HU204710B - Process for producing pharmaceutical compositions having antiviral and antibacterial effect - Google Patents
Process for producing pharmaceutical compositions having antiviral and antibacterial effect Download PDFInfo
- Publication number
- HU204710B HU204710B HU883981A HU398188A HU204710B HU 204710 B HU204710 B HU 204710B HU 883981 A HU883981 A HU 883981A HU 398188 A HU398188 A HU 398188A HU 204710 B HU204710 B HU 204710B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- dimer
- lysozyme
- ribonuclease
- concentration
- treatment
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 25
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 15
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 claims abstract description 97
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 claims abstract description 97
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 claims abstract description 97
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 claims abstract description 96
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 claims abstract description 95
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 claims abstract description 95
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims description 89
- 108020002230 Pancreatic Ribonuclease Proteins 0.000 claims description 23
- 102000005891 Pancreatic ribonuclease Human genes 0.000 claims description 23
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 17
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 10
- 108010015937 ribonuclease dimer Proteins 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 239000003883 ointment base Substances 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 claims 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 claims 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 claims 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 abstract description 32
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 abstract description 32
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract description 28
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract description 28
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 abstract description 28
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 abstract description 22
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 abstract description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 15
- 208000031295 Animal disease Diseases 0.000 abstract 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 26
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 26
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 23
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 21
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 16
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 15
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 15
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 15
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 15
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 14
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 14
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 13
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 12
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 12
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 10
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 9
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 9
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 8
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 description 8
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 7
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 6
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 6
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 6
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 6
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 6
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 5
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 4
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 4
- 201000004946 genital herpes Diseases 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- 208000001688 Herpes Genitalis Diseases 0.000 description 3
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 208000008071 Parvoviridae Infections Diseases 0.000 description 3
- 206010057343 Parvovirus infection Diseases 0.000 description 3
- 206010041925 Staphylococcal infections Diseases 0.000 description 3
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 3
- 241000193985 Streptococcus agalactiae Species 0.000 description 3
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 3
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 208000015688 methicillin-resistant staphylococcus aureus infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 241000701931 Canine parvovirus Species 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 208000005141 Otitis Diseases 0.000 description 2
- 241000588767 Proteus vulgaris Species 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 241000194042 Streptococcus dysgalactiae Species 0.000 description 2
- 208000033809 Suppuration Diseases 0.000 description 2
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 2
- 238000012084 abdominal surgery Methods 0.000 description 2
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002947 bartholin's gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 210000003717 douglas' pouch Anatomy 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 208000019258 ear infection Diseases 0.000 description 2
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 229940007042 proteus vulgaris Drugs 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- VPSXHKGJZJCWLV-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-3-(1-ethylpiperidin-4-yl)oxypyrazol-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C=1C(=NN(C=1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2)OC1CCN(CC1)CC VPSXHKGJZJCWLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 206010002942 Apathy Diseases 0.000 description 1
- 208000015898 Bacterial Skin disease Diseases 0.000 description 1
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 1
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 1
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 1
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 208000031637 Erythroblastic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000036566 Erythroleukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010017553 Furuncle Diseases 0.000 description 1
- 206010056663 Gastric infection Diseases 0.000 description 1
- 206010048461 Genital infection Diseases 0.000 description 1
- 208000004898 Herpes Labialis Diseases 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 206010021531 Impetigo Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MNLRQHMNZILYPY-MDMHTWEWSA-N N-acetyl-alpha-D-muramic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@@H]1NC(C)=O MNLRQHMNZILYPY-MDMHTWEWSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 206010029419 Nipple infection Diseases 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 208000001294 Nociceptive Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010067152 Oral herpes Diseases 0.000 description 1
- 206010033733 Papule Diseases 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N Sorbitan monostearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N 0.000 description 1
- 201000002014 Suppurative Otitis Media Diseases 0.000 description 1
- 206010042731 Sycosis barbae Diseases 0.000 description 1
- GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N Terfenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002474 Tinea Diseases 0.000 description 1
- 241000893966 Trichophyton verrucosum Species 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010046914 Vaginal infection Diseases 0.000 description 1
- 208000032159 Vaginal inflammation Diseases 0.000 description 1
- 201000008100 Vaginitis Diseases 0.000 description 1
- 208000000558 Varicose Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010046996 Varicose vein Diseases 0.000 description 1
- 208000012544 Viral Skin disease Diseases 0.000 description 1
- HVUMOYIDDBPOLL-XGKPLOKHSA-N [2-[(2r,3r,4s)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-2-hydroxyethyl] octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XGKPLOKHSA-N 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- -1 acetyl stearoyl oxy alcohol Chemical compound 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 208000021841 acute erythroid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000003532 endogenous pyrogen Substances 0.000 description 1
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 description 1
- 235000015220 hamburgers Nutrition 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000037189 immune system physiology Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 description 1
- 230000003228 microsomal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 210000002445 nipple Anatomy 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 210000004923 pancreatic tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 210000001732 sebaceous gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 208000015891 sexual disease Diseases 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229940115920 streptococcus dysgalactiae Drugs 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229940034610 toothpaste Drugs 0.000 description 1
- 239000000606 toothpaste Substances 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 208000027185 varicose disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
A találmány tárgya eljárás új antívirális és antibakíeriális hatású gyógyászati készítmények előállítására, amelyek hatóanyagként polimerizált enzimeket tartalmaznak, gyógyászatiig elfogadható hordozóanyaggal összekeverve.
Az antibiotikumokra rezisztens baktériumtörzsek és vírusos betegségek egyre növekvő száma szükségessé teszi újfajta gyógyszerek bevezetését, emberek és állatok kezelése céljából. A jelenlegi sokrétű kezelés és gyógyszer között ismert többek között a monomer formában lévő enzimek használata különféle betegségekben szenvedő betegek kezelésére. Az enzimek katalitikus hatású proteinek, amelyek az élő szervezetek majdnem minden fontos életfolyamatában szerepet játszanak. így sok enzimet izoláltak már tisztán, vagy bizonyos kombinációkban fizikai-kémiai, fiziológiai vagy biológiai hatásuk miatt.
A lizozim és a ribonukleáz azok között az enzimek között van, amelyeknek bizonyos gyógyászati hatását már leírták. A lizozim 1922 óta ismert, ebben az évben fedezte fel Fleming. A lizozim enzimatikus funkcióit azonban csak 1950 után fedezték fel. Azóta ezt a vegyületet fizikai-kémiai, fiziológiai és klinikai kutatásokban kiterjedten vizsgálják, azonban biológiai jelentőségét még mindig nem ismerik teljes mértékben. Ismeretes, hogy a lizozim különféle gyógyászati hatásokkal -például antívirális, antibakteriális, gyulladáscsökkentő és antihisztamin tulajdonságokkal - rendelkezik. Antibakteriális hatása valószínűleg az N-acetilmuraminsav és az N-acetil-glükózamin közötti β-1-4glükozidos kötés hidrolízisén alapul, az ilyen kötések a bakteriális sejtfalban fordulnak elő.
A h'zozim jelenlétét fagocita-sejtekben szintén sokan kimutatták. Az e területen végzett kutatások azt mutatják, hogy a lrzozimekben rnttacellulárisan tartalmazott lizozim enzim felelős a fagocrtált baktériumok felemésztéséért. Emberben a lizozim a megfigyelések szerint stimulálja a fagocitőzist, 10-400 mg/ml fiziológiás koncentrációban.
A lizozim egyéb tulajdonságait is leírták. Például · úgy tűnik, hogy a lizozim csökkenti a testhőmérsékletet a fertőzés folyamán, amikor a hőmérséklet a válasz a íoxinok által szabaddá tett endogén pirogénekre. Az is valószínű, hogy a lizozim szerepet játszik az immunológiai folyamatokban a gamma-globulinok, opszonr- 1 nők és egyéb antitestek szintézisének stimulálása útján. Ezenkívül az is valószínű, hogy a lizozim erős gyulladáscsökkentő hatással rendelkezik. A lizozim ismert hasznos tulajdonságai, és a kiterjedt kutatások eredményeként előállított lizozrm-alapú gyógyászati készít- í mények ellenére, a lizozim enzim gyógyászati célokra való alkalmazása rgen korlátozott
A ribonukleázok az enzimek egy másik csoportját képezik, amelyeket különféle biológiai hatásuk szempontjából sokat tanulmányoztak. Az enzimek ezen cső- 5 portja sok állati és növényi szervezetben, valamint baktériumsejtekben is szokásosan előfordul. Tulajdonságaik tanulmányozását és izolálásukra irányuló kutatásokat Schmidt és McDonald kezdték el 1955-ben. A fenti enzimmel kapcsolatos megfigyelések között említhet- 6 jük például, hogy a ribonukleázok aktivitása rákos szövetekben jelentősen csökken. Felfedezték továbbá, hogy a leukémiát előidéző vírusok drasztikusan csökkentik a sav ribonukleáz aktivitását egérben. Ezenkí5 vűl, a virális leukémiás egerekben a sav ribonukleáz aktivitás jelentős csökkenését tapasztalták mitokondríumokban és a beteg állatok lépszövetéből kapott mikroszóma-frakciókban.
