK in a cell. Natural binding partners can play a role in signal transmission during PK-mediated signaling. Changes in the interaction of the native binding partner with PK manifest as an increase or decrease in the concentration of the PK / natural binding partner complex, resulting in an observable change in the ability of the PK to transduce a signal. Occurs.

【０１５４】 本発明のもう一つの特徴は、本文に述べた化合物か、あるいはその塩またはプ
ロドラッグが、前文に議論した疾患または障害の治療のため、他の化学療法用薬
剤と組合わされてもよいことである。たとえば、本発明の化合物、塩、またはプ
ロドラッグは、フルオロウラシル（５−ＦＵ）等のアルキル化剤との、単独かま
たはロイコボリンとのさらなる組合せにおいて；あるいは、ＵＦＴ、カペシタビ
ン（capecitabine）、ジェムシタビン（gemsitabine）、およびシタラビン等の
他のピリミジン類似体、アルキルスルホン酸塩、たとえばブスルファン（慢性顆
粒球性白血病の治療に用いられる）、インプロスルファン、およびピポスルファ
ン、等のこれに限定されない他のアルキル化剤；アジリジン、たとえばベンゾデ
パ（benzodepa）、カルボコン、メツレデパ、およびウレデパ；エチレンイミン
およびメチルメラミン、たとえばアルトレタミン（altretamine）、トリエチレ
ンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、
およびトリメチロールメラミン；およびナイトロジェンマスタード、たとえばク
ロラムブシル（慢性リンパ球性白血病、原発性マクログロブリン血症、および非
ホジキンリンパ腫の治療に用いられる）、シクロホスファミド（ホジキン病、多
発性骨髄腫、神経芽細胞腫、乳癌、卵巣癌、肺癌、ウィルムス腫瘍、および横紋
筋肉腫の治療に用いられる）、エストラムスチン、イホスファミド、ノベンブリ
チン（novembrichin）、プレドニムスチン、およびウラシルマスタード（原発性
血小板増加症、非ホジキンリンパ腫、ホジキン病、および卵巣癌の治療に用いら
れる）；およびトリアジン、たとえばダカルバジン（dacarbazine）（軟部組織
肉腫の治療に用いられる）と組合せて用いられる。Another feature of the invention is that the compounds described herein, or salts or prodrugs thereof, can be combined with other chemotherapeutic agents for the treatment of the diseases or disorders discussed above. That is good. For example, a compound, salt or prodrug of the present invention may be administered alone or in further combination with leucovorin, with an alkylating agent such as fluorouracil (5-FU); or alternatively, UFT, capecitabine, gemcitabine. ) And other pyrimidine analogs such as cytarabine, alkyl sulfonates such as, but not limited to, busulfan (used in the treatment of chronic granulocytic leukemia), improsulfan, and piposulfan Aziridine, such as benzodepa, carbone, methuledepa, and uredepa; ethyleneimine and methylmelamine, such as altretamine, triethylenemelamine, triethylenephosphoramide, triethylenethiophosphoramide ,
And trimethylol melamine; and nitrogen mustards such as chlorambucil (used to treat chronic lymphocytic leukemia, primary macroglobulinemia, and non-Hodgkin's lymphoma), cyclophosphamide (Hodgkin's disease, multiple myeloma, Used in the treatment of neuroblastoma, breast, ovarian, lung, Wilms, and rhabdomyosarcoma), estramustine, ifosfamide, novembrichin, prednimustine, and uracil mustard (primary thrombocytosis, Used in the treatment of non-Hodgkin's lymphoma, Hodgkin's disease, and ovarian cancer); and in combination with triazines, such as dacarbazine (used in the treatment of soft tissue sarcoma).

【０１５５】 化合物と同様に、本発明の塩またはプロドラッグは、葉酸類似体、たとえばメ
トレキセート（急性リンパ球性白血病、絨毛上皮腫、菌状息肉腫、乳癌、頭頚部
癌、および骨肉腫の治療に用いられる）およびプテロプテリン；および急性顆粒
球性、急性リンパ球性、および慢性顆粒球性白血病の治療に用途が見い出される
メルカプトプリンおよびチオグアニン等のプリン類似体等の、これに限定されな
い他の代謝拮抗物質化学療法用薬剤との組合せにおいて有益な効果をもつことが
期待されてよいであろう。As with the compounds, the salts or prodrugs of the present invention may be useful in treating folate analogs, such as methotrexate (acute lymphocytic leukemia, villous epithelioma, mycosis fungoides, breast cancer, head and neck cancer, and osteosarcoma) And other metabolites, including but not limited to, purine analogs such as mercaptopurine and thioguanine, which find use in the treatment of acute granulocytic, acute lymphocytic, and chronic granulocytic leukemia It would be expected to have a beneficial effect in combination with an antagonist chemotherapeutic agent.

【０１５６】 本発明の化合物、塩、またはプロドラッグは、ビンカアルカロイド、たとえば
ビンブラスチン（***および精巣の癌の治療に用いられる）、ビンクリスチン、
およびビンデシン；エピポドフィロトキシン（epipodophylotoxins）、たとえば
、いずれも精巣癌およびカポジ肉腫の治療に有用であるエトポシド（etoposide
）およびテニポシド（teniposide）；抗生物質化学療法用薬剤、たとえばダウノ
ルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン（epirubicin）、マイトマイシン（胃
、子宮頚、結腸、***、膀胱、および膵臓の癌を治療するべく用いられる）、ダ
クチノマイシン、テモゾロミド（temozolomide）、プリカマイシン、ブレオマイ
シン（皮膚、食道、および泌尿生殖路の癌の治療において用いられる）；および
Ｌ−アスパラギナーゼ等の酵素化学療法用薬剤といった、これに限定されない天
然の産物を主成分とする化学療法薬剤との組合せにおいて効果を生じることも期
待されてよいであろう。The compounds, salts or prodrugs of the present invention may be vinca alkaloids, such as vinblastine (used in the treatment of breast and testicular cancer), vincristine,
And vindesine; epipodophyllotoxins, for example, etoposide, all of which are useful in treating testicular cancer and Kaposi's sarcoma
) And teniposide; antibiotic chemotherapeutic agents such as daunorubicin, doxorubicin, epirubicin, mitomycin (used to treat cancers of the stomach, cervix, colon, breast, bladder, and pancreas), daku Natural products such as, but not limited to, tynomycin, temozolomide, plicamycin, bleomycin (used in the treatment of skin, esophagus, and genitourinary tract cancers); and enzymatic chemotherapeutic agents such as L-asparaginase It may also be expected to produce an effect in combination with a chemotherapeutic agent based on.

【０１５７】 前述に加えて、本発明の化合物、塩、またはプロドラッグは、プラチナ配位複
合体（シスプラチンその他）；ヒドロキシ尿素等の置換された尿素；メチルヒド
ラジン誘導体、たとえばプロカルバジン；副腎皮質抑制剤、たとえばミトタン、
アミノグルテチミド；および、副腎皮質ホルモン（たとえばプレドニゾン）、プ
ロゲスチン（たとえばヒドロキシプロゲステロンカプロン酸塩）；エストロゲン
（たとえばジエチルスチルベストロール）；タモキシフェン等の抗エストロゲン
；アンドロゲン、たとえばプロピオン酸テストステロン；およびアロマターゼ阻
害剤（アナストロゾール（anastrozole）等）の、ホルモンおよびホルモン拮抗
薬、と組合せて用いられることにより有用な効果をもつことが期待されてもよい
。In addition to the foregoing, the compound, salt, or prodrug of the present invention may be a platinum coordination complex (cisplatin or the like); a substituted urea such as hydroxyurea; a methylhydrazine derivative, such as procarbazine; , For example, mitotane,
Aminoglutethimide; and corticosteroids (eg, prednisone), progestins (eg, hydroxyprogesterone caproate); estrogens (eg, diethylstilbestrol); antiestrogens such as tamoxifen; androgens, eg, testosterone propionate; and aromatase inhibition It may be expected that drugs (such as anastrozole) will have a useful effect when used in combination with hormones and hormone antagonists.

【０１５８】 最後に、本発明の化合物の組合せは、充実性腫瘍癌、あるいは急性骨髄性（非
リンパ球性）白血病等の、これに限定されない白血病の治療のために、ミトキサ
ントロンまたはパクリタキセルとの組合わせにおいて特に有効であることが期待
されてもよい。Finally, the combination of the compounds of the invention may be used in combination with mitoxantrone or paclitaxel for the treatment of leukemias such as, but not limited to, solid tumor cancers or acute myeloid (non-lymphocytic) leukemias. May be expected to be particularly effective in the combination of

【０１５９】発明の詳細な説明 １． 表の簡単な説明 表１は、本発明のいくつかの代表的な化合物の化学構造を示している。化合物
の番号は、実施例の部分における実施例番号に相当する。すなわち、表１の化合
物１の合成は、実施例１に述べられている。表１に示された化合物は単に代表的
なものであって、決して本発明の範囲を限定していると解釈されるためのもので
はない。[0159] DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION 1. BRIEF DESCRIPTION Table 1 Table shows the chemical structures of some representative compounds of the present invention. The compound numbers correspond to the example numbers in the Examples section. That is, the synthesis of Compound 1 in Table 1 is described in Example 1. The compounds shown in Table 1 are merely representative and are not to be construed as limiting the scope of the invention in any way.

【０１６０】 表２は、本発明のいくつかの代表的な化合物の生物学的検査の結果を示してい
る。結果はＩＣ50、すなわち検査化合物を何も加えられていない対照におけるＰ
ＴＫの活性に比較して、標的ＰＴＫの活性に５０％の変化を引起こす検査化合物
のマイクロモル（μＭ）濃度、で報告されている。具体的には、示された結果は
、標的ＰＴＫの活性の５０％減少を引起こすために必要な検査化合物の濃度を示
している。用いられた生物検定法は以下に詳細に述べられている。Table 2 shows the results of the biological tests of some representative compounds of the present invention. The result is the IC 50 , the P in the control to which no test compound was added.
It is reported at the micromolar (μM) concentration of the test compound which causes a 50% change in the activity of the target PTK compared to the activity of TK. Specifically, the results shown indicate the concentration of test compound required to cause a 50% decrease in the activity of the target PTK. The bioassay used was described in detail below.

【０１６１】２． 適用／標的疾患 本発明の化合物によってその触媒活性が調節されるＰＫは、タンパク質チロシ
ンキナーゼを含み、それには二つの型、レセプターチロシンキナーゼ（ＲＴＫ）
および細胞性チロシンキナーゼ（ＣＴＫ）と、セリン−トレオニンキナーゼ（Ｓ
ＴＫ）とがある。ＲＴＫを介するシグナル伝達は、特異的な成長因子（リガンド
）との細胞外の相互作用に始まり、レセプターの２量体化、内在タンパク質チロ
シンキナーゼ活性の一過性の刺激、およびリン酸化がそれに続く。それにより細
胞内シグナル伝達分子のための結合部位が造られ、適切な細胞の応答（たとえば
細胞***、細胞外の微小環境に対する代謝効果、その他）を容易にするある範囲
の細胞質シグナル分子との複合体形成に導かれる。Schlessinger & Ullrich, 19
92, Neuron 9 : 303 - 391参照。[0161] 2. Applications / Target Diseases PKs whose catalytic activity is modulated by the compounds of the present invention include protein tyrosine kinases, which include two types, receptor tyrosine kinases (RTKs).
And cellular tyrosine kinase (CTK) and serine-threonine kinase (S
TK). RTK-mediated signaling begins with extracellular interactions with specific growth factors (ligands), followed by receptor dimerization, transient stimulation of endogenous protein tyrosine kinase activity, and phosphorylation . This creates a binding site for intracellular signaling molecules and complexes with a range of cytoplasmic signaling molecules that facilitate appropriate cellular responses (eg, cell division, metabolic effects on the extracellular microenvironment, etc.) It leads to body formation. Schlessinger & Ullrich, 19
92, Neuron 9: 303-391.

【０１６２】 成長因子レセプター上のチロシンリン酸化部位は、シグナリング分子のＳＨ２
（Ｓｒｃホモロジー）ドメインのための高親和性結合部位として機能することが
示されている。Fantlら、1992, Cell 69: 413 - 423、Songyangら、1994, Mol.
Cell. Biol. 14 : 2777 - 2785）、 Songyangら、1993, Cell 72 :767 - 778）
、およびKoch ら、1991, Science 252 : 668 - 678。ＲＴＫと結合するいくつか
の細胞内基質タンパク質が同定されている。それらは二つの主要なグループに分
けられる：（１）触媒ドメインを有する基質、および（２）かかるドメインを欠
くが、アダプターとして役立ち、触媒活性のある分子と結合する。Songyangら、
1993, Cell 72 : 767 - 778。レセプターとその基質のＳＨ２ドメインとの間の
相互作用の特異性は、リン酸化されたチロシン残基を直接取囲んでいるアミノ酸
残基によって決められる。ＳＨ２ドメインと、特定のレセプターのホスホチロシ
ン残基を取囲んでいるアミノ酸配列との間の結合親和性の差異は、それらの基質
リン酸化のプロフィールに見られる差異と一致している。Songyangら、1993, Ce
ll 72 : 767 - 778。これらの観察は、各々のＲＴＫの機能が、その発現パター
ンならびにリガンド利用可能性によるだけでなく、特定のレセプターによって活
性化される下流のシグナル伝達経路によっても決定されることを示唆している。
したがって、リン酸化は特異的な成長因子レセプター、ならびに分化因子レセプ
ターによって活性化される、シグナリング経路の選択性を決定する重要な段階を
提供する。The tyrosine phosphorylation site on the growth factor receptor is a signaling molecule SH2
(Src homology) has been shown to function as a high affinity binding site for the domain. Fantl et al., 1992, Cell 69: 413-423, Songyang et al., 1994, Mol.
Cell. Biol. 14: 2777-2785), Songyang et al., 1993, Cell 72: 767-778).
And Koch et al., 1991, Science 252: 668-678. Several intracellular matrix proteins that bind to RTKs have been identified. They fall into two major groups: (1) substrates with catalytic domains, and (2) that lack such domains but serve as adapters and bind catalytically active molecules. Songyang et al.
1993, Cell 72: 767-778. The specificity of the interaction between the receptor and the SH2 domain of its substrate is determined by the amino acid residues immediately surrounding the phosphorylated tyrosine residue. Differences in binding affinity between the SH2 domain and the amino acid sequence surrounding the phosphotyrosine residue of the particular receptor are consistent with the differences seen in their substrate phosphorylation profiles. Songyang et al., 1993, Ce
ll 72: 767-778. These observations suggest that the function of each RTK is determined not only by its expression pattern as well as ligand availability, but also by downstream signaling pathways activated by specific receptors.
Thus, phosphorylation provides an important step in determining the selectivity of signaling pathways that are activated by specific growth factor receptors, as well as differentiation factor receptors.

【０１６３】 ＳＴＫは、本来細胞質ゾル性であり、しばしばＰＴＫ事象についてのダウン方
向の応答として、細胞内部の生化学に影響を及ぼす。ＳＴＫは、細胞増殖に導く
ＤＮＡ合成とそれに続く細胞***とを開始する、シグナリング過程に関係してい
る。STKs are cytosolic in nature and affect biochemistry inside cells, often as a down-bound response to PTK events. STKs are involved in signaling processes that initiate DNA synthesis leading to cell growth and subsequent cell division.

【０１６４】 したがって、ＰＫシグナル伝達は、数ある他の応答の中で特に、細胞増殖、分
化、成長、および代謝をもたらす。異常な細胞増殖は、癌腫、肉腫、グリア芽細
胞腫、および血管腫等の新生物、白血病、乾癬、動脈硬化症、関節炎、および糖
尿病性網膜炎、および制御されない血管新生（angiogenesis）および／または血
管形成（vasclogenesis）に関連する他の疾患を含む、広い範囲の障害および疾
患という結果をもたらしうる。Thus, PK signaling leads to cell proliferation, differentiation, growth, and metabolism, among other things. Abnormal cell proliferation can be caused by neoplasms such as carcinomas, sarcomas, glioblastomas, and hemangiomas, leukemias, psoriasis, arteriosclerosis, arthritis, and diabetic retinitis, and uncontrolled angiogenesis and / or It can result in a wide range of disorders and diseases, including other diseases associated with angiogenesis (vasclogenesis).

【０１６５】 本発明の化合物がＰＫを阻害する機構につての正確な理解は、本発明の実施の
ためには必要ではない。しかしながら、このことでいかなる特定の機構または定
理にも縛られるものではないが、当該化合物はＰＫの触媒領域のアミノ酸と相互
作用すると考えられている。ＰＫは典型的には２葉構造を有しており、ＡＴＰは
、ＰＫの中でアミノ酸が保存されている領域内の、２つの葉の間の裂け目に結合
するように見える。ＰＫの阻害剤は、前記のＡＴＰがＰＫに結合するのと同じ普
遍領域において、水素結合、ファン‐デル‐ワールス力、およびイオン相互作用
等の非共有結合によって結合すると信じられている。さらに具体的には、本発明
の化合物の２−インドリノン成分が、正常にはＡＴＰのアデニン環によって占め
られる普遍区域に結合すると考えられている。このように、ある特定の分子の特
定のＰＫに対する特異性は、２−インドリノンコアについての種々の置換基と、
特定のＰＫに特異的なアミノ酸ドメインとの間の、付加的な相互作用の結果とし
て生じてよい。したがって、異なるインドリノン置換基は、特定のＰＫに対する
優先的な結合に貢献してよい。異なるＡＴＰ（または他のヌクレオチド）結合部
位において活性のある化合物を選択する能力は、本発明の化合物を、かかる部位
を用いたタンパク質のターゲッティングにとって有用なものにする。したがって
本文において開示された化合物は、かかるタンパク質についてのインヴィトロで
のアッセイ用としての有用性をもつと同時に、かかるタンパク質との相互作用を
通じてインヴィヴォでの治療効果を示すものであってよい。An accurate understanding of the mechanism by which the compounds of the present invention inhibit PK is not required for the practice of the present invention. However, without being bound by any particular mechanism or theorem, it is believed that the compound interacts with an amino acid in the catalytic region of PK. PKs typically have a bilobal structure, and ATP appears to bind to a cleft between the two leaves in a region where amino acids are conserved in the PK. Inhibitors of PK are believed to bind by non-covalent bonds such as hydrogen bonding, van der Waals forces, and ionic interactions in the same universal region where ATP binds to PK. More specifically, it is believed that the 2-indolinone component of the compounds of the present invention binds to a universal zone normally occupied by the adenine ring of ATP. Thus, the specificity of a particular molecule for a particular PK depends on the various substituents on the 2-indolinone core,
Additional interactions between amino acid domains specific for a particular PK may result. Thus, different indolinone substituents may contribute to preferential binding to a particular PK. The ability to select compounds that are active at different ATP (or other nucleotide) binding sites makes the compounds of the invention useful for targeting proteins using such sites. Thus, the compounds disclosed herein may have utility as in vitro assays for such proteins, as well as exhibit in vivo therapeutic effects through interaction with such proteins.

【０１６６】 もう一つの特徴においては、その触媒活性が本発明の化合物との接触によって
調節されるプロテインキナーゼは、タンパク質チロシンキナーゼであり、さらに
詳しくはレセプタータンパク質チロシンキナーゼである。レセプタータンパク質
チロシンキナーゼの中でも、本発明の化合物またはその塩によりその触媒活性が
調節されるレセプタータンパク質チロシンキナーゼは、これに限定されないが、
ＥＧＦ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、ＩＲ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲＲ、ＰＤＧ
ＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＣＤＦＩＲ、Ｃ−Ｋｉｔ、Ｃ−ｆｍｓ、Ｆｌｋ−１Ｒ、
Ｆｌｋ４、ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１、Ｆｌｔ−１、ＦＧＦＲ−１Ｒ、ＦＧＦＲ−２Ｒ
、ＦＧＦＲ−３Ｒ、およびＦＧＦＲ−４Ｒである。In another aspect, the protein kinase whose catalytic activity is modulated by contact with a compound of the present invention is a protein tyrosine kinase, more particularly a receptor protein tyrosine kinase. Among the receptor protein tyrosine kinases, receptor protein tyrosine kinases whose catalytic activity is regulated by the compound of the present invention or a salt thereof include, but are not limited to,
EGF, HER2, HER3, HER4, IR, IGF-1R, IRR, PDG
FRα, PDGFRβ, CDFIR, C-Kit, C-fms, Flk-1R,
Flk4, KDR / Flk-1, Flt-1, FGFR-1R, FGFR-2R
, FGFR-3R, and FGFR-4R.

【０１６７】 本発明の化合物、またはその塩あるいはプロドラッグとの接触により、その触
媒活性が調節されるタンパク質チロシンキナーゼは、非レセプターまたは細胞性
タンパク質チロシンキナーゼ（ＣＴＫ）であってもよい。したがって、Ｓｒｃ、
Ｆｒｋ、Ｂｔｋ、Ｃｓｋ、Ａｂｌ、ＺＡＰ７０、Ｆｅｓ、Ｆｐｓ、Ｆａｋ、Ｊａ
ｋ、Ａｃｋ、Ｙｅｓ、Ｆｙｎ、Ｌｙｎ、Ｌｃｋ、Ｂｌｋ、Ｈｃｋ、Ｆｇｒ、 お
よびＹｒｋ等の、これに限定されないＣＴＫの触媒活性は、本発明の化合物また
は塩との接触により調節されることができる。A protein tyrosine kinase whose catalytic activity is modulated by contact with a compound of the present invention, or a salt or prodrug thereof, may be a non-receptor or cellular protein tyrosine kinase (CTK). Therefore, Src,
Frk, Btk, Csk, Abl, ZAP70, Fes, Fps, Fak, Ja
The catalytic activity of CTK, such as, but not limited to, k, Ack, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr, and Yrk, can be modulated by contact with a compound or salt of the present invention.

【０１６８】 本発明の化合物との接触によってその触媒活性が調節されることができるまた
別のＰＫ群は、ＣＤＫ２およびＲａｆ等の（これに限定されない）セリン−トレ
オニンプロテインキナーゼである。Another group of PKs whose catalytic activity can be modulated by contact with a compound of the invention are serine-threonine protein kinases such as, but not limited to, CDK2 and Raf.

【０１６９】 もう一つの特徴においては、本発明は治療上有効な量の本発明の化合物か、ま
たはその塩またはプロドラッグを生物に投与することにより、ＰＫ関連障害を治
療または予防するための方法に関する。In another aspect, the present invention provides a method for treating or preventing a PK-related disorder by administering to a living organism a therapeutically effective amount of a compound of the present invention, or a salt or prodrug thereof. About.

【０１７０】 本発明の化合物か、またはその塩またはプロドラッグを含んでいる薬剤組成物
を、ＰＫ関連障害の予防または治療を目的として生物に投与することもまた、本
発明の一つの特徴である。It is also a feature of the present invention that a pharmaceutical composition comprising a compound of the present invention, or a salt or prodrug thereof, is administered to an organism for the purpose of preventing or treating a PK-related disorder. .

【０１７１】 したがって本発明は、ＲＴＫ、ＣＴＫ、および／またはＳＴＫの酵素活性に影
響を及ぼし、それによりかかるタンパク質によって伝達されるシグナルに干渉す
ことにより、ＰＫのシグナル伝達を調節する化合物に向けられたものである。さ
らに詳細には、本発明は癌腫、カポジ肉腫を含む肉腫、赤芽細胞腫、グリア芽細
胞腫、髄膜腫、星状細胞腫、黒色腫、および筋芽細胞腫を含むがこれに限定され
ない多くの種類の充実性腫瘍の治療に向けての治療用アプローチとしての、ＲＴ
Ｋ、ＣＴＫ、および／またはＳＴＫを介するシグナル伝達経路を調節する化合物
に向けられたものである。白血病等の非充実性腫瘍癌の治療または予防もまた本
発明により期待される。適用には、脳の癌、膀胱癌、卵巣癌、胃癌、膵臓癌、結
腸癌、血液の癌、肺癌、および骨の癌が含まれてよいが、これに限定されない。The present invention is therefore directed to compounds that modulate PK signaling by affecting the enzymatic activity of RTKs, CTKs, and / or STKs, thereby interfering with the signals transmitted by such proteins. It is a thing. More specifically, the invention includes, but is not limited to, carcinomas, sarcomas including Kaposi's sarcoma, erythroblastomas, glioblastomas, meningiomas, astrocytomas, melanomas, and myoblastomas RT as a therapeutic approach towards the treatment of many types of solid tumors
It is directed to compounds that modulate signaling pathways via K, CTK, and / or STK. Treatment or prevention of non-solid tumor cancers such as leukemia is also expected by the present invention. Applications may include, but are not limited to, brain cancer, bladder cancer, ovarian cancer, stomach cancer, pancreatic cancer, colon cancer, blood cancer, lung cancer, and bone cancer.

【０１７２】 本文に述べた化合物がその予防、治療、および研究に有用であるかもしれない
不適切なＰＫ活性に関連した障害の型の、限定されないさらなる実例は、細胞増
殖性障害、線維性の障害、および代謝性障害である。Further non-limiting examples of the types of disorders associated with inappropriate PK activity in which the compounds described herein may be useful in their prevention, treatment, and research include cell proliferative disorders, fibrotic Disorders, and metabolic disorders.

【０１７３】 本発明により予防、治療、またはさらに研究されることができる細胞増殖性障
害は、癌、血管増殖性障害、およびメサンギウム細胞増殖性障害を含む。Cell proliferative disorders that can be prevented, treated, or further studied according to the present invention include cancer, vascular proliferative disorders, and mesangial cell proliferative disorders.

【０１７４】 血管増殖性障害は、異常な血管形成（血管の形成）および血管新生（血管の拡
散）を指す。血管形成および血管新生は胚発生、黄体形成、損傷治癒、および臓
器再生等の種々の正常な生理学的過程において重要な役割を果たすが、それらは
また腫瘍を生かしておくために必要な新しい毛細血管を形成する結果となる癌の
発生においても中枢的な役割を演じる。血管増殖障害の他の例は、新しい毛細血
管が関節に侵入して軟骨を破壊する関節炎、および糖尿病性網膜炎のように、網
膜内の新しい毛細血管が硝子体に侵入し、出血させ、さらに失明を引起す眼性疾
患を含む。Vascular proliferative disorders refer to abnormal angiogenesis (vascular formation) and angiogenesis (diffusion of blood vessels). Although angiogenesis and angiogenesis play important roles in various normal physiological processes such as embryogenesis, luteal formation, wound healing, and organ regeneration, they also provide new capillaries required to keep tumors alive It also plays a pivotal role in the development of cancer that results in the formation of Other examples of vascular proliferative disorders are arthritis, where new capillaries invade the joints and destroy cartilage, and, like diabetic retinitis, new capillaries in the retina invade the vitreous, cause bleeding, and Includes eye disorders that cause blindness.

【０１７５】 高い親和性をもってＶＥＧＦと結合する構造的に関連性のある二つのＲＴＫが
同定されている：ｆｍｓ様チロシン１（ｆｉｔ−１）レセプター（Shibuyaら、1
990, Oncogene, 5 : 519 - 524；De Vriesら、1992, Science, 255 : 989 - 991
）、およびＶＥＧＨ−Ｒ２として知られているＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターで
ある。血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）は、インヴィトロでの細胞成長促進活性を
もつ、内皮細胞に特異的なマイトジェンであることが報告されている。Ferrara
＆ Henzel, 1989, Biochen. Biophys. Res. Comm., 161 : 851 - 858；Vaisman
ら、1990, J. Biol. Chem., 265 : 19461 - 19566。米国出願第０８／１９３,８
２９号、第０８／０３８,５９６号、および第０７／９７５,７５０号に発表され
た情報は、ＶＥＧＦが内皮細胞の増殖の原因となるばかりでなく、正常および病
的な血管新生の主要な調節因子であることを強く示唆している。全般的には、Kl
agsburn ＆ Soker, 1993, Current Biology, 3 (10) 699 - 702； Houckら、199
2. J. Biol. Chem., 267 : 26031 - 26037参照のこと。Two structurally related RTKs that bind VEGF with high affinity have been identified: the fms-like tyrosine 1 (fit-1) receptor (Shibuya et al., 1).
990, Oncogene, 5: 519-524; De Vries et al., 1992, Science, 255: 989-991.
), And the KDR / FLK-1 receptor known as VEGH-R2. Vascular endothelial growth factor (VEGF) has been reported to be an endothelial cell-specific mitogen with cell growth promoting activity in vitro. Ferrara
& Henzel, 1989, Biochen. Biophys. Res. Comm., 161: 851-858; Vaisman
Et al., 1990, J. Biol. Chem., 265: 19461-19566. US Application No. 08 / 193,8
No. 29, 08 / 038,596, and 07 / 975,750 indicate that VEGF not only causes endothelial cell proliferation, but is also a key component of normal and pathological angiogenesis. It strongly suggests that it is a regulator. Generally, Kl
agsburn & Soker, 1993, Current Biology, 3 (10) 699-702; Houck et al., 199
2. See J. Biol. Chem., 267: 26031-26037.

【０１７６】 正常な血管形成および血管新生は、胚発生、損傷治癒、臓器再生等の種々の
生理学的過程、および***期の黄体における濾胞形成と妊娠後の胎盤の成長等の
女性の生殖過程において、重要な役割を演じている。Folkman ＆ Shing, 1992,
J. Biological Chem., 267 (16) : 10931 - 34。調節されない血管形成および／
または血管新生は、糖尿病等の疾患、ならびに血管形成に成長を依存している悪
性の充実性腫瘍と結付けられてきた。 Klagsburn ＆ Soker, 1993, Current Bio
logy, 3 (10) 699 - 702；Folkham, 1991, J. Natl. Cancer Inst.,82 : 4 - 6
；Weidnerら、1991, New Engl. J. Med., 324 : 1 - 5。Normal angiogenesis and angiogenesis occur during various physiological processes such as embryonic development, wound healing, and organ regeneration, and during female reproductive processes such as follicle formation in the luteum during ovulation and placental growth after pregnancy. Plays an important role. Folkman & Shing, 1992,
J. Biological Chem., 267 (16): 10931-34. Unregulated angiogenesis and / or
Or angiogenesis has been linked to diseases such as diabetes, as well as malignant solid tumors that depend on growth for angiogenesis. Klagsburn & Soker, 1993, Current Bio
logy, 3 (10) 699-702; Folkham, 1991, J. Natl. Cancer Inst., 82: 4-6.
Weidner et al., 1991, New Engl. J. Med., 324: 1-5.

【０１７７】 血管新生および血管形成の間の内皮細胞の増殖および移動におけるＶＥＧＦの
推測される役割は、 これらの過程におけるＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターにつ
いての重要な役割を示している。真性糖尿病（Folkman, 198, XIth Congress of
Thrombosisand Haemostasis（第１１回血栓症および鬱血会議）、（Verstraeta
ら、編）、583~596頁、ルーベン大学出版（Leuven University Press）、ルーベ
ン））、および関節炎等の疾患、ならびに悪性腫瘍の増殖は、調節されない血管
新生からの結果でありうる。たとえば、Folkman, 1971, N. Engl. J. Med., 285
: 1182 - 1186参照のこと。ＶＥＧＦが特異的に結合するレセプターは、血管形
成および／または血管新生、ならびにかかる過程によって引起される異常な細胞
増殖を含む厳しい疾患の、制御および調節のための重要かつ有力な治療上の標的
である。Plowmanら、1994, DN&P, 7 (6) : 334 - 339。さらに詳しくは、新生血
管形成におけるＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターの高度に特異的な役割は、それを
癌および、調節されない血管形成を含む他の疾患の治療のための治療用アプロー
チの選択ターゲットにする。The putative role of VEGF in endothelial cell proliferation and migration during angiogenesis and angiogenesis indicates an important role for the KDR / FLK-1 receptor in these processes. Diabetes mellitus (Folkman, 198, XIth Congress of
Thrombosis and Haemostasis (Eleventh Thrombosis and Congestion Conference), (Verstraeta
Eds., Pages 583-596, Leuven University Press, Leuven)), and diseases such as arthritis, and the growth of malignancies can be the result of unregulated angiogenesis. See, for example, Folkman, 1971, N. Engl. J. Med., 285.
: See 1182-1186. Receptors to which VEGF specifically binds are important and potent therapeutic targets for the control and regulation of severe diseases including angiogenesis and / or angiogenesis and abnormal cell proliferation caused by such processes. is there. Plowman et al., 1994, DN & P, 7 (6): 334-339. More particularly, the highly specific role of the KDR / FLK-1 receptor in neovascularization makes it a selective target for therapeutic approaches for the treatment of cancer and other diseases, including unregulated angiogenesis. .

【０１７８】 したがって、本発明の一つの特徴は、血管新生および／または血管形成を阻害
または促進するべく、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターを含むチロシンキナーゼシ
グナル伝達を制御および／または調節することのできる化合物、すなわちＶＥＧ
Ｆ等のリガンドにより活性化された場合、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１により伝達される
シグナルを阻害するか、妨げるか、または干渉する化合物に関する。本発明の化
合物は、チロシンキナーゼシグナル伝達経路に沿ったレセプターまたは他の成分
に作用すると信じられているが、調節されない血管新生の結果である腫瘍細胞に
直接作用してもよい。Thus, one feature of the present invention is a compound capable of controlling and / or modulating tyrosine kinase signaling, including the KDR / FLK-1 receptor, to inhibit or promote angiogenesis and / or angiogenesis. Ie, VEG
The present invention relates to compounds that inhibit, prevent or interfere with signals transmitted by KDR / FLK-1 when activated by a ligand such as F. The compounds of the present invention are believed to act on receptors or other components along the tyrosine kinase signaling pathway, but may act directly on tumor cells that are the result of unregulated angiogenesis.

【０１７９】 一般にいう「ｆｌｋ−Ｉ」レセプターの、ヒトおよびマウスの同等物の命名は
異なるが、それらは多くの点において交換可能である。マウスのレセプターＦｌ
ｋ−Ｉと、ヒトにおけるその同等物であるＫＤＲは、細胞内ドメインのうちの９
３．４％の配列相同性を共有している。同様に、マウスＦｌｋ−Ｉは、マウスＶ
ＥＧＦと同じ親和性をもってヒトＶＥＧＦと結合しており、したがっていずれの
種に由来するリガンドによっても活性化される。Millauerら、1993, Cell, 72 :
835 - 846；Quinnら、1993, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90 : 7533 - 7537
。Ｆｌｋ−Ｉはまた、２９３細胞（ヒト胚性腎臓の線維芽細胞）において同時発
現された場合、ヒトＲＴＫの基質（たとえばＰＬＣ−γまたはｐ８５）と結合し
、それに続いて、チロシンをリン酸化する。Although the nomenclature of the human and mouse equivalents of the commonly referred to "flk-I" receptors are different, they are interchangeable in many respects. Mouse receptor Fl
kI and its equivalent in humans, KDR, represent 9 of the intracellular domains.
They share 3.4% sequence homology. Similarly, mouse Flk-I is
It binds human VEGF with the same affinity as EGF and is therefore activated by ligands from either species. Millauer et al., 1993, Cell, 72:
835-846; Quinn et al., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 7533-7537.
. Flk-I also binds to a substrate for human RTKs (eg, PLC-γ or p85) and subsequently phosphorylates tyrosine when co-expressed in 293 cells (human embryonic kidney fibroblasts). .

【０１８０】 したがって、Ｆｌｋ−Ｉレセプターに依存したモデルは、ＫＤＲレセプターの
理解に直接適用することができる。たとえば、マウスのシグナル伝達経路を調節
する化合物を同定する方法においてマウスＦｌｋ−Ｉレセプターを使用すること
は、ヒトのシグナル伝達経路を調節するために用いることができる化合物、すな
わちＫＤＲレセプターに関連した活性を調節する化合物の同定に直接適用するこ
とができる。よってインヴィトロにおいてＫＤＲ／ＦＬＫ−１の阻害剤として同
定された化学的配合物は、適当なインヴィヴォのモデルにおいて確認されること
が可能である。インヴィヴォでのマウスおよびラット双方の動物モデルは、ＫＤ
Ｒ／ＦＬＫ−１に誘導されるシグナル伝達経路に作用する薬剤の、臨床上の潜在
能力についての調査にとって優れた価値があることが証明されている。Thus, models that rely on the Flk-I receptor can be directly applied to the understanding of the KDR receptor. For example, the use of the murine Flk-I receptor in a method of identifying a compound that modulates a mouse signaling pathway involves the use of a compound that can be used to modulate a human signaling pathway, ie, an activity associated with the KDR receptor. Can be directly applied to the identification of compounds that modulate. Thus, chemical formulations identified in vitro as inhibitors of KDR / FLK-1 can be identified in a suitable in vivo model. The animal model for both mice and rats at in vivo is KD
Drugs that act on the R / FLK-1 induced signaling pathway have proven to be of great value for investigations into the clinical potential.

【０１８１】 したがって、一つの特徴において、本発明はＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターの
酵素活性に影響を及ぼすことにより、またＫＤＲ／ＦＬＫ−１により誘導される
シグナルに干渉することにより、血管形成および／または血管新生を制御、調節
および／または阻害する化合物に向けられたものである。もう一つの特徴におい
ては、本発明は、これに限定されないが、グリア芽細胞腫、黒色腫、カポジ肉腫
、および卵巣、肺、***、前立腺、膵臓、結腸、および扁平上皮の癌を含む多種
類の充実性腫瘍を治療するための治療用アプローチとして、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１
を介するシグナル伝達を制御、調節、および／または阻害する化合物に向けられ
たものである。さらに、データは、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１を介するシグナル伝達経
路を阻害する化合物の投与が、血管腫、再狭窄、および糖尿病性網膜症の治療に
も用いることができることを示唆している。Thus, in one aspect, the present invention provides angiogenesis and / or angiogenesis by affecting the enzyme activity of the KDR / FLK-1 receptor and by interfering with the signals induced by KDR / FLK-1. Or to compounds that control, regulate and / or inhibit angiogenesis. In another aspect, the invention relates to a variety of cancers including, but not limited to, glioblastoma, melanoma, Kaposi's sarcoma, and ovarian, lung, breast, prostate, pancreatic, colon, and squamous cell carcinomas. KDR / FLK-1 as a therapeutic approach for treating solid tumors
And compounds that control, regulate, and / or inhibit signal transduction through Furthermore, the data suggest that administration of compounds that inhibit the signaling pathway through KDR / FLK-1 can also be used to treat hemangiomas, restenosis, and diabetic retinopathy.

【０１８２】 本発明のさらなる特徴は、ｆｌｔ−１レセプターを含む経路を含め、他のレセ
プターを介する経路による血管形成および血管新生の阻害に関する。A further feature of the invention relates to inhibiting angiogenesis and angiogenesis by other receptor-mediated pathways, including those involving the flt-1 receptor.

【０１８３】 レセプターチロシンキナーゼを介するシグナル伝達は、特異的な成長因子（リ
ガンド）との細胞外相互作用によって開始され、レセプターの２量体化、内在タ
ンパク質チロシンキナーゼ活性の一過性の刺激、および自己リン酸化がそれに続
く。それにより細胞内シグナル伝達分子のための結合部位が造られ、そのことが
適切な細胞の応答、たとえば細胞***、細胞外の微小環境に対する代謝効果、そ
の他を容易にするある範囲の細胞質シグナリング分子との複合体形成に導く。Sc
hlessinger & Ullrich, 1992, Neuron 9 :1 - 20参照。Signaling through receptor tyrosine kinases is initiated by extracellular interactions with specific growth factors (ligands), dimerizing the receptor, transiently stimulating endogenous protein tyrosine kinase activity, and Autophosphorylation follows. It creates binding sites for intracellular signaling molecules, which facilitate a proper cellular response, such as cell division, metabolic effects on the extracellular microenvironment, and a range of cytoplasmic signaling molecules. Leads to complex formation. Sc
See hlessinger & Ullrich, 1992, Neuron 9: 1-20.

【０１８４】 ＫＤＲ／ＦＬＫ−１の細胞内領域と、ＰＤＧＦ−βレセプターのそれ（５０．
３％の相同性）、および／または関連するｆｌｔ−１レセプターとの緊密な相同
性は、重複したシグナル伝達経路の誘導を示している。たとえばＰＤＧＦ−βレ
セプターについては、ｓｒｃファミリーのメンバー（Twamleyら、1993, Proc. N
atl. Acad. Sci. USA, 90 : 7696 - 7700）、ホスファチジルイノシトール−３'
キナーゼ（Huら、1992, Mol. Cell. Biol. 12 : 981 - 990）、ホスホリパーゼ
ｃγ（Kashishian＆ Cooper, 1993, Mol. Cell. Biol. , 4 : 49 - 51）、ｒａ
ｓ−ＧＴＰアーゼ活性化タンパク質（Kashishianら、1992, EMBO J., 11 : 1373
- 1382）、ＰＴＰ−ＩＤ／ｓｙｐ（Kazulauskasら、1993, Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 10 90 : 6939 - 6943）、Ｇｒｂ２（Arvidssonら、1994, Mol. Cell.
Biol. ,14 : 6715 - 6726)、およびアダプター分子SｈｃおよびＮｕｋ（Nishim
uraら、1993, Mol. Cell. Biol. , 13 : 6889 - 6896）が、異なる自己リン酸化
部位を含んでいる領域に結合することが示されている。全般的には、Claesson-W
elsh, 1994, Prog. Growth Factor Res., 5 : 37 - 54参照のこと。したがって
、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１により活性化されるシグナル伝達経路が、ｒａｓ経路（Ro
zakisら、1992, Nature, 360 : 689 - 692）、ＰＩ−３'キナーゼ、ｓｒｃ介在
性、およびｐｌｃγ介在性の経路を含むと考えられる。これらの経路の各々は、
内皮細胞におけるＫＤＲ／ＦＬＫ−１の血管新生および／または血管形成効果に
おいて、重大な役割を演じることができる。したがって本発明のまたさらなる特
徴は、本文に述べた有機化合物を、血管新生および血管形成を調節するべく用い
ることに関するが、それはかかる過程がこれらの経路によって調節されるためで
ある。The intracellular region of KDR / FLK-1 and that of the PDGF-β receptor (50.
(3% homology), and / or close homology to the related flt-1 receptor indicates induction of a redundant signaling pathway. For example, for the PDGF-β receptor, members of the src family (Twamley et al., 1993, Proc.
atl. Acad. Sci. USA, 90: 7696-7700), phosphatidylinositol-3 '.
Kinase (Hu et al., 1992, Mol. Cell. Biol. 12: 981-990), phospholipase cγ (Kashishian & Cooper, 1993, Mol. Cell. Biol., 4: 49-51), ra
s-GTPase activating protein (Kashishian et al., 1992, EMBO J., 11: 1373
-1382), PTP-ID / syp (Kazulauskas et al., 1993, Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 1090: 6939-6943), Grb2 (Arvidsson et al., 1994, Mol. Cell.
Biol., 14: 6715-6726), and adapter molecules Shc and Nuk (Nishim
ura, et al., 1993, Mol. Cell. Biol., 13: 6889-6896) have been shown to bind to regions containing distinct autophosphorylation sites. Overall, Claesson-W
See elsh, 1994, Prog. Growth Factor Res., 5: 37-54. Therefore, the signaling pathway activated by KDR / FLK-1 is the ras pathway (Ro
zakis et al., 1992, Nature, 360: 689-692), and are thought to involve PI-3 'kinase, src-mediated, and plcy-mediated pathways. Each of these pathways
It can play a critical role in the angiogenic and / or angiogenic effects of KDR / FLK-1 on endothelial cells. Thus, a still further feature of the invention relates to the use of the organic compounds described herein for regulating angiogenesis and angiogenesis, since such processes are regulated by these pathways.

【０１８５】 逆に、再狭窄などの、血管の収縮、狭窄、または閉鎖に関連した障害にも関与
することが示唆されており、本発明の方法により治療または予防することができ
る。Conversely, it has also been suggested to be involved in disorders related to vasoconstriction, stenosis, or closure, such as restenosis, and can be treated or prevented by the methods of the present invention.

【０１８６】 線維性障害は細胞外マトリックスの異常な形成を表す。線維性障害の例は、肝
硬変およびメサンギウム細胞増殖障害を含む。肝硬変は、肝性瘢痕の形成を生じ
る結果となる細胞外マトリックス成分の増加によって特徴づけられる。肝性瘢痕
を生じる結果となる亢進された細胞外マトリックスは、肝炎等のウイルス感染に
よっても引起こされることが可能である。脂肪細胞は、肝硬変において重要な役
割を果たすらしい。他の関係する線維性障害はアテローム性動脈硬化症を含む。[0186] Fibrotic disorders represent abnormal formation of extracellular matrix. Examples of fibrotic disorders include cirrhosis and mesangial cell proliferation disorders. Cirrhosis is characterized by an increase in extracellular matrix components that results in the formation of hepatic scars. The enhanced extracellular matrix that results in hepatic scarring can also be caused by viral infections such as hepatitis. Adipocytes appear to play an important role in cirrhosis. Other related fibrotic disorders include atherosclerosis.

【０１８７】 メサンギウム細胞の増殖性障害は、メサンギウム細胞の異常増殖によってもた
らされる障害を指す。メサンギウム増殖障害は、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、お
よび悪性腎硬化症等のヒトの腎疾患、ならびに血栓性細小血管症症候群、移植拒
絶反応、および糸球体症といった障害を含む。ＲＴＫ ＰＤＧＦＲはメサンギウ
ム細胞の増殖の維持に関与することが示唆されている。Floegeら、1993, Kidney
International 43 : 47s - 54s。A mesangial cell proliferative disorder refers to a disorder caused by abnormal proliferation of mesangial cells. Mesangial proliferative disorders include human renal diseases such as glomerulonephritis, diabetic nephropathy, and malignant renal sclerosis, and disorders such as thrombotic microangiopathy syndrome, transplant rejection, and glomerulopathy. RTK PDGFR has been suggested to be involved in maintaining mesangial cell proliferation. Floege et al., 1993, Kidney
International 43: 47s-54s.

【０１８８】 多くの癌は細胞増殖性の障害であり、先に記したように、ＰＫは細胞増殖性障
害に関係づけられてきた。したがって、たとえばＲＴＫファミリーの仲間等のＰ
Ｋが癌の発生と関連づけられてきたことも意外なことではない。ＥＧＦＲ（Tuzi
ら、1991, Br. J. Cancer 63 : 227 - 233、Torpら、1992, APMIS 100 : 713 -
719）、ＨＥＲ２／ｎｅｕ（Slamonら、1989, Science 244 : 707 - 712）、およ
びＰＤＧＦ−Ｒ（Kumabeら、1992, Oncogene, 7 : 627 -633）等のこれらのレセ
プターのいくつかは多くの腫瘍において過剰発現され、および／またはオートク
リンループにより持続的に活性化される。事実、ほとんどの一般的かつ重い癌に
おいては、これらのレセプターの過剰発現（Akbasak & Suner-Akbasakら、1992,
J. Neurol. Sci., 111 : 119 - 133, Dicksonら、1992, Cancer Treatment Res
. 61 : 249 - 273, Korcら、1992, J. Clin. Invest. 90 1352 - 1360）、およ
びオートクリーンループ（Lee & Donoghue, 1992, J. Cell. Biol., 118 : 1057
- 1070, Korcら、前出、Akbasak & Suner-Akbasakら、前出）が証明されている
。たとえば、ＥＧＦＲは扁平上皮癌、星状細胞腫、グリア芽細胞腫、頭頚部癌、
肺癌、および膀胱癌と関連づけられている。ＨＥＲ２は***、卵巣、胃、肺、膵
臓、および膀胱の癌と結びつけられている。ＰＤＧＦＲはグリア芽細胞腫および
黒色腫、ならびに肺、卵巣、および前立腺の癌と関連づけられている。ＲＴＫ
ｃ−ｍｅｔもまた悪性の腫瘍形成と関連づけられている。たとえば、ｃ−ｍｅｔ
は他の癌の中でも、結腸直腸、甲状腺、膵臓、胃、および肝細胞の癌腫およびリ
ンパ腫と関連づけられている。加えてｃ−ｍｅｔは白血病に結びつけられている
。ｃ−ｍｅｔ遺伝子の過剰発現はまたホジキン病およびバーキット病の患者に検
出されている。Many cancers are cell proliferative disorders, and, as noted above, PK has been implicated in cell proliferative disorders. Therefore, for example, P
It is not surprising that K has been linked to the development of cancer. EGFR (Tuzi
Et al., 1991, Br. J. Cancer 63: 227-233, Torp et al., 1992, APMIS 100: 713-
719), HER2 / neu (Slamon et al., 1989, Science 244: 707-712), and PDGF-R (Kumabe et al., 1992, Oncogene, 7: 627-633). And / or is persistently activated by the autocrine loop. In fact, in most common and severe cancers, overexpression of these receptors (Akbasak & Suner-Akbasak et al., 1992,
J. Neurol. Sci., 111: 119-133, Dickson et al., 1992, Cancer Treatment Res.
61: 249-273, Korc et al., 1992, J. Clin. Invest. 90 1352-1360), and an autoclean loop (Lee & Donoghue, 1992, J. Cell. Biol., 118: 1057).
-1070, Korc et al., Supra, Akbasak & Suner-Akbasak et al., Supra). For example, EGFR is used for squamous cell carcinoma, astrocytoma, glioblastoma, head and neck cancer,
It has been associated with lung cancer and bladder cancer. HER2 has been implicated in breast, ovarian, stomach, lung, pancreas, and bladder cancers. PDGFR has been associated with glioblastoma and melanoma, and lung, ovarian, and prostate cancer. RTK
c-met has also been associated with malignant tumorigenesis. For example, c-met
Has been associated with colorectal, thyroid, pancreatic, gastric, and hepatocellular carcinomas and lymphomas, among other cancers. In addition, c-met has been linked to leukemia. Overexpression of the c-met gene has also been detected in patients with Hodgkin's disease and Burkitt's disease.

【０１８９】 ＩＧＦ−ＩＲは、栄養上の支持およびI I型糖尿病に関係づけられていること
に加えて、いくつかの型の癌に関係づけられている。たとえば、ＩＧＦ−Ｉはい
くつかの型の腫瘍、たとえばヒト乳癌の癌細胞（Arteagaら、1989, J. Clin. In
vest. 84 : 1418 - 1423）、および肺腫瘍小細胞（Macauleyら、1990, Cancer R
es., 50 : 2511 - 2517）に対するオートクリン成長刺激因子として関係づけら
れている。さらに、ＩＧＦ−Ｉは神経系の正常な成長および分化に完全に深くか
かわっていると共に、ヒトの神経膠腫のオートクリン刺激因子でもあるように見
える。Sandberg-Nordqvistら、1993, Cancer Res. 53 : 2475 - 2478。細胞増殖
におけるＩＧＦ−ＩＲとそのリガンドの重要性は、培養されている多くの細胞型
（線維芽細胞、上皮細胞、平滑筋細胞、Ｔリンパ球、骨髄性細胞、軟骨細胞、お
よび骨芽細胞（骨髄の幹細胞）がＩＧＦ−Ｉによって成長するべく刺激されると
いう事実によってさらに支持される。Goldring & Goldring, 1991, Eukaryotic
Gene Expression, 1 : 301 - 326。最近の一連の発表においてBasergaは、ＩＧ
Ｆ−ＩＲが形質転換の機構において中心的な役割を果たしていること、またそれ
自体がヒトの広範囲の悪性腫瘍に対する治療的介入のための好ましい標的となり
得ることを示唆している。Baseerga、1995, Cancer Res., 55 : 249 - 252, Ba
serga, 1994, Cell 79 : 927 - 939, Coppolaら、1994, Mol. Cell. Biol., 14
: 4588 - 4595。IGF-IR has been implicated in several types of cancer, in addition to being implicated in nutritional support and type II diabetes. For example, IGF-I is a cancer cell of several types of tumors, such as human breast cancer (Arteaga et al., 1989, J. Clin. In.
vest. 84: 1418-1423), and small lung tumor cells (Macauley et al., 1990, Cancer R).
es., 50: 2511-2517) has been implicated as an autocrine growth stimulator. In addition, IGF-I is completely involved in the normal growth and differentiation of the nervous system and appears to be also an autocrine stimulator of human gliomas. Sandberg-Nordqvist et al., 1993, Cancer Res. 53: 2475-2478. The importance of IGF-IR and its ligands in cell proliferation is due to the number of cell types in culture (fibroblasts, epithelial cells, smooth muscle cells, T lymphocytes, myeloid cells, chondrocytes, and osteoblasts ( Further supported by the fact that bone marrow stem cells are stimulated to grow by IGF-I. Goldring & Goldring, 1991, Eukaryotic
Gene Expression, 1: 301-326. In a series of recent announcements, Baserga announced that
It has been suggested that F-IR plays a central role in the mechanism of transformation and may itself be a preferred target for therapeutic intervention against a wide range of human malignancies. Baseerga, 1995, Cancer Res., 55: 249-252, Ba
serga, 1994, Cell 79: 927-939, Coppola et al., 1994, Mol. Cell. Biol., 14
: 4588-4595.

【０１９０】 ＳＴＫは、特に乳癌を含む多くの型の癌に関係づけられている（Caneら、Int.
J. Cancer, 54 : 571 -77（1993））。STKs have been implicated in many types of cancer, including particularly breast cancer (Cane et al., Int.
J. Cancer, 54: 571-77 (1993)).

【０１９１】 異常なＰＫ活性と疾患との間の結びつきは癌に限らない。たとえば、ＲＴＫは
乾癬、真性糖尿病、子宮内膜症、血管新生、アテローム斑の発生、アルツハイマ
ー病、フォンヒッペル−リンダウ病、表皮の過剰増殖、神経変性疾患、年齢に関
連した黄斑部変性、および血管腫といった疾患と関連づけられている。たとえば
、ＥＧＦＲは角膜および皮膚の損傷治癒と関連づけられている。インスリン−Ｒ
およびＩＧＦ−Ｒの欠陥はI I型の真性糖尿病において示される。特異的なＲＴ
Ｋとそれらの治療上の指標との間のさらに完全な相関関係は、Plowmanら、1994,
DN&P 7 : 334 - 339において明らかにされている。The link between abnormal PK activity and disease is not limited to cancer. For example, RTKs are associated with psoriasis, diabetes mellitus, endometriosis, angiogenesis, atherogenic plaque development, Alzheimer's disease, von Hippel-Lindau disease, epidermal hyperproliferation, neurodegenerative diseases, age-related macular degeneration, and vascular It has been associated with diseases such as tumors. For example, EGFR has been linked to corneal and skin wound healing. Insulin-R
And deficiencies in IGF-R are indicated in type II diabetes mellitus. Specific RT
A more complete correlation between K and their therapeutic index is described in Plowman et al., 1994,
Revealed in DN & P 7: 334-339.

【０１９２】 先に記したように、ＲＴＫのみならず、ｓｒｃ、ａｂｌ、ｆｐｓ、ｙｅｓ、ｆ
ｙｎ、ｌｙｎ、ｌｃｋ、ｂｌｋ、ｈｃｋ、ｆｇｒ、およびｙｒｋを含むがこれに
限定されないＣＴＫ（Bolenらによる総説、1992, FASEB J., 6 : 3403 - 3409）
も、増殖および代謝のシグナル伝達経路に深くかかわっており、したがって本発
明が向けられている多くのＰＴＫを介する障害に深くかかわっていることが予想
でき、かつ示されてきた。たとえば突然変異したｓｒｃ（ｖ−ｓｒｃ）は、腫瘍
性タンパク質（ｐｐ６０v-src）であることがニワトリにおいて示されている。
さらに、その細胞性同等物であるプロト癌遺伝子ｐｐ６０c-srcは、多くのレセ
プターの発癌シグナルを伝達する。腫瘍におけるＥＧＦＲまたはＨＥＲ２／ｎｅ
ｕの過剰発現は悪性細胞に特徴的であるが正常細胞にはない、ｐｐ６０c-srcの
構造的活性化に導く。一方、ｃ−ｓｒｃの発現を欠如しているマウスは大理石骨
病の表現形を示し、破骨細胞機能におけるｃ−ｓｒｃの重要な関与と、関連する
障害における可能な関与とを暗示している。As described above, not only RTK but also src, abl, fps, yes, f
CTKs, including but not limited to yn, lyn, lck, blk, hck, fgr, and yrk (reviewed by Bolen et al., 1992, FASEB J., 6: 3403-3409).
Are also implicated in growth and metabolic signaling pathways, and thus can be expected and shown to be implicated in many of the PTK-mediated disorders to which the present invention is directed. For example, mutated src (v-src) has been shown in chickens to be an oncoprotein (pp60 v-src ).
In addition, its cellular equivalent, the proto-oncogene pp60 c-src , transmits oncogenic signals of many receptors. EGFR or HER2 / ne in tumor
Overexpression of u leads to a constitutive activation of pp60 c-src that is characteristic of malignant cells but not normal cells. On the other hand, mice lacking c-src expression exhibit a phenotype of osteopetrosis, implying a significant involvement of c-src in osteoclast function and a possible involvement in related disorders. .

【０１９３】 同様に、Ｚａｐ７０は自己免疫異常に関係してよいＴ細胞シグナリングに関係
づけられてきた。Similarly, Zap70 has been implicated in T cell signaling which may be involved in autoimmune disorders.

【０１９４】 ＳＴＫは、炎症、自己免疫疾患、免疫応答、および、再狭窄、線維症、 乾癬
、変形性関節炎、およびリウマチ様関節炎といった過剰増殖障害と結びつけられ
てきた。STKs have been implicated in inflammation, autoimmune diseases, immune responses, and hyperproliferative disorders such as restenosis, fibrosis, psoriasis, osteoarthritis, and rheumatoid arthritis.

【０１９５】 ＰＫはまた着床にも関連づけられてきた。したがって本発明の化合物は、かか
る着床を防ぐ有効な方法を提供し、それにより受胎調節用薬剤として有用であり
うる。[0195] PK has also been associated with implantation. Thus, the compounds of the present invention provide an effective method of preventing such implantation, and may be useful as fertility regulating agents.

【０１９６】 最後に、ＲＴＫおよびＣＴＫの双方は過免疫障害に深くかかわっていると一般
に考えられている。Finally, it is generally believed that both RTKs and CTKs are deeply involved in hyperimmune disorders.

【０１９７】 上で議論した一つまたはそれより多いプロテインキナーゼの触媒活性を調節す
る化学的配合物を同定するための方法は、本発明のもう一つの特徴である。当該
方法は、所望のプロテインキナーゼを発現している細胞を本発明の化合物（ある
いはその塩またはプロドラッグ）と接触させること、および当該細胞を、当該化
合物がそれらに対して及ぼす効果について監視することを含む。この効果は、肉
眼で、あるいは機械装備の使用を介して観察することができる、細胞表現型にお
けるどのような変化または無変化でもよい。監視された細胞表現型における変化
または無変化は、たとえば、これに限定されないが、細胞におけるプロテインキ
ナーゼの触媒活性の変化または無変化か、あるいはプロテインキナーゼと天然の
結合相手との相互作用の変化または無変化でもよい。A method for identifying a chemical formulation that modulates the catalytic activity of one or more protein kinases discussed above is another feature of the invention. The method comprises contacting cells expressing the desired protein kinase with a compound of the invention (or a salt or prodrug thereof) and monitoring the cells for the effect of the compound on them. including. This effect can be any change or no change in the cell phenotype that can be observed with the naked eye or through the use of mechanical equipment. The change or no change in the monitored cell phenotype can be, for example, but not limited to, a change or no change in the catalytic activity of a protein kinase in a cell, or a change in the interaction of a protein kinase with a natural binding partner. It may be unchanged.

【０１９８】 種々のＰＫに対する本発明のいくつかの代表的な化合物の効果の実例は、表２
に示されている。表示された化合物ならびにデータは、いかなる方法によっても
本発明の範囲を限定するものと解釈されない。Examples of the effects of some representative compounds of the invention on various PKs are shown in Table 2.
Is shown in The compounds and data displayed are not to be construed as limiting the scope of the invention in any way.

【０１９９】３． 薬剤学的組成物および用途 本発明の化合物、そのプロドラッグ、または当該化合物とそのプロドラッグの
いずれかの生理学的に許容される塩は、それ自体をヒトの患者に投与するか、ま
たは前述の材料が適当な担体または賦形剤と混合された薬剤学的組成物として投
与することが可能である。薬物の製剤および投与の技術は、「Remingtons Pharm
cological Sciences」、マック出版社（Mack Publishing Co）、ペンシルベニア
州、イーストン、の最新版に見られるだろう。[0199] 3. Pharmaceutical Compositions and Uses The compounds of the present invention, prodrugs thereof, or physiologically acceptable salts of any of the compounds and prodrugs thereof, may be administered to a human patient per se or as described above. The materials can be administered as a pharmaceutical composition, mixed with a suitable carrier or excipient. Drug formulation and administration techniques are described in Remingtons Pharm
cological Sciences, "Mack Publishing Co, Easton, PA.

【０２００】投与経路 本文において用いられる場合、「投与する」または「投与」は、本発明の化合
物、塩、またはプロドラッグを、あるいは本発明の化合物、塩、またはプロドラ
ッグを含んでいる薬剤学的組成物を、ＰＫ関連障害の予防または治療を目的とし
て生物に送達することに関する。 Routes of Administration As used herein, "administering" or "administration" refers to a compound, salt, or prodrug of the present invention, or a pharmaceutical containing a compound, salt, or prodrug of the present invention. The therapeutic composition to an organism for the prevention or treatment of a PK-related disorder.

【０２０１】 適当な投与経路は、これに限定されないが、経口、直腸、経粘膜、または腸管
投与か、あるいは筋肉内、皮下、骨髄内、髄内、直接心室内、静脈内、硝子体内
、腹腔内、鼻腔内、または眼内の注射を含む。好ましい投与経路は、経口または
非経口である。Suitable routes of administration include, but are not limited to, oral, rectal, transmucosal, or intestinal, or intramuscular, subcutaneous, intramedullary, intramedullary, direct intraventricular, intravenous, intravitreal, intraperitoneal Includes intra, intranasal, or intraocular injection. Preferred routes of administration are oral or parenteral.

【０２０２】 別法として、全身性の方法ではなく局所に、たとえば当該化合物を充実性腫瘍
内へ直接に、しばしばデポ剤または持効性の製剤において、注射することにより
投与してもよい。Alternatively, the compounds may be administered locally rather than systemically, for example, by injection of the compound directly into a solid tumor, often in a depot or sustained release formulation.

【０２０３】 さらに、当該薬物はターゲティングされたドラッグデリバリーシステムにおい
て、たとえば腫瘍に特異的な抗体によりコートされたリポソームにおいて投与さ
れてもよい。リポソームは当該腫瘍にターゲティングされ、取り込まれることと
なる。Additionally, the drug may be administered in a targeted drug delivery system, for example, in liposomes coated with a tumor-specific antibody. Liposomes will be targeted and taken up by the tumor.

【０２０４】組成物／製剤 本発明の薬剤学的組成物は、この技術に周知の工程、たとえば通常の混合、溶
解、顆粒化、糖衣作成、研和、乳化、カプセル封入、捕捉、または凍結乾燥の工
程により製造されてよい。 Compositions / Formulations Pharmaceutical compositions of the invention may be prepared by any of the procedures well known in the art, for example, conventional mixing, dissolving, granulating, dragee-making, levigating, emulsifying, encapsulating, entrapping, or lyophilizing. May be produced.

【０２０５】 本発明にしたがって使用するための薬剤学的組成物は、活性成分の薬剤学的に
使用可能な製品への加工を容易にする賦形剤および補助剤を含む、一つまたはそ
れより多い生理学的に許容される担体を用いる通常の方法で製剤されてよい。適
切な製剤は、選ばれた投与経路に依存する。Pharmaceutical compositions for use in accordance with the present invention may comprise one or more excipients and excipients that facilitate the processing of the active ingredient into a pharmaceutically usable product. It may be formulated in a conventional manner using many physiologically acceptable carriers. Proper formulation is dependent upon the route of administration chosen.

【０２０６】 注射用には、本発明の化合物は水溶性溶液、好ましくはハンクス溶液、リンガ
ー溶液、または生理的塩類緩衝液等の生理学的に適した緩衝液において製剤され
てよい。経粘膜投与用には、浸透されるべき障壁に適した浸透剤が製剤に用いら
れる。かかる浸透剤はこの技術において一般に周知である。For injection, the compounds of the invention may be formulated in aqueous solutions, preferably in physiologically suitable buffers such as Hanks's solution, Ringer's solution, or physiological saline buffer. For transmucosal administration, penetrants appropriate to the barrier to be permeated are used in the formulation. Such penetrants are generally known in the art.

【０２０７】 経口投与用には、活性成分を、この技術において周知の薬剤学的に許容される
担体と組合せて製剤することができる。かかる担体は、本発明の化合物を、患者
による経口摂取のための錠剤、丸剤、トローチ、糖衣剤、カプセル、液体、ゲル
、シロップ、スラリー、懸濁液、その他として製剤されるようにする。経口使用
のための薬剤学的製品は、固形の賦形剤を用い、結果として得られた混合物を任
意に破砕し、所望であればさらに他の適当な補助剤を添加した後に、顆粒混合物
を加工して錠剤または糖衣剤のコアを得る。有用な賦形剤は、特に、ラクトース
、ショ糖、マンニトール、またはソルビトールを含む糖類、たとえばトウモロコ
シデンプン、小麦デンプン、米デンプン、およびジャガイモデンプン等のセルロ
ース製品、およびゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシ
プロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／
またはポリビニルピロリドン（ｐｖｐ）等の他の材料、といった増量剤である。
もし所望であれば、架橋されたポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギニン
酸等の崩壊剤が添加されてもよい。またアルギン酸ナトリウム等の塩も使用され
てよい。For oral administration, the active ingredients can be formulated with pharmaceutically acceptable carriers well known in the art. Such carriers enable the compounds of the invention to be formulated as tablets, pills, troches, dragees, capsules, liquids, gels, syrups, slurries, suspensions, and the like, for oral ingestion by a patient. Pharmaceutical products for oral use use solid excipients, optionally crushing the resulting mixture and, if desired, adding other suitable adjuvants, to form the granulated mixture. Process to give tablets or dragee cores. Useful excipients are sugars including lactose, sucrose, mannitol, or sorbitol, for example, cellulose products such as corn starch, wheat starch, rice starch, and potato starch, and gelatin, tragacanth, methylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, among others. , Sodium carboxymethylcellulose, and / or
Or other materials such as polyvinylpyrrolidone (pvp).
If desired, disintegrating agents may be added, such as the cross-linked polyvinyl pyrrolidone, agar, or arginic acid. Also, salts such as sodium alginate may be used.

【０２０８】 糖衣剤のコアは、適当なコーティングを供給される。この目的のためには、濃
縮された糖溶液が用いられてよいが、それはアラビアゴム、タルク、ポリビニル
ピロリドン、カルボポルゲル（carbopol gel）、ポリエチレングリコール、およ
び／または２酸化チタン、ラッカー溶液、および適当な有機溶媒または溶媒混合
物を任意に含んでよい。識別のため、あるいは活性成分の線量の異なる組合せを
特徴づけるため、染料または色素が錠剤または糖衣剤コーティングに添加されて
よい。Dragee cores are provided with suitable coatings. For this purpose, a concentrated sugar solution may be used, which may be gum arabic, talc, polyvinylpyrrolidone, carbopol gel, polyethylene glycol, and / or titanium dioxide, a lacquer solution, and a suitable lacquer solution. An organic solvent or solvent mixture may optionally be included. Dyestuffs or pigments may be added to the tablets or dragee coatings for identification or to characterize different combinations of active ingredient doses.

【０２０９】 経口的に用いられることが可能な薬剤学的組成物は、ゼラチンでできたプッシ
ュフィット（push-fit）カプセル、ならびにゼラチンおよびグリセロールやソル
ビトールといった可塑剤から成るソフトな密封カプセルを含む。プッシュフィッ
トカプセルは、活性成分を、ラクトース等の増量剤、デンプン等の結合剤、およ
び／またはタルクやステアリン酸マグネシウムといった潤滑剤、さらに任意に安
定剤と混合して含むことができる。ソフトカプセルにおいては、活性成分は脂肪
油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコール等の適当な液体中に溶
解または懸濁されてよい。安定剤もこれらの製剤に添加されてよい。Pharmaceutical compositions that can be used orally include push-fit capsules made of gelatin, as well as soft, sealed capsules made of gelatin and a plasticizer, such as glycerol or sorbitol. Push-fit capsules can contain the active ingredient in admixture with fillers such as lactose, binders such as starch, and / or lubricants such as talc and magnesium stearate, and optionally, stabilizers. In soft capsules, the active ingredients may be dissolved or suspended in suitable liquids, such as fatty oils, liquid paraffin, or liquid polyethylene glycol. Stabilizers may also be added to these formulations.

【０２１０】 吸入による投与用には、本発明に従って用いられる化合物は、加圧されたパッ
クまたはネブライザーと、噴射剤、たとえばこれに限定されないが、ジクロロジ
フルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、
または二酸化炭素とを用いたエアーゾルスプレイの形状にて便利に送達される。
加圧されたエアーゾルの場合、用量単位は計量された量を送達するべく備えられ
たバルブにより調節されてよい。たとえば吸入器または注入器において使用する
ためのゼラチン製のカプセルおよびカートリッジは、当該化合物の粉末混合物と
、ラクトースやデンプンといった適当な粉末基剤とを含んで製剤されてよい。For administration by inhalation, the compounds employed in accordance with the present invention may include a pressurized pack or nebulizer and a propellant, such as, but not limited to, dichlorodifluoromethane, trichlorofluoromethane, dichlorotetrafluoroethane,
Alternatively, it is conveniently delivered in the form of an aerosol spray using carbon dioxide.
In the case of a pressurized aerosol the dosage unit may be adjusted with a valve provided to deliver a metered amount. Capsules and cartridges of, for example, gelatin for use in an inhaler or insufflator may be formulated containing a powder mix of the compound and a suitable powder base such as lactose or starch.

【０２１１】 また当該化合物は、たとえば大量注射または連続的な灌流による非経口投与用
に製剤されてもよい。注射用の製剤は、単位用量にて、たとえばアンプルにて、
あるいは多用量容器中に添加された保存料と共に提供されてよい。当該化合物は
油性または水性の媒体において、懸濁液、溶液、または乳濁液といった形状をと
ってよく、また懸濁、安定および／または分散剤といった製剤物質を含んでもよ
い。The compounds may also be formulated for parenteral administration, eg, by bolus injection or continuous perfusion. Formulations for injection may be presented in unit dose, for example, in ampules.
Alternatively, it may be provided with a preservative added in a multi-dose container. The compounds may take such forms as suspensions, solutions or emulsions in oily or aqueous vehicles, and may contain formulatory agents such as suspending, stabilizing and / or dispersing agents.

【０２１２】 非経口投与用の薬剤組成物は、これに限定されないが、活性成分の塩等の、水
に可溶性の形状の水溶液を含む。さらに、活性成分の懸濁物は、親油性の媒体中
で調製されてよい。適切な親油性媒体は、脂肪油、ゴマ油等の脂肪油、オレイン
酸エチル等の合成脂肪酸エステル、およびトリグリセリド、またはリポソーム等
の物質を含む。水溶性の注射用懸濁液は、カルボキシメチルセルロースナトリウ
ム、ソルビトール、またはデキストラン等の当該懸濁液の粘度を増す物質を含ん
でよい。任意で、当該懸濁液はまた、高度に濃縮された溶液の調製を可能にする
べく、当該化合物の可溶性を亢進する適当な安定剤および／または薬剤を含んで
もよい。Pharmaceutical compositions for parenteral administration include aqueous solutions in water-soluble form, such as, but not limited to, salts of the active ingredients. Additionally, suspensions of the active ingredients may be prepared in lipophilic vehicles. Suitable lipophilic vehicles include fatty oils, fatty oils such as sesame oil, synthetic fatty acid esters such as ethyl oleate, and substances such as triglycerides or liposomes. Aqueous injection suspensions may contain substances which increase the viscosity of the suspension, such as sodium carboxymethyl cellulose, sorbitol, or dextran. Optionally, the suspension may also contain suitable stabilizers and / or agents that increase the solubility of the compounds to allow for the preparation of highly concentrated solutions.

【０２１３】 別法として、活性成分は、使用前に適当な媒体、たとえば無菌の、発熱物質な
しの水を用いて構成するための、粉末の形状であってもよい。Alternatively, the active ingredient may be in powder form for constitution with a suitable vehicle, eg, sterile, pyrogen-free water, before use.

【０２１４】 当該化合物は、たとえばカカオバターまたは他のグリセリドといった通常の坐
剤基剤を用いて、坐剤または停留浣腸等の直腸用組成物に製剤されてもよい。The compounds may be formulated in rectal compositions such as suppositories or retention enemas, using conventional suppository bases such as cocoa butter or other glycerides.

【０２１５】 先に述べた製剤に加えて、当該化合物はまたデポ製剤として製剤されてよい。
かかる長時間作用性の製剤は、埋込み（たとえば皮下または筋肉内への）による
か、または筋肉内注射により投与されてよい。この投与経路のためには、本発明
の組成物は適当な高分子性または疎水性物質と共に（たとえば薬理学的に許容さ
れる油剤による乳濁液にて）、イオン交換樹脂と共に、あるいはこれに限定され
ないがやや溶けにくい塩等のやや溶けにくい誘導体として、製剤されてよい。In addition to the formulations described previously, the compounds may also be formulated as a depot preparation.
Such long acting formulations may be administered by implantation (for example, subcutaneously or intramuscularly) or by intramuscular injection. For this route of administration, the compositions of the present invention may be combined with a suitable polymeric or hydrophobic material (eg, in an emulsion with a pharmaceutically acceptable oil), with or with an ion exchange resin. It may be formulated as a slightly soluble derivative such as, but not limited to, a slightly soluble salt.

【０２１６】 本発明の疎水性化合物のための薬剤学的担体の限定しない実例は、ベンジルア
ルコール、非極性界面活性剤、水混和性有機高分子、およびＶＰＤコソルベント
システム等の水相、を含むコソルベントシステムである。ＶＰＤは３％ｗ／ｖの
ベンジルアルコール、８％ｗ／ｖの非極性界面活性剤ポリソルベート（Polysorb
ate）８０TM，および６５％ｗ／ｖのポリエチレングリコール３００の、無水ア
ルコールで体積を合わせた溶液である。ＶＰＤコソルベントシステム（ＶＰＤ：
Ｄ５Ｗ）は５％デキストロース水溶液を用いて１：１に希釈されたＶＰＤから成
る。このコソルベントシステムは疎水化合物をよく溶解し、またそれ自体が全身
投与に際して低毒性を産生する。本来、かかるコソルベントシステムの割合は、
その可溶性および毒性の特性を破壊することなしに、かなり変えれられてよい。
さらに、コソルベント成分の正体は変えられてよい：たとえば、ポリソルベート
８０TMの代わりに他の低毒性の非極性界面活性剤が用いられてよく、ポリエチレ
ングリコールの比率の大きさは変えられてよく、他の生物適合性のポリマーがポ
リエチレングリコール、たとえばポリビニルピロリドンを置換してよく、また他
の糖類または多糖類がデキストロースを置換してもよい。Non-limiting examples of pharmaceutical carriers for the hydrophobic compounds of the present invention include benzyl alcohol, non-polar surfactants, water-miscible organic polymers, and an aqueous phase such as a VPD co-solvent system. It is a co-solvent system. VPD is 3% w / v benzyl alcohol, 8% w / v non-polar surfactant polysorbate (Polysorb
ate) A solution of 80 ™ and 65% w / v polyethylene glycol 300 made up to volume with absolute alcohol. VPD cosolvent system (VPD:
D5W) consists of VPD diluted 1: 1 with 5% dextrose in water. This co-solvent system dissolves hydrophobic compounds well and itself produces low toxicity upon systemic administration. Originally, the proportion of such co-solvent systems was
It can be varied considerably without destroying its soluble and toxic properties.
In addition, the identity of the co-solvent components may be varied: for example, other low toxicity non-polar surfactants may be used instead of Polysorbate 80 ™ , and the magnitude of the proportion of polyethylene glycol may be varied; Other biocompatible polymers may replace polyethylene glycol, for example, polyvinylpyrrolidone, and other sugars or polysaccharides may replace dextrose.

【０２１７】 別法として、疎水性の薬剤学的化合物用の他のデリバリーシステムが用いられ
てもよい。リポソームおよび乳濁液は、疎水性薬剤のためのデリバリー用の媒体
または担体としての周知の例である。さらに、ジメチルスルホキシド等のある有
機溶媒も用いてよいが、しばしば毒性がより大きい。[0217] Alternatively, other delivery systems for hydrophobic pharmaceutical compounds may be used. Liposomes and emulsions are well-known examples of delivery vehicles or carriers for hydrophobic drugs. In addition, certain organic solvents such as dimethyl sulfoxide may be used, but often are more toxic.

【０２１８】 さらに、当該化合物は、治療用薬剤を含んでいる固形の疎水性高分子から成る
半透性のマトリックスといった持続放出性システムを用いて送達されてよい。種
々の持続放出性物質が確立されており、当業者には周知である。持続放出性カプ
セルは、その化学的性質に依存して数週間から１００日を超えるまでにわたり、
当該化合物を放出してよい。治療用薬剤の化学的性質および生物学的安定性に依
存して、タンパク質安定化のための付加的な方策が用いられてよい。In addition, the compounds may be delivered using sustained release systems, such as semipermeable matrices of solid hydrophobic macromolecules containing the therapeutic agent. Various sustained-release materials have been established and are well known by those skilled in the art. Sustained-release capsules may range from weeks to more than 100 days, depending on their chemical nature.
The compound may be released. Depending on the chemical nature and the biological stability of the therapeutic agent, additional strategies for protein stabilization may be used.

【０２１９】 本文の薬剤学的組成物はまた、適当な固形またはゲル相の担体または賦形剤を
含んでよい。かかる担体または賦形剤の実例は、これに限定されないが、炭酸カ
ルシウム、リン酸カルシウム、種々の糖類、デンプン、セルロース誘導体、ゼラ
チン、およびポリエチレングリコール等のポリマーを含む。The pharmaceutical compositions herein may also include a suitable solid or gel phase carrier or excipient. Examples of such carriers or excipients include, but are not limited to, calcium carbonate, calcium phosphate, various sugars, starches, cellulose derivatives, gelatin, and polymers such as polyethylene glycols.

【０２２０】 本発明のＰＫ調製化合物の多くは、生理学的に許容される塩類として提供され
てよいが、それにおいては、本発明の化合物は負または正に帯電された種を形成
してもよい。当該化合物が正に帯電した成分を形成している塩の実例は、これに
限定されないが、第４アンモニウム（本文の他の場所に定義されている）、塩酸
塩、硫酸塩、炭酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩等の、第４
アンモニウム基の窒素原子が、適当な酸と反応した本発明の選ばれた化合物の窒
素である塩類を含む。本発明の化合物が負に帯電した種を形成している塩類は、
これに制限されないが、当該化合物中のカルボン酸基と適当な塩基（たとえば水
酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）、水酸化カリウム（ＫＯＨ）、水酸化カルシウム（
Ｃａ（ＯＨ）2）、その他）との反応によって形成されるナトリウム、カリウム
、カルシウム、およびマグネシウム塩を含む。While many of the PK-preparing compounds of the invention may be provided as physiologically acceptable salts, the compounds of the invention may form negatively or positively charged species. . Illustrative examples of salts wherein the compound forms a positively charged component include, but are not limited to, quaternary ammonium (as defined elsewhere in the text), hydrochloride, sulfate, carbonate, and lactic acid. 4th salt, tartrate, maleate, succinate, etc.
Salts wherein the nitrogen atom of the ammonium group is the nitrogen of a selected compound of the present invention reacted with a suitable acid. Salts wherein the compound of the invention forms a negatively charged species are
Although not limited thereto, the carboxylic acid group in the compound and a suitable base (for example, sodium hydroxide (NaOH), potassium hydroxide (KOH), calcium hydroxide (
Ca (OH) 2 , etc.), and the sodium, potassium, calcium, and magnesium salts formed.

【０２２１】用量 本発明における使用に適した薬剤学的組成物は、意図された目的、すなわちＰ
Ｋ活性の調節、またはＰＫ関連障害の治療または予防を遂行するべく充分な量の
活性物質が含まれている組成物を含む。 Dosage Pharmaceutical compositions suitable for use in the invention are intended for the intended purpose, ie.
It includes compositions wherein the active substance is contained in an amount sufficient to modulate K activity or to treat or prevent a PK-related disorder.

【０２２２】 さらに具体的には、治療上有効な量とは、疾患の症状を予防、緩和、または改
善するため、あるいは治療されている患者の生存を延長されるために有効な化合
物の量を意味する。More specifically, a therapeutically effective amount refers to an amount of the compound that is effective to prevent, alleviate, or ameliorate the symptoms of the disease, or to prolong the survival of the patient being treated. means.

【０２２３】 治療上有効な量の決定は、特に本文において提供された詳細な開示に照らし合
われせば、当業者の能力で充分可能である。Determination of a therapeutically effective amount is well within the capability of those skilled in the art, especially in light of the detailed disclosure provided herein.

【０２２４】 本発明の方法において用いられる化合物については、治療上有効な量または用
量は、最初は細胞培養検定から算定されることが可能である。したがって、動物
モデルにおける使用のために、用量は細胞培養において測定されるようなＩＣ50 （すなわちＰＫ活性の最大阻害の半分を成し遂げる試験化合物の濃度）を含む循
環濃度範囲を達成するべく公式化されてよい。かかる情報は次いで、ヒトにおけ
る有用な用量のさらに正確な決定のために用いられることが可能である。For compounds used in the methods of the invention, the therapeutically effective amount or dose can be estimated initially from cell culture assays. Thus, for use in animal models, doses are formulated to achieve a circulating concentration range that includes the IC 50 (ie, the concentration of the test compound that achieves half-maximal inhibition of PK activity) as measured in cell culture. Good. Such information can then be used for more accurate determination of useful doses in humans.

【０２２５】 本文に述べた化合物の毒性ならびに治療上の有効性は、細胞培養物または実験
動物において、たとえば披検化合物についてＩＣ50およびＬＤ50（双方とも本文
の他の場所において議論されている）を測定することにより、標準的な薬剤学的
方法により測定されることが可能である。このような細胞培養物の検定および動
物研究から得られたデータは、ヒトにおいて使用するための用量範囲の公式化に
利用することができる。用量は、用いられる剤形と、利用される投与経路とに依
存して変えられてよい。正確な製剤、投与経路、および用量は、個々の医師によ
り、患者の状態を考慮して選択されることが可能である。（たとえば、Finglら
、1975, 「The Pharmacological Basis of Therapeutics」第１章、１頁を参照
のこと）。The toxicity and therapeutic efficacy of the compounds described herein can be demonstrated in cell cultures or experimental animals, eg, the IC 50 and LD 50 for the test compound (both discussed elsewhere in the text). Can be measured by standard pharmacological methods. The data obtained from assays of such cell cultures and animal studies can be used in formulating a range of dosage for use in humans. Dosages may vary depending on the dosage form employed and the route of administration utilized. The exact formulation, route of administration, and dosage can be chosen by the individual physician in view of the patient's condition. (See, eg, Fingl et al., 1975, "The Pharmacological Basis of Therapeutics", Chapter 1, page 1.)

【０２２６】 投薬用量および間隔は、活性をもつ種の、キナーゼ調節効果を維持するために
充分な血漿濃度を提供するべく、個々に調節されてよい。このような血漿濃度は
、最小有効濃度（ＭＥＣ）と呼ばれる。ＭＥＣは各々の化合物ごとに異なるであ
ろうが、インヴィトロのデータから算定されることは可能であり、たとえばキナ
ーゼの５０〜９０％阻害を達成するために必要な濃度は、本文に述べた検定法を
用いて確認されてよい。ＭＥＣを成遂げるために必要な用量は個体の特性および
投与経路に依存することとなる。ＨＰＬＣ検定法または生物学的検定法は、血漿
濃度を測定するべく使用されることが可能である。Dosage amount and interval may be adjusted individually to provide plasma levels of the active species that are sufficient to maintain the kinase-modulating effects. Such a plasma concentration is called a minimum effective concentration (MEC). The MEC will vary for each compound, but can be calculated from in vitro data; for example, the concentration required to achieve 50-90% inhibition of the kinase can be determined using the assays described herein. May be confirmed using Dosages necessary to achieve the MEC will depend on individual characteristics and route of administration. HPLC or biological assays can be used to determine plasma concentrations.

【０２２７】 投薬間隔もまたＭＥＣ値を用いて測定することができる。化合物は、ＭＥＣよ
り高い血漿濃度が１０〜９０％の時間、このましくは３０〜９０％の間、最も好
ましくは５０〜９０％の間にわたって維持される投与計画を用いて投与されるこ
ととなる。Dosage intervals can also be measured using MEC value. The compound is administered using a regimen in which the plasma concentration above the MEC is maintained for 10-90% of the time, preferably between 30-90%, most preferably between 50-90%. Become.

【０２２８】 局所投与または選択的摂取の場合には、薬剤の有効な局所濃度は血漿濃度に関
係なく、この技術において周知の他の方法を、正しい用量および間隔を決定する
べく用いてよい。 投与される化合物の量は、もちろん治療される患者、苦しみの激しさ、投与法
、処方している医師の判断、その他に依存する。In the case of local administration or selective uptake, the effective local concentration of the drug will be independent of plasma concentration, and other methods well known in the art may be used to determine the correct dose and interval. The amount of compound administered will, of course, be dependent on the subject being treated, the severity of the affliction, the manner of administration, the judgment of the prescribing physician, and the like.

【０２２９】梱包 当該化合物は、もし所望であれば、 ＦＤＡ承認のキット等の、活性成分を含
んでいる一つまたはそれより多い単位剤形を含むパックまたは調剤装置にて提供
されてよい。パックはたとえばＰＴＰ包装等の金属またはプラスチックの箔でよ
い。パックまたは調剤装置には、投与のための使用説明書が添付されてよい。 Packaging The compound may, if desired, be presented in a pack or dispensing device containing one or more unit dosage forms containing the active ingredient, such as an FDA approved kit. The pack may be metal or plastic foil, such as a PTP package. The pack or dispenser device may be accompanied by instructions for administration.

【０２３０】 またパックまたは調剤装置は、薬剤の製造、用途、または販売を取締まる政府
機関によって規定された形式の、容器に関連した注意書が添付されてよく、その
注意書は当該組成物の形状について、あるいはヒトまたは獣医学的投与について
の当該機関による承認を反映するものである。かかる注意書は、たとえば米国食
品医薬品局により処方箋調剤薬として承認されたラベルによるものか、または承
認された製品に差込まれたものでもよい。適合した製剤学的担体中で製剤された
、本発明の化合物を含んでいる組成物もまた調製され、適当な容器内に設置され
、さらに指示された条件による処置のためにラベルされてよい。ラベルに示され
た適切な条件は、腫瘍の治療、血管新生の阻害、線維症、糖尿病、およびその他
の治療を含んでよい。The packs or dispensers may also be accompanied by a notice, associated with the container, of the type prescribed by the governmental authority overseeing the manufacture, use, or sale of the drug, the notice comprising It reflects the agency's approval for form or for human or veterinary administration. Such notice, for example, may be on a label approved by the U.S. Food and Drug Administration for prescription dispensing, or it may be in an approved product. Compositions containing a compound of the present invention formulated in a compatible pharmaceutical carrier may also be prepared, placed in an appropriate container, and labeled for treatment according to the indicated conditions. Suitable conditions indicated on the label may include treatment of tumors, inhibition of angiogenesis, fibrosis, diabetes, and other treatments.

【０２３１】 ４．合成 本発明の化合物，ならびに前駆体のオキシインドールおよびアルデヒドは，化
学の技術分野でよく知られている技術を用いて容易に合成することができる。当
業者には，本発明の化合物を形成する他の合成経路が利用可能であり，以下の記
載は例示のためにのみ提供され，限定するものではないことが理解されるであろ
う[0241] 4. Synthesis The compounds of the present invention, as well as the precursors oxindole and aldehyde, can be readily synthesized using techniques well known in the chemical arts. Those skilled in the art will appreciate that other synthetic routes to form the compounds of the present invention are available and the following description is provided by way of illustration only and is not limiting.

【０２３２】一般的合成方法 以下の一般的方法論を用いて，本発明の化合物およびその中間体を製造するこ
とができる。 General Synthetic Methods The compounds of the present invention and their intermediates can be prepared using the following general methodology.

【０２３３】置換オキシインドールの製造 ５−アミノ−２−オキシインドール ５−ニトロ−２−オキシインドール（６．３ｇ）をメタノール中で１０％パラ
ジウム担持炭素で水素化して，３．０ｇ（６０％収率）の表題化合物を白色固体
として得た。Preparation of Substituted Oxindoles 5-Amino-2-oxindole 5-nitro-2-oxindole (6.3 g) was hydrogenated in methanol over 10% palladium on carbon to give 3.0 g (60% yield). %) Of the title compound was obtained as a white solid.

【０２３４】５−ブロモ−２−オキシインドール ２０ｍＬアセトニトリル中の２−オキシインドール（１．３ｇ）を−１０℃に
冷却し，２．０ｇのＮ−ブロモスクシンイミドを撹拌しながらゆっくり加えた。
反応液を−１０℃で１時間および０℃で２時間撹拌した。沈殿物を回収し，水で
洗浄し，乾燥して，１．９ｇ（９０％収率）の表題化合物を得た。 5-Bromo-2-oxindole 2-Oxindole (1.3 g) in 20 mL acetonitrile was cooled to -10 ° C and 2.0 g of N-bromosuccinimide was added slowly with stirring.
The reaction was stirred at -10 ° C for 1 hour and at 0 ° C for 2 hours. The precipitate was collected, washed with water and dried to give 1.9 g (90% yield) of the title compound.

【０２３５】４−メチル−２−オキシインドール ２０ｍＬの乾燥エーテル中のジエチルオキサレート（３０ｍＬ）を，撹拌しな
がら，５０ｍＬの乾燥エーテル中に懸濁した１９ｇのカリウムエトキシドに加え
た。混合物を氷浴中で冷却し，２０ｍＬの乾燥エーテル中の２０ｍＬの３−ニト
ロ−ｏ−キシレンをゆっくり加えた。粘稠な暗赤色混合物を０．５時間加熱還流
し，濃縮して暗赤色固体を得，ほぼすべての固体が溶解するまで１０％水酸化ナ
トリウムで処理した。暗赤色混合物を，赤色が黄色に変化するまで３０％過酸化
水素で処理した。暗赤色が存在しなくなるまで，混合物を１０％水酸化ナトリウ
ムと３０％過酸化水素で交互に処理した。固体を濾別し，濾液を６Ｎ塩酸で酸性
にした。得られた沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥し
て，９．８ｇ（４５％収率）の２−メチル−６−ニトロフェニル酢酸を灰白色固
体として得た。固体をメタノール中で１０％パラジウム担持炭素で水素化して，
９．０４ｇの表題化合物を白色固体として得た。 4-Methyl-2-oxindole Diethyl oxalate (30 mL) in 20 mL of dry ether was added with stirring to 19 g of potassium ethoxide suspended in 50 mL of dry ether. The mixture was cooled in an ice bath and 20 mL of 3-nitro-o-xylene in 20 mL of dry ether was added slowly. The viscous dark red mixture was heated at reflux for 0.5 hours and concentrated to give a dark red solid, which was treated with 10% sodium hydroxide until almost all solids dissolved. The dark red mixture was treated with 30% hydrogen peroxide until the red color turned yellow. The mixture was alternately treated with 10% sodium hydroxide and 30% hydrogen peroxide until no dark red color was present. The solid was filtered off and the filtrate was acidified with 6N hydrochloric acid. The resulting precipitate was collected by vacuum filtration, washed with water, and dried under vacuum to give 9.8 g (45% yield) of 2-methyl-6-nitrophenylacetic acid as an off-white solid. Hydrogenating the solid with 10% palladium on carbon in methanol,
9.04 g of the title compound were obtained as a white solid.

【０２３６】７−ブロモ−５−クロロ−２−オキシインドール ５−クロロ−２−オキシインドール（１６．８ｇ）および１９．６ｇのＮ−ブ
ロモスクシンイミドを１４０ｍＬのアセトニトリル中に懸濁し，３時間還流した
。２時間還流の時点において薄層クロマトグラフィー（シリカ，酢酸エチル）は
，５−クロロ−２−オキシインドールまたはＮ−ブロモスクシンイミド（Ｒｆ０
．８），生成物（Ｒｆ０．８５）および第２の生成物（Ｒｆ０，９）を示し，そ
の比率はさらに１時間還流しても変化しなかった。混合物を１０℃に冷却し，沈
殿物を真空濾過により回収し，２５ｍＬのエタノールで洗浄し，漏斗中で２０分
間吸引乾燥して，１４．１ｇの湿潤生成物（５６％収率）を得た。固体を２００
ｍＬの変性エタノールに懸濁し，１０分間撹拌し還流することによりスラリー洗
浄した。混合物を氷浴中で１０℃に冷却した。固体生成物を真空濾過により回収
し，２５ｍＬのエタノールで洗浄し，真空下で４０℃で乾燥して，１２．７ｇ（
５１％収率）の７−ブロモ−５−クロロ−２−オキシインドールを得た。 7-Bromo-5-chloro-2-oxindole 5-Chloro-2-oxindole (16.8 g) and 19.6 g of N-bromosuccinimide were suspended in 140 mL of acetonitrile and refluxed for 3 hours. . At the point of reflux for 2 hours, thin layer chromatography (silica, ethyl acetate) revealed that 5-chloro-2-oxindole or N-bromosuccinimide (Rf0
. 8), the product (Rf 0.85) and the second product (Rf 0.9), the ratio of which did not change even after refluxing for an additional hour. The mixture was cooled to 10 ° C. and the precipitate was collected by vacuum filtration, washed with 25 mL of ethanol, and sucked dry in a funnel for 20 minutes to give 14.1 g of wet product (56% yield). . 200 solids
The slurry was washed by suspending in 10 mL of denatured ethanol, stirring for 10 minutes and refluxing. The mixture was cooled to 10 ° C. in an ice bath. The solid product is collected by vacuum filtration, washed with 25 mL of ethanol, dried at 40 ° C. under vacuum and 12.7 g (
(51% yield) of 7-bromo-5-chloro-2-oxindole.

【０２３７】５−フルオロ−２−オキシインドール ５−フルオロイサチン（８．２ｇ）を５０ｍＬのヒドラジン水和物に溶解し，
１．０時間還流した。次に反応混合物を氷水に注加した。次に沈殿物を濾過し，
水で洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，表題化合物を得た。Dissolve 5-fluoro-2-oxindole 5-fluoroisatin (8.2 g) in 50 mL of hydrazine hydrate,
Refluxed for 1.0 hour. Then the reaction mixture was poured into ice water. Then the precipitate is filtered,
Washing with water and drying in a vacuum oven gave the title compound.

【０２３８】５−ニトロ−２−オキシインドール ２−オキシインドール（６．５ｇ）を２５ｍＬ濃硫酸に溶解し，混合物を−１
０から−１５℃に保持し，その間に２．１ｍＬの発煙硝酸を滴加した。硝酸を加
えた後，反応混合物を０℃で０．５時間撹拌し，氷水に注加した。沈殿物を濾過
により回収し，水で洗浄し，５０％酢酸から結晶化した。次に結晶生成物を濾過
し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，６．３ｇ（７０％）の５−ニトロ−２−オ
キシインドールを得た。 5-Nitro-2-oxindole 2-oxindole (6.5 g) was dissolved in 25 mL concentrated sulfuric acid, and the mixture was diluted with -1.
The temperature was maintained at 0 to -15 ° C while 2.1 mL of fuming nitric acid was added dropwise. After addition of nitric acid, the reaction mixture was stirred at 0 ° C. for 0.5 hour and poured into ice water. The precipitate was collected by filtration, washed with water, and crystallized from 50% acetic acid. The crystalline product was then filtered, washed with water and dried under vacuum to give 6.3 g (70%) of 5-nitro-2-oxindole.

【０２３９】５−アミノスルホニル−２−オキシインドール ２７ｍＬのクロロスルホン酸を入れた１００ｍＬのフラスコに１３．３ｇの２
−オキシインドールをゆっくり加えた。添加の間，反応温度は３０℃未満に維持
した。添加後，反応混合物を室温で１．５時間撹拌し，６８℃で１時間加熱し，
冷却し，水に注加した。沈殿物を水で洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，１１
．０ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドール（５０％収率）を得，こ
れをさらに精製することなく用いた。 ５−クロロスルホニル−２−オキシインドール（２．１ｇ）を１０ｍＬのエタ
ノール中の１０ｍＬの水酸化アンモニウムに加え，室温で一夜撹拌した。混合物
を濃縮し，固体を真空濾過により回収して，０．４ｇ（２０％収率）の表題化合
物を灰白色固体として得た。 5-Aminosulfonyl-2-oxindole 13.3 g of 23.3 mL was placed in a 100 mL flask containing 27 mL of chlorosulfonic acid.
-Oxindole was added slowly. During the addition, the reaction temperature was kept below 30 ° C. After the addition, the reaction mixture was stirred at room temperature for 1.5 hours, heated at 68 ° C. for 1 hour,
Cooled and poured into water. The precipitate is washed with water, dried in a vacuum oven and dried.
. 0 g of 5-chlorosulfonyl-2-oxindole (50% yield) was obtained, which was used without further purification. 5-Chlorosulfonyl-2-oxindole (2.1 g) was added to 10 mL of ammonium hydroxide in 10 mL of ethanol and stirred at room temperature overnight. The mixture was concentrated and the solid was collected by vacuum filtration to give 0.4 g (20% yield) of the title compound as an off-white solid.

【０２４０】５−メチルアミノスルホニル−２−オキシインドール ３．３８ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドールの，テトラヒドロ
フラン中の１０ｍＬの２Ｍメチルアミン中の懸濁液を室温で４時間撹拌し，この
間に白色固体が形成した。沈殿物を真空濾過により回収し，５ｍＬの水で２回洗
浄し，真空下で４０℃で一夜乾燥して，３．０ｇ（８８％収率）の５−メチルア
ミノスルホニル−２−オキシインドールを得た。 5-Methylaminosulfonyl-2-oxindole A suspension of 3.38 g of 5-chlorosulfonyl-2-oxindole in 10 mL of 2M methylamine in tetrahydrofuran was stirred at room temperature for 4 hours, during which time A white solid formed. The precipitate was collected by vacuum filtration, washed twice with 5 mL of water and dried under vacuum at 40 ° C. overnight to give 3.0 g (88% yield) of 5-methylaminosulfonyl-2-oxindole. Obtained.

【０２４１】５−（４−トリフルオロメチルフェニルアミノスルホニル）−２−オキシインド
ール ２．１ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドール，１．６ｇの４−ト
リフルオロメチルアニリンおよび１．４ｇのピリジンの２０ｍＬのジクロロメタ
ン中の懸濁液を室温で４時間撹拌した。形成した沈殿物を真空濾過により回収し
，５ｍＬの水で２回洗浄し，真空下で４０℃で一夜乾燥して，薄層クロマトグラ
フィーによりある程度の不純物を含有する２．４ｇの粗生成物を得た。粗生成物
をシリカゲルでクロマトグラフィーを行い，酢酸エチル：ヘキサン（１：２）で
溶出して，１．２ｇ（３７％収率）の５−（４−トリフルオロメチルフェニル−
アミノスルホニル）−２−オキシインドールを得た。 5- (4-trifluoromethylphenylaminosulfonyl) -2-oxyindo
5-chlorosulfonyl-2-oxindole Lumpur 2.1 g, a suspension in dichloromethane 20mL of pyridine 4-trifluoromethyl aniline and 1.4g of 1.6g was stirred at room temperature for 4 hours. The precipitate formed is collected by vacuum filtration, washed twice with 5 mL of water and dried under vacuum at 40 ° C. overnight to give 2.4 g of crude product containing some impurities by thin layer chromatography. Obtained. The crude product was chromatographed on silica gel, eluting with ethyl acetate: hexane (1: 2) to give 1.2 g (37% yield) of 5- (4-trifluoromethylphenyl-).
(Aminosulfonyl) -2-oxindole was obtained.

【０２４２】５−（モルホリノスルホニル）−２−オキシインドール ２．３ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドールおよび２．２ｇのモ
ルホリンの５０ｍＬのジクロロメタン中の懸濁液を室温で３時間撹拌した。白色
沈殿物を真空濾過により回収し，酢酸エチルおよびヘキサンで洗浄し，真空下で
４０℃で一夜乾燥して，２．１ｇ（７４％収率）の５−（モルホリノスルホニル
）−２−オキシインドールを得た。 5- (morpholinosulfonyl) -2-oxindole A suspension of 2.3 g of 5-chlorosulfonyl-2-oxindole and 2.2 g of morpholine in 50 mL of dichloromethane was stirred at room temperature for 3 hours. The white precipitate was collected by vacuum filtration, washed with ethyl acetate and hexane, dried under vacuum at 40 ° C. overnight to give 2.1 g (74% yield) of 5- (morpholinosulfonyl) -2-oxindole. I got

【０２４３】６−トリフルオロメチル−２−オキシインドール ジメチルスルホキシド（３３０ｍＬ）を，７．９ｇの水素化ナトリウムに加え
，次に４３．６ｇのジエチルオキサレートを滴加した。混合物を１００℃に１．
０時間加熱し，室温に冷却した。２−ニトロ−４−トリフルオロメチルトルエン
（３１．３ｇ）を加え，反応液を室温で３０分間撹拌し，次に１００℃に１時間
加熱した。反応液を冷却し，飽和水性塩化アンモニウム，酢酸エチルおよびヘキ
サンの混合物に注加した。有機層を飽和塩化アンモニウム，水およびブラインで
洗浄し，乾燥し，濃縮して，ジメチル２−（２−ニトロ−４−トリフルオロメチ
ルフェニル）マロネートを得た。 ジエステルを，１００ｍＬのジメチルスルホキシド中の６．４ｇの塩化リチウ
ムおよび２．７ｍＬの水の混合物に溶解し，１００℃に３時間加熱した。反応液
を冷却し，酢酸エチルおよびブラインの混合物に注加した。有機相をブラインで
洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮し，シリカゲル（１０％酢酸エチル，ヘ
キサン中）でクロマトグラフィーを行った。生成物を含む画分を蒸発させて，２
５．７ｇのメチル２−ニトロ−４−トリフルオロメチルフェニルアセテートを得
た。 メチル２−ニトロ−４−トリフルオロメチルフェニルアセテート（２６ｍｇ）
を１０％パラジウム担持炭素で水素化し，次に１００℃で３時間加熱した。触媒
を濾過により除去し，溶媒を蒸発させて，表題化合物を得た。 6-Trifluoromethyl-2-oxindole dimethyl sulfoxide (330 mL) was added to 7.9 g of sodium hydride, followed by dropwise addition of 43.6 g of diethyl oxalate. Bring the mixture to 100 ° C.
Heat for 0 h and cool to room temperature. 2-Nitro-4-trifluoromethyltoluene (31.3 g) was added and the reaction was stirred at room temperature for 30 minutes, then heated to 100 ° C. for 1 hour. The reaction was cooled and poured into a mixture of saturated aqueous ammonium chloride, ethyl acetate and hexane. The organic layer was washed with saturated ammonium chloride, water and brine, dried and concentrated to give dimethyl 2- (2-nitro-4-trifluoromethylphenyl) malonate. The diester was dissolved in a mixture of 6.4 g of lithium chloride and 2.7 mL of water in 100 mL of dimethyl sulfoxide and heated to 100 ° C. for 3 hours. The reaction was cooled and poured into a mixture of ethyl acetate and brine. The organic phase was washed with brine, dried over sodium sulfate, concentrated, and chromatographed on silica gel (10% ethyl acetate in hexane). The fractions containing the product are evaporated to give 2
5.7 g of methyl 2-nitro-4-trifluoromethylphenyl acetate were obtained. Methyl 2-nitro-4-trifluoromethylphenyl acetate (26 mg)
Was hydrogenated over 10% palladium on carbon and then heated at 100 ° C. for 3 hours. The catalyst was removed by filtration and the solvent was evaporated to give the title compound.

【０２４４】４−カルボキシ−２−オキシインドール トリメチルシリルジアゾメタンのヘキサン中の溶液（２Ｍ）を，２．０１ｇの
２−クロロ−３−カルボキシ−ニトロベンゼンの２０ｍＬメタノール中の溶液に
，ガスが発生しなくなるまで室温で滴加した。過剰のトリメチルシリルジアゾメ
タンを酢酸で急冷した。反応混合物をロータリーポンプにより乾燥し，残渣をさ
らに真空オーブン中で一夜乾燥した。生成物である（２−クロロ−３−メトキシ
カルボニル−ニトロベンゼン）は，以下の反応に用いるのに十分純粋であった。 ジメチルマロネート（６．０ｍＬ）を，１５ｍＬのＤＭＳＯ中の２．１ｇの水
素化ナトリウムの氷冷懸濁液に加えた。次に，反応混合物を１００℃で１．０時
間撹拌し，次に室温に冷却した。２−クロロ−３−メトキシカルボニル−ニトロ
ベンゼン（２．１５ｇ）を上述の混合物に一度に加え，混合物を１００℃に１．
５時間加熱した。次に反応混合物を室温に冷却し，氷水に注加し，ｐＨ５に酸性
にし，酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウム
で乾燥し，濃縮して，３．０ｇのジメチル２−メトキシカルボニル−６−ニトロ
フェニルマロネートを得た。 ジメチル２−メトキシカルボニル−６−ニトロフェニルマロネート（３．０ｇ
）を５０ｍＬの６Ｎ塩酸中で一夜還流した。混合物を濃縮乾固し，２０ｍＬのエ
タノール中の１．１ｇの塩化スズ（ＩＩ）とともに２時間還流した。混合物をセ
ライトを通して濾過し，濃縮し，シリカゲル（酢酸エチル：ヘキサン：酢酸）で
クロマトグラフィーを行い，０．６５ｇ（３７％収率）の４−カルボキシ−２−
オキシインドールを白色固体として得た。A solution of 4-carboxy-2-oxindole trimethylsilyldiazomethane in hexane (2M) was added to a solution of 2.01 g of 2-chloro-3-carboxy-nitrobenzene in 20 mL of methanol until no gas evolved. Added dropwise at room temperature. Excess trimethylsilyldiazomethane was quenched with acetic acid. The reaction mixture was dried by rotary pump and the residue was further dried in a vacuum oven overnight. The product (2-chloro-3-methoxycarbonyl-nitrobenzene) was pure enough to be used in the following reaction. Dimethyl malonate (6.0 mL) was added to an ice-cold suspension of 2.1 g sodium hydride in 15 mL DMSO. Next, the reaction mixture was stirred at 100 ° C. for 1.0 hour, and then cooled to room temperature. 2-Chloro-3-methoxycarbonyl-nitrobenzene (2.15 g) is added in one portion to the above mixture and the mixture is brought to 100 ° C.
Heat for 5 hours. The reaction mixture was then cooled to room temperature, poured into ice water, acidified to pH 5 and extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to give 3.0 g of dimethyl 2-methoxycarbonyl-6-nitrophenylmalonate. Dimethyl 2-methoxycarbonyl-6-nitrophenylmalonate (3.0 g
) Was refluxed in 50 mL of 6N hydrochloric acid overnight. The mixture was concentrated to dryness and refluxed with 1.1 g of tin (II) chloride in 20 mL of ethanol for 2 hours. The mixture was filtered through celite, concentrated and chromatographed on silica gel (ethyl acetate: hexane: acetic acid) to give 0.65 g (37% yield) of 4-carboxy-2-.
Oxindole was obtained as a white solid.

【０２４５】５−カルボキシエチル−２−オキシインドール ２５ｍＬの濃塩酸を含む１０ｍＬの水中の５−シアノエチル−２−オキシイン
ドール（４．０２ｇ）を４時間還流した。混合物を冷却し，水を加え，得られた
固体を真空濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，１．９ｇ（４４％収率）
の表題化合物を黄色固体として得た。 5- Carboxyethyl-2-oxindole 5-Cyanoethyl-2-oxindole (4.02 g) in 10 mL of water containing 25 mL of concentrated hydrochloric acid was refluxed for 4 hours. The mixture was cooled, water was added and the resulting solid was collected by vacuum filtration, washed with water, dried and 1.9 g (44% yield).
The title compound was obtained as a yellow solid.

【０２４６】５−（モルホリン−４−エチル）−２−オキシインドール ５−クロロエチル−２−オキシインドール（２．３ｇ），１．２ｍＬのモルホ
リンおよび１．２ｍＬのジイソプロピルエチルアミンを，１０ｍＬのジメチルス
ルホキシド中で１００℃で一夜加熱した。混合物を冷却し，水に注加し，酢酸エ
チルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し，乾燥し，蒸発させた。残渣をシリ
カゲル（５％メタノール，クロロホルム中）でクロマトグラフィーを行い，０．
９ｇ（３１％）の表題化合物を白色固体として得た。 5- (Morpholine-4-ethyl) -2-oxindole 5-Chloroethyl-2-oxindole (2.3 g), 1.2 mL of morpholine and 1.2 mL of diisopropylethylamine were added to 10 mL of dimethyl sulfoxide. At 100 ° C. overnight. The mixture was cooled, poured into water and extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed with brine, dried, and evaporated. The residue was chromatographed on silica gel (5% methanol, in chloroform).
9 g (31%) of the title compound were obtained as a white solid.

【０２４７】５−（４−メトキシカルボニルベンズアミド）−２−オキシインドール ８２．０ｍｇの５−アミノ−２−オキシインドールおよび１３１．０ｍｇの塩
化４−メトキシカルボニルベンゾイルのピリジン中の混合物を室温で３時間撹拌
し，氷水に注加した。沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で乾燥して
，１３８．０ｍｇの５−（４−メトキシカルボニルベンズアミド）−２−オキシ
インドール（８１％収率）を得た。 5- (4-Methoxycarbonylbenzamide) -2-oxindole A mixture of 82.0 mg of 5-amino-2-oxindole and 131.0 mg of 4-methoxycarbonylbenzoyl chloride in pyridine at room temperature for 3 hours Stir and pour into ice water. The precipitate was filtered, washed with water and dried in a vacuum oven to give 138.0 mg of 5- (4-methoxycarbonylbenzamido) -2-oxindole (81% yield).

【０２４８】５−メトキシ−２−オキシインドール 抱水クロラール（９．６ｇ）を，８３ｇの硫酸ナトリウムを含有する２００ｍ
Ｌの水に溶解した。溶液を６０℃に暖め，１１．４ｇのヒドロキシルアミン塩酸
塩の５０ｍＬの水中の溶液を加え，混合物を６０℃に保持した。別のフラスコで
，８０ｍＬの水中の６．４ｇの４−アニシジンおよび４．３ｍＬの濃塩酸を８０
℃に暖めた。第１の溶液を第二の溶液に加え，混合物を２分間還流し，その後，
室温までゆっくり冷却し，次に氷浴中で冷却した。褐色沈殿物を真空濾過により
回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，８．６ｇ（８５％収率）のＮ−（２−
ヒドロキシイミノアセチル）アニシジンを得た。 ５ｍＬの水を含む濃硫酸（４５ｍＬ）を６０℃に暖め，８．６ｇのＮ−（２−
ヒドロキシイミノアセチル）アニシジンを一度に加えた。撹拌した混合物を９３
℃に１０分間加熱し，次に放置して室温まで冷却した。混合物を５００ｇの氷に
注加し，酢酸エチルで３回抽出した。合わせた抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾
燥し，濃縮して，５．１ｇ（６５％収率）の５−メトキシ−イサチンを暗赤色固
体として得た。５−メトキシイサチン（５．０ｇ）および３０ｍＬのヒドラジン
水和物を１５分間加熱還流した。反応混合物を室温に冷却し，５０ｍＬの水を加
えた。混合物を各２５ｍＬの酢酸エチルで３回抽出し，有機層を合わせ，無水硫
酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，黄色固体を得た。固体を酢酸エチル中で撹拌
し，１．１ｇの不溶性物質を真空濾過により除去し，保存した。この物質は２−
ヒドラジノカルボニルメチル−４−アニシジンであることがわかった。濾液を濃
縮し，シリカゲルでクロマトグラフィーを行い，酢酸エチル：ヘキサン（１：１
）で溶出して，０．７ｇの５−メトキシ−２−オキシインドールを黄色固体とし
て得た。１．１ｇの２−ヒドラジノ−カルボニルメチル−４−アニシジンを２０
ｍＬの１Ｎ水酸化ナトリウム中で１時間還流した。混合物を冷却し，濃塩酸でｐ
Ｈ２に酸性にし，各２５ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。有機抽出物を合わせ
，ブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，０．８ｇの５−
メトキシ−２−オキシインドールを黄色固体として得た。合わせた収率は１．５
ｇ，すなわち３３％であった。 5-Methoxy-2-oxindole chloral hydrate (9.6 g) was added to 200 m containing 83 g of sodium sulfate.
L of water. The solution was warmed to 60 ° C., a solution of 11.4 g of hydroxylamine hydrochloride in 50 mL of water was added, and the mixture was kept at 60 ° C. In another flask, add 6.4 g of 4-anisidine and 4.3 mL of concentrated hydrochloric acid in 80 mL of water.
Warmed to ° C. The first solution is added to the second solution and the mixture is refluxed for 2 minutes, after which the
Cooled slowly to room temperature and then in an ice bath. The brown precipitate was collected by vacuum filtration, washed with water and dried under vacuum to give 8.6 g (85% yield) of N- (2-
(Hydroxyiminoacetyl) anisidine was obtained. Concentrated sulfuric acid (45 mL) containing 5 mL of water was warmed to 60 ° C. and 8.6 g of N- (2-
(Hydroxyiminoacetyl) anisidine was added all at once. The stirred mixture is 93
Heated to 10 ° C for 10 minutes, then allowed to cool to room temperature. The mixture was poured into 500 g of ice and extracted three times with ethyl acetate. The combined extracts were dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to give 5.1 g (65% yield) of 5-methoxy-isatin as a dark red solid. 5-Methoxyisatin (5.0 g) and 30 mL of hydrazine hydrate were heated at reflux for 15 minutes. The reaction mixture was cooled to room temperature and 50 mL of water was added. The mixture was extracted three times with 25 mL each of ethyl acetate, and the combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to give a yellow solid. The solid was stirred in ethyl acetate and 1.1 g of insoluble material was removed by vacuum filtration and saved. This substance is 2-
It was found to be hydrazinocarbonylmethyl-4-anisidine. The filtrate was concentrated, chromatographed on silica gel, and ethyl acetate: hexane (1: 1).
) To give 0.7 g of 5-methoxy-2-oxindole as a yellow solid. 1.1 g of 2-hydrazino-carbonylmethyl-4-anisidine in 20
Reflux in 1 mL of 1N sodium hydroxide for 1 hour. Cool the mixture and concentrate with concentrated hydrochloric acid.
Acidified to H2 and extracted three times with 25 mL each of ethyl acetate. The organic extracts were combined, washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated and 0.8 g of 5-
Methoxy-2-oxindole was obtained as a yellow solid. The combined yield is 1.5
g, that is, 33%.

【０２４９】７−アザオキシインドール ３，３−ジブロモ−７−アザオキシインドール（２．９ｇ）を２０ｍＬの酢酸
および３０ｍＬのアセトニトリルの混合物に溶解した。この溶液に６．５ｇの亜
鉛粉末を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。混合物から固体を濾過し，溶
媒を蒸発させた。残渣を酢酸エチルでスラリー化した。不溶性固体を含有する酢
酸エチル溶液を，シリカゲルの短いカラムを通した。回収した酢酸エチル溶液を
蒸発させ，残渣を真空下で乾燥して，１．８ｇ（収率９１％）の７−アザオキシ
インドール酢酸塩を得た。 7-Azaoxindole 3,3-Dibromo-7-azaoxindole (2.9 g) was dissolved in a mixture of 20 mL of acetic acid and 30 mL of acetonitrile. To this solution was added 6.5 g of zinc powder. The mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The solid was filtered from the mixture and the solvent was evaporated. The residue was slurried with ethyl acetate. The ethyl acetate solution containing the insoluble solid was passed through a short column of silica gel. The collected ethyl acetate solution was evaporated and the residue was dried under vacuum to give 1.8 g (91% yield) of 7-azaoxindole acetate.

【０２５０】５−ジメチルアミノスルホニル−２−オキシインドール ２．３ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドールの，１０ｍＬのメタ
ノール中２Ｍジメチルアミン中の懸濁液を室温で４時間撹拌し，このとき白色固
体が形成した。沈殿物を真空濾過により回収し，５ｍＬの１Ｎ水酸化ナトリウム
および５ｍＬの１Ｎ塩酸で洗浄し，真空下で４０℃で一夜乾燥して，１．９ｇ（
７９％収率）の５−ジメチルアミノスルホニル−２−オキシインドールを得た。 5-Dimethylaminosulfonyl-2-oxindole A suspension of 2.3 g of 5-chlorosulfonyl-2-oxindole in 10 mL of 2M dimethylamine in methanol was stirred at room temperature for 4 hours, at which time A white solid formed. The precipitate is collected by vacuum filtration, washed with 5 mL of 1N sodium hydroxide and 5 mL of 1N hydrochloric acid, dried under vacuum at 40 ° C. overnight, and 1.9 g (
79% yield) of 5-dimethylaminosulfonyl-2-oxindole.

【０２５１】６−フェニル−２−オキシインドール ２５ｍＬのジメチル−スルホキシド中のジメチルマロネート（１０ｍＬ）を，
２５ｍＬのジメチルスルホキシド中に懸濁した３．５ｇの水素化ナトリウムに滴
加し，混合物を１００℃で１０分間加熱した。混合物を室温に冷却し，２５ｍＬ
のジメチルスルホキシド中の４．７ｇの４−フルオロ−３−ニトロビフェニルを
加えた。混合物を１００℃で２時間加熱し，冷却し，３００ｍＬの飽和塩化アン
モニウム溶液で急冷した。混合物を酢酸エチルで３回抽出し，合わせた有機層を
水およびブラインで洗浄し，蒸発させて，粗ジメチル−３−ニトロビフェニル−
４−マロネートを黄色油状物として得た。 粗ジメチル−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを３０ｍＬの６Ｎ塩酸中
で２４時間還流した。沈殿物を濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，４．
５ｇの３−ニトロビフェニル−４−酢酸をクリーム色固体として得た。 ４０ｍＬの酢酸中の４．５ｇの３−ニトロビフェニル−４−酢酸に，鉄粉末（
２．６ｇ）を一度に加えた。混合物を２時間還流し，濃縮乾固し，酢酸エチル中
に取り出した。固体を濾過により除去し，濾液を１Ｎ塩酸およびブラインで２回
洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾液を濃縮して，３．４ｇ（９３％収
率）の６−フェニル−２−オキシインドールを淡褐色固体として得た。 6-Phenyl-2-oxindole Dimethyl malonate (10 mL) in 25 mL of dimethyl sulfoxide was added to
3.5 g of sodium hydride suspended in 25 mL of dimethylsulfoxide were added dropwise and the mixture was heated at 100 ° C. for 10 minutes. Cool the mixture to room temperature, 25 mL
4.7 g of 4-fluoro-3-nitrobiphenyl in dimethyl sulfoxide was added. The mixture was heated at 100 ° C. for 2 hours, cooled and quenched with 300 mL of saturated ammonium chloride solution. The mixture was extracted three times with ethyl acetate, the combined organic layers were washed with water and brine, evaporated and crude dimethyl-3-nitrobiphenyl-
4-malonate was obtained as a yellow oil. The crude dimethyl-3-nitrobiphenyl-4-malonate was refluxed in 30 mL of 6N hydrochloric acid for 24 hours. 3. collect the precipitate by filtration, wash with water and dry;
5 g of 3-nitrobiphenyl-4-acetic acid were obtained as a cream solid. To 4.5 g of 3-nitrobiphenyl-4-acetic acid in 40 mL of acetic acid was added iron powder (
2.6 g) were added all at once. The mixture was refluxed for 2 hours, concentrated to dryness and taken up in ethyl acetate. The solid was removed by filtration, the filtrate was washed twice with 1N hydrochloric acid and brine, and dried over anhydrous sodium sulfate. The filtrate was concentrated to give 3.4 g (93% yield) of 6-phenyl-2-oxindole as a light brown solid.

