CH643269A5

CH643269A5 - Derives anti-tumoraux de carboxhydrazide en c-3 de la 4-desacetyl vincaleucoblastine.

Info

Publication number: CH643269A5
Application number: CH370779A
Authority: CH
Inventors: George Joseph Cullinan; Koert Gerzon
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1978-04-20
Filing date: 1979-04-19
Publication date: 1984-05-30
Also published as: YU93179A; RO81037A; GR69987B; RO81114B; RO81114A; CA1097629A; DE2964130D1; ATA291279A; HU181431B; CS218583B2; IL57168A0; AU4609779A; AU527109B2; CS218585B2; GB2019396B; IL57168A; GB2019396A; RO80084A; BG33294A3; PL119416B1

Description

Cette invention a pour objet des composés de formule générale

O

643 269

4

(alcoxy en Ci à C3), ou quand Q' est NHNH2, en solution, avec le formaldéhyde, l'acétaldéhyde, l'acétone ou le propionaldéhyde, réaction éventuellement suivie d'une hydrogénation ou bien avec l'anhy-dryde d'acide ou le chlorure d'acide d'un acide alcanoïque en (C2 à C4), de l'acide dichloracétique ou de l'acide benzoïque.

Dans la formule I ci-dessus, R, pris isolément, peut être le radical éthyle, méthyle, n-propyle, isopropyle, acétyle, propionyle, n-buty-ryle, isobutyryle, dichloracétyle, benzoyle, éthoxycarbonyle ou mé-thyloxycarbonyle. Les groupements alkylidène en Cx à C3 que représentent R et Rx lorsqu'ils sont pris ensemble comprennent les groupements méthylidène (=CH2) éthylidène (=CH — CH3), n-propyli-dène (=CH—C2HS) et isopropylidène

Les composés de formule I ont été dénommés en tant que dérivés du carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB. La nomenclature systématique de ces composés devrait comprendre un terme 3-des-carbométhoxy, mais ce terme a été omis, car il est implicite dans le nom carboxhydrazide en C-3 en ce sens que le groupement carbo-méthoxy en C-3 de la VLB a été déplacé. En outre, on aurait pu utiliser un autre système de nomenclature; par exemple, ces composés peuvent être dénommés en tant que dérivés du 23-desméthoxy-23-hydrazide de la 4-désacétyl VLB compte tenu du remplacement du groupement méthoxyle en C-23 par la fonction hydrazide. Cependant, on préfère dénommer ici les composés en tant que dérivés de carboxhydrazine en C-3.

L'hydrazine contient deux atomes d'azote, qui sont numérotés dans un hydrazide de la façon suivante

C—N1—N2—H.

II I I

O H H

Les dérivés à fonction hydrazide selon l'invention sont tous des dérivés N2.

Les composés ayant la structure de la formule I ci-dessus peuvent être préparés par plusieurs modes opératoires optionnels. Le mode opératoire que l'on préfère utiliser ici consiste à préparer d'abord le carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, formé par l'action de l'hydrazine sur la VLB conformément au mode opératoire indiqué dans le brevet belge N° 813168. Selon ce mode opératoire, on chauffe la VLB et l'hydrazine dans un récipient de réaction étanche en employant l'éthanol anhydre comme solvant. Ou bien, on peut faire réagir la 4-désacétyl VLB avec l'hydrazine anhydre dans les mêmes conditions. La réaction de l'hydrazine avec la VLB, elle-même, sert à hydrolyser le groupement acétoxy en C-4 et ainsi le produit de la réaction est invariablement le carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, que l'on emploie comme produit de départ la VLB ou la 4-désacétyl VLB. On procède à la préparation des composés de formule I avec le carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, quel que soit son mode de préparation, comme produit de départ. On transforme ce composé en le carboxazide en C-3 correspondant (selon le mode opératoire du brevet belge N° 813168 susmentionné) par traitement de l'hydrazide par un nitrite en solution acide. On peut alors faire réagir le carboxazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB ainsi produit avec différentes hydrazines alkylées pour obtenir les composés de formule I, dans lesquelles R est un radical alkyle en Cj à C3 et R1 est un radical méthyle ou un atome d'hydrogène, comme prévu ci-dessus.

