CN101407532B - 一种用栀子为原料制备栀子苷的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用栀子为原料制备栀子苷的方法，。它利用HPD-100型大孔树脂吸附栀子提取液中其它成分和栀子苷能力的强弱不同，用特定的速度上样，以不同浓度的乙醇溶液、以不同洗脱速度进行洗冲洗后，合并所有洗脱后剩余药液，经喷雾干燥制得栀子苷成品。提取后栀子药渣可以用作饲料添加剂或肥料。整个工艺涉及技术没有产生固体废渣，没有产生工艺废水，是一种环保型工艺，适合企业生产应用，产品质量好，经济价值高。

Description

一种用栀子为原料制备栀子苷的方法

技术领域

本发明涉及一种从中药材提取有效成分的制备方法，特别地，涉及一种用栀子为原料制备栀子苷的方法。

背景技术

栀子，首载于<神农本草经>名要丹。列为中品<名医别录>称作越桃，<药性论>始称山栀子，又称山栀、生山栀子。<唐本草>又称枝子。在我国应用与临床治疗已有1600多年历史，现以茜草科常绿灌木植物栀子<GardeniaJasminotdes>的成熟果实入药、其味苦、性寒。归心、肝、胃经、，具有清热利尿、泻水除烦，凉血解毒等功效。常用于热病虚烦不眠，黄疸，淋病，消渴，目赤，咽痛，吐血，血痢疫病，扭伤肿痛等症。有保肝利胆、促进胰腺分泌、降压、防治动脉粥样硬化及抗血栓形成、解热镇痛、抗菌和抗炎及治疗软组织损伤的作用，对诱变剂变活性和对细毛免疫有抑制作用，且无致癌、致畸、致突变的毒性。神经营养因子(NCF)是人体神经***最重要的生物活性分子之一，而栀子中化合物栀子苷对其有促进作用，对神经缺氧起保护作用。

国内外所公认的中药栀子有效成分为环烯醚萜类物质，栀子所含的环烯醚萜类物质包括栀子苷、羟异栀子苷、栀子苷酸等，其中活性成分最高的是栀子苷，中国药典中栀子药材标志性成分为栀子苷。栀子苷是从茜草科植物栀子的干燥成熟果实中运用高科技生产工艺提取精制而成的产品。栀子苷为环烯醚萜苷类化合物，异名京尼平苷，都梅子素葡萄糖苷去羟栀子苷，栀子苷又是生产栀子蓝、栀子红、栀子紫的中间体和生药品的有效单体。因此，对栀子苷的分离、纯化、结晶和含量测定成为对栀子深度开发的关键技术。

栀子苷还有多种药用用途，有报道药理作用表明：栀子苷具有缓泻、镇痛、利胆、抗炎、治疗软组织损伤以及抑制胃液分泌和降低胰淀粉酶等作用，也是用于治疗心脑血管、肝胆等疾病及糖尿病的原料药物，亦可生成农作物增产剂。

中国专利【申请号CN200510026143】一种用栀子果实制备高纯度栀子苷的方法、[申请号CN200510026142]-用栀子果实制备栀子苷、京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷的方法、[申请号CN200510026144]-一种用栀子果实制备总环烯醚萜苷的方法等三项专利大致相同，均用大量水和10％乙醇冲洗后再用低浓度乙醇冲洗环烯醚萜类物质，该工艺过程相对比较繁琐，制备成本高。

中国专利【申请号CN200310111038.8】一种栀子提取物及其制备工艺和它的应用本发明公开了一种栀子提取物，它是以中药栀子为原料制备的含有环烯醚萜苷的提取物。所得栀子提取物中栀子苷重量百分含量仅为30％左右，含量相对较低。

中国专利【申请号CN200510017378.3】公开了栀子的综合利用的一种方法，其中涉及栀子苷的分离以及栀子中多种成分的萃取，充分利用了栀子资源，但其未精制栀子苷。

从20世纪60年代开始研究栀子有效成分的利用，至今仅仅具备生产少量栀子苷产品的能力，而栀子苷的供应在国际市场上一直处于非常紧俏状态。同时在国内随着现代生活水平和生活质量的不断提高，“天然产物”倍受青睐，人们越来越重视天然药品，尤其是中药治疗。因此，应该大力开展栀子提取物的综合利用研究，加大栀子产品在医药、食品等方面的应用开发力度。总之，探索开发栀子系列产品前景广阔。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种用栀子为原料制备栀子苷的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种用栀子为原料制备栀子苷的方法，包括以下步骤：

