CN101932587A - 噻唑并嘧啶pi3k抑制剂化合物及使用方法 - Google Patents

Abstract

式Ia和Ib的化合物，包括其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物和药学上可接受的盐，其可用于抑制包括PI3K的脂质激酶，以及用于治疗由脂质激酶介导的病症，如癌症。还公开了使用式Ia和Ib的化合物用于体外、原位和体内诊断、预防或治疗哺乳动物细胞中的此类疾病或相关病理状态的方法。

Description

噻唑并嘧啶PI3K抑制剂化合物及使用方法

相关申请的交叉引用

依据37CFR§1.53(b)提交的本非临时申请对2007年9月24日提交的序列号为60/974,708的美国临时申请要求基于35USC§119(e)的权益，该临时申请在此处全文并入供参考。

发明领域

本发明一般涉及具有抗癌活性的化合物，更具体地涉及抑制PI3激酶活性的化合物。本发明还涉及使用所述化合物用于对哺乳动物细胞或相关病理状态(pathological conditions)进行体外、原位和体内诊断或治疗的方法。

发明背景

磷脂酰肌醇是在细胞膜中发现的多种磷脂之一。近年来，已经弄清楚PI在细胞内信号传导中起着重要作用。经由3’-磷酸化的磷酸肌醇的细胞信号传导已牵涉到各种细胞过程，例如恶性转化、生长因子信号传导、炎症和免疫(Rameh等人(1999)，J.Biol Chem，274：8347-8350)。负责产生这些磷酸化信号传导产物的酶，即磷脂酰肌醇3-激酶(也称为PI 3-激酶或PI3K)，最初被确定为具有与病毒癌基因蛋白和生长因子受体酪氨酸激酶相关的活性，所述激酶将磷脂酰肌醇(PI)及其磷酸化衍生物的肌醇环的3’-羟基磷酸化(Panayotou等人(1992)Trends Cell Biol 2：358-60)。磷酸肌醇3-激酶(PI3K)是将脂质的肌醇环的3-羟基残基磷酸化的脂质激酶(Whitman等人(1988)Nature，332：664)。由PI-3激酶产生的3-磷酸化磷脂(PIP3s)用作具有脂质结合域(包括plekstrin同源(PH)区)的第二信使募集激酶，例如Akt和磷酸肌醇依赖性激酶-1(PDK1)。Akt与膜PIP3s的结合导致Akt移位到胞质膜上，使Akt与PDK1接触，这造成Akt的激活。肿瘤抑制磷酸酶PTEN将PIP3去磷酸化，因此起着Akt激活的负调节剂的作用。PI3-激酶Akt和PDK1对包括细胞周期调节、增殖、存活、凋亡和运动性的许多细胞过程的调节非常重要，是诸如癌症、糖尿病和免疫炎症的疾病的分子机制的重要组成部分(Vivanco等人(2002)，Nature Rev.Cancer 2：489；Phillips等人(1998)Cancer 83：41)。

PI3激酶家族包括按结构同源性细分的至少15种不同的酶，根据序列同源性和由酶催化形成的产物而分为三类。I类PI3激酶由2个亚单位(subunit)组成：110kd催化亚单位和85kd调节亚单位。该调节亚单位含有SH2结构域，并结合于具有酪氨酸激酶活性的生长因子受体或癌基因产物所磷酸化的酪氨酸残基，从而诱导p110催化亚单位的PI3K活性，将它的脂质底物磷酸化。I类PI3激酶牵涉细胞因子、整合素、生长因子和免疫受体下游的重要的信号传导过程，这表明该途径的控制可导致重要的治疗效果，如调节细胞增殖和癌变。I类PI3Ks能够将磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰肌醇-4-磷酸酯和磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸酯(PIP2)磷酸化，分别产生磷脂酰肌醇-3-磷酸酯(PIP)、磷脂酰肌醇-3，4-二磷酸酯和磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸酯。II类PI3Ks将PI和磷脂酰肌醇-4-磷酸酯磷酸化。III类PI3Ks仅能将PI磷酸化。

PI3激酶的初始纯化和分子克隆揭示，它是由p85和p110亚单位组成的杂二聚体(Otsu等人，(1991)Cell 65：91-104；Hiles等人，(1992)Cell 70：419-29)。自那时起，已经鉴定了四种不同的I类PI3Ks，表示为PI3Kα，β，δ和ω，其各自由不同的110kDa催化亚单位和调节亚单位组成。更具体地，所述催化亚单位中的三个，即p110α、p110β和p110δ，各自与相同的调节亚单位p85相互作用；而p110γ与不同的调节亚单位p101相互作用。这些PI3Ks各自在人的细胞和组织中的表达模式也是不同的。

癌症中的主要PI3-激酶同工型是I类PI3-激酶，p110α(US5824492；US5846824；US6274327)。其它同工型牵涉到心血管和免疫炎症性疾病(Workman P(2004)″抑制磷酸肌醇3-激酶途径用于治疗癌症(Inhibiting thephosphoinositide 3-kinase pathway for cancer treatment)″Biochem Soc Trans32：393-396；Patel等人，(2004)″鉴定有效的PI3K选择性抑制剂作为候选抗癌药(Identification of potent selective inhibitors of PI3K as candidate anticancerdrugs)″Proceedings of the American Association of Cancer Research(摘要LB-247)第95届年会，3月27-31，Orlando，Florida，USA；Ahmadi K和Waterfield MD(2004)″磷酸肌醇3-激酶：作用和机制(Phosphoinositide3-Kinase：Function and Mechanisms)″Encyclopedia of Biological Chemistry(Lennarz W J，Lane M D编)Elsevier/Academic Press)。

PI3激酶/Akt/PTEN途径是癌症药物开发的有吸引力的靶标，因为这些药剂预计会抑制增殖，逆转凋亡的阻遏和克服癌细胞中的耐细胞毒药物的作用。PI3激酶抑制剂已有报道(Yaguchi等人(2006)Jour.of the Nat.Cancer Inst.98(8)：545-556；US 7173029；US 7037915；US 6608056；US 6608053；US6838457；US 6770641；US 6653320；US 6403588；WO 2004/017950；US2004/092561；WO 2004/007491；WO 2004/006916；WO 2003/037886；US2003/149074；WO 2003/035618；WO 2003/034997；US 2003/158212；EP1417976；US 2004/053946；JP 2001247477；JP 08175990；JP 08176070)。

发明概述

本发明一般涉及具有抗癌活性，更具体地具有PI3激酶抑制活性的噻唑并嘧啶类化合物。某些过度增殖性疾病表征为对PI3激酶功能的调节，例如通过突变或蛋白的过表达来调节。因此，本发明的化合物可用于治疗过度增殖性疾病，如癌症。所述化合物可以抑制哺乳动物的肿瘤生长，可用于治疗癌症病人。

本发明还涉及使用所述化合物用于体外、原位和体内诊断或治疗哺乳动物细胞、有机体或相关病理状态的方法。

更具体地，本发明的一个方面提供了式Ia的4-吗啉代4-(噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉化合物和式Ib的4-(噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体或药学上可接受的盐：

其中，R¹和R³如本文所定义。

本发明的另一个方面提供了药物组合物，其包含式Ia或Ib的化合物和药学上可接受的载体、助流剂、稀释剂或赋形剂。该药物组合物可以进一步包含一种或多种选自以下的另外治疗剂：化疗剂、抗炎药、免疫调节剂、神经营养因子、治疗心血管疾病的药剂、治疗肝脏疾病的药剂、抗病毒药、治疗血液疾病的药剂、治疗糖尿病的药剂和治疗免疫缺陷疾病的药剂。

本发明的另一个方面提供了抑制PI3激酶活性的方法，其包括使PI3激酶与有效抑制量的式Ia或Ib的化合物、其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药接触。

本发明的另一个方面提供了预防或治疗过度增殖性疾病的方法，其包括对需要此类治疗的哺乳动物单独给予或与一种或多种具有抗过度增殖性性质的另外化合物联合给予有效量的式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药。

本发明的另一个方面提供了使用本发明化合物来治疗哺乳动物中由PI3K激酶调节的疾病或病症。

本发明的另一个方面是本发明化合物在制备用于治疗或预防哺乳动物中由PI3激酶调节的疾病或病症的药物中的用途。

本发明的另一个方面包括试剂盒，其包含：(i)式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药，(ii)容器，和(iii)指导治疗的包装插页(package insert)或标签。

本发明的另一个方面包括制备式Ia和Ib的化合物的方法，分离式Ia和Ib的化合物的方法，以及纯化式Ia和Ib的化合物的方法。

本发明的其他优点和新颖特征将部分在以下的说明中阐明，并且部分将在阅读了以下说明书之后对于本领域技术人员来说是明显的或者可以通过实施本发明来获悉。可通过在所附权利要求中具体指出的手段、组合、组合物和方法来实现和达到本发明的优点。

示例性实施方式详述

现在详细提到本发明的某些实施方案，结合结构及式子说明其实例。虽然结合所列举的实施方案描述了本发明，但应该理解的是，这无意将本发明局限于这些实施方案。相反，本发明意图涵盖落入权利要求所定义的发明范围内的所有替代、修改和等同物。本领域技术人员会认识到许多类似或等同于本文描述的那些的方法和材料，它们可以用于实施本发明。本发明决不受限于所述的方法和材料。在一篇或多篇引用文献、专利和类似资料不同于本申请(包括但不限于定义的术语、术语用法、所述技术等)或与本申请冲突的情况下，以本申请为准。

定义

本文所使用的术语“烷基”是指1-12个碳原子的饱和直链或支链单价烃基，其中所述烷基可以任选独立地被一个或多个下述取代基取代。烷基的实例包括但不限于甲基(Me，-CH₃)、乙基(Et，-CH₂CH₃)、1-丙基(n-Pr，正丙基，-CH₂CH₂CH₃)、2-丙基(i-Pr，异丙基，-CH(CH₃)₂)、1-丁基(n-Bu，正丁基，-CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-甲基-1-丙基(i-Bu，异丁基，-CH₂CH(CH₃)₂)、2-丁基(s-Bu，仲丁基，-CH(CH₃)CH₂CH₃)、2-甲基-2-丙基(t-Bu，叔丁基，-C(CH₃)₃)、1-戊基(正戊基，-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₃)、3-戊基(-CH(CH₂CH₃)₂)、2-甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH₂CH₃)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH₃)CH(CH₃)₂)、3-甲基-1-丁基(-CH₂CH₂CH(CH₃)₂)、2-甲基-1-丁基(-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₃)、1-己基(-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-己基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₂CH₃)、3-己基(-CH(CH₂CH₃)(CH₂CH₂CH₃))、2-甲基-2-戊基(-C(CH₃)₂CH₂CH₂CH₃)，3-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH(CH₃)CH₂CH₃)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)₂)、3-甲基-3-戊基(-C(CH₃)(CH₂CH₃)₂)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH₂CH₃)CH(CH₃)₂)、2，3-二甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH(CH₃)₂)、3，3-二甲基-2-丁基(-CH(CH₃)C(CH₃)₃、1-庚基、1-辛基等。

术语“烯基”是指具有至少一个不饱和位点，即碳-碳sp²双键的2-12个碳原子的直链或支链单价烃基，其中该烯基可以任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代，包括具有“顺式”和“反式”取向或者“E”和“Z”取向的基团。实例包括但不限于乙烯基(ethylenyl)或乙烯基(vinyl)(-CH＝CH₂)，烯丙基(-CH₂CH＝CH₂)等。

术语“炔基”是指具有至少一个不饱和位点，即碳-碳sp三键的2-12个碳原子的直链或支链单价烃基，其中该炔基可以任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。实例包括但不限于乙炔基(-C≡CH)、丙炔基(炔丙基，-CH₂C≡CH)等。

术语“碳环(carbocycle)”、“碳环基”、“碳环(carbocyclic ring)”和“环烷基(cycloalkyl)”是指作为单环具有3-12个碳原子或作为双环具有7-12个碳原子的单价非芳族、饱和或部分不饱和的环。具有7-12个原子的双环碳环例如可以排列为双环[4，5]、[5，5]、[5，6]或[6，6]***，并且具有9或10个环原子的双环碳环可以排列为双环[5，6]或[6，6]***，或者排列为桥连***，如双环[2.2.1]庚烷，双环[2.2.2]辛烷和双环[3.2.2]壬烷。单环碳环的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、1-环己-1-烯基、1-环己-2-烯基、1-环己-3-烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基、环十二烷基等。

“芳基”是指从芳族母环***的单个碳原子上除去一个氢原子所获得的6-20个碳原子的单价芳族烃基。一些芳基在示例性结构中表示为“Ar”。芳基包括芳环与饱和环、部分不饱和环或芳族碳环或杂环稠合的双环基团。典型的芳基包括但不限于由苯(苯基)、取代苯、萘、蒽、联苯基、茚基、茚满基、1，2-二氢萘、1，2，3，4-四氢萘基等衍生的基团。芳基任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。

术语“杂环(heterocycle)”、“杂环基”和“杂环(heterocyclic ring)”在本文可以互换地使用，是指3-20个或更多个环原子的饱和或部分不饱和(即，在环内具有一个或多个双键和/或三键)的碳环基团，其中至少一个环原子是选自氮、氧和硫的杂原子，其余的环原子是C，其中一个或多个环原子任选独立地被一个或多个下文所述的取代基取代。杂环可以是具有3-7个环原子的单环(2-6个碳原子和1-4个选自N、O、P和S的杂原子)或具有7-10个环原子的双环(4-9个碳原子和1-6个选自N、O、P和S的杂原子)，例如双环[4，5]、[5，5]、[5，6]或[6，6]***。杂环描述在下列文献中：Paquette，Leo A.；″现代杂环化学原理(Principles of Modern Heterocyclic Chemistry)″(W.A.Benjamin，New York，1968)，尤其第1、3、4、6、7和9章；″杂环化合物化学、系列专著(The Chemistry of Heterocyclic Compounds，A series ofMonographs)″(John Wiley & Sons，New York，1950至今)，尤其第13、14、16、19和28卷；以及J.Am.Chem.Soc.(1960)82：5566。术语“杂环”包括杂环烷氧基。“杂环基”还包括其中杂环基与饱和、部分不饱和环或芳族碳环或杂环稠合的基团。杂环的实例包括但不限于吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫代吗啉基、噻噁烷基、哌嗪基、高哌嗪基(homopiperazinyl)、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基(oxetanyl)、硫杂环丁烷基(thietanyl)、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基(thiepanyl)、氧氮杂

基、二氮杂

基(diazepinyl)、硫氮杂

基(thiazepinyl)、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫戊环基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂双环[3.1.0]己烷基、3-氮杂双环[4.1.0]庚烷基、氮杂双环[2.2.2]己烷基、3H-吲哚基喹嗪基和N-吡啶基脲。螺环结构部分(spiro moieties)也包括在该定义的范围内。其中2个环碳原子被氧代(＝O)结构部分取代的杂环基团的实例是嘧啶酮基和1，1-二氧代-硫代吗啉基。本文的杂环基团任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。

术语“杂芳基”是指含有一个或多个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5、6或7元环的单价芳族基团，其包括5-20个原子的稠环***(其中至少一个是芳族的)。杂芳基的实例是吡啶基(包括例如2-羟基吡啶基)、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧啶基(包括例如4-羟基嘧啶基)、吡唑基、***基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、中氮茚基、2，3-二氮杂萘基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、喋啶基、嘌呤基、噁二唑基、***基、噻二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并哌啶基。杂芳基任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。

杂环或杂芳基在可能进行此类连接之处可以是碳连接的、氮连接的或氧连接的。作为非限制性实例，碳连接的杂环或杂芳基连接于以下位置：吡啶的2、3、4、5或6位；哒嗪的3、4、5或6位；嘧啶的2、4、5或6位；吡嗪的2、3、5或6位；呋喃、四氢呋喃、噻吩(thiofuran)、噻吩(thiophene)、吡咯或四氢吡咯的2、3、4或5位；噁唑、咪唑或噻唑的2、4或5位；异噁唑、吡唑或异噻唑的3、4或5位；氮丙啶的2或3位；氮杂环丁烷的2、3或4位；喹啉的2、3、4、5、6、7或8位或者异喹啉的1、3、4、5、6、7或8位。

作为非限制性实例，氮连接的杂环或杂芳基连接于以下位置：氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、二氢吲哚、1H-吲唑的1位；异吲哚或异吲哚啉的2位；吗啉的4位以及咔唑或β-咔啉的9位。

术语“单环杂芳基”是指含有1、2、3或4个独立地选自N、O和S的环杂原子的五元或六元的未取代或取代的单环杂芳基。该单环杂芳基在单环杂芳基R³基团的任何碳(碳连接的)原子处连接于根据式Ia和Ib的嘧啶环的C-2位。单环杂芳基包括但不限于：2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、3-吡唑基、4-吡唑基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、3-哒嗪基、4-哒嗪基、5-哒嗪基、2-嘧啶基、5-嘧啶基、6-嘧啶基、2-吡嗪基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、3-***基、1-***基、5-四唑基、1-四唑基和2-四唑基。单环杂芳基任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。

含有一个或多个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的“稠合双环C₃-C₂₀杂环基”和“稠合双环C₁-C₂₀杂芳基”的区别仅在于它们的芳香性质，并且均具有稠合在一起的两个环，即，具有共同键。稠合双环杂环基和杂芳基在该稠合双环C₃-C₂₀杂环基或稠合双环C₁-C₂₀杂芳基的R³基团的任何碳(碳连接的)原子处连接于根据式Ia和Ib的嘧啶环的C-2位。稠合双环杂环基和杂芳基包括但不限于：1H-吲唑、1H-吲哚、二氢吲哚-2-酮、1-(二氢吲哚-1-基)乙酮、1H-苯并[d][1，2，3]***、1H-吡唑并[3，4-b]吡啶、1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶、1H-苯并[d]咪唑、1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮、1H-吡唑并[3，4-c]吡啶、1H-吡咯并[2，3-c]吡啶、3H-咪唑并[4，5-c]吡啶、7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶、7H-嘌呤、1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶、1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶、2-氨基-1H-嘌呤-6(9H)-酮、喹啉、喹唑啉、喹喔啉、异喹啉、异喹啉-1(2H)-酮、3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮、3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮、喹唑啉-2(1H)-酮、喹喔啉-2(1H)-酮、1，8-萘啶、吡啶并[3，4-d]嘧啶和吡啶并[3，2-b]吡嗪。稠合双环杂环和稠合双环杂芳基任选独立地被本文所述的一个或多个取代基取代。

烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、稠合双环C₃-C₂₀杂环基和稠合双环C₁-C₂₀杂芳基任选被取代基取代，所述取代基包括F、Cl、Br、I、CN、CF₃、-NO₂、氧代、R¹⁰、-C(＝Y)R¹⁰、-C(＝Y)OR¹⁰、-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_nNR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_nOR¹⁰、-NR¹⁰R¹¹、-NR¹²C(＝Y)R¹⁰、-NR¹²C(＝Y)OR¹¹、-NR¹²C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-NR¹²SO₂R¹⁰、＝NR¹²、OR¹⁰、-OC(＝Y)R¹⁰、-OC(＝Y)OR¹⁰、-OC(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-OS(O)₂(OR¹⁰)、-OP(＝Y)(OR¹⁰)(OR¹¹)、-OP(OR¹⁰)(OR¹¹)、SR¹⁰、-S(O)R¹⁰、-S(O)₂R¹⁰、-S(O)₂NR¹⁰R¹¹、-S(O)(OR¹⁰)、-S(O)₂(OR¹⁰)、-SC(＝Y)R¹⁰、-SC(＝Y)OR¹⁰、-SC(＝Y)NR¹⁰R¹¹、C₁-C₁₂任选取代的烷基、C₂-C₈任选取代的烯基、C₂-C₈任选取代的炔基、C₃-C₁₂任选取代的碳环基、C₂-C₂₀任选取代的杂环基、C₆-C₂₀任选取代的芳基、C₁-C₂₀任选取代的杂芳基、-(CR¹⁴R¹⁵)_t-NR¹²C(＝O)(CR¹⁴R¹⁵)NR¹⁰R¹¹以及(CR⁴R⁵)_t-NR¹⁰R¹¹。

术语“治疗”是指治疗性治疗和预防性措施两者，其中目的是预防或减慢(减轻)不希望有的生理变化或障碍，例如癌症的发生或扩散。对于本发明的目的来说，有益或所需的临床结果包括但不限于减轻症状、减轻疾病程度、稳定疾病状态(即没有恶化)、延迟或减慢疾病进程、改善或缓和以及缓解疾病状态(不论是部分还是全部)，不论是可检测到还是不能检测到。“治疗”还可以表示与如果没有接受治疗的期望存活期相比，延长存活期。需要治疗的那些人包括已患有该疾病或病症的那些人以及易患该疾病或的那些人或要预防该疾病或病症的那些人。

短语“治疗有效量”是指(i)治疗或预防特定疾病、病症或障碍；(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状，或者(iii)预防或延迟本文所述的特定疾病、病症或障碍的一个或多个症状开始出现的本发明化合物的量。在癌症的情况下，药物的治疗有效量可以减少癌细胞的数目；减小肿瘤尺寸；抑制(即一定程度减慢，且优选停止)癌细胞浸润到周围器官中；抑制(即一定程度减慢，且优选停止)肿瘤转移；一定程度抑制肿瘤生长；和/或一定程度减轻与癌症相关的一种或多种症状。该药物可以一定程度防止癌细胞生长和/或杀死存在的癌细胞，它可以抑制细胞生长和/或裂解细胞。对于癌症治疗，例如可以通过评定疾病进展时间(TTP)和/或测定反应率(RR)来测定效力。

术语“癌症”是指或描述哺乳动物中的生理状况，其通常表征为不受调节的细胞生长。“肿瘤”包括一种或多种癌细胞。癌症的实例包括但不限于癌、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤以及白血病或淋巴恶性肿瘤。这类癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌(例如鳞状上皮细胞癌)；肺癌，包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌(“NSCLC”)、肺腺癌和肺鳞状细胞癌；腹膜癌；肝细胞癌；包括肠或胃癌在内的胃肠癌症；胰腺癌；胶质母细胞瘤；子***；卵巢癌；肝癌；膀胱癌；肝细胞瘤；乳腺癌；结肠癌；直肠癌；结肠直肠癌；子宫内膜癌或子宫癌；唾液腺癌；肾癌；***癌；外阴癌；甲状腺癌；肝癌；***癌；***癌和头颈癌。

“化疗剂”是用于治疗癌症的化合物。化疗剂的实例包括埃罗替尼(TARCEV A

，Genentech/OSI Pharm.)、保特佐米(VELCADE

，MillenniumPharm.)、氟维司群(FASLODEX

，AstraZeneca)、舒尼替尼(sutent)(SUNITINIB

，SU11248，Pfizer)、来曲唑(FEMARA

，Novartis)、甲磺酸伊马替尼(GLEEVEC

，Novartis)、PTK787/ZK 222584(Novartis)、奥沙利铂(Eloxatin

，Sanofi)、5-FU(5-氟尿嘧啶)、甲酰四氢叶酸、雷帕霉素(Sirolimus，RAPAMUNE，Wyeth)、拉帕替尼(TYKERB，GSK572016，Glaxo Smith Kline)、洛那法尼(Lonafarnib)(SCH 66336)、索拉非尼(NEXAVAR，BAY43-9006，Bayer Labs)和吉非替尼(IRESSA