【０２５２】６−（３−メトキシフェニル）−２−オキシインドール テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．８ｇ）を，５ｇの３
−メトキシフェニルボロン酸，５ｇの５−ブロモ−２−フルオロ−ニトロベンゼ
ンおよび１１ｍＬの２Ｍ炭酸ナトリウム溶液の１００ｍＬのトルエン中の混合物
に加えた。混合物を２時間還流し，水で希釈し，酢酸エチルで抽出した。酢酸エ
チルを飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄し，次に乾燥し，濃縮して
油状固体を得た。固体をシリカゲル（酢酸エチル：ヘキサン（１：６））でクロ
マトグラフィーを行い，４．３ｇ（７７％収率）の４−フルオロ−３'−メトキ
シ−３−ニトロビフェニルを得た。 ジメチルマロネート（９．７ｍＬ）を，５０ｍＬのジメチルスルホキシド中に
懸濁した２．０ｇの水素化ナトリウムに滴加した。混合物を１００℃に３５分間
加熱し，室温に冷却した。５０ｍＬのジメチルスルホキシド中の４−フルオロ−
２'−メトキシ−３−ニトロビフェニル（４．２ｇ）を加え，混合物を１００℃
で１時間加熱した。反応混合物を冷却し，３００ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶
液で急冷し，酢酸エチルで２回抽出した。抽出物を合わせ，ブラインで洗浄し，
無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，粗ジメチル３'−メトキシ−３−ニト
ロビフェニル−４−マロネートを淡黄色固体として得た。 粗ジメチル３'−メトキシ−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを４５ｍ
Ｌの６Ｎ塩酸中で１１０℃で４日間加熱し，次に冷却した。沈殿物を濾過により
回収し，水およびヘキサンで洗浄し，乾燥して，５．３ｇの３'−メトキシ−２
−ニトロビフェニル−４−酢酸を淡黄褐色固体として得た。 ３'−メトキシ−３−ニトロビフェニル−４−酢酸（５．２ｇ）をメタノール
に溶解し，０．８ｇの１０％パラジウム担持炭素で室温で３時間水素化した。触
媒を濾過により除去し，メタノールで洗浄し，濾液を合わせ，濃縮して，褐色固
体を得た。固体をシリカゲルで酢酸エチル：ヘキサン：酢酸（３３：６６：１）
でクロマトグラフィーを行い，３．０ｇの６−（３−メトキシフェニル）−２−
オキシインドールを桃色固体として得た。 6- (3-methoxyphenyl) -2-oxindoletetrakis (triphenylphosphine) palladium (0.8 g) was added to 5 g of 3
-Methoxyphenylboronic acid, 5 g of 5-bromo-2-fluoro-nitrobenzene and 11 mL of a 2 M sodium carbonate solution in a mixture of 100 mL of toluene. The mixture was refluxed for 2 hours, diluted with water and extracted with ethyl acetate. The ethyl acetate was washed with saturated sodium bicarbonate and brine, then dried and concentrated to give an oily solid. The solid was chromatographed on silica gel (ethyl acetate: hexane (1: 6)) to give 4.3 g (77% yield) of 4-fluoro-3'-methoxy-3-nitrobiphenyl. Dimethyl malonate (9.7 mL) was added dropwise to 2.0 g of sodium hydride suspended in 50 mL of dimethyl sulfoxide. The mixture was heated to 100 ° C. for 35 minutes and cooled to room temperature. 4-Fluoro- in 50 mL of dimethyl sulfoxide
2′-Methoxy-3-nitrobiphenyl (4.2 g) was added and the mixture was brought to 100 ° C.
For 1 hour. The reaction mixture was cooled, quenched with 300 mL of saturated ammonium chloride solution and extracted twice with ethyl acetate. Combine the extracts, wash with brine,
Drying over anhydrous sodium sulfate and concentration gave crude dimethyl 3'-methoxy-3-nitrobiphenyl-4-malonate as a pale yellow solid. 45 m of crude dimethyl 3'-methoxy-3-nitrobiphenyl-4-malonate
Heated in L 6N hydrochloric acid at 110 ° C. for 4 days, then cooled. The precipitate was collected by filtration, washed with water and hexane, dried and treated with 5.3 g of 3'-methoxy-2.
-Nitrobiphenyl-4-acetic acid was obtained as a light tan solid. 3′-Methoxy-3-nitrobiphenyl-4-acetic acid (5.2 g) was dissolved in methanol and hydrogenated with 0.8 g of 10% palladium on carbon at room temperature for 3 hours. The catalyst was removed by filtration, washed with methanol, the combined filtrates and concentrated to give a brown solid. The solid is purified on silica gel with ethyl acetate: hexane: acetic acid (33: 66: 1).
And 3.0 g of 6- (3-methoxyphenyl) -2-
Oxindole was obtained as a pink solid.

【０２５３】５−アセチル−２−オキシインドール ２−オキシインドール（３ｇ）を１，２−ジクロロエタン中に懸濁し，３．２
ｍＬの塩化アセチルをゆっくり加えた。得られた懸濁液を５０℃に５時間加熱し
，冷却し，水に注加した。得られた沈殿物を真空濾過により回収し，豊富な水で
洗浄し，真空下で乾燥して，２．９ｇ（７３％収率）の表題化合物を褐色固体と
して得た。 5-Acetyl-2-oxindole 2-oxindole (3 g) was suspended in 1,2-dichloroethane and 3.2
mL of acetyl chloride was added slowly. The resulting suspension was heated to 50 ° C. for 5 hours, cooled and poured into water. The resulting precipitate was collected by vacuum filtration, washed with abundant water and dried under vacuum to give 2.9 g (73% yield) of the title compound as a brown solid.

【０２５４】５−シアノエチル−２−オキシインドール シアン酸カリウム（２．０ｇ）を，１５ｍＬのジメチル−スルホキシドに加え
，９０℃に加熱した。５ｍＬのジメチルスルホキシドに溶解した５−クロロエチ
ル−２−オキシインドール（３．０ｇ）を撹拌しながらゆっくり加え，反応液を
１５０℃に２時間加熱した。混合物を冷却し，氷水に注加し，沈殿物を真空濾過
により回収し，水で洗浄し，乾燥し，次にシリカゲル（５％メタノール，クロロ
ホルム中）でクロマトグラフィーを行い，１．２ｇ（４２％収率）の表題化合物
を得た。Potassium 5-cyanoethyl-2-oxindole cyanate (2.0 g) was added to 15 mL of dimethyl-sulfoxide and heated to 90 ° C. 5-Chloroethyl-2-oxindole (3.0 g) dissolved in 5 mL of dimethyl sulfoxide was slowly added with stirring, and the reaction was heated to 150 ° C. for 2 hours. The mixture is cooled, poured into ice-water and the precipitate is collected by vacuum filtration, washed with water, dried and then chromatographed on silica gel (5% methanol in chloroform) to give 1.2 g (42%). % Yield).

【０２５５】６−（モルホリン−４−イル）−２−オキシインドール ６−アミノ−２−オキシインドール（２．２ｇ），４．０ｇの２，２'−ジブ
ロモエチルエーテルおよび７．９ｇの炭酸ナトリウムを２０ｍｌのエタノール中
で一夜還流し，濃縮し，５０ｍｌの水で希釈した。混合物を５０ｍｌの酢酸エチ
ルで３回抽出し，有機抽出物を合わせ，２０ｍｌのブラインで洗浄し，無水硫酸
ナトリウムで乾燥し，濃縮乾固した。固体をシリカゲルのカラム（酢酸エチル：
ヘキサン（１：１），０．７％酢酸を含有）でクロマトグラフィーを行い，１．
２ｇ（３７％収率）の表題化合物をベージュ色固体として得た。 6- (morpholin-4-yl) -2-oxindole 6-amino-2-oxindole (2.2 g), 4.0 g of 2,2′-dibromoethyl ether and 7.9 g of sodium carbonate Was refluxed in 20 ml of ethanol overnight, concentrated and diluted with 50 ml of water. The mixture was extracted three times with 50 ml of ethyl acetate, the combined organic extracts were washed with 20 ml of brine, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to dryness. The solid was separated by silica gel column (ethyl acetate:
Chromatography with hexane (1: 1), containing 0.7% acetic acid).
2 g (37% yield) of the title compound were obtained as a beige solid.

【０２５６】フェノールのメチル化 適当なフェノール（１等量）を，１．３等量のヨウ化メチルおよび１．３等量
の炭酸カリウムを含む等容量のジメチルホルムアミドとともに室温で一夜撹拌す
る。混合物を水で希釈し，酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を水およびブラ
インで洗浄する。有機層を分離し，無水硫酸ナトリウムで洗浄し，蒸発乾固して
，アニソール誘導体を得る。 Methylation of phenol The appropriate phenol (1 equivalent) is stirred overnight at room temperature with an equivalent volume of dimethylformamide containing 1.3 equivalents of methyl iodide and 1.3 equivalents of potassium carbonate. Dilute the mixture with water and extract with ethyl acetate. Wash the ethyl acetate layer with water and brine. Separate the organic layer, wash with anhydrous sodium sulfate and evaporate to dryness to give the anisole derivative.

【０２５７】アニソールのホルミル化 アニソール（１等量），ジメチルホルムアミド（１−３等量）およびオキシ塩
化リン（１−３等量）を１００℃に１−３時間加熱する。反応混合物を室温に冷
却し，ジクロロメタンを加える。混合物を氷で冷却し，次に水を加え，続いて４
−１２等量の濃水酸化ナトリウムをｐＨが９−１０になるまで加える。有機層を
分離し，水で，次にブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，蒸発させ
て，粗アルデヒドを得る。粗アルデヒドを活性炭素を含む沸騰ヘキサンに溶解し
，ヘキサン溶液をデカントし，シリカゲルの層を通して熱濾過する。濾液を蒸発
乾固させて，ベンズアルデヒド誘導体を得る。 Formylation of Anisole Anisole (1 equivalent), dimethylformamide (1-3 equivalent) and phosphorus oxychloride (1-3 equivalent) are heated to 100 ° C. for 1-3 hours. Cool the reaction mixture to room temperature and add dichloromethane. The mixture is cooled with ice, then water is added, followed by 4
Add -12 equivalents of concentrated sodium hydroxide until the pH is 9-10. Separate the organic layer, wash with water, then brine, dry over anhydrous sodium sulfate and evaporate to give the crude aldehyde. The crude aldehyde is dissolved in boiling hexane containing activated carbon, the hexane solution is decanted and hot filtered through a layer of silica gel. The filtrate is evaporated to dryness to give the benzaldehyde derivative.

【０２５８】ピロールのホルミル化 ＰＯＣｌ3（１．１等量）を，ジクロロメタン中のジメチルホルムアミド（３
等量）に−１０℃で滴加し，続いて適当なピロールを加える。２時間撹拌した後
，反応混合物をＨ2Ｏで希釈し，１０ＮＫＯＨでｐＨ１１に塩基性にする。形成
した沈殿物を濾過により回収し，Ｈ2Ｏで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，
所望のアルデヒドを得る。 Formylated POCl 3 of pyrrole (1.1 equivalents) was converted to dimethylformamide (3
) At -10 ° C, followed by addition of the appropriate pyrrole. After stirring for 2 hours, the reaction mixture is diluted with H 2 O and basified to pH 11 with 10 NKOH. The precipitate formed is collected by filtration, washed with H 2 O and dried in a vacuum oven,
Obtain the desired aldehyde.

【０２５９】ピロールカルボン酸エステルのサポニン化 ピロールカルボン酸エステルおよびＫＯＨ（２−４等量）のＥｔＯＨ中の混合
物を，薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により反応の完了が示されるまで還流
する。冷却した反応混合物を１ＮＨＣｌでｐＨ３に酸性にする。形成した沈殿物
を濾過により回収し，Ｈ２Ｏで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，所望のピロ
ールカルボン酸を得る。Saponinated pyrrole carboxylate Ester A mixture of pyrrole carboxylate and KOH (2-4 equivalents) in EtOH is refluxed until thin layer chromatography (TLC) indicates that the reaction is complete. The cooled reaction mixture is acidified to pH 3 with 1N HCl. The precipitate formed is collected by filtration, washed with H2O and dried in a vacuum oven to give the desired pyrrole carboxylic acid.

【０２６０】ピロールカルボン酸のアミド化 ジメチルホルムアミドに溶解したピロールカルボン酸（０．３Ｍ）の撹拌溶液
に，１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（１．２
等量），１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．２等量），およびトリエチル
アミン（２等量）を加える。適当なアミン（１等量）を加え，反応液を，ＴＬＣ
により完了が示されるまで撹拌する。反応液を飽和ＮａＨＣＯ3およびブライン
（過剰の塩を含む）で希釈し，無水ＭｇＳＯ4で乾燥し，濃縮して，所望のアミ
ドを得る。 Amidation of pyrrolecarboxylic acid To a stirred solution of pyrrolecarboxylic acid (0.3 M) dissolved in dimethylformamide was added 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (1.2%).
Eq), 1-hydroxybenzotriazole (1.2 eq), and triethylamine (2 eq). The appropriate amine (1 equivalent) was added and the reaction was
Stir until indicated by. Dilute the reaction with saturated NaHCO 3 and brine (with excess salt), dry over anhydrous MgSO 4 and concentrate to give the desired amide.

【０２６１】ピロールおよびインドールカルボアルデヒドの製造 ３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸 ４−（２−カルボキシエチル）−３−エトキシカルボニル−２−メチルピロー
ル（Ｂｕｌｔｅｒ，Ａ．Ｒ．，ａｎｄ Ｇｅｏｒｇｅ，Ｓ．Ｄ．（１９９３）Ｔ
ｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ４９：７０１７−７０２６）を，エタノール（ＥｔＯＨ
）中で水酸化カリウム（ＫＯＨ）を用いて加水分解して，４−（２−カルボキシ
エチル）−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（６４％）を得た。1 HNMR (DMSO-d6) δ 11.63 (s, 1H, COOH), 10.81 (s, 1H, NH), 6.36 (s, 1H,
CH), 2.78, 2.45 (2 x t, 4H, CH2CH2), 2.34(s, 3H, CH3). MS m/z 225 [M+2].Preparation of pyrrole and indolecarbaldehyde 4- (2-carboxyethyl) -3-ethoxycarbonyl -2-methylpyrrole 3- (2-formyl-5-methyl-1H-pyrrol-3-yl) propionate ( Bulter, AR, and George, SD (1993) T.
etrahedron 49: 7017-7026) with ethanol (EtOH).
) To give 4- (2-carboxyethyl) -2-methyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid (64%). 1 HNMR (DMSO-d 6 ) δ 11.63 (s, 1H, COOH), 10.81 (s, 1H, NH), 6.36 (s, 1H,
CH), 2.78, 2.45 (2 xt, 4H, CH 2 CH 2 ), 2.34 (s, 3H, CH 3 ). MS m / z 225 [M + 2].

【０２６２】 ４−（２−カルボキシエチル）−２−メチル−−１Ｈ−ピロール−３−カルボ
ン酸を２００℃で１時間加熱することにより脱炭酸して，３−（５−メチル−１
Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸を得た。1 HNMR (DMSO-d6) δ 10.07 (s, 1H, NH), 9.60 (br s, 1H, COOH), 6.30 (s, 1H
, CH), 5.56 (s, 1H, CH), 2.51, 2.36 (2 x t, 4H, CH2CH2), 2.10(s, 3H, CH 3 ). MS m/z 154 [M+1].4- (2-carboxyethyl) -2-methyl-1H-pyrrole-3-carbo
The acid was decarboxylated by heating at 200 ° C. for 1 hour to give 3- (5-methyl-1
(H-pyrrol-3-yl) propionic acid was obtained.1 HNMR (DMSO-d6) δ 10.07 (s, 1H, NH), 9.60 (br s, 1H, COOH), 6.30 (s, 1H
, CH), 5.56 (s, 1H, CH), 2.51, 2.36 (2 x t, 4H, CHTwoCHTwo), 2.10 (s, 3H, CH Three ). MS m / z 154 [M + 1].

【０２６３】 ３−（５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）プロピオン酸を，オキシ塩化
リン（ＰＯＣｌ3）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を用いてホ
ルミル化して，３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）
プロピオン酸を得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.09 (br s, 1H, COOH), 11.54 (br s, 1H, NH)
, 9.44 (s, 1H, CHO), 5.86 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 2.87 (t, J = 7.5 Hz, 2H,
CH2), 2.47 (t, J = 7.5 Hz, 2H, CH2), 2.16 (s, 3H, CH3). MS-EI m/z 181 [M+].The 3- (5-methyl-1H-pyrrol-3-yl) propionic acid was formylated with phosphorus oxychloride (POCl 3 ) and N, N-dimethylformamide (DMF) to give 3- (2 -Formyl-5-methyl-1H-pyrrol-3-yl)
Propionic acid was obtained. 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.09 (br s, 1H, COOH), 11.54 (br s, 1H, NH)
, 9.44 (s, 1H, CHO), 5.86 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 2.87 (t, J = 7.5 Hz, 2H,
CH 2 ), 2.47 (t, J = 7.5 Hz, 2H, CH 2 ), 2.16 (s, 3H, CH 3 ). MS-EI m / z 181 [M + ].

【０２６４】４−（２−カルボキシエチル）−５−ホルミル−３−メチル−１Ｈ−ピロール−
２−カルボン酸エチルエステル １０ｇ（３８．９ｍｍｏｌ）のエチル２，４−ジメチル−５−（エトキシカル
ボニル）−３−ピロールプロピオネート（市販）の，水（２５０ｍＬ）とメタノ
ールＭｅＯＨ）（５０ｍＬ）との混合物中の懸濁液に，５０ｍＬの水中の３．０
ｇのＫＯＨを加えた。混合物を７０℃で４時間撹拌した。反応混合物を冷却し，
真空下で混合物からメタノールを除去した。残りの溶液を濾過し，次に濾液を６
Ｎ塩酸でｐＨ３に酸性にした。形成した沈殿物を濾過により回収し，水とエタノ
ールの２：１混合物で洗浄し，真空下で乾燥して，７．５ｇの４−（２−カルボ
キシ−エチル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエ
ステルを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.03 (br s, 1H, COOH), 11.02 (br s, 1H, NH)
, 4.16 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.53 (t, J = 7.8 Hz, 2H, CH2CH2), 2
.25 (t, J = 7.8 Hz, 2H, CH2CH2), 2.16 (s, 3H, CH3), 2.11 (s, 3H, CH3), 1
.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 239 [M+]. 4- (2-carboxyethyl) -5-formyl-3-methyl-1H-pyrrole-
Ethyl 2-carboxylate 10 g (38.9 mmol) of ethyl 2,4-dimethyl-5- (ethoxycarbonyl) -3-pyrrolepropionate (commercially available) in water (250 mL) and methanol (MeOH) (50 mL). To a suspension of 3.0 in 50 mL of water.
g KOH was added. The mixture was stirred at 70 ° C. for 4 hours. Cooling the reaction mixture,
The methanol was removed from the mixture under vacuum. The remaining solution is filtered and the filtrate is then
Acidified to pH 3 with N hydrochloric acid. The precipitate formed is collected by filtration, washed with a 2: 1 mixture of water and ethanol, dried under vacuum and treated with 7.5 g of 4- (2-carboxy-ethyl) -3,5-dimethyl-1H. -Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester was obtained as a white solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.03 (br s, 1H, COOH), 11.02 (br s, 1H, NH)
, 4.16 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 2.53 (t, J = 7.8 Hz, 2H, CH 2 CH 2 ), 2
.25 (t, J = 7.8 Hz, 2H, CH 2 CH 2 ), 2.16 (s, 3H, CH 3 ), 2.11 (s, 3H, CH 3 ), 1
.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 239 [M + ].

【０２６５】 ７ｇの４−（２−カルボキシエチル）−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−
２−カルボン酸エチルエステルの各３５ｍＬのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ），
酢酸（ＡｃＯＨ）および水中の混合物に，−１０℃で，７０ｇの硝酸第二セリウ
ムアンモニウムを２０分間かけて少しずつ加え，反応温度を約５℃に維持した。
次に得られた混合物を０℃に冷却し，さらに２時間撹拌し，次に２５０ｍＬのブ
ラインで希釈した。次に混合物を２ｘ３００ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）中
１０％ＭｅＯＨで抽出した。有機抽出物を合わせ，無水硫酸マグネシウム（Ｍｇ
ＳＯ4）で乾燥し，濾過し，濃縮した。残渣をシリカゲルカラムでヘキサン（ｈ
ｅｘ）／酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）／ＡｃＯＨ（６：４：０．０５）で精製し，
続いてＥｔＯＡｃ中で結晶化して，１．５ｇの４−（２−カルボキシエチル）−
５−ホルミル−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステルを
白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.36 (br s, 1H, COOH), 12.01 (br s, 1H, NH)
, 9.77 (s, 1H, CHO), 4.27 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.89 (t, J = 7.6
Hz, 2H, CH2CH2), 2.37 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2CH2), 2.21 (s, 3H, CH3), 1
.30 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 253 [M+].7 g of 4- (2-carboxyethyl) -3,5-dimethyl-1H-pyrrole-
35 mL each of 2-carboxylic acid ethyl ester in tetrahydrofuran (THF),
To a mixture of acetic acid (AcOH) and water at -10 <0> C, 70 g of ceric ammonium nitrate was added in portions over 20 minutes, maintaining the reaction temperature at about 5 <0> C.
The resulting mixture was then cooled to 0 ° C., stirred for another 2 hours, and then diluted with 250 mL of brine. The mixture was then extracted with 2x300 mL of 10% MeOH in dichloromethane (DCM). Combine the organic extracts and add anhydrous magnesium sulfate (Mg
(SO 4 ), filtered and concentrated. The residue was subjected to hexane (h
ex) / ethyl acetate (EtOAc) / AcOH (6: 4: 0.05)
It was subsequently crystallized in EtOAc to give 1.5 g of 4- (2-carboxyethyl)-
5-Formyl-3-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester was obtained as a white solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.36 (br s, 1H, COOH), 12.01 (br s, 1H, NH)
, 9.77 (s, 1H, CHO), 4.27 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 2.89 (t, J = 7.6
Hz, 2H, CH 2 CH 2 ), 2.37 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH 2 CH 2 ), 2.21 (s, 3H, CH 3 ), 1
.30 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 253 [M + ].

【０２６６】４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−ピロ
ール−３−カルボン酸エチルエステル ４−（２−カルボキシエチル）−３−エトキシカルボニル−２−メチルピロー
ル（２ｇ，８．８８ｍｍｏｌ）（Ｂｕｌｔｅｒ，Ａ．Ｒ．，ａｎｄＧｅｏｒｇｅ
，Ｓ．Ｄ．（１９９３）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ４９：７０１７−７０２６）
の１８ｍＬのＤＭＦ中の懸濁液に，１．７３ｇ（１０．６５ｍｍｏｌ）の１，１
'−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）を加え，続いてＴＨＦ中の８．９ｍＬ
（１７．７６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ中２Ｍジメチルアミンを滴加した。２時間撹拌
した後，反応液を水（２００ｍＬ）で希釈し，冷却した。形成した沈殿物を濾過
により回収し，水で洗浄し，乾燥して，１．０ｇの生成物を白色結晶固体として
得た。濾液をＥｔＯＡｃで抽出し，有機層をブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮し
て，さらに０．９ｇの生成物を得，合計して１．９ｇの４−（２−ジメチル−カ
ルバモイル−エチル）−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエ
ステル（８５％）を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.89 (br s, 1H, NH), 6.40 (d, J = 2.5 Hz, 1
H), 4.13 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.92 (s, 3H, NCH3), 2.79 (s, 3H,
NCH3), 2.75 (m, 2H, CH2CH2), 2.45 (m, 2H, CH2CH2), 2.35 (s, 3H, CH3), 1.
23 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 252 [M+]. 4- (3-dimethylaminopropyl) -5-formyl-2-methyl-1H-pyro
Toluene -3-carboxylic acid ethyl ester 4- (2-carboxyethyl) -3-ethoxycarbonyl-2-methylpyrrole (2 g, 8.88 mmol) (Bulter, AR, and George)
, S .; D. (1993) Tetrahedron 49: 7017-7026).
To a suspension in 18 mL of DMF was added 1.73 g (10.65 mmol) of 1,1
'-Carbonyldiimidazole (CDI) was added, followed by 8.9 mL in THF.
(17.76 mmol) of 2M dimethylamine in THF was added dropwise. After stirring for 2 hours, the reaction was diluted with water (200 mL) and cooled. The precipitate formed was collected by filtration, washed with water and dried to give 1.0 g of the product as a white crystalline solid. The filtrate was extracted with EtOAc and the organic layer was washed with brine, dried and concentrated to give an additional 0.9 g of product, for a total of 1.9 g of 4- (2-dimethyl-carbamoyl-ethyl). -2-Methyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester (85%) was obtained. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.89 (br s, 1H, NH), 6.40 (d, J = 2.5 Hz, 1
H), 4.13 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 2.92 (s, 3H, NCH 3 ), 2.79 (s, 3H,
NCH 3 ), 2.75 (m, 2H, CH 2 CH 2 ), 2.45 (m, 2H, CH 2 CH 2 ), 2.35 (s, 3H, CH 3 ), 1.
23 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 252 [M + ].

【０２６７】 ４−（２−ジメチルカルバモイル−エチル）−２−メチル−１Ｈ−ピロール−
３−カルボン酸エチルエステル（１．０１ｇ，４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９ｍＬ）
の異成分混合物に，８ｍＬのボラン−テトラヒドロフラン複合体（１Ｍ，ＴＨＦ
中）を滴加した。混合物を一夜還流した。次に，９．０ｍＬのＭｅＯＨを反応液
にゆっくり加え，さらに２時間還流を続けた。反応混合物を冷却し，１ＮＨＣｌ
で急冷し，ＥｔＯＡｃで抽出した。水性層を水性ＫＯＨで塩基性にし，ＥｔＯＡ
ｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物をブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮して，６１
６ｍｇ（６５％）の４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−１Ｈ−
ピロール−３−カルボン酸エチルエステルをわずかに橙色の油状物として得た。 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.84 (br s, 1H, NH), 6.36 (d, J = 2.5 Hz, 1
H), 4.12 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.52 (m, 2H, CH2), 2.34 (s, 3H, C
H3), 2.17 (m, 2H, CH2), 2.08 (s, 6H, N(CH3)2), 1.57 (m, 2H, CH2CH2 CH2),
1.23 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 238 [M+].4- (2-Dimethylcarbamoyl-ethyl) -2-methyl-1H-pyrrole-
3-Carboxylic acid ethyl ester (1.01 g, 4 mmol) in THF (9 mL)
8 mL of borane-tetrahydrofuran complex (1M, THF)
) Was added dropwise. The mixture was refluxed overnight. Next, 9.0 mL of MeOH was added to the reaction mixture.
And refluxed for another 2 hours. Cool the reaction mixture and add 1N HCl
And quenched with EtOAc. The aqueous layer is basified with aqueous KOH and EtOA
Extracted with c. The EtOAc extract was washed with brine, dried, and concentrated to 61
6 mg (65%) of 4- (3-dimethylaminopropyl) -2-methyl-1H-
Pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester was obtained as a slightly orange oil. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.84 (br s, 1H, NH), 6.36 (d, J = 2.5 Hz, 1
H), 4.12 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCHTwoCHThree), 2.52 (m, 2H, CHTwo), 2.34 (s, 3H, C
HThree), 2.17 (m, 2H, CHTwo), 2.08 (s, 6H, N (CHThree)Two), 1.57 (m, 2H, CHTwoCHTwo CHTwo),
 1.23 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCHTwoCHThree). MS-EI m / z 238 [M+].

【０２６８】 ４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カ
ルボン酸エチルエステル（６００ｍｇ，２．５ｍｍｏｌ）を，ＰＯＣＩおよびＤ
ＭＦを用いてホルミル化して，６４５ｍｇ（９６％）の４−（３−ジメチルアミ
ノ−プロピル）−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸
エチルエステルを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.15 (br s, 1H, NH), 9.59 (s, 1H, CHO), 4.1
9 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.93 (m, 2H, CH2), 2.41 (s, 3H, CH3), 2.
18 (m, 2H, CH2), 2.09 (s, 6H, N(CH3)2), 1.63 (m, 2H, CH2CH2 CH2), 1.27 (
t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 266 [M+].Ethyl 4- (3-dimethylaminopropyl) -2-methyl-1H-pyrrole-3-carboxylate (600 mg, 2.5 mmol) was added to POCI and D
Formylation with MF provided 645 mg (96%) of 4- (3-dimethylamino-propyl) -5-formyl-2-methyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.15 (br s, 1H, NH), 9.59 (s, 1H, CHO), 4.1
9 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 2.93 (m, 2H, CH 2 ), 2.41 (s, 3H, CH 3 ), 2.
18 (m, 2H, CH 2 ), 2.09 (s, 6H, N (CH 3 ) 2 ), 1.63 (m, 2H, CH 2 CH 2 CH 2 ), 1.27 (
t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 266 [M + ].

【０２６９】３−（３−ジメチルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒ
ド エチルインドール−２−カルボキシレート（１０ｇ，５２．８ｍｍｏｌ）をＰ
ＯＣｌ3（１．３等量）およびＤＭＦ（１．３等量）を用いて上述のようにホル
ミル化して，３−ホルミル−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸エチルエステル
を白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.0 (br s, 1H, NH), 10.6 (s, 1H, CHO), 8.24
(dd, J = 0.7 & 8.0 Hz, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.38 (m, 1H), 7.26 (m, 1H), 4
.44 (q, J = 7.12 Hz, 2H, OCH2CH3), 1.39 (t, J = 7.12 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 217 [M+]. 3- (3-Dimethylaminopropyl) -1H-indole-2-carbaldehyde
De-ethyl-2-carboxylate (10 g, 52.8 mmol) and P
OCl 3 (1.3 eq) and formylated as described above using DMF (1.3 eq) to give 3-formyl -1H- indole-2-carboxylic acid ethyl ester as a white solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.0 (br s, 1H, NH), 10.6 (s, 1H, CHO), 8.24
(dd, J = 0.7 & 8.0 Hz, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.38 (m, 1H), 7.26 (m, 1H), 4
.44 (q, J = 7.12 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 1.39 (t, J = 7.12 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 217 [M + ].

【０２７０】 ブチルリチウム（１．１等量）を，０℃で，ＴＨＦ中の臭化（２−ジメチルア
ミノエチル）トリフェニルホスホニウム（０．２Ｍ）の懸濁液に加えた。３０分
間撹拌した後，リチウムジエチルアミン（１．１等量）を滴加し，次に３−ホル
ミル−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸エチルエステル（３．９６ｇ，１８．
２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ中の冷懸濁液を加えた。得られた橙色懸濁液を１８時間撹
拌した。次に飽和塩化アンモニウムで反応を急冷し，ＤＣＭ中の１０％ＭｅＯＨ
で抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄し，乾燥し，濃縮して，３
−（３−ジメチルアミノプロペニル）−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸エチ
ルエステルを褐色を帯びた赤色のワックス状の固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.8 (br s, 1H, NH), 7.93 (d, 1H), 7.49 (d,
1H), 7.41 (d, 1H), 7.3 (t, 1H), 7.14 (t, 1H), 6.33-6.42 (m, 1H), 4.36 (q
, 2H, OCH2CH3), 3.38 (d, 2H, CH2), 2.44 (s, 6H, 2xCH3), 1.36 (t, 3H, OCH 2 CH3). MS-EI m/z 272 [M+].Butyllithium (1.1 equivalents) was added at 0 ° C. to the bromide (2-dimethylamine) in THF.
(Minoethyl) triphenylphosphonium (0.2M). 30 minutes
After stirring, lithium diethylamine (1.1 eq) was added dropwise, followed by
Mill-1H-indole-2-carboxylic acid ethyl ester (3.96 g, 18.
A cold suspension in THF (2 mmol) was added. The resulting orange suspension is stirred for 18 hours.
Stirred. The reaction is then quenched with saturated ammonium chloride and 10% MeOH in DCM
Extracted. The organic layer was washed with saturated sodium bicarbonate, dried, concentrated and concentrated.
-(3-dimethylaminopropenyl) -1H-indole-2-carboxylic acid ethyl
The ester was obtained as a brownish red waxy solid.1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.8 (br s, 1H, NH), 7.93 (d, 1H), 7.49 (d,
1H), 7.41 (d, 1H), 7.3 (t, 1H), 7.14 (t, 1H), 6.33-6.42 (m, 1H), 4.36 (q
, 2H, OCHTwoCHThree), 3.38 (d, 2H, CHTwo), 2.44 (s, 6H, 2xCHThree), 1.36 (t, 3H, OCH Two CHThree). MS-EI m / z 272 [M+].

【０２７１】 ３−（３−ジメチルアミノプロペニル）−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸
エチルエステルを，１０％パラジウム担持炭素を用いて水素化して，二重結合を
還元し，水素化リチウムアルミニウム（ＬＡＨ）でエステル基をアルコールに還
元して，［３−（３−ジメチルアミノ−プロピル）−１Ｈ−インドール−２−イ
ル］メタノールを橙色油状物として得た。Ethyl 3- (3-dimethylaminopropenyl) -1H-indole-2-carboxylate is hydrogenated using 10% palladium on carbon to reduce double bonds and remove lithium aluminum hydride (LAH ) To reduce the ester group to an alcohol to give [3- (3-dimethylamino-propyl) -1H-indol-2-yl] methanol as an orange oil.

【０２７２】 二酸化マグネシウム（１０等量）を［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−
１Ｈ−インドール−２−イル］メタノール（２．２ｇ）のＤＣＭ中の溶液に加え
た。混合物を室温で１８時間撹拌した。不溶性物質を濾過により除去し，濾液を
濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーを行い，３−（３−ジメチルアミノ
プロピル）−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒドをクリーム色固体として
得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.58 (br s, 1H, NH), 10.0 (s, 1H, CHO), 7.7
2 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.29 (t, 1H), 7.07 (t, 1H), 3.08 (t, 2H, CH2),
2.20 (t, 2H), 2.12 (s, 6H, 2xCH3), 1.73 (t, 2H, CH2). MS-EI m/z 230 [M+].The magnesium dioxide (10 equivalents) was converted to [3- (3-dimethylaminopropyl)-
1H-Indol-2-yl] methanol (2.2 g) in DCM. The mixture was stirred at room temperature for 18 hours. Insoluble materials were removed by filtration, and the filtrate was concentrated. The residue was subjected to column chromatography to give 3- (3-dimethylaminopropyl) -1H-indole-2-carbaldehyde as a cream solid. 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.58 (br s, 1H, NH), 10.0 (s, 1H, CHO), 7.7
2 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.29 (t, 1H), 7.07 (t, 1H), 3.08 (t, 2H, CH 2 ),
2.20 (t, 2H), 2.12 (s, 6H, 2xCH 3 ), 1.73 (t, 2H, CH 2 ). MS-EI m / z 230 [M + ].

【０２７３】アミノテトラヒドロインドールカルボアルデヒドの製造 ５−アミノレブリン酸塩酸塩（１等量），１，３−シクロヘキサンジオン（１
等量）および酢酸ナトリウム（２等量）の水（１Ｍ）中の混合物を１１０℃で４
−１２時間撹拌し，次に冷却する。形成した沈殿物を真空濾過により回収し，水
中３０％エタノールで洗浄し，真空下で乾燥して，アミド−ケト−テトラヒドロ
インドールを５０−７０％の収率で得る。 水素化リチウムアルミニウム（ＬＡＨ，４等量）を，適当なアミド−ケト−テ
トラヒドロインドール（１等量）のＴＨＦ中の懸濁液（０．５Ｍ）に滴加する。
混合物を一夜還流する。次に混合物を冷却し，ガスが発生しなくなるまで水を注
意深く加え，次に数滴の１５％ＮａＯＨ／水を加える。次に混合物を室温で０．
５時間撹拌し，濾過して不溶性物質を除去する。濾液を濃縮して，アミノ−テト
ラヒドロインドールを得る。アミノテトラヒドロインドールカルボアルデヒドの合成の例 以下のアミノテトラヒドロインドール−カルボアルデヒドの合成は，例示のた
めにのみ示され，いかなる意味においても本発明を限定するものと解釈すべきで
はない。３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル］−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 工程１：５−アミノレブリン酸塩酸塩（１．６８ｇ，１０ｍｍｏｌ），１，３−
シクロヘキサンジオン（１．１２ｇ，１０ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（１
．６４ｇ，２０ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）中の混合物を１１０℃で４時間撹拌
し，次に冷却した。形成した沈殿物を真空濾過により回収し，水中３０％エタノ
ールで洗浄し，真空下で乾燥して，１．７ｇ（８２％）の３−（４−オキソ−４
，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸を
得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.91 (br s, 1H, COOH), 10.99 (br s, 1H, NH)
, 6.45 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 2.76 (t, 2H, CH2), 2.69 (t, 2H, CH2), 2.44 (
t, 2H, CH2), 2.26 (t, 2H, CH2), 1.96 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 207 [M+].Preparation of aminotetrahydroindole carbaldehyde 5-aminolevulinic acid hydrochloride (1 equivalent), 1,3-cyclohexanedione (1 equivalent)
Equivalent) and sodium acetate (2 equiv.) In water (1M) at 110 ° C.
Stir for -12 hours, then cool. The precipitate formed is collected by vacuum filtration, washed with 30% ethanol in water and dried under vacuum to give the amide-keto-tetrahydroindole in 50-70% yield. Lithium aluminum hydride (LAH, 4 eq) is added dropwise to a suspension of the appropriate amide-keto-tetrahydroindole (1 eq) in THF (0.5 M).
Reflux the mixture overnight. The mixture is then cooled and water is carefully added until no more gas is evolved, then a few drops of 15% NaOH / water. The mixture is then brought to room temperature at 0.
Stir for 5 hours and filter to remove insoluble material. Concentrate the filtrate to give amino-tetrahydroindole. Examples of the Synthesis of Aminotetrahydroindolecarbaldehyde The following synthesis of aminotetrahydroindole-carbaldehyde is given by way of example only and should not be construed as limiting the invention in any way. 3- [3- (4-methylpiperazin-1-yl) propyl] -4,5,6,7-
Tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde Step 1: 5-aminolevulinic acid hydrochloride (1.68 g, 10 mmol), 1,3-
Cyclohexanedione (1.12 g, 10 mmol) and sodium acetate (1
. (64 g, 20 mmol) in water (10 mL) was stirred at 110 ° C. for 4 hours and then cooled. The precipitate formed was collected by vacuum filtration, washed with 30% ethanol in water, dried under vacuum and 1.7 g (82%) of 3- (4-oxo-4).
, 5,6,7-Tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionic acid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.91 (br s, 1H, COOH), 10.99 (br s, 1H, NH)
, 6.45 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 2.76 (t, 2H, CH 2 ), 2.69 (t, 2H, CH 2 ), 2.44 (
t, 2H, CH 2 ), 2.26 (t, 2H, CH 2 ), 1.96 (m, 2H, CH 2 ). MS-EI m / z 207 [M + ].

【０２７４】 工程２：１０ｇの工程１の生成物（４８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６０ｍＬ
）中の懸濁液に，９．３ｇ（５７．６ｍｍｏｌ）の１，１'−カルボニルジイミ
ダゾールを加えた。混合物を室温で２時間撹拌し，次に５．３ｍＬ（４８ｍｍｏ
ｌ）の１−メチルピペラジンおよび８．４ｍＬ（４８ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジイ
ソプロピル−エチルアミンを加えた。次に暗赤色の反応混合物を室温で一夜撹拌
した。次に反応液を水に注加し，有機層を分離し，ブラインで洗浄し，乾燥し，
濃縮して，８ｇ（５７％）の３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
３−オキソ−プロピル］−１，５，６，７−テトラヒドロインドール−４−オン
を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.97 (br s, 1H, NH), 6.47 (d, J = 2.0 Hz, 1
H), 3.43 (m, 4H, 2xCH2), 2.67-2.75 (m, 4H, 2xCH2), 2.51 (m, 2H, CH2), 2.
27 (m, 2H, CH2), 2.20 (m, 4H, 2xCH2), 2.15 (s, 3H, CH3), 1.97 (m, 2H, CH 2 ). MS-EI m/z 289 [M+].Step 2: 10 g of the product of Step 1 (48 mmol) in dichloromethane (60 mL)
) Was added to 9.3 g (57.6 mmol) of 1,1'-carbonyldiimidone.
Dazol was added. The mixture was stirred at room temperature for 2 hours, then 5.3 mL (48 mmol)
1) 1-methylpiperazine and 8.4 mL (48 mmol) of N, N-diyl
Sopropyl-ethylamine was added. Then stir the dark red reaction mixture at room temperature overnight
did. The reaction is then poured into water, the organic layer is separated, washed with brine, dried,
Concentrate to give 8 g (57%) of 3- [3- (4-methylpiperazin-1-yl)-.
3-oxo-propyl] -1,5,6,7-tetrahydroindol-4-one
I got1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.97 (br s, 1H, NH), 6.47 (d, J = 2.0 Hz, 1
H), 3.43 (m, 4H, 2xCHTwo), 2.67-2.75 (m, 4H, 2xCHTwo), 2.51 (m, 2H, CHTwo), 2.
27 (m, 2H, CHTwo), 2.20 (m, 4H, 2xCHTwo), 2.15 (s, 3H, CHThree), 1.97 (m, 2H, CH Two ). MS-EI m / z 289 [M+].

【０２７５】 工程３：ＬＡＨ（２．６ｇ，６８ｍｍｏｌ）を，３−［３−（４−メチルピペラ
ジン−１−イル）−３−オキソ−プロピル］−１，５，６，７−テトラヒドロイ
ンドール−４−オン（５ｇ，１７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３００ｍＬ）中の懸濁液
に滴加した。次に混合物を一夜還流した。次に混合物を冷却し，各２．６ｍＬの
水，続いて数滴の１５％ＮａＯＨを加えた。反応液を室温で３０分間撹拌し，次
に濾過して不溶性物質を除去した。濾液を濃縮して，４．５ｇ（１００％）の３
−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル］−４，５，６，７−テ
トラヒドロ−１Ｈ−インドールを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.79 (br s, 1H, NH), 6.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H
), 2.44 (m, 2H, CH2), 2.21-2.3 (m, 14H, 7xCH2), 2.12 (s, 3H, CH3), 1.65
(m, 4H, 2xCH2), 1.53 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 261 [M+].Step 3: LAH (2.6 g, 68 mmol) was added to 3- [3- (4-methylpiperazin-1-yl) -3-oxo-propyl] -1,5,6,7-tetrahydroindole- A suspension of 4-one (5 g, 17 mmol) in THF (300 mL) was added dropwise. The mixture was then refluxed overnight. The mixture was then cooled and 2.6 mL each of water was added, followed by a few drops of 15% NaOH. The reaction was stirred at room temperature for 30 minutes and then filtered to remove insoluble material. The filtrate was concentrated to 4.5 g (100%) of 3
-[3- (4-Methylpiperazin-1-yl) propyl] -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole was obtained. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.79 (br s, 1H, NH), 6.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H
), 2.44 (m, 2H, CH 2 ), 2.21-2.3 (m, 14H, 7xCH 2 ), 2.12 (s, 3H, CH 3 ), 1.65
(m, 4H, 2xCH 2 ), 1.53 (m, 2H, CH 2 ). MS-EI m / z 261 [M + ].

【０２７６】 工程４：ＰＯＣｌ3（１．８ｍＬ，１８．９ｍｍｏｌ）を，Ｎ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド（ＤＭＦ，３．８ｍＬ，５１．６ｍｍｏｌ）に−５℃で滴加した。次
に混合物を室温になるまで放置し，次に３０分間撹拌し，その後，再び−５℃に
冷却した。３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−プロピル］−４，
５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール（４．５ｇ，１７．２ｍｍｏｌ）
のＤＭＦ（９ｍＬ）中の溶液を滴加した。混合物を再び室温になるまで放置し，
次にその温度で一夜撹拌した。次に反応を氷で急冷し，１０ＮＮａＯＨでｐＨを
１０−１１に調節した。室温で１時間撹拌した後，反応液を酢酸エチル（ＥｔＯ
Ａｃ）で抽出し，有機層を分離し，ブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮して，３．
１ｇ（６２％）の３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−プロピル］
−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒドを
得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.24 (br, s, 1H, NH), 9.42 (s, 1H, CHO), 2.
60 (t, 2H, CH2), 2.51 (m, 2H, CH2), 2.35 (m, 2H, CH2), 2.28 (m, 8H, 4xCH 2 ), 2.21 (m, 2H, CH2), 2.12 (s, 3H, CH3), 1.57-1.68 (m, 6H, 3xCH2). MS-EI m/z 289 [M+].Step 4: POClThree(1.8 mL, 18.9 mmol) in N, N-dimethylphos.
Lumamide (DMF, 3.8 mL, 51.6 mmol) was added dropwise at -5 ° C. Next
The mixture is left to reach room temperature and is then stirred for 30 minutes, after which it is again brought to -5 ° C.
Cool. 3- [3- (4-methylpiperazin-1-yl) -propyl] -4,
5,6,7-tetrahydro-1H-indole (4.5 g, 17.2 mmol)
Of DMF (9 mL) was added dropwise. The mixture is left to reach room temperature again,
Then it was stirred at that temperature overnight. The reaction is then quenched on ice and the pH is adjusted with 10 N NaOH.
Adjusted to 10-11. After stirring at room temperature for 1 hour, the reaction solution was washed with ethyl acetate (EtO
2. Extract with Ac), separate the organic layer, wash with brine, dry and concentrate;
1 g (62%) of 3- [3- (4-methylpiperazin-1-yl) -propyl]
-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde
Obtained.1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.24 (br, s, 1H, NH), 9.42 (s, 1H, CHO), 2.
60 (t, 2H, CHTwo), 2.51 (m, 2H, CHTwo), 2.35 (m, 2H, CHTwo), 2.28 (m, 8H, 4xCH Two ), 2.21 (m, 2H, CHTwo), 2.12 (s, 3H, CHThree), 1.57-1.68 (m, 6H, 3xCHTwo). MS-EI m / z 289 [M+].

【０２７７】３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−
インドール−２−カルボアルデヒド 方法は実施例Ａで用いた方法と同じであるが，ただし，工程２のアミンはジメ
チルアミン（２．０Ｍ溶液，テトラヒドロフラン中）であった。 工程２：Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.0 (br s, 1H, NH), 6.48 (d, J = 1.6 Hz, 1H
), 2.95 (s, 3H, CH3), 2.79 (s, 3H, CH3), 2.71 (m, 4H, 2xCH2), 2.47 (m, 2
H, CH2), 2.27 (t, 2H, CH2), 1.96 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 234 [M+]. 3- (3-dimethylaminopropyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-
The indole-2-carbaldehyde method was the same as that used in Example A, except that the amine in step 2 was dimethylamine (2.0 M solution in tetrahydrofuran). Step 2: N, N-dimethyl-3- (4-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionamide: 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.0 (br s, 1H, NH), 6.48 (d, J = 1.6 Hz, 1H
), 2.95 (s, 3H, CH 3 ), 2.79 (s, 3H, CH 3 ), 2.71 (m, 4H, 2xCH 2 ), 2.47 (m, 2
H, CH 2 ), 2.27 (t, 2H, CH 2 ), 1.96 (m, 2H, CH 2 ). MS-EI m / z 234 [M + ].

【０２７８】 工程３：ジメチル−［３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール
−３−イル）プロピル］アミン：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.83 (br s, 1H, NH), 6.22 (d, J = 2.3 Hz, 1H
), 2.43 (m, 2H, CH2), 2.28 (m, 2H, CH2), 2.14-2.25 (m, 4H, CH2), 2.08 (s
, 6H, N(CH3)2), 1.64 (m, 4H, 2xCH2), 1.53 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 206 [M+].Step 3: Dimethyl- [3- (4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) propyl] amine: 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.83 (br s, 1H, NH), 6.22 (d, J = 2.3 Hz, 1H
), 2.43 (m, 2H, CH 2 ), 2.28 (m, 2H, CH 2 ), 2.14-2.25 (m, 4H, CH 2 ), 2.08 (s
, 6H, N (CH 3 ) 2 ), 1.64 (m, 4H, 2xCH 2 ), 1.53 (m, 2H, CH 2 ). MS-EI m / z 206 [M + ].

【０２７９】 工程４：３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.29 (br, s, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, CHO), 2.
59 (t, 2H, CH2), 2.5 (m, 2H, CH2), 2.34 (m, 2H, CH2), 2.16 (m, 2H, CH2),
2.08 (s, 6H, N(CH3)2), 1.67 (m, 4H, 2xCH2), 1.56 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 234 [M+].Step 4: 3- (3-Dimethylaminopropyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde: 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.29 (br, s, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, CHO), 2.
59 (t, 2H, CH 2 ), 2.5 (m, 2H, CH 2 ), 2.34 (m, 2H, CH 2 ), 2.16 (m, 2H, CH 2 ),
2.08 (s, 6H, N (CH 3 ) 2 ), 1.67 (m, 4H, 2xCH 2 ), 1.56 (m, 2H, CH 2 ). MS-EI m / z 234 [M + ].

【０２８０】３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 用いた方法は実施例Ａの方法と同じであるが，ただし，工程２で用いたアミン
はピロリジンであった。 工程２：３−（３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−１，５，６
，７−テトラヒドロインドール−４−オン：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.05 (br s, 1H, NH), 6.46 (d, J = 1.5 Hz, 1
H), 3.35 (m, 2H, CH2), 2.24 (m, 2H, CH2), 2.66-2.73 (m, 4H, 2xCH2), 2.44
(m, 2H, CH2), 2.26 (m, 2H, CH2), 1.96 (m, 2H, CH2), 1.82 (m, 2H, CH2),
1.73 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 260 [M+]. 3- (3-pyrrolidin-1-ylpropyl) -4,5,6,7-tetrahydro-
The method using 1H-indole-2-carbaldehyde was the same as the method in Example A, except that the amine used in step 2 was pyrrolidine. Step 2: 3- (3-oxo-3-pyrrolidin-1-ylpropyl) -1,5,6
, 7-Tetrahydroindol-4-one: 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.05 (br s, 1H, NH), 6.46 (d, J = 1.5 Hz, 1
H), 3.35 (m, 2H, CH 2 ), 2.24 (m, 2H, CH 2 ), 2.66-2.73 (m, 4H, 2xCH 2 ), 2.44
(m, 2H, CH 2 ), 2.26 (m, 2H, CH 2 ), 1.96 (m, 2H, CH 2 ), 1.82 (m, 2H, CH 2 ),
1.73 (m, 2H, CH 2 ). MS-EI m / z 260 [M + ].

【０２８１】 工程３：３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，５，６，７−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−インドール：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.82 (br s, 1H, NH), 6.22 (s, 1H), 2.2-2.5 (
m, 12H, 6xCH2), 1.5-1.64(m, 10H, 5xCH2). MS-EI m/z 232 [M+].Step 3: 3- (3-Pyrrolidin-1-ylpropyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole: 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.82 (br s, 1H , NH), 6.22 (s, 1H), 2.2-2.5 (
m, 12H, 6xCH 2), 1.5-1.64 (m, 10H, 5xCH 2). MS-EI m / z 232 [M +].

【０２８２】 工程４：３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，５，６，７−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.28 (br, s, 1H, NH), 9.38 (s, 1H, CHO), 2.
59 (t, 2H, CH2), 2.46 (m, 2H, CH2), 2.3-2.44 (m, 8H, 4xCH2), 1.55-1.65 (
m, 10H, 5xCH2). MS-EI m/z 260 [M+].Step 4: 3- (3-Pyrrolidin-1-ylpropyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde: 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.28 (br, s, 1H, NH), 9.38 (s, 1H, CHO), 2.
59 (t, 2H, CH 2 ), 2.46 (m, 2H, CH 2 ), 2.3-2.44 (m, 8H, 4xCH 2 ), 1.55-1.65 (
m, 10H, 5xCH 2 ). MS-EI m / z 260 [M + ].

【０２８３】３−（３−ジエチルアミノ−プロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ
−インドール−２−カルボアルデヒド 方法は実施例Ａの方法と同じであるが，ただし，用いたアミンはジエチルアミ
ンであった。 工程２：Ｎ，Ｎ−ジエチル−３−（４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.0 (br s, 1H, NH), 6.47 (d, J = 2.0 Hz, 1H
), 3.24 (m, 4H, N(CH2CH3)2), 2.69 (m, 4H, 2xCH2), 2.46 (m, 2H, CH2), 2.2
7 (m, 2H, CH2), 1.96 (m, 2H, CH2), 1.04 (t, J = 7.0 Hz, 3H, NCH2CH3), 0.
98 (t, J = 7.0 Hz, 3H, NCH2CH3). 3- (3-Diethylamino-propyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H
The method for indole-2-carbaldehyde was the same as that of Example A, except that the amine used was diethylamine. Step 2: N, N-diethyl-3- (4-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionamide: 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.0 (br s, 1H, NH), 6.47 (d, J = 2.0 Hz, 1H
), 3.24 (m, 4H, N (CH 2 CH 3 ) 2 ), 2.69 (m, 4H, 2xCH 2 ), 2.46 (m, 2H, CH 2 ), 2.2
7 (m, 2H, CH 2 ), 1.96 (m, 2H, CH 2 ), 1.04 (t, J = 7.0 Hz, 3H, NCH 2 CH 3 ), 0.
98 (t, J = 7.0 Hz, 3H, NCH 2 CH 3 ).

【０２８４】 工程３：ジエチル−［３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール
−３−イル）−プロピル］−アミン：1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.83 (br s, 1H, NH), 6.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H
), 2.19-2.44 (m, 12H, 6xCH2), 1.64(m, 4H, 2xCH2), 1.51 (m, 2H, CH2), 0.9
0 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). MS-EI m/z 234 [M+].Step 3: Diethyl- [3- (4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propyl] -amine: 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.83 (br s, 1H, NH), 6.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H
), 2.19-2.44 (m, 12H, 6xCH 2 ), 1.64 (m, 4H, 2xCH 2 ), 1.51 (m, 2H, CH 2 ), 0.9
0 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N (CH 2 CH 3 ) 2 ). MS-EI m / z 234 [M + ].

【０２８５】 工程４：３−（３−ジエチルアミノプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド：1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.24 (br, s, 1H, NH), 9.42 (s, 1H, CHO), 2.
59 (t, 2H, CH2), 2.34-2.53 (m, 10H, 5xCH2), 1.67 (m, 4H, 2xCH2), 1.57 (m
, 2H, CH2), 0.91 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). MS-EI m/z 262 [M+].Step 4: 3- (3-Diethylaminopropyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde: 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.24 (br, s , 1H, NH), 9.42 (s, 1H, CHO), 2.
59 (t, 2H, CH 2 ), 2.34-2.53 (m, 10H, 5xCH 2 ), 1.67 (m, 4H, 2xCH 2 ), 1.57 (m
, 2H, CH 2 ), 0.91 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N (CH 2 CH 3 ) 2 ). MS-EI m / z 262 [M + ].

【０２８６】３−（３−ジエチルアミノプロピル）−６，６−ジメチル−４，５，６，７−テ
トラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 工程１：５−アミノレブリン酸塩酸塩（１．６８ｇ，１０ｍｍｏｌ），５，５−
ジメチル−１，３−シクロヘキサンジオン（１．４ｇ，１０ｍｍｏｌ）および酢
酸ナトリウム（１．６４ｇ，２０ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）中の混合物を，１
１０℃で４時間撹拌し，次に冷却した。形成した沈殿物を真空濾過により回収し
，水中３０％のエタノール（ＥｔＯＨ）で洗浄し，真空下で乾燥して，１．６ｇ
（６８％）の３−（４−オキソ−６−ジメチル−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル）プロピオン酸を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.89 (br s, 1H, COOH), 10.94 (br s, 1H, NH)
, 6.45 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 2.76 (t, 2H, CH2), 2.57 (s, 2H, CH2), 2.44 (
t, 2H, CH2), 2.16 (s, 2H, CH2), 0.99 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 235 [M+]. 3- (3-diethylaminopropyl) -6,6-dimethyl-4,5,6,7-te
Trahydro-1H-indole-2-carbaldehyde Step 1: 5-aminolevulinic acid hydrochloride (1.68 g, 10 mmol), 5,5-
A mixture of dimethyl-1,3-cyclohexanedione (1.4 g, 10 mmol) and sodium acetate (1.64 g, 20 mmol) in water (10 mL) was treated with 1
Stirred at 10 ° C. for 4 hours, then cooled. The precipitate formed is collected by vacuum filtration, washed with 30% ethanol in water (EtOH), dried under vacuum and 1.6 g
(68%) of 3- (4-oxo-6-dimethyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) propionic acid was obtained. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.89 (br s, 1H, COOH), 10.94 (br s, 1H, NH)
, 6.45 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 2.76 (t, 2H, CH 2 ), 2.57 (s, 2H, CH 2 ), 2.44 (
t, 2H, CH 2 ), 2.16 (s, 2H, CH 2 ), 0.99 (s, 6H, 2xCH 3 ). MS-EI m / z 235 [M + ].

【０２８７】 工程２：１．１８ｇ（５ｍｍｏｌ）の工程１の生成物のジクロロメタン（２５ｍ
Ｌ）中の懸濁液に，０．９７ｇ（６ｍｍｏｌ）のＣＤＩを加えた。室温で２時間
撹拌した後，２．１ｍＬ（２０ｍｍｏｌ）のジエチルアミンを加えた。混合物を
室温で一夜撹拌した。反応液を濃縮し，残渣をジクロロメタンに溶解し，ブライ
ンで洗浄し，乾燥し，濃縮して，１．２ｇ（８３％）の３−（６，６−ジメチル
−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）
−Ｎ，Ｎ−ジエチルプロピオンアミドを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.91 (br s, 1H, NH), 6.46 (s, 1H), 3.20-3.2
9 (m, 4H, 2xCH2), 2.72-2.76 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 2H, CH2), 2.45 (m, 2H
, CH2), 2.17 (s, 2H, CH2), 0.96-1.06 (m, 12H, 4xCH3). MS-EI m/z 290 [M+].Step 2: 1.18 g (5 mmol) of the product of Step 1 in dichloromethane (25 m
To the suspension in L) was added 0.97 g (6 mmol) of CDI. After stirring at room temperature for 2 hours, 2.1 mL (20 mmol) of diethylamine was added. The mixture was stirred overnight at room temperature. The reaction was concentrated, the residue was dissolved in dichloromethane, washed with brine, dried, and concentrated to give 1.2 g (83%) of 3- (6,6-dimethyl-4-oxo-4,5, 6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl)
-N, N-diethylpropionamide was obtained as a white solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.91 (br s, 1H, NH), 6.46 (s, 1H), 3.20-3.2
9 (m, 4H, 2xCH 2 ), 2.72-2.76 (m, 2H, CH 2 ), 2.57 (s, 2H, CH 2 ), 2.45 (m, 2H
, CH 2 ), 2.17 (s, 2H, CH 2 ), 0.96-1.06 (m, 12H, 4xCH 3 ). MS-EI m / z 290 [M + ].

【０２８８】 工程３：ＬＡＨ（０．５７ｇ，１５．１ｍｍｏｌ）を，３−（６，６−ジメチル
−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）
−Ｎ，Ｎ−ジエチルプロピオンアミド（１．１ｇ，３．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（
８０ｍＬ）中の懸濁液に滴加した。混合物を一夜還流した。反応液を冷却し，ガ
スが発生しなくなるまで氷を加えた。次に，数滴の水中１５％ＮａＯＨを加えた
。混合物を室温で３０分間撹拌し，次に濾過して不溶性物質を除去した。濾液を
濃縮して，０．９ｇの［３−（６，６−ジメチル−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピル］−ジエチル−アミンを淡黄色油
状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 2.19-2.44
(m, 14H, 7xCH2), 1.53 (m, 2H, CH2), 1.40 (m, 2H, CH2), 0.88-0.92 (m, 12
H, 4xCH3). MS-EI m/z 262 [M+].Step 3: LAH (0.57 g, 15.1 mmol) was added to 3- (6,6-dimethyl-4-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl)
-N, N-diethylpropionamide (1.1 g, 3.8 mmol) in THF (
(80 mL). The mixture was refluxed overnight. The reaction was cooled and ice was added until no more gas evolved. Next, a few drops of 15% NaOH in water were added. The mixture was stirred at room temperature for 30 minutes, then filtered to remove insoluble material. The filtrate was concentrated to give 0.9 g of [3- (6,6-dimethyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propyl] -diethyl-amine as a pale yellow oil. As obtained. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 2.19-2.44
(m, 14H, 7xCH 2 ), 1.53 (m, 2H, CH 2 ), 1.40 (m, 2H, CH 2 ), 0.88-0.92 (m, 12
H, 4xCH 3 ). MS-EI m / z 262 [M + ].

【０２８９】 工程４：ＰＯＣｌ3（０．３５ｍＬ，３．７４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（０．８ｍＬ
，１０．３ｍｍｏｌ）に−５℃で滴加した。室温で３０分間撹拌した後，混合物
を−５℃に冷却した。次に，［３−（６，６−ジメチル−４，５，６，７−テト
ラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピル］−ジエチルアミン（０．
９ｇ，３．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）中の溶液を滴加した。混合物を室温
で３時間撹拌し，次に氷で急冷し，１０ＮＫＯＨでｐＨを１０−１１に調節した
。室温で１時間撹拌した後，混合物をＥｔＯＡｃで抽出し，ブラインで洗浄し，
乾燥し，濃縮して，０．５５ｇの３−（３−ジエチルアミノプロピル）−６，６
−ジメチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボア
ルデヒドを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.23 (br, s, 1H, NH), 9.41 (s, 1H, CHO), 2.
61 (t, 2H, CH2), 2.30-2.43 (m, 10 H, 5x CH2), 1.58 (m, 2H, CH2), 1.45 (t
, 2H, CH2), 0.93 (s, 6H, 2xCH3), 0.89 (t, 6H, N(CH2CH3)2). MS-EI m/z 290 [M+].Step 4: POCl 3 (0.35 mL, 3.74 mmol) was added to DMF (0.8 mL)
, 10.3 mmol) at -5 ° C. After stirring at room temperature for 30 minutes, the mixture was cooled to -5 ° C. Next, [3- (6,6-dimethyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propyl] -diethylamine (0.
9 g, 3.4 mmol) in DMF (2 mL) was added dropwise. The mixture was stirred at room temperature for 3 hours, then quenched with ice and the pH was adjusted to 10-11 with 10 NKOH. After stirring at room temperature for 1 hour, the mixture was extracted with EtOAc, washed with brine,
Dry and concentrate 0.55 g of 3- (3-diethylaminopropyl) -6,6
-Dimethyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde was obtained. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.23 (br, s, 1H, NH), 9.41 (s, 1H, CHO), 2.
61 (t, 2H, CH 2 ), 2.30-2.43 (m, 10 H, 5x CH 2 ), 1.58 (m, 2H, CH 2 ), 1.45 (t
, 2H, CH 2 ), 0.93 (s, 6H, 2xCH 3 ), 0.89 (t, 6H, N (CH 2 CH 3 ) 2 ). MS-EI m / z 290 [M + ].

【０２９０】６，６−ジメチル−３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 用いた方法は実施例Ｅの方法と同じであるが，ただし，工程２で用いたアミン
はピロリジンであった。 工程２：６，６−ジメチル−３−（３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロ
ピル）−１，５，６，７−テトラヒドロインドール−４−オン1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.90 (br s, 1H, NH), 6.46 (s, 1H), 3.34 (t,
2H, CH2), 3.25 (t, 2H, CH2), 2.76 (m, 2H, CH2), 2.58 (s, 2H, CH2), 2.43
(m, 2H, CH2), 2.17 (s, 2H, CH2), 1.74-1-1.74 (m, 4H, 2xCH2), 1.00 (s, 6
H, 2xCH3). MS-EI m/z 288 [M+]. 6,6-Dimethyl-3- (3-pyrrolidin-1-ylpropyl) -4,5,6
The method using 7-tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde was the same as the method in Example E, except that the amine used in step 2 was pyrrolidine. Step 2: 6,6-dimethyl-3- (3-oxo-3-pyrrolidin-1-ylpropyl) -1,5,6,7-tetrahydroindol-4-one 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.90 (br s, 1H, NH), 6.46 (s, 1H), 3.34 (t,
2H, CH 2 ), 3.25 (t, 2H, CH 2 ), 2.76 (m, 2H, CH 2 ), 2.58 (s, 2H, CH 2 ), 2.43
(m, 2H, CH 2 ), 2.17 (s, 2H, CH 2 ), 1.74-1-1.74 (m, 4H, 2xCH 2 ), 1.00 (s, 6
H, 2xCH 3 ). MS-EI m / z 288 [M + ].

【０２９１】 工程３：６，６−ジメチル−３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，
５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.23 (d, 1H), 2.22-2.37
(m, 12H, 6xCH2), 1.55-1.66 (m, 6H, 3xCH2), 1.40 (m, 2H, CH2), 0.92 (s,
6H, 2xCH3). MS-EI m/z 260 [M+].Step 3: 6,6-Dimethyl-3- (3-pyrrolidin-1-ylpropyl) -4,
5,6,7-tetrahydro-1H-indole 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (brs, 1H, NH), 6.23 (d, 1H), 2.22-2.37
(m, 12H, 6xCH 2 ), 1.55-1.66 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1.40 (m, 2H, CH 2 ), 0.92 (s,
6H, 2xCH 3 ). MS-EI m / z 260 [M + ].

【０２９２】 工程４：６，６−ジメチル−３−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）−４，
５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (br, s, 1H, NH), 9.41 (s, 1H, CHO), 2.
64 (t, 2H, CH2), 2.31-2.38 (m, 10 H, 5x CH2), 1.59-1.67 (m, 6H, 3xCH2),
1.46 (t, 2H, CH2), 0.93 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 288 [M+].Step 4: 6,6-dimethyl-3- (3-pyrrolidin-1-ylpropyl) -4,
5,6,7-tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (br, s, 1H, NH), 9.41 (s, 1H, CHO), 2.
64 (t, 2H, CH 2 ), 2.31-2.38 (m, 10 H, 5x CH 2 ), 1.59-1.67 (m, 6H, 3xCH 2 ),
1.46 (t, 2H, CH 2 ), 0.93 (s, 6H, 2xCH 3 ). MS-EI m / z 288 [M + ].

【０２９３】６，６−ジメチル−３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−プロピル
］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド
用いた方法は実施例Ｅの方法と同じであるが，ただし，工程２のアミンは１− メチルピペラジンであった。 工程２：６，６−ジメチル−３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
３−オキソ−プロピル］−１，５．６．７−テトラヒドロインドール−４−オン 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.93 (br s, 1H, NH), 6.48 (s, 1H), 3.42 (m,
4H, 2xCH2), 3.73 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 2H, CH2), 2.48 (m, 2H, CH2), 2.
21 (m, 4H, 2xCH2), 2.17 (s, 2H, CH2), 2.15 (s, 3H, CH3), 1.00 (s, 6H, 2x
CH3). MS-EI m/z 317 [M+].[0293]6,6-dimethyl-3- [3- (4-methylpiperazin-1-yl) -propyl
] -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde
 The method used was the same as that of Example E, except that the amine in step 2 was 1-methylpiperazine. Step 2: 6,6-dimethyl-3- [3- (4-methylpiperazin-1-yl)-
3-oxo-propyl] -1,5.6.7-tetrahydroindol-4-one 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.93 (br s, 1H, NH), 6.48 (s, 1H), 3.42 (m,
 4H, 2xCHTwo), 3.73 (m, 2H, CHTwo), 2.57 (s, 2H, CHTwo), 2.48 (m, 2H, CHTwo), 2.
21 (m, 4H, 2xCHTwo), 2.17 (s, 2H, CHTwo), 2.15 (s, 3H, CHThree), 1.00 (s, 6H, 2x
CHThree). MS-EI m / z 317 [M+].

【０２９４】 工程３：６，６−ジメチル−３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
プロピル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.74 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 2.21-2.30
(m, 16H, 8xCH2), 2.12 (s, 3H, CH3), 1.56 (m, 2H, CH2), 1.40 (m, 2H, CH2 ), 0.92 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 289 [M+].Step 3: 6,6-Dimethyl-3- [3- (4-methylpiperazin-1-yl)-
Propyl] -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.74 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 2.21-2.30
(m, 16H, 8xCH 2) , 2.12 (s, 3H, CH 3), 1.56 (m, 2H, CH 2), 1.40 (m, 2H, CH 2), 0.92 (s, 6H, 2xCH 3). MS -EI m / z 289 [M + ].

【０２９５】 工程４：６，６−ジメチル−３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
ピロリル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボア
ルデヒド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.21 (br, s, 1H, NH), 9.42 (s, 1H, CHO), 2.
62 (t, 2H, CH2), 2.18-2.37 (m, 14 H, 7x CH2), 2.12 (s, 3H, CH3), 1.61 (m
, 2H, CH2), 1.45 (t, 2H, CH2), 0.93 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 317 [M+].Step 4: 6,6-Dimethyl-3- [3- (4-methylpiperazin-1-yl)-
Pyrrolyl] -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.21 (br, s, 1H, NH), 9.42 (s, 1H, CHO ), 2.
62 (t, 2H, CH 2 ), 2.18-2.37 (m, 14 H, 7x CH 2 ), 2.12 (s, 3H, CH 3 ), 1.61 (m
, 2H, CH 2 ), 1.45 (t, 2H, CH 2 ), 0.93 (s, 6H, 2xCH 3 ). MS-EI m / z 317 [M + ].

【０２９６】６，６−ジメチル−３−（３−モルホリン−４−イルプロピル）−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 用いた方法は実施例Ｅの方法と同じであるが，ただし，用いたアミンはモルホ
リンであった。 工程２：６，６−ジメチル−３−（３−モルホリン−４−イル−３−オキソプロ
ピル）−１，５，６，７−テトラヒドロインドール−４−オン1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.94 (br s, 1H, NH), 6.49 (s, 1H), 3.42-3.5
0 (m, 8H, 4xCH2), 2.74 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 2H, CH2), 2.48 (m, 2H, CH2 ), 2.17 (s, 2H, CH2), 1.00 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 304 [M+]. 6,6-Dimethyl-3- (3-morpholin-4-ylpropyl) -4,5,6
The procedure using 7-tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde was the same as that of Example E, except that the amine used was morpholine. Step 2: 6,6-Dimethyl-3- (3-morpholin-4-yl-3-oxopropyl) -1,5,6,7-tetrahydroindol-4-one 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.94 (br s, 1H, NH), 6.49 (s, 1H), 3.42-3.5
0 (m, 8H, 4xCH 2 ), 2.74 (m, 2H, CH 2 ), 2.57 (s, 2H, CH 2 ), 2.48 (m, 2H, CH 2 ), 2.17 (s, 2H, CH 2 ), 1.00 (s, 6H, 2xCH 3 ). MS-EI m / z 304 [M + ].

【０２９７】 工程３：６，６−ジメチル−３−（３−モルホリン−４−イルプロピル）−４，
５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 3.54 (m,
4H, 2xCH2), 2.23-2.31 (m, 12H, 6xCH2), 1.58 (m, 2H, CH2), 1.40 (m, 2H, C
H2), 0.92 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 276 [M+].Step 3: 6,6-dimethyl-3- (3-morpholin-4-ylpropyl) -4,
5,6,7-tetrahydro-1H-indole 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 3.54 (m,
4H, 2xCH 2 ), 2.23-2.31 (m, 12H, 6xCH 2 ), 1.58 (m, 2H, CH 2 ), 1.40 (m, 2H, C
H 2 ), 0.92 (s, 6H, 2xCH 3 ). MS-EI m / z 276 [M + ].

【０２９８】 工程４：６，６−ジメチル−３−（３−モルホリン−４−−イルプロピル）−４
，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (br, s, 1H, NH), 9.43 (s, 1H, CHO), 3.
54 (m, 4H, 2xCH2), 2.63 (t, 2H, CH2), 2.20-2.37 (m, 10 H, 5xCH2), 1.62 (
m, 2H, CH2), 1.45 (t, 2H, CH2), 0.93 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 304 [M+].Step 4: 6,6-Dimethyl-3- (3-morpholin-4-ylpropyl) -4
, 5,6,7-Tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (br, s, 1H, NH), 9.43 (s, 1H, CHO), 3.
54 (m, 4H, 2xCH 2 ), 2.63 (t, 2H, CH 2 ), 2.20-2.37 (m, 10 H, 5xCH 2 ), 1.62 (
m, 2H, CH 2 ), 1.45 (t, 2H, CH 2 ), 0.93 (s, 6H, 2xCH 3 ). MS-EI m / z 304 [M + ].

【０２９９】３−（３−ジメチルアミノプロピル）−６，６−ジメチル−４，５，６，７−テ
トラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド 方法は実施例Ｅの方法と同じであるが，ただし，用いたアミンはジメチルアミ
ンであった。 工程２：３−（６，６−ジメチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロピオンアミド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.93 (br s, 1H, NH), 6.48 (s, 1H), 2.94 (s,
3H, CH3), 2.79 (s, 3H, CH3), 2.72 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 2H, CH2), 2.48
(m, 2H, CH2), 2.17 (s, 2H, CH2), 1.00 (m, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 262 [M+]. 3- (3-dimethylaminopropyl) -6,6-dimethyl-4,5,6,7-te
The trahydro-1H-indole-2-carbaldehyde method was the same as that of Example E, except that the amine used was dimethylamine. Step 2: 3- (6,6-dimethyl-4-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -N, N-dimethylpropionamide 1 HNMR (360 MHz, DMSO- d6) δ 10.93 (br s, 1H, NH), 6.48 (s, 1H), 2.94 (s,
3H, CH 3 ), 2.79 (s, 3H, CH 3 ), 2.72 (m, 2H, CH 2 ), 2.57 (s, 2H, CH 2 ), 2.48
(m, 2H, CH 2) , 2.17 (s, 2H, CH 2), 1.00 (m, 6H, 2xCH 3). MS-EI m / z 262 [M +].

【０３００】 工程３：［３−（６，６−ジメチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−３−イル）−プロピル］ジメチルアミン1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 3.36 (m,
2H, CH2), 2.07-2.3 (m, 14H, 7xCH2), 1.53 (m, 2H, CH2), 1.40 (m, 2H, CH2)
, 0.92 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 234 [M+].Step 3: [3- (6,6-Dimethyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propyl] dimethylamine 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br s, 1H, NH), 6.24 (s, 1H), 3.36 (m,
2H, CH 2 ), 2.07-2.3 (m, 14H, 7xCH 2 ), 1.53 (m, 2H, CH 2 ), 1.40 (m, 2H, CH 2 )
, 0.92 (s, 6H, 2xCH 3 ). MS-EI m / z 234 [M + ].

【０３０１】 工程４：３−（３−ジメチルアミノプロピル）−６，６−ジメチル−４，５，６
，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボアルデヒド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (br s, 1H, NH), 9.41 (s, 1H, CHO), 2.6
2 (t, 2H, CH2), 2.36 (t, 2H, CH2), 2.30 (s, 2H, CH2), 2.21 (t, 2H, CH2),
2.12 (s, 6H, 2xCH3), 1.60 (m, 2H, CH2), 1.46 (t, 2H, CH2), 0.93 (s, 6H,
2xCH3). MS-EI m/z 262 [M+].Step 4: 3- (3-dimethylaminopropyl) -6,6-dimethyl-4,5,6
, 7-Tetrahydro-1H-indole-2-carbaldehyde 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (br s, 1H, NH), 9.41 (s, 1H, CHO), 2.6
2 (t, 2H, CH 2 ), 2.36 (t, 2H, CH 2 ), 2.30 (s, 2H, CH 2 ), 2.21 (t, 2H, CH 2 ),
2.12 (s, 6H, 2xCH 3 ), 1.60 (m, 2H, CH 2 ), 1.46 (t, 2H, CH 2 ), 0.93 (s, 6H,
2xCH 3 ). MS-EI m / z 262 [M + ].

【０３０２】アルデヒドとカルボン酸置換基を含有するオキシインドールとの縮合 適当なオキシインドール（１等量），１等量の適当なアルデヒドおよび１−３
等量のピペリジン（またはピロリジン）のエタノール（０．４Ｍ）中の混合物を
９０−１００℃で，薄層クロマトグラフィーにより示して反応が完了するまで撹
拌する。次に混合物を濃縮し，残渣を希塩酸中で砕く。得られた沈殿物を真空濾
過により回収し，水およびエタノールで洗浄し，乾燥して，生成物を得る。 Condensation of aldehyde with oxindole containing a carboxylic acid substituent Suitable oxindole (1 equivalent), 1 equivalent of appropriate aldehyde and 1-3
A mixture of an equal volume of piperidine (or pyrrolidine) in ethanol (0.4 M) is stirred at 90-100 ° C. until the reaction is complete as indicated by thin layer chromatography. Then the mixture is concentrated and the residue is triturated in dilute hydrochloric acid. The resulting precipitate is collected by vacuum filtration, washed with water and ethanol, and dried to give the product.

【０３０３】アルデヒドとカルボン酸置換基を含有しないオキシインドールとの縮合 適当なオキシインドール（１等量），１等量の適当なアルデヒドおよび１−３
等量のピペリジン（またはピロリジン）の，エタノール（０．４Ｍ）中の混合物
を９０−１００℃で，薄層クロマトグラフィーにより示して反応が完了するまで
撹拌する。混合物を室温に冷却し，形成した沈殿物を真空濾過により回収し，エ
タノールで洗浄し，乾燥して，生成物を得る。沈殿物が形成されない場合には，
混合物を濃縮し，生成物をカラムクロマトグラフィーにより単離する。 Condensation of aldehyde with oxindole containing no carboxylic acid substituent Suitable oxindole (1 equivalent), 1 equivalent of appropriate aldehyde and 1-3
A mixture of an equal volume of piperidine (or pyrrolidine) in ethanol (0.4 M) is stirred at 90-100 ° C. until the reaction is complete as indicated by thin layer chromatography. The mixture is cooled to room temperature and the precipitate formed is collected by vacuum filtration, washed with ethanol and dried to give the product. If no precipitate forms,
The mixture is concentrated and the product is isolated by column chromatography.

【０３０４】アルデヒドとアミノ置換基を含有するオキシインドールの縮合 最初にアミノオキシインドールをＢＯＣ基で保護する。適当なアルデヒドとの
縮合の後，形成した固体をトリフルオロ酢酸を用いて脱保護して，所望の生成物
を得る。 Condensation of aldehyde with oxindole containing amino substituent First, aminooxindole is protected with a BOC group. After condensation with the appropriate aldehyde, the solid formed is deprotected with trifluoroacetic acid to give the desired product.

【０３０５】Ｃ．実施例−本発明の３−メチリデニル−２−インドリノンの合成 以下の本発明の代表的な化合物の合成は例示としてのみ示されるものであり，
いかなる意味においても本発明の範囲を限定するものと解釈すべきではない。 C. EXAMPLES-Synthesis of 3-Methylidenyl-2-indolinones of the Invention The following synthesis of representative compounds of the invention is given by way of example only,
It should not be construed as limiting the scope of the invention in any way.

【０３０６】 実施例１：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−ヒドロキシベンズアルデヒドをメチル化して，
３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 6.9 (s, 2H, 芳香族), 3.9 (s, 3H,
OCH3), 3.2 (m, 2H, 2xCH), 1.2 (d, 12H, 4xCH3).Example 1 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,
3-Dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-hydroxybenzaldehyde is methylated,
3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was obtained. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 6.9 (s, 2H, aromatic), 3.9 (s, 3H,
OCH 3 ), 3.2 (m, 2H, 2xCH), 1.2 (d, 12H, 4xCH 3 ).

【０３０７】 次に３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを２−オキシイ
ンドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキ
シベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として
得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.54 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.59, 7.49, 7.21, 6.81-6.8
8 (多重線, 7H, =CH-, 芳香族), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.26-3.33 (m, 2H, 2x-C
H), 1.2 (d, J = 7.23Hz, 12H, 4xCH3). MS m/z 336.Next, 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was condensed with 2-oxindole to obtain 0.25 g of 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole. The -2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.54 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.59, 7.49, 7.21, 6.81-6.8
8 (multiple, 7H, = CH-, aromatic), 3.73 (s, 3H, OCH 3 ), 3.26-3.33 (m, 2H, 2x-C
H), 1.2 (d, J = 7.23Hz, 12H, 4xCH 3). MS m / z 336.

【０３０８】 実施例２：５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリ
デン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−クロロ−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.69 (s, 1H, CONH), 7.67 (s, 1H, =CH-), 7.6 (d, J =
1.85Hz, 1H, H-4), 7.51 (s, 2H, 芳香族), 7.26 (dd, J = 1.85, 8.3Hz, 1H,
H-6), 6.89 (d, J = 8.3Hz, 1H, H-7), 3.74 (s, 3H, OCH3), 3.27-3.34 (m, 2H
, 2x-CH), 1.22 (d, J = 6.7Hz, 12H, 4xCH3).Example 2 5-Chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 5-chloro -2-
Condensation with oxindole provided 0.3 g of 5-chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole-2-one as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.69 (s, 1H, CONH), 7.67 (s, 1H, = CH-), 7.6 (d, J =
1.85Hz, 1H, H-4), 7.51 (s, 2H, aromatic), 7.26 (dd, J = 1.85, 8.3Hz, 1H,
H-6), 6.89 (d, J = 8.3Hz, 1H, H-7), 3.74 (s, 3H, OCH 3 ), 3.27-3.34 (m, 2H
, 2x-CH), 1.22 ( d, J = 6.7Hz, 12H, 4xCH 3).

【０３０９】 実施例３：Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）
−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミ
ド 塩化スズ二水和物（２２５ｇ）を２，４−ジニトロフェニル酢酸（２２．６ｇ
）のエタノール（４５０ｍｌ）中の溶液に加えた。混合物を９０℃で１０時間加
熱した。反応混合物を冷却し，１２Ｍ水酸化ナトリウムでｐＨ１１に調節した。
固体を濾過により除去し，濾液を濃縮した。残渣をエタノール（３００ｍｌ）で
処理した。不溶性物質を濾過により除去し，エタノール（５ｘ６０ｍｌ）で洗浄
した。合わせたエタノール溶液を蒸発させて，得られた固体を真空下で乾燥して
，１５ｇの６−アミノ−２−オキシインドールを褐色粉末として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.03 (s, br, NH), 6.78 (d, J = 8.55Hz, 1H,
H-4), 6.09-6.11 (m, 2H), 4.95 (s, br, 2H, NH2), 3.22 (s, 2H, H-3).MS (+
APCI) m/z (相対強度, %) MS m/z 147 ([M-1]+, 100).Example 3 N- [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene)
-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide Tin chloride dihydrate (225 g) was treated with 2,4-dinitrophenylacetic acid (22.6 g).
) In ethanol (450 ml). The mixture was heated at 90 ° C. for 10 hours. The reaction mixture was cooled and adjusted to pH 11 with 12M sodium hydroxide.
The solid was removed by filtration and the filtrate was concentrated. The residue was treated with ethanol (300ml). Insoluble materials were removed by filtration and washed with ethanol (5 × 60 ml). The combined ethanol solution was evaporated and the resulting solid was dried under vacuum to give 15 g of 6-amino-2-oxindole as a brown powder. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.03 (s, br, NH), 6.78 (d, J = 8.55 Hz, 1H,
H-4), 6.09-6.11 (m, 2H), 4.95 (s, br, 2H, NH2), 3.22 (s, 2H, H-3) .MS (+
(APCI) m / z (relative intensity,%) MS m / z 147 ([M-1] + , 100).

【０３１０】 ６−アミノ−２−オキシインドール（１ｇ）および塩化アセチル（０．７９ｇ
）の１０ｍｌのジクロロメタン中の混合物に，０℃で，トリエチルアミン（１ｇ
）を加えた。混合物を室温にし，乾燥管を用いて大気水分から保護しながら，４
時間撹拌した。次に，溶媒を蒸発させ，残渣をメタノールから再結晶して，０．
９８ｇ（７７％）の６−アセチルアミノ−２−オキシインドールをベージュ色固
体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) (: 10.28 (s, br, NH), 9.83 (s, br, NH), 7.34 (d
, J = 1.4Hz, 1H, H-7), 7.06 (d, J = 7.9Hz, 1H, H-4), 6.97 (dd, J = 1.4,
7.9Hz, 1H, H-5), 3.37 (s, 2H, H-3), 2.01 (s, 3H, CH3).6-Amino-2-oxindole (1 g) and acetyl chloride (0.79 g)
) In 10 ml of dichloromethane at 0 ° C. with triethylamine (1 g).
) Was added. Bring the mixture to room temperature and protect it from atmospheric moisture with a drying tube.
Stirred for hours. Then the solvent is evaporated and the residue is recrystallized from methanol to give
98 g (77%) of 6-acetylamino-2-oxindole were obtained as a beige solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) (: 10.28 (s, br, NH), 9.83 (s, br, NH), 7.34 (d
, J = 1.4Hz, 1H, H-7), 7.06 (d, J = 7.9Hz, 1H, H-4), 6.97 (dd, J = 1.4,
7.9Hz, 1H, H-5) , 3.37 (s, 2H, H-3), 2.01 (s, 3H, CH 3).

【０３１１】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−アセトアミド
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇのＮ−［３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−
インドール−６−イル］−アセトアミドを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.48 (s, 1H, CONH), 9.99 (s, 1H, CONH), 7.51 (d, J
= 8Hz, 1H, H-4), 7.46 (s, 2H, 芳香族), 7.44 (s, 1H, =CH-), 7.41 (d, J =
2Hz, 1H, H-7), 6.91 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-5), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.26-3
.34 (m, 2H), 2.03 (s, 3H, CH3), 1.21 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH3). MS m/z 392.Condensation of 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde with 6-acetamido-2-oxindole gives 0.3 g of N- [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2. -Oxo-2,3-dihydro-1H-
Indole-6-yl] -acetamide was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.48 (s, 1H, CONH), 9.99 (s, 1H, CONH), 7.51 (d, J
= 8Hz, 1H, H-4), 7.46 (s, 2H, aromatic), 7.44 (s, 1H, = CH-), 7.41 (d, J =
2Hz, 1H, H-7), 6.91 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-5), 3.73 (s, 3H, OCH 3 ), 3.26-3
.34 (m, 2H), 2.03 (s, 3H, CH 3 ), 1.21 (d, J = 7 Hz, 12H, 4xCH 3 ). MS m / z 392.

【０３１２】 実施例４：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−
ヒドロキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−ヒドロキシ−
２−オキシインドールと縮合させて，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル
−４−メトキシベンジリデン）−６−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロインドール
−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.34 (s, 1H, CONH), 9.79 (s, 1H, OH), 7.42 (d, J =
8Hz, 1H, H-4), 7.43 (s, 2H, 芳香族), 7.33 (s, 1H, =CH-), 6.32 (d, J = 2H
z, 1H, H-7), 6.21 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-5), 3.72 (s, 3H, OCH3), 3.25-3.3
3 (m, 2H), 1.2 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH3). MS m/z 351.Example 4: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6
Hydroxy-1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is converted to 6-hydroxy-
Condensation with 2-oxindole provided 0.3 g of 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6-hydroxy-1,3-dihydroindole-2-one as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.34 (s, 1H, CONH), 9.79 (s, 1H, OH), 7.42 (d, J =
8Hz, 1H, H-4), 7.43 (s, 2H, aromatic), 7.33 (s, 1H, = CH-), 6.32 (d, J = 2H
z, 1H, H-7) , 6.21 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-5), 3.72 (s, 3H, OCH 3), 3.25-3.3
3 (m, 2H), 1.2 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH 3 ). MS m / z 351.

【０３１３】 実施例５：５−アセチル−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジ
リデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−オキシインドール（３ｇ）を１，２−ジクロロエタン中に懸濁し，３．２
ｍｌの塩化アセチルでゆっくり処理した。得られた懸濁液を５０℃で５時間加熱
し，冷却し，水に注加した。得られた沈殿物を真空濾過により回収し，豊富な水
で洗浄し，真空下で乾燥して，２．９ｇ（７３％収率）の５−アセチル−２−オ
キシインドールを褐色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) (: 10.75 (s, br, NH), 7.83 (d, J = 8.23Hz, 1H),
7.78 (s, 1H, H-4), 6.88 (d, J = 8.23Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH2), 2.49 (s
, 3H, CH3).Example 5: 5-Acetyl-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 2-oxindole (3 g) in 1,2-dichloroethane Suspended in 3.2
Treated slowly with ml of acetyl chloride. The resulting suspension was heated at 50 ° C. for 5 hours, cooled and poured into water. The resulting precipitate was collected by vacuum filtration, washed with abundant water and dried under vacuum to give 2.9 g (73% yield) of 5-acetyl-2-oxindole as a brown solid. . 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) (: 10.75 (s, br, NH), 7.83 (d, J = 8.23 Hz, 1H),
7.78 (s, 1H, H-4), 6.88 (d, J = 8.23Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH2), 2.49 (s
, 3H, CH3).

【０３１４】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−アセチル−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−アセチル−３−（３，５−ジイ
ソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.95 (s, 1H, CONH), 8.22 (d, J = 2Hz, 1H, H-4), 7.9
3 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-6), 7.69 (s, 1H, =CH-), 7.53 (s, 2H, 芳香族), 6.
97 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.75 (s, 3H, OCH3), 3.24-3.34 (m, 2H), 2.48 (s
, 3H, CH3), 1.24 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH3). MS m/z 377.[0314] 3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is converted to 5-acetyl-2
-Oxyindole, condensing with 0.3 g of 5-acetyl-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole-2-
On was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.95 (s, 1H, CONH), 8.22 (d, J = 2 Hz, 1H, H-4), 7.9
3 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-6), 7.69 (s, 1H, = CH-), 7.53 (s, 2H, aromatic), 6.
97 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.75 (s, 3H, OCH 3 ), 3.24-3.34 (m, 2H), 2.48 (s
, 3H, CH 3 ), 1.24 (d, J = 7 Hz, 12H, 4xCH 3 ). MS m / z 377.

【０３１５】 実施例６：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−
オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸メチルエステル ２−オキシインドール（８２．９ｇ）を機械的撹拌を備えた反応容器中で６３
０ｍｌの酢酸に懸濁し，混合物を氷水浴中で１０℃に冷却した。固体のＮ−ヨー
ドスクシンイミド（１７５ｇ）を１０分間かけて少しずつ加えた。添加が終了し
た後，混合物を１０℃で１時間撹拌した。常に存在していた懸濁固体は，このと
き非常に粘稠になった。固体を真空濾過により回収し，１００ｍｌの水中５０％
酢酸で，次に２００ｍｌの水で洗浄し，２０分間真空濾過して，部分乾燥した。
次に，生成物を真空下で乾燥して，プロトンＮＭＲにより約５％の２−オキシイ
ンドールを含む９３．５ｇ（３６％）の５−ヨード−２−オキシインドールを得
た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, 1H, NH-1), 7.49 (s, 1H, H-4), 7.4
8 (d, J = 8.10 Hz, 1H, H-6), 6.64 (d, J = 8.10 Hz, 1H, H-7), および 3.46
(s, 2H, CH2-3). MS (m/z (相対強度, %)) 258 ([M-1]+, 13).Example 6: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-
Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid methyl ester 2-oxindole (82.9 g) was added in a reaction vessel equipped with mechanical stirring to 63
Suspended in 0 ml acetic acid and the mixture was cooled to 10 ° C. in an ice-water bath. Solid N-iodosuccinimide (175 g) was added in portions over 10 minutes. After the addition was completed, the mixture was stirred at 10 ° C. for 1 hour. The suspended solids, which were always present, became very viscous at this time. The solid is collected by vacuum filtration and 50% in 100 ml of water
Washed with acetic acid, then with 200 ml of water, vacuum filtered for 20 minutes and partially dried.
The product was then dried under vacuum to yield 93.5 g (36%) of 5-iodo-2-oxindole containing about 5% 2-oxindole by proton NMR. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, 1H, NH-1), 7.49 (s, 1H, H-4), 7.4
8 (d, J = 8.10 Hz, 1H, H-6), 6.64 (d, J = 8.10 Hz, 1H, H-7), and 3.46
(s, 2H, CH 2 -3). MS (m / z (relative intensity,%)) 258 ([M-1] + , 13).

【０３１６】 ５−ヨード−２−オキシインドール（１７ｇ）を２ｇの二酢酸パラジウム，１
８．２ｇのトリエチルアミン，１５０ｍｌのメタノール，１５ｍｌのジメチルス
ルホキシドおよび２．６ｇのＤＰＰＰとともに，一酸化炭素飽和雰囲気下で還流
した。２４時間後，反応物を濾過して触媒を除去し，濾液を濃縮した。濃縮物を
３０％酢酸エチル／ヘキサンを溶出剤として用いて，シリカゲルでクロマトグラ
フィーを行った。生成物を含む画分を濃縮し，放置した。沈殿した生成物を真空
濾過により回収して，０．８ｇ（７％）の５−メトキシカルボニル−２−オキシ
インドールを灰白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) (: 10.70 (s, br, 1H, NH-1), 7.83 (dd, J = 1.77,
8.29 Hz, 1H, H-6), 7.77 (s, br, 1H, H-4), 6.89 (d, J = 8.29 (Hz, 1H, H-
7), 3.80 (s, 3H, COOCH3-5), 3.51 (s, 2H, CH2-3).5-Iodo-2-oxindole (17 g) was added to 2 g of palladium diacetate, 1
The mixture was refluxed with 8.2 g of triethylamine, 150 ml of methanol, 15 ml of dimethyl sulfoxide and 2.6 g of DPPP under a carbon monoxide saturated atmosphere. After 24 hours, the reaction was filtered to remove the catalyst and the filtrate was concentrated. The concentrate was chromatographed on silica gel using 30% ethyl acetate / hexane as eluent. The fractions containing the product were concentrated and left to stand. The precipitated product was collected by vacuum filtration to give 0.8 g (7%) of 5-methoxycarbonyl-2-oxindole as an off-white solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) (: 10.70 (s, br, 1H, NH-1), 7.83 (dd, J = 1.77,
8.29 Hz, 1H, H-6), 7.77 (s, br, 1H, H-4), 6.89 (d, J = 8.29 (Hz, 1H, H-
7), 3.80 (s, 3H, COOCH 3 -5), 3.51 (s, 2H, CH 2-3 ).

【０３１７】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−メトキシカル
ボニル−２−オキシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３，５−ジイソ
プロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ
−インドール−５−カルボン酸メチルエステルを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.96 (s, 1H, CONH), 8.29 (d, J = 1Hz, 1H, H-4), 7.8
8 (dd, J = 1,8Hz, 1H, H-6), 7.7 (s, 1H, =CH-), 7.55 (s, 2H, 芳香族), 7.0
(d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.76 (s, 3H, OCH3), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.26-3.3
5 (m, 2H), 1.23 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH3). MS m/z 393.Condensation of 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde with 5-methoxycarbonyl-2-oxindole gives 0.25 g of 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo -2,3-dihydro-1H
-Indole-5-carboxylic acid methyl ester was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.96 (s, 1H, CONH), 8.29 (d, J = 1 Hz, 1H, H-4), 7.8
8 (dd, J = 1,8Hz, 1H, H-6), 7.7 (s, 1H, = CH-), 7.55 (s, 2H, aromatic), 7.0
(d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.76 (s, 3H, OCH 3 ), 3.73 (s, 3H, OCH 3 ), 3.26-3.3
5 (m, 2H), 1.23 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH 3). MS m / z 393.

【０３１８】 実施例７：３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン ２−イソプロピルフェノールをメチル化し，次にホルミル化して，３−イソプ
ロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを得た。３−イソプロピル−４−メトキ
シベンズアルデヒドを２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３−
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２
−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.6, 7.2, 7.1, 6.8 (多重線,
8H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.2 (d, 6H, 2xCH 3 ).Example 7: 3- (3-Isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-di
Hydroindole-2-one Methylation of 2-isopropylphenol followed by formylation to give 3-isopropyl
Ropyr-4-methoxybenzaldehyde was obtained. 3-isopropyl-4-methoxy
Condensation of cybenzaldehyde with 2-oxindole gives 0.3 g of 3- (3-
Isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole-2
The -one was obtained as a yellow-orange solid.1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.6, 7.2, 7.1, 6.8 (multiple lines,
 8H, aromatic, = CH-), 3.9 (s, 3H, OCHThree), 3.2 (m, 1H, CH), 1.2 (d, 6H, 2xCH Three ).

【０３１９】 実施例８：３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを２−オキシ
インドールと縮合して，０．２５ｇの３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−
２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固
体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.4, 7.3, 7.2, 6.9, 6.8, 6.
8 (多重線, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 2.3 (s
, 3H, CH3), 1.2 (d, 6H, 2xCH3).Example 8: 3- (5-Isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene)
-1,3-dihydroindol-2-one 5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzaldehyde is condensed with 2-oxindole to give 0.25 g of 3- (5-isopropyl-4-methoxy-
2-Methylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.4, 7.3, 7.2, 6.9, 6.8, 6.
8 (multiple, 7H, aromatic, = CH-), 3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 1H, CH), 2.3 (s
, 3H, CH 3 ), 1.2 (d, 6H, 2xCH 3 ).

【０３２０】 実施例９：５−クロロ−３−（５−イソプロピル−メトキシ−２−メチルベンジ
リデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−イソプロピル−５−メチルフェノールをメチル化し，次にホルミル化して
，５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 7.6, 6.9 (2xs, 2H, 芳香族), 3.9 (
s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 2.6 (s, 3H, CH3), 1.2 (d, 6H, 2xCH3).Example 9: 5-Chloro-3- (5-isopropyl-methoxy-2-methylbenzylidene) -l, 3-dihydroindol-2-one 2-isopropyl-5-methylphenol is methylated and then Formylation gave 5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzaldehyde. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 7.6, 6.9 (2xs, 2H, aromatic), 3.9 (
s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 1H, CH), 2.6 (s, 3H, CH 3 ), 1.2 (d, 6H, 2xCH 3 ).

【０３２１】 ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを５−クロロ
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（５−イソプ
ロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.65 (s, 1H, CONH), 7.73 (s, 1H,), 7.49 (s, 1H,), 7
.4 (d, J = 2Hz, 1H, H-4), 7.23 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-6), 6.98 (s, 1H), 6
.86 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.86 (s, 3H, OCH3), 3.23-3.3 (m, 2H), 2.33 (s
, 3H, CH3), 1.15 (d, J = 7Hz, 6H, 2xCH3). MS m/z 341.The condensation of 5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzaldehyde with 5-chloro-2-oxindole gave 0.3 g of 5-chloro-3- (5-isopropyl-4-methoxy-2- Methylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.65 (s, 1H, CONH), 7.73 (s, 1H,), 7.49 (s, 1H,), 7
.4 (d, J = 2Hz, 1H, H-4), 7.23 (dd, J = 2,8Hz, 1H, H-6), 6.98 (s, 1H), 6
.86 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.86 (s, 3H, OCH 3 ), 3.23-3.3 (m, 2H), 2.33 (s
, 3H, CH 3 ), 1.15 (d, J = 7 Hz, 6H, 2xCH 3 ). MS m / z 341.

【０３２２】 実施例１０：３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを２−オキシインドール
と縮合して，０．２５ｇの３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.5, 7.2, 7.1, 6.8 (多重線,
8H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.8 (多重線, 8H,
4xCH2).Example 10: 3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydroindole-2-one 3-cyclopentyl-4-methoxybenzaldehyde is condensed with 2-oxindole to give 0.25 g of 3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydro-indole- The 2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.5, 7.2, 7.1, 6.8 (multiplet,
8H, aromatic, = CH-), 3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 1H, CH), 1.8 (multiple, 8H,
4xCH 2 ).

【０３２３】 実施例１１：３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−５−フ
ルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−シクロペンチルフェノールをメチル化し，次にホルミル化して，３−シク
ロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 9.9 (s, 1H, CHO), 7.8, 7.7, 7.2 (多重線, 3H, 芳香族)
, 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.2 (多重線, 8H, 4xCH2).Example 11: 3- (3-Cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -5-fluoro-l, 3-dihydroindol-2-one Methylation of 2-cyclopentylphenol followed by formylation to give 3- Cyclopentyl-4-methoxybenzaldehyde was obtained. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 9.9 (s, 1H, CHO), 7.8, 7.7, 7.2 (multiple, 3H, aromatic)
, 3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 1H, CH), 1.2 (multiple lines, 8H, 4xCH 2 ).

【０３２４】 ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−フルオロ−２−オ
キシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−シクロペンチル−４−メト
キシベンジリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを
黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.6, 7.6, 7.4, 7.1, 7.0, 6.
8 (多重線, 7H, 芳香族, ビニル CH), 3.9 (s, 3H, CH3), 3.3 (m, 1H, CH), 2.
0-1.5 (多重線, 8H, 4xCH2). MS m/z 337.Condensation of 3-cyclopentyl-4-methoxybenzaldehyde with 5-fluoro-2-oxindole yields 0.25 g of 3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -5-fluoro-1,3- Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.6, 7.6, 7.4, 7.1, 7.0, 6.
8 (multiline, 7H, aromatic, vinyl CH), 3.9 (s, 3H, CH 3 ), 3.3 (m, 1H, CH), 2.
0-1.5 (Multiple lines, 8H, 4xCH 2 ). MS m / z 337.

【０３２５】 実施例１２：３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン ２−シクロヘキシルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。アルデヒ
ドをオキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３−シクロヘキシル−４−
メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体
として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.6, 7.6, 7.2, 7.1, 6.8, 6.
8 (多重線, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.0 (m, 1H, CH), 1.8, 1
.4 (多重線, 10H, 5xCH2).Example 12: 3- (3-Cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydroindol-2-one 2-cyclohexylphenol was methylated and then formylated. The aldehyde is condensed with oxindole to give 0.3 g of 3- (3-cyclohexyl-4-.
Methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.6, 7.6, 7.2, 7.1, 6.8, 6.
8 (multiline, 7H, aromatic, = CH-), 3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.0 (m, 1H, CH), 1.8, 1
.4 (multiple lines, 10H, 5xCH 2 ).

【０３２６】 実施例１３：５−ブロモ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−フェニルアニソールをホルミル化して，４−メトキシ−３−フェニルベン
ズアルデヒドを得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 9.9 (s, 1H, CHO), 7.9, 7.8, 7.5, 7.4, 7.4, 7.3 (多
重線, 8H, 芳香族), 3.9 (s, 3H, OCH3. MS m/z 213.Example 13: 5-bromo-3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene)
Formylation of -1,3-dihydroindol-2-one 2-phenylanisole gave 4-methoxy-3-phenylbenzaldehyde. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 9.9 (s, 1H, CHO), 7.9, 7.8, 7.5, 7.4, 7.4, 7.3 (multiple, 8H, aromatic), 3.9 (s, 3H, OCH 3 .MS m / z 213.

【０３２７】 ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを５−ブロモ−２−オキシイン
ドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（６−メトキシ−ビフェニル−
３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体とし
て得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 7.8-6.8 (多重線, 12H, 芳香族, =C
H-), 3.9 (s, 3H, OCH3).Condensation of 4-methoxy-3-phenylbenzaldehyde with 5-bromo-2-oxindole gives 0.3 g of 5-bromo-3- (6-methoxy-biphenyl-
3-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 7.8-6.8 (multiplet, 12H, aromatic, = C
H-), 3.9 (s, 3H, OCH 3 ).

【０３２８】 実施例１４：５−クロロ−３−（２，３−ジヒドロ−ベンゾフラン−５−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルベンゾフランを５−クロロ−２−オキシイン
ドールと縮合して，０．２５ｇの５−クロロ−３−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ
フラン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.6, 8.2, 7.7, 7.6, 7.2, 6.9, 6.
8 (多重線, 7H, 芳香族, =CH-), 4.6 (t, 2H, OCH2), 3.2 (t, 2H, OCH2).Example 14: 5-Chloro-3- (2,3-dihydro-benzofuran-5-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one 2,3-dihydro-5-formylbenzofuran was converted to 5- Condensation with chloro-2-oxindole gives 0.25 g of 5-chloro-3- (2,3-dihydro-benzofuran-5-ylmethylene) -1,3-dihydroindole-2-one as a yellow-orange solid Obtained. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.6, 8.2, 7.7, 7.6, 7.2, 6.9, 6.
8 (multiple, 7H, aromatic, = CH-), 4.6 (t, 2H, OCH 2 ), 3.2 (t, 2H, OCH 2 ).

【０３２９】 実施例１５：５−クロロ−３−（２，２−ジメチル−クロマン−６−イルメチレ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマンを５−クロロ−２−オキシインドー
ルと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−
イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得
た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.61 (s, 1H, CONH), 8.31, 8.27, 7.76, 7.17, 6.79 (
多重線, 6H, 芳香族), 7.8 (s, 1H, =CH-), 2.78 (t, 2H, CH2), 1.81 (t, 2H,
CH2), 1.31 (s, 6H, 2xCH3). MS m/z 340.5 (M+1).Example 15: 5-Chloro-3- (2,2-dimethyl-chroman-6-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one 2,2-dimethyl-6-formyl roman was treated with 5 -Chloro-2-oxindole and condensed with 0.3 g of 5-chloro-3- (2,2-dimethylchroman-6.
(Ilmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.61 (s, 1H, CONH), 8.31, 8.27, 7.76, 7.17, 6.79 (
Multiplet, 6H, arom), 7.8 (s, 1H, = CH-), 2.78 (t, 2H, CH 2), 1.81 (t, 2H,
CH 2 ), 1.31 (s, 6H, 2xCH 3 ). MS m / z 340.5 (M + 1).

【０３３０】 実施例１６：Ｎ−｛３−［３−シクロヘキシル−４−（２−モルホリン−４−イ
ルエトキシ）−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インド
ール−６−イル｝−アセトアミド トリフェニルホスフィン（７．４７ｇ，１９．５８ｍｍｏｌ）を，２−シクロ
ヘキシル−４−クロロフェノール（６ｇ，２８．４８ｍｍｏｌ）および２−ヒド
ロキシエチルモルホリン（３．５９，２８．４８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラ
ン（５０ｍｌ）中の溶液に加え，次にジエチルアゾジカルボキシレート（４．５
ｍｌ，２８．４８ｍｍｏｌ）を滴加した。混合物を室温で１２時間撹拌した。反
応混合物を減圧下で濃縮し，ジクロロメタン／ヘキサン中で砕き，次にさらにヘ
キサンで洗浄した。クロマトグラフィー（シリカ，１０−２０−３０％酢酸エチ
ル／ヘキサン）により，８．４ｇ（９５％）の３−シクロヘキシル−４−モルホ
リノエトキシ−クロロベンゼンを黄色を帯びた油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 7.12 (m, 2H, 2xAr-H), 6.93 (d, J = 9Hz, 1H,
Ar-H), 4.04 (m, 2H, O-CH2CH2), 3.55 (m, 4H, 2x ringO-CH2CH2), 2.84 (m,
1H, CHシクロヘキシル), 2.68 (m, 2H, N-CH2CH2), 2.47 (m, 4H, 2x ringN-CH 2 CH2), 1.7 (m, 5H, シクロヘキシル), 1.3 (m, 5H, シクロヘキシル). MS m/z 324.4 および 325.4, [M+1]+ および [M+3]+.Example 16: N- {3- [3-cyclohexyl-4- (2-morpholin-4-i
Ruethoxy) -benzylidene] -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indo
Toluyl-6-yl} -acetamido triphenylphosphine (7.47 g, 19.58 mmol)
Hexyl-4-chlorophenol (6 g, 28.48 mmol) and 2-hydr
Roxyethylmorpholine (3.59, 28.48 mmol) in tetrahydrofura
(50 ml) and then diethyl azodicarboxylate (4.5).
ml, 28.48 mmol) was added dropwise. The mixture was stirred at room temperature for 12 hours. Anti
The reaction mixture is concentrated under reduced pressure, triturated in dichloromethane / hexane and then further concentrated.
Washed with xane. Chromatography (silica, 10-20-30% ethyl acetate
/ Hexane) to give 8.4 g (95%) of 3-cyclohexyl-4-morpho.
Linoethoxy-chlorobenzene was obtained as a yellowish oil.1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 7.12 (m, 2H, 2xAr-H), 6.93 (d, J = 9Hz, 1H,
 Ar-H), 4.04 (m, 2H, O-CHTwoCHTwo), 3.55 (m, 4H, 2x ringO-CHTwoCHTwo), 2.84 (m,
1H, CH cyclohexyl), 2.68 (m, 2H, N-CHTwoCHTwo), 2.47 (m, 4H, 2x ringN-CH Two CHTwo), 1.7 (m, 5H, cyclohexyl), 1.3 (m, 5H, cyclohexyl). MS m / z 324.4 and 325.4, [M + 1]+ And [M + 3]+.

【０３３１】 ナフタレン（３．４８ｇ，２７．２ｍｍｏｌ）を，テトラヒドロフラン（８０
ｍｌ）中の３０％リチウム分散物（３．２ｇ，１３８ｍｍｏｌ，テトラヒドロフ
ランであらかじめ洗浄）の懸濁液に加えた。懸濁液を緑色が現れるまで撹拌した
（約１時間）。反応液を−７８℃に冷却し，３−シクロヘキシル−４−モルホリ
ノエトキシ−クロロベンゼン（８ｇ，２４．７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン
（２０ｍｌ）中の溶液を加えた。１時間後，反応液を０℃に暖め，さらに１時間
撹拌した。ジメチルホルムアミド（９．６ｍｌ，１２３．５ｍｍｏｌ）を加え，
反応液を０℃でさらに１時間撹拌し，次に室温に暖め，さらに１時間撹拌した。
反応をメタノール（３０ｍｌ）で急冷し，１Ｎ塩酸（３００ｍｌ）に加え，酢酸
エチル（４００ｍｌ）で抽出した。有機層を水（３００ｍｌ），飽和炭酸ナトリ
ウム溶液（３００ｍｌ）およびブライン（３００ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシ
ウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，４０−６０％酢酸エチ
ル／ヘキサン）により，３ｇ（３４％）の３−シクロヘキシル−４−モルホリノ
エトキシベンズアルデヒドを淡黄色油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.83 (s, 1H, CHO), 7.12 (m, 2H, 2xAr-H), 7.
13 (d, J = 8Hz, 1H, Ar-H), 4.19 (m, 2H, O-CH2CH2), 3.55 (m, 4H, 2x ringO
-CH2CH2), 2.88 (m, 1H, CHシクロヘキシル), 2.74 (m, 2H, N-CH2CH2), 2.49
(m, 4H, 2x ringN-CH2CH2), 1.7 (m, 5H, シクロヘキシル), 1.3 (m, 5H, シク
ロヘキシル). MS m/z 318.4 [M+1]+.Naphthalene (3.48 g, 27.2 mmol) was added to tetrahydrofuran (80
ml) to a suspension of a 30% lithium dispersion (3.2 g, 138 mmol, pre-washed with tetrahydrofuran). The suspension was stirred until a green color appeared (about 1 hour). The reaction was cooled to −78 ° C. and a solution of 3-cyclohexyl-4-morpholinoethoxy-chlorobenzene (8 g, 24.7 mmol) in tetrahydrofuran (20 ml) was added. After 1 hour, the reaction was warmed to 0 ° C. and stirred for another hour. Dimethylformamide (9.6 ml, 123.5 mmol) was added,
The reaction was stirred at 0 ° C. for an additional hour, then warmed to room temperature and stirred for an additional hour.
The reaction was quenched with methanol (30 ml), added to 1N hydrochloric acid (300 ml) and extracted with ethyl acetate (400 ml). The organic layer was washed with water (300ml), saturated sodium carbonate solution (300ml) and brine (300ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. Chromatography (silica, 40-60% ethyl acetate / hexane) provided 3 g (34%) of 3-cyclohexyl-4-morpholinoethoxybenzaldehyde as a pale yellow oil. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.83 (s, 1H, CHO), 7.12 (m, 2H, 2xAr-H), 7.
13 (d, J = 8Hz, 1H, Ar-H), 4.19 (m, 2H, O-CH 2 CH 2 ), 3.55 (m, 4H, 2x ringO
-CH 2 CH 2 ), 2.88 (m, 1H, CH cyclohexyl), 2.74 (m, 2H, N-CH 2 CH 2 ), 2.49
(m, 4H, 2x ring N-CH 2 CH 2 ), 1.7 (m, 5H, cyclohexyl), 1.3 (m, 5H, cyclohexyl). MS m / z 318.4 [M + 1] + .

【０３３２】 ３−シクロヘキシル−４−モルホリノエトキシベンズアルデヒド（３ｇ，９．
４５ｍｍｏｌ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（３．５ｇ，１８．
９ｍｍｏｌ）およびピペリジン（５ｍｌ，５０ｍｍｏｌ）のエタノール（３５ｍ
ｌ）中の混合物を，密封管中で１００℃で６時間保持した。反応混合物を冷却し
，酢酸エチル（５００ｍｌ）で希釈し，濾過して過剰の６−アセトアミド−２−
オキシインドールを除去した。濾液を０．５Ｎ塩酸（２００ｍｌ）およびブライ
ン（２Ｘ２００ｍｌ）で抽出した。酸性洗浄物を固体炭酸水素ナトリウムでｐＨ
９に塩基性にし，酢酸エチル（２ｘ２００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を
ブライン（２００ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。合わ
せた固体をジクロロメタン（２５ｍｌ）に溶解し，ジエチルエーテル（５００ｍ
ｌ）で沈殿させて，１．６ｇのからし色固体を得た。固体をメタノール（１００
ｍｌ）に溶解し，濾過して，黄色固体を得（これは別に保存しておいた），次に
水（４００ｍｌ）で沈殿させ，濾過した。固体残渣をメタノールに再溶解し，濃
縮して，固体とした。このプロセスを２回繰り返して，ＨＰＬＣにより約８２％
純粋な異性体１を得た。濾過した黄色固体は，ＨＰＬＣにより７７％異性体２で
あった。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, 1H, NH), 10.0 (s, 1H, NHAc), 7.55
(m, 3H, Ar-H), 7.44 (m, 2H, Ar-H および Ar-CH=C), 7.07 (d, 1H, J = 8Hz,
Ar-H), 6.89 (dd, 1H, J =2 および 8Hz, Ar-H), 4.16 (m, 2H, Ar-OCH2), 3.5
7 (m, 4H, OCH2CH2N), 2.92 (m, 1H, chexCH), 2.75 (m, 2H, ArOCH2-CH2N), 2.
51 (m, 4H, NCH2CH2O), 2.02 (s, 3H, NHCOCH3), 1.8 (m, 5H, chexCH2), 1.38
(m, 5H, chexCH2). 20% 異性体 1; 77% 異性体 21 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.39 (s, 1H, NH), 9.92 (s, 1H, NHAc), 8.37
(d, 1H, J = 2Hz, Ar-H), 8.24 (m, 1H, Ar-H), 7.55 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.52
(d, 1H, J = 8Hz, Ar-H), 7.36 (m, 1H, Ar-H), 7.03 (m, 2H, Ar-H), 4.16 (m
, 2H, Ar-OCH2), 3.57 (m, 4H, OCH2CH2N), 2.88 (m, 1H, chexCH), 2.74 (m, 2
H, ArOCH2-CH2N), 2.51 (m, 4H, NCH2CH2O), 2.03 (s, 3H, NHCOCH3), 1.8 (m,
5H, chexCH2), 1.38 (m, 5H, chexCH2).3-Cyclohexyl-4-morpholinoethoxybenzaldehyde (3 g, 9.
45 mmol), 6-acetamido-2-oxindole (3.5 g, 18.
9 mmol) and piperidine (5 ml, 50 mmol) in ethanol (35 m
The mixture in 1) was kept at 100 ° C. for 6 hours in a sealed tube. The reaction mixture was cooled, diluted with ethyl acetate (500 ml), filtered and excess 6-acetamido-2-
Oxindole was removed. The filtrate was extracted with 0.5N hydrochloric acid (200ml) and brine (2X200ml). PH of acidic wash with solid sodium bicarbonate
Basified to 9 and extracted with ethyl acetate (2 × 200 ml). The combined organic layers were washed with brine (200ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. The combined solid was dissolved in dichloromethane (25 ml) and diethyl ether (500 ml) was added.
Precipitation in 1) gave 1.6 g of mustard colored solid. The solid was treated with methanol (100
ml) and filtered to give a yellow solid (which was saved separately), then precipitated with water (400 ml) and filtered. The solid residue was redissolved in methanol and concentrated to a solid. This process was repeated twice, about 82% by HPLC.
Pure isomer 1 was obtained. The filtered yellow solid was 77% isomer 2 by HPLC. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, 1H, NH), 10.0 (s, 1H, NHAc), 7.55
(m, 3H, Ar-H), 7.44 (m, 2H, Ar-H and Ar-CH = C), 7.07 (d, 1H, J = 8Hz,
Ar-H), 6.89 (dd , 1H, J = 2 and 8Hz, Ar-H), 4.16 (m, 2H, Ar-OCH 2), 3.5
7 (m, 4H, OCH 2 CH 2 N), 2.92 (m, 1H, chexCH), 2.75 (m, 2H, ArOCH 2 -CH 2 N), 2.
51 (m, 4H, NCH 2 CH 2 O), 2.02 (s, 3H, NHCOCH 3 ), 1.8 (m, 5H, chexCH 2 ), 1.38
. (m, 5H, chexCH 2 ) 20% Isomer 1; 77% isomer 2 1 HNMR (360 MHz, DMSO -d6) δ: 10.39 (s, 1H, NH), 9.92 (s, 1H, NHAc), 8.37
(d, 1H, J = 2Hz, Ar-H), 8.24 (m, 1H, Ar-H), 7.55 (s, 1H, Ar-CH = C), 7.52
(d, 1H, J = 8Hz, Ar-H), 7.36 (m, 1H, Ar-H), 7.03 (m, 2H, Ar-H), 4.16 (m
, 2H, Ar-OCH 2 ), 3.57 (m, 4H, OCH 2 CH 2 N), 2.88 (m, 1H, chexCH), 2.74 (m, 2
H, ArOCH 2 -CH 2 N), 2.51 (m, 4H, NCH 2 CH 2 O), 2.03 (s, 3H, NHCOCH 3 ), 1.8 (m,
5H, chexCH 2 ), 1.38 (m, 5H, chexCH 2 ).

【０３３３】 実施例１７：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５
−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−ヒドロキシベンズアルデヒドをメチル化して，
３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 6.9 (s, 2H, 芳香族), 3.9
(s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 2H, 2xCH), 1.2 (d, 12H, 4xCH3).Example 17: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5
-Methyl-1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-hydroxybenzaldehyde
3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was obtained. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 6.9 (s, 2H, aromatic), 3.9
(s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 2H, 2xCH), 1.2 (d, 12H, 4xCH 3 ).

【０３３４】 １１．４ｇのヒドロキシルアミン塩酸塩の水（５０ｍｌ）中の溶液を，抱水ク
ロラール（９．６ｇ）および硫酸ナトリウム（８３ｇ）の水（２００ｍｌ）中の
溶液に６０℃で加えた。混合物を６０℃に保持し，この間に別のフラスコで，４
−アニシジン（６．４ｇ）および濃塩酸（４．３ｍｌ）の水（８０ｍｌ）中の溶
液を８０℃に暖めた。次に，第１の溶液を第２の溶液に加え，反応液を２分間還
流し，室温までゆっくり冷却し，次に氷浴中で冷却した。形成した黄褐色沈殿物
を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，８．６ｇ（８５％収
率）のＮ−（２−ヒドロキシイミノアセチル）−アニシジンを得た。A solution of 11.4 g of hydroxylamine hydrochloride in water (50 ml) was added at 60 ° C. to a solution of chloral hydrate (9.6 g) and sodium sulfate (83 g) in water (200 ml). The mixture was kept at 60 ° C., during which time
-A solution of anisidine (6.4 g) and concentrated hydrochloric acid (4.3 ml) in water (80 ml) was warmed to 80 <0> C. Next, the first solution was added to the second solution and the reaction was refluxed for 2 minutes, cooled slowly to room temperature, and then cooled in an ice bath. The tan precipitate formed was collected by vacuum filtration, washed with water and dried under vacuum to give 8.6 g (85% yield) of N- (2-hydroxyiminoacetyl) -anisidine.

【０３３５】 水（５ｍｌ）を含む濃硫酸（４５ｍｌ）を６０℃に暖め，８．６ｇのＮ−（２
−ヒドロキシイミノアセチル）−アニシジンを一度に加えた。混合物を９３℃で
１０分間撹拌し，次に室温まで冷却させた。混合物を５００ｇの氷に注加し，酢
酸エチルで３回抽出した。合わせた抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮
して，５．１ｇ（６５％収率）の５−メトキシイサチンを暗赤色固体として得た
。Concentrated sulfuric acid (45 ml) containing water (5 ml) was warmed to 60 ° C. and 8.6 g of N- (2
-Hydroxyiminoacetyl) -anisidine was added in one portion. The mixture was stirred at 93 ° C. for 10 minutes, then allowed to cool to room temperature. The mixture was poured into 500 g of ice and extracted three times with ethyl acetate. The combined extracts were dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to give 5.1 g (65% yield) of 5-methoxyisatin as a dark red solid.

