CZ20022982A3 - Urát oxidáza bez agregátů pro přípravu neimunogennického polymeru - Google Patents
Urát oxidáza bez agregátů pro přípravu neimunogennického polymeru Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20022982A3 CZ20022982A3 CZ20022982A CZ20022982A CZ20022982A3 CZ 20022982 A3 CZ20022982 A3 CZ 20022982A3 CZ 20022982 A CZ20022982 A CZ 20022982A CZ 20022982 A CZ20022982 A CZ 20022982A CZ 20022982 A3 CZ20022982 A3 CZ 20022982A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- urate oxidase
- uricase
- poly
- urate
- oxidase
- Prior art date
Links
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 17
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title abstract description 10
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 title abstract description 7
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 title 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 title 1
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 claims abstract description 262
- 229940005267 urate oxidase Drugs 0.000 claims abstract description 69
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 28
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 claims description 25
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 24
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 23
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 23
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 22
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 claims description 18
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 claims description 15
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 claims description 14
- 241001504519 Papio ursinus Species 0.000 claims description 13
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 6
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical group C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 claims description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 5
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 claims description 5
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 4
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 4
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 4
- 241000186074 Arthrobacter globiformis Species 0.000 claims description 3
- 241000228197 Aspergillus flavus Species 0.000 claims description 3
- 241000194110 Bacillus sp. (in: Bacteria) Species 0.000 claims description 3
- 241000235646 Cyberlindnera jadinii Species 0.000 claims description 3
- 241000255313 Drosophila pseudoobscura Species 0.000 claims description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 241000255601 Drosophila melanogaster Species 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 17
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 10
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 4
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 abstract description 2
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 abstract 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 abstract 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 abstract 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 60
- 108010068701 Pegloticase Proteins 0.000 description 25
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 19
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 17
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 230000001751 uricolytic effect Effects 0.000 description 16
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 11
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 10
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 9
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 6
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 6
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 241001415846 Procellariidae Species 0.000 description 5
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 5
- QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N Leu-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- KBBRNEDOYWMIJP-KYNKHSRBSA-N Thr-Gly-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N)O KBBRNEDOYWMIJP-KYNKHSRBSA-N 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ACBQROXDOHKANW-UHFFFAOYSA-N bis(4-nitrophenyl) carbonate Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 ACBQROXDOHKANW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- KTXKIYXZQFWJKB-VZFHVOOUSA-N Ala-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O KTXKIYXZQFWJKB-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 3
- LTTLSZVJTDSACD-OWLDWWDNSA-N Ala-Thr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O LTTLSZVJTDSACD-OWLDWWDNSA-N 0.000 description 3
- SIFXMYAHXJGAFC-WDSKDSINSA-N Arg-Asp Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SIFXMYAHXJGAFC-WDSKDSINSA-N 0.000 description 3
- KMSHNDWHPWXPEC-BQBZGAKWSA-N Arg-Asp-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O KMSHNDWHPWXPEC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- UZSQXCMNUPKLCC-FJXKBIBVSA-N Arg-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O UZSQXCMNUPKLCC-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 3
- KMCRKVOLRCOMBG-DJFWLOJKSA-N Asn-Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N KMCRKVOLRCOMBG-DJFWLOJKSA-N 0.000 description 3
- KNMRXHIAVXHCLW-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asn-Ser Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N)C(=O)O KNMRXHIAVXHCLW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- BSWHERGFUNMWGS-UHFFFAOYSA-N Asp-Ile Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(O)=O BSWHERGFUNMWGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GWIJZUVQVDJHDI-AVGNSLFASA-N Asp-Phe-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GWIJZUVQVDJHDI-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- UIKLEGZPIOXFHJ-DLOVCJGASA-N Cys-Phe-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UIKLEGZPIOXFHJ-DLOVCJGASA-N 0.000 description 3
- ZWQVYZXPYSYPJD-RYUDHWBXSA-N Glu-Gly-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZWQVYZXPYSYPJD-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 3
- VGUYMZGLJUJRBV-YVNDNENWSA-N Glu-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VGUYMZGLJUJRBV-YVNDNENWSA-N 0.000 description 3
- ZHNHJYYFCGUZNQ-KBIXCLLPSA-N Glu-Ile-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O ZHNHJYYFCGUZNQ-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 3
- CUYLIWAAAYJKJH-RYUDHWBXSA-N Gly-Glu-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CUYLIWAAAYJKJH-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 3
- ITZOBNKQDZEOCE-NHCYSSNCSA-N Gly-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)CN ITZOBNKQDZEOCE-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N H-Lys-Trp-OH Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FLUVGKKRRMLNPU-CQDKDKBSSA-N His-Ala-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O FLUVGKKRRMLNPU-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 3
- WPUAVVXYEJAWIV-KKUMJFAQSA-N His-Phe-Cys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N WPUAVVXYEJAWIV-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- FJWYJQRCVNGEAQ-ZPFDUUQYSA-N Ile-Asn-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N FJWYJQRCVNGEAQ-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 3
- CCHSQWLCOOZREA-GMOBBJLQSA-N Ile-Asp-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N CCHSQWLCOOZREA-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 3
- KEKTTYCXKGBAAL-VGDYDELISA-N Ile-His-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N KEKTTYCXKGBAAL-VGDYDELISA-N 0.000 description 3
- RMNMUUCYTMLWNA-ZPFDUUQYSA-N Ile-Lys-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N RMNMUUCYTMLWNA-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 3
- AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N Ile-Lys-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 3
- KWTVLKBOQATPHJ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N KWTVLKBOQATPHJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- ZURHXHNAEJJRNU-CIUDSAMLSA-N Leu-Asp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ZURHXHNAEJJRNU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- CFZZDVMBRYFFNU-QWRGUYRKSA-N Leu-His-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)NCC(O)=O CFZZDVMBRYFFNU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- OVZLLFONXILPDZ-VOAKCMCISA-N Leu-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OVZLLFONXILPDZ-VOAKCMCISA-N 0.000 description 3
- SJNZALDHDUYDBU-IHRRRGAJSA-N Lys-Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O SJNZALDHDUYDBU-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- FLCMXEFCTLXBTL-DCAQKATOSA-N Lys-Asp-Arg Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N FLCMXEFCTLXBTL-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N Lys-Asp-Tyr Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- IGRMTQMIDNDFAA-UWVGGRQHSA-N Lys-His Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 IGRMTQMIDNDFAA-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- RPWTZTBIFGENIA-VOAKCMCISA-N Lys-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O RPWTZTBIFGENIA-VOAKCMCISA-N 0.000 description 3
- PSVAVKGDUAKZKU-BZSNNMDCSA-N Lys-Tyr-His Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O PSVAVKGDUAKZKU-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 3
- MYAPQOBHGWJZOM-UWVGGRQHSA-N Met-Gly-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C MYAPQOBHGWJZOM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 108010087066 N2-tryptophyllysine Proteins 0.000 description 3
- AUJWXNGCAQWLEI-KBPBESRZSA-N Phe-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O AUJWXNGCAQWLEI-KBPBESRZSA-N 0.000 description 3
- YFXXRYFWJFQAFW-JHYOHUSXSA-N Phe-Thr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N)O YFXXRYFWJFQAFW-JHYOHUSXSA-N 0.000 description 3
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 3
- JFWDJFULOLKQFY-QWRGUYRKSA-N Ser-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JFWDJFULOLKQFY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- JIPVNVNKXJLFJF-BJDJZHNGSA-N Ser-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N JIPVNVNKXJLFJF-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 3
- OZPDGESCTGGNAD-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CO OZPDGESCTGGNAD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- XDARBNMYXKUFOJ-GSSVUCPTSA-N Thr-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XDARBNMYXKUFOJ-GSSVUCPTSA-N 0.000 description 3
- HQVKQINPFOCIIV-BVSLBCMMSA-N Trp-Arg-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 HQVKQINPFOCIIV-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 3
- ZHZLQVLQBDBQCQ-WDSOQIARSA-N Trp-Lys-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N ZHZLQVLQBDBQCQ-WDSOQIARSA-N 0.000 description 3
- JFDGVHXRCKEBAU-KKUMJFAQSA-N Tyr-Asp-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O JFDGVHXRCKEBAU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- FFCRCJZJARTYCG-KKUMJFAQSA-N Tyr-Cys-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O FFCRCJZJARTYCG-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- JKUZFODWJGEQAP-KBPBESRZSA-N Tyr-Gly-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O JKUZFODWJGEQAP-KBPBESRZSA-N 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 3
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 3
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 3
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 3
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- VWWAFGHMPWBKEP-GMOBBJLQSA-N Asp-Met-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N VWWAFGHMPWBKEP-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 2
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 2
- SVVULKPWDBIPCO-BZSNNMDCSA-N His-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SVVULKPWDBIPCO-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- 201000001431 Hyperuricemia Diseases 0.000 description 2
- 206010051364 Hyperuricosuria Diseases 0.000 description 2
- TZCGZYWNIDZZMR-NAKRPEOUSA-N Ile-Arg-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N TZCGZYWNIDZZMR-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 2
- TZCGZYWNIDZZMR-UHFFFAOYSA-N Ile-Arg-Ala Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(=O)NC(C)C(O)=O)CCCN=C(N)N TZCGZYWNIDZZMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BOTVMTSMOUSDRW-GMOBBJLQSA-N Ile-Arg-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BOTVMTSMOUSDRW-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 2
- OVDKXUDMKXAZIV-ZPFDUUQYSA-N Ile-Lys-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N OVDKXUDMKXAZIV-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 2
- NGKPIPCGMLWHBX-WZLNRYEVSA-N Ile-Tyr-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N NGKPIPCGMLWHBX-WZLNRYEVSA-N 0.000 description 2
- HQUXQAMSWFIRET-AVGNSLFASA-N Leu-Glu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN HQUXQAMSWFIRET-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- XQXGNBFMAXWIGI-MXAVVETBSA-N Leu-His-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CC1=CN=CN1 XQXGNBFMAXWIGI-MXAVVETBSA-N 0.000 description 2
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- ALEVUGKHINJNIF-QEJZJMRPSA-N Lys-Phe-Ala Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ALEVUGKHINJNIF-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- PSKRILMFHNIUAO-JYJNAYRXSA-N Phe-Glu-Lys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N PSKRILMFHNIUAO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DDDLIMCZFKOERC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N DDDLIMCZFKOERC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- MVFQLSPDMMFCMW-KKUMJFAQSA-N Tyr-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O MVFQLSPDMMFCMW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 2
- POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N allantoin Chemical compound NC(=O)NC1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 108010024607 phenylalanylalanine Proteins 0.000 description 2
- -1 poly (alkyl glycol Chemical compound 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N trisodium borate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]B([O-])[O-] BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- NXLNNXIXOYSCMB-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) carbonochloridate Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(OC(Cl)=O)C=C1 NXLNNXIXOYSCMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PBVBFKPJZFNFNY-UHFFFAOYSA-N 3,4-dichlorobenzene-1,2-diamine Chemical compound NC1=CC=C(Cl)C(Cl)=C1N PBVBFKPJZFNFNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMTQQYYKAHVGBJ-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-DICHLOROPHENYL)-1,1-DIMETHYLUREA Chemical compound CN(C)C(=O)NC1=CC=C(Cl)C(Cl)=C1 XMTQQYYKAHVGBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N Ala-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- LBFXVAXPDOBRKU-LKTVYLICSA-N Ala-His-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O LBFXVAXPDOBRKU-LKTVYLICSA-N 0.000 description 1
- POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N Allantoin Natural products NC(=O)N[C@@H]1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N 0.000 description 1
- WESHVRNMNFMVBE-FXQIFTODSA-N Arg-Asn-Asp Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)CN=C(N)N WESHVRNMNFMVBE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OTCJMMRQBVDQRK-DCAQKATOSA-N Arg-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OTCJMMRQBVDQRK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- URAUIUGLHBRPMF-NAKRPEOUSA-N Arg-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O URAUIUGLHBRPMF-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- HZYFHQOWCFUSOV-IMJSIDKUSA-N Asn-Asp Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HZYFHQOWCFUSOV-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- BHQQRVARKXWXPP-ACZMJKKPSA-N Asn-Asp-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N BHQQRVARKXWXPP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- FVKHEKVYFTZWDX-GHCJXIJMSA-N Asn-Ile-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N FVKHEKVYFTZWDX-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N Asp-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- YDJVIBMKAMQPPP-LAEOZQHASA-N Asp-Glu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O YDJVIBMKAMQPPP-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- ITGFVUYOLWBPQW-KKHAAJSZSA-N Asp-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ITGFVUYOLWBPQW-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- AUTNXSQEVVHSJK-YVNDNENWSA-N Glu-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O AUTNXSQEVVHSJK-YVNDNENWSA-N 0.000 description 1
- CQGBSALYGOXQPE-HTUGSXCWSA-N Glu-Thr-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O CQGBSALYGOXQPE-HTUGSXCWSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PTIIBFKSLCYQBO-NHCYSSNCSA-N Gly-Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CN PTIIBFKSLCYQBO-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- HUFUVTYGPOUCBN-MBLNEYKQSA-N Gly-Thr-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O HUFUVTYGPOUCBN-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- AVQOSMRPITVTRB-CIUDSAMLSA-N His-Asn-Asn Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N AVQOSMRPITVTRB-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 1
- HYXQKVOADYPQEA-CIUDSAMLSA-N Ile-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HYXQKVOADYPQEA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WZDCVAWMBUNDDY-KBIXCLLPSA-N Ile-Glu-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N WZDCVAWMBUNDDY-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- PNDMHTTXXPUQJH-RWRJDSDZSA-N Ile-Glu-Thr Chemical compound N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)O PNDMHTTXXPUQJH-RWRJDSDZSA-N 0.000 description 1
- URWXDJAEEGBADB-TUBUOCAGSA-N Ile-His-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N URWXDJAEEGBADB-TUBUOCAGSA-N 0.000 description 1
- BCVIOZZGJNOEQS-XKNYDFJKSA-N Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)[C@@H](C)CC BCVIOZZGJNOEQS-XKNYDFJKSA-N 0.000 description 1
- YBKKLDBBPFIXBQ-MBLNEYKQSA-N Ile-Thr-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)O)N YBKKLDBBPFIXBQ-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCOCBWDBHCUPQP-DCAQKATOSA-N Leu-Arg-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UCOCBWDBHCUPQP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- ILDSIMPXNFWKLH-KATARQTJSA-N Leu-Thr-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ILDSIMPXNFWKLH-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- QUCDKEKDPYISNX-HJGDQZAQSA-N Lys-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QUCDKEKDPYISNX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- NCZIQZYZPUPMKY-PPCPHDFISA-N Lys-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O NCZIQZYZPUPMKY-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- RIJCHEVHFWMDKD-SRVKXCTJSA-N Lys-Lys-Asn Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RIJCHEVHFWMDKD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- MUYQDMBLDFEVRJ-LSJOCFKGSA-N Met-Ala-His Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 MUYQDMBLDFEVRJ-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- FPTXMUIBLMGTQH-ONGXEEELSA-N Phe-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 FPTXMUIBLMGTQH-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- OXUMFAOVGFODPN-KKUMJFAQSA-N Phe-Asn-His Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N OXUMFAOVGFODPN-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ZIQQNOXKEFDPBE-BZSNNMDCSA-N Phe-Lys-His Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N ZIQQNOXKEFDPBE-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- BXLYSRPHVMCOPS-ACZMJKKPSA-N Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO BXLYSRPHVMCOPS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ILZAUMFXKSIUEF-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ILZAUMFXKSIUEF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 1
- RFKVQLIXNVEOMB-WEDXCCLWSA-N Thr-Leu-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)O)N)O RFKVQLIXNVEOMB-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- 206010043866 Tinea capitis Diseases 0.000 description 1
- HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N Tyr-Gly Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=C(O)C=C1 HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- PMDWYLVWHRTJIW-STQMWFEESA-N Tyr-Gly-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 PMDWYLVWHRTJIW-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- ZOBLBMGJKVJVEV-BZSNNMDCSA-N Tyr-Lys-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O ZOBLBMGJKVJVEV-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- BGFCXQXETBDEHP-BZSNNMDCSA-N Tyr-Phe-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BGFCXQXETBDEHP-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- SCZJKZLFSSPJDP-ACRUOGEOSA-N Tyr-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SCZJKZLFSSPJDP-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 238000011481 absorbance measurement Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 230000004931 aggregating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 229960000458 allantoin Drugs 0.000 description 1
- OFCNXPDARWKPPY-UHFFFAOYSA-N allopurinol Chemical compound OC1=NC=NC2=C1C=NN2 OFCNXPDARWKPPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003459 allopurinol Drugs 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000001818 capillary gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 239000013578 denaturing buffer Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229920000591 gum Polymers 0.000 description 1
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 1
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 229920001427 mPEG Polymers 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000000885 nephron Anatomy 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- AHWALFGBDFAJAI-UHFFFAOYSA-N phenyl carbonochloridate Chemical class ClC(=O)OC1=CC=CC=C1 AHWALFGBDFAJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 238000005932 reductive alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 125000000467 secondary amino group Chemical class [H]N([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 208000009189 tinea favosa Diseases 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0012—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0012—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7)
- C12N9/0044—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on other nitrogen compounds as donors (1.7)
- C12N9/0046—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on other nitrogen compounds as donors (1.7) with oxygen as acceptor (1.7.3)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Oblast techniky
Předložený vynález se týká přečištění a chemické modifikace proteinů, za účelem prodloužení jejich životnosti v oběhovém systému a snížení jejich imunogenicity.Zejména se vynález týká odstranění agregátů z urát oxidázy (urikázy), větších než oktamery před konjugací poly(ethylenglykolů) nebo poly(ethylenoxidů). Toto podstatně eliminuje imunogenicitu urikázy bez ohrožení její urikolytické aktivity.
Dosavadní stav techniky
Tvrzení obsažená v této kapitole nesestávají z uznání předchozí techniky, ale místo toho reflektují vlastní subjektivní komentáře a interpretace vynálezců na stav techniky v období, kdy byl vynález prováděn. Tyto interpretace mohou zahrnovat osobní, dříve nezveřejněné pochopení podstaty věci vynálezci, kterážto pochopení nejsou sama o sobě součástí předchozí techniky.
Urátoxidázy (urikázy, E.C.1.7.3.3) jsou enzymy, které katalyzují oxidaci kyseliny močové na více rozpustný produkt, allantoin, metabolit purinu, který je snadněji vylučován. Lidé neprodukují enzymaticky aktivní urikázu, což je následek několika mutací v genu urikázy získaných během evoluce ve vyšší primáty. Wu,X, et al., (1992) J Mol Evol 34:78-84. Jako následek může u citlivých individuí docházet k nadměrnému koncentrování močové kyseliny v krvi (hyperurikemie - nadbytek kyseliny močové v krvi) a v moči (hyperurikosurie - zvýšené vylučování kyseliny močové močí), které může vést k bolestivé artritidě (dna), znetvořující ložiska urátu (tofi) a selhání ledvin. U některých postižených individuí dostupná léčiva jako allopurinol (inhibitor syntézy močové kyseliny) přinášejí léčbu limitovanou nežádoucími účinky nebo neposkytují adekvátně úlevu při těchto stavech. Hande,
KR, etal., (1984) Am J Med 76: 47-56, Fam, AG, (1990) Bailliere’s Clin Rheumatol « «to *· ·· • to « · « to · • · · ♦ · * • · · · · · * • to · · · ·
«.*· ·· *· ··*·
4:177-192. Injekce urikázy mohou snížit hyperurikemii a hyperurikosurii alespoň přechodně. Přestože je urikáza pro lidi cizí protein, už první injekce nemodifikovaného proteinu z Aspergillus flavus indukovala anafylaktické reakce u několika procent léčených pacientů (Pui, CH, et al., (1997) Leukemia 11:1813-1816), ale imunologické odpovědi omezují jeho využití pro chronickou nebo intermitující léčbu. Donadio, D, etal., (1981) NouvPresse Méd 10:711-712, Leaustic, M, etal., (1983) Rev Rhum Mal Osteoartic 50:553-554.
US patentová žádost č. 09/370 084 a publikovaná mezinárodní žádost č. PCT/US99/17 514 zveřejňuje poly(ethylenglykol) urátoxidázu (PEG-urikázu), která si ponechává alespoň 75% urikolytické aktivity nekonjugované urikázy a má podstatně sníženou imunogenicitu. V jedné takto přečištěné urikáze, je každá podjednotka kovalentně konjugována s průměrně 2 až 10 řetězci PEG, ve kterém každá molekula PEG má molekulová hmotnost mezi 5 kDa a 100 kDa.
O agregaci proteinů je známo, že zvyšuje imunogenicitu proteinů. Toto porozumění přispělo k vývoji metod pro záměrné agregování proteinů způsobem jakým je teplotní denaturace a zesítění proteinů po jejich vystavení glutaraldehydu před použitím vakcínových prostředků při imunizaci zvířat za účelem produkce antisér.
Neúmyslné agregování proteinů přispívalo k imunizaci nebo sensitizaci během klinického využití léčebných proteinů, tj. lidský gama globulin (Henney etal., (1968) N.Engl.J.Med. 278:2244-2246) a lidský růstový hormon (Moore et. al., (1980) J. Clin. Endocrinol. Metab. 51:691- 697).
Příspěvek agregátů na inumogenicitu lidského interferonu alfa byl ukázán na BALB\c myši (Braun etal., (1997) Pharm. Res. 14:1472-1478) a pro měření byl vyvinut imunosorbent kvantitativní rozbor spojený s enzymem (ELISA) (Braun etal., (1997) Pharm. Res. 14:1394-1400).
Oproti známým účinkům agregátů na imunogenicitu proteinů, nejsou zatím k dispozici žádné studie o účinku agregátů na imunogenicitu proteinů konjugovaných s poly(alkylglykoly) jako je například PEG. Je třeba konjugátů poly(alkylglykol)urikázy, které dostatečně eliminují imunogenicitu urikázy, aniž by ovlivňovaly její urikolytickou aktivitu. Předložený vynález takové prostředky poskytuje.
• · · é » · « · · * · · · « ♦ · ·' · · ·» 4 *4 · · ♦ · » ·
Podstata vynálezu
Konjugace proteinů s poly(alkylglykoly), zvláště s PEG, poskytuje konjugáty se sníženou imunogenicitou a zvýšenou dobou setrvání v krevním oběhu. Při pokusu vyrobit v podstatě neimunogenické konjugáty urikázy, které si ponechají téměř veškerou urikolytickou aktivitu prostředku nemodifikované urikázy, bylo objeveno, že nepatrné množství velkých agregátů urikázy v počátečním materiálu po opakovaném vstříknutí PEG konjugátů připravených z urikázy obsahující takové agregáty, byly překvapivě účinné jak při vyvolání tvorby protilátek, tak při urychleném odstranění z oběhu, pro které jsou oba nežádoucí. Překvapivě předkládaní vynálezci objevili, že zvýšená imunogenicita a urychlené odstranění nebyly kvůli přítomnosti dobře definovaných agregátů vhodné velikosti podjednotky urikázy, které jsou větší než přirozený tetramer, tj. agregáty obsahující osm podjednotek (oktamery). Oktamerická forma urikázy je přítomna v dostatečně vysokých koncentracích ve většině prostředcích urikázy, a je detekována pomocí absorbance v UV světle, tj. při 214 nm nebo 276 nm, nebo pomocí příspěvku k indexu lomu nebo jiných měření koncentrace proteinů. Přesto bylo objeveno, že oktamery samy o sobě minimálně přispívají k imunogenicitě a urychlenému odstraňování konjugátů PEG-urikázy oproti dosti malým množstvím podstatně větších agregátů, které jsou v UV světle nedetekovatelné při podmínkách testu, ale jsou snadno detekovány pomocí statického (Raleighova) nebo dynamického rozptylu světla. Proto tedy bylo shledáno, že odstranění těchto malých množství velmi velkých agregátů před konjugací s PEG v překvapivém množství snižuje imunogenicitu a urychlené odstraňování výsledných konjugátů PEG-urikázy.
Jedním provedením předloženého vynálezu je přečištěná urátoxidáza (urikáza) téměř bez agregátů větších než oktametry. Výhodněji je urikázou savčí urikáza. Ještě výhodněji je urikáza z jater prasete, z hovězích jater nebo ovčích jater. Jedním z hledisek tohoto výhodného provedení je, že jde o rekombinnatní urikázu.
Z jiného hlediska tohoto výhodného provedení je, že urikáza má v podstatě sekvenci urikázy z prasečích, hovězích, ovčích jater nebo jater paviána. Výhodněji je urikáza chimérická. Ještě výhodněji je urikáza PKS urikázou. Z dalšího hlediska tohoto výhodného provedení je, že urikáza má v podstatě sekvenci urikázy z jater paviána, ve které tyrosin 97 byl nahrazen histidinem. Výhodněji obsahuje urikáza N-konec * · • · ·· 444 4
4» 4 • 4 4 4 4 4
4 < 4
44444 nebo C-konec, kde je urikáza zkrácena na jednom konci nebo na obou. Ještě výhodněji je urikáza mikrobiální urikáza nebo urikáza z plísně. Nejlépe je urikáza z plísně nebo mikrobiální urikáza izolována z Aspergillus flavus, Arthrobacter globiformis, Bacillus sp. nebo Candida utilis neboje rekombinantním enzymem mající v podstatě sekvenci jedné z popsaných urikáz. Alternativně je urikáza urikázou bezobratlých. Výhodně je urikáza bezobratlých izolována z Drosophila mefanogaster nebo Drosophila pseudoobscura nebo je rekombinantním enzymem majícím v podstatě sekvenci z výše uvedených urikáz. Z dalšího hlediska výhodného provedení tohoto vynálezu je urikáza rostlinnou urikázou . Výhodněji je rostlinnou urikázou izolovanou z kořenových hlíz Glycine max nebo je rekombinantním enzymem mající v podstatě sekvence uvedených urikáz.
