DE3782430T2

DE3782430T2 - Verwendung eines trypsininhibitors des kunitztyps aus sojabohnen und seiner derivate zur herstellung von medikamenten und denselben enthaltendes agens.

Info

Publication number: DE3782430T2
Application number: DE8787111047T
Authority: DE
Inventors: Hiroshi Maeda; Yasuhiro Matsumura; Tadahisa Shimoda; Kiyoharu Takamatsu
Original assignee: Fuji Oil Co Ltd
Current assignee: Fuji Oil Co Ltd
Priority date: 1986-01-31
Filing date: 1987-07-30
Publication date: 1993-04-15
Anticipated expiration: 2007-07-31
Also published as: JPH0623113B2; JPS62294622A; EP0301122A1; DE3782430D1; EP0301122B1

Description

Diese Erfindung betrifft ein Mittel zur Inhibition der Retention von krebsartigem Hydrothorax und Ascites, ein Mittel zum Inhibieren von übermäßigen entzündlichen Ödemen, und ein Mittel zur Erhöhung der carcinostatischen Wirkungen.
Von verschiedenen Proteaseinhibitoren pflanzlichen Ursprungs ist bisher berichtet worden. Diese Inhibitoren weisen Spezifizität auf. Beispielsweise ist es bekannt, daß ein Maistrypsininhibitor und ein Kürbistrypsininhibitor ihre inhibitorische Wirkung auf Trypsin und einen aktiven Hagemann-Faktor entfalten, wie es in Thromb. Res., Vol. 20, 149 (1980) beschrieben ist, und daß ein Trypsin-Inhibitor vom Kunitz-Typ von Sojabohnentrypsininhibitoren eine Inhibitionswirkung auf Trypsin, Plasmakallikrein und den aktivierten Faktor X ausüben.
Die Verstärkung von entzündlichen Ödemen ist mit dem Auftreten der Bradykininaktivität verbunden, unter Vergrößerung von Schmerzen oder der Durchlässigkeit von Gefäßen. Ein Schema für das Auftreten von Bradykinin wurde vorgeschlagen, worin ein Hageman-Faktor oder Kallikrein teilnimmt.
Jedoch sind Studien auf die Beziehung zwischen diesen Proteaseinhibitoren und der Entzündung bisher auf in vitro Experimente beschränkt und es wurde bisher von nur einigen Fällen berichtet, die die Wirkungen in vivo erläutern.
Auf der anderen Seite leiden Patienten mit Krebs häufig an Hydropsie, d.h. einer Retention von Ascites in dem Fall von Magenkrebs, Nierenkrebs, Ovarialkrebs und Leberkrebs oder an der Retention von Hydrothorax in dem Fall von Lungenkrebs. Derartige Ascites oder Hydrothorax verbreiten feste Tumoren nach der Operation, wobei metastatische Tumoren in dem Bauchraum oder in dem Brustraum mit einer hohen Wahrscheinlichkeit verursacht werden, was zu einer ähnlichen Ascites- oder Hydrothorax-Retention führt. Die Ascites-Retention verursacht die Reduktion von Plasmaprotein, das zur Verschlechterung der physikalischen Stärke der Patienten oder zu anderen Verschlechterungen führt. Als ein Ergebnis vermindern sich die therapeutischen Wirkungen, und die Transfusion einer großen Menge an Blut ist erforderlich. Die Hydrothorax-Retention verursacht eine Respirationsinsuffizienz und bringt schließlich sehr schwerwiegende Ergebnisse, wie eine beschleunigte Cachexie.
Die Erfinder haben intensive Untersuchungen in Bezug auf die Beziehung zwischen Proteaseinhibitoren und der Entzündungsinhibition durchgeführt. Als ein Ergebnis wurde nun festgestellt, daß Sojabohnen-Kunitz-Typ-Trypsininhibitor und unter anderem dessen Derivate beachtliche Wirkungen auf die Inhibition von entzündlichen Ödemen in vivo erzeugen. Die Erfinder haben weiter untersucht, wobei deren Aufmerkamkeit auf die Ähnlichkeit bei dem Mechanismus zwischen der Erhöhung der vaskulären Permeabilität aufgrund der Entzündung und der aufgrund der festen Tumoren und genauer ausgedrückt die Ähnlichkeit zwischen den Entzündungsstellen und den festen Tumoren, ausgedrückt an übermäßiger vaskulärer