On peut également faire réagir ledit carboxazide avec la N-(ß-hydroxyéthyl)hydrazine pour obtenir la [N2-(ß-hydr-oxy)éthyl]carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB correspondant. Ce dernier composé est utile pour préparer le dérivé P-acétoxy-

éthylhydrazide correspondant par acétylation pour donner un composé de formule I dans lequel R est le radical P-acétoxyéthyle et R1 est un atome d'hydrogène. Mais on préfère préparer ce dernier composé en faisant réagir le carboxazide en C-3 avec la P-acétoxy-éthylhydrazine. On peut préparer un composé de formule I où R est un radical alcoxycarbonyle

—C— (alcoxy en Q à C3) en faisant réagir ledit carboxazide avec

II

O

un composé de formule H2N—NH—CO—(alcoxy en C, à C3).

On prépare les composés de formule I dans lesquels R est un radical alcanoyle en C2 à C4, dichloracétyle ou benzoyle en faisant réagir le carboxhydrazide en C3 de la 4-désacétyl VLB avec l'anhydride ou le chlorure d'acide approprié.

De même, le carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB est le produit de départ pour préparer les composés de formule I dans lesquels R et R1, pris ensemble, forment un groupement alkylidène en C! à C3. On prépare ces composés en faisant réagir le carboxhydrazide en C-3 non substitué avec le formaldéhyde, l'acétaldéhyde, le propionaldéhyde ou l'acétone. Ces dérivés alkylidéni-ques peuvent à leur tour être hydrogénés, par exemple à l'aide d'un hydrure comme agent réducteur, tel que NaBH4, pour donner le composé correspondant de formule I dans lequel R est un radical alkyle en C! à C3 et R1 est un atome d'hydrogène.

Les exemples suivants illustrent plus en détail la préparation des composés de formule I ainsi que des produits de départ requis.

Préparation des produits de départ

1. Carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB

On a chauffé de la 4-désacétyl VLB dans de l'éthanol anhydre avec un excès d'hydrazine anhydre dans un récipient de réaction étanche à 60° C environ pendant 18 h environ. On a refroidi et ouvert le récipient de réaction, on a retiré son contenu, et on a fait évaporer sous vide les constituants volatils. On a repris dans du chlorure de méthylène le résidu résultant, comprenant le carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, on a lavé à l'eau la solution dans le chlorure de méthylène, on a séparé et séché, et on a chassé le chlorure de méthylène par évaporation sous vide. On a dissous le résidu résultant dans un mélange 1:1 de chloroforme et de benzène et on l'a soumis à une Chromatographie sur gel de silice. On a employé comme éluant un mélange de benzène, de chloroforme et de triéthylamine, pour développer le chromatogramme. Les fractions chromatographiques initiales contenaient de la 4-désacétyl VLB qui n'avait pas réagi. On a constaté que les autres fractions contenaient du carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl 18'-descarbométhoxy VLB déjà décrite par Neuss et al., «Tetrahedron Letters», 1968, 783. On a réuni les fractions suivantes, qui d'après la Chromatographie en couche mince (CCM) contenaient le carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB et on en a fait évaporer les solvants sous vide. Le solide résultant fondait à 219-220° C environ avec décomposition.

2. Carboxazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB

On a préparé une solution de 678 mg de carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB dans 15 ml de méthanol anhydre. On a ajouté environ 50 ml d'acide chlorhydrique aqueux IN, et on a refroidi à 0° C environ la solution résultante. On a alors ajouté environ 140 mg de nitrite de sodium, et on a agité le mélange réactionnel résultant pendant 10 min tout en maintenant la température aux environs de 0°C. La solution a viré au rouge brun foncé lorsqu'on lui a ajouté du nitrite de sodium. On a ensuite rendu basique le mélange réactionnel en lui ajoutant un excès de bicarbonate de sodium aqueux froid à 5%. On a extrait la solution aqueuse trois fois avec du di-chlorure de méthylène. Le carboxazide en C-3 de la 4-dêsacétyl VLB formé dans la réaction précédente est passé dans le dichlorure de méthylène. La solution dans le dichlorure de méthylène du carboxazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB est ordinairement utilisée sans autre purification.