【０３３６】 ５−メトキシイサチン（５．０ｇ）および３０ｍｌのヒドラジン水和物を１５
分間還流した。反応混合物を室温に冷却し，５０ｍｌの水を加えた。混合物を２
５ｍｌの酢酸エチルで３回抽出し，有機層を合わせ，無水硫酸ナトリウムで乾燥
し，濃縮して，黄色固体を得た。固体を酢酸エチル中で撹拌し，１．１ｇの不溶
性物質を真空濾過により除去し，保存した。この物質は２−ヒドラジノカルボニ
ル−メチル−４−アニシジンであることがわかった。濾液を濃縮し，シリカゲル
でクロマトグラフィーを行い，酢酸エチル：ヘキサン１：１で溶出して，０．７
ｇの５−メトキシ−２−オキシインドールを濁った黄色固体として得た。１．１
ｇの２−ヒドラジノカルボニル−メチル−４−アニシジンを２０ｍｌの１Ｎ水酸
化ナトリウム中で１時間還流した。混合物を冷却し，濃塩酸でｐＨ２に酸性にし
，２５ｍｌの酢酸エチルで３回抽出した。有機抽出物を合わせ，ブラインで洗浄
し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，０．８ｇの５−メトキシ−２−オ
キシインドールを濁った黄色固体として得た。合わせた収率は１．５ｇすなわち
３３％であった。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.13 (s, 1H, NH-1), 6.84 (s, 1H, H-4), 6.7
2 (d, J = 9Hz, 1H, H-6), 6.69 (d, J = 9Hz, 1H, H-7), 3.68 (s, 3H, OCH3-5
), 3.41 (s, 2H, CH2-3). MS m/z 163 [M+1]+.5-methoxyisatin (5.0 g) and 30 ml of hydrazine hydrate were added to 15
Reflux for minutes. The reaction mixture was cooled to room temperature and 50 ml of water was added. Mix 2
Extract three times with 5 ml of ethyl acetate, combine the organic layers, dry over anhydrous sodium sulfate and concentrate to give a yellow solid. The solid was stirred in ethyl acetate and 1.1 g of insoluble material was removed by vacuum filtration and saved. This material was found to be 2-hydrazinocarbonyl-methyl-4-anisidine. The filtrate was concentrated and chromatographed on silica gel, eluting with ethyl acetate: hexane 1: 1 to give a 0.7
g of 5-methoxy-2-oxindole was obtained as a cloudy yellow solid. 1.1
g of 2-hydrazinocarbonyl-methyl-4-anisidine was refluxed in 20 ml of 1N sodium hydroxide for 1 hour. The mixture was cooled, acidified to pH 2 with concentrated hydrochloric acid and extracted three times with 25 ml of ethyl acetate. The organic extracts were combined, washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to give 0.8 g of 5-methoxy-2-oxindole as a cloudy yellow solid. The combined yield was 1.5 g or 33%. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.13 (s, 1H, NH-1), 6.84 (s, 1H, H-4), 6.7
2 (d, J = 9Hz, 1H, H-6), 6.69 (d, J = 9Hz, 1H, H-7), 3.68 (s, 3H, OCH 3 -5
), 3.41 (s, 2H, CH 2 -3). MS m / z 163 [M + 1] + .

【０３３７】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−メトキシ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−５−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.34 (s, 1H, NH), 7.59 (s, 2H), 7.47 (s, 2
H), 7.15 (d, J = 2Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 2, 8Hz, 1H), 6.58 (d, J = 8Hz,
1H), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.63 (s, 3H, OCH3), 3.25-3.39 (m, 2H, 2 x (CH3) 2 CH), 1.2 (d, 12H, 2 x (CH3)2CH). MS APCI m/z 366.1 [M+1]+.[0337] 3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is converted to 5-methoxy-2
-Condensed with oxindole to give 0.3 g of 3- (3,5-diisopropyl-4).
-Methoxybenzylidene) -5-methoxy-1,3-dihydroindole-2-
On was obtained as a yellow-orange solid.1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.34 (s, 1H, NH), 7.59 (s, 2H), 7.47 (s, 2
H), 7.15 (d, J = 2Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 2, 8Hz, 1H), 6.58 (d, J = 8Hz,
1H), 3.73 (s, 3H, OCHThree), 3.63 (s, 3H, OCHThree), 3.25-3.39 (m, 2H, 2 x (CHThree) Two CH), 1.2 (d, 12H, 2 x (CHThree)TwoCH). MS APCI m / z 366.1 [M + 1]+.

【０３３８】 実施例１８：Ｎ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデ
ン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセト
アミド テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１．３５ｇ）を，
４−メトキシ−３−ブロモベンズアルデヒド（６．７２ｇ）のトルエン（４５ｍ
ｌ）およびエタノール（４５ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナトリ
ウム（８０ｍｌ）を加えた。この混合物にチオフェン−３−ボロン酸（５ｇ）を
加えた。次に混合物を１２時間還流した。反応混合物を水（２００ｍｌ）に注加
し，酢酸エチル（２ｘ１５０ｍｌ）中に抽出した。有機層を飽和水性炭酸水素ナ
トリウム（１５０ｍｌ）およびブライン（１５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシ
ウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，２０％酢酸エチル／ヘ
キサン）により，６ｇ（８８％）の３（３−チオフェン）−４−メトキシベンズ
アルデヒドを黄色油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.92 (s, 1H, CHO), 8.04 (d, 1H, J = 2Hz, 1x
Ar-H), 7.8 (m, 2H, Ar-H), 7.58 (dd, 1H, J = 3 および 5Hz, thiophene およ
び Ar-H), 7.50 (dd, 1H, J = 2 および 5Hz, Ar-H), 7.28 (d, 1H, J = 9Hz, t
hiophene), 3.94 (s, 3H, OCH3). MS m/z 219.2 [M+1]+.Example 18: N- [3- (4-Methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamidotetrakis (tri Phenylphosphine) palladium (0) (1.35 g)
4-methoxy-3-bromobenzaldehyde (6.72 g) in toluene (45 m
l) and a solution in ethanol (45 ml) was added, followed by 2M aqueous sodium carbonate (80 ml). To this mixture was added thiophene-3-boronic acid (5 g). The mixture was then refluxed for 12 hours. The reaction mixture was poured into water (200ml) and extracted into ethyl acetate (2x150ml). The organic layer was washed with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate (150ml) and brine (150ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. Chromatography (silica, 20% ethyl acetate / hexane) provided 6 g (88%) of 3 (3-thiophene) -4-methoxybenzaldehyde as a yellow oil. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.92 (s, 1H, CHO), 8.04 (d, 1H, J = 2Hz, 1x
Ar-H), 7.8 (m, 2H, Ar-H), 7.58 (dd, 1H, J = 3 and 5Hz, thiophene and Ar-H), 7.50 (dd, 1H, J = 2 and 5Hz, Ar-H ), 7.28 (d, 1H, J = 9Hz, t
hiophene), 3.94 (s, 3H, OCH 3 ). MS m / z 219.2 [M + 1] + .

【０３３９】 ３（３−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデヒド（１．７２ｇ），６−
アセトアミド−２−オキシインドール（１．５ｇ）およびピペリジン（４ｍｌ）
のエタノール（２６ｍｌ）中の混合物を密封管中で１００℃で１２時間保持した
。反応液を冷却し，ジエチルエーテルに注加した。形成した沈殿物を濾過により
除去し，ジエチルエーテルで，次にヘキサンで洗浄し，乾燥して，０．９ｇ（２
９％）のＮ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）
−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミ
ドを黄褐色固体として得た。1 HNMR 360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.52 (s, 1H, NH), 10.22 (s, 1H, NHAc), 7.85
(m, 2H, 2xAr-H), 7.7 (dd, J = 2 および 9Hz, 1H, Ar-H), 7.6 (m, 2H, 2xAr
-H), 7.5 (dd, 1H, J = 1 および 5Hz, Ar-H), 7.47 (s, 2H, Ar-H および Ar-C
H=C), 7.25 (d, 1H, J =9Hz, Ar-H), 6.96 (dd, 1H, J =2 および 9Hz, Ar-H),
3.92 (s, 3H, OCH3), 2.04 (s, 3H, NHCOCH3). MS m/z 391.2 [M+1]+.3 (3-thiophene) -4-methoxybenzaldehyde (1.72 g), 6-
Acetamide-2-oxindole (1.5 g) and piperidine (4 ml)
Of ethanol (26 ml) was kept in a sealed tube at 100 ° C. for 12 hours. The reaction was cooled and poured into diethyl ether. The precipitate formed was removed by filtration, washed with diethyl ether, then with hexane, dried and 0.9 g (2
9%) N- [3- (4-methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene)
-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide was obtained as a tan solid. 1 HNMR 360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.52 (s, 1H, NH), 10.22 (s, 1H, NHAc), 7.85
(m, 2H, 2xAr-H), 7.7 (dd, J = 2 and 9Hz, 1H, Ar-H), 7.6 (m, 2H, 2xAr
-H), 7.5 (dd, 1H, J = 1 and 5Hz, Ar-H), 7.47 (s, 2H, Ar-H and Ar-C
H = C), 7.25 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 6.96 (dd, 1H, J = 2 and 9Hz, Ar-H),
3.92 (s, 3H, OCH 3 ), 2.04 (s, 3H, NHCOCH 3 ). MS m / z 391.2 [M + 1] + .

【０３４０】 実施例１９：３−［３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５
−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−メチルイサチン（１５．０ｇ）および６０ｍｌのヒドラジン水和物の混合
物を１４０−１６０℃で４時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し，３００ｍ
ｌの氷水に注加し，６Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。室温で２日間放置した後，
形成した沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，６．
５ｇ（４７％収率）の５−メチル−２−オキシインドールを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.20 (s, br, 1H, NH-1), 6.99 (s, 1H, H-4),
6.94 (d, J = 8 Hz, 1H, H-6), 6.68 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.39 (s, 2H, C
H2-3), および 2.22 (s, 3H, CH3-5).Example 19: 3- [3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5
-Methyl-1,3-dihydroindol-2-one A mixture of 5-methylisatin (15.0 g) and 60 ml of hydrazine hydrate was stirred at 140-160 ° C for 4 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and
It was poured into 1 liter of ice water and acidified to pH 2 with 6N hydrochloric acid. After leaving at room temperature for 2 days,
5. The precipitate formed is collected by vacuum filtration, washed with water and dried under vacuum;
5 g (47% yield) of 5-methyl-2-oxindole were obtained. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.20 (s, br, 1H, NH-1), 6.99 (s, 1H, H-4),
6.94 (d, J = 8 Hz, 1H, H-6), 6.68 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.39 (s, 2H, C
H 2 -3), and 2.22 (s, 3H, CH 3 -5).

【０３４１】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−メチル−２−
オキシインドールと縮合させて，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−５−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.41 (s, br, 1H, NH), 7.56 (s, 1H), 7.51 (
s, 2H), 7.50 (s, br, 1H), 7.03 (d, br, J = 8Hz, 1H), 6.76 (d, J = 8Hz, 1
H), 3.74 (s, 3H, OCH3), 3.26-3.35 (m, 2H, 2 x (CH3)2CH), 2.15 (s, 3H, CH 3 ), 1.22 (d, J = 7Hz, 12H, 2 x (CH3)2CH). MS APCI m/z 350.2 [M+1]+.[0364] 3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 5-methyl-2-
Condensed with oxindole, 0.3 g of 3- (3,5-diisopropyl-4)
-Methoxybenzylidene) -5-methyl-1,3-dihydroindole-2-o
Was obtained as a yellow-orange solid.1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.41 (s, br, 1H, NH), 7.56 (s, 1H), 7.51 (
s, 2H), 7.50 (s, br, 1H), 7.03 (d, br, J = 8Hz, 1H), 6.76 (d, J = 8Hz, 1
H), 3.74 (s, 3H, OCHThree), 3.26-3.35 (m, 2H, 2 x (CHThree)TwoCH), 2.15 (s, 3H, CH Three ), 1.22 (d, J = 7Hz, 12H, 2 x (CHThree)TwoCH). MS APCI m / z 350.2 [M + 1]+.

【０３４２】 実施例２０：５−アミノ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシ−ベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−オキシインドール（６．５ｇ）を濃硫酸（２５ｍｌ）に溶解し，混合物を
−１０から１５℃に保持し，この間に発煙硝酸（２．１ｍｌ）を滴加した。硝酸
を加えた後，反応混合物を０℃で０．５時間撹拌し，氷水に注加した。形成した
沈殿物を濾過により回収し，水で洗浄し，５０％酢酸から結晶化した。次に，最
終結晶生成物を濾過し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，６．３ｇ（７０％）の
５−ニトロ−２−オキシインドールを得た。Example 20: 5-Amino-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxy-benzylidene) -l, 3-dihydroindol-2-one 2-oxindole (6.5 g) was added to concentrated sulfuric acid ( 25 ml) and the mixture was kept at -10 to 15 ° C., during which fuming nitric acid (2.1 ml) was added dropwise. After addition of nitric acid, the reaction mixture was stirred at 0 ° C. for 0.5 hour and poured into ice water. The precipitate formed was collected by filtration, washed with water and crystallized from 50% acetic acid. Next, the final crystalline product was filtered, washed with water and dried under vacuum to give 6.3 g (70%) of 5-nitro-2-oxindole.

【０３４３】 ５−ニトロ−２−オキシインドール（６．３ｇ）をメタノール中１０％パラジ
ウム担持炭素で水素化して，３．０ｇ（６０％収率）の５−アミノ−２−オキシ
インドールを白色固体として得た。３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベン
ズアルデヒドを５−アミノ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−
アミノ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.62 (br s, 1H, NH), 8.31 (s, 2H), 7.8 (s,
1H), 7.65 (s, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 2, 8Hz, 1H
), 6.88 (d, J = 8Hz, 1H), 3.72 (3H, OCH3), 3.24-3.32 (m, 2H, 2 x (CH3)2C
H), 1.23 (d, J = 6.5Hz, 12H, 2 x (CH3)2CH).Hydrogenation of 5-nitro-2-oxindole (6.3 g) over 10% palladium on carbon in methanol gave 3.0 g (60% yield) of 5-amino-2-oxindole as a white solid. As obtained. Condensation of 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde with 5-amino-2-oxindole yields 0.3 g of 5-
Amino-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.62 (br s, 1H, NH), 8.31 (s, 2H), 7.8 (s,
1H), 7.65 (s, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 2, 8Hz, 1H
), 6.88 (d, J = 8Hz, 1H), 3.72 (3H, OCH 3 ), 3.24-3.32 (m, 2H, 2 x (CH 3 ) 2 C
H), 1.23 (d, J = 6.5Hz, 12H, 2 x (CH 3 ) 2 CH).

【０３４４】 実施例２１：５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，６−ジメチルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.1(s, 1H, CHO), 6.9(s, 2H, 芳香族), 3.9(s, 3H, OCH 3 ), 2.6(s, 6H, 2xCH3).Example 21: 5-chloro-3- (4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene
) -1,3-Dihydroindol-2-one 2,6-dimethylphenol was methylated and then formylated.1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 6.9 (s, 2H, aromatic), 3.9 (s, 3H, OCH Three ), 2.6 (s, 6H, 2xCHThree).

【０３４５】 ３，５−ジメチル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−クロロ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−
ジメチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体
として得た。The 3,5-dimethyl-4-methoxybenzaldehyde was condensed with 5-chloro-2-oxindole to give 0.3 g of 5-chloro-3- (4-methoxy-3,5-
Dimethylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０３４６】 実施例２２：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６
−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン 水素化ナトリウム（２．６ｇ）およびジメチルマロネート（１４．５ｇ）のジ
メチルスルホキシド（１６０ｍｌ）中の懸濁液を１００℃で１時間撹拌した。混
合物を室温に冷却し，７．９５ｇの２，５−ジフルオロニトロベンゼンを加え，
３０分間撹拌を続けた。次に，混合物を１００℃に加熱し，さらに１時間撹拌し
，次に室温に冷却し，４００ｍｌの飽和塩化アンモニウムに注加した。混合物を
酢酸エチル（２００ｍｌ）で抽出し，有機層をブラインで洗浄し，無水硫酸ナト
リウムで乾燥し，真空下で濃縮した。残渣をメタノールから結晶化して，２４．
４ｇ（８０％収率）のジメチル４−フルオロ−２−ニトロフェニルマロネートを
白色固体として得た。濾液を濃縮し，シリカゲルのカラムでクロマトグラフィー
（酢酸エチル：ヘキサン１：８）を行って，５．０３ｇのジメチル４−フルオロ
−２−ニトロフェニルマロネート（合計２９．５ｇ（９６％収率））を得た。Example 22: 3- (3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6
-Fluoro-1,3-dihydroindol-2-one A suspension of sodium hydride (2.6 g) and dimethyl malonate (14.5 g) in dimethyl sulfoxide (160 ml) was stirred at 100 ° C. for 1 hour. The mixture was cooled to room temperature and 7.95 g of 2,5-difluoronitrobenzene was added,
Stirring was continued for 30 minutes. Then the mixture was heated to 100 ° C. and stirred for another hour, then cooled to room temperature and poured into 400 ml of saturated ammonium chloride. The mixture was extracted with ethyl acetate (200ml), the organic layer was washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated in vacuo. 23. crystallizing the residue from methanol;
4 g (80% yield) of dimethyl 4-fluoro-2-nitrophenylmalonate were obtained as a white solid. The filtrate was concentrated and chromatographed on a silica gel column (ethyl acetate: hexane 1: 8) to give 5.03 g of dimethyl 4-fluoro-2-nitrophenylmalonate (29.5 g in total (96% yield)). ) Got.

【０３４７】 ジメチル４−フルオロ−２−ニトロフェニルマロネート（５．０ｇ）を２０ｍ
ｌの６Ｎ塩酸中で２４時間還流した。反応液を冷却し，形成した白色固体を真空
濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，３．３ｇ（８７％収率）の４−フル
オロ−２−ニトロフェニル酢酸を得た。Dimethyl 4-fluoro-2-nitrophenylmalonate (5.0 g) was added to 20 m
Reflux in 1 L of 6N hydrochloric acid for 24 hours. The reaction was cooled and the white solid formed was collected by vacuum filtration, washed with water, and dried to give 3.3 g (87% yield) of 4-fluoro-2-nitrophenylacetic acid.

【０３４８】 酢酸（１５ｍｌ）中に溶解した４−フルオロ−２−ニトロフェニル酢酸（３．
３ｇ）を，０．４５ｇの１０％パラジウム担持炭素で６０ｐｓｉで２時間水素化
した。触媒を濾過により除去し，１５ｍｌのメタノールで洗浄した。合わせた濾
液を濃縮し，水で希釈した。沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥
して，１．６ｇ（７０％収率）の６−フルオロ−２−オキシインドールを得た。
濾液を濃縮して，最初の生成物と類似するＮＭＲスペクトルを有する紫色固体を
得た。紫色固体をクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン１：２，シリカゲ
ル）して，第２の生成物６−フルオロ−２−オキシインドールを白色固体として
得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.43 (s, 1H, NH-1), 7.17 (t, J = 8Hz, H-4)
, 6.69 (ddd, J = 2, 8, 10Hz, 1H, H-5), 6.6 (dd, J = 2, 9Hz, 1H, H-7), お
よび 3.42 (s, 2H, CH2-3). MS m/z 152.8 [M+1]+.4-Fluoro-2-nitrophenylacetic acid (3.
3g) was hydrogenated at 60 psi with 0.45 g of 10% palladium on carbon for 2 hours. The catalyst was removed by filtration and washed with 15 ml of methanol. The combined filtrate was concentrated and diluted with water. The precipitate was collected by vacuum filtration, washed with water, and dried to give 1.6 g (70% yield) of 6-fluoro-2-oxindole.
The filtrate was concentrated to give a purple solid with an NMR spectrum similar to the first product. Chromatography of the purple solid (ethyl acetate: hexane 1: 2, silica gel) provided the second product, 6-fluoro-2-oxindole, as a white solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.43 (s, 1H, NH-1), 7.17 (t, J = 8Hz, H-4)
, 6.69 (ddd, J = 2 , 8, 10Hz, 1H, H-5), 6.6 (dd, J = 2, 9Hz, 1H, H-7), and 3.42 (s, 2H, CH 2 -3). MS m / z 152.8 [M + 1] + .

【０３４９】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−フルオロ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−６−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.69 (s, br, 1H, NH), 7.58 (s, 1H, ビニル)
, 7.55-7.59 (m, 1H), 7.47 (s, 2H), 6.68 (m, 2H), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.2
5-3.34 (m, 2H, 2 x (CH3)2CH), 1.2 (d, J = 7Hz, 12H, 2 x (CH3)2CH). MS m/z 353.The 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 6-fluoro-2
-Condensed with oxindole to give 0.3 g of 3- (3,5-diisopropyl-4).
-Methoxybenzylidene) -6-fluoro-1,3-dihydroindole-2-
On was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.69 (s, br, 1H, NH), 7.58 (s, 1H, vinyl)
, 7.55-7.59 (m, 1H), 7.47 (s, 2H), 6.68 (m, 2H), 3.73 (s, 3H, OCH 3 ), 3.2
5-3.34 (m, 2H, 2 x (CH 3 ) 2 CH), 1.2 (d, J = 7 Hz, 12H, 2 x (CH 3 ) 2 CH) .MS m / z 353.

【０３５０】 実施例２３：３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−５−フル
オロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマン（市販）を５−フルオロ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．３ｇの３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イ
ルメチレン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。Example 23: 3- (2,2-Dimethylchroman-6-ylmethylene) -5-fluoro-1,3-dihydroindol-2-one 2,2-dimethyl-6-formyl roman (commercially available) With 5-fluoro-2-oxindole to give 0.3 g of 3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -5-fluoro-1,3-dihydroindol-2-one as a yellow-orange color. Obtained as a solid.

【０３５１】 実施例２４：５−クロロ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリ
ン−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒドロインドール−２−
オン トリフェニルホスフィン（５．１４ｇ，１９．５８ｍｍｏｌ）を，３，５−ジ
イソプロピル−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（４ｇ，１９．５８ｍｍｏｌ）
のテトラヒドロフラン（４０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２−ヒドロキシエチ
ルモルホリン（２．５７ｇ，１９．５８ｍｍｏｌ）を加え，次にジエチルアゾジ
カルボキシレート（３．４１ｇ，１９．５８ｍｍｏｌ）を滴加した。混合物を室
温で１２時間撹拌した。反応液を減圧下で濃縮し，２Ｎ塩酸（２００ｍｌ）と酢
酸エチル（１５０ｍｌ）との間に分配した。水性層を酢酸エチル（２ｘ１５０ｍ
ｌ）で抽出し，固体炭酸水素ナトリウムでｐＨ９に塩基性にし，酢酸エチル（３
ｘ１５０ｍｌ）で抽出した。有機層を会わせ，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮
して，９００ｍｇ（１４％）の３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン
−４−イルエトキシ）−ベンズアルデヒドを黄色を帯びた油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.91 (s, 1H, CHO), 9.37 (s, 2H, 2xAr-H), 3.
85 (t, J = 5Hz, 2H, O-CH2CH2), 3.59 (m, J = 5 および 4Hz, 4H, 2x ringO-C
H2CH2), 3.39 (sept, J = 7Hz, 2H, 2xCHCH3), 2.72 (t, J = 5Hz, 2H, N-CH2C
H2), 2.4 (m on DMSO, 4H, 2x ringN-CH2CH2), 1.2 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH3).Example 24: 5-Chloro-3- [3,5-diisopropyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzylidene] -1,3-dihydroindole-2-
On-triphenylphosphine (5.14 g, 19.58 mmol) was added to 3,5-diisopropyl-4-hydroxybenzaldehyde (4 g, 19.58 mmol).
Of tetrahydrofuran (40 ml), followed by 2-hydroxyethylmorpholine (2.57 g, 19.58 mmol), followed by dropwise addition of diethyl azodicarboxylate (3.41 g, 19.58 mmol). . The mixture was stirred at room temperature for 12 hours. The reaction was concentrated under reduced pressure and partitioned between 2N hydrochloric acid (200ml) and ethyl acetate (150ml). The aqueous layer was washed with ethyl acetate (2 × 150 m
l), basify to pH 9 with solid sodium bicarbonate, and add ethyl acetate (3.
x 150 ml). The organic layers were combined, dried over magnesium sulfate and concentrated to give 900 mg (14%) of 3,5-diisopropyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzaldehyde as a yellowish oil. Was. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.91 (s, 1H, CHO), 9.37 (s, 2H, 2xAr-H), 3.
85 (t, J = 5Hz, 2H, O-CH 2 CH 2 ), 3.59 (m, J = 5 and 4Hz, 4H, 2x ringO-C
H 2 CH 2), 3.39 ( sept, J = 7Hz, 2H, 2xCHCH 3), 2.72 (t, J = 5Hz, 2H, N-CH 2 C
H 2 ), 2.4 (m on DMSO, 4H, 2x ringN-CH 2 CH 2 ), 1.2 (d, J = 7Hz, 12H, 4xCH 3 ).

【０３５２】 ３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベン
ズアルデヒド（０．４ｇ，１．２６ｍｍｏｌ），５−クロロ−２−オキシインド
ール（０．２１ｇ，１．２６ｍｍｏｌ）およびピロリジン（０．５ｍｌ，６．３
ｍｍｏｌ）のエタノール（２ｍｌ）中の混合物を，密封管中で１００℃で１２時
間保持した。次に，混合物を１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）に注加し，残った固体を濾
過し，さらに水（５０ｍｌ）で洗浄した。次に，固体を酢酸エチル（２００ｍｌ
）に溶解し，溶液を硫酸マグネシウムで乾燥し，濾過し，次に濃縮した。残った
固体をクロマトグラフィー（シリカ，４／４／１ジクロロメタン／ヘキサン／メ
タノール）を行い，６０ｍｇ（１０％）の５−クロロ−３−［３，５−ジイソプ
ロピル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−１，３
−ジヒドロインドール−２−オンを褐色を帯びた橙色の固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 9.43 (d, J = 10Hz, 1H, A
r-H), 7.58 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H), 7.46 (d, J = 5Hz, 2H, Ar-H), 7.3 (m,
1H, Ar-H), 7.19 (m, J = 9 および 10Hz, 1H, Ar-H), 6.99 (m, J = 9 および
9Hz, 1H, Ar-H), 6.83 (m, J = 9 および 1Hz, 1H, Ar-H), 3.61 (dd, J = 9 お
よび 22 HZ 1H, 1xCH2CH), 3.43 (m, 1H, CHCH3), 2.86 (dd, J = 4 および 22H
z, 1H, 1xCH2CH), 1.35 (d, J = 9Hz, 3H, CH3). MS m/z 262.0 [M+1]+.3,5-diisopropyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzaldehyde (0.4 g, 1.26 mmol), 5-chloro-2-oxindole (0.21 g, 1.26 mmol) and Pyrrolidine (0.5 ml, 6.3
(mmol) in ethanol (2 ml) was kept in a sealed tube at 100 ° C. for 12 hours. Next, the mixture was poured into 1N hydrochloric acid (100 ml), and the remaining solid was filtered and further washed with water (50 ml). Next, the solid was washed with ethyl acetate (200 ml).
) And the solution was dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated. The remaining solid was chromatographed (silica, 4/4/1 dichloromethane / hexane / methanol) to give 60 mg (10%) of 5-chloro-3- [3,5-diisopropyl-4- (2-morpholine-4). -Ylethoxy) -benzylidene] -1,3
-Dihydroindol-2-one was obtained as a brownish orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 9.43 (d, J = 10Hz, 1H, A
rH), 7.58 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H), 7.46 (d, J = 5Hz, 2H, Ar-H), 7.3 (m,
1H, Ar-H), 7.19 (m, J = 9 and 10Hz, 1H, Ar-H), 6.99 (m, J = 9 and
9Hz, 1H, Ar-H), 6.83 (m, J = 9 and 1Hz, 1H, Ar-H), 3.61 (dd, J = 9 and 22 HZ 1H, 1xCH 2 CH), 3.43 (m, 1H, CHCH 3 ), 2.86 (dd, J = 4 and 22H
z, 1H, 1xCH 2 CH), 1.35 (d, J = 9Hz, 3H, CH 3 ). MS m / z 262.0 [M + 1] + .

【０３５３】 実施例２５：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−７
−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを７−フルオロ−２
−オキシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−
４−メトキシベンジリデン）−７−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２
−オンを黄橙色固体として得た。Example 25: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -7
-Fluoro-1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was treated with 7-fluoro-2.
-Condensed with oxindole to give 0.25 g of 3- (3,5-diisopropyl-
4-methoxybenzylidene) -7-fluoro-1,3-dihydroindole-2
The -one was obtained as a yellow-orange solid.

【０３５４】 実施例２６：３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−
５−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン ５−クロロアセチル−２−オキシインドール（４．１８ｇ）のトリフルオロ酢
酸（３０ｍｌ）中の溶液を氷浴中で冷却し，４．６５ｇのトリエチルシランを加
えた。次に混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を１５０ｍｌの水に注加し，
形成した沈殿物を真空濾過により回収し，５０ｍｌの水で洗浄し，乾燥して，２
．５３ｇ（６５％収率）の５−（２−クロロエチル）−２−オキシインドールを
赤みを帯びた褐色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.26 (s, br, NH), 7.11 (s, 1H, H-4), 7.05
(d, J = 8Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8Hz, 1H), 3.77 (t, J = 7Hz, 2H, CH2), 3.4
2 (s, 2H, CH2), 2.94 (t, J = 7Hz, 2H, CH2).Example 26: 3- (4-Methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene)-
5- (2-morpholin-4-yl-ethyl) -1,3-dihydroindole-2
A solution of -one 5-chloroacetyl-2-oxindole (4.18 g) in trifluoroacetic acid (30 ml) was cooled in an ice bath and 4.65 g of triethylsilane was added. The mixture was then stirred at room temperature for 3 hours. Pour the mixture into 150 ml of water,
The precipitate formed is collected by vacuum filtration, washed with 50 ml of water, dried and dried.
. 53 g (65% yield) of 5- (2-chloroethyl) -2-oxindole were obtained as a reddish brown solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.26 (s, br, NH), 7.11 (s, 1H, H-4), 7.05
(d, J = 8Hz, 1H ), 6.73 (d, J = 8Hz, 1H), 3.77 (t, J = 7Hz, 2H, CH 2), 3.4
2 (s, 2H, CH 2 ), 2.94 (t, J = 7 Hz, 2H, CH 2 ).

【０３５５】 ５−（２−クロロエチル）−２−オキシインドール（２．３ｇ），モルホリン
（１．２ｍｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．２ｍｌ）のジメチルス
ルホキシド（１０ｍｌ）中の溶液を，１００℃で一夜加熱した。混合物を冷却し
，水に注加し，酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し，乾燥し，蒸
発させた。残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル，５％メタノール，クロロホ
ルム中）を行って，０．９ｇ（３１％）の５−（２−モルホリン−４−イル−エ
チル）−２−オキシインドールを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.21 (s, br, 1H, NH), 7.06 (s, br, 1H, H-4
), 7.0 (d, J = 8Hz, 1H, H-6), 6.71 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.55-3.58 (m,
4H), 3.41 (s, 2H, H-3), 2.63-2.68 (m, 2H), 2.39-2.47 (m, 6H).A solution of 5- (2-chloroethyl) -2-oxindole (2.3 g), morpholine (1.2 ml) and diisopropylethylamine (1.2 ml) in dimethylsulfoxide (10 ml) was added at 100 ° C. overnight. Heated. The mixture was cooled, poured into water and extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed with brine, dried, and evaporated. The residue was chromatographed (silica gel, 5% methanol, in chloroform) to give 0.9 g (31%) of 5- (2-morpholin-4-yl-ethyl) -2-oxindole as a white solid. . 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.21 (s, br, 1H, NH), 7.06 (s, br, 1H, H-4
), 7.0 (d, J = 8Hz, 1H, H-6), 6.71 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.55-3.58 (m,
4H), 3.41 (s, 2H, H-3), 2.63-2.68 (m, 2H), 2.39-2.47 (m, 6H).

【０３５６】 ３（３−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデヒド（０．２７ｇ，１．２
２ｍｍｏｌ），５−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−２−オキシインド
ール（０．３ｇ，１．２２ｍｍｏｌ）およびピペリジン（０．６ｍｌ，６．１ｍ
ｍｏｌ）のエタノール（４ｍｌ）中の混合物を，密封管中で１００℃で１２時間
保持した。反応液を冷却し，ジエチルエーテル（１５０ｍｌ）およびヘキサン（
１５０ｍｌ）に注加した。残った固体を濾過により除去し，ジエチルエーテルで
，次にヘキサンで洗浄し，乾燥して，０．２７ｇ（５０％）の３−（４−メトキ
シ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−５−（２−モルホリン−４−イ
ル−エチル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを橙黄色固体として得た
。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.41 (s, 1H, NH), 8.86 (d, J = 2.15Hz, 1H,
Ar-H), 8.39 (dd, J = 2 および 9Hz, 1H, Ar-H), 7.8 (dd, 1H, J = 1 および
3Hz, Ar-H), 7.7 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.6 (m, 1H, ArH), 7.5 (m, 2H, 2xArH),
7.21 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H), 7.02 (dd, 1H, J = 1 および 8Hz, Ar-H), 6.7
3 (d, 1H, J = 8Hz, Ar-H), 3.93 (s, 3H, OCH3), 3.58 (m, 4H, 2x OCH2CH2N),
2.7 (m, 2H, ArCH2CH2), 2.5 (m, 2H, ArCH2CH2N), 2.4 (m, 4H, 2xOCH2CH2N).
MS m/z 447.2 [M+1]+.3 (3-thiophene) -4-methoxybenzaldehyde (0.27 g, 1.2
2 mmol), 5- (2-morpholin-4-yl-ethyl) -2-oxindole (0.3 g, 1.22 mmol) and piperidine (0.6 ml, 6.1 m).
mol) in ethanol (4 ml) was kept at 100 ° C. for 12 hours in a sealed tube. The reaction solution was cooled, and diethyl ether (150 ml) and hexane (
150 ml). The remaining solid was removed by filtration, washed with diethyl ether, then with hexane, dried and dried to give 0.27 g (50%) of 3- (4-methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene) -5. -(2-morpholin-4-yl-ethyl) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as an orange-yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.41 (s, 1H, NH), 8.86 (d, J = 2.15Hz, 1H,
Ar-H), 8.39 (dd, J = 2 and 9Hz, 1H, Ar-H), 7.8 (dd, 1H, J = 1 and
3Hz, Ar-H), 7.7 (s, 1H, Ar-CH = C), 7.6 (m, 1H, ArH), 7.5 (m, 2H, 2xArH),
7.21 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H), 7.02 (dd, 1H, J = 1 and 8Hz, Ar-H), 6.7
3 (d, 1H, J = 8Hz, Ar-H), 3.93 (s, 3H, OCH 3 ), 3.58 (m, 4H, 2x OCH 2 CH 2 N),
2.7 (m, 2H, ArCH 2 CH 2 ), 2.5 (m, 2H, ArCH 2 CH 2 N), 2.4 (m, 4H, 2xOCH 2 CH 2 N).
MS m / z 447.2 [M + 1] + .

【０３５７】 実施例２７：Ｎ−［３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチル−ベン
ジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−
アセトアミド ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド（０．２５ｇ
，１．３ｍｍｏｌ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（０．２５ｇ，
１．３ｍｍｏｌ）およびピロリジン（０．５４ｍｌ，６．５ｍｍｏｌ）のエタノ
ール（４ｍｌ）中の混合物を密封管中で１００℃で１２時間保持した。反応液を
冷却し，次に水（１００ｍｌ）に注加した。形成した固体を濾過により除去し，
水で洗浄し，次に酢酸エチル（２００ｍｌ）に溶解した。酢酸エチル溶液を硫酸
マグネシウムで乾燥し，濃縮した。得られた固体をジクロロメタン／ヘキサン中
で砕いて，０．３３ｇ（７０％）のＮ−［３−（５−イソプロピル−４−メトキ
シ−２−メチルベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インド
ール−６−イル］−アセトアミドを褐色を帯びた黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.46 (s, 1H, NH), 7.49 (s, 1H, Ar-H), 7.46
(s, 1H, Ar-H), 7.41 (s, 1H, Ar-H), 6.93 (m, 1H, Ar-CH=C), 6.83 (dd, 1H,
J =2 および 8Hz, Ar-H), 3.83 (s, 3H, OCH3), 2.30 (s, 3H, Ar-CH3), 2.02
(s, 3H, NHCOCH3), 1.2 (m, 1H, CH(CH3)2), 1.1 (d, J = 7Hz, 6H, CH(CH3)2).
MS m/z 365.2 [M+1]+.Example 27: N- [3- (5-Isopropyl-4-methoxy-2-methyl-benzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl]-
Acetamide 5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzaldehyde (0.25 g
, 1.3 mmol), 6-acetamido-2-oxindole (0.25 g,
A mixture of (1.3 mmol) and pyrrolidine (0.54 ml, 6.5 mmol) in ethanol (4 ml) was kept in a sealed tube at 100 ° C. for 12 hours. The reaction was cooled and then poured into water (100ml). The solid formed is removed by filtration,
Washed with water and then dissolved in ethyl acetate (200 ml). The ethyl acetate solution was dried over magnesium sulfate and concentrated. The solid obtained was triturated in dichloromethane / hexane and 0.33 g (70%) of N- [3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro 1H-Indol-6-yl] -acetamide was obtained as a brownish yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.46 (s, 1H, NH), 7.49 (s, 1H, Ar-H), 7.46
(s, 1H, Ar-H), 7.41 (s, 1H, Ar-H), 6.93 (m, 1H, Ar-CH = C), 6.83 (dd, 1H,
J = 2 and 8Hz, Ar-H), 3.83 (s, 3H, OCH 3 ), 2.30 (s, 3H, Ar-CH 3 ), 2.02
(s, 3H, NHCOCH 3 ), 1.2 (m, 1H, CH (CH 3 ) 2 ), 1.1 (d, J = 7 Hz, 6H, CH (CH 3 ) 2 ).
MS m / z 365.2 [M + 1] + .

【０３５８】 実施例２８：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５
−エチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン １，２−ジクロロエタン中に懸濁した２−オキシインドール（３ｇ）を３．２
ｍｌの塩化アセチルでゆっくり処理した。得られた懸濁液を５０℃で５時間撹拌
し，冷却し，水に注加した。得られた沈殿物を真空濾過により回収し，豊富な水
で洗浄し，真空下で乾燥して，２．９ｇ（７３％収率）の５−アセチル−２−オ
キシインドールを褐色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ : 10.75 (s, br, NH), 7.83 (d, J = 8Hz, 1H),
7.78 (s, 1H, H-4), 6.88 (d, J = 8Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH2), 2.49 (s, 3H
, CH3).Example 28: 3- (3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5
-Ethyl-1,3-dihydroindole-2-one 3.2 g of 2-oxindole (3 g) suspended in 1,2-dichloroethane.
Treated slowly with ml of acetyl chloride. The resulting suspension was stirred at 50 C for 5 hours, cooled and poured into water. The resulting precipitate was collected by vacuum filtration, washed with abundant water and dried under vacuum to give 2.9 g (73% yield) of 5-acetyl-2-oxindole as a brown solid. . 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.75 (s, br, NH), 7.83 (d, J = 8Hz, 1H),
7.78 (s, 1H, H-4), 6.88 (d, J = 8Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH 2 ), 2.49 (s, 3H
, CH 3 ).

【０３５９】 ５−アセチル−２−オキシインドール（２ｇ）および１５ｍｌのトリフルオロ
酢酸を，氷浴中で１．８ｇのトリエチルシランでゆっくり処理し，次に室温で５
時間撹拌した。１ｍｌのトリエチルシランを加え，一夜撹拌を続けた。反応混合
物を氷水に注加し，得られた沈殿物を真空濾過により回収し，豊富な水で洗浄し
，真空下で乾燥して，１．３ｇ（７１％収率）の５−エチル−２−オキシインド
ールを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.25 (s, br, NH-1), 7.03 (s, 1H, H-4), 6.9
7 (d, J = 8Hz, 1H, H-6), 6.69 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.40 (s, 2H, CH2-3)
, 2.51 (q, J = 8Hz, 2H, CH2CH3-5), および 1.12 (t, J = 7Hz, 3H, CH2CH3-5
).5-Acetyl-2-oxindole (2 g) and 15 ml of trifluoroacetic acid were slowly treated with 1.8 g of triethylsilane in an ice bath and then at room temperature for 5 minutes.
Stirred for hours. 1 ml of triethylsilane was added and stirring was continued overnight. The reaction mixture was poured into ice-water and the resulting precipitate was collected by vacuum filtration, washed with abundant water, dried under vacuum and 1.3 g (71% yield) of 5-ethyl-2 -Oxindole was obtained as a yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.25 (s, br, NH-1), 7.03 (s, 1H, H-4), 6.9
7 (d, J = 8Hz, 1H, H-6), 6.69 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.40 (s, 2H, CH 2-3 )
, 2.51 (q, J = 8Hz, 2H, CH 2 CH 3 -5), and 1.12 (t, J = 7Hz, 3H, CH 2 CH 3 -5)
).

【０３６０】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−エチル−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−５−エチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.42 (s, 1H, NH), 7.56 (s, 1H), 7.51 (s, 2
H), 7.49 (s, br, 1H), 7.08 (dd, J = 8Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8Hz, 1H), 3.7
4 (s, 3H, OCH3), 3.25-3.55 (m, 2H, 2 x (CH3)2CH), 2.44 (q, J = 8Hz, 2H,
CH3CH2), 1.22 (d, J = 7Hz, 12H, 2 x (CH3)2CH), 1.08 (t, J = 8Hz, 3H, CH 3 CH2). MS APCI m/z 364.3 [M+1]+.[0360] 3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 5-ethyl-2-
After condensing with oxindole, 0.3 g of 3- (3,5-diisopropyl-4-
(Methoxybenzylidene) -5-ethyl-1,3-dihydroindol-2-one
Was obtained as a yellow-orange solid.1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.42 (s, 1H, NH), 7.56 (s, 1H), 7.51 (s, 2
H), 7.49 (s, br, 1H), 7.08 (dd, J = 8Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8Hz, 1H), 3.7
4 (s, 3H, OCH3), 3.25-3.55 (m, 2H, 2 x (CHThree)TwoCH), 2.44 (q, J = 8Hz, 2H,
 CHThreeCHTwo), 1.22 (d, J = 7Hz, 12H, 2 x (CHThree)TwoCH), 1.08 (t, J = 8Hz, 3H, CH Three CHTwo). MS APCI m / z 364.3 [M + 1]+.

【０３６１】 実施例２９：Ｎ−［２'−メトキシ−５'−（２−オキソ−１，２−ジヒドロイン
ドール−３−イリデンメチル）−ビフェニル−３−イル］−アセトアミド ３−ブロモ−ｐ−アニスアルデヒド（１ｇ，４．６５ｍｍｏｌ），ピロリジン
（１．９ｍｌ，２３．２ｍｍｏｌ）およびオキシインドール（０．６２ｇ，４．
６５ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（７ｍｌ）中の混合物を，密封管中で１
００℃で１２時間保持した。混合物を室温に冷却し，１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）に
注加した。形成した沈殿物を濾過し，水で洗浄した。次に沈殿物を酢酸エチル（
２００ｍｌ）に溶解し，溶液をブラインで洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，
次に濃縮した。得られた固体をクロマトグラフィー（シリカ，３０−４０％酢酸
エチル／ヘキサン）を行い，０．６３ｇ（４２％）の３−（３−ブロモ−４−メ
トキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄色固体とし
て得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (m, 1H, NH), 7.7 (m, 1H, Ar-H), 7.6 (m
, 1H, Ar-CH=C), 7.5 (m, 1H, Ar-H), 7.2 (m, 2H, 2xAr-H), 6.9 (m, 1H, Ar-H
), 6.8 (m, 1H, Ar-H), 3.9 (s, 3H, OCH3). MS m/z 330.0 および 332.0. [M]+ および [M+2]+.Example 29: N- [2'-methoxy-5 '-(2-oxo-l, 2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -biphenyl-3-yl] -acetamido 3-bromo-p-anis Aldehyde (1 g, 4.65 mmol), pyrrolidine (1.9 ml, 23.2 mmol) and oxindole (0.62 g, 4.
65 mmol) in 1 ml of dimethylformamide (7 ml) in a sealed tube.
It was kept at 00 ° C. for 12 hours. The mixture was cooled to room temperature and poured into 1N hydrochloric acid (100ml). The precipitate formed was filtered and washed with water. Next, the precipitate was washed with ethyl acetate (
200 ml), wash the solution with brine, dry over magnesium sulfate,
Then it was concentrated. The resulting solid was chromatographed (silica, 30-40% ethyl acetate / hexane) to give 0.63 g (42%) of 3- (3-bromo-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole-. The 2-one was obtained as a yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (m, 1H, NH), 7.7 (m, 1H, Ar-H), 7.6 (m
, 1H, Ar-CH = C), 7.5 (m, 1H, Ar-H), 7.2 (m, 2H, 2xAr-H), 6.9 (m, 1H, Ar-H)
), 6.8 (m, 1H, Ar-H), 3.9 (s, 3H, OCH 3). MS m / z 330.0 and 332.0. [M] + and [M + 2] +.

【０３６２】 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ，０．
０２ｍｍｏｌ）を，３−（３−ブロモ−４−メトキシ−ベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン（０．２ｇ，０．６１ｍｍｏｌ）のトルエン（
１ｍｌ）およびエタノール（２ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナト
リウム（１．２ｍｌ，２．４ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に，３−アセトア
ミドフェニルボロン酸（０．１２ｇ，０．６７ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密封
管中で１００℃に加熱し，ここで１２時間保持した。次に，反応液を水（５０ｍ
ｌ）に注加し，酢酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽
和水性炭酸水素ナトリウム（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄した
。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ
，３０−４０％酢酸エチル／ヘキサン）により，ワックス状固体を得，これをジ
エチルエーテル／ヘキサン中で砕き，次に乾燥して，０．０５ｇ（２２％）のＮ
−［２'−メトキシ−５'−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イ
リデンメチル）−ビフェニル−３−イル］−アセトアミドを赤色を帯びた橙色固
体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.6 (m, 1H, NH), 9.88 (s, 1H, NHAc), 7.7 (
m, 1H, Ar-H), 7.5 (m, 3H, 2xAr-H および Ar-CH=C), 7.2 (m, 4H, Ar-H), 7.0
(m, 2H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, Ar-H), 3.9 (two s, 3H, OCH3), 2.02 (2, 3H, C
OCH3). MS m/z 385.2 [M+1]+.Tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.02 g, 0.
02 mmol) with 3- (3-bromo-4-methoxy-benzylidene) -1,3
-Dihydroindol-2-one (0.2 g, 0.61 mmol) in toluene (
1 ml) and a solution in ethanol (2 ml), followed by 2M aqueous sodium carbonate (1.2 ml, 2.4 mmol). To this mixture was added 3-acetamidophenylboronic acid (0.12 g, 0.67 mmol) and the mixture was heated to 100 ° C. in a sealed tube where it was held for 12 hours. Next, the reaction solution was washed with water (50 m
1) and extracted with ethyl acetate (2 × 100 ml). The combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (50ml) and brine (50ml). The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Chromatography (silica, 30-40% ethyl acetate / hexane) gave a waxy solid which was triturated in diethyl ether / hexane and then dried to give 0.05 g (22%) of N
-[2'-Methoxy-5 '-(2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -biphenyl-3-yl] -acetamide was obtained as a reddish orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.6 (m, 1H, NH), 9.88 (s, 1H, NHAc), 7.7 (
m, 1H, Ar-H), 7.5 (m, 3H, 2xAr-H and Ar-CH = C), 7.2 (m, 4H, Ar-H), 7.0
(m, 2H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, Ar-H), 3.9 (two s, 3H, OCH 3 ), 2.02 (2, 3H, C
OCH 3 ). MS m / z 385.2 [M + 1] + .

【０３６３】 実施例３０：５−フルオロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチ
ル−ベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを５−フルオ
ロ−２−オキシインドールと縮合して，０．２５ｇの５−フルオロ−３−（５−
イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 7.72 (s, 1H), 7.47 (s, 1
H), 7.1 (dd, 1H), 7.04 (ddd, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.82-6.86 (m, 1H), 3.86
(s, 3H, OCH3), 3.25-3.28 (m, 1H, (CH3)2CH), 2.32 (s, 3H, CH3), 1.14 (d,
6H, (CH3)2CH). EI MS m/z 325 [M]+.Example 30: 5-Fluoro-3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methyl-benzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 5-isopropyl-4-methoxy-2-methyl Benzaldehyde is condensed with 5-fluoro-2-oxindole to give 0.25 g of 5-fluoro-3- (5-
Isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 7.72 (s, 1H), 7.47 (s, 1
H), 7.1 (dd, 1H), 7.04 (ddd, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.82-6.86 (m, 1H), 3.86
(s, 3H, OCH 3 ), 3.25-3.28 (m, 1H, (CH 3 ) 2 CH), 2.32 (s, 3H, CH 3 ), 1.14 (d,
6H, (CH 3 ) 2 CH). EI MS m / z 325 [M] + .

【０３６４】 実施例３１：Ｎ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−２−イルベンジリデ
ン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセト
アミド テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．２４ｇ）を，
４−メトキシ−３−ブロモベンズアルデヒド（１．５ｇ）のトルエン（１５ｍｌ
）およびエタノール（１５ｍｌ）中の溶液に加え，次に２Ｍ水性炭酸ナトリウム
（１４ｍｌ）を加えた。この混合物に，チオフェン−２−ボロン酸（０．９８ｇ
）を加え，混合物を加熱還流した。３時間後，反応液を水（１００ｍｌ）と酢酸
エチル（２５０ｍｌ）との間に分配した。有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウム
（７５ｍｌ）およびブライン（７５ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し
，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，２０％酢酸エチル／ヘキサン）によ
り，１．３ｇ（８７％）の３−（２−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデ
ヒドを黄色油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.92 (s, 1H, CHO), 8.2 (d, 1H, J = 3Hz, 1xA
r-H), 7.8 (dd, 1H, J = 10 および 10Hz, SCHCHCH), 7.65 (m, 1H, Ar-H), 7.6
0 (dd, 1H, J = 2 および 6Hz, Ar-H), 7.32 (d, 1H, J = 10Hz, SCHCHCH), 7.1
3 (d, 1H, J = 10 および 6Hz, SCHCHCH), 3.99 (s, 3H, OCH3).Example 31: N- [3- (4-Methoxy-3-thiophen-2-ylbenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamidotetrakis (tri Phenylphosphine) palladium (0) (0.24 g)
4-methoxy-3-bromobenzaldehyde (1.5 g) in toluene (15 ml)
) And a solution in ethanol (15 ml), followed by 2M aqueous sodium carbonate (14 ml). To this mixture was added thiophene-2-boronic acid (0.98 g
) Was added and the mixture was heated to reflux. After 3 hours, the reaction was partitioned between water (100ml) and ethyl acetate (250ml). The organic layer was washed with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate (75ml) and brine (75ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. Chromatography (silica, 20% ethyl acetate / hexane) provided 1.3 g (87%) of 3- (2-thiophene) -4-methoxybenzaldehyde as a yellow oil. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.92 (s, 1H, CHO), 8.2 (d, 1H, J = 3Hz, 1xA
rH), 7.8 (dd, 1H, J = 10 and 10Hz, SCHCHCH), 7.65 (m, 1H, Ar-H), 7.6
0 (dd, 1H, J = 2 and 6Hz, Ar-H), 7.32 (d, 1H, J = 10Hz, SCHCHCH), 7.1
3 (d, 1H, J = 10 and 6Hz, SCHCHCH), 3.99 (s , 3H, OCH 3).

【０３６５】 ３−（２−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデヒド（０．２５ｇ，１．
１５ｍｍｏｌ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（０．２２ｇ，１．
１５ｍｍｏｌ）およびピロリジン（０．４８ｍｌ，５．７５ｍｍｏｌ）のエタノ
ール（４ｍｌ）中の混合物を，密封管中で１００℃で１２時間保持した。反応液
を冷却し，形成した沈殿物を濾過により除去し，エタノール，続いてヘキサンで
洗浄し，乾燥して，０．１５ｇ（３３％）のＮ−［３−（４−メトキシ−３−チ
オフェン−２−イルベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−６−イル］−アセトアミドを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.49 (s, 1H, NH), 9.95 (s, 1H, NHAc), 8.99
(d, J = 2Hz, 1H, Ar-H), 8.28 (dd, J = 2 および 9Hz, 1H, Ar-H), 7.6 (m,
2H, 2xAr-H), 7.5 (m, 2H, Ar-H および Ar-CH=C), 7.38 (d, 1H, J =1Hz, Ar-H
), 7.22 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 7.14 (dd, 1H, J = 4 および 5Hz, Ar-H), 7
.05 (dd, 1H, J =2 および 9Hz, Ar-H), 3.97 (s, 3H, OCH3), 2.04 (s, 3H, NH
COCH3). MS m/z 391.3 [M]+ および [M+2]+.3- (2-thiophene) -4-methoxybenzaldehyde (0.25 g, 1.
15 mmol), 6-acetamido-2-oxindole (0.22 g, 1.
A mixture of 15 mmol) and pyrrolidine (0.48 ml, 5.75 mmol) in ethanol (4 ml) was kept in a sealed tube at 100 ° C. for 12 hours. The reaction was cooled and the precipitate formed was removed by filtration, washed with ethanol followed by hexane, dried and dried with 0.15 g (33%) of N- [3- (4-methoxy-3-thiophene). -2-ylbenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide as a yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.49 (s, 1H, NH), 9.95 (s, 1H, NHAc), 8.99
(d, J = 2Hz, 1H, Ar-H), 8.28 (dd, J = 2 and 9Hz, 1H, Ar-H), 7.6 (m,
2H, 2xAr-H), 7.5 (m, 2H, Ar-H and Ar-CH = C), 7.38 (d, 1H, J = 1Hz, Ar-H
), 7.22 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 7.14 (dd, 1H, J = 4 and 5Hz, Ar-H), 7
.05 (dd, 1H, J = 2 and 9Hz, Ar-H), 3.97 (s, 3H, OCH 3 ), 2.04 (s, 3H, NH
COCH 3 ). MS m / z 391.3 [M] + and [M + 2] + .

【０３６６】 実施例３２：６−アミノ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシ−ベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−アミノ−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの６−アミノ−３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。Example 32: 6-Amino-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxy-benzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 6- Amino-2-
Condensation with oxindole provided 0.3 g of 6-amino-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole-2-one as a yellow-orange solid.

【０３６７】 実施例３３：Ｎ−［３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド ６−アセトアミド−２−オキシインドール（２８５ｍｇ），２，２−ジメチル
クロマン−６−カルボキシアルデヒド（２８５ｍｇ）およびピペリジン（０．２
ｍｌ）の混合物を９０℃で一夜撹拌した。反応混合物を冷却し，２０ｍｌの水で
希釈した。形成した粘稠な固体を濾過し，クロマトグラフィー（２％エタノール
，酢酸エチル中）を行って，２４０ｍｇ（４４％）のＮ−［３−（２，２−ジメ
チルクロマン−６−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−６−イル］−アセトアミドを橙赤色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.44 (s, 1H, NH), 10.0 (s, 1H, NH), 7.6, 7
.46, 7.42, 7.37, 6.93, 6.82 (m, 7H, 6 Ar-H および 1 ビニル-H), 2.8 (t, J
= 6Hz, 2H, CH2), 2.03 (s, 3H, CH3), 1.83 (t, J = 6Hz, 2H, CH2), 1.32 (s
, 6H, 2x CH3). MS m/z 363.1 [M+1]+.Example 33: N- [3- (2,2-Dimethylchroman-6-ylmethylene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide 6-acetamido-2-oxindole (285 mg), 2,2-dimethylchroman-6-carboxaldehyde (285 mg) and piperidine (0. 2
ml) was stirred at 90 ° C. overnight. The reaction mixture was cooled and diluted with 20 ml of water. The viscous solid formed was filtered and chromatographed (2% ethanol in ethyl acetate) to give 240 mg (44%) of N- [3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -2. -Oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide was obtained as an orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.44 (s, 1H, NH), 10.0 (s, 1H, NH), 7.6, 7
.46, 7.42, 7.37, 6.93, 6.82 (m, 7H, 6 Ar-H and 1 vinyl-H), 2.8 (t, J
= 6Hz, 2H, CH 2) , 2.03 (s, 3H, CH 3), 1.83 (t, J = 6Hz, 2H, CH 2), 1.32 (s
, 6H, 2x CH 3 ). MS m / z 363.1 [M + 1] + .

【０３６８】 実施例３４：５−ブロモ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２０ｍｌのアセトニトリル中の２−オキシインドール（１．３ｇ）を−１０℃
に冷却し，２．０ｇのＮ−ブロモスクシンイミドを撹拌しながらゆっくり加えた
。反応液を−１０℃で１時間，次に０℃で２時間撹拌した。形成した沈殿物を回
収し，水で洗浄し，乾燥して，１．９ｇ（９０％収率）の５−ブロモ−２−オキ
シインドールを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.44 (s, br, 1H, NH-1), 7.32-7.36 (m, 2H),
6.76 (d, J = 8.5 Hz, 1H, H-7), 3.5 (s, 2H, CH2). MS m/z 212.1 および 214.1, [M]+ および [M+2]+.Example 34: 5-Bromo-3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one 2-oxindole (1.3 g) in 20 ml of acetonitrile To -10 ° C
And 2.0 g of N-bromosuccinimide was added slowly with stirring. The reaction was stirred at −10 ° C. for 1 hour and then at 0 ° C. for 2 hours. The precipitate formed was collected, washed with water and dried to give 1.9 g (90% yield) of 5-bromo-2-oxindole. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.44 (s, br, 1H, NH-1), 7.32-7.36 (m, 2H),
6.76 (d, J = 8.5 Hz , 1H, H-7), 3.5 (s, 2H, CH 2). MS m / z 212.1 and 214.1, [M] + and [M + 2] +.

【０３６９】 ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマン（市販）を５−ブロモ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（２，２−ジメチルクロマ
ン−６−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体
として得た。 異性体 1 (67%): 1HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.65 (s, br, 1H, NH), 7.73
(d, 1H), 7.6 (s, 1H, ビニル), 7.5 (s, br, 1H), 7,47 (dd, 1H), 7.37 (dd,
1H), 6.86 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 2.77-2.81 (m, 4H, 2 x CH2), 1.81-1.84
(m, 4H, 2 x CH2), 1.32 (s, 6H, 2 x CH3). 異性体 2 (33%): 1HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.63 (s, br, 1H, NH), 8.32
(dd, 1H), 8.27 (s, br, 1H), 7.89 (d, 1H), 7,81 (s, 1H, ビニル), 7.3 (dd
, 1H), 6.79 (d, 1H), 6.76 (d, 1H), 2.77-2.81 (m, 4H, 2 x CH2), 1.81-1.84
(m, 4H, 2 x CH2), 1.31 (s, 6H, 2 x CH3). MS APCI m/z 384.1 および 385.9, [M]+ および [M+2]+.2,2-Dimethyl-6-formyl roman (commercially available) is condensed with 5-bromo-2-oxindole to give 0.3 g of 5-bromo-3- (2,2-dimethylchroman-6. -Ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. Isomer 1 (67%): 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.65 (s, br, 1H, NH), 7.73
(d, 1H), 7.6 (s, 1H, vinyl), 7.5 (s, br, 1H), 7,47 (dd, 1H), 7.37 (dd,
1H), 6.86 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 2.77-2.81 (m, 4H, 2 x CH 2 ), 1.81-1.84
(m, 4H, 2 x CH 2 ), 1.32 (s, 6H, 2 x CH 3 ). Isomer 2 (33%): 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.63 (s, br, 1H , NH), 8.32
(dd, 1H), 8.27 (s, br, 1H), 7.89 (d, 1H), 7,81 (s, 1H, vinyl), 7.3 (dd
, 1H), 6.79 (d, 1H), 6.76 (d, 1H), 2.77-2.81 (m, 4H, 2 x CH 2 ), 1.81-1.84
(m, 4H, 2 x CH 2 ), 1.31 (s, 6H, 2 x CH 3 ). MS APCI m / z 384.1 and 385.9, [M] + and [M + 2] + .

【０３７０】 実施例３５：３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ，０．
０２ｍｍｏｌ）を，３−（３−ブロモ−４−メトキシ−ベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン（０．２ｇ，０．６１ｍｍｏｌ）のトルエン（
１ｍｌ）およびエタノール（１ｍｌ）中の溶液に加え，次に２Ｍ水性炭酸ナトリ
ウム（１．２ｍｌ，２．４ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に，チオフェン−３
−ボロン酸（０．０９ｇ，０．６７ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密封管中で１０
０℃で１２時間保持した。次に，反応液を水（５０ｍｌ）に注加し，酢酸エチル
（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウム
（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し
，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，塩化メチレン，次に３０−４０％酢
酸エチル／ヘキサン）により，０．１ｇ（５０％）の３−（４−メトキシ−３−
チオフェン−３−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 7.8 (m, 2H, 2xAr-H), 7.6
(m, 5H, 4xAr-H および Ar-CH=C), 7.2 (m, 2H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, Ar-H), 3
.92 (s, 3H, OCH3). MS m/z 334.3 [M+1]+.Example 35: 3- (4-Methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene)-
1,3-dihydroindol-2-one tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.02 g, 0.
02 mmol) with 3- (3-bromo-4-methoxy-benzylidene) -1,3
-Dihydroindol-2-one (0.2 g, 0.61 mmol) in toluene (
1 ml) and a solution in ethanol (1 ml), followed by 2M aqueous sodium carbonate (1.2 ml, 2.4 mmol). To this mixture was added thiophene-3
-Boronic acid (0.09 g, 0.67 mmol) is added and the mixture is placed in a sealed tube for 10 minutes.
It was kept at 0 ° C. for 12 hours. Next, the reaction was poured into water (50 ml) and extracted with ethyl acetate (2 × 100 ml). The combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (50ml) and brine (50ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. Chromatography (silica, methylene chloride, then 30-40% ethyl acetate / hexane) gave 0.1 g (50%) of 3- (4-methoxy-3-).
Thiophen-3-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 7.8 (m, 2H, 2xAr-H), 7.6
(m, 5H, 4xAr-H and Ar-CH = C), 7.2 (m, 2H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, Ar-H), 3
.92 (s, 3H, OCH 3 ). MS m / z 334.3 [M + 1] + .

【０３７１】 実施例３６：５−ブロモ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチル
−ベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを５−ブロモ
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（５−イソプ
ロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.6, 7.5, 7.4, 7.0, 6.8 (m,
6H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.3 (m, 1H, CH), 2.3 (s, 3H, CH3)
, 1.2 (d, 6H, 2xCH3).Example 36: 5-Bromo-3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methyl-benzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 5-isopropyl-4-methoxy-2-methyl Benzaldehyde is condensed with 5-bromo-2-oxindole to give 0.3 g of 5-bromo-3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-dihydroindole-2-one. Was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.6, 7.5, 7.4, 7.0, 6.8 (m,
6H, aromatic, = CH-), 3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.3 (m, 1H, CH), 2.3 (s, 3H, CH 3 )
, 1.2 (d, 6H, 2xCH 3 ).

【０３７２】 実施例３７：５−フルオロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを５−フルオロ−２−オキシイ
ンドールと縮合して，０．３ｇの５−フルオロ−３−（６−メトキシビフェニル
−３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体と
して得た。Example 37: 5-Fluoro-3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one 4-methoxy-3-phenylbenzaldehyde was converted to 5-fluoro-2-oxy Condensation with indole provided 0.3 g of 5-fluoro-3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one as a yellow-orange solid.

【０３７３】 実施例３８：３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチ
ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２０ｍｌの乾燥エーテル中のジエチルオキサレート（３０ｍｌ）を，撹拌しな
がら，５０ｍｌの乾燥エーテル中に懸濁した１９ｇのカリウムエトキシドに加え
た。混合物を氷浴中で冷却し，２０ｍｌの乾燥エーテル中の２０ｍｌの３−ニト
ロ−ｏ−キシレンをゆっくり加えた。形成した粘稠な暗赤色混合物を０．５時間
還流し，濃縮して暗赤色固体を得，ほぼすべての固体が溶解するまで１０％水酸
化ナトリウムで処理した。暗赤色混合物を，赤色が黄色に変化するまで，３０％
過酸化水素で処理した。次に，水酸化ナトリウムの添加により暗赤色が形成され
なくなるまで，混合物を１０％水酸化ナトリウムと３０％過酸化水素で交互に処
理した。残りの固体を濾過し，濾液を６Ｎ塩酸で酸性にした。得られた沈殿物を
真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，９．８ｇ（４５％収率
）の１−メチル−６−ニトロフェニル酢酸を灰白色固体として得た。固体をメタ
ノール中で，１０％パラジウム担持炭素で水素化して，９．０４ｇの４−メチル
−２−オキシインドールを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.27 (s, br, 1H, NH), 7.06 (t, J = 8Hz, 1H
, H-6), 6.74 (d, J = 8Hz, H-5), 6.63 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.36 (s, 2H
, CH2), 2.18 (s, 3H, CH3).Example 38: 3- (3-Isopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one Diethyl oxalate (30 ml) in 20 ml of dry ether is stirred. While adding to 19 g of potassium ethoxide suspended in 50 ml of dry ether. The mixture was cooled in an ice bath and 20 ml of 3-nitro-o-xylene in 20 ml of dry ether was added slowly. The viscous dark red mixture formed was refluxed for 0.5 h and concentrated to a dark red solid, which was treated with 10% sodium hydroxide until almost all solids dissolved. 30% of dark red mixture until red turns yellow
Treated with hydrogen peroxide. The mixture was then treated alternately with 10% sodium hydroxide and 30% hydrogen peroxide until no dark red color was formed by the addition of sodium hydroxide. The remaining solid was filtered and the filtrate was acidified with 6N hydrochloric acid. The resulting precipitate was collected by vacuum filtration, washed with water, and dried under vacuum to give 9.8 g (45% yield) of 1-methyl-6-nitrophenylacetic acid as an off-white solid. The solid was hydrogenated in methanol over 10% palladium on carbon to give 9.04 g of 4-methyl-2-oxindole as a white solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.27 (s, br, 1H, NH), 7.06 (t, J = 8Hz, 1H
, H-6), 6.74 (d, J = 8Hz, H-5), 6.63 (d, J = 8Hz, 1H, H-7), 3.36 (s, 2H
, CH 2 ), 2.18 (s, 3H, CH 3 ).

【０３７４】 ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−２−オキシ
インドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−イソプロピル−４−メトキシベ
ンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固
体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.4(s, 1H, NH), 8.2, 8.1, 7.6, 7.2, 7.1, 6.8, 6.7 (
m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 2.6 (m, 1H, CH
), 1.2 (d, 6H, 2xCH3).Condensation of 3-isopropyl-4-methoxybenzaldehyde with 4-methyl-2-oxindole yields 0.25 g of 3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3- Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.4 (s, 1H, NH), 8.2, 8.1, 7.6, 7.2, 7.1, 6.8, 6.7 (
m, 7H, aromatic, = CH-), 3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 1H, CH), 2.6 (m, 1H, CH
), 1.2 (d, 6H, 2xCH 3 ).

【０３７５】 実施例３９：３−（４，５−ジメトキシ−２−チオフェン−２−イルベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ６−ブロモベラトルムアルデヒド（１ｇ，４．０８ｍｍｏｌ），オキシインド
ール（０．５４ｇ，４．０８ｍｍｏｌ）およびピロリジン（１．７ｍｌ，２０．
４ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（６ｍｌ）中の混合物を，密封管中で１０
０℃で１２時間保持した。反応混合物を冷却し，１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）に加え
た。形成した沈殿物を濾過し，水で洗浄した。次に，沈殿物を酢酸エチル（２０
０ｍｌ）に溶解し，溶液をブラインで洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮
した。得られた固体をクロマトグラフィー（シリカ，３０−４−％酢酸エチル／
ヘキサン）を行い，１．２ｇ（８１％）の３−（３−ブロモ−４，５−ジメトキ
シベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄色固体として得
た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (s, 1H, NH), 7.4 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.3
(m, 2H, 2xAr-H), 7.2 m, 1H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, 2xAr-H), 3.8 (s, 3H, OCH 3 ), 3.7 (s, 3H, OCH3). MS m/z 360.5 および 362.5, [M]+ および [M+2]+.Example 39: 3- (4,5-Dimethoxy-2-thiophen-2-ylbenzylide
) -1,3-Dihydroindol-2-one 6-bromoveratraldehyde (1 g, 4.08 mmol), oxyindo
(0.54 g, 4.08 mmol) and pyrrolidine (1.7 ml, 20.
4 mmol) in 10 ml of dimethylformamide (6 ml) in a sealed tube.
It was kept at 0 ° C. for 12 hours. The reaction mixture was cooled and added to 1N hydrochloric acid (100 ml).
Was. The precipitate formed was filtered and washed with water. Next, the precipitate was washed with ethyl acetate (20
0 ml), wash the solution with brine, dry over magnesium sulfate and concentrate
did. The resulting solid was chromatographed (silica, 30-4-% ethyl acetate /
Hexane) and 1.2 g (81%) of 3- (3-bromo-4,5-dimethoxy).
(Shibenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one as a yellow solid.
Was.1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (s, 1H, NH), 7.4 (s, 1H, Ar-CH = C), 7.3
 (m, 2H, 2xAr-H), 7.2 m, 1H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, 2xAr-H), 3.8 (s, 3H, OCH Three ), 3.7 (s, 3H, OCHThree). MS m / z 360.5 and 362.5, [M]+ And [M + 2]+.

【０３７６】 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０３ｇ，０．
０３ｍｍｏｌ）を３−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシベンジリデン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン（０．３２ｇ，０．８９ｍｍｏｌ）のトルエ
ン（２ｍｌ）およびエタノール（２ｍｌ）中の溶液に加え，次に２Ｍ水性炭酸ナ
トリウム（１．８ｍｌ，３．６ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に，チオフェン
−２−ボロン酸（０．１３ｇ，０．９８ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密封管中で
１００℃で１２時間保持した。反応混合物を水（５０ｍｌ）に注加し，酢酸エチ
ル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウ
ム（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥
し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，３０−４０％酢酸エチル／ヘキサ
ン）により橙色固体を得，これを塩化メチレン中で砕き，乾燥して，０．１９ｇ
（５９％）の３−（４，５−ジメトキシ−２−チオフェン−２−イルベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (m, 1H, NH), 7.6 (m, 1H, Ar-H), 7.5 (m
, 2H, Ar-H), 7.3 (m, 1H, Ar-CH=C), 7.2 (m, 4H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, Ar-H),
6.8 (m, 2H, Ar-H), 3.9 (two s, 3H, OCH3), 3.7 (two s, 3H, COCH3). MS m/z 364.0 [M+1]+.Tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.03 g, 0.
03 mmol) with 3- (3-bromo-4,5-dimethoxybenzylidene) -1,
To a solution of 3-dihydroindol-2-one (0.32 g, 0.89 mmol) in toluene (2 ml) and ethanol (2 ml) was added 2M aqueous sodium carbonate (1.8 ml, 3.6 mmol). Was. To this mixture was added thiophene-2-boronic acid (0.13 g, 0.98 mmol) and the mixture was kept in a sealed tube at 100 ° C. for 12 hours. The reaction mixture was poured into water (50ml) and extracted with ethyl acetate (2x100ml). The combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (50ml) and brine (50ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. Chromatography (silica, 30-40% ethyl acetate / hexane) gave an orange solid which was triturated in methylene chloride, dried and 0.19 g.
(59%) of 3- (4,5-dimethoxy-2-thiophen-2-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as an orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (m, 1H, NH), 7.6 (m, 1H, Ar-H), 7.5 (m
, 2H, Ar-H), 7.3 (m, 1H, Ar-CH = C), 7.2 (m, 4H, Ar-H), 6.8 (m, 2H, Ar-H),
6.8 (m, 2H, Ar-H), 3.9 (two s, 3H, OCH 3 ), 3.7 (two s, 3H, COCH 3 ). MS m / z 364.0 [M + 1] + .

【０３７７】 実施例４０：Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−３−チ
オフェン−２−イルベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−６−イル｝−アセトアミド トリフェニルホスフィン（６．８５ｇ）を，３−ブロモ−４−ヒドロキシベン
ズアルデヒド（５ｇ）のテトラヒドロフラン（４０ｍｌ）中の溶液に加え，続い
て２−ヒドロキシエチルモルホリン（３．０１ｍｌ）を加え，次にジエチルアゾ
ジカルボキシレート（４．１１ｍｌ）を滴加した。１２時間後，反応液を減圧下
で濃縮し，２Ｎ塩酸（２００ｍｌ）に注加し，酢酸エチル（２ｘ１５０ｍｌ）で
抽出した。水性層を固体炭酸水素ナトリウムでｐＨ９に塩基性にし，酢酸エチル
（２ｘ１５０ｍｌ）で抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮して
，４．４ｇ（５６％）の４−モルホリノエトキシ−３−ブロモベンズアルデヒド
を赤みを帯びた油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.84 (s, 1H, NH), 8.07 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-
H), 7.90 (dd, 1H, J = 2 および 8Hz, Ar-H), 7.32 (d, 1H, J = 8Hz, Ar-H),
4.29 (t, 2H, J = 6Hz, Ar-OCH2), 3.56 (m, 4H, OCH2CH2N), 2.76 (t, 2H, J =
6Hz, ArOCH2-CH2N), 2.50 (m, 4H, NCH2CH2O).Example 40: N- {3- [4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -3-thiophen-2-ylbenzylidene] -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-6 -Ill-acetamide triphenylphosphine (6.85 g) is added to a solution of 3-bromo-4-hydroxybenzaldehyde (5 g) in tetrahydrofuran (40 ml), followed by 2-hydroxyethylmorpholine (3.01 ml). In addition, diethyl azodicarboxylate (4.11 ml) was then added dropwise. After 12 hours, the reaction was concentrated under reduced pressure, poured into 2N hydrochloric acid (200ml) and extracted with ethyl acetate (2x150ml). The aqueous layer was basified to pH 9 with solid sodium bicarbonate and extracted with ethyl acetate (2 × 150 ml). The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated to give 4.4 g (56%) of 4-morpholinoethoxy-3-bromobenzaldehyde as a reddish oil. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.84 (s, 1H, NH), 8.07 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-
H), 7.90 (dd, 1H, J = 2 and 8Hz, Ar-H), 7.32 (d, 1H, J = 8Hz, Ar-H),
4.29 (t, 2H, J = 6Hz, Ar-OCH 2 ), 3.56 (m, 4H, OCH 2 CH 2 N), 2.76 (t, 2H, J =
6Hz, ArOCH 2 -CH 2 N), 2.50 (m, 4H, NCH 2 CH 2 O).

【０３７８】 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．２３）を，４
−モルホリノエトキシ−３−ブロモベンズアルデヒド（２．１３ｇ）のトルエン
（１０ｍｌ）およびエタノール（１０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭
酸ナトリウム（１３ｍｌ）を加えた。この混合物にチオフェン−２−ボロン酸（
１．１３ｇ）を加え，混合物を１２時間還流した。次に反応混合物を水（１００
ｍｌ）に注加し，酢酸エチル（３ｘ１００ｍｌ）中に抽出した。生成物を１Ｎ塩
酸（２ｘ１００ｍｌ）中に抽出し，固体炭酸水素ナトリウムで水性層をｐＨ９に
塩基性にし，酢酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。有機層をブライン（７
５ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮して，１．７ｇ（７５％）
の３−（２−チオフェン）−４−モルホリノエトキシベンズアルデヒドを緑色を
帯びた黄色油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.93 (s, 1H, CHO), 8.2 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-
H), 7.82 (dd, 1H, J = 2 および 8Hz, Ar-H), 7.76 (dd, 1H, J = 1 および 4H
z, Ar-H), 7.59 (dd, 1H, J = 1 および 5Hz, Ar-H), 7.35 (d, 1H, J = 9Hz, A
r-H), 7.14 (dd, 1H, J = 4 および 5Hz, Ar-H), 4.34 (t, J = 6Hz, 2H, O-CH2 CH2), 3.56 (m, 4H, 2x ringO-CH2CH2), 2.82 (t, J = 6Hz, 2H, N-CH2CH2), 2.
5 (m on DMSO, 4H, 2x ringN-CH2CH2). MS m/z 318.2 [M+1]+.The tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.23) was added to 4
To a solution of -morpholinoethoxy-3-bromobenzaldehyde (2.13 g) in toluene (10 ml) and ethanol (10 ml) was added, followed by 2M aqueous sodium carbonate (13 ml). To this mixture was added thiophen-2-boronic acid (
1.13 g) was added and the mixture was refluxed for 12 hours. The reaction mixture was then added to water (100
ml) and extracted into ethyl acetate (3 × 100 ml). The product was extracted into 1N hydrochloric acid (2 × 100 ml), the aqueous layer was basified to pH 9 with solid sodium bicarbonate and extracted with ethyl acetate (2 × 100 ml). The organic layer was washed with brine (7
5 ml), dried over magnesium sulfate, concentrated and 1.7 g (75%)
Of 3- (2-thiophene) -4-morpholinoethoxybenzaldehyde was obtained as a greenish yellow oil. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.93 (s, 1H, CHO), 8.2 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-
H), 7.82 (dd, 1H, J = 2 and 8Hz, Ar-H), 7.76 (dd, 1H, J = 1 and 4H
z, Ar-H), 7.59 (dd, 1H, J = 1 and 5Hz, Ar-H), 7.35 (d, 1H, J = 9Hz, A
rH), 7.14 (dd, 1H, J = 4 and 5Hz, Ar-H), 4.34 (t, J = 6Hz, 2H, O-CH 2 CH 2 ), 3.56 (m, 4H, 2x ringO-CH 2 CH 2), 2.82 (t, J = 6Hz, 2H, N-CH 2 CH 2), 2.
5 (m on DMSO, 4H, 2x ringN-CH 2 CH 2 ). MS m / z 318.2 [M + 1] + .

【０３７９】 ３（２−チオフェン）−４−モルホリノエトキシ−ベンズアルデヒド（１．７
４ｇ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（１ｇ）およびピペリジン（
２．６ｍｌ）のエタノール（１１ｍｌ）中の混合物を密封管中で１００℃で１２
時間保持した。反応液を冷却し，ジエチルエーテルに加え，エーテルをデカント
した。油状残渣を塩化メチレン（１０ｍｌ）に溶解し，エーテル（２００ｍｌ）
およびヘキサン（１００ｍｌ）中で沈殿させた。沈殿物を濾過により除去し，エ
ーテルで，次にヘキサンで洗浄し，乾燥して，褐色を帯びた固体を得た。クロマ
トグラフィー（シリカ，５％メタノール／ジクロロメタン）により，Ｎ−｛３−
［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−３−チオフェン−２−イルベン
ジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル｝−
アセトアミドを暗黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.49 (s, 1H, NH), 10.01 (s, 1H, NHAc), 8.0
5 (d, J = 2Hz, 1H, Ar-H), 7.72 (m, 1H, Ar-H), 7.65 (m, 1H, Ar-H), 7.48 (
m, 2H, 2xAr-H), 7.47 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.45 (d, 1H, J =2Hz, Ar-H), 7.29
(d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 7.13 (m, 1H, Ar-H), 6.90 (dd, 1H, J =2 および 9H
z, Ar-H), 4.32 (m, 2H, ArOCH2CH2N), 3.58 (m, 4H, 2xOCH2CH2N), 2.84 (m, 2
H, ArOCH2CH2N), 2.5 (m under DMSO, 4H, 2xOCH2CH2N), 2.03 (s, 3H, NHCOCH3 ). MS m/z 490.0 [M+1]+.3 (2-thiophene) -4-morpholinoethoxy-benzaldehyde (1.7
4 g), 6-acetamido-2-oxindole (1 g) and piperidine (
2.6 ml) in ethanol (11 ml) at 100 ° C. in a sealed tube.
Hold for hours. The reaction was cooled, added to diethyl ether and the ether was decanted. The oily residue was dissolved in methylene chloride (10 ml) and ether (200 ml)
And hexane (100 ml). The precipitate was removed by filtration, washed with ether, then with hexane, and dried to give a brownish solid. By chromatography (silica, 5% methanol / dichloromethane), N- {3-
[4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -3-thiophen-2-ylbenzylidene] -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl}-
Acetamide was obtained as a dark yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.49 (s, 1H, NH), 10.01 (s, 1H, NHAc), 8.0
5 (d, J = 2Hz, 1H, Ar-H), 7.72 (m, 1H, Ar-H), 7.65 (m, 1H, Ar-H), 7.48 (
m, 2H, 2xAr-H), 7.47 (s, 1H, Ar-CH = C), 7.45 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-H), 7.29
(d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 7.13 (m, 1H, Ar-H), 6.90 (dd, 1H, J = 2 and 9H
z, Ar-H), 4.32 (m, 2H, ArOCH 2 CH 2 N), 3.58 (m, 4H, 2xOCH 2 CH 2 N), 2.84 (m, 2
H, ArOCH 2 CH 2 N), 2.5 (m under DMSO, 4H, 2xOCH 2 CH 2 N), 2.03 (s, 3H, NHCOCH 3 ). MS m / z 490.0 [M + 1] + .

【０３８０】 実施例４１：３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−４−メチ
ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマン（市販）を４−メチル−２−オキシ
インドールと縮合して，０．２５ｇの３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イ
ルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固
体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, br, 1H, NH), 8.17 (dd, J = 2, 8HZ
, 1H), 8.02 (d, J = 2Hz, 1H), 7.6 (s, 1H, ビニル), 7.05 (t, J = 8Hz, 1H)
, 6.75 (t, 2H), 6.67 (d, J = 8Hz, 1H), 2.77 (t, J = 7Hz, 2H, CH2), 2.55
(s, 3H, CH3), 1.8 (t, J = 7Hz, 2H, CH2), 1.31 (s, 6H, 2 x CH3). MS APCI m/z 320.2 [M+1]+.Example 41: 3- (2,2-Dimethylchroman-6-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one 2,2-dimethyl-6-formyl roman (commercially available) With 4-methyl-2-oxindole to give 0.25 g of 3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one as a yellow-orange color. Obtained as a solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, br, 1H, NH), 8.17 (dd, J = 2, 8HZ
, 1H), 8.02 (d, J = 2Hz, 1H), 7.6 (s, 1H, vinyl), 7.05 (t, J = 8Hz, 1H)
, 6.75 (t, 2H), 6.67 (d, J = 8 Hz, 1H), 2.77 (t, J = 7 Hz, 2H, CH 2 ), 2.55
(s, 3H, CH 3 ), 1.8 (t, J = 7 Hz, 2H, CH 2 ), 1.31 (s, 6H, 2 x CH 3 ). MS APCI m / z 320.2 [M + 1] + .

【０３８１】 実施例４２：３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−５−
フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルベンゾフラン（市販）を５−フルオロ−２−
オキシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（２，３−ジヒドロベンゾフラ
ン−５−イルメチレン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ンを黄橙色固体として得た。Example 42: 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -5
Fluoro-1,3-dihydroindol-2-one 2,3-dihydro-5-formylbenzofuran (commercially available) was added to 5-fluoro-2-
Condensation with oxindole gave 0.25 g of 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -5-fluoro-1,3-dihydroindole-2-one as a yellow-orange solid.

【０３８２】 実施例４３：３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−５−フ
ルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−シクロヘキシルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。アルデヒ
ドを５−フルオロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３−シ
クロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 43: 3- (3-Cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -5-fluoro-1,3-dihydroindol-2-one 2-cyclohexylphenol was methylated and then formylated. The aldehyde is condensed with 5-fluoro-2-oxindole to give 0.3 g of 3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -5-fluoro-1,3-dihydroindole-2-one as a yellow-orange solid As obtained.

【０３８３】 実施例４４：５−フルオロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−フルオロ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．２５ｇの５−フルオロ−３−（３−イソプロピル
−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙
色固体として得た。Example 44: 5-Fluoro-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3-isopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 5-fluoro-2-oxy Condensation with indole provided 0.25 g of 5-fluoro-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one as a yellow-orange solid.

【０３８４】 実施例４５：３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン
）−１，３−ジヒドロ−ピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン 亜鉛粉末（６．５ｇ）を，３，３−ジブロモ−７−アザオキシインドール（２
．９ｇ）の酢酸（２０ｍｌ）およびアセトニトリル（３０ｍｌ）中の溶液に加え
た。混合物を室温で２時間撹拌した。固体を濾過により除去し，溶媒を蒸発させ
た。残渣を酢酸エチルで処理した。不溶性固体を含有する酢酸エチル溶液を，シ
リカゲルの短いカラムを通した。回収した酢酸エチル溶液を蒸発させ，残渣を真
空下で乾燥して，１．８ｇ（９１％収率）の７−アザ−２−オキシインドール酢
酸塩を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.90 (s, br, 1H, NH), 8.01, 7.52, 6.91 (m,
3H), 3.52 (s, 2H, CH2). MS APCI 135 (M+1).Example 45: 3- (5-Isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-dihydro-pyrrolo [2.3-b] pyridin-2-one zinc powder (6.5 g) With 3,3-dibromo-7-azaoxindole (2
. 9 g) to a solution in acetic acid (20 ml) and acetonitrile (30 ml). The mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The solid was removed by filtration and the solvent was evaporated. The residue was treated with ethyl acetate. The ethyl acetate solution containing the insoluble solid was passed through a short column of silica gel. The collected ethyl acetate solution was evaporated and the residue was dried under vacuum to give 1.8 g (91% yield) of 7-aza-2-oxindole acetate. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.90 (s, br, 1H, NH), 8.01, 7.52, 6.91 (m,
3H), 3.52 (s, 2H, CH 2 ). MS APCI 135 (M + 1).

【０３８５】 ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを７−アザ−
２−オキシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（５−イソプロピル−４−
メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ
］ピリジン−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5(s, 1H, CONH), 8.3-6.8(m, 6H, 芳香族, =CH-), 3.9
(s, 3H, OCH3), 3.3(m, 1H, CH), 2.3(s, 3H, CH3), 1.2(d, 6H, 2xCH3).The 5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzaldehyde was converted to 7-aza-
Condensation with 2-oxindole gives 0.25 g of 3- (5-isopropyl-4-
Methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-dihydro-pyrrolo [2,3-b
To give pyridin-2-one as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 8.3-6.8 (m, 6H, aromatic, = CH-), 3.9
(s, 3H, OCH 3 ), 3.3 (m, 1H, CH), 2.3 (s, 3H, CH 3 ), 1.2 (d, 6H, 2xCH 3 ).

【０３８６】 実施例４６：３−（３'−エトキシ−６−メトキシビフェニル−３−イルメチレ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ，０．
０２ｍｍｏｌ）を，３−（ブロモ−４−メトキシ−ベンジリデン）−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン（０．２ｇ，０．６１ｍｍｏｌ）のトルエン（１ｍ
ｌ）およびエタノール（１ｍｌ）中の溶液に加え，２Ｍ水性炭酸ナトリウム（１
．２ｍｌ，２．４ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に３−エトキシフェニルボロ
ン酸（０．１１ｇ，０．６７ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密封管中で１００℃で
１２時間保持した。反応混合物を水（４０ｍｌ）に加え，酢酸エチル（７５ｍｌ
）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウム（５０ｍｌ）およ
びブライン（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮
した。得られた固体をジクロロメタン／ヘキサン中で砕いて，０．９ｇ（３９％
）の３−（３'−エトキシ−６−メトキシ−ビフェニル−３−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.57 (s, 1H, NH), 7.65 (m, 5H, 4xAr-H およ
び Ar-CH=C), 7.3 (m, 3H, 4xAr-H), 7.15 (m, 2H, Ar-H), 6.9 (m, 2H, Ar-H),
4.05 (q, 2H, OCH2CH3), 3.85 (s, 3H, OCH3), 1.35 (t, 3H, OCH2CH3). MS m/z 372.5 [M+1]+.Example 46: 3- (3′-Ethoxy-6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.02 g, 0.
02 mmol) with 3- (bromo-4-methoxy-benzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one (0.2 g, 0.61 mmol) in toluene (1 m
l) and a solution in ethanol (1 ml), add 2M aqueous sodium carbonate (1
. 2 ml, 2.4 mmol) was added. To this mixture was added 3-ethoxyphenylboronic acid (0.11 g, 0.67 mmol) and the mixture was kept in a sealed tube at 100 ° C. for 12 hours. The reaction mixture was added to water (40 ml), and ethyl acetate (75 ml) was added.
). The combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (50ml) and brine (50ml). The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. The solid obtained was triturated in dichloromethane / hexane to give 0.9 g (39%
)) 3- (3'-Ethoxy-6-methoxy-biphenyl-3-ylmethylene)-
1,3-Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.57 (s, 1H, NH), 7.65 (m, 5H, 4xAr-H and Ar-CH = C), 7.3 (m, 3H, 4xAr-H), 7.15 (m, 2H, Ar-H), 6.9 (m, 2H, Ar-H),
4.05 (q, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.85 (s, 3H, OCH 3 ), 1.35 (t, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS m / z 372.5 [M + 1] + .

【０３８７】 実施例４７：３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを７−アザ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−シクロペンチル−４−メトキシ
ベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オンを
黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 1.1 (s, 1H, CONH), 8.3-6.8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.
9(s, 3H, OCH3), 3.2(m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H, 4xCH2).Example 47: 3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydropyrrolo [2.3-b] pyridin-2-one 3-cyclopentyl-4-methoxybenzaldehyde is condensed with 7-aza-2-oxindole to give 0.25 g of 3- (3-cyclopentyl-4- Methoxybenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 1.1 (s, 1H, CONH), 8.3-6.8 (m, 7H, aromatic, = CH-), 3.
9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H, 4xCH 2 ).

【０３８８】 実施例４８：３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−４−メ
チル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−２−オキ
シインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−シクロペンチル−４−メトキ
シベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙
色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.4 (s, 1H, CONH), 8.3, 8.1, 7.6, 7.0, 7.0, 6.8, 6.
6 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H,
4xCH2).Example 48: 3- (3-Cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one 3-cyclopentyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 4-methyl-2-oxy Condensation with indole provided 0.25 g of 3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.4 (s, 1H, CONH), 8.3, 8.1, 7.6, 7.0, 7.0, 6.8, 6.
6 (m, 7H, aromatic, = CH-), 3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H,
4xCH 2 ).

【０３８９】 実施例４９：３−（４，５，２'−トリメトキシビフェニル−２−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ，０．
０２ｍｍｏｌ）を，３−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシベンジリデン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン（０．２０ｇ，０．５６ｍｍｏｌ）のトル
エン（１ｍｌ）およびエタノール（１ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭
酸ナトリウム（１．１ｍｌ，２．２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に，２−メ
トキシフェニルボロン酸（０．０９ｇ，０．６２ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密
封管中で１００℃で１２時間保持した。反応混合物を水（５０ｍｌ）に加え，酢
酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナ
トリウム（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を硫酸マ
グネシウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，３０−４０％酢
酸エチル／ヘキサン）により，０．１４ｇ（６４％）の３−（４，５，２'−ト
リメトキシ−ビフェニル−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−
２−オンを橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.4 (m, 1H, NH), 7.5 (m, 1H, Ar-H), 7.3 (m
, 2H, Ar-H および Ar-CH=C), 7.2 (m, 4H, Ar-H), 6.9 (m, 4H, Ar-H), 3.8 (t
wo s, 3H, COCH3), 3.7 (two s, 3H, OCH3), 3.5 (two s, 3H, COCH3). MS m/z 388.2 [M+1]+.Example 49: 3- (4,5,2′-trimethoxybiphenyl-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.02 g) , 0.
02 mmol) with 3- (3-bromo-4,5-dimethoxybenzylidene) -1
To a solution of 2,3-dihydroindol-2-one (0.20 g, 0.56 mmol) in toluene (1 ml) and ethanol (1 ml), followed by 2M aqueous sodium carbonate (1.1 ml, 2.2 mmol). added. To this mixture was added 2-methoxyphenylboronic acid (0.09 g, 0.62 mmol) and the mixture was kept in a sealed tube at 100 ° C. for 12 hours. The reaction mixture was added to water (50ml) and extracted with ethyl acetate (2x100ml). The combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (50ml) and brine (50ml). The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. By chromatography (silica, 30-40% ethyl acetate / hexane), 0.14 g (64%) of 3- (4,5,2'-trimethoxy-biphenyl-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindole-
The 2-one was obtained as an orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.4 (m, 1H, NH), 7.5 (m, 1H, Ar-H), 7.3 (m
, 2H, Ar-H and Ar-CH = C), 7.2 (m, 4H, Ar-H), 6.9 (m, 4H, Ar-H), 3.8 (t
wo s, 3H, COCH 3 ), 3.7 (two s, 3H, OCH 3 ), 3.5 (two s, 3H, COCH 3 ). MS m / z 388.2 [M + 1] + .

【０３９０】 実施例５０：Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−３−チ
オフェン−３−イルベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−６−イル｝−アセトアミド テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．２１ｇ）を，
４−モルホリノエトキシ−３−ブロモベンズアルデヒド（１．９２ｇ）のトルエ
ン（１０ｍｌ）およびエタノール（１０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性
炭酸ナトリウム（１２ｍｌ）を加えた。この混合物にチオフェン−３−ボロン酸
（１．０２ｇ）を加え，混合物を加熱還流した。１２時間後，反応混合物を水（
１００ｍｌ）に加え，酢酸エチル（３ｘ１００ｍｌ）中に抽出した。次に生成物
を１Ｎ塩酸（２ｘ１００ｍｌ）中に抽出し，水性層を固体炭酸水素ナトリウムで
ｐＨ９に塩基性にし，酢酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。有機層をブラ
イン（７５ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮して，１．７ｇ（
８３％）の３−（３−チオフェン）−４−モルホリノエトキシベンズアルデヒド
を赤みを帯びた油状物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.91 (s, 1H, CHO), 8.08 (m, 2H, Ar-H), 7.83
(dd, 1H, J = 2 および 9Hz, Ar-H), 7.76 (dd, 1H, J = 1 および 4Hz, Ar-H)
, 7.59 (dd, 1H, J = 1 および 5Hz, Ar-H), 7.35 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 7.
64 (dd, 1H, J = 1 および 5Hz, Ar-H), 7.58 (dd, 1H, J = 3 および 5Hz, Ar-
H), 7.31 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 4.27 (t, J = 5Hz, 2H, O-CH2CH2), 3.56 (
m, 4H, 2x ringO-CH2CH2), 2.75 (t, J = 6Hz, 2H, N-CH2CH2), 2.48 (m on DMS
O, 4H, 2x ringN-CH2CH2). MS m/z 318.2 [M+1]+.Example 50: N- {3- [4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -3-thiophen-3-ylbenzylidene] -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-6 -Yl} -acetamide tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.21 g)
To a solution of 4-morpholinoethoxy-3-bromobenzaldehyde (1.92 g) in toluene (10 ml) and ethanol (10 ml) was added, followed by 2M aqueous sodium carbonate (12 ml). Thiophene-3-boronic acid (1.02 g) was added to the mixture, and the mixture was heated to reflux. After 12 hours, the reaction mixture was washed with water (
100 ml) and extracted into ethyl acetate (3 × 100 ml). The product was then extracted into 1N hydrochloric acid (2 × 100 ml), the aqueous layer basified to pH 9 with solid sodium bicarbonate and extracted with ethyl acetate (2 × 100 ml). The organic layer was washed with brine (75 ml), dried over magnesium sulfate, concentrated, and 1.7 g (
83%) of 3- (3-thiophene) -4-morpholinoethoxybenzaldehyde was obtained as a reddish oil. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.91 (s, 1H, CHO), 8.08 (m, 2H, Ar-H), 7.83
(dd, 1H, J = 2 and 9Hz, Ar-H), 7.76 (dd, 1H, J = 1 and 4Hz, Ar-H)
, 7.59 (dd, 1H, J = 1 and 5Hz, Ar-H), 7.35 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 7.
64 (dd, 1H, J = 1 and 5Hz, Ar-H), 7.58 (dd, 1H, J = 3 and 5Hz, Ar-H)
H), 7.31 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 4.27 (t, J = 5Hz, 2H, O-CH 2 CH 2 ), 3.56 (
m, 4H, 2x ring O-CH 2 CH 2 ), 2.75 (t, J = 6 Hz, 2H, N-CH 2 CH 2 ), 2.48 (m on DMS
O, 4H, 2x ringN-CH 2 CH 2 ). MS m / z 318.2 [M + 1] + .

【０３９１】 ３−（３−チオフェン）−４−モルホリノエトキシ−ベンズアルデヒド（１．
７４ｇ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（１ｇ）（実施例１で記載
したように製造）およびピペリジン（２．６ｍｌ）のエタノール（１１ｍｌ）中
の混合物を，密封管中で１００℃で１２時間保持した。反応液を冷却し，ジエチ
ルエーテル（２００ｍｌ）に加えた。溶媒をデカントし，残った油状固体をジク
ロロメタン（１５ｍｌ）に溶解し，ジエチルエーテル（２００ｍｌ）およびヘキ
サン（２００ｍｌ）で沈殿させ，濾過し，ジエチルエーテルで，次にヘキサンで
洗浄し，乾燥して，からし黄色固体を得た。クロマトグラフィー（シリカ，５％
メタノール／ジクロロメタン）により，Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４
−イルエトキシ）−３−チオフェン−３−イルベンジリデン］−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル｝−アセトアミドを黄色泡状物と
して得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.47 (s, 1H, NH), 10.00 (s, 1H, NHAc), 8.0
7 (m, 1H, Ar-H), 7.91 (d, J = 2Hz, 1H, Ar-H), 7.63 (m, 2H, 2xAr-H), 7.58
(m, 2H, 2xAr-H), 7.48 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.45 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-H), 7.
26 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 6.90 (dd, 1H, J =2 および 9Hz, Ar-H), 4.26 (m
, 2H, ArOCH2CH2N), 3.58 (m, 4H, 2xOCH2CH2N), 2.76 (m, 2H, ArOCH2CH2N), 2
.48 (m under DMSO, 4H, 2xOCH2CH2N), 2.03 (s, 3H, NHCOCH3). MS m/z 490.0 [M+1]+.3- (3-thiophene) -4-morpholinoethoxy-benzaldehyde (1.
74 g), a mixture of 6-acetamido-2-oxindole (1 g) (prepared as described in Example 1) and piperidine (2.6 ml) in ethanol (11 ml) were placed in a sealed tube at 100 ° C. for 12 hours. Hold for hours. The reaction was cooled and added to diethyl ether (200ml). The solvent was decanted and the remaining oily solid was dissolved in dichloromethane (15 ml), precipitated with diethyl ether (200 ml) and hexane (200 ml), filtered, washed with diethyl ether and then with hexane and dried. A mustard yellow solid was obtained. Chromatography (silica, 5%
Methanol-dichloromethane) to give N- {3- [4- (2-morpholine-4).
-Ylethoxy) -3-thiophen-3-ylbenzylidene] -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indol-6-yl} -acetamide was obtained as a yellow foam. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.47 (s, 1H, NH), 10.00 (s, 1H, NHAc), 8.0
7 (m, 1H, Ar-H), 7.91 (d, J = 2Hz, 1H, Ar-H), 7.63 (m, 2H, 2xAr-H), 7.58
(m, 2H, 2xAr-H), 7.48 (s, 1H, Ar-CH = C), 7.45 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-H), 7.
26 (d, 1H, J = 9Hz, Ar-H), 6.90 (dd, 1H, J = 2 and 9Hz, Ar-H), 4.26 (m
, 2H, ArOCH2CH2N), 3.58 ( m, 4H, 2xOCH 2 CH 2 N), 2.76 (m, 2H, ArOCH2CH2N), 2
.48 (m under DMSO, 4H, 2xOCH 2 CH 2 N), 2.03 (s, 3H, NHCOCH 3 ). MS m / z 490.0 [M + 1] + .

【０３９２】 実施例５１：５−クロロ−３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−シクロヘキシルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。アルデヒ
ドを５−クロロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３
−（３−シクロヘキシル−４−メトキシ−ベンジリデン）−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6(s, 1H, CONH), 7.7-6.8(m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9
(s, 3H, OCH3), 3.0 (m, 1H, CH), 1.8, 1.4 (m, 10H, 5xCH2).Example 51: 5-Chloro-3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -l, 3-dihydroindol-2-one 2-cyclohexylphenol was methylated and then formylated. The aldehyde is condensed with 5-chloro-2-oxindole to give 0.3 g of 5-chloro-3.
-(3-Cyclohexyl-4-methoxy-benzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 7.7-6.8 (m, 7H, aromatic, = CH-), 3.9
(s, 3H, OCH 3 ), 3.0 (m, 1H, CH), 1.8, 1.4 (m, 10H, 5xCH 2 ).

【０３９３】 実施例５２：［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−カルバミン酸
ｔｅｒｔ−ブチルエステル ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−ｔｅｒｔ−ブ
チルオキシカルボニルアミノ−２−オキシインドールと縮合して，０．３５ｇの
［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−
２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブ
チルエステルを黄橙色固体として得た。Example 52: [3- (3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene)-
2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -carbamic acid tert-butyl ester 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is converted to 6-tert-butyloxycarbonylamino-2-oxindole After condensation, 0.35 g of [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-
2,3-Dihydro-1H-indol-6-yl] -carbamic acid tert-butyl ester was obtained as a yellow-orange solid.

【０３９４】 実施例５３：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４
−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.41 (s, 1H, CONH), 8.0 (s, 2H), 7.66 (s, 1H), 7.07
(t, 1H), 6.76 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 3.7 (s, 3H, OCH3), 3.21-3.3 (m, 1H
), 1.21 (d, 12H, 4 x CH3).Example 53: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -4
-Methyl-1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is converted to 4-methyl-2-
Condensation with oxindole yields 0.3 g of 3- (3,5-diisopropyl-4-
Methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.41 (s, 1H, CONH), 8.0 (s, 2H), 7.66 (s, 1H), 7.07
(t, 1H), 6.76 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 3.7 (s, 3H, OCH 3 ), 3.21-3.3 (m, 1H
), 1.21 (d, 12H, 4 x CH 3 ).

【０３９５】 実施例５４：５−ブロモ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシ−ベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−ブロモ−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。Example 54: 5-Bromo-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxy-benzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 5- Bromo-2-
Condensation with oxindole provided 0.3 g of 5-bromo-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole-2-one as a yellow-orange solid.

【０３９６】 実施例５５：Ｎ−｛３−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２−モルホリン−４−
イルエトキシ）−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イン
ドール−６−イル｝−アセトアミド トリフェニルホスフィン（５．８９ｇ，２２．４４ｍｍｏｌ）を３−ｔｅｒｔ
−ブチル−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（４ｇ，２２．４４ｍｍｏｌ）のテ
トラヒドロフラン（４０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２−ヒドロキシエチルモ
ルホリン（２．９４ｇ，２２．４４ｍｍｏｌ）を加え，次にジエチルアゾジカル
ボキシレート（３．９１ｇ，２２．４４ｍｍｏｌ）を滴加した。混合物を室温で
３日間撹拌した。反応液を減圧下で濃縮し，２Ｎ塩酸（２００ｍｌ）と酢酸エチ
ル（１５０ｍｌ）との間に分配した。水性層を酢酸エチル（２ｘ１５０ｍｌ）で
抽出し，固体炭酸水素ナトリウムでｐＨ９に塩基性にし，固体塩化ナトリウムで
飽和し，酢酸エチル（３ｘ１５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグ
ネシウムで乾燥し，濃縮して，２．８ｇ（４４％）の３−ｔｅｒｔ−ブチル−４
−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）ベンズアルデヒドを黄色を帯びた油状
物として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.8 (s, 1H, CHO), 7.75 (m, 2H, 2xAr-H), 7.1
6 (d, J = 10Hz, 1H, Ar-H), 4.19 (t, J = 7Hz, 2H, O-CH2CH2), 3.55 (m, 4H,
2x ringO-CH2CH2), 2.75 (t, J = 7Hz, 2H, N-CH2CH2), 2.4 (m on DMSO, 4H,
2x ringN-CH2CH2), 1.36 (s, 9H, C(CH3)3). MS m/z 292.0 [M+1]+.Example 55: N- {3- [3-tert-butyl-4- (2-morpholine-4-
Ileethoxy) -benzylidene] -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl} -acetamido triphenylphosphine (5.89 g, 22.44 mmol) in 3-tert.
-Butyl-4-hydroxybenzaldehyde (4 g, 22.44 mmol) in tetrahydrofuran (40 ml), followed by 2-hydroxyethylmorpholine (2.94 g, 22.44 mmol), and then diethyl azodicarboxylate. Rate (3.91 g, 22.44 mmol) was added dropwise. The mixture was stirred at room temperature for 3 days. The reaction was concentrated under reduced pressure and partitioned between 2N hydrochloric acid (200ml) and ethyl acetate (150ml). The aqueous layer was extracted with ethyl acetate (2 × 150 ml), basified to pH 9 with solid sodium bicarbonate, saturated with solid sodium chloride, and extracted with ethyl acetate (3 × 150 ml). The combined organic layers were dried over magnesium sulfate and concentrated to give 2.8 g (44%) of 3-tert-butyl-4.
-(2-Morpholin-4-ylethoxy) benzaldehyde was obtained as a yellowish oil. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.8 (s, 1H, CHO), 7.75 (m, 2H, 2xAr-H), 7.1
6 (d, J = 10Hz, 1H, Ar-H), 4.19 (t, J = 7Hz, 2H, O-CH 2 CH 2 ), 3.55 (m, 4H,
2x ringO-CH 2 CH 2 ), 2.75 (t, J = 7 Hz, 2H, N-CH 2 CH 2 ), 2.4 (m on DMSO, 4H,
2x ringN-CH 2 CH 2 ), 1.36 (s, 9H, C (CH 3 ) 3 ). MS m / z 292.0 [M + 1] + .

【０３９７】 ３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベンズ
アルデヒド（０．２５ｇ），６−アセトアミド−２−オキシインドール（０．１
６ｇ）およびピペリジン（０．４３ｍｌ）のエタノール（３ｍｌ）中の混合物を
，密封管中で１００℃で１２時間保持した。反応液を冷却し，酢酸エチル（２５
０ｍｌ）に加え，１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄
し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。一部の生成物は酸洗浄を行い，した
がって，固体炭酸水素ナトリウムでｐＨ９に塩基性にし，酢酸エチル（２ｘ１５
０ｍｌ）で抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し，最初の生成物からの
油状物と合わせ，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，４０％酢酸エチル，
続いて５−１０％メタノール／塩化メチレン）により，１００ｍｇ（２７％）の
Ｎ−｛３−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ
）ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イ
ル｝−アセトアミドを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.46 (s, 1H, NH), 9.99 (s, 1H, NHAc), 7.58
(m, 3H, Ar-H), 7.41 (m, 2H, Ar-H および Ar-CH=C), 7.12 (d, 1H, Ar-H), 6
.92 (dd, 1H, J =2 および 8Hz, Ar-H), 4.18 (m, 2H, Ar-OCH2), 3.57 (m, 4H,
OCH2CH2N), 2.77 (m, 2H, ArOCH2-CH2N), 2.49 (m, 4H, NCH2CH2O), 2.02 (s,
3H, NHCOCH3), 1.38 (s, 9H, Ar-tBu). MS m/z 464.0 [M+1]+.3-tert-butyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzaldehyde (0.25 g), 6-acetamido-2-oxindole (0.1
A mixture of 6 g) and piperidine (0.43 ml) in ethanol (3 ml) was kept at 100 ° C. for 12 hours in a sealed tube. The reaction solution was cooled, and ethyl acetate (25
0 ml), washed with 1N hydrochloric acid (100 ml) and brine (100 ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. Some products have been acid washed and therefore made basic to pH 9 with solid sodium bicarbonate and ethyl acetate (2 × 15
0 ml). The organic layer was dried over magnesium sulfate, combined with the oil from the first product and concentrated. Chromatography (silica, 40% ethyl acetate,
Subsequently, 5-10% methanol / methylene chloride) gave 100 mg (27%) of N- {3- [3-tert-butyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) benzylidene] -2-oxo-2. , 3-Dihydro-1H-indol-6-yl} -acetamide was obtained as a yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.46 (s, 1H, NH), 9.99 (s, 1H, NHAc), 7.58
(m, 3H, Ar-H), 7.41 (m, 2H, Ar-H and Ar-CH = C), 7.12 (d, 1H, Ar-H), 6
.92 (dd, 1H, J = 2 and 8Hz, Ar-H), 4.18 (m, 2H, Ar-OCH 2), 3.57 (m, 4H,
OCH 2 CH 2 N), 2.77 (m, 2H, ArOCH 2 -CH 2 N), 2.49 (m, 4H, NCH 2 CH 2 O), 2.02 (s,
3H, NHCOCH 3 ), 1.38 (s, 9H, Ar-tBu). MS m / z 464.0 [M + 1] + .

【０３９８】 実施例５６：３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３−
ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン ２，６−ジメチルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 6.9 (s, 2H, 芳香族), 3.9 (s, 3H,
OCH3), 2.6 (s, 6H, 2xCH3).Example 56: 3- (4-Methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -1,3-
Dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one 2,6-dimethylphenol was methylated and then formylated. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.1 (s, 1H, CHO), 6.9 (s, 2H, aromatic), 3.9 (s, 3H,
OCH 3 ), 2.6 (s, 6H, 2xCH 3 ).

【０３９９】 アルデヒドを７−アザ−２−オキシインドールと縮合して，０．２ｇの３−（
４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２
，３−ｂ］ピリジン−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 1.5(s, 1H, CONH), 8.2-6.8(m, 6H, 芳香族, =CH-), 3.8(
s, 3H, OCH3), 2.5(s, 6H, 2xCH3), 2.4(s, 3H, CH3).The aldehyde is condensed with 7-aza-2-oxindole to give 0.2 g of 3- (
4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2
, 3-b] pyridin-2-one as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 1.5 (s, 1H, CONH), 8.2-6.8 (m, 6H, aromatic, = CH-), 3.8 (
s, 3H, OCH 3 ), 2.5 (s, 6H, 2xCH 3 ), 2.4 (s, 3H, CH 3 ).

【０４００】 実施例５７：５−ブロモ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリ
ン−４−イルエトキシ）ベンジリデン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オ
ン ３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベン
ズアルデヒド（０．４ｇ），５−ブロモ−２−オキシインドール（０．２７ｇ）
およびピロリジン（０．５ｍｌ）のエタノール（２ｍｌ）中の混合物を密封管中
で１００℃で１２時間保持した。次に混合物を１Ｎ塩酸（１００ｍｌ）に加え，
固体を濾過により除去し，さらに水（５０ｍｌ）で洗浄した。次に，固体を酢酸
エチル（２００ｍｌ）に溶解し，溶液を１Ｎ塩酸（７５ｍｌ）およびブライン（
７５ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。粗固体をクロマト
グラフィー（シリカ，４：４：１ジクロロメタン：ヘキサン：メタノール）を行
い，８０ｍｇ（１３％）の５−ブロモ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（
２−モルホリン−４−イルエトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オンを赤みを帯びた褐色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 9.43 (d, J = 10Hz, 1H, A
r-H), 7.58 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H), 7.46 (d, J = 5Hz, 2H, Ar-H), 7.3 (m,
1H, Ar-H), 7.19 (m, J = 9 および 10Hz, 1H, Ar-H), 6.99 (m, J = 9 および
9Hz, 1H, Ar-H), 6.83 (m, J = 9 および 1Hz, 1H, Ar-H), 3.61 (dd, J = 9 お
よび 22Hz 1H, 1xCH2CH), 3.43 (m, 1H, CHCH3), 2.86 (dd, J = 4 および 22Hz
, 1H, 1xCH2CH), 1.35 (d, J = 9 Hz, 3H, CH3). MS m/z 262.0 [M+1]+.Example 57: 5-Bromo-3- [3,5-diisopropyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) benzylidene] -1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl- 4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzaldehyde (0.4 g), 5-bromo-2-oxindole (0.27 g)
And a mixture of pyrrolidine (0.5 ml) in ethanol (2 ml) was kept at 100 ° C. for 12 hours in a sealed tube. Next, the mixture was added to 1N hydrochloric acid (100 ml),
The solid was removed by filtration and washed with additional water (50 ml). Next, the solid was dissolved in ethyl acetate (200 ml) and the solution was diluted with 1N hydrochloric acid (75 ml) and brine (75 ml).
75 ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. The crude solid was chromatographed (silica, 4: 4: 1 dichloromethane: hexane: methanol) and 80 mg (13%) of 5-bromo-3- [3,5-diisopropyl-4- (
2-morpholin-4-ylethoxy) -benzylidene] -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a reddish brown solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.54 (s, 1H, NH), 9.43 (d, J = 10Hz, 1H, A
rH), 7.58 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H), 7.46 (d, J = 5Hz, 2H, Ar-H), 7.3 (m,
1H, Ar-H), 7.19 (m, J = 9 and 10Hz, 1H, Ar-H), 6.99 (m, J = 9 and
9Hz, 1H, Ar-H), 6.83 (m, J = 9 and 1Hz, 1H, Ar-H), 3.61 (dd, J = 9 and 22Hz 1H, 1xCH 2 CH), 3.43 (m, 1H, CHCH 3 ), 2.86 (dd, J = 4 and 22Hz
, 1H, 1xCH 2 CH), 1.35 (d, J = 9 Hz, 3H, CH 3 ). MS m / z 262.0 [M + 1] + .

【０４０１】 実施例５８：３−（３'−エトキシ−４，５−ジメトキシビフェニル−２−イル
メチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ，０．
０２ｍｍｏｌ）を３−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシベンジリデン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン（０．２ｇ，０．５６ｍｍｏｌ）のトルエン
（１ｍｌ）およびエタノール（１ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナ
トリウム（１ｍｌ，２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に，３−エトキシフェニ
ルボロン酸（０．１ｇ，０．６２ｍｍｏｌ）を加え，混合物を密封管中で１００
℃で１２時間保持した。次に反応混合物を水（４０ｍｌ）に加え，酢酸エチル（
２ｘ７５ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウム（５
０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃
縮した。得られた固体を塩化メチレン／ヘキサン中で砕いて，０．１４ｇ（６４
％）の３−（３'−エトキシ−４，５−ジメトキシビフェニル−２−イルメチレ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (s, 1H, NH), 7.6 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H
), 7.2 (m, 4H, 3xAr-H および Ar-CH=C), 7.08 (s, 2H, Ar-H), 6.8 (m, 5H, 5
xAr-H), 4.0 (q, J = 8Hz, 2H, OCH2CH3), 3.89 (s, 3H, OCH3), 3.77 (s, 3H,
OCH3), 1.29 (t, J = 8Hz, 3H, OCH2CH3). MS m/z 402.5 [M+1]+.Example 58: 3- (3′-Ethoxy-4,5-dimethoxybiphenyl-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0. 02g, 0.
02 mmol) with 3- (3-bromo-4,5-dimethoxybenzylidene) -1,
To a solution of 3-dihydroindol-2-one (0.2 g, 0.56 mmol) in toluene (1 ml) and ethanol (1 ml) was added, followed by 2M aqueous sodium carbonate (1 ml, 2 mmol). To this mixture is added 3-ethoxyphenylboronic acid (0.1 g, 0.62 mmol) and the mixture is placed in a sealed tube for 100
C. for 12 hours. Then the reaction mixture was added to water (40 ml) and ethyl acetate (
2 × 75 ml). The combined organic layers were combined with saturated aqueous sodium bicarbonate (5
0 ml) and brine (50 ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. The resulting solid was triturated in methylene chloride / hexane to give 0.14 g (64
%) Of 3- (3'-ethoxy-4,5-dimethoxybiphenyl-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one as a yellow-orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (s, 1H, NH), 7.6 (d, J = 9Hz, 1H, Ar-H
), 7.2 (m, 4H, 3xAr-H and Ar-CH = C), 7.08 (s, 2H, Ar-H), 6.8 (m, 5H, 5
xAr-H), 4.0 (q, J = 8Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.89 (s, 3H, OCH 3 ), 3.77 (s, 3H,
OCH 3 ), 1.29 (t, J = 8 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS m / z 402.5 [M + 1] + .

【０４０２】 実施例５９：５−クロロ−３−（４−メトキシ−３−チオフェン−２−イルベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−（２−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデヒド（０．２１ｇ），５
−クロロ−２−オキシインドール（０．１６ｇ）およびピロリジン（０．４ｍｌ
）のエタノール（１ｍｌ）中の混合物を密封管に入れ，１００℃に加熱した。沈
殿物が１０分以内に形成したため，反応液をさらに１０ｍｌのエタノールで希釈
し，再び加熱した。４時間後，反応液を冷却し，形成した固体を濾過により除去
し，エタノールで，次にヘキサンで洗浄して，０．２１ｇ（６０％）の５−クロ
ロ−３−（４−メトキシ−３−チオフェン−２−イルベンジリデン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.7 (s, 1H, NH), 7.8-9.1 (m, 3H, Ar-H), 7.
6 (m, 3H, 2xAr-H および Ar-CH=C), 7.2 (m, 3H, Ar-H), 6.9 (m, 1H, Ar-H),
3.9 (m, 3H, OCH3). MS m/z 368.1 および 369.9 [M]+ および [M+2]+.Example 59: 5-Chloro-3- (4-methoxy-3-thiophen-2-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3- (2-thiophen) -4-methoxybenzaldehyde (0.21 g), 5
-Chloro-2-oxindole (0.16 g) and pyrrolidine (0.4 ml)
)) In ethanol (1 ml) was placed in a sealed tube and heated to 100 ° C. As a precipitate formed within 10 minutes, the reaction was diluted with an additional 10 ml of ethanol and heated again. After 4 hours, the reaction was cooled and the solid formed was removed by filtration, washed with ethanol and then with hexane to give 0.21 g (60%) of 5-chloro-3- (4-methoxy-3). -Thiophen-2-ylbenzylidene) -1,3-
Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.7 (s, 1H, NH), 7.8-9.1 (m, 3H, Ar-H), 7.
6 (m, 3H, 2xAr-H and Ar-CH = C), 7.2 (m, 3H, Ar-H), 6.9 (m, 1H, Ar-H),
3.9 (m, 3H, OCH 3 ). MS m / z 368.1 and 369.9 [M] + and [M + 2] + .

【０４０３】 実施例６０：５−クロロ−３−４−メトキシ−３−ピリジン−３−イルベンジリ
デン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．２ｇ）を，３
−ブロモ−４−メトキシベンズアルデヒド（１．２５ｇ）のトルエン（１０ｍｌ
）およびエタノール（１０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナトリウ
ム（１１ｍｌ）を加えた。この混合物に，ピリジン−３−ボロン酸プロパンジオ
ール（１ｇ）を加え，混合物を加熱還流した。２時間後，反応液を水（７５ｍｌ
）に加え，酢酸エチル（２ｘ７５ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性
炭酸水素ナトリウム（１００ｍｌ）およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄し，硫
酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，２０−５０
％酢酸エチル／ヘキサン）により，１．０８ｇ（８７％）の３−（３−ピリジル
）−４−メトキシベンズアルデヒドを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.93 (s, 1H, CHO), 8.7 (d, 1H, J = 3Hz, Ar-
H), 8.56 (dd, 1H, J = 1 および 6Hz, Ar-H), 7.9 (m, 3H, 3xAr-H), 7.46 (dd
, 1H, J = 6 および 9Hz, Ar-H), 7.35 (d, 1H, J = 10Hz, Ar-H), 3.89 (s, 3H
, OCH3).Example 60: 5-Chloro-3--4-methoxy-3-pyridin-3-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0. 2g) to 3
-Bromo-4-methoxybenzaldehyde (1.25 g) in toluene (10 ml)
) And a solution in ethanol (10 ml), followed by 2M aqueous sodium carbonate (11 ml). To this mixture was added propanediol pyridine-3-boronic acid (1 g) and the mixture was heated to reflux. After 2 hours, the reaction mixture was washed with water (75 ml).
) And extracted with ethyl acetate (2 × 75 ml). The combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate (100ml) and brine (100ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. Chromatography (silica, 20-50
% Ethyl acetate / hexane) to give 1.08 g (87%) of 3- (3-pyridyl) -4-methoxybenzaldehyde as a white solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.93 (s, 1H, CHO), 8.7 (d, 1H, J = 3Hz, Ar-
H), 8.56 (dd, 1H, J = 1 and 6Hz, Ar-H), 7.9 (m, 3H, 3xAr-H), 7.46 (dd
, 1H, J = 6 and 9Hz, Ar-H), 7.35 (d, 1H, J = 10Hz, Ar-H), 3.89 (s, 3H
, OCH 3 ).

