BR112016008110B1 - Composto inibidor de pirimidina fgfr4, composição farmacêutica compreendendo dito compoto e usos terapêuticos destes - Google Patents

Composto inibidor de pirimidina fgfr4, composição farmacêutica compreendendo dito compoto e usos terapêuticos destes Download PDF

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Sudeep Prajapati
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Abstract

resumo "inibidores de pirimidina fgfr4" o presente documento provê compostos da fórmula i úteis como inibidores de fgfr4, bem como métodos de uso dos mesmos.

Description

“COMPOSTO INIBIDOR DE PIRIMIDINA FGFR4, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA COMPREENDENDO DITO COMPOSTO E USOS TERAPÊUTICOS DESTES”
ANTECEDENTES [001] Fatores de crescimento de fibroblastos (FGF) constituem uma família de mais de 20 proteínas estruturalmente relacionadas com uma variedade de atividades biológicas. Seus principais receptores, os receptores do fator de crescimento do fibroblasto (FGFR1, FGFR2, FGFR3 e FGFR4), são uma família de tirosina-cinases receptoras que se ligam a FGF e estão envolvidas nos processos de proliferação e diferenciação celular. A desregulação de redes de sinalização de FGFR está implicada em vários estados patofisiológicos, incluindo diversos tipos de cânceres humanos.
[002]Receptor do Fator de Crescimento de Fibroblastos 4 ou FGFR4 é conhecido por regular a proliferação e a antiapoptose e é expresso ou altamente expresso em muitos cânceres. Vide, por exemplo, Dieci e outros 2013, Cancer Discovery, 0F1-0F16. Estudos mostraram que a expressão do FGFR4 é preditiva de um fenótipo mais agressivo do câncer, e nocaute ou redução de expressão de FGFR4 serve para reduzir a proliferação e promover a apoptose. Vide, por exemplo, Wesche e outros, 2011, Biochem J 437:199-213.
[003]Por exemplo, a expressão FGFR4 ou a sobre-expressão está associada à agressividade do câncer gástrico (Ye e outros, 2011, Cancer, 53045313), o câncer de próstata (Xu e outros, 2011, BMC Cancer, 11; 84), sarcoma como rabdomiossarcoma (Taylor VI e outros, 2009, J Clin Invest, 119 (11): 3395-3407), o câncer de pele como o melanoma (Streit e outros 2006, British J Cancer, 94:18791886), câncer do fígado, como colangiocarcinoma (Sia e outros 2013, Gastroenterology 144:829-840) e carcinoma hepatocelular (French e outros 2012, PLoS ONE 7 (5): e367313; Miura e outros 2012, BMC Cancer 00:56; Chiang e outros
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2008, Cancer Res 68 (16): 6779-6788; Sawey e outros 2011, Cancer Cell. 19: 347358), câncer do pâncreas, tal como neoplasia intraepitelial pancreática e adenocarcinoma dutal pancreático (Motoda e outros 2011, Int'l J Oncol 38: 133-143), câncer de pulmão, tal como o câncer de pulmão de células não pequenas (Fawdar e outros 2013, PNAS 110 (30):12426- 12431), câncer colorretal (Pelaez-Garcia e outros 2013, PLoS ONE 8 (5): e63695; Barderas e outros, 2012, J Proteomics. 75: 4647-4655), e câncer do ovário (Zaid e outros 2013, Cancer Res Clin 19: 809-820).
[004]O desenvolvimento clínico de vários inibidores de FGFR confirmou a sua utilidade como agentes antitumorais. Dieci e outros, 2013, Cancer Discovery, 0F1-0F16. No entanto, são necessários novos agentes que são úteis para direciona FGFR e FGFR4, em particular.
SUMÁRIO [005]Um objetivo da presente invenção consiste em proporcionar um composto de Fórmula I:
Figure BR112016008110B1_D0001
I em que:
R3 é selecionado do grupo consistindo em: alquila C1-6, alcóxi C1-6 alquila C16, NR10R11alquila C1-6, R10 heterociclilalquila C1-6, R10 arilalquila C1-6, e R10 hetero arilalquila C1-6, em que R10 e R11 são independentemente selecionados do grupo consistindo em: hidrogênio e alquila C1-6;
E é selecionado do grupo consistindo em:
-NR13C(O)CR14=CHR15, e
-NR13C(O)CeCR14, em que R13 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio e metila, e
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R14 e R15 são independentemente selecionados do grupo consistindo em: hidrogênio, metila, flúor e cloro;
R12 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio, halo, alquila C1-6, alcóxi C1-6, hidroxialquila C1-6, hidroxialcóxi C1-6, alcóxi C1-6 alcóxi C1-6, alcóxi C1-6 alquila C1-6, R5R6 heterociclila, -C(O) R5R6 heterociclila, R5R6 heterociclilalquila C1-6, NR5R6, NR5R6 alquila C1-6, -C(O)NR5R6, e NR5R6 alcóxi C1-6, em que R5 e R6 são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-6, hidroxialquila C1-6, aminoalquila C1-6,
-C(O)alquila C1-6 e sulfonil alquila C1-6; e
R1 é fenila, em que a dita fenila é substituída 2, 3 ou 4 vezes com halo ou alcóxi C1-6 independentemente selecionado;
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[006]Em agumas modalidades, R3 é alquila C1-6.
[007]Em agumas modalidades, R3 é selecionado do grupo consistindo em: metila, metoxietila, 4-piridilmetila, 3-piridilmetila, 2-piridilmetila, benzila, N,Ndimetilaminopropila, 3-metilisoxazol-5-il-metila, e 4-metil piperazin-1-il-propila.
[008]Em agumas modalidades, E é -NR13C(O)CH=CHR15 ou NR13C(O)CF=CH2, em que R13 e R15 são conforme definidos acima. Em agumas modalidades, E é -NHC(O)CH=CH2.
[009]Em agumas modalidades, R12 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio, flúor, cloro, metila, metóxi, N,N-dimetilaminoetila, piperazin-1-ila, 4-etil piperazin-1-ila, 4-etil piperazin-1-il-metila, 1-metilpiperidina-4-ila, 1-etilpiperidin-4-ila, N,N-dimetilaminometila, N,N-dimetilaminopropila piperidin-4-ila, morfolina, 3,5-dimetil piperazin-1-ila, 4-(metilssulfonil) piperazin-1-ila, N,N-dimetilaminoetoxi, 4-(2hidroxietil) piperazin-1-ila, hidroxietoxi, metoxietoxi, hidroximetila, metoximetila, 2metoxipropila, 2-hidroxipropila, 2-aminopropila, 4-metilpiperazin-1-il-carbonila, 4etilpiperazin-1-il-carbonila, 4-[2-propil] piperazin-1-ila, 4-acetilpiperazin-1-ila, N-metilPetição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 27/205
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N-hidroxietil-amino, N,N-dimetilamido, e 4-(2-aminoetil) piperazin-1-ila.
[010]Em agumas modalidades, R12 é selecionado do grupo consistindo em:
hidrogênio, alquila C1-6, hidroxialquila C1-6, R5R6 heterociclila, R5R6 heterociclilalquila C1-6, -C(O)NR5R6, NR5R6 alquila C1-6, NR5R6 alcóxi C1-6, alcóxi C1-6, e alcóxi C1-6 alquila C1-6, em que R5 e R6 são independentemente selecionados do grupo consistindo em: hidrogênio, alquila C1-6, hidroxialquila C1-6, -C(O)alquila C1-6 e alquilssulfonila C1-6.
[011]Em agumas modalidades, R12 é R5R6 heterociclila, em que R5 e R6 são conforme definidos acima.
[012]Em agumas modalidades, R5R6 heterociclila é R5R6 piperazinila, em que R5 e R6 são conforme definidos acima.
[013]Em agumas modalidades, R12 é 4-etil piperazin-1-il.
[014]Em agumas modalidades, R12 não é hidrogênio.
[015]Em agumas modalidades, R1 é 2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenila.
[016]Em agumas modalidades, o composto é um composto da Fórmula I(a):
Figure BR112016008110B1_D0002
I(a) em que R3, E, R12 e R1 são conforme definidos acima, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[017]Uma finalidade adicional é uma composição farmacêutica compreendendo um composto ou sal conforme descrito no presente documento e um veículo farmaceuticamente aceitável. Em agumas modalidades, a composição é formulada para administração oral ou parentérica.
[018]Uma finalidade adicional é um método para tratamento de carcinoma hepatocelular em um mamífero que necessite compreendendo administração ao dito indivíduo de uma quantidade eficaz para tratamento de um composto ou sal ou
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5/167 composição conforme descrito no presente documento. Em agumas modalidades, o carcinoma hepatocelular alterou o estado FGFR4 e/ou FGF19 (por exemplo, aumentou a expressão de FGFR4 e/ou FGF19).
[019]Um objetivo adicional é um método de tratamento de carcinoma hepatocelular num indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo: detecção de um estado alterado FGFR4 e/ou FGF19 (por exemplo, aumento da expressão de FGFR4 e/ou FGF19) em uma amostra biológica que contém as células do referido carcinoma hepatocelular, e se o referido carcinoma hepatocelular apresenta o dito estado alterado FGFR4 e/ou FGF19, a administração de um composto ou composição descrita no presente documento ao dito indivíduo em uma quantidade eficaz para o tratamento.
[020]Um objetivo adicional é a utilização de um composto ou seu sal ou uma composição tal como descrito no presente documento em um método de tratamento do carcinoma hepatocelular.
[021]Um objetivo adicional é a utilização de um composto ou sal descrito no presente documento na preparação de um medicamento para o tratamento do carcinoma hepatocelular.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS [022]A figura 1 apresenta os resultados de ensaios de eficácia in vivo em modelo de carcinoma hepatocelular usando células HUH7. Composto 108 (25 mg/kg ou 37,5 mg/kg) ou veículo de controle foi administrado através de injeção intraperitoneal, e o volume do tumor foi medido duas vezes por semana ao longo de 15 dias.
[023]A figura 2 apresenta os resultados de ensaios de eficácia in vivo em modelo de carcinoma hepatocelular utilizando células Hep3B. Composto 108 (12,5 mg/kg, 25 mg/kg ou 37,5 mg/kg) ou veículo de controle foi administrado por injeção intraperitoneal, e o volume do tumor foi medido duas vezes por semana ao longo de
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6/167 dias.
[024]A figura 3 apresenta os resultados de ensaios de eficácia in vivo em modelo de carcinoma hepatocelular utilizando células JHH7. Composto 108 (12,5 mg/kg, 25 mg/kg ou 37,5 mg/kg) ou veículo de controle foi administrado por injeção intraperitoneal, e o volume do tumor foi medido duas vezes por semana ao longo de 15 dias.
[025]A figura 4 apresenta os resultados do teste comparativo in vitro, eficácia em modelo de carcinoma hepatocelular utilizando células Hep3B. Composto 108 (25 mg/kg, 37,5 mg/kg ou 50 mg/kg) foi administrado duas vezes ao dia por meio de injeção intraperitoneal ou BGJ398 (30 mg/kg ou 60 mg/kg) foi administrado oralmente duas vezes por dia.
DESCRIÇÃO DETALHADA DAS MODALIDADES [026]O presente documento provê compostos úteis como inibidores FGFR4. Em algumas modalidades, os compostos são inibidores FGFR4 seletivos na medida em que têm uma maior afinidade de ligação e/ou efeito inibidor de FGFR4, em comparação ao de FGFR1 e/ou FGFR2 e/ou FGFR3 (por exemplo, por 10 vezes, 100 vezes, ou 1000 vezes maior ou mais).
A. Definições [027]Os compostos úteis como agentes ativos de acordo com a presente invenção incluem aqueles descritos geralmente acima e abaixo, e são ainda ilustrados pelas modalidades, submodalidades, e espécies reveladas no presente documento. Tal como utilizado no presente documento, as seguintes definições aplicam-se a menos que indicado de outra forma.
[028]Como descrito no presente documento, os compostos da invenção podem, opcionalmente, ser substituídos com um ou mais substituintes, tais como os ilustrados aqui genericamente, ou como exemplificado por determinadas classes, subclasses e espécies da invenção. Em geral, o termo substituído se refere à
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7/167 substituição de hidrogênio numa dada estrutura com um substituinte especificado. A menos que indicado de outro modo, um grupo substituído pode ter um substituinte em cada posição substituível do grupo, e quando mais do que uma posição numa dada estrutura puder ser substituída com mais do que um substituinte selecionado de um grupo especificado, o substituinte poderá ser quer o mesmo ou diferente em cada posição. As combinações de substituintes previstas por esta invenção são preferivelmente aquelas que resultam na formação de compostos estáveis. Estável, tal como empregado no presente documento, se refere ao composto quimicamente exequível sendo um que não é substancialmente alterado quando mantido a uma temperatura de 40°C ou menos, na ausência de umidade ou de outras condições quimicamente reativas, durante pelo menos uma semana.
[029]Como seria compreendido pelos versados na técnica, tal como é empregado no presente documento H é hidrogênio, C é carbono, N é nitrogênio, S é enxofre, e O é oxigênio.
[030]Alquila ou grupo alquila, tal como empregado no presente documento, significa uma cadeia linear (isto é, não ramificada), ou uma cadeia hidrocarboneto ramificada que está completamente saturada. Em algumas modalidades, o grupo alquila tem 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono. Em certas modalidades, os grupos alquila contêm 1-6 átomos de carbono (alquila C1-6). Em certas modalidades, os grupos alquila contêm 1-4 átomos de carbono (alquila C1-4). Em certas modalidades, os grupos alquila contêm 1-3 átomos de carbono (alquila C13). Ainda em outras modalidades, os grupos alquila contêm 2-3 átomos de carbono (alquila C2-3), e ainda em outras modalidades os grupos alquila contêm 1-2 átomos de carbono (alquila C1-2).
[031]Alquenila ou grupo alquenila, tal como empregado no presente documento, se refere a uma cadeia linear (isto é, não ramificada), ou uma cadeia hidrocarboneto ramificada que tem uma ou mais ligações duplas. Em algumas
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8/167 modalidades, a alquenila tem 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono. Em certas modalidades, grupos alquenila contém 2-8 átomos de carbono (alquila C2-8) . Em certas modalidades, grupos alquenila contém 2-6 átomos de carbono (alquila C2-6). Ainda em outras modalidades, os grupos alquenila contém 3-4 átomos de carbono (alquila C2-3), e ainda em outras modalidades contêm grupos alquenila de 2-3 átomos de carbono (alquila C2-3). De acordo com outro aspecto, o termo alquenila se refere a um hidrocarboneto de cadeia linear tendo duas ligações duplas, também referido como dieno. Exemplos não limitantes de grupos alquenila ilustrativos incluem:
-CH=CH2, -CH2CH=CH2, -CH=CHCH3, -CH2CH2CH=CH2,
-CH2CH=CHCH3, -CH=CHCH2CH3, e -CH=CHCH=CH2.
[032]Alquinila ou grupo alquinila conforme empregado no presente documento se refere a uma cadeia linear (isto é, não ramificada), ou uma cadeia hidrocarboneto ramificada que tem uma ou mais ligações triplas. Em algumas modalidades, a alquinila tem 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono. Em certas modalidades, grupos alquinila contêm 2-8 átomos de carbono (alquinila C2-8). Em certas modalidades, grupos alquinila contêm 2-6 átomos de carbono (alquinila C2-6). Ainda em outras modalidades, grupos alquinila contêm 3-4 átomos de carbono (alquinila C3-4), e ainda em outras modalidades contêm grupos alquinila de 2-3 átomos de carbono (alquinila C2-3).
[033]Ar ou arila se refere a um radical carbocíclico aromático possuindo um ou mais anéis fechados. Exemplos incluem, sem limitação, fenila, naftila, antracenila, fenantracenila, bifenila, e pirenila.
[034]Halo se refere ao cloro (Cl), flúor (F), bromo (Br) ou iodo (I).
[035]Haloalquila se refere a um ou mais grupos halo, apensos à fração molecular de origem através de um grupo alquila. Exemplos incluem, mas não estão limitados a, clorometila, fluormetila, trifluormetila, etc.
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9/167 [036]Heteroarila se refere a uma fração cíclica que tem um ou mais anéis fechados, com um ou mais heteroátomos (oxigênio, nitrogênio ou enxofre) em pelo menos um dos anéis, em que pelo menos um dos anéis é aromático, e em que o anel ou anéis podem ser fundidos de forma independente, e/ou em ponte. Exemplos incluem, sem limitação, quinolinila, isoquinolinila, indolila, furila, tienila, pirazolila, quinoxalinila, pirrolila, indazolila, tieno [2, 3 -c] pirazolila, benzofurila, pirazol [1, 5-a] piridila, tiofenilpirazolila, benzotienila, benzotiazolila, tiazolila, 2-feniltiazolila e isoxazolila.
[037]-OR ou oxi se refere a um grupo R ligado a uma fração molecular precursora através de um átomo de oxigênio, em que R é H, alquila, alquenila, alquinila, e semelhantes.
[038]Alcóxi se refere a um grupo alquila, como definido no presente documento, ligado à cadeia principal de carbono através de um átomo de oxigênio (alcóxi). Exemplos representativos de alcóxi incluem, mas não estão limitados a, metóxi, etóxi, propóxi, fenóxi, 2-propóxi, butóxi, t-butóxi, pentilóxi, hexilóxi e semelhantes.
[039]Hidroxi se refere a um grupo -OH.
[040]Carbonila é um grupo que tem um átomo de carbono duplamente ligado a um átomo de oxigênio (C=O), descrito frequentemente nas fórmulas químicas, tal como C (O).
[041]Uma acetila é um grupo -C (O) CH3.
[042]Uma amina ou amino se refere a um grupo -NH2, em que nenhum, um ou dois dos átomos de hidrogênio podem ser substituídos por um substituinte adequado, tal como descrito no presente documento, tal como alquila, alquenila, alquinila, e semelhantes.
[043]Uma amida ou amido se refere a um grupo tendo uma carbonila ligada a um átomo de nitrogênio, tal como -C(O)NH2, em que nenhum, um ou dois
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10/167 dos átomos de hidrogênio podem ser substituídos por um substituinte adequado, tal como descrito no presente documento, tal como alquila, alquenila, alquinila, e semelhantes.
