TW202012415A - 化學化合物 - Google Patents
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Abstract
本說明書涉及具有式 (I) 之化合物
Description
本說明書涉及抑制G12C突變型RAS蛋白並隨後表現出抗癌活性的某些四環雜芳基化合物及其藥學上可接受的鹽。本說明書還涉及所述四環雜芳基化合物及其藥學上可接受的鹽在治療人體或動物體之方法，例如在預防或治療癌症中之用途。本說明書還涉及在製備所述四環雜芳基化合物中所涉及的方法和中間體，並且涉及含有所述四環雜芳基化合物的藥物組成物。
KRAS、NRAS和HRAS基因編碼一組密切相關的小GTP酶蛋白KRas、NRas和HRas（在本文中統稱為Ras蛋白或Ras），它們具有82%-90%的總體序列同一性。Ras蛋白係傳訊途徑的關鍵組分，傳遞來自細胞表面受體的訊號以調節細胞增殖、存活和分化。Ras用作分子開關，在非活性GDP結合狀態與活性GTP結合狀態之間循環。Ras的GDP/GTP循環在細胞中藉由鳥嘌呤核苷酸交換因子（GEF）（如Sos1和Sos2）和GTP酶激活蛋白（GAP）（如NF-1和p120RasGAP）進行嚴格調節，該等鳥嘌呤核苷酸交換因子促進GDP交換為GTP，該等GTP酶激活蛋白刺激Ras的內在GTP酶活性，將GTP水解為GDP。
Ras蛋白長度為188-189個胺基酸並且具有高度保守的N末端G結構域，該G結構域含有結合核苷酸的p-環區，以及對調節蛋白和效應蛋白相互作用重要的開關I和開關II區。Ras蛋白的C末端區更加趨異並且含有調節Ras與膜的締合的元件，包括保守的羧基末端CAXX盒模體，該模體係翻譯後異戊二烯化修飾所必需的。在與GTP結合時，Ras的開關I和開關II區經歷構象變化，這能夠使其與效應蛋白相互作用並激活效應蛋白以調節下游傳訊途徑。Ras的最佳表徵的效應物係絲胺酸/蘇胺酸激酶Raf，其調節絲裂原激活蛋白激酶（MAPK）途徑的活性。PI3K途徑係Ras下游的另一個重要的效應途徑，其中I類磷酸肌醇3-激酶的p110催化亞基與Ras相互作用。還描述了Ras的其他效應物，包括RalGDS、Tiam1、PLC-ε和Rassf1（Cox等人 Nature Reviews Drug Discovery [自然綜述：藥物發現], 2014, 13:828-851）。
RAS突變經常見於癌症中，並且所有人類癌症中大約30%在KRAS、NRAS或HRAS基因中具有突變。致癌性Ras典型地但並非僅與Ras的甘胺酸12、甘胺酸13或麩醯胺酸61處的突變相關聯。該等殘基位於Ras的活性位點處，並且突變損害內源性和/或GAP催化的GTP酶活性，從而促成GTP結合Ras的形成和下游效應途徑的異常激活。KRAS係癌症中最常見的突變型RAS基因，其次係NRAS，並且然後是HRAS。有若干種腫瘤類型在KRAS中表現出高頻率的激活突變，包括胰腺癌（約90%患病率）、結腸直腸癌（約40%患病率）和非小細胞肺癌（約30%患病率）。KRAS突變也見於其他癌症類型中，包括多發性骨髓瘤、子宮癌、膽管癌、胃癌、膀胱癌、彌漫性大B細胞淋巴瘤、橫紋肌肉瘤、皮膚鱗狀細胞癌、子宮頸癌、睾丸生殖細胞癌等。
Ras殘基12處的甘胺酸至半胱胺酸突變（G12C突變）由密碼子12處的G.C至T.A鹼基顛換產生，該鹼基顛換係RAS基因中常見的一種突變，占癌症類型中所有KRAS突變的14%、所有NRAS突變的2%和所有HRAS突變的2%。G12C突變特別富集在KRAS突變型非小細胞肺癌中，其中大約一半攜帶該突變，該突變與由煙草煙霧形成的DNA加合物相關聯。G12C突變並非僅與肺癌相關聯，並且見於其他RAS突變型癌症類型，包括所有KRAS突變型結腸直腸癌的8%中。
迄今為止，還沒有已批准用於治療用途的G12C突變型Ras蛋白的抑制劑。因此，需要具有適於臨床應用所需的藥物特性的新的G12C突變型Ras蛋白抑制劑。已經發現本說明書的化合物具有抗腫瘤活性，有用於抑制由惡性疾病引起的不受控制的細胞增殖。本說明書的化合物藉由（作為最低限度）充當G12C突變型Ras蛋白抑制劑，提供抗腫瘤作用。
根據本說明書的第一方面，提供了一種具有式 (I) 之化合物：
其中：
環A選自苯基和雙環雜芳基；
R1
在每次出現時獨立地選自C1-4
烷基、鹵素、羥基、C1-4
烷氧基、C1-3
氟烷基、C1-3
氟烷氧基、氰基和乙炔基；
b係0、1、2或3；
Y係CH2
或CH2
CH2
；
R2
係氰基、鹵素、C1-4
烷基、C1-4
烷氧基或C1-3
氟烷基；
R3
係F、Me、Et、MeO或C1-2
氟烷基；
R4
係H或Me；
R5
係H或Me；
R6
係H或CH2
NMe2
；
或其藥學上可接受的鹽，其條件係當Y係CH2
，R2
係Cl，R3
係F，A係苯基，b係2，基團R1
係F和OH並且各自在聯芳基鍵的鄰位時，並且當R4
和R6
均為H時，那麼R5
係Me。
在另一個方面中，提供了一種藥物組成物，該藥物組成物包含具有式 (I) 之化合物。
在另一個方面中，提供了一種藉由向罹患癌症的受試者給予有效量的具有式 (I) 之化合物來治療癌症之方法。
在另一個方面中，提供了一種具有式 (I) 的化合物，其用作一種藥劑。
在另一個方面中，提供了一種具有式 (I) 之化合物，其用於治療癌症。
在另一個方面中，提供了一種具有式 (I) 之化合物，其用於製造藥物，例如用於治療癌症的藥物。
在另一個方面中，提供了一種套組（kit），該套組包含含有具有式 (I) 之化合物的藥物組成物及其用於該套組的使用，例如用於治療癌症的使用說明書。
在另一個方面中，提供了一種用於製造具有式 (I) 之化合物的方法。
已經發現，本說明書的化合物具有強力的抗腫瘤活性，據信該抗腫瘤活性源自對作為某些腫瘤細胞中增殖和存活的關鍵調節劑的G12C突變型Ras蛋白的抑制。
由於它們結合至並抑制Ras G12C突變型蛋白的正常功能的能力，本說明書的化合物可以具有作為抗腫瘤劑的價值，特別是作為哺乳動物癌細胞增殖、存活、活動、播散和侵襲的選擇性抑制劑，從而抑制腫瘤生長和存活並抑制轉移性腫瘤生長。確切地說，本說明書的化合物可以具有在抑制和/或治療實體瘤疾病方面作為抗增殖劑和抗侵襲劑的價值。確切地說，本說明書的化合物可以有用於預防或治療對G12C突變型Ras的抑制敏感且涉及細胞傳訊的那些腫瘤，該細胞傳訊引起腫瘤細胞的增殖和存活。
據信本說明書的化合物藉由位於具有式 (I) 之上部哌𠯤環上的丙烯醯胺模體與G12C突變型Ras相互作用，並且然後與G12C突變型Ras共價結合。在與G12C突變型Ras結合中，本說明書的化合物（如本文所述）損害或基本上消除G12C Ras蛋白獲取其活性的促增殖/促存活構象的能力。
已經發現結合至基團Y的哌𠯤環（如下圖中的星號所標記）的碳原子的立體化學係Ras G12C抑制活性的關鍵決定因素，其中每個鏡像異構物之間的Ras G12C抑制活性變化顯著。為了討論根據本說明書的化合物的性質，儘管由化學命名軟體產生的化合物的名稱並不總是符合這一命名慣例，但是將始終使用下圖中所示的編號。基團O-Y因此附接至喹唑啉的C-5並且可因此稱為C-5拴系（tether）基團。該等基團R2
、A和R3
分別附接至喹唑啉模體的C-6、C-7和C-8。鑒於基團A係芳香族基團，喹唑啉的C-7和A之間的鍵係聯芳基鍵。
除了Y結合的碳的立體化學構型的重要性，由於圍繞將喹唑啉環的C-7連接至芳香族環A的聯芳基鍵的旋轉受限，根據本說明書的該等化合物係阻轉異構物的（atropisomeric）。已經發現在喹唑啉環的C-6處併入取代基R2
和在喹唑啉環的C-8處併入取代基R3
，結合取代基R1
可提供具有式 (I) 之化合物的穩定的阻轉異構物形式，該形式可以被分離並且可以穩定儲存。此外，已經發現作為Ras G12C突變型蛋白的抑制劑的具有式 (I) 之化合物的每種單獨的阻轉異構物的活性可以在很大程度上變化。在本文中報導的實例中，在具有式 (I) 之化合物的阻轉異構物對間觀察到了10倍或更大的活性差異和有時100倍或更大的活性差異。阻轉異構物之間的活性差異可能源於取代基R2
和R3
保持基團A和A上的一個或多個取代基R1
處於與它們的最佳構象接近的構象或處於它們的最佳構象以結合至G12C Ras突變型蛋白因此降低抑制劑與該靶蛋白結合所需的能量的有利能力。
已經確定具有式 (I) 之該等化合物，和尤其是具有較佳的鏡像異構物和阻轉異構物形式的那些具有式 (I) 之化合物可以是Ras G12C突變型蛋白的非常強的抑制劑。在進行鏡像選擇性合成時（其中手性起始材料的立體化學構型藉由該合成保留），較佳的鏡像異構物已經鑒定係下圖所說明的。因此已經發現，當哌𠯤結合至Y的鍵的立體化學構型與其中Y = CH2
的系統和其中Y = CH2
CH2
的系統不同時，給出了最佳活性。據認為當以外消旋方式進行合成並且然後藉由手性層析法分離產物時，那麼最具有活性的化合物在如下所示出的不對稱哌𠯤碳處具有相同的立體化學。儘管如此，為避免疑義，本揭露涵蓋具有式 (I) 化合物的所有異構物和阻轉異構物。應當理解的是，具有產生最佳Ras G12C抑制活性的立體化學排列的化合物係本說明書的較佳的實施方式。
已經發現具有如上所示的立體化學的具有式 (I) 之化合物作為G12C Ras突變型蛋白抑制劑比具有相反立體化學的化合物或缺少基團O-Y的化合物表現出更高的的活性，因為在具有式 (I) 之化合物中喹唑啉環的C-5拴系至哌𠯤環。
除上述之外，還進一步確定在哌𠯤環（即R4
或R5
）上併入取代基可以改善根據式 (I) 之化合物的代謝曲線。其中R5
係甲基的具有式 (I) 之化合物在這方面已證明是特別有利的。在體內研究中有利地觀察到在R5
處併入甲基基團可極大地改善口服生體可用率，這被認為係由於齧齒動物中與麩胱甘肽的脫靶反應性的降低。例如，在其他相同的化合物中，R5
甲基的併入導致口服生體可用率從0到30%的改善和清除率降低30倍。口服生體可用率的差異見於實例4（其中R5
為Me的化合物，見下文）（其在大鼠中具有31%的口服生體可用率）和相應的化合物（其中R5
係H（本文未要求保護，在WO 2018/206539中報導）（在大鼠中口服生體可用率為0%）之間（也觀察到了對兩種化合物的清除率的顯著影響，實例4，Cl為29 ml/min/kg，而參考R5
去甲基化合物為962 ml/min/kg - 反映這種化合物在大鼠血液中的短暫的、12分鐘的半衰期的數字）。還觀察到在R5
處併入甲基改善了細胞滲透性（實例4，Caco AB為58 Papp
1E-6
cm/s，相應的化合物（其中R5
係H）具有5.8 Papp
1E-6
cm/s）。在Y = CH2
CH2
的情況下，R5
甲基的併入同樣提供良好的細胞滲透性、良好的口服生體可用率和低清除率（參見例如下文實例39，72 Papp
1E-6
cm/s，F(大鼠) 75%，Cl(大鼠) 22 ml/min/kg）。因此，R5
甲基化提供具有增強的藥物動力學 特性的化合物。在Y = CH2
CH2
的情況下，R5
基團的立體化學也證明對G12C突變型Ras的選擇性抑制作用具有顯著的影響。
本文描述了可以結合G12C突變型Ras的化合物。在基於生物化學和細胞的測定中，本說明書的化合物顯示為強力的G12C突變型Ras蛋白結合物，並且因此可以有用於治療由KRas、NRas或HRas G12C突變介導的病症，具體來說，可以有用於治療表現G12C突變型KRas、NRas或HRas蛋白的癌症，如胰腺癌、結腸直腸癌、子宮癌、膽管癌、胃癌、膀胱癌、子宮頸癌、睾丸生殖細胞癌和非小細胞肺癌和多發性骨髓瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、橫紋肌肉瘤和皮膚鱗狀細胞癌。在與G12C突變型Ras蛋白（G12C突變型Ras蛋白係從細胞表面受體傳遞訊號以調節細胞增殖、存活和分化的傳訊途徑的關鍵組分）的結合中，根據本說明書的該等化合物可以抑制或消除細胞（例如表現G12C突變型Ras蛋白的腫瘤細胞）的細胞增殖、存活和分化。
因此，本說明書提供了用於提供對G12C突變型Ras的選擇性抑制作用之方法，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
本說明書還涉及用於製造具有式 (I) 之化合物之方法、含有所述化合物的藥物組成物、包括向有需要的患者例如人給予所述化合物之治療方法、具有式 (I) 之化合物用於製造例如用於治療罹患過度增殖性疾病如癌症的患者的藥物之用途。
除非另外定義，否則本文所用的所有技術和科學術語具有如本揭露所屬領域的普通技術人員通常理解的相同含義。例如，Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology
[簡明生物醫學和分子生物學詞典], Juo, Pei-Show, 第2版, 2002, CRC出版社；Dictionary of Cell and Molecular Biology
[細胞和分子生物學詞典], 第3版, 1999, 學術出版社（Academic Press）；以及Oxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology
[生物化學和分子生物學牛津詞典]，修訂版, 2000, 牛津大學出版社（Oxford University Press）為技術人員提供在本揭露中使用的許多術語的通用詞典注釋。
為了使本說明書可以更容易理解，在下面明確定義了某些術語。此外，定義在整個詳細說明中視情況而闡述。
單位、前綴和符號係以它們的國際單位系統（Système International de Unites）（SI）接受形式表示。數值範圍包括限定該範圍的數字。
術語“藥物組成物”係指如下製劑，該製劑處於允許該活性成分的生物活性有效的形式，並且不含有另外的、對其將要給予的受試者具有不可接受的毒性的組分。此類組成物可以是無菌的。根據本說明書的藥物組成物包含具有式 (I) 之化合物和藥學上可接受的賦形劑。
術語如“治療（treating）”或“治療（treatment）”或“治療（to treat）”或“減輕（alleviating）”或“減輕（alleviate）”係指（1）使得診斷的病理性病症或障礙的治癒、減緩、減輕症狀、和/或停止進展的治療措施以及（2）防止和/或減緩所靶向的病理學病症或障礙的發展的預防性或防止性措施。因此，需要治療的那些包括已具有障礙的那些；傾向於具有以下障礙的那些；以及在他們中需要預防障礙的那些。在某些方面，如果患者顯示例如，總的、部分的、或暫態的某一類型的癌症的緩解，則根據本揭露的該等方法針對癌症成功地“治療”了該受試者。
術語“受試者”係指應該接受具體治療的任何動物（例如，哺乳動物），包括但不限於人類、非人類靈長動物、齧齒類、以及類似物。典型地，術語“受試者”和“患者”在此關於人類受試者可互換地使用。
在具有式 (I) 之化合物中的環A選自苯基和雙環雜芳基。如本文所使用的雙環雜芳基係芳香族基團，該芳香族基團包含兩個稠合環並且含有1、2、3或4個N原子，或一個O原子，或一個S原子，或1個N原子和一個S原子，或1個N原子和一個O原子，或2個N原子和一個S原子，或2個N原子和一個O原子。雙環雜芳基基團包括其中兩個稠合環均是芳香族，或者其中一個稠合環係芳香族的而另一個稠合環係部分或完全飽和的那些基團。所述部分或完全飽和的稠合環也可以包含羰基基團。在雙環雜芳基基團中的該至少一個雜原子可以出現在芳香族環或飽和環中。具有式 (I) 之化合物中的雙環雜芳基基團A係[6,6]或[6,5]環系統，合適的雙環雜芳基基團的實例包括吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并㗁唑基、苯并咪唑基、苯并***基、吲唑基、氮雜吲哚基、氮雜吲唑基、吡咯并[1,2-b]嗒𠯤基和吡咯并[2,3-b]吡啶基、喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基、口辛啉基、酞𠯤基、喹㗁啉基和口奈啶基及其部分飽和的衍生物。
R1
在每次出現時獨立地選自C1-4
烷基、鹵素、羥基、C1-4
烷氧基、C1-3
氟烷基、C1-3
氟烷氧基、氰基和乙炔基。為避免疑義，C1-4
烷基係指含有從1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基基團，在整個說明書中數字下標的使用，例如在烷氧基、氟烷基和氟烷氧基基團中，與此處的使用一致。
如本文所使用的術語鹵素係指選自F、Cl、Br或I的原子。在本說明書中的實施方式中，在具有式 (I) 之化合物中的鹵素基團，和尤其對於基團R2
和R1
、F和Cl係較佳的鹵素基團。
基團R2
選自氰基、鹵素、C1-4
烷基、C1-4
烷氧基或C1-3
氟烷基。較佳的R2
基團的實例包括Cl、甲基和氰基，例如Cl。基團R3
選自F、Me、Et、MeO或C1-2
氟烷基，例如F、Me或MeO。
在具有式 (I) 之化合物為如下：Y係CH2
，R2
係Cl，R3
係F，A係苯基，b係2，基團R1
係F和OH並且各自是聯芳基鍵的鄰位的情況下，並且此外，當R4
和R6
均是H時，那麼基團R5
係Me（並且不是H）。因此可以理解的是，如下所示的化合物1-((8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基)丙-2-烯-1-酮不是根據式 (I) 之化合物並且在本文中未要求保護。
為避免疑問，在多個取代基獨立地從一個給定的組中選擇的情況下，所選擇的取代基可以包括來自給定的組中的相同的取代基或不同的取代基。僅藉由舉例的方式，在環A係被(R1
)b
取代的苯基的情況下，並且在b係2的情況下，兩個R1
取代基可以是相同的（例如兩個氟），或可以是不同的（例如一個氟和一個羥基）。
為進一步避免疑義，在本說明書的式中使用的“
”表示不同基團之間的連接點。
如上文所指出，本說明書提供了一種具有式 (I) 之化合物：
其中：
環A選自苯基和雙環雜芳基；
R1
在每次出現時獨立地選自C1-4
烷基、鹵素、羥基、C1-4
烷氧基、C1-3
氟烷基、C1-3
氟烷氧基、氰基和乙炔基；
b係0、1、2或3；
Y係CH2
或CH2
CH2
；
R2
係氰基、鹵素、C1-4
烷基、C1-4
烷氧基或C1-3
氟烷基；
R3
係F、Me、Et、MeO或C1-2
氟烷基；
R4
係H或Me；
R5
係H或Me；
R6
係H或CH2
NMe2
；
或其藥學上可接受的鹽，其條件係當Y係CH2
，R2
係Cl，R3
係F，A係苯基，b係2，該等基團R1
係F和OH並且各自是聯芳基鍵的鄰位時，並且當R4
和R6
均為H時，那麼R5
係Me。
在一個實施方式中，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物。
在一個實施方式中，提供了具有式 (I) 之化合物的藥學上可接受的鹽。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物係具有式 (Ia) 之化合物，其中Y係CH2
。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物係具有式 (Ib) 之化合物，其中Y係CH2
CH2
。
在實施方式中，具有式 (I)、(Ia) 或 (Ib) 之化合物係具有式 (Ic) 之化合物，其中基團R2
選自Cl、Me、或CN（氰基）。在實施方式中，具有式 (Ic) 之化合物係具有式 (Id) 之化合物，其中基團R2
係Cl。
在實施方式中，具有式 (I)、(Ia)、(Ib)、(Ic) 或 (Id) 之化合物係具有式 (Ie) 之化合物，其中基團R3
選自F、Me或MeO。在實施方式中，具有式 (Ie) 之化合物係具有式 (If) 之化合物，其中基團R3
係F。
在實施方式中，具有式 (I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie) 或 (If) 之化合物係具有式 (Ig) 之化合物，其中基團R4
係H。
在實施方式中，具有式 (I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If) 或 (Ig) 之化合物係具有式 (Ih) 之化合物，其中基團R5
係H。在實施方式中，具有式 (I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If) 或 (Ig) 之化合物係具有式 (Ii) 之化合物，其中基團R5
係Me。
在實施方式中，具有式 (I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih) 或 (Ii) 之化合物係具有式 (Ij) 之化合物，其中基團R6
係H。
在實施方式中，具有式 (I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii) 或 (Ij) 之化合物係具有式 (Ik) 之化合物，其中基團A係苯基。
在實施方式中，具有式 (Ik) 之化合物係具有式 (Il) 之化合物，其中整數b係2或3並且至少一個R1
基團係OH。在實施方式中，具有式 (Ik) 或 (Il) 之化合物係具有式 (Im) 之化合物，其中至少兩個取代基R1
係聯芳基鍵的鄰位。
在實施方式中，具有式 (Ik) 之化合物係具有式 (In) 之化合物，其中基團A(R1
)b
係
，視需要其中R1
選自Me、F、Cl和CN（氰基）。在實施方式中，具有式 (In) 之化合物中的R1
基團選自Me、Cl和CN。
在實施方式中，具有式 (Ik) 之化合物係具有式 (Io) 之化合物，其中基團A(R1
)b
係
。
在實施方式中，具有式 (I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii) 或 (Ij) 之化合物係具有式 (Ip) 之化合物，其中基團A係雙環雜芳基。
在實施方式中，具有式 (Ip) 之化合物係具有式 (Iq) 之化合物，其中雙環雜芳基基團選自由以下組成之群組：
在實施方式中，具有式 (Ip) 之化合物係具有式 (Ir) 之化合物，其中雙環雜芳基基團選自由以下組成之群組：
在實施方式中，具有式 (Ip) 之化合物係具有式 (Is) 之化合物，其中雙環雜芳基基團選自由以下組成之群組：
在實施方式中，具有式 (Ip) 之化合物係具有式 (It) 之化合物，其中雙環雜芳基基團選自由以下組成之群組：
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物，即，具有式 (I)、(Ia)、(Ib)… 至 (It) 之化合物中的任一種係具有式 (Iu) 或 (Iv) 之化合物，其中該立體化學如下示出：
。
在實施方式中，具有式 (Iu) 之化合物係具有式 (Iui) 之化合物，其中Y = CH2
。在實施方式中，具有式 (Iv) 之化合物係具有式 (Ivi) 之化合物，其中Y = CH2
CH2
。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物，即，具有式(I)、(Ia)、(Ib)… 至 (Ivi) 之化合物中的任一種係具有式 (Iw) 之化合物，其中R4
係H並且R5
係Me。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物選自以下的各鏡像異構物和阻轉異構物形式：
7-[(8aS
)-10-丙烯醯基-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮；
1-[(8aS
,11S
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮；
5-[(8aS
)-10-丙烯醯基-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基喹唑啉-4(3H
)-酮；
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮；
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]異喹啉-1(2H
)-酮；
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1H
-吲唑-3-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-羥基-6-甲基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮；
(2E
)-1-[(8aS)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮；
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮；
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-((8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基)丙-2-烯-1-酮；
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-((8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基)丙-2-烯-1-酮；
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮；
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H
)-酮；
(2E
)-1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮；
1-[(6aR,9S)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(6aR
,9S
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮；
8-[3-氯-1-氟-8-(丙-2-烯醯基)-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并 [4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮；
1-[(6aS
,9R
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(6aR
,9R
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(6aS
,9S
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(8aS
)-4-氯-6-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮；
1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮；
8-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮；
(2E
)-1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮；和
(2E
)-1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮；
或其藥學上可接受的鹽。
在本說明書的實施方式中，提供了一種藥物組成物，該藥物組成物包含具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的賦形劑相聯合；視需要進一步包含具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物形式，其中該具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽以非鏡像異構物過量（d.e.%）≥ 90%存在於該組成物中。
在本說明書的實施方式中，提供了一種藥物組成物，該藥物組成物包含具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的賦形劑相聯合；視需要進一步包含具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物形式，其中該具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽以鏡像異構物過量（ee%）≥ 90%和非鏡像異構物過量（de%）≥ 90%存在於該組成物中。
具有式 (I) 之化合物及其藥學上可接受的鹽可以按無定形形式、結晶形式、或半結晶形式製備、使用或提供並且任何給定的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽可以能夠被形成為多於一種結晶/多晶型形式，包括水合的（例如半水合物、一水合物、二水合物、三水合物或其他化學計量水合物）和/或溶劑化形式。應當理解的是，本說明書涵蓋了任何以及所有具有式 (I) 之化合物及其藥學上可接受的鹽的此類固體形式。
在本說明書的另外的實施方式中，提供了具有式 (I) 之化合物，該化合物藉由在以下‘實例’部分中所描述的方法可獲得。
本說明書旨在包括存在於本發明化合物中的原子的所有同位素。同位素應理解為包括具有相同原子數但具有不同質量數的那些原子。例如，氫的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括13
C和14
C。具有式 (I) 之同位素標記的化合物通常可藉由熟悉該項技術者已知的常規技術或藉由與在附隨的實例中所描述的那些類似的過程使用適當的同位素標記的試劑替代以前採用的非標記的試劑來製備。
具有式 (I) 之化合物的合適的藥學上可接受的鹽例如係酸加成鹽。具有式 (I) 之化合物的適合藥學上可接受的鹽可以是例如具有式 (I) 之化合物的酸加成鹽，例如與無機或有機酸的酸加成鹽。
具有式 (I) 之化合物的另一種合適的藥學上可接受的鹽係例如在給予人體或動物體具有式 (I) 之化合物之後所述人體或動物體內所形成的鹽。
具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽可以作為共晶固體形式製備。應當理解的是，具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽的藥學上可接受的共晶體形成本說明書的一個方面。
用於在藥學背景下使用，可能較佳的是在不存在大量其他立體異構物形式的情況下提供具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
因此，在本說明書的一個實施方式中，提供了組成物，其包含具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，視需要和具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物形式一起，其中具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽以非鏡像異構物過量（%de）≥ 90%存在於該組成物中。
具有式 (I) 之化合物、或其藥學上可接受的鹽將通常經由口服或靜脈內途徑以包含活性成分或其藥學上可接受的鹽或其溶劑化物或這種鹽的溶劑化物的藥物製劑的形式，以藥學上可接受的劑型給予。取決於有待治療的障礙和患者以及給藥途徑，可以變化的劑量給予該等組成物，例如以1 mg至1000 mg的劑量給予。
上面所述的具有式 (I) 之化合物的藥物配製品可以方便地以單位劑型給予，並且可以藉由製藥領域中熟知的任何方法，例如如Remington's Pharmaceutical Sciences [雷明登氏藥學全書], 第17版, 馬克出版公司（Mack Publishing Company）, 伊斯頓（Easton）, 賓夕法尼亞州（PA.）, (1985)中所述的製備。在一種形式中，藥物可以是處於膠囊形式，例如兩片式硬殼膠囊或軟彈性明膠（SEG）膠囊，其包含具有式 (I) 之化合物和視需要的藥學上可接受的賦形劑。藥物組成物可包含從1 mg至1000 mg的量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在如人的溫血動物中作為藥物使用。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在如人的溫血動物中產生抗增殖性作用。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在如人的溫血動物中作為抑制和/或治療實體腫瘤疾病的抗侵襲性藥劑使用。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽用於在如人的溫血動物中產生抗增殖性作用的用途。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於在如人的溫血動物中產生抗增殖性作用的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於在如人的溫血動物中作為抑制和/或治療實體腫瘤疾病的抗侵襲性藥劑使用的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，提供了一種用於在需要這種治療的溫血動物（如人）中產生抗增殖性作用之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在本說明書中，除非另外說明，否則短語“有效量”意指一種化合物或組成物足夠顯著地並且有利地改變所治療的症狀和/或病症（例如，提供陽性臨床反應）的量。用於藥物組成物中的有效成分的有效量將隨所治療的具體病症、病症的嚴重程度、治療時間、同步治療的特性、所利用的一種或多種具體有效成分、所利用的一種或多種具體藥學上可接受的賦形劑/載體、以及處於主治醫生的知識和專業知識範圍內的類似因素而變化。
根據另一個實施方式，提供了一種用於藉由在需要這種治療的溫血動物（如人）中抑制和/或治療實體腫瘤疾病來產生抗侵襲性作用之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在溫血動物如人中預防或治療癌症。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於在溫血動物如人中預防或治療癌症的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，提供了一種用於在需要這種治療的溫血動物（如人）中預防或治療癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在溫血動物如人中預防或治療實體腫瘤疾病。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於在溫血動物如人中預防或治療實體腫瘤疾病的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，提供了一種用於在需要這種治療的溫血動物（如人）中預防或治療實體腫瘤疾病之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於預防或治療對G12C突變型Ras的抑制敏感的腫瘤。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於預防或治療對G12C突變型Ras的抑制敏感的那些腫瘤的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，提供了一種用於預防或治療對G12C突變型RAS的抑制敏感的那些腫瘤之方法，該方法包括向所述動物有需要的患者給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於提供對G12C突變型Ras的抑制作用。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於提供對G12C突變型Ras的抑制作用的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，還提供了一種用於提供對G12C突變型RAS的抑制作用之方法，該方法包括向有需要的患者給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於提供對G12C突變型Ras的選擇性抑制作用。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於提供對G12C突變型Ras的選擇性抑制作用的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，還提供了一種用於提供對G12C突變型Ras的選擇性抑制作用之方法，該方法包括向有需要的患者給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
本文描述了可以結合G12C突變型Ras的化合物。在基於生物化學和細胞的測定中，本說明書的化合物顯示為強力的G12C突變型Ras蛋白結合物，並且因此可以有用於治療由KRas、NRas或HRas G12C突變介導的病症，具體來說，可以有用於治療表現G12C突變型KRas、NRas或HRas蛋白的癌症，如胰腺癌、結腸直腸癌、子宮癌、膽管癌、胃癌、膀胱癌、子宮頸癌、睾丸生殖細胞癌和非小細胞肺癌和多發性骨髓瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、橫紋肌肉瘤和皮膚鱗狀細胞癌。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療由KRas、NRas或HRas G12C突變介導的病症。
根據另一個實施方式，提供了一種用於治療由KRas、NRas或HRas G12C突變介導的病症之方法，該方法包括向有需要的患者給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於治療由KRas、NRas或HRas G12C突變介導的病症的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療非小細胞肺癌或結腸直腸癌。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療非小細胞肺癌。
根據另一個實施方式，提供了一種用於治療非小細胞肺癌或結腸直腸癌之方法，該方法包括向有需要的患者給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了用於治療非小細胞肺癌之方法，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於治療乳癌或婦科癌的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於治療非小細胞肺癌或結腸直腸癌的藥物中之用途。
根據本說明書的另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於治療非小細胞肺癌的藥物中之用途。
本文所定義的抗癌治療可以作為單獨療法施用，或除本說明書的化合物外，還可以涉及常規外科手術或放射療法或化學療法。
因此，在一個實施方式中，提供了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽、以及一種另外的抗腫瘤物質，用於聯合治療癌症。
根據本說明書的實施方式，提供了一種適用於治療癌症的組合，該組合包括具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽和另一種抗腫瘤劑。
在本說明書的另一個實施方式中，提供了具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽與另一種抗腫瘤劑的組合。
雖然具有式 (I) 之化合物主要具有作為用於溫血動物（包括人）的治療劑的價值，但它們也有用在需要抑制G12C突變型Ras的任何時候。因此，它們有用於作為用於在開發新生物測試以及尋找新藥理學藥劑中使用的藥理學標準。
另一個實施方式係基於鑒定患者的G12C KRas、HRas或NRas突變狀態與對用具有式 (I) 之化合物的治療的潛在易感性之間的聯繫。然後可以有利地使用Ras抑制劑，如具有式 (I) 之化合物來治療可能對其他療法有抗性的具有G12C KRas、HRas或NRas突變的患者。因此，這提供了機會、方法和工具用於選擇用具有式 (I) 之化合物進行治療的患者，特別是癌症患者。該選擇係基於有待治療的腫瘤細胞係具有野生型還是G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS基因。該G12C KRAS、HRAS或NRAS基因狀態因此可以被用作一種生物標記，以表明選擇用具有式 (I) 之化合物的治療可以是有利的。然後被鑒定為對用具有式 (I) 之化合物成功治療敏感的患者可以用此類化合物治療。治療方案因此可涵蓋第一患者選擇步驟和用有效量的具有式 (I) 之化合物治療有其需要的患者。
根據實施方式，提供了一種用於選擇用具有式 (I) 之化合物進行治療的患者之方法，該方法包括提供來自患者的含有腫瘤細胞的樣品；確定患者的含有腫瘤細胞的樣品中的RAS基因編碼野生型（第12位為甘胺酸）還是突變型（第12位為半胱胺酸）KRas、HRas或NRas蛋白；並且基於以上來選擇用具有式 (I) 之化合物進行治療的患者。治療方案可涵蓋此類的患者選擇方法。
該方法可以包括或不包括實際患者樣品分離步驟。因此，根據一個實施方式，提供了一種用於選擇用具有式 (I) 之化合物進行治療的患者，該方法包括確定先前從患者分離的含有腫瘤細胞的樣品中的RAS基因編碼野生型（第12位為甘胺酸）還是突變型（第12位為半胱胺酸）KRas、HRas或NRas蛋白；並且基於以上來選擇用具有式 (I) 之化合物進行治療的患者。
在實施方式中，如果腫瘤細胞DNA具有G12C突變型KRAS基因，那麼選擇該患者用具有式 (I) 之化合物治療。
在實施方式中，如果腫瘤細胞DNA具有G12C突變型HRAS基因，那麼選擇該患者用具有式 (I) 之化合物治療。
在實施方式中，如果腫瘤細胞DNA具有G12C突變型NRAS基因，那麼選擇該患者用具有式 (I) 之化合物治療。
根據另一個實施方式，提供了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療具有已經鑒別為攜帶G12C突變型KRAS基因的腫瘤細胞的癌症。
根據另一個實施方式，提供了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療具有已經鑒別為攜帶G12C突變型HRAS基因的腫瘤細胞的癌症。
根據本說明書的另一個方面，提供了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療具有已經鑒別為攜帶G12C突變型NRAS基因的腫瘤細胞的癌症。
根據另一個實施方式，提供了一種治療具有已經鑒別為攜帶G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS基因的腫瘤細胞的癌症之方法，該方法包括給予有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了一種包含具有式 (I) 之化合物的藥物組成物，用於預防和治療具有已經鑒別為攜帶G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS基因的腫瘤細胞的癌症。
應瞭解，提供了以下實例以使得可以完全理解本發明的性質。還應瞭解，以下實例不旨在以任何方式限制描述的範圍。
生物學測定
使用以下測定來測量本說明書的化合物的作用。
KRasG12C功能測定
將非活性負載GDP的生物素化KRasG12C
蛋白質在內部進行表現、純化和GDP負載。在含有20 mM HEPES（pH 7.5）、5 mM MgCl2、150 mM NaCl和0.01%吐溫20的測定緩衝液中製備所有酶和底物溶液。在測定緩衝液中製備10 nM負載GDP的生物素化KRasG12C
和37.5 ng/ml鏈黴親和素（Streptavidin）銪穴狀化合物（Cisbio公司），將5 μl分配到384孔聚苯乙烯，Hibase，中等結合白色測定板（葛萊娜公司（Greiner），＃784075）的每個孔中，該孔含有在DMSO中製備的測試樣品和參考樣品，並且將樣品孵育4小時。在單獨的混合物中，在含有50 mM氟化鉀和0.05 mg/ml BSA的測定緩衝液中製備20 nM GST-Raf Ras結合結構域（GST-Raf RBD，內部純化的）和4 μg/ml抗GST XL665抗體（Cisbio）並且將其平衡4小時，之後添加0.6 μM鳥苷5'-[γ-硫代]三磷酸（GTPγS，西格瑪公司（Sigma））和0.08 μM SOS（內部純化的）。然後將5 μl GST-RAF RBD混合物分配到測定板的每個孔中。該添加引發核苷酸交換反應和非活性負載GDP的KRasG12C
向活性GTPγS KRasG12C
的轉變。此舉經由活性GTPγS KRasG12C
與GST-Raf RBD之間的特異性結合相互作用同時檢測，該相互作用使得銪和XL665緊密接近，從而使得能夠在配備有HTRF過濾器模組的Pherastar（BMG）板讀取儀上檢測到增加的FRET訊號。經由抑制核苷酸交換過程或抑制活性KRas:Raf RBD結合相互作用來阻止KRas激活的任何化合物將導致減小的FRET訊號。根據在Genedata screener（瑞士巴塞爾（Basel, Switzerland））中擬合的標準化劑量-反應FRET數據曲線計算IC50
值。
KRasG12C質譜加合測定
將非活性負載GDP的生物素化KRasG12C
蛋白質在內部進行表現、純化和GDP負載。在含有20 mM HEPES（pH 7.5）、5 mM MgCl2和150 mM NaCl的測定緩衝液中製備所有酶和底物溶液。在測定緩衝液中製備4 μM負載GDP的生物素化KRasG12C
，並且將50 μl添加到96孔聚苯乙烯測定板（葛萊娜公司，#651201）的每個孔中，該孔含有500 nl 1 mM測試化合物（最終濃度10 μM），使該混合物反應4小時，之後添加50 μl 1%甲酸以淬滅該反應。將板密封，之後在Xevo G2 QTOF（沃特世公司（Waters））和Acquity LC系統（沃特世公司）上進行讀取。將10 μl樣品注射到Xbridge BEH300；C4；3.5 um；2.1 × 50 mm柱（沃特世公司）上，運行3分鐘梯度。將空白樣品在每個測試樣品之間運行。
將數據在Mass Lynx軟體（沃特世公司）中分析，使用了總離子計數（TIC）跡線並且合併洗脫的蛋白質峰值數據。利用合併的譜圖，使用MaxEnt1法將數據去卷積。測量針對脫輔基蛋白KRasG12C
（APO）和KRAS +相關化合物質量（加合物）的峰面積，並且使用以下計算來計算加合物百分比：
加合物百分比 = 100*（加合物峰面積/(APO + 加合物峰的總和）
對於該等實例產生在表A中示出的數據（以下數據可以是來自單個實驗的結果或兩個或更多個實驗的平均值）。
[表A] 
實例
現將在以下實例中說明本說明書，除非另外說明，否則其中：
(i) 在環境溫度（即在17°C到25°C範圍內）下和在如氮氣等的惰性氣體的氣氛下進行合成，除非另外說明；
(ii) 藉由旋轉蒸發或利用Genevac設施或拜泰齊（Biotage）v10蒸發器在真空中進行蒸發且在藉由過濾去除殘餘固體狀之後進行處理常式；
(iii) 在Merck Kieselgel二氧化矽（Art. 9385）上或在反相二氧化矽（Fluka矽膠90 C18）上或在Silicycle柱體（40 μm-63 μm二氧化矽，4 g至330 g重量）上或在Grace resolv 柱體（4 g-120 g）上或在RediSep Rf 1.5快速柱上或在RediSep Rf高性能Gold快速柱（150 g-415 g重量）上或在RediSep
Rf Gold C18反相柱（20 μm-40 μm二氧化矽）上或在Interchim puriFlash柱體（50 μm二氧化矽，4 g-800 g）上使用Isco CombiFlash Companion系統或類似系統手動地或自動化進行快速柱層析法；
(iv) 在裝有ZMD或ZQ ESCi質譜儀和沃特斯X-Terra反相柱或沃特斯X-Bridge反相柱或沃特斯SunFire反相柱（C-18，5微米二氧化矽，19 mm或50 mm直徑，100 mm長度，40 mL/分鐘的流速）的沃特斯儀器（600/2700或2525）上，使用水（含有1%氨）和乙腈的漸減極性混合物或者水（含有0.1%甲酸）和乙腈的漸減極性混合物作為洗脫液進行製備型反相HPLC；
(vi) 產率（當存在時）並不必需為可獲得的最大值；
(vii) 一般而言，具有式I的終產物的結構藉由核磁共振（NMR）光譜法確認；NMR化學位移值係以δ級測量的[質子磁共振光譜使用Bruker Avance 500（500 MHz）、Bruker Avance 400（400 MHz）、Bruker Avance 300（300 MHz）或Bruker DRX（300 MHz）儀器測定]；除非另行說明，測量在環境溫度下進行；使用以下縮寫：s，單峰；d，二重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；dd，雙二重峰；ddd，雙二重峰的雙重峰；dt，雙三重峰；bs，寬峰訊號；
(viii) 一般而言，具有式I的終產物在液相層析法之後還藉由質譜法（LCMS或UPLC）來表徵；一般而言，使用具有1 mL/分鐘的流速的反相C18二氧化矽，並且藉由電灑質譜以及藉由記錄220 nm-320 nm的波長範圍的UV吸收進行檢測。使用具有2.1 x 50mm尺寸和1.7微米顆粒尺寸的沃特斯（Waters）XSelect CSH C18柱在CSH C18反相二氧化矽上進行分析UPLC。使用極性遞減混合物作為洗脫液，例如使用作為溶劑A的水（含有0.1%甲酸或0.1%氨）與作為溶劑B的乙腈的極性遞減混合物，進行梯度分析。典型的2分鐘分析型UPLC方法採用超過1.3分鐘的溶劑梯度，每分鐘大約1 mL，從溶劑A和B的97 : 3混合物分別至溶劑A和B的3 : 97混合物。除非另有說明，否則報告的分子離子對應於[M+H]+；對於具有多個同位素模式的分子（Br、Cl等），除非另有說明，否則報告的值係對於最低同位素質量獲得的值；
(ix) 離子交換純化通常使用SCX-2（拜泰齊公司）柱體進行；
(x) 在反應係指使用微波的情況下，使用以下微波反應器中之一：Biotage引發劑、個人化學Emrys優化器（Personal Chemistry Emrys Optimizer）、個人化學Smithcreator（Personal Chemistry Smithcreator）或CEM探測器；
(xi) 中間體純度藉由薄層層析法、質譜法、LCMS、UPLC/MS、HPLC和/或NMR分析來評估；
(xii) 使用以下縮寫：
DCM 二氯甲烷
DCE 1,2-二氯乙烷
DEA 二乙胺
DIPEA 二異丙基乙胺
DMAN , N
-二甲基乙醯胺
DMFN,N
-二甲基甲醯胺
DMSO 二甲亞碸
d.e. 非鏡像異構物過量
dppf 1,1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
HATU (1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H
-1,2,3-***并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化六氟磷酸鹽)
HCl 鹽酸
HCOOH 甲酸
HPLC 高效液相層析法
mCPBA 間-氯過氧苯甲酸
MeCN 乙腈
MeOH 甲醇
NMR 核磁共振
IPA/i-PrOH 異丙醇
Pd-C 活性炭上的鈀
Pd118 二氯[1,1’-雙(二-三級丁基膦基)二茂鐵]鈀(II)
PyBOP (苯并***-1-基氧基)三吡咯啶基鏻六氟磷酸鹽
RuPhos Pd G3 (2-二環己基膦基-2′,6′-二異丙氧基-1,1′-聯苯基)[2-(2′-胺基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)甲磺酸鹽
scCO2
超臨界CO2
SFC 超臨界流體層析法
TBME 三級丁基甲醚
TEA 三乙胺
TFA 三氟乙酸
THF 四氫呋喃
tR 保留時間
化合物在其他方面藉由其IUPAC名稱提及或使用ACD/ChemSketch 2017（可從ACD Labs公司商購獲得）命名。
三級丁基 (S
)-3-(((三級丁基二甲基矽基)氧基)甲基)哌𠯤-1-甲酸酯
在空氣下，在20°C下，經5分鐘的時間，將在DCM（10 ml）中的三級丁基二甲基矽基氯（1.53 g，10.17 mmol）逐滴添加至(S
)-4-N
-Boc-2-羥基甲基-哌𠯤（2 g，9.25 mmol）和三乙胺（2.58 ml，18.49 mmol）在DCM（50 ml）中的溶液。將所得溶液在20°C下攪拌16小時，然後蒸發至乾燥。將殘餘物藉由快速二氧化矽層析法（在EtOAc中0至5% EtOH的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥，以得到呈無色油的三級丁基 (S
)-3-(((三級丁基二甲基矽基)氧基)甲基)哌𠯤-1-甲酸酯（2.84 g，93%）。1H NMR (500 MHz, CDCl3
) 0.00 (s, 6H), 0.84 (s, 9H), 1.40 (s, 9H), 2.48 (s, 1H), 2.6 - 2.87 (m, 3H), 2.92 (d, 1H), 3.41 (dd, 1H), 3.52 (s, 1H), 3.85 (s, 2H)。
(E
)-N
-(3-溴-2,5-二氟苯基)-2-(羥基亞胺基)乙醯胺
將硫酸鈉（23.24 g，163.62 mmol）、鹽酸羥胺（4.97 g，71.59 mmol）和2,2,2-三氯乙烷-1,1-二醇（5.07 g，30.68 mmol）溶於水（103 ml）中。添加3-溴-2,5-二氟苯胺鹽酸鹽（5 g，20.45 mmol）在水（8.21 ml）、EtOH（14.36 ml）和濃HCl（3.49 ml）中的溶液，並將反應在60°C下攪拌過夜，形成沈澱物。將沈澱物藉由過濾收集並用水洗滌，然後在真空下乾燥，以得到呈淺褐色固體的(E
)-N
-(3-溴-2,5-二氟苯基)-2-(羥基亞胺基)乙醯胺（5.3 g，93%）。將此物質不進行進一步純化而使用。1H NMR (500 MHz, DMSO) 7.51 (ddd, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.85 (ddd, 1H), 10.08 (s, 1H), 12.43 (s, 1H)。m/z：ES- [M-H]- 277。
6-溴-4,7-二氟吲哚啉-2,3-二酮
將(E
)-N
-(3-溴-2,5-二氟苯基)-2-(羥基亞胺基)乙醯胺（7.62 g，27.31 mmol）分批添加至在60°C下加熱的硫酸（68.3 ml）。將反應在90°C下攪拌1小時。將反應混合物冷卻至室溫，並緩慢地添加至冰水。將所得沈澱物藉由過濾收集、用水洗滌、並在真空下乾燥，以得到呈深紅色固體的6-溴-4,7-二氟吲哚啉-2,3-二酮（5.1 g，71%）。將此物質不進行進一步純化而使用。1H NMR (500 MHz, DMSO) 7.38 (dd, 1H), 11.91 (s, 1H)。m/z：ES- [M-H]- 260/262。
2-胺基-4-溴-3,6-二氟苯甲酸
將過氧化氫（30%在H2
O中）（9.70 ml，95 mmol）逐滴添加至在氫氧化鈉（2M在H2
O中）（86 ml，171 mmol）的6-溴-4,7-二氟吲哚啉-2,3-二酮（4.98 g，19 mmol）。將反應在室溫下攪拌16小時。用過量的亞硫酸鈉淬滅過量的過氧化氫，並將混合物中和至pH 7。將所得棕色沈澱物過濾掉，並將剩餘溶液用濃HCl酸化至pH 2。將所得膏狀沈澱物藉由過濾收集，用水洗滌並在真空下乾燥，以得到呈棕色固體的2-胺基-4-溴-3,6-二氟苯甲酸（3.10 g，65%）。將此物質不進行進一步純化而使用。1H NMR (500 MHz, DMSO) 6.71 (1H, dd), 6.84 (2H, s), 13.37 (1H, s)。m/z：ES- [M-H]- 250 & 252。
7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4(3H
)-酮
將乙醇（49 ml）中的甲脒乙酸（15.35 g，147.47 mmol）和2-胺基-4-溴-3,6-二氟苯甲酸（3.1 g，12.29 mmol）在回流下攪拌16小時。將反應混合物蒸發至乾燥，並重新溶於EtOAc（100 ml）中，並依次用飽和鹽水（2 x 150 ml）洗滌。將有機相用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發，以得到呈黃色固體的7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4(3H
)-酮（2.9 g，90%）。將此物質不進行進一步純化而使用。1H NMR (500 MHz, DMSO) 7.73 (dd, 1H), 8.17 (s, 1H), 12.62 (s, 1H)。m/z：ES- [M-H]- 258 & 260。
三級丁基 (S
)-4-(7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-(((三級丁基二甲基矽基)氧基)甲基)哌𠯤-1-甲酸酯
將((1H-苯并[d][1,2,3]***-1-基)氧基)三(吡咯啶-1-基)六氟磷酸鏻(V)（2.59 g，4.98 mmol）添加至在DMA（13.72 ml）中的7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4(3H)-酮（1 g，3.83 mmol）和DIPEA（1.61 ml，9.19 mmol）。將所得溶液在室溫下攪拌過夜，並將反應混合物傾倒入水中，用EtOAc（100 ml）萃取，用飽和的鹽水（100 ml）洗滌，經MgSO4
乾燥，過濾並蒸發，以得到粗產物。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度為庚烷中0-100% EtOAc）純化。將純的級分蒸發至乾燥，以得到呈淡黃色油的三級丁基 (S
)-4-(7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-(((三級丁基二甲基矽基)氧基)甲基)哌𠯤-1-甲酸酯（0.66 g，30%）。1H NMR (500 MHz, CDCl3
