CN113508118A - 用作抗癌剂的稠合三环化合物 - Google Patents

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Abstract

本说明书涉及具有式(A)的化合物及其药学上可接受的盐。本说明书还涉及用于制备它们的方法及中间体，包含它们的药物组合物，以及它们在治疗细胞增殖性障碍中的用途。

Description

用作抗癌剂的稠合三环化合物
本说明书涉及抑制G12C突变型RAS蛋白并随后表现出抗癌活性的某些稠合三环化合物及其药学上可接受的盐。本说明书还涉及所述稠合三环化合物及其药学上可接受的盐在治疗人体或动物体的方法，例如在预防或治疗癌症中的用途。本说明书还涉及在制备所述稠合三环化合物中所涉及的方法和中间体化合物，并且涉及包含所述稠合三环化合物的药物组合物。
KRAS、NRAS和HRAS基因编码一组密切相关的小GTP酶蛋白KRas、NRas和HRas(在本文中统称为Ras蛋白或Ras)，它们具有82％-90％的总体序列同一性。Ras蛋白是信号传导途径的关键组分，传递来自细胞表面受体的信号以调节细胞增殖、存活和分化。Ras用作在非活性GDP结合状态与活性GTP结合状态之间循环的分子开关。Ras的GDP/GTP循环在细胞中通过鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)(如Sos1和Sos2)和GTP酶激活蛋白(GAP)(如NF-1和p120RasGAP)进行严格调节，这些鸟嘌呤核苷酸交换因子促进GDP交换为GTP，这些GTP酶激活蛋白刺激Ras的内在GTP酶活性，将GTP水解为GDP。
Ras蛋白长度为188-189个氨基酸并且具有高度保守的N末端G结构域，该G结构域含有结合核苷酸的p-环区、以及对调节蛋白和效应蛋白相互作用重要的开关I区和开关II区。Ras蛋白的C末端区更加趋异并且含有调节Ras与膜的缔合的元件，这些元件包括保守的羧基末端CAXX盒基序，该基序是翻译后异戊二烯化修饰所必需的。在与GTP结合时，Ras的开关I和开关II区经历构象变化，这能够使其与效应蛋白相互作用并激活效应蛋白以调节下游信号传导途径。Ras的最佳表征的效应物是丝氨酸/苏氨酸激酶Raf，其调节丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)途径的活性。PI3K途径是Ras下游的另一个重要的效应途径，其中I类磷酸肌醇3-激酶的p110催化亚基与Ras相互作用。还已经描述了包括RalGDS、Tiam1、PLC-ε和Rassf1在内的Ras的其他效应物(Cox等人Nature Reviews Drug Discovery[药物发现自然 评论]，2014，13：828-851)。
RAS突变经常见于癌症中，并且所有人类癌症中大约30％在KRAS、NRAS或HRAS基因中具有突变。致癌性Ras典型地但并非仅与Ras的甘氨酸12、甘氨酸13或谷氨酰胺61处的突变相关联。这些残基位于Ras的活性位点处，并且突变损害内源性和/或GAP催化的GTP酶活性，从而促成GTP结合Ras的形成和下游效应途径的异常激活。KRAS是癌症中最常见的突变型RAS基因，其次是NRAS，并且然后是HRAS。有若干种肿瘤类型在KRAS中表现出高频率的激活突变，包括胰腺癌(约90％患病率)、结肠直肠癌(约40％患病率)和非小细胞肺癌(约30％患病率)。KRAS突变也见于其他癌症类型中，包括多发性骨髓瘤、子宫癌、胆管癌、胃癌、膀胱癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、横纹肌肉瘤、皮肤鳞状细胞癌、***、睾丸生殖细胞癌等。
Ras残基12处的甘氨酸至半胱氨酸突变(G12C突变)由密码子12处的G.C至T.A碱基颠换产生，该碱基颠换是RAS基因中常见的一种突变，占癌症类型中所有KRAS突变的14％、所有NRAS突变的2％和所有HRAS突变的2％。G12C突变特别富集在KRAS突变型非小细胞肺癌中，其中大约一半携带该突变，该突变与由烟草烟雾形成的DNA加合物相关联。G12C突变并非仅与肺癌相关联，并且见于其他RAS突变型癌症类型，包括所有KRAS突变型结肠直肠癌的8％中。
迄今为止，还没有已批准用于治疗用途的G12C突变型Ras蛋白的抑制剂。因此，需要具有适于临床应用所需的药物特性的新的G12C突变型Ras蛋白抑制剂。已经发现本说明书的化合物具有抗肿瘤活性，有用于抑制由恶性疾病引起的不受控制的细胞增殖。本说明书的化合物通过(作为最低限度)充当G12C突变型Ras蛋白抑制剂，提供抗肿瘤作用。
根据本说明书的第一方面，提供了一种具有式(A)的化合物：
Figure BDA0003241985750000031
其中：
A是苯基或双环杂芳基；
X和Y通过双键连接，并且i)X是CR7并且Y是CR8，ii)X是N并且Y是CR8，或者iii)X是CR7并且Y是N；或
X和Y一起是C(O)NR9；或
X和Y是与经Z取代的芳香环稠合的任选经取代的5或6元N-杂环的相邻环原子，并且X和Y均为C或为C和N；
Z是O、NH、或NMe；
R1独立地选自F、Cl、Br、OH、CH2OH、OMe、CH2OMe、C1-C3烷基和C1-C3氟烷基；
n是0、1、2或3；
R2是H、F、Cl、CCH、CCMe、CN、Br、C1-C3烷基、C1-C3氟烷基、OMe或OEt；
R3a和R3b一起是＝O或者R3a和R3b是H；
R4是H或Me；
R5是H或Me；
R6是H或CH2NMe2；
R7和R8独立地选自H、F、Cl、CCH、CC(C1-C3烷基)、CCCH2NMe2、CCCH2O(C1-C3烷基)、CN、Me、C1-C6烷基、OH、OMe、O(C1-C3烷基)、O(C1-C3氘烷基)、O(C1-C3氟烷基)、O(C3-C6环烷基)、C1-C3氟烷基、OCH2CH2NMe2、OCH2CH2OMe、CH2OMe、OCH2CH2N(CH2CH2)2CH、OCH2CH2N(CH2CH2)2O、OCH2CH2(2-吡啶基)或者任选经取代的3、4、5或6元碳环或杂环；或
R7和R8组合形成任选经取代的5或6元碳环或杂环；
R9选自H、Me、Et、C3H7和C1-C3氟烷基；
或其药学上可接受的盐。
根据本说明书的另一方面，具有式(A)的化合物是具有式(I)的化合物：
Figure BDA0003241985750000041
其中：
A是苯基或双环杂芳基；
X和Y通过双键连接，并且i)X是CR7并且Y是CR8，ii)X是N并且Y是CR8或者iii)X是CR7并且Y是N；或
X和Y一起是C(O)NR9；或
X和Y是与经Z取代的芳香环稠合的任选经取代的5或6元N-杂环的相邻环原子，并且X和Y均为C或为C和N；
Z是O、NH、或NMe；
R1独立地选自F、Cl、Br、OH、CH2OH、OMe、CH2OMe、C1-C3烷基、C1-C3氟烷基；
n是0、1、2或3；
R2是H、F、Cl、CCH、CCMe、CN、Br、C1-C3烷基、C1-C3氟烷基、OMe或OEt；
R3a和R3b一起是＝O或者R3a和R3b是H；
R4是H或Me；
R5是H或Me；
R6是H或CH2NMe2；
R7和R8选自H、F、Cl、CCH、CN、Me、OH、OMe、O(C1-C3烷基)、C1-C3氟烷基或任选经取代的5或6元碳环或杂环；或
R7和R8组合形成任选经取代的5或6元碳环或杂环；
R9选自H、Me、Et、C3H7和C1-C3氟烷基；
或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，提供了一种用作药物的具有式(A)或式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，提供了一种药物组合物，该药物组合物包含具有式(A)或式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，提供了一种通过向有需要的患者给予有效量的具有式(A)或式(I)的化合物或其药学上可接受的盐来治疗癌症的方法。
在另一个方面，提供了一种用于治疗癌症的具有式(A)或式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，提供了一种具有式(A)或式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐，用于制造药物，该药物为例如用于治疗癌症的药物。
在另一个方面，提供了一种试剂盒及其用于治疗癌症的使用说明书，该试剂盒包括具有式(A)或式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。
在另一个方面，提供了一种用于制造具有式(A)或式(I)的化合物的方法。
具有式(A)的化合物，例如具有式(I)的化合物，其特征在于具有[6，7，6]-三环核，其中含有基团X和Y的芳香环通过1，4-二氮杂环庚烷(Z＝N)或1，4-氧杂氮杂环庚烷(Z＝O)基团与哌嗪连接。另外，选自苯基和双环杂芳基的基团A通过联芳基键连接至含有基团X和Y的芳香环。取决于基团R1、R2和X的性质，围绕联芳基键的旋转受到限制，因此，具有式(I)的化合物可以按稳定的阻转异构体形式存在。丙烯酰胺基团经由非桥头哌嗪氮附接到三环核上。
已经发现，具有式(A)的化合物，例如具有式(I)的化合物具有有效的抗肿瘤活性，认为这是由于抑制了G12C突变型Ras蛋白而引起的，该蛋白是某些肿瘤细胞中增殖和存活的关键介导物。更详细地，认为本说明书的化合物通过与具有式(I)的哌嗪附接的丙烯酰胺基团与G12C突变型Ras相互作用，并且然后共价结合。在与G12C突变型Ras结合时，本说明书的化合物(如本文所述)损害或基本上消除了G12C Ras蛋白获得其活性的、促增殖的/促存活的确认的能力。
根据本说明书的化合物具有良好的理化特性，指示它们将适合于对人口服给予以递送治疗效果。例如，根据本说明书的化合物除了其抑制G12C突变型Ras蛋白的能力外，与已知的这种Ras突变型形式的抑制剂相比，还具有良好的溶解性特征和相对较低的分子量。如本文进一步所述，本说明书化合物的立体化学构型，并且特别是其阻转异构体形式，是Ras抑制活性的关键决定因素。值得注意的是，相对于野生型Ras，本说明书的化合物对G12C突变型Ras蛋白表现出选择性抑制作用。
除了具有RasG12C抑制特性外，还发现根据本说明书的某些化合物具有指示它们将能够穿透血脑屏障的理化特性，这对于治疗患有表达RasG12C的已经转移至脑以形成脑转移或倾向于转移至脑的原发性肿瘤的患者是特别有利的特性。临床前研究已经确认，具有式(A)的示例性化合物，例如具有式(I)的化合物，不是人P-gp或BCRP的底物。此外，体内研究揭示，选定的具有式(I)的化合物展现出大鼠Kpuu值，指示其在脑中的良好分布。良好的BBB渗透特性以及因此治疗倾向于向脑转移的肿瘤的潜力也可以通过在用MDR1(Pgp)和BCRP(MDCK_MDR1_BCRP细胞)双重转染的Madin-Darby犬肾(MDCK)细胞中测得的外排比率来证实。特别是，其中R7或R8为乙炔基(即-CCH)或CCMe的化合物已被证明具有良好的血脑屏障(BBB)渗透特性，例如其中R7和/或R8为乙炔基或CCMe且R2为F或Cl的化合物已经被证明具有良好的BBB渗透特性，并且是高活性的RasG12C抑制剂。如体外测定所评估，某些特征为具有R8基团(为CCMe基团)的化合物展现降低的清除率。
因此，本说明书的化合物作为抗肿瘤剂可以是有价值的。特别地，本说明书的化合物作为表达G12C突变型Ras的哺乳动物癌细胞的增殖、存活、运动、传播和侵袭的选择性抑制剂可以是有价值的。由于其抑制G12C突变型Ras的能力，用根据本说明书的化合物治疗受试者可导致抑制肿瘤生长，触发肿瘤消退和/或抑制转移的形成和/或转移性肿瘤生长。确切地说，本说明书的化合物可以具有在抑制和/或治疗实体瘤疾病方面作为抗增殖剂和抗侵袭剂的价值。确切地说，本说明书的化合物可以有用于预防或治疗对G12C突变型Ras的抑制敏感且涉及细胞信号传导的那些肿瘤，该细胞信号传导引起肿瘤细胞的增殖和存活。
因此，还提供了一种用于例如在治疗表达RasGl2C突变型Ras的肿瘤中提供对G12C突变型Ras的选择性抑制作用的方法，该方法包括向有需要的患者给予有效量的如本文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
本文描述了可以结合G12C突变型Ras的化合物。在基于生物化学和细胞的测定中，本说明书的化合物显示为强力的G12C突变型Ras蛋白结合物，并且因此可以有用于治疗由KRas、NRas或HRas G12C突变介导的障碍，具体来说，可以有用于治疗表达G12C突变型KRas、NRas或HRas蛋白的癌症，如胰腺癌、结肠直肠癌、子宫癌、胆管癌、胃癌、膀胱癌、***、睾丸生殖细胞癌和非小细胞肺癌和多发性骨髓瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、横纹肌肉瘤和皮肤鳞状细胞癌。
本说明书还涉及用于制造所述化合物的方法、含有所述化合物的药物组合物、包括向有需要的患者例如人类给予所述化合物的治疗方法、具有式(I)的化合物用于制造例如用于治疗患有过度增殖性疾病如癌症的患者的药物的用途。
除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有如本披露内容所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。例如，Concise Dictionary of Biomedicine andMolecular Biology[简明生物医学和分子生物学词典]，Juo，Pei-Show，第2版，2002，CRC出版社；Dictionary of Cell and Molecular Biology[细胞和分子生物学词典]，第3版，1999，Academic Press[学术出版社]；以及Oxford Dictionary of Biochemistry andMolecular Biology[生物化学和分子生物学牛津词典]，修订版，2000，Oxford UniversityPress[牛津大学出版社]为技术人员提供在本披露内容中使用的许多术语的通用词典注释。
为了使本说明书可以更容易理解，在下面明确定义了某些术语。此外，定义在整个详细说明中视情况而阐述。
单位、前缀和符号是以它们的国际单位***(Système International deUnites)(SI)接受形式表示。数值范围包括限定该范围的数字。
术语“药物组合物”是指如下制剂，该制剂处于允许该活性成分的生物活性有效的形式，并且不含有另外的、对其将要给予的受试者具有不可接受的毒性的组分。此类组合物可以是无菌的。根据本说明书的药物组合物将包含具有式(A)的化合物，例如具有式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的赋形剂。
术语如“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”或“治疗(to treat)”或“减轻(alleviating)”或“减轻(alleviate)”是指(1)使得诊断的病理性病症或障碍被治愈、减缓、减轻症状、和/或停止进展的治疗措施以及(2)防止和/或减缓所靶向的病理学病症或障碍的发展的预防性或防止性措施。因此，需要治疗的那些包括已具有障碍的那些；倾向于具有障碍的那些；以及在他们中需要预防障碍的那些。在某些方面，如果患者显示例如，总的、部分的、或瞬时的某一类型的癌症的缓解，则根据本披露内容的这些方法针对癌症成功地“治疗”了该受试者。
术语“受试者”是指有待成为特定治疗的接受者的任何动物(例如，哺乳动物)，包括但不限于人类、非人类灵长动物、啮齿类等。典型地，术语“受试者”和“患者”在此关于人类受试者可互换地使用。
如本文所用，术语“烷基”是指具有指定碳原子数的直链和支链饱和烃基。如本文所用，术语氘烷基是指其中一个或多个，任选地所有氢被氘原子替代的烷基。术语环烷基是指饱和的碳环。
术语乙炔基(acetylenyl)是指乙炔基团，即-CCH基团。
在本说明书中，如在术语中所使用的前缀Cx-Cy如Cx-Cy烷基和类似物(其中x和y是整数)表示在该基团中存在的碳原子的数值范围。例如，C1-C4烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基和叔丁基，而C1-C3烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、和异丙基。C1-C4烷氧基包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。C1-C3烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基和异丙氧基。C1-C3氟烷基的实例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1，1-二氟乙基和2，2，2-三氟乙基。C1-C3氟烷氧基的实例包括氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基和2，2，2-三氟乙氧基。-O(C1-C3氘烷基)是部分或完全氘代的O-甲基、O-乙基或O-正丙基或O-异丙基。C3-C6环烷基是指环丙基、环丁基、环戊基或环己基。2-吡啶基是通过在吡啶N-原子的间位的键附接的吡啶环，即基团
Figure BDA0003241985750000091
除非明确说明，否则基团的键合原子可以是该基团的任何适合的原子；例如，丙基包括丙-1-基和丙-2-基。
除非另外说明，卤素选自Cl、F、Br和I，通常选自Cl、F或Br、或Cl和F。
如上所述，基团A可以是苯基或双环杂芳基。在本文背景中，双环杂芳基是芳香族基团，该芳香族基团包含两个稠合环并且含有1、2、3或4个N原子，或一个O原子，或一个S原子，或1个N原子和一个S原子，或1个N原子和一个O原子，或2个N原子和一个S原子，或2个N原子和一个O原子。双环杂芳基包括其中两个稠合环均是芳香族的或者其中一个稠合环是芳香族的而另一个稠合环是部分或完全饱和的那些基团。所述部分或完全饱和的稠合环也可以包含羰基。合适的双环杂芳基的实例包括吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并***基、吲唑基、氮杂吲哚基、氮杂吲唑基、吡咯并[1，2-b]哒嗪基、吡咯并[2，3-b]吡啶基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基、喹喔啉基和萘啶基。
如上所述，具有式(I)的化合物中的基团X和Y可以是与经Z取代的芳香环稠合的5或6元N-杂环的相邻环原子，并且均为C或为C和N。术语5或6元N-杂环是指饱和或不饱和的，例如芳香族的含有至少一个氮原子和至多两个选自O、N和S的另外的杂原子的5或6元环。与经Z取代的芳香环稠合的5元N-杂环可以选自吡咯、咪唑、吡唑、1，2，3-***、1，2，4-***、噁唑、异噁唑、噁二唑、噻唑和异噻唑及其部分饱和的等同物。与经Z取代的芳香环稠合的6元N-杂环可以选自吡啶、哒嗪、嘧啶和吡嗪。5或6元N-杂环可以任选地被一个或两个选自以下的取代基取代：C1-C3烷基、C1-C3氟烷基、C1-C3烷氧基、Cl、F、CN、OH、OMe、OEt、NH2、NHMe、NMe2和任选地被OH、OMe、NH2、NHMe或NMe2取代的C1-C3烷基。
如上所述，具有式(I)的化合物中的基团R7和R8可以是任选经取代的5或6元碳环或杂环。术语任选经取代的5或6元碳环或杂环是指含有至多三个选自O、N和S的杂原子的饱和或不饱和(例如芳香族)环。5元杂环可选自吡咯、咪唑、吡唑、1，2，3-***、1，2，4-***、噁唑、异噁唑、1，2，3-噁二唑、噻唑、异噻唑及其部分或完全饱和的等同物。6-元杂环可以选自吡啶、哒嗪、嘧啶和吡嗪。5或6元碳环或杂环可以任选地被一个或两个选自以下的取代基取代：C1-C3烷基、C1-C3氟烷基、C1-C3烷氧基、Cl、F、CN、OH、OMe、OEt、NH2、NHMe、NMe2和任选地被OH、OMe、NH2、NHMe或NMe2取代的C1-C3烷基。
如上所述，在基团R7和R8均存在于具有式(A)的化合物，例如具有式(I)的化合物中的情况下，它们可以组合形成与经Z取代的芳香环稠合的任选经取代的5或6元碳环或杂环。任选经取代的5或6元碳环或杂环可以是饱和或不饱和的。5或6元碳环或杂环可以任选地被一个或两个选自以下的取代基取代：C1-C3烷基、C1-C3氟烷基、C1-C3烷氧基、Cl、F、CN、OH、OMe、OEt、NH2、NHMe、NMe2和任选地被OH、OMe、NH2、NHMe或NMe2取代的C1-C3烷基。在R7和R8组合形成5元环的情况下，它们一起可以代表C3、C2O、COC、C2N、CNC、CNO、NCO、CNS或NCS链。在R7和R8组合形成6元环的情况下，它们一起可以代表C4、C3O、COC2、OC2O、C3N、C2NC、NCNC、CNNC或NCCN链。原子的R7和R8链共价键合并被氢或任选的取代基取代，以满足其常价。
为避免疑义，在多个取代基独立地选自一个给定的组的情况下，所选择的取代基可以包括来自给定的组中的相同的取代基或不同的取代基。仅通过举例的方式，在环A是被(R1)n取代的苯基的情况下，并且在n是2的情况下，两个R1取代基可以是相同的(例如两个氟)，或可以是不同的(例如一个氟和一个羟基)。
为进一步避免疑义，在本说明书的式中使用的
Figure BDA0003241985750000111
表示不同基团之间的附接点。
在本说明书内的任何实施例包括被称为是“任选经取代的”的基团的情况下，则另一个实施例将包括其中所述基团未被取代的实施例。
根据本说明书的第一方面，提供了一种具有式(A)的化合物：
Figure BDA0003241985750000121
其中：
A是苯基或双环杂芳基；
X和Y通过双键连接，并且i)X是CR7并且Y是CR8，ii)X是N并且Y是CR8，或者iii)X是CR7并且Y是N；或
X和Y一起是C(O)NR9；或
X和Y是与经Z取代的芳香环稠合的任选经取代的5或6元N-杂环的相邻环原子，并且X和Y均为C或为C和N；
Z是O、NH、或NMe；
R1独立地选自F、Cl、Br、OH、CH2OH、OMe、CH2OMe、C1-C3烷基和C1-C3氟烷基；
n是0、1、2或3；
R2是H、F、Cl、CCH、CCMe、CN、Br、C1-C3烷基、C1-C3氟烷基、OMe或OEt；
R3a和R3b一起是＝O或者R3a和R3b是H；
R4是H或Me；
R5是H或Me；
R6是H或CH2NMe2；
R7和R8独立地选自H、F、Cl、CCH、CC(C1-C3烷基)、CCCH2NMe2、CCCH2O(C1-C3烷基)、CN、Me、C1-C6烷基、OH、OMe、O(C1-C3烷基)、O(C1-C3氘烷基)、O(C1-C3氟烷基)、O(C3-C6环烷基)、C1-C3氟烷基、OCH2CH2NMe2、OCH2CH2OMe、CH2OMe、OCH2CH2N(CH2CH2)2CH、OCH2CH2N(CH2CH2)2O、OCH2CH2(2-吡啶基)或者任选经取代的3、4、5或6元碳环或杂环；或
R7和R8组合形成任选经取代的5或6元碳环或杂环；
R9选自H、Me、Et、C3H7和C1-C3氟烷基；
或其药学上可接受的盐。
在实施例中，具有式(A)的化合物是具有式(Aa)的化合物，其中R6是H。
在实施例中，具有式(A)或(Aa)的化合物是具有式(Ab)的化合物，其中R5是H。
在实施例中，具有式(A)、(Aa)或(Ab)的化合物是具有式(Ac)的化合物，其中R4是H。
在实施例中，具有式(A)、(Aa)、(Ab)或(Ac)的化合物是具有式(Ad)的化合物，其中A是苯基。
在实施例中，具有式(A)的化合物是具有式(Ae)的化合物
Figure BDA0003241985750000131
在实施例中，具有式(Ae)的化合物是具有式(Af)的化合物，其中R5是H。
在实施例中，具有式(Ae)或(Af)的化合物是具有式(Ag)的化合物，其中R3a和R3b是H。
在实施例中，具有式(Ae)或(Af)的化合物是具有式(Ah)的化合物，其中R3a和R3b一起是＝O。
在实施例中，具有式(Ae)、(Af)、(Ag)或(Ah)的化合物是具有式(Ai)的化合物，其中Z是O。
在实施例中，具有式(Ae)、(Af)、(Ag)、(Ah)或(Ai)的化合物是具有式(Aj)的化合物，其中R2选自F或Cl。
在实施例中，具有式(Ae)、(Af)、(Ag)、(Ah)、(Ai)或(Aj)的化合物是具有式(Ak)的化合物，其中n是2或3并且至少2个取代基R1是联芳基键的邻位。
在实施例中，具有式(Ae)、(Af)、(Ag)、(Ah)、(Ai)、(Aj)或(Ak)的化合物是具有式(Al)的化合物，其中至少一个R1基团是OH。
在实施例中，具有式(A)、(Ae)、(Af)、(Ag)、(Ai)、(Aj)、(Ak)或(Al)的化合物是具有式(Am)的化合物
Figure BDA0003241985750000141
在实施例中，具有式(A)、(Ae)、(Af)、(Ag)、(Ah)、(Ai)、(Aj)、(Ak)或(Al)的化合物是具有式(An)或(Ao)的化合物
Figure BDA0003241985750000142
在实施例中，具有式(A)、(Ae)、(Af)、(Ag)、(Ah)、(Ai)、(Aj)、(Ak)或(A1)的化合物是具有式(Ap)的化合物，其中X和Y是C(O)NR9。
在实施例中，具有式(A)、(Ae)、(Af)、(Ag)、(Ah)、(Ai)、(Aj)、(Ak)或(Al)的化合物是具有式(Aq)的化合物，其中X和Y是任选经取代的吡咯、咪唑、吡唑、1，2，3-***、1，2，4-***、噁唑、异噁唑、1，2，3-噁二唑、噻唑或异噻唑的相邻环原子。
在实施例中，具有式(Aq)的化合物是具有式(Ar)的化合物，其中在含有X和Y的5元环上的任选取代基选自C1-C3烷基、OC1-C2烷基、OMe、OH、F和Cl。
在实施例中，具有式(A)、(Aa)至(Ar)的化合物具有以下所示的立体化学
Figure BDA0003241985750000151
如上文所指出，本说明书提供了一种具有式(I)的化合物：
Figure BDA0003241985750000152
其中：
A是苯基或双环杂芳基；
X和Y通过双键连接，并且i)X是CR7并且Y是CR8，ii)X是N并且Y是CR8或者iii)X是CR7并且Y是N；或
X和Y一起是C(O)NR9；或
X和Y是与经Z取代的芳香环稠合的任选经取代的5或6元N-杂环的相邻环原子，并且X和Y均为C或为C和N；
Z是O、NH、或NMe；
R1独立地选自F、Cl、Br、OH、CH2OH、OMe、CH2OMe、C1-C3烷基、C1-C3氟烷基；
n是0、1、2或3；
R2是H、F、Cl、CCH、CCMe、CN、Br、C1-C3烷基、C1-C3氟烷基、OMe或OEt；
R3a和R3b一起是＝O或者R3a和R3b是H；
R4是H或Me；
R5是H或Me；
R6是H或CH2NMe2；
R7和R8选自H、F、Cl、CCH、CN、Me、OH、OMe、O(C1-C3烷基)、C1-C3氟烷基或任选经取代的5或6元碳环或杂环；或
R7和R8组合形成任选经取代的5或6元碳环或杂环；
R9选自H、Me、Et、C3H7和C1-C3氟烷基；
或其药学上可接受的盐。
在实施例中，具有式(I)的化合物是具有式(Ia)的化合物，其中R6是H。
在实施例中，具有式(I)或(Ia)的化合物是具有式(Ib)的化合物，其中R5是H。
在实施例中，具有式(I)、(Ia)或(Ib)的化合物是具有式(Ic)的化合物，其中R4是H。
在实施例中，具有式(I)、(Ia)、(Ib)或(Ic)的化合物是具有式(Id)的化合物，其中A是苯基。
在实施例中，具有式(I)的化合物是具有式(Ie)的化合物
Figure BDA0003241985750000161
在实施例中，具有式(Ie)的化合物是具有式(If)的化合物，其中R5是H。
在实施例中，具有式(Ie)或(If)的化合物是具有式(Ig)的化合物，其中R3a和R3b是H。
在实施例中，具有式(Ie)或(If)的化合物是具有式(Ih)的化合物，其中R3a和R3b一起是＝O。
在实施例中，具有式(Ie)、(If)、(Ig)或(Ih)的化合物是具有式(Ii)的化合物，其中Z是O。
在实施例中，具有式(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)或(Ii)的化合物是具有式(Ij)的化合物，其中R2选自F或Cl。
在实施例中，具有式(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii)或(Ij)的化合物是具有式(Ik)的化合物，其中n是2或3并且至少2个取代基R1是联芳基键的邻位。
在实施例中，具有式(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii)、(Ij)或(Ik)的化合物是具有式(Il)的化合物，其中至少一个R1基团是OH。
在实施例中，具有式(I)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ii)、(Ij)、(Ik)或(Il)的化合物是具有式(Im)的化合物
Figure BDA0003241985750000171
在实施例中，具有式(I)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii)、(Ij)、(Ik)或(Il)的化合物是具有式(In)或(Io)的化合物
Figure BDA0003241985750000172
在实施例中，具有式(I)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii)、(Ij)、(Ik)或(Il)的化合物是具有式(Ip)的化合物，其中X和Y是C(O)mR9。
在实施例中，具有式(I)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii)、(Ij)、(Ik)或(Il)的化合物是具有式(Iq)的化合物，其中X和Y是任选经取代的吡咯、咪唑、吡唑、1，2，3-***、1，2，4-***、噁唑、异噁唑、1，2，3-噁二唑、噻唑或异噻唑的相邻环原子。
在实施例中，具有式(Iq)的化合物是具有式(Ir)的化合物，其中在含有X和Y的5元环上的任选取代基选自C1-C3烷基、OC1-C2烷基、OMe、OH、F和Cl。
在实施例中，具有式(I)、(Ia)至(Ir)的化合物具有以下所示的立体化学
Figure BDA0003241985750000181
在实施例中，具有式(A)的化合物选自：
(12aS)-2-丙烯酰基-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-6-酮；
1-((12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮；
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮；
1-((12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮；
1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-咪唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-7-甲腈；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-吡唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-((12aR)-10-氯-8-氟-9-(5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮；
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈；
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲基-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮；
1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
8-[(12aR)-10-氯-8-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-7-甲基异喹啉-1(2H)-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮
(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aS)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2，3-二氟-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8，10-二氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8，10-二氟-9-[2-氟-6-(羟基甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8，10-二氟-9-[2-羟基-6-(三氟甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-乙基-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-[2-(二氟甲基)-6-羟基苯基]-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈；
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈；
1-[(12aR)-9-(2-溴-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8-氯-10-氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8-氯-10-乙炔基-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-乙炔基-8-氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮；
1-[(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮；
1-[(8aR)-6-氯-5-(2-氟-6-羟基苯基)-8a，9，11，12-四氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-10(8H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；和
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-((12aR)-10-氯-8-乙炔基-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮；
1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-乙炔基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，8-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-7，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-((12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；和
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-1-(丙-1-炔-1-基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮；和
1-((6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-1-乙炔基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基)丙-2-烯-1-酮；
或其药学上可接受的盐。
如本领域技术人员将理解的，本说明书的化合物在环A与含有X和Y的环之间含有联芳基键。
下文中与具有式(I)的化合物有关的阐述应理解为等同地适用于具有式(A)的化合物。
具有式(A)的化合物，例如具有式(I)的化合物，例如在附接有丙烯酰胺的哌嗪与包含Z的环之间的桥头碳上具有一个或多个手性中心，并且将认识到，可以在另外具有式(A)的化合物的一种或多种其他可能的立体异构形式以任何相对比例存在或不存在的情况下制备、分离和/或提供具有式(A)的化合物，例如具有式(I)的化合物。立体富集或立体纯化合物的制备可以通过本领域熟知的标准有机化学技术来进行，例如通过从立体富集或立体纯起始材料合成、在合成过程中使用适当的立体富集或立体纯催化剂来进行，和/或通过拆分外消旋或部分富集的立体异构体混合物(例如经由手性色谱法)来进行。在优选的实施例中，当Z为O时，本说明书的化合物呈(R)-构型，如下所示。
Figure BDA0003241985750000231
特别地，由于绕A与含有X和Y的环之间的联芳基键的受限旋转，具有式(I)的化合物可以具有轴向手性，并且因此可以按对映异构体过量值在约0％与＞98％ee之间的阻转异构体的混合物存在。当化合物是纯阻转异构体时，每个手性中心的立体化学可以由aR或aS来指定。此类命名也可以用于富含一种阻转异构体的混合物。仅通过举例的方式，以下部分可以表现出阻转异构现象并且能够通过手性色谱法拆分成aR和aS阻转异构体。为了说明，其中环A为2-F、6-羟基苯基的具有式(I)化合物的两种阻转异构体如下所示(为清楚起见，省略了R3、R4、R3和R6)。
Figure BDA0003241985750000241
对阻转异构和轴向手性的进一步描述以及构型排布的规则可在Eliel，E.L.&Wilen，S.H.‘Stereochemistry of Organic Compounds[有机化合物的立体化学]’JohnWiley and Sons，Inc.[约翰·威利父子公司出版社]1994中找到。在本说明书的化合物中，可以选择基团R1、R2和X以消除或基本上减少(aR)和(aS)阻转异构体之间的互变。
更详细地，一个或多个基团A(R1)n与取代基R2和/或X之间的相互作用可以有利地限制围绕环A和含有X的环之间的键的旋转。结果是，取代基R2与环A和/或环上的一个或多个取代基R1之间的相互作用可用于稳定根据本说明书的化合物的阻转异构体。这进而可以有利地允许分离作为G12C突变型Ras的抑制剂表现出比第二阻转异构体更高的活性的稳定性阻转异构体。应理解，更具活性的阻转异构体是优选的实施例。
在其中基团X被取代的具有式(I)的化合物的实施例中，取代基可以像R2一样能够稳定根据说明书的化合物的阻转异构体。
在本说明书的实施例中，还提供了一种可用于制备具有式(I)的化合物的中间体(II)或其在哌嗪NH(对于具有式(IX)的化合物在下面用*标记)处受保护的衍生物，其中基团和取代基是如以上对具有式(I)至式(Ir)的任何化合物所定义的。
Figure BDA0003241985750000251
在一个相关的实施例中，提供了一种用于合成具有式(I)的化合物的方法，该方法包括具有式(IX)的化合物与i)丙烯酰氯或其等同物(诸如丙烯酰酐)，和碱或ii)丙烯酸或其酯和偶联剂的反应。
在本说明书的实施例中，提供了一种药物组合物，该药物组合物包含具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，与药学上可接受的赋形剂相联合；任选地进一步包含具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的一种或多种其他立体异构体形式，其中该具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以非对映异构体过量值(d.e％)≥90％存在于该组合物中。
在本说明书的实施例中，提供了一种药物组合物，该药物组合物包含具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，与药学上可接受的赋形剂相联合；任选地进一步包含具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的一种或多种其他立体异构体形式，其中该具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以对映异构体过量值(ee％)、≥90％和非对映异构体过量值(de％)≥90％存在于该组合物中。
具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐可以按无定形形式、结晶形式、或半结晶形式制备、使用或提供并且任何给定的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可以能够被形成为多于一种结晶/多晶型形式，包括水合的(例如半水合物、一水合物、二水合物、三水合物或其他化学计量水合物)和/或溶剂化形式。应当理解的是，本说明书涵盖了任何以及所有具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐的此类固体形式。
在本说明书的另外的实施例中，提供了具有式(I)的化合物，该化合物通过在以下‘实例’部分中所描述的方法可获得。
本说明书旨在包括存在于本发明化合物中的原子的所有同位素。同位素应理解为包括具有相同原子数但具有不同质量数的那些原子。例如，氢的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括13C和14C。具有式(I)的同位素标记的化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与在附随的实例中所描述的那些类似的过程使用适当的同位素标记的试剂替代以前采用的非标记的试剂来制备。
具有式(I)的化合物的合适的药学上可接受的盐可以是例如酸加成盐。具有式(I)的化合物的合适药学上可接受的盐可以是例如具有式(I)的化合物的酸加成盐，例如与无机或有机酸的酸加成盐。说明书中的化合物可以作为游离化合物(即处于非盐化状态)来提供。
具有式(I)的化合物的另一种适合的药学上可接受的盐可以是例如在向所述人体或动物体给予具有式(I)的化合物之后在所述人体或动物体内所形成的盐。
可以将具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐制备为共晶固体形式。应当理解的是具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的药学上可接受的共晶形成本说明书的一个方面。
对于在药学背景下的使用，可优选的是在不存在大量其他立体异构体形式的情况下提供具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
具有式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐将通常经由口服途径给予，但是以包含活性成分或其药学上可接受的盐或其溶剂化物或这种盐的溶剂化物的药物制剂的形式、以药学上可接受的剂型的肠胃外、静脉内、肌肉内、皮下或其他可注射方式、含服、直肠、***、经皮和/或鼻途径和/或经由吸入的给予也是可以的。取决于有待治疗的障碍和患者以及给予途径，可以按变化的剂量给予这些组合物，例如以从1mg至1,000mg或从100mg至2,000mg的口服剂量给予。
上面所述的具有式(I)的化合物的药物配制品可以被制备例如用于肠胃外、皮下、肌肉内或静脉内给予。
上面所述的具有式(I)的化合物的药物配制品可以方便地以单位剂型给予，并且可以通过制药领域中熟知的任何方法，例如Remington′s Pharmaceutical Sciences[雷明登氏药学全书]，第17版，Mack Publishing Company[马克出版公司]，伊斯顿(Easton)，宾夕法尼亚州(PA.)，(1985)中所述的制备。
适于口服给予的药物配制品可以包含一种或多种生理上相容的载体和/或赋形剂，并且可以呈固体或液体形式。片剂和胶囊可以用粘合剂、填料、润滑剂和表面活性剂制备。液体组合物可以含有常规添加剂，诸如助悬剂、乳化剂和防腐剂。液体组合物可以包封在例如明胶中以提供单位剂型。固体口服剂型包括片剂、两件式硬壳胶囊和软弹性明胶(SEG)胶囊。示例性口服组合物包含填充到两件式硬壳胶囊或软弹性明胶(SEG)胶囊中的具有式(I)的化合物和至少一种药学上可接受的赋形剂。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在如人类的温血动物中作为药物使用。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在如人类的温血动物中产生抗增殖性作用。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在如人类的温血动物中作为抑制和/或治疗实体瘤疾病的抗侵袭性药剂使用。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于在如人类的温血动物中产生抗增殖性作用的用途。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于在如人类的温血动物中产生抗增殖性作用的药物中的用途。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于在如人类的温血动物中作为抑制和/或治疗实体瘤疾病的抗侵袭性药剂使用的药物中的用途。
根据另一个实施例，提供了一种用于在需要这种治疗的温血动物(如人类)中产生抗增殖性作用的方法，该方法包括向所述动物给予有效量的如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在本说明书中，除非另外说明，否则短语“有效量”意指化合物或组合物的足以显著和积极地改变待治疗的症状和/或病症(例如，提供积极的临床反应)的量。用于药物组合物中的活性成分的有效量将随所治疗的具体病症、病症的严重程度、治疗的持续时间、同步治疗的性质、所利用的一种或多种具体活性成分、所利用的一种或多种具体药学上可接受的赋形剂/载体、以及处于主治医生的知识和专业知识范围内的类似因素而变化。有效量通常在0.1mg至1,000mg的范围内。
根据另一个实施例，提供了一种用于通过在需要这种治疗的温血动物(如人类)中抑制和/或治疗实体瘤疾病来产生抗侵袭性作用的方法，该方法包括向所述动物给予有效量的如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在如人类的温血动物中预防或治疗癌症。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于在如人类的温血动物中预防或治疗癌症的药物中的用途。
根据另一个实施例，提供了一种用于在需要这种治疗的温血动物(如人类)中预防或治疗癌症的方法，该方法包括向所述动物给予有效量的如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在如人类的温血动物中预防或治疗实体瘤疾病。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于在如人类的温血动物中预防或治疗实体瘤疾病的药物中的用途。
根据另一个实施例，提供了一种用于在需要这种治疗的温血动物(如人类)中预防或治疗实体瘤疾病的方法，该方法包括向所述动物给予有效量的如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于预防或治疗对G12C突变型Ras的抑制敏感的肿瘤。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于预防或治疗对G12C突变型Ras的抑制敏感的那些肿瘤的药物中的用途。
根据另一个实施例，提供了一种用于预防或治疗对G12C突变型RAS的抑制敏感的那些肿瘤的方法，该方法包括向有需要的患者给予有效量的如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于提供对G12C突变型Ras的抑制作用。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于提供对G12C突变型Ras的抑制作用的药物中的用途。
根据另一个实施例，还提供了一种用于提供对G12C突变型RAS的抑制作用的方法，该方法包括向有需要的患者给予有效量的如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于提供对G12C突变型Ras的选择性抑制作用。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于提供对G12C突变型Ras的选择性抑制作用的药物中的用途。
根据另一个实施例，还提供了一种用于提供对G12C突变型Ras的选择性抑制作用的方法，该方法包括向有需要的患者给予有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
本文描述了可以结合G12C突变型Ras的化合物。在基于生物化学和细胞的测定中，本说明书的化合物显示为强力的G12C突变型Ras蛋白结合物，并且因此可以有用于治疗由KRas、NRas或HRas G12C突变介导的障碍，具体来说，可以有用于治疗表达G12C突变型KRas、NRas或HRas蛋白的癌症，如胰腺癌、结肠直肠癌、子宫癌、胆管癌、胃癌、膀胱癌、***、睾丸生殖细胞癌和非小细胞肺癌和多发性骨髓瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、横纹肌肉瘤和皮肤鳞状细胞癌。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗由KRas、NRas或HRas G12C突变介导的障碍。
根据另一个实施例，提供了一种用于治疗由KRas、NRas或HRas G12C突变介导的障碍的方法，该方法包括给予有效量的如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗由KRas、NRas或HRas G12C突变介导的障碍的药物中的用途。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗胰腺癌、非小细胞肺癌或结肠直肠癌。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗非小细胞肺癌。
根据另一个实施例，提供了一种用于治疗胰腺癌、非小细胞肺癌或结肠直肠癌的方法，该方法包括向有需要的患者给予有效量的如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
根据另一个实施例，提供了一种用于治疗非小细胞肺癌的方法，该方法包括向有需要的患者给予有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗胰腺癌、非小细胞肺癌或结肠直肠癌的药物中的用途。
根据本说明书的另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗非小细胞肺癌的药物中的用途。
本文所定义的抗癌治疗可以作为单独疗法施用，或除本说明书的化合物外，还可以涉及常规外科手术或放射疗法或化学疗法。
因此，在一个实施例中，提供了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、以及一种另外的抗肿瘤物质，用于联合治疗癌症。
根据本说明书的一个实施例，提供了一种适用于治疗癌症的组合，该组合包括具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和另一种抗肿瘤剂。
在本说明书的另外的实施例中，提供了与另一种抗肿瘤剂组合的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在相关的实施例中，提供了一种治疗方法，该方法包括将具有式(I)的化合物与另一种抗肿瘤剂组合给予有需要的患者，例如患有表达G12C突变体Ras的癌症的患者。
虽然具有式(I)的化合物主要具有作为用于温血动物(包括人类)的治疗剂的价值，但它们也有用在需要抑制G12C突变型Ras的任何时候。因此，它们有用于作为用于在开发新生物测试以及寻找新药理学药剂中使用的药理学标准。
另一个实施例是基于鉴定患者的G12C KRas、HRas或NRas突变状态与对具有式(I)的化合物治疗的潜在敏感性之间的联系。然后可以有利地使用Ras抑制剂，诸如具有式(I)的化合物来治疗具有G12CKRas、HRas或NRas突变的可能对其他疗法有抗性的患者。因此，这提供了机会、方法和工具来选择用具有式(I)的化合物进行治疗的患者，特别是癌症患者。选择是基于待治疗的肿瘤细胞是否具有野生型或G12C突变型KRAS、HRAS或NRAS基因。因此，G12C KRAS、HRAS或NRAS基因状态可以用作生物标记物，以指示选择用具有式(I)的化合物进行治疗可以是有利的。
根据一个实施例，提供了一种用于选择用具有式(I)的化合物进行治疗的患者的方法，该方法包括提供来自患者的含有肿瘤细胞的样品；确定患者的含有肿瘤细胞的样品中的RAS基因编码野生型(第12位为甘氨酸)还是突变型(第12位为半胱氨酸)KRas、HRas或NRas蛋白；并且基于以上来选择用具有式(I)的化合物进行治疗的患者。
该方法可以包括或不包括实际患者样品分离步骤。因此，根据一个实施例，提供了一种用于选择用具有式(I)的化合物进行治疗的患者，该方法包括确定先前从患者分离的含有肿瘤细胞的样品中的RAS基因编码野生型(第12位为甘氨酸)还是突变型(第12位为半胱氨酸)KRas、HRas或NRas蛋白；并且基于以上来选择用具有式(I)的化合物进行治疗的患者。
在实施例中，如果肿瘤细胞DNA具有G12C突变型KRAS基因，那么选择该患者用具有式(I)的化合物进行治疗。
在实施例中，如果肿瘤细胞DNA具有G12C突变型HRAS基因，那么选择该患者用具有式(I)的化合物进行治疗。
在实施例中，如果肿瘤细胞DNA具有G12C突变型NRAS基因，那么选择该患者用具有式(I)的化合物进行治疗。
根据另一个实施例，提供了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗具有已经鉴别为携带G12C突变型KRAS基因的肿瘤细胞的癌症。
根据另一个实施例，提供了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗具有已经鉴别为携带G12C突变型HRAS基因的肿瘤细胞的癌症。
根据本说明书的另一个方面，提供了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗具有已经鉴别为携带G12C突变型NRAS基因的肿瘤细胞的癌症。
根据另一个实施例，提供了一种治疗具有已经鉴别为携带G12C突变型KRAS、HRAS或NRAS基因的肿瘤细胞的癌症的方法，该方法包括给予有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
根据另一个实施例，提供了一种包含具有式(I)的化合物的药物组合物，用于预防和治疗具有已经鉴别为携带G12C突变型KRAS、HRAS或NRAS基因的肿瘤细胞的癌症。
应了解，提供了以下实例以使得可以完全理解本发明的性质。还应了解，以下实例不旨在以任何方式限制描述的范围。
生物学测定
使用以下测定来测量本说明书的化合物的作用。
KRasG12C功能测定
将非活性负载GDP的生物素化KRasG12C蛋白质在内部进行表达、纯化和GDP负载。在含有20mM HEPES(pH 7.5)、5mM MgCl2、150mM NaCl和0.01％吐温20的测定缓冲液中制备所有酶和底物溶液。在测定缓冲液中制备10nM的负载GDP的生物素化KRasG12C和37.5ng/ml链霉亲和素铕穴状化合物(Cisbio公司)，将5μl分配到含有在DMSO中制备的测试和参考样品的384聚苯乙烯、Hibase、中结合性白色测定板(葛莱娜(Greiner)，#784075)的每个孔中，并将样品孵育4小时。在单独的混合物中，在含有50mM氟化钾和0.05mg/ml BSA的测定缓冲液中制备20nM GST-Raf Ras结合结构域(GST-RafRBD，在内部纯化)和4μg/ml抗GST XL665抗体(Cisbio公司)，并且平衡4小时，然后添加0.6μM鸟苷5′-[γ-硫代]三磷酸(GTPγS，西格玛公司)和0.08μM SOS(内部纯化)。然后将5μlGST-RAF RBD混合物分配到测定板的每个孔中。该添加引发核苷酸交换反应和非活性负载GDP的KRasG12C向活性GTPγS KRasG12C的转变。此举经由活性GTPγS KRasG12C与GST-Raf RBD之间的特异性结合相互作用同时检测，该相互作用使得铕和XL665紧密接近，从而使得能够在配备有HTRF过滤器模块的Pherastar(BMG)板读取仪上检测到增加的FRET信号。经由抑制核苷酸交换过程或抑制活性KRas：RafRBD结合相互作用来阻止KRas激活的任何化合物将导致减小的FRET信号。根据在Genedata screener(瑞士巴塞尔(Basel，Switzerland))中拟合的标准化剂量-反应FRET数据曲线计算IC50值。
此KRasG12C功能测定的数据在下表A中呈现。
KRasG12C质谱加合测定
将非活性负载GDP的生物素化KRasG12C蛋白质在内部进行表达、纯化和GDP负载。在含有20mM HEPES(pH 7.5)、5mM MgCl2和150mM NaCl的测定缓冲液中制备所有酶和底物溶液。在测定缓冲液中制备4μM的负载GDP的生物素化KRasG12C，并将50μl添加到含有500nl1mM测试化合物(最终浓度10μM)的96孔聚丙烯测定板(葛莱娜，#651201)的每个孔中，使其反应4小时，然后添加50μl 1％甲酸以淬灭反应。将板密封，然后在Xevo G2 QTOF(沃特世)和Acquity LC***(沃特世)上读取。将10μl样品注入Xbridge BEH300；C4；3.5um；2.1x50mm柱(沃特世)，梯度运行3分钟。将空白样品在每个测试样品之间运行。
将数据在Mass Lynx软件(沃特世公司)中分析，使用了总离子计数(TIC)迹线并且合并洗脱的蛋白质峰值数据。利用合并的谱图，使用MaxEnt1法将数据去卷积。测量针对脱辅基蛋白KRasG12C(APO)和KRAS+相关化合物质量(加合物)的峰面积，并且使用以下计算来计算加合物百分比：
加合物百分比＝100*(加合物峰面积/(APO+加合物峰的总和)。
来自此质谱加合测定的数据呈现在下表A中标记为KRasG12C M.S.结合平均加合物％的列中。
对于这些实例产生在表A中示出的数据(以下数据可以是来自单个实验的结果或两个或更多个实验的平均值)。
如从表A中可以看出的，本说明书的化合物经由抑制核苷酸交换过程或经由抑制活性KRas：Raf RBD结合相互作用来阻止KRas的激活，如从KRasG12C功能测定中的FRET信号降低看出的。此外，在KRasG12C质谱加合测定中证明了本说明书的化合物是KRasG12C的有效共价结合物。还可以看出，各种阻转异构体对之间的活性差异通常是明显的，例如是10或20倍或更多。
表A
Figure BDA0003241985750000351
Figure BDA0003241985750000361
Figure BDA0003241985750000371
血脑屏障渗透评估
为了评估血脑屏障(BBB)渗透特性，在用BBB内皮细胞表达的主要外排泵转染的细胞中测量了根据本说明书的化合物的外排特性。外排特性的评估是使用双重转染了MDR1(Pgp)和BCRP的Madin-Darby犬肾(MDCK)细胞进行的。因此，转染的细胞系MDCK_MDR1_BCRP表达了两种主要的外排泵，它们有活性地起着排除化合物跨BBB转运的作用，并且可以按照文献中的描述测量从这些细胞的外排比率(Durant等人，Sci.Adv.[科学进展]2018；eeat：1719)。通过此技术测量的具有2或更小的外排比率的化合物被鉴定为具有良好的BBB渗透特性的潜力(Colclough等人，Drug Disc.Today[今日药物发现]2019；24(5)，1067-73)。下表B中提供了所选择的根据本说明书的化合物的外排比率。
表B
Figure BDA0003241985750000372
Figure BDA0003241985750000381
实例
现将在以下实例中说明本说明书，除非另外说明，否则其中：
(i)除非另外说明，否则在环境温度(即在17℃至25℃范围内)和在如氮气等的惰性气体的气氛下进行合成；
(ii)通过旋转蒸发或利用Genevac设施或拜泰齐(Biotage)v10蒸发器在真空中进行蒸发且在通过过滤去除残余固体状之后进行处理程序；
(iii)在Merck Kieselgel二氧化硅(Art.9385)上或在反相二氧化硅(Fluka硅胶90 C18)上或在Silicycle柱体(40μm-63μm二氧化硅、4g至330g重量)上或在Grace resolv柱体(4g-120g)上或在RediSep Rf 1.5快速柱上或在RediSep Rf高效Gold快速柱(150g-415g重量)上或在RediSep RfGold C18反相柱(20μm-40μm二氧化硅)上或在InterchimpuriFlash柱体(50μm二氧化硅，4g-800g)上，使用Isco CombiFlash Companion***或类似***手动地或自动化进行快速柱色谱法；
(iv)在装有ZMD或ZQ ESCi质谱仪和沃特世X-Terra反相柱或沃特世X-Bridge反相柱或沃特世SunFire反相柱(C-18，5微米二氧化硅，19mm或50mm直径，100mm长度，40mL/分钟的流速)的沃特世仪器(600/2700或2525)上，使用水(含有1％氨)和乙腈的极性渐减混合物或者水(含有0.1％甲酸)和乙腈的极性渐减混合物作为洗脱剂进行制备型反相HPLC；
(v)产率(当存在时)并不必需为可获得的最大值；
(vi)通常，具有式I的终产物的结构通过核磁共振(NMR)光谱法确认；NMR化学位移值是以δ级测量的[质子磁共振光谱使用Bruker Avance 500(500MHz)、Bruker Avance 400(400MHz)、Bruker Avance 300(300MHz)或Bruker DRX(300MHz)仪器测定]；除非另外说明，测量在环境温度下进行；使用以下缩写：s，单峰；d，二重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；dd，双二重峰；ddd，双二重峰的双重峰；dt，双三重峰；bs，宽峰信号；
(vii)通常，具有式I的终产物还通过液相色谱法(LCMS或UPLC)后的质谱进行表征；通常，使用反相C18二氧化硅，流速为1mL/分钟，并且通过电喷雾质谱和通过记录220-320nm波长范围的UV吸光度进行检测。使用尺寸为2.1x50mm，并且粒度为1.7微米的沃特世XSelect CSH C18柱，在CSH C18反相二氧化硅上进行分析性UPLC。使用极性渐减混合物作为洗脱剂，例如使用水(含有0.1％甲酸或0.1％氨)作为溶剂A和乙腈作为溶剂B的极性渐减混合物进行梯度分析。典型的2分钟UPLC分析方法将采用经1.3分钟的溶剂梯度，每分钟约1mL，分别从溶剂A和B的97∶3混合物到溶剂A和B的3∶97混合物。除非另外说明，否则报告的分子离子对应于[M+H]+；
(viii)离子交换纯化通常使用SCX-2(拜泰齐公司)柱体进行；
(ix)在反应是指使用微波的情况下，使用以下微波反应器中之一：Biotage引发器、个人化学Emrys优化器(Personal Chemistry Emrys Optimizer)、个人化学Smithcreator(Personal Chemistry Smith Creator)或CEM探测器；
(x)中间体纯度通过薄层色谱法、质谱法、LCMS、UPLC/MS、HPLC和/或NMR分析来评估；
(xi)使用以下缩写：
Boc-叔丁氧基羰基；DCM-二氯甲烷；DIPEA-N，N-二异丙基乙胺；DMA-二甲基乙酰胺；DMF-二甲基甲酰胺；EtOAc-乙酸乙酯；h-小时；HATU-(1-[双(二甲基氨基)甲叉]-1H-1，2，3-***并[4，5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸酯；MeCN-乙腈；MeOH-甲醇；iPrOH-异丙醇；NMP-N-甲基-2-吡咯烷酮；rt-室温；RuPhos Pd G3-甲磺酸(2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基-1，1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1，1′-联苯基)]钯(II)；RuPhos-2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯；SCX-强阳离子交换；BrettPhos Pd G3-[(2-二-叔丁基膦基-3，6-二甲氧基-2′，4′，6′-三异丙基-1，1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1，1′-联苯基)]钯(II)甲磺酸叔丁酯；TFA-三氟乙酸；THF-四氢呋喃；XPhos Pd G3-(2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基-1，1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1，1′-联苯基)]钯(II)甲磺酸酯。
(S)-4-(4-溴-3-氯-2-氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000401
在室温下将(S)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.875g，4.05mmol)添加到在THF(36.2mL)中的4-溴-3-氯-2-氟苯甲酰氯(1g，3.68mmol)和三乙胺(0.538mL，3.86mmol)中。将反应搅拌1h。将反应用EtOAc(100mL)稀释，用水(50mL)和盐水(100mL)洗涤，将有机层干燥(MgSO4)并蒸发，以提供粗产物。将其与MeOH一起研磨，得到固体，将其通过过滤收集并在真空下干燥，得到呈白色固体的(S)-4-(4-溴-3-氯-2-氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.471g，89％)。1H NMR(500MHz，DMSO，100℃)1.43(9H，s)，2.88(1H，td)，3.03(2H，d)，3.37-3.59(3H，m)，3.79-4.08(3H，m)，4.54(1H，t)，7.34(1H，dd)，7.68(1H，dd)。m/z：ES+[M-Boc]+352。
(S)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000411
在室温下将氢化钠(在矿物油中60％)(0.143g，3.58mmol)一次性添加到在DMF(13.03mL)中的(S)-4-(4-溴-3-氯-2-氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.471g，3.26mmol)中。将所得浆料在室温搅拌过夜。将反应混合物用水(100mL)和EtOAc(100mL)稀释，并依次用饱和NH4Cl(20mL)和盐水(3x100mL)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并蒸发以提供粗产物。将其溶解于DCM(2mL)中，并通过小的二氧化硅垫过滤，用50％EtOAc/庚烷洗脱，以提供呈浅黄色油状物的(S)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.25g，89％)，将其静置固化。1H NMR(500MHz，DMSO，27℃)1.41(9H，s)，3.47(2H，s)，3.52(1H，dd)，3.63(1H，d)，3.74(1H，d)，3.85-3.99(2H，m)，4.34(2H，s)，7.55(1H，d)，7.63(1H，d)。
(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000412
将(5-甲基-1H-吲唑-4-基)硼酸(0.306g，1.74mmol)、(S)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.5g，1.16mmol)和Pd(PPH3)4(0.134g，0.12mmol)在二噁烷(9.84mL)中的溶液脱气并且添加Na2CO3(2M)(1.737mL，3.47mmol)。将反应在100℃下搅拌16h。将反应冷却至室温，用EtOAc(50mL)稀释，用盐水(2x50mL)洗涤，将有机相干燥(MgSO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至10％MeOH)进行纯化，以提供呈浅黄色胶状物的(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.442g，79％)。m/z：ES-[M-H]-481/483。
(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-6-酮
Figure BDA0003241985750000421
将TFA(2.66mL)添加到(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.642g，1.33mmol)在DCM(2.66mL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌1h。将混合物用MeOH(10mL)稀释，并通过SCX(7M NH3/MeOH)纯化，以提供呈黄色胶状物的(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-6-酮(0.479g，94％)。m/z：ES+[M+H]+383。
(12aS)-2-丙烯酰基-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-6-酮旋转异构体1，实例1；和旋转异构体2，实例2
Figure BDA0003241985750000422
经一段时间，将丙烯酰氯(0.106mL，1.31mmol)逐滴添加到在冷却至0℃的在DMA(2.156mL)中的(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-6-酮(0.479g，1.25mmol)和DIPEA(0.240mL，1.38mmol)中。将所得溶液在室温搅拌2h。将反应混合物倒入水中，并通过过滤收集所得固体，用水洗涤并在真空下干燥，以提供粗产物。将其通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％的NH3OH(在H2O中28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到(12aS)-2-丙烯酰基-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-6-酮(0.05g，18％)的呈无色胶状物的旋转异构体1。1H NMR(500MHz，DMSO，27℃)2.16(3H，s)，3.59(1H，s)，3.69(1H，s)，3.75-4.05(5H，m)，4.32-4.45(2H，m)，5.66-5.8(1H，m)，6.11-6.21(1H，m)，6.67-6.82(1H，m)，7.21(1H，d)，7.32(1H，d)，7.44(1H，s)，7.51(1H，d)，7.69-7.79(1H，m)，13.10(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+437/439。接着是(12aS)-2-丙烯酰基-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-6-酮(0.039g，14％)的呈无色胶状物的旋转异构体2。1H NMR(500MHz，DMSO，27℃)2.12(3H，s)，3.52-3.74(1H，m)，3.74-3.88(3H，m)，3.88-4.04(2H，m)，4.04-4.21(1H，m)，4.28-4.43(2H，m)，5.73(1H，dd)，6.11-6.24(1H，m)，6.67-6.82(1H，m)，7.20(1H，d)，7.31(1H，d)，7.46-7.57(2H，m)，7.71(1H，dd)，13.09(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+437/439。
(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓旋转异构体1和2
Figure BDA0003241985750000431
在室温下经5min的时间段，将硼烷THF复合物(1M)(3.66mL，3.66mmol)的溶液逐滴添加到(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1∶1旋转异构体混合物)(0.442g，0.92mmol)在THF(5.49mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在65℃下搅拌12h。将反应混合物冷却至室温，并添加MeOH(2mL)和NaOH(2M，0.5mL)，并将反应搅拌30min。将反应用水(20mL)和EtOAc(20mL)稀释，并用盐水(2x20mL)洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发至干燥。将固体重新溶解在DCM(10mL)中，并用TFA(5mL)处理1h。将混合物蒸发至干燥，并通过SCX(7M NH3/MeOH)纯化，以提供固体。将其通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％NH3)和MeCN作为洗脱剂纯化。得到(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓的呈黄色胶状物的旋转异构体1(0.156g，92％)。1H NMR(500MHz，DMSO，27℃)2.13(3H，s)，2.27-2.35(2H，m)，2.6-2.69(2H，m)，2.72-2.84(2H，m)，3.17(2H，s)，3.65(2H，d)，3.82(1H，d)，4.27(1H，dd)，6.97(1H，d)，7.27-7.29(1H，m)，7.31(1H，s)，7.39(1H，d)，7.47(1H，dd)，13.05(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+369。然后是(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓的呈黄色胶状物的旋转异构体2(0.154g，91％)。1H NMR(500MHz，DMSO，27℃)2.09(3H，s)，2.26-2.34(2H，m)，2.58-2.71(2H，m)，2.72-2.86(2H，m)，3.6-3.73(2H，m)，3.80(1H，d)，4.08(2H，s)，4.26(1H，dd)，6.97(1H，d)，7.27-7.32(2H，m)，7.45(1H，d)，7.47(1H，dd)，13.06(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+369。
1-((12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例3
Figure BDA0003241985750000441
在0℃下将丙烯酰氯(0.036mL，0.44mmol)添加到在DMA(1.508mL)中的(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓的旋转异构体1(0.156g，0.42mmol)和DIPEA(0.148mL，0.85mmol)。将所得溶液在室温搅拌1h。将反应混合物倒入水(10mL)中，并将所得沉淀物通过过滤收集，用水洗涤并在真空下干燥以提供粗产物。将其通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有1％NH3)和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到1-((12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.025g，14％)。1H NMR(500MHz，MeOD，27℃)2.17(3H，s)，2.47-2.62(1H，m)，2.85-3.07(3H，m)，3.09-3.25(1H，m)，3.44-3.54(1H，m)，3.67-3.76(1H，m)，3.96(1H，d)，4-4.1(1H，m)，4.12-4.32(1H，m)，4.38-4.5(1H，m)，5.77(1H，d)，6.23(1H，d)，6.71-6.87(1H，m)，7.00(1H，d)，7.31(1H，d)，7.34(1H，d)，7.41(1H，s)，7.44-7.5(1H，m)。m/z：ES-[M-H]-421/423。
1-((12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮旋转异构体2，实例4
Figure BDA0003241985750000451
将丙烯酰氯(0.038g，0.42mmol)添加到冷却至0℃的在DMA(1.67mL)中的(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓的旋转异构体2(0.154g，0.42mmol)和DIPEA(0.054g，0.42mmol)。将所得溶液在室温搅拌1h。将反应倒入水(10mL)中，并将所得沉淀物通过过滤收集，用水洗涤，并在真空下干燥，以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有1％NH3)和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到1-((12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.038g，22％)。1HNMR(500MHz，CDCl3，27℃)2.19(3H，s)，2.57(1H，t)，2.85-3.06(3H，m)，3.34(1H，s)，3.47-3.6(1H，m)，3.72-3.91(2H，m)，4.06(1H，d)，4.18-4.51(2H，m)，5.75(1H，d)，6.34(1H，dd)，6.59(1H，dd)，7.01(1H，d)，7.19(1H，d)，7.32(1H，d)，7.4-7.47(1H，m)，7.60(1H，s)，10.37(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+423/425。
(3R)-4-(4-溴-2，6-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000461
向在DCM(287mL)中的4-溴-2，6-二氟苯甲酸(10g，42.19mmol)添加(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10.04g，46.41mmol)和三乙胺(23.52mL，168.78mmol)。然后添加1-丙烷膦酸酐(在EtOAc中的50％溶液)(30mL，50.63mmol)，并将该反应混合物在25℃搅拌3h。将反应混合物用DCM(500mL)稀释，并用水(1000mL)、饱和NaHCO3溶液(500mL)、水(500mL)和盐水(500mL)洗涤。将有机相通过使其通过相分离柱体来干燥并蒸发至干燥，以提供(3R)-4-(4-溴-2，6-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(15.03g，82％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.34-1.43(9H，m)，2.55-3.03(3H，m)，3.2-3.68(4H，m)，3.8-4.15(2H，m)，4.22-4.37(1H，m)，7.55-7.68(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝378。
(12aR)-9-溴-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000462
在0℃下将氢化钠(在矿物油中60％)(0.953g，23.83mmol)一次性添加到在DMF(100mL)中的(3R)-4-(4-溴-2，6-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(9.43g，21.67mmol)。将所得溶液加温至25℃并搅拌2h。将反应混合物用乙醇淬灭并搅拌5min。将所得溶液用水(50mL)、EtOAc(100mL)稀释，并依次用饱和NH4Cl(50mL)、水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层通过使其通过相分离柱体来干燥，并在真空下除去溶剂，以提供(12aR)-9-溴-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(8.88g，99％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，d)，3.44-3.54(1H，m)，3.6-3.71(3H，m)，3.83-3.96(2H，m)，4.06-4.29(3H，m)，7.25(1H，s)，7.48(1H，dd)。m/z：ES+[M+H]+＝416。
(12aR)-9-溴-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000471
将(12aR)-9-溴-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(8.65g，20.83mmol)溶解在DMF(100mL)中，并在0℃脱气5min。添加甲醇钠(4.95g，91.65mmol)并且将反应混合物在80℃下加热1h。添加另外的甲醇钠(4.95g，91.65mmol)并且再搅拌2h。冷却至25℃后，将溶液用EtOAc(750mL)和水(750mL)稀释。将有机层分离，并用水(500mL)、盐水(500mL)洗涤，并经相分离器干燥。将溶剂在减压下除去，以提供粗产物，将其通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到呈白色固体的(12aR)-9-溴-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3.43g，39％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.20(1H，s)，3.35(1H，d)，3.45(1H，s)，3.61-3.75(2H，m)，3.79(3H，s)，3.84-3.98(2H，m)，4.03(1H，dd)，4.14(1H，t)，6.93(1H，d)，7.14(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝427。
(12aR)-9-溴-10-氯-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000481
将N-氯琥珀酰亚胺(1.07g，8.03mmol)和氯三甲基硅烷(0.102mL，0.8mmol)一次性添加到(12aR)-9-溴-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3.43g，8.03mmol)在MeCN(80mL)中的搅拌溶液中，并将反应在25℃下搅拌15min。将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释，并用水(100mL)、饱和NaHCO3(100mL)、水(100mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机相通过使其通过相分离柱体来干燥，并将溶剂在减压下蒸发，以提供粗产物。将其通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％的NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化，以提供呈白色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氯-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2.73g，74％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.20(1H，s)，3.32-3.54(2H，m)，3.62-3.78(2H，m)，3.80(3H，s)，3.85-4.04(2H，m)，4.10(1H，dd)，4.22(1H，t)，7.35(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝460。
(12aR)-9-溴-10-氯-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000482
在25℃下，将硼烷-THF复合物(1M)(20.79mL，20.79mmol)的溶液逐滴添加到(12aR)-9-溴-10-氯-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.2g，2.6mmol)在THF(5mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在75℃下加热1h，冷却至25℃，并用i-PrOH(20mL)淬灭。添加NaOH(2M，10mL)，并将反应再搅拌30min。然后将反应用水(100mL)和EtOAc(100mL)稀释，并将有机层用盐水(2x20mL)洗涤，经相分离柱体干燥，并且将溶剂在减压下去除以提供呈透明油状物的(12aR)-9-溴-10-氯-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.836g，72％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.58-2.75(3H，m)，2.99(1H，t)，3.34-3.51(2H，m)，3.6-3.7(3H，m)，3.81(3H，s)，3.98(1H，d)，4.25-4.38(1H，m)，7.12(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝446。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000491
将(12aR)-9-溴-10-氯-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(836mg，1.87mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(291mg，1.87mmol)和碳酸钾(1.5g，11.20mmol)在2-甲基四氢呋喃(14mL)和水(5mL)中的混合物脱气15min。在25℃下添加Ruphos Pd G3(156mg，0.19mmol)和RuPhos(87mg，0.19mmol)，并且然后将反应在60℃下加热4h。冷却至25℃后，将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释，并用水(2x100mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机相经相分离柱体干燥，并将溶剂蒸发至干燥，以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelectCSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到呈奶油色泡沫的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(414mg)。m/z：ES+[M+H]+＝470。
2-[(12aR)-10-氯-7-甲氧基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚
Figure BDA0003241985750000501
在25℃下，将HCl(在二噁烷中4M)(1.94mL，7.77mmol)添加到在MeOH(2mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(186mg，0.39mmol)中。将所得溶液在25℃下搅拌12h，并通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供呈白色固体的2-[(12aR)-10-氯-7-甲氧基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚(139mg，94％)。1HNMR(400MHz，CD3CN，30℃)2.3-2.48(2H，m)，2.58-2.85(5H，m)，2.88(1H，d)，3.46(1H，dd)，3.59(1H，ddd)，3.76(3H，s)，4.07(1H，d)，4.23(1H，dd)，6.64-6.81(3H，m)，7.24(1H，q)。m/z：ES+[M+H]+＝379。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮，实例5
Figure BDA0003241985750000502
在0℃下向2-[(12aR)-10-氯-7-甲氧基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚(139mg，0.37mmol)和DIPEA(0.083mL，0.48mmol)在DCM(4mL)中的搅拌溶液中逐滴添加丙烯酰氯(0.031mL，0.39mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌15min。将反应混合物用DCM稀释，并用水淬灭，并将有机层使用相分离柱体进行干燥。将溶剂在减压下除去，以提供粗胶，将其溶于冷的1M NH3/MeOH(20mL)中，并在25℃下搅拌1h。将反应混合物浓缩至干燥，以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世CSH C18OBD柱，30x100mm id，5微米粒度)使用水(含有按体积计1％的NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，并将其溶于MeOH(3mL)中，并使用SFC纯化(柱：Princeton Diol，30×250mm，5微米；流动相：经8分钟20％至25％MeOH+0.1％NH3/80％-75％scCO2；流速：100mL/min BPR：120巴)。将溶剂蒸发，以提供1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮(59mg，37％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.34-2.46(1H，m)，2.53-2.56(1H，m)，2.61-2.7(1H，m)，2.71-2.8(1H，m)，2.84(1H，d)，2.89-3.05(1H，m)，3.55(1H，dd)，3.68(1H，dt)，3.76(3H，s)，3.85-3.99(1H，m)，4-4.12(1H，m)，4.31-4.45(1H，m)，5.70(1H，s)，6.12(1H，d)，6.62-6.72(2H，m)，6.77(1H，dd)，6.79-6.89(1H，m)，7.22(1H，q)，9.82(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝433。
(3R)-4-(4-溴-2，6-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000511
向在DCM(287ml)中的4-溴-2，6-二氟苯甲酸(10.00g，42.19mmol)添加(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10.04g，46.41mmol)和三乙胺(23.52ml，168.78mmol)。然后添加
Figure BDA0003241985750000512
(在EtOAc中50％)(30ml，50.63mmol)，并且将反应混合物在25℃下搅拌3h。将反应混合物用DCM(500ml)稀释，然后用水(1L)、饱和NaHCO3(0.5L)、水(0.5L)和饱和盐水(0.5L)洗涤。将有机相干燥(相分离柱体)并蒸发，以提供(3R)-4-(4-溴-2，6-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(15.03g，82％)。使用的物质无需进一步纯化。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.34-1.43(9H，m)，2.55-3.03(3H，m)，3.2-3.68(4H，m)，3.8-4.15(2H，m)，4.22-4.37(1H，m)，7.55-7.68(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝378。
(12aR)-9-溴-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000521
在0℃下将氢化钠(在矿物油中的60％)(0.95g，23.8mmol)一次性添加到在DMF(100ml)中的(3R)-4-(4-溴-2，6-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(9.43g，21.7mmol)。将所得溶液加温至室温并搅拌2h。将反应混合物用EtOH淬灭并搅拌5min。将所得溶液用水(50ml)和EtOAc(100ml)稀释，然后依次用饱和NH4Cl(50ml)、水(50ml)和饱和盐水(50ml)洗涤。将有机层干燥(相分离柱体)并蒸发，以提供(12aR)-9-溴-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯，将其无需进一步纯化即可使用。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，d)，3.44-3.54(1H，m)，3.6-3.71(3H，m)，3.83-3.96(2H，m)，4.06-4.29(3H，m)，7.25(1H，s)，7.48(1H，dd)。m/z：ES+[M+H]+＝416。
(12aR)-9-溴-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000522
将(12aR)-9-溴-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(8.65g，20.83mmol)溶解在DMF(100ml)中并且在0℃下脱气5min。添加甲醇钠(4.95g，91.65mmol)并将反应混合物加热至80℃。1h后，添加甲醇钠(4.95g，91.65mmol)，并继续搅拌2h。冷却至室温后，将溶液用EtOAc(750ml)和水(750ml)稀释。将有机层分离，然后用水(500ml)和饱和盐水(500ml)洗涤，然后经相分离器干燥并蒸发。制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)，其使用水(含有按体积计1％的NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂，提供了呈白色固体的(12aR)-9-溴-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3.43g，38.5％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.20(1H，s)，3.35(1H，d)，3.45(1H，s)，3.61-3.75(2H，m)，3.79(3H，s)，3.84-3.98(2H，m)，4.03(1H，dd)，4.14(1H，t)，6.93(1H，d)，7.14(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝427。
(12aR)-9-溴-10-氯-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000531
将N-氯琥珀酰亚胺(1.07g，8.03mmol)和氯三甲基硅烷(0.102ml，0.80mmol)一次性添加到(12aR)-9-溴-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3.43g，8.03mmol)在乙腈(80ml)中的搅拌溶液中。将反应在25℃下搅拌15分钟，然后用EtOAc(100ml)稀释。然后将分离的有机层用水(100ml)、饱和NaHCO3(100ml)、水(100ml)和饱和盐水(100ml)洗涤。将有机相干燥(相分离柱体)，然后蒸发。制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)，其使用水(含有按体积计1％的NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂，提供了呈白色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2.73g，73.7％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.20(1H，s)，3.32-3.54(2H，m)，3.62-3.78(2H，m)，3.80(3H，s)，3.85-4.04(2H，m)，4.10(1H，dd)，4.22(1H，t)，7.35(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝460。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000541
将(12aR)-9-溴-10-氯-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.3g，2.82mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(0.43g，2.82mmol)和碳酸钾(2.33g，16.89mmol)在甲基-THF(21ml)和水(7ml)中的混合物脱气15min。在25℃下添加RuPhos Pd G3(0.235g，0.28mmol)和RuPhos(0.131g，0.28mmol)，并将反应混合物加热至60℃保持16h。然后引入(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(0.439g，2.82mmol)、水(2ml)和碳酸钾(1.20g)。3h后，将反应冷却至25℃，用EtOAc(200ml)稀释，然后用水(2x100ml)和饱和盐水(100ml)洗涤。将有机层干燥(相分离柱体)并蒸发。制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)，其使用水(含有按体积计1％的NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂，提供了呈奶油色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.930g，67.0％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.43(9H，s)，3.41(1H，d)，3.53(1H，s)，3.73(1H，s)，3.76(3H，s)，3.89-4.03(2H，m)，4.03-4.16(3H，m)，4.16-4.3(1H，m)，6.69-6.84(2H，m)，6.87-6.93(1H，m)，7.16-7.36(1H，m)，9.95(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝493。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮
Figure BDA0003241985750000551
在0℃下向在DCM(3mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(352mg，0.71mmol)逐滴添加三溴化硼(在DCM中1M)(4.28mL，4.28mmol)，并且搅拌至25℃持续2h。将反应用MeOH淬灭，并通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供呈黄色透明玻璃状的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(243mg，90％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.67-2.76(1H，m)，2.77-2.9(2H，m)，2.9-3(1H，m)，3.35-3.49(1H，m)，3.72-3.89(2H，m)，4.05-4.14(2H，m)，4.59(1H，t)，6.60(1H，d)，6.67-6.81(2H，m)，7.15-7.33(1H，m)，9.90(1H，d)，11.01(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝379。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮，实例6
Figure BDA0003241985750000552