【０４０４】 ３−（３−ピリジル）−４−メトキシベンズアルデヒド（０．２５ｇ），５−
クロロ−２−オキシインドール（０．２ｇ）およびピロリジン（０．５ｍｌ）の
エタノール（２ｍｌ）中の混合物を密封管に入れ，１００℃に加熱した。沈殿物
が１０分以内に形成したため，反応液をさらに１０ｍｌのエタノールで希釈し，
再び加熱した。４時間後，反応液を冷却し，固体を濾過により除去し，エタノー
ルで，次にヘキサンで洗浄して，０．２７ｇ（６１％）の５−クロロ−３−（３
−（３−ピリジル）−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 0.67 (s, 1H, NH), 8.6 (m, 3H, 2xAr-H および
Ar-CH=C), 7.8 (m, 4H, Ar-H), 7.4 (m, 1H, Ar-H), 7.35 (m, 2H, Ar-H), 6.8
5 (m, 1H, Ar-H), 3.88 (s, 3H, OCH3). MS m/z 363.0 および 365.1, [M]+ および [M+2]+.3- (3-pyridyl) -4-methoxybenzaldehyde (0.25 g), 5-
A mixture of chloro-2-oxindole (0.2 g) and pyrrolidine (0.5 ml) in ethanol (2 ml) was placed in a sealed tube and heated to 100 ° C. Since a precipitate formed within 10 minutes, the reaction was further diluted with 10 ml of ethanol,
Heated again. After 4 hours, the reaction was cooled and the solids were removed by filtration, washed with ethanol and then with hexane to give 0.27 g (61%) of 5-chloro-3- (3
-(3-Pyridyl) -4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 0.67 (s, 1H, NH), 8.6 (m, 3H, 2xAr-H and
(Ar-CH = C), 7.8 (m, 4H, Ar-H), 7.4 (m, 1H, Ar-H), 7.35 (m, 2H, Ar-H), 6.8
5 (m, 1H, Ar- H), 3.88 (s, 3H, OCH 3). MS m / z 363.0 and 365.1, [M] + and [M + 2] +.

【０４０５】 実施例６１：５−クロロ−３−（４，５−３'−トリメトキシビフェニル−２−
イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．３６ｇ）を，
４，５−ジメトキシ−２−ブロモベンズアルデヒド（２．５ｇ）のトルエン（２
０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナ
トリウム（２０ｍｌ）を加えた。この混合物に，３−メトキシフェニルボロン酸
（１．７ｇ）を加え，混合物を加熱還流した。１時間後，反応液を水（１５０ｍ
ｌ）と酢酸エチル（３００ｍｌ）との間に分配した。有機層を飽和水性炭酸水素
ナトリウム（１５０ｍｌ）およびブライン（１５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネ
シウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ，２０−３０−４０％
酢酸エチル／ヘキサン）により，２．７ｇ（９８％）の２−（３−メトキシフェ
ニル）−４，５−ジメトキシベンズアルデヒドを黄色油状物として得，これは放
置すると固化した。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.71 (s, 1H, CHO), 7.38 (m, 2H, 2xAr-H), 7.
0 (m, 4H, 4xAr-H), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.84 (s, 3H, OCH3), 3.8 (s, 3H, O
CH3). MS m/z 273.5 [M+1]+.Example 61: 5-chloro-3- (4,5-3'-trimethoxybiphenyl-2-
Ilmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.36 g)
4,5-Dimethoxy-2-bromobenzaldehyde (2.5 g) in toluene (2
0 ml) and a solution in ethanol (20 ml), followed by 2M aqueous sodium carbonate (20 ml). To this mixture was added 3-methoxyphenylboronic acid (1.7 g) and the mixture was heated to reflux. One hour later, the reaction solution was washed with water (150 m
1) and ethyl acetate (300 ml). The organic layer was washed with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate (150ml) and brine (150ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. Chromatography (silica, 20-30-40%
Ethyl acetate / hexane) provided 2.7 g (98%) of 2- (3-methoxyphenyl) -4,5-dimethoxybenzaldehyde as a yellow oil which solidified on standing. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 9.71 (s, 1H, CHO), 7.38 (m, 2H, 2xAr-H), 7.
0 (m, 4H, 4xAr-H), 3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.84 (s, 3H, OCH 3 ), 3.8 (s, 3H, O
CH 3 ). MS m / z 273.5 [M + 1] + .

【０４０６】 ２−（３−メトキシフェニル）−４，５−ジメトキシ−ベンズアルデヒド（０
．２５ｇ），５−クロロ−２−オキシインドール（０．ｌ５ｇ）およびピロリジ
ン（０．４ｍｌ）のエタノール（１ｍｌ）中の混合物を密封管に入れ，１００℃
に加熱した。沈殿物が１０分以内に形成したため，反応液をさらに１０ｍｌのエ
タノールで希釈し，再び加熱した。２．５時間後，反応液を冷却し，固体を濾過
により除去し，エタノール，次にヘキサンで洗浄して，０．３６ｇ（９２％）の
３−（４，５−３'−トリメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オンを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.67 (s, 1H, NH), 7.6 (d, J = 2.5Hz, 1H, A
r-H), 7.3 (m, 4H, Ar-H), 7.12 (s, 1H, Ar-CH=C), 6.9 (m, 4H, Ar-H), 3.9 (
s, 3H, OCH3), 3.79 (s, 3H, OCH3), 3.75 (s, 3H, OCH3). MS m/z 422.0 および 424.1 [M]+ および [M+2]+.2- (3-methoxyphenyl) -4,5-dimethoxy-benzaldehyde (0
. 25g), a mixture of 5-chloro-2-oxindole (0.15g) and pyrrolidine (0.4ml) in ethanol (1ml) was placed in a sealed tube and placed at 100 ° C.
Heated. As a precipitate formed within 10 minutes, the reaction was diluted with an additional 10 ml of ethanol and heated again. After 2.5 hours, the reaction was cooled and the solids were removed by filtration, washed with ethanol and then with hexane to give 0.36 g (92%) of 3- (4,5-3'-trimethoxybiphenyl. -2-ylmethylene) -1,3-
Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.67 (s, 1H, NH), 7.6 (d, J = 2.5Hz, 1H, A
rH), 7.3 (m, 4H, Ar-H), 7.12 (s, 1H, Ar-CH = C), 6.9 (m, 4H, Ar-H), 3.9 (
s, 3H, OCH 3 ), 3.79 (s, 3H, OCH 3 ), 3.75 (s, 3H, OCH 3 ). MS m / z 422.0 and 424.1 [M] + and [M + 2] + .

【０４０７】 実施例６２：３−（４，５−ジメトキシ−２−ナフタレン−２−イルベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０２ｇ）を，
３−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オン（０．２０ｇ）のトルエン（１ｍｌ）およびエタノール（１ｍ
ｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭酸ナトリウム（１．１ｍｌ）を加えた。
この混合物に，ナフタレン−２−ボロン酸（０．１１ｇ）を加え，混合物を密封
管中で１００℃で１２時間保持した。形成した沈殿物を濾過し，エタノールで洗
浄し，次に２０％メタノール／トルエンに溶解し，濾過し，濃縮した。得られた
固体をヘキサン中で砕き，乾燥して，０．０７ｇ（２９％）の３−（４，５−ジ
メトキシ−２−ナフタレン−２−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オンを橙色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (m, 1H, NH), 7.9 (m, 4H, Ar-H), 7.7 (m
, 1H, Ar-H), 7.5 (m, 3H, Ar-H), 7.4 (s, 1H, Ar-CH=C), 7.2 (m, 3H, Ar-H),
6.9 (m, 2H, Ar-H), 3.9 (two s, 3H, COCH3), 3.8 (two s, 3H, OCH3). MS m/z 408.0 [M+1]+.Example 62: 3- (4,5-Dimethoxy-2-naphthalen-2-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.02 g) ),
3- (3-Bromo-4,5-dimethoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one (0.20 g) in toluene (1 ml) and ethanol (1 m
1), followed by 2M aqueous sodium carbonate (1.1 ml).
To this mixture was added naphthalene-2-boronic acid (0.11 g) and the mixture was kept in a sealed tube at 100 ° C. for 12 hours. The precipitate formed was filtered, washed with ethanol, then dissolved in 20% methanol / toluene, filtered and concentrated. The solid obtained was triturated in hexane and dried to give 0.07 g (29%) of 3- (4,5-dimethoxy-2-naphthalen-2-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindole-2-. On was obtained as an orange solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.5 (m, 1H, NH), 7.9 (m, 4H, Ar-H), 7.7 (m
, 1H, Ar-H), 7.5 (m, 3H, Ar-H), 7.4 (s, 1H, Ar-CH = C), 7.2 (m, 3H, Ar-H),
6.9 (m, 2H, Ar-H), 3.9 (two s, 3H, COCH 3 ), 3.8 (two s, 3H, OCH 3 ). MS m / z 408.0 [M + 1] + .

【０４０８】 実施例６３：Ｎ−［３−（３'−アセチルアミノ−６−メトキシビフェニル−３
−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イ
ル］−アセトアミド ３−ブロモ−４−メトキシベンズアルデヒドを６−アセトアミド−２−オキシ
インドールと縮合して，Ｎ−［３−（３−ブロモ−４−メトキシ−ベンジリデン
）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトア
ミドを得た。Example 63: N- [3- (3'-acetylamino-6-methoxybiphenyl-3
-Ylmethylene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide 3-bromo-4-methoxybenzaldehyde is condensed with 6-acetamido-2-oxindole to give N- [3 -(3-Bromo-4-methoxy-benzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide was obtained.

【０４０９】 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０１ｇ）を，
Ｎ−［３−（３−ブロモ−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−
ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド（０．１４ｇ）のトル
エン（１ｍｌ）およびエタノール（１ｍｌ）中の溶液に加え，続いて２Ｍ水性炭
酸ナトリウム（０．７２ｍｌ）を加えた。この混合物に３−アセチルアミノ−フ
ェニルボロン酸（０．０７ｇ）を加え，混合物を密封管中で１００℃で１２時間
保持した。反応混合物を水（５０ｍｌ）に加え，酢酸エチル（２ｘ１００ｍｌ）
で抽出した。Tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.01 g) was
N- [3- (3-bromo-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-
A solution of dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide (0.14 g) in toluene (1 ml) and ethanol (1 ml) was added, followed by 2M aqueous sodium carbonate (0.72 ml). To this mixture was added 3-acetylamino-phenylboronic acid (0.07 g) and the mixture was kept at 100 ° C. for 12 hours in a sealed tube. The reaction mixture was added to water (50 ml) and ethyl acetate (2 × 100 ml)
Extracted.

【０４１０】 合わせた有機層を飽和水性炭酸水素ナトリウム（５０ｍｌ）およびブライン（
５０ｍｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し，濃縮した。クロマトグラフィ
ー（シリカ，ジクロロメタン，次に５−１０％メタノール／ジクロロメタン）に
より，０．０７ｇ（４３％）のＮ−［３−（３'−アセチルアミノ−６−メトキ
シビフェニル−３−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−６−イル］−アセトアミドを黄色固体として得た。1ＨＮＭＲにより
，約２６％の異性体であった。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.49 (s, 1H, NH), 10.42 (s, 1H, NHAc), 9.9
5 (s, 1H, NHAc), 7.76 (m, 2H, 2xAr-H), 7.58 (m, 3H, 3xAr-H), 7.4 (m, 2H,
Ar-H および Ar-CH=C), 7.3 (m, 2H, Ar-H), 7.18 (m, 1H, Ar-H), 6.9 (dd, 2
H, J = 2 および 8.5Hz, Ar-H), 3.84 (s, 3H, OCH3), 2.05 (s, 3H, NHCOCH3),
2.03 (s, 3H, NHCOCH3). MS m/z 442.2 [M+1]+.The combined organic layers were combined with saturated aqueous sodium bicarbonate (50 ml) and brine (
50 ml), dried over magnesium sulfate and concentrated. Chromatography (silica, dichloromethane, then 5-10% methanol / dichloromethane) gave 0.07 g (43%) of N- [3- (3'-acetylamino-6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -2. -Oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide was obtained as a yellow solid. According to 1 HNMR, it was about 26% of an isomer. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.49 (s, 1H, NH), 10.42 (s, 1H, NHAc), 9.9
5 (s, 1H, NHAc), 7.76 (m, 2H, 2xAr-H), 7.58 (m, 3H, 3xAr-H), 7.4 (m, 2H,
(Ar-H and Ar-CH = C), 7.3 (m, 2H, Ar-H), 7.18 (m, 1H, Ar-H), 6.9 (dd, 2
H, J = 2 and 8.5Hz, Ar-H), 3.84 (s, 3H, OCH 3 ), 2.05 (s, 3H, NHCOCH 3 ),
2.03 (s, 3H, NHCOCH 3 ). MS m / z 442.2 [M + 1] + .

【０４１１】 実施例６４：６−メトキシ−３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベ
ンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３（３−チオフェン）−４−メトキシベンズアルデヒド（０．５３ｇ，２．４
５ｍｍｏｌ），６−メトキシ−２−オキシインドール（０．４ｇ，２．４５ｍｍ
ｏｌ）およびピペリジン（１．２ｍｌ，１２．２５ｍｍｏｌ）の５ｍｌのエタノ
ール中の混合物を，密封管中で１００℃で１２時間保持した。反応液を冷却し，
ジエチルエーテル（１５０ｍｌ）およびヘキサン（１５０ｍｌ）に加えた。形成
した沈殿物を濾過により除去し，ジエチルエーテル，次にヘキサンで洗浄し，乾
燥して，０．５７ｇ（６４％）の６−メトキシ−３−（４−メトキシ−３−チオ
フェン−３−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンをか
らし黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, 1H, NH), 8.78 (d, J = 2Hz, 1H, Ar
-H), 8.30 (dd, J = 2 および 9Hz, 1H, Ar-H), 7.8 (dd, 1H, J = 1.5 および
3Hz, Ar-H), 7.5 (m, 3H, 2xAr-H および Ar-CH=C), 7.18 (d, J = 9Hz, 1H, Ar
-H), 6.55 (dd, 1H, J = 2 および 8.5Hz, Ar-H), 6.39 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-H
), 3.91 (s, 3H, OCH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 2.04 (s, 3H, NHCOCH3). MS m/z 364.1 [M+1]+.Example 64: 6-methoxy-3- (4-methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3 (3-thiophene) -4-methoxybenzaldehyde ( 0.53 g, 2.4
5 mmol), 6-methoxy-2-oxindole (0.4 g, 2.45 mm
ol) and piperidine (1.2 ml, 12.25 mmol) in 5 ml of ethanol were kept at 100 ° C. for 12 hours in a sealed tube. Cool the reaction solution,
Added to diethyl ether (150 ml) and hexane (150 ml). The precipitate formed was removed by filtration, washed with diethyl ether, then hexane, dried and 0.57 g (64%) of 6-methoxy-3- (4-methoxy-3-thiophen-3-yl). (Benzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.45 (s, 1H, NH), 8.78 (d, J = 2Hz, 1H, Ar
-H), 8.30 (dd, J = 2 and 9Hz, 1H, Ar-H), 7.8 (dd, 1H, J = 1.5 and
3Hz, Ar-H), 7.5 (m, 3H, 2xAr-H and Ar-CH = C), 7.18 (d, J = 9Hz, 1H, Ar
-H), 6.55 (dd, 1H, J = 2 and 8.5Hz, Ar-H), 6.39 (d, 1H, J = 2Hz, Ar-H
), 3.91 (s, 3H, OCH 3 ), 3.76 (s, 3H, OCH 3 ), 2.04 (s, 3H, NHCOCH 3 ). MS m / z 364.1 [M + 1] + .

【０４１２】 実施例６５：３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを２−オキシインドールと縮合
して，０．３ｇの３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5(s, 1H, CONH), 8.5, 8.5, 7.8, 7.7, 7.5, 7.5, 7.4
, 7.4, 7.3, 7.2, 7.2, 7.0, 6.8(m, 13H, 芳香族, =CH-), 3.9(s, 3H, OCH3).Example 65: 3- (6-Methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one 4-Methoxy-3-phenylbenzaldehyde is condensed with 2-oxindole to give 0. 3 g of 3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3
-Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 8.5, 8.5, 7.8, 7.7, 7.5, 7.5, 7.4
, 7.4, 7.3, 7.2, 7.2 , 7.0, 6.8 (m, 13H, aromatic, = CH-), 3.9 (s , 3H, OCH 3).

【０４１３】 実施例６６：３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルベンゾフラン（市販）を２−オキシインドー
ルと縮合して，０．２５ｇの３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.4 (s, 1H, CONH), 8.6, 8.2, 7.7, 7.6, 7.2, 7.0, 6.
9, 6.8 (m, 8H, 芳香族, =CH-), 4.6(t, 2H, OCH2), 3.2 (t, 2H, OCH2).Example 66: 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -1,
3-Dihydroindol-2-one 2,3-dihydro-5-formylbenzofuran (commercially available) is condensed with 2-oxindole to give 0.25 g of 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene)- 1,3-Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.4 (s, 1H, CONH), 8.6, 8.2, 7.7, 7.6, 7.2, 7.0, 6.
9, 6.8 (m, 8H, aromatic, = CH-), 4.6 (t , 2H, OCH 2), 3.2 (t, 2H, OCH 2).

【０４１４】 実施例６７：５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを５−クロロ−２−オキシイン
ドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３
−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として
得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 11.5 (s, 1H, CONH), 7.8-6.8 (m, 12H, 芳香族, =CH-),
3.9 (s, 3H, OCH3).Example 67: 5-chloro-3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene)
-1,3-dihydroindol-2-one 4-methoxy-3-phenylbenzaldehyde is condensed with 5-chloro-2-oxindole to give 0.3 g of 5-chloro-3- (6-methoxybiphenyl-3.
-Ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 11.5 (s, 1H, CONH), 7.8-6.8 (m, 12H, aromatic, = CH-),
3.9 (s, 3H, OCH 3 ).

【０４１５】 実施例６８：３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−４−メ
チル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−シクロヘキシル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−２−オキ
シインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシ
ベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 7.7-6.8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3
.9 (s, 3H, OCH3), 3.0 (m, 1H, CH), 2.5 (s, 3H, CH3), 1.8-1.4 (m, 10H, 5x
CH2).Example 68: 3- (3-Cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one 3-cyclohexyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 4-methyl-2-oxy Condensation with indole provided 0.3 g of 3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 7.7-6.8 (m, 7H, aromatic, = CH-), 3
.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.0 (m, 1H, CH), 2.5 (s, 3H, CH 3 ), 1.8-1.4 (m, 10H, 5x
CH 2 ).

【０４１６】 実施例６９：３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−４−
メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルベンゾフラン（市販）を４−メチル−２−オ
キシインドールと縮合して，０．２５ｇの３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン
−５−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを
黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5(s, 1H, CONH), 8.4-6.6 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 4.
6 (t, 2H, OCH2), 3.2 (t, 2H, OCH2), 2.5 (s, 3H, CH3).Example 69: 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -4-
Methyl-1,3-dihydroindol-2-one 2,3-dihydro-5-formylbenzofuran (commercially available) is condensed with 4-methyl-2-oxindole to give 0.25 g of 3- (2,3- Dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 8.4-6.6 (m, 7H, aromatic, = CH-), 4.
6 (t, 2H, OCH 2 ), 3.2 (t, 2H, OCH 2 ), 2.5 (s, 3H, CH 3 ).

【０４１７】 実施例７０：３−（３−イソプロピル−４−メエトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを７−アザ−２−オキシイ
ンドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−イソプロピル−４−メトキシベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オンを黄橙
色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 11.5(s, 1H, CONH), 8.0-6.8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.
7 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.2 (d, 6H, 2xCH3).Example 70: 3- (3-Isopropyl-4-methoxyethoxybenzylidene) -1,3
-Dihydropyrrolo [2.3-b] pyridin-2-one 3-isopropyl-4-methoxybenzaldehyde is condensed with 7-aza-2-oxindole to give 0.25 g of 3- (3-isopropyl-4- Methoxybenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 11.5 (s, 1H, CONH), 8.0-6.8 (m, 7H, aromatic, = CH-), 3.
7 (s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 1H, CH), 1.2 (d, 6H, 2xCH 3 ).

【０４１８】 実施例７１：３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジ
ヒドロピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを７−アザ−２−オキシインド
ールと縮合して，０．２５ｇの３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレ
ン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オンを黄橙色固体
として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 8.5-6.8 (m, 12H, 芳香族, =CH-),
3.9 (s, 3H, OCH3).Example 71: 3- (6-Methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-dihydropyrrolo [2.3-b] pyridin-2-one 4-methoxy-3-phenylbenzaldehyde was converted to 7-aza Condensed with 2-oxindole to give 0.25 g of 3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one as a yellow-orange solid Obtained. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 8.5-6.8 (m, 12H, aromatic, = CH-),
3.9 (s, 3H, OCH 3 ).

【０４１９】 実施例７２：３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン ３−シクロヘキシル−４−メトキシベンズアルデヒドを７−アザ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．２５ｇの３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシ
ベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オンを
黄橙色固体として得た。Example 72: 3- (3-Cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydropyrrolo [2.3-b] pyridin-2-one 3-cyclohexyl-4-methoxybenzaldehyde is condensed with 7-aza-2-oxindole to give 0.25 g of 3- (3-cyclohexyl-4- Methoxybenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４２０】 実施例７３：３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，
３−ジヒドロピロロ［２．３−ｂ］ピリジン−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルベンゾフラン（市販）を７−アザ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．２ｇの３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５
−イルメチレン）−１，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン
を黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.4 (s, 1H, CONH), 8.3-6.8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 4
.6 (t, 2H, OCH2), 3.2 (t, 2H, OCH2).Example 73: 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -1,
3-Dihydropyrrolo [2.3-b] pyridin-2-one 2,3-Dihydro-5-formylbenzofuran (commercially available) is condensed with 7-aza-2-oxindole to give 0.2 g of 3- ( 2,3-dihydrobenzofuran-5
-Ylmethylene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.4 (s, 1H, CONH), 8.3-6.8 (m, 7H, aromatic, = CH-), 4
.6 (t, 2H, OCH 2 ), 3.2 (t, 2H, OCH 2 ).

【０４２１】 実施例７４：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
，３−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドをメチル化し，次に
ホルミル化した。アルデヒドを７−アザ−２−オキシインドールと縮合して，０
．２ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オンを黄橙色固体として得た。 1 HNMR (d6-DMSO) δ: 11.5 (s, 1H, CONH), 8.0-6.8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3
.7 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 2H, 2xCH), 1.2 (m, 12H, 4xCH3).Example 74: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1
, 3-Dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde
Formylated. The aldehyde is condensed with 7-aza-2-oxindole to give 0
. 2 g of 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d6-DMSO) δ: 11.5 (s, 1H, CONH), 8.0-6.8 (m, 7H, aromatic, = CH-), 3
.7 (s, 3H, OCHThree), 3.2 (m, 2H, 2xCH), 1.2 (m, 12H, 4xCH)Three).

【０４２２】 実施例７５： ５−ブロモ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−ブロモ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（３−イソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体
として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.5, 8.4, 7.9, 7.9, 7.3, 7.1, 6.
8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (m, 3H, OCH3), 3.3 (m, 1H, CH), 1.2 (d, 6H,
2xCH3).Example 75: 5-Bromo-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-
Dihydroindole-2-one 3-isopropyl-4-methoxybenzaldehyde is condensed with 5-bromo-2-oxindole to give 0.3 g of 5-bromo-3- (3-isopropyl-4-.
Methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.5, 8.4, 7.9, 7.9, 7.3, 7.1, 6.
8 (m, 7H, aromatic, = CH-), 3.9 (m, 3H, OCH 3 ), 3.3 (m, 1H, CH), 1.2 (d, 6H,
2xCH 3 ).

【０４２３】 実施例７６：５−ブロモ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−ブロモ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（３−シクロペンチル−
４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.6-6.7 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3
.9 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H, 4xCH2).Example 76: 5-Bromo-3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3-cyclopentyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 5-bromo-2-oxy After condensation with indole, 0.3 g of 5-bromo-3- (3-cyclopentyl-
4-Methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.6-6.7 (m, 7H, aromatic, = CH-), 3
.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H, 4xCH 2 ).

【０４２４】 実施例７７：５−クロロ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシ−ベンジリ
デン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３．０ｇの４−メチル−２−オキシインドールの懸濁液を５０ｍｌのアセトニ
トリル中で室温で撹拌しながら，３．３ｇのＮ−クロロスクシンイミドを少しず
つ加えた。次にトリフルオロ酢酸（１ｍｌ）を加えた。懸濁液を室温で３日間撹
拌し，その間常に固体が存在した。固体を真空濾過により回収し，少量のアセト
ンで洗浄し，真空オーブン中で４０℃で一夜乾燥して，２．５ｇ（６８％）の５
−クロロ−４−メチル−２−オキシインドールを得た。Example 77: 5-Chloro-3- (3-cyclopentyl-4-methoxy-benzylidene) -4-methyl-l, 3-dihydroindol-2-one 3.0 g of 4-methyl-2-oxy While stirring the indole suspension in 50 ml of acetonitrile at room temperature, 3.3 g of N-chlorosuccinimide were added in small portions. Then trifluoroacetic acid (1 ml) was added. The suspension was stirred at room temperature for 3 days, during which time there was always solid. The solid is collected by vacuum filtration, washed with a small amount of acetone and dried in a vacuum oven at 40 ° C. overnight to give 2.5 g (68%) of 5%.
-Chloro-4-methyl-2-oxindole was obtained.

【０４２５】 ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−５−クロ
ロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（３−シク
ロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Condensation of 3-cyclopentyl-4-methoxybenzaldehyde with 4-methyl-5-chloro-2-oxindole gives 0.3 g of 5-chloro-3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene)- 4-Methyl-1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４２６】 実施例７８：５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）
−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを４−メチル−５−クロロ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（６−メトキシビ
フェニル−３−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２
−オンを黄橙色固体として得た。Example 78: 5-chloro-3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene)
-4-Methyl-1,3-dihydroindol-2-one 4-methoxy-3-phenylbenzaldehyde is converted to 4-methyl-5-chloro-2.
-Oxyindole, 0.3 g of 5-chloro-3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindole-2
The -one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４２７】 実施例７９：５−クロロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチル
−ベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを４−メチル
−５−クロロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−
（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−４−メチル−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 79: 5-chloro-3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methyl-benzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one 5-isopropyl-4-methoxy Condensation of 2-methylbenzaldehyde with 4-methyl-5-chloro-2-oxindole gives 0.3 g of 5-chloro-3-.
(5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -4-methyl-
1,3-Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４２８】 実施例８０：５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，６−ジメチルフェノールをメチル化し，次にホルミル化した。アルデヒド
を４−メチル−５−クロロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−
クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−４−メチル−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 80: 5-Chloro-3- (4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -4-methyl-l, 3-dihydroindol-2-one 2,6-dimethylphenol was methylated, Next, it was formylated. The aldehyde is condensed with 4-methyl-5-chloro-2-oxindole to give 0.3 g of 5-
Chloro-3- (4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -4-methyl-
1,3-Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４２９】 実施例８１：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６
−トリフルオロメチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−トリフルオロ
メチル−２−オキシインドールと縮合して，０．３５ｇの３−（３，５−ジイソ
プロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−トリフルオロメチル−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 81: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6
-Trifluoromethyl-1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is condensed with 6-trifluoromethyl-2-oxindole to give 0.35 g of 3- (3,3 5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6-trifluoromethyl-1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４３０】 実施例８２：６−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジ
リデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−クロロ−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの６−クロロ−３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。Example 82: 6-Chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 6-chloro -2-
Condensation with oxindole gave 0.3 g of 6-chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole-2-one as a yellow-orange solid.

【０４３１】 実施例８３：３−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン
）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−プロピオ
ン酸 シアン酸カリウム（２．０ｇ）を，１５ｍｌのジメチルスルホキシドに加え，
９０℃に加熱した。５ｍｌのジメチルスルホキシドに溶解した５−クロロエチル
−２−オキシインドール（３．０ｇ）を，撹拌しながらゆっくり加え，反応液を
１５０℃に加熱し，２時間撹拌した。混合物を冷却し，氷水に注加し，形成した
沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，粗生成物を得た。粗生
成物をシリカゲルでクロマトグラフィー（５％メタノール，クロロホルム中）を
行って，１．２ｇ（４２％）の５−シアノエチル−２−オキシインドールを得た
。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.28 (s, br, NH), 7.12 (s, 1H, H-4), 7.07
(d, J = 8Hz, 1H), 6.74 (d, J = 8Hz, 1H), 3.43 (s, 2H, CH2), 2.71-2.82 (m
, 4H, 2xCH2).Example 83: 3- [3- (3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-5-yl] -propionic acid potassium cyanate ( 2.0 g) in 15 ml of dimethyl sulfoxide,
Heated to 90 ° C. 5-Chloroethyl-2-oxindole (3.0 g) dissolved in 5 ml of dimethylsulfoxide was slowly added with stirring, and the reaction was heated to 150 ° C. and stirred for 2 hours. The mixture was cooled, poured into ice water and the precipitate formed was collected by vacuum filtration, washed with water and dried to give the crude product. The crude product was chromatographed on silica gel (5% methanol in chloroform) to give 1.2 g (42%) of 5-cyanoethyl-2-oxindole. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.28 (s, br, NH), 7.12 (s, 1H, H-4), 7.07
(d, J = 8Hz, 1H ), 6.74 (d, J = 8Hz, 1H), 3.43 (s, 2H, CH 2), 2.71-2.82 (m
, 4H, 2xCH 2 ).

【０４３２】 ２５ｍｌの濃塩酸を含む１０ｍｌの水中の５−シアノエチル−２−オキシイン
ドール（４．０２ｇ）を４時間還流した。混合物を冷却し，水を加え，得られた
固体を真空濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，１．９ｇ（４４％収率）
の５−カルボキシエチル−２−オキシインドールを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 12.00 (s, br, 1H, 5-CH2CH2COOH), 10.21 (s,
1H, NH-1), 7.05 (s, 1H, H-4), 6.99 (d, J = 9Hz, 1H, H-6), 6.69 (d, J = 9
Hz, 1H, H-7), 3.40 (s, 2H, CH2-3), 2.74 (t, J = 7Hz, 2H, 5-CH2CH2COOH)
および 2.46 (t, J = 7Hz, 2H, 5-CH2CH2COOH).4-Cyanoethyl-2-oxindole (4.02 g) in 10 ml of water containing 25 ml of concentrated hydrochloric acid was refluxed for 4 hours. The mixture was cooled, water was added and the resulting solid was collected by vacuum filtration, washed with water, dried and 1.9 g (44% yield).
Of 5-carboxyethyl-2-oxindole as a yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 12.00 (s, br, 1H, 5-CH 2 CH 2 COOH), 10.21 (s,
1H, NH-1), 7.05 (s, 1H, H-4), 6.99 (d, J = 9Hz, 1H, H-6), 6.69 (d, J = 9
Hz, 1H, H-7), 3.40 (s, 2H, CH 2 -3), 2.74 (t, J = 7Hz, 2H, 5-CH 2 CH 2 COOH)
And 2.46 (t, J = 7Hz, 2H, 5-CH 2 CH 2 COOH).

【０４３３】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−（２−カルボ
キシエチル）−２−オキシインドールと縮合して，０．３５ｇの３−［３−（３
，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジ
ヒドロ−−１Ｈ−インドール−５−イル］−プロピオン酸を黄橙色固体として得
た。Condensation of 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde with 5- (2-carboxyethyl) -2-oxindole gave 0.35 g of 3- [3- (3
, 5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-5-yl] -propionic acid was obtained as a yellow-orange solid.

【０４３４】 実施例８４：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６
−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−メトキシ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−６−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。Example 84: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6
-Methoxy-1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 6-methoxy-2.
-Condensed with oxindole to give 0.3 g of 3- (3,5-diisopropyl-4).
-Methoxybenzylidene) -6-methoxy-1,3-dihydroindole-2-
On was obtained as a yellow-orange solid.

【０４３５】 実施例８５：５−ブチル−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシ−ベン
ジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３０ｍｌの１，２−ジクロロエタンに懸濁した１５ｇの塩化アルミニウムに，
氷浴中で，７．５ｇの２−オキシインドールを加え，次に１２ｇの塩化ブチリル
を加えた。得られた懸濁液を５０℃で一夜撹拌した。混合物を氷水に注加し，酢
酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層をブラインで洗浄し，硫酸ナト
リウムで乾燥し，濃縮乾固して，褐色固体を得た。固体をシリカゲルでクロマト
グラフィー（５０％酢酸エチル，ヘキサン中）を行い，４．３ｇ（３８％）の５
−ブタノイル−２−オキシインドールを黄色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.67 (s, br, NH), 7.84 (d, J =8.39Hz, 1H),
s, 1H, H-4), 6.88 (d, J = 8.39Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH2), 2.88 (t, J =
7.16Hz, 2H, CH2), 1.58-1.64 (m, 2H), 0.9 (t, J = 7.58Hz, 3H, CH3).Example 85: 5-Butyl-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxy-benzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 15 g of a suspension in 30 ml of 1,2-dichloroethane Aluminum chloride,
In an ice bath, 7.5 g of 2-oxindole were added, followed by 12 g of butyryl chloride. The resulting suspension was stirred at 50 ° C. overnight. The mixture was poured into ice water and extracted three times with ethyl acetate. The combined ethyl acetate layers were washed with brine, dried over sodium sulfate, and concentrated to dryness to give a brown solid. The solid was chromatographed on silica gel (50% ethyl acetate in hexane) to give 4.3 g (38%) of 5%.
-Butanoyl-2-oxindole was obtained as a yellow solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.67 (s, br, NH), 7.84 (d, J = 8.39 Hz, 1H),
s, 1H, H-4), 6.88 (d, J = 8.39Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH2), 2.88 (t, J =
7.16Hz, 2H, CH2), 1.58-1.64 (m, 2H), 0.9 (t, J = 7.58Hz, 3H, CH3).

【０４３６】 トリエチルシラン（２．３ｇ）を，２０ｍｌのトリフルオロ酢酸中の２ｇの５
−ブタノイル−２−オキシインドールに室温で加え，溶液を３時間撹拌した。反
応液を氷水に注加して，赤色油状物を得，これを放置して固化させた。固体を真
空濾過により回収し，水およびヘキサンで洗浄し，乾燥して，１．７ｇ（９１％
収率）の５−ブチル−２−オキシインドールを灰白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.19 (s, br, NH), 7.01 (s, 1H, H-4), 6.95
(d, J = 8Hz, 1H), 6.69 (d, J = 8Hz, 1H), 3.4 (s, 2H, CH2), 2.49 (t, J =
8Hz, 2H, CH2), 1.48-1.52 (m, 2H), 1.25-1.31 (m, 2H), 0.88 (t, J = 7Hz, 3
H).Triethylsilane (2.3 g) was added to 2 g of 5 g in 20 ml of trifluoroacetic acid.
-Butanoyl-2-oxindole was added at room temperature and the solution was stirred for 3 hours. The reaction was poured into ice water to give a red oil which solidified on standing. The solid was collected by vacuum filtration, washed with water and hexane, dried, and 1.7 g (91%
Yield) of 5-butyl-2-oxindole was obtained as an off-white solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.19 (s, br, NH), 7.01 (s, 1H, H-4), 6.95
(d, J = 8Hz, 1H ), 6.69 (d, J = 8Hz, 1H), 3.4 (s, 2H, CH 2), 2.49 (t, J =
8Hz, 2H, CH 2 ), 1.48-1.52 (m, 2H), 1.25-1.31 (m, 2H), 0.88 (t, J = 7Hz, 3
H).

【０４３７】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−ブチル−２−
オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−ブチル−３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。[0437] 3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 5-butyl-2-
Condensation with oxindole gave 0.3 g of 5-butyl-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindole-2-one as a yellow-orange solid.

【０４３８】 実施例８６：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−４−カルボン酸 ヘキサン中のトリメチルシリルジアゾメタン（２Ｍ）を２−クロロ−３−カル
ボキシニトロベンゼン（２．０１ｇ）のメタノール（２０ｍｌ）中の溶液に，室
温で，さらにガスが発生しなくなるまで滴加した。過剰のトリメチルシリル−ジ
アゾメタンを酢酸で急冷した。反応混合物をロータリーポンプにより乾燥し，残
渣をオーブン中でさらに一夜乾燥した。生成物（２−クロロ−３−メトキシカル
ボニル−ニトロベンゼン）は，以下の反応に用いるのに十分純粋であった。Example 86: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-4-carboxylic acid Trimethylsilyldiazomethane (2M) in hexane was added to a solution of 2-chloro-3-carboxynitrobenzene (2.01 g) in methanol (20 ml) at room temperature. Then, the solution was added dropwise until no more gas was generated. Excess trimethylsilyl-diazomethane was quenched with acetic acid. The reaction mixture was dried by a rotary pump and the residue was dried in an oven overnight. The product (2-chloro-3-methoxycarbonyl-nitrobenzene) was pure enough to be used in the following reaction.

【０４３９】 ジメチルマロネート（６．０ｍｌ）を水素化ナトリウム（２．１ｇ）のジメチ
ルスルホキシド（１５ｍｌ）中の氷冷懸濁液に加えた。反応混合物を１００℃に
加熱し，１時間撹拌し，次に室温に冷却した。２−クロロ−３−メトキシカルボ
ニルニトロベンゼン（２．１５ｇ）を一度に加え，混合物を１００℃で１．５時
間撹拌した。次に，反応混合物を室温に冷却し，氷水に注加し，ｐＨ５に酸性に
し，酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウムで
乾燥し，濃縮して，３．０ｇのジメチル２−メトキシカルボニル−６−ニトロフ
ェニルマロネートを得た。Dimethyl malonate (6.0 ml) was added to an ice-cold suspension of sodium hydride (2.1 g) in dimethyl sulfoxide (15 ml). The reaction mixture was heated to 100 ° C., stirred for 1 hour, and then cooled to room temperature. 2-Chloro-3-methoxycarbonylnitrobenzene (2.15 g) was added in one portion and the mixture was stirred at 100 ° C. for 1.5 hours. Then the reaction mixture was cooled to room temperature, poured into ice water, acidified to pH 5 and extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to give 3.0 g of dimethyl 2-methoxycarbonyl-6-nitrophenylmalonate.

【０４４０】 ジメチル２−メトキシカルボニル−６−ニトロフェニルマロネート（３．０ｇ
）を５０ｍｌの６Ｎ塩酸中で一夜還流した。混合物を濃縮乾固し，２０ｍｌのエ
タノール中の１．１ｇの塩化スズ（ＩＩ）中で２時間還流した。混合物をセライ
トを通して濾過し，濃縮し，シリカゲルでクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘ
キサン：酢酸）を行い，０．６５ｇ（３７％収率）の４−カルボキシ−２−オキ
シインドールを白色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 12.96 (s, br, 1H, COOH), 10.74 (s, br, 1H,
NH), 7.53 (d, J = 8Hz, 1H), 7.39 (t, J = 8Hz, 1H, H-6), 7.12 (d, J = 8Hz
, 1H, H-7), 3.67 (s, 2H, H-3).Dimethyl 2-methoxycarbonyl-6-nitrophenylmalonate (3.0 g)
) Was refluxed in 50 ml of 6N hydrochloric acid overnight. The mixture was concentrated to dryness and refluxed in 1.1 g of tin (II) chloride in 20 ml of ethanol for 2 hours. The mixture was filtered through celite, concentrated and chromatographed on silica gel (ethyl acetate: hexane: acetic acid) to give 0.65 g (37% yield) of 4-carboxy-2-oxindole as a white solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 12.96 (s, br, 1H, COOH), 10.74 (s, br, 1H,
NH), 7.53 (d, J = 8Hz, 1H), 7.39 (t, J = 8Hz, 1H, H-6), 7.12 (d, J = 8Hz
, 1H, H-7), 3.67 (s, 2H, H-3).

【０４４１】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−カルボキシ−
２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−
４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−４−カルボン酸を黄橙色固体として得た。[0442] 3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is converted to 4-carboxy-
Condensation with 2-oxindole yields 0.3 g of 3- (3,5-diisopropyl-
4-Methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-4-carboxylic acid was obtained as a yellow-orange solid.

【０４４２】 実施例８７：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６
−（３−メトキシフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−（３−メトキ
シフェニル）−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの３−（３，５−ジ
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−メトキシフェニル）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 87: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6
-(3-methoxyphenyl) -1,3-dihydroindol-2-one Condensation of 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde with 6- (3-methoxyphenyl) -2-oxindole gives 0.4 g 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6- (3-methoxyphenyl)-
1,3-Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４４３】 実施例８８：７−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジ
リデン）−５−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−メチル−７−
クロロ−２−オキシインドールと縮合して，０．３５ｇの７−クロロ−３−（３
，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−メチル−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 88: 7-Chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5-methyl-1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde Is 5-methyl-7-
After condensation with chloro-2-oxindole, 0.35 g of 7-chloro-3- (3
, 5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5-methyl-1,3-dihydroindol-2-one as a yellow-orange solid.

【０４４４】 実施例８９：［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−カルバミン酸
ｔｅｒｔ−ブチルエステル ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−ｔｅｒｔ−ブ
チルオキシ−カルボニルアミノ−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの
［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−
２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブ
チルエステルを黄橙色固体として得た。Example 89: [3- (3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene)-
2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-5-yl] -carbamic acid tert-butyl ester 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is converted to 5-tert-butyloxy-carbonylamino-2-oxindole After condensation, 0.4 g of [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-
2,3-Dihydro-1H-indol-5-yl] -carbamic acid tert-butyl ester was obtained as a yellow-orange solid.

【０４４５】 実施例９０：５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−クロロ−２−オキシ
インドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４−
メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体
として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.5, 8.4, 7.9, 7.8, 7.2, 7.1, 6.
8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.3 (m, 1H, CH), 1.2(d, 6H,
2xCH3).Example 90: 5-Chloro-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3-isopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 5-chloro-2-oxy After condensing with indole, 0.3 g of 5-chloro-3- (3-isopropyl-4-
Methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.5, 8.4, 7.9, 7.8, 7.2, 7.1, 6.
8 (m, 7H, aromatic, = CH-), 3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.3 (m, 1H, CH), 1.2 (d, 6H,
2xCH 3 ).

【０４４６】 実施例９１：５−クロロ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシ−ベンジリ
デン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−シクロペンチル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−クロロ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（３−シクロペンチル−
４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.5, 8.3, 7.9, 7.8, 7.2, 7.1, 6.
8 (m, 7H, 芳香族, =CH-), 3.9 (s, 3H, OCH3), 3.3 (m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H,
4xCH2).Example 91: 5-Chloro-3- (3-cyclopentyl-4-methoxy-benzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3-cyclopentyl-4-methoxybenzaldehyde is converted to 5-chloro-2- After condensation with oxindole, 0.3 g of 5-chloro-3- (3-cyclopentyl-
4-Methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.6 (s, 1H, CONH), 8.5, 8.3, 7.9, 7.8, 7.2, 7.1, 6.
8 (m, 7H, aromatic, = CH-), 3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 3.3 (m, 1H, CH), 1.8 (m, 8H,
4xCH 2 ).

【０４４７】 実施例９２：３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−４−メチル
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ４−メトキシ−３−フェニルベンズアルデヒドを４−メチル−２−オキシイン
ドールと縮合して，０．３ｇの３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレ
ン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として
得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 8.3-6.7 (m, 12H, 芳香族, =CH-),
3.9 (s, 3H, OCH3), 2.6 (s, 3H, CH3).Example 92: 3- (6-Methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one 4-methoxy-3-phenylbenzaldehyde was converted to 4-methyl-2-oxy Condensation with indole provided 0.3 g of 3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.5 (s, 1H, CONH), 8.3-6.7 (m, 12H, aromatic, = CH-),
3.9 (s, 3H, OCH 3 ), 2.6 (s, 3H, CH 3 ).

【０４４８】 実施例９３：３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドを４−メチル
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（５−イソプロピル−４−
メトキシ−２−メチルベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オンを黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.3 (s, 1H, CONH), 8.2, 7.8, 7.1, 6.8, 6.8, 6.7 (m,
6H, 芳香族, =CH-), 3.8 (s, 3H, OCH3), 3.2 (m, 1H, CH), 2.5 (s, 3H, CH3)
, 2.4 (s, 3H, CH3), 1.2 (d, 6H, 2xCH3).Example 93: 3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one 5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzaldehyde With 4-methyl-2-oxindole to give 0.3 g of 3- (5-isopropyl-4-.
Methoxy-2-methylbenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.3 (s, 1H, CONH), 8.2, 7.8, 7.1, 6.8, 6.8, 6.7 (m,
6H, aromatic, = CH-), 3.8 (s, 3H, OCH 3 ), 3.2 (m, 1H, CH), 2.5 (s, 3H, CH 3 )
, 2.4 (s, 3H, CH 3 ), 1.2 (d, 6H, 2xCH 3 ).

【０４４９】 実施例９４：５−ブロモ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチ
レン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，３−ジヒドロ−５−ホルミルイルベンゾフラン（市販）を５−ブロモ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−ブロモ−３−（２，３−ジヒド
ロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
を黄橙色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ: 10.64 (s, 1H, CONH), 7.71 (d, 1H), 7.62(ビニル, 1H),
7.61 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.37 (dd, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.984 (d, 1H),
4.64 (t, 2H, CH2), 3.22 (t, 2H, CH2).Example 94: 5-Bromo-3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one 2,3-dihydro-5-formylylbenzofuran (commercially available) To 5-bromo-2
Condensation with -oxindole gave 0.3 g of 5-bromo-3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -1,3-dihydroindole-2-one as a yellow-orange solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ: 10.64 (s, 1H, CONH), 7.71 (d, 1H), 7.62 (vinyl, 1H),
7.61 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.37 (dd, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.984 (d, 1H),
4.64 (t, 2H, CH 2 ), 3.22 (t, 2H, CH 2 ).

【０４５０】 実施例９５：５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−イソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−５−クロロ
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（３−イソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドー
ル−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 95: 5-Chloro-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-l, 3-dihydroindol-2-one 3-isopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 4-methyl Condensation with -5-chloro-2-oxindole gives 0.3 g of 5-chloro-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindole-2-one. Obtained as a yellow-orange solid.

【０４５１】 実施例９６：５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジ
リデン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを４−メチル−５−
クロロ−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの５−クロロ−３−（３，
５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 96: 5-Chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde Is 4-methyl-5
Condensed with chloro-2-oxindole to give 0.4 g of 5-chloro-3- (3,
5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４５２】 実施例９７：５−クロロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマン（市販）を４−メチル−５−クロロ
−２−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの５−クロロ−３−（２，２−ジ
メチル−クロマン−６−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 97: 5-chloro-3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one 2,2-dimethyl-6-formylic Roman (commercially available) is condensed with 4-methyl-5-chloro-2-oxindole to give 0.3 g of 5-chloro-3- (2,2-dimethyl-chroman-6-ylmethylene) -4-methyl-. 1,3-Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４５３】 実施例９８：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸 ２−オキシインドール（６．７ｇ）を，氷浴中で冷却した塩化アルミニウム（
２３ｇ）のジクロロエタン（３０ｍｌ）中の懸濁液に加えた。塩化クロロアセチ
ル（１１．３ｇ）をゆっくり加え，塩素ガスが発生した。１０分間撹拌した後，
反応液を４０−５０℃に１．５時間暖めた。混合物を室温に冷却し，氷水に注加
した。沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，１０．
３ｇ（９８％）の５−クロロアセチル−２−オキシインドールを灰白色固体とし
て得た。Example 98: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid 2-oxindole (6.7 g) was added to aluminum chloride (chilled in an ice bath).
23 g) to a suspension in dichloroethane (30 ml). Chloroacetyl chloride (11.3 g) was slowly added to generate chlorine gas. After stirring for 10 minutes,
The reaction was warmed to 40-50 ° C for 1.5 hours. The mixture was cooled to room temperature and poured into ice water. 9. collect the precipitate by vacuum filtration, wash with water and dry under vacuum;
3 g (98%) of 5-chloroacetyl-2-oxindole were obtained as an off-white solid.

【０４５４】 ９．３ｇの５−クロロアセチル−２−オキシインドールの懸濁液を９０ｍｌピ
リジン中で８０−９０℃で３時間撹拌し，次に室温に冷却した。沈殿物を真空濾
過により回収し，２０ｍｌのエタノールで洗浄した。固体を９０ｍｌの２．５Ｎ
水酸化ナトリウムに溶解し，７０−８０℃で３時間撹拌した。混合物を室温に冷
却し，０．５Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を真空濾過により回収し，水
でよく洗浄して，粗５−カルボキシ−２−オキシインドールを暗褐色固体として
得た。一夜放置した後，濾液から２ｇの５−カルボキシ−２−オキシインドール
を黄色固体として得た。粗暗褐色生成物を熱メタノールに溶解し，不溶性物質を
濾過により除去し，濾液を濃縮して，５．６ｇの５−カルボキシ−２−オキシイ
ンドールを褐色固体として得た。合わせた収率は９７％であった。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 2.56 (s, br, 1H, COOH-5), 10.70 (s, 1H, NH-
1), 7.82 (dd, J = 2, 8Hz, 1H, H-6), 7.74 (s, br, 1H, H-4), 6.87 (d, J =
8Hz, 1H, H-7), および 3.53 (s, 2H, CH2-3). MS m/z 178 [M+1]+.A suspension of 9.3 g of 5-chloroacetyl-2-oxindole was stirred in 90 ml pyridine at 80-90 ° C. for 3 hours and then cooled to room temperature. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 ml of ethanol. 90 ml of 2.5N solid
Dissolved in sodium hydroxide and stirred at 70-80 ° C for 3 hours. The mixture was cooled to room temperature and acidified to pH 2 with 0.5N hydrochloric acid. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed well with water to give crude 5-carboxy-2-oxindole as a dark brown solid. After standing overnight, 2 g of 5-carboxy-2-oxindole was obtained from the filtrate as a yellow solid. The crude dark brown product was dissolved in hot methanol, the insoluble material was removed by filtration, and the filtrate was concentrated to give 5.6 g of 5-carboxy-2-oxindole as a brown solid. The combined yield was 97%. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 2.56 (s, br, 1H, COOH-5), 10.70 (s, 1H, NH-
1), 7.82 (dd, J = 2, 8Hz, 1H, H-6), 7.74 (s, br, 1H, H-4), 6.87 (d, J =
8Hz, 1H, H-7) , and 3.53 (s, 2H, CH 2 -3). MS m / z 178 [M + 1] +.

【０４５５】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−カルボキシ−
２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−
４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−５−カルボン酸を黄橙色固体として得た。The 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 5-carboxy-
Condensation with 2-oxindole gives 0.4 g of 3- (3,5-diisopropyl-
4-Methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid was obtained as a yellow-orange solid.

【０４５６】 実施例９９：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５
，６−ジメトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５，６−ジメトキ
シ−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの３−（３，５−ジイソプロピ
ル−４−メトキシベンジリデン）−５，６−ジメトキシ−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 99: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5
, 6-Dimethoxy-1,3-dihydroindol-2-one 3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is condensed with 5,6-dimethoxy-2-oxindole to give 0.4 g of 3- (3,3 5-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5,6-dimethoxy-1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４５７】 実施例１００：Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデ
ン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−メタン
スルホンアミド ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−メチルスルホ
ニルアミノ−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇのＮ−［３−（３，５
−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒド
ロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−メタンスルホンアミドを黄橙色固体として
得た。Example 100 N- [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -methanesulfonamide 3,5 -Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is condensed with 6-methylsulfonylamino-2-oxindole to give 0.4 g of N- [3- (3,5
-Diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -methanesulfonamide was obtained as a yellow-orange solid.

【０４５８】 実施例１０１：Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデ
ン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−ベンズ
アミド ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−ベンズアミド
−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇのＮ−［３−（３，５−ジイソプ
ロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−
インドール−６−イル］−ベンズアミドを黄橙色固体として得た。Example 101: N- [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-lH-indol-6-yl] -benzamide 3,5-diisopropyl Condensation of 4-methoxybenzaldehyde with 6-benzamide-2-oxindole gives 0.4 g of N- [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro. -1H-
Indole-6-yl] -benzamide was obtained as a yellow-orange solid.

【０４５９】 実施例１０２：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
６−（３−エトキシフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．８ｇ）を，４．２ｇ
の３−エトキシフェニルボロン酸，５．０ｇの５−ブロモ−２−フルオロニトロ
ベンゼンおよび２２ｍｌの２Ｍ炭酸ナトリウム溶液の，５０ｍｌのトルエンおよ
び５０ｍｌのエタノール中の混合物に加えた。混合物を２時間加熱還流した。冷
却した混合物を濃縮し，水を加え，混合物を酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エ
チル層を水，ブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮した。残渣をシリカゲル（５％酢
酸エチル，ヘキサン中）でクロマトグラフィーを行い，５．３ｇ（９０％収率）
の粗４−フルオロ−３'−エトキシ−３−ニトロビフェニルを黄色油状物として
得た。Example 102: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene)-
4.2 g of 6- (3-ethoxyphenyl) -1,3-dihydroindol-2-one tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0.8 g)
Of 3-ethoxyphenylboronic acid, 5.0 g of 5-bromo-2-fluoronitrobenzene and 22 ml of 2M sodium carbonate solution in 50 ml of toluene and 50 ml of ethanol. The mixture was heated at reflux for 2 hours. The cooled mixture was concentrated, water was added and the mixture was extracted twice with ethyl acetate. The ethyl acetate layer was washed with water, brine, dried and concentrated. The residue was chromatographed on silica gel (5% ethyl acetate in hexane) to give 5.3 g (90% yield).
Of crude 4-fluoro-3'-ethoxy-3-nitrobiphenyl as a yellow oil.

【０４６０】 ジメチルマロネート（１１．４ｍｌ）を２０ｍｌのジメチルスルホキシド中に
懸濁した４．０ｇの水素化ナトリウムに滴加した。混合物を１００℃に１０分間
加熱し，室温に冷却した。２５ｍｌのジメチルスルホキシド中の粗４−フルオロ
−３'−エトキシ−３−ニトロビフェニル（５．３ｇ）を加え，混合物を１００
℃で２時間撹拌した。反応混合物を冷却し，３００ｍｌの飽和塩化アンモニウム
溶液で急冷し，酢酸エチルで３回抽出した。抽出物を合わせ，水およびブライン
で洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，粗ジメチル３'−エトキシ
−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを黄色油状物として得た。Dimethyl malonate (11.4 ml) was added dropwise to 4.0 g of sodium hydride suspended in 20 ml of dimethyl sulfoxide. The mixture was heated to 100 ° C. for 10 minutes and cooled to room temperature. Crude 4-fluoro-3'-ethoxy-3-nitrobiphenyl (5.3 g) in 25 ml of dimethyl sulfoxide was added and the mixture was added to 100 ml.
Stirred at C for 2 hours. The reaction mixture was cooled, quenched with 300 ml of saturated ammonium chloride solution and extracted three times with ethyl acetate. The extracts were combined, washed with water and brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to give crude dimethyl 3'-ethoxy-3-nitrobiphenyl-4-malonate as a yellow oil.

【０４６１】 ６０ｍｌの６Ｎ塩酸中の粗ジメチル３'−エトキシ−３−ニトロビフェニル−
４−マロネートを１００℃で４日間撹拌し，次に冷却した。形成した沈殿物を濾
過により回収し，水およびヘキサンで洗浄し，乾燥して，４．７ｇ（５−ブロモ
−２−フルオロニトロベンゼンに基づき７７％）の粗３'−エトキシ−３−ニト
ロビフェニル−４−酢酸を淡黄褐色固体として得た。The crude dimethyl 3′-ethoxy-3-nitrobiphenyl- in 60 ml of 6N hydrochloric acid
The 4-malonate was stirred at 100 ° C. for 4 days, then cooled. The precipitate formed is collected by filtration, washed with water and hexane, dried and 4.7 g (77% based on 5-bromo-2-fluoronitrobenzene) of crude 3'-ethoxy-3-nitrobiphenyl- 4-Acetic acid was obtained as a light tan solid.

【０４６２】 鉄チップ（２．４ｇ）を，氷酢酸（４０ｍｌ）中の４．６ｇの３'−エトキシ
−３−ニトロビフェニル−４−酢酸に一度に加えた。混合物を２時間還流した。
反応混合物を冷却し，濃縮乾固した。残渣を酢酸エチルで繰り返し処理し，濾過
して不溶性物質を除去した。濾液を１Ｎ塩酸およびブラインで２回洗浄し，無水
硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，３．５ｇ（９１％）の６−（３−エトキシ
フェニル）−２−オキシインドールを淡褐色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.4 (s, br, 1H, NH), 7.33 (t, J = 8Hz, 1H,
H-3'), 7.35 (d, J = 8Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 1, 8Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8
Hz, 1H), 7.07-7.08 (m, 1H), 7.0 (s, br, 1H), 6.9 (dd, J = 3, 8Hz, 1H), 4
.08 (q, J = 7Hz, 2H, O CH2CH3), 3.49 (s, 2H, CH2), 1.34 (t, J = 7Hz, 3H,
OCH2CH3). MS m/z 254.2 [M+1]+.The iron chips (2.4 g) were added in one portion to 4.6 g of 3′-ethoxy-3-nitrobiphenyl-4-acetic acid in glacial acetic acid (40 ml). The mixture was refluxed for 2 hours.
The reaction mixture was cooled and concentrated to dryness. The residue was repeatedly treated with ethyl acetate and filtered to remove insoluble material. The filtrate was washed twice with 1N hydrochloric acid and brine, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to give 3.5 g (91%) of 6- (3-ethoxyphenyl) -2-oxindole as a light brown solid. Was. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.4 (s, br, 1H, NH), 7.33 (t, J = 8Hz, 1H,
H-3 '), 7.35 (d, J = 8Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 1, 8Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8
Hz, 1H), 7.07-7.08 (m, 1H), 7.0 (s, br, 1H), 6.9 (dd, J = 3, 8Hz, 1H), 4
.08 (q, J = 7Hz, 2H, O CH 2 CH 3 ), 3.49 (s, 2H, CH 2 ), 1.34 (t, J = 7Hz, 3H,
OCH 2 CH 3 ). MS m / z 254.2 [M + 1] + .

【０４６３】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−（３−エトキ
シフェニル）−２−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの３−（３，５−ジ
イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−エトキシフェニル）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Condensation of 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde with 6- (3-ethoxyphenyl) -2-oxindole gives 0.4 g of 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6- (3-ethoxyphenyl)-
1,3-Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４６４】 実施例１０３：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
６−フェニル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．８ｇ）を，３．１ｇ
のベンゼンボロン酸，５ｇの５−ブロモ−２−フルオロニトロベンゼンおよび２
２ｍｌの２Ｍ水性炭酸ナトリウムの，５０ｍｌのトルエンおよび５０ｍｌのエタ
ノール中の混合物に加えた。混合物を２時間還流し，濃縮し，残渣を酢酸エチル
で２回抽出した。酢酸エチル層を水およびブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮して
，黄色油状物を得た。油状物をシリカゲル（５％酢酸エチル，ヘキサン中）でク
ロマトグラフィーを行い，４．７５ｇ（９６％）の４−フルオロ−３−ニトロビ
フェニルを黄色油状物として得た。Example 103: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene)-
3.1 g of 6-phenyl-1,3-dihydroindol-2-one tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0.8 g) was added.
Benzeneboronic acid, 5 g of 5-bromo-2-fluoronitrobenzene and 2 g
A mixture of 2 ml of 2M aqueous sodium carbonate in 50 ml of toluene and 50 ml of ethanol was added. The mixture was refluxed for 2 hours, concentrated and the residue was extracted twice with ethyl acetate. The ethyl acetate layer was washed with water and brine, dried, and concentrated to give a yellow oil. The oil was chromatographed on silica gel (5% ethyl acetate in hexane) to give 4.75 g (96%) of 4-fluoro-3-nitrobiphenyl as a yellow oil.

【０４６５】 ２５ｍｌのジメチルスルホキシド中のジメチルマロネート（１０ｍｌ）を，２
５ｍｌのジメチルスルホキシド中に懸濁した３．５ｇの水素化ナトリウムに滴加
し，混合物を１００℃で１０分間撹拌した。混合物を室温に冷却し，２５ｍｌの
ジメチルスルホキシド中の４．７ｇの４−フルオロ−３−ニトロビフェニルを加
えた。混合物を１００℃で２時間撹拌し，冷却し，３００ｍｌの飽和塩化アンモ
ニウム溶液で急冷した。混合物を酢酸エチルで３回抽出し，合わせた有機層を水
およびブラインで洗浄し，蒸発させて，粗ジメチル−３−ニトロビフェニル−４
−マロネートを黄色油状物として得た。Dimethyl malonate (10 ml) in 25 ml of dimethyl sulfoxide was added to 2 ml
3.5 g of sodium hydride suspended in 5 ml of dimethylsulfoxide were added dropwise and the mixture was stirred at 100 ° C. for 10 minutes. The mixture was cooled to room temperature and 4.7 g of 4-fluoro-3-nitrobiphenyl in 25 ml of dimethyl sulfoxide was added. The mixture was stirred at 100 ° C. for 2 hours, cooled and quenched with 300 ml of saturated ammonium chloride solution. The mixture was extracted three times with ethyl acetate and the combined organic layers were washed with water and brine, evaporated and crude dimethyl-3-nitrobiphenyl-4
-The malonate was obtained as a yellow oil.

【０４６６】 粗ジメチル−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを３０ｍｌの６Ｎ塩酸中
で２４時間還流した。沈殿物を濾過により回収し，水で洗浄し，乾燥して，４．
５ｇ（４−フルオロ−３−ニトロビフェニルに基づき８０％）の３−ニトロビフ
ェニル−４−酢酸をクリーム色固体として得た。The crude dimethyl-3-nitrobiphenyl-4-malonate was refluxed in 30 ml of 6N hydrochloric acid for 24 hours. 3. collect the precipitate by filtration, wash with water and dry;
5 g (80% based on 4-fluoro-3-nitrobiphenyl) of 3-nitrobiphenyl-4-acetic acid were obtained as a cream solid.

【０４６７】 鉄チップ（２．６ｇ）を，４０ｍｌの酢酸中の４．５ｇの３−ニトロビフェニ
ル−４−酢酸に一度に加えた。混合物を２時間還流し，濃縮乾固し，残渣を酢酸
エチル中に取り出した。固体を濾過により除去し，濾液を１Ｎ塩酸およびブライ
ンで２回洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾液を濃縮して，３．４ｇ（
９３％収率）の６−フェニル−２−オキシインドールを淡褐色固体として得た。 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.4 (s, br, 1H, NH-1), 7.57-7.6 (m, 2H), 7
.42-7.46 (m, 2H), 7.32-7.37 (m, 1H), 7.27 (d, J = 8, 1H, H-4), 7.19 (dd,
J = 2 および 8Hz, 1H, H-5), 7.01 (d, J = 2Hz, 1H, H-7), 3.49 (s, 2H, CH 2 ). MS m/z 210 [M+1]+.[0467] Iron chips (2.6 g) were mixed with 4.5 g of 3-nitrobiphenyl in 40 ml of acetic acid.
Added all at once to l-4-acetic acid. The mixture was refluxed for 2 hours, concentrated to dryness and the residue was treated with acetic acid.
Take up in ethyl. Solids are removed by filtration and the filtrate is washed with 1N hydrochloric acid and brine.
After washing twice with anhydrous sodium sulfate, it was dried over anhydrous sodium sulfate. The filtrate was concentrated to 3.4 g (
(93% yield) of 6-phenyl-2-oxindole was obtained as a light brown solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ: 10.4 (s, br, 1H, NH-1), 7.57-7.6 (m, 2H), 7
.42-7.46 (m, 2H), 7.32-7.37 (m, 1H), 7.27 (d, J = 8, 1H, H-4), 7.19 (dd,
 J = 2 and 8Hz, 1H, H-5), 7.01 (d, J = 2Hz, 1H, H-7), 3.49 (s, 2H, CH Two ). MS m / z 210 [M + 1]+.

【０４６８】 ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを６−フェニル−２
−オキシインドールと縮合して，０．４ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−６−フェニル−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。[0468] 3,5-Diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde was converted to 6-phenyl-2.
-Oxindole, condensing with 0.4 g of 3- (3,5-diisopropyl-4
-Methoxybenzylidene) -6-phenyl-1,3-dihydroindole-2-
On was obtained as a yellow-orange solid.

【０４６９】 実施例１０４：３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−フルオロ−２
−オキシインドールと縮合して，０．３ｇの３−（３，５−ジイソプロピル−４
−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを黄橙色固体として得た。Example 104: 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene)-
5-Fluoro-1,3-dihydroindol-2-one 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzaldehyde is converted to 5-fluoro-2.
-Condensed with oxindole to give 0.3 g of 3- (3,5-diisopropyl-4).
-Methoxybenzylidene) -5-fluoro-1,3-dihydroindole-2-
On was obtained as a yellow-orange solid.

【０４７０】 実施例１０５：５−フルオロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリ
デン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ３，５−ジメチル−４−メトキシベンズアルデヒドを５−フルオロ−２−オキ
シインドールと縮合して，０．３ｇの５−フルオロ−３−（４−メトキシ−３，
５−ジメチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色
固体として得た。Example 105: 5-Fluoro-3- (4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one 3,5-dimethyl-4-methoxybenzaldehyde is converted to 5-fluoro Condensed with -2-oxindole to give 0.3 g of 5-fluoro-3- (4-methoxy-3,
5-Dimethylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４７１】 実施例１０６：３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン ２，２−ジメチル−６−ホルミルクロマン（市販）を２−オキシインドールと
縮合して，０．３ｇの３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを黄橙色固体として得た。Example 106: 3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -1,3
-Dihydroindol-2-one 2,2-dimethyl-6-formyl roman (commercially available) is condensed with 2-oxindole to give 0.3 g of 3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene)-
1,3-Dihydroindol-2-one was obtained as a yellow-orange solid.

【０４７２】 実施例１０７：３−｛２−［６−（４−フルオロフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル］−５−メチル−１Ｈ−ピロール
−３−イル｝プロピオン酸 ６−（４−フルオロフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（７
０ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ）を３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロー
ル−３−イル）−プロピオン酸（５６ｍｇ）と縮合して，表題化合物を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.38 (s, br, 1H, COOH), 12.08 (s, br, 1H, N
H), 10.87 (s, br, 1H, NH), 7.79 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.63-7.69 (m, 3H),
7.23-7.29 (m, 3H), 7.07 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 2
.96 (t, J= 7.2 Hz, 2H, CH2), 2.52 (t, J = 7.2 Hz, 2H, CH2), 2.32 (s, 3H,
CH3). MS-EI m/z 390 [M+].Example 107: 3- {2- [6- (4-fluorophenyl) -2-oxo-1,
2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -5-methyl-1H-pyrrol-3-yl {propionate 6- (4-fluorophenyl) -1,3-dihydroindole-2-one (7
(0 mg, 0.31 mmol) was condensed with 3- (2-formyl-5-methyl-1H-pyrrol-3-yl) -propionic acid (56 mg) to give the title compound. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.38 (s, br, 1H, COOH), 12.08 (s, br, 1H, N
H), 10.87 (s, br, 1H, NH), 7.79 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.63-7.69 (m, 3H),
7.23-7.29 (m, 3H), 7.07 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 2
.96 (t, J = 7.2 Hz, 2H, CH 2 ), 2.52 (t, J = 7.2 Hz, 2H, CH 2 ), 2.32 (s, 3H,
CH 3 ). MS-EI m / z 390 [M + ].

【０４７３】 実施例１０８：４−（２−カルボキシエチル）−５−［６−（４−フルオロフェ
ニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−
２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル ６−（４−フルオロフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（６
０ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）を４−（２−カルボキシエチル）−５−ホルミル−
２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（６５ｍｇ）（４
−（２−カルボキシエチル）−３−エトキシカルボニル−２−メチルピロールの
ホルミル化により製造（Ｂｕｌｔｅｒ，Ａ．Ｒ．，ａｎｄＧｅｏｒｇｅ，Ｓ．Ｄ
．（１９９３）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ４９：７０１７−７０２６））と縮合
して，表題化合物を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 12.03 (s, br, 1H, COO
H), 11.05 (s, br, 1H, NH), 7.83 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.66-7.70 (m, 2H), 7.25-7.30 (m, 3H), 7.08 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.2
2 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.20 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2), 2.54 (s,
3H, CH3), 2.45 (m, 2H, CH2), 4.22 (t, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), MS-EI m/z 462 [M+].Example 108: 4- (2-Carboxyethyl) -5- [6- (4-fluorophenyl) -2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl]-
2-methyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 6- (4-fluorophenyl) -1,3-dihydroindol-2-one (6
0 mg, 0.26 mmol) with 4- (2-carboxyethyl) -5-formyl-
2-methyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester (65 mg) (4
Prepared by formylation of-(2-carboxyethyl) -3-ethoxycarbonyl-2-methylpyrrole (Bulter, AR, and George, SD
. (1993) Tetrahedron 49: 7017-7026)) to give the title compound. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 12.03 (s, br, 1H, COO
H), 11.05 (s, br, 1H, NH), 7.83 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H, H-vinyl), 7.66-7.70 (m, 2H), 7.25-7.30 ( m, 3H), 7.08 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.2
2 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.20 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH 2 ), 2.54 (s,
3H, CH 3), 2.45 ( m, 2H, CH 2), 4.22 (t, J = 7.0 Hz, 2H, OCH 2 CH 3), MS-EI m / z 462 [M +].

【０４７４】 実施例１０９：３−｛２−［６−（２−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル］−５−メチル−１Ｈ−ピロール
−３−イル｝−プロピオン酸 ６−（２−メトキシフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（７
１ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ）を３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロール
−３−イル）−プロピオン酸（５４ｍｇ）と縮合して，表題化合物を得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.33 (s, br, 1H, NH), 12.07 (s, br, 1H, COO
H), 10.74 (s, br, 1H, NH), 7.68 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.25-7.28 (m, 2H), 6.94-7.05 (m, 4H), 5.99 (br s, 1H), 3.70 (s, 3H,
OCH3), 2.89 (m, 2H, CH2), 2.45 (m, 2H, CH2), 2.26 (s, 3H, CH3). MS-EI m/z 402 [M+].Example 109: 3- {2- [6- (2-methoxyphenyl) -2-oxo-1,
2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -5-methyl-1H-pyrrol-3-yl} -propionic acid 6- (2-methoxyphenyl) -1,3-dihydroindole-2-one (7
(1 mg, 0.3 mmol) was condensed with 3- (2-formyl-5-methyl-1H-pyrrol-3-yl) -propionic acid (54 mg) to give the title compound. 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.33 (s, br, 1H, NH), 12.07 (s, br, 1H, COO
H), 10.74 (s, br, 1H, NH), 7.68 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H, H-vinyl), 7.25-7.28 (m, 2H), 6.94-7.05 ( m, 4H), 5.99 (br s, 1H), 3.70 (s, 3H,
OCH 3), 2.89 (m, 2H, CH 2), 2.45 (m, 2H, CH 2), 2.26 (s, 3H, CH 3). MS-EI m / z 402 [M +].

【０４７５】 実施例１１０：４−（２−カルボキシエチル）−５−［６−（２−メトキシフェ
ニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−
２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 12.07 (s, br, 1H, COO
H), 10.99 (s, br, 1H, NH), 7.77 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.28-7.36 (m, 2H), 7.07-7.1 (m, 2H), 6.99-7.04 (m, 2H), 4.21 (q, J
= 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 3.19 (m, 2H, CH2), 2.54 (s,
3H, CH3), 2.50 (m, 2H, CH2), 1.04 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 474 [M+].Example 110: 4- (2-carboxyethyl) -5- [6- (2-methoxyphenyl) -2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl]-
2-methyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 12.07 (s, br, 1H, COO
H), 10.99 (s, br, 1H, NH), 7.77 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H, H-vinyl), 7.28-7.36 (m, 2H), 7.07-7.1 ( m, 2H), 6.99-7.04 (m, 2H), 4.21 (q, J
= 7.0 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.76 (s, 3H, OCH 3 ), 3.19 (m, 2H, CH 2 ), 2.54 (s,
3H, CH 3), 2.50 ( m, 2H, CH 2), 1.04 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH 3). MS-EI m / z 474 [M +].

【０４７６】 実施例１１１：３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロピ
オン酸 ５−クロロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（６１ｍｇ，０．３６ｍ
ｍｏｌ）を３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プ
ロピオン酸（６６ｍｇ）と縮合して，表題化合物を得た。 MS-EI m/z 300 および 302 [M-1 および M+1].Example 111: 5-Chloro 3- [2- (5-chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -5-methyl-1H-pyrrol-3-yl] propionic acid -1,3-dihydroindol-2-one (61 mg, 0.36 m
mol) with 3- (2-formyl-5-methyl-1H-pyrrol-3-yl) -propionic acid (66 mg) to give the title compound. MS-EI m / z 300 and 302 [M-1 and M + 1].

【０４７７】 実施例１１２：４−（２−カルボキシエチル）−５−（５−クロロ−２−オキソ
−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２−メチル−１Ｈ−ピ
ロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 12.04 (s, br, 1H, COO
H), 11.08 (s, br, 1H, NH), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.15 (dd, J = 2.0, 8.3 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.20 (q,
J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.21 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2), 2.53 (s, 3H, CH 3 ), 2.45 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 402 および 404 [M-1 および M+1].Example 112: 4- (2-carboxyethyl) -5- (5-chloro-2-oxo
-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -2-methyl-1H-py
Roll-3-carboxylic acid ethyl ester1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 12.04 (s, br, 1H, COO
H), 11.08 (s, br, 1H, NH), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H, H-vinyl
), 7.15 (dd, J = 2.0, 8.3 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.20 (q,
J = 7.1 Hz, 2H, OCHTwoCHThree), 3.21 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CHTwo), 2.53 (s, 3H, CH Three ), 2.45 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CHTwo), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCHTwoCHThree). MS-EI m / z 402 and 404 [M-1 and M + 1].

【０４７８】 実施例１１７：４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ
−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−
カルボン酸エチルエステル オキシインドール（０．２５ｇ，１．８８ｍｍｏｌ）を４−（２−カルボキシ
エチル）−５−ホルミル−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチル
エステル（０．５ｇ，１．９７ｍｍｏｌ）と縮合して，０．４５ｇ（６５％）の
表題化合物を得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 12.12 (s, br, 1H, COO
H), 10.99 (s, br, 1H, NH), 7.78 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.17 (m 1H), 6.99 (m, 1H), 4.25 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.93
(t, J = 7.4 Hz, 2H, CH2), 2.38 (t, J = 7.4 Hz, 2H, CH2), 2.24 (s, 3H, CH 3 ), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 368 [M+].Example 117: 4- (2-carboxyethyl) -3-methyl-5- (2-oxo
-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-
Carboxylic acid ethyl ester oxindole (0.25 g, 1.88 mmol) was added to 4- (2-carboxy)
Ethyl) -5-formyl-3-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylate
Condensation with the ester (0.5 g, 1.97 mmol) gives 0.45 g (65%)
The title compound was obtained.1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 12.12 (s, br, 1H, COO
H), 10.99 (s, br, 1H, NH), 7.78 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H, H-vinyl
), 7.17 (m 1H), 6.99 (m, 1H), 4.25 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCHTwoCHThree), 2.93
(t, J = 7.4 Hz, 2H, CHTwo), 2.38 (t, J = 7.4 Hz, 2H, CHTwo), 2.24 (s, 3H, CH Three ), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCHTwoCHThree). MS-EI m / z 368 [M+].

【０４７９】 実施例１１８：２−メチル−５−（５−メチルスルファモイル−２−オキソ−１
，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４−（３−モルホリン−４
−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル ２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルア
ミドを５−ホルミル−２−メエチル−４−（３−モルホリン−４−イルプロピル
）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステルと室温で一夜撹拌して，表
題化合物を得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.86 (s, br, 1H, NH), 11.39 (s, br, 1H, NH)
, 8.16 (d, J = 1.6 Hz, 1H, H-4), 7.82 (s, 1H, H-ビニル), 7.57 (dd, J = 1
.6 & 6.9 Hz, 1H, H-6), 7.21 (m, 1H, CH3NHSO2), 7.07 (d, J = 6.9 Hz, 1H,
H-7), 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.52 (m, 4H, 2xCH2), 3.03 (m, 2
H, CH2), 2.55 (s, 3H, CH3), 2.40 (d, J = 5.0 Hz, 3H, CH3NHSO2), 2.25 (m,
6H, 3xCH2), 1.69 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 516 [M+].Example 118: 2-Methyl-5- (5-methylsulfamoyl-2-oxo-1
, 2-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4- (3-morpholine-4
-Ylpropyl) -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester Stir overnight at room temperature with 4-ylpropyl) -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester to give the title compound. 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.86 (s, br, 1H, NH), 11.39 (s, br, 1H, NH)
, 8.16 (d, J = 1.6 Hz, 1H, H-4), 7.82 (s, 1H, H-vinyl), 7.57 (dd, J = 1
.6 & 6.9 Hz, 1H, H-6), 7.21 (m, 1H, CH 3 NHSO 2 ), 7.07 (d, J = 6.9 Hz, 1H,
H-7), 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.52 (m, 4H, 2xCH 2 ), 3.03 (m, 2
H, CH 2 ), 2.55 (s, 3H, CH 3 ), 2.40 (d, J = 5.0 Hz, 3H, CH 3 NHSO 2 ), 2.25 (m,
6H, 3xCH 2 ), 1.69 (m, 2H, CH 2 ), 1.29 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 516 [M + ].

【０４８０】 実施例１１９：２−メチル−４−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
プロピル］−５−（５−メチルスルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ
インドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエ
ステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 11.38 (s, br, 1H, NH)
, 8.16 (d, J = 1.6 Hz, 1H, H-4), 7.79 (s, 1H, H-ビニル), 7.57 (dd, J = 1
.6 & 6.6 Hz, 1H, H-6), 7.21 (m, 1H, CH3NHSO2), 7.05 (d, J = 6.6 Hz, 1H,
H-7), 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.01 (m, 2H, CH2), 2.55 (s, 3H,
CH3), 2.40 (d, J = 5.4 Hz, 3H, CH3NHSO2), 2.57 (m, 10H, 5xCH2), 2.09 (s
, 3H, CH3N), 1.67 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 529 [M+].Example 119: 2-Methyl-4- [3- (4-methylpiperazin-1-yl)-
Propyl] -5- (5-methylsulfamoyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 11.38 (s, br, 1H, NH)
, 8.16 (d, J = 1.6 Hz, 1H, H-4), 7.79 (s, 1H, H-vinyl), 7.57 (dd, J = 1
.6 & 6.6 Hz, 1H, H-6), 7.21 (m, 1H, CH 3 NHSO 2 ), 7.05 (d, J = 6.6 Hz, 1H,
H-7), 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.01 (m, 2H, CH 2 ), 2.55 (s, 3H,
CH 3 ), 2.40 (d, J = 5.4 Hz, 3H, CH 3 NHSO 2 ), 2.57 (m, 10H, 5xCH 2 ), 2.09 (s
, 3H, CH 3 N), 1.67 (m, 2H, CH 2 ), 1.29 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 529 [M + ].

【０４８１】 実施例１２０：４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−（５−メトキシ−２
−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２−メチル−
１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.95 (s, br, 1H, NH), 10.76 (s, br, 1H, NH)
, 7.70 (s, 1H, H-ビニル), 7.31 (d, J = 2.2 Hz, 1H, H-4), 6.78 (d, J = 8.
3 Hz, 1H, H-7), 6.73 (dd, J = 2.2 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 4.21 (q, J = 7.0 H
z, 2H, OCH2CH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 2.98 (m, 2H, CH2), 2.53 (s, 3H, CH3 ), 2.19 (m, 2H, CH2), 2.11 (s, 6H, N(CH3)2), 1.64 (m, 2H, CH2), 1.30 (t,
J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 411 [M+].Example 120: 4- (3-dimethylaminopropyl) -5- (5-methoxy-2
-Oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -2-methyl-
1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.95 (s, br, 1H, NH), 10.76 (s, br, 1H, NH)
, 7.70 (s, 1H, H-vinyl), 7.31 (d, J = 2.2 Hz, 1H, H-4), 6.78 (d, J = 8.
3 Hz, 1H, H-7), 6.73 (dd, J = 2.2 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 4.21 (q, J = 7.0 H
z, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.76 (s, 3H, OCH 3 ), 2.98 (m, 2H, CH 2 ), 2.53 (s, 3H, CH 3 ), 2.19 (m, 2H, CH 2 ), 2.11 (s, 6H, N (CH 3 ) 2 ), 1.64 (m, 2H, CH 2 ), 1.30 (t,
J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 411 [M + ].

【０４８２】 実施例１２１：５−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール
−３−イリデンメチル）−２−メチル−４−（３−モルホリン−４−イルプロピ
ル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.0 (s, br, 1H, NH), 10.77 (s, br, 1H, NH),
7.65 (s, 1H, H-ビニル), 7.40 (m, 1H), 6.76 (m, 2H), 4.2 (q, J = 7.0 Hz,
2H, OCH2CH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 3.54 (m, 4H, 2xCH2), 2.99 (m, 2H, CH2 ), 2.52 (s, 3H, CH3), 2.25 (m, 6H, 3xCH2), 1.67 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J
= 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 453 [M+].Example 121: 5- (5-Methoxy-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -2-methyl-4- (3-morpholin-4-ylpropyl) -1H-pyrrole -3-Carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 14.0 (s, br, 1H, NH), 10.77 (s, br, 1H, NH),
7.65 (s, 1H, H-vinyl), 7.40 (m, 1H), 6.76 (m, 2H), 4.2 (q, J = 7.0 Hz,
2H, OCH 2 CH 3 ), 3.76 (s, 3H, OCH 3 ), 3.54 (m, 4H, 2xCH 2 ), 2.99 (m, 2H, CH 2 ), 2.52 (s, 3H, CH 3 ), 2.25 ( m, 6H, 3xCH 2 ), 1.67 (m, 2H, CH 2 ), 1.29 (t, J
= 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 453 [M + ].

【０４８３】 実施例１２２：５−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール
−３−イリデンメチル）−２−メチル−４−［３−（４−メチルピペラジン−１
−イル）−プロピル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.99 (s, br, 1H, NH), 10.78 (s, br, 1H, NH)
, 7.63 (s, 1H, H-ビニル), 7.39 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 6.76 (m, 2H), 4
.2 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.77 (s, 3H, OCH3), 2.97 (m, 2H, CH2),
2.52 (s, 3H, CH3), 2.25 (m, 10H, 5xCH2), 2.08 (s, 3H, NCH3), 1.66 (m, 2H
, CH2), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 466 [M+].Example 122: 5- (5-Methoxy-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -2-methyl-4- [3- (4-methylpiperazine-1
-Yl) -propyl] -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.99 (s, br, 1H, NH), 10.78 (s, br, 1H, NH)
, 7.63 (s, 1H, H-vinyl), 7.39 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 6.76 (m, 2H), 4
.2 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.77 (s, 3H, OCH 3 ), 2.97 (m, 2H, CH 2 ),
2.52 (s, 3H, CH 3 ), 2.25 (m, 10H, 5xCH 2 ), 2.08 (s, 3H, NCH 3 ), 1.66 (m, 2H
, CH 2 ), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 466 [M + ].

【０４８４】 実施例１２３：２−メチル−４−（３−モルホリン−４−イルプロピル）−５−
（２−オキソ−５−スルファモイル−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデ
ンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 11.33 (s, br, 1H, NH)
, 8.19 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 7.75 (s, 1H, H-ビニル), 7.63 (dd, J = 1
.8 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 7.16 (s, 2H, H2NSO2), 7.02 (d, J = 8.3 Hz, 1H, H-
7), 4.21 (q, J = 7.3 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.53 (m, 4H, 2xCH2), 3.01 (m, 2H,
CH2), 2.55 (s, 3H, CH3), 2.28 (m, 6H, 3xCH2), 1.68 (m, 2H, CH2), 1.29 (
t, J = 7.3 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 502 [M+].Example 123: 2-methyl-4- (3-morpholin-4-ylpropyl) -5
(2-oxo-5-sulfamoyl-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.85 (s, br, 1H , NH), 11.33 (s, br, 1H, NH)
, 8.19 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 7.75 (s, 1H, H-vinyl), 7.63 (dd, J = 1
.8 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 7.16 (s, 2H, H 2 NSO 2 ), 7.02 (d, J = 8.3 Hz, 1H, H-
7), 4.21 (q, J = 7.3 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.53 (m, 4H, 2xCH 2 ), 3.01 (m, 2H,
CH 2 ), 2.55 (s, 3H, CH 3 ), 2.28 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1.68 (m, 2H, CH 2 ), 1.29 (
t, J = 7.3 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 502 [M + ].

【０４８５】 実施例１２４：２−メチル−４−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）−
プロピル］−５−（２−オキソ−５−スルファモイル−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 11.31 (s, br, 1H, NH)
, 8.18 (d, J = 1.5 Hz, 1H, H-4), 7.74 (s, 1H, H-ビニル), 7.63 (dd, J = 1
.5 & 8.1 Hz, 1H, H-6), 7.15 (s, 2H, H2NSO2), 7.01 (d, J = 8.1 Hz, 1H, H-
7), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.0 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H, CH 3 ), 2.26 (m, 10H, 5xCH2), 2.09 (s, 3H, NCH3), 1.67 (m, 2H, CH2), 1.29 (t
, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 515 [M+].Example 124: 2-Methyl-4- [3- (4-methylpiperazin-1-yl)-
Propyl] -5- (2-oxo-5-sulfamoyl-1,2-dihydroindo
3-Ylidenemethyl) -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.85 (s, br, 1H, NH), 11.31 (s, br, 1H, NH)
, 8.18 (d, J = 1.5 Hz, 1H, H-4), 7.74 (s, 1H, H-vinyl), 7.63 (dd, J = 1
.5 & 8.1 Hz, 1H, H-6), 7.15 (s, 2H, HTwoNSOTwo), 7.01 (d, J = 8.1 Hz, 1H, H-
7), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCHTwoCHThree), 3.0 (m, 2H, CHTwo), 2.54 (s, 3H, CH Three ), 2.26 (m, 10H, 5xCHTwo), 2.09 (s, 3H, NCHThree), 1.67 (m, 2H, CHTwo), 1.29 (t
, J = 7.1 Hz, 3H, OCHTwoCHThree). MS-EI m / z 515 [M+].

【０４８６】 実施例１２５：３−［４−エトキシカルボニル−５−メチル−３−（３−モルホ
リン−４−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン］−２−オキソ
−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 11.03 (s, br, 1H, COO
H), 8.17 (s, 1H, H-4), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-6), 7.59 (s, 1H, H-ビ
ニル), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-7), 4.21 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH2CH3),
3.54 (m, 4H, 2xCH2), 2.98 (m, 2H, CH2), 2.49 (s, 3H, CH3), 2.29 (m, 6H,
3xCH2), 1.64 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 467 [M+].Example 125: 3- [4-ethoxycarbonyl-5-methyl-3- (3-morpholin-4-ylpropyl) -lH-pyrrol-2-ylmethylene] -2-oxo-2,3-dihydro -1H-indole-5-carboxylic acid 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 11.03 (s, br, 1H, COO
H), 8.17 (s, 1H, H-4), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-6), 7.59 (s, 1H, H-vinyl), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-7), 4.21 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ),
3.54 (m, 4H, 2xCH 2 ), 2.98 (m, 2H, CH 2 ), 2.49 (s, 3H, CH 3 ), 2.29 (m, 6H,
3xCH 2 ), 1.64 (m, 2H, CH 2 ), 1.29 (t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 467 [M + ].

【０４８７】 実施例１２６：２−メチル−５−（５−メチルスルファモイル−２−オキソ−１
，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４−（３−ピロリジン−１
−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.84 (s, 1H, NH), 11.28 (br s, 1H, NH), 8.0
6 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H, H-ビニル), 7.57 (dd, J = 2.1 & 8.3 H
z, 1H), 7.20 (m, 1H, HNCH3), 7.06 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.22 (q, J = 7.0
Hz, 2H, OCH2CH3), 3.04 (m, 2H, CH2), 2.55 (s, 3H, CH3), 2.40 (d, J = 4
.8 Hz, 3H, HNCH3), 2.3-2.36 (m, 6H, 3xCH2), 1.66-1.71 (m, 6H, 3xCH2), 1
.30 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 500 [M+].Example 126: 2-methyl-5- (5-methylsulfamoyl-2-oxo-1
, 2-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4- (3-pyrrolidine-1
-Ylpropyl) -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.84 (s, 1H, NH), 11.28 (brs, 1H, NH), 8.0
6 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H, H-vinyl), 7.57 (dd, J = 2.1 & 8.3 H
z, 1H), 7.20 (m, 1H, HNCH 3 ), 7.06 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.22 (q, J = 7.0
Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.04 (m, 2H, CH 2 ), 2.55 (s, 3H, CH 3 ), 2.40 (d, J = 4
.8 Hz, 3H, HNCH 3 ), 2.3-2.36 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1.66-1.71 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1
.30 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 500 [M + ].

【０４８８】 実施例１２７：５−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール
−３−イリデンメチル）−２−メチル−４−（３−ピロリジン−１−イルプロピ
ル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.96 (s, 1H, NH), 10.75 (br s, 1H, NH), 7.6
5 (s, 1H, H-ビニル), 7.28 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.71-6.79 (m, 2H), 4.20 (
q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.75 (s, 3H, OCH3), 3.0 (m, 2H, CH2), 2.52
(s, 3H, CH3), 2.26-2.35 (m, 6H, 3xCH2), 1.65-1.71 (m, 6H, 3xCH2), 1.29
(t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 437 [M+].Example 127: 5- (5-Methoxy-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -2-methyl-4- (3-pyrrolidin-1-ylpropyl) -1H-pyrrole -3-Carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.96 (s, 1H, NH), 10.75 (br s, 1H, NH), 7.6
5 (s, 1H, H-vinyl), 7.28 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.71-6.79 (m, 2H), 4.20 (
q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.75 (s, 3H, OCH 3 ), 3.0 (m, 2H, CH 2 ), 2.52
(s, 3H, CH 3 ), 2.26-2.35 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1.65-1.71 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1.29
(t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 437 [M + ].

【０４８９】 実施例１２８：３−［４−エトキシカルボニル−５−メチル−３−（３−ピロリ
ジン−１−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン］−２−オキソ
−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.80 (s, 1H, NH), 11.26 (br s, 1H, NH), 8.2
(s, 1H), 7.77 (m, 2H), 6.92 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.23 (q, J = 6.9 Hz, 2
H, OCH2CH3), 3.03 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H, CH3), 2.40 (m, 6H, 3xCH2),
1.68 (m, 6H, 3xCH2), 1.29 (t, J = 6.9 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 451 [M+].Example 128: 3- [4-Ethoxycarbonyl-5-methyl-3- (3-pyrrolidin-l-ylpropyl) -lH-pyrrol-2-ylmethylene] -2-oxo-2,3-dihydro -1H- indole-5-carboxylic acid 1 HNMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.80 (s, 1H, NH), 11.26 (br s, 1H, NH), 8.2
(s, 1H), 7.77 (m, 2H), 6.92 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.23 (q, J = 6.9 Hz, 2
H, OCH 2 CH 3 ), 3.03 (m, 2H, CH 2 ), 2.54 (s, 3H, CH 3 ), 2.40 (m, 6H, 3xCH 2 ),
1.68 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1.29 (t, J = 6.9 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 451 [M + ].

【０４９０】 実施例１３０：２−メチル−５−（２−オキソ−５−スルファモイル−１，２−
ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４−（３−ピロリジン−１−イル
プロピル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.98 (s, 1H, NH), 11.30 (br s, 1H, NH), 8.1
0 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H, H-ビニル), 7.63 (dd, J = 1.9 & 8.2 H
z, 1H), 7.16 (br s, 2H, H2NSO2), 7.02 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.21 (q, J =
6.9 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.03 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H, CH3), 2.33 (m, 6H
, 3xCH2), 1.68 (m, 6H, 3xCH2), 1.29 (t, J = 6.9 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 486 [M+].Example 130: 2-Methyl-5- (2-oxo-5-sulfamoyl-1,2-
Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4- (3-pyrrolidin-1-ylpropyl) -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.98 (s, 1H, NH) ), 11.30 (br s, 1H, NH), 8.1
0 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H, H-vinyl), 7.63 (dd, J = 1.9 & 8.2 H
z, 1H), 7.16 (br s, 2H, H 2 NSO 2 ), 7.02 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.21 (q, J =
6.9 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.03 (m, 2H, CH 2 ), 2.54 (s, 3H, CH 3 ), 2.33 (m, 6H
, 3xCH 2 ), 1.68 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1.29 (t, J = 6.9 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 486 [M + ].

【０４９１】 実施例１３１：５−［４−（２−ヒドロキシエチル）−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル］−２−メチル−４−（３−モルホリン
−４−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.93 (s, 1H, NH), 10.95 (br s, 1H, NH), 7.6
5 (s, 1H, H-ビニル), 7.06 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 7.6 Hz, 1H),
6.77 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.85 (br s, 1H, OH), 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2H,
OCH2CH3), 3.73 (m, 2H, CH2), 3.53 (m, 4H, 2xCH2), 3.09 (m, 2H, CH2), 2.
92 (m, 2H, CH2), 2.53 (s, 3H, CH3), 2.31 (m, 6H, 3xCH2), 1.68 (m, 2H, C
H2), 1.29 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 467 [M+].Example 131: 5- [4- (2-hydroxyethyl) -2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -2-methyl-4- (3-morpholin-4-ylpropyl ) -1H-Pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.93 (s, 1H, NH), 10.95 (brs, 1H, NH), 7.6
5 (s, 1H, H-vinyl), 7.06 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 7.6 Hz, 1H),
6.77 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.85 (br s, 1H, OH), 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2H,
OCH 2 CH 3 ), 3.73 (m, 2H, CH 2 ), 3.53 (m, 4H, 2xCH 2 ), 3.09 (m, 2H, CH 2 ), 2.
92 (m, 2H, CH 2 ), 2.53 (s, 3H, CH 3 ), 2.31 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1.68 (m, 2H, C
H 2 ), 1.29 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 467 [M + ].

【０４９２】 実施例１３２：５−［４−（２−ヒドロキシエチル）−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル］−２−メチル−４−（３−ピロリジン
−１−イルプロピル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.93 (s, 1H, NH), 10.94 (br s, 1H, NH), 7.6
8 (s, 1H, H-ビニル), 7.06 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 7.3 Hz, 1H),
6.77 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.87 (br s, 1H, OH), 4.21 (q, J = 7.2 Hz, 2H,
OCH2CH3), 3.72 (m, 2H, CH2), 3.09 (m, 2H, CH2), 2.94 (m, 2H, CH2), 2.53
(s, 3H, CH3), 2.38 (m, 6H, 3xCH2), 1.67 (m, 6H, 3xCH2), 1.29 (t, J = 7
.2 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 451 [M+].Example 132: 5- [4- (2-Hydroxyethyl) -2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -2-methyl-4- (3-pyrrolidin-1-ylpropyl ) -1H-Pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.93 (s, 1H, NH), 10.94 (brs, 1H, NH), 7.6
8 (s, 1H, H-vinyl), 7.06 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 7.3 Hz, 1H),
6.77 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.87 (br s, 1H, OH), 4.21 (q, J = 7.2 Hz, 2H,
OCH 2 CH 3 ), 3.72 (m, 2H, CH 2 ), 3.09 (m, 2H, CH 2 ), 2.94 (m, 2H, CH 2 ), 2.53
(s, 3H, CH 3 ), 2.38 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1.67 (m, 6H, 3xCH 2 ), 1.29 (t, J = 7
.2 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 451 [M + ].

【０４９３】 実施例１３３：４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−５−（２−
オキソ−５−スルファモイル−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチ
ル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.73 (s, 1H, NH), 11.25 (br s, 1H, NH), 8.0
9 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H, H-ビニル), 7.62 (dd, J = 1.6 & 8.1 H
z, 1H), 7.20 (br s, 2H, H2NSO2), 7.02 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.21 (q, J =
7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.01 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H, CH3), 2.16 (m, 2H,
CH2), 2.11 (s, 6H, N(CH3)2), 1.66 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H
, OCH2CH3). MS-EI m/z 460 [M+].Example 133: 4- (3-Dimethylaminopropyl) -2-methyl-5- (2-
Oxo-5-sulfamoyl-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.73 (s, 1H, NH), 11.25 (br s, 1H, NH), 8.0
9 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H, H-vinyl), 7.62 (dd, J = 1.6 & 8.1 H
z, 1H), 7.20 (br s, 2H, H 2 NSO 2 ), 7.02 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.21 (q, J =
7.1 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.01 (m, 2H, CH 2 ), 2.54 (s, 3H, CH 3 ), 2.16 (m, 2H,
CH 2 ), 2.11 (s, 6H, N (CH 3 ) 2 ), 1.66 (m, 2H, CH 2 ), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H
, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 460 [M + ].

【０４９４】 実施例１３４：３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４−エトキシカル
ボニル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イルメチレン］−２−オキソ−２，
３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.77 (s, 1H, NH), 11.25 (br s, 1H, NH), 8.2
4 (s, 1H), 7.85 (s, 1H, H-ビニル), 7.76 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 4.21 (q,
J = 6.9 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.0 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H, CH3), 2.20 (m,
2H, CH2), 2.14 (s, 6H, N(CH3)2), 1.64 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 6.9 Hz,
3H, OCH2CH3). MS m/z 426.2 [M+H].Example 134: 3- [3- (3-Dimethylaminopropyl) -4-ethoxycarbonyl-5-methyl-1H-pyrrol-2-ylmethylene] -2-oxo-2,
3-Dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.77 (s, 1H, NH), 11.25 (br s, 1H, NH), 8.2
4 (s, 1H), 7.85 (s, 1H, H-vinyl), 7.76 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 4.21 (q,
J = 6.9 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.0 (m, 2H, CH 2 ), 2.54 (s, 3H, CH 3 ), 2.20 (m,
2H, CH 2 ), 2.14 (s, 6H, N (CH 3 ) 2 ), 1.64 (m, 2H, CH 2 ), 1.29 (t, J = 6.9 Hz,
3H, OCH 2 CH 3 ). MS m / z 426.2 [M + H].

【０４９５】 実施例１３５：４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−［４−（２−ヒドロ
キシエチル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
］−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.95 (s, 1H, NH), 10.97 (br s, 1H, NH), 7.6
9 (s, 1H, H-ビニル), 7.05 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 7.7 Hz, 1H),
6.75 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.90 (br s, 1H, OH), 4.20 (q, J = 7.2 Hz, 2H,
OCH2CH3), 3.72 (m, 2H, CH2), 3.09 (m, 2H, CH2), 2.90 (m, 2H, CH2), 2.52
(s, 3H, CH3), 2.20 (m, 2H, CH2), 2.07 (s, 6H, N(CH3)2), 1.63 (m, 2H, CH 2 ), 1.28 (t, J = 7.2 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 425 [M+].Example 135: 4- (3-Dimethylaminopropyl) -5- [4- (2-hydro
(Xyethyl) -2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl
] -2-Methyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.95 (s, 1H, NH), 10.97 (br s, 1H, NH), 7.6
9 (s, 1H, H-vinyl), 7.05 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 7.7 Hz, 1H),
 6.75 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.90 (br s, 1H, OH), 4.20 (q, J = 7.2 Hz, 2H,
 OCHTwoCHThree), 3.72 (m, 2H, CHTwo), 3.09 (m, 2H, CHTwo), 2.90 (m, 2H, CHTwo), 2.52
 (s, 3H, CHThree), 2.20 (m, 2H, CHTwo), 2.07 (s, 6H, N (CHThree)Two), 1.63 (m, 2H, CH Two ), 1.28 (t, J = 7.2 Hz, 3H, OCHTwoCHThree). MS-EI m / z 425 [M+].

【０４９６】 実施例１３６：５−［４−（２−ヒドロキシエチル）−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル］−２−メチル−４−［３−（４−メチ
ルピペラジン−１−イル）−プロピル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチ
ルエステル1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 14.0 (s, 1H, NH), 10.94 (br s, 1H, NH), 7.70
(s, 1H, H-ビニル), 7.06 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 7.4 Hz, 1H),
6.76 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.77 (br s, 1H, OH), 4.22 (q, J = 7.21 Hz, 2H,
OCH2CH3), 3.72 (m, 2H, CH2), 3.36 (m, 2H, CH2), 3.13 (m, 4H, 2xCH2), 2.
56 (m, 2H, CH2), 2.53 (s, 3H, CH3), 2.09 (m, 8H, 4xCH2), 1.28 (t, J = 7.
1 Hz, 3H, OCH2CH3).Example 136: 5- [4- (2-Hydroxyethyl) -2-oxo-l, 2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -2-methyl-4- [3- (4-methylpiperazine- 1-yl) -propyl] -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 14.0 (s, 1H, NH), 10.94 (brs, 1H, NH), 7.70
(s, 1H, H-vinyl), 7.06 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 7.4 Hz, 1H),
6.76 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.77 (br s, 1H, OH), 4.22 (q, J = 7.21 Hz, 2H,
OCH 2 CH 3 ), 3.72 (m, 2H, CH 2 ), 3.36 (m, 2H, CH 2 ), 3.13 (m, 4H, 2xCH 2 ), 2.
56 (m, 2H, CH 2 ), 2.53 (s, 3H, CH 3 ), 2.09 (m, 8H, 4xCH 2 ), 1.28 (t, J = 7.
1 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ).

【０４９７】 実施例１３７：４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−５−（５−
メチルスルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデ
ンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル ２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルア
ミド（１１３ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）を４−（３−ジメチルアミノ−プロピル）
−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル
（１３３ｍｇ）と縮合して，９６ｍｇ（４０％）の表題化合物を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.73 (s, br, 1H, NH), 11.32 (s, br, 1H, NH)
, 8.05 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 7.92 (s, 1H, H-ビニル), 7.57 (dd, J = 1
.8 & 8.1 Hz, 1H, H-6), 7.22 (m, 1H, CH3NHSO2), 7.05 (d, J = 8.1 Hz, 1H,
H-7), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.01 (m, 2H, CH2), 2.54 (s, 3H,
CH3), 2.41 (d, J = 4.0 Hz, 3H, CH3NHSO2), 2.14 (s, 8H, CH2 & N(CH3)2),
1.66 (m, 2H, CH2), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 474 [M+].Example 137: 4- (3-Dimethylaminopropyl) -2-methyl-5- (5-
Methylsulfamoyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester 2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid methylamide (113 mg, 0.5 mmol) in 4- (3-dimethylamino-propyl)
Condensation with -5-formyl-2-methyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester (133 mg) gave 96 mg (40%) of the title compound. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.73 (s, br, 1H, NH), 11.32 (s, br, 1H, NH)
, 8.05 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 7.92 (s, 1H, H-vinyl), 7.57 (dd, J = 1
.8 & 8.1 Hz, 1H, H-6), 7.22 (m, 1H, CH 3 NHSO 2 ), 7.05 (d, J = 8.1 Hz, 1H,
H-7), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.01 (m, 2H, CH 2 ), 2.54 (s, 3H,
CH 3 ), 2.41 (d, J = 4.0 Hz, 3H, CH 3 NHSO 2 ), 2.14 (s, 8H, CH 2 & N (CH 3 ) 2 ),
1.66 (m, 2H, CH 2 ), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 474 [M + ].

【０４９８】 実施例１３８：４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−５−（５−
メチルスルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデ
ンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸 ４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−ピ
ロール−３−カルボン酸エチルエステル（３００ｍｇ，１．１３ｍｍｏｌ）およ
び水酸化ナトリウムのＭｅＯＨ（４ｍＬ）／水（２ｍＬ）中の混合物を８０℃で
１９時間撹拌した。次に反応をＥｔＯＡｃで希釈した。水性層を分離し，中和し
，濃縮した。残渣をＭｅＯＨに溶解し，濾過し，濾液を濃縮して，２５１ｍｇ（
９４％）の４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−ホルミル−２−メチル−
１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸を得た。1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.88 (br s, 1H, NH), 9.50 (s, 1H, CHO), 2.9
6 (m, 2H, CH2), 2.39 (s, 3H, CH3), 2.22 (m, 2H, CH2), 2.14 (s, 6H, N(CH3 )2), 1.68 (m, 2H, CH2CH2 CH2). MS-EI m/z 238 [M+].Example 138: 4- (3-Dimethylaminopropyl) -2-methyl-5- (5-
Methylsulfamoyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-3-carboxylate 4- (3-dimethylaminopropyl) -5-formyl-2-methyl-1H-pyrrole A mixture of -3-carboxylic acid ethyl ester (300 mg, 1.13 mmol) and sodium hydroxide in MeOH (4 mL) / water (2 mL) was stirred at 80 ° C. for 19 hours. Then the reaction was diluted with EtOAc. The aqueous layer was separated, neutralized and concentrated. The residue was dissolved in MeOH, filtered, and the filtrate was concentrated to 251 mg (
94%) of 4- (3-dimethylaminopropyl) -5-formyl-2-methyl-
1H-Pyrrole-3-carboxylic acid was obtained. 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.88 (br s, 1H, NH), 9.50 (s, 1H, CHO), 2.9
6 (m, 2H, CH 2 ), 2.39 (s, 3H, CH 3 ), 2.22 (m, 2H, CH 2 ), 2.14 (s, 6H, N (CH 3 ) 2 ), 1.68 (m, 2H, CH 2 CH 2 CH 2 ). MS-EI m / z 238 [M + ].

【０４９９】 ２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルア
ミド（１１３ｍｇ）を４−（３−ジメチルアミノプロピル）−５−ホルミル−２
−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１１９ｍｇ）と縮合して，５０ｍ
ｇの４−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−メチル−５−（５−メチルスル
ファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル
）−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸を得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.52 (s, br, 1H, NH), 11.25 (s, br, 1H, COO
H), 8.01 (d, J = 1.7 Hz, 1H, H-4), 7.84 (s, 1H, H-ビニル), 7.52 (dd, J =
1.7 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 7.22 (m, 1H, CH3NHSO2), 7.05 (d, J = 8.3 Hz, 1H
, H-7), 3.08 (m, 2H, CH2), 2.56 (s, 3H, CH3), 2.40 (m, 3H, CH3NHSO2), 2.
17 (m, 8H, CH2 & N(CH3)2), 1.72 (m, 2H, CH2). MS-EI m/z 446 [M+].2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid methylamide (113 mg) was added to 4- (3-dimethylaminopropyl) -5-formyl-2
-Methyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid (119 mg)
g of 4- (3-dimethylaminopropyl) -2-methyl-5- (5-methylsulfamoyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-3-carboxylic acid The acid was obtained. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.52 (s, br, 1H, NH), 11.25 (s, br, 1H, COO
H), 8.01 (d, J = 1.7 Hz, 1H, H-4), 7.84 (s, 1H, H-vinyl), 7.52 (dd, J =
1.7 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 7.22 (m, 1H, CH 3 NHSO 2 ), 7.05 (d, J = 8.3 Hz, 1H
, H-7), 3.08 (m, 2H, CH 2 ), 2.56 (s, 3H, CH 3 ), 2.40 (m, 3H, CH 3 NHSO 2 ), 2.
17 (m, 8H, CH 2 & N (CH 3 ) 2 ), 1.72 (m, 2H, CH 2 ). MS-EI m / z 446 [M + ].

【０５００】 実施例１３９：４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（４−メチル
−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピ
ロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.97 (s, br, 1H, NH), 12.15 ( br s, 1H, CO
OH ), 11.03 (s, 1H, NH), 7.69 (s, 1H, H-ビニル), 7.10 (t, J = 7.5 Hz, 1H
), 6.83 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.28 (q, J = 7.0
Hz, 2H, OCH2CH3), 2.88 (t, 2H, CH2), 2.62 (s, 3H, CH3), 2.43 (t, 2H, CH2 ), 2.26 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 382 [M+].Example 139: 4- (2-Carboxyethyl) -3-methyl-5- (4-methyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid Acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.97 (s, br, 1H, NH), 12.15 (br s, 1H, CO
OH), 11.03 (s, 1H, NH), 7.69 (s, 1H, H-vinyl), 7.10 (t, J = 7.5 Hz, 1H
), 6.83 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.28 (q, J = 7.0
Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 2.88 (t, 2H, CH 2 ), 2.62 (s, 3H, CH 3 ), 2.43 (t, 2H, CH 2 ), 2.26 (s, 3H, CH 3 ), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 382 [M + ].

【０５０１】 実施例１４０：４−（２−カルボキシエチル）−５−（５−メトキシ−２−オキ
ソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.97 (s, br, 1H, NH), 12.14 (br s, 1H, COO
H ), 10.81 (s, 1H, NH), 7.71 (s, 1H, H-ビニル), 7.46 (m, 1H), 6.78 (m, 2
H), 4.28 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 2.97 (t, 2H,
CH2), 2.40 (t, 2H, CH2), 2.26 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH3). MS-EI m/z 398 [M+].Example 140: 4- (2-Carboxyethyl) -5- (5-methoxy-2-oxo
So-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -3-methyl-1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.97 (s, br, 1H, NH), 12.14 (br s, 1H, COO
H), 10.81 (s, 1H, NH), 7.71 (s, 1H, H-vinyl), 7.46 (m, 1H), 6.78 (m, 2
H), 4.28 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCHTwoCHThree), 3.76 (s, 3H, OCHThree), 2.97 (t, 2H,
CHTwo), 2.40 (t, 2H, CHTwo), 2.26 (s, 3H, CHThree), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH Two CHThree). MS-EI m / z 398 [M+].

【０５０２】 実施例１４１：４−（２−カルボキシエチル）−５−（６−メトキシ−２−オキ
ソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.70 (s, br, 1H, NH), 12.11 ( br s, 1H, COO
H ), 10.95 (s, 1H, NH), 7.0 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-4), 7.55 (s, 1H, H-ビ
ニル), 6.59 (dd, J = 2.7 & 8.4 Hz, 1H, H-5), 6.45 (d, J = 2.7 Hz, 1H, H-
7), 4.27 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 2.92 (t, 2H,
CH2), 2.39 (t, 2H, CH2), 2.25 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH3). MS-EI m/z 398 [M+].Example 141: 4- (2-Carboxyethyl) -5- (6-methoxy-2-oxo
So-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -3-methyl-1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.70 (s, br, 1H, NH), 12.11 (br s, 1H, COO
H), 10.95 (s, 1H, NH), 7.0 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-4), 7.55 (s, 1H, H-bi
Nil), 6.59 (dd, J = 2.7 & 8.4 Hz, 1H, H-5), 6.45 (d, J = 2.7 Hz, 1H, H-
7), 4.27 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCHTwoCHThree), 3.76 (s, 3H, OCHThree), 2.92 (t, 2H,
CHTwo), 2.39 (t, 2H, CHTwo), 2.25 (s, 3H, CHThree), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH Two CHThree). MS-EI m / z 398 [M+].

【０５０３】 実施例１４２：５−（６−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−
３−イリデンメチル）−４−（２−カルボキシ−エチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.77 (s, br, 1H, NH), 12.13 ( br s, 1H, COO
H ), 11.14 (s, 1H, NH), 7.77 (br s, 2H), .12 (m, 2H), 4.28 (m, 2H, OCH2C
H3), 2.95 (m, 2H, CH2), 2.40 (m, 2H, CH2), 2.26 (s, 3H, CH3), 1.29 (m, 3
H, OCH2CH3). MS-EI m/z 446 & 448 [M-1 & M+1].Example 142: 5- (6-Bromo-2-oxo-1,2-dihydroindole-
3-ylidenemethyl) -4- (2-carboxy-ethyl) -3-methyl-1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.77 (s, br, 1H, NH), 12.13 (br s, 1H, COO
H), 11.14 (s, 1H, NH), 7.77 (br s, 2H), .12 (m, 2H), 4.28 (m, 2H, OCH 2 C
H 3 ), 2.95 (m, 2H, CH 2 ), 2.40 (m, 2H, CH 2 ), 2.26 (s, 3H, CH 3 ), 1.29 (m, 3
H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 446 & 448 [M-1 & M + 1].

【０５０４】 実施例１４３：５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−
３−イリデンメチル）−４−（２−カルボキシ−エチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.86 (s, br, 1H, NH), 12.2 ( br s, 1H, COOH
), 11.12 (s, 1H, NH), 8.11 (d, J = 2.0 Hz, 1H, H-4), 7.83 (s, 1H, H-ビニ
ル), 7.33 (dd, J = 2.0 & 8.3 Hz, 1H, H-6), 6.83 (d, J = 8.3 Hz, 1H, H-7)
, 4.28 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.98 (t, 2H, CH2), 2.39 (m, 2H, CH2 ), 2.25 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 446 & 448 [M-1 & M+1].Example 143: 5- (5-bromo-2-oxo-1,2-dihydroindole-
3-ylidenemethyl) -4- (2-carboxy-ethyl) -3-methyl-1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.86 (s, br, 1H, NH), 12.2 (br s, 1H, COOH
), 11.12 (s, 1H, NH), 8.11 (d, J = 2.0 Hz, 1H, H-4), 7.83 (s, 1H, H-vinyl), 7.33 (dd, J = 2.0 & 8.3 Hz, 1H , H-6), 6.83 (d, J = 8.3 Hz, 1H, H-7)
, 4.28 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 2.98 (t, 2H, CH 2 ), 2.39 (m, 2H, CH 2 ), 2.25 (s, 3H, CH 3 ), 1.31 ( t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 446 & 448 [M-1 & M + 1].

【０５０５】 実施例１４４：４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ
−６−フェニル−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.86 (s, br, 1H, NH), 12.2 ( br s, 1H, COOH
), 11.11 (s, 1H, NH), 7.89 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H, H-ビニル),
7.65 (m, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.12 (d, J = 1.6 Hz, 1H)
, 4.29 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.97 (m, 2H, CH2), 2.42 (m, 2H, CH2 ), 2.27 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 444 [M+].Example 144: 4- (2-Carboxyethyl) -3-methyl-5- (2-oxo-6-phenyl-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.86 (s, br, 1H, NH), 12.2 (br s, 1H, COOH
), 11.11 (s, 1H, NH), 7.89 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H, H-vinyl),
7.65 (m, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.12 (d, J = 1.6 Hz, 1H)
, 4.29 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 2.97 (m, 2H, CH 2 ), 2.42 (m, 2H, CH 2 ), 2.27 (s, 3H, CH 3 ), 1.31 ( t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 444 [M + ].

【０５０６】 実施例１４５：４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ
−５−スルファモイル−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）
−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.84 (s, br, 1H, NH), 11.0 ( br s, 2H), 8.2
6 (d, J = 1.6 Hz, 1H, H-4), 7.88 (s, 1H, H-ビニル), 7.67 (dd, J = 1.6 &
8.4 Hz, 1H, H-6), 7.22 (br m, 2H, H2NSO2), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-7)
, 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.97 (t, 2H, CH2), 2.37 (m, 2H, CH2 ), 2.26 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 447 [M+].Example 145: 4- (2-Carboxyethyl) -3-methyl-5- (2-oxo-5-sulfamoyl-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl)
-1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.84 (s, br, 1H, NH), 11.0 (br s, 2H), 8.2
6 (d, J = 1.6 Hz, 1H, H-4), 7.88 (s, 1H, H-vinyl), 7.67 (dd, J = 1.6 &
8.4 Hz, 1H, H-6), 7.22 (br m, 2H, H 2 NSO 2 ), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H, H-7)
, 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 2.97 (t, 2H, CH 2 ), 2.37 (m, 2H, CH 2 ), 2.26 (s, 3H, CH 3 ), 1.31 ( t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 447 [M + ].

【０５０７】 実施例１４６：４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（５−メチル
スルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチ
ル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.89 (s, br, 1H, NH), 12.2 ( br s, 1H, COOH
), 11.43 (s, 1H, NH), 8.25 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 7.94 (s, 1H, H-ビ
ニル), 7.62 (dd, J = 1.8 & 8.4 Hz, 1H, H-6), 7.27 (m, 1H, HNSO2), 7.07 (
d, J = 8.4 Hz, 1H, H-7), 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.01 (t, 2H,
CH2), 2.45 (m, 2H, CH2), 2.42 (d, J = 5.3 Hz, 3H, NCH3), 2.27 (s, 3H, C
H3), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). MS-EI m/z 461 [M+].Example 146: 4- (2-Carboxyethyl) -3-methyl-5- (5-methylsulfamoyl-2-oxo-l, 2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -lH-pyrrole- 2-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.89 (s, br, 1H, NH), 12.2 (br s, 1H, COOH
), 11.43 (s, 1H, NH), 8.25 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 7.94 (s, 1H, H-vinyl), 7.62 (dd, J = 1.8 & 8.4 Hz, 1H , H-6), 7.27 (m, 1H, HNSO 2 ), 7.07 (
d, J = 8.4 Hz, 1H, H-7), 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.01 (t, 2H,
CH 2 ), 2.45 (m, 2H, CH 2 ), 2.42 (d, J = 5.3 Hz, 3H, NCH 3 ), 2.27 (s, 3H, C
H 3 ), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 461 [M + ].

【０５０８】 実施例１４７：４−（２−カルボキシエチル）−５−（５−ジメチルスルファモ
イル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−３
−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 12.14 ( br s, 1H, COO
H ), 11.47 (s, 1H, NH), 8.26 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 8.0 (s, 1H, H-ビ
ニル), 7.58 (dd, J = 1.8 & 7.9 Hz, 1H, H-6), 7.10 (d, J = 7.9 Hz, 1H, H-
7), 4.29 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.03 (t, 2H, CH2), 2.61 (s, 6H, N
(CH3)2), 2.42 (t, 2H, CH2), 2.26 (s, 3H, CH3), 1.32 (t, J = 7.2 Hz, 3H,
OCH2CH3). MS-EI m/z 489 [M+].Example 147: 4- (2-Carboxyethyl) -5- (5-dimethylsulfamoyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -3
-Methyl-1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.88 (s, br, 1H, NH), 12.14 (brs, 1H, COO
H), 11.47 (s, 1H, NH), 8.26 (d, J = 1.8 Hz, 1H, H-4), 8.0 (s, 1H, H-vinyl), 7.58 (dd, J = 1.8 & 7.9 Hz, 1H, H-6), 7.10 (d, J = 7.9 Hz, 1H, H-
7), 4.29 (q, J = 7.2 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 3.03 (t, 2H, CH 2 ), 2.61 (s, 6H, N
(CH 3 ) 2 ), 2.42 (t, 2H, CH 2 ), 2.26 (s, 3H, CH 3 ), 1.32 (t, J = 7.2 Hz, 3H,
OCH 2 CH 3 ). MS-EI m / z 489 [M + ].

【０５０９】 実施例１４８：４−（２−カルボキシエチル）−５−（５−イソプロピルスルフ
ァモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）
−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.84 (s, br, 1H, NH), 11.0 ( br s, 2H, COOH
& NH), 8.23 (d, J = 1.5 Hz, 1H, H-4), 7.92 (s, 1H, H-ビニル), 7.64 (dd,
J = 1.5 & 8.4 Hz, 1H, H-6), 7.43 (br m, 1H, HNC(CH3)2), 7.05 (d, J = 8.
4 Hz, 1H, H-7), 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.96 (t, 2H, CH2), 2.
34 (t, 2H, CH2), 2.25 (s, 3H, CH3), 1.31 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3), 0
.95 (d, J = 6.6 Hz, 6H, HNC(CH3)2). MS-EI m/z 489 [M+].Example 148: 4- (2-Carboxyethyl) -5- (5-isopropylsulfamoyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl)
-3-methyl -1H- pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester 1 HNMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.84 (s, br, 1H, NH), 11.0 (br s, 2H, COOH
& NH), 8.23 (d, J = 1.5 Hz, 1H, H-4), 7.92 (s, 1H, H-vinyl), 7.64 (dd,
J = 1.5 & 8.4 Hz, 1H, H-6), 7.43 (br m, 1H, HNC (CH 3 ) 2 ), 7.05 (d, J = 8.
4 Hz, 1H, H-7), 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH 2 CH 3 ), 2.96 (t, 2H, CH 2 ), 2.
34 (t, 2H, CH 2 ), 2.25 (s, 3H, CH 3 ), 1.31 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH 2 CH 3 ), 0
.95 (d, J = 6.6 Hz, 6H, HNC (CH 3 ) 2 ). MS-EI m / z 489 [M + ].