Permeabilität und Extravasation von Plasmakomponenten gerichtet war. Als ein Ergebnis wurde ebenfalls festgestellt, daß der oben genannte Inhibitor und Derivate davon wirksam sind, die Retention von krebsartigem Ascites oder Hydrothorax zu unterdrücken. Das heißt, es wurde experimentell bestätigt, daß die kontinuierliche Verabreichung der oben genannten Inhibitoren an ein Ascites-Tumor-System (Meth A. und Sarcoma 180) die Retention von Ascites aufgrund ihrer starken inhibitorischen Aktivität auf die vaskulare Permeabilität in Krebsgeweben inhibiert, um dadurch die Überlebenszeit von krebshaltigen Mäusen zu verlängern. Daher könnten diese Inhibitoren bei der Behandlung von Krebs vielversprechend sein. Diese Erfindung wurde auf der Grundlage dieser Feststellungen vollendet.
Diese Erfindung betrifft ein Mittel zur Inhibition der Retention von krebsartigem Ascites oder Hydrothorax und ein Mittel zum Inhibieren der übermäßigen entzündlichen Ödeme, umfassend einen Sojabohnen-Kunitz-Typ-Trypsininhibitor oder ein Derivat davon als einen aktiven Bestandteil, wobei das Derivat durch Modifizieren des Sojabohnen-Kunitz-Typ-Trypsininhibitors mit einem Styrol- Maleinsäureanhydridcopolymer oder einem partiellen Ester davon, Polyethylenglycol, einem Vinylethercopolymer, einem Pyran oder einem Dextran erhalten wird.
Diese Erfindung betrifft ebenfalls ein Mittel zur Erhöhung der Aktivitäten einer karzinostatischen Substanz, die einen Sojabohnen-Kunitz-Typ-Trpysininhibitor oder ein Derivat davon als einen aktiven Bestandteil enthält, wobei das Derivat wie oben genannt erhalten wird und wobei die karzinostatische Substanz aus der Gruppe von anticancerogenen Antibiotika, metabolischen Antagonisten, Immunaktivatoren und Antikrebsmitteln ausgewählt ist.
Diese Erfindung betrifft ebenfalls die Verwendung der oben erwähnten aktiven Bestandteile für die Herstellung eines Medikamentes.
Die Figuren 1 und 2 zeigen jeweils ein Diagramm, das die Inhibitionswirkungen von Arzneimitteln gemäß Beispiel 2 bei der Körpergewichtszunahme aufgrund der Ascitesretention zeigen.
Figur 3 ist ein Diagramm, das die Volumenänderung des Ödems entsprechend Beispiel 4 zeigt.
Sojabohnentrypsininhibitoren sind grob in Kunitz-Typ-Trypsininhibitoren mit einem Molekulargewicht von etwa 20.000 und in Bowman-Birk-Typ Trypsininhibitoren mit einem Molekulargewicht von 6000 bis 8000 unterteilt. Grundlegende Eigenschaften dieser Inhibitoren wurden aufgedeckt, wie es beispielsweise in Methods in Enzymology, Bd. 19, 853 (1970) und Tanpakushitsu Kenkyu no Atarashii Shiten "Kagakuteki Kenkyu o Chushin to shite" (New Viewpoint of Studies on Proteins "centered at chemical studies"), 1738, Kyoritsu Shuppan (1982) beschrieben ist. Chemische Strukturen von typischen Beispielen der Kunitz-Typ-Trypsininhibitoren (nachfolgend mit KTI bezeichnet) und der Bowman-Birk-Typ-Trypsininhibitoren (nachfolgend mit BBI bezeichnet) sind bereits gesichert, so daß diese Inhibitoren heutzutage durch chemische Verfahren oder biologische Verfahren, beispielsweise Gewebekultur und Genrekombination synthetisiert werden können.
Die Mittel entsprechend der Erfindung umfassen KTI oder ein Derivat davon als einen aktiven Bestandteil, wobei das Derivat durch Modifizieren des Sojabohnen-Kunitz-Typ- Trypsininhibitors mit einem Styrolmaleinsäureanhydrid- Copolymer oder einem teilweisen Ester davon, Polyethylenglycol, einem Vinylethercopolymer, einem Pyran oder einem Dextran erhalten ist. KTI , das verwendet werden soll, umfaßt KTI, wie es von Sojabohnen isoliert ist und Produkte mit begrenztem Abbau von isoliertem Sojabohnen-KTI während die dem KTI inhärenten Aktivitäten beibehalten werden, ebenso wie KTI, das durch die oben erwähnten chemischen oder biologischen Verfahren synthetisiert worden ist.