在0℃下向(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(243mg，0.64mmol)和DIPEA(0.145mL，0.83mmol)在DCM(6mL)中的搅拌溶液中逐滴添加丙烯酰氯(0.053mL，0.67mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌15min。将反应混合物用EtOAc(20mL)稀释，并且用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，通过使其通过相分离柱体来干燥，并且蒸发，得到粗胶状物。将粗产物溶解在1M NH3/MeOH(20mL)中，并在25℃下搅拌1h。将反应混合物浓缩至干燥，以提供粗产物。将样品溶解在MeOH(2mL)和DCM(1mL)中，过滤并用MeOH(1mL)洗涤。将溶液使用SFC纯化(柱：Chiralpak IC，20x250mm，5微米流动相：30％MeOH＝0.1％NH3/70％scCO2流速：60mL/minBPR：120巴)。将溶剂蒸发，以提供(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(151mg，54％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.5-4(6H，m)，4.07(1H，s)，4.15-4.38(2H，m)，5.64-5.81(1H，m)，6.17(1H，d)，6.6-6.83(4H，m)，7.24(1H，q)，9.98(1H，s)，10.73(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝433。
(3R)-4-(4-溴-3-氯-2-氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000561
将4-溴-3-氯-2-氟苯甲酸(5g，19.73mmol)、HATU(11.22g，29.59mmol)和DIPEA(10.54mL.59.18mmol)在THF(200mL)中搅拌30min，然后添加(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.12g，23.67mmol)，并且将该混合物在25℃下搅拌3.5h。将反应混合物蒸发至干燥，再溶解于EtOAc(100mL)中，并用饱和NaHCO3(50mL)、水(2x50mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层经相分离柱体干燥，并在减压下除去溶剂，以提供黄色油状物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至5％MeOH)进行纯化，以提供呈白色固体的(3R)-4-(4-溴-3-氯-2-氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(11.83g，＞100％)，无需进一步纯化即可使用。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.75-3.08(3H，m)，3.31-3.36(1H，m)，3.4-3.57(2H，m)，3.57-3.68(1H，m)，3.71-3.89(1H，m)，4.28(1H，d)，4.8-4.87(1H，m)，7.35(1H，t)，7.69-7.75(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝451。
(12aR)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000571
在25℃下将双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(在THF中1M)(26.2mL，26.19mmol)添加到(3R)-4-(4-溴-3-氯-2-氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(11.83g，26.19mmol)在NMP(300mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在120℃下加热18h。将反应冷却至25℃，并用EtOAc(2000mL)稀释，并用水(1000mL)、饱和NaHCO3(500mL)、水(500mL)和盐水(500mL)洗涤。将有机层通过使其通过相分离柱体来干燥，蒸发溶剂，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)进行纯化，得到无色油状物，将其通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到呈黄色蜡状固体的(12aR)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(7.25g，64％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.43-3.56(3H，m)，3.61(1H，d)，3.73(1H，dd)，3.93(2H，ddd)，4.34(2H，d)，7.55(1H，d)，7.63(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝433。
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯旋转异构体1和2
Figure BDA0003241985750000581
将二氯[1，1’-双(二-叔丁基膦基)二茂铁]钯(II)(0.302g，0.46mmol)添加到(12aR)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2g，4.63mmol)、(5-甲基-1H-吲唑-4-基)硼酸(1.63g，9.27mmol)和碳酸钠(2.7g，25.48mmol)在1，4-二噁烷(54mL)和水(13mL)中的脱气混合物中。将反应混合物在85℃下加热6h，并且然后冷却到25℃。将反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，并用饱和NaHCO3(100mL)、水(2x100mL)、盐水(50mL)洗涤，并经相分离柱体干燥。将溶剂蒸发，以提供粗产物。将其通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。将得到的奶油色固体使用SFC进行纯化(柱：Chiralpak ID，30×250mm，5微米流动相：40％MeOH+0.1％NH3/60％scCO2流速：90mL/min BPR：120巴)，以提供(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体1(198mg，8％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.43(9H，s)，2.13(3H，s)，3.46-3.64(3H，m)，3.68(1H，d)，3.79-3.88(1H，m)，3.88-3.97(1H，m)，4.06(1H，q)，4.37(2H，d)，7.20(1H，d)，7.32(1H，d)，7.51(1H，d)，7.53(1H，s)，7.71(1H，d)，13.07(1H，s)。m/z：ES-[M-H]-＝481。随后是(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体2(207mg，9％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.43(9H，s)，2.16(3H，s)，3.45-3.64(3H，m)，3.68(1H，d)，3.76-3.87(1H，m)，3.91-4(1H，m)，4-4.1(1H，m)，4.37(2H，d)，7.20(1H，d)，7.32(1H，d)，7.43(1H，s)，7.51(1H，d)，7.73(1H，d)，13.08(1H，s)。m/z：ES-[M-H]-＝481。
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮旋转异构体1
Figure BDA0003241985750000591
在25℃下将HCl(在二噁烷中4M)(2.05mL，8.2mmol)添加到在MeOH(3mL)中的(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体1(198mg，0-41mmol)，并且搅拌3h。将反应混合物通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈无色油状物的旋转异构体1(155mg，99％)。m/z：ES+[M+H]+＝383。
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮旋转异构体2
Figure BDA0003241985750000592
在25℃下将HCl(在二噁烷中4M)(2.15mL，8.61mmol)添加到在MeOH(3mL)中的(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体2(208mg，0.43mmol)，并且搅拌3h。将反应混合物通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈无色油状物的旋转异构体2(164mg，99％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.16(3H，s)，2.65-2.74(2H，m)，2.77-2.99(3H，m)，3.42-3.54(1H，m)，3.85(2H，dt)，4.23(1H，dd)，4.69(1H，t)，7.18(1H，d)，7.32(1H，d)，7.43(1H，s)，7.50(1H，d)，7.73(1H，d)，13.08(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝383。
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮旋转异构体1，实例7
Figure BDA0003241985750000601
在-78℃下经5min向(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的旋转异构体1(155mg，0.4mmol)在DCM(4mL)、i-PrOH(1mL)和吡啶(0.098mL，1.21mmol)中的溶液中逐滴添加丙烯酰氯(0.033mL，0.4mmol)，并且在-78℃至室温搅拌1h。将溶液用饱和NaHCO3(3mL)淬灭，用EtOAc(10mL)稀释，并用水(10mL)和盐水(5mL)洗涤。有机相通过相分离柱体来干燥，并将溶剂在减压下除去，以提供粗产物。将其通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈白色固体的旋转异构体1(52mg，29％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.13(3H，s)，3.64(1H，d)，3.73-3.89(3H，m)，3.89-4.08(2H，m)，4.09-4.2(1H，m)，4.32-4.45(2H，m)，5.76(1H，d)，6.19(1H，d)，6.68-6.83(1H，m)，7.21(1H，d)，7.32(1H，d)，7.51(1H，d)，7.52-7.77(2H，m)，13.07(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝437。
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮旋转异构体2，实例8
Figure BDA0003241985750000611
在-78℃下经5min向(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的旋转异构体2(164mg，0.43mmol)在DCM(5mL)、i-PrOH(1mL)和吡啶(0.104mL，1.29mmol)中的溶液中缓慢逐滴添加丙烯酰氯(0.035mL，0.43mmol)，并且在-78℃至室温搅拌1h。将溶液用饱和NaHCO3(3mL)淬灭，用EtOAc(10mL)稀释，并用水(10mL)洗涤。产物可溶于水相，因此在减压下除去水并将其溶于1M NH3/MeOH中。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈白色固体的旋转异构体2(53mg，28％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.16(3H，s)，3.65(1H，d)，3.83(2H，s)，3.86-4.05(3H，m)，4.05-4.15(1H，m)，4.40(2H，t)，5.67-5.8(1H，m)，6.12-6.23(1H，m)，6.67-6.83(1H，m)，7.21(1H，d)，7.32(1H，d)，7.44(1H，s)，7.51(1H，d)，7.74(1H，t)，13.09(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝437。
(12aR)-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000612
在25℃下，将硼烷-THF复合物(1M)(60mL，60mmol)的溶液逐滴添加到(12aR)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(4.9g，11.35mmol)在THF(15mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在75℃下搅拌3.5h，并且然后冷却至25℃，并用i-PrOH(150mL)淬灭。添加NaOH(2M，100mL)，并将反应搅拌30min。将反应用水(20mL)和EtOAc(50mL)稀释，并用盐水(2x20mL)洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发，以提供呈无色油状物的(12aR)-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3.98g，84％)，将其静置固化。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.39(9H，s)，2.30(1H，ddd)，2.71(2H，s)，3.07(1H，ddd)，3.53-3.64(3H，m)，3.66(1H，q)，3.70(1H，s)，3.78(1H，d)，4.34(1H，dd)，7.17(1H，d)，7.41(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝416.9。
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯旋转异构体1和2
Figure BDA0003241985750000621
将二氯[1，1’-双(二-叔丁基膦基)二茂铁]钯(II)(126mg，0.19mmol)添加到(12aR)-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(806mg，1.93mmol)、(5-甲基-1H-吲唑-4-基)硼酸(679mg，3.86mmol)和无水碳酸钠(1125mg，10.61mmol)在1，4-二噁烷(22mL)和水(5mL)中的脱气混合物中。将反应混合物在85℃下加热2h，并且然后冷却到25℃。将反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，并将有机层用饱和NaHCO3(100mL)、水(2x100mL)、盐水(50mL)洗涤，并经相分离柱体干燥。将溶剂蒸发，以提供粗产物。将其通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH(在H2O中的28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。将得到的固体使用SFC进行纯化(柱：Chiralpak IG，30x250mm，5微米流动相：40％MeOH+0.1％NH3/40％scCO2流速：90mL/min BPR：120巴)，以提供(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体1(199mg，22％)。1H NMR(400MHz，DMSO，100℃)1.44(9H，s)，2.15(3H，s)，2.78-2.92(2H，m)，3.12-3.2(1H，m)，3.62-3.74(4H，m)，3.77(2H，d)，3.99(1H，d)，4.35(1H，dd)，6.97(1H，d)，7.29(2H，d)，7.39(1H，s)，7.47(1H，d)，12.74(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝469。随后是(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体2(224mg，25％)。1H NMR(400MHz，DMSO，100℃)1.44(9H，s)，2.12(3H，s)，2.36-2.46(1H，m)，2.85(2H，td)，3.11-3.2(1H，m)，3.64-3.73(3H，m)，3.71-3.81(2H，m)，3.96(1H，d)，4.34(1H，d)，6.97(1H，d)，7.29(2H，dd)，7.4-7.5(2H，m)，12.74(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝469。
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓旋转异构体1
Figure BDA0003241985750000631
在25℃下将HCl(在二噁烷中4M)(2.12mL，8.49mmol)添加到在MeOH(2mL)中的(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体1(199mg，0.42mmol)，并且将所得溶液搅拌3h。将反应混合物通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓的呈透明玻璃状的旋转异构体1(157mg，100％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.13(3H，s)，2.3-2.35(2H，m)，2.43-2.47(1H，m)，2.63-2.7(2H，m)，2.73-2.85(3H，m)，3.61-3.7(2H，m)，3.83(1H，d)，4.27(1H，dd)，6.97(1H，d)，7.29(1H，s)，7.31(1H，s)，7.39(1H，s)，7.47(1H，d)，13.03(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝369。
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓旋转异构体2
Figure BDA0003241985750000641
在25℃下将HCl(在二噁烷中4M)(2.38mL，9.55mmol)添加到在MeOH(3mL)中的(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体2(224mg，0.48mmol)，并且将所得溶液搅拌3h。将反应混合物通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓的呈透明油状物的旋转异构体2(180mg，100％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.10(3H，s)，2.29-2.38(2H，m)，2.43-2.47(1H，m)，2.59-2.7(2H，m)，2.77-2.88(3H，m)，3.63-3.72(2H，m)，3.81(1H，d)，4.27(1H，dd)，6.97(1H，d)，7.27-7.32(2H，m)，7.43-7.49(2H，m)，13.03(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝369。
1-((12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例9
Figure BDA0003241985750000642
在-78℃下经5min向(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓的旋转异构体1(159mg，0.43mmol)在DCM(5mL)、i-PrOH(1mL)和吡啶中的溶液中(0.105mL，1.29mmol)逐滴添加丙烯酰氯(0.035mL，0.43mmol)，并且将反应混合物加温至0℃并搅拌10min。将反应混合物蒸发至干燥，溶于1MNH3/MeOH中，并通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH)(在H2O中的28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到1-((12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮的呈奶油色固体的旋转异构体1(30mg，16％)。1H NMR(400MHz，DMSO，100℃)2.15(3H，s)，2.41-2.48(2H，m)，2.85-2.92(2H，m)，3.30(1H，t)，3.71-3.82(2H，m)，3.94(2H，d)，3.99(1H，d)，4.40(1H，dd)，5.67(1H，dd)，6.10(1H，dd)，6.75(1H，dd)，6.97(1H，d)，7.28(1H，d)，7.30(1H，d)，7.38(1H，s)，7.47(1H，d)，12.75(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝423.1。
1-((12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮旋转异构体2，实例10
Figure BDA0003241985750000651
在-78℃下经5min向(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓的旋转异构体2(180mg，0.49mmol)在DCM(5mL)、i-PrOH(1mL)和吡啶中的溶液中(0.118mL，1.46mmol)逐滴添加丙烯酰氯(0.04mL，0.49mmol)，并且将反应混合物加温至0℃并搅拌10min。将反应混合物蒸发至干燥，溶于1MNH3/MeOH中，并通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH)(在H2O中的28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到1-((12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮的呈奶油色固体的旋转异构体2(42mg，20％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.10(3H，s)，2.39(1H，s)，2.72-2.95(3H，m)，3.08(1H，d)，3.31-3.43(1H，m)，3.68-3.8(2H，m)，3.91(1H，d)，3.98-4.15(1H，m)，4.34-4.47(1H，m)，5.70(1H，d)，6.14(1H，d)，6.78-6.9(1H，m)，6.99(1H，d)，7.31(2H，dd)，7.46(1H，s)，7.48(1H，s)，13.03(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝423。
4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酸
Figure BDA0003241985750000661
在室温下将4-溴-2，5-二氟苯甲酸(10g，42.19mmOl)添加到浓硫酸(80mL)中，并将所得悬浮液在80℃加热。然后添加N-氯琥珀酰亚胺(11.27g，84.39mmol)，并将反应混合物在80℃加热过夜。将反应冷却至室温，倒入冰(200g)中，并将水相用EtOAc萃取。将蒸发后获得的粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至60％MeOH)进行纯化，以提供呈白色固体的4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酸(4.8g，42％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)7.81(1H，dd)，13.98(1H，s)。m/z：ES-[M+H]-＝271。
(3R)-4-(4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000662
在25℃下，将(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.98g，18.42mmol)添加到在THF(80mL)中的4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酸(5g，18.42mmol)、HATU(10.51g，27.63mmol)和DIPEA(6.43mL，36.84mmol)。将所得溶液在室温下搅拌2h。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至50％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的(3R)-4-(4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.72g，66％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，d)，2.74-3.05(1H，m)，3.15(1H，t)，3.26-3.37(2H，m)，3.41-3.63(2H，m)，3.67-3.90(1H，m)，3.94-4.14(1H，m)，4.19-4.33(1H，m)，4.44-5.00(1H，m)，7.59(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝469。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000671
在0℃下将氢化钠(0.971g，24.27mmol)添加到在THF(50mL)中的(3R)-4-(4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.7g，12.14mmol)。将所得溶液在室温下搅拌16h。将溶剂在减压下除去，并将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至40％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2.02g，37％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.13-3.34(1H，m)，3.44-3.50(2H，m)，3.58-3.67(1H，m)，3.72-3.80(1H，m)，3.85-3.90(1H，m)，3.92-4.02(1H，m)，4.32(2H，d)，7.59(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝449。
(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯旋转异构体1和旋转异构体2
Figure BDA0003241985750000681
将(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(656mg，1.46mmol)、(2-氟-6-甲氧基苯基)硼酸(496mg，2.92mmol)和碳酸钾(1210mg，8.75mmol)在2-甲基四氢呋喃(11mL)和水(4mL)中的混合物脱气15min。在25℃下添加RuPhos Pd G3(122mg，0.15mmol)和RuPhos(68.1mg，0.15mmol)，并且在60℃下加热2h。冷却至25℃后，将溶液用EtOAc(100mL)稀释，并用水(2x100mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机相经相分离柱体干燥，并将溶剂蒸发至干燥，以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH(在H2O中的28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。将得到的奶油色泡沫使用SFC进行纯化(柱：Chiralpak IG，30x250mm，5微米流动相：50％MeOH 0.1％NH3/50％scCO2流速：100mL/min BPR：120巴)，以提供(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体1(208mg，29％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.42(9H，s)，3.48(2H，s)，3.54-3.7(2H，m)，3.75-3.85(4H，m)，3.85-3.97(1H，m)，3.97-4.06(1H，m)，4.32(2H，d)，6.98(1H，t)，7.04(1H，d)，7.47-7.59(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝439。随后是(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体2(163mg，23％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.42(9H，s)，3.43-3.63(4H，m)，3.63-3.73(1H，m)，3.78(3H，s)，3.89-4.07(2H，m)，4.35(2H，d)，6.97(1H，t)，7.06(1H，d)，7.49-7.59(2H，m)。m/z：ES-[M-H]-493。
(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮旋转异构体1
Figure BDA0003241985750000691
在0℃下向在DCM(3mL)中的(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体1(108mg，0.22mmol)中逐滴添加三溴化硼(在DCM中1M)(1.309mL，1.31mmol)，并且搅拌至25℃持续4h。将反应用MeOH淬灭，并通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈白色固体的旋转异构体1(83mg，100％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.6-2.71(1H，m)，2.83(2H，qd)，2.94(1H，dt)，3.17(1H，d)，3.38(1H，ddd)，3.77-3.92(2H，m)，4.17(1H，dd)，4.66(1H，t)，6.73-6.86(2H，m)，7.32(1H，td)，7.50(1H，d)，10.18(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝380.9.1。
(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12,12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮旋转异构体2
Figure BDA0003241985750000692
在0℃下向在DCM(5mL)中的(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体2(163mg，0.33mmol)中逐滴添加三溴化硼(在DCM中1M)(1.309mL，1-31mmol)，并且搅拌至25℃持续4h。将反应用MeOH淬灭，并通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈白色固体的旋转异构体2(112mg，89％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.63-2.75(1H，m)，2.77-2.99(3H，m)，3.4-3.52(1H，m)，3.76-3.89(3H，m)，4.18(1H，q)，4.66(1H，t)，6.76(1H，t)，6.83(1H，d)，7.32(1H，q)，7.53(1H，d)，10.14(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝381.1。
(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮旋转异构体1，实例11
Figure BDA0003241985750000701
在-78℃下经5min向(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的旋转异构体1(122mg，0.32mmol)在DCM(4mL)、i-PrOH(1mL)和吡啶(0.078mL，0.96mmol)中的溶液中缓慢逐滴添加丙烯酰氯(0.026mL，0.32mmol)，并且然后将反应混合物搅拌20min。将反应混合物蒸发至干燥，溶于MeCN中，并通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5u二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH)(在H2O中的28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈奶油色固体的旋转异构体1(8mg，6％)。1H NMR(400MHz，CD3CN，30℃)3.6-3.85(3H，m)，3.85-3.98(2H，m)，4.04(2H，dq)，4.23-4.42(2H，m)，5.72(1H，d)，6.14-6.28(1H，m)，6.57-6.7(1H，m)，6.74-6.89(2H，m)，7.35(1H，dt)，7.47(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝435.0.1。
(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮旋转异构体2，实例12
Figure BDA0003241985750000711
在-78℃下向(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的旋转异构体2(112mg，0.29mmol)在DCM(3mL)、i-PrOH(1mL)和吡啶(0.071mL，0.88mmol)中的溶液中逐滴添加丙烯酰氯(0.024mL，0.29mmol)，并且将反应混合物搅拌20min。将反应混合物蒸发至干燥，溶于1M NH3/MeOH中，并通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有按体积计1％NH4OH)(在H2O中的28％-30％))和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈奶油色固体的旋转异构体2(12mg，9％)。1HNMR(400MHz，DMSO，100℃)3.57-3.82(4H，m)，3.82-3.97(2H，m)，3.97-4.14(2H，m)，4.3-4.46(2H，m)，5.70(1H，dd)，6.14(1H，dd)，6.63-6.76(2H，m)，6.84(1H，d)，7.31(1H，q)，7.51(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝435.4。
(12aR)-9-溴-8，10-二氯-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000712
将N-氯琥珀酰亚胺(0.37g，2.82mmol)和氯三甲基硅烷(0.036mL，0.28mmol)一次性添加到(12aR)-9-溴-10-氯-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.3g，2.82mmol)在MeCN(28mL)中的搅拌溶液中，并将反应在25℃下搅拌15min。然后将反应用EtOAc(100mL)、水(100mL)稀释，并用饱和NaHCO3(100mL)、水(100mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机相通过使其通过相分离柱体进行干燥，并在减压下蒸发溶剂，以提供呈奶油色固体的(12aR)-9-溴-8，10-二氯-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.39g，100％)，并且无需进一步纯化即可使用。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.13-3.28(1H，m)，3.39(1H，d)，3.50(1H，s)，3.67(1H，d)，3.76(1H，d)，3.88(3H，s)，3.93-4(1H，m)，4.04-4.1(1H，m)，4.1-4.19(1H，m)，4.21-4.34(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝495。
(12aR)-9-溴-8，10-二氯-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000721
在25℃下，将硼烷THF复合物(1M)(24.18mL，24.18mmol)的溶液逐滴添加到(12aR)-9-溴-8，10-二氯-7-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.5g，3.02mmol)在THF(6mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在75℃下搅拌20h，然后冷却至25℃，用水和饱和NH4Cl淬灭并搅拌30min。将反应用水(100mL)和EtOAc(100mL)稀释，并用盐水(2x100mL)洗涤，经相分离柱体干燥，并在减压下除去溶剂，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-9-溴-8，10-二氯-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.97g，67％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.34-2.43(1H，m)，2.69-2.84(3H，m)，3.03(1H，t)，3.61-3.75(4H，m)，3.77(3H，s)，3.93(1H，d)，4.39(1H，dd)。m/z：ES+[M+H]+＝480.9。
(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000731
将(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(281mg，1.8mmol)、(12aR)-9-溴-8，10-二氯-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(870mg，1.8mmol)和碳酸钾(1496mg，10.83mmol)在2-甲基四氢呋喃(13mL)和水(4mL)中的混合物进行脱气。在25℃下添加RuPhos Pd G3(151mg，0.18mmol)和RuPhos(84mg，0.18mmol)，并将反应混合物在60℃下加热4h。冷却至25℃后，将溶液用EtOAc(100mL)稀释，并用水(2x100mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机相经相分离柱体干燥，并将溶剂蒸发至干燥，以提供粗产物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(453mg，49％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，2.39-2.45(1H，m)，2.63-2.77(2H，m)，2.82-2.89(1H，m)，2.95-3.06(1H，m)，3.65-3.75(4H，m)，3.77(3H，s)，3.97(1H，d)，4.36-4.45(1H，m)，6.62-6.81(2H，m)，7.27(1H，q)，9.89-10.03(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝512.9。
(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-7-醇
Figure BDA0003241985750000741
在0℃下向在DCM(3mL)中的(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(453mg，0.88mmol)逐滴添加三溴化硼(在DCM中1M)(5.29mL，5.29mmol)，并且搅拌至25℃持续2h。将反应用MeOH淬灭，并通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供呈奶油色固体的(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-7-醇(351mg，100％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.35-2.44(2H，m)，2.55-2.65(1H，m)，2.69-2.76(1H，m)，2.76-2.93(3H，m)，3.49-3.59(1H，m)，3.59-3.71(1H，m)，3.98-4.15(2H，m)，4.21-4.32(1H，m)，6.57-6.88(2H，m)，7.24(1H，q)，9.89(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝399。
1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c]I1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例13；和旋转异构体2，实例14
Figure BDA0003241985750000742
在0℃下向(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-7-醇(351mg，0.88mmol)和DIPEA(0.199mL，1.14mmol)在DCM(6mL)中的搅拌溶液中逐滴添加丙烯酰氯(0.073mL，0.92mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌15min。将反应混合物用EtOAc(20mL)稀释，用水(2x20mL)、盐水(20mL)洗涤，并通过使其通过相分离柱体来干燥。将溶剂除去，以提供胶状物，将其溶于冷的1M NH3/MeOH(20mL)中，并在25℃下搅拌1h。将反应混合物浓缩至干燥，以提供粗产物。将其使用SFC进行纯化(柱：YMC直链淀粉C，20x250mm，5微米流动相：40％MeOH＝0.1％NH3/60％scCO2流速：60mL/minBPR：120巴)，以提供1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的旋转异构体1(105mg，26％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.35-2.46(1H，m)，2.64-2.73(1H，m)，2.73-2.84(1H，m)，2.89(1H，d)，2.93-3.09(1H，m)，3.57-3.74(2H，m)，3.83-4.01(1H，m)，4.01-4.22(2H，m)，4.38(1H，t)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.66-6.87(3H，m)，7.24(1H，q)，9.48(1H，s)，9.87(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝453。接着是1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的旋转异构体2(60mg，15％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.37-2.45(1H，m)，2.70(1H，s)，2.77-2.95(2H，m)，2.95-3.08(1H，m)，3.61(1H，d)，3.64-3.71(1H，m)，3.90(1H，t)，4.04(1H，d)，4.14(1H，d)，4.35(1H，t)，5.70(1H，s)，6.12(1H，d)，6.71(1H，t)，6.76(1H，d)，6.79-6.88(1H，m)，7.24(1H，q)，9.58(1H，s)，9.89(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝453。
(3R)-4-(4-溴-2，6-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000751
向在DCM(200ml)中的4-溴-2，6-二氟苯甲酸(10g，42.19mmol)添加(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10.95g，50.63mmol)和三乙胺(23.52ml，168.78mmol)。添加2，4，6-三丙基-1，3，5，2，4，6-三氧杂三磷杂环己烷2，4，6-三氧化物(29.8ml的在EtOAc中的50％溶液，50.63mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌。3h后，添加另外部分的(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.5g)和2，4，6-三丙基-1，3，5，2，4，6-三氧杂三磷杂环己烷2，4，6-三氧化物(10ml的在EtOAc中的50％溶液)，并且将混合物在室温下搅拌。另外的2h后，将反应混合物用水性饱和碳酸氢钠(200mL)、然后用盐水(200mL)洗涤。使有机部分通过疏水玻璃料，并在减压下浓缩，得到浅棕色油状物。将其通过快速二氧化硅色谱法使用在庚烷中0至100％EtOAc的洗脱梯度进行纯化，得到呈白色泡沫的(3R)-4-(4-溴-2，6-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(8.32g，45％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，2xs)，2.69-3.24(3H，m)，3.31-3.62(3H，m)，3.72-4.19(2H，m)，4.26-4.58(1H，m)，4.78-4.98(1H，m)，7.53-7.69(2H，m)。m/z：ES+[M-Boc]334.9。
(12aR)-9-溴-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000761
在0℃下将氢化钠(0.84g在矿物油中的60％分散体，21.03mmol)添加到在DMF(100ml)中的(3R)-4-(4-溴-2，6-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(8.32g，19.11mmol)。将所得溶液在0℃下搅拌5min，然后加温至室温。2h后，添加另一份氢化钠(200mg)，并将混合物在室温下搅拌。4h后，将反应混合物在冰浴中冷却，并逐滴添加饱和氯化铵水溶液(100mL)。添加水(100mL)，并将混合物用EtOAc(3x200mL)萃取。将合并的有机物用盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在减压下浓缩，得到浅黄色油状物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至80％EtOAc)进行纯化，得到呈白色泡沫的(12aR)-9-溴-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(6.46g，81％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.42(9H，s)，3.3-3.38(1H，m)，3.42-3.53(1H，m)，3.59-3.71(3H，m)，3.83-3.96(1H，m)，4.01-4.13(1H，m)，4.13-4.29(2H，m)，7.21-7.29(1H，m)，7.49(1H，dd).19F NMR(376MHz，DMSO，30℃)-111.16。m/z：ES+[M+H]+415.0。
(12aR)-9-溴-10-氯-7-氟-1，2，3，4，12,12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮
Figure BDA0003241985750000771
将(12aR)-9-溴-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(6.46g，15.56mmol)溶于浓硫酸(78ml)中，并将混合物在室温搅拌5min。将混合物在60℃下加热，并一次性添加N-氯琥珀酰亚胺(4.15g，31.11mmol)，并将反应混合物在60℃下搅拌。30min后，添加另一份N-氯琥珀酰亚胺(2g)。另外的45min后，将反应混合物冷却至室温，倒入碎冰(200g)中。将水性物使用2M氢氧化钠水溶液碱化至约pH10。将水层用EtOAc(3x200mL)萃取，并将合并的有机物干燥(MgSO4)，并在减压下浓缩，得到呈棕色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氯-7-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(6.33g，＞100％)，无需进一步纯化即可使用。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：2.78-2.85(2H，m)，2.95-3.09(2H，m)，3.18(1H，d)，3.87-3.98(1H，m)，4.01-4.13(3H，m)，4.75(1H，dd)，7.73(1H，d)。19F NMR(376MHz，DMSO，30℃)：-114.39(J＝9.1)。m/z：ES+[M+H]+348.8。
(12aR)-9-溴-10-氯-7-氟-6-氧代-3，4，12,12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000772
将(12aR)-9-溴-10-氯-7-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(6.33g，14.49mmol)溶解在DCM(150ml)中，并依次添加三乙胺(6.06ml，43.46mmol)和二碳酸二叔丁酯(4.74g，21.73mmol)。将所得溶液在室温搅拌。60min后，将反应混合物用水(100mL)洗涤。使有机部分通过疏水玻璃料，并在减压下浓缩，得到深棕色残余物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至60％EtOAc)进行纯化，以提供呈浅棕色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氯-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(5.81g，89％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.42(9H，s)，3.42-3.53(1H，m)，3.59-3.73(4H，m)，3.85-3.99(1H，m)，4.05-4.16(1H，m)，4.24(1H，dd)，4.28-4.41(1H，m)，7.75(1H，d).19F NMR(376MHz，DMSO，30℃)：-114.46--112.02。m/z：ES+[M-tBu]+394.8。
(12aR)-9-溴-10-氯-7-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000781
将(12aR)-9-溴-10-氯-7-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(5.81g，12.92mmol)溶解在THF(50mL)中，并在室温下添加硼烷-THF复合物(129mL的1M溶液，129.20mmol)。将所得溶液在75℃下加热。2h后，将反应混合物在冰浴中冷却，并通过逐滴添加饱和氯化铵水溶液(200mL)将其淬灭。搅拌所得混合物直至泡腾停止，并且然后用EtOAc(2x200mL)萃取。将合并的有机物用盐水(150mL)洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩，得到浅黄色残余物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)进行纯化，得到呈无色残余物的(12aR)-9-溴-10-氯-7-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(5.34g，95％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.40(9H，s)，2.32-2.41(1H，m)，2.68-2.83(3H，m)，3-3.11(1H，m)，3.55-3.73(3H，m)，3.80(1H，dd)，3.90(1H，d)，4.41(1H，dd)，7.50(1H，d)。19F NMR(376MHz，DMSO，30℃)：-116.50(J＝8.8)。m/z：ES+[M+H]+434.9。
(12aR)-9-溴-10-氯-7-(1H-咪唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000791
将(12aR)-9-溴-10-氯-7-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(500mg，1.15mmol)溶解在DMF(10mL)中，并连续添加磷酸钾(1.22g，5.74mmol)和1H-咪唑(117mg，1.72mmol)。将混合物密封并在微波反应器中于120℃加热1h。将混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(2x30mL)萃取。将合并的有机物用盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在减压下浓缩，得到浅黄色残余物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)进行纯化，得到呈无色干燥膜状物的(12aR)-9-溴-10-氯-7-(1H-咪唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(162mg，29％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.46(9H，s)，2.31(1H，td)，2.6-2.81(3H，m)，3-3.1(1H，m)，3.22(1H，d)，3.58(1H，d)，3.63-3.88(3H，m)，4.40(1H，dd)，7.08(1H，t)，7.21-7.23(1H，m)，7.35(1H，s)，7.6-7.63(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+482.9。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-甲氧基苯基)-7-(1H-咪唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000801
将(12aR)-9-溴-10-氯-7-(1H-咪唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(160mg，0.33mmol)和(2-氟-6-甲氧基苯基)硼酸(112mg，0.66mmol)在2M水性碳酸钠(0.50mL，0.99mmol)和2-甲基四氢呋喃(2.5mL)中的溶液进行脱气。添加RuPhos G3(28mg，0.03mmol)和RuPhos(15mg，0.03mmol)，并将混合物在60℃下加热。3h后，添加另一份(2-氟-6-甲氧基苯基)硼酸(112mg，0.66mmol)，并将混合物在60℃下搅拌。另外的5h后，将反应混合物冷却至室温。将有机部分收集，并且将水性物用EtOAc(10mL)洗涤。将合并的有机物干燥(MgSO4)并浓缩，得到棕色残余物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至10％MeOH)进行纯化，得到呈浅黄色泡沫的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-甲氧基苯基)-7-(1H-咪唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(170mg，97％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.36-1.45(9H，m)，2.2-2.32(2H，m)，2.92-3.04(1H，m)，3.15(1H，dd)，3.57-3.9(8H，m)，4.34-4.58(2H，m)，6.93(1H，td)，7.00(1H，dd)，7.07-7.16(2H，m)，7.36-7.43(1H，m)，7.43-7.51(1H，m)，7.78-7.87(1H，m).19F NMR(376MHz，DMSO，30℃)：-114.02--113.92，-113.86--113.69。m/z：ES+[M+H]+529.0。
2-[(12aR)-10-氯-7-(1H-咪唑-1-基)-1，2，3，4，12,12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚
Figure BDA0003241985750000811
将(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-甲氧基苯基)-7-(1H-咪唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(170mg，0.32mmol)溶解在DCM(2mL)中，并将混合物冷却至0℃，并且然后逐滴添加三溴化硼(3.78mL在DCM中的1M溶液，3.78mmOl)。将悬浮液置于室温并搅拌。15min后，将反应混合物在冰浴中冷却，并逐滴添加MeOH(20mL)，并在减压下除去挥发物。将所得残余物通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，得到呈浅黄色残余物的2-[(12aR)-10-氯-7-(1H-咪唑-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚(123mg，92％)。m/z：ES+[M+H]+415.0。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-咪唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮，实例15
Figure BDA0003241985750000812
在0℃向2-[(12aR)-10-氯-7-(1H-咪唑-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚(123mg，0.30mmol)和三乙胺(54μL，0.39mmol)在DCM(2ml)中的溶液中添加丙烯酰氯(26.5μL，0.33mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌。10min后，将混合物通过添加水(10mL)淬灭，并用DCM(2x10mL)、并且然后用2-甲基四氢呋喃(2x10mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)并浓缩，得到浅黄色残余物。将其溶于在MeOH中的7N氨中，并在室温搅拌5min。将混合物在减压下浓缩，得到浅黄色残余物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至10％MeOH)进行纯化，得到呈白色残余物的1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-咪唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮(6.3mg，5％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：2.25-2.49(1H，m)，2.47-2.87(3H，m)，2.91-3.13(1H，m)，3.14-3.44(2H，m)，3.51-3.95(3H，m)，4.22-4.53(2H，m)，5.7-5.78(1H，m)，6.26-6.39(1H，m)，6.54(1H，ddd)，6.67-6.76(1H，m)，6.84(1H，dd)，7.07-7.16(2H，m)，7.19-7.25(1H，m)，7.63-7.69(1H，m)，8.56(1H，s)。19F NMR(376MHz，CDCl3，30℃)：-113.58--113，-112.98--112.7。m/z：ES+[M+H]+469.0。
5-溴-2-(溴甲基)-1-氟-3-硝基苯
Figure BDA0003241985750000821
向5-溴-1-氟-2-甲基-3-硝基苯(5g，21.37mmol)在MeCN(200m1)中的溶液中添加N-溴琥珀酰亚胺(4.94g，27.77mmol)和苯甲酸过氧酸酐(0.26g，1.07mmol)，并且将溶液在回流下搅拌。6h后，添加另一份N-溴琥珀酰亚胺(2g，0.6当量)，并将混合物在回流下搅拌过夜。将溶剂在真空中除去，并将粗产物溶于DCM(20mL)中，过滤，并通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至20％EtOAc)进行纯化，得到呈浅黄色油状物的5-溴-2-(溴甲基)-1-氟-3-硝基苯(5.88g，88％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：4.76(2H，d)，7.58(1H，dd)，8.01(1H，t)。19F NMR(376MHz，CDCl3，30℃)：-109.66(J＝8.6，1.6)。
(3R)-4-[(4-溴-2-氟-6-硝基苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000831
向5-溴-2-(溴甲基)-1-氟-3-硝基苯(5.88g，18.79mmol)和(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4.47g，20.67mmol)在MeCN(150ml)中的溶液中添加碳酸钾(7.79g，56.37mmol)，并且将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物过滤并在减压下浓缩。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％EtOAc)进行纯化，得到浅黄色油状物，将其静置固化。将固体溶解在DCM(100mL)中，并用1M柠檬酸水溶液(100mL)洗涤。将有机部分干燥(MgSO4)并浓缩，得到呈浅黄色油状物的(3R)-4-[(4-溴-2-氟-6-硝基苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(8.2g，97％)，将其静置固化。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.38(9H，s)，2.02-2.15(1H，m)，2.33-2.39(1H，m)，2.4-2.47(1H，m)，2.96-3.11(2H，m)，3.11-3.45(3H，m)，3.53-3.76(2H，m)，4.11(1H，d)，4.46-4.75(1H，m)，7.87-8.04(2H，m).19F NMR(376MHz，DMSO，30℃)：-112.06。m/z：ES+[M+H]+448.0。
(12aR)-7-氨基-9-溴-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000832
在-78℃下将氢化钠(0.64g在矿物油中的60％分散体，15.95mmol)添加到在THF(100mL)中的(3R)-4-[(4-溴-2-氟-6-硝基苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(6.5g，14.50mmol)。将所得溶液在-78℃下搅拌5min，并且然后缓慢地使其达到室温，并搅拌过夜。将反应混合物通过缓慢添加饱和氯化铵水溶液(100mL)淬灭，并用EtOAc(2x100mL)萃取。将合并的有机物干燥(MgSO4)，并在减压下浓缩，得到棕色残余物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％甲基叔丁基醚)进行纯化，得到(12aR)-9-溴-7-硝基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯与(12aR)-9-溴-7-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯2：1的呈棕色干膜状物的混合物(3.11g，7.26mmol)。将此混合物溶解在乙酸(50ml)中，并一次性添加铁(1.014g，18.15mmol)。将得到的混合物在70℃下搅拌。1h后，将反应混合物冷却至室温，并在减压下浓缩。将残余物用水(20mL)稀释，并添加饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)。将所得混合物搅拌10min，直到泡腾停止。将水层用EtOAc(2x150mL)萃取。将合并的有机物干燥(MgSO4)，并在减压下浓缩，得到棕色残余物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至100％EtOAc)进行纯化，得到呈深黄色胶状物的(12aR)-7-氨基-9-溴-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.97g，17％)。将该胶状物溶于1：1DCM/庚烷(10mL)中，并在减压下浓缩，得到呈浅棕色固体的标题化合物。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：1.46(9H，s)，2.46(1H，ddd)，2.68(1H，tt)，2.78-2.9(2H，m)，3.18(1H，ddd)，3.60(2H，d)，3.62-3.73(4H，m)，3.74-3.82(1H，m)，4.15(1H，dd)，6.59(1H，d)，6.63(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+398.0。
(12aR)-7-氨基-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000841
将(12aR)-7-氨基-9-溴-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(800mg，2.01mmol)溶解于MeCN(20mL)中，并冷却至-10℃。连续添加N-氯琥珀酰亚胺(268mg，2.01mmol)和一滴氯三甲基硅烷，并将所得混合物在-10℃下搅拌。1h后，将混合物缓慢升至室温并搅拌。另外的1h后，将反应混合物通过添加水性饱和碳酸氢钠(20mL)淬灭，并将混合物用EtOAc(2x30mL)萃取。将合并的有机物干燥(MgSO4)，并在减压下浓缩，得到棕色泡沫。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至80％EtOAc)进行纯化，得到呈浅棕色固体的(12aR)-7-氨基-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(301mg，35％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.40(9H，s)，2.24-2.35(1H，m)，2.56-2.73(2H，m)，2.83-2.9(1H，m)，3.03(1H，t)，3.41(1H，d)，3.48-3.66(3H，m)，3.70(1H，d)，4.25(1H，dd)，5.51(2H，s)，6.76(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+431.9。
(12aR)-9-溴-10-氯-7-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000851
向(12aR)-7-氨基-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(300mg，0.69mmol)在MeCN(5mL)中的溶液中添加碘化亚铜(I)(158mg，0.83mmol)。逐滴添加亚硝酸叔丁酯(0.116mL，1.39mmol)，并将混合物在50℃下搅拌。2h后，将反应混合物冷却至室温，并搅拌过夜。将反应混合物用水性饱和氯化铵(10mL)稀释，并将混合物用EtOAc(2x20mL)萃取。将合并的有机物干燥(MgSO4)，并在减压下浓缩，得到棕色残余物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％EtOAc)进行纯化，得到呈浅黄色干膜状物的(12aR)-9-溴-10-氯-7-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(107mg，28％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：1.45(9H，s)，2.49-2.58(1H，m)，2.74-2.87(1H，m)，2.87-3.06(2H，m)，3.25-3.37(1H，m)，3.57-3.69(2H，m)，3.7-3.79(1H，m)，3.91-4.09(2H，m)，4.32(1H，dd)，7.86(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+542.7。
(12aR)-9-溴-10-氯-7-氰基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000861
将(12aR)-9-溴-10-氯-7-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(100mg，0.18mmol)溶解在DMF(2mL)中。连续添加氰化锌(25.9mg，0.22mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(42.5mg，0.04mmol)，并将得到的溶液在100℃加热。1h后，将反应混合物冷却至室温，并用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)稀释。将溶液用EtOAc(2x20mL)萃取，并且将合并的有机物用盐水(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在减压下浓缩，得到棕色残余物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至30％EtOAc)进行纯化，以提供呈无色干膜状物的(12aR)-9-溴-10-氯-7-氰基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(63mg，77％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：1.46(9H，s)，2.47-2.61(1H，m)，2.75-2.89(1H，m)，2.9-3.02(2H，m)，3.19-3.35(1H，m)，3.6-3.82(3H，m)，3.93(1H，d)，4.08(1H，d)，4.29-4.38(1H，m)，7.63(1H，s)。m/z：ES+[M-tBu]+385.9。
(12aR)-10-氯-7-氰基-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000871
将(12aR)-9-溴-10-氯-7-氰基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(63mg，0.14mmol)和(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(44.4mg，0.28mmol)在2M水性碳酸钠(0.213mL，0.43mmol)和2-甲基四氢呋喃(1mL)中的溶液用氮气脱气5min。添加RuPhos G3(12mg，0.01mmol)和RuPhos(7mg，0.01mmol)，并将混合物在60℃加热。1h后，将混合物冷却至室温，并用水(10mL)稀释。将混合物通过CELITETM短垫过滤，并用EtOAc(2x10mL)萃取。将合并的有机物用盐水(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在减压下浓缩，得到棕色残余物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-10-氯-7-氰基-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(54mg，80％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.47(9H，s)，2.47-2.68(1H，m)，2.8-3.01(3H，m)，3.16-3.34(1H，m)，3.66-3.91(3H，m)，3.96-4.18(2H，m)，4.31-4.42(1H，m)，5.33(1H，s)，6.71-6.81(3H，m)，7.38(1H，d)。19F NMR(376MHz，CDCl3，30℃)：-112.90。m/z：ES+[M+H]+474.1。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-7-甲腈
Figure BDA0003241985750000872
将(12aR)-10-氯-7-氰基-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(54mg，80％)(54mg，0.11mmol)溶解在DCM(1mL)中，并添加TFA(0.5mL)。将溶液在室温搅拌。1h后，将混合物用DCM(10mL)稀释，并添加饱和碳酸氢钠(10mL)。将所得混合物搅拌5min。将有机部分收集，并且将水性物用DCM(10mL)洗涤。使合并的有机物通过疏水性玻璃料，并在减压下浓缩，得到呈无色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-7-甲腈(33mg，77％)。m/z：ES+[M+H]+374.0。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-7-甲腈，实例16
Figure BDA0003241985750000881
在0℃下向(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-7-甲腈(33mg，0.09mmol)和三乙胺(16μL，0.11mmol)在DCM(1ml)中的溶液中添加丙烯酰氯(7.89μL，0.10mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌。5min后，将反应混合物通过添加几滴MeOH淬灭。将该混合物在减压下浓缩并将所得固体溶解在MeOH(1mL)中，并添加在MeOH中的7N氨(0.5mL)。将溶液在室温搅拌5min，并且然后在减压下浓缩。将残余物悬浮在DCM(5mL)中，并将混合物过滤。将滤液在减压下浓缩，得到浅黄色残余物。将其通过制备型HPLC(沃特世CSH C18 OBD柱，30x100mm id，5微米粒度)使用在水(含有0.1％甲酸)中的30％-60％MeCN洗脱进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-7-甲腈(9.9mg，26％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：2.48-2.63(1H，m)，2.81-3.1(3H，m)，3.33-3.5(1H，m)，3.61-3.87(2H，m)，3.93-4.16(3H，m)，4.25-4.38(1H，m)，5.65-5.73(1H，m)，6.18-6.31(1H，m)，6.41-6.55(1H，m)，6.61-6.77(2H，m)，7.15-7.24(1H，m)，7.32(1H，2x s)。19F NMR(376MHz，CDCl3，30℃)：-113.47--112.63。m/z：ES+[M+H]+428.0。
(12aR)-9-溴-10-氯-7-(1H-吡唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000891
将(12aR)-9-溴-10-氯-7-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(580mg，1.33mmol)、1H-吡唑(109mg，1.60mmol)和磷酸钾(1.41g，6.66mmol)悬浮在DMF(10mL)中，并密封在微波管中。将反应混合物在微波反应器中在120℃下加热1h。将另一份1H-吡唑(100mg)添加到微波管中并重新密封。将反应在微波反应器中在120℃下加热1.25h。将混合物用水(30mL)稀释，并用EtOAc(2x30mL)萃取。将合并的有机物干燥(MgSO4)并在减压下浓缩，得到浅黄色残余物(1.1g)。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)进行纯化，以提供呈无色胶状物的(12aR)-9-溴-10-氯-7-(1H-吡唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(337mg，52％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：1.42(9H，s)，2.35(1H，ddd)，2.58-2.71(1H，m)，2.71-2.85(2H，m)，3.11(1H，t)，3.46(1H，d)，3.62(1H，d)，3.65-3.86(3H，m)，4.36(1H，dd)，6.41-6.45(1H，m)，7.40(1H，s)，7.60(1H，dd)，7.69(1H，dd)。m/z：ES+[M+H]+482.9。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-吡唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000901
将(12aR)-9-溴-10-氯-7-(1H-吡唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(337mg，0.70mmol)和(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(217mg，1.39mmol)在2M水性碳酸钠(1.05mL，2.09mmol)和2-甲基四氢呋喃(6mL)中的溶液用氮气脱气5min。添加RuPhos G3(58.3mg，0.07mmol)和RuPhos(32.5mg，0.07mmol)，并将混合物在60℃下加热3h。添加另一份(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(100mg)，并将该反应在温度下搅拌1h。添加另一份(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(100mg)，并将混合物在60℃下再搅拌1h。将反应混合物用水(20mL)和2-甲基四氢呋喃(20mL)稀释。将有机层收集，并用另一份2-甲基四氢呋喃(20mL)萃取水层。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在压力下浓缩，得到橙色残余物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至60％EtOAc)进行纯化，得到呈浅黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-吡唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(224mg，62％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.40(9H，s)，2.26-2.37(1H，m)，2.54-2.63(1H，m)，2.64-2.87(2H，m)，2.91-3.1(1H，m)，3.34-3.51(1H，m)，3.57-3.77(2H，m)，3.77-3.92(2H，m)，4.34-4.57(1H，m)，6.49-6.59(1H，m)，6.73(1H，td)，6.80(1H，dd)，7.09(1H，s)，7.16-7.33(1H，m)，7.67-7.82(1H，m)，7.9-8.1(1H，m)，9.9-10.1(1H，m).19F NMR(376MHz，DMSO，30℃)：-115.79--112.35。m/z：ES+[M+H]+515.0。
2-[(12aR)-10-氯-7-(1H-吡唑-1-基)-1，2，3，4，12,12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚
Figure BDA0003241985750000911
在室温将在i-PrOH(0.725mL，4.35mmol)中的6M HCl添加到在MeOH(5mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-吡唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(224mg，0.430mmol)。将所得溶液搅拌0.5h。添加另一份在i-PrOH(1mL)中的6M HCl，并将反应混合物搅拌1h。添加另一份在i-PrOH(1mL)中的6M盐酸，并将反应混合物搅拌0.5h。将反应混合物在减压下浓缩，得到黄色粉末。将其通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供呈无色干膜状物的2-[(12aR)-10-氯-7-(1H-吡唑-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚(141mg，78％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：2.23-2.49(2H，m)，2.58-2.96(6H，m)，3.26-3.39(1H，m)，3.45-3.78(2H，m)，4.25(1H，dd)，5.19(1H，s)，6.38(1H，dt)，6.57(2H，dt)，7.02-7.17(2H，m)，7.54-7.74(2H，m)。19F NMR(376MHz，CDCl3，30℃)：-113.33(J＝7.7)，-112.91(J＝7.6)。m/z：ES+[M+H]+415.0。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-吡唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮，实例17
Figure BDA0003241985750000912
在0℃下向2-[(12aR)-10-氯-7-(1H-吡唑-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚(141mg，0.340mmol)和三乙胺(262μL，1.88mmol)在DCM(3mL)中的溶液中添加丙烯酰氯(30.4μL，0.370mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌0.5h。添加另一份丙烯酰氯(30.4μL，0.37mmol)，并将混合物搅拌0.1h。将混合物通过添加水(10mL)淬灭，并用DCM(2x10mL)萃取。使合并的有机物通过疏水性玻璃料，并在减压下浓缩，得到浅黄色泡沫。将其溶于7M NH3/MeOH(3mL)中并搅拌5min。将所得溶液在减压下浓缩，得到浅黄色残余物(201mg)。将其通过制备型HPLC(沃特世CSH C18 OBD柱，30x100mm id，5微米粒度)使用在水(含有0.1％甲酸)中的25％-50％MeCN进行纯化，以提供65mg的产物。将其通过制备型HPLC(沃特世CSH C18 OBD柱，30x100mm id，5微米粒度)使用水(含有0.1％NH3)和MeCN作为洗脱剂进行再次纯化。得到呈黄色粉末的1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-吡唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮(36mg，23％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：2.24-2.41(2H，m)，2.69-3.14(3H，m)，3.35-3.51(1H，m)，3.75-4.02(3H，m)，4.03-4.21(1H，m)，4.42-4.6(1H，m)，5.61-5.78(1H，m)，6.12(1H，d)，6.5-6.57(1H，m)，6.61-6.9(3H，m)，7.07(1H，d)，7.23(1H，q)，7.77(1H，d)，7.97-8.04(1H，m)，10.01(1H，br s).19F NMR(376MHz，DMSO，30℃)：-114.42--113.57。m/z：ES+[M+H]+469.0。
4-溴-5-甲基-1H-苯并咪唑
Figure BDA0003241985750000921
将3-溴-4-甲基苯-1，2-二胺(2.0g，9.95mmol)溶解于甲酸(20mL，530.15mmol)中，并且将所得混合物100℃下搅拌75min。将反应冷却至室温，并将溶剂在减压下除去。将残余物通过SCX(7MNH3/MeOH)纯化，以提供呈棕色固体的4-溴-5-甲基-1H-苯并咪唑(2.1g，100％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)2.54(3H，s)，7.19(1H，d)，7.57(1H，s)，8.03(1H，s)，9.25(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝211。
4-溴-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-苯并咪唑
Figure BDA0003241985750000931
将4-溴-5-甲基-1H-苯并咪唑(2.1g，9.94mmol)、3，4-二氢-2H-吡喃(4.54mL，49.68mmol)和4-甲基苯磺酸水合物(0.283g，1.49mmol)在THF(80mL)中的混合物在65℃下搅拌23h。将反应混合物冷却至室温，并在减压下浓缩。将所得残余物溶于EtOAc(150mL)中，并依次用水性饱和碳酸氢钠(75mL)和盐水(50mL)洗涤。使有机层通过疏水性玻璃料并在减压下浓缩以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至80％EtOAc)进行纯化，以提供呈橙色固体的4-溴-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-苯并咪唑(2.2g，75％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.63-1.85(3H，m)，2.04-2.21(3H，m)，2.54(3H，s)，3.74(1H，td)，4.10(1H，d)，5.46(1H，dd)，7.17(1H，d)，7.36(1H，d)，8.06(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝297。
[5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-苯并咪唑-4-基]硼酸
Figure BDA0003241985750000932
将二氯双(三环己基膦)钯(II)(525mg，0.71mmol)、双(频哪醇基)二硼(1.81g，7.11mmol)、4-溴-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-苯并咪唑(2.1g，7.11mmol)和乙酸钾(1.75g，17.79mmol)溶解在DMA(20mL)中。将所得溶液在155℃下搅拌105min。将反应混合物冷却至室温，并用水(80mL)稀释。将水性物用EtOAc(80mL x 3)萃取，并将合并的有机萃取物用水(80mL)和盐水(80mL)洗涤。使有机部分通过疏水性玻璃料，并在减压下浓缩，以提供呈棕色固体的粗产物，将其通过制备型HPLC(RediSepRF C18 GOLD，150克HP C18)用水(含有按体积计0.1％的甲酸)和MeCN洗脱进行纯化，以提供呈橙色固体的[5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-苯并咪唑-4-基]硼酸(1.87g，＞100％)，无需进一步纯化即可使用。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.75(2H，d)，2.13-2.25(2H，m)，2.60(3H，s)，2.63-2.69(2H，m)，3.75(2H，td)，5.68(1H，dd)，7.13(1H，d)，7.61(1H，d)，8.46(1H，s)，8.95(2H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝261。
(12aR)-10-氯-8-氟-9-[5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-苯并咪唑-4-基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750000941
在25℃下将(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(653mg，1.50mmol)添加到在1，4-二噁烷(10mL)和水(2.5mL)(4∶1比率)中的[5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-苯并咪唑-4-基]硼酸(780mg，3mmol)、RuPhos(70mg，0.15mmol)、RuPhos-Pd-G3(125mg，0.15mmol)和碳酸钾(518mg，3.75mmol)中。将所得溶液在100℃下搅拌1h。将获得的粗反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至70％MeCN)进行纯化，得到呈棕色固体的(12aR)-10-氯-8-氟-9-[5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-苯并咪唑-4-基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(845mg，99％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，1.52-1.82(4H，m)，1.95-2.07(2H，m)，2.13(3H，d)，2.21(1H，d)，2.35-2.39(1H，m)，2.74-2.82(3H，m)，3.06-3.14(1H，m)，3.17(2H，s)，3.75(2H，d)，3.85-4.05(2H，m)，4.34(1H，d)，5.66(1H，d)，7.26(1H，d)，7.63(1H，d)，8.16(1H，s)，8.24(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝571。
(12aR)-10-氯-8-氟-9-(5-甲基-1H-苯并咪唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750000951
在25℃下将(12aR)-10-氯-8-氟-9-[5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-苯并咪唑-4-基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(785mg，1.37mmol)添加到在MeOH(15mL)和水(3mL)中的对甲苯磺酸(1183mg，6.87mmol)中。将所得溶液在80℃下搅拌1h。将粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中0至30％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-10-氯-8-氟-9-(5-甲基-1H-苯并咪唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(310mg，58％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.12(3H，d)，2.22-2.43(3H，m)，2.60-2.89(5H，m)，3.52-3.77(2H，m)，3.78-3.89(1H，m)，4.16-4.30(1H，m)，7.08-7.20(1H，m)，7.25-7.36(1H，m)，7.54(1H，d)，8.07(1H，d)，12.21(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝387。
1-((12aR)-10-氯-8-氟-9-(5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例18；和旋转异构体2，实例19
Figure BDA0003241985750000952
在0℃下将丙烯酰氯(45.6mg，0.50mmol)添加到在DMF(2mL)中的(12aR)-10-氯-8-氟-9-(5-甲基-1H-苯并咪唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(150mg，0.39mmol)和DIPEA(0.203mL，1.16mmol)中。将所得溶液在0℃下搅拌30min。将粗反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4HCO3)中0至50％MeCN)进行纯化，得到呈白色固体的粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(柱：XBridge PrepOBD C18柱30×150mm 5μm)用水(10mmol/L NH4HCO3)和MeCN洗脱进行纯化。得到1-((12aR)-10-氯-8-氟-9-(5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(19.5mg，27％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.14(3H，s)，2.36-2.46(1H，m)，2.77-2.90(2H，m)，3.05-3.17(1H，m)，3.35-3.44(1H，m)，3.59-3.71(1H，m)，3.74-4.07(4H，m)，4.32-4.45(1H，m)，5.66-5.74(1H，m)，6.08-6.18(1H，m)，6.76-6.89(1H，m)，7.12-7.21(1H，m)，7.23-7.38(1H，m)，7.45-7.63(1H，m)，8.05(1H，d)，12.29(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝441。接着是1-((12aR)-10-氯-8-氟-9-(5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(14mg，20％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.10(3H，s)，2.37-2.46(1H，m)，2.80-2.90(2H，m)，3.15-3.21(1H，m)，3.36-3.47(1H，m)，3.58-4.02(5H，m)，4.32-4.45(1H，m)，5.67-5.75(1H，m)，6.09-6.19(1H，m)，6.77-6.90(1H，m)7.11-7.20(1H，m)，7.23-7.36(1H，m)，7.45-7.63(1H，m)，8.08(1H，d)，12.31(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝441。
(12aR)-9-溴-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮
Figure BDA0003241985750000961
将N-氯琥珀酰亚胺(1.856g，13.90mmol)添加到在浓硫酸(30mL)中的(12aR)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2g，4.63mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌20h。将反应混合物用2M NaOH碱化，用DCM(200mL x 3)萃取，并且将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中5％至60％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(0.5g，30％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.05-2.36(4H，m)，2.87-3.23(3H，m)，3.38-3.76(1H，m)，3.78-3.98(1H，m)，7.16(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝365。
(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮
Figure BDA0003241985750000971
在室温将RuPhos-Pd-G3(91mg，0.11mmol)和RuPhos(51mg，0.11mmol)添加到在1，4-二噁烷(8mL)和水(2mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(400mg，1.09mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(204mg，1.31mmol)和碳酸钠(290mg，2.73mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌1h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中0至60％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(50mg，12％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.96-3(4H，m)，3.72-3.76(3H，m)，3.93-3.98(1H，m)，4.29(1H，d)，4.66-4.76(1H，m)，6.71-6.86(2H，m)，7.25-7.36(1H，m)，7.88(1H，d)，10.14(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝397。
(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮旋转异构体1，实例20；和旋转异构体2，实例21
Figure BDA0003241985750000972
