CN102634490B - 活菌酵素的制备工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种活菌酵素的制备工艺,包括:分别用蔬菜、水果加入米曲霉、灵芝菌、枯草杆菌、乳酸菌、酵母菌发酵得到蔬菜酵素原液和水果酵素原液;用食用菌接种枯草杆菌,酵母,乳酸菌发酵得到食用菌酵素原液;用草本科接种灵芝菌、枯草杆菌、酵母菌、乳酸菌发酵得到草本酵素原液;用藻类接种枯草杆菌、酵母、乳酸菌发酵得到藻类酵素原液;合并滤液后接种双歧杆菌、纳豆菌、醋酸杆菌二次发酵后密封陈酿2个月,得到熟成的活菌酵素。本发明可有效减少杂菌滋生、使大分子物质迅速分解成人体容易吸收利用的小分子物质、能抵制肠道恶劣环境不易消化失活;且大大提高功能性活性成分含量、有效提高酵素的各种保健功效和高附加值。

Description

活菌酵素的制备工艺
技术领域
本发明涉及酵素领域,尤其涉及一种活菌酵素的制备工艺。
背景技术
酵素是一种由氨基酸组成的具有特殊生物活性的物质,也称为酶。它是一种生物催化剂,存在于所有的动、植物和微生物体内,是维持机体正常功能,消化食物,修复组织等生命活动的一种必需物质。目前,人体补充酵素主要还是生食果蔬为主。
现有技术的的酵素一般都为用各种杂果混合自然发酵而成的酵素,这种发酵过程很容易污染杂菌,且所需要的发酵时间长,第一次发酵最少也要2个月,包括陈化至少要6个月才成熟,且发酵完成后酵素产品中酵素含量比较低、或者很容易经过胃的消化失活(高酸导致酵素蛋白质变性失活和酵素被胃蛋白酶水解失活),发酵完成后有益活菌的数量也不多。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是:提供一种活菌酵素的制备工艺,该工艺可有效减少杂菌滋生、使大分子物质迅速分解成人体容易吸收利用的小分子物质、能抵制肠道恶劣环境不易消化失活;且大大提高功能性活性成分含量、使酵素功能更强大、有效提高酵素的各种保健功效和高附加值。
为解决上述技术问题,本发明采用如下技术方案:
一种活菌酵素的制备工艺,包括以下步骤:
水果酵素制备步骤,用若干种水果共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份、加入米曲霉、灵芝菌、枯草杆菌、乳酸菌、酵母菌各3-5份,在常温下发酵1-2个月,得到水果酵素原液;
蔬菜酵素制备步骤,用若干种蔬菜共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份、加入米曲霉、灵芝菌、枯草杆菌、乳酸菌、酵母菌各3-5份,在常温下发酵1-2个月,得到蔬菜酵素原液;
食用菌酵素制备步骤,用若干种食用菌共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份,接种至少包括有枯草杆菌,酵母,乳酸菌的有益菌群各3-5份,发酵20-40天,得到食用菌酵素原液;
草本酵素制备步骤,用若干种草本科植物作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份,接种至少包括有灵芝菌、枯草杆菌、酵母菌、乳酸菌的有益菌群各3-5份,发酵20-40天,得到草本酵素原液,其中,所述若干种草本科植物是菊花、金银花、车前草、金钱草、葛花、桑叶、芦荟各2-5份;
藻类酵素制备步骤,用若干种藻类共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成小片状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份,接种至少包括有枯草杆菌、酵母、乳酸菌的有益菌群各3-5份,发酵20-40天,得到藻类酵素原液;