[044]-SR se refere a um grupo R ligado à fração molecular de origem através de um átomo de enxofre, em que R é alquila, alquenila, alquinila, arila, cicloalquila, heterociclo, ou heteroarila. Exemplos representativos de -SR incluem, mas não estão limitados ao etanotiol, 3-metil-1 butanotiol, feniltiol e semelhantes.
[045]Cicloalquila, tal como usado no presente documento, se refere a um grupo hidrocarboneto cíclico saturado, contendo de 3 a 8 átomos de carbono ou mais. Exemplos representativos de cicloalquila incluem, mas não estão limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila, e ciclooctila.
[046]Cicloalquenila, tal como usada no presente documento, se refere a um grupo hidrocarboneto cíclico insaturado contendo 3 a 8 átomos de carbono ou mais e tendo uma ou mais ligações duplas.
[047]Cicloalquinila, tal como usada no presente documento, se refere a um grupo hidrocarboneto cíclico insaturado contendo 3 a 8 átomos de carbono ou mais e tendo uma ou mais ligações triplas.
[048]Eletrófilo tal como usado no presente documento se refere a um grupo possuindo densidade de elétron reduzida, tipicamente compreendendo um átomo de carbono que está diretamente ligado a um átomo mais eletronegativo, tal como um átomo de oxigênio, nitrogênio ou halogênio. eletrófilos exemplares incluem, mas não estão limitados ao diazometano, trimetilsilildiazometano, halogenetos de alquila, tais como, por exemplo, iodeto de metila, brometo de benzila e semelhantes, triflatos de alquila semelhantes, tais como, por exemplo, triflato de metila e semelhantes, sulfonatos de alquila como, tais como, por exemplo toluenossulfonato de etila, metanossulfonato de butila e semelhantes, halogenetos de acila, tais como, por exemplo, cloreto de acetila, brometo de benzoíla e, anidridos de ácido similares, tais
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11/167 como por exemplo anidrido acético, anidrido succínico, anidrido maleico e semelhantes, isocianatos, tais como, por exemplo isocianato de metila, isocianato de fenila e semelhantes, isotiocianatos, tais como, por exemplo, isotiocianato de metila, isotiocianato de fenila e semelhantes, cloroformatos, tais como, por exemplo, cloroformato de metila, cloroformato de etila, cloroformato de benzila e semelhantes, halogenetos de sulfonila, tais como, por exemplo cloreto de metanossulfonila, fluoreto de metanossulfonila, cloreto de p-toluenossulfonila e semelhantes, halogenetos de silila, tais como, por exemplo, cloreto de trimetilsilila, cloreto de tbutildimetilssilila e semelhantes, halogenetos de fosforila, tais como por exemplo clorofosfato de dimetila e outros semelhantes, epóxidos, tais como por exemplo, 2metiloxirano, aziridinas tais como, por exemplo, 2-metilaziridina, alfa-halocetona, tal como, por exemplo, l-cloro-2-propanona, compostos de carbonila alfa-betainsaturados tais como, por exemplo, acroleína, metil vinil cetona, cinamaldeído, N,Ndimetilacrilamida e semelhantes, e gama-halo-alfa-beta-insaturados tais como, por exemplo, (E)-6-cloroex-4-en-3-ona. Em algumas modalidades, eletrófilos são alfahalocetonas, isotiocianatos, epóxidos, aziridinas, haletos de sulfonila, ou alfa-betacarbonilas insaturadas.
[049]Em algumas modalidades, o eletrófilo é um receptor de Michael. Como é conhecido na arte, um receptor de Michael é um alqueno ou alquino da forma =—Z; em que Z compreende um grupo de remoção de elétrons, incluindo, mas não limitado a CHO, COR, COOR, CONRR', CONROR', CN, NO2, SOR, SO2R. R pode ser H, alquila, ou arila; em que R é alquila, alquenila, alcóxi ou arila. Em outra modalidade, azodicarboxamidas e quinonas são receptores de Michael. Vide, Santos, M.M.M. e Moreira, R., Mini-Reviews in Medicinal Chemistry, 7: 1040-1050, 2007. Um exemplo de Reação de Michael é ilustrado no esquema abaixo:
Z-CH£-Z' + ^-Z” base , z—C-C2-C2-Z'
Doador de Michael Receptor de Michael
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12/167 em que os grupos de retirada de elétron, Z, Z' e Z são conforme descritos acima. Em agumas modalidades, os receptores de Michael são compostos carbonila alfa-beta insaturados incluindo ésteres alfa-beta insaturados, carbonilas alquinila conjugadas e nitrilas alfa-beta insaturadas.
[050]Amida alfa-beta insaturada ou amida insaturada, tal como empregada no presente documento se refere a uma amida compreendendo um alqueno ou alquino ligado diretamente ao grupo carbonil amida e é representada
Figure BR112016008110B1_D0003
isir’ pela estrutura “r em que R' é hidrogênio ou alquila.
[051]Heteroátomo se refere a O, S ou N.
[052]Heterociclo ou heterociclila conforme empregado no presente documento significa um heterociclo monocíclico, um heterociclo bicíclico, ou heterociclo tricíclico contendo pelo menos um heteroátomo no anel.
[053]O heterociclo monocíclico é um anel de 3-, 4-, 5-, 6-, 7, ou 8 elementos contendo pelo menos um heteroátomo independentemente selecionado a partir do grupo consistindo de O, N, e S. Em algumas modalidades, o heterociclo é um anel de 3 ou 4 elementos contendo um heteroátomo selecionado a partir do grupo consistindo em O, N e S. Em algumas modalidades, o heterociclo é um anel de 5 elementos contendo zero ou uma ligação dupla e um, dois ou três heteroátomos selecionados a partir de o grupo que consiste em o, N e S. Em algumas modalidades, o heterociclo é um 6-, 7-, ou um anel de 8 elementos contendo zero, uma ou duas ligações duplas e um, dois ou três heteroátomos selecionados a partir do grupo constituído por O, N e S. Exemplos representativos de heterociclo monocíclico incluem, mas não estão limitados a, azetidinila, azepanila, aziridinila, diazepanila, 1,3-dioxanila, 1,3-dioxolanila, diidropiranila (incluindo 3,4-diidro-2Hpiran-6-il), 1,3-ditiolanila, 1,3-ditianila, imidazolinila, imidazolidinila, isotiazolinila, isotiazolidinila, isoxazolinila, isoxazolidinila, morfolinila, oxadiazolinila,
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13/167 oxadiazolidinila, oxazolinila, oxazolidinila, piperazinila, piperidinila, piranila, pirazolinila, pirazolidinila, pirrolinila, pirrolidinila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila (incluindo tetraidro-2H-piran-4-il), tetraidrotienila, tiadiazolinila, tiadiazolidinila, tiazolinila, tiazolidinila, tiomorfolinila, 1,1-dioxidotiomorfolinila (tiomorfolina sulfona), tiopiranila, e tritianila.
[054]Os heterociclos bicíclicos da presente invenção podem ser exemplificados por um heterociclo monocíclico fundido com um grupo arila, ou um heterociclo monocíclico fundido com um anel cicloalquila monocíclico, ou um heterociclo monocíclico fundido com uma cicloalquenila monocíclica, ou um heterociclo monocíclico fundido com um heterociclo monocíclico. Os exemplos representativos de heterociclos biciclicos incluem, mas não estão limitados a 3,4diidro-2H-piranila, 1,3-benzodioxolila, 1,3-benzoditiolila, 2,3-diidro-1,4-benzodioxinila, 2,3-diidro-1-benzofuranila, 2,3-diidro-1-benzotienila, 2,3-diidro-1H-indolila, 3,4diidroquinolin-2 (lH) -ona e de 1,2,3,4-tetraiidroquinolinila.
[055]O heterociclo tricíclico é um heterociclo biciclico fundido com um grupo arila, ou um heterociclo biclico fundido com um anel cicloalquila monocíclica, bicíclica ou um heterociclo fundido a uma cicloalquenila monocíclica, ou um heterociclo biclico fundido com um heterociclo monocíclico. Os exemplos representativos de heterociclos tricíclicos incluem, mas não estão limitados ao, 2, 3, 4, 4a, 9, 9ahexaiidro-1H-carbazolila, 5a, 6,7,8,9, 9a-hexaidrobenzo [b, d] furanila e 5a,6,7,8,9,9a-hexaidrodibenzo[b, d] tienila.
[056]Na heteroarila e heterociclos acima os átomos de nitrogênio ou de enxofre podem ser opcionalmente oxidados a vários estados de oxidação. Em um exemplo específico, o grupo S (O) 0-2 se refere ao -S- (sulfeto), -S (O) - (sulfóxido), e -SO2- (sulfona), respectivamente. Por conveniência, nitrogênios, particularmente mas não exclusivamente, aqueles definidos como nitrogênios aromáticos anulares, pretendem incluir as correspondentes formas de N-óxido.
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14/167 [057]Sal farmaceuticamente aceitável, tal como empregado no presente documento se refere aos sais de adição de ácido ou sais de adição de base dos compostos da presente revelação. Um sal farmaceuticamente aceitável é qualquer sal que retenha a atividade do composto de origem e não forneça qualquer efeito indevidamente prejudicial ou indesejável a um indivíduo a quem é administrado e no contexto em que é administrado. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados aos complexos metálicos e sais de ambos ácidos inorgânicos e carboxílicos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis também incluem sais de metais tais como alumínio, cálcio, ferro, magnésio, manganês e sais complexos. Além disso, os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados aos sais de ácidos tais como ácido acético, aspártico, alquilssulfônico, arilssulfônico, cefuroxima, benzenossulfônico, benzóico, bicarbônico, bissulfúrico, bitartárico, butírico, edetato de cálcio, camssílico, carbônico, clorobenzóico, cítrico, edético, edisílico, estólico, esil, esílico, fórmico, fumárico, glucéptico, glucônico, glutâmico, glicólico, glicolilarsanílico, hexâmico, hexilresorcinóico, hidrabâmico, bromídrico, clorídrico, iodídrico, hidroxinaftóico, isetiônico, láctico, Iactobiônico, maleico, málico, malônico, mandélico, metanossulfônico, metilnítrico, metilsulfúrico, múcico, mucônico, napsílico, nítrico, oxálico, p-nitrometanossulfônico, pamóico, pantotênico, fosfórico, monoidrogênio fosfórico, diidrogenfosfórico, ftálico, poligalactourônico, propiônico, salicílico, esteárico, succínico, sulfâmico, sulfanlico, sulfônico, tânico, tartárico, toluenossulfônico e semelhantes. Os sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser derivados de aminoácidos, incluindo, mas não se limitando a, cisteína. Métodos para produzir compostos como sais são conhecidos dos versados na arte {vide, por exemplo, Stahl e outros, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, Wiley-VCH; Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurique, 2002; Berge e outros., J. Pharm. Sci. 66: 1, 1977).
[058]Salvo indicação em contrário, a nomenclatura usada para descrever
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15/167 grupos químicos ou frações, tal como empregado no presente documento segue a convenção em que, lendo o nome da esquerda para a direita, o ponto de ligação ao restante da molécula é no lado direito do nome. Por exemplo, o grupo aril alquila C16 está anexado ao restante da molécula na extremidade alquila.
[059]A menos que indicado de outro modo, em que um grupo químico está descrito por sua fórmula química, incluindo uma porção terminal de ligação indicada por — será entendido que a ligação é lida da esquerda para a direita. Por exemplo, -C (O) alquila C1-6 está anexada ao restante da molécula na extremidade carbonila.
[060]A menos que indicado de outra forma, as estruturas ilustradas no presente documento pretendem também incluir todas as formas enantioméricas, diastereoméricas, e formas geométricas (ou conformacionais) da estrutura; por exemplo, as configurações R e S para cada centro assimétrico, isômeros de ligações duplas (Z) e (E) e isômeros conformacionais (Z) e (E). Portanto, os isômeros estereoquímicos individuais bem como misturas enantioméricas, diastereoméricas, e geométricas (ou conformacionais) dos presentes compostos estão dentro do âmbito da invenção. A menos que indicado de outra forma, todas as formas tautoméricas dos compostos da invenção estão dentro do âmbito da invenção. Além disso, a menos que indicado de outra forma, todas as formas de rotâmeros dos compostos da invenção estão dentro do âmbito da invenção. A menos que indicado de outra forma, as estruturas ilustradas no presente documento pretendem também incluir compostos que diferem apenas na presença de um ou mais átomos isotopicamente enriquecidos. Por exemplo, compostos possuindo as presentes estruturas exceto para a substituição de hidrogênio por deutério ou trítio, ou a substituição de um carbono por um carbono 13C ou 14C enriquecido estão dentro do escopo dessa invenção. Tais compostos são úteis, por exemplo, como ferramentas analíticas ou sondas em ensaios biológicos.
[061]Isômeros se referem aos compostos que têm o mesmo número e tipo
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16/167 de átomos e, portanto, o mesmo peso molecular, mas que diferem no que diz respeito ao arranjo ou configuração dos átomos. Será entendido, no entanto, que alguns isômeros ou racematos ou outras misturas de isômeros podem apresentar mais atividade do que outros. Estereoisômeros se referem aos isômeros que diferem apenas no arranjo dos átomos no espaço. Diastereoisômeros s referem aos estereoisômeros que não são imagens no espelho um do outro. Enantiômeros se refere aos estereoisômeros que são imagens no espelho não sobreponíveis um do outro.
[062]Em algumas modalidades, os compostos enantioméricos ensinados no presente documento podem ser isômeros enantiomericamente puros que compreendem substancialmente um único enantiômero, por exemplo, maior que ou igual a 90%, 92%, 95%, 98%, ou 99%, ou igual a 100 % de um único enantiômero.
[063]Em algumas modalidades, os compostos enantioméricos ensinados no presente documento podem ser estereoisomericamente puros. Estereoisomericamente puro como empregado no presente documento significa um composto ou composição do mesmo que compreende um estereoisômero de um composto e é substancialmente livre de outros estereoisômeros desse composto. Por exemplo, uma composição estereoisomericamente pura de um composto possuindo um centro quiral estará substancialmente isenta do enantiômero oposto do composto. Uma composição estereoisomericamente pura de um composto possuindo dois centros quirais será substancialmente isenta de diastereoisômeros, e substancialmente isenta do enantiômero oposto do composto. Um composto típico estereoisomericamente puro compreende mais que cerca de 80% em peso de um estereoisômero do composto e menos que cerca de 20% em peso dos outros estereoisômeros do composto, mais preferencialmente mais que cerca de 90% por peso de um estereoisômero do composto e menos que cerca de 10% em peso dos outros estereoisômeros do composto, ainda mais preferivelmente maior que cerca
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17/167 de 95% em peso de um estereoisômero do composto e menos que cerca de 5% em peso dos outros estereoisômeros do composto, e mais preferivelmente maior que cerca de 97% em peso de um estereoisômero do composto e menos que cerca de 3% em peso dos outros estereoisômeros do composto. Vide, por exemplo, Patente US número 7.189,715.
[064]R e S como termos que descrevem os isômeros são descritores da configuração estereoquímica no átomo de carbono assimetricamente substituído. A designação de um átomo de carbono assimetricamente substituído, tal como R ou S é feita por aplicação das regras de prioridade de Cahn-Ingold- Prelog, como são bem conhecidas dos versados na técnica, e descritas em International Union of Pure and Applied Chemistry (IUPAC) Rules for the Nomenclature of Organic Chemistry. Section E, Stereochemistry.
[065]Excesso enantiomérico (ee) de um enantiômero é [(a fração molar do enantiômero principal) menos (a fração molar do enantiômero menor)] x 100.
B. Compostos [066]Agentes ativos fornecidos no presente documento de acordo com algumas modalidades constituem um composto da Fórmula I:
Figure BR112016008110B1_D0004
I em que:
R3 é selecionado do grupo consistindo em alquila C1-6, alcóxi C1-6 alquila C16, NR10 R11 alquila C1-6, R10 heterociclila alquila C1-6, R10 arila alquila C1-6, e R10 heteroarila alquila C1-6, em que R10 e R11 são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio e alquila C1-6;
E é selecionado do grupo consistindo em:
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18/167
-NR13C(O)CR14=CHR15, e
-NR13C(O)CeCR14, em que R13 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio e metila, e R14 e R15 são independentemente selecionados do grupo consistindo em: hidrogênio, metila, flúor e cloro;
R12 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio, halo, alquila C1-6, alcóxi C1-6, hidróxi alquila C1-6, hidróxi alcóxi C1-6, alcóxi C1-6 alcóxi C1-6, alcóxi C1-6 alquila C1-6, R5R6 heterociclila, -C(O) heterociclila R5R6 , R5 R6 heterociclila alquila C16, NR5R6, NR5R6 alquila C1-6, -C(O)NR5R6, e NR5R6 C1-6 alquilóxi, em que R5 e R6 são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-6, hidróxi alquila C1-6, amino alquila C1-6,
-C(O) alquila C1-6 e alquilssulfonila C1-6; e
R1 é fenila, em que a dita fenila é substituída 2, 3, ou 4 vezes com halo ou alcóxi C1-6 independentemente selecionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmo.
Em algumas modalidades, R3 é alquila C1-6.
Em algumas modalidades, R3 é selecionado do grupo consistindo em: metila, metoxietila, 4-piridilmetila, 3-piridilmetila, 2-piridilmetila, benzila, N,Ndimetilaminopropila, 3-metilisoxazol-5-il-metila e 4-metilpiperazin-1-il-propila.
em que R13 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio e metila, e R14 e R15 são independentemente selecionados do grupo consistindo em: hidrogênio, metila, flúor e cloro;
R12 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio, halo, alquila C1-6, alcóxi C1-6, hidroxialquila C1-6, hidroxialcóxi C1-6,alcóxi C1-6 alcóxi C1-6, alcóxi C1-6 alquila C1-6, R5R6 heterociclila, -C(O) heterociclila R5R6 , R5R6 heterociclilalquila C1-6, NR5R6, NR5R6 alquila C1-6, -C(O)NR5R6, e NR5R6 alcóxi C1-6, em que R5 e R6 são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-6,
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19/167 hidroxialquila Ci-6, aminoalquila,
-C(O)alquila ci-6 e alquilassulfonila Ci-6; e
R1 é fenila, em que a dita fenila é substituída 2, 3, ou 4 vezes com halo ou alcóxi C1-6 independentemente selecionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Em agumas modalidades, R3 é alquila C1-6.