在0℃下将丙烯酰氯(10mg，0.11mmol)添加到在DMF(2mL)中的(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(50mg，0.13mmol)和DIPEA(0.066mL，0.38mmol)。将所得溶液在0℃下搅拌30min。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4HCO3)中0至50％MeCN)进行纯化，得到呈固体的粗产物。将其通过制备型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱30×150mm 5μm)用水(10mmol/L NH4HCO3)和MeCN洗脱进行纯化。得到(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈黄色固体的旋转异构体1(24mg，42％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.35-4.17(7H，m)，4.27-4.70(2H，m)，5.59-5.96(1H，m)，6.03-6.39(1H，m)，6.49-7(3H，m)，7.15-7.39(1H，m)，7.77(1H，d)，10.10(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝451。接着是(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈黄色固体的旋转异构体2(13mg，23％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.35-4.21(7H，m)，4.21-4.56(2H，m)，5.47-5.85(1H，m)，6.05-6.41(1H，m)，6.58-7.14(3H，m)，7.14-7.58(1H，m)，7.80(1H，d)，10.19(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝451。
(12aR)-9-溴-10-氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈
Figure BDA0003241985750000981
将四(三苯基膦)钯(0)(208mg，0.18mmol)添加到在DMF(5mL)中的氰化锌(127mg，1.08mmol)和(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(400mg，0.9mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌5h，并通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中5％至80％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(200mg，65％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.30-2.35(2H，m)，2.61-2.65(2H，m)，2.72-2.76(3H，m)，3.75-3.80(2H，m)，4.03(1H，q)，4.30-4.38(1H，m)，7.73(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝342。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈
Figure BDA0003241985750000991
在室温将RuPhos-Pd-G3(48.8mg，0.06mmol)和RuPhos(27mg，0.06mmol)添加到在1，4-二噁烷(5mL)和水(1mL)(5∶1比率)中的(12aR)-9-溴-10-氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(200mg，0.58mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(109mg，0.70mmol)和碳酸钠(155mg，1.46mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌1h，并通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中0至60％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(110mg，50％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.20-2.42(1H，m)，2.59-2.83(4H，m)，3.48-3.96(5H，m)，4.27-4.42(1H，m)，6.83(1H，s)，7.12-7.23(2H，m)，7.33-7.44(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝374。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈旋转异构体1，实例22；和旋转异构体2，实例23
Figure BDA0003241985750001001
在0℃下将丙烯酰氯(19.37mg，0.21mmol)添加到在DMF(2mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(80mg，0.21mmol)和DIPEA(0.112mL，0.64mmol)中。将所得溶液在0℃下搅拌30min。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4HCO3)中0至50％MeCN)进行纯化，以提供粗产物。将其通过制备型HPLC(柱：Kinetex EVO C18柱30*150，5μm)用水(10mmol/L NH4HCO3)和MeCN洗脱进行纯化，得到(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈黄色固体的旋转异构体1(15mg，16％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.41-2.51(1H，m)，2.62-2.80(3H，m)，2.94-3.15(1H，m)，3.65-4.15(5H，m)，4.38-4.91(1H，m)，5.41-5.88(1H，m)，6.09(1H，d)，6.62-6.91(3H，m)，7.35(1H，d)，7.84(1H，s)，10.31(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝428。接着是(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈黄色固体的旋转异构体2(10mg，11％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.41-2.51(1H，m)，2.73-2.77(1H，m)，2.85-2.89(2H，m)，2.99-3.03(1H，m)，3.79-3.94(4H，m)，3.95-4.03(1H，m)，4.51-4.59(1H，m)，5.70-5.81(1H，m)，6.13(1H，d)，6.72-6.77(3H，m)，7.287.34(1H，m)，7.82(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝428。
(3R)-4-(4-溴-2-氟-5-甲基苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001011
将DIPEA(8.99mL，51.49mmol)添加到在DMF(30mL)中的4-溴-2-氟-5-甲基苯甲酸(4g，17.16mmol)、HATU(9.79g，25.75mmol)和(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.90g，18.02mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释，并用盐水(100mL x 3)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中20％至50％EtOAc)进行纯化，得到呈黄色固体的(3R)-4-(4-溴-2-氟-5-甲基苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(6g，81％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)1.25(9H，s)，2.78-3.04(2H，m)，3.16-3.62(5H，m)，3.77-4.22(2H，m)，4.20-4.75(2H，m)，4.82-5.23(1H，m)，7.39(1H，d)，7.50-7.81(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝431。
(12aR)-9-溴-8-甲基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001012
将在THF(13.91mL，13.91mmol)中的1M双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂添加到在DMF(200mL)中的(3R)-4-(4-溴-2-氟-5-甲基苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5g，11.59mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌5h。将溶剂在减压下去除。将获得的粗油状物用水研磨，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-8-甲基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3.5g，73％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.25(9H，s)，2.80-3.04(2H，m)，3.04-3.65(6H，m)，3.65-4.20(2H，m)，4.17-4.63(1H，m)，4.63-5.07(1H，m)，7.14-7.50(1H，m)，7.62-7.83(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝411。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮
Figure BDA0003241985750001021
将N-氯琥珀酰亚胺(0.649g，4.86mmol)添加到在浓硫酸(10mL)中的(12aR)-9-溴-8-甲基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1g，2.43mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌20h。将反应混合物用2M NaOH调节至pH 8。将水层用DCM(200mL x 3)萃取。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中20％至80％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-8-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(0.35g，42％)。1H NMR(400MHz，CD3OD，30℃)2.45(3H，s)，2.77-3.15(4H，m)，3.47-3.75(1H，m)，3.77-4.07(2H，m)，4-4.37(1H，m)，4.66(1H，t)，7.60(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝345。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮
Figure BDA0003241985750001022
在25℃下将RuPhos-Pd-G3(145mg，0.17mmol)添加到在1，4-二噁烷(5mL)和水(1mL)(5∶1比率)中的(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(338mg，2.17mmol)、RuPhos(81mg，0.17mmol)、(12aR)-9-溴-10-氯-8-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(300mg，0.87mmol)和K2CO3(360mg，2.6mmol)中。将所得溶液在80℃下搅拌1h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中5％至80％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(130mg，40％)。1H NMR(300MHz，CD3OD，30℃)2.12(3H，s)，3.17-3.25(3H，m)，3.87-4.21(4H，m)，4.21-4.38(1H，m)，4.62-4.77(1H，m)，6.68-6.80(2H，m)，7.18-7.36(1H，m)，7.72(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝377。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲基-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮旋转异构体1，实例24；和旋转异构体2，实例25
Figure BDA0003241985750001031
将丙烯酰氯(25.9mg，0.29mmol)添加到在DMF(3mL)中的DIPEA(0.167mL，0.96mmol)和(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(120mg，0.32mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4h，并通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中5％至80％MeCN)进行纯化，得到粗产物。将其通过制备型手性HPLC(柱：CHIRALPAK IG，20*250mm，5μm；流动相A：Hex∶DCM＝3∶1--HPLC，流动相B：IPA--HPLC；流速：20mL/min；梯度：在10min内50B至50B)进行纯化。得到(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲基-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈白色固体的旋转异构体1(18mg，36％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)2.01(3H，s)，3.65-3.83(1H，m)，3.90-4.04(6H，m)，4.15-4.31(2H，m)，5.72(1H，d)，6.10-6.22(1H，m)，6.66-6.89(3H，m)，7.28(1H，t)，7.53(1H，d)，9.98(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝431。接着是(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲基-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮的呈白色固体的旋转异构体2(18mg，36％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.03(3H，s)，3.71-3.88(1H，m)，3.90-4.04(6H，m)，4.25-4.35(2H，m)，5.72(1H，d)，6.10-6.22(1H，m)，6.66-6.84(3H，m)，7.28(1H，t)，7.53(1H，d)，9.98(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝431。
(12aR)-9-溴-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750001041
在室温将N-氯琥珀酰亚胺(162mg，1.21mmol)添加到在浓硫酸(5mL)中的(12aR)-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯。将所得混合物在80℃下搅拌20h，然后用2M NaOH淬灭，用DCM(100mL x 3)萃取，并且将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发以提供粗产物。将其通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中30％至90％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(300mg，77％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.34-2.51(2H，m)，2.68-2.81(5H，m)，3.33-3.95(3H，m)，4.28-4.30(1H，m)，7.59(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝351。
2-[(12aR)-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚，旋转异构体1和旋转异构体2
Figure BDA0003241985750001042
在室温将RuPhos-Pd-G3(23.76mg，0.03mmol)和RuPhos(13mg，0.03mmol)添加到在1，4-二噁烷(5mL)和水(1mL)(5∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(100mg，0.28mmol)、2-氟-6-羟基苯基)硼酸(53mg，0.34mmol)和碳酸钠(75mg，0.71mmol)中。将所得混合物在80℃下搅拌1h，并通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中0至60％MeCN)进行纯化，得到2-[(12aR)-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚的呈黄色固体的旋转异构体1(25mg，23％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.32-2.27(5H，m)，2.69-2.93(3H，m)，2.95-3.16(2H，m)，3.33-3.69(1H，m)，5.66-6.08(2H，m)，6.27-6.47(1H，m)，6.58(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝383。接着是2-[(12aR)-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚的呈黄色固体的旋转异构体2(35mg，32％)。m/z：ES+[M+H]+＝383。
1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例26
Figure BDA0003241985750001051
将丙烯酰氯(5.9mg，0.07mmol)添加到在DMF(2mL)中的DIPEA(0.034mL，0.2mmol)和2-[(12aR)-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚的旋转异构体1(25mg，0.07mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌4h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中5％至70％MeCN)进行纯化，得到1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈黄色固体的旋转异构体1(8mg，28％)。1H NMR(300MHz，CD3OD，30℃)2.49-2.59(1H，m)，2.93-3.13(3H，m)，3.50-3.60(1H，m)，3.69-3.79(2H，m)，3.89-4.13(3H，m)，4.33-4.47(1H，m)，5.78(1H，d)，6.24(1H，d)，6.60-6.89(3H，m)，7.25(1H，t)，7.38(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝437。
1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体2，实例27
Figure BDA0003241985750001061
将丙烯酰氯(7.08mg，0.08mmol)添加到在DMF(2mL)中的DIPEA(0.041mL，0.23mmol)和2-[(12aR)-8，10-二氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚的旋转异构体2(30mg，0.08mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌4h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中5％至70％MeCN)进行纯化，得到1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈黄色固体的旋转异构体2(8mg，28％)。1HNMR(300MHz，CD3OD，30℃)2.52-2.58(1H，m)，3.16-3.22(2H，m)，3.11-3.21(1H，m)，3.46-3.55(1H，m)，3.69-3.80(2H，m)，3.86-4.06(3H，m)，4.34-4.40(1H，m)，5.77(1H，d)，6.22(1H，d)，6.58-6.79(3H，m)，7.23(1H，t)，7.37(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝437。
8-溴-7-甲基异喹啉
Figure BDA0003241985750001062
在25℃下，将2，2-二乙氧基乙-1-胺(2.68g，20.10mmol)逐滴添加到在甲苯(12mL)中的2-溴-3-甲基苯甲醛(4g，20.1mmol)中。将所得悬浮液在100℃下搅拌16h。冷却至室温后，将溶剂在减压下除去。将获得的残余物溶解于DCM(16mL)中，并在室温将三氯化铝(8.84g，66.32mmol)分批添加到该溶液。将所得悬浮液在室温搅拌3h。将反应混合物倒入冰(100mL)中，用DCM(50mL x 3)萃取，并将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至20％EtOAc)进行纯化，得到呈黄色固体的8-溴-7-甲基异喹啉(1.56g，35％)。m/z：ES+[M+H]+＝222。
8-溴-7-甲基-2-氧代-2λ5-异喹啉
Figure BDA0003241985750001071
在室温将3-氯过苯甲酸(3.25g，16mmol)添加到在DCM(70mL)中的8-溴-7-甲基异喹啉(3.23g，14.54mmol)中。将所得悬浮液在25℃下搅拌6h。将反应混合物用DCM(200mL)稀释，并用饱和NaHCO3(100mL x 3)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并蒸发，以提供呈浅黄色固体的8-溴-7-甲基-2-氧代-2λ5-异喹啉(3.75g，＞100％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)2.64(3H，s)，7.46-7.56(1H，m)，7.68(2H，t)，8.21(1H，d)，9.30(1H，s)。m/z ES+[M+H]+＝238。
8-溴-1-甲氧基-7-甲基异喹啉
Figure BDA0003241985750001072
在25℃下将氯甲酸甲酯(2.245mL，28.98mmol)逐滴添加到在MeOH(110mL)中的8-溴-7-甲基-2-氧代-2λ5-异喹啉(4.6g，19.32mmol)和三乙胺(5.06mL，36.32mmol)中。将所得溶液在25℃下搅拌5h。然后添加另外的三乙胺(5.06mL，36.32mmol)和氯甲酸甲酯(2.245mL，28.98mmol)，并将反应混合物在25℃下搅拌16h。然后添加另外的氯甲酸甲酯(2.245mL，28.98mmol)，并将反应混合物在25℃下再搅拌6h。将反应混合物蒸发至干燥，用EtOAc(300mL)稀释，并用盐水(50mL x 3)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至8％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的8-溴-1-甲氧基-7-甲基异喹啉(2.58g，53％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)2.61(3H，s)，4.12(3H，s)，7.18(1H，d)，7.48(1H，d)，7.57(1H，d)，7.96(1H，d)。m/z ES+[M+H]+＝252。
(3R)-4-(4-溴-2，5-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001081
将DIPEA(2.95mL，16.88mmol)添加到在DMF(20mL)中的4-溴-2，5-二氟苯甲酸(2g，8.44mmol)、(R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.01g，9.28mmol)和HATU(4.81g，12.66mmol)中。将所得混合物在室温搅拌4h。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释，用水(100mL)和盐水(100mL x 2)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中10％至40％EtOAc)进行纯化，得到呈白色泡沫的(3R)-4-(4-溴-2，5-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.2g，87％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.49(9H，d)，2.84-3.24(3H，m)，3.27-3.41(1H，m)，3.51-3.72(1H，m)，3.72-3.87(1H，m)，3.91-4.35(2H，m)，4.42-4.89(1H，m)，7.13-7.25(1H，m)，7.33-7.41(1H，m)。m/z ES+[M-tBu]+＝379。
(12aR)-9-溴-8-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001082
在0℃下将氢化钠(0.423g，10.57mmol)缓慢添加到在DMF(30mL)中的(3R)-4-(4-溴-2，5-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.3g，5.28mmol)中。将所得溶液在室温搅拌2h。将反应混合物用冰(100mL)淬灭，用EtOAc(100mL x 2)萃取，将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中20％至30％EtOAc)进行纯化，得到呈白色泡沫的(12aR)-9-溴-8-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.67g，76％)。1HNMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.50(9H，s)，3.45-3.61(2H，m)，3.64-3.81(2H，m)，3.84-3.99(1H，m)，4.08-4.25(3H，m)，4.26-4.38(1H，m)，7.29(1H，d)，7.67(1H，d)。m/z ES+[M-tBu]+＝359。
(12aR)-9-溴-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001091
将(12aR)-9-溴-8-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.67g，4.02mmol)和1M硼烷-THF复合物溶液在THF(40mL，40mmol)中的溶液在回流下搅拌2h。将溶剂在减压下除去。将残余物溶解在MeOH(20mL)中，并将所得溶液在回流下搅拌1h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中5％至30％MeCN)进行纯化，得到呈白色干膜状物的(12aR)-9-溴-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.06g，66％)。1HNMR(300MHz，CDCl3，30℃)1.48(9H，s)，2.35-2.55(1H，m)，2.66-3.09(3H，m)，3.23-3.40(1H，m)，3.43-3.60(1H，m)，3.62-3.81(3H，m)，3.95(1H，d)，4.14-4.25(1H，m)，6.97(1H，d)，7.24(1H，d)。m/z ES+[M+H]+＝401。
[(12aR)-2-(叔丁氧基羰基)-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]硼酸.1TFA
Figure BDA0003241985750001101
将在1，4-二噁烷(10mL)中的(12aR)-9-溴-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.06g，2.64mmol)、双(频哪醇基)二硼(1.01g，3.96mmol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II))(0.193g，0.26mmol)和乙酸钾(0.518g，5.28mmll)在100℃下搅拌4h。将溶剂在减压下除去。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.05％TFA)中10％至40％MeCN)进行纯化，得到呈白色泡沫的[(12aR)-2-(叔丁氧基羰基)-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]硼酸.1TFA(1.06g，84％)。1H NMR(300MHz，CD3OD，30℃)1.51(9H，s)，2.76-3.20(2H，m)，3.36-3.44(1H，m)，3.54-3.75(1H，m)，3.75-3.93(2H，m)，4.10-4.27(2H，m)，4.38(1H，d)，4.48-4.74(2H，m)，7.16-7.25(2H，m)。m/z ES+[M+H]+＝367。
(12aR)-8-氟-9-(1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯.1TFA
Figure BDA0003241985750001102
将在1，4-二噁烷(12mL)和水(3mL)(4∶1比率)中的8-溴-1-甲氧基-7-甲基异喹啉(350mg，1.39mmol)、[(12aR)-2-(叔丁氧基羰基)-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]硼酸.1TFA(1000mg，2.08mmol)、RuPhos(64.8mg，0.14mmol)、RuPhos-Pd-G3(116mg，0.14mmol)和碳酸钾(767mg，5.55mmol)在100℃下搅拌1h。将溶剂在减压下除去。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.05％TFA)中5％至40％MeCN)进行纯化，以提供呈白色泡沫的(12aR)-8-氟-9-(1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯.1TFA(637mg，76％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.45-1.53(9H，m)，2.20(3H，d)，2.41-2.59(1H，m)，2.73-3.54(4H，m)，3.56-3.95(7H，m)，3.95-4.30(2H，m)，6.77-6.86(1H，m)，6.93-7.02(1H，m)，7.23(1H，t)，7.58(1H，d)，7.70(1H，dd)，7.94(1H，t)。m/z ES+[M+H]+＝494。
(12aR)-10-氯-9-(4-氯-1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750001111
将N-氯琥珀酰亚胺(330mg，2.47mmol)添加到在浓硫酸(8mL)中的(12aR)-8-氟-9-(1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯.1TFA(500mg，0.82mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌过夜。添加另外的N-氯琥珀酰亚胺(330mg，2.47mmol)，并将反应混合物再加热16h。将反应混合物倒入冰水中，并用2M NaOH碱化，用DCM(200mL x 4)萃取，将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发。将获得的残余物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.05％TFA)中5％至30％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，并通过SCX(7M NH3/MeOH)纯化，以提供呈黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(4-氯-1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(223mg，59％)。1H NMR(400MHz，CD3OD，30℃)2.19(3H，d)，2.88-2.96(1H，m)，3.09-3.28(4H，m)，3.61(3H，s)，3.70-3.75(4H，m)，4.12-4.20(2H，m)，7.16(1H，d)，7.88(1H，s)，8.02(1H，d)，8.20(1H，d)。m/z ES+[M+H]+＝462。
(12aR)-10-氯-9-(4-氯-1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001121
在0℃下将二碳酸二叔丁酯(0.181mL，0.78mmol)添加到在DCM(10mL)中的(12aR)-10-氯-9-(4-氯-1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(240mg，0.52mmol)和三乙胺(0.145mL，1.04mmol)中。将所得溶液在室温下搅拌2h。将溶剂在减压下去除。将获得的残余物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中20％至40％EtOAc)进行纯化，得到呈浅黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(4-氯-1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(120mg，41％)。1H NMR(400MHz，CD3OD，30℃)1.48(9H，d)，2.22(3H，d)，2.50-2.55(2H，m)，2.88-2.97(4H，m)，3.65(3H，dd)，3.73-3.82(3H，m)，4.08(1H，d)，4.36(1H，d)，7.14(1H，dd)，7.88(1H，d)，8.01(1H，d)，8.19(1H，d)。m/z ES+[M+H]+＝562。
(12aR)-10-氯-8-氟-9-(1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001122
将在MeOH(10mL)中的(12aR)-10-氯-9-(4-氯-1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(110mg，0.2mmol)和10％钯炭(25mg，0.01mmol)在室温下在氢气氛下搅拌2天。将反应混合物通过CELITETM垫过滤，并将溶剂在减压下除去，以提供呈白色固体的(12aR)-10-氯-8-氟-9-(1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(103mg，100％)。1H NMR(400MHz，CD3OD，30℃)1.51(9H，d)，2.11-2.25(3H，m)，2.88-3(1H，m)，3.33-3.53(4H，m)，3.58-3.73(3H，m)，3.77-4.32(4H，m)，4.52-4.73(2H，m)，6.94(1H，s)，7.37(1H，dd)，7.72(1H，dd)，7.87(1H，dd)，7.92(1H，dd)。m/z ES+[M+H]+＝528。
8-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-7-甲基异喹啉-1(2H)-酮
Figure BDA0003241985750001131
将(12aR)-10-氯-8-氟-9-(1-甲氧基-7-甲基异喹啉-8-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(100mg，0.19mmol)、氯化锂(40.1mg，0.95mmol)和对甲苯磺酸(180mg，0.95mmol)溶解在DMF(5mL)中，并密封在微波管中。将反应在微波反应器中在120℃下加热30min，并冷却至室温。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.05％TFA)中5％至30％MeCN)进行纯化。将分离的产物使用SCX柱(7M NH3/MeOH)纯化，以提供呈黄色膜状物的8-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-7-甲基异喹啉-1(2H)-酮(50mg，64％)。1H NMR(400MHz，CD3OD，30℃)2.10(3H，d)，2.75-3.03(2H，m)，3.09-3.29(3H，m)，3.38-3.52(1H，m)，3.69-3.95(3H，m)，4.11(1H，dd)，4.30-4.46(1H，m)，6.68(1H，dd)，7.07(1H，dd)，7.11(1H，dd)，7.65-7.72(2H，m)。m/z ES+[M+H]+＝414。
8-[(12aR)-10-氯-8-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-7-甲基异喹啉-1(2H)-酮旋转异构体1，实例28；和旋转异构体2，实例29
Figure BDA0003241985750001141
在-10℃下将丙烯酰氯(10.93mg，0.12mmol)在DMF(1mL)中的溶液逐滴添加到8-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-7-甲基异喹啉-1(2H)-酮(50mg，0.12mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在-10℃下搅拌30min。将反应混合物通过制备型HPLC(柱：Xselect CSH OBD柱30*150mm 5μm)用水(0.1％甲酸)和MeCN洗脱进行纯化，得到8-[(12aR)-10-氯-8-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-7-甲基异喹啉-1(2H)-酮的呈白色固体的旋转异构体1(18mg，32％)。1H NMR(400MHz，CD3CN，30℃)2.11(3H，s)，2.40-2.54(1H，m)，2.81-3.53(4H，m)，3.62-3.75(2H，m)，3.74-3.87(1H，m)，3.90-4.15(2H，m)，4.32(1H，dd)，5.69(1H，dd)，6.18(1H，dd)，6.54(1H，d)，6.72(1H，dd)，7.02(2H，d)，7.57-7.79(2H，m)，9.07(1H，s)。m/z ES+[M+H]+＝468。接着是8-[(12aR)-10-氯-8-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-7-甲基异喹啉-1(2H)-酮的呈白色固体的旋转异构体2(13mg，23％)。1H NMR(400MHz，CD3CN，30℃)2.08(3H，s)，2.39-3.51(5H，m)，3.53-3.91(3H，m)，3.93-4.21(2H，m)，4.34(1H，dd)，5.70(1H，dd)，6.19(1H，dd)，6.54(1H，d)，6.72(1H，dd)，6.94-7.12(2H，m)，7.56-7.74(2H，m)，9.07(1H，s)。m/z ES+[M+H]+＝468。
4-氨基-3-氯-2-氟-5-甲氧基苯甲酸
Figure BDA0003241985750001151
在25℃下将4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯甲酸(2.5g，13.5mmol)添加到在MeCN(50mL)中的N-氯琥珀酰亚胺(1.803g，13.5mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌12h。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中5％至100％MeOH)进行纯化，得到呈黑色固体的4-氨基-3-氯-2-氟-5-甲氧基苯甲酸(1.241g，42％)。1H NMR(300MHz，CD3OD，30℃)3.90(3H，s)，7.26(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝220。
4-溴-3-氯-2-氟-5-甲氧基苯甲酸
Figure BDA0003241985750001152
将4-氨基-3-氯-2-氟-5-甲氧基苯甲酸(1.241g，5.65mmol)添加到冷却至0℃的在MeCN(45mL)中的亚硝酸叔丁酯(1.166g，11.30mmol)中。然后在0℃下经10min的时间段添加溴化铜(II)(2.52g，11.30mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中70％至72％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的4-溴-3-氯-2-氟-5-甲氧基苯甲酸(1g，62％)。m/z：ES-[M-H]-＝281。
(3R)-4-(4-溴-3-氯-2-氟-5-甲氧基苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001153
在25℃下经3h的时间段将4-溴-3-氯-2-氟-5-甲氧基苯甲酸(1g，3.53mmol)添加到在DMF(20ml)中的(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.144g，5.29mmol)、DIPEA(1.848ml，10.58mmol)和HATU(2.012g，5.29mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌3h。将反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，并用盐水(50mL x 3)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中15％至60％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(3R)-4-(4-溴-3-氯-2-氟-5-甲氧基苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.8g，47％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.65-3.11(3H，m)，3.40-3.64(2H，m)，3.88(3H，s)，3.93-4.15(1H，m)，4.15-4.41(1H，m)，4.39-4.68(1H，m)，4.69-5.28(1H，m)，7.15(1H，d)。m/z：ES+[M-tBu]+＝425。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001161
将在THF(1.495mL，1.49mmol)中的1M双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂添加到在DMF(15mL)中的(3R)-4-(4-溴-3-氯-2-氟-5-甲氧基苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(600mg，1.25mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌4h。将粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中5％至80％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(400mg，70％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.49(9H，s)，3.45-3.83(4H，m)，3.86-3.90(2H，m)，3.94(3H，s)，4.04-4.08(1H，m)，4.21-4.29(1H，m)，4.30-4.35(1H，m)，7.23(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝461。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001171
在25℃下将RuPhos-Pd-G3(72.5mg，0.09mmol)添加到在1，4-二噁烷(10mL)和水(2.5mL)(4∶1比率)中的2-氟-6-羟基苯基)硼酸(203mg，1.3mmol)、RuPhos(40mg，0.09mmol)、(12aR)-9-溴-10-氯-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(400mg，0.87mmol)和K2CO3(359mg，2.60mmol)中。将所得溶液在80℃下搅拌1h。将反应混合物通C18过快速色谱法(洗脱梯度为在水中40％至80％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(280mg，66％)。1H NMR(300MHz，CD3OD，30℃)1.51(9H，s)，3.69-3.90(7H，m)，3.89-4.19(3H，m)，4.22-4.51(2H，m)，6.36-6.79(2H，m)，7.12-7.28(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝493。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001172
将在THF(10mL，10.0mmol)中在1M硼烷-THF复合物溶液中的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(260mg，0.53mmol)在25℃下搅拌5h。将反应混合物用2M HCl淬灭，并将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通C18过快速色谱法(洗脱梯度为在水中10％至80％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(220mg，87％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.48(9H，s)，2.34-2.75(2H，m)，2.80-2.92(1H，m)，3.18-3.42(2H，m)，3.57-3.95(7H，m)，4-4.17(1H，m)，4.24-4.51(1H，m)，6.60-6.89(3H，m)，7.30(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝479。
2-[(12aR)-10-氯-8-甲氧基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚
Figure BDA0003241985750001181
将在TFA(9mL)和DCM(1mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(210mg，0.44mmol)在25℃下搅拌1h。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过SCX(7M NH3/MeOH)纯化，以提供呈固体的2-[(12aR)-10-氯-8-甲氧基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚(140mg，84％)。1HNMR(400MHz，CDCl3，30℃)2.41-2.68(3H，m)，2.70-3.28(6H，m)，3.59-3.71(1H，m)，3.76(3H，s)，3.88-4.10(1H，m)，4.10-4.39(1H，m)，6.48-6.99(3H，m)，7.28-7.30(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝379。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例30；和旋转异构体2，实例31
Figure BDA0003241985750001182
将丙烯酰氯(25.8mg，0.29mmol)添加到在DMF(5mL)中的三乙胺(0.044mL，0.32mmol)和2-[(12aR)-10-氯-8-甲氧基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚(120mg，0.32mmol)中。将反应混合物在25℃下搅拌4h。将反应混合物通过制备型手性HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱30*150mm 5μm)使用水(10mmol/L NH4HCO3)和MeCN洗脱进行纯化，得到1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(40mg，29％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.35-2.41(1H，m)，2.70-3.41(4H，m)，3.44-3.57(1H，m)，3.65(3H，s)，3.70-3.76(1H，m)，3.87-4.15(3H，m)，4.23-4.39(1H，m)，5.68(1H，d)，6.12(1H，d)，6.59-6.75(2H，m)，6.75-6.88(1H，m)，6.99(1H，s)，7.11-7.25(1H，m)，9.71(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝433。接着是1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(33mg，24％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.35-2.41(1H，m)，2.69-3.35(4H，m)，3.44-3.57(1H，m)，3.64(3H，s)，3.66-3.75(1H，m)，3.81-3.92(2H，m)，3.95-4.18(1H，m)，4.22-4.38(1H，m)，5.68(1H，d)，6.11(1H，d)，6.57-6.67(1H，m)，6.67-6.74(1H，m)，6.74-6.87(1H，m)，6.97(1H，s)，7.10-7.24(1H，m)，9.67(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝433。
(3aR)-1-氧代四氢-1H-1λ4-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001191
在0℃下将亚硫酰氯(4.70ml，64.73mmol)添加到1H-咪唑(14.64g，215mmol)在DCM(100mL)中的溶液中并将反应混合物搅拌1h。将反应混合物冷却至-78℃，并在搅拌下逐滴添加(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5g，23.12mmol)在DCM(100mL)中的溶液。另外，将所得黄色混合物置于室温并搅拌过夜。将反应混合物在冰浴中冷却，并通过逐滴添加饱和氯化铵水溶液(200mL)将其淬灭。将有机部分收集，并且将水性物用DCM(200mL)洗涤。使合并的有机物通过疏水玻璃料，并在减压下浓缩，以提供呈黄色油状物的(3aR)-1-氧代四氢-1H-1λ4-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯(6.4g，＞100％)，将其静置固化并且无需进一步纯化即可使用。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.47(9H，d)，2.05-2.75(1H，m)，2.82(1H，td)，2.88-3.14(1H，m)，3.20(1H，td)，3.32(1H，d)，3.55-3.67(1H，m)，3.88(1H，dd)，3.95-4.44(1H，m)，4.46-4.52(1H，m)，4.52-4.6(1H，m)，4.77(1H，dd)。m/z：ES+[M-Boc]＝163。
(3aR)-1，1-二氧代四氢-1H-1λ6-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001201
在0℃下将(3aR)-1-氧代四氢-1H-1λ4-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯(6.4g，24.4mmol)在MeCN(90mL)和EtOAc(18mL)中的溶液逐滴添加到高碘酸钠(6.78g，31.72mmol)和氯化钌(III)水合物(0.011g，0.05mmol)在水(30mL)中的悬浮液中，并在0℃下搅拌5min，然后将反应混合物置于室温并搅拌过夜。将反应混合物用水性饱和氯化铵(200mL)稀释，并用DCM(200mL x 2)萃取。将合并的有机物干燥(MgSO4)，并在减压下浓缩，以提供呈浅黄色固体的(3aR)-1，1-二氧代四氢-1H-1λ6-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯(6.02g，89％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.50(9H，s)，2.99(2H，td)，3.08-3.24(1H，m)，3.41-3.52(1H，m)，3.61-3.74(1H，m)，4.01-4.18(1H，m)，4.18-4.31(2H，m)，4.65(1H，dd)。
2-氨基-4-溴-3-氯苯甲酸甲酯
Figure BDA0003241985750001211
将N-氯琥珀酰亚胺(12.19g，91.28mmol)添加到在DMF(400mL)中的2-氨基-4-溴苯甲酸甲酯(20g，86.93mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌4h。将反应混合物用EtOAc(500mL)稀释，用水(500mL x 3)、盐水(350mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至5％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的2-氨基-4-溴-3-氯苯甲酸甲酯(4.5g，20％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)3.91(3H，s)，6.50(2H，s)，6.93(1H，d)，7.69(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝264。
4-溴-2-({[(2S)-4-(叔丁氧基羰基)-1-磺基哌嗪-2-基]甲基}氨基)-3-氯苯甲酸
Figure BDA0003241985750001212
在0℃下将氢化钠(0.544g，13.61mmol)添加到在DMF(30mL)中的(3aR)-1，1-二氧代四氢-1H-1λ6-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯(2.84g，10.21mmol)和2-氨基-4-溴-3-氯苯甲酸甲酯(1.8g，6.81mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌2h。将反应混合物用冰水稀释，并将所得粗反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中0至50％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的4-溴-2-({[(2S)-4-(叔丁氧基羰基)-1-磺基哌嗪-2-基]甲基}氨基)-3-氯苯甲酸(1.7g，47％)。m/z：ES+[M+H]+＝528。
4-溴-3-氯-2-({[(2R)-哌嗪-2-基]甲基}氨基)苯甲酸
Figure BDA0003241985750001221
将36％HCl(2mL，23.70mmol)分批添加到在THF(10mL)中的4-溴-2-({[(2S)-4-(叔丁氧基羰基)-1-磺基哌嗪-2-基]甲基}氨基)-3-氯苯甲酸(1.65g，3.12mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌过夜。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过SCX(7M NH3/MeOH)纯化，以提供呈黄色固体的(4-溴-3-氯-2-({[(2R)-哌嗪-2-基]甲基}氨基)苯甲酸(1g，92％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.60-2.71(1H，m)，2.74-2.95(2H，m)，2.97-3.16(3H，m)，3.19-3.32(2H，m)，3.35-3.47(1H，m)，7.14(1H，d)，7.71(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝348。
(12aR)-9-溴-10-氯-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮
Figure BDA0003241985750001222
将DIPEA(0.451mL，2.58mmol)添加到在DMF(6mL)中的4-溴-3-氯-2-({[(2R)-哌嗪-2-基]甲基}氨基)苯甲酸(300mg，0.86mmol)和HATU(491mg，1.29mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中0至45％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮(235mg，83％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.96-3.21(2H，m)，3.22-3.50(4H，m)，3.52-3.65(1H，m)，3.86-4.01(1H，m)，4.24-4.39(1H，m)，6.67(1H，t)，7.14(1H，d)，7.92(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝330。
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮
Figure BDA0003241985750001231
将四(三苯基膦)钯(0)(73.4mg，0.06mmol)添加到在1，4-二噁烷(5mL)和水(1mL)(5∶1比率)中的(12aR)-9-溴-10-氯-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮(210mg，0.64mmol)、(5-甲基-1H-吲唑-4-基)硼酸(224mg，1.27mmol)和碳酸钠(202mg，1.91mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌3h。将溶剂在减压下去除。将所获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4HCO3)中0至30％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮(100mg，41％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.12(3H，d)，2.59-2.93(4H，m)，3.42-3.69(4H，m)，3.69-3.82(1H，m)，6.04-6.14(1H，m)，6.68(1H，d)，7.30(1H，dd)，7.39-7.51(2H，m)，7.78-7.87(1H，m)，13.07(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝382。
(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮旋转异构体1，实例32；和旋转异构体2，实例33
Figure BDA0003241985750001232
在0℃下将丙烯酰氯(0.02mL，0.25mmol)添加到在DMF(4mL)中的(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮(95mg，0.25mmol)和DIPEA(0.087mL，0.50mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌1h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4HCO3)中0至50％MeCN)进行纯化，得到呈白色固体的粗产物。将其通过制备型手性HPLC纯化(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm，5μm；流动相A：己烷∶DCM＝3∶1(10mM NH3-MeOH)，流动相B：EtOH)。得到(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮的呈白色固体的旋转异构体1(9mg，18％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.11(3H，s)，3.40-3.52(1H，m)，3.54-3.75(4H，m)，3.76-4.13(4H，m)，5.66-5.79(1H，m)，6.07-6.30(2H，m)，6.66(1H，d)，6.68-6.93(1H，m)，7.30(1H，d)，7.38-7.53(2H，m)，7.82(1H，t)，13.08(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝436。接着是(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮的呈白色固体的旋转异构体2(6mg，12％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.13(3H，s)，3.39-3.53(1H，m)，3.55-4.14(8H，m)，5.67-5.80(1H，m)，6.07-6.34(2H，m)，6.66(1H，d)，6.69-6.92(1H，m)，7.30(1H，d)，7.36-7.54(2H，m)，7.76-7.93(1H，m)，13.08(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝436。
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001241
在25℃下将RuPhos-Pd-G3(48mg，0.06mmol)添加到在1，4-二噁烷(12mL)和水(3mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(250mg，0.57mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(495mg，2.87mmol)、碳酸钠(304mg，2.87mmol)和RuPhos(26.8mg，0.06mmol)中。将所得混合物在120℃下搅拌3h。将溶剂在真空下通过蒸馏除去，并将所获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中50％至90％MeOH)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(167mg，60％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.45(9H，s)，2.59-2.96(5H，m)，2.96-3.21(3H，m)，3.77-3.96(2H，m)，4.18-4.43(2H，m)，6.87-6.96(1H，m)，6.95-7.05(1H，m)，7.22-7.28(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝483。
3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚
Figure BDA0003241985750001251
在25℃下将TFA(1mL，0.33mmol)添加到在DCM(10mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(160mg，0.33mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌30min。将溶剂在真空下除去，并将获得的粗产物通过SCX(7M NH3/MeOH)纯化，以提供呈白色固体的3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(74mg，58％)。m/z：ES+[M+H]+＝383。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例34；和旋转异构体2，实例35
Figure BDA0003241985750001252
在25℃下将DIPEA(0.101mL，0.58mmol)逐滴添加到在DMF(3mL)中的3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(74mg，0.19mmol)中。然后在0℃下添加丙烯酰氯(17mg，0.19mmol)并且将反应混合物在25℃下搅拌30min。将反应混合物通过制备型HPLC(柱：Xselect CSH OBD柱30*150mm 5μm)用水(0.1％甲酸)和MeCN洗脱进行纯化，以提供1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(19mg，22％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.68-3.05(2H，m)，3.05-3.19(3H，m)，3.57-3.78(2H，m)，3.82-4.30(2H，m)，4.29-4.61(2H，m)，5.78(1H，m)，6.16(1H，m)，6.67-6.86(1H，m)，6.92(1H，m)，7.02(1H，m)，7.19-7.57(2H，m)，10.11(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝437。接着是1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(11mg，13％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.29-2.45(1H，m)，2.65-2.99(3H，m)，3.03-3.18(1H，m)，3.56-3.65(1H，m)，3.68-3.79(1H，m)，3.80-4(3H，m)，4.29-4.44(1H，m)，5.57-5.75(1H，m)，6.02-6.25(1H，m)，6.70-6.88(1H，m)，6.88-7.05(2H，m)，7.15-7.35(2H，m)，10.01-10.28(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝437。
4-溴-2-({[(2S)-4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-2-基]甲基}氨基)-3-氯苯甲酸
Figure BDA0003241985750001261
在0℃下将二碳酸二叔丁酯(0.599mL，2.58mmol)添加到在DCM(10mL)中的4-溴-2-({[(2S)-4-(叔丁氧基羰基)-1-磺基哌嗪-2-基]甲基}氨基)-3-氯苯甲酸(450mg，1.29mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌3h。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中0至50％MeCN)进行纯化，得到呈白色固体的4-溴-2-({[(2S)-4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-2-基]甲基}氨基)-3-氯苯甲酸(360mg，62％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.39(9H，s)，2.73-3.55(7H，m)，3.78-4.09(2H，m)，7.21(1H，d)，7.62(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝448。
(12aS)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，6，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001271
将DIPEA(0.397mL，2.27mmol)添加到在DMF(8mL)中的4-溴-2-({[(2S)-4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-2-基]甲基}氨基)-3-氯苯甲酸(340mg，0.76mmol)和HATU(432mg，1.14mmol)中。将所得混合物在室温搅拌2h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至50％MeCN)进行纯化，得到呈白色固体的(12aS)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，6，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(320mg，98％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.26-3.37(2H，m)，3.40-3.58(3H，m)，3.63-3.94(4H，m)，6.30-6.41(1H，m)，7.06(1H，d)，7.63(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝430。
(12aS)-9-溴-10-氯-11-甲基-6-氧代-3，4，6，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001272
在0℃下将碘甲烷(0.087mL，1.39mmol)添加到在DMF(6mL)中的(12aS)-9-溴-10-氯-6-氧代-3，4，6，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(300mg，0.7mmol)和氢化钠(84mg，2.09mmol)中。将所得混合物在室温搅拌2h。将反应混合物用水稀释，并通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至70％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aS)-9-溴-10-氯-11-甲基-6-氧代-3，4，6，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(260mg，84％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)11.41(9H，s)，2.92(3H，s)，3.09-3.33(3H，m)，3.40-3.89(6H，m)，7.35(1H，d)，7.57(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝444。
(12aS)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，6，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001281
将四(三苯基膦)钯(0)(62.4mg，0.05mmol)添加到在1，4-二噁烷(5mL)和水(1mL)(5∶1比率)中的(12aS)-9-溴-10-氯-11-甲基-6-氧代-3，4，6，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(240mg，0.54mmol)、(5-甲基-1H-吲唑-4-基)硼酸(142mg，0.81mmol)和碳酸钠(172mg，1.62mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌4h。将溶剂在减压下除去。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至50％MeCN)进行纯化，得到呈白色固体的(12aS)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，6，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(180mg，67％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.43(9H，s)，2.15(3H，d)，2.98(3H，d)，3.18-3.27(1H，m)，3.32-3.49(2H，m)，3.48-3.80(4H，m)，3.82-3.97(2H，m)，7.13(1H，dd)，7.31(1H，dd)，7.45-7.57(3H，m)，13.07(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝496。
(12aR)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮
Figure BDA0003241985750001282
将TFA(1mL，12.98mmol)逐滴添加到在DCM(5mL)中的(12aS)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-氧代-3，4，6，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(170mg，0.34mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌1h。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过SCX(7M NH3/MeOH)纯化，以提供呈黄色固体的(12aR)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮(125mg，92％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.14(3H，d)，2.54-2.87(3H，m)，2.93-3.01(4H，m)，3.04-3.25(2H，m)，3.51-3.81(2H，m)，3.92-4.21(1H，m)，7.11(1H，dd)，7.30(1H，dd)，7.45-7.56(3H，m)，13.08(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝396。
(12aS)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮旋转异构体1，实例36；和旋转异构体2，实例37
Figure BDA0003241985750001291
在0℃下将丙烯酰氯(0.026mL，0.32mmol)逐滴添加到在DMF(4mL)中的(12aR)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，3，4，11，12，12a-六氢苯并[e]吡嗪并[1，2-a][1，4]二氮杂卓-6(2H)-酮(120mg，0.3mmol)和DIPEA(0.106mL，0.61mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌1h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4HCO3)中0至50％MeCN)进行纯化，得到呈白色固体的粗产物。将其通过制备型手性HPLC纯化(柱：Chiralpak IA，2*25cm，5μm；流动相A：己烷∶DCM＝3∶1(10mM NH3-MeOH)，流动相B：EtOH)，得到(12aS)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮的呈白色固体的旋转异构体1(54mg，42％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.14(3H，s)，2.97(3H，s)，3.16-3.32(1H，m)，3.36-4.13(8H，m)，5.64-5.82(1H，m)，6.09-6.28(1H，m)，6.69-6.85(1H，m)，7.13(1H，d)，7.30(1H，d)，7.42-7.62(3H，m)，13.09(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝450。接着是(12aS)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮的呈白色固体的旋转异构体2(45mg，35％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.16(3H，s)，2.98(3H，s)，3.13-3.32(1H，m)，3.35-4.09(8H，m)，5.66-5.80(1H，m)，6.12-6.23(1H，m)，6.70-6.85(1H，m)，7.14(1H，d)，7.31(1H，d)，7.43-7.61(3H，m)，13.07(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝450。
4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酸
Figure BDA0003241985750001301
在室温下将4-溴-2，5-二氟苯甲酸(10g，42.2mmol)添加到浓硫酸(80mL)中，并将所得悬浮液加热到80℃。然后添加N-氯琥珀酰亚胺(11.27g，84.4mmol)，并将反应混合物在80℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温，倒入冰(200g)中，并将水相用EtOAc萃取。将有机层蒸发后获得的粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至60％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酸(4.80g，41.9％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)7.81(1H，dd)，13.98(1H，s)。m/z：ES-[M+H]-＝271。
(3R)-4-(4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001311
在25℃下，将(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.98g，18.42mmol)添加到在THF(80mL)中的4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酸(5g，18.42mmol)、HATU(10.51g，27.63mmol)和DIPEA(6.43mL，36.84mmol)。将所得溶液在室温下搅拌2h。将溶剂在减压下去除。快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至50％EtOAc)提供呈白色固体的(3R)-4-(4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.72g，66.1％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，d)，2.74-3.05(1H，m)，3.15(1H，t)，3.26-3.37(2H，m)，3.41-3.63(2H，m)，3.67-3.90(1H，m)，3.94-4.14(1H，m)，4.19-4.33(1H，m)，4.44-5.00(1H，m)，7.59(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝469。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001312
在0℃下在氮气下将氢化钠(0.971g，24.3mmol)添加到在THF(50mL)中的(3R)-4-(4-溴-3-氯-2，5-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.7g，12.14mmol)。将所得溶液在室温搅拌16h然后蒸发。快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至40％EtOAc)提供呈白色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2.020g，37.0％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.13-3.34(1H，m)，3.44-3.50(2H，m)，3.58-3.67(1H，m)，3.72-3.80(1H，m)，3.85-3.90(1H，m)，3.92-4.02(1H，m)，4.32(2H，d)，7.59(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝449。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001321
在25℃下在氮气下将(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(900mg，2.00mmol)添加到在THF(4ml，4.00mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液中。将所得溶液在60℃下搅拌16小时。然后添加MeOH(8ml)，并将所得溶液在室温搅拌1小时。将溶剂在减压下去除，并且将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至30％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(678mg，78％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.38(9H，s)，2.27-2.37(1H，m)，2.64-2.71(1H，m)，2.73-2.94(2H，m)，3.07-3.17(1H，m)，3.48-3.65(3H，m)，3.70(1H，d)，3.81(1H，d)，4.32(1H，dd)，7.37(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝435。
(12aR)-10-氯-9-(2，3-二氟-6-甲氧基苯基)-8-氟-3，4，12,12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001322
在25℃下将RuPhos-Pd-G3(101mg，0.12mmol)添加到在1，4-二噁烷(12mL)和水(3mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-10-氯-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(350mg，0.8mmol)、(2，3-二氟-6-甲氧基苯基)硼酸(906mg，4.82mmol)、RuPhos(56.2mg，0.12mmol)和碳酸钠(426mg，4.02mmol)中。将所得混合物在120℃下搅拌10h。将溶剂蒸发并将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中80％至90％MeOH)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-10-氯-9-(2，3-二氟-6-甲氧基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(100mg，25％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.42(9H，s)，1.54-1.71(2H，m)，1.73-1.77(1H，m)，2.73(1H，s)，3.71-3.77(3H，m)，3.81-4.23(3H，m)，4.36-4.52(3H，m)，4.53-4.76(1H，m)，6.98-7.07(1H，m)，7.42-7.51(1H，m)，7.53-7.66(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝499。
2-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3，4-二氟苯酚.2HBr
Figure BDA0003241985750001331
在25℃下将在DCM(3mL，3mmol)中的1M三溴化硼添加到在DCM(3mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2，3-二氟-6-甲氧基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(95mg，0.19mmol)中。将所得溶液在25℃下搅拌30min。添加MeOH(1mL)，并且然后将溶剂在真空下除去。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中50％至90％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的2-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3，4-二氟苯酚.2HBr(92mg，88％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.16-2.38(4H，m)，2.70-2.82(2H，m)，3.54-3.71(4H，m)，3.75-3.85(1H，m)，4.18-4.28(1H，m)，6.68-6.80(1H，m)，7.23-7.30(1H，m)，7.30-7.43(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝385。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2，3-二氟-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例38；和旋转异构体2，实例39
Figure BDA0003241985750001341
在25℃下将DIPEA(0.081mL，0.47mmol)逐滴添加到在DMF(2mL)中的2-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3，4-二氟苯酚.2HBr(85mg，0.16mmol)中。在0℃下添加丙烯酰氯(0.018mL，0.22mmol)，并将所得混合物在0℃下搅拌30min。添加水(0.5mL)，并且将所得溶液通过制备型HPCL(柱：XBridgePrep OBD C18柱30×150mm 5μm)用水(10mmol/L NH4HCO3)和MeCN洗脱进行纯化，给出1-[(12aR)-10-氯-9-(2，3-二氟-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(20mg，29％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.38-2.44(1H，m)，2.62-3.23(4H，m)，3.57-3.70(1H，m)，3.70-4.10(4H，m)，4.31-4.46(1H，m)，5.65-5.74(1H，m)，6.07-6.19(1H，m)，6.70-6.89(2H，m)，7.26-7.43(2H，m)，10.13-10.19(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝439。接着是1-[(12aR)-10-氯-9-(2，3-二氟-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(5.7mg，8％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.34-2.49(1H，m)，2.78-2.84(3H，m)，3.09-3.15(1H，m)，3.57-3.70(1H，m)，3.67-4.14(4H，m)，4.32-4.47(1H，m)，5.68-5.74(1H，m)，6.08-6.19(1H，m)，6.67-6.92(2H，m)，7.24-7.38(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝439。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750001351
将N-碘琥珀酰亚胺(7.54g，33.51mmol)添加到在浓硫酸(60mL)中的(12aR)-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(7g，16.76mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌20h。将反应混合物用2M NaOH淬灭，用DCM(200mLx 4)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(4g，54％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.18-2.43(3H，m)，2.56-2.73(3H，m)，2.73-2.96(2H，m)，3.59-3.63(2H，m)，4.24(2H，d)，7.84(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝443。
(12aR)-9-溴-10-氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈
Figure BDA0003241985750001352
将四(三苯基膦)钯(0)(2.084g，1.8mmol)添加到在DMF(40mL)中的氰化锌(1.271g，10.82mmol)和(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(4g，9.02mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌5h。将粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中5％至80％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(1.8g，51％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.27-2.46(2H，m)，2.67-2.82(3H，m)，2.74-2.99(2H，m)，3.61-3.91(3H，m)，4.41(1H，dd)，7.87(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝342。
(12aR)-10-氯-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈.1TFA
Figure BDA0003241985750001361
在室温将RuPhos-Pd-G3(0.387g，0.46mmol)和RuPhos(0.216g，0.46mmol)添加到在1，4-二噁烷(30mL)和水(6mL)(5∶1比率)中的(12aR)-9-溴-10-氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(1.8g，4.63mmol)、(2-甲氧基-6-甲基苯基)硼酸(1.076g，6.48mmol)和碳酸钠(1.227g，11.58mmol)中。将所得混合物在80℃下搅拌2.5h。将反应混合物浓缩，并用EtOAc(150mL)稀释，并用水(50mL x 2)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中20％至60％MeOH)进行纯化，得到呈黄色油状物的(12aR)-10-氯-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈.1TFA(1.55g，67％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.87-2.04(3H，m)，2.60-3.12(6H，m)，3.20-3.46(2H，m)，3.69(3H，s)，3.78-3.93(1H，m)，3.98-4.28(2H，m)，4.48-4.68(1H，m)，6.82-6.96(1H，m)，6.94-7.06(1H，m)，7.26-7.41(1H，m)，7.74-7.92(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝384。
(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈旋转异构体1和2
Figure BDA0003241985750001362
在室温将在DCM(15.60mL，15.60mmol)中的1M三溴化硼添加到在DCM(20mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈.1TFA(1.55g，3.12mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4h。将反应混合物用MeOH(20ml)淬灭并蒸发，以提供黄色油状物。将其通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中20％至50％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的粗产物。将其通过制备型手性HPLC(柱：CHIRALPAK IC，2*25cm，5μm)用己烷(8mmol/L NH3.MeOH)和EtOH洗脱进行纯化，得到(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈白色固体的旋转异构体1(210mg，35％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.90(3H，s)，2.17-2.46(2H，m)，2.61-3.01(6H，m)，3.69-3.95(3H，m)，4.40(1H，d)，6.67-6.89(2H，m)，7.01-7.28(1H，m)，7.80(1H，s)，8.25(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝370。接着是(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈白色固体的旋转异构体2(240mg，40％)。m/z：ES+[M+H]+＝370。
(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈旋转异构体1，实例40
Figure BDA0003241985750001371
将丙烯酰氯(55.8mg，0.62mmol)添加到在DMF(5mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的旋转异构体1(240mg，0.65mmol)和DIPEA(0.340mL，1.95mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中25％至40％MeCN)进行纯化，得到(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈白色固体的旋转异构体1(150mg，55％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.93(3H，s)，2.45-2.51(1H，m)，2.73-2.78(1H，m)，2.84-2.89(2H，m)，3.05-3.13(1H，m)，3.83-3.88(4H，m)，4.06-4.10(1H，m)，4.48-4.52(1H，m)，5.71(1H，d)，6.13(1H，d)，6.75-6.82(3H，m)，7.12-7.20(1H，m)，7.81(1H，s)，9.50(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝424。
(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈旋转异构体2，实例41
Figure BDA0003241985750001381
将丙烯酰氯(48.8mg，0.54mmol)添加到在DMF(5mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的旋转异构体2(210mg，0.57mmol)和DIPEA(0.298mL，1.70mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌4h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中25％至40％MeCN)进行纯化，得到(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈白色固体的旋转异构体2(121mg，50％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.90(3H，s)，2.41-2.45(1H，m)，2.73-2.77(1H，m)，2.83-2.90(2H，m)，3-3.25(1H，m)，3.79-4.01(4H，m)，4.05-4.13(1H，m)，4.52(1H，t)，5.71(1H，d)，6.13(1H，d)，6.76-6.87(3H，m)，7.12-7.20(1H，m)，7.81(1H，s)，9.50(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝424。
4-氨基-2，3，5-三氟苯甲酸甲酯
Figure BDA0003241985750001382
将DIPEA(17.05mL，97.61mmol)和4-氨基-2，3，5，6-四氟苯甲酸甲酯(6.6g，29.58mmol)添加到三(2-苯基吡啶)铱(III)(300mL，0.15mmol)在MeCN(300mL)中的溶液中。将反应加热至45℃并用蓝色LED灯照明7天。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至8％EtOAc)进行纯化，得到呈浅黄色固体的4-氨基-2，3，5-三氟苯甲酸甲酯(5.54g，91％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)3.91(3H，s)，4.29(2H，s)，7.45(1H，ddd)。m/z：ES+[M+H]+＝206。