Z dalšího hlediska výhodného provedení tohoto vynálezu je urikáza popsána výše konjugována s poly(ethylenglykolem) nebo s poly(ethylenoxidem) za takových podmínek, že je urikáza v konjugátu téměř bez agregátů větších než oktamery. Výhodně je urikáza konjugována s poly(ethylenglykolem) nebo s poly(ethylenoxidem) přes uretan (karbamát), sekundární amin nebo amidovou vazbu. Z dalšího hlediska výhodného provedení tohoto vynálezu je poly(ethylenglykol) monomethoxypoly(ethylenglykol). Z dalšího hlediska výhodného provedení tohoto vynálezu je poly(ethylenglykol) nebo poly(ethyleoxid) mající molekulovou hmotnost mezi 5 kDa a 30 kDa. Výhodně má poly(ethylenglykol) nebo poly(ethyleoxid) molekulovou hmotnost mezi 10 kDa a 20 kDa. Průměrný počet řetězců výše zmíněného poly(ethylenglykolu) nebo poly(ethylenoxidu) je v rozmezí 2 až 12 řetězců na jednotku urikázy. Výhodně je průměrný počet řetězců výše zmíněného poly(ethylenglykolu) nebo poly(ethylenoxidu) v rozmezí 6 až 10 řetězců na jednotku urikázy. Ještě výhodněji je průměrný počet řetězců výše zmíněného poly(ethylenglykolu) nebo poly(ethylenoxidu) v rozmezí 7 až 9 řetězců na jednotku urikázy. Výhodně je poly(ethylenglykol) nebo poly(ethylenoxid) lineární. Výhodněji je poly(ethylenglykol) nebo poly(ethylenoxid) větvený.
Předložený vynález také poskytuje farmaceutický prostředek na snížení hladin kyseliny močové v lidských tekutinách nebo tkáni, který obsahuje výše popsané konjugáty urikázy a farmaceuticky přijatelný nosič. Výhodně je prostředek stabilizován lyofilizací a rozpuštěn a rekonstituován pro poskytnutí roztoku vhodného pro perenterální podání.
»· *· • · • · • · »« · »1« ·« • · 9 · »
9 9 9 * • »99 9 9
9 9 9 9 • 99 99 999 9
Dalším provedením tohoto vynálezu je způsob přečištění urikázy mající sníženou imunogenicitu, obsahující krok separace agregátů urikázy větších než oktamery ve frakci urikázy a vyloučení frakcí obsahující tyto agregáty. Výhodně krok detekce sestává z měření rozptylu světla.
Předložený vynález také poskytuje izolovanou urikázu připravenou způsobem popsaným výše.
Krátký popis výkresů
Obrázek 1 znázorňuje aktivitu urikázy, celkové koncentrace proteinů a solí ve frakcích na iontově výměnné koloně od Pharmacia Biotech Mono Q (1 x 10 cm). Aktivita urikázy byla měřena při teplotě místnosti pomocí sledování nárůstu v absorbanci při 292 nm 100 μΜ kyseliny močové ve 200 mM borátu sodném, pH 9,2. Totální protein byl stanoven z plochy pod křivkou absorbčního píku urikázy v analýze „size-exclusion“ HPLC.
Obrázek 2 znázorňuje analýzu „size-exclusion“ HPLC na koloně Pharmacia Superdex 200 (1 x 30 cm) náplně a vybrané frakce z preparativní Mono Q chromatografie urikázy z prasete obsahující mutace R291K a T301S (PKS urikáza) ukazující data získaná pomocí detektoru rozptylu světla při 90 °C (horní křivka) a pomocí absorbance při 276 nm (spodní křivka). Odlišné síly signálů z tetramerních, oktamerních a ještě více agregovaných forem urikázy v nefrakciovaném vzorku (náplň) a dalších frakcí jsou evidentní. Náplň byla naředěna 1/5 pufrem Mono Q pro kolony, frakce 5 byla naředěna 1/3 a frakce 6 byla naředěna 1/9. Frakce 5 a 6 byly sloučeny pro tvorbu lázně s nízkou koncentrací solí.
Obrázek 3 znázorňuje „size-exclusion“ kvantitativní rozbor frakcí z Mono Q kolony na obrázku 1, ukazující data získaná pomocí detektoru rozptylu světla při 90 °C a pomocí absorbance při 276 nm, jak je tomu na obrázku 2. Frakce zobrazené na tomto obrázku byly použity k tvorbě lázně s vysokou koncentrací solí, odkud byly připraveny PEG konjugáty a vstříknuty do BALB/c myši. Aktivity výsledného séra a imunologické odpovědi v BALB/c myši jsou ukázány na obrázcích 5 a 6.
Obrázek 4 znázorňuje množství oktameru, určeného pomocí absorbance při 276 nm a pomocí detektoru rozptylu světla při 90 °C, spočteného z dat na obrázku 2 • · • φ ······ g titt *·· «·· ♦· *· ···· a 3 nefrakciované PKS urikázy a vybraných frakcí z preparativní chromatografie PKS urikázy na koloně Mono Q (obrázek 1).
Obrázek 5 znázorňuje UV kvantitativní rozbory, jako na obrázku 1, aktivity urikázy po 4 hodinové inkubaci při 37 °C, v séru odebraném 24 hodin po každé ze šesti týdenních injekcí 6 x 10-kDa PEG konjugátů PKS urikázy nebo z lázně frakcí z kolony Mono Q.
Obrázek 6 znázorňuje ELISA kvantitativní rozbor tvorby IgG protilátky proti PEG konjugátům PKS urikázy a proti PEG konjugátům lázně frakcí z kolony Mono Q zobrazených na obrázku 1, v séru odebraném 24 hodin po každé ze šesti týdenních injekcí samičky myši BALB/c 0,2 mg proteinu urikázy na 20 g tělesné váhy. Pro každou myš jsou ukázána data z odebrané krve vykrvácení 24 hodin po první až šesté injekci z leva do prava. Podmínky kvantitativního rozboru jsou popsány v příkladu 6. Data pro osm myší v každé skupině byla uspořádána podle vzrůstající imunitní odpovědi z leva do prava.
Podrobný popis výhodných provedení
Předchozí studie ukázali, že pokud je dosaženo výrazného snížení imunogenicity a/nebo antigenicity urikázy pomocí konjugace s PEG (PEGylace), je to neustále spojeno s podstatnou ztrátou urikolytické aktivity. Předložený vynález zahrnuje zjištění, že malá množství agregátů urát oxidázy větších než oktamery podstatně přispívají k imunogenicitě a indukci urychlení odstraňování konjugátů PEG-urikázy. Tento objev je s největší pravděpodobností aplikovatelný i na jiné proteiny než jsou urikázy, včetně interferonů a růstových faktorů.
Bezpečnost, vhodnost a efiktivita bioléčiv jsou všechny nepříznivě ovlivněné snížením jejich potenciálu a z toho vyplývajícím zvýšením podávané dávky. Proto je třeba bezpečných a účinných alternativních prostředků na snížení zvýšených hladin kyseliny močové v tělesných tekutinách, zahrnující krev a moč. Předložený vynález poskytuje způsob výroby urikázy, která vylučuje agregáty urikázy větší než oktametry pro použití v syntéze PEG-urikázy. Tato PEG-urikáza si ponechává veškerou nebo téměř veškerou urikolytickou aktivitu nemodifikovaného enzymu. Předložený vynález také poskytuje přečištěnou urikázu v podstatě bez agregátů větších než oktamery.
Slovním spojením „v postatě bez“ se míní, že přečištěná urikáza neobsahuje více než 2 % výhodně více než 1 % agregátů větších než oktamery.
• fc fc ·
9
9 ·
9999
9 fc • · · • · ·· ·· · fc fc • 9 9 • · fc·· 999 9
9C
Předložený vynález poskytuje způsob přečištění urikázy jakým je, že agregáty větší než oktamery jsou vyloučeny z přečištěného přípravku. Protože tyto větší agregáty jsou vysoce imunogenické, jejich přítomnost v prostředku přečištěné urikázy je nežádoucí. Způsob zahrnuje sledování frakcí kolony pomocí rozptylu světla spíše než ultrafialovou absorbancí při 280 nm, protože agregáty mohou být také zředěny aby byly detekovány pomocí absorbance v ultrafialovém světle. Přečištěná urikáza je potom konjugována s ve vodě rozpustnými polymery, nejlépe poly(ethylenglykoly) nebo poly(ethylenoxidy) jak bylo popsáno v souhrnu US přihlášky s pořadovým číslem 09/370 084.
Odstranění agregátů urikázy z přípravku obsahujícího převážně tetramerní urikázu může být proveden jakýmikoli metodami známými v oboru, včetně „sizeexclusion“ chromatografie, ultrafiltraci přes membránu s mikropóry a centrifugách včetně ultracentrifugace. Separační metoda může zahrnovat separaci a analýzu frakcí a nepřijetí nebo vyloučení těch frakcí, které obsahují nadměrné množství velkých agregátů. Výsledný přípravek urikázy je vhodnější pro syntézu v podstatě neimunogenických konjugátů urikázy než je nefrakciovaná urikáza. Pro opakované podávání je důležité, že PEG-konjugáty proteinů, tj. PEG-urikázy mají nižší imunogenicitu a progresivně nevyvolávají rychlejší odstraňování z krevního oběhu po opakovaných dávkách.
Vynález také poskytuje farmaceutické prostředky konjugátů polymer-urikázy. Tyto konjugáty jsou v podstatě neimunogenické a ponechávají si alespoň 75 %, lépe 85 % a nejlépe 95 % nebo více urikolytické aktivity nemodifikovaného enzymu.
Urikázy vhodné pro konjugaci s ve vodě rozpustnými polymery zahrnují přírodně se vyskytující urátoxidázy izolované z bakterií, plísní a tkání rostlin a zvířat, jak obratlovců tak bezobratlých, stejně jako rekombinantní formy urikázy, včetně mutovaných, hybridních a/nebo zkrácených enzymaticky aktivních obměn urikázy. Ve vodě rozpustné polymery vhodné k použití v předloženém vynálezu zahrnují lineární a větvené poly(ethylenglykoly) nebo poly(ethylenoxidy), všechny běžně známy jako polyethylenglykoly. Příklady větvených PEG jsou předmětem patentu US 5 643 575. Jedním výhodným příkladem lineárního PEG je monomethoxyPEG, obecného vzorce CH3O.(CH2CH2O)nH, kde se n pohybuje v rozmezí od 100 do 2 300.
Dalším provedením předloženého vynálezu je konjugát urátoxidázy (urikázy), který si ponechává alespoň 75 % urikolytické aktivity nekonjugované urikázy a má • · · · » * • · · · · · · • · · · · · ··· · · ·· ···· podstatně sníženou imunogenicitu. Urikáza může být z hlediska vynálezu rekombinantní. Ať rekombinantní nebo ne, urikáza může být savčího původu.
Z dalšího hlediska provedení může být urikáza urikázou z prasečích a/nebo hovězích nebo ovčích jater. Z dalšího hlediska provedení může být urikázy chimérická. Chimérická urikáza může obsahovat části urikázy z jater prasete a/nebo z jater paviána. Například chimérická urikáza může být urikáza z jater prasete obsahující mutace R291K a T301S (PKS urikáza). Popřípadě může být urikáza z jater paviána, ve které je tyrosin 97 nahrazen histidinem, čímž byla specifická aktivita zvýšena alespoň o 60 %. Urikáza v tomto vynálezu, jedno jakého původu může být také ve formě, která je zkrácena buď na N-konci nebo na C-konci nebo na obou koncích.
Stejně tak může být danou urikázou urikáza plísně nebo urikáza mikrobiálního původu. V dalším provedením předloženého vynálezu může být urikáza plísně nebo mikrobiální urikáza přirozeně se vyskytující nebo rekombinantní forma urikázy z Aspergillus fíavus, Arthrobacter globiformis, Bacillus sp. nebo Candida utilis.
Popřípadě to může být urikáza bezobratlých jako je například přirozeně se vyskytující urikáza nebo rekombinantní forma urikázy z Drosophila melanogaster nebo Drosophila pseudoobscura. Urikáza tohoto vynálezu může být také urikázou z rostlin, například přírodně se vyskytující nebo rekombinantní forma urikázy z kořenové hlízy sóji (Glycine max). PEG má průměrnou molekulovou hmotnost mezi 5 kDa do 100 kDa, lépe má PEG průměrnou molekulovou hmotnost mezí 8 kDa do 60 kDa a nejlépe má PEG průměrnou molekulovou hmotnost mezi 10 kDa do 40 kDa, jako například od 10 do 20 kDa. Průměrný počet kovalentně propojených řetězců PEG je od 2 do 12 řetězců na jednotku urikázy, lépe je průměrný počet kovalentně propojených řetězců PEG od 6 do 10 řetězců na jednotku urikázy a nejlépe je průměrný počet kovalentně propojených řetězců PEG od 7 do 9 řetězců na jednotku urikázy. Z dalšího hlediska provedení tohoto vynálezu, je urikáza tetramer. Řetězce PEG jsou kovalentně propojené s urikázou přes uretanové (karbamátové) vazby, vazby sekundárních aminů a/nebo amidové vazby. Pokud je urikáza rekombinantní formou jakékoli urikáz zde zmíněných, rekombinantní forma je v podstatě sekvencí přirozeně se vyskytující formy.