Em agumas modalidades, R3 é selecionado do grupo consistindo em: metila, metoxietila, 4-piridilmetila, 3-piridilmetila, 2-piridilmetila, benzila, N,Ndimetilaminopropila, 3-metilisoxazol-5-il-metila, e 4-metil piperazin-1-il-propila.
Em agumas modalidades, E é -NR13C(O)CH=CHR15 ou NR13C(O)CF=CH2, em que R13 e R15 são conforme definidos acima. Em agumas modalidades, E é -NHC(O)CH=CH2.
Em agumas modalidades, R12 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio, flúor, cloro, metila, metóxi, N,N-dimetilaminoetila, piperazin-1-ila, 4-etil piperazin-1-ila, 4-etil piperazin-1-il-metila, 1-metilpiperidina-4-ila, 1-etilpiperidina-4-ila, N,N-dimetilaminometila, N,N-dimetilaminopropila, piperidina-4-ila, morfolino, 3,5dimetil piperazin-1-ila, 4-(metilssulfonil) piperazin-1-ila, N,N-dimetilaminoetoxi, 4-(2hidroxietil) piperazin-1-ila, hidroxietoxi, metoxietoxi, hidroximetila, metoximetila, 2metoxipropila, 2-hidroxipropila, 2-aminopropila, 4-metil piperazin-1-il-carbonila, 4-etil piperazin-1-il-carbonila, 4-[2-propil] piperazin-1-ila, 4-acetil piperazin-1-ila, N-metil-Nhidroxietil-amino, N,N-dimetilamido, e 4-(2-aminoetil) piperazin-1-il.
Em agumas modalidades, R12 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio, alquila C1-6, hidroxialquila C1-6, R5R6 heterociclila, R5R6 heterociclilalquila C1-6, -C(O)NR5R6, NR5R6 alquila C1-6, NR5R6C1-6 alquiloxi, alcóxi C1-6, e alcóxi C1-6 alquila C1-6, em que R5 e R6 são independentemente selecionados do grupo consistindo em: hidrogênio, alquila C1-6, hidroxialquila C1-6,
-C(O)alquila C1-6 e alquilssulfonila C1-6.
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20/167
Em agumas modalidades, R12 é R5R6 heterociclila, em que R5 e R6 são conforme definidos acima.
Em agumas modalidades, R5R6 heterociclila é R5R6 piperazinila, em que R5 e R6 são conforme definidos acima.
Em agumas modalidades, R12 é 4-etil piperazin-1-il.
Em agumas modalidades, R12 não é hidrogênio.
Em agumas modalidades, R1 é 2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil.
Em agumas modalidades, o composto é um composto da Fórmula I(a):
Figure BR112016008110B1_D0005
I(a) em que R3, E, R12 e R1 são conforme definidos acima, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
C. Formulações Farmacêuticas [067]Os agentes ativos da presente invenção podem ser combinados com um veículo farmaceuticamente aceitável para proporcionar formulações farmacêuticas. A escolha particular do veículo e a formulação dependerá da via de administração particular para a qual a composição é destinada.
[068]Veículo farmaceuticamente aceitável tal como utilizado no presente documento se refere a um veículo não tóxico, adjuvante ou veículo que não destrua a atividade farmacológica do composto com o qual é formulado. Veículos farmaceuticamente aceitáveis, adjuvantes ou veículos que podem ser utilizados nas composições da presente invenção incluem, mas não estão limitados ao ácido sórbico, sorbato de potássio, misturas de glicerídeos parciais de ácidos graxos vegetais saturados, água, sais ou eletrólitos, fosfato de hidrogênio dissódico, hidrogeno-fosfato de potássio, cloreto de sódio, sais de zinco, sílica coloidal, trissilicato de magnésio, polivinil pirrolidona, substâncias à base de celulose,
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21/167 polietileno-glicol, carboximetilcelulose de sódio, poliacrilatos, ceras, polietileno-glicol e gordura de lã.
[069]As composições da presente invenção podem ser adequadas para administração parentérica, oral, por pulverização de inalação, tópica, retal, nasal, bucal, vaginal ou reservatório implantado, etc. Em algumas modalidades, a formulação compreende ingredientes que derivam de fontes naturais ou não naturais. Em algumas modalidades, a formulação ou agente de suporte pode ser fornecido sob uma forma estéril. Exemplos nãolimitativos de um veículo estéril incluem a água isenta de endotoxina ou água isenta de pirogênio.
[070]O termo parentérica tal como empregado no presente documento inclui injeção subcutânea, intravenosa, intramuscular, intra-articular, intrasinovial, intraesternal, intratecal, intra-hepática, intralesional e intracraniana ou técnicas de infusão. Em modalidades particulares, os compostos são administrados por via intravenosa, por via oral, por via subcutânea, ou administração por via intramuscular. As formas injetáveis estéreis das composições da presente invenção podem ser uma suspensão aquosa ou oleaginosa. Estas suspensões podem ser formuladas de acordo com técnicas conhecidas na especialidade utilizando agentes dispersantes ou umectantes adequados e agentes de suspensão. A preparação injetável estéril pode também ser uma solução injetável estéril ou suspensão num diluente parentericamente aceitável não tóxico ou solvente. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregados estão a água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotônica. Além disso, óleos fixos, estéreis são convencionalmente empregados como um meio solvente ou de suspensão.
[071]Para este fim, qualquer óleo fixo em combinação pode ser empregado incluindo mono ou diglicerídeos sintéticos. Ácidos graxos e os seus derivados de glicerídeo são úteis na preparação de injetáveis, como são os óleos naturais farmaceuticamente aceitáveis, tais como azeite ou óleo de rícino, especialmente nas
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22/167 suas versões POL oxietilada. Estas soluções ou suspensões oleosas podem também conter um diluente álcool de cadeia longa ou dispersante, tal como carboximetilcelulose ou agentes dispersantes similares que são comumente utilizados na formulação de formas de dosagem farmaceuticamente aceitáveis incluindo emulsões e suspensões. Outros tensoativos comumente utilizados, tais como Tweens, Spans e outros agentes emulsionantes que são comumente utilizados na fabricação de formas de dosagem farmaceuticamente aceitáveis sólidas, líquidas, ou outras formas de dosagem podem também ser utilizadas para os fins de formulação.
[072]Para administração oral, um composto ou sal pode ser fornecido numa forma de dosagem oral aceitável, incluindo, mas não se limitando as, cápsulas, comprimidos, suspensões ou soluções aquosas. No caso de comprimidos para utilização oral, veículos comumente utilizados incluem lactose e amido de milho. Agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio, também podem ser adicionados. Para administração oral numa forma de cápsula, os diluentes úteis incluem lactose e amido de milho seco. Quando são necessárias suspensões aquosas para utilização oral, o ingrediente ativo pode ser combinado com agentes emulsionantes e agentes de suspensão. Se desejado, podem também ser adicionados certos agentes edulcorantes, aromatizantes ou corantes. Em adição, conservantes podem também ser adicionados. Os exemplos adequados de conservantes farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados aos vários agentes antibacterianos e antifúngicos, tais como solventes, por exemplo, etanol, propileno glicol, álcool benzílico, clorobutanol, sais de amônio quaternário, e parabenos (tais como metilparabeno, etilparabeno, propil-parabeno, etc).
D. Indivíduos e Métodos de Uso [073]Os agentes ativos da presente invenção podem ser usados para tratar o carcinoma hepatocelular.
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23/167 [074]Tratamento, tratar e tratando se referem à reversão, alívio, retardo do início, inibição do progresso ou de outra forma melhora de uma doença ou transtorno, como descrito no presente documento. Em algumas modalidades, o tratamento pode ser administrado após um ou mais sintomas terem se desenvolvido. Em outras modalidades, o tratamento pode ser administrado na ausência de sintomas. Por exemplo, o tratamento pode ser administrado a um indivíduo suscetível antes do início dos sintomas (por exemplo, em função de um histórico de sintomas e/ou à luz de fatores de suscetibilidade genética ou outros). O tratamento também pode continuar após o desaparecimento dos sintomas, por exemplo, para prevenir ou retardar a sua recorrência.
[075]Paciente ou indivíduo, tal como empregado no presente documento, significa um animal, preferivelmente um mamífero, e indivíduos particularmente humanos (incluindo indivíduos de ambos os sexos, e incluindo indivíduos neonatais, infantis, juvenis, adolescentes, adultos e geriátricos). Os indivíduos podem também incluir outros indivíduos mamíferos (por exemplo, cão, gato, cavalo, vaca, ovelha, cabra, macaco, pássaros, etc.), para fins veterinários ou laboratoriais.
[076]Em algumas modalidades, o tratamento é fornecido a um indivíduo apresentando carcinoma hepatocelular com estado de FGFR4 e/ou FGF19 alterado (fator de crescimento de fibroblasto 19).
[077]Em algumas modalidades, o tratamento pode incluir ou ser realizado em conjunto com a análise do estado de FGFR4 e/ou FGF19 em uma amostra biológica que contém as células do referido carcinoma hepatocelular, e se o dito carcinoma hepatocelular exibe uma alteração de FGFR4 e/ou FGF19, tratamento de um indivíduo com uma quantidade eficaz para tratamento com um agente ativo tal como descrito no presente documento.
[078]Estado alterado tal como empregado no presente documento com referência à FGFR4 e/ou FGF19 inclui um aumento da expressão dos mesmos (por
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24/167 exemplo, aumento dos níveis de mRNA ou o aumento dos níveis de proteína), o aumento do número de cópias no genoma, e/ou aumento da atividade da proteína codificada como um resultado de mutação, etc, em comparação com um tecido não cancerígeno correspondente. Em algumas modalidades, o estado alterado de FGFR4 e/ou FGF19 inclui genes e/ou mutações de proteínas codificadas que resultam em um aumento da atividade ou estão de outra forma associados a uma forma mais agressiva do carcinoma hepatocelular.
[079]Expressão de FGFR4 e/ou FGF19 significa que um gene que codifica o mesmo é transcrito, e de um modo preferido, traduzido. Tipicamente, a expressão de uma região de codificação resultará na produção do polipeptídeo codificado.
[080]As proteínas FGFR4 e FGF19 são conhecidas, e o seu estado alterado e/ou expressão pode ser medida utilizando técnicas padrão na arte, por exemplo, a análise genômica de mutações ou aberrações no número de cópias, tais como, através de amplificação de ácido nucleico, a análise de sequenciamento e/ou técnicas com base em hibridação, análise de expressão do RNA, tais como northern blot ou qRT-PCR, western blot ou outro immunoblot ou imunoensaio, classificação de células ativadas por fluorescência (FACS), etc.
[081]A fim de que a invenção descrita no presente documento possa ser mais completamente compreendida, os seguintes exemplos são apresentados. Deve ser entendido que estes exemplos são apenas para fins ilustrativos e não se destinam à interpretação como limitativos.
EXEMPLOS
Geral [082]O aquecimento por micro-ondas foi feito usando um micro-ondas Liberador ou Iniciador Biotage Emrys. A cromatografia de coluna foi realizada utilizando um Isco Rf200d. A remoção do solvente foi realizada utilizando um evaporador rotativo Büchi ou um evaporador centrífugo da Genevac. LC/MS
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25/167 preparativo foi realizado utilizando um autopurificador Waters e coluna C18 de 19 x 100 mm XTerra de 5 micra MS em condições de fase móvel ácida. Os espectros de NMR foram registrados utilizando um espectrômetro Varian 400 MHz.
[083]Quando o termo inerte é utilizado para descrever um reator (por exemplo, um recipiente de reação, balão, reator de vidro e semelhantes) significa que o ar no reator foi substituído por um gás inerte, essencialmente seco ou isento de umidade (tal como nitrogênio, argônio e semelhantes).
[084] Os métodos gerais e experimentais para a preparação de compostos da presente invenção estão estabelecidos a seguir. Em certos casos, um composto particular é descrito a título de exemplo. No entanto, será apreciado que, em cada caso, uma série de compostos da presente invenção foi preparada de acordo com os esquemas e experimentos descritos abaixo.
Condições de HPLC Preparativas para a Purificação de Compostos Alvo
Condições de Cromatografia:
Instrumento: Waters 2767-SQD Mass trigger Prep System
Coluna: Waters Xbridge C 18 150 milímetros * 19 milímetros * 5 μπι
Detector: VWD SQD
Vazão: 15 mL/min.
Tempo de Gradiente:__
Tempo (min.) % de B
0 5
7,5 70
8 95
11 95
Fase móvel representativa:
1) Fase Móvel: A: 0,1% de TFA em água Fase móvel: B: ACN
2) Fase móvel: A: 0,1% NH4HCO3 em água Fase móvel: B: ACN
3) Fase Móvel: A: 0,1% de NH4OAc em água
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Fase móvel: B: ACN
4) Fase Móvel: A: 0,1% de NH4OH em água Fase móvel: B: ACN
Definições: As abreviaturas que se seguem apresentam os significados indicados:
ACN: Acetonitrila
BOC2O: dicarbonato de di-í-butila
Brettphos: 2-(diciclo-hexilfosfino)-3,6-dimetóxi-2',4',6'-tri-isopropil-1,1 '-bifenila tBuONa: í-butóxido de potássio
CH3I: iodometano
Cs2CO3: carbonato de césio
DCC: N,N'-dicicloexilcarbodiimida
DCM: Diclorometano
DIEA: Ν,Ν-diisopropiletilamina
DIPEA: Ν,Ν-diisopropiletilamina
DMAP: 4- (Dimetilamino)piridina
DME: Éter dimetílico
DMF: Dimetilformamida
DMSO: dimetilsulfóxido
EGTA: ácido tetracético de etileno-glicol
ESI-MS: ionização por electrospray - espectrometria de massa
EtOH: Etanol
HATU: hexafluorfosfato de 1-[bis (dimetilamino) metileno]-1H-1,2,3-trizol [4,5-b] piridinio 3-óxido
H2SO4: Ácido sulfúrico iPrOH: Isopropanol K2CO3: Carbonato de potássio
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KHMDS: bis (trimetilsilil) amida de potássio
KOH: hidróxido de potássio
LCMS: Cromatografia líquida - espectrometria de massa MeOH: Metanol
MsCl: cloreto de metanossulfonila
NaBH3CN: cianoboroidreto de sódio
NaBH(OAc)3; Triacetoxiboro hidreto de sódio
NH4Cl: Cloreto de amônio
NH4HCO3: Bicarbonato de amônio
Nal: Iodeto de sódio
NaNO3: Nitrato de sódio
NaOAc: Acetato de sódio nBuOH: n-butanol prep-HPLC: cromatografia líquida de alta eficiência preparativa prep-TLC: cromatografia em camada fina preparativa TBAF: fluoreto de tetrabutilamônio
TBDMS-CL: cloreto de í-butildimetilssilila
TBSCl: cloreto de í-butildimetilssilila
TBSOTf: trifluormetanossulfonato de í-butildimetilssilila
TEA: Trietilamina
TESCl: Clorotrietilssilano
TFA: ácido trifluoracético
THF: tetraidrofurano
Ti(OiPr)4: Isopropóxido de titânio
TLC: cromatografia em camada fina
PPTS: p-toluenossulfonato de piridínio
PE: éter de petróleo
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PEG: poli (etileno-glicol)
PtO2: dióxido de platina
EtOAc: Acetato de etila
Pd/C: Paládio (0) sobre carbono
Pd2(dba)3: tris (dibenzilidenoacetona) dipaládio (0)
Pd (dppf) 2Cl2: [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaládio (II)
Ruphos: 2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-diisopropoxibifenila
Xantphos: 4,5-bis (difenilfosfino) -9,9-dimetilxanteno
Materiais:
[085]Os compostos que se seguem estão comercialmente disponíveis e/ou podem ser preparados de várias maneiras bem conhecidas de um versado na técnica da síntese orgânica. Mais especificamente, os compostos descritos podem ser preparados utilizando as reações e as técnicas descritas no presente documento. Na descrição dos métodos sintéticos descritos abaixo, deve ser entendido que todas as condições reacionais propostas, incluindo a escolha do solvente, atmosfera de reação, temperatura de reação, duração da experiência e procedimentos de processamento, podem ser escolhidos para serem o padrão das condições de reação, a menos que indicado de outra forma. É entendido por um versado na técnica da síntese orgânica que a funcionalidade presente nas várias frações da molécula seriam compatíveis com os reagentes e reações propostas. Os substituintes não compatíveis com as condições de reação serão evidentes a um versado na técnica e métodos alternativos são portanto indicados. Os materiais de partida para os exemplos são tanto comercialmente disponíveis ou prontamente preparados por métodos convencionais a partir de materiais conhecidos.
SÍNTESE E TESTE DOS COMPOSTOS EXEMPLARES [086]Os compostos da Tabela 1 foram preparados pelos processos 2A- 2L.
