CN111544324B - 一种改善皮肤弹性的组合物及化妆品 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种改善皮肤弹性的组合物及化妆品，主要包含：洋蔷薇花提取物10‑15％，沙棘仁提取物6‑10％，棕榈酰四肽‑10 5‑8％，茉莉花提取物7‑13％，多元醇25‑40％，麦芽糊精1‑4％，水20‑37％。其中，本发明组合物中的茉莉花提取物还可选自茉莉花叶细胞提取物，该组合物通过调控皮肤细胞中关键蛋白质的表达，延缓皮肤细胞成熟进程，同时通过阻止外界环境因素对细胞中DNA的损伤来修护细胞。本发明公开的技术方案属于化妆品技术领域。

Description

一种改善皮肤弹性的组合物及化妆品
技术领域
本发明公开了一种组合物，具体地说，是一种改善皮肤弹性的组合物，还公开了含有该组合物的化妆品，属于化妆品技术领域。
背景技术
衰老又称老化，是任何生物生命活动进程中的必经阶段，是生物体发育成熟后，随年龄增长而发生的渐进的、受遗传因素影响的、全身复杂的形态结构与生理功能的衰退过程。皮肤是人体最大的器官，担负着保护、感觉、调节体温、分泌、***和免疫等诸多方面的作用，随着年龄的增长、环境因素作用，皮肤也会像人体的其他器官一样逐渐老化，造成干燥、皱纹、下垂、色斑等老化现象。为了保持年轻的肌肤状态，越来越多的消费者开始使用具有改善衰老状态的化妆品。
在延缓皮肤衰老进程的研究中，目前主要通过以下几个途径进行抗衰老：(1)通过维持细胞外基质胶原蛋白、弹性蛋白、糖蛋白等大分子物质水平来保持皮肤弹性功能，如通过加入视黄醇、维生素等促进细胞外基质的合成；(2)为肌肤补充抗氧化物质来抵御因自身代谢和受紫外辐射等因素引起的氧化压力；(3)从炎症途径上抑制因炎症因子造成的皮肤细胞老化和损伤，如通过添加绿茶提取物抑制炎症因子IL-1、IL-6和IL-8等炎症因子的释放。(4)抑制生物体内非酶糖基化反应阻止胶原蛋白和弹性蛋白发生交联，提高皮肤的弹性，延缓衰老。
对于上述延缓衰老的一些方法，其在使用方式、使用效果、不良反应等方面均存在差强人意的地方。近年来，随着表观遗传学研究的不断深入，人们对外界影响因素如何作用于人体基因表达的方式有了新的认识，研究表观遗传学因素对于衰老的影响显得越来越重要。表观遗传学则是指基于非基因序列改变所致的基因表达水平变化，如DNA甲基化和染色质构象变化等。人体的各种生理病理状况并不是单纯由基因决定的，表观遗传因素同样可以改变基因表达与否的指令并且让这套指令稳定遗传下去。表观遗传学的主要机制包括DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA等，其中非编码RNA具有非常重要且多样的调节功能，因此在分子生物学、细胞生物学和生理学领域都受到了高度的关注，具有极高的研究价值。
本发明主要是从表观遗传学的角度入手，通过调控表观遗传因子来改善皮肤衰老状态。
发明内容
本发明的目的是提供一种改善皮肤弹性的组合物及化妆品。该组合物一方面通过调控皮肤细胞中关键蛋白质的表达，延缓皮肤细胞成熟进程，同时促进表皮细胞分化，保持肌肤活力；另一方面，该组合物通过阻止外界环境因素对细胞中DNA的损伤来修护细胞。该组合物在改善皮肤弹性方面效果好，同时使用安全性高，能够广泛添加于化妆品中。
为此，本发明提供的技术方案是这样的：
一种改善皮肤弹性的组合物，以重量百分数计，包含：洋蔷薇花提取物10-15％，沙棘仁提取物6-10％，棕榈酰四肽-105-8％，茉莉花提取物7-13％，多元醇25-40％，麦芽糊精1-4％，水20-37％。
其中，洋蔷薇花提取物提取自法国的千叶玫瑰，该提取物富含蛋白质、糖、有机酸和小分子RNA，能够帮助角质形成细胞产生MARKSL1，维持皮肤细胞中miRNA-132的表达，帮助提升肌肤修护关键物质胶原蛋白、纤维连接蛋白、透明质酸等真皮基质成分的含量。