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Produits finals

Exemple 1 :

Préparation du N2-mèthylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-dèsacètyl VLB

On a ajouté 20 ml de CH3NHNH2 à une solution contenant environ 1 g de carboxazide en C-3 de la 4-dêsacétyl VLB dans 150 ml de CH2C12. On a fermé hermétiquement le récipient de réaction et on l'a laissé à la température ambiante pendant 6 h. On a ensuite extrait plusieurs fois à l'eau la solution dans le CH2C12 pour éliminer l'excès de CH3NHNH2. On a séché la solution dans le CH2C12 et on a fait évaporer le solvant sous vide. Le solide amorphe couleur chamois résultant, 250 mg, comprenant le N2-méthylcarbox-hydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, avait les caractéristiques physiques suivantes:

SM: m/e = 782 (M+), 441, 355, 154

IR: v = 3450 cm-1 (-N-H), 1715 cm"1 (-COOCH3), 1655 cm"1 (—COONH—)

Exemple 2:

Préparation du N2-éthylidénecarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB

On a dissous 1 mmol (768 mg) de carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB dans 50 ml de CH2C12 et on a ajouté 200 mg de CH3CHO. On a fermé hermétiquement le récipient de réaction et on l'a laissé pendant une nuit à la température ambiante. On a fait évaporer la solution jusqu'à obtenir une poudre amorphe couleur chamois que l'on a répartie entre CH2C12 et de l'eau pour éliminer l'excès de CH3CHO. On a séché et concentré à siccité la solution dans le CH2C12. La poudre amorphe couleur chamois résultante, comprenant le N2-éthylidènecarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, avait les caractéristiques physiques suivantes :

SM: m/e = 794 (M+)

IR: v = 1680 cm"1 (-CON), 1710 cm"1 (COO)

Exemple 3:

Préparation du N2-éthylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB

On a dissous le N2-éthylidènecarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB obtenu dans l'exemple 2 dans 100 ml d'éthanol absolu et on a ajouté 500 mg de NaBH4 à 96%. On a agité le mélange réactionnel pendant une nuit à la température ambiante. On a ajouté au mélange réactionnel de l'acide chlorhydrique IN jusqu'à ce que la solution devienne limpide. On a alors ajouté un complément d'eau. On a rendu la solution basique avec de l'ammoniaque concentrée et on l'a extraite deux fois avec du CH2C12. On a séché et concentré à siccité les extraits dans le CH2C12. La poudre amorphe couleur chamois résultante, comprenant le N2-éthyl-carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, avait les caractéristiques physiques suivantes (rendement: 49 mg):

SM: m/e = 796 (M+)

IR: v = 3460 cm-1 (N-H), 1656 cm"1 (CON), 1715 cm"1 (COO)

Exemple 4:

Préparation du N2, N2-diméthylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-dés-acétyl VLB

A une solution d'environ 1,5 g de carboxazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB dans le CH2C12, on a ajouté 20 ml de H2NN(CH3)2. On a fermé hermétiquement le récipient de réaction et on l'a laissé pendant 60 h environ à la température ambiante. On a concentré à siccité la solution résultante et on a dissous le résidu dans CH2C12. On a extrait la solution dans le CH2C12 une fois avec de l'ammoniaque diluée et à nouveau avec de l'eau pour éliminer l'excès de H2NN(CH3)2. On a séché et concentré à siccité la solution dans le CH2C12. On a soumis la poudre résultante à une Chromatographie sur gel de silice et on a élué avec un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et de méthanol. On a réuni les fractions contenant le produit recherché, déterminées par Chromatographie en couche mince (gel de silice élué avec un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et de méthanol), et on a concentré à siccité les fractions réunies. La poudre amorphe couleur chamois résultante, comprenant le N2,N2-diméthylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-dêsacétyl VLB, avait les caractéristiques physiques suivantes (rendement: 250 mg):

SM: m/e = 796 (M+), 737,455, 355,154

IR: v = 1715 cm-1 (COO), 1670 cm"1 (CON)

Exemple 5:

Préparation du N2-acétylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB

On a ajouté 300 mg d'anhydride acétique à une solution de 1500 mg de carboxhydrazide en C-3 de 4- désacétyl VLB que l'on avait dissous dans 50 ml de CH2C12. On a maintenu le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 3 h. On a ensuite lavé la solution dans le CH2C12 avec de l'ammoniaque diluée puis avec de l'eau. On a séché et concentré à siccité la solution dans le CH2C12. La poudre amorphe couleur chamois résultante, comprenant le N2-acétylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, avait les caractéristiques physiques suivantes (rendement: 750 mg):

SM: m/e = 810 (M+)

IR: v = 3410 cm"1 (N-H), 1720 cm-1 (COO), 1670 cm-1 (CON)

On prépare de la même façon le N2-dichloracéthylcarboxhyd-razide en C-3 de la 4-désacétyl VLB en substituant l'anhydride dichloracétique à l'anhydride acétique dans le mode opératoire précédent.