，AstraZeneca)、AG 1478、AG 1571(SU 5271；Sugen)、烷化剂，如硫替派和CYTOXAN环磷酰胺；烷基磺酸酯，例如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮杂环丙烷，例如苯佐替派(benzodopa)、卡巴醌、美妥替哌(meturedopa)和乌瑞替哌(uredopa)；乙撑亚胺(ethylenimines)和甲基蜜胺类(methylamelamines)，包括六甲蜜胺、曲他胺、三亚乙基磷酰胺、三乙撑硫代磷酰胺和三羟甲蜜胺(trimethylomelamine)；多聚乙酰类(acetogenins)(尤其布拉它辛(bullatacin)和布拉它辛酮(bullatacinone))；喜树碱(包括合成类似物拓扑替康)；草苔虫内酯(bryostatin)；卡来斯他汀(callystatin)；CC-1065(包括它的阿多来新、卡折来新和比折来新合成类似物)；自念珠藻环肽(cryptophycins)(尤其自念珠藻环肽1和自念珠藻环肽8)；海兔毒肽(dolastatin)；多卡米星(duocarmycin，包括合成类似物KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素；水鬼蕉碱(pancratistatin)；沙可迪汀(sarcodictyin)；海绵抑制素(spongistatin)；氮芥类，例如苯丁酸氮芥、双氯乙基-β-萘胺、氯磷酰胺(chlorophosphamide)、雌氮芥、异环磷酰胺、二氯甲二乙胺、二氯甲二乙胺氧化物盐酸盐、美法仑、新恩比兴、胆甾醇对苯乙酸氮芥、松龙苯芥、氯乙环磷酰胺、尿嘧啶氮芥；亚硝基脲类，例如亚硝脲氮芥、吡葡亚硝脲、福泰氮芥、环己亚硝脲、嘧啶亚硝脲和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，例如烯二炔类抗生素(例如卡奇霉素，尤其卡奇霉素γ1I和卡奇霉素ΩI1(Angew Chem.Intl.Ed.Engl.(1994)33：183-186)；蒽环类抗生素，包括Dynemicin A；二膦酸盐，例如氯膦酸盐；埃斯波霉素(esperamicin)；新制癌菌素发色团和相关色蛋白烯二炔抗生素发色团)、阿克拉霉素、放线菌素、奥斯拉米星(authramycin)、偶氮丝氨酸、博来霉素、放线菌素C、卡柔比星、洋红霉素、嗜癌菌素、色霉素(chromomycinis)、放线菌素、道诺红菌素、地托比星、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、ADRIAMYCIN

(多柔比星)、吗啉代多柔比星、氰基吗啉代多柔比星、2-吡咯啉并-多柔比星和去氧多柔比星)、表柔比星、依索比星、依达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素(例如丝裂霉素C)、霉酚酸、诺加霉素、橄榄霉素、培洛霉素、紫菜霉素、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑菌素、链脲霉素、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢物，例如氨甲喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，比如4-氨基二甲叶酸(denopterin)、氨甲喋呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，比如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、2-氨基嘌呤-6-硫醇；嘧啶类似物，比如环胞苷、阿扎胞苷、6-氮尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷(floxuridine)；雄性激素，比如二***、屈他雄酮丙酸酯、环硫雄醇、美雄烷、睾丸内脂；抗肾上腺药物，比如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂比如frolinic acid；醋葡醛内酯；醛磷酰胺苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶；贝斯特拉布希(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；地磷胺(defofamine)；脱羰秋水仙碱；地吖醌；依氟鸟氨酸(elfornithine)；依利醋铵；埃坡霉素；乙环氧啶；硝酸镓；羟基脲；蘑菇多糖；氯尼达明(lonidainine)；美登类化合物，比如美登素和安丝菌素(ansamitocins)；丙脒腙；米托蒽醌；莫哌达醇(mopidanmol)；尼曲吖啶(nitraerine)；喷司他丁；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基酰肼(2-ethylhydrazide)；普鲁苄肼；PSK

多糖复合物(JHS Natural Products，Eugene，OR)；丙亚胺；根瘤菌素；西佐喃；锗螺胺；细交链格孢菌酮酸；三乙撑亚胺苯醌；2，2′，2″-三氯三乙胺；单端孢霉烯族毒素类(trichothecenes)(尤其T-2毒素，verracurin A，杆孢菌素A和蛇形菌毒素(anguidine))；尿烷；去乙酰长春酰胺；氮烯唑胺；甘露醇氮芥；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；双溴丙基哌嗪；加西托新(gacytosine)；***糖苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；塞替派；紫杉烷类，例如紫杉醇(TAXOL

；Bristol-Myers Squibb Oncology.Princeton，N.J.)、ABRAXANE^TM(不含聚氧乙烯蓖麻油)、紫杉醇的白蛋白工程纳米颗粒制剂(American PharmaceuticalPartners，伊利诺州Schaumberg)、多西他赛(TAXOTERE

；法国Antony的

-Poulenc Rorer)；苯丁酸氮芥(chloranmbucil)；吉西他滨(GEMZAR)；6-硫代鸟嘌呤；巯基嘌呤；氨甲喋呤；铂类似物比如顺铂和碳铂；长春碱；表鬼臼毒素吡喃葡糖苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨(NAVELBINE

)；诺消灵；表鬼臼毒噻吩糖苷；依达曲沙；柔毛霉素；氨基蝶呤；卡培他滨(XELODA，Roche)；伊班膦酸钠；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视色素，比如视黄酸；以及任何上述化合物的药学上可接受的盐、酸和衍生物。

在“化疗剂”的定义内还包括：(i)用于调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素药，例如抗***剂和选择性***受体调节剂(SERMs)，包括例如它莫昔芬(包括NOLVADEX

；它莫昔芬柠檬酸盐)、雷洛西芬、屈洛昔芬、4-羟基它莫昔芬、曲沃昔芬、雷洛昔芬盐酸盐(keoxifene)、LY117018、奥那司酮和FARESTON

(托瑞米芬柠檬酸盐)；(ii)调节肾上腺中***产生的抑制芳香酶的芳香酶抑制剂，例如4(5)-咪唑类、氨鲁米特、MEGASE

(乙酸甲地孕酮)、AROMASIN

(依西美坦；Pfizer)、福美坦(formestanie)、法倔唑、RIVISOR

(伏氯唑)、FEMARA(来曲唑；Novartis)和ARIMIDEX(阿那曲唑；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素，例如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林、戈舍瑞林；以及曲沙他滨(1，3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白激酶抑制剂；(v)脂类激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，尤其抑制在牵涉异常细胞增殖的信号转导途径中的基因的表达的那些，例如PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核糖酶，例如VEGF表达抑制剂(例如ANGIOZYME

)和HER2表达抑制剂；(viii)疫苗，例如基因治疗疫苗，例如ALLOVECTIN、LEUVECTIN

和VAXID

；PROLEUKIN

rIL-2；拓扑异构酶1抑制剂例如LURTOTECAN

；ABARELIX

rmRH；(ix)抗血管新生药，例如贝伐单抗(AVASTIN

，Genentech)；以及(x)以上任何化合物的药学上可接受的盐、酸和衍生物。

“代谢物”是特定化合物或其盐通过在体内代谢产生的产物。化合物的代谢物可以使用本领域已知的常规技术来鉴定，使用诸如本文所述的那些试验来测定它们的活性。此类产物例如可以由被施用的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺基、酯化、脱酯、酶促裂解等产生。因此，本发明包括本发明化合物的代谢物，包括通过使本发明化合物与哺乳动物接触足以获得其代谢产物的时间的方法所产生的化合物。

术语“包装插页”是指通常在治疗产品的商品包装中含有的说明书，其含有关于使用这种治疗产品的指示、用法、剂量、给药、禁忌症和/或告诫的信息。

术语“手性”是指具有镜像配对(partner)的非重叠性的分子，而术语“非手性”是指可重叠于其镜像配对上的分子。

术语“立体异构体”是指具有相同的化学构成，但原子或基团在空间的排列不同的化合物。

“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心的立体异构体，其分子彼此之间不互为镜像。非对映异构体具有不同物理性质，如熔点、沸点、光谱性质和反应性。可以通过高分辨率分析程序如电泳和色谱法来分离非对映异构体的混合物。

“对映异构体”是指一种化合物的两种立体异构体，它们互为不可重叠的镜像。

本文所使用的立体化学定义和规定一般遵照S.P.Parker编辑，McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill BookCompany，New York；以及Eliel，E.和Wilen，S.，″Stereochemistry of OrganicCompounds″，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1994。本发明化合物可以含有不对称或手性中心，因此存在不同的立体异构形式。有意将式Ia或Ib的化合物的所有立体异构形式，包括但不限于非对映异构体、对映异构体和阻转异构体，以及它们的混合物(如外消旋混合物)形成本发明的一部分。许多有机化合物以旋光活性形式存在，即，它们具有旋转平面偏振光的平面的能力。在描述旋光活性化合物时，前缀D和L，或R和S，用于表示分子的手性中心的绝对构型。前缀d和l或者(+)和(-)用于表示该化合物旋转平面偏振光的符号，其中(-)或l表示该化合物是左旋的。前缀为(+)或d的化合物是右旋的。对于给定化学结构，这些立体异构体是相同的，除了它们为彼此的镜像。一种具体的立体异构体还可以称为对映异构体，此类异构体的混合物通常称为对映异构体混合物。对映异构体的50∶50混合物称为外消旋混合物或外消旋物，它们可以在非立体选择或立体特异性的化学反应或过程中出现。术语“外消旋混合物”和“外消旋物”是指两种对映异构体物质(species)的等摩尔混合物，无旋光性。

术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指可通过低能垒相互转换的不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子移变互变异构体)包括经由质子迁移相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。化合价互变异构体包括通过重新组织一些键合电子而发生的相互转化。

本文所使用的短语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的药学上可接受的有机或无机盐。盐的实例包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐，乳酸盐，水杨酸盐，酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、丹宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸、蔗糖盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对-甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐(pamoate)(即，1，1’-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐))。药学上可接受的盐可以涉及其它分子例如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其它抗衡离子。抗衡离子可以是稳定母体化合物上的电荷的任何有机或无机部分。此外，药学上可接受的盐可以在其结构中具有多于一个的带电荷原子。在多个带电荷的原子为药学上可接受的盐的一部分时，可以具有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可以具有一个或多个带电荷原子和/或一个或多个抗衡离子。

如果本发明的化合物为碱，所需的药学上可接受的盐可以通过本领域可获得的任何合适方法来制备，例如用诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、磷酸等无机酸或用诸如乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸(如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α羟基酸(如柠檬酸或酒石酸)、氨基酸(如天冬氨酸或谷氨酸)、芳香酸(如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(如对甲苯磺酸或乙磺酸)等有机酸处理游离碱。

如果本发明的化合物是酸，所需的药学上可接受的盐可以通过任何合适的方法来制备，例如用无机或有机碱如胺(伯、仲或叔)、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等处理游离酸。合适的盐的实例包括但不限于由氨基酸(如甘氨酸和精氨酸)、氨、伯胺、仲胺和叔胺和环胺(如哌啶、吗啉和哌嗪)衍生的有机盐，以及由钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂衍生的无机盐。

短语“药学上可接受的”是指该物质或组合物必须与制剂包含的其它成分和/或所治疗的哺乳动物在化学和/或毒理学上相容。

术语“本发明化合物”、“本发明的化合物”和“式Ia和Ib的化合物”包括式Ia和Ib的化合物以及它们的立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物和药学上可接受的盐和前药。

术语“哺乳动物”包括但不限于人、小鼠、大鼠、豚鼠、猴、狗、猫、马、牛、猪和羊以及禽类。

噻唑并嘧啶PI3激酶抑制剂化合物

本发明提供了潜在有用于治疗由PI3激酶调节的疾病、病症和/或障碍的噻唑并嘧啶化合物以及它们的药物制剂。所述化合物可以作为泛抑制剂抑制p110同工型，包括α、β、γ和δ型。所述化合物可以是选择性抑制p110同工型之一的p110同工型选择性抑制剂。

更具体地，本发明提供式Ia的4-吗啉代4-(噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉化合物和式Ib的4-(噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

R¹选自H、F、Cl、Br、I、CN、-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹、-C(R¹⁴R¹⁵)_nNR¹²C(＝Y)R¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_nNR¹²S(O)₂R¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_mOR¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_nS(O)₂R¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_nS(O)₂NR¹⁰R¹¹、-C(OR¹⁰)R¹¹R¹⁴、-C(＝Y)R¹⁰、-C(＝Y)OR¹⁰、-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-C(＝Y)NR¹²OR¹⁰、-C(＝O)NR¹²S(O)₂R¹⁰、-C(＝O)NR¹²(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹、-NO₂、-NR¹²C(＝Y)R¹¹、-NR¹²C(＝Y)OR¹¹、-NR¹²C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-NR¹²S(O)₂R¹⁰、-NR¹²SO₂NR¹⁰R¹¹、-SR¹⁰、-S(O)₂R¹⁰、-S(O)₂NR¹⁰R¹¹、-SC(＝Y)R¹⁰、-SC(＝Y)OR¹⁰、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基；

R³是碳连接的单环杂芳基、碳连接的稠合双环C₃-C₂₀杂环基，或者碳连接的稠合双环C₁-C₂₀杂芳基，其中所述单环杂芳基、稠合双环C₃-C₂₀杂环基和稠合双环C₁-C₂₀杂芳基任选被一个或多个选自以下的基团所取代：F、Cl、Br、I、-CN、-NR¹⁰R¹¹、-OR¹⁰、-C(O)R¹⁰、-NR¹⁰C(O)R¹¹、-N(C(O)R¹¹)₂、-NR¹⁰C(O)NR¹⁰R¹¹、-NR¹²S(O)₂R¹⁰、-C(＝O)OR¹⁰、-C(＝O)NR¹⁰R¹¹、C₁-C₁₂烷基和(C₁-C₁₂烷基)-OR¹⁰；

R¹⁰、R¹¹和R¹²独立地是H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基，

或者R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成C₂-C₂₀杂环，所述杂环任选被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：氧代、(CH₂)_mOR¹²、NR¹²R¹²、CF₃、F、Cl、Br、I、SO₂R¹²、C(＝O)R¹²、NR¹²C(＝Y)R¹²、NR¹²S(O)₂R¹²、C(＝Y)NR¹²R¹²、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基；

R¹⁴和R¹⁵独立地选自H、C₁-C₁₂烷基或-(CH₂)_n-芳基，

或者R¹⁴和R¹⁵与它们所连接的原子一起形成饱和或部分不饱和的C₃-C₁₂碳环；

其中所述烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：F、Cl、Br、I、CN、CF₃、-NO₂、氧代、R¹⁰、-C(＝Y)R¹⁰、-C(＝Y)OR¹⁰、-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_nNR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_nOR¹⁰、-NR¹⁰R¹¹、-NR¹²C(＝Y)R¹⁰、-NR¹²C(＝Y)OR¹¹、-NR¹²C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹²SO₂R¹⁰、＝NR¹²、OR¹⁰、-OC(＝Y)R¹⁰、-OC(＝Y)OR¹⁰、-OC(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-OS(O)₂(OR¹⁰)、-OP(＝Y)(OR¹⁰)(OR¹¹)、-OP(OR¹⁰)(OR¹¹)、-SR¹⁰、-S(O)R¹⁰、-S(O)₂R¹⁰、-S(O)₂NR¹⁰R¹¹、-S(O)(OR¹⁰)、-S(O)₂(OR¹⁰)、-SC(＝Y)R¹⁰、-SC(＝Y)OR¹⁰、-SC(＝Y)NR¹⁰R¹¹、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基；

Y是O、S或NR¹²；

m是0、1、2、3、4、5或6；以及

n是1、2、3、4、5或6；

条件是，当R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹时，其中R¹⁴和R¹⁵独立地选自H或C₁-C₆烷基，m是0、1或2，且R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成具有3-20个环原子的含氮杂环，所述环任选如以上所定义地被取代，那么R³不是未取代或取代的吲哚基。

式Ia和Ib的化合物是区域异构体，即根据硫和氮在噻唑环***中的位置而不同。式Ia和Ib化合物的母体分子是：

权利要求1的化合物，其中R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹，其中m是1，且R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成选自吗啉基、哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基中的C₂-C₂₀杂环。C₂-C₂₀杂环可以被一个或多个选自以下的基团取代：NR¹²R¹²、CF₃、F、Cl、Br、I、SO₂R¹²、C(＝O)R¹²、NR¹²C(＝Y)R¹²、NR¹²S(O)₂R¹²、C(＝Y)NR¹²R¹²和C₁-C₁₂烷基。

在某些实施方案中，R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_nNR¹²S(O)₂R¹⁰，其中n是1或2；R¹²、R¹⁴和R¹⁵独立地选自H和C₁-C₁₂烷基；且R¹⁰是C₁-C₁₂烷基或C₆-C₂₀芳基。

在某些实施方案中，R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_nOR¹⁰，其中n是1或2，且R¹⁰、R¹⁴和R¹⁵独立地选自H和C₁-C₁₂烷基。

在某些实施方案中，R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_nS(O)₂R¹⁰，其中n是1或2，且R¹⁴和R¹⁵各自是H。R¹⁰可以是C₁-C₁₂烷基或C₆-C₂₀芳基。

在某些实施方案中，R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_nS(O)₂NR¹⁰R¹¹，其中n是1或2，且R¹⁴和R¹⁵是H。

在某些实施方案中，R¹是-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹，其中Y是O，且R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成C₂-C₂₀杂环。R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起可以形成选自吗啉基、哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基的C₂-C₂₀杂环。

在某些实施方案中，R¹是-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹，其中Y是O，且R¹⁰和R¹¹独立地选自H和C₁-C₁₂烷基。

在某些实施方案中，R¹是-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹，其中Y是O，且R¹⁰和R¹¹独立地选自H、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基。

在某些实施方案中，R¹是-NHR¹²，其中R¹²是C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基。R¹²可以是苯基或4-吡啶基。

在某些实施方案中，R¹是-NR¹²C(＝Y)R¹¹，其中Y是O，R¹²是H或C₁-C₁₂烷基，且R¹¹是C₁-C₁₂烷基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基。R¹¹包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、2，2-二甲基丙基和叔丁基。R¹¹还包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

在某些实施方案中，R¹是-NR¹²S(O)₂R¹⁰，其中R¹²是H或C₁-C₁₂烷基，且R¹⁰是C₁-C₁₂烷基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基。

在某些实施方案中，R¹是S(O)₂NR¹⁰R¹¹，其中R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成选自吗啉基、哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基的C₂-C₂₀杂环。

在某些实施方案中，R¹是S(O)₂NR¹⁰R¹¹，其中R¹⁰和R¹¹独立地选自H和C₁-C₁₂烷基。R¹⁰和R¹¹可以独立地选自H、取代的乙基和取代的丙基。

在某些实施方案中，R¹是C₂-C₁₂烷基。

在某些实施方案中，R¹是C₂-C₈烯基。

在某些实施方案中，R¹是C₂-C₈炔基。所述C₂-C₈炔基可以被C₂-C₂₀杂环基取代，所述杂环基包括但不限于吗啉基、哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基。

在某些实施方案中，R¹选自：

在某些实施方案中，R¹是C₆-C₂₀芳基，例如苯基。

在某些实施方案中，R¹是C₃-C₁₂碳环基。

在某些实施方案中，R¹是C₂-C₂₀杂环基。

在某些实施方案中，R¹是C₁-C₂₀杂芳基，例如2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基或5-嘧啶基。

在某些实施方案中，R³是选自以下结构的碳连接的单环杂芳基：

其中所述单环杂芳基任选被-个或多个选自以下的基团取代：F、Cl、Br、I、-NR¹⁰R¹¹、-OR¹⁰、-C(O)R¹⁰、-NR¹⁰C(O)R¹¹、-N(C(O)R¹¹)₂、-NR¹⁰C(O)NR¹⁰R¹¹、-C(＝O)OR¹⁰、-C(＝O)NR¹⁰R¹¹和C₁-C₁₂烷基。

在某些实施方案中，R³是选自以下结构的碳连接的单环杂芳基：

在某些实施方案中，R³选自以下结构：

在某些实施方案中，所述单环杂芳基被一个或多个选自以下的基团取代：F、-CF₃、-NH₂、-NHCH₃、-N(CH₃)₂、-OH、-OCH₃、-C(O)CH₃、-NHC(O)CH₃、-N(C(O)CH₃)₂、-NHC(O)NH₂、-CO₂H、-CHO、-CH₂OH、-C(＝O)NHCH₃、-C(＝O)NH₂和-CH₃。

R³的示例性实施方案包括但不限于：1H-吲唑、1H-吲哚、二氢吲哚-2-酮、1-(二氢吲哚-1-基)乙酮、1H-苯并[d][1，2，3]***、1H-吡唑并[3，4-b]吡啶、1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶、1H-苯并[d]咪唑、1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮、1H-吡唑并[3，4-c]吡啶、1H-吡咯并[2，3-c]吡啶、3H-咪唑并[4，5-c]吡啶、7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶、7H-嘌呤、1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶、5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶、2-氨基-1H-嘌呤-6(9H)-酮、喹啉、喹唑啉、喹喔啉、异喹啉、异喹啉-1(2H)-酮、3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮、3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮、喹唑啉-2(1H)-酮、喹喔啉-2(1H)-酮、1，8-萘啶、吡啶并[3，4-d]嘧啶和吡啶并[3，2-b]吡嗪。

R³基团与根据式Ia和Ib的嘧啶环的C-2位连接的连接部位可以在稠合双环C₃-C₂₀杂环基或稠合双环C₁-C₂₀杂芳基R³基团的任何碳(碳连接)原子处。

R³的示例性实施方案包括以下基团，其中波浪线表示连接于嘧啶环的部位：

其中所述波浪线表示连接部位。

R³的示例性实施方案包括稠合双环C₃-C₂₀杂环基和稠合双环C₁-C₂₀杂芳基，其包括以上例举的那些，被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：F、Cl、Br、I、CN、CF₃、-NO₂、氧代、-C(＝Y)R¹⁰、-C(＝Y)OR¹⁰、-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_nNR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_nOR¹⁰、-NR¹⁰R¹¹、-NR¹²C(＝Y)R¹⁰、-NR¹²C(＝Y)OR¹¹、-NR¹²C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-NR¹²SO₂R¹⁰、＝NR¹²、OR¹⁰、-OC(＝Y)R¹⁰、-OC(＝Y)OR¹⁰、-OC(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-OS(O)₂(OR¹⁰)、-OP(＝Y)(OR¹⁰)(OR¹¹)、-OP(OR¹⁰)(OR¹¹)、SR¹⁰、-S(O)R¹⁰、-S(O)₂R¹⁰、-S(O)₂NR¹⁰R¹¹、-S(O)(OR¹⁰)、-S(O)₂(OR¹⁰)、-SC(＝Y)R¹⁰、-SC(＝Y)OR¹⁰、-SC(＝Y)NR¹⁰R¹¹、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基、C₁-C₂₀杂芳基、-(CR¹⁴R¹⁵)_t-NR¹²C(＝O)(CR¹⁴R¹⁵)NR¹⁰R¹¹和(CR⁴R⁵)_t-NR¹⁰R¹¹。

