CN103931497A

CN103931497A - 一种提高火龙果组培苗成苗率的方法

Info

Publication number: CN103931497A
Application number: CN201410135613.6A
Authority: CN
Inventors: 彭绿春; 瞿素萍; 张艺萍; 苏艳; 王丽花; 杨秀梅; 张丽芳
Original assignee: Flower Research Institute of YAAS
Current assignee: Flower Research Institute of YAAS
Priority date: 2014-04-05
Filing date: 2014-04-05
Publication date: 2014-07-23
Anticipated expiration: 2034-04-05
Also published as: CN103931497B

Abstract

本发明为一种提高火龙果组培苗成苗率的方法。该方法以火龙果带刺座并保留刺座上小刺和绒毛的半木质化茎片为外植体，经不定芽诱导、同步增殖和生根成苗培养，不定芽能长出侧枝、在不定芽基部长出基根及侧枝长出气生根时，炼苗，炼苗后将苗从瓶内取出，切下带有气生根的侧枝及带有基根的主茎种植于基质中，待成活长出新根即可上盆。该方法不仅能使火龙果组培种苗生产周期短、不定芽诱导率高、增殖与生根同步、增殖系数达到5.45以上、生根率达到100%，增殖苗长势旺盛，移栽成活率达到95%以上，并且能使接种的一个不定芽长出3～4枝带气生根的侧枝，即接种的一个不定芽能繁殖出4～5株带根的成苗，火龙果组培苗成苗率提高了3～4倍。

Description

一种提高火龙果组培苗成苗率的方法

技术领域

本发明属于植物繁殖技术领域，具体涉及一种提高火龙果组培苗的成苗率的方法。

背景技术

火龙果学名量天尺（Hylocereus undatus（Haw.）Britt. & Rose.），又名红龙果、青龙果、仙蜜果等，是仙人掌科（Cactaceae）量天尺属（Hylocereus）植物。火龙果的果实不仅外形美观，而且具有保健作用，具有清血、降火降胆固醇的功效，常食可促进人体新陈代谢，提高免疫功能，加之其栽培较为容易，病虫害少，早结丰产，能适应干旱气候，是种极具市场开发潜力的新型水果。近年来,云南、贵州、广西、广东等省份均在大力发展火龙果的种植、加工、旅游景观等产业。在此背景下，火龙果种苗市场火爆，种苗供不应求。

目前，火龙果种苗生产的方式有种子繁殖、扦插繁殖和组培繁殖，其中组织培养是快速繁殖生产火龙果种苗的一条有效途径。现有火龙果组培快繁技术一般以火龙果茎段为外植体，经不定芽诱导、增殖和生根三个步骤完成植株再生。存在着增殖培养过程中的细胞***素使用浓度过高和整个生产周期过长（如常规三步法再生植株从外植体进瓶到瓶苗移栽需要至少110天的时间）两大缺点，由此导致的生产的种苗变异率高、质量不稳定、生产成本高等问题，严重降低了火龙果组培种苗工厂化生产效率，大大限制了其生产的规模化。也有将增殖和生根同步进行的，但这些组培方法生产的组培苗只有基根，没有气生根（气生根是指组培苗的新增侧枝上长出的根），即一株组培苗只有基根，组培苗与形成的成品苗是一对一的，一株组培苗最多只能形成一株成品苗，因此，成苗率低，生产成本较高。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有火龙果组培苗成苗率较低的缺陷和不足，以提高火龙果组培苗的成苗率，更有效地降低成苗的生产成本，提供一种能提高火龙果组培苗成苗率的方法。该方法包括以下步骤：

（1）不定芽诱导

①外植体的选择和处理：选择半木质化、无病虫害的火龙果茎段，先用洗衣粉水清洗，并用自来水冲洗干净之后，将该茎段纵向切开，去除髓部，再切成宽为2cm～3cm、长为3cm～4cm的茎片，每块茎片的外皮均带有一个刺座，且保留刺座上的绒毛和小刺；

②不定芽诱导：将处理好的茎片经消毒、切去上下两端表面后接种到不定芽诱导培养基上，所述的不定芽诱导培养基为MS+TDZ0.4～0.6mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8；

（2）成苗培养

不定芽长至3～5cm长时，切取不定芽，将不定芽接入成苗培养基中,或将不定芽分成两段接入成苗培养基中,所述成苗培养基为MS+6-BA 2～4 mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭1g/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8；

步骤（1）②和步骤（2）的培养条件均为：温度为25℃～28℃，光照强度为3000lx～5000lx，光照时间为14 h/d，各培养基中蔗糖和琼脂含量的百分数均为质量百分数；