沙棘属胡颓子科，沙棘果油在许多化妆品中用作润肤剂。本发明中的沙棘仁提取物富含0.6-1.2％黄酮醇苷，能够减少成纤维细胞中Let-7b miRNA的过度表达。人们在研究蛋白质合成受细胞中的miRNA控制时发现，当miRNA抑制剂降低miRNA水平时，蛋白质表达水平增加。Let-7b miRNA能控制真皮结构中5种关键蛋白质CHSY3、XYLT1、TGFBR2、FBN1、ITGB3的表达。其中，蛋白质TGFBR2、FBN1参与真皮纤维，CHSY3、XYLT1参与纤维间结构，ITGB3参与纤维连接剂。因此，沙棘仁提取物通过作用Let-7b miRNA，来改善皮肤结构，增加皮肤紧致度。
棕榈酰四肽-10是一种生物调和肽，能够抑制非编码RNA ANCR的抗分化表达，减缓表皮成熟进程，维持表皮层的稳态平衡，最终影响表皮层肤质。
本发明的组合物还可以包含质量百分比为3-7％的翅荚决明叶提取物。翅荚决明又叫蜡烛树，这种植物长于南美，非洲，印度等热带和温带地区。本发明中的翅荚决明叶提取物含有类黄酮，特别是K3OS，能够保护细胞中的DNA免受UV的伤害，阻止皮肤发生光老化。
另外，本发明中的茉莉花提取物优选茉莉花叶细胞提取物，具体来自茉莉花叶的愈伤组织培养物的提取物。该提取物主要通过如下方法制得：
首先，将茉莉花的幼叶采用稀释10倍的次氯酸钠消毒20min后，用无菌水冲洗4-5次。使用消毒的刀片将茉莉花幼叶划伤，放入MS固体培养基，在温度25℃，pH值5-6，暗光条件下培养4周。
对于不同植物，同一植物的不同物种对于培养基所需的细胞生长素和***素都有很大差异。本发明培养基中优选加入细胞生长素萘乙酸，添加量为1.2-1.6mg/L，同时添加***素玉米素，添加量为0.2-0.5mg/L。该组合能够诱导茉莉花叶形成愈伤组织。
其次，对上述愈伤组织进行继代培养。选取乳黄色、有光泽、生长较好的茉莉花叶细胞组织转移至新的MS固体培养基进行愈伤组织继代培养。在温度25℃，pH值5-6的条件下培养2周。继代培养过程中，减少细胞生长素和分类素的添加量。优选地，细胞生长素萘乙酸的添加量为0.6-0.8mg/L，***素玉米素的添加量为0.05-0.1mg/L。
更优选地，在继代培养中加入弱光培养，其中，光照强度15-30μmol/m2·s，光照周期4h/天。
再次，为了使愈伤组织块变成良好分散性的细胞和小的细胞聚集体，同时大规模培养，本发明对继代培养的茉莉花叶细胞再进行悬浮培养。筛选生长良好的颗粒状细胞组织放入MS液体培养基进行悬浮培养，细胞生长素萘乙酸的添加量为0.6-0.8mg/L，***素玉米素的添加量为0.05-0.1mg/L。培养条件为温度25℃，pH值5-6，摇床转速100rpm/min。悬浮培养2周后将细胞培养物过滤，培养基灭菌。
最后，对得到的茉莉花叶细胞培养物用去离子水清洗4-5次后干燥破碎，按照料液比1:5加入50％乙醇在50-55℃提取4h-5h，将提取液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得茉莉花叶细胞提取物。
本发明制得的茉莉花叶细胞提取物相对于茉莉花提取物能够更好的保护紫外线引起的DNA损伤。特别是当茉莉花叶细胞提取物与翅荚决明叶提取物的质量比为5:2时，本发明组合物对抗紫外线引起的DNA伤害效果最佳。
在本发明的技术方案中，多元醇可以选自丁二醇、甘油中一种或组合。
此外，为了使本发明组合物稳定性更好，组合物还可以添加油溶性成分如质量占比为4-7％的辛酸/癸酸甘油三酯，添加乳化剂如质量占比为3-5％的鲸蜡醇棕榈酸酯、1-3％的山梨坦硬脂酸酯、1-3％的聚山梨醇酯-80、0.5-1％的氢化卵磷脂中的一种或几种。此外，还可添加防腐剂如质量比为0.1-0.3％的苯甲酸钠、抗氧化剂如质量比为0.05-0.1％的生育酚、pH调节剂如质量比为0.1-0.2％的柠檬酸。
