CN105708844A - 一种妥布霉素***纳米混悬滴眼液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种妥布霉素***纳米混悬滴眼液，该滴眼液由下述百分含量的原料药及辅料制备而成：***0.1％w/v、妥布霉素0.3％w/v、水溶性高分子聚合物0.2～0.5％w/v、湿润剂0.025～0.1％v/v、渗透压调节剂0.3～0.6％w/v、pH调节剂1.0～1.5％v/v、金属离子络合剂0.0025～0.01％w/v、防腐剂0.1～0.3％v/v。本发明还提供了该滴眼液的制备方法。本发明妥布霉素***纳米混悬滴眼液的制备方法生产工艺简便、重现性好，除菌方法简单有效，辅料易得，适合工业化生产。

Description

一种妥布霉素***纳米混悬滴眼液及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种妥布霉素***纳米混悬滴眼液。

背景技术

妥布霉素***滴眼液是糖皮质激素和抗生素的复方制剂，常用于治疗对肾上腺皮质激素敏感的眼科炎性病变、眼表的细菌感染及潜在感染性疾病，可减轻水肿和炎性反应；也适用于慢性前葡萄膜炎、化学性、放射性、灼伤性及异物穿透性角膜损伤；对一些常见的眼部细菌和病原菌感染也有一定的疗效。

该制剂原研药的商品名为“典必殊”(TOBRADEX)，由美国爱尔康公司(ALCON)生产，1995年进入我国市场。由于混悬滴眼液的粒径大小与患者滴眼的舒适度、药物疗效以及在组织中的作用时间等密切相关，因此，改进制备工艺，有效降低国内同类滴眼液中***的粒径，对于提升业内质量标准，改善国产妥布霉素***滴眼液的治疗效果至关重要。此外，目前妥布霉素***滴眼液主要组分***的灭菌主要采用干法灭菌、辐照灭菌，如：专利号为ZL97105772.9的中国发明专利《眼用复方妥布霉素混悬液的制法》即公开了采用160℃干热或2-2.5兆拉德辐射或波长的紫外光照射对***进行灭菌的方法，但上述灭菌法存在灭菌不够彻底或对灭菌设备有特殊要求的缺陷。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种新的妥布霉素***纳米混悬滴眼液。本发明的另一技术方案是提供了该滴眼液的制备方法。

本发明提供了一种妥布霉素***纳米混悬滴眼液，其特征在于：该滴眼液由下述百分含量的原料药及辅料制备而成：

***0.1％w/v、妥布霉素0.3％w/v、水溶性高分子聚合物0.2～0.5％w/v、湿润剂0.025～0.1％v/v、渗透压调节剂0.3～0.6％w/v、pH调节剂1.0～1.5％v/v、金属离子络合剂0.0025～0.01％w/v、防腐剂0.1～0.3％v/v。

其中，所述的水溶性高分子聚合物为：羟丙甲纤维素(E50)、羟丙甲纤维素(15000cps)、羟丙甲纤维素(K100M)、羟丙甲纤维素(K100)羟丙甲纤维素(E15)、羟丙甲纤维素(低取代)；所述的湿润剂为：吐温80；所述的渗透压调节剂为：氯化钠；所述的pH调节剂为：稀盐酸、稀硫酸；所述的金属离子络合剂为：依地酸二钠；所述的防腐剂为：苯扎溴铵、苯扎氯铵。

其中，所述的水溶性高分子聚合物为：羟丙甲纤维素；所述的湿润剂为：吐温80；所述的渗透压调节剂为：氯化钠、硫酸钠；所述的pH调节剂为：稀盐酸；所述的金属离子络合剂为：依地酸二钠；所述的防腐剂为：苯扎溴铵。

具体地，该滴眼液由下述百分含量的原料药及辅料制备而成：

***0.1％w/v、妥布霉素0.3％w/v、氯化钠0.4％w/v、羟丙甲纤维素0.4％w/v、依地酸二钠0.005％w/v、浓度为5％的苯扎溴铵溶液0.2％v/v、吐温800.05％v/v、硫酸钠1.0％w/v、稀盐酸1.5％v/v。

其中，所述的滴眼液的pH值为6.0～6.5。

本发明还提供了一种制备所述的滴眼液的方法，它包括如下步骤：

a、按照配方量称取除***、稀盐酸以外的其他组分，用注射用水将其溶解，经0.22μm微孔滤膜过滤，得澄清溶液A；

b、按照配方量称取***，以配制总量15％的注射用水悬浮，加稀盐酸调节pH值至3.0～4.0，采用高剪切分散乳化技术进行剪切乳化，制得***混悬液，经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，得混悬液B；

c、将混悬液B转入溶液A中，搅拌，混合均匀，调节pH值至6.0～6.5，即得。

其中，b步骤所述的乳化条件为：1000r/min，15min。

其中，b步骤所述的混悬液B中***微粒的平均粒径小于120nm，80％的***微粒粒径在100nm以下。

本发明针对上述制备方法的不足，通过反复试验研究，提出了一种新的妥布霉素***纳米混悬滴眼液制备方法，解决了上述问题，极大提高了该制剂品种的产品质量和治疗效果。

本发明提供的妥布霉素***纳米混悬滴眼液的制备方法生产工艺简便、重现性好，除菌方法简单有效，辅料易得，适合工业化生产。

本发明的效益主要包括：

1)***难溶于水，因此制备成混悬滴眼液的粒径关系到产品质量以及治疗效果，该有效组分粒径大小的控制是制备工艺的关键。相比现有的制备方法，本发明可进一步降低***的粒径，有效提高该滴眼液的生物利用度和延长药物的作用时间，显著改善患者滴眼时的舒适度。

