CN113030076A - 一种***分泌物多联检测试纸、制备方法及其测试方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种***分泌物多联检测试纸、制备方法及其测试方法，所述***分泌物多联检测试纸包括干化学检测试纸和色标卡，所述***分泌物多联检测试纸的制备方法包括：基体条或试纸卡的制备；项目原纸/项目反应块的制备，还公开了所述***分泌物多联检测试纸的测试方法，包括如下步骤：采集***分泌物；制备样本液；将样本液滴加至干化学检测试纸，与色标卡对判读结果，本发明提出的***分泌物多联检测试纸各项目中的显色剂或是反应促进剂加快反应速度，同时不需要二次再滴加显色液，且反应时间只需5min，无需终止液与显色液，准确、快速、方便，可以满足门诊的快速有效诊断的需求，并配置色标卡，可实现目测功能，用于女性个人健康监测。

Description

一种***分泌物多联检测试纸、制备方法及其测试方法
技术领域
本发明涉及体外诊断试剂技术领域，尤其涉及一种***分泌物多联检测试纸、制备方法及其测试方法。
背景技术
女性下生殖道感染是常见的妇科病、多发病，发病频次高，每年人次超过3亿人次，治疗费用高，但治愈率低、复发率高，同时抗生素合理使用率低，助长了***微生态失衡，严重威胁女性生命安全。
常见的***炎症包括细菌性***病(BV)、外阴***假丝酵母菌病(VVC)、滴虫***炎(TV)和需氧菌性***炎(AV)，实验室诊断方法目前主要有湿片镜检、革兰氏染色镜检等，但受到显微镜设备的质量、人员素质、操作者的经验等诸多因素的共同影响，主观性强，对结果判断统计比较困难，近年来，通过对pH值、过氧化氢(H2O2)、白细胞酯酶(LE)、唾液酸苷酶(SNA)、脯氨酸氨基肽酶(PIP)、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)等功能性指标的研究发现上述指标联合检测其功能方面实现了常规检测的需要，对常见的、多发的女性生殖道感染疾病例如：细菌性***感染疾病(BV)、念球菌外阴***炎(VVC)、滴虫性***炎(TV)可达到全面、早期、快速、准确的诊断的目的，互补甚至替代显微镜镜检，发展较快，但目前市面上不同厂家生产的***病联检试剂盒或是***分泌物分析试纸，操作比较繁琐，特定项目需要在不同时间内滴加不同的显色液与终止液，及其容易混扰，造成误操作，且反应需要在37℃加热设备中温育10-15min，操作时间内长，影响诊断效率。
因此，检测全面、准确、快速、方便，可以满足门诊的快速有效诊断的需求的***分泌物多联检测试纸成了迫切的需求。
发明内容
本发明为了解决现有技术中，对***炎症检测操作比较繁琐，容易造成误操作，且反应条件时间较长，影响诊断效率的问题，提出了一种***分泌物多联检测试纸、制备方法及其测试方法。
一种***分泌物多联检测试纸，其特征在于，包括：
干化学检测试纸，所述干化学检测试纸由塑料基材和项目原纸/项目反应块组成，其中，所述项目原纸/项目反应块为pH值原纸/反应块、过氧化氢原纸/反应块、白细胞酯酶原纸/反应块、乳酸原纸/反应块、唾液酸苷酶原纸/反应块、脯氨酸氨基肽酶原纸/反应块、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶原纸/反应块、β-葡萄糖醛酸苷酶原纸/反应块、凝固酶原纸/反应块、氧化酶原纸/反应块以及胺原纸/反应块中的至少一种，所述塑料基材为基体条或试纸卡中的一种；
色标卡，所述色标卡与所述干化学检测试纸联用。
其中，所述白细胞酯酶原纸/反应块包括0.5g/L～1.0g/L第一反应底物，0.1g/L～1.0g/L重氮盐第一显色剂，1.0g/L～10g/L第一反应促进剂，0.5g/L～1.0g/L的第一稳定剂和第一PBS缓冲溶液，其中，所述第一反应底物为吲哚酚酯类及其衍生物和吡咯酯及其吡咯氨基酸酯衍生物中的至少一种，所述第一稳定剂为β-环糊精、甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐和乙二胺四乙酸钾盐中的至少一种，所述第一反应促进剂为氯化钠和硫***中的至少一种；
所述过氧化氢原纸/反应块包括0.5g/L～1.0g/L的过氧化物酶或辣根过氧化酶，0.1g/L～0.6g/L的第二显色剂，0.1g/L～1.0g/L的第二反应促进剂，溶剂为第二缓冲溶液，所述第二显色剂为：4-氨基安替比林、DHBS和1，5-二甲基-2-苯基-4-氨基-3-吡唑酮(4-AAP)中的至少一种，所述第二反应促进剂为N-乙基－N－(2-羟基－3－磺丙基)间甲苯胺和3，5-二氯-2-羟基苯磺酸中的至少一种，所述第二缓冲溶液为PBS缓冲液、柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液和硼酸-硼砂缓冲液中的任一种；
所述的PH值原纸/反应块包括0.1g/L～0.6g/L溴甲酚绿，表面活性剂0.1g/L～2g/L，第二稳定剂0.1g/L～2g/L，乙醇在溶液中的浓度为10％～100％，所述第二稳定剂为海藻酸钠、海藻糖、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮类和明胶中的至少一种；
所述β-葡萄糖醛酸苷酶原纸/反应块包括由0.1g/L～4.0g/L 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷钠盐、4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷和酚酞葡萄糖醛酸苷中至少一种组成的第二反应底物，0.1g/L～4.0g/L重氮盐类第一显色剂，0.2g/L～6.0g/L第三反应促进剂，1g/L～10g/L第三稳定剂，溶剂为第三缓冲溶液，所述第三缓冲溶液为PBS缓冲液、柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液、柠檬酸-TRIS缓冲液、硼酸-硼砂缓冲液和乙酸钠缓冲液中的任一种，所述第三反应促进剂为氯化镁、氯化锌、氯化钙、乙二醇、海藻酸钠、戊二醛、蔗糖中的至少一种，所述第三稳定剂为β-环糊精、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐中的至少一种；
所述凝固酶原纸/反应块包括浓度为1g/L～10g/L作为第三反应底物的甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘胺、重氮盐类第一显色剂、第四稳定剂为海藻糖与蔗糖混合溶液，溶剂为盐酸-TRIS缓冲液；