4-氨基-2，3，5-三氟苯甲酸
Figure BDA0003241985750001391
将2M氢氧化钠(40.2mL，80.43mmol)添加到在THF(25mL)和MeOH(25mL)(1∶1比率)中的4-氨基-2，3，5-三氟苯甲酸甲酯(5.5g，26.81mmol)。将所得溶液在室温下搅拌2h。将反应混合物的pH用2M HCl调节至pH 5。将水层用EtOAc(100mL x 3)萃取。将溶剂在减压下去除，以提供呈黄色固体的4-氨基-2，3，5-三氟苯甲酸(5g，98％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)6.44(2H，s)，7.26-7.36(1H，m)，12.91(1H，s)。
4-溴-2，3，5-三氟苯甲酸
Figure BDA0003241985750001392
在0℃下将亚硝酸叔丁酯(1.295g，12.56mmol)添加到在MeCN(32mL)中的4-氨基-2，3，5-三氟苯甲酸(1.6g，8.37mmol)和溴化铜(II)(2.80g，12.56mmol)。将所得混合物在室温搅拌1h。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释，并用2M HCl(100mL x 2)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并且蒸发，以提供呈黄色固体的4-溴-2，3，5-三氟苯甲酸(2.05g，96％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)7.63-7.69(1H，m)，14.03(1H，s)。m/z：ES-[M+H]-＝253。
(3R)-4-(4-溴-2，3，5-三氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001401
在0℃下将DIPEA(2.74mL，15.69mmol)添加到在DMF(40mL)中的4-溴-2，3，5-三氟苯甲酸(2g，7.84mmol)、(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.696g，7.84mmol)和HATU(4.47g，11.77mmol)中。将所得溶液在室温下搅拌2h。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释并且用水(150mL)和盐水(100mL x 3)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至30％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的(3R)-4-(4-溴-2，3，5-三氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.47g，70％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，d)，2.72-3.22(3H，m)，3.30-3.63(2H，m)，3.68-3.90(1H，m)，3.91-4.14(1H，m)，4.20-4.30(1H，m)，4.43-4.54(1H，m)，4.83-4.89(1H，m)，7.32-7.50(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝453。
(12aR)-9-溴-8，10-二氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001402
在0℃下将氢化钠(0.635g，15.89mmol)添加到在DMF(48mL)中的(3R)-4-(4-溴-2，3，5-三氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.4g，5.3mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌1h。将反应混合物用水和EtOAc(150mL)稀释。将有机层用水(150mL x 2)和盐水(150mL x 2)洗涤，然后干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至30％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-9-溴-8，10-二氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.85g，81％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.39-3.56(3H，m)，3.57-3.70(1H，m)，3.70-3.81(1H，m)，3.85-3.94(1H，m)，3.95-4.08(1H，m)，4.28-4.38(2H，m)，7.48(1H，dd)。m/z：ES+[M+H]+＝433。
(12aR)-9-溴-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001411
将在THF(18mL，18mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液添加到在THF(18mL)中的(12aR)-9-溴-8，10-二氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.8g，4.15mmol)。将所得混合物在60℃下搅拌1h。将反应混合物用2M HCl和EtOAc(100mL)稀释。将有机层依次用水(100mL x 2)和盐水(100mL x 2)洗涤，然后干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供呈白色固体的(12aR)-9-溴-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.5g，86％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.39(9H，s)，2.26-2.38(1H，m)，2.63-3(3H，m)，3.07-3.19(1H，m)，3.44-3.59(2H，m)，3.61-3.90(3H，m)，4.30(1H，d)，7.23(1H，dd)。m/z：ES+[M+H]+＝419。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001421
将在1，4-二噁烷(25.0mL)和水(5mL)(5∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1300mg，3.1mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(1603mg，9.3mmol)、RuPhos(145mg，0.31mmol)、RuPhos-Pd-G3(259mg，0.31mmol)和K2CO3(1286mg，9.3mmol)在100℃下搅拌1h。将反应混合物浓缩并用EtOAc(150mL)稀释，然后依次用水(100mL x 2)和盐水(100mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至40％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1300mg，90％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.30-2.40(1H，m)，2.65-2.92(3H，m)，3.02-3.17(1H，m)，3.54-3.76(4H，m)，3.84-3.95(1H，m)，4.26-4.36(1H，m)，6.90-6.95(1H，m)，7-7.04(1H，m)，7.08(1H，dd)，7.28(1H，t)，10.14(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝467。
3-氯-2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚旋转异构体1和2
Figure BDA0003241985750001422
将TFA(5mL，64.90mmol)添加到在DCM(25mL)中的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1250mg，2.68mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2h。将溶剂在减压下去除。将获得的残余物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中0至35％MeCN)进行纯化，得到TFA盐，并且通过SCX(7M NH3/MeOH)进一步纯化以提供黄色固体。将其通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中0至40％MeCN)进行纯化。将第一个洗脱的旋转异构体通过SCX(7MNH3/MeOH)纯化，以提供3-氯-2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚的呈黄色固体的旋转异构体1(360mg，38％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.58-2.73(1H，m)，2.78-2.88(1H，m)，2.92-3.07(3H，m)，3.15-3.37(2H，m)，3.73-3.85(2H，m)，3.98(1H，d)，4.36(1H，dd)，6.91-6.96(1H，m)，7.01-7.04(1H，m)，7.09(1H，dd)，7.29(1H，t)，10.20(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝367。将第二个洗脱的旋转异构体通过SCX(7M NH3/MeOH)纯化，以提供3-氯-2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚的呈黄色固体的旋转异构体2(320mg，34％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.63-2.73(1H，m)，2.74-2.87(1H，m)，2.95-3.07(3H，m)，3.19-3.34(2H，m)，3.71-3.84(2H，m)，3.99(1H，d)，4.37(1H，dd)，6.94(1H，dd)，7.02(1H，dd)，7.09(1H，dd)，7.29(1H，t)，10.19(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝367。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例42
Figure BDA0003241985750001431
在0℃下将丙烯酰氯(0.079mL，0.97mmol)逐滴添加到在DMF(8mL)中的3-氯-2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚的旋转异构体1(340mg，0.93mmol)和DIPEA(0.486mL，2.78mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌1h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中(0.1％甲酸)0至42％MeCN)进行纯化，得到1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(220mg，56％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.31-2.46(1H，m)，2.70-2.93(3H，m)，3-3.20(1H，m)，3.59-3.78(2H，m)，3.80-4.08(3H，m)，4.29-4.45(1H，m)，5.65-5.73(1H，m)，6.12(1H，d)，6.76-6.88(1H，m)，6.92(1H，dd)，7.02(1H，dd)，7.08(1H，dd)，7.28(1H，t)，10.14(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝421。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体2，实例43
Figure BDA0003241985750001441
在0℃下将丙烯酰氯(0.070mL，0.86mmol)逐滴添加到在DMF(8mL)中的3-氯-2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚的旋转异构体2(300mg，0.82mmol)和DIPEA(0.429mL，2.45mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌1h。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中(0.1％甲酸)0至42％MeCN)进行纯化，得到1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(210mg，61％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.29-2.46(1H，m)，2.67-2.97(3H，m)，3.02-3.19(1H，m)，3.59-3.78(2H，m)，3.79-4.07(3H，m)，4.29-4.42(1H，m)，5.64-5.74(1H，m)，6.13(1H，d)，6.74-6.87(1H，m)，6.93(1H，dd)，7.02(1H，dd)，7.08(1H，dd)，7.28(1H，t)，10.14(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝421。
(12aR)-8，10-二氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001451
将在1，4-二噁烷(12.0mL)和水(3.0mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(140mg，0.33mmol)、(2-甲氧基-6-甲基苯基)硼酸(83mg，0.5mmol)、RuPhos(15.58mg，0.03mmol)、RuPhos-Pd-G3(27.9mg，0.03mmol)和K2CO3(138mg，1mmol)在100℃下搅拌1h。将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释，并用水(50mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中40％至60％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-8，10-二氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(165mg，＞100％)，无需进一步纯化即可使用。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.49(9H，s)，2.12(3H，d)，2.45-2.54(1H，m)，2.75-3.18(5H，m)，3.23-3.42(1H，m)，3.75-3.91(5H，m)，4.02-4.10(1H，m)，4.21-4.39(1H，m)，6.75-6.87(2H，m)，6.93(1H，dd)，7.31(1H，t)。m/z：ES+[M+H]+＝461。
2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-甲基苯酚
Figure BDA0003241985750001452
将在DCM(4mL，4mmol)中的1M三溴化硼添加到在DCM(4mL)中的(12aR)-8，10-二氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(150mg，0.33mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌1h。将反应混合物用MeOH淬灭，并将溶剂在减压下除去。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.05％TFA)中5％至35％MeCN)进行纯化，得到TFA盐，将其通过SCX(7M NH3/MeOH)纯化以提供呈浅黄色固体的2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-甲基苯酚(119mg，＞100％)，无需进一步纯化即可使用。1H NMR(300MHz，CD3OD，30℃)2.04(3H，d)，2.72-2.85(1H，m)，2.85-2.96(1H，m)，3.04-3.16(2H，m)，3.20(1H，dd)，3.42(1H，d)，3.73-3.86(3H，m)，4.07(1H，d)，4.36-4.46(1H，m)，6.74(1H，d)，6.80(1H，d)，6.93(1H，d)，7.14(1H，t)。m/z：ES+[M+H]+＝347。
1-[(12aR)-8，10-二氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例44；和旋转异构体2，实例45
Figure BDA0003241985750001461
在-10℃下将丙烯酰氯(31.1mg，0.34mmol)在DMF(2.5mL)中的溶液逐滴添加到2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-甲基苯酚(119mg，0.34mmol)和三乙胺(0.096mL，0.69mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在-10℃下搅拌30min。将反应混合物直接通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中(0.1％甲酸)0至37％MeCN)进行纯化，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(柱：Xselect CSH OBD柱30*150mm 5μm)分离，用水和MeCN洗脱，得到1-[(12aR)-8，10-二氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(41mg，30％)。1H NMR(300MHz，CD3OD，30℃)2.06(3H，s)，2.45-2.66(1H，m)，2.83-3.62(4H，m)，3.65-3.84(2H，m)，3.88-4.31(3H，m)，4.28-4.46(1H，m)，5.79(1H，d)，6.25(1H，d)，6.74-6.88(3H，m)，6.94(1H，d)，7.14(1H，t)。m/z：ES+[M+H]+＝402。接着是1-[(12aR)-8，10-二氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(36mg，25％)。1H NMR(300MHz，CD3OD，30℃)2.06(3H，s)，2.44-2.64(1H，m)，2.87-3.10(2H，m)，3.10-3.30(1H，m)，3.51-3.65(1H，m)，3.68-3.96(3H，m)，3.95-4.20(2H，m)，4.26-4.42(1H，m)，5.78(1H，d)，6.24(1H，d)，6.74-6.88(3H，m)，6.94(1H，d)，7.14(1H，t)。m/z：ES+[M+H]+＝402。
(12aR)-8，10-二氟-9-[2-氟-6-(羟基甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001471
将在1，4-二噁烷(12mL)和水(3mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(140mg，0.33mmol)、[2-氟-6-(羟基甲基)苯基]硼酸(85mg，0.5mmol)、RuPhos(15.58mg，0.03mmol)、RuPhos-Pd-G3(27.9mg，0.03mmol)和K2CO3(138mg，1mmol)在100℃下搅拌1h。将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释，并用水(50mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中40％至60％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-8，10-二氟-9-[2-氟-6-(羟基甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(174mg，＞100％)，无需进一步纯化即可使用。m/z：ES+[M+H]+＝465。
{2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯基}甲醇.2TFA
Figure BDA0003241985750001481
将TFA(2mL，25.96mmol)添加到在DCM(10mL)中的(12aR)-8，10-二氟-9-[2-氟-6-(羟基甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(174mg，0.37mmol)中。将所得溶液在室温搅拌过夜。将溶剂在减压下除去。将残余物溶解于MeOH(10mL)中，并添加K2CO3(155mg，1.12mmol)。将所得混合物在60℃下搅拌1h。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.05％TFA)中5％至33％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的{2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯基}甲醇.2TFA(119mg，54％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.61-2.89(2H，m)，2.90-3.09(3H，m)，3.20-3.35(2H，m)，3.75-3.90(3H，m)，3.99(1H，d)，4.22-4.28(2H，m)，4.39(1H，d)，7.13-7.32(2H，m)，7.42-7.62(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝365。
1-[(12aR)-8，10-二氟-9-[2-氟-6-(羟基甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例46；和旋转异构体2，实例47
Figure BDA0003241985750001482
在-10℃下将丙烯酰氯(18mg，0.2mmol)在DMF(2.5mL)中的溶液逐滴添加到{2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯基}甲醇.2TFA(119mg，0.20mmol)和三乙胺(0.112mL，0.8mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在-10℃下搅拌30min。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至37％MeCN)进行纯化，得到2种旋转异构体的混合物。将此混合物通过制备型HPLC(柱：SunFire C18 OBD制备型柱，
Figure BDA0003241985750001492
5μm，19mm X 250mm)用水(0.1％甲酸)和MeCN洗脱进行分离，得到1-[(12aR)-8，10-二氟-9-[2-氟-6-(羟基甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(22mg，26％)。1H NMR(300MHz，CD3OD，30℃)2.48-2.64(1H，m)，2.89-3.05(2H，m)，3.07-3.31(1H，m)，3.49-3.62(1H，m)，3.71-3.83(2H，m)，3.87-4(1H，m)，3.99-4.24(2H，m)，4.32-4.45(3H，m)，5.78(1H，d)，6.25(1H，d)，6.75-6.86(1H，m)，7.03(1H，d)，7.12-7.18(1H，m)，7.43-7.57(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝419。接着是1-[(12aR)-8，10-二氟-9-[2-氟-6-(羟基甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(25mg，30％)。1H NMR(300MHz，CD3OD，30℃)1.64-1.84(1H，m)，2.02-2.23(2H，m)，2.23-2.46(1H，m)，2.62-2.83(1H，m)，2.86-3.05(2H，m)，3.05-3.18(1H，m)，3.17-3.43(2H，m)，3.46-3.70(3H，m)，4.89-5.05(1H，m)，5.44(1H，d)，5.90-6.07(1H，m)，6.12-6.27(1H，m)，6.25-6.39(1H，m)，6.58-6.78(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝419。
2-[2-甲氧基-6-(三氟甲基)苯基]-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷
Figure BDA0003241985750001491
在-78℃下将在己烷(2.447mL，6.12mmol)中的2.5M正丁基锂添加到在THF(20mL)中的2-溴-1-甲氧基-3-(三氟甲基)苯(1.3g，5.10mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌1h，添加4，4，5，5-四甲基-2-[(丙-2-基)氧基]-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(1.768mL，8.67mmol)，并将反应混合物在室温搅拌16h。将反应混合物用EtOAc(20mL)稀释，并用盐水(20mL x 3)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至10％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的2-[2-甲氧基-6-(三氟甲基)苯基]-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(0.89g，58％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.29(12H，s)，3.79(3H，s)，7.21-7.29(2H，m)，7.54-7.60(1H，m)。
(12aR)-8，10-二氟-9-[2-甲氧基-6-(三氟甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001501
将RuPhos-Pd-G3(40mg，0.05mmol)和RuPhos(22mg，0.05mmol)添加到在1，4-二噁烷(5mL)和水(1mL)(5∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(200mg，0.48mmol)、2-[2-甲氧基-6-(三氟甲基)苯基]-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(576mg，1.91mmol)和K2CO3(198mg，1.43mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌1h，然后将溶剂在减压下除去。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中0至50％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-8，10-二氟-9-[2-甲氧基-6-(三氟甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(140mg，57％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.43(9H，s)，2.61-2.88(2H，m)，2.92-3.36(5H，m)，3.77(3H，s)，3.91-4.13(1H，m)，4.32-4.72(3H，m)，7.10(1H，d)，7.27-7.33(1H，m)，7.67-7.76(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝515。
2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-(三氟甲基)苯酚
Figure BDA0003241985750001511
将在DCM(4mL，12mmol)中的3M三溴化硼逐滴添加到(12aR)-8，10-二氟-9-[2-甲氧基-6-(三氟甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(130mg，0.25mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌1h。将反应混合物用MeOH稀释，并且然后将溶剂在减压下除去。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4HCO3)中0至35％MeCN)进行纯化，得到呈白色固体的2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-(三氟甲基)苯酚(45mg，45％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.30-2.47(1H，m)，2.53-2.62(1H，m)，2.64-2.88(3H，m)，2.89-3.06(2H，m)，3.59-3.76(2H，m)，3.81-3.95(1H，m)，4.20-4.31(1H，m)，7.01-7.13(1H，m)，7.20-7.36(2H，m)，7.45-7.54(1H，m)，10.25-10.35(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝401。
1-[(12aR)-8，10-二氟-9-[2-羟基-6-(三氟甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1实例48；和旋转异构体2，实例49
Figure BDA0003241985750001512
在0℃下逐滴添加丙烯酰氯(9.04mg，0.1mmol)，以提供在DMF(3mL)中的2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-(三氟甲基)苯酚(40mg，0.1mmol)和DIPEA(0.052mL，0.3mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌1h。将反应混合物通过制备型HPCL(柱：Xselect CSH OBD柱30*150mm 5μm)用水(0.1％甲酸)和MeCN洗脱进行纯化，得到1-[(12aR)-8，10-二氟-9-[2-羟基-6-(三氟甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(13mg，27％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.29-2.46(1H，m)，2.64-2.92(3H，m)，2.97-3.17(1H，m)，3.43-3.78(2H，m)，3.79-3.94(2H，m)，3.95-4.09(1H，m)，4.28-4.45(1H，m)，5.65-5.76(1H，m)，6.06-6.19(1H，m)，6.75-6.90(1H，m)，7.07(1H，d)，7.21-7.34(2H，m)，7.43-7.55(1H，m)，10.03-10.92(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝455。接着是1-[(12aR)-8，10-二氟-9-[2-羟基-6-(三氟甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(6mg，13％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.29-2.44(1H，m)，2.63-2.96(3H，m)，3-3.19(1H，m)，3.55-3.78(2H，m)，3.79-4.14(3H，m)，4.25-4.45(1H，m)，5.56-5.78(1H，m)，6.01-6.21(1H，m)，6.72-6.91(1H，m)，7.07(1H，d)，7.17-7.38(2H，m)，7.43-7.55(1H，m)，10.23-10.69(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝455。
2-溴-1-乙烯基-3-甲氧基苯
Figure BDA0003241985750001521
将四(三苯基膦)钯(0)(1.108g，0.96mmol)添加到在1，4-二噁烷(40mL)和水(10mL)(4∶1比率)中的2-溴-1-碘-3-甲氧基苯(3g，9.59mmol)、2-乙烯基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(1.772g，11.50mmol)和K2CO3(3.97g，28.76mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌4h。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在EtOAc中2％至5％石油醚)进行纯化，得到呈黄色固体的2-溴-1-乙烯基-3-甲氧基苯(1.5g，73％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)3.85(3H，s)，5.42(1H，dd)，5.82(1H，dd)，6.83-7.19(2H，m)，7.21-7.32(1H，m)，7.28-7.41(1H，m)。
2-(2-乙烯基-6-甲氧基苯基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷
Figure BDA0003241985750001531
将在DMA(15mL)中的2-溴-1-乙烯基-3-甲氧基苯(500mg，2.35mmol)、双(频哪醇基)二硼(11.92mg，4.69mmol)、二氯双(三环己基膦)钯(II)(1732mg，2.35mmol)和乙酸钾(806mg，8.21mmol)在120℃下搅拌2h。将粗反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中2％至60％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的2-(2-乙烯基-6-甲氧基苯基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(170mg，28％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.31(12H，s)，3.72(3H，s)，5.27(1H，dd)，5.76(1H，dd)，6.59-6.71(1H，m)，6.85(1H，d)，7.18(1H，d)，7.32(1H，t)。
(12aR)-9-(2-乙烯基-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001532
将RuPhos-Pd-G3(30mg，0.04mmol)添加到在1，4-二噁烷(8mL)和水(2mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(150mg，0.36mmol)、2-(2-乙烯基-6-甲氧基苯基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(140mg，0.54mmol)和RuPhos(16.70mg，0.04mmol)和K2CO3(99mg，0.72mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌5h。将粗反应混合物通C18过快速色谱法(洗脱梯度为在水中10％至50％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-(2-乙烯基-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(110mg，65％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.25(9H，s)，2.25-2.45(1H，m)，2.57-3.27(4H，m)，3.25(3H，s)，3.43-3.85(5H，m)，4.21-4.35(1H，m)，5.21-5.28(1H，m)，5.60-5.88(1H，m)，6.32-6.39(1H，m)，6.05-7.16(1H，m)，7.35-7.59(2H，m)，8.21(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝473。
(12aR)-9-(2-乙基-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001541
将10％钯碳(25mg，0.02mmol)添加到在MeOH(5mL)中的(12aR)-9-(2-乙烯基-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(110mg，0.23mmol)中，并且将反应混合物在氢气气氛下于25℃搅拌4h。将混合物通过CELITETM垫过滤。将滤液在减压下除去，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-(2-乙基-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(80mg，72％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)0.84-1.03(3H，m)，1.38(9H，s)，2.19-2.37(3H，m)，2.61-2.92(3H，m)，2.92-3.25(1H，m)，3.52-3.71(6H，m)，3.72-3.79(1H，m)，3.79-3.99(1H，m)，4.15-4.40(1H，m)，6.85-7(2H，m)，7.05(1H，d)，7.35(1H，t)。m/z：ES+[M+H]+＝475。
2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-乙基苯酚
Figure BDA0003241985750001542
将在DCM(0.316mL，0.32mmol)中的1M三溴化硼添加到在DCM(1mL)中的(12aR)-9-(2-乙基-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(75mg，0.16mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌5h。将反应混合物用MeOH(2mL)淬灭，并将获得的粗反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中40％至80％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-乙基苯酚(40mg，70％)。m/z：ES+[M+H]+＝361。
1-[(12aR)-9-(2-乙基-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例50；和旋转异构体2，实例51
Figure BDA0003241985750001551
将丙烯酰氯(8.79mg，0.1mmol)添加到在DMF(1mL)中的2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-乙基苯酚(35mg，0.1mmol)和DIPEA(0.051mL，0.29mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌5h。将粗反应混合物通过制备型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱30×150mm 5μm)用水(10mmol/L甲酸)和MeCN洗脱进行纯化，得到1-[(12aR)-9-(2-乙基-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈黄色固体的旋转异构体1(9mg，22％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)0.96(3H，t)，2.03-2.34(3H，m)，2.56-2.87(3H，m)，2.92-3.26(1H，m)，3.54-3.78(2H，m)，3.78-3.94(2H，m)，2.94-4.15(1H，m)，4.31-4.48(1H，m)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.57-6.91(3H，m)，7.06(1H，d)，7.18(1H，t)，9.55(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝415。接着是1-[(12aR)-9-(2-乙基-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈黄色固体的旋转异构体2(12mg，30％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)0.93(3H，t)，2.05-2.34(2H，m)，2.32-2.46(1H，m)，2.58-2.87(3H，m)，2.92-3.13(1H，m)，3.45-3.83(2H，m)，3.78-4.19(3H，m)，4.05-4.46(1H，m)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.57-6.88(3H，m)，7.06(1H，d)，7.18(1H，t)，9.45(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝415。
2-溴-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯甲醛
Figure BDA0003241985750001561
在室温下将1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(4.28g，27.36mmol)添加到在DMF(50mL)中的2-溴-3-羟基苯甲醛(5g，24.87mmol)、K2CO3(6.88g，49.75mmol)和碘化钾(0.826g，4.97mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释，依次用水(100mL)和盐水(100mL x 2)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至100％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的2-溴-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯甲醛(5g，63％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.76(3H，s)，5.20(2H，s)，6.91-7.04(2H，m)，7.36-7.62(5H，m)，10.28(1H，s)。
2-溴-1-(2，2-二氟乙基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯
Figure BDA0003241985750001562
在-78℃下将(二乙氨基)三氟化硫(2.057mL，15.57mmol)添加至在THF(30mL)中的2-溴-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯甲醛(2g，6.23mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用饱和NaHCO3(100mL)淬灭，用EtOAc(200mL)稀释，依次用饱和NaHCO3(200mL)和盐水(200mL x 2)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过C18快速色谱法(洗脱梯度为0至100％EtOAc/石油醚)进行纯化，得到呈白色固体的2-溴-1-(2，2-二氟乙基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯(1.4g，66％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.76(3H，s)，5.18(2H，s)，6.94-7.02(2H，m)，7.13-7.28(2H，m)，7.36-7.53(4H，m)。
2-{2-(二氟甲基)-6-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基}-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷
Figure BDA0003241985750001571
将二氯双(三环己基膦)钯(II)(43mg，0.06mmol)添加到在DMA(5mL)中的2-溴-1-(2，2-二氟乙基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯(200mg，0.58mmol)、双(频哪醇基)二硼(296mg，1.17mmol)和乙酸钾(200mg，2.04mmol)中。将所得混合物在120℃下搅拌5h。将粗反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中5％至80％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的2-{2-(二氟甲基)-6-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基}-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(80mg，35％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.19(12H，d)，3.75(3H，s)，5.03(2H，s)，6.80-6.99(3H，m)，7.04-7.30(2H，m)，7.28-7.57(3H，m)。
(12aR)-9-{2-(二氟甲基)-6-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基}-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001572
将(12aR)-9-溴-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(60mg，0.14mmol)、2-{2-(二氟甲基)-6-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基}-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(73mg，0.19mmol)、K2CO3(39.6mg，0.29mmol)、RuPhos(7mg，0.01mmol)和RuPhos-Pd-G3(12mg，0.01mmol)悬浮在1，4-二噁烷(4mL)和水(1mL)(4：1比率)中并且密封到微波管中。将反应在微波反应器中在100℃下加热45min，并且冷却至室温。将溶剂在减压下除去，并将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中30％至70％EtOAc)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-{2-(二氟甲基)-6-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基}-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(50mg，58％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，2.29-2.44(1H，m)，2.62-2.91(3H，m)，3.03-3.28(1H，m)，3.43-3.66(1H，m)，3.65-3.80(5H，m)，3.81-3.96(1H，m)，4-4.15(1H，m)，4.34-4.35(1H，m)，4.86-5.19(2H，m)，6.77(2H，d)，6.88(2H，d)，6.98(1H，d)，7.18-7.34(4H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝603。
1-[(12aR)-9-[2-(二氟甲基)-6-羟基苯基]-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]-2，2，2-三氟乙-1-酮
Figure BDA0003241985750001581
将在TFA(1mL)中的(12aR)-9-{2-(二氟甲基)-6-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基}-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(50mg，0.08mmol)在50℃下搅拌4h。将溶剂在减压下除去，并将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中2％至70％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的1-[(12aR)-9-[2-(二氟甲基)-6-羟基苯基]-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]-2，2，2-三氟乙-1-酮(30mg，76％)。m/z：ES+[M+H]+＝679。
2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-(二氟甲基)苯酚
Figure BDA0003241985750001591
将氢氧化钠(7.52mg，0.19mmol)添加到在MeOH(0.5mL)和水(0.1mL)(5∶1比率)中的1-[(12aR)-9-[2-(二氟甲基)-6-羟基苯基]-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]-2，2，2-三氟乙-1-酮(30mg，0.06mmol)中。将所得混合物在60℃下搅拌24h。将粗反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中10％至50％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-(二氟甲基)苯酚(13mg，54％)。m/z：ES+[M+H]+＝383。
1-[(12aR)-9-[2-(二氟甲基)-6-羟基苯基]-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例52；和旋转异构体2，实例53
Figure BDA0003241985750001592
将丙烯酰氯(2.367mg，0.03mmol)添加到在DMF(0.5mL)中的2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-(二氟甲基)苯酚(10mg，0.03mmol)和DIPEA(0.014mL，0.08mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌4h。将粗反应混合物通过制备型HPCL(柱：XBridge Prep OBD C18柱30×150mm 5μm)用水(10mmolL/L NH4HCO3)和MeCN洗脱进行纯化，得到1-[(12aR)-9-[2-(二氟甲基)-6-羟基苯基]-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈黄色固体的旋转异构体1(2.8mg，25％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.36-2.41(1H，m)，2.81-2.94(2H，m)，3.10-3.18(1H，m)，3.28-3.33(1H，m)，3.71-3.78(2H，m)，3.81-3.93(3H，m)，4.27-4.39(1H，m)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.50-6.78(1H，m)，6.79-6.92(1H，m)，7.04-7.19(3H，m)，7.38-7.47(1H，m)，10.02(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝437。接着是1-[(12aR)-9-[2-(二氟甲基)-6-羟基苯基]-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈黄色固体的旋转异构体2(2.8mg，25％)1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.30-2.48(1H，m)，2.73-2.80(1H，m)，2.86-2.90(1H，m)，3.01-3.18(1H，m)，3.38-3.57(1H，m)，3.57-3.71(1H，m)，3.71-3.86(1H，m)，3.86-3.95(2H，m)，3.95-4.19(1H，m)，4.34-4.51(1H，m)，5.73(1H，d)，6.10(1H，d)，6.29-6.79(1H，m)，6.77-6.96(1H，m)，6.99-7.28(3H，m)，7.42-7.51(1H，m)，10.02(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝437。
(3R)-4-(4-溴-2，3-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001601
将DIPEA(15.48mL，88.61mmol)添加到在DMF(80mL)中的4-溴-2，3-二氟苯甲酸(7g，29.54mmol)、HATU(16.85g，44.30mmol)和(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(7.03g，32.49mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释，并用盐水(100mL x 3)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中20％至50％EtOAc)进行纯化，得到呈黄色固体的(3R)-4-(4-溴-2，3-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10g，78％)。1HNMR(300MHz，DMSO，30℃)1.39(9H，s)，2.75-3.23(3H，m)，3.38-3.59(2H，m)，3.62-3.93(1H，m)，3.88-4.10(1H，m)，4.15-4.63(1H，m)，4.72-5.33(1H，m)，6.91-7.41(1H，m)，7.49-7.92(1H，m)。m/z：ES+[M-tBu]+＝379。
(12aR)-9-溴-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001611
将氢化钠(1.47g，36.76mmol)添加到在THF(50mL)中的(3R)-4-(4-溴-2，3-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(8g，18.38mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌5h。将反应混合物用水(100mL)淬灭，并用EtOAc(100mL x 3)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中10％至20％MeOH)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(6g，79％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.39(9H，s)，3.43-3.56(2H，m)，3.57-3.84(2H，m)，3.82-4.13(3H，m)，4-22-4.45(2H，m)，7.29-7.67(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝415。
(12aR)-9-溴-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001612
将在THF(40ml，40mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液添加到(12aR)-9-溴-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(6g，14.45mmol)中。将所得混合物在60℃下搅拌4h。将反应混合物用MeOH淬灭，并将溶剂在减压下除去。将粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中40％至60％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3g，52％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.19-2.43(1H，m)，2.61-2.82(2H，m)，2.97-3.12(1H，m)，3.51-3.66(2H，m)，3.66-3.76(2H，m)，3.75-3.90(1H，m)，4.11(1H，d)，4.33(1H，d)，7.04(1H，d)，7.31(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝401。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750001621
将N-碘琥珀酰亚胺(1.682g，7.48mmol)添加到在浓硫酸中的(12aR)-9-溴-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.5g，3.74mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌20h。将反应混合物用2M NaOH(100mL)淬灭，并且用DCM(100mL x 3)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供呈黄色油状物的粗产物。将粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中40％至80％MeOH)进行纯化，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(0.8g，50％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.17-2.46(2H，m)，2.61-2.80(3H，m)，2.78-3(2H，m)，3.54-3.98(3H，m)，4.25(1H，d)，7.70(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝427。
(12aR)-9-溴-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈
Figure BDA0003241985750001622
将四(三苯基膦)钯(0)(271mg，0.23mmol)添加到在DMF(15mL)中的氰化锌(206mg，1.76mmol)和(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(500mg，1.17mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌5h。将粗反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中20％至60％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(300mg，79％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.17-2.42(2H，m)，2.54-2.84(5H，m)，3.73(2H，d)，3.80-3.97(1H，m)，4.23-4.45(1H，m)，7.74(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝326。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈旋转异构体1和旋转异构体2
Figure BDA0003241985750001631
在室温将RuPhos-Pd-G3(77mg，0.09mmol)和RuPhos(42.9mg，0.09mmol)添加到在1，4-二噁烷(10mL)和水(2mL)(5∶1比率)中的(12aR)-9-溴-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(300mg，0.92mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(793mg，4.6mmol)和磷酸钾(586mg，2.76mmol)中。将所得混合物在微波中在115℃下搅拌40min。将粗反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中40％至70％MeOH)进行纯化，得到(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈黄色固体的旋转异构体1(65mg，19％)。1HNMR(300MHz，DMSO，30℃)2.19-2.45(2H，m)，2.53-2.88(5H，m)，3.55-3.99(3H，m)，4.37(1H，d)，6.96(1H，d)，7.06(1H，d)，7.33(1H，t)，7.69(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝374。接着是(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈黄色固体的旋转异构体2(65mg，19％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.12-2.45(2H，m)，2.54-2.81(5H，m)，3.60-4.01(3H，m)，4.37(1H，d)，6.97(1H，d)，7.06(1H，d)，7.33(1H，t)，7.69(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝374。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈旋转异构体1，实例54
Figure BDA0003241985750001641
将丙烯酰氯(16mg，0.17mmol)添加到在DMF(2mL)中的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的旋转异构体1(65mg，0.17mmol)和DIPEA(0.091mL，0.52mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4h。将粗反应混合物通过制备型HPLC(柱：XBridge Shield RP18 OBD 30*150mm，5μm)用水(10mmol/L NH4HCO3)和MeCN洗脱进行纯化，得到(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈白色固体的旋转异构体1(27.mg，36％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.38-2.44(1H，m)，2.68-2.74(1H，m)，2.82-3.02(3H，m)，3.77-4.03(4H，m)，4.06-4.16(1H，m)，4.44-4.50(1H，m)，5.69(1H，d)，6.11(1H，d)，6.91-7(1H，m)，7.02(1H，d)，7.05(1H，d)，7.32(1H，t)，7.68(1H，s)，10.31(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝428。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈旋转异构体2，实例55
Figure BDA0003241985750001651
将丙烯酰氯(15.74mg，0.17mmol)添加到在DMF(2mL)中的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的旋转异构体2(65mg，0.17mmol)和DIPEA(0.091mL，0.52mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4h。将粗反应混合物通过制备型HPCL(柱：XBridge BEH C18 OBD，5μm，19mm 250mm)用水(10mmol/L NH4HCO3)和MeCN洗脱进行纯化，得到(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈白色固体的旋转异构体2(30mg，40％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.32-2.42(1H，m)，2.64-2.77(1H，m)，2.80-3.14(3H，m)，3.72-4.21(5H，m)，4.33-4.92(1H，m)，5.68(1H，d)，6.11(1H，d)，6.60-6.91(1H，m)，6.95(1H，d)，7.04(1H，d)，7.31(1H，t)，7.68(1H，s)，10.31(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝428。
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈
Figure BDA0003241985750001652
在室温将RuPhos-Pd-G3(36.6mg，0.04mmol)和RuPhos(20.43mg，0.04mmol)添加到在1，4-二噁烷(5mL)和水(1mL)(5∶1比率)中的(12aR)-9-溴-10-氯-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(150mg，0.44mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(377mg，2.19mmol)和磷酸钾(279mg，1.31mmol)中。将所得混合物在微波反应器中在115℃下搅拌40min。将反应混合物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中40％至70％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(70mg，41％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.20-2.42(2H，m)，2.60-2.81(4H，m)，3.56-3.89(4H，m)，4.38(1H，d)，6.78-6.88(2H，m)，7.39(1H，d)，7.74(1H，s)，11.31(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝390。
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈旋转异构体1，实例56；和旋转异构体2，实例57
Figure BDA0003241985750001661
将丙烯酰氯(16mg，0.18mmol)添加到在DMF(5mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈(70mg，0.18mmol)和DIPEA(0.094mL，0.54mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4h。将反应混合物通过制备型HPLC(柱：SunFire C18 OBD
Figure BDA0003241985750001662
5μm，19mm X 250mm)用水(0.1％甲酸)和MeCN洗脱进行纯化，得到(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈白色固体的旋转异构体1(17mg，21％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.35-2.45(1H，m)，2.60-3.14(4H，m)，3.67-4.18(5H，m)，4.35-4.88(1H，m)，5.72(1H，d)，6.15(1H，d)，6.35-7.16(3H，m)，7.12-7.50(1H，m)，7.81(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝444。接着是(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈的呈白色固体的旋转异构体2(17mg，21％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.61-3.22(5H，m)，3.65-4.35(5H，m)，4.28-4.73(1H，m)，5.71(1H，d)，6.11(1H，d)，6.56-7.12(3H，m)，7.24(1H，t)，7.80(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝444。
3-甲氧基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯胺
Figure BDA0003241985750001671
在25℃下将二氯双(三环己基膦)钯(II)(0.365g，0.49mmol)添加到在DMA(25mL)中的2-溴-3-甲氧基苯胺(1g，4.95mmol)、双(频哪醇基)二硼(2.51g，9.9mmol)和乙酸钾(1.457g，14.85mmol)中。将所得溶液在155℃下搅拌30min。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释，并用盐水(100mL x 3)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中10％至30％THF)进行纯化，得到呈白色固体的3-甲氧基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯胺(0.576g，47％)。1HNMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.38(12H，s)，3.80(3H，s)，6.27(1H，d)，6.34(1H，dd)，7.16(1H，t)。m/z：ES+[M-82]+＝168。
(12aR)-9-(2-氨基-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001672
将在1，4-二噁烷(12.0mL)和水(3.0mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(260mg，0.62mmol)、3-甲氧基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯胺(463mg，1.86mmol)、RuPhos(28.9mg，0.06mmol)、RuPhos-Pd-G3(51.9mg，0.06mmol)和K2CO3(257mg，1.86mmol)在100℃下搅拌1h。将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释，并用水(50mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中40％至60％EtOAc)进行纯化，得到呈黄色泡沫的(12aR)-9-(2-氨基-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(238mg，83％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.49(9H，s)，2.72(3H，d)，3.48-3.67(2H，m)，3.74(3H，d)，3.76-4.20(5H，m)，4.20-4.50(1H，m)，6.40-6.50(2H，m)，6.75-6.90(1H，m)，7.21(1H，t)。m/z：ES+[M+H]+＝462。
(12aR)-9-(2-溴-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001681
在-20℃下将亚硝酸叔丁酯(160mg，1.55mmol)在二溴甲烷(0.5mL)中的溶液逐滴添加到(12aR)-9-(2-氨基-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(238mg，0.52mmol)在二溴甲烷(2mL)中的搅拌溶液中，然后添加在二溴甲烷(0.5mL)中的溴三甲基硅烷(0.2mL，1.55mmol)。将所得溶液在-40℃下搅拌1h。将反应混合物用饱和NaHCO3(100mL)淬灭，用DCM(3x100mL)萃取，将有机层干燥(Na2SO4)并且蒸发以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中10％至20％THF)进行纯化，得到呈黄色泡沫的(12aR)-9-(2-溴-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(134mg，50％)。m/z：ES+[M+H]+＝525。
3-溴-2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚
Figure BDA0003241985750001691
将在DCM(4mL，4mmol)中的1M三溴化硼添加到在DCM(4mL)中的(12aR)-9-(2-溴-6-甲氧基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(130mg，0.25mmol)中。将得到的混合物在室温搅拌1h。将反应混合物用MeOH淬灭。将溶剂在减压下除去。将粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.05％TFA)中5％至35％MeCN)进行纯化，得到TFA盐，将其通过SCX(7M NH3/MeOH)纯化以提供呈浅黄色固体的3-溴-2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(75mg，74％)。1H NMR(400MHz，CD3OD，30℃)2.70-2.97(2H，m)，3.05-3.25(3H，m)，3.38-3.52(2H，m)，3.62-3.85(2H，m)，4-4.13(1H，m)，4.37(1H，dd)，6.84-6.98(2H，m)，7.07-7.20(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝411。
1-[(12aR)-9-(2-溴-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例58；和旋转异构体2，实例59
Figure BDA0003241985750001692
在0℃下将丙烯酰氯(9.02μl，0.11mmol)逐滴添加到在THF(4mL)中的3-溴-2-[(12aR)-8，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(65mg，0.11mmol)和DIPEA(0.039mL，0.22mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌1h。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过制备型HPLC(柱：SunFire C18 OBD Prep柱，
Figure BDA0003241985750001693
5μm，19mm X 250mm)用水(0.1％TFA)和MeCN洗脱进行纯化，得到1-[(12aR)-9-(2-溴-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(6mg，6％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.61-3.23(3H，m)，3.50-4.62(8H，m)，5.65-5.79(1H，m)，6.06-6.21(1H，m)，6.76-6.92(1H，m)，6.94-6.98(1H，m)，7.03-7.29(3H，m)，10.15(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝465。接着是1-[(12aR)-9-(2-溴-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(9mg，15％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.56-4.51(11H，m)，5.62-5.83(1H，m)，6.08-6.21(1H，m)，6.72-6.89(1H，m)，6.92-7.02(1H，m)，7.03-7.25(3H，m)，10.12(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝465。
(12aR)-9-溴-8-氯-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750001701
将N-氯琥珀酰亚胺(0.666g，4.98mmol)添加到在浓硫酸(15mL)中的(12aR)-9-溴-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1g，2.49mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌16h。将反应混合物倒入冰水(100ml)中，并用2MNaOH中和，然后用DCM(100mL x 3)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发以提供黄色油状物。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中40％至80％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-8-氯-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(0.6g，72％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.28-2.45(2H，m)，2.62-2.75(3H，m)，2.79-2.88(2H，m)，3.67-3.71(1H，m)，3.71-3.81(2H，m)，4.20-4.31(1H，m)，7.44(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝335。
(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750001711
在20℃下将RuPhos-Pd-G3(74.8mg，0.09mmol)和RuPhos(41.7mg，0.09mmol)添加到在1，4-二噁烷(8mL)和水(2mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8-氯-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(300mg，0.89mmol)、(2-甲氧基-6-甲基苯基)硼酸(297mg，1.79mmol)和磷酸钾(311mg，1.79mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌40min。将溶剂在减压下去除并且将获得粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至100％MeOH)进行纯化，得到呈棕色固体的(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(280mg，74％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.90-2.01(3H，m)，2.05-2.10(1H，m)，2.22(1H，s)，2.62-2.96(3H，m)，3.26-3.58(2H，m)，3.56-3.76(5H，m)，3.75-3.96(1H，m)，4.19-4.41(1H，m)，6.62-6.80(1H，m)，6.87-7(1H，m)，7.27-7.41(1H，m)，7.98(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝377。
2-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-甲基苯酚
Figure BDA0003241985750001712
在0℃下将在DCM(5.11mL，5.11mmol)中的1M三溴化硼添加到在DCM(3mL)中的(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓和甲酸(270mg，0.64mmol)。将所得混合物在室温搅拌4h。将反应混合物用MeOH(25mL)淬灭，并将溶剂在减压下除去。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中0至100％MeCN)进行纯化，得到呈棕色固体的2-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-甲基苯酚(148mg，64％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.93(3H，d)，2.25-2.37(3H，m)，2.59-2.68(2H，m)，2.68-2.82(3H，m)，3.61-3.74(2H，m)，4.04-4.12(1H，m)，4.18-4.27(1H，m)，6.72-6.79(2H，m)，7.07-7.16(1H，m)，7.26-7.31(1H，m)，9.36(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝363。
1-[(12aR)-8-氯-10-氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例60；和旋转异构体2，实例61
Figure BDA0003241985750001721
在-20℃下将丙烯酰氯(35mg，0.39mmol)和DIPEA(0.135mL，0.77mmol)添加到在DMF(3mL)中的2-[(12aR)-10-氯-8-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-甲基苯酚(140mg，0.39mmol)。将所得混合物在-20℃下搅拌1h。将混合物通过滤膜过滤。将滤液通过制备型HPLC(柱：Sunfire prep C18柱30*150，5μm)用水(0.1％甲酸)和MeCN洗脱进行纯化，得到1-[(12aR)-8-氯-10-氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(40mg，25％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.95(3H，s)，2.38-2.43(1H，m)，2.63-3.07(3H，m)，3-3.19(1H，m)，3.64-4.21(5H，m)，4.33-4.42(1H，m)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.72-6.90(3H，m)，7.12(1H，t)，7.31(1H，s)，9.37(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝417。接着是1-[(12aR)-8-氯-10-氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(24mg，15％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.91(3H，s)，2.38-2.43(1H，m)，2.73-2.77(1H，m)，2.84-2.89(2H，m)，3.07-3.12(1H，m)，3.67-3.81(2H，m)，3.81-4.10(3H，m)，4.36-4.41(1H，m)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.72-6.90(3H，m)，7.12(1H，t)，7.31(1H，s)，9.35(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝417。
(3R)-4-(4-溴-5-氯-2-氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001731
在0℃下将DIPEA(6.89mL，39.46mmol)添加到在DMF(100mL)中的4-溴-5-氯-2-氟苯甲酸(5g，19.73mmol)、(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4.27g，19.73mmol)和HATU(15.00g，39.46mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物用EtOAc(250mL)稀释，用水(200mL x2)和盐水(200mL x2)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至25％EtOAc)进行纯化，得到呈黄色固体的(3R)-4-(4-溴-5-氯-2-氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(6g，67％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，d)，2.75-3.28(2H，m)，3.39-3.60(4H，m)，3.68-4.15(2H，m)，4.18-4.59(1H，m)，4.92(1H，s)，7.62-7.79(1H，m)，7.87-7.97(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝451。
(12aR)-9-溴-8-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001732
在0℃下将氢化钠(1.54g，38.52mmol)添加到在DMF(120mL)中的(3R)-4-(4-溴-5-氯-2-氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.8g，12.84mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物用水淬灭，用EtOAc(200mL)稀释，并且用水(200mL x 2)和盐水(200mL x 2)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至25％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-9-溴-8-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(5.4g，97％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.42(9H，s)，3.25-3.81(5H，m)，3.88-4.05(2H，m)，4.24-4.35(2H，m)，7.55(1H，s)，7.89(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝431。
(12aR)-9-溴-8-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001741
添加在THF(50mL，50mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液，以提供在THF(50mL)中的(12aR)-9-溴-8-氯-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(5.2g，12.05mmol)。将所得混合物在60℃下搅拌2h。将反应混合物用2MHCl和EtOAc(200mL)稀释，然后依次用水(200mL x2)和盐水(200mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至30％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的(12aR)-9-溴-8-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(4g，79％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.22-2.39(1H，m)，2.59-2.94(3H，m)，2.99-3.16(1H，m)，3.49-3.81(5H，m)，4.15-4.29(1H，m)，7.37(1H，s)，7.55(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝417。
(12aR)-9-溴-8-氯-10-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750001751
将N-碘琥珀酰亚胺(1.616g，7.18mmol)添加到在浓硫酸(15mL)中的(12aR)-9-溴-8-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.5g，3.59mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物倒入冰水(100mL)中，用2M NaOH中和，并用DCM(150mL x 2)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-8-氯-10-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(1.5g，94％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.54-2.66(1H，m)，2.71-2.91(4H，m)，2.96-3.19(2H，m)，3.49-3.83(3H，m)，4.16-4.39(1H，m)，7.62(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝443。
(12aR)-9-溴-8-氯-10-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001752
将二碳酸二叔丁酯(1.183mL，5.10mmol)添加到在DCM(20mL)中的(12aR)-9-溴-8-氯-10-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(1.13g，2.55mmol)和三乙胺(1.065mL，7.64mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌2h。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至50％THF)进行纯化，得到呈棕色固体的(12aR)-9-溴-8-氯-10-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.75g，54％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.39(9H，s)，2.26-2.35(1H，m)，2.62-2.66(1H，m)，2.75-2.80(1H，m)，3.08-3.17(1H，m)，3.45-3.62(4H，m)，3.66-3.74(1H，m)，3.74-3.82(1H，m)，4.19-4.33(1H，m)，7.63(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝543。
(12aR)-9-溴-8-氯-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001761
将四(三苯基膦)钯(0)(149mg，0.13mmol)添加到在甲苯(10mL)中的(12aR)-9-溴-8-氯-10-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(700mg，1.29mmol)、乙炔基三甲基硅烷(632mg，6.44mmol)、碘化亚铜(I)(245mg，1.29mmol)和三乙胺(0.718mL，5.15mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌过夜。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至80％THF)进行纯化，得到呈棕色固体的(12aR)-9-溴-8-氯-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(560mg，85％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)0.25(9H，s)，1.39(9H，s)，2.25-2.35(1H，m)，2.64-2.71(1H，m)，2.71-2.75(2H，m)，2.84-2.88(1H，m)，3.05-3.16(2H，m)，3.59-3.68(1H，m)，3.68-3.74(1H，m)，3.70-3.81(1H，m)，4.26-4.35(1H，m)，7.58(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝513。
(12aR)-8-氯-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001762
将RuPhos-Pd-G3(81mg，0.10mmol)添加到在1，4-二噁烷(8mL)和水(2mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8-氯-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(500mg，0.97mmol)、RuPhos(45.4mg，0.1mmol)、(2-甲氧基-6-甲基苯基)硼酸(323mg，1.95mmol)和K2CO3(269mg，1.95mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌40min。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至100％THF)进行纯化，得到呈棕色固体的(12aR)-8-氯-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(500mg，93％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)-0.09(9H，s)，1.40(9H，d)，1.86-2.01(3H，m)，2.26-2.42(1H，m)，2.56-2.70(2H，m)，2.70-2.88(2H，m)，2.90-3.17(2H，m)，3.56-3.67(3H，m)，3.63-3.73(2H，m)，3.76-3.84(1H，m)，4.28-4.37(1H，m)，6.83-6.95(2H，m)，7.22-7.32(1H，m)，7.38-7.47(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝555。
(12aR)-8-氯-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓.1HCl
Figure BDA0003241985750001771
将(12aR)-8-氯-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(500mg，0.9mmol)添加到在1，4-二噁烷(5mL)中的4M HCl。将所得混合物在20℃下搅拌40min。将溶剂在减压下除去，以提供呈棕色固体的(12aR)-8-氯-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓.1HCl(440mg，99％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)-0.08(9H，d)，1.87-1.96(3H，m)，3.05-3.09(2H，m)，3.26-3.31(3H，m)，3.59-3.71(4H，m)，3.81(2H，s)，3.96-4.04(2H，m)，4.30-4.35(1H，m)，4.52-4.60(1H，m)，6.87-6.97(2H，m)，7.24-7.33(1H，m)，7.58-7.63(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝455。
2-[(12aR)-8-氯-10-乙炔基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-甲基苯酚
Figure BDA0003241985750001781
将在DCM(7.16mL，7.16mmol)中的1M三溴化硼添加到在DCM(5mL)中的(12aR)-8-氯-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓.1HCl(440mg，0.9mmol)中。将所得混合物在20℃下搅拌2h。将反应混合物用MeOH(25mL)淬灭，并将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中0至100％MeCN)进行纯化，得到呈黄色固体的2-[(12aR)-8-氯-10-乙炔基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-甲基苯酚(200mg，61％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.83-1.93(3H，m)，2.29-2.41(4H，m)，2.61-2.65(1H，m)，2.65-2.75(1H，m)，2.75-2.79(1H，m)，2.79-2.91(1H，m)，3.57-3.69(1H，m)，3.68-3.79(1H，m)，3.96(1H，s)，4.21-4.30(1H，m)，6.65-6.75(2H，m)，7.02-7.10(1H，m)，7.42-7.47(1H，m)，9.16(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝369。
1-[(12aR)-8-氯-10-乙炔基-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例62；和旋转异构体2，实例63
Figure BDA0003241985750001782