) -0.10 (s, 6H), 0.72 (s, 9H), 1.49 (s, 9H), 3.02 (s, 1H), 3.27 (d, 1H), 3.35 - 3.47 (m, 1H), 3.66 (s, 1H), 3.77 - 3.85 (m, 1H), 3.91 (d, 1H), 4.17 (d, 2H), 4.32 (s, 1H), 7.22 - 7.31 (m, 1H), 8.65 (s, 1H)。m/z：ES+ [M+H]+ 573 & 575。
三級丁基 (S
)-10-溴-9-氟-3,4,13,13a-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]-氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-2(1H
)-甲酸酯
將四丁基氟化銨（1M在THF中）（1.37 ml，1.37 mmol）添加至在THF（3.2 ml）中的三級丁基 (S
)-4-(7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-(((三級丁基二甲基矽基)氧基)甲基)-哌𠯤-1-甲酸酯（0.66 g，1.14 mmol）。將所得溶液在室溫下攪拌1小時。將反應在65°C加熱1小時，然後冷卻至室溫，用EtOAc（100 ml）稀釋，用水（100 ml）、飽和的鹽水（100 ml）洗滌，將有機層經MgSO4
乾燥，過濾並蒸發，以得到呈淺褐色泡沫的三級丁基 (S
)-10-溴-9-氟-3,4,13,13a-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]-氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-2(1H
)-甲酸酯（0.54 g，＞ 100%）。將此物質不進行進一步純化而使用。1H NMR (500 MHz, CDCl3
) 1.49 (s, 9H), 3.07 (s, 2H), 3.1 - 3.2 (m, 1H), 3.84 (ddt, 1H), 3.98 - 4.24 (m, 2H), 4.30 (dd, 1H), 4.38 (dd, 1H), 5.06 (d, 1H), 7.14 (d, 1H), 8.65 (s, 1H)。m/z：ES+ [M+H]+ 439/441。
7-溴-6-碘-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮
在0°C，將7-溴-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮（5.7 g，26.88 mmol）添加至硫酸（60 ml）中。將所得混合物在0°C下攪拌30分鐘。然後一次性添加N
-碘代琥珀醯亞胺（9.07 g，40.32 mmol）並且將所得懸浮液在0°C攪拌2小時。將反應混合物倒入冰水中，導致形成沈澱物。將沈澱物用乙酸乙酯（3 x 200 ml）萃取。有機相和水相均含有沈澱物。將有機相用10% Na2
S2
O3
（200 ml）洗滌以去除過量的碘。將有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並蒸發以得到呈白色固體的7-溴-6-碘-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮（7.2 g，79%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 4.11 (2H, s), 7.43 (1H, d), 7.83 (1H, d), 8.90 (1H, s)。m/z: ES+ [M+H]+ = 338。
7-溴-6-甲基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮
在氮氣下，將三苯基膦氯化鈀（0.706 g，1.01 mmol）添加至在甲苯/H2
O（50 ml）（3:1比率）中的碳酸鉀（2.78 g，20.12 mmol）、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三硼雜環己烷（0.631 g，5.03 mmol）和7-溴-6-碘-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮（3.4 g，10.06 mmol）中。將所得混合物在100°C下攪拌過夜。將溶劑在減壓下去除。將該粗產物藉由製備型手性-HPLC（柱：Enantiocel-C1，5*25cm，5 um；流動相A：CO2
: 70，流動相B：MeOH-製備型：30；流速：160 ml/min；220 nm；rT 1:7.38；rT 2:8.53）純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的7-溴-6-甲基-2,3-二氫-1H-異吲哚-1-酮（420 mg，45.7 %）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.42 (3H, s), 4.27 (2H, s), 7.46 (1H, d), 7.55 (1H, d), 8.63 (1H, s)。m/z: ES+ [M+H]+
= 226。
[(8aS
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]硼酸
在氮氣下，將Pd(dppf)Cl2
·CH2
Cl2
（335 mg，0.41 mmol）添加至在1,4-二㗁𠮿（20 ml）中的三級丁基 (8aS
)-5-溴-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（900 mg，2.05 mmol）、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜環戊硼烷（dioxaborolane）)（1041 mg，4.10 mmol）和乙酸鉀（503 mg，5.12 mmol）中。將所得的混合物在100°C下攪拌2小時。將溶劑在減壓下去除。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至40% MeCN（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的[(8aS
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]硼酸（700 mg，85%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.52 (9H, s), 2.85 - 4.68 (8H, m), 5.37 (1H, s), 7.49 (1H, d), 8.64 (1H, s)。有兩個可交換的質子沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ = 405。
三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(5-甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-異吲哚-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在氮氣下，在室溫，將甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二-異-丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-胺基-1,1'-聯苯基-2-基)鈀(II)（129 mg，0.15 mmol）添加至在1,4-二㗁𠮿/H2
O（0.5 ml）（3:1比率）中的2-二環己基膦基-2',6'-二-異-丙氧基-1,1'-聯苯基（72.2 mg，0.15 mmol）、碳酸鉀（428 mg，3.10 mmol）、[(8aS
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]硼酸（626 mg，1.55 mmol）和7-溴-6-甲基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮（350 mg，1.55 mmol）中。將所得的混合物在100°C下攪拌2小時。將溶劑在減壓下去除。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在DCM中的6% MeOH的洗脫梯度）來純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(5-甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（470 mg，60%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.52 (9H, s), 2.24 (3H, d), 2.99 - 3.35 (3H, m), 3.48 - 3.97 (1H, m), 4.02 - 4.29 (2H, m), 4.35 - 4.58 (4H, m), 5.08 - 5.27 (1H, m), 6.06 (1H, s), 6.92 (1H, d), 7.46 (1H, d), 7.53 (1H, d), 8.72 (1H, s)。m/z: ES+ [M+H]+ = 506。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將N
-氯代琥珀醯亞胺（186 mg，1.39 mmol）和三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(5-甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（470 mg，0.93在DMF（0.5 ml）中）的混合物密封到微波管中。將該反應在微波反應器中加熱至120°C持續30分鐘並且冷卻至室溫。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至35% MeCN（0.1% HCOOH）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（260 mg，52%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.45 (9H, s), 2.09 (3H, d), 2.98 - 3.47 (3H, m), 3.81 - 4.17 (3H, m), 4.37 (2H, s), 4.61 - 4.68 (2H, m), 4.83 - 4.94 (1H, m), 7.61 (1H, d), 8.51 (1H, d), 8.64 (1H, s)。有1個可交換的質子沒有觀察到。m/z: ES+ [M+H]+ = 540。
7-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮 - 阻轉異構物1和阻轉異構物2
在室溫將在1,4-二㗁𠮿（5 ml，20 mmol）中的HCl添加至在MeOH（3 ml）中的三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（260 mg，0.48 mmol）中。將所得溶液在室溫下攪拌2小時。將溶劑在減壓下去除。將粗產物藉由製備型HPLC（柱：Xselect CSH OBD 柱 30*150 mm 5 um n；流動相A：水（0.1% HCOOH），流動相B：ACN；流速：60 ml/min；梯度：10% B至20% B，在8 min內；254/220 nm；rT：7.03,7.97 min和MeCN作為洗脫液）純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的7-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮的第一洗脫的阻轉異構物（阻轉異構物1）（80 mg，38%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.08 (3H, s), 2.77 (2H, d), 2.99 - 3.14 (3H, m), 4.01 (1H, s), 4.36 (2H, s), 4.42 - 4.59 (2H, m), 4.96 (1H, d), 7.55 - 7.65 (1H, m), 8.15 (1H, s), 8.48 (1H, s), 8.57 (1H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z：ES+ [M+H]+ = 440。
獲得了第二洗脫的阻轉異構物（阻轉異構物2）（70 mg，33%），呈白色固體。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.09 (3H, s), 2.74 - 2.92 (2H, m), 3.08 (3H, m), 3.93 (1H, d), 4.36 (2H, s), 4.46 - 4.59 (2H, m), 4.93 (1H, d), 7.55 - 7.68 (1H, m), 8.17 (1H, s), 8.49 (1H, s), 8.57 (1H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z：ES+ [M+H]+ = 440。
7-[(8aS
)-10-丙烯醯基-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮 - 阻轉異構物1（實例1）
在0°C，將在DMF（0.2 ml）中的丙烯醯氯（16.46 mg，0.18 mmol）的溶液添加至DIPEA（0.064 ml，0.36 mmol）和7-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮（阻轉異構物1）（80 mg，0.18 mmol）在DMF（0.3 ml）中的攪拌溶液中。將所得的溶液在0°C下攪拌1小時。將粗產物藉由快速C18快速層析法（0至35% MeCN在水中(NH4
OH)的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的7-[(8aS
)-10-丙烯醯基-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮（阻轉異構物1，實例1）（19 mg，21%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.08 (3H, s), 3.01 - 3.13 (1H, m), 3.32 - 3.53 (2H, m), 4.09 - 4.53 (5H, m), 4.54 - 4.72 (2H, m), 4.76 - 5.04 (1H, m), 5.77 (1H, d), 6.19 (1H, d), 6.77 - 6.98 (1H, m), 7.56 - 7.66 (2H, m), 8.48 (1H, s), 8.62 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 494。
7-[(8aS
)-10-丙烯醯基-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮 - 阻轉異構物2（實例2）
在0°C，將丙烯醯氯（14.40mg，0.16 mmol）在DMF（0.2 ml）中的溶液添加至DIPEA（0.056 ml，0.32 mmol）和7-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基-2,3-二氫-1H
-異吲哚-1-酮 - 阻轉異構物2（70 mg，0.16 mmol）在DMF（0.3 ml）中的攪拌溶液中。將所得的溶液在0°C攪拌1小時。將粗產物藉由快速C18快速層析法（0至30% MeCN在水中（NH4
OH）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的7-[(8aS)-10-丙烯醯基-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基-2,3-二氫-1H-異吲哚-1-酮（阻轉異構物2，實例2）（27.0 mg，34.4%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.10 (3H, s), 2.97 - 3.30 (2H, m), 3.36 - 3.57 (1H, m), 3.98 - 4.56 (5H, m), 4.58 - 4.72 (2H, m), 4.76 - 5.00 (1H, m), 5.76 (1H, d), 6.19 (1H, d), 6.78 - 6.98 (1H, m), 7.56 - 7.68 (2H, m), 8.50 (1H, s), 8.62 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 494。
甲基N
-苄基-D
-絲胺酸
在0°C，將TEA（44.8 ml，321.38 mmol）添加至甲基D
-絲胺酸鹽酸鹽（50 g，321.38 mmol）和苯甲醛（33 ml，321.38 mmol）在甲醇（250 ml）中的溶液中。將所得懸浮液在室溫下攪拌2小時。然後緩慢添加硼氫化鈉（24 g，634.39 mmol）並且將混合物在室溫攪拌持續另外的2小時。反應混合物用水（200 ml）淬滅，用DCM（3 x 100 ml）萃取，將有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並蒸發。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度：0%至60%的EtOAc的石油醚溶液）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈無色油狀物的甲基N
-苄基-D
-絲胺酸（40 g，60%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 2.51 (2H, s), 3.48 (1H, dd), 3.65 (1H, dd), 3.76 - 3.84 (5H, m), 3.92 (1H, d), 7.36 (5H, m)。m/z：ES+ [M+H]+ = 210。
甲基N
-(三級丁氧基羰基)-L
-丙胺醯基-N
-苄基-D
-絲胺酸
在0°C，將氯甲酸異丁酯（15.66 g，114.70 mmol）添加至甲基N
-(三級丁氧基羰基)-L
-丙胺酸酯（27.1 g，143.37 mmol）和N
-甲基𠰌啉（11.6 g，114.70 mmol）在THF（100 ml）中的溶液中並且允許反應溫度升至25°C並攪拌1小時。然後添加在THF（100 ml）中的N
-苄基-D
-絲胺酸（20 g，95.58 mmol）並且將混合物攪拌過夜。將反應混合物過濾並且用EtOAc洗滌。減壓去除溶劑之後，將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以0至50% EtOAc在石油醚中的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈無色油狀物的甲基N
-(三級丁氧基羰基)-L
-丙胺醯基-N
-苄基-D
-絲胺酸（16 g，44%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.22 (3H, d), 1.44 (9H, s), 3.74 (3H, s), 3.91 (2H, d), 4.06 (1H, m), 4.53 - 4.63 (1H, m), 4.72 (1H, m), 4.84 (1H, m), 5.28 (1H, m), 7.31 - 7.45 (5H, m)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z：ES+ [M+H]+ = 381。
(3R
,6S
)-1-苄基-3-(羥基甲基)-6-甲基哌𠯤-2,5-二酮
在25°C，將TFA（20 ml，259.60 mmol）添加至在DCM（200 ml）中的甲基N
-(三級丁氧基羰基)-L-丙胺醯基-N
-苄基-D
-絲胺酸（10 g，26.29 mmol）的溶液中。將混合物在25°C攪拌2小時。將反應混合物用飽和碳酸鈉水溶液鹼化並且在25°C攪拌1小時，萃取並且將有機溶劑蒸發。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度：0%至60%的EtOAc的石油醚溶液）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色油狀物的(3R
,6S
)-1-苄基-3-(羥基甲基)-6-甲基哌𠯤-2,5-二酮（4.8 g，74%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C)。1.50 (3H, d), 3.49 (1H, s), 3.80 (1H, d), 3.91 (1H, dd), 3.98 - 4.08 (2H, m), 4.37 (1H, d), 5.34 (1H, d), 7.23 - 7.41 (5H, m)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z：ES+ [M+H]+ = 249。
[(2S
,5S
)-1-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]甲醇
在0°C，將氫化鋰鋁（5.26 g，138.55 mmol）緩慢添加至(3R
,6S
)-1-苄基-3-(羥基甲基)-6-甲基哌𠯤-2,5-二酮（4.3 g，17.32 mmol）在THF（75 ml）中的溶液中。然後在65°C將所得混合物攪拌5小時。將反應混合物用水（2.9 ml）、15% NaOH水溶液（8.7 ml）和水（2.9 ml）分別淬滅。反應混合物通過矽藻土過濾，用EtOAc（100 ml）洗滌。減壓去除溶劑之後，獲得呈無色油狀物的[(2S
,5S
)-1-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]甲醇（3.8 g，100%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 0.98 (3H, d), 2.06 (3H, m), 2.35 - 2.43 (1H, m), 2.72 - 2.82 (2H, m), 3.03 - 3.08 (2H, m), 3.14 (1H, d), 3.48 (1H, dd), 4.03 (1H, dd), 4.18 (1H, d), 7.30 - 7.40 (5H, m)。m/z：ES+ [M+H]+ = 221。
三級丁基 (2S
,5S
)-4-苄基-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯
在25°C，將二碳酸二三級丁酯（9.06 ml，39.03 mmol）添加至[(2S
,5S
)-1-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]甲醇（4.3 g，19.52 mmol）和TEA（4.08 ml，29.28 mmol)在DCM（200 ml）中的溶液中。將所得溶液在25°C下攪拌過夜。藉由蒸發去除溶劑之後，將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以0至100% EtOAc在石油醚中的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈無色油狀物的三級丁基 (2S
,5S
)-4-苄基-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（3.3 g，53%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.22 (3H, d), 1.49 (9H, s), 1.68 (1H, s), 2.35 (1H, s), 2.81 (2H, m), 3.28 (1H, dd), 3.61 - 3.83 (4H, m), 4.02 (1H, d), 4.09 (1H, s), 7.34 (5H, d)。m/z：ES+ [M+H]+ = 321。
三級丁基 (2S
,5S
)-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯
在室溫，在氮氣下，將10% Pd-C（0.11 g，1.03 mmol）添加至三級丁基 (2S
,5S
)-4-苄基-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（3.3 g，10.30 mmol）在EtOH（5 ml）中的溶液中。將所得溶液用氫吹掃並且在25°C在1個大氣壓的氫氣下攪拌24小時。將混合物通過矽藻土墊過濾並且用DCM（20 ml）洗滌。減壓去除溶劑之後，獲得了呈白色固體的產物三級丁基 (2S
,5S
)-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（2.2 g，93%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.20 - 1.27 (3H, m), 1.48 (9H, s), 2.40 (2H, s), 2.51 - 2.56 (1H, m), 3.07 (2H, m), 3.23 (1H, m), 3.52 (1H, m), 3.66 - 3.76 (2H, m), 4.07 - 4.22 (1H, m)。m/z：ES+ [M+H]+ = 231。
三級丁基 (2S
,5S
)-5-{[(7-溴-8-氟-4-羥基喹唑啉-5-基)氧基]甲基}-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯
在室溫，將氫化鈉（0.575 g，14.37 mmol）添加至三級丁基 (2S
,5S
)-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（0.882 g，3.83 mmol）和7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4(3H
)-酮（1 g，3.83 mmol）在THF（40 ml）中的溶液中。將所得的混合物在60°C下攪拌4小時。將反應混合物用飽和NH4
Cl（20 ml）淬滅，用EtOAc（3 x 30 ml）萃取，將有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並蒸發。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度：0%至80%的EtOAc的石油醚溶液）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕褐色固體的三級丁基 (2S
,5S
)-5-{[(7-溴-8-氟-4-羥基喹唑啉-5-基)氧基]甲基}-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（1 g，55%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.27 (3H, d), 1.49 (9H, s), 3.56 (1H, dd), 3.66 (1H, dd), 3.85 (1H, dd), 4.11 (1H, m), 4.24 - 4.32 (2H, m), 4.46 (1H, dd), 4.64 (1H, dd), 7.17 (1H, d), 8.62 (1H, s)。有兩個可交換的質子沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ = 471。
三級丁基 (8aS
,11S
)-5-溴-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在0°C，將2,3,4,6,7,8,9,10-八氫嘧啶并[1,2-a]氮呯（291 mg，1.91 mmol）添加至三級丁基 (2S
,5S
)-5-{[(7-溴-8-氟-4-羥基喹唑啉-5-基)氧基]甲基}-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（900 mg，1.91 mmol）和((1H
-苯并[d
][1,2,3]***-1-基)氧基)三(吡咯啶-1-基)六氟磷酸鏻(V)（994 mg，1.91 mmol）的溶液中。將所得的溶液在25°C下攪拌4小時。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至100% MeOH（0.1% HCOOH）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕褐色固體的三級丁基 (8aS
,11S
)-5-溴-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（388 mg，45%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.27 (3H, d), 1.49 (9H, s), 3.56 (1H, dd), 3.66 (1H, dd), 3.85 (1H, dd), 4.11 (1H, m), 4.24 - 4.32 (2H, m), 4.46 (1H, dd), 4.64 (1H, dd), 7.17 (1H, d), 8.62 (1H, s)。m/z: ES+ [M+H]+ = 453。
三級丁基 (8aS
,11S
)-5-溴-6-氯-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在室溫，將N
-氯代琥珀醯亞胺（110 mg，0.83 mmol）添加至三級丁基 (8aS
,11S
)-5-溴-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（340 mg，0.75 mmol）在DMF（7.5 ml）中的溶液中。將所得的溶液在60°C下攪拌4小時。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的50至100% MeOH（0.1% HCOOH）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕褐色固體的三級丁基 (8aS
,11S
)-5-溴-6-氯-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（310 mg，85%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.29 (3H, d), 1.49 (9H, s), 3.49 - 3.57 (1H, m), 3.67 (1H, dd), 3.91 (1H, dd), 4.14 (1H, dd), 4.25 - 4.35 (1H, m), 4.38 (1H, dd), 4.62 - 4.76 (2H, m),8.68 (1H, s)。m/z: ES+ [M+H]+ = 487。
三級丁基 (3S
,13aS
)-11-氯-9-氟-10-(2-氟-6-羥基苯基)-3-甲基-3,4,13,13a-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H
)-甲酸酯
在室溫，在氮氣下，將碳酸鉀（54.4 mg，0.39 mmol）添加至三級丁基 (8aS
,11S
)-5-溴-6-氯-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（96 mg，0.20 mmol）、(2-氟-6-羥基苯基)硼酸（77 mg，0.49 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（18.37 mg，0.04 mmol）和RuPhos-Pd-G3（32.9 mg，0.04 mmol）在水（2 ml）和1,4-二㗁𠮿（8 ml）(1:4比率）中的混合物中。將所得的混合物在100°C下攪拌2小時。將溶劑蒸發之後，將粗產物藉由快速C18快速層析法（以水中的0至70% MeCN（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的三級丁基 (8aS
,11S
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（28 mg，27%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.26 (3H, d), 1.53 (9H, s), 3.61 - 3.74 (2H, m), 3.83 (1H, m), 4.00 (1H, m), 4.32 (2H, m), 4.46 (1H, m), 4.57 (1H, m), 6.73 (1H, d), 6.93 (1H, d), 7.29 - 7.36 (1H, m), 8.25 (1H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z: ES+ [M+H]+ = 519。
2-[(8aS,11S)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚
在25°C，將HCl（2 ml，65.83 mmol）添加至三級丁基 (3S
,13aS
)-11-氯-9-氟-10-(2-氟-6-羥基苯基)-3-甲基-3,4,13,13a-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H
)-甲酸酯（40 mg，0.08 mmol）在MeOH（2 ml）中的溶液中。將溶液在25°C攪拌1小時。將該粗產物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。將所希望的產物從該柱上使用7M NH3
/MeOH洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的2-[(8aS
,11S
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚（25 mg，77%）。1H NMR (400 MHz, CD3
OD, 30°C) 1.26 (3H, d), 2.88 (1H, dd), 2.97 - 3.04 (1H, m), 3.04 - 3.15 (2H, m), 3.28 (1H, dd), 4.07 (1H, m), 4.47 - 4.57 (1H, m), 4.57 - 4.65 (1H, m), 5.20 (1H, dd), 6.69 - 6.77 (1H, m), 6.79 (1H, m), 7.33 (1H, m), 8.55 (1H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z: ES+ [M+H]+ = 419。
1-[(8aS
,11S
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 （實例3）
在0°C，將DIPEA（0.021 ml，0.12 mmol）添加至2-[(8aS
,11S
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚（25 mg，0.06 mmol）和丙烯醯氯（5.4 mg，0.06 mmol）在THF（2 ml）中的溶液中。將所得的溶液在0°C下攪拌1小時。藉由蒸發去除溶劑之後，將粗產物藉由快速C18快速層析法（以在水中0至60% MeCN（0.1% NH4
HCO3
）洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的1-[(8aS
,11S
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮（實例3）（16 mg，57%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.23 (3H, d), 3.89 (3H, m), 4.24 - 4.58 (4H, m), 4.71 (1H, d), 5.75 (1H, dd), 6.20 (1H, dd), 6.68 - 6.98 (3H, m), 7.35 (1H, m), 8.57 (1H, s), 10.28 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 473。
甲基N
-苄基-D
-絲胺酸
在0°C，將TEA（44.8 ml，321.38 mmol）添加至甲基D
-絲胺酸鹽酸鹽（50 g，321.38 mmol）和苯甲醛（33 ml，321.38 mmol）在甲醇（250 ml）中的溶液中。將所得懸浮液在室溫下攪拌2小時。然後緩慢添加硼氫化鈉（24 g，634.39 mmol）並且將混合物在室溫攪拌持續另外的2小時。反應混合物用水（200 ml）淬滅，用DCM（3 x 100 ml）萃取，將有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並蒸發。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度：0%至60%的EtOAc的石油醚溶液）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈無色油狀物的甲基N
-苄基-D
-絲胺酸（40 g，60%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 2.51 (2H, s), 3.48 (1H, dd), 3.65 (1H, dd), 3.76 - 3.84 (5H, m), 3.92 (1H, d), 7.36 (5H, m)。m/z：ES+ [M+H]+ = 210。
甲基N
-(三級丁氧基羰基)-D
-丙胺醯基-N
-苄基-D
-絲胺酸
在0°C，將N
-甲基𠰌啉（14.5 g，143.37 mmol）添加至甲基N
-(三級丁氧基羰基)-D
-丙胺酸酯（27.1 g，143.37 mmol）和氯甲酸異丁酯（19.58 g，143.37 mmol）在THF（100 ml）中的溶液中。將所得的溶液在0°C下攪拌1小時。然後添加在THF（100 ml）中的甲基N
-苄基-D
-絲胺酸（20 g，95.58 mmol）。將混合物在25°C下攪拌過夜。去除溶劑之後，將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以20至80% EtOAc在石油醚中的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈無色液體的甲基N
-(三級丁氧基羰基)-D
-丙胺醯基-N
-苄基-D
-絲胺酸（18 g，50%）。1H NMR (300 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.30 (3H, d), 1.44 (9H, s), 3.73 (3H, s), 3.82 (1H, m), 4.06 - 4.20 (1H, m), 4.32 (1H, m), 4.66 (1H, m), 4.73 (2H, d), 5.31 (1H, d), 7.30 - 7.44 (5H, m)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z：ES+ [M+H]+ = 381。
(3R
,6R
)-1-苄基-6-(羥基甲基)-3-甲基哌𠯤-2,5-二酮
將TFA（40 ml，519.19 mmol）添加至甲基N
-(三級丁氧基羰基)-D
-丙胺醯基-N
-苄基-D
-絲胺酸（18 g，47.31 mmol）在DCM（400 ml）中的溶液中。將所得的溶液在25°C下攪拌2小時。將反應混合物用飽和碳酸鈉鹼化並攪拌1小時，萃取並且將有機溶劑蒸發。將粗產物藉由C18快速層析法（以在水中的0至60% MeOH（0.1% HCOOH）的洗脫梯度）純化。純的級分蒸發至乾燥以得到呈無色泡沫的(3R
,6R
)-1-苄基-6-(羥基甲基)-3-甲基哌𠯤-2,5-二酮（5.6 g，46%）。1H NMR (300 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.61 (3H, d), 3.26 (1H, s), 3.80 - 4.27 (5H, m), 5.33 (1H, d), 7.25 - 7.53 (6H, m)。m/z：ES+ [M+H]+ = 249。
[(2S
,5R
)-1-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]甲醇
在0°C，在氮氣下，將氫化鋰鋁（3.42 g，90.22 mmol）逐份添加至在THF（50 ml）中的(3R
,6R
)-1-苄基-6-(羥基甲基)-3-甲基哌𠯤-2,5-二酮（2.8 g，11.28 mmol）中。將所得的溶液在65°C下攪拌4小時。反應混合物用水（3.3 ml）、15% NaOH水溶液（9.9 ml）和水（9.9 ml）分別淬滅。將混合物過濾並蒸發以得到呈無色油狀物的[(2S
,5R
)-1-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]甲醇（2.4 g，97%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.03 (3H, d), 2.59 (1H, dd), 2.69 (1H, d), 3.03 (2H, m), 3.15 - 3.20 (1H, m), 3.24 (1H, m), 3.82 - 3.91 (3H, m), 4.10 (1H, m), 7.33 - 7.39 (5H, m)。有兩個可交換的質子沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ = 221。
三級丁基 (2R
,5S
)-4-苄基-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯
在25°C，將三乙胺（3.51 g，34.72 mmol）添加至[(2S
,5R
)-1-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]甲醇（5.1 g，23.15 mmol）和二碳酸二三級丁酯（10.1 g，46.3 mmol）在DCM（230 ml）中的溶液中。將溶液在25°C攪拌過夜。將溶劑蒸發之後，將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以0至50% EtOAc在石油醚中的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的三級丁基 (2R
,5S
)-4-苄基-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（3.1 g，42%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.19 (3H, d), 1.48 (9H, s), 2.32 (2H, m), 2.42 (1H, d), 2.62 - 2.71 (1H, m), 3.15 (1H, d), 3.24 (1H, t), 3.50 (1H, d), 3.87 (1H, d), 3.99 (1H, m), 4.18 (2H, d), 7.34 (5H, m)。m/z：ES+ [M+H]+ = 321。
三級丁基 (2R
,5S
)-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯
在25°C，在氮氣下，將10% Pd-C（1.030 g，9.67 mmol）一次性添加至在乙醇（20 ml）中的三級丁基 (2R
,5S
)-4-苄基-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（3.1 g，9.67 mmol）中。將所得溶液在氫氣氣氛下在25°C攪拌24小時。反應混合物通過矽藻土過濾並且用DCM（100 ml）洗滌。藉由蒸發去除溶劑之後，獲得了呈無色油狀物的三級丁基 (2R
,5S
)-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（2.2 g，99%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.22 (3H, d), 1.48 (9H, s), 2.32 (2H, s), 2.69 - 2.83 (2H, m), 2.86 (1H, dd), 2.97 (1H, dd), 3.49 - 3.59 (1H, m), 3.62 - 3.74 (1H, m), 3.80 (1H, s), 4.20 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 231。
三級丁基 (2R
,5S
)-5-{[(7-溴-8-氟-4-羥基喹唑啉-5-基)氧基]甲基}-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯
在室溫，將氫化鈉（326 mg，8.14 mmol）添加至三級丁基 (2R
,5S
)-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（500 mg，2.17 mmol）和7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4-醇（567 mg，2.17 mmol）在THF（50 ml）中的溶液中。將所得的混合物在45°C下攪拌12小時。反應混合物用水淬滅並且蒸發至乾燥。將粗產物藉由C18快速層析法（以在水中的0至60% MeCN（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕褐色固體的三級丁基 (2R
,5S
)-5-{[(7-溴-8-氟-4-羥基喹唑啉-5-基)氧基]甲基}-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（395 mg，39%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.23 (3H, d), 1.50 (9H, s), 3.10 (2H, m), 3.25 (1H, m), 4.06 (3H, m), 4.29 (2H, m), 7.05 (1H, d), 8.10 (1H, s)。有兩個可交換的質子沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ = 471。
三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在0°C，將2,3,4,6,7,8,9,10-八氫嘧啶并[1,2-a]氮呯（111 mg，0.73 mmol）添加至三級丁基 (2R
,5S
)-5-{[(7-溴-8-氟-4-羥基喹唑啉-5-基)氧基]甲基}-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（345 mg，0.73 mmol）和((1H-苯并[d
][1,2,3]***-1-基)氧基)三(吡咯啶-1-基)六氟磷酸鏻(V)（381 mg，0.73 mmol）在乙腈（35 ml）中的溶液中。將所得的溶液在25°C下攪拌24小時。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至60% MeCN（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（192 mg，58%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 8.67 (s, 1H), 7.21 (d, 1H), 5.26 - 5.03 (m, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.14 (d, 1H), 3.97 (d, 1H), 3.82 (s, 1H), 3.45 - 3.19(m, 2H), 1.52 (s, 9H), 1.13 (d, 3H)。m/z：ES+ [M+H]+ = 453。
三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-6-氯-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在室溫，將N
-氯代琥珀醯亞胺（56.6 mg，0.42 mmol）添加至三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（192 mg，0.42 mmol）在DMF（4 ml）中的溶液中。將所得的溶液在60°C下攪拌4小時。將粗產物藉由C18快速層析法（以0%至90% CH3CN在水中（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕褐色固體的三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-6-氯-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（184 mg，89%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30o
C) 1.14 (3H, d), 1.50 (9H, s), 3.26 - 3.74 (2H, m), 4.02 - 4.73 (5H, m), 5.16 - 5.44 (1H, m), 8.77 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 487。
三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（阻轉異構物1和2）
在氮氣下，將RuPhos-Pd-G3（240 mg，0.29 mmol）添加至三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-6-氯-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（700 mg，1.44 mmol）、(2-氟-6-羥基苯基)硼酸（559 mg，3.58 mmol）、碳酸鉀（595 mg，4.31 mmol）和二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（134 mg，0.29 mmol)在1,4-二㗁𠮿/H2
O（10 ml）（4:1比率）中的溶液中。將所得混合物在100°C下攪拌30分鐘。將溶劑在減壓下去除。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度：0%至40%的EtOAc的石油醚溶液）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到：
呈淡黃色固體的三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯的阻轉異構物1（250 mg，34%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30o
C) 1.12 (3H, s), 1.49 (9H, s), 3.19 - 3.63 (3H, m), 3.75 - 3.87 (1H, m), 3.93 - 4.18 (1H, m), 4.22 - 4.63 (2H, m), 4.67 - 5.06 (1H, m), 6.73 (1H, t), 6.89 (1H, d), 7.24 - 7.36 (1H, m), 8.50 (1H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z
: ES+ [M+H]+ = 519。
呈淡黃色固體的三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯的阻轉異構物2（270 mg，36%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.07 - 1.20 (3H, m), 1.52 (9H, s), 3.14 - 3.53 (3H, m), 3.77 - 3.91 (1H, m), 3.95 - 4.18 (1H, m), 4.29 - 4.57 (2H, m), 5.03 - 5.24 (1H, m), 6.76 (1H, t), 6.90 (1H, d), 7.27 - 7.37 (1H, m), 8.50 (1H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z
: ES+ [M+H]+ = 519。
2-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚（阻轉異構物1）
將4M HCl在1,4-二㗁𠮿（5 ml，20 mmol）中的溶液緩慢添加至如上獲得的三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯的阻轉異構物1（250 mg，0.48 mmol）在MeOH（2 ml）中的攪拌溶液中。將所得溶液在室溫攪拌1小時並且然後減壓去除溶劑以得到呈黃色固體的2-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚.1HCl的阻轉異構物1（400 mg，183%），將其不經進一步純化直接用於下一步中。1H NMR (400 MHz, CD3
OD, 30o
C) 1.43 (3H, d), 3.53 - 3.64 (1H, m), 3.66 (1H, d), 3.74 (4H, d), 3.93 - 4.04 (1H, m), 4.13 (1H, s), 6.73 - 6.86 (2H, m), 7.32 - 7.43 (1H, m), 8.83 (1 H, s)。有兩個可交換的質子沒有看到m/z
：ES+ [M+H]+ = 419。
1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 阻轉異構物1，實例4
在0°C，將丙烯醯氯（46.1 mg，0.51 mmol）添加至在THF（5 ml）中的2-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚.1HCl（400 mg，0.88 mmol）和DIPEA（227 mg，1.76 mmol）。將所得的溶液在0°C下攪拌40分鐘。將粗產物藉由快速C18-快速層析法（以0至30%MeCN在水中（0.1% NH4
HCO3
）中的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮（130 mg，31%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 1.12 (3H, dd), 3.10 - 3.21 (0.5H, m), 3.50 - 3.60 (1.5H, m), 3.98 - 4.14 (1H, m), 4.21 - 4.77 (4H, m), 4.89 - 5.06 (1H, m), 5.70 - 5.80 (1H, m), 6.04 - 6.23 (1H, m), 6.77 - 6.92 (3H, m), 7.32 - 7.42 (1H, m), 8.63 (1H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z
: ES+ [M+H]+ = 473。
2-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚，阻轉異構物2
將4M HCl在1,4-二㗁𠮿（5 ml，20 mmol）中的溶液緩慢添加至如上獲得的三級丁基 (8aS,11R)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-甲酸酯的阻轉異構物2（270 mg，0.52 mmol）在MeOH（3 ml）中的攪拌溶液中。將所得溶液在室溫攪拌1小時並且然後減壓去除溶劑以得到呈黃色固體的2-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚.1HCl（400 mg，169%）。將該產物不進行進一步純化直接用於下一步。1H NMR (400 MHz, CD3
OD, 30o
C) 1.43 (3H, d), 3.55 - 3.60 (1H, m), 3.63 - 3.68 (1H, m), 3.71 - 3.80 (4H, m), 3.90 - 4.00 (1H, m), 4.10 (1H, s), 6.73 - 6.86 (2H, m), 7.32 - 7.46 (1H, m), 8.83 (1H, s)。有兩個可交換的質子沒有看到。m/z
: ES+ [M+H]+ = 419。
1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 阻轉異構物2，實例5
