CN110090170A - 具有生发固发防脱的生物多糖及其应用 - Google Patents
具有生发固发防脱的生物多糖及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及具有生发固发防脱功效的生物多糖及其应用。具体地,本发明中的β‑葡聚糖,尤其是具有天然可溶性、高分子质量、高粘度的β‑葡聚糖(如裂褶菌β‑葡聚糖),能够非常有效地促进生发和/或防止脱发。实验表明,β‑葡聚糖能够明显促进休止期的毛囊进入生长期,使其长时间处于生长期,促进毛发再生和毛发生长,预防脱发、巩固发根,并且具有除去和预防头皮屑,以及止痒的功效。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术和药物制剂领域,具体地涉及具有生发固发防脱的生物多糖及其应用。
背景技术
毛发的生长是一个循环周期性的过程,主要经过生长期(anagen stage)、退行期(catagen stage)、休止期(telogen stage)3个过程。毛发的生长不仅受到年龄、性别、部位的影响,还受到机体激素水平、疾病和外界因素等的影响。
毛发具有防御、保护及增加信息交流和美观的作用。毛发由毛囊生成,毛囊是一种结构复杂的皮肤附属器官,持续经历着生长期、退行期和休止期的周期循环性生长。毛囊周期一旦失调,将会影响毛囊正常生长从而导致脱发疾病的发生。随着社会发展,人们对兼有保护与美观作用的毛发越来越重视,但临床上疗效确切的促毛发生长药物仍十分匮乏。目前,仅美国FDA批准的口服药物非那雄胺和外用药物米诺地尔具有较肯定的疗效。对促进毛囊再生、毛发生长药物的研究已逐渐成为皮肤学领域的研究热点与难点。
因此,本领域亟需开发一种能有效促进生发、防止脱发的产品。
发明内容
本发明的目的是提供一种能有效促进生发、防止脱发的药物。
本发明的另一目的是提供一种具有生发防脱的生物多糖及其在发品中的应用。
本发明的第一方面,提供了一种β-葡聚糖的用途,用于(a)促进生发和/或防止脱发,或(b)制备促进生发和/或防止脱发的制剂或组合物。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖为β-D-葡聚糖。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖为β-1,3-葡聚糖,优选地,具有β-1,6-分支的β-1,3-葡聚糖。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的结构如式I所示,
其中,l为≥0的整数,较佳地0-50,较佳地0-10,更佳地0-3,更佳地1-2,更佳地1;m为≥0的整数,较佳地为0-19,较佳地为0-4,更佳地为0-1,更佳地为0;n为≥3的整数,较佳地为30-60000,更佳地100-10000。
在另一优选例中,l为0-50的整数,较佳地0-10,更佳地0-3,更佳地1-2,更佳地1;m为≥0的整数,较佳地为0-19,较佳地为0-4,更佳地为0-1,更佳地为0;n为≥3的整数,较佳地为30-60000,更佳地100-10000。
在另一优选例中,所述l选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。
在另一优选例中,所述m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的分支度(DB)为0.02-0.8,较佳地0.1-0.5,较佳地0.25-0.4,更佳地,0.2-0.4。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖包括具有三螺旋立体结构的β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述三螺旋立体结构的β-葡聚糖的含量为80%,90%,95%,按β-葡聚糖的总摩尔量计。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的β-1,3-主链为三螺旋立体结构的主体。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的β-1,6-分支位于三螺旋立体结构的外侧。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的分子量≥2kD,较佳地2kD-40000kD,更佳地20kD-20000kD。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的分子量可以为5kD-35000kD;10kD-30000kD;50kD-25000kD;100kD-20000kD;200kD-18000kD;400kD-16000kD;500kD-14000kD;1000kD-12000kD;2000kD-4000kD;3000kD-5000kD;4000kD-6000kD;5000kD-7000kD;6000kD-8000kD;7000kD-9000kD;或者8000kD-10000kD。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖选自下组:裂褶菌β-葡聚糖、香菇β-葡聚糖、小核菌β-葡聚糖、灰树花β-葡聚糖、侧耳多糖、蘑菇β-葡聚糖、酵母β-葡聚糖、燕麦β-葡聚糖、或其组合。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖为裂褶菌β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述香菇β-葡聚糖为每5个β-1,3-的主链,带有2个β-1,6-的分支,且每个分支1个葡萄糖残基的β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的纯度≥70%,较佳地≥90%,更佳地≥95%,更佳地≥99%。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖具有良好的稳定性。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖呈固态形式或液态形式,如β-葡聚糖固体颗粒或粉末、或β-葡聚糖水溶液。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖颗粒或粉末的粒径≤20mm,较佳地0.001-10mm,更佳地0.01-5mm,更佳地0.1-2mm。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖为完全水溶的β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖(颗粒或粉末)具有良好的水溶性和/或天然可溶性。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖(颗粒或粉末)在25℃水(100g)中的溶解度≥0.0001g,较佳地0.01-50g,更佳地0.1-10g。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖(颗粒或粉末)在25℃水(100g)中的溶解度可以为0.1-100g;0.2-90g;0.5-80g;1-50g;或者,所述溶解度可以为0.1-0.3g;0.2-0.4g;0.3-0.5g;0.4-0.6g;0.5-0.7g;0.6-0.8g;0.7-0.9g;0.8-1g;或者1-3g;2-4g;3-5g;4-6g;5-7g;6-8g;7-9g;或者8-10g。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖溶液为β-葡聚糖在水中的溶液,即β-葡聚糖水溶液。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖(水)溶液粘度大;较佳地,质量浓度为0.5%的β-葡聚糖水溶液(25℃时)粘度≥40mPa·s,更佳地100-10000mPa·s,更佳地500-2000mPa·s。