二次发酵步骤,将所述水果酵素原液、蔬菜酵素原液、食用菌酵素原液、草本酵素原液、藻类酵素原液合并滤液混合均匀后,接种双歧杆菌、纳豆菌、以及醋酸杆菌,接种量为1%-3%,联合发酵20-30天;
陈酿步骤,将经二次发酵后的半成品分别装瓶或装罐密封保存陈酿至少2个月,得到熟成的活菌酵素;
所述若干种水果包括有苹果、山楂、葡萄、红枣、草莓、桑葚、梨、甜橙、柠檬、香蕉、木瓜、芒果、番茄、番石榴、胡萝卜、生姜中的任意至少一种;
所述若干种蔬菜包括有菠菜,韭菜,豆芽,青椒,芹菜、卷心菜、南瓜、葫芦瓜、洋葱中的任意至少一种;
所述若干种食用菌包括有金针菇、猴头菇、灰树花、姬松茸、香菇、茶树菇、木耳、银耳中的任意至少一种;
所述若干种藻类包括有螺旋藻、小球藻、海带、昆布中的任意至少一种;
上述各种水果、蔬菜、食用菌、草本科植物、藻类的分量是每种各2-5份。
优选地,所述米曲霉种子通过以下方法制得:
按重量计每100份豆饼中加入500份水浸泡6小时、煮沸3-4小时后,用纱布过滤取液,调整其波美度值至5,得到豆汁;每100ml豆汁加入可溶性淀粉2-3%,磷酸二氢钾0.1-0.3%,硫酸镁0.05%,硫酸铵0.05%为培养基、在120-125℃下湿热灭菌20-30分钟,冷却后接种米曲霉试管菌种1-2环,在28-32℃、转速80-140rmp的摇床中培养2-5天,得到米曲霉种子。
优选地,所述灵芝菌种通过以下方法制得:
以按重量计的葡萄糖5%-8%、麦芽浸膏0.5%-3%、酵母抽提物0.1%-0.2%、以及蛋白胨0.01%-0.1%为培养基,调整PH值为4.0-7.0、温度为120-125℃湿热灭菌15-25分钟,冷却到常温后,接种灵芝斜面试管菌种1-2环,在22-32℃、转速85-165rpm/min的摇床中培养3-6天,得到摇瓶灵芝菌种子。
优选地,所述枯草芽孢杆菌菌种通过以下方法制得:
以按重量计的葡萄糖0.5%-5%、酵母膏0.2%-1.5%、蛋白胨0.01%-0.1%、以及大豆水解液5%为培养基,调整PH值为4.0-7.0、温度为120-125℃湿热灭菌15-25分钟,冷却到常温后,接种枯草芽孢杆菌斜面种子1-2环,在20-32℃、转速90-200rpm/min的摇床中培养4-8天,得到摇瓶枯草芽孢杆菌种子。
优选地,所述乳酸菌菌种通过以下方法制得:
以按重量计的大豆胨5份、蛋白胨2.5份、酪蛋白胨2.5份、酵母浸粉2.5份、牛肉粉5份、乳糖5份、抗坏血酸钠0.5份、β-甘油磷酸钠19份、MgS040.25份、蒸馏水1000份为培养基,调整PH值为7.0-7.4、温度为120-125℃湿热灭菌10-20分钟,冷却到常温后,接种乳酸菌种子1-2环,在20-35℃下静置培养4-8天,得到摇瓶乳酸菌种子。
优选地,所述酵母菌通过以下方法制得:
以按重量计的酵母膏1%-2%、蛋白胨2%-4%、葡萄糖2%-5%为培养基,在其自然pH值、120-125℃下灭菌20-30分钟,冷却后接种酵母试管菌种1-2环,在28-30℃、转速80-120rmp的摇床中培养2-5天,得到摇瓶酵母菌种子。
优选地,所述醋酸杆菌菌种通过以下方法制得:
以按重量计的酵母膏1%-3%,葡萄糖1%-3%,酒精0.03%为培养基,在PH值为4.5-5.0、温度为120-125℃下灭菌15-25分钟,冷却到常温后,接种醋酸杆菌斜面种子1-2环,在28-33℃、转速90-200rpm/min的摇床中培养3-5天,得到摇瓶醋酸杆菌种子。
优选地,所述纳豆菌菌种通过以下方法制得:
以按重量计的乳糖2%-4%,蛋白胨4%-6%,磷酸二氢钾0.2-%0.5%,甘氨酸0.2%-0.45%,在其自然pH值、120-125℃下湿热灭菌15-25分钟,冷却到常温后接种纳豆菌斜面种子1-2环,在28-35℃、转速70-200rpm/min的摇床中培养3-5天,得到摇瓶纳豆菌种子。
