KR20210135539A - 항암제로 유용한 융합 삼환식 화합물 - Google Patents

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KR20210135539A
KR20210135539A KR1020217031298A KR20217031298A KR20210135539A KR 20210135539 A KR20210135539 A KR 20210135539A KR 1020217031298 A KR1020217031298 A KR 1020217031298A KR 20217031298 A KR20217031298 A KR 20217031298A KR 20210135539 A KR20210135539 A KR 20210135539A
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마이클 스티븐 보드나척
도일 조셉 카사르
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Abstract

본 명세서는 하기 화학식 A:
[화학식 A]

Description

항암제로 유용한 융합 삼환식 화합물
본 명세서는 G12C 돌연변이 RAS 단백질을 억제하고 결과적으로 항암 활성을 나타내는 특정한 융합 삼환식 화합물 및 이의 제약상 허용가능한 염에 관한 것이다. 본 명세서는 또한 인간 또는 동물 신체의 치료 방법에서의, 예를 들어 암의 예방 또는 치료에서의 상기 융합 삼환식 화합물 및 이의 제약상 허용가능한 염의 용도에 관한 것이다. 본 명세서는 또한 상기 융합 삼환식 화합물의 제조에 관여된 공정 및 중간체 화합물 및 이를 함유하는 제약 조성물에 관한 것이다.
KRAS, NRAS 및 HRAS 유전자는 82% 내지 90%의 전반적 서열 동일성을 공유하는, Ras 단백질 또는 Ras로 본원에서 총칭되는, 밀접하게 관련된 소형 GTP아제 단백질 KRas, NRas 및 HRas의 세트를 코딩한다. Ras 단백질은 세포의 증식, 생존 및 분화를 조절하기 위해 세포-표면 수용체로부터의 신호를 전달하는 신호전달 경로의 중추적 구성요소이다. Ras는 불활성 GDP-결합 상태와 활성 GTP-결합 상태 사이를 사이클링하는 분자 스위치로 기능한다. Ras의 GDP/GTP 사이클은 GTP에 대해 GDP의 교환을 촉진하는 구아닌 뉴클레오티드 교환 인자(GEF), 예컨대 Sos1 및 Sos2, 그리고 GTP를 GDP로 가수분해하는 Ras의 내인성 GTP아제 활성을 자극하는 GTP아제 활성화 단백질(GAP), 예컨대 NF-1 및 p120RasGAP에 의해 세포에서 철저히 조절된다.
Ras 단백질은 길이가 188 내지 189개 아미노산이며, 뉴클레오티드에 결합하는 p-루프 영역, 및 조절 및 이펙터 단백질 상호작용에 중요한 스위치 I 및 스위치 II 영역을 함유하는 고도 보존된 N-말단 G-도메인을 갖는다. Ras 단백질의 C-말단 영역은 보다 분기성이며 번역-후 프레닐화 변형에 필요한 보존된 카르복실 말단 CAXX 박스 모티프를 포함하여 Ras와 막의 회합을 조절하는 요소를 함유한다. GTP에 결합 시, Ras의 스위치 I 및 스위치 II 영역은 그의 상호작용 및 이펙터 단백질의 활성화를 가능하게 하는 구조 변화를 거쳐 하류 신호전달 경로를 조절한다. Ras의 가장 잘 특징화된 이펙터는 미토겐-활성화 단백질 키나아제(MAPK) 경로의 활성을 조절하는 세린/트레오닌 키나아제 Raf이다. PI3K 경로는 Ras 하류의 또 다른 중요한 이펙터 경로로, 클래스 I 포스포이노시티드 3-키나아제의 p110 촉매성 서브유닛이 Ras와 상호작용한다. RalGDS, Tiam1, PLC-ε 및 Rassf1을 포함하는 Ras의 다른 이펙터도 설명되었다(문헌[Cox, et al. Nature Reviews Drug Discovery, 2014, 13:828-851]).
RAS 돌연변이는 암에서 빈번하게 발견되며 모든 인간 암의 대략 30%가 KRAS, NRAS 또는 HRAS 유전자의 돌연변이를 갖는다. 종양형성 Ras는 배타적으로는 아니지만 전형적으로 Ras의 글리신 12, 글리신 13 또는 글루타민 61에서의 돌연변이와 연관된다. 이들 잔기는 Ras의 활성 부위에 위치하며 돌연변이는 내인성 및/또는 GAP-촉매 GTP아제 활성을 손상시켜 GTP 결합된 Ras의 형성 및 하류 이펙터 경로의 비정상적 활성화를 돕는다. KRAS는 암에서 가장 빈번하게 돌연변이된 RAS 유전자이며, NRAS에 이어 HRAS가 뒤따른다. 췌장암(약 90% 유병률), 결장직장암(약 40% 유병률) 및 비-소세포 폐암(약 30% 유병률)을 포함하여, KRAS의 높은 빈도의 활성화 돌연변이를 나타내는 몇몇 종양 유형이 존재한다. KRAS 돌연변이는 다발성 골수종, 자궁암, 담관암, 위암, 방광암, 미만성 대형 B 세포 림프종, 횡문근육종, 피부 편평상피세포 암종, 자궁경부암, 고환 배아 세포 암 등을 포함하는 다른 암 유형에서도 발견된다.
Ras의 잔기 12에서 글리신에서 시스테인으로의 돌연변이(G12C 돌연변이)는 코돈 12에서 G.C에서 T.A로의 염기 전환(암 유형 전체에 걸쳐 모든 KRAS 돌연변이의 14%, 모든 NRAS 돌연변이의 2% 및 모든 HRAS 돌연변이의 2%를 차지하는 RAS 유전자에서 일반적으로 발견되는 돌연변이)으로 생성된다. G12C 돌연변이는 KRAS 돌연변이 비-소세포 폐암에서 특히 증가되어 대략 절반이 상기 돌연변이를 수반하며, 이는 담배 연기에 의해 형성되는 DNA 부가물과 연관되었다. G12C 돌연변이가 폐암과만 연관되는 것은 아니며 모든 KRAS 돌연변이 결장직장암의 8%를 포함하여 다른 RAS 돌연변이 암 유형에서도 발견된다.
현재까지, 치료적 사용을 위해 승인된 G12C 돌연변이 Ras 단백질의 억제제는 없었다. 따라서 임상적 사용에 적합한 요구되는 약학적 특성을 보유하는 G12C 돌연변이 Ras 단백질의 새로운 억제제에 대한 필요성이 존재한다. 본 명세서의 화합물은 항종양 활성을 보유하며, 악성 질환으로부터 일어나는 제어되지 않는 세포 증식을 억제하는 데 유용함이 밝혀졌다. 본 명세서의 화합물은 최소한, G12C 돌연변이 Ras 단백질의 억제제로서 작용하여 항-종양 효과를 제공한다.
본 명세서의 제1 양태에 따르면, 하기 화학식 A의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다:
[화학식 A]
Figure pct00001
여기서,
A는 페닐 또는 이환식 헤테로아릴 기이며;
X 및 Y는 이중 결합에 의해 연결되며 i) X는 CR7이고 Y는 CR8이거나, ii) X는 N이고 Y는 CR8이거나, iii) X는 CR7이고 Y는 N이거나; 또는
X 및 Y는 함께 C(O)NR9이거나; 또는
X 및 Y는 Z로 치환된 방향족 고리에 융합된 선택적 치환 5원 또는 6원 N-복소환의 인접 고리 원자이고, X 및 Y는 둘 다 C이거나 C 및 N이며;
Z는 O, NH, 또는 NMe이며;
R1은 F, Cl, Br, OH, CH2OH, OMe, CH2OMe, C1-C3알킬 및 C1-C3플루오로알킬로부터 독립적으로 선택되며;
n은 0, 1, 2 또는 3이며;
R2는 H, F, Cl, CCH, CCMe, CN, Br, C1-C3알킬, C1-C3플루오로알킬, OMe 또는 OEt이며;
R3a 및 R3b는 함께 =O이거나 R3a 및 R3b는 H이며;
R4는 H 또는 Me이며;
R5는 H 또는 Me이며;
R6은 H 또는 CH2NMe2이며;
R7 및 R8은 H, F, Cl, CCH, CC(C1-C3알킬), CCCH2NMe2, CCCH2O(C1-C3알킬), CN, Me, C1-C6알킬, OH, OMe, O(C1-C3알킬), O(C1-C3듀테로알킬), O(C1-C3플루오로알킬), O(C3-C6시클로알킬), C1-C3플루오로알킬, OCH2CH2NMe2, OCH2CH2OMe, CH2OMe, OCH2CH2N(CH2CH2)2CH, OCH2CH2N(CH2CH2)2O, OCH2CH2(2-피리딜) 또는 선택적 치환 3원, 4원, 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환으로부터 독립적으로 선택되거나; 또는
R7 및 R8은 조합되어 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환을 형성하며;
R9는 H, Me, Et, C3H7 및 C1-C3플루오로알킬로부터 선택된다.
본 명세서의 추가 양태에 따르면, 화학식 A의 화합물은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이다:
[화학식 I]
Figure pct00002
여기서,
A는 페닐 또는 이환식 헤테로아릴 기이며;
X 및 Y는 이중 결합에 의해 연결되며 i) X는 CR7이고 Y는 CR8이거나, ii) X는 N이고 Y는 CR8이거나, iii) X는 CR7이고 Y는 N이거나; 또는
X 및 Y는 함께 C(O)NR9이거나; 또는
X 및 Y는 Z로 치환된 방향족 고리에 융합된 선택적 치환 5원 또는 6원 N-복소환의 인접 고리 원자이고, X 및 Y는 둘 다 C이거나 C 및 N이며;
Z는 O, NH, 또는 NMe이며;
R1은 F, Cl, Br, OH, CH2OH, OMe, CH2OMe, C1-C3알킬, C1-C3플루오로알킬로부터 독립적으로 선택되며;
n은 0, 1, 2 또는 3이며;
R2는 H, F, Cl, CCH, CCMe, CN, Br, C1-C3알킬, C1-C3플루오로알킬, OMe 또는 OEt이며;
R3a 및 R3b는 함께 =O이거나 R3a 및 R3b는 H이며;
R4는 H 또는 Me이며;
R5는 H 또는 Me이며;
R6은 H 또는 CH2NMe2이며;
R7 및 R8은 H, F, Cl, CCH, CN, Me, OH, OMe, O(C1-C3알킬), C1-C3플루오로알킬 또는 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환으로부터 선택되거나; 또는
R7 및 R8은 조합되어 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환을 형성하며;
R9는 H, Me, Et, C3H7 및 C1-C3플루오로알킬로부터 선택된다.
추가 양태에서, 의약으로 사용하기 위한 화학식 A 또는 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 양태에서, 화학식 A 또는 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 포함하는 제약 조성물이 제공된다.
추가 양태에서, 암의 치료 방법이 제공되며, 암 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 A 또는 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 투여함으로써 암을 치료하는 방법이 제공된다.
추가 양태에서, 암의 치료에서 사용하기 위한 화학식 A 또는 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 양태에서, 약제, 예를 들어 암 치료용 약제의 제조에서 사용하기 위한 화학식 A 또는 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 양태에서, 화학식 A 또는 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 포함하는 제약 조성물 및 암의 치료에서의 그의 사용을 위한 설명서를 포함하는 키트가 제공된다.
추가 양태에서, 화학식 A 또는 화학식 I의 화합물의 제조 방법이 제공된다.
화학식 A의 화합물, 예를 들어 화학식 I의 화합물은 기 X 및 Y를 함유하는 방향족 고리가 1,4-디아제판(Z = N) 또는 1,4-옥사제판(Z = O) 모티프에 의해 피페라진에 연결된 [6,7,6]-삼환식 코어를 특징으로 한다. 또한, 페닐 및 이환식 헤테로아릴로부터 선택되는 기 A는 바이아릴 결합을 통해 기 X 및 Y를 포함하는 방향족 고리에 연결된다. 기 R1, R2 및 X의 성질에 따라 바이아릴 결합 주위의 회전은 제한되고, 결과적으로 화학식 I의 화합물은 안정한 회전장애 이성질체 형태로 존재할 수 있다. 아크릴아미드 모티프는 비-브리지헤드 피페라진 질소를 통해 삼환식 코어에 부착된다.
화학식 A의 화합물, 예를 들어 화학식 I의 화합물은, 특정 종양 세포에서 증식 및 생존의 핵심 매개체인 G12C 돌연변이 Ras 단백질의 억제로부터 유래된다고 여겨지는, 강력한 항-종양 활성을 보유함이 밝혀졌다. 더욱 상세하게는, 본 명세서의 화합물은 화학식 I의 피페라진에 부착된 아크릴아미드 모티프를 통해 G12C 돌연변이 Ras와 상호작용한 후 이에 공유 결합하는 것으로 여겨진다. G12C 돌연변이 Ras에 대한 결합에서, 본 명세서의 화합물(본원에 기술된 바와 같음)은 G12C Ras 단백질이 이의 활성, 프로-증식/프로-생존 확인에 접근하는 능력을 손상시키거나 실질적으로 제거한다.
본 명세서에 따른 화합물은 치료 효과를 전달하기 위해 인간에게 경구 투여하기에 적합할 것임을 나타내는 우수한 물리화학적 특성을 갖는다. 예를 들어, 본 명세서에 따른 화합물은, G12C 돌연변이 Ras 단백질을 억제하는 능력에 더하여, 이러한 돌연변이 형태의 Ras의 공지된 억제제와 비교할 때 우수한 용해도 프로파일 및 비교적 낮은 분자량을 갖는다. 본원에 추가로 기술된 바와 같이, 본 명세서의 화합물의 입체화학적 배열, 구체적으로 그의 회전장애 이성질체 형태는 Ras 억제 활성의 핵심 결정인자이다. 특히, 본 명세서의 화합물은 야생형 Ras에 비해 G12C 돌연변이 Ras 단백질에 대한 선택적 억제 효과를 발현한다.
본 명세서에 따른 특정 화합물은, RasG12C 억제 특성에 더하여, 혈액 뇌 장벽을 투과할 수 있음을 나타내는 물리화학적 특성, 뇌로 전이되어 뇌 전이를 형성하였거나 뇌로 전이되는 경향이 있는 RasG12C 발현 원발성 종양 환자의 치료에 특히 유리한 특성을 갖는 것으로 밝혀졌다. 전임상 연구에서는 예시적인 화학식 A의 화합물, 예를 들어 화학식 I의 화합물이 인간 P-gp 또는 BCRP의 기질이 아님이 확인되었다. 또한, 생체 내 연구는 화학식 I의 선택된 화합물이 뇌로의 양호한 분포를 나타내는 래트 Kpuu 값을 나타냄을 보여주었다. 우수한 BBB 투과 특성, 및 이에 따라 뇌로 전이되는 경향이 있는 종양의 치료 가능성은 MDR1(Pgp) 및 BCRP로 이중 형질감염된 Madin-Darby 개 신장(MDCK) 세포(MDCK_MDR1_BCRP 세포)에서 측정된 유출 비에 의해 또한 입증된다. 특히, R7 또는 R8이 에티닐(즉 -CCH) 또는 CCMe인 화합물은 우수한 혈액 뇌 장벽(BBB) 투과 특성을 갖는 것으로 입증되었으며, 예를 들어 R7 및/또는 R8이 에티닐 또는 CCMe이고 R2가 F 또는 Cl인 화합물은 우수한 BBB 투과 특성을 갖는 것으로 입증되었으며 고도 활성 RasG12C 억제제이다. CCMe 기인 R8 기를 특징으로 하는 특정 화합물은 시험관 내 분석에서 평가되는 경우 감소된 제거율을 나타낸다.
따라서, 본 출원의 화합물은 항종양제로서 가치가 있을 수 있다. 특히, 본 명세서의 화합물은 G12C 돌연변이 Ras를 발현하는 포유동물 암세포의 증식, 생존, 운동성, 파종 및 침습성의 선택적 억제제로서 가치가 있을 수 있다. G12C 돌연변이 Ras를 억제하는 능력으로 인해, 본 명세서에 따른 화합물을 이용한 대상체의 치료는 종양 성장 억제를 초래하고/하거나, 종양 퇴행을 촉발하고/하거나 전이 형성 및/또는 전이성 종양 성장을 억제할 수 있다. 특히, 본 명세서의 화합물은 고형 종양 질환의 봉쇄 및/또는 치료에서 항증식제 및 항침습제로서 가치가 있을 수 있다. 특히, 본 명세서의 화합물은 G12C 돌연변이 Ras의 억제에 민감하며 종양 세포의 증식 및 생존을 초래하는 세포-신호전달에 관여되는 종양의 예방 또는 치료에 유용할 수 있다.
따라서, 예를 들어 RasG12C 돌연변이 Ras를 발현하는 종양의 치료에서 G12C 돌연변이 Ras에 대한 선택적 억제 효과를 제공하는 방법이 또한 제공되며, 본 방법은 본원에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.
G12C 돌연변이 Ras에 결합할 수 있는 화합물이 본원에서 기술된다. 생화학적 및 세포 기반 분석법에서, 본 명세서의 화합물은 강력한 G12C 돌연변이 Ras 단백질 결합제인 것으로 나타나며 이에 따라 KRas, NRas 또는 HRas G12C 돌연변이에 의해 매개되는 장애의 치료에서, 특히 G12C 돌연변이된 KRas, NRas 또는 HRas 단백질을 발현하는 암, 예컨대 췌장암, 결장직장암, 자궁암, 담관암, 위암, 방광암, 자궁경부암, 고환 배아 세포 암 및 비-소세포 폐암 및 다발성 골수종, 미만성 대형 B 세포 림프종, 횡문근육종 및 피부 편평상피세포 암종의 치료에서 유용할 수 있다.
본 명세서는 또한 상기 화합물의 제조 방법, 이를 함유하는 제약 조성물, 치료 방법으로서 이를 필요로 하는 환자, 예를 들어 인간에게 상기 화합물을 투여하는 단계를 포함하는 치료 방법, 예를 들어 과증식성 질환, 예컨대 암을 앓는 환자의 치료에서 사용하기 위한, 약제의 제조를 위한 화학식 I의 화합물의 용도에 관한 것이다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술 용어 및 과학 용어는 본 개시내용과 관련된 분야에서 통상의 기술을 가진 자에 의해 통상적으로 이해되는 의미와 동일한 의미를 가진다. 예를 들면, 문헌[Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press]; 문헌[The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3rd ed., 1999, Academic Press]; 및 문헌[Oxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology, Revised, 2000, Oxford University Press]은 본 개시내용에 사용된 용어 중 대다수의 용어의 일반적인 사전을 숙련자에게 제공한다.
본 명세서가 보다 쉽게 이해될 수 있도록, 특정 용어가 아래에서 명시적으로 정의된다. 또한, 정의는 상세한 설명 전체에 걸쳐 적절하게 제시된다.
단위, 접두어, 및 기호는 이의 국제 단위 체계(SI) 허용 형태로 표시된다. 수치 범위는 그 범위를 한정하는 수치를 포함한다.
용어 "제약 조성물"은 활성 성분의 생물학적 활성을 허용하기 위한 형태이고, 조성물이 투여될 대상체에 허용불가능하게 독성인 추가 성분을 함유하지 않는 제제를 지칭한다. 이러한 조성물은 살균 조성물일 수 있다. 본 명세서에 따른 제약 조성물은 화학식 A의 화합물, 예를 들어 화학식 I의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및 적어도 하나의 제약상 허용가능한 부형제를 포함할 것이다.
"치료하는" 또는 "치료" 또는 "치료하기 위한" 또는 "완화하는" 또는 "완화하기 위한"과 같은 용어는 (1) 진단받은 병리적 병태 또는 장애를 치유하고/하거나, 둔화시키고/시키거나, 이의 증상을 경감시키고/시키거나 이의 진행을 중지시키는 치료적 조치 및 (2) 표적화된 병리적 병태 또는 장애를 예방하고/하거나 이의 발생을 둔화시키는 예방적 또는 방지적 조치 둘 다를 지칭한다. 따라서, 치료를 필요로 하는 대상에는 이미 장애를 갖고 있는 대상; 장애를 갖기 쉬운 대상; 및 장애가 방지되어야 하는 대상이 포함된다. 특정 양태에서, 대상체는 환자가 예를 들어 특정 유형의 암의 완전한, 부분적인 또는 일시적인 관해를 나타내는 경우, 본 발명의 방법에 따라 암에 대해 성공적으로 "치료된" 것이다.
용어 "대상체"는 특정 치료의 수령자가 되는, 인간, 비-인간 영장류, 설치류 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는 임의의 동물(예를 들어, 포유동물)을 지칭한다. 전형적으로, 용어 "대상체" 및 "환자"는 인간 대상체에 대해 본원에서 상호교환가능하게 이용된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "알킬"은 특정한 수의 탄소 원자를 갖는 직쇄 및 분지쇄 포화 탄화수소 라디칼 둘 모두를 지칭한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 듀테로알킬은 하나 이상의 수소, 선택적으로 모든 수소가 중수소 원자로 대체된 알킬 기를 지칭한다. 시클로알킬이라는 용어는 포화 탄소환을 지칭한다.
아세틸레닐이라는 용어는 에티닐 라디칼, 즉 -CCH 기를 지칭한다.
본 명세서에서, x 및 y가 정수인 Cx-Cy 등과 같은 용어에서 사용되는 접두어 Cx-Cy는 기에 존재하는 탄소 원자의 수치 범위를 나타낸다. 예를 들어, C1-C4 알킬은 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, i-부틸 및 t-부틸을 포함하는 한편, C1-C3 알킬 기의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 및 i-프로필을 포함한다. C1-C4 알콕시 기는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, i-프로폭시, n-부톡시, sec-부톡시 및 t-부톡시를 포함한다. C1-C3 알콕시 기의 예는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시 및 i-프로폭시를 포함한다. C1-C3 플루오로알킬 기의 예는 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 1,1-디플루오로에틸 및 2,2,2-트리플루오로에틸을 포함한다. C1-C3 플루오로알콕시 기의 예는 플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, 트리플루오로메톡시 및 2,2,2-트리플루오로에톡시를 포함한다. -O(C1-C3듀테리오알킬) 기는 부분적으로 또는 완전히 중수소화된 O-메틸, O-에틸 또는 O-n-프로필 또는 O-i-프로필 기이다. C3-C6시클로알킬 기는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 또는 시클로헥실 기를 지칭한다. 2-피리딜 기는 피리딘 N-원자에 대해 메타 위치에서 결합에 의해 부착되는 피리딘 고리, 즉 기
Figure pct00003
이다.
구체적으로 언급되지 않는 한, 원자 또는 기의 결합은 그 기의 임의의 적합한 원자일 수 있으며; 예를 들어, 프로필은 프로프-1-일 및 프로프-2-일을 포함한다.
달리 언급되지 않는 한, 할로는 Cl, F, Br 및 I, 일반적으로 Cl, F 또는 Br, 또는 Cl 및 F로부터 선택된다.
상기 주지된 바와 같이, 기 A는 페닐 기 또는 이환식 헤테로아릴 기일 수 있다. 이와 관련하여, 이환식 헤테로아릴 기는 2개의 융합 고리를 포함하며, 1개, 2개, 3개 또는 4개의 N 원자, 또는 1개의 O 원자, 또는 1개의 S 원자, 또는 1개의 N 원자 및 1개의 S 원자, 또는 1개의 N 원자 및 1개의 O 원자, 또는 2개의 N 원자 및 1개의 S 원자, 또는 2개의 N 원자 및 1개의 O 원자를 함유하는 방향족 기이다. 이환식 헤테로아릴 기는 두 융합 고리가 모두 방향족인 기, 또는 하나의 융합 고리가 방향족이고, 나머지 하나의 융합 고리는 부분 또는 완전 포화된 기를 포함한다. 상기 부분 또는 완전 포화 융합 고리는 또한 카르보닐 기를 포함할 수 있다. 적합한 이환식 헤테로아릴 기의 예는 인돌릴, 벤조푸라닐, 벤조티에닐, 벤족사졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤조트리아졸릴, 인다졸릴, 아자인돌릴, 아자인다졸릴, 피롤로[1,2-b]피리다지닐, 피롤로[2,3-b]피리디닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퀴나졸리닐, 신놀리닐, 프탈라지닐, 퀴녹살리닐 및 나프티리디닐을 포함한다.
상기 주지된 바와 같이, 화학식 I의 화합물에서 기 X 및 Y는 Z로 치환된 방향족 고리에 융합된 5원 또는 6원 N-복소환의 인접 고리 원자일 수 있고 둘 다 C이거나 또는 C 및 N이다. 용어 5원 또는 6원 N-복소환은 하나 이상의 질소 원자 및 O, N 및 S로부터 선택되는 2개 이하의 추가 헤테로원자를 함유하는 포화 또는 불포화, 예를 들어 방향족, 5원 또는 6원 고리를 지칭한다. Z로 치환된 방향족 고리에 융합된 5원 N-복소환은 피롤, 이미다졸, 피라졸, 1,2,3-트리아졸, 1,2,4-트리아졸, 옥사졸, 이속사졸, 옥사디아졸, 티아졸 및 이소티아졸 및 이들의 부분 포화 등가물로부터 선택될 수 있다. Z로 치환된 방향족 고리에 융합된 6원 N-복소환은 피리딘, 피리다진, 피리미딘 및 피라진으로부터 선택될 수 있다. 상기 5원 또는 6원 N-복소환은 C1-C3 알킬, C1-C3 플루오로알킬, C1-C3 알콕시, Cl, F, CN, OH, OMe, OEt, NH2, NHMe, NMe2, 및 OH, OMe, NH2, NHMe 또는 NMe2로 선택적으로 치환된 C1-C3 알킬로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환체로 선택적으로 치환될 수 있다.
상기 주지된 바와 같이, 화학식 I의 화합물에서 기 R7 및 R8은 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환일 수 있다. 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환이라는 용어는 O, N 및 S로부터 선택되는 3개 이하의 헤테로원자를 함유하는 포화 또는 불포화, 예를 들어, 방향족, 고리를 지칭한다. 상기 5원 복소환은 피롤, 이미다졸, 피라졸, 1,2,3-트리아졸, 1,2,4-트리아졸, 옥사졸, 이속사졸, 1,2,3-옥사디아졸, 티아졸, 이소티아졸 및 이들의 부분 또는 완전 포화 등가물로부터 선택될 수 있다. 상기 6원 복소환은 피리딘, 피리다진, 피리미딘 및 피라진으로부터 선택될 수 있다. 상기 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환은 C1-C3 알킬, C1-C3 플루오로알킬, C1-C3 알콕시, Cl, F, CN, OH, OMe, OEt, NH2, NHMe, NMe2, 및 OH, OMe, NH2, NHMe 또는 NMe2로 선택적으로 치환된 C1-C3 알킬로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환체로 선택적으로 치환될 수 있다.
상기 주지된 바와 같이, 기 R7 및 R8이 둘 다 화학식 A의 화합물, 예를 들어 화학식 I의 화합물에 존재하는 경우, 이들은 조합되어, Z로 치환된 방향족 고리에 융합된 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환을 형성할 수 있다. 상기 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환은 포화되거나 불포화될 수 있다. 상기 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환은 C1-C3 알킬, C1-C3 플루오로알킬, C1-C3 알콕시, Cl, F, CN, OH, OMe, OEt, NH2, NHMe, NMe2, 및 OH, OMe, NH2, NHMe 또는 NMe2로 선택적으로 치환된 C1-C3 알킬로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환체로 선택적으로 치환될 수 있다. R7 및 R8이 조합되어 5원 고리를 형성하는 경우, 이들은 함께 C3, C2O, COC, C2N, CNC, CNO, NCO, CNS 또는 NCS 사슬을 나타낼 수 있다. R7 및 R8이 조합되어 6원 고리를 형성하는 경우, 이들은 함께 C4, C3O, COC2, OC2O, C3N, C2NC, NCNC, CNNC 또는 NCCN 사슬을 나타낼 수 있다. 원자들의 R7 및 R8 사슬은 공유 결합되고 수소 또는 이들의 정상 원자가를 충족시키는 선택적 치환체로 치환된다.
의심의 여지를 없애기 위해, 다수의 치환체가 주어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 경우에, 선택된 치환체는 주어진 군 내로부터의 동일한 치환체 또는 상이한 치환체를 포함할 수 있다. 단지 예로서, 고리 A가 (R1)n으로 치환된 페닐이고, n이 2인 경우, 상기 2개의 R1 치환체는 동일할 수 있거나(예를 들어 둘 다 플루오로), 또는 상이할 수 있다(예를 들어 하나는 플루오로이고 하나는 히드록시).
추가로 의심의 여지를 없애기 위해, 본 명세서의 화학식에서의 “
Figure pct00004
“의 사용은 상이한 기 사이의 부착점을 나타낸다.
본 명세서 내의 임의의 실시 형태가 "선택적으로 치환된"이라고 하는 기를 포함하는 경우, 추가 실시 형태는 상기 기가 비치환된 실시 형태를 포함할 것이다.
본 명세서의 제1 양태에 따르면, 하기 화학식 A의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다:
[화학식 A]
Figure pct00005
여기서,
A는 페닐 또는 이환식 헤테로아릴 기이며;
X 및 Y는 이중 결합에 의해 연결되며 i) X는 CR7이고 Y는 CR8이거나, ii) X는 N이고 Y는 CR8이거나, iii) X는 CR7이고 Y는 N이거나; 또는
X 및 Y는 함께 C(O)NR9이거나; 또는
X 및 Y는 Z로 치환된 방향족 고리에 융합된 선택적 치환 5원 또는 6원 N-복소환의 인접 고리 원자이고, X 및 Y는 둘 다 C이거나 C 및 N이며;
Z는 O, NH, 또는 NMe이며;
R1은 F, Cl, Br, OH, CH2OH, OMe, CH2OMe, C1-C3알킬 및 C1-C3플루오로알킬로부터 독립적으로 선택되며;
n은 0, 1, 2 또는 3이며;
R2는 H, F, Cl, CCH, CCMe, CN, Br, C1-C3알킬, C1-C3플루오로알킬, OMe 또는 OEt이며;
R3a 및 R3b는 함께 =O이거나 R3a 및 R3b는 H이며;
R4는 H 또는 Me이며;
R5는 H 또는 Me이며;
R6은 H 또는 CH2NMe2이며;
R7 및 R8은 H, F, Cl, CCH, CC(C1-C3알킬), CCCH2NMe2, CCCH2O(C1-C3알킬), CN, Me, C1-C6알킬, OH, OMe, O(C1-C3알킬), O(C1-C3듀테로알킬), O(C1-C3플루오로알킬), O(C3-C6시클로알킬), C1-C3플루오로알킬, OCH2CH2NMe2, OCH2CH2OMe, CH2OMe, OCH2CH2N(CH2CH2)2CH, OCH2CH2N(CH2CH2)2O, OCH2CH2(2-피리딜) 또는 선택적 치환 3원, 4원, 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환으로부터 독립적으로 선택되거나; 또는
R7 및 R8은 조합되어 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환을 형성하며;
R9는 H, Me, Et, C3H7 및 C1-C3플루오로알킬로부터 선택된다.
실시 형태에서, 화학식 A의 화합물은 R6이 H인 화학식 Aa의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 A 또는 Aa의 화합물은 R5가 H인 화학식 Ab의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 A, Aa 또는 Ab의 화합물은 R4가 H인 화학식 Ac의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 A, Aa, Ab 또는 Ac의 화합물은 A가 페닐인 화학식 Ad의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 A의 화합물은 하기 화학식 Ae의 화합물이다:
[화학식 Ae]
Figure pct00006
.
실시 형태에서, 화학식 Ae의 화합물은 R5가 H인 화학식 Af의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ae 또는 Af의 화합물은 R3a 및 R3b가 H인 화학식 Ag의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ae 또는 Af의 화합물은 R3a 및 R3b가 함께 =O인 화학식 Ah의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ae, Af, Ag 또는 Ah의 화합물은 Z가 O인 화학식 Ai의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ae, Af, Ag, Ah 또는 Ai의 화합물은 R2가 F 또는 Cl로부터 선택되는 화학식 Aj의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ae, Af, Ag, Ah, Ai 또는 Aj의 화합물은 n이 2 또는 3이고 2개 이상의 치환체 R1이 바이아릴 결합에 대해 오르토인 화학식 Ak의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ae, Af, Ag, Ah, Ai, Aj 또는 Ak의 화합물은 하나 이상의 R1 기가 OH인 화학식 Al의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 A, Ae, Af, Ag, Ai, Aj, Ak 또는 A1의 화합물은 하기 화학식 Am의 화합물이다:
[화학식 Am]
Figure pct00007
.
실시 형태에서, 화학식 A, Ae, Af, Ag, Ah, Ai, Aj, Ak 또는 Al의 화합물은 하기 화학식 An 또는 Ao의 화합물이다:
[화학식 An]
Figure pct00008
[화학식 Ao]
Figure pct00009
.
실시 형태에서, 화학식 A, Ae, Af, Ag, Ah, Ai, Aj, Ak 또는 Al의 화합물은 X 및 Y가 C(O)NR9인 화학식 Ap의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 A, Ae, Af, Ag, Ah, Ai, Aj, Ak 또는 Al의 화합물은 X 및 Y가 선택적 치환 피롤, 이미다졸, 피라졸, 1,2,3-트리아졸, 1,2,4-트리아졸, 옥사졸, 이속사졸, 1,2,3-옥사디아졸, 티아졸 또는 이소티아졸의 인접 고리 원자인 화학식 Aq의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Aq의 화합물은 X 및 Y를 포함하는 5원 고리 상의 선택적 치환체가 C1-C3 알킬, OC1-C2 알킬, OMe, OH, F 및 Cl로부터 선택되는 화학식 Ar의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 A, Aa 내지 Ar의 화합물은 아래에 나타낸 입체화학을 갖는다:
Figure pct00010
.
상기 주지된 바와 같이, 본 명세서는 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 I]
Figure pct00011
여기서,
A는 페닐 또는 이환식 헤테로아릴 기이며;
X 및 Y는 이중 결합에 의해 연결되며 i) X는 CR7이고 Y는 CR8이거나, ii) X는 N이고 Y는 CR8이거나, iii) X는 CR7이고 Y는 N이거나; 또는
X 및 Y는 함께 C(O)NR9이거나; 또는
X 및 Y는 Z로 치환된 방향족 고리에 융합된 선택적 치환 5원 또는 6원 N-복소환의 인접 고리 원자이고, X 및 Y는 둘 다 C이거나 C 및 N이며;
Z는 O, NH, 또는 NMe이며;
R1은 F, Cl, Br, OH, CH2OH, OMe, CH2OMe, C1-C3알킬, C1-C3플루오로알킬로부터 독립적으로 선택되며;
n은 0, 1, 2 또는 3이며;
R2는 H, F, Cl, CCH, CCMe, CN, Br, C1-C3알킬, C1-C3플루오로알킬, OMe 또는 OEt이며;
R3a 및 R3b는 함께 =O이거나 R3a 및 R3b는 H이며;
R4는 H 또는 Me이며;
R5는 H 또는 Me이며;
R6은 H 또는 CH2NMe2이며;
R7 및 R8은 H, F, Cl, CCH, CN, Me, OH, OMe, O(C1-C3알킬), C1-C3플루오로알킬 또는 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환으로부터 선택되거나; 또는
R7 및 R8은 조합되어 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환을 형성하며;
R9는 H, Me, Et, C3H7 및 C1-C3플루오로알킬로부터 선택된다.
실시 형태에서, 화학식 I의 화합물은 R6이 H인 화학식 Ia의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 I 또는 Ia의 화합물은 R5가 H인 화학식 Ib의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 I, Ia 또는 Ib의 화합물은 R4가 H인 화학식 Ic의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 I, Ia, Ib 또는 Ic의 화합물은 A가 페닐인 화학식 Id의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 I의 화합물은 하기 화학식 Ie의 화합물이다:
[화학식 Ie]
Figure pct00012
.
실시 형태에서, 화학식 Ie의 화합물은 R5가 H인 화학식 If의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ie 또는 If의 화합물은 R3a 및 R3b가 H인 화학식 Ig의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ie 또는 If의 화합물은 R3a 및 R3b가 함께 =O인 화학식 Ih의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ie, If, Ig 또는 Ih의 화합물은 Z가 O인 화학식 Ii의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ie, If, Ig, Ih 또는 Ii의 화합물은 R2가 F 또는 Cl로부터 선택되는 화학식 Ij의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ie, If, Ig, Ih, Ii 또는 Ij의 화합물은 n이 2 또는 3이고 2개 이상의 치환체 R1이 바이아릴 결합에 대해 오르토인 화학식 Ik의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Ie, If, Ig, Ih, Ii, Ij 또는 Ik의 화합물은 하나 이상의 R1 기가 OH인 화학식 Il의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 I, Ie, If, Ig, Ii, Ij, Ik 또는 I1의 화합물은 하기 화학식 Im의 화합물이다:
[화학식 Im]
Figure pct00013
.
실시 형태에서, 화학식 I, Ie, If, Ig, Ih, Ii, Ij, Ik 또는 Il의 화합물은 하기 화학식 In 또는 Io의 화합물이다:
[화학식 In]
Figure pct00014
[화학식 Io]
Figure pct00015
.
실시 형태에서, 화학식 I, Ie, If, Ig, Ih, Ii, Ij, Ik 또는 Il의 화합물은 X 및 Y가 C(O)NR9인 화학식 Ip의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 I, Ie, If, Ig, Ih, Ii, Ij, Ik 또는 Il의 화합물은 X 및 Y가 선택적 치환 피롤, 이미다졸, 피라졸, 1,2,3-트리아졸, 1,2,4-트리아졸, 옥사졸, 이속사졸, 1,2,3-옥사디아졸, 티아졸 또는 이소티아졸의 인접 고리 원자인 화학식 Iq의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 Iq의 화합물은 X 및 Y를 포함하는 5원 고리 상의 선택적 치환체가 C1-C3 알킬, OC1-C2 알킬, OMe, OH, F 및 Cl로부터 선택되는 화학식 Ir의 화합물이다.
실시 형태에서, 화학식 I, Ia 내지 Ir의 화합물은 아래에 나타낸 입체화학을 갖는다:
Figure pct00016
.
일 실시 형태에서, 화학식 A의 화합물은 하기로부터 선택된다:
(12aS)-2-아크릴로일-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-6-온;
1-((12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-히드록시-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온;
(12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온;
1-((12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온;
(12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온;
1-[(12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-히드록시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-(1H-이미다졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-7-카르보니트릴;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-(1H-피라졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-((12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(5-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온;
(12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온;
(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴;
(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메틸-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온;
1-[(12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
8-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-7-메틸이소퀴놀린-1(2H)-온;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온
(12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
(12aS)-10-클로로-11-메틸-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2,3-디플루오로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
(12aR)-10-클로로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴;
1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-플루오로-6-(히드록시메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-히드록시-6-(트리플루오로메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-9-(2-에틸-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-9-[2-(디플루오로메틸)-6-히드록시페닐]-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴;
(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴;
1-[(12aR)-9-(2-브로모-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-8-클로로-10-플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-8-클로로-10-에티닐-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-10-에티닐-8-플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
(6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-8-(프로프-2-에노일)-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온;
1-[(6aR)-1,4-디클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온;
(6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-(프로프-2-에노일)-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온;
1-[(8aR)-6-클로로-5-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8a,9,11,12-테트라히드로-14H-피라지노[2,1-c][1,2,4]트리아졸로[4',3':1,2]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-10(8H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온; 및
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-((12aR)-10-클로로-8-에티닐-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온;
1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온 ;
1-[(12aR)-8-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-에티닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-메틸-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,8-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-7,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-((12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(2-메톡시에톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-[(2H3)메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(메톡시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온; 및
1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-(프로프-1-인-1-일)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온; 및
1-((6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-에티닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일)프로프-2-엔-1-온;
또는 이의 제약상 허용가능한 염.
당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 본 명세서의 화합물은 고리 A와 X 및 Y를 함유하는 고리 사이에 바이아릴 결합을 함유한다.
본원에서 하기 화학식 I의 화합물에 관한 설명은 화학식 A의 화합물에 동일하게 적용되는 것으로 판독되어야 한다.
화학식 A의 화합물, 예를 들어 화학식 I의 화합물은, 예를 들어 아크릴아미드가 부착된 피페라진과 Z를 포함하는 고리 사이의 브리지헤드 탄소에서 하나 이상의 키랄 중심을 갖고, 게다가, 화학식 A의 화합물, 예를 들어 화학식 I의 화합물은 임의의 상대적 비율의 화학식 A의 화합물의 다른 가능한 입체이성질체 형태들 중 하나 이상이 존재하거나 존재하지 않으면서 제조, 단리 및/또는 공급될 수 있음이 인식될 것이다. 입체적 풍부(stereoenriched) 또는 입체적 순수(stereopure) 화합물의 제조는 당업계에 잘 알려진 유기 화학의 표준 기술에 의해, 예를 들어 합성 동안 적절한 입체적 풍부 또는 입체적 순수 촉매를 사용, 입체적 풍부 또는 입체적 순수 출발 재료로부터의 합성에 의해, 및/또는 예를 들어 키랄 크로마토그래피를 통해 입체이성질체의 라세미 또는 부분 풍부화 혼합물의 분할에 의해 수행될 수 있다. 바람직한 실시 형태에서, 본 명세서의 화합물은 아래에 나타낸 바와 같이 Z가 O인 경우 (R)-배열이다.
Figure pct00017
특히, 화학식 I의 화합물은 A와 X 및 Y를 포함하는 고리 사이의 바이아릴 결합 주위에서의 제한된 회전으로 인해 축방향 키랄성(axial chirality)을 가질 수 있고, 따라서 약 0% 내지 >98%의 거울상 이성질체 과잉률(e.e.)을 갖는 회전장애 이성질체의 혼합물로서 존재할 수 있다. 화합물이 순수한 회전장애 이성질체인 경우, 각각의 키랄 중심에서의 입체화학은 aR 또는 aS 중 하나로 명시될 수 있다. 이러한 지정은 또한 하나의 회전장애 이성질체가 풍부한 혼합물에 사용될 수 있다. 단지 예로서, 하기 모이어티는 회전장애 이성질체를 나타낼 수 있고 키랄 크로마토그래피에 의해 aR 및 aS 회전장애 이성질체로 분할될 수 있다. 예시를 위해, 고리 A가 2-F, 6-히드록시페닐인 화학식 I의 화합물의 2가지 회전장애 이성질체가 아래에 예시되어 있다(명확성을 위해 R3, R4, R5 및 R6은 생략됨).
Figure pct00018
회전장애 이성질체성 및 축방향 키랄성에 대한 추가의 설명 및 배열 할당 규칙은 문헌[Eliel, E.L. & Wilen, S. H. ‘Stereochemistry of Organic Compounds' John Wiley and Sons, Inc. 1994]에서 찾을 수 있다. 본 명세서의 화합물에서 기 R1, R2 및 X는 (aR) 및 (aS) 회전장애 이성질체 사이의 상호전환을 제거하거나 실질적으로 감소시키도록 선택될 수 있다.
더욱 상세하게는, 기(들) A(R1)n과 치환체 R2 및/또는 X 사이의 상호작용은 유리하게는 고리 A와 X를 함유하는 고리 사이의 결합 주위의 회전을 제한할 수 있다. 치환체 R2와 고리 A 및/또는 고리 A 상의 치환체(들) R1 사이의 상호작용은 결과적으로 본 명세서에 따른 화합물의 회전장애 이성질체를 안정화시키는 데 사용될 수 있다. 이것은 결국, G12C 돌연변이 Ras의 억제제로서 제2 회전장애 이성질체보다 더 높은 활성을 나타내는 안정한 회전장애 이성질체의 단리를 유리하게 허용할 수 있다. 더 큰 활성의 회전장애 이성질체가 바람직한 실시 형태임이 이해될 것이다.
기 X가 치환된 화학식 I의 화합물의 실시 형태에서, 그 치환체는 R2와 같이 본 명세서에 따른 화합물의 회전장애 이성질체를 안정화시킬 수 있다.
본 명세서의 실시 형태에서, 화학식 I의 화합물의 제조에 유용한 피페라진 NH(하기 화학식 IX의 화합물에 대해 *로 표시됨)에서 보호된 중간체 (II) 또는 이의 유도체가 또한 제공되며, 여기서, 기 및 치환체는 상기 화학식 I 내지 화학식 Ir의 화합물 중 임의의 것에 대해 정의된 바와 같다.
[화학식 IX]
Figure pct00019
관련 실시 형태에서, 화학식 IX의 화합물을 i) 아크릴로일 클로라이드, 또는 이의 등가물, 예컨대 아크릴로일 무수물, 및 염기 또는 ii) 아크릴산 또는 이의 에스테르 및 커플링 시약과 반응시키는 것을 포함하는 화학식 I의 화합물의 합성 방법이 제공된다.
본 명세서의 실시 형태에서, 제약상 허용가능한 부형제와 회합된, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 포함하며, 선택적으로, 하나 이상의 다른 입체이성질체 형태의 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 추가로 포함하는 제약 조성물이 제공되며, 여기서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염은 ≥90%의 부분입체 이성질체 과잉률(%d.e.)로 조성물 내에 존재한다.
본 명세서의 실시 형태에서, 제약상 허용가능한 부형제와 회합된, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 포함하고, 선택적으로, 하나 이상의 다른 입체이성질체 형태의 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 추가로 포함하는 제약 조성물이 제공되며, 여기서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염은 ≥90%의 거울상이성질체 과잉률(%ee) 및 ≥90%의 부분입체이성질체 과잉률(%de)로 조성물 내에 존재한다.
화학식 I의 화합물 및 이의 제약상 허용가능한 염은 비정질 형태, 결정형 형태, 또는 반-결정형 형태로 제조되거나, 사용되거나, 공급될 수 있고, 임의의 주어진 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염은 수화된 형태(예를 들어, 반수화물, 1수화물, 2수화물, 3수화물 또는 다른 화학양론의 수화물) 및/또는 용매화된 형태를 포함하는, 하나 초과의 결정형/다형성 형태로 형성되는 것이 가능할 수 있다. 본 명세서는 화학식 I의 화합물의 임의의 및 모든 이러한 고체 형태 및 이의 제약상 허용가능한 염을 포함하는 것으로 이해될 것이다.
본 명세서의 추가 실시 형태에서 이하에서 '실시예' 섹션에 기술되는 방법에 의해 수득가능한 화학식 I의 화합물이 제공된다.
본 명세서는 본 발명의 화합물에서 나타나는 원자의 모든 동위원소를 포함하고자 한다. 동위원소는 동일한 원자 번호를 갖지만, 상이한 질량수를 갖는 원자를 포함하는 것이 이해될 것이다. 예를 들어, 수소의 동위원소는 삼중수소 및 중수소를 포함한다. 탄소의 동위원소는 13C 및 14C를 포함한다. 동위원소로 표지된 화학식 I의 화합물은 일반적으로 당업자에게 알려진 통상적 기술에 의해 또는 이전에 이용된 비-표지된 시약 대신 적절한 동위원소 표지 시약을 사용하여 동반되는 실시예에 기술된 것과 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다.
화학식 I의 화합물의 적합한 제약상 허용가능한 염은 예를 들어 산 부가염일 수 있다. 화학식 I의 화합물의 적합한 제약상 허용가능한 염은, 예를 들어, 화학식 I의 화합물의 산 부가염, 예를 들어 무기 산 또는 유기 산에 의한 산 부가염일 수 있다. 본 명세서의 화합물은 유리 화합물, 즉 비-염화 상태로 제공될 수 있다.
화학식 I의 화합물의 추가의 적합한 제약상 허용가능한 염은 예를 들어 상기 인간 또는 동물 신체에 화학식 I의 화합물을 투여한 후 인간 또는 동물 신체 내에서 형성되는 염일 수 있다.
화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염은 공결정 고체 형태로서 제조될 수 있다. 화학식 I의 화합물의 제약상 허용가능한 공결정 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 본 명세서의 양태를 형성함이 이해되어야 한다.
약학적 맥락에서 사용하기 위해, 다량의 다른 입체이성질체 형태가 존재하지 않는 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염을 제공하는 것이 바람직할 수 있다.
화학식 I의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염은 통상적으로 경구 경로를 통해 투여되지만, 비경구, 정맥내, 근육내, 피하 또는 다른 주사가능한 방식, 협측, 직장, 질, 경피 및/또는 비강 경로 및/또는 흡입을 통한 것(활성 성분 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 또는 이러한 염의 용매화물을 포함하는 제약 제제의 형태로, 제약상 허용가능한 투여 형태로)이 가능할 수 있다. 치료받을 장애 및 환자, 그리고 투여 경로에 따라, 조성물은 다양한 용량으로, 예를 들어 1 mg 내지 1,000 mg 또는 100 mg 내지 2,000 mg의 경구 용량으로 투여될 수 있다.
상기 기술된 화학식 I의 화합물의 제약 제형은 예를 들어 비경구, 피하, 근육내 또는 정맥내 투여용으로 제조될 수 있다.
상기에 기술된 화학식 I의 화합물의 제약 제형은 단위 투여 형태로 편리하게 투여될 수 있으며, 예를 들어 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA., (1985)]에 기술된 바와 같은, 제약 분야에 잘 알려진 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다.
경구 투여에 적합한 제약 제형은 하나 이상의 생리학적으로 상용성인 담체들 및/또는 부형제들을 포함할 수 있고 고체 또는 액체 형태일 수 있다. 정제 및 캡슐은 결합제; 충전제; 윤활제; 및 계면활성제를 이용하여 제조될 수 있다. 액체 조성물은 현탁제; 유화제; 및 보존제와 같은 통상적인 첨가제를 함유할 수 있다. 액체 조성물은 단위 투여 형태를 제공하기 위해 예를 들어 젤라틴에 캡슐화될 수 있다. 고체 경구 투여 형태는 정제, 투-피스(two-piece) 경질 쉘 캡슐 및 연질 탄성 젤라틴(SEG) 캡슐을 포함한다. 예시적인 경구 조성물은 화학식 I의 화합물 및 하나 이상의 제약상 허용가능한 부형제가 투-피스 경질 쉘 캡슐 또는 연질 탄성 젤라틴(SEG) 캡슐에 충전된 것을 포함할 것이다.
추가 실시 형태에 따르면, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 약제로서 사용하기 위한, 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 항증식 효과의 생성에 사용하기 위한, 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 고형 종양 질환의 방지 및/또는 치료에서 항침습제로서 사용하기 위한, 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 항증식 효과의 생성을 위한, 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 항증식 효과의 생성에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 고형 종양 질환의 방지 및/또는 치료에서 항침습제로 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 항증식 효과를 생성하는 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에서 항증식 효과를 생성하기 위한 방법이 제공되며, 상기 방법은 이상에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 상기 동물에게 투여하는 단계를 포함한다.
본 명세서에서, 달리 언급되지 않는 한, 어구 "유효량"은 치료될 증상 및/또는 병태를 유의미하게 및 긍정적으로 변경시키기에(예를 들어, 긍정적인 임상적 반응을 제공하기에) 충분한 화합물 또는 조성물의 양을 의미한다. 제약 조성물에 사용되는 활성 성분의 유효량은 치료될 특정 질환, 질환의 중증도, 치료 지속기간, 병행 요법의 특성, 이용되는 특정 활성 성분(들), 이용된 특정한 제약상 허용가능한 부형제(들)/담체(들), 및 주치의의 지식과 전문 지식 내에 있는 유사 인자에 따라 가변적일 것이다. 유효량은 일반적으로 0.1 mg 내지 1,000 mg의 범위일 것이다.
추가 실시 형태에 따르면, 고형 종양 질환의 방지 및/또는 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에서 고형 종양 질환의 방지 및/또는 치료에 의한 항침습 효과를 생성하기 위한 방법이 제공되며, 상기 방법은 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 상기 동물에 투여하는 것을 포함한다.
추가 실시 형태에 따르면, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 암의 방지 또는 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 암의 예방 또는 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에서 암의 예방 또는 치료를 위한 방법이 제공되며, 상기 방법은 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 상기 동물에 투여하는 것을 포함한다.
추가 실시 형태에 따르면, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 고형 종양 질환의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 고형 종양 질환의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 고형 종양 질환의 예방 또는 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에서 고형 종양 질환의 예방 또는 치료를 위한 방법이 제공되며, 상기 방법은 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 상기 동물에 투여하는 것을 포함한다.
추가 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 Ras의 억제에 민감한 종양의 예방 또는 치료에서 사용하기 위한, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 Ras의 억제에 민감한 종양의 예방 또는 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 Ras의 억제에 민감한 종양의 예방 또는 치료를 위한 방법이 제공되며, 상기 방법은 상기에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 상기 동물에 투여하는 것을 포함한다.
추가 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 Ras에 대해 억제 효과를 제공하는 데 사용하기 위한, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 Ras에 대해 억제 효과를 제공하는 데 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 Ras에 대해 억제 효과를 제공하는 방법이 또한 제공되며, 본 방법은 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.
추가 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 Ras에 대해 선택적 억제 효과를 제공하는 데 사용하기 위한, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 Ras에 대해 선택적 억제 효과를 제공하는 데 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 Ras에 대해 선택적 억제 효과를 제공하는 방법이 또한 제공되며, 본 방법은 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.
G12C 돌연변이 Ras에 결합할 수 있는 화합물이 본원에서 기술된다. 생화학적 및 세포 기반 분석법에서, 본 명세서의 화합물은 강력한 G12C 돌연변이 Ras 단백질 결합제인 것으로 나타나며 이에 따라 KRas, NRas 또는 HRas G12C 돌연변이에 의해 매개되는 장애의 치료에서, 특히 G12C 돌연변이된 KRas, NRas 또는 HRas 단백질을 발현하는 암, 예컨대 췌장암, 결장직장암, 자궁암, 담관암, 위암, 방광암, 자궁경부암, 고환 배아 세포 암 및 비-소세포 폐암 및 다발성 골수종, 미만성 대형 B 세포 림프종, 횡문근육종 및 피부 편평상피세포 암종의 치료에서 유용할 수 있다.
추가 실시 형태에 따르면, KRas, NRas 또는 HRas G12C 돌연변이에 의해 매개되는 장애의 치료에서 사용하기 위한, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, KRas, NRas 또는 HRas G12C 돌연변이에 의해 매개되는 장애를 치료하는 방법이 제공이 제공되며, 본 방법은 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 투여하는 단계를 포함한다.
추가 실시 형태에 따르면, KRas, NRas 또는 HRas G12C 돌연변이에 의해 매개되는 장애의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 췌장암, 비-소세포 폐암 또는 결장직장암의 치료에서 사용하기 위한, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 비-소세포 폐암의 치료에서 사용하기 위한, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
추가 실시 형태에 따르면, 췌장암, 비-소세포 폐암 또는 결장직장암을 치료하는 방법이 제공되며, 본 방법은 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.
추가 실시 형태에 따르면, 비-소세포 폐암을 치료하는 방법이 제공되며, 본 방법은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.
추가 실시 형태에 따르면, 췌장암, 비-소세포 폐암 또는 결장직장암의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 명세서의 추가 양태에 따르면, 비-소세포 폐암의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본원에 정의된 항암 치료는 단독 요법으로 적용될 수 있거나, 본 명세서의 화합물에 더하여 통상적인 수술 또는 방사선요법 또는 화학요법을 포함할 수 있다.
따라서 일 실시 형태에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염, 및 암의 병용 치료(conjoint treatment)를 위한 추가 항-종양 물질이 제공된다.
본 명세서의 일 실시 형태에 따르면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 및 또 다른 항-종양제를 포함하는, 암 치료에서 사용하기 적합한 조합이 제공된다.
본 명세서의 추가 실시 형태에서, 또 다른 항-종양제와 조합된, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다. 관련 실시 형태에서, 치료 방법으로서 화학식 I의 화합물을 또 다른 항종양제와 조합하여 이를 필요로 하는 환자, 예를 들어 G12C 돌연변이 Ras를 발현하는 암을 앓고 있는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 치료 방법이 제공된다.
화학식 I의 화합물은 주로 온혈 동물(인간 포함)에서 사용하기 위한 치료제로서 가치를 갖지만, 이들은 또한 G12C 돌연변이 Ras를 억제하기 위해 요구되는 경우 언제든지 유용하다. 따라서, 이들은 새로운 생물학적 테스트의 개발 및 새로운 약리학적 제제의 탐색에 사용하기 위한 약리학적 표준으로 유용하다.
또 다른 실시 형태는 환자의 G12C KRas, HRas 또는 NRas 돌연변이 상태와 화학식 I의 화합물을 이용한 치료에 대한 잠재적 감수성 사이의 연관성 확인을 기반으로 한다. 이어서 Ras 억제제, 예컨대 화학식 I의 화합물이 다른 치료법에 내성이 있을 수 있는 G12C KRas, HRas 또는 NRas 돌연변이를 갖는 환자를 치료하기 위해 유리하게 사용될 수 있다. 따라서 이는 화학식 I의 화합물을 이용한 치료를 위한 환자, 특히 암 환자를 선택하기 위한 기회, 방법 및 도구를 제공한다. 상기 선택은 처리될 종양 세포가 야생형 또는 G12C 돌연변이체 KRAS, HRAS 또는 NRAS 유전자를 보유하는지 여부를 기반으로 한다. 따라서 G12C KRAS, HRAS 또는 NRAS 유전자 상태는 화학식 I의 화합물을 이용한 치료의 선택이 유리할 수 있음을 시사하는 바이오마커로서 사용될 수 있다.
일 실시 형태에 따르면, 화학식 I의 화합물을 이용한 치료를 위한 환자를 선택하는 방법이 제공되며, 본 방법은 환자로부터의 종양 세포-함유 샘플을 제공하는 단계; 환자의 종양 세포-함유 샘플에서 RAS 유전자가 야생형(위치 12에 글리신) 또는 돌연변이(위치 12에 시스테인) KRas, HRas 또는 NRas 단백질을 코딩하는지를 결정하는 단계; 및 이에 기반하여 화학식 I의 화합물을 이용한 치료를 위한 환자를 선택하는 단계를 포함한다.
상기 방법은 실제 환자 샘플 단리 단계를 포함하거나 배제할 수 있다. 따라서, 일 실시 형태에 따르면, 화학식 I의 화합물을 이용한 치료를 위한 환자를 선택하는 방법이 제공되며, 본 방법은 환자로부터 이전에 단리된 종양 세포-함유 샘플에서 RAS 유전자가 야생형(위치 12에 글리신) 또는 돌연변이(위치 12에 시스테인) KRas, HRas 또는 NRas 단백질을 코딩하는지를 결정하는 단계; 및 이에 기반하여 화학식 I의 화합물을 이용한 치료를 위한 환자를 선택하는 단계를 포함한다.
실시 형태에서, 환자는 종양 세포 DNA가 G12C 돌연변이체 KRAS 유전자를 갖는 경우 화학식 I의 화합물을 이용한 치료를 위해 선택된다.
실시 형태에서, 환자는 종양 세포 DNA가 G12C 돌연변이 HRAS 유전자를 갖는 경우 화학식 I의 화합물을 이용한 치료를 위해 선택된다.
실시 형태에서, 환자는 종양 세포 DNA가 G12C 돌연변이 NRAS 유전자를 갖는 경우 화학식 I의 화합물을 이용한 치료를 위해 선택된다.
또 다른 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 KRAS 유전자를 보유하는 것으로 확인된 종양 세포를 갖는 암의 치료에서 사용하기 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
또 다른 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 HRAS 유전자를 보유하는 것으로 확인된 종양 세포를 갖는 암의 치료에서 사용하기 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
본 명세서의 또 다른 양태에 따르면, G12C 돌연변이 NRAS 유전자를 보유하는 것으로 확인된 종양 세포를 갖는 암의 치료에서 사용하기 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염이 제공된다.
또 다른 실시 형태에 따르면, 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, G12C 돌연변이 KRAS, HRAS 또는 NRAS 유전자를 보유하는 것으로 확인된 종양 세포를 갖는 암을 치료하는 방법이 제공된다.
또 다른 실시 형태에 따르면, G12C 돌연변이 KRAS, HRAS 또는 NRAS 유전자를 보유하는 것으로 확인된 종양 세포를 갖는 암의 방지 및 치료에서 사용하기 위한, 화학식 I의 화합물을 포함하는 제약 조성물이 제공된다.
하기 실시예는 본 발명의 성질이 완전히 이해될 수 있도록 제공됨이 이해될 것이다. 또한 하기 실시예가 어떠한 방식으로든 기재의 범주를 제한하려는 것이 아님이 이해될 것이다.
생물학적 분석법
하기 분석법은 본 명세서의 화합물의 효과를 측정하기 위해 이용되었다.
KRasG12C 기능 분석
내부적으로 불활성 GDP 로딩된 바이오틴화 KRasG12C 단백질을 발현하고, 정제하고, GDP 로딩하였다. 모든 효소 및 기질 용액은 20 mM HEPES(pH 7.5), 5 mM MgCl2, 150 mM NaCl, 및 0.01% Tween 20 함유 분석 완충액 중에 제조하였다. 10 nM GDP 로딩된 바이오틴화 KRasG12C 및 37.5 ng/㎖ 스트렙타비딘 유로퓸 크립테이트(Cisbio)를 분석 완충액 중에 제조하고, 5 ㎕를 DMSO 중 제조된 테스트 및 기준 샘플을 함유하는 384 폴리스티렌, Hibase, 중간 결합 흰색 분석 플레이트(Greiner, #784075)의 각 웰 내로 분배하고, 샘플을 4시간 동안 인큐베이션하였다. 별개의 믹스에서 20 nM GST-Raf Ras 결합 도메인(GST-Raf RBD, 내부적으로 정제함) 및 4 ㎍/㎖ 항-GST XL665 항체(Cisbio)를 50 mM 칼륨 플루오라이드 및 0.05 mg/㎖ BSA를 함유하는 분석 완충액 중에 제조하고 4시간 동안 평형화한 후, 0.6 μM 구아노신 5'-[γ-티오]트리포스페이트(GTPγS, Sigma) 및 0.08 μM SOS(내부적으로 정제함)를 첨가하였다. 이어서 5 ㎕의 GST-RAF RBD 믹스를 분석 플레이트의 각 웰 내로 분배하였다. 상기 첨가는 뉴클레오티드 교환 반응 및 불활성 GDP 로딩된 KRasG12C의 활성 GTPγS KRasG12C로의 전환을 개시한다. 이는 유로퓸 및 XL665를 매우 가깝게 하여 증가된 FRET 신호가 HTRF 필터 모듈이 장착된 Pherastar(BMG) 플레이트 판독장치 상에서 검출될 수 있도록 하는, 활성 GTPγS KRasG12C와 GST-Raf RBD 사이의 특이적 결합 상호작용을 통해 동시적으로 검출된다. 뉴클레오티드 교환 공정의 억제를 통해 KRas의 활성화를 방지하거나, 활성 KRas:Raf RBD 결합 상호작용을 억제하는 임의의 화합물은 감소된 FRET 신호를 초래할 것이다. IC50 값을 Genedata screener(스위스 바젤)에서 피팅된 정규화된 용량-반응 반응 FRET 데이터 곡선으로부터 계산하였다.
이 KRasG12C 기능 분석의 데이터가 아래 표 A에 제시되어 있다.
KRasG12C 질량 분광측정 부가물형성 분석
내부적으로 불활성 GDP 로딩된 바이오틴화 KRasG12C 단백질을 발현하고, 정제하고, GDP 로딩하였다. 효소 용액은 20 mM HEPES(pH 7.5), 5 mM MgCl2, 150 mM NaCl를 함유하는 분석 완충액 중에 제조하였다. 4 μM GDP 로딩된 바이오틴화 KRasG12C를 분석 완충액 중에 제조하고 50 ㎕를 500 nl의 1 mM 테스트 화합물(최종 농도 10 μM)을 함유하는 96웰 폴리프로필렌 분석 플레이트(Greiner, #651201)의 각 웰 내로 첨가하고, 이를 4시간 동안 반응하도록 둔 후 50 ㎕ 1% 포름산을 첨가하여 반응을 켄칭하였다. 플레이트를 밀봉한 후, Xevo G2 QTOF(Waters) 및 Acquity LC 시스템(Waters) 상에서 판독하였다. 10 ㎕의 샘플을 3분 구배로 작동시키며 Xbridge BEH300; C4; 3.5 ㎛; 2.1 × 50 ㎜ 컬럼(Waters) 상에 주입하였다. 블랭크 샘플을 각각의 테스트 샘플 사이에 러닝시켰다.
데이터를 Mass Lynx 소프트웨어(Waters)에서 분석하고, 총 이온수(TIC) 추적을 사용하고 용출된 단백질 피크 데이터를 조합하였다. 조합된 스펙트럼을 사용하여 데이터를 MaxEnt1 방법을 사용해서 데콘볼루션하였다. 아포-단백질 KRasG12C(APO) 및 KRAS + 상대적 화합물 질량(부가물)에 대한 피크 면적을 측정하고, 부가물의 백분율을 하기 계산식을 사용하여 계산하였다:
부가물% = 100 * (부가물 피크의 면적 / (APO + 부가물 피크의 합).
이 질량 분광측정 부가 분석의 데이터는 아래 표 A에서 KRasG12C M.S. 결합 평균 부가물 %로 라벨링된 컬럼에 제시되어 있다.
표 A에 나타낸 데이터를 실시예에 대해 생성하였다(아래의 데이터는 단회 실험의 결과 또는 2회 이상 실험의 평균일 수 있음).