在0°C，將丙烯醯氯（43.7 mg，0.48 mmol）添加至在THF（5 ml）中的2-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚.1HCl的阻轉異構物2（400 mg，0.88 mmol）和DIPEA（227 mg，1.76 mmol）。將所得的溶液在0°C下攪拌40分鐘。將粗產物藉由快速C18-快速層析法（以0至30%MeCN在水中（0.1% NH4
HCO3
）中的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基]丙-2-烯-1-酮（160 mg，38%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 1.11 (3H, dd), 3.16 (0.5H, t), 3.41 - 3.61 (1.5H, m), 3.93 - 4.07 (1H, m), 4.20 - 4.83 (4H, m), 4.88 - 5.05 (1H, m), 5.70 - 5.80 (1H, m), 6.13 - 6.24 (1H, m), 6.76 - 6.93 (3H, m), 7.36 (1H, q), 8.59 (1H, s), 10.27 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ = 473。
6-胺基-2-溴-3-甲基苯甲酸
在80°C加熱3N NaOH（80 ml，79.15 mmol）和4-溴-5-甲基-1H
-吲哚-2,3-二酮（19 g，79.15 mmol）的混合物。向溶液中緩慢添加過氧化氫（18 ml，176.22 mmol）並且將混合物攪拌1小時並且混合物冷卻至5°C然後用濃HCl酸化至pH5。將溶液蒸發至乾燥並且然後添加甲醇（100 ml）。將混合物過濾並且將濾液蒸發以給出呈棕色固體的6-胺基-2-溴-3-甲基苯甲酸（18 g，99%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 2.21 (3H, s), 6.71 (1H, d), 7.07 (1H, d)。有三個可交換的質子沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ = 230。
5-溴-6-甲基喹唑啉-4(3H
)-酮
將6-胺基-2-溴-3-甲基苯甲酸（15 g，65.2 mmol）溶解在甲醯胺（45 ml）並且密封到微波管中。將反應在微波反應器中加熱至200°C持續1小時然後冷卻至室溫。反應混合物用EtOH（200 ml）稀釋。將沈澱物藉由過濾收集，用EtOH（20 ml）洗滌並且真空乾燥以得到呈棕色固體的5-溴-6-甲基喹唑啉-4(3H
)-酮（9 g，58%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 2.47 (3H, s), 7.56 (1H, d), 7.74 (1H, d), 8.04 (1H, s), 12.24 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 239。
5-溴-4-甲氧基-6-甲基喹唑啉
在25°C，將PyBOP（6.53 g，12.55 mmol）一次性添加至在DMF（20 ml）中5-溴-6-甲基喹唑啉-4(3H
)-酮（2 g，8.37 mmol）和DIPEA（2.92 ml，16.73 mmol）中。將所得的溶液在40°C下攪拌16小時。然後添加在甲醇（1.506 g，8.37 mmol）中的甲醇鈉並且將所得溶液在40°C攪拌16小時。將反應混合物傾倒入水（100 ml）中，用EtOAc（2 x 100 ml）萃取，將有機層用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發。將粗產物藉由閃爍C18-快速層析法（在水中5%至80% MeCN的洗脫梯度）進行純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的5-溴-4-甲氧基-6-甲基喹唑啉（1.5 g，71%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 2.55 (3H, s), 4.11 (3H, s), 7.83 (1H, d), 7.90 (1H, d), 8.75 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 254。
三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(4-甲氧基-6-甲基喹唑啉-5-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在氮氣下，將RuPhos-Pd-G3.（51.7 mg，0.06 mmol）添加至在1,4-二㗁𠮿（0.4 ml）和水（0.1 ml）（4:1比率）中的([(8aS)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]硼酸（250 mg，0.62 mmol）、5-溴-4-甲氧基-6-甲基喹唑啉（188 mg，0.74 mmol）、2-二環己基膦基-2',6'-二-異-丙氧基-1,1'-聯苯基（28.9 mg，0.06 mmol）和碳酸鉀（214 mg，1.55 mmol）中。將所得混合物在100°C下攪拌40分鐘。將溶劑在減壓下去除。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度：0%至5%的MeOH的DCM溶液）純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供粗產物。將粗產物藉由快速C18快速層析法（以在水中的0至55% MeOH（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(4-甲氧基-6-甲基喹唑啉-5-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（150 mg，46%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 1.46 (9H, s), 2.11 (3H, d), 2.16 - 2.37 (2H, m), 2.52 - 3.56 (6H, m), 3.86 - 5.05 (4H, m), 7.74 (1H, d), 7.84 (1H, d), 7.99 (1H, s), 8.11 (1H, s), 8.71 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 533。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(4-甲氧基-6-甲基喹唑啉-5-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將N
-氯代琥珀醯亞胺（36.1 mg，0.27 mmol）添加至在乙腈（0.5 ml）中的三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(4-甲氧基-6-甲基喹唑啉-5-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（120 mg，0.23 mmol）中。將所得的混合物在40°C下攪拌4小時。將溶劑減壓去除以得到粗產物三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(4-甲氧基-6-甲基喹唑啉-5-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（200 mg，＞100%），將其直接用於下一步驟中而無需進一步純化。m/z: ES+ [M+H]+ = 567。
5-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基喹唑啉-4(3H
)-酮
將在DCM（2 ml，2 mmol）中的溴化硼添加至三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(4-甲氧基-6-甲基喹唑啉-5-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（190 mg，0.34 mmol）。將所得懸浮液在室溫下攪拌2小時。將溶劑在減壓下去除。將粗產物藉由快速C18快速層析法（以0至50% MeOH在水中(NH4
HCO3
)的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的5-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基喹唑啉-4(3H
)-酮（50 mg，33%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 2.06 (3H, d), 2.60 - 2.83 (2H, m), 2.94 - 3.12 (3H, m), 3.17 (1H, d), 3.83 - 4.16 (1H, m), 4.37 - 4.60 (2H, m), 4.88 - 5.00 (1H, m), 7.72 (1H, d), 7.84 (1H, d), 8.04 (1H, s), 8.54 (1H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z：ES+ [M+H]+ = 453。
5-[(8aS
)-10-丙烯醯基-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基喹唑啉-4(3H
)-酮 阻轉異構物1（實例6）和阻轉異構物2（實例7）
在0°C，將在DMF（2 ml）中的丙烯醯氯（9 mg，0.10 mmol）的溶液添加至在DMF（3 ml）中的5-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基喹唑啉-4(3H
)-酮（45 mg，0.10 mmol）和DIPEA（0.035 ml，0.20 mmol）的攪拌溶液中。將所得的溶液在0°C下攪拌1小時。將粗產物藉由快速C18快速層析法（以0至48% MeOH在水中(NH4
OH)的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供粗產物。將該粗產物藉由製備型手性-HPLC（柱：CHIRALPAK IA 2*25 cm，5 um；流動相A：Hex:DCM=3:1 (10 mM NH3
-MeOH)-HPLC，流動相B：EtOH--HPLC；流速：14 ml/min；梯度：50 B至50 B，在15 min內；220/254 nm；tR 1:9.761；tR 2:12.395）純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的5-[(8aS
)-10-丙烯醯基-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基喹唑啉-4(3H
)-酮的第一洗脫的阻轉異構物（阻轉異構物1，實例6）（7 mg，14%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 2.05 (3H, s), 2.98 - 3.14 (1H, m), 3.33 - 3.57 (2H, m), 4.00 - 4.52 (3H, m), 4.52 - 4.72 (2H, m), 4.73 - 4.97 (1H, m), 5.72 - 5.80 (1H, m), 6.15 - 6.24 (1H, m), 6.75 - 7.03 (1H, m), 7.74 (1H, d), 7.85 (1H, d), 8.05 (1H, s), 8.61 (1H, s), 12.01 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 407。
獲得了該相同化合物的第二洗脫的阻轉異構物，阻轉異構物2（實例7），呈白色固體（7 mg，14%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 2.07 (3H, s), 3.00 - 3.26 (1H, m), 3.33 - 3.59 (2H, m), 4.00 - 4.57 (3H, m), 4.57 - 4.74 (2H, m), 4.78 - 4.96 (1H, m), 5.72 - 5.80 (1H, m), 6.15 - 6.24 (1H, m), 6.84 - 6.89 (1H, m), 7.74 (1H, d), 7.86 (1H, d), 8.05 (1H, s), 8.61 (1H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z：ES+ [M+H]+ = 407。
(+/-)-4-溴-5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑
在65°C，在氮氣下，將4-溴-5-甲基-1H
-苯并咪唑（CAS號：952511-48-7；1.06 g，5.02 mmol）、3,4-二氫-2H
-哌喃（2.3 ml，25.11 mmol）和4-甲基苯磺酸水合物（0.143 g，0.75 mmol）在THF（45 ml）中的混合物攪拌20小時。允許反應混合物冷卻，濃縮並且用EtOAc（150 ml）稀釋，並且依次用飽和NaHCO3
（75 ml）和飽和的鹽水（50 ml）洗滌。將有機層用MgSO4
乾燥，過濾並且蒸發以提供粗產物。將該粗產物藉由快速矽膠層析（0%到80%EtOAc/庚烷的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕褐色固體的(+/-)-4-溴-5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑（1.08 g，72.9%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.66 - 1.8 (3H, m), 2.06 - 2.18 (3H, m), 2.53 (3H, s), 3.68 - 3.78 (1H, m), 4.05 - 4.14 (1H, m), 5.45 (1H, dd), 7.17 (1H, d), 7.35 (1H, d), 8.06 (1H, s)。[M+H]+ 295, 297。三級丁基
(8aS
)-4-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯和[(8aS)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸
在氮氣下，將與二氯甲烷錯合的[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)（0.335 g，0.41 mmol）、雙(頻哪醇合)二硼（3.12 g，12.29 mmol）和乙酸鉀（0.804 g，8.20 mmol）添加至三級丁基 (8aS)-5-溴-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.8 g，4.10 mmol）在二㗁𠮿（65 ml）中的攪拌且脫氣的溶液中。將所得的混合物在90°C下攪拌17小時。將反應混合物允許冷卻，蒸發並且在EtOAc（150 ml）、和水（75 ml）/飽和的鹽水（50 ml）之間分配，將混合物通過矽藻土過濾。將有機層分離，用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發以得到呈棕色油狀物的作為頻哪醇酯和硼酸的混合物（假定為4.10 mmol）的粗產物，其在靜置時固化並且其不經進一步純化即使用。m/z
(ES+), [M+H]+ 405（硼酸）和487（頻哪醇酯）。三級丁基
(8aS
)-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將RuPhos Pd G3（0.306 g，0.37 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（0.171 g，0.37 mmol）和碳酸鉀（1.011 g，7.32 mmol）添加至三級丁基
(8aS)-4-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯和[(8aS)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸（1.95 g，4.02 mmol）和(+/-)-4-溴-5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑（1.08 g，3.66 mmol）在二㗁𠮿（100 ml）和水（25 ml）中的攪拌且脫氣的溶液中，將混合物用氮氣抽空（5個循環），並且在80°C攪拌90分鐘。將反應混合物允許冷卻，用EtOAc（150 ml）稀釋，並且用水（75 ml）/飽和的鹽水（75 ml）洗滌，分離並且將水層用EtOAc（100 ml）再萃取。將有機萃取物合併，用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發以得到粗產物。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度：0%至5%的MeOH的DCM溶液）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色泡沫的三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（2.09 g，99 %）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.51 (9H, s), 1.69 - 1.8 (3H, m), 2.08 - 2.21 (3H, m), 2.33 (3H, d), 3.01 - 3.31 (3H, m), 3.71 - 3.9 (2H, m), 4.13 (3H, d), 4.34 - 4.54 (2H, m), 5.08 (1H, d), 5.44 - 5.55 (1H, m), 7.05 (1H, dt), 7.26 - 7.29 (1H, m), 7.46 - 7.54 (1H, m), 7.99 (1H, dd), 8.68 (1H, d)。m/z
(ES+), [M+H]+ 575。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1和阻轉異構物2
在rt，將1-氯吡咯啶-2,5-二酮（0.534 g，4.00 mmol）添加至三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（2.09 g，3.64 mmol）在DMF（20 ml）中的攪拌溶液中。在120°C，將所得溶液攪拌17 h。允許反應混合物冷卻，用水（25 ml）稀釋，添加EtOAc（125 ml）並且將乳液通過矽藻土過濾。將有機層分離，進一步用飽和的鹽水（2 x 100 ml）洗滌，用相分離柱乾燥，過濾並蒸發以得到粗產物。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度：0%至8%的MeOH的DCM溶液）純化。將純的級分蒸發至乾燥並且將阻轉異構物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18 柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（28-30%，在H2
O中））和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）分離。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（0.342 g，17.9%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
) 1.58 (s, 9H), 2.23和2.29 (s, 3H*), 2.98 - 3.33 (m, 3H), 3.48 (brs, 0.6H), 3.84 - 4.05 (m, 1H), 4.05 - 4.23 (m, 1H), 4.37 - 4.59 (m, 2H), 4.59 - 4.93 (br s, 1H), 5.01 (d, J = 12.9 Hz, 0.4H), 7.23和7.29 (d, 1H*), 7.49和7.78 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.93和7.94 (s, 1H*), 8.25和8.67 (s, 1H*), 9.71和11.73 (br s, 1H*) *據觀察在苯并咪唑 NH處的互變異構物處於2:1比率。19
F NMR (376 MHz, CDCl3
, 30°C) -126.93, -124.43。m/z
(ES+), [M+H]+ 525,527。
還獲得了該相同化合物的第二洗脫的阻轉異構物 - 阻轉異構物2（0.185 g，9.69%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
) 1.57 (s, 9H), 2.23和2.24 (s, 3H*), 2.93 - 3.4 (m, 3H), 3.76 - 3.88 (m, 1H), 4.03 - 4.30 (m, 2H), 4.36 - 4.51 (m, 1.5H), 4.57 (d, J = 13.2 Hz, 0.5H), 4.93 - 5.06 (m, 0.5H), 5.09 - 5.25 (m, 0.5H), 7.22和7.30 (d, J = 8.3 Hz, 1H*), 7.49和7.79 (d, J = 8.3 Hz, 1H*), 7.94 (s, 1H), 8.24和8.68 (s, 1H*), 9.82和11.94 (br s, 1H*)。*觀察到在苯并咪唑 NH處的互變異構物處於2:1比率。19
F NMR (376 MHz, CDCl3
, 30°C) -127.08, -123.84,m/z
(ES+), [M+H]+ 525, 527。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2.
將在MeOH（1 ml）中的二㗁𠮿（1.4 ml，5.64 mmol）中的4M HCl添加至三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物2（185 mg，0.35 mmol）在MeOH（1 ml）中的攪拌溶液中。將所得溶液在室溫攪拌6 h。將反應混合物藉由離子交換層析法（使用SCX柱）純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色固體的(8aS
)-6-氯-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2（147 mg，98%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 2.15 (s, 3H), 2.75-2.97 (m, 2H), 3.04-3.23 (m,, 3H), 4.06 (br s, 1H), 4.57 (m, 2H), 4.99 (d,J
= 12.8 Hz, 1H), 7.21 (d,J
= 8.3 Hz, 1H), 7.51-7.57和7.62-7.67 (m, 1H*), 8.09 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 12.18和12.48 (s, 1H*), *據觀察苯并咪唑 NH處的互變異構物處於1:1比率。19
F NMR (376 MHz, DMSO) -127.77, 128.21 ppm（互變異構物比率 1:1）。m/z
(ES+), [M+H]+ 425,427。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1
從三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1開始，(8aS
)-6-氯-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1以類似於如上所述的相應的阻轉異構物2的方式製備。產物阻轉異構物1示出：1
H NMR (400 MHz, DMSO) 2.17和2.18 (3H, s*), 2.7 - 2.88 (2H, m), 2.97 - 3.18 (3H, m), 3.96 (1H, br s), 4.49 (1H, dd), 4.57 - 4.66 (1H, m), 4.9 - 5.0 (1H, m), 7.16 - 7.29 (1H, m), 7.54和7.65 (1H, d*), 8.08 (1H, d), 8.58 (1H, d), 12.15和12.47 (1H, s), *據觀察在苯并咪唑 NH處的互變異構物處於1:1比率，NH 哌𠯤未觀察到。19
F NMR (376 MHz, DMSO) -128.38, -128.10 ppm (互變異構物比率 1:1),m/z
(ES+), [M+H]+ 425,427。
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2（實例8）
將在DCM（0.5 ml）中的丙烯醯氯（0.026 ml，0.32 mmol）溶液緩慢添加至(8aS
)-6-氯-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2（137 mg，0.32 mmol）和三乙胺（0.090 ml，0.64 mmol）在DCM（5 ml）中的冷卻至-70°C的攪拌溶液中。將所得溶液在-70°C下攪拌30 min。將DCM蒸發並且將殘餘物用DMSO稀釋並且藉由製備型HPLC（沃特斯CSH C18 OBD柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（28-30%在H2
O中））和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）純化。平緩梯度：25%至50% MeCN。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2，實例8（17.8 mg，11.5%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.16 (3H, s), 3.01 - 3.17 (1H, m), 3.42 - 3.54 (1H, m), 4.04 - 4.24 (2H, m), 4.28 - 4.57 (2H, m), 4.66 (2H, s), 4.81 - 4.99 (1H, m), 5.77 (1H, dd), 6.20 (1H, dd), 6.79 - 6.97 (1H, m), 7.22 (1H, d), 7.60 (1H, d), 8.09 (1H, s), 8.64 (1H, s), 12.25 (1H brs),m/z
(ES+), [M+H]+ 479, 481。
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例9）
從(8aS
)-6-氯-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1開始，以類似於實例8的方式製備1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例9）。實例9，示出：1
H NMR (400 MHz, DMSO) 2.18 (3H, s), 2.98 - 3.2 (1H, m), 3.4 - 3.56 (2H, m), 4.06 - 4.56 (3H, m), 4.56 - 4.97 (3H, m), 5.77 (1H, d), 6.20 (1H, d), 6.87 (1H, s), 7.14 - 7.29 (1H, m), 7.54和7.66 (1H, d*), 8.09 (1H, d), 8.64 (1H, d), 12.16和12.49 (1H, s*), *據觀察，在苯并咪唑 NH處的互變異構物處於1 : 1比率。19
F NMR (376 MHz, DMSO, 30°C) -128.18, -127.94 ppm (互變異構物比率 1 : 1),m/z
(ES+), [M+H]+ 479,481。
8-溴-2-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}異喹啉-1(2H
)-酮
在氮氣氣氛下向8-溴異喹啉-1(2H
)-酮（2.5 g，11.16 mmol）在無水DMF（50 ml）的攪拌溶液中添加氫化鈉（在礦物油中的60%分散體）（0.669 g，16.74 mmol）。將所得懸浮液在室溫攪拌5分鐘，然後逐滴添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷（2.96 ml，16.74 mmol）。允許反應混合物在室溫攪拌16小時。在室溫添加另外的氫化鈉（在礦物油中的60%分散體）（260 mg，6.54 mmol）並且允許反應攪拌五分鐘。添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷（2.96 ml，16.74 mmol）（1.2 ml，7.12 ml）並且允許反應攪拌1小時。將反應藉由添加水（150 ml）淬滅並且將混合物用EtOAc（2 x 100 ml）萃取。將有機層通過相分離柱並且減壓濃縮以給出橙色膠狀物。將該粗產物藉由快速矽膠層析（0%到20%EtOAc/庚烷的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色油狀物的8-溴-2-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}異喹啉-1(2H
)-酮（2.76 g，69.8%），其在靜置時固化。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) -0.00 (9H, s), 0.86 - 0.97 (2H, m), 3.63 (2H, dd), 5.33 (2H, s), 6.66 (1H, d), 7.56 (2H, dd), 7.68 (1H, dd), 7.78 (1H, dd)。
8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-2-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}異喹啉-1(2H
)-酮
將PdCl2
(dppf).DCM（0.403 g，0.49 mmol）添加至8-溴-2-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)異喹啉-1(2H
)-酮（1.4 g，3.95 mmol）、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜環戊硼烷)（2.308 g，9.09 mmol）和乙酸鉀（1.94 g，19.76 mmol）在1,4-二㗁𠮿（35 ml）中的脫氣溶液中。將混合物脫氣另外的5分鐘然後在100°C加熱16小時。將冷卻的反應混合物用EtOAc（50 ml）稀釋，依次用水（25 ml）、2M水性Na2
CO3
（2 x 25 ml）和鹽水（25 ml）洗滌。將有機部分乾燥（MgSO4
），過濾並且將濾液濃縮。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度為庚烷中0-25% EtOAc）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色膠狀物的8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-2-{[2-(三甲基矽基)乙氧基] 甲基}異喹啉-1(2H
)-酮（0.938 g，59.1%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 0.00 (9H, d), 0.98 (2H, d), 1.47 (12H, s), 3.6 - 3.69 (2H, m), 5.41 (2H, s), 6.51 (1H, d), 7.16 (1H, d), 7.50 (2H, ddd), 7.59 - 7.65 (1H, m)。m/z：ES+ [M+H]+ 402。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1-側氧基-2-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}-1,2-二氫異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
合併8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-2-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}異喹啉-1(2H
)-酮（0.928 g，2.31 mmol）、{2',6'-雙[(丙-2-基)氧基][1,1'-聯苯基]-2-基}(二環己基)磷烷（0.108 g，0.23 mmol）、RuPhos-Pd-G3（0.193 g，0.23 mmol）、碳酸鉀（0.959 g，6.94 mmol）和三級丁基 (8aS
)-5-溴-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.095 g，2.31 mmol）。添加二㗁𠮿（16 ml）和水（4 ml）的脫氣混合物並且將反應脫氣另外的1分鐘然後在80°C加熱30分鐘。允許反應在80°C攪拌另外的16小時。允許反應冷卻然後用氮氣脫氣5分鐘。添加另外的二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（0.108 g，0.23 mmol）和RuPhos Pd G3（0.193 g，0.23 mmol）並且允許反應在80°C攪拌另外的24小時。將冷卻的反應混合物用EtOAc（100 ml）稀釋，用水（50 ml）和鹽水（50 ml）洗滌，通過相分離柱並且減壓濃縮。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以0至50% EtOAc的洗脫梯度）來純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淺褐色膠狀物的三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1-側氧基-2-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}-1,2-二氫異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.500 g，32.4%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30 °C) 0.00 (9H, s), 1.63 (9H, s), 3.02 - 3.35 (3H, m), 3.56 - 3.63 (2H, m), 3.78 - 4.34 (4H, m), 4.4 - 4.71 (3H, m), 5.04 (1H, d), 5.26 (1H, dd), 5.39 (1H, dd), 6.64 (1H, dd), 7.23 - 7.37 (2H, m), 7.70 (1H, d), 7.78 (1H, td), 8.71 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 668, 670。
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]異喹啉-1(2H
)-酮
將2,2,2-三氟乙酸（2.8 ml，36.34 mmol）添加至在微波小瓶中的三級丁基 (13aS
)-11-氯-9-氟-10-(1-側氧基-2-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1,2-二氫異喹啉-8-基)-3,4,13,13a-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H
)-甲酸酯（0.50 g，0.75 mmol）在THF（2 ml）和水（0.2 ml）中的溶液中。將所得混合物在微波中在105°C攪拌40分鐘。減壓去除揮發物並且將所得殘餘物與甲苯（3 x 5 ml）共沸。將粗產物藉由離子交換層析法（使用載入MeOH和用甲醇洗滌的SCX柱）純化。將所希望的產物使用7M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淺褐色泡沫的8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]異喹啉-1(2H
)-酮（0.287 g，88%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.71 - 2.97 (2H, m), 3.05 - 3.22 (3H, m), 3.84 - 4.2 (2H, m), 4.43 - 4.67 (2H, m), 5.02 (1H, t), 6.72 (1H, d), 7.22 - 7.39 (2H, m), 7.84 - 7.91 (2H, m), 8.64 (1H, dd), 11.11 (1H, d)。m/z
: ES+ [M+H]+ 438, 440。
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]異喹啉-1(2H
)-酮（實例10）
在-78°C，經5分鐘，向8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]異喹啉-1(2H
)-酮（287 mg，0.66 mmol）在DCM（16.4 ml）、IPA（4.1 ml）和吡啶（0.106 ml，1.31 mmol）中的溶液中緩慢逐滴添加丙烯醯氯（0.056 ml，0.69 mmol）在二氯甲烷（3.85 ml）中的溶液。將反應混合物在-78°C攪拌十分鐘。添加另外的在DCM（0.55 ml）中的丙烯醯氯（7.9 μL，0.1 mmol）並且允許反應在-78°C攪拌另外的10分鐘。將反應混合物升溫至室溫並且減壓去除揮發物。添加1M 甲醇胺（2 ml），隨後添加DMSO（4 ml）並且將粗產物藉由製備型HPLC（3 x 注入，沃特斯CSH C18 OBD柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（28%-30%，在H2
O中））和MeCN（25%-50%梯度）的極性遞減混合物作為洗脫液）進行純化。將純的級分蒸發以得到呈白色固體的8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]異喹啉-1(2H
)-酮（45.0 mg，13.96 %）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 3.03 - 3.36 (2H, m), 3.38 - 3.68 (1H, m), 3.83 - 4.13 (2H, m), 4.42 - 4.61 (2H, m), 4.61 - 4.81 (1H, m), 4.98 - 5.13 (1H, m), 5.80 (1H, d), 6.38 (1H, d), 6.59 (2H, dd), 7.01 (1H, dd), 7.21 - 7.33 (1H, m), 7.67 (1H, dt), 7.75 (1H, td), 8.55 - 9.04 (2H, m)。m/z
: ES+ [M+H]+ 492, 494。
3-溴-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}-1H
-吲唑
將3-溴-1H
-吲唑（5 g，25.38 mmol）作為在DMF（100 ml）中的懸浮液在氮氣下攪拌，然後冷卻至0°C。分批添加氫化鈉（在礦物油中的60%分散體）（1.218 g，30.45 mmol）並且將反應在0°C攪拌15分鐘。逐滴添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷（5.39 ml，30.45 mmol）然後允許反應經16小時達到室溫。將反應用NH4
Cl（50 ml）淬滅並且用水（300 ml）和乙酸乙酯（300 ml）稀釋。將各層分離並且將有機相用水（2 x 200 ml）洗滌，通過相分離柱並且減壓濃縮以得到棕色油狀物。將該油狀物藉由快速二氧化矽層析法（以在庚烷中的0-10% EtOAc的洗脫梯度）純化以得到呈白色固體的3-溴-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}-1H
-吲唑（4.33 g，52.1%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) -0.00 (9H, s), 0.9 - 0.99 (2H, m), 3.57 - 3.69 (2H, m), 5.75 (2H, s), 7.26 - 7.37 (1H, m), 7.53 (1H, ddd), 7.62 (1H, d), 7.67 - 7.76 (1H, m)。
3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}-1H
-吲唑
在氮氣下，在攪拌下，將3-溴-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}-1H
-吲唑（3.80 g，11.61 mmol）溶解在脫氣的1,4-二㗁𠮿（50 ml）中並且添加乙酸鉀（4.56 g，46.44 mmol）、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜環戊硼烷)（3.83 g，15.09 mmol）和Pd(dppf)Cl2
.DCM複合物（1.7 g，2.32 mmol）。然後將反應在80°C加熱16小時並且然後加熱至90°C並且攪拌另外的8小時。將揮發物減壓去除並且將所得殘餘物在水（60 ml）和DCM（60 ml）之間分配。將各層分離並且將水層用DCM（2 x 60 ml）萃取。將有機相合併，通過相分離柱並且減壓濃縮以得到深色殘餘物。將殘餘物溶解在DCM中並且藉由快速二氧化矽層析法（以在庚烷中0-40% EtOAc的洗脫梯度）純化。將含有級分的產物減壓濃縮以得到3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基) 甲基)-1H-吲唑（2.44 g，56.1%），其不經進一步純化而使用。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 0.00 (9H, s), 0.93 (2H, d), 1.50 (12H, s), 3.63 (2H, dd), 5.92 (2H, s), 7.32 (1H, s), 7.48 (1H, ddd), 7.70 (1H, d), 8.14 - 8.23 (1H, m)。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}-1H
-吲唑-3-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
合併3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}-1H
-吲唑（0.553 g，1.48 mmol）、{2',6'-雙[(丙-2-基)氧基][1,1'-聯苯基]-2-基}(二環己基)磷烷（0.049 g，0.11 mmol）、RuPhos-Pd-G3（0.088 g，0.11 mmol）、碳酸鉀（0.292 g，2.11 mmol）和三級丁基 (8aS
)-5-溴-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.50 g，1.06 mmol）。添加二㗁𠮿（10 ml）和水（2.5 ml）的脫氣混合物並且將反應脫氣另外的1分鐘然後在80°C加熱30分鐘。將冷卻的反應混合物用EtOAc（100 ml）稀釋，依次用水（35 ml）和鹽水（35 ml）洗滌，然後通過相分離柱並且將有機相減壓濃縮。將該粗材料藉由快速矽膠層析（在庚烷中0-60% EtOAc的洗脫梯度）進行純化。將含有級分的產物合併並且濃縮以得到呈黃色膠狀物的三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}-1H
-吲唑-3-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.450 g，66.5%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 0.00 (9H, s), 0.94 - 0.99 (2H, m), 1.59 (9H, s), 3.13 - 3.35 (3H, m), 3.66 - 3.76 (2H, m), 3.99 (1H, s), 4.1 - 4.32 (2H, m), 4.59 (2H, qd), 5.12 (1H, d), 5.94 (2H, s), 7.31 (1H, d), 7.56 (1H, ddd), 7.63 (1H, d), 7.76 (1H, d), 8.80 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 641, 643。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1H
-吲唑-3-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉
將2,2,2-三氟乙酸（2 ml，25.96 mmol）添加至在微波小瓶中的三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}-1H
-吲唑-3-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（360 mg，0.56 mmol）在THF（1.4 ml）和水（0.14 ml）中的溶液中。將所得混合物在105°C下攪拌持續20分鐘。減壓去除揮發物並且將所得殘餘物與甲苯（3 x 5 ml）共沸。將粗產物藉由離子交換層析法（使用載入MeOH和用甲醇洗滌的SCX柱）純化。將所希望的產物使用7M 甲醇胺從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淺褐色泡沫的(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1H
-吲唑-3-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉（220mg，95%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.7 - 2.93 (2H, m), 3.06 - 3.24 (3H, m), 3.86 - 4.25 (1H, m), 4.53 - 4.78 (2H, m), 5.08 (1H, d), 7.19 - 7.34 (1H, m), 7.54 (1H, ddd), 7.61 (1H, d), 7.76 (1H, d), 8.70 (1H, s), 13.65 (1H, s)。有1個可交換的NH訊號沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ 411, 413。
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1H
-吲唑-3-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 （實例11）
在-78°C，經5分鐘，向(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1H
-吲唑-3-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉（205 mg，0.50 mmol）在DCM（11.7 ml）、IPA（4.1 ml）和吡啶（0.08 ml，1.00 mmol）中的溶液中緩慢逐滴添加丙烯醯氯（0.042 ml，0.52 mmol）在二氯甲烷（2.85 ml）中的溶液。將反應混合物在-78°C下攪拌10分鐘。添加另外的在DCM（0.55 ml）中的丙烯醯氯（7.9 µl，0.1 mmol）並且將反應在-78°C攪拌另外的10分鐘。將反應混合物升溫至室溫並且減壓去除DCM。添加1M 甲醇胺（2 ml）並且將粗產物藉由製備型HPLC（2 x 注入，沃特斯CSH C18 OBD柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（28%-30%，在H2
O中））和MeCN（25%-50%梯度）的極性遞減混合物作為洗脫液）進行純化。將純的級分蒸發以得到呈白色固體的1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1H
-吲唑-3-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮（27.0 mg，11.64%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 3.16 (1H, d), 3.48 (2H, d), 4.14 - 4.23 (1H, m), 4.29 - 4.58 (2H, m), 4.66 - 4.81 (2H, m), 4.87 - 5.02 (1H, m), 5.82 (1H, dd), 6.26 (1H, dd), 6.92 (1H, s), 7.2 - 7.29 (1H, m), 7.47 - 7.52 (1H, m), 7.56 (1H, d), 7.72 (1H, d), 8.71 (1H, s), 13.62 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 465,467。
(2-羥基-6-甲基苯基)硼酸
在-78°C，將正丁基鋰溶液（1.6 M 在己烷中，18.38 ml，29.41 mmol）緩慢添加至2-溴-3-甲酚（2.5 g，13.37 mmol）在THF（100 ml）中的攪拌溶液中。允許反應升溫至室溫並且在該溫度攪拌2小時。將反應混合物冷卻至-78°C並且添加硼酸三甲酯（2.474 ml，22.19 mmol）並且允許反應在-78°C攪拌30分鐘。允許反應升溫至室溫並且在該溫度攪拌16小時。添加2M HCl水溶液（100 ml）並且將反應在室溫攪拌1小時。添加DCM（150 ml）並且將各層分離。將水性部分用DCM（150 ml）萃取並且將合併的有機部分通過相分離柱並且減壓濃縮以得到黃色油狀物。添加庚烷（20 ml）並且將所得沈澱物藉由過濾收集，用DCM（10 ml）洗滌並且真空乾燥以得到呈白色固體的(2-羥基-6-甲基苯基)硼酸（0.811 g，39.9%）。1H NMR (400 MHz, D2
O, 30°C) 2.30 (3H, s), 6.69 (1H, t), 6.81 (1H, d), 7.18 (1H, t)。有3個可交換的OH訊號沒有觀察到。m/z：ES-, [M-H]- 151。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-羥基-6-甲基苯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡啶并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10-甲酸酯 - 阻轉異構物1和阻轉異構物2
在反應管中合併(2-羥基-6-甲基苯基)硼酸（0.305 g，2.01 mmol）、{2',6'-雙[(丙-2-基)氧基][1,1'-聯苯基]-2-基}(二環己基)磷烷（0.049 g，0.11 mmol）、RuPhos-Pd-G3（0.088 g，0.11 mmol）、碳酸鉀（0.438 g，3.17 mmol）和三級丁基 (8aS
)-5-溴-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.5 g，1.06 mmol）。添加二㗁𠮿（12 ml）和水（3 ml）的脫氣混合物並且將反應脫氣另外的1分鐘然後在80°C加熱90分鐘。將冷卻的反應混合物用EtOAc（100 ml）稀釋，依次用水（35 ml）和鹽水（35 ml）洗滌，通過相分離柱並且減壓濃縮。將該粗材料藉由快速矽膠層析（在庚烷中0-80% EtOAc的洗脫梯度）進行純化。將含有級分的產物蒸發以得到固體，其藉由手性SFC（Phenomenex A1，30 x 250 mm，5微米，流動相：30% 2-丙醇 + 0.1% DEA/70% scCO2
，流速：90 ml/min，BPR：120巴，柱溫度：40°C）純化以得到第一洗脫的阻轉異構物三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-羥基-6-甲基苯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡啶并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10-甲酸酯 - 阻轉異構物1（165 mg，62%，d.e.100%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.45 (9H, s), 1.97 (3H, s), 3.05 - 3.2 (2H, m), 3.22 - 3.27 (1H, m), 3.94 (1H, d), 4 - 4.14 (2H, m), 4.61 (2H, qd), 4.85 (1H, d), 6.81 (2H, dd), 7.18 (1H, t), 8.59 (1H, s), 9.44 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 501, 503。還獲得了該相同化合物的第二洗脫的阻轉異構物，阻轉異構物2（151 mg，57%，d.e. 100%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.51 (9H, s), 2.00 (3H, s), 3.12 - 3.26 (2H, m), 3.25 - 3.32 (1H, m), 4.00 (1H, d), 4.10 (2H, ddd), 4.67 (2H, d), 4.91 (1H, d), 6.87 (2H, d), 7.17 - 7.31 (1H, m), 8.65 (1H, s), 9.50 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 501, 503。
2-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-3-甲酚 -阻轉異構物2
將三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-羥基-6-甲基苯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡啶并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10-甲酸酯 - 阻轉異構物2（150 mg，0.30 mmol）在MeOH（1.6 ml）中攪拌然後在室溫添加氯化氫（4N，在1,4-二㗁𠮿中）（1.6 ml，6.40 mmol）。然後將反應在室溫攪拌1小時。將反應藉由離子交換層析法（使用SCX柱）純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淺褐色固體的2-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
] 喹唑啉-5-基]-3-甲酚 - 阻轉異構物2（91 mg，76%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.95 (3H, s), 2.66 - 2.8 (2H, m), 2.86 - 3.13 (4H, m), 3.82 - 3.98 (1H, m), 4.47 (1H, dd), 4.55 (1H, dd), 4.93 (1H, d), 6.80 (2H, d), 7.17 (1H, t), 8.55 (1H, s), 9.43 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 401, 403。
2-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-3-甲酚 -阻轉異構物1