【０５１０】 実施例１４９：３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール
−２−イルメチレン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５
−スルホン酸メチルアミド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.90 (s, 1H, NH), 11.40 (br s, 1H, NH), 8.1
7 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H, H-ビニル), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H),
7.63 (dd, J = 1.5 & 8.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.30 (m, 2H)
, 7.08 (m, 2H), 3.15 (t, J = 6.6 Hz, 2H, CH2), 2.43 (d, J = 4.2 Hz, 3H,
NCH3), 2.17 (t, J = 6.6 Hz, 2H, CH2), 2.14 (s, 6H, N(CH3)2), 1.78 (m, 2H
, CH2). MS-EI m/z 438 [M+].Example 149: 3- [3- (3-Dimethylaminopropyl) -1H-indol-2-ylmethylene] -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5
-Sulfonic acid methylamide 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.90 (s, 1H, NH), 11.40 (br s, 1H, NH), 8.1
7 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H, H-vinyl), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H),
7.63 (dd, J = 1.5 & 8.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.30 (m, 2H)
, 7.08 (m, 2H), 3.15 (t, J = 6.6 Hz, 2H, CH 2 ), 2.43 (d, J = 4.2 Hz, 3H,
NCH 3 ), 2.17 (t, J = 6.6 Hz, 2H, CH 2 ), 2.14 (s, 6H, N (CH 3 ) 2 ), 1.78 (m, 2H
, CH 2 ). MS-EI m / z 438 [M + ].

【０５１１】 実施例１５０：３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール
−２−イルメチレン］−４−（２−ヒドロキシエチル）−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オン1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, 1H, NH), 11.01 (br s, 1H, NH), 7.9
5 (s, 1H, H-ビニル), 7.66 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 7.9 Hz, 1H),
7.26 (t, J = 7.54 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.06 (t, J = 7.4 H
z, 1H), 6.87 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.91 (br s,
1H, OH), 3.79 (m, 2H, CH2), 3.16 (m, 2H, CH2), 3.04 (m, 2H, CH2), 2.21 (
m, 2H, CH2), 2.09 (s, 6H, N(CH3)2), 1.77 (m, 2H, CH2). MS m/z 389 [M+].Example 150: 3- [3- (3-Dimethylaminopropyl) -1H-indol-2-ylmethylene] -4- (2-hydroxyethyl) -1,3-dihydroindol-2-one 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.12 (s, 1H, NH), 11.01 (br s, 1H, NH), 7.9
5 (s, 1H, H-vinyl), 7.66 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 7.9 Hz, 1H),
7.26 (t, J = 7.54 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.06 (t, J = 7.4 H
z, 1H), 6.87 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.91 (br s,
1H, OH), 3.79 (m, 2H, CH 2 ), 3.16 (m, 2H, CH 2 ), 3.04 (m, 2H, CH 2 ), 2.21 (
m, 2H, CH 2 ), 2.09 (s, 6H, N (CH 3 ) 2 ), 1.77 (m, 2H, CH 2 ). MS m / z 389 [M + ].

【０５１２】 実施例１５１：３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール
−２−イルメチレン］−５−メトキシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H, NH), 10.84 (br s, 1H, NH), 7.9
2 (s, 1H, H-ビニル), 7.65 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.1 Hz, 1H),
7.44 (s, 1H), 7.26 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.05 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.79
(s, 2H), 3.79 (s, 3H, OCH3), 3.11 (m, 2H, CH2), 2.20 (m, 2H, CH2), 2.12
(s, 6H, N(CH3)2), 1.76 (m, 2H, CH2). MS m/z 375 [M+].Example 151: 3- [3- (3-Dimethylaminopropyl) -1H-indole
-2-ylmethylene] -5-methoxy-1,3-dihydroindol-2-one 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H, NH), 10.84 (br s, 1H, NH), 7.9
2 (s, 1H, H-vinyl), 7.65 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.1 Hz, 1H),
 7.44 (s, 1H), 7.26 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.05 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.79
(s, 2H), 3.79 (s, 3H, OCHThree), 3.11 (m, 2H, CHTwo), 2.20 (m, 2H, CHTwo), 2.12
(s, 6H, N (CHThree)Two), 1.76 (m, 2H, CHTwo) .MS m / z 375 [M+].

【０５１３】 実施例１５２：５−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ３−メチルインドール−２−カルボアルデヒドは，文献に記載のように製造し
た（（１）Ｄａｖｉｄ Ｗ．Ｍ．Ｂｅｎｚｉｅｓ，Ｐｉｌａｒ Ｍａｔｉｎｅｚ
Ｆｒｅｓｎｅｄａ ａｎｄ Ｒ．Ａｌａｎ Ｊｏｎｅｓ，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ
Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１６（１４），１７９９−１８０７（１９８
６）および（２）Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ，Ａ．ａｎｄ Ｂｉｓｗａｓ，Ｋ．Ｍ．
，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９７３，３８，４００２）。Example 152: 5-Methyl-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydro-indol-2-one 3-methylindole-2-carbaldehyde is described in the literature ((1) David WM Benzies, Pillar Matinez)
Fresneda and R.S. Alan Jones, Synthetic
Communications, 16 (14), 1799-1807 (198)
6) and (2) Chatterjee, A .; and Biswas, K .; M.
, J. et al. Org. Chem. , 1973, 38, 4002).

【０５１４】 ５−メチル−２−オキシインドール（５９ｍｇ），３−メチルインドール−２
−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）およびピペリジン（３０ｍｇ）のエタノール（
１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９０℃で一夜保持した。混合物を室温に冷却
した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で
乾燥して，７２ｍｇ（７４％）の５−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インド
ール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 13.03 (s, br, 1H, NH), 10.88 (s, br, 1H, NH),
7.84 (s, 1H, ビニル), 7.71 (s, br, 1H), 6.62 (d, J= 8Hz, 1H), 7.48 (d, J
= 8Hz, 1H), 7.26 (t, J= 7Hz, 1H), 7.06 (t, J= 7Hz, 1H), 7.0 (d, J= 8Hz,
1H), 6.78 (d, J= 8Hz, 1H), 2.59 (s, 3H, CH3), 2.32 (s, 3H, CH3). MSm/z 289 [M+1]+.5-Methyl-2-oxindole (59 mg), 3-methylindole-2
-Ethanol of carbaldehyde (56 mg) and piperidine (30 mg)
(1 mL) was kept at 90 ° C. overnight in a sealed tube. The mixture was cooled to room temperature. The solid was collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol and dried in a vacuum oven to give 72 mg (74%) of 5-methyl-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1, 3-Dihydroindol-2-one was obtained. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 13.03 (s, br, 1H, NH), 10.88 (s, br, 1H, NH),
7.84 (s, 1H, vinyl), 7.71 (s, br, 1H), 6.62 (d, J = 8Hz, 1H), 7.48 (d, J
= 8Hz, 1H), 7.26 (t, J = 7Hz, 1H), 7.06 (t, J = 7Hz, 1H), 7.0 (d, J = 8Hz,
1H), 6.78 (d, J = 8Hz, 1H), 2.59 (s, 3H, CH 3), 2.32 (s, 3H, CH 3). MSm / z 289 [M + 1] +.

【０５１５】 実施例１５３：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド ５−アミノスルホニル−２−オキシインドール（８４ｍｇ），３−メチルイン
ドール−２−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕ
ｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペ
リジン（３０ｍｇ）のエタノール（１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９０℃で
一夜保持した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタ
ノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，８８ｍｇ（７１％収率）の３−（
３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジ
ヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミドを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.86 (s, br, 1H, NH), 11.3 (s, br, 1H, NH), 8
.3 (d, J= 2Hz, 1H), 7.97 (s, 1H, ビニル), 7.63 (dd, J= 2 および 8Hz, 1H)
, 7.6 (d, J= 8Hz, 1H), 7.47 (d, J= 8Hz, 1H), 7.24 (t, J= 7.5Hz, 1H), 7.1
2 (s, br, 2H, NH2), 7.02 (t, J= 7.5Hz, 1H), 6.98 (d, J= 8Hz, 1H), 2.57 (
s, 3H, CH3). MS m/z 354.1 [M+1]+ Example 153: 3- (3-Methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid amide 5-aminosulfonyl-2-oxindole (84 mg), 3-methylindole-2-carbaldehyde (56 mg) (Synthetic Commu
A mixture of piperidine (30 mg) in ethanol (1 mL) was kept at 90 ° C. in a sealed tube overnight. The mixture was cooled to room temperature. The solid was collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol and dried in a vacuum oven to give 88 mg (71% yield) of 3- (
3-Methyl-1H-indole-2-ylmethylene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonamide was obtained. 1 H NMR (360 MHz, DMSO -d6) 12.86 (s, br, 1H, NH), 11.3 (s, br, 1H, NH), 8
.3 (d, J = 2Hz, 1H), 7.97 (s, 1H, vinyl), 7.63 (dd, J = 2 and 8Hz, 1H)
, 7.6 (d, J = 8Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8Hz, 1H), 7.24 (t, J = 7.5Hz, 1H), 7.1
2 (s, br, 2H, NH 2 ), 7.02 (t, J = 7.5Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8Hz, 1H), 2.57 (
s, 3H, CH 3 ). MS m / z 354.1 [M + 1] +

【０５１６】 実施例１５４：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中の２Ｍメチルアミン中の５−クロロスルホ
ニル−２−オキシインドール（３．３８ｇ）の懸濁液を，室温で４時間撹拌し，
このとき白色固体が形成した。固体を真空濾過により回収し，５ｍＬの水で２回
洗浄し，真空下で４０℃で乾燥して，３．０ｇ（８８％収率）の５−メチルアミ
ノスルホニル−２−オキシインドールを得た。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.87 (s, br, 1H, NH-1), 7.86 (s, br, 1H, 5
-SO2NHCH3),7.61 (d, J= 8Hz 1H, H-6), 7.32 (d, J= 5Hz, 1H, H-4), 6.97 (d,
J= 8Hz, 1H, H-7), 2.53 (s, 2H, CH2-3), および 2.36 (s, 3H, 5-SO2NHCH 3).
MS m/z 226.Example 154: 3- (3-Methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid methylamide A suspension of 5-chlorosulfonyl-2-oxindole (3.38 g) in 2M methylamine in tetrahydrofuran (10 mL) was added at room temperature. And stir for 4 hours.
A white solid formed at this time. The solid was collected by vacuum filtration, washed twice with 5 mL of water and dried under vacuum at 40 ° C. to give 3.0 g (88% yield) of 5-methylaminosulfonyl-2-oxindole. . 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.87 (s, br, 1H, NH-1), 7.86 (s, br, 1H, 5
-SO 2 N H CH 3 ), 7.61 (d, J = 8Hz 1H, H-6), 7.32 (d, J = 5Hz, 1H, H-4), 6.97 (d,
J = 8Hz, 1H, H- 7), 2.53 (s, 2H, CH 2 -3), and 2.36 (s, 3H, 5- SO 2 NHC H 3).
MS m / z 226.

【０５１７】 ５−メチルアミノスルホニル−２−オキシインドール（９０ｍｇ），３−メチ
ルインドール−２−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏ
ｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およ
びピペリジン（３０ｍｇ）のエタノール（１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９
０℃で一夜保持した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，
冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，９０ｍｇ（７０％収率）の
３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，
３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド（異性体の混合
物）を得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 11.13 (s, br, 1H, NH), 10.94 (s, br, 1H, NH),
8.84 (d, J= 16Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 6.97-7.66 (m, 6H, Ar-H), 2.6 (s, 3H
, CH3), 2.4 (d, J= 5Hz, 3H, CH3N.5-Methylaminosulfonyl-2-oxindole (90 mg), 3-methylindole-2-carbaldehyde (56 mg) (Synthetic Co
A mixture of piperidine (30 mg) in ethanol (1 mL) was prepared in a sealed tube.
Hold at 0 ° C. overnight. The mixture was cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration,
Wash with cold ethanol and dry in a vacuum oven to give 90 mg (70% yield) of 3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -2-oxo-2,
3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid methylamide (mixture of isomers) was obtained. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 11.13 (s, br, 1H, NH), 10.94 (s, br, 1H, NH),
8.84 (d, J = 16Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 6.97-7.66 (m, 6H, Ar-H), 2.6 (s, 3H
, CH 3 ), 2.4 (d, J = 5Hz, 3H, CH 3 N.

【０５１８】 実施例１５５：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミ
ド ５−ジメチルアミノスルホニル−２−オキシインドール（９６ｍｇ），３−メ
チルインドール−２−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃ
ｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）お
よびピペリジン（３０ｍｇ）のエタノール（１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で
９０℃で一夜保持した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し
，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，７６ｍｇ（５７％収率）
の３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド（異性体の
混合物）を得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 11.09 (s, br, 1H, NH), 10.95 (s, br, 1H, NH),
8.78 (d, J= 16Hz, 1H), 7.8 (s, 1H, ビニル), 7.45-7.54 (m, 2H), 7.32 (d,
J= 8Hz, 1H), 7.1 (t, 1H), 6.98 (d, J= 8Hz, 1H), 6.93 (t, 1H), 2.56 (s, 6
H, 2 x CH3), 2.39 (s, 3H, CH3)Example 155: 3- (3-Methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid dimethylamide 5-dimethylaminosulfonyl-2-oxindole (96 mg), 3-methylindole-2-carbaldehyde (56 mg) (Synthetic C
A mixture of piperidine (30 mg) in ethanol (1 mL) was kept at 90 ° C. in a sealed tube overnight. The mixture was cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol, dried in a vacuum oven and 76 mg (57% yield)
3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid dimethylamide (mixture of isomers) was obtained. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 11.09 (s, br, 1H, NH), 10.95 (s, br, 1H, NH),
8.78 (d, J = 16Hz, 1H), 7.8 (s, 1H, vinyl), 7.45-7.54 (m, 2H), 7.32 (d,
J = 8Hz, 1H), 7.1 (t, 1H), 6.98 (d, J = 8Hz, 1H), 6.93 (t, 1H), 2.56 (s, 6
H, 2 x CH 3 ), 2.39 (s, 3H, CH 3 )

【０５１９】 実施例１５６：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（ピペリジン
塩） ５−カルボキシ−２−オキシインドール（１１３ｍｇ），３−メチルインドー
ル−２−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉ
ｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジ
ン（３０ｍｇ）のエタノール（１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９０℃で一夜
保持した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノー
ルで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，７５ｍｇ（５８％収率）の３−（３−
メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒド
ロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（ピペリジン塩）を得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 13.0 (s, br, 1H, NH), 8.35 (d, J= 1.5Hz, 1H, H
-4), 7.91 (s, 1H, ビニル), 7.82 (dd, J= 1.5 および 8Hz, 1H, H-6), 7.63 (
d, J= 8Hz, 1H), 7.49 (d, J= 8Hz, 1H), 7.26 (t, J= 7.5Hz, 1H), 7.06 (t, J
= 7.5Hz, 1H), 6.87 (d, J= 8Hz, 1H), 2.91 (t, 4H, ピペリジン), 2.6 (s, 3H
, CH3), 1.6 (m, 4H, ピペリジン), 1.54 (m, 2H, ピペリジン).Example 156: 3- (3-Methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid (piperidine salt) 5-carboxy-2-oxindole (113 mg), 3-methylindole-2-carbaldehyde (56 mg) (Synthetic Community)
A mixture of piperidine (30 mg) in ethanol (1 mL) was kept at 90 ° C. in a sealed tube overnight. The mixture was cooled to room temperature. The solid was collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol and dried in a vacuum oven to give 75 mg (58% yield) of 3- (3-
Methyl-1H-indole-2-ylmethylene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid (piperidine salt) was obtained. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 13.0 (s, br, 1H, NH), 8.35 (d, J = 1.5Hz, 1H, H
-4), 7.91 (s, 1H, vinyl), 7.82 (dd, J = 1.5 and 8Hz, 1H, H-6), 7.63 (
d, J = 8Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8Hz, 1H), 7.26 (t, J = 7.5Hz, 1H), 7.06 (t, J
= 7.5Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8Hz, 1H), 2.91 (t, 4H, piperidine), 2.6 (s, 3H
, CH 3 ), 1.6 (m, 4H, piperidine), 1.54 (m, 2H, piperidine).

【０５２０】 実施例１５７：５−アセチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル
メチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ２−オキシインドール（３ｇ）を１，２−ジクロロエタン中に懸濁し，３．２
ｍＬの塩化アセチルをゆっくり加えた。得られた懸濁液を５０℃で５時間撹拌し
，冷却し，水に注加した。得られた沈殿物を真空濾過により回収し，豊富な水で
洗浄し，真空下で乾燥して，２．９ｇ（７３％収率）の５−アセチル−２−オキ
シインドールを褐色固体として得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, br, NH), 7.83 (d, J= 8Hz, 1H), 7.
78 (s, 1H, H-4), 6.88 (d, J= 8Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH2), 2.49 (s, 3H, C
H3).Example 157: 5-Acetyl-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one 2-oxindole (3 g) was treated with 1,2-dichloroethane Suspended in 3.2
mL of acetyl chloride was added slowly. The resulting suspension was stirred at 50 C for 5 hours, cooled and poured into water. The resulting precipitate was collected by vacuum filtration, washed with abundant water and dried under vacuum to give 2.9 g (73% yield) of 5-acetyl-2-oxindole as a brown solid. . 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, br, NH), 7.83 (d, J = 8Hz, 1H), 7.
78 (s, 1H, H- 4), 6.88 (d, J = 8Hz, 1H), 3.53 (s, 2H, CH 2), 2.49 (s, 3H, C
H 3 ).

【０５２１】 ５−アセチル−２−オキシインドール（７０ｍｇ），３−メチルインドール−
２−カルボアルデヒド（５６ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａ
ｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジン（
３０ｍｇ）のエタノール（１ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９０℃で一夜保持
した。混合物を室温に冷却し，固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗
浄し，真空下で乾燥して，８３ｍｇ（７５％収率）の５−アセチル−３−（３−
メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ−インドー
ル−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.86 (s, br, 1H, NH), 11.29 (s, br, 1H, NH),
8.43 (d, J= 1.5Hz, 1H, H-4), 8.01 (s, 1H, ビニル), 7.78 (dd, J= 1.5 およ
び 8Hz, 1H, H-6), 7.58 (d, J= 8Hz, 1H), 7.45 (d,J= 8Hz, 1H), 7.23 (t, 1H
), 7.01 (t, 1H), 6.92 (d, J= 8Hz, 1H), 2.58 (s, 3H, CH3), 2.54 (s, 3H, C
H3). MS m/z 317.2 [M+1]+.5-Acetyl-2-oxindole (70 mg), 3-methylindole-
2-Carboxaldehyde (56 mg) (Synthetic Communica)
tions, 1986, 16, 1799) and piperidine (
A mixture of 30 mg) in ethanol (1 mL) was kept at 90 ° C. in a sealed tube overnight. The mixture was cooled to room temperature and the solid was collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol, dried under vacuum and 83 mg (75% yield) of 5-acetyl-3- (3-
Methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydro-indol-2-one was obtained. 1 H NMR (360 MHz, DMSO -d6) 12.86 (s, br, 1H, NH), 11.29 (s, br, 1H, NH),
8.43 (d, J = 1.5Hz, 1H, H-4), 8.01 (s, 1H, vinyl), 7.78 (dd, J = 1.5 and 8Hz, 1H, H-6), 7.58 (d, J = 8Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8Hz, 1H), 7.23 (t, 1H
), 7.01 (t, 1H), 6.92 (d, J = 8Hz, 1H), 2.58 (s, 3H, CH 3 ), 2.54 (s, 3H, C
H 3 ). MS m / z 317.2 [M + 1] + .

【０５２２】 実施例１５８：５−アセチル−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン インドール−２−カルボアルデヒドは，文献に記載のように製造した（Ｍｉｃ
ｈｅｌ Ｂａｒｂｉｅｒ，Ｍｉｃｈｅｌ Ｄｅｖｙｓ，Ｃｈｒｉｓｔｉａｎｅ
Ｔｅｍｐｅｔｅ，Ａｌｂｅｒｔ Ｋｏｌｌｍａｎｎ ａｎｄ Ｊｅａｎ−Ｆｒａ
ｎｃｏｉｓ Ｂｏｕｓｑｕｅｔ，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉ
ｏｎｓ，２３（２２），３１０９−３１１７（１９９３））。Example 158: 5-Acetyl-3- (1H-indol-2-ylmethylene)-
1,3-Dihydro-indole-2-one indole-2-carbaldehyde was prepared as described in the literature (Mic
hel Barbier, Michel Devys, Christiane
Tempte, Albert Kollmann and Jean-Fra
ncois Bousquet, Synthetic Communication
ons, 23 (22), 3109-3117 (1993)).

【０５２３】 エタノール（２ｍＬ）中の５−アセチル−２−オキシインドール（８８ｍｇ）
，インドール−２−カルボアルデヒド（８７ｍｇ）およびピペリジン（４ｍｇ）
の混合物を，密封管中で９０℃で３時間保持した。混合物を室温に冷却した。形
成した固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で
乾燥して，１３３ｍｇ（８８％収率）の５−アセチル−３−（１Ｈ−インドール
−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オンを橙色固体と
して得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.81 (s, br, 1H, NH), 11.38 (s, br, 1H, NH),
8.38 (d, J= 1Hz, H-4), 8.17 (s, 1H, ビニル), 7.88 (dd, J= 1 および 8Hz,
1H, H-6), 7.69 (d, J= 8Hz, 1H), 7.58 (d, J= 8Hz, 1H), 7.29 (t, 1H), 7.21
(s, 1H), 7.09 (t, 1H), 7.0 (d, J= 8Hz, 1H), 2.59 (s, 3H, CH3). MS m/z 303.1 [M+1]+.5-Acetyl-2-oxindole (88 mg) in ethanol (2 mL)
, Indole-2-carbaldehyde (87 mg) and piperidine (4 mg)
Was kept in a sealed tube at 90 ° C. for 3 hours. The mixture was cooled to room temperature. The solid formed was collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol and dried in a vacuum oven to give 133 mg (88% yield) of 5-acetyl-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1, 3-Dihydro-indol-2-one was obtained as an orange solid. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.81 (s, br, 1H, NH), 11.38 (s, br, 1H, NH),
8.38 (d, J = 1 Hz, H-4), 8.17 (s, 1H, vinyl), 7.88 (dd, J = 1 and 8 Hz,
1H, H-6), 7.69 (d, J = 8Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8Hz, 1H), 7.29 (t, 1H), 7.21
(s, 1H), 7.09 ( t, 1H), 7.0 (d, J = 8Hz, 1H), 2.59 (s, 3H, CH 3). MS m / z 303.1 [M + 1] +.

【０５２４】 実施例１５９：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド ５−アミノスルホニル−２−オキシインドール（１０６ｍｇ），インドール−
２−カルボアルデヒド（８７ｍｇ）（ＳｙｎｔｈｅｔｉｃＣｏｍｍｎｉｃａｔｉ
ｏｎｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（４ｍ
ｇ）のエタノール（２ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９０℃で３時間保持した
。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄
し，真空オーブン中で乾燥して，１４０ｍｇ（８３％収率）の３−（１Ｈ−イン
ドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−５−スルホン酸アミドを橙色固体として得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.81 (s, br, 1H, NH), 11.38 (s, br, 1H, NH),
8.18 (d, J= 1Hz, H-4), 8.12 (s, 1H, ビニル), 7.7 (m, 2H), 7.6 (d, J= 8Hz
, 1H), 7.26-7.29 (m, 2H), 7.2 (s, 2H, NH2), 7.05-7.11 (m, 2H). MS m/z 340 [M+1]+.Example 159: 3- (1H-Indol-2-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid amide 5-aminosulfonyl-2-oxindole (106 mg), indole-
2-Carboxaldehyde (87 mg) (SyntheticCommunicati)
ons, 1993, 23, 3109) and piperidine (4m
The mixture of g) in ethanol (2 mL) was kept in a sealed tube at 90 ° C. for 3 hours. The mixture was cooled to room temperature. The solid was collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol, dried in a vacuum oven and 140 mg (83% yield) of 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -2-oxo-2,3- Dihydro-1H-indole-5-sulfonamide was obtained as an orange solid. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.81 (s, br, 1H, NH), 11.38 (s, br, 1H, NH),
8.18 (d, J = 1Hz, H-4), 8.12 (s, 1H, vinyl), 7.7 (m, 2H), 7.6 (d, J = 8Hz
, 1H), 7.26-7.29 (m, 2H), 7.2 (s, 2H, NH 2), 7.05-7.11 (m, 2H). MS m / z 340 [M + 1] +.

【０５２５】 実施例１６０：５−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−オキシインドール（１２４ｍ
ｇ），インドール−２−カルボアルデヒド（８７ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ
Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）
およびピペリジン（４ｍｇ）のエタノール（２ｍＬ）中の混合物を，密封管中で
９０℃で３時間保持した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収
し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，１９６ｍｇの５−ｔｅ
ｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オンを明るい橙色固体として得た。次
に，生成物をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（各２ｍＬ）に溶解し，室温で
１時間撹拌した。次に反応混合物を濃縮した。残渣を水に溶解し，飽和炭酸水素
ナトリウム溶液で塩基性にした。固体を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真
空オーブン中で乾燥して，１２９ｍｇの５−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−
２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを褐色固体として
得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 13.1 (s, br, 1H, NH), 10.57 (s, br, 1H, NH), 7
.65 (s, 1H, ビニル), 7.64 (d, J= 8Hz, 1H), 7.54 (d, J= 8Hz, 1H), 7.24 (t
, 1H), 7.1 (s, 1H), 7.06 (t, 1H), 6.93 (d, J= 2Hz, 1H), 6.61 (d, J= 8Hz,
1H), 6.5 (dd, J= 2 および 8Hz, 1H), 4.8 (s, br, 2H, NH2). MS m/z 276.1 [M+1]+.Example 160: 5-Amino-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1
, 3-Dihydro-indol-2-one 5-tert-butoxycarbonylamino-2-oxindole (124 m
g), indole-2-carbaldehyde (87 mg) (Synthetic)
Communications, 1993, 23, 3109)
A mixture of and piperidine (4 mg) in ethanol (2 mL) was kept at 90 ° C. in a sealed tube for 3 hours. The mixture was cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol, dried in a vacuum oven and 196 mg of 5-te
rt-butoxycarbonylamino-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydro-indol-2-one was obtained as a bright orange solid. Next, the product was dissolved in trifluoroacetic acid / dichloromethane (2 mL each) and stirred at room temperature for 1 hour. Then the reaction mixture was concentrated. The residue was dissolved in water and made basic with saturated sodium bicarbonate solution. The solid was collected by vacuum filtration, washed with water, dried in a vacuum oven and 129 mg of 5-amino-3- (1H-indole-
2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a brown solid. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 13.1 (s, br, 1H, NH), 10.57 (s, br, 1H, NH), 7
.65 (s, 1H, vinyl), 7.64 (d, J = 8Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8Hz, 1H), 7.24 (t
, 1H), 7.1 (s, 1H), 7.06 (t, 1H), 6.93 (d, J = 2Hz, 1H), 6.61 (d, J = 8Hz,
1H), 6.5 (dd, J = 2 and 8Hz, 1H), 4.8 (s , br, 2H, NH 2). MS m / z 276.1 [M + 1] +.

【０５２６】 実施例１６１：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸 ５−カルボキシ−２−オキシインドール（８８．５ｍｇ），インドール−２−
カルボアルデヒド（８７ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉ
ｏｎｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１滴
）のエタノール（３ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。
混合物を室温に冷却した。固体を濾過し，２Ｎ塩酸で酸性にした。得られた固体
を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，
６０ｍｇ（４０％収率）の３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−
オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸をからし色固体
として得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.8 (s, br, 1H, NH), 12.69 (s, 1H, COOH), 11.
35 (s, br, 1H, NH), 8.33 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.86 (dd, J= 1 および 8H
z, 1H), 7.68 (d, J= 8Hz, 1H), 7.59 (d, J= 8Hz, 1H), 7.28 (t, 1H), 7.21 (
s, 1H), 7.08 (t, 1H), 6.99 (d, J= 8Hz, 1H). MS m/z 304 [M]+.Example 161: 3- (1H-Indol-2-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid 5-carboxy-2-oxindole (88.5 mg), indole-2-
Carboxaldehyde (87 mg) (Synthetic Communication)
ons, 1993, 23, 3109) and piperidine (1 drop) in ethanol (3 mL) was kept in a sealed tube at 95 ° C. for 4 hours.
The mixture was cooled to room temperature. The solid was filtered and acidified with 2N hydrochloric acid. The resulting solid is collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol, dried in a vacuum oven,
60 mg (40% yield) of 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -2-
Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid was obtained as a mustard colored solid. 1 H NMR (360 MHz, DMSO -d6) 12.8 (s, br, 1H, NH), 12.69 (s, 1H, COOH), 11.
35 (s, br, 1H, NH), 8.33 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.86 (dd, J = 1 and 8H
z, 1H), 7.68 (d, J = 8Hz, 1H), 7.59 (d, J = 8Hz, 1H), 7.28 (t, 1H), 7.21 (
s, 1H), 7.08 (t, 1H), 6.99 (d, J = 8Hz, 1H). MS m / z 304 [M] + .

【０５２７】 実施例１６２：６−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ６−クロロ−２−オキシインドール（４１ｍｇ）（市販），インドール−２−
カルボアルデヒド（４２ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉ
ｏｎｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１滴
）のエタノール（３ｍＬ）中の混合物を密封管中で９５℃で３時間保持した。混
合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，
真空オーブン中で乾燥して，６２ｍｇ（８７％収率）の６−クロロ−３−（１Ｈ
−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを
光沢のある橙色固体として得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.83 (s, br, 1H, NH), 11.17 (s, br, 1H, NH),
7.98 (s, 1H), 7.74 (d, J= 8Hz, 1H), 7.67 (d, J= 8Hz, 1H), 7.58 (d, J= 8H
z, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.15 (s, br, 1H), 7.08 (m, 2H), 6.91 (d, J= 2Hz, 1
H). MS m/z 293 および 295.Example 162: 6-chloro-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1
, 3-Dihydro-indol-2-one 6-chloro-2-oxindole (41 mg) (commercially available), indole-2-
Carboxaldehyde (42 mg) (Synthetic Communication)
ons, 1993, 23, 3109) and piperidine (1 drop) in ethanol (3 mL) were kept in a sealed tube at 95 ° C. for 3 hours. The mixture was cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol,
Dry in a vacuum oven and dry 62 mg (87% yield) of 6-chloro-3- (1H
-Indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one was obtained as a shiny orange solid. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) 12.83 (s, br, 1H, NH), 11.17 (s, br, 1H, NH),
7.98 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8Hz, 1H), 7.67 (d, J = 8Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8H
z, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.15 (s, br, 1H), 7.08 (m, 2H), 6.91 (d, J = 2Hz, 1
H) .MS m / z 293 and 295.

【０５２８】 実施例１６３：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒド
ロ−インドール−２−オン ２−オキシインドール（１３３ｍｇ），インドール−２−カルボアルデヒド（
１７４ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９９３
，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１０ｍｇ）のエタノー
ル中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。混合物を室温に冷却した
。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブン中で乾燥
して，３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ−イン
ドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.97 (s, br, 1H, NH), 11.01 (s, br, 1H, NH
), 7.92 (s, 1H, H-ビニル), 7.72 (d, J= 7Hz, 1H), 7.66 (d, J= 7Hz, 1H), 7
.57 (dd, J= 1, 8Hz, 1H), 7.27 (dt, J= 1, 7Hz, 1H), 7.21 (dt, J= 1, 8Hz,
1H), 7.13 (s, 1H), 7.01-7.1 (m, 2H), 6.91 (d, J= 8Hz, 1H). MS El 260.Example 163: 3- (1H-Indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydro-indol-2-one 2-oxindole (133 mg), indole-2-carbaldehyde (
174 mg) (Synthetic Communications, 1993)
, 23, 3109) and piperidine (10 mg) in ethanol was kept at 95 ° C. in a sealed tube for 4 hours. The mixture was cooled to room temperature. The solid was collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol and dried in a vacuum oven to give 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydro-indol-2-one. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.97 (s, br, 1H, NH), 11.01 (s, br, 1H, NH
), 7.92 (s, 1H, H-vinyl), 7.72 (d, J = 7Hz, 1H), 7.66 (d, J = 7Hz, 1H), 7
.57 (dd, J = 1, 8Hz, 1H), 7.27 (dt, J = 1, 7Hz, 1H), 7.21 (dt, J = 1, 8Hz,
1H), 7.13 (s, 1H), 7.01-7.1 (m, 2H), 6.91 (d, J = 8Hz, 1H). MS El 260.

【０５２９】 実施例１６４：５−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ５−クロロ−２−オキシインドール（１６７ｍｇ），インドール−２−カルボ
アルデヒド（１７４ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ
ｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１０ｍｇ
）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。混合物を室
温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オー
ブン中で乾燥して，５−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.88 (s, br, 1H, NH), 11.12 (s, br, 1H, NH
), 8.07 (s, 1H, H-ビニル), 7.86 (d, J= 2Hz, 1H), 7.68 (d, J= 8Hz, 1H), 7
.59 (dd, J= 1, 8Hz, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.24 (dd, J= 2, 8Hz, 1H), 7.14 (s
, 1H), 7.09 (dt, J= 1, 8Hz, 1H), 6.90 (d, J= 8Hz, 1H). MS El 294 および 296.Example 164: 5-chloro-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1
, 3-Dihydro-indol-2-one 5-chloro-2-oxindole (167 mg), indole-2-carbaldehyde (174 mg) (Synthetic Communication)
s, 1993, 23, 3109) and piperidine (10 mg).
)) Was kept in a sealed tube at 95 ° C. for 4 hours. The mixture was cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol, dried in a vacuum oven, and treated with 5-chloro-3- (1H-indol-2-ylmethylene).
-1,3-Dihydroindol-2-one was obtained. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.88 (s, br, 1H, NH), 11.12 (s, br, 1H, NH
), 8.07 (s, 1H, H-vinyl), 7.86 (d, J = 2Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8Hz, 1H), 7
.59 (dd, J = 1, 8Hz, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.24 (dd, J = 2, 8Hz, 1H), 7.14 (s
, 1H), 7.09 (dt, J = 1, 8Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8Hz, 1H). MS El 294 and 296.

【０５３０】 実施例１６５：５−ブロモ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ５−ブロモ−２−オキシインドール（２１２ｍｇ），インドール−２−カルボ
アルデヒド（１７４ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ
ｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１０ｍｇ
）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。混合物を室
温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オー
ブン中で乾燥して，５−ブロモ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.87 (s, br, 1H, NH), 11.12 (s, br, 1H, NH)
, 8.07 (s, 1H, H-ビニル), 7.98 (d, J= 2Hz, 1H), 7.68 (d, J= 8Hz, 1H), 7.
59 (d, J= 8Hz, 1H), 7.36 (dd, J= 2, 8Hz, 1H), 7.28 (dt, J= 1, 8Hz, 1H),
7.14 (s, 1H), 7.08 (dt, J= 1, 8Hz, 1H), 6.86 (d, J= 8Hz, 1H). MS El 338 および 340.Example 165: 5-Bromo-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1
, 3-Dihydro-indol-2-one 5-bromo-2-oxindole (212 mg), indole-2-carbaldehyde (174 mg) (Synthetic Communication)
s, 1993, 23, 3109) and piperidine (10 mg).
)) Was kept in a sealed tube at 95 ° C. for 4 hours. The mixture was cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol, dried in a vacuum oven, and treated with 5-bromo-3- (1H-indol-2-ylmethylene).
-1,3-Dihydroindol-2-one was obtained. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.87 (s, br, 1H, NH), 11.12 (s, br, 1H, NH)
, 8.07 (s, 1H, H-vinyl), 7.98 (d, J = 2Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8Hz, 1H), 7.
59 (d, J = 8Hz, 1H), 7.36 (dd, J = 2, 8Hz, 1H), 7.28 (dt, J = 1, 8Hz, 1H),
7.14 (s, 1H), 7.08 (dt, J = 1, 8Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8Hz, 1H). MS El 338 and 340.

【０５３１】 実施例１６６：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−４−メチル−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ４−メチル−２−オキシインドール（１４７ｍｇ），インドール−２−カルボ
アルデヒド（１７４ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ
ｓ，１９９３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（１０ｍｇ
）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。混合物を室
温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オー
ブン中で乾燥して，３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−４−メチル
−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, br, 1H, NH), 11.02 (s, br, 1H, NH
), 7.79 (s, 1H, H-ビニル), 7.64 (d, J= 8Hz, 1H), 7.57 (d, J= 8Hz, 1H), 7
.27 (d, J= 7Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.05- 7.14 (m, 2H), 6.84 (d, J= 8Hz,
1H), 6.78 (d, J= 8Hz, 1H), 2.61 (s, 3H, CH3). MS El 274.Example 166: 3- (1H-Indol-2-ylmethylene) -4-methyl-1
, 3-Dihydro-indol-2-one 4-methyl-2-oxindole (147 mg), indole-2-carbaldehyde (174 mg) (Synthetic Communication)
s, 1993, 23, 3109) and piperidine (10 mg).
)) Was kept in a sealed tube at 95 ° C. for 4 hours. The mixture was cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol and dried in a vacuum oven to give 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one. Was. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, br, 1H, NH), 11.02 (s, br, 1H, NH
), 7.79 (s, 1H, H-vinyl), 7.64 (d, J = 8Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8Hz, 1H), 7
.27 (d, J = 7Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.05- 7.14 (m, 2H), 6.84 (d, J = 8Hz,
1H), 6.78 (d, J = 8Hz, 1H), 2.61 (s, 3H, CH 3). MS El 274.

【０５３２】 実施例１６７：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ２−オキシインドール（１３３ｍｇ），３−メチルインドール−２−カルボア
ルデヒド（１９０ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ
，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジン（１０ｍｇ）
のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。混合物を室温
に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空オーブ
ン中で乾燥して，３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.01 (s, br, 1H, NH), 10.99 (s, br, 1H, NH
), 7.89 (s, 1H, H-ビニル), 7.88 (d, J= 7Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8Hz, 1H), 7
.49 (d, J= 8Hz, 1H), 7.27 (dt, J= 1, 8Hz, 1H), 7.2 (dt, J= 1, 8Hz, 1H),
7.01-7.08 (m, 2H), 6.9 (d, J= 8Hz, 1H), 2.59 (s, 3H, CH3). MS El 274.Example 167: 3- (3-Methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1
, 3-Dihydro-indol-2-one 2-oxindole (133 mg), 3-methylindole-2-carbaldehyde (190 mg) (Synthetic Communications)
, 1986, 16, 1799) and piperidine (10 mg)
Of ethanol in a sealed tube at 95 ° C. for 4 hours. The mixture was cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol and dried in a vacuum oven to give 3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene)-
1,3-Dihydroindol-2-one was obtained. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.01 (s, br, 1H, NH), 10.99 (s, br, 1H, NH
), 7.89 (s, 1H, H-vinyl), 7.88 (d, J = 7Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8Hz, 1H), 7
.49 (d, J = 8Hz, 1H), 7.27 (dt, J = 1, 8Hz, 1H), 7.2 (dt, J = 1, 8Hz, 1H),
7.01-7.08 (m, 2H), 6.9 (d, J = 8Hz, 1H), 2.59 (s, 3H, CH 3). MS El 274.

【０５３３】 実施例１６８：５−クロロ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ５−クロロ−２−オキシインドール（１６７ｍｇ），３−メチルインドール−
２−カルボアルデヒド（１９０ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃ
ａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジン
（１０ｍｇ）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した。
混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し
，真空オーブン中で乾燥して，５−クロロ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドー
ル−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを得た。1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.96 (s, br, 1H, NH), 11.09 (s, br, 1H, NH
), 8.09 (d, J= 2Hz, 1H), 8.02 (s, 1H, H-ビニル), 7.63 (d, J= 8Hz, 1H), 7
.5 (d, J= 8Hz, 1H), 7.29 (dt, J= 1, 7Hz, 1H), 7.21 (dd, J= 2, 8Hz, 1H),
7.07 (dt, J= 1, 7Hz, 1H), 6.89 (d, J= 8Hz, 1H), 2.61 (s, 3H, CH3). MS El 308.Example 168: 5-Chloro-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydro-indol-2-one 5-chloro-2-oxindole (167 mg), 3-methylindole-
2-Carboxaldehyde (190 mg) (Synthetic Common)
, 1986, 16, 1799) and piperidine (10 mg) in ethanol was kept at 95 ° C. for 4 hours in a sealed tube.
The mixture was cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol, dried in a vacuum oven, and 5-chloro-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindole-2 -Got on. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.96 (s, br, 1H, NH), 11.09 (s, br, 1H, NH
), 8.09 (d, J = 2Hz, 1H), 8.02 (s, 1H, H-vinyl), 7.63 (d, J = 8Hz, 1H), 7
.5 (d, J = 8Hz, 1H), 7.29 (dt, J = 1, 7Hz, 1H), 7.21 (dd, J = 2, 8Hz, 1H),
7.07 (dt, J = 1, 7Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8Hz, 1H), 2.61 (s, 3H, CH 3). MS El 308.

【０５３４】 実施例１６９：５−ブロモ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン ５−ブロモ−２−オキシインドール（２１２ｍｇ），３−メチル−インドール
−２−カルボアルデヒド（１９０ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉ
ｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジ
ン（１０ｍｇ）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した
。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄
し，真空オーブン中で乾燥して，５−ブロモ−３−（３−メチル−１Ｈ−インド
ール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オンを得た。 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.96 (s, br, 1H, NH), 11.09 (s, br, 1H, NH
), 8.21 (d, J= 2Hz, 1H), 8.02 (s, 1H, H-ビニル), 7.63 (d, J= 8Hz, 1H), 7
.5 (d, J= 8Hz, 1H), 7.33 (dd, J= 2, 8Hz, 1H), 7.29 (dt, J= 1, 7Hz, 1H),
7.07 (dt, J= 1, 7Hz, 1H), 6.84 (d, J= 8Hz, 1H), 2.62 (s, 3H, CH3). MS El 352 および 354.Example 169: 5-Bromo-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmeth
Tylene) -1,3-dihydro-indol-2-one 5-bromo-2-oxindole (212 mg), 3-methyl-indole
-2-carbaldehyde (190 mg) (Synthetic Comuni)
cations, 1986, 16, 1799) and piperidi
(10 mg) in ethanol was kept in a sealed tube at 95 ° C. for 4 hours.
. The mixture was cooled to room temperature. Collect the solid by vacuum filtration and wash with cold ethanol
And dried in a vacuum oven to give 5-bromo-3- (3-methyl-1H-indo
2-ylmethylene) -1,3-dihydro-indol-2-one was obtained. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.96 (s, br, 1H, NH), 11.09 (s, br, 1H, NH
), 8.21 (d, J = 2Hz, 1H), 8.02 (s, 1H, H-vinyl), 7.63 (d, J = 8Hz, 1H), 7
.5 (d, J = 8Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 2, 8Hz, 1H), 7.29 (dt, J = 1, 7Hz, 1H),
7.07 (dt, J = 1, 7Hz, 1H), 6.84 (d, J = 8Hz, 1H), 2.62 (s, 3H, CHThree). MS El 352 and 354.

【０５３５】 実施例１７０：４−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン ４−メチル−２−オキシインドール（１４７ｍｇ），３−メチル−インドール
−２−カルボアルデヒド（１９０ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉ
ｃａｔｉｏｎｓ，１９８６，１６，１７９９にしたがって製造）およびピペリジ
ン（１０ｍｇ）のエタノール中の混合物を，密封管中で９５℃で４時間保持した
。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄
し，真空オーブン中で乾燥して，４−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インド
ール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オンを得た。 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.07 (s, br, 1H, NH), 11.0 (s, br, 1H, NH)
, 7.78 (s, 1H, H-ビニル), 7.64 (d, J= 8Hz, 1H), 7.51 (d, J= 8Hz, 1H), 7.
27 (dt, J= 1, 8Hz, 1H), 7.04- 7.12 (m, 2H), 6.85 (d, J= 8Hz, 1H), 6.78 (
d, J= 8Hz, 1H), 2.64 (s, 3H, CH3), 2.52 (s, 3H, CH3). MS El 288.Example 170: 4-Methyl-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylme
(Tylene) -1,3-dihydroindole-2-one 4-methyl-2-oxindole (147 mg), 3-methyl-indole
-2-carbaldehyde (190 mg) (Synthetic Comuni)
cations, 1986, 16, 1799) and piperidi
(10 mg) in ethanol was kept in a sealed tube at 95 ° C. for 4 hours.
. The mixture was cooled to room temperature. Collect the solid by vacuum filtration and wash with cold ethanol
And dried in a vacuum oven to give 4-methyl-3- (3-methyl-1H-indo
2-ylmethylene) -1,3-dihydro-indol-2-one was obtained. 1 H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 13.07 (s, br, 1H, NH), 11.0 (s, br, 1H, NH)
, 7.78 (s, 1H, H-vinyl), 7.64 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.
27 (dt, J = 1, 8Hz, 1H), 7.04- 7.12 (m, 2H), 6.85 (d, J = 8Hz, 1H), 6.78 (
d, J = 8Hz, 1H), 2.64 (s, 3H, CHThree), 2.52 (s, 3H, CHThree). MS El 288.

【０５３６】 実施例１７１：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−５−［（１Ｈ−
インドール−２−イルメチレン）−アミノ］−１，３−ジヒドロインドール−２
−オン ５−アミノ−２−オキシインドール（７４ｍｇ），インドール−２−カルボア
ルデヒド（８７ｍｇ）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，
１９８３，２３，３１０９にしたがって製造）およびピペリジン（４ｍｇ）のエ
タノール（２ｍＬ）中の混合物を，密封管中で９５℃で３時間保持した。混合物
を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，冷エタノールで洗浄し，真空
オーブン中で乾燥した。次に粗固体をシリカゲルでクロマトグラフィーを行って
，５０ｍｇ（２５％収率）の３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−５
−［（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−アミノ］−１，３−ジヒドロ−
インドール−２−オンを得た。Example 171: 3- (1H-Indol-2-ylmethylene) -5-[(1H-
Indole-2-ylmethylene) -amino] -1,3-dihydroindole-2
-One 5-amino-2-oxindole (74 mg), indole-2-carbaldehyde (87 mg) (Synthetic Communications,
1983, 23, 3109) and a mixture of piperidine (4 mg) in ethanol (2 mL) was kept in a sealed tube at 95 ° C. for 3 hours. The mixture was cooled to room temperature. The solid was collected by vacuum filtration, washed with cold ethanol and dried in a vacuum oven. The crude solid was then chromatographed on silica gel to give 50 mg (25% yield) of 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -5.
-[(1H-indol-2-ylmethylene) -amino] -1,3-dihydro-
Indole-2-one was obtained.

【０５３７】 実施例１７２：３−（１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.03 (br, s, 1H, NH), 10.80 (br, s, 1H, NH)
, 9.37 (s, 1H), 8.09-8.24 (m, 3H), 7.51 (m, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.13 (m,
2H), 7.03 (s, 2H, NH2), 6.85 (d, J = 7.8 Hz, 1H). MS-EI m/z 339 [M]+.Example 172: 3- (1H-Indol-3-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonamide 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.03 (br, s, 1H, NH), 10.80 (br, s, 1H, NH)
, 9.37 (s, 1H), 8.09-8.24 (m, 3H), 7.51 (m, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.13 (m,
2H), 7.03 (s, 2H, NH 2 ), 6.85 (d, J = 7.8 Hz, 1H). MS-EI m / z 339 [M] + .

【０５３８】 実施例１７３：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (br, s, 1H, NH), 11.40 (br, s, 1H, NH)
, 8.15 (s, 1H, H-ビニル), 8.10 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.54-7.65 (m, 3H), 7
.20-7.27 (m, 3H), 7.02-7.06 (m, 2H), 2.38 (d, J = 4.8 Hz, 3H, CH3). MS-EI m/z 353 [M]+.Example 173: 3- (1H-Indol-2-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid methylamide 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (br, s, 1H, NH), 11.40 (br, s, 1H, NH)
, 8.15 (s, 1H, H-vinyl), 8.10 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.54-7.65 (m, 3H), 7
.20-7.27 (m, 3H), 7.02-7.06 (m, 2H), 2.38 (d, J = 4.8 Hz, 3H, CH 3 ). MS-EI m / z 353 [M] + .

【０５３９】 実施例１７４：３−（１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.13 (br, s, 1H, NH), 10.88 (br, s, 1H, NH)
, 8.22-8.50 (m, 2H), 7.66-7.94 (m, 2H), 7.52 (m, 1H), 7.23 (m, 2H), 6.94
(m, 1H). MS-EI m/z 304 [M]+.Example 174: 3- (1H-Indol-3-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.13 (br, s, 1H, NH), 10.88 (br, s, 1H, NH)
, 8.22-8.50 (m, 2H), 7.66-7.94 (m, 2H), 7.52 (m, 1H), 7.23 (m, 2H), 6.94
(m, 1H). MS-EI m / z 304 [M] + .

【０５４０】 実施例１７５：３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.92 (br, s, 1H, NH), 11.35 (br, s, 1H, NH)
, 8.36 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H, H-ビニル), 7.67 (m, 2H), 7.53 (
d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.30 (m, 1H), 7.16 (s, 2H, NH2), 7.08 (m, 1H), 7.03
(d, J = 8.6 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H, CH3). MS-EI m/z 353 [M]+.Example 175: 3- (3-Methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid amide 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.92 (br, s, 1H, NH), 11.35 (br, s, 1H, NH)
, 8.36 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H, H-vinyl), 7.67 (m, 2H), 7.53 (
d, J = 7.6 Hz, 1H ), 7.30 (m, 1H), 7.16 (s, 2H, NH 2), 7.08 (m, 1H), 7.03
(d, J = 8.6 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H, CH 3 ). MS-EI m / z 353 [M] + .

【０５４１】 実施例１７６：３−（１Ｈ−インドール−５−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.38 (br, s, 1H, NH), 10.85 (br, s, 1H, NH)
, 8.11 (m, 1H), 8.01 (m, 1H), 7.90 (m, 1H), 7.78 (m, 1H), 7.37-7.53 (m,
3H), 7.10 (m, 1H), 6.95 (m, 1H), 6.4 (m, 1H), 2.28 (s, 3H, CH3). MS-EI m/z 353 [M]+.Example 176: 3- (1H-Indol-5-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid methylamide 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.38 (br, s, 1H, NH), 10.85 (br, s, 1H, NH)
, 8.11 (m, 1H), 8.01 (m, 1H), 7.90 (m, 1H), 7.78 (m, 1H), 7.37-7.53 (m,
3H), 7.10 (m, 1H ), 6.95 (m, 1H), 6.4 (m, 1H), 2.28 (s, 3H, CH 3). MS-EI m / z 353 [M] +.

【０５４２】 実施例１７７：３−（１Ｈ−インドール−５−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.54 (br, s, 1H, NH), 10.86 (br, s, 1H, NH)
, 8.56, 7.76, 7.46, 6.91 (m, 9H).Example 177: 3- (1H-Indol-5-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.54 (br, s, 1H, NH), 10.86 (br, s, 1H, NH)
, 8.56, 7.76, 7.46, 6.91 (m, 9H).

【０５４３】 実施例１７８：３−（１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.03 (br, s, 1H, NH), 10.84 (br, s, 1H, NH)
, 9.39 (s, 1H), 8.25 (s, 1H, H-ビニル), 8.22 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.16 (
m, 1H), 7.40-7.46 (m, 2H), 7.06-7.15 (m, 2H), 7.04 (m, 1H, CH3NH), 6.88
(d, J = 7.8 Hz, 1H), 2.32 (d, J = 5.1 Hz, 3H, CH3). MS-EI m/z 355 [M]+.Example 178: 3- (1H-Indol-3-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid methylamide 1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.03 (br, s, 1H, NH), 10.84 (br, s, 1H, NH)
, 9.39 (s, 1H), 8.25 (s, 1H, H-vinyl), 8.22 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.16 (
m, 1H), 7.40-7.46 (m, 2H), 7.06-7.15 (m, 2H), 7.04 (m, 1H, CH 3 NH), 6.88
(d, J = 7.8 Hz, 1H), 2.32 (d, J = 5.1 Hz, 3H, CH 3 ). MS-EI m / z 355 [M] + .

【０５４４】 実施例１７９：５−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−５−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロ−インドール−２−オン MS-EI m/z 275 [M]+.Example 179: 5-Amino-3- (1H-indol-5-ylmethylene) -1
, 3-Dihydro-indol-2-one MS-EI m / z 275 [M] + .

【０５４５】 実施例１８０：５−アミノ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.13 (br, s, 1H, NH), 10.57 (br, s, 1H, NH)
, 7.63 (s, 1H, H-ビニル), 7.61 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.6 Hz,
1H), 7.25 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.03-7.06 (m, 2H), 6.61 (d, J = 8.3 Hz,
1H), 6.49 (dd, J = 1.4 & 8.3 Hz, 1H), 4.70 (br s, 2H, NH2), 2.55 (s, 3H,
CH3). MS-EI m/z 289 [M]+.Example 180: 5-Amino-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.13 ( br, s, 1H, NH), 10.57 (br, s, 1H, NH)
, 7.63 (s, 1H, H-vinyl), 7.61 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.6 Hz,
1H), 7.25 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.03-7.06 (m, 2H), 6.61 (d, J = 8.3 Hz,
1H), 6.49 (dd, J = 1.4 & 8.3 Hz, 1H), 4.70 (br s, 2H, NH 2 ), 2.55 (s, 3H,
CH 3 ). MS-EI m / z 289 [M] + .

【０５４６】 実施例１８２：３−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.0 (br, s, 1H, NH), 10.85 (br, s, 1H, NH),
7.90 (s, 1H, H-ビニル), 7.79 (dd, 1H), 7.41-7.44 (m, 2H), 7.02-7.18 (m,
3H), 6.91 (d, 1H), 2.45 (s, 3H, CH3). MS-EI m/z 318 [M]+.Example 182: 3- (2-Methyl-1H-indol-3-ylmethylene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.0 (br, s, 1H, NH), 10.85 (br, s, 1H, NH),
7.90 (s, 1H, H-vinyl), 7.79 (dd, 1H), 7.41-7.44 (m, 2H), 7.02-7.18 (m,
3H), 6.91 (d, 1H), 2.45 (s, 3H, CH 3 ). MS-EI m / z 318 [M] + .

【０５４７】 実施例１８３：３−（１Ｈ−インドール−５−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド MS-EI m/z 367 [M]+.Example 183: 3- (1H-Indol-5-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid dimethylamide MS-EI m / z 367 [M] + .

【０５４８】 実施例１８４：３−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミ
ド1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.95 (br, s, 1H, NH), 10.86 (br, s, 1H, NH)
, 7.84 (s, 1H, H-ビニル), 7.41 (dd, J = 1.8 & 8.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J =
8.4 Hz, 1H), 7.04 (m, 1H), 6.85-6.95 (m, 4H). MS-EI m/z 381 [M]+.Example 184: 3- (2-Methyl-1H-indol-3-ylmethylene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid dimethylamide 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.95 (br, s, 1H, NH), 10.86 (br, s, 1H, NH )
, 7.84 (s, 1H, H-vinyl), 7.41 (dd, J = 1.8 & 8.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J =
8.4 Hz, 1H), 7.04 (m, 1H), 6.85-6.95 (m, 4H). MS-EI m / z 381 [M] + .

【０５４９】 実施例１８５：３−（１Ｈ−インドール−５−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド MS-EI m/z 339 [M]+.Example 185: 3- (1H-Indol-5-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid amide MS-EI m / z 339 [M] + .

【０５５０】 実施例１８６：３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.80 (br, s, 1H, NH), 11.44 (br, s, 1H, NH)
, 8.30 (s, 1H, H-ビニル), 8.15 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 7.2 Hz,
1H), 7.60 (m, 2H), 7.30 (m, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.07-7.12 (m, 2H), 2.63
(s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 367 [M]+.Example 186: 3- (1H-Indol-2-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid dimethylamide 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.80 (br, s, 1H, NH), 11.44 (br, s, 1H, NH)
, 8.30 (s, 1H, H-vinyl), 8.15 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 7.2 Hz,
1H), 7.60 (m, 2H), 7.30 (m, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.07-7.12 (m, 2H), 2.63
(s, 6H, 2xCH 3 ). MS-EI m / z 367 [M] + .

【０５５１】 実施例１８７：５−アミノ−３−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イルメ
チレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン MS-EI m/z 289 [M]+.Example 187: 5-Amino-3- (2-methyl-1H-indol-3-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one MS-EI m / z 289 [M] + .

【０５５２】 実施例１８８：３−（１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.11 (br, s, 1H, NH), 10.94 (br, s, 1H, NH)
, 9.50 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.33 (m, 2H), 7.51-7.53 (m, 2H), 7.25 (m,
2H), 7.03 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 2.63 (s, 6H, 2xCH3). MS-EI m/z 367 [M]+.Example 188: 3- (1H-Indol-3-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid dimethylamide 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 12.11 (br, s, 1H, NH), 10.94 (br, s, 1H, NH)
, 9.50 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.33 (m, 2H), 7.51-7.53 (m, 2H), 7.25 (m,
2H), 7.03 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 2.63 (s, 6H, 2xCH 3). MS-EI m / z 367 [M] +.

【０５５３】 実施例１８９：３−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチレン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド MS-EI m/z 353 [M]+.Example 189: 3- (2-methyl-1H-indol-3-ylmethylene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid amide MS-EI m / z 353 [M] + .

【０５５４】 実施例１９０：３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−
イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル］−プロピオン酸 １−（モルホリン−４−イル）シクロヘキセン（３００ｇ），２１４ｇのトリ
エチルアミンおよび１４００ｍＬのジクロロメタンを１５分間還流し，次に水浴
中で１５−２０℃に冷却した。５００ｍＬのジクロロメタンに溶解した塩化エチ
ルスクシニル（２６６ｇ）を３０分間かけて加えた。混合物を３０分間還流し，
水浴中で周囲温度に冷却した。固体を真空濾過により回収し，１００ｍＬのジク
ロロメタンで洗浄し，廃棄した。濾液をフラスコに戻し，溶媒を蒸留により除去
して，４５４ｇの粗４−（２−モルホリン−４−イル−シクロヘキセ−１−ニル
）−４−オキソ−酪酸エチルエステルを油状物として得た。Example 190: 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-
(Ilidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionate 1- (morpholin-4-yl) cyclohexene (300 g), 214 g of triethylamine and 1400 mL of dichloromethane were refluxed for 15 minutes. And then cooled to 15-20 ° C in a water bath. Ethyl succinyl chloride (266 g) dissolved in 500 mL of dichloromethane was added over 30 minutes. The mixture is refluxed for 30 minutes,
Cooled to ambient temperature in a water bath. The solid was collected by vacuum filtration, washed with 100 mL of dichloromethane and discarded. The filtrate was returned to the flask and the solvent was removed by distillation to give 454 g of crude 4- (2-morpholin-4-yl-cyclohex-1-ynyl) -4-oxo-butyric acid ethyl ester as an oil.

【０５５５】 粗４−（２−モルホリン−４−イルシクロヘキセ−１−ニル）−４−オキソ−
酪酸エチルエステル（４５４ｇ），３９８ｇのジエチルアミノマロネート塩酸塩
，１６２ｇの酢酸ナトリウムおよび３５０ｍＬの氷酢酸を１０８℃に３０分間加
熱した。混合物を１００−１０８℃で２時間保持し，次に水浴中で約５０℃に冷
却した。水（２５００ｍＬ）および７００ｍＬの酢酸エチルを加えた。酢酸エチ
ル層を分離し，ブラインで３回，飽和炭酸水素ナトリウム溶液で２回，ブライン
で１回洗浄した。溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し，酢酸エチルをロータリー
エバポレーターを用いて除去して，４９４ｇ（１０５％収率）の粗３−（２−エ
トキシカルボニルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール
−２−カルボン酸エチルエステルを油状物として得た。粗混合物をシリカゲルカ
ラムで酢酸エチル：ヘキサンの１：１０混合物を溶出剤として用いてクロマトグ
ラフィーを行い，１２２．１ｇの純粋な３−（２−エトキシカルボニルエチル）
−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸エチルエ
ステルを低融点固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 11.0 (s, 1H, ピロール NH), 4.2, 4.0 (t, それぞれ 4H
, COCH2), 2.8, 2.4 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH2 -), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).Crude 4- (2-morpholin-4-ylcyclohex-1-ynyl) -4-oxo-
Butyric acid ethyl ester (454 g), 398 g of diethylaminomalonate hydrochloride, 162 g of sodium acetate and 350 mL of glacial acetic acid were heated to 108 ° C. for 30 minutes. The mixture was kept at 100-108 ° C for 2 hours, and then cooled to about 50 ° C in a water bath. Water (2500 mL) and 700 mL of ethyl acetate were added. The ethyl acetate layer was separated and washed three times with brine, twice with saturated sodium bicarbonate solution, and once with brine. The solution was dried over anhydrous sodium sulfate and the ethyl acetate was removed using a rotary evaporator to give 494 g (105% yield) of crude 3- (2-ethoxycarbonylethyl) -4,5,6,7-tetrahydro- 1H-indole-2-carboxylic acid ethyl ester was obtained as an oil. The crude mixture was chromatographed on a silica gel column using a 1:10 mixture of ethyl acetate: hexane as eluent to give 122.1 g of pure 3- (2-ethoxycarbonylethyl).
-4,5,6,7-Tetrahydro-1H-indole-2-carboxylic acid ethyl ester was obtained as a low melting solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 11.0 (s, 1H, pyrrole NH), 4.2, 4.0 (t, 4H each
, COCH 2 ), 2.8, 2.4 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-), 2.4 (m, 4H, -CH 2- , -CH 2- ), 1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ).

【０５５６】 精製した３−（２−エトキシカルボニルエチル）−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸エチルエステル（１２２．１ｇ）およ
び３２８ｍＬの５Ｎ水酸化ナトリウムを８０分間還流した。加熱を止め，激しく
撹拌している混合物に，１６５ｍＬの１０Ｎ塩酸を，還流冷却器を備えた滴加ロ
ートを用いて注意深く加えた。塩酸はｐＨが２−３となるまで加えた。次に，混
合物を氷浴中で冷却し，この間に，混合物中の油状物は固化した。固体を真空濾
過により回収し，水で３回洗浄し，真空下で５０−６０℃で乾燥して，５４．９
ｇ（７１％収率）の３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル）−プロピオン酸を暗褐色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 11.8 (br s, 1H, COOH),
9.8 (s, 1H, CH), 2.5, 2.3 (t, 4H, -CH2CH2CO-), 2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH2-)
, 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).[0556] Purified 3- (2-ethoxycarbonylethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-2-carboxylic acid ethyl ester (122.1 g) and 328 mL of 5N sodium hydroxide were added for 80 minutes. Refluxed. The heat was turned off and to the vigorously stirred mixture, 165 mL of 10N hydrochloric acid was carefully added using a dropping funnel equipped with a reflux condenser. Hydrochloric acid was added until the pH was 2-3. The mixture was then cooled in an ice bath, during which time the oil in the mixture solidified. The solid is collected by vacuum filtration, washed three times with water, dried under vacuum at 50-60 ° C, and
g (71% yield) of 3- (4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-
3-yl) -Propionic acid was obtained as a dark brown solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.1 (s, 1H, pyrrole NH), 11.8 (br s, 1H, COOH),
9.8 (s, 1H, CH), 2.5, 2.3 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-), 2.4 (m, 4H, -CH 2- , -CH 2- )
, 1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ).

【０５５７】 ２４ｇのジメチルホルムアミドおよび３００ｍＬのジクロロメタンの混合物を
−９℃に冷却した。オキシ塩化リン（５０ｇ）を，滴加ロートにより急速に加え
た。３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プ
ロピオン酸（５４．９ｇ）を，激しく撹拌しながら少しずつ加えた。混合物を室
温に暖め，次に１０分間還流した。次にこれを５℃に冷却し，３００ｍＬの水で
希釈した。１０Ｎ水酸化ナトリウムを用いてｐＨを１０に調節した。層を分離し
た。水性層を１０℃に冷却し，約１３０ｍＬの１０Ｎ塩酸を用いてｐＨを２−３
に調節した。形成した油状物を固化し，真空濾過により回収し，水で３回洗浄し
，真空下で５０℃で乾燥して，５２．８ｇ（９３％収率）の３−（２−ホルミル
−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン
酸を暗褐色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 11.7 (br s, 1H, COOH),
9.4 (s, 1H, CHO), 2.8, 2.5(t, 4H, -CH2CH2CO-), 2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH2-)
, 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).A mixture of 24 g of dimethylformamide and 300 mL of dichloromethane was cooled to -9 ° C. Phosphorus oxychloride (50 g) was added rapidly via a dropping funnel. 3- (4,5,6,7-Tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionic acid (54.9 g) was added in portions with vigorous stirring. The mixture was warmed to room temperature and then refluxed for 10 minutes. Then it was cooled to 5 ° C. and diluted with 300 mL of water. The pH was adjusted to 10 using 10N sodium hydroxide. The layers were separated. Cool the aqueous layer to 10 ° C. and adjust the pH to 2-3 with about 130 mL of 10N hydrochloric acid.
Was adjusted to The oil formed was solidified, collected by vacuum filtration, washed three times with water, dried at 50 ° C. under vacuum and 52.8 g (93% yield) of 3- (2-formyl-4, 5,6,7-Tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionic acid was obtained as a dark brown solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.1 (s, 1H, pyrrole NH), 11.7 (br s, 1H, COOH),
9.4 (s, 1H, CHO), 2.8, 2.5 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-), 2.4 (m, 4H, -CH 2- , -CH 2- )
, 1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ).

【０５５８】 ２５ｍＬのエタノール中の３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．６ｇの２
−オキシインドールおよび２．７ｇのピペリジン（または２．２ｇのピロリジン
）を４時間還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると，沈殿物が形成した。
混合物を５分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，
２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬのエタノール中で還流してス
ラリー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し
，真空下で乾燥して，５．５ｇ（６８％収率）の３−［２−（２−オキソ−１，
２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た：ｍｐ
２６３−２６５℃。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.1, 6.9, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.6 (s,
1H, -CH=), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH 2 -), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).3- (2-Formyl-4,5,6,7-tetrahydride in 25 mL of ethanol
B-1H-Indol-3-yl) -propionic acid (5.4 g), 3.6 g of 2
-Oxindole and 2.7 g of piperidine (or 2.2 g of pyrrolidine
) Was refluxed for 4 hours. Acetic acid (8 mL) was added slowly and a precipitate formed.
The mixture was refluxed for 5 minutes and cooled to ambient temperature. The precipitate is collected by vacuum filtration,
Washed with 20 mL of ethanol. The solid is refluxed in 30 mL of ethanol
Rally wash, cool, collect by vacuum filtration, wash with 30 mL ethanol
, Dried under vacuum, 5.5 g (68% yield) of 3- [2- (2-oxo-1,
2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydrido
B-1H-Indol-3-yl] -propionic acid was obtained as an orange solid: mp
263-265 ° C.1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.1, 6.9, 6.8 (m, 4H each, aromatic), 7.6 (s,
1H, -CH =), 2.9, 2.7 (t, 4H, -CH respectively)TwoCHTwoCO-), 2.4 (m, 4H, -CHTwo-, -CH Two -), 1.7 (m, 4H, -CHTwoCHTwo-).

【０５５９】 実施例１９１：３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸 ２５ｍＬのエタノール中の３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．７ｇの５
−クロロ−２−オキシインドールおよび２．７ｇのピペリジン（または２．２ｇ
のピロリジン）を４時間還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると沈殿物が
形成した。混合物を５分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過によ
り回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬのエタノール中で
還流することによりスラリー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬ
のエタノールで洗浄し，高真空下で乾燥して，６．５ｇ（８０％収率）の３−［
２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメ
チル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロ
ピオン酸を橙色固体として得た。ｍｐ３７０−３８４℃1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.8, 7.1, 6.8 (m, それぞれ 3H, 芳香族), 7.7 (s, 1H, -
CH=), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, CH2CH2CO), 2.5 (m, 4H, -CH2-, -CH2-), 1.
7 (m, 4H, -CH2CH2-).Example 191: 3- [2- (5-Chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl ] -Propionic acid 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionic acid (5.4 g) in 25 mL of ethanol, 3.7 g of 5
-Chloro-2-oxindole and 2.7 g of piperidine (or 2.2 g
Was refluxed for 4 hours. A precipitate formed upon slow addition of acetic acid (8 mL). The mixture was refluxed for 5 minutes and cooled to ambient temperature. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of ethanol. The solid is slurry washed by refluxing in 30 mL of ethanol, cooled, collected by vacuum filtration, and
Of ethanol and dried under high vacuum to give 6.5 g (80% yield) of 3- [
2- (5-Chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid was obtained as an orange solid. . mp 370-384 ° C. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.3 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.8, 7.1, 6.8 (m, 3H each, aromatic), 7.7 (s, 1H,-
CH =), 2.9, 2.7 (t, 4H, CH 2 CH 2 CO, respectively), 2.5 (m, 4H, -CH 2- , -CH 2- ), 1.
7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ).

【０５６０】 実施例１９２：３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸 ３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）−プロピオン酸（３．４ｇ），２．７ｇの５−ブロモ−２−オキシイン
ドールおよび１．４ｇのピロリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物を４時間
還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると沈殿物が形成した。混合物を５分
間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエ
タノールで洗浄した。固体を３０ｍＬのエタノール中で還流することによりスラ
リー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，
真空下で乾燥して，５．２ｇ（９８％収率）の３−［２−（５−ブロモ−２−オ
キソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を赤橙色固体とし
て得た。ｍｐ２８６−２８９℃1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.9, 7.1, 6.8 (m, それぞれ 3H, 芳香族), 7.7 (s, 1H, -
CH=), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.5 (m, 4H, -CH2-, -CH2-),
1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).Example 192: 3- [2- (5-Bromo-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl ] -Propionic acid 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3
A mixture of -yl) -propionic acid (3.4 g), 2.7 g of 5-bromo-2-oxindole and 1.4 g of pyrrolidine in 25 mL of ethanol was refluxed for 4 hours. A precipitate formed upon slow addition of acetic acid (8 mL). The mixture was refluxed for 5 minutes and cooled to ambient temperature. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of ethanol. The solid was slurry washed by refluxing in 30 mL of ethanol, cooled, collected by vacuum filtration, washed with 30 mL of ethanol,
Dry under vacuum to give 5.2 g (98% yield) of 3- [2- (5-bromo-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7. −
Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid was obtained as a red-orange solid. mp 286-289 ° C 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.3 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.9, 7.1, 6.8 (m, 3H each, aromatic), 7.7 (s, 1H,-
CH =), 2.9, 2.7 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-), 2.5 (m, 4H, -CH 2- , -CH 2- ),
1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ).

【０５６１】 実施例１９３：３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸 ２０ｍＬの乾燥エーテル中のジエチルオキサレート（３０ｍＬ）を，５０ｍＬ
の乾燥エーテル中に懸濁した１９ｇのカリウムエトキシドに撹拌しながら加えた
。混合物を氷浴中で冷却し，２０ｍＬの乾燥エーテル中の２０ｍＬの３−ニトロ
−ｏ−キシレンをゆっくり加えた。粘稠な暗赤色混合物を０．５時間還流し，濃
縮し，ほぼすべての固体が溶解するまで１０％水酸化ナトリウムで処理した。次
に，赤色が黄色に変化するまで，過酸化水素（３０％）を暗赤色混合物に加えた
。暗赤色がもはや存在しなくなるまで，混合物を１０％水酸化ナトリウムと３０
％過酸化水素で交互に処理した。固体を濾別し，濾液を６Ｎ塩酸で酸性にした。
得られた沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下で乾燥して，９．
８ｇ（４５％収率）の１−メチル−６−ニトロフェニル酢酸を灰白色固体として
得た。固体をメタノール中で１０％パラジウム担持炭素で水素化して，９．０４
ｇの４−メチル−２−オキシインドールを白色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz) δ 10.27 (s, br, 1H, NH-1), 7.06 (t, 7.71 Hz,
1H, H-6), 6.74 (d, 7.73 Hz, H-5), 6.63 (d, 7.73 Hz, 1H, H-7), 3.36 (s,
2H, CH2), 2.18 (s, 3H, CH3).Example 193: 3- [2- (4-Methyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl ] -Propionic acid 50 mL of diethyl oxalate (30 mL) in 20 mL of dry ether
Was added with stirring to 19 g of potassium ethoxide suspended in dry ether. The mixture was cooled in an ice bath and 20 mL of 3-nitro-o-xylene in 20 mL of dry ether was added slowly. The viscous dark red mixture was refluxed for 0.5 h, concentrated, and treated with 10% sodium hydroxide until almost all solids dissolved. Next, hydrogen peroxide (30%) was added to the dark red mixture until the red color changed to yellow. Mix the mixture with 10% sodium hydroxide and 30% until dark red is no longer present.
% Hydrogen peroxide. The solid was filtered off and the filtrate was acidified with 6N hydrochloric acid.
8. collect the resulting precipitate by vacuum filtration, wash with water and dry under vacuum;
8 g (45% yield) of 1-methyl-6-nitrophenylacetic acid was obtained as an off-white solid. The solid is hydrogenated in methanol over 10% palladium on carbon to give 9.04
g of 4-methyl-2-oxindole was obtained as a white solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO, 360 MHz) δ 10.27 (s, br, 1H, NH-1), 7.06 (t, 7.71 Hz,
1H, H-6), 6.74 (d, 7.73 Hz, H-5), 6.63 (d, 7.73 Hz, 1H, H-7), 3.36 (s,
2H, CH 2 ), 2.18 (s, 3H, CH 3 ).

【０５６２】 ３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．２ｇの４−メチル−２−オキシイン
ドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物を４時間
還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると沈殿物が形成した。混合物を５分
間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエ
タノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中でスラリー洗浄し，冷
却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空下で乾燥し
て，６．２ｇ（８０％収率）の３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−
ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7 (s, 1H, -CH=), 7.0, 6.8 (m, それぞれ 2H, 芳香族),
2.8, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.6 (s, 1H, CH3), 2.5 (m, 4H, -C
H2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).3- (2-Formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3
A mixture of -yl) -propionic acid (5.4 g), 3.2 g of 4-methyl-2-oxindole and 2.7 g of piperidine in 25 mL of ethanol was refluxed for 4 hours. A precipitate formed upon slow addition of acetic acid (8 mL). The mixture was refluxed for 5 minutes and cooled to ambient temperature. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of ethanol. The solid was slurry washed in 30 mL of refluxing ethanol, cooled, collected by vacuum filtration, washed with 30 mL of ethanol, dried under vacuum, and dried with 6.2 g (80% yield) of 3- [2- (4-methyl-2-oxo-1,2-
Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-
1H-Indol-3-yl] -propionic acid was obtained as an orange solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.3 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7 (s, 1H, -CH =), 7.0, 6.8 (m, 2H each, aromatic),
2.8, 2.7 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-), 2.6 (s, 1H, CH 3 ), 2.5 (m, 4H, -C
H 2- , -CH 2- ), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).

【０５６３】 実施例１９４：３−［２−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸 ３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．２ｇの５−メチル−２−オキシイン
ドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物を４時間
還流した。酢酸（８ｍＬ）を加えると沈殿物が形成した。混合物を５分間還流し
，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノール
で洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノールでスラリー洗浄し，冷却し，真空
濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，６．２ｇ（
８０％収率）の３−［２−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7 (s, 1H, -CH=), 7.0, 6.8 (m, それぞれ 3H 芳香族),
2.8, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.6 (s, 1H, CH3), 2.5 (m, 4H, -CH 2 -, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 349.Example 194: 3- [2- (5-Methyl-2-oxo-1,2-dihydroindo
-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole
Ru-3-yl] -propionic acid 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3
-Yl) -propionic acid (5.4 g), 3.2 g of 5-methyl-2-oxyin
A mixture of dol and 2.7 g of piperidine in 25 mL of ethanol for 4 hours
Refluxed. A precipitate formed upon addition of acetic acid (8 mL). Reflux the mixture for 5 minutes
, Cooled to ambient temperature. The precipitate is collected by vacuum filtration and 20 mL of ethanol
And washed. The solid is slurry washed with 30 mL of refluxing ethanol, cooled, and evacuated.
Collected by filtration, washed with 30 mL of ethanol, dried under vacuum, 6.2 g (
80% yield) of 3- [2- (5-methyl-2-oxo-1,2-dihydroindo
3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole
Ru-3-yl] -propionic acid was obtained as an orange solid.1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7 (s, 1H, -CH =), 7.0, 6.8 (m, 3H aromatic each),
2.8, 2.7 (t, 4H, -CH respectivelyTwoCHTwoCO-), 2.6 (s, 1H, CHThree), 2.5 (m, 4H, -CH Two -, -CHTwo-), 1.7 (m, 4H, -CHTwoCHTwo-). MS: m / z 349.

【０５６４】 実施例１９５：３−［２−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸 ３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．７ｇの６−クロロ−２−オキシイン
ドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物を４時間
還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると，沈殿物が形成した。混合物を５
分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬの
エタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中でスラリー洗浄し，
真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，６．５
ｇ（８０％）の３−［２−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.0, 6.9 (m, それぞれ 3H, 芳香族), 7.6 (s, 1H, -
CH=), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH2-),
1.7(m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 371.Example 195: 3- [2- (6-Chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl ] -Propionic acid 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3
A mixture of -yl) -propionic acid (5.4 g), 3.7 g of 6-chloro-2-oxindole and 2.7 g of piperidine in 25 mL of ethanol was refluxed for 4 hours. Acetic acid (8 mL) was added slowly and a precipitate formed. Mix 5
Reflux for minutes and cool to ambient temperature. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of ethanol. The solid was slurry washed in 30 mL of refluxing ethanol,
Collect by vacuum filtration, wash with 30 mL ethanol, dry under vacuum, 6.5
g (80%) of 3- [2- (6-chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -Propionic acid was obtained as an orange solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.3 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.7, 7.0, 6.9 (m, 3H each, aromatic), 7.6 (s, 1H,-
CH =), 2.9, 2.7 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-), 2.4 (m, 4H, -CH 2- , -CH 2- ),
1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ). MS: m / z 371.

【０５６５】 実施例１９６：３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロイン
ドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インド
ール−３−イル］−プロピオン酸 ３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）−プロピオン酸（５．４ｇ），３．６ｇの６−メトキシ−２−オキシイ
ンドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物を４時
間還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加えると沈殿物が形成した。混合物を５
分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬの
エタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中でスラリー洗浄し，
冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して
，６．４ｇ（８０％収率）の３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−
ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た。ｍｐ２６
３−２６６℃1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.0 (s, 1H, ピロール NH), 12.0(s, 1H, COOH), 10.7
(s, 1H, CONH), 7.6, 6.5, 6.4 (m, それぞれ 3H, 芳香族), 7.4 (s, 1H, -CH=)
, 3.7 (s, 3H, CH3), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.5 (m, 4H -C
H2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 365.Example 196: 3- [2- (6-Methoxy-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl ] -Propionic acid 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3
A mixture of -yl) -propionic acid (5.4 g), 3.6 g of 6-methoxy-2-oxindole and 2.7 g of piperidine in 25 mL of ethanol was refluxed for 4 hours. A precipitate formed upon slow addition of acetic acid (8 mL). Mix 5
Reflux for minutes and cool to ambient temperature. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of ethanol. The solid was slurry washed in 30 mL of refluxing ethanol,
Cool, collect by vacuum filtration, wash with 30 mL of ethanol, vacuum dry and dry 6.4 g (80% yield) of 3- [2- (6-methoxy-2-oxo-1,2-
Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-
1H-Indol-3-yl] -propionic acid was obtained as an orange solid. mp26
3-266 ° C 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.0 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (s, 1H, COOH), 10.7
(s, 1H, CONH), 7.6, 6.5, 6.4 (m, 3H each, aromatic), 7.4 (s, 1H, -CH =)
, 3.7 (s, 3H, CH 3 ), 2.9, 2.7 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-), 2.5 (m, 4H -C
H 2- , -CH 2- ), 1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ). MS: m / z 365.

【０５６６】 実施例１９７：Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ
インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−３−イル］−プロピオンアミド ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸（１０ｇ）を１００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。カルボニルジ
イミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌した。ジメチ
ルアミン（２．７ｇ）および３０ｍＬのジメチルホルムアミドを加え，室温で一
夜撹拌を続けた。５０ｍＬの水を混合物に加え，１０分間撹拌を続けた。沈殿物
を真空濾過により回収し，２０ｍＬの水で，次に２０ｍＬのエタノールで洗浄し
た。固体を３０ｍＬの還流エタノール中で５分間スラリー洗浄し，室温に冷却し
た。固体を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥し
て，８．９ｇ（８３％収率）のＮ，Ｎ−ジメチル−３−［２−（２−オキソ−１
，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミドを得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 10.7 (s, 1H, CONH), 7.7,
7.1, 6.9, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.6 (s, 1H, -CH=), 3.3 (s, 6H,
CH3), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.5 (m, 4H -CH2-, -CH2-), 1
.7(m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 364.Example 197: N, N-dimethyl-3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3 -Yl] -propionamide 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid ( 10 g) was dissolved in 100 mL of dimethylformamide. Carbonyl diimidazole (6.3 g) was added and the mixture was stirred at ambient temperature for 1 hour. Dimethylamine (2.7 g) and 30 mL of dimethylformamide were added and stirring was continued at room temperature overnight. 50 mL of water was added to the mixture and stirring was continued for 10 minutes. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of water and then with 20 mL of ethanol. The solid was slurry washed in 30 mL of refluxing ethanol for 5 minutes and cooled to room temperature. The solid was collected by vacuum filtration, washed with 20 mL of ethanol, dried in vacuo, and 8.9 g (83% yield) of N, N-dimethyl-3- [2- (2-oxo-1).
, 2-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.1 (s, 1H, pyrrole NH), 10.7 (s, 1H, CONH), 7.7,
7.1, 6.9, 6.8 (m, 4H each, aromatic), 7.6 (s, 1H, -CH =), 3.3 (s, 6H,
CH 3 ), 2.9, 2.7 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-), 2.5 (m, 4H -CH 2- , -CH 2- ), 1
.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ). MS: m / z 364.

【０５６７】 実施例１９８：３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オン １００ｍＬのテトラヒドロフラン中の３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸（９．７ｇ）を８．１ｇのカルボ
ニルジイミダゾールとともに１時間撹拌した。ジメチルアミン（２．５ｇ）を加
え，混合物を２時間撹拌した。溶媒を蒸発させ，残渣を酢酸エチル中に取り，水
，０．１Ｎ塩酸，水，およびブラインで洗浄し，硫酸ナトリウムで乾燥し，蒸発
させて，７．７ｇ（７０％収率）の３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ
−インドール−３−イル）−プロピオン酸ジメチルアミドを得た。Example 198: 3- [3- (3-dimethylaminopropyl) -4,5,6,7-
Tetrahydro-1H-indol-2-ylmethylene] -1,3-dihydroindol-2-one 3- (4,5,6,7-tetrahydro- in 100 mL of tetrahydrofuran
1H-Indol-3-yl) -propionic acid (9.7 g) was stirred with 8.1 g of carbonyldiimidazole for 1 hour. Dimethylamine (2.5 g) was added and the mixture was stirred for 2 hours. The solvent was evaporated, the residue was taken up in ethyl acetate, washed with water, 0.1 N hydrochloric acid, water, and brine, dried over sodium sulfate and evaporated to give 7.7 g (70% yield) of 3- (4,5,6,7-tetrahydro-1H
-Indol-3-yl) -propionic acid dimethylamide was obtained.

【０５６８】 ５０ｍＬのテトラヒドロフラン中の３−（４，５，６，７−テトラヒドロ−１
Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸ジメチルアミド（７．７ｇ）および
１３ｇのボラン−テトラヒドロフラン複合体を３時間還流した。反応をアセトン
で，次に水で急冷し，蒸発乾固させた。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー
を行い，２ｇ（２０％収率）の３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，
６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドールを黄色油状物として得た。The 3- (4,5,6,7-tetrahydro-1 in 50 mL of tetrahydrofuran
H-Indol-3-yl) -propionic acid dimethylamide (7.7 g) and 13 g of the borane-tetrahydrofuran complex were refluxed for 3 hours. The reaction was quenched with acetone and then with water and evaporated to dryness. The residue was chromatographed on silica gel to give 2 g (20% yield) of 3- (3-dimethylaminopropyl) -4,5,5.
6,7-Tetrahydro-1H-indole was obtained as a yellow oil.

【０５６９】 ジメチルホルムアミド（０．８ｇ）および１３ｍＬのジクロロメタンを−９℃
に冷却した。オキシ塩化リン（１．７ｇ）を滴加ロートにより急速に加えた。３
−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール（２ｇ）を，激しく撹拌しながら少しずつ加えた。混合物を室温に暖め
，次に１０分間還流した。次にこれを５℃に冷却し，２０ｍＬの水で希釈した。
１０Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨを１０に調節した。層を分離した。有機層を水お
よびブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，蒸発させて，１．８ｇ（
８０％）の３−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−ホルミル−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドールを暗色油状物として得て，これを固化した
。 １０ｍＬのエタノール中の３−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−ホルミ
ル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール（１．８ｇ），１ｇの２
−オキシインドールおよび０．１ｇのピペリジンを４時間還流し，次に室温に冷
却した。形成した沈殿物を真空濾過により回収し，４ｍＬのエタノールで洗浄し
た。固体を８ｍＬの還流エタノールでスラリー洗浄し，冷却し，真空濾過により
回収し，３ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，１．８ｇ（７０％収率）
の３−［３−（３−ジメチルアミノプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１，３−ジヒドロインドール−２−
オンを橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 10.7 (s, 1H, CONH), 7.6,
7.1, 7.0, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.6 (s, 1H, -CH=), 3.3 (s, 6H,
CH3), 2.7 (m, 4H, -CH2-, -CH2-), 2.5, 2.3, 1.4 (t, それぞれ 6H, -CH2CH2C
H2N-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 350.Add dimethylformamide (0.8 g) and 13 mL of dichloromethane to -9 ° C.
And cooled. Phosphorus oxychloride (1.7 g) was added rapidly via a dropping funnel. 3
-(3-Dimethylaminopropyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole (2 g) was added in portions with vigorous stirring. The mixture was warmed to room temperature and then refluxed for 10 minutes. Then it was cooled to 5 ° C. and diluted with 20 mL of water.
The pH was adjusted to 10 with 10N sodium hydroxide. The layers were separated. The organic layer was washed with water and brine, dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated to give 1.8 g (
80%) of 3- (3-dimethylaminopropyl) -2-formyl-4,5,6,
7-Tetrahydro-1H-indole was obtained as a dark oil which solidified. 3- (3-dimethylaminopropyl) -2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole (1.8 g), 1 g of 2 in 10 mL of ethanol
-Oxindole and 0.1 g of piperidine were refluxed for 4 hours and then cooled to room temperature. The precipitate formed was collected by vacuum filtration and washed with 4 mL of ethanol. The solid was slurry washed with 8 mL of refluxing ethanol, cooled, collected by vacuum filtration, washed with 3 mL of ethanol, dried in vacuo, and 1.8 g (70% yield).
3- [3- (3-dimethylaminopropyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-2-ylmethylene] -1,3-dihydroindole-2-
On was obtained as an orange solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.1 (s, 1H, pyrrole NH), 10.7 (s, 1H, CONH), 7.6,
7.1, 7.0, 6.8 (m, 4H each, aromatic), 7.6 (s, 1H, -CH =), 3.3 (s, 6H,
CH 3 ), 2.7 (m, 4H, -CH 2- , -CH 2- ), 2.5, 2.3, 1.4 (t, 6H, -CH 2 CH 2 C respectively
H 2 N-), 1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ). MS: m / z 350.

【０５７０】 実施例１９９：３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオンアミド ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸（１０ｇ）を１００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。カルボニルジ
イミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌した。３０ｍ
Ｌのジメチルホルムアミド中のアンモニア（１ｇ）を加え，一夜撹拌を続けた。
５０ｍＬの水を混合物に加え，１０分間撹拌を続けた。形成した沈殿物を真空濾
過により回収し，２０ｍＬの水で，次に２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体
を３０ｍＬの還流エタノールで５分間スラリー洗浄し，室温に冷却した。固体を
真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，１１ｇ
（８３％収率）の３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−
イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル］−プロピオンアミドを得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.1, 6.9, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.6 (s,
1H, -CH=), 7.2, 6.7 (s, それぞれ 2H, NH2), 2.9, 2.7 (t, 4H, -CH2CH2CO-),
2.4 (m, 4H, -CH2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 336.Example 199: 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid (10 g) was added to 100 mL of dimethyl Dissolved in formamide. Carbonyl diimidazole (6.3 g) was added and the mixture was stirred at ambient temperature for 1 hour. 30m
L of ammonia in dimethylformamide (1 g) was added and stirring continued overnight.
50 mL of water was added to the mixture and stirring was continued for 10 minutes. The precipitate formed was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of water and then with 20 mL of ethanol. The solid was slurry washed with 30 mL of refluxing ethanol for 5 minutes and cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with 20 mL of ethanol, dried in vacuo and 11 g
(83% yield) of 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-
(Ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.3 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.1, 6.9, 6.8 (m, 4H each, aromatic), 7.6 (s,
1H, -CH =), 7.2, 6.7 (s, 2H each, NH 2), 2.9, 2.7 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-),
2.4 (m, 4H, -CH 2- , -CH 2- ), 1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ). MS: m / z 336.

【０５７１】 実施例２００：３−［３−（３−モルホリン−４−イル−３−オキソプロピル）
−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸（１０ｇ）を１００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。カルボニルジ
イミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌した。３０ｍ
Ｌのジメチルホルムアミド中のモルホリン（５．２ｇ）を加え，一夜撹拌を続け
た。５０ｍＬの水を混合物に加え，１０分間撹拌を続けた。沈殿物を真空濾過に
より回収し，２０ｍＬの水で，次に２０ｍＬのエタノールで洗浄した。形成した
固体を３０ｍＬの還流エタノール中で５分間スラリー洗浄し，室温に冷却した。
固体を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，
９．６ｇ（８０％）の３−［３−（３−モルホリン−４−イル−３−オキソプロ
ピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン
］−１，３−ジヒドロインドール−２−オンを橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.1, 6.9, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.6 (s,
1H, -CH=), 3.3 (多重線, 8H, モルホリン CH2), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -
CH2CH2CO-), 2.5 (m, 4H, CH2, CH2), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 406.Example 200: 3- [3- (3-morpholin-4-yl-3-oxopropyl)
-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-2-ylmethylene] -1
, 3-Dihydroindol-2-one 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl]- Propionic acid (10 g) was dissolved in 100 mL of dimethylformamide. Carbonyl diimidazole (6.3 g) was added and the mixture was stirred at ambient temperature for 1 hour. 30m
L of morpholine in dimethylformamide (5.2 g) was added and stirring continued overnight. 50 mL of water was added to the mixture and stirring was continued for 10 minutes. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of water and then with 20 mL of ethanol. The solid formed was slurry washed in 30 mL of refluxing ethanol for 5 minutes and cooled to room temperature.
The solid is collected by vacuum filtration, washed with 20 mL of ethanol, dried in vacuo,
9.6 g (80%) of 3- [3- (3-morpholin-4-yl-3-oxopropyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-2-ylmethylene] -1,3 -Dihydroindol-2-one was obtained as an orange solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.3 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.6, 7.1, 6.9, 6.8 (m, 4H each, aromatic), 7.6 (s,
1H, -CH =), 3.3 (multiple lines, 8H, morpholine CH 2 ), 2.9, 2.7 (t, 4H,-respectively)
CH 2 CH 2 CO-), 2.5 (m, 4H, CH 2 , CH 2 ), 1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ). MS: m / z 406.

【０５７２】 実施例２０１：Ｎ−メチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル−プロピオンアミド ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸（１０ｇ）を１００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。カルボニルジ
イミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌した。３０ｍ
Ｌのジメチルホルムアミド中のメチルアミン（１．８ｇ）を加え，一夜撹拌を続
けた。５０ｍＬの水を混合物に加え，１０分間撹拌を続けた。沈殿物を真空濾過
により回収し，２０ｍＬの水で，次に２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を
３０ｍＬの還流エタノール中で５分間スラリー洗浄し，室温に冷却した。固体を
真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，８．３
ｇ（８０％収率）のＮ−メチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロイ
ンドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−イン
ドール−３−イル］−プロピオンアミドを橙色固体として得た。 MS: m/z 350.Example 201 N-methyl-3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl -Propionamide 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid (10 g). Dissolved in 100 mL of dimethylformamide. Carbonyl diimidazole (6.3 g) was added and the mixture was stirred at ambient temperature for 1 hour. 30m
L of methylamine in dimethylformamide (1.8 g) was added and stirring was continued overnight. 50 mL of water was added to the mixture and stirring was continued for 10 minutes. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of water and then with 20 mL of ethanol. The solid was slurry washed in 30 mL of refluxing ethanol for 5 minutes and cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with 20 mL of ethanol, dried in vacuo and 8.3
g (80% yield) of N-methyl-3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3- Yl] -propionamide was obtained as an orange solid. MS: m / z 350.

【０５７３】 実施例２０２：Ｎ−（２−モルホリン−４−イルエチル）−３−［２−（２−オ
キソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミド ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸（１０ｇ）を１００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。カルボニルジ
イミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌した。４−（
２−アミノエチル）モルホリン（７．７ｇ）および３０ｍＬのジメチルホルムア
ミドを加え，一夜撹拌を続けた。５０ｍＬの水を混合物に加え，１０分間撹拌を
続けた。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬの水で，次に２０ｍＬのエタ
ノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中で５分間スラリー洗浄し
，室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエタノールで洗浄
し，真空乾燥して，１ｇ（８３％）のＮ−（２−モルホリン−４−イルエチル）
−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチ
ル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピ
オンアミドを得た。ｍｐ２５６−２５８℃1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 10.7 (s, 1H, -CONH-), 7.
7 (t, 1H, -CONHCH2-), 7.6, 7.1, 6.9, 6.8 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.5 (
s, 1H, -CH=), 3.5 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2-), 3.1, 2.8 (m, それぞれ 2H,
-CH2NCH2-), 2.7, 2.5 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.3, 2.2 (m, それぞれ
4H, -NHCH2CH2N-), 2.2 (m, 4H, -CH2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).Example 202: N- (2-morpholin-4-ylethyl) -3- [2- (2-oxo-l, 2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-
Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3 -Yl] -propionic acid (10 g) was dissolved in 100 mL of dimethylformamide. Carbonyl diimidazole (6.3 g) was added and the mixture was stirred at ambient temperature for 1 hour. 4- (
2-Aminoethyl) morpholine (7.7 g) and 30 mL of dimethylformamide were added and stirring was continued overnight. 50 mL of water was added to the mixture and stirring was continued for 10 minutes. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of water and then with 20 mL of ethanol. The solid was slurry washed in 30 mL of refluxing ethanol for 5 minutes and cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration, washed with 20 mL of ethanol, dried in vacuo, and 1 g (83%) of N- (2-morpholin-4-ylethyl)
There was obtained -3- [2- (2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide. mp 256-258 ° C 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.1 (s, 1H, pyrrole NH), 10.7 (s, 1H, -CONH-), 7.
7 (t, 1H, -CONHCH 2- ), 7.6, 7.1, 6.9, 6.8 (m, 4H each, aromatic), 7.5 (
s, 1H, -CH =), 3.5 (t, 4H each, -CH 2 CH 2- ), 3.1, 2.8 (m, 2H each,
-CH 2 NCH 2- ), 2.7, 2.5 (t, 4H each, -CH 2 CH 2 CO-), 2.3, 2.2 (m, each
4H, -NHCH 2 CH 2 N-), 2.2 (m, 4H, -CH 2- , -CH 2- ), 1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ).

【０５７４】 実施例２０３：３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロピロロ［２，３−ｂ
］ピリジン−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−イ
ンドール−３−イル］−プロピオン酸 ７−アザオキシインドール（９９ｍｇ），１１０ｍｇの３−（２−ホルミル−
４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオン酸
および２滴のピペリジンの２ｍＬのエタノール中の混合物を５時間還流した。反
応混合物を冷却し，濃縮した。残渣を酢酸でｐＨ６に酸性にした。得られた沈殿
物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空オーブン中で４０℃で乾燥して，
２５．４ｍｇ（１３％収率）の３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロピロ
ロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を得た。 MS: m/z 338.Example 203: 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydropyrrolo [2,3-b
] Pyridine-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid 7-azaoxindole (99 mg), 110 mg of 3- (2-formyl-
A mixture of 4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionic acid and 2 drops of piperidine in 2 mL of ethanol was refluxed for 5 hours. The reaction mixture was cooled and concentrated. The residue was acidified to pH 6 with acetic acid. The resulting precipitate is collected by vacuum filtration, washed with water and dried in a vacuum oven at 40 ° C.
25.4 mg (13% yield) of 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridine-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro- 1H-Indol-3-yl] -propionic acid was obtained. MS: m / z 338.

【０５７５】 実施例２０４：３−｛２−［６−（３−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸 １０３ｍｇの６−（３−メトキシフェニル）−２−オキシインドール，９５ｍ
ｇの３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル）−プロピオン酸およびピペリジン（３滴）のエタノール（２ｍＬ）中
の混合物を密封管中で９０℃に加熱し，ここで一夜保持した。反応混合物を濃縮
し，６Ｎ塩酸で酸性にした。形成した沈殿物を濾過により回収し，水およびヘキ
サンで洗浄して，１５６ｍｇの３−｛２−［６−（３−メトキシフェニル）−２
−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸を褐色固体と
して得た（８２％）。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz): δ 13.26 (s, br, 1H, NH-1 ) 1.78 (s, br, 1H,
NH-1), 7.72 (d, 8.1 Hz, 1H, H-4), 7.65 (s, 1H, H-ビニル), 7.35 (d, 7.9 H
z, 1H), 7.26 (dd, 1.3 Hz, 8.1 Hz, 1H, H-5), 7.18 (d, 7.9 Hz 1H), 7.13 (t
, 2.0 Hz, 1H ), 7.09 (d, 1.3 Hz, 1H, H-7), 6.90 (dd,, 2.0 Hz, 1H), 3.82
(s, 3H, OCH3), 2.91 (t, 7.4 Hz, 2H, CH2CH2COOH), 2.66 (t, 5.9 Hz, 2H, H
-7'), 2.38-2.46 (m, 4H, CH2CH2COOH および H-4'), 1.69-1.76 (m, 4H, H-5',
6'). MS: m/z 443.2.Example 204: 3- {2- [6- (3-methoxyphenyl) -2-oxo-1,
2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl] -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl} -propionic acid 103 mg of 6- (3-methoxyphenyl) -2-oxindole, 95 m
g of 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-
A mixture of 3-yl) -propionic acid and piperidine (3 drops) in ethanol (2 mL) was heated in a sealed tube to 90 ° C. where it was kept overnight. The reaction mixture was concentrated and acidified with 6N hydrochloric acid. The precipitate formed was collected by filtration, washed with water and hexane and 156 mg of 3- {2- [6- (3-methoxyphenyl) -2
-Oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -4,5,6.
7-Tetrahydro-1H-indol-3-yl} -propionic acid was obtained as a brown solid (82%). 1 H NMR (d 6 -DMSO, 360 MHz): δ 13.26 (s, br, 1H, NH-1) 1.78 (s, br, 1H,
NH-1), 7.72 (d, 8.1 Hz, 1H, H-4), 7.65 (s, 1H, H-vinyl), 7.35 (d, 7.9 H
z, 1H), 7.26 (dd, 1.3 Hz, 8.1 Hz, 1H, H-5), 7.18 (d, 7.9 Hz 1H), 7.13 (t
, 2.0 Hz, 1H), 7.09 (d, 1.3 Hz, 1H, H-7), 6.90 (dd ,, 2.0 Hz, 1H), 3.82
(s, 3H, OCH 3 ), 2.91 (t, 7.4 Hz, 2H, CH 2 CH 2 COOH), 2.66 (t, 5.9 Hz, 2H, H
-7 '), 2.38-2.46 (m, 4H, CH 2 CH 2 COOH and H-4'), 1.69-1.76 ( m, 4H, H-5 ',
6 '). MS: m / z 443.2.

【０５７６】 実施例２０５：３−｛２−［６−（４−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸 １０３ｍｇの６−（４−メトキシフェニル）−２−オキシインドール，９５ｍ
ｇの３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル）−プロピオン酸およびピペリジン（３滴）のエタノール（２ｍＬ）中
の混合物を密封管中で９０℃に加熱し，ここで４時間保持した。反応混合物を濃
縮し，６Ｎ塩酸で酸性にした。酢酸エチルを加えると，水性層から固体が沈殿し
た。沈殿物を濾過により回収し，水およびヘキサンで洗浄して，５７ｍｇの３−
｛２−［６−（４−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル｝−プロピオン酸を褐色固体（３０％）として得た。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz): δ 13.24 (s, br, 1H, NH-1), 11.61 (s, br, 1H,
COOH), 10.76 (s, br, 1H, NH-1), 7. (d, 8.1 Hz, 1H, H-4), 7.61 (s, 1H, H
-ビニル), 7.56 (d, 8.8 Hz, 2H, H-3, 5), 7.21 (dd, 1.5 Hz, 8.1 Hz, 1H, H-
5), 7.04 (d, J = 1.5 Hz, 1H, H-7), 7.01 (d, 8.8 Hz, 2H, H-2",6" ), 3.79
(s, 3H, OCH3), 2.91 (t, 7.4 Hz, 2H, CH2CH2COOH ), 2.67 (t, 5.9 Hz, 2H,
H-7'), 2.40-2.46 (m, 4H, CH2CH2COOH および H-4'), 1.72-1.78 (m, 4H, H-5'
,6'). MS: m/z 441.2.Example 205: 3- {2- [6- (4-methoxyphenyl) -2-oxo-1,
2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl] -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl} -propionic acid 103 mg of 6- (4-methoxyphenyl) -2-oxindole, 95 m
g of 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-
A mixture of 3-yl) -propionic acid and piperidine (3 drops) in ethanol (2 mL) was heated to 90 ° C. in a sealed tube where it was held for 4 hours. The reaction mixture was concentrated and acidified with 6N hydrochloric acid. Upon addition of ethyl acetate, a solid precipitated from the aqueous layer. The precipitate was collected by filtration, washed with water and hexane, and treated with 57 mg of 3-
{2- [6- (4-methoxyphenyl) -2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl} -propionic acid Was obtained as a brown solid (30%). 1 H NMR (d 6 -DMSO, 360 MHz): δ 13.24 (s, br, 1H, NH-1), 11.61 (s, br, 1H,
COOH), 10.76 (s, br, 1H, NH-1), 7. (d, 8.1 Hz, 1H, H-4), 7.61 (s, 1H, H
-Vinyl), 7.56 (d, 8.8 Hz, 2H, H-3, 5), 7.21 (dd, 1.5 Hz, 8.1 Hz, 1H, H-
5), 7.04 (d, J = 1.5 Hz, 1H, H-7), 7.01 (d, 8.8 Hz, 2H, H-2 ", 6"), 3.79
(s, 3H, OCH 3 ), 2.91 (t, 7.4 Hz, 2H, CH 2 CH 2 COOH), 2.67 (t, 5.9 Hz, 2H,
H-7 '), 2.40-2.46 ( m, 4H, CH 2 CH 2 COOH and H-4'), 1.72-1.78 ( m, 4H, H-5 '
, 6 '). MS: m / z 441.2.

【０５７７】 実施例２０６：３−［２−（２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロイン
ドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インド
ール−３−イル］−プロピオン酸 ９０ｍｇの６−フェニル−２−オキシインドール，９５ｍｇの３−（２−ホル
ミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピ
オン酸およびピペリジン（３滴）のエタノール（２ｍＬ）中の混合物を密封管中
で９０℃で４時間保持した。反応混合物を濃縮し，６Ｎ塩酸で酸性にした。沈殿
物を濾過により回収し，水およびヘキサンで洗浄して，５９ｍｇの３−［２−（
２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチ
ル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピ
オン酸を褐色固体として得た（３１％収率）。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz): δ 13.27 (s, br, 1H, NH-1'), 12.06 (s, v br,
1H, COOH), 10.80 (s, br, 1H, NH-1), 7.74 (d, 7.9 Hz, 1H, H-4), 7.64 (s,
1H, H-ビニル), 7.62 (d, 7.7 Hz, 2H), 7.44 (t, 7.7 Hz, 2H), 7.32 (dd, 7.7
Hz, 1H), 7.27 (dd, 1.1, 7.9 Hz 1H, H-5), 7.10 (d, 1.1 Hz, 1H, H-7), 2.9
2 (t, 7.3 Hz, 2H, CH2CH2COOH), 2.67 (t, 5.5 Hz, 2H, H-7'), 2.41-2.46 (m,
4H, CH2CH2COOH および H-4'), 1.73-1.76 (m, 4H, H-5',6'). MS: m/z 411.2.Example 206: 3- [2- (2-oxo-6-phenyl-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl ] -Propionic acid 90 mg 6-phenyl-2-oxindole, 95 mg 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionic acid and piperidine (3 drops) )) In ethanol (2 mL) was kept at 90 ° C. for 4 hours in a sealed tube. The reaction mixture was concentrated and acidified with 6N hydrochloric acid. The precipitate was collected by filtration, washed with water and hexane, and treated with 59 mg of 3- [2- (
2-oxo-6-phenyl-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid was obtained as a brown solid (31 %yield). 1 H NMR (d 6 -DMSO, 360 MHz): δ 13.27 (s, br, 1H, NH-1 '), 12.06 (s, v br,
1H, COOH), 10.80 (s, br, 1H, NH-1), 7.74 (d, 7.9 Hz, 1H, H-4), 7.64 (s,
1H, H-vinyl), 7.62 (d, 7.7 Hz, 2H), 7.44 (t, 7.7 Hz, 2H), 7.32 (dd, 7.7
Hz, 1H), 7.27 (dd, 1.1, 7.9 Hz 1H, H-5), 7.10 (d, 1.1 Hz, 1H, H-7), 2.9
2 (t, 7.3 Hz, 2H, CH 2 CH 2 COOH), 2.67 (t, 5.5 Hz, 2H, H-7 '), 2.41-2.46 (m,
4H, CH 2 CH 2 COOH and H-4 '), 1.73-1.76 ( m, 4H, H-5', 6 ') MS:. M / z 411.2.

【０５７８】 実施例２０７：３−｛２−［６−（２−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１ｇ）を，５ｇの２−メ
トキシフェニルボロン酸，６．６ｇの５−ブロモ−２−フルオロニトロベンゼン
および３０ｍＬの２Ｍ炭酸ナトリウム溶液の，５０ｍＬのトルエンおよび５０ｍ
Ｌのエタノール中の混合物に加えた。混合物を２時間還流し，濃縮し，残渣を酢
酸エチルで２回抽出した。酢酸エチル層を水およびブラインで洗浄し，乾燥し，
濃縮して，暗緑色油状物を得て，これを放置して固化させて，粗４−フルオロ−
２'−メトキシ−３−ニトロビフェニルを得た。Example 207: 3- {2- [6- (2-methoxyphenyl) -2-oxo-1,
2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl] -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl} -propionic acid tetrakis (triphenylphosphine) palladium (1 g), 5 g of 2-methoxyphenyl Boronic acid, 6.6 g of 5-bromo-2-fluoronitrobenzene and 30 mL of 2M sodium carbonate solution in 50 mL of toluene and 50 m
L of the mixture in ethanol. The mixture was refluxed for 2 hours, concentrated and the residue was extracted twice with ethyl acetate. The ethyl acetate layer is washed with water and brine, dried,
Concentration gave a dark green oil which solidified on standing to give crude 4-fluoro-
2′-Methoxy-3-nitrobiphenyl was obtained.

【０５７９】 ジメチルマロネート（１４ｍＬ）を，５０ｍＬのジメチルスルホキシド中に懸
濁した２．９ｇの水素化ナトリウムに滴加した。混合物を１００℃で１５分間撹
拌し，室温に冷却した。６０ｍＬのジメチルスルホキシド中の粗４−フルオロ−
２'−メトキシ−３−ニトロビフェニルを加え，混合物を１００℃で２時間撹拌
した。反応混合物を冷却し，３００ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶液で急冷し，
酢酸エチルで２回抽出した。抽出物を合わせ，飽和塩化アンモニウム，水，およ
びブラインで洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，粗ジメチル２'
−メトキシ−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを黄色油状物として得た。Dimethyl malonate (14 mL) was added dropwise to 2.9 g of sodium hydride suspended in 50 mL of dimethyl sulfoxide. The mixture was stirred at 100 ° C. for 15 minutes and cooled to room temperature. Crude 4-fluoro- in 60 mL of dimethyl sulfoxide
2′-Methoxy-3-nitrobiphenyl was added and the mixture was stirred at 100 ° C. for 2 hours. The reaction mixture was cooled and quenched with 300 mL of saturated ammonium chloride solution,
Extracted twice with ethyl acetate. The extracts were combined, washed with saturated ammonium chloride, water, and brine, dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated, and the crude dimethyl 2 '
-Methoxy-3-nitrobiphenyl-4-malonate was obtained as a yellow oil.

【０５８０】 粗２'−メトキシ−３−ニトロビフェニル−４−マロネートを５０ｍＬの６Ｎ
塩酸中で１００℃で２４時間撹拌し，冷却した。形成した沈殿物を濾過により回
収し，水およびヘキサンで洗浄し，乾燥して，９．８ｇの２'−メトキシ−２−
ニトロビフェニル−４−酢酸を淡黄褐色固体として得た。The crude 2′-methoxy-3-nitrobiphenyl-4-malonate was added to 50 mL of 6N
Stirred in hydrochloric acid at 100 ° C. for 24 hours and cooled. The precipitate formed is collected by filtration, washed with water and hexane, dried and 9.8 g of 2'-methoxy-2-
Nitrobiphenyl-4-acetic acid was obtained as a light tan solid.

【０５８１】 鉄チップ（５ｇ）を５０ｍＬの氷酢酸中の９．８ｇの２'−メトキシ−３−ニ
トロビフェニル−４−酢酸に一度に加え，混合物を１００℃で３時間撹拌した。
反応混合物を濃縮乾固し，酢酸エチル中で超音波処理し，濾過して不溶性物質を
除去した。濾液を１Ｎ塩酸で２回，次に水およびブラインで洗浄し，無水硫酸ナ
トリウムで乾燥し，濃縮した。残渣をシリカゲルで酢酸エチル：ヘキサン１：２
を溶出剤として用いてクロマトグラフィーを行って，５．４ｇ（５−ブロモ−２
−フルオロニトロベンゼンに基づき６９％）の６−（２−メトキシフェニル）−
２−オキシインドールをバラ色固体として得た。The iron chips (5 g) were added in one portion to 9.8 g of 2′-methoxy-3-nitrobiphenyl-4-acetic acid in 50 mL of glacial acetic acid and the mixture was stirred at 100 ° C. for 3 hours.
The reaction mixture was concentrated to dryness, sonicated in ethyl acetate and filtered to remove insoluble material. The filtrate was washed twice with 1N hydrochloric acid, then with water and brine, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue is purified on silica gel with ethyl acetate: hexane 1: 2.
Was performed using 5.4 as an eluent to obtain 5.4 g (5-bromo-2).
-69% based on fluoronitrobenzene) of 6- (2-methoxyphenyl)-
2-Oxindole was obtained as a rosy solid.

【０５８２】 １０３ｍｇの６−（２−メトキシフェニル）５−２−オキシインドール，９５
ｍｇの３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール
−３−イル）−プロピオン酸およびピペリジン（３滴）のエタノール（２ｍＬ）
中の混合物を，密封管中で９０℃で４時間保持した。反応混合物を濃縮し，６Ｎ
塩酸で酸性にした。沈殿物を濾過により回収し，水およびヘキサンで洗浄して，
６７ｍｇの３−｛２−［６−（２−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−
ジヒドロインドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル｝−プロピオン酸を褐色固体として得た（３５％収
率）。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz): δ 13.26 (s, br, 1H, H1, 20, vr H OH) 10.71 (
s, br, 1H, NH-1), 7.67 (d, 7.7 Hz, 1H, H-4), 7.61 (s, 1H, H-ビニル), 7.2
7-7.34 (m, 2H,), 7.01-7.10 (m, 2H), 7.05 (dd, 1.2, 7.7 Hz, 1H, H-5), 6.9
9 (d, 1.2 Hz, 1H, H-7), 3.75 (s, 3H, OCH3), 2.91 (t, 7.5 Hz, 2H, CH2CH2C
OOH), 2.68 (t, 7 Hz, 2H, H-7'), 2.40-2.46 (m, 4H, CH2CH2COOH および H-4'
), 1.71-1.78 (m, 4H, H-5',6'). MS m/z 441.2.103 mg of 6- (2-methoxyphenyl) 5-2-oxindole, 95
mg of 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionic acid and piperidine (3 drops) in ethanol (2 mL)
The mixture therein was kept in a sealed tube at 90 ° C. for 4 hours. Concentrate the reaction mixture and add 6N
Acidified with hydrochloric acid. The precipitate is collected by filtration, washed with water and hexane,
67 mg of 3- {2- [6- (2-methoxyphenyl) -2-oxo-1,2-
Dihydroindole-3-ylidenemethyl] -4,5,6,7-tetrahydro-
1H-Indol-3-yl} -propionic acid was obtained as a brown solid (35% yield). 1 H NMR (d 6 -DMSO, 360 MHz): δ 13.26 (s, br, 1H, H1, 20, vr H OH) 10.71 (
s, br, 1H, NH-1), 7.67 (d, 7.7 Hz, 1H, H-4), 7.61 (s, 1H, H-vinyl), 7.2
7-7.34 (m, 2H,), 7.01-7.10 (m, 2H), 7.05 (dd, 1.2, 7.7 Hz, 1H, H-5), 6.9
9 (d, 1.2 Hz, 1H, H-7), 3.75 (s, 3H, OCH 3 ), 2.91 (t, 7.5 Hz, 2H, CH 2 CH 2 C
OOH), 2.68 (t, 7 Hz, 2H, H-7 '), 2.40-2.46 (m, 4H, CH 2 CH 2 COOH and H-4'
), 1.71-1.78 (m, 4H, H-5 ', 6'). MS m / z 441.2.

【０５８３】 実施例２０８：３−［２−（５−イソプロピルアミノスルホニル−２−オキソ−
１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸 ２７ｍＬのクロロスルホン酸を入れた１００ｍＬのフラスコに，１３．３ｇの
２−オキシインドールをゆっくり加えた。添加の間，反応温度は３０℃未満に維
持した。添加後，反応混合物を室温で１．５時間撹拌し，６８℃に加熱し，さら
に１時間撹拌し，冷却し，水に注加した。沈殿物を水で洗浄し，真空オーブン中
で乾燥して，１１．０ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドール（５０
％収率）を得，これをさらに精製することなく用いた。Example 208: 3- [2- (5-Isopropylaminosulfonyl-2-oxo-
1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid In a 100 mL flask containing 27 mL of chlorosulfonic acid was added 13.3 g of 2-Oxindole was added slowly. During the addition, the reaction temperature was kept below 30 ° C. After the addition, the reaction mixture was stirred at room temperature for 1.5 hours, heated to 68 ° C., stirred for another 1 hour, cooled and poured into water. The precipitate was washed with water, dried in a vacuum oven and dried with 11.0 g of 5-chlorosulfonyl-2-oxindole (50 g).
% Yield) which was used without further purification.

【０５８４】 ３ｇの５−クロロスルホニル−２−オキシインドール，１．１５ｇのイソプロ
ピルアミンおよび１．２ｍＬのピリジンの５０ｍＬのジクロロメタン中の懸濁液
を室温で４時間撹拌し，このとき白色固体が存在した。固体を真空濾過により回
収し，熱エタノールでスラリー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，４０℃
で真空乾燥して，１．５ｇ（４５％）の５−イソプロピルアミノ−スルホニル−
２−オキシインドールを得た。1 H NMR (d6-DMSO, 300 MHz) δ 10.69 (s, br, 1H, NH), 7.63 (dd, 1.8 Hz, 1H
, H-6), 7.59 (d, 1 Hz, 1H, H-4), 7.32 (d, 7 Hz, 1H, NH-SO2-), 6.93 (d, 8
Hz, 1H, H-7), 3.57 (s, 2H, H-3), 3.14-3.23 (m, 1H, CH-(CH3)2), 0.94 (d,
7 Hz, 6H, CH3).A suspension of 3 g of 5-chlorosulfonyl-2-oxindole, 1.15 g of isopropylamine and 1.2 mL of pyridine in 50 mL of dichloromethane was stirred at room temperature for 4 hours, when a white solid was present. did. The solids are collected by vacuum filtration, slurry washed with hot ethanol, cooled, collected by vacuum filtration, and
And dried under vacuum with 1.5 g (45%) of 5-isopropylamino-sulfonyl-
2-Oxindole was obtained. 1 H NMR (d 6 -DMSO, 300 MHz) δ 10.69 (s, br, 1H, NH), 7.63 (dd, 1.8 Hz, 1H
, H-6), 7.59 (d, 1 Hz, 1H, H-4), 7.32 (d, 7 Hz, 1H, N H -SO 2- ), 6.93 (d, 8
Hz, 1H, H-7), 3.57 (s, 2H, H-3), 3.14-3.23 (m, 1H, C H- (CH 3 ) 2 ), 0.94 (d,
7 Hz, 6H, CH 3 ).

【０５８５】 （２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル）−プロピオン酸（５．４ｇ），５．７ｇの５−イソプロピルアミノ−スルホ
ニル−２−オキシインドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノー
ル中の混合物を４時間還流した。酢酸（８ｍＬ）を加えると，沈殿物が形成した
。混合物を５分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し
，２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中でスラ
リー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，
真空乾燥して，８．１ｇ（８０％収率）の３−［２−（５−イソプロピルアミノ
−スルホニル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ン酸を橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.3 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 8.1, 7.5, 7.3, 7.0 (m, それぞれ 4H, 芳香族), 7.7 (s,
1H, -CH=), 2.3 (m, 1H, -CH-), 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.4
(m, 4H, -CH2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-), 0.9 (d, 6H, CH3). MS m/z 458. (2-Formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionic acid (5.4 g), 5.7 g of 5-isopropylamino-sulfonyl-2-oxindole And a mixture of 2.7 g of piperidine in 25 mL of ethanol was refluxed for 4 hours. Upon addition of acetic acid (8 mL), a precipitate formed. The mixture was refluxed for 5 minutes and cooled to ambient temperature. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of ethanol. The solid is slurry washed in 30 mL of refluxing ethanol, cooled, collected by vacuum filtration, washed with 30 mL of ethanol,
Vacuum dried to give 8.1 g (80% yield) of 3- [2- (5-isopropylamino-sulfonyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6. 7-Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid was obtained as an orange solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.3 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 8.1, 7.5, 7.3, 7.0 (m, 4H each, aromatic), 7.7 (s,
1H, -CH =), 2.3 ( m, 1H, -CH-), 2.9, 2.7 (t, 4H each, -CH 2 CH 2 CO-), 2.4
(m, 4H, -CH 2- , -CH 2- ), 1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ), 0.9 (d, 6H, CH 3 ) .MS m / z 458.