표 A에서 알 수 있는 바와 같이, 본 명세서의 화합물은 뉴클레오티드 교환 과정의 억제를 통하여 또는 활성 KRas:Raf RBD 결합 상호작용의 억제를 통하여 Kras의 활성화를 방지하며, 이는 KRasG12C 기능 분석에서 감소된 FRET 신호에서 볼 수 있는 바와 같다. 또한, 본 명세서의 화합물은 KRasG12C 질량 분광측정 부가 분석에서 KRasG12C에 대한 효과적인 공유 결합자인 것으로 입증되었다. 또한 다양한 회전장애 이성질체 쌍 사이의 활성 차이가 일반적으로 현저함(예를 들어 10배 또는 20배 이상)을 알 수 있다.
[표 A]
Figure pct00020
Figure pct00021
혈액 뇌 장벽 투과성 평가
혈액 뇌 장벽(BBB) 투과 특성을 평가하기 위하여, 본 명세서에 따른 화합물의 유출 특성을 BBB의 내피 세포에서 발현되는 주요 유출 펌프로 형질감염된 세포에서 측정하였다. 유출 특성의 평가는 MDR1(Pgp) 및 BCRP로 이중 형질감염된 마딘(Madin)-다비(Darby) 개 신장(MDCK) 세포를 사용하여 수행되었다. 따라서 형질감염된 세포주인 MDCK_MDR1_BCRP는 BBB를 가로지르는 화합물의 이동을 배제하는 역할을 능동적으로 하는 2개의 주요 유출 펌프를 발현하고 이들 세포로부터의 유출 비는 문헌[Durant et al, Sci . Adv . 2018; eeat:1719]에 기술된 바와 같이 측정될 수 있다. 이 기술에 의해 측정되는 바와 같이 2 이하의 유출 비를 갖는 화합물은 우수한 BBB 투과 특성에 대한 잠재성을 갖는 것으로 확인된다(문헌[Colclough et al, Drug Disc. Today 2019; 24(5), 1067-73]). 본 명세서에 따른 선택된 화합물의 유출 비는 하기 표 B에 제공된다.
[표 B]
Figure pct00022
실시예
이제 본 명세서는 달리 언급되지 않는 한, 다음과 같이 하기 실시예에서 예시될 것이다:
(i) 모든 합성은 달리 언급하지 않는 한 주위 온도, 즉 17℃ 내지 25℃의 범위에서 질소와 같은 불활성 기체의 분위기 하에 수행되었다;
(ii) 증발은 회전 증발에 의해 또는 Genevac 설비 또는 Biotage v10 증발장치를 진공 하에 이용하여 수행하였고 워크업 절차는 여과에 의한 잔여 고형의 제거 후 수행하였다;
(iii) 플래시 컬럼 크로마토그래피는 Merck Kieselgel 실리카(Art. 9385)에서 또는 역상 실리카(Fluka 실리카 겔 90 C18)에서 또는 Silicycle 카트리지(40 ㎛ 내지 63 ㎛ 실리카, 4 g 내지 330 g 중량)에서 또는 Grace resolv 카트리지(4 g 내지 120 g)에서 또는 RediSep Rf 1.5 플래시 컬럼에서 또는 RediSep Rf 고성능 Gold 플래시 컬럼(150 g 내지 415 g 중량)에서 또는 RediSep Rf Gold C18 역상 컬럼(20 ㎛ 내지 40 ㎛ 실리카)에서 또는 Interchim puriFlash 카트리지(50 ㎛ 실리카, 4 g 내지 800 g)에서 수동으로 또는 자동화되어 Isco CombiFlash Companion 시스템 또는 유사한 시스템을 사용하여 수행하였다;
(iv) 분취용 역상 HPLC는 ZMD 또는 ZQ ESCi 질량 분광측정계 및 Waters X-Terra 또는 Waters X-Bridge 또는 Waters SunFire 역상 컬럼(C-18, 5마이크론 실리카, 19 ㎜ 또는 50 ㎜ 지름, 100 ㎜ 길이, 유속 40 ㎖/분)이 갖추어진 Waters 기기(600/2700 또는 2525)에서 물(1% 암모니아 함유) 및 아세토니트릴의 감소하는 극성의 혼합물 또는 물(0.1% 포름산 함유) 및 아세토니트릴의 감소하는 극성의 혼합물을 용출제로 사용하여 수행하였다;
(v) 수율은 존재하는 경우 반드시 획득가능한 최대치는 아니다;
(vi) 일반적으로, 화학식 I의 최종 산물의 구조는 핵 자기 공명(NMR) 분광측정에 의해 확인하였다; NMR 화학적 이동값은 델타 척도로 측정하였다[양성자 자기 공명 스펙트럼은 Bruker Avance 500(500 MHz), Bruker Avance 400(400 MHz), Bruker Avance 300(300 MHz) 또는 Bruker DRX(300 MHz) 기기를 사용하여 결정하였음]; 측정치는 달리 명시되지 않는 한 주위 온도에서 취하였다; 하기 약어를 사용하였다: s, 단일선; d, 이중선; t, 삼중선; q, 사중선; m, 다중선; dd, 이중선의 이중선; ddd, 이중선의 이중선의 이중선; dt, 삼중선의 이중선; bs, 넓은 신호.
(vii) 일반적으로, 화학식 I의 최종 산물은 또한 액체 크로마토그래피에 이어 질량 분광측정(LCMS 또는 UPLC)으로 특성화하였다; 일반적으로, 역상 C18 실리카를 유량 1 ㎖/분으로 사용하였고 검출은 전기분무 질량 분광측정에 의해 그리고 파장 범위 220 nm 내지 320 nm를 기록하는 UV 흡광도에 의해 수행하였다. 분석용 UPLC는 Waters XSelect CSH C18 컬럼(치수 2.1 × 50 mm 및 입자 크기 1.7 마이크론을 가짐)을 이용하여, CSH C18 역상 실리카에서 수행되었다. 용출제로서 감소하는 극성의 혼합물, 예를 들어, 용매 A로서 물(0.1% 포름산 또는 0.1% 암모니아 함유)과 용매 B로서 아세토니트릴의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하는 구배 분석이 이용되었다. 통상적인 2분 분석용 UPLC 방법은 1.3분에 걸쳐 분당 대략 1 mL로, 용매 A 및 용매 B 각각의 97:3 혼합물에서 용매 A 및 용매 B의 3:97 혼합물까지의 용매 구배를 이용할 것이다. 보고된 분자 이온은 달리 명시되지 않는 한 [M+H]+에 상응한다;
(viii) 이온 교환 정제는 일반적으로 SCX-2(Biotage) 카트리지를 사용하여 수행하였다;
(ix) 반응이 마이크로웨이브의 사용을 언급하는 경우, 하기 마이크로웨이브 반응기 중 하나를 사용하였다: Biotage Initiator, Personal Chemistry Emrys Optimizer, Personal Chemistry Smith Creator 또는 CEM Explorer;
(x) 중간체 순도는 박막 크로마토그래피, 질량 분광측정, LCMS, UPLC/MS, HPLC 및/또는 NMR 분석에 의해 평가하였다;
(xi) 하기 약어를 사용하였다:
Boc - tert-부틸옥시카르보닐; DCM - 디클로로메탄; DIPEA - N,N-디이소프로필에틸아민; DMA - 디메틸아세트아미드; DMF - 디메틸포름아미드; EtOAc - 에틸 아세테이트; h - 시간; HATU - (1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; MeCN - 아세토니트릴; MeOH - 메탄올; iPrOH - 이소프로판올; NMP - N-메틸-2-피롤리돈; rt - 실온; RuPhos Pd G3 - (2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시-1,1'-바이페닐)[2-(2'-아미노-1,1'-바이페닐)]팔라듐(II) 메탄술포네이트; RuPhos - 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐; SCX - 강력 양이온 교환(Strong Cation eXchange); tert-부틸 BrettPhos Pd G3 - [(2-디-tert-부틸포스피노-3,6-디메톡시-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-바이페닐)-2-(2'-아미노-1,1'-바이페닐)]팔라듐(II) 메탄술포네이트; TFA - 트리플루오로아세트산; THF - 테트라히드로푸란; XPhos Pd G3 - (2-디시클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-바이페닐)[2-(2'-아미노-1,1'-바이페닐)] 팔라듐(II) 메탄술포네이트.
Tert -부틸 ( S )-4-(4- 브로모 -3- 클로로 -2- 플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00023
Tert-부틸 (S)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (0.875 g, 4.05 mmol)를 실온에서 THF (36.2 mL) 중 4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤조일 클로라이드 (1 g, 3.68 mmol) 및 트리에틸아민 (0.538 mL, 3.86 mmol)에 첨가하였다. 반응물을 1시간 동안 교반시켰다. 반응물을 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하고, 유기 층을 건조시키고 (MgSO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 MeOH로 미분화하여 고형물을 제공하고, 이를 여과로 수집하고 진공 하에 건조시켜 tert-부틸 (S)-4-(4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (1.471 g, 89%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO, 100℃) 1.43 (9H, s), 2.88 (1H, td), 3.03 (2H, d), 3.37 - 3.59 (3H, m), 3.79 - 4.08 (3H, m), 4.54 (1H, t), 7.34 (1H, dd), 7.68 (1H, dd). m/z: ES+ [M-Boc]+ 352.
Tert -부틸 ( S )-9- 브로모 -10- 클로로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00024
수소화나트륨 (광유 중 60%) (0.143 g, 3.58 mmol)을 실온에서 DMF (13.03 mL) 중 tert-부틸 (S)-4-(4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (1.471 g, 3.26 mmol)에 한꺼번에 첨가하였다. 생성된 슬러리를 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (100 mL) 및 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 포화 NH4Cl (20 mL) 및 염수 (3 x 100 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (MgSO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 DCM (2 mL)에 용해시키고, 50% EtOAc/헵탄으로 용출시키면서 작은 실리카 패드를 통하여 여과시켜 tert-부틸 (S)-9-브로모-10-클로로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.25 g, 89%)를 담황색 오일로 수득하였으며, 이는 정치시에 고체화되었다. 1H NMR (500 MHz, DMSO, 27℃) 1.41 (9H, s), 3.47 (2H, s), 3.52 (1H, dd), 3.63 (1H, d), 3.74 (1H, d), 3.85 - 3.99 (2H, m), 4.34 (2H, s), 7.55 (1H, d), 7.63 (1H, d).
Tert -부틸 ( 12 aS )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00025
디옥산 (9.84 mL) 중 (5-메틸-1H-인다졸-4-일)보론산 (0.306 g, 1.74 mmol), tert-부틸 (S)-9-브로모-10-클로로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.5 g, 1.16 mmol) 및 Pd(PPH3)4 (0.134 g, 0.12 mmol)의 용액을 탈기시키고, Na2CO3 (2 M) (1.737 mL, 3.47 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 100℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응물을 실온까지 냉각시키고, EtOAc (50 mL)로 희석시키고, 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, 유기 상을 건조시키고 (MgSO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~10% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.442 g, 79%)를 담황색 검으로 수득하였다. m/z: ES- [M-H]- 481/483.
( 12 aS )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-6-온
Figure pct00026
TFA (2.66 mL)를 DCM (2.66 mL) 중 tert-부틸 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.642 g, 1.33 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 MeOH (10 mL)로 희석시키고, SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-6-온 (0.479 g, 94%)을 황색 검으로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ 383.
( 12 aS )-2-아크릴로일-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-6-온 회전 이성질체 1, 실시예 1, 및 회전 이성질체 2, 실시예 2
Figure pct00027
아크릴로일 클로라이드 (0.106 mL, 1.31 mmol)를 소정 기간에 걸쳐 0℃까지 냉각시킨 DMA (2.156 mL) 중 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-6-온 (0.479 g, 1.25 mmol) 및 DIPEA (0.240 mL, 1.38 mmol)에 적가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물에 붓고, 생성된 고형물을 여과로 수집하고, 물로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH3OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 이것을 정제하였다. 이것은 (12aS)-2-아크릴로일-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-6-온의 회전 이성질체 1 (0.05 g, 18%)을 무색 검으로 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO, 27℃) 2.16 (3H, s), 3.59 (1H, s), 3.69 (1H, s), 3.75 - 4.05 (5H, m), 4.32 - 4.45 (2H, m), 5.66 - 5.8 (1H, m), 6.11 - 6.21 (1H, m), 6.67 - 6.82 (1H, m), 7.21 (1H, d), 7.32 (1H, d), 7.44 (1H, s), 7.51 (1H, d), 7.69 - 7.79 (1H, m), 13.10 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 437/439. 이것에 이어서 무색 검으로서의 (12aS)-2-아크릴로일-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-6-온의 회전 이성질체 2 (0.039 g, 14%)가 뒤따랐다. 1H NMR (500 MHz, DMSO, 27℃) 2.12 (3H, s), 3.52 - 3.74 (1H, m), 3.74 - 3.88 (3H, m), 3.88 - 4.04 (2H, m), 4.04 - 4.21 (1H, m), 4.28 - 4.43 (2H, m), 5.73 (1H, dd), 6.11 - 6.24 (1H, m), 6.67 - 6.82 (1H, m), 7.20 (1H, d), 7.31 (1H, d), 7.46 - 7.57 (2H, m), 7.71 (1H, dd), 13.09 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 437/439.
( 12 aS )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀 회전 이성질체 1 및 2
Figure pct00028
보란 THF 착물의 용액 (1 M) (3.66 mL, 3.66 mmol)을 실온에서 5분의 기간에 걸쳐 THF (5.49 mL) 중 tert-부틸 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (회전 이성질체들의 1:1 혼합물) (0.442 g, 0.92 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 생성된 용액을 65℃에서 12시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, MeOH (2 mL) 및 NaOH (2 M, 0.5 mL)를 첨가하고, 반응물을 30분 동안 교반시켰다. 반응물을 물 (20 mL) 및 EtOAc (20 mL)로 희석시키고, 염수 (2 x 20 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 건조상태까지 증발시켰다. 고형물을 DCM (10 mL)에 재용해시키고, TFA (5 mL)로 1시간 동안 처리하였다. 혼합물을 건조상태까지 증발시키고, SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 고형물을 수득하였다. 용출제로서 물 (0.1% NH3을 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 이것을 정제하였다. 이것은 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀의 회전 이성질체 1 (0.156 g, 92%)을 황색 검으로 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO, 27℃) 2.13 (3H, s), 2.27 - 2.35 (2H, m), 2.6 - 2.69 (2H, m), 2.72 - 2.84 (2H, m), 3.17 (2H, s), 3.65 (2H, d), 3.82 (1H, d), 4.27 (1H, dd), 6.97 (1H, d), 7.27 - 7.29 (1H, m), 7.31 (1H, s), 7.39 (1H, d), 7.47 (1H, dd), 13.05 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 369. 이것에 이어서 황색 검으로서의 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀의 회전 이성질체 2 (0.154 g, 91%)가 뒤따랐다. 1H NMR (500 MHz, DMSO, 27℃) 2.09 (3H, s), 2.26 - 2.34 (2H, m), 2.58 - 2.71 (2H, m), 2.72 - 2.86 (2H, m), 3.6 - 3.73 (2H, m), 3.80 (1H, d), 4.08 (2H, s), 4.26 (1H, dd), 6.97 (1H, d), 7.27 - 7.32 (2H, m), 7.45 (1H, d), 7.47 (1H, dd), 13.06 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 369.
1-(( 12 aS )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1 H )-일)프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 3
Figure pct00029
아크릴로일 클로라이드 (0.036 mL, 0.44 mmol)를 0℃에서 DMA (1.508 mL) 중 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀의 회전 이성질체 1 (0.156 g, 0.42 mmol) 및 DIPEA (0.148 mL, 0.85 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)에 붓고, 생성된 침전물을 물로 세척하면서 여과로 수집하고, 진공 하에 건조시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (1% NH3을 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 이것을 정제하였다. 이것은 1-((12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.025 g, 14%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD, 27℃) 2.17 (3H, s), 2.47 - 2.62 (1H, m), 2.85 - 3.07 (3H, m), 3.09 - 3.25 (1H, m), 3.44 - 3.54 (1H, m), 3.67 - 3.76 (1H, m), 3.96 (1H, d), 4 - 4.1 (1H, m), 4.12 - 4.32 (1H, m), 4.38 - 4.5 (1H, m), 5.77 (1H, d), 6.23 (1H, d), 6.71 - 6.87 (1H, m), 7.00 (1H, d), 7.31 (1H, d), 7.34 (1H, d), 7.41 (1H, s), 7.44 - 7.5 (1H, m). m/z: ES- [M-H]- 421/423.
1-(( 12 aS )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1 H )-일)프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2, 실시예 4
Figure pct00030
아크릴로일 클로라이드 (0.038 g, 0.42 mmol)를 0℃까지 냉각시킨 DMA (1.67 mL) 중 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀 (0.154 g, 0.42 mmol)의 회전 이성질체 2 및 DIPEA (0.054 g, 0.42 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응물을 물 (10 mL)에 붓고, 생성된 침전물을 물로 세척하면서 여과에 의해 수집하고, 진공 하에 건조시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (1% NH3을 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 이것은 1-((12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (0.038 g, 22%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3, 27℃) 2.19 (3H, s), 2.57 (1H, t), 2.85 - 3.06 (3H, m), 3.34 (1H, s), 3.47 - 3.6 (1H, m), 3.72 - 3.91 (2H, m), 4.06 (1H, d), 4.18 - 4.51 (2H, m), 5.75 (1H, d), 6.34 (1H, dd), 6.59 (1H, dd), 7.01 (1H, d), 7.19 (1H, d), 7.32 (1H, d), 7.4 - 7.47 (1H, m), 7.60 (1H, s), 10.37 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 423/425.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -2,6- 디플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00031
DCM (287 mL) 중 4-브로모-2,6-디플루오로벤조산 (10 g, 42.19 mmol)에 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (10.04 g, 46.41 mmol) 및 트리에틸아민 (23.52 mL, 168.78 mmol)을 첨가하였다. 그 후 1-프로판포스폰산 무수물 (EtOAc 중 50% 용액) (30 mL, 50.63 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM (500 mL)으로 희석시키고, 물 (1000 mL), 포화 NaHCO3 용액 (500 mL), 물 (500 mL) 및 염수 (500 mL)로 세척하였다. 유기 상을 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,6-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (15.03 g, 82%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.34 - 1.43 (9H, m), 2.55 - 3.03 (3H, m), 3.2 - 3.68 (4H, m), 3.8 - 4.15 (2H, m), 4.22 - 4.37 (1H, m), 7.55 - 7.68 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 378.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -7- 플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00032
수소화나트륨 (광유 중 60%) (0.953 g, 23.83 mmol)을 0℃에서 DMF (100 mL) 중tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,6-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (9.43 g, 21.67 mmol)에 한꺼번에 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃까지 가온하고, 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 에탄올로 켄칭하고, 5분 동안 교반시켰다. 생성된 용액을 물 (50 mL), EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 포화 NH4Cl (50 mL), 물 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 용매를 진공 하에 제거하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (8.88 g, 99%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, d), 3.44 - 3.54 (1H, m), 3.6 - 3.71 (3H, m), 3.83 - 3.96 (2H, m), 4.06 - 4.29 (3H, m), 7.25 (1H, s), 7.48 (1H, dd). m/z: ES+ [M+H]+ = 416.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -7- 메톡시 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00033
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (8.65 g, 20.83 mmol)를 DMF (100 mL)에 용해시키고, 0℃에서 5분 동안 탈기시켰다. 소듐 메톡시드 (4.95 g, 91.65 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 가열하였다. 추가의 소듐 메톡시드 (4.95 g, 91.65 mmol)를 첨가하고, 추가 2시간 동안 교반시켰다. 25℃까지 냉각시킨 후 상기 용액을 EtOAc (750 mL) 및 물 (750 mL)로 희석시켰다. 유기 층을 분리하고, 물 (500 mL), 염수 (500 mL)로 세척하고, 상 분리기에서 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 수득하고, 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 이를 정제하였다. 이것은 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3.43 g, 39%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.20 (1H, s), 3.35 (1H, d), 3.45 (1H, s), 3.61 - 3.75 (2H, m), 3.79 (3H, s), 3.84 - 3.98 (2H, m), 4.03 (1H, dd), 4.14 (1H, t), 6.93 (1H, d), 7.14 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 427.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -7- 메톡시 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00034
N-클로로숙신이미드 (1.07 g, 8.03 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.102 mL, 0.8 mmol)을 MeCN (80 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3.43 g, 8.03 mmol)의 교반 용액에 한꺼번에 첨가하고, 반응물을 25℃에서 15분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 물 (100 mL), 포화 NaHCO3 (100 mL), 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 상을 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 용매를 감압 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 이것을 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2.73 g, 74%)를 백색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.20 (1H, s), 3.32 - 3.54 (2H, m), 3.62 - 3.78 (2H, m), 3.80 (3H, s), 3.85 - 4.04 (2H, m), 4.10 (1H, dd), 4.22 (1H, t), 7.35 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 460.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -7- 메톡시 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00035
보란-THF 착물의 용액 (1 M) (20.79 mL, 20.79 mmol)을 25℃에서 THF (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.2 g, 2.6 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 생성된 용액을 75℃에서 1시간 동안 가열하고, 25℃까지 냉각시키고, i-PrOH (20 mL)로 켄칭하였다. NaOH (2 M, 10 mL)를 첨가하고, 반응물을 추가 30분 동안 교반시켰다. 그 후 반응물을 물 (100 mL) 및 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 유기 층을 염수 (2x 20 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.836 g, 72%)를 투명 오일로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.58 - 2.75 (3H, m), 2.99 (1H, t), 3.34 - 3.51 (2H, m), 3.6 - 3.7 (3H, m), 3.81 (3H, s), 3.98 (1H, d), 4.25 - 4.38 (1H, m), 7.12 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 446.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00036
2-메틸테트라히드로푸란 (14 mL) 및 물 (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (836 mg, 1.87 mmol), (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (291 mg, 1.87 mmol) 및 탄산칼륨 (1.5 g, 11.20 mmol)의 혼합물을 15분 동안 탈기시켰다. Ruphos Pd G3 (156 mg, 0.19 mmol) 및 RuPhos (87 mg, 0.19 mmol)를 25℃에서 첨가하고, 그 후 반응물을 60℃에서 4시간 동안 가열하였다. 25℃까지 냉각시킨 후 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 물 (2 x 100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 상을 상 분리 카트리지에서 건조시키고, 용매를 건조상태까지 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 이것은 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트를 크림색 폼 (414 mg)으로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 470.
2-[( 12aR )-10- 클로로 -7- 메톡시 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-플루오로페놀
Figure pct00037
HCl (디옥산 중 4 M) (1.94 mL, 7.77 mmol)을 25℃에서 MeOH (2 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (186 mg, 0.39 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반시키고, SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 2-[(12aR)-10-클로로-7-메톡시-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀 (139 mg, 94%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3CN, 30℃) 2.3 - 2.48 (2H, m), 2.58 - 2.85 (5H, m), 2.88 (1H, d), 3.46 (1H, dd), 3.59 (1H, ddd), 3.76 (3H, s), 4.07 (1H, d), 4.23 (1H, dd), 6.64 - 6.81 (3H, m), 7.24 (1H, q). m/z: ES+ [M+H]+ = 379.
1-[( 12aR )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-7- 메톡시 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온, 실시예 5
Figure pct00038
0℃의 DCM (4 mL) 중 2-[(12aR)-10-클로로-7-메톡시-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀 (139 mg, 0.37 mmol) 및 DIPEA (0.083 mL, 0.48 mmol)의 교반 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.031 mL, 0.39 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석시키고, 물로 켄칭하고, 상 분리 카트리지를 사용하여 유기 층을 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 조 검을 수득하고, 저온 1 M NH3/MeOH (20 mL)에 용해시키고, 25℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조상태까지 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters CSH C18 OBD 컬럼, 30 x 100 mm 내경, 5 마이크론의 입자 크기)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시키고, MeOH (3 mL)에 용해시키고, SFC를 사용하여 정제하였다 (컬럼: Princeton Diol, 30 x 250 mm, 5 마이크론; 이동상: 8분에 걸쳐 20~25%의 MeOH + 0.1% NH3 / 80~75%의 scCO2; 유량: 100 mL/분; BPR: 120 bar). 용매를 증발시켜 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (59 mg, 37%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.34 - 2.46 (1H, m), 2.53 - 2.56 (1H, m), 2.61 - 2.7 (1H, m), 2.71 - 2.8 (1H, m), 2.84 (1H, d), 2.89 - 3.05 (1H, m), 3.55 (1H, dd), 3.68 (1H, dt), 3.76 (3H, s), 3.85 - 3.99 (1H, m), 4 - 4.12 (1H, m), 4.31 - 4.45 (1H, m), 5.70 (1H, s), 6.12 (1H, d), 6.62 - 6.72 (2H, m), 6.77 (1H, dd), 6.79 - 6.89 (1H, m), 7.22 (1H, q), 9.82 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 433.
tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -2,6- 디플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00039
DCM (287 ml) 중 4-브로모-2,6-디플루오로벤조산 (10.00 g, 42.19 mmol)에 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (10.04 g, 46.41 mmol) 및 트리에틸아민 (23.52 ml, 168.78 mmol)을 첨가하였다. 그 후 T3P® (EtOAc 중 50%) (30 ml, 50.63 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM (500 mL)으로 희석시키고, 그 후 물 (1 L), 포화 NaHCO3 (0.5 L), 물 (0.5 L) 및 포화 염수 (0.5 L)로 세척하였다. 유기 상을 건조시키고 (상 분리 카트리지), 증발시켜 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,6-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (15.03 g, 82%)를 수득하였다. 물질을 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.34 - 1.43 (9H, m), 2.55 - 3.03 (3H, m), 3.2 - 3.68 (4H, m), 3.8 - 4.15 (2H, m), 4.22 - 4.37 (1H, m), 7.55 - 7.68 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 378.
tert -부틸 ( 12aR )-9- 브로모 -7- 플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6H- 피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 -2(1H)-카르복실레이트
Figure pct00040
수소화나트륨 (광유 중 60%) (0.95 g, 23.8 mmol)을 0℃에서 DMF (100 ml) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,6-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (9.43 g, 21.7 mmol)에 한꺼번에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온까지 가온하고, 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOH로 켄칭하고, 5분 동안 교반시켰다. 생성된 용액을 물 (50 ml) 및 EtOAc (100 ml)로 희석시키고, 그 후 포화 NH4Cl (50 ml), 물 (50 ml) 및 포화 염수 (50 ml)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (상 분리 카트리지), 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, d), 3.44 - 3.54 (1H, m), 3.6 - 3.71 (3H, m), 3.83 - 3.96 (2H, m), 4.06 - 4.29 (3H, m), 7.25 (1H, s), 7.48 (1H, dd). m/z: ES+ [M+H]+ = 416.
tert -부틸 ( 12aR )-9- 브로모 -7- 메톡시 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6H- 피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 -2(1H)-카르복실레이트
Figure pct00041
tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (8.65 g, 20.83 mmol)를 DMF (100 mL)에 용해시키고, 0℃에서 5분 동안 탈기시켰다. 소듐 메톡시드 (4.95 g, 91.65 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃까지 가열하였다. 1시간 후 소듐 메톡시드 (4.95 g, 91.65 mmol)를 첨가하고, 교반을 2시간 동안 계속하였다. 실온까지 냉각시킨 후, 상기 용액을 EtOAc (750 mL) 및 물 (750 mL)로 희석시켰다. 유기 층을 분리하고, 그 후 물 (500 ml) 및 포화 염수 (500 ml)로 세척한 후 상 분리기에서 건조시키고, 증발시켰다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3.43 g, 38.5 %)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.20 (1H, s), 3.35 (1H, d), 3.45 (1H, s), 3.61 - 3.75 (2H, m), 3.79 (3H, s), 3.84 - 3.98 (2H, m), 4.03 (1H, dd), 4.14 (1H, t), 6.93 (1H, d), 7.14 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 427.
tert -부틸 ( 12aR )-9- 브로모 -10- 클로로 -7- 메톡시 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트
Figure pct00042
N-클로로숙신이미드 (1.07 g, 8.03 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.102 ml, 0.80 mmol)을 아세토니트릴 (80 ml) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3.43 g, 8.03 mmol)의 교반 용액에 한꺼번에 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 15분 동안 교반시키고, 그 후 EtOAc (100 ml)로 희석시켰다. 그 후, 분리된 유기 층을 물 (100 ml), 포화 NaHCO3 (100 ml), 물 (100 ml) 및 포화 염수 (100 ml)로 세척하였다. 유기 상을 건조시키고 (상 분리 카트리지), 그 후 증발시켰다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2.73 g, 73.7 %)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.20 (1H, s), 3.32 - 3.54 (2H, m), 3.62 - 3.78 (2H, m), 3.80 (3H, s), 3.85 - 4.04 (2H, m), 4.10 (1H, dd), 4.22 (1H, t), 7.35 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 460.
tert -부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트
Figure pct00043
메틸-THF (21 ml) 및 물 (7 ml) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.3 g, 2.82 mmol), (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (0.43 g, 2.82 mmol) 및 탄산칼륨 (2.33 g, 16.89 mmol)의 혼합물을 15분 동안 탈기시켰다. RuPhos Pd G3 (0.235 g, 0.28 mmol) 및 RuPhos (0.131 g, 0.28 mmol)를 25℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 60℃까지 가열하였다. 그 후 (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (0.439 g, 2.82 mmol), 물 (2 ml) 및 탄산칼륨 (1.20 g)을 도입하였다. 3시간 후 반응물을 25℃까지 냉각시키고, EtOAc (200 ml)로 희석시키고, 그 후 물 (2 x 100 ml) 및 포화 염수 (100 ml)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (상 분리 카트리지), 증발시켰다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.930 g, 67.0 %)를 크림색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.43 (9H, s), 3.41 (1H, d), 3.53 (1H, s), 3.73 (1H, s), 3.76 (3H, s), 3.89 - 4.03 (2H, m), 4.03 - 4.16 (3H, m), 4.16 - 4.3 (1H, m), 6.69 - 6.84 (2H, m), 6.87 - 6.93 (1H, m), 7.16 - 7.36 (1H, m), 9.95 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 493.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-7-히드록시-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온
Figure pct00044
0℃의 DCM (3 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (352 mg, 0.71 mmol)에 삼브롬화붕소 (DCM 중 1 M) (4.28 mL, 4.28 mmol)를 적가하고, 2시간 동안 25℃까지 교반시켰다. 반응물을 MeOH로 켄칭하고, SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-히드록시-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (243 mg, 90%)을 황색 투명 유리로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.67 - 2.76 (1H, m), 2.77 - 2.9 (2H, m), 2.9 - 3 (1H, m), 3.35 - 3.49 (1H, m), 3.72 - 3.89 (2H, m), 4.05 - 4.14 (2H, m), 4.59 (1H, t), 6.60 (1H, d), 6.67 - 6.81 (2H, m), 7.15 - 7.33 (1H, m), 9.90 (1H, d), 11.01 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 379.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-7-히드록시-2-( 프로프 -2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온, 실시예 6
Figure pct00045
0℃의 DCM (6 mL) 중 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-히드록시-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (243 mg, 0.64 mmol) 및 DIPEA (0.145 mL, 0.83 mmol)의 교반 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.053 mL, 0.67 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (20 mL)로 희석시키고, 물 (20 mL) 및 염수 (20 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 증발시켜 조 검을 제공하였다. 조 생성물을 1 M NH3/MeOH (20 mL)에 용해시키고, 25℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조상태까지 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 샘플을 MeOH (2 mL) 및 DCM (1 mL)에 용해시키고, 여과시키고, MeOH (1 mL)로 세척하였다. 상기 용액을 SFC를 사용하여 정제하였다 (컬럼: Chiralpak IC, 20 x 250 mm, 5 마이크론 이동상: 30% MeOH = 0.1% NH3 / 70% scCO2 유량: 60 mL/분; BPR: 120 bar). 용매를 증발시켜 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-히드록시-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (151 mg, 54%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.5 - 4 (6H, m), 4.07 (1H, s), 4.15 - 4.38 (2H, m), 5.64 - 5.81 (1H, m), 6.17 (1H, d), 6.6 - 6.83 (4H, m), 7.24 (1H, q), 9.98 (1H, s), 10.73 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 433.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -3- 클로로 -2- 플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00046
4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤조산 (5 g, 19.73 mmol), HATU (11.22 g, 29.59 mmol) 및 DIPEA (10.54 mL, 59.18 mmol)를 THF (200 mL)에서 30분 동안 교반시키고, 그 후 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5.12 g, 23.67 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 3.5시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시키고, EtOAc (100 mL)에 재용해시키고, 포화 NaHCO3 (50 mL), 물 (2 x 50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 상 분리 카트리지에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 황색 오일을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~5% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (11.83 g, >100%)를 백색 고형물로 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.75 - 3.08 (3H, m), 3.31 - 3.36 (1H, m), 3.4 - 3.57 (2H, m), 3.57 - 3.68 (1H, m), 3.71 - 3.89 (1H, m), 4.28 (1H, d), 4.8 - 4.87 (1H, m), 7.35 (1H, t), 7.69 - 7.75 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 451.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00047
리튬 비스(트리메틸실릴)아미드 (THF 중 1 M) (26.2 mL, 26.19 mmol)를 25℃에서 NMP (300 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (11.83 g, 26.19 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 120℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응물을 25℃까지 냉각시키고, EtOAc (2000 mL)로 희석시키고, 물 (1000 mL), 포화 NaHCO3 (500 mL), 물 (500 mL) 및 염수 (500 mL)로 세척하였다. 유기 층을 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 용매를 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피 (용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하여 무색 오일을 제공하고, 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 이를 정제하였다. 이것은 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (7.25 g, 64%)를 황색 왁스질 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.43 - 3.56 (3H, m), 3.61 (1H, d), 3.73 (1H, dd), 3.93 (2H, ddd), 4.34 (2H, d), 7.55 (1H, d), 7.63 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 433.
Tert -부틸 ( 12a R )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트 회전 이성질체 1 및 2
Figure pct00048
디클로로[1,1'-비스(디-tert-부틸포스피노)페로센]팔라듐(II) (0.302 g, 0.46 mmol)을 1,4-디옥산 (54 mL) 및 물 (13 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2 g, 4.63 mmol), (5-메틸-1H-인다졸-4-일)보론산 (1.63 g, 9.27 mmol) 및 탄산나트륨 (2.7 g, 25.48 mmol)의 탈기 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 6시간 동안 가열하고, 그 후 25℃까지 냉각시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (200 mL)로 희석시키고, 포화 NaHCO3 (100 mL), 물 (2 x 100 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 이것을 정제하였다. 이것은 크림색 고형물을 제공하였으며, 이를 SFC (컬럼: Chiralpak 내경, 30 x 250 mm, 5 마이크론 이동상: 40% MeOH + 0.1% NH3 / 60% scCO2 유량: 90 mL/분; BPR: 120 bar)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 1 (198 mg, 8%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.43 (9H, s), 2.13 (3H, s), 3.46 - 3.64 (3H, m), 3.68 (1H, d), 3.79 - 3.88 (1H, m), 3.88 - 3.97 (1H, m), 4.06 (1H, q), 4.37 (2H, d), 7.20 (1H, d), 7.32 (1H, d), 7.51 (1H, d), 7.53 (1H, s), 7.71 (1H, d), 13.07 (1H, s). m/z: ES- [M-H]- = 481. 이것에 이어서 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 2 (207 mg, 9%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.43 (9H, s), 2.16 (3H, s), 3.45 - 3.64 (3H, m), 3.68 (1H, d), 3.76 - 3.87 (1H, m), 3.91 - 4 (1H, m), 4 - 4.1 (1H, m), 4.37 (2H, d), 7.20 (1H, d), 7.32 (1H, d), 7.43 (1H, s), 7.51 (1H, d), 7.73 (1H, d), 13.08 (1H, s). m/z: ES- [M-H]- = 481.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온 회전 이성질체 1
Figure pct00049
HCl (디옥산 중 4 M) (2.05 mL, 8.2 mmol)을 25℃에서 MeOH (3 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 1 (198 mg, 0.41 mmol)에 첨가하고, 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 1 (155 mg, 99%)을 무색 오일로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 383.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -6-온 회전 이성질체 2
Figure pct00050
HCl (디옥산 중 4 M) (2.15 mL, 8.61 mmol)을 25℃에서 MeOH (3 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 2 (208 mg, 0.43 mmol)에 첨가하고, 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 2 (164 mg, 99%)를 무색 오일로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.16 (3H, s), 2.65 - 2.74 (2H, m), 2.77 - 2.99 (3H, m), 3.42 - 3.54 (1H, m), 3.85 (2H, dt), 4.23 (1H, dd), 4.69 (1H, t), 7.18 (1H, d), 7.32 (1H, d), 7.43 (1H, s), 7.50 (1H, d), 7.73 (1H, d), 13.08 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 383.
( 12aR )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온 회전 이성질체 1, 실시예 7
Figure pct00051
-78℃의 DCM (4 mL), i-PrOH (1 mL) 및 피리딘 (0.098 mL, 1.21 mmol) 중 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 1 (155 mg, 0.4 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.033 mL, 0.4 mmol)를 5분에 걸쳐 적가하고, -78℃에서 실온까지 1시간 동안 교반시켰다. 상기 용액을 포화 NaHCO3 (3 mL)으로 켄칭하고, EtOAc (10 mL)로 희석시키고, 물 (10 mL) 및 염수 (5 mL)로 세척하였다. 유기 상을 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 이것을 정제하였다. 이것은 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 1 (52 mg, 29%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.13 (3H, s), 3.64 (1H, d), 3.73 - 3.89 (3H, m), 3.89 - 4.08 (2H, m), 4.09 - 4.2 (1H, m), 4.32 - 4.45 (2H, m), 5.76 (1H, d), 6.19 (1H, d), 6.68 - 6.83 (1H, m), 7.21 (1H, d), 7.32 (1H, d), 7.51 (1H, d), 7.52 - 7.77 (2H, m), 13.07 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 437.
( 12aR )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온 회전 이성질체 2, 실시예 8
Figure pct00052
-78℃의 DCM (5 mL), i-PrOH (1 mL) 및 피리딘 (0.104 mL, 1.29 mmol) 중 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 2 (164 mg, 0.43 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.035 mL, 0.43 mmol)를 5분에 걸쳐 서서히 적가하고, -78℃에서 실온까지 1시간 동안 교반시켰다. 상기 용액을 포화 NaHCO3 (3 mL)으로 켄칭하고, EtOAc (10 mL)로 희석시키고, 물 (10 mL)로 세척하였다. 생성물은 수성 상에 가용성이어서 감압 하에 물을 제거하고 1 M NH3/MeOH에 용해시켰다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 이것은 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 2 (53 mg, 28%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.16 (3H, s), 3.65 (1H, d), 3.83 (2H, s), 3.86 - 4.05 (3H, m), 4.05 - 4.15 (1H, m), 4.40 (2H, t), 5.67 - 5.8 (1H, m), 6.12 - 6.23 (1H, m), 6.67 - 6.83 (1H, m), 7.21 (1H, d), 7.32 (1H, d), 7.44 (1H, s), 7.51 (1H, d), 7.74 (1H, t), 13.09 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 437.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00053
보란 THF 착물의 용액 (1 M) (60 mL, 60 mmol)을 25℃에서 THF (15 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (4.9 g, 11.35 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 생성된 용액을 75℃에서 3.5시간 동안 교반시키고, 그 후 25℃까지 냉각시키고, i-PrOH (150 mL)로 켄칭하였다. NaOH (2 M, 100 mL)를 첨가하고, 반응물을 30분 동안 교반시켰다. 반응물을 물 (20 mL) 및 EtOAc (50 mL)로 희석시키고, 염수 (2 x 20 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3.98 g, 84%)를 무색 오일로 수득하였으며, 이는 정치시에 고체화되었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.39 (9H, s), 2.30 (1H, ddd), 2.71 (2H, s), 3.07 (1H, ddd), 3.53 - 3.64 (3H, m), 3.66 (1H, q), 3.70 (1H, s), 3.78 (1H, d), 4.34 (1H, dd), 7.17 (1H, d), 7.41 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 416.9.
Tert -부틸 ( 12a R )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트 회전 이성질체 1 및 2
Figure pct00054
디클로로[1,1'-비스(디-tert-부틸포스피노)페로센]팔라듐(II) (126 mg, 0.19 mmol)을 1,4-디옥산 (22 mL) 및 물 (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (806 mg, 1.93 mmol), (5-메틸-1H-인다졸-4-일)보론산 (679 mg, 3.86 mmol) 및 무수 탄산나트륨 (1125 mg, 10.61 mmol)의 탈기 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 2시간 동안 가열하고, 그 후 25℃까지 냉각시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (200 mL)로 희석시키고, 유기 층을 포화 NaHCO3 (100 mL), 물 (2 x 100 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에서 건조시켰다. 용매를 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 이것을 정제하였다. 이것은 고형물을 제공하였으며, 이를 SFC (컬럼: Chiralpak IG, 30 x 250 mm, 5 마이크론 이동상: 40% MeOH + 0.1% NH3 / 40% scCO2 유량: 90 mL/분; BPR: 120 bar)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 1 (199 mg, 22%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 100℃) 1.44 (9H, s), 2.15 (3H, s), 2.78 - 2.92 (2H, m), 3.12 - 3.2 (1H, m), 3.62 - 3.74 (4H, m), 3.77 (2H, d), 3.99 (1H, d), 4.35 (1H, dd), 6.97 (1H, d), 7.29 (2H, d), 7.39 (1H, s), 7.47 (1H, d), 12.74 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 469. 이것에 이어서 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 2 (224 mg, 25%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 100℃) 1.44 (9H, s), 2.12 (3H, s), 2.36 - 2.46 (1H, m), 2.85 (2H, td), 3.11 - 3.2 (1H, m), 3.64 - 3.73 (3H, m), 3.71 - 3.81 (2H, m), 3.96 (1H, d), 4.34 (1H, d), 6.97 (1H, d), 7.29 (2H, dd), 7.4 - 7.5 (2H, m), 12.74 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 469.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 회전 이성질체 1
Figure pct00055
HCl (디옥산 중 4 M) (2.12 mL, 8.49 mmol)을 25℃에서 MeOH (2 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 1 (199 mg, 0.42 mmol)에 첨가하고, 생성된 용액을 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀의 회전 이성질체 1 (157 mg, 100%)을 투명 유리로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.13 (3H, s), 2.3 - 2.35 (2H, m), 2.43 - 2.47 (1H, m), 2.63 - 2.7 (2H, m), 2.73 - 2.85 (3H, m), 3.61 - 3.7 (2H, m), 3.83 (1H, d), 4.27 (1H, dd), 6.97 (1H, d), 7.29 (1H, s), 7.31 (1H, s), 7.39 (1H, s), 7.47 (1H, d), 13.03 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 369.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 회전 이성질체 2
Figure pct00056
HCl (디옥산 중 4 M) (2.38 mL, 9.55 mmol)을 25℃에서 MeOH (3 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 2 (224 mg, 0.48 mmol)에 첨가하고, 생성된 용액을 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀의 회전 이성질체 2 (180 mg, 100%)를 투명 오일로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.10 (3H, s), 2.29 - 2.38 (2H, m), 2.43 - 2.47 (1H, m), 2.59 - 2.7 (2H, m), 2.77 - 2.88 (3H, m), 3.63 - 3.72 (2H, m), 3.81 (1H, d), 4.27 (1H, dd), 6.97 (1H, d), 7.27 - 7.32 (2H, m), 7.43 - 7.49 (2H, m), 13.03 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 369.
1-(( 12a R )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -벤조[ f ]피라지노[2,1- c ][1,4]옥사제핀-2(1 H )-일)프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 9
Figure pct00057
-78℃의 DCM (5 mL), i-PrOH (1 mL) 및 피리딘 (0.105 mL, 1.29 mmol) 중 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀의 회전 이성질체 1 (159 mg, 0.43 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.035 mL, 0.43 mmol)를 5분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 0℃까지 가온하고, 10분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시키고, 1 M NH3/MeOH에 용해시키고, 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하였다. 이것은 1-((12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (30 mg, 16%)을 크림색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 100℃) 2.15 (3H, s), 2.41 - 2.48 (2H, m), 2.85 - 2.92 (2H, m), 3.30 (1H, t), 3.71 - 3.82 (2H, m), 3.94 (2H, d), 3.99 (1H, d), 4.40 (1H, dd), 5.67 (1H, dd), 6.10 (1H, dd), 6.75 (1H, dd), 6.97 (1H, d), 7.28 (1H, d), 7.30 (1H, d), 7.38 (1H, s), 7.47 (1H, d), 12.75 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 423.1.
1-(( 12a R )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 벤조[ f ]피라지노[2,1- c ][1,4]옥사제핀 -2(1 H )-일)프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2, 실시예 10
Figure pct00058
-78℃의 DCM (5 mL), i-PrOH (1 mL) 및 피리딘 (0.118 mL, 1.46 mmol) 중 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀의 회전 이성질체 2 (180 mg, 0.49 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.04 mL, 0.49 mmol)를 5분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 0℃까지 가온하고, 10분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시키고, 1 M NH3/MeOH에 용해시키고, 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하였다. 이것은 1-((12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (42 mg, 20%)를 크림색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.10 (3H, s), 2.39 (1H, s), 2.72 - 2.95 (3H, m), 3.08 (1H, d), 3.31 - 3.43 (1H, m), 3.68 - 3.8 (2H, m), 3.91 (1H, d), 3.98 - 4.15 (1H, m), 4.34 - 4.47 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.14 (1H, d), 6.78 - 6.9 (1H, m), 6.99 (1H, d), 7.31 (2H, dd), 7.46 (1H, s), 7.48 (1H, s), 13.03 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 423.
4- 브로모 -3- 클로로 -2,5- 디플루오로벤조산
Figure pct00059
4-브로모-2,5-디플루오로벤조산 (10g, 42.19 mmol)을 실온에서 진한 황산 (80 mL)에 첨가하고, 생성된 현탁물을 80℃에서 가열하였다. 그 후 N-클로로숙신이미드 (11.27g, 84.39 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 하룻밤 가열하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고, 얼음 (200 g)에 붓고, 수성 상을 EtOAc로 추출하였다. 증발 후 수득된 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~60% MeOH)로 정제하여 4-브로모-3-클로로-2,5-디플루오로벤조산 (4.8 g, 42%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 7.81 (1H, dd), 13.98 (1H, s). m/z: ES- [M+H]- = 271.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -3- 클로로 -2,5- 디플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00060
tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (3.98 g, 18.42 mmol)를 25℃에서 THF (80 mL) 중 4-브로모-3-클로로-2,5-디플루오로벤조산 (5 g, 18.42 mmol), HATU (10.51 g, 27.63 mmol) 및 DIPEA (6.43 mL, 36.84 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~50% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-3-클로로-2,5-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5.72 g, 66%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, d), 2.74 - 3.05 (1H, m), 3.15 (1H, t), 3.26 - 3.37 (2H, m), 3.41 - 3.63 (2H, m), 3.67 - 3.90 (1H, m), 3.94 - 4.14 (1H, m), 4.19 - 4.33 (1H, m), 4.44 - 5.00 (1H, m), 7.59 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 469.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8- 플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00061
수소화나트륨 (0.971 g, 24.27 mmol)을 0℃에서 THF (50 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-3-클로로-2,5-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5.7 g, 12.14 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 16시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~40% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2.02 g, 37%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.13 - 3.34 (1H, m), 3.44 - 3.50 (2H, m), 3.58 - 3.67 (1H, m), 3.72 - 3.80 (1H, m), 3.85 - 3.90 (1H, m), 3.92 - 4.02 (1H, m), 4.32 (2H, d), 7.59 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 449.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트 회전 이성질체 1 및 회전 이성질체 2
Figure pct00062
2-메틸테트라히드로푸란 (11 mL) 및 물 (4 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (656 mg, 1.46 mmol), (2-플루오로-6-메톡시페닐)보론산 (496 mg, 2.92 mmol) 및 탄산칼륨 (1210 mg, 8.75 mmol)의 혼합물을 15분 동안 탈기시켰다. RuPhos Pd G3 (122 mg, 0.15 mmol) 및 RuPhos (68.1 mg, 0.15 mmol)를 25℃에서 첨가하고, 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 25℃까지 냉각시킨 후 상기 용액을 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 물 (2 x 100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 상을 상 분리 카트리지에서 건조시키고, 용매를 건조상태까지 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 이것은 크림색 폼을 제공하였으며, 이를 SFC (컬럼: Chiralpak IG, 30 x 250 mm, 5 마이크론 이동상: 50% MeOH 0.1% NH3/ 50% scCO2 유량: 100 mL/분; BPR: 120 bar)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 1 (208 mg, 29%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.42 (9H, s), 3.48 (2H, s), 3.54 - 3.7 (2H, m), 3.75 - 3.85 (4H, m), 3.85 - 3.97 (1H, m), 3.97 - 4.06 (1H, m), 4.32 (2H, d), 6.98 (1H, t), 7.04 (1H, d), 7.47 - 7.59 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 439. 이것에 이어서 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 2 (163 mg, 23%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.42 (9H, s), 3.43 - 3.63 (4H, m), 3.63 - 3.73 (1H, m), 3.78 (3H, s), 3.89 - 4.07 (2H, m), 4.35 (2H, d), 6.97 (1H, t), 7.06 (1H, d), 7.49 - 7.59 (2H, m). m/z: ES- [M-H]- 493.
( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온 회전 이성질체 1
Figure pct00063
0℃의 DCM (3 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 1 (108 mg, 0.22 mmol)에 삼브롬화붕소 (DCM 중 1 M) (1.309 mL, 1.31 mmol)를 적가하고, 4시간 동안 25℃까지 교반시켰다. 반응물을 MeOH로 켄칭하고, SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 1 (83 mg, 100%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.6 - 2.71 (1H, m), 2.83 (2H, qd), 2.94 (1H, dt), 3.17 (1H, d), 3.38 (1H, ddd), 3.77 - 3.92 (2H, m), 4.17 (1H, dd), 4.66 (1H, t), 6.73 - 6.86 (2H, m), 7.32 (1H, td), 7.50 (1H, d), 10.18 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 380.9. 1.
( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온 회전 이성질체 2
Figure pct00064
0℃의 DCM (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 2 (163 mg, 0.33 mmol)에 삼브롬화붕소 (DCM 중 1 M) (1.309 mL, 1.31 mmol)를 적가하고, 4시간 동안 25℃까지 교반시켰다. 반응물을 MeOH로 켄칭하고, SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 2 (112 mg, 89%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.63 - 2.75 (1H, m), 2.77 - 2.99 (3H, m), 3.4 - 3.52 (1H, m), 3.76 - 3.89 (3H, m), 4.18 (1H, q), 4.66 (1H, t), 6.76 (1H, t), 6.83 (1H, d), 7.32 (1H, q), 7.53 (1H, d), 10.14 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 381. 1.
( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온 회전 이성질체 1, 실시예 11
Figure pct00065
-78℃의 DCM (4 mL), i-PrOH (1 mL) 및 피리딘 (0.078 mL, 0.96 mmol) 중 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 1 (122 mg, 0.32 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.026 mL, 0.32 mmol)를 5분에 걸쳐 서서히 적가하고, 그 후 반응 혼합물을 20분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시키고, MeCN에 용해시키고, 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하였다. 이것은 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 1 (8 mg, 6%)을 크림색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3CN, 30℃) 3.6 - 3.85 (3H, m), 3.85 - 3.98 (2H, m), 4.04 (2H, dq), 4.23 - 4.42 (2H, m), 5.72 (1H, d), 6.14 - 6.28 (1H, m), 6.57 - 6.7 (1H, m), 6.74 - 6.89 (2H, m), 7.35 (1H, dt), 7.47 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 435.0. 1.
( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-2-( 프로프 -2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온 회전 이성질체 2, 실시예 12
Figure pct00066
-78℃의 DCM (3 mL), i-PrOH (1 mL) 및 피리딘 (0.071 mL, 0.88 mmol) 중 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 2 (112 mg, 0.29 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.024 mL, 0.29 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 20분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시키고, 1 M NH3/MeOH에 용해시키고, 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하였다. 이것은 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 2 (12 mg, 9%)를 크림색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 100℃) 3.57 - 3.82 (4H, m), 3.82 - 3.97 (2H, m), 3.97 - 4.14 (2H, m), 4.3 - 4.46 (2H, m), 5.70 (1H, dd), 6.14 (1H, dd), 6.63 - 6.76 (2H, m), 6.84 (1H, d), 7.31 (1H, q), 7.51 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 435.4.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8,10- 디클로로 -7- 메톡시 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00067
N-클로로숙신이미드 (0.37 g, 2.82 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.036 mL, 0.28 mmol)을 MeCN (28 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.3 g, 2.82 mmol)의 교반 용액에 한꺼번에 첨가하고, 반응물을 25℃에서 15분 동안 교반시켰다. 그 후 반응물을 EtOAc (100 ml), 물 (100 mL)로 희석시키고, 포화 NaHCO3 (100 mL), 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 상을 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 용매를 감압 하에 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디클로로-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.39 g, 100%)를 크림색 고형물로 수득하고, 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.13 - 3.28 (1H, m), 3.39 (1H, d), 3.50 (1H, s), 3.67 (1H, d), 3.76 (1H, d), 3.88 (3H, s), 3.93 - 4 (1H, m), 4.04 - 4.1 (1H, m), 4.1 - 4.19 (1H, m), 4.21 - 4.34 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 495.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8,10- 디클로로 -7- 메톡시 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00068
보란 THF 착물의 용액 (1 M) (24.18 mL, 24.18 mmol)을 25℃에서 THF (6 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디클로로-7-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.5 g, 3.02 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 생성된 용액을 75℃에서 20시간 동안 교반시키고, 그 후 25℃까지 냉각시키고, 물 및 포화 NH4Cl로 켄칭하고, 30분 동안 교반시켰다. 반응물을 물 (100 mL) 및 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 염수 (2x 100 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디클로로-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.97 g, 67%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.34 - 2.43 (1H, m), 2.69 - 2.84 (3H, m), 3.03 (1H, t), 3.61 - 3.75 (4H, m), 3.77 (3H, s), 3.93 (1H, d), 4.39 (1H, dd). m/z: ES+ [M+H]+ = 480.9.
Tert -부틸 (12a R )-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00069
2-메틸테트라히드로푸란 (13 mL) 및 물 (4 mL) 중 (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (281 mg, 1.8 mmol), tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디클로로-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (870 mg, 1.8 mmol) 및 탄산칼륨 (1496 mg, 10.83 mmol)의 혼합물을 탈기시켰다. RuPhos Pd G3 (151 mg, 0.18 mmol) 및 RuPhos (84 mg, 0.18 mmol)를 25℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 가열하였다. 25℃까지 냉각시킨 후 상기 용액을 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 물 (2 x 100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 상을 상 분리 카트리지에서 건조시키고, 용매를 건조상태까지 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (453 mg, 49%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 2.39 - 2.45 (1H, m), 2.63 - 2.77 (2H, m), 2.82 - 2.89 (1H, m), 2.95 - 3.06 (1H, m), 3.65 - 3.75 (4H, m), 3.77 (3H, s), 3.97 (1H, d), 4.36 - 4.45 (1H, m), 6.62 - 6.81 (2H, m), 7.27 (1H, q), 9.89 - 10.03 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 512.9.
( 12aR )-8,10- 디클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-7-올
Figure pct00070
0℃의 DCM (3 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (453 mg, 0.88 mmol)에 삼브롬화붕소 (DCM 중 1 M) (5.29 mL, 5.29 mmol)를 적가하고, 2시간 동안 25℃까지 교반시켰다. 반응물을 MeOH로 켄칭하고, SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-7-올 (351 mg, 100%)를 크림색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.35 - 2.44 (2H, m), 2.55 - 2.65 (1H, m), 2.69 - 2.76 (1H, m), 2.76 - 2.93 (3H, m), 3.49 - 3.59 (1H, m), 3.59 - 3.71 (1H, m), 3.98 - 4.15 (2H, m), 4.21 - 4.32 (1H, m), 6.57 - 6.88 (2H, m), 7.24 (1H, q), 9.89 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 399.
1-[( 12aR )-8,10- 디클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-7-히드록시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 13 및 회전 이성질체 2, 실시예 14
Figure pct00071
0℃의 DCM (6 mL) 중 (12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-7-올 (351 mg, 0.88 mmol) 및 DIPEA (0.199 mL, 1.14 mmol)의 교반 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.073 mL, 0.92 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (20 mL)로 희석시키고, 물 (2 x 20 mL), 염수 (20 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시켰다. 용매를 제거하여 검을 수득하고, 저온 1 M NH3/MeOH (20 mL)에 용해시키고, 25℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조상태까지 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 SFC (컬럼: YMC Amylose C, 20 x 250 mm, 5 마이크론 이동상: 40% MeOH = 0.1% NH3 / 60% scCO2 유량: 60 mL/분; BPR: 120 bar)를 사용하여 정제하여 1-[(12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-히드록시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (105 mg, 26%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.35 - 2.46 (1H, m), 2.64 - 2.73 (1H, m), 2.73 - 2.84 (1H, m), 2.89 (1H, d), 2.93 - 3.09 (1H, m), 3.57 - 3.74 (2H, m), 3.83 - 4.01 (1H, m), 4.01 - 4.22 (2H, m), 4.38 (1H, t), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.66 - 6.87 (3H, m), 7.24 (1H, q), 9.48 (1H, s), 9.87 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 453. 이것에 이어서 1-[(12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-히드록시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (60 mg, 15%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.37 - 2.45 (1H, m), 2.70 (1H, s), 2.77 - 2.95 (2H, m), 2.95 - 3.08 (1H, m), 3.61 (1H, d), 3.64 - 3.71 (1H, m), 3.90 (1H, t), 4.04 (1H, d), 4.14 (1H, d), 4.35 (1H, t), 5.70 (1H, s), 6.12 (1H, d), 6.71 (1H, t), 6.76 (1H, d), 6.79 - 6.88 (1H, m), 7.24 (1H, q), 9.58 (1H, s), 9.89 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 453.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -2,6- 디플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00072
DCM (200 ml) 중 4-브로모-2,6-디플루오로벤조산 (10 g, 42.19 mmol)에 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (10.95 g, 50.63 mmol) 및 트리에틸아민 (23.52 ml, 168.78 mmol)을 첨가하였다. 2,4,6-트리프로필-1,3,5,2,4,6-트리옥사트리포스피난 2,4,6-트리옥시드 (EtOAc 중 50% 용액 29.8 ml, 50.63 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 교반시켰다. 3시간 후, 추가분의 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (2.5 g) 및 2,4,6-트리프로필-1,3,5,2,4,6-트리옥사트리포스피난 2,4,6-트리옥시드 (EtOAc 중 50% 용액 10 ml)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 교반시켰다. 추가 2시간 후, 반응 혼합물을 수성 포화 탄산수소나트륨 (200 mL) 및 그 후 염수 (200 mL)로 세척하였다. 유기 부분을 소수성 프릿에 통과시키고 감압 하에 농축시켜 옅은 갈색 오일을 제공하였다. 이것을 헵탄 중 0~100% EtOAc의 용출 구배를 사용하여 플래시 실리카 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,6-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (8.32 g, 45%)를 백색 폼으로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, 2 x s), 2.69 - 3.24 (3H, m), 3.31 - 3.62 (3H, m), 3.72 - 4.19 (2H, m), 4.26 - 4.58 (1H, m), 4.78 - 4.98 (1H, m), 7.53 - 7.69 (2H, m). m/z: ES+ [M-Boc] 334.9.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -7- 플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00073
수소화나트륨 (광유 중 60% 분산물 0.84 g, 21.03 mmol)을 0℃에서 DMF (100 ml) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,6-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (8.32 g, 19.11 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 5분 동안 교반시킨 후 실온까지 가온하였다. 2시간 후 추가분의 수소화나트륨 (200 mg)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 교반시켰다. 4시간 후, 반응 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 포화 염화암모늄 수용액 (100 mL)을 적가하였다. 물 (100 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (200 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 담황색 오일을 제공하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~80% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (6.46 g, 81%)를 백색 폼으로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.42 (9H, s), 3.3 - 3.38 (1H, m), 3.42 - 3.53 (1H, m), 3.59 - 3.71 (3H, m), 3.83 - 3.96 (1H, m), 4.01 - 4.13 (1H, m), 4.13 - 4.29 (2H, m), 7.21 - 7.29 (1H, m), 7.49 (1H, dd). 19F NMR (376 MHz, DMSO, 30℃) -111.16. m/z: ES+ [M+H]+ 415.0.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -7- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -6-온
Figure pct00074
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (6.46 g, 15.56 mmol)를 진한 황산 (78 ml)에 용해시키고, 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 60℃에서 가열하고, N-클로로숙신이미드 (4.15 g, 31.11 mmol)를 한꺼번에 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 교반시켰다. 30분 후 추가분의 N-클로로숙신이미드 (2 g)를 첨가하였다. 추가 45분 후 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 분쇄된 얼음 (200 g)에 부었다. 수성인 것을 2 M 수산화나트륨 수용액을 사용하여 대략 pH 10으로 염기성화하였다. 수성 층을 EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하고, 합한 유기물을 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (6.33 g, >100%)을 갈색 폼으로 제공하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 2.78 - 2.85 (2H, m), 2.95 - 3.09 (2H, m), 3.18 (1H, d), 3.87 - 3.98 (1H, m), 4.01 - 4.13 (3H, m), 4.75 (1H, dd), 7.73 (1H, d). 19F NMR (376 MHz, DMSO, 30℃): -114.39 (J = 9.1). m/z: ES+ [M+H]+ 348.8.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -7- 플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00075
(12aR)-9-브로모-10-클로로-7-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (6.33 g, 14.49 mmol)을 DCM (150 ml)에 용해시키고, 트리에틸아민 (6.06 ml, 43.46 mmol) 및 디-tert-부틸 디카르보네이트 (4.74 g, 21.73 mmol)를 순차적으로 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 교반시켰다. 60분 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 세척하였다. 유기 부분을 소수성 프릿에 통과시키고 감압 하에 농축시켜 짙은 갈색 잔사를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (5.81 g, 89%)를 옅은 갈색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.42 (9H, s), 3.42 - 3.53 (1H, m), 3.59 - 3.73 (4H, m), 3.85 - 3.99 (1H, m), 4.05 - 4.16 (1H, m), 4.24 (1H, dd), 4.28 - 4.41 (1H, m), 7.75 (1H, d). 19F NMR (376 MHz, DMSO, 30℃): -114.46 - -112.02. m/z: ES+ [M-tBu]+ 394.8.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -7- 플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00076
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (5.81 g, 12.92 mmol)를 THF (50 mL)에 용해시키고, 보란-THF 착물 (1 M 용액 129 mL, 129.20 mmol)을 첨가하였다(실온에서). 생성된 용액을 75℃에서 가열하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 포화 염화암모늄 수용액 (200 mL)의 적가에 의해 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 발포가 중단될 때까지 교반하고, 그 후 EtOAc (2 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (150 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 농축시켜 담황색 잔사를 제공하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (5.34 g, 95%)를 무색 잔사로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.40 (9H, s), 2.32 - 2.41 (1H, m), 2.68 - 2.83 (3H, m), 3 - 3.11 (1H, m), 3.55 - 3.73 (3H, m), 3.80 (1H, dd), 3.90 (1H, d), 4.41 (1H, dd), 7.50 (1H, d). 19F NMR (376 MHz, DMSO, 30℃): -116.50 (J = 8.8). m/z: ES+ [M+H]+ 434.9.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -7-(1 H -이미다졸-1-일)-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00077
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (500 mg, 1.15 mmol)를 DMF (10 mL)에 용해시키고, 인산칼륨 (1.22 g, 5.74 mmol) 및 1H-이미다졸 (117 mg, 1.72 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 상기 혼합물을 밀봉하고, 마이크로웨이브 반응기에서 120℃에서 1시간 동안 가열하였다. 상기 혼합물을 물 (20 mL)로 희석시키고, EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (20 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 담황색 잔사를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-(1H-이미다졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (162 mg, 29%)를 무색 건조 필름으로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.46 (9H, s), 2.31 (1H, td), 2.6 - 2.81 (3H, m), 3 - 3.1 (1H, m), 3.22 (1H, d), 3.58 (1H, d), 3.63 - 3.88 (3H, m), 4.40 (1H, dd), 7.08 (1H, t), 7.21 - 7.23 (1H, m), 7.35 (1H, s), 7.6 - 7.63 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 482.9.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-7-(1 H -이미다졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00078
2 M 수성 탄산나트륨 (0.50 mL, 0.99 mmol) 및 2-메틸테트라히드로푸란 (2.5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-(1H-이미다졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (160 mg, 0.33 mmol) 및 (2-플루오로-6-메톡시페닐)보론산 (112 mg, 0.66 mmol)의 용액을 탈기시켰다. RuPhos G3 (28 mg, 0.03 mmol) 및 RuPhos (15 mg, 0.03 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 60℃에서 가열하였다. 3시간 후 추가분의 (2-플루오로-6-메톡시페닐)보론산 (112 mg, 0.66 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 교반되도록 두었다. 추가 5시간 후 반응 혼합물을 실온까지 냉각시켰다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 EtOAc (10 mL)로 세척하였다. 합한 유기물을 건조시키고 (MgSO4), 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~10% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-7-(1H-이미다졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (170 mg, 97%)를 담황색 폼으로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.36 - 1.45 (9H, m), 2.2 - 2.32 (2H, m), 2.92 - 3.04 (1H, m), 3.15 (1H, dd), 3.57 - 3.9 (8H, m), 4.34 - 4.58 (2H, m), 6.93 (1H, td), 7.00 (1H, dd), 7.07 - 7.16 (2H, m), 7.36 - 7.43 (1H, m), 7.43 - 7.51 (1H, m), 7.78 - 7.87 (1H, m). 19F NMR (376 MHz, DMSO, 30℃): -114.02 - -113.92, -113.86 - -113.69. m/z: ES+ [M+H]+ 529.0.