藉由對三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-羥基-6-甲基苯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡啶并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10-甲酸酯 - 阻轉異構物1脫保護，以類似於前述阻轉異構物2的方式製備2-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-3-甲酚 -阻轉異構物1。分離出呈淺褐色固體的阻轉異構物1（120 mg，91%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.01 (3H, s), 2.71 - 2.88 (2H, m), 3.08 (4H, dt), 3.98 (1H, dd), 4.52 (1H, dd), 4.62 (1H, dd), 4.99 (1H, d), 6.81。m/z：ES+ [M+H]+ 401, 403。
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-羥基-6-甲基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2（實例12）
在-78°C，向2-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-3-甲酚 阻轉異構物2（91 mg，0.23 mmol）在DCM（5.3 ml）、IPA（1.9 ml）和吡啶（0.037 ml，0.45 mmol）的溶液中添加丙烯醯氯（22 µl，0.27 mmol）在二氯甲烷（1.52 ml）中的溶液（經5分鐘緩慢逐滴）並且將反應混合物在-78°C攪拌十分鐘。添加在DCM（0.55 ml）中丙烯醯氯（7.9 µl，0.1 mmol）的另外的儲備溶液並且允許反應在-78°C攪拌另外的10分鐘。將反應混合物升溫至室溫並且減壓去除DCM。添加1M 甲醇胺（2 ml）和DMSO（1 ml）並且將粗產物過製備型HPLC（2 x 注入，沃特斯CSH C18 OBD柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（28-30%，在H2
O中））和MeCN（25-50%梯度）的極性遞減混合物作為洗脫液）純化。將純的級分蒸發以得到呈白色固體的1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-羥基-6-甲基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2，實例11，(29.9 mg，29%，d.e. 100%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.00 (3H, s), 3.08 - 3.23 (1H, m), 3.44 - 3.55 (1H, m), 4.09 - 4.17 (1H, m), 4.18 - 4.62 (3H, m), 4.67 - 4.74 (2H, m), 4.85 - 4.99 (1H, m), 5.82 (1H, dd), 6.25 (1H, dd), 6.86 (2H, d), 6.89 - 6.99 (1H, m), 7.19 - 7.29 (1H, m), 8.66 (1H, s), 9.52 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 455, 457。
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-羥基-6-甲基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例13）
從2-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-3-甲酚 - 阻轉異構物1開始，以類似於實例12的方式製備1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-羥基-6-甲基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例13）。分離出呈白色固體的實例13（45 mg，32%，d.e. 99%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.02 (3H, s), 3.07 - 3.22 (1H, m), 3.41 - 3.53 (1H, m), 4.05 - 4.29 (2H, m), 4.29 - 4.61 (2H, m), 4.65 - 4.76 (2H, m), 4.84 - 4.98 (1H, m), 5.82 (1H, dd), 6.25 (1H, dd), 6.85 (2H, d), 6.89 - 7.03 (1H, m), 7.23 (1H, t), 8.66 (1H, s), 9.52 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 455, 457。
(2E
)-1-[(8aS)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2（實例14）
在室溫，在氮氣下，將DIPEA（287 µl，1.65 mmol）一次性添加至在DMA（24.5 ml）中的2-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚 - 阻轉異構物2（222 mg，0.55 mmol）、HATU（250 mg，0.66 mmol）和(E
)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸.HCl鹽（100 mg，0.60 mmol）中。將所得溶液在室溫下攪拌1小時。將反應混合物傾倒入水（80 ml）中，用EtOAc（3 X 80 ml）萃取並且用鹽水（80 ml）洗滌。將有機部分用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發以得到粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18柱，5μ二氧化矽，50 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（H2
O中的28%-30%））與MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）來純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈固體的(2E
)-1-[(8aS)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2，實例14，（72.0 mg，25.4%，d.e. 100%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.17 (6H, s), 2.99 - 3.16 (3H, m), 3.41 (1H, s), 4.02 - 4.2 (2H, m), 4.23 - 4.54 (2H, m), 4.55 - 4.75 (2H, m), 4.75 - 4.95 (1H, m), 6.63 - 6.72 (2H, m), 6.76 (1H, t), 6.83 (1H, d), 7.33 (1H, q), 8.61 (1H, s)。有1個可交換的OH訊號沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ 516, 518。
(2E
)-1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例15）
從2-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚 - 阻轉異構物1開始，以類似於實例14的方式製備(2E
)-1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1，實例15。分離出呈固體的實例15（85 mg，37%，d.e. 99%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.23 (6H, s), 3.02 - 3.25 (3H, m), 3.42 - 3.62 (1H, m), 4.05 - 4.3 (2H, m), 4.3 - 4.59 (2H, m), 4.63 - 4.79 (2H, m), 4.85 - 5.02 (1H, m), 6.68 - 6.8 (2H, m), 6.8 - 6.95 (2H, m), 7.40 (1H, q), 8.67 (1H, s), 10.25 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 516, 518。
8-溴-7-甲基異喹啉
將2,2-二乙氧基乙-1-胺（3.77 ml，25.95 mmol）添加至2-溴-3-甲基苯甲醛（4.92 g，24.72 mmol）在無水甲苯（14 ml）中的攪拌溶液中並且加熱至100°C持續4小時。允許反應混合物冷卻至室溫然後減壓濃縮。將所得殘餘物與甲苯（3 x 15 ml）共沸以從縮合中去除殘餘的水。黃色粗油狀殘餘物溶解在DCM（21 ml）中並且冷卻至0°C。分批添加三氯化鋁（10.88 g，81.57 mmol）並且將所得的深紅色懸浮液在0°C攪拌30分鐘並且然後允許經18小時緩慢升溫至室溫。將反應混合物逐滴添加至冰水中（150 g，注意，極易冒泡）並且用DCM（100 ml）稀釋。將反應混合物小心地用2M水性NaOH 溶液（約120 ml）鹼化。將所得的乳液進一步用水（500 ml）和DCM（700 ml）稀釋，在分液漏斗中震盪然後允許各層經1小時的時間段分離。添加水（400 ml）和鹽水（400 ml）並且將各層分離然後將水層用DCM-MeOH（5:2；2 x 500 ml）萃取。將合併的有機萃取物通過相分離柱並且將濾液減壓濃縮以得到粗產物。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度為庚烷中0-40% EtOAc）純化。將含有所希望的產物的級分蒸發至乾燥以得到呈橙色固體的8-溴-7-甲基異喹啉（3.30 g，60.1 %）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 2.64 (3H, s), 7.49 - 7.63 (2H, m), 7.69 (1H, d), 8.55 (1H, d), 9.67 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 222。
8-溴-7-甲基異喹啉 2-氧化物
在0°C，將間-氯過氧苯甲酸（4.00 g，17.83 mmol）添加至8-溴-7-甲基異喹啉（3.3 g，14.86 mmol）在DCM（150 ml）中的攪拌溶液中。30分鐘之後，將冰浴去除並且在室溫繼續攪拌2小時。將反應混合物用碳酸氫鈉（50 ml）的飽和溶液淬滅並且將各層分離。將水性部分用DCM（3 x 30 ml）萃取並且將合併的有機層用 MgSO4
乾燥，過濾並且減壓濃縮以得到呈白色固體的8-溴-7-甲基異喹啉 2-氧化物（3.54 g，100 %），其不經進一步純化而使用。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30 °C) 2.57 (3H, s), 7.61 (1H, d), 7.92 (1H, d), 7.98 (1H, d), 8.17 - 8.26 (1H, m), 8.85 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 240。
8-溴-1-甲氧基-7-甲基異喹啉
在0°C，將三乙胺（2.072 ml，14.87 mmol）添加至8-溴-7-甲基異喹啉 2-氧化物（1.77 g，7.43 mmol）和氯甲酸甲酯（0.574 ml，7.43 mmol）的攪拌的懸浮液中。允許反應在融化的冰浴中攪拌16小時。將反應冷卻至0°C並且添加另外的氯甲酸甲酯（0.86 ml，1.5當量）和三乙胺（3.1 ml，3當量）然後在室溫將反應攪拌另外的1.5小時。將揮發物減壓去除。將殘餘物溶解在EtOAc（100 ml）中並且依次用水（50 ml）和鹽水（50 ml）洗滌。將有機部分通過相分離柱並且減壓濃縮。將該粗產物藉由快速矽膠層析（0%到20%EtOAc/庚烷的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的8-溴-1-甲氧基-7-甲基異喹啉（1.1 g，58%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 2.60 (3H, s), 4.10 (3H, s), 7.17 (1H, d), 7.47 (1H, d), 7.56 (1H, d), 7.94 (1H, d)。m/z：ES+ [M+H]+ 254。
三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在氮氣下，合併RuPhos-Pd-G3（152 mg，0.18 mmol）、{2',6'-雙[(丙-2-基)氧基][1,1'-聯苯基]-2-基}(二環己基)磷烷、碳酸鉀（504 mg，3.64 mmol）、8-溴-1-甲氧基-7-甲基異喹啉（459 mg，1.82 mmol）和[(8aS)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]硼酸（735 mg，1.82 mmol）並且然後添脫氣二㗁𠮿（40 ml）和脫氣水（10 ml）。將所得混合物脫氣另外的1分鐘並且然後在氮氣下在80°C攪拌60分鐘。允許反應混合物冷卻，用EtOAc（125 ml）稀釋並且依次用水（50 ml）和飽和的鹽水（25 ml）洗滌。將水性部分進一步用EtOAc（75 ml）萃取。將有機萃取物合併，用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發以得到粗產物。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（40克二氧化矽柱）（以在庚烷中0至70% EtOAc的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色泡沫的三級丁基 (8aS)-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（793 mg，82%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.51 (9H, s), 2.20 (3H, s), 3.08 - 3.24 (3H, m), 3.55 (3H, d), 3.90 (1H, d), 4.09 - 4.19 (2H, m), 4.31 - 4.39 (1H, m), 4.43 - 4.55 (1H, m), 5.14 (1H, s), 6.81 (1H, d), 7.24 (1H, d), 7.59 (1H, d), 7.74 (1H, d), 7.95 (1H, d), 8.71 (1H, s). m/z ES+ [M+H]+ 532。
三級丁基 (8aS)-6-氯-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1和阻轉異構物2
在室溫，將N
-氯代琥珀醯亞胺（173 mg，1.30 mmol）添加至三級丁基 (8aS)-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（690 mg，1.30 mmol）在DMF（7 ml）中的攪拌溶液中。將所得溶液在120°C下攪拌30 min。添加另外的N
-氯代琥珀醯亞胺（30 mg，0.22 mmol）並且允許反應在120°C攪拌另外的15分鐘。允許反應混合物冷卻然後藉由反相層析法藉由載入反應混合物至RP柱（150克 C18 RF gold）上然後用在水（具有甲酸0.1%作為改性劑）中的40%-80% MeCN梯度洗脫純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈淺褐色泡沫的三級丁基 (8aS)-6-氯-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯。將固體溶解在MeOH（2 ml）中並且使用手性SFC（Phenomenex C2，30 x 250 mm，5微米，流動相：30% MeOH + 0.1% NH3
/70% scCO2，流速：100 ml/min，BPR：120巴，柱溫度：40°C，UV @ 220 nm）純化以得到三級丁基
(8aS)-6-氯-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（125 mg，34%，d.e.98%），作為第一洗脫峰。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.52 (9H, s), 2.17 (3H, s), 3.03 - 3.24 (3H, m), 3.56 (3H, s), 3.82 - 4.02 (1H, m), 4.02 - 4.31 (2H, m), 4.39 - 4.6 (2H, m), 4.82 - 5.23 (1H, m), 7.27 (1H, s), 7.63 (1H, d), 7.78 (1H, d), 7.96 (1H, d), 8.71 (1H, s). m/z ES+ [M+H]+ 566。第二洗脫峰證明係該相同化合物的阻轉異構物2（120 mg，33%，d.e. 97%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.52 (9H, s), 2.17 (3H, s), 3.11 - 3.3 (3H, m), 3.56 (3H, s), 3.97 (1H, s), 4.06 - 4.25 (2H, m), 4.39 - 4.48 (1H, m), 4.51 - 4.65 (1H, m), 4.98 - 5.14 (1H, m), 7.27 (1H, s), 7.63 (1H, d), 7.78 (1H, d), 7.96 (1H, d), 8.71 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 566。
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物1
在微波小瓶中裝入三級丁基 (8aS)-6-氯-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（125 mg，0.22 mmol）、氯化鋰（46.8 mg，1.10 mmol）、4-甲基苯磺酸水合物（210 mg，1.10 mmol）和無水DMF（4 ml）。將微波小瓶密封並且在微波中在120°C輻射30分鐘。將該粗產物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。將柱用MeOH洗滌，然後將所希望的產物使用1M 甲醇胺從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈灰白色固體的8-[(8aS)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物1（100 mg，100%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 2.14 (3H, s), 2.95 (1H, s), 3.07 - 3.19 (4H, m), 3.89 (1H, d), 4.41 (1H, dd), 4.52 (1H, dd), 5.06 (1H, d), 6.50 (1H, d), 6.93 (1H, d), 7.57 (1H, d), 7.63 (1H, d), 8.57 (1H, s), 8.65 (1H, s)。有1個可交換的NH訊號沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ 452, 454。
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物2
從三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物2開始，以類似於前述阻轉異構物1的方式製備8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物2。分離出呈灰白色固體的所希望的阻轉異構物2（95 mg，99%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 2.14 (3H, s), 2.88 - 2.95 (1H, m), 3 - 3.2 (4H, m), 3.84 - 3.96 (1H, m), 4.40 (1H, dd), 4.48 (1H, dd), 5.07 (1H, dd), 6.49 (1H, d), 6.89 (1H, d), 7.56 (1H, d), 7.58 - 7.67 (1H, m), 8.65 (1H, s), 9.09 (1H, s)。有1個可交換的NH訊號沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ 452, 454。
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物1（實例16）
在-78°C，向8-[(8aS)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物1（0.1 g，0.22 mmol）在二氯甲烷（3 ml）、2-丙醇（1 ml）和三乙胺（0.031 ml，0.22 mmol）中的溶液中添加丙烯醯氯（0.019 ml，0.23 mmol）在二氯甲烷（1 ml）中的溶液（經5分鐘緩慢逐滴添加）並且將反應混合物在-78°C攪拌十分鐘。將反應混合物升溫至室溫，用DCM（20 ml）稀釋並且用水（20 ml）洗滌。將有機層通過相分離柱並且減壓濃縮以得到粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18柱，5μ二氧化矽，30 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（H2
O中的28%-30%））與MeCN（25%至50%的梯度）的極性遞減混合物作為洗脫液）來純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物1（0.055 g，49.1%，d.e. 96%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.03 (3H, s), 3.01 - 3.13 (1H, m), 3.36 - 3.56 (1H, m), 4.07 - 4.26 (2H, m), 4.26 - 4.53 (2H, m), 4.53 - 4.69 (2H, m), 4.77 - 4.97 (1H, m), 5.76 (1H, dd), 6.20 (1H, dd), 6.59 (1H, dd), 6.81 - 6.98 (1H, m), 7.09 - 7.15 (1H, m), 7.72 (2H, s), 8.60 (1H, s), 10.89 (1H, d)。m/z：ES+ [M+H]+ 506, 508。
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物2（實例17）
從8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物2（95 mg，0.21 mmol）開始，以類似於實例16的方式製備8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物2（實例17）。分離出呈白色固體的實例17（52 mg，49%，d.e. 95.8%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.05 (3H, s), 3.02 - 3.23 (1H, m), 3.50 (1H, d), 4 - 4.23 (2H, m), 4.29 - 4.57 (2H, m), 4.57 - 4.73 (2H, m), 4.75 - 4.96 (1H, m), 5.76 (1H, dd), 6.20 (1H, dd), 6.59 (1H, d), 6.8 - 6.98 (1H, m), 7.09 - 7.17 (1H, m), 7.72 (2H, s), 8.60 (1H, s), 10.89 (1H, d)。m/z：ES+ [M+H]+ 506, 508。
4-溴-5-甲基-1H
-苯并***
在0°C，將在水中的（6 ml）亞硝酸鈉（1.132 g，16.41 mmol）溶液逐滴添加至3-溴-4-甲基苯-1,2-二胺（2.0 g，9.95 mmol）在乙酸（20 ml）和水（8 ml）中的攪拌溶液中。將所得混合物在室溫下攪拌1小時。將沈澱物藉由過濾收集，用水（3 x 15 ml）洗滌並且在真空烘箱中在50°C乾燥以得到呈棕色固體的4-溴-5-甲基-1H
-苯并***（1.51 g，72%），其不經進一步純化而使用。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.51 (3H, s), 7.43 (1H, d), 7.80 (1H, s), 15.99 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 212, 214。
4-溴-5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并***
在20°C，將3,4-二氫-2H
-哌喃（0.774 ml，8.49 mmol）添加至在DCM（16 ml）中的4-溴-5-甲基-1H
-苯并***（1.5 g，7.07 mmol）和4-甲基苯磺酸水合物（0.269 g，1.41 mmol）中。將所得混合物在回流下攪拌1小時。允許反應混合物冷卻並且將溶劑在減壓下去除。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度為庚烷中0-100% EtOAc）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色油狀物的4-溴-5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并***（1.150 g，54.9%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 52°C) 1.6 - 1.7 (2H, m), 1.75 - 1.88 (1H, m), 2 - 2.2 (2H, m), 2.39 - 2.46 (1H, m), 2.53 (3H, s), 3.74 - 3.93 (2H, m), 6.15 (1H, dd), 7.49 - 7.57 (1H, m), 7.81 (1H, d)。三級丁基
(8aS
)-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H-苯并***-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在氮氣下，合併RuPhos-Pd-G3（152 mg，0.18 mmol）、{2',6'-雙[(丙-2-基)氧基][1,1'-聯苯基]-2-基}(二環己基)磷烷（85 mg，0.18 mmol）、碳酸鉀（504 mg，3.64 mmol）、4-溴-5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并***（540 mg，1.82 mmol）和[(8aS)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]硼酸（735 mg，1.82 mmol）並且添加脫氣的1,4-二㗁𠮿（40 ml）和脫氣的水（10 ml）。將所得混合物用氮氣脫氣另外的1分鐘然後在氮氣下在80°C攪拌90分鐘。允許反應混合物冷卻然後用EtOAc（125 ml）稀釋並且依次用水（50 ml）和飽和的鹽水（25 ml）洗滌。將水性部分用EtOAc（75 ml）萃取。將有機萃取物合併，用MgSO4
乾燥，過濾並減壓蒸發以得到粗產物。將該粗產物藉由快速矽膠層析（0%到80%EtOAc/庚烷的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色膠狀物的三級丁基 (8aS)-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H-苯并***-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（850 mg，81%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.51 (9H, d), 1.68 - 1.91 (3H, m), 2.12 - 2.3 (2H, m), 2.34 - 2.43 (3H, m), 2.58 (1H, dd), 3.16 (3H, dt), 3.87 (3H, ddt), 4.05 - 4.2 (2H, m), 4.32 - 4.57 (2H, m), 5.10 (1H, d), 6.06 (1H, dd), 7.08 - 7.18 (1H, m), 7.45 (1H, d), 7.68 - 7.77 (1H, m), 8.70 (1H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ 576。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在室溫，將N
-氯代琥珀醯亞胺（174mg，1.30 mmol）添加至三級丁基 (8aS)-4-氟-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H-苯并***-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（850 mg，1.18 mmol）在DMF（5 ml）中的攪拌溶液中。將所得的溶液在120°C下攪拌17小時。允許反應混合物冷卻，用EtOAc（50 ml）稀釋，並且依次用 水（25 ml）和飽和的鹽水（25 ml）洗滌。將合併的有機部分用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發以得到粗的棕色油狀物。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以在DCM中的0至8% 1M 甲醇胺的洗脫梯度）純化以得到呈膠狀物的三級丁基 (8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de] 喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（380 mg，61.2%），其不經進一步純化而使用。m/z：ES+ [M+H]+ 526, 528。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-苯并***-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉
在0°C，在氮氣下，向作為阻轉異構物1和阻轉異構物2的混合物的三級丁基 (8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（380 mg，0.72 mmol）在二氯甲烷（10 ml）中的溶液中添加2,2,2-三氟乙酸（3 ml，39.18 mmol）並且將反應混合物攪拌2小時然後將溶劑減壓蒸發。將殘餘物溶於甲醇中並施加至用甲醇充分洗滌的SCX柱，然後將產物使用在甲醇中的1M氨洗脫。將溶劑蒸發以得到呈灰白色固體的(8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H-苯并***-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉作為阻轉異構物1和阻轉異構物2的混合物（240 mg，79%），其不經進一步純化而使用。m/z：ES+ [M+H]+ 426, 428。
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例18）和阻轉異構物2（實例19）
在-78°C，向(8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H-苯并***-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉在DCM（16.4 ml）、IPA（4.1 ml）和吡啶（0.091 ml，1.13 mmol）中的溶液中添加丙烯醯氯（0.048 ml，0.59 mmol）在二氯甲烷（3.4 ml）中的溶液（經5分鐘逐滴）並且將反應混合物在-78°C攪拌十分鐘。添加另外的在二氯甲烷（0.55 ml）中的丙烯醯氯（7.77 µl，0.096 mmol）並且允許反應在-78°C攪拌另外的10分鐘。允許反應混合物升溫至室溫並且減壓去除揮發物。將所得殘餘物溶解在DMSO（4 ml）中並且將粗產物藉由製備型HPLC（2 x 注入）（沃特斯CSH C18 OBD柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（在H2
O中的28%-30%））和MeCN（5%-30%梯度）的極性遞減混合物作為洗脫液）純化。將純的級分蒸發以得到呈白色固體的1-[(8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮。將固體溶解在MeOH（2 ml）中並且使用手性SFC（Phenomenex C1，30 x 250 mm，5微米，流動相：40% MeOH + 0.1% NH3
/60% scCO2
，流速：90 ml/min，BPR：120巴，柱溫度：40°C，UV @ 220 nm）純化以得到1-[(8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例18）（11 mg，8%，d.e.79%），作為第一洗脫峰。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 2.25 (3H, s), 3.16 - 3.32 (1H, m), 3.44 - 3.66 (2H, m), 3.93 - 4.08 (2H, m), 4.5 - 4.57 (2H, m), 4.74 (2H, s), 5.84 (1H, dd), 6.42 (1H, dd), 6.59 (1H, dd), 7.34 (1H, d), 7.98 (1H, s), 8.36 (1H, s)。有1個可交換的NH訊號沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ 480, 482。
獲得了1-[(8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮（阻轉異構物2，實例19），作為第二洗脫峰（7 mg，5.1%，d.e. 79%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 2.25 (3H, s), 3.13 (2H, s), 3.40 (1H, s), 3.89 (1H, s), 4.07 (1H, s), 4.50 (1H, s), 4.62 (1H, dd), 4.76 (1H, s), 5.19 (1H, d), 5.84 (1H, d), 6.40 (1H, d), 6.61 (1H, dd), 7.35 (1H, d), 7.98 (1H, s), 8.35 (1H, s)。有1個可交換的NH訊號沒有觀察到。m/z：ES+ [M+H]+ 480, 482。
三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在二㗁𠮿（5 ml）和水（1.5 ml）的脫氣混合物中，合併4-溴-5-氟-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H
-苯并咪唑（0.257 g，0.86 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（0.040 g，0.09 mmol）、碳酸鉀（0.237 g，1.72 mmol）和[(8aS
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸（0.347 g，0.86 mmol）。然後添加RuPhos Pd G3（0.072 g，0.09 mmol）並且將混合物脫氣另外的1分鐘。將該反應然後加熱至80o
C持續16小時。將冷卻的反應混合物用EtOAc（50 ml）稀釋，用2M水性Na2
CO3
（2 x 30 ml）、鹽水（30 ml）洗滌，乾燥（MgSO4
），過濾並且將濾液在真空中濃縮。將該粗產物藉由快速矽膠層析（0%到80%EtOAc/庚烷的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色膠狀物的三級丁基 (8aS)-4-氟-5-(5-氟-1-(四氫-2H
-哌喃-2-基)-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.497 g，100%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30 °C) 1.51 (9H, s), 1.64 - 1.84 (4H, m), 2.06 - 2.3 (2H, m), 2.55 (1H, d), 2.89 - 3.29 (3H, m), 3.97 - 4.25 (3H, m), 4.29 - 4.57 (3H, m), 5.11 (1H, d), 5.75 (1H, dd), 7.12 (1H, d), 7.30 (1H, t), 7.66 (1H, dd), 7.87 (1H, s), 8.72 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 579。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉
將N
-氯代琥珀醯亞胺（0.115 g，0.86 mmol）一次性添加至在DMF（2.86 ml）中的三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.497 g，0.86 mmol）的攪拌溶液中並且將反應在110°C攪拌1小時。然後添加另外的N
-氯代琥珀醯亞胺（0.115 g，0.86 mmol）並且將反應在110°C攪拌另外的1小時並且然後冷卻至環境溫度。將該等溶劑在真空中去除以給出棕色膠狀物。將膠狀物溶解在DCM（10 ml）中並且然後在20°C添加TFA（10 ml）並且將反應攪拌1小時。將該粗產物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉（0.328 g，89%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 3.02 - 3.21 (4H, m), 4.06 (1H, s), 4.33 - 4.82 (2H, m), 5.01 (1H, s), 7.44 (1H, t), 7.65 - 7.87 (2H, m), 7.92 (1H, d), 8.62 (1H, s), 13.41 (1H, s)。有1 x 可交換的未看見。m/z
(ES+), [M+H]+ 429。
1-((8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基)丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例20）和阻轉異構物2（實例21）
在-78°C，向(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉（0.325 g，0.76 mmol）在DCM（10 ml）、2-丙醇（2.0 ml）和三乙胺（0.106 ml，0.76 mmol）中的溶液中添加丙烯醯氯（0.072 g，0.80 mmol）在DCM（1 ml）中的溶液（經5 min緩慢逐滴添加）並且將反應混合物在-78°C攪拌10分鐘。將反應混合物升溫至室溫，用DCM（20 ml）稀釋，用水（20 ml）洗滌，將有機層通過相分離柱並且在真空中濃縮以給出粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18柱，5 µ二氧化矽，30 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有1% NH4
OH）與MeCN的漸減極性混合物作為洗脫液）來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供白色固體。將該固體溶解在MeOH中並且使用SFC（柱：Phenomonex C4 30 x 250 mm，5微米，流動相：45% MeOH + 0.1% NH3
/55% scCO2
，流速：100 ml/min，120巴，柱溫度：40°C）分離。將純的級分乾燥以給出第一洗脫的阻轉異構物1-((8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基)丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（12 mg，36%）。1H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 3.14 - 3.25 (1H, m), 3.36 - 3.72 (2H, m), 3.99 - 4.41 (2H, m), 4.44 - 4.66 (3H, m), 5.09 (1H, d), 5.82 (1H, dd), 6.29 (1H, dd), 6.66 - 6.96 (1H, m), 7.37 (1H, t), 7.72 (2H, d), 8.60 (1H, s)。有1個可交換的質子沒有觀察到。m/z
(ES+), [M+H]+ 483。
還獲得了第二洗脫的阻轉異構物1-((8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基)丙-2-烯-1-酮 -阻轉異構物2（14 mg，42%）。1H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 3.33 - 3.72 (3H, m), 4.05 - 4.41 (2H, m), 4.46 - 4.69 (3H, m), 5.09 (1H, d), 5.82 (1H, dd), 6.29 (1H, dd), 6.79 - 6.96 (1H, m), 7.33 - 7.47 (1H, m), 7.62 - 7.83 (2H, m), 8.60 (1H, s)。有1 x可交換的質子未觀察到。m/z (ES+), [M+H]+ 483。
三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(6-氟-2-甲基-3-硝基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在二㗁𠮿（10 ml）和水（3 ml）的脫氣混合物中，合併2-溴-1-氟-3-甲基-4-硝基苯（CAS 1427502-92-8；0.440 g，1.88 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（0.070 g，0.15 mmol）、碳酸鉀（0.416 g，3.01 mmol）和[(8aS
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸（0.608 g，1.50 mmol）。然後添加RuPhos Pd G3（0.126 g，0.15 mmol）並且將反應脫氣另外的1分鐘然後在80°C加熱2小時。將冷卻的反應混合物用EtOAc（50 ml）稀釋，用2M水性Na2
CO3
（2 x 30 ml）、鹽水（30 ml）洗滌，乾燥（MgSO4
），過濾並且將濾液在真空中濃縮。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度為庚烷中0-50% EtOAc）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色膠狀物的三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(6-氟-2-甲基-3-硝基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.422 g，54.6%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.50 (9H, d), 2.96 - 3.27 (3H, m), 3.48 (3H, s), 3.75 - 3.97 (1H, m), 4.29 - 4.59 (3H, m), 5.11 (1H, d), 6.82 (1H, d), 7.12 - 7.23 (1H, m), 8.04 (1H, dd), 8.71 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 548。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(6-氟-2-甲基-3-硝基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將N
-氯代琥珀醯亞胺（0.608 g，4.55 mmol）一次性添加至在DMF（15.18 ml）中的三級丁基 (8aS)-4-氟-5-(6-氟-2-甲基-3-硝基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（2.338 g，4.55 mmol）的攪拌溶液中並且將反應在110°C攪拌1小時。然後將反應冷卻至環境溫度並且將揮發物在真空中去除以給出棕色膠狀物。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度為庚烷中0-50% EtOAc）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(6-氟-2-甲基-3-硝基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.339 g，53.7%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.51 (9H, s), 2.34 (3H, d), 2.94 - 3.43 (3H, m), 3.78 - 4.01 (1H, m), 4.02 - 4.29 (2H, m), 4.36 - 4.65 (2H, m), 5.03 (1H, s), 7.12 - 7.23 (1H, m), 8.12 (1H, dd), 8.71 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 548。
三級丁基 (8aS
)-5-(3-胺基-6-氟-2-甲基苯基)-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(6-氟-2-甲基-3-硝基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.337 g，2.44 mmol）溶解在IPA（15 ml）和水（3 ml）中。在環境溫度添加鐵（0.681 g，12.20 mmol）然後添加氯化銨（0.653 g，12.20 mmol）。然後將反應在85°C加熱1小時。允許反應冷卻至環境溫度並且然後通過矽藻土過濾。將矽藻土用乙酸乙酯（50 ml）然後甲醇（50 ml）洗滌。將合併的濾液壓濃縮，溶解在DCM（50 ml）中，用飽和NaHCO3
（100 ml）和飽和水性NaCl（100 ml）洗滌。將有機物乾燥MgSO4
，過濾並蒸發以得到呈棕色膠狀物的三級丁基 (8aS
)-5-(3-胺基-6-氟-2-甲基苯基)-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.483 g，117%），其不經進一步純化而使用。1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30°C) 1.51 (9H, s), 1.91 (3H, d), 2.95 - 3.34 (3H, m), 3.58 (2H, s), 3.76 - 4 (1H, m), 4.01 - 4.28 (2H, m), 4.37 - 4.61 (2H, m), 4.87 - 5.08 (1H, m), 6.77 (1H, dd), 6.90 (1H, t), 8.69 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 571。
三級丁基 (8aS
)-5-(1-乙醯基-5-氟-1H
-吲唑-4-基)-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將乙酸酐（0.047 ml，0.50 mmol）添加至在氯仿（20 ml）中的三級丁基 (8aS
)-5-(3-胺基-6-氟-2-甲基苯基)-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.103 g，0.20 mmol）和乙酸鉀（0.049 g，0.50 mmol）中。加熱至70°C 30 min之後，添加18-冠醚-6（0.013 g，0.05 mmol）和亞硝酸異戊酯（0.107 ml，0.80 mmol）並且將反應攪拌在70o
C 16小時。冷卻之後，將反應用水洗滌，並且將水層用DCM萃取。將合併的有機物濃縮，然後將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以在庚烷中的0至50% EtOAc的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈灰白色固體的三級丁基 (8aS
)-5-(1-乙醯基-5-氟-1H
-吲唑-4-基)-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.074 g，65.2%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.52 (9H, s), 2.80 (3H, s), 2.97 - 3.38 (3H, m), 4.06 - 4.28 (3H, m), 4.32 - 4.69 (2H, m), 4.82 - 5.2 (1H, m), 7.4 - 7.53 (1H, m), 7.80 (1H, d), 8.57 (1H, dd), 8.73 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 571。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1和阻轉異構物2
將氫氧化鈉（9.94 ml，19.88 mmol）添加至三級丁基 (8aS
)-5-(1-乙醯基-5-氟-1H
-吲唑-4-基)-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.135 g，1.99 mmol）在THF（15 ml）和MeOH（3 ml）的混合物中的攪拌溶液中並且將反應攪拌1小時。將該粗產物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度為庚烷中0-100% EtOAc）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到淺粉色固體。將該固體溶解在MeOH中並且使用SFC（柱：Phenomonex C1 3 x 50 mm，3微米，流動相：45% MeOH + 0.1% NH3
/55% scCO2
，流速：2 ml/min，120巴，柱溫度：40°C）分離。將級分蒸發以給出作為第一洗脫的阻轉異構物的三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（187 mg，37%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.52 (9H, s), 2.95 - 3.34 (3H, m), 3.83 - 4.03 (1H, m), 4.03 - 4.34 (2H, m), 4.50 (1H, dd), 4.59 (1H, dd), 5.05 (1H, d), 7.33 (1H, t), 7.60 (1H, dd), 7.78 (1H, s), 8.73 (1H, s), 10.31 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 529。
還獲得了三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯的第二洗脫的阻轉異構物，阻轉異構物2，（180 mg，36%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.52 (9H, s), 2.9 - 3.41 (3H, m), 3.82 - 3.98 (1H, m), 4 - 4.33 (2H, m), 4.44 - 4.63 (2H, m), 5.04 (1H, d), 7.33 (1H, t), 7.60 (1H, dd), 7.76 (1H, s), 8.73 (1H, s), 10.33 (1H, s)。m/z (ES+), [M+H]+ 529。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1
在20°C，將TFA（1 ml）添加至三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（0.187 g，0.35 mmol）在DCM（2 ml）中的攪拌溶液中並且將反應攪拌1小時。將該粗產物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1（0.152 g，100 %）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.71 - 2.89 (2H, m), 2.95 - 3.15 (2H, m), 3.87 - 4.21 (2H, m), 4.45 - 4.73 (2H, m), 4.98 (1H, d), 7.36 - 7.49 (1H, m), 7.69 - 7.86 (2H, m), 8.60 (1H, s), 13.41 (1H, s)。有1 x可交換的質子未觀察到。m/z
(ES+), [M+H]+ 429。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2
從三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物2開始，以類似於前述阻轉異構物1的方式製備(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2。所希望的阻轉異構物2示出：1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.63 - 2.88 (3H, m), 2.91 - 3.14 (2H, m), 3.8 - 4 (1H, m), 4.41 - 4.72 (2H, m), 4.95 (1H, d), 7.43 (1H, t), 7.65 - 7.89 (2H, m), 8.59 (1H, s), 13.40 (1H, s)。有1 x 可交換的未看見。m/z
: ES+ [M+H]+ 429。
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例22）
在-78°C，向(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1（0.152 g，0.35 mmol）在二氯甲烷（5 ml）、2-丙醇（1 ml）和三乙胺（0.049 ml，0.35 mmol）中的溶液中添加丙烯醯氯（0.034 g，0.37 mmol）在二氯甲烷（1 ml）中的溶液（經5 min緩慢逐滴添加）並且將反應混合物在-78°C攪拌十分鐘。將反應混合物升溫至室溫，用DCM（20 ml）稀釋，用水（20 ml）洗滌，將有機層通過相分離柱並且在真空中濃縮以給出粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18柱，5 µ二氧化矽，30 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有1% NH4
OH）與MeCN的漸減極性混合物作為洗脫液）來純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈灰白色固體的實例22，1-((13aS)-11-氯-9-氟-10-(5-氟-1H-吲唑-4-基)-3,4,13,13a-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1，（0.065 g，38%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 3.17 (2H, s), 3.35 - 3.56 (1H, m), 3.95 - 4.24 (2H, m), 4.26 - 4.56 (1H, m), 4.57 - 4.78 (2H, m), 4.77 - 5 (1H, m), 5.76 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.86 (1H, s), 7.44 (1H, t), 7.67 - 8.01 (2H, m), 8.65 (1H, s), 13.42 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 483。