优选地:
所述若干种水果包括有苹果、山楂、葡萄、红枣、草莓、桑葚、梨、甜橙、柠檬、香蕉、木瓜、芒果、番茄、番石榴、胡萝卜、生姜中的任意至少一种;
所述若干种蔬菜包括有菠菜,韭菜,豆芽,青椒,芹菜、卷心菜、南瓜、葫芦瓜、洋葱中的任意至少一种;
所述若干种食用菌包括有金针菇、猴头菇、灰树花、姬松茸、香菇、茶树菇、木耳、银耳中的任意至少一种;
所述若干种草本科植物包括有菊花、金银花、车前草、金钱草、葛花、桑叶、芦荟的任意至少一种;
所述若干种藻类包括有螺旋藻、小球藻、海带、昆布中的任意至少一种。
优选地,上述各种水果、蔬菜、食用菌、草本科植物、藻类的分量是每种各2-5份。
本发明的有益效果是:
本发明的实施例通过利用各种酶系强大的米曲霉、枯草杆菌、纳豆菌、乳酸菌、酵母菌等有益菌作为前期的有益菌联合共生优势快速发酵,从而有效减少杂菌滋生,并且使大分子物质迅速分解成人体容易吸收利用的小分子物质;并第一次发酵的基础上继续接种各种肠道益生菌如枯草杆菌、纳豆菌、醋酸杆菌等功能性菌种继续进行发酵和培养,有效积累了其功能性活性成分,提高了各种酵素活性和活菌的数量;且枯草杆菌、纳豆芽孢杆菌等有益微生物能通过胃的恶劣环境,并在肠道定植生长繁殖,同时产生各种活力强大的酵素来维持肠道正常健康,从而达到了使酵素功能更强大、有效提高酵素的各种保健功效和高附加值的效果。
具体实施方式
下面详细描述本发明提供的活菌酵素的制备工艺一个实施例;本实施例中,制备一次活菌酵素主要包括有以下步骤:
水果酵素制备步骤,用若干种水果和生姜共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份、加入米曲霉、灵芝菌、枯草杆菌、乳酸菌、酵母菌各3-5份,在常温下发酵1-2个月,得到水果酵素原液;
蔬菜酵素制备步骤,用若干种蔬菜共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份、加入米曲霉、灵芝菌、枯草杆菌、乳酸菌、酵母菌各3-5份,在常温下发酵1-2个月,得到蔬菜酵素原液;
食用菌酵素制备步骤,用若干种食用菌共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份,接种至少包括有枯草杆菌,酵母,乳酸菌的有益菌群各3-5份,发酵20-40天,得到食用菌酵素原液;
草本酵素制备步骤,用若干种草本科植物作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份,接种至少包括有灵芝菌、枯草杆菌、酵母菌、乳酸菌的有益菌群各3-5份,发酵20-40天,得到草本酵素原液;
藻类酵素制备步骤,用若干种藻类共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成小片状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份,接种至少包括有枯草杆菌、酵母、乳酸菌的有益菌群各3-5份,发酵20-40天,得到藻类酵素原液;
二次发酵步骤,将所述水果酵素原液、蔬菜酵素原液、食用菌酵素原液、草本酵素原液、藻类酵素原液合并滤液混合均匀后,接种双歧杆菌、纳豆菌、以及醋酸杆菌,接种量为1%-3%,联合发酵20-30天;
陈酿步骤,将经二次发酵后的半成品分别装瓶或装罐密封保存陈酿至少2个月,得到熟成的活菌酵素。
另外,在所述水果酵素制备步骤、蔬菜酵素制备步骤中,还可以加入樟芝菌。
具体实现时,所述米曲霉种子可通过以下方法制得:
按重量计每100份豆饼中加入500份水浸泡6小时、煮沸3-4小时后,用纱布过滤取液,调整其波美度值至5,得到豆汁;每100ml豆汁加入可溶性淀粉2-3%,磷酸二氢钾0.1-0.3%,硫酸镁0.05%,硫酸铵0.05%为培养基、在120-125℃下湿热灭菌20-30分钟,冷却后接种米曲霉试管菌种1-2环,在28-32℃、转速80-140rmp的摇床中培养2-5天,得到米曲霉种子。
所述灵芝菌种可通过以下方法制得:
以按重量计的葡萄糖5%-8%、麦芽浸膏0.5%-3%、酵母抽提物0.1%-0.2%、以及蛋白胨0.01%-0.1%为培养基,调整PH值为4.0-7.0、温度为120-125℃湿热灭菌15-25分钟,冷却到常温后,接种灵芝斜面试管菌种1-2环,在22-32℃、转速85-165rpm/min的摇床中培养3-6天,得到摇瓶灵芝菌种子。
所述枯草芽孢杆菌菌种可通过以下方法制得:
以按重量计的葡萄糖0.5%-5%、酵母膏0.2%-1.5%、蛋白胨0.01%-0.1%、以及大豆水解液5%为培养基,调整PH值为4.0-7.0、温度为120-125℃湿热灭菌15-25分钟,冷却到常温后,接种枯草芽孢杆菌斜面种子1-2环,在20-32℃、转速90-200rpm/min的摇床中培养4-8天,得到摇瓶枯草芽孢杆菌种子。
所述乳酸菌菌种可通过以下方法制得:
以按重量计的大豆胨5份、蛋白胨2.5份、酪蛋白胨2.5份、酵母浸粉2.5份、牛肉粉5份、乳糖5份、抗坏血酸钠0.5份、β-甘油磷酸钠19份、MgS040.25份、蒸馏水1000份为培养基,调整PH值为7.0-7.4、温度为120-125℃湿热灭菌10-20分钟,冷却到常温后,接种乳酸菌种子1-2环,在20-35℃下静置培养4-8天,得到摇瓶乳酸菌种子。
所述酵母菌可通过以下方法制得:
以按重量计的酵母膏1%-2%、蛋白胨2%-4%、葡萄糖2%-5%为培养基,在其自然pH值、120-125℃下灭菌20-30分钟,冷却后接种酵母试管菌种1-2环,在28-30℃、转速80-120rmp的摇床中培养2-5天,得到摇瓶酵母菌种子。
所述醋酸杆菌菌种可通过以下方法制得:
以按重量计的酵母膏1%-3%,葡萄糖1%-3%,酒精0.03%为培养基,在PH值为4.5-5.0、温度为120-125℃下灭菌15-25分钟,冷却到常温后,接种醋酸杆菌斜面种子1-2环,在28-33℃、转速90-200rpm/min的摇床中培养3-5天,得到摇瓶醋酸杆菌种子。
所述纳豆菌菌种可通过以下方法制得:
以按重量计的乳糖2%-4%,蛋白胨4%-6%,磷酸二氢钾0.2-%0.5%,甘氨酸0.2%-0.45%,在其自然pH值、120-125℃下湿热灭菌15-25分钟,冷却到常温后接种纳豆菌斜面种子1-2环,在28-35℃、转速70-200rpm/min的摇床中培养3-5天,得到摇瓶纳豆菌种子。
具体实现时,所述若干种水果可以是苹果、山楂、葡萄、红枣、草莓、桑葚、梨、甜橙、柠檬、香蕉、木瓜、芒果、番茄、番石榴、胡萝卜、生姜等各2-5份;
所述若干种蔬菜可以是菠菜,韭菜,豆芽,青椒,芹菜、卷心菜、南瓜、葫芦瓜、洋葱等各2-5份;
所述若干种食用菌可以是金针菇、猴头菇、灰树花、姬松茸、香菇、茶树菇、木耳、银耳等各2-5份;
所述若干种草本科植物可以是菊花、金银花、车前草、金钱草、葛花、桑叶、芦荟等各2-5份;
所述若干种藻类可以是螺旋藻、小球藻、海带、昆布等各2-5份。
本发明与现有技术相比,具有以下优点:
传统的酵素发酵过程污染杂菌的几率大,并且所需时间长,最少也要2个月的第一次发酵,包括陈化至少要6个月才成熟,而本发明外加复合菌种联合发酵,针对原料的组分精心挑选与其相对的益生菌有目的地进行二次发酵,所需要的时间比较少,一般20天左右就可以第一次发酵完成,然后二次发酵7-10天,熟成两个月即可,所用时间短、污染杂菌几率少、风味特别;