2-[( 12a R )-10- 클로로 -7-(1 H -이미다졸-1-일)-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-플루오로페놀
Figure pct00079
Tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-7-(1H-이미다졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (170 mg, 0.32 mmol)를 DCM (2 mL)에 용해시키고, 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 그 후 삼브롬화붕소 (DCM 중 1 M 용액 3.78 mL, 3.78 mmol)를 적가하였다. 상기 현탁물을 실온까지 되게 하고, 교반시켰다. 15분 후 반응 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, MeOH (20 mL)를 적가하고, 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 생성된 잔사를 SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 2-[(12aR)-10-클로로-7-(1H-이미다졸-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀 (123 mg, 92%)을 담황색 잔사로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ 415.0.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-7-(1 H -이미다졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온, 실시예 15
Figure pct00080
0℃의 DCM (2 ml) 중 2-[(12aR)-10-클로로-7-(1H-이미다졸-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀 (123 mg, 0.30 mmol) 및 트리에틸아민 (54 μL, 0.39 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (26.5 μL, 0.33 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 교반시켰다. 10분 후 혼합물을 물 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (2 x 10 mL), 그 후 2-메틸테트라히드로푸란 (2 x 10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조시키고 (MgSO4) 농축시켜 담황색 잔사를 제공하였다. 이것을 MeOH 중 7 N 암모니아에 용해시키고, 실온에서 5분 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 감압 하에 농축시켜 담황색 잔사를 제공하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~10% MeOH)로 정제하여 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-(1H-이미다졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (6.3 mg, 5%)을 백색 잔사로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 2.25 - 2.49 (1H, m), 2.47 - 2.87 (3H, m), 2.91 - 3.13 (1H, m), 3.14 - 3.44 (2H, m), 3.51 - 3.95 (3H, m), 4.22 - 4.53 (2H, m), 5.7 - 5.78 (1H, m), 6.26 - 6.39 (1H, m), 6.54 (1H, ddd), 6.67 - 6.76 (1H, m), 6.84 (1H, dd), 7.07 - 7.16 (2H, m), 7.19 - 7.25 (1H, m), 7.63 - 7.69 (1H, m), 8.56 (1H, s). 19F NMR (376 MHz, CDCl3, 30℃): -113.58 - -113, -112.98 - -112.7. m/z: ES+ [M+H]+ 469.0.
5- 브로모 -2-( 브로모메틸 )-1- 플루오로 -3-니트로벤젠
Figure pct00081
MeCN (200 ml) 중 5-브로모-1-플루오로-2-메틸-3-니트로벤젠 (5 g, 21.37 mmol)의 용액에 N-브로모숙신이미드 (4.94 g, 27.77 mmol) 및 벤조익 퍼옥시무수물 (0.26 g, 1.07 mmol)을 첨가하고, 용액을 환류에서 교반시켰다. 6시간 후, 추가분의 N-브로모숙신이미드 (2 g, 0.6 eq)를 첨가하고, 상기 혼합물을 환류에서 하룻밤 교반시켰다. 용매를 진공에서 제거하고, 조 생성물을 DCM (20 mL)에 용해시키고, 여과시키고, 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~20% EtOAc)로 정제하여 5-브로모-2-(브로모메틸)-1-플루오로-3-니트로벤젠 (5.88 g, 88%)를 담황색 오일로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 4.76 (2H, d), 7.58 (1H, dd), 8.01 (1H, t). 19F NMR (376 MHz, CDCl3, 30℃): -109.66 (J = 8.6, 1.6).
Tert -부틸 (3 R )-4-[(4- 브로모 -2- 플루오로 -6- 니트로페닐 ) 메틸 ]-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00082
MeCN (150 ml) 중 5-브로모-2-(브로모메틸)-1-플루오로-3-니트로벤젠 (5.88 g, 18.79 mmol) 및 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (4.47 g, 20.67 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (7.79 g, 56.37 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 여과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% EtOAc)로 정제하여 담황색 오일을 제공하였으며, 이는 정치시에 고체화되었다. 상기 고체를 DCM (100 mL)에 용해시키고, 1 M 시트르산 수용액 (100 mL)으로 세척하였다. 유기 부분을 건조시키고 (MgSO4), 농축시켜 tert-부틸 (3R)-4-[(4-브로모-2-플루오로-6-니트로페닐)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (8.2 g, 97%)를 담황색 오일로 제공하였으며, 이는 정치시에 고체화되었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.38 (9H, s), 2.02 - 2.15 (1H, m), 2.33 - 2.39 (1H, m), 2.4 - 2.47 (1H, m), 2.96 - 3.11 (2H, m), 3.11 - 3.45 (3H, m), 3.53 - 3.76 (2H, m), 4.11 (1H, d), 4.46 - 4.75 (1H, m), 7.87 - 8.04 (2H, m). 19F NMR (376 MHz, DMSO, 30℃): -112.06. m/z: ES+ [M+H]+ 448.0.
Tert -부틸 ( 12a R )-7-아미노-9- 브로모 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6H- 피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00083
수소화나트륨 (광유 중 60% 분산물 0.64 g, 15.95 mmol)을 -78℃에서 THF (100 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-[(4-브로모-2-플루오로-6-니트로페닐)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (6.5 g, 14.50 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 -78℃에서 5분 동안 교반시키고, 그 후 서서히 실온까지 되게 하고, 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 수용액 (100 mL)의 느린 첨가에 의해 켄칭하고, EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% 메틸 tert-부틸 에테르)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-니트로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 및 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 2:1 혼합물을 갈색 건조 필름 (3.11 g, 7.26 mmol)으로 제공하였다. 이 혼합물을 아세트산 (50 ml)에 용해시키고, 철 (1.014 g, 18.15 mmol)을 한꺼번에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 교반시켰다. 1시간 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물 (20 mL)로 희석시키고, 포화 탄산수소나트륨 수용액 (100 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 발포가 중지될 때까지 10분 동안 교반시켰다. 수성 층을 EtOAc (2 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~100% EtOAc)로 정제하여 tert -부틸 (12aR)-7-아미노-9-브로모-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.97 g, 17%)를 짙은 황색 검으로 제공하였다. 상기 검을 1:1의 DCM/헵탄 (10 mL)에 용해시키고, 감압 하에 농축시켜 표제 화합물을 옅은 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 1.46 (9H, s), 2.46 (1H, ddd), 2.68 (1H, tt), 2.78 - 2.9 (2H, m), 3.18 (1H, ddd), 3.60 (2H, d), 3.62 - 3.73 (4H, m), 3.74 - 3.82 (1H, m), 4.15 (1H, dd), 6.59 (1H, d), 6.63 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 398.0.
Tert -부틸 ( 12a R )-7-아미노-9- 브로모 -10- 클로로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00084
Tert -부틸 (12aR)-7-아미노-9-브로모-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (800 mg, 2.01 mmol)를 MeCN (20 mL)에 용해시키고, -10℃까지 냉각시켰다. N-클로로숙신이미드 (268 mg, 2.01 mmol) 및 한 드롭의 클로로트리메틸실란을 연속적으로 첨가하고, 생성된 혼합물을 -10℃에서 교반시켰다. 1시간 후, 상기 혼합물을 서서히 실온까지 되게 하고, 교반시켰다. 추가 1시간 후, 반응 혼합물을 수성 포화 탄산수소나트륨 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 상기 혼합물을 EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 갈색 폼을 제공하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~80% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-7-아미노-9-브로모-10-클로로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (301 mg, 35%)를 옅은 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.40 (9H, s), 2.24 - 2.35 (1H, m), 2.56 - 2.73 (2H, m), 2.83 - 2.9 (1H, m), 3.03 (1H, t), 3.41 (1H, d), 3.48 - 3.66 (3H, m), 3.70 (1H, d), 4.25 (1H, dd), 5.51 (2H, s), 6.76 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 431.9.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -7- 요오도 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00085
MeCN (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-7-아미노-9-브로모-10-클로로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (300 mg, 0.69 mmol)의 용액에 요오드화구리(I) (158 mg, 0.83 mmol)를 첨가하였다. Tert-부틸 니트라이트 (0.116 mL, 1.39 mmol)를 적가하고, 상기 혼합물을 50℃에서 교반시켰다. 2시간 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 수성 포화 염화암모늄 (10 mL)으로 희석시키고, 상기 혼합물을 EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (107 mg, 28%)를 담황색 건조 필름으로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 1.45 (9H, s), 2.49 - 2.58 (1H, m), 2.74 - 2.87 (1H, m), 2.87 - 3.06 (2H, m), 3.25 - 3.37 (1H, m), 3.57 - 3.69 (2H, m), 3.7 - 3.79 (1H, m), 3.91 - 4.09 (2H, m), 4.32 (1H, dd), 7.86 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 542.7.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -7- 시아노 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00086
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (100 mg, 0.18 mmol)를 DMF (2 mL)에 용해시켰다. 시안화아연 (25.9 mg, 0.22 mmol) 및 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (42.5 mg, 0.04 mmol)을 연속적으로 첨가하고, 생성된 용액을 100℃에서 가열하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 포화 탄산수소나트륨 수용액 (10 mL)으로 희석시켰다. 상기 용액을 EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하고, 합한 유기물을 염수 (10 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~30% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-시아노-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (63 mg, 77%)를 무색 건조 필름으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 1.46 (9H, s), 2.47 - 2.61 (1H, m), 2.75 - 2.89 (1H, m), 2.9 - 3.02 (2H, m), 3.19 - 3.35 (1H, m), 3.6 - 3.82 (3H, m), 3.93 (1H, d), 4.08 (1H, d), 4.29 - 4.38 (1H, m), 7.63 (1H, s). m/z: ES+ [M-tBu]+ 385.9.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-7-시아노-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00087
2 M 수성 탄산나트륨 (0.213 mL, 0.43 mmol) 및 2-메틸테트라히드로푸란 (1 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-시아노-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (63 mg, 0.14 mmol) 및 (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (44.4 mg, 0.28 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 탈기시켰다. RuPhos G3 (12 mg, 0.01 mmol) 및 RuPhos (7 mg, 0.01 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 60℃에서 가열하였다. 1시간 후, 상기 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물 (10 mL)로 희석시켰다. 상기 혼합물을 짧은 CELITETM 패드를 통해 여과시키고, EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (10 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-7-시아노-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (54 mg, 80%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.47 (9H, s), 2.47 - 2.68 (1H, m), 2.8 - 3.01 (3H, m), 3.16 - 3.34 (1H, m), 3.66 - 3.91 (3H, m), 3.96 - 4.18 (2H, m), 4.31 - 4.42 (1H, m), 5.33 (1H, s), 6.71 - 6.81 (3H, m), 7.38 (1H, d). 19F NMR (376 MHz, CDCl3, 30℃): -112.90. m/z: ES+ [M+H]+ 474.1.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-7-카르보니트릴
Figure pct00088
Tert-부틸 (12aR)-10-클로로-7-시아노-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (54 mg, 80%) (54 mg, 0.11 mmol)를 DCM (1 mL)에 용해시키고, TFA (0.5 mL)를 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 교반시켰다. 1시간 후, 상기 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석시키고, 포화 탄산수소나트륨 (10 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반시켰다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 DCM (10 mL)으로 세척하였다. 합한 유기물을 소수성 프릿에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-7-카르보니트릴 (33 mg, 77%)을 무색 고형물로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ 374.0.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-7-카르보니트릴, 실시예 16
Figure pct00089
0℃의 DCM (1 ml) 중 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-7-카르보니트릴 (33 mg, 0.09 mmol) 및 트리에틸아민 (16 μL, 0.11 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (7.89 μL, 0.10 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 교반시켰다. 5분 후, 반응 혼합물을 몇 드롭의 MeOH의 첨가에 의해 켄칭하였다. 상기 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 생성된 고형물을 MeOH (1 mL)에 용해시키고, MeOH 중 7 N 암모니아 (0.5 mL)를 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 5분 동안 교반시키고, 그 후 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM (5 mL)에 현탁시키고, 상기 혼합물을 여과시켰다. 여과액을 감압 하에 농축시켜 담황색 잔사를 제공하였다. 물 (0.1% 포름산 함유) 중 30~60% MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (Waters CSH C18 OBD 컬럼, 30 x 100 mm 내경, 5 마이크론의 입자 크기)로 이것을 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-7-카르보니트릴 (9.9 mg, 26%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 2.48 - 2.63 (1H, m), 2.81 - 3.1 (3H, m), 3.33 - 3.5 (1H, m), 3.61 - 3.87 (2H, m), 3.93 - 4.16 (3H, m), 4.25 - 4.38 (1H, m), 5.65 - 5.73 (1H, m), 6.18 - 6.31 (1H, m), 6.41 - 6.55 (1H, m), 6.61 - 6.77 (2H, m), 7.15 - 7.24 (1H, m), 7.32 (1H, 2 x s). 19F NMR (376 MHz, CDCl3, 30℃): -113.47 - -112.63. m/z: ES+ [M+H]+ 428.0.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -7-(1 H - 피라졸 -1-일)-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00090
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (580 mg, 1.33 mmol), 1H-피라졸 (109 mg, 1.60 mmol) 및 인산칼륨 (1.41 g, 6.66 mmol)을 DMF (10 mL)에 현탁시키고, 마이크로웨이브 튜브에 넣어 밀봉하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 반응기에서 120℃에서 1시간 동안 가열하였다. 추가분의 1H-피라졸 (100 mg)을 마이크로웨이브 튜브에 첨가하고, 재밀봉하였다. 반응물을 마이크로웨이브 반응기에서 120℃에서 1.25시간 동안 가열하였다. 상기 혼합물을 물 (30 mL)로 희석시키고, EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 담황색 잔사 (1.1 g)를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-(1H-피라졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (337 mg, 52%)를 무색 검으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 1.42 (9H, s), 2.35 (1H, ddd), 2.58 - 2.71 (1H, m), 2.71 - 2.85 (2H, m), 3.11 (1H, t), 3.46 (1H, d), 3.62 (1H, d), 3.65 - 3.86 (3H, m), 4.36 (1H, dd), 6.41 - 6.45 (1H, m), 7.40 (1H, s), 7.60 (1H, dd), 7.69 (1H, dd). m/z: ES+ [M+H]+ 482.9.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-(1 H -피라졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00091
2 M 수성 탄산나트륨 (1.05 mL, 2.09 mmol) 및 2-메틸테트라히드로푸란 (6 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-7-(1H-피라졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (337mg, 0.70 mmol) 및 (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (217 mg, 1.39 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 탈기시켰다. RuPhos G3 (58.3 mg, 0.07 mmol) 및 RuPhos (32.5 mg, 0.07 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 60℃에서 3시간 동안 가열하였다. 추가분의(2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (100 mg)을 첨가하고, 반응물을 그 온도에서 1시간 동안 교반시켰다. 추가분의 (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (100 mg)을 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 추가 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (20 mL) 및 2-메틸테트라히드로푸란 (20 mL)으로 희석시켰다. 유기 층을 수집하고, 수성 층을 추가분의 2-메틸테트라히드로푸란 (20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수 (20 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 가압 하에 농축시켜 주황색 잔사를 제공하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-(1H-피라졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (224 mg, 62%)를 담황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.40 (9H, s), 2.26 - 2.37 (1H, m), 2.54 - 2.63 (1H, m), 2.64 - 2.87 (2H, m), 2.91 - 3.1 (1H, m), 3.34 - 3.51 (1H, m), 3.57 - 3.77 (2H, m), 3.77 - 3.92 (2H, m), 4.34 - 4.57 (1H, m), 6.49 - 6.59 (1H, m), 6.73 (1H, td), 6.80 (1H, dd), 7.09 (1H, s), 7.16 - 7.33 (1H, m), 7.67 - 7.82 (1H, m), 7.9 - 8.1 (1H, m), 9.9 - 10.1 (1H, m). 19F NMR (376 MHz, DMSO, 30℃): -115.79 - -112.35. m/z: ES+ [M+H]+ 515.0.
2-[( 12a R )-10- 클로로 -7-(1 H - 피라졸 -1-일)-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-플루오로페놀
Figure pct00092
i-PrOH 중 6 M HCl (0.725 mL, 4.35 mmol)을 실온에서 MeOH (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-(1H-피라졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (224 mg, 0.430 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 0.5시간 동안 교반시켰다. 추가분의, i-PrOH 중 6 M HCl (1 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 교반시켰다. 추가분의, i-PrOH 중 6 M HCl 산 (1 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 0.5시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 황색 분말을 제공하였다. 이것을 SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 2-[(12aR)-10-클로로-7-(1H-피라졸-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀 (141 mg, 78%)을 무색 건조 필름으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 2.23 - 2.49 (2H, m), 2.58 - 2.96 (6H, m), 3.26 - 3.39 (1H, m), 3.45 - 3.78 (2H, m), 4.25 (1H, dd), 5.19 (1H, s), 6.38 (1H, dt), 6.57 (2H, dt), 7.02 - 7.17 (2H, m), 7.54 - 7.74 (2H, m). 19F NMR (376 MHz, CDCl3, 30℃): -113.33 (J = 7.7), -112.91 (J = 7.6). m/z: ES+ [M+H]+ 415.0.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-7-(1 H - 피라졸 -1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온, 실시예 17
Figure pct00093
0℃의 DCM (3 mL) 중 2-[(12aR)-10-클로로-7-(1H-피라졸-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀 (141 mg, 0.340 mmol) 및 트리에틸아민 (262 μL, 1.88 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (30.4 μL, 0.370 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반시켰다. 추가분의 아크릴로일 클로라이드 (30.4 μL, 0.37 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0.1시간 동안 교반시켰다. 혼합물을 물 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (2 x 10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기물을 소수성 프릿에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 담황색 폼을 제공하였다. 이것을 7 M NH3/MeOH (3 mL)에 용해시키고, 5분 동안 교반시켰다. 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 담황색 잔사 (201 mg)를 제공하였다. 물 (0.1% 포름산 함유) 중 25 ~ 50% MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters CSH C18 OBD 컬럼, 30 x 100 mm 내경, 5 마이크론의 입자 크기)에 의해 이것을 정제하여 65 mg의 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (0.1% NH3 함유) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters CSH C18 OBD 컬럼, 30 x 100 mm 내경, 5 마이크론의 입자 크기)에 의해 이것을 재정제하였다. 이것은 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-(1H-피라졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (36 mg, 23%)을 황색 분말로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 2.24 - 2.41 (2H, m), 2.69 - 3.14 (3H, m), 3.35 - 3.51 (1H, m), 3.75 - 4.02 (3H, m), 4.03 - 4.21 (1H, m), 4.42 - 4.6 (1H, m), 5.61 - 5.78 (1H, m), 6.12 (1H, d), 6.5 - 6.57 (1H, m), 6.61 - 6.9 (3H, m), 7.07 (1H, d), 7.23 (1H, q), 7.77 (1H, d), 7.97 - 8.04 (1H, m), 10.01 (1H, br s). 19F NMR (376 MHz, DMSO, 30℃): -114.42 - -113.57. m/z: ES+ [M+H]+ 469.0.
4- 브로모 -5- 메틸 -1 H - 벤즈이미다졸
Figure pct00094
3-브로모-4-메틸벤젠-1,2-디아민 (2.0 g, 9.95 mmol)을 포름산 (20 mL, 530.15 mmol)에 용해시키고, 생성된 혼합물을 100℃에서 75분 동안 교반시켰다. 반응물을 실온까지 냉각시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 4-브로모-5-메틸-1H-벤즈이미다졸 (2.1 g, 100%)을 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 2.54 (3H, s), 7.19 (1H, d), 7.57 (1H, s), 8.03 (1H, s), 9.25 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 211.
4- 브로모 -5- 메틸 -1-(옥산-2-일)-1 H - 벤즈이미다졸
Figure pct00095
THF (80 mL) 중 4-브로모-5-메틸-1H-벤즈이미다졸 (2.1 g, 9.94 mmol), 3,4-디히드로-2H-피란 (4.54 mL, 49.68 mmol) 및 4-메틸벤젠술폰산 수화물 (0.283 g, 1.49 mmol)의 혼합물을 65℃에서 23시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 잔사를 EtOAc (150 mL)에 용해시키고, 수성 포화 탄산수소나트륨 (75 mL) 및 염수 (50 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 소수성 프릿에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~80% EtOAc)로 정제하여 4-브로모-5-메틸-1-(옥산-2-일)-1H-벤즈이미다졸 (2.2 g, 75%)을 주황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.63 - 1.85 (3H, m), 2.04 - 2.21 (3H, m), 2.54 (3H, s), 3.74 (1H, td), 4.10 (1H, d), 5.46 (1H, dd), 7.17 (1H, d), 7.36 (1H, d), 8.06 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 297.
[5- 메틸 -1-(옥산-2-일)-1 H - 벤즈이미다졸 -4-일] 보론산
Figure pct00096
디클로로비스(트리시클로헥실포스핀)팔라듐(II) (525 mg, 0.71 mmol), 비스(피나콜라토)디보론 (1.81 g, 7.11 mmol), 4-브로모-5-메틸-1-(옥산-2-일)-1H-벤즈이미다졸 (2.1 g, 7.11 mmol) 및 아세트산칼륨 (1.75 g, 17.79 mmol)을 DMA (20 mL)에 용해시켰다. 생성된 용액을 155℃에서 105분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물 (80 mL)로 희석시켰다. 수성인 것을 EtOAc (80 mL x 3)로 추출하고, 합한 유기 추출물을 물 (80 mL) 및 염수 (80 mL)로 세척하였다. 유기 부분을 소수성 프릿에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 갈색 고형물로 수득하고, 이를 물 (0.1 부피%의 포름산을 함유함) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (RediSepRF C18 GOLD, 150 g HP C18)로 정제하여 [5-메틸-1-(옥산-2-일)-1H-벤즈이미다졸-4-일]보론산 (1.87 g, >100%)을 주황색 고형물로 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.75 (2H, d), 2.13 - 2.25 (2H, m), 2.60 (3H, s), 2.63 - 2.69 (2H, m), 3.75 (2H, td), 5.68 (1H, dd), 7.13 (1H, d), 7.61 (1H, d), 8.46 (1H, s), 8.95 (2H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 261.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-8-플루오로-9-[5-메틸-1-(옥산-2-일)-1 H -벤즈이미다졸-4-일]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00097
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (653 mg, 1.50 mmol)를 25℃에서 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (2.5 mL) (4:1의 비) 중 [5-메틸-1-(옥산-2-일)-1H-벤즈이미다졸-4-일]보론산 (780 mg, 3 mmol), RuPhos (70 mg, 0.15 mmol), RuPhos-Pd-G3 (125 mg, 0.15 mmol) 및 탄산칼륨 (518 mg, 3.75 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 수득된 조 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~70% MeCN)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-[5-메틸-1-(옥산-2-일)-1H-벤즈이미다졸-4-일]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (845 mg, 99%)를 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 1.52 - 1.82 (4H, m), 1.95 - 2.07 (2H, m), 2.13 (3H, d), 2.21 (1H, d), 2.35 - 2.39 (1H, m), 2.74 - 2.82 (3H, m), 3.06 - 3.14 (1H, m), 3.17 (2H, s), 3.75 (2H, d), 3.85 - 4.05 (2H, m), 4.34 (1H, d), 5.66 (1H, d), 7.26 (1H, d), 7.63 (1H, d), 8.16 (1H, s), 8.24 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 571.
( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -9-(5- 메틸 -1 H - 벤즈이미다졸 -4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀
Figure pct00098
Tert-부틸 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-[5-메틸-1-(옥산-2-일)-1H-벤즈이미다졸-4-일]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (785 mg, 1.37 mmol)를 25℃에서 MeOH (15 mL) 및 물 (3 mL) 중 p-톨루엔술폰산 (1183 mg, 6.87 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 80℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 0~30% MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(5-메틸-1H-벤즈이미다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (310 mg, 58%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.12 (3H, d), 2.22 - 2.43 (3H, m), 2.60 - 2.89 (5H, m), 3.52 - 3.77 (2H, m), 3.78 - 3.89 (1H, m), 4.16 - 4.30 (1H, m), 7.08 - 7.20 (1H, m), 7.25 - 7.36 (1H, m), 7.54 (1H, d), 8.07 (1H, d), 12.21 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 387.
1-(( 12aR )-10- 클로로 -8- 플루오로 -9-(5- 메틸 -1 H - 벤조[ d ]이미다졸 -4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -벤조[ f ]피라지노[2,1- c ][1,4]옥사제핀-2(1 H )-일)프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 18 및 회전 이성질체 2, 실시예 19
Figure pct00099
아크릴로일 클로라이드 (45.6 mg, 0.50 mmol)를 0℃에서 DMF (2 mL) 중 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(5-메틸-1H-벤즈이미다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (150 mg, 0.39 mmol) 및 DIPEA (0.203 mL, 1.16 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4HCO3) 중 0~50% MeCN)로 정제하여 조 생성물을 백색 고형물로 제공하였다. 조 생성물을 물 (10 mmol/L NH4HCO3) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼 30×150 mm 5 μm)로 정제하였다. 이것은 1-((12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(5-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온 (19.5 mg, 27%)의 회전 이성질체 1을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.14 (3H, s), 2.36 - 2.46 (1H, m), 2.77 - 2.90 (2H, m), 3.05 - 3.17 (1H, m), 3.35 - 3.44 (1H, m), 3.59 - 3.71 (1H, m), 3.74 - 4.07 (4H, m), 4.32 - 4.45 (1H, m), 5.66 - 5.74 (1H, m), 6.08 - 6.18 (1H, m), 6.76 - 6.89 (1H, m), 7.12 - 7.21 (1H, m), 7.23 - 7.38 (1H, m), 7.45 - 7.63 (1H, m), 8.05 (1H, d), 12.29 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 441. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-((12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(5-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (14 mg, 20%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.10 (3H, s), 2.37 - 2.46 (1H, m), 2.80 - 2.90 (2H, m), 3.15 - 3.21 (1H, m), 3.36 - 3.47 (1H, m), 3.58 - 4.02 (5H, m), 4.32 - 4.45 (1H, m), 5.67 - 5.75 (1H, m), 6.09 - 6.19 (1H, m), 6.77 - 6.90 (1H, m) 7.11 - 7.20 (1H, m), 7.23 - 7.36 (1H, m), 7.45 - 7.63 (1H, m), 8.08 (1H, d), 12.31 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 441.
( 12a R )-9- 브로모 -8,10- 디클로로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -6-온
Figure pct00100
N-클로로숙신이미드 (1.856 g, 13.90 mmol)를 진한 황산 (30 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2g, 4.63 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 20시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 2 M NaOH로 염기성화하고, DCM (200 mL x 3)으로 추출하고, 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 5~60% MeOH)로 정제하여 (12aR)-9-브로모-8,10-디클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (0.5 g, 30%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.05 - 2.36 (4H, m), 2.87 - 3.23 (3H, m), 3.38 - 3.76 (1H, m), 3.78 - 3.98 (1H, m), 7.16 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 365.
( 12a R )-8,10- 디클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온
Figure pct00101
RuPhos-Pd-G3 (91 mg, 0.11 mmol) 및 RuPhos (51 mg, 0.11 mmol)를 실온에서 1,4-디옥산 (8 mL) 및 물 (2 mL) (4:1의 비) 중 (12aR)-9-브로모-8,10-디클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (400 mg, 1.09 mmol), (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (204 mg, 1.31 mmol) 및 탄산나트륨 (290 mg, 2.73 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 0~60% MeCN)로 정제하여 (12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (50 mg, 12%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.96 - 3 (4H, m), 3.72 - 3.76 (3H, m), 3.93 - 3.98 (1H, m), 4.29 (1H, d), 4.66 - 4.76 (1H, m), 6.71 - 6.86 (2H, m), 7.25 - 7.36 (1H, m), 7.88 (1H, d), 10.14 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 397.
( 12a R )-8,10- 디클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온 회전 이성질체 1, 실시예 20 및 회전 이성질체 2, 실시예 21
Figure pct00102
아크릴로일 클로라이드 (10 mg, 0.11 mmol)를 0℃에서 DMF (2 mL) 중 (12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (50 mg, 0.13 mmol) 및 DIPEA (0.066 mL, 0.38 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4HCO3) 중 0~50% MeCN)로 정제하여 조 생성물을 고형물로 제공하였다. 이것을 물 (10 mmol/L NH4HCO3) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼 30×150 mm 5 μm)로 정제하였다. 이것은 (12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 1 (24 mg, 42%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.35 - 4.17 (7H, m), 4.27 - 4.70 (2H, m), 5.59 - 5.96 (1H, m), 6.03 - 6.39 (1H, m), 6.49 - 7 (3H, m), 7.15 - 7.39 (1H, m), 7.77 (1H, d), 10.10 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 451. 이것에 이어서 황색 고형물로서의 (12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 2 (13 mg, 23%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.35 - 4.21 (7H, m), 4.21 - 4.56 (2H, m), 5.47 - 5.85 (1H, m), 6.05 - 6.41 (1H, m), 6.58 - 7.14 (3H, m), 7.14 - 7.58 (1H, m), 7.80 (1H, d), 10.19 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 451.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -8-카르보니트릴
Figure pct00103
테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (208 mg, 0.18 mmol)을 DMF (5 mL) 중 디시아노아연 (127 mg, 1.08 mmol), 및 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (400 mg, 0.9 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 교반시키고, C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 5~80% MeOH)로 정제하여 (12aR)-9-브로모-10-클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (200 mg, 65%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.30 - 2.35 (2H, m), 2.61 - 2.65 (2H, m), 2.72 - 2.76 (3H, m), 3.75 - 3.80 (2H, m), 4.03 (1H, q), 4.30 - 4.38 (1H, m), 7.73 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 342.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴
Figure pct00104
RuPhos-Pd-G3 (48.8 mg, 0.06 mmol) 및 RuPhos (27 mg, 0.06 mmol)를 실온에서 1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (1 mL) (5:1의 비) 중 (12aR)-9-브로모-10-클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (200 mg, 0.58 mmol), (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (109 mg, 0.70 mmol) 및 탄산나트륨 (155 mg, 1.46 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반시키고, C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 0~60% MeCN)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (110 mg, 50%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.20 - 2.42 (1H, m), 2.59 - 2.83 (4H, m), 3.48 - 3.96 (5H, m), 4.27 - 4.42 (1H, m), 6.83 (1H, s), 7.12 - 7.23 (2H, m), 7.33 - 7.44 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 374.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 회전 이성질체 1, 실시예 22 및 회전 이성질체 2, 실시예 23
Figure pct00105
아크릴로일 클로라이드 (19.37 mg, 0.21 mmol)를 0℃에서 DMF (2 mL) 중 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (80 mg, 0.21 mmol) 및 DIPEA (0.112 mL, 0.64 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4HCO3) 중 0~50% MeCN)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 이것을 물 (10 mmol/L NH4HCO3) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: Kinetex EVO C18 컬럼 30*150, 5 μm)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 1 (15 mg, 16%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.41 - 2.51 (1H, m), 2.62 - 2.80 (3H, m), 2.94 - 3.15 (1H, m), 3.65 - 4.15 (5H, m), 4.38 - 4.91 (1H, m), 5.41 - 5.88 (1H, m), 6.09 (1H, d), 6.62 - 6.91 (3H, m), 7.35 (1H, d), 7.84 (1H, s), 10.31 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 428. 이것에 이어서 황색 고형물로서의 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 2 (10 mg, 11%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.41 - 2.51 (1H, m), 2.73 - 2.77 (1H, m), 2.85 - 2.89 (2H, m), 2.99 - 3.03 (1H, m), 3.79 - 3.94 (4H, m), 3.95 - 4.03 (1H, m), 4.51 - 4.59 (1H, m), 5.70 - 5.81 (1H, m), 6.13 (1H, d), 6.72 - 6.77 (3H, m), 7.28 7.34 (1H, m), 7.82 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 428.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -2- 플루오로 -5- 메틸벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00106
DIPEA (8.99 mL, 51.49 mmol)를 DMF (30 mL) 중 4-브로모-2-플루오로-5-메틸벤조산 (4 g, 17.16 mmol), HATU (9.79 g, 25.75 mmol) 및 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (3.90 g, 18.02 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 염수 (100 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 20~50% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2-플루오로-5-메틸벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (6 g, 81%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.25 (9H, s), 2.78 - 3.04 (2H, m), 3.16 - 3.62 (5H, m), 3.77 - 4.22 (2H, m), 4.20 - 4.75 (2H, m), 4.82 - 5.23 (1H, m), 7.39 (1H, d), 7.50 - 7.81 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 431.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 메틸 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00107
THF (13.91 mL, 13.91 mmol) 중 1 M 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드를 DMF (200 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2-플루오로-5-메틸벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5 g, 11.59 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 오일을 물로 미분화하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-메틸-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3.5 g, 73%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.25 (9H, s), 2.80 - 3.04 (2H, m), 3.04 - 3.65 (6H, m), 3.65 - 4.20 (2H, m), 4.17 - 4.63 (1H, m), 4.63 - 5.07 (1H, m), 7.14 - 7.50 (1H, m), 7.62 - 7.83 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 411.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8- 메틸 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -6-온
Figure pct00108
N-클로로숙신이미드 (0.649 g, 4.86 mmol)를 진한 황산 (10 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-메틸-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1 g, 2.43 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 20시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 2 M NaOH로 pH 8로 조정하였다. 수성 층을 DCM (200 mL x 3)으로 추출하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 20~80% MeOH)로 정제하여 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-메틸-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (0.35 g, 42%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD, 30℃) 2.45 (3H, s), 2.77 - 3.15 (4H, m), 3.47 - 3.75 (1H, m), 3.77 - 4.07 (2H, m), 4 - 4.37 (1H, m), 4.66 (1H, t), 7.60 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 345.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-8- 메틸 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온
Figure pct00109
RuPhos-Pd-G3 (145 mg, 0.17 mmol)을 25℃에서 1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (1 mL) (5:1의 비) 중 (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (338 mg, 2.17 mmol), RuPhos (81 mg, 0.17 mmol), (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-메틸-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (300 mg, 0.87 mmol) 및 K2CO3 (360 mg, 2.6 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 80℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 5~80% MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메틸-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (130 mg, 40%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 2.12 (3H, s), 3.17 - 3.25 (3H, m), 3.87 - 4.21 (4H, m), 4.21 - 4.38 (1H, m), 4.62 - 4.77 (1H, m), 6.68 - 6.80 (2H, m), 7.18 - 7.36 (1H, m), 7.72 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 377.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-8- 메틸 -2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온 회전 이성질체 1, 실시예 24 및 회전 이성질체 2, 실시예 25
Figure pct00110
아크릴로일 클로라이드 (25.9 mg, 0.29 mmol)를 DMF (3 mL) 중 DIPEA (0.167 mL, 0.96 mmol) 및 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메틸-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (120 mg, 0.32 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시키고, C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 5~80% MeCN)로 정제하여 조 생성물을 제공하였다. 이것을 분취용 키랄-HPLC (컬럼: CHIRALPAK IG, 20*250 mm, 5 μm; 이동상 A:Hex:DCM=3:1--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 50 B에서 10분 내에 50 B까지)로 정제하였다. 이것은 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메틸-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 1 (18 mg, 36%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.01 (3H, s), 3.65 - 3.83 (1H, m), 3.90 - 4.04 (6H, m), 4.15 - 4.31 (2H, m), 5.72 (1H, d), 6.10 - 6.22 (1H, m), 6.66 - 6.89 (3H, m), 7.28 (1H, t), 7.53 (1H, d), 9.98 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 431. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메틸-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온의 회전 이성질체 2 (18 mg, 36%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.03 (3H, s), 3.71 - 3.88 (1H, m), 3.90 - 4.04 (6H, m), 4.25 - 4.35 (2H, m), 5.72 (1H, d), 6.10 - 6.22 (1H, m), 6.66 - 6.84 (3H, m), 7.28 (1H, t), 7.53 (1H, d), 9.98 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 431.
( 12a R )-9- 브로모 -8,10- 디클로로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀
Figure pct00111
N-클로로숙신이미드 (162 mg, 1.21 mmol)을 실온에서 진한 황산 (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 20시간 동안 교반시키고, 그 후 2 M NaOH로 켄칭하고, DCM (100 mL x 3)으로 추출하고, 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 30~90% MeOH)로 정제하여 (12aR)-9-브로모-8,10-디클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (300 mg, 77%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.34 - 2.51 (2H, m), 2.68 - 2.81 (5H, m), 3.33 - 3.95 (3H, m), 4.28 - 4.30 (1H, m), 7.59 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 351.
2-[( 12a R )-8,10- 디클로로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-플루오로페놀, 회전 이성질체 1 및 회전 이성질체 2
Figure pct00112
RuPhos-Pd-G3 (23.76 mg, 0.03 mmol) 및 RuPhos (13 mg, 0.03 mmol)를 실온에서 1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (1 mL) (5:1의 비) 중 (12aR)-9-브로모-8,10-디클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (100 mg, 0.28 mmol), 2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (53 mg, 0.34 mmol) 및 탄산나트륨 (75 mg, 0.71 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반시키고, C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 0~60% MeCN)로 정제하여 2-[(12aR)-8,10-디클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀의 회전 이성질체 1 (25 mg, 23%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.32 - 2.27 (5H, m), 2.69 - 2.93 (3H, m), 2.95 - 3.16 (2H, m), 3.33 - 3.69 (1H, m), 5.66 - 6.08 (2H, m), 6.27 - 6.47 (1H, m), 6.58 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 383. 이것에 이어서 황색 고형물로서의 2-[(12aR)-8,10-디클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀의 회전 이성질체 2 (35 mg, 32%)가 뒤따랐다. m/z: ES+ [M+H]+ = 383.
1-[( 12a R )-8,10- 디클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 26
Figure pct00113
아크릴로일 클로라이드 (5.9 mg, 0.07 mmol)를 DMF (2 mL) 중 DIPEA (0.034 mL, 0.2 mmol) 및 2-[(12aR)-8,10-디클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀의 회전 이성질체 1 (25 mg, 0.07 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 5~70% MeCN)로 정제하여 1-[(12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (8 mg, 28%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 2.49 - 2.59 (1H, m), 2.93 - 3.13 (3H, m), 3.50 - 3.60 (1H, m), 3.69 - 3.79 (2H, m), 3.89 - 4.13 (3H, m), 4.33 - 4.47 (1H, m), 5.78 (1H, d), 6.24 (1H, d), 6.60 - 6.89 (3H, m), 7.25 (1H, t), 7.38 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 437.
1-[( 12a R )-8,10- 디클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2, 실시예 27
Figure pct00114
아크릴로일 클로라이드 (7.08 mg, 0.08 mmol)를 DMF (2 mL) 중 DIPEA (0.041 mL, 0.23 mmol) 및 2-[(12aR)-8,10-디클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀의 회전 이성질체 2 (30 mg, 0.08 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시키고, 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 5~70% MeCN)로 정제하여 1-[(12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (8 mg, 28%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 2.52 - 2.58 (1H, m), 3.16 - 3.22 (2H, m), 3.11 - 3 .21 (1H, m), 3.46 - 3.55 (1H, m), 3.69 - 3.80 (2H, m), 3.86 - 4.06 (3H, m), 4.34 - 4.40 (1H, m), 5.77 (1H, d), 6.22 (1H, d), 6.58 - 6.79 (3H, m), 7.23 (1H, t), 7.37 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 437.
8- 브로모 -7- 메틸이소퀴놀린
Figure pct00115
2,2-디에톡시에탄-1-아민 (2.68 g, 20.10 mmol)을 25℃에서 톨루엔 (12 mL) 중 2-브로모-3-메틸벤즈알데히드 (4 g, 20.1 mmol)에 적가하였다. 생성된 현탁액을 100℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 실온까지 냉각시킨 후 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 잔사를 DCM (16 mL)에 용해시키고, 삼염화알루미늄 (8.84 g, 66.32 mmol)을 상기 용액에 일부씩 첨가하였다(실온에서). 생성된 현탁물을 실온에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음 (100 mL)에 붓고, DCM (50 mL x 3)으로 추출하고, 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켰다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~20% EtOAc)로 정제하여 8-브로모-7-메틸이소퀴놀린 (1.56 g, 35%)을 황색 고형물로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 222.
8- 브로모 -7- 메틸 -2-옥소- 2λ 5 -이소퀴놀린
Figure pct00116
3-클로로퍼벤조산 (3.25 g, 16 mmol)을 실온에서 DCM (70 mL) 중 8-브로모-7-메틸이소퀴놀린 (3.23 g, 14.54 mmol)에 첨가하였다. 생성된 현탁물을 25℃에서 6시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM (200 mL)으로 희석시키고, 포화 NaHCO3 (100 mL x 3)으로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (MgSO4), 증발시켜 8-브로모-7-메틸-2-옥소-2λ5-이소퀴놀린 (3.75 g, >100%)을 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 2.64 (3H, s), 7.46 - 7.56 (1H, m), 7.68 (2H, t), 8.21 (1H, d), 9.30 (1H, s). m/z ES+ [M+H]+ =238.
8- 브로모 -1- 메톡시 -7- 메틸이소퀴놀린
Figure pct00117
메틸 클로로포르메이트 (2.245 mL, 28.98 mmol)를 25℃에서 MeOH (110 mL) 중 8-브로모-7-메틸-2-옥소-2λ5-이소퀴놀린 (4.6 g, 19.32 mmol) 및 트리에틸아민 (5.06 mL, 36.32 mmol)에 적가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 그 후 추가의 트리에틸아민 (5.06 mL, 36.32 mmol) 및 메틸 클로로포르메이트 (2.245 mL, 28.98 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 그 후 추가의 메틸 클로로포르메이트 (2.245 mL, 28.98 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 추가 6시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시키고, EtOAc (300 mL)로 희석시키고, 염수 (50 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켰다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~8% EtOAc)로 정제하여 8-브로모-1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린 (2.58 g, 53%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 2.61 (3H, s), 4.12 (3H, s), 7.18 (1H, d), 7.48 (1H, d), 7.57 (1H, d), 7.96 (1H, d). m/z ES+ [M+H]+ =252.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -2,5- 디플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00118
DIPEA (2.95 mL, 16.88 mmol)를 DMF (20 mL) 중 4-브로모-2,5-디플루오로벤조산 (2 g, 8.44 mmol), tert-부틸 (R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (2.01 g, 9.28 mmol) 및 HATU (4.81 g, 12.66 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL x 2)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 10~40% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,5-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (3.2 g, 87%)를 백색 폼으로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.49 (9H, d), 2.84 - 3.24 (3H, m), 3.27 - 3.41 (1H, m), 3.51 - 3.72 (1H, m), 3.72 - 3.87 (1H, m), 3.91 - 4.35 (2H, m), 4.42 - 4.89 (1H, m), 7.13 - 7.25 (1H, m), 7.33 - 7.41 (1H, m). m/z ES+ [M- t Bu]+ = 379.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00119
수소화나트륨 (0.423 g, 10.57 mmol)을 0℃에서 DMF (30 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,5-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (2.3 g, 5.28 mmol)에 서서히 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음 (100 mL)으로 켄칭하고, EtOAc (100 mL x 2)로 추출하고, 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 20~30% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.67 g, 76%)를 백색 폼으로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.50 (9H, s), 3.45 - 3.61 (2H, m), 3.64 - 3.81 (2H, m), 3.84 - 3.99 (1H, m), 4.08 -4.25 (3H, m), 4.26 - 4.38 (1H, m), 7.29 (1H, d), 7.67 (1H, d). m/z ES+ [M- t Bu]+ = 359.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00120
tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.67 g, 4.02 mmol) 및 THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (40 mL, 40 mmol)의 용액을 환류에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 MeOH (20 mL)에 용해시키고, 생성된 용액을 환류에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 5~30% MeCN)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.06 g, 66%)를 백색 건조 필름으로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3, 30℃) 1.48 (9H, s), 2.35 - 2.55 (1H, m), 2.66 - 3.09 (3H, m), 3.23 - 3.40 (1H, m), 3.43 - 3.60 (1H, m), 3.62 - 3.81 (3H, m), 3.95 (1H, d), 4.14 - 4.25 (1H, m), 6.97 (1H, d), 7.24 (1H, d). m/z ES+ [M+H]+ = 401.
[(12a R )-2-( Tert -부톡시카르보닐) -8- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]보론산.1TFA
Figure pct00121
1,4-디옥산 (10 mL) 중 Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.06 g, 2.64 mmol), 비스(피나콜라토)디보론 (1.01 g, 3.96 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)) (0.193 g, 0.26 mmol) 및 아세트산칼륨 (0.518 g, 5.28 mmol)을 100℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18 플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.05% TFA) 중 10~40% MeCN)로 정제하여 [(12aR)-2-(tert-부톡시카르보닐)-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]보론산. 1TFA (1.06 g, 84%)를 백색 폼으로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 1.51 (9H, s), 2.76 - 3.20 (2H, m), 3.36 - 3.44 (1H, m), 3.54 - 3.75 (1H, m), 3.75 - 3.93 (2H, m), 4.10 - 4.27 (2H, m), 4.38 (1H, d), 4.48 - 4.74 (2H, m), 7.16 - 7.25 (2H, m). m/z ES+ [M+H]+ = 367.
Tert -부틸 ( 12a R )-8- 플루오로 -9-(1- 메톡시 -7- 메틸이소퀴놀린 -8-일)-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트.1TFA
Figure pct00122
1,4-디옥산 (12 mL) 및 물 (3 mL) (4:1의 비) 중 8-브로모-1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린 (350 mg, 1.39 mmol), [(12aR)-2-(tert-부톡시카르보닐)-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]보론산. 1TFA (1000 mg, 2.08 mmol), RuPhos (64.8 mg, 0.14 mmol), RuPhos-Pd-G3 (116 mg, 0.14 mmol) 및 탄산칼륨 (767 mg, 5.55 mmol)을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.05% TFA) 중 5~40% MeCN)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-8-플루오로-9-(1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린-8-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트. 1TFA (637 mg, 76%)를 백색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.45 - 1.53 (9H, m), 2.20 (3H, d), 2.41 - 2.59 (1H, m), 2.73 - 3.54 (4H, m), 3.56 - 3.95 (7H, m), 3.95 - 4.30 (2H, m), 6.77 - 6.86 (1H, m), 6.93 - 7.02 (1H, m), 7.23 (1H, t), 7.58 (1H, d), 7.70 (1H, dd), 7.94 (1H, t). m/z ES+ [M+H]+ = 494.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(4- 클로로 -1- 메톡시 -7- 메틸이소퀴놀린 -8-일)-8- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀
Figure pct00123
N-클로로숙신이미드 (330 mg, 2.47 mmol)를 진한 황산 (8 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-8-플루오로-9-(1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린-8-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트. 1TFA (500 mg, 0.82 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 하룻밤 교반시켰다. 추가의 N-클로로숙신이미드 (330 mg, 2.47 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 추가 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 얼음물에 붓고, 2 M NaOH로 염기성화하고, DCM (200 mL x 4)으로 추출하고, 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켰다. 수득된 잔사를 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.05% TFA) 중 5~30% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시키고, SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(4-클로로-1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린-8-일)-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (223 mg, 59%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD, 30℃) 2.19 (3H, d), 2.88 - 2.96 (1H, m), 3.09 - 3.28 (4H, m), 3.61 (3H, s), 3.70 - 3.75 (4H, m), 4.12 - 4.20 (2H, m), 7.16 (1H, d), 7.88 (1H, s), 8.02 (1H, d), 8.20 (1H, d). m/z ES+ [M+H]+ = 462.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(4-클로로-1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린-8-일)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00124
디-tert-부틸 디카르보네이트 (0.181 mL, 0.78 mmol)를 0℃에서 DCM (10 mL) 중 (12aR)-10-클로로-9-(4-클로로-1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린-8-일)-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (240 mg, 0.52 mmol) 및 트리에틸아민 (0.145 mL, 1.04 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 잔사를 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 20~40% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(4-클로로-1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린-8-일)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (120 mg, 41%)를 담황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD, 30℃) 1.48 (9H, d), 2.22 (3H, d), 2.50 - 2.55 (2H, m), 2.88 - 2.97 (4H, m), 3.65 (3H, dd), 3.73 - 3.82 (3H, m), 4.08 (1H, d), 4.36 (1H, d), 7.14 (1H, dd), 7.88 (1H, d), 8.01 (1H, d), 8.19 (1H, d). m/z ES+ [M+H]+ = 562.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-8-플루오로-9-(1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린-8-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00125
MeOH (10 mL) 중 Tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(4-클로로-1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린-8-일)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (110 mg, 0.2 mmol) 및 목탄상의 10% 팔라듐 (25 mg, 0.01 mmol)을 실온에서 수소 분위기 하에 2일 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 CELITETM 패드를 통하여 여과시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린-8-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (103 mg, 100%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD, 30℃) 1.51 (9H, d), 2.11 - 2.25 (3H, m), 2.88 - 3 (1H, m), 3.33 - 3.53 (4H, m), 3.58 - 3.73 (3H, m), 3.77 - 4.32 (4H, m), 4.52 - 4.73 (2H, m), 6.94 (1H, s), 7.37 (1H, dd), 7.72 (1H, dd), 7.87 (1H, dd), 7.92 (1H, dd). m/z ES+ [M+H]+ = 528.
8-[( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-7-메틸이소퀴놀린-1(2 H )-온
Figure pct00126
Tert-부틸 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(1-메톡시-7-메틸이소퀴놀린-8-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (100 mg, 0.19 mmol), 염화리튬 (40.1 mg, 0.95 mmol) 및 p-톨루엔술폰산 (180 mg, 0.95 mmol)을 DMF (5 mL)에 용해시키고, 마이크로웨이브 튜브에 넣어 밀봉하였다. 반응물을 마이크로웨이브 반응기에서 120℃에서 30분 동안 가열하고, 실온까지 냉각시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.05% TFA) 중 5~30% MeCN)로 정제하였다. 단리된 생성물을 SCX 컬럼 (7 M NH3/MeOH)을 사용하여 정제하여 8-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-7-메틸이소퀴놀린-1(2H)-온 (50 mg, 64%)을 황색 필름으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD, 30℃) 2.10 (3H, d), 2.75 - 3.03 (2H, m), 3.09 - 3.29 (3H, m), 3.38 - 3.52 (1H, m), 3.69 - 3.95 (3H, m), 4.11 (1H, dd), 4.30 - 4.46 (1H, m), 6.68 (1H, dd), 7.07 (1H, dd), 7.11 (1H, dd), 7.65 - 7.72 (2H, m). m/z ES+ [M+H]+ = 414.
8-[( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]-7-메틸이소퀴놀린-1(2 H )-온 회전 이성질체 1, 실시예 28 및 회전 이성질체 2, 실시예 29
Figure pct00127
DMF (1 mL) 중 아크릴로일 클로라이드 (10.93 mg, 0.12 mmol)의 용액을 -10℃에서 DMF (5 mL) 중 8-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-7-메틸이소퀴놀린-1(2H)-온 (50 mg, 0.12 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 생성된 용액을 -10℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (0.1% 포름산) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: Xselect CSH OBD 컬럼 30*150 mm 5 μm)로 정제하여 8-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-7-메틸이소퀴놀린-1(2H)-온의 회전 이성질체 1 (18 mg, 32%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3CN, 30℃) 2.11 (3H, s), 2.40 - 2.54 (1H, m), 2.81 - 3.53 (4H, m), 3.62 - 3.75 (2H, m), 3.74 - 3.87 (1H, m), 3.90 - 4.15 (2H, m), 4.32 (1H, dd), 5.69 (1H, dd), 6.18 (1H, dd), 6.54 (1H, d), 6.72 (1H, dd), 7.02 (2H, d), 7.57 - 7.79 (2H, m), 9.07 (1H, s). m/z ES+ [M+H]+ = 468. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 8-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-7-메틸이소퀴놀린-1(2H)-온의 회전 이성질체 2 (13 mg, 23%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, CD3CN, 30℃) 2.08 (3H, s), 2.39 - 3.51 (5H, m), 3.53 - 3.91 (3H, m), 3.93 - 4.21 (2H, m), 4.34 (1H, dd), 5.70 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.54 (1H, d), 6.72 (1H, dd), 6.94 - 7.12 (2H, m), 7.56 - 7.74 (2H, m), 9.07 (1H, s). m/z ES+ [M+H]+ = 468.
4-아미노-3- 클로로 -2- 플루오로 -5- 메톡시벤조산
Figure pct00128
4-아미노-2-플루오로-5-메톡시벤조산 (2.5 g, 13.5 mmol)을 25℃에서 MeCN (50 mL) 중 N-클로로숙신이미드 (1.803 g, 13.5 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 5~100% MeOH)로 정제하여 4-아미노-3-클로로-2-플루오로-5-메톡시벤조산 (1.241 g, 42%)을 흑색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 3.90 (3H, s), 7.26 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 220.
4- 브로모 -3- 클로로 -2- 플루오로 -5- 메톡시벤조산
Figure pct00129
4-아미노-3-클로로-2-플루오로-5-메톡시벤조산 (1.241 g, 5.65 mmol)을 0℃까지 냉각시킨 MeCN (45 mL) 중 tert-부틸 니트라이트 (1.166 g, 11.30 mmol)에 첨가하였다. 그 후 브롬화구리(II) (2.52 g, 11.30 mmol)를 0℃에서 10분의 기간에 걸쳐 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 70~72% MeOH)로 정제하여 4-브로모-3-클로로-2-플루오로-5-메톡시벤조산 (1 g, 62%)을 황색 고형물로 제공하였다. m/z: ES- [M-H]- = 281.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -3- 클로로 -2- 플루오로 -5- 메톡시벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00130
4-브로모-3-클로로-2-플루오로-5-메톡시벤조산 (1 g, 3.53 mmol)을 25℃에서 3시간의 기간에 걸쳐 DMF (20 ml) 중 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (1.144 g, 5.29 mmol), DIPEA (1.848 ml, 10.58 mmol) 및 HATU (2.012 g, 5.29 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (200 mL)로 희석시키고, 염수 (50 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 15~60% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-3-클로로-2-플루오로-5-메톡시벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (0.8 g, 47%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.65 - 3.11 (3H, m), 3.40 - 3.64 (2H, m), 3.88 (3H, s), 3.93 - 4.15 (1H, m), 4.15 - 4.41 (1H, m), 4.39 - 4.68 (1H, m), 4.69 - 5.28 (1H, m), 7.15 (1H, d). m/z: ES+ [M- t Bu]+ = 425.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8- 메톡시 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00131
THF 중 1 M 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드 (1.495 mL, 1.49 mmol)를 DMF (15 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-3-클로로-2-플루오로-5-메톡시벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (600 mg, 1.25 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 5~80% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (400 mg, 70%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.49 (9H, s), 3.45 - 3.83 (4H, m), 3.86 - 3.90 (2H, m), 3.94 (3H, s), 4.04 - 4.08 (1H, m), 4.21 - 4.29 (1H, m), 4.30 - 4.35 (1H, m), 7.23 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 461.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00132
RuPhos-Pd-G3 (72.5 mg, 0.09 mmol)을 25℃에서 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (2.5 mL) (4:1의 비) 중 2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (203 mg, 1.3 mmol), RuPhos (40 mg, 0.09 mmol), tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (400 mg, 0.87 mmol) 및 K2CO3 (359 mg, 2.60 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 80℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 40~80% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (280 mg, 66%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 1.51 (9H, s), 3.69 - 3.90 (7H, m), 3.89 - 4.19 (3H, m), 4.22 - 4.51 (2H, m), 6.36 - 6.79 (2H, m), 7.12 - 7.28 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 493.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00133
THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (10 mL, 10.0 mmol) 중 Tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (260 mg, 0.53 mmol)를 25℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 2 M HCl로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 10~80% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (220 mg, 87%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.48 (9H, s), 2.34 - 2.75 (2H, m), 2.80 - 2.92 (1H, m), 3.18 - 3.42 (2H, m), 3.57 - 3.95 (7H, m), 4 - 4.17 (1H, m), 4.24 - 4.51 (1H, m), 6.60 - 6.89 (3H, m), 7.30 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 479.
2-[( 12a R )-10- 클로로 -8- 메톡시 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-플루오로페놀
Figure pct00134
TFA (9 mL) 및 DCM (1 mL) 중 Tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (210 mg, 0.44 mmol)를 25℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 2-[(12aR)-10-클로로-8-메톡시-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀 (140 mg, 84%)을 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 2.41 - 2.68 (3H, m), 2.70 - 3.28 (6H, m), 3.59 - 3.71 (1H, m), 3.76 (3H, s), 3.88 - 4.10 (1H, m), 4.10 - 4.39 (1H, m), 6.48 - 6.99 (3H, m), 7.28 - 7.30 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 379.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-8- 메톡시 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 30 및 회전 이성질체 2, 실시예 31
Figure pct00135
아크릴로일 클로라이드 (25.8 mg, 0.29 mmol)를 DMF (5 mL) 중 트리에틸아민 (0.044 mL, 0.32 mmol) 및 2-[(12aR)-10-클로로-8-메톡시-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀 (120mg, 0.32 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (10 mmol/L NH4HCO3) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 키랄-HPLC (컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼 30×150 mm 5 μm)로 정제하여 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (40 mg, 29%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.35 - 2.41 (1H, m), 2.70 - 3.41 (4H, m), 3.44 - 3.57 (1H, m), 3.65 (3H, s), 3.70 - 3.76 (1H, m), 3.87 - 4.15 (3H, m), 4.23 - 4.39 (1H, m), 5.68 (1H, d), 6.12 (1H, d), 6.59 - 6.75 (2H, m), 6.75 - 6.88 (1H, m), 6.99 (1H, s), 7.11 - 7.25 (1H, m), 9.71 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 433. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (33 mg, 24%)가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.35 - 2.41 (1H, m), 2.69 - 3.35 (4H, m), 3.44 - 3.57 (1H, m), 3.64 (3H, s), 3.66 - 3.75 (1H, m), 3.81 - 3.92 (2H, m), 3.95 - 4.18 (1H, m), 4.22 - 4.38 (1H, m), 5.68 (1H, d), 6.11 (1H, d), 6.57 - 6.67 (1H, m), 6.67 - 6.74 (1H, m), 6.74 - 6.87 (1H, m), 6.97 (1H, s), 7.10 - 7.24 (1H, m), 9.67 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 433.
Tert -부틸 ( 3a R )-1- 옥소테트라히드로 -1 H - 1λ 4 - [1,2,3]옥사티아졸로[3,4- a ]피라진 -5(3 H )-카르복실레이트
Figure pct00136
티오닐 클로라이드 (4.70 ml, 64.73 mmol)를 0℃의 DCM (100 mL) 중 1H-이미다졸 (14.64 g, 215 mmol)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 -78℃까지 냉각시키고, DCM (100 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5 g, 23.12 mmol)의 용액을 교반하면서 적가하였다. 첨가시에, 생성된 황색 혼합물을 실온까지 되게 하고, 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 포화 염화암모늄 수용액 (200 mL)의 적가에 의해 켄칭하였다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 DCM (200 mL)으로 세척하였다. 합한 유기물을 소수성 프릿에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 (3aR)-1-옥소테트라히드로-1H-1λ4-[1,2,3]옥사티아졸로[3,4-a]피라진-5(3H)-카르복실레이트 (6.4 g, >100%)를 황색 오일로 수득하였으며, 이것은 정치시에 고체화되었고, 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.47 (9H, d), 2.05 - 2.75 (1H, m), 2.82 (1H, td), 2.88 - 3.14 (1H, m), 3.20 (1H, td), 3.32 (1H, d), 3.55 - 3.67 (1H, m), 3.88 (1H, dd), 3.95 - 4.44 (1H, m), 4.46 - 4.52 (1H, m), 4.52 - 4.6 (1H, m), 4.77 (1H, dd). m/z: ES+ [M-Boc] = 163.
Tert -부틸 ( 3a R )-1,1- 디옥소테트라히드로 -1 H - 1λ 6 - [1,2,3]옥사티아졸로[3,4- a ]피라진 -5(3 H )-카르복실레이트
Figure pct00137
MeCN (90 mL) 및 EtOAc (18 mL) 중 tert-부틸 (3aR)-1-옥소테트라히드로-1H-1λ4-[1,2,3]옥사티아졸로[3,4-a]피라진-5(3H)-카르복실레이트 (6.4 g, 24.4 mmol)의 용액을 0℃에서 물 (30 mL) 중 과요오드산나트륨 (6.78 g, 31.72 mmol) 및 염화루테늄(III) 수화물 (0.011 g, 0.05 mmol)의 현탁물에 적가하고, 0℃에서 5분 동안 교반시키고, 그 후 반응 혼합물을 실온까지 되게 하고, 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 수성 포화 염화암모늄 (200 mL)으로 희석시키고, DCM (200 mL x 2)으로 추출하였다. 합한 유기물을 건조시키고 (MgSO4), 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 (3aR)-1,1-디옥소테트라히드로-1H-1λ6-[1,2,3]옥사티아졸로[3,4-a]피라진-5(3H)-카르복실레이트 (6.02 g, 89%)를 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.50 (9H, s), 2.99 (2H, td), 3.08 - 3.24 (1H, m), 3.41 - 3.52 (1H, m), 3.61 - 3.74 (1H, m), 4.01 - 4.18 (1H, m), 4.18 - 4.31 (2H, m), 4.65 (1H, dd).
메틸 2-아미노-4- 브로모 -3- 클로로벤조에이트
Figure pct00138
N-클로로숙신이미드 (12.19 g, 91.28 mmol)를 DMF (400 mL) 중 메틸 2-아미노-4-브로모벤조에이트 (20 g, 86.93 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (500 mL)로 희석시키고, 물 (500 mL x 3), 염수 (350 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~5% EtOAc)로 정제하여 메틸 2-아미노-4-브로모-3-클로로벤조에이트 (4.5 g, 20%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 3.91 (3H, s), 6.50 (2H, s), 6.93 (1H, d), 7.69 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 264.
4- 브로모 -2-({[(2 S )-4-( tert - 부톡시카르보닐 )-1- 술포피페라진 -2-일] 메틸 }아미노)-3-클로로벤조산
Figure pct00139
수소화나트륨 (0.544 g, 13.61 mmol)을 0℃의 DMF (30 mL) 중 tert-부틸 (3aR)-1,1-디옥소테트라히드로-1H-1λ6-[1,2,3]옥사티아졸로[3,4-a]피라진-5(3H)-카르복실레이트 (2.84 g, 10.21 mmol) 및 메틸 2-아미노-4-브로모-3-클로로벤조에이트 (1.8 g, 6.81 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물로 희석시키고, 생성된 조 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 0~50% MeCN)로 정제하여 4-브로모-2-({[(2S)-4-(tert-부톡시카르보닐)-1-술포피페라진-2-일]메틸}아미노)-3-클로로벤조산 (1.7 g, 47%)을 황색 고형물로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 528.
4- 브로모 -3- 클로로 -2-({[(2 R )-피페라진-2-일] 메틸 }아미노)벤조산
Figure pct00140
36% HCl (2 mL, 23.70 mmol)을 THF (10 mL) 중 4-브로모-2-({[(2S)-4-(tert-부톡시카르보닐)-1-술포피페라진-2-일]메틸}아미노)-3-클로로벤조산 (1.65 g, 3.12 mmol)에 일부씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 하룻밤 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 (4-브로모-3-클로로-2-({[(2R)-피페라진-2-일]메틸}아미노)벤조산 (1 g, 92%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.60 - 2.71 (1H, m), 2.74 - 2.95 (2H, m), 2.97 - 3.16 (3H, m), 3.19 - 3.32 (2H, m), 3.35 - 3.47 (1H, m), 7.14 (1H, d), 7.71 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 348.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1- c ][1,4]벤조디아제핀-6(2 H )-온
Figure pct00141
DIPEA (0.451 mL, 2.58 mmol)에 DMF (6 mL) 중 4-브로모-3-클로로-2-({[(2R)-피페라진-2-일]메틸}아미노)벤조산 (300 mg, 0.86 mmol) 및 HATU (491 mg, 1.29 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 0~45% MeCN)로 정제하여 (12aR)-9-브로모-10-클로로-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온 (235 mg, 83%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.96 - 3.21 (2H, m), 3.22 - 3.50 (4H, m), 3.52 - 3.65 (1H, m), 3.86 - 4.01 (1H, m), 4.24 - 4.39 (1H, m), 6.67 (1H, t), 7.14 (1H, d), 7.92 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 330.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1- c ][1,4]벤조디아제핀-6(2 H )-온
Figure pct00142
테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (73.4 mg, 0.06 mmol)을 1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (1 mL) (5:1의 비) 중 (12aR)-9-브로모-10-클로로-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온 (210 mg, 0.64 mmol), (5-메틸-1H-인다졸-4-일)보론산 (224 mg, 1.27 mmol) 및 탄산나트륨 (202 mg, 1.91 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4HCO3) 중 0~30% MeCN)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온 (100 mg, 41%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.12 (3H, d), 2.59 - 2.93 (4H, m), 3.42 - 3.69 (4H, m), 3.69 - 3.82 (1H, m), 6.04 - 6.14 (1H, m), 6.68 (1H, d), 7.30 (1H, dd), 7.39 - 7.51 (2H, m), 7.78 - 7.87 (1H, m), 13.07 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 382.