Vhodná savčí urikáza je rekombinantní chimérická urikáza z prasete-paviána, sestávající z částí sekvencí urikázy z jater prasete a urikázy z jater paviána, obě byly již dříve určeny Wu, etal., (1989). Příklad takové chimérické urikázy obsahuje
288 aminokyselin ze sekvence prasete (SEQ ID NO:1) a posledních 16 aminokyselin ze sekvence paviána (SEQ ID NO:2). Hershfield, etal., International Publication WO 00/08 196, Uráte Oxidase, vydaný 17.února 2000. Zatímco poslední sekvence se liší od sekvence prasete pouze ve dvou pozicích, mající lysin (K) na místě argininu ve zbytku 291 a serin (S) na místě threoninu ve zbytku 301, odkazuje se na tento mutant jako na prasečí-K-S nebo PKS urikázu (SEQ ID NO:3). PKS urikáza má ještě jeden lysinový zbytek a tak má o jedno potenciální místo pro PEGylaci než sekvence z prasete nebo paviána.
cDNA pro různé savčí urikázy, včetně PKS urikázy byly subklonovány a byly určeny optimální podmínky pro expresi v E. coli s použitím standardních metod. Viz Erlich, HA, (Ed.)(1998) PCR Technology. Principles and Aplications for DNA Amplfication. New York: Stockton Press, Sambrook, J, etal., (1989) Molecular Cloning. A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press. Rekombinantní urikázy byly získány, přečištěny a byla stanovena jejich stabilita a aktivita s použitím modifikace standardních kvantitativních rozborů. Viz Fridovich, I, (1965) J Biol Chem 240: 2491-2494, Nishimura, et al., (1979) a příklady 1 a 5.
V dalším provedení vynálezu je urikáza konjugována přes biologicky stabilní, netoxickou, kovalentní vazbu k relativně malému počtu řetězců PG. Takové vazby zahrnují uretanové (karbamátové) vazby, vazby sekundárního amidu a amidové vazby. Různé aktivované PEG vhodné pro takovou konjugaci jsou komerčně dostupné od Shearwater Polymers, AL.
Například uretanové vazby u urikázy mohou být vytvořeny inkubováním urikázy v přítomnosti derivátů PEG sukcimidylkarbonátu (SC) nebo p-nitrofenylkarbonátu (NPC). SC-PEG mohou být syntetizovány použitím postupu popsaném v patentu US 5 612 460. NPC-PEG může být syntetizován reakcí PEG s p-nitrofenylchlorformiátem podle postupů popsaných v Veronese, FM, etal., (1985) Appl Biochem Biotechnol 11:141-152 a v patentu US 5 286 637. Postupy popsané v patentu 637 jsou upraveny pro PEG vyšší molekulové hmotnosti přizpůsobením koncentrací reaktantů za účelem udržení podobné stechiometrie. Alternativní postup syntézy NPC-PEG je popsán v Buttner, W, etal., East German Patent Specification DD 279 486 A1.
Amidové vazby u urikázy mohou být získány použitím PEG derivovaného N-hydroxysukcinamidesteru kyseliny karbonové (Shearwater Polymers). Vazby sekundárních aminů mohou být vytvořeny použitím • ·
A · · ···· · lv ··· ··· ··· ·· ··
2,2,2-trifluorethansulfonyl-PEG (tresyl PEG, Shearwater Polymers) nebo redukční alkylaci s použitím PEG aldehydu (Shearwater Polymers) a kyanoborohydridu sodného.
V konjugátech obsahujících PEG s molekulovou hmotností 10 kDa byl maximální počet řetězců PEG, které byly spojeny na jednotku a ponechávající si alespoň 75 % urikolytické aktivity nemodifikovaného enzymu 12 řetězců pro savčí urikázu (tj. mutovaná forma urikázy z prasete, viz podmínky kvantitativního rozboru v příkladu 5). Další význam PEGylace odpovídá 40 % všech aminoskupin. V dalším provedení vynálezu je průměrný počet spojených řetězců PEG na podjednotku urikázy mezi 2 a 12. Ve výhodnějším provedení je průměrný počet kovalentně vázaných řetězců PEG na podjednotku urikázy mezi 6 a 10. Ve výhodnějším provedení je průměrný počet kovalentně vázaných řetězců PEG na jednotku urikázy mezi 7 a 9. V jiném provedení je molekulová hmotnost PEG použitého ke kopulační reakci mezi 5 kDa a 30 kDa, lépe mezi 10 kDa a 20 kDa.
Existuje mnoho faktorů, které mohou ovlivnit volbu optimální molekulové hmotnosti a počet řetězců PEG pro konjugaci dané formy urikázy. Obecně redukce nebo eliminace imunogenicity bez značné ztráty urikolytické aktivity vyžaduje spojení poměrně více řetězců PEG menší molekulové hmotnosti oproti poměrně méně řetězců PEG vyšší molekulové hmotnosti. Podobně každá odlišná forma urikázy má odlišné optimum s ohledem jak na velikost tak na počet řetězců. Optimální počet řetězců PEG a molekulová hmotnost PEG může být snadno určena použitím postupu uvedených v tomto dokumetu.
Pokud byly PEG konjugáty savčí urikázy připraveny z přečištěných tetramerních a oktamerních forem enzymu (obsahujícího čtyři nebo osm podjednotek přibližné molekulové hmotnosti 35 kDa), ukáže se nesmírně snížená imunogenicita u myši, oproti střední imunogenicitě prostředků PEG konjugátů urikázy obsahující velké agregáty (viz obrázek 6) a velmi vysoké imunogenicitě nemodifikovaného enzymu.
Přečištěné prostředky přírodně se vyskytujících a rekombinantních urikáz obvykle obsahují směs velmi velkých agregátů enzymu a navíc tetramerní (140 kDa) a oktamerní (280 kDa) formy. Procentuální obsah každé urikázy prostředku, která je ve formě buď tetramerní nebo oktamerní se obecně různí od 20 % do 95 % (viz obrázek 2-4). Navzdory skutečnosti, že nePEGylované agregáty několika jiných proteinů jsou vysoce imunogenické (viz např. Moore, WV, etal., (1980) • ·
J Clin Endocrinol Metab 51:691-697), předešlé studie PEG-urikázy nepopisují žádnou snahu omezit množství agregátů, za předpokladu že potenciální imunogenicita PEG-modifikovaných agregátů nebyla brána v úvahu. Na základě pozorování předkládaných vynálezců se jeví pravděpodobné, že takové agregáty byly přítomny v prostředcích enzymu používaných pro předchozí syntézu PEG-urikázy. Jejich přítomnost činila úkol přípravy neimunogenních konjugátu složitější. Také se zdá, že velká ztráta urikolytické aktivity pozorovaná v předchozí snaze u PEG-urikázy byla spojena s velkým počtem řetězců nízké molekulové hmotnosti PEG, které byly spojeny. Na druhou stranu způsoby přečišťování urikázy a PEGylace popsané v tomto dokumentu připouštějí kovalentní připojení až 12 řetězců PEG na jednotku zatímco si ponechávají víc než 75 % urikolytické aktivity alespoň určité urikázy, tj. PKS urikázy (mutované formy urikázy z prasete) a enzymu z termofilního Bacillus sp.
V dalším výhodném provedení mohou být před konjugací odstraněny v podstatě všechny velké agregáty enzymu iontově-výměnnou chromatografií (obrázky 1 až 3) nebo „size-exclusion“chromatografií při pH mezi 9 a 10,5 , výhodně 10,2 , a získat tak v podstatě prostředek urikázy s PEG bez agregátů. Molekulární hmotnost urikázy v každé frakci z preparativní kolony je monitorována jakoukoliv analytickou metodou založenou na velikosti včetně například HPLC, běžné „sizeexclusion “ chromatografie, centrifugace, rozptylu světla, kapilární elektroforézy nebo gelové elektroforézy v nedenaturujícím pufru. Pro urikázu bez agregátů izolovanou použitím „size-exclusion“chromatografii, lze shromažďovat pouze frakce forem enzymu mezi 140 kDa až 280 kDa a tyto mohou být použity pro konjugaci s PEG.
Pro tetramerní a oktamerní urikázu izolovanou použitím iontově-výměnné chromatografie jsou analyzovány frakce z iontově-výměnné kolony s ohledem na velikost určující, která frakce obsahují dostatečné množství tetramerních a oktamerních forem bez velkých agregátů detekovatelných pomocí rozptylu světla.
V přečištěném produktu by proto mělo být obsaženo jenom 1 % nebo méně nežádoucích velkých agregátů z celkové urikázy.
Výsledky zde prezentované naznačují, že pokud je dostatečně PEGylováno, formy PKS urikázy větší než oktamer iniciují zvýšené odstraňování (obrázek 5) a jsou v myši poněkud imunogenické (obrázek 6). Oproti tomu konjugáty připravené z urikázy, které jsou v podstatě bez agregátů (detkovatelných pomocí rozptylu světla) mohou být opakovaně injektovány alespoň šestkrát během jednotýdenních • ·
intervalů a ještě k tomu není zaznamenána zvýšená míra odstraňování (obrázek 5) ani detekována tvorba protilátek , což je měřeno citlivou metodou ELISA - analýza s enzymem navázaným na immunosorbent (obrázek 6). Použití vysoce přečištěné tetramerní nebo oktamerní urikázy dále rozlišuje zlepšené konjugáty předloženého vynálezu od přípravku PEG-urikázy popsané dříve. Oproti tomu značné množství velkých agregátů v přípravku urikázy použité předešlými vynálezci je mohlo vést ke spojení velkého počtu řetězců PEG ve snaze potlačit imunogenicitu. Následkem toho byla enzymatická aktivita výsledných konjugátů značně snížena.
Konjugáty PEG-urikázy v předloženém vynálezu jsou použitelné pro snížení hladin kyseliny močové v tělních tekutinách a tkáních savců, především lidí a mohou být proto použity pro léčbu zvýšených hladin kyseliny močové spojených s potížemi jako je dna, tofi, ledvinová nedostatečnost, transplantace orgánu a zhoubné nemoce. Konjugáty PEG-urikázy mohou být injektovány do savce, který má nadměrné hladiny kyseliny močové, jakoukoliv cestou včetně nitrožilní, podkožní, nitrokožní, nitrosvalové a nitropobřišnicové cesty. Alternativně mohou být konjugáty PEGurikázy aerosolovány a inhalovány. Viz Patton, JS, (1996) Adv Drug Delivery Rev 19:3-36 a patent US 5 458 135. Účinná dávka PEG-urikázy předloženého vynálezu závisí na hladině kyseliny močové a velikosti individua. V provedení z tohoto hlediska vynálezu je PEG-urikázy podávána ve farmaceuticky přijatelné inertní substanci určené k přenosu léčebné látky nebo v ředidle v množství pohybujícím se od 10 pg do 1 g. Ve výhodném provedení je podáváné množství od 100 pg do 500 pg. Výhodněji je podávána konjugovaná urikáza v množství od 1 mg do 100 mg, jako například 5 mg, 20 mg nebo 50 mg. Hmotnosti uvedené na množství dávky provedení se vztahují k množství proteinu v konjugátu.
Farmaceutický prostředek obsahující PEG-urikázu může být připraven běžnými postupy, tj. jak je posáno v Gennaro, AR (Ed.) (1990)
Remingtoďs Pharmaceutical Science, 18 th Edition, Easton, PA: Mack Publishing Co. Vhodné inertní substance určené k přenosu léčebné látky pro přípravu injektovatelného roztoku zahrnují pufr fosfátové sole, Ringerů roztok, vodu, polyoly a glycerol. Farmaceutické prostředky pro parenterální injekci obsahují farmaceuticky vhodné sterilní vodné nebo nevodné tekutiny, disperse, suspenze nebo emulze stejně jako sterilní prášky pro rekonstituci do sterilních injektovatelných roztoků nebo disperzí těsně před použitím. Tyto prostředky mohou obsahovat ještě další složky
| • · | • • · | ·· · | ♦ | ·* • | • | • * » | |
| • | • ♦ | • | • | • | • | ||
| • | • · | • | • | • | • | ||
| • · · | ··· | • · · | « · | • · | ·· · · |
jakými jsou například konzervační přísady, rozpouštědla, stabilizátory, smáčedla, emulgátory, pufry, antioxidanty a ředidla.
PEG-urikáza může být dodávána jako regulaci uvolňující prostředek při implantaci do individua pro regulaci zvýšených hladin kyseliny močové v tělních tekutinách. Například pomléčná kyselina, regeneratovatelný kolagen, poly-L-lysin, alginát sodný, želatnová guma, chitosan, agaróza, vícevrstevné lipozomy a mnoho dalších běžných depotních prostředků obsahující bioerodibilní a biodegradibilní materiály, které se mohou vyvinout v biologicky aktivní prostředky. Tyto materiály pokud implantovány nebo injektovány se postupně rozkládají a uvolňují aktivní materiál do okolní tkáně. Například jedna metoda enkapsulace PEG-urikázy obsahuje postup odhalený v patentu US 5 653 974. V tomto vynálezu je jednoznačně bráno v úvahu použití bioerodibilních, biodegradibilních a ostatních depotních prostředků. Použití infúzních pump a matrix zachycujících systémů pro dodání PEGurikázy je také v rámci předloženého vynálezu.
PEG-urikáza může být také s výhodou uzavřena do micel nebo lipozómů. Technologie enkapsulace lipozómů je v oboru dobře známa. Viz Lasic, D, et al., (Eds.) (1995) Stealth Liposomes. Boča Raton, FL: CRC Press.
Farmaceutický prostředek PEG-urikázy tohoto vynálezu zvyšuje potřebu hemodialýzy u pacientů s vysokém rizikem selhání ledvin indukovaným ureátem, tj. u příjemce transplantovaných orgánů (viz Venkataseshan, VS, etal., (1990) Nephron 56:317-321) a u pacientů s maligními nemocemi. U pacientů s velkou akumulací krystalického ureátu (tofi) tyto farmaceutické prostředky zlepšují kvalitu života rychleji než doposud dostupná léčba.