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2（實例23）
從(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2開始，以類似於實例22的方式製備1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2（實例23）。實例23示出：1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 3.36 - 3.55 (2H, m), 3.97 - 4.24 (2H, m), 4.27 - 4.57 (2H, m), 4.59 - 4.77 (2H, m), 4.78 - 5.01 (1H, m), 5.76 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.7 - 7.07 (1H, m), 7.44 (1H, t), 7.68 - 7.83 (2H, m), 8.65 (1H, s), 13.41 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 483。
4-溴-5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d
]咪唑
將碘甲烷（2 ml，32.13 mmol）添加至4-溴-5-氟-1H
-苯并[d]咪唑（CAS 1360962-58-8；1.834 g，8.53 mmol）、碳酸鉀（2.4 g，17.06 mmol）和IPA（50 ml）的攪拌混合物中。將混合物在80°C攪拌24小時並且然後冷卻至環境溫度。將混合物用EtOAc稀釋並且將所得固體過濾掉。將濾液在真空中濃縮並且將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以在DCM中0至7% MeOH的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到的位置異構物的混合物。將該混合物進一步藉由製備型HPLC（沃特斯CSH C18 OBD柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（在H2O中的28%-30%））和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）純化。將級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的7-溴-6-氟-1-甲基-1H
-苯并[d]咪唑（0.180 g，9%）和呈白色固體的所希望的4-溴-5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d
]咪唑（0.195 g，10%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 27°C) 4.14 (3H, s), 7.05 - 7.12 (1H, m), 7.65 (1H, dd), 7.79 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 229。
三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在二㗁𠮿（5 ml）和水（1.5 ml）的脫氣混合物中，合併4-溴-5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d
]咪唑（0.190 g，0.83 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（0.039 g，0.08 mmol）、碳酸鉀（0.229 g，1.66 mmol）和[(8aS
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸（0.335 g，0.83 mmol）。添加RuPhos Pd G3（0.069 g，0.08 mmol）並且將反應脫氣另外的1分鐘然後在80°C加熱16小時。將冷卻的反應混合物用EtOAc（50 ml）稀釋，用2M水性Na2
CO3
（2 x 30 ml）、鹽水（30 ml）洗滌，乾燥（MgSO4
），過濾並且將濾液在真空中濃縮。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以在庚烷中的0至100% EtOAc，隨後在EtOAc中的10% MeOH的洗脫梯度）純化。純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色固體的三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.329 g，78%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.51 (9H, s), 2.87 - 3.33 (3H, m), 3.75 - 3.87 (1H, m), 3.89 (3H, s), 3.99 - 4.25 (2H, m), 4.3 - 4.55 (2H, m), 5.08 (1H, d), 7.15 - 7.3 (2H, m), 7.41 (1H, dd), 7.90 (1H, s), 8.70 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 509。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1和阻轉異構物2
將N
-氯代琥珀醯亞胺（0.086 g，0.65 mmol）一次性添加至三級丁基 (8aS
)-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.329 g，0.65 mmol）在DMF（2.2 ml）中的攪拌溶液中，將反應在110°C攪拌1小時然後冷卻至環境溫度。將該等溶劑在真空中去除以給出棕色膠狀物。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以在庚烷中的0至100% EtOAc，隨後在EtOAc中的10% MeOH的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體。將該固體溶解在MeOH中並且使用SFC（柱：Phenomonex A1，30 x 250 mm，5微米，流動相：45% IPA + 0.1% DEA/55% scCO2
，流速：80 ml/min，120巴，柱溫度：40°C）分離。將級分乾燥以給出第一洗脫的阻轉異構物三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（61 mg，37%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30°C) 1.51 (9H, s), 2.89 - 3.27 (3H, m), 3.76 - 3.95 (4H, m), 3.99 - 4.31 (2H, m), 4.36 - 4.68 (2H, m), 5.00 (1H, d), 7.15 - 7.3 (1H, m), 7.38 - 7.57 (1H, m), 7.86 (1H, s), 8.68 (1H, d)。m/z
(ES+), [M+H]+ 543。
還分離出該相同化合物得第二洗脫的阻轉異構物，阻轉異構物2（58 mg，35%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30°C) 1.51 (9H, s), 2.85 - 3.4 (3H, m), 3.75 - 3.94 (4H, m), 4.01 - 4.28 (2H, m), 4.4 - 4.66 (2H, m), 5.00 (1H, d), 7.23 (1H, d), 7.46 (1H, dd), 7.88 (1H, s), 8.69 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 543。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2
在20°C，將TFA（0.5 ml）添加至三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物 2（0.058 g，0.11 mmol）在DCM（1 ml）中的攪拌溶液中。允許反應攪拌1小時。將該粗產物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉（0.043 g，91%）。m/z
(ES+), [M+H]+ 443。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1
從三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1開始，以類似於(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2的方式製備(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1，三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1示出：1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.63 - 2.88 (3H, m), 2.91 - 3.14 (2H, m), 3.8 - 4 (1H, m), 4.41 - 4.72 (2H, m), 4.95 (1H, d), 7.43 (1H, t), 7.65 - 7.89 (2H, m), 8.59 (1H, s), 13.40 (1H, s)。有1 x 可交換的未看見。m/z
: ES+ [M+H]+ 429。
1-((8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基)丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2（實例24）
在-78°C，向(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉 - 阻轉異構物2（0.043 g，0.10 mmol）在二氯甲烷（1 ml）、2-丙醇（0.2 ml）和三乙胺（0.014 ml，0.10 mmol）中的溶液中添加丙烯醯氯（9.23 mg，0.10 mmol）在二氯甲烷（1 ml）中的溶液（經5 min緩慢逐滴添加）並且將反應混合物在-78°C攪拌10分鐘。將反應混合物升溫至室溫，用DCM（20 ml）稀釋，用水（20 ml）洗滌，將有機層通過相分離柱並且在真空中濃縮以給出粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18柱，5 µ二氧化矽，30 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有1% NH4
OH）與MeCN的漸減極性混合物作為洗脫液）來純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈灰白色固體的1-((8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-基)丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2，實例24，（0.026 g，53.9 %）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30 °C) 3.34 - 3.57 (2H, m), 3.90 (3H, s), 4.03 - 4.23 (2H, m), 4.26 - 4.55 (2H, m), 4.59 - 4.75 (2H, m), 4.78 - 4.99 (1H, m), 5.76 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.61 - 6.99 (1H, m), 7.24 - 7.43 (1H, m), 7.76 (1H, dd), 8.23 (1H, s), 8.63 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 497。
1-((8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基)丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例25）
從(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并 [5,6,7-de]喹唑啉 - 阻轉異構物1開始，以類似於實例24的方式製備1-((8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H
-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基)丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例25）。實例25示出：1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 3.35 - 3.55 (2H, m), 3.90 (3H, s), 4.01 - 4.24 (2H, m), 4.25 - 4.56 (2H, m), 4.56 - 4.77 (2H, m), 4.78 - 5.01 (1H, m), 5.76 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.69 - 7.04 (1H, m), 7.22 - 7.52 (1H, m), 7.76 (1H, dd), 8.22 (1H, s), 8.63 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 497。
2-溴-3-氟-6-硝基喹啉
在環境溫度將三乙胺（8.87 ml，63.63 mmol）添加至2-溴-1,3-二氟-4-硝基苯（CAS 103977-78-2；5.05 g，21.21 mmol）和碳酸銨（2.04 g，21.21 mmol）在DMF（35 ml）中的攪拌的懸浮液中並且將反應攪拌18小時。然後添加水（100 ml）並且將混合物用DCM（3 x 50 ml）萃取。將合併的有機物用水（3 x 100 ml）、鹽水（100 ml）洗滌，通過相分離柱並且在真空中濃縮以給出呈黃色固體的2-溴-3-氟-6-硝基喹啉（5.35 g，107%），其不經進一步純化而使用。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30 °C) 6.55 (1H, dd), 6.90 (2H, s), 8.21 (1H, dd)。m/z
: ES+ [M+H]+ 233。
三級丁基 (8aS
)-5-(2-胺基-6-氟-3-硝基苯基)-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在二㗁𠮿（10 ml）和水（3.0 ml）的脫氣混合物中，合併2-溴-3-氟-6-硝基喹啉（0.538 g，2.29 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（0.107 g，0.23 mmol）、碳酸鉀（0.633 g，4.58 mmol）和[(8aS
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸（0.926 g，2.29 mmol）。添加RuPhos Pd G3（0.192 g，0.23 mmol）並且將反應脫氣另外的1分鐘然後在80°C加熱16小時。將冷卻的反應混合物用EtOAc（50 ml）稀釋，用2M水性Na2
CO3
（2 x 30 ml）、鹽水（30 ml）洗滌，乾燥（MgSO4
），過濾並且將濾液在真空中濃縮。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度為庚烷中0-60% EtOAc）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色固體的三級丁基 (8aS
)-5-(2-胺基-6-氟-3-硝基苯基)-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.850 g，72.1%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.50 (9H, d), 2.86 - 3.32 (3H, m), 3.76 - 3.98 (1H, m), 4 - 4.26 (2H, m), 4.27 - 4.55 (2H, m), 4.92 - 5.23 (1H, m), 6.31 (2H, d), 6.52 - 6.67 (1H, m), 6.85 - 6.97 (1H, m), 8.31 (1H, dd), 8.70 (1H, d)。m/z
(ES+), [M+H]+ 515。
三級丁基 (8aS
)-5-(2-胺基-6-氟-3-硝基苯基)-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將N
-氯代琥珀醯亞胺（0.108 g，0.81 mmol）一次性添加至三級丁基 (8aS
)-5-(2-胺基-6-氟-3-硝基苯基)-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.415 g，0.81 mmol）在DMF（2.69 ml）中的攪拌溶液中並且將反應在110°C攪拌1小時並且然後冷卻至環境溫度。將該等溶劑在真空中去除以給出棕色膠狀物。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18 柱，5 µ矽膠，30 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有1% NH3
）與MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）來純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的三級丁基 (8aS
)-5-(2-胺基-6-氟-3-硝基苯基)-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.105 g，23.71%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30°C) 1.51 (9H, s), 2.77 - 3.41 (3H, m), 3.73 - 4.34 (3H, m), 4.37 - 4.62 (2H, m), 5.04 (1H, s), 6.17 (2H, d), 6.62 (1H, ddd), 8.36 (1H, dd), 8.71 (1H, d)。m/z
(ES+), [M+H]+ 549
三級丁基 (8aS
)-6-氯-5-(2,3-二胺基-6-氟苯基)-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將三級丁基 (8aS
)-5-(2-胺基-6-氟-3-硝基苯基)-6-氯-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.187 g，0.34 mmol）溶解在IPA（3 ml）和水（0.5 ml）中。在環境溫度添加鐵（0.095 g，1.70 mmol）然後添加氯化銨（0.091 g，1.70 mmol）。然後將反應在85°C加熱1小時。將反應冷卻至環境溫度然後通過矽藻土過濾。矽藻土用乙酸乙酯（100 ml）洗滌並且將合併的濾液用飽和水性NaHCO3
（100 ml）然後飽和NaCl（100 ml）洗滌。將有機相用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發以得到呈黃色固體的三級丁基 (8aS
)-6-氯-5-(2,3-二胺基-6-氟苯基)-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.177 g，100%），作為阻轉異構物的混合物。1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30°C) 1.53 (9H, d), 2.91 - 3.36 (5H, m), 3.47 (2H, d), 3.73 - 4.03 (1H, m), 3.99 - 4.29 (2H, m), 4.35 - 4.68 (2H, m), 4.78 - 5.17 (1H, m), 6.55 (1H, t), 6.68 - 6.86 (1H, m), 8.70 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 519。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1和阻轉異構物2
在8°C，將在水（0.5 ml）中的亞硝酸鈉（0.038 g，0.55 mmol）逐滴添加至三級丁基 (8aS
)-6-氯-5-(2,3-二胺基-6-氟苯基)-4-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.177 g，0.34 mmol）在乙酸（2 ml）中的攪拌溶液中。允許反應升溫至環境溫度並且攪拌另外的1小時。將該等溶劑在真空中去除，將殘餘物溶解在DCM（50 ml）中並且用飽和碳酸氫鈉溶液（100 ml）洗滌。將有機層通過相分離柱並且減壓濃縮以給出棕色固體。將殘餘物溶解在MeOH中並且使用SFC（柱：Chiralpak ID，30 x 250 mm，5微米，流動相：30% MeOH + 0.1% NH3
/70% scCO2
，流速：90 ml/min，120巴，柱溫度：40°C）分離。將含有產物的級分蒸發以給出第一洗脫的阻轉異構物三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（43 mg，27%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.52 (9H, s), 2.82 - 3.19 (3H, m), 3.82 - 4.03 (1H, m), 4.04 - 4.44 (3H, m), 4.57 (1H, dd), 5.22 (1H, d), 7.23 (1H, d), 8.14 (1H, dd), 8.24 (1H, s)。有1個可交換的質子沒有觀察到。m/z
(ES+), [M+H]+ 530。
還從SFC純化中分離出第二洗脫的阻轉異構物三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物2（38 mg，24%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.52 (9H, s), 2.93 - 3.44 (3H, m), 3.66 (1H, s), 3.8 - 4.24 (3H, m), 4.47 (2H, s), 7.22 (1H, d), 8.13 (1H, dd), 8.28 (1H, s)。有1 x 可交換的質子未觀察到。m/z
(ES+), [M+H]+ 530。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1
在20°C，將TFA（0.5 ml）添加至三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（0.043 g，0.08 mmol）在DCM（1 ml）中的攪拌溶液中。允許反應攪拌1小時。將該粗產物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1（0.033 g，95%）。m/z
(ES+), [M+H]+ 430。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2
從三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物2開始，以類似於前述阻轉異構物1的方式製備(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并 [2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2。所希望的產物示出：m/z
: ES+ [M+H]+ 430。
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例26）
在-78°C，向(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1（0.033 g，0.08 mmol）在DCM（1 ml）、2-丙醇（0.2 ml）和TEA（10.70 µl，0.08 mmol）的中溶液中添加丙烯醯氯（7.30 mg，0.08 mmol）在DCM（1 ml）中的溶液（經5 min緩慢逐滴添加）並且將反應混合物在-78°C攪拌10分鐘。將反應混合物升溫至室溫，用DCM（20 ml）稀釋，用水（20 ml）洗滌並且將有機層通過相分離柱並且在真空中濃縮以給出粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18柱，5 µ二氧化矽，30 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有1% NH4
OH）與MeCN的漸減極性混合物作為洗脫液）來純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到88 mg白色固體（甲酸鹽）。將該固體溶解在DCM（25 ml）中並且用飽和碳酸氫鈉溶液（25 ml）攪拌2小時。將有機層通過相分離柱並且在真空中濃縮以給出呈灰白色固體的實例26，1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮，（7.5 mg，20.19%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30°C) 2.72 - 3.26 (3H, m), 3.26 - 3.47 (1H, m), 3.69 - 4.2 (2H, m), 4.22 - 4.86 (3H, m), 5.03 - 5.42 (1H, m), 5.82 (1H, d), 6.38 (1H, d), 6.58 (1H, t), 8.12 (1H, s), 8.31 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 484。
1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2（實例27）
從(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
] 喹唑啉 - 阻轉異構物2開始，以類似於實例26的方式製備1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H
-苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2（實例27）。實例27示出：1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 3.08 - 3.75 (4H, m), 3.82 - 4.08 (2H, m), 4.28 - 4.6 (3H, m), 4.6 - 4.94 (1H, m), 5.85 (1H, d), 6.43 (1H, d), 6.49 - 6.67 (1H, m), 8.13 (1H, dd), 8.38 (1H, s)。有1 x 可交換的未看見。m/z
: ES+ [M+H]+ 484
8-溴-7-氟異喹啉
將2,2-二乙氧基乙-1-胺（6.07 ml，41.77 mmol）添加至2-溴-3-氟苯甲醛（CAS 891180-59-9；8.479 g，41.77 mmol）在無水甲苯（20 ml）中的攪拌溶液中並且將混合物在100°C攪拌18小時。允許反應混合物冷卻至環境溫度並且在真空中濃縮。
將粗殘餘物溶解在DCM（30 ml）中並且冷卻至0°C。分批添加三氯化鋁（18.38 g，137.83 mmol）並且將所得的深紅色懸浮液在0°C攪拌30 min並且然後允許經1小時緩慢升溫至環境溫度並且攪拌16小時。將反應混合物倒入冰水中並用DCM稀釋。反應混合物用2M水性NaOH溶液鹼化並且將各相分離。將水相用DCM萃取，將合併的有機萃取物通過相分離柱並且將濾液在真空中濃縮。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以0至40% EtOAc的洗脫梯度）來純化。將含有將所希望的產物的級分在真空中濃縮以給出呈棕色固體的8-溴-7-氟異喹啉（2.23 g，23.6%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 7.52 (1H, t), 7.64 (1H, d), 7.81 (1H, dd), 8.62 (1H, d), 9.63 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 228。
8-溴-7-氟異喹啉2-氧化物
在環境溫度將mCPBA（0.523 g，2.34 mmol）添加至8-溴-7-氟異喹啉（0.44 g，1.95 mmol）在DCM（10 ml）中的攪拌溶液中並且將反應攪拌2小時。將混合物用DCM（100 ml）稀釋並且用飽和碳酸氫鈉溶液（2 x 100 ml）洗滌。將有機層通過相分離柱並且在真空中濃縮以給出呈淡黃色固體的8-溴-7-氟異喹啉 2-氧化物（0.466 g，99%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 7.38 (1H, dd), 7.66 (1H, d), 7.76 (1H, dd), 8.16 (1H, dd), 9.09 - 9.2 (1H, m)。m/z
: ES+ [M+H]+ 242。
8-溴-7-氟-1-甲氧基異喹啉
在0°C，將三乙胺（0.924 ml，6.63 mmol）添加至8-溴-7-氟異喹啉 2-氧化物（0.802 g，3.31 mmol）和氯甲酸甲酯（0.333 ml，4.31 mmol）的攪拌的懸浮液中。允許反應在環境溫度攪拌過夜。添加另外的氯甲酸甲酯（0.333 ml，4.31 mmol）和三乙胺（0.924 ml，6.63 mmol）並且將反應攪拌另外的2h。將揮發物減壓去除並且將殘餘物溶解在DCM（50 ml）中並且用水（50 ml）洗滌然後用鹽水（50 ml）洗滌。將有機層通過相分離柱並且在真空中濃縮。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度為庚烷中0-25% EtOAc）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的8-溴-7-氟-1-甲氧基異喹啉（0.386 g，45.5%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30°C) 4.11 (3H, s), 7.21 (1H, d), 7.42 (1H, dd), 7.67 (1H, dd), 7.99 (1H, d)。m/z
: ES+ [M+H]+ 258。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(7-氟-1-甲氧基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在二㗁𠮿（5 ml）和水（1.5 ml）的脫氣混合物中，合併8-溴-7-氟-1-甲氧基異喹啉（0.251 g，0.98 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（0.046 g，0.10 mmol）、碳酸鉀（0.271 g，1.96 mmol）和[(8aS
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸（0.396 g，0.98 mmol）。添加RuPhos Pd G3（0.082 g，0.10 mmol）並且將反應脫氣另外的1分鐘然後在80°C加熱2小時。將冷卻的反應混合物用EtOAc（50 ml）稀釋，用2M水性Na2
CO3
（2 x 30 ml）、鹽水（30 ml）洗滌，乾燥（MgSO4
），過濾並且將濾液在真空中濃縮。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度為庚烷中0-60% EtOAc）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色膠狀物的三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(7-氟-1-甲氧基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.525 g，100%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.51 (9H, s), 2.89 - 3.32 (3H, m), 3.64 (3H, d), 3.76 - 3.98 (1H, m), 3.99 - 4.25 (2H, m), 4.31 - 4.57 (2H, m), 5.13 (1H, s), 6.94 (1H, d), 7.28 (1H, d), 7.52 (1H, t), 7.85 (1H, dd), 8.01 (1H, d), 8.70 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 536。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(7-氟-1-甲氧基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 -阻轉異構物1和阻轉異構物2
將N
-氯代琥珀醯亞胺（0.137 g，1.03 mmol）一次性添加至三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(7-氟-1-甲氧基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.525 g，0.98 mmol）在DMF（4 ml）中的攪拌溶液中並且將反應在120°C攪拌30分鐘。將反應冷卻至環境溫度並且將該等溶劑在真空中去除以給出棕色膠狀物。將該粗產物藉由快速矽膠層析（0%到70%EtOAc/庚烷的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體。將該固體溶解在MeOH中並且使用SFC（柱：Chiralpak IG，30 x 250 mm，5微米，流動相：45% MeOH + 0.1% NH3
/65% scCO2
，流速：100 ml/min，120巴，柱溫度：40°C）分離。將含有級分的產物蒸發以給出第一洗脫的阻轉異構物三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(7-氟-1-甲氧基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（132 mg，23%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.52 (9H, s), 3 - 3.3 (3H, m), 3.63 (3H, s), 3.97 (1H, s), 4.16 (2H, s), 4.37 - 4.63 (2H, m), 5.08 (1H, d), 7.31 (1H, s), 7.56 (1H, t), 7.90 (1H, dd), 8.02 (1H, d), 8.71 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 570。還從SFC純化中分離出第二洗脫的阻轉異構物三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(7-氟-1-甲氧基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物2（245 mg，42%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30°C) 1.51 (9H, s), 3.05 - 3.42 (3H, m), 3.63 (3H, s), 3.83 - 4.04 (1H, m), 4.05 - 4.32 (2H, m), 4.38 - 4.69 (2H, m), 5.03 (1H, s), 7.30 (1H, d), 7.56 (1H, t), 7.90 (2H, dd), 8.02 (1H, d), 8.71 (1H, s)。ES+ [M+H]+ 570。
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物1
在微波小瓶中裝入三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(7-氟-1-甲氧基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
] 喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（132 mg，0.23 mmol）、氯化鋰（49.1 mg，1.16 mmol）、4-甲基苯磺酸水合物（220 mg，1.16 mmol）和無水DMF（4 ml）。將微波小瓶密封並且在微波中在120°C輻射30 min。將粗產物藉由離子交換層析法（使用載入了MeOH的SCX柱（10 g）純化。將柱用MeOH洗滌，然後將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈灰白色固體的8-((13aS)-11-氯-9-氟-1,2,3,4,13,13a-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10-基)-7-氟異喹啉-1(2H)-酮 - 阻轉異構物1（106 mg，100%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30°C) 2.84 - 3.21 (5H, m), 3.47 (1H, s), 3.78 - 4.01 (1H, m), 4.36 (1H, dd), 4.51 (1H, dd), 5.06 (1H, d), 6.50 (1H, d), 6.91 (1H, d), 7.51 (1H, t), 7.66 (1H, dd), 8.65 (1H, s)。有1個可交換的質子沒有觀察到。m/z
: ES+ [M+H]+ 456。
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物2
從三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(7-氟-1-甲氧基異喹啉-8-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物2開始，以類似於前述相應的阻轉異構物1的方式製備8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
] 喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物2（151 mg，77%），灰白色固體。所希望的阻轉異構物2示出：1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 2.89 - 3.21 (5H, m), 3.78 - 4.01 (1H, m), 4.32 - 4.57 (2H, m), 5.06 (1H, d), 6.51 (1H, d), 6.95 (1H, d), 7.52 (1H, t), 7.67 (1H, dd), 8.65 (1H, s)。2 x可交換的H的未被看到。m/z
: ES+ [M+H]+ 456。
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物1（實例28）
在-78°C，向8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物1（0.106 g，0.23 mmol）在二氯甲烷（3 ml）、2-丙醇（1 ml）和三乙胺（0.032 ml，0.23 mmol）中的溶液中添加丙烯醯氯（0.022 g，0.24 mmol）在二氯甲烷（1 ml）中的溶液（經5 min緩慢逐滴添加）並且將反應混合物在-78°C攪拌10分鐘。將反應混合物升溫至環境溫度，用DCM（20 ml）稀釋，用水（20 ml）洗滌，將有機層通過相分離柱並且在真空中濃縮以給出粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18 柱，5 µ矽膠，30 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有1% NH3
）與MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）來純化。將含有所希望的化合物實例28的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并 [2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物1（0.066 g，55.7%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.94 - 3.14 (2H, m), 3.99 - 4.22 (3H, m), 4.23 - 4.52 (1H, m), 4.52 - 4.75 (2H, m), 4.74 - 5 (1H, m), 5.75 (1H, dd), 6.18 (1H, dd), 6.68 (1H, d), 6.86 (1H, s), 7.19 (1H, d), 7.78 (1H, t), 7.93 (1H, dd), 8.60 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 510。
8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物2（實例29）
從8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
] 喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物2開始，以類似於實例28的方式製備實例29，8-[(8aS
)-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H
)-酮 - 阻轉異構物2（0.083 g，49%），白色固體。實例29示出：1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.93 - 3.2 (1H, m), 3.35 - 3.58 (2H, m), 4.02 (1H, d), 4.09 - 4.75 (4H, m), 4.86 (1H, dd), 5.75 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.68 (1H, d), 6.76 - 7.02 (1H, m), 7.19 (1H, d), 7.79 (1H, t), 7.94 (1H, dd), 8.61 (1H, s), 11.01 (1H, s)。 m/z
：ES+ [M+H]+ 510。
三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 -阻轉異構物1和阻轉異構物2
將Pd118（0.086 g，0.13 mmol）添加至(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)硼酸（CAS 1245816-10-7；0.418 g，2.37 mmol）和三級丁基 (S
)-10-溴-11-氯-9-氟-3,4,13,13a-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H
)-甲酸酯（0.5 g，1.06 mmol）在二㗁𠮿（15 ml）和2M水性碳酸鈉（2.90 ml，5.81 mmol）的混合物中的脫氣懸浮液中。將反應混合物在100°C攪拌2小時。將冷卻的反應混合物用EtOAc（50 ml）稀釋，用2M水性Na2
CO3
（2 x 30 ml）、鹽水（30 ml）洗滌，乾燥（MgSO4
），過濾並且將濾液在真空中濃縮。將該粗材料藉由快速矽膠層析（在庚烷中0-100% EtOAc的洗脫梯度）進行純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體。將該固體溶解在MeOH中並且使用SFC（柱：Phenomenex C1，30 x 250 mm，5微米，流動相：40% MeOH + 0.1% NH3
/60 % scCO2
，流速：100 ml/min，120巴，柱溫度：40o
C）分離。將含有級分的產物蒸發以給出呈灰白色固體的第一洗脫的阻轉異構物三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1（58 mg，49%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.51 (9H, s), 2.23 (3H, s), 2.95 - 3.37 (3H, m), 3.74 - 4.01 (1H, m), 4.16 (2H, s), 4.36 - 4.69 (2H, m), 5.04 (1H, d), 7.36 (1H, d), 7.50 (1H, d), 7.58 (1H, s), 8.71 (1H, s), 10.83 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 525。
還分離出呈灰白色固體的該相同化合物的第二洗脫的阻轉異構物，阻轉異構物2（34 mg，29%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.51 (9H, s), 2.23 (3H, s), 2.98 - 3.4 (3H, m), 3.95 (1H, d), 4.17 (2H, s), 4.42 - 4.68 (2H, m), 5.05 (1H, d), 7.38 (1H, d), 7.51 (1H, d), 7.60 (1H, s), 8.72 (1H, s), 10.34 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 525。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2
在0°C，在氮氣下，向三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物2（0.151 g，0.29 mmol）在二氯甲烷（2 ml）中的溶液中添加2,2,2-三氟乙酸（1 ml，13.06 mmol）並且將反應混合物攪拌兩小時然後將溶劑蒸發。將殘餘物溶於甲醇中並施加至用甲醇充分洗滌的5 g SCX柱，然後將產物使用在甲醇中的1M氨洗脫。將溶劑蒸發以得到呈灰白色固體的(13aS
)-11-氯-9-氟-10-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-1,2,3,4,13,13a-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉 - 阻轉異構物2（0.122 g，100%）。m/z
: ES+ [M+H]+ 425。
(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1
從三級丁基 (8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 - 阻轉異構物1開始，以類似於前述相應的阻轉異構物2的方式製備(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1（0.116 g，100%），灰白色固體。產物示出：m/z
: ES+ [M+H]+ 425。
(2E
)-1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2（實例30）
在環境溫度，將DIPEA（150 µl，0.86 mmol）一次性添加至在DMA（1.2 ml）中的(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物2（122 mg，0.29 mmol）、O-(7-氮雜苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽（131 mg，0.34 mmol）和(E
)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸.HCl鹽（52.3mg，0.32 mmol）中。將所得溶液攪拌1小時。將反應混合物傾倒入水（10 ml）中，萃取到EtOAc（2 x 25 ml）中，用鹽水（20 ml）洗滌，將有機層用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發以得到粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18 柱，5 µ矽膠，50 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有0.1% NH3
）與MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）來純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的實例30，（79 mg，51%），(2E
)-1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物2。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 2.14 (3H, s), 2.17 (6H, s), 3.03 - 3.09 (3H, m), 3.38 - 3.53 (2H, m), 3.92 - 4.21 (2H, m), 4.22 - 4.42 (1H, m), 4.43 - 4.56 (1H, m), 4.56 - 4.76 (2H, m), 4.75 - 4.97 (1H, m), 6.42 - 6.78 (2H, m), 7.37 (1H, d), 7.5 - 7.65 (2H, m), 8.63 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 536。
(2E
)-1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例31）
從(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 - 阻轉異構物1開始，以類似於實例30的方式製備(2E
)-1-[(8aS
)-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 - 阻轉異構物1（實例31）（68 mg，47%），白色固體。實例31示出：1H NMR (400 MHz, DMSO, 100 °C) 2.17 (3H, s), 2.21 (6H, s), 3.27 - 3.61 (5H, m), 4.03 - 4.28 (3H, m), 4.34 (1H, d), 4.60 (1H, dd), 4.69 (1H, dd), 4.78 - 4.94 (1H, m), 6.5 - 6.78 (2H, m), 7.36 (1H, d), 7.50 (1H, s), 7.57 (1H, d), 8.62 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 536。
甲基N
-苄基-D
-丙胺酸酯
在0°C，將硼氫化鈉（27.1 g，716.44 mmol）逐份添加至甲基D
-丙胺酸酯鹽酸鹽（25 g，179.11 mmol）、苯甲醛（18.15 ml，179.11 mmol）和三乙胺（49.9 ml，358.22 mmol）在MeOH（250 ml）中的溶液中。將所得溶液在25°C下攪拌過夜。將反應混合物用飽和NH4
Cl（200 ml）淬滅，用DCM（3 x 100 ml）萃取並且用Na2
SO4
乾燥，並且將濾液蒸發至乾燥。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度：10%至30%的EtOAc的石油醚溶液）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈無色油狀物的甲基N
-苄基-D
-丙胺酸酯（15 g，43%）。1H NMR (300 MHz, CDCl3
, 30o
C) 1.35 (3H, d), 2.07 (1H, s), 3.32 - 3.47 (1H, m), 3.69 (1H, d), 3.75 (3H, s), 3.82 (1H, d), 7.29 - 7.43 (5H, m)。m/z
: ES+ [M+H]+ = 194。
(3R
)-4-{苄基[(2S
)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯
在0°C，將2-甲基丙基氯甲酸酯（0.848 g，6.21 mmol）緩慢添加至在THF（4 ml）中的(2R
)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-甲氧基-4-側氧基丁酸（1.407 g，5.69 mmol）和N
-甲基𠰌啉（0.628 g，6.21 mmol）中。將所得的溶液在0°C下攪拌1小時。添加在THF（4 ml）中的甲基N
-苄基-D
-丙胺酸酯（1 g，5.17 mmol）溶液並且將反應攪拌過夜。將反應混合物用水（50 ml）淬滅，用EtOAc（3 x 20 ml）萃取，將有機層用Na2
SO4
乾燥，過濾並蒸發至乾燥。將粗產物藉由快速矽膠層析法（洗脫梯度：0%至40%的EtOAc的石油醚溶液）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈無色液體的(3R
)-4-{苄基[(2S
)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯（0.52 g，24%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30o
C) 11.39 (9H, s), 1.47 (3H, s), 2.62 (1H, dd), 2.72 (1H, dd), 3.54 (1H, s), 3.67 (3H, s), 3.68 (3H, s), 4.25 (1H, d), 4.75 (2H, s), 4.98 (1H, s), 7.37 (5H, d)。m/z
: ES+ [M+H]+ = 423。
[(2R
,5S
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯
在室溫，將TFA（1 ml）添加至(3R
)-4-{苄基[(2S
)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯（500 mg，1.18 mmol）在DCM（5 ml）中的溶液中。將所得的溶液在25°C下攪拌2小時。將反應混合物蒸發並且將殘餘物懸浮於飽和碳酸鈉中並且攪拌4小時，然後用DCM萃取並且蒸發。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至40% MeCN（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色油狀物的[(2R
,5S
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯（330 mg，96%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30o
C) 1.51 (3H, d), 2.87 (1H, dd), 3.27 (1H, dd), 3.77 (3H, s), 3.97 (1H, m), 4.11 (1H, d), 4.50 (1H, dd), 5.26 (1H, d), 7.28 - 7.46 (5H, m), 7.65 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ = 291。