A fent említett vizsgálatok azt sugallják, hogy a ribonukleáz aktivitásának csökkenése valahogyan szoros kapcsolatban van a vírus okozta fertőzésekkel. így feltételezték, hogy a ribonukleáz enzim bizonyos antivirális aktivitással rendelkezik. Azonban jelenleg nem ismeretesek olyan készítmények, amelyekben ezt az > enzimet aníivirális széfként használnák.
Annak, hogy az ilyen potenciálisan hatásos enzimeket nem alkalmazzák széles körben gyógyászati készítmények hatóanyagaként az egyik fő oka az, hogy ezek az enzimek és más enzimek is monomer formájukban 1 ciíotoxikus hatást mutatnak. Tenyésztett fibroblasztokkal végzett vizsgálatok szerint kimutatták, hogy a lizozim és ribonukleáz monomerek már igen alacsony koncentrációkban is citoíoxikusak. Nyilvánvaló, hogy a fenti és más enzimek potenciális gyógyászati hatását csak úgy lehet hasznosítani, ha ezen citotoxikus hatások csökkentésére sikerül eredményes módszert kidolgozni. Célunk tehát olyan gyógyászati készítmények előállítása volt, amelyek hatóanyagként ϋζοζήηεζ ribonukleázt, vagy egyéb hasonló enzimet tartalmaznak, és amelyeket virális vagy bakteriális fertőzések kezelésére alkalmazhatunk anélkül, hogy az enzimek monomer formájában észlelhető citotoxikus hatásokat is mutatnák.
Bartholeyns és Zenebergh [Europ. J. Cancer 15 (4), 85-91 (1979)] ismertették, hogy a ribonukleáz dimer gátolja a patkány ráksejtek replikációját Azonban nem utaltak arra, hogy a fenti vegyület aníivirális vagy antibakteriális hatással is rendelkezne.
Tamowski és munkatársai [Cancer Research 36 (11), 4074-4078 (1976)] hasonlóképpen a ribonukleáz dimemek csak antitumor aktivitását ismertették egérben, antibakteriális - vagy antívirális hatására nem utaltak.
Bartholeyns és Baudhuin [Arch. Int. Phys. Biochim. 84 (1), 139-140 (1976)] szintén csak a ribonukleáz dimer paíkányráksejtek elleni aktivitását ismertették.
D’Alessio és munkatársai [Biochim. J. 141 (1), 317— 320 (1974)] leírták, hogy a dimer ribonukleáz A mindkét aktív helyének egyidejűleg csak akkor kell hozzáférhetőnek lennie, ha az enzim kettős szálú RNS-t bont le. A cikkben azonban semmiféle gyógyászati hatást nem említenek a dimerrel kapcsolatban.
Studebaker és munkatársai [J. Am. Chem. Soc. 93(18), 4579-4585 (1971)] egy aktív hellyel rendelkező lizozim alkalmazása esetén NMR-vizsgálatokat végeztek az enzimreakció termékén. Nem említették azonban a lizozim dimer semmiféle terápiás aktivitását
Megállapítható tehát, hogy egyetlen irodalmi hivatkozásban sem ismertetik a lizozim és ribonukleáz dimerek antívirális vagy antibakteriális hatású gyógyászati készítmények hatóanyagaként való alkalmazását.
HU 204 710 Β
Találmányunk azon a felismerésen alapul, hogy hatóanyagként lizozimet vagy ribonukleázt tartalmazó antivirális vagy antibakteriális hatású, azonban citotoxikus hatás nélküli gyógyászati készítményeket úgy állíthatunk elő, ha az enzimeket dimer formájukban használjuk. A hatóanyagként dimer formában lévő lizozimet vagy ribonukleázt és győgyászatilag elfogadható hordozóanyagot tartalmazó gyógyászati készítményekkel számos fertőző betegség eredményesen kezelhető, jelentős toxikus hatás nélkül.
A találmány szerinti eljárás értelmében a hatóanyagként ribonukleáz dimert vagy lizozim dimert tartalmazó gyógyászati készítményeket úgy állítjuk elő, hogy az ismert módon előállított hatóanyagot a gyógyszerkészítésben szokásosan használt hordozó- és/vagy egyéb segédanyagokkal összekeverjük és antivirális vagy antibakteriális hatású gyógyászati készítménnyé alakítjuk.
Az „ismert módon előállított” kifejezés a találmány elsőbbségi napja előtt publikált, a technika állásából ismert eljárásokat öleli fel.
A találmány szerinti eljárással előállított, antibakteriális és antivirális hatású gyógyászati készítményekhez először be kell szerezni a monomer formában lévő lizozimet és ribonukleázt. A monomer lizozimet (Serva katalógusszáma 28260) és a monomer ribonukleázt (Serva katalógusszáma 34 388), amelyet a találmány szerinti hatóanyagok előállítására használunk, a Serva Feine Biochimica, GmbH und Cooperation, D69-000, Heidelberg cégtől szereztük be. A fenti monomer enzimeket bármely ismert eljárással dimerré polimerizálhatjuk. Előnyös azonban, ha a polimerizálást Carlsson és munkatársai [Biochemistry Journal, 173, 723-737 (1978)] módszere szerint végezzük. Más eljárások, például Sorrentino és munkatársai [Eur. J. Biochem. 124, 183-189 (1982)] eljárása is alkalmazható. Azt is felismertük, hogy a találmány szerinti eljárással előállított gyógyászati készítményekben ribonukleáz dimerként különösen előnyösen használható az állati pankreász szövetekből izolált pankreász ribonukleáz A-ból előállított dimer.
Azt tapasztaltuk, hogy a hatóanyagként lizozim vagy ribonukleáz dimer és győgyászatilag elfogadható hordozóanyagot tartalmazó gyógyászati készítmények számos bakteriális és vírusos betegség kezelésére alkalmasak, nemkívánatos mellékhatások nélkül. Az enzimek említett káros mellékhatásait összehasonlító vizsgálatokban tanulmányoztuk, amelyekben mind monomer, mind dimer formájú lizozimet és ribonukleázt használtunk. A fenti kísérletekben kabócamajomvese (GMK) fibroblaszt-tenyészetekhez különböző koncentrációkban adtuk a monomer és dimer formában lévő lizozimet és ribonukleázt. Azt tapasztaltuk, hogy a monomer lizozim a fibroblasztokra nézve citotoxikus hatást fejt ki 24 óra alatt, 0,1 mg/ml és 1,0 mg/ml koncentrációkban. Három napon keresztüli inkubálás után a citotoxikus hatást már 0,01 mg/ml koncentrációban is észleltük a fibroblasztokon, amikor is az inkubált sejtek 50%-a elpusztult Ötnapos inkubálás után a tenyésztett sejtek 75%-át elpusztította a monomer lizozim, 1,0 és 0,1 mg/ml koncentrációban. Ezzel szemben, a lizozim dimer nem mutatott citotoxikus hatást a fenti vizsgálatokban használt egyetlen koncentrációban sem, még hétnapos inkubálás után sem. A fenti vizsgálatok szerint a lizozim dimer formája közelítőleg 100szor kevésbé toxikus GMK fibroblasztokkal szemben, mint a monomer forma.
A ribonukleázzal végzett vizsgálat hasonlóan bizonyította a dimer forma citotoxicitásának hiányát A fenti vizsgálatokban a ribonukleáz ötnapos tenyészetben már 0,0001 mg/ml koncentrációban is citotoxikusnak bizonyult GMK fibroblasztok ellen. Hétnapos tenyészetben a ribonukleáz monomerek citotoxikus hatása 0,01 mg/ml koncentrációban és e felett 100%-ban megölte a tenyésztett sejteket Ezzel szemben, a ribonukleáz dimer egyáltalán nem volt citotoxikus GMK fibroblasztok ellen egyeüen vizsgált koncentrációban sem, még hétnapos inkubálás alatt sem. A ribonukleáz dimer formája vizsgálataink szerint közelítőleg 100010 000-szer kevésbé toxikus fibroblasztokkal szemben, mint a monomer forma. Ezek a vizsgálatok világosan mutatják, hogy az enzimek, mint lizozim és ribonukleáz monomer formájának alkalmazásával járó citotoxikus hatások láthatólag eltűnnek, ha ezeket az enzimeket dimeq'eik formájában használjuk.
További kutatásaink azt mutatták, hogy annak ellenére, hogy a lizozim és ribonukleáz dimer formájukban nem fejtenek ki citotoxikus hatást, rendkívül hatásosak virális és bakteriális fertőzések ellen. Megtermékenyített tyúktojással és Sendai vírus törzzsel végzett vizsgálatokban a lizozim dimert intraamnionálisan injektáltuk a tojásokba, különböző koncentrációkban. Minden egyes tojásba két egység Sendai vírust is injektáltunk. Inkubálás után összegyűjtöttük az amnionhoz tartozó és az allantoiszhoz tartozó folyadékot a fertőzött és a kontroll tojásokból, és összehasonlítottuk azokat. A fenti vizsgálat szerint a lizozim dimer már 0,01 mg/ml koncentrációban gátolta a 10 napos megtermékenyített tyúktojásban tenyésztett Sendai vírus replikációjáf Hasonló vizsgálatokkal kimutattuk a lizozim és ribonukleáz dimerek bakteriosztatikus hatását is Streptococcus baktériumokkal szemben.