KTI mit Sojabohnenursprung kann durch irgendeines der bekannten Verfahren hergestellt werden. Entsprechend einem allgemein angewandten Verfahren werden Rohmaterialien wie Sojabohnen, entfettete Sojabohnen und Sojabohnenmolke mit wässrigen Medien oder polaren organischen Lösungsmitteln (beispielsweise Ethanol und Aceton) extrahiert, und mit dem Extrakt werden Konzentrierungs- und Fraktionierungstechniken durchgeführt, beispielsweise die Membrantrennung, I.E.P. - Ausfällung und das Aussalzen unter Erhalt eines rohen Produktes, das dann durch Gelfiltration, Ionenaustausch, physikalische oder chemische Adsorption gereinigt wird. Die Aktivitäten und Reinheiten von KTI können durch bekannte Verfahren bestimmt werden, beispielsweise ein Caseindigestionsverfahren durch Kunitz und Electrophoreseanalyse unter Verwendung eines SDS-haltigen Polyacrylamidgels. In dieser Erfindung wird das zuerst genannte Verfahren angewandt und die Menge, die 1 mg Typ-XI (Trypsin, hergestellt von Sigma Co.; aktives Protein mit 7500 bis 9000 BAEE Einheit/mg) wird als 1 Einheit verwendet.
Die effektive Menge des aktiven Bestandteils variiert etwas in Abhängigkeit von dem Grad der Reinheit, der Verabreichungsroute und der restlichen Aktivität und liegt üblicherweise in dem Bereich von 1 bis 3000 mg 60 kg-Körpergewicht bei einer intraperitonealen Verabreichung oder von 1 bis 300 mg/60 kg-Körpergewicht bei einer intravenösen Injektion, wenn es in KTI-Proteingewicht mit einer Aktivität von 1,5 bis 2,5 Einheiten/mg umgewandelt wird.
Die Derivate von KTI können in dieser Erfindung für einen oder mehrere Zwecke verwendet werden, beispielsweise die Reduktion der Antigenwirkung von KTI Protein, die Erhöhung der Stabilität, Substanzen zu zersetzen (beispielsweise SH-Protease), d.h. die Verbesserung der in vivo Halbwärtszeitperiode und die Verleihung von hydrophoben Eigenschaften für die Erhöhung der amiphiphatischen Eigenschaften. Derartige KTI Derivate sind Kombinationen von KTI und verschiedenen Modifizierern, d.h. Styrol-Maleinsäureanhydrid-Copolymeren (SMA) und teilweisen Estern davon, Polyethylenglycol, Vinylethercopolymeren, Pyranen und Dextranen. Die Art für die Kombination von KTI mit diesen Modifizierern kann nach irgendeinem der üblicherweise bekannten Verfahren erfolgen, solange der Zweck oder die Zwecke, die beabsichtigt sind, erreicht werden können. Beispielsweise in dem Fall der Modifizierung mit SMA oder teilweisen Estern davon, wird der Modifizierer direkt an eine epsilon-Aminogruppe der N-terminierten Aminogruppe an eine epsilon-Aminogruppe des Lysinrestes von KTI in einer neutralen bis alkalischen Lösung gebunden, zur Bildung einer Peptidbindung, wie es von Maeda, et al., die Erfinder dieser Erfindung, in Journal of Medicinal Chemistry, Bd. 28, 455-461 (1985) beschrieben ist.
KTI und Derivate davon können topisch, intravenös, intraarteriell, permukös, percutan, oral oder intraperitoneal verabreicht werden.
Beispielsweise umfassen wasserlösliche Ansätze für die intravenöse Injektion KTI, wie es isoliert ist und injizierbare Lösungen von KTI in physiologischer Kochsalzlösung oder einer 5 Gew.%igen Glucoselösung. Präparate für die intraarterielle Injektion umfassen Öle unter Verwendung von Lipidöl, Emulsionen, die durch Emulgieren einer wässrigen Lösung von KTI in Fetten und Ölen, beispielsweise Olivenöl, Mittelkettenfettsäureestern, Linolsäureestern, Sojabohnenöl und Tung Öl in der Gegenwart eines Emulgators hergestellt worden sind, und Formen von Liposomen.