在另一优选例中,所述质量浓度为0.5%的β-葡聚糖水溶液(25℃)粘度可以为50-10000mPa·s;100-9000mPa·s;200-8000mPa·s;300-7000mPa·s;400-6000mPa·s;450-5000mPa·s;500-5000mPa·s;550-4000mPa·s;600-3000mPa·s;650-2000mPa·s;或者700-1500mPa·s。
在另一优选例中,所述质量浓度为1%的β-葡聚糖的水溶液具有高澄清度或高透光率,所述质量浓度为1%的β-葡聚糖水溶液的透光率≥50%,较佳地≥80%,较佳地≥85%,更佳地≥95%;
在另一优选例中,所述β-葡聚糖溶液具有良好的稳定性。
在另一优选例中,所述促进生发和/或防止脱发包括促进休止期的毛囊进入生长期。
在另一优选例中,所述促进生发和/或防止脱发包括:促进毛***细胞的增殖和/或活化、延迟毛囊细胞的退行、或其组合。
在另一优选例中,所述促进生发包括促进毛发再生和/或毛发生长。
在另一优选例中,所述脱发包括遗传决定的和/或获得形式的脱发。
在另一优选例中,所述遗传决定的或获得形式的脱发包括毛发生长不足、斑秃、部分脱发、全部脱发、拔毛癖或药物诱导的脱发。
在另一优选例中,所述脱发包括脂溢性脱发、化学性脱发。
在另一优选例中,所述脱发包括瘢痕性脱发和/或非瘢痕性脱发。
在另一优选例中,所述瘢痕性脱发包括毛发扁平苔藓、绝经后脱发、红斑狼疮性脱发、Brocq假性斑秃、头皮分割性蜂窝织炎、或其组合。
在另一优选例中,所述非瘢痕性脱发包括雄激素源性脱发、斑秃、颞部三角形脱发、拔毛癖、老年性脱发、休止期脱发、生长期毛发疏松综合症、梅毒性脱发、脂水肿性脱发、食盐性脱发、食糖性脱发、肿瘤相关性脱发,或其组合,优选地雄激素源性脱发和/或斑秃。
在另一优选例中,所述非瘢痕性脱发包括雄激素源性脱发、斑秃、颞部三角形脱发、拔毛癖、老年性脱发、休止期脱发、生长期毛发疏松综合症、梅毒性脱发、脂水肿性脱发、食盐性脱发、食糖性脱发、或其组合,优选地雄激素源性脱发和/或斑秃。
在另一优选例中,所述防止脱发包括预防脱发和/或巩固发根。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖、制剂或组合物还用于修护毛鳞片,改善发质。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖、制剂或组合物还用于除去和/或预防头皮屑、止痒、修复受损头皮或毛囊、和/或对抗头部感染。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖、制剂或组合物还用于预防和/或治疗头皮炎症,优选地毛囊炎、脂溢性皮炎。
在另一优选例中,所述制剂或组合物含有(a)β-葡聚糖;以及任选的(b)药学上、化妆品学上、或器械类可接受的载体或赋形剂。
在另一优选例中,所述制剂或组合物含有0.001-99wt%、较佳地0.002-30wt%、更佳地0.005-10wt%、更佳地0.01-3wt%、更较佳地0.02-1wt%的β-葡聚糖,按制剂或组合物的总重量计。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖在所述制剂或组合物中的质量浓度为≥1μg/mL,具体可以为1μg/mL-200mg/mL,或者1μg/mL-10mg/mL,或者1μg/mL-5mg/mL,或者1μg/mL-3mg/mL。
在另一优选例中,所述组合物或制剂的剂型为药学上、食品或保健或日化可接受的剂型,包括固体剂型、半固体剂型、或液体剂型,如溶液、凝胶、膏霜、乳液等。
在另一优选例中,所述组合物为药物组合物、化妆品组合物、食品或保健食品组合物,及其组合。
在另一优选例中,所述组合物为药物组合物或化妆品组合物。
在另一优选例中,所述组合物为口服、外用,和/或两者的组合,较佳地为外用,更佳地为皮肤外用。
本发明的第二方面,提供了一种用于促进生发和/或防止脱发的制剂,所述制剂包含作为活性成分的β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述制剂含有0.001-99wt%、较佳地0.002-30wt%、更佳地0.005-10wt%、更佳地0.01-3wt%、更较佳地0.02-1wt%的β-葡聚糖,按制剂的总重量计。
在另一优选例中,所述制剂还包括第二活性成分,所述第二活性成分为不同于β-葡聚糖的促进生发和/或防止脱发活性成分、或治疗头皮炎症的活性成分。
在另一优选例中,所述第二活性成分来自化学合成的活性成分、天然药物来源和/或食物来源的活性成分。
在另一优选例中,所述第二活性成分为生发药物和/或消炎药物。
在另一优选例中,所述生发固发防脱药物包括化学合成的生发药物、天然生发药物、具有生发功效的食物、具有固发生发功效的活性多肽、或其组合。
在另一优选例中,所述生发药物为化学合成的生发药物、天然生发药物和/或具有固发生发功效的活性多肽。
在另一优选例中,所述化学合成的生发药物选自下组:非那雄胺、西咪替丁、安体舒通、氟他胺、米诺地尔、或其组合。
在另一优选例中,所述天然生发药物选自下组:女贞子、何首乌、侧柏叶、或其组合。
在另一优选例中,所述天然生发药物选自下组:女贞子、何首乌、或其组合。
在另一优选例中,所述具有生发功效的食物选自下组:生姜、黑芝麻、或其组合。
在另一优选例中,所述活性多肽选自下组:血管内皮细胞生长因子、天冬氨酸-丝氨酸-丝氨酸重复多肽、或其组合。
在另一优选例中,所述消炎药物选自下组:抗生素、抑菌剂、维生素A酸类、过氧化苯甲酰、植物杀菌抑菌成分、糖皮质激素、壬二酸、烟酰胺、硫磺、雷琐辛、水杨酸、或其组合。另一类为中药及其提取物:如白术、半夏、柴胡、陈皮、赤芍、大黄、地黄、茯苓、甘草、桂枝、黄连、黄芩、积雪草、姜黄、金银花、连翘、牡丹根/皮、牛蒡子、枇杷叶、蒲公英、人参、桑白皮、山药、生山楂、乌梅、野菊花、生薏苡仁、焦栀子、枳实、竹茹、或其组合。
在另一优选例中,所述制剂还包括药学上、化妆品、食品和/或保健食品学上可接受的载体、赋形剂或添加剂。
在另一优选例中,所述药学上、化妆品、食品上可接受的载体、赋形剂或添加剂选自下组:表面活性剂、乳化剂、增稠剂、防腐剂、抗氧化剂、或其组合。
在另一优选例中,所述制剂的剂型为药学上或保健或日化可接受的剂型,优选地为口服制剂(如口服液剂、胶囊剂)、外用制剂或透皮制剂(如外用溶液剂、软膏剂、贴剂等)。
在另一优选例中,所述制剂为液状、泡沫状、喷雾状、粉状、凝胶状或膏状。
在另一优选例中,所述制剂用于具有毛囊的温血动物体,优选地人、家畜、宠物。
在另一优选例中,所述制剂选自下组:生发和/或防脱发药水、生发和/或防脱发药膏、生发和/或防脱发药物或敷片、洗发水、润发乳或护发素、发胶、摩丝、涂剂、发膏、发膜、染发液、眉毛再生剂、睫毛再生剂或睫毛营养剂、护发精华液、或其组合。
在另一优选例中,所述制剂用于制备选自下组的产品:生发和/或防脱发药水、生发和/或防脱发药膏、生发和/或防脱发药物或敷片、洗发水、润发乳或护发素、发胶、摩丝、涂剂、发膏、发膜、染发液、眉毛再生剂、睫毛再生剂或睫毛营养剂、护发精华液、或其组合。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖选自下组:裂褶菌β-葡聚糖、香菇β-葡聚糖、小核菌β-葡聚糖、灰树花β-葡聚糖、侧耳多糖、蘑菇β-葡聚糖、酵母β-葡聚糖、燕麦β-葡聚糖、或其组合,优选地,所述β-葡聚糖为裂褶菌β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述制剂中的β-葡聚糖具有选自下组一个或多个特征:
(1)所述β-葡聚糖的纯度≥70%,较佳地≥90%,更佳地≥95%,更佳地≥99%;
(2)所述β-葡聚糖具有良好的水溶性、复溶性和/或天然可溶性;
(3)所述β-葡聚糖(固体颗粒或粉末)在25℃水中的溶解度≥0.0001g/100g水,较佳地0.01-50g/100g水,更佳地0.1g-10g/100g水;