TABELA 1
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Estrutura Número composto FGFR4 IC50 (μΜ) FGFR1 IC50 (μΜ)
1 0 7H Η 1 H <?' AvvVyY N^N °ciA< 100 <0,001 >10,0
1 0 VH Η 1 H N^N 0 LJ 102 0,853 >10,0
° 7 Η 1 H ?' N^N 0 103 0,673 >10,0
Η 1 H ?' Λ/ΝγγΝϊΝ 1 0. N^N 0 LJ 105 0,201 >10,0
IA ., ΛγΝγγΝ^Ν 1 Οχ N^N °ci-A^ <K 107 <0,001 0,720
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30/167
1 °> Η 1 H <?' AN^rNYNA°- n^n ocijy 108 <0,001 0,173
Fr ° ΥΗ Η 1 H ?' ΛνυύύνΑ°- N^N oci^A <K 110 0,027 >50,0
0 ,ÍH Η 1 Η V rVN Af N ΊΓ N TY °x N^N °CI^ 111 <0,001 1,280
0 γπ Η 1 H ?' An/yY N^N OC|AA 112 <0,001 2,600
1 0 Γ Η 1 H ?' , Λν^υνυν/Λ N<^N °C|AA <K 113 <0,001 0,621
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31/167
O<SH Η 1 H <?' N^N °C|A^ 114 <0,001 0,042
0 íl ΪΗ H ΛΥϊ PI 1 J 116 0,004 >20,0
0 1 rl .n. ΓΥ T ϊ O PI T H ? 1 TFA 120 <0,001 1,190
—o 3^y°\ /=zv >°° zpH iz 2 o 1 ' 121 <0,001 1,020
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32/167
O h n ipr T'í Va Cl , 1 | 1 H | 1 H'J - γχ/° z° 122 <0,001 0,324
0 [Ah h íiV Υϊ /N^n 1 o /0 123 <0,001 3,890
0 ΛΗ h íV τΝϊ VH Cl , 1 °οι-ψ /0 124 <0,001 0,164
0 |Ah h η ΎΝϊ Vh Cl 1 0%'Ν^ /ΝγΝ l^o ' °cFY /° 125 <0,001 2,860
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33/167
0 Ά„„ h i ΛΥγΥ 126 <0,001 0,601
0 5;V-Nh h 1 Λν*1 -Nr° ?' ;# °x 127 <0,001 3,200
0 H ίΥγΧ U Yh c, , ΎγΫ °ciX/ ^0 128 0,033 1,680
0 [íSH h >' Xn . M Vh Ç, , -NCX /0 129 0,063 >10,0
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0 t-:. í'7..... 130 0,002 >10,0
/ o IZL 3 x/ y/ 131 <0,001 1,170
/ o 12 3 °J··» 132 < 0,001 0,495
0 y H yy, 'Y-A-0 U °c>y > TFA 133 0,004 >10,0
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0 Ύη H Y„ Yj /N^N^^OMe 1 0 O OMe 139 0,006 >20,0
0 *AH h r'^ -/00 140 < 0,001 >20,0
0 '^'NH H ίΥγΛ 'γΝ C| /A θγΐ/kyOMe OMe 141 0,002 >20,0
0 ^Anh h Λγϊ 0Λ^ H ci /ΝγΝγ^/0Μθ OMe OMe 142 < 0,001 >10,0
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0 Vh H Vh χ H3PO4 /ΝγΝγ^γ0Μθ [ OMe 143 0,010 0,155
0 ΑνυΛ Vh ϊ /N NVyOMe H3P°4 OMe 144 < 0,001 0,105
O Vh h VVV ,/V h OH zN^NVOMe °CI-V OMe 145 < 0,001 2,190
0 Vh h Vvv [V1 h /° TFA /ΝγΝ^ΛγΟΜθ °CI^ OMe 147 < 0,001 5,940
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0 ^' NH H ΑνυΛ τ N H Cl V °ciA^ 1 OMe 148 < 0,001 6,440
0 ^'NH H ίΥγΛ τ N H Cl /N^N^^OMe °α^ψ OMe 149 < 0,001 7,700
0 ^' NH H ΑνυΛ oUJ H C| ziyJyOMB U θοιΑ A OMe 150 < 0,001 2,290
0 ^^NH H ífVNYN*i N H Cl -γΝΑ /ΝγΝΑχΟχ °ο,Ά 151 < 0,001 0,197
0 1 H ιΓί Τ ϊ pN^V H C| /NA /ΝγΝγΑθΜθ 1 Ά OMe 152 0,014 0,297
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0 H Á..N___N líi Ύ 9 ρ,/Ρ ÇN H C| Ύγ0 0 °α/ρ 154 < 0,001 0,777
0 ^•nh ___N. Π Ύ /0^0 Vn Cl T T Η 1 ΎνΥύ°χ °C|A^ 155 < 0,001 8,030
I CH ZI JZH^Z O=( z—V Xj, o / 156 < 0,001 1,950
O H Λν \° H Cl H^ xt□ □^γο\ OC|A/ 157 < 0,001 0,131
0 <5^nh h ΑγνΎν^ι ho^-nJU h c| ' 'VA °CI^Y 158 < 0,001 2,152
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40/167
0 ^NH „ 1 π h Cl /ΝγΝγ^ν °CI^ °\ 159 < 0,001 0,115
0 ^NH H 1 π ίΓΎΝΎΝ^ι 1 T Η ί 'Υυύ^ °CÁf Ά 160 < 0,001 0,660
0 ^NH H χγ.Ί N H Cl ντν^Γ° °\ 161 < 0,001 2,694
0 Ά« u 1 π ___N fíi Ύ h I Η 1 /ΝΪΝΪΎ°Χ °cAf Ά 162 < 0,001 >10,0
0 H Λγ^ -N-JU ίγΝ H C| 1 AyN ±n °cAf Ά 163 < 0,001 0,519
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0 Cl à 164 < 0,001 3,510
7 T H -V °CI
0 Ά·ΝΗ fS
fS
fN H N N Cl 1 0 165 < 0,001 7,370
γ Ύ
c> λ
cr T A
0 1 ν-ί
O
0 1 yN I H N N Cl 1 Ck 166 < 0,001 4,920
Y Ύ Ί Γ
c> 1XA .A
cr T 0
0 ^NH F fS
rS
Al yN T H N N Cl 1 Ck 167 < 0,001 > 10,0
γ Ύ
c> Λ
cr T A
O
kNH 1 'ΎΝ<Ί
O
ry Vh -NYN. Cl Ar 0Me 168 < 0,001 1,030
0 cA V
OMe
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42/167
0 ΟΙ'^^'ΝΗ íVa u Y„ Ϊ' °αΆ 170 0,008 > 10,0
Cl 0 ViNH H A U Vh 9' AyNyVv °c,-V A 171 0,003 3,920
A h íVa M Vh í' °c,-V A 172 0,011 7,370
0 Ah h áX X A A 175 0,015 > 10,0
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43/167
Cl 0 m-nh h h c| zNYN^OMe w OMe 181 < 0,001 0,224
O Ύ^ΝΗ H M Yh ?' rNYN YV °Me hist θοι^γγ OMe 183 0,180 6,210
O u„„ H WyY M Yh ?' x»Y'Yd\ °αΎ 184 0,089 6,475
1 NH H fyYyy M Y„ ? χΥγ^Α °cPY 0-. 185 0,013 >10,0
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Figure BR112016008110B1_D0007
Figure BR112016008110B1_D0008
Rendimento: 35%
Rendimento: 18%
Rendimento:
62%
Figure BR112016008110B1_D0009
• n
M
Kl
Cl
Figure BR112016008110B1_D0010
N-(2-{6-[3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureído]-pirimidin-4-ilamino}fenil)-acrilamida
NHj
Figure BR112016008110B1_D0011
Tolueno <Ac)jO
O
HN
O
A
Figure BR112016008110B1_D0012
a. N-(3,5-Dimetóxi-fenil) -acetamida [087]A uma solução de 3,5-dimetóxi-fenilamina (20 g, 0,131 mol) em tolueno (110 mL) foi adicionado anidrido acético (14 g, 0,137 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada por 18 horas a temperatura ambiente. PE (55 mL) foi adicionado, o precipitado foi filtrado e lavado com PE (100 mL) de modo a obter o composto título (24,2 g, rendimento: 95%). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 2,16 (s, 3H), 3,77 (s, 6H), 6,23 (s, 1H), 6,75 (s, 2H), 7,20 (s, 1H).
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45/167
Figure BR112016008110B1_D0013
b. N-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil) -acetamida [088]A uma solução de N-(3,5-dimetóxi-fenil)-acetamida (5 g, 25,6 mmol) em ACN (75 mL) foi adicionado cloreto de sulfurila (6,9 g, 51,2 mmol) a 0°C em atmosfera de nitrogênio. A mistura resultante foi agitada por 30 minutos nessa temperatura e saturada com NaHCO3 aquoso, saturado (40 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco de modo a obter o composto título (2,3 g, rendimento: 34%). 1H-NMR (400 MHz, CDCIs) δ 2,25 (s, 3H), 3,86 (s, 6H), 6,54 (s, 1H), 6,90 (s, 1H).
o «A αγΜ>
-ONHj
2MKOH _ ayLa EtOH J T refuxo
c. 2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenilamina [089]Uma solução de N-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-acetamida (3,6 g, 13,7 mmol) em EtOH (130 mL) e KOH (2M, 75 mL) foi aquecida ao refluxo por 24 horas. A reação foi resfriada para 0°C e agitada por 1 hora nessa temperatura. O precipitado foi filtrado e seco de modo a obter o composto título (2,3 g, rendimento:
76%). 1H-NMR (400 MHz, CDCIs) δ 3,90 (s, 6H), 4,57 (bs, 2H), 6,05 (s, 1H).
NH? trifosgeno
TEA dioxano C'ÀCI
d. 2,4-Dicloro-3-isocianato-1,5-dimetóxi-benzeno [090]Uma mistura de 2,6-dicloro- 3,5-dimetóxi-fenilamina (500 mg, 2,25
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46/167 mmol), trifosgeno (335 mg, 1,12 mmol) e TEA (342 mg, 3,38 mmol) em dioxano (15 mL) foi aquecida para 130°C por 2 horas em micro-ondas. A reação foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com DCM de modo a obter o composto título (450 mg, rendimento: 80%). 1H-NMR (400 MHz,
CDCIs) δ 3,92 (s, 6H), 6,42 (s, 1H).
ci
N N
II
ÍPrOH metilamina em THF
Figure BR112016008110B1_D0014
H
e. (6-Cloro-pirimidin-4-il)-metil-amina [091 ]A uma solução de 4,6-dicloro-pirimidina (7,45 g, 50 mmol) em ÍPrOH (50 mL) foi adicionado uma solução de metil amina in THF (2M, 30 mL, 60 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada por 18 horas. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com DCM:EtOAc = 6:1-1:1 de modo a obter o composto título (4,4 g, rendimento: 62%) como um sólido branco. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 2,96 (d, 3H), 5,22-5,36 (bs, 1H), 6,35 (s, 1H), 8,35 (s, 1H); MS (ESI): 144 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0015
H
Figure BR112016008110B1_D0016
Brettphos tBuONa, DME
Figure BR112016008110B1_D0017
HN
f. N-Metil-N'-(2-nitro-fenil)-pirímidina-4,6-diamina [092]Uma mistura de (6-cloro-pirimidin-4-il)-metil-amina (1 g, 7 mmol), 2nitro-fenilamina (965 mg, 7 mmol), Brettphos (279 mg, 0,35 mmol) e tBuONa (2 g, 21 mmol) em DME (50 mL) foi aquecida para 90°C por 1 hora em atmosfera de nitrogênio. A reação foi concentrada, e 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com DCM:EtOAc = 10:1-1:1 de modo a obter 0 composto título (600 mg, rendimento: 35%) como um sólido amarelo. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 2,94 (d, 3H), 4,99 (bs, 1H), 5,82 (s, 1H), 7,04 (t, 1H), 7,60 (t, 1H), 8,21 (d,
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47/167
Η), 8,33 (s, 1 Η), 8,75 (d, 1 Η), 9,91 (s, 1H); MS (ESI): 246 [M+H]
Figure BR112016008110B1_D0018
Figure BR112016008110B1_D0019
g. 3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-1 -[6-(2-nitro-fenilamino)-pirimidin4-il]-ureia [093]A uma solução de N-metil-N'-(2-nitro-fenil)-pirimidina-4,6-diamina (150 mg, 0,61 mmol) em THF (15 mL) foi adicionado NaH (60%, 60 mg, 1,5 mmol) a 0°C, e a mistura foi agitada por 30 minutos a temperatura ambiente. Uma solução de 2,4dicloro-3-isocianato-1,5-dimetóxi-benzeno (180 mg, 0,73 mmol) foi adiciona gota a gota a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada por 2 horas. Água (2 mL) foi adicionada para saturar a reação. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com DCM:EtOAc = 6:1 ~1:1 de modo a obter o composto título (54 mg, rendimento: 18%) como um sólido amarelo. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,38 (s, 3H), 3,93 (s, 6H), 6,75 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 7,34 (t, 1H), 7,72 (t, 1H), 7,79 (d, 1H), 8,01 (d, 1H), 8,38 (s, 1H), 9,99 (s, 1H), 11,78 (s, 1H); MS (ESI): 493 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0020
h. 1-[6-(2-Amino-fenilamino)-pirimidin-4-il]-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1metil-ureia
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 71/205
48/167 [094]A uma solução de 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-1-[6-(2-nitrofenilamino)-pirimidin-4-il]-ureia (50 mg, 0,1 mmol) em THF (10 mL) e MeOH (10 mL) foi adicionado níquel Raney (suspensão em água) a temperatura ambiente, a mistura resultante foi agitada por 2 horas em atmosfera de hidrogênio. A reação foi filtrada e concentrada e modo a obter o composto título (38 mg, rendimento: 82%), que foi empregado diretamente na próxima etapa. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3,28 (s, 3H), 3,85 (s, 2H), 3,94 (s, 6H), 5,86 (s, 1H), 6,52 (s, 1H), 6,78-6,87 (m, 3H), 7,167,20 (m, 2H), 8,39 (s, 1H), 12,62 (s, 1H); MS (ESI): 463 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0021
i. N-(2-{ 6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-ureído]-pirimidin-4ilamino}- fenil)-acrilamida [095]A uma solução de 1-[6-(2-amino-fenilamino)-pirimidin-4-il]-3-(2,6dicloro-3,5-dimetóxi- fenil)-1-metil-ureia (25 mg, 0,05 mmol) em THF (10 mL) foi adicionada uma solução de cloreto de acriloila em THF (20 mg/mL, 0,5 mL, 0,1 mmol) a -10°C, e a mistura resultante foi agitada por 1 hora nessa temperatura. MeOH (1 mL) foi adicionada para saturar a reação. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por TLC de preparação de modo a obter o composto título (12 mg, rendimento: 43%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,26 (s, 3H), 3,94 (s, 6H), 5,74 (d, 1H), 6,24 (d, 1H), 6,37 (s, 1H), 6,47-6,54 (m, 1H), 6,90 (s, 2H), 7,20 (d, 2H), 7,56-7,58 (m, 1H), 7,66-7,68 (m, 1H), 8,38 (s, 1H), 9,99 (s, 1H), 9,70 (s, 1H), 11,99 (s, 1H); MS (ESI): 517 [M+H]+.
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49/167 [096]Os compostos 102, 103 e 105 foram sintetizados de modo semelhante ao composto 100.
Procedimento 2B: Exemplo - 107
Figure BR112016008110B1_D0022
CI-AAci IPr2NEt, dioxano c( Temp. ambiente, por toda noite, rendimento: 46%
Figure BR112016008110B1_D0023
N02
Xantphnc
CsjCOj. Tolueno 100'C, 4 horas Rendimento: 34%
Figure BR112016008110B1_D0024
Rendimento: 32%
Fe. AcOh 50 BC. 2h
Rendimento: 66%
Figure BR112016008110B1_D0025
Figure BR112016008110B1_D0026
N-(2-{6-[3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -piridin-3-ilmetil-ureído]-pirimidin4-ilamino}-fenil)-acrilamida
Ν '•'N .;|Αρ| pp,
N
-- Cl
DIPEA, dioxano, rt, a noite toda
Figure BR112016008110B1_D0027
a. (6-Cloro-pirimidin-4-il)-piridin-3-ilmetil-amina [097]A uma solução de 4,6-dicloro-pirimidina (1 g, 6,71 mmol) em dioxano (20 mL) foi adicionada uma solução de piridin-3-il-metilamina (745 mg, 6,9 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por toda noite. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia
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50/167 flash sobre sílica de modo a obter o composto título (680 mg, rendimento: 46%). MS (ESI): 221 [M+H]+.
ci
N 'N
A,AN
NO?
NH2
Pd2(dba)3, xantDhos Cs2CO3l tolueno
10Q°C,4h
Figure BR112016008110B1_D0028
HN..
Il
N
b. N-(2-Nitro-fenil)-N'-piridin-3-ilmetil-pirimidina-4,6-diamina [098]Uma mistura desgaseificada de (6-cloro-pirimidin-4-il)-piridin-3-ilmetilamina (300 mg, 1,36 mmol), 2-nitro-fenilamina (188 mg, 1,36 mmol), Pd2(dba)3 (128 mg, 0,14 mmol), Xantphos (161 mg, 0,28 mmol) e CS2CO3 (913 mg, 2,8 mmol) em tolueno (10 mL) foi aquecida a 100°C por 4 horas. A reação foi concentrada, e 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter 0 composto título (150 mg, rendimento: 34%). MS (ESI): 323 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0029
c. 3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -[6-(2-nitro-fenilamino)-pirimidin-4-il]-1 piridin-3-ilmetil-ureia [099]A uma solução de N-(2-nitro-fenil)-N'-piridin-3-ilmetil-pirimidina-4,6diamina (150 mg, 0,467 mmol) em THF (15 mL) foi adicionado NaH (60%, 48 mg, 1,2 mmol) a 0°C, e a mistura foi agitada por 30 minutos a temperatura ambiente. Uma solução de 2,4-dicloro-3-isocianato-1,5-dimetóxi-benzeno (procedimento 2A, etapas a-d; 180 mg, 0,73 mmol) foi adicionada gota a gota a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada por 2 horas. Água (2 mL) foi adicionada para saturar a reação. A mistura foi concentrada, e 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash
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51/167 sobre sílica de modo a obter o composto título (85 mg, rendimento: 32%). MS (ESI): 570 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0030
Figure BR112016008110B1_D0031
d. 1-[6-(2-Amino-fenilamino)-pirimidin-4-il]-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1piridin-3-ilmetil-ureia [0100]Uma mistura de 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-[6-(2-nitrofenilamino)- pirimidin-4-il]-1-piridin-3-ilmetil-ureia (85 mg, 0,149 mmol) e Fe (84 mg, 1,5 mmol) em AcOH (5 mL) foi aquecida a 50oC por 2 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado ao vácuo de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título (53 mg, rendimento: 66%). MS (ESI): 540 [M+H]+.
o
Figure BR112016008110B1_D0032
e. N-(2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-piridin-3-ilmetil-ureído]pirimidin-4- ilamino}-fenil)-acrilamida [0101]A uma solução de 1-[6-(2-amino-fenilamino)-pirimidin-4-il]-3-(2,6dicloro-3,5-dimetóxi fenil)-1-piridin-3-ilmetil-ureia (53 mg, 0,1 mmol) em THF (10 mL) foi adicionada uma solução de cloreto de acriloila emTHF (20 mg/mL, 0,5 mL, 0,1
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 75/205
52/167 mmol) a -10°C, e a mistura foi agitada por 1 hora nessa temperatura. MeOH (1 mL) foi adicionado para saturar a reação. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por TLC de preparação, de modo a obter o composto título (9 mg, rendimento: 15%). 1H NMR (400 MHz, CDCIs) δ 3,84 (s, 6H), 5,01 (s, 2H), 5,69 (d, 1H), 5,75 (s, 1H), 6,10 (dd, 1H), 6,34 (d, 1H), 6,47 (s, 1H), 7,00 (d, 1H), 7,09-7,24 (m, 2H), 7,28 (t, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,47 (d, 1H), 7,69-7,71 (m, 2H), 8,31-8,34 (m, 2H), 8,40-8,42 (m, 1H), 12,60 (s, 1H); MS (ESI): 594 [M+H]+.