所述N-乙酰氨基葡萄糖苷酶原纸/反应块包括0.1g/L-4g/L的4-硝基苯基-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷、p-硝基苯酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、2-氯-4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡糖糖苷、4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、5-[4-(3-甲氧基-苯甲烯-绕丹宁)]-3-乙酸铵-N-乙酰氨基-β-D-葡萄糖苷中的至少一种组成的第四反应底物，溶剂为PBS缓冲液，第四反应促进剂为钨酸钠和牛血清白蛋白中的至少一种，所述第五稳定剂为维生素C、抗坏血酸氧化酶、谷胱甘肽和碘化钾中的至少一种；
所述唾液酸苷酶原纸/反应块包括生色底物层与显色促进层，其中，所述生色底物层由0.5g/L～4.0g/L的5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-N-乙酰神经氨酸钠盐、甲酚蓝-α-N-乙酰基神经氨酸苷钠盐、硝基苯-N-乙酰-α-唾液酸苷、萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷或5-溴-4氯-3-吲哚基乙酰神经氨酸盐中的至少一种组成第五反应底物，溶剂为第三缓冲溶液，显色反应促进层包括0.5g/L～1.0g/L重氮盐，所述第五反应促进剂为0.1g/L～10g/L钨酸钠、聚乙烯吡咯烷酮类、硫醇类的至少一种，所述第六稳定剂为β-环糊精、甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐和牛血清白蛋白中的至少一种；
所述脯氨酸氨基肽酶原纸/反应块包括浓度为0.4g～5g/L的L-脯氨酸对硝基苯胺三氟乙酸盐、Z-甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺、L-脯氨酸β-萘酰胺盐酸盐、L-脯氨酰-对硝基苯胺中的至少一种制成的第六反应底物，所述的溶剂为第三缓冲溶液；所述第六反应促进剂为重氮盐试剂，所述第七稳定剂为酒石酸、乙二酸四乙酸钠盐、钾盐和顺丁烯二酸中的至少一种；
所述乳酸原纸/反应块包括0.1g/L～1.0g/L过氧化物酶，0.1g/L～1.0g/乳酸氧化酶，表面活性剂，第三显色剂为3，3'，5，5'-四甲基联苯胺，溶剂为第一PBS缓冲溶液；
所述氧化酶原纸/反应块包括1g/L～10g/L四甲基对苯二胺的第七反应底物，0.5g/L～5g/L表面活性剂，溶剂为第二缓冲溶液；
所述胺原纸/反应块由反应层和显色层组成，反应层为质量分数为0.1％～5％氢氧化钾溶液；显色层包含20mg/L～500mg/L溴甲酚绿，0.8g/L～2g/L表面活性剂，乙醇在溶液中的浓度为10％～100％。
其中，所述表面活性剂为OP乳化剂、曲拉通X-100、吐温20、吐温40、吐温60、吐温80和聚乙二醇中的至少一种。
其中，所述有机酸为0.1g/L～10g/L苯甲酸钠、苯甲酸、柠檬酸和酒石酸中的至少一种。
采用如上述所述的一种***分泌物多联检测试纸的制备方法，所述干化学检测试纸的制备方法如下：
基体条或试纸卡的制备：
将项目原纸粘贴于由PET、PVC、PP、PS和ABS中至少一项材料制成的片材或卷材上组成基体条；试纸卡由ABS、PP、改性PP和PMMA中的至少一种材料制成，所述试纸卡上有若干φ3mm-φ7mm的圆孔，圆孔数量与项目反应块一致，在每个圆孔中填入对应的项目反应块；
项目原纸/项目反应块的制备：
白细胞酶原纸/反应块的制备，将第一反应底物溶解于PH值为6-9、浓度为0.1mM-2mM的第一PBS缓冲溶液并加入1g/L-10g/L第一稳定剂，0.5g/L-5g/L第一反应促进剂形成A1液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸有机溶剂中并加入0.1g/L-5g/L表面活性剂形成B1液，将A1液与B1液按照1:1～9:1的体积比进行混合，形成白细胞酯酶溶液，将滤纸在白细胞酯酶溶液中浸润后进行干燥制成白细胞酶纸块，或将白细胞酯酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成白细胞酯酶反应孔；
过氧化氢原纸/反应块的制备，将过氧化物酶或辣根过氧化物酶溶解于PH值为5-8、浓度为0.1mM-2mM的第二缓冲溶液并加入0.1g/L～0.6g/L第二显色剂，0.1g/L～1.0g/L第二反应促进剂制成过氧化氢试溶液，将滤纸在过氧化氢溶液中浸润后进行干燥，或是将过氧化氢溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成过氧化氢反应孔；
pH值原纸/反应块的制备，将溴甲酚绿、表面活性剂溶解于10％～100％乙醇溶剂中形成A2液，将第二稳定剂溶解于纯化水或乙醇中形成B2液，将A2液与B2液按照9:1～1:9任何体积比例进行混合，形成pH值溶液，将滤纸在pH值中溶液中浸润后进行干燥制得pH值纸块，或是将pH值溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成pH值反应孔；
β-葡萄糖醛酸苷酶原纸/反应块的制备，将第二反应底物溶解于PH值为4-9、浓度为0.5mM-10mM的第三缓冲溶液并加入1g/L-10g/L第三稳定剂，0.5g/L-5g/L第三反应促进剂形成A3液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B3液，将A3液与B3液按照1:1的体积比进行混合，形成β-葡萄糖醛酸苷酶溶液，将滤纸在β-葡萄糖醛酸苷酶溶液中浸润后进行干燥制得β-葡萄糖醛酸苷酶纸块，或是将β-葡萄糖醛酸苷酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成β-葡萄糖醛酸苷酶反应孔；
凝固酶原纸/反应块的制备，将第三反应底物溶解于PH值为3-7浓度为0.1mM-5mM的盐酸-TRIS缓冲液缓冲并加入第四稳定剂溶解完成后形成A4液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B4液，将滤纸在凝固酶A4溶液中浸润干燥后再放入凝固酶B4溶液中浸润后干燥制得凝固酶纸块，或是将凝固酶A4溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥再滴加凝固酶A4溶液5-30ul，干燥制得凝固酶反应孔；