(1)栀子原药材经切片或粉碎成粗粉，加入8～10倍体积的体积百分比为60％的含水乙醇提取2～3次，每次1.5～2小时；

(2)合并提取后液，离心过滤，滤液减压浓缩回收乙醇至药液相对密度为1.05；

(3)将浓缩后的药液用去离子水稀释至上样药液A440达到60后，上HPD—100型大孔树脂柱，控制上样速度在每小时5～6倍的上柱大孔树脂体积，上样量与上柱大孔树脂体积比为1∶1；收集上柱后药液，药液洗脱一倍上柱大孔树脂体积的去离子水后，用体积百分比为25％的含水乙醇洗脱至洗脱液A238小于0.8，收集洗脱液，然后用体积百分比为70％的含水乙醇洗脱洗脱液；

(4)合并所有洗脱后剩余药液，减压浓缩回收乙醇后，经喷雾干燥得栀子苷。

本发明得有益效果是：整个工艺过程仅使用水和乙醇为提取溶剂，生产过程没有废水、废气产生，所用HPD-100型大孔树脂和乙醇试剂均可回收再利用，适合工业化生产，是一种环保型新技术，得到高纯度天然产品栀子苷

具体实施方式

本发明用栀子为原料制备栀子苷的方法，包括以下步骤：

一、栀子原药材经切片或粉碎成粗粉，加入8～10倍体积(体积百分比为60％)的含水乙醇提取2～3次，每次1.5～2小时。

二、合并提取后液，经离心过滤，滤液经减压浓缩回收乙醇至药液相对密度为1.05。

三、将浓缩后的药液用去离子水稀释至上样药液A440达到60左右后，上HPD—100型大孔树脂柱，控制上样速度在每小时5～6倍的上柱大孔树脂体积，上样量(以浓缩药液体积计)与上柱大孔树脂体积比为1∶1以使大孔树脂充分吸附提取药液中除栀子苷外的其他成分，上样药液中60％左右栀子苷不被树脂吸附。收集上柱后药液，上样完毕后先洗脱一倍上柱大孔树脂体积的去离子水，以冲洗栀子苷。洗脱速度可调节增大。去离子水洗脱收集完毕后，利用HPD—100大孔树脂吸附栀子苷和其它有效成分能力的相对大小，用25％的含水乙醇洗脱被大孔树脂吸附的栀子苷，以洗脱液A238小于0.8时为洗脱终点(洗脱过程时刻观察洗脱液颜色，以控制速度和判定洗脱终点)，洗脱栀子苷较完全后用70％浓度的含水乙醇洗脱剩余有效成分，洗脱速度可调节增大。

四、最后合并所有洗脱后剩余药液，经减压浓缩回收乙醇后分别经喷雾干燥得栀子苷。

实施例1：溶媒的选择

各取100g栀子药材进行试验，提取条件见下表，结果如下：

 

栀子药材量量	提取次数	溶媒名称	溶媒用量	含固量％	OD
						100	2	水1000	1000	30.10	7.97
100	2	30％乙醇	1000	30.08	5.66
						100	2	60％乙醇	1000	25.70	3.88
100	2	95％乙醇	1000	23.72	2.65

综合上表，考虑到提取成本及含固量等因素，60％的含水乙醇提取是最佳浓度。

实施例2：提取时间的选择

取三份100g栀子药材，用60％的含水乙醇提取，提取两次，对提取1小时、2小时、3小时进行比较。

 

药材量	提取次数	时间(hr)	溶媒用量(ml)	含固量％	OD
						100	2	1	60％乙醇1000	25.70％	3.30
100	2	2	60％乙醇1000	28.12％	3.41
						100	2	3	60％乙醇1000	28.5％	3.50

以上实验表明：用60％的含水乙醇提取，提取两次，提取2小时，基本上能将栀子中有效成分提取完全，提取3小时得率基本上没有大的变化。实施例3：提取次数的选择

取三份100g栀子药材，用60％的含水乙醇提取，每次提取时间为2小时，对提取1次、2次、3次进行比较，结果如下：

 

药材量	提取次数	时间(hr)	溶媒用量(ml)	含固量％	OD
						100	1	2	60％乙醇1000	20.50％	3.30
100	2	2	60％乙醇1000	28.12％	3.41
						100	3	2	60％乙醇1000	28.7％	3.55

从上表可以看出，提取两次就可以使桅子果实中的大部分桅子有效成分提取出来，但综合得失依据实际情况，本发明采用提取次数为二次到三次。

实施例4：药液离心试验试验研究

药液经离心后可明显去除大量肉眼可见絮状物杂质

实施例5：树脂型号的选择试验研究

根据栀子黄色素及栀子苷的性质选择HPD-100、HPD-80、HPD-400、D-101、X-5型号的大孔树脂进行比较

各取10g经预处理的树脂加入100ml烧杯中，加入药液中(A238＝178.3、A440＝50.9、OD＝3.5)80ml，静止吸附。3小时后检测药液参数。结果见下表：

 