A lizozim és ribonukleáz dimerekból készített gyógyászati készítmények a fentiek szerint különféle vírusos és bakteriális fertőzések kezelésére használhatók. A gyógyászati készítmények formája különféle lehet, és a találmány szerinti eljárással előállított enzim-hordozóanyag készítményeket belsőleg és külsőleg alkalmazhatjuk ember vagy állatok kezelésére, a kezelendő betegségtől függően. Belső fertőzések - például fülgyulladás, masztitisz, gyomor- vagy vaginális fertőzés kezelésére a dimer enzimet tartalmazó gyógyászati készítményeket megfelelő formában orálisan, intravénásán, parenterálisan, kúp formában vagy bármely egyéb módon adagolhatjuk, amely lehetővé teszi a hatóanyag eljuttatását a fertőzött területre. Külső fertőzések például bakteriális és vírusos bőrbetegségek, fertőzött sebek, herpeszek vagy egyéb, külsőleges szexuális betegségek - kezelésére a találmány szerinti eljárással előállított gyógyászati készítményeket bármely arra al3
HU 204 710 Β kalmas formában helyileg adgolhatjuk a kezelendő betegnek.
A kezelendő betegség vagy fertőzés természete megszabja a találmány szerinti eljárással előállított gyógyászati készítmény megfelelő formáját Külsőle- 5 ges kezelésre a készítményeket különböző formákban, például kenőcsök, lemosók, oldatok, olajok, stb. formájában alkalmazhatjuk. Ha belsőleges kezelés szükséges, a készítmény formája például csepp, tabletta, oldat kapszula, fogkrém, stb. lehet Akezelendő alany- 10 nak adagolandó készítmény speciális formája így a gyógyászati készítmény előállítására használt gyógyászatiig elfogadható hordozóanyag természetét is meghatározza. Hordozóanyagként többek között hidrofil bázisokat, fiziológiásán elfogadható sóoldatokat, vizet 15 kenőcs-bázisokat porokat stb. használhatunk.
A virális és bakteriális fertőzéseket így enzimatikusan, cítotoxikns mellékhatások nélkül kezelhetjük, ha a kezelendő embernek vagy állatnak a hatóanyagként dimer enzimet tartalmazó gyógyászati készítményből 20 hatásos mennyiséget adagolunk. Hatásos mennyiség alatt itt az antivirális vagy antibakteriális hatás kiváltásához szükséges mennyiséget értjük. A hatásos kezeléshez szükséges mennyiség minden esetben a kezelendő betegség természetétől és a dimer kompozíció fór- 25 májától függ. Általában a találmány szerinti eljárással előállított gyógyászati készítményt 0,01-50,0 mg/testtömeg kg, különösen előnyösen 1,0-2,0 mg/testtömeg kg dózisban adjuk a kezelendő betegnek. Helyi kezelés' esetén kb. 4,0 mg dimert kb. 200 ml víz, propilénglikol 30 és paraffin oldatában tartalmazó kenőcsökkel megfelelő hatást érünk el, ha naponta 4-5 alkalommal végezzük a kezelést A fenti dőzistartományba eső dózisok elegendőek számos virális vagy bakteriális betegség kezelésére, káros citotoxikus hatások nélkül, amelyek 35 az enzim monomerekkel végzett kezelés esetén észlelhetőklennének.
A találmány szerinti eljárást a korlátozás szándéka nélkül az alábbi példákkalkívánjukközelebbről ismertetni.
1. példa
Lizozim és pankreász ribonukleáz A monomerek és dimerek citotoxikus hatását hasonlítjuk össze kabőcamajom-vese (GMK) fihroblaszt tenyészetben.
A vizsgálatokban a monomer és dimer enzimeket 45 0,0001-1,0 mg/ml koncentrációban adjuk a fibroblaszt-tenyészethez. A tenyészeteket ezután hét napon keresztül inkubáljuk, majd megvizsgáljuk citotoxicitás szempontjából. A fenti vizsgálatok eredményeit az 1. és 2. táblázatban ismertetjük. 50
1. táblázat
Lizozrm monomer és dimer formájának citoíoxícitása
Készítmény típusa | Konc. (mg/ml) | Citotoxicitás mértéke | |||
24 óra múlva | 3 nap múlva | 5 nap múlva | 7 nap múlva | ||
kontroll | 0 | O | 0 | ||
lizozim | 1,0 | 2 | 2 | 2 | 3 |
Készítmény típusa | Konc. (mg/ml) | Citotoxicitás mértéke | |||
24 óra múlva | 3 nap múlva | 5 nap múlva | 7 nap múlva | ||
monomer | 0,1 | 1 | 2 | 3 | 3 |
0,01 | 0 | 2 | 2 | 2 | |
0,001 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
0,0001 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
lizozim | 1,0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
monomer | 0,1 | 0 | 0 | 0 | 0 |
0,01 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
0,001 | 0 | O | 0 | 0 | |
0,0001 | 0 | O | O | 0 |
A vizsgálatokat háromszor végeztük el, GMK fibroblaszt-tenyészeteken. A kiértékelés az alábbi skála szerint történik:
0: citotoxicitás 0%
1: citotoxicitás 25%
2: citotoxicitás 50%
3: citotoxicitás 75%
4: citotoxicitás 100%
Az 1. táblázat eredményeiből látható, hogy a lizozim monomer 24 órás inkubálás alatt 0,1 és 1,0 mg/ml koncentrációban citotoxikus a fibroblasztokra nézve. Háromnapos inkubálás után a monomer már 0,01 mg/ml koncentrációban is citotoxikus hatást fejt ki az rnkubált sejtek 50%-ára. Ötnapos inkubálás után a tenyésztett sejtek 75%-át érinti a lizozim monomer citotoxikus aktivitása 1,0 mg/ml és 0,1 mg/ml koncentrációkban.
Ezzel szemben, a lizozim dimer formája egyetlen vizsgált koncentrációban sem fejt ki citotoxikus hatást még a hétnapos inkubálás befejeztével sem. A fenti eredmények azt mutatják, hogy a lizozim dimer formája kb. 100-szor kevésbé toxikus GMKfibroblasztokkal szemben, mint a lizozim monomer formája.
2. táblázat
Pankreász ribonukleáz A monomer és dimer formájának citoíoxícitása
Készítmény típusa | Konc. (mg/ml) | Citotoxicitás mértéke | |||
24 óra múlva | 3 nap múlva | 5 nap múlva | 7 nap múlva | ||
kontroll | 0 | 0 | 0 | 0 | |
pankreász ribonukleáz | 1,0 | 1 | 2 | 4 | 4 |
A monomer | 0,1 | 0 | 1 | 3 | 4 |
0,01 | 0 | 0 | 3 | 4 | |
0,001 | 0 | 0 | 2 | 3 | |
0,0001 | 0 | 1 | 1 | 2 | |
pankreász ribonukleáz | 1,0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
monomer | 0,1 | 0 | 0 | 0 | 0 |
0,01 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
0,001 | 0 | 0 | 0 | 0 |
HU 204 710 B
A vizsgálatokat háromszor végeztük el, GMK fibroblaszt-tenyészeteken. A kiértékelés az alábbi skála szerint történik:
0: citotoxicitás 0%
1: citotoxicitás 25%
2: citotoxicitás 50%
3: citotoxicitás 75%
4: citotoxicitás 100%
A 2. táblázatban közölt eredmények azt mutatják, hogy a pankreász ribonukleáz A monomer ötnapos tenyészetben már 0,0001 mg/ml koncentrációban is citotoxikusnak bizonyult GMK fibroblasztokra. Hétnapos tenyészetben a pankreász ribonukleáz A 0,01 mg/ml és ennél nagyobb koncentrációban 100%-os pusztulást okozott a tenyésztett sejtekben.
A lizozim dimeihez hasonlóan, a pankreász ribonukleáz A diroer formája nem mutatott citotoxikus hatást GMK fibroblasztokra egyetlen vizsgált koncentrációban sem, a hétnapos vizsgálat során. Az eredmények így azt mutatják, hogy a pankreász ribonukleáz A dimer formája kb. 1000-10 000-szer kevésbé toxikus GMK fibroblasztokra, mint a pankreász ribonukleáz A monomer formája.
2. példa
A lizozim dimer formájának antivirális hatását az alábbiak szerint tanulmányozzuk.