2)本发明的制备方法条件温和、操作简便、重现性好；产品质量稳定可靠、疗效显著。

3)本发明有效降低了***粒径，故仅采用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，避免了该组分目前通常使用的干法灭菌、辐照灭菌对设备的特殊要求，简化了灭菌工艺，在确保产品质量的同时，大大提高了生产效率。

4)采用本发明工艺制备的产品，因降低了***粒径及辅料的用量，经家兔眼部刺激性实验证明无眼部刺激性，试验结果与原研制剂“典必殊”一致，眼部使用舒适安全。

5)经家兔药效试验证明，采用本发明工艺制备的滴眼剂在家兔眼部组织中的浓度较原研制剂“典必殊”在家兔眼部组织的浓度更高，说明其药效优于原研制剂。

6)采用本发明工艺制备的产品，重点质量指标、安全性、有效性等各方面均优于目前同类制剂产品。

附图说明

图1a.原研组药物浓度

图1b.自制组药物浓度

具体实施方式

通过以下实施例进一步说明本发明，但以下实施例不构成对本发明的限制。

实施例一：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水，量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(E50)，溶解于适量注射用水，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的***，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得***混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

实施例二：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水，量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(15000cps)，溶解于适量注射用水，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的***，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得***混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

实施例三：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水，量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(K100M)，溶解于适量注射用水，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的***，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得***混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

实施例四：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水，量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(K100)，溶解于适量注射用水，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的***，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得***混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

实施例五：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水，量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(E15)，溶解于适量注射用水，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的***，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得***混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

实施例六：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水，量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(低取代)，溶解于适量注射用水，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的***，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得***混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

为证明本发明的创造性，以ALCON的原研滴眼液TOBRADEX为对照，进行的产品质量及药物疗效指标的对比考察，实验数据如下：

试验例1.本发明滴眼液处方优化

在确定主药处方量(妥布霉素：0.3％、***0.1％)的前提下，对本发明所用辅料的种类及用量进行了优化筛选，并对各试验组产品的质量指标(pH值、粒径、沉降体积比、渗透压)进行对比考察，实验结果见表1a、表1b。

表1a.处方组成考察

表1b.处方组样品质量指标检测

注：粒径项“≥90％(μm)”表示：从小粒子开始，累积含全部粒子90％的分布区域的最大粒径。

结论：由表1a、表1b试验结果可知，本发明处方优选为：2#。

试验例2.本发明滴眼液乳化参数的优化

由于制备工艺对产品的质量影响较大，在确定处方组成及用量的条件下，结合本制剂的特点，本发明重点考察了乳化参数对产品质量的影响：在将乳化机的转速设置为1000r/min的基础上，对乳化时间进行优化，并以粒径、沉降体积为检测指标，对不同条件制备的产品进行对比考察，结果见表2。

表2.乳化条件对比考察

结论：由表2可知，b步骤所述的乳化参数优选为：1000r/min，15min。

试验例3.产品质量指标(参照国家批准的妥布霉素***滴眼液质量标准)

表3.产品质量对比结果

结论：采用本发明工艺制备的产品平均粒径较原研制剂减小一半，粒径指标明显优于原研产品。

试验例4.眼部刺激性实验

按照妥布霉素***滴眼液说明书，选择日本大耳家兔20只，平均分成两组(一组：自制、二组：原研)，采用同组家兔同体左右眼自身对比法进行试验。家兔左眼滴入妥布霉素***滴眼液，右眼滴入生理盐水作为对照。

给药量：2滴/次(100μl)。

给药方法：眼结膜囊内给药，给药后轻合眼脸约10秒钟。

重复给药：连续给药两周(14d)，每天早晚各给药一次，于每次给药前以及最后一次给药后1、2、4、24、48、和72h对眼部进行检查。记录角膜、虹膜、结膜及其他观察到的损伤情况。按照“Draize眼部刺激试验评分标准”：将每只家兔的角膜、虹膜和结膜的刺激反应分值相加，即全部受试动物眼刺激反应的总积分。将总积分除以动物数，即受试动物对眼刺激性的最后分值，结果见表4。