当该组合物添加至化妆品中时，组合物在化妆品中的质量比优选0.1-8％。
本发明提供的另一个技术方案为，一种化妆品，其包含改善皮肤弹性的组合物与化妆品基质，化妆品基质为乳化剂、防腐剂、pH值调节剂、油脂、螯合剂、皮肤调理剂、香精或水的一种或几种。
与现有技术相比，本发明提供的技术方案具有如下技术优点：
(1)本发明通过活性成分洋蔷薇花提取物、沙棘仁提取物、棕榈酰四肽-10、茉莉花提取物的合理组配，提升肌肤修护关键物质胶原蛋白、纤维连接蛋白、透明质酸等真皮基质成分的含量，促进真皮修护；同时，组合物还能促进真皮结构中5种关键蛋白质的表达，进而优化真皮结构，减缓皮肤成熟进程；对于皮肤表皮层，组合物能够促进表皮细胞的和谐分化，维持表皮层的稳态平衡，使肌肤保持活力。此外，该组合物能够抵御光照引起的细胞DNA损伤，保持细胞活力。本发明中的组合物通过多途径作用于皮肤表皮、真皮结构，改善皮肤弹性，提升肌肤紧致度。
(2)本发明中，当组合物中的茉莉花提取物为茉莉花叶细胞提取物，且茉莉花叶细胞提取物与翅荚决明叶提取物为特定比例时，组合物之间具有更好的DNA保护效果，抵御光老化的效果更加明显。本发明中的茉莉花叶通过愈伤组织培养，选择合适的细胞生长素以及***素，诱导培养后再进行继代培养、悬浮培养，得到的茉莉花叶愈伤组织质量好，能大规模培养，提取得到的茉莉花叶细胞提取物能更好地抵抗光老化带来的细胞损伤。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例。对于未特别注明的工艺参数或者条件，可参照常规技术进行。本发明所用的原料可通过自制获得或商业渠道购买。其中，洋蔷薇花提取物可采购自亚什兰投资有限公司，沙棘仁提取物、翅夹决明叶提取物可采购自佛山市新安化工贸易有限公司，棕榈酰四肽-10可采购自禾大国际集团，茉莉花提取物可采购自北京东方淼森生物科技有限公司。
实施例1
发明提供一种改善皮肤弹性的组合物，按照总重量100g计，由以下成分组成：洋蔷薇花提取物10g，沙棘仁提取物8g，棕榈酰四肽-105g，茉莉花提取物13g，甘油25g，麦芽糊精2g，水37g。
实施例2
本发明提供一种改善皮肤弹性的组合物，按照总重量100g计，由以下成分组成：洋蔷薇花提取物12g，沙棘仁提取物10g，棕榈酰四肽-107g，茉莉花提取物8g，丁二醇29g，麦芽糊精1g，水33g。
其中，实施例1-2中的茉莉花提取物为市售。
实施例3
本发明提供一种改善皮肤弹性的组合物，按照总重量100g计，由以下成分组成：洋蔷薇花提取物12g，沙棘仁提取物10g，棕榈酰四肽-107g，茉莉花叶细胞提取物8g，丁二醇29g，麦芽糊精1g，水33g。
其中，茉莉花叶细胞提取物通过以下方法制备：
(1)将茉莉花的幼叶采用稀释10倍的次氯酸钠消毒20min后，用无菌水冲洗4次。使用消毒的刀片将茉莉花幼叶划伤，放入MS固体培养基中诱导愈伤组织。培养基中加入细胞生长素萘乙酸，添加量为1.2mg/L，同时添加***素玉米素，添加量为0.2mg/L。在温度25℃，pH值5，暗光条件下培养4周。
(2)对上述愈伤组织进行继代培养。选取乳黄色、有光泽、生长较好的茉莉花叶细胞组织转移至新的MS固体培养基进行愈伤组织继代培养。培养基中细胞生长素萘乙酸的添加量为0.6mg/L，***素玉米素的添加量为0.05mg/L。在温度25℃，pH值5的条件下培养2周。
(3)对继代培养的茉莉花叶细胞再进行悬浮培养。筛选生长良好的颗粒状细胞组织放入MS液体培养基进行悬浮培养，细胞生长素萘乙酸的添加量为0.6mg/L，***素玉米素的添加量为0.05mg/L。培养条件为温度25℃，pH值5，摇床转速100rpm/min。悬浮培养2周后将细胞培养物过滤，培养基灭菌。
(4)对得到的茉莉花叶细胞培养物用去离子水清洗4-5次后干燥破碎，按照料液比1:5加入50％乙醇在50℃提取4h，将提取液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得茉莉花叶细胞提取物。