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶原纸/反应块的制备，将0.1g/L-4g/L第四反应底物溶解于PH值为7-10浓度为0.1mM-10mM的PBS缓冲液中并加入1g/L-10g/L第五稳定剂，0.5g/L-5g/L第四反应促进剂形成N-乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液，将滤纸在N-乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液中浸润后进行干燥制得N-乙酰氨基葡萄糖苷酶纸块，或是将N-乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成N-乙酰氨基葡萄糖苷酶反应孔；
唾液酸苷酶原纸/反应块的制备，将0.5g/L-4.0g/L第五反应底物溶解于PH值为3-7浓度为0.1mM-10mM的缓冲液中并加入1g/L-10g/L第六稳定剂，0.1g/L-10g/L第五反应促进剂形成A5液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.1g/L-10g/L有机酸溶液中形成B5液，将A5液与B5液按照1:1的体积比进行混合，形成唾液酸苷酶溶液，将滤纸在唾液酸苷酶溶液中浸润后进行干燥制得或是将唾液酸苷酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成唾液酸苷酶反应孔；
脯氨酸氨基肽酶原纸/反应块的制备，将0.4g/L-5g/L第六反应底物溶解于PH值为6-8浓度为0.1mM-10mM的缓冲液中并加入1g/L-10g/L第七稳定剂，0.5g/L-5g/L第六反应促进剂形成脯氨酸氨基肽酶溶液，将滤纸在脯氨酸氨基肽酶溶液中浸润后进行干燥制得脯氨酸氨基肽酶纸块，或是将脯氨酸氨基肽酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成脯氨酸氨基肽酶反应孔；
乳酸原纸/反应块的制备，将0.1g/L～1.0g/L过氧化物酶，0.1g/L～1.0g/乳酸氧化酶，表面活性剂，3,3',5,5'-四甲基联苯胺作为第三显色剂，溶解在PH值为5-7的第一PBS缓冲溶液形成乳酸溶液，将滤纸在乳酸溶液中浸润后进行干燥制得乳酸纸块，或是将乳酸溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成乳酸反应孔；
氧化酶原纸/反应块的制备，将1g/L～10g/L第七反应底物溶于第二缓冲溶液中，加入0.5g/L～5g/L表面活性剂，形成氧化酶试剂液，将滤纸在氧化酶溶液中浸润后进行干燥制得；或是将氧化酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成氧化酶反应孔；
胺原纸/反应块的制备，将0.1％-5％氢氧化钾溶液与滤纸进行浸泡干燥，形成反应层原纸；将溴甲酚绿、表面活性剂溶解于10％～100％乙醇溶剂中形成A6液；将第二稳定剂溶解于纯化水或乙醇中形成B6液；将A6液与B6液按照9:1～0:10任何比例进行混合，形成显色层溶液，将滤纸浸泡于显色层溶液中经过干燥形成显色层原纸，将反应层原纸张贴于显色层原纸上形成胺原纸，或是将显色层溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的孔中，经过干燥形成胺试纸显色孔，将反应层原纸分裁成合适的尺寸粘贴于显色孔上形成胺反应孔。
采用如上述所述的一种***分泌物多联检测试纸的测试方法，包括如下步骤：
用无菌棉签或无菌拭子于***后穹窿处旋转10-20秒，以清晰见到棉签或拭子上有分泌物附着为准；
将无菌拭子或无菌棉签采集样本，放入软试管中，每个样本加生理盐水，反复涮洗，使样本充分洗脱，得到样本液；
取出干化学检测试纸，在每个项目试纸孔中滴加样本20-30ul，约1滴；
放置在特定的仪器上进行检测，或者试纸条在37±1℃温育5分钟后，在1分钟内与色标卡对比判读结果。
上述所述的一种***分泌物多联检测试纸在检测***分泌物中PH值、有益菌、白细胞、乳酸杆菌、BV致病菌、***、加德纳菌和动弯杆菌、白色念珠菌和滴虫、大肠埃希菌和B族链球菌、金葡菌和粪肠球菌、白带的中至少一项的应用。
本发明的有益效果为：本发明提出的***分泌物多联检测试纸各项目中的显色剂或是反应促进剂加快反应速度，同时不需要二次再滴加显色液，且反应时间只需5min，无需终止液与显色液，准确、快速、方便，可以满足门诊的快速有效诊断的需求，并配置色标卡，可实现目测功能，也使用于女性个人健康监测。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明一种***分泌物多联检测试纸的干化学检测试纸的结构示意图。
图2是本发明一种***分泌物多联检测试纸的色标卡的结构示意图。
图3是本发明一种***分泌物多联检测试纸的制备方法的步骤示意图。
10-干化学检测试纸、20-色标卡、11-项目原纸/项目反应块、12-塑料基材。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
在本发明的描述中，需要理解的是，术语“长度”、“宽度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。
请参阅图1至图3，本发明提供一种技术方案：
一种***分泌物多联检测试纸，其特征在于，包括：
干化学检测试纸10，所述干化学检测试纸10由塑料基材12和项目原纸/项目反应块11组成，其中，所述项目原纸/项目反应块11为pH值原纸/反应块、过氧化氢原纸/反应块、白细胞酯酶原纸/反应块、乳酸原纸/反应块、唾液酸苷酶原纸/反应块、脯氨酸氨基肽酶原纸/反应块、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶原纸/反应块、β-葡萄糖醛酸苷酶原纸/反应块、凝固酶原纸/反应块、氧化酶原纸/反应块以及胺原纸/反应块中的至少一种，所述塑料基材12为基体条或试纸卡中的一种；
色标卡20，所述色标卡20与所述干化学检测试纸10联用。