表4.家兔眼刺激性对比结果

结论：采用本发明工艺制备所得产品，对眼无刺激性，与原研一致。

试验例5.组织药物浓度实验

按照妥布霉素***滴眼液说明书，选择日本大耳家兔28只，平均分成两组(组1：自制；组2：原研)，给予家兔双眼滴入妥布霉素***滴眼液。

给药量：2滴/次/只(100μl)。

给药方法：眼结膜囊内给药，给药后轻合眼脸约10秒钟。

给药后样品提取：在给予家兔妥布霉素***滴眼液药物后，分别于给药后0.5h、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h各取2只受试家兔，处死，手术分离家兔眼的玻璃体、虹膜、巩膜、视网膜及脉络膜，用二氯甲烷于组织匀浆及玻璃体中萃取药物，分离有机相，萃取3次，合并有机相，并于70℃恒温水浴锅上，用氮气吹干，残渣用0.2ml的40％乙腈水溶解，采用HPLC-MS/MS检测分析，绘制时药曲线图，结果见图1a、图1b。

结论：由图1a、图1b可知，采用改进工艺制备所得产品与原研制剂在兔眼组织中，所含***的量基本一致；不同时段的药量比较显示，本发明制备的产品的释药趋势更为平缓，作用效果更佳。

试验例6.无菌检测

参照中国药典2010年版附录ⅪH无菌检测方法，以金黄色葡萄球菌为阳性对照，对新产品无菌进行考察，检测结果见表5。

表5.无菌检查结果

结论：产品无菌符合规定，说明本发明专利改进的除菌方式(由高温湿热灭菌改进为：过滤除菌)，在降低产能的同时亦能保证产品无菌，进一步说明了改进工艺的先进性。

为了克服***因溶解度较差、湿热条件下晶型易发生改变导致该组分灭菌方法受限的不足，本发明改进了该滴眼液的配方，采用高剪切分散乳化技术，通过优化剪切参数，成功将***的平均粒径控制在120nm以下，简化了以往需要对妥布霉素、***分别采用不同灭菌方法的工艺，仅采用超滤除菌工艺即可实现该产品的无菌，大大简化了生产工艺。相比原研制剂，该发明产品的粒径明显降低，刺激性更小，生物疗效较原研制剂有进一步的提高。

相比原研滴眼液TOBRADEX，本发明优化了制剂配方，选择价格更为低廉的羟丙甲纤维素代替羟乙基纤维素作为助悬剂，并尽可能降低其用量，在确保临床治疗效果的同时，提高滴眼剂的安全性；通过改进制备工艺，有效降低妥布霉素***滴眼液中***的粒径，提高该制剂的疗效和舒适度，避免上述灭菌工艺存在的缺陷，提供了一种操作简单、易于工业生产，且产品质量稳定的妥布霉素***纳米混悬滴眼液的生产技术。

Claims (7)

1.一种妥布霉素***纳米混悬滴眼液，其特征在于：该滴眼液由下述百分含量的原料药及辅料制备而成：

***0.1％w/v、妥布霉素0.3％w/v、水溶性高分子聚合物0.2～0.5％w/v、湿润剂0.025～0.1％v/v、渗透压调节剂0.3～0.6％w/v、pH调节剂1.0～1.5％v/v、金属离子络合剂0.0025～0.01％w/v、防腐剂0.1～0.3％v/v。

其中，所述的水溶性高分子聚合物为：羟丙甲纤维素(E50)、羟丙甲纤维素(15000cps)、羟丙甲纤维素(K100M)、羟丙甲纤维素(K100)羟丙甲纤维素(E15)或羟丙甲纤维素(低取代)；所述的湿润剂为：吐温80；所述的渗透压调节剂为：氯化钠、硫酸钠；所述的pH调节剂为：稀盐酸、稀硫酸；所述的金属离子络合剂为：依地酸二钠；所述的防腐剂为：苯扎溴铵、苯扎氯铵。

2.根据权利要求1所述的滴眼液，其特征在于：所述的水溶性高分子聚合物为：羟丙甲纤维素；所述的湿润剂为：吐温80；所述的渗透压调节剂为：氯化钠；所述的pH调节剂为：稀盐酸；所述的金属离子络合剂为：依地酸二钠；所述的防腐剂为：苯扎溴铵。

3.根据权利要求2所述的滴眼液，其特征在于：该滴眼液是由下述百分含量的原料药及辅料制备而成：

***0.1％w/v、妥布霉素0.3％w/v、氯化钠0.4％w/v、羟丙甲纤维素0.4％w/v、依地酸二钠0.005％w/v、浓度为5％苯扎溴铵溶液0.2％v/v、吐温800.05％v/v、硫酸钠1.0％w/v、稀盐酸1.5％v/v。

4.权利要求1～3任意一项所述的滴眼液，其特征在于：所述的滴眼液的pH值为6.0～6.5。

5.一种制备权利要求3或4所述的滴眼液的方法，它包括如下步骤：

a、按照配方量称取除***、稀盐酸以外的其他组分，用注射用水将其溶解，经0.22μm微孔滤膜过滤，得澄清溶液A；

b、按照配方量称取***，以配制总量15％的注射用水悬浮，加稀盐酸调节pH值至3.0～4.0，采用高剪切分散乳化技术进行剪切乳化，制得***混悬液，经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，得混悬液B；

c、将混悬液B转入溶液A中，搅拌，混合均匀，调节pH值至6.0～6.5，即得。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：b步骤所述的剪切乳化条件为：1000r/min，15min。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：b步骤所述的混悬液B中***微粒的平均粒径小于120nm，80％的***微粒粒径在100nm以下。