(4)所述β-葡聚糖(固体颗粒或粉末)的水溶液具有高澄清度或高透光率;优选地,所述质量浓度为1%的β-葡聚糖水溶液的透光率≥50%,较佳地≥80%,较佳地≥85%,更佳地≥95%;
(5)所述β-葡聚糖(固体颗粒或粉末)的水溶液粘度大;优选地,质量浓度为0.5%的β-葡聚糖水溶液(25℃时)粘度≥40mPa·s,更佳地100-10000,更佳地600-2000mPa·s;
(6)所述β-葡聚糖的水溶液具有良好的稳定性;和/或
(7)所述β-葡聚糖的分子量≥2kD,较佳地2kD-40000kD,更佳地20kD-20000kD。
在另一优选例中,药学上或化妆品学上可接受的载体为水。
本发明的第三方面,提供了如本发明第二方面所述的制剂的用途,用于制备选自下组的产品:生发和/或防脱发药水、生发和/或防脱发药膏、生发和/或防脱发药物或敷片、洗发水、润发乳或护发素、发胶、摩丝、涂剂、发膏、发膜、染发液、眉毛再生剂、睫毛再生剂或睫毛营养剂、护发精华液、或其组合。
本发明的第四方面,提供了一种组合物产品,所述组合物产品包括:
(1)第一组合物,所述第一组合物含有(a)第一活性成分,所述第一活性成分为β-葡聚糖;和(b)药学上、化妆品学上、食品和/或保健食品学上、或器械类可接受的载体或赋形剂;以及
(2)第二组合物,所述第二组合物为生发固发防脱药物、或治疗头皮炎症药物。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖选自下组:裂褶菌β-葡聚糖、香菇β-葡聚糖、小核菌β-葡聚糖、灰树花β-葡聚糖、侧耳多糖、蘑菇β-葡聚糖、酵母β-葡聚糖、燕麦β-葡聚糖、或其组合,优选地,所述β-葡聚糖为裂褶菌β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖为裂褶菌β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述制剂中的β-葡聚糖具有选自下组一个或多个特征:
(1)所述β-葡聚糖的纯度≥70%,较佳地≥90%,更佳地≥95%,更佳地≥99%;
(2)所述β-葡聚糖具有良好的水溶性、复溶性和/或天然可溶性;
(3)所述β-葡聚糖(固体颗粒或粉末)在25℃水中的溶解度≥0.0001g/100g水,较佳地0.01-50g/100g水,更佳地0.1g-10g/100g水;
(4)所述β-葡聚糖(固体颗粒或粉末)的水溶液具有高澄清度或高透光率;优选地,所述质量浓度为1%的β-葡聚糖水溶液的透光率≥50%,较佳地≥80%,较佳地≥85%,更佳地≥95%;
(5)所述β-葡聚糖(固体颗粒或粉末)的水溶液粘度大;优选地,质量浓度为0.5%的β-葡聚糖水溶液(25℃时)粘度≥40mPa·s,更佳地100-10000,更佳地600-2000mPa·s;
(6)所述β-葡聚糖的水溶液具有良好的稳定性;和/或
(7)所述β-葡聚糖的分子量≥2kD,较佳地2kD-40000kD,更佳地20kD-20000kD。
在另一优选例中,药学上、化妆品学上、或食品和/或保健食品学上可接受的载体为水。
在另一优选例中,所述生发固发防脱药物含有(a)第二活性成分,所述第二活性成分为不同于β-葡聚糖的生发固发防脱活性成分、或治疗头皮炎症的活性成分;和(b)药学上、化妆品学上、食品和/或保健食品学上、或器械类可接受的载体或赋形剂。
在另一优选例中,所述第二活性成分来自化学合成的活性成分、天然药物来源和/或食物来源的活性成分。
在另一优选例中,所述第二活性成分为生发药物和/或消炎药物。
在另一优选例中,所述生发固发防脱药物包括化学合成的生发药物、天然生发药物、具有生发功效的食物、具有固发生发功效的活性多肽、或其组合。
在另一优选例中,所述生发药物为化学合成的生发药物、天然生发药物和/或具有固发生发功效的活性多肽。
在另一优选例中,所述化学合成的生发药物选自下组:非那雄胺、西咪替丁、安体舒通、氟他胺、米诺地尔、或其组合。
在另一优选例中,所述天然生发药物选自下组:女贞子、何首乌、侧柏叶、或其组合。
在另一优选例中,所述天然生发药物选自下组:女贞子、何首乌、或其组合。
在另一优选例中,所述具有生发功效的食物选自下组:生姜、黑芝麻、或其组合。
在另一优选例中,所述活性多肽选自下组:血管内皮细胞生长因子、天冬氨酸-丝氨酸-丝氨酸重复多肽、或其组合。
在另一优选例中,所述治疗头皮炎症药物选自下组:抗生素、抑菌剂、维生素A酸类、过氧化苯甲酰、植物杀菌抑菌成分、糖皮质激素、壬二酸、烟酰胺、硫磺、雷琐辛、水杨酸、或其组合。另一类为中药及其提取物:如白术、半夏、柴胡、陈皮、赤芍、大黄、地黄、茯苓、甘草、桂枝、黄连、黄芩、积雪草、姜黄、金银花、连翘、牡丹根/皮、牛蒡子、枇杷叶、蒲公英、人参、桑白皮、山药、生山楂、乌梅、野菊花、生薏苡仁、焦栀子、枳实、竹茹、或其组合。
在另一优选例中,所述第一组合物和第二组合物为各自独立的、或合二为一的。
在另一优选例中,所述组合物产品用于促进生发和/或防止脱发。
在另一优选例中,所述组合物产品用于治疗、预防和/或改善脱发。
在另一优选例中,所述组合物产品为化妆品、药物、食品、或其组合。
本发明的第五方面,提供了一种毛发养护产品,所述的产品包括:作为活性成分的β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述毛发养护产品选自下组:生发和/或防脱发药水、生发和/或防脱发药膏、生发和/或防脱发药物或敷片、洗发水、润发乳或护发素、发胶、摩丝、涂剂、发膏、发膜、染发液、眉毛再生剂、睫毛再生剂或睫毛营养剂、护发精华液、或其组合。
本发明的第六方面,提供了一种促进生发和/或防止脱发的方法,包括步骤:(a)给需要的对象施用β-葡聚糖、如本发明第二方面所述的制剂、本发明第四方面所述的组合物产品或本发明第五方面所述的毛发养护产品。
在另一优选例中,所述的对象包括具有毛囊的温血动物体,优选地人、家畜、宠物。
在另一优选例中,所述的对象患有遗传决定的和/或获得形式的脱发。
在另一优选例中,所述遗传决定的或获得形式的脱发是斑秃、部分脱发、全部脱发、拔毛癖或药物诱导的脱发。
应理解,在本发明范围内中,本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合,从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅,在此不再一一累述。
附图说明
图1显示了实施例1中制备的裂褶菌β-葡聚糖的傅里叶变换红外光谱图。
图2显示了裂褶菌β-葡聚糖具有显著促进毛发生长的作用。
图3显示了裂褶菌β-葡聚糖具有增加AES泡沫的堆高度,减缓消泡速度以及增加泡沫细腻度的效果,其中A为增加泡沫堆高度,B为减慢消泡速度,C为增加泡沫细腻度。
图4显示了含有裂褶菌β-葡聚糖的无硅油洗发水具有更好的去屑能力,并且延长了头发的返油时间以及改善了发质。
图5显示了裂褶菌β-葡聚糖具有显著修复毛鳞片的作用。
图6显示了裂褶菌β-葡聚糖具有显著促进人类毛发生长的作用。
图7显示了裂褶菌β-葡聚糖具有显著促进人类毛发生长的作用。
图8显示了裂褶菌β-葡聚糖具有显著促进人类毛发生长的作用。
具体实施方式
本发明人经过广泛而深入的研究,首次意外地发现,β-葡聚糖,尤其是具有天然可溶性、高分子量、高粘度的β-葡聚糖(如裂褶菌β-葡聚糖),能够非常有效地促进生发和/或防止脱发。实验表明,β-葡聚糖有明显促进休止期的毛囊进入生长期,使得长时间处于生长期,促进毛发再生和毛发生长,除去和预防头皮屑、止痒、修复受损头皮或毛囊,并且预防脱发、巩固发根。此外,还能够优化表面活性剂的基本特性,提高产泡量、消泡速度慢、泡沫更细腻。在此基础上,完成了本发明。
术语说明
除非另外定义,否则本文中所用的全部技术与科学术语均具有如本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
如本文所用,在提到具体列举的数值中使用时,术语“约”意指该值可以从列举的值变动不多于1%。例如,如本文所用,表述“约100”包括99和101和之间的全部值(例如,99.1、99.2、99.3、99.4等)。