A lizozim dimert tíznapos megtermékenyített tyúktojásba injektáljuk, 10,0 mg/ml, 1,0 mg/ml, 0,1 mg/ml, 0,01 mg/ml és 0,001 mg/ml koncentrációban. Minden egyes dimer-koncentráció esetén egy Sendai vírus törzset (hemagglutinációs titer = 1:128 HA) injektálunk a tojásba, kb. 2 hemagglutinációs egység mennyiségben. A lizozim dimer és a vírus beadása után a tojásokat 37 °C-on 72 órán keresztül inkubáljuk. Az inkubálási idő letelte után összegyűjtjük a fertőzött tojások amnionos és allantoiszos folyadékait, és Takátsy-féle készletet és tyúk vörösvértestet használva mikromódszerrel meghatározzuk a hemagglutináció mértékét Az eredményeket a 3. táblázatban ismertetjük.
A 3. táblázat eredményeiből látható, hogy a lizozim dimer már 0,01 mg/ml koncentrációban is gátolja a Sendai vírus ieplikációját tíznapos megtermékenyített tyúktojásban.
3. táblázat
Lizozim dimer hatása Sendai vírustörzs ellen
Lizozim dimer koncentrációja (mg/ml) | Hemagglutináció gátlás (hemagglutinációs teszt tyűk-vörösvértesteken Takátsy módszere szerint) | |
1987 szeptember | 1987 november | |
10,0 | +++ | nem vizsgált |
1,0 | +++ | +++ |
0,1 | +++ | +++ |
0,01 | +++ | +++ |
0,001 | ++ | nincs gátlás |
+++ : teljes gátlás, 1:256 ++ : nem teljes gátlás, 1:32
1. A vizsgálatokat Sendai vírus törzsön végezzük, a virális hemagglutinációs titer 1:128.
2. Kísérleti modellként tíznapos megtermékenyített tyúktojást használunk.
3. A lizozim-dimer minden egyes koncentrációjához azonos mennyiségű Sendai vírus-2 hemagglutinációs egységet adunk. Ezzel egyidejűleg a lizozim dimert kontroli-tesztben is vizsgáljuk, annak megállapítására, hogy van-e hemagglutinációs tulajdonsága - a vizsgálat eredménye negatív. A lizozim dimert nagyobb koncentrációkban 22 HA egység vírussal együtt is vizsgáltuk, 4 tyúktojáson. A tojásokat 37 °C-on 72 órán keresztül inkubáltnk.
4. Az inkubálás befejeztével a fertőzött tojásokból összegyűjtöttük az amnionos és az allantoiszos folyadékokat, és Takátsy-féle készletet és tyúkvörösvértestet használva elvégeztük a hemagglutinációs tesztet (hemagglutinációs mikromódszer).
3. példa
A lizozim és pankreász ribonukleáz A dimer formáinak baktériumellenes hatását masztitiszes tehenekből izolált patogén baktériumtörzseken vizsgáltuk.
A lizozim dimer hatását három törzs (Streptococcus agalactiae, S. dysgalactiae és S. liberis) ellen különböző koncentrációk esetén vizsgáljuk, az eredményeket a
4. táblázat tartalmazza.
4. táblázat
Lizozim dimer minimális gátló koncentrációja (mg/ml)
A baktériumtörzseket masztitiszes tehenekből nyert mintákból tenyésztettük ki
Baktériumtörzs | Lizozim dimer (mg/ml) | ||||
1,25 | 2,5 | 5,0 | 10,0 | 20,0 | |
Streptococcus agalactiae | + | + | - | - - | |
Streptococcus dysgalactiae | + | + | + | - | - |
Streptococcus liberis | - | - | - | - | - |
-: nincs baktériumszaporodás + : baktérium szaporodik
Az érzékenységi vizsgálatokat a WHO által ajánlott, általánosan elfogadott tesztekkel végezzük.
A 4. táblázatban ismertetett eredmények azt mutatják, hogy mind a három vizsgált Streptococcus törzs érzékeny a lizozim dimerre. Ezt a legvilágosabban a S. liberis esetén mutattuk ki, amelynek szaporodását a lizozim dimer már 1,25 mg/ml koncentrációban gátolta. A másik két Streptococcus törzs esetén a bakteriosztatikus hatást 1,25 mg/ml koncentrációtól kezdve észleltük.
5. táblázat
Pankreász ribonukleáz A és lizozim dimer minimális gáűő koncentrációja (mg/ml) betegekből kitenyésztett baktériumtörzseken
Lizozim dimer hatása K-562 eiythrokémia sejtvonal proliferációjára. A K-562 sejteket lOVml koncentrációban használjuk. A hatást a tenyészet 24 órás inkubálása után értékeljük (37 °C, 5% COt)
Baktériumtörzs | Pankreász ribonukleáz A dimer (mgtol) | Lizozim dimer (mgtal) | ||||||
2,5 | 5,0 | 10,0 | 20,0 | 2,5 | 5,0 | 10,0 | 20,0 | |
Pseudomonomas aeruginosa | + | - | - | - | 4- | 4- | -F | 4- |
Escherichia coli | + | 4· | - | - | 4- | 4- | 4- | 4- |
Proteus vulgáris | 4- | 4- | - | - | 4- | 4- | -F | 4- |
Staph. auerus 209 (standard törzs) | 4- | 4- | 4- | -F | - | - | - | |
Staph. auerus (patogén törzs betegekből) | + | 4- | 4- | 4- | 4- | - | - | - |
Staph. aureus 11704 MRSA' | 4- | + | 4- | 4- | -F | 4- | - | - |
Staph. aureus 11708 MRSA’ | 4- | 4- | 4- | 4- | 4- | -F | - | - |
Streptpyogenes (patogén törzs betegből) | 4- | 4- | -F | 4- | •F | - | - | - |
*: MRSA: meticillin-rezisztens Staphylococcus aureus törzs -: nincs bafctériumszaporodás +: baktérium szaporodik
6. táblázat
Az érzékenységi vizsgálatokat a WHO által ajánlott, általánosan elfogadott tesztekkel végezzük.
Az 5. táblázatban pankreász ribonukleáz A dimer és lizozim dimer hatását ismertetjük humán betegekből kitenyésztett patogén baktériumtörzsek ellen. A táblázat eredményeiből látható, hogy a pankreász ribonukleáz A dimer Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli és Proteus vulgáris törzsek ellen a leghatásosabb, 510 mg/ml koncentrációban. A Staphylococcus és Streptococcus törzsek vizsgálataink szerint a lizozim dimerrel szemben érzékenyek, szintén 5-10 mg/ml koncentrációban.
4.példa
A lizozim dimer és pankreász ribonukleáz A dimer K-562 eiythroleukémxa sejtvonalra kifejtett hatását úgy vizsgáljuk, hogy a fenti sejtvonalból származó sejteket a dimerek különböző koncentrációi jelenlétében tenyésztjük. Az eredményeket a 6. és 7. táblázatban ismertetjük.
Összefoglalóan megállapíthatjuk, hogy a lizozim dxmer az összes vizsgált koncentrációban erős cítopatogén hatást fejt ki K-562 sejtekkel szemben. A 7. táblázat adataiból az is megállapítható, hogy a pankreász ribonukleáz A dimer hasonló hatást fejt ki az erythroleukémia sejtvonal ellen, de csak 1,0 mg/ml koncentrációban.
Lizozim dimer koncentrációja (mgtal) | K-562 sejtek proliferáciőja in vitro 24 órás tenyészetben | |
Sejtek száma | Elpusztult sejtek (%) | |
kontroll | 190000 | 2-3 |
1,0 | sejtek lízise | 100 |
0,1 | 107000 | 95 |
0,05 | 98000 | 99 |
7. táblázat
Pankreász ribonukleáz A dimer hatása K-562 erythrokémia sejtvonal proliferációjára. A K-562 sejteket lOVml koncentrációban használjuk. A hatást 37 °C-on 5% C02 mellett 24 órán keresztül tartó tenyésztés után értékeljük
Pankreász ribonukleáz dimer koncentrációja (mgtol) | K-562 sejtek prolhérációja in vitro 24 órás tenyészetben | |
Sejtek száma | Elpusztult sejtek (%) | |
kontroll | 207000 | 2-5 |
1,0 | 68000 | 74 |
0,1 | 140000 | 14 |
0,05 | 150000 | 7 |
5. példa
A. lizozim dimer hatását gennyes otitiszes közegre kutyában az alábbiak szerint vizsgáltuk.
A vizsgálatokat 19 különböző fajtájú kutyán végeztük, amelyek a betegség különböző formáiban szenvedtek. A betegség jellemzője egy gyulladásos folyamat, amely átlagosan 7-14 napon keresztül tart, egy esetben azonban 9 hónapon keresztül tartott. A kísérleti állatok közül hét kutyánál megvizsgáltuk a gyulladt fülből származó gennyes váladékot a kezelés megkezdése előtt, és azonosítottuk a baktériumokat Ezek szerint a tenyésztési vizsgálatok szerint kimutattuk a Staphylococcusok, kék gennybacillusok, Pseudomonas aeruginosa, Coccidium speciesek és különféle bacillus speciesek jelenlétét
A beteg állatok a fájdalom különféle jelét adták, például fejüket rázták és megpróbálták mancsukkal elérni fertőzött fülüket. Az állatoknak általában csökkent az étvágyuk, és hőmérsékletük megemelkedett (39,2-41,2 °C). A vizsgálatban felhasznált állatok közül 19 nem kapott korábban semmilyen gyógyászati kezelést Egy állatot, amelyben a fertőzés 9 hónapon keresztül tartott, többféle antibiotikummal is kezeltek, de ezek közül egy sem volt hatásos a betegség ellen.