（3）炼苗移栽

成苗培养至不定芽上长出侧枝、且不定芽基部长出基根及侧枝长出气生根时，将瓶苗移至室外通风的大棚内，炼苗6～7天，头两天覆盖50%遮光率的遮荫网，炼苗结束，将苗从瓶内取出，洗净培养基，用锋利并经酒精消毒的小刀，切下带有气生根的侧枝及带有基根的主茎，放于75%百菌清可湿性粉剂1000倍液中浸泡10分钟，取出后置于阴凉处晾1～2小时，之后种植于盛有基质的平盘中，株行距为2cm×4cm，平盘中的基质为珍珠岩，预先对珍珠岩浇透水，种植后将平盘放置于大棚内管理，3～5天浇一次水，保持大棚内温度22℃～25℃，空气相对湿度50～60%，待种植在平盘中的带有气生根的侧枝及带有基根的主茎成活长出新根，移到育苗钵中养护。

步骤（1）②优选的不定芽诱导培养基为：MS+TDZ 0.4mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8；步骤（2）优选的成苗培养基为：MS+6-BA 4mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭1g/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明方法采用特殊的外植体处理、较低浓度的激素以及各步骤的协同配合，产生了协同增效的作用，不仅使火龙果组培种苗的生产周期短、不定芽诱导率高（80%以上）、增殖与生根同步、增殖系数达到5.45以上、增殖苗长势旺盛，生根率能达到100%，组培苗成苗移栽的成活率达到95%以上，而且接种的一个不定芽能长出3～4枝带气生根的侧枝，侧枝粗壮，即能使接种的一个不定芽繁殖出4～5株带根的成苗（3～4枝带气生根的侧枝和一株带基根的茎段即为4～5株带根的成苗即组培苗成苗），使组培苗成苗率提高了300～400%，即火龙果组苗成苗的生产率提高了3～4倍，生产效率得到大幅度提高，大幅度地降低了生产成本，与现有技术相比产生了预料不到的技术效果。

具体实施方式

实施例1 本发明一种提高火龙果组培苗成苗率的方法，其步骤如下：

（1）不定芽诱导

①外植体的选择和处理：选择半木质化、无病虫害的火龙果茎段，先用洗衣粉水清洗，并用自来水冲洗干净之后，将该茎段纵向切开，去除髓部，再切成宽为2cm～3 cm、长为3 cm～4cm的茎片，每块茎片的外皮均带有一个完整的刺座，且保留刺座上的绒毛和小刺。

②不定芽诱导：将处理好的茎片先在质量分数为75%的酒精中消毒30s，无菌水中清洗1次后，转入质量分数为2%的次氯酸钠溶液中消毒10min，之后无菌水清洗3～5次，消毒完成后，切去上下两端表面后接种到不定芽诱导培养基上，所述的不定芽诱导培养基为：MS+TDZ 0.6mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8，不定芽诱导率为80%；

（2）成苗培养（同步增殖和生根）

35天～40天后，不定芽从茎片的刺座处长出，不定芽长至3～5cm长时，切取不定芽，较短的不定芽直接接入成苗培养基中，较长的将不定芽分成两段接入成苗培养基中（增加不定芽数量），所述成苗培养基为MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭1g/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8；

（3）炼苗移栽

成苗培养30天后，不定芽长出长度为3～4cm的新侧枝，不定芽基部长出基根及侧枝长出气生根，此时，将瓶苗移至室外通风的大棚内，炼苗6～7天，头两天覆盖50%遮光率的遮荫网，之后揭去所述的遮荫网。炼苗结束，将苗从瓶内取出，洗净培养基，用锋利并经酒精消毒的小刀，切下带有气生根的侧枝及带有基根的主茎，放于75%百菌清可湿性粉剂1000倍液中浸泡10分钟，取出后置于阴凉处晾1～2小时，之后种植于盛有基质的平盘中，株行距为2cm×4cm，再将平盘放置于大棚内管理，3～5天浇一次水，保持大棚内温度22℃～25℃，空气相对湿度50～60%，待种植在平盘中的带有气生根的侧枝及带有基根的主茎成活长出新根，移到育苗钵中养护；平盘中的基质为珍珠岩，在种植前对珍珠岩预先浇透水。约30天后小苗成活长出新根。

实施例2

实施例2除以下措施不同外，其余措施与实施例1相同，不再赘述。

步骤（1）②的不定芽诱导培养基为：MS+TDZ 0.4mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8；步骤（2）的成苗培养基为：MS+6-BA 4mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭1g/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8。