2-[(2R
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇
在0°C，將氫化鋰鋁（2.56 g，67.51 mmol）逐份添加至在THF（50 ml）中的[(2R
,5S
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯（2.45 g，8.44 mmol）中。將所得到的懸浮液在60°C下攪拌持續3小時。在室溫，將反應混合物用DCM稀釋並且用水（2.56 ml）和15% NaOH（7.68 ml）淬滅，然後過濾並蒸發以得到呈無色油狀物的2-[(2R
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇（1.8 g，91%），其在靜置時固化。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30o
C) 1.08 (1H, d), 1.15 (3H, d), 1.45 - 1.53 (2H, m), 1.68 - 1.81 (1H, m), 2.17 - 2.27 (1H, m), 2.54 - 2.65 (1H, m), 2.65 - 2.73 (1H, m), 2.87 - 2.98 (2H, m), 3.10 (1H, d), 3.72 - 3.79 (2H, m), 4.12 (1H, d), 7.29 - 7.36 (5H, m)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z
: ES+ [M+H]+ = 235。
5-{2-[(2R
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-8-氟喹唑啉-4-醇
在25°C，將氫化鈉（0.888 g，22.19 mmol）逐份添加至在THF（40 ml）中的2-[(2R
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇（1.3 g，5.55 mmol）中。所得懸浮液在室溫攪拌30分鐘。然後添加7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4(3H
)-酮（2.172 g，8.32 mmol）並且將所得混合物在60°C攪拌4小時。反應混合物用水（1 ml）淬滅並蒸發至乾燥。將粗產物藉由快速C18快速層析法（以在水中的0至30% MeOH（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈黃色固體的5-{2-[(2R
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-8-氟喹唑啉-4-醇（1.8 g，68%）。1H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30o
C) 1.28 (3H, d), 1.35 (1H, q), 1.92 (1H, d), 2.56 (2H, dq), 2.73 - 3.04 (2H, m), 3.18 (2H, dd), 3.51 (2H, s), 3.75 - 4.00 (1H, m), 4.18 - 4.45 (2H, m), 6.84 (1H, d), 7.27 - 7.38 (5H, m), 8.51 (1H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z
: ES+ [M+H]+ = 475。
(6aR
,9S
)-8-苄基-2-溴-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉
在25°C，將四氯甲烷（1.827 ml，18.93 mmol）添加至在DCE（0.5 ml）中的5-{2-[(2R
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-8-氟喹唑啉-4-醇（1.8 g，3.79 mmol）和三苯基膦（2.98 g，11.36 mmol）中。將所得混合物在80°C攪拌4小時然後蒸發至乾燥。將粗產物藉由快速C18快速層析法（以在水中的0至20% MeOH（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈棕色固體的(6aR
,9S
)-8-苄基-2-溴-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉（1.6 g，92%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 0.93 - 1.36 (3 H, m), 1.55 - 2.37 (2 H, m), 2.65 - 3.26 (3 H, m), 3.34 - 3.69 (2 H, m), 3.73 - 4.82 (5 H, m), 7.17 (3 H, s), 7.30 (3 H, s), 7.43 (1 H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 457。
(6aR,9S)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉
在25°C，將N
-氯代琥珀醯亞胺（657 mg，4.92 mmol）添加至在MeCN（10 ml）中的(6aR
,9S
)-8-苄基-2-溴-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉（750 mg，1.64 mmol）中。將所得混合物在60°C下攪拌1小時。將粗產物藉由閃爍C18-快速層析法（在水中0%到40% MeOH的洗脫梯度）進行純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的(6aR,9S)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉（550 mg，68%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 1.56 (3 H, td), 1.85 - 1.94 (2 H, m), 2.92 - 3.33 (2 H, m), 3.47 - 4.47 (7 H, m), 4.73 (1 H, s), 7.26 - 7.73 (5 H, m), 8.80 (1 H, s)。m/z：ES+ [M+H]+ = 491。
2-[(6aR
,9S
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚 阻轉異構物1和2
在氮氣下，將RuPhos-Pd-G3（85 mg，0.10 mmol）添加至(6aR,9S)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并 [4,3,2-de]喹唑啉（500 mg，1.02 mmol）、(2-氟-6-羥基苯基)硼酸（396 mg，2.54 mmol）、碳酸鉀（422 mg，3.05 mmol）和二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（47.4 mg，0.10 mmol）在1,4-二㗁𠮿/水（10 ml）（4 : 1比率）中的溶液中。將所得混合物在100°C攪拌30分鐘然後蒸發至乾燥。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（以石油醚中的0%至60% EtOAc的洗脫梯度）進行純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的2-[(6aR
,9S
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚的阻轉異構物1（65.0 mg，12.22%）。1H NMR (400 MHz, CD3
OD, 30o
C) 0.97 - 1.07 (3 H, m), 1.16 - 1.22 (3 H, m), 1.64 - 1.76 (1 H, m), 2.77 - 2.87 (1 H, m), 3.06 - 3.19 (1 H, m), 3.36 - 3.53 (2 H, m), 3.84 - 3.93 (1 H, m), 4.03 - 4.62 (3 H, m), 6.68 - 6.82 (2 H, m), 7.17 - 7.50 (7 H, m), 8.38 (1 H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z：ES+ [M+H]+ = 523。在此之後得到呈淡黃色產物的2-[(6aR
,9S
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6] [1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚的阻轉異構物2（55 mg，10%）。1H NMR (400 MHz, CD3
OD, 30o
C) 1.19 (3 H, d), 1.75 - 1.92 (1 H, m), 2.30 - 2.46 (3 H, m), 2.78 - 2.86 (1 H, m), 3.09 - 3.13 (1 H, m), 3.44 - 3.57 (1 H, m), 3.79 - 3.98 (4 H, m), 4.23 - 4.57 (1 H, m), 6.68 - 6.81 (2 H, m), 7.21 - 7.42 (7 H, m), 8.48 (1 H, s)。有一個可交換的質子沒有看到。m/z
: ES+ [M+H]+ = 523。
2-[(6aR
,9S
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚 阻轉異構物2
在一個大氣壓的氫氣下，在室溫，將在THF（5 ml）中的2-[(6aR
,9S
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并 [1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚 阻轉異構物2（50 mg，0.10 mmol）、二碳酸二三級丁酯（0.111 ml，0.48 mmol）和10%鈀碳（20.35 mg，0.02 mmol）攪拌1小時。將反應混合物通過矽藻土過濾並且將濾液減壓去除。反應混合物用MeOH（5 ml）稀釋並且添加在1,4-二㗁𠮿（2 ml，8 mmol）中的4M HCl。將所得溶液在室溫下攪拌1小時。將溶劑在減壓下去除。將該粗產物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。將所希望的產物使用7M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的2-[(6aR
,9S
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚 阻轉異構物2（40 mg，97%）。將該產物不進行進一步純化而直接用於下一步。m/z
: ES+ [M+H]+ = 433。
1-[(6aR
,9S
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮 阻轉異構物2，實例32
在0°C，將丙烯醯氯（8.36mg，0.09 mmol）在DMF（1 ml）中的溶液添加至2-[(6aR
,9S
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并 [4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚 阻轉異構物2（40 mg，0.09 mmol）和DIPEA（0.032 ml，0.18 mmol）在DMF（2.000 ml）中的攪拌溶液中。將所得的溶液在0°C下攪拌1小時。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至40% MeCN（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的1-[(6aR
,9S
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮，阻轉異構物2，（實例32）（17 mg，37%）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 1.13 - 1.22 (3H, m), 1.98 (1H, dd), 2.20 - 2.38 (1H, m), 3.41 - 3.69 (2H, m), 3.88 - 4.33 (3H, m), 4.45 - 4.52 (1H, m), 4.53 - 5.07 (2H, m), 5.74 (1H, d), 6.18 (1H, d), 6.75 - 6.87 (3H, m), 7.34 (1H, q), 8.45 (1H, s), 10.19 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ = 487。
2-((3S,14aR)-11-氯-9-氟-3-甲基-1,3,4,13,14,14a-六氫-2H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉-10-基)-3-氟苯酚 阻轉異構物1
在一個大氣壓的氫氣下，在室溫，將在THF（5 ml）中的2-[(6aR
,9S
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（55 mg，0.11 mmol）、二碳酸二三級丁酯（0.122 ml，0.53 mmol）和10%鈀碳（22.38 mg，0.02 mmol）攪拌1小時。將反應混合物通過矽藻土過濾並且將濾液減壓去除。反應混合物用MeOH（5 ml）稀釋並且添加在1,4-二㗁𠮿（2 ml，8 mmol）中的4 M HCl。將所得溶液在室溫下攪拌1小時。將溶劑在減壓下去除。將該粗產物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。將所希望的產物使用7M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的2-[(6aR
,9S
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并 [4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚 阻轉異構物1（40 mg，88%）。將該產物不進行進一步純化而直接用於下一步。m/z
: ES+ [M+H]+ = 433。
1-[(6aR
,9S
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮 阻轉異構物1，實例33
在0°C，將丙烯醯氯（8.36 mg，0.09 mmol）在DMF（1 ml）中的溶液添加至2-[(6aR
,9S
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并 [4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚 阻轉異構物1（40 mg，0.09 mmol）和DIPEA（0.032 ml，0.18 mmol）在DMF（2.000 ml）中的攪拌溶液中。將所得的溶液在0°C下攪拌1小時。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至30% MeCN（0.1% TFA）的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的1-[(6aR
,9S
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮（25mg，56%）阻轉異構物1（實例33）。1H NMR (400 MHz, DMSO, 30o
C) 1.17 (3H, d), 1.98 - 2.05 (1H, m), 2.24 - 2.34 (1H, m), 3.52 - 3.77 (2H, m), 3.93 - 4.38 (3H, m), 4.48 - 5.09 (3H, m), 5.76 (1H, d), 6.18 (1H, d), 6.77 - 6.89 (3H, m), 7.37 (1H, q), 8.55 (1H, s)。有一個可交換的沒有看到。m/z
: ES+ [M+H]+ = 487。
7-溴-4-氯-5,8-二氟喹唑啉
在室溫，將草醯二氯化物（2.74 ml，31.26 mmol）添加至7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4(3H
)-酮（2.04 g，7.82 mmol）和DMF（0.030 ml，0.39 mmol）在DCM（150 ml）中的攪拌的懸浮液中。將所得混合物在室溫攪拌2天。添加另外的草醯二氯化物（1.0 ml）並且將懸浮液在室溫攪拌另外的24小時。將反應混合物蒸發以得到粗產物，藉由LCMS其仍然含有約30% SM，因此將混合物懸浮在DCM（150 ml）中並且添加草醯二氯化物（2.74 ml，31.26 mmol）並且將所得混合物在室溫攪拌另外的24小時。將所得溶液蒸發以得到呈黃色固體的粗產物，2.1 g，其不經進一步純化而使用。
三級丁基 4-(7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-(2-羥基乙基)哌𠯤-1-甲酸酯
在室溫，將DIPEA（5.24 ml，30.06 mmol）添加至在MeCN（100 ml）中的三級丁基 3-(2-羥基乙基)哌𠯤-1-甲酸酯（1.73 g，7.51 mmol）和7-溴-4-氯-5,8-二氟喹唑啉（2.1 g，7.51 mmol）的攪拌混合物中。將所得溶液在室溫攪拌3小時，在約30分鐘之後形成了懸浮液。將沈澱物藉由過濾收集，用MeCN（3 x 20 ml）洗滌並且真空乾燥以得到所希望的產物，2.64 g。靜置過夜後，分離出第二批的所希望的產物300 mg以得到呈白色固體的三級丁基 4-(7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-(2-羥基乙基)哌𠯤-1-甲酸酯（2.94 g，83%），其不經進一步純化而使用。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.43 (9H, s), 1.71 - 1.82 (2H, m), 2.86 (1H, s), 3.18 (1H, s), 3.37 - 3.51 (2H, m), 3.72 (1H, d), 3.97 (2H, d), 4.36 (1H, s), 4.70 (1H, s), 7.75 (1H, dd), 8.62 (1H, s) OH未觀察到,m/z
(ES+), [M+H]+ 473, 475。
三級丁基 2-溴-1-氟-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯
在室溫，在氮氣下，將雙(三甲基矽基)胺基鋰（6.2 ml，6.21 mmol，在THF中的1M 溶液）添加至三級丁基 4-(7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-(2-羥基乙基)哌𠯤-1-甲酸酯（2.94 g，6.21 mmol）在NMP（100 ml）中的攪拌的懸浮液中。將所得的溶液在100°C下攪拌45分鐘。允許反應混合物冷卻，用水（100 ml）稀釋，並且用醚（3 x 200 ml）萃取，將有機層合併，用飽和的鹽水（2 x 150 ml）洗滌，用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發以得到粗產物。將該粗產物懸浮在DCM（3 ml）和MeOH（0.5 ml）中，將固體藉由過濾收集，用DCM（2 ml）洗滌並且真空乾燥以得到呈奶油狀固體的三級丁基 2-溴-1-氟-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯（0.854 g，30%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.57 (9H, s), 2.01 - 2.16 (1H, m), 2.23 - 2.35 (1H, m), 3.34 - 3.53 (2H, m), 3.68 - 3.86 (2H, m), 3.91 - 4.11 (2H, m), 4.32 (1H, t), 4.54 (1H, dd), 4.81 (1H, s), 7.40 (1H, d), 8.59 (1H, s),m/z
(ES+), [M+H]+ 453, 455。
三級丁基 1-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯
在氮氣下，將與二氯甲烷錯合的[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)（155 mg，0.189 mmol）、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜環戊硼烷)（1.45 g，5.69 mmol）和乙酸鉀（373 mg，3.8 mmol）添加至三級丁基 2-溴-1-氟-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯（861 mg，1.9 mmol）在二㗁𠮿（45 ml）中的攪拌且脫氣的溶液中。將所得的混合物在90°C下攪拌17小時。允許反應混合物冷卻，蒸發並且在EtOAc（150 ml）和水（75 ml）/飽和的鹽水（50 ml）之間分配，將混合物通過矽藻土過濾，將有機層分離，用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發以得到粗產物三級丁基 1-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉-8-甲酸酯（2.3 g），其不經進一步純化而使用，m/z
(ES+), [M+H]+ 501。
三級丁基 1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯
將RuPhos Pd G3（159 mg，0.19 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（89 mg，0.19 mmol）和碳酸鉀（525 mg，3.80 mmol）添加至8-溴-1-甲氧基-7-甲基異喹啉（479 mg，1.90 mmol）、
三級丁基 1-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并 [1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯（1.9 mmol）在二㗁𠮿（20 ml）和水（5 ml）中的攪拌且脫氣的溶液中，將混合物用氮氣（5個循環）抽空，並且在80°C攪拌90分鐘。允許反應混合物冷卻，用EtOAc（75 ml）稀釋，並且用水（50 ml）/飽和的鹽水（50 ml）洗滌，將水層用EtOAc（75 ml）再萃取。將有機萃取物合併，用MgSO4
乾燥，過濾並蒸發以得到粗產物。將該粗產物藉由快速矽膠層析（0%到70%EtOAc/庚烷的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淺褐色泡沫的三級丁基 1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯（619 mg，60%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.50 (9H, s), 1.65 - 1.77 (1H, m), 1.95 - 2.1 (3H, m), 2.22 (3H, d), 3.4 - 3.57 (5H, m), 3.64 - 3.78 (2H, m), 3.95 - 4.07 (1H, m), 4.22 (1H, t), 4.38 (1H, dt), 6.81 - 6.86 (1H, m), 7.24 (1H, d), 7.59 (1H, dd), 7.73 (1H, d), 7.95 (1H, dd), 8.63 (1H, s)。m/z
(ES+), [M+H]+ 546。
三級丁基 3-氯-1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯
在室溫，將1-氯吡咯啶-2,5-二酮（167 mg，1.25 mmol）添加至三級丁基 1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯（619 mg，1.13 mmol）在DMF（6 ml）中的攪拌溶液中。將所得的溶液在120°C下攪拌1小時。允許反應混合物冷卻，用水（25 ml）稀釋，萃取到EtOAc（75 ml）中，並且用飽和的鹽水（50 ml）洗滌。將該有機層用相分離柱乾燥，過濾並蒸發以提供粗產物。將該粗產物藉由快速矽膠層析（0%到80%EtOAc/庚烷的洗脫梯度）純化。將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色膠狀物的三級丁基 3-氯-1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯（485 mg，74%）。藉由手性SFC，使用Chiralpak IC，30 x 250 mm，5微米柱，流動相45% MeOH + 0.1% NH3
/55% scCO2
，流速90 ml/min，BPR 120巴，柱溫度40°C，在220 nmUV檢測的進一步的純化分離出三級丁基 3-氯-1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯的第一洗脫的異構物（命名為鏡像異構物2，阻轉異構物1）（63.7 mg，13%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.49 (9H, s), 1.98 (1H, s), 2.19 (3H, s), 2.25 (1H, s), 3.54 (3H, s), 3.57 - 3.95 (6H, m), 4.45 (3H, s), 7.27 (1H, d), 7.63 (1H, d), 7.78 (1H, d), 7.96 (1H, d), 8.67 (1H, s),19
F NMR (376 MHz, CDCl3
, 30°C) -128.46, -128.02,m/z
(ES+), [M+H]+ 580;582。手性分析 Chiralpak IC，3.0 x 150 mm，3微米柱，流動相：45% MeOH+ 0.1% NH3
/55% scCO2
，流速2.0 ml/min，BPR 120巴，溫度40o
C，rT 1.49 min。在此之後得到三級丁基 3-氯-1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯的第二洗脫的異構物（命名為鏡像異構物1，阻轉異構物1）（32.6 mg，7%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.49 (9H, s), 1.99 - 2.11 (1H, m), 2.19 (3H, s), 2.22 - 2.3 (1H, m), 3.56 (3H, s), 3.59 - 3.91 (6H, m), 4.24 - 4.59 (3H, m), 7.27 (1H, d), 7.64 (1H, d), 7.78 (1H, d), 7.96 (1H, d), 8.68 (1H, s),19
F NMR (376 MHz, CDCl3
, 30°C) -129.30, -128.54,m/z
(ES+), [M+H]+ 580;582。手性分析Chiralpak IC，3.0 x 150 mm，3微米柱，流動相：45% MeOH+ 0.1% NH3
/55% scCO2
，流速2.0 ml/min，BPR 120巴，溫度40o
C，rT 1.66 min。在此之後得到三級丁基 3-氯-1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉-8-甲酸酯的第三洗脫（命名為鏡像異構物2，阻轉異構物2）（42.6 mg，9%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.49 (9H, s), 2 - 2.11 (1H, m), 2.19 (3H, s), 2.25 (1H, s), 3.56 (3H, s), 3.61 - 3.87 (6H, m), 4.27 - 4.53 (3H, m), 7.25 - 7.29 (1H, m), 7.64 (1H, d), 7.78 (1H, d), 7.96 (1H, d), 8.68 (1H, s),19
F NMR (376 MHz, CDCl3
, 30°C) -129.34, -128.54,m/z
(ES+), [M+H]+ 580, 582。手性分析Chiralpak IC，3.0 x 150 mm，3微米柱，流動相：45% MeOH+ 0.1% NH3
/55% scCO2
，流速2.0 ml/min，BPR 120巴，溫度40°C，rT 2.79 min。在此之後得到三級丁基 3-氯-1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并 [1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-甲酸酯的第四洗脫（命名為鏡像異構物1，阻轉異構物2）（68.5 mg，14%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.49 (9H, s), 1.92 - 2.03 (1H, m), 2.19 (3H, s), 2.21 - 2.32 (1H, m), 3.54 (3H, s), 3.4 - 3.95 (6H, m), 4.21 - 4.54 (3H, m), 7.27 (1H, d), 7.63 (1H, d), 7.78 (1H, d), 7.96 (1H, d), 8.67 (1H, s),19
F NMR (376 MHz, CDCl3
, 30°C) -128.02, -128.46,m/z
(ES+), [M+H]+ 580;582。手性分析Chiralpak IC，3.0 x 150 mm，3微米柱，流動相：45% MeOH+ 0.1% NH3
/55% scCO2
，流速2.0 ml/min，BPR 120巴，溫度40°C，rT 4.11 min。
8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 鏡像異構物1，阻轉異構物1
將三級丁基
3-氯-1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de] 喹唑啉-8-甲酸酯的鏡像異構物1，阻轉異構物1（39 mg，0.07 mmol）在DMF（1.0 ml）中的溶液添加至4-甲基苯磺酸水合物（63.9 mg，0.34 mmol）和氯化鋰（14 mg，0.34 mmol）中並且密封到微波管中。將該反應在微波反應器中加熱至120°C持續30分鐘並且冷卻至室溫。將該粗反應混合物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈奶油狀固體的8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物1，阻轉異構物1（30 mg，96%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.91 - 2.04 (1H, m), 2.16 (3H, s), 2.44 - 2.58 (1H, m), 2.94 - 3.02 (3H, m), 3.12 - 3.21 (1H, m), 3.4 - 3.47 (1H, m), 3.84 (1H, s), 4.32 - 4.5 (2H, m), 4.85 (1H, s), 6.52 (1H, d), 6.93 (1H, d), 7.58 (1H, d), 7.65 (1H, d), 8.44 (1H, s), 8.56 (1H, s), NH未看到,m/z
(ES+), [M+H]+ 466,468。
8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 鏡像異構物1，阻轉異構物2
將在DMF（2 ml）中的三級丁基
3-氯-1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de] 喹唑啉-8-甲酸酯的鏡像異構物1，阻轉異構物2（81 mg，0.14 mmol）的溶液添加至4-甲基苯磺酸水合物（133 mg，0.70 mmol）和氯化鋰（29 mg，0.70 mmol）中並且密封到微波管中。將該反應在微波反應器中加熱至120°C持續30分鐘並且冷卻至室溫。將該粗反應混合物藉由離子交換層析使用SCX柱進行純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物1，阻轉異構物2（56 mg，86%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.8 - 1.93 (1H, m), 2.04 (3H, s), 2.66 - 2.75 (2H, m), 2.81 (2H, d), 3.04 (1H, d), 3.33 - 3.45 (1H, m), 3.72 (1H, d), 4.23 - 4.36 (1H, m), 4.36 - 4.47 (1H, m), 4.74 (1H, s), 6.58 (1H, d), 7.05 - 7.18 (1H, m), 7.70 (2H, s), 8.42 (1H, s), 10.87 (1H, d), NH未看見,19
F NMR (376 MHz, DMSO, 30°C) -131.44,m/z
(ES+), [M+H]+ 466,468。
8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 鏡像異構物2，阻轉異構物1
將三級丁基 3-氯-1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de] 喹唑啉-8-甲酸酯的鏡像異構物2，阻轉異構物1（74 mg，0.13 mmol）在DMF（1.2 ml）中的溶液添加至4-甲基苯磺酸水合物（121 mg，0.64 mmol）和氯化鋰（27 mg，0.64 mmol）中並且密封到微波管中。將該反應在微波反應器中加熱至120°C持續30分鐘並且冷卻至室溫。將該粗反應混合物藉由離子交換層析使用SCX柱進行純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈奶油狀固體的8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物2，阻轉異構物1（46 mg，77%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.8 - 1.93 (1H, m), 2.04 (3H, s), 2.66 - 2.75 (2H, m), 2.81 (2H, d), 3.04 (1H, d), 3.33 - 3.45 (1H, m), 3.72 (1H, d), 4.23 - 4.36 (1H, m), 4.36 - 4.47 (1H, m), 4.74 (1H, s), 6.58 (1H, d), 7.05 - 7.18 (1H, m), 7.70 (2H, s), 8.42 (1H, s), 10.87 (1H, d), 哌𠯤NH未看見,19
F NMR (376 MHz, DMSO, 30°C) -131.44,m/z
(ES+), [M+H]+ 466,468。
8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 鏡像異構物2，阻轉異構物2
將三級丁基
3-氯-1-氟-2-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de ]喹唑啉-8-甲酸酯的鏡像異構物2，阻轉異構物2（44 mg，0.08 mmol）在DMF（1.1 ml）中的溶液添加至4-甲基苯磺酸水合物（72.1 mg，0.38 mmol）和氯化鋰（16mg，0.38 mmol）中並且密封到微波管中。將該反應在微波反應器中加熱至120°C持續30分鐘並且冷卻至室溫。將該粗反應混合物藉由離子交換層析使用SCX柱進行純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫並且將純的級分蒸發至乾燥以得到呈淡黃色固體的8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物2，阻轉異構物2（35 mg，99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.82 - 1.94 (1H, m), 2.04 (3H, s), 2.66 - 2.74 (2H, m), 2.79 - 2.89 (2H, m), 3.05 (1H, d), 3.35 - 3.45 (1H, m), 3.69 (1H, d), 4.29 (1H, t), 4.42 (1H, d), 4.75 (1H, s), 6.58 (1H, d), 7.08 - 7.18 (1H, m), 7.66 - 7.76 (2H, m), 8.42 (1H, s), 10.86 (1H, d), NH 哌𠯤未看見,19
F NMR (376 MHz, DMSO, 30°C) -132.19,m/z
(ES+), [M+H]+ 466,468。
8-[3-氯-1-氟-8-(丙-2-烯醯基)-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮，鏡像異構物1，阻轉異構物1 實例34
將丙烯醯氯（5.41 µl，0.07 mmol）緩慢添加至8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物1，阻轉異構物1（31 mg，0.07 mmol）和三乙胺（9.27 µl，0.07 mmol）在DCM（2 ml）中的冷卻至-70°C的攪拌溶液中。將所得溶液在-70°C下攪拌20 min。將反應混合物蒸發並且將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯CSH C18 OBD柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（在H2
O中的28%-30%））和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）純化。平緩梯度：30%至60% MeCN。檢測UV @ 254nm。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的8-[3-氯-1-氟-8-(丙-2-烯醯基)-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉-2-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物1，阻轉異構物1（19.3 mg，56%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.89 - 2.01 (1H, m), 2.05 (3H, s), 2.14 - 2.27 (1H, m), 3.64 - 3.95 (6H, m), 4.29 - 4.57 (3H, m), 5.73 (1H, s), 6.17 (1H, d), 6.59 (1H, d), 6.80 (1H, s), 7.14 (1H, d), 7.72 (2H, d), 8.52 (1H, s), 10.87 (1H, s),19
F NMR (376 MHz, DMSO, 30°C) -131.09, -130.89,m/z
(ES+), [M+H]+ 520,522。在Phenomonex C3，3.0 x 150 mm，3微米柱，洗脫液20% MeOH + 0.1% NH3
/80% scCO2
，流速：2.0 ml/min，BPR 120巴，柱溫度 40o
C，rT 0.84 min進行分析型手性SFC分析。
8-[3-氯-1-氟-8-(丙-2-烯醯基)-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮，鏡像異構物1，阻轉異構物2 實例35
將丙烯醯氯（5.41 µl，0.07 mmol）緩慢添加至8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物1，阻轉異構物2（31 mg，0.07 mmol）和三乙胺（9.27 µl，0.07 mmol）在DCM（2 ml）中的冷卻至-70°C的攪拌溶液中。將所得的溶液在-70°C下攪拌20分鐘。將反應混合物蒸發並且將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯CSH C18 OBD柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（在H2O中的28%-30%））和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）純化。平緩梯度：30%至60% MeCN。檢測UV @ 254nm。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的8-[3-氯-1-氟-8-(丙-2-烯醯基)-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉-2-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物1，阻轉異構物2（22.8 mg，66%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.82 - 2 (1H, m), 2.06 (3H, s), 2.15 - 2.29 (1H, m), 3.64 - 3.98 (6H, m), 4.31 - 4.58 (3H, m), 5.66 - 5.8 (1H, m), 6.16 (1H, dd), 6.59 (1H, d), 6.79 (1H, dd), 7.08 - 7.17 (1H, m), 7.71 (2H, s), 8.51 (1H, s), 10.89 (1H, d),19
F NMR (376 MHz, DMSO, 30°C) -130.46, -130.25,m/z
(ES+), [M+H]+ 520,522。在Phenomonex C3，3.0 x 150 mm，3微米柱，洗脫液30% MeOH + 0.1% NH3
/70% scCO2
，流速：2.0 ml/min，BPR 120巴，柱溫度40o
C，rT 1.29 min進行分析型手性SFC分析。
8-[3-氯-1-氟-8-(丙-2-烯醯基)-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮，鏡像異構物2，阻轉異構物1 實例36
將丙烯醯氯（8.02 µl，0.10 mmol）緩慢添加至8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并 [4,3,2-de
]喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物2，阻轉異構物1（46 mg，0.10 mmol）和三乙胺（14 µl，0.10 mmol）在DCM（2 ml）中的冷卻至-70°C的攪拌溶液中。將所得的溶液在-70°C下攪拌15分鐘。將反應混合物蒸發並且將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯CSH C18 OBD柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（在H2O中的28%-30%））和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）純化。平緩梯度：30%至60% MeCN。檢測UV @ 254nm。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的8-[3-氯-1-氟-8-(丙-2-烯醯基)-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物2，阻轉異構物1（23.5 mg，46%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.90 (1H, s), 2.06 (3H, s), 2.23 (1H, d), 3.61 - 3.99 (6H, m), 4.28 - 4.59 (3H, m), 5.66 - 5.79 (1H, m), 6.16 (1H, dd), 6.59 (1H, d), 6.79 (1H, dd), 7.09 - 7.16 (1H, m), 7.71 (2H, s), 8.51 (1H, s), 10.89 (1H, d),19
F NMR (376 MHz, DMSO, 30°C) -130.46, -130.25,m/z
(ES+), [M+H]+ 520,522。在Phenomonex C3，3.0 x 150 mm，3微米柱，洗脫液25% MeOH + 0.1% NH3
/75% scCO2
，流速：2.0 ml/min，BPR 120巴，柱溫度 40o
C，rT 1.30 min進行分析型手性SFC分析。
8-[3-氯-1-氟-8-(丙-2-烯醯基)-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 鏡像異構物2，阻轉異構物2 實例37
將丙烯醯氯（6.10 µl，0.08 mmol）緩慢添加至8-(3-氯-1-氟-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并 [4,3,2-de
]喹唑啉-2-基)-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物2，阻轉異構物2（35 mg，0.08 mmol）和三乙胺（10.47 µl，0.08 mmol）在DCM（2 ml）中的冷卻至-70°C的攪拌溶液中。將所得的溶液在-70°C下攪拌15分鐘。將反應混合物蒸發並且將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯CSH C18 OBD柱，30 x 100 mm內徑，5微米粒度）（使用水（含有按體積計1%的NH4
OH（在H2O中的28%-30%））和MeCN的極性遞減混合物作為洗脫液）純化。平緩梯度：30%至60% MeCN。檢測UV @ 254nm。將含有所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以得到呈白色固體的8-[3-氯-1-氟-8-(丙-2-烯醯基)-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮的鏡像異構物2，阻轉異構物2（13.3 mg，34%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.85 - 2.02 (1H, m), 2.05 (3H, s), 2.16 - 2.27 (1H, m), 3.62 - 3.99 (6H, m), 4.29 - 4.57 (3H, m), 5.68 - 5.77 (1H, m), 6.17 (1H, d), 6.59 (1H, d), 6.71 - 6.86 (1H, m), 7.08 - 7.19 (1H, m), 7.65 - 7.78 (2H, m), 8.52 (1H, s), 10.87 (1H, s),19
F NMR (376 MHz, DMSO, 30°C) -131.09, -130.89,m/z
(ES+), [M+H]+ 520,522。在Phenomonex C3，3.0 x 150 mm，3微米柱，洗脫液25% MeOH + 0.1% NH3
/75% scCO2
，流速：2.0 ml/min，BPR 120巴，柱溫度 40o
C，rT 0.89 min進行分析型手性SFC分析。
2-胺基-4-溴-5-氯-3,6-二氟苯甲酸
在rt，將N-氯代琥珀醯亞胺（5.30 g，39.68 mmol）添加至在濃H2
SO4
（80 mL）中的2-胺基-4-溴-3,6-二氟苯甲酸（5 g，19.84 mmol）中並且然後將反應混合物在80°C攪拌16h。將所得溶液冷卻至室溫並且倒在冰上。將沈澱物藉由過濾收集並且真空乾燥以得到呈黃色固體的2-胺基-4-溴-5-氯-3,6-二氟苯甲酸（4.50 g，79%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 7.78 (2H, br s)。m/z
: ES+
[M+H]+
= 286。
7-溴-6-氯-5,8-二氟喹唑啉-4-醇
在rt，將2-胺基-4-溴-5-氯-3,6-二氟苯甲酸（4.5 g，15.71 mmol）添加至乙酸甲脒（19.63 g，188.51 mmol）在iPrOH（40 mL）和乙醇（40 mL）中的溶液中。在100°C將所得溶液攪拌過夜然後冷卻至rt並且傾倒入水中並且藉由過濾收集沈澱物，用水（400 ml）洗滌，並且真空乾燥以得到呈棕色固體的7-溴-6-氯-5,8-二氟喹唑啉-4-醇（3.70 g，80%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 8.20 (1H, s), 12.67 (1H, s)。m/z
: ES+
[M+H]+
= 295。
甲基N
-苄基-D
-丙胺酸酯
在0°C，將硼氫化鈉（11.0 g，291 mmol）逐份添加至在MeOH（1 l）中的甲基D
-丙胺酸酯（30 g，290 mmol）、三乙胺（162 ml，1160 mmol）和苯甲醛（61.7 g，581.8 mmol）中。將所得混合物在rt攪拌4 h。將反應混合物用飽和NH4
Cl（200 ml）淬滅，用DCM（3 x 100 ml）萃取，將有機層用Na2
SO4
乾燥，過濾並蒸發至乾燥。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在石油醚中的20%至30% EtOAc）純化以給出呈無色油狀物的甲基N
-苄基-D
-丙胺酸酯（42.1 g，75%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.31 (3H, d), 3.54 (3H, s), 4.02-4.07 (1H, m), 4.53 (2H, s), 7.22-7.26 (5H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 194。
(3S
)-4-{苄基[(2R
)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基 }-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯
在0°C，將4-甲基𠰌啉（12.6 g，124 mmol）添加至在THF（250 ml）中的(2S
)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-甲氧基-4-側氧基丁酸（30.7 g，124 mmol）和氯甲酸異丁酯（15.55 g，113.8 mmol）中。將所得溶液在0°C攪拌1 h並且然後在0°C添加甲基N
-苄基-D
-丙胺酸酯（20 g，100 mmol）在THF（250 ml）中的溶液。將所得溶液在rt攪拌16 h。將溶劑在真空中去除。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在石油醚中的0至50% EtOAc）純化以給出呈黃色油狀物的(3S
)-4-{苄基[(2R
)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯（4.9 g，11%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.47 (9H, s), 1.47-1.52 (3H, s), 2.39-2.54 (1H, m), 2.64-2.89 (1H, m), 3.44-3.64 (7H, m), 3.93-4.29 (1H, m), 4.57-4.90 (2H, m), 7.01-7.76 (6H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 423。
[(2S
,5R
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯
在0°C，將TFA（8.94 ml，116 mmol）添加至在DCM（50 ml）中的(3S)-4-{苄基[(2R)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯（4.9 g，12 mmol）中。將所得溶液在rt攪拌1 h並且蒸發。將粗產物溶解在飽和水性Na2
CO3
（100 ml）中並且在rt攪拌2 h然後藉由C18-快速層析法（在水中的0至70% MeOH）純化以給出呈黃色油狀物的甲基 [(2S
,5R
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯（2.8 g，83%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.43 (3H, d), 2.73-2.98 (2H, m), 3.64 (3H, s), 3.65-3.72 (1H, m), 4.07-4.21 (1H, m), 4.51 (1H, t), 4.84-5.07 (1H, m), 7.22-7.41 (5H, m), 8.30 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 291。
2-[(2S
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇
在0°C，將氫化鋰鋁（2.93 g，77.2 mmol）逐份添加至[(2S
,5R
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯（2.8 g，9.6 mmol）在THF（50 ml）中的溶液中。將所得溶液在0°C攪拌0.5 h然後在rt攪拌另外的2 h。將反應混合物用水（7.8 ml）和15% NaOH（23.5 ml）淬滅並且通過矽藻土過濾。將有機層乾燥（Na2
SO4
），過濾並蒸發以得到黃色油狀物。將粗產物藉由C18-快速層析法（在水中的0至55% MeOH）純化以給出呈無色油狀物的2-[(2S
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇（2.02 g，89%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.09 (3H, d), 1.16-1.43 (2H, m), 1.48-1.69 (1H, m), 2.01-2.24 (1H, m), 2.29-2.40 (1H, m), 2.47-2.63 (2H, m), 2.70-2.85 (1H, m), 2.93-3.11 (1H, m), 3.25-3.58 (4H, m), 4.00 (1H, d), 7.24-7.38 (5H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 235。
5-{2-[(2S
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-4-醇
在0°C，將氫化鈉（0.725 g，18.1 mmol）添加至在THF（200 ml）中的2-[(2S
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇（2.142 g，7.25 mmol）中。將所得混合物在0°C下攪拌15 min。然後添加7-溴-6-氯-5,8-二氟喹唑啉-4-醇（2.14 g，7.25 mmol）並且將混合物在60°C攪拌4 h。將反應混合物用水（5 ml）淬滅並且用2M HCl酸化至pH = 7，用EtOAc（3 x 200 ml）萃取並且將有機層乾燥（Na2
SO4
），過濾並蒸發以得到粗產物。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至60% MeCN（0.1% NH4
HCO3
））純化以給出呈白色固體的5-{2-[(2S
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-4-醇（1.75 g，47%）。1
H NMR (400 MHz, CD3
OD) 1.30 (3H, d), 1.83-2.02 (2H, m), 2.88-2.96 (1H, m), 2.97-3.07 (1H, m), 3.17-3.25 (1H, m), 3.66-3.97 (4H, m), 3.97-4.04 (1H, m), 4.04-4.11 (1H, m), 4.15-4.27 (1H, m), 7.26-7.36 (5H, m), 8.22 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 509。