Následující příklady, které nejsou pojímaný jako vynález limitující v jakémkoli směru, znázorňují různé aspekty odhalené výše. Tyto příklady popisují PEG-urikázu připravenou konjugací s aktivovaným PEG (tj. derivát p-nitrofenyikarbonátu) na mutovanou urikázu z prasete.
Tyto příklady poskytují odborníkovi radu, jak vyrobit v podstatě neimunogenní konjugáty urikázy, které si ponechávají alespoň 75 % urikolytícké aktivity nemodifikovaného enzymu a jsou vhodné pro opakované podávání.
, . · ,» »« ·· ·« ·· ·♦ · · · * · · ·«·»· · • ·· ··»*·· * • a aaaa·· aaa ··· ta· ·· ♦ · aaaa
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Preparativní iontově-výměnná chromatografíe urikázy
Preparativní iontově-výměnná chromatografíe urikázy byla provedena na aparatuře pro rychloproteinovou kapalnou chromatografií (FPLC) (Amersham Pharmacia, Piscataway, NJ). Mono Q kolona (1 x 10 cm, Amersham Pharmacia) byla eluována gradientem 50 mM uhličitanu sodného, pH 10,3 , 0,1 M NaCI (pufr A) až 50 mM uhličitanu sodného, pH 10,3 , 0,6 M NaCI (pufr B) při průtokové rychlosti 0,5 ml/min, s výjimkou toho, že byl vzorek nanesen při nižší průtokové rychlosti. Tato technika byla použita pro frakcíonaci 25 ml roztoku PKS urikázy (pH 10,3). PKS urikáza byla získána od Bio-technology Genral Limited (Rehovot, Israel). Posledně zmíněný enzym je rekombinantní urikáza z prasete, ve které je jeden aminokyselinový zbytek lysinu (K) a jeden aminokyselinový zbytek šeřinu (S) nahrazen jedním aminokyselinovým zbytkem argininu a jedním aminokyselinovým zbytkem threoninu v původní sekvenci z prasete (Lee etal., (1988) Science 239:1288-1291), Wu et al., (1989) Proč. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 86:9412-9416). Po té co byl vzorek nanesen, byla kolona promyta 100 ml pufru A. Pík urikázy se začal vymývat na konci 31. mililitru lineárního gradientu 0 až 26% pufru B. Většina urikázy byla vymyta 7 ml pufru obsahujícího 26% pufru B. Zůstatek vylepšené urikázy byl vymyt 89 ml lineárního gradientu 26% až 100% pufru B. Byiy shromažďovány 4ml a 6ml frakce. Alikvotní část frakce 4 až 11 byla podrobena kvantitativnímu rozboru na obsah urikázy a proteinu (obrázek 1) a byla analyzována pomocí „size-exclusion“
HPLC jak je popsáno v příkladu 2 (obrázky 2 a 3). Zbývající část frakcí 5 až 10 byla spojena s PEG, jak je popsáno v příkladu 3. Na základě výsledků analýzy v příkladu 2, konjugáty PEG frakcí 5 a 6 byly smíšeny jako „lázeň o nízké koncentraci solí“ a konjugáty PEG frakcí 7 až 10 byly smíšeny jako „lázeň o vysoké koncentraci solí“ jak je naznačeno na obrázku 1.
* ·
C· 449 9 • **»
Příklad 2 „Size-exclusion“ chromatografie urikázy monitorovaná pomoc? rozptylu světla a ultrafialové absorbance „Size-exclusion“ HPLC nefrakciované PKS urikázy a vybraných frakcí z preparativní chromatografie PKS urikázy na koloně Mono Q z příkladu 1 byla provedena při teplotě místnosti na koloně Supradexu 200 (1 x 30 cm, Amersham Pharmacia Biotech). Eluát na monitoru absorbance (UV 2000) Thermo Separations HPLC (Sunnyvale, CA) byl analyzován pomocí rozptylu světla při 90 °C oproti dopadajícímu světlu s použitím MiniDawn detektoru od Wyatt Technologies (Santa Barbara, CA).
Výsledky ukázané na obrázcích 2 až 4 znázorňují rozlišení mezi tetramery, oktamery a velkými agregáty podjednotek urikázy a rozdílné podíly signálů detekovaných z těchto forem urikázy v různých vzorcích. Na rozdíl od absorpčního signálu, který je přímo úměrný produktu koncentrace krát velikost jednotky rozptylu světla. Výsledná citlivost detektoru rozptylu světla k velmi malým množstvím vysoce agregované urikázy odhalila přítomnost větších agregátů, které jsou vymyty nebo se v objemu téměř nevyskytují (přibližně 7 ml).
Příklad 3
Syntéza konjugátů PEG-urikázy
Nefrakciovaná PKS urikáza (od Bio-Technology General Limited) a urikáza ve frakcích z kolony Mono Q z příkladu 1 byla spojena s 10-kDa PEG s použitím PEG derivovaným p-nitrofenylkarbonátem (NPC-PEG) získaným od Shearwater Polymers (Huntsville, AL). Příprava NPC-PEG z PEG s použitím fenylchloroformiátů byla popsána v několika studiích (tj. Veronese, FM, et al., (1985) Appl Biochem Biotechnol 11:141-152, Kito, M, etal., (Eds.) Polyethylen glycol) Chemistry and Biological • · · • · · · · ·
Aplications. ACS Symposium Series 680 (pp. 155-176) Washington, DC: American Chemical Society). Počet řetězců 10-kDa PEG spojených s každou podjednotkou urikázy byl pomocí postupu popsaném v Kunitani, M, etal., (1991) J Chromatogr 588:125-137.
Příklad 4
Stálost a imunogenicita séra urikázy a Peg-urikázy in vivo
Konjugáty PEG rekombinantní savčí urikázy připravené podle postupu v příkladu 3 byly upraveny na 1 mg/ml ve fosfátem pufrovaném roztoku (PBS), pH 7,4 na injekci. Vzorky byly zmraženy a uskladněny dokud nebyly analyzovány nebo injektovány. Vzorky byly zahřáté na 37 °C až jednu hodinu před injektáží osmi skupin samiček myší BALB/c. Skupiny myší měly průměrnou hmotnost v rozmezí 8-22 g na počátku studie.
Hmotnosti všech myší byly sledovány a nepříznivé reakce na injekce nebo další onemocnění byla zaznamenávána. 24 hodin po každé ze šesti týdenních injekcí byla zvířata uspána ketaminem a retroorbitálně bylo získáno 100 až 200 μΙ krve, s výjimkou obětování myši pro vykrvácení, kdy bylo získáno větší množství krve. Sérum bylo připraveno z krve, která se srazila mezi 4 až 32 hodinami při 2 až 8 °C. Séra byla uskladněna při -20 °C. U sér byla analyzována urikolytická aktivita, jak je popsáno v příkladu 5 a dále byly analyzovány protilátky proti urikáze, jak je popsáno v příkladu 6.
Příklad 5
Urikolytická aktivita PEG-urikázy v séru myši injektované Peg-urikázou • » • · • · ·· · · · · Λ ί / ······ ··· ·· 9*
Kvantitativní rozbor aktivity založený na absorbanci v ultrafialovém světle (UV kvantitativní rozbor) byl proveden se 100 μΙ kyseliny močové jako substrátu v 200 mM borátu sodném, pH 9,2 , na mikrodestičce po přizpůsobení postupu podle i.Fridoviche (J Biol Chem. (1965) 240:2491-2494). Snížení absorbance při 292 nm bylo pozorováno 15 minut při teplotě místnosti na mikrodestičkách s 96 jamkami s UV-transparentním dnem (Costar, Corning, NY), s použitím čtecího zařízení mikrodestiček SpectraMAX 250 od Molecular Devices (Sunnyvale, CA). Data byla analyzována nalezením maxima sklonu (v mili-jednotkách absorbance za minutu) měření absorbance provedeného v intervalu, kdy bylo 10 až 40 % substrátu oxidováno. Výsledky získané tímto kvantitativním rozborem jsou znázorněny na obrázcích 1 a 5.
Poločas rozpadu séra myši injektované poprvé PKS urikázou spojenou se šesti PEG řetězci o 10 kDa na jednotku (6 x 10-kDa PEG PKS) byl 29 ± 4 hodiny, na základě dat séra získaného 24 hodin a 72 hodin po injekci.
V jiných experimentech bylo zjištěno, že detekovatelná urikolytícká aktivita v séru myši injektované PEG-urikázou klesá během skladování při -20 °C a že maximální obnovení této aktivity je dosaženo 4 hodinovou inkubací při 37 °C před tímto kvantitativním rozborem. Obrázek 5 ukazuje, že obnovení urikolytické aktivity po týdně opakovaných injekcí 6 x 10-kDa PEG PKS urikázy bylo největší, když byl enzym přečištěn chromatografií na Mono Q koloně, jak je tomu v příkladu 1, před PEGylací podle postupu v příkladu 3. Obnovení enzymu bylo největší po injekci konjugátů připravených z lázně eluátu o vysoké koncentraci solí příkladu (viz obrázek 1), který měl nejmenší obsah velmi velkých agregátů (viz popis rozptylu světla frakcí 7 až 10 na obrázku 3). Střední obnovení enzymu bylo získáno s konjugáty připravenými z lázně eluátu o nízké koncentraci solí z kolony Mono Q příkladu 1 a nejmenší obnovení enzymu bylo získáno u konjugátů vyrobených z nefrakciované PKS urikázy, která měla největší obsah velmi velkých agregátů (viz obrázek 2). Stejné pořadí relativních aktivit obnovených v séru po opakovaní injekcí (lázeň s vysokou koncentrací solí > lázeň s nízkou koncentrací solí > nefrakciovaná urikáza) bylo sledováno bez ohledu na to, zda se jednalo o UV kvantitativní rozbor popsaný výše nebo kolorimetrický kvantitativní rozbor převzatý od P. Fossati et ai.,
(J Clin Chem (1980) 26:227-231)a bez ohledu na to, zda bylo před testem sérum inkubováno při 37 °C.
Příklad 6
Analýza s enzymem navázaným na immunosorbent (ELISA) séra z myši injektované
PEG-urikázou
Nekompetitivní ELISA analýzy byla provedena s urikázou z prasete navázáním na 2 Immulon-mikrodestičky s 96 jamkami (Dynex Technologies od VWR Scientific, San Francisko, CA). Primární antisérum bylo připravené z myši injektované urikázou nebo 6 x 10-kDa konjugátů připravených podle postupu v příkladu 3. Sekundární protilátka byla kozí anti-myší IgG spojená s křenovou peroxidázou (Calbiochem-Novabiochem č. 401 253, La Jolla, CA) a substrátem byl o-fenylendiamindichlorid (Sigma P-9187, St. Louis, MO), jak bylo popsáno u B. Portsman etal., (J Clin. Chem. Clin. Biochem. (1981) 19:435-440).
Obrázek 6 znázorňuje výsledky nekompetitivní ELISA analýzy. Výsledky ukazují, že 6 x 10-kDa PEG PKS urikáza syntetizovaná podle postupu v příkladu 3 z lázně eluátu o vysoké koncentraci solí z kolony Mono Q příkladu 1 (ukázáno na obrázku 1) nevytvořila detekovatelnou imunitní odpověď u žádné z osmi myší, která týdně obdržela injekce po dobu šesti týdnů. U mála myší injektovaných konjugáty z nefrakciované PKS urikázy podle postupu v příkladu 3 se ukázaly nízké, ale detekovatelné imunitní odpovědi. Nejvyšší výskyt imunitních odpovědí byl u myší injektovaných konjugáty připravenými podle postupu v příkladu 3 z lázně eluátu o nízké koncentraci solí z kolony Mono Q v příkladu 1.
Bez výhody vyplývající z detektoru rozptylu světla analýzy „size-exclusion“ HPLC, jak je uvedeno v příkladu 2, by nebylo zřejmé, že přítomnost největších agregátů , větších než oktamerů, je spojena s postupným snížením obnovy konjugátů PEG-urikázy po opakovaném injektování, jak bylo pozorováno v příkladu 5 (obrázek 5) a se zvýšením imunogenicity u BALB/c myši, jak bylo pozorováno v příkladu 6 (obrázek 6). Tyto výsledky mají důležité důsledky pro specifikaci urikázy použité coby výchozího materiálu při výrobě PEG-urikázy pro klinické účely.
Ačkoliv zmíněný vynález byl detailně popsán pomocí ilustrací a příkladů za účelem srozumitelnosti, je odborníkům jasně zřejmé, že určité změny a modifikace mohou být provedeny aniž by se to odklánělo od podstaty a rámce toho, co popsáno a nárokováno.