KTI oder Derivate davon können in Kombination mit Arzneimitteln verwendet werden, die carcinostatische Aktivität als solche aufweisen. Beispiele der Carcinostatika, die in Kombination verwendet werden sollen, umfassen anticancerogene Antibiotika, beispielsweise Neocarzinostatin (NCS), SMANCS (ein Styrol-Maleinsäure-Copolymer, gebunden an NCS über die Aminogruppe von NCS) und Mitomycin (Warenzeichen), metabolische Antagonisten, beispielsweise 5-FU (Warenzeichen), Immunaktivatoren, beispielsweise Picibanil (Warenzeichen) und andere Antikrebsmittel. Diese Carcinostatika können mit KTI oder dessen Derivaten in einer Einzeldosisform kombiniert werden, oder die Carcinostatika und KTI und dessen Derivate können getrennt verabreicht werden.
KTI und dessen Derivate entsprechen dieser Erfindung entfalten Wirkungen zur Inhibition des Übermaßes an entzündlichen Ödemen und Retention von Ascites und Hydrothorax bis letztendlich zu dem Vorteil der Verlängerung der Überlebenszeit. KTI und dessen Derivate sind ebenfalls nützlich, die Antikrebsaktivitäten zu erhöhen, die verschiedene Karzinostatika aufweisen, wenn sie in Kombination damit verwendet werden. Der Mechanismus der Erzeugung dieser Wirkungen ist nicht vollständig geklärt, aber es wird vermutet, daß KTI effektiv ein Kallikrein-Bradykinin-System in vivo, von dem angenommen wird, daß es bei entzündlichen Ödemen teilnimmt, um dadurch Schmerzerzeugung zu unterdrücken, und die Beschleunigung der vaskulären Permeabilität aufgrund des Auftretens von Bradykinin inhibiert; daß KTI die Permeabilität von Gefäßen in Krebsgeweben inhibiert, in denen das oben beschriebene System vorhanden ist, das heißt, die Extravasation von Plasmaproteinen in Krebsgeweben wird inhibiert, um dadurch die Retention von Ascites oder Hydrothorax zu inhibieren; und daß KTI die Zufuhr von Plasmakomponenten (Ernährung) zu den Krebsgeweben unterdrückt, was zur Vergrößerung der Aktivitäten führt, die die Antikrebsmittel aufweisen. Es gibt eine Möglichkeit, daß KTI teilweise die Aktivität von Proteasen inhibiert, die das Wachstum von Krebszellen beschleunigen. Da KTI ein Molekulargewicht von etwa 20.000 aufweist (KTI Derivate haben höhere Molekulargewichte), wirkt es selektiv bei solchen Geweben, die eine übermäßige vaskuläre Permeabilität aufweisen, zur Inhibition des Wachstums der Ödeme oder Krebsgewebes, ohne daß eine wesentliche Extravasion in normale Gewebe erfolgt, wo die vaskuläre Permeabilität nicht verstärkt ist. Weiterhin, während das Exsudat (Extravasation) an der Entzündungsstelle üblicherweise durch lymphatische Gefäße wiedergewonnen wird, da dort kein lymphatisches System in Krebsgeweben ist, wird davon ausgegangen, daß die hochpolymeren Substanzen, die aus den Gefäßen in die Krebsgewebe austreten, dort für eine verlängerte Zeitperiode zurückgehalten werden, ohne daß sie wiedergewonnen werden. Es wird angenommen, daß diese Eigenschaft ebenfalls zu der selektiven Wirkung von KTI an der gestörten Stelle beitritt.
Die oben beschriebene Ausschaltung einer Ernährungszufuhr an Krebsgewebe ist dem Konzept der Inhibierung einer Ernährungszufuhr durch physikalische embolische Therapie vergleichbar. Jedoch beinhaltet die physikalische embolische Therapie häufig die Zerstörung von normalen Geweben. Auf der anderen Seite verursacht das Mittel entsprechend dieser Erfindung nicht derartige nachteilige Wirkungen.
Diese Erfindung wird nachfolgend unter Bezugnahme auf die folgenden Beispiele detaillierter beschrieben.