( 12a S )-10- 클로로 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1- c ][1,4]벤조디아제핀-6(2 H )-온 회전 이성질체 1, 실시예 32 및 회전 이성질체 2, 실시예 33
Figure pct00143
아크릴로일 클로라이드 (0.02 mL, 0.25 mmol)를 0℃의 DMF (4 mL) 중 (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온 (95 mg, 0.25 mmol) 및 DIPEA (0.087 mL, 0.50 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4HCO3) 중 0~50% MeCN)로 정제하여 조 생성물을 백색 고형물로 제공하였다. 이것을 분취용 키랄-HPLC (컬럼: CHIRALPAK IE, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A:헥산:DCM=3:1(10 mM NH3-MeOH), 이동상 B: EtOH)로 정제하였다. 이것은 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온의 회전 이성질체 1 (9 mg, 18%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.11 (3H, s), 3.40 - 3.52 (1H, m), 3.54 -3.75 (4H, m), 3.76 - 4.13 (4H, m), 5.66 - 5.79 (1H, m), 6.07 - 6.30 (2H, m), 6.66 (1H, d), 6.68 - 6.93 (1H, m), 7.30 (1H, d), 7.38 - 7.53 (2H, m), 7.82 (1H, t), 13.08 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 436. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온의 회전 이성질체 2 (6 mg, 12%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.13 (3H, s), 3.39 - 3.53 (1H, m), 3.55 - 4.14 (8H, m), 5.67 - 5.80 (1H, m), 6.07 - 6.34 (2H, m), 6.66 (1H, d), 6.69 - 6.92 (1H, m), 7.30 (1H, d), 7.36 - 7.54 (2H, m), 7.76 - 7.93 (1H, m), 13.08 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 436.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00144
RuPhos-Pd-G3 (48 mg, 0.06 mmol)를 25℃에서 1,4-디옥산 (12 mL) 및 물 (3 mL) (4:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (250 mg, 0.57 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (495 mg, 2.87 mmol), 탄산나트륨 (304 mg, 2.87 mmol) 및 RuPhos (26.8 mg, 0.06 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 120℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 용매를 진공 하에 증류에 의해 제거하고, 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 50~90% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (167 mg, 60%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.45 (9H, s), 2.59 - 2.96 (5H, m), 2.96 - 3.21 (3H, m), 3.77 - 3.96 (2H, m), 4.18 - 4.43 (2H, m), 6.87 - 6.96 (1H, m), 6.95 - 7.05 (1H, m), 7.22 - 7.28 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 483.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]페놀
Figure pct00145
TFA (1 mL, 0.33 mmol)를 25℃에서 DCM (10 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (160 mg, 0.33 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반시켰다. 용매를 진공 하에 제거하고, 수득된 조 생성물을 SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (74 mg, 58%)을 백색 고형물로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 383.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8- 플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 34 및 회전 이성질체 2, 실시예 35
Figure pct00146
DIPEA (0.101 mL, 0.58 mmol)를 25℃에서 DMF (3 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (74 mg, 0.19 mmol)에 적가하였다. 그 후 아크릴로일 클로라이드 (17 mg, 0.19 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (0.1% 포름산) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: Xselect CSH OBD 컬럼 30*150 mm 5 μm)로 정제하여 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (19 mg, 22%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.68 - 3.05 (2H, m), 3.05 - 3.19 (3H, m), 3.57 - 3.78 (2H, m), 3.82 - 4.30 (2H, m), 4.29 - 4.61 (2H, m), 5.78 (1H, m), 6.16 (1H, m), 6.67 - 6.86 (1H, m), 6.92 (1H, m), 7.02 (1H, m), 7.19 - 7.57 (2H, m), 10.11 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 437. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (11 mg, 13%)의 회전 이성질체 2가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.29 - 2.45 (1H, m), 2.65 - 2.99 (3H, m), 3.03 - 3.18 (1H, m), 3.56 - 3.65 (1H, m), 3.68 - 3.79 (1H, m), 3.80 - 4 (3H, m), 4.29 - 4.44 (1H, m), 5.57 - 5.75 (1H, m), 6.02 - 6.25 (1H, m), 6.70 - 6.88 (1H, m), 6.88 - 7.05 (2H, m), 7.15 - 7.35 (2H, m), 10.01 - 10.28 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 437.
4- 브로모 -2-({[(2 S )-4-( tert - 부톡시카르보닐 )피페라진-2-일] 메틸 }아미노)-3- 클로로벤조산
Figure pct00147
디-tert-부틸 디카르보네이트 (0.599 mL, 2.58 mmol)를 0℃의 DCM (10 mL) 중 4-브로모-2-({[(2S)-4-(tert-부톡시카르보닐)-1-술포피페라진-2-일]메틸}아미노)-3-클로로벤조산 (450 mg, 1.29 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 0~50% MeCN)로 정제하여 4-브로모-2-({[(2S)-4-(tert-부톡시카르보닐)피페라진-2-일]메틸}아미노)-3-클로로벤조산 (360 mg, 62%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.39 (9H, s), 2.73 - 3.55 (7H, m), 3.78 - 4.09 (2H, m), 7.21 (1H, d), 7.62 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 448.
Tert -부틸 ( 12a S )-9- 브로모 -10- 클로로 -6-옥소-3,4,6,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1- c ][1,4]벤조디아제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00148
DIPEA (0.397 mL, 2.27 mmol)를 DMF (8 mL) 중 4-브로모-2-({[(2S)-4-(tert-부톡시카르보닐)피페라진-2-일]메틸}아미노)-3-클로로벤조산 (340 mg, 0.76 mmol) 및 HATU (432 mg, 1.14 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~50% MeCN)로 정제하여 tert-부틸 (12aS)-9-브로모-10-클로로-6-옥소-3,4,6,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-2(1H)-카르복실레이트 (320 mg, 98%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.26 - 3.37 (2H, m), 3.40 - 3.58 (3H, m), 3.63 - 3.94 (4H, m), 6.30 - 6.41 (1H, m), 7.06 (1H, d), 7.63 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 430.
Tert -부틸 ( 12a S )-9- 브로모 -10- 클로로 -11- 메틸 -6-옥소-3,4,6,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1- c ][1,4]벤조디아제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00149
요오도메탄 (0.087 mL, 1.39 mmol)을 0℃에서 DMF (6 mL) 중 tert-부틸 (12aS)-9-브로모-10-클로로-6-옥소-3,4,6,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-2(1H)-카르복실레이트 (300 mg, 0.7 mmol) 및 수소화나트륨 (84 mg, 2.09 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~70% MeCN)로 정제하여 tert-부틸 (12aS)-9-브로모-10-클로로-11-메틸-6-옥소-3,4,6,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-2(1H)-카르복실레이트 (260 mg, 84%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 11.41 (9H, s), 2.92 (3H, s), 3.09 - 3.33 (3H, m), 3.40 - 3.89 (6H, m), 7.35 (1H, d), 7.57 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 444.
Tert -부틸 (12a S )-10-클로로-11-메틸-9-(5-메틸-1 H -인다졸-4-일)-6-옥소-3,4,6,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1- c ][1,4]벤조디아제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00150
테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (62.4 mg, 0.05 mmol)을 1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (1 mL) (5:1의 비) 중 tert-부틸 (12aS)-9-브로모-10-클로로-11-메틸-6-옥소-3,4,6,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-2(1H)-카르복실레이트 (240 mg, 0.54 mmol), (5-메틸-1H-인다졸-4-일)보론산 (142 mg, 0.81 mmol) 및 탄산나트륨 (172 mg, 1.62 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~50% MeCN)로 정제하여 tert-부틸 (12aS)-10-클로로-11-메틸-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-6-옥소-3,4,6,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-2(1H)-카르복실레이트 (180 mg, 67%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.43 (9H, s), 2.15 (3H, d), 2.98 (3H, d), 3.18 - 3.27 (1H, m), 3.32 - 3.49 (2H, m), 3.48 - 3.80 (4H, m), 3.82 - 3.97 (2H, m), 7.13 (1H, dd), 7.31 (1H, dd), 7.45 - 7.57 (3H, m), 13.07 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 496.
( 12a R )-10- 클로로 -11- 메틸 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1- c ][1,4]벤조디아제핀-6(2 H )-온
Figure pct00151
TFA (1 mL, 12.98 mmol)를 DCM (5 mL) 중 tert-부틸 (12aS)-10-클로로-11-메틸-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-6-옥소-3,4,6,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-2(1H)-카르복실레이트 (170 mg, 0.34 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-11-메틸-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온 (125 mg, 92%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.14 (3H, d), 2.54 - 2.87 (3H, m), 2.93 - 3.01 (4H, m), 3.04 - 3.25 (2H, m), 3.51 - 3.81 (2H, m), 3.92 - 4.21 (1H, m), 7.11 (1H, dd), 7.30 (1H, dd), 7.45 - 7.56 (3H, m), 13.08 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 396.
( 12a S )-10- 클로로 -11- 메틸 -9-(5- 메틸 -1 H - 인다졸 -4-일)-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1- c ][1,4]벤조디아제핀-6(2 H )-온 회전 이성질체 1, 실시예 36 및 회전 이성질체 2, 실시예 37
Figure pct00152
아크릴로일 클로라이드 (0.026 mL, 0.32 mmol)를 0℃의 DMF (4 mL) 중 (12aR)-10-클로로-11-메틸-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로벤조[e]피라지노[1,2-a][1,4]디아제핀-6(2H)-온 (120 mg, 0.3 mmol) 및 DIPEA (0.106 mL, 0.61 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4HCO3) 중 0~50% MeCN)로 정제하여 조 생성물을 백색 고형물로 제공하였다. 이것을 분취용 키랄-HPLC (컬럼: Chiralpak IA, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A:헥산:DCM=3:1(10 mM NH3-MeOH), 이동상 B: EtOH)로 정제하여 (12aS)-10-클로로-11-메틸-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온의 회전 이성질체 1 (54 mg, 42%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.14 (3H, s), 2.97 (3H, s), 3.16 - 3.32 (1H, m), 3.36 - 4.13 (8H, m), 5.64 - 5.82 (1H, m), 6.09 - 6.28 (1H, m), 6.69 - 6.85 (1H, m), 7.13 (1H, d), 7.30 (1H, d), 7.42 - 7.62 (3H, m), 13.09 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 450. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 (12aS)-10-클로로-11-메틸-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온의 회전 이성질체 2 (45 mg, 35%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.16 (3H, s), 2.98 (3H, s), 3.13 - 3.32 (1H, m), 3.35 - 4.09 (8H, m), 5.66 - 5.80 (1H, m), 6.12 - 6.23 (1H, m), 6.70 - 6.85 (1H, m), 7.14 (1H, d), 7.31 (1H, d), 7.43 - 7.61 (3H, m), 13.07 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 450.
4- 브로모 -3- 클로로 -2,5- 디플루오로벤조산
Figure pct00153
4-브로모-2,5-디플루오로벤조산 (10 g, 42.2 mmol)을 실온에서 진한 황산 (80 mL)에 첨가하고, 생성된 현탁물을 80℃까지 가열하였다. 그 후 N-클로로숙신이미드 (11.27 g, 84.4 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 하룻밤 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 얼음 (200 g)에 붓고, 수성 상을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층의 증발 후 수득된 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~60% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 4-브로모-3-클로로-2,5-디플루오로벤조산 (4.80 g, 41.9 %)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 7.81 (1H, dd), 13.98 (1H, s). m/z: ES- [M+H]- = 271.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -3- 클로로 -2,5- 디플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00154
Tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (3.98 g, 18.42 mmol)를 25℃에서 THF (80 mL) 중 4-브로모-3-클로로-2,5-디플루오로벤조산 (5g, 18.42 mmol), HATU (10.51 g, 27.63 mmol) 및 DIPEA (6.43 mL, 36.84 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~50% EtOAc)에 의해 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-3-클로로-2,5-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5.72 g, 66.1 %)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, d), 2.74 - 3.05 (1H, m), 3.15 (1H, t), 3.26 - 3.37 (2H, m), 3.41 - 3.63 (2H, m), 3.67 - 3.90 (1H, m), 3.94 - 4.14 (1H, m), 4.19 - 4.33 (1H, m), 4.44 - 5.00 (1H, m), 7.59 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 469.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8- 플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00155
수소화나트륨 (0.971 g, 24.3 mmol)을 질소 하에 0℃에서 THF (50 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-3-클로로-2,5-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5.7 g, 12.14 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 16시간 동안 교반시키고, 그 후 증발시켰다. 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~40% EtOAc)에 의해 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2.020 g, 37.0 %)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.13 - 3.34 (1H, m), 3.44 - 3.50 (2H, m), 3.58 - 3.67 (1H, m), 3.72 - 3.80 (1H, m), 3.85 - 3.90 (1H, m), 3.92 - 4.02 (1H, m), 4.32 (2H, d), 7.59 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 449.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8- 플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00156
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (900 mg, 2.00 mmol)를 질소 하에 25℃에서 THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (4 ml, 4.00 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 60℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 그 후 MeOH (8 ml)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~30% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (678 mg, 78 %)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.38 (9H, s), 2.27 - 2.37 (1H, m), 2.64 - 2.71 (1H, m), 2.73 - 2.94 (2H, m), 3.07 - 3.17 (1H, m), 3.48 - 3.65 (3H, m), 3.70 (1H, d), 3.81 (1H, d), 4.32 (1H, dd), 7.37 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 435.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2,3-디플루오로-6-메톡시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00157
RuPhos-Pd-G3 (101 mg, 0.12 mmol)를 25℃에서 1,4-디옥산 (12 mL) 및 물 (3 mL) (4:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (350 mg, 0.8 mmol), (2,3-디플루오로-6-메톡시페닐)보론산 (906 mg, 4.82 mmol), RuPhos (56.2 mg, 0.12 mmol) 및 탄산나트륨 (426 mg, 4.02 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 120℃에서 10시간 동안 교반시켰다. 용매를 증발시키고, 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 80~90% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2,3-디플루오로-6-메톡시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (100 mg, 25%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.42 (9H, s), 1.54 - 1.71 (2H, m), 1.73 - 1.77 (1H, m), 2.73 (1H, s), 3.71 - 3.77 (3H, m), 3.81 - 4.23 (3H, m), 4.36 - 4.52 (3H, m), 4.53 - 4.76 (1H, m), 6.98 - 7.07 (1H, m), 7.42 - 7.51 (1H, m), 7.53 - 7.66 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 499.
2-[( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3,4-디플루오로페놀.2HBr
Figure pct00158
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 (3 mL, 3 mmol)를 25℃에서 DCM (3 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2,3-디플루오로-6-메톡시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (95 mg, 0.19 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 30분 동안 교반시켰다. MeOH (1 mL)를 첨가하고, 그 후 용매를 진공 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 50~90% MeOH)로 정제하여 2-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3,4-디플루오로페놀. 2HBr (92 mg, 88%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.16 - 2.38 (4H, m), 2.70 - 2.82 (2H, m), 3.54 - 3.71 (4H, m), 3.75 - 3.85 (1H, m), 4.18 - 4.28 (1H, m), 6.68 - 6.80 (1H, m), 7.23 - 7.30 (1H, m), 7.30 - 7.43 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 385.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2,3- 디플루오로 -6- 히드록시페닐 )-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 38 및 회전 이성질체 2, 실시예 39
Figure pct00159
DIPEA (0.081 mL, 0.47 mmol)를 25℃에서 DMF (2 mL) 중 2-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3,4-디플루오로페놀.2HBr (85 mg, 0.16 mmol)에 적가하였다. 아크릴로일 클로라이드 (0.018 mL, 0.22 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 물 (0.5 mL)을 첨가하고, 생성된 용액을 물 (10 mmol/L NH4HCO3) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPCL (컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼 30×150 mm 5 μm)로 정제하여 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2,3-디플루오로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (20 mg, 29%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.38 - 2.44 (1H, m), 2.62 - 3.23 (4H, m), 3.57 - 3.70 (1H, m), 3.70 - 4.10 (4H, m), 4.31 - 4.46 (1H, m), 5.65 - 5.74 (1H, m), 6.07 - 6.19 (1H, m), 6.70 - 6.89 (2H, m), 7.26 - 7.43 (2H, m), 10.13 - 10.19 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 439. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2,3-디플루오로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (5.7 mg, 8%)가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.34 - 2.49 (1H, m), 2.78 - 2.84 (3H, m), 3.09 - 3.15 (1H, m), 3.57 - 3.70 (1H, m), 3.67 - 4.14 (4H, m), 4.32 - 4.47 (1H, m), 5.68 - 5.74 (1H, m), 6.08 - 6.19 (1H, m), 6.67 - 6.92 (2H, m), 7.24 - 7.38 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 439.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8- 요오도 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀
Figure pct00160
N-요오도숙신이미드 (7.54 g, 33.51 mmol)를 진한 황산 (60 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (7 g, 16.76 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 20시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 2 M NaOH로 켄칭하고, DCM (200 mL x 4)으로 추출하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (4 g, 54%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.18 - 2.43 (3H, m), 2.56 - 2.73 (3H, m), 2.73 - 2.96 (2H, m), 3.59 - 3.63 (2H, m), 4.24 (2H, d), 7.84 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 443.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -8-카르보니트릴
Figure pct00161
테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (2.084 g, 1.8 mmol)을 DMF (40 mL) 중 디시아노아연 (1.271 g, 10.82 mmol), 및 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (4 g, 9.02 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 5~80% MeOH)로 정제하여 (12aR)-9-브로모-10-클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (1.8 g, 51%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.27 - 2.46 (2H, m), 2.67 - 2.82 (3H, m), 2.74 - 2.99 (2H, m), 3.61 - 3.91 (3H, m), 4.41 (1H, dd), 7.87 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 342.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 메톡시 -6- 메틸페닐 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -8-카르보니트릴.1TFA
Figure pct00162
RuPhos-Pd-G3 (0.387 g, 0.46 mmol) 및 RuPhos (0.216 g, 0.46 mmol)를 실온에서 1,4-디옥산 (30 mL) 및 물 (6 mL) (5:1의 비) 중(12aR)-9-브로모-10-클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (1.8 g, 4.63 mmol), (2-메톡시-6-메틸페닐)보론산 (1.076 g, 6.48 mmol) 및 탄산나트륨 (1.227 g, 11.58 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 2.5시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL x 2)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 20~60% MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴. 1TFA (1.55 g, 67%)를 황색 오일로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.87 - 2.04 (3H, m), 2.60 - 3.12 (6H, m), 3.20 - 3.46 (2H, m), 3.69 (3H, s), 3.78 - 3.93 (1H, m), 3.98 - 4.28 (2H, m), 4.48 - 4.68 (1H, m), 6.82 - 6.96 (1H, m), 6.94 - 7.06 (1H, m), 7.26 - 7.41 (1H, m), 7.74 - 7.92 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 384.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2-히드록시-6- 메틸페닐 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -8-카르보니트릴 회전 이성질체 1 및 2
Figure pct00163
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 (15.60 mL, 15.60 mmol)를 실온에서 DCM (20 mL) 중 (12aR)-10-클로로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴.1TFA (1.55 g, 3.12 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (20 ml)로 켄칭하고, 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 이것을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 20~50% MeOH)로 정제하여 조 생성물을 황색 고형물로 제공하였다. 이것을 헥산 (8 mmol/L NH3.MeOH) 및 EtOH로 용출시키면서 분취용 키랄-HPLC (컬럼: CHIRALPAK IC,2*25 cm, 5 μm)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 1 (210 mg, 35%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.90 (3H, s), 2.17 - 2.46 (2H, m), 2.61 - 3.01 (6H, m), 3.69 - 3.95 (3H, m), 4.40 (1H, d), 6.67 - 6.89 (2H, m), 7.01 - 7.28 (1H, m), 7.80 (1H, s), 8.25 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 370. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 (12aR)-10-클로로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (240 mg, 40%)의 회전 이성질체 2가 뒤따랐다. m/z: ES+ [M+H]+ = 370.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2-히드록시-6- 메틸페닐 )-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 회전 이성질체 1, 실시예 40
Figure pct00164
아크릴로일 클로라이드 (55.8 mg, 0.62 mmol)를 DMF (5 mL) 중 (12aR)-10-클로로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 1 (240 mg, 0.65 mmol) 및 DIPEA (0.340 mL, 1.95 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 25~40% MeCN)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 1 (150 mg, 55%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.93 (3H, s), 2.45 - 2.51 (1H, m), 2.73 - 2.78 (1H, m), 2.84 - 2.89 (2H, m), 3.05 - 3.13 (1H, m), 3.83 - 3.88 (4H, m), 4.06 - 4.10 (1H, m), 4.48 - 4.52 (1H, m), 5.71 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.75 - 6.82 (3H, m), 7.12 - 7.20 (1H, m), 7.81 (1H, s), 9.50 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 424.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2-히드록시-6- 메틸페닐 )-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 회전 이성질체 2, 실시예 41
Figure pct00165
아크릴로일 클로라이드 (48.8 mg, 0.54 mmol)를 DMF (5 mL) 중 (12aR)-10-클로로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 2 (210 mg, 0.57 mmol) 및 DIPEA (0.298 mL, 1.70 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 25~40% MeCN)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 2 (121 mg, 50%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.90 (3H, s), 2.41 - 2.45 (1H, m), 2.73 - 2.77 (1H, m), 2.83 - 2.90 (2H, m), 3 - 3.25 (1H, m), 3.79 - 4.01 (4H, m), 4.05 - 4.13 (1H, m), 4.52 (1H, t), 5.71 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.76 - 6.87 (3H, m), 7.12 - 7.20 (1H, m), 7.81 (1H, s), 9.50 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 424.
메틸 4-아미노-2,3,5- 트리플루오로벤조에이트
Figure pct00166
DIPEA (17.05 mL, 97.61 mmol) 및 메틸 4-아미노-2,3,5,6-테트라플루오로벤조에이트 (6.6 g, 29.58 mmol)를 MeCN (300 mL) 중 트리스(2-페닐피리딘)이리듐(III) (300 mL, 0.15 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 45℃까지 가열하고, LED 청색광을 7일 동안 조사하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~8% EtOAc)로 정제하여 메틸 4-아미노-2,3,5-트리플루오로벤조에이트 (5.54 g, 91%)를 담황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 3.91 (3H, s), 4.29 (2H, s), 7.45 (1H, ddd). m/z: ES+ [M+H]+ = 206.
4-아미노-2,3,5- 트리플루오로벤조산
Figure pct00167
2 M 수산화나트륨 (40.2 mL, 80.43 mmol)을 THF (25 mL) 및 MeOH (25 mL) (1:1의 비) 중 메틸 4-아미노-2,3,5-트리플루오로벤조에이트 (5.5g, 26.81 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물의 pH를 2 M HCl로 pH 5로 조정하였다. 수성 층을 EtOAc (100 mL x 3)로 추출하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 4-아미노-2,3,5-트리플루오로벤조산 (5 g, 98%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 6.44 (2H, s), 7.26 - 7.36 (1H, m), 12.91 (1H, s).
4- 브로모 -2,3,5- 트리플루오로벤조산
Figure pct00168
Tert-부틸 니트라이트 (1.295 g, 12.56 mmol)를 0℃에서 MeCN (32 mL) 중 4-아미노-2,3,5-트리플루오로벤조산 (1.6 g, 8.37 mmol) 및 브롬화구리(II) (2.80 g, 12.56 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 2 M HCl (100 mL x 2)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 4-브로모-2,3,5-트리플루오로벤조산 (2.05 g, 96%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 7.63 - 7.69 (1H, m), 14.03 (1H, s). m/z: ES- [M+H]- = 253.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -2,3,5- 트리플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00169
DIPEA (2.74 mL, 15.69 mmol)를 0℃에서 DMF (40 mL) 중 4-브로모-2,3,5-트리플루오로벤조산 (2 g, 7.84 mmol), tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (1.696 g, 7.84 mmol) 및 HATU (4.47 g, 11.77 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 물 (150 mL) 및 염수 (100 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 C18-플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~30% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,3,5-트리플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (2.47 g, 70%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, d), 2.72 - 3.22 (3H, m), 3.30 - 3.63 (2H, m), 3.68 - 3.90 (1H, m), 3.91 - 4.14 (1H, m), 4.20 - 4.30 (1H, m), 4.43 - 4.54 (1H, m), 4.83 - 4.89 (1H, m), 7.32 - 7.50 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 453.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8,10- 디플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00170
수소화나트륨 (0.635 g, 15.89 mmol)을 0℃의 DMF (48 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,3,5-트리플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (2.4 g, 5.3 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 및 EtOAc (150 mL)로 희석시켰다. 유기 층을 물 (150 mL x 2) 및 염수 (150 mL x 2)로 세척하고, 그 후 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~30% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.85 g, 81%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.39 - 3.56 (3H, m), 3.57 - 3.70 (1H, m), 3.70 - 3.81 (1H, m), 3.85 - 3.94 (1H, m), 3.95 - 4.08 (1H, m), 4.28 - 4.38 (2H, m), 7.48 (1H, dd). m/z: ES+ [M+H]+ = 433.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00171
THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (18 mL, 18 mmol)을 THF (18 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.8 g, 4.15 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 2 M HCl 및 EtOAc (100 mL)로 희석시켰다. 유기 층을 물 (100 mL x 2) 및 염수 (100 mL x 2)로 순차적으로 세척하고, 그 후 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.5 g, 86%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.39 (9H, s), 2.26 - 2.38 (1H, m), 2.63 - 3 (3H, m), 3.07 - 3.19 (1H, m), 3.44 - 3.59 (2H, m), 3.61 - 3.90 (3H, m), 4.30 (1H, d), 7.23 (1H, dd). m/z: ES+ [M+H]+ = 419.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00172
1,4-디옥산 (25.0 mL) 및 물 (5 mL) (5:1의 비) 중 Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1300 mg, 3.1 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (1603 mg, 9.3 mmol), RuPhos (145 mg, 0.31 mmol), RuPhos-Pd-G3 (259 mg, 0.31 mmol) 및 K2CO3 (1286 mg, 9.3 mmol)을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 그 후 물 (100 mL x 2) 및 염수 (100 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~40% MeCN)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1300 mg, 90%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.30 - 2.40 (1H, m), 2.65 - 2.92 (3H, m), 3.02 - 3.17 (1H, m), 3.54 - 3.76 (4H, m), 3.84 - 3.95 (1H, m), 4.26 - 4.36 (1H, m), 6.90 - 6.95 (1H, m), 7 - 7.04 (1H, m), 7.08 (1H, dd), 7.28 (1H, t), 10.14 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 467.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-8,10- 디플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]페놀 회전 이성질체 1 및 2
Figure pct00173
TFA (5 mL, 64.90 mmol)를 DCM (25 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1250 mg, 2.68 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 잔사를 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 0~35% MeCN)로 정제하여 TFA 염을 제공하고, 추가로 SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 황색 고형물을 수득하였다. 이것을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 0~40% MeCN)로 정제하였다. 첫 번째 용출된 회전 이성질체를 SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 3-클로로-2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀의 회전 이성질체 1 (360 mg, 38%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.58 - 2.73 (1H, m), 2.78 - 2.88 (1H, m), 2.92 - 3.07 (3H, m), 3.15 - 3.37 (2H, m), 3.73 - 3.85 (2H, m), 3.98 (1H, d), 4.36 (1H, dd), 6.91 - 6.96 (1H, m), 7.01 - 7.04 (1H, m), 7.09 (1H, dd), 7.29 (1H, t), 10.20 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 367. 두 번째 용출된 회전 이성질체를 SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 3-클로로-2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀의 회전 이성질체 2 (320 mg, 34%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.63 - 2.73 (1H, m), 2.74 - 2.87 (1H, m), 2.95 - 3.07 (3H, m), 3.19 - 3.34 (2H, m), 3.71 - 3.84 (2H, m), 3.99 (1H, d), 4.37 (1H, dd), 6.94 (1H, dd), 7.02 (1H, dd), 7.09 (1H, dd), 7.29 (1H, t), 10.19 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 367.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 42
Figure pct00174
아크릴로일 클로라이드 (0.079 mL, 0.97 mmol)를 0℃의 DMF (8 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀의 회전 이성질체 1 (340 mg, 0.93 mmol) 및 DIPEA (0.486 mL, 2.78 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~42% MeCN)로 정제하여 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (220 mg, 56%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.31 - 2.46 (1H, m), 2.70 - 2.93 (3H, m), 3 - 3.20 (1H, m), 3.59 - 3.78 (2H, m), 3.80 - 4.08 (3H, m), 4.29 - 4.45 (1H, m), 5.65 - 5.73 (1H, m), 6.12 (1H, d), 6.76 - 6.88 (1H, m), 6.92 (1H, dd), 7.02 (1H, dd), 7.08 (1H, dd), 7.28 (1H, t), 10.14 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 421.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2, 실시예 43
Figure pct00175
아크릴로일 클로라이드 (0.070 mL, 0.86 mmol)를 0℃의 DMF (8 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀의 회전 이성질체 2 (300 mg, 0.82 mmol) 및 DIPEA (0.429 mL, 2.45 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~42% MeCN)로 정제하여 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (210 mg, 61%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.29 - 2.46 (1H, m), 2.67 - 2.97 (3H, m), 3.02 - 3.19 (1H, m), 3.59 - 3.78 (2H, m), 3.79 - 4.07 (3H, m), 4.29 - 4.42 (1H, m), 5.64 - 5.74 (1H, m), 6.13 (1H, d), 6.74 - 6.87 (1H, m), 6.93 (1H, dd), 7.02 (1H, dd), 7.08 (1H, dd), 7.28 (1H, t), 10.14 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 421.
Tert -부틸 ( 12a R )-8,10- 디플루오로 -9-(2- 메톡시 -6- 메틸페닐 )-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00176
1,4-디옥산 (12.0 mL) 및 물 (3.0 mL) (4:1의 비) 중 Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (140 mg, 0.33 mmol), (2-메톡시-6-메틸페닐)보론산 (83 mg, 0.5 mmol), RuPhos (15.58 mg, 0.03 mmol), RuPhos-Pd-G3 (27.9 mg, 0.03 mmol) 및 K2CO3 (138 mg, 1 mmol)을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 40~60% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-8,10-디플루오로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (165 mg, >100%)를 백색 고형물로 제공하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.49 (9H, s), 2.12 (3H, d), 2.45 - 2.54 (1H, m), 2.75 - 3.18 (5H, m), 3.23 - 3.42 (1H, m), 3.75 - 3.91 (5H, m), 4.02 - 4.10 (1H, m), 4.21 - 4.39 (1H, m), 6.75 - 6.87 (2H, m), 6.93 (1H, dd), 7.31 (1H, t). m/z: ES+ [M+H]+ = 461.
2-[( 12a R )-8,10- 디플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-메틸페놀
Figure pct00177
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 (4 mL, 4 mmol)를 DCM (4 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-8,10-디플루오로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (150 mg, 0.33 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.05% TFA) 중 5~35% MeCN)로 정제하여 TFA 염을 제공하고, 이를 SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-메틸페놀 (119 mg, >100%)를 담황색 고형물로 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 2.04 (3H, d), 2.72 - 2.85 (1H, m), 2.85 - 2.96 (1H, m), 3.04 - 3.16 (2H, m), 3.20 (1H, dd), 3.42 (1H, d), 3.73 - 3.86 (3H, m), 4.07 (1H, d), 4.36 - 4.46 (1H, m), 6.74 (1H, d), 6.80 (1H, d), 6.93 (1H, d), 7.14 (1H, t). m/z: ES+ [M+H]+ = 347.
1-[( 12a R )-8,10- 디플루오로 -9-(2-히드록시-6- 메틸페닐 )-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 44 및 회전 이성질체 2, 실시예 45
Figure pct00178
DMF (2.5 mL) 중 아크릴로일 클로라이드 (31.1 mg, 0.34 mmol)의 용액을 -10℃의 DMF (5 mL) 중 2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-메틸페놀 (119 mg, 0.34 mmol) 및 트리에틸아민 (0.096 mL, 0.69 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 생성된 용액을 -10℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 직접적으로 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~37% MeCN)로 정제하여 조 생성물을 제공하였다. 조 생성물을 물 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: Xselect CSH OBD 컬럼 30*150 mm 5 μm)로 분리하여 1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (41 mg, 30%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 2.06 (3H, s), 2.45 - 2.66 (1H, m), 2.83 - 3.62 (4H, m), 3.65 - 3.84 (2H, m), 3.88 - 4.31 (3H, m), 4.28 - 4.46 (1H, m), 5.79 (1H, d), 6.25 (1H, d), 6.74 - 6.88 (3H, m), 6.94 (1H, d), 7.14 (1H, t). m/z: ES+ [M+H]+ = 402. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (36 mg, 25%)가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 2.06 (3H, s), 2.44 - 2.64 (1H, m), 2.87 - 3.10 (2H, m), 3.10 - 3.30 (1H, m), 3.51 - 3.65 (1H, m), 3.68 - 3.96 (3H, m), 3.95 - 4.20 (2H, m), 4.26 - 4.42 (1H, m), 5.78 (1H, d), 6.24 (1H, d), 6.74 - 6.88 (3H, m), 6.94 (1H, d), 7.14 (1H, t). m/z: ES+ [M+H]+ = 402.
Tert -부틸 (12a R )-8,10-디플루오로-9-[2-플루오로-6-(히드록시메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00179
1,4-디옥산 (12 mL) 및 물 (3 mL) (4:1의 비) 중 Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (140 mg, 0.33 mmol), [2-플루오로-6-(히드록시메틸)페닐]보론산 (85 mg, 0.5 mmol), RuPhos (15.58 mg, 0.03 mmol), RuPhos-Pd-G3 (27.9 mg, 0.03 mmol) 및 K2CO3 (138 mg, 1 mmol)을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 40~60% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-플루오로-6-(히드록시메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (174 mg, >100%)를 백색 고형물로 제공하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 465.
{2-[(12a R ) -8,10- 디플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-플루오로페닐}메탄올.2TFA
Figure pct00180
TFA (2 mL, 25.96 mmol)를 DCM (10 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-플루오로-6-(히드록시메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (174 mg, 0.37 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 MeOH (10 mL)에 용해시키고, K2CO3 (155 mg, 1.12 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.05% TFA) 중 5~33% MeCN)로 정제하여 {2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페닐}메탄올. 2TFA (119 mg, 54%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.61 - 2.89 (2H, m), 2.90 - 3.09 (3H, m), 3.20 - 3.35 (2H, m), 3.75 - 3.90 (3H, m), 3.99 (1H, d), 4.22 - 4.28 (2H, m), 4.39 (1H, d), 7.13 - 7.32 (2H, m), 7.42 - 7.62 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 365.
1-[( 12a R )-8,10- 디플루오로 -9-[2- 플루오로 -6-( 히드록시메틸 )페닐]-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 46 및 회전 이성질체 2, 실시예 47
Figure pct00181
DMF (2.5 mL) 중 아크릴로일 클로라이드 (18 mg, 0.2 mmol)의 용액을 -10℃의 DMF (5 mL) 중 {2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페닐}메탄올.2TFA (119 mg, 0.20 mmol) 및 트리에틸아민 (0.112 mL, 0.8 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 생성된 용액을 -10℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~37% MeCN)로 정제하여 2가지 회전 이성질체의 혼합물을 제공하였다. 이 혼합물을 물 (0.1% 포름산) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: SunFire C18 OBD Prep 컬럼, 100 Å, 5 μm, 19 mm X 250 mm)로 분리하여 1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-플루오로-6-(히드록시메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (22 mg, 26%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 2.48 - 2.64 (1H, m), 2.89 - 3.05 (2H, m), 3.07 - 3.31 (1H, m), 3.49 - 3.62 (1H, m), 3.71 - 3.83 (2H, m), 3.87 - 4 (1H, m), 3.99 - 4.24 (2H, m), 4.32 - 4.45 (3H, m), 5.78 (1H, d), 6.25 (1H, d), 6.75 - 6.86 (1H, m), 7.03 (1H, d), 7.12 - 7.18 (1H, m), 7.43 - 7.57 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 419. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-플루오로-6-(히드록시메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (25 mg, 30%)가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD, 30℃) 1.64 - 1.84 (1H, m), 2.02 - 2.23 (2H, m), 2.23 - 2.46 (1H, m), 2.62 - 2.83 (1H, m), 2.86 - 3.05 (2H, m), 3.05 - 3.18 (1H, m), 3.17 - 3.43 (2H, m), 3.46 - 3.70 (3H, m), 4.89 - 5.05 (1H, m), 5.44 (1H, d), 5.90 - 6.07 (1H, m), 6.12 - 6.27 (1H, m), 6.25 - 6.39 (1H, m), 6.58 - 6.78 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 419.
2-[2- 메톡시 -6-( 트리플루오로메틸 )페닐]-4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란
Figure pct00182
헥산 중 2.5 M n-부틸리튬 (2.447 mL, 6.12 mmol)을 -78℃의 THF (20 mL) 중 2-브로모-1-메톡시-3-(트리플루오로메틸)벤젠 (1.3 g, 5.10 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반시키고, 4,4,5,5-테트라메틸-2-[(프로판-2-일)옥시]-1,3,2-디옥사보롤란 (1.768 mL, 8.67 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (20 mL)로 희석시키고, 염수 (20 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~10% EtOAc)로 정제하여 2-[2-메톡시-6-(트리플루오로메틸)페닐]-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (0.89 g, 58%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.29 (12H, s), 3.79 (3H, s), 7.21 - 7.29 (2H, m), 7.54 - 7.60 (1H, m).
Tert -부틸 (12a R )-8,10-디플루오로-9-[2-메톡시-6-(트리플루오로메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00183
RuPhos-Pd-G3 (40 mg, 0.05 mmol) 및 RuPhos (22 mg, 0.05 mmol)를 1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (1 mL) (5:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (200 mg, 0.48 mmol), 2-[2-메톡시-6-(트리플루오로메틸)페닐]-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (576 mg, 1.91 mmol) 및 K2CO3 (198 mg, 1.43 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반시키고, 그 후 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 0~50% MeCN)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-메톡시-6-(트리플루오로메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (140 mg, 57%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.43 (9H, s), 2.61 - 2.88 (2H, m), 2.92 - 3.36 (5H, m), 3.77 (3H, s), 3.91 - 4.13 (1H, m), 4.32 - 4.72 (3H, m), 7.10 (1H, d), 7.27 - 7.33 (1H, m), 7.67 - 7.76 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 515.
2-[( 12a R )-8,10- 디플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-(트리플루오로메틸)페놀
Figure pct00184
DCM 중 3 M 삼브롬화붕소 (4 mL, 12 mmol)를 tert-부틸 (12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-메톡시-6-(트리플루오로메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (130 mg, 0.25 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH로 희석시키고, 그 후 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4HCO3) 중 0~35% MeCN)로 정제하여 2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-(트리플루오로메틸)페놀 (45 mg, 45%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.30 - 2.47 (1H, m), 2.53 - 2.62 (1H, m), 2.64 - 2.88 (3H, m), 2.89 - 3.06 (2H, m), 3.59 - 3.76 (2H, m), 3.81 - 3.95 (1H, m), 4.20 - 4.31 (1H, m), 7.01 - 7.13 (1H, m), 7.20 - 7.36 (2H, m), 7.45 - 7.54 (1H, m), 10.25 - 10.35 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 401.
1-[( 12a R )-8,10- 디플루오로 -9-[2-히드록시-6-( 트리플루오로메틸 )페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1 실시예 48 및 회전 이성질체 2, 실시예 49
Figure pct00185
아크릴로일 클로라이드 (9.04 mg, 0.1 mmol)를 적가하여 0℃의 DMF (3 mL) 중 2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-(트리플루오로메틸)페놀 (40 mg, 0.1 mmol) 및 DIPEA (0.052 mL, 0.3 mmol)를 수득하고, 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (0.1% 포름산) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: Xselect CSH OBD 컬럼 30*150 mm 5 μm)로 정제하여 1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-히드록시-6-(트리플루오로메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (13 mg, 27%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.29 - 2.46 (1H, m), 2.64 - 2.92 (3H, m), 2.97 - 3.17 (1H, m), 3.43 - 3.78 (2H, m), 3.79 - 3.94 (2H, m), 3.95 - 4.09 (1H, m), 4.28 - 4.45 (1H, m), 5.65 - 5.76 (1H, m), 6.06 - 6.19 (1H, m), 6.75 - 6.90 (1H, m), 7.07 (1H, d), 7.21 - 7.34 (2H, m), 7.43 - 7.55 (1H, m), 10.03 - 10.92 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 455. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-히드록시-6-(트리플루오로메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (6 mg, 13%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.29 - 2.44 (1H, m), 2.63 - 2.96 (3H, m), 3 - 3.19 (1H, m), 3.55 - 3.78 (2H, m), 3.79 - 4.14 (3H, m), 4.25 - 4.45 (1H, m), 5.56 - 5.78 (1H, m), 6.01 - 6.21 (1H, m), 6.72 - 6.91 (1H, m), 7.07 (1H, d), 7.17 - 7.38 (2H, m), 7.43 - 7.55 (1H, m), 10.23 - 10.69 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 455.
2- 브로모 -1- 에테닐 -3- 메톡시벤젠
Figure pct00186
테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (1.108 g, 0.96 mmol)을 1,4-디옥산 (40 mL) 및 물 (10 mL) (4:1의 비) 중 2-브로모-1-요오도-3-메톡시벤젠 (3 g, 9.59 mmol), 2-에테닐-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (1.772 g, 11.50 mmol) 및 K2CO3 (3.97 g, 28.76 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: EtOAc 중 2~5% 석유 에테르)로 정제하여 2-브로모-1-에테닐-3-메톡시벤젠 (1.5 g, 73%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 3.85 (3H, s), 5.42 (1H, dd), 5.82 (1H, dd), 6.83 - 7.19 (2H, m), 7.21 - 7.32 (1H, m), 7.28 - 7.41 (1H, m).
2-(2- 에테닐 -6- 메톡시페닐 )-4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란
Figure pct00187
DMA (15 mL) 중 2-브로모-1-에테닐-3-메톡시벤젠 (500 mg, 2.35 mmol), 비스(피나콜라토)디보론 (11.92 mg, 4.69 mmol), 디클로로비스(트리시클로헥실포스핀)팔라듐 (II) (1732 mg, 2.35 mmol) 및 아세트산칼륨 (806 mg, 8.21 mmol)을 120℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 2~60% MeOH)로 정제하여 2-(2-에테닐-6-메톡시페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (170 mg, 28%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.31 (12H, s), 3.72 (3H, s), 5.27 (1H, dd), 5.76 (1H, dd), 6.59 - 6.71 (1H, m), 6.85 (1H, d), 7.18 (1H, d), 7.32 (1H, t).
Tert -부틸 ( 12a R )-9-(2- 에테닐 -6- 메톡시페닐 )-8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00188
RuPhos-Pd-G3 (30 mg, 0.04 mmol)을 1,4-디옥산 (8 mL) 및 물 (2 mL) (4:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (150 mg, 0.36 mmol), 2-(2-에테닐-6-메톡시페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (140 mg, 0.54 mmol) 및 RuPhos (16.70 mg, 0.04 mmol) 및 K2CO3 (99 mg, 0.72 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 10~50% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-(2-에테닐-6-메톡시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (110 mg, 65%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃ ) 1.25 (9H, s), 2.25 - 2.45 (1H, m), 2.57 - 3.27 (4H, m), 3.25 (3H, s), 3.43 - 3.85 (5H, m), 4.21 - 4.35 (1H, m), 5.21 - 5.28 (1H, m), 5.60 - 5.88 (1H, m), 6.32 - 6.39 (1H, m), 6.05 - 7.16 (1H, m), 7.35 - 7.59 (2H, m), 8.21 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 473.
Tert -부틸 ( 12a R )-9-(2-에틸-6- 메톡시페닐 )-8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00189
탄소상의 10% 팔라듐 (25 mg, 0.02 mmol)을 MeOH (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-에테닐-6-메톡시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (110 mg, 0.23 mmol)에 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다(수소 분위기 하에). 상기 혼합물을 CELITETM 패드를 통하여 여과시켰다. 여과액을 감압 하에 제거하여 tert-부틸 (12aR)-9-(2-에틸-6-메톡시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (80 mg, 72%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃ ) 0.84 - 1.03 (3H, m), 1.38 (9H, s), 2.19 - 2.37 (3H, m), 2.61 - 2.92 (3H, m), 2.92 - 3.25 (1H, m), 3.52 - 3.71 (6H, m), 3.72 - 3.79 (1H, m), 3.79 - 3.99 (1H, m), 4.15 - 4.40 (1H, m), 6.85 - 7 (2H, m), 7.05 (1H, d), 7.35 (1H, t). m/z: ES+ [M+H]+ = 475.
2-[( 12a R )-8,10- 디플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-에틸페놀
Figure pct00190
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 (0.316 mL, 0.32 mmol)를 DCM (1 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-에틸-6-메톡시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (75 mg, 0.16 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (2 mL)로 켄칭하고, 수득된 조 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 40~80% MeOH)로 정제하여 2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-에틸페놀 (40 mg, 70%)을 황색 고형물로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 361.
1-[( 12a R )-9-(2-에틸-6- 히드록시페닐 )-8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 50 및 회전 이성질체 2, 실시예 51
Figure pct00191
아크릴로일 클로라이드 (8.79 mg, 0.1 mmol)를 DMF (1 mL) 중 2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-에틸페놀 (35 mg, 0.1 mmol) 및 DIPEA (0.051 mL, 0.29 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 물 (10 mmol/L 포름산) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼 30×150 mm 5 μm)로 정제하여 1-[(12aR)-9-(2-에틸-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (9 mg, 22%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 0.96 (3H, t), 2.03 - 2.34 (3H, m), 2.56 - 2.87 (3H, m), 2.92 - 3.26 (1H, m), 3.54 - 3.78 (2H, m), 3.78 - 3.94 (2H, m), 2.94 - 4.15 (1H, m), 4.31 - 4.48 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.57 - 6.91 (3H, m), 7.06 (1H, d), 7.18 (1H, t), 9.55 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 415. 이것에 이어서 황색 고형물로서의 1-[(12aR)-9-(2-에틸-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (12 mg, 30%)가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 0.93 (3H, t), 2.05 - 2.34 (2H, m), 2.32 - 2.46 (1H, m), 2.58 - 2.87 (3H, m), 2.92 - 3.13 (1H, m), 3.45 - 3.83 (2H, m), 3.78 - 4.19 (3H, m), 4.05 - 4.46 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.57 - 6.88 (3H, m), 7.06 (1H, d), 7.18 (1H, t), 9.45 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 415.
2- 브로모 -3-[(4- 메톡시페닐 ) 메톡시 ] 벤즈알데히드
Figure pct00192
1-(클로로메틸)-4-메톡시벤젠 (4.28 g, 27.36 mmol)을 실온에서 DMF (50 mL) 중 2-브로모-3-히드록시벤즈알데히드 (5 g, 24.87 mmol), K2CO3 (6.88 g, 49.75 mmol) 및 요오드화칼륨 (0.826 g, 4.97 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL x 2)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~100% EtOAc)로 정제하여 2-브로모-3-[(4-메톡시페닐)메톡시]벤즈알데히드 (5 g, 63%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.76 (3H, s), 5.20 (2H, s), 6.91 - 7.04 (2H, m), 7.36 - 7.62 (5H, m), 10.28 (1H, s).
2- 브로모 -1-(2,2- 디플루오로에틸 )-3-[(4- 메톡시페닐 ) 메톡시 ]벤젠
Figure pct00193
(디에틸아미노)황 트리플루오라이드 (2.057 mL, 15.57 mmol)를 -78℃의 THF (30 mL) 중 2-브로모-3-[(4-메톡시페닐)메톡시]벤즈알데히드 (2 g, 6.23 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 (100 mL)으로 켄칭하고, EtOAc (200 mL)로 희석시키고, 포화 NaHCO3 (200 mL) 및 염수 (200 mL x 2)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 0~100% EtOAc/석유 에테르)로 정제하여 2-브로모-1-(2,2-디플루오로에틸)-3-[(4-메톡시페닐)메톡시]벤젠 (1.4 g, 66%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.76 (3H, s), 5.18 (2H, s), 6.94 - 7.02 (2H, m), 7.13 - 7.28 (2H, m), 7.36 - 7.53 (4H, m).
2-{2-( 디플루오로메틸 )-6-[(4- 메톡시페닐 ) 메톡시 ]페닐}-4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2-디옥사보롤란
Figure pct00194
디클로로비스(트리시클로헥실포스핀)팔라듐 (II) (43 mg, 0.06 mmol)을 DMA (5 mL) 중 2-브로모-1-(2,2-디플루오로에틸)-3-[(4-메톡시페닐)메톡시]벤젠 (200 mg, 0.58 mmol), 비스(피나콜라토)디보론 (296 mg, 1.17 mmol) 및 아세트산칼륨 (200 mg, 2.04 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 120℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 5~80% MeOH)로 정제하여 2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(4-메톡시페닐)메톡시]페닐}-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (80 mg, 35%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.19 (12H, d), 3.75 (3H, s), 5.03 (2H, s), 6.80 - 6.99 (3H, m), 7.04 - 7.30 (2H, m), 7.28 - 7.57 (3H, m).
Tert -부틸 (12a R )-9-{2-(디플루오로메틸)-6-[(4-메톡시페닐)메톡시]페닐}-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00195
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (60 mg, 0.14 mmol), 2-{2-(디플루오로메틸)-6-[(4-메톡시페닐)메톡시]페닐}-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (73 mg, 0.19 mmol), K2CO3 (39.6 mg, 0.29 mmol), RuPhos (7 mg, 0.01 mmol) 및 RuPhos-Pd-G3 (12 mg, 0.01 mmol)을 1,4-디옥산 (4 mL) 및 물 (1 mL) (4:1의 비)에 현탁시키고, 마이크로웨이브 튜브에 넣어 밀봉하였다. 반응물을 마이크로웨이브 반응기에서 100℃에서 45분 동안 가열하고, 실온까지 냉각시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 30~70% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-{2-(디플루오로메틸)-6-[(4-메톡시페닐)메톡시]페닐}-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (50 mg, 58%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 2.29 - 2.44 (1H, m), 2.62 - 2.91 (3H, m), 3.03 - 3.28 (1H, m), 3.43 - 3.66 (1H, m), 3.65 - 3.80 (5H, m), 3.81 - 3.96 (1H, m), 4 - 4.15 (1H, m), 4.34 - 4.35 (1H, m), 4.86 - 5.19 (2H, m), 6.77 (2H, d), 6.88 (2H, d), 6.98 (1H, d), 7.18 - 7.34 (4H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 603.
1-[( 12a R )-9-[2-( 디플루오로메틸 )-6- 히드록시페닐 ]-8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온
Figure pct00196
TFA (1 mL) 중 Tert-부틸 (12aR)-9-{2-(디플루오로메틸)-6-[(4-메톡시페닐)메톡시]페닐}-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (50 mg, 0.08 mmol)를 50℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 2~70% MeOH)로 정제하여 1-[(12aR)-9-[2-(디플루오로메틸)-6-히드록시페닐]-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온 (30 mg, 76%)을 황색 고형물로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 679.
2-[( 12a R )-8,10- 디플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-(디플루오로메틸)페놀
Figure pct00197
수산화나트륨 (7.52 mg, 0.19 mmol)을 MeOH (0.5 mL) 및 물 (0.1 mL) (5:1의 비) 중 1-[(12aR)-9-[2-(디플루오로메틸)-6-히드록시페닐]-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온 (30 mg, 0.06 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 24시간 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 10~50% MeCN)로 정제하여 2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-(디플루오로메틸)페놀 (13 mg, 54%)을 황색 고형물로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 383.
1-[( 12a R )-9-[2-( 디플루오로메틸 )-6- 히드록시페닐 ]-8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 52 및 회전 이성질체 2, 실시예 53
Figure pct00198
아크릴로일 클로라이드 (2.367 mg, 0.03 mmol)를 DMF (0.5 mL) 중 2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-(디플루오로메틸)페놀 (10 mg, 0.03 mmol) 및 DIPEA (0.014 mL, 0.08 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 물 (10 mmolL/L NH4HCO3) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼 30×150 mm 5 μm)로 정제하여 1-[(12aR)-9-[2-(디플루오로메틸)-6-히드록시페닐]-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (2.8 mg, 25%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.36 - 2.41 (1H, m), 2.81 - 2.94 (2H, m), 3.10 - 3.18 (1H, m), 3.28 - 3.33 (1H, m), 3.71 - 3.78 (2H, m), 3.81 - 3.93 (3H, m), 4.27 - 4.39 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.50 - 6.78 (1H, m), 6.79 - 6.92 (1H, m), 7.04 - 7.19 (3H, m), 7.38 - 7.47 (1H, m), 10.02 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 437. 이것에 이어서 황색 고형물로서의 1-[(12aR)-9-[2-(디플루오로메틸)-6-히드록시페닐]-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (2.8 mg, 25%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.30 - 2.48 (1H, m), 2.73 - 2.80 (1H, m), 2.86 - 2.90 (1H, m), 3.01 - 3.18 (1H, m), 3.38 - 3.57 (1H, m), 3.57 - 3.71 (1H, m), 3.71 - 3.86 (1H, m), 3.86 - 3.95 (2H, m), 3.95 - 4.19 (1H, m), 4.34 - 4.51 (1H, m), 5.73 (1H, d), 6.10 (1H, d), 6.29 - 6.79 (1H, m), 6.77 - 6.96 (1H, m), 6.99 - 7.28 (3H, m), 7.42 - 7.51 (1H, m), 10.02 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 437.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -2,3- 디플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00199
DIPEA (15.48 mL, 88.61 mmol)를 DMF (80 mL) 중 4-브로모-2,3-디플루오로벤조산 (7 g, 29.54 mmol), HATU (16.85 g, 44.30 mmol) 및 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (7.03 g, 32.49 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 염수 (100 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 20~50% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,3-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (10 g, 78%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.39 (9H, s), 2.75 - 3.23 (3H, m), 3.38 - 3.59 (2H, m), 3.62 - 3.93 (1H, m), 3.88 - 4.10 (1H, m), 4.15 - 4.63 (1H, m), 4.72 - 5.33 (1H, m), 6.91 - 7.41 (1H, m), 7.49 - 7.92 (1H, m). m/z: ES+ [M-tBu]+ = 379.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00200
수소화나트륨 (1.47 g, 36.76 mmol)을 THF (50 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,3-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (8 g, 18.38 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 켄칭하고, EtOAc (100 mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 10~20% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (6 g, 79%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.39 (9H, s), 3.43 - 3.56 (2H, m), 3.57 - 3.84 (2H, m), 3.82 - 4.13 (3H, m), 4.22 - 4.45 (2H, m), 7.29 - 7.67 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 415.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00201
THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (40 ml, 40 mmol)을 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (6 g, 14.45 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 40~60% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3 g, 52%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.19 - 2.43 (1H, m), 2.61 - 2.82 (2H, m), 2.97 - 3.12 (1H, m), 3.51 - 3.66 (2H, m), 3.66 - 3.76 (2H, m), 3.75 - 3.90 (1H, m), 4.11 (1H, d), 4.33 (1H, d), 7.04 (1H, d), 7.31 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 401.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -8- 요오도 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀
Figure pct00202
N-요오도숙신이미드 (1.682 g, 7.48 mmol)를 진한 황산 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.5 g, 3.74 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 20시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 2 M NaOH (100 mL)로 켄칭하고, DCM (100 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 황색 오일로 수득하였다. 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 40~80% MeOH)로 정제하여 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (0.8 g, 50%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.17 - 2.46 (2H, m), 2.61 - 2.80 (3H, m), 2.78 - 3 (2H, m), 3.54 - 3.98 (3H, m), 4.25 (1H, d), 7.70 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 427.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -8-카르보니트릴
Figure pct00203
테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (271 mg, 0.23 mmol)을 DMF (15 mL) 중 디시아노아연 (206 mg, 1.76 mmol) 및 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (500 mg, 1.17 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 20~60% MeOH)로 정제하여 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (300 mg, 79%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.17 - 2.42 (2H, m), 2.54 - 2.84 (5H, m), 3.73 (2H, d), 3.80 - 3.97 (1H, m), 4.23 - 4.45 (1H, m), 7.74 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 326.
( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 회전 이성질체 1 및 회전 이성질체 2
Figure pct00204
RuPhos-Pd-G3 (77 mg, 0.09 mmol) 및 RuPhos (42.9 mg, 0.09 mmol)를 실온에서 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (2 mL) (5:1의 비) 중 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (300 mg, 0.92 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (793 mg, 4.6 mmol) 및 인산칼륨 (586 mg, 2.76 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 마이크로웨이브에서 115℃에서 40분 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 40~70% MeOH)로 정제하여 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 1 (65 mg, 19%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.19 - 2.45 (2H, m), 2.53 - 2.88 (5H, m), 3.55 - 3.99 (3H, m), 4.37 (1H, d), 6.96 (1H, d), 7.06 (1H, d), 7.33 (1H, t), 7.69 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 374. 이것에 이어서 황색 고형물로서의 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 2 (65 mg, 19%)가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.12 - 2.45 (2H, m), 2.54 - 2.81 (5H, m), 3.60 - 4.01 (3H, m), 4.37 (1H, d), 6.97 (1H, d), 7.06 (1H, d), 7.33 (1H, t), 7.69 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 374.
( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-10- 플루오로 -2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 회전 이성질체 1, 실시예 54
Figure pct00205
아크릴로일 클로라이드 (16 mg, 0.17 mmol)를 DMF (2 mL) 중 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 1 (65 mg, 0.17 mmol) 및 DIPEA (0.091 mL, 0.52 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 물 (10 mmol/L NH4HCO3) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 30*150 mm, 5 μm)로 정제하여 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 1 (27.mg, 36%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.38 - 2.44 (1H, m), 2.68 - 2.74 (1H, m), 2.82 - 3.02 (3H, m), 3.77 - 4.03 (4H, m), 4.06 - 4.16 (1H, m), 4.44 - 4.50 (1H, m), 5.69 (1H, d), 6.11 (1H, d), 6.91 - 7 (1H, m),7.02 (1H, d), 7.05 (1H, d), 7.32 (1H, t), 7.68 (1H, s), 10.31 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 428.
( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-10- 플루오로 -2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 회전 이성질체 2, 실시예 55
Figure pct00206
아크릴로일 클로라이드 (15.74 mg, 0.17 mmol)를 DMF (2 mL) 중 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 2 (65 mg, 0.17 mmol) 및 DIPEA (0.091 mL, 0.52 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 조 반응 혼합물을 물 (10 mmol/L NH4HCO3) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: XBridge BEH C18 OBD, 5 μm, 19 mm 250 mm)로 정제하여 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 2 (30 mg, 40%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.32 - 2.42 (1H, m), 2.64 - 2.77 (1H, m), 2.80 - 3.14 (3H, m), 3.72 - 4.21 (5H, m), 4.33 - 4.92 (1H, m), 5.68 (1H, d), 6.11 (1H, d), 6.60 - 6.91 (1H, m), 6.95 (1H, d), 7.04 (1H, d), 7.31 (1H, t), 7.68 (1H, s), 10.31 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 428.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴
Figure pct00207
RuPhos-Pd-G3 (36.6 mg, 0.04 mmol) 및 RuPhos (20.43 mg, 0.04 mmol)를 실온에서 1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (1 mL) (5:1의 비) 중 (12aR)-9-브로모-10-클로로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (150 mg, 0.44 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (377 mg, 2.19 mmol) 및 인산칼륨 (279 mg, 1.31 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 마이크로웨이브 반응기에서 115℃에서 40분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 40~70% MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (70 mg, 41%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.20 - 2.42 (2H, m), 2.60 - 2.81 (4H, m), 3.56 - 3.89 (4H, m), 4.38 (1H, d), 6.78 - 6.88 (2H, m), 7.39 (1H, d), 7.74 (1H, s), 11.31 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 390.
( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-2-( 프로프 -2- 에노일 )-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 회전 이성질체 1, 실시예 56 및 회전 이성질체 2, 실시예 57
Figure pct00208
아크릴로일 클로라이드 (16 mg, 0.18 mmol)를 DMF (5 mL) 중 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴 (70 mg, 0.18 mmol) 및 DIPEA (0.094 mL, 0.54 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (0.1% 포름산) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: SunFire C18 OBD 100 Å, 5 μm, 19 mm X 250 mm)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 1 (17 mg, 21%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.35 - 2.45 (1H, m), 2.60 - 3.14 (4H, m), 3.67 - 4.18 (5H, m), 4.35 - 4.88 (1H, m), 5.72 (1H, d), 6.15 (1H, d), 6.35 - 7.16 (3H, m), 7.12 - 7.50 (1H, m), 7.81 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 444. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴의 회전 이성질체 2 (17 mg, 21%)가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.61 - 3.22 (5H, m), 3.65 - 4.35 (5H, m), 4.28 - 4.73 (1H, m), 5.71 (1H, d), 6.11 (1H, d), 6.56 - 7.12 (3H, m), 7.24 (1H, t), 7.80 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 444.
3- 메톡시 -2-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란 -2-일)아닐린
Figure pct00209
디클로로비스(트리시클로헥실포스핀)팔라듐 (II) (0.365 g, 0.49 mmol)을 25℃에서 DMA (25 mL) 중 2-브로모-3-메톡시아닐린 (1 g, 4.95 mmol), 비스(피나콜라토)디보론 (2.51 g, 9.9 mmol) 및 아세트산칼륨 (1.457 g, 14.85 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 155℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 염수 (100 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 10~30% THF)로 정제하여 3-메톡시-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린 (0.576 g, 47%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.38 (12H, s), 3.80 (3H, s), 6.27 (1H, d), 6.34 (1H, dd), 7.16 (1H, t). m/z: ES+ [M-82]+ = 168.
Tert -부틸 ( 12a R )-9-(2-아미노-6- 메톡시페닐 )-8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00210
1,4-디옥산 (12.0 mL) 및 물 (3.0 mL) (4:1의 비) 중 Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (260 mg, 0.62 mmol), 3-메톡시-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린 (463 mg, 1.86 mmol), RuPhos (28.9 mg, 0.06 mmol), RuPhos-Pd-G3 (51.9 mg, 0.06 mmol) 및 K2CO3 (257 mg, 1.86 mmol)을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 40~60% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-(2-아미노-6-메톡시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (238 mg, 83%)를 황색 폼으로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.49 (9H, s), 2.72 (3H, d), 3.48 - 3.67 (2H, m), 3.74 (3H, d), 3.76 - 4.20 (5H, m), 4.20 - 4.50 (1H, m), 6.40 - 6.50 (2H, m), 6.75 - 6.90 (1H, m), 7.21 (1H, t). m/z: ES+ [M+H]+ = 462.
Tert -부틸 ( 12a R )-9-(2- 브로모 -6- 메톡시페닐 )-8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00211
디브로모메탄 (0.5 mL) 중 tert-부틸 니트라이트 (160 mg, 1.55 mmol)의 용액을 -20℃의 디브로모메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-아미노-6-메톡시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (238 mg, 0.52 mmol)의 교반 용액에 적가하고, 이어서 디브로모메탄 (0.5 mL) 중 브로모트리메틸실란 (0.2 mL, 1.55 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 -40℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 (100 mL)으로 켄칭하고, DCM (3 x 100 mL)으로 추출하고, 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 10~20% THF)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-(2-브로모-6-메톡시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (134 mg, 50%)를 적색 오일로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 525.
3- 브로모 -2-[( 12a R )-8,10- 디플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]페놀
Figure pct00212
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 (4 mL, 4 mmol)를 DCM (4 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-브로모-6-메톡시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (130 mg, 0.25 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH로 켄칭하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.05% TFA) 중 5~35% MeCN)로 정제하여 TFA 염을 제공하고, 이를 SCX (7 M NH3/MeOH)로 정제하여 3-브로모-2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (75 mg, 74%)을 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD, 30℃) 2.70 - 2.97 (2H, m), 3.05 - 3.25 (3H, m), 3.38 - 3.52 (2H, m), 3.62 - 3.85 (2H, m), 4 - 4.13 (1H, m), 4.37 (1H, dd), 6.84 - 6.98 (2H, m), 7.07 - 7.20 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 411.
1-[( 12a R )-9-(2- 브로모 -6- 히드록시페닐 )-8,10- 디플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 58 및 회전 이성질체 2, 실시예 59
Figure pct00213
아크릴로일 클로라이드 (9.02 μl, 0.11 mmol)를 0℃의 THF (4 mL) 중 3-브로모-2-[(12aR)-8,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (65 mg, 0.11 mmol) 및 DIPEA (0.039 mL, 0.22 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 물 (0.1% TFA) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: SunFire C18 OBD Prep 컬럼, 100 Å, 5 μm, 19 mm X 250 mm)로 정제하여 1-[(12aR)-9-(2-브로모-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (6 mg, 6%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.61 - 3.23 (3H, m), 3.50 - 4.62 (8H, m), 5.65 - 5.79 (1H, m), 6.06 - 6.21 (1H, m), 6.76 - 6.92 (1H, m), 6.94 - 6.98 (1H, m), 7.03 - 7.29 (3H, m), 10.15 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 465. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-9-(2-브로모-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (9 mg, 15%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.56 - 4.51 (11H, m), 5.62 - 5.83 (1H, m), 6.08 - 6.21 (1H, m), 6.72 - 6.89 (1H, m), 6.92 - 7.02 (1H, m), 7.03 - 7.25 (3H, m), 10.12 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 465.
( 12a R )-9- 브로모 -8- 클로로 -10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀
Figure pct00214
N-클로로숙신이미드 (0.666 g, 4.98 mmol)를 진한 황산 (15 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1 g, 2.49 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물 (100 ml)에 붓고, 2 M NaOH로 중화시키고, 그 후 DCM (100 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 40~80% MeOH)로 정제하여 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (0.6 g, 72%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.28 - 2.45 (2H, m), 2.62 - 2.75 (3H, m), 2.79 - 2.88 (2H, m), 3.67 - 3.71 (1H, m), 3.71 - 3.81 (2H, m), 4.20 - 4.31 (1H, m), 7.44 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 335.
( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -9-(2- 메톡시 -6- 메틸페닐 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀
Figure pct00215
RuPhos-Pd-G3 (74.8 mg, 0.09 mmol) 및 RuPhos (41.7 mg, 0.09 mmol)에 1,4-디옥산 (8 mL) 및 물 (2 mL) (4:1의 비) 중 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (300 mg, 0.89 mmol), (2-메톡시-6-메틸페닐)보론산 (297 mg, 1.79 mmol) 및 인산칼륨, (311 mg, 1.79 mmol)을 20℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 40분 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~100% MeOH)로 정제하여 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (280 mg, 74%)을 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.90 - 2.01 (3H, m), 2.05 - 2.10 (1H, m), 2.22 (1H, s), 2.62 - 2.96 (3H, m), 3.26 - 3.58 (2H, m), 3.56 - 3.76 (5H, m), 3.75 - 3.96 (1H, m), 4.19 - 4.41 (1H, m), 6.62 - 6.80 (1H, m), 6.87 - 7 (1H, m), 7.27 - 7.41 (1H, m), 7.98 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 377.
2-[( 12a R )-10- 클로로 -8- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-메틸페놀
Figure pct00216
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 (5.11 mL, 5.11 mmol)를 0℃에서 DCM (3 mL) 중 (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 및 포름산 (270 mg, 0.64 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (25 mL)로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 0~100% MeCN)로 정제하여 2-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-메틸페놀 (148 mg, 64%)을 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.93 (3H, d), 2.25 - 2.37 (3H, m), 2.59 - 2.68 (2H, m), 2.68 - 2.82 (3H, m), 3.61 - 3.74 (2H, m), 4.04 - 4.12 (1H, m), 4.18 - 4.27 (1H, m), 6.72 - 6.79 (2H, m), 7.07 - 7.16 (1H, m), 7.26 - 7.31 (1H, m), 9.36 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 363.
1-[( 12a R )-8- 클로로 -10- 플루오로 -9-(2-히드록시-6- 메틸페닐 )-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 60 및 회전 이성질체 2, 실시예 61
Figure pct00217
아크릴로일 클로라이드 (35 mg, 0.39 mmol) 및 DIPEA (0.135 mL, 0.77 mmol)를 -20℃의 DMF (3 mL) 중 2-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-메틸페놀 (140 mg, 0.39 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 여과막을 통하여 여과시켰다. 여과액을 물 (0.1% 포름산) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: Sunfire prep C18 컬럼 30*150, 5 μm)로 정제하여 1-[(12aR)-8-클로로-10-플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (40 mg, 25%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.95 (3H, s), 2.38 - 2.43 (1H, m), 2.63 - 3.07 (3H, m), 3 - 3.19 (1H, m), 3.64 - 4.21 (5H, m), 4.33 - 4.42 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.72 - 6.90 (3H, m), 7.12 (1H, t), 7.31 (1H, s), 9.37 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 417. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-8-클로로-10-플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (24 mg, 15%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.91 (3H, s), 2.38 - 2.43 (1H, m), 2.73 - 2.77 (1H, m), 2.84 - 2.89 (2H, m), 3.07 - 3.12 (1H, m), 3.67 - 3.81 (2H, m), 3.81 - 4.10 (3H, m), 4.36 - 4.41 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.72 - 6.90 (3H, m), 7.12 (1H, t), 7.31 (1H, s), 9.35 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 417.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -5- 클로로 -2- 플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00218
DIPEA (6.89 mL, 39.46 mmol)를 0℃에서 DMF (100 mL) 중 4-브로모-5-클로로-2-플루오로벤조산 (5 g, 19.73 mmol), tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (4.27 g, 19.73 mmol) 및 HATU (15.00 g, 39.46 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (250 mL)로 희석시키고, 물 (200 mL x 2) 및 염수 (200 mL x 2)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~25% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-5-클로로-2-플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (6 g, 67%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, d), 2.75 - 3.28 (2H, m), 3.39 - 3.60 (4H, m), 3.68 - 4.15 (2H, m), 4.18 - 4.59 (1H, m), 4.92 (1H, s), 7.62 - 7.79 (1H, m), 7.87 - 7.97 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 451.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 클로로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00219
수소화나트륨 (1.54 g, 38.52 mmol)을 0℃에서 DMF (120 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-5-클로로-2-플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5.8 g, 12.84 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, EtOAc (200 mL)로 희석시키고, 물 (200 mL x 2) 및 염수 (200 mL x 2)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~25% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (5.4 g, 97%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.42 (9H, s), 3.25 - 3.81 (5H, m), 3.88 - 4.05 (2H, m), 4.24 - 4.35 (2H, m), 7.55 (1H, s), 7.89 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 431.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 클로로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00220
THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (50 mL, 50 mmol)을 첨가하여 THF (50 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (5.2 g, 12.05 mmol)를 수득하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 2 M HCl 및 EtOAc (200 mL)로 희석시키고, 그 후 물 (200 mL x 2) 및 염수 (200 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~30% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (4 g, 79%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.22 - 2.39 (1H, m), 2.59 - 2.94 (3H, m), 2.99 - 3.16 (1H, m), 3.49 - 3.81 (5H, m), 4.15 - 4.29 (1H, m), 7.37 (1H, s), 7.55 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 417.
( 12a R )-9- 브로모 -8- 클로로 -10- 요오도 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀
Figure pct00221
N-요오도숙신이미드 (1.616 g, 7.18 mmol)를 진한 황산 (15 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.5 g, 3.59 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물 (100 mL)에 붓고, 2 M NaOH로 중화시키고, DCM (150 mL x 2)으로 추출하고, 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (1.5 g, 94%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.54 - 2.66 (1H, m), 2.71 - 2.91 (4H, m), 2.96 - 3.19 (2H, m), 3.49 - 3.83 (3H, m), 4.16 - 4.39 (1H, m), 7.62 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 443.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 클로로 -10- 요오도 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00222
디-tert-부틸 디카르보네이트 (1.183 mL, 5.10 mmol)를 DCM (20 mL) 중 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (1.13 g, 2.55 mmol) 및 트리에틸아민 (1.065 mL, 7.64 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~50% THF)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.75 g, 54%)를 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.39 (9H, s), 2.26 - 2.35 (1H, m), 2.62 - 2.66 (1H, m), 2.75 - 2.80 (1H, m), 3.08 - 3.17 (1H, m), 3.45 - 3.62 (4H, m), 3.66 - 3.74 (1H, m), 3.74 - 3.82 (1H, m), 4.19 - 4.33 (1H, m), 7.63 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 543.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 클로로 -10-[( 트리메틸실릴 ) 에티닐 ]-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00223
테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (149 mg, 0.13 mmol)을 톨루엔 (10 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (700 mg, 1.29 mmol), 에티닐트리메틸실란 (632 mg, 6.44 mmol), 요오드화구리 (I) (245 mg, 1.29 mmol) 및 트리에틸아민 (0.718 mL, 5.15 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 하룻밤 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~80% THF)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (560 mg, 85%)를 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 0.25 (9H, s), 1.39 (9H, s), 2.25 - 2.35 (1H, m), 2.64 - 2.71 (1H, m), 2.71 - 2.75 (2H, m), 2.84 - 2.88 (1H, m), 3.05 - 3.16 (2H, m), 3.59 - 3.68 (1H, m), 3.68 - 3.74 (1H, m), 3.70 - 3.81 (1H, m), 4.26 - 4.35 (1H, m), 7.58 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 513.
Tert -부틸 (12a R )-8-클로로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00224
RuPhos-Pd-G3 (81 mg, 0.10 mmol)를 1,4-디옥산 (8 mL) 및 물 (2 mL) (4:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (500 mg, 0.97 mmol), RuPhos (45.4 mg, 0.1 mmol), (2-메톡시-6-메틸페닐)보론산 (323 mg, 1.95 mmol) 및 K2CO3 (269 mg, 1.95 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 40분 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~100% THF)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-8-클로로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (500 mg, 93%)을 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) -0.09 (9H, s), 1.40 (9H, d), 1.86 - 2.01 (3H, m), 2.26 - 2.42 (1H, m), 2.56 - 2.70 (2H, m), 2.70 - 2.88 (2H, m), 2.90 - 3.17 (2H, m), 3.56 - 3.67 (3H, m), 3.63 - 3.73 (2H, m), 3.76 - 3.84 (1H, m), 4.28 - 4.37 (1H, m), 6.83 - 6.95 (2H, m), 7.22 - 7.32 (1H, m), 7.38 - 7.47 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 555.
( 12a R )-8- 클로로 -9-(2- 메톡시 -6- 메틸페닐 )-10-[( 트리메틸실릴 ) 에티닐 ]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀.1HCl
Figure pct00225
Tert-부틸 (12aR)-8-클로로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (500 mg, 0.9 mmol)를 1,4-디옥산 중 4M HCl (5 mL)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 40분 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 (12aR)-8-클로로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀.1HCl (440 mg, 99%)을 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) -0.08 (9H, d), 1.87 - 1.96 (3H, m), 3.05 - 3.09 (2H, m), 3.26 - 3.31 (3H, m), 3.59 - 3.71 (4H, m), 3.81 (2H, s), 3.96 - 4.04 (2H, m), 4.30 - 4.35 (1H, m), 4.52 - 4.60 (1H, m), 6.87 - 6.97 (2H, m), 7.24 - 7.33 (1H, m), 7.58 - 7.63 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 455.
2-[( 12a R )-8- 클로로 -10- 에티닐 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-메틸페놀
Figure pct00226
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 (7.16 mL, 7.16 mmol)를 DCM (5 mL) 중 (12aR)-8-클로로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀.1HCl (440 mg, 0.9 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (25 mL)로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 0~100% MeCN)로 정제하여 2-[(12aR)-8-클로로-10-에티닐-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-메틸페놀 (200 mg, 61%)을 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.83 - 1.93 (3H, m), 2.29 - 2.41 (4H, m), 2.61 - 2.65 (1H, m), 2.65 - 2.75 (1H, m), 2.75 - 2.79 (1H, m), 2.79 - 2.91 (1H, m), 3.57 - 3.69 (1H, m), 3.68 - 3.79 (1H, m), 3.96 (1H, s), 4.21 - 4.30 (1H, m), 6.65 - 6.75 (2H, m), 7.02 - 7.10 (1H, m), 7.42 - 7.47 (1H, m), 9.16 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 369.
1-[( 12a R )-8- 클로로 -10- 에티닐 -9-(2-히드록시-6- 메틸페닐 )-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 62 및 회전 이성질체 2, 실시예 63
Figure pct00227
아크릴로일 클로라이드 (46.6 mg, 0.51 mmol) 및 DIPEA (0.176 mL, 1.01 mmol)에 -20℃의 DMF (3 mL) 중 2-[(12aR)-8-클로로-10-에티닐-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-메틸페놀 (186 mg, 0.5 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 실온에서 여과시키고, 여과액을 물 (0.1% 포름산) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: Xselect CSH OBD 컬럼 30*150 mm 5 μm)로 정제하여 1-[(12aR)-8-클로로-10-에티닐-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (14 mg, 6%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.90 (3H, s), 2.35 - 2.42 (1H, m), 2.68 - 2.73 (1H, m), 2.80 - 2.88 (2H, m), 3.02 - 3.12 (1H, m), 3.57 - 3.78 (2H, m), 3.78 - 3.94 (2H, m), 3.94 - 4.13 (2H, m), 4.29 - 4.42 (1H, m), 5.66 - 5.74 (1H, m), 6.08 - 6.18 (1H, m), 6.67 - 6.74 ( H, m), 6.76 - 6.89 (1H, m), 7.06 (1H, t), 7.46 (1H, s), 9.14 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 423. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-8-클로로-10-에티닐-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (27 mg, 13%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.90 (3H, s), 2.35 - 2.42 (1H, m), 2.68 - 2.73 (1H, m), 2.80 - 2.88 (2H, m), 3.02 - 3.12 (1H, m), 3.57 - 3.78 (2H, m), 3.78 - 3.94 (2H, m), 3.94 - 4.13 (2H, m), 4.29 - 4.42 (1H, m), 5.66 - 5.74 (1H, m), 6.08 -6.18 (1H, m), 6.67 - 6.91 (3H, m), 7.06 (1H, t), 7.46 (1H, s), 9.14 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 423.
( 12a R )-9- 브로모 -8- 플루오로 -10- 요오도 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀
Figure pct00228
N-요오도숙신이미드 (3.36 g, 14.95 mmol)를 진한 황산 (15 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.5 g, 3.74 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물 (100 mL)에 부었다. 상기 수성 용액을 2 M NaOH로 중화시키고, DCM (150 mL x 2)으로 추출하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 증발시켜 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-10-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (1.5 g, 94%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.65 - 2.78 (1H, m), 2.84 - 3.06 (3H, m), 3.11 - 3.29 (3H, m), 3.53 - 3.63 (1H, m), 3.65 - 3.86 (2H, m), 4.20 - 4.41 (1H, m), 7.43 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 427.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 플루오로 -10- 요오도 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00229
디-tert-부틸 디카르보네이트 (0.87 mL, 3.75 mmol)를 0℃의 DCM (20 mL) 중 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-10-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (800 mg, 1.87 mmol) 및 트리에틸아민 (0.783 mL, 5.62 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~60% THF)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-10-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (780 mg, 79%)를 담황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.39 (9H, s), 2.25 - 2.35 (1H, m), 2.60 - 2.68 (1H, m), 2.75 - 2.82 (2H, m), 3.08 - 3.19 (1H, m), 3.45 - 3.61 (3H, m), 3.63 - 3.74 (1H, m), 3.76 - 3.84 (1H, m), 4.23 - 4.36 (1H, m), 7.41 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 527.
Tert -부틸 (12a R )-9-브로모-8-플루오로-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00230
테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (123 mg, 0.11 mmol) 및 요오드화구리(I) (202 mg, 1.06 mmol)를 톨루엔 (15 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-10-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (560 mg, 1.06 mmol), 에티닐트리메틸실란 (417 mg, 4.25 mmol) 및 트리에틸아민 (0.592 mL, 4.25 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 하룻밤 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~60% THF)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (400 mg, 76%)를 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 0.26 (9H, s), 1.39 (9H, s), 2.28 - 2.36 (1H, m), 2.65 - 2.73 (3H, m), 3.05 - 3.18 (1H, m), 3.48 - 3.73 (5H, m), 4.23 - 4.35 (1H, m), 7.26 - 7.49 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 497.
Tert -부틸 (12a R )-8-플루오로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00231
RuPhos-Pd-G3 (67.2 mg, 0.08 mmol)를 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (2 mL) (5:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-플루오로-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (400 mg, 0.8 mmol), (2-메톡시-6-메틸페닐)보론산 (267 mg, 1.61 mmol), K2CO3 (222 mg, 1.61 mmol) 및 RuPhos (37.5 mg, 0.08 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 40분 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~60% THF)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-8-플루오로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (400 mg, 92%)를 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) -0.07 (9H, s), 1.40 (9H, d), 1.91 - 2.04 (3H, m), 2.27 - 3.35 (1H, m), 2.61 - 2.85 (3H, m), 2.98 - 3.08 (1H, m), 3.55 - 3.64 (3H, m), 3.63 - 3.66 (4H, m), 3.72 - 3.84 (1H, m), 4.25 - 4.35 (1H, m), 6.77 - 7.04 (2H, m), 7.14 - 7.32 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 539.
( 12a R )-8- 플루오로 -9-(2- 메톡시 -6- 메틸페닐 )-10-[( 트리메틸실릴 ) 에티닐 ]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀.1HCl
Figure pct00232
Tert-부틸 (12aR)-8-플루오로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (400 mg, 0.74 mmol)를 1,4-디옥산 중 4 M HCl (5 mL)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 (12aR)-8-플루오로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀.1HCl (350 mg, 99%)을 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) -0.05 (9H, s), 1.87 - 2.05 (5H, m), 3.03 - 3.07 (2H, m), 3.25 - 3.29 (3H, m), 3.58 - 3.75 (5H, m), 3.94 - 3.99 (1H, m), 4.49 - 4.57 (1H, m), 6.87 - 6.97 (3H, m), 7.34 - 7.40 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 439.
2-{( 12a R )-8- 플루오로 -10-[( 트리메틸실릴 ) 에티닐 ]-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일}-3-메틸페놀
Figure pct00233
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 (4.72 mL, 4.72 mmol)를 첨가하여 DCM (4 mL) 중 (12aR)-8-플루오로-9-(2-메톡시-6-메틸페닐)-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀.1HCl (350 mg, 0.59 mmol)을 수득하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (25 mL)로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4OH) 중 0~100% MeCN)로 정제하여 2-{(12aR)-8-플루오로-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일}-3-메틸페놀 (125 mg, 60%)을 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.94 (3H, d), 2.24 - 2.36 (4H, m), 2.57 - 2.68 (1H, m), 2.72 - 2.85 (3H, m), 3.52 - 3.61 (1H, m), 3.65 - 3.77 (1H, m), 3.98 (1H, d), 4.16 - 4.25 (1H, m), 6.65 - 6.75 (2H, m), 7.03 - 7.11 (1H, m), 7.19 (1H, d), 9.21 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 353.
1-[( 12a R )-10- 에티닐 -8- 플루오로 -9-(2-히드록시-6- 메틸페닐 )-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 64 및 회전 이성질체 2, 실시예 65
Figure pct00234
아크릴로일 클로라이드 (31 mg, 0.34 mmol) 및 DIPEA (0.116 mL, 0.66 mmol)를 -20℃의 DMF (1.5 mL) 중 2-{(12aR)-8-플루오로-10-[(트리메틸실릴)에티닐]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일}-3-메틸페놀 (117 mg, 0.33 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 여과시키고, 여과액을 물 (0.1% 포름산) 및 MeCN으로 용출시키면서 분취용 HPLC (컬럼: Sunfire prep C18 컬럼 30*150, 5 μm)로 정제하여 1-[(12aR)-10-에티닐-8-플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (29 mg, 21%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.96 (3H, s), 2.35 - 2.40 (1H, m), 2.69 - 2.75 (1H, m), 2.79 - 2.86 (2H, m), 3.04 - 3.12 (1H, m), 3.54 - 3.64 (1H, m),3.64 - 3.72 (1H, m), 3.77 - 3.91 (2H, m), 3.89 - 4.10 (2H, m), 4.27 - 4.40 (1H, m), 5.65 - 5.72 (1H, m), 6.08 - 6.17 (1H, m), 6.68 - 6.75 (2H, m), 6.76 - 6.87 (1H, m), 7.07 (1H, t), 7.21 (1H, d), 9.23 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 407. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-10-에티닐-8-플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (34 mg, 26%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.96 (3H, s), 2.35 - 2.40 (1H, m), 2.69 - 2.75 (1H, m), 2.79 - 2.86 (2H, m), 3.04 - 3.12 (1H, m), 3.51 - 3.72 (2H, m), 3.77 - 3.91 (2H, m), 3.89 - 4.10 (2H, m), 4.27 - 4.40 (1H, m), 5.65 - 5.72 (1H, m), 6.08 - 6.17 (1H, m), 6.68 - 6.90 (3H, m), 7.07 (1H, t), 7.21 (1H, d), 9.23 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 407.
메틸 2- 클로로 -4- 플루오로피리딘 -3- 카르복실레이트
Figure pct00235
DMF (100 mL) 중 2-클로로-4-플루오로피리딘-3-카르복실산 (10 g, 56.97 mmol) 및 탄산칼륨 (11.81 g, 85.45 mmol)의 혼합물을 요오도메탄 (4.26 mL, 68.36 mmol)으로 처리하고, 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하고, 그 후 유기물을 물, 그 후 염수로 세척하고, 그 후 건조시키고, 증발시켜 짙은 갈색 오일을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~30% EtOAc)로 정제하여 메틸 2-클로로-4-플루오로피리딘-3-카르복실레이트 (7.9 g, 73%)를 무색 오일로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 4.00 (3H, s), 7.09 (1H, dd), 8.44 (1H, dd).
메틸 2,5- 디클로로 -4- 플루오로피리딘 -3- 카르복실레이트
Figure pct00236
메틸 2-클로로-4-플루오로피리딘-3-카르복실레이트 (7.9 g, 41.67 mmol)를 THF (100 mL)에 용해시키고, 상기 혼합물을 -45℃까지 냉각시키고, 리튬 마그네슘 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘-1-이드 디클로라이드 (1 M 용액, 45.8 mL, 45.84 mmol)를 적가하였다. 상기 혼합물을 -45℃에서 20분 동안 교반시키고, 그 후 THF (10 mL) 중 퍼클로로에탄 (12.33 g, 52.09 mmol)을 적가하고, 상기 혼합물을 -45℃에서 1.5시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 포화 염화암모늄의 첨가에 의해 켄칭하고, 그 후 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기물을 염수로 세척하고, 그 후 건조시키고, 증발시켰다. 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하여 메틸 2,5-디클로로-4-플루오로피리딘-3-카르복실레이트 (6.33 g, 68%)을 무색 오일로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 4.01 (3H, s), 8.46 (1H, d).
2,5- 디클로로 -4- 플루오로피리딘 -3- 카르브알데히드
Figure pct00237
메틸 2,5-디클로로-4-플루오로피리딘-3-카르복실레이트 (6.1 g, 27.23 mmol)를 DCM (100 mL)에 용해시키고, 상기 혼합물을 -78℃까지 냉각시켰다. 디이소부틸알루미늄 히드라이드 (톨루엔 중 1 M, 28.6 mL, 28.59 mmol)를 온도를 -70℃ 미만으로 유지하면서 대략 20분에 걸쳐 적가하고, 그 후 상기 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 1 M HCl (40 mL)의 적가에 의해 켄칭하고, 그 후 혼합물을 실온까지 가온하고, 20분 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 DCM (300 mL) 및 물 (300 mL)로 희석시키고, 그 후 유기물을 분리하였다. 수성 층을 DCM (150 mL)으로 추출하고, 그 후 합한 유기물을 건조시키고, 증발시켜 2,5-디클로로-4-플루오로피리딘-3-카르브알데히드 (5.1 g, 97%)를 무색 오일로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 8.57 (1H, d), 10.37 (1H, d).
Tert -부틸 (3 R )-4-[(2,5- 디클로로 -4- 플루오로피리딘 -3-일) 메틸 ]-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00238
2,5-디클로로-4-플루오로피리딘-3-카르브알데히드 (5.1 g, 26.29 mmol)를 DCM (112 mL)에 용해시키고, 아세트산 (0.158 g, 2.63 mmol), 이어서 tert-부틸 (R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (6.82 g, 31.55 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 1시간 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시히드로보레이트 (8.36 g, 39.44 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 추가 소듐 트리아세톡시히드로보레이트 (2.79 g, 13.1 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 4시간 동안 교반시켰다. 포화 중탄산나트륨 용액 (100 mL)을 일부씩 첨가하고, 상기 혼합물을 발포가 중단될 때까지 교반시켰다. 상기 혼합물을 DCM (200 mL)으로 희석시키고, 그 후 유기물을 분리하고, 건조시키고, 증발시키고, 그 후 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-[(2,5-디클로로-4-플루오로피리딘-3-일)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5.7 g, 55%)을 무색 오일로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.46 (9H, s), 2.38 (2H, s), 2.59 - 2.84 (2H, m), 3.29 (1H, s), 3.38 - 3.64 (3H, m), 3.64 - 3.75 (2H, m), 3.85 (1H, ddd), 4.03 - 4.19 (1H, m), 8.36 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 394.
Tert -부틸 ( 6a R )-1,4- 디클로로 - 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H - 피라지노[2,1-c]피리도[3,4- f ] [1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00239
Tert-부틸 (3R)-4-[(2,5-디클로로-4-플루오로피리딘-3-일)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5.7 g, 14.46 mmol)를 THF (250 mL)에 용해시키고, 상기 혼합물을 20℃까지 냉각시키고, 2-(tert-부틸이미노)-N,N-디에틸-1,3-디메틸-1,3,2λ5-디아자포스피난-2-아민 (4.59 mL, 15.9 mmol)을 한꺼번에 첨가하였다. 상기 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 증발시키고, 그 후 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액, 그 후 염수로 세척하고, 그 후 건조시키고, 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (5.5 g, >100%)를 무색 오일로 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.47 (9H, s), 2.59 (1H, td), 2.69 - 2.79 (1H, m), 2.79 - 2.92 (1H, m), 2.93 - 3.09 (1H, m), 3.09 - 3.23 (1H, m), 3.87 (3H, dd), 4.03 (1H, dd), 4.08 - 4.18 (1H, m), 4.38 (1H, dd), 8.20 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 375.
Tert -부틸 ( 6a R )-1,4- 디클로로 -3- 요오도 - 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H - 피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ] [1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00240
건조 THF (50 mL) 중 Tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (5 g, 13.36 mmol)를 -45℃까지 냉각시키고, 리튬 마그네슘 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘-1-이드 디클로라이드 (20.04 mL, 20.04 mmol)를 적가하였다. 상기 혼합물을 -45℃에서 20분 동안 교반시키고, 그 후 요오드 (5.09 g, 20.04 mmol)를 한꺼번에 첨가하였다. 상기 혼합물을 -45℃에서 15분 동안 교반시키고, 그 후 혼합물을 0℃까지 가온하고, 그 후 포화 염화암모늄 용액 (5 mL)의 적가에 의해 켄칭하였다. 상기 혼합물을 물 (100 mL)로 희석시키고, 그 후 EtOAc (100 mL)로 추출하였다. 유기물을 티오황산나트륨 용액, 그 후 염수로 세척하고, 그 후 건조시키고, 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-요오도-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (4.7 g, 70%)를 황색 오일로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.46 (9H, d), 2.48 - 2.7 (1H, m), 2.7 - 2.9 (2H, m), 3.01 (1H, s), 3.15 (1H, t), 3.73 - 3.9 (3H, m), 3.95 - 4.17 (2H, m), 4.38 (1H, dt). m/z: ES+ [M+H]+ 500.
Tert -부틸 (6a R )-1,4-디클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00241
Tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-요오도-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (2.5 g, 5 mmol), (2-플루오로-6-메톡시페닐)보론산 (1.104 g, 6.5 mmol), RuPhos (0.233 g, 0.5 mmol), RuPhos Pd G3 (0.418 g, 0.5 mmol) 및 2 M 수성 탄산나트륨 (5 mL, 10 mmol)을 디옥산 (30 mL)에서 교반시키고, 혼합물을 질소 버블링에 의해 탈기시켰다. 상기 혼합물을 3시간 동안 50℃까지 가열하고, 그 후 EtOAc와 물 사이에 분배하고, 그 후 유기물을 염수로 세척하고, 그 후 건조시키고, 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (1.83 g, 74%)를 황색 오일로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.48 (9H, d), 2.62 (1H, tdd), 2.75 (1H, ddd), 2.83 - 3.07 (2H, m), 3.06 - 3.25 (1H, m), 3.77 (3H, s), 3.8 - 4.04 (3H, m), 4 - 4.27 (2H, m), 4.43 (1H, dd), 6.72 - 6.82 (2H, m), 7.34 (1H, dd).
m/z: ES+ [M+H]+ 498.
Tert -부틸 (6a R )-4-클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-1-옥소-2,6a,7,9,10,12-헥사히드로-1 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00242
Tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (1 g, 2.01 mmol)를 디옥산 (10 mL)/물 (2 mL)에 용해시키고, 탄산세슘 (1.961 g, 6.02 mmol), 이어서 tert-부틸 Brettphos Pd G3 (0.171 g, 0.20 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 탈기시켰다. 상기 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 상기 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하고, 그 후 유기물을 건조시키고, 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~10% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-1-옥소-2,6a,7,9,10,12-헥사히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.22 g, 23%)를 갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.47 (9H, s), 2.58 (2H, dd), 2.8 - 3.21 (3H, m), 3.59 (1H, d), 3.81 (3H, d), 3.95 (2H, s), 4.08 (2H, dd), 4.44 (1H, dd), 6.71 - 6.85 (2H, m), 7.35 - 7.47 (1H, m), 9.24 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 480.
Tert -부틸 (6a R )-4-클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-2-메틸-1-옥소-2,6a,7,9,10,12-헥사히드로-1 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00243
Tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-1-옥소-2,6a,7,9,10,12-헥사히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.22 g, 0.46 mmol)를 THF (4mL)에 용해시키고, 수소화나트륨 (0.028 g, 0.69 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 10분 동안 교반시키고, 그 후 요오도메탄 (0.057 mL, 0.92 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 상기 혼합물을 물의 첨가에 의해 켄칭하고, 그 후 물과 EtOAc 사이에 분배하였다. 수성인 것을 EtOAc (x 2)로 추출하고, 그 후, 합한 유기 추출물을 건조시키고, 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~8% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-2-메틸-1-옥소-2,6a,7,9,10,12-헥사히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.15 g, 66%)를 황색 오일로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.47 (9H, s), 2.59 (2H, dd), 2.86 - 3.17 (3H, m), 3.26 (3H, d), 3.66 (1H, dd), 3.81 (3H, d), 3.84 - 4.01 (2H, m), 4.06 (1H, ddd), 4.15 - 4.28 (1H, m), 4.42 (1H, dd), 6.73 - 6.89 (2H, m), 7.38 - 7.52 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 494.
( 6a R )-4- 클로로 -3-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-2- 메틸 -2,6, 6a,7 ,8,9,10,12-옥타히드로-1 H- 피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-1-온 회전 이성질체 1 및 회전 이성질체 2
Figure pct00244
Tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-2-메틸-1-옥소-2,6a,7,9,10,12-헥사히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.15 g, 0.3 mmol)를 DCM (3 mL)에 용해시키고, 삼브롬화붕소 (3.04 mL, 3.04 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시키고, 그 후 환류에서 하룻밤 가열하였다. 상기 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 그 후 메탄올의 적가에 의해 켄칭하고, 그 후 혼합물을 SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 연한 갈색 오일을 수득하였다. 이것을 용출제로서 물 (0.1% 포름산 함유) 및 MeCN을 사용하여 분취용 LCMS (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하였다. 이것은 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온의 회전 이성질체 1 (0.035 g, 27%)을 백색 고형물로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ 380. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온의 회전 이성질체 2 (0.032 g, 25%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 2.75 - 2.92 (2H, m), 3 - 3.32 (6H, m), 3.35 (3H, s), 3.85 - 4.13 (2H, m), 4.23 (1H, d), 4.58 (1H, dd), 6.70 (1H, t), 6.94 (1H, d), 7.34 (1H, td). m/z: ES+ [M+H]+ 380.
( 6a R )-4- 클로로 -3-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-2- 메틸 -8-( 프로프 -2- 에노일 )-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1 H- 피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 66
Figure pct00245
(6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온의 회전 이성질체 1 (0.035 g, 0.07 mmol)을 DCM (1 mL)/i-PrOH (1 mL)에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.02 mL, 0.15 mmol), 이어서 아크릴로일 클로라이드 (6.59 μl, 0.08 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반시켰다. 추가분의 아크릴로일 클로라이드 (6.59 μl, 0.08 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 20분 동안 교반시켰다. 1 M NH3/MeOH (2 mL)를 첨가하고, 그 후 상기 혼합물을 10분 동안 교반시키고, 그 후 증발시켜 무색 오일을 수득하였다. 용출제로서 물 (1% NH3을 함유함) 및 MeCN을 사용하여 분취용 LCMS (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 이것은 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-8-(프로프-2-에노일)-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온의 회전 이성질체 1 (7 mg, 22%)을 무색 건조 필름으로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 2.45 - 2.67 (2H, m), 2.96 (2H, dd), 3.33 (3H, s), 3.35 - 3.5 (1H, m), 3.64 (1H, d), 3.91 (1H, d), 4.02 - 4.2 (2H, m), 4.37 (2H, dd), 5.77 (1H, d), 6.35 (1H, d), 6.57 (1H, dd), 6.74 (1H, t), 6.91 (1H, d), 7.29 - 7.39 (1H, m), 8.27 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 434.
( 6a R )-4- 클로로 -3-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-2- 메틸 -8-( 프로프 -2- 에노일 )-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-1-온 회전 이성질체 2, 실시예 67
Figure pct00246
(6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-8-(프로프-2-에노일)-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온의 회전 이성질체 2 (0.035 g, 0.09 mmol)를 DCM (1 mL)/i-PrOH (1 mL)에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.025 mL, 0.18 mmol), 이어서 아크릴로일 클로라이드 (8.19 μl, 0.10 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반시켰다. 추가분의 아크릴로일 클로라이드 (8.19 μl, 0.10 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 20분 동안 교반시켰다. 1 M NH3/MeOH (2 mL)를 첨가하고, 그 후 상기 혼합물을 10분 동안 교반시키고, 그 후 증발시켜 무색 오일을 수득하였다. 이것을 용출제로서 물 (0.1% AcOH 함유) 및 MeCN을 사용하여 분취용 LCMS (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하였다. 이것은 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-8-(프로프-2-에노일)-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온 (0.015 g, 38%)을 무색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 2.49 - 2.76 (2H, m), 2.87 - 3.02 (2H, m), 3.32 (4H, s), 3.59 - 3.96 (2H, m), 4.07 (1H, d), 4.16 (1H, d), 4.42 (2H, d), 5.73 (1H, d), 6.29 (1H, d), 6.54 (1H, dd), 6.73 (1H, t), 6.88 (1H, d), 7.32 (1H, td). m/z: ES+ [M+H]+ 434.
2-[( 6a R )-1,4- 디클로로 -6, 6a,7 ,8,9,10- 헥사히드로 -12 H - 피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ] [1,4]옥사제핀-3-일]-3-플루오로페놀
Figure pct00247
Tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.1 g, 0.2 mmol)를 DCM (2 mL)에 용해시키고, 삼브롬화붕소 (2.007 mL, 2.01 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 상기 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 그 후 메탄올의 적가에 의해 켄칭하고, SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 2-[(6aR)-1,4-디클로로-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-3-일]-3-플루오로페놀 (0.045 g, 58.4 %)을 무색 오일로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ 384.
1-[( 6a R )-1,4- 디클로로 -3-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )- 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-일]프로프-2-엔-1-온, 실시예 68
Figure pct00248
2-[(6aR)-1,4-디클로로-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-3-일]-3-플루오로페놀 (0.042 g, 0.11 mmol)를 DCM (1 mL)/i-PrOH (1 mL)에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.022 g, 0.22 mmol), 이어서 아크릴로일 클로라이드 (0.012 g, 0.13 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 증발시키고, 그 후, 용출제로서 물 (1% NH3 함유) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하였다. 이것은 1-[(6aR)-1,4-디클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온 (0.018 g, 38%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) 2.56 (1H, s), 2.62 - 2.74 (1H, m), 2.78 - 3.05 (2H, m), 3.17 (1H, s), 3.89 - 4.21 (3H, m), 4.29 (2H, s), 4.66 (1H, s), 5.71 (1H, s), 6.14 (1H, d), 6.67 - 6.91 (3H, m), 7.24 - 7.35 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 438.
( 6a R )-4- 클로로 -3-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-2,6, 6a,7 ,8,9,10,12- 옥타히드로 -1 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-1-온
Figure pct00249
Tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-1-옥소-2,6a,7,9,10,12-헥사히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.1 g, 0.21 mmol)를 DCM (2 mL)에 용해시키고, 삼브롬화붕소 (2.08 mL, 2.08 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반시키고, MeOH로 켄칭하고, SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온 (0.075 g, 98%)을 무색 오일로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ 366.
( 6a R )-4- 클로로 -3-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-8-( 프로프 -2- 에노일 )-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-1-온, 실시예 69
Figure pct00250
(6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온 (0.080 g, 0.22 mmol)을 DCM (1 mL)/i-PrOH (1 mL)에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.044 g, 0.44 mmol), 이어서 아크릴로일 클로라이드 (0.024 g, 0.26 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 증발시키고, 그 후, 용출제로서 물 (1% NH3 함유) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하였다. 이것은 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-(프로프-2-에노일)-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온 (0.02 g, 22%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 2.55 (2H, d), 2.89 (2H, s), 3.35 (1H, s), 3.49 (1H, d), 3.99 (3H, s), 4.39 (2H, s), 5.72 (1H, d), 6.28 (1H, d), 6.44 - 6.58 (1H, m), 6.63 (1H, t), 6.79 (1H, d), 7.21 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 420.
Tert -부틸 (6a R )-4-클로로-1-[2-(디페닐메틸리덴)히드라지닐]-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00251
Tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.55 g, 1.1 mmol), 포타슘 2-메틸프로판-2-올레이트 (0.186 g, 1.66 mmol) 및 Xphos Pd G3 (0.093 g, 0.11 mmol)를 톨루엔 (10 mL)에 용해시키고, 혼합물을 탈기시켰다. (디페닐메틸렌)히드라진 (0.26 g, 1.32 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하고, 그 후 유기물을 염수로 세척하고, 건조시키고, 증발시켜 짙은 갈색 고형물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (6aR)-4-클로로-1-[2-(디페닐메틸리덴)히드라지닐]-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.36 g, 50%)를 황갈색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.49 (9H, s), 2.44 - 2.6 (1H, m), 2.68 (1H, s), 2.92 (2H, d), 3.11 (1H, s), 3.74 (3H, d), 3.83 - 4.18 (4H, m), 4.36 (1H, dd), 4.55 (1H, dd), 6.67 - 6.78 (2H, m), 7.31 (6H, ddq), 7.4 - 7.48 (1H, m), 7.47 - 7.57 (4H, m), 7.96 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 658.
Tert -부틸 (6a R )-4-클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-1-히드라지닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00252
tert-부틸 (6aR)-4-클로로-1-[2-(디페닐메틸리덴)히드라지닐]-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.3 g, 0.46 mmol)를 MeOH (5 mL)에 용해시키고, 2 M HCl (5 ml, 10 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-1-히드라지닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.22 g, 98%)를 무색 오일로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ 494.
2-[( 8a R )-6- 클로로 -8, 8a,9 ,10,11,12- 헥사히드로 -14 H - 피라지노[2,1- c ][1,2,4]트리아졸로 [4',3':1,2]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-5-일]-3-플루오로페놀 회전 이성질체 1 및 회전 이성질체 2
Figure pct00253
tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-메톡시페닐)-1-히드라지닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.22 g, 0.45 mmol)를 트리메톡시메탄 (3 ml, 27.42 mmol)에 용해시키고, 상기 혼합물을 60℃에서 3시간 동안 가열하였다. 상기 혼합물을 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 이것을 DCM (5 mL)에 용해시키고, 삼브롬화붕소 (4.45 ml, 4.45 mmol)를 첨가하고, 그 후 혼합물(이는 그 후 40℃에서 3시간 동안 가열함)을 실온까지 냉각시키고, 하룻밤 교반시켰다. 상기 혼합물을 MeOH (10 ml)로 켄칭하고, SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 갈색 오일을 수득하였다. 이것을 용출제로서 물 (0.1% 포름산 함유) 및 MeCN을 사용하여 분취용 LCMS (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하여, 불순물을 포함하는 표제 화합물의 회전 이성질체 1을 제공하였다. 이것을 SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 2-[(8aR)-6-클로로-8,8a,9,10,11,12-헥사히드로-14H-피라지노[2,1-c][1,2,4]트리아졸로[4',3':1,2]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-5-일]-3-플루오로페놀의 회전 이성질체 1 (0.039 g, 22%)을 무색 필름으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD, 30℃) 2.47 - 2.75 (3H, m), 2.81 - 3.12 (4H, m), 3.74 - 4.15 (2H, m), 4.41 - 4.5 (1H, m), 4.54 (1H, dd), 6.57 - 6.88 (2H, m), 7.46 (1H, d), 8.44 - 8.6 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 390. 분취용 LCMS의 추가 용출에 의해 2-[(8aR)-6-클로로-8,8a,9,10,11,12-헥사히드로-14H-피라지노[2,1-c][1,2,4]트리아졸로[4',3':1,2]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-5-일]-3-플루오로페놀의 회전 이성질체 2 (0.032 g, 18%)를 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD, 30℃) 2.57 - 2.72 (2H, m), 2.78 - 3.15 (5H, m), 3.9 - 4.11 (2H, m), 4.39 - 4.62 (2H, m), 6.7 - 6.92 (2H, m), 7.47 (1H, td), 8.53 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 390.
1-[( 8a R )-6- 클로로 -5-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )- 8a,9 ,11,12- 테트라히드로 -14 H -피라지노[2,1- c ][1,2,4]트리아졸로[4',3':1,2]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-10(8 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 70
Figure pct00254
2-[(8aR)-6-클로로-8,8a,9,10,11,12-헥사히드로-14H-피라지노[2,1-c][1,2,4]트리아졸로[4',3':1,2]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-5-일]-3-플루오로페놀의 회전 이성질체 1 (0.039 g, 0.1 mmol)을 DCM (0.5 mL)/i-PrOH (0.5 mL)에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.027 mL, 0.2 mmol), 이어서 아크릴로일 클로라이드 (9.7 μL, 0.12 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반시켰다. MeOH 중 1 M NH3 (5 ml)을 첨가하고, 상기 혼합물을 30분 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 증발시키고, 그 후 용출제로서 물 (0.1% NH3 함유) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하였다. 이것은 1-[(8aR)-6-클로로-5-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8a,9,11,12-테트라히드로-14H-피라지노[2,1-c][1,2,4]트리아졸로[4',3':1,2]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-10(8H)-일]프로프-2-엔-1-온 (0.012 g, 27%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.54 - 2.63 (1H, m), 2.77 (1H, s), 2.82 - 3.2 (3H, m), 3.87 - 4.33 (4H, m), 4.41 (1H, s), 4.62 (1H, s), 5.72 (1H, s), 6.14 (1H, d), 6.77 (3H, d), 7.41 (1H, d), 8.59 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 444.
1-[( 8a R )-6- 클로로 -5-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )- 8a,9 ,11,12- 테트라히드로 -14 H -피라지노[2,1- c ][1,2,4]트리아졸로[4',3':1,2]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-10(8 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2, 실시예 71
Figure pct00255
2-[(8aR)-6-클로로-8,8a,9,10,11,12-헥사히드로-14H-피라지노[2,1-c][1,2,4]트리아졸로[4',3':1,2]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-5-일]-3-플루오로페놀의 회전 이성질체 2 (0.028 g, 0.07 mmol)를 DCM (0.5 mL)/i-PrOH (0.5 mL)에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.015 g, 0.14 mmol), 이어서 아크릴로일 클로라이드 (7.8 mg, 0.09 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반시켰다. MeOH 중 1 M NH3 (5 ml)을 첨가하고, 상기 혼합물을 30분 동안 교반시켰다. 혼합물을 증발시키고, 그 후 용출제로서 물 (0.1% NH3 함유) 및 MeCN을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)로 정제하였다. 이것은 1-[(8aR)-6-클로로-5-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8a,9,11,12-테트라히드로-14H-피라지노[2,1-c][1,2,4]트리아졸로[4',3':1,2]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-10(8H)-일]프로프-2-엔-1-온 (0.013 g, 41%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.55 (1H, d), 2.77 (1H, s), 2.83 - 3.22 (3H, m), 3.91 - 4.21 (3H, m), 4.26 (1H, s), 4.40 (1H, s), 4.64 (1H, s), 5.72 (1H, s), 6.14 (1H, d), 6.85 (3H, d), 7.45 (1H, q), 8.62 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 444.
(2 E )- N -(3- 브로모 -5- 플루오로 -2- 메틸페닐 )-2-( 히드록시이미노 )아세트아미드
Figure pct00256
황산나트륨 (5.57 g, 39.21 mmol), 히드록실아민 히드로클로라이드 (1.19 g, 17.15 mmol) 및 2,2,2-트리클로로에탄-1,1-디올 (1.21 g, 7.35 mmol)을 물 (25 mL)에 용해시켰다. 물 (2 mL), EtOH (3.5 mL) 및 진한 HCl (0.85 mL) 중 3-브로모-5-플루오로-2-메틸아닐린 (1.0 g, 4.90 mmol)의 용액을 첨가하고, 60℃에서 하룻밤 가열하였다. 반응물을 25℃까지 냉각시켜 침전물을 형성하였다. 침전물을 여과에 의해 수집하고, 과량의 물로 세척하고, 그 후 진공 하에 건조시켜 (2E)-N-(3-브로모-5-플루오로-2-메틸페닐)-2-(히드록시이미노)아세트아미드 (1.08 g, 80%)를 연한 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.23 (3H, s), 7.34 - 7.53 (2H, m), 7.68 (1H, s), 9.79 (1H, s), 12.28 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 274.8.
6- 브로모 -4- 플루오로 -7- 메틸 -1H-인돌-2,3- 디온
Figure pct00257
(2E)-N-(3-브로모-5-플루오로-2-메틸페닐)-2-(히드록시이미노)아세트아미드 (36.9 g, 107.32 mmol)를 60℃의 황산 (270 mL)에 일부씩 첨가하였다. 그 후 반응 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 25℃까지 냉각시키고, 얼음물에 서서히 첨가하였다. 생성된 침전물을 물로 세척하면서 여과에 의해 수집하고, 진공 하에 건조시켜 6-브로모-4-플루오로-7-메틸-1H-인돌-2,3-디온 (25 g, 90 %)을 짙은 적색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.21 (3H, s), 7.30 (1H, d), 11.43 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 257.9.
2-아미노-4- 브로모 -6- 플루오로 -3- 메틸벤조산
Figure pct00258
과산화수소 (H2O 중 30%) (45 mL, 440.81 mmol)를 25℃에서 수산화나트륨 (H2O 중 2M) (397 mL, 793.46 mmol) 중 6-브로모-4-플루오로-7-메틸-1H-인돌-2,3-디온 (25 g, 88.16 mmol)에 적가하고, 반응물을 3시간 동안 교반시켰다. 과량의 과산화수소를 아황산나트륨 수용액에 서서히 첨가하여 켄칭하고, 혼합물을 pH 7로 중화시켰다. 갈색 침전물을 여과에 의해 수집하고, 버렸다. 잔존 용액을 진한 HCl로 pH 4로 서서히 산성화하였다. 생성된 용액을 DCM (300 mL)으로 추출하고, 상 분리 카트리지를 사용하여 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 2-아미노-4-브로모-6-플루오로-3-메틸벤조산 (21.71 g, 99 %)을 크림색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.17 (3H, s), 6.66 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 247.8.
2-아미노-4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -3- 메틸벤조산
Figure pct00259
N-클로로숙신이미드 (13.1 g, 98.10 mmol)를 25℃에서 DMF (250 mL) 중 2-아미노-4-브로모-6-플루오로-3-메틸벤조산 (22.12 g, 89.18 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 70℃까지 교반시켰다. 반응 혼합물을 25℃까지 냉각시키고, 물 (500 mL)로 희석시켰다. 생성된 고형물을 EtOAc (1000 mL)로 추출하고, 층들을 분리하였다. 유기 층을 물 (4 x 500 mL), 염수 (200 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 2-아미노-4-브로모-5-클로로-6-플루오로-3-메틸벤조산 (25 g, 99%)을 갈색 고형물로 수득하였다. m/z: ES- [M+H]+ = 281.
메틸 2-아미노-4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -3- 메틸벤조에이트
Figure pct00260
2-아미노-4-브로모-5-클로로-6-플루오로-3-메틸벤조산 (21.62 g, 76.53 mmol)을 MeOH (214 mL)에 용해시킨 후 황산 (40.8 mL, 765.33 mmol)을 서서히 첨가하고, 상기 용액을 80℃에서 16시간 동안 가열하고, 그 후 실온까지 냉각시켰다. MeOH를 감압 하에 제거하고, 잔사를 과량의 얼음 및 DCM (500 mL)으로 희석시켰다. 유기 층을 상 분리 카트리지에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 적색 오일을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하여 메틸 2-아미노-4-브로모-5-클로로-6-플루오로-3-메틸벤조에이트 (11.58 g, 51%)를 적색 오일로 수득하였으며, 이는 정치시에 고체화되었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 2.33 (3H, s), 3.92 (3H, s), 5.91 (2H, s). m/z: ES- [M-H]- = 293.8.
메틸 4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -1 H - 인다졸 -7- 카르복실레이트
Figure pct00261
클로로포름 (120 mL) 중 메틸 2-아미노-4-브로모-5-클로로-6-플루오로-3-메틸벤조에이트 (5.08 g, 17.13 mmol)의 교반 용액에 아세트산칼륨 (1.84 g, 18.85 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 아세트산 무수물 (3.23 mL, 34.26 mmol)을 첨가하고, 20분 동안 25℃까지 교반시켰다. 18-크라운-6 (0.81 g, 3.08 mmol) 및 이소펜틸 니트라이트 (5.06 mL, 37.69 mmol)를 첨가하고, 반응물을 65℃에서 2시간 동안 가열하고, 그 후 25℃까지 되돌렸다. 물 (100 mL)을 첨가하고, 상 분리 카트리지를 사용하여 유기 층을 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 적색 고형물을 수득하고, 이를 MeOH (200 mL) 및 진한 HCl (29.4 mL, 342.64 mmol)로 희석시켰다. 상기 현탁물을 25℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 증발시키고, 잔사를 물 (200 mL)로 희석시키고, DCM (400 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO3 (250 mL)으로 세척하고, 상 분리 카트리지를 사용하여 유기물을 건조시켰다. 상 분리 카트리지 상의 고형물을 진공 하에 건조시켜 메틸 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1H-인다졸-7-카르복실레이트를 백색 고형물 (1.28 g)로 수득하였다. 용매 여과액을 감압 하에 농축시키고, 생성된 고형물을 진공 하에 여과시켜 추가의 메틸 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1H-인다졸-7-카르복실레이트 (2.43 g)를 백색 고형물로 수득하였다. 여과액을 실리카에 로딩하고, 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하여 추가 메틸 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1H-인다졸-7-카르복실레이트 (0.46 g)를 백색 고형물로 수득하여, 79%의 전체 수율을 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.98 (3H, s), 8.25 (1H, d), 13.75 (1H, s). m/z: ES- [M-H]- = 304.7.
메틸 4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -1- 메틸 -1 H - 인다졸 -7- 카르복실레이트
Figure pct00262
DMF (27 mL) 중 메틸 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1H-인다졸-7-카르복실레이트 (4.16 g, 13.53 mmol)에 탄산세슘 (5.28 g, 16.23 mmol) 및 요오도메탄 (1.01 mL, 16.23 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응물을 EtOAc (500 mL)로 희석시키고, 물 (2 x 250 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 상 분리 카트리지에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하여 메틸 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-카르복실레이트 (2.69 g, 62%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 4.03 (3H, s), 4.05 (3H, s), 8.00 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 320.7.
4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -1- 메틸 -1 H - 인다졸 -7- 카르복실산
Figure pct00263
수산화나트륨 (2 M) (7.42 mL, 14.84 mmol)을 5시간 동안 70℃에서 THF (15 mL) 중 메틸 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-카르복실레이트 (1.59 g, 4.95 mmol)에 첨가하였다. 반응물을 25℃까지 냉각시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 상기 용액을 진한 HCl을 사용하여 pH 4로 산성화하고, 생성된 고형물을 진공 하에 여과시키고, 과량의 물로 세척하였다. 상기 고형물을 진공 오븐에서 16시간 동안 건조시켜 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-카르복실산 (1.5 g, 99%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 4.04 (3H, s), 8.19 (1H, s), 14.58 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 306.7.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -1- 메틸 -1 H - 인다졸 -7-카르보닐)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00264
4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-카르복실산 (1.59 g, 5.17 mmol), HATU (2.35 g, 6.20 mmol) 및 DIPEA (2.76 mL, 15.51 mmol)를 DMF (25 mL)에서 30분 동안 교반시키고, 그 후 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (1.23 g, 5.69 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응물을 EtOAc (300 mL)로 희석시키고, 물 (2 x 200 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 상 분리 카트리지에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 주황색 오일로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-카르보닐)-3-(히드록시메틸) 피페라진-1-카르복실레이트 (2.12 g, 81%)를 주황색 건조 폼으로 수득하였다. m/z: ES+ [M-tBu]+ = 450.6.
Tert -부틸 ( 7aR )-4- 브로모 -5- 클로로 -1- 메틸 -13-옥소-1, 7a,8 ,10,11,13- 헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4] 옥사제피노[7,6- g ]인다졸-9(7 H )-카르복실레이트
Figure pct00265
수소화나트륨 (광유 중 60%) (0.184 g, 4.61 mmol)을 0℃의 DMF (35 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-카르보닐)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (2.12 g, 4.19 mmol)에 한꺼번에 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃까지 가온하고, 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (300 mL)로 희석시키고, EtOAc (500 mL)로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, 물 (2 x 400 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 용매를 진공 하에 제거하여 조 생성물을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~10% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (7aR)-4-브로모-5-클로로-1-메틸-13-옥소-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (1.5 g, 74%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 100℃) 1.46 (9H, s), 3.32 - 3.4 (1H, m), 3.44 - 3.53 (1H, m), 3.66 - 3.76 (1H, m), 4.01 (3H, s), 4.05 - 4.14 (2H, m), 4.14 - 4.25 (2H, m), 4.26 - 4.34 (1H, m), 4.38 (1H, dd), 8.05 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 486.06.
Tert -부틸 ( 7a R )-4- 브로모 -5- 클로로 -1- 메틸 -1, 7a,8 ,10,11,13- 헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4] 옥사제피노[7,6- g ]인다졸-9(7 H )-카르복실레이트
Figure pct00266
보란-THF 착물의 용액 (1 M) (23.06 mL, 23.06 mmol)을 25℃에서 THF (5 mL) 중 tert-부틸 (7aR)-4-브로모-5-클로로-1-메틸-13-옥소-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노 [2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (1.4 g, 2.88 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 생성된 용액을 75℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 25℃까지 냉각시키고, i-PrOH 및 NaOH (2 M)로 켄칭하고, 20분 동안 교반시켰다. 반응물을 물 (100 mL) 및 EtOAc (200 mL)로 희석시키고, 층들을 분리하고, 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기물을 상 분리 카트리지에서 건조시키고 증발시켜 무색 오일을 수득하고, 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (7aR)-4-브로모-5-클로로-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4] 옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (0.73 g, 54%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.44 (1H, td), 2.75 (2H, s), 2.85 - 2.95 (1H, m), 3.03 (1H, s), 3.65 - 3.75 (3H, m), 4.00 (1H, d), 4.22 (3H, s), 4.35 - 4.44 (2H, m), 7.94 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 472.7.
Tert -부틸 (7a R )-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6- g ]인다졸-9(7 H )-카르복실레이트
Figure pct00267
메틸테트라히드로푸란 (10 mL) 및 물 (3.33 mL) 중 tert-부틸 (7aR)-4-브로모-5-클로로-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노 [2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (630 mg, 1.34 mmol), (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (250 mg, 1.60 mmol) 및 탄산칼륨 (1107 mg, 8.01 mmol)의 혼합물을 5분 동안 탈기시켰다. Ruphos Pd G3 (112 mg, 0.13 mmol) 및 RuPhos (62.3 mg, 0.13 mmol)를 25℃에서 첨가하고, 반응물을 60℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응물을 25℃까지 냉각시키고, EtOAc (200 mL)로 희석시키고, 물 (2 x 50 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에서 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 갈색 오일을 수득하였다. 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~10% MeOH)로 정제하여 tert-부틸 (7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (575 mg, 86%)를 황색 고형물로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 502.8.
2-[( 7a R )-5- 클로로 -1- 메틸 -1,7, 7a,8 ,9,10,11,13- 옥타히드로피라지노 [2',1':3,4][1,4] 옥사제피노 [7,6-g]인다졸-4-일]-3-플루오로페놀
Figure pct00268
MeOH (5 mL) 중 tert-부틸 (7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (575 mg, 1.14 mmol)에 HCl (i-PrOH 중 6 N) (7.62 mL, 45.73 mmol)을 첨가하고, 상기 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 그 후 반응 혼합물을 SCX (1 M NH3/MeOH)로 정제하여 2-[(7aR)-5-클로로-1-메틸-1,7,7a,8,9,10,11,13-옥타히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-4-일]-3-플루오로페놀 (386 mg, 84%)을 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.23 - 2.31 (1H, m), 2.52 - 2.63 (2H, m), 2.68 (1H, d), 2.76 (2H, d), 3.51 - 3.63 (1H, m), 3.63 - 3.82 (1H, m), 3.87 (1H, dd), 4.08 (3H, s), 4.18 - 4.26 (2H, m), 6.64 (1H, td), 6.71 (1H, dd), 7.18 (1H, td), 7.29 (1H, s), 9.77 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 402.8.
1-[( 7a R )-5- 클로로 -4-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-1- 메틸 -1, 7a,8 ,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6- g ]인다졸-9(7 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 72 및 회전 이성질체 2, 실시예 73
Figure pct00269
0℃의 DCM (18 mL) 중 2-[(7aR)-5-클로로-1-메틸-1,7,7a,8,9,10,11,13-옥타히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-4-일]-3-플루오로페놀 (386 mg, 0.96 mmol) 및 DIPEA (0.217 mL, 1.25 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.084 mL, 1.05 mmol)를 첨가하고, 상기 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (5 mL)로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하여 황색 오일을 수득하였다. 상기 오일을 MeOH (5 mL)에 용해시키고, 7 N NH3/MeOH (1 mL)를 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 황색 필름을 수득하였다. 샘플을 MeOH (2 mL) 및 DCM (2 mL)에 용해시키고, 여과시키고, 그 후 MeOH (1 mL)로 세척하였다. 상기 용액을 40% MeOH + 0.1% NH3/60% scCO2로 용출시키면서 SFC (컬럼: Chiralpak IC, 20 x 250 mm, 5 마이크론)로 정제하여 1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (107 mg, 24%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO, 27℃) 2.71 - 2.83 (2H, m), 2.94 - 3.09 (2H, m), 3.7 - 3.77 (1H, m), 3.97 (1H, t), 4.07 - 4.17 (2H, m), 4.22 (3H, s), 4.38 - 4.52 (2H, m), 5.71 (1H, t), 6.08 - 6.21 (1H, m), 6.76 (1H, t), 6.8 - 6.89 (2H, m), 7.27 - 7.34 (1H, m), 7.42 (1H, s), 9.89 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 457.0. 이것에 이어서 1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4] 옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (80 mg, 18%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.73 - 2.84 (2H, m), 2.96 - 3.09 (2H, m), 3.65 - 3.82 (1H, m), 3.91 - 4.02 (1H, m), 4.06 - 4.14 (1H, m), 4.23 (3H, s), 4.39 - 4.53 (2H, m), 5.67 - 5.76 (1H, m), 6.14 (1H, d), 6.73 - 6.8 (1H, m), 6.82 - 6.91 (2H, m), 7.26 - 7.37 (1H, m), 7.43 (1H, s), 9.90 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 456.9.
메틸 4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -2- 메틸 -2 H - 인다졸 -7- 카르복실레이트
Figure pct00270
DMF (27 mL) 중 메틸 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1H-인다졸-7-카르복실레이트 (4.16 g, 13.5 mmol)에 탄산세슘 (5.28 g, 16.2 mmol) 및 요오도메탄 (1.01 mL, 16.2 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 3시간 동안 교반시키고, 그 후 EtOAc (500 mL)로 희석시키고, 물 (2 x 250 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (상 분리 카트리지), 증발시켜 크림색 고형물을 수득하였다. 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)에 의해 메틸 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-2-메틸-2H-인다졸-7-카르복실레이트 (1.03 g, 24%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 4.04 (3H, s), 4.26 (3H, s), 7.99 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 320.7.
4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -2- 메틸 -2 H - 인다졸 -7- 카르복실산
Figure pct00271
수산화나트륨 (2 M) (3.5 mL, 7 mmol)을 THF (10 mL) 중 메틸 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-2-메틸-2H-인다졸-7-카르복실레이트 (1.03 g, 3.2 mmol)에 첨가하고, 70℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응물을 실온까지 냉각시키고, 진공 하에 여과시키고, 진공 오븐에서 16시간 동안 건조시켜 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-2-메틸-2H-인다졸-7-카르복실산 (0.813 g, 77%)을 백색 고형물(나트륨 염으로 단리됨)로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 4.14 (3H, s), 8.37 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 306.7.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -2- 메틸 -2 H - 인다졸 -7-카르보닐)-3-(히드록시메틸) 피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00272
4-브로모-5-클로로-6-플루오로-2-메틸-2H-인다졸-7-카르복실산 (sodium salt) (813 mg, 2.64 mmol), HATU (1203 mg, 3.17 mmol) 및 DIPEA (1.41 mL, 7.93 mmol)를 DMF (15 mL)에서 0.5시간 동안 교반시켰다. 그 후 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (629 mg, 2.91 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반시키고, 그 후 EtOAc (150 mL)로 희석시켰다. 그 후 반응 혼합물을 물 (2 x 100 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, 그 후 건조시키고, 증발시켰다. 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)에 의해tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-5-클로로-6-플루오로-2-메틸-2H-인다졸-7-카르보닐)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (779 mg, 58%)를 적색 오일로 제공하였으며, 이는 정치시에 고체화되었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 100℃) 1.44 (9H, s), 3.07 - 3.17 (1H, m), 3.36 - 3.55 (2H, m), 3.58 - 3.69 (1H, m), 3.67 - 3.81 (1H, m), 3.82 - 3.95 (1H, m), 3.98 - 4.1 (1H, m), 4.20 (3H, s), 4.37 - 4.48 (1H, m), 4.62 (1H, s), 8.50 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 504.7.
Tert -부틸 ( 7a R )-4- 브로모 -5- 클로로 -2- 메틸 -13-옥소-2, 7a,8 ,10,11,13- 헥사 히드로피라지노[2',1':3,4] [1,4]옥사제피노[7,6- g ]인다졸-9(7 H )-카르복실레이트
Figure pct00273
수소화나트륨 (광유 중 60%) (67.8 mg, 1.69 mmol)을 0℃의 DMF (15 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-5-클로로-6-플루오로-2-메틸-2H-인다졸-7-카르보닐)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (779 mg, 1.54 mmol)에 한꺼번에 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃까지 가온하고, 그 후 3시간 동안 교반시킨 후 물 (300 mL)로 희석시키고, EtOAc (500 mL)로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, 물 (2 x 400 mL), 그 후 염수 (50 mL)로 세척하고, 건조시키고, 증발시켰다. 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~10% MeOH)에 의해 tert-부틸 (7aR)-4-브로모-5-클로로-2-메틸-13-옥소-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4] 옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (690 mg, 92%)를 황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.42 (9H, s), 3.49 (1H, d), 3.58 - 3.62 (1H, m), 3.62 - 3.7 (2H, m), 3.75 (1H, s), 3.9 - 4.06 (2H, m), 4.17 (3H, s), 4.22 - 4.35 (2H, m), 8.47 - 8.56 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 484.7.
Tert -부틸 ( 7a R )-4- 브로모 -5- 클로로 -2- 메틸 -2, 7a,8 ,10,11,13- 헥사히드로피라지노 [2',1':3,4][1,4] 옥사제피노[7,6- g ]인다졸-9(7 H )-카르복실레이트
Figure pct00274
보란-THF 착물의 용액 (1 M) (11.36 mL, 11.36 mmol)을 질소 하에 25℃에서 THF (10 mL) 중 tert-부틸 (7aR)-4-브로모-5-클로로-2-메틸-13-옥소-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노 [2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (690 mg, 1.42 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 생성된 용액을 16시간 동안 75℃까지 가열하고, 그 후 25℃까지 냉각시키고, i-PrOH (5 mL) 및 NaOH (2 M, 10 mL)로 켄칭하고, 20분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (100 mL) 및 EtOAc (200 mL)로 희석시키고, 염수 (50 mL)로 세척하고, 건조시키고, 증발시켰다. 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)에 의해 tert-부틸 (7aR)-4-브로모-5-클로로-2-메틸-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (370 mg, 55%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.31 - 2.43 (1H, m), 2.63 - 2.75 (2H, m), 2.76 - 2.9 (1H, m), 3.02 (1H, t), 3.62 - 3.76 (3H, m), 3.79 (1H, d), 4.15 (3H, s), 4.29 (1H, d), 4.36 (1H, d), 8.38 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 470.8.
Tert -부틸 (7a R )-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6- g ]인다졸-9(7 H )-카르복실레이트
Figure pct00275
1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (2 mL) 중 tert-부틸 (7aR)-4-브로모-5-클로로-2-메틸-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (302 mg, 0.64 mmol), (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (200 mg, 1.28 mmol) 및 탄산칼륨 (531 mg, 3.84 mmol)의 교반 용액을 10분 동안 탈기시켰다. RuPhos Pd G3 (53.5 mg, 0.06 mmol) 및 RuPhos (29.9 mg, 0.06 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 90℃에서 가열하였다. 3시간 동안 교반시킨 후, 추가의 (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (200 mg, 1.28 mmol) 및 RuPhos Pd G3 (53.5 mg, 0.06 mmol)을 첨가하였다. 추가로 2시간 교반시킨 후, 반응 용매를 증발시키고, 갈색 오일을 EtOAc (50 mL)로 희석시켰다. 유기물을 물 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하고, 그 후 건조시키고, 증발시켰다. 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~10% MeOH)에 의해 tert-부틸 (7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (215 mg, 67%)를 황색 건조 필름으로 제공하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 503.4.