如本文所用,术语“含有”或“包括(包含)”可以是开放式、半封闭式和封闭式的。换言之,所述术语也包括“基本上由…构成”、或“由…构成”。
如本文所用,术语“生发”、“育发”可互换使用,具体地包括毛发再生和/或毛发生长。
如本文所用,术语“防止脱发”是指防止、抑制、阻止和减少部分或完全脱发。
如本文所用,术语“促进毛发再生”被定义为包括维持、诱发、刺激、促进和恢复毛发产生、缺发的生长,或者毛发生长周期中生长期的延长。
如本文所用,术语“毛发生长”被定义为包括防脱、促进毫毛的发展和生长以及毫毛向终毛的转化。
如本文所用,术语“完全水溶”指所述固态形式的β-葡聚糖,可以在水中完全溶解成为β-葡聚糖水溶液,即在25℃100g水中β-葡聚糖的溶解度≥0.0001g,较佳地0.01-50g,更佳地0.1g-10g。
如本文所用,术语“天然可溶性”指天然状态的β-葡聚糖本身所具有的、在水中完全溶解形成水溶液的性质。所述“天然状态的β-葡聚糖”,是指使用天然方法生产得到(如生物发酵)的β-葡聚糖,所述β-葡聚糖没有经过任何化学改性、并且没有经过任何物理的和/或化学的和/或生物的方法将其长链分子打断而降低其分子质量。在另一优选例中,本发明β-葡聚糖为天然状态的β-葡聚糖。
脱发
如本文所用,术语“脱发”或“脱发症”是指毛发生长不足和毛发部分或完全脱落,包括但不限于雄激素源性脱发症或男性型脱发症、中毒性脱发症、斑秃、休止期脱发、因内分泌反常、代谢紊乱或营养不良引起的脱发症、药物诱发的脱发症、机械性脱发、皮肤病并发的脱发症、瘢痕性脱发症、先天性脱发症和拔毛癖。
脱发是临床上最常见的皮肤性疾病,对于它的分类方法各不相同,现在最普遍的是将脱发分为瘢痕性脱发和非瘢痕性脱发两大类。其中非瘢痕性脱发是可逆的,瘢痕性脱发是永久性的。瘢痕性脱发又分原发性和继发性两种,原发性是指毛囊的疾病,而继发性是指毛囊不是炎症的主要部位。非瘢痕性脱发包括雄激素源性脱发、斑秃、颞部三角形脱发、拔毛癖、老年性脱发、休止期脱发、生长期毛发疏松综合症、梅毒性脱发、脂水肿性脱发、食盐性脱发、食糖性脱发,最常见的是雄激素源性脱发和斑秃。瘢痕性脱发包括毛发扁平苔藓、绝经后脱发、红斑狼疮性脱发、Brocq假性斑秃、头皮分割性蜂窝织炎。
β-葡聚糖
β-葡聚糖是一种天然多糖,在自然环境中可以找到相当多种类的β-葡聚糖,通常存在于特殊种类的细菌、酵母菌、真菌(灵芝)的细胞壁中,也可存在于高等植物种子的包被中。β-葡聚糖的生产方法主要有两种,其一是从燕麦等谷物或蘑菇等子实体真菌中直接提取;其二是通过真菌或细菌的液体发酵,经由对发酵液进行提取加工,以获得β-葡聚糖。
如本文所用,“本发明β-葡聚糖”、“本发明生物多糖”可互换使用,主要是指本发明第一方面所述的β-葡聚糖,所述β-葡聚糖选自下组:裂褶菌β-葡聚糖、香菇β-葡聚糖、小核菌β-葡聚糖、灰树花β-葡聚糖、侧耳多糖、蘑菇β-葡聚糖、酵母β-葡聚糖、燕麦β-葡聚糖、或其组合;优选地裂褶菌β-葡聚糖。
如本文所用,“裂褶菌β-葡聚糖”指来源于裂褶菌的β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的结构如式I所示。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的分子量≥2kD,较佳地2kD-40000kD,更佳地20kD-20000kD。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的分子量可以为5kD-35000kD;10kD-30000kD;50kD-25000kD;100kD-20000kD;200kD-18000kD;400kD-16000kD;500kD-14000kD;1000kD-12000kD;2000kD-4000kD;3000kD-5000kD;4000kD-6000kD;5000kD-7000kD;6000kD-8000kD;7000kD-9000kD;或者8000kD-10000kD。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖的纯度≥70%,较佳地≥90%,更佳地≥95%,更佳地≥99%。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖具有良好的稳定性。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖呈固态形式或液态形式,如β-葡聚糖固体颗粒或粉末、或β-葡聚糖水溶液。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖颗粒或粉末的粒径≤20mm,较佳地0.001-10mm,更佳地0.01-5mm,更佳地0.1-2mm。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖(颗粒或粉末)具有良好的水溶性和/或天然可溶性。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖(颗粒或粉末)在25℃水(100g)中的溶解度≥0.0001g,较佳地0.01-50g,更佳地0.1-10g。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖(颗粒或粉末)在25℃水(100g)中的溶解度可以为0.1-100g;0.2-90g;0.5-80g;1-50g;或者,所述溶解度可以为0.1-0.3g;0.2-0.4g;0.3-0.5g;0.4-0.6g;0.5-0.7g;0.6-0.8g;0.7-0.9g;0.8-1g;或者1-3g;2-4g;3-5g;4-6g;5-7g;6-8g;7-9g;或者8-10g。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖溶液为β-葡聚糖在水中的溶液,即β-葡聚糖水溶液。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖(水)溶液粘度大;较佳地,质量浓度为0.5%的β-葡聚糖水溶液(25℃时)粘度≥40mPa·s,更佳地100-10000mPa·s,更佳地500-2000mPa·s。
在另一优选例中,所述质量浓度为0.5%的β-葡聚糖水溶液(25℃)粘度可以为50-10000mPa·s;100-9000mPa·s;200-8000mPa·s;300-7000mPa·s;400-6000mPa·s;450-5000mPa·s;500-5000mPa·s;550-4000mPa·s;600-3000mPa·s;650-2000mPa·s;或者700-1500mPa·s。
在另一优选例中,所述质量浓度为1%的β-葡聚糖的水溶液具有高澄清度或高透光率,所述质量浓度为1%的β-葡聚糖水溶液的透光率≥50%,较佳地≥80%,较佳地≥85%,更佳地≥95%;
在另一优选例中,所述β-葡聚糖溶液具有良好的稳定性。
在另一优选例中,所述β-葡聚糖来源于高等植物或者各种细菌、真菌。
本发明的实施例具体以裂褶菌的发酵产物为例,但不限于此。健康的毛囊是头皮和头发健康的基础。本发明β-葡聚糖不仅可以促进生发和防止脱发,而且还能帮助头皮抵御外来损伤和侵害(如真菌等),有效防治毛囊炎、丘疹以及脂溢性皮炎等头部皮肤问题,促进头皮健康。
此外,本发明β-葡聚糖具有良好的包裹性,能够包裹发丝,在有效锁水的同时,保护发丝并改善发质。其用于香波、护发素、及发膜等洗护产品中,对头发具有良好的调理功能,起到抗静电,增加头发柔软度,改善干、湿梳理性,以及减少头发缠结等作用。此外,在舒缓止痒和抗菌、抗病毒等方面,本发明β-葡聚糖同样具有显著功效,尤其针对无硅油洗发水的洗后干涩、难于梳理等弊端,具有极佳的改善效果。
制剂或组合物
本发明提供了一种用于促进生发和/或防止脱发的制剂,所述制剂包含作为活性成分的β-葡聚糖。
在另一优选例中,所述制剂含有0.001-99wt%、较佳地0.002-30wt%、更佳地0.005-10wt%、更佳地0.01-3wt%、更较佳地0.02-1wt%的β-葡聚糖,按制剂的总重量计。