以上各实施例的试验效果：

火龙果组培苗成苗：是指接入上述成苗培养基中的不定芽增殖（即长出的）的带有基根的主茎和/或带有气生根的侧枝。

这些带有基根的主茎及带有气生根的侧枝具有根、茎、叶（火龙果的小刺即为其叶，也就是***叶），分别切下后即成为完整再生植株即成苗。

火龙果组培苗成苗率：是指接入成苗培养基中的一个不定芽增殖的带有气生根的侧枝数与该不定芽的带有基根的主茎数之和与该不定芽数的比率，其计算公式是：

以上各实施例接入成苗培养基中的不定芽，其基部长出大量基根，一个不定芽能长出3～4枝带有气生根的侧枝，每枝侧枝长出2～4条气生根，因此，一个不定芽即能切下3～4枝带有气生根的侧枝和一个带有基根的主茎，故一个不定芽即能繁殖出组培苗成苗4～5株，组培成苗率为400～500%，而现有技术中，接种一个不定芽不能产生带有气生根的侧枝，即一个不定芽只能繁殖出一株带基根的组培苗成苗，因此，本发明方法能使火龙果组培苗成苗率提高300～400%，生产效率得到大幅度提高，大幅度地降低了生产成本，与现有技术相比产生了预料不到的技术效果。

以上各实施例由于繁殖的组培苗主茎基部长出大量基根、侧枝上的气生根也较多（每枝侧枝长出2～4条气生根），其增殖苗长势旺盛、侧枝粗壮，因此，切下带有气生根的侧枝和带有基根的主茎的组培苗成苗移栽到基质的成活率也高，移栽成活率为95%以上，成活快，30～35天即可成活长出新根。

以上各实施例火龙果组培种苗的生产周期短：从不定芽诱导（35天～40天）至成苗培养（同步增殖和生根）（30天～35天）只需65～75天，即形成完整再生植株只需65～75天，再经炼苗移栽成活需30天～35天，即从不定芽诱导至炼苗移栽成活只需95天～110天，因此，火龙果组培种苗的生产周期短。

以上各实施例采用特殊的外植体处理、较低浓度的激素以及各步骤的协同配合，产生了协同增效的作用，不仅使火龙果组培种苗的生产周期短、不定芽诱导率高（80%以上）、增殖与生根同步、增殖系数达到5.45以上、生根率能达到100%（见表1），增殖苗长势旺盛，组培苗成苗移栽成活率达到95%以上，而且接种的一个不定芽能长出3～4枝较多的带有气生根的侧枝，侧枝粗壮，即能使接种的一个不定芽繁殖出4～5株带根的成苗（即组培苗成苗），使组培苗成苗率提高了300～400%，火龙果组培苗成苗的生产率提高了3～4倍，生产效率得到大幅度提高，大幅度地低了生产成本，与现有技术相比产生了预料不到的技术效果。

Claims

1.一种提高火龙果组培苗成苗率的方法，包括以下步骤：

（1）不定芽诱导

①外植体的选择和处理：选择半木质化、无病虫害的火龙果茎段，先用洗衣粉水清洗，并用自来水冲洗干净之后，将该茎段纵向切开，去除髓部，再切成宽为2cm～3 cm、长为3 cm～4cm的茎片，每块茎片的外皮均带有一个刺座，且保留刺座上的绒毛和小刺；

②不定芽诱导：将处理好的茎片经消毒、切去上下两端表面后接种到不定芽诱导培养基上，所述不定芽诱导培养基为MS+TDZ 0.4～0.6mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8；

（2）成苗培养

步骤（1）②和步骤（2）的培养条件均为：温度为25℃～28℃，光照强度为3000～5000lx，光照时间为14 h/d，各培养基中蔗糖和琼脂含量的百分数均为质量百分数；

（3）炼苗移栽

成苗培养至不定芽上长出侧枝、且不定芽基部长出基根及侧枝长出气生根时，将瓶苗移至室外通风的大棚内，炼苗6～7天，头两天覆盖50%遮光率的遮荫网，炼苗结束，将苗从瓶内取出，洗净培养基，用经酒精消毒的小刀切下带有气生根的侧枝及带有基根的主茎，放于75%百菌清可湿性粉剂1000倍液中浸泡10分钟，取出后置于阴凉处晾1～2小时，之后种植于盛有基质的平盘中，株行距为2cm×4cm，平盘中的基质为珍珠岩，在种植前对珍珠岩预先浇透水，种植后将平盘放置于大棚内管理，3～5天浇一次水，保持大棚内温度22℃～25℃，空气相对湿度50～60%，待种植在平盘中的带有气生根的侧枝及带有基根的主茎成活长出新根，移到育苗钵中养护。

2.根据权利要求1所述的一种提高火龙果组培苗成苗率的方法，步骤（1）②的不定芽诱导培养基为：MS+TDZ 0.4mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8；步骤（2）的成苗培养基为：MS+6-BA 4mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭1g/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值为5.8。