Exemple 6:

Préparation du N2-butyrylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétoxy VLB

On a ajouté 120 mg d'anhydride butyrique à une solution de 768 mg de carboxhydrazide en C-3 de 4-désacétyl VLB dissous dans 50 ml de CH2C12. On a fermé hermétiquement le récipient de réaction et on l'a laissé pendant une nuit à la température ambiante. On a ensuite extrait le mélange réactionnel avec de l'ammoniaque diluée et on a jeté l'extrait. On a séché et concentré à siccité la solution dans le CH2C12 restant. On a soumis le résidu à une Chromatographie sur gel de silice élué avec un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et de méthanol. On a réuni les fractions contenant le produit recherché, déterminées par CCM, et on a concentré à siccité les fractions réunies. La poudre amorphe couleur chamois résultante (128 mg), comprenant le N2-butyrylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, avait les caractéristiques physiques suivantes:

SM: m/e = 838 (M+), 497, 355, 154

Exemple 7:

Préparation du N2-benzoylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB

A une solution de 768 mg de carboxhydrazide en C-3 de 4-désacétyl VLB, dissous dans 50 ml de CH2C12, on a ajouté 240 mg d'anhydride benzoïque. On a fermé hermétiquement le récipient de réaction et on l'a laissé pendant une nuit à la température ambiante. On a ouvert le récipient de réaction et on a lavé la solution dans le chlorure de méthylène qu'il contenait avec de l'ammoniaque diluée, puis avec de l'eau pour éliminer les benzoates. On a ensuite séché et concentré à siccité la solution dans le CH2C12. On a soumis la poudre amorphe à une Chromatographie sur gel de silice, élué avec un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et de méthanol. On a réuni les fractions contenant le produit recherché, déterminées par CCM (gel de silice élué avec un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et de méthanol), et on les a concentrées à siccité. La poudre amorphe couleur chamois résultante (150 mg), comprenant le N2-benzoylcarbox-hydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, avait les caractéristiques physiques suivantes:

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SM: m/e = 872 (M+), 813, 531, 355,154 RMN : en accord avec la structure proposée nouveaux protons aromatiques à 8 7,3-8,0

Exemple 8:

Préparation du N2- (ß-hydroxy jëthylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB

On a dissous environ 3 g de carboxazide en C-3 de 4-désacétyl VLB dans du CH2C12 et on a ajouté 15 ml de H2NNHCH2CH2OH. On a fermé hermétiquement le récipient de réaction et on a agité pendant une nuit à la température ambiante. On a fait évaporer le mélange réactionnel et on a réparti le résidu entre du chloroforme et de l'eau. On a lavé deux fois à l'eau la solution chloroformique puis on l'a séchée et concentrée à siccité. On a soumis la poudre amorphe à une Chromatographie sur gel de silice, élué avec un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et de méthanol. On a réuni les fractions contenant le produit recherché, déterminées par CCM (gel de silice élué avec un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et de méthanol), et on a concentré à siccité les fractions réunies. La poudre amorphe couleur chamois résultante avait les caractéristiques physiques suivantes (rendement lg):

IR: v = 1720 cm-1 (COO), 1655 cm"1 (CON)

Exemple 9:

Préparation du N2-(fi-acétoxy)éthylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-dêsacétyl VLB

On a dissous dans 50 ml de CH2C12 1624 mg de N2-(ß-hydroxy)-éthylcarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétyl VLB. A cette solution, on a ajouté 220 mg d'anhydride acétique. On a fermé hermétiquement le récipient de réaction et on l'a laissé pendant une nuit à la température ambiante. On a ensuite lavé le mélange réactionnel avec de l'ammoniaque diluée puis avec de l'eau. On a séché et concentré à siccité la solution dans le CH2C12 résultant. On a soumis la poudre amorphe à une Chromatographie sur gel de silice et on élue le chro-matogramme avec un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et de méthanol. On a réuni les fractions contenant le produit recherché déterminées par CCM (gel de silice élué avec un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et de méthanol) et on a concentré à siccité les fractions réunies. La poudre amorphe couleur chamois résultante (125 mg), comprenant le N2-(P-acétoxy)éthylcarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, avait les caractéristiques physiques suivantes:

SM: m/e = 854(M+), 795, 651, 513, 355,154

Exemple 10:

Préparation du N2-éthoxycarbonylecarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB

On a dissous dans du CH2C12 environ 900 mg de carboxazide en C3 de la 4-désacétyl VLB. On a dissous, dans du CH2C12,1 g de