在某些实施方案中，R³不是未取代或取代的吲哚基。

式Ia和Ib的化合物可以含有不对称或手性中心，因此以不同立体异构形式存在。本发明化合物的所有立体异构形式，包括但不限于非对映异构体、对映异构体和阻转异构体以及它们的混合物(如外消旋混合物)有意形成本发明的一部分。

另外，式Ia和Ib的化合物包括所有的几何和位置异构体。例如，如果式Ia和Ib的化合物包含双键或稠环，则它们的顺式、反式形式以及顺式和反式的混合物均包括在本发明的范围内。单一的位置异构体和位置异构体的混合物也均在本发明的范围内。

在本文所示结构式中，如果任何特定手性原子的立体化学没有被指明，那么考虑所有的立体异构体，并将之包括为本发明化合物。如果用表示特定构型的实心楔或短划线规定了立体化学，那么该立体异构体被这样规定和定义。

式Ia和Ib的化合物可以非溶剂化形式和含有药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等)的溶剂化形式存在，本发明有意包括溶剂化和非溶剂化形式。

式Ia和Ib的化合物还可以不同互变异构形式存在，所有这些形式均包括在本发明范围内。术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指经由低能垒相互转化的不同能量的结构异构体，例如，质子互变异构体(也称为质子移变互变异构体)包括经由质子迁移的相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。化合价互变异构体包括通过重新组织(reorganization)一些键合(bonding)电子而发生的相互转化。

本发明还包括同位素标记的式Ia和Ib的化合物，它们与本文所述那些相同，但实际上一个或多个原子被原子量或质量数与天然存在的原子量或质量数不同的原子替代。任何特定原子或元素的所有同位素被考虑在本发明化合物和它们的用途的范围内。可以并入本发明化合物的同位素实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，例如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³⁵S、¹⁸F、³⁶Cl、¹²³I和¹²⁵I。式Ia和Ib的某些同位素标记的化合物(例如用³H和¹⁴C标记的那些)有用于化合物和/或底物组织分布检测。氚化(³H)和碳-14(¹⁴C)同位素因其制备简单和可检测性而有用。此外，用诸如氘(即²H)的更重的同位素进行取代可以提供由更高的代谢稳定性而获得的某些治疗优点(例如增加体内半衰期或减小剂量要求)，因此在某些情况下可能是优选的。正电子发射同位素(例如¹⁵O、¹³N、¹¹C和¹⁸F)有用于正电子发射断层摄影术(PET)研究来检验底物受体占用率。同位素标记的式Ia或Ib的化合物一般可以按照类似于以下方案和/或实施例中所公开的那些的程序，通过用同位素标记的试剂替代非同位素标记的试剂来制备。式Ia和Ib的化合物的制备

可以通过包括类似于化学领域众所周知的那些方法的合成路线，尤其根据本文的说明来合成式Ia和Ib的化合物。原料一般可以从商业来源如AldrichChemicals(Milwaukee，WI)获得，或者使用本领域技术人员熟知的方法容易地制备(例如通过Louis F.Fieser和Mary Fieser，Reagents for Organic Synthesis，第1-19卷，Wiley，N.Y.(1967-1999ed.)或者Beilsteins Handbuch derorganischen Chemie，4，Aufl.编辑Springer-Verlag，Berlin，包括补充材料(也可以从Beilstein在线数据库获得)中描述的方法来制备)。

在某些实施方案中，可以使用众所周知的用于制备噻唑类、嘧啶类、噻唑并嘧啶类(US 6608053；US 6492383；US 6232320；US 6187777；US 3763156；US 3661908；US 3475429；US 5075305；US 2003/220365；GB1390658；GB1393161；WO 93/13664；)和其它杂环(其描述于Comprehensive HeterocyclicChemistry，Katritzky和Rees编辑，Pergamon Press，1984中)的程序来容易地制备式Ia或Ib的化合物。

式Ia和Ib的化合物可以单独制备或作为包含至少2种(例如5-1,000种或10-100种)化合物的化合物库来制备。可以通过本领域技术人员已知的程序，通过“分割和混合(‘split and mix’)”组合方法或者通过使用溶液相或固相化学的多个平行合成来制备式Ia或Ib的化合物库。因此，根据本发明的另一个方面，提供了包含至少2种化合物或其药学上可接受的盐的化合物库。

为了说明的目的，方案1-7示出了制备式Ia和Ib的化合物和关键中间体的一般方法。关于各个反应步骤的更详细说明，参见以下实施例部分。本领域技术人员将理解，可以使用其它合成路线来合成本发明化合物。虽然在以下方案中描述并且讨论了具体的原料和试剂，但可以容易地换用其它原料和试剂以提供各种衍生物和/或反应条件。另外，用下述方法制备的许多化合物可以根据本公开内容，使用本领域技术人员熟知的常规化学方法加以进一步修改。

在式Ia和Ib的化合物的制备中，中间体的远端官能团(remotefunctionality)(例如伯胺或仲胺)的保护可能是必需的。对此类保护的需要将取决于远端官能团的性质和制备方法的条件。合适的氨基保护基包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧羰基(BOC)、苄氧基羰基(CBz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)。本领域技术人员容易地确定对此类保护的需要。关于保护基及其用途的一般说明，参见T.W.Greene，Protective Groups in OrganicSynthesis，John Wiley & Sons，New York，1991。

方案1

方案1示出了从3-羧基酯，2-氨基噻唑80a和3-氨基，2-羧基酯噻唑80b制备噻唑并[5，4-d]嘧啶82a和噻唑并[4，5-d]嘧啶中间体82b的一般方法，其中Hal是Cl、Br或I；且R¹和R¹⁰如以上对于式Ia和Ib的化合物或其前体或前药所定义。

方案2

方案2示出了在碱性条件下，在有机溶剂中用吗啉分别从2，5-双卤代噻唑并嘧啶中间体83a和83b选择性置换5-卤素，以制备2-卤代，4-吗啉代噻唑并嘧啶化合物84a和84b的一般方法，其中Hal是Cl、Br或I；且R¹如以上对于式Ia和Ib的化合物或其前体或前药所定义。

方案3

方案3示出了对5-卤素，7-吗啉代，2-氢噻唑并嘧啶化合物85a和85b(R¹是H)的2-位进行衍生化的一般方法。用锂化试剂处理85a或85b，以除去2位质子，随后加入酰化试剂R¹⁰C(O)Z，其中Z是离去基团，如卤素、NHS酯、羧酸根或二烷基氨基，获得5-卤素，7-吗啉代，2-酰基噻唑并嘧啶化合物86a和86b，其中Hal是Cl、Br或I；且R¹⁰如以上对于式Ia和Ib的化合物或其前体或前药所定义。制备2-甲酰基化合物(R¹⁰＝H)的R¹⁰C(O)Z的实例是N，N’-二甲基甲酰胺(DMF)。

方案4

方案4示出了使5-卤代噻唑并嘧啶中间体(87a和87b)与单环杂芳基、稠合双环杂环或稠合双环杂芳基硼酸(R¹⁵＝H)或酯(R¹⁵＝烷基)试剂(Hy-B(OR¹⁵)₂)进行铃木(Suzuki)型偶合，以制备式Ia和Ib的5-单环杂芳基、5-稠合双环杂环或5-稠合双环杂芳基(Hy)，7-吗啉代噻唑并嘧啶化合物(88a和88b)的一般方法，其中Hal是Cl、Br或I；且R¹如以上对于式Ia和Ib的化合物或其前体或前药所定义。关于铃木反应的综述，参见Miyaura等人，(1995)Chem.Rev.95：2457-2483；Suzuki，A.(1999)J.Organomet.Chem.576：147-168；Suzuki，A.，in Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions，Diederich，F.，Stang，P.J.编辑，VCH，Weinheim，DE(1998)，第49-97页。钯催化剂可以是通常用于铃木类型的交叉偶合的任何催化剂，例如PdCl₂(PPh₃)₂、Pd(PPh₃)₄、Pd(OAc)₂、PdCl₂(dppf)-DCM、Pd₂(dba)₃/Pt-Bu)₃(Owens等人，(2003)Bioorganic & Med.Chem.Letters 13：4143-4145；Molander等人，(2002)Organic Letters 4(11)：1867-1870；US 6448433)。

通常，式Ia或式Ib的化合物可以通过以下方法制备：所述方法包括使式IIa或式IIb的化合物与含有单环杂芳基、稠合双环杂环或稠合双环杂芳基的硼酸酯化合物反应：

从而形成式Ia和式Ib的化合物。

方案5

方案5示出了制备炔基化合物90a和90b的一般方法。可以通过在适当的碱(Cs₂CO₃等)的存在下，使炔丙基溴与式R¹⁰R¹¹NH的胺(其中R¹⁰和R¹¹独立地选自H、烷基、芳基和杂芳基，或者R¹⁰和R¹¹与它们连接的氮原子一起形成杂环)反应来制备炔丙基胺。关于炔基胺和相关合成的综述，参见Booker-Milburn，K.I.，Comprehensive Organic Functional GroupTransformations(1995)，2：1039-1074；以及Viehe，H.G.，(1967)Angew.Chem.，Int.Ed.Eng.，6(9)：767-778。炔可以随后与中间体89a或89b(X²＝溴或碘)通过Sonogashira偶合来进行反应，以分别提供炔基化化合物90a和90b，其中R³如以上对于式Ia和Ib化合物或其前体或前药所定义。

方案6

方案6示出了合成炔基化合物92a和92b的一般方法。可以使用Zaragoza等人，(2004)J.Med.Chem.，47：2833中所述的方法来制备偕二烷基炔丙基胺。可使偕二烷基氯(R¹⁴和R¹⁵独立地是甲基、乙基或其它烷基)与式R¹⁰R¹¹NH的胺(其中R¹⁰和R¹¹独立地选自H、烷基、芳基和杂芳基，或者R¹⁰和R¹¹与它们连接的氮原子一起形成杂环)在CuCl和适当的碱(例如TEA等)的存在下反应，以提供炔丙类炔烃(propargylic alkyne)。炔丙类炔烃可以分别与中间体91a或91b通过Sonogashira偶合来反应，以获得化合物92a和92b，其中R³如以上对于式Ia和Ib的化合物或其前体或前药所定义。

方案7

方案7示出了制备丁炔基化化合物94a和94b的一般方案。可以使用Olomucki M.等人(1960)Ann.Chim.5：845所述的规程，通过使炔烃(LG＝甲苯磺酸基(tosylate)或其它离去基团)与式R¹⁰R¹¹NH的胺(其中R¹⁰和R¹¹独立地选自H、烷基、芳基和杂芳基，或者R¹⁰和R¹¹与它们连接的氮原子一起形成杂环)反应来制备丁-3-炔-1-胺(其中R¹⁴和R¹⁵独立地是H、烷基、芳基、杂芳基，或者R¹⁴和R¹⁵与它们连接的碳原子一起形成碳环或杂环)。丁-3-炔-1-胺随后可以与中间体93a或93b通过Sonogashira偶合，按照对方案5和6所提供的说明进行反应，分别提供化合物94a和94b，其中R³如以上对于式Ia和Ib的化合物或其前体或前药所定义。

分离方法

在制备本发明的化合物的方法中，可以有利地将反应产物相互分离和/或与原料分离。通过本领域的常用技术将每一步骤或每一系列步骤的所需产物分离和/或纯化(下文称为“分离”)至所需的均匀程度。通常，此类分离涉及多相萃取、从溶剂或溶剂混合物中结晶、蒸馏、升华或色谱。色谱可以涉及许多方法，包括例如反相和正相色谱；尺寸排阻色谱；离子交换色谱；高、中和低压液相色谱方法和装置；小规模分析；模拟移动床(SMB)和制备性薄层或厚层色谱法以及小规模薄层和快速(flash)色谱技术。

另一类分离方法涉及用试剂处理混合物，所述试剂选择为与所需产物、未反应的原料、反应副产物等结合或者在其它情况下可分离(otherwiseseparable)。此类试剂包括吸附剂或吸收剂，例如活性炭、分子筛、离子交换介质等。或者，该试剂在碱性材料的情况下可以是酸，在酸性材料的情况下可以是碱，还可以是结合试剂，例如抗体、结合蛋白、选择性螯合剂例(如冠醚)、液/液离子萃取试剂(LIX)等。

适当的分离方法的选择取决于所涉及的材料的性质，例如，蒸馏和升华时的沸点和分子量，色谱中的极性官能团的有或无，多相萃取中的材料在酸性和碱性介质中的稳定性等。本领域技术人员将应用最可能实现所需分离的技术。

可以通过本领域技术人员熟知的方法(例如通过色谱和/或分级结晶)基于它们的物理化学差别，将非对映异构体混合物分离为它们的单独的非对映异构体。可以通过以下方法分离对映异构体：通过与适当的旋光化合物(例如手性助剂，如手性醇或Mosher’酰氯)反应将对映异构体混合物转化为非对映异构体混合物，分离非对映异构体并将单独非对映异构体转化(例如水解)为相应的纯对映异构体。另外，一些式Ia和Ib的化合物可以是阻转异构体，并且被认为是本发明的一部分。还可以使用手性HPLC柱来分离对映异构体。

单一立体异构体(例如基本上不含其立体异构体的对映异构体)可以通过使用诸如用旋光活性拆分剂形成非对映异构体的方法拆分外消旋混合物来获得(Eliel，E.和Wilen，S.″有机化合物的立体化学(Stereochemistry ofOrganic Compounds)，″John Wiley & Sons，Inc.，New York，1994；Lochmuller，C.H.，(1975)J.Chromatogr.，113(3)：283-302)。本发明的手性化合物的外消旋混合物可以通过任何合适的方法分离，所述方法包括：(1)与手性化合物形成离子型非对映异构体盐，并通过分级结晶或其它方法分离，(2)用手性衍生化试剂形成非对映异构体化合物，将所述非对映异构体分离，并转化为纯的立体异构体，以及(3)直接在手性条件下分离基本纯的或富集的立体异构体。参见：“药物立体化学、分析方法和药理学(Drug Stereochemistry，Analytical Methods and Pharmacology)”，Irving W.Wainer，Ed.，MarcelDekker，Inc.，New York(1993)。

在方法(1)中，可通过对映异构体纯(enantiomerically pure)的手性碱(例如马钱子碱、奎宁、麻黄素、***、α-甲基-β-苯基乙基胺(苯异丙胺)等)与带有酸性官能团的不对称化合物(如羧酸和磺酸)反应而形成非对映异构体盐。非对映异构体盐可通过分级结晶或离子色谱法分离。为了分离氨基化合物的旋光异构体，加入手性羧酸或磺酸(如樟脑磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸)，可导致形成非对映异构体盐。

或者通过方法(2)，使待拆分的底物与手性化合物的一种对映异构体反应，以形成非对映异构体对(E.and Wilen，S.“有机化合物的立体化学(Stereochemistry of Organic Compounds)”，John Wiley & Sons，Inc.，1994，第322页)。可以通过使不对称化合物与对映异构体纯的手性衍生化试剂(如薄荷基衍生物)反应来形成非对映异构体化合物，随后分离非对映异构体并水解，获得纯的或富集的对映异构体。测定光学纯度的一种方法涉及制备外消旋混合物的手性酯，例如薄荷酯(例如在碱的存在下的(-)氯甲酸薄荷酯)或Mosher酯、乙酸α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯酯(Jacob III.J.Org.Chem.，(1982)47：4165)，并对关于两种阻转对映异构体或非对映异构体的存在的¹H NMR波谱进行分析。可以按照分离阻转异构体萘基-异喹啉的方法(WO96/15111)，通过正相和反相色谱来分离阻转异构体化合物的稳定的非对映异构体。通过方法(3)，可以通过使用手性固定相的色谱将两种对映异构体的外消旋混合物分离(″Chiral Liquid Chromatography″(1989)W.J.Lough编辑，Chapmanand Hall，New York；Okamoto，J.Chromatogr.，(1990)513：375-378)。富集的或纯化的对映异构体可以通过用于区分具有不对称碳原子的其它手性分子的方法来区分，例如旋光度和圆二色性。

生物学评价

有可能通过许多直接和间接的检测法来测定式Ia或Ib化合物对PI3激酶活性的活性。对本文所述的某些示例性化合物进行制备、表征，并且分析了它们的PI3K结合活性(实施例73和74)和体外抗肿瘤细胞活性(实施例75)。PI3K结合活性的范围为小于1nM(纳摩尔)到大约10μM(微摩尔)。本发明的某些示例性化合物具有小于10nM的PI3K结合活性IC₅₀值。本发明的某些化合物具有小于100nM的基于肿瘤细胞的活性IC₅₀值。

式Ia和Ib化合物可以作为泛抑制剂抑制p110催化亚单位同工型，包括α、β、γ和δ型。某些式Ia和Ib化合物可以是通过选择性抑制p110同工型α、β、γ或δ型之一的p110同工型选择性抑制剂。本发明的一个实施方案是式Ia或Ib的化合物，其为p110α选择性抑制剂。P110选择性抑制剂可以减轻由于抑制其它p110同工型相关的潜在毒性所造成的毒性风险。某些式Ia和Ib化合物可以是与两种或更多种p110同工型显著结合的p110同工型泛抑制剂。本发明的一个实施方案是式Ia或Ib化合物，其为PI3K泛抑制剂。

通过闪烁亲近测定法(SPA)测量表1中的式Ia和Ib的化合物与p110同工型α、β、δ和γ的纯化制剂的结合，以测定结合活性(IC₅₀μMol)以及β、δ和γ同工型相对于α同工型的结合选择性(实施例74)。

式Ia和Ib的示例性化合物的细胞毒或细胞静止(cytostatic)活性通过以下方法来测定：在细胞培养基中建立正在增殖的哺乳动物肿瘤细胞系，加入式Ia或Ib的化合物，将细胞培养大约6小时到大约5天的时期；测定细胞生存力(实施例75)。使用基于细胞的体外试验来测定生存力，即，增殖(IC₅₀)、细胞毒性(EC₅₀)和细胞凋亡的诱导(胱冬酶活化)。

式Ia和Ib的示例性化合物的体外效力通过针对几种肿瘤细胞系(包括PC3、Detroit 562和MDAMB361.1)的细胞增殖试验，购自Promega Corp.，Madison，WI的CellTiter-Glo发光法细胞活力试验(Luminescent CellViability Assay)来测定(实施例75)。建立试验化合物的EC₅₀值。体外细胞效力活性的范围是大约100nM到大约10μM。该均匀试验方法基于鞘翅目(Coleoptera)荧光素酶的重组表达(US 5583024；US 5674713；US 5700670)，并基于所存在的ATP(代谢活性细胞的指示物)的定量来测定培养基中的存活细胞数(Crouch等人，(1993)J.Immunol.Meth.160：81-88；US 6602677)。CellTiter-Glo

试验在96或384孔格式中进行，使得可以进行自动化高通量筛选(HTS)(Cree等人，(1995)Anticancer Drugs 6：398-404)。均匀试验程序涉及将单一试剂(CellTiter-Glo

试剂)直接加入到补充有血清的培养基中培养的细胞中。不需要细胞洗涤、去除培养基和多个移液步骤。384孔格式中，该***可以在加入试剂并混合之后10分钟内检测到少达15个细胞/孔。

均匀的“加入-混合-测量(add-mix-measure)”的格式导致细胞裂解以及产生与ATP存在量成比例的发光信号。ATP的量与培养基中存在的细胞数成正比。CellTiter-Glo

试验产生了“辉光型(glow-type)”发光信号，通过荧光素酶反应而形成，它具有通常大于5小时的半衰期，这取决于细胞类型和所使用的培养基。存活细胞反映在相对发光单位(RLU)上。底物、甲虫荧光素通过重组萤火虫荧光素酶进行氧化脱羧，伴随着ATP转化为AMP并产生光子。延长的半衰期不需要使用试剂注射器并提供多板连续或间歇模式处理的灵活性。该细胞增殖试验可以按各种多孔格式，例如96或384孔格式使用。可以用光度计或CCD照相机成像装置来记录数据。发光输出表示为随时间测定的相对光单位(RLU)。

通过以下试验测定某些示例性化合物的某些ADME性质：Caco-2渗透性(实施例76)、肝细胞清除(实施例77)、细胞色素P450抑制(实施例78)、细胞色素P450诱导(实施例79)、血浆蛋白结合(实施例80)和hERG通道阻断(实施例81)。

根据本发明的方法制备的示例性式Ia和Ib的化合物No.101-147包括表1中的以下结构及其相应的名称(ChemDraw Ultra，CambridgeSoft Corp.，Cambridge MA)。

表1

式Ia和Ib的化合物的给药

可以通过任何适于所治疗的病症的途径给予本发明化合物。适合的途径包括口服、胃肠外(包括皮下、肌内、静脉内、动脉内、皮内、鞘内和硬膜外)、透皮、直肠、经鼻、局部(包括经颊和舌下)、***、腹膜内、肺内和鼻内。对于局部免疫抑制治疗，可通过损害内(intralesional)给予所述化合物，包括灌注或者使移植物与抑制剂在移植之前进行其他形式接触。应该理解，优选的途径可以随着例如接受者的状态而改变。在口服给予化合物时，该化合物可以与药学上可接受的载体或赋形剂配制为丸剂、胶囊、片剂等。在胃肠外给予化合物时，该化合物可以与药学上可接受的胃肠外载体配制为单位剂量注射形式(unit dosage injectable form)，如下所详述。

治疗病人的剂量可以是大约10mg到大约1000mg的式Ia或Ib的化合物。典型剂量可以是大约100mg到大约300mg的化合物。可以一天一次(QID)、每天两次(BID)或者更频繁地给予某一剂量，这取决于特定化合物的药代动力学和药效性质，包括吸收、分布、代谢和***。另外，毒性因素可能影响剂量和给药方案。当口服给药时，可以在规定的时期内每日或以更低频率摄取丸剂、胶囊或片剂。该方案可以重复多个治疗周期。

用式Ia和Ib的化合物治疗的方法

式Ia和Ib的化合物有用于治疗疾病、病症和/或障碍(包括但不限于以过表达脂质激酶(例如PI3激酶)为特征的那些)。因此，本发明的另一个方面包括治疗或预防疾病或病症的方法，所述疾病或病症可以通过抑制包括PI3的脂质激酶来治疗或预防。在一个实施方案中，该方法包括对需要其的哺乳动物给予治疗有效量的式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐。式Ia和Ib的化合物可用来治疗过度增殖性疾病或病症，包括肿瘤、癌症和新生组织以及癌前和非肿瘤或非恶性过度增殖性疾病。在一个实施方案中，病人用式Ia和Ib的化合物和药学上可接受的载体、佐剂或载体治疗，其中所述式Ia或Ib的化合物以可检测到抑制PI3激酶活性的量存在。