在另一优选例中,所述制剂含有(a)β-葡聚糖;以及任选的(b)药学上、化妆品学上、食品和/或保健食品学上、或器械类可接受的载体或赋形剂。
在另一优选例中,所述制剂还包括第二活性成分,所述第二活性成分为不同于β-葡聚糖的促进生发和/或防止脱发活性成分、或治疗头皮炎症的活性成分。
在另一优选例中,所述第二活性成分,来自化学合成的活性成分、天然药物和/或食物来源的活性成分。
在另一优选例中,所述第二活性成分为生发药物和/或消炎药物。
在另一优选例中,所述生发固发防脱药物包括化学合成的生发药物、天然生发药物、具有生发功效的食物、具有固发生发功效的活性多肽、或其组合。
在另一优选例中,所述化学合成的生发药物选自下组:非那雄胺、西咪替丁、安体舒通、氟他胺、米诺地尔、或其组合。
在另一优选例中,所述天然生发药物选自下组:女贞子、何首乌、侧柏叶、或其组合。
在另一优选例中,所述天然生发药物选自下组:女贞子、何首乌、或其组合。
在另一优选例中,所述具有生发功效的食物选自下组:生姜、黑芝麻、或其组合。
在另一优选例中,所述活性多肽选自下组:血管内皮细胞生长因子、天冬氨酸-丝氨酸-丝氨酸重复多肽、或其组合。
在另一优选例中,所述消炎药物选自下组:抗生素、抑菌剂、维生素A酸类、过氧化苯甲酰、植物杀菌抑菌成分、糖皮质激素、壬二酸、烟酰胺、硫磺、雷琐辛、水杨酸、或其组合。另一类为中药及其提取物:如白术、半夏、柴胡、陈皮、赤芍、大黄、地黄、茯苓、甘草、桂枝、黄连、黄芩、积雪草、姜黄、金银花、连翘、牡丹根/皮、牛蒡子、枇杷叶、蒲公英、人参、桑白皮、山药、生山楂、乌梅、野菊花、生薏苡仁、焦栀子、枳实、竹茹、或其组合。
本发明还提供了一种组合物产品,所述组合物产品包括:
(1)第一组合物,所述第一组合物含有(a)第一活性成分,所述第一活性成分为β-葡聚糖;和(b)药学上、化妆品学上、食品和/或保健食品学上、或器械类可接受的载体或赋形剂;以及
(2)第二组合物,所述第二组合物为生发固发防脱药物、或治疗头皮炎症药物。
在另一优选例中,所述制剂或组合物产品中含有安全有效量或化妆品学有效量的活性成分(包括第一活性成分和/或第二活性成分)。
在本说明文中,“安全有效量”指的是:活性成分的量足以明显改善病情或症状,而不至于产生严重的副作用。
在本说明文中,术语“化妆品学有效量”意味着充分达成上述本发明的制剂或组合物的功效的量。
药学上、或化妆品学上接受的载体是在制剂或组合物时通常利用的,其包含乳糖(lactose)、葡萄糖(dextrose)、蔗糖(sucrose)、山梨糖醇(sorbitol)、甘露醇(mannitol)、淀粉、***胶(acaciagum)、磷酸钙(calciumphosphate)、藻酸盐(alginate)、明胶(gelatin)、硅酸钙(calciumsilicate)、微晶纤维素(microcrystallinecellulose)、聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone)、纤维素(cellulose)、水、糖浆(syrup)、甲基纤维素(methylcellulose)、羟基苯甲酸甲酯(methylhydroxybenzoate)、羟基苯甲酸丙酯(propylhydroxybenzoate)、滑石、硬脂酸镁(magnesiumstearate)及矿物油(mineraloil)等,但并不局限于此。
作为用于本发明的制剂或组合物的载体,可以使用任何一种常规载体,其实例包括纯水、矿泉水、乙醇、甘油、鲨烯、1,3-丙二醇、1,3-丁二醇、蓖麻油、山茶油和液体矿脂。
本发明的制剂或组合物可以经皮施用,为此目的,可将其配制为洗液、软膏、乳膏、贴剂、喷剂、片剂、丸剂、粉末、袋装剂、酏剂、悬浮液、乳液、溶液。
本发明的制剂或组合物可根据本发明所属技术领域的普通技术人员容易实施的方法,利用药学上、或化妆品学上接受的载体和/或赋形剂进行制剂化,由此制备为单位容量形态,或者装入至大容量容器内而制备。具体地,剂型可以是油性或水性介质中的溶液、悬浮液或乳化液形态,或者也可以是浸膏剂、粉剂、颗粒剂、片剂或胶囊剂或凝胶(例如,水凝胶)形态,还可包含分散剂或稳定剂。本发明的制剂或组合物也能够以在该领域中通常所制备的任何剂型制成,例如,能够以溶液、悬浮液、乳浊液、糊剂、凝胶、乳霜、乳液、粉、皂、含有表面活性剂清洁剂、油、及喷雾剂等剂型化,但并不局限于此。
本发明制剂或组合物的剂型为糊剂、乳霜或凝胶的情况下,作为载体成分,可利用动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、胺黄树胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、二氧化硅、滑石或氧化锌等。
本发明的剂型为粉或喷雾剂的情况下,作为载体成分,可利用乳糖、滑石、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉,尤其喷雾剂的情况下,还可包含氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚等推进剂。
本发明的剂型为溶液或乳浊液的情况下,作为载体成分,利用溶剂、增溶剂或乳浊剂,例如有水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁基乙二醇油、甘油脂肪酯、聚乙二醇或山梨糖醇酐的脂肪酸酯。
本发明的剂型为悬浮液的情况下,作为载体成分,可利用水、乙醇或丙二醇等液状稀释剂、乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯及聚氧乙烯山梨糖醇酐酯等悬浮剂、微晶纤维素、甲基氢氧化铝、膨润土、琼脂或胺黄树胶等。
本发明的制剂除了上述成分之外,还可以包含通常用于药品或化妆品组合物的成分,如润滑剂、湿润剂、甜味剂、香味剂、乳化剂、表面活性剂、悬浮剂、增稠剂、防腐剂、抗氧化剂、保鲜剂、稳定剂、增溶剂、维生素、颜料及香料等常规的助剂。
特别的是,本发明的制剂或组合物可以通过直接涂抹或喷洒而使用。可施用本发明的组合物的毛发包括发根和毛囊,并包括头上的头发、眉毛和睫毛、颔毛、髭须、腮须、腋毛和身体上具有发根和毛囊的任何区域。因此,本发明可以用作生发水、发乳、发膏、发胶、摩丝、发用啫喱、护发素、洗发香波、染发液、焗油膏、毛发护理剂、眉毛再生剂、睫毛再生剂或睫毛营养剂,或者宠物用香波和染发剂。
促进生发和/或防止脱发的方法
本发明还提供了一种促进生发和/或防止脱发的方法,所述方法包括步骤:(a)给需要的对象施用β-葡聚糖、本发明的制剂或组合物产品。
施用本发明的制剂或组合物的对象不受特别限制,本发明的组合物可以施用于人和包括家畜和宠物在内的所有动物。例如,所述需要的对象是患有脱发、毛发稀疏和/或秃发的男人和女人。患有这类病况的动物也可以用本发明的组合物治疗。
优选地,以非口服的方式将本发明的制剂或组合物进行给药,例如,可通过皮肤局部给药来进行给药。
本发明的组合物可以通过直接涂敷法涂到头皮上,例如,将少量该组合物倒在头皮上或手指上,然后在头皮上或起作用的区域上擦该物质。或者,可以用常规的喷雾装置(例如空气驱动的喷雾装置或烟雾装置)喷雾该组合物,这些装置被广泛用于涂敷香水和美容制品。
作为本发明制剂或组合物的给予方式,例如可优选自傍晚至夜间用涂敷等方法经皮给予本发明制剂或组合物,并在晚间冲洗或保留过夜的方法,但不限定于所述给药方式。
本发明制剂或组合物可以单独给药,或者与其他治疗药物联合给药(如配制在同一药物组合物中)。
本发明制剂或组合物也可以与已知的治疗或改善相似病状的食物或保健食品联用。联用时,原来食物或保健食品的使用方式和剂量可保持不变,而同时或随后使用本发明制剂或组合物。与食物或保健食品的联用,也包括在重叠的时间段使用本发明组合物与其它一种或几种已知药物。或当本发明组合物与其它一种或几种食物或保健食品进行联用时,本发明产品组合物或已知食物或保健食品的剂量比它们单独使用时的剂量较低。