H2NNHCOC2H5

il

O

et on a ajouté cette solution à la précédente. On a fermé hermétiquement le récipient de réaction et on l'a laissé pendant une nuit à la température ambiante. On a ensuite concentré à siccité le mélange réactionnel et on a réparti le résidu entre du CH2C12 et de l'eau. On a lavé encore deux fois à l'eau la couche de CH2C12, on l'a séchée et concentrée à siccité. On a transformé en son sel d'acide sulfurique la poudre amorphe couleur chamois résultante comprenant le N2-éthoxycarbonylecarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, en dissolvant la poudre amorphe dans de l'éthanol anhydre et en ajoutant le pH à 4 environ à l'aide d'acide sulfurique à 2% dans de l'alcool absolu. On a recueilli par filtration et séché le sulfate précipité. La substance résultante était une poudre amorphe de couleur chamois (104 mg).

Exemple II:

Préparation du N2-méthylidènecarboxhydrazide en C-3 de la 4-désacé-tyl VLB

On a dissous dans 100 ml de tétrahydrofuranne (THF) 768 mg de carboxhydrazide en C-3 de 4-désacétyl VLB et on a ajouté 20 ml de HCHO à 37% dans l'eau. On a fermé hermétiquement le récipient de réaction, puis on a agité pendant une nuit à la température ambiante. On a fait évaporer la solution réactionnelle jusqu'à obtenir un gel que l'on a ensuite dissous dans de l'éthanol absolu. A cette solution alcoolique, on a ajouté du CH2C12 et on a extrait à l'eau la solution résultante. On a séparé la solution dans le CH2C12, puis on l'a séchée et concentrée à siccité. La poudre amorphe couleur chamois résultante, comprenant le N2-méthylidènecarbox-hydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB, avait les caractéristiques physiques suivantes:

SM: m/e = 780 (M+), 439, 355,154

IR: bande large pour les carbonyles v = 1650-1740 cm-1

RMN : deux nouveaux signaux 8 4,63 et 8 4,89

Exemple 12:

Préparation du N2-isopropylidènecarboxhydrazide en C-3 de la 4-dêsacétyl VLB

On a dissous 400 mg de carboxhydrazide en C-3 de 4-désacétyl VLB dans 25 ml d'acétone et on a agité le mélange réactionnel pendant 3 d dans l'obscurité à la température ambiante. On a concentré la solution par évaporation, ce qui a donné environ 400 mg de N2-isopropylidènecarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétyl VLB, qui ava.it les caractéristiques physiques suivantes:

SM: m/e = 808 (M+), 822, 836, 777, 750, 751, 467, 355,154,124 IR(CHC13): v = 1730 cm-1 (-COOCH3), 1710 cm-1 (—N=C—), 1685 cm"1 (-COONH-)

Les composés de formule I sont actifs pour inhiber la croissance des tumeurs transplantées chez les souris et/ou pr>ur prolonger la vie de souris auxquelles on a inoculé des tumeurs. Pour démontrer l'activité de ces médicaments, on a utilisé un protocole qui comportait l'administration du médicament, habituellement par la voie intrapé-ritonéale à une dose donnée pendant 7 à 10 d. On a mesuré la taille de la tumeur au bout de 3 ou 7 d au moment où le médicament inhibait la croissance de la tumeur. Dans les cas où il s'agissait d'une prolongation de la vie, on a déterminé la durée de vie supplémentaire des animaux traités par rapport à des animaux témoins.

Le tableau 1 donne le résultat d'expériences dans lesquelles on a traité avec succès des souris porteuses de tumeurs transplantées avec un composé de formule I. Dans ce tableau, la première colonne donne le nom du composé, la deuxième celui de la tumeur transplantée, la troisième colonne la dose ou l'intervalle de doses et le nombre de jours pendant lesquels la dose a été administrée, et la quatrième donne le pourcentage d'inhibition de la croissance des tumeurs ou le pourcentage de prolongation de la durée de survie, par exemple B16 (ROS est une abréviation de sarcome ostéogénique de Ridgeway; GLS une abréviation de lymphosarcome de Gardner et B16 l'abréviation d'un mélanome malin).