【０５８６】 実施例２０９：３−［２−（６−モルホリン−４−イル−２−オキソ−１，２−
ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸 ４ｇの６−（モルホリン−４−イル）−２−オキシインドール，３．７５ｇの
３−（２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−
イル）プロピオン酸，および１．８ｍＬのピペリジンのエタノール（６０ｍＬ）
中の混合物を６時間還流した。反応混合物を濃縮し，６Ｎ塩酸でｐＨ６に酸性に
した。沈殿物を濾過により回収し，水で１回，酢酸エチルで２回，およびメタノ
ールで２回洗浄して，２．６ｇの３−［２−（６−モルホリン−４−イル−２−
オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４．５，６，７
−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］プロピオン酸を橙色固体として
得た（３４％収率）。1 H NMR (d6-DMSO, 360 MHz): δ 13.04 (s, br, 1H, NH-1'), 12.05 (s, vbr, 1
H, COOH), 10.60 (s, br, 1H, NH-1), 7.50 (d, 8.0 Hz, 1H, H-4), 7.39 (s, 1
H, H-ビニル), 6.60 (d, 8.0 Hz, 1H, H-5), 6.43 (s, 1H, H-7), 3.73 (d, 4.7
, 4H, H-2'', 6''), 3.09 (s, 4H, H-3'', 5''), 2.86 (t, 7.1 Hz, 2H, CH2CH2 COOH), 2.64 (s, br, 2H, H-7'), 2.37-2.43 (m, 4H, CH2CH2COOH および H-4')
, 1.71-1.75 (m, 4H, H-5',6'). MS m/z 422.3.Example 209: 3- [2- (6-morpholin-4-yl-2-oxo-1,2-
Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-
1H-Indol-3-yl] -propionic acid 4 g of 6- (morpholin-4-yl) -2-oxindole, 3.75 g of 3- (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H -Indole-3-
Yl) propionic acid, and 1.8 mL of piperidine in ethanol (60 mL)
The mixture therein was refluxed for 6 hours. The reaction mixture was concentrated and acidified to pH 6 with 6N hydrochloric acid. The precipitate was collected by filtration, washed once with water, twice with ethyl acetate, and twice with methanol to give 2.6 g of 3- [2- (6-morpholin-4-yl-2-yl).
Oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4.5,6,7
-Tetrahydro-1H-indol-3-yl] propionic acid was obtained as an orange solid (34% yield). 1 H NMR (d 6 -DMSO, 360 MHz): δ 13.04 (s, br, 1H, NH-1 '), 12.05 (s, vbr, 1
H, COOH), 10.60 (s, br, 1H, NH-1), 7.50 (d, 8.0 Hz, 1H, H-4), 7.39 (s, 1
H, H-vinyl), 6.60 (d, 8.0 Hz, 1H, H-5), 6.43 (s, 1H, H-7), 3.73 (d, 4.7
, 4H, H-2 '', 6 ''), 3.09 (s, 4H, H-3 '', 5 ''), 2.86 (t, 7.1 Hz, 2H, CH 2 CH 2 COOH), 2.64 (s , br, 2H, H-7 '), 2.37-2.43 (m, 4H, CH 2 CH 2 COOH and H-4')
, 1.71-1.75 (m, 4H, H-5 ', 6'). MS m / z 422.3.

【０５８７】 実施例２１０：３−［２−（５−クロロ−４−メチル−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−
１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸 ３．０ｇの４−メチル−２−オキシインドールの懸濁液をを５０ｍＬのアセト
ニトリル中で室温で撹拌しながら，３．３ｇのＮ−クロロスクシンイミドを少し
ずつ加えた。次にトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を加えた。白色沈殿物が形成した
。懸濁液を室温で３日間撹拌した。白色固体を真空濾過により回収し，少量の冷
アセトンで洗浄し，真空オーブンで４０℃で一夜乾燥して，２．５ｇ（６８％）
の５−クロロ−４−メチル−２−オキシインドールを得た。Example 210: 3- [2- (5-Chloro-4-methyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-
1H-Indol-3-yl] -propionic acid While stirring a suspension of 3.0 g of 4-methyl-2-oxindole in 50 mL of acetonitrile at room temperature, 3.3 g of N-chlorosuccinimide was added slightly. Was added. Next, trifluoroacetic acid (1 mL) was added. A white precipitate formed. The suspension was stirred at room temperature for 3 days. The white solid is collected by vacuum filtration, washed with a small amount of cold acetone, dried in a vacuum oven at 40 ° C. overnight, 2.5 g (68%)
Of 5-chloro-4-methyl-2-oxindole.

【０５８８】 （２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル）−プロピオン酸（５．４ｇ），４．０ｇの５−クロロ−４−メチル−２−オ
キシインドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物
を４時間還流した。酢酸（８ｍＬ）を加えると沈殿物が形成した。混合物を５分
間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬのエ
タノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノールでスラリー洗浄し，冷却
し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，６
．８ｇ（８０％）の３−（２−（５−クロロ−４−メチル−２−オキソ−１，２
−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を橙色固体として得た。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.6 (s, 1H, -CH=), 7.3, 6.7(m, それぞれ 2H, 芳香族),
2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.7 (s, 3H, CH3), 2.4(m, 4H, -CH2 -, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-).(2-Formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionic acid (5.4 g), 4.0 g of 5-chloro-4-methyl-2-oxy A mixture of indole and 2.7 g of piperidine in 25 mL of ethanol was refluxed for 4 hours. A precipitate formed upon addition of acetic acid (8 mL). The mixture was refluxed for 5 minutes and cooled to ambient temperature. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of ethanol. The solid was slurry washed with 30 mL of refluxing ethanol, cooled, collected by vacuum filtration, washed with 30 mL of ethanol, dried in vacuo,
. 8 g (80%) of 3- (2- (5-chloro-4-methyl-2-oxo-1,2).
-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid was obtained as an orange solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.1 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.6 (s, 1H, -CH =), 7.3, 6.7 (m, 2H each, aromatic),
2.9, 2.7 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-), 2.7 (s, 3H, CH 3 ), 2.4 (m, 4H, -CH 2- , -CH 2- ), 1.7 (m, 4H , -CH 2 CH 2- ).

【０５８９】 実施例２１１：３−［２−（５−ブロモ−４−メチル−２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１
Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸 （２−ホルミル−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル）−プロピオン酸（５．４ｇ），５．０ｇの５−ブロモ−４−メチル−２−オ
キシインドールおよび２．７ｇのピペリジンの２５ｍＬのエタノール中の混合物
を４時間還流した。酢酸（８ｍＬ）をゆっくり加え，沈殿物が形成した。混合物
を５分間還流し，周囲温度に冷却した。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍ
Ｌエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中でスラリー洗浄し
，冷却し，真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥し
て，７．６ｇ（８０％）の３−［２−（５−ブロモ−４−メチル−２−オキソ−
１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオン酸を赤橙色固体として得た
。1 H NMR (d6-DMSO): δ 13.1 (s, 1H, ピロール NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.8 (s, 1H, -CH=), 7.3, 6.7, (m, それぞれ 2H, 芳香族)
, 2.9, 2.7 (t, それぞれ 4H, -CH2CH2CO-), 2.7 (s, 3H, CH3), 2.4 (m, 4H -C
H2-, -CH2-), 1.7 (m, 4H, -CH2CH2-). MS: m/z 427,429.Example 211: 3- [2- (5-bromo-4-methyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1
H-Indol-3-yl] -propionic acid (2-formyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) -propionic acid (5.4 g), 5.0 g of 5-bromo A mixture of -4-methyl-2-oxindole and 2.7 g of piperidine in 25 mL of ethanol was refluxed for 4 hours. Acetic acid (8 mL) was added slowly and a precipitate formed. The mixture was refluxed for 5 minutes and cooled to ambient temperature. The precipitate is collected by vacuum filtration and
Washed with L ethanol. The solid was slurry washed in 30 mL of refluxing ethanol, cooled, collected by vacuum filtration, washed with 30 mL of ethanol, dried in vacuo, and 7.6 g (80%) of 3- [2- (5-bromo). -4-methyl-2-oxo-
1,2-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid was obtained as a red-orange solid. 1 H NMR (d 6 -DMSO): δ 13.1 (s, 1H, pyrrole NH), 12.0 (br s, 1H, COOH), 1
0.7 (s, 1H, CONH), 7.8 (s, 1H, -CH =), 7.3, 6.7, (m, 2H each, aromatic)
, 2.9, 2.7 (t, 4H, -CH 2 CH 2 CO-), 2.7 (s, 3H, CH 3 ), 2.4 (m, 4H -C
H 2- , -CH 2- ), 1.7 (m, 4H, -CH 2 CH 2- ). MS: m / z 427,429.

【０５９０】 実施例２１２：３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イルエチル）−プロピオンアミド ３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオン酸（１２．３ｇ）を１５０ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解し
た。カルボニルジイミダゾール（６．３９）を加え，混合物を周囲温度で１時間
撹拌した。４−（２−アミノエチル）モルホリン（７．７ｇ）および３０ｍＬの
ジメチルホルムアミドを加え，室温で一夜撹拌を続けた。５０ｍＬの水を混合物
に加え，１０分間撹拌を続けた。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬの水
で，次に２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中
で５分間スラリー洗浄し，室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，２０
ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，１２．５ｇ（８０％）の３−［２−
（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−（２
−モルホリン−４−イルエチル）−プロピオンアミドを得た。Example 212: 3- [2- (5-Bromo-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl ] -N- (2-morpholin-4-ylethyl) -propionamide 3- [2- (5-bromo-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7- Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid (12.3 g) was dissolved in 150 mL of dimethylformamide. Carbonyl diimidazole (6.39) was added and the mixture was stirred at ambient temperature for 1 hour. 4- (2-Aminoethyl) morpholine (7.7 g) and 30 mL of dimethylformamide were added and stirring was continued at room temperature overnight. 50 mL of water was added to the mixture and stirring was continued for 10 minutes. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 20 mL of water and then with 20 mL of ethanol. The solid was slurry washed in 30 mL of refluxing ethanol for 5 minutes and cooled to room temperature. The solid is collected by vacuum filtration and
Wash with mL of ethanol, dry in vacuo and 12.5 g (80%) of 3- [2-
(5-bromo-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -N- (2
-Morpholin-4-ylethyl) -propionamide was obtained.

【０５９１】 実施例２１３：３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イルエチル）−プロピオンアミド ３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオン酸（１１ｇ）を１５０ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。
カルボニルジイミダゾール（６．３ｇ）を加え，混合物を周囲温度で１時間撹拌
した。４−（２−アミノエチル）モルホリン（７．７ｇ）および３０ｍＬのジメ
チルホルムアミドを加え，室温で一夜撹拌を続けた。５０ｍＬの水を混合物に加
え，１０分間撹拌を続けた。沈殿物を真空濾過により回収し，２０ｍＬの水で，
次に２０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を３０ｍＬの還流エタノール中で５
分間スラリー洗浄し，室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，２０ｍＬ
のエタノールで洗浄し，真空乾燥して，１１．５ｇ（８０％）の３−［２−（５
−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−
４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−（２−モ
ルホリン−４−イルエチル）−プロピオンアミドを得た。Example 213: 3- [2- (5-Chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl ] -N- (2-morpholin-4-ylethyl) -propionamide 3- [2- (5-chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7- Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid (11 g) was dissolved in 150 mL of dimethylformamide.
Carbonyl diimidazole (6.3 g) was added and the mixture was stirred at ambient temperature for 1 hour. 4- (2-Aminoethyl) morpholine (7.7 g) and 30 mL of dimethylformamide were added and stirring was continued at room temperature overnight. 50 mL of water was added to the mixture and stirring was continued for 10 minutes. The precipitate is collected by vacuum filtration and with 20 mL of water,
Then, it was washed with 20 mL of ethanol. The solid was washed with 5 mL of refluxing ethanol in 5 mL.
The slurry was washed for 5 minutes and cooled to room temperature. Collect the solid by vacuum filtration, 20 mL
Of ethanol and dried in vacuo to give 11.5 g (80%) of 3- [2- (5
-Chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl)-
4,5,6,7-Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -N- (2-morpholin-4-ylethyl) -propionamide was obtained.

【０５９２】 実施例２１４：３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イ
リデンメチル）−フェニル］−プロピオン酸 １００ｍＬのジクロロメタン中の１３．４ｇのフタル酸ジカルボキシアルデヒ
ドの溶液に，３５ｇのエチル（トリフェニルホスホランイリデン）アセテートを
５分間かけて少しずつ加えた。反応混合物を室温で一夜撹拌し，濃縮した。残渣
を５００ｍＬのヘキサン：酢酸エチルの６：１混合物中で１時間撹拌した。固体
を濾過により除去し，濾液を濃縮した。生成物をシリカゲルカラムでクロマトグ
ラフィーを行い，１０ｇのエチル３−（２−ホルミルフェニル）プロペネートを
ＥおよびＺ異性体の混合物として得た。Example 214: 3- [2- (2-Oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -phenyl] -propionic acid Solution of 13.4 g of dicarboxaldehyde phthalate in 100 mL of dichloromethane To this was added 35 g of ethyl (triphenylphosphoranylidene) acetate in portions over 5 minutes. The reaction mixture was stirred at room temperature overnight and concentrated. The residue was stirred in 500 mL of a 6: 1 mixture of hexane: ethyl acetate for 1 hour. The solid was removed by filtration and the filtrate was concentrated. The product was chromatographed on a silica gel column to give 10 g of ethyl 3- (2-formylphenyl) propenate as a mixture of E and Z isomers.

【０５９３】 上述の混合物を１００ｍｇの５％パラジウム担持炭素を含有する１００ｍＬの
酢酸エチルに溶解し，水素（バルーン圧）下で１０時間撹拌した。混合物をセラ
イトのベッドを通して濾過し，酢酸エチルで洗浄した。合わせた濾液を濃縮して
，８ｇのエチル３−（２−ホルミルフェニル）プロピオネートを得た。The above mixture was dissolved in 100 mL of ethyl acetate containing 100 mg of 5% palladium on carbon and stirred under hydrogen (balloon pressure) for 10 hours. The mixture was filtered through a bed of celite and washed with ethyl acetate. The combined filtrate was concentrated to give 8 g of ethyl 3- (2-formylphenyl) propionate.

【０５９４】 １ｇのエチル３−（２−ホルミルフェニル）プロペネート，５００ｍｇのオキ
シインドールおよび０．１ｍＬのピペリジンの５ｍＬのエタノール中の混合物を
９０℃で一夜撹拌した。混合物を蒸発させ，シリカゲルカラムで精製して，４５
０ｍｇのエチル（Ｅ）−３−［（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３
−イリデンメチル）フェニル］−プロピオネートを得た（Ｍ＋ｌ＝３２２）。A mixture of 1 g ethyl 3- (2-formylphenyl) propenate, 500 mg oxindole and 0.1 mL piperidine in 5 mL ethanol was stirred at 90 ° C. overnight. The mixture was evaporated and purified on a silica gel column to give 45%
0 mg of ethyl (E) -3-[(2-oxo-1,2-dihydroindole-3
-Ylidenemethyl) phenyl] -propionate was obtained (M + l = 322).

【０５９５】 ３ｍＬのエタノール中の３００ｍｇのエチル（Ｅ）−３−［（２−オキソ−１
，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）フェニル］−プロピオネート
に，２ｍＬの２Ｎ水酸化ナトリウムを加えた。混合物を９０℃で２時間撹拌し，
冷却し，６Ｎ塩酸でｐＨ３に酸性にした。固体を濾過により回収し，冷エタノー
ルで洗浄して，３０ｍｇの３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドー
ル−３−イリデンメチル）−フェニル］−プロピオン酸を黄色固体として得た。 1 H NMR (d6-DMSO): δ 12.1 (s, 1H, COOH),10.6 (S, 1H, CONH), 7.7 (s, 1H,
=CH) 7.6, 7.4, 7.3, 7.2, 7.0, 6.8 ,6.7 (m, 8H, 芳香族), 2.9, 2.5 (t, そ
れぞれ 4H, CH2CH2). MS: m/z 294.[0595] 300 mg of ethyl (E) -3-[(2-oxo-1) in 3 mL of ethanol.
, 2-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) phenyl] -propionate
To the mixture was added 2 mL of 2N sodium hydroxide. The mixture was stirred at 90 ° C. for 2 hours,
Cooled and acidified to pH 3 with 6N hydrochloric acid. The solids are collected by filtration and cold ethanol
And washed with 30 mg of 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydroindole).
[Ru-3-ylidenemethyl) -phenyl] -propionic acid was obtained as a yellow solid. 1 H NMR (d6-DMSO): δ 12.1 (s, 1H, COOH), 10.6 (S, 1H, CONH), 7.7 (s, 1H,
= CH) 7.6, 7.4, 7.3, 7.2, 7.0, 6.8, 6.7 (m, 8H, aromatic), 2.9, 2.5 (t,
4H, CH respectivelyTwoCHTwo). MS: m / z 294.

【０５９６】 実施例２１５：３−［４−メチル−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸 ３，５−ジメチル−４−（２−メトキシカルボニルエチル）−１Ｈ−ピロール
−２−カルボン酸エチルエステル（１２７ｇ）を酢酸（１９００ｍＬ），水（１
９００ｍＬ）およびテトラヒドロフラン（１９００ｍＬ）に溶解し，−３０℃に
冷却した。硝酸第二セリウムアンモニウム（１０９７ｇ）を撹拌しながら少しず
つ加え，赤みを帯びた橙色懸濁液を得た。懸濁液を０℃で２時間撹拌し，炭酸水
素ナトリウムで中和してｐＨ７とし，酢酸エチル（２０００ｍＬ）で抽出した。
酢酸エチル層を分離し，ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し，無水硫酸ナトリウム
（２０ｇ）で乾燥した。溶媒を除去して，８０．２ｇ（６０％）の５−ホルミル
−４−（２−メトキシ−カルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２
−カルボン酸エチルエステルを油状物として得た。Example 215: 3,5-Dimethyl- 3- [4-methyl-2- (2-oxo-l, 2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -lH-pyrrol-3-yl] -propionic acid. 4- (2-Methoxycarbonylethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (127 g) was treated with acetic acid (1900 mL) and water (1
900 mL) and tetrahydrofuran (1900 mL) and cooled to -30 ° C. Cerium ammonium nitrate (1097 g) was added little by little with stirring to obtain a reddish orange suspension. The suspension was stirred at 0 ° C. for 2 hours, neutralized with sodium bicarbonate to pH 7, and extracted with ethyl acetate (2000 mL).
The ethyl acetate layer was separated, washed with brine (200mL) and dried over anhydrous sodium sulfate (20g). The solvent was removed and 80.2 g (60%) of 5-formyl-4- (2-methoxy-carbonylethyl) -3-methyl-1H-pyrrole-2.
-Ethyl carboxylate was obtained as an oil.

【０５９７】 ５−ホルミル−４−（２−メトキシカルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（８０．２ｇ），２−オキシインドー
ル（３７．９ｇ）およびエタノール（３００ｍＬ）を，機械的撹拌および還流冷
却器を備えた５００ｍＬの三ツ口丸底フラスコ中で７０℃に暖めた。ピペリジン
（１．３ｇ）を加え，混合物を４時間還流した。混合物を１０℃に冷却し，橙色
沈殿物を真空濾過により回収し，３０ｍＬのエタノールで洗浄した。固体を１５
０ｍＬの還流エタノール中でスラリー洗浄し，冷却し，真空濾過により回収し，
３０ｍＬのエタノールで洗浄し，真空乾燥して，８１．７ｇ（７５％）の４−（
２−メトキシカルボニルエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エ
チルエステルを橙色固体として得た。5-Formyl-4- (2-methoxycarbonylethyl) -3-methyl-1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (80.2 g), 2-oxindole (37.9 g) and ethanol (300 mL) were added at 70 ° C. in a 500 mL three-necked round bottom flask equipped with mechanical stirring and a reflux condenser. Warmed up. Piperidine (1.3 g) was added and the mixture was refluxed for 4 hours. The mixture was cooled to 10 ° C. and the orange precipitate was collected by vacuum filtration and washed with 30 mL of ethanol. 15 solids
Slurry wash in 0 mL refluxing ethanol, cool, collect by vacuum filtration,
Wash with 30 mL of ethanol, dry under vacuum and dry 81.7 g (75%) of 4- (
2-methoxycarbonylethyl) -3-methyl-5- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester was obtained as an orange solid.

【０５９８】 ４−（２−メトキシカルボニルエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ−１
，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カ
ルボン酸エチルエステル（８１．７ｇ）），５６．５ｇの水酸化カリウム，２０
０ｍＬのエタノールおよび２００ｍＬの水を，機械的撹拌および温度計を備えた
１Ｌの三ツ口丸底フラスコに入れた。混合物を９０℃で９０分間撹拌し，室温に
冷却し，酢酸で沈殿物が形成するまで酸性にした。沈殿物を真空濾過により回収
し，５０ｍＬの水で洗浄し，真空乾燥して，６９．１ｇ（８５％）の４−（２−
カルボキシエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を赤色固体とし
て得た。4- (2-methoxycarbonylethyl) -3-methyl-5- (2-oxo-1
, 2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (81.7 g), 56.5 g potassium hydroxide, 20
0 mL of ethanol and 200 mL of water were placed in a 1 L 3-neck round bottom flask equipped with mechanical stirring and a thermometer. The mixture was stirred at 90 ° C. for 90 minutes, cooled to room temperature and acidified with acetic acid until a precipitate formed. The precipitate was collected by vacuum filtration, washed with 50 mL of water, dried in vacuo and 69.1 g (85%) of 4- (2-
Carboxyethyl) -3-methyl-5- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid was obtained as a red solid.

【０５９９】 ５０ｍＬのエチレングリコール（ｂ．ｐ．１９８℃）に懸濁した４−（２−カ
ルボキシエチル）−３−メチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドー
ル−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（１０ｇ）を１Ｌ
の加圧反応器中に密封し，反応器を窒素で１２０ｐｓｉに加圧し，次に１５０℃
に３時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し，次に５０ｍＬの水で希釈した。
得られた沈殿物を真空濾過により回収し，１００ｍＬの水で２回洗浄して，３−
［４−メチル−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデン
メチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸と３−［４−メチル−２
−（２−オキソ−ｌ，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−
ピロール−３−イル］−プロピオン酸２−ヒドロキシエチルエステルとの混合物
を暗橙色固体として得た。この固体は乾燥せずに次の工程で用いた。1 H NMR (d6-DMSO) δ 13.3 (s, br, 1H, NH), 10.77 (s, 1 H, NH), 7.6 (s, 1
H, H-ビニル), 7.67, 7.08, 6.97, 6.85 (m, 4 H, Ar-H), 4.73 (t, J = 6Hz, 1
H, OH), 3.97-4.0 (m, 2H, CH2), 3.5-3.55 (m, 2 H, CH2), 2.98 (t, J = 7.5
Hz, 2 H, CH2), 2.51 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.04 (s, 3 H, CH3). MS m/z 341 (M+1).4- (2-Carboxyethyl) -3-methyl-5- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) suspended in 50 mL of ethylene glycol (bp 198 ° C.) 1 L of -1H-pyrrole-2-carboxylic acid (10 g)
And pressurized the reactor to 120 psi with nitrogen, then 150 ° C.
For 3 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and then diluted with 50 mL of water.
The resulting precipitate was collected by vacuum filtration, washed twice with 100 mL of water,
[4-methyl-2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid and 3- [4-methyl-2
-(2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-
A mixture with [pyrrole-3-yl] -propionic acid 2-hydroxyethyl ester was obtained as a dark orange solid. This solid was used in the next step without drying. 1 H NMR (d 6 -DMSO) δ 13.3 (s, br, 1H, NH), 10.77 (s, 1 H, NH), 7.6 (s, 1
(H, H-vinyl), 7.67, 7.08, 6.97, 6.85 (m, 4 H, Ar-H), 4.73 (t, J = 6Hz, 1
H, OH), 3.97-4.0 (m, 2H, CH 2 ), 3.5-3.55 (m, 2 H, CH 2 ), 2.98 (t, J = 7.5
Hz, 2 H, CH 2 ), 2.51 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.04 (s, 3 H, CH 3 ). MS m / z 341 (M + 1).

【０６００】 ５００ｍＬの三ツ口丸底フラスコ中の，３−［４−メチル−２−（２−オキソ
−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−
イル］−プロピオン酸および３−［４−メチル−２−（２−オキソ−１，２−ジ
ヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸２−ヒドロキシエチルエステル，１．９ｇの水酸化カリウム，５０ｍＬ
の水，および５０ｍＬのエタノールを７０℃で１時間撹拌した。混合物を室温に
冷却し，２Ｎ塩酸で沈殿物が形成するまで酸性にした。沈殿物を真空濾過により
回収し，エタノール：水混合物（１：１，１００ｍＬ）で洗浄した。固体を酢酸
エチル：エタノール混合物（１：１，１００ｍＬ）で７０℃で３０分間スラリー
洗浄し，次に室温に冷却した。生成物を真空濾過により回収し，４０℃で一夜真
空乾燥して，７．８ｇ（９０％総収率）の３−［４−メチル−２−（２−オキソ
−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−
イル］−プロピオン酸を暗橙色固体として得た。（Ｒ．Ｂ．Ｗｏｏｄｗａｒｄ
ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １９９０，４６（２２），７５９９−
７６５９）。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.28 (s, br, 1 H, NH), 12.05 (s, 1 H, COOH), 10.78 (
s, 1 H, NH), 7.68 (d, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H), 7.64 (s, 1 H, H-ビニル), 7.1
1 (t, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H), 7.11 (s, 1 H), 6.97 (t, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H)
, 6.86 (d, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H), 2.94 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.41 (t
, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.04 (s, 3H, CH3).In a 500 mL three-necked round bottom flask, 3- [4-methyl-2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-3-
Yl] -propionic acid and 3- [4-methyl-2- (2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid 2-hydroxyethyl ester, 1 .9 g of potassium hydroxide, 50 mL
Of water and 50 mL of ethanol were stirred at 70 ° C. for 1 hour. The mixture was cooled to room temperature and acidified with 2N hydrochloric acid until a precipitate formed. The precipitate was collected by vacuum filtration and washed with an ethanol: water mixture (1: 1, 100 mL). The solid was slurry washed with an ethyl acetate: ethanol mixture (1: 1, 100 mL) at 70 ° C. for 30 minutes, then cooled to room temperature. The product was collected by vacuum filtration, dried in vacuo at 40 ° C. overnight and 7.8 g (90% overall yield) of 3- [4-methyl-2- (2-oxo-1,2-dihydroindole- 3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-3-
Yl] -propionic acid was obtained as a dark orange solid. (RB Woodward
et al. , Tetrahedron 1990, 46 (22), 7599-
7659). 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ 13.28 (s, br, 1 H, NH), 12.05 (s, 1 H, COOH), 10.78 (
s, 1 H, NH), 7.68 (d, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H), 7.64 (s, 1 H, H-vinyl), 7.1
1 (t, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H), 7.11 (s, 1 H), 6.97 (t, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H)
, 6.86 (d, J = 7 Hz, 1 H, Ar-H), 2.94 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.41 (t
, J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.04 (s, 3H, CH 3 ).

【０６０１】 実施例２１６：３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸 エタノール（２ｍＬ）中の，５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエ
チル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１
ｍｇ），５−クロロ−２−オキシインドール（１６８ｍｇ），およびピペリジン
（２滴）を２時間還流した。反応混合物を冷却し，形成した沈殿物を濾過し，エ
タノールおよびヘキサンで洗浄し，乾燥して，３６９ｍｇ（８６％）の４−（２
−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−５−（５−クロロ−２−オキソ−
１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−
カルボン酸エチルエステルを淡黄色針状結晶として得た。Example 216: 3- [2- (5-Chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid ethanol ( 5-formyl-4- (2-ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (281
mg), 5-chloro-2-oxindole (168 mg), and piperidine (2 drops) were refluxed for 2 hours. The reaction mixture was cooled and the precipitate formed was filtered, washed with ethanol and hexane, dried and 369 mg (86%) of 4- (2
-Ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-5- (5-chloro-2-oxo-
1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-
Ethyl carboxylate was obtained as pale yellow needles.

【０６０２】 ４−（２−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−５−（５−クロロ−２
−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロー
ル−２−カルボン酸エチルエステル（３４６ｍｇ）および水酸化カリウム（５６
０ｍｇ）のエタノール（５ｍＬ）中の混合物を９５℃に加熱し，次に冷却した。
このとき，赤色結晶が形成した。結晶を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性に
した。沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，２９９ｍ
ｇ（１００％）の４−（２−カルボキシエチル）−３−メチル−５−（５−クロ
ロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸を褐色固体として得た。4- (2-ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-5- (5-chloro-2
-Oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (346 mg) and potassium hydroxide (56
(0 mg) in ethanol (5 mL) was heated to 95 ° C. and then cooled.
At this time, red crystals were formed. The crystals were dissolved in water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate is filtered, washed with water and dried in a vacuum oven overnight, 299 m
g (100%) of 4- (2-carboxyethyl) -3-methyl-5- (5-chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid was obtained as a brown solid.

【０６０３】 エチレングリコール（５ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３
−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を，密封管中で，予熱し
た油浴中で２００℃で２時間加熱した。反応混合物を９０℃に冷却し，水酸化カ
リウム（２ペレット）を加えた。次に混合物を９０℃で３０分間加熱し，その後
冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。形成した沈殿物を濾過し
，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，７７ｍｇ（２９％）の３−［２
−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチ
ル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.31 (s, br. 1 H, NH), 12.05 (s, 1 H, COOH), 10.89(s
, br, 1 H, NH), 7.85 (d, J = 2 Hz, 1 H, H-4), 7.75 (s, 1 H, H-ビニル), 7
.16 (d, J = 3 Hz, 1 H), 7.11 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 6.84 (d, J = 8
Hz, 1 H, H-7), 2.97 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.41 (t, J = 7.5 Hz, 2 H,
CH2), 2.04 (s, 3 H, CH3). MS m/z 331 (M+1).4- (2-carboxyethyl)-suspended in ethylene glycol (5 mL)
3-methyl-5- (5-chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3
-Ilidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid was heated in a sealed tube at 200 ° C. for 2 hours in a preheated oil bath. The reaction mixture was cooled to 90 ° C. and potassium hydroxide (2 pellets) was added. The mixture was then heated at 90 ° C. for 30 minutes, then cooled, poured into water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate formed was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight and 77 mg (29%) of 3- [2
There was obtained-(5-chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ 13.31 (s, br. 1 H, NH), 12.05 (s, 1 H, COOH), 10.89 (s
, br, 1 H, NH), 7.85 (d, J = 2 Hz, 1 H, H-4), 7.75 (s, 1 H, H-vinyl), 7
.16 (d, J = 3 Hz, 1 H), 7.11 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 6.84 (d, J = 8
Hz, 1 H, H-7), 2.97 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.41 (t, J = 7.5 Hz, 2 H,
CH 2 ), 2.04 (s, 3 H, CH 3 ). MS m / z 331 (M + 1).

【０６０４】 実施例２１７：３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロイン
ドール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プ
ロピオン酸 エタノール（４ｍＬ）中の，５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエ
チル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（５９１
ｍｇ），６−メトキシ−２−オキシインドール（３３３ｍｇ）およびピペリジン
（０．１ｍＬ）を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（５３７ｍｇ）を混
合物に加え，次にこれを９５℃でさらに１時間撹拌した。反応混合物を冷却し，
濃縮し，水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗
浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，７３０ｍｇ（９９％）の４−（２−カル
ボキシエチル）−３−メチル−５−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒ
ドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を得
た。Example 217: 3- [2- (6-Methoxy-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid ethanol ( 5-formyl-4- (2-ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (591) in 4 mL).
mg), 6-methoxy-2-oxindole (333 mg) and piperidine (0.1 mL) were stirred at 90 ° C. for 2 hours. Potassium hydroxide (537 mg) was added to the mixture, which was then stirred at 95 ° C. for another hour. Cooling the reaction mixture,
Concentrated, dissolved in water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight and 730 mg (99%) of 4- (2-carboxyethyl) -3-methyl-5- (6-methoxy-2-oxo- (1,2-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid was obtained.

【０６０５】 エチレングリコール（１０ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）
−３−メチル−５−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール
−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（５０１ｍｇ）を，
密封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間加熱した。反応混合物を９０℃
に冷却し，水酸化カリウム（２ペレット）を加えた。次に混合物を９０℃で３０
分間撹拌し，その後冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿
物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，２２１ｍｇ（４８％
）の３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−
３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン
酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.09 (s, 1 H, NH), 12.05 (s, 1 H, COOH), 10.74 (s, 1
H, NH), 7.58 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.48 (s, 1 H, H-ビニル), 7.04 (d,
J = 2 Hz, 1 H), 6.56 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-5), 6.43 (d, J = 2 Hz, 1 H
), 3.75 (s, 3 H, OCH3), 2.91 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.4 (t, J = 7.5
Hz, 2 H, CH2), 2.03 (s, 3 H, CH3). MS m/z 325 (M-1).4- (2-carboxyethyl) suspended in ethylene glycol (10 mL)
3-methyl-5- (6-methoxy-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid (501 mg)
Heated in a preheated oil bath at 200 ° C. for 2 hours in a sealed tube. 90 ° C reaction mixture
And potassium hydroxide (2 pellets) was added. The mixture is then heated at 90 ° C. for 30
Stirred for minutes, then cooled, poured into water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight and 221 mg (48%
)] 3- [2- (6-Methoxy-2-oxo-1,2-dihydro-indole-
3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid was obtained. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ 13.09 (s, 1 H, NH), 12.05 (s, 1 H, COOH), 10.74 (s, 1
H, NH), 7.58 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.48 (s, 1 H, H-vinyl), 7.04 (d,
J = 2 Hz, 1 H), 6.56 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-5), 6.43 (d, J = 2 Hz, 1 H
), 3.75 (s, 3 H, OCH 3 ), 2.91 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.4 (t, J = 7.5
Hz, 2 H, CH 2 ), 2.03 (s, 3 H, CH 3 ). MS m / z 325 (M-1).

【０６０６】 実施例２１８：３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸 ５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１ｍｇ），４−メチル−２−オ
キシインドール（１４７ｍｇ）およびピペリジン（２滴）のエタノール（２ｍＬ
）中の混合物を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（２１３ｍｇ）を加え
，温度を９５℃に上げ，ここで１時間保持した。反応混合物を冷却し，濃縮した
。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗
浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，３３７ｍｇ（９５％）の４−（２−カル
ボキシエチル）−３−メチル−５−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒド
ロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を得た
。Example 218: 3- [2- (4-Methyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid 5- Formyl-4- (2-ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (281 mg), 4-methyl-2-oxindole (147 mg) and piperidine (2 drops) in ethanol (2 mL)
)) Was stirred at 90 ° C. for 2 hours. Potassium hydroxide (213 mg) was added and the temperature was raised to 95 ° C. where it was held for 1 hour. The reaction mixture was cooled and concentrated. The residue was dissolved in water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight, and 337 mg (95%) of 4- (2-carboxyethyl) -3-methyl-5- (4-methyl-2-oxo- (1,2-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid was obtained.

【０６０７】 エチレングリコール（５ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３
−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（３００ｍｇ）を，密封
管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間加熱した。反応混合物を９０℃に冷
却し，水酸化カリウム（１ペレット）を加えた。次にこれを９０℃で３０分間撹
拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈
殿物を濾過し，水で洗浄し，シリカゲルカラムで精製して，１１５ｍｇ（４４％
収率）の３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−
３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン
酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.37 (s, 1 H, NH), 12.04 (s, 1 H, COOH), 10.81 (s, 1
H, NH), 7.69 (s, 1 H, H-ビニル), 7.09 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 7.01 (t, J
= 7.5 HZ, 1 H, Ar-H), 6.79 (d, J = 7.5 Hz, 1 H, Ar-H), 6.74 (d, J = 7.5
Hz, 1 H, Ar-H), 2.88 (t, J = 7.2 Hz, 2 H, CH2), 2.61 (s, 3 H, CH3-4), 2.
44 (t, J = 7.2 Hz, 2 H, CH2), 2.04 (s, 3 H, CH3). MS m/z 309 (M-1).4- (2-carboxyethyl)-suspended in ethylene glycol (5 mL)
3-methyl-5- (4-methyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3
-Ilidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid (300 mg) was heated in a sealed tube at 200 ° C. for 2 hours in a preheated oil bath. The reaction mixture was cooled to 90 ° C. and potassium hydroxide (1 pellet) was added. It was then stirred at 90 ° C. for 30 minutes. The reaction mixture was cooled, poured into water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water and purified on a silica gel column to give 115 mg (44%
Yield) of 3- [2- (4-methyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-
3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid was obtained. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ 13.37 (s, 1 H, NH), 12.04 (s, 1 H, COOH), 10.81 (s, 1
H, NH), 7.69 (s, 1 H, H-vinyl), 7.09 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 7.01 (t, J
= 7.5 HZ, 1 H, Ar-H), 6.79 (d, J = 7.5 Hz, 1 H, Ar-H), 6.74 (d, J = 7.5
Hz, 1 H, Ar-H), 2.88 (t, J = 7.2 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.61 (s, 3 H, CH 3 -4), 2.
44 (t, J = 7.2 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.04 (s, 3 H, CH 3 ). MS m / z 309 (M-1).

【０６０８】 実施例２１９：３−［２−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸 エタノール（２ｍＬ）中の，５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエ
チル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１
ｍｇ），６−クロロ−２−オキシインドール（１６８ｍｇ）およびピペリジン（
２滴）を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（５３７ｍｇ）を混合物に加
え，次にこれを９５℃でさらに１時間撹拌した。反応混合物を冷却し，濃縮した
。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗
浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，２７０ｍｇ（７２％）の４−（２−カル
ボキシ−エチル）−３−メチル−５−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒ
ドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を得
た。Example 219: 3- [2- (6-Chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid ethanol ( 5-formyl-4- (2-ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (281
mg), 6-chloro-2-oxindole (168 mg) and piperidine (
(2 drops) was stirred at 90 ° C. for 2 hours. Potassium hydroxide (537 mg) was added to the mixture, which was then stirred at 95 ° C. for another hour. The reaction mixture was cooled and concentrated. The residue was dissolved in water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight and 270 mg (72%) of 4- (2-carboxy-ethyl) -3-methyl-5- (6-chloro-2-oxo. -1,2-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid was obtained.

【０６０９】 エチレングリコール（５ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−
３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（２４０ｍｇ）を，密
封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間保持した。反応混合物を９０℃に
冷却し，水酸化カリウム（２ペレット）を加えた。次にこれを９０℃で３０分間
撹拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。
沈殿物を濾過し，水で洗浄し，シリカゲルカラムで酢酸エチル：ヘキサン：氷酢
酸５０：５０：１０を溶出剤として用いて精製して，４５ｍｇ（２１％）の３−
［２−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデン
メチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.2 (s, 1H, NH), 12.04 (s, 1 H, COOH), 10.92 (s, 1 H
, NH), 7.72 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.68 (s, 1 H, H-ビニル), 7.15 (d, J
= 2.4 HZ, 1 H), 7.01 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 6.86 (d, J = 2 Hz, 1 H
, H-7), 2.94 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.4 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2
.03 (s, 3 H, CH3). MS m/z 329 (M-1).4- (2-Carboxyethyl)-suspended in ethylene glycol (5 mL)
3-methyl-5- (6-chloro-2-oxo-1,2-dihydro-indole-
(3-Ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid (240 mg) was kept in a sealed tube at 200 ° C. for 2 hours in a preheated oil bath. The reaction mixture was cooled to 90 ° C. and potassium hydroxide (2 pellets) was added. It was then stirred at 90 ° C. for 30 minutes. The reaction mixture was cooled, poured into water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid.
The precipitate was filtered, washed with water and purified on a silica gel column using 50:50:10 ethyl acetate: hexane: glacial acetic acid as eluent to give 45 mg (21%) of 3-
[2- (6-Chloro-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid was obtained. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ 13.2 (s, 1H, NH), 12.04 (s, 1 H, COOH), 10.92 (s, 1 H
, NH), 7.72 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.68 (s, 1 H, H-vinyl), 7.15 (d, J
= 2.4 HZ, 1 H), 7.01 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 6.86 (d, J = 2 Hz, 1 H
, H-7), 2.94 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.4 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2
.03 (s, 3 H, CH 3 ). MS m / z 329 (M-1).

【０６１０】 実施例２２０：３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸 ５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１ｍｇ），５−ブロモ−２−オ
キシインドール（２２０ｍｇ），およびピペリジン（２滴）のエタノール（２ｍ
Ｌ）中の混合物を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（５３７ｍｇ）を加
え，温度を９５℃に１時間上昇させた。反応混合物を冷却し，濃縮した。残渣を
水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。形成した沈殿物を濾過し，水で洗
浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，４１１ｍｇ（９８％）の４−（２−カル
ボキシエチル）−３−メチル−５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒド
ロ−インドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を得
た。Example 220: 3- [2- (5-Bromo-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid 5- Formyl-4- (2-ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (281 mg), 5-bromo-2-oxindole (220 mg), and piperidine (2 drops) in ethanol (2 m
The mixture in L) was stirred at 90 ° C. for 2 hours. Potassium hydroxide (537 mg) was added and the temperature was raised to 95 ° C. for 1 hour. The reaction mixture was cooled and concentrated. The residue was dissolved in water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate formed was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight and 411 mg (98%) of 4- (2-carboxyethyl) -3-methyl-5- (5-bromo-2- Oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid was obtained.

【０６１１】 エチレングリコール（５ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−
３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（３８０ｍｇ）を，密
封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間保持した。反応混合物を９０℃に
冷却し，水酸化カリウム（１ペレット）を加えた。次にこれを９０℃で３０分間
撹拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。
沈殿物を濾過し，水で洗浄し，シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精
製して，１６８ｍｇ（４９％収率）の３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１
，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロー
ル−３−イル］−プロピオン酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.32 (s, 1 H, NH), 12.0 (s, 1 H, COOH), 10.9 (s, 1 H
, NH), 7.97 (d, J = 2 HZ, 1 H, h-4), 7.75 (s, 1 H, H-ビニル), 7.23 (dd,
v = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 7.16 (d, v = 2.6 Hz, 1 H), 6.8 (d, J = 8 Hz, 1 H,
H-7), 2.97 (t, J = 7.7 Hz, 2 H, CH2), 2.41 (t, J = 7.7 Hz, 2 H, CH2), 2
.04 (s, 3 H, CH3). MS m/z 375/377.4- (2-carboxyethyl)-suspended in ethylene glycol (5 mL)
3-methyl-5- (5-bromo-2-oxo-1,2-dihydro-indole-
(3-Ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid (380 mg) was kept in a sealed tube in a preheated oil bath at 200 ° C. for 2 hours. The reaction mixture was cooled to 90 ° C. and potassium hydroxide (1 pellet) was added. It was then stirred at 90 ° C. for 30 minutes. The reaction mixture was cooled, poured into water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid.
The precipitate was filtered, washed with water and purified using silica gel column chromatography to give 168 mg (49% yield) of 3- [2- (5-bromo-2-oxo-1).
, 2-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ 13.32 (s, 1 H, NH), 12.0 (s, 1 H, COOH), 10.9 (s, 1 H
, NH), 7.97 (d, J = 2 HZ, 1 H, h-4), 7.75 (s, 1 H, H-vinyl), 7.23 (dd,
v = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 7.16 (d, v = 2.6 Hz, 1 H), 6.8 (d, J = 8 Hz, 1 H,
H-7), 2.97 (t, J = 7.7 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.41 (t, J = 7.7 Hz, 2 H, CH 2 ), 2
.04 (s, 3 H, CH 3 ). MS m / z 375/377.

【０６１２】 実施例２２１：３−［２−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインド
ール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロ
ピオン酸 ５−メチルイサチン（１５．０ｇ）および６０ｍＬのヒドラジン水和物を１４
０−１６０℃に４時間加熱した。薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサ
ン１：２，シリカゲル）は，出発物質が残っていないことを示した。反応混合物
を室温に冷却し，３００ｍＬの氷水に注加し，６Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。
室温で２日間放置した後，沈殿物を真空濾過により回収し，水で洗浄し，真空下
で乾燥して，６．５ｇ（４７％）の５−メチル−２−オキシインドールを得た。 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.20 (s, br, 1 H, NH-1), 6.99 (s, 1 H, H-4)
, 6.94 (d, J = 8.11 Hz, 1 H, H-6), 6.68 (d, J = 8.11 Hz, 1 H, H-7), 3.39
(s, 2 H, CH2-3), および 2.22 (s, 3 H, CH3-5).Example 221: 3- [2- (5-Methyl-2-oxo-1,2-dihydroindo
-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -pro
5-Methylisatin pionate (15.0 g) and 60 mL of hydrazine hydrate were added to 14
Heated to 0-160 ° C for 4 hours. Thin layer chromatography (ethyl acetate: hexa
1: 2, silica gel) showed no starting material remained. Reaction mixture
Was cooled to room temperature, poured into 300 mL of ice water and acidified to pH 2 with 6N hydrochloric acid.
After standing at room temperature for 2 days, the precipitate is collected by vacuum filtration, washed with water, and dried under vacuum.
To give 6.5 g (47%) of 5-methyl-2-oxindole. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.20 (s, br, 1 H, NH-1), 6.99 (s, 1 H, H-4)
, 6.94 (d, J = 8.11 Hz, 1 H, H-6), 6.68 (d, J = 8.11 Hz, 1 H, H-7), 3.39
 (s, 2 H, CHTwo-3), and 2.22 (s, 3 H, CHThree-Five).

【０６１３】 エタノール（４ｍＬ）中の，５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエ
チル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（５６０
ｍｇ），５−メチル−２−オキシインドール（３００ｍｇ），およびピペリジン
（４滴）を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（５３７ｍｇ）を混合物に
加え，次にこれを９５℃でさらに１時間撹拌した。反応混合物を冷却し，濃縮し
た。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で
洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，４９６ｍｇの４−（２−カルボキシエ
チル）−３−メチル−５−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−イン
ドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を得た。[0613] Ethyl 5-formyl-4- (2-ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylate (560 mL) in ethanol (4 mL).
mg), 5-methyl-2-oxindole (300 mg), and piperidine (4 drops) were stirred at 90 ° C. for 2 hours. Potassium hydroxide (537 mg) was added to the mixture, which was then stirred at 95 ° C. for another hour. The reaction mixture was cooled and concentrated. The residue was dissolved in water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight and 496 mg of 4- (2-carboxyethyl) -3-methyl-5- (5-methyl-2-oxo-1,2- Dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid was obtained.

【０６１４】 エチレングリコール（２ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３
−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（４９６ｍｇ）を，密封
管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間保持した。反応混合物を９０℃に冷
却し，水酸化カリウム（１５７ｍｇ）を加えた。次にこれを９０℃で３０分間撹
拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈
殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，１２８ｍｇ（２９
％）の３−［２−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３
−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸
を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.31 (s, 1 H, NH), 12.07 (s, 1 H, COOH), 10.68 (s, 1
H, NH), 7.59 (s, 1 H), 7.51 (br s, 1 H, H-4), 7.09 (d, J = 2.7 Hz, 1H),
6.91 (br d, J = 8 HZ, 1 H, H-6), 6.73 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-7), 2.93 (t,
J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.41 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.3 (s, CH3-5),
2.04 (s, 3 H, CH3). MS m/z 311 (M+1).4- (2-Carboxyethyl)-suspended in ethylene glycol (2 mL)
3-methyl-5- (5-methyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3
-Ilidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid (496 mg) was kept in a sealed tube at 200 ° C. for 2 hours in a preheated oil bath. The reaction mixture was cooled to 90 ° C. and potassium hydroxide (157 mg) was added. It was then stirred at 90 ° C. for 30 minutes. The reaction mixture was cooled, poured into water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight, and treated with 128 mg (29
%) Of 3- [2- (5-methyl-2-oxo-1,2-dihydroindole-3).
-Ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ 13.31 (s, 1 H, NH), 12.07 (s, 1 H, COOH), 10.68 (s, 1
H, NH), 7.59 (s, 1 H), 7.51 (br s, 1 H, H-4), 7.09 (d, J = 2.7 Hz, 1H),
6.91 (br d, J = 8 HZ, 1 H, H-6), 6.73 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-7), 2.93 (t,
J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.41 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.3 (s, CH 3 -5),
2.04 (s, 3 H, CH 3 ). MS m / z 311 (M + 1).

【０６１５】 実施例２２２：３−［２−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロイン
ドール−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プ
ロピオン酸 ５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（５６２ｍｇ），５−メトキシ−２−
オキシインドール（３２６ｍｇ），およびピペリジン（２滴）のエタノール（２
ｍＬ）中の混合物を９０℃で２時間撹拌した。水酸化カリウム（５３７ｍｇ）を
加え，温度を９５℃に上昇し，ここで１時間保持した。反応混合物を冷却し，濃
縮した。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，
水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，２４０ｍｇ（６５％）の４−（２
−カルボキシ−エチル）−３−メチル−５−（５−メトキシ−２−オキソ−１，
２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボ
ン酸を得た。Example 222: 3- [2- (5-Methoxy-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid 5- Formyl-4- (2-ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (562 mg), 5-methoxy-2-
Oxindole (326 mg) and piperidine (2 drops) in ethanol (2
(mL) was stirred at 90 ° C. for 2 hours. Potassium hydroxide (537 mg) was added and the temperature was raised to 95 ° C. where it was held for 1 hour. The reaction mixture was cooled and concentrated. The residue was dissolved in water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. Filter the precipitate,
Wash with water, dry in a vacuum oven overnight, and 240 mg (65%) of 4- (2
-Carboxy-ethyl) -3-methyl-5- (5-methoxy-2-oxo-1,
2-Dihydroindole-3-ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid was obtained.

【０６１６】 エチレングリコール（２ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
３−メチル−５−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−
３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（２４０ｍｇ）を，密
封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２時間保持した。反応混合物を９０℃に
冷却し，水酸化カリウム（１ペレット）を加えた。次にこれを９０℃で３０分間
撹拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。
沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，３０．５ｍｇ（
１４％）の３−［２−（５−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドー
ル−３−イリデンメチル）−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピ
オン酸を得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.38 (s, 1 H, NH), 12.07 (s, 1 H, COOH), 10.59 (s, 1
H, NH), 7.63 (s, 1 H, H-ビニル), 7.1 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 6.75 (d, J =
8 Hz, 1 H, H-7), 6.69 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 3.76 (s, 3 H, OCH3),
2.96 (t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH2), 2.41 (t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH2), 2.04 (s,
3 H, CH3). MS m/z 327 (M+1).4- (2-Carboxyethyl)-suspended in ethylene glycol (2 mL)
3-methyl-5- (5-methoxy-2-oxo-1,2-dihydroindole-
(3-Ylidenemethyl) -1H-pyrrole-2-carboxylic acid (240 mg) was kept in a sealed tube at 200 ° C. for 2 hours in a preheated oil bath. The reaction mixture was cooled to 90 ° C. and potassium hydroxide (1 pellet) was added. It was then stirred at 90 ° C. for 30 minutes. The reaction mixture was cooled, poured into water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid.
The precipitate was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight and 30.5 mg (
14%) of 3- [2- (5-Methoxy-2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl) -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl] -propionic acid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ 13.38 (s, 1 H, NH), 12.07 (s, 1 H, COOH), 10.59 (s, 1
H, NH), 7.63 (s, 1 H, H-vinyl), 7.1 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 6.75 (d, J =
8 Hz, 1 H, H-7), 6.69 (dd, J = 2.8 Hz, 1 H, H-6), 3.76 (s, 3 H, OCH 3 ),
2.96 (t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.41 (t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.04 (s,
3 H, CH 3 ) .MS m / z 327 (M + 1).

【０６１７】 実施例２２３：３−｛２−［６−（３−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４−メチル−１Ｈ−ピロー
ル−３−イル｝−プロピオン酸 テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．７ｇ）を，５ｇの３
−メトキシフェニルボロン酸，３．８ｇの５−ブロモ−２−フルオロニトロベン
ゼン，および１１ｍＬの２Ｍ炭酸ナトリウム溶液の１００ｍＬのトルエン中の混
合物に加えた。混合物を２時間還流し，水で希釈し，酢酸エチルで抽出した。酢
酸エチルを飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄し，乾燥し，濃縮して
，油状固体を得た。この固体をシリカゲルカラムで酢酸エチル：ヘキサンの１：
６混合物を溶出剤として用いて精製して，４．３ｇ（７７％）の４−フルオロ−
３'−メトキシ−３−ニトロビフェニルを得た。Example 223: 3- {2- [6- (3-methoxyphenyl) -2-oxo-1,
2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl] -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl} -propionic acid tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0.7 g), 5 g of 3
-Methoxyphenylboronic acid, 3.8 g of 5-bromo-2-fluoronitrobenzene, and a mixture of 11 mL of a 2M sodium carbonate solution in 100 mL of toluene. The mixture was refluxed for 2 hours, diluted with water and extracted with ethyl acetate. The ethyl acetate was washed with saturated sodium bicarbonate and brine, dried and concentrated to give an oily solid. This solid was separated on a silica gel column with ethyl acetate: hexane 1: 1 :.
6 mixture was purified as eluent and 4.3 g (77%) of 4-fluoro-
3′-Methoxy-3-nitrobiphenyl was obtained.

【０６１８】 ジメチルマロネート（９．７ｍＬ）を，５０ｍＬのジメチルスルホキシドに懸
濁した２．０ｇの水素化ナトリウムに滴加した。混合物を１００℃で３５分間撹
拌し，室温に冷却した。５０ｍＬのジメチルスルホキシド中の４−フルオロ−２
'−メトキシ−３−ニトロビフェニル（４．２ｇ）を加え，混合物を１００℃で
１時間撹拌した。反応混合物を冷却し，３００ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶液
で急冷し，酢酸エチルで２回抽出した。抽出物を合わせ，ブラインで洗浄し，無
水硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，粗ジメチル３'−メトキシ−３−ニトロ
ビフェニル−４−マロネートを淡黄色固体として得た。Dimethyl malonate (9.7 mL) was added dropwise to 2.0 g of sodium hydride suspended in 50 mL of dimethyl sulfoxide. The mixture was stirred at 100 ° C. for 35 minutes and cooled to room temperature. 4-Fluoro-2 in 50 mL of dimethyl sulfoxide
'-Methoxy-3-nitrobiphenyl (4.2 g) was added and the mixture was stirred at 100 ° C for 1 hour. The reaction mixture was cooled, quenched with 300 mL of saturated ammonium chloride solution and extracted twice with ethyl acetate. The extracts were combined, washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to give crude dimethyl 3'-methoxy-3-nitrobiphenyl-4-malonate as a pale yellow solid.

【０６１９】 粗３'−メトキシ−３−ニトロ−ビフェニル−４−マロネートを４５ｍＬの６
Ｎ塩酸中で１１０℃で４日間撹拌し，次に冷却した。形成した沈殿物を濾過によ
り回収し，水およびヘキサンで洗浄し，乾燥して，５．３ｇの３'−メトキシ−
２−ニトロビフェニル−４−酢酸を淡黄褐色固体として得た。The crude 3′-methoxy-3-nitro-biphenyl-4-malonate was added to 45 mL of 6
Stirred at 110 ° C. for 4 days in N hydrochloric acid, then cooled. The precipitate formed was collected by filtration, washed with water and hexane, dried and dried with 5.3 g of 3'-methoxy-
2-Nitrobiphenyl-4-acetic acid was obtained as a light tan solid.

【０６２０】 ３'−メトキシ−３−ニトロビフェニル−４−酢酸（５．２ｇ）をメタノール
に溶解し，０．８ｇの１０％パラジウム担持炭素で室温で３時間水素化した。触
媒を濾過により除去し，メタノールで洗浄し，濾液を合わせ，濃縮して，褐色固
体を得た。この固体をシリカゲルカラムで酢酸エチル：ヘキサン：酢酸の混合物
（３３：６６：１）を溶出剤として用いて精製して，３．０ｇ（４−フルオロ−
３'−メトキシ−３−ニトロビフェニルに基づき７５％）の６−（３−メトキシ
フェニル）−２−オキシインドールを桃色固体として得た。1 HNMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 10.39 (s, br, 1 H, NH), 7.35 (t, J = 7.85 Hz
, 1 H), 7.26 (d, J = 7.78 Hz, 1 H), 7.19 (dd, J = 1.22, 7.8 Hz, 1 H), 7.
13-7.16 (m, 1 H), 7.09-7.1 (m, 1 H), 7.01 (d, J = 1.48 Hz, 1 H), 6.90-6.
93 (m, 1 H), 3.8 (s, 3 H, OCH3), 3.49 (s, 2H, CH2). MS m/z (相対強度, %) 240.0 ([M+1]+, 100).3′-Methoxy-3-nitrobiphenyl-4-acetic acid (5.2 g) was dissolved in methanol and hydrogenated with 0.8 g of 10% palladium on carbon for 3 hours at room temperature. The catalyst was removed by filtration, washed with methanol, the combined filtrates and concentrated to give a brown solid. This solid was purified on a silica gel column using a mixture of ethyl acetate: hexane: acetic acid (33: 66: 1) as an eluent to give 3.0 g (4-fluoro-acetic acid).
75% based on 3'-methoxy-3-nitrobiphenyl) of 6- (3-methoxyphenyl) -2-oxindole was obtained as a pink solid. 1 HNMR (360 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.39 (s, br, 1 H, NH), 7.35 (t, J = 7.85 Hz
, 1 H), 7.26 (d, J = 7.78 Hz, 1 H), 7.19 (dd, J = 1.22, 7.8 Hz, 1 H), 7.
13-7.16 (m, 1 H), 7.09-7.1 (m, 1 H), 7.01 (d, J = 1.48 Hz, 1 H), 6.90-6.
93 (m, 1 H), 3.8 (s, 3 H, OCH 3 ), 3.49 (s, 2H, CH 2 ). MS m / z (relative strength,%) 240.0 ([M + 1] + , 100) .

【０６２１】 エタノール（５ｍＬ）中の，５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエ
チル）−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１
ｍｇ），６−（３−メトキシ−フェニル）−２−オキシインドール（２８７ｍｇ
），およびピペリジン（２滴）を９０℃で一夜撹拌した。沈殿物を濾過し，エタ
ノールで洗浄した。黄橙色固体および水酸化カリウム（４ペレット）をエタノー
ル（３ｍＬ）中で９０℃で２．５時間撹拌した。反応混合物を冷却し，濃縮した
。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗
浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，４１３ｍｇの４−（２−カルボキシエチ
ル）−５−［６−（３−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロイ
ンドール−３−イリデンメチル］−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン
酸を得た。Ethyl 5-formyl-4- (2-ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylate (281) in ethanol (5 mL)
mg), 6- (3-methoxy-phenyl) -2-oxindole (287 mg)
), And piperidine (2 drops) were stirred at 90 ° C overnight. The precipitate was filtered and washed with ethanol. The yellow-orange solid and potassium hydroxide (4 pellets) were stirred in ethanol (3 mL) at 90 ° C. for 2.5 hours. The reaction mixture was cooled and concentrated. The residue was dissolved in water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight and 413 mg of 4- (2-carboxyethyl) -5- [6- (3-methoxyphenyl) -2-oxo-1,2. -Dihydroindole-3-ylidenemethyl] -3-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylic acid was obtained.

【０６２２】 エチレングリコール（５ｍＬ）中に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−
５−［６−（３−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドー
ル−３−イリデンメチル］−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（４
１３ｍｇ）を，密封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２．５時間保持した。
反応混合物を９０℃に冷却し，水酸化カリウム（４ペレット）を加えた。次にこ
れを１００℃でさらに２時間撹拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ
塩酸でｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一
夜乾燥した。粗固体をシリカゲルカラムで酢酸エチル：ヘキサン：氷酢酸（３３
：６６：１）を溶出剤として用いて，７５ｍｇ（２０％）の３−｛２−［６−（
３−メトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリ
デンメチル］−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル｝−プロピオン酸を橙赤
色固体として得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.27 (s, 1 H, NH), 12.06 (s, 1 H, COOH), 10.86 (s, 1
H, NH), 7.76 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.68 (s, 1 H, H-ビニル), 7.36 (t,
J = 8 Hz, 1 H), 7.29 (dd, J = 1.5, 8 Hz, 1 H), 6.92, 7.09, 7.13,7.2 (m,
5 H, Ar-H), 3.82 (s, 3 H, OCH3), 2.96 (t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH2), 2.42 (
t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH2), 1.97 (s, 3H, CH3).4- (2-Carboxyethyl)-suspended in ethylene glycol (5 mL)
5- [6- (3-methoxyphenyl) -2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -3-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylic acid (4
13 mg) was kept in a sealed tube in a preheated oil bath at 200 ° C. for 2.5 hours.
The reaction mixture was cooled to 90 ° C. and potassium hydroxide (4 pellets) was added. It was then stirred at 100 ° C. for a further 2 hours. The reaction mixture is cooled, poured into water and 2N
Acidify to pH 2 with hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water and dried in a vacuum oven overnight. The crude solid is subjected to ethyl acetate: hexane: glacial acetic acid (33
: 66: 1) as eluent, 75 mg (20%) of 3- {2- [6- (
3-methoxyphenyl) -2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl} -propionic acid was obtained as an orange-red solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ 13.27 (s, 1 H, NH), 12.06 (s, 1 H, COOH), 10.86 (s, 1
H, NH), 7.76 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.68 (s, 1 H, H-vinyl), 7.36 (t,
J = 8 Hz, 1 H), 7.29 (dd, J = 1.5, 8 Hz, 1 H), 6.92, 7.09, 7.13, 7.2 (m,
5 H, Ar-H), 3.82 (s, 3 H, OCH 3), 2.96 (t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH 2), 2.42 (
t, J = 7.4 Hz, 2 H, CH 2 ), 1.97 (s, 3H, CH 3 ).

【０６２３】 実施例２２４：３−｛２−［６−（３−エトキシフェニル）−２−オキソ−１，
２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル］−４−メチル−１Ｈ−ピロー
ル−３−イル｝−プロピオン酸 ５−ホルミル−４−（２−エトキシカルボニルエチル）−３−メチル−１Ｈ−
ピロール−２−カルボン酸エチルエステル（２８１ｍｇ），６−（３−エトキシ
フェニル）−２−オキシインドール（３０４ｍｇ），およびピペリジン（２滴）
のエタノール（５ｍＬ）中の混合物を９０℃で一夜保持した。形成した沈殿物を
濾過し，エタノールで洗浄した。沈殿物である橙色固体を水酸化カリウム（４ペ
レット）とともにエタノール（３ｍＬ）中で９０℃で２．５時間撹拌した。反応
混合物を冷却し，濃縮した。残渣を水に溶解し，２Ｎ塩酸でｐＨ２に酸性にした
。沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，３７０ｍｇの
４−（２−カルボキシエチル）−５−［６−（３−エトキシフェニル）−２−オ
キソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル］−３−メチル−１Ｈ
−ピロール−２−カルボン酸を得た。Example 224: 3- {2- [6- (3-ethoxyphenyl) -2-oxo-1,
2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl] -4-methyl-1H-pyrrol-3-yl} -propionic acid 5-formyl-4- (2-ethoxycarbonylethyl) -3-methyl-1H-
Pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (281 mg), 6- (3-ethoxyphenyl) -2-oxindole (304 mg), and piperidine (2 drops)
Of ethanol (5 mL) was kept at 90 ° C. overnight. The precipitate formed was filtered and washed with ethanol. The orange solid precipitate was stirred with potassium hydroxide (4 pellets) in ethanol (3 mL) at 90 ° C. for 2.5 hours. The reaction mixture was cooled and concentrated. The residue was dissolved in water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water, dried in a vacuum oven overnight, and 370 mg of 4- (2-carboxyethyl) -5- [6- (3-ethoxyphenyl) -2-oxo-1,2. -Dihydroindole-3-ylidenemethyl] -3-methyl-1H
-Pyrrole-2-carboxylic acid was obtained.

【０６２４】 エチレングリコール（５ｍＬ）に懸濁した４−（２−カルボキシエチル）−５
−［６−（３−エトキシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール
−３−イリデンメチル］−３−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸（３５
０ｍｇ）を，密封管中で，予熱した油浴中で２００℃で２．５時間保持した。反
応混合物を１００℃に冷却し，水酸化カリウム（４ペレット）を加えた。次にこ
れを１００℃で２時間撹拌した。反応混合物を冷却し，水に注加し，２Ｎ塩酸で
ｐＨ２に酸性にした。沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥
した。粗固体をシリカゲルカラムで酢酸エチル：ヘキサン：氷酢酸（３３：６６
：１）を用いて精製して，１４０ｍｇ（４４％）の３−｛２−［６−（３−エト
キシフェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチ
ル］−４−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル｝−プロピオン酸を褐色固体とし
て得た。1 HNMR (d6-DMSO) δ 13.28 (s, 1 H, NH), 12.04 (s, 1 H, COOH), 10.86 (s, 1
H, NH), 7.76 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.68 (s, 1 H, H-ビニル), 7.34 (t,
J = 8 Hz, 1 H), 7.28 (dd, J = 2, 8 Hz, 1 H, H-5), 7.08 (d, J = 2 Hz, 1
H, H-7), 7.18, 7.13, 6.9 (m, 4 H, Ar-H), 4.1 (q, J = 7 Hz, 2 H, OCH 2CH3)
, 2.96 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.43 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH2), 2.05 (
s, 3 H, CH3), 1.35 (t, J = 7 Hz, 3 H, OCH2CH 3).[0624] 4- (2-Carboxyethyl) -5 suspended in ethylene glycol (5 mL)
-[6- (3-Ethoxyphenyl) -2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -3-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylic acid (35
0 mg) was kept in a sealed tube in a preheated oil bath at 200 ° C. for 2.5 hours. The reaction mixture was cooled to 100 ° C. and potassium hydroxide (4 pellets) was added. Then it was stirred at 100 ° C. for 2 hours. The reaction mixture was cooled, poured into water and acidified to pH 2 with 2N hydrochloric acid. The precipitate was filtered, washed with water and dried in a vacuum oven overnight. The crude solid is passed through a silica gel column with ethyl acetate: hexane: glacial acetic acid (33:66).
: 140 mg (44%) of 3- {2- [6- (3-ethoxyphenyl) -2-oxo-1,2-dihydroindole-3-ylidenemethyl] -4-methyl 1H-pyrrole-3-yl} -propionic acid was obtained as a brown solid. 1 HNMR (d 6 -DMSO) δ 13.28 (s, 1 H, NH), 12.04 (s, 1 H, COOH), 10.86 (s, 1
H, NH), 7.76 (d, J = 8 Hz, 1 H, H-4), 7.68 (s, 1 H, H-vinyl), 7.34 (t,
J = 8 Hz, 1 H), 7.28 (dd, J = 2, 8 Hz, 1 H, H-5), 7.08 (d, J = 2 Hz, 1
H, H-7), 7.18, 7.13, 6.9 (m, 4 H, Ar-H), 4.1 (q, J = 7 Hz, 2 H, OC H 2 CH 3 )
, 2.96 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.43 (t, J = 7.5 Hz, 2 H, CH 2 ), 2.05 (
s, 3 H, CH 3 ), 1.35 (t, J = 7 Hz, 3 H, OCH 2 C H 3 ).

【０６２５】 ５．生物学的評価 任意の所定の一連の化合物において，生物学的活性のスペクトルが与えられる
ことが理解されるであろう。好ましい態様においては，本発明は，ＲＴＫ，ＣＴ
Ｋ，およびＳＴＫ活性を調節する能力を示す３−メチリデニル−２−インドリノ
ン類に関する。所望の活性を示す化合物を選択するために用いられるアッセイが
以下に記載される。表２は，記載されるアッセイを用いる，本発明の化合物の試
験の結果を示す。示される結果はいかなる意味においても本発明の範囲を限定す
るものと解釈すべきではない。[0625] 5. Biological Evaluation It will be appreciated that for any given set of compounds, a spectrum of biological activities will be provided. In a preferred embodiment, the present invention relates to an RTK, CT
The present invention relates to 3-methylidenyl-2-indolinones exhibiting the ability to regulate K and STK activities. The assays used to select compounds that exhibit the desired activity are described below. Table 2 shows the results of testing compounds of the invention using the described assay. The results shown are not to be construed as limiting the scope of the invention in any way.

【０６２６】[0626]

【表２４】 [Table 24]

【０６２７】[0627]

【表２５】 [Table 25]

【０６２８】[0628]

【表２６】 [Table 26]

【０６２９】[0629]

【表２７】 [Table 27]

【０６３０】[0630]

【表２８】 [Table 28]

【０６３１】[0631]

【表２９】 [Table 29]

【０６３２】 Ａ．アッセイ方法 以下のインビトロアッセイを用いて，本発明の種々の化合物の１つまたはそれ
以上のＰＫに対する活性および効果のレベルを決定することができる。同様にし
て，当該技術分野においてよく知られる技術を用いて，任意のＰＫについて類似
のアッセイを設計することができる。A. Assay Methods The following in vitro assays can be used to determine the level of activity and effect of one or more of the various compounds of the invention on PK. Similarly, similar assays can be designed for any PK using techniques well known in the art.

【０６３３】 本明細書に記載される細胞／触媒アッセイは，ＥＬＩＳＡフォーマットで実施
する。一般的方法は以下のとおりである：天然にまたは組換え的に試験キナーゼ
を発現する細胞に化合物を導入する。選択された時間が経過した後，試験キナー
ゼがレセプターである場合には，レセプターを活性化することが知られているリ
ガンドを加える。細胞を溶解し，あらかじめ酵素的リン酸化反応の基質を認識す
る特異的抗体でコーティングしたＥＬＩＳＡプレートのウエルに溶解物を移す。
細胞溶解物の非基質成分を洗い流し，ホスホチロシンを特異的に認識する抗体で
基質のリン酸化の量を検出し，試験化合物と接触させていない対照細胞と比較す
る。本明細書に記載される細胞／生物学的アッセイは，試験キナーゼの活性化に
応答して生成したＤＮＡの量を測定し，これは一般的な増殖性応答の測定である
。このアッセイの一般的方法は次のとおりである：天然にまたは組換え的に試験
キナーゼを発現する細胞に化合物を導入する。選択された時間が経過した後，試
験キナーゼがレセプターである場合にはレセプターを活性化することが知られて
いるリガンドを加える。少なくとも一夜インキュベーションした後，ＤＮＡ標識
試薬，例えばブロモデオキシ−ウリジン（ＢｒｄＵ）または３Ｈ−チミジンを加
える。抗ＢｒｄＵ抗体でまたは放射活性を測定することにより標識されたＤＮＡ
の量を検出し，試験化合物と接触させていない対照細胞と比較する。The cell / catalytic assays described herein are performed in an ELISA format. The general method is as follows: the compound is introduced into cells expressing the test kinase, either naturally or recombinantly. After the selected time has elapsed, if the test kinase is a receptor, a ligand known to activate the receptor is added. The cells are lysed and the lysate is transferred to wells of an ELISA plate previously coated with a specific antibody that recognizes the substrate for the enzymatic phosphorylation reaction.
The non-substrate components of the cell lysate are washed away and the amount of phosphorylation of the substrate is detected with an antibody that specifically recognizes phosphotyrosine, and compared to control cells that have not been contacted with the test compound. The cell / biological assays described herein measure the amount of DNA produced in response to test kinase activation, which is a measure of the general proliferative response. The general method of this assay is as follows: the compound is introduced into cells expressing the test kinase, either naturally or recombinantly. After a selected period of time, if the test kinase is a receptor, a ligand known to activate the receptor is added. After at least overnight incubation, a DNA labeling reagent such as bromodeoxy-uridine (BrdU) or 3H-thymidine is added. DNA labeled with anti-BrdU antibody or by measuring radioactivity
The amount is determined and compared to control cells that have not been contacted with the test compound.

【０６３４】 １．細胞／触媒アッセイ 酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）を用いて，ＰＫ活性の存在
を検出し測定することができる。ＥＬＩＳＡは，例えば，Ｖｏｌｌｅｒ，ｅｔ
ａｌ．，１９８０（"Ｅｎｚｙｍｅ−Ｌｉｎｋｅｄ Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎ
ｔ Ａｓｓａｙ，" Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ
ｏｇｙ，第２版，Ｒｏｓｅ ａｎｄ Ｆｒｉｅｄｍａｎ編，ｐｐ３５９−３７１
Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ
．Ｃ．）に記載の既知のプロトコルに従って実施することができる。 開示されるプロトコルを，特定のＰＫに関する活性を検出するように適合させ
ることができる。例えば，特定のＰＫに関するＥＬＩＳＡ実験を実施するための
好ましいプロトコルは以下に記載される。しかし，ＲＴＫファミリーの他のメン
バー，ならびにＣＴＫおよびＳＴＫに対する化合物の活性を検出するためにこれ
らのプロトコルを適合させることは，当業者の知識の範囲内である。[0634] 1. Cell / Catalytic Assay The presence of PK activity can be detected and measured using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). ELISA is described, for example, in Voller, et.
al. , 1980 ("Enzyme-Linked Immunosorben").
t Assay, "Manual of Clinical Immunol
ogy, 2nd edition, Rose and Friedman, pp. 359-371
Am. Soc. Of Microbiology, Washington, D
. C. ) Can be carried out according to the known protocol described in (1). The disclosed protocol can be adapted to detect activity for a particular PK. For example, a preferred protocol for performing an ELISA experiment for a particular PK is described below. However, adapting these protocols to detect the activity of compounds against other members of the RTK family, as well as CTKs and STKs, is within the knowledge of those skilled in the art.

【０６３５】ＦＬＫ−１アッセイ ＥＬＩＳＡアッセイを実施して，ＦＬＫ−１レセプターのキナーゼ活性，より
詳細にはＦＬＫ−１レセプター上のＴＫ活性の阻害または活性化を測定する。詳
細には，以下のアッセイを実施して，Ｆｌｋ−１を発現するように遺伝子工学処
理された細胞において，ＦＬＫ−１レセプターのキナーゼ活性を測定することが
できる。 FLK-1 Assay An ELISA assay is performed to measure the kinase activity of the FLK-1 receptor, and more particularly, the inhibition or activation of TK activity on the FLK-1 receptor. Specifically, the following assays can be performed to measure the kinase activity of the FLK-1 receptor in cells that have been genetically engineered to express Flk-1.

【０６３６】材料および方法 ａ． Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇカタログ
Ｎｏ．２５８０５−９６）； ｂ． Ｃａｐｐｅｌヤギ抗ウサギＩｇＧ（カタログＮｏ．５５６４１）； ｃ． ＰＢＳ（ＧｉｂｃｏカタログＮｏ．４５０−１３００ＥＢ）； ｄ． ＴＢＳＷ緩衝液（５０ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ７．２），１５０ｍＭＮａＣｌ
および０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０）； ｅ． エタノールアミン保存液（１０％エタノールアミン（ｐＨ７．０），４℃
で保存）； ｆ． ＨＮＴＧ緩衝液（２０ｍＭＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．５），１５０ｍＭ
ＮａＣｌ，０．２％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００，および１０％グリセロール）； ｇ． ＥＤＴＡ（０．５Ｍ（ｐＨ７．０）１００Ｘ保存液として）； ｈ． オルトバナジウム酸ナトリウム（０．５Ｍ，１００Ｘ保存液として）； ｉ． ピロリン酸ナトリウム（０．２Ｍ，１００Ｘ保存液として）； ｊ． ＮＵＮＣ９６ウエルＶ底ポリプロピレンプレート（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃ
ｉｅｎｔｉｆｉｃカタログＮｏ．ＡＳ−７２０９２）； ｋ． ＮＩＨ３Ｔ３ Ｃ７＃３細胞（ＦＬＫ−１発現細胞）； ｌ． ＤＭＥＭ，１Ｘ高グルコースＬ−グルタミン含有（カタログＮｏ．１１９
６５−０５０）； ｍ． ＦＢＳ，Ｇｉｂｃｏ（カタログＮｏ．１６０００−０２８）； ｎ． Ｌ−グルタミン，Ｇｉｂｃｏ（カタログＮｏ．２５０３０−０１６）； ｏ． ＶＥＧＦ，ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．（カタログＮｏ．１００−２０
）Ｍｉｌｌｉ−ＱｄＨ2Ｏ中１μｇ／１００μｌ保存液として保持し，−２０℃
で保存； ｐ． アフィニティー精製抗ＦＬＫ−１抗血清； ｑ． ホスホチロシン特異的ＵＢ４０モノクローナル抗体（Ｆｅｎｄｌｅｙ，ｅ
ｔ ａｌ．，１９９０，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５０：１５５０−１
５５８を参照）； ｒ． ＥＩＡ等級ヤギ抗マウスＩｇＧ−ＰＯＤ（ＢｉｏＲａｄカタログＮｏ．１
７２−１０１１）； ｓ． ２，２−アジノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−硫酸（ＡＢＴ
Ｓ）溶液（１００ｍＭクエン酸（無水），２５０ｍＭＮａ2ＨＰＯ4（ｐＨ４．０
），０．５ｍｇ／ｍｌＡＢＴＳ（ＳｉｇｍａカタログＮｏ．Ａ−１８８８）），
溶液は，使用まで暗所で４℃で保存しなければならない； ｔ． Ｈ2Ｏ2（３０％溶液）（ＦｉｓｈｅｒカタログＮｏ．Ｈ３２５）； ｕ． ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2（１５ｍｌＡＢＴＳ溶液，２μｌＨ2Ｏ2）使用の５分間
に調製，室温に保持； ｖ． ０．２ＭＨＣｌ保存液，Ｈ2Ｏ中； ｗ． ジメチルスルホキシド（１００％）（ＳｉｇｍａカタログＮｏ．Ｄ−８４
１８）；および ｙ． トリプシン−ＥＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬカタログＮｏ．２５２００−
０４９） Materials and Methods a. Corning 96-well ELISA plate (Corning Catalog No. 25805-96); b. Cappel goat anti-rabbit IgG (Catalog No. 55641); c. PBS (Gibco Catalog No. 450-1300EB); d. TBSW buffer (50 mM Tris (pH 7.2), 150 mM NaCl
And 0.1% Tween-20); e. Ethanolamine storage solution (10% ethanolamine (pH 7.0), 4 ° C
Saved); f. HNTG buffer (20 mM HEPES buffer (pH 7.5), 150 mM
NaCl, 0.2% Triton X-100, and 10% glycerol); g. EDTA (as a 0.5 M (pH 7.0) 100X stock solution); h. Sodium orthovanadate (as a 0.5 M, 100X stock solution); i. Sodium pyrophosphate (0.2 M, as 100 × stock solution); j. NUNC 96-well V-bottom polypropylene plate (Applied Sc
entific catalog No. AS-72092); k. NIH3T3 C7 # 3 cells (FLK-1 expressing cells); l. DMEM, containing 1X high glucose L-glutamine (Catalog No. 119
65-050); m. FBS, Gibco (Catalog No. 16000-028); n. L-glutamine, Gibco (Catalog No. 25030-016); o. VEGF, PeproTech, Inc. (Catalog No. 100-20
) Retained as a 1 μg / 100 μl stock solution in Milli-QdH 2 O and stored at −20 ° C.
Stored at p. Affinity purified anti-FLK-1 antiserum; q. Phosphotyrosine-specific UB40 monoclonal antibody (Fendley, e
t al. , 1990, Cancer Research 50: 1550-1.
558); r. EIA grade goat anti-mouse IgG-POD (BioRad Catalog No. 1)
72-1011); s. 2,2-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfuric acid (ABT
S) solution (100 mM citric acid (anhydrous), 250 mM Na 2 HPO 4 (pH 4.0)
), 0.5 mg / ml ABTS (Sigma Catalog No. A-1888)),
The solution must be stored at 4 ° C. in the dark until use; t. H 2 O 2 (30% solution) (Fisher Catalog No. H325); u. ABTS / H 2 O 2 (15mlABTS solution, 2μlH 2 O 2) prepared of use 5 minutes, kept at room temperature; v. 0.2MHCl preservative solution, H 2 O in; w. Dimethyl sulfoxide (100%) (Sigma Catalog No. D-84)
18); and y. Trypsin-EDTA (Gibco BRL Catalog No. 25200-
049)

【０６３７】プロトコル １． Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートを，ウエルあたり１．０μ
ｇの，０．１ＭＮａ2ＣＯ3（ｐＨ９．６）中Ｃａｐｐｅｌ抗ウサギＩｇＧ抗体，
でコーティングする。最終容量をウエルあたり１５０μｌとする。プレートを４
℃で一夜コーティングする。プレートは，４℃で保存したとき，２週間まで保存
することができる。 ２． 細胞を適当な培養皿中で成長培地（ＤＭＥＭ，２．０ｍＭＬ−グルタミン
，１０％ＦＢＳを補充）中で，コンフルエントとなるまで３７℃，５％ＣＯ2で
成長させる。 ３． トリプシン処理により細胞を回収し，Ｃｏｒｎｉｎｇ２５８５０ポリスチ
レン９６ウエル丸底細胞プレートに，２００μｌの成長培地中２５，０００細胞
／ウエルで播種する。 ４． 細胞を３７℃，５％ＣＯ2で少なくとも１日成長させる。 ５． 細胞をＤ−ＰＢＳ １Ｘで洗浄する。 ６． ２００μｌ／ウエルの飢餓培地（ＤＭＥＭ，２．０ｍＭ ｌ−グルタミン
，０．１％ＦＢＳ）を加える。３７℃，５％ＣＯ2で一夜インキュベートする。
７． 化合物をポリプロピレン９６ウエルプレート中で飢餓培地を用いて１：２
０に希釈する。対照ウエルで使用するために，ジメチルスルホキシドを１：２０
に希釈する。 ８． ９６ウエル細胞培養プレートから飢餓培地を除去し，１６２μｌの新たに
調製した飢餓培地を各ウエルに加える。 ９． １：２０に希釈された化合物希釈物１８μｌ（工程７より）を各ウエルに
加え，１：２０ジメチルスルホキシド希釈物を対照ウエルに加え（＋／−ＶＥＧ
Ｆ），細胞刺激の後，１：２００の最終希釈とする。最終ジメチルスルホキシド
は０．５％である。プレートを３７℃，５％ＣＯ2で２時間インキュベートする
。 １０． プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合抗体をＥＬＩ
ＳＡプレートから除去する。ＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミン，ｐＨ７．０
で３回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて，過剰の液体およ
び気泡を除去する。 １１． ウエルあたり１５０μｌのＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミン，ｐＨ
７．０でプレートをブロッキングする。プレートをマイクロタイタープレート振
盪器で振盪しながら，３０分間インキュベートする。 １２． プレートを工程１０で記載したように３回洗浄する。 １３． ０．５μｇ／ウエルのアフィニティー精製抗ＦＬＵ−１ポリクローナル
ウサギ抗血清を加える。ＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミンｐＨ７．０で最終
容量を１５０μｌ／ウエルとする。プレートを振盪しながら３０分間インキュベ
ートする。 １４． 細胞に１８０μｌの飢餓培地を加え，２０μｌ／ウエルの１０．０ｍＭ
オルトバナジウム酸ナトリウムおよび５００ｎｇ／ｍｌＶＥＧＦ（最終濃度；ウ
エルあたり１．０ｍＭオルトバナジウム酸ナトリウムおよび５０ｎｇ／ｍｌＶＥ
ＧＦ）で３７℃，５％ＣＯ2で８分間細胞を刺激する。陰性対照ウエルには飢餓
培地のみを加える。 １５． ８分後，培地を細胞から除去し，２００μｌ／ウエルのＰＢＳで１回洗
浄しなければならない。 １６． １５０μｌ／ウエルのＨＮＴＧ中で室温で５分間振盪しながら細胞を溶
解させる。ＨＮＴＧ配合物はオルトバナジウム酸ナトリウム，ピロリン酸ナトリ
ウムおよびＥＤＴＡを含む。 １７． ＥＬＩＳＡプレートを工程１０に記載したように３回洗浄する。 １８． 細胞溶解物を細胞プレートからＥＬＩＳＡプレートに移し，振盪しなが
ら２時間インキュベートする。細胞溶解物を移すには，ウエルを掻きながらピペ
ットアップおよびダウンを行う。 １９． プレートを工程１０に記載したように３回洗浄する。 ２０． ＥＬＩＳＡプレートを０．０２μｇ／ウエルのＴＢＳＷ＋０５％エタノ
ールアミン中のＵＢ４０とともにインキュベートする。最終容量を１５０μｌ／
ウエルとする。振盪しながら３０分間インキュベートする。 ２１． プレートを工程１０に記載したように３回洗浄する。 ２２． ＥＬＩＳＡプレートを，ＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミン，ｐＨ７
．０中で１：１０，０００に希釈したＥＩＡ等級ヤギ抗マウスＩｇＧコンジュゲ
ート西洋ワサビペルオキシダーゼとともにインキュベートする。最終容量を１５
０μｌ／ウエルとする。振盪しながら３０分間インキュベートする。 ２３． 工程１０で記載したようにプレートを洗浄する。 ２４． １００μｌのＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液をウエルに加える。振盪しながら１
０分間インキュベートする。 ２５． １００μｌの０．２ＭＨＣｌを０．１ＭＨＣｌ最終濃度となるように加
えて，発色反応を停止する。室温で１分間振盪する。ゆっくりした空気の流れで
気泡を除去し，ＥＬＩＳＡプレートをＥＬＩＳＡプレートリーダーで４１０ｎｍ
で読む。 Protocol 1. Corning 96-well ELISA plate, 1.0 μl per well
g of Cappel anti-rabbit IgG antibody in 0.1 M Na 2 CO 3 (pH 9.6),
Coating with Final volume is 150 μl per well. Plate 4
Coat overnight at ° C. Plates can be stored for up to 2 weeks when stored at 4 ° C. 2. The cells are grown in growth media (supplemented with DMEM, 2.0 mM L-glutamine, 10% FBS) in a suitable culture dish at 37 ° C., 5% CO 2 until confluent. 3. Cells are harvested by trypsinization and seeded in Corning 25850 polystyrene 96-well round bottom cell plates at 25,000 cells / well in 200 μl of growth medium. 4. The cells are grown for at least one day at 37 ° C., 5% CO 2 . 5. Wash cells with D-PBS 1X. 6. Add 200 μl / well of starvation medium (DMEM, 2.0 mM 1-glutamine, 0.1% FBS). Incubate overnight at 37 ° C., 5% CO 2 .
7. Compounds were 1: 2 in starvation media in polypropylene 96 well plates.
Dilute to 0. Dimethyl sulfoxide 1:20 for use in control wells.
Dilute to. 8. Remove the starvation medium from the 96-well cell culture plate and add 162 μl of freshly prepared starvation medium to each well. 9. 18 μl of the 1:20 diluted compound (from step 7) was added to each well, and the 1:20 dimethylsulfoxide dilution was added to control wells (+/− VEGF).
F) After cell stimulation, make a final dilution of 1: 200. Final dimethyl sulfoxide is 0.5%. Plates are incubated for 2 hours at 37 ° C., 5% CO 2 . 10. Unbound antibody is removed by ELI by inverting the plate and removing the liquid.
Remove from SA plate. TBSW + 0.5% ethanolamine, pH 7.0
And wash three times. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid and air bubbles. 11. 150 μl of TBSW + 0.5% ethanolamine per well, pH
Block the plate at 7.0. Incubate the plate for 30 minutes while shaking on a microtiter plate shaker. 12. The plate is washed three times as described in step 10. 13. Add 0.5 μg / well of affinity purified anti-FLU-1 polyclonal rabbit antiserum. Bring the final volume to 150 μl / well with TBSW + 0.5% ethanolamine pH 7.0. Incubate the plate for 30 minutes with shaking. 14． Add 180 μl of starvation medium to the cells and add 20 μl / well of 10.0 mM
Sodium orthovanadate and 500 ng / ml VEGF (final concentration; 1.0 mM sodium orthovanadate and 50 ng / ml VE per well
Stimulate cells for 8 minutes at 37 ° C., 5% CO 2 at GF). Negative control wells receive only starvation medium. 15. After 8 minutes, the medium must be removed from the cells and washed once with 200 μl / well of PBS. 16. Lyse cells in 150 μl / well of HNTG with shaking for 5 minutes at room temperature. The HNTG formulation includes sodium orthovanadate, sodium pyrophosphate and EDTA. 17． Wash the ELISA plate three times as described in step 10. 18. Transfer the cell lysate from the cell plate to the ELISA plate and incubate for 2 hours with shaking. To transfer cell lysate, pipette up and down while scraping wells. 19. The plate is washed three times as described in step 10. 20. Incubate the ELISA plate with UB40 in 0.02 μg / well TBSW + 05% ethanolamine. Final volume of 150 μl /
Well. Incubate for 30 minutes with shaking. 21. The plate is washed three times as described in step 10. 22. The ELISA plate was washed with TBSW + 0.5% ethanolamine, pH7.
. Incubate with EIA grade goat anti-mouse IgG conjugate horseradish peroxidase diluted 1: 10,000 in 0. 15 final volume
0 μl / well. Incubate for 30 minutes with shaking. 23. Wash the plate as described in step 10. 24. Add 100 μl ABTS / H 2 O 2 solution to the wells. 1 with shaking
Incubate for 0 minutes. 25. Stop the color reaction by adding 100 μl of 0.2 M HCl to a final concentration of 0.1 M HCl. Shake at room temperature for 1 minute. Remove bubbles with a slow stream of air and place the ELISA plate at 410 nm with an ELISA plate reader.
Read on.

【０６３８】全細胞におけるＥＧＦレセプター−ＨＥＲ２キメラレセプターアッセイ ＥＧＦＲ−ＮＩＨ３Ｔ３全細胞中のＨＥＲ２キナーゼ活性を以下に記載するよ
うにして測定した。 EGF Receptor-HER2 Chimeric Receptor Assay in Whole Cells HER2 kinase activity in all EGFR-NIH3T3 cells was measured as described below.

【０６３９】材料および試薬 ａ． ＥＧＦ：保存液濃度：１６．５ＩＬＭ；ＥＧＦ２０１，ＴＯＹＯＢＯ，Ｃ
ｏ．，Ｌｔｄ．Ｊａｐａｎ ｂ． ０５−１０１（ＵＢＩ）（ＥＧＦＲ細胞外ドメインを認識するモノクロー
ナル抗体） ｃ． 抗ホスホチロシン抗体（抗Ｐｔｙｒ）（ポリクローナル）（Ｆｅｎｄｌｅ
ｙ，ｅｔ ａｌ．，（上掲）を参照） ｄ． 検出抗体：ヤギ抗ウサギｌｇＧ西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲー
ト，ＴＡＧＯ，Ｉｎｃ．，Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ ｅ． ＴＢＳＴ緩衝液： Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．２ ５０ｍＭ ＮａＣｌ １５０ｍＭ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．１ ｆ． ＨＮＴＧ ５Ｘ保存液： ＨＥＰＥＳ ０．１Ｍ ＮａＣｌ ０．７５Ｍ グリセロール ５０％ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ １．０％ ｇ． ＡＢＴＳ保存液： クエン酸 １００ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4 ２５０ｍＭ ＨＣｌ（濃） ０．５ｍＭ ＡＢＴＳ* ０．５ｍｇ／ｍｌ ＊（２，２'−アジノビス（３−エチルベンズチアゾリンスルホン酸）） 溶液は使用するまで暗所で４℃で保存する。 ｈ． 試薬保存液： ＥＤＴＡ １００ｍＭ ｐＨ７．０ Ｎａ3ＶＯ4 ０．５Ｍ Ｎａ4（Ｐ2Ｏ7） ０．２Ｍ Materials and Reagents a. EGF: stock solution concentration: 16.5 ILM; EGF201, TOYOBO, C
o. , Ltd. Japan b. 05-101 (UBI) (monoclonal antibody recognizing EGFR extracellular domain) c. Anti-phosphotyrosine antibody (anti-Ptyr) (polyclonal) (Fendle
y, et al. , (Supra)) d. Detection antibody: goat anti-rabbit lgG horseradish peroxidase conjugate, TAGO, Inc. Burlingame, CA e. TBST buffer: Tris-HCl, pH 7.2 50 mM NaCl 150 mM Triton X-100 0.1 f. HNTG 5X stock solution: HEPES 0.1 M NaCl 0.75 M glycerol 50% Triton X-100 1.0% g. ABTS stock solution: citric acid 100 mM Na 2 HPO 4 250 mM HCl (concentrated) 0.5 mM ABTS * 0.5 mg / ml * (2,2′-azinobis (3-ethylbenzthiazoline sulfonic acid)) Solution is dark until used Store at 4 ° C. h. Reagent stock: EDTA 100 mM pH 7.0 Na 3 VO 4 0.5 M Na 4 (P 2 O 7 ) 0.2 M

【０６４０】方法 ＥＬＩＳＡプレートのプレコート １． ＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ，９６ウエル，Ｃａｔ．＃２５８０
５−９６）をウエルあたりＰＢＳ中０．５μｇの０５−１０１抗体で１００μｌ
の最終容量／ウエルでコーティングし，４℃で一夜保存する。コーティングした
プレートは４℃で保存した場合，１０日間まで良好である。 ２． 使用の日，コーティング緩衝液を除去し，１００μｌのブロッキング緩衝
液（ＰＢＳ中５％Ｃａｒｎａｔｉｏｎインスタント脱脂乾燥ミルク）で置き換え
る。プレートを室温で（約２３℃から２５℃）振盪しながら３０分間インキュベ
ートする。使用の直前に，ブロッキング緩衝液を除去し，プレートをＴＢＳＴ緩
衝液で４回洗浄する。 Method Precoat of ELISA plate ELISA plate (Corning, 96 well, Cat. # 2580)
5-96) with 0.5 μg of the 05-101 antibody in PBS per well in 100 μl
And store at 4 ° C. overnight. The coated plates are good up to 10 days when stored at 4 ° C. 2. On the day of use, remove the coating buffer and replace with 100 μl of blocking buffer (5% Carnation instant skim dry milk in PBS). The plate is incubated for 30 minutes with shaking at room temperature (about 23 ° C. to 25 ° C.). Immediately before use, remove the blocking buffer and wash the plate four times with TBST buffer.

【０６４１】細胞播種 １． このアッセイには，ＥＧＦＲ細胞外ドメインおよび細胞内ＨＥＲ２キナー
ゼドメインを含有するキメラレセプターを過剰発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞株を用
いることができる。 ２． ８０−９０％コンフルエントの培養皿を実験用に選択する。細胞をトリプ
シン処理し，１０％ウシ胎児血清を加えることにより反応を停止させる。細胞を
ＤＭＥＭ培地（１０％ＣＳ ＤＭＥＭ培地）中に懸濁し，１５００ｒｐｍで室温
で５分間１回遠心分離する。 ３． 細胞を播種培地（ＤＭＥＭ，０．５％ウシ血清）に再懸濁し，トリパンブ
ルーを用いて細胞を計数する。９０％より高い生存性が許容される。細胞をＤＭ
ＥＭ培地（０．５％ウシ血清）中で，ウエルあたり１０，０００細胞の密度で，
ウエルあたり１００μｌで，９６ウエルマイクロタイタープレートに播種する。
播種した細胞を５％ＣＯ2中で３７℃で約４０時間インキュベートする。[0641] Cell seeding This assay can use the NIH3T3 cell line that overexpresses a chimeric receptor containing the EGFR extracellular domain and the intracellular HER2 kinase domain. 2. An 80-90% confluent culture dish is selected for the experiment. The cells are trypsinized and the reaction is stopped by adding 10% fetal calf serum. The cells are suspended in DMEM medium (10% CS DMEM medium) and centrifuged once at 1500 rpm at room temperature for 5 minutes. 3. Resuspend cells in seeding medium (DMEM, 0.5% bovine serum) and count cells using trypan blue. Survivability higher than 90% is acceptable. DM cells
In EM medium (0.5% bovine serum) at a density of 10,000 cells per well,
Seed in a 96-well microtiter plate at 100 μl per well.
The seeded cells are incubated for about 40 hours at 37 ° C. in 5% CO 2 .

【０６４２】アッセイ方法 １． 播種した細胞を，倒立顕微鏡を用いてコンタミネーションについて検査す
る。薬剤保存液（ＤＭＳＯ中１０ｍｇ／ｍｌ）をＤＭＥＭ培地で１：１０に希釈
し，次に５μｌを，最終薬剤希釈１：２００および最終ＤＭＳＯ濃度１％となる
ように，ＴＢＳＴウエルに移す。対照ウエルにはＤＭＳＯのみを加える。５％Ｃ
Ｏ2中で３７℃で２時間インキュベートする。 ２． ＥＧＦリガンドの調製：保存液ＥＧＦを，１０μｌ希釈ＥＧＦ（１：１２
希釈）を移したときに１００ｎＭの最終濃度が得られるように，ＤＭＥＭ中で希
釈する。 ３． ウエルあたり１００μｌに十分なように新たにＨＮＴＧ*を調製し，氷上
に置く。 ＨＮＴＧ*（１０ｍｌ）： ＨＮＴＧ保存液 ２．０ｍｌ ｍｉｌｌｉ−ＱＨ2Ｏ ７．３ｍｌ ＥＤＴＡ，１００ｍＭ，ｐＨ７．０ ０．５ｍｌ Ｎａ3ＶＯ4，０．５Ｍ ０．１ｍｌ Ｎａ4（Ｐ2Ｏ7），０．２Ｍ ０．１ｍｌ ４． 薬剤とともに１２０分間インキュベーションした後，調製したＳＧＦリガ
ンドを，ウエルあたり１０μｌ，最終濃度１００ｎＭとなるように細胞に加える
。対照ウエルにはＤＭＥＭのみを加える。室温で５分間振盪しながらインキュベ
ートする。 ５． 薬剤，ＥＧＦ，およびＤＭＥＭを除去する。細胞をＰＢＳで２回洗浄する
。ウエルあたり１００μｌのＨＮＴＧ*を細胞に移す。氷上に５分間放置する。
この間に，ブロッキング緩衝液を他のＥＬＩＳＡプレートから除去し，上述した
ようにＴＢＳＴで洗浄する。 ６． マイクロピペッターにぴったりと固定したピペットチップを用いて，細胞
をプレートからはがし，ＨＮＴＧ*溶解緩衝液を繰り返し吸引および分配するこ
とにより，細胞物質をホモジナイズする。コーティングし，ブロッキングし，洗
浄したＥＬＩＳＡプレートに溶解物を移す。振盪しながら室温で１時間インキュ
ベートする。 ７． 溶解物を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに希釈した抗Ｐｔｙｒ抗
体をウエルあたり１００μｌでＥＬＩＳＡプレートに移す。抗Ｐｔｙｒ抗血清（
ＴＢＳＴ中１：３０００希釈）の存在下で，振盪しながら室温で３０分間インキ
ュベートする。 ８． 抗Ｐｔｙｒ抗体を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに希釈したＴＡ
ＧＯ抗ウサギＩｇＧ抗体をＥＬＩＳＡプレートにウエルあたり１００μｌで移す
。振盪しながら室温で３０分間インキュベートする（抗ウサギＩｇＧ抗体：ＴＢ
ＳＴ中１：３０００希釈）。 ９． ＴＡＧＯ検出抗体を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに調製したＡ
ＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液をウエルあたり１００μｌでＥＬＩＳＡプレートに移す。振
盪しながら室温で２０分間インキュベートする（ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液：１０ｍ
ｌＡＢＴＳ保存液中１．０μｌの３０％Ｈ2Ｏ2）。 １０． ５０μｌの５Ｎ Ｈ2ＳＯ4を加えることにより反応を停止し（任意），
４１０ｎｍでＯ．Ｄ．を測定する。 １１． 最大ホスホチロシンシグナルは，陰性対照の値を陽性対照の値から差し
引くことにより決定する。次に，抽出物含有ウエルについて、陰性対照を差し引
いた後にホスホチロシン含有量のパーセント阻害を計算する。 Assay Method 1. The seeded cells are examined for contamination using an inverted microscope. The drug stock solution (10 mg / ml in DMSO) is diluted 1:10 with DMEM medium and then 5 μl is transferred to TBST wells for a final drug dilution of 1: 200 and a final DMSO concentration of 1%. Control wells receive only DMSO. 5% C
Incubate at 37 ° C. for 2 hours in O 2 . 2. Preparation of EGF ligand: Stock solution EGF was diluted with 10 μl of diluted EGF (1:12
Dilute in DMEM so that a final concentration of 100 nM is obtained when transferring (dilution). 3. Prepare fresh HNTG * enough for 100 μl per well and place on ice. HNTG * (10 ml): HNTG stock solution 2.0 ml milli-QH 2 O 7.3 ml EDTA, 100 mM, pH 7.0 0.5 ml Na 3 VO 4 , 0.5 M 0.1 ml Na 4 (P 2 O 7 ), 0.2 M 0.1 ml 4. After incubation with the drug for 120 minutes, the prepared SGF ligand is added to the cells at a final concentration of 100 nM, 10 μl per well. Control wells receive only DMEM. Incubate at room temperature with shaking for 5 minutes. 5. Remove drug, EGF, and DMEM. Wash cells twice with PBS. Transfer 100 μl HNTG * per well to cells. Leave on ice for 5 minutes.
During this time, the blocking buffer is removed from the other ELISA plates and washed with TBST as described above. 6. The cells are detached from the plate using a pipette tip fitted tightly in a micropipettor and the cellular material is homogenized by repeatedly aspirating and dispensing the HNTG * lysis buffer. Transfer lysate to coated, blocked and washed ELISA plates. Incubate for 1 hour at room temperature with shaking. 7. Remove lysate and wash 4 times with TBST. Transfer the freshly diluted anti-Ptyr antibody at 100 μl per well to the ELISA plate. Anti-Ptyr antiserum (
Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking in the presence of (1: 3000 dilution in TBST). 8. Remove anti-Ptyr antibody and wash 4 times with TBST. Freshly diluted TA
Transfer GO anti-rabbit IgG antibody to ELISA plate at 100 μl per well. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking (anti-rabbit IgG antibody: TB
1: 3000 dilution in ST). 9. Remove the TAGO detection antibody and wash 4 times with TBST. Freshly prepared A
Transfer the BTS / H 2 O 2 solution at 100 μl per well to the ELISA plate. Incubate for 20 minutes at room temperature with shaking (ABTS / H 2 O 2 solution: 10 m
1.0 μl of 30% H 2 O 2 in lABTS stock solution). 10. The reaction was stopped by adding 50 μl of 5N H 2 SO 4 (optional),
O.D. D. Is measured. 11. The maximum phosphotyrosine signal is determined by subtracting the value of the negative control from the value of the positive control. The percent inhibition of phosphotyrosine content is then calculated for wells containing the extract after subtraction of the negative control.

【０６４３】ＰＤＧＦ−Ｒアッセイ すべての細胞培養培地，グルタミンおよびウシ胎児血清は，特に記載しないか
ぎり，Ｇｉｂｃｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌ
ａｎｄ，ＮＹ）から購入した。すべての細胞は，９０−９５％空気および５−１
０％ＣＯ2の湿潤雰囲気下で３７℃で成長させた。すべての細胞株は，日常的に
１週間に２回サブカルチャーし，Ｍｙｃｏｔｅｃｔ法（Ｇｉｂｃｏ）によりマイ
コプラズマがないことを確認した。 ＥＬＩＳＡアッセイについては，細胞（Ｕ１２４２，Ｊｏｓｅｐｈ Ｓｃｈｌ
ｅｓｓｉｎｇｅｒ，ＮＹＵから入手）を成長培地（ＭＥＭ，１０％ＦＢＳ，ＮＥ
ＡＡ，１ｍＭ ＮａＰｙｒおよび２ｍＭＧＬＮ含有）で８０−９０％コンフルエ
ントまで成長させ，９６ウエル組織培養プレートに０．５％血清中で，ウエルあ
たり２５，０００−３０，０００細胞を播種する。０．５％血清含有培地で一夜
インキュベーションした後，細胞を無血清培地に移し，５％ＣＯ2，３７℃イン
キュベーター中で試験化合物で２時間処理する。次に細胞をリガンドで５−１０
分間刺激し，ＨＮＴＧ（２０ｍＭＨｅｐｅｓ，１５０ｍＭＮａＣｌ，１０％グリ
セロール，５ｍＭＥＤＴＡ，５ｍＭＮａ3ＶＯ4，０．２％ＴｒｉｔｏｎＸ−１０
０，および２ｍＭＮａＰｙｒ）で溶解する。細胞溶解物（ＰＢＳ中０．５ｍｇ／
ウエル）をレセプター特異的抗体であらかじめ被覆し，ＴＢＳＴ（５０ｍＭＴｒ
ｉｓ−ＨＣｌｐＨ７．２，１５０ｍＭＮａＣｌおよび０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−
１００）中５％ミルクで室温で３０分間ブロッキングしたＥＬＩＳＡプレートに
移す。溶解物を振盪しながら室温で１時間インキュベートする。プレートをＴＢ
ＳＴで４回洗浄し，次にポリクローナル抗ホスホチロシン抗体とともに室温で３
０分間インキュベートする。プレートをＴＢＳＴで４回すすぐことにより過剰の
抗ホスホチロシン抗体を除去する。ＥＬＩＳＡプレートにヤギ抗ウサギＩｇＧ抗
体を室温で３０分間加え，次にＴＢＳＴでさらに４回すすぐ。ＡＢＴＳ（１００
ｍＭクエン酸，２５０ｍＭＮａ2ＨＰＯ4および０．５ｍｇ／ｍＬ２，２'−アジ
ノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−硫酸）），およびＨ2Ｏ2（１．２
ｍＬ３０％Ｈ2Ｏ2を１０ｍｌＡＢＴＳに加える）をＥＬＩＳＡプレートに加えて
発色を開始させる。ＡＢＴＳ添加の約１５から３０分後，４１０ｎｍおよび６３
０ｎｍの参照波長における吸光度を記録する。 PDGF-R Assay All cell culture media, glutamine and fetal calf serum were used, unless otherwise indicated, by Gibco Life Technologies (Grand Isl).
and, NY). All cells were 90-95% air and 5-1
Grow at 37 ° C. in a humidified atmosphere of 0% CO 2 . All cell lines were routinely subcultured twice a week and confirmed by the Myprotect method (Gibco) to be free of mycoplasma. For ELISA assays, cells (U1242, Joseph Schl
essinger, NYU) and growth medium (MEM, 10% FBS, NE)
AA, containing 1 mM NaPyr and 2 mM GLN) and grow to 80-90% confluence, and seed 96 well tissue culture plates with 25,000-30,000 cells per well in 0.5% serum. After overnight incubation in medium containing 0.5% serum, cells are transferred to serum-free medium and treated with test compounds for 2 hours in a 5% CO 2 , 37 ° C. incubator. The cells are then 5-10 with the ligand.
For 5 minutes, HNTG (20 mM Hepes, 150 mM NaCl, 10% glycerol, 5 mM EDTA, 5 mM Na 3 VO 4 , 0.2% Triton X-10)
0, and 2 mM NaPyr). Cell lysate (0.5 mg /
Wells) were previously coated with a receptor-specific antibody, and TBST (50 mM Tr
is-HCl pH 7.2, 150 mM NaCl and 0.1% Triton X-
Transfer to an ELISA plate blocked with 5% milk in 100) for 30 minutes at room temperature. Incubate the lysate for 1 hour at room temperature with shaking. Plate to TB
Wash 4 times with ST, then 3 times at room temperature with polyclonal anti-phosphotyrosine antibody.
Incubate for 0 minutes. Excess anti-phosphotyrosine antibody is removed by rinsing the plate four times with TBST. Goat anti-rabbit IgG antibody is added to the ELISA plate at room temperature for 30 minutes, then rinsed four more times with TBST. ABTS (100
mM citric acid, 250 mM Na 2 HPO 4 and 0.5 mg / mL 2,2′-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfate)) and H 2 O 2 (1.2
ML30% added H 2 O 2 in 10MlABTS) to initiate the color development in addition to the ELISA plate. Approximately 15 to 30 minutes after ABTS addition, 410 nm and 63
Record the absorbance at the reference wavelength of 0 nm.

【０６４４】ＩＧＦ−Ｉレセプターアッセイ 以下のプロトコルを用いて，ＩＧＦ−Ｉレセプター上のホスホチロシンレベル
を測定することができ，これはＩＧＦ−Ｉレセプターチロシンキナーゼ活性を示
す。 IGF-I Receptor Assay The following protocol can be used to measure phosphotyrosine levels on IGF-I receptor, indicating IGF-I receptor tyrosine kinase activity.

【０６４５】材料および試薬 ａ． このアッセイにおいて用いる細胞株は，ＩＧＦ−１レセプターを過剰発現
するように遺伝子工学処理された細胞株３Ｔ３／ＩＧＦ−１Ｒである。 ｂ． ＮＩＨ３Ｔ３／ＩＧＦ−１Ｒを，５％ＣＯ2，３７℃のインキュベーター
で成長させる。成長培地はＤＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ（熱不活性化）＋２ｍＭＬ−
グルタミンである。 ｃ． アフィニティー精製抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体１７−６９ ｄ． Ｄ−ＰＢＳ： ＫＨ2ＰＯ4 ０．２０ｇ／ｌ Ｋ2ＨＰＯ4 ２．１６ｇ／ｌ ＫＣｌ ０．２０ｇ／ｌ ＮａＣｌ ８．００ｇ／ｌ（ｐＨ７．２） ｅ． ブロッキング緩衝液：ＴＢＳＴプラス５％ミルク（Ｃａｒｎａｔｉｏｎイ
ンスタント脱脂乾燥ミルク） ｆ． ＴＢＳＴ緩衝液： Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ５０ｍＭ ＮａＣｌ １５０ｍＭ（ｐＨ７．２／ＨＣｌ １０Ｎ） ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．１％ ＴＢＳ（１０Ｘ）の保存溶液を調製し，希釈の間に緩衝液にＴｒｉｔｏｎＸ−１
００を加える。 ｇ． ＨＮＴＧ緩衝液： ＨＥＰＥＳ ２０ｍＭ ＮａＣｌ １５０ｍＭ（ｐＨ７．２／ＨＣｌ １Ｎ） グリセロール １０％ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．２％ 保存溶液（５Ｘ）を調製し，４℃で保存する。 ｈ． ＥＤＴＡ／ＨＣｌ：０．５ＭｐＨ７．０（ＮａＯＨ），１００Ｘ保存液と
して ｉ． Ｎａ3ＶＯ4：１００Ｘ保存液として０．５Ｍ，アリコートは−８０℃で保
存する。 ｊ． Ｎａ4Ｐ2Ｏ7：１００Ｘ保存液として０．２Ｍ ｋ． インスリン様成長因子−１，Ｐｒｏｍｅｇａ（Ｃａｔ＃Ｇ５１１１） ウサギポリクローナル抗ホスホチロシン抗血清 ｍ． ヤギ抗ウサギＩｇＧ，ＰＯＤコンジュゲート（検出抗体），Ｔａｇｏ（Ｃ
ａｔ．Ｎｏ．４５２０，ＬｏｔＮｏ．１８０２）：Ｔａｇｏ，Ｉｎｃ．，Ｂｕｒ
ｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ ｎ． ＡＢＴＳ（２，２'−アジノビス（３−エチルベンズチアゾリン硫酸））
溶液： クエン酸 １００ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4 ２５０ｍＭ（ｐＨ４．０／１ＮＨＣｌ） ＡＢＴＳ ０．５ｍｇ／ｍｌ ＡＢＴＳ溶液は暗所で４℃で保存しなければならない。溶液は緑色に変色したと
きは廃棄しなければならない。 ｏ． 過酸化水素：３０％溶液を暗所で４℃で保存する。 Materials and Reagents a. The cell line used in this assay is the cell line 3T3 / IGF-1R that has been genetically engineered to overexpress the IGF-1 receptor. b. NIH3T3 / IGF-1R is grown in a 5% CO 2 , 37 ° C. incubator. The growth medium was DMEM + 10% FBS (heat inactivated) +2 mM L−
Glutamine. c. Affinity purified anti-IGF-1R antibody 17-69 d. D-PBS: KH 2 PO 4 0.20 g / l K 2 HPO 4 2.16 g / l KCl 0.20 g / l NaCl 8.00 g / l (pH 7.2) e. Blocking buffer: TBST plus 5% milk (Carnation instant skim dry milk) f. TBST buffer: Tris-HCl 50 mM NaCl 150 mM (pH 7.2 / HCl 10 N) Triton X-100 A stock solution of 0.1% TBS (10 ×) was prepared, and Triton X-1 was added to the buffer during the dilution.
Add 00. g. HNTG buffer: HEPES 20 mM NaCl 150 mM (pH 7.2 / HCl 1N) Glycerol 10% Triton X-100 0.2% A stock solution (5X) is prepared and stored at 4 ° C. h. EDTA / HCl: 0.5M pH 7.0 (NaOH), as 100X stock solution i. Na 3 VO 4 : 0.5 M as 100 × stock solution, store aliquots at −80 ° C. j. Na 4 P 2 O 7 : 0.2M as a 100 × stock solution. Insulin-like growth factor-1, Promega (Cat # G5111) rabbit polyclonal anti-phosphotyrosine antiserum m. Goat anti-rabbit IgG, POD conjugate (detection antibody), Tago (C
at. No. 4520, LotNo. 1802): Tago, Inc. , Bur
lingame, CA n. ABTS (2,2'-azinobis (3-ethylbenzthiazoline sulfate))
Solution: citric acid 100 mM Na 2 HPO 4 250 mM (pH 4.0 / 1 N HCl) ABTS 0.5 mg / ml ABTS solution must be stored at 4 ° C. in the dark. The solution must be discarded when it turns green. o. Hydrogen peroxide: Store the 30% solution at 4 ° C. in the dark.

【０６４６】方法 以下のすべての工程は，特に記載しないかぎり，室温で実施する。すべてのＥ
ＬＩＳＡプレート洗浄は，プレートを水道水で３回すすぎ，ＴＢＳＴで１回すす
ぐことにより実施する。プレートを軽くたたいてペーパータオルで乾燥させる。[0646] All of the following method steps, unless otherwise stated, carried out at room temperature. All E
LISA plate washing is performed by rinsing the plate three times with tap water and once with TBST. Tap the plate and dry with a paper towel.

【０６４７】細胞播種 ： １． 組織培養皿（Ｃｏｒｎｉｎｇ２５０２０−１００）で８０−９０％コンフ
ルエントまで成長させた細胞を，トリプシン−ＥＤＴＡ（０．２５％，０．５ｍ
ｌ／Ｄ−１００，ＧＩＢＣＯ）で回収する。 ２． 細胞を新鮮なＤＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ＋２ｍＭＬ−グルタミン中に再懸濁
し，９６ウエル組織培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ，２５８０６−９６）に２０
，０００細胞／ウエル（１００μｌ／ウエル）で移す。１日インキュベートし，
次に培地を無血清培地（９０／μｌ）で置き換え，５％ＣＯ2，３７℃で一夜イ
ンキュベートする。 Cell seeding : Cells grown to 80-90% confluence in tissue culture dishes (Corning 25020-100) were converted to trypsin-EDTA (0.25%, 0.5 m
1 / D-100, GIBCO). 2. The cells were resuspended in fresh DMEM + 10% FBS + 2 mM L-glutamine and added to 96-well tissue culture plates (Corning, 25806-96).
Transfer at 2,000 cells / well (100 μl / well). Incubate for one day,
The medium is then replaced with serum-free medium (90 / μl) and incubated overnight at 37 ° C., 5% CO 2 .

【０６４８】ＥＬＩＳＡプレートコーティングおよびブロッキング ： １． ＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ２５８０５−９６）を，１００μｌ
ＰＢＳ中の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体で０．５μｇ／ウエルで少なくとも２時間コーテ
ィングする。 ２． コーティング溶液を除去し，１００μｌのブロッキング緩衝液で置き換え
，３０分間振盪する。ブロッキング緩衝液を除去し，溶解物を加える直前にプレ
ートを洗浄する。 ELISA plate coating and blocking : 100 μl of the ELISA plate (Corning 25805-96)
Coat with anti-IGF-1R antibody in PBS at 0.5 μg / well for at least 2 hours. 2. Remove the coating solution, replace with 100 μl of blocking buffer and shake for 30 minutes. Remove blocking buffer and wash plate just before adding lysate.

【０６４９】アッセイ方法 ： １． 薬剤は，無血清条件で試験する。 ２． 薬剤保存液（１００％ＤＭＳＯ中）を９６ウエルポリプロピレンプレート
中でＤＭＥＭで１：１０に希釈し，１０μｌ／ウエルのこの溶液を細胞に移して
，最終薬剤希釈１：１００，最終ＤＭＳＯ濃度１．０％とする。細胞を５％ＣＯ 2 中で３７℃で２時間インキュベートする。 ３． 新鮮な細胞溶解緩衝液（ＨＮＴＧ＊）を調製する。 ＨＮＴＧ ２ｍｌ ＥＤＴＡ ０．１ｍｌ Ｎａ3ＶＯ4 ０．１ｍｌ Ｎａ4（Ｐ2Ｏ7） ０．１ｍｌ Ｈ2Ｏ ７．３ｍｌ ４． 薬剤を２時間インキュベートした後，１０μｌ／ウエルのＰＢＳ中２００
ｎＭＩＧＦ−１リガンドを細胞に移し（最終濃度２０ｎＭ），５％ＣＯ2で３７
℃で１０分間インキュベートする。 ５． 培地を除去し，１００μｌ／ウエルのＨＮＴＧ＊を加え，１０分間振盪す
る。細胞を顕微鏡下で観察して，これらが適切に溶解したか否かを見る。 ６． １２チャネルピペットを用いて細胞をプレートから掻き取り，吸引と分配
を繰り返すことにより溶解物をホモジナイズする。すべての溶解物を抗体コーテ
ィングＥＬＩＳＡプレートに移し，１時間振盪する。 ７． 溶解物を除去し，プレートを洗浄し，抗ｐＴｙｒ（ＴＢＳＴ中１：３，０
００）を１００μｌ／ウエルで移し，３０分間振盪する。 ８． 抗ｐＴｙｒを除去し，プレートを洗浄し，ＴＡＧＯ（ＴＢＳＴ中１：３，
０００）を１００μｌ／ウエルで移し，３０分間振盪する。 ９． 検出抗体を除去し，プレートを洗浄し，新鮮なＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2（１．２
μｌＨ2Ｏ2を１０ｍｌＡＢＴＳに加える）を１００μｌ／ウエルでプレートに移
して，発色を開始させる。 １０． ＤｙｎａｔｅｃＭＲ５０００で参照波長６３０ｎｍで４１０ｎｍのＯＤ
を測定する。[0649]Assay method : 1. Drugs are tested in serum-free conditions. 2. 96-well polypropylene plate with drug stock solution (in 100% DMSO)
Diluted 1:10 with DMEM in and transfer 10 μl / well of this solution to the cells
, Final drug dilution 1: 100, final DMSO concentration 1.0%. 5% CO Two Incubate at 37 ° C for 2 hours. 3. Prepare fresh cell lysis buffer (HNTG *). HNTG 2ml EDTA 0.1ml NaThreeVOFour 0.1 ml NaFour(PTwoO7) 0.1ml HTwoO 7.3 ml 4. After incubating the drug for 2 hours, 200 μl in 10 μl / well of PBS
The nMIGF-1 ligand was transferred to the cells (final concentration 20 nM) and 5% CO 2TwoAt 37
Incubate at 10 ° C for 10 minutes. 5. Remove the medium, add 100 μl / well of HNTG * and shake for 10 minutes
You. Observe the cells under a microscope to see if they have lysed properly. 6. Scrape cells from plate using 12-channel pipette, aspirate and distribute
Is repeated to homogenize the lysate. Antibody coating for all lysates
Transfer to the ELISA plate and shake for 1 hour. 7. Lysates were removed, plates were washed and anti-pTyr (1: 3,0 in TBST)
00) at 100 μl / well and shake for 30 minutes. 8. The anti-pTyr was removed, the plate was washed, and TAGO (1: 3 in TBST,
000) at 100 μl / well and shake for 30 minutes. 9. The detection antibody is removed, the plate is washed, and fresh ABTS / HTwoOTwo(1.2
μlHTwoOTwoTo 10 ml ABTS) at 100 μl / well.
To start coloring. 10. OD of 410 nm at 630 nm reference wavelength with Dynatec MR5000
Is measured.

【０６５０】ＥＧＦＲアッセイ ヒトＥＧＦ−Ｒを発現するよう遺伝子工学処理された細胞中のＥＧＦレセプタ
ーキナーゼ活性を以下に記載するように測定することができる。 EGFR Assay EGF receptor kinase activity in cells engineered to express human EGF-R can be measured as described below.