在-20℃下将丙烯酰氯(46.6mg，0.51mmol)和DIPEA(0.176mL，1.01mmol)添加到在DMF(3mL)中的2-[(12aR)-8-氯-10-乙炔基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-甲基苯酚(186mg，0.5mmol)。将所得混合物在-20℃下搅拌1h。将混合物在室温过滤，并且将滤液通过制备型HPLC(柱：Xselect CSH OBD柱30*150mm 5μm)用水(0.1％甲酸)和MeCN洗脱进行纯化，得到1-[(12aR)-8-氯-10-乙炔基-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(14mg，6％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.90(3H，s)，2.35-2.42(1H，m)，2.68-2.73(1H，m)，2.80-2.88(2H，m)，3.02-3.12(1H，m)，3.57-3.78(2H，m)，3.78-3.94(2H，m)，3.94-4.13(2H，m)，4.29-4.42(1H，m)，5.66-5.74(1H，m)，6.08-6.18(1H，m)，6.67-6.74(H，m)，6.76-6.89(1H，m)，7.06(1H，t)，7.46(1H，s)，9.14(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝423。接着是1-[(12aR)-8-氯-10-乙炔基-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(27mg，13％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.90(3H，s)，2.35-2.42(1H，m)，2.68-2.73(1H，m)，2.80-2.88(2H，m)，3.02-3.12(1H，m)，3.57-3.78(2H，m)，3.78-3.94(2H，m)，3.94-4.13(2H，m)，4.29-4.42(1H，m)，5.66-5.74(1H，m)，6.08-6.18(1H，m)，6.67-6.91(3H，m)，7.06(1H，t)，7.46(1H，s)，9.14(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝423。
(12aR)-9-溴-8-氟-10-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750001791
将N-碘琥珀酰亚胺(3.36g，14.95mmol)添加到在浓硫酸(15mL)中的(12aR)-9-溴-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.5g，3.74mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物倒入冰水(100mL)中。将水溶液用2M NaOH中和，并用DCM(150mL x 2)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-8-氟-10-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(1.5g，94％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.65-2.78(1H，m)，2.84-3.06(3H，m)，3.11-3.29(3H，m)，3.53-3.63(1H，m)，3.65-3.86(2H，m)，4.20-4.41(1H，m)，7.43(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝427。
(12aR)-9-溴-8-氟-10-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001801
在0℃下将二碳酸二叔丁酯(0.87mL，3.75mmol)添加到在DCM(20mL)中的(12aR)-9-溴-8-氟-10-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(800mg，1.87mmol)和三乙胺(0.783mL，5.62mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌2h。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至60％THF)进行纯化，得到呈浅黄色固体的(12aR)-9-溴-8-氟-10-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(780mg，79％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.39(9H，s)，2.25-2.35(1H，m)，2.60-2.68(1H，m)，2.75-2.82(2H，m)，3.08-3.19(1H，m)，3.45-3.61(3H，m)，3.63-3.74(1H，m)，3.76-3.84(1H，m)，4.23-4.36(1H，m)，7.41(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝527。
(12aR)-9-溴-8-氟-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001802
将四(三苯基膦)钯(0)(123mg，0.11mmol)和碘化亚铜(I)(202mg，1.06mmol)添加到在甲苯(15mL)中的(12aR)-9-溴-8-氟-10-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(560mg，1.06mmol)、乙炔基三甲基硅烷(417mg，4.25mmol)和三乙胺(0.592mL，4.25mmol)中。将所得混合物在80℃下搅拌过夜。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至60％THF)进行纯化，得到呈棕色固体的(12aR)-9-溴-8-氟-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(400mg，76％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)0.26(9H，s)，1.39(9H，s)，2.28-2.36(1H，m)，2.65-2.73(3H，m)，3.05-3.18(1H，m)，3.48-3.73(5H，m)，4.23-4.35(1H，m)，7.26-7.49(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝497。
(12aR)-8-氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001811
将RuPhos-Pd-G3(67.2mg，0.08mmol)添加到在1，4-二噁烷(10mL)和水(2mL)(5∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8-氟-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(400mg，0.8mmol)、(2-甲氧基-6-甲基苯基)硼酸(267mg，1.61mmol)、K2CO3(222mg，1.61mmol)和RuPhos(37.5mg，0.08mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌40min。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至60％THF)进行纯化，得到呈棕色固体的(12aR)-8-氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(400mg，92％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)-0.07(9H，s)，1.40(9H，d)，1.91-2.04(3H，m)，2.27-3.35(1H，m)，2.61-2.85(3H，m)，2.98-3.08(1H，m)，3.55-3.64(3H，m)，3.63-3.66(4H，m)，3.72-3.84(1H，m)，4.25-4.35(1H，m)，6.77-7.04(2H，m)，7.14-7.32(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝539。
(12aR)-8-氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓.IHCl
Figure BDA0003241985750001821
将(12aR)-8-氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(400mg，0.74mmol)添加到在1，4-二噁烷(5mL)中的4MHCl中。将所得混合物在20℃下搅拌1h。将溶剂在减压下除去，以提供呈棕色固体的(12aR)-8-氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓.1HCl(350mg，99％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)-0.05(9H，s)，1.87-2.05(5H，m)，3.03-3.07(2H，m)，3.25-3.29(3H，m)，3.58-3.75(5H，m)，3.94-3.99(1H，m)，4.49-4.57(1H，m)，6.87-6.97(3H，m)，7.34-7.40(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝439。
2-{(12aR)-8-氟-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}-3-甲基苯酚
Figure BDA0003241985750001822
添加在DCM(4.72mL，4.72mmol)中的1M三溴化硼，以提供在DCM(4mL)中的(12aR)-8-氟-9-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓.1HCl(350mg，0.59mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌4h。将反应混合物用MeOH(25mL)淬灭，并将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4OH)中0至100％MeCN)进行纯化，得到呈棕色固体的2-({12aR)-8-氟-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}-3-甲基苯酚(125mg，60％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.94(3H，d)，2.24-2.36(4H，m)，2.57-2.68(1H，m)，2.72-2.85(3H，m)，3.52-3.61(1H，m)，3.65-3.77(1H，m)，3.98(1H，d)，4.16-4.25(1H，m)，6.65-6.75(2H，m)，7.03-7.11(1H，m)，7.19(1H，d)，9.21(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝353。
1-[(12aR)-10-乙炔基-8-氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例64：和旋转异构体2，实例65
Figure BDA0003241985750001831
在-20℃下将丙烯酰氯(31mg，0.34mmol)和DIPEA(0.116mL，0.66mmol)添加到在DMF(1.5mL)中的2-{(12aR)-8-氟-10-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}-3-甲基苯酚(117mg，0.33mmol)中。将所得混合物在-20℃下搅拌1h。将混合物过滤并且将滤液通过制备型HPLC(柱：Sunfire prep C18柱30*150，5μm)用水(0.1％甲酸)和MeCN洗脱进行纯化，得到1-[(12aR)-10-乙炔基-8-氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(29mg，21％)。1H NMR(400 MHz，DMSO，30℃)1.96(3H，s)，2.35-2.40(1H，m)，2.69-2.75(1H，m)，2.79-2.86(2H，m)，3.04-3.12(1H，m)，3.54-3.64(1H，m)，3.64-3.72(1H，m)，3.77-3.91(2H，m)，3.89-4.10(2H，m)，4.27-4.40(1H，m)，5.65-5.72(1H，m)，6.08-6.17(1H，m)，6.68-6.75(2H，m)，6.76-6.87(1H，m)，7.07(1H，t)，7.21(1H，d)，9.23(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝407。接着是1-[(12aR)-10-乙炔基-8-氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(34mg，26％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.96(3H，s)，2.35-2.40(1H，m)，2.69-2.75(1H，m)，2.79-2.86(2H，m)，3.04-3.12(1H，m)，3.51-3.72(2H，m)，3.77-3.91(2H，m)，3.89-4.10(2H，m)，4.27-4.40(1H，m)，5.65-5.72(1H，m)，6.08-6.17(1H，m)，6.68-6.90(3H，m)，7.07(1H，t)，7.21(1H，d)，9.23(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝407。
2-氯-4-氟吡啶-3-甲酸甲酯
Figure BDA0003241985750001841
将2-氯-4-氟吡啶-3-甲酸(10g，56.97mmol)和碳酸钾(11.81g，85.45mmol)在DMF(100mL)中的混合物用碘甲烷(4.26mL，68.36mmol)处理并且在室温下搅拌2h。将混合物在EtOAc和水之间分配，然后将有机物用水、然后用盐水洗涤，然后干燥并蒸发，以提供深棕色油状物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至30％EtOAc)进行纯化，得到呈无色油状物的2-氯-4-氟吡啶-3-甲酸甲酯(7.9g，73％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.00(3H，s)，7.09(1H，dd)，8.44(1H，dd)。
2，5-二氯-4-氟吡啶-3-甲酸甲酯
Figure BDA0003241985750001842
将2-氯-4-氟吡啶-3-甲酸甲酯(7.9g，41.67mmol)溶解在THF(100mL)中，并且将混合物冷却至-45℃，并且逐滴添加二氯化镁(2，2，6，6-四甲基哌啶)锂盐(lithiummagnesium 2，2，6，6-tetramethylpiperidin-1-ide dichloride)(1M溶液，45.8mL，45.84mmol)。将该混合物在-45℃下搅拌20min，然后逐滴添加全氯乙烷(12.33g，52.09mmol)在THF(10mL)中的溶液，并将混合物在-45℃下搅拌1.5h。将混合物通过添加饱和氯化铵淬灭，然后在EtOAc和水之间分配。将有机物用盐水洗涤，然后干燥并蒸发。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化，得到呈无色油状物的2，5-二氯-4-氟吡啶-3-甲酸甲酯(6.33g，68％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.01(3H，s)，8.46(1H，d)。
2，5-二氯-4-氟吡啶-3-甲醛
Figure BDA0003241985750001851
将2，5-二氯-4-氟吡啶-3-甲酸甲酯(6.1g，27.23mmol)溶解在DCM(100mL)中并且将混合物冷却至-78℃。经约20min逐滴添加二异丁基氢化铝(在甲苯中1M，28.6mL，28.59mmol)，保持温度＜-70℃，然后将该混合物在-78℃下搅拌1h。将混合物通过逐滴添加1M HCl(40mL)淬灭，然后将混合物加温至室温并搅拌20min。将混合物用DCM(300mL)和水(300mL)稀释，然后分离有机物。将水层用DCM(150mL)萃取，然后将合并的有机物干燥并蒸发，以提供呈无色油状物的2，5-二氯-4-氟吡啶-3-甲醛(5.1g，97％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)8.57(1H，d)，10.37(1H，d)。
(3R)-4-[(2，5-二氯-4-氟吡啶-3-基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001861
将2，5-二氯-4-氟吡啶-3-甲醛(5.1g，26.29mmol)溶解在DCM(112mL)中，并且添加乙酸(0.158g，2.63mmol)，然后添加(R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(6.82g，31.55mmol)，并且将混合物搅拌1h。添加三乙酰氧基硼氢化钠(8.36g，39.44mmol)，并且将混合物在室温下搅拌过夜。添加更多的三乙酰氧基硼氢化钠(2.79g，13.1mmol)，并将混合物搅拌4h。分批添加饱和碳酸氢钠溶液(100mL)，并将混合物搅拌直到泡腾停止。将混合物用DCM(200mL)稀释，然后将有机物分离、干燥并蒸发，然后通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化，得到呈无色油状物的(3R)-4-[(2，5-二氯-4-氟吡啶-3-基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.7g，55％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.46(9H，s)，2.38(2H，s)，2.59-2.84(2H，m)，3.29(1H，s)，3.38-3.64(3H，m)，3.64-3.75(2H，m)，3.85(1H，ddd)，4.03-4.19(1H，m)，8.36(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+394。
(6aR)-1，4-二氯-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001862
将(3R)-4-[(2，5-二氯-4-氟吡啶-3-基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.7g，14.46mmol)溶解在THF(250mL)中，并且将混合物冷却至20℃，并且一次性添加2-(叔丁基亚氨基)-N，N-二乙基-1，3-二甲基-1，3，2λ5-二氮杂磷杂环己烷-2-胺(4.59mL，15.9mmol)。将混合物在20℃下搅拌2h。将混合物蒸发，然后在EtOAc和水之间分配。将有机物用饱和碳酸氢钠溶液、然后用盐水洗涤，然后干燥并蒸发，以提供呈无色油状物的(6aR)-1，4-二氯-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(5.5g，＞100％)，无需进一步纯化即可使用。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.47(9H，s)，2.59(1H，td)，2.69-2.79(1H，m)，2.79-2.92(1H，m)，2.93-3.09(1H，m)，3.09-3.23(1H，m)，3.87(3H，dd)，4.03(1H，dd)，4.08-4.18(1H，m)，4.38(1H，dd)，8.20(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+375。
(6aR)-1，4-二氯-3-碘-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001871
将在干燥THF(50mL)中的(6aR)-1，4-二氯-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(5g，13.36mmol)冷却至-45℃，并且逐滴添加二氯化镁(2，2，6，6-四甲基哌啶)锂盐(lithium magnesium 2，2，6，6-tetramethylpiperidin-1-ide dichloride)(20.04mL，20.04mmol)。将混合物在-45℃下搅拌20min然后一次性添加碘(5.09g，20.04mmol)。将混合物在-45℃下搅拌15min，然后将混合物加温至0℃，然后通过逐滴添加饱和氯化铵溶液(5mL)淬灭。将混合物用水(100mL)稀释，然后萃取到EtOAc(100mL)中。将有机物用硫代硫酸钠溶液、然后用盐水洗涤，然后干燥并蒸发，以提供棕色油状物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％EtOAc)进行纯化，得到呈黄色油状物的(6aR)-1，4-二氯-3-碘-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(4.7g，70％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.46(9H，d)，2.48-2.7(1H，m)，2.7-2.9(2H，m)，3.01(1H，s)，3.15(1H，t)，3.73-3.9(3H，m)，3.95-4.17(2H，m)，4.38(1H，dt)。m/z：ES+[M+H]+500。
(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001881
将(6aR)-1，4-二氯-3-碘-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(2.5g，5mmol)、(2-氟-6-甲氧基苯基)硼酸(1.104g，6.5mmol)、RuPhos(0.233g，0.5mmol)、RuPhos Pd G3(0.418g，0.5mmol)和2M水性碳酸钠(5mL，10mmol)在二噁烷(30mL)中搅拌，并通过鼓入氮气将混合物脱气。将混合物加热至50℃保持3h，然后在EtOAc和水之间分配，然后将有机物用盐水洗涤，然后干燥并蒸发，以提供棕色油状物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至60％EtOAc)进行纯化，得到呈黄色油状物的(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(1.83g，74％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.48(9H，d)，2.62(1H，tdd)，2.75(1H，ddd)，2.83-3.07(2H，m)，3.06-3.25(1H，m)，3.77(3H，s)，3.8-4.04(3H，m)，4-4.27(2H，m)，4.43(1H，dd)，6.72-6.82(2H，m)，7.34(1H，dd)。m/z：ES+[M+H]+498。
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-氧代-2，6a，7，9，10，12-六氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001882
将(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(1g，2.01mmol)溶解在二噁烷(10mL)/水(2mL)中，并且添加碳酸铯(1.961g，6.02mmol)，然后添加叔丁基Brettphos Pd G3(0.171g，0.20mmol)，并且将混合物脱气。将该混合物在室温下搅拌过夜。将混合物在EtOAc和水之间分配，然后将有机物干燥并蒸发，以提供棕色油状物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至10％MeOH)进行纯化，得到呈棕色固体的(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-氧代-2，6a，7，9，10，12-六氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.22g，23％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.47(9H，s)，2.58(2H，dd)，2.8-3.21(3H，m)，3.59(1H，d)，3.81(3H，d)，3.95(2H，s)，4.08(2H，dd)，4.44(1H，dd)，6.71-6.85(2H，m)，7.35-7.47(1H，m)，9.24(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+480。
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-甲基-1-氧代-2，6a，7，9，10，12-六氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001891
将(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-氧代-2，6a，7，9，10，12-六氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.22g，0.46mmol)溶解在THF(4mL)中并且添加氢化钠(0.028g，0.69mmol)。将混合物搅拌10min，然后添加碘甲烷(0.057mL，0.92mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。将混合物通过添加水淬灭，然后在水和EtOAc之间分配。将水性物用EtOAc(x2)萃取，然后将合并的有机萃取物干燥并蒸发，以提供棕色油状物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至8％MeOH)进行纯化，得到呈黄色油状物的(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-甲基-1-氧代-2，6a，7，9，10，12-六氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.15g，66％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.47(9H，s)，2.59(2H，dd)，2.86-3.17(3H，m)，3.26(3H，d)，3.66(1H，dd)，3.81(3H，d)，3.84-4.01(2H，m)，4.06(1H，ddd)，4.15-4.28(1H，m)，4.42(1H，dd)，6.73-6.89(2H，m)，7.38-7.52(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+494。
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮旋转异构体1和旋转异构体2
Figure BDA0003241985750001901
将(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-甲基-1-氧代-2，6a，7，9，10，12-六氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.15g，0.3mmol)溶解在DCM(3mL)中，并且添加三溴化硼(3.04mL，3.04mmol)。将混合物在室温搅拌2h，然后在回流下加热过夜。将混合物在冰浴中冷却，然后通过逐滴添加甲醇淬灭，然后将混合物通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供浅棕色油状物。将其通过制备型LCMS(沃特世XSelect CSHC18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％甲酸)和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.035g，27％)。m/z：ES+[M+H]+380。接着是(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.032g，25％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)2.75-2.92(2H，m)，3-3.32(6H，m)，3.35(3H，s)，3.85-4.13(2H，m)，4.23(1H，d)，4.58(1H，dd)，6.70(1H，t)，6.94(1H，d)，7.34(1H，td)。m/z：ES+[M+H]+380。
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮旋转异构体1，实例66
Figure BDA0003241985750001911
将(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮的旋转异构体1(0.035g，0.07mmol)溶解在DCM(1mL)/i-PrOH(1mL)中，并且添加三乙胺(0.02mL，0.15mmol)，然后添加丙烯酰氯(6.59μl，0.08mmol)，并且将混合物在室温搅拌20min。添加另一份丙烯酰氯(6.59μl，0.08mmol)，并且将混合物搅拌20min。添加1M NH3/MeOH(2mL)，然后将混合物搅拌10min，然后蒸发，以提供无色油状物。将粗产物通过制备型LCMS(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有1％NH3)和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮的呈无色干膜状物的旋转异构体1(7mg，22％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)2.45-2.67(2H，m)，2.96(2H，dd)，3.33(3H，s)，3.35-3.5(1H，m)，3.64(1H，d)，3.91(1H，d)，4.02-4.2(2H，m)，4.37(2H，dd)，5.77(1H，d)，6.35(1H，d)，6.57(1H，dd)，6.74(1H，t)，6.91(1H，d)，7.29-7.39(1H，m)，8.27(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+434。
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮旋转异构体2，实例67
Figure BDA0003241985750001912
将(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮的旋转异构体2(0.035g，0.09mmol)溶解在DCM(1mL)/i-PrOH(1mL)中，并且添加三乙胺(0.025mL，0.18mmol)，然后添加丙烯酰氯(8.19μl，0.10mmol)，并且将混合物在室温搅拌20min。添加另一份丙烯酰氯(8.19μl，0.10mmol)，并且将混合物搅拌20min。添加1M NH3/MeOH(2mL)，然后将混合物搅拌10min，然后蒸发，以提供无色油状物。将其通过制备型LCMS(沃特世XSelectCSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％AcOH)和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到呈无色固体的(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮(0.015g，38％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)2.49-2.76(2H，m)，2.87-3.02(2H，m)，3.32(4H，s)，3.59-3.96(2H，m)，4.07(1H，d)，4.16(1H，d)，4.42(2H，d)，5.73(1H，d)，6.29(1H，d)，6.54(1H，dd)，6.73(1H，t)，6.88(1H，d)，7.32(1H，td)。m/z：ES+[M+H]+434。
2-[(6aR)-1，4-二氯-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f]H，4]氧氮杂卓-3-基]-3-氟苯酚
Figure BDA0003241985750001921
将(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.1g，0.2mmol)溶解在DCM(2mL)中，并且添加三溴化硼(2.007mL，2.01mmol)。将该混合物在室温下搅拌过夜。将混合物在冰浴中冷却，然后通过逐滴添加甲醇淬灭，并且通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供呈无色油状物的2-[(6aR)-1，4-二氯-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]-3-氟苯酚(0.045g，58.4％)。m/z：ES+[M+H]+384。
1-[(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮，实例68
Figure BDA0003241985750001931
将2-[(6aR)-1，4-二氯-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]-3-氟苯酚(0.042g，0.11mmol)溶解在DCM(1mL)/i-PrOH(1mL)中，并且添加三乙胺(0.022g，0.22mmol)，然后添加丙烯酰氯(0.012g，0.13mmol)，并且将混合物在室温搅拌1h。将混合物蒸发然后通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有1％NH3)和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到呈白色固体的1-[(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮(0.018g，38％)。1H NMR(400MHz，DMSO)2.56(1H，s)，2.62-2.74(1H，m)，2.78-3.05(2H，m)，3.17(1H，s)，3.89-4.21(3H，m)，4.29(2H，s)，4.66(1H，s)，5.71(1H，s)，6.14(1H，d)，6.67-6.91(3H，m)，7.24-7.35(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+438。
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮
Figure BDA0003241985750001932
将(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-氧代-2，6a，7，9，10，12-六氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.1g，0.21mmol)溶解在DCM(2mL)中，并且添加三溴化硼(2.08mL，2.08mmol)。将混合物在室温搅拌4h，用MeOH淬灭，并通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供呈无色油状物的(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮(0.075g，98％)。m/z：ES+[M+H]+366。
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮，实例69
Figure BDA0003241985750001941
将(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮(0.080g，0.22mmol)溶解在DCM(1mL)/i-PrOH(1mL)中，并且添加三乙胺(0.044g，0.44mmol)，然后添加丙烯酰氯(0.024g，0.26mmol)，并且将混合物在室温搅拌1h。将混合物蒸发然后通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有1％NH3)和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到呈白色固体的(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮(0.02g，22％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)2.55(2H，d)，2.89(2H，s)，3.35(1H，s)，3.49(1H，d)，3.99(3H，s)，4.39(2H，s)，5.72(1H，d)，6.28(1H，d)，6.44-6.58(1H，m)，6.63(1H，t)，6.79(1H，d)，7.21(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+420。
(6aR)-4-氯-1-[2-(二苯基亚甲基)肼基]-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001951
将(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.55g，1.1mmol)、2-甲基丙-2-醇钾(0.186g，1.66mmol)和Xphos Pd G3(0.093g，0.11mmol)溶解在甲苯(10mL)中，并且将混合物脱气。添加(二苯基甲叉)肼((Diphenylmethylene)hydrazine)(0.26g，1.32mmol)，并且将混合物在室温搅拌20min。将混合物在EtOAc和水之间分配，然后将有机物用盐水洗涤，干燥并蒸发，以提供深棕色固体。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至60％EtOAc)进行纯化，得到呈褐色固体的(6aR)-4-氯-1-[2-(二苯基亚甲基)肼基]-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.36g，50％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.49(9H，s)，2.44-2.6(1H，m)，2.68(1H，s)，2.92(2H，d)，3.11(1H，s)，3.74(3H，d)，3.83-4.18(4H，m)，4.36(1H，dd)，4.55(1H，dd)，6.67-6.78(2H，m)，7.31(6H，ddq)，7.4-7.48(1H，m)，7.47-7.57(4H，m)，7.96(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+658。
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-肼基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750001952
将(6aR)-4-氯-1-[2-(二苯基亚甲基)肼基]-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.3g，0.46mmol)溶解在MeOH(5mL)中，并且添加2M HCl(5ml，10mmol)，并且将混合物在室温搅拌4h。将混合物通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供呈无色油状物的(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-肼基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.22g，98％)。m/z：ES+[M+H]+494。
2-[(8aR)-6-氯-8，8a，9，10，11，12-六氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-5-基]-3-氟苯酚旋转异构体1和旋转异构体2
Figure BDA0003241985750001961
将(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-肼基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.22g，0.45mmol)溶解在三甲氧基甲烷(3ml，27.42mmol)中，并且将混合物在60℃加热3h。将混合物蒸发，以提供棕色油状物。将其溶解在DCM(5mL)中，并添加三溴化硼(4.45ml，4.45mmol)，然后将混合物在40℃加热3h，然后冷却至室温并搅拌过夜。将混合物用MeOH(10ml)淬灭，并通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供棕色油状物。将其通过制备型LCMS(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％甲酸)和MeCN作为洗脱剂进行纯化，得到具有杂质的标题化合物的旋转异构体1。将其通过SCX(1M NH3/MeOH)纯化，以提供2-[(8aR)-6-氯-8，8a，9，10，11，12-六氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-5-基]-3-氟苯酚的呈无色膜状物的旋转异构体1(0.039g，22％)。1H NMR(400MHz，MeOD，30℃)2.47-2.75(3H，m)，2.81-3.12(4H，m)，3.74-4.15(2H，m)，4.41-4.5(1H，m)，4.54(1H，dd)，6.57-6.88(2H，m)，7.46(1H，d)，8.44-8.6(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+390。制备型LCMS的进一步洗脱得到2-[(8aR)-6-氯-8，8a，9，10，11，12-六氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-5-基]-3-氟苯酚的旋转异构体2(0.032g，18％)。1H NMR(400MHz，MeOD，30℃)2.57-2.72(2H，m)，2.78-3.15(5H，m)，3.9-4.11(2H，m)，4.39-4.62(2H，m)，6.7-6.92(2H，m)，7.47(1H，td)，8.53(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+390。
1-[(8aR)-6-氯-5-(2-氟-6-羟基苯基)-8a，9，11，12-四氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-10(8H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例70
Figure BDA0003241985750001971
将2-[(8aR)-6-氯-8，8a，9，10，11，12-六氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-5-基]-3-氟苯酚的旋转异构体1(0.039g，0.1mmol)溶解在DCM(0.5mL)/i-PrOH(0.5mL)中，并且添加三乙胺(0.027mL，0.2mmol)，然后添加丙烯酰氯(9.7μL，0.12mmol)，并且将混合物在室温搅拌20min。添加在MeOH(5ml)中的1M NH3，并将混合物搅拌30min。将混合物蒸发，然后通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSHC18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％NH3)和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到呈白色固体的1-[(8aR)-6-氯-5-(2-氟-6-羟基苯基)-8a，9，11，12-四氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-10(8H)-基]丙-2-烯-1-酮(0.012g，27％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.54-2.63(1H，m)，2.77(1H，s)，2.82-3.2(3H，m)，3.87-4.33(4H，m)，4.41(1H，s)，4.62(1H，s)，5.72(1H，s)，6.14(1H，d)，6.77(3H，d)，7.41(1H，d)，8.59(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+444。
1-[(8aR)-6-氯-5-(2-氟-6-羟基苯基)-8a，9，11，12-四氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-10(8H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体2，实例71
Figure BDA0003241985750001981
将2-[(8aR)-6-氯-8，8a，9，10，11，12-六氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-5-基]-3-氟苯酚的旋转异构体2(0.028g，0.07mmol)溶解在DCM(0.5mL)/i-PrOH(0.5mL)中，并且添加三乙胺(0.015g，0.14mmol)，然后添加丙烯酰氯(7.8mg，0.09mmol)，并且将混合物在室温搅拌20min。添加在MeOH(5ml)中的1M NH3，并将混合物搅拌30min。将混合物蒸发，然后通过制备型HPLC(沃特世XSelectCSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％NH3)和MeCN作为洗脱剂进行纯化。得到呈白色固体的1-[(8aR)-6-氯-5-(2-氟-6-羟基苯基)-8a，9，11，12-四氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-10(8H)-基]丙-2-烯-1-酮(0.013g，41％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.55(1H，d)，2.77(1H，s)，2.83-3.22(3H，m)，3.91-4.21(3H，m)，4.26(1H，s)，4.40(1H，s)，4.64(1H，s)，5.72(1H，s)，6.14(1H，d)，6.85(3H，d)，7.45(1H，q)，8.62(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+444。
(2E)-N-(3-溴-5-氟-2-甲基苯基)-2-(羟基亚氨基)乙酰胺
Figure BDA0003241985750001982
将硫酸钠(5.57g，39.21mmol)、盐酸羟胺(1.19g，17.15mmol)和2，2，2-三氯乙烷-1，1-二醇(1.21g，7.35mmol)溶解在水(25mL)中。添加3-溴-5-氟-2-甲基苯胺(1.0g，4.90mmol)在水(2mL)、EtOH(3.5mL)和浓HCl(0.85mL)中的溶液，并在60℃下加热过夜。将反应冷却至25℃，形成沉淀物。将沉淀物通过过滤收集，并用过量的水洗涤，然后在真空下干燥，以提供呈浅棕色固体的(2E)-N-(3-溴-5-氟-2-甲基苯基)-2-(羟基亚氨基)乙酰胺(1.08g，80％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.23(3H，s)，7.34-7.53(2H，m)，7.68(1H，s)，9.79(1H，s)，12.28(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝274.8。
6-溴-4-氟-7-甲基-1H-吲哚-2，3-二酮
Figure BDA0003241985750001991
在60℃下将(2E)-N-(3-溴-5-氟-2-甲基苯基)-2-(羟基亚氨基)乙酰胺(36.9g，107.32mmol)分批添加到硫酸(270mL)中。然后将反应混合物在60℃下加热1h。将反应混合物冷却至25℃，并缓慢地添加至冰水。将所得沉淀物通过过滤收集，用水洗涤，并且在真空下干燥，以提供呈深红色固体的6-溴-4-氟-7-甲基-1H-吲哚-2，3-二酮(25g，90％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.21(3H，s)，7.30(1H，d)，11.43(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝257.9。
2-氨基-4-溴-6-氟-3-甲基苯甲酸
Figure BDA0003241985750001992
在25℃下将过氧化氢(在H2O中30％)(45mL，440.81mmol)逐滴添加到在氢氧化钠(在H2O中2M)(397mL，793.46mmol)中的6-溴-4-氟-7-甲基-1H-吲哚-2，3-二酮(25g，88.16mmol)中，并将反应搅拌3h。将过量的过氧化氢通过缓慢添加到亚硫酸钠水溶液中淬灭，并将混合物中和至pH7。将棕色沉淀物通过过滤收集并弃去。将剩余溶液用浓HCl缓慢酸化至pH 4。将所得溶液用DCM(300mL)萃取，并使用相分离柱体来干燥。将溶剂在减压下除去，以提供呈奶油色固体的2-氨基-4-溴-6-氟-3-甲基苯甲酸(21.71g，99％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.17(3H，s)，6.66(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝247.8。
2-氨基-4-溴-5-氯-6-氟-3-甲基苯甲酸
Figure BDA0003241985750002001
在25℃下将N-氯琥珀酰亚胺(13.1g，98.10mmol)添加到在DMF(250mL)中的2-氨基-4-溴-6-氟-3-甲基苯甲酸(22.12g，89.18mmol)中。将所得溶液搅拌至70℃持续2h。将反应混合物冷却至25℃，并用水(500mL)稀释。将所得固体用EtOAc(1000mL)萃取，并分离各层。将有机层用水(4x500mL)、盐水(200mL)洗涤，并通过使该有机层通过相分离柱体进行干燥。将溶剂在减压下去除以提供呈棕色固体的2-氨基-4-溴-5-氯-6-氟-3-甲基苯甲酸(25g，99％)。m/z：ES-[M+H]+＝281。
2-氨基-4-溴-5-氯-6-氟-3-甲基苯甲酸甲酯
Figure BDA0003241985750002002
将2-氨基-4-溴-5-氯-6-氟-3-甲基苯甲酸(21.62g，76.53mmol)溶解在MeOH(214mL)中，然后缓慢添加硫酸(40.8mL，765.33mmol)，并将溶液在80℃下加热16h，然后冷却至室温。将MeOH在减压下除去，并将残余物用过量的冰和DCM(500mL)稀释。将有机层经相分离柱体干燥，并在减压下浓缩，以提供红色油状物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化，以提供呈红色油状物的2-氨基-4-溴-5-氯-6-氟-3-甲基苯甲酸甲酯(11.58g，51％)，将其静置固化。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)2.33(3H，s)，3.92(3H，s)，5.91(2H，s)。m/z：ES-[M-H]-＝293.8。
4-溴-5-氯-6-氟-1H-吲唑-7-甲酸甲酯
Figure BDA0003241985750002011
在25℃下向2-氨基-4-溴-5-氯-6-氟-3-甲基苯甲酸甲酯(5.08g，17.13mmol)在氯仿(120mL)中的搅拌溶液中添加乙酸钾(1.84g，18.85mmol)。将混合物冷却至0℃，并且添加乙酸酐(3.23mL，34.26mmol)，并搅拌至25℃持续20min。添加18-冠-6(18-Crown-6)(0.81g，3.08mmol)和亚硝酸异戊酯(5.06mL，37.69mmol)，并将该反应在65℃下加热2h，并且然后返回至25℃。添加水(100mL)，并使用相分离柱体来干燥有机层。将溶剂在减压下除去，以提供红色固体，将其用MeOH(200mL)和浓HCl(29.4mL，342.64mmol)稀释。将悬浮液在25℃下搅拌1h。将溶剂蒸发，并将残余物用水(200mL)稀释，并用DCM(400mL)萃取。将有机层用饱和NaHCO3(250mL)洗涤，并且将有机物通过使用相分离柱体来干燥。将相分离柱体上的固体在真空下干燥，以提供呈白色固体的4-溴-5-氯-6-氟-1H-吲唑-7-甲酸甲酯(1.28g)。将溶剂滤液在减压下浓缩，并将所得固体在真空下过滤，以提供另外的呈白色固体的4-溴-5-氯-6-氟-1H-吲唑-7-甲酸甲酯(2.43g)。将滤液加载到二氧化硅上，并通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化，以提供另外的呈白色固体的4-溴-5-氯-6-氟-1H-吲唑-7-甲酸甲酯(0.46g)，得到的总产率为79％。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.98(3H，s)，8.25(1H，d)，13.75(1H，s)。m/z：ES-[M-H]-＝304.7。
4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-甲酸甲酯
Figure BDA0003241985750002012
向在DMF(27mL)中的4-溴-5-氯-6-氟-1H-吲唑-7-甲酸甲酯(4.16g，13.53mmol)添加碳酸铯(5.28g，16.23mmol)和碘甲烷(1.01mL，16.23mmol)。将反应在25℃下搅拌3h。将反应用EtOAc(500mL)稀释，并用水(2x250mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机层经相分离柱体干燥，并在减压下除去溶剂，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-甲酸甲酯(2.69g，62％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)4.03(3H，s)，4.05(3H，s)，8.00(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝320.7。
4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-甲酸
Figure BDA0003241985750002021
在70℃下将氢氧化钠(2M)(7.42mL，14.84mmol)添加到在THF(15mL)中的4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-甲酸甲酯(1.59g，4.95mmol)中保持5h。将反应冷却至25℃并且将溶剂在减压下去除。将该溶液使用浓HCl酸化至pH 4，并将所得固体在真空下过滤，并用过量水洗涤。将固体在真空烘箱中干燥16h，以提供呈白色固体的4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-甲酸(1.5g，99％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)4.04(3H，s)，8.19(1H，s)，14.58(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝306.7。
(3R)-4-(4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002022
将4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-甲酸(1.59g，5.17mmol)、HATU(2.35g，6.20mmol)和DIPEA(2.76mL，15.51mmol)在DMF(25mL)中搅拌30min，然后添加(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.23g，5.69mmol)，并且将混合物在25℃下搅拌2h。将反应用EtOAc(300mL)稀释，并用水(2x200mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机层经相分离柱体干燥，并在减压下除去溶剂，以提供呈橙色油状物的粗产物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)进行纯化，以提供呈橙色干膜状物的(3R)-4-(4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.12g，81％)。m/z：ES+[M-tBu]+＝450.6。
(7aR)-4-溴-5-氯-1-甲基-13-氧代-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002031
在0℃下将氢化钠(在矿物油中60％)(0.184g，4.61mmol)一次性添加到在DMF(35mL)中的(3R)-4-(4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.12g，4.19mmol)中。将所得溶液加温至25℃并搅拌2h。将反应混合物用水(300mL)稀释，并用EtOAc(500mL)萃取。将有机层分离，并用水(2x400mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层通过使其通过相分离柱体来干燥，并将溶剂在真空下除去，以提供粗产物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至10％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(7aR)-4-溴-5-氯-1-甲基-13-氧代-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(1.5g，74％)。1H NMR(400MHz，DMSO，100℃)1.46(9H，s)，3.32-3.4(1H，m)，3.44-3.53(1H，m)，3.66-3.76(1H，m)，4.01(3H，s)，4.05-4.14(2H，m)，4.14-4.25(2H，m)，4.26-4.34(1H，m)，4.38(1H，dd)，8.05(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝486.06。
(7aR)-4-溴-5-氯-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002041
在25℃下将硼烷-THF复合物溶液(1M)(23.06mL，23.06mmol)逐滴添加到(7aR)-4-溴-5-氯-1-甲基-13-氧代-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(1.4g，2.88mmol)在THF(5mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在75℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至25℃，并用i-PrOH和NaOH(2M)淬灭并搅拌20min。将反应用水(100mL)和EtOAc(200mL)稀释，分离各层，并且将有机层用盐水(50mL)洗涤。将有机物经相分离柱体干燥，并蒸发，以提供无色油状物，将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)进行纯化，以提供呈白色固体的(7aR)-4-溴-5-氯-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(0.73g，54％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.44(1H，td)，2.75(2H，s)，2.85-2.95(1H，m)，3.03(1H，s)，3.65-3.75(3H，m)，4.00(1H，d)，4.22(3H，s)，4.35-4.44(2H，m)，7.94(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝472.7。
(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002042
将(7aR)-4-溴-5-氯-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(630mg，1.34mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(250mg，1.60mmol)和碳酸钾(1107mg，8-01mmol)在甲基四氢呋喃(10mL)和水(3.33mL)中的混合物脱气5min。在25℃下添加Ruphos Pd G3(112mg，0.13mmol)和RuPhos(62.3mg，0.13mmol)，并将反应在60℃下加热1h。将反应冷却至25℃，并用EtOAc(200mL)稀释，用水(2x50mL)、盐水(50mL)洗涤，并经相分离柱体干燥。将溶剂在减压下去除，以提供棕色油状物。将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至10％MeOH)进行纯化，得到呈黄色固体的(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(575mg，86％)。m/z：ES+[M+H]+＝502.8。
2-[(7aR)-5-氯-1-甲基-1，7，7a，8，9，10，11，13-八氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-4-基]-3-氟苯酚
Figure BDA0003241985750002051
向在MeOH(5mL)中的(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(575mg，1.14mmol)添加HCl(在i-PrOH中6N)(7.62mL，45.73mmol)，并且将溶液在25℃下搅拌3h。然后将反应混合物通过SCX(1M NH3/MeOH)进行纯化，以提供呈浅黄色固体的2-[(7aR)-5-氯-1-甲基-1，7，7a，8，9，10，11，13-八氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-4-基]-3-氟苯酚(386mg，84％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.23-2.31(1H，m)，2.52-2.63(2H，m)，2.68(1H，d)，2.76(2H，d)，3.51-3.63(1H，m)，3.63-3.82(1H，m)，3.87(1H，dd)，4.08(3H，s)，4.18-4.26(2H，m)，6.64(1H，td)，6.71(1H，dd)，7.18(1H，td)，7.29(1H，s)，9.77(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝402.8。
1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例72；和旋转异构体2，实例73
Figure BDA0003241985750002061
在0℃下向2-[(7aR)-5-氯-1-甲基-1，7，7a，8，9，10，11，13-八氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-4-基]-3-氟苯酚(386mg，0.96mmol)和DIPEA(0.217mL，1.25mmol)在DCM(18mL)中的溶液中添加丙烯酰氯(0.084mL，1.05mmol)，并且将溶液在0℃下搅拌2h。将反应混合物用MeOH(5mL)淬灭，并将溶剂在减压下去除，以提供黄色油状物。将油状物溶解在MeOH(5mL)中，并添加7N NH3/MeOH(1mL)。将所得溶液在25℃下搅拌1h。将溶剂在减压下去除得到黄色膜状物。将样品溶解在MeOH(2mL)和DCM(2mL)中，过滤，然后用MeOH(1mL)洗涤。将溶液通过SFC(柱：Chiralpak IC，20x250mm，5微米)用40％MeOH+0.1％NH3/60％scCO2洗脱进行纯化，以提供1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮的旋转异构体1(107mg，24％)。1H NMR(500MHz，DMSO，27℃)2.71-2.83(2H，m)，2.94-3.09(2H，m)，3.7-3.77(1H，m)，3.97(1H，t)，4.07-4.17(2H，m)，4.22(3H，s)，4.38-4.52(2H，m)，5.71(1H，t)，6.08-6.21(1H，m)，6.76(1H，t)，6.8-6.89(2H，m)，7.27-7.34(1H，m)，7.42(1H，s)，9.89(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝457.0。接着是1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮的旋转异构体2(80mg，18％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.73-2.84(2H，m)，2.96-3.09(2H，m)，3.65-3.82(1H，m)，3.91-4.02(1H，m)，4.06-4.14(1H，m)，4.23(3H，s)，4.39-4.53(2H，m)，5.67-5.76(1H，m)，6.14(1H，d)，6.73-6.8(1H，m)，6.82-6.91(2H，m)，7.26-7.37(1H，m)，7.43(1H，s)，9.90(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝456.9。
4-溴-5-氯-6-氟-2-甲基-2H-吲唑-7-甲酸甲酯
Figure BDA0003241985750002071
向在DMF(27mL)中的4-溴-5-氯-6-氟-1H-吲唑-7-甲酸甲酯(4.16g，13.5mmol)添加碳酸铯(5.28g，16.2mmol)和碘甲烷(1.01mL，16.2mmOl)。将反应在25℃下搅拌3h，然后用EtOAc(500mL)稀释，用水(2x250mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机层干燥(相分离柱体)并蒸发，以提供奶油色固体。快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)进行纯化，得到呈白色固体的4-溴-5-氯-6-氟-2-甲基-2H-吲唑-7-甲酸甲酯(1.03g，24％)。1HNMR(400MHz，CDCl3，30℃)4.04(3H，s)，4.26(3H，s)，7.99(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝320.7。
4-溴-5-氯-6-氟-2-甲基-2H-吲唑-7-甲酸
Figure BDA0003241985750002072
将氢氧化钠(2M)(3.5mL，7mmol)添加到在THF(10mL)中的4-溴-5-氯-6-氟-2-甲基-2H-吲唑-7-甲酸甲酯(1.03g，3.2mmol)中，并且在70℃下搅拌4h。将反应冷却至室温，在真空下过滤，并在真空烘箱中干燥16h，以提供呈白色固体的4-溴-5-氯-6-氟-2-甲基-2H-吲唑-7-甲酸(0.813g，77％)(分离为钠盐)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)4.14(3H，s)，8.37(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝306.7。
(3R)-4-(4-溴-5-氯-6-氟-2-甲基-2H-吲唑-7-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002081
将4-溴-5-氯-6-氟-2-甲基-2H-吲唑-7-甲酸(钠盐)(813mg，2.64mmol)、HATU(1203mg，3.17mmol)和DIPEA(1.41mL，7.93mmol)在DMF(15mL)中搅拌0.5h。然后添加(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(629mg，2.91mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2h，然后用EtOAc(150mL)稀释。然后将反应混合物用水(2x100mL)、盐水(50mL)洗涤，然后干燥并蒸发。快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)，得到呈红色油状物的(3R)-4-(4-溴-5-氯-6-氟-2-甲基-2H-吲唑-7-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(779mg，58％)，将其静置固化。1H NMR(400MHz，DMSO，100℃)1.44(9H，s)，3.07-3.17(1H，m)，3.36-3.55(2H，m)，3.58-3.69(1H，m)，3.67-3.81(1H，m)，3.82-3.95(1H，m)，3.98-4.1(1H，m)，4.20(3H，s)，4.37-4.48(1H，m)，4.62(1H，s)，8.50(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝504.7。
(7aR)-4-溴-5-氯-2-甲基-13-氧代-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002082
在0℃下将氢化钠(在矿物油中60％)(67.8mg，1.69mmol)一次性添加到在DMF(15mL)中的(3R)-4-(4-溴-5-氯-6-氟-2-甲基-2H-吲唑-7-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(779mg，1.54mmol)中。将所得溶液加温至25℃，然后搅拌3小时，然后用水(300mL)稀释，并用EtOAc(500mL)萃取。将有机层分离，用水(2x400mL)、然后用盐水(50mL)洗涤，干燥并蒸发。快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至10％MeOH)，得到呈黄色固体的(7aR)-4-溴-5-氯-2-甲基-13-氧代-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(690mg，92％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.42(9H，s)，3.49(1H，d)，3.58-3.62(1H，m)，3.62-3.7(2H，m)，3.75(1H，s)，3.9-4.06(2H，m)，4.17(3H，s)，4.22-4.35(2H，m)，8.47-8.56(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝484.7。
(7aR)-4-溴-5-氯-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002091
在25℃下在氮气下将硼烷-THF复合物溶液(1M)(11.36mL，11.36mmol)逐滴添加到(7aR)-4-溴-5-氯-2-甲基-13-氧代-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(690mg，1.42mmol)在THF(10mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液加热至75℃保持16h，然后冷却至25℃，用i-PrOH(5mL)和NaOH(2M，10mL)淬灭，并搅拌20min。将反应混合物用水(100mL)和EtOAc(200mL)稀释，用盐水(50mL)洗涤，干燥并蒸发。快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)得到呈白色固体的(7aR)-4-溴-5-氯-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(370mg，55％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.31-2.43(1H，m)，2.63-2.75(2H，m)，2.76-2.9(1H，m)，3.02(1H，t)，3.62-3.76(3H，m)，3.79(1H，d)，4.15(3H，s)，4.29(1H，d)，4.36(1H，d)，8.38(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝470.8。
(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002101
将(7aR)-4-溴-5-氯-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(302mg，0.64mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(200mg，1.28mmol)和碳酸钾(531mg，3.84mmol)在1，4-二噁烷(10mL)和水(2mL)中的搅拌溶液脱气10分钟。添加RuPhos Pd G3(53.5mg，0.06mmol)和RuPhos(29.9mg，0.06mmol)，并将混合物在90℃下加热。搅拌3h后，添加另外的(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(200mg，1.28mmol)和RuPhos PdG3(53.5mg，0.06mmol)。再搅拌2h后，将反应溶剂蒸发，并将棕色油状物用EtOAc(50mL)稀释。将有机物用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，然后干燥并蒸发。快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至10％MeOH)得到呈黄色干膜状物的(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(215mg，67％)。m/z：ES+[M+H]+＝503.4。
2-[(7aR)-5-氯-2-甲基-2，7，7a，8，9，10，11，13-八氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-4-基]-3-氟苯酚
Figure BDA0003241985750002111
将(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-甲酸叔丁酯(215mg，0.43mmol)和HCl(在i-PrOH中6M)(2.85mL，17.10mmol)在MeOH(4mL)中的溶液在25℃下搅拌3h。然后使用SCX柱，将反应混合物通过离子交换色谱法纯化，将所需产物使用1M NH3/MeOH从柱上洗脱，以提供呈浅黄色固体的2-[(7aR)-5-氯-2-甲基-2，7，7a，8，9，10，11，13-八氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-4-基]-3-氟苯酚(172mg，100％)。m/z：ES+[M+H]+＝403.2。
1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例74；和旋转异构体2，实例75
Figure BDA0003241985750002112
在氮气下在0℃下向2-[(7aR)-5-氯-2-甲基-2，7，7a，8，9，10，11，13-八氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-4-基]-3-氟苯酚(185mg，0.46mmol)和DIPEA(0.104mL，0.60mmol)在DCM(18mL)中的溶液中添加丙烯酰氯(0.040mL，0.51mmol)。在0℃下搅拌2h后，将反应用MeOH(5mL)淬灭，并将溶剂在减压下除去。将所得油状物溶解在MeOH(5mL)中，并添加7N NH3/MeOH(1mL)，然后在25℃下搅拌1h，在此之后蒸发溶剂。然后将样品溶解在MeOH(3mL)中，过滤，并将残余物用MeOH(0.5mL)洗涤。将溶液使用SFC纯化(柱：Chiralpak IC，20x250mm，5微米流动相：35％MeOH+0.1％NH3/65％scCO2流速：60mL/minBPR：120巴柱温：40℃UV max 216nm)，以提供1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮的旋转异构体1(61mg，29％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.37-2.47(1H，m)，2.68-2.88(2H，m)，2.88-3.12(2H，m)，3.78(1H，dd)，3.83-4.02(2H，m)，4.09(4H，s)，4.3-4.57(2H，m)，5.62-5.82(1H，m)，6.04-6.22(1H，m)，6.7-6.79(1H，m)，6.79-6.89(2H，m)，7.21-7.42(1H，m)，7.91(1H，s)，9.83(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝457。接着是1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮的旋转异构体2(25mg，12％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.36-2.48(1H，m)，2.68-2.83(2H，m)，2.88-3.14(2H，m)，3.7-3.82(1H，m)，3.82-4.02(2H，m)，4.02-4.29(4H，m)，4.3-4.63(2H，m)，5.61-5.81(1H，m)，6.02-6.23(1H，m)，6.62-6.99(3H，m)，7.16-7.4(1H，m)，7.92(1H，s)，9.83(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝457。
(3R)-4-[(4-溴-2，3-二氟苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002121
将4-溴-2，3-二氟苯甲醛(28g，126.70mmol)溶解在干DCM(300ml)中，并且添加(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(41.1g，190.04mmol)，然后添加冰乙酸(0.725ml，12.67mmol)，并且将反应混合物在室温下在氮气下搅拌两小时。然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(53.7g，253.39mmol)和DCM(300ml)，并且将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物通过小心添加饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，并将水层用DCM萃取。将获得的有机层用饱和盐水洗涤，并通过使该有机层通过相分离器柱体来干燥，然后蒸发成浅黄色油状物。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至60％EtOAc)进行纯化，以提供呈黄色胶状物的(3R)-4-[(4-溴-2，3-二氟苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(51.8g，97％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.14(1H，ddd)，2.3-2.45(1H，m)，2.56-2.63(1H，m)，3.02(2H，ddd)，3.31-3.4(1H，m)，3.48(2H，d)，3.69(2H，dt)，3.94-4.09(1H，m)，4.65(1H，t)，7.18-7.34(1H，m)，7.51(1H，ddd)。m/z：ES+[M+H]+＝421。
(12aR)-9-溴-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002131
在0℃下在氮气下(观察到泡腾)将氢化钠(2.70g，67.55mmol)经三十分钟分批添加到在DMF(300ml)中的(3R)-4-[(4-溴-2，3-二氟苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(25.87g，61.41mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌三十分钟，然后在10℃下搅拌三十分钟。然后将反应混合物冷却至0℃，并用饱和氯化铵水溶液淬灭。将该反应混合物用水稀释，并且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用饱和盐水洗涤，并通过使其通过相分离器柱体来干燥。蒸发提供了黄色油状物(12aR)-9-溴-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(29.5g，＞100％)。m/z：ES+[M+H]+401。重复该反应，并将若干粗批料合并，以用于下面的单个纯化。
(12aR)-9-溴-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002132
将(12aR)-9-溴-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(64.3g，160.24mmol)溶解在DCM中，并且通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(48.1g，74.8％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.31(1H，ddd)，2.74(2H，td)，2.80(1H，d)，3.09(1H，ddd)，3.58(2H，d)，3.66-3.75(2H，m)，3.81(1H，d)，4.33(1H，dd)，7.03(1H，dd)，7.31(1H，dd)。m/z：ES+[M+H]+＝401。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750002141
在0℃下将浓硫酸(60.2ml)逐滴添加到(12aR)-9-溴-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(14.5g，36.13mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌十五分钟，直至形成溶液。一次性添加N-碘琥珀酰亚胺(16.26g，72.27mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌三十分钟，然后在室温下搅拌三小时。将反应混合物缓慢倒入冰中，并用NaOH(50％w/w水溶液)将pH调节至pH 10，并用DCM萃取。将有机萃取物合并，用饱和盐水洗涤，然后通过使其通过相萃取器柱体干燥并且蒸发，以提供呈棕色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(17.1g，＞100％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.36(2H，ddd)，2.61-2.97(5H，m)，3.71(3H，dtd)，4.12-4.34(1H，m)，7.71(1H，d)。有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝427。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002151
在室温下将二碳酸二叔丁酯(13.11g，60.06mmol)添加到(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓和三乙胺(16.74mL，120.12mmol)在DCM(200mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在室温搅拌十七小时。将反应混合物用DCM(150mL)稀释，并用水(150mL)、然后用饱和盐水(150mL)洗涤。将有机层通过使其通过相分离器柱体来干燥，并蒸发，以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至60％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈浅黄色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(9.53g，45％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.23-2.38(1H，m)，2.63-2.8(2H，m)，2.88(1H，s)，3.12(1H，ddd)，3.55(2H，t)，3.67-3.82(3H，m)，4.32(1H，dd)，7.71(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝527。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002152
将(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(9.33g，17.70mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(4.09g，3.54mmol)和碘化亚铜(I)(3.37g，17.70mmol)悬浮在甲苯(160ml)中。连续添加乙炔基三甲基硅烷(12.24ml，88.49mmol)和三乙胺(4.93ml，35.40mmol)，并且将反应混合物在100℃下加热三十分钟。将反应混合物冷却至室温并蒸发。将获得的残余物溶解在DCM中，并通过硅藻土层过滤。蒸发提供油状物，将其溶于***并过滤。将滤液蒸发至棕色油状物。将获得的粗产物溶解在庚烷中，并且通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈浅黄色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(6.76g，77％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)0.25(9H，s)，1.40(9H，s)，2.34(1H，ddd)，2.65-2.85(2H，m)，2.91(1H，s)，3.13(1H，ddd)，3.55(2H，t)，3.72-3.94(3H，m)，4.35(1H，dd)，7.35(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝497。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002161
将(12aR)-9-溴-10-氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(6.5g，13.07mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(3.38g，19.60mmol)和水性2M碳酸钠(19.60ml，39.20mmol)在1，4-二噁烷(111ml)中的溶液用氮气脱气5分钟。然后添加RuPhos-Pd-G3(1.093g，1.31mmol)和2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(0.610g，1.31mmol)，并且将反应混合物在90℃加热三十分钟。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc(150mL)和水(150mL)稀释。将合并的有机物经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到棕色残余物。将获得的残余物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0％至50％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈浅黄色干膜状物的粗产物。将粗产物纯化，并将阻转异构体通过手性SFC分离：使用Chiralpak IC柱，20x250mm，5微米流动相：25％MeOH+0.1％NH3/75％scCO2流速：60ml/min BPR：120巴柱温：40℃ UV max 220nm。将纯的第一个洗脱的阻转异构体级分收集，并在减压下浓缩，以提供(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的呈浅黄色固体的旋转异构体1(2.55g，33％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)-0.00(9H，s)，1.43(9H，s)，2.33-2.45(1H，m)，2.68-2.77(1H，m)，2.77-2.84(1H，m)，2.89(1H，s)，3.11(1H，t)，3.59-3.71(2H，m)，3.72-3.83(2H，m)，3.93(1H，d)，4.39(1H，dd)，6.92(1H，dd)，7.00(1H，dd)，7.23-7.33(2H，m)，9.84(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝545。＞99％ee。随后将纯的第二个洗脱的阻转异构体级分收集，并在减压下浓缩，以提供(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的呈浅黄色固体的旋转异构体2(3.15g，41％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)-0.00(9H，s)，1.43(9H，s)，2.32-2.44(1H，m)，2.68-2.76(1H，m)，2.76-2.83(1H，m)，2.88(1H，s)，3.11(1H，t)，3.66(2H，d)，3.72-3.81(2H，m)，3.91(1H，d)，4.38(1H，dd)，6.91(1H，dd)，7.00(1H，dd)，7.22-7.3(2H，m)，9.86(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝545。＞98.1％ee。
3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚
Figure BDA0003241985750002171
将(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2.55g，4.68mmol)溶解在DCM(20mL)中，并且添加TFA(10.74mL，140.34mmol)，并且将所得溶液在室温下搅拌一小时。将该粗反应混合物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用1MNH3/MeOH从柱上洗脱，并将纯级分蒸发至干燥，以提供黄色泡沫，将其与***一起研磨，以提供呈白色固体的3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(1.61g，92％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.29-2.42(2H，m)，2.6-2.72(2H，m)，2.74-2.87(3H，m)，3.36(1H，d)，3.62-3.86(3H，m)，3.89(1H，s)，4.29(1H，dd)，6.93(1H，dd)，7.00(1H，dd)，7.2-7.32(2H，m)，9.94(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝373。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮，实例76
Figure BDA0003241985750002181
在氮气下在0℃下向3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(1.515g，4.06mmol)和DIPEA(0.920mL，5.28mmol)在DCM(30mL)中的悬浮液中逐滴添加丙烯酰氯(0.355mL，4.47mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌三十分钟。然后将反应混合物在40℃蒸发，以提供黄色油状物，将其溶于冷的7N NH3/MeOH(50mL)中，并经三十分钟搅拌至室温。将反应混合物在40℃蒸发，以提供黄色残余物，将其溶于DCM中并用水萃取。将所得有机层通过使其通过相分离器柱体来干燥。蒸发提供了粗产物，将其溶于DCM中，并通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在EtOAc中0至1％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供白色泡沫，将其在高真空下于55℃干燥一天，然后溶于乙腈(10ml)和水(10ml)中，并经一个周末冷冻干燥，以提供呈白色固体的1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮(1.03g，59％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.43(1H，s)，2.73(1H，s)，2.87(1H，d)，3.09(1H，d)，3.35(1H，s)，3.72-3.82(2H，m)，3.85-3.96(3H，m)，3.98-4.1(1H，m)，4.40(1H，d)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.75-6.87(1H，m)，6.90(1H，dd)，6.98(1H，dd)，7.24(1H，t)，7.27-7.31(1H，m)，9.88(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝427。
3-氯-2-((12aR)-8-乙炔基-10-氟-1，2，3，4，12,12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-9-基)苯酚
Figure BDA0003241985750002191
将(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(200mg，0.37mmol)溶解在DCM(3mL)中，并且添加TFA(0.562mL，7.34mmol)。将所得溶液在室温搅拌两小时，并添加另一份的TFA(0.562mL，7.34mmol)，并且然后将反应混合物搅拌三十分钟。将该粗反应混合物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用1M NH3/MeOH从柱上洗脱，并将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色泡沫的3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-9-基)苯酚(177mg，＞100％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)2.83(3H，dd)，2.98(2H，t)，3.41(2H，dt)，3.71-3.82(2H，m)，3.87(2H，d)，4.13(1H，s)，4.34(1H，d)，6.92(1H，dd)，7.01(1H，dd)，7.21-7.32(2H，m)，9.97(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝373。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮，实例77
Figure BDA0003241985750002192
在氮气下在0℃下向3-氯-2-((12aR)-8-乙炔基-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-9-基)苯酚(0.170g，0.46mmol)和DIPEA(0.103mL，0.59mmol)在DCM(3mL)中的悬浮液中逐滴添加丙烯酰氯(0.040mL，0.50mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌十五分钟。将反应混合物在40℃蒸发，以提供黄色油状物，将其溶于冷的1N NH3/MeOH(10mL)中，并经三十分钟搅拌至室温。将反应混合物在40℃蒸发，以提供黄色固体，将其溶于DCM中并用水萃取。将所得有机层通过使其通过相分离器柱体来干燥。蒸发提供了呈黄色泡沫的粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世CSH C18 OBD柱，30x100mm id，5微米粒度)使用水(含有0.3％NH3水溶液)与MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。平缓梯度：20％至40％MeCN。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮(81mg，42％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.42(1H，s)，2.66-2.78(1H，m)，2.87(2H，dd)，3.09(1H，d)，3.72-3.79(2H，m)，3.86-3.93(3H，m)，4.05(1H，d)，4.39(1H，d)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.83(1H，s)，6.89(1H，d)，6.97(1H，d)，7.22(1H，t)，7.27-7.31(1H，m)，9.95(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝427。
4-溴-3-氯-2-氟苯甲醛
Figure BDA0003241985750002201
将机械搅拌的二异丙胺(6.96mL，49.66mmol)在THF(35mL)中的溶液冷却至-20℃，并逐滴添加1.6M正丁基锂在己烷(31.0mL，49.66mmol)中的溶液。另外，将溶液在0℃下搅拌20分钟。将混合物冷却至-78℃，并经20分钟逐滴添加1-溴-2-氯-3-氟苯(10g，47.75mmol)在THF(10mL)中的溶液。将所得黄色悬浮液在-78℃下搅拌一小时。经5分钟逐滴添加DMF(5.55mL，71.62mmol)，并且然后将混合物加温至-20℃。在-20℃下，将透明的黄色溶液用饱和水性氯化铵(100mL)淬灭，并用***(2x100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并将溶剂在减压下除去，以提供浅黄色固体。将残余物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至5％乙酸乙酯)进行纯化，以提供呈白色固体的4-溴-3-氯-2-氟苯甲醛(6.83g，60％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：7.51(1H，ddd)，7.59(1H，dd)，10.24(1H，d)。m/z：ES-[M-H]-235。
(3R)-4-[(4-溴-3-氯-2-氟苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002211