可以根据本发明方法治疗的癌症包括但不限于乳腺癌、卵巢癌、***、***癌、睾丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、成胶质细胞瘤、神经母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤(keratoacanthoma)、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤(adenoma)、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡状癌、未分化癌、***状癌、***瘤、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、骨髓病、淋巴疾病、毛细胞癌、口腔和咽(口)癌、唇癌、舌癌、口癌、咽癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑和中枢神经***癌症、霍奇金病和白血病。

本发明的另一个方面提供了用于对遭受此类疾病或病症的哺乳动物(例如人)治疗本文所述疾病或病症的本发明化合物。还提供了本发明化合物在制备治疗诸如哺乳动物(例如人)的温血动物的本文所述疾病和病症的药物中的用途。药物制剂

为了使用本发明化合物治疗性治疗(包括预防性治疗)包括人在内的哺乳动物，通常根据标准制药实践将其配制为药物组合物。根据本发明的该方面，提供了包含本发明化合物以及药学上可接受的稀释剂或载体的药物组合物。药物制剂包括适合于本文所详述的给药途径的那些制剂。所述制剂可以便利地以单位剂量形式存在，并且可以通过制药领域中熟知的任何方法来制备技术和制剂一般记载于“雷明登氏制药科学(Remington′s Pharmaceutical Sciences)”(MackPublishing Co.，Easton，PA)中。此类方法包括将活性成分与构成一种或多种辅助成分的载体混合的步骤。通常，通过将活性成分与液体载体或细碎固体载体或二者均匀且充分混合，然后如果需要将该产物成形来制备所述制剂。

通过将式Ia或Ib的化合物与载体、稀释剂或赋形剂混合来制备典型的制剂。合适的载体、稀释剂和赋形剂是本领域技术人员所熟知的，包括诸如碳水化合物、蜡、水溶性和/或水溶胀性聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等材料。所使用的特定载体、稀释剂或赋形剂取决于施用式Ia或Ib的化合物的方法和目的。一般基于本领域技术人员公认对哺乳动物施用安全(GRAS)的溶剂来选择溶剂。通常，安全的溶剂是无毒的含水溶剂，例如水和其它在水中可溶或混溶的无毒溶剂。合适的含水溶剂包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如PEG400、PEG300)等和它们的混合物。所述制剂还可以包括一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、不透明剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、香味剂、矫味剂和其它已知的添加剂，以提供优美表观的药物(即，Ia或Ib的化合物或其药物组合物)或者有助于制造药物产品(即药物)。

可以使用常规的溶解和混合程序来制备制剂。例如，在一种或多种上述赋形剂的存在下，将松散的(bulk)药物物质(即Ia或Ib的化合物或稳定形式的该化合物(例如与环糊精衍生物或其它已知复合剂的复合物)溶于合适的溶剂中。通常将Ia或Ib的化合物配制成药物剂型，以提供容易控制的药物剂量，且能够使患者依从处方方案。

可以用各种方式包装用于施用的药物组合物(或制剂)，这取决于用于给予药物的方法。通常，分销的制品包括容器，药物制剂以适当的形式存放在容器内。合适的容器是本领域技术人员所熟知的，包括诸如瓶子(塑料和玻璃)、小袋、安瓿、塑料袋、金属圆筒等材料。该容器还可以包括防干扰组装(tamper-proof assemblage)，以防止不慎接触包装的内容物。另外，该容器上设有说明容器内容物的标签。该标签还可以包括适当的警告。

可以制备Ia或Ib的化合物的药物制剂以用于各种给药途径和类型。例如，具有所需纯度的化合物可以任选与药学上可接受的稀释剂、载体、赋形剂或稳定剂(雷明登氏制药科学(Remington′s Pharmaceutical Sciences)(1980)第16版，Osol，A.编辑)混合为冻干制剂、碾碎粉末或水溶液的形式。可以通过在环境温度下，于适当的pH下，以所需的纯度与药学上可接受的载体(即，在所用剂量和浓度下对接受者无毒的载体)混合来进行配制。用于体内给药的制剂必需是灭菌的。通过无菌过滤膜过滤容易地实现此类灭菌。制剂通常可以作为固体组合物、冻干制剂或水溶液加以保存。

作为一般建议，每剂量胃肠外给予的抑制剂的初始药学有效量是在大约0.01-100mg/kg的范围内，即大约0.1-20mg/kg患者体重/天，典型的化合物初始用量范围是0.3-15mg/kg/天。

可接受的稀释剂、载体、赋形剂和稳定剂在所用剂量和浓度下对接受者无毒，其包括缓冲剂，如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨酸；防腐剂(例如十八烷基二甲基苄基氯化铵；六甲氯铵；苯扎氯铵；苄索氯铵；苯酚、丁基或苄基醇；对羟基苯甲酸烷基酯，例如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，例如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，如EDTA；糖类，如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；成盐抗衡离子，例如钠；金属络合物(例如Zn蛋白络合物)；和/或非离子表面活性剂，例如TWEEN^TM、PLURONICS^TM或聚乙二醇(PEG)。活性药物成分还可以装入到微胶囊中(所述微胶囊例如分别通过凝聚技术或通过界面聚合制备，如羟甲基纤维素或明胶微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊制备)、胶体药物递送***中(例如脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米颗粒和纳米胶囊)或粗滴乳状液中。此类技术公开于雷明登氏制药科学(Remington′sPharmaceutical Sciences)，第16版，Osol，A.编辑(1980)中。

可以制备式Ia和Ib化合物的缓释制剂。缓释制剂的合适实例包括含有式Ia或Ib化合物的固体疏水性聚合物的半渗透性基质，该基质为成形制品的形式，例如薄膜或微胶囊。缓释基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸酯)或聚乙烯醇)、聚丙交酯(US 3,773,919)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物(例如LUPRON DEPOT^TM(包含乳酸-乙醇酸共聚物和乙酸亮丙瑞林的可注射微球))和聚-D-(-)3-羟基丁酸。

适于口服给药的式Ia或Ib的化合物的制剂可制备为离散(discrete)的单位，例如丸剂、胶囊、扁囊剂或片剂，其各自含有预定量的式Ia或Ib的化合物。压制片剂可以通过在合适的机器中压缩任选与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂混合的自由流动形式(如粉末或颗粒)的活性成分来制备。模制片剂可以通过在合适的机器中模压用惰性液体稀释剂润湿的粉状活性成分的混合物来制备。可任选将片剂包衣或划痕，并任选进行配制，以致提供从其中缓释或控释活性成分。可以制备片剂、锭剂、糖锭、水性或油性混悬剂、分散性粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊(例如明胶胶囊)、糖浆或酏剂，用于口服使用。有意用于口服使用的式Ia或Ib的化合物的制剂可以根据本领域已知用于制备药物组合物的任何方法来制备，此类组合物可以含有一种或多种试剂，包括甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以便提供适口的制剂。含有与适于制造片剂的无毒药学上可接受的赋形剂混合的活性成分的片剂是可接受的。这些赋形剂例如可以是惰性稀释剂，例如碳酸钙或碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或***树胶；以及润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是未包衣的或者可以用已知技术(包括微胶囊包封)进行包衣，以延缓在胃肠道中的崩解和吸收，从而提供长时期的持续作用。例如，可以使用延时材料，例如单独使用的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯或其与蜡一起使用。

为了治疗眼睛或其它外部组织(例如口和皮肤)，所述制剂优选以含有其量例如为0.075-20％w/w的活性成分的局部用软膏或乳膏施用。当在软膏中配制时，活性成分可以与石蜡基或水混溶性软膏基质一起使用。或者，活性成分可以用水包油乳膏基质在乳膏中配制。乳膏基质的水相可以包括多元醇，即具有两个或多个羟基的醇，例如丙二醇、1，3-丁二醇、甘露醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇(包括PEG400)和它们的混合物。局部制剂可以理想地包含增强活性成分通过皮肤或其它受影响区域的吸收或渗透的化合物。此类皮肤渗透增强剂的实例包括二甲亚砜和相关类似物。

本发明的乳剂的油相可由已知成分以已知方式组成。虽然该相可以只包含乳化剂，但它理想地包含至少一种乳化剂与脂肪或油或脂肪和油二者的混合物。优选地，亲水性乳化剂与用作稳定剂的亲脂性乳化剂一起包含在内。还优选包含油和脂肪两者。乳化剂与或不与稳定剂一起组成所谓的乳化蜡，而该蜡与油和脂肪一起组成所谓的乳化软膏基质，这形成了乳膏制剂的含油分散相。适用于本发明制剂的乳化剂和乳液稳定剂包括Tween

60、Span

80、鲸蜡硬脂醇、苄醇、肉豆蔻醇、甘油单硬脂酸酯和月桂基硫酸钠。

式Ia或Ib的化合物的水性混悬液含有与适用于制备水性混悬液的赋形剂混合的活性物质。此类赋形剂包括悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素、聚维酮、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪胶和***树胶；以及分散剂或润湿剂，例如天然存在的磷脂(例如卵磷脂)、烯化氧与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧化乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物(例如十七氧化乙烯鲸蜡醇)、环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯(partial ester)的缩合产物(例如聚氧化乙烯脱水山梨醇单油酸酯)。水性混悬液还可以含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯；一种或多种着色剂；一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂，例如蔗糖或糖精。

式Ia或Ib的化合物的药物组合物可以是无菌注射制剂的形式，例如无菌注射水性或油性混悬液。可以根据现有技术使用以上提到的那些适合的分散剂或润湿剂和悬浮剂来配制该混悬液。无菌注射制剂还可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬液(例如1，3-丁二醇中的溶液)，或者制备为冻干粉。能够使用的可接受赋形剂和溶剂包括水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌固定油可以常规用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可以使用任何温和的固定油，包括合成的单甘油酯或二甘油酯。另外，脂肪酸(例如油酸)可以同样在注射制剂中使用。

可以与载体材料混合以产生单剂型的活性成分的量将根据所治疗的主体和具体的给药模式而变化。例如，有意用于对人口服给予的缓释(time-release)制剂可以含有大约1-1000mg活性物质与适当且便利的量的载体物质，所述载体物质的量可以在组合物总量的约5％到约95％(重量：重量)之间变化。可制备该药物组合物，以提供容易测定的给药量。例如，有意用于静脉内输注的水溶液可以含有约3到500μg的活性成分/毫升溶液，以便能够以大约30mL/hr的速率输注适当的量。

适于胃肠外给药的制剂包括水性和非水性无菌注射溶液，其可以含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使配制剂与目的接受者的血液等渗的溶质；以及可以包括悬浮剂和增稠剂的水性和非水性无菌混悬液。

适于对眼局部施用的制剂还包括滴眼剂，其中将活性成分溶于或悬浮于适合的载体，尤其用于活性成分的含水溶剂中。活性成分优选以约0.5-20％w/w，例如约0.5-10％w/w(例如约1.5％w/w)的浓度存在于此类制剂中。

适于口内局部给药的制剂包括在增香基质(通常为蔗糖和***树胶或黄蓍胶)中含有活性成分的锭剂；在惰性基质(例如明胶和甘油，或者蔗糖和***树胶)中含有活性成分的软锭剂；以及在适合的液体载体中含有活性成分的漱口剂。

用于直肠给药的制剂可以具有适合基质的栓剂存在，所述基质例如包括可可脂或水杨酸酯/盐。

适于肺内给药或经鼻给药的制剂具有例如0.1-500微米的粒度(包括在0.1-500微米范围内的以例如0.5、1、30微米、35微米等增量的粒度)，它通过鼻道快速吸入或者通过口吸入来给药，以便到达肺泡囊。适合的制剂包括活性成分的水溶液或油溶液。适于气雾剂或干粉给药的制剂可以根据常规方法制备，且可以与其它治疗剂(例如前文用于治疗或预防如下所述病症的化合物)一起递送。

适于***给药的制剂可以***栓剂、棉塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫或喷雾制剂存在，除了活性成分，其含有诸如本领域已知是适当的载体。

制剂可包装于单位剂量或多剂量容器(例如密封安瓿和管形瓶)内，并且可在冷冻干燥(冻干)条件下储存，在紧邻使用之前仅需要加入无菌液体载体(例如水)，用于注射。从前述类型的无菌粉末、颗粒和片剂制备即用注射溶液和混悬液。优选的单位剂量制剂是含有如上所述的日剂量或单位每日亚剂量(unit daily sub-dose)或者其适当部分的活性成分的那些制剂。

因此本发明进一步提供包含至少一种如上所定义的活性成分与兽药载体的兽药组合物。兽药载体是用于给予组合物目的的材料，可以是固体、液体或气体材料，其另外是惰性的或者在兽药领域可接受的，并且与活性成分相容。这些兽药组合物可以胃肠外、口服或其它希望的途径给药。

联合治疗

式Ia和Ib的化合物可以单独使用或与其它治疗本文所述的疾病或病症(如过度增殖性疾病(例如癌症))的治疗剂联合使用。在某些实施方案中，式Ia或Ib的化合物在药物联合制剂或者作为联合治疗的定量给药方案中与具有抗过度增殖性质或者可用于治疗过度增殖性病症(例如癌症)的第二化合物组合。药物联合制剂或者定量给药方案的第二化合物优选具有与式Ia或Ib的化合物互补的活性，以使它们不会相互产生不利影响。此类化合物适合以有效用于预期目的的量联合存在。在一个实施方案中，本发明的组合物包含式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药以及如本文所述的化疗剂。

联合治疗可以同时或按序方案施用。当按序给药时，该联合治疗剂可以按两次或多次给予。联合给药包括使用独立的制剂或者单一药物制剂的同时给药以及按任意顺序的连续给药，其中优选存在其中两种(或全部)活性剂同时发挥其生物活性的时段。

以上任何同时给予的药剂的适宜剂量是目前使用的剂量，并且可以由于新确定的药剂和其它化疗剂或治疗的联合作用(协同)而降低。

联合治疗可以提供“协同作用”，证明具有“协同性”，即，当活性成分一起使用时所获得的效果大于单独使用各化合物所获得的效果的总和。当活性成分处于以下情况时可以获得协同效果：(1)在联合单位剂量制剂中共同配制并同时给予或递送；(2)以单独制剂形式交替或平行递送；或者(3)通过某些其它方案。在交替治疗中递送时，当按序给予或递送(例如通过用分开的注射器进行不同注射)化合物时，可以获得协同效果。一般地，在交替治疗过程中，按序(即，连续)给予有效剂量的每一种活性成分，而在联合治疗中，一起给予有效剂量的两种或更多种活性成分。

在抗癌治疗的具体实施方案中，式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药可以与诸如本文所述那些的其它化疗剂、激素或抗体药剂联合以及与手术治疗和放疗联合。根据本发明的联合治疗因此包括给予至少一种式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药以及使用至少一种其它癌症治疗方法。对式Ia或Ib的化合物和其它药学活性化疗剂的量以及相对给药时机(relative timings of administration)进行选择，以便获得所需的联合治疗效果。

式Ia和Ib的化合物的代谢物

本文所述式Ia和Ib的化合物的体内代谢产物也落入本发明的范围内。此类产物可以例如从被给予的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺基、酯化、脱酯、酶促裂解等获得。因此，本发明包括式Ia和Ib的化合物的代谢物，包括通过包括使本发明化合物与哺乳动物接触足够长的时间以获得其代谢产物的方法所产生的化合物。

代谢产物一般通过下列方式鉴定：制备本发明化合物的放射性标记(例如¹⁴C或³H)同位素，以可检测的剂量(例如高于约0.5mg/kg)胃肠外将其给予诸如大鼠、小鼠、豚鼠、猴或人的动物，允许足够时间发生代谢(通常大约30秒至30小时)，从尿、血液或其它生物样品中分离出其转化产物。这些产物容易分离，因为它们被标记(其它通过使用能够与代谢物中存留的表位结合的抗体来分离)。用常规方式(例如通过MS、LC/MS或NMR分析)来确定代谢物结构。一般地，代谢物的分析以与本领域技术人员熟知的常规药物代谢研究相同的方式进行。只要代谢产物不另外(otherwise)在体内被发现，就有用于对本发明化合物的治疗剂量的诊断分析。

制品

在本发明的另一个实施方案中，提供了含有用于治疗上述疾病或病症的物料的制品或“试剂盒”。在一个实施方案中，所述试剂盒包含容纳式Ia或Ib的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物或药学上可接受的盐或前药的容器。该试剂盒可进一步包含在容器上或与容器相随的标签或包装插页(package insert)。术语“包装插页”用于表示通常在治疗产品的商业包装中包含的说明书，其含有关于使用此类治疗产品的指示、用法、剂量、给药、禁忌症和/或告诫的信息。合适的容器例如包括瓶、管形瓶、注射器、泡罩包装(blister pack)等。该容器可以由各种材料(例如玻璃或塑料)制成。该容器可装有有效治疗疾病的式Ia或Ib的化合物或其制剂，可以具有无菌进入口(例如，该容器可以是具有可被皮下注射针刺穿的塞子的静脉溶液袋或管形瓶)。组合物中的至少一种活性剂是式Ia或Ib的化合物。标签或包装插页指出，该组合物用于治疗所选择的病症，例如癌症。另外，标签或包装插页可以指出，所治疗的患者是患有过度增殖性疾病、神经变性、心脏肥大、疼痛、偏头痛或神经外伤疾病或事件的患者。在一个实施方案中，标签或包装插页指出，含有式Ia或Ib的化合物的组合物可以用于治疗由异常细胞生长所导致的病症。标签或包装插页还可以指出，该组合物可以用于治疗其它病症。作为替代，或者另外，该制品可进一步包含容纳药学上可接受的缓冲剂的第二容器，所述缓冲剂例如是抑菌注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏液和葡萄糖溶液。它可以进一步包含从商业和用户角度上需要的其它物料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头和注射器。

该试剂盒可以进一步包含式Ia或Ib的化合物以及第二药物制剂(如果存在)的给药说明书。例如，如果该试剂盒包含含有式Ia或Ib的化合物的第一组合物以及第二药物制剂，则该试剂盒可进一步包含将第一和第二药物组合物同时、按序或单独给予需要其的患者的说明书。

在另一个实施方案中，所述试剂盒适于递送固体口服形式的式Ia或Ib的化合物，例如片剂或胶囊。此类试剂盒优选包括若干单位剂量。此类试剂盒可包含记载有按其预定使用顺序排列的剂量的卡片。此类试剂盒的实例是“泡罩包装”。泡罩包装在包装工业中是众所周知的，广泛用于包装药物单位剂型。如果需要，可以提供记忆辅助手段，例如以数字、字母或其它标记的形式，或使用日历插页，其指明可以给予剂量的治疗时间表中的日子。

根据一个实施方案，试剂盒可包含(a)其中容纳式Ia或Ib化合物的第一容器；和任选的(b)其中容纳第二药物制剂的第二容器，其中第二药物制剂包含具有抗过度增殖活性的第二化合物。作为替代或另外，该试剂盒可进一步包含容纳药学上可接受的缓冲剂(如抑菌注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏液和葡萄糖溶液)的第三容器。它可以进一步包含从商业和用户角度上需要的其它物料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头和注射器。

在其中试剂盒包含式Ia或Ib的化合物与第二治疗剂的组合物的某些其它实施方案中，该试剂盒可以包含用于容纳单独组合物的容器，例如分开的瓶子或分开的箔包装，然而，各单独组合物还可以容纳在单一的未分开的容器内。通常，该试剂盒包含关于各单独组分的给药的说明书。当各单独组分优选以不同的剂型给予(例如口服和胃肠外)，以不同的给药间隔给予时，或者当该组合的各单独组分需要处方医生确定时，该试剂盒形式尤为有利。

一般制备程序

一般程序A 铃木偶合：

铃木型偶合反应有用于在嘧啶环的5位处连接单环杂芳基、稠合双环杂环或稠合双环杂芳基(参见方案4)。例如，2-取代的4-(5-氯噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉2或2-取代的4-(5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉4可以与1.5当量的4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)1H-吲唑1混合，并且溶于3当量的1M(molar)碳酸钠水溶液和等体积的乙腈中。加入催化量或更多的低价钯试剂，例如双(三苯基膦)二氯化钯(II)。可以使用各种硼酸或硼酸酯代替所指出的吲唑硼酸酯。或者，吲唑的氮可以被保护，例如化合物54和62。在某些情况下，使用乙酸钾代替碳酸钠来调节水层的pH。然后在压力下在Biotage Optimizer微波反应器(Biotage，Inc.)内将反应液加热到大约140-150℃，保持10-30分钟。内容物用乙酸乙酯或另一有机溶剂萃取。在蒸发有机层之后，将产物，5-取代的4-(5-(1H-吲唑-4-基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉3或4-(5-(1H-吲唑-4-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉5进行铃木偶合，可以在硅胶上纯化或通过反相HPLC纯化。

在嘧啶环的5位处连接单环杂芳基的程序包括：将取代的5-氯-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶2或5-氯-7-吗啉-4-基-噻唑并[4，5-d]嘧啶4与1.5当量的5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺33(或者可以使用各种硼酸或硼酸酯代替33)混合，并且溶解在3.0当量的碳酸钠(作为1M水溶液)和等体积的乙腈中。在一些情况下，使用乙酸钾代替碳酸钠来调节水层的pH。然后在压力下在Biotage Optimizer微波反应器(Biotage，Inc.)内将反应液加热到大约140-150℃，保持10-30分钟。内容物用乙酸乙酯萃取。蒸发有机层之后，在硅胶上或通过反相HPLC纯化产物34或35。

一般程序B 酰胺偶合：

用1.5当量HATU、3当量的伯胺或仲胺(R₂NH，其中R＝H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基)和3当量的DIPEA在DMF中处理5-(1H-吲唑-4-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-羧酸6或5-(1H-吲唑-4-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-羧酸8至大约0.1M浓度。搅拌反应直至完成，在乙酸乙酯中用饱和碳酸氢钠溶液萃取一次。将有机层干燥，过滤并浓缩，获得粗中间体。通过反相HPLC纯化该中间体，获得酰胺产物7或9。

一般程序C 磺酰胺的形成：

将5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-磺酰氯10或5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-磺酰氯12悬浮于有机溶剂(如DCM)中，然后加入2当量的伯胺或仲胺(R₂NH，其中R＝H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基)和3当量的叔胺碱(如二异丙基乙胺(DIPEA))。通过LCMS监控反应，直至完成。粗反应混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和氯化铵萃取，用乙酸乙酯反萃取。粗磺酰胺中间体11和13在后续铃木偶合中直接使用。

一般程序D 醇合成：

将4-(5-氯噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉14(US 3850917)或4-(5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉16以0.2M浓度溶解或悬浮在THF中，并在干冰/乙腈浴中冷却至约-50℃，然后加入2当量的2.5M nBuLi的己烷溶液。15分钟后，将大约3.0摩尔当量的醛或酮(R₂CO，其中R＝H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基)加入到该溶液中。将反应液在-50℃下持续搅拌1小时，然后在大多数情况下使之达到0℃。当通过TLC或质谱确定反应完成时，将它猝灭入饱和氯化铵溶液中，用EtOAc萃取两次。将有机层浓缩，用作粗混合物，或者在硅胶(silica)上纯化，获得产物15或17。