【０６５１】材料および試薬 ａ． ＥＧＦリガンド：保存液濃度＝１６．５μＭ；ＥＧＦ２０１，ＴＯＹＯＢ
Ｏ，Ｃｏ．，Ｌｔｄ．Ｊａｐａｎ ｂ． ０５−１０１（ＵＢＩ）（ＥＧＦＲ細胞外ドメインを認識するモノクロー
ナル抗体） ｃ． 抗ホスホチロシン抗体（抗Ｐｔｙｒ）（ポリクローナル） ｄ． 検出抗体：ヤギ抗ウサギｌｇＧ西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲー
ト，ＴＡＧＯ，Ｉｎｃ．，Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ ｅ． ＴＢＳＴ緩衝液： Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７ ５０ｍＭ ＮａＣｌ １５０ｍＭ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．１ ｆ． ＨＮＴＧ ５Ｘ保存液： ＨＥＰＥＳ ０．１Ｍ ＮａＣｌ ０．７５Ｍ グリセロール ５０ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ １．０％ ｇ． ＡＢＴＳ保存液： クエン酸 １００ｍＭ ＮａＶＯ4 ２５０ｍＭ ＨＣｌ（濃） ４．０ｐＨ ＡＢＴＳ* ０．５ｍｇ／ｍｌ 溶液は使用するまで暗所で４℃で保存する。 ｈ． 試薬保存液： ＥＤＴＡ １００ｍＭ ｐＨ７．０ Ｎａ3ＶＯ4 ０．５Ｍ Ｎａ4（Ｐ2０7） ０．２Ｍ Materials and Reagents a. EGF ligand: stock solution concentration = 16.5 μM; EGF201, TOYOB
O, Co. , Ltd. Japan b. 05-101 (UBI) (monoclonal antibody recognizing EGFR extracellular domain) c. Anti-phosphotyrosine antibody (anti-Ptyr) (polyclonal) d. Detection antibody: goat anti-rabbit lgG horseradish peroxidase conjugate, TAGO, Inc. Burlingame, CA e. TBST buffer: Tris-HCl, pH7 50 mM NaCl 150 mM Triton X-100 0.1 f. HNTG 5X stock solution: HEPES 0.1 M NaCl 0.75 M glycerol 50 Triton X-100 1.0% g. ABTS stock solution: citric acid 100 mM NaVO 4 250 mM HCl (conc.) 4.0 pH ABTS * 0.5 mg / ml Store solution at 4 ° C. in the dark until use. h. Reagent storage solution: EDTA 100mM pH7.0 Na 3 VO 4 0.5M Na 4 (P 2 0 7) 0.2M

【０６５２】方法 ＥＬＩＳＡプレートのプレコート １． ＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ，９６ウエル，Ｃａｔ．＃２５８０
５−９６）をウエルあたりＰＢＳ中０．５μｇ，１５０μｌ最終容量／ウエルの
０５−１０１抗体でコーティングし，４℃で一夜保存する。コーティングしたプ
レートは４℃で保存した場合１０日間まで良好に使用しうる。 ２． 使用の日，コーティング緩衝液を除去し，ブロッキング緩衝液（ＰＢＳ中
５％Ｃａｒｎａｔｉｏｎインスタント脱脂乾燥ミルク）で置き換える。プレート
を振盪しながら室温（約２３℃−２５℃）で３０分間インキュベートする。使用
の直前に，ブロッキング緩衝液を除去し，プレートをＴＢＳＴ緩衝液で４回洗浄
する。 Method Precoat of ELISA plate ELISA plate (Corning, 96 well, Cat. # 2580)
5-96) are coated with 0.5 μg / well in PBS, 150 μl final volume / well of the 05-101 antibody and stored at 4 ° C. overnight. The coated plate can be used well up to 10 days when stored at 4 ° C. 2. On the day of use, remove the coating buffer and replace with blocking buffer (5% Carnation instant skim dry milk in PBS). Incubate the plate for 30 minutes at room temperature (about 23 ° C.-25 ° C.) with shaking. Immediately before use, remove the blocking buffer and wash the plate four times with TBST buffer.

【０６５３】細胞播種 １． このアッセイにはＮＩＨ３Ｔ３／Ｃ７細胞株（Ｈｏｎｅｇｇｅｒ，ｅｔ
ａｌ．，Ｃｅｌｌ５１：１９９−２０９，１９８７）を用いることができる。 ２． ８０−９０％コンフルエントの皿を実験用に選択する。細胞をトリプシン
処理し，１０％ＣＳ ＤＭＥＭ培地を加えることにより反応を停止させる。細胞
をＤＭＥＭ培地（１０％ＣＳ ＤＭＥＭ培地）中に懸濁し，１０００ｒｐｍで室
温で５分間，１回遠心分離する。 ３． 細胞を播種培地（ＤＭＥＭ，０．５％ウシ血清）に再懸濁し，トリパンブ
ルーを用いて細胞を計数する。９０％を越える生存率が許容範囲である。細胞を
９６ウエルマイクロタイタープレート上で，ＤＭＥＭ培地（０．５％ウシ血清）
中に，ウエルあたり１０，０００細胞の密度でウエルあたり１００μｌで播種す
る。播種した細胞を５％ＣＯ2，３７℃で約４０時間インキュベートする。[0653] Cell seeding The assay uses the NIH3T3 / C7 cell line (Honeyger, et al.).
al. , Cell 51: 199-209, 1987). 2. An 80-90% confluent dish is selected for the experiment. The cells are trypsinized and the reaction is stopped by adding 10% CS DMEM medium. The cells are suspended in DMEM medium (10% CS DMEM medium) and centrifuged once at 1000 rpm at room temperature for 5 minutes. 3. Resuspend cells in seeding medium (DMEM, 0.5% bovine serum) and count cells using trypan blue. Survival rates greater than 90% are acceptable. Cells are plated on a 96-well microtiter plate in DMEM medium (0.5% bovine serum).
Inoculate at a density of 10,000 cells per well at 100 μl per well. The seeded cells are incubated for about 40 hours at 37 ° C., 5% CO 2 .

【０６５４】アッセイ方法 １． 倒立顕微鏡を用いて，播種した細胞のコンタミネーションを調べる。試験
化合物保存液（ＤＭＳＯ中１０ｍｇ／ｍｌ）をＤＭＥＭ培地中で１：１０に希釈
し，次に５μｌを試験ウエルに移して，１：２００の最終薬剤希釈および１％の
最終ＤＭＳＯ濃度とする。対照ウエルにはＤＭＳＯのみを加える。５％ＣＯ2，
３７℃で１時間インキュベートする。 ２． ＥＧＦリガンドの調製：保存液ＥＧＦを，１０μｌの希釈ＥＧＦ（１：１
２希釈）を移したときに２５ｎＭの最終濃度が得られるように，ＤＭＥＭ中で希
釈する。 ３． ウエルあたり１００μｌに十分なように新鮮なＨＮＴＧ*１０ｍｌを調製
する。ＨＮＴＧ＊は以下のものを含む：ＨＮＴＧ保存液（２．０ｍｌ），ｍｉｌ
ｌｉ−ＱＨ2Ｏ（７．３ｍｌ），ＥＤＴＡ，１００ｍＭ，ｐＨ７．０（０．５ｍ
ｌ），Ｎａ3ＶＯ4０．５Ｍ（０．１ｍｌ）およびＮａ4（Ｐ2Ｏ7），０．２Ｍ（
０．１ｍｌ） ４． 氷上に置く。 ５． 薬剤とともに２時間インキュベーションした後，調製したＥＧＦリガンド
を，ウエルあたり１０μｌで，２５ｎＭの最終濃度となるように細胞に加える。
対照ウエルにはＤＭＥＭのみを加える。振盪しながら室温で５分間インキュベー
トする。 ６． 試験化合物，ＥＧＦおよびＤＭＥＭを除去する。細胞をＰＢＳで２回洗浄
する。ＨＮＴＧ*をウエルあたり１００μｌで細胞に移す。氷上に５分間置く。
その間に，他のＥＬＩＳＡプレートからブロッキング緩衝液を除去し，上述した
ようにＴＢＳＴで洗浄する。 ７. マイクロピペッターにぴったりと固定したピペットチップを用いて，細胞
をプレートからはがし，ＨＮＴＧ*溶解緩衝液を繰り返し吸引および分配するこ
とにより，細胞物質をホモジナイズする。コーティングし，ブロッキングし，洗
浄したＥＬＩＳＡプレートに溶解物を移す。振盪しながら室温で１時間インキュ
ベートする。 ８． 溶解物を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに希釈した抗Ｐｔｙｒ抗
体をウエルあたり１００μｌでＥＬＩＳＡプレートに移す。抗Ｐｔｙｒ抗血清（
ＴＢＳＴ中１：３０００希釈）の存在下で，振盪しながら室温で３０分間インキ
ュベートする。 ９． 抗Ｐｔｙｒ抗体を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに希釈したＴＡ
ＧＯ３０抗ウサギＩｇＧ抗体をＥＬＩＳＡプレートにウエルあたり１００μｌで
移す。振盪しながら室温で３０分間インキュベートする（抗ウサギＩｇＧ抗体：
ＴＢＳＴ中１：３０００希釈）。 １０． 検出抗体を除去し，ＴＢＳＴで４回洗浄する。新たに調製したＡＢＴＳ
／Ｈ2Ｏ2溶液をウエルあたり１００μｌでＥＬＩＳＡプレートに移す。室温で２
０分間インキュベートする（ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液：１０ｍｌＡＢＴＳ保存液中
１．２μｌの３０％Ｈ2Ｏ2）。 １１． ５０μｌの５ＮＨ2ＳＯ4を加えることにより反応を停止し（任意），４
１０ｎｍでＯ．Ｄ．を測定する。 １２． 最大ホスホチロシンシグナルは，陰性対照の値を陽性対照の値から差し
引くことにより決定する。次に，陰性対照を差し引いた後，抽出物含有ウエルに
ついてのホスホチロシン含有量のパーセント阻害を計算する。 Assay Method 1. Inspect the seeded cells for contamination using an inverted microscope. The test compound stock (10 mg / ml in DMSO) is diluted 1:10 in DMEM medium, then 5 μl is transferred to test wells for a final drug dilution of 1: 200 and a final DMSO concentration of 1%. Control wells receive only DMSO. 5% CO 2 ,
Incubate at 37 ° C. for 1 hour. 2. Preparation of EGF ligand: Stock solution EGF was diluted with 10 μl of diluted EGF (1: 1).
Dilute in DMEM so that a final concentration of 25 nM is obtained when transferring (2 dilutions). 3. Prepare 10 ml of fresh HNTG * enough for 100 μl per well. HNTG * includes: HNTG stock solution (2.0 ml), mil
li-QH 2 O (7.3ml) , EDTA, 100mM, pH7.0 (0.5m
l), Na 3 VO 4 0.5M (0.1 ml) and Na 4 (P 2 O 7 ), 0.2M (
0.1 ml) 4. Put on ice. 5. After 2 hours incubation with the drug, the prepared EGF ligand is added to the cells at a final concentration of 25 nM at 10 μl per well.
Control wells receive only DMEM. Incubate for 5 minutes at room temperature with shaking. 6. Remove test compound, EGF and DMEM. Wash cells twice with PBS. Transfer HNTG * to cells at 100 μl per well. Place on ice for 5 minutes.
Meanwhile, remove the blocking buffer from the other ELISA plates and wash with TBST as described above. 7. Using a pipette tip tightly secured to a micropipettor, detach cells from plate and homogenize cellular material by repeatedly aspirating and dispensing HNTG * lysis buffer. Transfer lysate to coated, blocked and washed ELISA plates. Incubate for 1 hour at room temperature with shaking. 8. Remove lysate and wash 4 times with TBST. Transfer the freshly diluted anti-Ptyr antibody at 100 μl per well to the ELISA plate. Anti-Ptyr antiserum (
Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking in the presence of (1: 3000 dilution in TBST). 9. Remove anti-Ptyr antibody and wash 4 times with TBST. Freshly diluted TA
Transfer GO30 anti-rabbit IgG antibody to ELISA plate at 100 μl per well. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking (anti-rabbit IgG antibody:
1: 3000 dilution in TBST). 10. Remove detection antibody and wash 4 times with TBST. ABTS newly prepared
Transfer the / H 2 O 2 solution to the ELISA plate at 100 μl per well. 2 at room temperature
Incubate for 0 min (ABTS / H 2 O 2 solution: 1.2 μl of 30% H 2 O 2 in 10 ml ABTS stock). 11. The reaction was stopped by adding 50 μl of 5NH 2 SO 4 (optional) and 4
O.D. D. Is measured. 12. The maximum phosphotyrosine signal is determined by subtracting the value of the negative control from the value of the positive control. Next, after subtraction of the negative control, the percent inhibition of phosphotyrosine content for the wells containing the extract is calculated.

【０６５５】Ｍｅｔ自己リン酸化アッセイ このアッセイは，Ｍｅｔレセプター上のＭｅｔ蛋白質チロシンキナーゼレベル
を分析することにより，Ｍｅｔチロシンキナーゼ活性を決定する Met Autophosphorylation Assay This assay determines Met tyrosine kinase activity by analyzing Met protein tyrosine kinase levels on Met receptors.

【０６５６】試薬 ａ． ＨＮＴＧ（５Ｘ保存溶液）：２３．８３ｇＨＥＰＥＳおよび４３．８３ｇ
ＮａＣｌを約３５０ｍｌｄＨ2Ｏに溶解する。ＨＣｌまたはＮａＯＨでｐＨを７
．２に調節し，５００ｍｌグリセロールおよび１０ｍｌＴｒｉｔｏｎＸ−１００
を加え，混合し，ｄＨ2Ｏを加えて総容量を１Ｌとする。１Ｘ作業溶液１Ｌを作
成するためには，２００ｍｌの５Ｘ保存溶液を８００ｍｌｄＨ2Ｏに加え，必要
に応じてｐＨを調べて調節し，４℃で保存する。 ｂ． ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水），Ｇｉｂｃｏ Ｃａｔ．＃４５
０−１３００ＥＢ（１Ｘ溶液） ｃ． ブロッキング緩衝液：５００ｍｌｄＨ2Ｏ中に，１００ｇＢＳＡ，１２．
１ｇＴｒｉｓ−ｐＨ７．５，５８．４４ｇＮａＣｌおよび１０ｍｌＴｗｅｅｎ−
２０を加え，希釈して総容量１Ｌとする。 ｄ． キナーゼ緩衝液：５００ｍｌｄＨ2Ｏに，１２．１ｇＴＲＩＳ（ｐＨ７．
２），５８．４ｇＮａＣｌ，４０．７ｇＭｇＣｌ2および１．９ｇＥＧＴＡを加
え，ｄＨ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｅ． ＰＭＳＦ（フッ化フェニルメチルスルホニル），Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃
Ｐ−７６２６，４３５．５ｍｇに１００％エタノールを総容量２５ｍｌとなるよ
うに加え，ボルテックスする。 ｆ． ＡＴＰ（細菌起源），Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃Ａ−７６９９，粉末を−２
０℃で保存する；作業溶液を作成するためには，３．３１ｍｇを１ｍｌｄＨ2Ｏ
中に溶解する。 ｇ． ＲＣ−２０Ｈ ＨＲＰＯコンジュゲート化抗ホスホチロシン，Ｔｒａｎｓ
ｄｕｃｔｉｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｃａｔ．＃Ｅ１２０Ｈ ｈ． Ｐｉｅｒｃｅ １−Ｓｔｅｐ（商標）Ｔｕｒｂｏ−ＴＭＢ−ＥＬＩＳＡ（
３，３'，５，５'−テトラメチルベンジジン），Ｐｉｅｒｃｅ Ｃａｔ．＃３４
０２２ ｉ． Ｈ2ＳＯ4，濃硫酸１ｍｌ（１８Ｎ）を３５ｍｌｄＨ2Ｏに加える。 ｊ． ＴＲＩＳ ＨＣＬ，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ１５２−５；材料１
２１．１４ｇに６００ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏを加え，ＨＣｌでｐＨを７．
５（または７．２）に調節し，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで容量を１Ｌとする。 ｋ． ＮａＣｌ，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ２７１−１０，５Ｍ溶液を作成
する。 ｌ． Ｔｗｅｅｎ−２０，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ３３７−５００ ｍ． Ｎａ3ＶＯ4，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ４５４−５０，材料１．８ｇ
に８０ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏを加え，ＨＣｌまたはＮａＯＨでｐＨを１０
．０に調節し，電子レンジで沸騰させ，冷却し，ｐＨを調べ，ｐＨが１０．０で
安定となるまでこの工程を繰り返し，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏを加えて総容量１０
０ｍｌとし，１ｍｌアリコートを作成し，−８０℃で保存する。 ｎ． ＭｇＣｌ2，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｍ３３−５００，１Ｍ溶液を作
成する。 ｏ． ＨＥＰＥＳ，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ３１０−５００，２００ｍ
ｌＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，材料５９．６ｇを加え，ｐＨを７．５に調節し，総
容量２５０ｍｌとし，濾過滅菌する。 ｐ． アルブミン，ウシ（ＢＳＡ），Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃Ａ−４５０３，材
料３０ｇに滅菌蒸留水を加えて総容量３００ｍｌとし，４℃で保存する。 ｑ． ＴＢＳＴ緩衝液：１Ｌの目盛り付きシリンダー中の約９００ｍｌのｄＨ2
Ｏに６．０５７ｇＴＲＩＳおよび８．７６６ｇＮａＣｌを加え，溶解したとき，
ＨＣｌでｐＨを７．２に調節し，１．０ｍｌＴｒｉｔｏｎＸ−１００を加え，ｄ
Ｈ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｒ． ヤギアフィニティー精製抗体ウサギＩｇＧ（全分子），Ｃａｐｐｅｌ Ｃ
ａｔ．＃５５６４１ ｓ． 抗ｈ−Ｍｅｔ（Ｃ−２８）ウサギポリクローナルＩｇＧ抗体，Ｓａｎｔａ
Ｃｒｕｚ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃａｔ．＃ＳＣ−１６１ ｔ． 過渡的にトランスフェクションされたＥＧＦＲ／Ｍｅｔキメラ細胞（ＥＭ
Ｒ）（Ｋｏｍａｄａ，ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，８：２３８１−２３９
０（１９９３） ｕ． 炭酸ナトリウム緩衝液，（Ｎａ2ＣＯ4，Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ４
９５）：材料１０．６ｇに８００ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏを加え，溶解した
とき，ＮａＯＨでｐＨを９．６に調節し，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１Ｌと
し，濾過し，４℃で保存する。 Reagent a. HNTG (5X stock solution): 23.83 g HEPES and 43.83 g
Dissolving the NaCl in about 350mldH 2 O. PH 7 with HCl or NaOH
. Adjusted to 2, 500 ml glycerol and 10 ml Triton X-100
Is added and mixed, and dH 2 O is added to bring the total volume to 1 L. To create a 1X working solution 1L is added 5X stock solution of 200ml to 800mldH 2 O, and adjusted pH checked if necessary, stored at 4 ° C.. b. PBS (Dulbecco's phosphate buffered saline), Gibco Cat. # 45
0-1300 EB (1X solution) c. Blocking buffer: 100 g BSA in 500 ml dH 2 O, 12.
1 g Tris-pH 7.5, 58.44 g NaCl and 10 ml Tween-
Add 20 and dilute to a total volume of 1 L. d. Kinase Buffer: 500mldH to 2 O, 12.1gTRIS (pH7.
2) Add 58.4 g NaCl, 40.7 g MgCl 2 and 1.9 g EGTA, and make up to 1 L total volume with dH 2 O. e. PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride), Sigma Cat. #
100% ethanol is added to 435.5 mg of P-7626 so that the total volume becomes 25 ml, and vortexed. f. ATP (of bacterial origin), Sigma Cat. # A-7699, powder -2
Store at 0 ° C .; to make a working solution, 3.31 mg is added to 1 ml dH 2 O
Dissolve in. g. RC-20H HRPO-conjugated anti-phosphotyrosine, Trans
Diction Laboratories Cat. # E120H h. Pierce 1-Step (TM) Turbo-TMB-ELISA (
3,3 ', 5,5'-tetramethylbenzidine), Pierce Cat. # 34
022 i. H 2 SO 4, is added concentrated sulfuric acid 1ml of (18N) in 35mldH 2 O. j. TRIS HCL, Fisher Cat. # BP152-5; Material 1
To 21.14 g, 600 ml of MilliQ H 2 O was added and the pH was adjusted to 7.0 with HCl.
Adjust to 5 (or 7.2) and bring the volume to 1 L with MilliQ H 2 O. k. NaCl, Fischer Cat. # S271-10, Make a 5M solution. l. Tween-20, Fischer Cat. # S337-500 m. Na 3 VO 4 , Fischer Cat. # S454-50, material 1.8g
80 ml of MilliQ H 2 O was added to the mixture and the pH was adjusted to 10 with HCl or NaOH.
. Adjust to 0, boil in the microwave, cool, check the pH, repeat this process until the pH is stable at 10.0, add MilliQ H 2 O and add a total volume of 10
Make 0 ml, make 1 ml aliquots, and store at -80 ° C. n. MgCl 2 , Fischer Cat. # M33-500, make 1M solution. o. HEPES, Fischer Cat. # BP310-500, 200m
the lMilliQ H 2 O, the material 59.6g added, the pH was adjusted to 7.5, and the total volume 250 ml, sterile filtered. p. Albumin, bovine (BSA), Sigma Cat. # A-4503 Add sterile distilled water to 30 g of the material to make a total volume of 300 ml, and store at 4 ° C. q. TBST buffer: about 900 ml dH 2 in a 1 L graduated cylinder
When 6.057 g TRIS and 8.766 g NaCl were added to O and dissolved,
Adjust the pH to 7.2 with HCl, add 1.0 ml Triton X-100, add d
The total volume is made 1 L with H 2 O. r. Yagia affinity purified antibody rabbit IgG (all molecules), Cappel C
at. # 55641 s. Anti-h-Met (C-28) rabbit polyclonal IgG antibody, Santa
Cruz Chemical Cat. # SC-161 t. Transiently transfected EGFR / Met chimeric cells (EM
R) (Komada, et al., Oncogene, 8: 2381-239).
0 (1993) u. Sodium carbonate buffer, (Na 2 CO 4 , Fischer Cat. # S4
95): 800 ml of MilliQ H 2 O was added to 10.6 g of the material, and when dissolved, the pH was adjusted to 9.6 with NaOH, the total volume was adjusted to 1 L with MilliQ H 2 O, filtered, and stored at 4 ° C. .

【０６５７】方法 以下の工程は，特に記載のない限り，全て室温で実施する。ＥＬＩＳＡプレー
ト洗浄は全てＴＢＳＴで４回すすぐことにより行う。 Methods The following steps are all performed at room temperature unless otherwise noted. All ELISA plate washes are performed by rinsing 4 times with TBST.

【０６５８】ＥＭＲ溶解 この方法は，レセプター捕捉の開始の前夜または直前に実施することができる
。 １． 溶解物を３７℃の水浴中で渦巻き動作により最後の結晶が消失するまで急
速に溶解する。 ２． 細胞ペレットを１ｍＭＰＭＳＦを含有する１Ｘ ＨＮＴＧ中で溶解する。
１５ｃｍ皿の細胞あたり３ｍｌのＨＮＴＧを用いる。計算したＨＮＴＧ容量の１
／２を加え，管を１分間ボルテックスし，残量のＨＮＴＧを加え，さらに１分間
ボルテックスする。 ３． 管の釣り合いをとり，１０，０００ｘｇ，１０分間，４℃で遠心分離する
。 ４． 上清をプールし，アリコートを除去して蛋白質測定を行う。 ５． プールしたサンプルをドライアイス／エタノール浴中で急速凍結する。こ
の工程は，溶解物を一夜保存するか蛋白質測定後に直ちに使用するかにかかわら
ず実施する。 ６． 標準的ビシンコニン酸（ＢＣＡ）法を用いて蛋白質測定を実施する（ＢＣ
Ａアッセイ試薬キット，Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃａｔ．＃２３２２
５）。 EMR Lysis This method can be performed the night before or just before the start of receptor capture. 1. The lysate is rapidly dissolved by swirling in a 37 ° C. water bath until the last crystal disappears. 2. The cell pellet is lysed in 1X HNTG containing 1 mM PMSF.
Use 3 ml of HNTG per 15 cm dish of cells. 1 of the calculated HNTG capacity
Add / 2, vortex the tube for 1 minute, add the remaining amount of HNTG and vortex for another minute. 3. The tubes are balanced and centrifuged at 10,000 xg for 10 minutes at 4 ° C. 4. Pool supernatants, remove aliquots and measure protein. 5. Quick freeze the pooled samples in a dry ice / ethanol bath. This step is performed whether the lysate is stored overnight or used immediately after protein measurement. 6. Perform protein measurements using the standard bicinchoninic acid (BCA) method (BC
A Assay Reagent Kit, Pierce Chemical Cat. # 2322
5).

【０６５９】ＥＬＩＳＡ法 １． Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートを，総ウエル容量５０μｌ
、ウエルあたり５μｇの炭酸塩緩衝液中のヤギ抗ウサギ抗体でコーティングする
。４℃で一夜保存する。 ２． プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合ヤギ抗ウサギ抗
体を除去する。 ３． １５０μｌのブロッキング緩衝液を各ウエルに加える。振盪しながら３０
分間インキュベートする。 ４． ＴＢＳＴで４回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて過
剰の液体および気泡を除去する。 ５． ウエル総容量１００μｌに対して，ＴＢＳＴ中で希釈したウサギ抗Ｍｅｔ
抗体をウエルあたり１μｇ加える。 ６． 溶解物をＨＮＴＧで希釈する（９０μｇ溶解物／１００μｌ）。 ７． 希釈した溶解物１００μｌを各ウエルに加える。６０分間振盪する。 ８． ＴＢＳＴで４回洗浄する。ペーパータオル上で軽くたたいて過剰の液体お
よび気泡を除去する。 ９． ウエルあたり５０μｌの１Ｘ溶解物緩衝液を加える。 １０． 化合物／抽出物をポリプロピレン９６ウエルプレート中で１Ｘキナーゼ
緩衝液中で１：１０に希釈する。 １１． 希釈した化合物５．５μｌをＥＬＩＳＡプレートウエルに移す。振盪し
ながら室温で２０分間インキュベートする。 １２． ウエルあたり５．５μｌの６０μＭＡＴＰ溶液を加える。陰性対照には
ＡＴＰを加えない。振盪しながら９０分間インキュベートする。 １３． ＴＢＳＴで４回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて
過剰の液体および気泡を除去する。 １４． ウエルあたり１００μｌのＲＣ２０（ブロッキング緩衝液中１：３００
０希釈）を加える。振盪しながら３０分間インキュベートする。 １５． ＴＢＳＴで４回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて
過剰の液体および気泡を除去する。 １６． ウエルあたり１００μｌのＴｕｒｂｏ−ＴＭＢを加える。振盪しながら
３０−６０分間インキュベートする。 １７． ウエルあたり１００μｌの１ＭＨ2ＳＯ4を加えて反応を停止させる。 １８． Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡリーダーでアッセイを読
む。試験フィルター＝４５０ｎｍ，参照フィルター＝４１０ｎｍ。 ELISA Method 1. Coming 96-well ELISA plate with 50 μl total well volume
, Coated with goat anti-rabbit antibody in 5 μg per well of carbonate buffer. Store overnight at 4 ° C. 2. Unbound goat anti-rabbit antibody is removed by inverting the plate and removing the liquid. 3. Add 150 μl of blocking buffer to each well. 30 with shaking
Incubate for minutes. 4. Wash 4 times with TBST. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid and air bubbles. 5. Rabbit anti-Met diluted in TBST to a total volume of 100 μl
Add 1 μg of antibody per well. 6. Dilute the lysate with HNTG (90 μg lysate / 100 μl). 7. Add 100 μl of the diluted lysate to each well. Shake for 60 minutes. 8. Wash 4 times with TBST. Tap excess light on a paper towel to remove excess liquid and air bubbles. 9. Add 50 μl IX lysate buffer per well. 10. Compounds / extracts are diluted 1:10 in IX kinase buffer in polypropylene 96 well plates. 11. Transfer 5.5 μl of diluted compound to ELISA plate wells. Incubate for 20 minutes at room temperature with shaking. 12. Add 5.5 μl of 60 μM ATP solution per well. ATP is not added to the negative control. Incubate for 90 minutes with shaking. 13. Wash 4 times with TBST. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid and air bubbles. 14． 100 μl of RC20 per well (1: 300 in blocking buffer)
0 dilution). Incubate for 30 minutes with shaking. 15. Wash 4 times with TBST. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid and air bubbles. 16. Add 100 μl Turbo-TMB per well. Incubate for 30-60 minutes with shaking. 17． The reaction is stopped by adding 100 μl of 1 MH 2 SO 4 per well. 18. Read the assay on a Dynatech MR7000 ELISA reader. Test filter = 450 nm, reference filter = 410 nm.

【０６６０】生化学的ｓｒｃアッセイ このアッセイを用いて，ビオチニル化ペプチドのリン酸化を読出しとして測定
することにより，ｓｒｃ蛋白質キナーゼ活性を決定する。 Biochemical src Assay This assay is used to determine src protein kinase activity by measuring the phosphorylation of a biotinylated peptide as a readout.

【０６６１】材料および試薬： ａ． ｓｒｃでトランスフォームした酵母（Ｓｕｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｒｅｄｗｏ
ｏｄＣｉｔｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ） ｂ． 細胞溶解物：ｓｒｃを発現する酵母細胞をペレット化し，水で１回洗浄し
，再びペレット化して，使用するまで−８０℃で保存する。 ｃ． Ｎ−末端ビオチニル化ＥＥＥＹＥＥＹＥＥＥＹＥＥＥＹＥＥＥＹは，当業
者に周知の標準的な方法により調製する。 ｄ． ＤＭＳＯ：Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ ｅ． ９６ウエルＥＬＩＳＡプレート：Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥａｓｙ Ｗ
ａｓｈ，改変平底プレート，Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃａｔ．＃２５８０５−９６ ｆ． ＮＵＮＣ９６ウエルＶ−底ポリプロピレンプレート，化合物の希釈用：Ａ
ｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃａｔ．＃Ａ−７２０９２ ｇ． Ｖｅｃａｓｔａｉｎ ＥＬＩＴＥ ＡＢＣ試薬：Ｖｅｃｔｏｒ，Ｂｕｒｌ
ｉｎｇａｍｅ，ＣＡ ｈ． 抗ｓｒｃ（３２７）ｍａｂ：Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ
Ｐｏｍｂｅを用いて組換えＳｒｃを発現させる（Ｓｕｐｅｒｔｉ−Ｆｕｒｇａ，
ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．，１２：２６２５−２６３４；Ｓｕｐｅｒｔｉ−
Ｆｕｒｇａ，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１４：６００−
６０５）。Ｓ．Ｐｏｍｂｅ ＳＰ２００株（ｈ−ｓ ｌｅｕｌ．３２ ｕｒａ４
ａｄｅ２１０）を記載されたように増殖させ，酢酸リチウム法（Ｓｕｐｅｒｔ
ｉ−Ｆｕｒｇａ，（上掲））によりｐＲＳＰ発現プラスミドでトランスフォーム
する。細胞は１μＭチアミンの存在下で増殖させてｎｍｔｌプロモーターの発現
を抑制するか，またはチアミンの非存在下で増殖させて発現を誘導する。 ｉ． モノクローナル抗ホスホチロシン，ＵＢＩ０５−３２１（代わりにＵＢ４
０を用いることができる） ｊ． Ｔｕｒｂｏ ＴＭＢ−ＥＬＩＳＡペルオキシダーゼ基質：Ｐｉｅｒｃｅ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Materials and Reagents: a. src transformed yeast (Sugen, Inc., Redwo)
odCity, California) b. Cell lysate: Pellet yeast cells expressing src, wash once with water, pellet again, and store at -80 ° C until use. c. N-terminal biotinylated EEEEYEYEEEEYEEEYEEEEY is prepared by standard methods well known to those skilled in the art. d. DMSO: Sigma, St. Louis, MO e. 96-well ELISA plate: Corning 96-well Easy W
ash, modified flat bottom plate, Corning Cat. # 25805-96 f. NUNC 96-well V-bottom polypropylene plate, for compound dilution: A
Applied Scientific Cat. # A-72092 g. Vecastain ELITE ABC reagent: Vector, Burl
ingame, CA h. Anti-src (327) mab: Schizosaccharomyces
Expression of recombinant Src using Pombe (Superti-Furga,
et al. , EMBO J .; , 12: 2625-2634; Superti-
Furga, et al. , Nature Biochem. , 14: 600-
605). S. Pombe SP200 strain (h-sleul.32 ura4
ade210) was grown as described and the lithium acetate method (Supert) was performed.
i-Furga, supra) with the pRSP expression plasmid. Cells are grown in the presence of 1 μM thiamine to suppress expression of the nmtl promoter, or are grown in the absence of thiamine to induce expression. i. Monoclonal anti-phosphotyrosine, UBI05-321 (alternatively UB4
0 can be used) j. Turbo TMB-ELISA peroxidase substrate: Pierce
Chemical

【０６６２】緩衝液溶液： ａ． ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水）：ＧＩＢＣＯ ＰＢＳ，ＧＩＢ
ＣＯ Ｃａｔ．＃４５０−１３００ＥＢ ｂ． ブロッキング緩衝液：５％無脂乳（Ｃａｒｎａｔｉｏｎ），ＰＢＳ中 ｃ 炭酸塩緩衝液：Ｎａ2ＣＯ4，Ｆｉｓｃｈｅｒ，Ｃａｔ．＃Ｓ４９５，１００
ｍＭ保存溶液を作成する。 ｄ． キナーゼ緩衝液：１．０ｍｌ（１Ｍ保存溶液から）ＭｇＣｌ2；０．２ｍ
ｌ（１Ｍ保存溶液から）ＭｎＣｌ2；０．２ｍｌ（１Ｍ保存溶液から）ＤＴＴ；
５．０ｍｌ（１Ｍ保存溶液から）ＨＥＰＥＳ；０．１ｍｌＴＸ−１００；Ｍｉｌ
ｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１０ｍｌとする。 ｅ． 溶解緩衝液：５．０ＨＥＰＥＳ（１Ｍ保存溶液から）；２．７４ｍｌＮａ
Ｃｌ（５Ｍ保存溶液から）；１０ｍｌグリセロール；１．０ｍｌＴＸ−１００；
０．４ｍｌＥＤＴＡ（１００ｍＭ保存溶液から）；１．０ｍｌＰＭＳＦ（１００
ｍＭ保存溶液から）；０．１ｍｌＮａ3ＶＯ4（０．１Ｍ保存溶液から）；Ｍｉｌ
ｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１００ｍｌとする。 ｆ． ＡＴＰ：Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃Ａ−７６９９，１０ｍＭ保存溶液（５．
５１ｍｇ／ｍｌ）を作成する。 ｇ ＴＲＩＳ−ＨＣｌ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ１５２−５，６００ｍ
ｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに１２１．１４ｇの物質を加え，ＨＣｌでｐＨを７．
５に調節し，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｈ． ＮａＣｌ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ２７１−１０，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで５Ｍ保存溶液を作成する。 ｉ． Ｎａ3ＶＯ4：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ４５４−５０；８０ｍｌのＭ
ｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，１．８ｇの物質を加える；ＨＣｌまたはＮａＯＨでｐＨ
を１０．０に調節する；電子レンジ中で沸騰させる；冷却する；ｐＨを調べ，加
熱／冷却サイクルの後にｐＨが安定に維持されるまでｐＨ調節を繰り返す；Ｍｉ
ｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１００ｍｌとする；１ｍｌのアリコートを作成し，−
８０℃で保存する。 ｊ． ＭｇＣｌ2：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｍ３３−５００，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで１Ｍ保存溶液を作成する。 ｋ． ＨＥＰＥＳ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ３１０−５００；２００ｍ
ｌＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，５９．６ｇの物質を加え，ｐＨを７．５に調節し，
ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量２５０ｍｌとし，濾過滅菌する（１Ｍ保存溶液）
。 ｌ． ＴＢＳＴ緩衝液：ＴＢＳＴ緩衝液：９００ｍｌのｄＨ2Ｏに，６．０５７
ｇＴＲＩＳおよび８．７６６ｇＮａＣｌを加える；ＨＣｌでｐＨを７．２に調節
し，１．０ｍｌＴｒｉｔｏｎ−Ｘ１００を加える；ｄＨ2Ｏで総容量１Ｌとする
。 ｍ． ＭｎＣｌ2：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｍ８７−１００，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで１Ｍ保存溶液とする。 ｎ． ＤＴＴ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ１７２−５ ｏ． ＴＢＳ（ＴＲＩＳ緩衝化食塩水）：９００ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに
，６．０５７ｇＴＲＩＳおよび８．７７７ｇＮａＣｌを加える；ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで総容量を１Ｌとする。 ｐ． キナーゼ反応混合物：アッセイプレート（１００ウエル）１枚あたりの量
：１．０ｍｌキナーゼ緩衝液，２００μｇＧＳＴ−ζ，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで
最終容量８．０ｍｌとする。 ｑ． ビオチン標識ＥＥＥＹＥＥＹＥＥＥＹＥＥＥＹＥＥＥＹ：水中のペプチド
保存溶液（１ｍＭ，２．９８ｍｇ／ｍｌ）を使用の直前に新たに作成する。 ｒ． Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ ＥＬＩＴＥ ＡＢＣ試薬：１４ｍｌの作業用試薬
を調製するためには，１滴の試薬Ａを１５ｍｌＴＢＳＴに加え，管を数回逆さに
して混合する。次に１滴の試薬Ｂを加える。管を室温で環状振盪器に入れ，３０
分間混合する。 Buffer Solution: a. PBS (Dulbecco's phosphate buffered saline): GIBCO PBS, GIB
CO Cat. # 450-1300EB b. Blocking buffer: 5% nonfat milk (Carnation), in PBS c Carbonate buffer: Na 2 CO 4 , Fisher, Cat. # S495, 100
Make a mM stock solution. d. Kinase buffer: 1.0 ml (from 1M stock solution) MgCl 2 ; 0.2 m
1 (from 1M stock solution) MnCl 2 ; 0.2 ml (from 1M stock solution) DTT;
5.0 ml HEPES (from 1M stock solution); 0.1 ml TX-100; Mil
Make up to 10 ml total volume with liq H 2 O. e. Lysis buffer: 5.0 HEPES (from 1M stock solution); 2.74 ml Na
Cl (from a 5M stock solution); 10 ml glycerol; 1.0 ml TX-100;
0.4 ml EDTA (from 100 mM stock solution); 1.0 ml PMSF (100
0.1 ml Na 3 VO 4 (from 0.1 M stock solution); Mil
Make up to 100 ml total volume with liq H 2 O. f. ATP: Sigma Cat. # A-7699, 10 mM stock solution (5.
51 mg / ml). g TRIS-HCl: Fischer Cat. # BP152-5,600m
Add 121.14 g of material to 1 of MilliQ H 2 O and adjust the pH to 7.0 with HCl.
Adjust to 5 and make up to 1 L total volume with MilliQ H 2 O. h. NaCl: Fischer Cat. # S271-10, MilliQ
To create a 5M stock solution in H 2 O. i. Na 3 VO 4 : Fischer Cat. # S454-50; 80 ml of M
Add 1.8 g of material to illiQ H 2 O; pH with HCl or NaOH
Adjust pH to 10.0; boil in microwave oven; cool; check pH and repeat pH adjustment until stable after heating / cooling cycle; Mi
Make up to 100 ml total volume with lliQ H 2 O; make 1 ml aliquots and
Store at 80 ° C. j. MgCl 2 : Fischer Cat. # M33-500, MilliQ
Make a 1M stock solution in H 2 O. k. HEPES: Fischer Cat. # BP310-500; 200m
To 1MilliQ H 2 O, add 59.6 g of substance, adjust pH to 7.5,
Make up to a total volume of 250 ml with MilliQ H 2 O and sterilize by filtration (1M stock solution)
. l. TBST buffer: TBST buffer: 6.057 in 900 ml dH 2 O
Add gTRIS and 8.766GNaCl; the pH was adjusted to 7.2 with HCl, add 1.0mlTriton-X100; a total volume 1L with dH 2 O. m. MnCl 2 : Fischer Cat. # M87-100, MilliQ
Make a 1M stock solution with H 2 O. n. DTT: Fischer Cat. # BP172-5 o. TBS (TRIS Buffered Saline): to MiIIiQ H 2 O in 900 ml, added 6.057gTRIS and 8.777gNaCl; MilliQ
The total volume is made up to 1 L with H 2 O. p. Kinase reaction mixture: Volume per assay plate (100 wells): 1.0 ml Kinase buffer, 200 μg GST-ζ, MilliQ H 2 O to a final volume of 8.0 ml. q. Biotin-labeled EEYEEYEEEEYEEEEYEEEEY: Make a fresh stock solution of peptide (1 mM, 2.98 mg / ml) in water just before use. r. Vectastain ELITE ABC Reagent: To prepare 14 ml of working reagent, add 1 drop of Reagent A to 15 ml TBST and invert tube several times to mix. Next, one drop of reagent B is added. Place the tube in an orbital shaker at room temperature,
Mix for a minute.

【０６６３】方法： ｓｒｃでコーティングしたＥＬＩＳＡプレートの調製 １． ＥＬＩＳＡプレートを１００μｌの炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ９．６）
中の０．５μｇ／ウエルの抗ｓｒｃモノクローナル抗体で，４℃で一夜コーティ
ングする。 ２． ウエルをＰＢＳで１回洗浄する。 ３． プレートをＰＢＳ中５％ミルク０．１５ｍｌで，室温で３０分間ブロッキ
ングする。 ４． プレートをＰＢＳで５回洗浄する。 ５． 溶解緩衝液中で希釈した，ｓｒｃでトランスフォームした酵母の溶解物を
１０μｇ／ウエルで加える（ウエルあたり総容量０．１ｍｌ）。（溶解物の量は
，バッチにより異なるであろう）。プレートを室温で２０分間振盪する。ホスホチロシン抗体でコーティングしたＥＬＩＳＡプレートの調製 １． ４Ｇ１０プレート：１００μｌＰＢＳ中の０．５μｇ／ウエルの４Ｇ１０
で４℃で一夜コーティングし，１５０μｌのＰＢＳ中５％ミルクで室温で３０分
間ブロッキングする。 キナーゼアッセイ法 １． 未結合蛋白質をプレートから除去し，プレートをＰＢＳで５回洗浄する。
２． ウエルあたり０．０８ｍｌのキナーゼ反応混合物（ウエルあたり１０μｌ
の１０Ｘキナーゼ緩衝液および１０μＭ（最終濃度）のビオチン−ＥＥＥＹＥＥ
ＹＥＥＥＹＥＥＥＹＥＥＥＹ，水中に希釈）を加える。 ３． １０％ＤＭＳＯを含有する水中に希釈した１０μｌの化合物を加え，室温
で１５分間プレインキュベートする。 ４． １０μｌ／ウエルの水中０．０５ｍＭＡＴＰ（最終５μＭＡＴＰ）を加え
ることにより，キナーゼ反応を開始させる。 ５． ＥＬＩＳＡプレートを室温で１５分間振盪する。 ６． ウエルあたり１０μｌの０．５ＭＥＤＴＡを加えることによりキナーゼ反
応を停止させる。 ７． ９０μｌの上清を，ブロッキングした４Ｇ１０コーティングＥＬＩＳＡプ
レートに移す。 ８． 振盪しながら室温で３０分間インキュベートする。 ９． プレートをＴＢＳＴで５回洗浄する。 １０． Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ ＥＬＩＴＥ ＡＢＣ試薬（１００μｌ／ウエル
）とともに室温で３０分間インキュベートする。 １１． ウエルをＴＢＳＴで５回洗浄する。 １２． Ｔｕｒｂｏ ＴＭＢで発色させる。 Method: Preparation of src coated ELISA plate Transfer the ELISA plate to 100 μl of sodium carbonate buffer (pH 9.6).
Coat with 0.5 μg / well of anti-src monoclonal antibody in at 4 ° C. overnight. 2. Wash wells once with PBS. 3. Plates are blocked with 0.15 ml of 5% milk in PBS for 30 minutes at room temperature. 4. Wash plate 5 times with PBS. 5. Add lysate of src transformed yeast, diluted in lysis buffer, at 10 μg / well (total volume 0.1 ml per well). (The amount of lysate will vary from batch to batch). Shake plate for 20 minutes at room temperature. Preparation of ELISA plate coated with phosphotyrosine antibody 4G10 plate: 0.5 μg / well 4G10 in 100 μl PBS
And block overnight at 4 ° C. with 150 μl of 5% milk in PBS for 30 minutes at room temperature. Kinase assay method Remove unbound protein from plate and wash plate 5 times with PBS.
2. 0.08 ml of kinase reaction mixture per well (10 μl per well)
10X kinase buffer and 10 μM (final concentration) of biotin-EEEYEE
YEEEYEEEEYEEEY, diluted in water). 3. Add 10 μl of compound diluted in water containing 10% DMSO and pre-incubate for 15 minutes at room temperature. 4. The kinase reaction is started by adding 10 μl / well of 0.05 mM ATP in water (final 5 μM ATP). 5. Shake the ELISA plate at room temperature for 15 minutes. 6. The kinase reaction is stopped by adding 10 μl of 0.5 MEDTA per well. 7. Transfer 90 μl of the supernatant to the blocked 4G10 coated ELISA plate. 8. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking. 9. Wash plate 5 times with TBST. 10. Incubate with Vectastain ELITE ABC reagent (100 μl / well) for 30 minutes at room temperature. 11. Wash wells 5 times with TBST. 12. Color is developed with Turbo TMB.

【０６６４】生化学的ｌｃｋアッセイ このアッセイを用いて，ＧＳＴ−ζのリン酸化を読出しとして測定することに
より，ｌｃｋ蛋白質キナーゼ活性を決定する Biochemical lck assay This assay is used to determine lck protein kinase activity by measuring GST-ζ phosphorylation as a readout.

【０６６５】材料および試薬： ａ． ｌｃｋでトランスフォームした酵母：Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙ
ｃｅｓ Ｐｏｍｂｅを用いて組換えＬｃｋを発現させる（Ｓｕｐｅｒｔｉ−Ｆｕ
ｒｇａ，ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ，１２：２６２５−２６３４；Ｓｕｐｅｒ
ｔｉ−Ｆｕｒｇａ，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，１４：６
００−６０５）。Ｓ．Ｐｏｍｂｅ ＳＰ２００株（ｈ−ｓ ｌｅｕｌ．３２ ｕ
ｒａ４ ａｄｅ２１０）を記載されたように増殖させ，ｐＲＳＰ発現プラスミド
で酢酸リチウム法によりトランスフォームする（Ｓｕｐｅｒｔｉ−Ｆｕｒｇａ，
（上掲））。細胞を１μＭチアミンの存在下で増殖させ，発現を誘導する。 ｂ． 細胞溶解物：ｌｃｋを発現する酵母細胞をペレット化し，水で１回洗浄し
，再ペレット化し，使用するまで−８０℃で凍結保存する。 ｃ． ＧＳＴ−ζ：細菌中で発現させるためのＧＳＴ−ζ融合蛋白質をコードす
るＤＮＡは，Ｈｏｗａｒｄ Ｈｕｇｈｅｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔ
ｅ，ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｓａｎ Ｆ
ｒａｎｃｉｓｃｏのＡｒｔｈｕｒ Ｗｅｉｓｓから入手する。トランスフォーム
した細菌を振盪しながら２５℃で一夜増殖させる。ＧＳＴ−ζは，グルタチオン
アフィニティークロマトグラフィー（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ａｌａｍｅｄａ，Ｃ
Ａ）により精製する。 ｄ． ＤＭＳＯ：Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ ｅ． ９６ウエルＥＬＩＳＡプレート：Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥａｓｙ Ｗ
ａｓｈ，改変平底プレート，Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃａｔ．＃２５８０５−９６ ｆ． ＮＵＮＣ９６ウエルＶ−底ポリプロピレンプレート，化合物希釈用：Ａｐ
ｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃａｔ．＃ＡＳ−７２０９２ ｇ． 精製ウサギ抗ＧＳＴ抗血清：Ａｍｒａｄ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ａｕ
ｓｔｒａｌｉａ）Ｃａｔ．＃９０００１６０５ ｈ． ヤギ抗ウサギ−ＩｇＧ−ＨＲＰ：Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｃａｔ．＃Ｖ０１０
３０１ ｉ． ヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）：Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｓ Ｃａｔ．＃
５２１５−００５−００３ ｊ． 抗Ｌｃｋ（３Ａ５）モノクローナル抗体：Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏ
ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣａｔ＃ｓｃ−４３３ ｋ． 抗ホスホチロシンモノクローナル抗体ＵＢＩ０５−３２１（代わりにＵＢ
４０を用いてもよい） Materials and Reagents: a. Yeast transformed by lck: Schizosaccharomy
Expression of recombinant Lck using ces Pombe (Superti-Fu
rga, et al. , EMBO J, 12: 2625-2634; Super.
ti-Furga, et al. , Nature Biotech. , 14: 6
00-605). S. Pombe SP200 strain (h-s leul. 32 u
ra4ade210) are grown as described and transformed with the pRSP expression plasmid by the lithium acetate method (Superti-Furga,
(Above)). Cells are grown in the presence of 1 μM thiamine to induce expression. b. Cell lysate: Yeast cells expressing lck are pelleted, washed once with water, re-pelleted and stored frozen at -80 ° C until use. c. GST-II: DNA encoding a GST-II fusion protein for expression in bacteria is available from Howard Hughes Medical Institute.
e, the University of California, San F
Obtained from Arthur Weiss of Ranchisco. The transformed bacteria are grown overnight at 25 ° C. with shaking. GST-ζ was obtained using glutathione affinity chromatography (Pharmacia, Alameda, C
Purify according to A). d. DMSO: Sigma, St. Louis, MO e. 96-well ELISA plate: Corning 96-well Easy W
ash, modified flat bottom plate, Corning Cat. # 25805-96 f. NUNC 96-well V-bottom polypropylene plate for compound dilution: Ap
plied Scientific Cat. # AS-72092 g. Purified rabbit anti-GST antiserum: Amrad Corporation (Au
stralia) Cat. # 900001605 h. Goat anti-rabbit-IgG-HRP: Amersham Cat. # V010
301 i. Goat anti-mouse IgG (H + L): Jackson Labs Cat. #
5215-005-003 j. Anti-Lck (3A5) monoclonal antibody: Santa Cruz Bio
technologyCat # sc-433 k. Anti-phosphotyrosine monoclonal antibody UBI05-321 (instead of UB
40 may be used)

【０６６６】緩衝液溶液： ａ． ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水）１Ｘ溶液：ＧＩＢＣＯＰＢＳ，
ＧＩＢＣＯ Ｃａｔ．＃４５０−１３００ＥＢ ｂ． ブロッキング緩衝液：１００ｇＢＳＡ，１２．１ｇＴＲＩＳ−ｐＨ７．５
，５８．４４ｇＮａＣｌ，１０ｍｌＴｗｅｅｎ−２０，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで
総容量１Ｌとする。 ｃ． 炭酸緩衝液：Ｎａ2ＣＯ4，Ｆｉｓｃｈｅｒ，Ｃａｔ．＃Ｓ４９５；Ｍｉｌ
ｌｉＱ Ｈ2Ｏで１００ｍＭ溶液とする。 ｄ． キナーゼ緩衝液：１．０ｍｌ（１Ｍ保存溶液より）ＭｇＣｌ2；０．２ｍ
ｌ（１Ｍ保存溶液より）ＭｎＣｌ2；０．２ｍｌ（１Ｍ保存溶液より）ＤＴＴ；
５．０ｍｌ（１Ｍ保存溶液より）ＨＥＰＥＳ；０．１ｍｌＴＸ−１００；Ｍｉｌ
ｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１０ｍｌとする。 ｅ． 溶解緩衝液：５．０ＨＥＰＥＳ（１Ｍ保存溶液より）；２．７４ｍｌＮａ
Ｃｌ（５Ｍ保存溶液より）；１０ｍｌグリセロール；１．０ｍｌＴＸ−１００；
０．４ｍｌＥＤＴＡ（１００ｍＭ保存溶液より）；１．０ｍｌＰＭＳＦ（１００
ｍＭ保存溶液より）；０．１ｍｌＮａ3ＶＯ4（０．１Ｍ保存溶液より）；Ｍｉｌ
ｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１００ｍｌとする。 ｆ． ＡＴＰ：Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃Ａ−７６９９，１０ｍＭ保存溶液（５．
５１ｍｇ／ｍｌ）を作成する。 ｇ ＴＲＩＳ−ＨＣｌ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ１５２−５，６００ｍ
ｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，１２１．１４ｇの物質を加え，ＨＣｌでｐＨを７
．５に調節し，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｈ． ＮａＣｌ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ２７１−１０，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで５Ｍ保存溶液を作成する。 ｉ Ｎａ3ＶＯ4：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｓ４５４−５０；８０ｍｌのＭｉ
ｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，１．８ｇの物質を加える；ＨＣｌまたはＮａＯＨでｐＨを
１０．０に調節する；電子レンジ中で沸騰させる；冷却する；ｐＨを調べ，加熱
／冷却サイクルの後にｐＨが安定となるまでｐＨ調節を繰り返す；ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量１００ｍｌとする；１ｍｌのアリコートを作成し，−８０℃で
保存する。 ｊ． ＭｇＣｌ2：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｍ３３−５００，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで１Ｍ保存溶液を作成する。 ｋ． ＨＥＰＥＳ：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ３１０−５００；２００ｍ
ｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，５９．６ｇの物質を加え，ｐＨを７．５に調節し
，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで総容量２５０ｍｌとし，濾過滅菌する（１Ｍ保存溶液
）。 ｌ． アルブミン，ウシ（ＢＳＡ），Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．＃Ａ４５０３；１５
０ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに，３０ｇの物質を加え，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで
総容量３００ｍｌとし，０．２２μｍフィルターを通して濾過し，４℃で保存す
る。 ｍ． ＴＢＳＴ緩衝液：９００ｍｌのｄＨ2Ｏに，６．０５７ｇＴＲＩＳおよび
８．７６６ｇＮａＣｌを加える；ＨＣｌでｐＨを７．２に調節する；１．０ｍｌ
Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００を加える；ｄＨ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｎ． ＭｎＣｌ2：Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃Ｍ８７−１００，ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで１Ｍ保存溶液を作成する。 ｏ． ＤＴＴ；Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．＃ＢＰ１７２−５ ｐ． ＴＢＳ（ＴＲＩＳ緩衝化食塩水）：９００ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏに
，６．０５７ｇＴＲＩＳおよび８．７７７ｇＮａＣｌを加える；ＭｉｌｌｉＱ
Ｈ2Ｏで総容量１Ｌとする。 ｑ キナーゼ反応混合物：アッセイプレート（１００ウエル）１枚あたりの量：
１．０ｍｌキナーゼ緩衝液，２００μｇＧＳＴ−ζ，ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏで最
終容量８．０ｍｌとする。 Buffer Solution: a. PBS (Dulbecco's phosphate buffered saline) 1X solution: GIBCO PBS,
GIBCO Cat. # 450-1300EB b. Blocking buffer: 100 g BSA, 12.1 g TRIS-pH 7.5
, 58.44 g NaCl, 10 ml Tween-20, MilliQ H 2 O to a total volume of 1 L. c. Carbonate buffer: Na 2 CO 4 , Fischer, Cat. # S495; Mil
Make up a 100 mM solution with liQ H 2 O. d. Kinase buffer: 1.0 ml (from 1M stock solution) MgCl 2 ; 0.2 m
1 (from 1M stock solution) MnCl 2 ; 0.2 ml (from 1M stock solution) DTT;
5.0 ml (from 1M stock solution) HEPES; 0.1 ml TX-100; Mil
Make up to 10 ml total volume with liq H 2 O. e. Lysis buffer: 5.0 HEPES (from 1M stock solution); 2.74 ml Na
Cl (from a 5M stock solution); 10 ml glycerol; 1.0 ml TX-100;
0.4 ml EDTA (from a 100 mM stock solution); 1.0 ml PMSF (100
0.1 ml Na 3 VO 4 (from 0.1 M stock solution); Mil
Make up to 100 ml total volume with liq H 2 O. f. ATP: Sigma Cat. # A-7699, 10 mM stock solution (5.
51 mg / ml). g TRIS-HCl: Fischer Cat. # BP152-5,600m
To 1 ml of MilliQ H 2 O, add 121.14 g of material and adjust the pH to 7 with HCl
. Adjust to 5 and make up to 1 L total volume with MilliQ H 2 O. h. NaCl: Fischer Cat. # S271-10, MilliQ
To create a 5M stock solution in H 2 O. i Na 3 VO 4 : Fischer Cat. # S454-50; 80 ml of Mi
Add 1.8 g of material to the liQ H 2 O; adjust pH to 10.0 with HCl or NaOH; boil in microwave; cool; check pH; pH stable after heating / cooling cycle The pH adjustment is repeated until pH is reached; make up to a total volume of 100 ml with MilliQ H 2 O; make 1 ml aliquots and store at −80 ° C. j. MgCl 2 : Fischer Cat. # M33-500, MilliQ
Make a 1M stock solution in H 2 O. k. HEPES: Fischer Cat. # BP310-500; 200m
in MiIIiQ H 2 O of l, added substances of 59.6 g, the pH was adjusted to 7.5, a total volume of 250ml in MiIIiQ H 2 O, filter sterilized (1M stock solution). l. Albumin, bovine (BSA), Sigma Cat. # A4503; 15
To 0 ml of MilliQ H 2 O, add 30 g of material, make up to a total volume of 300 ml with MilliQ H 2 O, filter through a 0.22 μm filter and store at 4 ° C. m. TBST buffer: To 900 ml dH 2 O, add 6.057 g TRIS and 8.766 g NaCl; adjust pH to 7.2 with HCl; 1.0 ml
Add Triton-X100; a total volume 1L with dH 2 O. n. MnCl 2 : Fischer Cat. # M87-100, MilliQ
Make a 1M stock solution in H 2 O. o. DTT; Fischer Cat. # BP172-5 p. TBS (TRIS Buffered Saline): to MiIIiQ H 2 O in 900 ml, added 6.057gTRIS and 8.777gNaCl; MilliQ
The total volume is made 1 L with H 2 O. q Kinase reaction mixture: Amount per assay plate (100 wells):
Make up to 1.0 ml final volume with 1.0 ml kinase buffer, 200 μg GST-ζ, MilliQ H 2 O.

【０６６７】方法： ＬｃｋでコーティングしたＥＬＩＳＡプレートの調製 １． １００μｌの炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ９．６）中のヤギ抗マウスＩｇ
Ｇ２．０μｇ／ウエルで，４℃で一夜コーティングする。 ２． ウエルをＰＢＳで１回洗浄する。 ３． プレートを０．１５ｍｌのブロッキング緩衝液で室温で３０分間ブロッキ
ングする。 ４． プレートをＰＢＳで５回洗浄する。 ５． ０．１ｍｌＰＢＳ中の抗ｌｃｋ（モノクローナル抗体３Ａ５）を０．５μ
ｇ／ウエルで室温で１−２時間加える。 ６． プレートをＰＢＳで５回洗浄する。 ７． 溶解緩衝液中に希釈した，ｌｃｋでトランスフォームした酵母の溶解物を
２０μｇ／ウエルで加える（ウエルあたり総容量０．１ｍｌ）。プレートを４℃
で一夜振盪して活性の喪失を防止する。 Method: Preparation of ELISA plates coated with Lck Goat anti-mouse Ig in 100 μl sodium carbonate buffer (pH 9.6)
Coat at 2.0 μg / well at 4 ° C. overnight. 2. Wash wells once with PBS. 3. Block the plate with 0.15 ml blocking buffer for 30 minutes at room temperature. 4. Wash plate 5 times with PBS. 5. 0.5 μl of anti-lck (monoclonal antibody 3A5) in 0.1 ml PBS
Add 1-2 hours at room temperature in g / well. 6. Wash plate 5 times with PBS. 7. Add lck-transformed yeast lysate diluted in lysis buffer at 20 μg / well (total volume 0.1 ml per well). Plate at 4 ° C
Shake overnight to prevent loss of activity.

【０６６８】ホスホチロシン抗体でコーティングしたＥＬＩＳＡプレートの調製 １． ＵＢ４０プレート：１００μｌＰＢＳ中の１．０μｇ／ウエルＵＢ４０を
４℃で一夜加え，１５０μｌのブロッキング緩衝液で少なくとも１時間ブロッキ
ングする。キナーゼアッセイ法 １． 未結合蛋白質をプレートから除去し，プレートをＰＢＳで５回洗浄する。
２． ウエルあたり０．０８ｍｌのキナーゼ反応混合物（ウエルあたり，水で希
釈した１０μｌの１０Ｘキナーゼ緩衝液および２μｇＧＳＴ−ζを含む）を加え
る。 ３． １０％ＤＭＳＯを含有する水中で希釈した化合物１０μｌを加え，室温で
１５分間プレインキュベートする。 ４． 水中０．１ｍＭＡＴＰ（最終濃度１０μＭＡＴＰ）を１０μｌ／ウエルで
加えることによりキナーゼ反応を開始させる。 ５． ＥＬＩＳＡプレートを室温で６０分間振盪する。 ６． ウエルあたり１０μｌの０．５ＭＥＤＴＡを加えることによりキナーゼ反
応を停止させる。 ７． ９０μｌの上清を，上述のＢ節からのブロッキングした４Ｇ１０コーティ
ングＥＬＩＳＡプレートに移す。 ８． 振盪しながら室温で３０分間インキュベートする。 ９． プレートをＴＢＳＴで５回洗浄する。 １０． １００μｌＴＢＳＴ中１：５０００に希釈したウサギ抗ＧＳＴ抗体とと
もに室温で３０分間インキュベートする。 １１． ウエルをＴＢＳＴで５回洗浄する。 １２． １００μｌのＴＢＳＴ中１：２０，０００に希釈したヤギ抗ウサギ−Ｉ
ｇＧ−ＨＲＰとともに室温で３０分間インキュベートする。 １３． ウエルをＴＢＳＴで５回洗浄する。 １４． Ｔｕｒｂｏ ＴＭＢで発色させる。 Preparation of ELISA Plate Coated with Phosphotyrosine Antibody UB40 plate: Add 1.0 μg / well UB40 in 100 μl PBS overnight at 4 ° C. and block with 150 μl blocking buffer for at least 1 hour. Kinase Assay Remove unbound protein from plate and wash plate 5 times with PBS.
2. Add 0.08 ml per well of the kinase reaction mixture (per well containing 10 μl of 10 × kinase buffer and 2 μg GST-ζ diluted in water). 3. Add 10 μl of compound diluted in water containing 10% DMSO and pre-incubate for 15 minutes at room temperature. 4. The kinase reaction is started by adding 10 mM / well of 0.1 mM ATP in water (final concentration 10 μM ATP). 5. Shake the ELISA plate at room temperature for 60 minutes. 6. The kinase reaction is stopped by adding 10 μl of 0.5 MEDTA per well. 7. Transfer 90 μl of the supernatant to the blocked 4G10 coated ELISA plate from section B above. 8. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking. 9. Wash plate 5 times with TBST. 10. Incubate with rabbit anti-GST antibody diluted 1: 5000 in 100 μl TBST for 30 minutes at room temperature. 11. Wash wells 5 times with TBST. 12. Goat anti-rabbit-I diluted 1: 20,000 in 100 μl TBST
Incubate with gG-HRP for 30 minutes at room temperature. 13. Wash wells 5 times with TBST. 14． Color is developed with Turbo TMB.

【０６６９】ＲＡＦのリン酸化機能を測定するアッセイ 以下のアッセイは，ＲＡＦにより触媒される，その標的蛋白質ＭＥＫならびに
ＭＥＫの標的であるＭＡＰＫのリン酸化の量を測定する。ＲＡＦ遺伝子配列は，
Ｂｏｎｎｅｒら（１９８５，Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５：１４００−
１４０７）に記載されており，多くの遺伝子配列データバンクにおいて容易にア
クセス可能である。核酸ベクターの構築および本発明のこの部分において用いら
れる細胞株は，Ｍｏｒｒｉｓｏｎら（１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ
．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８５：８８５５−８８５９）にすべて記載されている。 Assays for Measuring RAF Phosphorylation Function The following assays measure the amount of phosphorylation of RAF-catalyzed phosphorylation of its target protein MEK as well as MAPK, which is the target of MEK. The RAF gene sequence is
(1985, Molec. Cell. Biol. 5: 1400-).
1407) and is easily accessible in many gene sequence data banks. The construction of nucleic acid vectors and cell lines used in this part of the invention are described in Morrison et al. (1988, Proc. Natl. Acad.
. Sci. USA 85: 8855-8859).

【０６７０】材料および試薬 １． Ｓｆ９（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）細胞；ＧＩＢＣ
Ｏ−ＢＲＬ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ ２． ＲＩＰＡ緩衝液：２０ｍＭＴｒｉｓ／ＨＣ１ｐＨ７．４，１３７ｍＭＮａ
Ｃｌ，１０％グリセロール，１ｍＭＰＭＳＦ，５ｍｇ／Ｌアプロテニン，０．５
％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００； ３． チオレドキシン−ＭＥＫ融合蛋白質（Ｔ−ＭＥＫ）：Ｔ−ＭＥＫ 発現およびアフィニティークロマトグラフィーによる精製は，製造元の方法に従
って実施する。カタログ＃Ｋ３５０−０１およびＲ３５０−４０，Ｉｎｖｉｔｒ
ｏｇｅｎＣｏｒｐ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ ４． Ｈｉｓ−ＭＡＰＫ（ＥＲＫ２）；Ｈｉｓ−タグＭＡＰＫは，Ｈｉｓ−ＭＡ
ＰＫをコードするｐＵＣ１８ベクターによりトランスフォームしたＸＬ１ Ｂｌ
ｕｅ細胞中で発現させる。Ｈｉｓ−ＭＡＰＫはＮｉ−アフィニティークロマトグ
ラフィーにより精製する。Ｃａｔ＃２７−４９４９−０１，Ｐｈａｒｍａｃｉａ
，Ａｌａｍｅｄａ，ＣＡ，本明細書に記載されたとおり。 ５． ヤギ抗マウスＩｇＧ：Ｊａｃｋｓｏｎ ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｗｅ
ｓｔ Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ．カタログ，＃５１５−００６−００８，Ｌｏｔ＃２８
５６３ ６． ＲＡＦ−１蛋白質キナーゼ特異的抗体：ＵＲＰ２６５３，ＵＢＩ ７． コーティング緩衝液：ＰＢＳ；リン酸緩衝化食塩水，ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ
，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ ８． 洗浄緩衝液：ＴＢＳＴ−５０ｍＭＴｒｉｓ／ＨＣＬｐＨ７．２，１５０ｍ
ＭＮａＣｌ，０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ９． ブロッキング緩衝液：ＴＢＳＴ，０．１％エタノールアミンｐＨ７．４ １０． ＤＭＳＯ，Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ １１． キナーゼ緩衝液（ＫＢ）：２０ｍＭＨＥＰＥＳ／ＨＣｌ（ｐＨ７．２）
，１５０ｍＭＮａＣｌ，０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００，１ｍＭＰＭＳＦ，５
ｍｇ／Ｌアプロテニン，７５ｍＭオルトバナジウム酸ナトリウム，０．５ＭＭＤ
ＴＴおよび１０ｍＭＭｇＣｌ2 １２． ＡＴＰ混合物：ｌ００ｍＭＭｇＣｌ2，３００ｍＭＡＴＰ，１０ｍＣｉ
γ33ＰＡＴＰ（ＤｕＰｏｎｔ−ＮＥＮ）／ｍＬ １３ 停止溶液：１％リン酸；Ｆｉｓｈｅｒ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ １４． Ｗａｌｌａｃリン酸セルロースフィルターマット；Ｗａｌｌａｃ，Ｔｕ
ｒｋｕ，Ｆｉｎｎｌａｎｄ １５． フィルター洗浄溶液：１％リン酸，Ｆｉｓｈｅｒ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇ
ｈ，ＰＡ １６． Ｔｏｍｔｅｃプレート回収機，Ｗａｌｌａｃ，Ｔｕｒｋｕ，Ｆｉｎｎｌ
ａｎｄ １７． Ｗａｌｌａｃベータプレートリーダー＃１２０５，Ｗａｌｌａｃ，Ｔｕ
ｒｋｕ，Ｆｉｎｎｌａｎｄ １８． 化合物用に，ＮＵＮＣ９６ウエルＶ底ポリプロピレンプレート，Ａｐｐ
ｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ＃ＡＳ−７２０９２ Materials and Reagents Sf9 (Spodoptera frugiperda) cells; GIBC
1. O-BRL, Gaithersburg, MD RIPA buffer: 20 mM Tris / HCl pH 7.4, 137 mM Na
Cl, 10% glycerol, 1 mM PMSF, 5 mg / L aprotenin, 0.5
2.% Triton X-100; Thioredoxin-MEK fusion protein (T-MEK): T-MEK expression and purification by affinity chromatography are performed according to the manufacturer's methods. Catalog # K350-01 and R350-40, Invitr
ogenCorp. , San Diego, CA 4. His-MAPK (ERK2); His-tag MAPK is His-MA
XL1 B1 transformed with pUC18 vector encoding PK
ue cells. His-MAPK is purified by Ni-affinity chromatography. Cat # 27-4949-01, Pharmacia
, Alameda, CA, as described herein. 5. Goat anti-mouse IgG: Jackson laboratories, We
st Grove, PA. Catalog # 515-006-008, Lot # 28
563 6. 6. RAF-1 protein kinase specific antibody: URP2653, UBI Coating buffer: PBS; phosphate buffered saline, GIBCO-BRL
7. Gaithersburg, MD Wash buffer: TBST-50mM Tris / HCL pH 7.2, 150m
8. MNaCl, 0.1% Triton X-100 9. Blocking buffer: TBST, 0.1% ethanolamine pH 7.4 DMSO, Sigma, St. Louis, MO11. Kinase buffer (KB): 20 mM HEPES / HCl (pH 7.2)
, 150 mM NaCl, 0.1% Triton X-100, 1 mM PMSF, 5
mg / L aprotenin, 75 mM sodium orthovanadate, 0.5 MMD
TT and 10 mM MgCl 2 12. ATP mixture: 100 mM MgCl 2 , 300 mM ATP, 10 mCi
13. γ 33 PATP (DuPont-NEN) / mL 13 stop solution: 1% phosphoric acid; Fisher, Pittsburgh, PA Wallac phosphate cellulose filter mat; Wallac, Tu
rku, Finnland 15. Filter washing solution: 1% phosphoric acid, Fisher, Pittsburg
h, PA16. Tomtec plate recovery machine, Wallac, Turku, Finnl
and 17. Wallac Beta Plate Reader # 1205, Wallac, Tu
rku, Finnland 18. For compounds, NUNC 96-well V-bottom polypropylene plate, App
lied Scientific Catalog # AS-72092

【０６７１】方法 以下のすべての工程は，特に指示しないかぎり，室温で実施する。 １． ＥＬＩＳＡプレートコーティング：ＥＬＩＳＡウエルを１００ｍｌのヤギ
抗マウスアフィニティー精製抗血清（１ｍｇ／ｌ００ｍＬコーティング緩衝液）
で４℃で一夜コーティングする。ＥＬＩＳＡプレートは，４℃で保存したとき，
２週間使用することができる。 ２． プレートを逆さにして液体を除去する。１００ｍＬのブロッキング溶液を
加え，３０分間インキュベートする。 ３． ブロッキング溶液を除去し，洗浄緩衝液で４回洗浄する。プレートをペー
パータオル上で軽くたたいて過剰の液体を除去する。 ４． 各ウエルに１ｍｇのＲＡＦ−１特異的抗体を加え，１時間インキュベート
する。工程３に記載したように洗浄する。 ５． ＲＡＳ／ＲＡＦで感染させたＳｆ９細胞からの溶解物を解凍し，ＴＢＳＴ
で１０ｍｇ／１００ｍＬに希釈する。１０ｍｇの希釈溶解物をウエルに加え，１
時間インキュベートする。インキュベーションの間，プレートを振盪する。陰性
対照には溶解物を加えない。各ウイルスにつきＭＯＩ５で細胞を組換えバキュロ
ウイルスで感染させた後，ＲＡＳ／ＲＡＦで感染させたＳｆ９昆虫細胞からの溶
解物を調製し，４８時間後に回収する。細胞をＰＢＳで１回洗浄し，ＲＩＰＡ緩
衝液中で溶解する。不溶物質を遠心分離（５分間，１００００ｘｇ）により除去
する。溶解物のアリコートをドライアイス／エタノール中で凍結し，使用まで−
８０℃で保存する。 ６． 非結合物質を除去し，上に簡単に述べたように洗浄する（工程３）。 ７． ウエルあたり２ｍｇのＴ−ＭＥＫおよび２ｍｇのＨｉｓ−ＭＡＥＰＫを加
え，キナーゼ緩衝液で容量を４０ｍＬに調節する。細胞抽出物からＴ−ＭＥＫお
よびＭＡＰＫを精製する方法は，本明細書の実施例に記載される。 ８． 化合物（保存溶液１０ｍｇ／ｍＬＤＭＳＯ）または抽出物をＴＢＳＴプラ
ス１％ＤＭＳＯ中であらかじめ２０倍に希釈する。５ｍＬのあらかじめ希釈した
化合物／抽出物を工程６に記載したウエルに加える。２０分間インキュベートす
る。対照には薬剤を加えない。 ９． ５ｍＬＡＴＰミックスを加えることによりキナーゼ反応を開始する。イン
キュベーションの間，ＥＬＩＳＡプレート振盪器でプレートを振盪する。 １０． ６０分後，３０ｍＬの停止溶液を各ウエルに加えることによりキナーゼ
反応を停止する。 １１． ホスホセルロースマットおよびＥＬＩＳＡプレートをＴｏｍｔｅｃプレ
ート回収機中に置く。フィルターを回収し，フィルター洗浄溶液で製造元の推奨
にしたがってこれを洗浄する。フィルターマットを乾燥する。フィルターマット
を密封し，ケース中に置く。ケースを放射活性検出装置に入れ，フィルターマッ
ト上の放射活性リンを定量する。 あるいは，アッセイプレートの個々のウエルからの４０ｍＬのアリコートを，
ホスホセルロースフィルターマットの対応する位置に移すことができる。フィル
ターを風乾した後，フィルターをトレイ中に置く。トレイを穏やかにロックし，
洗浄溶液を１５分間ごとに１時間交換する。フィルターマットを風乾する。フィ
ルターマットを密封し，サンプル中の放射活性リンを測定するのに適当なケース
中に入れる。ケースを検出装置に入れ，フィルターマット上の放射活性リンを定
量する。[0671] The method all of the following steps, unless otherwise indicated, carried out at room temperature. 1. ELISA plate coating: ELISA wells with 100 ml goat anti-mouse affinity purified antiserum (1 mg / 100 mL coating buffer)
And coat overnight at 4 ° C. When the ELISA plate is stored at 4 ° C,
Can be used for 2 weeks. 2. Invert plate to remove liquid. Add 100 mL of blocking solution and incubate for 30 minutes. 3. Remove the blocking solution and wash four times with wash buffer. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid. 4. Add 1 mg of RAF-1 specific antibody to each well and incubate for 1 hour. Wash as described in step 3. 5. Thaw lysates from Sf9 cells infected with RAS / RAF and thaw TBST
Dilute to 10 mg / 100 mL with. Add 10 mg of the diluted lysate to the wells and add 1
Incubate for hours. Shake plate during incubation. No lysate is added to the negative control. After infecting the cells with the recombinant baculovirus at MOI 5 for each virus, a lysate from Sf9 insect cells infected with RAS / RAF is prepared and harvested 48 hours later. Wash cells once with PBS and lyse in RIPA buffer. Insoluble material is removed by centrifugation (5 min, 10000 × g). Aliquots of the lysate are frozen in dry ice / ethanol and used until
Store at 80 ° C. 6. Remove unbound material and wash as described briefly above (step 3). 7. Add 2 mg T-MEK and 2 mg His-MAEPK per well and adjust the volume to 40 mL with kinase buffer. Methods for purifying T-MEK and MAPK from cell extracts are described in the Examples herein. 8. Compounds (10 mg / mL stock solution in DMSO) or extracts are pre-diluted 20-fold in TBST plus 1% DMSO. Add 5 mL of the pre-diluted compound / extract to the wells described in step 6. Incubate for 20 minutes. Controls receive no drug. 9. Initiate the kinase reaction by adding 5 mL ATP mix. During the incubation, shake the plate on an ELISA plate shaker. 10. After 60 minutes, the kinase reaction is stopped by adding 30 mL of stop solution to each well. 11. Place the phosphocellulose mat and ELISA plate in a Tomtec plate collector. Collect the filter and wash it with the filter wash solution according to the manufacturer's recommendations. Dry the filter mat. Seal the filter mat and place in the case. Place the case in a radioactivity detector and quantify the radioactive phosphorus on the filter mat. Alternatively, a 40 mL aliquot from each well of the assay plate is
It can be transferred to the corresponding position on the phosphocellulose filter mat. After air-drying the filter, place the filter in the tray. Lock the tray gently,
The wash solution is changed every 15 minutes for 1 hour. Air dry the filter mat. Seal the filter mat and place in a suitable case for measuring radioactive phosphorus in the sample. Place the case in the detector and quantify the radioactive phosphorus on the filter mat.

【０６７２】ＣＤＫ２／サイクリンＡ−阻害アッセイ このアッセイは，外部基質中のＣＤＫ２の蛋白質キナーゼ活性を測定する。 CDK2 / Cyclin A-Inhibition Assay This assay measures the protein kinase activity of CDK2 in an external substrate.

【０６７３】試薬： Ａ． 緩衝液Ａ（８０ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ７．２），４０ｍＭＭｇＣｌ2）：４
．８４ｇＴｒｉｓ（Ｆ．Ｗ．＝１２１．１ｇ／ｍｏｌ），４．０７ｇＭｇＣｌ2
（Ｆ．Ｗ．＝２０３．３１ｇ／ｍｏｌ），５００ｍｌＨ2Ｏ中に溶解。ＨＣｌで
ｐＨを７．２に調節する。 Ｂ． ヒストンＨ１溶液（０．４５ｍｇ／ｍｌヒストンＨ１および２０ｍＭＨＥ
ＰＥＳ（ｐＨ７．２）：１１．１１１ｍｌの２０ｍＭＨＥＰＥＳｐＨ７．２（４
７７ｍｇＨＥＰＥＳ（Ｆ．Ｗ．＝２３８．３ｇ／ｍｏｌ））中の５ｍｇヒストン
Ｈ１（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ），１００ｍｌｄｄＨ2Ｏ中に
溶解する。１ｍｌアリコートとして−８０℃で保存する。 Ｃ． ＡＴＰ溶液（６０μＭＡＴＰ，３００μｇ／ｍｌＢＳＡ，３ｍＭＤＴＴ）
：１２０μｌの１０ｍＭＡＴＰ，６００μｌの１０ｍｇ／ｍｌＢＳＡで２０ｍｌ
とし，１ｍｌアリコートとして−８０℃で保存する。 Ｄ． ＣＤＫ２溶液：ｃｄｋ２／サイクリンＡ，１０ｍＭＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．
２，２５ｍＭＮａＣｌ，０．５ｍＭＤＴＴ，１０％グリセロール中。９μｌアリ
コートとして−８０℃で保存する。 Reagents: A. Buffer A (80 mM Tris (pH 7.2), 40 mM MgCl 2 ): 4
. 84 g Tris (FW = 121.1 g / mol), 4.07 g MgCl 2
(FW = 203.31 g / mol), dissolved in 500 ml H 2 O. Adjust the pH to 7.2 with HCl. B. Histone H1 solution (0.45 mg / ml histone H1 and 20 mM HE
PES (pH 7.2): 11.111 ml of 20 mM HEPES pH 7.2 (4
77mgHEPES (F.W. = 238.3g / mol) ) 5mg histone H1 (Boehringer Mannheim in), dissolved in 100mlddH 2 O. Store at -80 ° C as 1 ml aliquots. C. ATP solution (60 μM ATP, 300 μg / ml BSA, 3 mM DTT)
: 20 μl of 120 μl of 10 mM ATP, 600 μl of 10 mg / ml BSA
And store at -80 ° C as 1 ml aliquots. D. CDK2 solution: cdk2 / cyclin A, 10 mM HEPES, pH7.
In 2,25 mM NaCl, 0.5 mM DTT, 10% glycerol. Store at -80 ° C as 9 μl aliquots.

【０６７４】プロトコル １． 阻害剤の溶液を，ｄｄＨ2Ｏ／１５％ＤＭＳＯ（ｖ／ｖ）で所望の最終ア
ッセイ濃度の３倍で調製する。 ２． ２０μｌの阻害剤をポリプロピレンの９６ウエルプレートのウエルに加え
る（または陽性および陰性対照については２０μｌの１５％ＤＭＳＯ）。 ３． ヒストンＨ１溶液（１ｍｌ／プレート），ＡＴＰ溶液（１ｍｌ／プレート
プラス陰性対照について１アリコート），およびＣＤＫ２溶液（９μｌ／プレー
ト）を解凍する。ＣＤＫ２は使用まで氷上に保存する。ＣＤＫ２溶液を適当にア
リコートに分けて，凍結解凍サイクルの繰り返しを避ける。 ４． ９μｌＣＤＫ２溶液を２．１ｍｌ緩衝液Ａ（プレートあたり）で希釈し，
混合し，２０μｌを各ウエルに加える。 ５． １ｍｌヒストンＨ１溶液を１ｍｌＡＴＰ溶液（プレートあたり）と混合し
て，１０ｍｌねじ蓋管に入れる。γ33Ｐ ＡＴＰを０．１５μＣｉ／２０μｌ（
アッセイ中，０．１５μＣｉ／ウエル）の濃度となるよう加える。ＢＳＡの泡を
避けるよう注意深く混合する。２０μｌを適当なウエルに加える。プレートをプ
レート振盪器上で混合する。陰性対照については，等量の２０ｍＭＨＥＰＥＳ（
ｐＨ７．２）とＡＴＰ溶液とを混合し，γ33Ｐ ＡＴＰを０．１５μＣｉ／２０
μｌ溶液の濃度となるように加える。２０μｌを適当なウエルに加える。 ６． 反応を６０分間進行させる。 ７． ３５μｌの１０％ＴＣＡを各ウエルに加える。プレートをプレート振盪器
上で混合する。 ８． ４０μｌの各サンプルをＰ３０フィルターマットの升目上にスポットする
。マットを乾燥させる（約１０−２０分間）。 ９． フィルターマットを２５０ｍｌの１％リン酸（ｄｄＨ2Ｏ １ｌあたり１
０ｍｌリン酸）で４Ｘ１０分間洗浄する。 １０． フィルターマットをベータプレートリーダーで計数する。 Protocol 1. A solution of the inhibitor is prepared in ddH 2 O / 15% DMSO (v / v) at three times the desired final assay concentration. 2. Add 20 μl of inhibitor to the wells of a 96-well polypropylene plate (or 20 μl of 15% DMSO for positive and negative controls). 3. Thaw Histone H1 solution (1 ml / plate), ATP solution (1 ml / plate plus 1 aliquot for negative control), and CDK2 solution (9 μl / plate). CDK2 is stored on ice until use. Divide the CDK2 solution appropriately into aliquots to avoid repeated freeze-thaw cycles. 4. Dilute 9 μl CDK2 solution with 2.1 ml buffer A (per plate),
Mix and add 20 μl to each well. 5. Mix 1 ml Histone H1 solution with 1 ml ATP solution (per plate) and place in a 10 ml screw cap tube. 0.15 μCi / 20 μl of γ 33 P ATP (
During the assay, add to a concentration of 0.15 μCi / well). Mix carefully to avoid BSA foam. Add 20 μl to the appropriate well. Mix plate on plate shaker. For the negative control, an equal volume of 20 mM HEPES (
pH 7.2) and an ATP solution, and γ 33 P ATP was added at 0.15 μCi / 20.
Add to a concentration of μl solution. Add 20 μl to the appropriate well. 6. The reaction is allowed to proceed for 60 minutes. 7. Add 35 μl of 10% TCA to each well. Mix plate on plate shaker. 8. Spot 40 μl of each sample on the squares of a P30 filter mat. Dry the mat (about 10-20 minutes). 9. Filter mat was added to 250 ml of 1% phosphoric acid (1 liter per ddH 2 O).
(0 ml phosphoric acid) for 4 × 10 minutes. 10. The filter mat is counted on a beta plate reader.

【０６７５】細胞／生物学的アッセイ ＰＤＧＦ−誘導性ＢｒｄＵ取り込みアッセイ 材料および試薬 ： （１） ＰＤＧＦ：ヒトＰＤＧＦ Ｂ／Ｂ；１２７６−９５６，Ｂｏｅｈｒｉｎ
ｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （２） ＢｒｄＵ標識試薬：１０ｍＭ，ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中，Ｃａｔ．Ｎｏ
．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ
（３） ＦｉｘＤｅｎａｔ：固定溶液（即使用可），Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２
２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （４） 抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ：ペルオキシダーゼとコンジュゲート化したマウス
モノクローナル抗体，Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （５） ＴＭＢ基質溶液：テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ），即使用可，Ｃａ
ｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒ
ｍａｎｙ （６） ＰＢＳ洗浄溶液：１ＸＰＢＳ，ｐＨ７．４（Ｓｕｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｒ
ｅｄｗｏｏｄ Ｃｉｔｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ） （７） アルブミン，ウシ（ＢＳＡ）：画分Ｖ粉末；Ａ−８５５１，Ｓｉｇｍａ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，ＵＳＡ （８）株ヒトＰＤＧＦ−Ｒを発現するよう遺伝子工学処理された３Ｔ３細胞 Cell / Biological Assay PDGF-Inducible BrdU Incorporation Assay Materials and Reagents : (1) PDGF: Human PDGF B / B; 1276-956, Boehrin
ger Mannheim, Germany (2) BrdU labeling reagent: 10 mM in PBS (pH 7.4), Cat. No
. 1647229, Boehringer Mannheim, Germany
(3) FixDenat: fixative solution (can be used immediately), Cat. No. 16472
29, Boehringer Mannheim, Germany (4) Anti-BrdU-POD: a mouse monoclonal antibody conjugated with peroxidase, Cat. No. 1647229, Boehringer
Mannheim, Germany (5) TMB substrate solution: tetramethylbenzidine (TMB), ready for use, Ca
t. No. 1647229, Boehringer Mannheim, Ger
many (6) PBS washing solution: 1X PBS, pH 7.4 (Sugen, Inc., R
(edwood City, California) (7) Albumin, bovine (BSA): fraction V powder; A-8551, Sigma
Chemical Co. , USA (8) 3T3 cells genetically engineered to express human PDGF-R

【０６７６】プロトコル （１） 細胞をＤＭＥＭ，１０％ＣＳ，２ｍＭＧｌｎ中で，９６ウエルプレート
に８０００細胞／ウエルで播種する。細胞を５％ＣＯ2中で３７℃で一夜インキ
ュベートする。 （２） ２４時間後，細胞をＰＢＳで洗浄し，次に無血清培地（０％ＣＳ ＤＭ
ＥＭ，０．１％ＢＳＡ）中で２４時間血清飢餓とする。 （３） 第３日に，リガンド（ＰＤＧＦ，３．８ｎＭ，ＤＭＥＭ，０．１％ＢＳ
Ａ中で調製）および試験化合物を細胞に同時に加える。陰性対照ウエルには，無
血清ＤＭＥＭおよび０．１％ＢＳＡのみを加える；陽性対照細胞には，リガンド
（ＰＤＧＦ）を加えるが試験化合物を加えない。試験化合物は，９６ウエルプレ
ート中で無血清ＤＭＥＭ中でリガンドとともに調製し，連続希釈して７種類の試
験濃度とする。 （４） リガンド活性化の２０時間後，希釈ＢｒｄＵ標識試薬（ＤＭＥＭ，０．
１％ＢＳＡ中１：１００）を加え，細胞をＢｒｄＵ（最終濃度＝１０μＭ）とと
もに１．５時間インキュベートする。 （５） 標識試薬とともにインキュベーションした後，デカントし，逆さにした
プレートをペーパータオル上で軽くたたくことにより，培地を除去する。Ｆｉｘ
Ｄｅｎａｔ溶液を加え（５０μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器上で室
温で４５分間インキュベートする。 （６） デカントし，逆さにしたプレートをペーパータオル上で軽くたたくこと
により，ＦｉｘＤｅｎａｔ溶液をよく除去する。ブロッキング溶液としてミルク
を加え（ＰＢＳ中５％脱水ミルク，２００μｌ／ウエル），プレートをプレート
振盪器上で室温で３０分間インキュベートする。 （７） デカントによりブロッキング溶液を除去し，ウエルをＰＢＳで１回洗浄
する。抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ溶液（ＰＢＳ，１％ＢＳＡ中１：１００希釈）を加え
（１００μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器上で室温で９０分間インキ
ュベートする。 （８） デカントし，ウエルをＰＢＳで５回すすぐことにより抗体コンジュゲー
トをよく除去し，プレートを逆さにしてペーパータオル上で軽くたたくことによ
り乾燥させる。 （９） ＴＭＢ基質溶液を加え（１００μｌ／ウエル），プレート振盪器で室温
で２０分間，発色が光度計による検出に十分となるまでインキュベートする。 （１０） サンプルの吸光度は，Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＥＬＩＳＡプレートリーダ
ーで４１０ｎｍで測定する（参照波長として４９０ｎｍで読みとるフィルターを
用いる"二波長"モード）。 Protocol (1) Cells are seeded at 8000 cells / well in 96-well plates in DMEM, 10% CS, 2 mM Gln. The cells are incubated overnight at 37 ° C. in 5% CO 2 . (2) After 24 hours, the cells are washed with PBS and then serum-free medium (0% CSDM)
(EM, 0.1% BSA) for 24 hours. (3) On the third day, ligand (PDGF, 3.8 nM, DMEM, 0.1% BS
A) and a test compound are added to the cells simultaneously. Negative control wells receive only serum-free DMEM and 0.1% BSA; positive control cells receive ligand (PDGF) but no test compound. Test compounds are prepared with ligand in serum-free DMEM in 96-well plates and serially diluted to seven test concentrations. (4) Twenty hours after ligand activation, the diluted BrdU labeling reagent (DMEM, 0.
(1: 100 in 1% BSA) is added and the cells are incubated for 1.5 hours with BrdU (final concentration = 10 μM). (5) After incubation with the labeling reagent, decant and remove the medium by tapping the inverted plate on a paper towel. Fix
Add Denat solution (50 μl / well) and incubate the plate on a plate shaker at room temperature for 45 minutes. (6) The FixDenat solution is thoroughly removed by tapping the decanted and inverted plate on a paper towel. Milk is added as blocking solution (5% dehydrated milk in PBS, 200 μl / well) and the plate is incubated for 30 minutes at room temperature on a plate shaker. (7) The blocking solution is removed by decanting, and the wells are washed once with PBS. An anti-BrdU-POD solution (1: 100 dilution in PBS, 1% BSA) is added (100 μl / well) and the plate is incubated for 90 minutes at room temperature on a plate shaker. (8) Decant and remove antibody conjugate well by rinsing wells 5 times with PBS and invert plate to dry by tapping on paper towel. (9) Add TMB substrate solution (100 μl / well) and incubate for 20 minutes at room temperature on a plate shaker until color development is sufficient for photometric detection. (10) The absorbance of the sample is measured at 410 nm with a Dynatech ELISA plate reader ("two wavelength" mode using a filter reading at 490 nm as reference wavelength).

【０６７７】ＥＧＦ−誘導性ＢｒｄＵ取り込みアッセイ 材料および試薬 （１） ＥＧＦ：マウスＥＧＦ，２０１；Ｔｏｙｏｂｏ，Ｃｏ．，Ｌｔｄ．Ｊａ
ｐａｎ （２） ＢｒｄＵ標識試薬：１０ｍＭ，ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中，Ｃａｔ．Ｎｏ
．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ
（３） ＦｉｘＤｅｎａｔ：固定溶液（即使用可），Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２
２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （４） 抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ：ペルオキシダーゼとコンジュゲート化したマウス
モノクローナル抗体，Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （５） ＴＭＢ基質溶液：テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ），即使用可，Ｃａ
ｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒ
ｍａｎｙ （６） ＰＢＳ洗浄溶液：１ＸＰＢＳ，ｐＨ７．４（Ｓｕｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｒ
ｅｄｗｏｏｄＣｉｔｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ） （７） アルブミン，ウシ（ＢＳＡ）：画分Ｖ粉末；Ａ−８５５１，Ｓｉｇｍａ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，ＵＳＡ （８） ヒトＥＧＦ−Ｒを発現するよう遺伝子工学処理された３Ｔ３細胞株 EGF-Inducible BrdU Incorporation Assay Materials and Reagents (1) EGF: Mouse EGF, 201; Toyobo, Co. , Ltd. Ja
pan (2) BrdU labeling reagent: 10 mM in PBS (pH 7.4), Cat. No
. 1647229, Boehringer Mannheim, Germany
(3) FixDenat: fixative solution (can be used immediately), Cat. No. 16472
29, Boehringer Mannheim, Germany (4) Anti-BrdU-POD: a mouse monoclonal antibody conjugated with peroxidase, Cat. No. 1647229, Boehringer
Mannheim, Germany (5) TMB substrate solution: tetramethylbenzidine (TMB), ready for use, Ca
t. No. 1647229, Boehringer Mannheim, Ger
many (6) PBS washing solution: 1X PBS, pH 7.4 (Sugen, Inc., R
edwoodCity, California) (7) Albumin, bovine (BSA): fraction V powder; A-8551, Sigma
Chemical Co. , USA (8) 3T3 cell line engineered to express human EGF-R

【０６７８】プロトコル （１） 細胞をＤＭＥＭ中１０％ＣＳ，２ｍＭＧｌｎで，９６ウエルプレート中
で８０００細胞／ウエルで播種する。細胞を５％ＣＯ2中で３７℃で一夜インキ
ュベートする。 （２） ２４時間後，細胞をＰＢＳで洗浄し，次に無血清培地（０％ＣＳ ＤＭ
ＥＭ，０．１％ＢＳＡ）中で２４時間血清飢餓とする。 （３） 第３日に，リガンド（ＥＧＦ，２ｎＭ，ＤＭＥＭ，０．１％ＢＳＡ中で
調製）および試験化合物を細胞に同時に加える。陰性対照ウエルには０．１％Ｂ
ＳＡを含む無血清ＤＭＥＭのみを加える。陽性対照細胞には，リガンド（ＥＧＦ
）を加えるが試験化合物を加えない。試験化合物は，９６ウエルプレート中で，
無血清ＤＭＥＭ中でリガンドとともに調製し，連続希釈して７種類の試験濃度と
する。 （４） リガンド活性化の２０時間後，希釈したＢｒｄＵ標識試薬（ＤＭＥＭ中
１：１００，０．１％ＢＳＡ）を加え，細胞をＢｒｄＵ（最終濃度＝１０μＭ）
とともに１．５時間インキュベートする。 （５） 標識試薬とともにインキュベートした後，デカントして逆さにしたプレ
ートをペーパータオル上で軽くたたくことにより培地を除去する。ＦｉｘＤｅｎ
ａｔ溶液を加え（５０μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器で室温で４５
分間インキュベートする。 （６） デカントして逆さにしたプレートをペーパータオル上で軽くたたくこと
によりＦｉｘＤｅｎａｔ溶液をよく除去する。ブロッキング溶液としてミルクを
加え（ＰＢＳ中５％脱水ミルク，２００μｌ／ウエル），プレートをプレート振
盪器で室温で３０分間インキュベートする。 （７） デカントによりブロッキング溶液を除去し，ウエルをＰＢＳで１回洗浄
する。抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ溶液（ＰＢＳ中１：１００希釈，１％ＢＳＡ）を加え
（１００μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器で室温で９０分間インキュ
ベートする。 （８） デカントし，ウエルをＰＢＳで５回すすぐことにより抗体コンジュゲー
トをよく除去し，プレートを逆さにしてペーパータオル上で軽くたたくことによ
り乾燥させる。 （９） ＴＭＢ基質溶液を加え（１００μｌ／ウエル），プレート振盪器で室温
で２０分間，発色が高度計検出に十分となるまでインキュベートする。 （１０） サンプルの吸光度は，Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＥＬＩＳＡプレートリーダ
ーで，４１０ｎｍ（参照波長として４９０ｎｍを読むフィルターを用いる"二波
長"モード”で）測定する。 Protocol (1) Cells are seeded at 8000 cells / well in 96 well plates with 10% CS, 2 mM Gln in DMEM. The cells are incubated overnight at 37 ° C. in 5% CO 2 . (2) After 24 hours, the cells are washed with PBS and then serum-free medium (0% CSDM)
(EM, 0.1% BSA) for 24 hours. (3) On the third day, the ligand (prepared in EGF, 2 nM, DMEM, 0.1% BSA) and the test compound are added simultaneously to the cells. 0.1% B for negative control wells
Add only serum-free DMEM with SA. Positive control cells include a ligand (EGF
) But without the test compound. Test compounds were prepared in 96 well plates.
Prepare with ligand in serum-free DMEM and serially dilute to 7 test concentrations. (4) Twenty hours after ligand activation, diluted BrdU labeling reagent (1: 100 in DMEM, 0.1% BSA) is added and cells are BrdU (final concentration = 10 μM).
For 1.5 hours. (5) After incubation with the labeling reagent, remove the medium by tapping the decanted inverted plate on a paper towel. FixDen
The at solution was added (50 μl / well) and the plate was shaken on a plate shaker at room temperature for 45 minutes.
Incubate for minutes. (6) Thoroughly remove the FixDenat solution by tapping the decanted and inverted plate on a paper towel. Milk is added as a blocking solution (5% dehydrated milk in PBS, 200 μl / well) and the plate is incubated for 30 minutes at room temperature on a plate shaker. (7) The blocking solution is removed by decanting, and the wells are washed once with PBS. Add anti-BrdU-POD solution (1: 100 dilution in PBS, 1% BSA) (100 μl / well) and incubate plate on plate shaker at room temperature for 90 minutes. (8) Decant and remove antibody conjugate well by rinsing wells 5 times with PBS and invert plate to dry by tapping on paper towel. (9) Add TMB substrate solution (100 μl / well) and incubate for 20 minutes at room temperature on a plate shaker until color development is sufficient for altimeter detection. (10) The absorbance of the sample is measured with a Dynatech ELISA plate reader at 410 nm (in "two-wavelength" mode using a filter that reads 490 nm as a reference wavelength).

【０６７９】ＥＧＦ−誘導性Ｈｅｒ２−推進ＢｒｄＵ取り込み 材料および試薬 ： （１） ＥＧＦ：マウスＥＧＦ，２０１；Ｔｏｙｏｂｏ，Ｃｏ．，Ｌｔｄ．Ｊａ
ｐａｎ （２）ＢｒｄＵ標識試薬：１０ｍＭ，ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中，Ｃａｔ．Ｎｏ．
１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （３） ＦｉｘＤｅｎａｔ：固定溶液（即使用可），Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２
２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （４） 抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ：ペルオキシダーゼとコンジュゲート化したマウス
モノクローナル抗体，Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （５） ＴＭＢ基質溶液：テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ），即使用可，Ｃａ
ｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒ
ｍａｎｙ （６） ＰＢＳ洗浄溶液：１ＸＰＢＳ，ｐＨ７．４，自社製。 （７） アルブミン，ウシ（ＢＳＡ）：画分Ｖ粉末；Ａ−８５５１，Ｓｉｇｍａ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，ＵＳＡ （８） ＥＧＦ−Ｒの細胞外ドメインおよびＨｅｒ２の細胞内ドメインを有する
キメラレセプターを発現するよう遺伝子工学処理された３Ｔ３細胞株 EGF-Inducible Her2-Propelled BrdU Incorporation Materials and Reagents : (1) EGF: Mouse EGF, 201; Toyobo, Co. , Ltd. Ja
pan (2) BrdU labeling reagent: 10 mM in PBS (pH 7.4), Cat. No.
1647229, Boehringer Mannheim, Germany (3) FixDenat: fixative solution (can be used immediately), Cat. No. 16472
29, Boehringer Mannheim, Germany (4) Anti-BrdU-POD: a mouse monoclonal antibody conjugated with peroxidase, Cat. No. 1647229, Boehringer
Mannheim, Germany (5) TMB substrate solution: tetramethylbenzidine (TMB), ready for use, Ca
t. No. 1647229, Boehringer Mannheim, Ger
many (6) PBS washing solution: 1X PBS, pH 7.4, manufactured in-house. (7) Albumin, bovine (BSA): fraction V powder; A-8551, Sigma
Chemical Co. (8) 3T3 cell line engineered to express a chimeric receptor having an extracellular domain of EGF-R and an intracellular domain of Her2

【０６８０】プロトコル ： （１） 細胞をＤＭＥＭ，１０％ＣＳ，２ｍＭＧｌｎ中で９６−ウエルプレート
に８０００細胞／ウエルで播種する。細胞を３７℃で５％ＣＯ2中で一夜インキ
ュベートする。 （２） ２４時間後，細胞をＰＢＳで洗浄し，次に無血清培地（０％ＣＳ ＤＭ
ＥＭ，０．１％ＢＳＡを含む）中で２４時間血清飢餓とする。 （３） 第３日に，リガンド（ＥＧＦ＝２ｎＭ，０．１％ＢＳＡを含むＤＭＥＭ
中で調製）および試験化合物を細胞に同時に加える。陰性対照ウエルには無血清
ＤＭＥＭ，０．１％ＢＳＡのみを加える；陽性対照細胞にはリガンド（ＥＧＦ）
を加えるが試験化合物は加えない。試験化合物は，無血清ＤＭＥＭ中でリガンド
とともに９６ウエルプレート中で調製し，連続希釈して７種類の試験濃度とする
。 （４） リガンド活性化の２０時間後，希釈ＢｒｄＵ標識試薬（ＤＭＥＭ中１：
１００，０．１％ＢＳＡ）を加え，細胞をＢｒｄＵ（最終濃度＝１０μＭ）とと
もに１．５時間インキュベートする。 （５） 標識試薬とともにインキュベートした後，デカントして逆さにしたプレ
ートをペーパータオル上で軽くたたくことにより培地を除去する。ＦｉｘＤｅｎ
ａｔ溶液を加え（５０μｌ／ウエル），プレートを室温でプレート振盪器で４５
分間インキュベートする。 （６） デカントし，逆さにしたプレートをペーパータオル上で軽くたたくこと
により，ＦｉｘＤｅｎａｔ溶液をよく除去する。ブロッキング溶液としてミルク
を加え（ＰＢＳ中５％脱水ミルク，２００μｌ／ウエル），プレートをプレート
振盪器上で室温で３０分間インキュベートする。 （７） デカントによりブロッキング溶液を除去し，ウエルをＰＢＳで１回洗浄
する。抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ溶液（ＰＢＳ，１％ＢＳＡ中１：１００希釈）を加え
（１００μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器上で９０分間室温でインキ
ュベートする。 （８） デカントし，ウエルをＰＢＳで５回すすぐことにより抗体コンジュゲー
トをよく除去し，プレートを逆さにしてペーパータオル上で軽くたたくことによ
り乾燥させる。 （９） ＴＭＢ基質溶液を加え（１００μｌ／ウエル），プレート振盪器で室温
で２０分間，発色が光度計検出に十分となるまでインキュベートする。 （１０） サンプルの吸光度を，Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＥＬＩＳＡプレートリーダ
ーで，４１０ｎｍで（参照波長として４９０ｎｍで読むフィルターを用いる"二
波長"モードで）測定する。 Protocol : (1) Seed cells at 8000 cells / well in 96-well plate in DMEM, 10% CS, 2 mM Gln. The cells are incubated overnight at 37 ° C. in 5% CO 2 . (2) After 24 hours, the cells are washed with PBS and then serum-free medium (0% CSDM)
Serum starved in EM, containing 0.1% BSA) for 24 hours. (3) On the third day, ligand (EGF = 2 nM, DMEM containing 0.1% BSA)
And the test compound are added to the cells simultaneously. Serum-free DMEM, 0.1% BSA only is added to negative control wells; ligand (EGF) is added to positive control cells
But not the test compound. Test compounds are prepared in 96-well plates with ligand in serum-free DMEM and serially diluted to seven test concentrations. (4) Twenty hours after ligand activation, the diluted BrdU labeling reagent (1: D in DMEM)
100, 0.1% BSA) and the cells are incubated with BrdU (final concentration = 10 μM) for 1.5 hours. (5) After incubation with the labeling reagent, remove the medium by tapping the decanted inverted plate on a paper towel. FixDen
at solution (50 μl / well) and plate at room temperature on a plate shaker.
Incubate for minutes. (6) The FixDenat solution is thoroughly removed by tapping the decanted and inverted plate on a paper towel. Milk is added as blocking solution (5% dehydrated milk in PBS, 200 μl / well) and the plate is incubated for 30 minutes at room temperature on a plate shaker. (7) The blocking solution is removed by decanting, and the wells are washed once with PBS. Add anti-BrdU-POD solution (PBS, 1: 100 dilution in 1% BSA) (100 μl / well) and incubate the plate on a plate shaker for 90 minutes at room temperature. (8) Decant and remove antibody conjugate well by rinsing wells 5 times with PBS and invert plate to dry by tapping on paper towel. (9) Add TMB substrate solution (100 μl / well) and incubate for 20 minutes at room temperature on a plate shaker until color development is sufficient for photometric detection. (10) The absorbance of the sample is measured on a Dynatech ELISA plate reader at 410 nm (in "two wavelength" mode using a filter reading at 490 nm as a reference wavelength).

【０６８１】ＩＧＦ１−誘導性ＢｒｄＵ取り込みアッセイ 材料および試薬 ： （１） ＩＧＦ１リガンド：ヒト，組換え；Ｇ５１１，Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒ
ｐ，ＵＳＡ （２） ＢｒｄＵ標識試薬：１０ｍＭ，ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中，Ｃａｔ．Ｎｏ
．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ
（３） ＦｉｘＤｅｎａｔ：固定溶液（即使用可），Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２
２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （４） 抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ：ペルオキシダーゼとコンジュゲート化したマウス
モノクローナル抗体，Ｃａｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ （５） ＴＭＢ基質溶液：テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ），即使用可，Ｃａ
ｔ．Ｎｏ．１６４７２２９，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒ
ｍａｎｙ （６） ＰＢＳ洗浄溶液：１ＸＰＢＳ，ｐＨ７．４（Ｓｕｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｒ
ｅｄｗｏｏｄ Ｃｉｔｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ） （７） アルブミン，ウシ（ＢＳＡ）：画分Ｖ粉末；Ａ−８５５１，Ｓｉｇｍａ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，ＵＳＡ （８） ヒトＩＧＦ−１レセプターを発現するよう遺伝子工学処理された３Ｔ３
細胞株 IGF1-Inducible BrdU Incorporation Assay Materials and Reagents : (1) IGF1 ligand: human, recombinant; G511, Promega Cor
p, USA (2) BrdU labeling reagent: 10 mM in PBS (pH 7.4), Cat. No
. 1647229, Boehringer Mannheim, Germany
(3) FixDenat: fixative solution (can be used immediately), Cat. No. 16472
29, Boehringer Mannheim, Germany (4) Anti-BrdU-POD: a mouse monoclonal antibody conjugated with peroxidase, Cat. No. 1647229, Boehringer
Mannheim, Germany (5) TMB substrate solution: tetramethylbenzidine (TMB), ready for use, Ca
t. No. 1647229, Boehringer Mannheim, Ger
many (6) PBS washing solution: 1X PBS, pH 7.4 (Sugen, Inc., R
(edwood City, California) (7) Albumin, bovine (BSA): fraction V powder; A-8551, Sigma
Chemical Co. , USA (8) 3T3 engineered to express human IGF-1 receptor
Cell line

【０６８２】プロトコル ： （１） 細胞をＤＭＥＭ，１０％ＣＳ，２ｍＭＧｌｎ中で９６−ウエルプレート
に８０００細胞／ウエルで播種する。細胞を５％ＣＯ2中，３７℃で一夜インキ
ュベートする。 （２） ２４時間後，細胞をＰＢＳで洗浄し，次に無血清培地（０％ＣＳ ＤＭ
ＥＭ，０．１％ＢＳＡ）中で２４時間血清飢餓とする （３） 第３日に，リガンド（ＩＧＦ１＝３．３ｎＭ，０．１％ＢＳＡを含むＤ
ＭＥＭ中で調製）および試験化合物を細胞に同時に加える。陰性対照ウエルには
０．１％ＢＳＡを含む無血清ＤＭＥＭのみを加える。陽性対照細胞にはリガンド
（ＩＧＦ１）を加えるが試験化合物を加えない。試験化合物は，９６ウエルプレ
ートで無血清ＤＭＥＭ中でリガンドとともに調製し，連続希釈して７種類の試験
濃度とする。 （４） リガンド活性化の１６時間後，希釈ＢｒｄＵ標識試薬（ＤＭＥＭ，０．
１％ＢＳＡ中１：１００）を加え，細胞をＢｒｄＵ（最終濃度＝１０μＭ）とと
もに１．５時間インキュベートする。 （５） 標識試薬とともにインキュベーションした後，デカントし，逆さにした
プレートをペーパータオル上で軽くたたくことにより培地を除去する。ＦｉｘＤ
ｅｎａｔ溶液を加え（５０μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器上で室温
で４５分間インキュベートする。 （６） デカントし，逆さにしたプレートをペーパータオル上で軽くたたくこと
によりＦｉｘＤｅｎａｔ溶液をよく除去する。ブロッキング溶液としてミルクを
加え（ＰＢＳ中５％脱水ミルク，２００μｌ／ウエル），プレートをプレート振
盪器上で室温で３０分間インキュベートする。 （７） ブロッキング溶液をデカントにより除去し，ウエルをＰＢＳで１回洗浄
する。抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ溶液（ＰＢＳ，１％ＢＳＡ中１：１００希釈）を加え
（１００μｌ／ウエル），プレートをプレート振盪器上で室温で９０分間インキ
ュベートする。 （８） デカントし，ウエルをＰＢＳで５回すすぐことにより抗体コンジュゲー
トをよく除去し，プレートを逆さにしペーパータオル上で軽くたたくことにより
乾燥する。 （９） ＴＭＢ基質溶液を加え（１００μｌ／ウエル），プレート振盪器上で室
温で２０分間，発色が光度計検出に十分となるまでインキュベートする。 （１０） サンプルの吸光度は，Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＥＬＩＳＡプレートリーダ
ーで，４１０ｎｍ（参照波長として４９０ｎｍで読むフィルターを用いる"二波
長"モード）で測定する。 Protocol : (1) Seed cells at 8000 cells / well in 96-well plate in DMEM, 10% CS, 2 mM Gln. The cells are incubated overnight at 37 ° C. in 5% CO 2 . (2) After 24 hours, the cells are washed with PBS and then serum-free medium (0% CSDM)
(EM, 0.1% BSA) for 24 hours serum starvation (3) On the third day, ligand (IGF1 = 3.3 nM, D containing 0.1% BSA)
(Prepared in MEM) and test compounds are added to the cells simultaneously. Negative control wells receive only serum-free DMEM containing 0.1% BSA. Positive control cells receive the ligand (IGF1) but no test compound. Test compounds are prepared with ligand in serum-free DMEM in 96-well plates and serially diluted to seven test concentrations. (4) 16 hours after ligand activation, the diluted BrdU labeling reagent (DMEM, 0.
(1: 100 in 1% BSA) is added and the cells are incubated for 1.5 hours with BrdU (final concentration = 10 μM). (5) After incubation with the labeling reagent, decant and remove the medium by tapping the inverted plate on a paper towel. FixD
Enat solution is added (50 μl / well) and the plate is incubated for 45 minutes at room temperature on a plate shaker. (6) The FixDenat solution is removed well by tapping the decanted and inverted plate on a paper towel. Milk is added as blocking solution (5% dehydrated milk in PBS, 200 μl / well) and the plate is incubated for 30 minutes at room temperature on a plate shaker. (7) The blocking solution is removed by decanting, and the wells are washed once with PBS. An anti-BrdU-POD solution (1: 100 dilution in PBS, 1% BSA) is added (100 μl / well) and the plate is incubated for 90 minutes at room temperature on a plate shaker. (8) Decant and remove antibody conjugate well by rinsing wells 5 times with PBS, invert plate and dry by tapping on paper towel. (9) Add TMB substrate solution (100 μl / well) and incubate for 20 minutes at room temperature on a plate shaker until color development is sufficient for photometric detection. (10) The absorbance of the sample is measured with a Dynatech ELISA plate reader at 410 nm ("two wavelength" mode using a filter reading at 490 nm as a reference wavelength).

【０６８３】ＦＧＦ−誘導性ＢｒｄＵ取り込みアッセイ このアッセイは，外来性ＦＧＦレセプターを発現する３Ｔｃ７／ＥＧＦｒ細胞
におけるＦＧＦ誘導性ＤＮＡ合成を測定する。FGF- Induced BrdU Incorporation Assay This assay measures FGF-induced DNA synthesis in 3Tc7 / EGFr cells expressing exogenous FGF receptor.

【０６８４】材料および試薬： １．ＦＧＦ：ヒトＦＧＦ２／ｂＦＧＦ（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ，Ｎｏ．１３２５６
−０２９） ２．ＢｒｄＵ標識試薬，（１０ｍＭＰＢＳ（ｐＨ７．４），Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅ
ｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ ＣａｔＮｏ．１６４７２２９） ３．Ｆｉｘｄｅｎａｔ固定溶液（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ Ｃ
ａｔ Ｎｏ．１６４７２２９） ４．抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ（ペルオキシダーゼとコンジュゲートしたマウスモノク
ローナル抗体，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ ＭａｎｎｈｅｉｍＣａｔ：．Ｎｏ．１６
４７２２９） ５．ＴＭＢ（テトラメチルベンジジン，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉ
ｍＣａｔ．Ｎｏ．１６４７２２９） ６．ＰＢＳ洗浄溶液，ｐＨ７．４（Ｓｕｇｅｎ，Ｉｎｃ．） ７．アルブミン，ウシ（ＢＳＡ），画分Ｖ粉末（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ
Ｃｏ．，Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ−８５５１） Materials and Reagents: FGF: human FGF2 / bFGF (Gibco BRL, No. 13256)
-029) 2. BrdU labeling reagent, (10 mM PBS (pH 7.4), Boehringe
r Mannheim CatNo. 1647229) 3. Fixenat fixative solution (Boehringer Mannheim C
at No. 1647229) 4. Anti-BrdU-POD (mouse monoclonal antibody conjugated with peroxidase, Boehringer Mannheim Cat: No. 16)
47229) 5. TMB (tetramethylbenzidine, Boehringer Mannhei
mCat. No. 1647229) 6. 6. PBS wash solution, pH 7.4 (Sugen, Inc.) Albumin, bovine (BSA), fraction V powder (Sigma Chemical)
Co. , Cat. No. A-8551)

【０６８５】方法 １．３Ｔ３遺伝子工学処理細胞株：３Ｔ３ｃ７／ＥＧＦｒ ２．細胞は，ＤＭＥＭ，１０％ＣＳおよび２ｍＭＧｌｎで，９６ウエルプレート
に８，０００細胞／ウエルで播種する。５％ＣＯ2中で３７℃で２４時間インキ
ュベートする。 ３．２４時間後，細胞をＰＢＳで洗浄し，次に，無血清培地（０％ＤＭＥＭ，０
．１％ＢＳＡ）中で２４時間血清飢餓とする。 ４．リガンド（ＦＧＦ２（ＤＭＥＭ中１．５ｎＭ，０．１％ＢＳＡ）および試験
化合物を同時に加える。陰性対照ウエルには０．１％ＢＳＡを含む無血清ＤＭＥ
Ｍのみを加え，陽性対照ウエルにはＦＧＦ２リガンドを加えるが試験化合物は加
えない。試験化合物は，９６ウエルプレート中で無血清ＤＭＥＭ中でリガンドと
ともに調製し，連続希釈して７種類の試験濃度とする。 ５．２０時間後，希釈ＢｒｄＵ標識試薬を細胞に加え（１：１００ＢｒｄＵ：Ｄ
ＭＥＭ，０．１％ＢＳＡ，最終濃度１０μＭ），１．５時間インキュベートする
。 ６．培地をデカントする。ペーパータオルで痕跡量の物質を除去する。ＦｉｘＤ
ｅｎａｔを加え（５０μｌ／ウエル），プレート振盪器で室温で４５分間インキ
ュベートする。 ７．Ｆｉｘｄｅｎａｔ溶液を除去する。ブロッキング溶液（ＰＢＳ中５％脱水ミ
ルク（２００μｌ／ウエル））を加え，プレート振盪器で室温で３０分間インキ
ュベートする。 ８．ブロッキング溶液をデカントし，ウエルをＰＢＳで１回洗浄する。抗Ｂｒｄ
Ｕ−ＰＯＤ溶液（ＰＢＳ中１：１００希釈，０．１％ＢＳＡ）を加え，プレート
振盪器で室温で９０分間インキュベートする。 ９．抗体コンジュゲートをデカントし，ウエルをＰＢＳで５回すすぐ。ペーパー
タオル上で逆さにして軽くたたくことによりプレートを乾燥する。 １０．ＴＭＢ溶液を加え（１００μｌ／ウエル），プレート振盪器で室温で２０
分間，発色が光度検出に十分となるまでインキュベートする。 １１．Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＥＬＩＳＡプレートリーダーで"二波長"モードを用い
，４９０ｎＭのフィルターを用いて，４１０ｎＭで吸光度を測定する。 Method 1. 3T3 genetically engineered cell line: 3T3c7 / EGFr Cells are seeded at 8,000 cells / well in 96-well plates in DMEM, 10% CS and 2 mM Gln. Incubate at 37 ° C. in 5% CO 2 for 24 hours. 3. After 24 hours, cells were washed with PBS and then serum-free medium (0% DMEM, 0%
. Serum starvation in 1% BSA) for 24 hours. 4. Simultaneously add ligand (FGF2 (1.5 nM in DMEM, 0.1% BSA) and test compound. Negative control wells in serum-free DME with 0.1% BSA
M only, FGF2 ligand is added to the positive control wells, but no test compound. Test compounds are prepared with ligand in serum-free DMEM in 96-well plates and serially diluted to seven test concentrations. 5. After 20 hours, diluted BrdU labeling reagent was added to the cells (1: 100 BrdU: D
(MEM, 0.1% BSA, final concentration 10 μM), and incubate for 1.5 hours. 6. Decant the medium. Remove traces of material with a paper towel. FixD
Add enaat (50 μl / well) and incubate for 45 minutes at room temperature on a plate shaker. 7. Remove the Fixdenat solution. Add blocking solution (5% dehydrated milk in PBS (200 μl / well)) and incubate for 30 minutes at room temperature on a plate shaker. 8. Decant the blocking solution and wash the wells once with PBS. Anti-Brd
Add U-POD solution (1: 100 dilution in PBS, 0.1% BSA) and incubate for 90 minutes at room temperature on a plate shaker. 9. Decant the antibody conjugate and rinse the wells 5 times with PBS. Dry the plate by inverting and tapping on a paper towel. 10. TMB solution was added (100 μl / well) and the plate was shaken at room temperature for 20 minutes.
Incubate for 1 minute until color development is sufficient for photometric detection. 11. The absorbance is measured at 410 nM using a 490 nM filter using the "dual wavelength" mode on a Dynatech ELISA plate reader.

【０６８６】生化学的ＥＧＦＲアッセイ このアッセイは，ＥＬＩＳＡを用いてＥＧＦＲのインビトロキナーゼ活性を測
定する Biochemical EGFR Assay This assay measures the in vitro kinase activity of EGFR using an ELISA.