现有的酵素产品中酵素含量比较低,或者酵素经过胃的消化失活(高酸导致酵素蛋白质变性失活和酵素被胃蛋白酶水解失活),有益活菌比较低,而本发明有针对性地采用复合活菌联合二次发酵,各种胞外酵素齐全,活力强,并且这些有益活菌大部分能顺利通过胃,在肠道中定植下来,大量繁殖,生产各种酵素,有效分解肠道内的食物和清除肠道垃圾,维持肠道的有益微生物菌群,利于肠道对各种营养的吸收等;
传统的酵素在酵素的基础上几乎没有加强酵素的附加值,而本发明在第一次发酵过程中把大部分底物都分解或转化成有机小分子物质,利于机体的吸收,在这种情况下接种培养肠道益生菌和能积累功能性成分的功能性营养菌,使其合成功能性成分和代谢有益产物,从而大大提高了酵素的附加值;
本发明活菌酵素的制作利用各种有益微生物的快速发酵,比自然发酵周期短很多,节省时间,并且各种菌的复配共生有效分解各种植物成分,起到相互互补作用。
本发明适用于肠道活菌制剂、水果蔬菜等农产品高附加值深加工等领域。
以上所述,仅为本发明较好的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种活菌酵素的制备工艺,其特征在于,包括以下步骤: 
水果酵素制备步骤,用若干种水果共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份、加入米曲霉、灵芝菌、枯草杆菌、乳酸菌、酵母菌各3-5份,在常温下发酵1-2个月,得到水果酵素原液; 
蔬菜酵素制备步骤,用若干种蔬菜共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份、加入米曲霉、灵芝菌、枯草杆菌、乳酸菌、酵母菌各3-5份,在常温下发酵1-2个月,得到蔬菜酵素原液; 
食用菌酵素制备步骤,用若干种食用菌共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份,接种至少包括有枯草杆菌,酵母,乳酸菌的有益菌群各3-5份,发酵20-40天,得到食用菌酵素原液; 
草本酵素制备步骤,用若干种草本科植物作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成片状或者小块状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份,接种至少包括有灵芝菌、枯草杆菌、酵母菌、乳酸菌的有益菌群各3-5份,发酵20-40天,得到草本酵素原液,其中,所述若干种草本科植物是菊花、金银花、车前草、金钱草、葛花、桑叶、芦荟各2-5份; 
藻类酵素制备步骤,用若干种藻类共100份作为原料,进行臭氧消毒处理后,在洁净条件下,切成小片状,混合均匀,加入黑糖2.5-3.5份,接种至少包括有枯草杆菌、酵母、乳酸菌的有益菌群各3-5份,发酵20-40天,得到藻类酵素原液; 
二次发酵步骤,将所述水果酵素原液、蔬菜酵素原液、食用菌酵素原液、草本酵素原液、藻类酵素原液合并滤液混合均匀后,接种双歧杆菌、纳豆菌、以及醋酸杆菌,接种量为1%-3%,联合发酵20-30天; 
陈酿步骤,将经二次发酵后的半成品分别装瓶或装罐密封保存陈酿至少2个月,得到熟成的活菌酵素; 
所述若干种水果包括有苹果、山楂、葡萄、红枣、草莓、桑葚、梨、甜橙、柠檬、香蕉、木瓜、芒果、番茄、番石榴、胡萝卜、生姜中的任意至少 一种; 
所述若干种蔬菜包括有菠菜,韭菜,豆芽,青椒,芹菜、卷心菜、南瓜、葫芦瓜、洋葱中的任意至少一种; 
所述若干种食用菌包括有金针菇、猴头菇、灰树花、姬松茸、香菇、茶树菇、木耳、银耳中的任意至少一种; 