进一步的，所述白细胞酯酶原纸/反应块包括0.5g/L～1.0g/L第一反应底物，0.1g/L～1.0g/L重氮盐第一显色剂，1.0g/L～10g/L第一反应促进剂，0.5g/L～1.0g/L的第一稳定剂和第一PBS缓冲溶液，其中，所述第一反应底物为吲哚酚酯类及其衍生物和吡咯酯及其吡咯氨基酸酯衍生物中的至少一种，所述第一稳定剂为β-环糊精、甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐和乙二胺四乙酸钾盐中的至少一种，所述第一反应促进剂为氯化钠和硫***中的至少一种；
所述过氧化氢原纸/反应块包括0.5g/L～1.0g/L的过氧化物酶或辣根过氧化酶，0.1g/L～0.6g/L的第二显色剂，0.1g/L～1.0g/L的第二反应促进剂，溶剂为第二缓冲溶液，所述第二显色剂为：4-氨基安替比林、DHBS和1，5-二甲基-2-苯基-4-氨基-3-吡唑酮(4-AAP)中的至少一种，所述第二反应促进剂为N-乙基－N－(2-羟基－3－磺丙基)间甲苯胺和3，5-二氯-2-羟基苯磺酸中的至少一种，所述第二缓冲溶液为PBS缓冲液、柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液和硼酸-硼砂缓冲液中的任一种；
所述的PH值原纸/反应块包括0.1g/L～0.6g/L溴甲酚绿，表面活性剂0.1g/L～2g/L，第二稳定剂0.1g/L～2g/L，乙醇在溶液中的浓度为10％～100％，所述第二稳定剂为海藻酸钠、海藻糖、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮类和明胶中的至少一种；
所述β-葡萄糖醛酸苷酶原纸/反应块包括由0.1g/L～4.0g/L 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷钠盐、4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷和酚酞葡萄糖醛酸苷中至少一种组成的第二反应底物，0.1g/L～4.0g/L重氮盐类第一显色剂，0.2g/L～6.0g/L第三反应促进剂，1g/L～10g/L第三稳定剂，溶剂为第三缓冲溶液，所述第三缓冲溶液为PBS缓冲液、柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液、柠檬酸-TRIS缓冲液、硼酸-硼砂缓冲液和乙酸钠缓冲液中的任一种，所述第三反应促进剂为氯化镁、氯化锌、氯化钙、乙二醇、海藻酸钠、戊二醛、蔗糖中的至少一种，所述第三稳定剂为β-环糊精、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐中的至少一种；
所述凝固酶原纸/反应块包括浓度为1g/L～10g/L作为第三反应底物的甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘胺、重氮盐类第一显色剂、第四稳定剂为海藻糖与蔗糖混合溶液，溶剂为盐酸-TRIS缓冲液；
所述N-乙酰氨基葡萄糖苷酶原纸/反应块包括0.1g/L-4g/L的4-硝基苯基-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷、p-硝基苯酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、2-氯-4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡糖糖苷、4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、5-[4-(3-甲氧基-苯甲烯-绕丹宁)]-3-乙酸铵-N-乙酰氨基-β-D-葡萄糖苷中的至少一种组成的第四反应底物，溶剂为PBS缓冲液，第四反应促进剂为钨酸钠和牛血清白蛋白中的至少一种，所述第五稳定剂为维生素C、抗坏血酸氧化酶、谷胱甘肽和碘化钾中的至少一种；
所述唾液酸苷酶原纸/反应块包括生色底物层与显色促进层，其中，所述生色底物层由0.5g/L～4.0g/L的5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-N-乙酰神经氨酸钠盐、甲酚蓝-α-N-乙酰基神经氨酸苷钠盐、硝基苯-N-乙酰-α-唾液酸苷、萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷或5-溴-4氯-3-吲哚基乙酰神经氨酸盐中的至少一种组成第五反应底物，溶剂为第三缓冲溶液，显色反应促进层包括0.5g/L～1.0g/L重氮盐，所述第五反应促进剂为0.1g/L～10g/L钨酸钠、聚乙烯吡咯烷酮类、硫醇类的至少一种，所述第六稳定剂为β-环糊精、甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐和牛血清白蛋白中的至少一种；
所述脯氨酸氨基肽酶原纸/反应块包括浓度为0.4g～5g/L的L-脯氨酸对硝基苯胺三氟乙酸盐、Z-甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺、L-脯氨酸β-萘酰胺盐酸盐、L-脯氨酰-对硝基苯胺中的至少一种制成的第六反应底物，所述的溶剂为第三缓冲溶液；所述第六反应促进剂为重氮盐试剂，所述第七稳定剂为酒石酸、乙二酸四乙酸钠盐、钾盐和顺丁烯二酸中的至少一种；
所述乳酸原纸/反应块包括0.1g/L～1.0g/L过氧化物酶，0.1g/L～1.0g/乳酸氧化酶，表面活性剂，第三显色剂为3，3'，5，5'-四甲基联苯胺，溶剂为第一PBS缓冲溶液；
所述氧化酶原纸/反应块包括1g/L～10g/L四甲基对苯二胺的第七反应底物，0.5g/L～5g/L表面活性剂，溶剂为第二缓冲溶液；
所述胺原纸/反应块由反应层和显色层组成，反应层为质量分数为0.1％～5％氢氧化钾溶液；显色层包含20mg/L～500mg/L溴甲酚绿，0.8g/L～2g/L表面活性剂，乙醇在溶液中的浓度为10％～100％。
其中，所述表面活性剂为OP乳化剂、曲拉通X-100、吐温20、吐温40、吐温60、吐温80和聚乙二醇中的至少一种。
进一步的，所述有机酸为0.1g/L～10g/L苯甲酸钠、苯甲酸、柠檬酸和酒石酸中的至少一种。
进一步的，所述干化学检测试纸10包括卡式和条式，将制备的各项原纸按所需分裁为一定规格试纸条与所述基体条粘接，再分切即可制成条式检测试纸；又将各个项目原纸根据所述试纸卡的圆孔大小裁剪，又将裁剪后的项目原纸冲入对应圆孔并参照对应项目反应块的制备制得卡式检测试纸。