Procedimento 2C: Exemplo - 108 no2
Figure BR112016008110B1_D0033
nh2 (Boc)2O
THF
NO? .NHBoc /'NH refluxo portoda noite
Br
Pd2(dbali, xantohQs Cs2CO3. tolueno
100 C, 4h
Figure BR112016008110B1_D0034
Figure BR112016008110B1_D0035
NHBoc
N !N
Figure BR112016008110B1_D0036
C|AAnH
Pd^dbaij, xantphos
Cs2CO3l tolueno A1?
100 °C, 1h nA
Figure BR112016008110B1_D0037
TFA DCM rt, 3h
Figure BR112016008110B1_D0038
rendimento: 29¾
Figure BR112016008110B1_D0039
°C - rt 2h rendimento: 21%
Figure BR112016008110B1_D0040
Níquel Raney, h2
THF. MeOH rt, 6h rendimento: 62%
Figure BR112016008110B1_D0041
N-[2-{6-[3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-ureído]-pirimidin-4-ilamino}5-(4-etil- piperazin-1 -il)-fenil]-acrilamidametano
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53/167
Br
Figure BR112016008110B1_D0042
NH2 (Boc)2O
THF
Refluxo Por toda noite
Br
N02
Figure BR112016008110B1_D0043
NHBoc
a. 4-bromo-2-nitrofenilcarbamato de t-butila [0102]Uma mistura de 4-bromo-2-nitroanilina (4 g, 18,4 mmol), (Boc)2O (4,4 g, 20,24 mmol) em THF (50 mL) foi aquecida ao refluxo por toda noite. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com PE:EtOAc = 20:1 de modo a obter o composto título (5,4 g, rendimento: 93%). MS (ESI): 317, 319 [M+H]+.
NHBoc
Br
Pd2(dba)3, xantphos Cs2CO3, Tolueno 100°C, 4h
b. 4-(4-etil piperazin-1-il)-2-nitrofenilcarbamato de t-butila [0103]Uma mistura desgaseificada de 4-bromo-2-nitrofenilcarbamato de tbutila (5,4 g, 17 mmol), 1-etil piperazina (2,91 g, 25,5 mmol), Pd2(dba)3 (2,1 g, 3,4 mmol), xantphos (3,92 g, 6,8 mmol) e Cs2CO3 (11,1 g, 34 mmol) em tolueno (85 mL) foi aquecida a 100°C por 4 horas. A reação foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com MeOH: DCM = 1:50~1:20 de modo a obter o composto título (3,3 g, rendimento: 55%). MS (ESI): 351 [M+H]+.
NO
NO
c. 4-(4-Etil piperazin-1-il)-2-nitroanilina [0104]A uma solução de 4-(4-etil piperazin-1-il)-2-nitrofenilcarbamato de tbutila (3,3 g, 9,43 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionado TFA (20 mL) a 0°C, a
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 77/205
54/167 mistura resultante foi agitada por 3 horas a temperatura ambiente. Após remoção de todos os voláteis em vácuo, o resíduo foi redissolvido em DCM, neutralizado com K2CO3 aquoso, saturado e extraído com DCM. Os extratos combinados foram concentrados de modo a obter o composto título (2,1 g, rendimento: 90%), que foi empregado diretamente na próxima etapa. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,02 (t, 3H), 2,36 (q, 2H), 2,47-2,49 (m, 4H) 2,97-3,00 (m, 4H), 6,97 (d, 1H), 7,20 (s, 2H), 7,25 (s, 1H), 7,34 (dd, 1H); MS (ESI): 251 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0044
d. N4-(4-(4-etil piperazin-1 -il)-2-nitrofenil)-N6-metilpirimidina-4,6-diamina [0105]Uma mistura desgaseificada de 4-(4-etil piperazin-1-il)-2-nitroanilina (2,1 g, 8,4 mmol), 6-cloro-N-metilpirimidin-4-amina (Procedimento 2A, etapa e; 1,2 g, 8,4 mmol), Pd2(dba)3 (1,54 g, 1,68 mmol), xantphos (1,94 g, 3,36 mmol) e Cs2CO3 (5,48 g, 16,8 mmol) em tolueno (45 mL) foi aquecida a 100°C por 1 hora. A reação foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com MeOH: DCM = 1:40~1:20 de modo a obter o composto título (870 mg, rendimento: 29%). MS (ESI): 358 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0045
nitrofenilamino)pirimidin-4-il)-1 -metilureia
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 78/205
55/167 [0106]A uma solução de N4-(4-(4-etil piperazin-1-il)-2-nitrofenil)-N6metilpirimidina-4,6-diamina (870 mg, 2,44 mmol) em THF (15 mL) foi adicionado NaH (60%, 200 mg, 5 mmol) a 0°C, e a mistura foi agitada por 30 minutos a temperatura ambiente. Uma solução de 2,4-dicloro-3-isocianato-1,5-dimetóxi-benzeno (Procedimento 2A, etapas a-d; 908 mg, 3,66 mmol) em THF foi adicionada gota a gota a 0°C. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. Solução aquosa saturada de NH4Cl (2 mL) foi adicionada para saturar a reação. A mistura foi concentrada e extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 anidro, e concentrados de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (330 mg, rendimento: 21%) como um óleo vermelho. 1H NMR (400 MHz, CDCls) δ 1,44 (t, 3H), 3,01 (t, 2H), 3,21 (q, 2H), 3,41-3,49 (m, 5H), 3,73-3,80 (m, 4H), 3,92 (s, 6H), 6,27 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,69 (s, 1H), 8,32 (d, 1H), 8,52 (s, 1H), 10,28 (br s, 1H), 12,05 (br s, 1H); MS (ESI): 605 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0046
f. 1 -(6-(2-Amino-4-(4-etil piperazin-1 -il)fenilamino)pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro3,5- dimetoxifenil) -1 -metilureia [0107]A uma solução de 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-(6-(4-(4-etil piperazin-1-il)-2-nitrofenilamino)pirimidin-4-il)-1-metilureia (330 mg, 0,546 mmol) em THF (20 mL) e MeOH (20 mL) foi adicionado níquel Raney (suspensão em água) a temperatura ambiente, a mistura resultante foi agitada por 3 horas em atmosfera de hidrogênio (1 atm.). A reação foi filtrada e concentrada. O resíduo foi lavado duas vezes com MeOH de modo a obter o composto título (280 mg, pureza: 90%), que foi empregado diretamente na próxima etapa. MS (ESI): 575 [M+H]+.
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 79/205
56/167 ο
Figure BR112016008110B1_D0047
g. N-(2-(6-(3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-ilamino)5-(4- etil piperazin-1-il)fenil)acrilamida [0108]A uma solução de 1-(6-(2-amino-4-(4-etilpiperazin-1il)fenilamino)pirimidin-4-il)-3-(2,6- dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureia (280 mg, pureza: 90%, 0,44 mmol) em THF (30 mL) foi adicionada uma solução de cloreto de acriloila emTHF (20 mg/mL, 2 mL, 0,44 mmol) a -10°C, e a mistura resultante foi agitada por 1 hora nessa temperatura. MeOH (1 mL) foi adicionada para saturar a reação. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por HPLC de preparação e TLC de preparação, de modo a obter o composto título (20 mg, rendimento: 7%).
1H NMR (400 MHz, CDCL) δ 1,31 (t, 3H), 2,65 (q, 2H), 2,62-2,68 (m, 4H), 3,27 (s,
3H), 3,36-3,38 (m, 4H), 3,91 (s, 6H), 5,76 (d, 1H), 5,90 (s, 1H), 6,24 (dd, 1H), 6,41 (d,
1H), 6,52 (s, 1H), 6,74 (dd, 1H), 7,07 (br s, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,72 (br s, 1H), 7,98 (br s, 1H), 8,37 (s, 1H), 12,52 (s, 1H); MS (ESI): 629 [M+H]+.
Exemplo - 110 O
F.
N-(2-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-ilamino)fenil)-2-fluoracrilamida
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 80/205
57/167 [0109]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2A (Exemplo 100), modificação da etapa (i) para o seguinte procedimento: A uma solução de 1-[6-(2-amino-fenilamino)-pirimidin- 4-il]-3-(2,6dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureia (130 mg, misturada com tetracloro anilina) e DCC (118 mg, 0,56 mmol) em clorofórmio (100 ml_) foi adicionada uma solução de ácido 2-fluoracrílico (50 mg, 0,56 mmol) em clorofórmio (50 ml_) a 0°C, e a mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por toda noite. Água (1 ml_) foi adicionada para saturar a reação. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por coluna de fase reversa e TLC de preparação de modo a obter o composto título (4 mg, rendimento: 5%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 12,17 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,84 (d, 1H), 7,37 (d, 1H), 7,29 (t, 1H), 7,26 (t, 1H), 6,47 (s, 1H), 5,94 (s, 1H), 5,78 (dd, 1 H), 5,21 (dd, 1H), 3,85 (s, 6H), 3,25 (s, 3H); MS (ESI): 535 [M+H]+.
Procedimento 2E: Exemplo -111
Figure BR112016008110B1_D0048
dioxano/H20, refluxo, 3 horas
Figure BR112016008110B1_D0049
Figure BR112016008110B1_D0050
NaH, THF 0°C-rt então SEMCI Rendimento: 28%
Cl
Figure BR112016008110B1_D0051
CS2CO3 (2 eqv_),
Tolueno, 100C, 5 h Rendimento: 57%
Figure BR112016008110B1_D0052
Rendimento: 10% ,0^
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 81/205
58/167
N-(2-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-ilamino)-5(1-etilpiperidin-4-il)fenil)acrilamida
Figure BR112016008110B1_D0053
Figure BR112016008110B1_D0054
Figure BR112016008110B1_D0055
a. 4-(4-amino-3-nitrofenil)-5,6-diidropiridina-1(2H)-carboxilato de t-butila [0110]A uma mistura desgaseificada de 4-bromo-2-nitroanilina (1 g, 4,6 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-diidropiridina-1 (2H)carboxilato de t-butila (1,42 g, 4,6 mmol), triidrato fosfato tripotássio (3,9 g, 14,64 mmol) em dioxano e água (30 mL, 8:1) foi adicionado Pd(dppf)2Cl2 (337 mg, 0,46 mmol). A mistura foi refluxada a 110°C por 3 horas. Filtração e concentração forneceram o produto bruto, que foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título (1,1 g, rendimento: 75%). MS (ESI): 320 [M+H]+.
Cl
Figure BR112016008110B1_D0056
□ H
Figure BR112016008110B1_D0057
b. 1-(6-cloropirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-((2(trimetilssilil)etóxi)metil)ureia [0111]A uma solução de 6-cloro-N-metilpirimidin-4-amina (Procedimento 2A, etapa e; 460 mg, 3,21 mmol) em DMF (15 mL) foi adicionado NaH (60%, 193 mg, 4,81 mmol) a 0°C, e a mistura foi agitada por 30 minutos a temperatura ambiente.
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 82/205
59/167
Uma solução de 2,4-dicloro-3-isocianato-1,5-dimetóxi-benzeno (Procedimento H, etapas a-d; 1,03 g, 4,17 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionada gota a gota a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada por meia hora. SEMCl (804 mg, 4,81 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. NH4Cl aquoso, saturado foi adicionado para saturar a reação. A mistura foi diluída com água e extraída com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados com água e salmoura, secos sobre Na2SO4 anidro e filtrados. O filtrado foi evaporado ao vácuo de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica, de modo a obter o composto título (470 mg, rendimento: 28%). MS (ESI): 521 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0058
Figure BR112016008110B1_D0059
c. (4-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metil-3-((2- (trimetilssilil)etóxi) metil)ureído)pirimidin-4-ilamino)-3-nitrofenil)-5,6-diidropiridina-1(2H)-carboxilato de tbutila [0112]Uma mistura desgaseificada de 1-(6-cloropirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-((2-(trimetilssilil)etóxi)metil)ureia (470 mg, 0,9 mmol), 4(4-amino-3-nitrofenil)-5,6-diidropiridina-1(2H)-carboxilato de t-butila (320 mg, 1 mmol), Pd2(dba)3 (92 mg, 0,1 mmol), xantphos (115 mg, 0,2 mmol) e Cs2CO3 (652 mg, 2 mmol) em tolueno (10 mL) foi aquecida a 100°C por 5 horas. A reação foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (400 mg, rendimento: 57%). MS (ESI): 804 [M+H]+.
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 83/205
60/167
Figure BR112016008110B1_D0060
MeOH
PtO2, H2
Figure BR112016008110B1_D0061
d. 4-(3-amino-4-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metil-3 -((2(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-ilamino)fenil)piperidina-1 -carboxilato de tbutila [0113]A uma solução de 4-(4-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3((2- (trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-ilamino)-3-nitrofenil)-5,6-diidropiridina1(2H)-carboxilato de t-butila (380 mg, 0,473 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado PtO2 (38 mg, 10% em peso) e uma gota de clorobenzeno a temperatura ambiente, a mistura resultante foi agitada em atmosfera de hidrogênio (1 atm) por toda noite. A reação foi filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (130 mg, rendimento: 37%). MS (ESI): 776 [M+H]+.
O
Figure BR112016008110B1_D0062
e. Sal TFA de N-(2-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metilureído)pirimidin-4-ilamino)-5- (piperidin-4-il)fenil)acrilamida [0114]A uma solução de 4-(3-amino-4-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metil-3-((2-(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-ilamino)fenil)piperidina-1carboxilato de t-butila (130 mg, 0,168 mmol) em THF (15 mL) foi adicionada uma solução de cloreto de acriloila (10 mg/mL, 1,7 mL, 0,19 mmol) gota a gota a -10°C, e
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 84/205
61/167 a mistura resultante foi agitada a 0°C por 1 hora. LC-MS mostrou que a reação estava completa. MeOH (5 mL) foi adicionado para saturar a reação, e a reação foi concentrada. O resíduo em DCM (2 mL) foi adicionado gota a gota to uma mistura de DCM/TFA (2/1, v/v, 3 mL). A mistura foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora e então concentrada ao vácuo. O resíduo (50 mg, quant.) foi empregado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. MS (ESI): 600 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0063
f. N-(2-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-ilamino)5- (1-etilpiperidin-4-il)fenil)acrilamida [0115]A uma solução de sal de TFA de N-(2-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-ilamino)-5-(piperidin-4-il)fenil)acrilamida (35 mg, 0,049 mmol) em EtOH (1 mL), foi adicionado NaOAc (4 mg, 0,05 mmol) e acetaldeído aquoso (1 mL, 0,9 mmol, 40%). Após a mistura ter sido agitada a temperatura ambiente por 1 hora, NaBHsCN (12 mg, 0,18 mmol) foi adicionado, e a solução foi agitada a temperatura ambiente por mais 3 horas. Após remoção de todos os voláteis em vácuo, o resíduo foi dividido entre DCM e água. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio duas vezes. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 anidro e filtrados. O filtrado foi evaporado ao vácuo de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por HPLC de preparação para fornecer o composto título (3 mg, rendimento: 10%). 1H NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 8,38 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,54 (d, 1H), 7,24 (dd, 1H), 6,83 (s, 1H), 6,46-6,35 (m, 3H), 5,81 (d, 1H), 3,97 (s, 6H), 3,74-3,70 (m, 2H), 3,37 (s, 3H), 3,26 (q, 2H), 3,17-3,11 (m, 2H), 2,99-2,96 (m, 1H), 2,26-2,22 (m, 2H), 2,06-1,99
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 85/205
62/167 (m, 2H), 1,43 (t, 3H); MS (ESI): 628 [M+H]+.
Exemplo - 112 0
Figure BR112016008110B1_D0064
N-(2-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-ilamino)-5(1-metilpiperidin-4-il)fenil)acrilamida [0116]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2E (Exemplo 111), substituindo aldeído fórmico na etapa (f) para fornecer o composto título (1,5 mg, rendimento: 11,6%). 1H NMR (400 MHz, MeOHd4) δ 8,26 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,41 (d, 1H), 7,11 (d, 1H), 6,71 (s, 1H), 6,34-6,22 (m, 3H), 5,68 (d, 1H), 3,84 (s, 6H), 3,55-3,52 (m, 2H), 3,25 (s, 3H), 3,21-3,08 (m, 2H), 2,90-2,83 (m, 4H), 2,11 -2,08 (m, 2H), 1,89-1,85 (m, 2H); MS (ESI): 614 [M+H]+.