所述若干种藻类包括有螺旋藻、小球藻、海带、昆布中的任意至少一种; 
上述各种水果、蔬菜、食用菌、草本科植物、藻类的分量是每种各2-5份。 
2.如权利要求1所述的活菌酵素的制备工艺,其特征在于,所述米曲霉种子通过以下方法制得: 
按重量计每100份豆饼中加入500份水浸泡6小时、煮沸3-4小时后,用纱布过滤取液,调整其波美度值至5,得到豆汁;每100ml豆汁加入可溶性淀粉2-3%,磷酸二氢钾0.1-0.3%,硫酸镁0.05%,硫酸铵0.05%为培养基、在120-125℃下湿热灭菌20-30分钟,冷却后接种米曲霉试管菌种1-2环,在28-32℃、转速80-140rpm 的摇床中培养2-5天,得到米曲霉种子。 
3.如权利要求1所述的活菌酵素的制备工艺,其特征在于,所述灵芝菌种通过以下方法制得: 
以按重量计的葡萄糖5%-8%、麦芽浸膏0.5%-3%、酵母抽提物0.1%-0.2%、以及蛋白胨0.01%-0.1%为培养基,调整pH值为4.0-7.0、温度为120-125℃湿热灭菌15-25分钟,冷却到常温后,接种灵芝斜面试管菌种1-2环,在22-32℃、转速85-165rpm的摇床中培养3-6天,得到摇瓶灵芝菌种子。 
4.如权利要求1所述的活菌酵素的制备工艺,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌菌种通过以下方法制得: 
以按重量计的葡萄糖0.5%-5%、酵母膏0.2%-1.5%、蛋白胨0.01%-0.1%、以及大豆水解液5%为培养基,调整pH值为4.0-7.0、温度为120-125℃湿热灭菌15-25分钟,冷却到常温后,接种枯草芽孢杆菌斜面种子1-2环,在20-32℃、转速90-200rpm的摇床中培养4-8天,得到摇瓶枯草芽孢杆菌种子。 
5.如权利要求1所述的活菌酵素的制备工艺,其特征在于,所述乳酸菌菌种通过以下方法制得: 
以按重量计的大豆胨5份、蛋白胨2.5份、酪蛋白胨2.5份、酵母浸粉2.5份、牛肉粉5份、乳糖5份、抗坏血酸钠0.5份、β-甘油磷酸钠19份、MgS040.25份、蒸馏水1000份为培养基,调整pH值为7.0-7.4、温度为120-125℃湿热灭菌10-20分钟,冷却到常温后,接种乳酸菌种子1-2环,在20-35℃下静置培养4-8天,得到摇瓶乳酸菌种子。 
6.如权利要求1所述的活菌酵素的制备工艺,其特征在于,所述酵母菌通过以下方法制得: 
以按重量计的酵母膏1%-2%、蛋白胨2%-4%、葡萄糖2%-5%为培养基,在其自然pH值、120-125℃下灭菌20-30分钟,冷却后接种酵母试管菌种1-2环,在28-30℃、转速80-120r pm的摇床中培养2-5天,得到摇瓶酵母菌种子。 
7.如权利要求1所述的活菌酵素的制备工艺,其特征在于,所述醋酸杆菌菌种通过以下方法制得: 
以按重量计的酵母膏1%-3%,葡萄糖1%-3%,酒精0.03%为培养基,在pH值为4.5-5.0、温度为120-125℃下灭菌15-25分钟,冷却到常温后,接种醋酸杆菌斜面种子1-2环,在28-33℃、转速90-200rpm的摇床中培养3-5天,得到摇瓶醋酸杆菌种子。 
8.如权利要求1所述的活菌酵素的制备工艺,其特征在于,所述纳豆菌菌种通过以下方法制得: 
以按重量计的乳糖2%-4%,蛋白胨4%-6%,磷酸二氢钾0.2-%0.5%,甘氨酸0.2%-0.45%,在其自然pH值、120-125℃下湿热灭菌15-25分钟,冷却到常温后接种纳豆菌斜面种子1-2环,在28-35℃、转速70-200rpm的摇床中培养3-5天,得到摇瓶纳豆菌种子。 
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