A kutyákat 20 mg lizozim dimer 25 ml fiziológiás sóoldattal készült oldatával, mint találmány szerinti eljárással előállított készítménnyel kezeltük. A készít6
HU 204 710 B ményt cseppek formájában adagoltuk, és a cseppeket a gyulladt fölbe csepegtettük, naponta 4-5 alkalommal. Az első napi kezelés után már kifejezett javulást észleltünk; a hőmérséklet csökkent, és a kutyák láthatólag jobban érezték magukat, és jobb étvágyuk volt A gennyes gyulladás tünetei teljesen megszűntek a kezelés 3. és 6. napja között. A korábban 9 hónapon keresztül antibiotikumokkal sikertelenül kezelt kutyánál is elmúlt a betegség tíznapos kezelés után. A lizozim dimer tehát hatásosnak bizonyult gennyes otitisz kezelésében, kutyán.
6. példa
A lizozim dimer hatását masztitiszes teheneken vizsgáltuk.
A vizsgálatot 6 masztitiszben szenvedő tehénen végeztük el. A tehenek a betegség különböző jeleit mutatták, így hőmérsékletük 40,5 °C felett volt, és étvágyuk csökkent. Mind a hat esetben a megbetegedés második napján kezdtük el a kezelést A készítmény beadása előtt bakteriális vizsgálat céljára tejmintákat vettünk. A tenyésztési vizsgálatok szerint a tej mikrobákat így Staphylococcust és Streptococcus agalactiae-t tartalmazott
A lizozim dimert injekciós fecskendő segítségével adagoltuk a fertőzött mellbimbóba, 50 ml fiziológiás sóoldatban 40 mg hatóanyagdózisban, naponta két alkalommal. Azt tapasztaltuk, hogy 24 óra elteltével a testhőmérséklet ismét normális volt, és az étvágy visszatért. Három nap múlva egyetlen kezelt tehén sem mutatta a betegség szimptómáit A kezelést így csak a negyedik napig folytattuk, majd ismét megvizsgáltuk a tejet, és azt tapasztaltuk, hogy a kezelés megkezdése előtt még jelen volt patogén mikrobák eltűntek. Ezenkívül a tej nem mutatott olyan változásokat amelyekből szubklinikai masztitiszre következtethettünk volna. A kezelt tehenek között egy esetben sem csökkent a tejhozam, és a mellbimbók nyílása sem csökkent A lizozim dimerrel végzett kezelés után 24 órával nem találtunk blokkoló anyagot a kezelt tehenek tejében. A betegség tüneteinek gyors megszűnése és a tejelőképesség teljes helyreállása azt jelzi, hogy a találmány szerinti eljárással előállított, lizozim dimert tartalmazó készítmények tehéu-masztitisz kezelésére is használhatók.
Ez a kezelés rendkívüli gazdasági jelentőségű a Staphylococcus és Streptococcus baktériumtörzsek által okozott masztitiszes fertőzés megelőzésében, amely a tejiparban jelenleg közel 5,4 milliárd dollárba kerül évente.
7. példa
Kutyák parvovírus fertőzését (CPV) kezeltük orálisan adagolt lizozim dimerrel.
A kezelést 27 különféle fajtájú és testtömegű, 3 hónapostól 6 éves kutyán végeztük, amelyekben az állatorvosok parvovírus fertőzésre utaló komplex tüneteket diagnosztizáltak. Az összes kísérleti állatnak magas volt a testhőmérséklete (40-41,6 °C), gyakran heves hányási rohamuk volt, többször volt jellegzetesen büdös székletük, valamint a kiszáradás és apátia tüneteit mutatták. Az állatokon látszott, hogy erős fájdalmaik vannak. A kezelést átlagosan a fertőzés utáni harmadik-ötödik napon kezdtük el, attól függően, hogy az állat gazdája mikor hozta el kedvencét az állatorvosi rendelőbe. A fertőzött állatoknak 1-2 mg/testtömeg kg dózisban adtuk a lizozim dimert, naponta kétszer. Azoknak az állatoknak, amelyek még képesek voltak inni, a lizozim dimert az ivóvizükben adtuk be. Azoknak, amelyek nem tudtak inni, szondán keresztül adtuk a lizozim dimert fiziológiás sóoldatban oldva.
A 27 kezelt állat közül 25 kutya fizikai állapota teljesen helyreállt 3-5 napos kezelés után. Rendszerint már a kezelés első napján jelentősen csökkent a székelések és hányási rohamok száma, és a kutyák többségében ezek a tünetek teljesen eltűntek kétnapos kezelés után. Néhány kutya esetében a tünetek már a készítmény első dózisának beadása után megszűntek. Az állatokban nem észleltünk a lizozim dimer beadásával összefüggő egyetlen mellékhatást sem. Ezek a klinikai vizsgálatok azt mutatják, hogy a találmány szerinti eljárással előállított hatóanyagként lizozim dimert tartalmazó gyógyászati készítmények kutyák parvovírus fertőzés elleni kezelésére is használhatók.
8. példa
A találmány szerinti eljárással előállított hatóanyagként lizozim dimert tartalmazó készítmények bizonyos bőrbetegségekre kifejtett hatását emberen az alábbiak szerint vizsgáltuk.
A vizsgálatokat több tucat, különféle, korábban sikertelenül kezelt bőrbetegségben szenvedő páciensen végeztük, koruk 15-35 év volt. A következő betegségeket diagnosztizáltuk ebben a csoportban:
krónikus furunkulus (forunculosis chronica) 2 eset szőrtüszőgyulladás (sycosis barbae) 1 eset ótvar (impetigo coutagiosa) 11 eset faggyúmirigy-gyulladás (acne vulgáris) 22 eset resacea 6 eset visszér-fekély (varicose ulcer) 12 eset
A csoportba tartozó néhány beteg esetében a kezelést megelőzően bakteriológiai vizsgálatot is végeztünk. A legtöbb esetben Staphylococcus aureust tenyésztettünk ki a vizsgálati anyagból. A kezelést naponta négy alkalommal végeztük, 4 mg lizozim dimert tartalmazó kenőccsel. Különösen előnyös az alábbi Összetételű kenőcs:
lizozim dimer | 4,0 mg |
acetil- sztearoil-oxi-alkohol | 25,0 mg |
cseppfolyós paraffin | 10,0 mg |
Span 60 | 5,0 mg |
Tween 60 | 8,0 mg |
propilénglikol | 10,0 mg |
Aseptina M | 0,3 mg |
Aseptina P | 0,16 mg |
desztillált víz | 200,0 ml-re |
Az összes beteg esetében megszűntek | a különféle |
bőrbántalmak 10-12 napon belül, és bizonyos esetek7
HU 204710 Β 2 ben már 3 nap múlva mutatkozott a gyógyulás. A krónikus furunkulusos betegek esetében a kezelés 4-5 héten keresztül tartott, és a visszér-fekélyes betegek esetében általában 2-12 hetet vett igénybe a gyógyulás, attól függően, hogy milyen súlyos volt a betegség, és mennyi ideig tartott a betegség kifejlődése a kezelés megkezdése előtt.
A vizsgálati eredmények azt mutatják, hogy a lizozim dimer különféle bőrbetegségek kezelésére is eredményesen használható.
9. példa
A genítálíák különféle fertőzéseinek kezelésére is alkalmaztuk a találmány szerinti eljárással előállított, lizozim dímert tartalmazó gyógyászati készítményeket
Ezekben a vizsgálatokban kilenc, 25-49 éves női beteget kezeltünk, hét betegnél krónikus hüvelygyulladás (colpitis chroníca), egy betegnél Douglas-tályog és egy betegnél Bartholín-mirigy-gyulladás volt a diagnózis.
A krónikus hüvelygyulladásban szenvedő betegeknek íntravaginálisan adtunk 10 mg lizozim dimert 2 ml hidrofil bázisban, kúp formájában, A kúpokat naponta kétszer adtuk, 7 napon keresztül. Minden betegnél megfigyeltük agenitális területek gyulladásának teljes recesszióját Ezenkívül megszűntek a leucorrhea és az egyéb tünetek is.
ADouglas-tályogban szenvedő betegnek 5 ml 0,9®os náttium-klorid-oldatban 20 mg Ezozim dimert adtunk, naponta két alkalommal, 4 napon keresztül. Az oldatot közvetlenül a Douglas-üregbe adagoltuk. A lizozim dimer minden egyes beadása előtt leszívattuk a Douglas-üreg gennyváladékát A tenyésztési vizsgálatokkal Streptococcus haemolytícus és colibaktéríum jelenlétét mutattuk ki. A lizozim dimer első beadagolása 1 után 24 órán belül a beteg addig kórosan magas testhőmérséklete normális értékre csökkent A fájdalomtünetek is csökkentek ez alatt az idő alatt A negyedik . napon, a lizozim dimer második adagjának beadása után nem találtunk gennyet a Douglas-üregben. Ebben z az esetben három hét múlva a betegség kiújult de a lizozim dimerből újabb két dózist adagolvaa-Douglasüregbe, a betegség lefolyását ellenőrizni tudtuk.