本发明制剂或组合物也可以与已知的治疗或改进相似病状的其它药物联用。联合给药时,原来药物的给药方式和剂量保持不变,而同时或随后使用本发明药物组合物。药物联用也包括在重叠的时间段使用本发明药物组合物与其它一种或几种已知药物。当本发明药物组合物与其它一种或几种药物进行药物联用时,本发明药物组合物或已知药物的剂量可能比它们单独用药时的剂量较低。例如,将本发明第一药物组合物和第二药物组合物联合施用。
本发明的β-葡聚糖的剂量应该根据性别、年龄、脱发症状况、毛发状况等适当确定。通常,使用的浓度为0.1mg/mL-5mg/mL,或者0.5mg/mL-3mg/mL。
在本发明的一个实施方式中,将上述制剂或组合物通过喷雾、涂敷、湿敷等方法经皮给予患部或希望生发的头皮或皮肤区域,也可对整个头皮进行适当的经皮给药。优选每天在头皮/皮肤上涂敷。可以把该组合物喷雾或倒在待治疗的区域上并且可以用手指轻柔地擦或者经过头发和头皮方便地进行涮洗或梳理。
在本发明的一个实施方式中,本发明的组合物可以每天涂敷或者每三天至少涂敷一次。通常,这种使用能在四周内防止脱发。在连续使用两个月至十二个月后通常观察到毛发恢复(即新发生长)方面的可见差异。每天使用或者每三天一次地连续使用该产品可以防止脱发并有效地促进生发。
本发明的主要优点包括:
(a)本发明β-葡聚糖能够非常有效地促进生发和/或防止脱发。
(b)本发明β-葡聚糖促进生发固发的副作用非常低,不破坏皮肤表面菌群生态平衡,不会伤害患者皮肤或使其产生耐药性。
(c)本发明β-葡聚糖不仅可以用于促进生发和/或防止脱发,还可用于除去和/或预防头皮屑、止痒、修复受损头皮或毛囊、对抗头部感染、预防和/或治疗头皮炎症(如毛囊炎、脂溢性皮炎)。
(d)本发明β-葡聚糖与其他生发固发防脱药物、或治疗头皮炎症药物组合使用,可以进一步增强预防和/或治疗效果,具有协同作用。
(e)本发明β-葡聚糖为纯天然来源的生物多糖,具有完全可溶性或天然可溶性。由于不需要并且未经过任何化学和/或物理的改性或修饰,本发明β-葡聚糖完整保留了三螺旋的三维构象,具有更好的生发防脱活性这对于其功效的发挥至关重要。本发明β-葡聚糖具有极佳的稳定性,能够与大多数物质共存而保持其活性,因而应用领域广泛。
(f)本发明β-葡聚糖优化表面活性剂(如AES)的基本特性,可以提高泡沫产生量,并且消泡速度慢、泡沫更细腻,能深入毛囊进行清洁,并增加β-葡聚糖与毛囊内细胞的接触,发挥增强免疫、固发生发的功效。
(g)本发明制剂或组合物不仅能够非常有效地促进生发和/或防止脱发,还能清洁护理毛发,除去和/或预防头皮屑、止痒、修复受损头皮或毛囊、对抗头部感染、预防和/或治疗头皮炎症(如毛囊炎、脂溢性皮炎);具有良好的包裹性,能够包裹发丝,在有效锁水的同时,保护发丝并改善发质,对头发具有良好的调理功能,起到抗静电,增加头发柔软度,改善干、湿梳理性,以及减少头发缠结等作用。尤其针对无硅油洗发水的洗后干涩、难于梳理等弊端,具有极佳的改善效果。
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,例如Sambrook等人,分子克隆:实验室手册(New York:Cold Spring HarborLaboratory Press,1989)中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明,否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂、设备等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实施例1、β-葡聚糖的获得以及测定
本实施例仅以裂褶菌发酵获得的β-葡聚糖为例,但不限于此。
一、裂褶菌菌种发酵液的获得
下述实施例中的发酵液通过发酵裂褶菌菌种(裂褶菌Schizophyllum communeFr—1003,产品目录:38548TM,购于美国模式菌种收集中心[ATCC]),具体如下:
1、裂褶菌菌种活化:将马铃薯200g/L、葡萄糖30g/L、氯化钠10g/L、琼脂20g/L制成平板培养基,把裂褶菌菌种接种到该平板培养基上,于25℃恒温培养箱内培养7天得到平板菌丝体;
2、种子活化:将马铃薯淀粉100g/L、葡萄糖40g/L、酵母浸膏2g/L、酵母浸粉2g/L、水制成的液体培养基装入摇瓶,装液量为1/3,取步骤1所得的平板菌丝体接种该摇瓶,于25℃恒温摇床内160rpm震荡培养培养7天,作为种子液;
3、发酵培养:将葡萄糖50g/L、蔗糖50g/L、黄豆粉(山东招远市温计食品有限公司)5g/L、酵母浸粉2g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、七水合硫酸镁0.5g/L、硫酸铵0.5g/L、硝酸钾6g/L和水制成的发酵培养基加入发酵罐中121℃灭菌15分钟,再将步骤2所得的种子液接种上述发酵罐中,25℃恒温300rpm搅拌4Lpm通气发酵培养8天,得到裂褶菌发酵液。
二、β-葡聚糖的分离纯化及β-葡聚糖溶液的制备
1、将上述第一部分得到的裂褶菌发酵液与4倍体积的蒸馏水混合,60℃下浸煮8h,得到浸煮液;
2、将步骤1得到的浸煮液在4,000rpm离心5min,取上清液;将上清液用300目的滤布负压过滤,取滤出清液待用,即为浸煮清液;
3、将步骤2过滤后的浸煮清液加热至50℃,向其中同时加入200目的木质活性炭及8~16目的椰壳活性炭,每种活性炭的添加体积为浸煮清液体积的1%。于50℃,350rpm条件下持续搅拌4h,冷却后待用,得到混合有活性炭的浸煮清液;再将混合有活性炭的浸煮清液依次使用300目滤布及SCP-321#滤板(孔径大小约1.5μm)进行负压抽滤,取过滤后的清液待用;
4、将Solarbio脂肪酶(L8070,酶活力100~400U/mg)溶于生理磷酸盐缓冲液中,按10U/mL的酶用量,将脂肪酶溶液加入步骤3制备的滤液中,搅拌均匀后40℃酶解2h;再将Solarbio中性蛋白酶(Z8030,酶活力>60U/mg)溶于生理磷酸盐缓冲液中,按60U/mL的酶用量,将中性蛋白酶溶液加入上述酶解液中,搅拌均匀后,40℃酶解2h。酶解结束后90℃水浴加热30min,以灭酶活,再以SCP-321#滤板(孔径大小约1.5μm)进行负压抽滤,取过滤后的清液待用;
5、将步骤4过滤后的清液快速与95%浓度的食用乙醇混合(体积比为1:3),搅拌,直至得到析出物;再将析出物重新溶解至原体积,后快速与95%浓度的食用乙醇混合(体积比为1:3),搅拌,直至得到析出物;
6、将步骤5得到的析出物置于带孔托盘中,使用电热烘箱40℃烘干,直至恒重,得干燥产物;
7、将上述步骤6得到的β-葡聚糖干燥物粉碎,称取粉碎物5g,溶解于1,000mL超纯水中,维持600rpm搅拌2h,直至β-葡聚糖充分溶解,得到β-葡聚糖溶液;将上述β-葡聚糖溶液使用5μm滤膜进行负压抽滤,即可得到浓度为0.5%的高粘度、高透光率的β-葡聚糖溶液。
该质量浓度为0.5%的β-葡聚糖溶液在600nm波长(以分光光度计检测)下的透光率可以达到90%,40℃时粘度可达600mPa·s以上。使用时,可将该质量浓度为0.5%的β-葡聚糖溶液,用适当的溶剂进行稀释。
三、β-葡聚糖的鉴定与检测
1、β-葡聚糖的红外光谱鉴定
对上述0.5%的β-葡聚糖溶液进行鉴定,具体按照《中华人民共和国药典》(2010版)二部附录IV中方法C使用红外光谱法,将105℃烘干后的样品,使用傅里叶变换红外光谱仪进行全波长扫描。结果上述实施例1第二部分步骤(7)得到的0.5%溶液为β-葡聚糖溶液。
与酵母β-葡聚糖行业标准QBT 4572-2013中酵母β-葡聚糖的红外光谱图对比,官能团位置基本吻合。如图1所示,主要的官能团位置为:
1)3301cm-1附近有较强,较宽的吸收峰(糖类O-H键伸缩振动吸收峰)
2)2921cm-1附近有较弱的吸收峰(糖类C-H键伸缩振动吸收峰)
3)886cm-1附近有较弱的吸收峰(糖类β构型特征振动吸收峰)
4)1076cm-1附近有较强的吸收峰(糖类C-OH,C-O-C伸缩振动吸收峰)
傅里叶变换红外光谱测试结果表明,本实施例得到的产物为β-葡聚糖。
2、β-葡聚糖的含量检测
对上述实施例1第二部分步骤(6)得到的干燥产物进行β-葡聚糖定量检测,具体按照酵母β-葡聚糖行业标准QBT 4572-2013中酵母β-葡聚糖含量测定方法,将得到的β-葡聚糖干燥物样品研磨至直径1.0mm左右后进行。结果产物中β-葡聚糖含量为99.23%。