将4-溴-3-氯-2-氟苯甲醛(1g，4.21mmol)溶解在DCM(20mL)中，并且添加(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.37g，6.32mmol)，然后添加乙酸(0.024mL，0.42mmol)，并且将混合物在室温搅拌一小时。添加三乙酰氧基硼氢化钠(1.79g，8.42mmol)，并将该溶液在室温搅拌17小时。添加另一份三乙酰氧基硼氢化钠(0.9g)，并将溶液搅拌3小时。将混合物通过将反应混合物小心地添加至饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)中淬灭，并且然后将水层用DCM(2x100mL)萃取。将合并的有机层通过相分离器柱体，并在减压下干燥，得到呈浅黄色油状物的粗产物。将残余物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至60％乙酸乙酯)进行纯化，以提供呈无色胶状物的(3R)-4-[(4-溴-3-氯-2-氟苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.56g，85％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.39(9H，s)，2.14(1H，ddd)，2.33-2.44(1H，m)，2.55-2.65(1H，m)，2.81-3.17(2H，m)，3.36(1H，dt)，3.46(2H，d)，3.68(2H，dt)，4.02(1H，d)，4.65(1H，t)，7.33-7.51(1H，m)，7.61(1H，dd)。m/z：ES+[M+H]+437。
(12aR)-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002221
在室温下在氮气下将氢化钠(50.5mg在矿物油中的60％分散体，1.26mmol)一次性添加到在DMF(10mL)中的(3R)-4-[(4-溴-3-氯-2-氟苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(502mg，1.15mmol)中。将所得混合物在室温搅拌30分钟，然后冷却，并用饱和氯化铵水溶液(20mL)淬灭。将反应混合物用水稀释，并用乙酸乙酯(2x50mL)萃取，并将合并的有机层用水(3x100mL)洗涤。将有机层经硫酸镁干燥，过滤并蒸发，以提供白色泡沫。将残余物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％乙酸乙酯)进行纯化，以提供呈无色胶状物的(12aR)-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(381mg，80％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：1.46(9H，s)，2.42(1H，ddd)，2.77(1H，ddd)，2.81-3.03(2H，m)，3.26(1H，ddd)，3.55(1H，d)，3.6-3.76(3H，m)，3.93(1H，d)，4.24-4.38(1H，m)，6.94(1H，d)，7.29(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+417。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750002222
在室温下将N-碘琥珀酰亚胺(5.39g，23.94mmol)分批添加到(12aR)-9-溴-10-氯-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(5g，11.97mmol)在浓硫酸(40mL)中的溶液中。将所得混合物在室温搅拌2小时，然后在冰浴中冷却，并用冰冷的25％氢氧化钠水溶液(200mL)处理至pH 10。将反应混合物用水(500mL)稀释，并用乙酸乙酯(3x500mL)萃取，并将合并的有机层用水(2x500mL)洗涤。将有机层经硫酸镁干燥，过滤并蒸发，以提供呈棕色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：2.54-2.68(2H，m)，2.89-3.19(5H，m)，3.44(1H，d)，3.71(1H，dd)，3.88(1H，d)，4.22-4.39(1H，m)，7.62(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+443。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002231
在室温下将二碳酸二叔丁酯(11.76g，53.88mmol)分批添加到(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(15.93g，35.92mmol)在DCM(300mL)和三乙胺(15.02mL，107.75mmol)中的溶液中。将该溶液在室温搅拌30分钟，并且然后蒸发至干燥，以提供棕色固体。将残余物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至30％乙酸乙酯)进行纯化，以提供呈浅棕色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(12.34g，63％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：1.45(9H，s)，2.33-2.52(1H，m)，2.68-2.82(1H，m)，2.83-3.07(2H，m)，3.18-3.38(1H，m)，3.50(1H，d)，3.55-3.77(3H，m)，3.91(1H，d)，4.29(1H，dd)，7.62(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+543。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002232
将(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(7g，12.88mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(2.98g，2.58mmol)和碘化亚铜(I)(2.45g，12.88mmol)悬浮在甲苯(116mL)中。连续添加乙炔基三甲基硅烷(8.91mL，64.38mmol)和三乙胺(3.59mL，25.75mmol)，并将混合物在100℃下加热。30分钟后，将反应混合物冷却至室温，并通过短硅藻土垫过滤(用EtOAc，100mL洗涤)。将滤液浓缩，得到粗棕色残余物。添加***(50mL)，导致形成沉淀物。将固体滤出，并用***(100mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩，得到棕色残余物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％乙酸乙酯)进行纯化。将级分蒸发至干燥，以提供呈浅棕色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氯-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(6.18g，93％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：0.25(9H，s)，1.40(9H，s)，2.3-2.37(1H，m)，2.68-2.79(2H，m)，2.88(1H，s)，3.06-3.18(1H，m)，3.56(2H，t)，3.67-3.86(3H，m)，4.37(1H，dd)，7.50(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+513.2。
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002241
将(12aR)-9-溴-10-氯-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(6.18g，12.02mmol)、(2-氯-6-甲氧基苯基)硼酸(4.48g，24.05mmol)和水性2M碳酸钠(18.04mL，36.07mmol)在1，4-二噁烷(102mL)中的溶液用氮气脱气5分钟。添加RuPhos Pd G3(1.01g，1.20mmol)和二环己基(2′，6′-二异丙氧基-[1，1′-联苯基]-2-基)磷烷(0.56g，1.20mmol)，并且将混合物在90℃下加热。2小时后，剩余少量的起始材料，因此添加另一份的硼酸(2.2g)。7小时后，将反应混合物冷却至室温，并用EtOAc(100mL)和水(100mL)稀释。将有机部分收集，并且将水性物用EtOAc(100mL)洗涤。将合并的有机物经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到棕色膜状物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％乙酸乙酯)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈浅棕色泡沫的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3.40g)(作为阻转异构体的混合物)。将阻转异构体使用超临界流体色谱法(SFC)分离(柱：Phenomenex C4，30x250mm，5微米；流动相A：30％甲醇(+0.1％NH3)/流动相B：70％scCO2；流速：90mL/min；BPR：120巴；柱温：40℃)。将含有所需产物的级分蒸发至干燥，以提供(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的呈浅棕色泡沫的阻转异构体1(1.3g，2.26mmol，19％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：-0.03(9H，s)，1.47(9H，s)，2.47(1H，ddd)，2.77-3.03(3H，m)，3.2-3.33(1H，m)，3.58(1H，d)，3.67-3.88(6H，m)，4.00(1H，d)，4.28-4.39(1H，m)，6.87(1H，dd)，7.09(1H，dd)，7.27-7.32(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+575.3。接着是(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的呈浅棕色泡沫的阻转异构体2(1.62g，2.82mmol，24％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：-0.03(9H，s)，1.46(9H，s)，2.45(1H，ddd)，2.74-3(3H，m)，3.27(1H，ddd)，3.58(1H，d)，3.64-3.84(6H，m)，3.99(1H，d)，4.26-4.38(1H，m)，6.87(1H，dd)，7.09(1H，dd)，7.27-7.32(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+575.2。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮，实例78
Figure BDA0003241985750002261
将(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的阻转异构体1(1.20g，2.08mmol)在DCM(20mL)中的溶液在0℃冷却，并且在搅拌下逐滴添加三溴硼烷(20.85mL在DCM中的1M溶液，20.85mmol)。另外，使混合物达到室温并搅拌。4小时后，将混合物在冰浴中冷却，并将混合物用DCM(20mL)稀释。将混合物通过逐滴添加饱和碳酸氢钠水溶液淬灭(添加直到水性部分保持在pH 8)。将有机部分收集，并且将水性物用乙酸乙酯(2x50mL)洗涤。将合并的有机物经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈浅棕色固体的3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-乙炔基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(812mg)，将其悬浮在DCM(20mL)中，并添加三乙胺(0.569mL，4.17mmol)。添加丙烯酰氯(0.202mL，2.5mmol)，并将混合物在室温搅拌。10分钟后，将反应混合物通过添加饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)淬灭。将有机部分收集，并且将水性物用DCM(20mL)洗涤。使合并的有机物通过相分离器柱体，并在减压下浓缩。将粗残余物溶解在甲醇(5mL)和在甲醇(5mL)中的7N氨中，并在室温下搅拌。5分钟后，将反应混合物在减压下浓缩，得到浅黄色泡沫。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至90％MeOH/EtOAc(1：9))进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈浅黄色固体的1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮(193mg)。将产物再次使用超临界流体色谱法(SFC)进一步纯化(柱：Princeton Diol，30x250mm，5微米；流动相A：甲醇(+0.1％NH3)/流动相B：scCO2；梯度：经10分钟24％-40％；流速：90mL/min；BPR：120巴；柱温：40℃)。将含有所需产物的级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮(127mg，14％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)：2.37-2.44(1H，m)，2.71-2.81(1H，m)，2.81-2.94(2H，m)，3.02-3.14(1H，m)，3.67-3.81(2H，m)，3.85-3.94(3H，m)，3.97-4.11(1H，m)，4.31-4.56(1H，m)，5.62-5.81(1H，m)，6.13(1H，d)，6.75-6.86(1H，m)，6.89(1H，dd)，6.96(1H，dd)，7.22(1H，t)，7.44(1H，s)，9.76(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+443.2。
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002271
在20℃下在氮气下将2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(45.4mg，0.1mmol)和RuPhos-Pd-G3(81mg，0.1mmol)添加到在1，4-二噁烷(8mL)和H2O(2mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-10-氯-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(500mg，0.97mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(303mg，1.95mmol)和K2CO3(269mg，1.95mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至50％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(400mg，75％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)0.01(9H，s)，1.39(9H，s)，2.25-2.45(1H，m)，2.62-2.93(3H，m)，2.98-3.21(1H，m)，3.45-3.78(4H，m)，3.78-3.94(1H，m)，4.24-4.44(1H，m)，6.59-6.80(2H，m)，7.10-7.29(1H，m)，7.33-7.46(1H，m)，9.64-9.84(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝545。
2-[(12aR)-10-氯-8-乙炔基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚
Figure BDA0003241985750002281
在20℃下将TFA(1mL，12.98mmol)添加到在DCM(4mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(356mg，0.65mmol)中。将所得混合物在20℃下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的2-[(12aR)-10-氯-8-乙炔基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚(140mg，58％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.13-2.26(1H，m)，2.66-2.91(2H，m)，2.93-3.07(2H，m)，3.19-3.42(2H，m)，3.54-3.74(1H，m)，3.74-4.10(3H，m)，4.38-4.48(1H，m)，6.54-6.94(2H，m)，7.15-7.32(1H，m)，7.32-7.57(1H，m)，9.78-10.04(1H，m)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝373。
1-((12aR)-10-氯-8-乙炔基-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例79；和旋转异构体2，实例80
Figure BDA0003241985750002291
在-20℃下在氮气下将丙烯酰氯(34mg，0.38mmol)和DIPEA(0.328mL，1.88mmol)添加到在DMF(3mL)中的2-[(12aR)-10-氯-8-乙炔基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-3-氟苯酚(140mg，0.38mmol)中。将反应混合物在-20℃下搅拌1小时，然后用水淬灭，并直接通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至100％MeCN)进行纯化，从而在蒸发后提供呈白色固体的粗产物。将粗产物通过制备型HPLC柱纯化：XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5um，19*150mm；流动相A：水(0.1％甲酸)，流动相B：MeCN；流速：25mL/min；梯度：7min内50B至55B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-((12aR)-10-氯-8-乙炔基-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(13mg，8％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.27-2.45(1H，m)，2.63-2.77(1H，m)，2.77-2.94(2H，m)，2.97-3.16(1H，m)，3.62-3.81(2H，m)，3.82-3.99(3H，m)，3.99-4.15(1H，m)，4.42(1H，t)，5.63-5.78(1H，m)，6.09-6.26(1H，m)，6.77-6.94(2H，m)，6.94-7.04(1H，m)，7.21(1H，t)，7.43(1H，s)，9.82(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝427。接着是1-((12aR)-10-氯-8-乙炔基-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(16mg，10％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.31-2.44(1H，m)，2.68-2.81(1H，m)，2.80-2.98(2H，m)，3.00-3.19(1H，m)，3.68-3.81(2H，m)，3.81-3.95(3H，m)，3.95-4.13(1H，m)，4.42(1H，t)，5.64-5.74(1H，m)，6.13(1H，d)，6.76-6.92(2H，m)，6.95(1H，dd)，7.21(1H，t)，7.43(1H，s)，9.79(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝427。
2-氨基-5-氯-6-氟-3-硝基苯甲酸乙酯
Figure BDA0003241985750002301
将1-氯吡咯烷-2，5-二酮(10.53g，78.9mmol)添加到在DMF(200mL)中的2-氨基-6-氟-3-硝基苯甲酸乙酯(15g，65.74mmol)。将所得混合物在60℃下搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc(500mL)稀释，依次用水(400mL)和饱和盐水(300mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至25％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的2-氨基-5-氯-6-氟-3-硝基苯甲酸乙酯(16g，93％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.32(3H，t)，4.39(2H，q)，8.04(2H，s)，8.44(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝263。
2，3-二氨基-5-氯-6-氟苯甲酸乙酯
Figure BDA0003241985750002302
将铁(21.26g，380.78mmol)添加到在MeOH(200mL)中的2-氨基-5-氯-6-氟-3-硝基苯甲酸乙酯(20g，76.16mmol)和饱和氯化铵(50mL，76.16mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物通过硅藻土过滤。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至25％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的2，3-二氨基-5-氯-6-氟苯甲酸乙酯(14.4g，81％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.27(3H，t)，4.28(2H，q)，4.88(2H，s)，6.04(2H，s)，6.69(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝233。
6-氯-5-氟-1H-苯并咪唑-4-甲酸乙酯
Figure BDA0003241985750002311
将2，3-二氨基-5-氯-6-氟苯甲酸乙酯(14g，60.2mmol)添加到三乙氧基甲烷(210mL)中。将所得混合物在120℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，并将形成的沉淀物通过过滤收集，用石油醚(200mL)洗涤，并在真空下干燥，以提供呈白色固体的6-氯-5-氟-1H-苯并咪唑-4-甲酸乙酯(10g，69％)，1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)11.36(3H，t)，4.43(2H，q)，8.16(1H，d)，8.35(1H，d)，12.69(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝243。
5-氯-6-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酸甲酯
Figure BDA0003241985750002312
将碘甲烷(2.111mL，33.75mmol)添加到在DMF(50mL)中的6-氯-5-氟-1H-苯并咪唑-4-甲酸乙酯(7.8g，32.15mmol)和K2CO3(8.9g，64.3mmol)中。将所得混合物在60℃下搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(300mL)稀释，并依次用水(80mL x 3)和饱和盐水(50mL x 3)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至90％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的5-氯-6-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酸酯苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯(1.6g，21％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.31(3H，s)，3.98(3H，s)，8.09(1H，d)，8.35(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝243。
4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酸
Figure BDA0003241985750002321
将1-溴吡咯烷-2，5-二酮(3.5g，19.68mmol)添加到在浓硫酸(20mL)中的5-氯-6-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酸甲酯(1.5g，6.56mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌过夜。将反应混合物倒入冰水中，并用4M NaOH中和，并且直接通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.05％甲酸)中10％至50％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酸(0.45g，22％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.86(3H，s)，8.44(1H，s)，14.51(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝307。
(3R)-4-(4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-7-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002322
在20℃下在氮气下将DIPEA(0.477mL，2.73mmol)添加到在DMF(10mL)中的4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酸(420mg，1.37mmol)、(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(443mg，2.05mmol)和HATU(779mg，2.05mmol)中。将所得混合物在20℃下搅拌1小时。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释，并用饱和盐水(50mL x 3)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中5％至20％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(3R)-4-(4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-7-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(420mg，61％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.92-3.26(4H，m)，3.64-3.93(5H，m)，4.00-5.42(4H，m)，8.28-8.47(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝505。
(7aR)-4-溴-5-氯-1-甲基-13-氧代-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002331
在0℃下在氮气下将氢化钠(79mg，1.98mmol)添加到在DMF(10mL)中的(3R)-4-(4-溴-5-氯-6-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-7-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(400mg，0.79mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将该反应混合物用饱和NH4Cl(50mL)淬灭，并且用EtOAc(3x75mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗品。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中5％至20％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(7aR)-4-溴-5-氯-1-甲基-13-氧代-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-甲酸叔丁酯(350mg，91％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，d)，3.15-3.50(3H，m)，3.78(5H，s)，3.90-4.48(4H，m)，8.37(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝485。
(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-13-氧代-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002332
在氮气下将K2CO3(256mg，1.85mmol)添加到在1，4-二噁烷(5mL)和水(1mL)(5∶1比率)中的2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(28.8mg，0.06mmol)、RuPhos-Pd-G3(51.7mg，0.06mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(319mg，1.85mmol)和(7aR)-4-溴-5-氯-1-甲基-13-氧代-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-甲酸叔丁酯(300mg，0.62mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌1小时。然后直接通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中5％至50％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-13-氧代-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-甲酸叔丁酯(220mg，67％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.43(9H，s)，3.37-3.57(2H，m)，3.58-3.94(5H，m)，3.93-4.41(5H，m)，6-83-7.09(2H，m)，7.20-7.31(1H，m)，8.15(1H，s)，9.85(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝533。
(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002341
在室温下将在THF(4124μl，4.12mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液添加到(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-13-氧代-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-甲酸叔丁酯(220mg，0.41mmol)中。将所得混合物在60℃下搅拌4小时。将反应混合物用MeOH(20mL)淬灭，并将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中5％至20％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-甲酸叔丁酯(120mg，56％)。m/z：ES+[M+H]+＝519。
3-氯-2-[(7aR)-5-氯-1-甲基-1，7，7a，8，9，10，11，13-八氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-4-基]苯酚
Figure BDA0003241985750002351
将TFA(0.5mL，6.49mmol)添加到在DCM(5mL)中的(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-甲酸叔丁酯(120mg，0.22mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌4小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7MNH3/MeOH从柱上洗脱，并将纯级分蒸发至干燥得到呈黄色固体的3-氯-2-((7aR)-5-氯-1-甲基-1，7，7a，8，9，10，11，13-八氢咪唑并[4′，5′：5，6]苯并[1，2-f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-4-基)苯酚(80mg，85％)。m/z：ES+[M+H]+＝419。
1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例81；和旋转异构体2，实例82
Figure BDA0003241985750002352
将丙烯酰氯(19.43mg，0.21mmol)添加到在DMF(2mL)中的3-氯-2-[(7aR)-5-氯-1-甲基-1，7，7a，8，9，10，11，13-八氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-4-基]苯酚和DIPEA(0.112mL，0.64mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌4小时然后直接纯化，并将每种阻转异构体通过制备型HPLC柱分离：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5umn；流动相A：水(0.05％NH3H2O)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：7min内24B至38B；254/220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(25mg，25％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.19-2.45(1H，m)，2.61-2.88(2H，m)，2.88-3.10(2H，m)，3.49-3.70(1H，m)，3.75-4.35(5H，m)，4.32-4.90(3H，m)，5.26-5.96(1H，m)，6.06-6.51(1H，m)，6.63-7.04(3H，m)，7.43(1H，t)，7.98(1H，s)，9.60(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝473。接着是1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(15mg，15％)1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.49-2.51(1H，m)，2.71-2.89(2H，m)，2.89-3.14(2H，m)，3.50-3.76(1H，m)，3.79-4.17(6H，m)，4.17-4.83(2H，m)，5.59-5.84(1H，m)，6.15(1H，d)，6.85-6.91(2H，m)，6.93-7.08(1H，m)，7.24(1H，t)，8.01(1H，s)，9.57(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝473。
4-溴-5-氯-2，3-二氟苯甲酸
Figure BDA0003241985750002361
将1-氯吡咯烷-2，5-二酮(5.63g，42.19mmol)添加到在浓硫酸(30mL)中的4-溴-2，3-二氟苯甲酸(5g，21.1mmol)中。将所得混合物在80℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水中，并用EtOAc(2x100mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并将溶剂在减压下除去。将获得的粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至50％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的4-溴-5-氯-2，3-二氟苯甲酸(5g，87％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)7.09-7.17(1H，m)，11.52-11.83(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝271。
(3R)-4-(4-溴-5-氯-2，3-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002371
在0℃下将DIPEA(7.14g，55.26mmol)添加到在DMF(100mL)中的4-溴-5-氯-2，3-二氟苯甲酸(5g，18.42mmol)、HATU(14g，36.84mmol)和(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.98g，18.42mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释，依次用水(150mL x3)和饱和盐水(150mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至50％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(3R)-4-(4-溴-5-氯-2，3-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.3g，27％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.37-1.43(9H，m)，2.73-3.22(3H，m)，3.28-3.31(2H，m)，3.39-3.89(2H，m)，3.90-4.12(1H，m)，4.20-4.33(1H，m)，7.49-7.74(1H，m)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝469。
(12aR)-9-溴-8-氯-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002372
在0℃下在氮气下将氢化钠(0.358g，8.94mmol)添加到在DMF(50mL)中的(3R)-4-(4-溴-5-氯-2，3-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.1g，4.47mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用冰水淬灭，用EtOAc(100mL)萃取，依次用水(100mL)和饱和盐水(100mL x 2)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至50％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥得到呈黄色固体的(12aR)-9-溴-8-氯-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2g，99％)。m/z：ES+[M+H]+＝469。
(12aR)-9-溴-8-氯-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002381
在室温下将在THF(10mL，10mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液添加到在THF(10mL)中的(12aR)-9-溴-8-氯-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1g，2.22mmol)中。将所得混合物在60℃下搅拌45分钟。将反应混合物用饱和NH4Cl淬灭。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，依次用水(50mL)和饱和盐水(50mL×2)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至40％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-8-氯-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.9g，93％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.39(9H，s)，2.16-2.39(2H，m)，2.61-2.83(2H，m)，3.09-3.19(1H，m)，3.48-3.64(1H，m)，3.61-3.96(4H，m)，4.27-4.39(1H，m)，7.42-7.46(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝435。
(12aR)-8-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002391
在氮气下将K2CO3(0.793g，5.74mmol)和(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(1.187g，6.89mmol)添加到在1，4-二噁烷(15mL)和水(3mL)(5∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8-氯-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.00g，2.30mmol)、2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(0.107g，0.23mmol)和RuPhos-Pd-G3(0.192g，0.23mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌1小时。将冷却至室温的反应混合物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至60％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-8-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.5g，45％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.29-2.43(1H，m)，2.67-2.74(2H，m)，2.74-2.86(1H，m)，3.01-3.14(1H，m)，3.60-3.68(2H，m)，3.69-3.84(1H，m)，3.87-3.94(1H，m)，4.25-4.41(2H，m)，6.88-6.96(1H，m)，6.98-7.04(1H，m)，7.24-7.28(1H，m)，7.28-7.33(1H，m)，9.87-10.25(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝483。
3-氯-2-[(12aR)-8-氯-10-氟-1，2，3，4，12,12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚
Figure BDA0003241985750002392
将TFA(1mL，12.98mmol)添加到在DCM(5mL)中的(12aR)-8-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(500mg，1.03mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将获得的残余物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的3-氯-2-[(12aR)-8-氯-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(350mg，88％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.27-2.36(3H，m)，2.67-2.87(4H，m)，3.55-3.82(4H，m)，4.14-4.32(1H，m)，6.89-6.94(1H，m)，6.97-7.05(1H，m)，7.23-7.32(2H，m)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝383。
1-[(12aR)-8-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例83；和旋转异构体2，实例84
Figure BDA0003241985750002401
在0℃下将丙烯酰氯(0.074mL，0.91mmol)添加到在DMF(6mL)中的3-氯-2-[(12aR)-8-氯-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(350mg，0.91mmol)和DIPEA(0.479mL，2.74mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(0.5mL)淬灭，并且直接通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至60％MeOH)进行纯化。将包含产物的级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的粗产物。将粗产物纯化，并通过制备型HPLC柱分离各阻转异构体：XBridge Prep OBD C18柱，19*250mm，5um；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3+0.1％NH3.H2O)，流动相B：MeCN；流速：25mL/min；梯度：7min内47B至60B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-[(12aR)-8-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(42mg，20％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.32-2.44(1H，m)，2.64-2.94(3H，m)，3.01-3.18(1H，m)，3.67-3.81(2H，m)，3.81-3.96(2H，m)，3.97-4.10(1H，m)，4.30-4.52(1H，m)，5.66-5.75(1H，m)，6.05-6.20(1H，m)，6.75-6.88(1H，m)，6.89-6.97(1H，m)，6.99-7.07(1H，m)，7.21-7.37(2H，m)，10.07(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝437。接着是1-[(12aR)-8-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(37mg，17％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.33-2.46(1H，m)，2.65-2.80(1H，m)，2.81-2.98(2H，m)，3.03-3.18(1H，m)，3.66-3.79(2H，m)，3.81-4.11(3H，m)，4.31-4.47(1H，m)，5.64-5.77(1H，m)，6.08-6.18(1H，m)，6.73-6.91(1H，m)，6.87-7.05(2H，m)，7.22-7.36(2H，m)，10.05(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝437。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002411
将(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2g，3.79mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(0.219g，0.19mmol)和碘化亚铜(I)(0.217g，1.14mmol)悬浮在甲苯(31.4mL)中，并且添加三乙胺(1.745mL，12.52mmol)。然后连续添加在THF(4.17mL，4.17mmol)中的1-(三甲基甲硅烷基)丙炔(0.618mL，4.17mmol)和1M四丁基氟化铵，并将所得溶液在室温搅拌3小时。添加另外的在THF(4.17mL，4.17mmol)中的1-(三甲基甲硅烷基)丙炔(0.618mL，4.17mmol)和1M四丁基氟化铵溶液，并将反应混合物在室温搅拌过夜。将混合物用***稀释，通过硅藻土短垫过滤，并将滤液在减压下浓缩。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.47g，88％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.10(3H，s)，2.33(1H，ddd)，2.63-2.78(2H，m)，2.89(1H，s)，3.12(1H，ddd)，3.56(2H，t)，3.63-3.85(3H，m)，4.33(1H，dd)，7.27(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝439。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002421
将(12aR)-9-溴-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.47g，3.35mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(0.865g，5.02mmol)和水性2M碳酸钠(5.02mL，10.04mmol)在1，4-二噁烷(28.4mL)中的溶液用氮气脱气5分钟。添加RuPhos-Pd-G3(0.280g，0.33mmol)和2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(0.156g，0.33mmol)，并且将混合物在90℃下加热1小时。将反应混合物蒸发，添加水和DCM，并且将有机层用饱和盐水洗涤。将有机层通过使其通过相转移柱体进行干燥。蒸发提供了呈胶状物的粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至10％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供黄色泡沫(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.43g，88％)。m/z：ES+[M+H]+＝487。
3-氯-2-[(12aR)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚旋转异构体1和2
Figure BDA0003241985750002431
将(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.43g，2.94mmol)溶解在DCM(20mL)中，并且添加TFA(6.74mL，88.10mmol)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将该粗反应混合物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用1M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色泡沫的粗产物3-氯-2-[(12aR)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(1.014g，89％)。m/z：ES+[M+H]+＝387。将其通过制备型HPLC(沃特世CSH C18 OBD柱，30x100mm id，5微米粒度)使用水(含有按体积计1％的NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。平缓梯度：20％至40％MeCN。在254nm处进行UV检测。将乙腈通过蒸发除去，并将所得水性悬浮液用DCM萃取，并通过相分离器柱体干燥。蒸发首先提供了3-氯-2-[(12aR)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚的呈黄色泡沫的旋转异构体1(0.272g，27％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)1.79(3H，s)，2.05(1H，d)，2.23-2.38(2H，m)，2.57-2.69(2H，m)，2.69-2.82(3H，m)，3.59-3.8(3H，m)，4.24(1H，dd)，6.88(1H，dd)，6.98(1H，dd)，7.15-7.18(1H，m)，7.22(1H，t)，9.81(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝387。接着是3-氯-2-[(12aR)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚的旋转异构体2(0.271g，27％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.79(3H，s)，2.13(1H，s)，2.26-2.38(2H，m)，2.57-2.68(2H，m)，2.76(3H，ddd)，3.61(1H，d)，3.66-3.8(2H，m)，4.24(1H，dd)，6.89(1H，dd)，6.97(1H，dd)，7.16-7.18(1H，m)，7.22(1H，t)，9.82(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝387。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例85
Figure BDA0003241985750002441
在氮气下在0℃下向3-氯-2-[(12aR)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(0.272g，0.70mmol)和DIPEA(0.159mL，0.91mmol)在DCM(2mL)中的悬浮液中逐滴添加丙烯酰氯(0.061mL，0.77mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。将反应混合物蒸发(40℃水浴)，以提供黄色油状物。将该油状物溶解在冷的7N NH3/MeOH(10mL)中。将所得溶液经30分钟搅拌至室温。在40℃下蒸发，得到呈黄色胶状物的粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世CSH C18OBD柱，30x100mm id，5微米粒度)使用水(含有按体积计1％的NH4OH(在H2O中28％-30％))与MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。平缓梯度：20％至45％MeCN。在254nm处进行UV检测。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，以提供1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.188g，61％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.79(3H，s)，2.41(1H，s)，2.62-2.78(1H，m)，2.79-2.91(2H，m)，3.10(1H，s)，3.64-3.79(2H，m)，3.87(2H，d)，4.03(1H，d)，4.37(1H，d)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.93(3H，ddd)，7.21(2H，dd)，9.82(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝441。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体2，实例86
Figure BDA0003241985750002451
在氮气下在0℃下向3-氯-2-[(12aR)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(0.271g，0.70mmol)和DIPEA(0.159mL，0.91mmol)在DCM(2mL)中的悬浮液中逐滴添加丙烯酰氯(0.061mL，0.77mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。将反应混合物蒸发(40℃水浴)，以提供黄色油状物。将该油状物溶解在冷的7N NH3/MeOH(10mL)中。将所得溶液经30分钟搅拌至室温。在40℃下蒸发，得到呈黄色胶状物的粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世CSH C18OBD柱，30x100mm id，5微米粒度)使用水(含有按体积计1％的NH4OH(在H2O中28％-30％))与MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。平缓梯度：20％至45％MeCN。在254nm处进行UV检测。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，以提供1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.154g，50％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.79(3H，s)，2.42(1H，s)，2.63-2.77(1H，m)，2.87(2H，t)，3.09(1H，s)，3.73(2H，dd)，3.89(2H，d)，4.01(1H，d)，4.37(1H，d)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.74-7.01(3H，m)，7.12-7.26(2H，m)，9.86(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝441。
(3R)-4-(5-溴-3-氟吡啶-2-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002461
在室温下将HATU(20.73g，54.55mmol)添加到5-溴-3-氟吡啶-2-甲酸(10g，45.46mmol)、(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10.81g，50mmol)和DIPEA(18.06mL，104.55mmol)在THF(200mL)中的溶液中。将反应混合物搅拌过夜，用EtOAc(150mL)和水(150mL)稀释，然后用EtOAc(100mL)萃取。将合并的有机物用水(150mL)和盐水(150mL)洗涤。然后将有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并在压力下减少以提供呈棕色油状物的粗产物。然后将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0％至100％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈浅黄色胶状物的(3R)-4-(5-溴-3-氟吡啶-2-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(20.8g，＞100％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，d)，2.74-3.27(4H，m)，3.32-3.81(3H，m)，3.91(1H，d)，4.22-4.55(1H，m)，4.66-5.03(1H，m)，8.31-8.41(1H，m)，8.59-8.67(1H，m)。m/z：ES+[M-tBu]+364。
(6aR)-3-溴-12-氧代-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002462
在氮气下将(3R)-4-(5-溴-3-氟吡啶-2-羰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.1g，0.24mmol)溶解在乙腈(2mL)中，并且一次性添加碳酸铯(0.078g，0.24mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时，然后在80℃加热过夜。将反应混合物用MeCN(10mL)稀释，过滤，并在压力下减少以提供呈棕色胶状物的(6aR)-3-溴-12-氧代-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.103g，＞100％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.43(1H，s)，3.54-3.59(3H，m)，3.72-3.83(1H，m)，3.83-3.93(1H，m)，3.98-4.04(1H，m)，4.21-4.35(2H，m)，7.94(1H，d)，8.61(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝398。
(6aR)-3-溴-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002471
将(6aR)-3-溴-12-氧代-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(8.7g，21.85mmol)溶解在THF(200mL)中，并且在室温下添加在THF(65.5mL，65.54mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液，并且将混合物在75℃下搅拌10分钟。将混合物在冰浴中冷却，并逐滴添加饱和氯化铵水溶液(150mL)，直到泡腾停止。将混合物用EtOAc(2x200mL)萃取，并将合并的有机物用盐水(200mL)洗涤。将有机层经无水MgSO4干燥，过滤并在压力下浓缩，以提供呈黄色泡沫的粗产物。将粗产物溶解在DCM中并过滤。然后将该黄色滤液通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0％至60％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈无色胶状物的(6aR)-3-溴-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(4.35g，52％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.3-2.41(1H，m)，2.62-2.71(1H，m)，2.74-2.92(2H，m)，3.04(1H，t)，3.59-3.71(2H，m)，3.72-3.83(2H，m)，4.00(1H，d)，4.31(1H，dd)，7.68(1H，d)，8.30(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝384。
(6aR)-3-溴-4-氯-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002481
在氮气下将(6aR)-3-溴-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(7.94g，20.65mmol)在THF(200mL)中的溶液冷却至-50℃，并且逐滴添加在THF/甲苯(31mL，30.98mmol)中的1M 2，2，6，6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂复合物溶液。将该溶液在-40℃下搅拌0.5小时。添加另外的在THF/甲苯(10mL，10mmol)中的1M 2，2，6，6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂复合物溶液，并将该溶液在-40℃搅拌0.5小时。添加全氯乙烷(7.33g，30.98mmol)，并将反应混合物在-40℃下搅拌0.5小时。将反应混合物通过添加饱和氯化铵水溶液(10mL)在0℃下淬灭，用水(20mL)稀释，并用EtOAc(2x20mL)萃取。将合并的有机物用盐水(20mL)洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并在压力下浓缩，以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色干燥固体的(6aR)-3-溴-4-氯-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(6.8g，79％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，2.35-2.44(1H，m)，2.72-2.83(2H，m)，2.87(1H，s)，3.02-3.13(1H，m)，3.63(2H，dd)，3.79(1H，d)，3.88(1H，dd)，4.08(1H，d)，4.43(1H，dd)，8.45(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝418。
(6aR)-3-溴-4-氯-2-碘-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002482
在氮气下将(6aR)-3-溴-4-氯-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.562g，1.34mmol)在THF(50mL)中的溶液冷却至-50℃，并且逐滴添加在THF/甲苯(4.03mL，4.03mmol)中的1M 2，2，6，6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂复合物溶液。将该溶液在-40℃下搅拌0.5小时。然后添加二碘(0.511g，2.01mmol)，并将反应混合物在-40℃搅拌至室温持续2小时。在-20℃下添加另外的在THF/甲苯中的1M 2，2，6，6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂复合物溶液(4.03mL，4.03mmol)，并将反应混合物搅拌至室温持续1小时。将反应混合物通过添加饱和氯化铵水溶液在0℃下淬灭，并用EtOAc萃取，用饱和盐水洗涤并蒸发。将获得的黄色残余物溶解在DCM中，并通过使其通过相分离器柱体进行干燥。蒸发提供了呈黄色胶状物的粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色胶状物的(6aR)-3-溴-4-氯-2-碘-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.66g，90％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.46(9H，s)，2.51(1H，ddd)，2.72-2.92(2H，m)，2.99(1H，s)，3.15-3.31(1H，m)，3.65-3.75(2H，m)，3.78-3.87(1H，m)，3.90(1H，d)，4.02(1H，d)，4.32(1H，dt)。m/z：ES+[M+H]+＝544。
(6aR)-3-溴-4-氯-2-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002491
在室温下在氮气下将(6aR)-3-溴-4-氯-2-碘-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.645g，1.18mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(0.274g，0.24mmol)和碘化亚铜(I)(0.226g，1.18mmol)悬浮在甲苯(11mL)中。添加乙炔基三甲基硅烷(0.819mL，5.92mmol)和三乙胺(0.33mL，2.37mmol)。将所得混合物在100℃下加热10分钟。将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土层过滤，并用***洗涤。蒸发提供了呈油状物的粗产物。将粗产物溶解在DCM中，并且通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化，以提供呈黄色胶状物的(6aR)-3-溴-4-氯-2-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.375g，61％)。m/z：ES+[M+H]+＝544。
(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002501
将(6aR)-3-溴-4-氯-2-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.369g，0.72mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(0.247g，1.43mmol)、2M水性碳酸钠(1.075mL，2.15mmol)和2-甲基-THF(10mL)的溶液用氮气脱气15分钟。添加RuPhos-Pd-G3(0.060g，0.07mmol)和2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(0.033g，0.07mmol)，并且然后将反应混合物在90℃加热1.5小时。将反应混合物在静置过夜下冷却至室温，添加水并用EtOAc萃取。将有机层用饱和盐水洗涤，并通过使其通过相分离器柱体进行干燥。蒸发提供了呈黄色胶状物的粗产物。然后将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0％至100％EtOAc)进行纯化。将纯级分合并并蒸发，以提供呈黄色泡沫的(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.16g，39％)。m/z：ES+[M+H]+＝562。
3-氯-2-{(6aR)-4-氯-2-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基}苯酚
Figure BDA0003241985750002511
将(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.156g，0.28mmol)溶解在DCM(5mL)中，并且添加TFA(2.12mL，27.73mmol)。将该溶液在室温下搅拌1小时，然后在60℃下加热30分钟。然后将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用1M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色泡沫的3-氯-2-{(6aR)-4-氯-2-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基}苯酚(0.153g，＞100％)。m/z：ES+[M+H]+＝462。
3-氯-2-[(6aR)-4-氯-2-乙炔基-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]苯酚
Figure BDA0003241985750002512
将3-氯-2-{(6aR)-4-氯-2-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基}苯酚(0.155g，0.34mmol)和碳酸钾(0.139g，1.01mmol)在MeOH(5mL)中的悬浮液在室温下搅拌2小时。将水添加到反应混合物中，并将所得溶液通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用1MNH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色泡沫的3-氯-2-[(6aR)-4-氯-2-乙炔基-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]苯酚(0.164g，＞100％)。m/z：ES+[M+H]+＝390。
1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-乙炔基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例87；和旋转异构体2，实例88
Figure BDA0003241985750002521
在氮气下在0℃下向3-氯-2-[(6aR)-4-氯-2-乙炔基-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]苯酚(0.164g，0.42mmol)和DIPEA(0.095mL，0.55mmol)在DCM(2mL)和DMF(0.5mL)中的悬浮液中逐滴添加丙烯酰氯(0.037mL，0.46mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。将反应混合物蒸发(40℃水浴)，以提供黄色油状物。将此油状物溶解在冷的7N NH3/MeOH(10mL)中，并将所得溶液经30分钟搅拌至室温。在40℃下蒸发，得到在黄色DMF溶液中的粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世CSHC18 OBD柱，30x100mm id，5微米粒度)使用水(含有按体积计1％的NH4OH(在H2O中28％-30％))和MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。平缓梯度：10％至30％MeCN。在254nm处进行UV检测。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，首先提供了1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-乙炔基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.018g，10％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.75(1H，td)，2.91(2H，dd)，3.02(1H，s)，3.24(1H，d)，3.58(1H，s)，3.79-3.98(3H，m)，4.17(2H，d)，4.52(1H，s)，5.74(1H，d)，6.14(1H，d)，6.71-6.92(2H，m)，6.96(1H，d)，7.24(1H，t)，10.01(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝444。接着是1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-乙炔基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.047g，25％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.76(1H，s)，2.94(2H，d)，3.16(1H，s)，3.30(1H，s)，3.75-4.05(4H，m)，4.1-4.27(2H，m)，4.55(1H，s)，5.72(1H，s)，6.14(1H，d)，6.84(1H，s)，6.92(1H，d)，6.96-7.04(1H，m)，7.27(1H，t)，9.98(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝444。
(3R)-4-(4-溴-2-氟-3-甲基苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002531
在0℃下将DIPEA(33.7mL，193.10mmol)添加到在DMF(200mL)中的4-溴-2-氟-3-甲基苯甲酸(15g，64.37mmol)、(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(13.92g，64.37mmol)和HATU(36.70g，96.55mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(500mL)稀释，依次用0.5M柠檬酸(500mL x 3)、水(500mL x 3)和饱和盐水(500mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过从EtOAc/MeCN(200mL)(100∶1比率)中结晶而纯化，以提供呈黄色固体的(3R)-4-(4-溴-2-氟-3-甲基苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(26.7g，96％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.38(9H，s)，2.28(3H，d)，2.64-3.01(3H，m)，3.04-3.24(1H，m)，3.44-3.24(1H，m)，3.82-3.88(1H，m)，3.92-4.12(1H，m)，4.18-4.56(1H，m)，4.76-4.98(1H，m)，7.13-7.19(1H，m)，7.51-7.61(1H，m)。m/z：ES+[M+Na]+＝453。
(12aR)-9-溴-10-甲基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002532
在0℃下将氢化钠(5.56g，139.11mmol)添加到在DMF(200mL)中的(3R)-4-(4-溴-2-氟-3-甲基苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(20g，46.37mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入冰水中。将形成的沉淀物通过过滤收集，用水洗涤并在真空下干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-甲基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(16g，84％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.29(3H，s)，3.38-3.50(2H，m)，3.53(2H，d)，3.62-3.77(1H，m)，3.77-3.94(2H，m)，4.23(2H，d)，7.37(1H，d)，7.46(1H，d)。m/z：ES+[M-Boc]+＝355。
(12aR)-9-溴-8-碘-10-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮
Figure BDA0003241985750002541
在0℃下将1-碘吡咯烷-2，5-二酮(16.41g，72.94mmol)添加到在浓硫酸(50mL)中的(12aR)-9-溴-10-甲基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(10g，24.31mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入冰水中，并用2M NaOH碱化。将混合物用DCM(500mL)稀释，并依次用2M Na2S2O3(500mLx 2)、饱和盐水(500mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈红色固体的产物(12aR)-9-溴-8-碘-10-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(6.7g，63％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.41(3H，s)，2.64-2.83(2H，m)，2.84-3.01(2H，m)，3.43-3.68(2H，m)，3.72-3.84(2H，m)，4.13(1H，dd)，4.59(1H，t)，8.02(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝437。
(12aR)-9-溴-8-碘-10-甲基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002551
将二碳酸二叔丁酯(2.87mL，12.35mmol)添加到冷却至0℃的在DCM(50mL)中的(12aR)-9-溴-8-碘-10-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(4.5g，10.3mmol)和三乙胺(4.31mL，30.89mmol)中。将所得溶液在室温搅拌2小时。将反应混合物用DCM(50mL)稀释，并用水(100mL x 3)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至40％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-8-碘-10-甲基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(5.2g，94％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，2.42(3H，s)，3.41-3.60(4H，m)，3.66-3.79(1H，m)，3.80-3.97(2H，m)，4.25(2H，d)，7.96(1H，s)。m/z：ES+[M-tBu]+＝481。
(12aR)-9-溴-8-碘-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002552
在氮气下在室温下将(12aR)-9-溴-8-碘-10-甲基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3g，5.58mmol)添加到在THF(30mL，30mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液中。将所得溶液在60℃搅拌2小时。将反应混合物用MeOH(30mL)淬灭。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至50％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈浅黄色固体的(12aR)-9-溴-8-碘-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2.9g，99％)。1H NMR(300MHz，CDCl3，30℃)1.41(9H，s)，2.40-2.43(1H，m)，2.43(3H，s)，2.69-2.96(3H，m)，3.17-3.30(1H，m)，3.43(1H，d)，3.52-3.76(3H，m)，3.84(1H，d)，4.21(1H，dd)，7.56(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝523。
(12aR)-9-溴-10-甲基-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002561
在密封管中在氮气下将三乙胺(1.598mL，11.47mmol)添加到在甲苯(20mL)中的(12aR)-9-溴-8-碘-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.5g，2.87mmol)、乙炔基三甲基硅烷(1.126g，11.47mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(0.331g，0.29mmol)和碘化亚铜(I)(0.546g，2.87mmol)中。将所得溶液在100℃下搅拌6小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至40％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色泡沫的(12aR)-9-溴-10-甲基-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.1g，78％)。1H NMR(300MHz，CDCl3，30℃)0.27(9H，s)，1.46(9H，s)，2.35(3H，s)，2.38-2.47(1H，m)，2.70-2.99(3H，m)，3.21-3.36(1H，m)，3.51(1H，d)，3.57-3.76(3H，m)，3.89(1H，d)，4.24(1H，d)，7.22(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝493。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-甲基-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002571
在氮气下将碳酸钾(252mg，1.82mmol)在水(4mL)中的溶液添加到(12aR)-9-溴-10-甲基-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(900mg，1.82mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(943mg，5.47mmol)、RuPhos-Pd-G3(139mg，0.18mmol)和2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(85mg，0.18mmol)在1，4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在100℃下搅拌2小时。将反应混合物直接通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水中0至80％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色泡沫的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-甲基-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.57g，58％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)-0.06(9H，s)，1.40(9H，s)，1.85(3H，s)，2.22-2.41(1H，m)，2.58-2.87(4H，m)，2.97-3.12(1H，m)，3.50-3.71(3H，m)，3.71-3.84(1H，m)，4.29(1H，d)，6.81-6.92(1H，m)，6.92-7.01(1H，m)，7.18(1H，t)，7.24(1H，s)，9.60(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝541。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002572
将Cs2CO3(2258mg，6.93mmol)添加到在MeOH(20mL)中的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-甲基-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(750mg，1.39mmol)中。将所得溶液在25℃下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干燥并溶解在EtOAc(50mL)中，并依次用水(50mL x 3)和饱和盐水(50mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.6g，92％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，1.81(3H，s)，2.31(1H，t)，2.56-2.88(3H，m)，2.90-3.12(1H，m)，3.45-3.59(1H，m)，3.59-3.69(3H，m)，3.72-3.81(1H，m)，4.29(1H，d)，5.76(1H，s)，6.83-6.91(1H，m)，6.93-7.00(1H，m)，7.14-7.26(1H，m)，7.26-7.35(1H，m)，9.60-9.76(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝469。
3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-10-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚
Figure BDA0003241985750002581
将(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(550mg，1.17mmol)添加到在DCM(5mL)中的TFA(1mL，12.98mmol)中。将所得溶液在25℃下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-10-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(0.32g，74％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.82(3H，d)，2.20-2.33(2H，m)，2.55-2.70(1H，m)，2.70-2.89(4H，m)，3.44-3.61(2H，m)，3.62-3.73(2H，m)，4.13-4.28(1H，m)，6.81-6.92(1H，m)，6.92-7.04(1H，m)，7.14-7.30(2H，m)有两个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝369。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例89；和旋转异构体2，实例90
Figure BDA0003241985750002591
将丙烯酰氯(66.2mg，0.73mmol)添加到在DMF(6mL)中的DIPEA(142μl，0.81mmol)和3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-10-甲基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(300mg，0.81mmol)中。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将该反应混合物用水(50mL)淬灭，并且用EtOAc(3x50mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供呈棕色胶状物的粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(XBridge Shield RP18 OBD柱，5μ二氧化硅，19mm直径，150mm长度)使用水(含有10mmol/L NH4HCO3+0.1％NH3.H2O)和MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.055g，16％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.82(3H，s)，2.23-2.44(1H，m)，2.59-2.75(1H，m)，2.75-2.92(2H，m)，2.95-3.15(1H，m)，3.47-3.60(1H，m)，3.61-3.82(3H，m)，3.82-3.96(1H，m)，3.95-4.19(1H，m)，4.34(1H，t)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.71-6.92(2H，m)，6.96(1H，d)，7.18(1H，t)，7.28(1H，s)，9.68(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝423。接着是1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.058g，17％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.82(3H，s)，2.25-2.44(1H，m)，2.62-2.76(1H，m)，2.76-2.93(2H，m)，2.94-3.15(1H，m)，3.50-3.70(2H，m)，3.71(1H，s)，3.75-3.95(2H，m)，3.95-4.15(1H，m)，4.34(1H，t)，5.69(1H，d)，6.13(1H，d)，6.72-6.92(2H，m)，6.95(1H，d)，7.18(1H，t)，7.29(1H，s)，9.66(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝423。
(3aR)-1-氧代四氢-1H-1λ4-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002601
在0℃下将亚硫酰氯(14.17mL，194.19mmol)逐滴添加到在DCM(180mL)中的咪唑(43.9g，644.99mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物冷却至-78℃。逐滴添加(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(15g，69.35mmol)在DCM(180mL)中的溶液。将所得混合物加温至室温并搅拌过夜。将该反应混合物用饱和NH4Cl(200mL)淬灭，并且用DCM(2x200mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈黄色固体的(3aR)-1-氧代四氢-1H-1λ4-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯(11.4g，63％)。呈黄色固体的(3R)-4-(4-溴-5-氯-2，3-二氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸酯(2.3g，27％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.46(9H，s)，2.67-2.70(1H，m)，2.81-2.90(1H，m)，2.95-3.01(1H，m)，3.23-3.40(1H，m)，3.59-3.62(1H，m)，3.87-3.92(1H，m)，4.19-4.23(1H，m)，4.43-4.62(1H，m)，4.76-4.90(1H，m)。m/z：[M-tBu]+＝207。
(3aR)-1，1-二氧代四氢-1H-1λ6-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002602
在0℃下将高碘酸钠(12.08g，56.5mmol)在水(100mL)中的溶液逐滴添加到(3aR)-1-氧代四氢-1H-1λ4-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯(11.4g，43.46mmol)在乙腈(300mL)和乙酸乙酯(50mL)中的搅拌溶液中，然后添加氯化钌(III)(0.018g，0.09mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将该反应混合物用饱和水性NH4Cl(200mL)淬灭，并且用DCM(2x200mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈浅黄色固体的(3aR)-1，1-二氧代四氢-1H-1λ6-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯叔丁酯(9.5g，79％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.48(9H，s)，2.96-3.05(2H，m)，3.13-3.20(1H，m)，3.45-3.60(1H，m)，3.64-3.72(1H，m)，4.08-4.12(1H，m)，4.24-4.31(2H，m)，4.64-4.70(1H，m)。
3-氯-5，6-二氟-2-甲氧基苯甲酸
Figure BDA0003241985750002611
在室温下将1-氯吡咯烷-2，5-二酮(51.50g，385.37mmol)添加到在DMF(300mL)中的2，3-二氟-6-甲氧基苯甲酸(29g，154.15mmol)中。将所得混合物在60℃下搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc(500mL)稀释，并依次用饱和盐水(400mL x 6)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至50％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的3-氯-5，6-二氟-2-甲氧基苯甲酸(20g，58％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.50-4.04(3H，s)，7.13-8.24(1H，d)有一个可交换的质子没有发现。
3-氯-5，6-二氟-4-碘-2-甲氧基苯甲酸
Figure BDA0003241985750002612
在-40℃下在氮气下将在THF/甲苯(162mL，161.75mmol)中的1M 2，2，6，6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂复合物溶液添加到在THF(120mL)中的3-氯-5，6-二氟-2-甲氧基苯甲酸(9g，40.44mmol)中。将所得混合物在-50℃下搅拌30分钟。然后在-40℃下在氮气下将在THF(20mL)中的二碘(41.1g，161.75mmol)添加到混合物中。将所得溶液在-50℃下搅拌2小时。将反应混合物用饱和NH4Cl(100mL)淬灭，并用DCM(200mL x 5)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供呈棕色固体的粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中5％至60％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥得到呈白色固体的3-氯-5，6-二氟-4-碘-2-甲氧基苯甲酸(7g，50％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.82(3H，s)有一个可交换的质子没有发现。