(6aS
,9R
)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并 [1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉
在rt，將四氯甲烷（1.609 ml，16.67 mmol）添加至在1,2-二氯乙烷（50 ml）中的5-{2-[(2S
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-4-醇（1.7 g，3.33 mmol）和三苯基膦（2.62 g，10 mmol）中。將所得混合物在80°C攪拌2 h。將溶劑在真空中去除。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至80% MeCN（0.1% NH4
HCO3
））純化以給出呈黃色固體的(6aS
,9R
)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉（0.68 g，42%）。1
H NMR (400 MHz, CD3
OD) 1.15 (3H, d), 1.75-1.90 (1H, m), 2.29-2.56 (3H, m), 2.80-2.85 (1H, m), 3.05-3.21 (2H, m), 3.46-3.56 (1H, m), 3.71-3.92 (2H, m), 4.25-4.50 (2H, m), 7.25-7.37 (5H, m), 8.44 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 491。
2-[(6aS
,9R
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6] [1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚
將RuPhos-Pd-G3（187 mg，0.22 mmol）添加至在1,4-二㗁𠮿/H2
O（30 ml，4:1比率）中的(6aS
,9R
)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉（550 mg，1.12 mmol）、(2-氟-6-羥基苯基)硼酸（436 mg，2.80 mmol）、Na2
CO3
（474 mg，4.47 mmol）和二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（104 mg，0.22 mmol）的溶液中。將所得混合物在80°C攪拌1 h。將溶劑在真空中去除。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在石油醚中的80%至100% EtOAc）純化以給出呈黃色固體的2-[(6aS
,9R
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（480 mg，82%）。1
H NMR (400 MHz, CD3
OD) 0.95-1.03 (3H, m), 1.85-1.90 (2H, m), 2.30-2.54 (1H, m), 2.74-2.92 (1H, m), 3.05-3.19 (1H, m), 3.48-3.51 (1H, m), 3.77-4.19 (3H, m), 4.31-4.52 (3H, m), 7.05-7.13 (1H, m), 7.22-7.42 (5H, m), 7.46-7.54 (2H, m), 8.48 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 523。
2-((3R
,14aS
)-11-氯-9-氟-3-甲基-1,3,4,13,14,14a-六氫-2H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-10-基)-3-氟苯酚
將在THF（10 ml）中的10% 鈀炭1（1.02 g，0.96 mmol）、二碳酸二三級丁酯（0.222 ml，0.96 mmol）和2-[(6aS
,9R
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（500 mg，0.96 mmol）在氫氣氣氛下，在1 atm和rt攪拌1 h。將反應混合物通過矽膠過濾並且將溶劑在真空中去除。將殘餘物溶解在DCM（10 ml）中並且添加在1,4-二㗁𠮿（1.2 ml，4.78 mmol）中的4M HCl。將所得溶液在rt攪拌1 h。將溶劑在真空中去除。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至40% MeCN（0.1% NH4
HCO3
））純化以給出呈白色固體的2-((3R
,14aS
)-11-氯-9-氟-3-甲基-1,3,4,13,14,14a-六氫-2H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉-10-基)-3-氟苯酚（350 mg，85%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 0.98-1.16 (3H, m), 1.74-1.90 (1H, m), 1.95-2.05 (1H, m), 2.56-2.81 (1H, m), 2.89-3.01 (1H, m), 3.01-3.45 (2H, m), 3.61-3.70 (1H, m), 3.86-4.06 (1H, m), 4.20-4.31 (2H, m), 6.73-6.88 (2H, m), 7.34-7.35 (1H, m), 8.64 (1H, s), 10.20 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 433。
1-[(6aS
,9R
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮（阻轉異構物1，實例38；阻轉異構物2，實例39）
在0°C，將在DMF（0.5 ml）中的丙烯醯氯（32.2 mg，0.36 mmol）的溶液逐滴添加至2-((3R,14aS)-11-氯-9-氟-3-甲基-1,3,4,13,14,14a-六氫-2H-吡𠯤并 [1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉-10-基)-3-氟苯酚（220 mg，0.51 mmol）和DIPEA （0.133 ml，0.76 mmol）在DMF（3.0 ml）中的攪拌溶液中。將所得溶液在0°C攪拌0.5 h。反應混合物用水（1 ml）淬滅並且將所得混合物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至40% MeCN（1% NH4
HCO3
））純化以給出兩個阻轉異構物的混合物，其然後藉由製備型手性-HPLC（柱：CHIRALPAK IE，2x25 cm，5 µm；流動相A：Hex（8 mmol/L NH3
.MeOH）--HPLC，流動相B：EtOH--HPLC；流速：20 ml/min；梯度：30 B至30 B，在16 min內；220/254 nm；RT1：9.899；RT2：13.349）分離。將包含所希望的化合物的級分蒸發至乾燥以首先得到呈白色固體的阻轉異構物1，1-[(6aS
,9R
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并 [4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮（實例38，33 mg，13%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.12-1.23 (3H, m), 1.82-2.06 (1H, m), 3.15-3.27 (0.5H, m), 3.43-3.72 (1.5H, m), 3.86-4.04 (2H, m), 4.19-4.52 (3H, m), 4.54-5.08 (2H, m), 5.74 (1H, d), 6.18 (1H, d), 6.73-6.93 (3H, m), 7.34-7.35 (1H, m), 8.45 (1H, s), 10.15 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 487。在此之後得到呈白色固體的阻轉異構物2，1-[(6aS
,9R
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮（實例39，33 mg，13%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.18-1.28 (3H, m), 1.83-2.15 (1H, m), 3.13-3.27 (0.5H, m), 3.43-3.69 (1.5H, m), 3.88-4.04 (2H, m), 4.19-4.52 (3H, m), 4.55-5.05 (2H, m), 5.74 (1H, d), 6.18 (1H, d), 6.74-6.97 (3H, m), 7.34-7.35 (1H, m), 8.45 (1H, s), 10.19 ( H, d)。m/z：ES+
[M+H]+
= 487。
(3S
)-4-{苄基[(2S
)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3 -[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯
在0°C，將氯甲酸異丁酯（15.55 g，113.84 mmol）添加至(2R
)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-甲氧基-4-側氧基丁酸（30.7 g，124 mmol）和4-甲基𠰌啉（12.56 g，124.19 mmol）在THF（100 ml）中的溶液中。將所得溶液在0°C攪拌1 h並且然後在0°C添加甲基N
-苄基-D
-丙胺酸酯（20 g，100 mmol）在THF（10 ml）中的溶液。將所得混合物在rt下攪拌過夜。反應混合物用水（200 ml）淬滅，用EtOAc（3 x 100 ml）萃取，將有機層乾燥（Na2
SO4
），過濾並蒸發以給出粗產物。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在石油醚中的10%至25% EtOAc）純化以給出呈黃色液體的(3R
)-4-{苄基[(2R
)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯（5.6 g，13%）。1
H NMR (400 MHz, CD3
OD) 1.34 (9H, s), 1.45 (3H, d), 2.53-2.66 (1H, m), 2.77-2.94 (1H, m), 3.65 (3H, s), 3.67 (3H, s), 3.97-4.09 (1H, m), 4.65-4.76 (1H, m), 4.80-4.95 (1H, m), 5.01-5.07 (1H, m), 7.17-7.52 (5H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 423。
[(2R
,5R
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯
在rt，將在1,4-二㗁𠮿（4.97 ml，19.9 mmol）中的4M HCl添加至在MeOH（20 ml）中的(3R
)-4-{苄基[(2R
)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯（5.6 g，13 mmol）。將所得溶液在rt攪拌1 h。將溶劑在真空中去除。反應混合物用飽和Na2
CO3
水溶液（50 ml）稀釋。將所得混合物在rt攪拌2 h然後藉由快速C18快速層析法（在水中的0至70% MeOH）純化以給出呈無色液體的[(2R
,5R
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯（2.5 g，65%）。1
H NMR (400 MHz, CD3
OD) 1.53 (3H, d), 2.82-3.05 (2H, m), 3.74 (3H, s), 3.87-4.01 (1H, m), 4.37 (1H, d), 4.41-4.47 (1H, m), 5.06 (1H, d), 7.18-7.41 (5H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 291。
2-[(2R
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇
在0°C，將氫化鋰鋁（2.61 g，68.89 mmol）逐份添加至[(2R
,5R
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯（2.5 g，8.6 mmol）在THF（50 ml）中的溶液中。將所得溶液在0°C攪拌0.5 h然後在60°C攪拌另外的4 h。將反應混合物用水（2.6 ml）和15%水性NaOH（7.8 ml）淬滅，用DCM（200 ml）稀釋並且通過矽藻土過濾。將有機層蒸發至乾燥以得到呈黃色液體的2-[(2R
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇（1.8 g，89%）。1
H NMR (400 MHz, CD3
OD) 1.11 (3H, d), 1.57-1.83 (2H, m), 2.35-2.44 (2H, m), 2.69-2.80 (2H, m), 2.85-2.98 (2H, m), 3.44 (1H, d), 3.52-3.64 (2H, m), 3.73 (1H, d), 7.19-7.39 (5H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 235。
5-{2-[(2R
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-4-醇
在0°C，將氫化鈉（0.447 g，18.6 mmol）添加至在THF（50 ml）中的2-[(2R
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇（1.745 g，7.45 mmol）中。將所得混合物在0°C下攪拌15 min。添加7-溴-6-氯-5,8-二氟喹唑啉-4-醇（2.2 g，7.5 mmol）並且將混合物在60°C攪拌4 h。將反應混合物用水（5 ml）淬滅，用2M HCl酸化至pH = 7，用EtOAc（3 x 200 ml）萃取並且將有機層乾燥（Na2
SO4
），過濾並蒸發以得到粗產物。將粗產物藉由C18-快速層析法（在水中的0至70% MeCN（0.1% NH4
HCO3
））純化以給出呈棕色固體的5-{2-[(2R
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-4-醇（1.8 g，47%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.00-1.11 (3H, m), 1.68-1.87 (1H, m), 1.87-2.11 (1H, m), 2.28-2.42 (2H, m), 2.66-2.86 (3H, m), 2.85-3.17 (2H, m), 3.86-4.09 (2H, m), 4.10-4.20 (1H, m), 7.25-7.34 (5H, m), 8.16 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 509。
(6aR
,9R
)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并 [1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉
在rt，將四氯甲烷（1.703 ml，17.65 mmol）添加至在1,2-二氯乙烷（20 ml）中的5-{2-[(2R
,5R
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-4-醇（1.8 g，3.53 mmol）和三苯基膦（2.78 g，10.6 mmol）中。將所得混合物在80°C攪拌2 h。將溶劑在真空中去除。將粗產物藉由快速C18快速層析法（在水中的0至90% MeOH（0.1% NH4
HCO3
））純化以給出呈黃色固體的(6aR
,9R
)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉（0.42 g，24%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.14-1.25 (3H, m), 2.11-2.21 (1H, m), 2.35-2.41 (1H, m), 2.56-2.67 (2H, m), 2.96-3.12 (2H, m), 3.54-3.62 (2H, m), 3.68-3.77 (1H, m), 3.95-4.06 (1H, m), 4.23-4.44 (1H, m), 4.93-5.04 (1H, m), 7.07-7.36 (5H, m), 8.38 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 491。
2-[(6aR
,9R
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并 [1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚
將RuPhos-Pd-G3 （119 mg，0.14 mmol）添加至在1,4-二㗁𠮿/H2
O（15 ml；4 : 1比率）中的(6aR
,9R
)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉（350 mg，0.71 mmol）、(2-氟-6-羥基苯基)硼酸（277 mg，1.78 mmol）、Na2
CO3
（302 mg，2.85 mmol）和二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（66.4 mg，0.14 mmol）的溶液中。將所得混合物在80°C攪拌1 h。將溶劑在真空中去除。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在石油醚中的60%至80% EtOAc）純化以給出呈淡黃色固體的2-[(6aR
,9R
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（365 mg，98%）。1
H NMR (400 MHz, CD3
OD) 1.02 (3H, d), 1.81-1.94 (1H, m), 2.23-2.32 (1H, m), 2.49-2.79 (3H, m), 3.03-3.18 (2H, m), 3.79-3.92 (1H, m), 4.12-4.20 (1H, m), 4.40-4.52 (2H, m), 5.13-5.21 (1H, m), 6.65-6.81 (3H, m), 7.27-7.37 (5H, m), 8.36 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 523。
2-[(6aR
,9R
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚
將在THF（20 ml）中的10% 鈀炭（712 mg，0.67 mmol）、二碳酸二三級丁酯（0.311 ml，1.34 mmol）和2-[(6aR
,9R
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（350 mg，0.67 mmol）在氫氣氣氛下，在1 atm和rt攪拌1 h。將反應混合物通過矽膠過濾並且將溶劑在真空中去除。將反應混合物用DCM（20 ml）稀釋。添加在1,4-二㗁𠮿（0.84 ml，3.35 mmol）中的4M HCl。將所得溶液在rt攪拌1 h。將溶劑在真空中去除並且將粗產物藉由離子交換層析法（使用SCX柱）純化。該柱用7M NH3
/MeOH洗脫以給出呈黃色固體的2-[(6aR
,9R
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（310 mg，＞ 100%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO)。1.08 (3H, d), 1.35-1.71 (5H, m), 1.74-2.29 (1H, m), 3.10-3.31 (2H, m), 3.95-4.20 (1H, m), 4.30-4.56 (1H, m) 6.63 (1H, d), 6.71-6.82 (1H, m), 6.85-7.01 (1H, m), 8.48 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 433。
1-[(6aR
,9R
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮（阻轉異構物1，實例40；阻轉異構物2，實例41）
在0°C，將在DMF（0.5 ml）中的丙烯醯氯（43.1 mg，0.48 mmol）溶液逐份添加至在DMF（2.5 ml）中的2-[(6aR
,9R
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（300 mg，0.69 mmol）和DIPEA（0.12 ml，0.69 mmol）的攪拌溶液中。將所得溶液在0°C攪拌0.5 h。將反應混合物用水（0.5 ml）淬滅並且將所得混合物藉由C18-快速層析法（在水中的0至40% MeCN（0.1% NH4
HCO3
））純化以給出兩個阻轉異構物的混合物，然後將其藉由製備型手性-HPLC（柱：CHIRALPAK IA，2 x 25 cm，5 µm；流動相A: Hex--HPLC，流動相B：IPA--HPLC；流速：20 ml/min；梯度：30 B至30 B，在18 min內；254/220 nm；RT1：9.284；RT2：13.389）分離。這給出了呈白色固體的阻轉異構物1，1-[(6aR
,9R
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮（實例40，5 mg，1%）。1
H NMR (400 MHz, CD3
CN) 1.18-1.33 (3H, m), 1.67-1.81 (1H, m), 2.26-2.33 (1H, m), 2.93-3.48 (2H, m), 3.48-4.47 (3H, m), 4.53-4.83 (3H, m), 5.49-5.74 (1H, m), 6.05 (1H, d), 6.42-6.62 (1H, m), 6.74-6.96 (2H, m), 7.30-7.44 (1H, m), 8.47 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 487。在此之後得到呈白色固體的阻轉異構物2，1-[(6aR
,9R
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并 [4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮（實例41，30 mg，9%）。1
H NMR (400 MHz, CD3
CN) 1.16-1.38 (3H, m), 1.70-1.80 (1H, m), 2.25-2.40 (1H, m), 2.92-3.44 (2H, m), 3.56-4.46 (3H, m), 4.57-4.76 (3H, m), 5.48-5.70 (1H, m), 6.05 (1H, d), 6.48-6.59 (1H, m), 6.78-6.91 (2H, m), 7.34 -7.44 (1H, m), 8.40-8.51 (1H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 487。
甲基N
-苄基-L
-丙胺酸酯
在0°C，將硼氫化鈉（11.01 g，290.92 mmol）逐份添加至在MeOH（1 l）中的甲基L
-丙胺酸酯（30 g，290 mmol）、三乙胺（162 ml，1160 mmol）和苯甲醛（61.7 g，582 mmol）中。將所得混合物在rt攪拌4 h。將反應混合物用飽和NH4
Cl（200 ml）淬滅，用DCM（3 x 100 ml）萃取，將有機層乾燥（Na2
SO4
），過濾並蒸發至乾燥。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在石油醚中的20%至30% EtOAc）純化以給出呈無色油狀物的甲基N
-苄基-L
-丙胺酸酯（45 g，80%）。1
H NMR (300 MHz, CDCl3
) 1.33 (3H, d), 3.32-3.46 (1H, m), 3.74 (3H, s), 4.66 (2H, s), 7.34-7.45 (5H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 194。
(3S
)-4-{苄基[(2S)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3 -[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯
在0°C，將氯甲酸異丁酯（19.44 g，142.3 mmol）添加至在THF（50 ml）中的(2S
)-2-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-甲氧基-4-側氧基丁酸（32 g，130 mmol）和4-甲基𠰌啉（15.7 g，155.24 mmol）的溶液中。將所得溶液在0°C攪拌1 h並且然後在0°C添加甲基N
-苄基-L
-丙胺酸酯（25 g，130 mmol）在THF（20 ml）中的溶液。將所得混合物在rt下攪拌過夜。反應混合物用水（50 ml）淬滅，用EtOAc（3 x 200 ml）萃取，將有機層乾燥（Na2
SO4
），過濾並蒸發以得到黃色液體。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在石油醚中的0至30% EtOAc）純化以給出呈黃色油狀物的(3S
)-4-{苄基[(2S
)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯（20 g，37%）。1
H NMR (300 MHz, CDCl3
) 1.31-1.38 (3H, m), 1.45 (9H, s), 2.77-3.09 (2H, m), 3.46 (2H, s), 3.59-3.72 (6H, m), 4.49-4.72 (1H, m), 5.16-5.21 (1H, m), 7.29-7.43 (5H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 423。
[(2S
,5S
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯
在rt，將TFA（54 g，470 mmol）添加至(3S
)-4-{苄基[(2S
)-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基]胺基}-3-[(三級丁氧基羰基)胺基]-4-側氧基丁酸甲酯（20 g，47 mmol）在DCM（100 ml）中的溶液中。將所得溶液在rt攪拌2 h並且蒸發。將粗產物重新溶解在飽和水性NaHCO3
（200 ml）中。將溶液在rt攪拌2 h，然後藉由C18-快速層析法（在水中的0至60% MeCN）純化以給出呈黃色油狀物的[(2S
,5S
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯（6.5 g，47%）。1
H NMR (300 MHz, CDCl3
) 1.50 (3H, d), 2.68-2.81 (2H, m), 3.70-3.71 (1H, m), 3.74 (3H, s), 3.97-4.06 (1H, m), 4.41-4.54 (1H, m), 5.25-5.31 (1H, m), 7.22-7.37 (6H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 291。
2-[(2S
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇
在0°C，將氫化鋰鋁（6.80 g，179 mmol）分批添加到[(2S
,5S
)-4-苄基-5-甲基-3,6-二側氧基哌𠯤-2-基]乙酸甲酯（6.5 g，22 mmol）在THF（20 ml）中的溶液中。將所得溶液在0°C攪拌0.5 h然後在rt攪拌另外的4 h。將反應混合物用水（6.5 ml）和15%水性NaOH（19.5 ml）淬滅，通過矽藻土墊過濾並且用DCM（3 x 100 ml）洗滌以在蒸發後得到呈淡黃色液體的2-[(2S
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇（4.6 g，88%）。1
H NMR (300 MHz, CDCl3
) 1.07 (3H, d), 1.42-1.50 (1H, m), 2.25-2.32 (1H, m), 2.34-2.44 (2H, m), 2.65-2.87 (3H, m), 2.92-3.05 (2H, m), 3.35-3.48 (1H, m), 3.69-3.82 (3H, m), 4.71 (1H, s), 7.32-7.35 (3H, m), 7.37-7.40 (2H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 235。
5-{2-[(2S
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-4-醇
在0°C，將氫化鈉（0.85 g，21 mmol）添加至在THF（20 ml）中的2-[(2S
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙-1-醇（2 g，8.5 mmol）中。將所得混合物在0°C下攪拌15 min。然後添加7-溴-6-氯-5,8-二氟喹唑啉-4-醇（2.52 g，8.53 mmol）並且將混合物在60°C攪拌3 h。反應混合物用水（20 ml）淬滅並且用2H HCl酸化至pH = 7。將混合物用EtOAc（3 x 100 ml）萃取。將有機層合並且濃縮。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在DCM中0至10% MeOH）純化以給出呈棕色固體的5-{2-[(2S
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-4-醇（1.4 g，32%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.17 (3H, d), 2.14-2.25 (1H, m), 2.46-2.51 (2H, m), 2.71-2.94 (3H, m), 3.11-3.25 (1H, m), 3.45 (1H, d), 3.69 (1H, d), 3.89-4.24 (3H, m), 7.31-7.45 (5H, m, 8.19 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 509。
(6aS
,9S
)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并 [1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉
在rt，將四氯甲烷（1.33 ml，13.7 mmol）添加至在1,2-二氯乙烷（20 ml）中的5-{2-[(2S
,5S
)-4-苄基-5-甲基哌𠯤-2-基]乙氧基}-7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-4-醇（1.4 g，2.8 mmol）和三苯基膦（2.16 g，8.24 mmol）中。將所得混合物在80°C攪拌2 h。將溶劑在真空中去除。將粗產物藉由C18-快速層析法（在水中的0至80% MeCN（0.1% NH4
HCO3
））純化以給出呈黃色固體的(6aS
,9S
)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉（0.45 g，33%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.20 (3H, d), 1.58-1.81 (1H, m), 2.14-2.24 (1H, m), 2.40-2.45 (1H, m), 2.63-2.71 (2H, m), 3.06-3.21 (3H, m), 3.61-3.86 (1H, m), 4.03-4.10 (1H, m), 4.19-4.49 (1H, m), 5.01-5.12 (1H, m), 7.31-7.45 (5H, m), 8.40 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 491。
2-[(6aS
,9S
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6] [1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚
將RuPhos-Pd-G3（153 mg，0.18 mmol）添加至在1,4-二㗁𠮿/H2
O（8 ml）（4:1比率）中的(6aS
,9S
)-8-苄基-2-溴-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
] 喹唑啉（450 mg，0.92 mmol）、(2-氟-6-羥基苯基)硼酸（357 mg，2.29 mmol）、Na2
CO3
（388 mg，3.66 mmol）和二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（85 mg，0.18 mmol）的溶液中。將所得混合物在80°C攪拌1 h。將溶劑在真空中去除。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在石油醚中的40%至60% EtOAc）純化以給出呈黃色固體的2-[(6aS
,9S
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（260 mg，54%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.20 (3H, d), 0.94 (3H, d), 1.54-1.79 (3H, m), 2.26-2.31 (1H, m), 2.67-2.71(1H, m), 3.03-3.19 (2H, m), 3.36-3.62 (1H, m), 3.81-3.85 (1H, m), 4.03-4.05 (1H, m), 4.28-4.45 (2H, m), 6.64 (1H, d), 6.73-6.87 (1H, m), 7.18-7.28 (1H, m), 7.29-7.38 (5H, m), 8.42 (1H, s), 10.16 (1H, d)。m/z：ES+
[M+H]+
= 523。
2-[(6aS
,9S
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚
將在THF（10 ml）中的10% 鈀炭（509 mg，0.48 mmol）、二碳酸二三級丁酯（0.111 ml，0.48 mmol）和2-[(6aS
,9S
)-8-苄基-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（250 mg，0.48 mmol）在氫氣氣氛下，在1 atm和rt攪拌1 h。將反應混合物通過矽膠過濾並且將溶劑在真空中去除。反應混合物用DCM（10.00 ml）稀釋並且添加TFA（0.37 ml，4.8 mmol）。將所得溶液在rt攪拌1 h。將溶劑在真空中去除。將該粗產物藉由離子交換層析（使用SCX柱）進行純化。用7M NH3
/MeOH洗脫以給出呈淡黃色固體的2-[(6aS
,9S
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（200 mg，97%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.40 (3H, d), 1.88-1.99 (1H, m), 2.63-2.78 (1H, m), 3.17-3.30 (4H, m), 4.02-4.09 (1H, m), 4.37-4.50 (2H, m), 5.07-5.15 (1H, m), 6.78 (1H, t), 6.89 (1H, d), 7.34-7.45 (1H, m), 8.51 (1H, s), 10.30 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 433。
1-[(6aS
,9S
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮（阻轉異構物1，實例42；阻轉異構物2，實例43）
在0°C，將丙烯醯氯（37.6 mg，0.42 mmol）在DMF（0.5 ml）中的溶液逐滴添加至2-[(6aS
,9S
)-3-氯-1-氟-9-甲基-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H
-吡𠯤并[1',2':5,6] [1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-2-基]-3-氟苯酚（200 mg，0.46 mmol）和DIPEA（0.12 ml，0.69 mmol）在DMF（3.0 ml）中的攪拌溶液中。將所得溶液在0°C下攪拌30 min。將反應混合物用水（1 ml）淬滅並且將所得混合物藉由C18-快速層析法（在水中的0至40% MeCN（1% NH4
HCO3
））純化以給出兩個阻轉異構物的混合物，其然後藉由製備型手性-HPLC在柱：(R,R)Whelk-01，21.1x250 mm，5 µm；流動相A：Hex（8 mmol/L NH3
.MeOH）--HPLC，流動相B：EtOH-HPLC；流速：20 ml/min；梯度：50 B至50 B，在20 min內；220/254 nm；RT1：12.723；RT2：15.375上分離。這給出了呈白色固體的1-[(6aS
,9S
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮的阻轉異構物1（實例42，25 mg，25%）。1
H NMR (400 MHz, CD3
CN) 1.13-1.35 (3H, m), 1.63-1.87 (1H, m), 2.24-2.46 (1H, m), 2.87-3.46 (2H, m), 3.50-4.09 (2H, m), 4.15-4.81 (4H, m), 5.46-5.66 (1H, m), 6.04 (1H, d), 6.53 (1H, dd), 6.76-6.94 (2H, m), 7.29-7.48 (1H, m), 8.35 (1H, d)。m/z：ES+
[M+H]+
= 487。在此之後得到呈白色固體的1-[(6aS
,9S
)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H
-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de
]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮的阻轉異構物2（實例43，8 mg，8%）。1H NMR (400 MHz, CD3
CN) 1.13-1.35 (3H, m), 1.52-1.86 (2H, m), 2.90-4.09 (4H, m), 4.13-4.89 (4H, m), 5.48-5.70 (1H, m), 6.06 (1H, d), 6.55 (1H, dd), 6.75-6.98 (2H, m), 7.26-7.47 (1H, m), 8.49 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 487。
3-溴-2-氯-4,5-二氟苯胺
在rt，將N-氯代琥珀醯亞胺（2.76 g，20.67 mmol）添加至在MeCN（20 ml）中的3-溴-4,5-二氟苯胺（4.3 g，21 mmol）中。將所得溶液在60°C下攪拌過夜。將粗產物藉由C18-快速層析法（在MeCN中的0至20% MeOH（1% NH4
HCO3
））純化以給出呈棕色固體的3-溴-2-氯-4,5-二氟苯胺（3.5 g，70%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 5.80 (2H, s), 6.82 (1H, dd)。m/z：ES+
[M+H]+
= 242。
2-N
-(3-溴-2-氯-4,5-二氟苯基)-2-(羥基亞胺基)乙醯胺
在rt，將3-溴-2-氯-4,5-二氟苯胺（3.5 g，14.44 mmol）、水合氯醛（1.27 g，18.4 mmol）和鹽酸羥胺（3.01 g，43.3 mmol）在水（40 ml）、EtOH（70 ml）和11.65 M HCl（30 ml）中的溶液添加至硫酸鈉（13.94 g，98.17 mmol）在水（400 ml）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60°C下攪拌過夜。將反應冷卻至rt並且藉由過濾收集沈澱物，用水洗滌並且真空乾燥以得到呈淺褐色固體的2-N
-(3-溴-2-氯-4,5-二氟苯基)-2-(羥基亞胺基)乙醯胺（4 g，88%）。1
H NMR (300 MHz, CDCl3
) 7.61 (1H, s), 8.05 (1H, s), 8.51 (1H, dd), 8.95 (1H, s)。
6-溴-7-氯-4,5-二氟-1H-吲哚-2,3-二酮
在rt，將2-N
-(3-溴-2-氯-4,5-二氟苯基)-2-(羥基亞胺基)乙醯胺（4 g，13 mmol）添加至濃H2
SO4
（30 ml，560 mmol）中。將所得混合物在80°C攪拌3 h。冷卻至rt後，將混合物倒在冰上，並且將形成的沈澱物過濾掉並且用水洗滌。將固體真空乾燥以得到呈深紅色固體的6-溴-7-氯-4,5-二氟-1H
-吲哚-2,3-二酮（3.7 g，98%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 11.81 (1H, s)。m/z：ES- [M+H]- = 294。
2-胺基-4-溴-3-氯-5,6-二氟苯甲酸
在rt，將過氧化氫（6.37 ml，62.4 mmol）添加至6-溴-7-氯-4,5-二氟-1H
-吲哚-2,3-二酮（3.7 g，12 mmol）在2M NaOH（56.2 ml，112 mmol）中的溶液中。將所得混合物在rt下攪拌過夜。反應混合物用過量Na2
SO3
淬滅。將水溶液用2M HCl調節至pH 7並且藉由C18-快速層析法（在水中的0 至50% MeOH）純化以給出呈淡黃色固體 2-胺基-4-溴-3-氯-5,6-二氟苯甲酸（2.85 g，80%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 5.83 (2H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 286。
7-溴-8-氯-5,6-二氟喹唑啉-4-醇
在rt，將乙酸甲脒（12.43 g，119.4 mmol）添加至2-胺基-4-溴-3-氯-5,6-二氟苯甲酸（2.85 g，9.95 mmol）在乙醇（20 ml）和異丙醇（20 ml）中的溶液中。將所得懸浮液在90°C攪拌過夜。將反應混合物蒸發，並且將殘餘物懸浮於水（100 ml）中。將沈澱物藉由過濾收集，用水（3 x 10 ml）洗滌並且真空乾燥以得到呈棕褐色固體的7-溴-8-氯-5,6-二氟喹唑啉-4-醇（1.9 g，65%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 8.23 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 295。
三級丁基 (3S
)-3-{[(7-溴-8-氯-6-氟-4-羥基喹唑啉-5-基)氧基]甲基}哌𠯤-1-甲酸酯
在rt，將氫化鈉（0.86 g，21 mmol）添加至在THF（40 ml）中的三級丁基 (3S)-3-(羥基甲基)哌𠯤-1-甲酸酯（1.244 g，5.75 mmol）。將所得混合物在rt下攪拌10 min。緩慢添加7-溴-8-氯-5,6-二氟喹唑啉-4-醇（1.7 g，5.75 mmol）並且將所得溶液在40°C攪拌1 h。將反應混合物用水（2 ml）淬滅。將反應混合物用2M HCl調節至pH = 7。將粗產物藉由C18-快速層析法（在水中的0至65% MeOH（0.1% TFA））純化以得到呈棕色固體的三級丁基 (3S
)-3-{[(7-溴-8-氯-6-氟-4-羥基喹唑啉-5-基)氧基]甲基}哌𠯤-1-甲酸酯（1.65 g，58%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 1.35 (9H, s), 2.62-3.07 (2H, m), 3.11-3.19 (2H, m), 3.20-3.76 (1H, m), 3.80-3.88 (1H, m), 3.98-4.29 (3H, m), 8.23 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 491。
三級丁基 (8aS
)-5-溴-4-氯-6-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在rt，將(苯并***-1-基氧基)三吡咯啶基鏻六氟磷酸鹽（3.49 g，6.71 mmol）添加至在乙腈（20 ml）中的三級丁基 (3S
)-3-{[(7-溴-8-氯-6-氟-4-羥基喹唑啉-5-基)氧基]甲基} 哌𠯤-1-甲酸酯（1.65 g，3.36 mmol）和1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯（1.01 ml，6.71 mmol）中。將所得溶液在40°C攪拌1 h。在標準處理之後，將粗產物藉由C18-快速層析法（在水中的0至40% MeCN（0.1% 甲酸））純化以給出呈棕色固體的三級丁基 (8aS
)-5-溴-4-氯-6-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.82 g，52%）。1
H NMR (300 MHz, CDCl3
) 1.52 (9H, s), 1.82-2.04 (3H, m), 3.03-3.56 (3H, m), 3.96-5.27 (3H, m), 8.82 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
=473。
三級丁基 (8aS
)-4-氯-6-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將RuPhos-Pd-G3（70.6 mg，0.08 mmol）添加至在1,4-二㗁𠮿/H2
O（5 ml；4:1比率）中的三級丁基 (8aS
)-5-溴-4-氯-6-氟-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（400 mg，0.84 mmol）、(2-氟-6-羥基苯基)硼酸（329 mg，2.11 mmol）、碳酸鉀（350 mg，2.53 mmol）和二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（39.4 mg，0.08 mmol）的溶液中。將所得混合物在100°C下攪拌30 min。將溶劑在真空中去除。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在石油醚中的20%至60% EtOAc）純化並且然後藉由C18-快速層析法（在水中的0至35% MeOH（0.1% TFA））純化以給出呈淡黃色固體的三級丁基 (8aS
)-4-氯-6-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（150 mg，35%）。1
H NMR (300 MHz, CDCl3
) 1.53 (9H, s), 3.22-3.35 (2H, m), 3.88-4.00 (1H, m), 4.04-4.22 (3H, m), 4.45-4.64 (2H, m), 4.92-5.06 (1H, m), 6.57 (1H, d), 6.77 (1H, t), 6.88 (1H, d), 8.71 (1H, d)。m/z：ES+
[M+H]+
=505。
2-[(8aS
)-4-氯-6-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚
將在1,4-二㗁𠮿（2 ml，66 mmol）中的4M HCl添加至在MeOH（0.5 ml）中的三級丁基 (8aS
)-4-氯-6-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de] 喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（150 mg，0.3 mmol）的溶液中。將所得混合物在rt攪拌2 h。將混合物藉由C18-快速層析法（在水中的0至38% MeOH（0.1% TFA））純化以給出粗產物。將該粗產物藉由離子交換層析法（使用SCX柱）純化。將所希望的產物使用7M NH3
/MeOH從柱上洗脫以給出呈淡黃色固體的2-[(8aS
)-4-氯-6-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚（120 mg，99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 3.05-3.20 (1H, m), 3.27-3.46 (3H, m), 3.49-3.63 (1H, m), 4.22-4.36 (1H, m), 4.60-4.81 (2H, m), 5.04-5.19 (1H, m), 6.74-6.92 (2H, m), 7.29-7.44 (1H, m), 8.69 (1H, s), 10.36 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 405。
1-[(8aS
)-4-氯-6-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮（阻轉異構物1，實例44；阻轉異構物2，實例45）
在0°C，將丙烯醯氯（26.82 mg，0.29 mmol）在DMF（0.5 ml）中的溶液逐滴添加至2-[(8aS
)-4-氯-6-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-3-氟苯酚 （120 mg，0.29 mmol）和DIPEA（0.1 ml，0.58 mmol）在DMF（2.00 ml）中的攪拌溶液中。將所得溶液在0°C攪拌1 h並且藉由C18-快速層析法（在水中的0至40% MeOH（0.1% NH4
OH））純化以給出兩個阻轉異構物的混合物，然後將其藉由製備型手性-HPLC在柱：手性 ART纖維素-SB S-5 µm，2 x 25 cm，5 µm；流動相A：MTBE（10mM NH3
-MeOH）--HPLC，流動相B：IPA--HPLC；流速：20 ml/min；梯度：30 B至30 B，在22 min內；254/220 nm；RT1：13.164；RT2：18.688）分離。這給出了呈白色固體的1-[(8aS
)-4-氯-6-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮的阻轉異構物1（實例44，32 mg，24%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 2.98-3.20 (1H, m), 3.39-3.55 (1H, m), 4.03-4.19 (2H, m), 4.26-4.53 (2H, m), 4.58-4.74 (2H, m), 4.76-4.93 (1H, m), 5.76 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.76-6.94 (3H, m), 7.30-7.41 (1H, m), 8.63 (1H, s), 10.16-10.30 (1H, m)。m/z：ES+
[M+H]+
= 459。在此之後得到呈白色固體的1-[(8aS
)-4-氯-6-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮的阻轉異構物2（實例45，22 mg，16%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO) 2.96-3.18 (1H, m), 3.37-3.57 (2H, m), 4.02-4.54 (3H, m), 4.61-4.74 (2H, m), 4.74-4.91 (1H, m), 5.76 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.69-6.94 (3H, m), 7.28-7.40 (1H, m), 8.63 (1H, s), 10.36 (1H, s)。m/z：ES+
[M+H]+
= 459。
甲基N
-[(苄基氧基)羰基]-D
-絲胺醯-D
-丙胺酸酯
將甲基D
-丙胺酸酯鹽酸鹽（18.21 g，130.5 mmol）和((苄基氧基)羰基)-D
-絲胺酸（31.2 g，130.5 mmol）在DCM（573 ml）中的懸浮液在冰浴中冷卻並且添加3-(((乙基亞胺基)亞甲基)胺基)-N
,N
-二甲基丙-1-胺鹽酸鹽（30 g，160 mmol）。經20 min逐滴添加DIPEA（80 ml，460 mmol）並且然後在rt，將溶液攪拌過夜。將混合物在真空中濃縮以給出無色殘餘物。將殘餘物溶解在EtOAc（375 ml）中並且用1 : 1水/水性飽和NaHCO3
（470 ml）洗滌。將有機部分收集並且將水性部分用另外的EtOAc（375 ml）洗滌。將合併的有機物用水性2 M HCl（250 ml）、鹽水（250 ml）洗滌，乾燥（MgSO4
），過濾並且濃縮以給出呈無色固體的甲基N
-[(苄基氧基)羰基]-D
-絲胺醯-D
-丙胺酸酯（38.8 g，92%）。1
H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 1.38 (3H, d), 3.70 (3H, d), 3.77 (2H, q), 4.24 (1H, t), 4.45 (1H, q), 5.11 (2H, s), 7.23 - 7.44 (5H, m)。m/z
: ES+ [M+H]+ 325。
(3R
,6R
)-3-(羥基甲基)-6-甲基哌𠯤-2,5-二酮
向甲基N
-[(苄基氧基)羰基]-D
-絲胺醯-D
-丙胺酸酯（38.76 g，119.5 mmol）中添加10% 鈀碳（1.925 g，9.32 mmol）、MeOH（130 ml）和環己烯（78 ml，770 mmol）。將所得混合物在回流下加熱過夜。添加甲醇（450 ml）並且將混合物在回流下攪拌1 h。將反應混合物過濾（在熱的時候）通過矽藻土，用熱甲醇（2 x 150 ml）洗滌。將濾液濃縮以給出白色固體。將固體用乙腈（170 ml）研磨，過濾，用乙腈（86 ml）洗滌並且在40°C真空乾燥1 h以給出呈白色固體的(3R
,6R
)-3-(羥基甲基)-6-甲基哌𠯤-2,5-二酮（16.09 g，85%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.32 (3H, d), 3.51 (1H, ddd), 3.67 - 3.78 (2H, m), 3.81 (1H, dddd), 5.05 (1H, t), 7.83 (1H, s), 8.08 (1H, s)。
[(2S
,5R
)-5-甲基哌𠯤-2-基]甲醇 二鹽酸鹽
向(3R
,6R
)-3-(羥基甲基)-6-甲基哌𠯤-2,5-二酮（14.77 g，93.39 mmol）中添加硼烷-THF複合物（1M在THF中）（700 ml，700 mmol），伴隨緩慢的冷卻。在添加時，將混合物升溫至rt並且然後在回流下加熱18 h。將反應混合物升溫至rt並且然後在冰浴中冷卻。逐滴添加MeOH（185 ml），隨後逐滴添加水性5 M HCl（49 ml，250 mmol）。在添加時，將混合物在70°C加熱2 h。允許反應冷卻至rt然後在冰浴中冷卻。在燒瓶壁上形成了膠狀物。將溶劑傾析出來，留下一種膠狀物，其用THF（100 ml）刮下。將THF傾析出來並且將所得的膠狀物與甲苯共沸（3 x100 ml）以得到呈無色半固體的[(2S
,5R