进一步的，所述干化学检测试纸10可以进行目测，也可配合***分泌物专用分析仪进行检测，因其属于现有技术，本申请未对***分泌物专用分析仪做详细说明。
采用如上述所述的一种***分泌物多联检测试纸的制备方法，所述干化学检测试纸10的制备方法如下：
S101：基体条或试纸卡的制备：
将项目原纸粘贴于由PET、PVC、PP、PS和ABS中至少一项材料制成的片材或卷材上组成基体条；试纸卡由ABS、PP、改性PP和PMMA中的至少一种材料制成，所述试纸卡上有若干
Figure BDA0002980719430000101
的圆孔，圆孔数量与项目反应块一致，在每个圆孔中填入对应的项目反应块；
S101：项目原纸/项目反应块11的制备：
白细胞酶原纸/反应块的制备，将第一反应底物溶解于PH值为6-9、浓度为0.1mM-2mM的第一PBS缓冲溶液并加入1g/L-10g/L第一稳定剂，0.5g/L-5g/L第一反应促进剂形成A1液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸有机溶剂中并加入0.1g/L-5g/L表面活性剂形成B1液，将A1液与B1液按照1:1～9:1的体积比进行混合，形成白细胞酯酶溶液，将滤纸在白细胞酯酶溶液中浸润后进行干燥制成白细胞酶纸块，或将白细胞酯酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成白细胞酯酶反应孔；
过氧化氢原纸/反应块的制备，将过氧化物酶或辣根过氧化物酶溶解于PH值为5-8、浓度为0.1mM-2mM的第二缓冲溶液并加入0.1g/L～0.6g/L第二显色剂，0.1g/L～1.0g/L第二反应促进剂制成过氧化氢试溶液，将滤纸在过氧化氢溶液中浸润后进行干燥，或是将过氧化氢溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成过氧化氢反应孔；
pH值原纸/反应块的制备，将溴甲酚绿、表面活性剂溶解于10％～100％乙醇溶剂中形成A2液，将第二稳定剂溶解于纯化水或乙醇中形成B2液，将A2液与B2液按照9:1～1：9任何体积比例进行混合，形成pH值溶液，将滤纸在pH值中溶液中浸润后进行干燥制得pH值纸块，或是将pH值溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成pH值反应孔；
β-葡萄糖醛酸苷酶原纸/反应块的制备，将第二反应底物溶解于PH值为4-9、浓度为0.5mM-10mM的第三缓冲溶液并加入1g/L-10g/L第三稳定剂，0.5g/L-5g/L第三反应促进剂形成A3液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B3液，将A3液与B3液按照1:1的体积比进行混合，形成β-葡萄糖醛酸苷酶溶液，将滤纸在β-葡萄糖醛酸苷酶溶液中浸润后进行干燥制得β-葡萄糖醛酸苷酶纸块，或是将β-葡萄糖醛酸苷酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成β-葡萄糖醛酸苷酶反应孔；
凝固酶原纸/反应块的制备，将第三反应底物溶解于PH值为3-7浓度为0.1mM-5mM的盐酸-TRIS缓冲液缓冲并加入第四稳定剂溶解完成后形成A4液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B4液，将滤纸在凝固酶A4溶液中浸润干燥后再放入凝固酶B4溶液中浸润后干燥制得凝固酶纸块，或是将凝固酶A4溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥再滴加凝固酶A4溶液5-30ul，干燥制得凝固酶反应孔；
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶原纸/反应块的制备，将0.1g/L-4g/L第四反应底物溶解于PH值为7-10浓度为0.1mM-10mM的PBS缓冲液中并加入1g/L-10g/L第五稳定剂，0.5g/L-5g/L第四反应促进剂形成N-乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液，将滤纸在N-乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液中浸润后进行干燥制得N-乙酰氨基葡萄糖苷酶纸块，或是将N-乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成N-乙酰氨基葡萄糖苷酶反应孔；
唾液酸苷酶原纸/反应块的制备，将0.5g/L-4.0g/L第五反应底物溶解于PH值为3-7浓度为0.1mM-10mM的缓冲液中并加入1g/L-10g/L第六稳定剂，0.1g/L-10g/L第五反应促进剂形成A5液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.1g/L-10g/L有机酸溶液中形成B5液，将A5液与B5液按照1:1的体积比进行混合，形成唾液酸苷酶溶液，将滤纸在唾液酸苷酶溶液中浸润后进行干燥制得或是将唾液酸苷酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成唾液酸苷酶反应孔；
脯氨酸氨基肽酶原纸/反应块的制备，将0.4g/L-5g/L第六反应底物溶解于PH值为6-8浓度为0.1mM-10mM的缓冲液中并加入1g/L-10g/L第七稳定剂，0.5g/L-5g/L第六反应促进剂形成脯氨酸氨基肽酶溶液，将滤纸在脯氨酸氨基肽酶溶液中浸润后进行干燥制得脯氨酸氨基肽酶纸块，或是将脯氨酸氨基肽酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成脯氨酸氨基肽酶反应孔；
乳酸原纸/反应块的制备，将0.1g/L～1.0g/L过氧化物酶，0.1g/L～1.0g/乳酸氧化酶，表面活性剂，3,3',5,5'-四甲基联苯胺作为第三显色剂，溶解在PH值为5-7的第一PBS缓冲溶液形成乳酸溶液，将滤纸在乳酸溶液中浸润后进行干燥制得乳酸纸块，或是将乳酸溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成乳酸反应孔；
氧化酶原纸/反应块的制备，将1g/L～10g/L第七反应底物溶于第二缓冲溶液中，加入0.5g/L～5g/L表面活性剂，形成氧化酶试剂液，将滤纸在氧化酶溶液中浸润后进行干燥制得；或是将氧化酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成氧化酶反应孔；