实施例4
本发明提供一种改善皮肤弹性的组合物，按照总重量100g计，由以下成分组成：洋蔷薇花提取物11g，沙棘仁提取物6g，棕榈酰四肽-108g，茉莉花叶细胞提取物10g，翅荚决明叶提取物4g，丁二醇20、甘油13g，麦芽糊精4g，水24g。
其中，茉莉花叶细胞提取物通过以下方法制备：
(1)将茉莉花的幼叶采用稀释10倍的次氯酸钠消毒20min后，用无菌水冲洗5次。使用消毒的刀片将茉莉花幼叶划伤，放入MS固体培养基中诱导愈伤组织。培养基中加入细胞生长素萘乙酸，添加量为1.6mg/L，同时添加***素玉米素，添加量为0.5mg/L。在温度25℃，pH值6，暗光条件下培养4周。
(2)对上述愈伤组织进行继代培养。选取乳黄色、有光泽、生长较好的茉莉花叶细胞组织转移至新的MS固体培养基进行愈伤组织继代培养。培养基中细胞生长素萘乙酸的添加量为0.8mg/L，***素玉米素的添加量为0.1mg/L。在温度25℃，pH值6的条件下培养2周。
(3)对继代培养的茉莉花叶细胞再进行悬浮培养。筛选生长良好的颗粒状细胞组织放入MS液体培养基进行悬浮培养，细胞生长素萘乙酸的添加量为0.8mg/L，***素玉米素的添加量为0.1mg/L。培养条件为温度25℃，pH值6，摇床转速100rpm/min。悬浮培养2周后将细胞培养物过滤，培养基灭菌。
(4)对得到的茉莉花叶细胞培养物用去离子水清洗5次后干燥破碎，按照料液比1:5加入50％乙醇在55℃提取5h，将提取液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得茉莉花叶细胞提取物。
实施例5
本发明提供一种改善皮肤弹性的组合物，按照总重量100g计，由以下成分组成：洋蔷薇花提取物11g，沙棘仁提取物6g，棕榈酰四肽-108g，茉莉花叶细胞提取物7g，翅荚决明叶提取物7g，辛酸/癸酸甘油三酯4g、鲸蜡醇棕榈酸酯3g、山梨坦硬脂酸酯1g、聚山梨醇酯-802g、氢化卵磷脂0.5g、苯甲酸钠0.2g、生育酚0.1g、柠檬酸0.2g、丁二醇13g、甘油13g，麦芽糊精4g、水20g。
其中，茉莉花叶细胞提取物通过以下方法制备：
(1)将茉莉花的幼叶采用稀释10倍的次氯酸钠消毒20min后，用无菌水冲洗5次。使用消毒的刀片将茉莉花幼叶划伤，放入MS固体培养基中诱导愈伤组织。培养基中加入细胞生长素萘乙酸，添加量为1.6mg/L，同时添加***素玉米素，添加量为0.5mg/L。在温度25℃，pH值6，暗光条件下培养4周。
(2)对上述愈伤组织进行继代培养。选取乳黄色、有光泽、生长较好的茉莉花叶细胞组织转移至新的MS固体培养基进行愈伤组织继代培养。培养基中细胞生长素萘乙酸的添加量为0.8mg/L，***素玉米素的添加量为0.1mg/L。在温度25℃，pH值6的条件下培养2周。
(3)对继代培养的茉莉花叶细胞再进行悬浮培养。筛选生长良好的颗粒状细胞组织放入MS液体培养基进行悬浮培养，细胞生长素萘乙酸的添加量为0.8mg/L，***素玉米素的添加量为0.1mg/L。培养条件为温度25℃，pH值6，摇床转速100rpm/min。悬浮培养2周后将细胞培养物过滤，培养基灭菌。
(4)对得到的茉莉花叶细胞培养物用去离子水清洗5次后干燥破碎，按照料液比1:5加入50％乙醇在55℃提取5h，将提取液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得茉莉花叶细胞提取物。
实施例6
本发明提供一种改善皮肤弹性的组合物，按照总重量100g计，由以下成分组成：洋蔷薇花提取物15g，沙棘仁提取物7g，棕榈酰四肽-105g，茉莉花叶细胞提取物8g，翅荚决明叶提取物3g，丁二醇10g、甘油30g，麦芽糊精2g，水20g。
其中，茉莉花叶细胞提取物通过以下方法制备：