一般程序E 顺序亲核胺取代/铃木偶合反应

将4-(5-氯-2-(甲基磺酰基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉69(1.0当量)溶解在四氢呋喃(0.1M)中。缓慢加入伯胺(或仲胺)(1.4当量)和三乙胺(1.4当量)，获得70或71。将溶液在40℃下搅拌5分钟，真空脱除溶剂。向残留物中加入1.5当量的5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺33(或者5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-胺或其他类似硼酸酯试剂)、反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.07当量)和等份的1M Na₂CO₃(3.0当量)和乙腈。将溶液在130℃下微波处理10分钟。一经完成，将水加入到反应混合物中，过滤固体，获得粗产物72或73。

一般程序F 在一釜中(one pot)进行的铃木偶合反应

在密封微波反应器中，将4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18(1当量)、硼酸(R¹-B(OH)₂，1.1当量)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)在1M Na₂CO₃水溶液(3当量)和乙腈(3当量)中加热至100℃，保持10-40分钟，获得2-取代的19。一经完成，在同一釜中加入4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑1(1.3当量)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)。在密封微波反应器中将反应混合物加热到150℃，保持10-15分钟。混合物用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层浓缩，获得粗产物20。

或者，在密封微波反应器中，将中间体4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18(1.0当量)、任选取代的苯基硼酸36或杂环硼酸(1.05当量)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)在1M Na₂CO₃水溶液(3.0当量)和等体积的乙腈中加热至100℃，保持10-30分钟。一经完成，加入水，将固体过滤，获得5-取代的中间体37，使中间体37与单环杂芳基硼酸酯试剂38(1.5当量)(例如5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺33)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.07当量)在1M Na₂CO₃(或1M KOAC)水溶液(3.0当量)和等体积的乙腈中于140℃，在密封微波反应器中反应10-15分钟。一经完成，将水加入到反应混合物中，将固体过滤，获得粗制2-取代中间体39，其中X＝SO₂Me、OMe、NH₂、CH₂NHSO₂Me、NHSO₂Me、吗啉代、NHCOCH₃；Y＝CR、N；以及Z＝CR、N。

一般程序G 酰胺偶合反应

将5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-b]嘧啶-2-胺21(1当量)、酰氯(1.5～2当量)在二氯甲烷中搅拌，其中R＝H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基。通过LC/MS监控反应，直至完成。将该混合物蒸发，获得粗酰胺22，它可以未经纯化直接用于下一步反应。

一般程序H  乙酰胺、苯甲脒和磺酰胺的制备

向冷却至0℃的1-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-N-甲基甲胺23在DCM中的0.25-0.40M溶液中加入1.5当量的TEA，随后滴加1.0-1.5当量的酰氯或者磺酰氯，在DCM中稀释，其中R＝H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基。将反应液在环境温度下搅拌，通过LCMS监控至反应完成。在完成后，用DCM增加反应体积，将稀碳酸氢钠水溶液加入到该溶液中。分离有机层和水层。最后，有机层用盐水洗涤并干燥(MgSO₄)。真空浓缩无水有机溶液，如果需要，通过硅胶色谱纯化，获得酰胺24a或磺酰胺24b产物。

一般程序I  用于苯胺的酰胺偶合反应

将3-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苯胺25(1当量)、羧酸(RCO₂H，1.5当量)(其中R＝H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基)、1-羟基-7-氮杂苯并***(HOAt，0.2当量)、O-(7-氮杂苯并***-1-基)-(N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU，1.5当量)和N，N-二异丙基乙胺(2.5当量)在DMF中于室温搅拌。通过LC/MS监控反应直至完成。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。有机层用MgSO₄干燥，过滤，蒸发，获得酰胺产物26。

一般程序J  布赫瓦尔德(Buchwald)反应、2-碘置换和5-铃木偶合

向4-(5-氯-2-碘噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉27(0.05g，0.13mmol)的DMF(1.00ml)溶液中加入适当的苯胺(200mol％)、Cs₂CO₃(50mol％)、Pd₂(dba)₃(5mol％)和XANTPHOS(10mol％)。在Biotage Optimizer微波反应器中于压力下将反应液加热至110℃并保持30分钟。将所得溶液真空浓缩，在按照一般程序A与硼酸试剂1偶合之后，获得28。

或者，在密封微波反应器内，将化合物18(1.0当量)、任选取代的苯胺(2.0当量)、三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(0.05当量)、9，9-二甲基-4，5-双(二苯基膦基)呫吨(0.10当量)和碳酸铯(0.50当量)在DMF(0.15M)中加热至100-115℃，保持15-30分钟。一经完成，将反应混合物真空浓缩，通过硅胶色谱纯化粗混合物，获得中间体28a，该中间体在密封微波反应器内与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺(1.5当量)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.07当量)在1M Na₂CO₃水溶液(3.0eq)和等体积的乙腈中反应，加热至140℃，保持10分钟。一经完成，将水加入到反应混合物中，过滤固体，获得粗产物28b，其中X是H、SO₂Me或吗啉代。

一般程序K  2-氨基烷基酰化和5-铃木偶合

向(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)甲胺29(50mg，0.2mmol)的CH₂Cl₂(4mL)溶液中加入Et₃N(84μl，0.6mmol)和适当的酰氯或其HCl盐(0.3mmol)，其中R＝H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基。在用水猝灭之前，将在室温下搅拌反应液18-48小时。水层用EtOAc萃取。合并的有机物用Na₂SO₄干燥，并真空浓缩。5-氯粗产物与硼酸酯试剂1和钯催化剂按照一般程序A偶合，获得酰胺30，通过反相HPLC纯化将其纯化。

或者，向(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)甲胺29(111mg，0.39mmol)的DMF(5mL)溶液中加入2，6-二甲基吡啶(48.2μl，0.41mmol)和适当的酰氯或其HCl盐(0.39mmol)。在用水猝灭之前，将该反应液在室温下搅拌18-72小时。水层用EtOAc萃取。合并的有机物用MgSO₄干燥，并真空浓缩。5-氯粗产物与硼酸酯试剂7和钯催化剂按照一般程序A偶合，获得20mg的酰胺30，然后通过反相HPLC纯化将其纯化。

一般程序L  2-氟吡啶上的胺取代

将4-(5-氯-2-(6-氟吡啶-3-基)-噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉31、大约4当量的伯胺或仲胺(R＝H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基)和大约2当量的二异丙基乙胺在N-甲基吡咯烷(约0.1M)中的混合物在密封微波反应器内加热到大约130-140℃，保持10-40分钟，随后在高真空度下去除挥发物。通过快速色谱纯化粗混合物，获得2-吡啶基胺化的中间体32，中间体32可以按照一般程序A与硼酸酯试剂(例如1)进行铃木偶合。

实施例

为了说明本发明，包括以下实施例。然而，应理解，这些实施例并不限制本发明，仅意味着提出实施本发明的一种方法。本领域技术人员会认识到，可以容易地使所描述的化学反应适合制备本发明的许多其它PI3K抑制剂，制备本发明化合物的另选方法被认为落入本发明范围内。例如，可以通过对本领域技术人员而言显而易见的修改而成功实施未例示的本发明化合物的合成，例如通过适当保护干扰基团，通过利用除了所描述的那些以外的本领域已知的其它适合试剂，和/或通过反应条件的常规修改来实施。或者，本文公开的或本领域已知的其它反应将被公认适于制备本发明的其它化合物。

在下述实施例中，除非另有指明，所有温度按摄氏度(℃)计。试剂购自商业供应商(例如Aldrich Chemical Company、Lancaster、TCI或Maybridge)，且除非另有指明，未经进一步纯化而使用。

下述反应一般在正氮气压或正氩气压下或者于干燥管(除非另有规定)在无水溶剂中进行。反应烧瓶一般配备橡胶隔片，用于经由注射器引入底物和试剂。玻璃器皿经过烘箱干燥和/或热干燥。

在具有硅胶柱的Biotage***(制造商：Dyax Corporation)上或在硅胶SEP PAK

柱(Waters)上进行柱色谱。在400MHz下操作的Varian仪器上记录¹H NMR波谱。使用氯仿作为参比标准物(7.25ppm)，在含氘CDCl₃、d₆-DMSO、CH₃OD或d₆-丙酮溶液(按ppm报告)中获得¹H NMR波谱。当报告峰多重性时，使用下列缩写：s(单峰)，d(双重峰)，t(三重峰)，m(多重峰)，br(增宽峰)，dd(双重峰的双重峰)，dt(三重峰的双重峰)。所给出的偶合常数按赫兹(Hz)报告。以下实施例中的所有化合物、最终产物和中间体通过LC/MS表征，并且检测母离子。

实施例1 5，7-二氯噻唑并[4，5-d]嘧啶42

将4-氨基噻唑-5-羧酸甲酯40(WO2006/096338；WO2005/049613)和尿素的混合物在190℃下加热2小时。将热的反应混合物倾至氢氧化钠溶液上，通过过滤来除去任何不溶性物质。将该混合物酸化(HCl，2N)，获得白色沉淀状的噻唑并[4，5-d]嘧啶-5，7-(4H，6H)-二酮41(Baker等人，(1970)Jour.of theChem.Soc.18：2478-84；US 3277093；Childress和McKee(1951)J.Am.Chem.Soc.73：3862-64；Erlenmeyer和Furger(1943)Helv.Chem.Acta 26：366-68)，通过过滤来收集，并风干。

将噻唑并[4，5-d]嘧啶-5，7-(4H，6H)-二酮41和三氯氧磷的混合物在回流下加热6小时。然后将该反应混合物冷却，并在剧烈搅拌下倾至冰/水上，获得沉淀。然后将该混合物过滤，获得白色固体状5，7-二氯噻唑并[4，5-d]嘧啶42。

实施例2 4-(5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉16

将5，7-二氯噻唑并[4，5-d]嘧啶42、吗啉(8.11mL，2.2当量)和MeOH(150mL)的混合物在室温下搅拌1小时。然后将该反应混合物过滤，用水和MeOH洗涤，获得白色固体状4-(5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉16。

实施例3  5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-甲醛(carbaldehyde)43

在-78℃下，向4-(5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉16(1.75g，6.85mmol)的无水THF(40mL)悬浮液中加入正丁基锂(nBuLi)在己烷(3.3mL，1.2当量)中的2.5M溶液。搅拌1小时之后，加入无水DMF(796μL，1.5当量)。将该反应混合物在-78℃下搅拌1小时，然后缓慢温热至室温。在室温下保持另外2小时之后，将该反应混合物倾至冰/水上，获得黄色沉淀。通过过滤收集该黄色沉淀，并风干，获得5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-甲醛43。

实施例4  5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-甲醛44

在-78℃下，向4-(5-氯噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉14(1.75g，6.85mmol)的无水THF(40mL)悬浮液中加入正丁基锂(nBuLi)在己烷(3.3mL，1.2当量)中的2.5M溶液。搅拌1小时之后，加入无水DMF(796μL，1.5当量)。将该反应混合物在-78℃下搅拌1小时，然后缓慢温热至室温。在室温下保持另外2小时之后，将该反应混合物倾至冰/水上，获得了黄色沉淀。通过过滤收集该黄色沉淀，并风干，获得5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-甲醛44。

实施例5  4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑1—路线1

按照WO 2006/046031和WO 2006/046040的程序，向3-溴-2-甲基苯胺(5.0g，26.9mmol)的氯仿(50mL)溶液中加入乙酸钾(1.05当量，28.2mmol，2.77g)。将乙酸酐(2.0当量，53.7mmol，5.07mL)加入到在冰水中冷却的该混合物中。然后将该混合物在室温下搅拌10分钟，此后，形成白色凝胶状固体。然后先后加入18-冠醚-6(0.2当量，5.37mmol，1.42g)和亚硝酸异戊基酯(2.2当量，59.1mmol，7.94mL)，将该混合物在回流下加热18小时。允许该反应混合物冷却，在氯仿(3×100mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)之间分配。合并的有机萃取物用盐水(100mL)洗涤，分离，干燥(MgSO₄)。

将粗产物蒸发至硅胶上，通过色谱(用20％→40％EtOAc-汽油(petrol)洗脱)纯化，获得橙色固体状1-(4-溴-吲唑-1-基)-乙酮A(3.14g，49％)和浅橙色固体状4-溴-1H-吲唑B(2.13g，40％)。A：¹H NMR(400MHz，CDCl₃)2.80(3H，s)，7.41(1H，t，J＝7.8Hz)，7.50(1H，d，J＝7.8Hz)，8.15(1H，s)，8.40(1H，d，J＝7.8Hz)。B：¹H NMR(400MHz，CDCl₃)7.25(1H，t，J＝7.3Hz)，7.33(1H，d，J＝7.3Hz)，7.46(1H，d，J＝7.3Hz)，8.11(1H，s)，10.20(1H，br s)。

向1-(4-溴-吲唑-1-基)-乙酮A(3.09g，12.9mmol)的MeOH(50mL)溶液中加入6N HCl水溶液(30mL)，并将该混合物在室温下搅拌7小时。将MeOH蒸发，使混合物在EtOAc(2×50mL)和水(50mL)之间分配。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，分离，干燥(MgSO₄)。通过减压蒸发除去溶剂，获得4-溴-1H-吲唑B(2.36g，93％)。

向4-溴-1H-吲唑B(500mg，2.54mmol)和联硼酸频那醇酯(bis(pinacolato)diboron)(1.5当量，3.81mmol)在DMSO(20mL)中的溶液中加入乙酸钾(3.0当量，7.61mmol，747mg；用干燥枪干燥)和PdCl₂(dppf)₂(3mol％，0.076mmol，62mg)。该混合物用氩气脱气，在80℃下加热40小时。允许反应混合物冷却，在水(50mL)和醚(3×50mL)之间分配。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，分离，干燥(MgSO₄)。通过色谱(用30％→40％EtOAc-汽油洗脱)纯化粗物质，获得不可分离的4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑1(369mg，60％)和吲唑(60mg，20％)的3∶1混合物，作为黄色胶质分离，经静置固化，得到灰白色固体。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)1.41(12H，s)，7.40(1H，dd，J＝8.4Hz，6.9Hz)，7.59(1H，d，J＝8.4Hz)，7.67(1H，d，J＝6.9Hz)，10.00(1H，br s)，8.45(1H，s)，以及吲唑：7.40(1H，t)，7.18(1H，t，J＝7.9Hz)，7.50(1H，d，J＝9.1Hz)，7.77(1H，d，J＝7.9Hz)，8.09(1H，s)。杂质在1.25。

实施例6  4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑1—路线2

向2-甲基-3-硝基苯胺(2.27g，14.91mmol)的乙酸(60mL)溶液中加入亚硝酸钠(1.13g，1.1当量)的水(5mL)溶液。2小时后，将该深红色溶液倾至冰/水上，通过过滤收集所得沉淀，获得4-硝基-1H-吲唑C(1.98g，81％)。

将4-硝基-1H-吲唑C(760mg，4.68mmol)、钯/碳(10％，催化量)和乙醇(30mL)的混合物在一气球氢气(a balloon of hydrogen)下搅拌4小时。然后将该反应混合物过滤通过硅藻土，真空脱除溶剂，获得1H-吲唑-4-基胺D(631mg，100％)。

在低于0℃下，将亚硝酸钠(337mg，4.89mmol)在水(2mL)中的水溶液滴加到1H-吲唑-4-基胺D(631mg，4.74mmol)在6M盐酸(7.2mL)中的悬浮液中。搅拌30分钟后，将四氟硼酸钠(724mg)加入到该反应混合物中。获得粘性溶液，将其过滤，用水短暂洗涤，获得深红色固体状四氟硼酸1H-吲唑-4-重氮盐E(69)(218mg，20％)。

用氩气吹扫无水甲醇(4mL)5分钟，然后向其中加入四氟硼酸1H-吲唑-4-重氮盐(218mg，0.94mmol)、联硼酸频哪醇酯(239mg，1.0当量)和[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]氯化钯(II)(20mg)。将该反应混合物搅拌5小时，然后过滤通过硅藻土。使用快速色谱纯化残留物，获得4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑1(117mg)。

实施例7  6-氟吲唑-4-硼酸酯45

按照WO2006/046031的程序，向4-氟-2-硝基甲苯(3.44g)的三氟乙酸(13mL)溶液中先后加入浓硫酸(4mL)和N-溴代琥珀酰亚胺(5.92g)。将该反应混合物搅拌16小时，然后用盐水猝灭，萃取入乙酸乙酯中，并干燥(MgSO₄)。真空脱除溶剂，以提供粗制1-溴-5-氟-2-甲基-3-硝基-苯(5.96g)。

向粗制1-溴-5-氟-2-甲基-3-硝基-苯(5.96g)的MeOH(90mL)溶液中加入浓盐酸(11.7mL)和铁(6.1g)，将该反应混合物加热到回流。16小时后，将该混合物冷却，用DCM稀释，用碳酸钠溶液洗涤，干燥(MgSO₄)，真空脱除溶剂。使用快速色谱纯化残留物，获得3-溴-5-氟-2-甲基-苯胺(1.46g)。

向3-溴-5-氟-2-甲基-苯胺(470mg)的二噁烷(6mL)中溶液加入三乙胺(1.28mL)、乙酸钯(25mg)、2-二环己基膦联苯(161mg)和频那醇硼烷(1.001ml)，将该混合物在80℃下加热4小时。将反应混合物冷却，用氯仿稀释，用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，真空脱除溶剂。使用快速色谱纯化残留物，获得45(466mg)。

实施例8  6-(三丁基甲锡烷基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑[4，5-b]吡啶50

在N₂下，向3.07g的5-溴-2，3-二氨基吡啶46中加入20mL甲酸，将反应液在加热至回流，保持4小时，允许冷却到室温。将反应液在室温下搅拌过夜，通过LCMS证实反应完成。将该溶液真空浓缩，通过快速色谱(DCM/MeOH)纯化，获得1.64g化合物47(产率51％)。在-78℃下，在氮气下将40mLTHF中的化合物47(1.64g)加入到10mL THF中的0.22g(1.1当量)NaH中。将反应液在-78℃下搅拌30分钟，随后加入1.45g的SEM-Cl(1.05当量)，允许温热到室温。将该反应液在室温下搅拌过夜，通过LCMS证实反应完成。用水猝灭反应，随后加入NaCl(不饱和)，该两种产物用EtOAc萃取，并真空浓缩。通过快速色谱(EtOAc/己烷)分离两种区域异构体，获得1.68g的48和0.5g的49(总产率80％)。将化合物49(0.5g)溶于50mL二噁烷中，随后加入1.76g(2.0当量)的双(三丁基锡)、88mg(0.05当量)的Pd(PPh₃)₄和0.19g(3.0当量)的LiCl。将该反应混合物在氮气下加热到回流，保持1.5小时，通过LCMS证实反应完成。将该混合物冷却到室温，通过硅藻土过滤(硅藻土用EtOAc洗涤)，旋转蒸发，通过快速色谱(EtOAc/己烷)纯化，获得501mg的6-(三丁基甲锡烷基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶50(产率61％)。MS(Q1)539.2(M)+。

实施例9  2-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶54

在N₂下，向5.06g的5-溴-2，3-二氨基吡啶46(Ryabukhin等人，(2006)Synthesis 21：3715-3726；Oguchi等人，(2000)J.Med.Chem.43(16)：3052-3066；Seki等人，(1995)J.Hetero.Chem.32(3)：1071-73；Fray等人，(1995)J.Med.Chem.38(18)：3524-35)中加入50mL乙酸，将反应液加热到回流过夜。通过LCMS证实反应完成。将该溶液真空浓缩，通过快速色谱(DCM/MeOH)纯化，获得4.68g的6-溴-2-甲基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶51(产率82％)，该化合物还可以通过Cee等人，(2007)J.Med.Chem.50(4)：627-40；Itoh等人，(1982)J.Hetero.Chem.19(3)：513-17的方法来制备。在-78℃下，在氮气下将150mLTHF中的6-溴-2-甲基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶(4.68g)加入到10mL THF中的0.63g(1.1当量)NaH中。将反应液在-78℃下搅拌30分钟，随后加入3.86g的SEM-Cl(1.05当量)，允许温热到室温。将反应液在室温下搅拌4.5小时，通过LCMS证实反应完成。用水猝灭反应，随后加入NaCl(不饱和)，该两种产物用EtOAc萃取，并真空浓缩。通过快速色谱(EtOAc/己烷)分离该两种区域异构体，获得2.84g 6-溴-2-甲基-3-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶52和1.94g 6-溴-2-甲基-1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶53(总产率63％)。将6-溴-2-甲基-3-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶52(2.08g)溶于50mL甲苯中，随后加入2.32g(1.5当量)联硼酸频那醇酯、0.24g(0.05当量)PdCl₂(dppf)和1.79g(3.0当量)的KOAc。在氮气下将该反应混合物加热到95℃，搅拌过夜。通过LCMS证实反应完成。将混合物冷却到室温，旋转蒸发，通过快速色谱(EtOAc/己烷)纯化，获得1.83g的2-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶54(产率77％)。MS(Q1)390.2(M)+。

实施例10  1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑62(路线A)

步骤A：4-氯-1H-吲唑的制备：向具有搅拌棒的250ml烧瓶内加入2-甲基-3-氯苯胺(8.4ml，9.95g，70.6mmol)、乙酸钾(8.3g，84.7mmol)和氯仿(120ml)。在搅拌下将该混合物冷却到0℃。向冷却的混合物中经2分钟滴加乙酸酐(20.0ml，212mmol)。将该反应混合物温热到25℃，搅拌1小时。在此时刻，将反应液加热到60℃。加入亚硝酸异戊酯(18.9ml，141mmol)，将反应液在60℃下搅拌过夜。一旦完成，加入水(75ml)和THF(150ml)，将反应液冷却到0℃。加入LiOH(20.7g，494mmol)，将反应液在0℃下搅拌3小时。加入水(200ml)，产物用EtOAc(300ml，100ml)萃取。将有机层合并，用MgSO₄干燥，真空浓缩，获得11.07g(100％)橙色固体状4-氯-1H-吲唑(100％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.18(d，J＝1Hz，1H)，7.33(d，J＝8Hz 1H)，7.31(t，J＝7Hz，1H)，7.17(dd，J＝7Hz，1Hz 1H)。LCMS(ESI pos)m/e 153(M+1)。

步骤B：4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑的制备：在具有机械搅拌器的1L烧瓶内加入4-氯-1H-吲唑(75.0g，0.492mol)、对甲苯磺酸吡啶鎓(1.24g，4.92mmol)、CH₂Cl₂(500ml)和3，4-二氢-2H-吡喃(98.6ml，1.08mol)。在搅拌下，将该混合物加热至45℃并保持16小时。反应混合物的分析显示生成两种异构体产物。将反应液冷却到25℃，加入CH₂Cl₂(200ml)。用水(300ml)和饱和碳酸氢钠溶液(250ml)洗涤该溶液。用MgSO₄干燥有机物，并浓缩至干。通过将其溶于EtOAc/己烷(4∶6，1L)和加入SiO₂(1.2L)来纯化粗产物。将该混合物过滤，滤饼用EtOAc/己烷(4∶6，2L)洗涤。将有机物真空浓缩，获得110.2g橙色固体状4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(95％)。异构体1：¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.10(d，J＝1Hz，1H)，7.50(dd，J＝9Hz，1Hz 1H)，7.29(dd，J＝9Hz，8Hz 1H)，7.15(dd，J＝8Hz，1Hz 1H)5.71(dd，J＝9Hz，3Hz 1H)4.02(m，1H)3.55(m，1H)2.51(m，1H)2.02(m，2H)1.55(m，3H)。LCMS(ESI pos)m/e237(M+1)；异构体2：¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.25(d，J＝1Hz，1H)，7.62(dd，J＝9Hz，1Hz 1H)，7.20(dd，J＝9Hz，8Hz 1H)，7.06(dd，J＝8Hz，1Hz 1H)5.69(dd，J＝9Hz，3Hz 1H)4.15(m，1H)3.80(m，1H)2.22(m，2H)2.05(m，1H)1.75(m，3H)。LCMS(ESI pos)m/e 237(M+1)。