)-5-甲基哌𠯤-2-基]甲醇 二鹽酸鹽（9.88 g，52%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 30°C) 1.40 (3H, d), 3.14 (1H, dd), 3.26 (1H, dd), 3.32 - 3.39 (2H, m), 3.55 - 3.61 (1H, m), 3.69 - 3.76 (2H, m), 3.92 (1H, dd), 5.59 (1H, s), 9.97 (4H, d)。
三級丁基 (2R
,5S
)-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯
將[(2S
,5R
)-5-甲基哌𠯤-2-基]甲醇 二鹽酸鹽（9.88 g，48.64 mmol）懸浮在甲醇（50 ml）中並且在冰浴中冷卻。添加三乙胺（21.02 ml，150.8 mmol）並且然後經30 min逐滴添加在甲醇（75 ml）中的二碳酸二三級丁酯（25.5 g，117 mmol）的溶液。將溶液在冰浴中攪拌30 min，然後升溫至rt並且然後在50°C加熱18 h。將反應混合物在真空中濃縮。將所得的殘餘物溶解在乙醇（200 ml）中並且添加水性1.5 M KOH（162 ml，243 mmol）。將溶液在100°C加熱過夜。將混合物冷卻至rt並且使用水性1 M HCl（約150 ml）調節至pH 10。將溶液用氯仿（3 x 200 ml）萃取並且將合併的有機物乾燥（MgSO4
），過濾並且在真空中濃縮以給出呈無色油狀物的三級丁基 (2R
,5S
)-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（9.5 g，85%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.20 (3H, d), 1.46 (9H, s), 2.00 (2H, d), 2.75 (2H, dd), 2.83 (1H, dd), 2.96 (1H, dd), 3.45 - 3.54 (1H, m), 3.62 - 3.7 (1H, m), 3.77 (1H, s), 4.18 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 321。
三級丁基 (2R
,5S
)-5-{[(7-溴-8-氟-4-側氧基-3,4-二氫喹唑啉-5-基)氧基]甲基}-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯
在rt，用分子篩（10 g）將氫化鈉（在礦物油中的60%分散體，3.3 g，82.55 mmol）分批添加至三級丁基 (2R
,5S
)-5-(羥基甲基)-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（8.45 g，36.7 mmol）和7-溴-5,8-二氟喹唑啉-4(3H
)-酮（9.58 g，36.7 mmol）在THF（340 ml）中的攪拌的懸浮液中。將所得懸浮液攪拌15 min並且然後在65°C攪拌4 h。允許反應冷卻至rt然後用水（50 ml）淬滅。通過矽藻土藉由過濾去除分子篩並且用二***（100 ml）洗滌濾餅。將合併的濾液在真空中濃縮。將所得殘餘物用水稀釋並且將pH用水性2M HCl調節至pH 8。將水溶液用EtOAc（2 X 200 ml）萃取。將合併的萃取物乾燥（MgSO4
）並且濃縮以得到呈淡棕色泡沫的三級丁基 (2R
,5S
)-5-{[(7-溴-8-氟-4-側氧基-3,4-二氫喹唑啉-5-基)氧基]甲基}-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（20.88 g，＞ 100%）。m/z
: ES+ [M+H]+ 471。
三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在0°C，將2,3,4,6,7,8,9,10-八氫嘧啶并[1,2-a]氮呯（15.33 ml，102.5 mmol）緩慢添加至三級丁基 (2R
,5S
)-5-{[(7-溴-8-氟-4-側氧基-3,4-二氫喹唑啉-5-基)氧基]甲基}-2-甲基哌𠯤-1-甲酸酯（19.32 g，40.99 mmol）和((1H
-苯并[d
][1,2,3]***-1-基)氧基)三(吡咯啶-1-基)六氟磷酸鏻(V)（27.7 g，53.3 mmol）在乙腈（400 ml）中的攪拌溶液中。將所得溶液在0°C攪拌15 min並且然後在rt攪拌16 h。將反應混合物濃縮並且用EtOAc（500 ml）稀釋並且依次用2M水性Na2
CO3
（300 ml）和鹽水（150 ml）洗滌。將有機層乾燥（MgSO4
），過濾並蒸發以得到粗產物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在庚烷中0至80% EtOAc）純化以給出呈白色固體的三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（6.59 g，36%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.11 (3H, d), 1.49 (9H, s), 3.18 - 3.4 (2H, m), 3.75 (1H, d), 4.11 (1H, s), 4.34 (3H, d), 5.03 (1H, d), 7.16 (1H, d), 8.63 (1H, s)。m/z
: ES-
[M-H]-
453。
三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-6-氯-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
在rt，將N-氯代琥珀醯亞胺（0.551 g，4.13 mmol）添加至三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
] 喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.7 g，3.75 mmol）在DMF（15 ml）中的攪拌的懸浮液中。將所得懸浮液在70°C攪拌3 h。允許反應混合物冷卻至rt並且將懸浮液用水（57 ml）稀釋，藉由過濾收集，用水（19 ml）洗滌並且在50°C真空乾燥16 h以得到呈黃色固體的三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-6-氯-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.67 g，91%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.13 (3H, s), 1.50 (9H, s), 3.35 (2H, d), 3.81 (1H, s), 4.04 (1H, d), 4.44 (3H, dd), 4.95 (1H, s), 8.64 (1H, s)。m/z
: ES+ [M+H]+ 487。
[(8aS
,11R
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸
將與二氯甲烷錯合的[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)（252 mg，0.31 mmol）、雙(頻哪醇合)二硼（2353 mg，9.27 mmol）和乙酸鉀（606 mg，6.18 mmol）添加至三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.4 g，3.09 mmol）在二㗁𠮿（45 ml）中的攪拌且脫氣的溶液中。將所得混合物在90°C攪拌17 h。將反應混合物允許冷卻，蒸發並且在EtOAc（125 ml）和水（75 ml）之間分配，將有機層分離，用鹽水（50 ml）洗滌，乾燥（MgSO4
），過濾並蒸發以得到呈棕色油狀物的粗的[(8aS
,11R
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸（假定為3.09 mmol），其在靜置時固化。m/z ES+
[M+H]+
419。
三級丁基 (8aS
,11R
)-4-氟-11-甲基-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
合併[(8aS
,11R
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸（0.862 g，2.06 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（0.096 g，0.21 mmol）、RuPhos Pd-G3（0.172 g，0.21 mmol）、碳酸鉀（0.569 g，4.12 mmol）和4-溴-5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑（0.608 g，2.06 mmol）。添加1,4-二㗁𠮿（15 ml）和水（4.5ml）的脫氣混合物並且將反應脫氣另外的1分鐘然後在80o
C加熱2 h。將冷卻的反應混合物用EtOAc（90 ml）稀釋，用2M水性Na2
CO3
（2 x 45 ml）、鹽水（45 ml）洗滌，乾燥（MgSO4
），過濾並且將濾液在真空中濃縮。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在庚烷中的0至100% EtOAc，然後在DCM中0至8% 1M 甲醇胺）純化以給出呈棕色泡沫的三級丁基 (8aS
,11R
)-4-氟-11-甲基-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
] 喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.08 g，89%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.14 (3H, d), 1.50 (9H, d), 1.74 (3H, d), 2.09 - 2.24 (3H, m), 2.34 (3H, d), 3.34 (2H, d), 3.71 - 3.84 (2H, m), 4.02 - 4.24 (2H, m), 4.26 - 4.52 (3H, m), 4.99 - 5.23 (1H, m), 5.44 - 5.58 (1H, m), 7.05 (1H, dt), 7.27 - 7.29 (1H, m), 7.50 (1H, dd), 7.99 (1H, t), 8.66 (1H, d). m/z (ES+), [M+H]+
589。
三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯和三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將三級丁基 (8aS
,11R
)-4-氟-11-甲基-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（1.08 g，1.83 mmol）溶解在DMF（6 ml）中然後在攪拌下添加N-氯代琥珀醯亞胺（0.294 g，2.20 mmol）。然後將反應在100°C加熱1 h然後冷卻至rt。將該等溶劑在真空中去除以得到三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
] 喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯和三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯的呈棕色膠狀物的混合物（假定為1.83 mmol），其在下一步驟中直接使用。m/z ES+
, [M+H]+
539（沒有THP基團）和m/z (ES+), [M+H]+
623（有THP基團）。
(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉
將三級丁基 (8aS,11R)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-[5-甲基-1-(㗁𠮿-2-基)-1H
-苯并咪唑-4-基]-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯和三級丁基 (8aS,11R)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯的混合物（假定為1.83 mmol）在IPA（35 ml，1.8 mmol）中的6M HCl中攪拌。將所得懸浮液在70°C攪拌2h然後將揮發物在真空中去除。將所得殘餘物藉由離子交換層析法（使用SCX柱）純化。將所希望的產物使用1M NH3
/MeOH從柱上洗脫以給出呈棕色泡沫的(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉（801 mg，100%）。m/z ES-
[M-H]-
437。
1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮（阻轉異構物1，實例46；阻轉異構物2，實例47）
在rt在攪拌下，將(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉（400 mg，0.91 mmol）溶解在DCM（12 ml）和IPA（2.5 ml）中，然後添加三乙胺（0.127 ml，0.91 mmol）。將溶液在-78o
C冷卻然後經5 min逐滴添加丙烯醯氯（0.078 ml，0.96 mmol）。將反應在rt攪拌5 min然將DCM在真空中去除並且將所得混合物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18 ODB柱，5µ 二氧化矽，30 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有0.1% 甲酸）和MeCN（10%至30%梯度）的混合物）純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發至接近乾燥。將所得溶液約5 ml用2M水性K2
CO3
（20 ml）處理並且用DCM（3 X 20 ml）萃取。將合併的萃取物用水（10 ml）和鹽水（10 ml）洗滌，通過相分離柱並且蒸發至乾燥以得到灰白色玻璃狀固體。將該固體使用SFC（柱：Chiralpak OD，20 x 250 mm，5 µm，流動相：45% MeOH +
0.1% NH3
/55% scCO2
，流速：60 ml/min，120巴，柱溫度：40o
C）分離以給出呈白色固體的1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]丙-2-烯-1-酮的阻轉異構物1（實例46，26mg，12%，d.e.99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 100°C) 1.21 (3H, d), 2.20 (3H, s), 3.25 - 3.6 (2H, m), 3.99 - 4.13 (1H, m), 4.22 - 4.46 (1H, m), 4.59 - 4.78 (3H, m), 4.99 (1H, d), 5.72 (1H, dd), 6.16 (1H, dd), 6.74 - 6.9 (1H, m), 7.22 (1H, d), 7.49 - 7.7 (1H, m), 8.02 (1H, s), 8.61 (1H, s), 11.47 - 12.41 (1H, m). m/z (ES+), [M+H]+
493, 495。在此之後得到1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H)-基]丙-2-烯-1-酮的阻轉異構物2（實例47，11 mg，4%，d.e. 99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 100°C) 1.21 (3H, d), 2.20 (3H, s), 3.25-3.6 (2H, m), 3.99-4.13 (1H, m), 4.22-4.46 (1H, m), 4.59-4.78 (3H, m), 4.99 (1H, d), 5.72 (1H, dd), 6.16 (1H, dd), 6.74-6.9 (1H, m), 7.22 (1H, d), 7.49-7.7 (1H, m), 8.02 (1H, s), 8.61 (1H, s), 11.47-12.41 (1H, m)。m/z (ES+), [M+H]+
493, 495。
三級丁基 (8aS
,11R
)-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
合併RuPhos Pd G3（110 mg，0.13 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（61.6 mg，0.13 mmol）、碳酸鉀（365 mg，2.64 mmol）、8-溴-1-甲氧基-7-甲基異喹啉（333 mg，1.32 mmol）和[(8aS
,11R
)-10-(三級丁氧基羰基)-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]硼酸（552 mg，1.32 mmol）並且然後添加脫氣二㗁𠮿（15 ml）和脫氣水（4.5 ml）。將所得混合物在80°C攪拌2 h。允許反應混合物冷卻然後用EtOAc（125 ml）稀釋，用水（50 ml）和鹽水（25 ml）洗滌，然後將水層用EtOAc（75 ml）再萃取。將有機萃取物合併，乾燥（MgSO4
），過濾並蒸發以得到粗產物。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法（在庚烷中的0至70% EtOAc）純化以給出呈棕色泡沫的三級丁基 (8aS
,11R
)-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
] 喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（890 mg，＞ 100%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.18 (3H, s), 1.57 (9H, s), 2.22 (3H, s), 3.21 - 3.46 (2H, m), 3.55 (3H, d), 3.83 (1H, s), 4 - 4.19 (1H, m), 4.24 - 4.62 (3H, m), 4.92 - 5.32 (1H, m), 6.81 (1H, d), 7.24 (1H, dd), 7.59 (1H, d), 7.74 (1H, d), 7.95 (1H, d), 8.68 (1H, s)。
三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯
將三級丁基 (8aS
,11R
)-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（720 mg，1.32 mmol）溶解在DMF（4.5 ml）中然後在攪拌下添加N-氯代琥珀醯亞胺（176 mg，1.32 mmol）。然後將反應在110°C加熱30 min。添加另外的N-氯代琥珀醯亞胺（70 mg，0.52 mmol）並且將反應在110°C攪拌0.5h。許反應混合物冷卻然後藉由反相層析法（150 g C18 RF GOLD）（用在水（具有甲酸 0.1%作為改性劑）中的40-80% MeCN梯度洗脫）純化以給出淺褐色泡沫。將該固體溶解在MeOH中並且使用SFC（柱：Chiralpak IC，20 x 250 mm，5 µm，流動相：45% MeOH +
0.1% NH3
/65% scCO2
，流速：60 ml/min，120巴，柱溫度：40°C）分離。這給出了呈淺褐色泡沫的三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物1（82 mg，21%，d.e. 98.4%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.21 (3H, d), 1.51 (9H, s), 2.19 (3H, s), 3.35 (2H, d), 3.56 (3H, s), 3.81 - 4.42 (3H, m), 4.45 - 4.71 (2H, m), 4.97 - 5.26 (1H, m), 7.26 - 7.28 (1H, m), 7.63 (1H, d), 7.78 (1H, d), 7.96 (1H, d), 8.65 - 8.71 (1H, m)。m/z (ES+), [M+H]+
580, 582。在此之後得到呈淺褐色泡沫的三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物2（100 mg，26%，d.e. 99%）。1
H NMR (400 MHz, CDCl3
, 30°C) 1.14 - 1.28 (3H, m), 1.51 (9H, s), 2.20 (3H, s), 3.33 (2H, s), 3.55 (3H, s), 3.82 - 4.41 (3H, m), 4.45 - 4.61 (2H, m), 4.94 (1H, d), 7.27 (1H, s), 7.63 (1H, d), 7.78 (1H, d), 7.96 (1H, d), 8.68 (1H, s)。m/z (ES+), [M+H]+
580, 582。
8-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮（阻轉異構物1）
在微波反應器中，在120°C，攪拌三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物1（82 mg，0.14 mmol）、氯化鋰（30 mg，0.71 mmol）、4-甲基苯磺酸水合物（134 mg，0.71 mmol）和無水DMF（2.6 ml）的混合物30 min。將粗產物藉由離子交換層析法（使用載入MeOH的SCX柱）純化。將柱使用1M NH3
/MeOH洗脫以得到呈灰白色固體的8-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 阻轉異構物1（72 mg，＞ 100%）。1
H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 1.21 (3H, d), 2.11 (3H, s), 2.94-2.99 (1H, m), 3.48-3.59 (1H, m), 4.03 (1H, dq), 4.55 (2H, dd), 4.87 (2H, dd), 6.68 (1H, d), 7.11 (1H, d), 7.64-7.75 (2H, m), 8.46 (1H, s)。m/z (ES+), [M+H]+
466, 468。
8-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮（阻轉異構物2）
從三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-5-(1-甲氧基-7-甲基異喹啉-8-基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物2開始，以類似於相應的阻轉異構物的方式製備標題化合物。分離出呈灰白色固體的標題化合物（84 mg，＞ 100%）。1
H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 1.22 (3H, d), 2.12 (3H, s), 2.95 (1H, dd), 3.38 - 3.49 (1H, m), 4.02 (1H, dq), 4.38 - 4.63 (2H, m), 4.99 (1H, dd), 6.67 (1H, d), 7.10 (1H, d), 7.65 - 7.76 (2H, m), 8.46 (1H, s)。m/z ES+
, [M+H]+
466。
8-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 （阻轉異構物1，實例48）
在rt在攪拌下，將8-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 阻轉異構物1（65.2 mg，0.14 mmol）溶解在DCM（5 ml）和IPA（1 ml）中，然後添加三乙胺（0.02 ml，0.14 mmol）。將溶液在-78o
C冷卻，然後經5 min逐滴添加丙烯醯氯（0.012 ml，0.15 mmol）。允許反應混合物升溫至rt，用DCM（20 ml）稀釋並且用水（20 ml）洗滌。將有機層乾燥（相分離器）並且真空濃縮。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18柱，5μ 二氧化矽，30 x 100 mm）（使用水（含有1% NH3
）和MeCN（25%至50%的梯度）作為洗脫液）純化。這給出了呈灰白色固體的8-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 阻轉異構物1（實例48，37 mg，51%，d.e. 99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 100°C) 1.21 (3H, d), 2.07 (3H, s), 3.33 (1H, s), 3.50 (1H, dd), 4.03 (1H, dd), 4.32 (1H, s), 4.62 (3H, d), 5.00 (1H, dd), 5.72 (1H, dd), 6.15 (1H, dd), 6.55 (1H, d), 6.81 (1H, dd), 7.09 (1H, d), 7.66 - 7.78 (2H, m), 8.56 (1H, s), 10.55 (1H, s)。m/z ES+
, [M+H]+
520, 522。
8-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮（阻轉異構物2，實例49）
從8-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H
)-酮 阻轉異構物2開始，以類似於相應的阻轉異構物的方式製備標題化合物。分離出呈灰白色固體的標題化合物（實例49，46 mg，53%, d.e. 99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 100°C) 1.21 (3H, d), 2.08 (3H, s), 3.27 (1H, s), 3.51 (1H, dd), 3.95-4.08 (1H, m), 4.33 (1H, s), 4.63 (3H, d), 4.97 (1H, dd), 5.72 (1H, dd), 6.15 (1H, dd), 6.55 (1H, d), 6.81 (1H, dd), 7.09 (1H, d), 7.64-7.77 (2H, m), 8.56 (1H, s), 10.55 (1H, s)。m/z ES+
, [M+H]+
520, 522。
三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（阻轉異構物1和阻轉異構物2）
將(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉（1088 mg，2.48 mmol）溶解在MeOH（20 ml）中並且冷卻至0°C然後經0.5h逐滴添加二碳酸二三級丁酯（541 mg，2.48 mmol）在MeOH（20 ml）中的溶液。將溶液在0°C攪拌30 min然後允許經18 h達到rt。添加碳酸銫（808 mg，2.48 mmol）並且將反應在rt攪拌30 min。將該等溶劑在真空中去除並且將所得殘餘物在EtOAc（50 ml）和水（20 ml）之間分配。將各層分離並且將水相用EtOAc（2 x 50 ml）萃取。將合併的有機相乾燥（相分離器）並且在真空中濃縮。將粗材料用REDISEP GOLD 150 g C18柱，使用水（含有0.1% 甲酸）和MeCN（梯度 15%-55%）純化。將含有所希望的化合物的級分蒸發以去除乙腈。將所得的乳液（150 ml）用K2
CO3
（50 ml）的2M水性溶液處理然後將混合物用EtOAc（130 ml x 3）萃取。將合併的有機萃取物乾燥（相分離器）並且在真空中蒸發以得到呈黃色膠狀物的三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯。將該固體溶解在MeOH中並且使用SFC（柱：Phenomenex C2，20 x 250 mm，5 µm，流動相：45% MeOH + 0.1% NH3
/55% scCO2
，流速：60 ml/min，120巴，柱溫度：40°C）分離以給出呈灰白色固體的三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物1（145 mg，21%，d.e.99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 100°C) 1.15 (3H, d), 1.48 (9H, s), 2.19 (3H, s), 3.28 (1H, t), 3.51 (1H, dd), 3.96 - 4.08 (2H, m), 4.28 - 4.4 (1H, m), 4.54 - 4.72 (2H, m), 4.88 - 4.99 (1H, m), 7.22 (1H, d), 7.60 (1H, d), 8.02 (1H, s), 8.59 (1H, s)。m/z ES+
, [M+H]+
539, 541。在此之後得到呈灰白色固體的三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物2（267 mg，40%，d.e. 99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 100°C) 1.14 (3H, d), 1.48 (9H, s), 2.21 (3H, s), 3.21 - 3.38 (1H, m), 3.43 - 3.57 (1H, m), 3.91 - 4.13 (2H, m), 4.27 - 4.38 (1H, m), 4.64 (2H, d), 4.93 (1H, dd), 7.22 (1H, d), 7.59 (1H, s), 8.01 (1H, s), 8.59 (1H, s)。m/z (ES+), [M+H]+
539, 541。
(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉（阻轉異構物1）
向三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物1（145 mg，0.27 mmol）在DCM（5 ml）中的溶液中添加TFA（1.13 ml，14.8 mmol）並且將反應混合物攪拌2 h然後將溶劑蒸發。將殘餘物溶解在甲醇中並且施加至用甲醇充分洗滌的SCX柱上。將產物使用氨在甲醇中的1M溶液洗脫。將溶劑蒸發以得到呈灰白色固體的(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 阻轉異構物1（108 mg，91%）。1
H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 1.21 (3H, d), 2.22 (3H, s), 2.98 (1H, dd), 3.32 - 3.34 (1H, m), 3.51 (1H, dd), 4.04 (1H, dq), 4.49 - 4.62 (2H, m), 4.93 (2H, dd), 7.29 (1H, d), 7.62 (1H, d), 8.06 (1H, s), 8.50 (1H, s)。m/z (ES+), [M+H]+
439, 441。
(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉（阻轉異構物2）
從三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物2開始，以類似於相應的阻轉異構物的方式製備標題化合物。分離出呈灰白色固體的標題化合物（187 mg，86%）。1
H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 1.19 (3H, d), 2.24 (3H, s), 2.86 - 3.04 (1H, m), 3.22 - 3.29 (1H, m), 3.46 - 3.54 (1H, m), 3.96 - 4.1 (1H, m), 4.54 (2H, d), 4.95 (2H, dd), 7.28 (1H, d), 7.62 (1H, d), 8.03 (1H, s), 8.50 (1H, s)。m/z (ES+), [M+H]+
439, 441。
(2E
)-1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮（阻轉異構物1，實例50）
在rt，將DIPEA（129 µl，0.74 mmol）添加至(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 阻轉異構物1（108 mg，0.25 mmol）、O-(7-氮雜苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽（112 mg，0.30 mmol）和(E
)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸.HCl鹽（44.8 mg，0.27 mmol）在DMA（1.1 ml）中的混合物中。將所得溶液在rt攪拌1 h。將反應混合物傾倒入水（10 ml）中，萃取到EtOAc（3 x 20 ml）中，將有機萃取物乾燥（相分離器）並且在真空中濃縮以給出粗產物。將該粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18柱，5 µ 二氧化矽，50 mm直徑，100 mm長度）（使用水（含有0.1% NH3
）和MeCN（25%-55%梯度）作為洗脫液）純化。這給出了呈灰白色固體的(2E
)-1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 阻轉異構物1（實例50，42 mg，31%，d.e.99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 100°C) 1.20 (3H, d), 2.20 (3H, s), 2.22 (6H, s), 3.09 (2H, d), 3.33 - 3.48 (1H, m), 3.54 (1H, d), 4.03 (1H, s), 4.23 - 4.45 (1H, m), 4.56 - 4.8 (3H, m), 4.98 (1H, dd), 6.54 - 6.81 (2H, m), 7.22 (1H, d), 7.60 (1H, d), 8.02 (1H, s), 8.60 (1H, s), 12.02 (1H, s)。m/z ES+
, [M+H]+
550, 552。
(2E
)-1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮（阻轉異構物2，實例51）
從(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-苯并咪唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 阻轉異構物2開始，以類似於相應的阻轉異構物的方式製備標題化合物。分離出呈灰白色固體的標題化合物（實例51，63 mg，27%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 100°C) 1.19 (3H, d), 2.21 (3H, s), 2.22 (6H, s), 3.09 (2H, d), 3.29 - 3.59 (2H, m), 3.89 - 4.11 (1H, m), 4.37 (1H, s), 4.52 - 4.77 (3H, m), 4.96 (1H, d), 6.48 - 6.78 (2H, m), 7.23 (1H, d), 7.60 (1H, s), 8.01 (1H, s), 8.60 (1H, s), 12.15 (1H, s)。m/z ES+
, [M+H]+
550, 552。
三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（阻轉異構物1和阻轉異構物2）
在反應管中合併三級丁基 (8aS
,11R
)-5-溴-6-氯-4-氟-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯（0.4 g，0.82 mmol）、二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（0.038 g，0.08 mmol）、RuPhos Pd G3（0.069 g，0.08 mmol）、碳酸鉀（0.340 g，2.46 mmol）、(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)硼酸（173 mg，0.98 mmol）和二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（0.038 g，0.08 mmol）。添加二㗁𠮿（9.14 ml）和水（3.04 ml）的脫氣混合物並且將反應脫氣另外的1分鐘然後在80°C加熱0.5 h。允許反應冷卻至rt，脫氣10 min然後添加另外的二環己基(2',6'-二異丙氧基-[1,1'-聯苯基]-2-基)磷烷（38 mg，0.08 mmol）、RuPhos Pd-G3（0.069 g，0.08 mmol）和(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)硼酸（144 mg，0.82 mmol）。將反應在80°C攪拌20 min。允許反應混合物冷卻至rt。添加EtOAc（30 ml）並且將全部用水（2 x 20 ml）洗滌。將合併的水溶液用EtOAc（30 ml）萃取。將合併的有機部分用鹽水（30 ml）洗滌，乾燥（MgSO4
）並且在真空中濃縮以得到橙色殘餘物。將該殘餘物藉由快速二氧化矽層析法（在庚烷中0-100% EtOAc）純化。這給出了殘餘物，其使用SFC（柱：Chiralpak OD，20 x 250 mm，5 µm，流動相：30% MeOH +
0.1% NH3
/70% scCO2
，流速：60 ml/min，120巴，柱溫度：40°C）分離。這給出了呈灰白色固體的三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物1（104 mg，46%，d.e. 99%）。1
H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 1.14-1.26 (3H, m), 1.51 (9H, s), 2.22 (3H, s), 3.38-3.57 (2H, m), 3.96-4.06 (1H, m), 4.06-4.15 (1H, m), 4.43 (1H, s), 4.59-4.68 (2H, m), 5.08-5.33 (1H, m), 7.42 (1H, d), 7.52 (1H, s), 7.58 (1H, d), 8.55 (1H, s)。m/z (ES+), [M+H]+
539, 541。在此之後得到呈灰白色固體的三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 -10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物2（101 mg，44%，d.e. 99%）。1
H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 1.09-1.22 (3H, m), 1.51 (9H, s), 2.21 (3H, s), 3.36-3.57 (2H, m), 3.93-4.04 (1H, m), 4.04-4.17 (1H, m), 4.42 (1H, s), 4.64 (2H, d), 5.15 (1H, dd), 7.42 (1H, d), 7.54 (1H, s), 7.58 (1H, d), 8.55 (1H, s)。m/z ES+
, [M+H]+
539, 541。
(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉（阻轉異構物1）
向三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物1（104 mg，0.19 mmol）在DCM（4 ml）中的溶液中添加TFA（0.813 ml，10.6 mmol）並且將反應混合物攪拌2 h然後將溶劑蒸發。將殘餘物使用SCX柱純化，使用氨在甲醇中的1M溶液洗脫產物。這給出了呈灰白色固體的(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 阻轉異構物1（83 mg，98%）。1
H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 1.23 (3H, d), 2.21 (3H, s), 2.99 (1H, dd), 3.35-3.41 (2H, m), 3.51 (1H, dd), 4.07 (1H, dq), 4.57 (2H, d), 4.96 (1H, dd), 7.41 (1H, d), 7.53 (1H, s), 7.58 (1H, d), 8.52 (1H, s)。m/z (ES+), [M+H]+
441。
(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉（阻轉異構物2）
從三級丁基 (8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-甲酸酯 阻轉異構物2開始，以類似於相應的阻轉異構物的方式製備標題化合物。分離出呈灰白色固體的標題化合物（86 mg，＞ 100%）。1
H NMR (400 MHz, MeOD, 30°C) 1.22 (3H, d), 2.21 (3H, s), 2.99 (1H, dd), 3.35-3.41 (2H, m), 3.49-3.57 (1H, m), 4.03-4.14 (1H, m), 4.58 (2H, d), 4.93 (1H, dd), 7.41 (1H, d), 7.53 (1H, s), 7.58 (1H, d), 8.52 (1H, s)。m/z (ES+), [M+H]+
441。
(2E
)-1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮（阻轉異構物1，實例52）
在RT，將DIPEA（99 µl，0.57 mmol）一次性添加至在DMA（0.85 ml）中的(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
] 喹唑啉 阻轉異構物1（83 mg，0.19 mmol）、O-(7-氮雜苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽（86 mg，0.23 mmol）和(E
)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸.HCl鹽（34.5 mg，0.21 mmol）中。將所得溶液在rt攪拌1 h。將反應混合物傾倒入水（10 ml）中，萃取到EtOAc（3 x 20 ml）中，乾燥（相分離器）並且在真空中濃縮。將粗產物藉由製備型HPLC（沃特斯XSelect CSH C18柱，5µ 二氧化矽，50 x 100）（使用水（含有0.1% NH3
）和MeCN（25%-55%梯度）作為洗脫液）純化。這給出了呈灰白色固體的(2E
)-1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮 阻轉異構物1（實例52，48 mg，46%，d.e. 99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 100°C) 1.21 (3H, d), 2.19 (3H, s), 2.22 (6H, s), 3.09 (2H, d), 3.55 (2H, dd), 4.05 (1H, dd), 4.36 (1H, s), 4.68 (3H, d), 4.98 (1H, dd), 6.47-6.79 (2H, m), 7.38 (1H, d), 7.45-7.71 (2H, m), 8.60 (1H, s), 12.86 (1H, s)。m/z (ES+), [M+H]+
550, 552。
(2E
)-1-[(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉-10(8H
)-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮（阻轉異構物2，實例53）
從(8aS
,11R
)-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H
-吲唑-4-基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de
]喹唑啉 阻轉異構物2開始，以類似於相應的阻轉異構物的方式製備標題化合物。分離出呈灰白色固體的標題化合物（實例53，45 mg，42%，d.e. 99%）。1
H NMR (400 MHz, DMSO, 100°C) 1.20 (3H, d), 2.18 (3H, s), 2.22 (6H, s), 3.09 (2H, d), 3.37 (1H, s), 3.57 (1H, dd), 4-4.12 (1H, m), 4.35 (1H, s), 4.59-4.76 (3H, m), 4.95 (1H, dd), 6.56-6.75 (2H, m), 7.38 (1H, d), 7.47-7.65 (2H, m), 8.60 (1H, s), 12.87 (1H, s)。m/z ES+
, [M+H]+
550, 552。
無
無
無
Claims (19)
- 一種具有式 (I) 之化合物：其中： 環A選自苯基和雙環雜芳基； R1 在每次出現時獨立地選自C1-4 烷基、鹵素、羥基、C1-4 烷氧基、C1-3 氟烷基、C1-3 氟烷氧基、氰基和乙炔基； b係0、1、2或3； Y係CH2 或CH2 CH2 ； R2 係氰基、鹵素、C1-4 烷基、C1-4 烷氧基或C1-3 氟烷基； R3 係F、Me、Et、MeO或C1-2 氟烷基； R4 係H或Me； R5 係H或Me； R6 係H或CH2 NMe2 ； 或其藥學上可接受的鹽，其條件係當Y係CH2 ，R2 係Cl，R3 係F，A係苯基，b係2，該等基團R1 係F和OH並且各自是聯芳基鍵的鄰位時，並且當R4 和R6 均為H時，那麼R5 係Me。
- 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其具有以下結構：
- 如申請專利範圍第1或2項所述之化合物，其中該環A選自由以下組成之群組：
- 如申請專利範圍第1-3項中任一項所述之化合物，其中該基團R4 係H。
- 如申請專利範圍第1-4項中任一項所述之化合物，其中該基團R6 係H。
- 如申請專利範圍第1-5項中任一項所述之化合物，其中該基團Y係CH2 。
- 如申請專利範圍第1-5項中任一項所述之化合物，其中該基團Y係CH2 CH2 。
- 如任一前述申請專利範圍所述之化合物，其中R2 係Cl。
- 如任一前述申請專利範圍所述之化合物，其中R3 係F。
- 如任一前述申請專利範圍所述之化合物，其中R4 係H並且R5 係Me。
- 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其選自： 7-[(8aS )-10-丙烯醯基-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基-2,3-二氫-1H -異吲哚-1-酮； 1-[(8aS ,11S )-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H )-基]丙-2-烯-1-酮； 1-[(8aS ,11R )-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-11-甲基-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]丙-2-烯-1-酮； 5-[(8aS )-10-丙烯醯基-6-氯-4-氟-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并 [5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-6-甲基喹唑啉-4(3H )-酮； 1-[(8aS )-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H -苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]丙-2-烯-1-酮； 8-[(8aS )-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-5-基]異喹啉-1(2H )-酮； 1-[(8aS )-6-氯-4-氟-5-(1H -吲唑-3-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]丙-2-烯-1-酮； 1-[(8aS )-6-氯-4-氟-5-(2-羥基-6-甲基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]丙-2-烯-1-酮； (2E )-1-[(8aS)-6-氯-4-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮； 8-[(8aS )-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4] 氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H )-酮； 1-[(8aS )-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H -苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H )-基]丙-2-烯-1-酮； 1-((8aS)-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基)丙-2-烯-1-酮； 1-[(8aS )-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H -吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]丙-2-烯-1-酮； 1-((8aS )-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1-甲基-1H -苯并[d]咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de]喹唑啉-10(8H)-基)丙-2-烯-1-酮； 1-[(8aS )-6-氯-4-氟-5-(5-氟-1H -苯并***-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]丙-2-烯-1-酮； 8-[(8aS )-6-氯-4-氟-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-5-基]-7-氟異喹啉-1(2H )-酮；和(2E )-1-[(8aS )-6-氯-4-氟-5-(5-甲基-1H -吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮； 1-[(6aR,9S)-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H-吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮； 1-[(6aR ,9S )-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H -吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de ]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮； 8-[3-氯-1-氟-8-(丙-2-烯醯基)-6,6a,7,8,9,10-六氫-5H -吡𠯤并[1',2':5,6][1,5] 氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de ]喹唑啉-2-基]-7-甲基異喹啉-1(2H )-酮； 1-[(6aS ,9R )-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H -吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de ]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮； 1-[(6aR ,9R )-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H -吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de ]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮； 1-[(6aS ,9S )-3-氯-1-氟-2-(2-氟-6-羥基苯基)-9-甲基-5,6,6a,7,9,10-六氫-8H -吡𠯤并[1',2':5,6][1,5]氧氮雜環辛烷并[4,3,2-de ]喹唑啉-8-基]丙-2-烯-1-酮； 1-[(8aS )-4-氯-6-氟-5-(2-氟-6-羥基苯基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4] [1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]丙-2-烯-1-酮； 1-[(8aS ,11R )-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H -苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]丙-2-烯-1-酮； 8-[(8aS ,11R )-6-氯-4-氟-11-甲基-10-(丙-2-烯醯基)-8,8a,9,10,11,12-六氫吡𠯤并 [2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-5-基]-7-甲基異喹啉-1(2H )-酮； (2E )-1-[(8aS ,11R )-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H -苯并咪唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮；和 (2E )-1-[(8aS ,11R )-6-氯-4-氟-11-甲基-5-(5-甲基-1H -吲唑-4-基)-8a,9,11,12-四氫吡𠯤并[2',1':3,4][1,4]氧氮呯并[5,6,7-de ]喹唑啉-10(8H )-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮； 或其藥學上可接受的鹽。
- 如申請專利範圍第1-11項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於用作藥物。
- 如申請專利範圍第12項所述使用的化合物、或其藥學上可接受的鹽，用於治療由KRAS、NRAS或HRAS G12C突變介導的障礙。
- 如申請專利範圍第12項或申請專利範圍第13項所述使用的化合物、或其藥學上可接受的鹽，用於治療癌症。
- 如申請專利範圍第1-11項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製造藥物，視需要其中在該藥物中用於治療由KRAS、NRAS或HRAS G12C突變介導的障礙。
- 一種治療方法，該方法包括給予有需要的患者有效量的如申請專利範圍第1-11項中任一項所述之化合物、或其藥學上可接受的鹽。
- 如申請專利範圍第16項所述之治療方法，其中該有需要的患者患有由KRAS、NRAS或HRAS G12C突變介導的障礙。
- 如申請專利範圍第16項或申請專利範圍第17項所述之治療方法，其中該有需要的患者患有癌症。
- 一種藥物組成物，該藥物組成物包含如申請專利範圍第1-11項中任一項所述之化合物、或其藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的賦形劑。
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