Beispiel 1

Herstellung von KTI:

Sojabohnenmolke, die in dem Verfahren zur Isolierung von Sojabohnenprotein aus gering denaturierten entfetteten Sojabohnen erhalten ist, wurde konzentriert, um so einen rohen Proteingehalt von 5,5 Gew.% zu haben. Halbsoviel Aceton wie das Konzentrat, bezogen auf das Volumen, wurde dazugegeben, und die Mischung wurde für etwa 1 Stunde gerührt, gefolgt von der Trennung durch Zentrifuge. Zu der überstehenden Flüssigkeit wurde weiterhin das 1 1/2fache des Volumens an Aceton im Vergleich zu den oben genannten Konzentrat zugegeben mit anschließendem Rühren für etwa eine zusätzliche halbe Stunde. Die ausgefällte Fraktion, getrennt durch Zentrifugation, wurde einer Dialyse gegen Wasser unterwofen. Zu dem Dialysat wurde eine 0,5 M Natriumphosphatpufferlösung (pH 7.0) in einer Menge von 1/50, bezogen auf das Volumen, zugegeben, um einen pH Wert von 7,0 einzustellen und das System wurde durch eine Ionenaustauschsäule, die mit DEAE-Cellulose gepackt war, geleitet, um den aktiven Bestandteil auf dem Harz zu adsorbieren. Die Säule wurde dann mit einem Eluenten, enthaltend Natriumchlorid mit einem geraden Konzentrationsgradienten von 0 M bis zu 0,4 M eluiert und der Eluent wurde mit Hilfe eines automatischen Fraktionssammlers gesammelt. Jede der kombinierten aktiven Fraktionen, die reich an BBI, war und der kombinierten aktiven Fraktion, die reich an KTI war, wurde ausgesalzt und konzentriert. Das Konzentrat von BBI wurde weiterhin durch ein CM-Celluloseaustauschharz gereinigt und lyophilisiert. Die KTI-Fraktion wurde einer I.E.P.-Ausfällung und Lyophilisierung unterwofen, unter Erhalt einer KTI-Probe. Beide Proben wiesen eine Reinheit von 95% oder mehr in dem gesamten Protein auf, wie es durch SDS-haltige Polyacrylamidgelelektrophorese bestimmt wurde. Die KTI-Probe und die BBI-Probe wiesen eine spezifische Aktivität von 1,97 Einheiten/mg-Protein, bzw. 3,37 Einheiten/mg-Protein auf.

Beispiel 2

Inhibition von Ascites Retention und Verlängerung des Lebens:

Eine Suspension mit 500.000 Zellen/Tier an Sarcoma 180 wurde intraperitoneal sieben 8-Wochen alten weiblichen ddy-Mäusen pro Gruppe eingeimpft. Ein wasserlösliches Präparat, das durch Auflösen von 3 mg von KTI oder BBI, wie es gemäß Beispiel 1 erhalten wurde, in 1 ml physiologischer Kochsalzlösung oder physiologischer Kochsalzlösung, die keinen Trypsininhibitor enthielt (blank), hergestellt wurde, wurde intraperitoneal jedem dieser Testtiere bei einem Gehalt von 1 ml/Tag für vier aufeinander folgende Tage oder 14 Tage von dem Tag der Impfung verabreicht. Die Tiere, die keine Impfung von Sarcoma 180 und Arzneimittel erhalten haben, wurden als die Kontrollgruppe verwendet. Während der Verabreichungsperiode konnten die Tiere nach Belieben Nahrung und Wasser zu sich nehmen.
Die Tiere wurden jeden Tag während der Verabreichung gewogen, und die Ergebnisse der Gewichtszunahme sind in Fig. 1 (14tägige Verabreichung) und in Fig. 2 (4tägige Verabreichung) aufgezeichnet. In den Fig. 1 und 2 zeigen die Kurven 1 die Gruppen, die physiologische Kochsalzlösung erhalten haben; die Kurven 2 zeigen die Gruppen, die BBI erhalten haben, die Kurven 3 zeigen die Gruppen, die KTI erhalten haben, die Kurven 4 zeigen die Kontrollgruppe an; der weiße Pfeil zeigt den Tag der Impfung von Krebszellen an; und der schwarze Pfeil zeigt die Tage der Verabreichung des Arzneimittels an. In Fig. 2 bedeutet die gepunktete Linie die Kontrollgruppe. Im Hinblick auf die Ergebnisse, die in den Fig. 1 und 2 gezeigt sind, kombiniert mit visueller Beobachtung, zeigt die Gruppe, die KTI empfängt, offensichtlich die Wirkung der Inhibition der Gewichtszunahme, d.h. die Inhibition der Ascitisretention, was keinen wesentlichen Unterschied von der Kontrollgruppe aufzeigt, während ein derartiger inhibitorischer Effekt bei der Gruppe unwesentlich ist, die BBI erhalten hat.
Ein Durchschnitt der Überlebenstage und eine 20 Tagesüberlebensrate ist unten in Tabelle 1 gezeigt. Aus dieser Tabelle ist ersichtlich, daß KTI für die Lebensverlängerung wirksam ist. Tabelle 1 Verabreichung Gruppe Durchschnittliche Tage bei der Überlebung Tage Überlebensrate Blankogruppe KTI-Gruppe BBI-Gruppe