(Tableau en tête de la page suivante)

Comme on pouvait s'y attendre, les nouveaux dérivés à fonction hydrazide de formule I diffèrent par leur spectre antitumoral de la VLB, de la vincristine et de la vindésine, ainsi que des esters N,N-dialkylglycyliques en C-4 de la VLB, de la même façon que les spectres antitumoraux de ces composés diffèrent entre eux, certains étant plus efficaces contre certaines tumeurs ou catégories de tumeurs et moins efficaces contre d'autres: Cependant, en utilisant chimiquement un composé de formule I, le clinicien l'administrerait initialement par la même voie et dans le même véhicule et contre les mêmes types de tumeurs que pour l'usage clinique de la vincristine et de la VLB. Les différences de posologie seraient bien entendu basées sur

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10

15

20

25

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65

7

Tableau 1

643 269

Composé

Tumeur

Dose

(mg/kg x d)

Pourcentage d'inhibition ou de prolongation

3 d

7 d

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,25-0,5 x 10

toxique toxique

N2-méthylcarboxhydrazide

0,125 x 10

83

53

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,5 x 10

toxique toxique

N2,N2-diméthylcarboxhydrazide

0,25 x 10

100

—

0,125 x 10

100

93

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,5 x 10

toxique toxique

N2-éthylcarboxhydrazide

0,25 x 10

100 (+)

toxique

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,5 x 10

toxique toxique

N2-(p-hydroxy)éthylcarboxhydrazide

0,5 x 7

90

0,3 x 7

20

0,25 x 10

100

40

0,125 x 10

77

37

0,2 x 7

0,3 x 9

17

0,2 x 9

100

0,1 x 9

0

ROS

0,5 x 10

toxique

0,3 x 10

14

0,2 x 10

0

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,5 x 10

100

N2-(P-acétoxy)éthylcarboxhydrazide

0,25 x 10

100

73

0,125 x 10

74

26

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,5 x 10

100

toxique

N2-acétylcarboxhydrazide

0,25 x 10

100

0,125 x 10

100

93

B16

1,2 x 3

69 ~

0,9 x 3

84

pourcentage

0,6 x 3

109

► de

0,3 x 3

100

prolongation

0,15 x 3

71 .

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,5 x 10

toxique toxique

N2-benzoylcarboxhydrazide

0,25 x 10

100

toxique

0,125 x 10

76

45

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,5 x 10

64

toxique

N2-butyrylcarboxhydrazide

0,25 x 10

100

0,125 x 10

100

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,4 x 7

93

N2-éthoxycarbonylecarboxhydrazide

0,2 x 7

100

ROS

0,4 x 10

toxique

0,2 x 10

66

4-Désacétyl VLB C-3

ROS

0,05 x 10

33

N2-isopropylidènecarboxhydrazide

0,1 x 10

42

0,15 x 10

74

0,2-1,0 x 10

toxique

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,4 x 9

toxique

N2-éthylidènecarboxhydrazide

0,2 x 9

100

ROS

0,4 x 9

toxique

4-Désacétyl VLB C-3

ROS

0,2 x 9

100

N2-éthylidènecarboxhydrazide

4-Désacétyl VLB C-3

GLS

0,5 x 10

toxique toxique

N2-méthylidènecarboxhydrazide

0,25 x 10

100

0,125 x 10

91

4-Désacétyl VLB C-3

ROS

0,15 x 10

74

N2-isopropylidènecarboxhydrazide

l'activité relative de la vincristine ou du VLB, d'une part, et du mé- Dans l'application des nouveaux dérivés à fonction hydrazide de dicament nouveau, d'autre part, sur la même tumeur expérimentale formule I comme agents antinéoplastiques, on utiliserait la voie chez les souris. d'administration parentérale. Pour cela, on emploie des solutions

643 269

8

isotoniques contenant 1 à 10 mg/ml d'un composé de formule I. Les composés sont administrés à raison de 0,01 à 1 mg/kg, et de préférence de 0,1 à 1 mg/kg de poids corporel de mammifère, une ou deux fois par semaine ou toutes les deux semaines, suivant l'activité et la toxicité du médicament. Une autre méthode d'obtention d'une dose thérapeutique est fondée sur la surface du corps, la dose étant alors comprise entre 0,1 et 10 mg/m2 de surface corporelle de mammifère tous les 7 ou 14 d.

Un essai clinique d'un composé de formule I serait mené conformément à un mode opératoire suggéré par S.K. Carter dans une section intitulée «Study Design Principles for the Clinical Evaluation of New Drugs as Developed by the Chemotherapy Programme 5 of the National Cancer Institute» que l'on trouve aux pages 242 à 289 d'un ouvrage récent «The Design of Clinical Trials in Cancer Therapy», édité par Maurice Staquet (Futura Publishing Co., New York, 1973).