(1)将茉莉花的幼叶采用稀释10倍的次氯酸钠消毒20min后，用无菌水冲洗5次。使用消毒的刀片将茉莉花幼叶划伤，放入MS固体培养基中诱导愈伤组织。培养基中加入细胞生长素萘乙酸，添加量为1.4mg/L，同时添加***素玉米素，添加量为0.3mg/L。在温度25℃，pH值6，暗光条件下培养4周。
(2)对上述愈伤组织进行继代培养。选取乳黄色、有光泽、生长较好的茉莉花叶细胞组织转移至新的MS固体培养基进行愈伤组织继代培养。培养基中细胞生长素萘乙酸的添加量为0.7mg/L，***素玉米素的添加量为0.08mg/L。在温度25℃，pH值6的条件下培养2周。
(3)对继代培养的茉莉花叶细胞再进行悬浮培养。筛选生长良好的颗粒状细胞组织放入MS液体培养基进行悬浮培养，细胞生长素萘乙酸的添加量为0.7mg/L，***素玉米素的添加量为0.08mg/L。培养条件为温度25℃，pH值6，摇床转速100rpm/min。悬浮培养2周后将细胞培养物过滤，培养基灭菌。
(4)对得到的茉莉花叶细胞培养物用去离子水清洗5次后干燥破碎，按照料液比1:5加入50％乙醇在55℃提取5h，将提取液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得茉莉花叶细胞提取物。
实施例7
本发明提供一种改善皮肤弹性的组合物，按照总重量100g计，由以下成分组成：洋蔷薇花提取物15g，沙棘仁提取物7g，棕榈酰四肽-105g，茉莉花叶细胞提取物8g，翅荚决明叶提取物3g，丁二醇10g、甘油30g，麦芽糊精2g，水20g。
其中，茉莉花叶细胞提取物通过以下方法制备：
(1)将茉莉花的幼叶采用稀释10倍的次氯酸钠消毒20min后，用无菌水冲洗5次。使用消毒的刀片将茉莉花幼叶划伤，放入MS固体培养基中诱导愈伤组织。培养基中加入细胞生长素萘乙酸，添加量为1.4mg/L，同时添加***素玉米素，添加量为0.3mg/L。在温度25℃，pH值6，暗光条件下培养4周。
(2)对上述愈伤组织进行继代培养。选取乳黄色、有光泽、生长较好的茉莉花叶细胞组织转移至新的MS固体培养基进行愈伤组织继代培养。培养基中细胞生长素萘乙酸的添加量为0.7mg/L，***素玉米素的添加量为0.08mg/L。培养期间加入弱光，光照强度15-30μmol/m2·s，光照周期4h/天。在温度25℃，pH值6的条件下培养2周。
(3)对继代培养的茉莉花叶细胞再进行悬浮培养。筛选生长良好的颗粒状细胞组织放入MS液体培养基进行悬浮培养，细胞生长素萘乙酸的添加量为0.7mg/L，***素玉米素的添加量为0.08mg/L。培养条件为温度25℃，pH值6，摇床转速100rpm/min。悬浮培养2周后将细胞培养物过滤，培养基灭菌。
(4)对得到的茉莉花叶细胞培养物用去离子水清洗5次后干燥破碎，按照料液比1:5加入50％乙醇在55℃提取5h，将提取液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得茉莉花叶细胞提取物。
对比例1
一种组合物，按照总重量100g计，由以下成分组成：沙棘仁提取物10g，棕榈酰四肽-107g，茉莉花提取物20g，丁二醇29g、麦芽糊精1g，水33g。
对比例1与实施例2的区别在于将实施例2中的洋蔷薇花提取物用等量的茉莉花提取物代替。
对比例2
一种组合物，按照总重量100g计，由以下成分组成：洋蔷薇花提取物20g，沙棘仁提取物10g，棕榈酰四肽-107g，丁二醇29g、麦芽糊精1g，水33g。
对比例2与实施例2的区别在于将实施例2中的茉莉花提取物用等量的洋蔷薇花提取物代替。
对比例3
一种组合物，按照总重量100g计，由以下成分组成：洋蔷薇花提取物22g，棕榈酰四肽-107g，茉莉花提取物8g，丁二醇29g、麦芽糊精1g，水33g。
对比例3与实施例2的区别在于将实施例2中的沙棘仁提取物用等量的洋蔷薇花提取物代替。