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 86/205
63/167
Procedimento 2F: Exemplo - 113
HO.
no2
Dess-Marlln DCM,Ü°C - rL
NO,
NH^OH
NO2 ^nh2
NHMe,, TI (OiPru
Rendimento: 75%
MeOH. NaBHU
Rendimento: 53%
NO2
THF, rt
Rendimento: 53%
NH,
Figure BR112016008110B1_D0065
Rendimento: 30%
Pl02, HU MeOH
Figure BR112016008110B1_D0066
i. TFA. DCM
-A,
THF, -20 OC*
Rendimento: 15%
Figure BR112016008110B1_D0067
N-(2-{6-[3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureído]-pirimidin-4-ilamino}5-dimetilaminometil-fenil)-acrilamida
Dess martin
NO,
Figure BR112016008110B1_D0068
NO2
DCM, O°C-r.t. 1h
Figure BR112016008110B1_D0069
OH O
a. 4-Flúor-3-nitro-benzaldeído [0117]A uma solução agitada de (4-flúor-3-nitro-fenil)-metanol (750 mg, 4,4 mmol) em DCM (40 ml_) a 0°C foi adicionado reagente Dess Martin (3,0 g, 7 mmol). A solução foi agitada a temperatura ambiente por 4 horas. TLC mostrou desaparecimento do material de partida. A reação foi saturada com 10% NaHCO3 e solução aquosa a 10% de Na2S2O3 e camada de DCM separada e lavada com água (100 mL) e salmoura (50 mL). A reação foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (570 mg,
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 87/205
64/167 (dd, 1H), 7,97 (m, 1H).
NO2
Figure BR112016008110B1_D0070
THF, rt, 1h
F □ 4O rendimento: 75%). Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,09 (d, 1H), 8,36 (t, 1H), 8,06 □ O'
Ã'
O
b. 4-Amino-3-nitrobenzaldeído [0118]A uma solução de 4-flúor-3-nitro-benzaldeído (570 mg, 3,3 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado NH4OH (5 mL). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. O sólido amarelo resultante foi coletado e lavado com água, seco ao vácuo de modo a fornecer o composto título (300 mg, rendimento: 53%). Ή-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 8,57 (d, 1H), 8,18 (br s, 2H), 7,80 (dd, 1H), 7,10 (d, 1H).
Figure BR112016008110B1_D0071
Figure BR112016008110B1_D0072
c. 4-Dimetilaminometil-2-nitro-fenilamina [0119]A uma solução agitada de dimetilamina (4,0 mL, 2 M, 8,0 mmol) em MeOH (4 mL) foi adicionado Ti(OPr)4 (1,15 g, 4 mmol) e a solução foi agitada a temperatura ambiente por 15 minutos Então 4-amino-3-nitro-benzaldeído (160 mg, 1,0 mmol) em MeOH (2 mL) foi adicionado e a solução foi agitada a temperatura ambiente por toda noite. Então NaBH4 (78 mg, 2 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. LCMS mostrou maior pico do produto. A solução foi diluída com EtOAc (60 mL) e lavada com água (2 x100 mL) e salmoura (50 mL), seca sobre Na2SO4 anidro. A solução foi evaporada a secura e 130 mg do produto bruto foram coletados, os quais foram empregados para a próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,82 (s, 1H), 7,35 (br s,
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 88/205
65/167
2H), 7,31 (dd, 1H), 6,97 (d, 1H), 3,26 (s, 2H), 2,12 (s, 6H).
ci
Figure BR112016008110B1_D0073
d. 1 -(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil) -3-[6-(4-dimetilaminometil-2-nitrofenilamino)-pirimidin-4-il]-3-metil-1-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia [0120]A uma solução agitada de 1-(6-cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5dimetóxi-fenil)-1-metil-3 (2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia (procedimento L, etapa b; 260 mg, 0,5 mmol) em tolueno (5 mL) foram adicionados 4-dimetilaminometil-2-nitrofenilamina (100 mg, 0,5 mmol), Cs2CO3 (400 mg, 1,25 mmol), Pd2(dba)3 (46 mg, 0,05 mmol), xantphos (90 mg, 0,15 mmol). A solução foi agitada a 100°C por toda noite. LCMS mostrou pico de produto maior. A solução foi evaporada com gel de sílica e purificada por cromatografia flash sobre sílica eluindo com EtOAc (peso(/0,5% TEA):MeOH (peso/0,5% TEA) = 10~10:0,5 para fornecer o produto desejado (100 mg, rendimento: 30%). MS (ESI): 680 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0074
e. [6-(2-Amino-4-dimetilaminometil-fenilamino)-pirimidin-4-il]-3-(2,6-dicloro3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia [0121]A uma solução agitada de 1-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-3-[6-(4dimetilaminometil-2-nitro-fenilamino)-pirimidin-4-il]-3-metil-1-(2-trimetilssilanilPetição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 89/205
66/167 etoximetil)-ureia (100 mg, 0,15 mmol) em MeOH (10 mL) foram adicionadas 4 gotas de clorobenzeno e então PtO2 (30 mg, 30% em peso). A solução foi agitada em atmosfera de hidrogênio a temperatura ambiente por toda noite. A reação foi filtrada e concentrada. O resíduo foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. MS (ESI): 650 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0075
f. 1 -[6-(2-Amino-4-dimetilaminometil-fenilamino)-pirimidin-4-il]-3-(2,6- dicloro3,5-dimetóxi-fenil) -1 -metil-ureia
A uma solução agitada de 1-[6-(2-amino-4-dimetilaminometil-fenilamino)pirimidin-4-il]-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)ureia em DCM anidro (10 mL) foi adicionado TFA (10 mL) a temperatura ambiente. A solução foi agitada a temperatura ambiente por 3 horas. LCMS mostrou pico de produto maior.. A solução foi evaporada a secura, diluída com DCM (40 mL) e lavadao com 10% Na2CO3 saturado (10 mL). A camada de DCM foi seca sobre Na2SO4 anidro. Concentração ao vácuo forneceu o produto bruto, que foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (10% MeOH/DCM com 0,5% Et3N) para fornecer o composto título (45 mg, rendimento: 58% em duas etapas). MS (ESI): 520 [M+H]+.
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67/167
Figure BR112016008110B1_D0076
g. N-(2-{ 6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-ureído]-pirimidin-4 ilamino}-5-dimetilaminometil-fenil)-acrilamida
A uma solução agitada de 1-[6-(2-amino-4-dimetilaminometil-fenilamino)pirimidin-4-il]-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureia (45 mg, 0,11 mmol) em THF (40 mL) a -10°C foi adicionado cloreto de acriloila (30 mg, 0,33 mmol) em THF (3 mL). A solução foi agitada a -10°C por 5 horas. LCMS mostrou pico de produto maior. A reação foi saturada com MeOH (3 mL) e evaporada. O resíduo foi purificado por HPLC de preparação (água/ACN na condição NH4HCO3) para fornecer o composto título (6 mg, rendimento: 15%). 1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 8,25 (s, 1H), 7,47 (d, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,16 (dd, 1H), 6,70 (s, 1H), 6,33-6,20 (m, 3H), 5,67 (dd, 1H), 3,84 (s, 6H), 3,43 (s, 2H) 3,22 (s, 3H), 2,20 (s, 6H); MS (ESI): 574 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0077
N-(2-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4ilamino)fenil)propiolamida [0122]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2C (Exemplo 108) modificação da etapa (g) para o seguinte procedimento: A uma solução de 1-[6-(2-amino-fenilamino)-pirimidin- 4-il]-3-(2,6Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 91/205
68/167 dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureia (50 mg, 0,108 mmol) e DCC (46 mg, 0,22 mmol) em clorofórmio (50 mL) foi adicionada uma solução de ácido propiólico (16 mg, 0,22 mmol) em clorofórmio (50 mL) a 0°C, e a mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por toda noite. Água (1 mL) foi adicionada para saturar a reação. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por coluna de fase reversa e TLC de preparação, de modo a obter o composto título (5 mg, rendimento: 9,1%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,04 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 9,03 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,59 (d, 1H), 7,30-7,25 (m, 2H), 6,96 (s, 1H), 6,50 (s, 1H), 4,42 (s, 1H), 4,00 (s, 6H), 3,35 (s, 3H); MS (ESI): 515 [M+H]+
Exemplo - 116
Figure BR112016008110B1_D0078
N-(2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-(2-metóxi-etil)-ureído]-pirimidin-4ilamino}-fenil)-acrilamida [0123]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 1-(6-cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro3,5-dimetóxi-fenil)-1-(2-metoxi-etil)-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia (preparação mostrada a seguir) na etapa (d) para fornecer o composto título (40 mg, rendimento: 16% por cinco etapas). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,28 (s, 1H), 9,71 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,70-7,68 (m, 1H), 7,55-7,53 (m, 1H), 7,20-7,18 (m, 2H), 6,89 (s, 1H), 6,69 (s, 1H), 6,50 (dd, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,75 (d, 1H), 4,03 (t, 2H), 3,94 (s, 6H), 3,56 (t, 2H), 3,24 (s, 3H); MS (ESI): 437 [M+H]+.
Preparação de 1 -(6-Cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 92/205
69/167 (2-metóxi-etil)-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia:
Figure BR112016008110B1_D0079
Cl DIPEA, i-PrOH Cl RT, 1h
a. (6-Cloro-pirimidin-4-il)-(2-metóxi-etil)-amina [0124]A uma solução de 4,6-dicloro-pirimidina (2 g, 14 mmol) em iPrOH (70 mL) e DIPEA (1,94 g, 15 mmol) foi adicionada uma solução de 2-metóxi-etilamina (1,13 g, 15 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com
DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (1,95 g, rendimento: 82%). MS (ESI): 188 [M+H]+.
ii) SEMCI, DMF 0 ~ rt, 1 h
b. 1-(6-Cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-(2-metóxi-etil)3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia [0125]A uma solução de (6-cloro-pirimidin-4-il)-(2-metóxi-etil)-amina (300 mg, 1,6 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado NaH (60%, 96 mg, 2,4 mmol) a 0°C, e a mistura foi agitada por 10 minutos a temperatura ambiente. Uma solução de 1isocianato-3,5-dimetóxi-benzeno (590 mg, 2,4 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionada gota a gota a 0 °C. A mistura resultante foi agitada por 30 minutos. SEMCl (400 mg, 2,4 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. NH4Cl aquoso, saturado foi adicionado para saturar a reação. A mistura foi diluída com água e extraída com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados com água e salmoura, secos sobre Na2SO4 anidro e
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 93/205
70/167 concentrados para fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (720 mg, rendimento: 78%). MS (ESI): 565 [M+H]+.
Exemplo - 120 o
Figure BR112016008110B1_D0080
Ácido N-(2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-(3-dimetilamino-propil)ureído]-pirimidin-4-ilamino}-fenil)-acrilamida trifluoracético [0126]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2I (Exemplo 142), substituindo 2-nitroanilina e N-(3-dimetilaminopropil)-N'-(2-nitro-fenil)-pirimidina-4,6-diamina (preparado pelo método ressaltado abaixo) na etapa (c) para fornecer o composto título (11 mg, rendimento: 7,5% por seis etapas). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,30 (s, 1H), 9,80 (s, 1H), 9,28 (m, 1H), 8,92 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,24-7,16 (m, 2H), 6,90 (s, 1H), 6,53 (s, 1H), 6,49 (dd, 1H), 6,25 (d, 1H), 5,76 (d, 1H), 3,95 (s, 6H), 3,91-3,88 (m, 2H), 3,11 -3,05 (m, 2H), 2,74 (d, 6H), 1,97-1,92 (m, 2H); MS (ESI): 588 [M+H]+.
Preparação de N-(3-Dimetilamino-propil)-N'-(2-nitro-fenil)-pirimidina-4,6diamina
Figure BR112016008110B1_D0081
a. N'-(6-Cloro-pirimidin-4-il)-N,N-dimetil-propano-1,3-diamina
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 94/205
71/167 [0127]A uma solução de 4,6-dicloro-pirimidina (1 g, 6,7 mmol) e DIPEA (1,03 g, 8 mmol) em iPrOH (20 mL) foi adicionada N,N-dimetil-propano-1,3-diamina (714 mg, 7 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada por 2 horas. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (1,15 g, rendimento: 80%). MS (ESI): 215 [M+H]+.
NO.
Pd2dba3, xantphos, Cs2CO; tolueno, 100°C, 4 h
b. N-(3-Dimetilamino-propil)-N'-(2-nitro-fenil)-pirimidina-4,6-diamina [0128]Uma mistura desgaseificada de N'-(6-cloro-pirimidin-4-il)-N,N-dimetilpropano-1,3-diamina (800 mg, 3,74 mmol), nitro anilina (525 mg, 3,8 mmol), Pd2(dba)3 (348 mg, 0,38 mmol), Xantphos (438 mg, 0,76 mmol) e CS2CO3 (3,05 g, 9,35 mmol) em tolueno (15 mL) foi aquecida a 100°C por 4 horas. A reação foi concentrada, e 0 resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa de modo a obter 0 composto título (530 mg, rendimento: 45%). MS (ESI): 317 [M+H]+.
Exemplo - 121 o
N-[2-(6-{3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-[3-(4-metil-piperazin-1-il)-propil]ureído}-pirimidin-4-ilamino)-fenil]-acrilamida
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72/167 [0129]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2I (Exemplo 142), substituindo 2-nitroanilina e N-[3-(4-metil-piperazin1-il)-propil]-N'-(2-nitro-fenil)-pirimidina-4,6-diamina (preparação mostrada a seguir) na etapa (e) para fornecer o composto título (8 mg, rendimento: 1,2% por seis etapas). 1H NMR (300 MHz, Metanol-d4) δ 8,17 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,12-7,08 (m, 2H), 6,62 (s, 1H), 6,29-6,14 (m, 3H), 5,58 (d, 1H), 3,82 (t, 2H), 3,75 (s, 6H), 2,27-2,19 (m, 8H), 2,06 (s, 3H), 1,67 (t, 2H); MS (ESI): 643 [M+H]+.
Preparação de N-[3-(4-Metil-piperazin-1 -il)-propil]-N'-(2-nitro-fenil)-pirimidina4,6-diamina
Figure BR112016008110B1_D0082
a. (6-Cloro-pirimidin-4-il)-[3-(4-metil- piperazin-1 -il)-propil]-amina [0130]A uma solução de 4,6-dicloro- pirimidina (1,5 g, 10 mmol) e DIPEA (1,55 g, 12 mmol) em iPrOH (50 mL) foi adicionada uma solução de 3-(4-metilpiperazin-1-il)-propilamina (1,73 g, 11 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados para fornecer o composto título (1,4 g, 51%), que foi empregado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. MS (ESI): 270 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0083
b. N-[3-(4-Metil-piperazin-1 -il)-propil]-N'-(2-nitro-fenil)-pirímidina-4,6-diamina [0131]Uma mistura desgaseificada de (6-cloro-pirimidin-4-il)-[3-(4-metilpiperazin-1-il)-propil]-amina (600 mg, 2,22 mmol), nitroanilina (317 mg, 2,3 mmol),
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73/167
Pd2(dba)3 (210 mg, 0,23 mmol), Xantphos (265 mg, 0,46 mmol) e CS2CO3 (1,81 g, 5,55 mmol) em tolueno (15 mL) foi aquecida a 100°C por 4 horas. A reação foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa de modo a obter o composto título (400 mg, rendimento: 48%). MS (ESI): 372 [M+H]+.
Exemplo - 122
O
Figure BR112016008110B1_D0084
Ácido N-(2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureído]-pirimidin-4ilamino}-5-piperidin-4-il-fenil)-acrilamida trifluoroacético [0132]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2E (Exemplo 111), substituindo as etapas (e) e (f) pelo procedimento que se segue: A uma solução de 4-(3-amino-4-(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metil-3-((2-(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-ilamino)fenil)piperidina-1carboxilato de t-butila (Procedimento 2E, Exemplo 111, 65 mg, 0,084 mmol) em THF (15 mL) foi adicionada uma solução de cloreto de acriloila (10 mg/mL, 0,9 mL, 0,1 mmol) gota a gota a -10°C, e a mistura resultante foi agitada a 0°C por 1 hora. MeOH (5 mL) foi adicionado para saturar a reação, e a reação foi concentrada. O resíduo foi dissolvido em DCM (2 mL) e adicionado gota a gota a uma mistura de DCM/TFA (2:1, 3 mL). A mistura foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora e então concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC de preparação para fornecer o composto título (23 mg, rendimento: 47%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,92 (s, 1H), 9,64 (s, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,60 (m, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,25 (m, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,52 (dd, 1H), 6,41 (s, 1H), 6,24 (d, 1H), 5,74 (d, 1H), 3,96 (s, 6H), 3,49 (d, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,02 (q, 2H), 2,85 (t, 1H), 1,96 (d,
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74/167
2Η), 1,78 (q, 2H); MS (ESI): 600 [M+H]+.
Procedimento 2G: EXEMPLO - 123
Br
Mn,
NH, (BocJjO, DMAP
NO, Boc refluxo por toda noite
NO, Boc ' Boc
Pd,dba3 (10%) [--''N
Xanrphoç (20%) O ._.J Cs,CO, (2 eqv..)