3-氯-5，6-二氟-2-羟基-4-碘苯甲酸
Figure BDA0003241985750002621
在0℃下将在DCM(20.09mL，20.09mmol)中的1M三溴化硼溶液添加到在DCM(10mL)中的3-氯-5，6-二氟-4-碘-2-甲氧基苯甲酸(7g，20.09mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用饱和水性NH4Cl(20mL)淬灭，并用DCM(200mL x 2)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈棕色固体的3-氯-5，6-二氟-2-羟基-4-碘苯甲酸(5g，74％)，无需进一步纯化即可使用。
3-氯-5，6-二氟-2-羟基-4-碘苯甲酸甲酯
Figure BDA0003241985750002622
将浓硫酸(0.797mL，14.95mmol)添加到在MeOH(150mL)中的3-氯-5，6-二氟-2-羟基-4-碘苯甲酸(5g，14.95mmol)。将所得混合物在100℃搅拌16小时。将溶剂在减压下去除。将反应混合物倒入冰水中并用EtOAc(200mL x 3)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供呈棕色固体的粗产物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至10％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以提供呈白色固体的3-氯-5，6-二氟-2-羟基-4-碘苯甲酸甲酯(3.6g，69％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.90(3H，s)，11.06(1H，s)。
2-{[(2R)-4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-2-基]甲氧基}-3-氯-5，6-二氟-4-碘苯甲酸
Figure BDA0003241985750002631
在0℃下将氢化钠(0.826g，20.66mmol)逐滴添加到在DMF(30mL)中的3-氯-5，6-二氟-2-羟基-4-碘苯甲酸甲酯(2.4g，6.89mmol)和(3aR)-1，1-二氧代四氢-1H-1λ6-[1，2，3]氧杂噻唑并[3，4-a]吡嗪-5(3H)-甲酸叔丁酯(5.75g，20.66mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌40分钟。将反应混合物倒入冰水中并用EtOAc(150mL x 3)萃取。将有机层合并，用饱和盐水(100mL)洗涤，然后经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈黄色固体的粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中5％至40％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以提供呈白色固体的2-{[(2R)-4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-2-基]甲氧基}-3-氯-5，6-二氟-4-碘苯甲酸(1.5g，41％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.37(9H，s)，2.14(1H，d)，2.73-2.76(2H，m)，2.89-2.96(2H，m)，3.08-3.20(2H，m)，3.64-3.78(1H，m)，3.85-4.26(2H，m)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M-tBu]+＝477。
(12aR)-10-氯-7，8-二氟-9-碘-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002641
在氮气下将DIPEA(0.738mL，4.22mmol)添加到在DMF(4mL)中的(2-{[(2R)-4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-2-基]甲氧基}-3-氯-5，6-二氟-4-碘苯甲酸(750mg，1.41mmol)和HATU(1071mg，2.82mmol)中。将所得混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物用水稀释，并用EtOAc(3x150mL)萃取。将有机层合并，并用饱和盐水(5x100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈棕色固体的粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至20％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以提供呈黄色固体的(12aR)-10-氯-7，8-二氟-9-碘-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(660mg，91％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.46-3.50(1H，m)，3.60-3.74(3H，m)，3.74-4.16(3H，m)，4.22-4.30(2H，m)。m/z：ES+[M-tBu]+＝459。
(12aR)-10-氯-7，8-二氟-9-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002642
在室温下将在THF(6mL，6mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液添加到在THF(6mL)中的(12aR)-10-氯-7，8-二氟-9-碘-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(650mg，1.26mmol)中。将所得混合物在60℃下搅拌1小时。将反应混合物用饱和NH4Cl(10mL)淬灭。将反应混合物用水(70mL)稀释，并用EtOAc(3x200mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供呈白色固体的粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中5％至80％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以提供呈白色固体的(12aR)-10-氯-7，8-二氟-9-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(500mg，79％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.38(9H，s)，2.35-2.42(1H，m)，2.78-2.88(3H，m)，3.10-3.25(1H，m)，3.56-3.60(2H，m)，3.70-3.80(2H，m)，3.93-3.96(1H，m)，4.35-4.40(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝501。
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，8-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002651
将(12aR)-10-氯-7，8-二氟-9-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(450mg，0.9mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(465mg，2.7mmol)RuPhos-Pd-G3(75mg，0.09mmol)、Na2CO3(191mg，1.80mmol)和2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(84mg，0.18mmol)溶解在1，4-二噁烷(16mL)和H2O(4mL)(4∶1比率)中，然后密封到微波管中。在微波反应器中将反应加热至120℃持续30分钟，并冷却至室温。将溶剂在减压下去除。将所获得的粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中5％至50％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以提供呈白色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，8-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(374mg，83％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.42(9H，s)，2.87-3.06(2H，m)，3.14-3.20(2H，m)，3.66-4.04(4H，m)，4.28-4.31(2H，m)，4.58-4.63(1H，m)，6.94(1H，d)，7.05(1H，d)，7.32(1H，t)，10.28(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝501。
3-氯-2-[(12aR)-10-氯-7，8-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚
Figure BDA0003241985750002661
在20℃下将TFA(1mL，12.98mmol)添加到在DCM(5mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，8-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(364mg，0.73mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的3-氯-2-[(12aR)-10-氯-7，8-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(290mg，100％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.75-2.80(1H，m)，2.86-2.90(1H，m)，2.97-3.17(3H，m)，3.27-3.41(3H，m)，3.87-4.09(3H，m)，4.47(1H，d)，6.99(2H，d)，7.31(1H，d)，10.24(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝401。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，8-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例91；和旋转异构体2，实例92
Figure BDA0003241985750002662
在-20℃下在氮气下将DIPEA(609μl，3.49mmol)和丙烯酰氯(63.2mg，0.70mmol)添加到在DMF(5mL)中的3-氯-2-[(12aR)-10-氯-7，8-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(280mg，0.70mmol)中。将所得混合物在-20℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(1mL)淬灭，并且直接通过制备型HPLC(柱：Xselect CSH OBD柱30*150mm 5um；流动相A：水(0.1％甲酸)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：9min内35B至45B；254；220nm)并且MeCN作为洗脱剂进行纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，8-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.041g，12％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.80-2.82(1H，m)，2.91-2.95(2H，m)，3.23-3.28(2H，m)，3.74-3.98(3H，m)，4.02-4.05(2H，m)，4.45-4.50(1H，m)，5.70-5.72(1H，m)，6.18-7.21(1H，m)，6.65-6.93(1H，m)，6.99(2H，d)，7.30(1H，t)，10.45(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝455。接着是1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，8-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.074g，23％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.80-2.82(1H，m)，2.91-2.93(2H，m)，3.23-3.26(2H，m)，3.74-3.98(3H，m)，4.02-4.23(2H，m)，4.45-4.50(1H，m)，5.70-5.73(1H，m)，6.13-6.17(1H，m)，6.65-6.93(1H，m)，6.99(2H，d)，7.30(1H，t)，10.45(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝455。
4-溴-2，3-二氟-5-碘苯甲酸
Figure BDA0003241985750002671
在0℃下将1-碘吡咯烷-2，5-二酮(57.0g，253.16mmol)添加到4-溴-2，3-二氟苯甲酸(40g，168.78mmol)和浓硫酸(160mL)中。将所得混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物倒在冰水(500mL)上，并用EtOAc(2x400mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈白色固体的4-溴-2，3-二氟-5-碘苯甲酸(60g，98％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)8.04-8.19(1H，m)，11.06(1H，s)。m/z：ES-[M-H]-＝361。
(3R)-4-(4-溴-2，3-二氟-5-碘苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002681
在0℃下将DIPEA(72.2mL，413.34mmol)逐滴添加到在DMF(500mL)中的4-溴-2，3-二氟-5-碘苯甲酸(50g，137.78mmol)、(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(29.8g，137.78mmol)和HATU(79.0g，206.67mmol)中。将所得混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(1000mL)稀释，依次用水(1000mL)和饱和盐水(750mL x 3)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈黄色固体的(3R)-4-(4-溴-2，3-二氟-5-碘苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(70g，91％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.38(9H，s)，3.05-3.24(2H，m)，3.40-3.68(3H，m)，3.69-3.90(1H，m)，4.17-4.55(2H，m)，4.77-5.00(1H，m)，8.11-8.28(1H，m)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝561。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002682
在0℃下将氢化钠(8.55g，213.84mmol)添加到在DMF(600mL)中的(3R)-4-(4-溴-2，3-二氟-5-碘苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(60g，106.92mmol)中。将所得混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物用冰水淬灭。将混合物用EtOAc(1000mL)稀释，依次用水(1000mL)和饱和盐水(750mL x 2)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至25％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(42g，73％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.38-3.55(3H，m)，3.61-3.81(2H，m)，3.84-3.97(1H，m)，3.98-4.09(1H，m)，4.31-4.42(2H，m)，8.00(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝541。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002691
将碘化亚铜(I)(0.352g，1.85mmol)添加到在MeOH(160mL)中的(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(10g，18.48mmol)、N1，N2-双(4-羟基-2，6-二甲基苯基)乙二酰胺(0.607g，1.85mmol)和Cs2CO3(18.06g，55.44mmol)中。将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释，依次用水(150mL)和饱和盐水(150mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至40％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的(R)-9-溴-10-氟-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3.9g，47％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.42-3.67(5H，m)，3.83-3.86(1H，m)，3.89(3H，s)，3.92-4.01(1H，m)，4.17-4.30(2H，m)，7.11(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝445。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-羟基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮
Figure BDA0003241985750002701
在0℃下将在DCM(62.9mL，62.88mmol)中的1M三溴化硼溶液添加到在DCM(20mL)中的(12aR)-9-溴-10-氟-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(3.5g，7.86mmol)中。将所得混合物在20℃下搅拌2小时。将反应混合物用MeOH(25mL)淬灭。将溶剂在减压下除去，以提供呈黄色固体的((12aR)-9-溴-10-氟-8-羟基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(2.5g，96％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)3.21-3.25(3H，m)，3.33-3.50(1H，m)，3.73-3.84(1H，m)，3.84-3.95(1H，m)，4.01-4.12(1H，m)，4.13-4.27(2H，m)，7.28(1H，s)，9.11-9.19(1H，s)，9.19-9.30(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝331。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-羟基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002702
在0℃下在氮气下将二碳酸二叔丁酯(1.648g，7.55mmol)添加到在DCM(75mL)中的(12aR)-9-溴-10-氟-8-羟基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(2.5g，7.55mmol)和三乙胺(6.31mL，45.30mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用DCM(100mL)稀释，依次用5％水性柠檬酸(200mL x 2)和饱和盐水(200mL x 2)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，并将溶剂在减压下除去。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至30％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-8-羟基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.7g，52％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，3.30-3.31(2H，m)，3.43-3.52(2H，m)，3.52-3.60(1H，m)，3.68-3.90(1H，m)，3.92-4.01(1H，m)，4.12-4.25(2H，m)，7.02(1H，s)，10.76-10.81(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝431。
(12aR)-9-溴-8-(二氟甲氧基)-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002711
在0℃下将三氟甲磺酸二氟甲酯(0.791mL，6.26mmol)添加到在CH3CN(8mL)中的(12aR)-9-溴-10-氟-8-羟基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(900mg，2.09mmol)和6M KOH(8mL，48.00mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用EtOAc(80mL)稀释，依次用水(50mL x 3)、和饱和盐水(25mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈棕色固体的(12aR)-9-溴-8-(二氟甲氧基)-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(950mg，95％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.50(9H，s)，3.53-3.70(3H，m)，3.71-3.78(1H，m)，3.80-3.88(1H，m)，3.90-4.02(1H，m)，4.10-4.15(1H，m)，4.28-4.35(1H，m)，4.35-4.49(1H，m)，6.36-6.80(1H，m)，7.57(1H，s)。m/z：ES+[M-tBu]+＝425。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002721
在25℃下在氮气下将2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(87mg，0.19mmol)和RuPhos-Pd-G3(156mg，0.19mmol)添加到在1，4-二噁烷(20mL)和水(5mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8-(二氟甲氧基)-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(900mg，1.87mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(645mg，3.74mmol)和K2CO3(517mg，3.74mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌8小时。将反应混合物直接通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至100％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(380mg，38％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.42(9H，s)，3.40-3.61(3H，m)，3.69-3.83(2H，m)，3.94-4.13(2H，m)，4.32-4.44(2H，m)，6.90-6.95(1H，m)，7.00-7.05(1H，m)，7.11-7.32(2H，m)，7.42(1H，s)，10.20(1H，s)。m/z：ES+[M-tBu]+＝473。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002722
在25℃下在氮气下将在THF(4mL，4mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液添加到在THF(4mL)中的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(350mg，0.66mmol)中。将所得混合物在60℃下搅拌1小时。将该反应混合物用饱和NH4Cl(10mL)淬灭，并且用EtOAc(3x25mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈棕色固体的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(320mg，94％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.29-2.41(1H，m)，2.63-2.87(4H，m)，2.99-3.09(1H，m)，3.57-3.66(2H，m)，3.70-3.78(1H，m)，3.84-3.95(1H，m)，4.29-4.34(1H，m)，6.47-6.59(1H，m)，6.87-6.94(1H，m)，6.95-6.99(1H，m)，7.01-7.04(1H，m)，7.21-7.29(1H，m)，10.06(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝515。
3-氯-2-[(12aR)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚
Figure BDA0003241985750002731
在25℃下将TFA(0.8mL，10.38mmol)添加到在DCM(4mL)中的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(350mg，0.68mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7MNH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的3-氯-2-[(12aR)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(230mg，82％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.29-2.37(2H，m)，2.59-2.71(2H，m)，2.72-2.88(3H，m)，3.60-3.69(2H，m)，3.76-3.85(1H，m)，4.19-4.32(1H，m)，6.88-6.93(1H，m)，6.95-6.99(1H，m)，6.99-7.04(2H，m)，7.22-7.29(1H，m)有两个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝415。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例93；和旋转异构体2，实例94
Figure BDA0003241985750002741
在-20℃下在氮气下将DIPEA(185μl，1.06mmol)和丙烯酰氯(48.0mg，0.53mmol)添加到在DMF(2.5mL)中的3-氯-2-[(12aR)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(220mg，0.53mmol)中。将所得混合物在-20℃下搅拌1小时。将反应混合物用水淬灭，并通过微滤膜过滤。将滤液通过制备型HPLC柱纯化：Xselect CSH OBD柱30*150mm 5um；流动相A：水(0.1％甲酸)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：9min内26B至36B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.036g，14％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.34-2.45(1H，m)，2.63-2.92(H，m)，2.97-3.12(1H，m)，3.62-3.71(1H，m)，3.73-3.82(1H，m)，3.83-3.98(2H，m)，3.98-4.16(1H，m)，4.30-4.45(1H，m)，5.62-5.76(1H，m)，6.13(1H，d)，6.77-7.18(5H，m)，7.25(1H，t)，10.09(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝469。接着是1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.048g，19％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.36-2.45(1H，m)，2.69-2.78(1H，m)，2.76-2.98(2H，m)，2.94-3.13(1H，m)，3.60-3.69(1H，m)，3.69-3.83(1H，m)，3.83-3.97(2H，m)，3.96-4.10(1H，m)，4.33-4.47(1H，m)，5.62-5.75(1H，m)，6.13(1H，d)，6.74-7.16(5H，m)，7.25(1H，t)，10.07(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝469。
(3R)-4-[(4-溴-2，3，6-三氟苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002751
将4-溴-2，3，6-三氟苯甲醛(5g，20.92mmol)、(R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.43g，25.11mmol)和乙酸(0.12mL，2.09mmol)在DCM(150mL)中的溶液在室温下搅拌24小时。添加三乙酰氧基硼氢化钠(8.87g，41.84mmol)，并且将所得混合物在室温下搅拌7小时，再添加三乙酰氧基硼氢化钠(4.4g，20.92mmol)，并且将混合物在室温下再搅拌17小时。将反应混合物用饱和水性NaHCO3(200mL)稀释，并将混合物在室温搅拌直至泡腾消失，然后依次用水(125mL)和饱和盐水(125mL)洗涤有机层。将该有机层用相分离柱体来干燥，过滤并蒸发以提供呈浅黄色胶状物的(3R)-4-[(4-溴-2，3，6-三氟苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(9.67g，＞100％)，无需进一步纯化即可使用。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.45(9H，s)，2.26-2.49(2H，m)，2.56(1H，s)，2.67-2.83(1H，m)，3.03-3.18(1H，m)，3.31(1H，dd)，3.53-3.76(4H，m)，3.92(1H，dd)，4.03(1H，d)，7.13(1H，ddd)，m/z：ES+[M+H]+439。
(12aR)-9-溴-7，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002761
将氢化钠(1.3g，33.02mmol)添加到(3R)-4-[(4-溴-2，3，6-三氟苯基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(9.67g，22.01mmol)在THF(220mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在室温搅拌2天。添加另外的氢化钠(1g)，然后将混合物在50℃下加热3小时。将反应混合物用水(150mL)淬灭，用EtOAc(2x300mL)萃取，将有机萃取物合并，用饱和盐水(300mL)洗涤。将有机层用MgSO4干燥，过滤并且蒸发以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至60％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色泡沫的(12aR)-9-溴-7，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(8.7g，94％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.46(9H，s)，2.47(1H，ddd)，2.78-2.87(2H，m)，2.95(1H，s)，3.24(1H，ddd)，3.6-3.78(3H，m)，3.82(1H，dd)，4.01(1H，dd)，4.30(1H，dd)，7.00(1H，dd)。
(12aR)-9-溴-7，10-二氟-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓
Figure BDA0003241985750002762
将浓H2SO4(50mL)缓慢添加到(12aR)-9-溴-7，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(8.7g，20.75mmol)中，添加时伴随放热。将所得溶液在室温下搅拌20分钟。经5分钟的时间段分批添加1-碘吡咯烷-2，5-二酮(9.3g，41.5mmol)。将所得混合物在室温搅拌90分钟。将反应混合物缓慢倒入冰(150mL)中，然后将混合物置于冰水冷却浴中，并用NaOH(25％溶液，300mL)缓慢调节至pH 10。将混合物用EtOAc(4x400mL)萃取，将有机萃取物合并，依次用水(200mL)和饱和盐水(200mL)洗涤。将有机层用MgSO4干燥，过滤并蒸发，以提供呈棕色固体的(12aR)-9-溴-7，10-二氟-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(8.28g，90％)，无需进一步纯化即可使用。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.33-2.47(2H，m)，2.65-2.93(5H，m)，3.65-3.76(1H，m)，3.82-3.96(2H，m)，4.33(1H，dd)，NH没有观察到。m/z：ES+[M+H]+445。
(12aR)-9-溴-7，10-二氟-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002771
在室温下将二碳酸二叔丁酯(6.09g，27.91mmol)添加到(12aR)-9-溴-7，10-二氟-8-碘-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓(8.28g，18.6mmol)和三乙胺(7.8mL，55.81mmol)在DCM(300mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在室温搅拌17小时。将反应混合物依次用水(400mL)和饱和盐水(400mL)洗涤，将有机层分离，用相分离柱体来干燥，过滤并蒸发，以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至30％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈奶油色泡沫的(12aR)-9-溴-7，10-二氟-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(6.26g，62％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.45(9H，s)，2.49(1H，ddd)，2.84(2H，dddd)，2.99(1H，s)，3.26(1H，ddd)，3.71(3H，ddd)，3.84(1H，dd)，4.06(1H，dd)，4.31(1H，dd)，m/z：ES+[M+H]+545。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，10-二氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯旋转异构体1和2
Figure BDA0003241985750002781
在氮气下将碳酸钾(1.5g，11.17mmol)、RuPhos Pd G3(0.312g，0.37mmol)、二环己基(2′，6′-二异丙氧基-[1，1′-联苯基]-2-基)磷烷(0.174g，0.37mmol)和(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(1.3g，7.45mmol)添加到(12aR)-9-溴-7，10-二氟-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.92g，3.72mmol)在二噁烷(30mL)和水(6mL)中的搅拌和脱气溶液中。将所得溶液在90℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(75mL)稀释，用EtOAc(2x125mL)萃取。将合并的有机层用MgSO4干燥，过滤并且蒸发，以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈红色泡沫的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，10-二氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.150g)。使用以下SFC条件进行稳定的阻转异构体的分离：柱：Chiralpak IC 20x250mm，5微米。流动相：15％MeOH+0.1％NH3/85％scCO2。流速：60mL/min。BPR：120巴。柱温：40℃，从而首先得到旋转异构体1(401mg)，将其通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进一步纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色泡沫的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，10-二氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(338mg，16％)。1HNMR(400MHz，CDCl3，30℃)0.03(9H，s)，1.47(9H，s)，2.42-2.63(1H，m)，2.86(3H，ddd)，3.21(1H，ddd)，3.63-3.84(3H，m)，3.90(1H，dd)，4.10(1H，d)，4.35(1H，dd)，5.30(1H，brd)，6.89(1H，dd)，7.07(1H，dd)，7.23(1H，t)，m/z：ES+[M+H]+563。接着是(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，10-二氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的呈黄色泡沫的旋转异构体2(326mg，15％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)0.03(9H，s)，1.47(9H，s)，2.46-2.6(1H，m)，2.75-3.1(3H，m)，3.23(1H，ddd)，3.76(3H，dd)，3.91(1H，dd)，4.11(1H，d)，4.33(1H，dd)，4.93(1H，brs)，6.88(1H，dd)，7.08(1H，dd)，7.23(1H，t)，m/z：ES+[M+H]+563。
3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-7，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚旋转异构体1
Figure BDA0003241985750002791
将TFA(1.2mL，16.21mmol)添加到(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，10-二氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(338mg，0.6mmol)在DCM(2.5mL)中的搅拌溶液中。将所得悬浮液在室温下搅拌5小时。将该反应混合物蒸发以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelectCSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％甲酸)与MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。将含有所需化合物的级分通过离子交换色谱法使用SCX柱纯化。将所需产物使用1M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥以提供呈奶油色固体的3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-7，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(146mg，62％)。1H NMR(400MHz，DMSO)2.38-2.51(2H，m)，2.57-2.93(5H，m)，3.6-3.86(3H，m)，3.97(1H，s)，4.28(1H，d)，6.75(1H，d)，6.83(1H，d)，7.10(1H，t)，9.95(1H，s)，NH没有观察到，m/z：ES+[M+H]+391。
3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-7，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚旋转异构体2
Figure BDA0003241985750002801
将TFA(1.2mL，16.21mmol)添加到(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，10-二氟-8-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(326mg，0.58mmol)在DCM(2.5mL)中的搅拌溶液中。将所得悬浮液在室温下搅拌7小时。将该反应混合物蒸发以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％甲酸)与MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂(梯度为10％至40％)进行纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-7，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(190mg，84％)。1H NMR(400MHz，DMSO，)2.58(2H，d)，2.71-3.09(5H，m)，3.86(3H，dd)，4.20(1H，s)，4.42(1H，d)，6.91(1H，d)，7.00(1H，d)，7.25(1H，t)，10.08(1H，s)，NH没有观察到。m/z：ES+[M+H]+391。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-7，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例95
Figure BDA0003241985750002802
在0℃下将丙烯酰氯(33.4μL，0.41mmol)添加到3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-7，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(146mg，0.37mmol)和DIPEA(85μL，0.49mmol)在DCM(5mL)中的搅拌悬浮液中。将所得悬浮液在0℃下搅拌30分钟。将反应混合物蒸发(保持水浴低于40℃)，将残余物溶解在冷的1M NH3/MeOH(5mL)中，并在0℃下搅拌40分钟。将反应混合物蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％甲酸)与MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂(梯度为25％-60％)进行纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-7，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮(74mg，45％)。1H NMR(400MHz，DMSO)2.44-2.54(1H，m)，2.70(1H，dd)，2.81-3.2(3H，m)，3.79-4.06(4H，m)，4.15(1H，d)，4.23(1H，s)，4.51(1H，t)，5.71(1H，t)，6.14(1H，d)，6.78-6.9(1H，m)，6.92(1H，dd)，7.00(1H，dd)，7.27(1H，t)，10.07(1H，s)，m/z：ES+[M+H]+445。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-7，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体2，实例96
Figure BDA0003241985750002811
在0℃下将丙烯酰氯(43.4μL，0.53mmol)添加到3-氯-2-[(12aR)-8-乙炔基-7，10-二氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(190mg，0.49mmol)和DIPEA(110μL，0.63mmol)在DCM(5mL)中的搅拌悬浮液中。将所得悬浮液在0℃下搅拌30分钟。将反应混合物蒸发(保持水浴低于40℃)，将残余物溶解在冷的1M NH3/MeOH(5mL)中，并在室温下搅拌50分钟。将反应混合物蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％甲酸)与MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂(梯度为30％-60％)进行纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-7，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮(99mg，46％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.4-2.55(1H，m)，2.69-2.78(1H，m)，2.84-3.2(3H，m)，3.82-4.04(4H，m)，4.08-4.19(1H，m)，4.19(1H，s)，4.39-4.57(1H，m)，5.71(1H，d)，6.13(1H，d)，6.76-6.89(1H，m)，6.91(1H，dd)，6.95-7.03(1H，m)，7.26(1H，t)，10.00(1H，s)，m/z：ES+[M+H]+445。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-羟基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮
Figure BDA0003241985750002821
将在DCM(59.8mL，59.77mmol)中的1M三溴化硼溶液添加到在DCM(20mL)中的(12aR)-9-溴-10-氯-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(4.6g，9.96mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用MeOH淬灭。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-8-羟基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(3.4g，98％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)0.75-0.89(1H，m)，3.15-3.22(1H，m)，3.67-3.81(1H，m)，3.81-3.93(1H，m)，3.93-4.06(1H，m)，4.09-4.19(2H，m)，4.52-4.66(2H，m)，7.28(1H，s)有两个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝347。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-羟基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002831
在0℃下在氮气下将二碳酸二叔丁酯(1.842mL，7.93mmol)添加到在DCM(50mL)中的(12aR)-9-溴-10-氯-8-羟基-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮(3.4g，7.93mmol)和三乙胺(6.64mL，47.61mmol)里。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用DCM(100mL)稀释，依次用5％水性柠檬酸(200mL x 2)和饱和盐水(200mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，并将溶剂在减压下除去。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至30％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-8-羟基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.8g，51％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，1.99(1H，s)，3.40-3.52(2H，m)，3.52-3.60(2H，m)，3.86-3.94(1H，m)，3.97-4.09(1H，m)，4.07-4.25(2H，m)，7.14(1H，s)，10.79(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝447。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-(二氟甲氧基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002832
在0℃下在氮气下将三氟甲磺酸二氟甲基酯(0.564mL，4.47mmol)添加到在CH3CN(8mL)中的(12aR)-9-溴-10-氯-8-羟基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1g，2.23mmol)和6M KOH(2mL，12mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用EtOAc(30mL)稀释，并且依次用水(50mL x 3)和饱和盐水(25mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中25至50％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色油状物的(12aR)-9-溴-10-氯-8-(二氟甲氧基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.1g，99％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.09-1.24(1H，m)，1.41(9H，s)，3.42-3.54(4H，m)，3.57-3.69(1H，m)，3.69-3.84(1H，m)，3.84-4.12(1H，m)，4.24-4.44(2H，m)，7.55(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝497。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002841
在25℃下在氮气下将在THF(10mL，10mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液添加到在THF(10mL)中的(12aR)-9-溴-10-氯-8-(二氟甲氧基)-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1g，2.01mmol)中。将所得混合物在60℃下搅拌1小时。将该反应混合物用饱和NH4Cl(50mL)淬灭，并且用EtOAc(2x100mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈浅黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氯-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.95g，98％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.47(9H，s)，2.38-2.55(1H，m)，2.72-2.85(1H，m)，2.82-3.03(2H，m)，3.22-3.39(1H，m)，3.56(1H，d)，3.61-3.78(3H，m)，3.98(1H，d)，4.28-4.38(1H，m)，6.48(1H，t)，7.03(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝483。
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002851
在25℃下在氮气下将RuPhos-Pd-G3(225mg，0.27mmol)和2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(125mg，0.27mmol)添加到在1，4-二噁烷(10mL)和水(2.5mL)(4∶1比率)中的K2CO3(557mg，4.03mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(695mg，4.03mmol)和(12aR)-9-溴-10-氯-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(650mg，1.34mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至100％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(120mg，17％)。m/z：ES+[M+H]+＝531。
3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(二氟甲氧基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚
Figure BDA0003241985750002852
在20℃下将TFA(0.5mL，6.49mmol)添加到在DCM(2.5mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(100mg，0.19mmll)中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将获得的残余物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至100％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以提供呈黄色固体的粗产物。将该粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥以提供呈黄色固体的3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(二氟甲氧基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(45mg，55％)。m/z：ES+[M+H]+＝431。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例97；和旋转异构体2，实例98
Figure BDA0003241985750002861
在-20℃下在氮气下将DIPEA(0.032mL，0.19mmol)和丙烯酰氯(8.39mg，0.09mmll)添加到在DMF(2mL)中的3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(二氟甲氧基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(40mg，0.09mmol)中。将所得混合物在-20℃下搅拌1小时。将反应混合物用水淬灭，并直接通过制备型HPLC柱纯化：Xselect CSHOBD柱30*150mm 5um；流动相A：水(0.1％甲酸)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：9min内27B至37B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈紫色固体的旋转异构体1(7mg，15％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)2.34-2.43(1H，m)，2.69-2.90(3H，m)，2.99-3.09(1H，m)，3.54-3.64(1H，m)，3.73-3.81(1H，m)，3.83-3.94(2H，m)，3.99-4.11(1H，m)，4.34-4.46(1H，m)，5.70(1H，t)，6.13(1H，d)，6.73-7.02(4H，m)，7.17-7.30(2H，m)，9.99(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝485。接着是1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(8mg，18％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.34-2.44(1H，m)，2.65-2.91(3H，m)，3.01-3.05(1H，m)，3.55-3.65(1H，m)，3.72-3.80(1H，m)，3.83-3.97(2H，m)，3.98-4.12(1H，m)，4.38-4.46(1H，m)，5.66-5.75(1H，m)，6.08-6.17(1H，m)，6.70-7.01(4H，m)，7.06-7.27(2H，m)，10.13(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝485。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002871
将在THF(30.3mL，30.32mmol)中的1M硼烷-THF复合物溶液添加到在THF(30mL)中的(12aR)-9-溴-10-氟-8-甲氧基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2.7g，6.06mmol)中。将所得溶液在60℃下搅拌1小时。将反应混合物用2M HCl(10mL)淬灭，并且倒入水(30mL)中，然后用EtOAc(3x50mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈白色固体的粗产物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在EtOAc中0至80％石油醚)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(2.2g，84％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.39(9H，s)，2.27-2.37(1H，m)，2.65-2.94(3H，m)，3.06-3.17(1H，m)，3.49-3.58(2H，m)，3.58-3.65(1H，m)，3.67-3.74(1H，m)，3.75-3.79(1H，m)，3.80(3H，s)，4.25(1H，dd)，6.91(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝431。
(12aR)-9-溴-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-醇
Figure BDA0003241985750002881
在0℃下将在DCM(20.4mL，20.4mmol)中的1M三溴化硼溶液添加到在DCM(10mL)中的(12aR)-9-溴-10-氟-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.1g，2.55mmll)中。将所得混合物在20℃下搅拌2小时。将反应混合物用MeOH(25mL)淬灭。将溶剂在减压下去除，以提供呈黄色固体的粗产物。将该粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-醇(0.75g，93％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.76-2.99(2H，m)，3.01-3.19(2H，m)，3.49-3.59(1H，m)，3.64-3.82(2H，m)，3.94-4.18(2H，m)，4.32-4.47(2H，m)，6.75(1H，s)，9.06(1H，s)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝317。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-羟基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002882
在0℃下在氮气下将二碳酸二叔丁酯(0.551mg，2.52mmol)添加到在DCM(15mL)中的(12aR)-9-溴-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-醇(800mg，2.52mmol)和三乙胺(2.11mL，15.13mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌2小时。将溶剂在减压下去除，并且将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至50％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-8-羟基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(900mg，86％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.38(9H，s)，2.11-2.26(4H，m)，3.12-3.18(2H，m)，3.74-3.82(2H，m)，4.22-4.28(3H，m)，6.61-6.64(1H，m)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝417。
(12aR)-9-溴-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002891
在25℃下在氮气下将溴环丙烷(2.9g，23.96mmol)添加到在DMF(30mL)中的(12aR)-9-溴-10-氟-8-羟基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1g，2.4mmol)和Cs2CO3(1.562g，4.79mmol)中。将所得混合物在150℃下搅拌20小时。将反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，依次用水(150mL x 2)和饱和盐水(150mL x3)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至60％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的(12aR)-9-溴-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.45g，41％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)0.67-0.75(2H，m)，0.80-0.86(2H，m)，1.40(9H，s)，2.24-2.37(1H，m)，2.66-2.82(3H，m)，3.02-3.21(1H，m)，3.52-3.63(3H，m)，3.73-3.85(2H，m)，3.88-4.00(1H，m)，4.28(1H，d)，7.15(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝457。
(12aR)-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002901
在25℃下在氮气下将RuPhos-Pd-G3(73.2mg，0.09mmol)和2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(40.8mg，0.09mmol)添加到在1，4-二噁烷(10mL)和水(2.5mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(400mg，0.87mmol)、(2-氯-6-甲氧基苯基)硼酸(326mg，1.75mmol)和K2CO3(363mg，2.62mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中20至70％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(330mg，73％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)0.68-0.73(2H，m)，0.80-0.88(2H，m)，1.41(9H，s)，2.24-2.40(1H，m)，2.60-2.87(4H，m)，3.46-3.64(5H，m)，3.62-3.72(3H，m)，3.75-3.97(1H，m)，4.20-4.35(1H，m)，6.98-7.09(2H，m)，7.07-7.18(1H，m)，7.28-7.46(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝519。
3-氯-2-[(12aR)-8-(环丙基氧基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚
Figure BDA0003241985750002902
在0℃下将在DCM(4.62mL，4.62mmol)中的1M三溴化硼溶液添加到在DCM(5mL)中的(12aR)-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(300mg，0.58mmol)中。将所得混合物在20℃下搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％NH4HCO3)中0至100％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的3-氯-2-[(12aR)-8-(环丙基氧基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(80mg，34％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)0.39-0.56(2H，m)，0.61-0.74(2H，m)，1.41(1H，s)，2.20-2.41(3H，m)，2.54-2.76(1H，m)，2.77-2.96(3H，m)，3.45-3.67(2H，m)，3.68-3.87(2H，m)，4.04-4.24(1H，m)，6.76-6.89(1H，m)，6.87-6.97(1H，m)，6.96-7.07(1H，m)，7.09-7.25(1H，m)，9.78(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝405。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例99；和旋转异构体2，实例100
Figure BDA0003241985750002911
在0℃下将丙烯酰氯(0.06mL，0.74mmol)添加到在DMF(5mL)中的3-氯-2-[(12aR)-8-(环丙基氧基)-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(300mg，0.74mmol)和DIPEA(0.518mL，2.96mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌30分钟。将反应混合物用水淬灭，并直接通过制备型HPLC柱纯化：Xselect CSH OBD柱30*150mm 5um；流动相A：水(0.1％甲酸)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：8min内24B至34B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(70mg，21％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)0.40-0.55(2H，m)，0.56-0.77(2H，m)，2.30-2.45(1H，m)，2.57-3.18(3H，m)，3.49-4.17(7H，m)，4.21-4.39(1H，m)，5.61-5.74(1H，m)，6.03-6.19(1H，m)，6.76-7.00(3H，m)，7.01-7.08(1H，m)，7.10-7.25(1H，m)，9.78(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝459。接着是1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(71mg，21％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)0.37-0.53(2H，m)，0.59-0.74(2H，m)，2.24-2.42(1H，m)，2.57-2.77(2H，m)，2.76-2.94(1H，m)，2.96-3.11(1H，m)，3.47-3.62(1H，m)，3.64-3.81(1H，m)，3.82-3.99(4H，m)，4.23-4.40(1H，m)，5.62-5.77(1H，m)，6.05-6.18(1H，m)，6.71-7.00(3H，m)，7.00-7.08(1H，m)，7.10-7.21(1H，m)，9.66-9.92(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝459。
(12aR)-9-溴-8-[3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002921
在25℃下在氮气下在密封管中将四(三苯基膦)钯(0)(175mg，0.15mmol)添加到在甲苯(20mL)中的(12aR)-9-溴-10-氟-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(800mg，1.52mmol)、3-二甲基氨基-1-丙炔(0.654mL，6.07mmol)、三乙胺(0.423mL，3.04mmol)和碘化亚铜(I)(578mg，3.04mmol)中。将所得混合物在100℃下搅拌16小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至100％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的(12aR)-9-溴-8-[3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(600mg，82％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.39(9H，s)，2.23-2.42(4H，m)，2.69-2.77(2H，m)，3.06-3.15(1H，m)，3.30(4H，s)，3.49-3.67(4H，m)，3.68-3.83(3H，m)，4.30-4.39(1H，m)，7.32(1H，d)。m/z：ES+[M-Boc]-＝439。
(12aR)-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-[3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002931
在25℃下在氮气下将2-二环己基膦基-2′，6′-二甲氧基-1，1′-联苯(51.1mg，0.12mmol)和甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2，6-二甲氧基-1，1-联苯基)(2-氨基-1，1-联苯基-2-基)钯(II)二氯甲烷加合物(97mg，0.12mmol)添加到在1，4-二噁烷(8mL)和水(2mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-8-[3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(600mg，1.24mmol)、(2-氯-6-甲氧基苯基)硼酸(464mg，2.49mmol)和磷酸钾(528mg，2.49mmol)中。将所得混合物在120℃下搅拌3小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中40至90％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的(12aR)-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-[3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(450mg，67％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，d)，1.86(6H，s)，2.31-2.42(1H，m)，2.61-2.74(1H，m)，2.75-2.83(1H，m)，3.00-3.11(1H，m)，3.23(2H，s)，3.57-3.79(8H，m)，3.85-3.95(1H，m)，4.36(1H，d)，7.07-7.18(2H，m)，7.23(1H，s)，7.40(1H，t)。m/z：ES+[M+H]+＝544。
3-氯-2-{(12aR)-8-[3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基]-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚
Figure BDA0003241985750002941
在0℃下在氮气下将在DCM(4742μl，4.74mmol)中的1M三溴化硼溶液添加到在DCM(5mL)中的(12aR)-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-[3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(430mg，0.79mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用MeOH(20mL)淬灭，并且将溶剂在减压下去除以提供呈棕色固体的粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中0至100％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的3-氯-2-{(12aR)-8-[3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基]-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚(0.32g，75％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.52(6H，s)，2.65-2.96(4H，m)，2.99-3.12(1H，m)，3.18-3.26(1H，m)，3.28-3.42(2H，m)，3.50-3.61(1H，m)，3.90-4.04(2H，m)，4.13-4.20(2H，m)，6.85-7.08(2H，m)，7.10-7.46(2H，m)，8.90(1H，s)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝430。
1-((12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例101；和旋转异构体2，实例102
Figure BDA0003241985750002951
在-20℃下在氮气下将DIPEA(387μl，2.21mmol)和丙烯酰氯(50.1mg，0.55mmol)添加到在DMF(2mL)中的3-氯-2-{(12aR)-8-[3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基]-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚(300mg，0.55mmol)中。将所得混合物在-20℃下搅拌1小时。将反应混合物用水淬灭并且直接通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至80％MeCN)进行纯化，然后通过制备型HPLC柱进一步纯化：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm 5um；流动相A：沃特世(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：7min内31B至41B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-((12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.013g，5％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.88(6H，s)，2.28-2.46(1H，m)，2.63-2.77(1H，m)，2.80-2.92(2H，m)，3.01-3.15(1H，m)，3.23(2H，s)，3.68-3.81(2H，m)，3.82-3.97(2H，m)，3.98-4.13(1H，m)，4.39(1H，t)，5.70(1H，s)，6.13(1H，d)，6.76-6.91(2H，m)，6.97(1H，dd)，7.17-7.26(2H，m)，9.89(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝484。接着是1-((12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.02g，7％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.88(6H，s)，2.29-2.46(1H，m)，2.63-2.78(1H，m)，2.78-2.95(2H，m)，3.00-3.15(1H，m)，3.23(2H，s)，3.68-3.80(2H，m)，3.81-3.96(2H，m)，3.96-4.15(1H，m)，4.40(1H，t)，5.70(1H，s)，6.03-6.20(1H，m)，6.76-6.93(2H，m)，6.96(1H，dd)，7.14-7.30(2H，m)，9.87(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝484。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002961
在室温下将K2CO3(1192mg，8.63mmol)添加到在DMF(20mL)中的4-(氯甲基)吡啶(550mg，4.31mmol)、(12aR)-9-溴-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-醇(900mg，2.16mmol)中。将反应混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释，依次用水(50mL x 3)和饱和盐水(50mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至40％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以提供呈白色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.6g，55％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.36(9H，s)，2.25-2.35(1H，m)，2.63-2.86(3H，m)，3.06-3.15(1H，m)，3.48-3.70(4H，m)，3.78-3.87(1H，m)，4.22-4.31(1H，m)，5.23(2H，s)，6.96-7.02(1H，m)，7.42-7.50(2H，m，)，8.56-8.63(2H，m)。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750002971
在室温下在氮气下将RuPhos-Pd-G3(82mg，0.1mmol)和2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(45.9mg，0.10mmol)添加到在1，4-二噁烷(8mL)和水(2mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(500mg，0.98mmol)、K2CO3(340mg，2.46mmol)和(2-氯-6-甲氧基苯基)硼酸(509mg，2.95mmol)中。将反应混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，依次用水(50mL x 2)和饱和盐水(50mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗产物。将粗产物通过快速C-18色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中0至40％CH3CN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.5g，91％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.35(9H，s)，2.83-3.03(1H，m)，3.13-3.32(2H，m)，3.40-3.55(2H，m)，3.68-3.83(3H，m)，3.95-4.11(2H，m)，4.30-4.43(1H，m)，4.54-4.70(2H，m)，6.90-6.96(1H，m)，6.99-7.07(2H，m)，7.22-7.30(1H，m)，7.47-7.55(2H，m)，8.66-8.74(2H，m)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝556。
3-氯-2-{(12aR)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚
Figure BDA0003241985750002981
在室温下将TFA(1386μl，17.98mmol)添加到在DCM(10mL)中的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(500mg，0.90mmol)中。将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将该反应混合物蒸发以提供粗产物。将粗产物通过使用离子交换柱通过离子交换色谱法纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的3-氯-2-{(12aR)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚(0.25g，61％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.61-2.84(2H，m)，2.92-3.07(3H，m)，3.19-3.35(2H，m)，3.65-3.79(4H，m)，3.88-4.03(2H，m)，6.78-6.88(1H，m)，6.88-6.94(1H，m)，6.96-7.04(1H，m)，7.20-7.28(1H，m)，7.47-7.55(2H，m)，8.64-8.75(2H，m)，9.99(1H，s)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝456。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例103；和旋转异构体2，实例104
Figure BDA0003241985750002982
在0℃下将丙烯酰氯(49.6mg，0.55mmol)添加到在DMF(5mL)中的3-氯-2-{(12aR)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚(250mg，0.55mmol)和DIPEA(287μl，1.65mmol)中。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(0.5mL)淬灭并且直接通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge PrepOBD C18柱，30×150mm 5um；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3+0.1％NH3.H2O)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：10min内25B至35B；254/220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.061g，22％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.31-2.44(1H，m)，2.66-2.77(1H，m)，2.80-2.88(1H，m)，3.00-3.14(1H，m)，3.35-3.37(1H，m)，3.55-3.71(2H，m)，3.81-3.92(2H，m)，3.96-4.09(1H，m)，4.26-4.39(1H，m)，5.09(2H，s)，5.65-5.75(1H，m)，6.09-6.18(1H，m)，6.75-6.83(1H，m)，6.84-6.87(1H，m)，6.90-6.94(1H，m)，6.99-7.03(1H，m)，7.18-7.21(2H，m)，7.22-7.28(1H，m)，8.46-8.52(2H，m)，9.87(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝510。接着是1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.065g，23％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.27-2.45(1H，m)，2.61-2.75(1H，m)，2.78-2.89(1H，m)，2.98-3.15(1H，m)，3.34-3.35(1H，m)，3.55-3.70(2H，m)，3.80-3.92(2H，m)，3.93-4.11(1H，m)，4.26-4.39(1H，m)，5.08(2H，s)，5.65-5.74(1H，m)，6.08-6.20(1H，m)，6.75-6.84(1H，m)，6.84-6.88(1H，m)，6.90-6.95(1H，m)，6.98-7.03(1H，m)，7.18-7.21(2H，m)，7.22-7.28(1H，m)，8.45-8.51(2H，m)，9.82(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝510。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003001
将碳酸铯(3.38g，10.38mmol)添加到(12aR)-9-溴-10-氯-8-羟基-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.5g，3.46mmol)中，添加到在DMF(20mL)中的1-氯-2-甲氧基乙烷(0.49g，5.19mmol)中。将所得溶液在100℃下搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，并依次用水(50mL x3)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈棕色固体的粗产物(12aR)-9-溴-10-氯-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1g，59％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)11.39(9H，s)，2.01-2.44(2H，m)，2.65-2.87(3H，m)，3.01-3.19(2H，m)，3.46-3.98(8H，m)，4.03-4.38(3H，m)，7.10(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝491。
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003002
在氮气下将K2CO3(0.984g，7.12mmol)添加到在1，4-二噁烷(16mL)和水(4.00mL)(4∶1比率)中的RuPhos-Pd-G3(0.155g，0.20mmol)、2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(0.095g，0.2mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(0.876g，5.08mmol)和(12aR)-9-溴-10-氯-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1g，2.03mmol)中。将所得溶液在100℃下搅拌1小时。将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释萃取，依次用水(100mL x 3)和饱和盐水(50mL x 2)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中30至40％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色泡沫的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.6g，55％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，2.25-2.44(1H，m)，2.61-2.90(3H，m)，3.11(3H，s)，3.34(1H，d)，3.40-3.45(2H，m)，3.48-3.56(1H，m)，3.60-3.70(3H，m)，3.78-3.92(1H，m)，4.00(2H，dd)，4.28(1H，d)，6.80-6.87(1H，m)，6.90-6.97(1H，m)，7.00(1H，s)，7.17(1H，t)，9.66(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝539。
3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(2-甲氧基乙氧基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚
Figure BDA0003241985750003011
在室温下将TFA(2mL，25.96mmol)添加到在DCM(20mL)中的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(550mg，1.02mmol)中。将所得溶液在室温下搅拌12小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱并且将纯级分蒸发至干燥提供呈黄色泡沫的3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(2-甲氧基乙氧基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(0.3g，67％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.28-2.34(2H，m)，2.62-2.85(5H，m)，3.10(3H，s)，3.38-3.48(2H，m)，3.48-3.64(2H，m)，3.70-3.84(1H，m)，3.92-4.09(2H，m)，4.19(1H，d)，6.79-6.89(1H，m)，6.87-6.96(1H，m)，6.98(1H，s)，7.17(1H，t)，9.66(1H，s)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝439。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例105；和旋转异构体2，实例106
Figure BDA0003241985750003021
在氮气下将丙烯酰氯(103mg，1.14mmol)添加到冷却至0℃的在DMF(5mL)中的3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(2-甲氧基乙氧基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚(250mg，0.57mmol)中。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将该反应混合物用水(50mL)淬灭，用EtOAc(3x50mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供呈棕色胶状物的粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(XBridge Shield RP18 OBD柱，5μ二氧化硅，50mm直径，100mm长度)使用水(含有0.05％NH3)和MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.057g，20％)。1HNMR(300MHz，DMSO，30℃)2.29-2.45(1H，m)，2.68-2.92(3H，m)，2.98-3.19(4H，m)，3.41-3.58(3H，m)，3.69(1H，d)，3.86(2H，d)，3.93-4.14(3H，m)，4.33(1H，t)，5.71-5.75(1H，m)，6.13(1H，d)，6.76-7.05(4H，m)，7.17(1H，t)，9.66(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝493。接着是1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.07g，25％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)2.31-2.44(1H，m)，2.66-2.96(3H，m)，2.98-3.23(4H，m)，3.41-3.48(2H，m)，3.48-3.62(1H，m)，3.68(1H，d)，3.79-4.16(5H，m)，4.32(1H，t)，5.70-5.75(1H，m)，6.14(1H，d)，6.73-7.07(4H，m)，7.17(1H，t)，9.63(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝493。
(12aR)-9-溴-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003031
将1-(2-氯乙基)-哌啶(177mg，1.2mmol)添加到在DMF(10mL)中的K2CO3(497mg，3.59mmol)和(12aR)-9-溴-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-醇(500mg，1.2mmol)中。将所得溶液在100℃下搅拌3小时。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，依次用水(50mL x 3)和饱和盐水(50mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中10至40％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的(12aR)-9-溴-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.6g，95％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.31(9H，s)，1.35-1.41(1H，m)1.44-1.59(5H，m)，2.21-2.38(2H，m)，2.38-2.48(3H，m)，2.64-2.91(5H，m)，3.07-3.19(1H，m)，3.47-3.73(4H，m)，3.76-3.87(1H，m)，4.06-4.16(2H，m)，4.21-4.30(1H，m)，6.94(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝530。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003041