Seznam sekvencí:
Sekvence 1
304 aminokyselinových zbytků
Prase divoké
| Met 1 | Ala | His | Tyr Arg 5 | Asn | Asp Tyr Lys Lys Asn Asp Glu 10 | Val | Glu 15 | Phe | |||||||
| Val | Arg | Thr | Gly | Tyr | Gly | Lys | Asp | Met | Ile | Lys | Val | Leu | His | Ile | Gin |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| Arg | Asp | Gly | Lys | Tyr | His | Ser | Ile | Lys | Glu | Val | Ala | Thr | Ser | Val | Gin |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| Leu | Thr | Leu | Ser | Ser | Lys | Lys | Asp | Tyr | Leu | His | Gly | Asp | Asn | Ser | Asp |
| 50 | 55 | 60 | |||||||||||||
| Val | Ile | Pro | Thr | Asp | Thr | Ile | Lys | Asn | Thr | Val | Asn | Val | Leu | Ala | Lys |
| 65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
| Phe | Lys | Gly | Ile | Lys | Ser | Ile | Glu | Thr | Phe | Ala | Val | Thr | Ile | Cys | Glu |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| His | Phe | Leu | Ser | Ser | Phe | Lys | His | Val | Ile | Arg | Ala | Gin | Val | Tyr | Val |
| 100 | 105 | 110 | |||||||||||||
| Glu | Glu | Val | Pro | Trp | Lys | Arg | Phe | Glu | Lys | Asn | Gly | Val | Lys | His | Val |
| 115 | 120 | 125 | |||||||||||||
| His | Ala | Phe | Ile | Tyr | Thr | Pro | Thr | Gly | Thr | His | Phe | Cys | Glu | Val | Glu |
| 130 | 135 | 140 | |||||||||||||
| Gin | Ile | Arg | Asn | Gly | Pro | Pro | Val | Ile | His | Ser | Gly | Ile | Lys | Asp | Leu |
| 145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
| Lys | Val | Leu | Lys | Thr | Thr | Gin | Ser | Gly | Phe | Glu | Gly | Phe | Ile | Lys | Asp |
| 165 | 170 | 175 | |||||||||||||
| Gin | Phe | Thr | Thr | Leu | Pro | Glu | Val | Lys | Asp | Arg | Cys | Phe | Ala | Thr | Gin |
| 180 | 185 | 190 | |||||||||||||
| Val | Tyr | Cys | Lys | Trp | Arg | Tyr | His | Gin | Gly | Arg | Asp | Val | Asp | Phe | Glu |
195 200 205
| Ala Thr Trp Asp | Thr Val | Arg 215 | Ser | Ile | Val | Leu | Gin 220 | Lys | Phe | Ala | Gly | ||||
| 210 | |||||||||||||||
| Pro | Tyr | Asp | Lys | Gly | Glu | Tyr | Ser | Pro | Ser | Val | Gin | Lys | Thr | Leu | Tyr |
| 225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
| Asp | Ile | Gin | Val | Leu | Thr | Leu | Gly | Gin | Val | Pro | Glu | Ile | Glu | Asp | Met |
| 245 | 250 | 255 | |||||||||||||
| Glu | Ile | Ser | Leu | Pro | Asn | Ile | His | Tyr | Leu | Asn | Ile | Asp | Met | Ser | Lys |
| 260 | 265 | 270 | |||||||||||||
| Met | Gly | Leu | Ile | Asn | Lys | Glu | Glu | Val | Leu | Leu | Pro | Leu | Asp | Asn | Pro |
| 275 | 280 | 285 | |||||||||||||
| Tyr | Gly | Arg | Ile | Thr | Gly | Thr | Val | Lys | Arg | Lys | Leu | Thr | Ser | Arg | Leu |
290 295 300 • · · ·· · · · · • · · · ··· · · * · • · ····· *
Sekvence 3
304 aminokyselinových zbytků
Pavián pláštíkový
Chiméra z Prasete divokého a Paviána pláštíkového
Met Ala His Tyr Arg Asn Asp Tyr Lys Lys Asn Asp Glu Val Glu Phe
| 1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||||
| Val | Arg | Thr | Gly | Tyr | Gly | Lys | Asp | Met | Ile | Lys | Val | Leu | His | Xle | Gin |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| Arg | Asp | Gly | Lys | Tyr | His | Ser | Ile | Lys | Glu | Val | Ala | Thr | Ser | Val | Gin |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| Leu | Thr | Leu | Ser | Ser | Lys | Lys | Asp | Tyr | Leu | His | Gly | Asp | Asn | Ser | Asp |
| 50 | 55 | 60 | |||||||||||||
| Val | Ile | Pro | Thr | Asp | Thr | Xle | Lys | Asn | Thr | Val | Asn | Val | Leu | Ala | Lys |
| 65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
| Phe | Lys | Gly | Ile | Lys | Ser | Xle | Glu | Thr | Phe | Ala | Val | Thr | Ile | Cys | Glu |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| His | Phe | Leu | Ser | Ser | Phe | Lys | His | Val | Ile | Arg | Ala | Gin | Val | Tyr | Val |
| 100 | 105 | 110 | |||||||||||||
| Glu | Glu | Val | Pro | Trp | Lys | Arg | Phe | Glu | Lys | Asn | Gly | Val | Lys | His | Val |
| 115 | 120 | 125 | |||||||||||||
| His | Ala | Phe | Ile | Tyr | Thr | Pro | Thr | Gly | Thr | His | Phe | Cys | Glu | Val | Glu |
| 130 | 135 | 140 | |||||||||||||
| Gin | Ile | Arg | Asn | Gly | Pro | Pro | Val | Ile | His | Ser | Gly | Ile | Lys | Asp | Leu |
| 145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
| Lys | Val | Leu | Lys | Thr | Thr | Gin | Ser | Gly | Phe | Glu | Gly | Phe | Ile | Lys | Asp |
| 165 | 170 | 175 | |||||||||||||
| Gin | Phe | Thr | Thr | Leu | Pro | Glu | Val | Lys | Asp | Arg | Cys | Phe | Ala | Thr | Gin |
| 180 | 185 | 190 | |||||||||||||
| Val | Tyr | Cys | Lys | Trp | Arg | Tyr | His | Gin | Gly | Arg | Asp | Val | Asp | Phe | Glu |
| 195 | 200 | 205 | |||||||||||||
| Ala | Thr | Trp | Asp | Thr | Val | Arg | Ser | Ile | Val | Leu | Gin | Lys | Phe | Ala | Gly |
| 210 | 215 | 220 | |||||||||||||
| Pro | Tyr | Asp | Lys | Gly | Glu | Tyr | Ser | Pro | Ser | Val | Gin | Lys | Thr | Leu | Tyr |
| 225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
| Asp | Ile | Gin | Val | Leu | Thr | Leu | Gly | Gin | Val | Pro | Glu | Ile | Glu | Asp | Met |
| 245 | 250 | 255 | |||||||||||||
| Glu | Ile | Ser | Leu | Pro | Asn | Ile | His | Tyr | Leu | Asn | Ile | Asp | Met | Ser | Lys |
| - | 260 | 265 | 270 | ||||||||||||
| Met | Gly | Leu | Ile | Asn | Lys | Glu | Glu | Val | Leu | Leu | Pro | Leu | Asp | Asn | Pro |
| 275 | 280 | 285 | |||||||||||||
| Tyr | Gly | Lys | Ile | Thr | Gly | Thr | Val | Lys | Arg | Lys | Leu | Ser | Ser | Arg | Leu |
| 290 | 295 | 300 |
Sekvence 2
304 aminokyselinových zbytků
Pavián pláštíkový
| Met 1 | Ala Asp | Tyr His Asn Asn 5 | Tyr Lys | Lys 10 | Asn Asp Glu | Leu | Glu 15 | Phe | |||||||
| Val | Arg | Thr | Gly | Tyr | Gly | Lys | Asp | Met | Val | Lys | Val | Leu | His | Ile | Gin |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| Arg | Asp | Gly | Lys | Tyr | His | Ser | Ile | Lys | Glu | Val | Ala | Thr | Ser | Val | Gin |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| Leu | Thr | Leu | Ser | Ser | Lys | Lys | Asp | Tyr | Leu | His | Gly | Asp | Asn | Ser | Asp |
| 50 | 55 | 60 | |||||||||||||
| Ile | Ile | Pro | Thr | Asp | Thr | Ile | Lys | Asn | Thr | Val | His | Val | Leu | Ala | Lys |
| 65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
| Phe | Lys | Gly | Ile | Lys | Ser | Ile | Glu | Ala | Phe | Gly | Val | Asn | Ile | Cys | Glu |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| Tyr | Phe | Leu | Ser | Ser | Phe | Asn | His | Val | Ile | Arg | Ala | Gin | Val | Tyr | Val |
| 100 | 105 | 110 | |||||||||||||
| Glu | Glu | Ile | Pro | Trp | Lys | Arg | Leu | Glu | Lys | Asn | Gly | Val | Lys | His | Val |
| 115 | 120 | 125 | |||||||||||||
| His | Ala | Phe | Ile | His | Thr | Pro | Thr | Gly | Thr | His | Phe | Cys | Glu | Val | Glu |
| 130 | 135 | 140 | |||||||||||||
| Gin | Leu | Arg | Ser | Gly | Pro | Pro | Val | Ile | His | Ser | Gly | Ile | Lys | Asp | Leu |
| 145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
| Lys | Val | Leu | Lys | Thr | Thr | Gin | Ser | Gly | Phe | Glu | Gly | Phe | Ile | Lys | Asp |
| 165 | 170 | 175 | |||||||||||||
| Gin | Phe | Thr | Thr | Lys | Pro | Glu | Val | Lys | Asp | Arg | Cys | Phe | Ala | Thr | Gin |
| 180 | 185 | 190 | |||||||||||||
| Val | Tyr | Cys | Lys | Trp | Arg | Tyr | His | Gin | Cys | Arg | Asp | Val | Asp | Phe | Glu |
| 195 | 200 | 205 | |||||||||||||
| Ala | Thr | Trp | Gly | Thr | Ile | Arg | Asp | Leu | Val | Leu | Glu | Lys | Phe | Ala | Gly |
| 210 | 215 | 220 | |||||||||||||
| Pro | Tyr | Asp | Lys | Gly | Glu | Tyr | Ser | Pro | Ser | Val | Gin | Lys | Thr | Leu | Tyr |
| 225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
| Asp | Ile | Gin | Val | Leu | Ser | Leu | Ser | Arg | Val | Pro | Glu | Ile | Glu | Asp | Met |
| 245 | 250 | 255 | |||||||||||||
| Glu | Ile | Ser | Leu | Pro | Asn | Ile | His | Tyr | Phe | Asn | Ile | Asp | Met | Ser | Lys |
| 260 | 265 | 270 | |||||||||||||
| Met | Gly | Leu | Ile | Asn | Lys | Glu | Glu | Val | Leu | Leu | Pro | Leu | Asp | Asn | Pro |
| 275 | 280 | 285 | |||||||||||||
| Tyr | Gly | Lys | Ile | Thr | Gly-Thr | Val | Lys | Arg | Lys | Leu | Ser | Ser | Arg | Leu | |
| 290 | 295 | 300 |
··
Claims (1)
- Přečištěná urátoxidáza, kde je urátoxidáza v podstatě bez agregátů větších než oktamery.Urátoxidáza podle nároku 1, kde je urátoxidáza savčí urátoxidázou.Urátoxidáza podle nároku 2, kde je urátoxidáza urátoxidázou z jater prasete, z hovězích jater nebo z ovčích jater.Urátoxidáza podle nároku 1, kde je urátoxidáza rekombinantní urátoxidázou.Urátoxidáza podle nároku 4, kde má urátoxidáza v podstatě sekvenci urátoxidázy z jater prasete, z hovězích jater, z ovčích jater nebo z jater paviána.Urátoxidáza podle nároku 4, kde je urátoxidáza chimérickou urátoxidázou.Urátoxidáza podle nároku 6, kde chimérická urátoxidáza obsahuje podíly urátoxidázy z jater prasete a z jater paviána.Urátoxidáza podle nároku 7, kde chimérická urátoxidáza je PKS urátoxidáza. Urátoxidáza podle nároku 4, kde urátoxidáza má v podstatě sekvenci urátoxidázy z jater paviána, ve které je tyrosin 97 nahrazen histidinem. Urátoxidáza podle nároku 4, kde urátoxidáza obsahuje N-konec a C-konec a kde se urátoxidáza zkracuje na jednom nebo obou koncích.Urátoxidáza podle nároku 1, kde je urátoxidáza urátoxidázou plísně nebo mikrobiální urátoxidázou.Urátoxidáza podle nároku 11, kde se urátoxidáza z plísně nebo mikrobiální urátoxidáza izoluje z Aspergillus flavus, Arthrobacter globiformis, Bacillus sp.nebo Candida utilis nebo je rekombinantním enzymem, který má v podstatě sekvenci jedné ze zmíněných urátoxidáz.13. Urátoxidáza podle nároku 1, kde je urátoxidáza urátoxidázou bezobratlých.14. Urátoxidáza podle nároku 13, kde se urátoxidáza bezobratlých izoluje z Drosophila melanogaster nebo Drosophila pseudoobscura nebo je rekombinantním enzymem, který má v podstatě sekvenci jedné ze zmíněných urátoxidáz.15. Urátoxidáza podle nároku 1, kde je urátoxidáza rostlinná urátoxidázou.16. Urátoxidáza podle nároku 15, kde se rostlinná urátoxidáza izoluje z kořenových hlíz Glycine max nebo je to rekombinantním enzymem, který má v podstatě sekvenci jedné ze zmíněných urátoxidáz.17. Urátoxidáza podle nároku 1, která se konjuguje s poly(ethylenglykolem) nebo poly(ethylenoxidem), kdy je konjugát zmíněné urátoxidázy v podstatě bez agregátů větších než oktamery.18. Konjugát urátoxidázy podle nároku 17, ve které je poly(ethylenglykolem) monomethoxypoly(ethylenglykol).19. Urátoxidáza podle nároku 17, která se konjuguje se zmíněným poly(ethylenglykolem) nebo poly(ethylenoxidem) přes vazbu vybranou ze skupiny, která obsahuje vazbu uretanovou (karbamátovou), vazbu sekundárního aminu a amidovou vazbu.20. Konjugát urátoxidázy podle nároku 17, ve kterém má zmíněný poly(ethylenglykol) nebo poly(ethylenoxid) molekulární hmotnost mezi 5 kDa až 30 kDa.21. Konjugát urátoxidázy podle nároku 20, ve kterém má zmíněný poly(ethylenglykol) nebo poly(ethylenoxid) molekulární hmotnost mezi 10 kDa až 20 kDa.22. Urátoxidáza podle nároku 17, která má průměrný počet zmíněných řetězců poly(ethylenglykolu) nebo poly(ethylenoxidu) mezi 2 až 12 na podjednotku urátoxidázy.23. Urátoxidáza podle nároku 22, která má průměrný počet zmíněných řetězců poly(ethylenglykolu) nebo poly(ethylenoxidu) mezi 6 až 10 na podjednotku urátoxidázy.24. Urátoxidáza podle nároku 23, která má průměrný počet zmíněných řetězců poly(ethylenglykolu) nebo poly(ethylenoxidu) mezi 7 až 9 na podjednotku urátoxidázy.25. Konjugát urátoxidázy podle nároku 17, ve které je poly(ethylenglykol) nebo poly(ethylenoxid) lineární.26. Konjugát urátoxidázy podle nároku 17, ve které je poly(ethylenglykol) nebo poly(ethylenoxid) větvený.27. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že se používá k snižování hladin kyseliny močové v tělních tekutinách nebo tkáních a že obsahuje konjugát z nároku 17 a farmaceuticky vhodný nosič.28. Farmaceutický prostředek podle nároku 27, vyznačující se tím, že se stabilizuje lyofilizací a po rekonstituci se rozpouští, aby poskytl roztok vhodný pro parenterální podání.29. Způsob přečištění urátoxidázy, vyznačující se tím, že sestává ze separace agregátů urátoxidázy větších než oktamery ve frakcích urátoxidázy a urátoxidáza tak má sníženou imunogenicitu.30. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, že separace je vybrána ze skupiny sestávající z iontově-výměnné chromatografie, „size-exclusion“ chromatografie a ultrafiltrace.