TFA. ncM 2. aq. HaHCO,
Figure BR112016008110B1_D0085
MO2 Boc
Bcg?O, DMAP THF, refluxo A
Λ·ν% γΝ SEMCI Ní, quel Raney, H2
N_N ..A-0 MeOH, 2 h °
Figure BR112016008110B1_D0086
O JL lí NH BQÇ
AA r---N
Αχ
TEA, THF 0°C
NH, Boc N.AL | Ί Y 1 J J k N
SEMCI | 14 tW °CI-'V o
u lí T H ίΤΝΎ'ΝΊι
SEMCI | TF*'DCM 'ψΝ H Cl | o °-J -N>,-N-T-νψ V ,-O .,o
Cl
Figure BR112016008110B1_D0087
Figure BR112016008110B1_D0088
N-(2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureído]-pirimidin-4-ilamino}5-morfolin-4-il-fenil)-acrilamida
NO,
Br
Figure BR112016008110B1_D0089
NH, (Boc ),0. DMAP
THF
Refluxo, por toda noite
N02 Boc
N
Br
Figure BR112016008110B1_D0090
‘Boc
a. di- 4-bromo-2-nitrofenilcarbamato de t-butila [0133]Uma mistura de 4-bromo-2-nitroanilina (10 g, 46 mmol), (Boc)20 (20,7 g, 95 mmol) em THF (250 mL) foi aquecida ao refluxo por toda noite. A mistura foi concentrada para fornecer o composto título (19,2 g, rendimento: quant.) que foi empregado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
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75/167
Br
NOj Boc
Figure BR112016008110B1_D0091
H
NCl· Boc N
Figure BR112016008110B1_D0092
Boc
Pdjdb&í. xantphos, Cs2CO3 tolueno, 100 °c, 1h
b. Éster d\-t-butila do ácido (4-morfolin-4-il-2-nitro-fenil)-carbâmico [0134]Uma mistura desgaseificada de 4-bromo-2-nitrofenilcarbamato de tbutila (1 g, 2,4 mmol), morfolina (314 mg, 3,6 mmol), Pd2(dba)3 (220 mg, 0,24 mmol), Xantphos (278 mg, 0,48 mmol) e CS2CO3 (1,56 g, 4,8 mmol) em tolueno (30 mL) foi aquecida a 100°C por 1 hora. A reação foi concentrada, e 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter uma mistura bruta do composto título e produto mono-Boc (744 mg). A mistura foi empregada diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. MS (ESI): 324 [M-Boc+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0093
TFA, DCM rt, 3h
Figure BR112016008110B1_D0094
NH,
c. 4-Morfolin-4-il-2-nitro-fenilamina [0135]A uma solução de éster b\-t-butila do ácido (4-morfolin-4-il-2-nitrofenil)-carbâmico e produto (744 mg) em DCM (20 mL) foi adicionado TFA (10 mL) a 0°C, a mistura resultante foi agitada por 3 horas a temperatura ambiente. Após remoção de todos os voláteis ao vácuo, 0 resíduo foi redissolvido em DCM, neutralizado por NaHCO3 aquoso, saturado, e extraído com DCM. Os extratos combinados foram concentrados e 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter 0 composto título (290 mg, rendimento: 54% por duas etapas). MS (ESI): 251 [M+H]+.
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76/167
Figure BR112016008110B1_D0095
d. 1-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-3-metil-3-[6-(4-morfolin-4-il-2-nitrofenilamino)-pirimidin-4-il]-1-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia [0136]Uma mistura desgaseificada de 4-morfolin-4-il-2-nitro-fenilamina (290 mg, 1,3 mmol), 1 -(6-cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-3-(2trimetilssilanil-etoximetil)-ureia (Procedimento 2E, etapa b; 624 mg, 1,2 mmol), Pd2(dba)3 (110 mg, 0,12 mmol), Xantphos (139 mg, 0,24 mmol) e CS2CO3 (782 mg, 2,4 mmol) em tolueno (15 mL) foi aquecida a 100°C por 2,5 horas. A reação foi concentrada, e 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter 0 composto título (440 mg, rendimento: 49%) como um sólido vermelho. MS (ESI): 708 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0096
Figure BR112016008110B1_D0097
e. Éster t-butílico do ácido {6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-3-(2trimetilssilanil-etoximetil)-ureído]-pirimidin-4-il}-(4-morfolin-4-il-2-nitro-fenil)-carbâmico [0137]Uma mistura de 1-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-3-metil-3-[6-(4morfolin-4-il-2-nitro-fenilamino)-pirimidin-4-il]-1 -(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia (200 mg, 0,28 mmol), (Boc)20 (93 mg, 0,42 mmol) e quantidade catalítica de DMAP emTHF (10 mL) foi aquecida ao refluxo por 1 hora. A mistura foi concentrada e 0 resíduo foi empregado na próxima etapa sem purificação adicional. MS (ESI): 808
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77/167 [Μ+Η]+.
NOa Boc
NH2 Boc
Figure BR112016008110B1_D0098
.0
f. Éster t-butílico do ácido (2-amino-4-morfolin-4-il-fenil)-{6-[3-(2,6-dicloro-3,5dimetóxi-fenil)-1-metil-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureído]-pirimidin-4-il}-carbâmico [0138]A uma solução do éster t-butílico do ácido {6-[3-(2,6-dicloro-3,5dimetóxi-fenil)-1 -metil-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureído]-pirimidin-4-il}-(4-morfolin4-il-2-nitro-fenil)-carbâmico (bruto, preparado como acima) em MeOH (20 mL) foi adicionado níquel Raney (suspensão em água) a temperatura ambiente, a mistura resultante foi agitada por 2 horas em atmosfera de hidrogênio (1 atm). A reação foi filtrada e concentrada. O resíduo foi lavado duas vezes com MeOH de modo a obter o produto título (160 mg, rendimento: 70%). MS (ESI):778 [M+H]+.
NH2 Boc
O
TEA, DCM O°C-r.t.
g. Éster t-butílico do ácido (2-acriloilamino-4-morfolin-4-il-fenil)-{6-[3-(2,6dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureído]-pirimidin-4-il}carbâmico [0139]A uma solução do éster t-butílico do ácido (2-amino-4-morfolin-4-ilfenil)-{6-[3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)ureído]-pirimidin-4-il}-carbâmico (80 mg, 0,103 mmol) em DCM (5 mL) foi adicionada uma solução de TEA (10 mg/mL, 1,2 mL, 0,12 mmol) e uma solução de cloreto de
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78/167 acriloila (10 mg/mL, 1 mL, 0,11 mmol) gota a gota a 0°C, e a mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. LC-MS mostrou que a reação estava completa. Água (5 mL) foi adicionada para saturar a reação, e a mistura de reação foi extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio anidro e filtrados. O filtrado foi evaporado ao vácuo de modo a fornecer o produto bruto, o qual foi empregado na próxima etapa sem purificação adicional.
Figure BR112016008110B1_D0099
TFA, DCM
O '□H
Figure BR112016008110B1_D0100
H
Figure BR112016008110B1_D0101
O
h. N-(2-{ 6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-ureído]-pirimidin-4ilamino}-5-morfolin-4-il-fenil)-acrilamida [0140]A uma solução do éster t-butílico do ácido (2-acriloilamino-4-morfolin4-il-fenil)-{6-[3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)ureído]-pirimidin-4-il}-carbâmico (bruto, preparado acima) em CH2O2 (10 mL) foi adicionado TFA (3 mL) a 0°C, a mistura resultante foi agitada por 1 hora a temperatura ambiente. A mistura de reação foi concentrada e neutralizada com NH3.H2O de modo a fornecer o composto bruto, que foi purificado por HPLC de preparação de modo a obter o composto título (10 mg, rendimento: 16% em duas etapas). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,05 (s, 1H), 9,60 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,33-7,30 (m, 2H), 6,89 (s, 1H), 6,83 (d, 1H), 6,48 (dd, 1H), 6,25-6,21 (m, 2H), 5,72 (d, 1H), 3,96 (s, 6H), 3,73 (br, 4H), 3,44 (s, 3H), 3,10 (br, 4H); MS (ESI): 602 [M+H]+
EXEMPLO - 124
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 102/205
79/167
Figure BR112016008110B1_D0102
N-[2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-ureído]-pirimidin-4-ilamino}5-(3,5-dimetil- piperazin-1 -i l)-fen i l]-acri Iam ida [0141 ]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 4-(3,5-dimetil-piperazin-1 -il)-2-nitrofenilamina (preparação mostrada a seguir) na etapa (d) para fornecer o composto título (26 mg, rendimento: 30% nas três etapas). 1H NMR (300 MHz, Metanol-d4) δ 8,32 (s, 1H), 7,36-7,33 (m, 2H), 6,95 (d, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,43-6,37 (m, 2H), 6,15 (s, 1H), 5,77 (d, 1H), 3,95 (s, 6H), 3,70 (d, 2H), 3,29 (s, 3H), 3,18-3,13 (m, 2H), 2,45 (t, 2H), 1,24 (d, 6H); MS (ESI): 629 [M+H]+.
Preparação de 4-(3,5-Dimetil- piperazin-1-il)-2-nitro-fenilamina NO2 Boc
NH2 (BoebO.DMAF· THF Brrefluxo, por toda noite
Figure BR112016008110B1_D0103
a. 4-bromo-2-nitrofenilcarbamato de d-t-butila [0142]Uma mistura de 4-bromo-2-nitroanilina (10 g, 46 mmol), (Boc)20 (20,7 g, 95 mmol) em THF (250 mL) foi aquecida ao refluxo por toda noite. A mistura foi concentrada para fornecer o composto título (19,2 g, quant.) o qual foi empregado para a próxima etapa sem purificação adicional.
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 103/205
80/167
Figure BR112016008110B1_D0104
b.
Pd2dba3, xantphos, Cs2CO3 tolun Tolueno, 100°C, 1 h
Éster di-t-butílico do ácido
Figure BR112016008110B1_D0105
[4-(3,5-Dimetil-piperazin-1 -il)-2-nitro-fenil]carbâmico [0143]Uma mistura desgaseificada de 4-bromo-2-nitrofenilcarbamato de di-tbutila (1 g, 2,4 mmol), 2,6-dimetil- piperazina (410 mg, 3,6 mmol), Pd2(dba)3 (220 mg, 0,24 mmol), Xantphos (278 mg, 0,48 mmol) e Cs2CO3 (1,56 g, 4,8 mmol) em tolueno (30 mL) foi aquecida a 100°C por 1 hora. A reação foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter uma mistura do composto título e produto mono-Boc (600 mg). A mistura foi empregada diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. MS (ESI): 350 [M-Boc+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0106
c. 4-(3,5-Dimetil- piperazin-1-il)-2-nitro-fenilamina [0144]A uma solução do éster di-t-butílico do ácido [4-(3,5-dimetil- piperazin1-il)-2-nitro-fenil]-carbâmico e produto mono-Boc (600 mg) em DCM (20 mL) foi adicionado TFA (10 mL) a 0°C, a mistura resultante foi agitada por 3 horas a temperatura ambiente. Após remoção de todos os voláteis em vácuo, o resíduo foi redissolvido em DCM, neutralizado por NaHCO3 aquoso, saturado, e extraído com DCM. Os extratos combinados foram concentrados e o resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (233 mg, rendimento: 39% por duas etapas). MS (ESI): 251 [M+H]+.
EXEMPLO - 125
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 104/205
81/167
Ο
Figure BR112016008110B1_D0107
.0
N-[2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-ureído]-pirimidin-4-ilamino}5-(4-metanossulfonil-piperazin-1-il)-fenil]-acrilamida [0145]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 4-(4-metanossulfonil-piperazin-1-il)-2nitro-fenilamina (preparação mostrada abaixo) na etapa (d) para fornecer o composto título (15 mg, rendimento: 9,6% em cinco etapas). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,03 (s, 1H), 9,62 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 7,37-7,32 (m, 2H), 6,89-6,83 (m, 2H), 6,46 (dd, 1H), 6,26-6,21 (m, 2H), 5,72 (d, 1H), 3,93 (s, 6H), 3,343,16 (m, 11H), 2,93 (s, 3H); MS (ESI): 679 [M+H]+.
Preparação de 4-(4-metanossulfonil-piperazin-1 -il)-2-nitro-feniIamina
Br
Figure BR112016008110B1_D0108
NO2 Boc
THF refluxo, por toda noite
a. 4-bromo-2-nitrofenilcarbamato de di-t-butila [0146]Uma mistura de 4-bromo-2-nitroanilina (10 g, 46 mmol), (ΒοφΟ (20,7 g, 95 mmol) em THF (250 ml_) foi aquecida ao refluxo por toda noite. A mistura foi concentrada para fornecer 0 composto título (19,2 g, quant.) que foi empregado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 105/205
82/167
Br
NÇ>2 Boc
Figure BR112016008110B1_D0109
Figure BR112016008110B1_D0110
H
Pd?dba3, xantphos. Cs;CO3 tolueno, 100C, 1 hora
NOe Boc
Figure BR112016008110B1_D0111
b. Éster di-t-butílico do ácido [4-(4-metanossulfonil piperazin-1 -il)-2-nitrofenil]-carbâmico [0147]Uma mistura desgaseificada de 4-bromo-2-nitrofenilcarbamato de di-íbutila (1 g, 2,4 mmol), 1-metanossulfonil-piperazina (590 mg, 3,6 mmol), Pd2(dba)3 (220 mg, 0,24 mmol), Xantphos (278 mg, 0,48 mmol) e CS2CO3 (1,56 g, 4,8 mmol) em tolueno (30 mL) foi aquecida a 100°C por 1 hora. A reação foi concentrada, e 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter uma mistura do composto título e produto mono-Boc (755 mg). A mistura foi empregada diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. MS (ESI): 400 [M-Boc+H]+.
NO,
Figure BR112016008110B1_D0112
c. 4-(4-Metanossulfonil- piperazin-1 -il)-2-nitro-fenilamina [0148]A uma solução do éster di-t-butílico do ácido [4-(4-metanossulfonilpiperazin-1-il)-2-nitro-fenil]-carbâmico e produto mono-Boc (755 mg) em DCM (20 mL) foi adicionado TFA (10 mL) a 0°C, a mistura resultante foi agitada por 3 horas a RT. Após remoção de todos os voláteis em vácuo, 0 resíduo foi redissolvido em DCM, neutralizado por NaHCO3 aquoso, saturado, e extraído com DCM. Os extratos combinados foram concentrados e 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter 0 composto título (290 mg, rendimento: 40% em duas etapas). MS (ESI): 301[M+H]+.
EXEMPLO-126
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 106/205
83/167
Figure BR112016008110B1_D0113
N-[2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -metil-ureído]-pirimidin-4-ilamino}5-(3-dimetilamino-propil)-fenil]-acrilamida [0149]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 4-(3-Dimetilamino-prop-1-inil)-2-nitrofenilamina (preparação mostrada abaixo) na etapa (d) e óxido de platina na etapa (f) para fornecer o composto título (4 mg, rendimento: 1,4% em cinco etapas). 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,98 (s, 1H), 9,66 (d, 1H), 8,88 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,04 (dd, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,48 (dd, 1H), 6,34 (s, 1H), 6,24 (dd, 1H), 5,72 (dd, 1H), 3,94 (s, 6H), 3,25 (s, 3H), 2,59 (t, 2H), 2,24 (t, 2H), 2,11 (s. 6H), 1,71 (m, 2H); MS (ESI) 602 [M+H]+.
Preparação de 4-(3-Dimetilamino-prop-1-inil)-2-nitro-fenilamina
Figure BR112016008110B1_D0114
a. 4-(3-Dimetilamino-prop-1 -inil)-2-nitro-fenilamina
A uma solução agitada de 4-bromo-2-nitro-fenilamina (1,08 g, 5 mmol) e dimetil-prop-2-inil-amina (1,0 g, 12 mmol) em TEA (20 mL) foi adicionado Pd(PPh3)2Cl2 (0,7 g, 1 mmol) e Cul (360 mg, 2 mmol). A solução foi agitada a 60°C sob nitrogênio por 3 horas. A solução foi evaporada com gel de sílica e purificada por cromatografia flash sobre sílica de modo a fornecer o composto título (1,1 g, 70% de pureza). O composto título foi empregado diretamente na próxima etapa sem
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 107/205
84/167 purificação adicional. MS (ESI) 221 [M+H]+.
EXEMPLO-127 o
Figure BR112016008110B1_D0115
N-[2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureído]-pirimidin-4-ilamino}5-(2-dimetilamino-etóxi)-fenil]-acrilamida [0150]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G para o composto 123, substituindo 4-(2-dimetilamino-etóxi)-2-nitrofenilamina (preparação mostrada a seguir) na etapa (d) e óxido de platina na etapa (f) para fornecer o composto título (4,3 mg, rendimento: 8% por cinco etapas). 1HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,04 (s, 1H), 9,58 (s, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,33( d, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,79 (dd, 1H), 6,51 (dd, 1H), 6,26-6,20 (m, 2H), 5,73 (dd, 1H), 4,04 (t, 2H), 3,96 (s, 6H), 3,27 (s, 3H), 2,67 (t, 2H), 2,24 (s, 6H); MS (ESI) 604 [M+H]+.
Preparação de 4-(2-Dimetilamino-etóxi)-2-nitro-fenilamina
Nal, Cs-jCOj, butanona etrc, 2h
a. 4-(2-Dimetilamino-etoxi)-2-nitro-fenilamina [0151 ]A uma solução agitada de 4-amino-3-nitro-fenol (1,54 g, 10 mmol) e cloridrato de (2-cloro-etil)-dimetil-amina hidrogenada (1,43 g, 10 mmol) em butanona (40 mL) foram adicionados CS2CO3 (10 g, 30 mmol) e Nal (150 mg, 1 mmol). A solução foi lentamente aquecida para 80°C por uma hora Então a solução foi agitada
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 108/205
85/167 a 80°C por 2 horas. A solução foi filtrada através de Celite® e lavada com acetona. A solução foi evaporada com gel de sílica e purificada por cromatografia flash sobre sílica para fornecer o composto título (1,0 g, rendimento: 45%) como um sólido marrom. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,38 (d, 1H), 7,24 (s, 2H), 7,16 (dd, 2H), 6,99 (d, 1H), 3,98 (t, 2H), 2,58 (t, 2H), 2,20 (s, 6H); MS (ESI) 226 [M+H]+.
EXEMPLO-128
Figure BR112016008110B1_D0116
Figure BR112016008110B1_D0117
(2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureído]-pirimidin-4-ilamino}fenil)-amida do ácido but-2-inóico [0152]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 2-nitro-fenilamina na etapa (d), omitindo a etapa (e), e substituindo a etapa (g) com o procedimento seguinte abaixo para fornecer o composto título (7 mg, rendimento: 4,8% por cinco etapas). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,97 (s, 1H), 10,07 (s, 1H), 8,89 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,53 (d, 1H), 7,24-7,15 (m, 2H), 6,90 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 3,93 (s, 6H), 3,29 (s, 3H), 2,22 (s, 3H); MS (ESI): 529 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0118
Figure BR112016008110B1_D0119
[0153]A uma solução de éster t-butílico do ácido (2-amino-fenil)-{6-[3-(2,6Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 109/205
86/167 dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureído]-pirimidin-4-il}carbâmico (50 mg, 0,075 mmol) e DCC (42 mg, 0,2 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionada uma solução de ácido but-2-inóico (13 mg, 0,15 mmol) em DCM (10 mL) a 0°C, e a mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por toda noite. Água (1 mL) foi adicionada para saturar a reação. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa de modo a obter o composto título (20 mg, rendimento: 34%). MS (ESI): 659 [M+H]+.
[0154]O composto 129 foi sintetizado de modo semelhante ao composto
100.