2-[( 7a R )-5- 클로로 -2- 메틸 -2,7, 7a,8 ,9,10,11,13- 옥타히드로피라지노[2',1':3,4][1,4] 옥사제피노[7,6- g ]인다졸-4-일]-3-플루오로페놀
Figure pct00276
MeOH (4 mL) 중 tert-부틸 (7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-카르복실레이트 (215 mg, 0.43 mmol) 및 HCl (i-PrOH 중 6 M) (2.85 mL, 17.10 mmol)의 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 그 후, 반응 혼합물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피로 정제하고, 1 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시켜 2-[(7aR)-5-클로로-2-메틸-2,7,7a,8,9,10,11,13-옥타히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-4-일]-3-플루오로페놀 (172 mg, 100%)을 담황색 고형물로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 403.2.
1-[( 7aR )-5- 클로로 -4-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-2- 메틸 -2, 7a,8 ,10,11,13-헥사히드로피라지노 [2',1':3,4][1,4]옥사제피노 [7,6- g ] 인다졸 -9(7 H )-일] 프로프 -2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 74 및 회전 이성질체 2, 실시예 75
Figure pct00277
질소 하에 0℃에서 DCM (18 mL) 중 2-[(7aR)-5-클로로-2-메틸-2,7,7a,8,9,10,11,13-옥타히드로피라지노[2',1':3,4] [1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-4-일]-3-플루오로페놀 (185 mg, 0.46 mmol) 및 DIPEA (0.104 mL, 0.60 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드 (0.040 mL, 0.51 mmol)를 첨가하였다. 0℃에서 2시간 동안 교반시킨 후 반응물을 MeOH (5 mL)로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 생성된 오일을 MeOH (5 mL)에 용해시키고, 7 N NH3/MeOH (1 mL)를 첨가하고, 그 후 25℃에서 1시간 동안 교반시키고, 그 후 용매를 증발시켰다. 그 후 샘플을 MeOH (3 mL)에 용해시키고, 여과시키고, 잔사를 MeOH (0.5 mL)로 세척하였다. 상기 용액을 SFC (컬럼: Chiralpak IC, 20 x 250 mm, 5 마이크론 이동상: 35% MeOH + 0.1% NH3 / 65% scCO2 유량: 60 mL/분; BPR: 120 bar; 컬럼 온도: 40℃; UV max 216 nm)를 사용하여 정제하여 1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (61 mg, 29%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.37 - 2.47 (1H, m), 2.68 - 2.88 (2H, m), 2.88 - 3.12 (2H, m), 3.78 (1H, dd), 3.83 - 4.02 (2H, m), 4.09 (4H, s), 4.3 - 4.57 (2H, m), 5.62 - 5.82 (1H, m), 6.04 - 6.22 (1H, m), 6.7 - 6.79 (1H, m), 6.79 - 6.89 (2H, m), 7.21 - 7.42 (1H, m), 7.91 (1H, s), 9.83 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 457. 이것에 이어서 1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (25 mg, 12%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.36 - 2.48 (1H, m), 2.68 - 2.83 (2H, m), 2.88 - 3.14 (2H, m), 3.7 - 3.82 (1H, m), 3.82 - 4.02 (2H, m), 4.02 - 4.29 (4H, m), 4.3 - 4.63 (2H, m), 5.61 - 5.81 (1H, m), 6.02 - 6.23 (1H, m), 6.62 - 6.99 (3H, m), 7.16 - 7.4 (1H, m), 7.92 (1H, s), 9.83 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 457.
Tert -부틸 (3 R )-4-[(4- 브로모 -2,3- 디플루오로페닐 ) 메틸 ]-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00278
4-브로모-2,3-디플루오로벤즈알데히드 (28 g, 126.70 mmol)를 건조 DCM (300 ml)에 용해시키고, tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (41.1 g, 190.04 mmol), 이어서 빙초산 (0.725 ml, 12.67 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다(질소 하에). 그 후 소듐 트리아세톡시히드로보레이트 (53.7 g, 253.39 mmol) 및 DCM (300 ml)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액의 조심스러운 첨가에 의해 켄칭하고, 수성 층을 DCM으로 추출하였다. 수득된 유기 층을 포화 염수로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 그 후 증발시켜 담황색 오일을 얻었다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-[(4-브로모-2,3-디플루오로페닐)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (51.8 g, 97%)를 황색 검으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.14 (1H, ddd), 2.3 - 2.45 (1H, m), 2.56 - 2.63 (1H, m), 3.02 (2H, ddd), 3.31 - 3.4 (1H, m), 3.48 (2H, d), 3.69 (2H, dt), 3.94 - 4.09 (1H, m), 4.65 (1H, t), 7.18 - 7.34 (1H, m), 7.51 (1H, ddd). m/z: ES+ [M+H]+ = 421.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6H- 피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00279
질소 하에 0℃에서 30분에 걸쳐 수소화나트륨 (2.70 g, 67.55 mmol)을 DMF (300 ml) 중 tert-부틸 (3R)-4-[(4-브로모-2,3-디플루오로페닐)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (25.87 g, 61.41 mmol)에 일부씩 첨가하였다(발포가 관찰됨). 생성된 혼합물을 0℃에서 30분 동안, 그 후 10℃에서 30분 동안 교반시켰다. 그 후 반응 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 포화 염화암모늄 수용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 염수로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시켰다. 증발에 의해 황색 오일 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (29.5 g, >100%)를 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ 401. 반응을 반복하고, 아래의 단일 정제를 위해 여러 조 배치들을 합하였다.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H - 피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 -2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00280
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (64.3 g, 160.24 mmol)를 DCM에 용해시키고, 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (48.1 g, 74.8 %)를 황색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.31 (1H, ddd), 2.74 (2H, td), 2.80 (1H, d), 3.09 (1H, ddd), 3.58 (2H, d), 3.66 - 3.75 (2H, m), 3.81 (1H, d), 4.33 (1H, dd), 7.03 (1H, dd), 7.31 (1H, dd). m/z: ES+ [M+H]+ = 401.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -8- 요오도 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀
Figure pct00281
진한 황산 (60.2 ml)을 0℃의 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (14.5 g, 36.13 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 용액이 형성될 때까지 0℃에서 15분 동안 교반시켰다. N-요오도숙신이미드 (16.26 g, 72.27 mmol)를 한꺼번에 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안, 그 후 실온에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음에 서서히 붓고, pH를 NaOH (50%(w/w) 수용액)로 pH 10으로 조정하고, DCM으로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 염수로 세척하하고, 그 후 상 추출 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 증발시켜 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (17.1 g, >100%)을 갈색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.36 (2H, ddd), 2.61 - 2.97 (5H, m), 3.71 (3H, dtd), 4.12 - 4.34 (1H, m), 7.71 (1H, d). 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 427.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -8- 요오도 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00282
디-tert-부틸 디카르보네이트 (13.11 g, 60.06 mmol)를 실온에서 DCM (200 mL) 중 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 및 트리에틸아민 (16.74 mL, 120.12 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 17시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM (150 mL)으로 희석시키고, 물 (150 mL), 그 후 포화 염수 (150 mL)로 세척하였다. 유기 층을 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (9.53 g, 45%)를 담황색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.23 - 2.38 (1H, m), 2.63 - 2.8 (2H, m), 2.88 (1H, s), 3.12 (1H, ddd), 3.55 (2H, t), 3.67 - 3.82 (3H, m), 4.32 (1H, dd), 7.71 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 527.
Tert -부틸 (12a R )-9-브로모-10-플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00283
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4] 벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (9.33 g, 17.70 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀) 팔라듐(0) (4.09 g, 3.54 mmol) 및 요오드화구리(I) (3.37 g, 17.70 mmol)를 톨루엔 (160 ml)에 현탁시켰다. 에티닐트리메틸실란 (12.24 ml, 88.49 mmol) 및 트리에틸아민 (4.93 ml, 35.40 mmol)을 연속적으로 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 30분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 증발시켰다. 수득된 잔사를 DCM에 용해시키고, 셀라이트 층을 통하여 여과시켰다. 증발에 의해 오일을 수득하고, 이를 디에틸 에테르에 용해시키고, 여과시켰다. 여과액을 갈색 오일까지 증발시켰다. 수득된 조 생성물을 헵탄에 용해시키고, 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-[(트리메틸실릴) 에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (6.76 g, 77%)를 담황색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 0.25 (9H, s), 1.40 (9H, s), 2.34 (1H, ddd), 2.65 - 2.85 (2H, m), 2.91 (1H, s), 3.13 (1H, ddd), 3.55 (2H, t), 3.72 - 3.94 (3H, m), 4.35 (1H, dd), 7.35 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 497.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00284
1,4-디옥산 (111 ml) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (6.5 g, 13.07 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (3.38 g, 19.60 mmol) 및 수성 2 M 탄산나트륨 (19.60 ml, 39.20 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 탈기시켰다. 그 후 RuPhos-Pd-G3 (1.093 g, 1.31 mmol) 및 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (0.610 g, 1.31 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 90℃에서 30분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, EtOAc (150 mL) 및 물 (150 mL)로 희석시켰다. 합한 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 수득된 잔사를 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 조 생성물을 담황색 건조 필름으로 수득하였다. 조 생성물을 정제하고, 회전장애 이성질체들을 키랄 SFC로 분리하였다(다음을 사용함: Chiralpak IC 컬럼, 20 x 250 mm, 5 마이크론 이동상: 25% MeOH + 0.1% NH3/ 75% scCO2 유량: 60 ml/분; BPR: 120 bar; 컬럼 온도: 40℃ UV max 220 nm). 첫 번째 용출된 순수 회전장애 이성질체 분획을 수집하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 1 (2.55 g, 33%)을 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) -0.00 (9H, s), 1.43 (9H, s), 2.33 - 2.45 (1H, m), 2.68 - 2.77 (1H, m), 2.77 - 2.84 (1H, m), 2.89 (1H, s), 3.11 (1H, t), 3.59 - 3.71 (2H, m), 3.72 - 3.83 (2H, m), 3.93 (1H, d), 4.39 (1H, dd), 6.92 (1H, dd), 7.00 (1H, dd), 7.23 - 7.33 (2H, m), 9.84 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 545. >99% ee. 이것에 이어서 두 번째 용출된 순수 회전장애 이성질체 분획을 수집하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 2 (3.15 g, 41%)를 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) -0.00 (9H, s), 1.43 (9H, s), 2.32 - 2.44 (1H, m), 2.68 - 2.76 (1H, m), 2.76 - 2.83 (1H, m), 2.88 (1H, s), 3.11 (1H, t), 3.66 (2H, d), 3.72 - 3.81 (2H, m), 3.91 (1H, d), 4.38 (1H, dd), 6.91 (1H, dd), 7.00 (1H, dd), 7.22 - 7.3 (2H, m), 9.86 (1H, s).m/z: ES+ [M+H]+ = 545. >98.1% ee.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-8- 에티닐 -10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀
Figure pct00285
Tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2.55 g, 4.68 mmol)를 DCM (20 mL)에 용해시키고, TFA (10.74 mL, 140.34 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 조 반응 혼합물을 정제하였다. 1 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 황색 폼을 수득하고, 이를 디에틸 에테르로 미분화하여 3-클로로-2-[(12aR)-8-에티닐-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (1.61 g, 92%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.29 - 2.42 (2H, m), 2.6 - 2.72 (2H, m), 2.74 - 2.87 (3H, m), 3.36 (1H, d), 3.62 - 3.86 (3H, m), 3.89 (1H, s), 4.29 (1H, dd), 6.93 (1H, dd), 7.00 (1H, dd), 7.2 - 7.32 (2H, m), 9.94 (1H, s).m/z: ES+ [M+H]+ = 373.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8- 에티닐 -10- 플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온, 실시예 76
Figure pct00286
질소 하에 0℃에서 DCM (30 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-8-에티닐-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (1.515 g, 4.06 mmol) 및 DIPEA (0.920 mL, 5.28 mmol)의 현탁물에 아크릴로일 클로라이드 (0.355 mL, 4.47 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 그 후 반응 혼합물을 40℃에서 증발시켜 황색 오일을 수득하고, 이를 저온 7 N NH3/MeOH (50 mL)에 용해시키고, 30분에 걸쳐 실온까지 교반시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 증발시켜 황색 잔사를 수득하고, 이를 DCM에 용해시키고, 물로 추출하였다. 생성된 유기 층을 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시켰다. 증발에 의해 조 생성물을 수득하고, 이를 DCM에 용해시키고, 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: EtOAc 중 0~1% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 백색 폼을 수득하고, 이를 고 진공 하에 55℃에서 1일 동안 건조시키고, 그 후 아세토니트릴 (10 ml) 및 물 (10 ml)에 용해시키고, 주말에 걸쳐 동결 건조시켜 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (1.03 g, 59%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.43 (1H, s), 2.73 (1H, s), 2.87 (1H, d), 3.09 (1H, d), 3.35 (1H, s), 3.72 - 3.82 (2H, m), 3.85 - 3.96 (3H, m), 3.98 - 4.1 (1H, m), 4.40 (1H, d), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.75 - 6.87 (1H, m), 6.90 (1H, dd), 6.98 (1H, dd), 7.24 (1H, t), 7.27 - 7.31 (1H, m), 9.88 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 427.
3- 클로로 -2-(( 12aR )-8- 에티닐 -10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-9-일)페놀
Figure pct00287
Tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (200 mg, 0.37 mmol)를 DCM (3 mL)에 용해시키고, TFA (0.562 mL, 7.34 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반시키고, 추가분의 TFA (0.562 mL, 7.34 mmol)를 첨가하고, 그 후 반응 혼합물을 30분 동안 교반시켰다. SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 조 반응 혼합물을 정제하였다. 1 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-((12aR)-8-에티닐-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-9-일)페놀 (177 mg, >100%)을 황색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.83 (3H, dd), 2.98 (2H, t), 3.41 (2H, dt), 3.71 - 3.82 (2H, m), 3.87 (2H, d), 4.13 (1H, s), 4.34 (1H, d), 6.92 (1H, dd), 7.01 (1H, dd), 7.21 - 7.32 (2H, m), 9.97 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 373.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8- 에티닐 -10- 플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온, 실시예 77
Figure pct00288
질소 하에 0℃에서 DCM (3 mL) 중 3-클로로-2-((12aR)-8-에티닐-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-9-일)페놀 (0.170 g, 0.46 mmol) 및 DIPEA (0.103 mL, 0.59 mmol)의 현탁물에 아크릴로일 클로라이드 (0.040 mL, 0.50 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 증발시켜 황색 오일을 수득하고, 이를 저온 1 N NH3/MeOH (10 mL)에 용해시키고, 30분에 걸쳐 실온까지 교반시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 증발시켜 황색 고형물을 수득하고, 이를 DCM에 용해시키고, 물로 추출하였다. 생성된 유기 층을 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시켰다. 증발에 의해 조 생성물을 황색 폼으로 수득하였다. 용출제로서 물 (0.3% 수성 NH3 함유) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters CSH C18 OBD 컬럼, 30 x 100 mm 내경, 5 마이크론의 입자 크기)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 얕은 구배: 20~40% MeCN. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (81 mg, 42%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.42 (1H, s), 2.66 - 2.78 (1H, m), 2.87 (2H, dd), 3.09 (1H, d), 3.72 - 3.79 (2H, m), 3.86 - 3.93 (3H, m), 4.05 (1H, d), 4.39 (1H, d), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.83 (1H, s), 6.89 (1H, d), 6.97 (1H, d), 7.22 (1H, t), 7.27 - 7.31 (1H, m), 9.95 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 427.
4- 브로모 -3- 클로로 -2- 플루오로벤즈알데히드
Figure pct00289
THF (35 mL) 중 디이소프로필아민 (6.96 mL, 49.66 mmol)의 기계적 교반 용액을 -20℃까지 냉각시키고, 헥산 중 1.6 M n-부틸리튬의 용액 (31.0 mL, 49.66 mmol)을 적가하였다. 첨가시에 상기 용액을 0℃에서 20분 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 -78℃까지 냉각시키고, THF (10 mL) 중 1-브로모-2-클로로-3-플루오로벤젠 (10 g, 47.75 mmol)의 용액을 20분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 황색 현탁물을 -78℃에서 1시간 동안 교반시켰다. DMF (5.55 mL, 71.62 mmol)를 5분에 걸쳐 적가하고, 그 후 혼합물을 -20℃까지 가온하였다. -20℃에서 상기 투명 황색 용액을 포화 수성 염화암모늄 (100 mL)으로 켄칭하고, 디에틸 에테르 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 담황색 고형물을 수득하였다. 잔사를 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~5% 에틸 아세테이트)로 정제하여 4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤즈알데히드 (6.83 g, 60%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 7.51 (1H, ddd), 7.59 (1H, dd), 10.24 (1H, d). m/z: ES- [M-H]- 235.
Tert -부틸 (3R)-4-[(4- 브로모 -3- 클로로 -2- 플루오로페닐 ) 메틸 ]-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00290
4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤즈알데히드 (1 g, 4.21 mmol)를 DCM (20 mL)에 용해시키고, tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (1.37 g, 6.32 mmol), 이어서 아세트산 (0.024 mL, 0.42 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (1.79 g, 8.42 mmol)를 첨가하고, 상기 용액을 실온에서 17시간 동안 교반시켰다. 추가분의 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (0.9 g)를 첨가하고, 상기 용액을 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액 (100 mL)에 조심스럽게 첨가함으로써 상기 혼합물을 켄칭하고, 그 후 수성 층을 DCM (2 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 건조시켜 조 생성물을 담황색 오일로 제공하였다. 잔사를 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% 에틸 아세테이트)로 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-[(4-브로모-3-클로로-2-플루오로페닐)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (1.56 g, 85%)를 무색 검으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.39 (9H, s), 2.14 (1H, ddd), 2.33 - 2.44 (1H, m), 2.55 - 2.65 (1H, m), 2.81 - 3.17 (2H, m), 3.36 (1H, dt), 3.46 (2H, d), 3.68 (2H, dt), 4.02 (1H, d), 4.65 (1H, t), 7.33 - 7.51 (1H, m), 7.61 (1H, dd). m/z: ES+ [M+H]+ 437.
Tert -부틸 ( 12aR )-9- 브로모 -10- 클로로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6H- 피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 -2(1H)-카르복실레이트
Figure pct00291
질소 하에 실온에서 수소화나트륨 (광유 중 60% 분산물 50.5 mg, 1.26 mmol)을 DMF (10 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-[(4-브로모-3-클로로-2-플루오로페닐)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (502 mg, 1.15 mmol)에 한꺼번에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시키고, 그 후 냉각시키고, 포화 염화암모늄 수용액 (20 mL)으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 물 (3 x 100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 백색 폼을 수득하였다. 잔사를 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (381 mg, 80%)를 무색 검으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 1.46 (9H, s), 2.42 (1H, ddd), 2.77 (1H, ddd), 2.81 - 3.03 (2H, m), 3.26 (1H, ddd), 3.55 (1H, d), 3.6 - 3.76 (3H, m), 3.93 (1H, d), 4.24 - 4.38 (1H, m), 6.94 (1H, d), 7.29 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 417.
( 12aR )-9- 브로모 -10- 클로로 -8- 요오도 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6H- 피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀
Figure pct00292
N-요오도숙신이미드 (5.39 g, 23.94 mmol)를 실온에서 진한 황산 (40 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (5 g, 11.97 mmol)의 용액에 일부씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시키고, 그 후 빙조에서 냉각시키고, 빙냉 25% 수산화나트륨 수용액 (200 mL)으로 pH 10까지 처리하였다. 반응 혼합물을 물 (500 mL)로 희석시키고, 에틸 아세테이트 (3 x 500 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 물 (2 x 500 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀을 갈색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 2.54 - 2.68 (2H, m), 2.89 - 3.19 (5H, m), 3.44 (1H, d), 3.71 (1H, dd), 3.88 (1H, d), 4.22 - 4.39 (1H, m), 7.62 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 443.
Tert -부틸 ( 12aR )-9- 브로모 -10- 클로로 -8- 요오도 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6H-피라지노[2,1-c][1,4] 벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트
Figure pct00293
디-tert-부틸 디카르보네이트 (11.76 g, 53.88 mmol)를 실온에서 DCM (300 mL) 및 트리에틸아민 (15.02 mL, 107.75 mmol) 중 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (15.93 g, 35.92 mmol)의 용액에 일부씩 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 30분 동안 교반시키고, 그 후 건조상태까지 증발시켜 갈색 고형물을 수득하였다. 잔사를 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~30% 에틸 아세테이트)로 정제하여 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (12.34 g, 63%)를 옅은 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 1.45 (9H, s), 2.33 - 2.52 (1H, m), 2.68 - 2.82 (1H, m), 2.83 - 3.07 (2H, m), 3.18 - 3.38 (1H, m), 3.50 (1H, d), 3.55 - 3.77 (3H, m), 3.91 (1H, d), 4.29 (1H, dd), 7.62 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 543.
Tert -부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트
Figure pct00294
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4] 벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (7 g, 12.88 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (2.98 g, 2.58 mmol) 및 요오드화구리(I) (2.45 g, 12.88 mmol)를 톨루엔 (116 mL)에 현탁시켰다. 에티닐트리메틸실란 (8.91 mL, 64.38 mmol) 및 트리에틸아민 (3.59 mL, 25.75 mmol)을 연속적으로 첨가하고, 상기 혼합물을 100℃에서 가열하였다. 30분 후 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, (EtOAc (100 mL)로 세척하면서) 짧은 셀라이트 패드를 통하여 여과시켰다. 여과액을 농축시켜 조 갈색 잔사를 제공하였다. 디에틸에테르 (50 mL)를 첨가하여 침전물이 형성되게 하였다. 고형물을 여과 제거하고, 디에틸에테르 (100 mL)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (6.18 g, 93%)를 옅은 갈색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 0.25 (9H, s), 1.40 (9H, s), 2.3 - 2.37 (1H, m), 2.68 - 2.79 (2H, m), 2.88 (1H, s), 3.06 - 3.18 (1H, m), 3.56 (2H, t), 3.67 - 3.86 (3H, m), 4.37 (1H, dd), 7.50 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 513.2.
Tert -부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트
Figure pct00295
1,4-디옥산 (102 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (6.18 g, 12.02 mmol), (2-클로로-6-메톡시페닐)보론산 (4.48 g, 24.05 mmol) 및 수성 2 M 탄산나트륨 (18.04 mL, 36.07 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 탈기시켰다. RuPhos Pd G3 (1.01 g, 1.20 mmol) 및 디시클로헥실(2',6'-디이소프로폭시-[1,1'-바이페닐]-2-일)포스판 (0.56 g, 1.20 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 90℃에서 가열하였다. 2 시간 후, 소량의 출발 물질이 남아서 추가분의 보론산 (2.2 g)을 첨가하였다. 7 시간 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, EtOAc (100 mL) 및 물 (100 mL)로 희석시켰다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 EtOAc (100 mL)로 세척하였다. 합한 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 갈색 필름을 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3.40 g)를 옅은 갈색 폼으로 (회전장애 이성질체들의 혼합물로서) 수득하였다. 회전장애 이성질체를 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)를 사용하여 분리하였다 (컬럼: Phenomenex C4, 30 x 250 mm, 5 마이크론; 이동상 A: 30% 메탄올 (+0.1% NH3)/이동상 B: 70% scCO2; 유량: 90 mL/분; BPR: 120 bar; 컬럼 온도: 40℃). 원하는 생성물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전장애 이성질체 1 (1.3 g, 2.26 mmol, 19%)을 옅은 갈색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): -0.03 (9H, s), 1.47 (9H, s), 2.47 (1H, ddd), 2.77 - 3.03 (3H, m), 3.2 - 3.33 (1H, m), 3.58 (1H, d), 3.67 - 3.88 (6H, m), 4.00 (1H, d), 4.28 - 4.39 (1H, m), 6.87 (1H, dd), 7.09 (1H, dd), 7.27 - 7.32 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 575.3. 이것에 이어서 옅은 갈색 폼으로서의 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전장애 이성질체 2 (1.62 g, 2.82 mmol, 24%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): -0.03 (9H, s), 1.46 (9H, s), 2.45 (1H, ddd), 2.74 - 3 (3H, m), 3.27 (1H, ddd), 3.58 (1H, d), 3.64 - 3.84 (6H, m), 3.99 (1H, d), 4.26 - 4.38 (1H, m), 6.87 (1H, dd), 7.09 (1H, dd), 7.27 - 7.32 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 575.2.
1-[( 12aR )-10- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8- 에티닐 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온, 실 시예 78
Figure pct00296
DCM (20 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전장애 이성질체 1 (1.20 g, 2.08 mmol)의 용액을 0℃에서 냉각시키고, 트리브로모보란 (DCM 중 1 M 용액 20.85 mL, 20.85 mmol)을 교반하면서 적가하였다. 첨가시에 상기 혼합물을 실온까지 되게 하고, 교반시켰다. 4시간 후, 상기 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 상기 혼합물을 DCM (20 mL)으로 희석시켰다. 상기 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액의 적가에 의해 켄칭하였다 (수성 부분이 계속 pH 8에 있을 때까지 첨가함). 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 세척하였다. 합한 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-에티닐-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀을 옅은 갈색 고형물 (812 mg)로 제공하고, 이를 DCM (20 mL)에 현탁시키고, 트리에틸아민 (0.569 mL, 4.17 mmol)을 첨가하였다. 아크릴로일 클로라이드 (0.202 mL, 2.5 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 교반시켰다. 10분 후 반응 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 DCM (20 mL)으로 세척하였다. 합한 유기물을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 잔사를 메탄올 (5 mL) 및 메탄올 중 7 N 암모니아 (5 mL)에 용해시키고, 실온에서 교반시켰다. 5분 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 담황색 폼을 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~90% MeOH/EtOAc (1:9))로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (193 mg)을 담황색 고형물로 수득하였다. 생성물을 다시 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)를 사용하여 추가로 정제하였다 (컬럼: Princeton 디올, 30 x 250 mm, 5 마이크론; 이동상 A: 메탄올 (+0.1% NH3)/이동상 B: scCO2; 구배: 10분에 걸쳐 24~40%; 유량: 90 mL/분; BPR: 120 bar; 컬럼 온도: 40℃). 원하는 생성물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (127 mg, 14%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 2.37 - 2.44 (1H, m), 2.71 - 2.81 (1H, m), 2.81 - 2.94 (2H, m), 3.02 - 3.14 (1H, m), 3.67 - 3.81 (2H, m), 3.85 - 3.94 (3H, m), 3.97 - 4.11 (1H, m), 4.31 - 4.56 (1H, m), 5.62 - 5.81 (1H, m), 6.13 (1H, d), 6.75 - 6.86 (1H, m), 6.89 (1H, dd), 6.96 (1H, dd), 7.22 (1H, t), 7.44 (1H, s), 9.76 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 443.2.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00297
2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (45.4 mg, 0.1 mmol) 및 RuPhos-Pd-G3 (81 mg, 0.1 mmol)을 질소 하에 20℃에서 1,4-디옥산 (8 mL) 및 H2O (2 mL) (4:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (500 mg, 0.97 mmol), (2-플루오로-6-히드록시페닐)보론산 (303 mg, 1.95 mmol) 및 K2CO3 (269 mg, 1.95 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~50% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (400 mg, 75%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 0.01 (9H, s), 1.39 (9H, s), 2.25 - 2.45 (1H, m), 2.62 - 2.93 (3H, m), 2.98 - 3.21 (1H, m), 3.45 - 3.78 (4H, m), 3.78 - 3.94 (1H, m), 4.24 - 4.44 (1H, m), 6.59 - 6.80 (2H, m), 7.10 - 7.29 (1H, m), 7.33 - 7.46 (1H, m), 9.64 - 9.84 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 545.
2-[( 12a R )-10- 클로로 -8- 에티닐 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]-3-플루오로페놀
Figure pct00298
TFA (1 mL, 12.98 mmol)를 20℃의 DCM (4 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (356 mg, 0.65 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 2-[(12aR)-10-클로로-8-에티닐-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀 (140 mg, 58%)을 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.13 - 2.26 (1H, m), 2.66 - 2.91 (2H, m), 2.93 - 3.07 (2H, m), 3.19 - 3.42 (2H, m), 3.54 - 3.74 (1H, m), 3.74 - 4.10 (3H, m), 4.38 - 4.48 (1H, m), 6.54 - 6.94 (2H, m), 7.15 - 7.32 (1H, m), 7.32 - 7.57 (1H, m), 9.78 - 10.04 (1H, m) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 373.
1-(( 12a R )-10- 클로로 -8- 에티닐 -9-(2- 플루오로 -6- 히드록시페닐 )-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -벤조[ f ]피라지노[2,1- c ][1,4]옥사제핀-2(1 H )-일)프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 79 및 회전 이성질체 2, 실시예 80
Figure pct00299
아크릴로일 클로라이드 (34 mg, 0.38 mmol) 및 DIPEA (0.328 mL, 1.88 mmol)를 질소 하에 -20℃에서 DMF (3 mL) 중 2-[(12aR)-10-클로로-8-에티닐-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-3-플루오로페놀 (140 mg, 0.38 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반시키고, 그 후 물로 켄칭하고, 직접적으로 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~100% MeCN)로 정제하여, 증발 후, 조 생성물을 백색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 분취용 HPLC로 정제하였다 (컬럼: XSelect CSH Prep C18 OBD 컬럼, 5 um,19*150 mm ; 이동상 A:물(0.1%포름산), 이동상 B:MeCN; 유량:25 mL/분; 구배:50 B에서 7분 내에 55 B까지; 254;220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-((12aR)-10-클로로-8-에티닐-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (13 mg, 8%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.27 - 2.45 (1H, m), 2.63 - 2.77 (1H, m), 2.77 - 2.94 (2H, m), 2.97 - 3.16 (1H, m), 3.62 - 3.81 (2H, m), 3.82 - 3.99 (3H, m), 3.99 - 4.15 (1H, m), 4.42 (1H, t), 5.63 - 5.78 (1H, m), 6.09 - 6.26 (1H, m), 6.77 - 6.94 (2H, m), 6.94 - 7.04 (1H, m), 7.21 (1H, t), 7.43 (1H, s), 9.82 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 427. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-((12aR)-10-클로로-8-에티닐-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (16 mg, 10%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.31 - 2.44 (1H, m), 2.68 - 2.81 (1H, m), 2.80 - 2.98 (2H, m), 3.00 - 3.19 (1H, m), 3.68 - 3.81 (2H, m), 3.81 - 3.95 (3H, m), 3.95 - 4.13 (1H, m), 4.42 (1H, t), 5.64 - 5.74 (1H, m), 6.13 (1H, d), 6.76 - 6.92 (2H, m), 6.95 (1H, dd), 7.21 (1H, t), 7.43 (1H, s), 9.79 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 427.
에틸 2-아미노-5- 클로로 -6- 플루오로 -3- 니트로벤조에이트
Figure pct00300
1-클로로피롤리딘-2,5-디온 (10.53 g, 78.9 mmol)을 DMF (200 mL) 중 에틸 2-아미노-6-플루오로-3-니트로벤조에이트 (15 g, 65.74 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (500 mL)로 희석시키고, 물 (400 mL) 및 포화 염수 (300 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~25% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 에틸 2-아미노-5-클로로-6-플루오로-3-니트로벤조에이트 (16 g, 93%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.32 (3H, t), 4.39 (2H, q), 8.04 (2H, s), 8.44 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 263.
에틸 2,3- 디아미노 -5- 클로로 -6- 플루오로벤조에이트
Figure pct00301
철 (21.26 g, 380.78 mmol)을 MeOH (200 mL) 중 에틸 2-아미노-5-클로로-6-플루오로-3-니트로벤조에이트 (20 g, 76.16 mmol) 및 포화 염화암모늄 (50 mL, 76.16 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통하여 여과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~25% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 에틸 2,3-디아미노-5-클로로-6-플루오로벤조에이트 (14.4 g, 81%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.27 (3H, t), 4.28 (2H, q), 4.88 (2H, s), 6.04 (2H, s), 6.69 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 233.
에틸 6- 클로로 -5- 플루오로 -1 H - 벤즈이미다졸 -4- 카르복실레이트
Figure pct00302
에틸 2,3-디아미노-5-클로로-6-플루오로벤조에이트 (14 g, 60.2 mmol)를 트리에톡시메탄 (210 mL)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 120℃에서 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 형성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 석유 에테르 (200 mL)로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 에틸 6-클로로-5-플루오로-1H-벤즈이미다졸-4-카르복실레이트 (10 g, 69%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 11.36 (3H, t), 4.43 (2H, q), 8.16 (1H, d), 8.35 (1H, d), 12.69 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 243.
메틸 5- 클로로 -6- 플루오로 -1- 메틸 -1 H - 벤즈이미다졸 -7- 카르복실레이트
Figure pct00303
요오도메탄 (2.111 mL, 33.75 mmol)을 DMF (50 mL) 중 에틸 6-클로로-5-플루오로-1H-벤즈이미다졸-4-카르복실레이트 (7.8 g, 32.15 mmol) 및 K2CO3 (8.9 g, 64.3 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (300 mL)로 희석시키고, 물 (80 mL x 3) 및 포화 염수 (50 mL x 3)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~90% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 메틸 5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-7-카르복실레이트 벤조[d]이미다졸-7-카르복실레이트 (1.6 g, 21%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.31 (3H, s), 3.98 (3H, s), 8.09 (1H, d), 8.35 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 243.
4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -1- 메틸 -1 H - 벤즈이미다졸 -7- 카르복실산
Figure pct00304
1-브로모피롤리딘-2,5-디온 (3.5 g, 19.68 mmol)을 진한 황산 (20 mL) 중 메틸 5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-7-카르복실레이트 (1.5 g, 6.56 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물에 붓고, 4 M NaOH로 중화시키고, 직접적으로 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.05% 포름산) 중 10~50% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-7-카르복실산 (0.45 g, 22%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.86 (3H, s), 8.44 (1H, s), 14.51 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 307.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -5- 클로로 -6- 플루오로 -1- 메틸 -1 H - 벤즈이미다졸 -7-카르보닐)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00305
DIPEA (0.477 mL, 2.73 mmol)를 질소 하에 20℃에서 DMF (10 mL) 중 4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-7-카르복실산 (420 mg, 1.37 mmol), tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (443 mg, 2.05 mmol) 및 HATU (779 mg, 2.05 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 포화 염수 (50 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 5~20% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-7-카르보닐)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (420 mg, 61%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.92 - 3.26 (4H, m), 3.64 - 3.93 (5H, m), 4.00 - 5.42 (4H, m), 8.28 - 8.47 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 505.
Tert -부틸 ( 7a R )-4- 브로모 -5- 클로로 -1- 메틸 -13-옥소-1, 7a,8 ,10,11,13- 헥사히드로이미다조[4,5- g ]피라지노 [2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9(7 H )-카르복실레이트
Figure pct00306
수소화나트륨 (79 mg, 1.98 mmol)을 질소 하에 0℃에서 DMF (10 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-5-클로로-6-플루오로-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-7-카르보닐)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (400 mg, 0.79 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (50 mL)로 켄칭하고, EtOAc (3 x 75 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 5~20% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (7aR)-4-브로모-5-클로로-1-메틸-13-옥소-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9(7H)-카르복실레이트 (350 mg, 91%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, d), 3.15 - 3.50 (3H, m), 3.78 (5H, s), 3.90 - 4.48 (4H, m), 8.37 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 485.
Tert -부틸 (7a R )-5-클로로-4-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-메틸-13-옥소-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5- g ]피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9(7 H )-카르복실레이트
Figure pct00307
K2CO3 (256 mg, 1.85 mmol)을 질소 하에 1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (1 mL)(5:1의 비) 중 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (28.8 mg, 0.06 mmol), RuPhos-Pd-G3 (51.7 mg, 0.06 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (319 mg, 1.85 mmol) 및 tert-부틸 (7aR)-4-브로모-5-클로로-1-메틸-13-옥소-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9(7H)-카르복실레이트 (300 mg, 0.62 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 그 후, 직접적으로 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 5~50% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (7aR)-5-클로로-4-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-메틸-13-옥소-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9(7H)-카르복실레이트 (220 mg, 67%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.43 (9H, s), 3.37 - 3.57 (2H, m), 3.58 - 3.94 (5H, m), 3.93 - 4.41 (5H, m), 6.83 - 7.09 (2H, m), 7.20 - 7.31 (1H, m), 8.15 (1H, s), 9.85 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 533.
Tert -부틸 (7a R )-5-클로로-4-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5- g ]피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9(7 H )-카르복실레이트
Figure pct00308
THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (4124 μl, 4.12 mmol)을 실온에서 tert-부틸 (7aR)-5-클로로-4-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-메틸-13-옥소-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9(7H)-카르복실레이트 (220 mg, 0.41 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (20 mL)로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 5~20% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (7aR)-5-클로로-4-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9(7H)-카르복실레이트 (120 mg, 56%)를 황색 고형물로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 519.
3- 클로로 -2-[( 7a R )-5- 클로로 -1- 메틸 -1,7, 7a,8 ,9,10,11,13- 옥타히드로이미다조[4,5- g ]피라지노 [2,1- c ][1,4]벤족사제핀-4-일]페놀
Figure pct00309
TFA (0.5 mL, 6.49 mmol)를 DCM (5 mL) 중 tert-부틸 (7aR)-5-클로로-4-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9(7H)-카르복실레이트 (120 mg, 0.22 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-((7aR)-5-클로로-1-메틸-1,7,7a,8,9,10,11,13-옥타히드로이미다조[4',5':5,6]벤조[1,2-f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-4-일)페놀 (80 mg, 85%)을 황색 고형물로 얻었다. m/z: ES+ [M+H]+ = 419.
1-[( 7a R )-5- 클로로 -4-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-1- 메틸 -1, 7a,8 ,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5- g ]피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9(7 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 81 및 회전 이성질체 2, 실시예 82
Figure pct00310
아크릴로일 클로라이드 (19.43 mg, 0.21 mmol)를 DMF (2 mL) 중 3-클로로-2-[(7aR)-5-클로로-1-메틸-1,7,7a,8,9,10,11,13-옥타히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-4-일]페놀 및 DIPEA (0.112 mL, 0.64 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 4시간 동안 교반시키고, 그 후 직접적으로 정제하고 각각의 회전장애 이성질체를 분리하였다(다음에 의해: 분취용 HPLC 컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 30*150 mm, 5 um ; 이동상 A:물(0.05%NH3H2O), 이동상 B:MeCN; 유량:60 mL/분; 구배:24 B에서 7분 내에 38 B까지; 254/220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (25 mg, 25%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.19 - 2.45 (1H, m), 2.61 - 2.88 (2H, m), 2.88 - 3.10 (2H, m), 3.49 - 3.70 (1H, m), 3.75 - 4.35 (5H, m), 4.32 - 4.90 (3H, m), 5.26 - 5.96 (1H, m), 6.06 - 6.51 (1H, m), 6.63 - 7.04 (3H, m), 7.43 (1H, t), 7.98 (1H, s), 9.60 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 473. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (15 mg, 15%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.49 - 2.51 (1H, m), 2.71 - 2.89 (2H, m), 2.89 - 3.14 (2H, m), 3.50 - 3.76 (1H, m), 3.79 - 4.17 (6H, m), 4.17 - 4.83 (2H, m), 5.59 - 5.84 (1H, m), 6.15 (1H, d), 6.85 - 6.91 (2H, m), 6.93 - 7.08 (1H, m), 7.24 (1H, t), 8.01 (1H, s), 9.57 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 473.
4- 브로모 -5- 클로로 -2,3- 디플루오로벤조산
Figure pct00311
1-클로로피롤리딘-2,5-디온 (5.63 g, 42.19 mmol)을 진한 황산 (30 mL) 중 4-브로모-2,3-디플루오로벤조산 (5 g, 21.1 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물에 붓고, EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~50% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 4-브로모-5-클로로-2,3-디플루오로벤조산 (5 g, 87%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 7.09 - 7.17 (1H, m), 11.52 - 11.83 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 271.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -5- 클로로 -2,3- 디플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00312
DIPEA (7.14 g, 55.26 mmol)를 0℃의 DMF (100 mL) 중 4-브로모-5-클로로-2,3-디플루오로벤조산 (5 g, 18.42 mmol), HATU (14 g, 36.84 mmol) 및 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (3.98 g, 18.42 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 물 (150 mL x 3) 및 포화 염수 (150 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켰다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~50% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-5-클로로-2,3-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (2.3 g, 27%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.37 - 1.43 (9H, m), 2.73 - 3.22 (3H, m), 3.28 - 3.31 (2H, m), 3.39 - 3.89 (2H, m), 3.90 - 4.12 (1H, m), 4.20 - 4.33 (1H, m), 7.49 - 7.74 (1H, m) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 469.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 클로로 -10- 플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00313
수소화나트륨 (0.358 g, 8.94 mmol)을 질소 하에 0℃에서 DMF (50 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-5-클로로-2,3-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (2.1 g, 4.47 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물로 켄칭하고, EtOAc (100 mL)로 추출하고, 물 (100 mL) 및 포화 염수 (100 mL x 2)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켰다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~50% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2 g, 99%)를 황색 고형물로 얻었다. m/z: ES+ [M+H]+ = 469.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 클로로 -10- 플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00314
THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (10 mL, 10 mmol)을 실온에서 THF (10 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1 g, 2.22 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 45분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL) 및 포화 염수 (50 mL x 2)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~40% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.9 g, 93%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.39 (9H, s), 2.16 - 2.39 (2H, m), 2.61 - 2.83 (2H, m), 3.09 - 3.19 (1H, m), 3.48 - 3.64 (1H, m), 3.61 - 3.96 (4H, m), 4.27 - 4.39 (1H, m), 7.42 - 7.46 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 435.
Tert -부틸 (12a R )-8-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00315
K2CO3 (0.793 g, 5.74 mmol) 및 (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (1.187 g, 6.89 mmol)을 질소 하에 1,4-디옥산 (15 mL) 및 물 (3 mL) (5:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-클로로-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.00 g, 2.30 mmol), 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (0.107 g, 0.23 mmol) 및 RuPhos-Pd-G3 (0.192 g, 0.23 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~60% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-8-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.5 g, 45%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.29 - 2.43 (1H, m), 2.67 - 2.74 (2H, m), 2.74 - 2.86 (1H, m), 3.01 - 3.14 (1H, m), 3.60 - 3.68 (2H, m), 3.69 - 3.84 (1H, m), 3.87 - 3.94 (1H, m), 4.25 - 4.41 (2H, m), 6.88 - 6.96 (1H, m), 6.98 - 7.04 (1H, m), 7.24 - 7.28 (1H, m), 7.28 - 7.33 (1H, m), 9.87 - 10.25 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 483.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-8- 클로로 -10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀
Figure pct00316
TFA (1 mL, 12.98 mmol)를 DCM (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-8-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (500 mg, 1.03 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 잔사를 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-8-클로로-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (350 mg, 88%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.27 - 2.36 (3H, m), 2.67 - 2.87 (4H, m), 3.55 - 3.82 (4H, m), 4.14 - 4.32 (1H, m), 6.89 - 6.94 (1H, m), 6.97 - 7.05 (1H, m), 7.23 - 7.32 (2H, m) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 383.
1-[( 12a R )-8- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-10- 플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 83 및 회전 이성질체 2, 실시예 84
Figure pct00317
아크릴로일 클로라이드 (0.074 mL, 0.91 mmol)를 0℃의 DMF (6 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-8-클로로-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (350 mg, 0.91 mmol) 및 DIPEA (0.479 mL, 2.74 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (0.5 mL)로 켄칭하고, 직접적으로 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~60% MeOH)로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 건조상태까지 증발시켜 조 생성물을 백색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 정제하고, 각각의 회전장애 이성질체를 분리하였다(다음에 의해: 분취용 HPLC 컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm,5 um; 이동상 A:물 (10 mmol/L NH4HCO3 + 0.1%NH3.H2O), 이동상 B:MeCN; 유량:25 mL/분; 구배:47 B에서 7분 내에 60 B까지; 254;220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(12aR)-8-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (42 mg, 20%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.32 - 2.44 (1H, m), 2.64 - 2.94 (3H, m), 3.01 - 3.18 (1H, m), 3.67 - 3.81 (2H, m), 3.81 - 3.96 (2H, m), 3.97 - 4.10 (1H, m), 4.30 - 4.52 (1H, m), 5.66 - 5.75 (1H, m), 6.05 - 6.20 (1H, m), 6.75 - 6.88 (1H, m), 6.89 - 6.97 (1H, m), 6.99 - 7.07 (1H, m), 7.21 - 7.37 (2H, m), 10.07 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 437. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-8-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (37 mg, 17%)의 회전 이성질체 2가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.33 - 2.46 (1H, m), 2.65 - 2.80 (1H, m), 2.81 - 2.98 (2H, m), 3.03 - 3.18 (1H, m), 3.66 - 3.79 (2H, m), 3.81 - 4.11 (3H, m), 4.31 - 4.47 (1H, m), 5.64 - 5.77 (1H, m), 6.08 - 6.18 (1H, m), 6.73 - 6.91 (1H, m), 6.87 - 7.05 (2H, m), 7.22 - 7.36 (2H, m), 10.05 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 437.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -8-( 프로프 -1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00318
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2 g, 3.79 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (0.219 g, 0.19 mmol) 및 요오드화구리(I) (0.217 g, 1.14 mmol)를 톨루엔 (31.4 mL)에 현탁시키고, 트리에틸아민 (1.745 mL, 12.52 mmol)을 첨가하였다. 그 후 1-(트리메틸실릴)프로핀 (0.618 mL, 4.17 mmol) 및 THF 중 1 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (4.17 mL, 4.17 mmol)를 연속적으로 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반시켰다. 추가의 1-(트리메틸실릴)프로핀 (0.618 mL, 4.17 mmol) 및 THF 중 1 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 용액 (4.17 mL, 4.17 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 상기 혼합물을 디에틸 에테르로 희석시키고, 짧은 셀라이트 패드를 통하여 여과시키고, 여과액을 감압 하에 농축시켰다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.47 g, 88%)를 갈색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.10 (3H, s), 2.33 (1H, ddd), 2.63 - 2.78 (2H, m), 2.89 (1H, s), 3.12 (1H, ddd), 3.56 (2H, t), 3.63 - 3.85 (3H, m), 4.33 (1H, dd), 7.27 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 439.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00319
1,4-디옥산 (28.4 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.47 g, 3.35 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (0.865 g, 5.02 mmol) 및 수성 2 M 탄산나트륨 (5.02 mL, 10.04 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 탈기시켰다. RuPhos-Pd-G3 (0.280 g, 0.33 mmol) 및 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (0.156 g, 0.33 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 증발시키고, 물 및 DCM을 첨가하고, 유기 층을 포화 염수로 세척하였다. 유기 층을 상 전이 카트리지에 통과시킴으로써 건조시켰다. 증발에 의해 조 생성물을 검으로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~10% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 황색 폼 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.43 g, 88%)를 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 487.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-10- 플루오로 -8-( 프로프 -1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 회전 이성질체 1 및 2
Figure pct00320
Tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.43 g, 2.94 mmol)를 DCM (20 mL)에 용해시키고, TFA (6.74 mL, 88.10 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 조 반응 혼합물을 정제하였다. 1 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 조 생성물 3-클로로-2-[(12aR)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (1.014 g, 89%)을 황색 폼으로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 387. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters CSH C18 OBD 컬럼, 30 x 100 mm 내경, 5 마이크론의 입자 크기)에 의해 이것을 정제하였다. 얕은 구배: 20~40% MeCN. 검출 UV: 254 nm. 아세토니트릴을 증발에 의해 제거하고, 생성된 수성 현탁물을 DCM으로 추출하고, 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시켰다. 증발에 의해 첫 번째의, 3-클로로-2-[(12aR)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀의 회전 이성질체 1 (0.272 g, 27%)을 황색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.79 (3H, s), 2.05 (1H, d), 2.23 - 2.38 (2H, m), 2.57 - 2.69 (2H, m), 2.69 - 2.82 (3H, m), 3.59 - 3.8 (3H, m), 4.24 (1H, dd), 6.88 (1H, dd), 6.98 (1H, dd), 7.15 - 7.18 (1H, m), 7.22 (1H, t), 9.81 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 387. 이것에 이어서 3-클로로-2-[(12aR)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀의 회전 이성질체 2 (0.271 g, 27%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.79 (3H, s), 2.13 (1H, s), 2.26 - 2.38 (2H, m), 2.57 - 2.68 (2H, m), 2.76 (3H, ddd), 3.61 (1H, d), 3.66 - 3.8 (2H, m), 4.24 (1H, dd), 6.89 (1H, dd), 6.97 (1H, dd), 7.16 - 7.18 (1H, m), 7.22 (1H, t), 9.82 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 387.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-10- 플루오로 -8-( 프로프 -1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 85
Figure pct00321
질소 하에 0℃에서 DCM (2 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (0.272 g, 0.70 mmol) 및 DIPEA (0.159 mL, 0.91 mmol)의 현탁물에 아크릴로일 클로라이드 (0.061 mL, 0.77 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 증발시켜 (40℃ 수조) 황색 오일을 수득하였다. 상기 오일을 저온 7 N NH3/MeOH (10 mL)에 용해시켰다. 생성된 용액을 30분에 걸쳐 실온까지 교반시켰다. 40℃에서의 증발에 의해 조 생성물을 황색 검으로 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters CSH C18 OBD 컬럼, 30 x 100 mm 내경, 5 마이크론의 입자 크기)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 얕은 구배: 20~45% MeCN. 검출 UV: 254 nm. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.188 g, 61%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.79 (3H, s), 2.41 (1H, s), 2.62 - 2.78 (1H, m), 2.79 - 2.91 (2H, m), 3.10 (1H, s), 3.64 - 3.79 (2H, m), 3.87 (2H, d), 4.03 (1H, d), 4.37 (1H, d), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.93 (3H, ddd), 7.21 (2H, dd), 9.82 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 441.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-10- 플루오로 -8-( 프로프 -1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2, 실시예 86
Figure pct00322
질소 하에 0℃에서 DCM (2 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (0.271 g, 0.70 mmol) 및 DIPEA (0.159 mL, 0.91 mmol)의 현탁물에 아크릴로일 클로라이드 (0.061 mL, 0.77 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 증발시켜 (40℃ 수조) 황색 오일을 수득하였다. 상기 오일을 저온 7 N NH3/MeOH (10 mL)에 용해시켰다. 생성된 용액을 30분에 걸쳐 실온까지 교반시켰다. 40℃에서의 증발에 의해 조 생성물을 황색 검으로 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters CSH C18 OBD 컬럼, 30 x 100 mm 내경, 5 마이크론의 입자 크기)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 얕은 구배: 20~45% MeCN. 검출 UV: 254 nm. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (0.154 g, 50%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.79 (3H, s), 2.42 (1H, s), 2.63 - 2.77 (1H, m), 2.87 (2H, t), 3.09 (1H, s), 3.73 (2H, dd), 3.89 (2H, d), 4.01 (1H, d), 4.37 (1H, d), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.74 - 7.01 (3H, m), 7.12 - 7.26 (2H, m), 9.86 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 441.
Tert -부틸 (3 R )-4-(5- 브로모 -3- 플루오로피리딘 -2-카르보닐)-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00323
HATU (20.73 g, 54.55 mmol)를 실온에서 THF (200 mL) 중 5-브로모-3-플루오로피리딘-2-카르복실산 (10 g, 45.46 mmol), tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (10.81 g, 50 mmol) 및 DIPEA (18.06 mL, 104.55 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 교반시키고, EtOAc (150 mL) 및 물 (150 mL)로 희석시키고, 그 후 EtOAc (100 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 물 (150 mL) 및 염수 (150 mL)로 세척하였다. 그 후 유기 층을 무수 MgSO4로 건조시키고, 여과시키고, 압력 하에 감소시켜 조 생성물을 갈색 오일로 수득하였다. 그 후 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (3R)-4-(5-브로모-3-플루오로피리딘-2-카르보닐)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (20.8 g, >100%)를 담황색 검으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, d), 2.74 - 3.27 (4H, m), 3.32 - 3.81 (3H, m), 3.91 (1H, d), 4.22 - 4.55 (1H, m), 4.66 - 5.03 (1H, m), 8.31 - 8.41 (1H, m), 8.59 - 8.67 (1H, m). m/z: ES+ [M-tBu]+ 364.
Tert -부틸 ( 6a R )-3- 브로모 -12-옥소- 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H - 피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ] [1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00324
Tert-부틸 (3R)-4-(5-브로모-3-플루오로피리딘-2-카르보닐)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (0.1 g, 0.24 mmol)를 질소 하에 아세토니트릴 (2 mL)에 용해시키고, 탄산세슘 (0.078 g, 0.24 mmol)을 한꺼번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시키고, 그 후 80℃에서 하룻밤 가열하였다. 반응 혼합물을 MeCN (10 mL)으로 희석시키고, 여과시키고, 압력 하에 감소시켜 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-12-옥소-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.103 g, >100%)를 갈색 검으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.43 (1H, s), 3.54 - 3.59 (3H, m), 3.72 - 3.83 (1H, m), 3.83 - 3.93 (1H, m), 3.98 - 4.04 (1H, m), 4.21 - 4.35 (2H, m), 7.94 (1H, d), 8.61 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 398.
Tert -부틸 ( 6a R )-3- 브로모 - 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H - 피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ] [1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00325
Tert-부틸 (6aR)-3-브로모-12-옥소-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (8.7 g, 21.85 mmol)를 THF (200 mL)에 용해시키고, THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (65.5 mL, 65.54 mmol)을 첨가하고(실온에서), 상기 혼합물을 75℃에서 10분 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 발포가 중단될 때까지 포화 염화암모늄 수용액 (150 mL)을 적가하였다. 상기 혼합물을 EtOAc (2 x 200 mL)로 추출하고, 합한 유기물을 염수 (200 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 MgSO4로 건조시키고, 여과시키고, 가압 하에 농축시켜 조 생성물을 황색 폼으로 수득하였다. 조 생성물을 DCM에 용해시키고, 여과시켰다. 그 후 황색 여과액을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (4.35 g, 52%)를 무색 검으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.3 - 2.41 (1H, m), 2.62 - 2.71 (1H, m), 2.74 - 2.92 (2H, m), 3.04 (1H, t), 3.59 - 3.71 (2H, m), 3.72 - 3.83 (2H, m), 4.00 (1H, d), 4.31 (1H, dd), 7.68 (1H, d), 8.30 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 384.
Tert -부틸 ( 6a R )-3- 브로모 -4- 클로로 - 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H - 피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ] [1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00326
THF (200 mL) 중 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (7.94 g, 20.65 mmol)의 용액을 질소 하에 -50℃까지 냉각시키고, THF/톨루엔 중 1 M 2,2,6,6-테트라메틸피페리디닐마그네슘 클로라이드 염화리튬 착물 용액 (31 mL, 30.98 mmol)을 적가하였다. 상기 용액을 -40℃에서 0.5시간 동안 교반시켰다. 추가의, THF/톨루엔 중 1 M 2,2,6,6-테트라메틸피페리디닐마그네슘 클로라이드 염화리튬 착물 용액 (10 mL, 10 mmol)을 첨가하고, 상기 용액을 -40℃에서 0.5시간 동안 교반시켰다. 퍼클로로에탄 (7.33 g, 30.98 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 -40℃에서 0.5시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 수용액 (10 mL)의 첨가에 의해 0℃에서 켄칭하고, 물 (20 mL)로 희석시키고, EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 MgSO4로 건조시키고, 여과시키고, 가압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-4-클로로-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (6.8 g, 79%)를 백색 건조 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 2.35 - 2.44 (1H, m), 2.72 - 2.83 (2H, m), 2.87 (1H, s), 3.02 - 3.13 (1H, m), 3.63 (2H, dd), 3.79 (1H, d), 3.88 (1H, dd), 4.08 (1H, d), 4.43 (1H, dd), 8.45 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 418.
Tert -부틸 ( 6a R )-3- 브로모 -4- 클로로 -2- 요오도 - 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00327
THF (50 mL) 중 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-4-클로로-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.562 g, 1.34 mmol)의 용액을 질소 하에 -50℃까지 냉각시키고, THF/톨루엔 중 1 M 2,2,6,6-테트라메틸피페리디닐마그네슘 클로라이드 염화리튬 착물 용액 (4.03 mL, 4.03 mmol)을 적가하였다. 상기 용액을 -40℃에서 0.5시간 동안 교반시켰다. 그 후 이요오드 (0.511 g, 2.01 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 -40℃~실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 추가의, THF/톨루엔 중 1 M 2,2,6,6-테트라메틸피페리디닐마그네슘 클로라이드 염화리튬 착물 용액 (4.03 mL, 4.03 mmol)을 -20℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 실온까지 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 수용액의 첨가에 의해 0℃에서 켄칭하고, EtOAc로 추출하고, 포화 염수로 세척하고, 증발시켰다. 수득된 황색 잔사를 DCM에 용해시키고, 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시켰다. 증발에 의해 조 생성물을 황색 검으로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-4-클로로-2-요오도-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.66 g, 90%)를 황색 검으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.46 (9H, s), 2.51 (1H, ddd), 2.72 - 2.92 (2H, m), 2.99 (1H, s), 3.15 - 3.31 (1H, m), 3.65 - 3.75 (2H, m), 3.78 - 3.87 (1H, m), 3.90 (1H, d), 4.02 (1H, d), 4.32 (1H, dt). m/z: ES+ [M+H]+ = 544.
Tert -부틸 (6a R )-3-브로모-4-클로로-2-[(트리메틸실릴)에티닐]-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00328
Tert-부틸 (6aR)-3-브로모-4-클로로-2-요오도-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.645 g, 1.18 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (0.274 g, 0.24 mmol) 및 요오드화구리(I) (0.226 g, 1.18 mmol)를 질소 하에 실온에서 톨루엔 (11 mL)에 현탁시켰다. 에티닐트리메틸실란 (0.819 mL, 5.92 mmol) 및 트리에틸아민 (0.33 mL, 2.37 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 10분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 셀라이트 층을 통하여 여과시키고, 디에틸 에테르로 세척하였다. 증발에 의해 조 생성물을 오일로 수득하였다. 조 생성물을 DCM에 용해시키고, 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하여 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-4-클로로-2-[(트리메틸실릴)에티닐]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.375 g, 61%)를 황색 검으로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 544.
Tert -부틸 (6a R )-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-[(트리메틸실릴)에티닐]-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00329
tert-부틸 (6aR)-3-브로모-4-클로로-2-[(트리메틸실릴)에티닐]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.369 g, 0.72 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (0.247 g, 1.43 mmol), 2 M 수성 탄산나트륨 (1.075 mL, 2.15 mmol) 및 2-메틸-THF (10 mL)의 용액을 질소로 15분 동안 탈기시켰다. RuPhos-Pd-G3 (0.060 g, 0.07 mmol) 및 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (0.033 g, 0.07 mmol)을 첨가하고, 그 후 반응 혼합물을 90℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물은 하룻밤 정치시에 실온까지 냉각되었으며, 물을 첨가하고, EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 포화 염수로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시킴으로써 건조시켰다. 증발에 의해 조 생성물을 황색 검으로 수득하였다. 그 후 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 합하고, 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-[(트리메틸실릴)에티닐]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.16 g, 39%)를 황색 폼으로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 562.
3- 클로로 -2-{( 6a R )-4- 클로로 -2-[( 트리메틸실릴 ) 에티닐 ]-6, 6a,7 ,8,9,10- 헥사히드로 -12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-3-일}페놀
Figure pct00330
Tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-[(트리메틸실릴)에티닐]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.156 g, 0.28 mmol)을 DCM (5 mL)에 용해시키고, TFA (2.12 mL, 27.73 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 1시간 동안 교반시키고, 그 후 60℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 반응 혼합물을 정제하였다. 1 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-{(6aR)-4-클로로-2-[(트리메틸실릴)에티닐]-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-3-일}페놀 (0.153 g, >100%)을 황색 폼으로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 462.
3- 클로로 -2-[( 6a R )-4- 클로로 -2- 에티닐 -6, 6a,7 ,8,9,10- 헥사히드로 -12 H - 피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ] [1,4]옥사제핀-3-일]페놀
Figure pct00331
MeOH (5 mL) 중 3-클로로-2-{(6aR)-4-클로로-2-[(트리메틸실릴)에티닐]-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-3-일}페놀 (0.155 g, 0.34 mmol) 및 탄산칼륨 (0.139 g, 1.01 mmol)의 현탁물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 물을 반응 혼합물에 첨가하고, 생성된 용액을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 1 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(6aR)-4-클로로-2-에티닐-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-3-일]페놀 (0.164g, >100%)를 황색 폼으로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 390.
1-[( 6a R )-4- 클로로 -3-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-2- 에티닐 - 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 87 및 회전 이성질체 2, 실시예 88
Figure pct00332
질소 하에 0℃에서 DCM (2 mL) 및 DMF (0.5 mL) 중 3-클로로-2-[(6aR)-4-클로로-2-에티닐-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-3-일]페놀 (0.164 g, 0.42 mmol) 및 DIPEA (0.095 mL, 0.55 mmol)의 현탁물에 아크릴로일 클로라이드 (0.037 mL, 0.46 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 증발시켜 (40℃ 수조) 황색 오일을 수득하였다. 이 오일을 저온 7 N NH3/MeOH (10 mL)에 용해시키고, 생성된 용액을 30분에 걸쳐 실온까지 교반시켰다. 40℃에서의 증발에 의해 조 생성물을 황색 DMF 용액으로 수득하였다. 용출제로서 물 (1 부피%의 NH4OH (H2O 중 28~30%)를 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters CSH C18 OBD 컬럼, 30 x 100 mm 내경, 5 마이크론의 입자 크기)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 얕은 구배: 10~30% MeCN. 검출 UV: 254 nm. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-에티닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.018 g, 10%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.75 (1H, td), 2.91 (2H, dd), 3.02 (1H, s), 3.24 (1H, d), 3.58 (1H, s), 3.79 - 3.98 (3H, m), 4.17 (2H, d), 4.52 (1H, s), 5.74 (1H, d), 6.14 (1H, d), 6.71 - 6.92 (2H, m), 6.96 (1H, d), 7.24 (1H, t), 10.01 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 444. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-에티닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (0.047 g, 25%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.76 (1H, s), 2.94 (2H, d), 3.16 (1H, s), 3.30 (1H, s), 3.75 - 4.05 (4H, m), 4.1 - 4.27 (2H, m), 4.55 (1H, s), 5.72 (1H, s), 6.14 (1H, d), 6.84 (1H, s), 6.92 (1H, d), 6.96 - 7.04 (1H, m), 7.27 (1H, t), 9.98 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 444.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -2- 플루오로 -3- 메틸벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00333
DIPEA (33.7 mL, 193.10 mmol)를 0℃에서 DMF (200 mL) 중 4-브로모-2-플루오로-3-메틸벤조산 (15 g, 64.37 mmol), tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (13.92 g, 64.37 mmol) 및 HATU (36.70 g, 96.55 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (500 mL)로 희석시키고, 0.5 M 시트르산 (500 mL x 3), 물 (500 mL x 3) 및 포화 염수 (500 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 EtOAc/MeCN (200 mL)(100:1의 비)로부터의 결정화에 의해 정제하여 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2-플루오로-3-메틸벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (26.7 g, 96%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.38 (9H, s), 2.28 (3H, d), 2.64 - 3.01 (3H, m), 3.04 - 3.24 (1H, m), 3.44 - 3.24 (1H, m), 3.82 - 3.88(1H, m), 3.92 - 4.12 (1H, m), 4.18 - 4.56 (1H, m), 4.76 - 4.98 (1H, m), 7.13 - 7.19 (1H, m), 7.51 - 7.61 (1H, m). m/z: ES+ [M+Na]+ = 453.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 메틸 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00334
수소화나트륨 (5.56 g, 139.11 mmol)을 0℃에서 DMF (200 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2-플루오로-3-메틸벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (20 g, 46.37 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물에 부었다. 형성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-메틸-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (16 g, 84%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.29 (3H, s), 3.38 - 3.50 (2H, m), 3.53 (2H, d), 3.62 - 3.77 (1H, m), 3.77 - 3.94 (2H, m), 4.23 (2H, d), 7.37 (1H, d), 7.46 (1H, d). m/z: ES+ [M-Boc]+ = 355.