Beispiel 3

Herstellung von KTI, das an partiell butyliertes SMA gebunden ist
In 30 ml einer wässrigen 0,5 M Natriumhydrogencarbonat-Lösung wurden 300 mg KTI, das in Beispiel 1 hergestellt worden ist, und 150 mg von teilweise butyliertem SMA (durchschnittliche Molmasse: ca. 2000) aufgelöst, und die Lösung wurde 90 Minuten lang bei 25ºC gerührt. Eine Glycinlösung wurde zu dem Reaktionssystem zugegeben, zum Stoppen der Reaktion. Die resultierende Lösung wies eine restliche Aktivität von 36,3% auf und enthielt 1,94 modifizierte Aminogruppen pro Molekül, wie es durch ein TNBS Verfahren bestimmt wurde (cf. Tanpakushitsu, Kakusan, Koso (Proteins, Nucleic Acids, and Enzymes), Bd. 18 (13), 1153-1159 (1973)). Die Lösung wurde gegen eine wässrige Ammoniumhydrogencarbonatlösung dialysiert, mit anschließender Lyophilisierung unter Erhalt eines SMA-modifizierten KTI (nachfolgend mit KTI-SMA bezeichnet).

Beispiel 4

Inhibition der übermäßigen Bildung von entzündlichen Ödemen:

Eine 1 Gew.% Carrageeninlösung wurde hergestellt, indem Carrageenin in physiologischer Kochsalzlösung (blanko) oder physiologischer Kochsalzlösung, die 5 mg oder 15 mg/ml KTI-SMA, wie in Beispiel 3 hergestellt, enthielt, aufgelöst wurde. Fünf männliche SD Ratten (durchschnittliches Körpergewicht: 150 g ± 5 g) pro Gruppe, wurden lokal 0,1 ml/Stelle (Pfote) der Carrageeninlösung verabreicht, zur Induzierung einer Entzündung in der Pfote. Das Volumen der Pfote wurde mit der Zeit gemessen, um die Inhibitionswirkung bei carrageenininduzierten Ödemen zu bestimmen. Die erhaltenen Ergebnisse sind in Fig. 3 dargestellt. In Fig. 3 bedeutet Kurve 1 die Blankogruppe; die Kurve 2 zeigt die Gruppe an, die 5 mg/ml KTI-SMA erhalten hat; und die Kurve 3 zeigt die Gruppe an, die 15 mg/ml KTI-SMA erhalten haben.
Aus Fig. 3 ist ersichtlich, daß ein signifikanter Effekt der Inhibierung der entzündlichen Ödeme bei der Gruppe, die 15 mg/ml KTI-SMA erhalten hat, 3 Stunden nach der Entzündungsinduktion beobachtet wird.
Wenn der gleiche Versuch wiederholt wurde, mit der Ausnahme, daß KTI-SMA durch 20 mg/ml nicht modifiziertes KTI ersetzt wurde, zeigte sich, daß die Inhibitionswirkung nahezu gleich zu der war, die durch 5 mg/cc KTI-SMA erzeugt wurde.