3、β-葡聚糖溶液的激素检测
对上述0.5%的β-葡聚糖溶液进行48项激素测定,具体按照《化妆品安全技术规范》(2015年版)第四章2.4雌三醇等7种组分第一法高压液相色谱-二极管阵列检测器法和GB/T24800.2-2009化妆品中四十一种糖皮质激素的测定液相色谱/串联质谱法和薄层层析法进行。结果上述实施例1第二部分步骤(7)得到的0.5%β-葡聚糖溶液中,未检出上述激素(结果见表1)。
表1 48项激素测定
4、β-葡聚糖溶液的粘度测定
按照实施例1第二部分步骤(7)的方法,配制0.3%、0.5%、0.8%、1.0%(质量体积比)的β-葡聚糖水溶液,于25℃时分别检测动力粘度。结果详见表2,随着β-葡聚糖含量的提高,各样品的粘度也递增,分别为472、740、2150和3100mPa·s。
取市售分散性(不溶于水)酵母β-葡聚糖颗粒(购自Wellmune公司),准确称取2g,加入去离子水混合,并定容至200mL,得到质量体积比为1.0%的酵母β-葡聚糖混悬液,于25℃时检测动力粘度。结果该1.0%的酵母β-葡聚糖混悬液的动力粘度为0mPa·s(见表2)。
取市售可溶性酵母β-葡聚糖粉末(购自Wellmune公司),准确称取2g,加入去离子水溶解,并定容至200mL,得到质量体积比为1.0%的酵母β-葡聚糖水溶液,于25℃时检测动力粘度。结果该1.0%的酵母β-葡聚糖水溶液的动力粘度为0mPa·s(见表2)。
上述动力粘度的测定方法如下:
(1)取200mL上述溶液样品,置于250mL烧杯中;
(2)将盛有上述溶液/混合液样品的烧杯置于水浴锅中,25℃保温1h;
(3)使用旋转粘度计,检测25℃下各样品的动力粘度。
5、β-葡聚糖溶液的透光率测定
按照实施例1第二部分步骤(7)的方法,配制0.3%、0.5%、0.8%、1.0%(质量体积比)的β-葡聚糖水溶液,于600nm波长处测定溶液透光率,结果如见表2所示,各样品的透光率分别为96.5%、93.1%、87.5%和81.1%。
取市售1.0%的燕麦β-葡聚糖溶液(购自Symrise公司),于600nm波长处测定溶液透光率,结果透光率为59.7%(见表2)。
取市售分散性酵母β-葡聚糖颗粒,准确称取2g,加入去离子水混合,并定容至200mL,得到质量体积比为1.0%的酵母β-葡聚糖混悬液,于600nm波长处测定混悬液透光率,结果透光率仅为1.3%(见表2)。
取市售可溶性酵母β-葡聚糖粉末,准确称取2g,加入去离子水溶解,并定容至200mL,得到质量体积比为1.0%的酵母β-葡聚糖水溶液,于600nm波长处测定溶液透光率,结果透光率为68.4%(见表2)。
上述透光率的测定方法如下:
(1)取10mL上述溶液样品置于离心管中;
(2)1000rpm低速离心1min,以去除气泡(两种酵母β-葡聚糖溶液/悬液无气泡,未经离心处理);
(3)小心取3mL至1cm玻璃比色皿内,避免气泡;
(4)使用分光光度计,以去离子水作为空白参照(去离子水的透光率为100%计),于600nm波长处测定样品透光率。
6、β-葡聚糖溶液的稳定性测定
按照实施例1第二部分步骤(7)的方法,配制0.5%、0.8%、1.0%(质量体积比)的β-葡聚糖水溶液,加入防腐剂后,室温(未避光)放置24个月,观察溶液稳定性,并检测溶液动力粘度和透光率。结果,上述三种溶液状态均十分稳定,其粘度和透光率变化不大,其中透光率甚至有所提高(见表2)。
取市售1.0%的燕麦β-葡聚糖溶液,室温(未避光)放置24个月,观察溶液稳定性,并检测溶液动力粘度和透光率。结果,该1.0%的燕麦β-葡聚糖溶液状态十分不稳定,室温放置3个月后就有固形物析出,导致其粘度和透光率无法检测(见表2)。
表2各种β-葡聚糖溶液动力粘度数据
注:a为市售分散性酵母β-葡聚糖颗粒(不溶于水),b为市售可溶性酵母β-葡聚糖粉末。
实施例2β-葡聚糖促进毛发生长实验(大鼠)
一、实验方法
1、取Wistar大鼠8只,备用;
2、各取100g松香和石蜡在小烧杯中,于沸水浴加热熔化混合,并70℃保温防凝固备用;
3、称量每只大鼠的体重,按照体重0.3%的用量,使用三氯乙醛进行腹腔注射麻醉;
4、在麻醉后的大鼠背部左右两侧,各选取一块区域,均匀涂抹适量松香石蜡混合物,稍待冷却凝固后,逆着毛发生长方向揭下,露出无毛的大鼠背部皮肤;
5、大鼠背部除毛后分成两组,在每只大鼠背部两侧分别涂抹1mg/mL甘油和1mg/mL裂褶菌β-葡聚糖(按照实施例1方法制备得到),其中涂抹1mg/mL甘油的一侧为对照组,涂抹1mg/mL裂褶菌β-葡聚糖的一侧为实验组;
6、每天上午及下午各进行一次涂抹操作,并观察各组大鼠的皮肤状况及毛发生长状况,拍照记录。
二、实验结果
结果如图2所示。从图2可以看出,连续涂抹9天后,实验组(裂褶菌β-葡聚糖组)大鼠背部毛发重生率超过90%,而对照组毛发重生率不足10%。结果表明,裂褶菌β-葡聚糖具有显著的促进毛发生长的作用。
实施例3β-葡聚糖优化AES的基本特性
一、实验方法
1、取两管25mL 10%AES的水溶液,实验组添加1mg/mL裂褶菌β-葡聚糖(按照实施例1方法制备得到),对照组添加1mg/mL去离子水。两管分别混匀,剧烈震荡30s后,立即观察产泡量。
2、取两管25mL 10%AES的水溶液,实验组添加1mg/mL裂褶菌β-葡聚糖(按照实施例1方法制备得到),对照组添加1mg/mL去离子水。两管分别混匀,剧烈震荡30s后,立即观察消泡速度。
3、取两管25mL 10%AES的水溶液,实验组添加1mg/mL裂褶菌β-葡聚糖(按照实施例1方法制备得到),对照组添加1mg/mL去离子水。两管分别混匀,剧烈震荡30s后,立即观察泡沫细腻度。
二、实验结果
结果如图3所示。图3A添加1mg/mL裂褶菌β-葡聚糖组,泡沫堆高度好。添加1mg/mLβ-葡聚糖后产泡量为60%,而对照组仅20%。图3B添加1mg/mL裂褶菌β-葡聚糖组,消泡速度慢。添加1mg/mLβ-葡聚糖可显著减慢洗护产品的消泡速度。图3C添加1mg/mL裂褶菌β-葡聚糖组,泡沫明显更细腻。细腻丰富的泡沫能深入毛囊进行清洁,并增加β-葡聚糖与毛囊内细胞的接触,发挥增强免疫、固发生发的功效。
实施例4洗发水组成及功效
一、各种洗发水的组成
按下表3制备无硅油洗发水,其中洗发水I、III、V、VII和VIII添加有不同含量的裂褶菌β-葡聚糖(按照实施例1方法制备得到)。洗发水II、IV和VI除不含裂褶菌β-葡聚糖外,其它组分分别与洗发水I、III和V相同。
表3以β-葡聚糖为主要功效成分的无硅洗发水配方
二、无硅洗发水制备方法
1、先将脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠全部加入40%冷水中,加热到75℃,搅拌至透明;
2、加入EDTA二钠、椰油酸单异丙醇酰胺、638增稠剂、椰油酰胺丙基甜菜碱、裂褶菌β-葡聚糖(部分洗发水中添加),和聚乙二醇-7椰油甘油酯,恒温75℃搅拌至透明均一(约10min)后开始降温;
3、停止加热后,加入用10%冷水分散的聚季铵盐-67,恒温65-70℃保温5min,至透明均一;
4、45℃时加入余下的香精和防腐剂等,调节粘度和pH值,搅拌均匀出料。
三、洗发水样品试用评价
28名志愿者分别使用I、III、V、VII或VIII洗发水10次后,感官评价其综合改善发质的效果,包括梳理性、柔软度、光泽度等,具体结果如下表4所示。
表4以β-葡聚糖为主要功效成分的无硅洗发水试用结果
头发问题 | 梳理性 | 柔软度 | 光泽度 | 去屑 | 止痒 | 控油 | 防脱 |
正反馈人数 | 25 | 28 | 28 | 23 | 24 | 28 | 27 |
负反馈人数 | - | - | - | 1 | - | - | - |
根据志愿者反馈,之前使用普通无硅洗发水或II、IV和VI洗发水后,第二天头发就开始返油,头皮瘙痒。但使用添加裂褶菌β-葡聚糖的无硅油洗发水(I、III、V、VII或VIII洗发水)后,首先改善了洗头过程的发涩的问题,泡沫更加丰富,清洗更干净。更重要的是,解决了无硅洗发水洗后头发毛躁,难于梳理等的问题(如图4所示),另外头发返油时间从原先的1天推迟到3天,并且脱发掉发明显减少。结果表明,本发明裂褶菌β-葡聚糖具有明显的去屑效果,发质变得柔软光亮,并且能够防脱生发。