步骤C：1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑的制备：在带有搅拌棒的500ml烧瓶内加入4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(10.0g，42.2mmol)、DMSO(176ml)、PdCl₂(PPh₃)₂(6.2g，8.86mmol)、三环己基膦(0.47g，1.69mmol)、联硼酸频那醇酯(16.1g，63.4mmol)和乙酸钾(12.4g，0.127mol)。在搅拌下，将该混合物加热至130℃，保持16小时。将该反应液冷却到25℃，加入EtOAc(600ml)，用水(2×250ml)洗涤。有机物用MgSO₄干燥，并且真空浓缩至干。粗产物通过SiO₂填料(plug)(120g)(用10％EtOAc/己烷(1L)和30％EtOAc/己烷(1L)洗脱)纯化。将滤液真空浓缩，获得13.9g 1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑(100％)产物62，为乙酸乙酯中的20％(wt/wt)溶液。¹H NMR显示存在约20％(wt/wt)联硼酸频那醇酯。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.37(s，1H)，7.62(dd，J＝14Hz，2Hz 1H)，7.60(dd，J＝7Hz，1Hz1H)，7.31(dd，J＝8Hz，7Hz 1H)5.65(dd，J＝9Hz，3Hz 1H)4.05(m，1H)3.75(m，1H)2.59(m，1H)2.15(m，1H)2.05(m，1H)1.75(m，3H)1.34(s，12H)。LCMS(ESI pos)m/e 245(M+1)。

实施例11  1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑62(路线B)

步骤A：4-硝基-1H-吲唑的制备：将2-甲基-3-硝基苯胺(200g，1.315mol)和乙酸(8000ml)的混合物冷却到15-20℃，经30分钟缓慢加入亚硝酸钠(90.6g，1.315mol)的水(200ml)溶液。在加入之后，将反应温度升高到25-30℃，将反应液在该温度下搅拌2-3小时。通过TLC监控反应进程，反应完成后，将产物过滤，残留物用乙酸(1000ml)洗涤。在真空(550mm Hg)下，在低于80℃下蒸馏乙酸，加入水(8000ml)，冷却到25-30℃，并搅拌30分钟。将淤浆过滤，用水(1000ml)洗涤。在70-80℃下加热2小时来将粗产物干燥，然后溶解在5％乙酸乙酯/正己烷(100∶2000ml)溶液中，在环境温度下搅拌1-1.5小时。将该悬浮液过滤，用5％乙酸乙酯/正己烷混合物(25∶475ml)洗涤。所得产物在真空下，在低于80℃下干燥10-12小时，获得棕色固体状4-硝基-1H-吲唑(150g，70％)：熔点：200-203℃；¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ13.4(br，1H)，8.6(s，1H)，8.2-7.95(dd，2H)，7.4(m，1H)。ESMS m/z 164(M+1)。纯度：95％(HPLC)。

步骤B：4-氨基-1H-吲唑的制备：将4-硝基-1H-吲唑(200g，1.22mol)和10％钯/碳(20.0g)在EtOH(3000ml)中的混合物在环境温度下氢化(反应放热，温度升高到50℃)。在反应完成后，通过过滤去除催化剂。在低于80℃下真空蒸发溶剂，冷却到室温，将正己烷(1000ml)加入到残留物中，并搅拌30分钟。过滤分离的固体，并用正己烷(200mL)洗涤。在70-80℃下真空干燥产物10-12小时，获得棕色固体状4-氨基-1H-吲唑(114g，70％)，熔点：136-143℃。¹HNMR(200MHz，CDCl₃)δ12(br，1H)，8.0(s，1H)，7.1-7.0(dd，2H)，6.5(d.1H)，3.9(m，2H)。ESMS m/z 134(M+1)。纯度：90-95％(HPLC)。

步骤C：4-碘-1H-吲唑的制备：将4-氨基-1H-吲唑(50.0g，0.375mol)在水(100ml)和浓盐酸(182ml)中的混合物冷却到-10℃，在-10℃下，在大约30-60分钟内，向其中滴加亚硝酸钠(51.7g，0.75mol)的水(75ml)溶液(在加入过程中观察到起泡)。在另一烧瓶内，在室温下制备碘化钾(311g，1.87mol)在水(3000ml)中的混合物，在大约30-40分钟内在30-40℃下，向其中加入以上冷却的重氮盐。将反应液在30℃下保持1小时，在反应完成后，加入乙酸乙酯(500ml)，通过硅藻土过滤反应混合物。分离各层，水层用乙酸乙酯(2×500ml)萃取。合并的有机层用5％大苏打溶液(2×500ml)、盐水(500ml)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，并浓缩。通过色谱(硅胶，己烷，15-20％乙酸乙酯/己烷)纯化粗产物，获得橙色固体状4-碘-1H-吲唑(23.0g，25％)。熔点：151-177℃，¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ12.4(br，1H)，8.0(s，1H)，7.6(dd，2H)，7.1(d，1H)。ESMS m/z 245(M+1)。纯度：95-98％(HPLC)。

步骤D：4-碘-1-(2-四氢吡喃基)吲唑的制备：将4-氨基-1H-吲唑(250.0g，1.024mol)、3，4-二氢-2H-吡喃(126.0g，1.5mol)和PPTS(2.57g，0.01mol)在CH₂Cl₂(1250ml)中的混合物加热至50℃，保持2小时。将反应液冷却到室温，倾入水(625ml)中，分离各层，水层用CH₂Cl₂(250ml)萃取。合并的有机层用水(625ml)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，并浓缩。通过色谱(硅胶，己烷，5-10％乙酸乙酯/己烷)纯化粗残留物，获得油状4-碘-1-(2-四氢吡喃基)吲唑(807.0g，60％)。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ8.5(s，1H)，7.8(m，1H)，7.6(d，1H)，7.25(m，1H)，5.7(dd，1H)，4.2-3.8(dd，1H)，2.2-2.0(m，4H)2.0-1.8(m，4H)。ESMS m/z 329(M+1)。

步骤E：1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑的制备：将4-碘-1-(2-四氢吡喃基)吲唑(100g，0.304mol)、联硼酸频那醇酯(96.4g，0.381mol)、PdCl₂(dppf)(8.91g，0.012mol)和乙酸钾(85.97g，0.905mol)在DMSO(500ml)中的混合物加热到80℃，保持2-3小时。反应完成后，将反应液冷却到室温，加入水(1500ml)。将反应物质萃取入乙酸乙酯(3×200ml)中，将合并的有机层蒸发，干燥(Na₂SO₄)，并浓缩。通过柱色谱(硅胶，己烷，5-10％乙酸乙酯/己烷)纯化粗产物，获得粘性棕色油状1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑62(70.0g，70％)。5：¹H NMR(CDCl₃)δ8.5(s，1H)，7.8(m，1H)，7.6(d，1H)，7.25(m，1H)，5.7(dd，1H)，4.2-3.8(dd，1H)，2.2-2.0(m，4H)2.0-1.8(m，4H)，1.4-1.2(s，12H)。ESMS m/z 329(M+1)。

实施例12  (5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)甲醇56

在0℃下，用NaBH₄(0.1g，3.5mmol)处理5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-甲醛43(1.0g，3.5mmol)的MeOH(30mL)溶液。允许将该溶液温热到室温，并搅拌15分钟。该反应混合物用碳酸氢钠饱和溶液和水(1∶1，v/v)的混合物猝灭。用EtOAc萃取水溶液。合并的有机层用Na₂SO₄干燥，并真空浓缩。粗制(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)甲醇56不需要进一步纯化。

实施例13  4-(2-(溴甲基)-5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉57

在0℃下，向(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)甲醇56(100mg，0.4mmol)的苯(3.0mL)溶液中加入PBr₃(30μL，0.4mmol)。将反应液在回流下加热1小时。冷却至室温后，通过加入水来猝灭反应。水层用EtOAc萃取。合并的有机物用Na₂SO₄干燥，并真空浓缩。粗制4-(2-(溴甲基)-5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉57不需要进一步纯化(xmg，x％)。MS(Q1)x(M)+。

实施例14  2-((5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)甲基)异吲哚啉-1，3-二酮58

向4-(2-(溴甲基)-5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉57的DMF溶液中加入K₂CO₃和邻苯二甲酰亚胺。将所得溶液在室温下搅拌20小时。将反应液真空浓缩，用水(10mL)稀释，将该非均相混合物过滤，获得2-((5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)甲基)异吲哚啉-1，3-二酮58。

实施例15  (5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)甲胺59

向2-((5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)甲基)异二氢吲哚-1，3-二酮58(100mg，0.24mmol)的MeOH(7mL)溶液中加入H₂N-NH₂ ^*H₂O。将反应液在回流下加热1小时。在冷却到室温之后，用水(10mL)猝灭反应液，并用EtOAc萃取。合并的有机物用Na₂SO₄干燥，真空浓缩，获得(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)甲胺59。

实施例16  1-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)-N-甲基甲胺60

向50mL甲苯和50mL THF中的5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-甲醛43中加入30mL NH₂Me(40％水溶液)，并将该混合物在N₂下搅拌2天。将该混合物真空浓缩，再溶解于50mL THF和50mL MeOH中，随后分批加入1.6g(4.0当量)NaBH₄，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。通过LCMS证实反应完成，将该混合物真空浓缩，通过快速色谱(95/5％EtOAc/EtOH 20min，随后直至100％EtOH的梯度，历时超过30分钟)纯化，获得1-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)-N-甲基甲胺60。

实施例17  1-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-N-甲基甲胺61

同样，向5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-甲醛44的THF(50mL)溶液中加入20mL的40％甲胺水溶液。将反应混合物在氮气下于室温搅拌24小时。真空脱除溶剂，将残留物溶于50mL MeOH和50mL THF中，分批加入NaBH₄。将该反应混合物在氮气下于室温搅拌24小时，并通过LCMS证实反应完成。真空脱除溶剂，通过快速色谱(EtOAc/EtOH)纯化粗产物，获得1-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-N-甲基甲胺61。

实施例18  4-(5-氯-2-碘噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉27

按照US 6492383中的程序，在-78℃下，将己烷溶液中的2.5M正丁基锂(9.4mL，22.48mmol)加入到4-(5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉16(3.0g，11.74mmol)在60mL THF中的混合物中。允许反应混合物温热至-40℃，并搅拌30分钟。滴加碘(6.0g，23.48mmol)的THF(10mL)溶液。在加入完成之后，使反应混合物达到室温，并搅拌2小时。通过用二氯甲烷稀释和用H₂O(2×100mL)萃取将混合物猝灭。有机层用Na₂S₂O₃(2×100mL)、H₂O(2×100mL)洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，蒸发，获得4-(5-氯-2-碘噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉27。

实施例19  2-苯基-5-脲基噻唑-4-羧酸乙酯63

在-78℃下，向2-苯基-5-氨基噻唑-4-羧酸乙酯(116mg，1.0当量)的二氯甲烷(3ml)溶液中滴加氯代磺酰异氰酸酯(0.06ml，1.3当量)(Redman等人J.(2000)Org.Lett.2：2061-2063)。将反应液缓慢温热至室温，并搅拌40分钟。将反应液浓缩。向残留物中加入6N HCl(2.5ml)，并将混合物加热至100℃，保持20分钟。允许反应混合物冷却到室温，并且用饱和NaHCO₃水溶液中和。通过过滤收集固体，获得米色固体状2-苯基-5-脲基噻唑-4-羧酸乙酯63，其未经进一步纯化而在下一反应中使用。

实施例20  2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶-5，7-二醇64

将2-苯基-5-脲基噻唑-4-羧酸乙酯63(xmg，x当量)悬浮于甲醇(5ml)中并用1.5M NaOH(1ml)处理。将反应混合物加热至回流，保持90分钟。允许反应混合物冷却到室温，并用6N HCl进行酸化直至pH3。过滤固体，在95℃下，于高度真空下干燥24小时，获得米色固体状2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶-5，7-二醇64，其未经进一步纯化而在下一反应中使用。

实施例21  5，7-二氯-2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶65

将2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶-5，7-二醇64溶于POCl₃(xml)中。将混合物冷却到-40℃，缓慢加入N，N-二异丙基乙胺。然后将反应混合物加热至回流，保持48小时，然后冷却到室温。将该反应混合物倾入冰/水中。混合物用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，干燥(Na₂SO₄)，并浓缩，获得5，7-二氯-2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶65，其未经进一步纯化而在下一反应中使用。

实施例22  4-(5-氯-2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉66

将5，7-二氯-2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶65悬浮于甲醇中，并用吗啉处理。将反应混合物在室温下搅拌4小时。过滤固体，获得米色固体状的纯4-(5-氯-2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉66。

实施例23  4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18

在-78℃下，向溶于THF中的4-(5-氯噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉14的溶液中加入1.6M正丁基锂的己烷溶液。将反应混合物在-78℃下搅拌30分钟。加入碘的THF溶液，允许反应混合物缓慢温热至室温并搅拌45分钟。反应混合物用饱和Na₂S₂O₃水溶液猝灭，并用二氯甲烷萃取。将合并的有机层干燥(Na₂SO₄)并浓缩。通过快速色谱纯化粗制反应混合物，获得4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18。

实施例24  2-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)丙-2-醇68

将4-(5-氯噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉14在四氢呋喃中制浆(slurried)，并在氮气下冷却至-78℃。缓慢加入庚烷/四氢呋喃/乙基苯中的2当量2M二异丙基酰胺锂，并将溶液搅拌30分钟。加入丙酮(6当量)，并将溶液在-78℃下搅拌另外1小时。加入冰，将溶液温热至室温，之后用二氯甲烷萃取。有机层用硫酸钠干燥、并浓缩。所得残留物在硅胶上纯化，获得浅黄色固体状2-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)丙-2-醇68。

实施例25  5-(1H-吲唑-4-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-甲醛55

将5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-甲醛43、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑1和碳酸钠的混合物悬浮于甲苯、乙醇和水中。向其中加入双(三苯基膦)氯化钯(II)，用氩气吹洗反应容器。将该反应混合物在120℃下微波处理1小时，然后在DCM和水之间分配。有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，并进行真空蒸发。使用快速色谱纯化所得残留物，获得5-(1H-吲唑-4-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-甲醛55。

实施例26  N-甲基-5-(2-((4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)吡啶-2-胺101

经由一般程序A，使5-氯-2-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基甲基)-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶74(90mg)与100mg的N-Boc-氨基甲基吡啶硼酸酯反应，获得粗制{5-[2-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基甲基)-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基]-吡啶-2-基}-甲基-氨基甲酸叔丁酯75(100mg)。

将粗制{5-[2-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基甲基)-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基]-吡啶-2-基}-甲基-氨基甲酸叔丁酯75(100mg)溶于1mL三氟乙酸和1mL二氯甲烷的溶液中。将反应混合物搅拌1小时。将混合物浓缩。通过反相HPLC纯化产物，获得53.8mg的101。MS(Q1)505.2(M)⁺。

实施例27  5-(2-(2-甲氧基丙-2-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)-N-甲基吡啶-2-胺102

将5-溴吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯(10g)和碳酸铯(20g)加入到50mL DMF中。随后将甲基碘(4mL)缓慢加入到搅拌的混合物中。30分钟之后，TLC指示反应完成。在高度真空下去除大部分DMF，用乙酸乙酯和水萃取反应混合物。将有机层干燥、过滤和浓缩。通过等度(Isco)0-30％梯度(H/E)经25分钟纯化粗产物。将各试管汇集，进行浓缩，获得9.85g的澄清油状的5-溴吡啶-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯。

向9.5g 5-溴吡啶-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯的DMSO(60mL)溶液中加入13g联硼酸频那醇酯、9.7g KOAc和与二氯甲烷络合(1∶1)的1.4g[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)，将反应液在80℃下加热过夜。第二天，LC-MS显示，原料被消耗，反应完成。将反应液冷却到室温，然后加入到水中，并用乙酸乙酯萃取。将有机层干燥，过滤并浓缩，获得黑色油。经由120g色谱(ISCO)柱按2批纯化该粗材料。将各级分汇集并浓缩，获得结晶白色固体。NMR显示30％残留联硼酸频那醇酯，剩余物是所需的5-溴吡啶-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯。该混合物在后续的铃木偶合中使用。

经由一般程序A，使粗制4-(5-氯-2-(2-甲氧基丙-2-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉(60mg)与甲基(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯反应。然后，用TFA处理该粗产物，以去除残留的保护基，并经由反相HPLC纯化，获得58.4mg 102。MS(Q1)401.2(M)+。

实施例28  5-(2-(2-甲氧基丙-2-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)-N-甲基嘧啶-2-胺103

经由一般程序A，使粗制4-(5-氯-2-(2-甲氧基丙-2-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉(60mg)与2-(叔丁氧羰基氨基)甲基嘧啶-5-硼酸反应。然后用TFA处理该粗产物，以去除残留的保护基，通过反相HPLC纯化，获得43.8mg 103。MS(Q1)402.2(M)+。

实施例29  5-(2-(2-甲氧基丙-2-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺104

将2-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)丙-2-醇68(175mg)在DMF中冷却至0℃，然后立即加入NaH。允许反应液温热至室温，搅拌几分钟，然后加入甲基碘。将反应液搅拌几小时，通过LC-MS监控，直至反应完成。加入乙酸乙酯，该溶液用饱和碳酸氢盐溶液萃取。收集有机物并干燥，过滤，浓缩，获得粗制4-(5-氯-2-(2-甲氧基丙-2-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉。

使粗制4-(5-氯-2-(2-甲氧基丙-2-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉(60mg)与2-氨基嘧啶-5-硼酸频那醇酯经由一般程序A反应，在反相HPLC纯化之后，获得55mg 104。MS(Q1)388.2(M)+。

实施例30  N-甲基-5-(2-(3-(甲基磺酰基)苯基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)吡啶-2-胺105

将4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18(400mg，1mmol)、3-甲基磺酰基苯基硼酸(230mg，1.1mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(37mg，0.052mmol)在4ml乙腈和4mL的1.0M碳酸钠水溶液中的混合物在微波中加热至100℃，保持10分钟。加入水(5mL)，过滤所得固体，用水和乙酸乙酯洗涤，获得粗制5-氯-2-(3-甲磺酰基-苯基)-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶(400mg)。

经由一般程序A，使5-氯-2-(3-甲磺酰基-苯基)-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶(100mg)与98mg N-Boc-氨基甲基吡啶硼酸酯反应。通过反相HPLC纯化产物，获得33mg的105。MS(Q1)483.2(M)⁺。

实施例31  (S)-2-羟基-1-(4-((7-吗啉代-5-(喹啉-3-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)丙-1-酮106

将5-氯-7-吗啉-4-基-2-哌嗪-1-基甲基-噻唑并[5，4-d]嘧啶的HCl盐(1g，2.6mmol)、L-(+)-乳酸(460mg，5.1mmol)、HATU(1.9g，5.1mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.4mL，7.8mmol)在8mL DMF中的混合物搅拌过夜。该混合物用乙酸乙酯稀释，并且用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤，并蒸发，获得粗制1-[4-(5-氯-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基甲基)-哌嗪-1-基]-2-羟基-丙-1-酮(900mg)。

经由一般程序A，使1-[4-(5-氯-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基甲基)-哌嗪-1-基]-2-羟基-丙-1-酮(100mg)与72mg的3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹啉反应。通过反相HPLC纯化产物，获得43.5mg的106。MS(Q1)520.3(M)⁺。

实施例32  (S)-2-羟基-1-(4-((5-(2-(甲基氨基)嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)丙-1-酮107

将甲基碘(390μL，6.2mmol)加入到2-(叔丁氧羰基氨基)嘧啶-5-硼酸、频那醇酯(1g，3mmol)和碳酸铯(2.0mg，6.2mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(15mL，190mmol)中的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌1小时。加入水(20mL)。使用1N HCl将该混合物中和至pH7，然后用乙酸乙酯(3×60mL)萃取。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，蒸发，获得粗制2-(叔丁氧羰基氨基)甲基嘧啶-5-硼酸(560mg)。

经由一般程序A，使1-[4-(5-氯-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基甲基)-哌嗪-1-基]-2-羟基-丙-1-酮(80mg)与56mg的2-(叔丁氧羰基氨基)甲基嘧啶-5-硼酸反应。通过反相HPLC纯化产物，获得24.1mg的107。MS(Q1)500.3(M)⁺。

实施例33  (S)-1-(4-((5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)-2-羟基丙-1-酮108

经由一般程序A，使1-[4-(5-氯-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基甲基)-哌嗪-1-基]-2-羟基-丙-1-酮(100mg)与62mg的2-氨基嘧啶-5-硼酸频那醇酯反应。通过反相HPLC纯化产物，获得28mg的108。MS(Q1)486.2(M)⁺。

实施例34  4-(2-(3-(甲基磺酰基)苯基)-5-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉109

经由一般程序A，使5-氯-2-(3-甲磺酰基-苯基)-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶(80mg)与54mg的5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶反应。通过反相HPLC纯化产物，获得41.8mg的109。MS(Q1)493.2(M)⁺。

实施例35  N，N-二甲基-5-(2-((4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺110

经由一般程序A，使5-氯-2-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基甲基)-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶(80mg)与55mg的二甲基-[5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-嘧啶-2-基]-胺反应。通过反相HPLC纯化产物，获得10.3mg的110。MS(Q1)520.2(M)⁺

实施例36  5-(2-((4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)吡啶-2-胺111

经由一般程序A，使5-氯-2-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基甲基)-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶(80mg)与49mg的5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-吡啶-2-基胺反应。通过反相HPLC纯化产物，获得24.3mg的111。MS(Q1)491.0(M)⁺。

实施例37  4-(2-((4-甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-5-(喹啉-3-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉112

经由一般程序A，使5-氯-2-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基甲基)-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶(130mg)与92mg的3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-喹啉反应。通过反相HPLC纯化产物，获得72.6mg的112。MS(Q1)526.2(M)⁺。

实施例38  N-甲基-5-(2-((4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺113

经由一般程序A，使5-氯-2-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基甲基)-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶(80mg)与56mg的2-(叔丁氧羰基氨基)甲基嘧啶-5-硼酸反应。通过反相HPLC纯化产物，获得17.3mg的113。MS(Q1)506.2(M)⁺。

实施例39  N-(3-(5-(2-(甲基氨基)嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苄基)甲磺酰胺114