• to to * • to toto • • ♦ · ♦ · to · tt 9 4 • · • • · 9 • * ♦ •to 9 9 ·♦ • •toto 31. Způsob podle nároku 30, vyznačující se tím, že separace sestává z detekce agregátů větších než oktamery ve frakcích urátoxidázy a vyloučení takových frakcí obsahujících zmíněné agregáty.32. Způsob podle nároku 31, vyznačující se tím, že zmíněná detekce agregátů zahrnuje měření rozptylu světla.33. Izolovaná urátoxidáza připravená způsobem podle nároku 29.1/6
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US09/501,730 US6783965B1 (en) | 2000-02-10 | 2000-02-10 | Aggregate-free urate oxidase for preparation of non-immunogenic polymer conjugates |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20022982A3 true CZ20022982A3 (cs) | 2003-01-15 |
| CZ304864B6 CZ304864B6 (cs) | 2014-12-17 |
Family
ID=23994789
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2002-2982A CZ304864B6 (cs) | 2000-02-10 | 2001-02-07 | Konjugát urikázy obsahující přečištěnou urátoxidázu, farmaceutický prostředek jej obsahující a způsob jeho přípravy, způsob čištění urikázy a izolovaná urikáza |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US6783965B1 (cs) |
| EP (3) | EP2196538B1 (cs) |
| JP (2) | JP5165826B2 (cs) |
| KR (3) | KR101054247B1 (cs) |
| CN (2) | CN100491532C (cs) |
| AT (1) | ATE463576T1 (cs) |
| AU (3) | AU4997501A (cs) |
| BE (1) | BE2013C045I2 (cs) |
| BR (1) | BRPI0108386B8 (cs) |
| CA (1) | CA2398679C (cs) |
| CY (3) | CY1110142T1 (cs) |
| CZ (1) | CZ304864B6 (cs) |
| DE (1) | DE60141742D1 (cs) |
| DK (3) | DK2196538T3 (cs) |
| ES (2) | ES2343105T3 (cs) |
| FR (1) | FR13C0036I2 (cs) |
| HK (4) | HK1056742A1 (cs) |
| HU (1) | HU227127B1 (cs) |
| IL (3) | IL151065A0 (cs) |
| LU (1) | LU92237I2 (cs) |
| MX (1) | MXPA02007545A (cs) |
| NZ (1) | NZ520434A (cs) |
| PL (1) | PL208064B1 (cs) |
| PT (2) | PT1254237E (cs) |
| RU (3) | RU2352354C2 (cs) |
| TW (2) | TW200914617A (cs) |
| WO (1) | WO2001059078A2 (cs) |
| ZA (1) | ZA200207206B (cs) |
Families Citing this family (56)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6057287A (en) | 1994-01-11 | 2000-05-02 | Dyax Corp. | Kallikrein-binding "Kunitz domain" proteins and analogues thereof |
| JP5183836B2 (ja) * | 1998-08-06 | 2013-04-17 | マウンテン ビュー ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド | Ｐｅｇ−尿酸酸化酵素結合体およびその使用 |
| US20060188971A1 (en) * | 1998-08-06 | 2006-08-24 | Duke University | Urate oxidase |
| PT1100880E (pt) | 1998-08-06 | 2011-01-13 | Univ Duke | Urato-oxidase |
| US6783965B1 (en) | 2000-02-10 | 2004-08-31 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Aggregate-free urate oxidase for preparation of non-immunogenic polymer conjugates |
| CA2338665C (en) | 1998-08-06 | 2011-01-18 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Peg-urate oxidase conjugates and use thereof |
| US7229810B2 (en) | 2001-06-28 | 2007-06-12 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Polymer conjugates of proteinases |
| US6913915B2 (en) * | 2001-08-02 | 2005-07-05 | Phoenix Pharmacologics, Inc. | PEG-modified uricase |
| US7153829B2 (en) | 2002-06-07 | 2006-12-26 | Dyax Corp. | Kallikrein-inhibitor therapies |
| EP2298278B1 (en) | 2002-06-07 | 2015-11-11 | Dyax Corp. | Prevention and reduction of blood loss and inflammatory response |
| US20040062748A1 (en) | 2002-09-30 | 2004-04-01 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof |
| US8129330B2 (en) * | 2002-09-30 | 2012-03-06 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof |
| RS20050502A (en) * | 2002-12-26 | 2007-08-03 | Mountain View Pharmaceuticals Inc., | Polymer conjugates of interferon- beta with enhanced biological potency |
| WO2004101600A2 (en) * | 2003-05-12 | 2004-11-25 | Affymax, Inc. | Novel poly(ethylene glycol) modified compounds and uses thereof |
| ES2395413T3 (es) * | 2003-05-12 | 2013-02-12 | Affymax, Inc. | Péptidos que se unen al receptor de eritropoyetina |
| MXPA05012314A (es) * | 2003-05-12 | 2006-04-18 | Affymax Inc | Radical separador para peptido modificado con polietilenglicol. |
| CA3050564A1 (en) * | 2003-08-29 | 2005-03-10 | Dyax Corp. | Poly-pegylated protease inhibitors |
| US7235530B2 (en) | 2004-09-27 | 2007-06-26 | Dyax Corporation | Kallikrein inhibitors and anti-thrombolytic agents and uses thereof |
| JP2008519858A (ja) * | 2004-11-11 | 2008-06-12 | アフィーマックス・インコーポレイテッド | エリスロポエチンレセプターに結合する新規ペプチド |
| WO2006062685A2 (en) * | 2004-11-11 | 2006-06-15 | Affymax, Inc. | Novel peptides that bind to the erythropoietin receptor |
| CA2602654A1 (en) * | 2005-04-05 | 2006-10-12 | Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P Angeletti Spa | Method for shielding functional sites or epitopes on proteins |
| US8148123B2 (en) * | 2005-04-11 | 2012-04-03 | Savient Pharmaceuticals, Inc. | Methods for lowering elevated uric acid levels using intravenous injections of PEG-uricase |
| US20080159976A1 (en) * | 2005-04-11 | 2008-07-03 | Jacob Hartman | Methods for lowering elevated uric acid levels using intravenous injections of PEG-uricase |
| ES2856881T3 (es) | 2005-04-11 | 2021-09-28 | Horizon Pharma Rheumatology Llc | Formas variantes de urato oxidasa y su uso |
| EP1871877A2 (en) | 2005-04-11 | 2008-01-02 | Savient Pharmaceuticals, Inc. | A variant form of urate oxidase and use thereof |
| EP1883425A1 (en) * | 2005-05-23 | 2008-02-06 | Universite De Geneve | Injectable superparamagnetic nanoparticles for treatment by hyperthermia and use for forming an hyperthermic implant |
| US7550433B2 (en) * | 2005-06-03 | 2009-06-23 | Affymax, Inc. | Erythropoietin receptor peptide formulations and uses |
| US7919461B2 (en) | 2005-06-03 | 2011-04-05 | Affymax, Inc. | Erythropoietin receptor peptide formulations and uses |
| US8324159B2 (en) * | 2005-06-03 | 2012-12-04 | Affymax, Inc. | Erythropoietin receptor peptide formulations and uses |
| ES2532804T3 (es) * | 2006-04-12 | 2015-03-31 | Crealta Pharmaceuticals Llc | Purificación de proteínas con tensioactivo catiónico |
| CA2696208A1 (en) * | 2007-08-21 | 2009-02-26 | Genzyme Corporation | Treatment with kallikrein inhibitors |
| AU2010203712A1 (en) | 2009-01-06 | 2010-07-15 | Dyax Corp. | Treatment of mucositis with kallikrein inhibitors |
| AU2010265964B2 (en) | 2009-06-25 | 2014-09-18 | Horizon Therapeutics Usa, Inc. | Methods and kits for predicting infusion reaction risk and antibody-mediated loss of response by monitoring serum uric acid during PEGylated uricase therapy |
| LT2521568T (lt) | 2010-01-06 | 2018-12-10 | Dyax Corp. | Plazmos kalikreiną surišantys baltymai |
| US8940861B2 (en) | 2010-04-08 | 2015-01-27 | Georgia Tech Research Corporation | Variants of ancestral uricases and uses thereof |
| BR112013017080A8 (pt) | 2011-01-06 | 2023-05-09 | Dyax Corp | Anticorpo ou fragmento funcional do mesmo que se liga a forma ativa de calicreína do plasma humano, composiçao farmacêutica e método de detecçao de calicreína do plasma em um paciente |
| CN102827073A (zh) | 2011-06-17 | 2012-12-19 | 安吉奥斯医药品有限公司 | 治疗活性组合物和它们的使用方法 |
| US9474779B2 (en) | 2012-01-19 | 2016-10-25 | Agios Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutically active compositions and their methods of use |
| DK3003358T3 (da) | 2013-06-07 | 2021-06-21 | Allena Pharmaceuticals Inc | Sammensætninger og anordninger til dialyse |
| CA2917671A1 (en) | 2013-07-11 | 2015-01-15 | Agios Pharmaceuticals, Inc. | 2,4-or 4,6-diaminopyrimidine compounds as idh2 mutants inhibitors for the treatment of cancer |
| US9579324B2 (en) | 2013-07-11 | 2017-02-28 | Agios Pharmaceuticals, Inc | Therapeutically active compounds and their methods of use |
| WO2015003360A2 (en) | 2013-07-11 | 2015-01-15 | Agios Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutically active compounds and their methods of use |
| WO2015003355A2 (en) | 2013-07-11 | 2015-01-15 | Agios Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutically active compounds and their methods of use |
| US20150031627A1 (en) | 2013-07-25 | 2015-01-29 | Agios Pharmaceuticals, Inc | Therapeutically active compounds and their methods of use |
| US9968595B2 (en) | 2014-03-14 | 2018-05-15 | Agios Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical compositions of therapeutically active compounds |
| US10428158B2 (en) | 2014-03-27 | 2019-10-01 | Dyax Corp. | Compositions and methods for treatment of diabetic macular edema |
| EP3294322A4 (en) | 2015-05-15 | 2018-12-12 | Medimmune, LLC | Improved uricase sequences and methods of treatment |
| MX2018004587A (es) | 2015-10-15 | 2018-08-14 | Agios Pharmaceuticals Inc | Terapia de combinacion para tratar tumores malignos. |
| KR20180067658A (ko) | 2015-10-15 | 2018-06-20 | 아지오스 파마슈티컬스 아이엔씨. | 악성 종양의 치료를 위한 조합물 요법 |
| BR112018011622A2 (pt) | 2015-12-11 | 2018-11-27 | Dyax Corp | método para tratar ataque de angioedema hereditário (hae) ou reduzir a taxa de ataque de hae |
| US20230085022A1 (en) | 2016-11-11 | 2023-03-16 | Horizon Therapeutics Usa, Inc. | Combination therapies of prednisone and uricase molecules and uses thereof |
| JP2020530282A (ja) | 2017-07-07 | 2020-10-22 | アレナ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド | 組換えウリカーゼ酵素 |
| US20190309269A1 (en) | 2018-03-20 | 2019-10-10 | Rubius Therapeutics, Inc. | Therapeutic cell systems and methods for treating hyperuricemia and gout |
| US10980788B2 (en) | 2018-06-08 | 2021-04-20 | Agios Pharmaceuticals, Inc. | Therapy for treating malignancies |
| CN109055260B (zh) * | 2018-08-08 | 2021-11-09 | 淮海工学院 | 弯曲芽孢杆菌alkaAU及产尿酸氧化酶方法、产品与应用 |
| CN114181917B (zh) * | 2022-02-14 | 2022-06-03 | 潍坊华卓生物科技有限公司 | 一种改造尿酸酶、基因序列、制备方法及应用 |
Family Cites Families (53)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE279486C (cs) | ||||
| US3616231A (en) | 1968-11-14 | 1971-10-26 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process for the production of uricase |
| US4179337A (en) * | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
| JPS5599189A (en) | 1979-01-22 | 1980-07-28 | Mihama Hisaharu | Modified uricase free from antigenicity and its preparation |
| JPS55135590A (en) | 1979-04-05 | 1980-10-22 | Mihama Hisaharu | Modified asparaginase and uricase and their preparation |
| CH657141A5 (de) | 1980-07-01 | 1986-08-15 | Hoffmann La Roche | Dns-sequenzen, rekombinante expressionsvektoren zur mikrobiellen herstellung von human-leukozyten-interferonen und transformierte mikroorganismen. |
| JPS57192435A (en) | 1981-05-20 | 1982-11-26 | Toyobo Co Ltd | Modified polypeptide |
| DE3126759A1 (de) | 1981-07-07 | 1983-01-27 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Loesliche leber-uricase, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung |
| WO1987000056A1 (en) * | 1985-06-26 | 1987-01-15 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
| US4917888A (en) | 1985-06-26 | 1990-04-17 | Cetus Corporation | Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
| US4766106A (en) | 1985-06-26 | 1988-08-23 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
| US4847079A (en) * | 1985-07-29 | 1989-07-11 | Schering Corporation | Biologically stable interferon compositions comprising thimerosal |
| DD279486A1 (de) | 1986-03-10 | 1990-06-06 | Akad Wissenschaften Ddr | Verfahren zur aktivierung von hydroxylgruppenhaltigen polymeren verbindungen |
| JPS6255079A (ja) * | 1986-04-23 | 1987-03-10 | Mihama Hisaharu | 修飾ウリカ−ゼ |
| JPH085506B2 (ja) * | 1986-08-25 | 1996-01-24 | 日東製器株式会社 | 缶容器 |
| DD279489A1 (de) | 1986-12-11 | 1990-06-06 | Leuna Werke Veb | Verfahren zur herstellung optisch transparenter epoxidharzformmassen |
| US5080891A (en) * | 1987-08-03 | 1992-01-14 | Ddi Pharmaceuticals, Inc. | Conjugates of superoxide dismutase coupled to high molecular weight polyalkylene glycols |
| US4847325A (en) | 1988-01-20 | 1989-07-11 | Cetus Corporation | Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1 |
| US5955336A (en) * | 1988-08-17 | 1999-09-21 | Toyo Boseki Kabushiki Kaisha | DNA sequence for uricase and manufacturing process of uricase |
| US5349052A (en) | 1988-10-20 | 1994-09-20 | Royal Free Hospital School Of Medicine | Process for fractionating polyethylene glycol (PEG)-protein adducts and an adduct for PEG and granulocyte-macrophage colony stimulating factor |
| US5122614A (en) * | 1989-04-19 | 1992-06-16 | Enzon, Inc. | Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides |
| US5324844A (en) | 1989-04-19 | 1994-06-28 | Enzon, Inc. | Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides |
| NZ234453A (en) * | 1989-07-13 | 1993-01-27 | Sanofi Sa | Recombinant dna encoding urate oxidase, and vector, host, protein and pharmaceutical compositions associated therewith |
| US5382518A (en) | 1989-07-13 | 1995-01-17 | Sanofi | Urate oxidase activity protein, recombinant gene coding therefor, expression vector, micro-organisms and transformed cells |
| US5286637A (en) | 1989-08-07 | 1994-02-15 | Debiopharm, S.A. | Biologically active drug polymer derivatives and method for preparing same |
| JPH03148298A (ja) | 1989-11-01 | 1991-06-25 | Sumitomo Pharmaceut Co Ltd | 修飾ペプチドおよびその製造方法 |
| US5766897A (en) * | 1990-06-21 | 1998-06-16 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Cysteine-pegylated proteins |
| US5653974A (en) | 1990-10-18 | 1997-08-05 | Board Of Regents,The University Of Texas System | Preparation and characterization of liposomal formulations of tumor necrosis factor |
| WO1992016221A1 (en) * | 1991-03-15 | 1992-10-01 | Synergen, Inc. | Pegylation of polypeptides |
| DE69233690T2 (de) | 1991-07-02 | 2008-01-24 | Nektar Therapeutics, San Carlos | Abgabevorrichtung für nebelförmige Medikamente |
| AU6240494A (en) | 1993-02-16 | 1994-09-14 | Enzon, Inc. | Ribosome inactivating protein compositions having reduced antigenicity |
| AU6586394A (en) * | 1993-04-22 | 1994-11-08 | Celtrix Pharmaceuticals, Inc. | Conjugates of growth factor and bone resorption inhibitor |
| WO1995000162A1 (en) | 1993-06-21 | 1995-01-05 | Enzon, Inc. | Site specific synthesis of conjugated peptides |
| IT1265101B1 (it) * | 1993-07-23 | 1996-10-30 | Erba Carlo Spa | Derivati dell'acido 2-ammino-4-fenil-4-osso butirrico |
| US5643575A (en) | 1993-10-27 | 1997-07-01 | Enzon, Inc. | Non-antigenic branched polymer conjugates |
| US5919455A (en) | 1993-10-27 | 1999-07-06 | Enzon, Inc. | Non-antigenic branched polymer conjugates |
| DK0730470T3 (da) * | 1993-11-10 | 2002-06-03 | Enzon Inc | Forbedrede interferonpolymerkonjugater |
| US5824784A (en) * | 1994-10-12 | 1998-10-20 | Amgen Inc. | N-terminally chemically modified protein compositions and methods |
| WO1996017929A1 (en) * | 1994-12-07 | 1996-06-13 | Novo Nordisk A/S | Polypeptide with reduced allergenicity |
| US5932462A (en) * | 1995-01-10 | 1999-08-03 | Shearwater Polymers, Inc. | Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces |
| JP2758154B2 (ja) * | 1995-04-06 | 1998-05-28 | エフ・ホフマン−ラ ロシユ アーゲー | インターフェロンを含む液体製剤 |
| FR2733914B1 (fr) * | 1995-05-11 | 1997-08-01 | Sanofi Sa | Composition de liquide stable contenant de l'urate oxydase et composition lyophilisee pour sa preparation |
| US5853974A (en) | 1995-06-07 | 1998-12-29 | Chiron Corporation | Enhancement of alkaline phosphatase with SDS in chemiluminescent substrates |
| JPH09154581A (ja) | 1995-12-05 | 1997-06-17 | Asahi Chem Ind Co Ltd | ウリカーゼを生産する実質上純粋な微生物 |
| EP1007082B1 (en) | 1997-01-15 | 2006-10-18 | Phoenix Pharmacologics, Inc. | Modified tumor necrosis factor |
| EP1500661A1 (en) * | 1998-06-01 | 2005-01-26 | Genetech, Inc. | Separation of protein monomers from aggregates by use of ion-exchange chromatography |
| PT1100880E (pt) | 1998-08-06 | 2011-01-13 | Univ Duke | Urato-oxidase |
| CA2338665C (en) * | 1998-08-06 | 2011-01-18 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Peg-urate oxidase conjugates and use thereof |
| JP5183836B2 (ja) | 1998-08-06 | 2013-04-17 | マウンテン ビュー ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド | Ｐｅｇ−尿酸酸化酵素結合体およびその使用 |
| US6783965B1 (en) * | 2000-02-10 | 2004-08-31 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Aggregate-free urate oxidase for preparation of non-immunogenic polymer conjugates |
| US6425448B1 (en) | 2001-01-30 | 2002-07-30 | Cdx Gas, L.L.P. | Method and system for accessing subterranean zones from a limited surface area |
| US6913915B2 (en) * | 2001-08-02 | 2005-07-05 | Phoenix Pharmacologics, Inc. | PEG-modified uricase |
| WO2014187953A1 (en) | 2013-05-24 | 2014-11-27 | Zentrum Mikroelektronik Dresden Ag | Non pwm digital dc-dc converter |
-
2000
- 2000-02-10 US US09/501,730 patent/US6783965B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-02-06 TW TW097145974A patent/TW200914617A/zh unknown
- 2001-02-06 TW TW090102540A patent/TWI322184B/zh not_active IP Right Cessation
- 2001-02-07 EP EP10158016.5A patent/EP2196538B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-07 AU AU4997501A patent/AU4997501A/xx active Pending
- 2001-02-07 CA CA2398679A patent/CA2398679C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-07 PL PL358539A patent/PL208064B1/pl unknown
- 2001-02-07 ES ES01923265T patent/ES2343105T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-07 CN CNB018077501A patent/CN100491532C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-07 DK DK10158016.5T patent/DK2196538T3/en active
- 2001-02-07 DE DE60141742T patent/DE60141742D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-07 RU RU2006107110/13A patent/RU2352354C2/ru active
- 2001-02-07 CZ CZ2002-2982A patent/CZ304864B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-02-07 JP JP2001558218A patent/JP5165826B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-07 KR KR1020087024272A patent/KR101054247B1/ko active IP Right Grant
- 2001-02-07 PT PT01923265T patent/PT1254237E/pt unknown
- 2001-02-07 KR KR1020027010189A patent/KR100884724B1/ko active IP Right Grant
- 2001-02-07 WO PCT/US2001/040069 patent/WO2001059078A2/en active Application Filing
- 2001-02-07 IL IL15106501A patent/IL151065A0/xx unknown
- 2001-02-07 BR BRPI0108386A patent/BRPI0108386B8/pt not_active Application Discontinuation
- 2001-02-07 RU RU2002120486/13A patent/RU2281954C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-02-07 AU AU2001249975A patent/AU2001249975B2/en not_active Revoked
- 2001-02-07 CN CN2009101278530A patent/CN101735991B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-07 DK DK10180428.4T patent/DK2305819T3/en active
- 2001-02-07 MX MXPA02007545A patent/MXPA02007545A/es active IP Right Grant
- 2001-02-07 DK DK01923265.1T patent/DK1254237T3/da active
- 2001-02-07 EP EP10180428.4A patent/EP2305819B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-07 AT AT01923265T patent/ATE463576T1/de active
- 2001-02-07 HU HU0204544A patent/HU227127B1/hu active Protection Beyond IP Right Term
- 2001-02-07 EP EP01923265A patent/EP1254237B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-07 PT PT101804284T patent/PT2305819E/pt unknown
- 2001-02-07 KR KR1020077018682A patent/KR20070092329A/ko active Search and Examination
- 2001-02-07 ES ES10180428.4T patent/ES2524153T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-07 NZ NZ520434A patent/NZ520434A/en not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-08-05 IL IL151065A patent/IL151065A/en active Protection Beyond IP Right Term
- 2002-09-09 ZA ZA200207206A patent/ZA200207206B/en unknown
-
2003
- 2003-12-11 HK HK03109064.9A patent/HK1056742A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-08-03 US US11/882,750 patent/US7927852B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-08-11 IL IL193365A patent/IL193365A/en active IP Right Grant
-
2009
- 2009-02-06 RU RU2009104003/10A patent/RU2557318C9/ru active
- 2009-09-02 AU AU2009212900A patent/AU2009212900B2/en not_active Expired
-
2010
- 2010-06-29 CY CY20101100597T patent/CY1110142T1/el unknown
- 2010-10-27 HK HK10110105.9A patent/HK1143989A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2010-10-27 HK HK11109405.7A patent/HK1155203A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2010-12-08 HK HK10111402.7A patent/HK1144701A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-04-12 JP JP2011088663A patent/JP5341945B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2011-04-13 US US13/085,793 patent/US8921064B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-07-03 BE BE2013C045C patent/BE2013C045I2/fr unknown
- 2013-07-03 LU LU92237C patent/LU92237I2/fr unknown
- 2013-07-04 FR FR13C0036C patent/FR13C0036I2/fr active Active
- 2013-07-04 CY CY2013028C patent/CY2013028I1/el unknown
-
2015
- 2015-02-09 CY CY20151100129T patent/CY1117264T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ20022982A3 (cs) | Urát oxidáza bez agregátů pro přípravu neimunogennického polymeru | |
| US20180223263A1 (en) | Aggregate-free urate oxidase for preparation of non-immunogenic polymer conjugates | |
| JP5291235B2 (ja) | Ｐｅｇ−尿酸酸化酵素結合体およびその使用 | |
| AU2006203252B8 (en) | Aggregate-free urate oxidase for preparation of non-immunogenic polymer conjugates | |
| MXPA01001272A (en) | Peg-urate oxidase conjugates and use thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20210207 |