( 12a R )-9- 브로모 -8- 요오도 -10- 메틸 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -6-온
Figure pct00335
1-요오도피롤리딘-2,5-디온 (16.41 g, 72.94 mmol)을 0℃에서 진한 황산 (50 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-메틸-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (10 g, 24.31 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물에 붓고, 2 M NaOH로 염기성으로 만들었다. 상기 혼합물을 DCM (500 mL)으로 희석시키고, 2 M Na2S2O3 (500 mL x 2), 포화 염수 (500 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 생성물 (12aR)-9-브로모-8-요오도-10-메틸-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (6.7 g, 63%)을 적색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.41 (3H, s), 2.64 - 2.83 (2H, m), 2.84 - 3.01 (2H, m), 3.43 - 3.68 (2H, m), 3.72 - 3.84 (2H, m), 4.13 (1H, dd), 4.59 (1H, t), 8.02 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 437.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 요오도 -10- 메틸 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00336
디-tert-부틸 디카르보네이트 (2.87 mL, 12.35 mmol)를 0℃까지 냉각시킨 DCM (50 mL) 중 (12aR)-9-브로모-8-요오도-10-메틸-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (4.5 g, 10.3 mmol) 및 트리에틸아민 (4.31 mL, 30.89 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM (50 mL)으로 희석시키고, 물 (100 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~40% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-요오도-10-메틸-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (5.2 g, 94%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 2.42 (3H, s), 3.41 - 3.60 (4H, m), 3.66 - 3.79 (1H, m), 3.80 - 3.97 (2H, m), 4.25 (2H, d), 7.96 (1H, s). m/z: ES+ [M-tBu]+ = 481.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8- 요오도 -10- 메틸 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00337
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-요오도-10-메틸-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3 g, 5.58 mmol)를 질소 하에 실온에서 THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (30 mL, 30 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 60℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (30 mL)로 켄칭하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~50% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-요오도-10-메틸-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2.9 g, 99%)를 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3, 30℃) 1.41 (9H, s), 2.40 - 2.43 (1H, m), 2.43 (3H, s), 2.69 - 2.96 (3H, m), 3.17 - 3.30 (1H, m), 3.43 (1H, d), 3.52 - 3.76 (3H, m), 3.84 (1H, d), 4.21 (1H, dd), 7.56 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 523.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 메틸 -8-[( 트리메틸실릴 ) 에티닐 ]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00338
질소 하에 밀봉 튜브에서 트리에틸아민 (1.598 mL, 11.47 mmol)을 톨루엔 (20 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-요오도-10-메틸-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.5 g, 2.87 mmol), 에티닐트리메틸실란 (1.126 g, 11.47 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (0.331 g, 0.29 mmol) 및 요오드화구리(I) (0.546 g, 2.87 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 6시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~40% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-메틸-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.1 g, 78%)을 갈색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3, 30℃) 0.27 (9H, s), 1.46 (9H, s), 2.35 (3H, s), 2.38 - 2.47 (1H, m), 2.70 - 2.99 (3H, m), 3.21 - 3.36 (1H, m), 3.51 (1H, d), 3.57 - 3.76 (3H, m), 3.89 (1H, d), 4.24 (1H, d), 7.22 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 493.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-메틸-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00339
질소 하에 물 (4 mL) 중 탄산칼륨 (252 mg, 1.82 mmol)의 용액을 1,4-디옥산 (20 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-메틸-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (900 mg, 1.82 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (943 mg, 5.47 mmol), RuPhos-Pd-G3 (139 mg, 0.18 mmol) 및 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (85 mg, 0.18 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 직접적으로 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 중 0~80% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-메틸-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.57 g, 58%)을 갈색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) -0.06 (9H, s), 1.40 (9H, s), 1.85 (3H, s), 2.22 - 2.41 (1H, m), 2.58 - 2.87 (4H, m), 2.97 - 3.12 (1H, m), 3.50 - 3.71 (3H, m), 3.71 - 3.84 (1H, m), 4.29 (1H, d), 6.81 - 6.92 (1H, m), 6.92 -7.01 (1H, m), 7.18 (1H, t), 7.24 (1H, s), 9.60 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 541.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-메틸-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00340
Cs2CO3 (2258 mg, 6.93 mmol)을 MeOH (20 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-메틸-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (750 mg, 1.39 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시키고, EtOAc (50 mL)에 용해시키고, 물 (50 mL x 3) 및 포화 염수 (50 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-메틸-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.6 g, 92%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 1.81 (3H, s), 2.31 (1H, t), 2.56 - 2.88 (3H, m), 2.90 - 3.12 (1H, m), 3.45 - 3.59 (1H, m), 3.59 - 3.69 (3H, m), 3.72 - 3.81 (1H, m), 4.29 (1H, d), 5.76 (1H, s), 6.83 - 6.91 (1H, m), 6.93 - 7.00 (1H, m), 7.14 - 7.26 (1H, m), 7.26 - 7.35 (1H, m), 9.60 - 9.76 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 469.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-8- 에티닐 -10- 메틸 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -9-일]페놀
Figure pct00341
Tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-메틸-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (550 mg, 1.17 mmol)를 DCM (5 mL) 중 TFA (1 mL, 12.98 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-8-에티닐-10-메틸-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (0.32 g, 74%)을 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.82 (3H, d), 2.20 - 2.33 (2H, m), 2.55 - 2.70 (1H, m), 2.70 - 2.89 (4H, m), 3.44 - 3.61 (2H, m), 3.62 - 3.73 (2H, m), 4.13 - 4.28 (1H, m), 6.81 - 6.92 (1H, m), 6.92 - 7.04 (1H, m), 7.14 - 7.30 (2H, m) 2개의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 369.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8- 에티닐 -10- 메틸 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 89 및 회전 이성질체 2, 실시예 90
Figure pct00342
아크릴로일 클로라이드 (66.2 mg, 0.73 mmol)를 DMF (6 mL) 중 DIPEA (142 μl, 0.81 mmol) 및 3-클로로-2-[(12aR)-8-에티닐-10-메틸-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (300 mg, 0.81 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 켄칭하고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 갈색 검으로 수득하였다. 용출제로서 물 (10 mmol/L의 NH4HCO3 + 0.1%NH3.H2O를 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 μ 실리카, 19 mm 직경, 150 mm 길이)로 조 생성물을 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-메틸-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.055 g, 16%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.82 (3H, s), 2.23 - 2.44 (1H, m), 2.59 - 2.75 (1H, m), 2.75 - 2.92 (2H, m), 2.95 - 3.15 (1H, m), 3.47 - 3.60 (1H, m), 3.61 - 3.82 (3H, m), 3.82 - 3.96 (1H, m), 3.95 - 4.19 (1H, m), 4.34 (1H, t), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.71 - 6.92 (2H, m), 6.96 (1H, d), 7.18 (1H, t), 7.28 (1H, s), 9.68 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 423. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-메틸-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (0.058 g, 17%)가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.82 (3H, s), 2.25 - 2.44 (1H, m), 2.62 - 2.76 (1H, m), 2.76 - 2.93 (2H, m), 2.94 - 3.15 (1H, m), 3.50 - 3.70 (2H, m), 3.71 (1H, s), 3.75 - 3.95 (2H, m), 3.95 - 4.15 (1H, m), 4.34 (1H, t), 5.69 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.72 - 6.92 (2H, m), 6.95 (1H, d), 7.18 (1H, t), 7.29 (1H, s), 9.66 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 423.
Tert -부틸 ( 3a R )-1- 옥소테트라히드로 -1 H - 1λ 4 - [1,2,3]옥사티아졸로[3,4- a ]피라진 -5(3 H )-카르복실레이트
Figure pct00343
티오닐 클로라이드 (14.17 mL, 194.19 mmol)를 0℃에서 DCM (180 mL) 중 이미다졸 (43.9 g, 644.99 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 -78℃까지 냉각시켰다. DCM (180 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (15 g, 69.35 mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온까지 가온하고, 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (200 mL)로 켄칭하고, DCM (2 x 200 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 tert-부틸 (3aR)-1-옥소테트라히드로-1H-1λ4-[1,2,3]옥사티아졸로[3,4-a]피라진-5(3H)-카르복실레이트 (11.4 g, 63%)를 황색 고형물로 수득하였다. ((3R)-4-(4-브로모-5-클로로-2,3-디플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (2.3 g, 27%)을 황색 고형물로서). 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.46 (9H, s), 2.67 - 2.70 (1H, m), 2.81 - 2.90 (1H, m), 2.95 - 3.01 (1H, m), 3.23 - 3.40 (1H, m), 3.59 - 3.62 (1H, m), 3.87 - 3.92 (1H, m), 4.19 - 4.23 (1H, m), 4.43 - 4.62 (1H, m), 4.76 - 4.90 (1H, m). m/z: [M-tBu]+ = 207.
Tert -부틸 ( 3a R )-1,1- 디옥소테트라히드로 -1 H - 1λ 6 - [1,2,3]옥사티아졸로[3,4- a ]피라진 -5(3 H )-카르복실레이트
Figure pct00344
물 (100 mL) 중 과요오드산나트륨 (12.08 g, 56.5 mmol)의 용액을 0℃의 아세토니트릴 (300 mL) 및 에틸 아세테이트 (50 mL) 중 tert-부틸 (3aR)-1-옥소테트라히드로-1H-1λ4-[1,2,3]옥사티아졸로[3,4-a]피라진-5(3H)-카르복실레이트 (11.4 g, 43.46 mmol)의 교반 용액에 적가하고, 이어서 염화루테늄(III) (0.018 g, 0.09 mmol)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl (200 mL)로 켄칭하고, DCM (2 x 200 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 tert-부틸 tert-부틸 (3aR)-1,1-디옥소테트라히드로-1H-1λ6-[1,2,3]옥사티아졸로[3,4-a]피라진-5(3H)-카르복실레이트 (9.5 g, 79%)를 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.48 (9H, s), 2.96 - 3.05 (2H, m), 3.13 - 3.20 (1H, m), 3.45 - 3.60 (1H, m), 3.64 - 3.72 (1H, m), 4.08 - 4.12 (1H, m), 4.24 - 4.31 (2H, m), 4.64 - 4.70 (1H, m).
3- 클로로 -5,6- 디플루오로 -2- 메톡시벤조산
Figure pct00345
1-클로로피롤리딘-2,5-디온 (51.50 g, 385.37 mmol)을 실온에서 DMF (300 mL) 중 2,3-디플루오로-6-메톡시벤조산 (29 g, 154.15 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (500 mL)로 희석시키고, 순차적으로 포화 염수 (400 mL x 6)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~50% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-5,6-디플루오로-2-메톡시벤조산 (20 g, 58%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.50 - 4.04 (3H, s), 7.13 - 8.24 (1H, d) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음.
3- 클로로 -5,6- 디플루오로 -4- 요오도 -2- 메톡시벤조산
Figure pct00346
THF/톨루엔 중 1 M 2,2,6,6-테트라메틸피페리디닐마그네슘 클로라이드 염화리튬 착물 용액 (162 mL, 161.75 mmol)을 질소 분위기 하에 -40℃에서 THF (120 mL) 중 3-클로로-5,6-디플루오로-2-메톡시벤조산 (9 g, 40.44 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -50℃에서 30분 동안 교반시켰다. 그 후 THF (20 mL) 중 이요오드 (41.1 g, 161.75 mmol)를 질소 하에 -40℃에서 상기 혼합물에 첨가하였다. 생성된 용액을 -50℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (100 mL)로 켄칭하고, DCM (200 mL x 5)으로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 갈색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 5~60% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-5,6-디플루오로-4-요오도-2-메톡시벤조산 (7 g, 50%)을 백색 고형물로 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.82 (3H, s) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음.
3- 클로로 -5,6- 디플루오로 -2-히드록시-4- 요오도벤조산
Figure pct00347
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 용액 (20.09 mL, 20.09 mmol)을 0℃에서 DCM (10 mL) 중 3-클로로-5,6-디플루오로-4-요오도-2-메톡시벤조산 (7 g, 20.09 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl (20 mL)로 켄칭하고, DCM (200 mL x 2)으로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 3-클로로-5,6-디플루오로-2-히드록시-4-요오도벤조산 (5 g, 74%)을 갈색 고형물로 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.
메틸 3- 클로로 -5,6- 디플루오로 -2-히드록시-4- 요오도벤조에이트
Figure pct00348
진한 황산 (0.797 mL, 14.95 mmol)을 MeOH (150 mL) 중 3-클로로-5,6-디플루오로-2-히드록시-4-요오도벤조산 (5 g, 14.95 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 반응 혼합물을 얼음물에 붓고, EtOAc (200 mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 갈색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~10% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 메틸 3-클로로-5,6-디플루오로-2-히드록시-4-요오도벤조에이트 (3.6 g, 69%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.90 (3H, s), 11.06 (1H, s).
2-{[(2 R )-4-( Tert - 부톡시카르보닐 )피페라진-2-일] 메톡시 }-3- 클로로 -5,6- 디플루오로 -4-요오도벤조산
Figure pct00349
수소화나트륨 (0.826 g, 20.66 mmol)을 0℃에서 DMF (30 mL) 중 메틸 3-클로로-5,6-디플루오로-2-히드록시-4-요오도벤조에이트 (2.4 g, 6.89 mmol) 및 tert-부틸 (3aR)-1,1-디옥소테트라히드로-1H-1λ6-[1,2,3]옥사티아졸로[3,4-a]피라진-5(3H)-카르복실레이트 (5.75 g, 20.66 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 40분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물에 붓고, EtOAc (150 mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 포화 염수 (100 mL)로 세척하고, 그 후 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 황색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 5~40% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 2-{[(2R)-4-(tert-부톡시카르보닐)피페라진-2-일]메톡시}-3-클로로-5,6-디플루오로-4-요오도벤조산 (1.5 g, 41%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.37 (9H, s), 2.14 (1H, d), 2.73 - 2.76 (2H, m), 2.89 - 2.96 (2H, m), 3.08 - 3.20 (2H, m), 3.64 - 3.78 (1H, m), 3.85 - 4.26 (2H, m) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M-tBu]+ = 477.
Tert -부틸 ( 12a R )-10- 클로로 -7,8- 디플루오로 -9- 요오도 -6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00350
DIPEA (0.738 mL, 4.22 mmol)를 질소 하에 DMF (4 mL) 중 (2-{[(2R)-4-(tert-부톡시카르보닐)피페라진-2-일]메톡시}-3-클로로-5,6-디플루오로-4-요오도벤조산 (750 mg, 1.41 mmol) 및 HATU (1071 mg, 2.82 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, EtOAc (3 x 150 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 포화 염수 (5 x 100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 갈색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~20% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-7,8-디플루오로-9-요오도-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (660 mg, 91%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.46 - 3.50 (1H, m), 3.60 - 3.74 (3H, m), 3.74 - 4.16 (3H, m), 4.22 - 4.30 (2H, m). m/z: ES+ [M-tBu]+ = 459.
Tert -부틸 ( 12a R )-10- 클로로 -7,8- 디플루오로 -9- 요오도 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00351
THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (6 mL, 6 mmol)을 실온에서 THF (6 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-7,8-디플루오로-9-요오도-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (650 mg, 1.26 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (10 mL)로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물 (70 mL)로 희석시키고, EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 백색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 5~80% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-7,8-디플루오로-9-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (500 mg, 79%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.38 (9H, s), 2.35 - 2.42 (1H, m), 2.78 - 2.88 (3H, m), 3.10 - 3.25 (1H, m), 3.56 - 3.60 (2H, m), 3.70 - 3.80 (2H, m), 3.93 - 3.96 (1H, m), 4.35 - 4.40 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 501.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,8-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00352
Tert-부틸 (12aR)-10-클로로-7,8-디플루오로-9-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (450 mg, 0.9 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (465 mg, 2.7 mmol) RuPhos-Pd-G3 (75 mg, 0.09 mmol), Na2CO3 (191 mg, 1.80 mmol) 및 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (84 mg, 0.18 mmol)을 1,4-디옥산 (16 mL) 및 H2O (4 mL)(4:1의 비)에 용해시키고, 그 후 마이크로웨이브 튜브에 넣어 밀봉하였다. 반응물을 마이크로웨이브 반응기에서 30분 동안 120℃까지 가열하고, 실온까지 냉각시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 5~50% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,8-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (374 mg, 83%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.42 (9H, s), 2.87 - 3.06 (2H, m), 3.14 - 3.20 (2H, m), 3.66 - 4.04 (4H, m), 4.28 - 4.31 (2H, m), 4.58 - 4.63 (1H, m), 6.94 (1H, d), 7.05 (1H, d), 7.32 (1H, t), 10.28 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 501.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-10- 클로로 -7,8- 디플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀
Figure pct00353
TFA (1 mL, 12.98 mmol)를 20℃에서 DCM (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,8-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (364 mg, 0.73 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-7,8-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (290 mg, 100%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.75 - 2.80 (1H, m), 2.86 - 2.90 (1H, m), 2.97 - 3.17 (3H, m), 3.27 - 3.41 (3H, m), 3.87 - 4.09 (3H, m), 4.47 (1H, d), 6.99 (2H, d), 7.31 (1H, d), 10.24 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 401.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-7,8- 디플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 91 및 회전 이성질체 2, 실시예 92
Figure pct00354
DIPEA (609 μl, 3.49 mmol) 및 아크릴로일 클로라이드 (63.2 mg, 0.70 mmol)를 질소 하에 -20℃에서 DMF (5 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-7,8-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (280 mg, 0.70 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (1 mL)로 켄칭하고, 직접적으로 분취용 HPLC (컬럼: Xselect CSH OBD 컬럼 30*150 mm 5 um; 이동상 A:물 (0.1%포름산), 이동상 B:MeCN; 유량:60 mL/분; 구배:35 B에서 9분 내에 45 B까지; 254;220 nm) 및 용출제로서 MeCN에 의해 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,8-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.041 g, 12%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.80 - 2.82 (1H, m), 2.91 - 2.95 (2H, m), 3.23 - 3.28 (2H, m), 3.74 - 3.98 (3H, m), 4.02 - 4.05 (2H, m), 4.45 - 4.50 (1H, m), 5.70 - 5.72 (1H, m), 6.18 - 7.21 (1H, m), 6.65 - 6.93 (1H, m), 6.99 (2H, d), 7.30 (1H, t), 10.45 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 455. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,8-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (0.074 g, 23%)의 회전 이성질체 2가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.80 - 2.82 (1H, m), 2.91 - 2.93 (2H, m), 3.23 - 3.26 (2H, m), 3.74 - 3.98 (3H, m), 4.02 - 4.23 (2H, m), 4.45 - 4.50 (1H, m), 5.70 - 5.73 (1H, m), 6.13 - 6.17 (1H, m), 6.65 - 6.93 (1H, m), 6.99 (2H, d), 7.30 (1H, t), 10.45 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 455.
4- 브로모 -2,3- 디플루오로 -5- 요오도벤조산
Figure pct00355
1-요오도피롤리딘-2,5-디온 (57.0 g, 253.16 mmol)을 0℃에서 4-브로모-2,3-디플루오로벤조산 (40 g, 168.78 mmol) 및 진한 황산 (160 mL)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물 (500 mL)에 붓고, EtOAc (2 x 400 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 4-브로모-2,3-디플루오로-5-요오도벤조산 (60 g, 98%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 8.04 - 8.19 (1H, m), 11.06 (1H, s). m/z: ES- [M-H]- = 361.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -2,3- 디플루오로 -5- 요오도벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00356
DIPEA (72.2 mL, 413.34 mmol)를 0℃의 DMF (500 mL) 중 4-브로모-2,3-디플루오로-5-요오도벤조산 (50 g, 137.78 mmol), tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (29.8 g, 137.78 mmol) 및 HATU (79.0 g, 206.67 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (1000 mL)로 희석시키고, 물 (1000 mL) 및 포화 염수 (750 mL x 3)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,3-디플루오로-5-요오도벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (70 g, 91%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.38 (9H, s), 3.05 - 3.24 (2H, m), 3.40 - 3.68 (3H, m), 3.69 - 3.90 (1H, m), 4.17 - 4.55 (2H, m), 4.77 - 5.00 (1H, m), 8.11 - 8.28 (1H, m) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 561.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -8- 요오도 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00357
수소화나트륨 (8.55 g, 213.84 mmol)을 0℃의 DMF (600 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,3-디플루오로-5-요오도벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (60 g, 106.92 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물로 켄칭하였다. 상기 혼합물을 EtOAc (1000 mL)로 희석시키고, 물 (1000 mL) 및 포화 염수 (750 mL x 2)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~25% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-요오도-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (42 g, 73%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.38 - 3.55 (3H, m), 3.61 - 3.81 (2H, m), 3.84 - 3.97 (1H, m), 3.98 - 4.09 (1H, m), 4.31 - 4.42 (2H, m), 8.00 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 541.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -8- 메톡시 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00358
요오드화구리 (I) (0.352 g, 1.85 mmol)를 MeOH (160 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-요오도-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4] 벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (10 g, 18.48 mmol), N 1,N 2-비스(4-히드록시-2,6-디메틸페닐)에탄디아미드 (0.607 g, 1.85 mmol) 및 Cs2CO3 (18.06 g, 55.44 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석시키고, 물 (150 mL) 및 포화 염수 (150 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~40% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (R)-9-브로모-10-플루오로-8-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3.9 g, 47%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.42 - 3.67 (5H, m), 3.83 - 3.86 (1H, m), 3.89 (3H, s), 3.92 - 4.01 (1H, m), 4.17 - 4.30 (2H, m), 7.11 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 445.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -8-히드록시-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-6-온
Figure pct00359
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 용액 (62.9 mL, 62.88 mmol)을 0℃의 DCM (20 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (3.5 g, 7.86 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (25 mL)로 켄칭하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 ((12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-히드록시-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (2.5 g, 96%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 3.21 - 3.25 (3H, m), 3.33 - 3.50 (1H, m), 3.73 - 3.84 (1H, m), 3.84 - 3.95 (1H, m), 4.01 - 4.12 (1H, m), 4.13 - 4.27 (2H, m), 7.28 (1H, s), 9.11 - 9.19 (1H, s), 9.19 - 9.30 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 331.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -8-히드록시-6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00360
디-tert-부틸 디카르보네이트 (1.648 g, 7.55 mmol)를 질소 하에 0℃에서 DCM (75 mL) 중 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-히드록시-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (2.5 g, 7.55 mmol) 및 트리에틸아민 (6.31 mL, 45.30 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM (100 mL)으로 희석시키고, 5% 수성 시트르산 (200 mL x 2) 및 포화 염수 (200 mL x 2)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~30% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-히드록시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.7 g, 52%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 3.30 - 3.31 (2H, m), 3.43 - 3.52 (2H, m), 3.52 - 3.60 (1H, m), 3.68 - 3.90 (1H, m), 3.92 - 4.01 (1H, m), 4.12 - 4.25 (2H, m), 7.02 (1H, s), 10.76 - 10.81 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 431.
Tert -부틸 (12a R )-9-브로모-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00361
디플루오로메틸 트리플레이트 (0.791 mL, 6.26 mmol)를 0℃의 CH3CN (8 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-히드록시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (900 mg, 2.09 mmol) 및 6 M KOH (8 mL, 48.00 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (80 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL x 3), 및 포화 염수 (25 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (950 mg, 95%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.50 (9H, s), 3.53 - 3.70 (3H, m), 3.71 - 3.78 (1H, m), 3.80 - 3.88 (1H, m), 3.90 - 4.02 (1H, m), 4.10 - 4.15 (1H, m), 4.28 - 4.35 (1H, m), 4.35 - 4.49 (1H, m), 6.36 - 6.80 (1H, m), 7.57 (1H, s). m/z: ES+ [M-tBu]+ = 425.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00362
2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (87 mg, 0.19 mmol) 및 RuPhos-Pd-G3 (156 mg, 0.19 mmol)을 질소 하에 25℃에서 1,4-디옥산 (20 mL) 및 물 (5 mL)(4:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (900 mg, 1.87 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (645 mg, 3.74 mmol) 및 K2CO3 (517 mg, 3.74 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 8시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 직접적으로 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~100% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (380 mg, 38%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.42 (9H, s), 3.40 - 3.61 (3H, m), 3.69 - 3.83 (2H, m), 3.94 - 4.13 (2H, m), 4.32 - 4.44 (2H, m), 6.90 - 6.95 (1H, m), 7.00 - 7.05 (1H, m), 7.11 - 7.32 (2H, m), 7.42 (1H, s), 10.20 (1H, s). m/z: ES+ [M-tBu]+ = 473.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00363
THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (4mL, 4 mmol)을 질소 하에 25℃에서 THF (4 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (350 mg, 0.66 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (10 mL)로 켄칭하고, EtOAc (3 x 25 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (320 mg, 94%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.29 - 2.41 (1H, m), 2.63 - 2.87 (4H, m), 2.99 - 3.09 (1H, m), 3.57 - 3.66 (2H, m), 3.70 - 3.78 (1H, m), 3.84 - 3.95 (1H, m), 4.29 - 4.34 (1H, m), 6.47 - 6.59 (1H, m), 6.87 - 6.94 (1H, m), 6.95 - 6.99 (1H, m), 7.01 - 7.04 (1H, m), 7.21 - 7.29 (1H, m), 10.06 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 515.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-8-( 디플루오로메톡시 )-10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀
Figure pct00364
TFA (0.8 mL, 10.38 mmol)를 25℃에서 DCM (4 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (350mg, 0.68 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (230 mg, 82%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.29 - 2.37 (2H, m), 2.59 - 2.71 (2H, m), 2.72 - 2.88 (3H, m), 3.60 - 3.69 (2H, m), 3.76 - 3.85 (1H, m), 4.19 - 4.32 (1H, m), 6.88 - 6.93 (1H, m), 6.95 - 6.99 (1H, m), 6.99 - 7.04 (2H, m), 7.22 - 7.29 (1H, m) 2개의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 415.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8-( 디플루오로메톡시 )-10- 플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 93 및 회전 이성질체 2, 실시예 94
Figure pct00365
DIPEA (185 μl, 1.06 mmol) 및 아크릴로일 클로라이드 (48.0 mg, 0.53 mmol)를 질소 하에 -20℃에서 DMF (2.5 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (220 mg, 0.53 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 정밀여과막을 통하여 여과시켰다. 여과액을 분취용 HPLC로 정제하였다 (컬럼: Xselect CSH OBD 컬럼 30*150 mm 5 um; 이동상 A:물 (0.1%포름산), 이동상 B:MeCN; 유량:60 mL/분; 구배:26 B에서 9분 내에 36 B까지; 254;220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.036 g, 14%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.34 - 2.45 (1H, m), 2.63 - 2.92 ( H, m), 2.97 - 3.12 (1H, m), 3.62 - 3.71 (1H, m), 3.73 - 3.82 (1H, m), 3.83 - 3.98 (2H, m), 3.98 - 4.16 (1H, m), 4.30 - 4.45 (1H, m), 5.62 - 5.76 (1H, m), 6.13 (1H, d), 6.77 - 7.18 (5H, m), 7.25 (1H, t), 10.09 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 469. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (0.048 g, 19%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.36 - 2.45 (1H, m), 2.69 - 2.78 (1H, m), 2.76 - 2.98 (2H, m), 2.94 - 3.13 (1H, m), 3.60 - 3.69 (1H, m), 3.69 - 3.83 (1H, m), 3.83 - 3.97 (2H, m), 3.96 - 4.10 (1H, m), 4.33 - 4.47 (1H, m), 5.62 - 5.75 (1H, m), 6.13 (1H, d), 6.74 - 7.16 (5H, m), 7.25 (1H, t), 10.07 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 469.
Tert -부틸 (3 R )-4-[(4- 브로모 -2,3,6- 트리플루오로페닐 ) 메틸 ]-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00366
DCM (150 mL) 중 4-브로모-2,3,6-트리플루오로벤즈알데히드 (5 g, 20.92 mmol), tert-부틸 (R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (5.43 g, 25.11 mmol) 및 아세트산 (0.12 mL, 2.09 mmol)의 용액을 실온에서 24시간 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시히드로보레이트 (8.87 g, 41.84 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 7시간 동안 교반시키고, 추가 소듐 트리아세톡시히드로보레이트 (4.4 g, 20.92 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 추가 17시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 수성 NaHCO3 (200 mL)으로 희석시키고, 발포가 가라앉을 때까지 상기 혼합물을 실온에서 교반시키고, 그 후 유기 층을 물 (125 mL), 및 포화 염수 (125 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 상 분리 카트리지로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 tert-부틸 (3R)-4-[(4-브로모-2,3,6-트리플루오로페닐)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (9.67 g, >100%)를 담황색 검으로 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.45 (9H, s), 2.26 - 2.49 (2H, m), 2.56 (1H, s), 2.67 - 2.83 (1H, m), 3.03 - 3.18 (1H, m), 3.31 (1H, dd), 3.53 - 3.76 (4H, m), 3.92 (1H, dd), 4.03 (1H, d), 7.13 (1H, ddd), m/z: ES+ [M+H]+ 439.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -7,10- 디플루오로 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00367
수소화나트륨 (1.3 g, 33.02 mmol)을 THF (220 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-[(4-브로모-2,3,6-트리플루오로페닐)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (9.67 g, 22.01 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2일 동안 교반시켰다. 추가의 수소화나트륨 (1 g)을 첨가하고, 그 후 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (150 mL)로 켄칭하고, EtOAc (2 x 300 mL)로 추출하고, 유기 추출물을 합하고, 포화 염수 (300 mL)로 세척하였다. 유기 층을 MgSO4로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (8.7 g, 94%)를 황색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.46 (9H, s), 2.47 (1H, ddd), 2.78 - 2.87 (2H, m), 2.95 (1H, s), 3.24 (1H, ddd), 3.6 - 3.78 (3H, m), 3.82 (1H, dd), 4.01 (1H, dd), 4.30 (1H, dd), 7.00 (1H, dd).
( 12a R )-9- 브로모 -7,10- 디플루오로 -8- 요오도 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀
Figure pct00368
진한 H2SO4 (50 mL)를 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (8.7 g, 20.75 mmol)에 서서히 첨가하였으며, 첨가는 발열을 동반하였다. 생성된 용액을 실온에서 20분 동안 교반시켰다. 1-요오도피롤리딘-2,5-디온 (9.3 g, 41.5 mmol)을 5분의 기간에 걸쳐 일부씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 90분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음 (150 mL)에 서서히 붓고, 그 후 혼합물을 얼음물 냉각조에 넣고, NaOH (25% 용액, 300 mL)를 사용하여 pH 10으로 서서히 조정하였다. 상기 혼합물을 EtOAc (4 x 400 mL)로 추출하고, 유기 추출물을 합하고, 물 (200 mL), 및 포화 염수 (200 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 MgSO4로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 (12aR)-9-브로모-7,10-디플루오로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (8.28 g, 90%)을 갈색 고형물로 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.33 - 2.47 (2H, m), 2.65 - 2.93 (5H, m), 3.65 - 3.76 (1H, m), 3.82 - 3.96 (2H, m), 4.33 (1H, dd), NH는 관찰되지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ 445.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -7,10- 디플루오로 -8- 요오도 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4] 벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00369
디-tert-부틸 디카르보네이트 (6.09 g, 27.91 mmol)를 실온에서 DCM (300 mL) 중 (12aR)-9-브로모-7,10-디플루오로-8-요오도-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀 (8.28 g, 18.6 mmol) 및 트리에틸아민 (7.8 mL, 55.81 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 17시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (400 mL), 및 포화 염수 (400 mL)로 순차적으로 세척하고, 유기 층을 분리하고, 상 분리 카트리지로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~30% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7,10-디플루오로-8-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (6.26 g, 62%)를 크림색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.45 (9H, s), 2.49 (1H, ddd), 2.84 (2H, dddd), 2.99 (1H, s), 3.26 (1H, ddd), 3.71 (3H, ddd), 3.84 (1H, dd), 4.06 (1H, dd), 4.31 (1H, dd), m/z: ES+ [M+H]+ 545.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,10-디플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트 회전 이성질체 1 및 2
Figure pct00370
탄산칼륨 (1.5 g, 11.17 mmol), RuPhos Pd G3 (0.312 g, 0.37 mmol), 디시클로헥실(2',6'-디이소프로폭시-[1,1'-바이페닐]-2-일)포스판 (0.174 g, 0.37 mmol), 및 (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (1.3 g, 7.45 mmol)을 질소 하에 디옥산 (30 mL) 및 물 (6 mL) 중의 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7,10-디플루오로-8-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4] 벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.92 g, 3.72 mmol)의 교반 및 탈기 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 90℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (75 mL)로 희석시키고, EtOAc (2 x 125 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,10-디플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.150 g)를 적색 폼으로 수득하였다. 하기 SFC 조건: 컬럼: Chiralpak IC 20 x 250 mm, 5 마이크론. 이동상: 15% MeOH + 0.1% NH3 / 85% scCO2. 유량: 60 mL/분. BPR: 120 bar. 컬럼 온도: 40℃를 사용하여 안정한 회전장애 이성질체의 분리를 수행하여 첫 번째의 회전 이성질체 1 (401 mg)을 제공하고, 이를 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0 내지 50% EtOAc)로 추가로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,10-디플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (338 mg, 16%)를 황색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 0.03 (9H, s), 1.47 (9H, s), 2.42 - 2.63 (1H, m), 2.86 (3H, ddd), 3.21 (1H, ddd), 3.63 - 3.84 (3H, m), 3.90 (1H, dd), 4.10 (1H, d), 4.35 (1H, dd), 5.30 (1H, brd), 6.89 (1H, dd), 7.07 (1H, dd), 7.23 (1H, t), m/z: ES+ [M+H]+ 563. 이것에 이어서 황색 폼으로서의 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,10-디플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전 이성질체 2 (326 mg, 15%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 0.03 (9H, s), 1.47 (9H, s), 2.46 - 2.6 (1H, m), 2.75 - 3.1 (3H, m), 3.23 (1H, ddd), 3.76 (3H, dd), 3.91 (1H, dd), 4.11 (1H, d), 4.33 (1H, dd), 4.93 (1H, brs), 6.88 (1H, dd), 7.08 (1H, dd), 7.23 (1H, t), m/z: ES+ [M+H]+ 563.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-8- 에티닐 -7,10- 디플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 회전 이성질체 1
Figure pct00371
TFA (1.2 mL, 16.21 mmol)를 DCM (2.5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,10-디플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (338 mg, 0.6 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 현탁물을 실온에서 5시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (0.1% 포름산을 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 1 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-8-에티닐-7,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (146 mg, 62%)를 크림색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) 2.38 - 2.51 (2H, m), 2.57 - 2.93 (5H, m), 3.6 - 3.86 (3H, m), 3.97 (1H, s), 4.28 (1H, d), 6.75 (1H, d), 6.83 (1H, d), 7.10 (1H, t), 9.95 (1H, s), NH는 관찰되지 않음, m/z: ES+ [M+H]+ 391.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-8- 에티닐 -7,10- 디플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 회전 이성질체 2
Figure pct00372
TFA (1.2 mL, 16.21 mmol)를 DCM (2.5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,10-디플루오로-8-[(트리메틸실릴)에티닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (326 mg, 0.58 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 현탁물을 실온에서 7시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (0.1% 포름산을 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물(10~40%의 구배)을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-8-에티닐-7,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (190 mg, 84%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO,) 2.58 (2H, d), 2.71 - 3.09 (5H, m), 3.86 (3H, dd), 4.20 (1H, s), 4.42 (1H, d), 6.91 (1H, d), 7.00 (1H, d), 7.25 (1H, t), 10.08 (1H, s), NH는 관찰되지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ 391.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8- 에티닐 -7,10- 디플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 95
Figure pct00373
아크릴로일 클로라이드 (33.4 μL, 0.41 mmol)를 0℃의 DCM (5 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-8-에티닐-7,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (146 mg, 0.37 mmol) 및 DIPEA (85 μL, 0.49 mmol)의 교반 현탁물에 첨가하였다. 생성된 현탁물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 증발시키고(수조를 40℃ 미만으로 유지), 잔사를 저온 1 M NH3/MeOH (5 mL)에 용해시키고, 0℃에서 40분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (0.1% 포름산을 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물(25~60%의 구배)을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-7,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (74 mg, 45%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) 2.44 - 2.54 (1H, m), 2.70 (1H, dd), 2.81 - 3.2 (3H, m), 3.79 - 4.06 (4H, m), 4.15 (1H, d), 4.23 (1H, s), 4.51 (1H, t), 5.71 (1H, t), 6.14 (1H, d), 6.78 - 6.9 (1H, m), 6.92 (1H, dd), 7.00 (1H, dd), 7.27 (1H, t), 10.07 (1H, s), m/z: ES+ [M+H]+ 445.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8- 에티닐 -7,10- 디플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2, 실시예 96
Figure pct00374
아크릴로일 클로라이드 (43.4 μL, 0.53 mmol)를 0℃의 DCM (5 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-8-에티닐-7,10-디플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (190 mg, 0.49 mmol) 및 DIPEA (110 μL, 0.63 mmol)의 교반 현탁물에 첨가하였다. 생성된 현탁물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 증발시키고(수조를 40℃ 미만으로 유지), 잔사를 저온 1 M NH3/MeOH (5 mL)에 용해시키고, 실온에서 50분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 용출제로서 물 (0.1% 포름산을 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물(30~60%의 구배)을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-7,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온 (99 mg, 46%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.4 - 2.55 (1H, m), 2.69 - 2.78 (1H, m), 2.84 - 3.2 (3H, m), 3.82 - 4.04 (4H, m), 4.08 - 4.19 (1H, m), 4.19 (1H, s), 4.39 - 4.57 (1H, m), 5.71 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.76 - 6.89 (1H, m), 6.91 (1H, dd), 6.95 - 7.03 (1H, m), 7.26 (1H, t), 10.00 (1H, s), m/z: ES+ [M+H]+ 445.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8-히드록시-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -6-온
Figure pct00375
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 용액 (59.8 mL, 59.77 mmol)을 DCM (20 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (4.6 g, 9.96 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH로 켄칭하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-히드록시-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온 (3.4 g, 98%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 0.75 - 0.89 (1H, m), 3.15 - 3.22 (1H, m), 3.67 - 3.81 (1H, m), 3.81 - 3.93 (1H, m), 3.93 - 4.06 (1H, m), 4.09 - 4.19 (2H, m), 4.52 - 4.66 (2H, m), 7.28 (1H, s) 2개의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 347.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8-히드록시-6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00376
디-tert-부틸 디카르보네이트 (1.842 mL, 7.93 mmol)를 질소 하에 0℃에서 DCM (50 mL) 중 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-히드록시-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4] 벤족사제핀-6-온 (3.4 g, 7.93 mmol) 및 트리에틸아민 (6.64 mL, 47.61 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM (100 mL)으로 희석시키고, 5% 수성 시트르산 (200 mL x 2) 및 포화 염수 (200 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~30% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-히드록시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.8 g, 51%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 1.99 (1H, s), 3.40 - 3.52 (2H, m), 3.52 - 3.60 (2H, m), 3.86 - 3.94 (1H, m), 3.97 - 4.09 (1H, m), 4.07 - 4.25 (2H, m), 7.14 (1H, s), 10.79 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 447.
Tert -부틸 (12a R )-9-브로모-10-클로로-8-(디플루오로메톡시)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00377
디플루오로메틸 트리플레이트 (0.564 mL, 4.47 mmol)를 질소 하에 0℃에서 CH3CN (8 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-히드록시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1 g, 2.23 mmol) 및 6 M KOH (2 mL, 12 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (30 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL x 3) 및 포화 염수 (25 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 25~50% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(디플루오로메톡시)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.1 g, 99%)를 갈색 오일로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.09 - 1.24 (1H, m), 1.41 (9H, s), 3.42 - 3.54 (4H, m), 3.57 - 3.69 (1H, m), 3.69 - 3.84 (1H, m), 3.84 - 4.12 (1H, m), 4.24 - 4.44 (2H, m), 7.55 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 497.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8-( 디플루오로메톡시 )-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00378
THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (10 mL, 10 mmol)을 질소 하에 25℃에서 THF (10 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(디플루오로메톡시)-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1 g, 2.01 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (50 mL)로 켄칭하고, EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(디플루오로메톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.95 g, 98%)를 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.47 (9H, s), 2.38 - 2.55 (1H, m), 2.72 - 2.85 (1H, m), 2.82 - 3.03 (2H, m), 3.22 - 3.39 (1H, m), 3.56 (1H, d), 3.61 - 3.78 (3H, m), 3.98 (1H, d), 4.28 - 4.38 (1H, m), 6.48 (1H, t), 7.03 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 483.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00379
RuPhos-Pd-G3 (225 mg, 0.27 mmol) 및 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (125 mg, 0.27 mmol)을 질소 하에 25℃에서 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (2.5 mL) (4:1의 비) 중 K2CO3 (557 mg, 4.03 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (695 mg, 4.03 mmol) 및 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(디플루오로메톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (650 mg, 1.34 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~100% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (120 mg, 17%)를 황색 고형물로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 531.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-10- 클로로 -8-( 디플루오로메톡시 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀
Figure pct00380
TFA (0.5 mL, 6.49 mmol)를 20℃에서 DCM (2.5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (100 mg, 0.19 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 잔사를 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~100% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 조 생성물을 황색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-(디플루오로메톡시)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4] 벤족사제핀-9-일]페놀 (45 mg, 55%)을 황색 고형물로 수득하였다. m/z: ES+ [M+H]+ = 431.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8-( 디플루오로메톡시 )-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 97 및 회전 이성질체 2, 실시예 98
Figure pct00381
DIPEA (0.032 mL, 0.19 mmol) 및 아크릴로일 클로라이드 (8.39 mg, 0.09 mmol)를 질소 하에 -20℃에서 DMF (2 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-(디플루오로메톡시)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (40 mg, 0.09 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 직접적으로 분취용 HPLC로 정제하였다 (컬럼: Xselect CSH OBD 컬럼 30*150 mm 5 um; 이동상 A:물 (0.1%포름산), 이동상 B:MeCN; 유량: 60 mL/분; 구배:27 B에서 9분 내에 37 B까지; 254;220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (7 mg, 15%)을 보라색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.34 - 2.43 (1H, m), 2.69 - 2.90 (3H, m), 2.99 - 3.09 (1H, m), 3.54 - 3.64 (1H, m), 3.73 - 3.81 (1H, m), 3.83 - 3.94 (2H, m), 3.99 - 4.11 (1H, m), 4.34 - 4.46 (1H, m), 5.70 (1H, t), 6.13 (1H, d), 6.73 - 7.02 (4H, m), 7.17 - 7.30 (2H, m), 9.99 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 485. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (8 mg, 18%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.34 - 2.44 (1H, m), 2.65 - 2.91 (3H, m), 3.01 - 3.05 (1H, m), 3.55 - 3.65 (1H, m), 3.72 - 3.80 (1H, m), 3.83 - 3.97 (2H, m), 3.98 - 4.12 (1H, m), 4.38 - 4.46 (1H, m), 5.66 - 5.75 (1H, m), 6.08 - 6.17 (1H, m), 6.70 - 7.01 (4H, m), 7.06 - 7.27 (2H, m), 10.13 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 485.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -8- 메톡시 -3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00382
THF 중 1 M 보란-THF 착물 용액 (30.3 mL, 30.32 mmol)을 THF (30 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-메톡시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2.7 g, 6.06 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 60℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 2 M HCl (10 mL)로 켄칭하고, 물 (30 mL)에 붓고, 그 후 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 백색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: EtOAc 중 0~80% 석유 에테르)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (2.2 g, 84%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.39 (9H, s), 2.27 - 2.37 (1H, m), 2.65 - 2.94 (3H, m), 3.06 - 3.17 (1H, m), 3.49 - 3.58 (2H, m), 3.58 - 3.65 (1H, m), 3.67 - 3.74 (1H, m), 3.75 - 3.79 (1H, m), 3.80 (3H, s), 4.25 (1H, dd), 6.91 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 431.
( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H - 피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀 -8-올
Figure pct00383
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 용액 (20.4 mL, 20.4 mmol)을 0℃의 DCM (10 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.1g, 2.55 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (25 mL)로 켄칭하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 황색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-올 (0.75 g, 93%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.76 - 2.99 (2H, m), 3.01 - 3.19 (2H, m), 3.49 - 3.59 (1H, m), 3.64 - 3.82 (2H, m), 3.94 - 4.18 (2H, m), 4.32 - 4.47 (2H, m), 6.75 (1H, s), 9.06 (1H, s) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 317.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 플루오로 -8-히드록시-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00384
디-tert-부틸 디카르보네이트 (0.551 mg, 2.52 mmol)를 질소 하에 0℃에서 DCM (15 mL) 중 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-올 (800 mg, 2.52 mmol) 및 트리에틸아민 (2.11 mL, 15.13 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~50% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-히드록시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (900 mg, 86%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.38 (9H, s), 2.11 - 2.26 (4H, m), 3.12 - 3.18 (2H, m), 3.74 - 3.82 (2H, m), 4.22 - 4.28 (3H, m), 6.61 - 6.64 (1H, m) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 417.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -8-( 시클로프로필옥시 )-10- 플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00385
브로모시클로프로판 (2.9 g, 23.96 mmol)을 질소 하에 25℃에서 DMF (30 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-히드록시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1 g, 2.4 mmol) 및 Cs2CO3 (1.562 g, 4.79 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 150℃에서 20시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (200 mL)로 희석시키고, 물 (150 mL x 2) 및 포화 염수 (150 mL x 3)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~60% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.45 g, 41%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 0.67 - 0.75 (2H, m), 0.80 - 0.86 (2H, m), 1.40 (9H, s), 2.24 - 2.37 (1H, m), 2.66 - 2.82 (3H, m), 3.02 - 3.21 (1H, m), 3.52 - 3.63 (3H, m), 3.73 - 3.85 (2H, m), 3.88 - 4.00 (1H, m), 4.28 (1H, d), 7.15 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 457.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00386
RuPhos-Pd-G3 (73.2 mg, 0.09 mmol) 및 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (40.8 mg, 0.09 mmol)을 질소 하에 25℃에서 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (2.5 mL)(4:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (400 mg, 0.87 mmol), (2-클로로-6-메톡시페닐)보론산 (326 mg, 1.75 mmol) 및 K2CO3 (363 mg, 2.62 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 20~70% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (330 mg, 73%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 0.68 - 0.73 (2H, m), 0.80 - 0.88 (2H, m), 1.41 (9H, s), 2.24 - 2.40 (1H, m), 2.60 - 2.87 (4H, m), 3.46 - 3.64 (5H, m), 3.62 - 3.72 (3H, m), 3.75 - 3.97 (1H, m), 4.20 - 4.35 (1H, m), 6.98 - 7.09 (2H, m), 7.07 - 7.18 (1H, m), 7.28 - 7.46 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 519.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-8-( 시클로프로필옥시 )-10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀
Figure pct00387
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 용액 (4.62 mL, 4.62 mmol)을 0℃의 DCM (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (300 mg, 0.58 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% NH4HCO3) 중 0~100% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (80 mg, 34%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 0.39 - 0.56 (2H, m), 0.61 - 0.74 (2H, m), 1.41 (1H, s), 2.20 - 2.41 (3H, m), 2.54 - 2.76 (1H, m), 2.77 - 2.96 (3H, m), 3.45 - 3.67 (2H, m), 3.68 - 3.87 (2H, m), 4.04 - 4.24 (1H, m), 6.76 - 6.89 (1H, m), 6.87 - 6.97 (1H, m), 6.96 - 7.07 (1H, m), 7.09 - 7.25 (1H, m), 9.78 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 405.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8-( 시클로프로필옥시 )-10- 플루오로 -3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 99 및 회전 이성질체 2, 실시예 100
Figure pct00388
아크릴로일 클로라이드 (0.06 mL, 0.74 mmol)를 0℃의 DMF (5 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (300 mg, 0.74 mmol) 및 DIPEA (0.518 mL, 2.96 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 직접적으로 분취용 HPLC로 정제하였다 (컬럼: Xselect CSH OBD 컬럼 30*150 mm 5 um; 이동상 A:물 (0.1% 포름산), 이동상 B:MeCN; 유량:60 mL/분; 구배:24 B에서 8분 내에 34 B까지; 254;220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (70 mg, 21%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 0.40 - 0.55 (2H, m), 0.56 - 0.77 (2H, m), 2.30 - 2.45 (1H, m), 2.57 - 3.18 (3H, m), 3.49 - 4.17 (7H, m), 4.21 - 4.39 (1H, m), 5.61 - 5.74 (1H, m), 6.03 - 6.19 (1H, m), 6.76 - 7.00 (3H, m), 7.01 - 7.08 (1H, m), 7.10 - 7.25 (1H, m), 9.78 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 459. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (71 mg, 21%)가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 0.37 - 0.53 (2H, m), 0.59 - 0.74 (2H, m), 2.24 - 2.42 (1H, m), 2.57 - 2.77 (2H, m), 2.76 - 2.94 (1H, m), 2.96 - 3.11 (1H, m), 3.47 - 3.62 (1H, m), 3.64 - 3.81 (1H, m), 3.82 - 3.99 (4H, m), 4.23 - 4.40 (1H, m), 5.62 - 5.77 (1H, m), 6.05 - 6.18 (1H, m), 6.71 - 7.00 (3H, m), 7.00 - 7.08 (1H, m), 7.10 - 7.21 (1H, m), 9.66 - 9.92 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 459.
Tert -부틸 (12a R )-9-브로모-8-[3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00389
테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (175 mg, 0.15 mmol)을 질소 하에 25℃에서 밀봉 튜브에서 톨루엔 (20 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (800 mg, 1.52 mmol), 3-디메틸아미노-1-프로핀 (0.654 mL, 6.07 mmol), 트리에틸아민 (0.423 mL, 3.04 mmol) 및 요오드화구리(I) (578 mg, 3.04 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~100% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-[3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (600 mg, 82%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.39 (9H, s), 2.23 - 2.42 (4H, m), 2.69 - 2.77 (2H, m), 3.06 - 3.15 (1H, m), 3.30 (4H, s), 3.49 - 3.67 (4H, m), 3.68 - 3.83 (3H, m), 4.30 - 4.39 (1H, m), 7.32 (1H, d). m/z: ES+ [M-Boc]- = 439.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-[3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00390
2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디메톡시-1,1'-바이페닐 (51.1 mg, 0.12 mmol) 및 메탄술포나토(2-디시클로헥실포스피노-2,6-디메톡시-1,1-바이페닐)(2-아미노-1,1-바이페닐-2-일)팔라듐(II) 디클로로메탄 부가물 (97 mg, 0.12 mmol)을 질소 하에 25℃에서 1,4-디옥산 (8 mL) 및 물 (2 mL)(4:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-8-[3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (600 mg, 1.24 mmol), (2-클로로-6-메톡시페닐)보론산 (464 mg, 2.49 mmol) 및 인산칼륨 (528 mg, 2.49 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 120℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 40~90% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-[3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (450 mg, 67%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, d), 1.86 (6H, s), 2.31 - 2.42 (1H, m), 2.61 - 2.74 (1H, m), 2.75 - 2.83 (1H, m), 3.00 - 3.11 (1H, m), 3.23 (2H, s), 3.57 - 3.79 (8H, m), 3.85 - 3.95 (1H, m), 4.36 (1H, d), 7.07 - 7.18 (2H, m), 7.23 (1H, s), 7.40 (1H, t). m/z: ES+ [M+H]+ = 544.
3- 클로로 -2-{( 12a R )-8-[3-(디메틸아미노) 프로프 -1-인-1-일]-10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀
Figure pct00391
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 용액 (4742 μl, 4.74 mmol)을 질소 하에 0℃에서 DCM (5 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-[3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (430 mg, 0.79 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (20 mL)로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 갈색 고형물로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 0~100% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-{(12aR)-8-[3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일]-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀 (0.32 g, 75%)을 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.52 (6H, s), 2.65 - 2.96 (4H, m), 2.99 - 3.12 (1H, m), 3.18 - 3.26 (1H, m), 3.28 - 3.42 (2H, m), 3.50 - 3.61 (1H, m), 3.90 - 4.04 (2H, m), 4.13 - 4.20 (2H, m), 6.85 - 7.08 (2H, m), 7.10 - 7.46 (2H, m), 8.90 (1H, s) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 430.
1-(( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8-(3-(디메틸아미노) 프로프 -1-인-1-일)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -벤조[ f ]피라지노[2,1- c ][1,4]옥사제핀-2(1 H )-일)프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 101 및 회전 이성질체 2, 실시예 102
Figure pct00392
DIPEA (387 μl, 2.21 mmol) 및 아크릴로일 클로라이드 (50.1 mg, 0.55 mmol)를 질소 하에 -20℃에서 DMF (2 mL) 중 3-클로로-2-{(12aR)-8-[3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일]-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀 (300 mg, 0.55 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 직접적으로 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~80% MeCN)로 정제하고, 그 후 다음에 의해 추가로 정제하였다: 분취용 HPLC 컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A:물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B:MeCN; 유량:60 mL/분; 구배:31 B에서 7분 내에 41 B까지; 254;220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-((12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.013 g, 5%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.88 (6H, s), 2.28 - 2.46 (1H, m), 2.63 - 2.77 (1H, m), 2.80 - 2.92 (2H, m), 3.01 - 3.15 (1H, m), 3.23 (2H, s), 3.68 - 3.81 (2H, m), 3.82 - 3.97 (2H, m), 3.98 - 4.13 (1H, m), 4.39 (1H, t), 5.70 (1H, s), 6.13 (1H, d), 6.76 - 6.91 (2H, m), 6.97 (1H, dd), 7.17 - 7.26 (2H, m), 9.89 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 484. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-((12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (0.02 g, 7%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.88 (6H, s), 2.29 - 2.46 (1H, m), 2.63 - 2.78 (1H, m), 2.78 - 2.95 (2H, m), 3.00 - 3.15 (1H, m), 3.23 (2H, s), 3.68 - 3.80 (2H, m), 3.81 - 3.96 (2H, m), 3.96 - 4.15 (1H, m), 4.40 (1H, t), 5.70 (1H, s), 6.03 - 6.20 (1H, m), 6.76 - 6.93 (2H, m), 6.96 (1H, dd), 7.14 - 7.30 (2H, m), 9.87 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 484.
Tert -부틸 (12a R )-9-브로모-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00393
K2CO3 (1192 mg, 8.63 mmol)을 실온에서 DMF (20 mL) 중 4-(클로로메틸)피리딘 (550 mg, 4.31 mmol), (12aR)-9-브로모-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-올 (900 mg, 2.16 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL x 3) 및 포화 염수 (50 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~40% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.6 g, 55%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.36 (9H, s), 2.25 - 2.35 (1H, m), 2.63 - 2.86 (3H, m), 3.06 - 3.15 (1H, m), 3.48 - 3.70 (4H, m), 3.78 - 3.87 (1H, m), 4.22 - 4.31 (1H, m), 5.23 (2H, s), 6.96 - 7.02 (1H, m), 7.42 - 7.50 (2H, m,), 8.56 - 8.63 (2H, m).
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00394
RuPhos-Pd-G3 (82 mg, 0.1 mmol) 및 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (45.9 mg, 0.10 mmol)을 질소 하에 실온에서 1,4-디옥산 (8 mL) 및 물 (2 mL)(4:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (500 mg, 0.98 mmol), K2CO3 (340 mg, 2.46 mmol) 및 (2-클로로-6-메톡시페닐)보론산 (509 mg, 2.95 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL x 2) 및 포화 염수 (50 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 C-18 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 0~40% CH3CN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.5 g, 91%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.35 (9H, s), 2.83 - 3.03 (1H, m), 3.13 - 3.32 (2H, m), 3.40 - 3.55 (2H, m), 3.68 - 3.83 (3H, m), 3.95 - 4.11 (2H, m), 4.30 - 4.43 (1H, m), 4.54 - 4.70 (2H, m), 6.90 - 6.96 (1H, m), 6.99 - 7.07 (2H, m), 7.22 - 7.30 (1H, m), 7.47 - 7.55 (2H, m), 8.66 - 8.74 (2H, m) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 556.
3- 클로로 -2-{( 12a R )-10- 플루오로 -8-[(피리딘-4-일) 메톡시 ]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀
Figure pct00395
TFA (1386 μl, 17.98 mmol)를 실온에서 DCM (10 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (500 mg, 0.90 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 이온 교환 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-{(12aR)-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀 (0.25 g, 61%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.61 - 2.84 (2H, m), 2.92 - 3.07 (3H, m), 3.19 - 3.35 (2H, m), 3.65 - 3.79 (4H, m), 3.88 - 4.03 (2H, m), 6.78 - 6.88 (1H, m), 6.88 - 6.94 (1H, m), 6.96 - 7.04 (1H, m), 7.20 - 7.28 (1H, m), 7.47 - 7.55 (2H, m), 8.64 - 8.75 (2H, m), 9.99 (1H, s) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 456.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-10- 플루오로 -8-[(피리딘-4-일) 메톡시 ]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 103 및 회전 이성질체 2, 실시예 104
Figure pct00396
아크릴로일 클로라이드 (49.6 mg, 0.55 mmol)를 0℃의 DMF (5 mL) 중 3-클로로-2-{(12aR)-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀 (250 mg, 0.55 mmol) 및 DIPEA (287 μl, 1.65 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (0.5 mL)로 켄칭하고, 직접적으로 분취용 HPLC로 정제하였다 (컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A:물 (10 mmol/L NH4HCO3 + 0.1% NH3.H2O), 이동상 B:MeCN; 유량:60 mL/분; 구배:25 B에서 10분 내에 35 B까지; 254/220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.061 g, 22%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.31 - 2.44 (1H, m), 2.66 - 2.77 (1H, m), 2.80 - 2.88 (1H, m), 3.00 - 3.14 (1H, m), 3.35 - 3.37 (1H, m), 3.55 - 3.71 (2H, m), 3.81 - 3.92 (2H, m), 3.96 - 4.09 (1H, m), 4.26 - 4.39 (1H, m), 5.09 (2H, s), 5.65 - 5.75 (1H, m), 6.09 - 6.18 (1H, m), 6.75 - 6.83 (1H, m), 6.84 - 6.87 (1H, m), 6.90 - 6.94 (1H, m), 6.99 - 7.03 (1H, m), 7.18 - 7.21 (2H, m), 7.22 - 7.28 (1H, m), 8.46 - 8.52 (2H, m), 9.87 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 510. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (0.065 g, 23%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.27 - 2.45 (1H, m), 2.61 - 2.75 (1H, m), 2.78 - 2.89 (1H, m), 2.98 - 3.15 (1H, m), 3.34 - 3.35 (1H, m), 3.55 - 3.70 (2H, m), 3.80 - 3.92 (2H, m), 3.93 - 4.11 (1H, m), 4.26 - 4.39 (1H, m), 5.08 (2H, s), 5.65 - 5.74 (1H, m), 6.08 - 6.20 (1H, m), 6.75 - 6.84 (1H, m), 6.84 - 6.88 (1H, m), 6.90 - 6.95 (1H, m), 6.98 - 7.03 (1H, m), 7.18 - 7.21 (2H, m), 7.22 - 7.28 (1H, m), 8.45 - 8.51 (2H, m), 9.82 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 510.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8-(2- 메톡시에톡시 )-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00397
탄산세슘 (3.38 g, 10.38 mmol)을 DMF (20 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-히드록시-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.5 g, 3.46 mmol) 및 1-클로로-2-메톡시에탄 (0.49 g, 5.19 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석시키고, 순차적으로 물 (50 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(2-메톡시에톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1 g, 59%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 11.39 (9H, s), 2.01 - 2.44 (2H, m), 2.65 - 2.87 (3H, m), 3.01 - 3.19 (2H, m), 3.46 - 3.98 (8H, m), 4.03 - 4.38 (3H, m), 7.10 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 491.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(2-메톡시에톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00398
K2CO3 (0.984 g, 7.12 mmol)을 질소 하에 1,4-디옥산 (16 mL) 및 물 (4.00 mL)(4:1의 비) 중 RuPhos-Pd-G3 (0.155 g, 0.20 mmol), 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (0.095 g, 0.2 mmol), (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (0.876 g, 5.08 mmol) 및 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(2-메톡시에톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1 g, 2.03 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석시키고, 추출하고, 물 (100 mL x 3) 및 포화 염수 (50 mL x 2)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 30~40% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(2-메톡시에톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.6 g, 55%)를 백색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 2.25 - 2.44 (1H, m), 2.61 - 2.90 (3H, m), 3.11 (3H, s), 3.34 (1H, d), 3.40 - 3.45 (2H, m), 3.48 - 3.56 (1H, m), 3.60 - 3.70 (3H, m), 3.78 - 3.92 (1H, m), 4.00 (2H, dd), 4.28 (1H, d), 6.80 - 6.87 (1H, m), 6.90 - 6.97 (1H, m), 7.00 (1H, s), 7.17 (1H, t), 9.66 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 539.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-10- 클로로 -8-(2- 메톡시에톡시 )-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀
Figure pct00399
TFA (2 mL, 25.96 mmol)를 실온에서 DCM (20 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(2-메톡시에톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (550 mg, 1.02 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 12시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-(2-메톡시에톡시)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (0.3 g, 67%)을 황색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.28 - 2.34 (2H, m), 2.62 - 2.85 (5H, m), 3.10 (3H, s), 3.38 - 3.48 (2H, m), 3.48 - 3.64 (2H, m), 3.70 - 3.84 (1H, m), 3.92 - 4.09 (2H, m), 4.19 (1H, d), 6.79 - 6.89 (1H, m), 6.87 - 6.96 (1H, m), 6.98 (1H, s), 7.17 (1H, t), 9.66 (1H, s) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 439.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8-(2- 메톡시에톡시 )-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 105 및 회전 이성질체 2, 실시예 106
Figure pct00400
아크릴로일 클로라이드 (103 mg, 1.14 mmol)를 질소 하에 0℃까지 냉각시킨 DMF (5 mL) 중 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-(2-메톡시에톡시)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (250 mg, 0.57 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 켄칭하고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 갈색 검으로 수득하였다. 용출제로서 물 (0.05% NH3을 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 μ 실리카, 50 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(2-메톡시에톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.057 g, 20%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.29 - 2.45 (1H, m), 2.68 - 2.92 (3H, m), 2.98 - 3.19 (4H, m), 3.41 - 3.58 (3H, m), 3.69 (1H, d), 3.86 (2H, d), 3.93 - 4.14 (3H, m), 4.33 (1H, t), 5.71 - 5.75 (1H, m), 6.13 (1H, d), 6.76 - 7.05 (4H, m), 7.17 (1H, t), 9.66 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 493. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(2-메톡시에톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (0.07 g, 25%)가 뒤따랐다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 2.31 - 2.44 (1H, m), 2.66 - 2.96 (3H, m), 2.98 - 3.23 (4H, m), 3.41 - 3.48 (2H, m), 3.48 - 3.62 (1H, m), 3.68 (1H, d), 3.79 - 4.16 (5H, m), 4.32 (1H, t), 5.70 - 5.75 (1H, m), 6.14 (1H, d), 6.73 - 7.07 (4H, m), 7.17 (1H, t), 9.63 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 493.
Tert -부틸 (12a R )-9-브로모-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00401
1-(2-클로로에틸)-피페리딘 (177 mg, 1.2 mmol)을 DMF (10 mL) 중 K2CO3 (497 mg, 3.59 mmol) 및 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-올 (500 mg, 1.2 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석시키고, 물 (50 mL x 3) 및 포화 염수 (50 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 10~40% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.6 g, 95%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.31 (9H, s), 1.35 - 1.41 (1H, m) 1.44 - 1.59 (5H, m), 2.21 - 2.38 (2H, m), 2.38 - 2.48 (3H, m), 2.64 - 2.91 (5H, m), 3.07 - 3.19 (1H, m), 3.47 - 3.73 (4H, m), 3.76 - 3.87 (1H, m), 4.06 - 4.16 (2H, m), 4.21 - 4.30 (1H, m), 6.94 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 530.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00402
RuPhos-Pd-G3 (95 mg, 0.11 mmol)를 질소 하에 1,4-디옥산 (16 mL) 및 물 (4 mL) (4:1의 비) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (600 mg, 1.14 mmol), (2-클로로-6-메톡시페닐)보론산 (587 mg, 3.41 mmol), 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (53 mg, 0.11 mmol) 및 K2CO3 (392 mg, 2.84 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석시키고, 물 (20 mL x 2) 및 포화 염수 (20 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 5~60% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.5 g, 76%)를 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.17 - 1.30 (2H, m), 1.34 (9H, s), 1.41 - 1.50 (1H, m), 1.50 - 1.72 (7H, m), 2.62 - 2.78 (3H, m), 2.95 - 3.11 (2H, m), 3.44 - 3.53 (1H, m), 3.74 - 3.84 (2H, m), 3.98 - 4.09 (2H, m), 4.24 - 4.39 (3H, m), 4.54 - 4.69 (2H, m), 6.92 - 6.95 (1H, m), 6.98 - 7.03 (1H, m), 7.07 - 7.11 (1H, m), 7.22 - 7.27 (1H, m), 9.76 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 576.