将4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18(400mg，1mmol)、3-甲磺酰基氨基甲基苯硼酸(260mg，1.1mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(37mg，0.052mmol)在4ml乙腈和4mL的1.0M碳酸钠水溶液中的混合物在微波中加热至100℃，保持10分钟。加入水(5mL)，将所得固体过滤，用水和乙酸乙酯洗涤，获得粗制N-[3-(5-氯-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苄基]甲磺酰胺(400mg)。

经由一般程序A，使N-[3-(5-氯-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苄基]甲磺酰胺(100mg)与100mg的2-(叔丁氧羰基氨基)甲基嘧啶-5-硼酸反应。通过反相HPLC纯化产物，获得114。MS(Q1)513.2(M)⁺。

实施例40  N-(3-(7-吗啉基-5-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苄基)甲磺酰胺115

经由一般程序A，使N-[3-(5-氯-7-吗啉-4-基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苄基]甲磺酰胺(120mg)与80mg的5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶反应。通过反相HPLC纯化产物，获得45mg的115。MS(Q1)522.2(M)⁺。

实施例41  4-(2-((4-甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-5-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉116

用等份的1M碳酸钠(3当量)和乙腈将5-氯-2-((4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶、1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基硼酸(1.2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将该溶液在130℃下微波处理15分钟。加入乙腈，将该溶液过滤。所得有机层通过反相硅胶色谱纯化，获得产物116。

实施例42  5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代-N-(4-吗啉基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺117

经由一般程序B，使4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与4-吗啉代苯胺反应，在纯化之后，获得5-氯-7-吗啉代-N-(4-吗啉代苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺反应，然后再次经由一般程序B使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得117。MS(Q1)492(M⁺)。

实施例43  5-(2-氨基嘧啶-5-基)-N-(4-(甲基磺酰基)苯基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺118

经由一般程序B，使4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与4-甲基磺酰基苯胺反应，在纯化之后，获得5-氯-N-(4-(甲基磺酰基)苯基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺反应，然后再次经由一般程序B使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得118。MS(Q1)485(M⁺)。

实施例44  5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代-N-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺119

经由一般程序B，使4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与苯胺反应，在纯化之后，获得5-氯-7-吗啉代-N-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺反应，然后再次经由一般程序B使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得119。MS(Q1)407(M⁺)。

实施例45  5-(2-(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺120

经由一般程序A，使4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基-3-硼酸反应，获得粗制5-氯-2-(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶反应，然后再次经由一般程序A使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得120。MS(Q1)471(M⁺)。

实施例46  N-(3-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苯基)甲磺酰胺121

经由一般程序A，使4-(5-氯-2碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与3-(甲基磺酰基氨基)苯基硼酸反应，获得粗制3-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-N-甲基磺酰基苯胺，其然后再次经由一般程序A使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得121。MS(Q1)485(M)⁺。

实施例47  5-(2-((4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺122

用等份1M碳酸钠(3当量)和乙腈将5-氯-2-((4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶、5-嘧啶-2-胺硼酸(1.2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将该溶液在130℃下微波处理8分钟。去除溶剂，通过反相硅胶色谱纯化所得残留物，获得122。

实施例48  5-(7-吗啉代-2-(6-吗啉代吡啶-3-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺123

经由一般程序A，使4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与4-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)吗啉反应，获得粗制5-氯-7-吗啉代-2-(6-吗啉代吡啶-3-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，然后再次经由一般程序A使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得123。MS(Q1)478(M⁺)

实施例49  N-(3-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苯基)乙酰胺124

经由一般程序A，使4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与(3-乙酰基氨基苯基)硼酸反应，获得粗制N-(3-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苯基)乙酰胺，然后再次经由一般程序A使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，获得124。MS(Q1)449(M)⁺。

实施例50  N-(4-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苯基)甲磺酰胺125

经由一般程序A，使4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与N-甲基磺酰基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯胺反应，获得粗制4-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-N-甲基磺酰基苯胺，然后再次经由一般程序A使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得125。MS(Q1)485(M)⁺。

实施例51  N-(3-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苄基)甲磺酰胺126

经由一般程序A，使4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与3-((甲基磺酰基氨基)甲基)苯基硼酸反应，获得粗制(3-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苯基)-N-甲基磺酰基甲胺，然后再次经由一般程序A使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得126。MS(Q1)499(M)⁺。

实施例52  5-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺127

经由一般程序A，使4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-胺反应，获得粗制5-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)吡啶-2-胺，然后再次经由一般程序A使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得127。MS(Q1)408(M)⁺。

实施例53  5-(2-(4-甲氧基吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺128

经由一般程序A，使4-(5-氯-2-碘噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉18与4-甲氧基吡啶-3-基-3-硼酸反应，获得粗制5-氯-2-(4-甲氧基吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶，然后再次经由一般程序A使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得128。MS(Q1)423(M)⁺。

实施例54  4-(5-(1H-吲唑-4-基)-2-((4-甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉129

将5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶在四氢呋喃中制浆，并在氮气下冷却至-78℃。缓慢加入庚烷/四氢呋喃/乙基苯中的2当量的2M二异丙基酰胺锂，并将该溶液搅拌30分钟。加入二甲基甲酰胺(6当量)，并将溶液在-78℃下搅拌另外1小时。将该溶液温热至0℃，加入冰冷的0.1N盐酸，将溶液温热至室温，然后用二氯甲烷萃取。有机层用硫酸钠干燥并浓缩，获得5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-甲醛。

将5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-甲醛与1-甲基磺酰基哌嗪盐酸盐(1.45当量)、乙酸钠(1.45当量)和原甲酸三甲酯(1.45当量)一起溶解在二氯甲烷中。将该溶液搅拌过夜。加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.35当量)，在室温下保持三小时之后，用饱和碳酸氢钠溶液猝灭反应液。水相用二氯甲烷萃取，用硫酸钠干燥，通过硅胶色谱纯化，获得5-氯-2-((4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶。

将5-氯-2-((4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶、1H-吲唑-4-基-4-硼酸(1.2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)在等份的碳酸钠水溶液(1M，3当量)和乙腈的溶液中混合。将该溶液在130℃下微波处理18分钟。加入另外0.1当量的反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)，将该溶液在130℃下微波处理另外20分钟。加入乙腈，将该溶液过滤。有机层通过反相色谱纯化，获得灰白色固体状的129。

实施例55  2-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)丙-2-醇130

用等份的1M碳酸钠水溶液(3当量)和乙腈将2-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)丙-2-醇、5-嘧啶-2-胺硼酸68(1.2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将该溶液在130℃下微波处理15分钟。将该溶液蒸发至干，通过反相硅胶色谱纯化，获得产物130。

实施例56  5-(7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺131

经由一般程序A，使4-(5-氯噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉14与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得131。

实施例57  5-(2-(3-(甲基磺酰基)苯基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺132

经由一般程序A，使5-氯-2碘7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶与3-(甲基磺酰基)苯基硼酸反应，获得粗制5-氯-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶，然后再次经由一般程序A使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得132。MS(Q1)470(M⁺)

实施例58  5-(2-氨基嘧啶-5-基)-N-(2-(甲基磺酰基)乙基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺133

经由一般程序C，使用2.8当量的三乙胺，使5-氯-2-(甲基磺酰基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶与2-(甲基磺酰基)乙胺(HCl盐)反应，获得粗制5-氯-N-(2-(甲基磺酰基)乙基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺，然后再次经由一般程序C使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得133。MS(Q1)437(M⁺)

实施例59  2-(4-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醇134

经由一般程序C，使5-氯-2-(甲基磺酰基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶与2-(哌嗪-1-基)乙醇反应，获得粗制2-(4-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醇，然后再次经由一般程序C使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得134。MS(Q1)444(M⁺)

实施例60  5-(2-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺135

经由一般程序C，使用2.8当量的三乙胺，使5-氯-2-(甲基磺酰基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶与1-甲基磺酰基哌嗪(HCl盐)反应，获得粗制5-氯-2-(4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶，然后再次经由一般程序C使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得135。MS(Q1)478(M⁺)

实施例61  5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代-N-(2-吗啉代乙基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺136

经由一般程序C，使5-氯-2-(甲基磺酰基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶与2-吗啉代乙胺反应，获得粗制5-氯-7-吗啉代-N-(2-吗啉代乙基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺，然后再次经由一般程序C使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-胺反应，通过反相HPLC纯化之后获得136。MS(Q1)444(M⁺)

实施例62  2-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)丙-2-醇137

将5-氯-2-(甲基磺酰基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶在无水甲醇/四氢呋喃(1∶10)中制浆。将该溶液在氮气下冷却至0℃，按4份加入硼氢化钠(1.1当量)。将溶液在0℃下搅拌30分钟。如果需要加入另外0.1当量的硼氢化钠。真空脱除溶剂，通过硅胶色谱(等梯度1∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯)纯化所得残留物。分离所得白色固体状的4-(5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉16。

将4-(5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉16在四氢呋喃中制浆，并在氮气下冷却至-78℃。缓慢加入庚烷/四氢呋喃/乙基苯中的2当量的2M二异丙基酰胺锂，并将该溶液搅拌30分钟。加入丙酮(6当量)，并将溶液在-78℃下搅拌另外1小时。加入冰，将溶液温热至室温，然后用二氯甲烷萃取。有机层用硫酸钠干燥，浓缩。在硅胶上纯化所得残留物，获得浅黄色固体状的2-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)丙-2-醇。

用等份1M碳酸钠水溶液(3当量)和乙腈将2-(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)丙-2-醇、5-嘧啶-2-胺硼酸(1.2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将溶液在130℃下微波处理15分钟。将溶液蒸发至干，通过反相硅胶色谱纯化，获得产物137。

实施例63  5-(7-吗啉代-2-(噻唑-4-基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺138

将5-氯-2-(甲硫基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶与4-(三丁基甲锡烷基)噻唑(1.1当量)、氟化铯(2当量)、碘化铜(2当量)、四(三苯基膦)钯(0.1当量)在二甲基甲酰胺中混合，并110℃下微波处理15分钟。加入二氯甲烷，通过二氧化硅过滤溶液，用甲醇洗涤。将有机层蒸发至干，通过硅胶色谱纯化所得残留物，获得浅黄色固体状5-氯-7-吗啉代-2-(噻唑-4-基)噻唑并[4，5-d]嘧啶。

用等份1M碳酸钠(3当量)和乙腈将5-氯-7-吗啉代-2-(噻唑-4-基)噻唑并[4，5-d]嘧啶、5-嘧啶-2-胺硼酸(1.2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将溶液在130℃下微波处理15分钟。加入乙腈，过滤溶液。通过反相硅胶色谱纯化所得有机层，获得产物138。MS数据：(ESI+)：MH+399。

实施例64  5-(2，7-二吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺139

在150mL二氯甲烷中溶解4-氨基-2-甲硫基-5-噻唑羧酸甲酯(0.05mol)，并在氮气下冷却至-78℃。搅拌，缓慢加入0.07mol(1.4当量)氯磺酰基异氰酸酯，获得棕色溶液。将该反应缓慢温热至0℃，形成白色沉淀。30分钟之后，将溶液真空蒸发，再悬浮于40mL的6N盐酸(4当量)中，加热至100℃。30分钟之后，将溶液冷却到室温，用饱和碳酸钠中和，随后用饱和碳酸氢钠中和。通过过滤将白色固体分离，获得2-(甲硫基)-4-脲基噻唑-5-羧酸甲酯76。

将2-(甲硫基)-4-脲基噻唑-5-羧酸甲酯悬浮于2M氨的甲醇(100当量)溶液中。将该溶液回流过夜，冷却到室温，并过滤(大规模，该反应在密封管内进行)。所得白色固体2-(甲硫基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-5，7-二醇77用苯研制，在高度真空下干燥过夜。

向2-(甲硫基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-5，7-二醇77中加入三氯氧化磷(25当量)，并将所得溶液冷却至-40℃。缓慢加入二异丙基乙胺(6当量)。然后将溶液加热至120℃过夜，获得棕色溶液。将该溶液冷却到室温，倾入冰水中。加入氢氧化铵(28％溶液)，达到中性pH。溶液用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥，浓缩。将粗制棕色固体在甲醇中制浆，加入吗啉(6当量)。将溶液在室温下搅拌30分钟，真空脱除溶剂，加入乙酸乙酯。有机物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。对沉淀和含产物的有机层均进行硅胶色谱，获得5-氯-2-(甲硫基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶78和5-氯-2，7-二吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶79。

用等份的1M碳酸钠(3当量)和乙腈将5-氯-2，7-二吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶79、5-嘧啶-2-胺硼酸(1.2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将溶液在150℃下微波处理10分钟。加入另外0.1当量的反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)，并将溶液在150℃下微波处理另外10分钟。加入水，将溶液过滤。通过反相硅胶色谱纯化所得沉淀，获得139。

实施例65  N-(3-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)苯基)乙酰胺140

用等份的1M碳酸钠水溶液(3当量)和乙腈将4-(5-氯-2-碘噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉27、3-乙酰氨基-苯基硼酸(1.2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将溶液在90℃下微波处理10分钟。加入水，并将溶液过滤。将含水层干燥，并与5-嘧啶-2-胺硼酸(1.2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)混合，用等份的1M碳酸钠水溶液(3当量)和乙腈制浆。将溶液在150℃下微波处理10分钟。加入水，将溶液过滤。通过反相硅胶色谱纯化所得沉淀，获得140。

实施例66  (5-(1H-吲唑-4-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲酮141

将4-(5-氯噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉16溶于四氢呋喃中，并加入碘(3当量)。将溶液冷却至-50℃，经10分钟的时间加入双(三甲基甲硅烷基)酰胺钾(1.2当量的0.5M甲苯溶液)。将溶液温热至室温，并搅拌过夜。加入水以猝灭该反应，真空脱除四氢呋喃。将残留物溶于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥。将该溶液浓缩，通过硅胶色谱纯化，获得4-(5-氯-2-碘噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉27。

将4-(5-氯-2-碘噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉27溶于四氢呋喃中，并与三乙胺、1-甲基磺酰基哌嗪盐酸盐(2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)混合。在55℃下，用在一氧化碳气球下搅拌的一氧化碳吹洗溶液过夜。将溶液冷却至室温。加入水，将溶液过滤，获得棕褐色产物(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)(4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)甲酮。

用等份的1M碳酸钠水溶液(3当量)和乙腈将(5-氯-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)(4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)甲酮、1H-吲唑-4-基-4-硼酸(2.5当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将溶液在140℃下微波处理10分钟。加入水，将溶液过滤。所得沉淀用二氯甲烷洗涤，有机层先后通过硅胶色谱和反相硅胶色谱纯化，获得产物141。

实施例67  5-(2-(3-甲基磺酰基)苯基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺142

用等份的1M碳酸钠(3当量)和乙腈将5-氯-2-碘-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶、3-(甲基磺酰基)苯基硼酸和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将溶液在90℃下微波处理10分钟。加入水，将溶液过滤。将水层干燥，与5-嘧啶-2-胺硼酸(1.2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)混合，用等份的1M碳酸钠水溶液(3当量)和乙腈制浆。将溶液在150℃下微波处理10分钟。加入水，将溶液过滤。通过反相硅胶色谱纯化所得沉淀，获得142。

实施例68  5-(2-(4-甲氧基吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)吡啶-2-胺143

用等份的1M碳酸钠水溶液(3当量)和乙腈将5-氯-2-碘-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶、4-甲氧基吡啶-3-硼酸水合物和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将溶液在100℃下微波处理10分钟。加入水，并将溶液过滤，获得产物5-氯-2-(4-甲氧基吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶。

5-氯-2-(4-甲氧基吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶与5-吡啶-2-胺硼酸(1.2当量)和反式双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)混合，用等份的1M碳酸钠水溶液(3当量)和乙腈制浆。将溶液在150℃下微波处理10分钟。将溶液真空干燥，通过反相硅胶色谱纯化，获得143。

实施例69  5-(6-氨基吡啶-3-基)-N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺114

将5-氯-2-(甲硫基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶溶于甲醇中。将过硫酸氢钾(oxone)(2.2当量)加入到水(10∶1比率甲醇∶水)中。将溶液在50℃下加热2.5小时。加入另外1当量的过硫酸氢钾(如果需要)，并将溶液在50℃下搅拌另外1小时。将溶液冷却到室温，并且加入二氯甲烷。过滤出所得固体，用二氯甲烷冲洗。有机溶液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤(pH试验中性)，用硫酸镁干燥，浓缩，获得5-氯-2-(甲基磺酰基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶。

将5-氯-2-(甲基磺酰基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶溶于四氢呋喃中，并缓慢加入1-甲基-4-(甲胺)哌啶(1.2当量)。将溶液搅拌过夜，真空脱除溶剂。将残留物溶于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，有机层用硫酸镁干燥。所得黄色油通过硅胶色谱纯化，获得黄色固体状5-氯-N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺。

用等份的1M乙酸钾(3当量)和乙腈将5-氯-N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺、2-氨基吡啶-5-硼酸频那醇酯(2当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将溶液在140℃下微波处理10分钟。真空脱除溶剂，通过反相硅胶色谱纯化所得沉淀，获得产物144。

或者，经由一般程序C，不存在三乙胺下，使5-氯-2-(甲基磺酰基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶与1-甲基-4-(甲基氨基)哌啶反应，获得粗制5-氯-N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺，然后再次经由一般程序C使之与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-胺反应，通过硅胶色谱纯化后获得144。MS(Q1)441(M⁺)

实施例70  5-(2-(4-甲基磺酰基)哌嗪-1-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)吡啶-2-胺145

将5-氯-2-(甲基磺酰基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶(1.0当量)溶于1，2-二氯乙烷(0.1M)中。加入1-甲基磺酰基哌嗪(1.1当量)和乙酸钠(1.1当量)。将溶液在70℃下搅拌2小时，然后真空脱除溶剂。通过硅胶色谱纯化残留物，获得5-氯-2-(4-甲基磺酰基哌嗪-1-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶。将该中间体、5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-胺(2.0当量)、反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.10当量)、1M KOAc(3.0当量)和6X体积的乙腈在150℃下微波处理15分钟。一经完成，将反应混合物真空浓缩，粗混合物通过硅胶色谱纯化，获得145。MS(Q1)477(M⁺)

实施例71  5-(6-氨基吡啶-3-基)-7-吗啉代-N-苯基噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺146

将5-氯-2-(甲基磺酰基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶(1.0当量)和苯胺(1.0当量)在甲苯中在60℃下加热15小时。一经完成，将反应混合物真空浓缩，粗混合物通过硅胶色谱纯化，获得中间体5-氯-7-吗啉代-N-苯基噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺，使该中间体与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-胺(2.0当量)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.10当量)在1M KOAc水溶液(3.0当量)和4X体积的乙腈中反应，并在密封微波反应器中加热至150℃，保持10分钟。一经完成，将反应混合物真空浓缩，粗混合物通过硅胶色谱纯化，获得146。MS(Q1)406(M⁺)

实施例72  4-(5-(1H-吲唑-4-基)-2-(甲硫基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉147

用等份1M乙酸钾(3当量)和乙腈将5-氯-7-吗啉代-2-(噻唑-4-基)噻唑并[4，5-d]嘧啶、1H-吲唑-4-基-4-硼酸(2.5当量)和反式-双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.1当量)制浆。将该溶液在150℃下微波处理15分钟。将溶液过滤，并真空干燥该溶液。所得残留物通过反相硅胶色谱法纯化，获得产物147。

实施例73  p110αPI3K结合试验

结合试验：在Analyst HT 96-384(Molecular Devices Corp，Sunnyvale，CA.)上进行初始偏振实验。通过在终浓度10mM的PIP₂(Echelon-Inc，SaltLake City，UT.)中加入以20μg/mL的终浓度起始的p110αPI3K(Upstate CellSignaling Solutions，Charlottesville，VA)在偏振缓冲液(10mM Tris pH7.5，50mM NaCl，4mM MgCl₂，0.05％Chaps和1mM DTT)中的1∶3连续稀释物来制备荧光偏振亲合(fluorescence polarization affinity)测定用样品。在室温下孵育30分钟后，通过加入终浓度分别为100nM和5nM的GRP-1和PIP3-TAMRA探针(Echelon-Inc，Salt Lake City，UT.)使反应停止。在384孔黑色低容积浅孔板(Proxiplates)(PerkinElmer，Wellesley，MA.)中用若丹明荧光团的标准截止滤光片(cut-off filters)(λex＝530nm；λem＝590nm)读数。对作为蛋白浓度的函数的荧光偏振值进行绘图，通过使用KaleidaGraph软件(Synergy software，Reading，PA)将该数据与4-参数方程式拟合来获得EC₅₀值。该实验还确立在随后的抑制剂竞争实验中使用的恰当蛋白浓度。

通过以下方法测定抑制剂的IC₅₀值：在孔中加入与PIP₂(100mM终浓度)混合的0.04mg/mL p110αPI3K(终浓度)，所述孔含有在偏振缓冲液中的终浓度为25mM ATP的拮抗剂(Cell Signaling Technology，Inc.，Danvers，MA)1∶3连续稀释物。在室温下孵育30分钟后，通过分别加入终浓度100nM和5nM的GRP-1和PIP3-TAMRA探针(Echelon-Inc，Salt Lake City，UT.)来停止反应。在384孔黑色低容积浅孔板(Proxiplates)(PerkinElmer，Wellesley，MA.)中用若丹明荧光团的标准截止滤光片(λex＝530nm；λem＝590nm)读数。对作为拮抗剂浓度的函数的荧光偏振值绘图，通过使用Assay Explorer软件(MDL，San Ramon，CA.)将该数据与4-参数方程式拟合来获得IC₅₀值。

或者使用纯化的重组酶和浓度为1μM的ATP在放射试验中测定PI3K的抑制。在100％DMSO中连续稀释该化合物。将该激酶反应物在室温下孵育1小时，通过加入PBS来终止反应。随后使用S形剂量-反应曲线拟合(可变斜率)来测定IC₅₀值。

实施例74  p110同工型选择性闪烁亲近结合试验

通过放射闪烁亲近试验(SPA，GE Healthcare，Amersham Biosciences)来测定表1中的式Ia和Ib化合物抑制人PI3K同工型α、β、δ和γ的纯化制剂的脂质激酶活性的能力。测定所有四种同工型(α)的50％浓度依赖抑制(Concentration dependent inhibition at 50％)(IC₅₀μMol)，计算α同工型与β、δ和γ同工型相比的效力倍数。

实施例75  体外细胞增殖试验

通过使用下列操作程序的细胞增殖试验来测定式Ia和Ib的化合物的效力(Promega Corp.Technical Bulletin TB288；Mendoza等人(2002)Cancer Res.62：5485-5488)：

1.将在培养基中含有大约10⁴细胞(PC3，Detroit562或MDAMB361.1)的100μl细胞培养物等分试样沉积在384孔不透明壁板的每一孔内。

2.制备含有培养基但无细胞的对照孔。

3.将该化合物加入到实验孔内，孵育3-5天。

4.将板平衡至室温，保持大约30分钟。

5.加入其体积等于每孔内所存在的细胞培养基体积的CellTiter-Glo试剂。

6.在定轨振荡器上将内容物混合2分钟，以诱发细胞裂解。

7.将板在室温下孵育10分钟，以稳定发光信号。

8.记录发光，并在图中报告为RLU＝相对发光单位。

或者，将细胞以最佳密度接种于96孔板上，在试验化合物的存在下孵育4天。随后将Alamar Blue^TM加入到试验培养基中，将细胞孵育6小时，然后在544nm激发、590nm发射下进行读数。使用S形剂量-反应曲线拟合来计算EC₅₀值。