A Bartholin-mirigy-gyulladásos beteget 1 ml 0,9%os nátrium-kloridban 20 mg lizozim dimerrel kezeltük, z egy alkalommal, amelyet közvetlenül a gennyedző mirigybe adtunk, a gennytartalom Ieszívatása után. A beteget 4 nap múlva teljesen győgyultnak nyilvánítottuk.
hónapos megfigyelés alatt nem újultki ez a betegség.
A fenti klinikai vizsgálatok azt mutatják, hogy a 5 lizozim dimer rendkívül hasznos gyógyászati hatást fejt ki női genítális területek fertőzéses megbetegedései esetén. Ezenkívül azt tapasztaltuk, hogy a fekélyeket helyileg, a lizozim dimert közvetlenül a gennyes váladékot tartalmazó üregbe adagolva is kezelhetjük. 5 lO.példa
Alizozim dimer hatásátfertőzött sebek kezelésére is tanulmányoztuk.
A vizsgált csoport négy betegből állt, a betegeknek 6 operáció után befertőződött a sebük: két nőbeteg hasműtéten esett át; egy nőbetegnek a lábujját amputálták, cukorbetegséggel járó érszűkület következtében kialakult nekrőzis miatt; és egy férfibetegnek alsó végtagját amputálták Burger-betegség miatt.
Minden esetben nedves alkalmazást és lemosást végeztünk 20 mg lizozim dimert tartalmazó 5 ml 0,9%-os nátríum-klorid-oldattal, naponta négy alkalommal. A hasműtétes betegek gennyedző sebei 4 és 6 napos ke0 zelés után teljesen gyógyultak. A másik két betegnél gyógyulást 21 napon, illetve öt hónapon keresztül tartó kezeléssel értünk el.
A fenti vizsgálatok’ azt mutatják, hogy a lizozim dimer mellékhatások nélkül alkalmazható operáció utáni fertőzött sebekkezelésére is.
11. példa
Klinikai vizsgálatokat végeztünk genítális herpeszben (herpes genítális) szenvedő betegeken, ribonukleáz
A dimert tartalmazó készítménnyel.
A vizsgált csoport öt nőbetegből állt, koruk 23-36 év. Közülük négy először szenvedett ebben a betegségben, míg egy harmadszor kapta meg a betegséget Mindegyik beteg ahőlyagképződés szakaszában volt 5 ami rendszerint a betegség 3. és 5. napja között jelentkezik, és a perineálís területen igen erős fájdalmat éreztek, különösen vizelés közben. Az összes betegnél : észleltük az ajak duzzadását és fertőzését, valamint számos, zavaros folyadékkal telt hólyagot az ajak-nyál3 kamembránokon és a comb és anális területek külső borén. Alágyéki nyirokcsomók minden betegnél megnagyobbodtak és fájdalmat okoztak.
A kezelést ribonukleáz A dimert tartalmazó kenőcscsel végeztük, naponta 4-5 alkalommal bekentük a ) hólyagokat és a fertőzött nyálkamembránt a kenőccsel.
. A kenőcs ősszeté tele az alábbi volt:
ribonukleáz dimer | 4,0 mg |
acetií-szíearoil-oxi-alkohol | 25,0 mg |
cseppfolyós paraffin | 10,0 mg |
Span60 | 5,0 mg |
TweenóO | . 8,0 mg |
propilénglikol | 10,0 mg |
Aseptina M | 0,3 mg |
AseptinaP | 0,16 mg |
desztillált víz | 200,0 ml-re |
A ribonukleáz dímeael kezelt betegek néhány perc |
múlva, legfeljebb egy órán belül jelezték a kenőcs első alkalmazása után, hogy a fájdalom jelentősen csökkent, és a következő 10-20 óra alatt teljesen megszűnt A fizikai vizsgálatok szerint négy betegnél a kóros elváltozások 3 napos kezelés után teljesen eltűntek. Az ötödik beteg esetén az ötödik napon tűntek el teljesen a kóros tünetek. A pankreász ribonukleáz A dimert tartalmazó kenőccsel kezelt egyetlen betegen sem jelentek meg új hólyagok.
A fenti vizsgálati eredmények azt jelzik, hogy a találmány szerinti eljárással, előállított, dimer enzimeket tartalmazó kenőcsök herpes genítális kezelésére is eredményesen alkalmazhatók.
HU 204 710 Β
12. példa
Több mint 100 különböző korú beteget kezeltünk a találmány szerinti eljárással előállított készítménnyel ajakherpesz ellen.
A betegség tünetei minden betegnél a következők voltak: az alsó ajak környéke megduzzadt, kivörösödött, és számos, zavaros folyadékkal telt hólyag jelent meg. Minden beteg fájdalomról panaszkodott a fertőzött bőrterületen, és emellett a szövetekben nyomást is éreztek. A kezelés abból állt, hogy lokálisan, naponta 4-5 alkalommal pankreász ribonukleáz A dimert tartalmazó kenőccsel kentük be a fertőzött bőrfelületet
Az összes beteg kivétel nélkül azt állította, hogy a szöveti fájdalom és nyomás gyorsan elmúlt. A következő néhány órában a fájdalom teljesen megszűnt, ugyanúgy, mint a genitális herpesz esetén. A fizikai vizsgálatok azt mutatták, hogy a hólyagok és a duzzadás 2-3 nap alatt eltűnt. Egyes esetekben azonban öt napig tartott, míg a betegség tünetei teljesen elmúltak és a gyógyulási folyamat teljesen befejeződött. Megfigyeltük továbbá, hogy azoknál a betegeknél, akiknél a kezelést a betegség első napján megkezdtük, a bőrtünetek, így a duzzadás, bőrizgalom és papulák 24 óra alatt teljesen eltűntek. Azt is megfigyeltük, hogy azoknál a betegeknél, akiknél gyakran előfordult ez a betegség, hosszabb idő telt el két megbetegedés között, és a kiújult tünetek minden egyes alkalommal enyhébbek voltak. Egyetlen esetben sem tapasztaltunk mellékhatást.
13. példa
Heipes zosterben szenvedő hat betegen végeztünk klinikai vizsgálatokat a betegeket találmány szerinti eljárással előállított dimer készítménnyel kezeltük.
Öt esetben a betegség jellegzetes módon fejlődött ki, a hatodik esetben különleges komplikációk léptek fel, amelyeket alább ismertetünk. A betegeket pankreász ribonukleáz A dimert tartalmazó kenőccsel kezeltük, és a kezelést a betegség harmadik vagy negyedik napján kezdtük el. A kenőcsöt naponta 4-5 alkalommal adtuk a betegnek.
Minden esetben 24-48 óra alatt teljesen megszűnt a fájdalom A hólyagok 3-4 nap alatt leszáradtak, ezért ekkor úgy döntöttünk, hogy befejezzük a kezelést Az elkövetkező néhány nap alatt a bőrtünetek teljesen gyógyultak. Egyetlen betegnél sem tartott a fájdalom az első 24-48 óránál tovább, és a tünetek nem jelentkeztek újra három betegnél, akiket több mint egy éven keresztül megfigyelés alatt tartottunk.
Egy betegnél - amint azt fent említettük - a betegség klinikai lefolyása szokatlan volt A 42 éves nőbeteg tüdőrák ellen kobalt-kezelést kapott ami immunrendszerét komolyan károsította. A heipes zoster szokásos tünetein kívül generalizált hólyag-szóródást észleltünk a beteg egész testén. A ribonukleáz dimert tartalmazó készítménnyel végzett kezeléssel teljes sikert értünk el ennél a lecsökkent immunitású betegnél is, és a beteg hólyagjai teljesen eltűntek néhány napos kezelés után.
Az ennél a betegnél - és a csoportba tartozó többi betegnél is - elért sikerek azt mutatják, hogy a pankreász ribonukleáz A dimer különösen hatásos a Varicella vírusok által okozott herpes zoster kezelésére.
Claims (16)
1. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, amelyek hatóanyagként ribonukleáz dimert vagy lizozim dimert tartalmaznak, azzal jellemezve, hogy az ismert módon előállított hatóanyagot a gyógyszerkészítésben szokásosan használt hordozó- és/vagy egyéb segédanyagokkal összekeverjük és antivirális és antibakteriális hatású gyógyászati készítménnyé alakítjuk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hatóanyagként Ezozim dimert alkalmazunk.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hatóanyagként ribonukleáz dimert alkalmazunk.
4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy dimerként pankreász ribonukleáz A dimert alkalmazunk.
5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a dimert 0,001 mg/ml-20,0 mg/ml hordozóanyag koncentrációban alkalmazzuk.
6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy gyógyászatiig elfogadható hordozóanyagként hidrofil bázist alkalmazunk.
7. A 6. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a dimert 10 mg/2 ml hidrofil bázis koncentrációban alkalmazzuk.
8. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy gyógyászatiig elfogadható hordozóanyagként 0,5-1,5%-os nátrium-klorid-oldatot alkalmazunk.
9. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a dimert 4 mg/ml nátrium-klorid-oldatkoncentrációban alkalmazzuk.
10. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy gyógyászatiig elfogadható hordozóanyagként vizet alkalmazunk.
11. A10. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a dimert 0,02 mg/ml víz koncentrációban alkalmazzuk.
12. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy gyógyászatiig elfogadható hordozóanyagként egy keuőcs-bázist alkalmazunk.
13. A12. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy vízből, paraffinból és propiléuglikolból készült kenőcs-bázist alkalmazunk.
14. A12. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a dimert 0,02 mg/ml kenőcs-bázis koncentrációban alkalmazzuk.
15. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy gyógyászatiig elfogadható hordozóanyagként gyógyászatiig elfogadható sókat tartalmazó izotóniás oldatot alkalmazunk.
16. A15. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a dimert 0,8 mg/ml sóoldat koncentrációban alkalmazzuk.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US17858888A | 1988-05-26 | 1988-05-26 | |
PCT/US1988/001785 WO1989011294A1 (en) | 1988-05-26 | 1988-05-26 | Antiviral or antibacterial compound and method of use |
OA59731A OA09785A (en) | 1988-05-26 | 1990-01-26 | Antiviral or antibacterial compound and method of use |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HU883981D0 HU883981D0 (en) | 1990-12-28 |
HUT54060A HUT54060A (en) | 1991-01-28 |
HU204710B true HU204710B (en) | 1992-02-28 |
Family
ID=33162813
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU883981A HU204710B (en) | 1988-05-26 | 1988-05-26 | Process for producing pharmaceutical compositions having antiviral and antibacterial effect |
Country Status (23)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US5200182A (hu) |
EP (1) | EP0380484B1 (hu) |
JP (1) | JPH0649659B2 (hu) |
AT (1) | ATE93143T1 (hu) |
AU (1) | AU624331B2 (hu) |
BG (1) | BG60544B1 (hu) |
CA (1) | CA1335425C (hu) |
CS (1) | CS277030B6 (hu) |
DK (1) | DK173078B1 (hu) |
ES (1) | ES2011577A6 (hu) |
FI (1) | FI900412A0 (hu) |
HK (1) | HK42394A (hu) |
HU (1) | HU204710B (hu) |
IL (1) | IL90092A (hu) |
LV (1) | LV10054B (hu) |
MA (1) | MA21560A1 (hu) |
MW (1) | MW390A1 (hu) |
OA (1) | OA09785A (hu) |
PH (1) | PH26284A (hu) |
RU (1) | RU2092183C1 (hu) |
WO (1) | WO1989011294A1 (hu) |
YU (1) | YU109289A (hu) |
ZA (1) | ZA893382B (hu) |
Families Citing this family (39)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2092183C1 (ru) * | 1988-05-26 | 1997-10-10 | Ника Хелт Продактс Лимитед (Лихтенштейн) | Антивирусный или антибактериальный состав и способ его употребления |
US5989880A (en) * | 1990-01-08 | 1999-11-23 | Nika Health Products Ltd. | Method of preparing lysozyme dimers |
WO1991010730A1 (en) * | 1990-01-08 | 1991-07-25 | Nika Health Products Ltd. | Method of preparing ribonuclease dimers |
PL173978B1 (pl) * | 1992-07-13 | 1998-05-29 | Nika Health Products Ltd | Sposób oddziaływania na wydzielanie cytokin w hodowli limfocytów krwi obwodowej |
CH682541A5 (de) * | 1992-06-23 | 1993-10-15 | Urs Viktor Dr Wirth | Biochemische Inaktivierung von RNA-Viren. |
US6183742B1 (en) | 1992-07-13 | 2001-02-06 | Nika Health Products, Limited | Applications of lysozyme dimer |
DZ1964A1 (fr) * | 1995-01-13 | 2002-10-15 | Nika Health Products Ltd | Nouvelle applications d'un dimère de lysozyme. |
GB2304048A (en) * | 1995-08-12 | 1997-03-12 | John William Carson | Medicament containing saliva extract |
US6123937A (en) * | 1997-03-14 | 2000-09-26 | Nika Health Products, Limited | Applications of lysozyme dimer |
US7338936B2 (en) * | 2000-11-28 | 2008-03-04 | House Ear Institute | Use of antimicrobial proteins and peptides for the treatment of otitis media and paranasal sinusitis |
US6716813B2 (en) * | 2000-11-28 | 2004-04-06 | House Ear Institute | Use of antimicrobial proteins and peptides for the treatment of otitis media and paranasal sinusitis |
JP2002187853A (ja) * | 2000-12-21 | 2002-07-05 | Shinei Ferumentekku:Kk | 動物の乳頭除菌剤および菌環境改善方法 |
DE10210285A1 (de) * | 2002-03-08 | 2003-11-13 | Medigene Ag | Reversibles Toxin und seine Verwendung |
WO2005115477A2 (en) | 2004-04-13 | 2005-12-08 | Quintessence Biosciences, Inc. | Non-natural ribonuclease conjugates as cytotoxic agents |
US20050244402A1 (en) * | 2004-04-30 | 2005-11-03 | Villanueva Julie M | Absorption of pain-causing agents |
US7348301B2 (en) * | 2006-02-16 | 2008-03-25 | Buckman Laboratories International, Inc. | Lysozyme-based method and composition to control the growth of microorganisms in aqueous systems |
JP2009541333A (ja) * | 2006-06-23 | 2009-11-26 | クインテセンス バイオサイエンシーズ インコーポレーティッド | 修飾リボヌクレアーゼ |
EP2049151A4 (en) | 2006-07-17 | 2010-03-24 | Quintessence Biosciences Inc | METHOD AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF CANCER |
EP2134354A4 (en) * | 2007-03-02 | 2012-03-21 | Saint Simeon Lda | COMPOSITION AND METHOD FOR THE TREATMENT OF PAPILLOMA VIRUS AND HORSE SARCODES |
WO2009036000A2 (en) * | 2007-09-11 | 2009-03-19 | University Of Maryland, Baltimore | Methods of treating a microbial infection by modulating rnase-l expression and/or activity |
CA2702043A1 (en) * | 2007-10-08 | 2009-04-16 | Quintessence Biosciences, Inc. | Compositions and methods for ribonuclease-based therapies |
WO2010039985A1 (en) | 2008-10-01 | 2010-04-08 | Quintessence Biosciences, Inc. | Therapeutic Ribonucleases |
US20100215707A1 (en) * | 2009-02-25 | 2010-08-26 | Mcdonald Thomas | Activated creatinine and precursors thereof as antibacterial agents, compositions and products containing such agents and uses thereof |
NZ600269A (en) | 2009-05-20 | 2014-02-28 | Dec Int Nz Ltd | Delivery device for treatment of mastitis |
PL2457576T3 (pl) | 2010-11-29 | 2021-04-06 | Eurochit Danuta Kruszewska | Szczep Lactobacillus reuteri do stosowania medycznego i weterynaryjnego w profilaktyce oraz w leczeniu zespołu metabolicznego lub infekcji |
RU2548803C2 (ru) * | 2011-11-28 | 2015-04-20 | Общество с ограниченной ответственностью " Фарматренд" | ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЛАЗНЫХ ИНФЕКЦИЙ P. Aeruginosa, СОДЕРЖАЩАЯ РЕКОМБИНАНТНЫЙ ЛИЗОЦИМ |
RU2509801C2 (ru) * | 2012-03-22 | 2014-03-20 | Борис Михайлович Куриненко | СПОСОБ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ РИБОНУКЛЕАЗЫ Bacillus intermedius |
EP2674162A1 (en) | 2012-05-29 | 2013-12-18 | Danuta Kruszewska | Nanoproduct comprising lactobacillus reuteri dan080 useful in prophylaxis and medicine, both human and veterinary and medical use of the same |
JP2015520773A (ja) | 2012-05-29 | 2015-07-23 | ダヌタ・クルセフスカDanutaKRUSZEWSKA | ヒトおよび動物における予防および医薬に有用であるラクトバチルス・ロイテリdan80を含むナノ製品ならびにこれらの医薬用途 |
RU2504397C1 (ru) * | 2012-10-25 | 2014-01-20 | Леонид Леонидович Клопотенко | Фармацевтическая композиция, содержащая фермент рибонуклеазу и глицирризиновую кислоту или ее соли: глицирризинат аммония, или дикалия, или тринатрия |
WO2014152678A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | University Of Massachusetts | Compositions and methods for delivering agents to the central nervous system |