Claims

643 269

2

REVENDICATIONS

1. Carboxhydrazide en C-3 de 4-dêsacétylvincaleucoblastine, de formule générale:

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dans laquelle R, pris isolément, est un radical alkyle en Ct à C3, ß-hydroxyéthyle, P-acétoxyéthyle, alcanoyle en C2 à C4, dichlor-acétyle, benzoyle ou (alcoxy en Ci à C3)-carbonyle, R1, pris isolément, est un radical méthyle ou un atome d'hydrogène seulement lorsque R est un radical alkyle en Q à C3, sinon c'est un atome d'hydrogène, ou bien R et R1, pris ensemble, forment un groupement alkylidène en C! à C3.

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où R est un radical alkyle en Ci à C3, ß-hydroxyethyle ou ß-acétoxyéthyle, et R1 est un atome d'hydrogène ou un radical 30 méthyle lorsque R est un radical alkyle en C! à C3, sinon c'est un atome d'hydrogène, ou bien avec une acylhydrazine de formule
2. L'un des composés suivants:

N2, N2-diméthylcarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleuco-blastine,

N2-méthylidènecarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine,

N2-isoproylidènecarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine,

N2-butyrylcarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine, N2-acétylcarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine, N2-(P-hydroxy)éthylcarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine,

N2-méthylcarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine, N2-éthylidènecarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine,

N2-éthylcarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine, N2-benzoylcarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblas-tine,

N2-(P-acétoxy)éthylcarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine, et

N2-éthoxycarbonylcarboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleu-coblastine, à titre de composé selon la revendication 1.
3. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle com-'prend un carboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine de formule (I) selon la revendication 1 et un véhicule pharmaceuti-quement accpetable.
4. Procédé de préparation d'un carboxhydrazide en C-3 de 4-

désacétylvincaleucoblastine de formule (I) dans laquelle R est un radical alkyle en C! à C3, P-hydroxyéthyle, ß-acétoxyéthyle ou (alcoxy en Q à C3)-carbonyle, et R1 est de l'hydrogène ou — CH3 lorsque R est un alkyle en Cj à C3, sinon c'est de l'hydrogène, caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir un dérivé en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine, de formule générale

40

O

où Z est un groupe alcoxy en C! à C3.
5. Procédé de préparation d'un carboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine de formule (I) dans laquelle R et R1 forment ensemble un groupe alkylidène en C! à C3, caractérisé en ce qu'on fait réagir un composé de formule (IA) dessinée dans la revendication 4, — formule dans laquelle Q' est — NH2 —, en solution, avec le formaldéhyde, l'acétaldéhyde, l'acétone ou le propion-aldéhyde.

« 6. Procédé de préparation d'un carboxhydrazide en C-3 de 4-désacétylvincaleucoblastine de formule (I) dans laquelle R est un radical alcanoyle en C2 à C4, dichloroacétyle ou benzoyle, et R1 est de l'hydrogène, caractérisé en ce qu'on fait réagir un composé de formule (IA) dessinée à la revendication 4 — formule dans laquelle so Q' est — NHNH2 — avec l'anhydride ou le chlorure d'un acide alca-noïque en C2 à C4, de l'acide dichloroacétique, ou de l'acide benzoï-que.
7. Procédé de préparation d'un composé de formule (I) dans laquelle R est un groupement ß-acêtoxyéthyle, les autres symboles ayant la signification donnée à la revendication 1, caractérisé en ce qu'on exécute le procédé selon la revendication 4 en utilisant une hydrazine où R = P-hydroxyéthyle, et en ce qu'on fait suivre une réaction d'acétylation.

60 8. Procédé de préparation d'un composé de formule (I) dans laquelle R est un groupement alkyle en Ct à C3, les autres symboles ayant la signification donnée à la revendication 1, caractérisé en ce qu'on exécute le procédé selon la revendication 6, en utilisant un des composés oxo indiqués, et en ce qu'on fait suivre une réaction d'hy-65 drogénation.