实施例1-7、对比例1-3中的组合物可通过如下方法制备：
(1)将氢化卵磷脂、生育酚、辛酸/癸酸甘油三酯、鲸蜡醇棕榈酸酯、山梨坦硬脂酸酯、聚山梨醇酯-80在70-80℃下混合搅拌得A混合物，备用；
(2)将麦芽糊精、苯甲酸钠、柠檬酸、水在50-60℃下搅拌混合均匀得B混合物，备用；
(3)将B混合物加入A混合物在70-80℃下混合均质10-15min，降温至40-45℃；
(4)将苯氧乙醇溶解于多元醇中，并加入到步骤(3)得到的混合物中；
(5)将洋蔷薇花提取物、沙棘仁提取物、棕榈酰四肽-10、茉莉花提取物(或茉莉花叶细胞提取物)、翅夹决明叶提取物加入步骤(4)中的混合物，混合搅拌均匀，即得本发明组合物。
上述制备方法中的成分，实施例或对比例中如果有就添加，没有就省略。
一、对紫外线引起DNA损伤的抑制实验
将HaCaT细胞加入0.25％胰酶消化，细胞悬液1x106个/mL，每孔1mL加入细胞培养板中，在培养箱中培养24h。将实施例1-7，对比例1-3的组合物用DMEM培养基稀释40μg/mL后每孔1mL依次加入，另外，设置一组只用DMEM培养基培养细胞的对照组。培养21h后在8W的小紫外灯下用365nm紫外光照射1h，灯距离细胞10cm。照射完后继续放入培养箱中培养2h后去掉上清液。用冷浴PBS洗2-3次，然后每孔加入0.5mL细胞裂解液，在冰上裂解细胞约15min。然后将裂解产物离心15min，取上清液进行单细胞凝胶电泳实验。最后利用紫外成像***获取结果，再用CASP图像处理软件对结果进行计数分析。
DNA损伤＝DNA尾部荧光数量/DNA总彗星荧光数量×100％
表1 DNA损伤抑制试验
Figure BDA0002526095440000081
Figure BDA0002526095440000091
从表1中DNA损伤抑制试验可以看出，当对HaCaT细胞进行紫外照射时，细胞中的DNA会发生相应的损伤。如果在细胞培养基中加入本发明的组合物，DNA的损伤率由6％左右可明显降低至3％左右。此外，当提取物中的茉莉花提取物来自于茉莉花的叶细胞时，整个组合物对于DNA保护的效果更好，更能降低紫外线对于DNA的损伤。同时，翅荚决明叶提取物的加入，也会使本发明组合物的抗光老化的效果更好。
二、人体斑贴安全性测试
选取30名年龄30-50岁的志愿者，将实施例1-7的组合物分别取20μg至合格的斑试器中，同时设置一组空白对照组。将含有测试样品、空白对照组的斑贴用无刺激的胶带贴敷于受试者的前臂曲侧，用手掌轻压使之均匀贴敷在皮肤上，持续24h。24h后移除斑贴，并在移除斑贴0.5h、24h、48h观察皮肤反应，按照《化妆品安全技术规范》(2015版)中皮肤反应分级标准记录结果如表2所示。
表2组合物人体皮肤封闭型斑贴试验结果
Figure BDA0002526095440000092
Figure BDA0002526095440000101
从表2可以看出，除了实施例2在0.5h后有1名1级反应，其他测试样品均显示为阴性反应。根据《化妆品安全技术规范》(2015版)中规定，该测试样品对本批次受试者皮肤可认定为未引起不良反应，本申请的组合物具有较好的使用安全性。
三、皮肤弹性的改善实验
为了评估该组合物对于皮肤弹性的改善效果，将实施例1-7，对比例1-3的组合物按照质量比5％分别添加至下述化妆品基质中，制备成相应的膏霜。膏霜中的各成分质量比为：PEG-40硬脂酸脂5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷//山梨坦橄榄油酸酯1％、聚二甲基硅氧烷2.5％、异壬酸异壬酯4％、辛酸/癸酸甘油三酯3％、1,3-丁二醇5％、甘油5％、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.5％、环五聚二甲基硅氧烷//C30-45烷基鲸蜡硬脂基聚二甲基硅氧烷交联聚合物3％、苯氧乙醇0.4％、本实验组合物5％、水余量。