3- 클로로 -2-{( 12a R )-10- 플루오로 -8-[2-(피페리딘-1-일) 에톡시 ]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀
Figure pct00403
TFA (2 mL, 25.96 mmol)를 DCM (10 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (400 mg, 0.69 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-{(12aR)-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀 (0.3 g, 91%)을 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 30℃) 1.22 - 1.44 (7H, m), 2.16 - 2.37 (7H, m), 2.55 - 2.69 (2H, m), 2.72 - 2.88 (3H, m), 3.56 - 3.60 (1H, m), 3.92 - 4.01 (2H, m), 3.92 - 4.01 (2H, m), 4.11 - 4.21 (1H, m), 6.78 - 6.81 (1H, m), 6.82 - 6.88 (1H, m), 6.90 - 6.96 (1H, m), 7.17 (1H, t) 2개의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 476.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-10- 플루오로 -8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 107 및 회전 이성질체 2, 실시예 108
Figure pct00404
아크릴로일 클로라이드 (41.8 mg, 0.46 mmol)를 DMF (5 mL) 중 3-클로로-2-{(12aR)-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀 (200 mg, 0.42 mmol) 및 DIPEA (220 μl, 1.26 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (0.5 mL)로 켄칭하고, 용출제로서 물 (10 mmol% NH4HCO3 + 0.1 mmol% NH3.H2O를 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 직접적으로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.06 g, 27%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.20 - 1.48 (7H, m), 2.18 - 2.31 (4H, m), 2.67 - 2.73 (2H, m), 2.77 - 2.92 (2H, m), 3.03 - 3.11 (1H, m), 3.48 - 3.76 (3H, m), 3.79 - 4.12 (5H, m), 4.23 - 4.39 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.12 (1H, d), 6.12 (1H, d), 6.79 - 6.89 (2H, m), 6.94 (1H, d), 7.18 (1H, t) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 530. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (0.07 g, 31%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.20 - 1.44 (7H, m), 2.17 - 2.30 (4H, m), 2.61 - 2.77 (2H, m), 2.77 - 2.93 (2H, m), 2.96 - 3.18 (1H, m), 3.48 - 3.75 (3H, m), 3.79 - 4.08 (5H, m), 4.23 - 4.37 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.67 - 6.88 (3H, m), 6.93 (1H, d), 7.18 (1H, t) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 530.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8-( 프로프 -1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00405
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.60 g, 2.94 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀) 팔라듐(0) (0.17 g, 0.15 mmol) 및 요오드화구리(I) (0.17 g, 0.88 mmol)를 톨루엔 (24 mL)에 현탁시키고, 트리에틸아민 (1.35 mL, 9.71 mmol)을 첨가하였다. 1-(트리메틸실릴)프로핀 (0.48 mL, 3.24 mmol) 및 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (THF 중 1.0 M 용액 3.24 mL, 3.24 mmol)를 연속적으로 첨가하고, 상기 용액을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 추가분의 1-(트리메틸실릴)프로핀 (0.48 mL, 3.24 mmol) 및 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (THF 중 1.0 M 용액 3.24 mL, 3.24 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 하룻밤 계속 교반시켰다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 희석시키고, 짧은 셀라이트 패드에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.28 g, 95%)를 갈색 잔사로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 1.45 (9H, s), 2.09 (3H, s), 2.41 (1H, ddd), 2.68 - 2.8 (1H, m), 2.84 - 2.92 (1H, m), 2.92 - 3.04 (1H, m), 3.29 (1H, ddd), 3.52 (1H, d), 3.57 - 3.69 (2H, m), 3.72 (1H, dd), 3.92 (1H, d), 4.29 (1H, dd), 7.17 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 455.2.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트 회전 이성질체 1 및 2
Figure pct00406
1,4-디옥산 (24 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.28 g, 2.81 mmol), (2-클로로-6-메톡시페닐)보론산 (0.79 g, 4.21 mmol) 및 수성 2 M 탄산나트륨 (4.21 mL, 8.43 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 탈기시켰다. RuPhos Pd G3 (0.235 g, 0.28 mmol) 및 디시클로헥실(2',6'-디이소프로폭시-[1,1'-바이페닐]-2-일)포스판 (0.13 g, 0.28 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 90℃에서 가열하였다. 3 시간 후, 상기 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (50 mL) 및 물 (50 mL)로 희석시켰다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 에틸 아세테이트 (50 mL)로 세척하였다. 합한 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 갈색 건조 필름을 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (683 mg)를 담황색 건조 필름으로 수득하였다 (회전장애 이성질체들의 혼합물로서). 회전장애 이성질체를 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)를 사용하여 분리하였다 (컬럼: Phenomenex C4, 30 x 250 mm, 5 마이크론 이동상 A: 30% MeOH (+0.1% NH3) / 이동상 B: 70% scCO2; 유량: 90 mL/분; BPR: 120 bar; 컬럼 온도: 40℃; UV max: 216 nm). 첫 번째 용출되는 이성질체를 함유하는 분획을 수집하고, 농축시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전장애 이성질체 1 (190 mg, 0.37 mmol, 13%)을 담황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 1.45 (9H, s), 1.76 (3H, s), 2.37 - 2.56 (1H, m), 2.75 - 2.99 (2H, m), 3.15 - 3.34 (1H, m), 3.47 (1H, s), 3.52 - 3.64 (1H, m), 3.65 - 3.87 (6H, m), 3.91 - 4.07 (1H, m), 4.26 - 4.42 (1H, m), 6.88 (1H, d), 7.08 (1H, d), 7.2 - 7.24 (1H, m), 7.27 - 7.31 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 517.2. 두 번째 용출되는 이성질체를 함유하는 분획을 수집하고, 농축시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트의 회전장애 이성질체 2 (265 mg, 18%)를 담황색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 1.49 (9H, s), 1.80 (3H, s), 2.43 - 2.57 (1H, m), 2.78 - 2.99 (2H, m), 3.19 - 3.38 (1H, m), 3.51 (1H, s), 3.55 - 3.66 (1H, m), 3.68 - 3.84 (6H, m), 3.94 - 4.08 (1H, m), 4.3 - 4.42 (1H, m), 6.91 (1H, d), 7.13 (1H, d), 7.25 - 7.27 (1H, m), 7.31 - 7.38 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 517.2.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-10- 클로로 -8-( 프로프 -1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a- 헥사히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 회전 이성질체 1
Figure pct00407
DCM (2 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 회전 이성질체 1 (190 mg, 0.37 mmol)의 용액을 0℃까지 냉각시키고, 트리브로모보란 (DCM 중 1.0 M 용액 3.67 mL, 3.67 mmol)을 교반하면서 적가하였다. 첨가시에 상기 혼합물을 실온까지 되게 하고, 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM (20 mL)으로 희석시키고, 수성 포화 탄산수소나트륨 (50 mL)의 격렬하게 교반되는 용액에 적가하였다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 에틸 아세테이트 (50 mL), 그 후 2-메틸-THF (50 mL)로 세척하였다. 합한 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 담황색 고형물 (150 mg)을 제공하였다. 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. MeOH 중 1.0 M NH3을 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-(프로프-1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀의 회전 이성질체 1 (118 mg, 80%)을 담황색 건조 필름으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.76 (3H, s), 2.38 - 2.45 (2H, m), 2.69 - 2.95 (5H, m), 3.6 - 3.75 (3H, m), 3.81 (1H, d), 4.29 (1H, dd), 6.88 (1H, dd), 6.96 (1H, dd), 7.21 (1H, t), 7.31 (1H, s), 9.70 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 403.2.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8-( 프로프 -1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 109
Figure pct00408
3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-(프로프-1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 (118 mg, 0.29 mmol)의 회전 이성질체 1을 DCM (1 mL)에 현탁시키고, 트리에틸아민 (0.08 mL, 0.59 mmol)을 첨가하였다. 아크릴로일 클로라이드 (0.03 mL, 0.35 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 교반시켰다. 5분 후 반응 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액 (5 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 DCM (10 mL)으로 세척하였다. 합한 유기물을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 잔사를 MeOH (1 mL) 및 MeOH 중 7 N 암모니아 (1 mL)에 용해시키고, 실온에서 교반시켰다. 10분 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 담황색 폼을 제공하였다. 용출제로서 물 (0.1% 포름산을 함유함) 및 아세토니트릴의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (33 mg, 25%)을 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 1.79 (3H, s), 2.47 - 2.6 (1H, m), 2.84 - 3.27 (3H, m), 3.35 - 3.55 (1H, m), 3.60 (1H, d), 3.68 - 3.9 (2H, m), 4.01 - 4.2 (2H, m), 4.24 - 4.47 (2H, m), 5.74 (1H, d), 6.31 (1H, dd), 6.54 (1H, dd), 6.91 (1H, d), 7.07 (1H, d), 7.22 (1H, t), 7.28 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 457.2.
3- 클로로 -2-[( 12a R )-10- 클로로 -8-( 프로프 -1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a- 헥사 히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀 회전 이성질체 2
Figure pct00409
DCM (2 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-메톡시페닐)-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (265 mg, 0.51 mmol)의 회전 이성질체 2의 용액을 0℃까지 냉각시키고, 트리브로모보란 (DCM 중 1.0 M 용액 5.12 mL, 5.12 mmol)을 교반하면서 적가하였다. 첨가시에 상기 혼합물을 실온까지 되게 하고, 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM (20 mL)으로 희석시키고, 수성 포화 탄산수소나트륨 (50 mL)의 격렬하게 교반되는 용액에 적가하였다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 에틸 아세테이트 (50 mL), 그 후 2-메틸-THF (50 mL)로 세척하였다. 합한 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 담황색 고형물 (500 mg)을 제공하였다. 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. MeOH 중 1.0 M NH3을 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-(프로프-1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀의 회전 이성질체 2 (203 mg, 98%)를 담황색 건조 필름으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.76 (3H, s), 2.44 - 2.52 (1H, m), 2.77 - 2.93 (4H, m), 2.97 - 3.1 (2H, m), 3.64 - 3.78 (3H, m), 3.85 (1H, d), 4.33 (1H, d), 6.87 (1H, dd), 6.97 (1H, dd), 7.21 (1H, t), 7.32 (1H, s), 9.72 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 403.2.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8-( 프로프 -1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2, 실시예 110
Figure pct00410
3-클로로-2-[(12aR)-10-클로로-8-(프로프-1-인-1-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]페놀의 회전 이성질체 2 (200 mg, 0.5 mmol)를 DCM (4 mL)에 현탁시키고, 트리에틸아민 (0.14 mL, 0.99 mmol)을 첨가하였다. 아크릴로일 클로라이드 (0.05 mL, 0.60 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 교반시켰다. 10분 후 반응 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액 (5 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 DCM (10 mL)으로 세척하였다. 합한 유기물을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 잔사를 MeOH (2 mL) 및 MeOH 중 7 N 암모니아 (2 mL)에 용해시키고, 실온에서 교반시켰다. 20분 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 담황색 폼을 제공하였다. 용출제로서 물 (0.1% 포름산을 함유함) 및 아세토니트릴의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (81 mg, 36%)를 담황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.77 (3H, s), 2.37 - 2.45 (1H, m), 2.7 - 2.78 (1H, m), 2.8 - 2.93 (1H, m), 3.04 - 3.15 (1H, m), 3.26 - 3.29 (1H, m), 3.61 - 3.77 (2H, m), 3.82 - 3.93 (2H, m), 3.97 - 4.09 (1H, m), 4.35 - 4.47 (1H, m), 5.65 - 5.76 (1H, m), 6.13 (1H, d), 6.74 - 6.91 (2H, m), 6.97 (1H, dd), 7.21 (1H, t), 7.33 (1H, s), 9.71 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 457.2.
에틸 5- 브로모 -3- 플루오로 -6-[( 2 H 3 ) 메틸옥시 ]피리딘-2- 카르복실레이트
Figure pct00411
클로로포름 (100 mL) 중 에틸 5-브로모-3-플루오로-6-히드록시피리딘-2-카르복실레이트 (10 g, 37.9 mmol) 및 탄산은 (23.0 g, 83.3 mmol)의 현탁물에 요오도메탄-d3 (11.8 mL, 189 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 하룻밤 교반시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, DCM (100 mL)으로 희석시키고, 짧은 셀라이트 패드를 통하여 여과시켰다. 셀라이트를 DCM (100 mL)으로 세척하고, 여과액을 감압 하에 농축시켜 담황색 오일 (11.5 g)을 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~30% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 에틸 5-브로모-3-플루오로-6-[(2H3)메틸옥시]피리딘-2-카르복실레이트 (9.02 g, 85%)를 무색 오일로 수득하였으며, 이는 정치시에 고체화되었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO): 1.32 (3H, t), 4.36 (2H, q), 8.39 (1H, d). 19F NMR (376 MHz, DMSO): -126.47. m/z: ES+ [M+H]+ 281.0.
5- 브로모 -3- 플루오로 -6-[( 2 H 3 ) 메틸옥시 ]피리딘-2- 카르복실산
Figure pct00412
에틸 5-브로모-3-플루오로-6-[(2H3)메틸옥시]피리딘-2-카르복실레이트 (9.02 g, 32.1 mmol)를 THF (90 mL)에 용해시키고, 물 (18 mL) 및 수산화리튬 수화물 (1.75 g, 41.7 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반시켰다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하고, 수성인 것을 1 M 시트르산으로 pH 4로 산성화하고, 2-메틸-THF (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 5-브로모-3-플루오로-6-[(2H3)메틸옥시]피리딘-2-카르복실산 (8.2 g, 100%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 8.32 (1H, dd), 12.68 (1H, s). 19F NMR (376 MHz, DMSO, 30℃): -127.09. m/z: ES- [M-H]- 251.1.
Tert -부틸 (3 R )-4-{5- 브로모 -3- 플루오로 -6-[( 2 H 3 ) 메틸옥시 ]피리딘-2-카르보닐}-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00413
5-브로모-3-플루오로-6-[(2H3)메틸옥시]피리딘-2-카르복실산 (5.00 g, 19.8 mmol) 및 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (4.70 g, 21.74 mmol)를 THF (120 mL)에 용해시켰다. N,N-디이소프로필에틸아민 (8.60 mL, 49.4 mmol)을 첨가하고, 그 후 HATU (11.27 g, 29.64 mmol)를 첨가하였다(5분에 걸쳐 일부씩). 상기 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔사를 DCM (100 mL)에 용해시키고, 물 (100 mL)로 세척하였다. 수성 부분을 DCM (100 mL)으로 추출하고, 합한 유기물을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 농축시켜 갈색 점착성 오일을 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~70% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (3R)-4-{5-브로모-3-플루오로-6-[(2H3)메틸옥시]피리딘-2-카르보닐}-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (6.82 g, 76%)를 백색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.41 (9H, s), 2.74 - 3.22 (3H, m), 3.35 - 3.83 (3H, m), 3.9 - 4.16 (2H, m), 4.22 - 4.54 (1H, m), 4.69 - 4.97 (1H, m), 8.28 - 8.35 (1H, m). 19F NMR (376 MHz, DMSO, 30℃): -134.12, -132.96. m/z: ES+ [M+H]+ 451.2.
Tert -부틸 ( 6a R )-3- 브로모 -2-[( 2 H 3 ) 메틸옥시 ]-12-옥소- 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00414
탄산세슘 (14.8 g, 45.3 mmol)을 아세토니트릴 (120 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-{5-브로모-3-플루오로-6-[(2H3)메틸옥시]피리딘-2-카르보닐}-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (6.82 g, 15.1 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 현탁물을 80℃에서 하룻밤 교반시켰다. 상기 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반시키고, 그 후 고온일 때 여과시켰다. 여과액을 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하고, 생성된 잔사를 DCM (100 mL)에 용해시키고, 물 (50 mL), 그 후 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기 부분을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-2-[(2H3)메틸옥시]-12-옥소-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (6.49 g, 99%)를 연한 갈색 폼으로 제공하였다. 물질을 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.42 (9H, s), 3.45 (1H, s), 3.51 - 3.65 (3H, m), 3.7 - 3.92 (2H, m), 3.95 - 4.09 (1H, m), 4.20 (2H, d), 7.94 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 431.2.
Tert -부틸 ( 6a R )-3- 브로모 -2-[( 2 H 3 ) 메틸옥시 ]- 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00415
보란-THF 착물 용액 (THF 중 1.0 M 용액 60.2 mL, 60.12 mmol)를 0℃에서 THF (100 mL) 중 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-2-[(2H3)메틸옥시]-12-옥소-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (6.49 g, 15.1 mmol)의 용액에 적가하였다. 생성된 용액을 실온까지 되게 하고, 그 후 80℃에서 가열하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 실온까지 서서히 냉각시키고, 그 후 빙조에서 냉각시키고, 포화 염화암모늄 수용액 (80 mL)의 적가에 의해 켄칭하였다. 상기 혼합물을 물 (80 mL)로 희석시키고, 에틸 아세테이트 (100 mL)로 세척하였다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 추가분의 에틸 아세테이트 (100 mL)로 세척하였다. 합한 유기물을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 담황색 오일을 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-2-[(2H3)메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (4.98 g, 79%)를 백색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO): 1.40 (9H, s), 2.27 - 2.4 (1H, m), 2.58 - 2.72 (1H, m), 2.72 - 2.85 (2H, m), 3.05 (1H, t), 3.58 - 3.7 (4H, m), 3.92 (1H, d), 4.22 (1H, dd), 7.72 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 417.2.
Tert -부틸 ( 6a R )-3- 브로모 -4- 클로로 -2-[( 2 H 3 ) 메틸옥시 ]- 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00416
THF (100 mL) 중 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-2-[(2H3)메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (4.98 g, 11.9 mmol)의 용액을 -40℃까지 냉각시키고, 2,2,6,6-테트라메틸피페리디닐마그네슘 클로라이드 염화리튬 착물 용액 (THF/톨루엔 중 1.0 M 용액, 14.3 mL, 14.32 mmol)를 적가하였다. 상기 용액을 -40℃에서 교반시켰다. 30분 후, 추가분의 2,2,6,6-테트라메틸피페리디닐마그네슘 클로라이드 염화리튬 착물 용액 (THF/톨루엔 중 1.0 M 용액 14.3 mL, 14.32 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 -40℃에서 추가 30분 동안 교반시켰다. 퍼클로로에탄 (3.11 g, 13.1 mmol)을 한꺼번에 첨가하고, 상기 혼합물을 실온까지 가온하고, 하룻밤 교반시켰다. 상기 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 포화 염화암모늄 수용액 (100 mL)의 적가에 의해 켄칭하였다. 수성인 것을 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하고, 합한 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~30% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-4-클로로-2-[(2H3)메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (4.75 g, 88%)를 옅은 갈색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.40 (9H, s), 2.3 - 2.42 (1H, m), 2.55 - 2.66 (1H, m), 2.72 - 2.89 (3H, m), 3.04 - 3.14 (1H, m), 3.55 - 3.71 (3H, m), 4.00 (1H, d), 4.28 - 4.38 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 451.2.
Tert -부틸 (6a R )-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-[( 2 H 3 )메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00417
2-메틸-THF (90 mL) 및 2 M 수성 탄산나트륨 용액 (15.8 mL, 31.5 mmol) 중 tert-부틸 (6aR)-3-브로모-4-클로로-2-[(2H3)메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (4.75 g, 10.5 mmol) 및 (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (2.72 g, 15.8 mmol)의 용액을 질소로 10분 동안 탈기시켰다. RuPhos Pd G3 (0.879 g, 1.05 mmol) 및 디시클로헥실(2',6'-디이소프로폭시-[1,1'-바이페닐]-2-일)포스판 (0.491 g, 1.05 mmol)을 첨가하고, 상기 용액을 80℃에서 교반시켰다. 4시간 후 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물 (50 mL)로 희석시켰다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 에틸 아세테이트 (50 mL)로 세척하였다. 합한 유기물을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-[(2H3)메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (3.64 g, 69%)를 담황색 고형물로 수득하였다 (회전장애 이성질체들의 혼합물로서). m/z: ES+ [M+H]+ 499.2.
3- 클로로 -2-{( 6a R )-4- 클로로 -2-[( 2 H 3 ) 메틸옥시 ]-6, 6a,7 ,8,9,10- 헥사히드로 -12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-3-일}페놀 회전 이성질체 1 및 2
Figure pct00418
Tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-[(2H3)메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (3.64 g, 7.29 mmol)를 DCM (50 mL)에 현탁시키고, 트리플루오로아세트산 (5.58 mL, 72.9 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 3시간 동안 교반시켰다. 상기 용액을 감압 하에 농축시켜 적색 폼을 제공하고, 이를 DCM (100 mL)에 용해시키고, 포화 탄산수소나트륨 수용액 (100 mL)으로 세척하였다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 에틸 아세테이트 (100 mL)로 세척하였다. 합한 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 주황색 고형물을 제공하였다. 용출제로서 물 (1% NH3을 함유함) 및 아세토니트릴의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 역상 크로마토그래피 (Waters XSelect CSH C18 ODB, 450 g)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 첫 번째 용출되는 이성질체를 함유하는 분획을 수집하고, 농축시켜 3-클로로-2-{(6aR)-4-클로로-2-[(2H3)메틸옥시]-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-3-일}페놀의 회전장애 이성질체 1 (334 mg, 11%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO, 27℃): 2.29 - 2.39 (2H, m), 2.6 - 2.68 (2H, m), 2.72 - 2.83 (3H, m), 3.57 - 3.68 (3H, m), 3.96 (1H, d), 4.25 (1H, dd), 6.86 - 6.89 (1H, m), 6.98 (1H, dd), 7.23 (1H, t), 9.85 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 399.2. 두 번째 용출되는 이성질체를 함유하는 분획을 수집하고, 농축시켜 3-클로로-2-{(6aR)-4-클로로-2-[(2H3)메틸옥시]-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-3-일}페놀의 회전장애 이성질체 2 (641 mg, 22%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO, 27℃): 2.11 (1H, s), 2.29 - 2.38 (2H, m), 2.59 - 2.67 (2H, m), 2.72 - 2.84 (3H, m), 3.56 - 3.69 (2H, m), 3.97 (1H, d), 4.26 (1H, dd), 6.88 (1H, dd), 6.94 - 6.99 (1H, m), 7.23 (1H, t), 9.84 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 399.2.
1-[( 6a R )-4- 클로로 -3-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-2-[( 2 H 3 ) 메틸옥시 ]-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 111
Figure pct00419
3-클로로-2-{(6aR)-4-클로로-2-[(2H3)메틸옥시]-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-3-일}페놀의 회전 이성질체 1 (330 mg, 0.83 mmol)을 DCM (5 mL)에 현탁시키고, 트리에틸아민 (225 μL, 1.65 mmol)을 첨가하였다. 아크릴로일 클로라이드 (80 μL, 0.99 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 교반시켰다. 30분 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 크림색 고형물을 수득하였다. 조 고형물을 MeOH (5 mL) 및 MeOH 중 7 N 암모니아 (5 mL)에 용해시키고, 실온에서 교반시켰다. 10분 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 담황색 폼을 제공하였다. 용출제로서 물 (0.1% 포름산을 함유함) 및 MeCN의 감소하는 극성의 혼합물(25~50%의 구배)을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-[(2H3)메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (146 mg, 39%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 2.37 - 2.47 (1H, m), 2.7 - 2.78 (1H, m), 2.79 - 2.98 (2H, m), 3 - 3.16 (1H, m), 3.63 - 3.76 (2H, m), 3.85 - 3.98 (1H, m), 4.01 - 4.16 (2H, m), 4.31 - 4.5 (1H, m), 5.66 - 5.75 (1H, m), 6.14 (1H, d), 6.78 - 6.91 (2H, m), 6.98 (1H, dd), 7.23 (1H, t), 9.84 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 453.2.
1-[( 6a R )-4- 클로로 -3-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-2-[( 2 H 3 ) 메틸옥시 ]-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[2,3- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2, 실시예 112
Figure pct00420
3-클로로-2-{(6aR)-4-클로로-2-[(2H3)메틸옥시]-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-3-일}페놀의 회전 이성질체 2 (640 mg, 1.60 mmol)를 DCM (10 mL)에 현탁시키고, 트리에틸아민 (437 μL, 3.21 mmol)을 첨가하였다. 아크릴로일 클로라이드 (155 μL, 1.92 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 교반시켰다. 10분 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 크림색 고형물을 수득하였다. 상기 고형물을 아세토니트릴 (2 mL)/MeOH (2 mL)/디메틸술폭시드 (1 mL)에 현탁시키고, 여과시키고, 아세토니트릴 (2 mL)로 세척하고, 진공 오븐에서 45℃에서 건조시켜 1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-[(2H3)메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (290 mg, 40%)를 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 2.38 - 2.46 (1H, m), 2.7 - 2.79 (1H, m), 2.81 - 2.99 (2H, m), 3.01 - 3.13 (1H, m), 3.71 (2H, dd), 3.85 - 4.01 (1H, m), 4.01 - 4.16 (2H, m), 4.33 - 4.47 (1H, m), 5.65 - 5.78 (1H, m), 6.14 (1H, d), 6.74 - 6.92 (2H, m), 6.97 (1H, dd), 7.23 (1H, t), 9.81 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 453.2.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8-( 히드록시메틸 )-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00421
Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-요오도-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1 g, 1.84 mmol)를 THF (15 mL)에 용해시키고, 0℃까지 냉각시켰다. 이소프로필 마그네슘 클로라이드 염화리튬 착물 (THF 중 1.3 M 용액 1.56 mL, 2.02 mmol)을 적가하고, 상기 용액을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. DMF (0.17 mL, 2.21 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 0℃에서 5분 동안 교반시키고, 그 후 실온까지 되게 하고, 교반시켰다. 45분 후, 반응 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 포화 염화암모늄 수용액 (5 mL) 및 물 (5 mL)의 적가에 의해 켄칭하였다. 상기 용액을 에틸 아세테이트 (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-formyl-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트를 옅은 갈색 잔사 (850 mg)로 제공하였다. 이 조 물질 (820 mg)을 THF (10 mL)에 용해시키고, 빙조에서 냉각시켰다. 소듐 테트라히드로보레이트 (139 mg, 3.68 mmol)를 한꺼번에 첨가하고, 상기 혼합물을 실온까지 가온하고, 교반시켰다. 2시간 후 상기 혼합물을 염화암모늄 수용액 (5 mL) 및 물 (5 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트 (2 x 20 mL)로 추출하고, 합한 유기 부분을 염수 (10 mL)로 세척하였다. 유기물을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 갈색 폼을 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~100% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(히드록시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (300 mg, 36%)를 담황색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.40 (9H, s), 2.3 - 2.38 (1H, m), 2.44 - 2.48 (1H, m), 2.69 - 2.87 (2H, m), 3.04 - 3.14 (1H, m), 3.48 - 3.67 (3H, m), 3.72 (1H, d), 3.83 (1H, d), 4.33 (1H, dd), 4.47 (2H, d), 5.46 (1H, t), 7.38 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 447.2.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -10- 클로로 -8-( 메톡시메틸 )-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00422
수소화나트륨 (40 mg, 광유 중 60 중량%, 1.01 mmol)을 0℃까지 냉각시킨 DMF (2 mL) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(히드록시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (300 mg, 0.67 mmol) 및 요오도메탄 (213 μL, 3.35 mmol)의 용액에 한꺼번에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온까지 되게 하고, 교반시켰다. 10분 후 상기 혼합물을 포화 염화암모늄 수용액 (2 mL) 및 물 (2 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트 (2 x 10 mL)로 추출하고, 합한 유기물을 염수 (10 mL)로 세척하였다. 유기물을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~40% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(메톡시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.125 g, 40%)를 백색 폼으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃): 1.40 (9H, s), 2.32 - 2.37 (1H, m), 2.69 - 2.8 (3H, m), 3.05 - 3.15 (1H, m), 3.36 (3H, s), 3.53 - 3.68 (3H, m), 3.72 (1H, d), 3.82 (1H, d), 4.34 (1H, dd), 4.42 (2H, s), 7.33 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 461.2.
Tert -부틸 (12a R )-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(메톡시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00423
2-메틸-THF (2 mL) 및 2 M 수성 탄산나트륨 용액 (390 μL, 0.78 mmol) 중 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-10-클로로-8-(메톡시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (120 mg, 0.26 mmol) 및 (2-클로로-6-히드록시페닐)보론산 (134 mg, 0.78 mmol)의 용액을 질소로 10분 동안 탈기시켰다. RuPhos Pd G3 (22 mg, 0.03 mmol) 및 디시클로헥실(2',6'-디이소프로폭시-[1,1'-바이페닐]-2-일)포스판 (12 mg, 0.03 mmol)을 첨가하고, 상기 용액을 85℃에서 교반시켰다. 1시간 후 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물 (5 mL)로 희석시켰다. 유기 부분을 수집하고, 수성인 것을 에틸 아세테이트 (10 mL)로 세척하였다. 합한 유기물을 염수 (5 mL)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 갈색 잔사를 제공하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~60% 에틸 아세테이트)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(메톡시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (80 mg, 60%)를 담황색 고형물로 수득하였다 (회전장애 이성질체들의 혼합물로서). m/z: ES+ [M+H]+ 509.2.
1-[( 12a R )-10- 클로로 -9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-8-( 메톡시메틸 )-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 113 및 회전 이성질체 2, 실시예 114
Figure pct00424
Tert-부틸 (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(메톡시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (80 mg, 0.16 mmol)를 DCM (1 mL)에 현탁시키고, 트리플루오로아세트산 (120 μL, 1.57 mmol)을 첨가하였다. 1시간 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물을 MeOH 중 1.0 M NH3을 사용하여 용출시키고, 생성물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 담황색 건조 필름을 수득하고, 이를 DCM (1 mL)에 현탁시키고, 트리에틸아민 (40 μL, 0.29 mmol)을 첨가하였다. 아크릴로일 클로라이드 (14.21 μl, 0.18 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 교반시켰다. 10분 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 황색 잔사를 제공하였다. 조 잔사를 MeOH (1 mL) 및 MeOH 중 7 N 암모니아 (1 mL)에 용해시키고, 실온에서 교반시켰다. 10분 후 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 담황색 잔사를 제공하였다. 용출제로서 물 (0.1% 포름산을 함유함) 및 아세토니트릴의 감소하는 극성의 혼합물을 사용하여 분취용 HPLC (Waters XSelect CSH C18 ODB 컬럼, 5 μ 실리카, 30 mm 직경, 100 mm 길이)에 의해 조 생성물을 정제하였다. 첫 번째 용출되는 이성질체를 함유하는 분획을 수집하고, 농축시켜 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(메톡시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전장애 이성질체 1 (1 mg, 2%)을 황백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 2.53 - 2.66 (1H, m), 2.83 - 3.14 (3H, m), 3.25 (3H, s), 3.37 - 3.57 (1H, m), 3.63 - 3.9 (3H, m), 3.98 - 4.11 (2H, m), 4.12 - 4.24 (2H, m), 4.3 - 4.48 (1H, m), 5.74 (1H, d), 6.32 (1H, dd), 6.54 (1H, dd), 6.94 - 7.01 (1H, m), 7.11 (1H, dd), 7.27 - 7.3 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 463.2. 두 번째 용출되는 이성질체를 함유하는 분획을 수집하고, 농축시켜 1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(메톡시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전장애 이성질체 2 (3 mg, 5 %)를 황백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃): 2.47 - 2.66 (1H, m), 2.86 - 3.11 (3H, m), 3.26 (3H, s), 3.32 - 3.59 (1H, m), 3.69 (1H, d), 3.74 - 3.91 (2H, m), 3.96 - 4.25 (4H, m), 4.29 - 4.45 (1H, m), 5.74 (1H, d), 6.31 (1H, dd), 6.55 (1H, dd), 6.98 (1H, dd), 7.10 (1H, dd), 7.27 - 7.32 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 463.2.
4- 브로모 -2,3,6- 트리플루오로벤조산
Figure pct00425
2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 (48 mL, 284.39 mmol)을 질소 하에 -78℃에서 THF (500 mL) 중의 헥산 중 2.5 M n-부틸리튬 용액 (114 mL, 284.39 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반시켰다. 1-브로모-2,3,5-트리플루오로벤젠 (17.06 mL, 142.19 mmol)을 질소 하에 -78℃에서 상기 혼합물에 적가하였다. 생성된 용액을 -78℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 그 후 고체 이산화탄소 (18.77 g, 426.58 mmol)를 -78℃에서 일부씩 첨가하였다. 생성된 용액을 -78℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 2 M HCl (100 mL)로 켄칭하고, 물 (500 mL)로 희석시키고, EtOAc (3 x 300 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 갈색 오일로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 0~20% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 4-브로모-2,3,6-트리플루오로벤조산 (30 g, 83%)을 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 7.16 - 7.23 (1H, m) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음.
Tert -부틸 (3 R )-4-(4- 브로모 -2,3,6- 트리플루오로벤조일 )-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00426
DIPEA (61.6 mL, 352.95 mmol)를 0℃에서 DMF (400 mL) 중 4-브로모-2,3,6-트리플루오로벤조산 (30 g, 117.65 mmol), tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (38.2 g, 176.48 mmol) 및 HATU (89 g, 235.3 mmol)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (200 mL)로 켄칭하였다. EtOAc (1000 mL)로 희석시키고, 물 (300 mL) 및 포화 염수 (3 X 600 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 갈색 오일로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~50% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,3,6-트리플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (12 g, 23%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.46 (9H, s), 2.78 - 2.87 (2H, m), 2.87 - 3.17 (2H, m), 3.18 - 3.42 (1H, m), 3.51 - 3.67 (1H, m), 3.67 - 3.81 (1H, m), 3.82 - 4.36 (2H, m), 4.47 - 4.89 (1H, m), 7.14 - 7.23 (1H, m). m/z: ES+ [M-tBu]+ = 397.
Tert -부틸 ( 12a R )-9- 브로모 -7,10- 디플루오로 -6-옥소-3,4,12,12a- 테트라히드로 -6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00427
수소화나트륨 (1.456 g, 36.4 mmol)을 질소 하에 0℃에서 DMF (60 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-(4-브로모-2,3,6-트리플루오로벤조일)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 레이트 (11 g, 24.27 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (50 mL)로 켄칭하고, 물 (200 mL)로 희석시키고, EtOAc (2 x 300 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 염수 (2 x 400 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 황색 오일로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 10~50% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7,10-디플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (6 g, 57%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.42 (9H, s), 3.43 - 3.55 (1H, m), 3.56 - 3.73 (4H, m), 3.83 - 3.97 (1H, m), 4.10 - 4.19 (1H, m), 4.21 - 4.40 (2H, m), 7.57 - 7.70 (1H, m). m/z: ES+ [M-tBu]+ = 377.
Tert -부틸 (12a R )-9-브로모-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00428
수소화나트륨 (0.208 g, 5.19 mmol)을 질소 하에 0℃에서 DMF (30 m) 중 2-디메틸아미노에탄올 (0.383 mL, 3.81 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반시켰다. DMF (30 mL) 중 Tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7,10-디플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4] 벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.5 g, 3.46 mmol)를 질소 하에 0℃에서 상기 혼합물에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (50 mL)로 켄칭하고, EtOAc (3 x 75 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 포화 염수 (2 x 150 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 황색 오일로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: DCM 중 10~30% MeOH)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1.1 g, 63%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.42 (9H, s), 2.21 (6H, s), 2.54 - 2.64 (2H, m), 3.22 - 3.30 (1H, m), 3.30 - 3.39 (2H, m), 3.61 - 3.82 (2H, m), 3.90 - 4.16 (5H, m), 4.15 - 4.29 (1H, m), 7.29 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 502.
Tert -부틸 (12a R )-9-브로모-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00429
(아세틸아세토나토)(1,5-시클로옥타디엔)-로듐(I) (136 mg, 0.44 mmol)을 질소 하에 25℃에서 THF (50 mL) 중 페닐실란 (1896 mg, 17.52 mmol) 및 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-6-옥소-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (1100 mg, 2.19 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 NH4F (50 mL)로 켄칭하고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 생성물을 황색 오일로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 0~80% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.8 g, 75%)를 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.29 - 2.43 (1H, m), 2.53 (6H, s), 2.62 - 2.67 (1H, m), 2.69 - 2.81 (2H, m), 2.97 - 3.03 (1H, m), 3.40 - 3.54 (2H, m), 3.57 - 3.68 (2H, m), 3.68 - 3.81 (2H, m), 3.98 - 4.10 (1H, m), 4.09 - 4.23 (2H, m), 4.29 - 4.39 (1H, m), 7.05 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 488.
Tert -부틸 (12a R )-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-카르복실레이트
Figure pct00430
(2-클로로-6-메톡시페닐)보론산 (371 mg, 2.15 mmol)을 질소 하에 25℃에서 1,4-디옥산 (16 mL) 및 H2O (4 mL)(4:1의 비) 중 K2CO3 (396 mg, 2.87 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (166 mg, 0.14 mmol) 및 tert-부틸 (12aR)-9-브로모-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (700 mg, 1.43 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% 포름산) 중 20~40% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (0.5 g, 65%)를 무색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.44 (9H, s), 2.90 (6H, s), 3.07 - 3.21 (2H, m), 3.50 - 3.61 (2H, m), 3.75 - 3.92 (2H, m), 4.19 - 4.97 (9H, m), 6.67 - 6.83 (1H, m), 6.93 (1H, d), 7.02 (1H, d), 7.24 (1H, t), 9.97 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 536.
3- 클로로 -2-{( 12a R )-7-[2-(디메틸아미노) 에톡시 ]-10- 플루오로 -1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀
Figure pct00431
TFA (1 mL, 12.98 mmol)를 25℃의 DCM 중 tert-부틸 (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-카르복실레이트 (500 mg, 0.93 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-{(12aR)-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀 (0.4 g, 98%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.82 - 2.90 (2H, m), 2.89 (6H, s), 2.94 - 3.19 (4H, m), 3.39 - 3.60 (2H, m), 3.70 - 4.01 (3H, m), 4.13 - 4.32 (3H, m), 4.36 - 4.47 (1H, m), 6.58 - 6.69 (1H, m), 6.86 - 6.96 (1H, m), 7.01 (1H, d), 7.24 (1H, d), 9.01 (1H, t), 9.96 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 436.
1-[( 12a R )-9-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-7-[2-(디메틸아미노) 에톡시 ]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6 H -피라지노[2,1- c ][1,4]벤족사제핀-2(1 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 115 및 회전 이성질체 2, 실시예 116
Figure pct00432
아크릴로일 클로라이드 (83 mg, 0.92 mmol)를 질소 하에 0℃에서 DMF (10 mL) 중 3-클로로-2-{(12aR)-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일}페놀 (400 mg, 0.92 mmol) 및 DIPEA (481 μl, 2.75 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (1 mL)로 켄칭하고, 직접적으로 분취용 HPLC로 정제하였다 (컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 30*150 mm, 5 um; 이동상 A:물 (0.1% 포름산), 이동상 B:MeCN; 유량:60 mL/분; 구배:8 B에서 10분 내에 18 B까지; 254；220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 1 (0.059 g, 11%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.26 (6H, s), 2.40 - 2.43 (1H, m), 2.56 - 2.73 (3H, m), 2.73 - 3.41 (3H, m), 3.56 - 3.60 (1H, m), 3.67 - 3.90 (1H, m), 3.82 - 4.29 (5H, m), 4.38 - 4.31 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.13 (1H, d), 6.53 (1H, d), 6.81 - 6.90 (1H, m), 6.84 - 7.05 (2H, m), 7.22 - 7.30 (1H, m) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 490. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온의 회전 이성질체 2 (0.055 g, 11)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD, 30℃) 2.58 (1H, d), 2.94 - 3.01 (7H, m), 3.00 - 3.32 (3H, m), 3.60 (2H, d), 3.61 - 4.04 (3H, m), 4.22 - 4.67 (5H, m), 5.79 (1H, d), 6.14 - 6.38 (1H, m), 6.67 (1H, d), 6.75 - 6.96 (2H, m), 6.99 (1H, d), 7.21 - 7.25 (1H, m) 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 490.
메틸 2,5- 디클로로 -4- 플루오로니코티네이트
Figure pct00433
THF (300 mL) 중 메틸 2-클로로-4-플루오로피리딘-3-카르복실레이트 (20 g, 105.5 mmol)의 용액을 질소 하에 -45℃까지 냉각시키고, THF 중 1 M 리튬 마그네슘 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘-1-이드 디클로라이드 (127 mL, 126.6 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 -45℃에서 20분 동안 교반시키고, 그 후 THF (50 mL) 중 퍼클로로에탄 (31.2 g, 131.88 mmol)의 용액을 적가하고, 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반시켰다. 반응물을 포화 염화암모늄의 첨가에 의해 켄칭하고, 그 후 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 증발시켰다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 헵탄 중 0~50% EtOAc)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 메틸 2,5-디클로로-4-플루오로니코티네이트 (14 g, 59%)를 무색 오일로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 4.02 (3H, s), 8.47 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 224.
2,5- 디클로로 -4- 플루오로피리딘 -3- 카르브알데히드
Figure pct00434
DCM (200 mL) 중 메틸 2,5-디클로로-4-플루오로니코티네이트 (14 g, 50 mmol)의 용액을 질소 하에 -78℃까지 냉각시켰다. 내부 반응물 온도를 -70℃ 미만으로 유지하면서 헥산 중 1 M 디-이소부틸알루미늄 히드라이드 용액 (52.5 mL, 52.5 mmol)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 2 M HCl (100 mL)로 켄칭하고, DCM (2 x 200 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 2,5-디클로로-4-플루오로피리딘-3-카르브알데히드 (8 g, 82%)를 무색 오일로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 8.60 (1H, d), 10.39 (1H, d). 질량 이온은 관찰되지 않음.
Tert -부틸 (3 R )-4-[(2,5- 디클로로 -4- 플루오로피리딘 -3-일) 메틸 ]-3-( 히드록시메틸 )피페라진-1-카르복실레이트
Figure pct00435
빙초산 (0.212 mL, 3.71 mmol)을 20℃의 DCM (150 mL) 중 2,5-디클로로-4-플루오로피리딘-3-카르브알데히드 (8 g, 37.12 mmol) 및 tert-부틸 (3R)-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (9.63 g, 44.54 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 그 후 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (11.8 g, 55.67 mmol)를 20℃에서 상기 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 추가의 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (3.93 g, 18.56 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 추가 4시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액의 조심스러운 첨가에 의해 켄칭하고, 수성 층을 DCM으로 추출하였다. 유기 층을 포화 염수로 세척하고, 건조시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켰다. 수득된 잔사를 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~30% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (3R)-4-[(2,5-디클로로-4-플루오로피리딘-3-일)메틸]-3-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (9 g, 62%)를 무색 오일로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 30℃) 1.41 (9H, s), 2.33 - 2.45 (1H, m), 2.63 - 2.84 (2H, m), 3.24 - 3.34 (1H, m), 3.41 - 3.55 (2H, m), 3.57 - 3.64 (1H, m), 3.65 - 3.73 (2H, m), 3.74 - 3.79 (1H, m), 3.82 - 3.94 (1H, m), 4.09 - 4.19 (1H, m), 8.38 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ = 394.
Tert -부틸 ( 6a R )-1,4- 디클로로 - 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H - 피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ] [1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00436
질소 하에 DMF (100 mL) 중 tert-부틸 (3R)-4-[(2,5-디클로로-4-플루오로피리딘-3-일)메틸]-3-(히드록시메틸) 피페라진-1-카르복실레이트 (9 g, 22.83 mmol)의 용액을 0℃까지 냉각시켰다. 수소화나트륨 (2.74 g, 68.48 mmol)을 한꺼번에 첨가하고, 반응 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (15 mL)로 켄칭하고, EtOAc (200 mL)로 희석시켰다. 유기 층을 물 (3 x 250 mL), 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 그 후 증발시켜 조 생성물을 갈색 오일로 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~25% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (8 g, 94%)를 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.41 (9H, s), 2.60 - 2.66 (1H, m), 2.80 - 2.97 (4H, m), 3.70 - 3.77 (1H, m), 3.78 - 3.85 (1H, m), 3.88 - 3.97 (1H, m), 3.98 - 4.07 (1H, m), 4.14 - 4.23 (1H, m), 4.50 - 4.59 (1H, m), 8.30 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 374.
Tert -부틸 ( 6a R )-1,4- 디클로로 -3- 요오도 - 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H - 피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ] [1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00437
Tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (8 g, 21.38 mmol)를 THF (100 mL)에 용해시키고, -45℃까지 냉각시켰다(질소 하에). THF/톨루엔 중 1 M 2,2,6,6-테트라메틸피페리디닐마그네슘 클로라이드 염화리튬 착물 용액 (64.1 mL, 64.13 mmol)을 적가하고, 생성된 혼합물을 -45℃에서 30분 동안 교반시켰다. 그 후 THF (50 mL) 중 이요오드 (8.14 g, 32.06 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -45℃에서 15분 동안 교반시키고, 그 후 0℃까지 가온하고, 포화 염화암모늄 (10 mL)으로 0℃에서 켄칭하고, 물 (200 mL)로 희석시키고, 그 후 EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 티오황산나트륨, 염수로 세척하고, 그 후 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 조 갈색 오일을 수득하였다. 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~40% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-요오도-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (9.7 g, 91%)를 황색 오일로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.60 - 2.69 (1H, m), 2.73 - 3.06 (3H, m), 3.33 - 3.42 (1H, m), 3.66 - 3.85 (2H, m), 3.87 - 4.04 (2H, m), 4.16 - 4.24 (1H, m), 4.45 - 4.60 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ = 500.
Tert -부틸 ( 6a R )-1,4- 디클로로 -3-(2- 클로로 -6- 메톡시페닐 )- 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00438
RuPhos-Pd-G3 (0.936 g, 1.12 mmol) 및 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시바이페닐 (0.522 g, 1.12 mmol)을 1,4-디옥산 (32 mL) 및 물 (8 mL) (4:1의 비) 중 tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-요오도-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (5.60g, 11.20 mmol), (2-클로로-6-메톡시페닐)보론산 (2.71 g, 14.56 mmol) 및 탄산나트륨 (2.37 g, 22.39 mmol)의 탈산소화 현탁물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에 50℃에서 3시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~40% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-(2-클로로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (2.2 g, 38%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.55 - 2.64 (1H, m), 2.77 - 3.01 (3H, m), 3.54 - 3.63 (1H, m), 3.74 - 3.98 (3H, m), 4.03 - 4.31 (2H, m), 4.58 - 4.69 (1H, m), 6.84 - 6.92 (1H, m), 7.07 - 7.17 (2H, m), 7.24 (1H, t), 7.46 (1H, t), 8.18 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 514.
Tert -부틸 (6a R )-4-클로로-3-(2-클로로-6-메톡시페닐)-1-(프로프-1-인-1-일)-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00439
N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (3.39 mL, 19.42 mmol) 및 THF 중 1 M 프로프-1-인 (19.42 mL, 19.42 mmol)을 질소 분위기 하에 20℃에서 DMF (15 mL) 중 tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-(2-클로로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (1.00 g, 1.94 mmol), 1,1'-페로센디일-비스(디페닐포스핀) (0.108 g, 0.19 mmol) 및 메탄술포나토 1,1-페로센디일-비스(디페닐포스피노) (2'-아미노-1,1'-바이페닐-2-일) 팔라듐(II) (0.179 g, 0.19 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 마이크로웨이브에서 120℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 실리카 크로마토그래피(용출 구배: 석유 에테르 중 0~40% THF)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-메톡시페닐)-1-(프로프-1-인-1-일)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.39 g, 39%)를 갈색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 1.40 (9H, s), 2.09 (3H, s), 2.55 - 2.73 (2H, m), 2.79 - 2.89 (2H, m), 2.90 - 3.02 (1H, m), 3.69 (3H, d), 3.71 - 3.86 (2H, m), 4.00 - 4.13 (3H, m), 4.49 - 4.59 (1H, m), 7.11 (2H, t), 7.43 (1H, t). m/z: ES+ [M+H]+ = 518.
3- 클로로 -2-[( 6a R )-4- 클로로 -1-( 프로프 -1-인-1-일)-6, 6a,7 ,8,9,10- 헥사히드로 -12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-3-일]페놀
Figure pct00440
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 (3.47 mL, 3.47 mmol)를 질소 하에 0℃에서 DCM (5 mL) 중 tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-메톡시페닐)-1-(프로프-1-인-1-일)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.3 g, 0.58 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (20 mL)로 켄칭하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 잔사를 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 0~80% MeCN)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(6aR)-4-클로로-1-(프로프-1-인-1-일)-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-3-일]페놀 (0.14 g, 60%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.09 (3H, d), 2.75 - 2.92 (1H, m), 2.93 - 3.01 (2H, m), 3.01 - 3.14 (2H, m), 3.24 - 3.35 (2H, m), 4.00 - 4.12 (1H, m), 4.16 - 4.26 (2H, m), 4.55 - 4.68 (1H, m), 6.86 - 7.01 (2H, m), 7.17 - 7.33 (1H, m), 9.98 (1H, s). 하나의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 404.
1-[( 6a R )-4- 클로로 -3-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-1-( 프로프 -1-인-1-일)-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 117 및 회전 이성질체 2, 실시예 118
Figure pct00441
아크릴로일 클로라이드 (19.5 mg, 0.22 mmol) 및 N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (168 μl, 0.96 mmol)을 질소 하에 -20℃에서 DMF (3 mL) 중 3-클로로-2-[(6aR)-4-클로로-1-(프로프-1-인-1-일)-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-3-일]페놀 (0.13 g, 0.32 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 여과시켰다. 여과액을 직접적으로 정제하고, 각각의 회전장애 이성질체를 분리하였다(다음에 의해: 분취용 HPLC 컬럼: SunFire C18 OBD Prep 컬럼, 100 Å, 5 μm, 19 mm X 250 mm; 이동상 A: 물 (0.1% FA), 이동상 B: MeCN; 유량: 20 mL/분; 구배: 35 B에서 10분 내에 45 B까지; 254；220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켰다. 첫 번째의, 1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-(프로프-1-인-1-일)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1 (0.013 g, 9%)을 백색 고형물로 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.11 (3H, s), 2.53 - 2.58 (1H, m), 2.61 - 2.75 (1H, m), 2.76 - 3.01 (2H, m), 3.04 - 3.21 (1H, m), 3.88 - 4.16 (4H, m), 4.16 - 4.31 (1H, m), 4.48 - 4.64 (1H, m), 5.72 (1H, d), 6.14 (1H, d), 6.74 - 6.93 (2H, m), 6.97 (1H, d), 7.25 (1H, t), 9.95 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 458. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-(프로프-1-인-1-일)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2 (9.1 mg, 6%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.11 (3H, s), 2.53 - 2.58 (1H, m), 2.61 - 2.75 (1H, m), 2.76 - 3.01 (2H, m), 3.04 - 3.21 (1H, m), 3.88 - 4.16 (4H, m), 4.16 - 4.31 (1H, m), 4.48 - 4.64 (1H, m), 5.72 (1H, d), 6.14 (1H, d), 6.74 - 6.93 (2H, m), 6.97 (1H, d), 7.25 (1H, t), 9.95 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 458.
Tert -부틸 (6a R )-4-클로로-3-(2-클로로-6-메톡시페닐)-1-[(트리메틸실릴)에티닐]-6a,7,9,10-테트라히드로-12 H -피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ][1,4]옥사제핀-8(6 H )-카르복실레이트
Figure pct00442
N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (2 mL, 11.65 mmol) 및 에티닐트리메틸실란 (1.5 mL, 11.65 mmol)을 질소 분위기 하에 20℃에서 DMF (10 mL) 중 tert-부틸 (6aR)-1,4-디클로로-3-(2-클로로-6-메톡시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.6 g, 1.17 mmol), 1,1'-페로센디일-비스(디페닐포스핀) (64.6 mg, 0.12 mmol) 및 메탄술포나토 1,1-페로센디일-비스(디페닐포스피노) (2'-아미노-1,1'-바이페닐-2-일) 팔라듐(II) (108 mg, 0.12 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 마이크로웨이브에서 120℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 0~100% MeCN)로 정제하였다. 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-메톡시페닐)-1-[(트리메틸실릴)에티닐]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (0.3 g, 45%)을 흑색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 0.25 (9H, s), 1.40 (9H, s), 2.77 - 3.03 (3H, m), 3.11 - 3.18 (1H, m), 3.70 (3 H, d), 3.78 - 3.93 (3H, m), 4.25 - 4.40 (3H, m), 4.61 - 4.67 (1H, m), 7.13 (2H, t), 7.45 (1H, t). m/z: ES+ [M+H]+ = 576.
3- 클로로 -2-[( 6a R )-4- 클로로 -1- 에티닐 -6, 6a,7 ,8,9,10- 헥사히드로 -12 H - 피라지노[2,1- c ]피리도[3,4- f ] [1,4]옥사제핀-3-일]페놀
Figure pct00443
DCM 중 1 M 삼브롬화붕소 (1977 μl, 1.98 mmol)를 질소 하에 0℃에서 DCM (2 mL) 중 tert-부틸 (6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-메톡시페닐)-1-[(트리메틸실릴)에티닐]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-카르복실레이트 (190 mg, 0.33 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 MeOH (20 mL)로 켄칭하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 잔사를 플래시 C18-플래시 크로마토그래피(용출 구배: 물 (0.1% TFA) 중 0~100% MeCN)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 SCX 컬럼을 사용하여 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 7 M NH3/MeOH를 사용하여 상기 컬럼으로부터 원하는 생성물을 용출시키고, 순수 분획을 건조상태까지 증발시켜 3-클로로-2-[(6aR)-4-클로로-1-에티닐-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-3-일]페놀 (0.085 g, 66%)을 황색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.54 - 2.68 (2H, m), 2.69 - 2.88 (3H, m), 2.90 - 3.07 (2H, m), 3.68 - 3.77 (1H, m), 4.02 - 4.12 (2H, m), 4.45 - 4.67 (2H, m), 6.87 - 7.01 (2H, m), 7.23 - 7.32 (1H, m). 2개의 교환가능한 양성자가 보이지 않음. m/z: ES+ [M+H]+ = 390.
1-(( 6aR )-4- 클로로 -3-(2- 클로로 -6- 히드록시페닐 )-1- 에티닐 - 6a,7 ,9,10- 테트라히드로 -12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일)프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1, 실시예 119 및 회전 이성질체 2, 실시예 120
Figure pct00444
아크릴로일 클로라이드 (19.71 mg, 0.22 mmol) 및 N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (114 μl, 0.65 mmol)을 질소 하에 -20℃에서 DMF (2 mL) 중 3-클로로-2-[(6aR)-4-클로로-1-에티닐-6,6a,7,8,9,10-헥사히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-3-일]페놀 (85.00 mg, 0.22 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 여과시켰다. 여과액을 직접적으로 정제하고, 각각의 회전장애 이성질체를 분리하였다(다음에 의해: 분취용 HPLC 컬럼: SunFire C18 OBD Prep 컬럼, 100 Å, 5 μm, 19 mm X 250 mm; 이동상 A: 물 (0.1% FA), 이동상 B: MeCN; 유량: 20 mL/분; 구배: 35 B에서 10분 내에 45 B까지; 254；220 nm). 원하는 화합물을 함유하는 분획을 건조상태까지 증발시켜 첫 번째의, 1-((6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-에티닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일)프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 1 (0.011 g, 12%)을 백색 고형물로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.52 - 2.61 (1H, m), 2.64 - 2.73 (1H, m), 2.82 - 3.00 (2H, m), 3.09 - 3.22 (1H, m), 3.89 - 4.17 (4H, m), 4.18 - 4.36 (1H, m), 4.51 - 4.62 (1H, m), 4.67 (1H, s), 5.63 - 5.75 (1H, m), 6.14 (1H, d), 6.77 - 6.89 (1H, m), 6.94 (2H, dd), 7.27 (1H, t), 10.01 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 444. 이것에 이어서 백색 고형물로서의 1-((6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-에티닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일)프로프-2-엔-1-온 회전 이성질체 2 (6.6 mg, 7%)가 뒤따랐다. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.52 - 2.61 (1H, m), 2.64 - 2.73 (1H, m), 2.82 - 3.00 (2H, m), 3.09 - 3.22 (1H, m), 3.89 - 4.17 (4H, m), 4.18 - 4.36 (1H, m), 4.51 - 4.62 (1H, m), 4.67 (1H, s), 5.63 - 5.75 (1H, m), 6.14 (1H, d), 6.77 - 6.89 (1H, m), 6.94 (2H, dd), 7.27 (1H, t), 10.01 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ = 444.

Claims (16)

  1. 하기 화학식 A의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염:
    [화학식 A]
    Figure pct00445

    (여기서,
    A는 페닐 또는 이환식 헤테로아릴 기이며;
    X 및 Y는 이중 결합에 의해 연결되며 i) X는 CR7이고 Y는 CR8이거나, ii) X는 N이고 Y는 CR8이거나, iii) X는 CR7이고 Y는 N이거나; 또는
    X 및 Y는 함께 C(O)NR9이거나; 또는
    X 및 Y는 Z로 치환된 방향족 고리에 융합된 선택적 치환 5원 또는 6원 N-복소환의 인접 고리 원자이고, X 및 Y는 둘 다 C이거나 C 및 N이며;
    Z는 O, NH, 또는 NMe이며;
    R1은 F, Cl, Br, OH, CH2OH, OMe, CH2OMe, C1-C3알킬 및 C1-C3플루오로알킬로부터 독립적으로 선택되며;
    n은 0, 1, 2 또는 3이며;
    R2는 H, F, Cl, CCH, CCMe, CN, Br, C1-C3알킬, C1-C3플루오로알킬, OMe 또는 OEt이며;
    R3a 및 R3b는 함께 =O이거나 R3a 및 R3b는 H이며;
    R4는 H 또는 Me이며;
    R5는 H 또는 Me이며;
    R6은 H 또는 CH2NMe2이며;
    R7 및 R8은 H, F, Cl, CCH, CC(C1-C3알킬), CCCH2NMe2, CCCH2O(C1-C3알킬), CN, Me, C1-C6알킬, OH, OMe, O(C1-C3알킬), O(C1-C3듀테로알킬), O(C1-C3플루오로알킬), O(C3-C6시클로알킬), C1-C3플루오로알킬, OCH2CH2NMe2, OCH2CH2OMe, CH2OMe, OCH2CH2N(CH2CH2)2CH, OCH2CH2N(CH2CH2)2O, OCH2CH2(2-피리딜) 또는 선택적 치환 3원, 4원, 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환으로부터 독립적으로 선택되거나; 또는
    R7 및 R8은 조합되어 선택적 치환 5원 또는 6원 탄소환 또는 복소환을 형성하며;
    R9는 H, Me, Et, C3H7 및 C1-C3플루오로알킬로부터 선택됨).
  2. 제1항에 있어서, i) X는 CR7이고 Y는 CR8이거나, ii) X는 N이고 Y는 CR8이거나, iii) X는 CR7이고 Y는 N인 화합물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, Z는 O인 화합물.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, R3a 및 R3b는 H인 화합물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, R4는 H인 화합물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R6은 H인 화합물.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, A는 페닐인 화합물.
  8. 제1항에 있어서, 다음으로부터 선택되는 화합물:
    (12aS)-2-아크릴로일-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-6-온;
    1-((12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-히드록시-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온;
    (12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온;
    1-((12aR)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온;
    (12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온;
    1-[(12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-히드록시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-(1H-이미다졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-7-카르보니트릴;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-7-(1H-피라졸-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-((12aR)-10-클로로-8-플루오로-9-(5-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-4-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온;
    (12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온;
    (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴;
    (12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메틸-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-6-온;
    1-[(12aR)-8,10-디클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    8-[(12aR)-10-클로로-8-플루오로-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9-일]-7-메틸이소퀴놀린-1(2H)-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-메톡시-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    (12aS)-10-클로로-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    (12aS)-10-클로로-11-메틸-9-(5-메틸-1H-인다졸-4-일)-2-(프로프-2-에노일)-1,3,4,11,12,12a-헥사히드로피라지노[2,1-c][1,4]벤조디아제핀-6(2H)-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2,3-디플루오로-6-히드록시페닐)-8-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    (12aR)-10-클로로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴;
    1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-플루오로-6-(히드록시메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-8,10-디플루오로-9-[2-히드록시-6-(트리플루오로메틸)페닐]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-9-(2-에틸-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-9-[2-(디플루오로메틸)-6-히드록시페닐]-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    (12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴;
    (12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-(프로프-2-에노일)-1,2,3,4,12,12a-헥사히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-8-카르보니트릴;
    1-[(12aR)-9-(2-브로모-6-히드록시페닐)-8,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-8-클로로-10-플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-8-클로로-10-에티닐-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-10-에티닐-8-플루오로-9-(2-히드록시-6-메틸페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-8-(프로프-2-에노일)-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온;
    1-[(6aR)-1,4-디클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    (6aR)-4-클로로-3-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8-(프로프-2-에노일)-2,6,6a,7,8,9,10,12-옥타히드로-1H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-1-온;
    1-[(8aR)-6-클로로-5-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-8a,9,11,12-테트라히드로-14H-피라지노[2,1-c][1,2,4]트리아졸로[4',3':1,2]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-10(8H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온; 및
    1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-2-메틸-2,7a,8,10,11,13-헥사히드로피라지노[2',1':3,4][1,4]옥사제피노[7,6-g]인다졸-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-((12aR)-10-클로로-8-에티닐-9-(2-플루오로-6-히드록시페닐)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온;
    1-[(7aR)-5-클로로-4-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-메틸-1,7a,8,10,11,13-헥사히드로이미다조[4,5-g]피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-9(7H)-일]프로프-2-엔-1-온 ;
    1-[(12aR)-8-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-에티닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-10-메틸-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7,8-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-에티닐-7,10-디플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(디플루오로메톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(시클로프로필옥시)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-((12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(3-(디메틸아미노)프로프-1-인-1-일)-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-벤조[f]피라지노[2,1-c][1,4]옥사제핀-2(1H)-일)프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[(피리딘-4-일)메톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(2-메톡시에톡시)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-10-플루오로-8-[2-(피페리딘-1-일)에톡시]-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(프로프-1-인-1-일)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-2-[(2H3)메틸옥시]-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[2,3-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(12aR)-10-클로로-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-8-(메톡시메틸)-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온; 및
    1-[(12aR)-9-(2-클로로-6-히드록시페닐)-7-[2-(디메틸아미노)에톡시]-10-플루오로-3,4,12,12a-테트라히드로-6H-피라지노[2,1-c][1,4]벤족사제핀-2(1H)-일]프로프-2-엔-1-온;
    1-[(6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-(프로프-1-인-1-일)-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일]프로프-2-엔-1-온; 및
    1-((6aR)-4-클로로-3-(2-클로로-6-히드록시페닐)-1-에티닐-6a,7,9,10-테트라히드로-12H-피라지노[2,1-c]피리도[3,4-f][1,4]옥사제핀-8(6H)-일)프로프-2-엔-1-온;
    또는 이의 제약상 허용가능한 염.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 및 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물.
  10. 의약으로 사용하기 위한, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염.
  11. KRAS, NRAS 또는 HRAS G12C 돌연변이에 의해 매개되는 장애의 치료에 사용하기 위한 제10항에 따른 화합물.
  12. 암 치료에 사용하기 위한 제10항 또는 제11항에 따른 화합물.
  13. 치료를 필요로 하는 환자에게 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법.
  14. 제13항에 있어서, 치료를 필요로 하는 환자가 KRAS, NRAS 또는 HRAS G12C 돌연변이에 의해 매개되는 장애를 갖는, 치료 방법.
  15. 제13항 또는 제14항에 있어서, 치료를 필요로 하는 환자가 암을 앓고 있는, 치료 방법.
  16. 의약, 예를 들어 암 치료용 의약의 제조에 있어서의, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 용도.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220087566A (ko) * 2019-12-11 2022-06-24 일라이 릴리 앤드 캄파니 KRas G12C 억제제

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019217307A1 (en) 2018-05-07 2019-11-14 Mirati Therapeutics, Inc. Kras g12c inhibitors
EP3908283A4 (en) 2019-01-10 2022-10-12 Mirati Therapeutics, Inc. KRAS G12C INHIBITORS
JP2022546043A (ja) 2019-08-29 2022-11-02 ミラティ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｋｒａｓ ｇ１２ｄ阻害剤
KR20220091480A (ko) 2019-09-24 2022-06-30 미라티 테라퓨틱스, 인크. 병용 요법
IL292438A (en) 2019-10-28 2022-06-01 Merck Sharp & Dohme Small molecules that inhibit the g12c mutant of kras
JP2023505100A (ja) 2019-11-27 2023-02-08 レボリューション メディシンズ インコーポレイテッド 共有ｒａｓ阻害剤及びその使用
IL294048A (en) 2019-12-20 2022-08-01 Mirati Therapeutics Inc sos1 inhibitors
TWI799871B (zh) * 2020-05-27 2023-04-21 大陸商勁方醫藥科技(上海)有限公司 三環并環類化合物，其製法與醫藥上的用途
CN115916194A (zh) 2020-06-18 2023-04-04 锐新医药公司 用于延迟、预防和治疗针对ras抑制剂的获得性抗性的方法
AU2021344830A1 (en) 2020-09-03 2023-04-06 Revolution Medicines, Inc. Use of SOS1 inhibitors to treat malignancies with SHP2 mutations
CN114539286B (zh) * 2020-11-24 2024-02-02 成都百裕制药股份有限公司 哌嗪衍生物及其在医药上的应用
TW202235082A (zh) 2020-12-04 2022-09-16 美商美國禮來大藥廠 Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ抑制劑
US20230107642A1 (en) 2020-12-18 2023-04-06 Erasca, Inc. Tricyclic pyridones and pyrimidones
AU2022254674A1 (en) * 2021-04-08 2023-10-12 Genentech, Inc. Oxazepine compounds and uses thereof in the treatment of cancer
CA3224341A1 (en) 2021-09-01 2023-03-09 Novartis Ag Pharmaceutical combinations comprising a tead inhibitor and uses thereof for the treatment of cancers
TW202325298A (zh) * 2021-11-01 2023-07-01 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 含氮的四環化合物、其製備方法及其在醫藥上的應用
TW202333800A (zh) 2021-12-28 2023-09-01 英商阿斯特捷利康英國股份有限公司 抗體-藥物結合物及rasg12c抑制劑之組合
WO2023168036A1 (en) 2022-03-04 2023-09-07 Eli Lilly And Company Method of treatment including kras g12c inhibitors and shp2 inhibitors
WO2023196887A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Eli Lilly And Company Method of treatment including kras g12c inhibitors and aurora a inhibitors

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008007661A1 (fr) 2006-07-11 2008-01-17 Takeda Pharmaceutical Company Limited Composé hétérocyclique tricycique et son utilisation
NO2714752T3 (ko) * 2014-05-08 2018-04-21
GB201409624D0 (en) * 2014-05-30 2014-07-16 Astrazeneca Ab 1,3,4-thiadiazole compounds and their use in treating cancer
GB201519406D0 (en) * 2015-11-03 2015-12-16 Astrazeneca Ab Imidazo[4,5-c]quinolin-2-one compounds and their use in treating cancer
AR111776A1 (es) * 2017-05-11 2019-08-21 Astrazeneca Ab Heteroarilos inhibidores de las proteínas ras mutantes de g12c
TW202012415A (zh) * 2018-05-08 2020-04-01 瑞典商阿斯特捷利康公司 化學化合物

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220087566A (ko) * 2019-12-11 2022-06-24 일라이 릴리 앤드 캄파니 KRas G12C 억제제

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