【０６８７】材料および試薬 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥｌｉｓａプレート（ＣｏｒｎｉｎｇカタログＮ
ｏ．２５８０５−９６） ２．ＳＵＭ０１モノクローナル抗ＥＧＦＲ抗体（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌ
ａｂ，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．） ３．ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水，ＧｉｂｃｏカタログＮｏ．４５０
−１３００ＥＢ） ４．ＴＢＳＴ緩衝液 Materials and Reagents Corning 96-well Elisa plate (Corning Catalog N
o. 25805-96) 2. SUM01 monoclonal anti-EGFR antibody (Biochemistry L
ab, SUGEN, Inc. ) 3. PBS (Dulbecco's phosphate buffered saline, Gibco Catalog No. 450
-1300EB) 4. TBST buffer

【表３０】 ５．ブロッキング緩衝液：[Table 30] 5. Blocking buffer:

【表３１】 ６．Ａ４３１細胞溶解物（Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｌａｂ，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．
）７．ＴＢＳ緩衝液：[Table 31] 6. A431 cell lysate (Screening Lab, SUGEN, Inc.).
) 7. TBS buffer:

【表３２】 ８．ＴＢＳ＋１０％ＤＭＳＯ[Table 32] 8. TBS + 10% DMSO

【表３３】 ９．アデノシン−５'−三リン酸（ウマ筋肉からのＡＴＰ，Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ
．Ｎｏ．Ａ−５３９４） ｄＨ2Ｏ中１．０ｍＭ溶液を調製する。この試薬は使用の直前に作成し，氷上に
保存する。 １０．ＭｎＣｌ2 ｄＨ2Ｏ中１．０Ｍの保存溶液を調製する。 １１．ＡＴＰ／ＭｎＣｌ2リン酸化混合物[Table 33] 9. Adenosine-5'-triphosphate (ATP from horse muscle, Sigma Cat
. No. Preparing A-5394) dH 2 O in 1.0mM solutions. Make this reagent immediately before use and keep it on ice. 10. Prepare a 1.0 M stock solution in MnCl 2 dH 2 O. 11. ATP / MnCl 2 phosphorylation mixture

【表３４】 この試薬は，使用直前に調製し，氷上に保存しなければならない。 １２．ＮＵＮＣ９６ウエルＶ底ポリプロピレンプレート（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃ
ｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＳ−７２０９２） １３．エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ） ｄＨ2Ｏ中２００ｍＭの作業溶液を調製する。１０ＮＮａＯＨでｐＨ８．０に調
製する。 １４．ウサギポリクローナル抗ホスホチロシン血清（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
Ｌａｂ，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．） １５．ヤギ抗ウサギＩｇＧペルオキシダーゼコンジュゲート（Ｂｉｏｓｏｕｒｃ
ｅ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＬＴ０４０４） １６．ＡＢＴＳ（２，２'−アジノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−
硫酸），Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ−１８８８）[Table 34] This reagent must be prepared immediately before use and stored on ice. 12. NUNC 96-well V-bottom polypropylene plate (Applied Sc
entitic Cat. No. AS-72092) 13. Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) dH 2 O in 200mM work to prepare a solution. Adjust to pH 8.0 with 10N NaOH. 14． Rabbit polyclonal anti-phosphotyrosine serum (Biochemistry)
Lab, SUGEN, Inc. 15). Goat anti-rabbit IgG peroxidase conjugate (Biosource
e Cat. No. ALT0404) 16. ABTS (2,2′-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6)
Sulfuric acid), Sigma Cat. No. A-1888)

【表３５】 最初に，約９００ｍｌのｄＨ2Ｏ中で２つの成分を混合する。リン酸でｐＨを４
．０に調製する。ＡＢＴＳを加え，カバーし，約０．５時間放置し，濾過する。
溶液は使用前まで暗所で４℃で保存すべきである。 １７．過酸化水素３０％溶液（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｈ３２５） １８．ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2 １５ｍｌのＡＢＴＳ溶液と２．０μｌのＨ2Ｏ2を混合する。使用の５分前に調製
する。 １９．０．２ＭＨＣｌ[Table 35] First, mixing the two components in dH 2 O to about 900 ml. PH 4 with phosphoric acid
. Adjust to 0. Add ABTS, cover, leave for about 0.5 hour, and filter.
The solution should be stored at 4 ° C. in the dark before use. 17． 17. Hydrogen peroxide 30% solution (Fisher Cat. No. H325) ABTS / H 2 O 2 15 ml of ABTS solution and 2.0 μl of H 2 O 2 are mixed. Prepare 5 minutes before use. 19. 0.2 M HCl

【０６８８】方法 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートをウエルあたり１００μｌＰ
ＢＳ中０．５μｇのＳＵＭ０１でコーティングし，４℃で一夜保存する。 ２．プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合ＳＵＭ０１をウエ
ルから除去する。ｄＨ2Ｏで１回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽く
たたいて過剰の液体を除去する。 ３．１５０μｌのブロッキング緩衝液を各ウエルに加える。振盪しながら室温で
３０分間インキュベートする。 ４．プレートを脱イオン水で３回，次にＴＢＳＴで１回洗浄する。プレートをペ
ーパータオル上で軽くたたいて，過剰の液体および気泡を除去する。 ５．溶解物をＰＢＳ中で希釈する（７μｇ溶解物／１００μｌＰＢＳ）。 ６．１００μｌの希釈溶解物を各ウエルに加える。室温で６０分間振盪する。 ７．上述の工程４に記載したようにプレートを洗浄する。 ８．１２０μｌのＴＢＳを，捕捉ＥＧＦＲを含有するＥＬＩＳＡプレートに加え
る。 ９．試験化合物を９６ウエルポリプロピレンプレート中でＴＢＳで１：１０に希
釈する（すなわち，１０μｌ化合物＋９０μｌＴＢＳ）。 １０．１３．５μｌの希釈試験化合物をＥＬＩＳＡプレートに加える。対照ウエ
ルには１３．５μｌＴＢＳ＋１０％ＤＭＳＯを加える（ウエルには試験化合物を
加えない）。 １１．振盪しながら室温で３０分間インキュベートする。 １２．１５μｌリン酸化混合物を陰性対照ウエルを除くすべてのウエルに直接加
える。陰性対照ウエルにはＡＴＰ／ＭｎＣｌ2を加えない。（最終ウエル容量は
約１５０μｌ，各ウエル中３μＭＡＴＰ／５ｍＭＭｎＣｌ2の最終濃度となるは
ずである）。振盪しながら５分間インキュベートする。 １３．５分後，１６．５μｌの２００ｍＭＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）を各ウエルに
加えることにより反応を停止させ，振盪を続ける。ＥＤＴＡを加えた後，１分間
振盪する。 １４．脱イオン水で４回，ＴＢＳＴで２回洗浄する。 １５．ウエルあたり１００μｌの抗ホスホチロシン（ＴＢＳＴ中１：３０００希
釈）を加える。振盪しながら室温で３０−４５分間インキュベートする。 １６．上述の工程４に記載したように洗浄する。 １７．１００μｌのＢｉｏｓｏｕｒｃｅヤギ抗ウサギＩｇＧペルオキシダーゼコ
ンジュゲート（ＴＢＳＴ中１：２０００希釈）を各ウエルに加える。振盪しなが
ら室温で３０分間インキュベートする。 １８．上述の工程４に記載したように洗浄する。 １９．１００μｌのＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液を各ウエルに加える。 ２０．振盪しながら５−１０分間インキュベートする。気泡を除去する。 ２１．必要ならば，ウエルあたり１００μｌの０．２ＭＨＣｌを加えて，反応を
停止させる。 ２２．アッセイをＤｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡリーダーで読む
；試験フィルター：４１０ｎＭ参照フィルター：６３０Ｎｍ。 Method 1. Corning 96-well ELISA plate with 100 μl P / well
Coat with 0.5 μg SUM01 in BS and store at 4 ° C. overnight. 2. Unbound SUM01 is removed from the wells by inverting the plate and removing the liquid. Wash once with dH 2 O. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid. 3. Add 150 μl of blocking buffer to each well. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking. 4. The plate is washed three times with deionized water and then once with TBST. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid and air bubbles. 5. Dilute the lysate in PBS (7 μg lysate / 100 μl PBS). 6. Add 100 μl of diluted lysate to each well. Shake at room temperature for 60 minutes. 7. Wash the plate as described in step 4 above. 8. Add 120 μl of TBS to the ELISA plate containing captured EGFR. 9. Test compounds are diluted 1:10 with TBS in 96-well polypropylene plates (ie, 10 μl compound + 90 μl TBS). 10.13.5 μl of diluted test compound is added to the ELISA plate. Add 13.5 μl TBS + 10% DMSO to control wells (no test compound in wells). 11. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking. 12. Add 15 μl phosphorylation mixture directly to all wells except negative control wells. No ATP / MnCl 2 is added to the negative control wells. (The final well volume should be about 150 μl, resulting in a final concentration of 3 μM ATP / 5 mM MnCl 2 in each well). Incubate for 5 minutes with shaking. After 13.5 minutes, stop the reaction by adding 16.5 μl of 200 mM EDTA (pH 8.0) to each well and continue shaking. Shake for 1 minute after adding EDTA. 14． Wash 4 times with deionized water and 2 times with TBST. 15. Add 100 μl per well of anti-phosphotyrosine (1: 3000 dilution in TBST). Incubate for 30-45 minutes at room temperature with shaking. 16. Wash as described in step 4 above. 17. Add 100 μl Biosource goat anti-rabbit IgG peroxidase conjugate (1: 2000 dilution in TBST) to each well. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking. 18. Wash as described in step 4 above. 19. Add 100 μl ABTS / H 2 O 2 solution to each well. 20. Incubate for 5-10 minutes with shaking. Remove air bubbles. 21. If necessary, stop the reaction by adding 100 μl of 0.2 M HCl per well. 22. The assay is read on a Dynatech MR7000 ELISA reader; test filter: 410 nM reference filter: 630 Nm.

【０６８９】生化学的ＰＤＧＦＲアッセイ このアッセイは，ＥＬＩＳＡを用いてＰＤＧＦＲのインビトロキナーゼ活性を
測定する。 Biochemical PDGFR Assay This assay measures the in vitro kinase activity of PDGFR using an ELISA.

【０６９０】材料および試薬 特に記載しないかぎり，以下の試薬の作業溶液の調製は，上述の生化学的ＥＧ
ＦＲアッセイと同じである。 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥｌｉｓａプレート（ＣｏｒｎｉｎｇカタログＮ
ｏ．２５８０５−９６） ２．２８Ｄ４Ｃ１０モノクローナル抗ＰＤＧＦＲ抗体（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ Ｌａｂ，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．） ３．ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水，ＧｉｂｃｏカタログＮｏ．４５０
−１３００ＥＢ） ４．ＴＢＳＴ緩衝液 ５．ブロッキング緩衝液 ６．ＰＤＧＦＲ−β発現ＮＩＨ３Ｔ３細胞溶解物（Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｌａｂ
，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．） ７．ＴＢＳ緩衝液 ８．ＴＢＳ＋１０％ＤＭＳＯ ９．アデノシン−５'−三リン酸（ＡＴＰ，ウマ筋肉由来，Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ
．Ｎｏ．Ａ−５３９４） １０．ＭｎＣｌ2 １１．キナーゼ緩衝液リン酸化混合物 Materials and Reagents Unless otherwise noted, the preparation of working solutions of the following reagents was performed using the biochemical EG described above.
Same as FR assay. 1. Corning 96-well Elisa plate (Corning Catalog N
o. 25805-96) 2.28D4C10 monoclonal anti-PDGFR antibody (Biochemistr)
y Lab, SUGEN, Inc. ) 3. PBS (Dulbecco's phosphate buffered saline, Gibco Catalog No. 450
-1300EB) 4. TBST buffer 5. Blocking buffer 6. PDGFR-β expressing NIH3T3 cell lysate (Screening Lab
, SUGEN, Inc. ) 7. TBS buffer 8. 8. TBS + 10% DMSO Adenosine-5'-triphosphate (ATP, derived from horse muscle, Sigma Cat
. No. A-5394) 10. MnCl 2 11. Kinase buffer phosphorylation mixture

【表３６】 １２．ＮＵＮＣ９６ウエルＶ底ポリプロピレンプレート（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃ
ｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＳ−７２０９２） １３．エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ） １４．ウサギポリクローナル抗ホスホチロシン血清（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
Ｌａｂ，ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．） １５．ヤギ抗ウサギＩｇＧペルオキシダーゼコンジュゲート（Ｂｉｏｓｏｕｒｃ
ｅ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＬＩ０４０４） １６．２，２'−アジノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−硫酸）（Ａ
ＢＴＳ，Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ−１８８８） １７．過酸化水素３０％溶液（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｈ３２５） １８．ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2 １９．０．２ＭＨＣｌ[Table 36] 12. NUNC 96-well V-bottom polypropylene plate (Applied Sc
entitic Cat. No. AS-72092) 13. 13. Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) Rabbit polyclonal anti-phosphotyrosine serum (Biochemistry)
Lab, SUGEN, Inc. 15). Goat anti-rabbit IgG peroxidase conjugate (Biosource
e Cat. No. ALI0404) 16.2,2'-Azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfuric acid) (A
BTS, Sigma Cat. No. A-1888) 17. 17. Hydrogen peroxide 30% solution (Fisher Cat. No. H325) ABTS / H 2 O 2 19.0.2 M HCl

【０６９１】方法 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートをウエルあたり１００μｌＰ
ＢＳ中の０．５μｇの２８Ｄ４Ｃ１０でコーティングする。４℃で一夜保存する
。 ２．プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合２８Ｄ４Ｃ１０を
ウエルから除去する。ｄＨ2Ｏで１回洗浄する。プレートをペーパータオル上で
軽くたたいて過剰の液体を除去する。 ３．１５０μｌのブロッキング緩衝液を各ウエルに加える。振盪しながら室温で
３０分間インキュベートする。 ４．プレートを脱イオン水で３回，次にＴＢＳＴで１回洗浄する。プレートをペ
ーパータオル上で軽くたたいて，過剰の液体および気泡を除去する。 ５．溶解物をＨＮＴＧ中で希釈する（１０μｇ溶解物／１００μｌＨＮＴＧ） ６．１００μｌの希釈溶解物を各ウエルに加える。室温で６０分間振盪する。 ７．プレートを上述の工程４に記載したように洗浄する。 ８．８０μｌの作業用キナーゼ緩衝液混合物を捕捉ＰＤＧＦＲを含有するＥＬＩ
ＳＡプレートに加える。 ９．試験化合物を９６ウエルポリプロピレンプレート中でＴＢＳで１：１０に希
釈する（１０μｌ化合物＋９０μｌＴＢＳ）。 １０．１０μｌの希釈試験化合物をＥＬＩＳＡプレートに加える。対照ウエル（
試験化合物を加えないウエル）には１０μｌＴＢＳ＋１０％ＤＭＳＯを加える。
１１．振盪しながら室温で３０分間インキュベートする。 １２．１０μｌのＡＴＰを陰性対照ウエルを除く全てのウエルに直接加える。（
各ウエル中最終ウエル容量は２０μＭＡＴＰを含む約１００μｌとなるはずであ
る）。振盪しながら３０分間インキュベートする。 １３．３０分後，１０μｌの２００ｍＭＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）を各ウエルに加
えることにより反応を停止する。 １４．脱イオン水で４回，ＴＢＳＴで２回洗浄する。 １５．ウエルあたり１００μｌの抗ホスホチロシン（ＴＢＳＴ中１：３０００希
釈）を加える。振盪しながら室温で３０−４５分間インキュベートする。 １６．上述の工程４に記載したように洗浄する。 １７．１００μｌのＢｉｏｓｏｕｒｃｅヤギ抗ウサギＩｇＧペルオキシダーゼコ
ンジュゲート（ＴＢＳＴ中１：２０００希釈）を各ウエルに加える。振盪しなが
ら室温で３０分間インキュベートする。 １８．上述の工程４に記載したように洗浄する。 １９．１００μｌのＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液を各ウエルに加える。 ２０．振盪しながら１０−３０分間インキュベートする。気泡を除去する。 ２１．必要ならば，ウエルあたり１００μｌの０．２ＭＨＣｌを加えて反応を停
止する。 ２２．Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡリーダーでアッセイを読む
：試験フィルター：４１０ｎＭ，参照フィルター：６３０ｎＭ。 Method 1. Corning 96-well ELISA plate with 100 μl P / well
Coat with 0.5 μg of 28D4C10 in BS. Store overnight at 4 ° C. 2. Unbound 28D4C10 is removed from the wells by inverting the plate and removing the liquid. Wash once with dH 2 O. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid. 3. Add 150 μl of blocking buffer to each well. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking. 4. The plate is washed three times with deionized water and then once with TBST. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid and air bubbles. 5. Dilute lysate in HNTG (10 μg lysate / 100 μl HNTG) 6. Add 100 μl of diluted lysate to each well. Shake at room temperature for 60 minutes. 7. The plate is washed as described in step 4 above. 8. Capture 80 μl working kinase buffer mixture ELI containing PDGFR
Add to SA plate. 9. Test compounds are diluted 1:10 with TBS in 96-well polypropylene plates (10 μl compound + 90 μl TBS). 10. Add 10 μl of diluted test compound to the ELISA plate. Control wells (
10 μl TBS + 10% DMSO is added to the wells without test compound).
11. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking. 12. Add 10 μl ATP directly to all wells except negative control wells. (
The final well volume in each well should be about 100 μl containing 20 μM ATP). Incubate for 30 minutes with shaking. 13. After 30 minutes, stop the reaction by adding 10 μl of 200 mM EDTA (pH 8.0) to each well. 14． Wash 4 times with deionized water and 2 times with TBST. 15. Add 100 μl per well of anti-phosphotyrosine (1: 3000 dilution in TBST). Incubate for 30-45 minutes at room temperature with shaking. 16. Wash as described in step 4 above. 17. Add 100 μl Biosource goat anti-rabbit IgG peroxidase conjugate (1: 2000 dilution in TBST) to each well. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking. 18. Wash as described in step 4 above. 19. Add 100 μl ABTS / H 2 O 2 solution to each well. 20. Incubate for 10-30 minutes with shaking. Remove air bubbles. 21. If necessary, stop the reaction by adding 100 μl of 0.2 M HCl per well. 22. Read the assay on a Dynatech MR7000 ELISA reader: test filter: 410 nM, reference filter: 630 nM.

【０６９２】生化学的ＦＧＦＲアッセイ このアッセイは，ＥＬＩＳＡを用いてＭｙｃ−ＧｙｒＢ−ＦＧＦＲ融合蛋白質
のキナーゼ活性をインビトロで測定する。 Biochemical FGFR Assay This assay measures the kinase activity of the Myc-GyrB-FGFR fusion protein in vitro using an ELISA.

【０６９３】材料および試薬 １．ＨＮＴＧ Materials and Reagents HNTG

【表３７】 １リットルの５ｘ保存溶液を作成するためには，ＨＥＰＥＳおよびＮａＣｌを
約３５０ｍｌのｄＨ2Ｏに溶解し，ＨＣｌまたはＮａＯＨでｐＨを７．２に調節
し（用いるＨＥＰＥＳによる），グリセロール，ＴｒｉｔｏｎＸ１００を加え，
次にｄＨ2Ｏを加えて最終容量とする。 ２．ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水，Ｇｉｂｃｏカタログ＃４５０−１
３００ＥＢ） ３．ブロッキング緩衝液 ４．キナーゼ緩衝液[Table 37] To create one liter of 5x stock solution, dissolve the HEPES and NaCl in dH 2 O to about 350 ml, (by using HEPES) adjusted to pH 7.2 with HCl or NaOH, glycerol, TritonX100 added ,
Next, dH 2 O is added to the final volume. 2. PBS (Dulbecco's phosphate buffered saline, Gibco Catalog # 450-1
300EB) 3. Blocking buffer 4. Kinase buffer

【表３８】 ５．フッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ，Ｓｉｇｍａ，Ｃａｔ．Ｎｏ．
Ｐ−７６２６） 作業溶液：エタノール中１００ｍＭ ６．ＡＴＰ（細菌起源，Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ−７６９９） ６ｍＭの濃度の保存液のためには，１ｍｌのＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏあたり３．３
１ｍｇを用いる。 ７．ビオチンコンジュゲート化抗ホスホチロシンモノクローナル抗体（クローン
４Ｇ１０，Ｕｐｓｔａｔｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ．Ｃａｔ．Ｎ
ｏ．１６−１０３，Ｓｅｒ．Ｎｏ．１４４９５） ８．Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ Ｅｌｉｔｅ ＡＢＣ試薬（アビジンペルオキシダー
ゼコンジュゲート，Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｃａｔ．Ｎｏ．
ＰＫ−６１００） ９．ＡＢＴＳ溶液 １０．過酸化水素３０％溶液（Ｆｉｓｈｅｒカタログ＃Ｈ３２５） １１．ＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2 １２．０．２ＭＨＣｌ １３．ＴＲＩＳ ＨＣｌ（Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＢＰ１５２−５） ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中の１．０ｍＭ溶液を調製し，ＨＣｌでｐＨを７．２に調
節する １４．ＮａＣｌ（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｓ２７１−１０） ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中の５Ｍ溶液を調製する １５．ＭｇＣｌ2（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｍ３３−５００） ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中の１Ｍ溶液を調製する １６．ＨＥＰＥＳ（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＢＰ３１０−５００） ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中の１Ｍ溶液を調製し，ｐＨを７．５に調節し，濾過滅菌
する。 １７．ＴＢＳＴ緩衝液 １８．炭酸ナトリウム緩衝液（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｓ４９５） ＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中に０．１Ｍ溶液を調製し，ＮａＯＨでｐＨを９．６に調
製し，濾過する。 １９．ジチオスレイトール（ＤＴＴ，Ｆｉｓｈｅｒ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＢＰ１７２
−２５） 使用直前にＭｉｌｌｉＱ Ｈ2Ｏ中に０．５ｍＭの作業溶液を調製する。使用す
るまで−２０℃で保存し，残りは廃棄する。 ２０．ＭｎＣｌ2 ２１．ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ２２．ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｃａｐｐｅｌ） ２３．アフィニティー精製ウサギ抗ＧＳＴ ＧｙｒＢ（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ Ｌａｂ．ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．）[Table 38] 5. Phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF, Sigma, Cat. No.
P-7626) Working solution: 100 mM in ethanol ATP (bacterial origin, Sigma Cat.No.A-7699) for 6mM concentration of stock solution, MiIIiQ of 1 ml H 2 O per 3.3
Use 1 mg. 7. Biotin-conjugated anti-phosphotyrosine monoclonal antibody (clone 4G10, Upstate Biotechnology Inc. Cat. N.
o. 16-103, Ser. No. 14495) 8. Vectastain Elite ABC reagent (avidin peroxidase conjugate, Vector Laboratories Cat. No.
PK-6100) 9. ABTS solution 10. 10. 30% hydrogen peroxide solution (Fisher catalog # H325) ABTS / H 2 O 2 12.0.2M HCl 13. TRIS HCl (Fischer Cat.No.BP152-5) MilliQ H a 2 1.0 mM solution in O was prepared and the pH is adjusted to 7.2 with HCl 14. NaCl (Fisher Cat.No.S271-10) MilliQ H 2 5M solution 15 for preparing in O. MgCl 2 (Fisher Cat.No.M33-500) MilliQ H 2 1M solution preparing 16 in O. HEPES (Fisher Cat.No.BP310-500) MilliQ H 2 a 1M solution in O was prepared and the pH adjusted to 7.5, sterilized by filtration. 17． TBST buffer 18. Sodium carbonate buffer (Fisher Cat.No.S495) of 0.1M solution prepared in MilliQ H 2 O, the pH was adjusted to 9.6 with NaOH, and filtered. 19. Dithiothreitol (DTT, Fisher Cat. No. BP172)
-25) preparing 0.5mM of working solution in immediately before use MilliQ H 2 O. Store at -20 ° C until use, discard remainder. 20. MnCl 2 21. Triton X-100 22. 21. Goat anti-rabbit IgG (Cappel) Affinity purified rabbit anti-GST GyrB (Biochemistr)
y Lab. SUGEN, Inc. )

【０６９４】方法 以下の全ての工程は，特に記載しない限り，室温で実施する。 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートを，ウエルの総容量が１００
μｌとなるように，ウエルあたり２μｇの炭酸緩衝液中のヤギ抗ウサギ抗体でコ
ーティングする。４℃で一夜保存する。 ２．プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合ヤギ抗ウサギ抗体
を除去する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて，過剰の液体および気
泡を除去する。 ３．１５０μｌのブロッキング緩衝液（ＰＢＳ中５％低脂肪ミルク）を各ウエル
に加える。マイクロタイタープレート振盪器で振盪しながら３０分間インキュベ
ートする。 ４．ＴＢＳＴで４回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて，過
剰の液体および気泡を除去する。 ５．ウエルあたり０．５μｇのウサギ抗ＧｙｒＢ抗体を加える。抗体をＤＰＢＳ
中で希釈して最終容量をウエルあたり１００μｌとする。マイクロタイタープレ
ート振盪器で振盪しながら室温で１時間インキュベートする。 ６．工程４に記載したようにＴＢＳＴで４回洗浄する。 ７．ＨＮＴＧ中の２μｇのＣＯＳ／ＦＧＦＲ細胞溶解物（Ｍｙｃ−ＧｙｒＢ−Ｆ
ＧＦＲ源）を各ウエルに加えて，ウエルあたり１００μｌの最終容量とする。マ
イクロタイタープレート振盪器で振盪しながら１時間インキュベートする。 ８．工程４に記載したようにＴＢＳＴで４回洗浄する。 ９．ウエルあたり８０μｌの１ｘキナーゼ緩衝液を加える。 １０．ポリプロピレン９６ウエルプレート中で試験化合物を１ｘキナーゼ緩衝液
＋１％ＤＭＳＯで１：１０に希釈する。 １１．希釈した試験化合物溶液および対照ウエルの１０μｌをポリプロピレンプ
レートウエルから対応するＥＬＩＳＡプレートウエルに移し，マイクロタイター
プレート振盪器で振盪しながら２０分間インキュベートする。 １２．キナーゼ緩衝液中で希釈した７０μＭＡＴＰの１０μｌを陽性対照および
試験ウエル（最終ＡＴＰ濃度は７μＭ／ウエル）に加える。１０μｌの１ｘキナ
ーゼ緩衝液を陰性対照ウエルに加える。マイクロタイタープレート振盪器で振盪
しながら１５分間インキュベートする。 １３．５μｌの０．５ＭＥＤＴＡをすべてのウエルに加えることによりキナーゼ
反応を停止する。 １４．工程４に記載したようにＴＢＳＴで４回洗浄する。 １５．ＴＢＳＴ中で希釈したビオチンコンジュゲート化抗ホスホチロシンモノク
ローナル抗体（ｂ４Ｇ１０）１００μｌを各ウエルに加える。マイクロタイター
プレート振盪器で振盪しながら３０分間インキュベートする。 １６．Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ ＡＢＣ試薬を調製する。１滴の試薬Ａを１５ｍｌ
のＴＢＳＴに加える。管を数回逆さにすることにより混合する。１滴の試薬Ｂを
加え，再び混合する。 １７．工程４に記載したようにＴＢＳＴで４回洗浄する。 １８．１００μｌのＡＢＣ ＨＲＰ試薬を各ウエルに加える。マイクロタイター
プレート振盪器で振盪しながら３０分間インキュベートする。 １９．工程４に記載したようにＴＢＳＴで４回洗浄する。 ２０．１００μｌのＡＢＴＳ／Ｈ2Ｏ2溶液を各ウエルに加える。 ２２．振盪しながら５−１５分間インキュベートする。気泡を除去する。 ２３．必要ならば，１００μｌの０．２ＭＨＣｌ／ウエルを加えることにより 反応を停止させる。 ２４．アッセイをＤｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡプレートリーダ
ーで読む；試験フィルター：４１０ｎＭ，参照フィルター：６３０ｎＭ。[0694] The method following all steps, unless otherwise stated, carried out at room temperature. 1. Corning 96-well ELISA plate with 100 wells
Coat 2 μg per well with goat anti-rabbit antibody in carbonate buffer to give μl. Store overnight at 4 ° C. 2. Unbound goat anti-rabbit antibody is removed by inverting the plate and removing the liquid. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid and air bubbles. 3. Add 150 μl blocking buffer (5% low fat milk in PBS) to each well. Incubate for 30 minutes with shaking on a microtiter plate shaker. 4. Wash 4 times with TBST. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid and air bubbles. 5. Add 0.5 μg of rabbit anti-GyrB antibody per well. Antibody to DPBS
To a final volume of 100 μl per well. Incubate for 1 hour at room temperature with shaking on a microtiter plate shaker. 6. Wash 4 times with TBST as described in step 4. 7. 2 μg COS / FGFR cell lysate (Myc-GyrB-F
GFR source) is added to each well to give a final volume of 100 μl per well. Incubate for 1 hour with shaking on a microtiter plate shaker. 8. Wash 4 times with TBST as described in step 4. 9. Add 80 μl of 1 × kinase buffer per well. 10. Test compounds are diluted 1:10 in 1x kinase buffer + 1% DMSO in polypropylene 96 well plates. 11. Transfer 10 μl of the diluted test compound solution and control wells from the polypropylene plate wells to the corresponding ELISA plate wells and incubate for 20 minutes with shaking on a microtiter plate shaker. 12. Add 10 μl of 70 μM ATP diluted in kinase buffer to positive control and test wells (final ATP concentration 7 μM / well). Add 10 μl of 1 × kinase buffer to negative control wells. Incubate for 15 minutes with shaking on a microtiter plate shaker. The kinase reaction is stopped by adding 13.5 μl of 0.5 M EDTA to all wells. 14． Wash 4 times with TBST as described in step 4. 15. Add 100 μl of biotin-conjugated anti-phosphotyrosine monoclonal antibody (b4G10) diluted in TBST to each well. Incubate for 30 minutes with shaking on a microtiter plate shaker. 16. Prepare Vectastain ABC reagent. 15 ml of one drop of reagent A
Add to TBST. Mix by inverting the tube several times. Add 1 drop of reagent B and mix again. 17． Wash 4 times with TBST as described in step 4. 18. Add 100 μl ABC HRP reagent to each well. Incubate for 30 minutes with shaking on a microtiter plate shaker. 19. Wash 4 times with TBST as described in step 4. 20. Add 100 μl of ABTS / H 2 O 2 solution to each well. 22. Incubate for 5-15 minutes with shaking. Remove air bubbles. 23. If necessary, stop the reaction by adding 100 μl 0.2 M HCl / well. 24. The assay is read on a Dynatech MR7000 ELISA plate reader; test filter: 410 nM, reference filter: 630 nM.

【０６９５】生化学的ＦＬＫ−１アッセイ このアッセイは，ＥＬＩＳＡを用いて，ｆｌｋ−１自己リン酸化活性をインビ
トロで評価する。 Biochemical FLK-1 Assay This assay evaluates flk-1 autophosphorylation activity in vitro using an ELISA.

【０６９６】材料および試薬 １．１５ｃｍ組織培養皿 ２．Ｆｌｋ−１／ＮＩＨ細胞：ヒトｆｌｋ−１クローン３（ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ
．，ＭＰＩ，Ｍａｒｔｉｎｓｒｉｅｄ，Ｇｅｒｍａｎｙより入手）を過剰発現す
るＮＩＨ繊維芽細胞株 ３．成長培地：ＤＭＥＭプラス熱不活性化１０％ＦＢＳおよび２ｍＭグルタミン
（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ） ４．飢餓培地：ＤＭＥＭプラス０．５％熱不活性化ＦＢＳ，２ｍＭグルタミン（
Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ） ５．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃａｔ．
Ｎｏ．２５８０５−９６） ６．ｆｌｋ−１に特異的なＬ４またはＥ３８モノクローナル抗体；蛋白質−Ａア
ガロースアフィニティークロマトグラフィーにより精製（ＳＵＧＥＮ，Ｉｎｃ．
） ７．ＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝化食塩水）Ｇｉｂｃｏ Ｃａｔ．Ｎｏ．４５
０−１３００ＥＢ） ８．ＨＮＴＧ（調製については生化学的ＦＧＦＲを参照） ９．ＰｉｅｒｃｅＢＣＡ蛋白質検定キット １０．ブロッキング緩衝液 １１．ＴＢＳＴ（ｐＨ７．０） １２．キナーゼ緩衝液 １３．キナーゼ停止溶液：２００ｍＭＥＤＴＡ １４．ビオチニル化４Ｇ１０，ホスホチロシンに特異的（ＵＢＩ，Ｃａｔ．Ｎｏ
．Ｎｏ．１６−１０３） １５．ＡＢキット（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｃａｔ．Ｎｏ．
ＰＫ４０００） １６．ＤＭＳＯ １７．ＮＵＮＣ９６ウエルＶ底ポリプロピレンプレート（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃ
ｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＳ−７２０９２） １８．Ｔｕｒｂｏ−ＴＭＢ（Ｐｉｅｒｃｅ） １９．Ｔｕｒｂｏ−ＴＭＢ停止溶液：１Ｍ Ｈ2ＳＯ4 ２０．ＡＴＰ（Ｓｉｇｍａ Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ−７６９９） ２１．２０％ＤＭＳＯ，ＴＢＳ（ｐＨ７．０）中 Materials and Reagents 1.15 cm tissue culture dish Flk-1 / NIH cells: human flk-1 clone 3 (SUGEN, Inc.
. 2. An NIH fibroblast cell line that overexpresses MPI, obtained from MPI, Martinsried, Germany. 3. Growth medium: DMEM plus heat inactivated 10% FBS and 2 mM glutamine (Gibco-BRL) Starvation medium: DMEM plus 0.5% heat-inactivated FBS, 2 mM glutamine (
Gibco-BRL) 5. Corning 96-well ELISA plate (Corning Cat.
No. 25805-96) 6. An L4 or E38 monoclonal antibody specific for flk-1; purified by protein-A agarose affinity chromatography (SUGEN, Inc.
) 7. PBS (Dulbecco's phosphate buffered saline) Gibco Cat. No. 45
0-1300EB) 8. 8. HNTG (see biochemical FGFR for preparation) Pierce BCA protein assay kit Blocking buffer 11. TBST (pH 7.0) 12. Kinase buffer 13. Kinase stop solution: 200 mM EDTA Biotinylated 4G10, specific for phosphotyrosine (UBI, Cat.
. No. 16-103) 15. AB kit (Vector Laboratories Cat. No.
PK4000) 16. DMSO 17. NUNC 96-well V-bottom polypropylene plate (Applied Sc
entitic Cat. No. (AS-72092) 18. Turbo-TMB (Pierce) 19. Turbo-TMB stop solution: 1 MH 2 SO 4 20. ATP (Sigma Cat. No. A-7699) 21.20% in DMSO, TBS (pH 7.0)

【０６９７】方法 細胞成長および溶解物調製 １．細胞を成長培地中に播種し，３７℃，５％ＣＯ2で９０−１００％コンフル
エントとなるまで２−３日間成長させる。２０継代を越えないこと。 ２．培地を除去し，細胞をＰＢＳで２回洗浄する。ＨＮＴＧ溶解緩衝液で溶解す
る。すべての溶解物を回収し，２０−３０秒間ボルテックス混合する。 ３．遠心分離（５−１０分間，約１０，０００ｘｇ）により不溶性物質を除去す
る。 ４．ＢＣＡキットを用いて蛋白質濃度を決定する。 ５．溶解物を１ｍｇのアリコートに分配し，−８０℃で保存する。アッセイ方法 １．Ｃｏｒｎｉｎｇ９６ウエルＥＬＩＳＡプレートを，１００μｌのＰＢＳ中の
２μｇ／ウエルの精製Ｌ４（またはＥ３８）でコーティングする。４℃で一夜保
存する。 ２．プレートを逆さにして液体を除去することにより，未結合蛋白質をウエルか
ら除去する。ｄＨ2Ｏで１回洗浄し，プレートをペーパータオル上で軽くたたい
て過剰の液体を除去する。 ３．プレートをウエルあたり１５０μｌのブロッキング緩衝液でブロッキングす
る。４℃で振盪しながら４５−６０分間インキュベートする。 ４．ブロッキング緩衝液を除去し，ＥＬＩＳＡプレートをｄＨ2Ｏで３回，ＴＢ
ＳＴで１回洗浄する。プレートをペーパータオル上で軽くたたいて過剰の液体を
除去する。 ５．溶解物をＰＢＳ中で希釈して，最終濃度を５０μｇ／１００μｌとする。１
００μｌの希釈溶解物を各ウエルに加える。振盪しながら４℃で一夜インキュベ
ートする。 ６．プレートを逆さにすることにより未結合蛋白質をウエルから除去する。工程
４と同様に洗浄する。 ７．８０μｌのキナーゼ緩衝液をウエルに加える（陰性対照ウエルには９０μｌ
）。 ８．試験化合物をＴＢＳ中２０％ＤＭＳＯを含むポリプロピレンプレートのウエ
ル中で希釈する（通常は１０倍）。 ９．１０μｌの希釈化合物を固定化ｆｌｋ−１を含むＥＬＩＳＡウエルに加え，
振盪する。対照ウエルには化合物を加えない。 １０．１ｍＭＡＴＰ保存液から，ｄＨ2Ｏ中０．３ｍＭＡＴＰ溶液を調製する（
あるいは，キナーゼ緩衝液を用いてもよい）。 １１．陰性対照を除くすべてのウエルに１０μｌの０．３ｍＭＡＴＰを加える。
振盪しながら室温で６０分間インキュベートする。 １２．１時間後，１１μｌの２００ｍＭＥＤＴＡを加えることにより，キナーゼ
反応を停止させる。１−２分間振盪する。 １３．ＥＬＩＳＡプレートをｄＨ2Ｏで４回，ＴＢＳＴで２回洗浄する。 １４．１００μｌの１：５０００ビオチニル化４Ｇ１Ｏ：ＴＢＳＴをすべてのウ
エルに加える。振盪しながら室温で４５分間インキュベートする。 １５．上述のものをインキュベートしている間，ＡＢＣキットからの５０μｌの
溶液ＡおよびＢを１０ｍｌのＴＢＳＴに加える。これらの溶液は，使用の約３０
分前に混合しなければならない。 １６．工程４と同様にプレートを洗浄する。 １７．あらかじめ形成したＡとＢの複合体１００μｌをすべてのウエルに加える
。振盪しながら室温で３０分間インキュベートする。 １８．工程４と同様にプレートを洗浄する。 １９．１００μｌのＴｕｒｂｏ−ＴＭＢを加える。室温で１０−１５分間振盪す
る。 ２０．陽性対照ウエルの色が吸光度約０．３５−０．４に達したとき，１００μ
ｌのＴｕｒｂｏ−ＴＭＢ停止溶液で反応を停止する。 ２１．Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡリーダーでプレートを読む
。試験フィルター：４５０ｎＭ，参照フィルター：４１０ｎＭ。 Methods Cell Growth and Lysate Preparation Cells are seeded in growth medium and grown for 2-3 days at 37 ° C., 5% CO 2 to 90-100% confluence. Do not exceed 20 passages. 2. Remove the medium and wash the cells twice with PBS. Dissolve in HNTG lysis buffer. Collect all lysates and vortex for 20-30 seconds. 3. Remove insoluble material by centrifugation (5-10 minutes, about 10,000 xg). 4. Determine protein concentration using the BCA kit. 5. The lysate is distributed in 1 mg aliquots and stored at -80 ° C. Assay method Coat Corning 96-well ELISA plates with 2 μg / well purified L4 (or E38) in 100 μl of PBS. Store overnight at 4 ° C. 2. Unbound protein is removed from the wells by inverting the plate and removing the liquid. Wash once with dH 2 O and tap the plate on a paper towel to remove excess liquid. 3. Block plate with 150 μl blocking buffer per well. Incubate at 4 ° C with shaking for 45-60 minutes. 4. The blocking buffer was removed and the ELISA plate was washed three times with dH 2 O, TB
Wash once with ST. Tap the plate on a paper towel to remove excess liquid. 5. The lysate is diluted in PBS to a final concentration of 50 μg / 100 μl. 1
Add 00 μl of the diluted lysate to each well. Incubate overnight at 4 ° C. with shaking. 6. Unbound protein is removed from the wells by inverting the plate. Wash as in step 4. 7. Add 80 μl of kinase buffer to wells (90 μl for negative control wells)
). 8. Test compounds are diluted (usually 10-fold) in the wells of a polypropylene plate containing 20% DMSO in TBS. 9. Add 10 μl of diluted compound to ELISA wells containing immobilized flk-1
Shake. No compound is added to control wells. From the 10.1 mM ATP stock solution, prepare a 0.3 mM ATP solution in dH 2 O (
Alternatively, a kinase buffer may be used). 11. Add 10 μl of 0.3 mM ATP to all wells except the negative control.
Incubate for 60 minutes at room temperature with shaking. 12.1 hours later, the kinase reaction is stopped by adding 11 μl of 200 mM EDTA. Shake for 1-2 minutes. 13. Wash the ELISA plate 4 times with dH 2 O and 2 times with TBST. 14. Add 100 μl of 1: 5000 biotinylated 4G10: TBST to all wells. Incubate for 45 minutes at room temperature with shaking. 15. While incubating the above, add 50 μl of solutions A and B from the ABC kit to 10 ml of TBST. These solutions require approximately 30
Minutes before mixing. 16. Wash the plate as in step 4. 17． Add 100 μl of the preformed complex of A and B to all wells. Incubate for 30 minutes at room temperature with shaking. 18. Wash the plate as in step 4. 19. Add 100 μl Turbo-TMB. Shake at room temperature for 10-15 minutes. 20. When the color of the positive control well reaches an absorbance of about 0.35-0.4,
Stop the reaction with 1 Turbo-TMB stop solution. 21. Read the plate on a Dynatech MR7000 ELISA reader. Test filter: 450 nM, reference filter: 410 nM.

【０６９８】ＨＵＶ−ＥＣ−Ｃアッセイ また，以下のプロトコルを用いて，ＰＤＧＦ−Ｒ，ＦＧＦ−Ｒ，ＶＥＧＦ，ａ
ＦＧＦまたはＦｌｋ−１／ＫＤＲ（これらはすべてＨＵＶ−ＥＣ細胞により天然
に発現されている）に対する化合物の活性を測定することができる。 HUV-EC-C Assay Alternatively, PDGF-R, FGF-R, VEGF, a
The activity of the compound on FGF or Flk-1 / KDR, all of which are naturally expressed by HUV-EC cells, can be measured.

【０６９９】第０日 １． ＨＵＶ−ＥＣ−Ｃ細胞（ヒト臍静脈内皮細胞，（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙ
ｐｅ Ｃｕｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ；カタログＮｏ．１７３０ＣＲＬ）
を洗浄し，トリプシン処理する。ダルベッコリン酸緩衝化食塩水（Ｄ−ＰＢＳ；
Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ；カタログＮｏ．１４１９０−０２９から入手）で２回，約
１ｍｌ／１０ｃｍ2組織培養フラスコで洗浄する。非酵素細胞解離溶液（Ｓｉｇ
ｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ；カタログＮｏ．Ｃ−１５４４）中で
０．０５％トリプシン−ＥＤＴＡでトリプシン処理する。０．０５％トリプシン
は，０．２５％トリプシン／１ｍＭＥＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ；カタログＮｏ．２５
２００−０４９）を細胞解離溶液中で希釈することにより作成する。約１ｍｌ／
２５−３０ｃｍ2組織培養フラスコで３７℃で約５分間トリプシン処理する。細
胞をフラスコからはがした後，等量のアッセイ培地を加え，５０ｍｌ滅菌遠心分
離管（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；カタログＮｏ．０５−５３９−６
）に移す。 ２． ５０ｍｌ滅菌遠心分離管中にアッセイ培地を加えることにより，細胞を約
３５ｍｌのアッセイ培地で洗浄し，約２００ｇで１０分間遠心分離し，上清を吸
引し，３５ｍｌのＤ−ＰＢＳに再懸濁する。Ｄ−ＰＢＳでさらに２回洗浄し，細
胞を約１ｍｌ／組織培養フラスコ１５ｃｍ2のアッセイ培地に再懸濁する。アッ
セイ培地は，Ｆ１２Ｋ培地（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ；カタログＮｏ．２１１２７−
０１４）＋０．５％熱不活性化ウシ胎児血清からなる。Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｃｏｕ
ｎｔｅｒ（商標）（Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．）で細
胞を計数し，アッセイ培地を細胞に加えて０．８−１．０ｘ１０5細胞／ｍｌの
濃度とする。 ３． 細胞を９６ウエル平底プレートに１００μｌ／ウエルまたは０．８−１．
０ｘ１０4細胞／ウエルで加える；３７℃，５％ＣＯ2で約２４時間インキュベー
トする。[0699] Day 0 1. HUV-EC-C cells (human umbilical vein endothelial cells, (American Ty
catalog No. pe Culture Collection; 1730 CRL)
Is washed and trypsinized. Dulbecco's phosphate buffered saline (D-PBS;
Gibco BRL; Catalog No. 14190-029) twice
1ml / 10cm Two Wash in tissue culture flask. Non-enzyme cell dissociation solution (Sig
ma Chemical Company; Catalog No. C-1544)
Trypsinize with 0.05% trypsin-EDTA. 0.05% trypsin
Is 0.25% trypsin / 1 mM EDTA (Gibco; Catalog No. 25)
200-049) in a cell dissociation solution. About 1ml /
25-30cm Two Trypsinize at 37 ° C. for about 5 minutes in a tissue culture flask. Fine
After removing the cells from the flask, add an equal volume of assay medium and centrifuge in a 50 ml sterile centrifuge.
Discharge tube (Fisher Scientific; Catalog No. 05-539-6)
). 2. By adding assay medium into a 50 ml sterile centrifuge tube, the cells are
Wash with 35 ml assay medium, centrifuge at about 200 g for 10 minutes, and aspirate supernatant.
And resuspend in 35 ml of D-PBS. Wash twice more with D-PBS,
About 1 ml / 15 cm tissue culture flask Two Resuspend in assay medium. Up
Say's medium was F12K medium (Gibco BRL; Catalog No. 21127-).
014) + 0.5% heat-inactivated fetal calf serum. Coulter Cou
interter ™ (Coulter Electronics, Inc.).
The cells are counted and assay medium is added to the cells to give 0.8-1.0 × 10 Five Cells / ml
Concentration. 3. Cells were plated in 96-well flat bottom plates at 100 μl / well or 0.8-1.
0x10 Four Add cells / well; 37 ° C, 5% CO Two Incubate for about 24 hours
To

【０７００】第１日 １． 試験化合物の２倍滴定を別々の９６ウエルプレート中に作成する。一般に
，５０μＭから０μＭまで。上述の第０日，工程２と同じアッセイ培地を用いる
。滴定は，９０μｌ／ウエルの試験化合物を２００μＭ（４Ｘ最終ウエル濃度）
で特定のプレートカラムの最上のウエルに加えることにより行う。試験化合物保
存液濃度は通常ＤＭＳＯ中２０ｍＭであるため，２００μＭの薬剤濃度は２％Ｄ
ＭＳＯを含む。 ＤＭＳＯ濃度を一定に保持しながら薬剤を希釈するために，アッセイ培地中（
Ｆ１２Ｋ＋０．５％ウシ胎児血清）２％ＤＭＳＯとした希釈剤を，試験化合物滴
定の希釈剤として用いる。この希釈物をカラム中の残りのウエルに６０μｌ／ウ
エルで加える。カラムの最上ウエル中の１２０μｌの２００μＭ試験化合物希釈
物から６０μｌを採取し，カラムの第２のウエル中の６０μｌと混合する。この
ウエルから６０μｌを採取し，カラム中の第３のウエル中の６０μｌと混合し，
２倍滴定が完了するまでこれを続ける。最後から２番目のウエルが混合されたと
き，このウエル中の１２０μｌの６０μｌを採取し，これを廃棄する。最後のウ
エルには薬剤非含有対照として６０μｌのＤＭＳＯ／培地希釈物を加える。以下
のアッセイの，滴定する試験化合物の三重のウエルに十分な９つのカラムを作成
する：（１）ＶＥＧＦ（Ｐｅｐｒｏ Ｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，から入手，カタログ
Ｎｏ．１００−２００，（２）内皮細胞成長因子（ＥＣＧＦ）（酸性繊維芽細胞
成長因子またはａＦＧＦとしても知られる）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎ
ｈｅｉｍ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａから入手，カタログＮｏ．１４３９６００）；
または（３）ヒトＰＤＧＦ Ｂ／Ｂ（１２７６−９５６，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）およびアッセイ培地対照。ＥＣＧＦはヘ
パリンナトリウムを有する調製物として得た。 ２． ５０μｌ／ウエルの試験化合物希釈物を，第０日からのＨＵＶ−ＥＣ−Ｃ
細胞０．８−１．０ｘ１０4細胞／１００μｌ／ウエルを含む９６ウエルアッセ
イプレートに移し，３７oＣ，５％ＣＯ2で約２時間インキュベートする。 ３． 三重に，８０μｇ／ｍｌＶＥＧＦ，２０ｎｇ／ｍｌＥＣＧＦ，または各試
験化合物の条件に対する培地対照を５０μｌ／ウエルで加える。試験化合物につ
いては，成長因子濃度は所望の最終濃度の４倍である。第０日，工程２からのア
ッセイ培地を用いて，成長因子の濃度を調節する。３７℃，５％ＣＯ2で約２４
時間インキュベートする。各ウエルに５０μｌの試験化合物希釈物，５０μｌの
成長因子または培地，および１００μｌの細胞を加え，総量２００μｌ／ウエル
とする。すなわち，すべてをウエルに加えたとき，４倍濃度の試験化合物および
成長因子は１倍となる。 Day 1 Two-fold titrations of test compounds are made in separate 96-well plates. Generally, from 50 μM to 0 μM. On day 0 above, use the same assay medium as in step 2. The titration was performed by adding 90 μl / well of the test compound to 200 μM (4 × final well concentration).
By adding to the top well of a particular plate column. Since the concentration of the test compound stock solution is usually 20 mM in DMSO, the drug concentration of 200 μM is 2% D
Including MSO. To dilute the drug while keeping the DMSO concentration constant,
A diluent of F12K + 0.5% fetal bovine serum) 2% DMSO is used as the diluent for test compound titration. Add this dilution to the remaining wells in the column at 60 μl / well. Take 60 μl from the 120 μl 200 μM test compound dilution in the top well of the column and mix with 60 μl in the second well of the column. Take 60 μl from this well, mix with 60 μl in the third well in the column,
Continue this until the 2-fold titration is complete. When the penultimate well is mixed, remove 60 μl of 120 μl in this well and discard it. The last well receives 60 μl of DMSO / media dilution as a drug-free control. Prepare nine columns sufficient for triplicate wells of the test compound to be titrated for the following assays: (1) VEGF (obtained from Pepro Tech Inc., Catalog No. 100-200, (2) Endothelial cell growth factor (ECGF) (also known as acidic fibroblast growth factor or aFGF) (Boehringer Mann)
Heim Biochemica, catalog no. 1439600);
Or (3) human PDGF B / B (1276-956, Boehringer
Mannheim, Germany) and assay media controls. ECGF was obtained as a preparation with sodium heparin. 2. 50 μl / well of the test compound dilution was added to the HUV-EC-C from day 0.
Transfer to a 96-well assay plate containing 0.8-1.0 × 10 4 cells / 100 μl / well and incubate at 37 ° C., 5% CO 2 for about 2 hours. 3. In triplicate, add 50 μl / well of 80 μg / ml VEGF, 20 ng / ml ECGF, or media control for each test compound condition. For test compounds, the growth factor concentration is four times the desired final concentration. On day 0, adjust the concentration of the growth factor using the assay medium from step 2. Approx. 24 at 37 ° C, 5% CO 2
Incubate for hours. To each well, add 50 μl of test compound dilution, 50 μl of growth factor or medium, and 100 μl of cells for a total volume of 200 μl / well. That is, when all are added to the wells, the 4-fold concentration of test compound and growth factor is 1-fold.

【０７０１】第２日 １． 3Ｈ−チミジン（Ａｍｅｒｓｈａｍ；カタログＮｏ．ＴＲＫ−６８６）を
１μＣｉ／ウエル（ＲＰＭＩ培地＋１０％熱不活性化ウシ胎児血清中で調製した
１００μＣｉ／ｍｌ溶液を１０μｌ／ウエル）で加え，３７℃，５％ＣＯ2で約
２４時間インキュベートする。ＲＰＭＩはＧｉｂｃｏ ＢＲＬから入手する，カ
タログＮｏ．１１８７５−０５１ Day 1 3 H-thymidine (Amersham; Catalog No. TRK-686) was added at 1 μCi / well (10 μl / well of a 100 μCi / ml solution prepared in RPMI medium + 10% heat-inactivated fetal bovine serum), and 37 ° C., 5 Incubate with% CO 2 for about 24 hours. RPMI is available from Gibco BRL, catalog no. 11875-051

【０７０２】第３日 １． プレートを−２０℃で一夜凍結する。 Day 3 1. Freeze the plate at -20 ° C overnight.

【０７０３】第４日 １． プレートを融解し，９６ウエルプレート回収器（Ｔｏｍｔｅｃ Ｈａｒｖ
ｅｓｔｅｒ９６（登録商標））でフィルターマット（Ｗａｌｌａｃ；カタログＮ
ｏ．１２０５−４０１）上に回収する；Ｗａｌｌａｃ Ｂｅｔａｐｌａｔｅ（商
標）液体シンチレーション計数機で計数する。 Day 4 1. The plate was thawed and a 96-well plate collector (Tomtec Harv) was used.
filter mat (Wallac; Catalog N)
o. 1205-401); count on a Wallac Betaplate ™ liquid scintillation counter.

【０７０４】インビボ動物モデル 異種移植片動物モデル ヒト腫瘍が無胸腺マウス（例えば，Ｂａｌｂ／ｃ，ｎｕ／ｎｕ）中で異種移植
片として成長する能力は，ヒト腫瘍の治療に対する生物学的応答を研究するのに
有用なインビボモデルを提供する。ヒト腫瘍の無胸腺マウスへの最初の成功的な
異種移植（Ｒｙｇａａｒｄ ａｎｄ Ｐｏｖｌｓｅｎ，１９６９，Ａｃｔａ Ｐ
ａｔｈｏｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ．Ｓｃａｎｄ．７７：７５８−７６０）以来，
多くの異なるヒト腫瘍細胞株（例えば，***，肺，尿生殖器，胃腸，頭頸部，神
経膠芽細胞腫，骨，および悪性黒色腫）が移植され，ヌードマウス中での成長に
成功してきた。以下のアッセイを用いて，本発明の種々の化合物の活性，特異性
および効果のレベルを決定することができる。３種類の一般的アッセイ，すなわ
ち細胞／触媒，細胞／生物学的およびインビボアッセイが化合物の評価に有用で
ある。細胞／触媒アッセイの目的は，ＴＫが細胞中の既知の基質上のチロシンを
リン酸化する能力に及ぼす化合物の影響を判定することである。細胞／生物学的
アッセイの目的は，細胞中でＴＫにより刺激される生物学的応答に及ぼす化合物
の影響を判定することである。インビボアッセイの目的は，特定の疾患，例えば
癌の動物モデルにおける化合物の影響を判定することである。In Vivo Animal Models Xenograft Animal Models The ability of human tumors to grow as xenografts in athymic mice (eg, Balb / c, nu / nu) studies the biological response to treatment of human tumors. To provide an in vivo model useful for First successful xenograft of human tumors into athymic mice (Rygaard and Povlsen, 1969, Acta P
atol. Microbial. Scand. 77: 758-760)
Many different human tumor cell lines (eg, breast, lung, urogenital, gastrointestinal, head and neck, glioblastoma, bone, and malignant melanoma) have been transplanted and successfully grown in nude mice. The following assays can be used to determine the level of activity, specificity and effect of various compounds of the invention. Three general assays are useful for evaluating compounds, namely cell / catalytic, cell / biological and in vivo assays. The purpose of the cell / catalytic assay is to determine the effect of a compound on the ability of TK to phosphorylate tyrosine on a known substrate in cells. The purpose of a cell / biological assay is to determine the effect of a compound on the biological response stimulated by TK in a cell. The purpose of an in vivo assay is to determine the effect of a compound in an animal model on a particular disease, eg, cancer.

【０７０５】 皮下異種移植片実験に適した細胞株としては，Ｃ６細胞（神経膠腫，ＡＴＣＣ
＃ＣＣＬ１０７），Ａ３７５細胞（黒色腫，ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１６１９），Ａ４
３１細胞（類表皮癌腫，ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１５５５），Ｃａｌｕ６細胞（肺，Ａ
ＴＣＣ＃ＨＴＢ５６），ＰＣ３細胞（前立腺，ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１４３５），お
よびＥＧＦＲ，ＰＤＧＦＲ，ＩＧＦ−１Ｒまたは任意の他の試験キナーゼを過剰
発現するように遺伝子工学処理されたＳＫＯＶ３ＴＰ５細胞およびＮＩＨ３Ｔ３
繊維芽細胞が挙げられる。以下のプロトコルを用いて異種移植片実験を行うこと
ができる。Cell lines suitable for subcutaneous xenograft experiments include C6 cells (gliomas, ATCC
# CCL107), A375 cells (melanoma, ATCC # CRL1619), A4
31 cells (epidermoid carcinoma, ATCC # CRL1555), Calu6 cells (lung, A
TCC # HTB56), PC3 cells (prostate, ATCC # CRL1435), and SKOV3TP5 cells and NIH3T3 engineered to overexpress EGFR, PDGFR, IGF-1R or any other test kinase.
Fibroblasts. Xenograft experiments can be performed using the following protocol.

【０７０６】 雌無胸腺マウス（ＢＡＬＢ／ｃ，ｎｕ／ｎｕ）はＳｉｍｏｎｓｅｎ Ｌａｂｏ
ｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｇｉｌｒｏｙ，ＣＡ）から入手する。すべての動物は，クリ
ーンルーム条件下で，マイクロアイソレーターケージでアルファドライ敷きわら
で維持する。動物には，滅菌齧歯類食および水を任意に与える。[0706] Female athymic mice (BALB / c, nu / nu) were purchased from Simonsen Labo.
ratories (Gilroy, CA). All animals are maintained on alpha dry bedding in microisolator cages under clean room conditions. Animals are fed a sterile rodent diet and water ad libitum.

【０７０７】 細胞株は，適当な培地（例えば，ＭＥＭ，ＤＭＥＭ，Ｈａｍ'ｓＦ１０，また
はＨａｍ'ｓＦ１２プラス５％−１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）および２ｍＭグ
ルタミン（ＧＬＮ））中で成長させる。すべての細胞培養培地，グルタミン，お
よびウシ胎児血清は，特に断らない限り，Ｇｉｂｃｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏ
ｌｏｇｉｅｓ（Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ）から購入する。すべての細胞
は，９０−９５％空気および５−１０％ＣＯ2の湿潤環境下で３７℃で成長させ
る。すべての細胞株は，週に２回，定期的に継代し，Ｍｙｃｏｔｅｃｔ法（Ｇｉ
ｂｃｏ）により判定して，マイコプラズマについては陰性である。The cell lines are grown in a suitable medium (eg, MEM, DMEM, Ham's F10, or Ham's F12 plus 5% -10% fetal bovine serum (FBS) and 2 mM glutamine (GLN)). All cell culture media, glutamine, and fetal bovine serum are Gibco Life Techno unless otherwise noted.
logs (Grand Island, NY). All cells are grown at 37 ° C. in a humidified environment of 90-95% air and 5-10% CO 2 . All cell lines were routinely passaged twice a week, using the Myprotect method (Gi
bco), negative for mycoplasma.

【０７０８】 細胞は，コンフルエント，またはそれに近い状態で，０．０５％トリプシン−
ＥＤＴＡで回収し，４５０ｘｇで１０分間ペレット化する。ペレットを滅菌ＰＢ
Ｓまたは培地（ＦＢＳなし）中に懸濁して特定の濃度とし，細胞をマウス（１群
あたり，８−１０匹のマウス，２−１０ｘ１０6細胞／動物）の後側腹部内に移
植する。腫瘍成長は，ベニエカリパスを用いて３−６週間にわたり測定する。腫
瘍体積は，とくに記載のないかぎり，長さｘ幅ｘ高さの積として計算する。Ｐ値
は，スチューデントｔ−テストを用いて計算する。５０−１００μｌの賦形剤（
ＤＭＳＯ，またはＶＰＤ：Ｄ５Ｗ）中の試験化合物は，通常は移植後の第１日か
ら初めて，異なる濃度でＩＰ注入により輸送することができる。The cells were incubated at or near confluence with 0.05% trypsin-
Collect with EDTA and pellet at 450 × g for 10 minutes. Pellets sterilized PB
Cells are implanted into the hind flank of S or medium (without FBS) to a specific concentration and mice (8-10 mice per group, 2-10 × 10 6 cells / animal). Tumor growth is measured over 3-6 weeks using veneer calipers. Tumor volume is calculated as the product of length x width x height unless otherwise noted. The P value is calculated using the Student's t-test. 50-100 μl of excipient (
Test compounds in DMSO, or VPD: D5W) can be delivered by IP infusion at different concentrations, usually beginning on the first day after transplantation.

【０７０９】腫瘍侵襲モデル 以下の腫瘍侵襲モデルが開発されており，ＫＤＲ／ＦＬＫ−１レセプターを選
択的に阻害すると同定された化合物の治療的価値および有効性を評価するために
用いることができる。 Tumor Invasion Models The following tumor invasion models have been developed and can be used to evaluate the therapeutic value and efficacy of compounds identified as selectively inhibiting the KDR / FLK-1 receptor.

【０７１０】方法 ８週齢のヌードマウス（雌）（ＳｉｍｏｎｓｅｎＩｎｃ．）を実験動物として
用いる。腫瘍細胞の移植は，層流フード内で行うことができる。麻酔用に，キシ
ラジン／ケタミンカクテル（１００ｍｇ／ｋｇケタミンおよび５ｍｇ／ｋｇキシ
ラジン）を腹膜内に投与する。中線切開を行って，腹腔を露出して（約１．５ｃ
ｍの長さ），容量１００μｌの培地中の１０7個の腫瘍細胞を注入する。細胞は
，膵臓の十二指腸葉または結腸の漿膜下に注入する。腹膜および筋肉を６−０絹
連続縫糸により縫合し，皮膚は創傷クリップを用いて縫合する。動物は毎日観察
する。 Method An 8-week-old nude mouse (female) (Simonsen Inc.) is used as an experimental animal. Implantation of tumor cells can be performed in a laminar flow hood. For anesthesia, a xylazine / ketamine cocktail (100 mg / kg ketamine and 5 mg / kg xylazine) is administered intraperitoneally. Make a midline incision to expose the abdominal cavity (about 1.5 c
m length), inject 10 7 tumor cells in a medium of 100 μl volume. Cells are injected into the duodenal lobe of the pancreas or subserosal in the colon. The peritoneum and muscles are sutured with 6-0 silk continuous suture, and the skin is sutured with wound clips. Animals are observed daily.

【０７１１】分析 動物の全体的所見により２−６週間後，マウスを殺し，局所腫瘍の種々の臓器
（肺，肝臓，脳，胃，脾臓，心臓，筋肉）への転移を調べ，分析する（腫瘍サイ
ズ，侵襲の程度，免疫化学，およびインサイチオハイブリダイゼーション測定）
。[0711] After 2-6 weeks the overall findings of the analysis animals, the mice were sacrificed, examined various organs of local tumor (lung, liver, brain, stomach, spleen, heart, muscle) metastasis to be analyzed ( Tumor size, degree of invasion, immunochemistry, and in situ hybridization measurements)
.

【０７１２】細胞毒性の測定 治療用化合物は，細胞毒性効果を発揮するよりも，蛋白質キナーゼ活性の阻害
においてより強力であるべきである。ある化合物の有効性および細胞毒性の尺度
は，治療指数，すなわちＩＣ50／ＬＤ50を決定することにより得ることができる
。５０％阻害を達成するのに必要な用量ＩＣ50は，標準的な技術，例えば本明細
書に記載される技術を用いて測定することができる。５０％毒性を与える用量Ｌ
Ｄ50もまた，標準的な技術を用いて（Ｍｏｓｓｍａｎ，１９８３，Ｊ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，６５：５５−６３），放出されたＬＤＨの量を測定す
ることにより（Ｋｏｒｚｅｎｉｅｗｓｋｉ ａｎｄ Ｃａｌｌｅｗａｅｒｔ，１
９８３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，６４：３１３；Ｄｅｃｋｅｒ
ａｎｄ Ｌｏｈｍａｎｎ−Ｍａｔｔｈｅｓ，１９８８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ，１１５：６１），または動物モデルにおける致死量を測定するこ
とにより，測定することができる。高い治療指数を有する化合物が好ましい。治
療指数は，２より大きくなくてはならず，好ましくは少なくとも１０，より好ま
しくは少なくとも５０である。 Measurement of Cytotoxicity Therapeutic compounds should be more potent at inhibiting protein kinase activity than exerting a cytotoxic effect. A measure of the efficacy and cytotoxicity of a compound can be obtained by determining the therapeutic index, ie, IC 50 / LD 50 . The dose IC 50 required to achieve 50% inhibition can be measured using standard techniques, for example, those described herein. Dose L giving 50% toxicity
D 50 also using standard techniques (Mossman, 1983, J.Immu
nol. Methods, 65: 55-63), by measuring the amount of LDH released (Korzeniewski and Callewaert, 1).
983, J.A. Immunol. Methods, 64: 313; Decker
and Lohmann-Matthes, 1988, J. Am. Immunol. M
methods, 115: 61), or by measuring the lethal dose in animal models. Compounds with a high therapeutic index are preferred. The therapeutic index must be greater than 2, preferably at least 10, more preferably at least 50.

【０７１３】例−生物学的活性 本発明の化合物のインビトロの効力の例は，表２に示される。示される例は，
いかなる意味においても，本発明を限定するものと解釈すべきではない。 Examples-Biological Activity Examples of the in vitro potency of the compounds of the present invention are shown in Table 2. The example shown is
It should not be construed as limiting the invention in any way.

【０７１４】結論 本発明の化合物，方法および医薬組成物は，ＰＫ活性を調節するのに有効であ
り，したがって，ＲＴＫ，ＣＴＫ，およびＳＴＫ関連疾患に対する治療薬として
有効であると予測されることが理解されるであろう。 当業者は，本発明は，その目的を実施し，記載される結果および利点，ならび
に本明細書に固有のものを得るのによく適合していることを容易に理解するであ
ろう。本明細書に記載される分子複合体および方法，手順，処理，分子，特定の
化合物は，現在のところ好ましい態様の代表的なものであり，例示的なものであ
って，本発明の範囲を限定することを意図するものではない。当業者は，特許請
求の範囲において定義される本発明の精神の中に包含される変更および他の用途
をなすであろう。 Conclusions The compounds, methods and pharmaceutical compositions of the present invention are effective in modulating PK activity and are therefore expected to be effective as therapeutics against RTK, CTK, and STK related diseases. Will be appreciated. Those skilled in the art will readily appreciate that the present invention is well adapted to carry out its objects and obtain the results and advantages described, as well as those unique to this specification. The molecular complexes and methods, procedures, treatments, molecules, and particular compounds described herein are representative of presently preferred embodiments, are exemplary, and are intended to be within the scope of the invention. It is not intended to be limiting. Those skilled in the art will make modifications and other uses that are encompassed within the spirit of the invention as defined in the claims.

【０７１５】 当業者は，本発明の範囲および精神から逸脱することなく，本明細書に開示さ
れる本発明に対して置換基および修飾の変更をなすことが可能であることを容易
に理解するであろう。Those skilled in the art will readily appreciate that substitutions and modifications may be made to the invention disclosed herein without departing from the scope and spirit of the invention. Will.

【０７１６】 本明細書において言及されるすべての特許および刊行物は，本発明の属する技
術分野の技術者のレベルを示す。すべての特許および刊行物は，それぞれの刊行
物が特定的に個々に本明細書の一部としてここに引用されることと同じ程度に，
本明細書の一部として引用される。All patents and publications mentioned in the specification are indicative of the levels of those skilled in the art to which the invention pertains. All patents and publications are to the same extent as if each individual publication was specifically and individually cited herein as part of this specification.
Referenced as part of this specification.

【０７１７】 本明細書に例示的に記載されている発明は，本明細書に特定的に開示されてい
ない任意の要素または限定なしでも適切に実施することができる。すなわち，例
えば，本明細書における各例において，”・・・を含む"，"・・・から本質的に
なる"および"・・・からなる"との用語は，他の２つのいずれかと置き換えるこ
とができる。本明細書において用いた用語および表現は，説明の用語として用い
るものであり，限定ではない。そのような用語および表現の使用においては，示
されかつ記載されている特徴またはその一部の等価物を排除することを意図する
ものではなく，特許請求の範囲に記載される本発明の範囲中で種々の変更が可能
であることが理解される。すなわち，好ましい態様および任意の特徴により本発
明を特定的に開示してきたが，当業者には本明細書に記載される概念の変更およ
び変種が可能であり，そのような変更および変種も特許請求の範囲に定義される
本発明の範囲内であると考えられることが理解されるべきである。 さらに，発明の特徴および局面がマーカッシュグループの用語で記載されてい
る場合，当業者は，本発明が，マーカッシュグループのメンバーの個々のメンバ
ーまたはサブグループに関してもまた記載されていることを認識するであろう。
例えば，Ｘが，臭素，塩素およびヨウ素からなる群より選択されるとして記載さ
れている場合，Ｘが臭素である特許請求の範囲およびＸが臭素および塩素である
特許請求の範囲も完全に記載されている。The invention exemplarily described herein can be suitably practiced without any element or limitation not specifically disclosed herein. That is, for example, in each example in this specification, the terms “including”, “consisting essentially of” and “consisting of” are replaced with either of the other two. be able to. The terms and expressions used herein are used as terms of description and are not limiting. The use of such terms and phrases is not intended to exclude the equivalents of the features shown or described, or some of them, and is not intended to limit the scope of the invention as claimed. It is understood that various modifications are possible. That is, although the present invention has been specifically disclosed by preferred embodiments and optional features, those skilled in the art can make modifications and variations to the concept described in the present specification, and such modifications and variations are also claimed. It is to be understood that they are considered to be within the scope of the present invention as defined in In addition, where features and aspects of the invention are described in Markush group terms, those skilled in the art will recognize that the invention is also described with respect to individual members or subgroups of Markush group members. There will be.
For example, if X is described as being selected from the group consisting of bromine, chlorine and iodine, the claims where X is bromine and the claims where X is bromine and chlorine are also fully described. ing.

【０７１８】 他の態様も特許請求の範囲の範囲内である。Other embodiments are within the scope of the following claims.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/5377 Ａ６１Ｋ 31/5377 Ａ６１Ｐ 9/00 Ａ６１Ｐ 9/00 17/06 17/06 19/02 19/02 29/00 29/00 １０１ １０１ 35/00 35/00 37/00 37/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ Ｃ０７Ｄ 401/10 Ｃ０７Ｄ 401/10 403/06 403/06 405/06 405/06 409/10 409/10 471/04 １０４ 471/04 １０４Ｚ (31)優先権主張番号 ６０／１０２，１７８ (32)優先日 平成10年９月28日(1998．9．28) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ６０／１１６，１０７ (32)優先日 平成11年１月15日(1999．1．15) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，Ｇ Ｈ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ， ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，Ｍ Ｗ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ， ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (71)出願人 230 Ｅａｓｔ Ｇｒａｎｄ Ａｖｅｎｕ ｅ，Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓ ｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ 94080，Ｕ ｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅ ｒｉｃａ (72)発明者 ミラー，トッド・アンソニー アメリカ合衆国カリフォルニア州94587， ユニオン・シティー，コルサ・ストリート 4928 (72)発明者 リャン，コンジン アメリカ合衆国カリフォルニア州94087， サニーヴェイル，ウエスト・レミントン・ ドライブ 729 (72)発明者 トラン，エンゴク・マイ アメリカ合衆国カリフォルニア州94065， レッドウッド・シティー，シャノン・ウェ イ 550，エスピーティー6306 (72)発明者 ニュイエン，アン・ティー アメリカ合衆国カリフォルニア州94539， フレモント，ベカド・プレイス 503 (72)発明者 ネマタラ，アサード アメリカ合衆国カリフォルニア州94596， ウォルナット・クリーク，ボデガ・プレイ ス 1324 Ｆターム(参考） 4C063 AA01 AA03 BB03 BB06 BB08 CC06 CC11 CC34 CC76 CC79 CC92 DD04 DD06 EE01 4C065 AA04 BB04 CC01 DD02 EE02 HH01 JJ01 KK04 LL01 PP03 PP04 QQ05 4C086 AA01 AA02 AA03 AA04 BA05 BA08 BB02 BC05 BC07 BC50 BC73 GA02 GA04 GA07 GA08 GA09 MA02 MA05 NA14 ZA36 ZA89 ZB01 ZB11 ZB15 ZB26 4C204 AB02 BB01 BB09 CB03 DB04 DB30 DB31 DB40 EB03 FB01 GB01 GB15 GB26 GB32 GB40──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI Theme coat ゛ (Reference) A61K 31/5377 A61K 31/5377 A61P 9/00 A61P 9/00 17/06 17/06 19/02 19/19 02 29/00 29/00 101 101 35/00 35/00 37/00 37/00 43/00 111 43/00 111 C07D 401/10 C07D 401/10 403/06 403/06 405/06 405/06 409 / 10 409/10 471/04 104 471/04 104Z (31) Priority claim number 60 / 102,178 (32) Priority date September 28, 1998 (September 28, 1998) (33) Priority claim Country United States (US) (31) Priority number 60 / 116,107 (32) Priority date January 15, 1999 (1999.1.15) (33) Priority country United States (US) (81) Designated countries EP (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, I T, LU, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AP (GH, GM, KE, LS, MW, SD, SL, SZ, UG, ZW), EA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM), AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CU, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL , IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, UA, G, US, UZ, VN, YU, ZW (71) Applicant 230 East Grand Avenue, South San Francisco, California 94080, United States of America, United States of America Inventor Miller, Todd 87, United States 87 , Union City, Corsa Street 4928 (72) Inventor Liang, Congin 94087, California, United States of America, Sunnyvale, West Remington Drive 729 (72) Inventor Tran, Engok Mai 94065, California, United States of America Redwood City , Shannon Way 550, Espty 6306 (72) Inventor Nguyen, An Tee 94539, California, United States, Fremont, Bekad Place 503 (72) Inventor Nematara Asard, CA 94496, Walnut Creek, Bodega Place 1324 F-term (reference) 4C063 AA01 AA03 BB03 BB06 BB08 CC06 CC11 CC34 CC76 CC79 CC92 DD04 DD06 EE01 4C065 AA04 BB04 CC01 DD02 EE02 HH01 JJ01 KK04A01 AA02 AA03 AA04 BA05 BA08 BB02 BC05 BC07 BC50 BC73 GA02 GA04 GA07 GA08 GA09 MA02 MA05 NA14 ZA36 ZA89 ZB01 ZB11 ZB15 ZB26 4C204 AB02 BB01 BB09 CB03 DB04 DB30 DB31 DB40 EB03 FB01 GB01 GB15 GB26 GB32 GB40

Claims (35)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 次の化学構造： 【化１】 ［式中， Ａは，炭素および窒素からなる群より選択され； Ｑは， 【化２】 からなる群より選択され 結合ａおよびｂは点線により表されるように単結合または二重結合のいずれであ
ってもよく，ただし，本発明のいずれか１つの化合物においてａおよびｂは両方
とも単結合であるかまたは両方とも二重結合であり； ａおよびｂが二重結合であるときｒは１であり； ａおよびｂが単結合であるときｒは２であり； Ｒ0は，水素，アルキル，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19および−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群よ
り選択され； Ｒ1は，水素，アルキル，アルコキシ，ハロ，アリール，−（ＣＨ2）nＯＣ（Ｏ
）Ｒ19；−Ｃ（Ｏ）ＮＲ19；−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19および−（ＣＨ2）nＲ20からなる
群より選択され， ここで，Ｒ19は，水素，アルキル，アルケニル，アルキニル，シクロアルキルお
よびアリールからなる群より選択され； ｎは，１，２，３または４であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ21Ｒ22；−Ｏ
Ｃ（Ｓ）ＮＲ21Ｒ22，−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＳＯ2Ｒ21Ｒ22；−ＮＲ21Ｒ22，および
環中に少なくとも１つの窒素原子を含むヘテロ脂環式基であって環は窒素原子を
介して隣接するＣＨ2基に結合している，からなる群より選択され； Ｒ2は，水素，アルキル，シクロアルキル，アリール，ヘテロアリール，ヘテロ
脂環式，トリハロメチル，アルコキシ，ハロ，−（ＣＨ2）nＲ20，−ＳＯ2ＮＲ2 1 Ｒ22，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19，−ＮＲ21
Ｒ22および−Ｎ＝ＣＲ23からなる群より選択され， ここで，Ｒ21およびＲ22は，独立して，水素，アルキル，アルケニル，アルキニ
ル，シクロアルキル，アリール，ヘテロアリール，ヘテロ脂環式からなる群より
選択され； Ｒ23は，アルキル，アルケニル，アルキニル，シクロアルキル，アリールおよび
ヘテロアリールからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，アルキル，トリハロメチル，アルコキシ，アリール，アリールオ
キシ，ヘテロアリール，ヘテロ脂環式，ヒドロキシ，ハロ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22
，−ＮＨＳＯ2Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−ＮＲ21Ｒ22および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ2 4 からなる群より選択され， ここで，Ｒ24は，アルキル，アルケニル，アルキニル，アリール，ヘテロアリー
ルおよびヘテロ脂環式からなる群より選択され； Ｒ4は，水素，アルキル，アルコキシおよびハロからなる群より選択され； Ｒ5は，水素，アルキル，シクロアルキル，ハロ，アリールおよびヘテロアリー
ルからなる群より選択され； Ｒ6は，水素，アルキル，アルコキシ，ハロ，シクロアルキル，アリールからな
る群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造： 【化３】 ［式中，ｙおよびｙ'は，独立して，水素，アルキルおよびアリールからなる群
より選択される］ を有するヘテロ脂環式基であり； Ｒ7は，ＯＲ18であり，ここでＲ18は，アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20からなる群
より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって，構造： 【化４】 を有するヘテロ脂環式基であり； Ｒ8は，水素，アルキル，シクロアルキル，アルコキシ，ハロ，アリール，ヘテ
ロアリールからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造： 【化５】 を有するヘテロ脂環式環であり； Ｒ9は，水素，アルキル，アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ21Ｒ22からなる群より
選択され； Ｒ10は，アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され； Ｒ11は，水素，アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され； Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ13は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または水素
およびアルキルからなる群より選択される基であり； Ｒ14は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または水素
，アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択される基であり； Ｒ15は，Ｑがこれを介して分子の残りに結合している結合であるか，または水素
であり； ただし，本発明のいずれか１つの化合物において，Ｒ13，Ｒ14またはＲ15のいず
れか１つのみが，Ｑを分子の残りに結合している結合であり； Ｒ16およびＲ17は，ａおよびｂが単結合であるとき，水素，アルキルおよびアリ
ールからなる群より独立して選択され，ａおよびｂが二重結合であるとき，Ｒ16 は，水素であり，Ｒ17は存在しない］ を有する化合物またはその生理学的に許容される塩。1. The following chemical structure: Wherein A is selected from the group consisting of carbon and nitrogen; Q is And the bonds a and b may be either single or double as represented by the dashed line, provided that in any one compound of the present invention, a and b are both single Is a bond or both are double bonds; r is 1 when a and b are double bonds; r is 2 when a and b are single bonds; R 0 is hydrogen, R 1 is selected from the group consisting of alkyl, —C (O) R 19 and —C (O) OR 19 ; R 1 is hydrogen, alkyl, alkoxy, halo, aryl, — (CH 2 ) n OC (O
) R 19; -C (O) NR 19; -C (O) OR 19 and - (CH 2) is selected from the group consisting of n R 20, wherein, R 19 is hydrogen, alkyl, alkenyl, alkynyl, R is selected from the group consisting of cycloalkyl and aryl; n is 1, 2, 3, or 4; R 20 is hydroxy, halo, —C (O) OR 19 , —OC (O) NR 21 R 22 ; -O
C (S) NR 21 R 22 , —OC (O) NHSO 2 R 21 R 22 ; —NR 21 R 22 , and a heteroalicyclic group containing at least one nitrogen atom in the ring, wherein the ring is a nitrogen atom It is attached to adjacent CH 2 groups are selected from the group consisting of through; R 2 is hydrogen, alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, trihalomethyl, alkoxy, halo, - (CH 2) n R 20, -SO 2 NR 2 1 R 22, -C (O) OR 19, -C (O) R 19, -NHC (O) OR 19, -NR 21
R 22 and —N ＝ CR 23 are selected from the group consisting of: R 21 and R 22 are independently hydrogen, alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic. R 23 is selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, aryl and heteroaryl; R 3 is hydrogen, alkyl, trihalomethyl, alkoxy, aryl, aryloxy, heteroaryl , heteroalicyclic, hydroxy, halo, -SO 2 NR 21 R 22
, -NHSO 2 R 19, is selected from the group consisting of -C (O) OR 19, -NR 21 R 22 and -NHC (O) R 2 4, wherein, R 24 is alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl R 4 is selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, alkoxy and halo; R 5 is hydrogen, alkyl, cycloalkyl, halo, aryl and heteroaryl R 6 is selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, alkoxy, halo, cycloalkyl, aryl, or together with R 18 has the structure: Wherein y and y ′ are independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl and aryl; R 7 is OR 18 , wherein R 18 is Is selected from the group consisting of alkyl,-(CH 2 ) n R 20 or, together with R 6 or R 8 , has the structure: R 8 is selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, cycloalkyl, alkoxy, halo, aryl, heteroaryl, or together with R 18 has the structure: ] R 9 is selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, alkoxy, halo and —NR 21 R 22 ; R 10 is a group consisting of alkyl and —C (O) OR 19 is more selective; R 11 is hydrogen, is selected from the group consisting of alkyl and -C (O) oR 19; R 12 is - (CH 2) be n R 20; R 13 is Q is through this Or a group selected from the group consisting of hydrogen and alkyl; and R 14 is a bond through which Q is bonded to the rest of the molecule. or hydrogen, alkyl and - (CH 2) a group selected from the group consisting of n R 20; R 15 is a bond Q is attached to the remainder of the molecule through this or Hydrogen, provided that in any one compound of the present invention Only one of R 13, R 14 or R 15 is a bond attached to Q to the rest of the molecule; when R 16 and R 17, a and b is a single bond, hydrogen, alkyl And when a and b are a double bond, R 16 is hydrogen and R 17 is absent.] Or a physiologically acceptable salt thereof. 【請求項２】 Ｑが 【化６】 である，請求項１記載の化合物または塩。2. The method according to claim 1, wherein Q is The compound or salt according to claim 1, which is 【請求項３】 Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる
群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，低級
アルコキシ，−ＮＲ21Ｒ22，−（ＣＨ2）nＲ20および−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ19から
なる群より選択され； Ｒ3は，水素，ヒドロキシ，ハロ，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル），−ＮＨ
ＳＯ2Ｒ19，−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ24，トリハロメチル，および１またはそれ以上の
低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択さ
れ； Ｒ4は水素であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択され； Ｒ21およびＲ22は，独立して，水素および低級アルキルからなる群より選択され
；および， Ｒ24は，水素および低級アルキルからなる群より選択される，請求項２記載の化
合物または塩。3. R 1 is selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl and —C (O) OH; R 2 is hydrogen, lower alkyl, halo, —C (O) R 19 , —C (O ) OR 19 , lower alkoxy, —NR 21 R 22 , — (CH 2 ) n R 20 and —NHC (O) OR 19 ; R 3 is hydrogen, hydroxy, halo, —NHC (O ) O (lower alkyl),-NH
R 2 is selected from the group consisting of SO 2 R 19 , —NHC (O) R 24 , trihalomethyl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; R 4 is hydrogen; 19 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; n is 2 or 3; R 20 is hydroxy, -C (O) OH, morpholin-4-yl, piperidine -1
-Yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl and -NR 21 R 22 ; R 21 and R 22 are independently selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; and , R 24 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl. 【請求項４】 Ｒ5は，水素，低級アルキル，ハロ，５員環ヘテロアリール
，および低級アルキル，ハロ，ヒドロキシ，−ＮＲ21Ｒ22および低級アルコキシ
からなる群より選択される１またはそれ以上の基で任意に置換されていてもよい
アリールからなる群より選択され； Ｒ6は，水素，低級アルキル，３−７員のシクロアルキル，低級アルコキシ，ハ
ロ，および低級アルキル，ハロ，ヒドロキシ，−ＮＲ21Ｒ22および低級アルコキ
シからなる群より独立して選択される１またはそれ以上の基で任意に置換されて
いてもよいアリールからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって構造： 【化７】 ［式中，ｙおよびｙ'は両方とも水素であるかまたは両方とも低級アルキルであ
る］ を有する基であり； Ｒ7は，−ＯＲ18であり，ここでＲ18は，低級アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20から
なる群より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって，構造： 【化８】 を有する基であり； Ｒ8は，水素，低級アルキル，３−６員環のシクロアルキル，低級アルコキシ，
ハロ，および低級アルキル，低級アルコキシ，ハロ，−ＮＲ21Ｒ22および−ＮＨ
Ｃ（Ｏ）（低級アルキル）からなる群より選択される１またはそれ以上の基で任
意に置換されていてもよいアリール，環中に１−３個のヘテロ原子を有する５員
のヘテロアリール，および環中に１−３個のヘテロ原子を有する６員のヘテロア
リールからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造： 【化９】 を有する基であり； Ｒ9は，水素，低級アルキル；ヒドロキシ，低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ2 1 Ｒ22からなる群より選択される， 請求項３記載の化合物または塩。4. R 5 is one or more selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl, halo, 5-membered heteroaryl, and lower alkyl, halo, hydroxy, —NR 21 R 22 and lower alkoxy. R 6 is selected from the group consisting of aryl optionally substituted with a group; R 6 is hydrogen, lower alkyl, 3-7 membered cycloalkyl, lower alkoxy, halo, and lower alkyl, halo, hydroxy, —NR Selected from the group consisting of aryl optionally substituted with one or more groups independently selected from the group consisting of 21 R 22 and lower alkoxy, or together with R 18 has the structure: Formula 7 Wherein both y and y ′ are hydrogen or both are lower alkyl. R 7 is —OR 18 , wherein R 18 is lower alkyl, — ( CH 2 ) n selected from the group consisting of R 20 , or together with R 6 or R 8 , the structure: R 8 is hydrogen, lower alkyl, 3-6 membered cycloalkyl, lower alkoxy,
Halo, and lower alkyl, lower alkoxy, halo, —NR 21 R 22 and —NH
Aryl optionally substituted with one or more groups selected from the group consisting of C (O) (lower alkyl), 5-membered heteroaryl having 1-3 heteroatoms in the ring, And selected from the group consisting of 6-membered heteroaryl having 1-3 heteroatoms in the ring, or together with R 18 , the structure: A group having a; R 9 is hydrogen, lower alkyl; hydroxy, lower alkoxy, is selected from the group consisting of halo and -NR 2 1 R 22, a compound or salt according to claim 3, wherein. 【請求項５】 Ｒ5は，水素，低級アルキル，チエン−２−イル，チエン−
３−イル，および１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていて
もよいアリールからなる群より選択され； Ｒ6は，水素，低級アルキル，５員または６員のシクロアルキル，および１また
はそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる
群より選択され，またはＲ18と一緒になって構造： 【化１０】 ［式中，ｙおよびｙ'は両方とも水素であるかまたは両方とも低級アルキルであ
る］ を有する基であり； Ｒ7は，−ＯＲ18であり，ここで，Ｒ18は，低級アルキル，−（ＣＨ2）nＲ20か
らなる群より選択され，またはＲ6またはＲ8と一緒になって，構造： 【化１１】 を有する基であり； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択され； Ｒ8は，水素，低級アルキル，５員または６員環のシクロアルキル，低級アルコ
キシ，および−ＮＨＣ（Ｏ）（低級アルキル）基で任意に置換されていてもよい
アリール，チエン−２−イル，チエン−３−イル，ピリジン−２−イル，および
ピリジン−３−イルからなる群より選択され，またはＲ18と一緒になって，構造
： 【化１２】 を有する基であり；および Ｒ9は，水素および低級アルキルからなる群より選択される，請求項３記載の化
合物または塩。5. R 5 is hydrogen, lower alkyl, thien-2-yl, thien-
R 6 is selected from the group consisting of 3-yl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; R 6 is hydrogen, lower alkyl, 5- or 6-membered cycloalkyl, and 1 Or selected from the group consisting of aryl optionally substituted with a lower alkoxy group, or together with R 18 has the structure: Wherein both y and y ′ are hydrogen or both are lower alkyl. R 7 is —OR 18 , where R 18 is lower alkyl, — Selected from the group consisting of (CH 2 ) n R 20 , or together with R 6 or R 8 , the structure: N is 2 or 3; R 20 is hydroxy, —C (O) OH, morpholin-4-yl, piperidin-1
R 8 is selected from the group consisting of —yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl and —NR 21 R 22 ; R 8 is hydrogen, lower alkyl, 5- or 6-membered cycloalkyl, lower alkoxy, and Selected from the group consisting of aryl optionally substituted with a -NHC (O) (lower alkyl) group, thien-2-yl, thien-3-yl, pyridin-2-yl, and pyridin-3-yl Or together with R 18 have the structure: 4. The compound or salt of claim 3, wherein R 9 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl. 【請求項６】 Ｑが 【化１３】 である，請求項１記載の化合物または塩。6. Q is embedded image The compound or salt according to claim 1, which is 【請求項７】 Ｒ1は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からな
る群より選択され； ｎは，２または３であり； Ｒ20は，ヒドロキシおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および
−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され； Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，および１またはそれ以上
の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択
され；および， Ｒ4は水素である，請求項６記載の化合物または塩。7. R 1 is selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl and — (CH 2 ) n R 20 ; n is 2 or 3; R 20 is hydroxy and —C (O) OH R 2 is selected from the group consisting of hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, —SO 2 NR 21 R 22 and —C (O) OH; R 3 is hydrogen, halo, lower alkyl is selected from the group consisting of lower alkoxy, and one or more lower alkoxy aryl which may be optionally substituted with groups; and, R 4 is hydrogen, a compound or salt according to claim 6, wherein. 【請求項８】 Ｒ10は，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群よ
り選択され； Ｒ11は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され；
Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは，２または３であり；および， Ｒ20は，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−４−イル，ピペリジン−１
−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−ＮＲ21Ｒ22から
なる群より選択される，請求項７記載の化合物または塩。8. R 10 is selected from the group consisting of lower alkyl and —C (O) OR 19 ; R 11 is selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl and —C (O) OR 19 ;
R 12 is - (CH 2) be n R 20; R 19 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; n is 2 or 3; and, R 20 is hydroxy, -C ( O) OH, morpholin-4-yl, piperidin-1
- yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl and -NR 21 are selected from the group consisting of R 22, a compound or salt according to claim 7 wherein. 【請求項９】 Ｒ10は，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）Ｏ（低級アルキル）
からなる群より選択され； Ｒ11は，水素，低級アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19からなる群より選択され；
Ｒ12は，−（ＣＨ2）nＲ20であり； Ｒ19は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； ｎは２であり；および， Ｒ20は，−Ｃ（Ｏ）ＯＨ，モルホリン−１−イル，ピペリジン−１−イル，ピペ
ラジン−１−イル，ピロリジン−１−イルおよび−Ｎ（低級アルキル）2からな
る群より選択される， 請求項７記載の化合物または塩。9. R 10 is lower alkyl and —C (O) O (lower alkyl)
R 11 is selected from the group consisting of hydrogen, lower alkyl and —C (O) OR 19 ;
R 12 is - (CH 2) be n R 20; R 19 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; n is 2; and, R 20 is, -C (O) OH, morpholine The compound or salt according to claim 7, wherein the compound or salt is selected from the group consisting of -1-yl, piperidin-1-yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl and -N (lower alkyl) 2 . 【請求項１０】 Ｑは， 【化１４】 であり； Ｒ1は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ2は，水素，低級アルキル，ハロ，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ19，−Ｃ（Ｏ）Ｒ19，−Ｎ
Ｒ21Ｒ22，−ＳＯ2ＮＲ21Ｒ22および−Ｎ＝Ｃ−Ｒ23からなる群より選択され；
Ｒ3は，水素，ハロ，低級アルキル，低級アルコキシ，モルホリン−４−イル，
ピペリジン−１−イル，ピペラジン−１−イル，ピロリジン−１−イル，および
１またはそれ以上の低級アルコキシ基で任意に置換されていてもよいアリールか
らなる群より選択され；および， Ｒ4は，水素である，請求項１記載の化合物または塩。10. Q is: embedded image R 1 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 2 is hydrogen, lower alkyl, halo, —C (O) OR 19 , —C (O) R 19 , —N
R 21 R 22 , selected from the group consisting of —SO 2 NR 21 R 22 and —N ＝ C—R 23 ;
R 3 is hydrogen, halo, lower alkyl, lower alkoxy, morpholin-4-yl,
R 4 is selected from the group consisting of piperidin-1-yl, piperazin-1-yl, pyrrolidin-1-yl, and aryl optionally substituted with one or more lower alkoxy groups; The compound or salt according to claim 1, which is hydrogen. 【請求項１１】 ａおよびｂはいずれも単結合であり； ｒは２であり； Ｒ13は，共有結合であって，Ｑはこれを介して分子の残りに結合しており； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
Ｒ15は，水素であり； Ｒ16およびＲ17は，独立して，水素および低級アルキルからなる群より選択され
る，請求項１０記載の化合物または塩。11. a and b are both a single bond; r is 2; R 13 is a covalent bond, Q is connected to the rest of the molecule; R 14 is , hydrogen, lower alkyl and - (CH 2) is selected from the group consisting of n R 20;
R 15 is hydrogen; R 16 and R 17 are independently selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl, A compound or salt according to claim 10, wherein. 【請求項１２】 Ｒ20は，−ＮＲ21Ｒ22であり，ここでＲ21およびＲ22は，
水素および低級アルキルからなる群より独立して選択される，請求項１１記載の
化合物または塩。12. R 20 is -NR 21 R 22, wherein R 21 and R 22,
12. The compound or salt according to claim 11, which is independently selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl. 【請求項１３】 ａおよびｂはいずれも二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ13は，共有結合であって，Ｑはこれを介して分子の残りに結合しており； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
Ｒ15およびＲ16は水素であり；および， Ｒ17は存在しない，請求項１０記載の化合物または塩13. a and b is either a double bond; r is an 1; R 13 is a covalent bond, is bound to the rest of the Q via this molecule; R 14 is hydrogen, lower alkyl and - (CH 2) is selected from the group consisting of n R 20;
R 15 and R 16 are hydrogen; and, R 17 is absent, the compound or salt according to claim 10, wherein 【請求項１４】 ａおよびｂはいずれも二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ13は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ14は，共有結合であって，Ｑはこれを介して分子の残りに結合しており； Ｒ15およびＲ16は水素であり；および， Ｒ17は存在しない，請求項１０記載の化合物または塩。14. a and b are both a double bond; r is 1; R 13 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 14 is a covalent bond, and Q is 11. A compound or salt according to claim 10 wherein R 15 and R 16 are hydrogen; and R 17 is absent. 【請求項１５】 ａおよびｂは二重結合であり； ｒは１であり； Ｒ13は，水素および低級アルキルからなる群より選択され； Ｒ14は，水素，低級アルキルおよび−（ＣＨ2）nＲ20からなる群より選択され；
Ｒ15は，共有結合であって，Ｑはこれを介して分子の残りに結合しており； Ｒ16は，水素であり；および， Ｒ17は存在しない，請求項１０記載の化合物または塩。15. a and b are double bonds; r is 1; R 13 is selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl; R 14 is hydrogen, lower alkyl and — (CH 2 ) It is selected from the group consisting of n R 20;
R 15 is a covalent bond, Q is is attached to the remainder of the molecule through this; R 16 is hydrogen; and, R 17 is absent, the compound or salt according to claim 10, wherein. 【請求項１６】 請求項１記載の化合物または塩および薬学的に許容しうる
担体または賦形剤を含む医薬組成物。16. A pharmaceutical composition comprising the compound or salt according to claim 1 and a pharmaceutically acceptable carrier or excipient. 【請求項１７】 蛋白質キナーゼの触媒活性を調節する方法であって，前記
蛋白質キナーゼを請求項１記載の化合物または塩と接触させることを含む方法。17. A method for regulating the catalytic activity of a protein kinase, comprising contacting the protein kinase with a compound or salt according to claim 1. 【請求項１８】 前記蛋白質キナーゼが，レセプターチロシンキナーゼ，非
レセプターチロシンキナーゼおよびセリン−トレオニンキナーゼからなる群より
選択される，請求項１７記載の方法。18. The method of claim 17, wherein said protein kinase is selected from the group consisting of receptor tyrosine kinase, non-receptor tyrosine kinase and serine-threonine kinase. 【請求項１９】 生物において蛋白質キナーゼ関連疾患を治療または予防す
る方法であって，治療的有効量の請求項１記載の化合物または塩を前記生物に投
与することを含む方法。19. A method for treating or preventing a protein kinase-related disease in an organism, comprising administering to the organism a therapeutically effective amount of the compound or salt of claim 1. 【請求項２０】 前記蛋白質キナーゼ関連疾患が，レセプターチロシンキナ
ーゼ関連疾患，非レセプターチロシンキナーゼ関連疾患およびセリン−トレオニ
ンキナーゼ関連疾患からなる群より選択される，請求項１９記載の方法。20. The method according to claim 19, wherein said protein kinase-related disease is selected from the group consisting of a receptor tyrosine kinase-related disease, a non-receptor tyrosine kinase-related disease and a serine-threonine kinase-related disease. 【請求項２１】 前記蛋白質キナーゼ関連疾患が，ＥＧＦＲ関連疾患，ＰＤ
ＧＦＲ関連疾患，ＩＧＦＲ関連疾患およびｆｌｋ関連疾患からなる群より選択さ
れる，請求項１９記載の方法。21. The protein kinase-related disease is an EGFR-related disease, PD
20. The method according to claim 19, wherein the method is selected from the group consisting of a GFR-related disease, an IGFR-related disease, and a flk-related disease. 【請求項２２】 前記蛋白質キナーゼ関連疾患が，扁平上皮癌，星状細胞腫
，カポジ肉腫，神経膠芽細胞腫，肺癌，膀胱癌，頭頚部癌，黒色腫，卵巣癌，前
立腺癌，乳癌，小細胞肺癌，神経膠腫，直腸結腸癌，尿生殖器癌および胃腸癌か
らなる群より選択される癌である，請求項１９記載の方法。22. The protein kinase-related disease is squamous cell carcinoma, astrocytoma, Kaposi's sarcoma, glioblastoma, lung cancer, bladder cancer, head and neck cancer, melanoma, ovarian cancer, prostate cancer, breast cancer, 20. The method according to claim 19, wherein the cancer is selected from the group consisting of small cell lung cancer, glioma, colorectal cancer, urogenital cancer and gastrointestinal cancer. 【請求項２３】 前記蛋白質キナーゼ関連疾患が，糖尿病，自己免疫疾患，
過増殖疾患，再狭窄，線維症，乾癬，フォン・ヒッペル−リンダウ症候群，変形
性関節症，慢性関節リウマチ，脈管形成，炎症性疾患，免疫疾患および心血管疾
患からなる群より選択される，請求項１９記載の方法。23. The protein kinase-related disease is diabetes, an autoimmune disease,
Selected from the group consisting of hyperproliferative disease, restenosis, fibrosis, psoriasis, von Hippel-Lindau syndrome, osteoarthritis, rheumatoid arthritis, angiogenesis, inflammatory disease, immune disease and cardiovascular disease, The method according to claim 19. 【請求項２４】 前記生物がヒトである，請求項１９記載の方法。24. The method of claim 19, wherein said organism is a human. 【請求項２５】 ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキ
ソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−ヒドロキシ
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−アセチル−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸メチルエステル， ３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オン， ３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オン， ３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロイ
ンドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−｛３−［３−シクロヘキシル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）
−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イ
ル｝−アセトアミド， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−メトキシ−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−２−オ
キソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−メチル−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−アミノ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−フルオロ−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−５−フルオロ−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン−４−イル
エトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−７−フルオロ−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−５−（２−モ
ルホリン−４−イルエチル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−２
−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−エチル−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［２'−メトキシ−５'−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−
イリデンメチル）−ビフェニル−３−イル］−アセトアミド， ５−フルオロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデ
ン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（４−メトキシ−３−チオフェン−２−イルベンジリデン）−２−オ
キソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド， ６−アミノ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセトアミド， ５−ブロモ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン， ３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）−１，３−ジヒ
ドロインドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−フルオロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン，３−（４，５−ジメトキシ−２−チオフェン−
２−イルベンジリデン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−３−チオフェン−２
−イルベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６
−イル｝−アセトアミド， ３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−４−メチル−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン， ３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−５−フルオロ−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−フルオロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−１，３−
ジヒドロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（３'−エトキシ−６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロピ
ロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（４，５，２'−トリメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−｛３−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−３−チオフェン−３
−イルベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６
−イル｝−アセトアミド， ５−クロロ−３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン， ［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−
２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブ
チルエステル， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−｛３−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ
）−ベンジリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−
イル｝−アセトアミド， ３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロ
ロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ５−ブロモ−３−［３，５−ジイソプロピル−４−（２−モルホリン−４−イル
エトキシ）−ベンジリデン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３'−エトキシ−４，５−ジメトキシビフェニル−２−イルメチレン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（４−メトキシ−３−チオフェン−２−イルベンジリデン）−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（４−メトキシ−３−ピリジン−３−イルベンジリデン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（４，５，３'−トリメトキシビフェニル−２−イルメチレン
）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（４，５−ジメトキシ−２−ナフタレン−２−イルベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（３'−アセチルアミノ−６−メトキシビフェニル−３−イルメチレ
ン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−アセト
アミド， ６−メトキシ−３−（４−メトキシ−３−チオフェン−３−イルベンジリデン）
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインド
ール−２−オン， ３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン， ５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン， ３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチル−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−４−メチル−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロピロ
ロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−１，３−ジヒドロピロロ
［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（３−シクロヘキシル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒドロピ
ロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−ジヒド
ロピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−オン， ５−ブロモ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−４−メ
チル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−４−メチル
−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン
）−４−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−４−メチ
ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−トリフルオ
ロメチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ６−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキ
ソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−プロピオン酸， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−メトキシ−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−ブチル−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−４−カルボン酸， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−メト
キシフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ７−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５
−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−
２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブ
チルエステル， ５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−１，３−
ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３−シクロペンチル−４−メトキシベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（６−メトキシビフェニル−３−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジ
ヒドロインドール−２−オン， ３−（５−イソプロピル−４−メトキシ−２−メチルベンジリデン）−４−メチ
ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルメチレン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３−イソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４−メチ
ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−４
−メチル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−クロロ−３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−４−メチ
ル−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５，６−ジメト
キシ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキ
ソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−メタンスルホンアミド
， Ｎ−［３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−２−オキ
ソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル］−ベンズアミド， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−（３−エト
キシフェニル）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−６−フェニル−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３，５−ジイソプロピル−４−メトキシベンジリデン）−５−フルオロ−
１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−フルオロ−３−（４−メトキシ−３，５−ジメチルベンジリデン）−１，３
−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（２，２−ジメチルクロマン−６−イルメチレン）−１，３−ジヒドロイン
ドール−２−オン からなる群より選択される，請求項１記載の化合物またはその塩。25. 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene)- 1
, 3-Dihydroindol-2-one, N- [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide, 3 -(3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6-hydroxy-1,3-dihydroindol-2-one, 5-acetyl-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene)-
1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid methyl ester, 3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (5-isopropyl-4-methoxy -2-methylbenzylidene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene ) -1,3-Dihydroindol-2-one, 3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -5-fluoro-1,
3-dihydroindol-2-one, 3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene)- 1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -1,
3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, N- {3- [3-cyclohexyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy)]
-Benzylidene] -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl} -acetamide, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5-methoxy-
1,3-dihydroindol-2-one, N- [3- (4-methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl]- Acetamide, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5-methyl-1
, 3-Dihydroindol-2-one, 5-amino-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1
, 3-Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6-fluoro-
1,3-dihydroindol-2-one, 3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -5-fluoro-1,3
-Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- [3,5-diisopropyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzylidene] -1,3-dihydroindol-2-one, 3- ( 3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -7-fluoro-
1,3-dihydroindol-2-one, 3- (4-methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene) -5- (2-morpholin-4-ylethyl) -1,3-dihydroindol-2-one , N- [3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -2
-Oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamido 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5-ethyl-1
, 3-Dihydroindole-2-one, N- [2'-methoxy-5 '-(2-oxo-1,2-dihydroindole-3-
(Ylidenemethyl) -biphenyl-3-yl] -acetamide, 5-fluoro-3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, N- [3- ( 4-methoxy-3-thiophen-2-ylbenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide, 6-amino-3- (3,5-diisopropyl-4-) Methoxybenzylidene) -1
, 3-Dihydroindol-2-one, N- [3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide, 5-bromo-3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, 3- (4-methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (5-isopropyl-4-methoxy- 2-methylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-fluoro-3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, 3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-
Dihydroindol-2-one, 3- (4,5-dimethoxy-2-thiophene-
2-ylbenzylidene) -1,3-dihydroindol-2-one, N- {3- [4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -3-thiophen-2
-Ilbenzylidene] -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-6
-Yl} -acetamide, 3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -4-methyl-1,3-
Dihydroindol-2-one, 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -5-fluoro-1
, 3-Dihydroindol-2-one, 3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -5-fluoro-1,
3-dihydroindol-2-one, 5-fluoro-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydroindol-2-one, 3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -1,3-
Dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 3- (3'-ethoxy-6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3
-Dihydroindol-2-one, 3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 3- (3-cyclopentyl-4-methoxy Benzylidene) -4-methyl-1,3
-Dihydroindol-2-one, 3- (4,5,2'-trimethoxybiphenyl-2-ylmethylene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, N- {3- [4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -3-thiophen-3
-Ilbenzylidene] -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-6
-Yl} -acetamide, 5-chloro-3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydroindol-2-one, [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-
2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -carbamic acid tert-butyl ester, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1
, 3-Dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1
, 3-Dihydroindol-2-one, N- {3- [3-tert-butyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzylidene] -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole -6
Ill-acetamide, 3- (4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 5-bromo-3- [3,5- Diisopropyl-4- (2-morpholin-4-ylethoxy) -benzylidene] -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3'-ethoxy-4,5-dimethoxybiphenyl-2-ylmethylene)-
1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (4-methoxy-3-thiophen-2-ylbenzylidene)-
1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (4-methoxy-3-pyridin-3-ylbenzylidene) -1
, 3-Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (4,5,3'-trimethoxybiphenyl-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (4,5 -Dimethoxy-2-naphthalen-2-ylbenzylidene) -1,3
-Dihydroindol-2-one, N- [3- (3'-acetylamino-6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -acetamide , 6-methoxy-3- (4-methoxy-3-thiophen-3-ylbenzylidene)
-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3-cyclohexyl-4-methoxy Benzylidene) -4-methyl-1,3
-Dihydroindol-2-one, 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -4-methyl-1,
3-dihydroindol-2-one, 3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 3- (6-methoxybiphenyl-3 -Ylmethylene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 3- (3-cyclohexyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridine -2-one, 3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4- (Methoxybenzylidene) -1,3-dihydropyrrolo [2,3-b] pyridin-2-one, 5-bromo-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (6-methoxy Biphenyl-3-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methylbenzylidene) -4-methyl-1,3 -Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3,5-diisopropyl -4-methoxybenzylidene) -6-trifluoromethyl-1,3-dihydroindol-2-one, 6-chloro-3- (3,5-diisopropyl- - methoxybenzylidene) -1
, 3-Dihydroindol-2-one, 3- [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-5-yl] -propionic acid, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6-methoxy-
1,3-dihydroindol-2-one, 5-butyl-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -1
, 3-Dihydroindol-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-4-carboxylic acid, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6- (3-methoxyphenyl) -1,3-dihydroindole-2-one, 7 -Chloro-3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5
-Methyl-1,3-dihydroindol-2-one, [3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-
2,3-dihydro-1H-indol-5-yl] -carbamic acid tert-butyl ester, 5-chloro-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -1,3-
Dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (3-cyclopentyl-4-methoxybenzylidene) -1,3
-Dihydroindol-2-one, 3- (6-methoxybiphenyl-3-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (5-isopropyl-4-methoxy-2-methyl Benzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (2,3-dihydrobenzofuran-5-ylmethylene) -1,
3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (3-isopropyl-4-methoxybenzylidene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (3, 5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -4
-Methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2
, 3-Dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5,6-dimethoxy-1,3-dihydroindole-2-one, N- [3 -(3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -methanesulfonamide, N- [3- (3,5-diisopropyl-4) -Methoxybenzylidene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-6-yl] -benzamide, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6- (3-ethoxyphenyl)- 1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -6-phenyl-
1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3,5-diisopropyl-4-methoxybenzylidene) -5-fluoro-
1,3-dihydroindol-2-one, 5-fluoro-3- (4-methoxy-3,5-dimethylbenzylidene) -1,3
The compound according to claim 1, which is selected from the group consisting of -dihydroindol-2-one, 3- (2,2-dimethylchroman-6-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, or a salt thereof. . 【請求項２６】 ５−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−
イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−２−オン， ３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，
３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド， ３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，
３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸メチルアミド， ３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，
３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸ジメチルアミド， ３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，
３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸， ５−アセチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１
，３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−アセチル−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒド
ロインドール−２−オン， ３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ
−１Ｈ−インドール−５−スルホン酸アミド， ５−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン， ３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ
−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸， ６−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン， ３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロインドール−
２−オン， ５−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン， ３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−４−メチル−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン， ３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，３−ジヒドロ
インドール−２−オン， ５−クロロ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン， ５−ブロモ−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン， ４−メチル−３−（３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−１，
３−ジヒドロインドール−２−オン，および ３−（１Ｈ−インドール−２−イルメチレン）−５［（１Ｈ−インドール−２−
イルメチレン）アミノ］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン からなる群より選択される，請求項１記載の化合物またはその生理学的に許容し
うる塩。26. 5-methyl-3- (3-methyl-1H-indole-2-
Ilmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -2-oxo-2,
3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid amide, 3- (3-methyl-1H-indole-2-ylmethylene) -2-oxo-2,
3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid methylamide, 3- (3-methyl-1H-indole-2-ylmethylene) -2-oxo-2,
3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid dimethylamide, 3- (3-methyl-1H-indole-2-ylmethylene) -2-oxo-2,
3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid, 5-acetyl-3- (3-methyl-1H-indole-2-ylmethylene) -1
, 3-Dihydroindol-2-one, 5-acetyl-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -2 -Oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-sulfonic acid amide, 5-amino-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 3- (1H -Indol-2-ylmethylene) -2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-5-carboxylic acid, 6-chloro-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindole- 2-one, 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindole-
2-one, 5-chloro-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (1H-indol-2-ylmethylene) -1,3 -Dihydroindol-2-one, 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -4-methyl-1,3-dihydroindol-2-one, 3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,3-dihydroindol-2-one, 5-chloro-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,
3-dihydroindol-2-one, 5-bromo-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,
3-dihydroindol-2-one, 4-methyl-3- (3-methyl-1H-indol-2-ylmethylene) -1,
3-dihydroindol-2-one, and 3- (1H-indol-2-ylmethylene) -5 [(1H-indole-2-one
The compound according to claim 1, which is selected from the group consisting of: ilmethylene) amino] -1,3-dihydroindol-2-one, or a physiologically acceptable salt thereof. 【請求項２７】 ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール
−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−
３−イル］−プロピオン酸， ３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオン酸， ３−２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリ
デンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］
−プロピオン酸， ３−［２−（４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオン酸， ３−［２−（５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオン酸， ３−［２−（６−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオン酸， ３−［２−（６−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−
イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル］−プロピオン酸， Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−
３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル］−プロピオンアミド， ３−［３−（３−ジメチルアミノ−プロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ
−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１，３−ジヒドロ−インドール−２
−オン， ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル
）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオ
ンアミド， ３−［３−（３−モルホリン−４−イル−３−オキソ−プロピル）−４，５，６
，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメチレン］−１，３−ジヒド
ロ−インドール−２−オン， Ｎ−メチル−３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−プロピオンアミド， Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−３−［２−（２−オキソ−１，２
−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒド
ロ−１Ｈ−インドール−３−イル］−プロピオンアミド， ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−
３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル］−プロピオン酸， ３−｛２−［６−（３−メトキシ−フェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ
−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−
インドール−３−イル｝−プロピオン酸， ３−｛２−［６−（４−メトキシ−フェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ
−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−
インドール−３−イル｝−プロピオン酸， ３−［２−（２−オキソ−６−フェニル−１，２−ジヒドロ−インドール−３−
イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イ
ル］−プロピオン酸， ３−｛２−［６−（２−メトキシ−フェニル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ
−インドール−３−イリデンメチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−
インドール−３−イル｝−プロピオン酸， ３−［２−（５−イソプロピルスルファモイル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ
−インドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−
インドール−３−イル］−プロピオン酸， ３−［２−（６−モルホリン−４−イル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−イン
ドール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インド
ール−３−イル］−プロピオン酸， ３−［２−（５−クロロ−４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸， ３−［２−（５−ブロモ−４−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インド
ール−３−イリデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル］−プロピオン酸， ３−［２−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−プロピオンアミド， ３−［２−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イ
リデンメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル
］−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−プロピオンアミド，および ３−［２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル
）−フェニル］−プロピオン酸 からなる群より選択される，請求項１記載の化合物またはその生理学的に許容し
うる塩。27. 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-
3-yl] -propionic acid, 3- [2- (5-chloro-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3 -Yl] -propionic acid, 3-2- (5-bromo-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl ]
-Propionic acid, 3- [2- (4-methyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl]- Propionic acid, 3- [2- (5-methyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propion Acid, 3- [2- (6-chloro-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid , 3- [2- (6-Methoxy-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-
(Ilidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, N, N-dimethyl-3- [2- (2-oxo-1,2-dihydro-indole-
3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3
-Yl] -propionamide, 3- [3- (3-dimethylamino-propyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-2-ylmethylene] -1,3-dihydro-indole-2
-One, 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide, 3- [3- (3-morpholin-4-yl-3-oxo-propyl) -4,5,6
, 7-Tetrahydro-1H-indol-2-ylmethylene] -1,3-dihydro-indol-2-one, N-methyl-3- [2- (2-oxo-1,2-dihydro-indole-3- (Ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide, N- (2-morpholin-4-yl-ethyl) -3- [2- (2-oxo-1) , 2
-Dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionamide, 3- [2- (2-oxo-1,2-dihydro-pyrrolo [ 2,3-b] pyridine-
3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3
-Yl] -propionic acid, 3- {2- [6- (3-methoxy-phenyl) -2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl] -4,5,6,7-tetrahydro- 1H-
Indole-3-yl} -propionic acid, 3- {2- [6- (4-methoxy-phenyl) -2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl] -4,5,6,7 -Tetrahydro-1H-
Indole-3-yl} -propionic acid, 3- [2- (2-oxo-6-phenyl-1,2-dihydro-indole-3-
(Ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3- {2- [6- (2-methoxy-phenyl) -2-oxo-1,2-dihydro -Indole-3-ylidenemethyl] -4,5,6,7-tetrahydro-1H-
Indole-3-yl} -propionic acid, 3- [2- (5-isopropylsulfamoyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro- 1H-
Indole-3-yl] -propionic acid, 3- [2- (6-morpholin-4-yl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro -1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3- [2- (5-chloro-4-methyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5,6, 7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3- [2- (5-bromo-4-methyl-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5 , 6,7-Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -propionic acid, 3- [2- (5-bromo-2-oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -4,5, 6,7 -Tetrahydro-1H-indol-3-yl] -N- (2-morpholin-4-yl-ethyl) -propionamide, 3- [2- (5-chloro-2-oxo-1,2-dihydro-indole -3-ylidenemethyl) -4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl] -N- (2-morpholin-4-yl-ethyl) -propionamide, and 3- [2- (2 A compound according to claim 1 or a physiologically acceptable salt thereof, wherein the compound is selected from the group consisting of -oxo-1,2-dihydro-indole-3-ylidenemethyl) -phenyl] -propionic acid. 【請求項２８】 ３−（３−（Ｒ27Ｒ28Ｎ）プロピル）−４，５，６，７−
テトラヒドロ−１Ｈ−インドールを製造する方法であって， ５−アミノレブリン酸またはその塩酸塩を，５位においてアルキルおよびアリー
ルからなる群より独立して選択される１または２個の基で任意に置換されていて
もよい１，３−シクロヘキサジオンと，第１の溶媒中，塩基の存在下で，約６０
℃−約１８０℃の温度で反応させて，任意に置換されていてもよい３−（４−オ
キソ−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）プロピオ
ン酸を得； 前記３−（４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３
−イル）プロピオン酸を，Ｒ27Ｒ28ＮＨ基（式中，Ｒ27およびＲ28は，水素，ア
ルキル，アルケニル，アルキニルおよびアリールからなる群より独立して選択さ
れるか，またはＲ27およびＲ28は一緒になって，窒素原子とともに５員ヘテロア
リール基を形成し，または窒素原子とともに５員または６員のヘテロ脂環式基を
形成する）と反応させて，任意に置換されていてもよい３−（３−（Ｒ27Ｒ28Ｎ
）−３−オキソプロピル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−インドール−４−
オンを得；そして 前記３−（３−（Ｒ27Ｒ28Ｎ）−３−オキソプロピル）−４，５，６，７−テト
ラヒドロインドール−４−オンを，第２の溶媒中で，およそ室温から約８０℃の
温度で，金属水素化物還元剤で還元して，３−（３−Ｒ27Ｒ28Ｎ）プロピル−４
，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドールを得る， の各工程を含む方法。28. 3- (3- (R 27 R 28 N) propyl) -4,5,6,7-
A process for preparing tetrahydro-1H-indole, wherein 5-aminolevulinic acid or its hydrochloride salt is optionally substituted at the 5-position with one or two groups independently selected from the group consisting of alkyl and aryl. 1,3-cyclohexadione, in a first solvent, in the presence of a base, about 60
Reacting at a temperature of from about 180C to about 180C to obtain optionally substituted 3- (4-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) propionic acid; The 3- (4-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indole-3
- yl) propionic acid, in R 27 R 28 NH group (wherein, R 27 and R 28 are hydrogen, alkyl, alkenyl, are independently selected from the group consisting of alkynyl, and aryl, or R 27 and R 28 together form a 5-membered heteroaryl group with the nitrogen atom or form a 5- or 6-membered heteroalicyclic group with the nitrogen atom) Good 3- (3- (R 27 R 28 N
) -3-Oxopropyl) -4,5,6,7-tetrahydro-indole-4-
On the resulting; and the 3- (3- (R 27 R 28 N) -3- oxopropyl) -4,5,6,7-tetrahydronaphthalen-indol-4-one, in a second solvent at about room At a temperature of about 80 ° C. with a metal hydride reducing agent to give 3- (3-R 27 R 28 N) propyl-4
, 5,6,7-tetrahydro-1H-indole. 【請求項２９】 前記５−アミノレブリン酸またはその塩酸塩と前記任意に
置換されていてもよい１，３−シクロヘキサジオンとの反応を，前記第１の溶媒
として水を用いて行う，請求項２８記載の方法。29. The reaction between the 5-aminolevulinic acid or its hydrochloride and the optionally substituted 1,3-cyclohexadione using water as the first solvent. 28. The method of claim 28. 【請求項３０】 前記５−アミノレブリン酸またはその塩酸塩と前記任意に
置換されていてもよい１，３−シクロヘキサジオンとの反応を，前記塩基として
酢酸ナトリウムを用いて行う，請求項２８記載の方法。30. The reaction between the 5-aminolevulinic acid or its hydrochloride and the optionally substituted 1,3-cyclohexadione using sodium acetate as the base. the method of. 【請求項３１】 前記５−アミノレブリン酸またはその塩酸塩と前記任意に
置換されていてもよい１，３−シクロヘキサジオンとの反応を，約１００℃−約
１２０℃の温度で行う，請求項２８記載の方法。31. The reaction of the 5-aminolevulinic acid or its hydrochloride with the optionally substituted 1,3-cyclohexadione at a temperature of about 100 ° C. to about 120 ° C. 28. The method of claim 28. 【請求項３２】 Ｒ27およびＲ28基として，独立して低級アルキル，および
一緒になって−（ＣＨ2）4−，−（ＣＨ2）5−，−（ＣＨ2）2Ｏ（ＣＨ2）2−お
よび−（ＣＨ2）2Ｎ（ＣＨ2）2−からなる群より選択される基を用いる，請求項
２８記載の方法。32. As the R 27 and R 28 groups, independently lower alkyl and, together, — (CH 2 ) 4 —, — (CH 2 ) 5 —, — (CH 2 ) 2 O (CH 2 ) 2 - and - (CH 2) 2 N (CH 2) 2 - is used a group selected from the group consisting of the method of claim 28. 【請求項３３】 前記Ｒ27Ｒ28ＮＨと前記３−（４−オキソ−４，５，６，
７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−３−イル）プロピオン酸との前記反応を
，１，１−カルボニルジイミダゾールを用いて行う，請求項２８記載の方法。33. The R 27 R 28 NH and the 3- (4-oxo-4,5,6,33)
29. The method of claim 28, wherein said reaction with 7-tetrahydro-1H-indol-3-yl) propionic acid is performed using 1,1-carbonyldiimidazole. 【請求項３４】 前記３−（３−（Ｒ27Ｒ28Ｎ）−３−オキソプロピル）−
４，５，６，７−テトラヒドロインドール−４−オンの還元を，水素化リチウム
アルミニウムを用いて行う，請求項２８記載の方法。34. The 3- (3- (R 27 R 28 N) -3-oxopropyl)-
29. The method according to claim 28, wherein the reduction of 4,5,6,7-tetrahydroindol-4-one is performed using lithium aluminum hydride. 【請求項３５】 前記３−（３−（Ｒ27Ｒ28Ｎ）−３−オキソプロピル）−
４，５，６，７−テトラヒドロインドール−４−オンの還元を，前記第２の溶媒
としてテトラヒドロフランを用いて，およそ室温から前記テトラヒドロフランの
還流温度までの温度で行う，請求項２８記載の方法。35. The 3- (3- (R 27 R 28 N) -3-oxopropyl)-
29. The method of claim 28, wherein the reduction of 4,5,6,7-tetrahydroindol-4-one is performed using tetrahydrofuran as the second solvent at a temperature from about room temperature to the reflux temperature of the tetrahydrofuran.
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