Beispiel 5

Eine Sarcoma 180 Suspension (500000 Zellen pro Tier) wurde intraperitoneal zehn 8-Wochen alten weiblichen ddy-Mäusen pro Gruppe implantiert. Den Testtieren wurde physiologische Kochsalzlösung, die KTI enthielt, wie in Beispiel 1 hergestellt, Neocarzinostatin (NCS) oder eine Mischung aus KTI und NCS einmal am Tag für 7 aufeinanderfolgende Tage verabreicht. Eine Kontrollgruppe erhielt nur physiologische Kochsalzlösung. Während des Versuches konnten die Tiere Nahrung und Wasser nach Belieben aufnehmen. Die Dosen und die Änderungen der Überlebensrate sind in Tabelle 2 unten gezeigt. Tabelle 2 Überlebensrate Gruppe Dosis (mg/Kg-KG.) Tage (%) Kontrolle
Wie aus Tabelle 2 ersichtlich ist, entfaltet KTI nicht nur per se eine Aktivität zur Verlängerung des Lebens, sondern entfaltet ebenfalls synergistische Effekte min einem Carcinostatikum (NCS).
Wie oben beschrieben entfalten Mittel, die KTI oder ein Derivat davon als einen aktiven Bestandteil enthalten, Wirkungen für die Inhibition von entzündlichen Ödemen, Wirkungen zur Inhibition der Retention von Ascites oder Hydrothorax, ebenso wie Wirkungen zur Erhöhung der carcinostatischen Aktivität auf. Die Inhibition der entzündlichen Ödeme verhindert die Erzeugung oder die übermäßige Bildung von Schmerzen aufgrund der Ödeme, und die Inhibition von Ascites oder Hydrothoraxretention verhindert oder unterdrückt die negativen Einflüsse, die damit verbunden sind, beispielsweise die Reduktion der physikalischen Stärke der Patienten, die Reduktion der therapeutischen Wirkungen, das Erfordernis einer Transfusion einer großen Menge an Blutplasma, die Atmungsinsuffizienz und die Einführung von Cachexie und vergrößert die therapeutichen Wirkungen, was zu einer Verlängerung des Lebens führt.

Claims

1. Sojabohnen-Kunitz-Typ-Trypsininhibitor oder ein Derivat davon als ein aktiver Bestandteil, wobei das Derivat erhalten ist durch Modifizieren eines Sojabohnen-Kunitz-Typ-Trypsininhibitors mit einem Styrol-Maleinsäureanhydrid-Copolymer oder einem teilweisen Ester davon, Polyethylenglycol, einem Vinylethercopolymer, einem Pyran oder einem Dextran, für die Verwendung als ein Mittel zur Inhibition der Retention von cancerogenem Ascites und/oder Hydrothorax und zur Inhibition der übermäßigen Bildung von entzündlichen Ödemen.

2. Sojabohnen-Kunitz-Typ-Trypsininhibitor oder ein Derivat davon als ein aktiver Bestandteil, wobei das Derivat erhalten ist durch Modifizieren von Sojabohnen-Kunitz-Typ-Trypsininhibitor mit einem Styrol-Maleinsäureanhydrid-Copolymer oder einem teilweisen Ester davon, Polyethylenglycol, einem Vinylethercopolymer, einem Pyran oder einem Dextran, für die Verwendung als ein Mittel zur Erhöhung der Aktivitäten einer carcinostatischen Substanz, wobei die carcinostatische Substanz ausgewählt ist aus anticancerogenen Antibiotika, metabolischen Antagonisten, Immunaktivatoren und Antikrebsmitteln.

3. Verwendung der aktiven Bestandteile nach Anspruch 1, für die Herstellung eines Medikamentes zur Inhibition der Retention von cancerogenem Hydrothorax und Ascites.

4. Verwendung der aktiven Bestandteile nach Anspruch 1, zur Herstellung eines Medikamentes zur Inhibition der übermäßigen Bildung von entzündlichen Ödemen.

5. Verwendung der aktiven Bestandteile nach Anspruch 1, für die Herstellung eines Medikamentes zur Vergrößerung der Aktivität von carcinostatischen Substanzen.

6. Verwendung nach Anspruch 5, wobei die carcinostatische Substanz aus der Gruppe ausgewählt wird, die in Anspruch 2 angegeben ist.