US9573980B2 (en) | 2013-03-15 | 2017-02-21 | Spogen Biotech Inc. | Fusion proteins and methods for stimulating plant growth, protecting plants from pathogens, and immobilizing Bacillus spores on plant roots |
JP5806434B1 (ja) | 2014-02-21 | 2015-11-10 | 国立大学法人東京海洋大学 | ノロウィルス不活化剤及びその製造方法、ノロウィルス不活化方法、ノロウィルス不活化用リゾチーム類の製造方法、ノロウィルス感染の予防薬又は治療薬、並びにノロウィルス不活化用皮膚外用剤 |
KR20170038829A (ko) * | 2014-07-31 | 2017-04-07 | 큐피가부시키가이샤 | 함수 유동상 조성물 및 그 제조 방법, 그리고 리소자임 가공품 및/또는 그 염 그리고 그 제조 방법 |
BR122023020910A2 (pt) | 2014-09-17 | 2024-01-30 | Spogen Biotech Inc | Método para fornecimento de proteínas ou peptídeos a um animal |
LV15071B (lv) * | 2015-07-14 | 2016-02-20 | Rīgas Stradiņa Universitāte | Kompozīcija subklīniska mastīta ārstēšanai govīm |
RU2634264C1 (ru) * | 2016-09-19 | 2017-10-24 | Александр Ливиевич Ураков | Крем-молочко для лечения опоясывающего лишая |
CN113861760B (zh) | 2016-12-28 | 2023-05-05 | Dic株式会社 | 分散体 |
WO2021021765A1 (en) * | 2019-07-26 | 2021-02-04 | Evolve Biosystems, Inc. | Nutritive compositions with bioactive proteins |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR1268M (fr) * | 1961-06-29 | 1962-04-24 | Puiseux | Médicament antimitotique et antiviral. |
FR4020M (hu) * | 1965-01-29 | 1966-03-21 | ||
DE1517751C3 (de) * | 1965-07-08 | 1975-02-27 | Eisai Co., Ltd., Tokio | Verfahren zum Verhindern der Bildung von flockigen Lysozym- und/oder Lysozymsalzniederschlägen in wässrigen Lösungen, die Lysozym und/oder Lysozymsalze enthalten |
DE1545644A1 (de) * | 1965-12-06 | 1969-08-07 | Boehringer Sohn Ingelheim | Verfahren zur Herstellung von neuen quaternaeren Scopolammoniumsalzen |
GB1110504A (en) * | 1966-03-18 | 1968-04-18 | Prodotti Antibiotici Spa | Pharmaceutical compositions |
US4221794A (en) * | 1979-06-21 | 1980-09-09 | Newport Pharmaceuticals International, Inc. | Method of imparting immunomodulating and antiviral activity |
US4510144A (en) * | 1981-08-26 | 1985-04-09 | Newport Pharmaceuticals International | Methods of imparting immunomodulating activity with dihydrothiazolo purine derivatives |
EP0187705A3 (en) * | 1985-01-08 | 1988-05-11 | Norwich Eaton Pharmaceuticals, Inc. | Imidazo(4,5-f)quinolines useful as immunomodulating agents |
US4739046A (en) * | 1985-08-19 | 1988-04-19 | Luzio Nicholas R Di | Soluble phosphorylated glucan |
US4744984A (en) * | 1985-10-08 | 1988-05-17 | Vetrepharm Research, Inc. | Antiviral immunotherapeutic agent and preparation thereof |
RU2092183C1 (ru) * | 1988-05-26 | 1997-10-10 | Ника Хелт Продактс Лимитед (Лихтенштейн) | Антивирусный или антибактериальный состав и способ его употребления |
-
1988
- 1988-05-26 RU SU884743095A patent/RU2092183C1/ru active
- 1988-05-26 AU AU19408/88A patent/AU624331B2/en not_active Expired
- 1988-05-26 WO PCT/US1988/001785 patent/WO1989011294A1/en active IP Right Grant
- 1988-05-26 JP JP63504463A patent/JPH0649659B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1988-05-26 AT AT88905146T patent/ATE93143T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-05-26 US US07/459,738 patent/US5200182A/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-05-26 HU HU883981A patent/HU204710B/hu unknown
- 1988-05-26 EP EP88905146A patent/EP0380484B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-04-20 CA CA000597341A patent/CA1335425C/en not_active Expired - Fee Related
- 1989-04-27 IL IL9009289A patent/IL90092A/en not_active IP Right Cessation
- 1989-05-08 ZA ZA893382A patent/ZA893382B/xx unknown
- 1989-05-16 ES ES8901637A patent/ES2011577A6/es not_active Expired - Fee Related
- 1989-05-23 PH PH38684A patent/PH26284A/en unknown
- 1989-05-24 MA MA21811A patent/MA21560A1/fr unknown
- 1989-05-26 YU YU01092/89A patent/YU109289A/xx unknown
- 1989-05-26 CS CS893180A patent/CS277030B6/cs not_active IP Right Cessation
-
1990
- 1990-01-22 MW MW3/90A patent/MW390A1/xx unknown
- 1990-01-22 DK DK199000168A patent/DK173078B1/da not_active IP Right Cessation
- 1990-01-25 FI FI900412A patent/FI900412A0/fi not_active IP Right Cessation
- 1990-01-26 OA OA59731A patent/OA09785A/en unknown
- 1990-02-22 BG BG91270A patent/BG60544B1/bg unknown
-
1992
- 1992-04-08 US US07/865,002 patent/US5466449A/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-28 LV LVP-92-508A patent/LV10054B/en unknown
-
1994
- 1994-05-05 HK HK42394A patent/HK42394A/xx not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-06-07 US US08/474,663 patent/US6099835A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU1940888A (en) | 1989-12-12 |
BG60544B1 (en) | 1995-08-28 |
CS277030B6 (en) | 1992-11-18 |
JPH03504121A (ja) | 1991-09-12 |
DK16890D0 (da) | 1990-01-22 |
US6099835A (en) | 2000-08-08 |
HK42394A (en) | 1994-05-13 |
CS318089A3 (en) | 1992-05-13 |
PH26284A (en) | 1992-04-10 |
FI900412A0 (fi) | 1990-01-25 |
IL90092A (en) | 1995-03-30 |
EP0380484A1 (en) | 1990-08-08 |
LV10054B (en) | 1995-02-20 |
DK173078B1 (da) | 1999-12-20 |
OA09785A (en) | 1994-04-15 |
ATE93143T1 (de) | 1993-09-15 |
WO1989011294A1 (en) | 1989-11-30 |
RU2092183C1 (ru) | 1997-10-10 |
HUT54060A (en) | 1991-01-28 |
US5466449A (en) | 1995-11-14 |
LV10054A (lv) | 1994-05-10 |
ZA893382B (en) | 1991-01-30 |
MA21560A1 (fr) | 1989-12-31 |
MW390A1 (en) | 1990-11-14 |
ES2011577A6 (es) | 1990-01-16 |
YU109289A (en) | 1991-08-31 |
HU883981D0 (en) | 1990-12-28 |
JPH0649659B2 (ja) | 1994-06-29 |
EP0380484B1 (en) | 1993-08-18 |
DK16890A (da) | 1990-01-22 |
US5200182A (en) | 1993-04-06 |
BG91270A (bg) | 1993-12-24 |
AU624331B2 (en) | 1992-06-11 |
CA1335425C (en) | 1995-05-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HU204710B (en) | Process for producing pharmaceutical compositions having antiviral and antibacterial effect | |
RU2536264C2 (ru) | Композиция для наружного применения на коже, содержащая соль и сахар в качестве активных ингредиентов, для предотвращения и лечения вагиноза, и ее применение | |
EP0090837A1 (en) | Method and composition for treating a patient suffering from interferonsusceptible disorder | |
US8703205B2 (en) | Natural compositions and methods of promoting wound healing | |
JPS61286382A (ja) | 雌の哺乳動物における子宮内膜炎の治療用組成物 | |
US6132715A (en) | Method of inhibiting biosynthesis of tumor necrosis factor | |
CN102824337B (zh) | 一种治疗家畜子***的凝胶剂及其制备方法 | |
CN112236163B (zh) | 使用协同量的硼酸增强缩酚酸肽抗生素的抗菌作用 | |
KR930004599B1 (ko) | 항바이러스성 또는 항균성 조성물 | |
US7704976B2 (en) | Use of N-acetyl-D-glucosamine for preparing medicines for urogenital tract infection's treatment and prevention | |
Cox | Cefazolin therapy of urinary tract infections | |
RU2745236C1 (ru) | Способ лечения и профилактики субклинического мастита у коров | |
DE3883392T2 (de) | Verwendung eines Lysozymdimeren und/oder Ribonucleasedimeren zur Herstellung eines antiviralen oder antibakteriellen Arzneimittels. | |
US2801952A (en) | Antibiotic compositions comprising erythromycin and neomycin | |
RU2687041C1 (ru) | Биопрепарат для профилактики и лечения эндометритов у коров | |
JOHNSON | Dermatologic evaluation of yeast, tyrothricin, chlorophyll and nitrofurazone | |
RO110037B1 (ro) | Compoziții antivirale sau antibacteriene și metodă de tratare a infecțiilor, cu acestea | |
Powell, SJ & MacLeod | Ambilhar, a nitrothiazole derivative, in urinary tract bilharzia |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HPC4 | Succession in title of patentee |
Owner name: NIKA HEALTH PRODUCTS LTD., LI |