选取年龄为30-50岁的志愿者44名，志愿者排除条件符合《化妆品接触性皮炎诊断标准及处理原则》中的排除标准。将志愿者分为11组，每组4人。测试期间，受试者取适量膏霜在脸部涂抹，每天早晚涂抹两次，连续使用28天。同时，志愿者脸部实验部位在测试期间不能涂抹其他化妆品。使用皮肤弹性仪Cutometer MPA580在第0天，第28天后对志愿者的颧部进行数据采集，同一测试区域测量3次，取平均值。
皮肤弹性指数使用R2来表征，R2是指无负压时皮肤的回弹量Ua与有负压时的最大拉伸量Uf之比，R2越接近1，皮肤的弹性越好，R2平均变化值＝第28天R2值－第0天R2值，R2平均变化率＝R2平均变化值/第0天R2值。皮肤弹性R2测试结果如表3所示。
表3皮肤弹性R2测试结果
Figure BDA0002526095440000102
Figure BDA0002526095440000111
从表3可以看出，使用本发明的组合物28天以后，皮肤弹性指数R2变化达到10％以上，组合物能够比较明显地改善皮肤弹性。本发明通过活性成分洋蔷薇花提取物、沙棘仁提取物、棕榈酰四肽-10、茉莉花提取物的合理组配，调控皮肤细胞中关键蛋白质的表达，延缓皮肤细胞成熟进程，最终达到改善皮肤弹性的功效。当组合物中的茉莉花提取物来自于叶细胞时，整个组合物对于皮肤弹性改善的效果更好。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种改善皮肤弹性的组合物，其特征在于，以重量百分数计，包含：洋蔷薇花提取物10-15%，沙棘仁提取物6-10%，棕榈酰四肽-10 5-8%，茉莉花叶细胞提取物7-13%，多元醇25-40%，麦芽糊精1-4%，水20-37%，翅荚决明叶提取物3-7%，所述茉莉花叶细胞提取物与翅荚决明叶提取物的质量比为5:2，所述茉莉花叶细胞提取物通过如下方式制得：
（1）将茉莉花的幼叶进行消毒处理后，用刀片割伤放入培养基诱导愈伤组织，在温度25℃，pH值5-6，暗光条件下培养4周，所述培养基为MS固体培养基与细胞生长素和***素的组合，其中，细胞生长素为萘乙酸，添加量为1.2-1.6mg/L；***素为玉米素，添加量为0.2-0.5mg/L；
（2）选取（1）中乳黄色、有光泽、生长较好的茉莉花叶细胞组织转移至新的MS固体培养基进行愈伤组织继代培养，在温度25℃，pH值5-6的条件下培养2周，培养基中细胞生长素萘乙酸的添加量为0.6-0.8mg/L，***素玉米素的添加量为0.05-0.1mg/L；
（3）筛选（2）中生长良好的颗粒状细胞组织放入MS液体培养基进行悬浮培养，细胞生长素萘乙酸的添加量为0.6-0.8mg/L，***素玉米素的添加量为0.05-0.1mg/L，培养条件为温度25℃，pH值5-6，摇床转速100rpm/min，黑暗培养2周后将细胞培养物过滤，培养基灭菌；
（4）将（3）中的茉莉花叶细胞培养物用去离子水清洗4-5次后干燥破碎，按照料液比1:5加入50%乙醇在50-55℃提取4h-5h，将提取液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得茉莉花叶细胞提取物。
2.根据权利要求1所述的改善皮肤弹性的组合物，其特征在于，在所述茉莉花叶细胞的制备方法步骤（2）中加入弱光，其中，光照强度15-30μmol/m2·s，光照周期4h/天。
3.根据权利要求1所述的改善皮肤弹性的组合物，其特征在于，所述多元醇选自丁二醇、甘油中一种或组合。
4.一种化妆品，其特征在于：包含权利要求1-3任一所述改善皮肤弹性的组合物与化妆品基质，其中，化妆品基质为乳化剂、防腐剂、pH值调节剂、油脂、螯合剂、皮肤调理剂、香精或水中的一种或几种。
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