胺原纸/反应块的制备，将0.1％-5％氢氧化钾溶液与滤纸进行浸泡干燥，形成反应层原纸；将溴甲酚绿、表面活性剂溶解于10％～100％乙醇溶剂中形成A6液；将第二稳定剂溶解于纯化水或乙醇中形成B6液；将A6液与B6液按照9:1～0:10任何比例进行混合，形成显色层溶液，将滤纸浸泡于显色层溶液中经过干燥形成显色层原纸，将反应层原纸张贴于显色层原纸上形成胺原纸，或是将显色层溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的孔中，经过干燥形成胺试纸显色孔，将反应层原纸分裁成合适的尺寸粘贴于显色孔上形成胺反应孔。
采用如上述所述的一种***分泌物多联检测试纸的测试方法，包括如下步骤：
用无菌棉签或无菌拭子于***后穹窿处旋转10-20秒，以清晰见到棉签或拭子上有分泌物附着为准；
将无菌拭子或无菌棉签采集样本，放入软试管中，每个样本加生理盐水，反复涮洗，使样本充分洗脱，得到样本液；
取出干化学检测试纸10，在每个项目试纸孔中滴加样本20-30ul，约1滴；
放置在特定的仪器上进行检测，或者试纸在37±1℃温育5分钟后，在1分钟内与色标卡20对比判读结果。
在本实施方式中，
各项目检测原理为：
Figure BDA0002980719430000131
Figure BDA0002980719430000141
Figure BDA0002980719430000151
各项目与色标卡20对比：
白细胞酯酶：
不显色(-)或淡紫色(+-)为阴性，提示正常；***(+1～+3)为阳性，颜色深浅表明患者***内有不同程度的炎症反应。
过氧化氢：
呈红色或***为阴性(-)，提示可能有大量乳酸杆菌存在，***菌群正常；
呈淡红色(+-)，弱阳性，提示可能有中量乳酸杆菌存在，可能***菌开始呈现不正常趋势或处于恢复期，需结合临床再判断，通常判阴性；不显色或淡黄色为阳性(+)，指示***菌群失调，***环境病态或处于亚健康状态。
唾液酸苷酶：
不显色或黄色为阴性(-)；红色或淡紫色为弱阳性(+-)，提示可能感染细菌性***病；显红色或***为阳性(+)，表示可能感染细菌性***病(BV)。
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶：
不显色或淡淡黄色为阴性(-)，提示正常；显橙色为弱阳性(+-)，显橙红色为阳性(+)，弱阳性或阳性表示受念珠菌等霉菌或滴虫感染；
脯氨酸氨基肽酶：
不显色或淡淡黄色为阴性(-)，提示正常；浅黄色为弱阳性(+-)，显黄色或紫黄色为阳性(+)，弱阳性或阳性表示可能感染细菌性***病(BV)。
β-葡萄糖醛酸苷酶：
不显色为阴性(-)，提示正常；红色或淡紫色为弱阳性(+-)，显红色或***为阳性(+)，阳性或是弱阳性均提示***受以需氧菌为主的感染，***环境病态或处于亚健康状态；
凝固酶：
不显色或淡黄色为阴性(-)，提示正常；浅黄色为弱阳性(+-)；显黄色或紫黄色为阳性(+)，阳性或是弱阳性表示受金黄色葡萄球菌、链球菌等需氧性细菌感染；
乳酸：
呈红色或***为阴性(-)，提示可能有大量乳酸杆菌存在，***菌群正常；
呈淡红色(+-)，弱阳性，提示可能有中量乳酸杆菌存在，可能***菌开始呈现不正常趋势或处于恢复期，需结合临床再判断，通常判阴性；不显色或淡黄色为阳性(+)，指示***菌群失调，***环境病态或处于亚健康状态。
氧化酶：
不显色或淡淡黄色为阴性(-)，提示正常；浅蓝色为弱阳性(+-)；蓝色或蓝紫色为阳性(+)，阳性或是弱阳性表示可能***感染；
胺：
黄色为阴性(-)，提示正常；浅绿色为弱阳性(+-)；绿色、蓝绿色、蓝色为阳性(+)，阳性或是弱阳性表示可能细菌性***病。
上述所述的一种***分泌物多联检测试纸在检测***分泌物中PH值、有益菌、白细胞、乳酸杆菌、BV致病菌、***、加德纳菌和动弯杆菌、白色念珠菌和滴虫、大肠埃希菌和B族链球菌、金葡菌和粪肠球菌、白带的中至少一项的应用。
以上所揭露的仅为本发明一种较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，本领域普通技术人员可以理解实现上述实施例的全部或部分流程，并依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于发明所涵盖的范围。

Claims (7)

1.一种***分泌物多联检测试纸，其特征在于，包括：
干化学检测试纸，所述干化学检测试纸由塑料基材和项目原纸/项目反应块组成，其中，所述项目原纸/项目反应块为pH值原纸/反应块、过氧化氢原纸/反应块、白细胞酯酶原纸/反应块、乳酸原纸/反应块、唾液酸苷酶原纸/反应块、脯氨酸氨基肽酶原纸/反应块、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶原纸/反应块、β-葡萄糖醛酸苷酶原纸/反应块、凝固酶原纸/反应块、氧化酶原纸/反应块以及胺原纸/反应块中的至少一种，所述塑料基材为基体条或试纸卡中的一种；
色标卡，所述色标卡与所述干化学检测试纸联用。
2.如权利要求1所述的一种***分泌物多联检测试纸，其特征在于，
所述白细胞酯酶原纸/反应块包括0.5g/L～1.0g/L第一反应底物，0.1g/L～1.0g/L重氮盐第一显色剂，1.0g/L～10g/L第一反应促进剂，0.5g/L～1.0g/L的第一稳定剂和第一PBS缓冲溶液，其中，所述第一反应底物为吲哚酚酯类及其衍生物和吡咯酯及其吡咯氨基酸酯衍生物中的至少一种，所述第一稳定剂为β-环糊精、甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐和乙二胺四乙酸钾盐中的至少一种，所述第一反应促进剂为氯化钠和硫***中的至少一种；
所述过氧化氢原纸/反应块包括0.5g/L～1.0g/L的过氧化物酶或辣根过氧化酶，0.1g/L～0.6g/L的第二显色剂，0.1g/L～1.0g/L的第二反应促进剂，溶剂为第二缓冲溶液，所述第二显色剂为：4-氨基安替比林、DHBS和1，5-二甲基-2-苯基-4-氨基-3-吡唑酮(4-AAP)中的至少一种，所述第二反应促进剂为N-乙基－N－(2-羟基－3－磺丙基)间甲苯胺和3，5-二氯-2-羟基苯磺酸中的至少一种，所述第二缓冲溶液为PBS缓冲液、柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液和硼酸-硼砂缓冲液中的任一种；