在氮气下将RuPhos-Pd-G3(95mg，0.11mmol)添加到在1，4-二噁烷(16mL)和水(4mL)(4∶1比率)中的(12aR)-9-溴-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(600mg，1.14mmol)、(2-氯-6-甲氧基苯基)硼酸(587mg，3.41mmol)、2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(53mg，0.11mmol)和K2CO3(392mg，2.84mmol)中。将所得溶液在100℃下搅拌1小时。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，依次用水(20mL x 2)和饱和盐水(20mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中5％至60％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.5g，76％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.17-1.30(2H，m)，1.34(9H，s)，1.41-1.50(1H，m)，1.50-1.72(7H，m)，2.62-2.78(3H，m)，2.95-3.11(2H，m)，3.44-3.53(1H，m)，3.74-3.84(2H，m)，3.98-4.09(2H，m)，4.24-4.39(3H，m)，4.54-4.69(2H，m)，6.92-6.95(1H，m)，6.98-7.03(1H，m)，7.07-7.11(1H，m)，7.22-7.27(1H，m)，9.76(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝576。
3-氯-2-{(12aR)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚
Figure BDA0003241985750003051
将TFA(2mL，25.96mmol)添加到在DCM(10mL)中的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(400mg，0.69mmol)中。将所得溶液在25℃下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除，以提供粗产物。将该粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥以提供呈棕色固体的3-氯-2-{(12aR)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚(0.3g，91％)。1H NMR(300MHz，DMSO，30℃)1.22-1.44(7H，m)，2.16-2.37(7H，m)，2.55-2.69(2H，m)，2.72-2.88(3H，m)，3.56-3.60(1H，m)，3.92-4.01(2H，m)，3.92-4.01(2H，m)，4.11-4.21(1H，m)，6.78-6.81(1H，m)，6.82-6.88(1H，m)，6.90-6.96(1H，m)，7.17(1H，t)有两个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝476。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例107；和旋转异构体2，实例108
Figure BDA0003241985750003052
将丙烯酰氯(41.8mg，0.46mmol)添加到在DMF(5mL)中的3-氯-2-{(12aR)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚(200mg，0.42mmol)和DIPEA(220μl，1.26mmol)中。将所得溶液在0℃下搅拌持续1小时。将反应混合物用水(0.5mL)淬灭，并且直接通过制备型HPLC(XBridge Prep C18OBD柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有10mmol％NH4HCO3+0.1mmol％NH3.H2O)和MeCN的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，首先提供1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.06g，27％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.20-1.48(7H，m)，2.18-2.31(4H，m)，2.67-2.73(2H，m)，2.77-2.92(2H，m)，3.03-3.11(1H，m)，3.48-3.76(3H，m)，3.79-4.12(5H，m)，4.23-4.39(1H，m)，5.70(1H，d)，6.12(1H，d)，6.12(1H，d)，6.79-6.89(2H，m)，6.94(1H，d)，7.18(1H，t)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝530。接着是1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.07g，31％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.20-1.44(7H，m)，2.17-2.30(4H，m)，2.61-2.77(2H，m)，2.77-2.93(2H，m)，2.96-3.18(1H，m)，3.48-3.75(3H，m)，3.79-4.08(5H，m)，4.23-4.37(1H，m)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.67-6.88(3H，m)，6.93(1H，d)，7.18(1H，t)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝530。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003061
将(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.60g，2.94mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(0.17g，0.15mmol)和碘化亚铜(I)(0.17g，0.88mmol)悬浮在甲苯(24mL)中，并且添加三乙胺(1.35mL，9.71mmol)。连续添加1-(三甲基甲硅烷基)丙炔(0.48mL，3.24mmol)和四丁基氟化铵(3.24mL的在THF中的1.0M溶液，3.24mmol)，并且将溶液在室温下搅拌过夜。添加另外份的1-(三甲基甲硅烷基)丙炔(0.48mL，3.24mmol)和四丁基氟化铵(3.24mL在THF中的1.0M溶液，3.24mmol)，并将混合物在室温下继续搅拌过夜。将混合物用乙酸乙酯(20mL)稀释，通过硅藻土短垫，并在减压下浓缩，得到棕色残余物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％乙酸乙酯)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色残余物的(12aR)-9-溴-10-氯-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.28g，95％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：1.45(9H，s)，2.09(3H，s)，2.41(1H，ddd)，2.68-2.8(1H，m)，2.84-2.92(1H，m)，2.92-3.04(1H，m)，3.29(1H，ddd)，3.52(1H，d)，3.57-3.69(2H，m)，3.72(1H，dd)，3.92(1H，d)，4.29(1H，dd)，7.17(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+455.2。
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯旋转异构体1和2
Figure BDA0003241985750003071
将(12aR)-9-溴-10-氯-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.28g，2.81mmol)、(2-氯-6-甲氧基苯基)硼酸(0.79g，4.21mmol)和水性2M碳酸钠(4.21mL，8.43mmol)在1，4-二噁烷(24mL)中的溶液用氮气脱气5分钟。添加RuPhos Pd G3(0.235g，0.28mmol)和二环己基(2′，6′-二异丙氧基-[1，1′-联苯基]-2-基)磷烷(0.13g，0.28mmol)，并将混合物在90℃加热。3小时后，将混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀释。将有机部分收集，并且将水性物用乙酸乙酯(50mL)洗涤。将合并的有机物经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到棕色干膜状物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％乙酸乙酯)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈浅黄色干膜状物的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(683mg)(作为阻转异构体的混合物)。将阻转异构体使用超临界流体色谱法(SFC)分离(柱：Phenomenex C4，30x250mm，5微米流动相A：30％MeOH(+0.1％NH3)/流动相B：70％scCO2；流速：90mL/min；BPR：120巴；柱温：40℃；UV max：216nm)。将含有第一洗脱异构体的级分收集并浓缩，得到呈浅黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的阻转异构体1(190mg，0.37mmol，13％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：1.45(9H，s)，1.76(3H，s)，2.37-2.56(1H，m)，2.75-2.99(2H，m)，3.15-3.34(1H，m)，3.47(1H，s)，3.52-3.64(1H，m)，3.65-3.87(6H，m)，3.91-4.07(1H，m)，4.26-4.42(1H，m)，6.88(1H，d)，7.08(1H，d)，7.2-7.24(1H，m)，7.27-7.31(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+517.2。将含有第二洗脱异构体的级分收集并浓缩，得到呈浅黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的阻转异构体2(265mg，18％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：1.49(9H，s)，1.80(3H，s)，2.43-2.57(1H，m)，2.78-2.99(2H，m)，3.19-3.38(1H，m)，3.51(1H，s)，3.55-3.66(1H，m)，3.68-3.84(6H，m)，3.94-4.08(1H，m)，4.3-4.42(1H，m)，6.91(1H，d)，7.13(1H，d)，7.25-7.27(1H，m)，7.31-7.38(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+517.2。
3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚旋转异构体1
Figure BDA0003241985750003091
将(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体1(190mg，0.37mmol)在DCM(2mL)中的溶液冷却至0℃，并且在搅拌下逐滴添加三溴硼烷(3.67mL在DCM中的1.0M溶液，3.67mmol)。另外，使混合物达到室温并搅拌过夜。将反应混合物用DCM(20mL)稀释，并逐滴添加到剧烈搅拌的饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)中。将有机部分收集，并且将水性物用乙酸乙酯(50mL)、然后用2-甲基-THF(50mL)洗涤。将合并的有机物经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到浅黄色固体(150mg)。将该粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用在MeOH中的1.0M NH3从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚的呈浅黄色干膜状物的旋转异构体1(118mg，80％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.76(3H，s)，2.38-2.45(2H，m)，2.69-2.95(5H，m)，3.6-3.75(3H，m)，3.81(1H，d)，4.29(1H，dd)，6.88(1H，dd)，6.96(1H，dd)，7.21(1H，t)，7.31(1H，s)，9.70(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+403.2。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例109
Figure BDA0003241985750003092
在室温下将3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚的旋转异构体1(118mg，0.29mmol)悬浮在DCM(1mL)中，并且添加三乙胺(0.08mL，0.59mmol)。添加丙烯酰氯(0.03mL，0.35mmol)，并且将混合物在室温搅拌。5分钟后，将反应混合物通过添加饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)淬灭。将有机部分收集，并且将水性物用DCM(10mL)洗涤。使合并的有机物通过相分离器柱体，并在减压下浓缩。将粗残余物溶解在MeOH(1mL)和在MeOH(1mL)中的7N氨中，并在室温下搅拌。10分钟后，将反应混合物在减压下浓缩，得到浅黄色泡沫。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5u二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％甲酸)和乙腈的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，以提供1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈浅黄色固体的旋转异构体1(33mg，25％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：1.79(3H，s)，2.47-2.6(1H，m)，2.84-3.27(3H，m)，3.35-3.55(1H，m)，3.60(1H，d)，3.68-3.9(2H，m)，4.01-4.2(2H，m)，4.24-4.47(2H，m)，5.74(1H，d)，6.31(1H，dd)，6.54(1H，dd)，6.91(1H，d)，7.07(1H，d)，7.22(1H，t)，7.28(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+457.2。
3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚旋转异构体2
Figure BDA0003241985750003101
将(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-甲氧基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯的旋转异构体2(265mg，0.51mmol)在DCM(2mL)中的溶液冷却至0℃，并且在搅拌下逐滴添加三溴硼烷(5.12mL的在DCM中的1.0M溶液，5.12mmol)。另外，使混合物达到室温并搅拌过夜。将反应混合物用DCM(20mL)稀释，并逐滴添加到剧烈搅拌的饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)中。将有机部分收集，并且将水性物用乙酸乙酯(50mL)、然后用2-甲基-THF(50mL)洗涤。将合并的有机物经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到浅黄色固体(500mg)。将该粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用在MeOH中的1.0M NH3从柱中洗脱并且将纯级分蒸发至干燥，以提供3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚的呈浅黄色干膜状物的旋转异构体2(203mg，98％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.76(3H，s)，2.44-2.52(1H，m)，2.77-2.93(4H，m)，2.97-3.1(2H，m)，3.64-3.78(3H，m)，3.85(1H，d)，4.33(1H，d)，6.87(1H，dd)，6.97(1H，dd)，7.21(1H，t)，7.32(1H，s)，9.72(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+403.2。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体2，实例110
Figure BDA0003241985750003111
在室温下将3-氯-2-[(12aR)-10-氯-8-(丙-1-炔-1-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]苯酚的旋转异构体2(200mg，0.5mmol)悬浮在DCM(4mL)中，并且添加三乙胺(0.14mL，0.99mmol)。添加丙烯酰氯(0.05mL，0.60mmol)，并且将混合物在室温搅拌。10分钟后，将反应混合物通过添加饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)淬灭。将有机部分收集，并且将水性物用DCM(10mL)洗涤。使合并的有机物通过相分离器柱体，并在减压下浓缩。将粗残余物溶解在MeOH(2mL)和在MeOH(2mL)中的7N氨中，并在室温下搅拌。20分钟后，将反应混合物在减压下浓缩，得到浅黄色泡沫。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％甲酸)与乙腈的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，以提供1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈浅黄色固体的旋转异构体2(81mg，36％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.77(3H，s)，2.37-2.45(1H，m)，2.7-2.78(1H，m)，2.8-2.93(1H，m)，3.04-3.15(1H，m)，3.26-3.29(1H，m)，3.61-3.77(2H，m)，3.82-3.93(2H，m)，3.97-4.09(1H，m)，4.35-4.47(1H，m)，5.65-5.76(1H，m)，6.13(1H，d)，6.74-6.91(2H，m)，6.97(1H，dd)，7.21(1H，t)，7.33(1H，s)，9.71(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+457.2。
5-溴-3-氟-6-[(2H3)甲基氧基]吡啶-2-甲酸乙酯
Figure BDA0003241985750003121
向5-溴-3-氟-6-羟基吡啶-2-甲酸乙酯(10g，37.9mmol)和碳酸银(23.0g，83.3mmol)在氯仿(100mL)中的悬浮液中添加碘甲烷-d3(11.8mL，189mmol)，并且将反应混合物在40℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用DCM(100mL)稀释，并通过短硅藻土垫过滤。硅藻土用DCM(100mL)洗涤，并且将滤液在减压下浓缩，得到浅黄色油状物(11.5g)。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至30％乙酸乙酯)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈无色油状物的5-溴-3-氟-6-[(2H3)甲基氧基]吡啶-2-甲酸乙酯(9.02g，85％)，将其静置固化。1H NMR(400MHz，DMSO)：1.32(3H，t)，4.36(2H，q)，8.39(1H，d)。19F NMR(376MHz，DMSO)：-126.47。m/z：ES+[M+H]+281.0。
5-溴-3-氟-6-[(2H3)甲基氧基]吡啶-2-甲酸
Figure BDA0003241985750003131
将5-溴-3-氟-6-[(2H3)甲基氧基]吡啶-2-甲酸乙酯(9.02g，32.1mmol)溶解在THF(90mL)和水(18mL)中，并且依次添加氢氧化锂水合物(1.75g，41.7mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将挥发物在减压下除去，并用1M柠檬酸将水性物酸化至pH 4，并用2-甲基-THF(2x100mL)萃取。将合并的有机物经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到呈白色固体的5-溴-3-氟-6-[(2H3)甲基氧基]吡啶-2-甲酸(8.2g，100％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：8.32(1H，dd)，12.68(1H，s)。19F NMR(376MHz，DMSO，30℃)：-127.09。m/z：ES-[M-H]-251.1。
(3R)-4-{5-溴-3-氟-6-[(2H3)甲基氧基]吡啶-2-羰基}-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003132
将5-溴-3-氟-6-[(2H3)甲基氧基]吡啶-2-甲酸(5.00g，19.8mmol)和(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4.70g，21.74mmol)溶解在THF(120mL)中。添加N，N-二异丙基乙胺(8.60mL，49.4mmol)，并且然后经5分钟分批添加HATU(11.27g，29.64mmol)。将混合物在室温搅拌4小时。将反应混合物在减压下浓缩，并将所得残余物溶解在DCM(100mL)中，并用水(100mL)洗涤。将水性部分用DCM(100mL)萃取，并使合并的有机物通过相分离器柱体并浓缩，得到棕色粘性油状物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至70％乙酸乙酯)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色泡沫的(3R)-4-{5-溴-3-氟-6-[(2H3)甲基氧基]吡啶-2-羰基}-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(6.82g，76％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.41(9H，s)，2.74-3.22(3H，m)，3.35-3.83(3H，m)，3.9-4.16(2H，m)，4.22-4.54(1H，m)，4.69-4.97(1H，m)，8.28-8.35(1H，m)。19F NMR(376MHz，DMSO，30℃)：-134.12，-132.96。m/z：ES+[M+H]+451.2。
(6aR)-3-溴-2-[(2H3)甲基氧基]-12-氧代-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003141
将碳酸铯(14.8g，45.3mmol)添加到(3R)-4-{5-溴-3-氟-6-[(2H3)甲基氧基]吡啶-2-羰基}-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(6.82g，15.1mmol)在乙腈(120mL)中的搅拌溶液中。将所得悬浮液在80℃下搅拌过夜。将混合物搅拌另外一个小时，并且然后趁热过滤。将滤液在减压下浓缩，得到棕色残余物，并将所得残余物溶解在DCM(100mL)中，并用水(50mL)、然后用盐水(50mL)洗涤。使有机部分通过相分离器柱体，并在减压下浓缩，以给出呈浅棕色泡沫的(6aR)-3-溴-2-[(2H3)甲基氧基]-12-氧代-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(6.49g，99％)。使用的物质无需进一步纯化。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.42(9H，s)，3.45(1H，s)，3.51-3.65(3H，m)，3.7-3.92(2H，m)，3.95-4.09(1H，m)，4.20(2H，d)，7.94(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+431.2。
(6aR)-3-溴-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003151
在0℃下将硼烷-THF复合物溶液(60.2mL在THF中的1.0M溶液，60.12mmol)逐滴添加到(6aR)-3-溴-2-[(2H3)甲基氧基]-12-氧代-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(6.49g，15.1mmol)在THF(100mL)中的溶液中。使所得溶液达到室温，并且然后在80℃下加热。1小时后，将反应混合物缓慢冷却至室温，并且然后在冰浴中冷却，并通过逐滴添加饱和氯化铵水溶液(80mL)淬灭。将混合物用水(80mL)稀释，并用乙酸乙酯(100mL)洗涤。将有机部分收集，并将水性物用另一份乙酸乙酯(100mL)洗涤。将合并的有机物用盐水(100mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到浅黄色油状物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％乙酸乙酯)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色泡沫的(6aR)-3-溴-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(4.98g，79％)。1H NMR(400MHz，DMSO)：1.40(9H，s)，2.27-2.4(1H，m)，2.58-2.72(1H，m)，2.72-2.85(2H，m)，3.05(1H，t)，3.58-3.7(4H，m)，3.92(1H，d)，4.22(1H，dd)，7.72(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+417.2。
(6aR)-3-溴-4-氯-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003152
将(6aR)-3-溴-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(4.98g，11.9mmol)在THF(100mL)中的溶液冷却至-40℃，并且逐滴添加2，2，6，6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂复合物溶液(14.3mL的在THF/甲苯中的1.0M溶液，14.32mmol)。将该溶液在-40℃下搅拌。30分钟后，添加另一份2，2，6，6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂复合物溶液(14.3mL的在THF/甲苯中的1.0M溶液，14.32mmol)，并将混合物在-40℃下再搅拌30分钟。一次性添加全氯乙烷(3.11g，13.1mmol)，并将混合物加温至室温并搅拌过夜。将混合物在冰浴中冷却，并通过逐滴添加饱和氯化铵水溶液(100mL)淬灭。将水性物用乙酸乙酯(2x100mL)萃取，并将合并的有机物经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到棕色残余物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至30％乙酸乙酯)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈浅棕色泡沫的(6aR)-3-溴-4-氯-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(4.75g，88％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.40(9H，s)，2.3-2.42(1H，m)，2.55-2.66(1H，m)，2.72-2.89(3H，m)，3.04-3.14(1H，m)，3.55-3.71(3H，m)，4.00(1H，d)，4.28-4.38(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+451.2。
(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003161
将(6aR)-3-溴-4-氯-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(4.75g，10.5mmol)和(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(2.72g，15.8mmol)在2-甲基-THF(90mL)和2M碳酸钠水溶液(15.8mL，31.5mmol)中的溶液用氮气脱气10分钟。添加RuPhos Pd G3(0.879g，1.05mmol)和二环己基(2′，6′-二异丙氧基-[1，1′-联苯基]-2-基)磷烷(0.491g，1.05mmol)，并将溶液在80℃下搅拌。4小时后，将反应混合物冷却至室温，并用水(50mL)稀释。将有机部分收集，并且将水性物用乙酸乙酯(50mL)洗涤。将合并的有机物用盐水(50mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到棕色残余物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至60％乙酸乙酯)进行纯化。将含有产物的级分蒸发至干燥，以提供呈浅黄色固体的(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(3.64g，69％)(作为阻转异构体的混合物)。m/z：ES+[M+H]+499.2。
3-氯-2-{(6aR)-4-氯-2-[(2H3)甲基氧基]-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基}苯酚旋转异构体1和2
Figure BDA0003241985750003171
将(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(3.64g，7.29mmol)悬浮在DCM(50mL)中，并且添加三氟乙酸(5.58mL，72.9mmol)。将该溶液在室温搅拌3小时。将该溶液在减压下浓缩，得到红色泡沫，将其溶解在DCM(100mL)中，并用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤。将有机部分收集，并将水性物用乙酸乙酯(100mL)洗涤。将合并的有机物经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到橙色固体。将粗产物通过反相色谱法纯化(沃特世XSelect CSH C18 ODB，450g)使用水(含有1％NH3)和乙腈的极性渐减混合物作为洗脱剂。将含有第一洗脱异构体的级分收集并浓缩，得到呈白色固体的3-氯-2-{(6aR)-4-氯-2-[(2H3)甲基氧基]-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基}苯酚的阻转异构体1(334mg，11％)。1H NMR(500MHz，DMSO，27℃)：2.29-2.39(2H，m)，2.6-2.68(2H，m)，2.72-2.83(3H，m)，3.57-3.68(3H，m)，3.96(1H，d)，4.25(1H，dd)，6.86-6.89(1H，m)，6.98(1H，dd)，7.23(1H，t)，9.85(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+399.2。将含有第二洗脱异构体的级分收集并浓缩，得到呈白色固体的3-氯-2-{(6aR)-4-氯-2-[(2H3)甲基氧基]-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基}苯酚的阻转异构体2(641mg，22％)。1HNMR(500MHz，DMSO，27℃)：2.11(1H，s)，2.29-2.38(2H，m)，2.59-2.67(2H，m)，2.72-2.84(3H，m)，3.56-3.69(2H，m)，3.97(1H，d)，4.26(1H，dd)，6.88(1H，dd)，6.94-6.99(1H，m)，7.23(1H，t)，9.84(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+399.2。
1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例111
Figure BDA0003241985750003181
将3-氯-2-{(6aR)-4-氯-2-[(2H3)甲基氧基]-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基}苯酚的旋转异构体1(330mg，0.83mmol)悬浮在DCM(5mL)中，并且添加三乙胺(225μL，1.65mmol)。添加丙烯酰氯(80μL，0.99mmol)，并将混合物在室温下搅拌。30分钟后，将反应混合物在减压下浓缩，得到奶油色固体。将粗固体溶解在MeOH(5mL)和在MeOH中的7N氨(5mL)中，并在室温下搅拌。10分钟后，将反应混合物在减压下浓缩，得到浅黄色泡沫。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％甲酸)与MeCN(25％-50％梯度)的极性渐减混合物作为洗脱剂纯化。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，以提供1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(146mg，39％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：2.37-2.47(1H，m)，2.7-2.78(1H，m)，2.79-2.98(2H，m)，3-3.16(1H，m)，3.63-3.76(2H，m)，3.85-3.98(1H，m)，4.01-4.16(2H，m)，4.31-4.5(1H，m)，5.66-5.75(1H，m)，6.14(1H，d)，6.78-6.91(2H，m)，6.98(1H，dd)，7.23(1H，t)，9.84(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+453.2。
1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体2，实例112
Figure BDA0003241985750003191
将3-氯-2-{(6aR)-4-氯-2-[(2H3)甲基氧基]-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-3-基}苯酚的旋转异构体2(640mg，1.60mmol)悬浮在DCM(10mL)中，并且添加三乙胺(437μL，3.21mmol)。添加丙烯酰氯(155μL，1.92mmol)，并且将混合物在室温下搅拌。10分钟后将反应混合物在减压下浓缩，得到奶油色固体。将固体悬浮在乙腈(2mL)/MeOH(2mL)/二甲亚砜(1mL)中，过滤并用乙腈(2mL)洗涤，并在真空烘箱中于45℃干燥，得到1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(290mg，40％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：2.38-2.46(1H，m)，2.7-2.79(1H，m)，2.81-2.99(2H，m)，3.01-3.13(1H，m)，3.71(2H，dd)，3.85-4.01(1H，m)，4.01-4.16(2H，m)，4.33-4.47(1H，m)，5.65-5.78(1H，m)，6.14(1H，d)，6.74-6.92(2H，m)，6.97(1H，dd)，7.23(1H，t)，9.81(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+453.2。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-(羟基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003201
将(12aR)-9-溴-10-氯-8-碘-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1g，1.84mmol)溶解在THF(15mL)中并冷却至0℃。逐滴添加异丙基氯化镁氯化锂复合物(1.56mL的在THF中的1.3M溶液，2.02mmol)，并将该溶液在0℃下搅拌30分钟。添加DMF(0.17mL，2.21mmol)，并将混合物在0℃下搅拌5分钟，并且然后使其达到室温并搅拌。45分钟后，将反应混合物在冰浴中冷却，并通过逐滴添加饱和氯化铵水溶液(5mL)和水(5mL)淬灭。将溶液用乙酸乙酯(2x20mL)萃取。将合并的有机物经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到呈浅棕色残余物的(12aR)-9-溴-10-氯-8-甲酰基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(850mg)。将此粗物质(820mg)溶解在THF(10mL)中，并在冰浴中冷却。一次性添加四氢硼酸钠(139mg，3.68mmol)，并将混合物加温至室温并搅拌。2小时后，将混合物通过添加氯化铵水溶液(5mL)和水(5mL)淬灭。将混合物用乙酸乙酯(2x20mL)萃取，并将合并的有机物部分用盐水(10mL)洗涤。将有机物经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到棕色泡沫。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至100％乙酸乙酯)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈浅黄色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氯-8-(羟基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(300mg，36％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.40(9H，s)，2.3-2.38(1H，m)，2.44-2.48(1H，m)，2.69-2.87(2H，m)，3.04-3.14(1H，m)，3.48-3.67(3H，m)，3.72(1H，d)，3.83(1H，d)，4.33(1H，dd)，4.47(2H，d)，5.46(1H，t)，7.38(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+447.2。
(12aR)-9-溴-10-氯-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003211
将氢化钠(40mg，在矿物油中按重量计60％，1.01mmol)一次性添加到(12aR)-9-溴-10-氯-8-(羟基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(300mg，0.67mmOl)和碘甲烷(213μL，3.35mmol)在DMF(2mL)中的冷却至0℃的溶液中。使所得溶液达到室温并搅拌。10分钟后，将混合物通过添加饱和氯化铵水溶液(2mL)和水(2mL)淬灭。将混合物用乙酸乙酯(2x10mL)萃取，并将合并的有机物用盐水(10mL)洗涤。使有机物通过相分离器柱体，并在减压下浓缩。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至40％乙酸乙酯)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色泡沫的(12aR)-9-溴-10-氯-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.125g，40％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)：1.40(9H，s)，2.32-2.37(1H，m)，2.69-2.8(3H，m)，3.05-3.15(1H，m)，3.36(3H，s)，3.53-3.68(3H，m)，3.72(1H，d)，3.82(1H，d)，4.34(1H，dd)，4.42(2H，s)，7.33(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+461.2。
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003212
将(12aR)-9-溴-10-氯-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(120mg，0.26mmol)和(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(134mg，0.78mmol)在2-甲基-THF(2mL)和2M碳酸钠水溶液(390μL，0.78mmol)中的溶液用氮气脱气10分钟。添加RuPhos Pd G3(22mg，0.03mmol)和二环己基(2′，6′-二异丙氧基-[1，1′-联苯基]-2-基)磷烷(12mg，0.03mmol)，并将溶液在85℃下搅拌。1小时后，将反应混合物冷却至室温，并用水(5mL)稀释。将有机部分收集，并且将水性物用乙酸乙酯(10mL)洗涤。将合并的有机物用盐水(5mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到棕色残余物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至60％乙酸乙酯)进行纯化。将含有产物的级分蒸发至干燥，以提供呈浅黄色固体的(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(80mg，60％)(作为阻转异构体的混合物)。m/z：ES+[M+H]+509.2。
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例113；和旋转异构体2，实例114
Figure BDA0003241985750003221
将(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(80mg，0.16mmol)悬浮在DCM(1mL)中，并且添加三氟乙酸(120μL，1.57mmol)。1小时后将该反应混合物在减压下浓缩，并且将粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将产物用在MeOH中的1.0M NH3洗脱，并将含有产物的级分蒸发至干燥，以提供浅黄色干膜状物，将其悬浮在DCM(1mL)中，并添加三乙胺(40μL，0.29mmol)。添加丙烯酰氯(14.21μl，0.18mmol)，并将混合物在室温下搅拌。10分钟后，将反应混合物在减压下浓缩，得到黄色残余物。将粗残余物溶解在MeOH(1mL)和在MeOH中的7N氨(1mL)中，并在室温下搅拌。10分钟后，将反应混合物在减压下浓缩，得到浅黄色残余物。将粗产物通过制备型HPLC(沃特世XSelect CSH C18 ODB柱，5μ二氧化硅，30mm直径，100mm长度)使用水(含有0.1％甲酸)和乙腈的极性渐减混合物作为洗脱剂进行纯化。将含有第一洗脱异构体的级分收集并浓缩，得到呈灰白色固体的1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的阻转异构体1(1mg，2％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：2.53-2.66(1H，m)，2.83-3.14(3H，m)，3.25(3H，s)，3.37-3.57(1H，m)，3.63-3.9(3H，m)，3.98-4.11(2H，m)，4.12-4.24(2H，m)，4.3-4.48(1H，m)，5.74(1H，d)，6.32(1H，dd)，6.54(1H，dd)，6.94-7.01(1H，m)，7.11(1H，dd)，7.27-7.3(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+463.2。将含有第二洗脱异构体的级分收集并浓缩，得到呈灰白色固体的1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的阻转异构体2(3mg，5％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)：2.47-2.66(1H，m)，2.86-3.11(3H，m)，3.26(3H，s)，3.32-3.59(1H，m)，3.69(1H，d)，3.74-3.91(2H，m)，3.96-4.25(4H，m)，4.29-4.45(1H，m)，5.74(1H，d)，6.31(1H，dd)，6.55(1H，dd)，6.98(1H，dd)，7.10(1H，dd)，7.27-7.32(2H，m)。m/z：ES+[M+H]+463.2。
4-溴-2，3，6-三氟苯甲酸
Figure BDA0003241985750003231
在-78℃下在氮气下将2，2，6，6-四甲基哌啶(48mL，284.39mmol)逐滴添加到在THF(500mL)中在己烷(114mL，284.39mmol)中的2.5M正丁基锂溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30分钟。在-78℃下在氮气下将1-溴-2，3，5-三氟苯(17.06mL，142.19mmll)逐滴添加到混合物中。将所得溶液在-78℃下搅拌1小时。然后在-78℃下分批添加固体二氧化碳(18.77g，426.58mmol)。将所得溶液在-78℃下搅拌4小时。将反应混合物用2M HCl(100mL)淬灭，用水(500mL)稀释，并用EtOAc(3x300mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供呈棕色油状物的粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中0至20％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的4-溴-2，3，6-三氟苯甲酸(30g，83％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)7.16-7.23(1H，m)有一个可交换的质子没有发现。
(3R)-4-(4-溴-2，3，6-三氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003241
在0℃下将DIPEA(61.6mL，352.95mmol)逐滴添加到在DMF(400mL)中的4-溴-2，3，6-三氟苯甲酸(30g，117.65mmol)、(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(38.2g，176.48mmol)和HATU(89g，235.3mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用饱和NH4Cl(200mL)淬灭。用EtOAc(1000mL)稀释，依次用水(300mL)和饱和盐水(3X600mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈棕色油状物的粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至50％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的(3R)-4-(4-溴-2，3，6-三氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(12g，23％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.46(9H，s)，2.78-2.87(2H，m)，2.87-3.17(2H，m)，3.18-3.42(1H，m)，3.51-3.67(1H，m)，3.67-3.81(1H，m)，3.82-4.36(2H，m)，4.47-4.89(1H，m)，7.14-7.23(1H，m)。m/z：ES+[M-tBu]+＝397。
(12aR)-9-溴-7，10-二氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003251
在0℃下在氮气下将氢化钠(1.456g，36.4mmol)添加到在DMF(60mL)中的(3R)-4-(4-溴-2，3，6-三氟苯甲酰基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(11g，24.27mmol)中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将该反应混合物用饱和NH4Cl(50mL)淬灭，用水(200mL)稀释并且用EtOAc(2x300mL)萃取。将有机层用饱和盐水(2x400mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈黄色油状物的粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中10％至50％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-7，10-二氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(6g，57％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.42(9H，s)，3.43-3.55(1H，m)，3.56-3.73(4H，m)，3.83-3.97(1H，m)，4.10-4.19(1H，m)，4.21-4.40(2H，m)，7.57-7.70(1H，m)。m/z：ES+[M-tBu]+＝377。
(12aR)-9-溴-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003252
在0℃下在氮气下将氢化钠(0.208g，5.19mmol)添加到在DMF(30m)中的2-二甲基氨基乙醇(0.383mL，3.81mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌20分钟。在0℃下在氮气下将在DMF(30mL)中的(12aR)-9-溴-7，10-二氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.5g，3.46mmol)添加到混合物中。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将反应混合物用饱和NH4Cl(50mL)淬灭，用EtOAc(3x75mL)萃取。将有机层合并，并用饱和盐水(2x150mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈黄色油状物的粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在DCM中10％至30％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.1g，63％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.42(9H，s)，2.21(6H，s)，2.54-2.64(2H，m)，3.22-3.30(1H，m)，3.30-3.39(2H，m)，3.61-3.82(2H，m)，3.90-4.16(5H，m)，4.15-4.29(1H，m)，7.29(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝502。
(12aR)-9-溴-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12,12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003261
在25℃下在氮气下将(乙酰丙酮)(1，5-环辛二烯)-铑(I)(136mg，0.44mmol)添加到在THF(50mL)中的苯基硅烷(1896mg，17.52mmol)和(12aR)-9-溴-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-6-氧代-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(1100mg，2.19mmol)中。将所得混合物在70℃下搅拌2小时。将反应混合物用饱和NH4F(50mL)淬灭，用EtOAc(3x50mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供呈黄色油状物的粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中0至80％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的(12aR)-9-溴-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.8g，75％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.29-2.43(1H，m)，2.53(6H，s)，2.62-2.67(1H，m)，2.69-2.81(2H，m)，2.97-3.03(1H，m)，3.40-3.54(2H，m)，3.57-3.68(2H，m)，3.68-3.81(2H，m)，3.98-4.10(1H，m)，4.09-4.23(2H，m)，4.29-4.39(1H，m)，7.05(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝488。
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003271
在25℃下在氮气下将(2-氯-6-甲氧基苯基)硼酸(371mg，2.15mmol)添加到在1，4-二噁烷(16mL)和H20(4mL)(4：1比率)中的K2CO3(396mg，2.87mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(166mg，0.14mmol)和(12aR)-9-溴-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(700mg，1.43mmol)中。将所得混合物在80℃下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％甲酸)中20％至40％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈无色固体的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.5g，65％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.44(9H，s)，2.90(6H，s)，3.07-3.21(2H，m)，3.50-3.61(2H，m)，3.75-3.92(2H，m)，4.19-4.97(9H，m)，6.67-6.83(1H，m)，6.93(1H，d)，7.02(1H，d)，7.24(1H，t)，9.97(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝536。
3-氯-2-{(12aR)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚
Figure BDA0003241985750003281
在25℃下将TFA(1mL，12.98mmol)添加到在DCM中的(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-甲酸叔丁酯(500mg，0.93mmol)中。将所得混合物在25℃下搅拌30分钟。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的3-氯-2-{(12aR)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚(0.4g，98％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.82-2.90(2H，m)，2.89(6H，s)，2.94-3.19(4H，m)，3.39-3.60(2H，m)，3.70-4.01(3H，m)，4.13-4.32(3H，m)，4.36-4.47(1H，m)，6.58-6.69(1H，m)，6.86-6.96(1H，m)，7.01(1H，d)，7.24(1H，d)，9.01(1H，t)，9.96(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝436。
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例115；和旋转异构体2，实例116
Figure BDA0003241985750003291
在0℃下在氮气下将丙烯酰氯(83mg，0.92mmol)添加到在DMF(10mL)中的DIPEA(481μl，2.75mmol)和3-氯-2-{(12aR)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基}苯酚(400mg，0.92mmol)中。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(1mL)淬灭，并直接通过制备型HPLC纯化：(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5um；流动相A：水(0.1％甲酸)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：10min内8B至18B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体1(0.059g，11％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.26(6H，s)，2.40-2.43(1H，m)，2.56-2.73(3H，m)，2.73-3.41(3H，m)，3.56-3.60(1H，m)，3.67-3.90(1H，m)，3.82-4.29(5H，m)，4.38-4.31(1H，m)，5.70(1H，d)，6.13(1H，d)，6.53(1H，d)，6.81-6.90(1H，m)，6.84-7.05(2H，m)，7.22-7.30(1H，m)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝490。接着是1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮的呈白色固体的旋转异构体2(0.055g，11)。1H NMR(400MHz，CD3OD，30℃)2.58(1H，d)，2.94-3.01(7H，m)，3.00-3.32(3H，m)，3.60(2H，d)，3.61-4.04(3H，m)，4.22-4.67(5H，m)，5.79(1H，d)，6.14-6.38(1H，m)，6.67(1H，d)，6.75-6.96(2H，m)，6.99(1H，d)，7.21-7.25(1H，m)有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝490。
2，5-二氯-4-氟烟酸甲酯
Figure BDA0003241985750003301
在氮气下将2-氯-4-氟吡啶-3-甲酸甲酯(20g，105.5mmol)在THF(300mL)中的溶液冷却至-45℃，并且逐滴添加在THF(127mL，126.6mmol)中的1M二氯化镁(2，2，6，6-四甲基哌啶)锂盐(lithium magnesium 2，2，6，6-tetramethylpiperidin-1-ide dichloride)。将反应混合物在-45℃下搅拌20分钟，然后逐滴添加全氯乙烷(31.2g，131.88mmol)在THF(50mL)中的溶液，并将混合物在室温搅拌1.5小时。将反应通过添加饱和氯化铵淬灭，然后在EtOAc和水之间分配。将有机层用盐水洗涤并蒸发。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在庚烷中0至50％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈无色油状物的2，5-二氯-4-氟烟酸甲酯(14g，59％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)4.02(3H，s)，8.47(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝224。
2，5-二氯-4-氟吡啶-3-甲醛
Figure BDA0003241985750003302
在氮气下将2，5-二氯-4-氟烟酸甲酯(14g，50mmol)在DCM(200mL)中的溶液冷却至-78℃。逐滴添加在己烷中的1M二异丁基氢化铝溶液(52.5mL，52.5mmol)，保持内部反应温度低于-70℃。将所得混合物在-78℃下搅拌1小时。将反应混合物用2M HCl(100mL)淬灭，并用DCM(2x200mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供呈无色油状物的2，5-二氯-4-氟吡啶-3-甲醛(8g，82％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)8.60(1H，d)，10.39(1H，d)。未观察到质量离子。
(3R)-4-[(2，5-二氯-4-氟吡啶-3-基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003311
在20℃下将冰乙酸(0.212mL，3.71mmol)添加到在DCM(150mL)中的2，5-二氯-4-氟吡啶-3-甲醛(8g，37.12mmol)和(3R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(9.63g，44.54mmol)中。将所得混合物在20℃下搅拌1小时。然后在20℃下将三乙酰氧基硼氢化钠(11.8g，55.67mmol)添加到混合物中。将所得混合物在20℃下搅拌16小时。添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(3.93g，18.56mmol)，并将所得混合物在20℃下再搅拌4小时。将反应混合物通过小心添加饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，并将水层用DCM萃取。将有机层用饱和盐水洗涤，并经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将获得的残余物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至30％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈无色油状物的(3R)-4-[(2，5-二氯-4-氟吡啶-3-基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(9g，62％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，30℃)1.41(9H，s)，2.33-2.45(1H，m)，2.63-2.84(2H，m)，3.24-3.34(1H，m)，3.41-3.55(2H，m)，3.57-3.64(1H，m)，3.65-3.73(2H，m)，3.74-3.79(1H，m)，3.82-3.94(1H，m)，4.09-4.19(1H，m)，8.38(1H，d)。m/z：ES+[M+H]+＝394。
(6aR)-1，4-二氯-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003312
在氮气下将(3R)-4-[(2，5-二氯-4-氟吡啶-3-基)甲基]-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(9g，22.83mmol)在DMF(100mL)中的溶液冷却至0℃。一次性添加氢化钠(2.74g，68.48mmol)，并将反应混合物在20℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(15mL)淬灭，并用EtOAc(200mL)稀释。将有机层用水(3x250mL)、饱和盐水洗涤，并经无水硫酸钠干燥，过滤然后蒸发，以提供呈棕色油状物的粗产物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至25％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈白色固体的(6aR)-1，4-二氯-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(8g，94％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.41(9H，s)，2.60-2.66(1H，m)，2.80-2.97(4H，m)，3.70-3.77(1H，m)，3.78-3.85(1H，m)，3.88-3.97(1H，m)，3.98-4.07(1H，m)，4.14-4.23(1H，m)，4.50-4.59(1H，m)，8.30(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝374。
(6aR)-1，4-二氯-3-碘-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003321
在氮气下将(6aR)-1，4-二氯-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(8g，21.38mmol)溶解在THF(100mL)中，并且冷却至-45℃。逐滴添加在THF/甲苯中的1M 2，2，6，6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂复合物溶液(64.1mL，64.13mmol)，并将所得混合物在-45℃下搅拌30分钟。然后添加二碘(8.14g，32.06mmol)在THF(50mL)中的溶液。将反应混合物在-45℃下搅拌15分钟，然后使其加温至0℃，并在0℃下用饱和氯化铵(10mL)淬灭，用水(200mL)稀释，然后用EtOAc(3x200mL)萃取。将有机层用饱和硫代硫酸钠、盐水洗涤，然后经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，以提供粗棕色油状物。将该粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至40％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色油状物的(6aR)-1，4-二氯-3-碘-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(9.7g，91％)。1HNMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.60-2.69(1H，m)，2.73-3.06(3H，m)，3.33-3.42(1H，m)，3.66-3.85(2H，m)，3.87-4.04(2H，m)，4.16-4.24(1H，m)，4.45-4.60(1H，m)。m/z：ES+[M+H]+＝500。
(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氯-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f]H，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003331
将RuPhos-Pd-G3(0.936g，1.12mmol)和2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基联苯(0.522g，1.12mmol)添加到(6aR)-1，4-二氯-3-碘-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(5.60g，11.20mmol)、(2-氯-6-甲氧基苯基)硼酸(2.71g，14.56mmol)和碳酸钠(2.37g，22.39mmol)在1，4-二噁烷(32mL)和水(8mL)(4∶1比率)中的脱氧悬浮液中。将所得混合物在氮气气氛下在50℃下搅拌3小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至40％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氯-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(2.2g，38％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.55-2.64(1H，m)，2.77-3.01(3H，m)，3.54-3.63(1H，m)，3.74-3.98(3H，m)，4.03-4.31(2H，m)，4.58-4.69(1H，m)，6.84-6.92(1H，m)，7.07-7.17(2H，m)，7.24(1H，t)，7.46(1H，t)，8.18(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝514。
(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-甲氧基苯基)-1-(丙-1-炔-1-基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003341
在20℃下在氮气气氛下将在THF(19.42mL，19.42mmol)中的N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(3.39mL，19.42mmol)和1M丙-1-炔添加到在DMF(15mL)中的(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氯-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(1.00g，1.94mmol)、1，1′-二茂铁二基-双(二苯基膦)(0.108g、0.19mmol)和甲烷磺酸1，1-二茂铁二基-双(二苯基膦基)(2′-氨基-1，1′-联苯基-2-基)钯(II)(0.179g，0.19mmol)中。将所得混合物在微波中在120℃下搅拌16小时。将溶剂在减压下去除。将获得的粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为在石油醚中0至40％THF)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈棕色固体的(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-甲氧基苯基)-1-(丙-1-炔-1-基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.39g，39％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)1.40(9H，s)，2.09(3H，s)，2.55-2.73(2H，m)，2.79-2.89(2H，m)，2.90-3.02(1H，m)，3.69(3H，d)，3.71-3.86(2H，m)，4.00-4.13(3H，m)，4.49-4.59(1H，m)，7.11(2H，t)，7.43(1H，t)。m/z：ES+[M+H]+＝518。
3-氯-2-[(6aR)-4-氯-1-(丙-1-炔-1-基)-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]苯酚
Figure BDA0003241985750003342
在0℃下在氮气下将在DCM(3.47mL，3.47mmol)中的1M三溴化硼添加到在DCM(5mL)中的(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-甲氧基苯基)-1-(丙-1-炔-1-基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.3g，0.58mmol)中。将所得混合物在20℃下搅拌2小时。将反应混合物用MeOH(20mL)淬灭。将溶剂在减压下去除。将获得的残余物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中0至80％MeCN)进行纯化。将含有产物的级分蒸发至干燥，以提供粗产物。将该粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的3-氯-2-[(6aR)-4-氯-1-(丙-1-炔-1-基)-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]苯酚(0.14g，60％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.09(3H，d)，2.75-2.92(1H，m)，2.93-3.01(2H，m)，3.01-3.14(2H，m)，3.24-3.35(2H，m)，4.00-4.12(1H，m)，4-16-4.26(2H，m)，4.55-4.68(1H，m)，6.86-7.01(2H，m)，7.17-7.33(1H，m)，9.98(1H，s).有一个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝404。
1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-1-(丙-1-炔-1-基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例117；和旋转异构体2，实例118
Figure BDA0003241985750003351
在-20℃下在氮气下将丙烯酰氯(19.5mg，0.22mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(168μl，0.96mmol)添加到在DMF(3mL)中的3-氯-2-[(6aR)-4-氯-1-(丙-1-炔-1-基)-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]苯酚(0.13g，0.32mmol)中。将所得混合物在-20℃下搅拌1小时。将反应混合物用水淬灭并过滤。将滤液直接纯化，并将每种阻转异构体通过制备型HPLC柱分离：SunFire C18 OBD Prep柱，
Figure BDA0003241985750003352
5μm，19mm X 250mm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：MeCN；流速：20mL/min；梯度：10min内35B至45B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥。从而首先得到呈白色固体的1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-1-(丙-1-炔-1-基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体1(0.013g，9％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.11(3H，s)，2.53-2.58(1H，m)，2.61-2.75(1H，m)，2.76-3.01(2H，m)，3.04-3.21(1H，m)，3.88-4.16(4H，m)，4.16-4.31(1H，m)，4.48-4.64(1H，m)，5.72(1H，d)，6.14(1H，d)，6.74-6.93(2H，m)，6.97(1H，d)，7.25(1H，t)，9.95(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝458。接着是呈白色固体的1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-1-(丙-1-炔-1-基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮旋转异构体2(9.1mg，6％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.11(3H，s)，2.53-2.58(1H，m)，2.61-2.75(1H，m)，2.76-3.01(2H，m)，3.04-3.21(1H，m)，3.88-4.16(4H，m)，4.16-4.31(1H，m)，4.48-4.64(1H，m)，5.72(1H，d)，6.14(1H，d)，6.74-6.93(2H，m)，6.97(1H，d)，7.25(1H，t)，9.95(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝458。
(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-甲氧基苯基)-1-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯
Figure BDA0003241985750003361
在20℃下在氮气气氛下将N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(2mL，11.65mmol)和乙炔基三甲基硅烷(1.5mL，11.65mmol)添加到在DMF(10mL)中的(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氯-6-甲氧基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.6g，1.17mmol)、1，1′-二茂铁二基-双(二苯基膦)(64.6mg，0.12mmol)和甲烷磺酸1，1-二茂铁二基-双(二苯基膦基)(2′-氨基-1，1′-联苯基-2-基)钯(II)(108mg，0.12mmol)中。在微波中将所得混合物在120℃下搅拌16小时。将反应混合物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中0至100％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黑色固体的(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-甲氧基苯基)-1-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(0.3g，45％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)0.25(9H，s)，1.40(9H，s)，2.77-3.03(3H，m)，3.11-3.18(1H，m)，3.70(3H，d)，3.78-3.93(3H，m)，4.25-4.40(3H，m)，4.61-4.67(1H，m)，7.13(2H，t)，7.45(1H，t)。m/z：ES+[M+H]+＝576。
3-氯-2-[(6aR)-4-氯-1-乙炔基-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]苯酚
Figure BDA0003241985750003371
在0℃下在氮气下将在DCM(1977μl，1.98mmol)中的1M三溴化硼添加到在DCM(2mL)中的(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-甲氧基苯基)-1-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-甲酸叔丁酯(190mg，0.33mmol)中。将所得混合物在20℃下搅拌2小时。将反应混合物用MeOH(20mL)淬灭。将溶剂在减压下去除。将获得的残余物通过快速C18快速色谱法(洗脱梯度为在水(0.1％TFA)中0至100％MeCN)进行纯化。将含有产物的级分蒸发至干燥，以提供粗产物。将该粗产物通过离子交换色谱法使用SCX柱进行纯化。将所需产物使用7M NH3/MeOH从柱中洗脱，并且将纯级分蒸发至干燥，以提供呈黄色固体的3-氯-2-[(6aR)-4-氯-1-乙炔基-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]苯酚(0.085g，66％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.54-2.68(2H，m)，2.69-2.88(3H，m)，2.90-3.07(2H，m)，3.68-3.77(1H，m)，4.02-4.12(2H，m)，4.45-4.67(2H，m)，6.87-7.01(2H，m)，7.23-7.32(1H，m)。有两个可交换的质子没有发现。m/z：ES+[M+H]+＝390。
1-((6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-1-乙炔基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基)丙-2-烯-1-酮旋转异构体1，实例119；和旋转异构体2，实例120
Figure BDA0003241985750003381
在-20℃下在氮气下将丙烯酰氯(19.71mg，0.22mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(114μl，0.65mmol)添加到在DMF(2mL)中的3-氯-2-[(6aR)-4-氯-1-乙炔基-6，6a，7，8，9，10-六氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-3-基]苯酚(85.00mg，0.22mmol)中。将所得混合物在-20℃下搅拌1小时。将反应混合物用水淬灭并过滤。将滤液直接纯化，并将每种阻转异构体通过制备型HPLC柱分离：SunFire C18 OBD Prep柱，
Figure BDA0003241985750003382
5μm，19mm X 250mm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：MeCN；流速：20mL/min；梯度：10min内35B至45B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干燥，从而首先提供呈白色固体的1-((6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-1-乙炔基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基)丙-2-烯-1-酮旋转异构体1(0.011g，12％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.52-2.61(1H，m)，2.64-2.73(1H，m)，2.82-3.00(2H，m)，3.09-3.22(1H，m)，3.89-4.17(4H，m)，4.18-4.36(1H，m)，4.51-4.62(1H，m)，4.67(1H，s)，5.63-5.75(1H，m)，6.14(1H，d)，6.77-6.89(1H，m)，6.94(2H，dd)，7.27(1H，t)，10.01(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝444。接着是呈白色固体的1-((6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-1-乙炔基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基)丙-2-烯-1-酮旋转异构体2(6.6mg，7％)。1H NMR(400MHz，DMSO，30℃)2.52-2.61(1H，m)，2.64-2.73(1H，m)，2.82-3.00(2H，m)，3.09-3.22(1H，m)，3.89-4.17(4H，m)，4.18-4.36(1H，m)，4.51-4.62(1H，m)，4.67(1H，s)，5.63-5.75(1H，m)，6.14(1H，d)，6.77-6.89(1H，m)，6.94(2H，dd)，7.27(1H，t)，10.01(1H，s)。m/z：ES+[M+H]+＝444。

Claims (16)

1.一种具有式(A)的化合物：
Figure FDA0003241985740000011
其中：
A是苯基或双环杂芳基；
X和Y通过双键连接，并且i)X是CR7并且Y是CR8，ii)X是N并且Y是CR8，或者iii)X是CR7并且Y是N；或
X和Y一起是C(O)NR9；或
X和Y是与经Z取代的芳香环稠合的任选经取代的5或6元N-杂环的相邻环原子，并且X和Y均为C或为C和N；
Z是O、NH、或NMe；
R1独立地选自F、Cl、Br、OH、CH2OH、OMe、CH2OMe、C1-C3烷基和C1-C3氟烷基；
n是0、1、2或3；
R2是H、F、Cl、CCH、CCMe、CN、Br、C1-C3烷基、C1-C3氟烷基、OMe或OEt；
R3a和R3b一起是＝O或者R3a和R3b是H；
R4是H或Me；
R5是H或Me；
R6是H或CH2NMe2；
R7和R8独立地选自H、F、Cl、CCH、CC(C1-C3烷基)、CCCH2NMe2、CCCH2O(C1-C3烷基)、CN、Me、C1-C6烷基、OH、OMe、O(C1-C3烷基)、O(C1-C3氘烷基)、O(C1-C3氟烷基)、O(C3-C6环烷基)、C1-C3氟烷基、OCH2CH2NMe2、OCH2CH2OMe、CH2OMe、OCH2CH2N(CH2CH2)2CH、OCH2CH2N(CH2CH2)2O、OCH2CH2(2-吡啶基)或者任选经取代的3、4、5或6元碳环或杂环；或
R7和R8组合形成任选经取代的5或6元碳环或杂环；
R9选自H、Me、Et、C3H7和C1-C3氟烷基；
或其药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中i)X是CR7并且Y是CR8，ii)X是N并且Y是CR8，或者iii)X是CR7并且Y是N。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物，其中Z是O。
4.根据任一前述权利要求所述的化合物，其中R3a和R3b是H。
5.根据任一前述权利要求所述的化合物，其中R4是H。
6.根据任一前述权利要求所述的化合物，其中R6是H。
7.根据任一前述权利要求所述的化合物，其中A是苯基。
8.根据权利要求1所述的化合物，该化合物选自：
(12aS)-2-丙烯酰基-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-6-酮；
1-((12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮；
(12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮；
1-((12aR)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-10-氯-8-氟-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮；
1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-羟基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-咪唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-7-甲腈；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-7-(1H-吡唑-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-((12aR)-10-氯-8-氟-9-(5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f[]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮；
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈；
(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲基-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-6-酮；
1-[(12aR)-8，10-二氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
8-[(12aR)-10-氯-8-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9-基]-7-甲基异喹啉-1(2H)-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氟-6-羟基苯基)-8-甲氧基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aS)-10-氯-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aS)-10-氯-11-甲基-9-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，3，4，11，12，12a-六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂卓-6(2H)-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2，3-二氟-6-羟基苯基)-8-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-10-氯-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8，10-二氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8，10-二氟-9-[2-氟-6-(羟基甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8，10-二氟-9-[2-羟基-6-(三氟甲基)苯基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-乙基-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-[2-(二氟甲基)-6-羟基苯基]-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈；
(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-2-(丙-2-烯酰基)-1，2，3，4，12，12a-六氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-8-甲腈；
1-[(12aR)-9-(2-溴-6-羟基苯基)-8，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8-氯-10-氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8-氯-10-乙炔基-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-乙炔基-8-氟-9-(2-羟基-6-甲基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮；
1-[(6aR)-1，4-二氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮；
(6aR)-4-氯-3-(2-氟-6-羟基苯基)-8-(丙-2-烯酰基)-2，6，6a，7，8，9，10，12-八氢-1H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-1-酮；
1-[(8aR)-6-氯-5-(2-氟-6-羟基苯基)-8a，9，11，12-四氢-14H-吡嗪并[2，1-c][1，2，4]***并[4′，3′：1，2]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-10(8H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮；和
1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氟-6-羟基苯基)-2-甲基-2，7a，8，10，11，13-六氢吡嗪并[2′，1′：3，4][1，4]氧氮杂卓并[7，6-g]吲唑-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-((12aR)-10-氯-8-乙炔基-9-(2-氟-6-羟基苯基)-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮；
1-[(7aR)-5-氯-4-(2-氯-6-羟基苯基)-1-甲基-1，7a，8，10，11，13-六氢咪唑并[4，5-g]吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-9(7H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-8-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-乙炔基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-10-甲基-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7，8-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-乙炔基-7，10-二氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(二氟甲氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(环丙基氧基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-((12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基)-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-苯并[f]吡嗪并[2，1-c][1，4]氧氮杂卓-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[(吡啶-4-基)甲氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(2-甲氧基乙氧基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-10-氟-8-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(丙-1-炔-1-基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-2-[(2H3)甲基氧基]-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[2，3-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(12aR)-10-氯-9-(2-氯-6-羟基苯基)-8-(甲氧基甲基)-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；和
1-[(12aR)-9-(2-氯-6-羟基苯基)-7-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-10-氟-3，4，12，12a-四氢-6H-吡嗪并[2，1-c][1，4]苯并氧氮杂卓-2(1H)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-1-(丙-1-炔-1-基)-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基]丙-2-烯-1-酮；和
1-((6aR)-4-氯-3-(2-氯-6-羟基苯基)-1-乙炔基-6a，7，9，10-四氢-12H-吡嗪并[2，1-c]吡啶并[3，4-f][1，4]氧氮杂卓-8(6H)-基)丙-2-烯-1-酮；
或其药学上可接受的盐。
9.一种药物组合物，该药物组合物包含根据任一前述权利要求所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。
10.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于作为药物使用。
11.用于根据权利要求10所述使用的化合物，用于治疗由KRAS、NRAS或HRAS G12C突变介导的障碍。
12.用于根据权利要求10或权利要求11所述使用的化合物，用于治疗癌症。
13.一种治疗方法，该方法包括向有需要的患者给予有效量的根据权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。
14.根据权利要求13所述的治疗方法，其中该有需要的患者患有由KRAS、NRAS或HRASG12C突变介导的障碍。
15.根据权利要求13或权利要求14所述的治疗方法，其中该有需要的患者患有癌症。
16.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐用于制造药物的用途，该药物例如为用于治疗癌症的药物。
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