55

3

643 269

Plusieurs alcaloïdes naturels pouvant être obtenus à partir de Vinca rosea se sont révélés actifs dans le traitement de malignités expérimentales chez les animaux. Font partie de ces alcaloïdes la leuro-sine (brevet US N° 3370057), la vincaleucoblastine (vinblastine) qui sera désignée ci-après par les initiales VLB (brevet US N° 3097137), 5 la leuroformine (brevet belge N° 811110), la leurosidine (vinrosi-dine) et la leurocristine (qui sera appelée ci-après vincristine) (toutes deux décrites dans le brevet US N° 3205220), les désoxy-VLB A et B, «Tetrahedron Letters», 783 (1958); la 4-désacétoxyvinblastine (brevet US N° 3954773), la 4-désacétoxy-3'-hydroxyvinblastine io (brevet US N° 3944554), la leurocolombine (brevet US N° 3890325) et la vincadioline (brevet US N° 3887565). Deux de ces alcaloïdes, la VLB et la vincristine, sont maintenant commercialisés comme médicaments pour le traitement des malignités, en particulier les leucémies et les maladies apparentées chez les humains. Ces deux alcaloï- 15 des commercialisées sont habituellement administrés par voie intraveineuse.

La modification chimique des alcaloïdes de Vinca rosea est pour le moment plutôt limitée. En premier lieu, les structures moléculaires 20 mises enjeu sont extrêmement complexes, et les réactions chimiques qui modifient un groupement fonctionnel spécifique de la molécule sans effectuer les autres groupements sont difficiles à mettre au point. En second lieu, des alcaloïdes dimères manquant des propriétés chimiothérapeutiques souhaitables ont été récupérés ou produits 25 à partir de fractions ou d'alcaloïdes de Vinca rosea, et une détermination de leurs structures a conduit à la conclusion que ces composés inactifs sont étroitement liés aux alcaloïdes actifs, dont ils ne diffèrent souvent que par la stéréochimie sur un seul atome. Ainsi, l'activité antinéoplastique semble limitée à des structures fondamentales 30 très spécifiques et les chances d'obtention de médicaments plus actifs par modification de ces structures sembleraient d'autant plus faibles. Parmi les modifications fructueuses des alcaloïdes physiologique-ment actifs, citons la préparation de la 6,7-dihydro VLB (brevet US N° 3352868) et le remplacement du groupement acétyle en C-4 35 (carbone N° 4 du système cyclique de la VLB — voir la structure numérotée ci-dessous) par un groupement alcanoyle supérieur ou par des groupements acyle complètement différents (voir le brevet US N° 3392173). Plusieurs de ces dérivés en C-4 sont capables de prolonger la vie de souris auxquelles on a inoculé la leucémie PI534. 40 L'un de ces dérivés en C-4, dans lequel un groupement chloracétyle remplace le groupement acétyle en C-4 de la VLB, est aussi un intermédiaire utile pour la préparation de dérivés de VLB à structure modifiée dans lesquels un groupement N,N-dialkylglycyle remplace le groupement acétyle en C-4 de la VLB (voir brevet US N° 3387001). 45 Les dérivés de carboxamide et de carboxhydrazide en C-3 de la VLB, de la vincristine, de la vincadioline et d'autres alcaloïdes ont également été préparés et se sont révélés des agents antitumoraux actifs (brevet belge N° 813168). Ces composés sont extrêmement intéressants car, par exemple, les 3-carboxamides de la VLB sont plus 50 actifs contre le sarcome ostéogénique de Ridgeway et le lymphosar-come de Gardner que la VLB elle-même, l'alcaloïde fondamental dont ils sont dérivés. Certains de ces dérivés à fonction amide approchent en fait l'activité de la vincristine vis-à-vis des mêmes tumeurs. L'un des amides, le C-3 carboxamide de la 4-désacétyl VLB, ou vin- 55 désine, est actuellement soumis à des essais cliniques chez les humains et s'est révélé actif dans certaines leucémies. Chez les humains, la vindésine semble avoir une neurotoxicité moindre que la vincristine et est apparemment efficace contre les leucémies résistant à la vincristine. 60

Le carboxhydrazide en C-3 de la 4-désacétyl VLB est révélé dans le brevet belge N° 813168 comme étant un agent antitumoral actif contre les tumeurs transplantées chez les souris. Il s'est montré actif contre le sarcome ostéogénique de Ridgeway, le lymphosarcome de 65 Gardner et la leucémie P1534 (J).

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Un procédé de préparation d'un caboxydrazide en C-3 de la 4-désacétylvincaleucoblastine de formule I ci-dessus consiste à faire réagir un dérivé en C-3 de la 4-désacétylvincaleucoblastine, de formule générale

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où R est un radical alkyle en Ct à C3, P-hydroxyéthyle ou p-acétoxyéthyle, et Rx est un atome d'hydrogène ou un radical méthyle lorsque R est un radical alkyle en Ci à C3, sinon c'est un atome d'hydrogène, réaction éventuellement suivie d'une acétylation lorsque R est un radical P-hydroxyéthyle, ou avec

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