此外,另有9名志愿者使用II、IV和VI洗发水10次后,发现洗发过程中泡沫较少,容易发涩,头发容易返油、毛躁难梳理,头皮瘙痒,并且对于脱发掉发没有改善。
实施例5修复毛鳞片实验
一、实验方法
实验试剂与设备:无菌水、0.12mg/mL裂褶菌来源的β-葡聚糖(按照实施例1方法制备得到)、扫描电镜、10cm培养皿、头发。
实验步骤:
(1)取10mL上述各样品置于10cm培养皿中,将发丝浸入其中,约5min;
(2)将浸泡后的发丝取出,放置装有清水的皿里,洗脱5min后取出晾干(放在摇床轻轻震荡洗脱);
(3)将经过上述处理的发丝,于扫描电镜下观察毛鳞片的状况,并拍照记录。
二、实验结果
电镜照片显示,无菌水处理组的毛发,表面粗糙,毛鳞片呈不规则翘起状。而在12mg/mL裂褶菌来源的β-葡聚糖溶液中处理了5min的发丝,表面光滑,其毛鳞片的闭合程度远远高于无菌水处理组(如图5所示)。
裂褶菌来源β-葡聚糖属于大分子生物多糖物质,具有良好的包裹性,能够包裹发丝,在有效锁水的同时,还可以修复毛鳞片,保护发丝并改善发质。其用于香波、护发素、及发膜等洗护产品中,对头发具有良好的调理功能,起着抗静电,增加头发柔软度、光泽度,改善干湿梳理性,以及减少头发缠结等作用。
实施例6头皮护理液防脱使用实验
一、实验方法
试用过程中,志愿者每天或隔天洗发一次,洗发后将0.1%裂褶菌来源的β-葡聚糖(按照实施例1方法制备得到)喷在头皮并轻轻按摩至吸收,观察掉发量的变化。
二、实验结果
总共统计50位志愿者,有不同程度的脱发问题,包括脂溢性脱发,作息不规律脱发,遗传性脱发,产后脱发以及一些不明原因造成的脱发。
50名志愿者使用该头皮护理精华30次左右,正反馈率达到为100%。
表5β-葡聚糖防脱固发试用结果
使用次数 | 5次 | 10次 | 20次 | 30次 | 50次 | 80次 | 100次 | 200次 |
正反馈(人数) | 1 | 39 | 43 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 |
负反馈(人数) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
志愿者使用结果数据统计显示,裂褶菌来源的β-葡聚糖可有效缓解掉发的程度,70%以上的志愿者使用10次左右就是明显的改善,长期使用该头皮护理精华,可显著改善掉发的情况,并有助于生发。
实施例7防脱生发实验
志愿者A:女,29岁,属压力性脱发,每次洗头平均掉发量150根左右;
试用过程中,该志愿者每天洗发一次后,将0.1%裂褶菌来源的β-葡聚糖(按照实施例1方法制备得到)喷在头皮并轻轻按摩至吸收,观察掉发量的变化。
如表6所示,志愿者A使用β-葡聚糖后,掉发量在逐渐减少,3周后每天掉发量已经不到100根。此外,在试用3个月后,该志愿者发现,原来掉发严重的地方(即已经能看到裸露头皮的毛发稀疏部位)长出许多新的头发,发际线降低,24周后恢复正常发量(图6)。
表6志愿者试用裂褶菌β-葡聚糖后脱发量的变化
实施例8防脱生发实验
志愿者B:女,27岁,属产后激素性脱发,每次洗头平均掉发200根左右,前额部位明显有秃块出现,脱发程度严重。
试用过程中,该志愿者每天洗发一次后,将0.1%裂褶菌来源的β-葡聚糖(按照实施例1方法制备得到)喷在头皮并轻轻按摩至吸收,观察掉发量的变化。
志愿者B试用结果如图7所示,掉发量在2周后明显减少,8周后发现秃块部位长出新发,24周后秃块被新发覆盖,48周后基本恢复正常的发量。
实施例9防脱生发实验
志愿者C:男,39岁,雄性激素源性脱发。雄性激素源性脱发又称为脂溢性脱发、男性脱发或遗传性脱发,患者头皮油脂过量溢出,常伴有头屑增多,头皮油腻,瘙痒明显。雄性激素源性脱发症,多发生于皮脂腺分泌旺盛的青壮年,开始逐渐自头顶部脱发,之后蔓延及额部,继而弥漫于整个头顶。患者一般头发细软,有的还伴有头皮脂溢性皮炎症状。头皮油腻而亮红,结黄色油性痂。脂溢性脱发是一种永久性脱发,有些男性在发育后,即开始出现脱发,进而头发油腻发亮,头皮屑慢慢增多,经常出现奇痒,有时头发干枯无光泽,只要用手抓一抓,头发就会脱落,特别是两侧额角还会发生慢性弥漫性脱发。
志愿者C在试用过程中,每日早晚两次、每次取3mL左右的0.3%裂褶菌来源的β-葡聚糖溶液(按照实施例1方法制备得到),涂抹于头皮上并轻轻按摩至吸收。20周后,开始稀疏的微绒毛逐渐健壮,密度也逐渐提升,24周后毛发明显比使用前浓密(如图8所示)。
上述人类志愿者的使用情况,证实了β-葡聚糖能够有效地改善发质,减少/防止脱发,并促进头发生长,可用于防治各种原因导致的发质损伤、脱发,促进毛发生长和治疗斑秃等发量减少的问题。
讨论
本发明首次发现,β-葡聚糖具有显著的促进生发和/或防止脱发的功效,尤其是本发明实施例1中制备的高粘度、高分子质量的裂褶菌β-葡聚糖。本发明发现β-葡聚糖的促进生发和/或防止脱发的活性与其分支度高低、侧链的葡萄糖数量、立体结构、分子量均有关系。酵母葡聚糖的分支度不定,主链上随机延伸出由β-1,6-糖苷键构成的侧链,侧链的葡萄糖数量较大且不定,多的可高达上百个。酵母葡聚糖侧链长度长,容易形成严密的网状结构,对促进生发和/或防止脱发效果不如裂褶菌β-葡聚糖。裂褶菌β-葡聚糖分支度适中,侧链仅一个葡萄糖残基。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考,就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解,在阅读了本发明的上述讲授内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
Claims (10)
1.一种β-葡聚糖的用途,其特征在于,用于(a)促进生发和/或防止脱发,或(b)制备促进生发和/或防止脱发的制剂或组合物。
2.如权利要求1所述的用途,其特征在于,所述β-葡聚糖为β-1,3-葡聚糖,优选地,所述β-葡聚糖为具有β-1,6-分支的β-1,3-葡聚糖。
3.如权利要求1所述的用途,其特征在于,所述β-葡聚糖的结构如式I所示,
其中,l为≥0的整数,较佳地0-50,较佳地0-10,更佳地0-3,更佳地1-2,更佳地1;m为≥0的整数,较佳地为0-19,较佳地为0-4,更佳地为0-1,更佳地为0;n为≥3的整数,较佳地为30-60000,更佳地100-10000。
4.如权利要求1所述的用途,其特征在于,所述β-葡聚糖的分支度为0.02-0.8,较佳地0.1-0.5,较佳地0.25-0.4,更佳地0.2-0.4。
5.如权利要求1所述的用途,其特征在于,所述β-葡聚糖的分子量≥2kD,较佳地2kD-40000kD,更佳地20kD-20000kD。
6.如权利要求1所述的用途,其特征在于,所述β-葡聚糖选自下组:裂褶菌β-葡聚糖、香菇β-葡聚糖、小核菌β-葡聚糖、灰树花β-葡聚糖、侧耳多糖、蘑菇β-葡聚糖、酵母β-葡聚糖、燕麦β-葡聚糖、或其组合。
7.一种用于促进生发和/或防止脱发的制剂,其特征在于,所述制剂包含作为活性成分的β-葡聚糖。
8.如权利要求7所述的制剂的用途,其特征在于,用于制备选自下组的产品:生发和/或防脱发药水、生发和/或防脱发药膏、生发和/或防脱发药物或敷片、洗发水、润发乳或护发素、发胶、摩丝、涂剂、发膏、发膜、染发液、眉毛再生剂、睫毛再生剂或睫毛营养剂、护发精华液、或其组合。
9.一种组合物产品,其特征在于,所述组合物产品包括:
(1)第一组合物,所述第一组合物含有(a)第一活性成分,所述第一活性成分为β-葡聚糖;和(b)药学上、化妆品学上、食品和/或保健食品学上、或器械类可接受的载体或赋形剂;以及
(2)第二组合物,所述第二组合物为生发固发防脱药物、或治疗头皮炎症药物。
10.一种毛发养护产品,其特征在于,所述的产品包括:作为活性成分的β-葡聚糖。
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