所述的PH值原纸/反应块包括0.1g/L～0.6g/L溴甲酚绿，表面活性剂0.1g/L～2g/L，第二稳定剂0.1g/L～2g/L，乙醇在溶液中的浓度为10％～100％，所述第二稳定剂为海藻酸钠、海藻糖、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮类和明胶中的至少一种；
所述β-葡萄糖醛酸苷酶原纸/反应块包括由0.1g/L～4.0g/L 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷钠盐、4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷和酚酞葡萄糖醛酸苷中至少一种组成的第二反应底物，0.1g/L～4.0g/L重氮盐类第一显色剂，0.2g/L～6.0g/L第三反应促进剂，1g/L～10g/L第三稳定剂，溶剂为第三缓冲溶液，所述第三缓冲溶液为PBS缓冲液、柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液、柠檬酸-TRIS缓冲液、硼酸-硼砂缓冲液和乙酸钠缓冲液中的任一种，所述第三反应促进剂为氯化镁、氯化锌、氯化钙、乙二醇、海藻酸钠、戊二醛、蔗糖中的至少一种，所述第三稳定剂为β-环糊精、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐中的至少一种；
所述凝固酶原纸/反应块包括浓度为1g/L～10g/L作为第三反应底物的甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘胺、重氮盐类第一显色剂、第四稳定剂为海藻糖与蔗糖混合溶液，溶剂为盐酸-TRIS缓冲液；
所述N-乙酰氨基葡萄糖苷酶原纸/反应块包括0.1g/L-4g/L的4-硝基苯基-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷、p-硝基苯酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、2-氯-4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡糖糖苷、4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、5-[4-(3-甲氧基-苯甲烯-绕丹宁)]-3-乙酸铵-N-乙酰氨基-β-D-葡萄糖苷中的至少一种组成的第四反应底物，溶剂为PBS缓冲液，第四反应促进剂为钨酸钠和牛血清白蛋白中的至少一种，所述第五稳定剂为维生素C、抗坏血酸氧化酶、谷胱甘肽和碘化钾中的至少一种；
所述唾液酸苷酶原纸/反应块包括生色底物层与显色促进层，其中，所述生色底物层由0.5g/L～4.0g/L的5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-N-乙酰神经氨酸钠盐、甲酚蓝-α-N-乙酰基神经氨酸苷钠盐、硝基苯-N-乙酰-α-唾液酸苷、萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷或5-溴-4氯-3-吲哚基乙酰神经氨酸盐中的至少一种组成第五反应底物，溶剂为第三缓冲溶液，显色反应促进层包括0.5g/L～1.0g/L重氮盐，所述第五反应促进剂为0.1g/L～10g/L钨酸钠、聚乙烯吡咯烷酮类、硫醇类的至少一种，所述第六稳定剂为β-环糊精、甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐和牛血清白蛋白中的至少一种；
所述脯氨酸氨基肽酶原纸/反应块包括浓度为0.4g～5g/L的L-脯氨酸对硝基苯胺三氟乙酸盐、Z-甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺、L-脯氨酸β-萘酰胺盐酸盐、L-脯氨酰-对硝基苯胺中的至少一种制成的第六反应底物，所述的溶剂为第三缓冲溶液；所述第六反应促进剂为重氮盐试剂，所述第七稳定剂为酒石酸、乙二酸四乙酸钠盐、钾盐和顺丁烯二酸中的至少一种；
所述乳酸原纸/反应块包括0.1g/L～1.0g/L过氧化物酶，0.1g/L～1.0g/乳酸氧化酶，表面活性剂，第三显色剂为3，3'，5，5'-四甲基联苯胺，溶剂为第一PBS缓冲溶液；
所述氧化酶原纸/反应块包括1g/L～10g/L四甲基对苯二胺的第七反应底物，0.5g/L～5g/L表面活性剂，溶剂为第二缓冲溶液；
所述胺原纸/反应块由反应层和显色层组成，反应层为质量分数为0.1％～5％氢氧化钾溶液；显色层包含20mg/L～500mg/L溴甲酚绿，0.8g/L～2g/L表面活性剂，乙醇在溶液中的浓度为10％～100％。
3.如权利要求2所述的一种***分泌物多联检测试纸，其特征在于，所述表面活性剂为OP乳化剂、曲拉通X-100、吐温20、吐温40、吐温60、吐温80 和聚乙二醇中的至少一种。
4.如权利要求3所述的一种***分泌物多联检测试纸，其特征在于，所述有机酸为0.1g/L～10g/L苯甲酸钠、苯甲酸、柠檬酸和酒石酸中的至少一种。
5.采用如权利要求4所述的一种***分泌物多联检测试纸的制备方法，其特征在于，所述干化学检测试纸的制备方法如下：
基体条或试纸卡的制备：
将项目原纸粘贴于由PET、PVC、PP、PS和ABS中至少一项材料制成的片材或卷材上组成基体条；试纸卡由ABS、PP、改性PP和PMMA中的至少一种材料制成，所述试纸卡上有若干φ3mm-φ7mm的圆孔，圆孔数量与项目反应块一致，在每个圆孔中填入对应的项目反应块；
项目原纸/项目反应块的制备：
白细胞酶原纸/反应块的制备，将第一反应底物溶解于PH值为6-9、浓度为0.1mM-2mM的第一PBS缓冲溶液并加入1g/L-10g/L第一稳定剂，0.5g/L-5g/L第一反应促进剂形成A1液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸有机溶剂中并加入0.1g/L-5g/L表面活性剂形成B1液，将A1液与B1液按照1:1～9:1的体积比进行混合，形成白细胞酯酶溶液，将滤纸在白细胞酯酶溶液中浸润后进行干燥制成白细胞酶纸块，或将白细胞酯酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成白细胞酯酶反应孔；