实施例76  Caco-2渗透性

以1×10⁵细胞/cm²的密度将Caco-2细胞接种到Millipore Multiscreen板上，培养20天。随后进行化合物渗透性评价。将化合物施加于单层细胞的顶端面(A)上，对进入基底外侧(B)区室的化合物渗透进行测定。这以反向(B-A)进行，以研究主动运输。计算每一种化合物的渗透系数值P_app(化合物跨膜渗透率的度量)。基于与具有已确立的人体吸附的对照化合物的比较，将化合物分组为低(P_app＜/＝1.0×10⁶cm/s)或高(P_app＞/＝1.0×10⁶cm/s)吸附电位。

实施例77  肝细胞清除率

使用冷藏的人肝细胞悬浮液。在1mM或3μM的化合物浓度和0.5×10⁶存活细胞/mL的细胞密度下孵育。孵育中的最终DMSO浓度为约0.25％。还在不存在细胞的条件下进行对照孵育，以揭露任何的非酶促降解。在0、5、10、20、40和60分钟时(对照样品仅在60分钟时)从孵育混合物中取双份样品(50μL)，加入到含甲醇的内标(100μL)中，以终止反应。使用甲苯磺丁脲、7-羟基香豆素和睾酮作为对照化合物。将样品离心，将每一时间点的上清液汇集，通过LC-MSMS分析。从ln峰面积比(母体化合物峰面积/内标峰面积)对时间的图线(plot)，计算内在清除率(CL_int)如下：CL_int(μl/min/百万细胞)＝Vxk，其中k是消除速度常数，由ln浓度对时间的图线的梯度获得；V是源自孵育体积的体积术语，表示为μL 10⁶细胞^-1。

实施例78  细胞色素P450的抑制

可通过抗CYP450靶标(例如1A2、2C9、2C19、2D6、3A4)来筛选本发明化合物，所述靶标采用一式两份10个浓度，最高浓度使用100μM。使用标准抑制剂(呋拉茶碱、磺胺苯吡唑、反苯环丙胺、奎尼丁、酮康唑)作为对照。使用BMG LabTechnologies PolarStar以荧光模式进行读板。

实施例79  细胞色素P450的诱导

将新鲜分离自单个供体的人肝细胞培养48小时，然后添加三种浓度的试验化合物并孵育72小时。在孵育结束前30分钟和1小时，加入CYP3A4和CYP1A2的探针底物。在72小时，移出细胞和培养基，通过LC-MS/MS定量每一种探针底物的代谢程度。通过使用一式三份的在某一浓度下孵育的各P450s的诱导剂来控制实验，以测定细胞色素P450酶的诱导程度。

实施例80  血浆蛋白的结合

在缓冲液和10％血浆(v/v，基于缓冲液)中制备试验化合物溶液(5μm，0.5％最终DMSO浓度)。组装96孔HT渗析板，以使通过半渗透纤维素膜将每一孔分成两部分。将缓冲液加入到膜的一侧，将血浆溶液加入到另一侧；然后在37℃下按一式三份孵育超过2小时。然后倒空小室(cells)，将每一批化合物的溶液合并为两组(无血浆和含血浆)，然后使用用于无血浆溶液(6个点)和含血浆溶液(7个点)的两套校准标准品通过LC-MSMS进行分析。表1化合物的未结合分数值计算为：高蛋白结合化合物(＞/＝90％结合)具有＜/＝0.1的Fu。

实施例81  hERG通道阻断

使用已确立的通量(flux)方法，评价表1化合物对自稳定表达hERG钾通道的HEK-294细胞的铷流出通量(efflux)的调节。在含有RbCl的培养基中制备细胞，将平板接种到96孔板内，使之生长过夜，以形成细胞单层。通过在室温下抽吸该培养基并用3×100μL的预孵育缓冲液(含有低[K⁺])洗涤每一孔来启动流出通量实验。在最终的抽吸之后，将50μL工作储存(workingstock)(2×)化合物加入到每一孔内，在室温下孵育10分钟。然后将50μL刺激缓冲液(含有高[K⁺])加入到每一孔内，获得最终的试验化合物浓度。然后将细胞板在室温下孵育另外10分钟。随后将来自每一孔的80μL上清液转移到96孔板的同等孔内，通过原子发射光谱法进行分析。根据10pt重复IC₅₀曲线(n＝2)从最高浓度100μM筛选化合物。

以上描述仅用于说明本发明的原理。此外，因为许多修改和变化对于本领域技术人员来说是显而易见的，所以不希望将本发明局限于如上所述的确切结构和方法。因此，可认为所有适合的修改和等同物均落入所附权利要求限定的本发明范围内。

说明书和随附权利要求中所使用的措词“包括”、“包含”和“含有”意在说明所述特征、整数、组分或步骤的存在，但其不排除一种或多种其它特征、整数、组分、步骤或基团的存在或增加。

Claims (45)

1.选自式Ia和式Ib的化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

R¹选自H、F、Cl、Br、I、CN、-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹、-C(R¹⁴R¹⁵)_nNR¹²C(＝Y)R¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_nNR¹²S(O)₂R¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_mOR¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_nS(O)₂R¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_nS(O)₂NR¹⁰R¹¹、-C(OR¹⁰)R¹¹R¹⁴、-C(＝Y)R¹⁰、-C(＝Y)OR¹⁰、-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-C(＝Y)NR¹²OR¹⁰、-C(＝O)NR¹²S(O)₂R¹⁰、-C(＝O)NR¹²(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹、-NO₂、-NR¹²C(＝Y)R¹¹、-NR¹²C(＝Y)OR¹¹、-NR¹²C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-NR¹²S(O)₂R¹⁰、-NR¹²SO₂NR¹⁰R¹¹、-SR¹⁰、-S(O)₂R¹⁰、-S(O)₂NR¹⁰R¹¹、-SC(＝Y)R¹⁰、-SC(＝Y)OR¹⁰、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基；

R³是碳连接的单环杂芳基、碳连接的稠合双环C₃-C₂₀杂环基或碳连接的稠合双环C₁-C₂₀杂芳基，其中所述单环杂芳基、稠合双环C₃-C₂₀杂环基和稠合双环C₁-C₂₀杂芳基任选被一个或多个选自以下的基团所取代：F、Cl、Br、I、-CN、-NR¹⁰R¹¹、-OR¹⁰、-C(O)R¹⁰、-NR¹⁰C(O)R¹¹、-N(C(O)R¹¹)₂、-NR¹⁰C(O)NR¹⁰R¹¹、-NR¹²S(O)₂R¹⁰、-C(＝O)OR¹⁰、-C(＝O)NR¹⁰R¹¹、C₁-C₁₂烷基和(C₁-C₁₂烷基)-OR¹⁰；

R¹⁰、R¹¹和R¹²独立地是H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基，

或者R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成C₂-C₂₀杂环，所述杂环任选被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：氧代、(CH₂)_mOR¹²、NR¹²R¹²、CF₃、F、Cl、Br、I、SO₂R¹²、C(＝O)R¹²、NR¹²C(＝Y)R¹²、NR¹²S(O)₂R¹²、C(＝Y)NR¹²R¹²、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基；

R¹⁴和R¹⁵独立地选自H、C₁-C₁₂烷基或-(CH₂)_n-芳基，

或者R¹⁴和R¹⁵与它们所连接的原子一起形成饱和或部分不饱和的C₃-C₁₂碳环；

其中所述烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：F、Cl、Br、I、CN、CF₃、-NO₂、氧代、R¹⁰、-C(＝Y)R¹⁰、-C(＝Y)OR¹⁰、-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_nNR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_nOR¹⁰、-NR¹⁰R¹¹、-NR¹²C(＝Y)R¹⁰、-NR¹²C(＝Y)OR¹¹、-NR¹²C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹²SO₂R¹⁰、＝NR¹²、OR¹⁰、-OC(＝Y)R¹⁰、-OC(＝Y)OR¹⁰、-OC(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-OS(O)₂(OR¹⁰)、-OP(＝Y)(OR¹⁰)(OR¹¹)、-OP(OR¹⁰)(OR¹¹)、-SR¹⁰、-S(O)R¹⁰、-S(O)₂R¹⁰、-S(O)₂NR¹⁰R¹¹、-S(O)(OR¹⁰)、-S(O)₂(OR¹⁰)、-SC(＝Y)R¹⁰、-SC(＝Y)OR¹⁰、-SC(＝Y)NR¹⁰R¹¹、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基；

Y是O、S或NR¹²；

m是0、1、2、3、4、5或6；以及

n是1、2、3、4、5或6；

条件是，当R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹时，其中R¹⁴和R¹⁵独立地选自H或C₁-C₆烷基，m是0、1或2，且R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成具有3-20个环原子的含氮杂环，所述环任选如以上所定义地被取代，则R³不是未取代或取代的吲哚基。

2.权利要求1所述的化合物，其为式Ia的化合物：

3.权利要求1所述的化合物，其为式Ib的化合物：

4.权利要求1所述的化合物，其中R³是选自以下的单环杂芳基：吡啶基、异噁唑基、咪唑基、吡唑基、吡咯基、噻唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噁唑基、呋喃基、噻吩基、***基和四唑基。

5.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹，其中m是1，且R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成选自吗啉基、哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基的C₂-C₂₀杂环。

6.权利要求5所述的化合物，其中所述C₂-C₂₀杂环被一个或多个选自以下的基团所取代：NR¹²R¹²、CF₃、F、Cl、Br、I、SO₂R¹²、C(＝O)R¹²、NR¹²C(＝Y)R¹²、NR¹²S(O)₂R¹²、C(＝Y)NR¹²R¹²和C₁-C₁₂烷基。

7.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_nNR¹²S(O)₂R¹⁰，其中n是1或2；R¹²、R¹⁴和R¹⁵独立地选自H和C₁-C₁₂烷基；且R¹⁰是C₁-C₁₂烷基或C₆-C₂₀芳基。

8.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_nOR¹⁰，其中n是1或2，且R¹⁰、R¹⁴和R¹⁵独立地选自H和C₁-C₁₂烷基。

9.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_nS(O)₂R¹⁰，其中n是1或2，且R¹⁴和R¹⁵是H。

10.权利要求9所述的化合物，其中R¹⁰是C₁-C₁₂烷基或C₆-C₂₀芳基。

11.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_nS(O)₂NR¹⁰R¹¹，其中n是1或2，且R¹⁴和R¹⁵是H。

12.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹，其中Y是O，且R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成选自吗啉基、哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基的C₂-C₂₀杂环。

13.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹，其中Y是O，且R¹⁰和R¹¹独立地选自H和C₁-C₁₂烷基。

14.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹，其中Y是O，且R¹⁰和R¹¹独立地选自H、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基。

15.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-NHR¹¹，其中R¹¹是C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基。

16.权利要求19所述的化合物，其中R¹²是苯基或4-吡啶基。

17.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-NR¹²C(＝Y)R¹¹，其中Y是O，R¹²是H或C₁-C₁₂烷基，且R¹¹是C₁-C₁₂烷基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基。

18.权利要求1所述的化合物，其中R¹是-NR¹²S(O)₂R¹⁰，其中R¹²是H或C₁-C₁₂烷基，且R¹⁰是C₁-C₁₂烷基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基。

19.权利要求1所述的化合物，其中R¹是S(O)₂NR¹⁰R¹¹，其中R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成选自吗啉基、哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基的C₂-C₂₀杂环。

20.权利要求1所述的化合物，其中R¹是S(O)₂NR¹⁰R¹¹，其中R¹⁰和R¹¹独立地选自H和C₁-C₁₂烷基。

21.权利要求1所述的化合物，其中R¹是C₂-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基或C₂-C₈炔基。

22.权利要求21所述的化合物，其中R¹是被C₂-C₂₀杂环基取代的C₂-C₈炔基，所述杂环基选自吗啉基、哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基。

23.权利要求21所述的化合物，其中R¹选自以下基团：

和

24.权利要求1所述的化合物，其中R¹是C₆-C₂₀芳基。

25.权利要求24所述的化合物，其中R¹是被一个或多个选自以下的基团所取代的苯基：N-甲基羧酰胺、异丙基磺酰基氨基、甲基磺酰基、2-羟基-2-甲基丙酰胺、2-羟基丙酰胺、2-甲氧基乙酰胺、(丙-2-醇)磺酰基、2-氨基-2-甲基丙酰胺、2-氨基乙酰胺、2-羟基乙酰胺、甲基磺酰基氨基、2-(二甲基氨基)乙酰胺、氨基、乙酰氨基、羧酰胺、(4-甲基磺酰基哌嗪基)-1-甲基、(4-甲基哌嗪基)-1-甲基、羟甲基和甲氧基。

26.权利要求36所述的化合物，其中R¹是2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基或5-嘧啶基。

27.权利要求1所述的化合物，其中R³选自：

其中波浪线表示连接部位。

28.权利要求1所述的化合物，其中R³选自：

其中波浪线表示连接部位。

29.权利要求38所述的化合物，其中R³是1H-吲唑-4-基。

30.权利要求1所述的化合物，其中R³选自以下结构：

其中波浪线表示连接部位。

31.权利要求1所述的化合物，其中R³选自下列结构：

其中波浪线表示连接部位。

32.权利要求1所述的化合物，其中R³选自下列结构：

其中波浪线表示连接部位。

33.权利要求1所述的化合物，其中所述单环杂芳基、稠合双环C₃-C₂₀杂芳基或稠合双环C₁-C₂₀杂芳基被一个或多个选自以下的基团所取代：F、-CF₃、-NH₂、-NHCH₃、-OH、-OCH₃、-C(O)CH₃、-NHC(O)CH₃、-N(C(O)CH₃)₂、-NHC(O)NH₂、-CO₂H、-CHO、-CH₂OH、-C(＝O)NHCH₃、-C(＝O)NH₂和-CH₃。

34.化合物，其选自：

N-甲基-5-(2-((4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)吡啶-2-胺；

5-(2-(2-甲氧基丙-2-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)-N-甲基吡啶-2-胺；

5-(2-(2-甲氧基丙-2-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)-N-甲基嘧啶-2-胺；

5-(2-(2-甲氧基丙-2-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

N-甲基-5-(2-(3-(甲基磺酰基)苯基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)吡啶-2-胺；

(S)-2-羟基-1-(4-((7-吗啉代-5-(喹啉-3-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)丙-1-酮；

(S)-2-羟基-1-(4-((5-(2-(甲基氨基)嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)丙-1-酮；

(S)-1-(4-((5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)-2-羟基丙-1-酮；

4-(2-(3-(甲基磺酰基)苯基)-5-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉；

N，N-二甲基-5-(2-((4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

5-(2-((4-甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)吡啶-2-胺；

4-(2-((4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-5-(喹啉-3-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉；

N-甲基-5-(2-((4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

N-(3-(5-(2-(甲基氨基)嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苄基)甲磺酰胺；

N-(3-(7-吗啉代-5-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苄基)甲磺酰胺；

4-(2-((4-甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-5-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉；

5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代-N-(4-吗啉代苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺；

5-(2-氨基嘧啶-5-基)-N-(4-(甲基磺酰基)苯基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺；

5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代-N-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺；

5-(2-(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

N-(3-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苯基)甲磺酰胺；

5-(2-((4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

5-(7-吗啉代-2-(6-吗啉代吡啶-3-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

N-(3-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苯基)乙酰胺；

N-(4-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苯基)甲磺酰胺；

N-(3-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)苄基)甲磺酰胺；

5-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

5-(2-(4-甲氧基吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

4-(5-(1H-吲唑-4-基)-2-((4-甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-7-基)吗啉；

2-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)丙-2-醇；

5-(7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

5-(2-(3-(甲基磺酰基)苯基)-7-吗啉代噻唑并[5，4-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

5-(2-氨基嘧啶-5-基)-N-(2-(甲基磺酰基)乙基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺；

2-(4-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醇；

5-(2-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代-N-(2-吗啉代乙基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺；

2-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)丙-2-醇；

5-(7-吗啉代-2-(噻唑-4-基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

5-(2，7-二吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

N-(3-(5-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)苯基)乙酰胺；

(5-(1H-吲唑-4-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-基)(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)甲酮；

5-(2-(3-(甲基磺酰基)苯基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)嘧啶-2-胺；

5-(2-(4-甲氧基吡啶-3-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)吡啶-2-胺；

5-(6-氨基吡啶-3-基)-N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺；

5-(2-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)-7-吗啉代噻唑并[4，5-d]嘧啶-5-基)吡啶-2-胺；

5-(6-氨基吡啶-3-基)-7-吗啉代-N-苯基噻唑并[4，5-d]嘧啶-2-胺；以及

4-(5-(1H-吲唑-4-基)-2-(甲硫基)噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吗啉。

35.权利要求1或权利要求34所述的化合物，其用于治疗癌症的方法，所述癌症选自乳腺癌、卵巢癌、***、***癌、睾丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、成胶质细胞瘤、神经母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡状癌、未分化癌、***状癌、***瘤、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、胰腺癌、骨髓病、淋巴瘤、毛细胞癌、口腔癌、鼻咽癌、咽癌、唇癌、舌癌、口癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑和中枢神经***癌症、霍奇金病和白血病。

36.药物组合物，其包含权利要求1或权利要求34所述的化合物和药学上可接受的载体、助流剂、稀释剂或赋形剂。

37.治疗哺乳动物中的癌症的方法，其包括对所述哺乳动物给予治疗有效量的权利要求1或权利要求34所述的化合物，其中所述癌症选自乳腺癌、卵巢癌、***、***癌、睾丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、成胶质细胞瘤、神经母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡状癌、未分化癌、***状癌、***瘤、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、胰腺癌、骨髓病、淋巴瘤、毛细胞癌、口腔癌、鼻咽癌、咽癌、唇癌、舌癌、口癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑和中枢神经***癌症、霍奇金病和白血病。

38.权利要求37所述的方法，其进一步包括联合给予一种或多种具有抗过度增殖性质的另外化合物。

39.制备药物组合物的方法，其包括将权利要求1所述的化合物与药学上可接受的载体组合。

40.权利要求1所述的化合物在制备用于预防性治疗或治疗性治疗癌症的药物中的用途。

41.权利要求1所述的化合物用于治疗癌症的用途。

42.抑制或调节哺乳动物中PI3K活性的方法，其包括对所述哺乳动物给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

43.试剂盒，其用于治疗PI3K介导的疾病，所述试剂盒包含：

a)第一药物组合物，其包含权利要求1所述的化合物；以及

b)使用说明书。

44.化合物，其选自：

45.制备式Ia或式Ib的化合物的方法，其包括使式IIa或式IIb的化合物与含有单环杂芳基、稠合双环杂环或稠合双环杂芳基的硼酸酯化合物反应：

从而形成式Ia和式Ib的化合物：

其中：

R¹选自H、F、Cl、Br、I、CN、-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹、-C(R¹⁴R¹⁵)_nNR¹²C(＝Y)R¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_nNR¹²S(O)₂R¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_mOR¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_nS(O)₂R¹⁰、-(CR¹⁴R¹⁵)_nS(O)₂NR¹⁰R¹¹、-C(OR¹⁰)R¹¹R¹⁴、-C(＝Y)R¹⁰、-C(＝Y)OR¹⁰、-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-C(＝Y)NR¹²OR¹⁰、-C(＝O)NR¹²S(O)₂R¹⁰、-C(＝O)NR¹²(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹、-NO₂、-NR¹²C(＝Y)R¹¹、-NR¹²C(＝Y)OR¹¹、-NR¹²C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-NR¹²S(O)₂R¹⁰、-NR¹²SO₂NR¹⁰R¹¹、-SR¹⁰、-S(O)₂R¹⁰、-S(O)₂NR¹⁰R¹¹、-SC(＝Y)R¹⁰、-SC(＝Y)OR¹⁰、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基；

R³是碳连接的单环杂芳基、碳连接的稠合双环C₃-C₂₀杂环基或碳连接的稠合双环C₁-C₂₀杂芳基，其中所述单环杂芳基、稠合双环C₃-C₂₀杂环基和稠合双环C₁-C₂₀杂芳基任选被一个或多个选自以下的基团所取代：F、Cl、Br、I、-CN、-NR¹⁰R¹¹、-OR¹⁰、-C(O)R¹⁰、-NR¹⁰C(O)R¹¹、-N(C(O)R¹¹)₂、-NR¹⁰C(O)NR¹⁰R¹¹、-NR¹²S(O)₂R¹⁰、-C(＝O)OR¹⁰、-C(＝O)NR¹⁰R¹¹、C₁-C₁₂烷基和(C₁-C₁₂烷基)-OR¹⁰；

R¹⁰、R¹¹和R¹²独立地是H、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基或C₁-C₂₀杂芳基，

或者R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成C₂-C₂₀杂环，所述杂环任选被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：氧代、(CH₂)_mOR¹²、NR¹²R¹²、CF₃、F、Cl、Br、I、SO₂R¹²、C(＝O)R¹²、NR¹²C(＝Y)R¹²、NR¹²S(O)₂R¹²、C(＝Y)NR¹²R¹²、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基；

R¹⁴和R¹⁵独立地选自H、C₁-C₁₂烷基或-(CH₂)_n-芳基，

或者R¹⁴和R¹⁵与它们所连接的原子一起形成饱和或部分不饱和的C₃-C₁₂碳环；

其中所述烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：F、Cl、Br、I、CN、CF₃、-NO₂、氧代、R¹⁰、-C(＝Y)R¹⁰、-C(＝Y)OR¹⁰、-C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_nNR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_nOR¹⁰、-NR¹⁰R¹¹、-NR¹²C(＝Y)R¹⁰、-NR¹²C(＝Y)OR¹¹、-NR¹²C(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹²SO₂R¹⁰、＝NR¹²、OR¹⁰、-OC(＝Y)R¹⁰、-OC(＝Y)OR¹⁰、-OC(＝Y)NR¹⁰R¹¹、-OS(O)₂(OR¹⁰)、-OP(＝Y)(OR¹⁰)(OR¹¹)、-OP(OR¹⁰)(OR¹¹)、-SR¹⁰、-S(O)R¹⁰、-S(O)₂R¹⁰、-S(O)₂NR¹⁰R¹¹、-S(O)(OR¹⁰)、-S(O)₂(OR¹⁰)、-SC(＝Y)R¹⁰、-SC(＝Y)OR¹⁰、-SC(＝Y)NR¹⁰R¹¹、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₂碳环基、C₂-C₂₀杂环基、C₆-C₂₀芳基和C₁-C₂₀杂芳基；

Y是O、S或NR¹²；

m是0、1、2、3、4、5或6；以及

n是1、2、3、4、5或6；

条件是，当R¹是-(CR¹⁴R¹⁵)_mNR¹⁰R¹¹时，其中R¹⁴和R¹⁵独立地选自H或C₁-C₆烷基，m是0、1或2，且R¹⁰和R¹¹与它们所连接的氮一起形成具有3-20个环原子的含氮杂环，所述环任选如以上所定义地被取代，则R³不是未取代或取代的吲哚基。