	HPD-80	HPD-100	HPD-400	D-101	X-5
						A238	53.1	70.0	74.7	89.1	45.2
A440	16.4	18.0	19.8	21.0	14.7
						OD	3.24	3.88	3.77	4.24	3.07

分析：X-5对栀子苷及其它有效成分吸附能力都较强，选择性不高，不利于前期水冲洗栀子苷。因此综合比较选择HPD-100做后续实验。

实施例6：上样栀子药液稀释溶剂的选择试验研究

采用不同溶剂稀释药液，取10g树脂浸泡于相同量的药液，进行静置吸附比较，结果见下表

 

	水	25％乙醇	30％乙醇	40％乙醇
					吸附前A440	50.9	49.0	47.6	46.8
吸附3h后A440	12.4	20.6	29.5	23.0

大孔树脂吸附能力存在饱和，药液中其它成分被大孔树脂吸附的量越大，则代表栀子苷被吸附的量越小，就越有利与前期水洗脱栀子苷，所以直接用水稀释上柱既可。

实施例7：上样液浓度的选择试验研究：

树脂的吸附是一个选择吸附的过程，过高的浓度必然影响吸附，而浓度过低必然会使吸附时间延长，从而降低效率。本实验通过流动上样的方法，使用不同浓度的药液上柱(20ml树脂装入30*1.6cm柱)。通过检测，以流出液A440＝2为上样终点。考察A440在40-80浓度范围内的吸附变化。

 

上样液浓度A440	40	50	60	70	80
						上样体积ml	395	300	235	185	135
总上样量	15800	15000	14100	12950	10800

注；总上样量以A440*上样体积计

上表分析可得，上样液浓度A440应选择在50-70之间。结合各项实验综合得失，选择药液稀释至A440＝60时上柱，药液中其他有效成分吸附量相对较大，有利与前期水洗脱栀子苷。

实施例8：洗脱液的选择试验研究

以A440为60的水溶液上柱(20ml树脂装入30*1.6cm柱)，计算总上样量。分别以500ml不同浓度的乙醇洗脱。计算各洗脱液的含量。

各上样250ml稀释后药液，水及不同浓度乙醇洗脱液大量平行试验，结果见下表：

 

	水	10％	20％	25％	30％	35％	70％	90％	100％
										色素含量(mg)	--－	---	---	20.7	31.1	102.4	343.7	392.1	401.6
0D	72.54.1	310-517	582.3-73	677-53.4	483.7-57.4	209.4-0.7	2.1	2.3	2.1

水、10％、20％、25％、30％乙醇对栀子苷的选择性大于其他有效成分，35％乙醇对两者的选择性较差，而70％、90％、100％的乙醇对两者几乎无选择性。因此选择先用大量水洗脱栀子苷，接着用25％乙醇洗脱栀子苷之后再用高浓度的70％乙醇洗脱剩余有效成分，从而达到精制栀子苷的目的。

实施例9：

10KG栀子鲜药材经60％乙醇(以体积计)提取浓缩后得药液3140ml，取1750ml药液(含栀子苷93537.5mg)用去离子水稀释至A440＝60上1500mlHPD-100大孔树脂，(走样药液体积约60000ml，上柱后药液中含栀子苷58464mg，占药液栀子苷总含量的62.5％)，上样完毕后，先用去离子水洗脱树脂吸附水溶性杂质，(水洗液含栀子苷4209.75mg)再用25％乙醇(以体积计)冲洗树脂吸附的栀子苷至洗脱液A238小于0.8(洗脱液含栀子苷22478.38mg，占药液中总含量的24％，至此约91％左右的栀子苷从药液中分离)，接着用70％的乙醇洗脱剩余有效成分，合并所有洗脱后剩余药液，经喷雾干燥后得44.8g左右得栀子苷和100g左右其他有效成分。

Claims (1)

1.一种用栀子为原料制备栀子苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)栀子原药材经切片或粉碎成粗粉，加入8～10倍体积的含水乙醇提取2～3次，每次1.5～2小时；所述含水乙醇中乙醇的体积百分比为60％；

(2)合并提取后液，离心过滤，滤液减压浓缩回收乙醇至药液相对密度为1.05；

(3)将浓缩后的药液用去离子水稀释至上样药液A440达到60后，上HPD-100型大孔树脂柱，控制上样速度在每小时5～6倍的上柱大孔树脂体积，上样量与上柱大孔树脂体积比为1∶1；收集上柱后药液，药液洗脱一倍上柱大孔树脂体积的去离子水后，用体积百分比为25％的含水乙醇洗脱至洗脱液A238小于0.8，收集洗脱液，然后用体积百分比为70％的含水乙醇洗脱剩余有效成分；

(4)合并所有洗脱后剩余药液，减压浓缩回收乙醇后，经喷雾干燥得栀子苷。