过氧化氢原纸/反应块的制备，将过氧化物酶或辣根过氧化物酶溶解于PH值为5-8、浓度为0.1mM-2mM的第二缓冲溶液并加入0.1g/L～0.6g/L第二显色剂，0.1g/L～1.0g/L第二反应促进剂制成过氧化氢试溶液，将滤纸在过氧化氢溶液中浸润后进行干燥，或是将过氧化氢溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成过氧化氢反应孔；
pH值原纸/反应块的制备，将溴甲酚绿、表面活性剂溶解于10％～100％乙醇溶剂中形成A2液，将第二稳定剂溶解于纯化水或乙醇中形成B2液，将A2液与B2液按照9:1～1:9任何体积比例进行混合，形成pH值溶液，将滤纸在pH值中溶液中浸润后进行干燥制得pH值纸块，或是将pH值溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成pH值反应孔；
β-葡萄糖醛酸苷酶原纸/反应块的制备，将第二反应底物溶解于PH值为4-9、浓度为0.5mM-10mM的第三缓冲溶液并加入1g/L-10g/L第三稳定剂，0.5g/L-5g/L第三反应促进剂形成A3液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B3液，将A3液与B3液按照1:1的体积比进行混合，形成β-葡萄糖醛酸苷酶溶液，将滤纸在β-葡萄糖醛酸苷酶溶液中浸润后进行干燥制得β-葡萄糖醛酸苷酶纸块，或是将β-葡萄糖醛酸苷酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成β-葡萄糖醛酸苷酶反应孔；
凝固酶原纸/反应块的制备，将第三反应底物溶解于PH值为3-7浓度为0.1mM-5mM的盐酸-TRIS缓冲液缓冲并加入第四稳定剂溶解完成后形成A4液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B4液，将滤纸在凝固酶A4溶液中浸润干燥后再放入凝固酶B4溶液中浸润后干燥制得凝固酶纸块，或是将凝固酶A4溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥再滴加凝固酶A4溶液5-30ul，干燥制得凝固酶反应孔；
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶原纸/反应块的制备，将0.1g/L-4g/L第四反应底物溶解于PH值为7-10浓度为0.1mM-10mM的PBS缓冲液中并加入1g/L-10g/L第五稳定剂，0.5g/L-5g/L第四反应促进剂形成N-乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液，将滤纸在N-乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液中浸润后进行干燥制得N-乙酰氨基葡萄糖苷酶纸块，或是将N-乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成N-乙酰氨基葡萄糖苷酶反应孔；
唾液酸苷酶原纸/反应块的制备，将0.5g/L-4.0g/L第五反应底物溶解于PH值为3-7浓度为0.1mM-10mM的缓冲液中并加入1g/L-10g/L第六稳定剂，0.1g/L-10g/L第五反应促进剂形成A5液，将重氮盐类第一显色剂溶于含有0.1g/L-10g/L有机酸溶液中形成B5液，将A5液与B5液按照1:1的体积比进行混合，形成唾液酸苷酶溶液，将滤纸在唾液酸苷酶溶液中浸润后进行干燥制得或是将唾液酸苷酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成唾液酸苷酶反应孔；
脯氨酸氨基肽酶原纸/反应块的制备，将0.4g/L-5g/L第六反应底物溶解于PH值为6-8浓度为0.1mM-10mM的缓冲液中并加入1g/L-10g/L第七稳定剂，0.5g/L-5g/L第六反应促进剂形成脯氨酸氨基肽酶溶液，将滤纸在脯氨酸氨基肽酶溶液中浸润后进行干燥制得脯氨酸氨基肽酶纸块，或是将脯氨酸氨基肽酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成脯氨酸氨基肽酶反应孔；
乳酸原纸/反应块的制备，将0.1g/L～1.0g/L过氧化物酶，0.1g/L～1.0g/乳酸氧化酶，表面活性剂，3,3',5,5'-四甲基联苯胺作为第三显色剂，溶解在PH值为5-7的第一PBS缓冲溶液形成乳酸溶液，将滤纸在乳酸溶液中浸润后进行干燥制得乳酸纸块，或是将乳酸溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成乳酸反应孔；
氧化酶原纸/反应块的制备，将1g/L～10g/L第七反应底物溶于第二缓冲溶液中，加入0.5g/L～5g/L表面活性剂，形成氧化酶试剂液，将滤纸在氧化酶溶液中浸润后进行干燥制得，或是将氧化酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔中，经过干燥形成氧化酶反应孔；
胺原纸/反应块的制备，将0.1％-5％氢氧化钾溶液与滤纸进行浸泡干燥，形成反应层原纸；将溴甲酚绿、表面活性剂溶解于10％～100％乙醇溶剂中形成A6液；将第二稳定剂溶解于纯化水或乙醇中形成B6液；将A6液与B6液按照9:1～0:10任何比例进行混合，形成显色层溶液，将滤纸浸泡于显色层溶液中经过干燥形成显色层原纸，将反应层原纸张贴于显色层原纸上形成胺原纸，或是将显色层溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的孔中，经过干燥形成胺试纸显色孔，将反应层原纸分裁成合适的尺寸粘贴于显色孔上形成胺反应孔。
6.采用如权利要求5所述的一种***分泌物多联检测试纸的测试方法，其特征在于，包括如下步骤：
用无菌棉签或无菌拭子于***后穹窿处旋转10-20秒，以清晰见到棉签或拭子上有分泌物附着为准；
将无菌拭子或无菌棉签采集样本，放入软试管中，每个样本加生理盐水，反复涮洗，使样本充分洗脱，得到样本液；
取出干化学检测试纸，在每个项目试纸孔中滴加样本20-30ul，约1滴；
放置在特定的仪器上进行检测，或者试纸条在37±1℃温育5分钟后，在1分钟内与色标卡对比判读结果。
7.权利要求1、5、6中任一项所述的一种***分泌物多联检测试纸在检测***分泌物中PH值、有益菌、白细胞、乳酸杆菌、BV致病菌、***、加德纳菌和动弯杆菌、白色念珠菌和滴虫、大肠埃希菌和B族链球菌、金葡菌和粪肠球菌、白带的中至少一项的应用。
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