EXEMPLO - 130 O
N-(2-{6-[1-Benzil-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-ureído]-pirimidin-4ilamino}-fenil)-acrilamida [0155]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 2-nitro-fenilamina e 1-benzil-1-(6cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)ureia (preparação mostrada a seguir) na etapa (d) para fornecer o composto título (26 mg, rendimento: 20% por cinco etapas),1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,27 (s, 1H), 9,68 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,33-7,19 (m, 6H), 6,92 (s, 1H), 6,45 (dd, 1H), 6,24 (d, 1H), 6,18 (s, 1H), 5,74 (d, 1H), 5,07 (s, 2H), 3,95 (s, 6H); MS (ESI): 593 [M+H]+.
Preparação de 1 -benzil-1 -(6-cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxiPetição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 110/205
87/167 fenil)-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia
Figure BR112016008110B1_D0120
a. Benzil-(6-cloro-pirimidin-4-il)-amina [0156]A uma solução de 4,6-dicloro-pirimidina (1,5 g, 10 mmol) em iPrOH (40 mL) e DIPEA (1,55 g, 12 mmol) foi adicionada uma solução de benzilamina (1,28 g, 12 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2,5 horas. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (1,5 g, rendimento: 68%) como um sólido branco. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,35 (br s,
1H), 7,20-7,38 (m, 5 H), 6,35 (s, 1H), 4,52 (s, 2H); MS (ESI): 220 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0121
o.
b. 1-Benzil-1-(6-cloro-pirimidin-4-il)-3-(2!6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-3-(2trimetilssilanil-etoximetil)-ureia [0157]A uma solução de benzil-(6-cloro-pirimidin-4-il)-amina (800 mg, 3,64 mmol) em DMF (15 mL) foi adicionado NaH (60%, 218 mg, 5,45 mmol) a 0°C, e a mistura foi agitada por 10 minutos a temperatura ambiente. Uma solução de 1isocianato-3,5-dimetóxi-benzeno (Procedimento 2A , etapas a-d; 1,35 g, 5,45 mmol)
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 111/205
88/167 em DMF (2 mL) foi adicionada gota a gota a 0°C. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. NH4Cl aquoso, saturado( 2 mL) foi adicionado para saturar a reação. A mistura foi concentrada e extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (1,7 g, rendimento: 77%). MS (ESI): 599 [M+H]+.
EXEMPLO - 131
NH
Figure BR112016008110B1_D0122
N-(2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-piridin-2-ilmetil-ureído]-pirimidin4-ilamino}-fenil)-acrilamida [0158]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 2-nitro-fenilamina e 1-(6-cloropirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-piridin-2-ilmetil-3-(2-trimetilssilaniletoximetil)-ureia (preparação mostrada a seguir) na etapa (d) para fornecer o composto título (35 mg, rendimento: 13% por cinco etapas),1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,15 (s, 1H), 9,65 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,80 (t, 1H), 7,66 (d, 1H), 7,31-7,25 (m, 3H), 7,17 (t, 1H), 7,09 (t, 1H), 6,91 (s, 1H), 6,45 (dd, 1H), 6,39 (s, 1H), 6,23 (d, 1H), 5,74 (d, 1H), 5,17 (s, 2H), 3,94 (s, 6H); MS (ESI): 594 [M+H]+.
Preparação de 1 -(6-cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 piridin-2-ilmetil-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 112/205
89/167
Figure BR112016008110B1_D0123
a. (6-Cloro-pirimidin-4-il)-piridin-2-ilmetil-amina
A uma solução de 4,6-dicloro-pirimidina (1 g, 7 mmol) em iPrOH (40 mL) e DIPEA (1,16 g, 9 mmol) foi adicionada uma solução de 2-piridinilmetanamina (970 mg, 9 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2,5 horas. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio anidro e concentrados de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (1,2 g, rendimento: 78%). MS (ESI): 221 [M+H]+.
ci
Figure BR112016008110B1_D0124
Figure BR112016008110B1_D0125
b. 1-(6-Cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-piridin-2-ilmetil3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia [0159]A uma solução de (6-cloro-pirimidin-4-il)-piridin-2-ilmetil-amina (200 mg, 0,91 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado NaH (60%, 55 mg, 1,37 mmol) a 0°C, e a mistura foi agitada por 10 minutos a temperatura ambiente. Uma solução de 1isocianato-3,5-dimetóxi-benzeno (Procedimento 2A, a-d; 337 mg, 1,37 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionada gota a gota a 0°C. A mistura resultante foi agitada por 30 minutos. SEMCl (230 mg, 1,37 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. NH4Cl aquoso, saturado foi
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 113/205
90/167 adicionado para saturar a reação. A mistura foi diluída com água e extraída com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados com água e salmoura, secos sobre Na2SO4 anidro e filtrados. O filtrado foi concentrado de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o produto título (420 mg, rendimento: 78%). MS (ESI): 598 [M+H]+.
EXEMPLO - 132 o
Figure BR112016008110B1_D0126
N-(2-{6-[3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-piridin-4-ilmetil-ureído]-pirimidin4-ilamino}-fenil)-acrilamida [0160]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-[6(2-nitro-fenilamino)-pirimidin-4-il]-1-piridin-4-ilmetil-ureia na etapa (e) para fornecer o composto título (14 mg, rendimento: 8,1%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,03 (s, 1H), 9,68 (s, 1H), 8,92 (s, 1H), 8,49 (d, 2H), 8,39 (s, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,27-7,17 (m, 4H), 7,10 (t, 1H), 6,92 (s, 1H), 6,48 (dd, 1H), 6,24 (d, 1H), 6,15 (s, 1H), 5,74 (d, 1H), 5,09 (s, 2H), 3,94 (s, 6H); MS (ESI): 594 [M+H]+.
Preparação de 3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -[6-(2-nitro-fenilamino)pirimidin-4-il]-1-piridin-4-ilmetil-ureia
Cl
Cl
DIPEA, i-PrOH rt, 2.5 h
Cl
Figure BR112016008110B1_D0127
a. (6-Cloro-pirimidin-4-il)-piridin-4-ilmetil-amina [0161]A uma solução de 4,6-dicloro-pirimidina (1,5 g, 10,5 mmol) e DIPEA (1,62 g, 12,6 mmol) em iPrOH (40 mL) foi adicionada 4-piridinilmetanamina (1,2 g, 11
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91/167 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SÜ4 anidro e concentrados de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (1,8 g, rendimento: 80%). MS (ESI): 221 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0128
b. N-(2-Nitro-fenil)-N'-piridin-4-ilmetil-pirimidina-4!6-diamina [0162]Uma mistura desgaseificada de (6-cloro-pirimidin-4-il)-piridin-4-ilmetilamina (500 mg, 2,27 mmol), 2-nitroanilina (317mg, 2,3 mmol), Pd2(dba)3 (200 mg, 0,22 mmol), Xantphos (253 mg, 0,44 mmol) e CS2CO3 (1,48 g, 9,35 mmol) em tolueno (10 mL) foi aquecida a 100°C por 3 horas. A reação foi concentrada, e 0 resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa seguido por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter 0 composto título (330 mg, rendimento: 45%). MS (ESI): 323 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0129
Figure BR112016008110B1_D0130
c. 3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1 -[6-(2-nitro-fenilamino)-pirimidin-4-il]-1 piridin-4-ilmetil-ureia [0163]A uma solução de N-(2-nitro-fenil)-N'-piridin-4-ilmetil-pirimidina-4,6diamina (330 mg, 1,02 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado NaH (60%, 56 mg, 1,4
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 115/205
92/167 mmol) a 0°C, e a mistura foi agitada por 30 minutos a temperatura ambiente. Uma solução de 1-isocianato-3,5-dimetóxi-benzeno (Procedimento 2A , etapas a-d; 345 mg, 1,4 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionada gota a gota a 0°C. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. NPLCI aquoso, saturado (2 mL) foi adicionado para saturar a reação. A mistura foi concentrada e extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SÜ4 anidro e concentrados de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por TLC de preparação de modo a obter o composto título (190 mg, rendimento: 33%). MS (ESI): 570 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0131
Preparação de 5-(4-etil- piperazin-1 -il)-2-nitro-fenilamina
Figure BR112016008110B1_D0132
1. 5-(4-Etil- piperazin-1-il)-2-nitro-fenilamina [0164]Uma mistura de 1 -etil- piperazina (1,2 mL, 9,6 mmol), 5-flúor-2-nitrofenilamina (1 g, 6,4 mmol), DIPEA (1,24 g, 9,6 mmol) em DMF (15 mL) foi aquecida a 80°C por toda noite. A mistura de reação foi derramada em água gelada e extraída com EtOAc. O extrato combinado foi lavado com salmoura, seco sobre Na2SO4,anidro e concentrado de modo a obter a o produto bruto, que foi purificado
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 116/205
93/167 por cromatografia flash sobre sílica para fornecer o composto título (1 g, rendimento: 63%). ESI-MS: 251 [M+H]+.
Sal do ácido N-[2-{6-[3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureído]pirimidin-4-ilamino}-4-(4-etil-piperazin-1-il)-fenil]-acrilamida trifluoroacético [0165]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 5-(4-etil- piperazin-1-il)-2-nitrofenilamina na etapa (a) para fornecer o composto título (20 mg, rendimento: 39%). 1H NMR (300 MHz, Metanol-d4) δ 8,37 (s, 1H), 7,49 (d, 1H), 7,25 (s, 1H), 6,98 (d, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,43-6,38 (m, 3H), 5,78 (d, 1H), 3,96-3,88 (m, 8H), 3,68-3,64 (m, 2H), 3,37 (s, 3H), 3,33-3,08 (m, 6H), 1,40 (t, 3H); MS (ESI): 629 [M+H]+.
Exemplo - 135
Figure BR112016008110B1_D0133
N-[2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureído]-pirimidin-4-ilamino}5-(4-etil- piperazin-1-ilmetil)-fenil]-acrilamida [0166]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 4-(4-etil-piperazin-1-ilmetil)-2-nitrofenilamina (preparação mostrada a seguir) na etapa (d) para fornecer o composto título (30 mg, rendimento: 31% por cinco etapas). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,97 (s, 1H), 9,71 (s, 1H), 8,95 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,12 (d, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,50 (dd, 1H), 6,39 (s, 1H), 6,25 (d, 1H), 5,73 (d, 1H), 3,93 (s, 6H), 3,48 (s, 2H), 3,32 (s, 3H), 2,50-2,25 (m, 10H), 0,98 (t, 3H); MS (ESI): 643 [M+H]+.
Preparação de 4-(4-etil- piperazin-1-ilmetil)-2-nitro-fenilamina
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94/167
Ί
Figure BR112016008110B1_D0134
Η
Figure BR112016008110B1_D0135
Ο
Ti(OiPr)4, NaBH4 MeOH, rt
Figure BR112016008110B1_D0136
ΝΗ
Por toda noite
a. 4-(4-etil- piperazin-1-ilmetil)-2-nitro-fenilamina [0167]A uma solução agitada de 1-etil- piperazina (1,37 g, 12 mmol) em MeOH (30 mL) foi adicionado Ti(O'Pr)4 (1,73 g, 6 mmol). Então a solução foi agitada a temperatura ambiente por 15 min. Então 4-amino-3-nitro-benzaldeído (Procedimento 2F, etapas a-b, 1,5 g, 9 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado e a solução foi agitada a temperatura ambiente por toda noite. Então NaBH4 (380 mg, 10 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. A solução foi diluída com EtOAc e filtrada. O filtrado foi lavado com água e salmoura, seco sobre Na2SO4 anidro. Concentração forneceu o produto que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (800 mg, rendimento: 34%). MS (ESI): 265 [M+H]+.
Exemplo - 136 o
Figure BR112016008110B1_D0137
N-(2-{6-[3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-(3-metil-isoxazol-5-ilmetil)ureído]-pirimidin-4-ilamino}-fenil)-acrilamida [0168]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 1-(6-Cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-(3-metil-isoxazol-5-ilmetil)-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)ureia (preparação mostrada a seguir) na etapa (d) e ferro/ácido acético na 60°C na
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95/167 etapa (f) para fornecer o composto título (26 mg, rendimento: 12% em cinco etapas),1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,78 (s, 1H), 9,72 (s, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,66 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,21-7,15 (m, 2H), 6,90 (s, 1H), 6,52-6,43 (m, 2H), 6,26 (d, 1H), 6,09 (s, 1H), 5,74 (d, 1H), 5,16 (s, 2H), 3,93 (s, 6H), 2,18 (s, 3H); MS (ESI): 598 [M+H]+
Preparação de 1-(6-Cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1(3-metil-isoxazol-5-ilmetil)-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia
Figure BR112016008110B1_D0138
a. (6-Cloro-pirimidin-4-il)-(3-metil-isoxazol-5-ilmetil)-amina.
[0169]A uma solução de 4,6-dicloro-pirimidina (660 mg, 4,46 mmol) em iPrOH (40 mL) e DIEA (690 mg, 5,35 mmol) foi adicionada uma solução de C-piridin2-il-metilamina (560 mg, 5 mmol) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio anidro e concentração ao vácuo de modo a fornecer o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o composto título (650 mg, rendimento: 65%). MS (ESI): 225 [M+H]+.
<C'
-o
Cl yÇci
Cl'
Figure BR112016008110B1_D0139
1) DaH. DMF 0°C a tem d. ambiente
2) SEMCl. DMF 0°C a temp. ambiente
Figure BR112016008110B1_D0140
Os
b. 1-(6-Cloro-pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-(3-metilisoxazol-5-ilmetil)-3-(2-trimetilssilanil-etoximetil)-ureia.
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96/167 [0170]A uma solução de (6-cloro-pirimidin-4-il)-(3-metil-isoxazol-5-ilmetil)amina (300 mg, 1,34 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado NaH (60%, 80 mg, 2 mmol) a 0°C, e a mistura foi agitada por 10 minutos a temperatura ambiente. Uma solução de 1-isocianato-3,5-dimetóxi-benzeno (Procedimento 2A, etapas a-d, 337 mg, 1,37 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionada gota a gota a 0°C. A mistura resultante foi agitada por meia hora. SEMCl (230 mg, 1,37 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. NH4Cl aquoso, saturado foi adicionado para saturar a reação. A mistura foi diluída com água e extraída com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados com água e salmoura, secos sobre sulfato de sódio anidro e filtrados. O filtrado foi evaporado ao vácuo de modo a fornecer o produto bruto, que foi purificado por cromatografia flash sobre sílica de modo a obter o produto título (440 mg, rendimento: 55%). MS (ESI): 604 [M+H]+
Exemplo - 137 o
Figure BR112016008110B1_D0141
Sal de TFA N-[2-{6-[3-(2,6-Dicloro-3,5-dimetóxi-fenil)-1-metil-ureído]pirimidin-4-ilamino}-4-(2-dimetilamino-etil)-fenil]-acrilamida [0171]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G substituindo 5-(2-dimetilamino-etil)-2-nitro-fenilamina (preparada pelo método ressaltado abaixo) na etapa (d) para fornecer o composto título (39 mg, rendimento: 29%) como um sal de TFA. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,86 (s, 1H), 9,76-9,70 (m, 2H), 9,02 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,86 (d, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,12 (d,
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 120/205
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1H), 6,90 (s, 1H), 6,57-6,48 (m, 2H), 6,24 (d, 1H), 5,74 (d, 1H), 3,94 (s, 6H), 3,353,28 (m, 5H), 2,98-2,92 (m, 2H), 2,79 (s, 6H); MS (ESI): 588 [M+H]+ .
o 'O^N'
Preparação de 5-(2-Dimetilamino-etil)-2-nitro-fenilamina no2 ,f no2 ,f
Figure BR112016008110B1_D0142
Figure BR112016008110B1_D0143
DMF, 100°C
a. [2-(3-flúor-4-nitro-fenil)-vinil]-dimetil-amina.
[0172]Uma mistura de 2-flúor-4-metil-1-nitro-benzeno (3 g, 19,3 mmol), N,Ndimetilformamida dimetilacetal (10 mL) e 3 mL of DMF (30 mL) foi aquecida a 125oC por 1 hora. A mistura foi resfriada e concentrada sob pressão reduzida de modo a fornecer um sólido púrpura. Trituração com hexanos forneceu the produto título puro (2,5 g, rendimento: 63%). MS (ESI): 211 [M+H]+. no, no2
Figure BR112016008110B1_D0144
b. [2-(3-flúor-4-nitro-fenil) -etil]-dimetil-amina.
[0173]A uma solução de [2-(3-flúor-4-nitro-fenil)-vinil]-dimetil-amina (1,7 g, 8 mmol) em MeOH, foi adicionado NaBH3CN (770 mg, 12 mmol) e uma gota de AcOH. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas e saturada com água. Após remoção de todos os voláteis em vácuo, o resíduo foi extraído com 10% metanol em DCM duas vezes. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio anidro. Concentração ao vácuo forneceu o produto bruto, que foi purificado por coluna de fase reversa para fornecer o composto título (1,08 g, rendimento: 63%). MS (ESI): 213 [M+H]+
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 121/205
98/167
Figure BR112016008110B1_D0145
c. 5-(2-Dimetilamino-etil)-2-nitro-fenilamina [0174]A uma solução de [2-(3-flúor-4-nitro-fenil)-etil]-dimetil-amina (800 mg, 3,76 mmol) em MeOH (20 mL) foi adicionado hidróxido de amônia (5 mL). A mistura de reação foi aquecida a 100°C em micro-ondas por uma hora e meia. O sólido amarelo resultante foi coletado e lavado com água, seco ao vácuo e combinado com batelada anterior de modo a fornecer o composto título puro (560 mg, rendimento: 55%). MS (ESI): 210 [M+H]+.
Procedimento 2H: Exemplo - 139
Figure BR112016008110B1_D0146
Figure BR112016008110B1_D0147
A.
ΌΓ
Ν- Υ- 'ΝΟϊ
Figure BR112016008110B1_D0148
NaH,(Boc)2P
THF. 0 °C-rt 18h
Pdsdha3 (10¾) Xantphos (20%i Cs^COa (2 eqv ) tolueno, 10D°C Portoda noite
Figure BR112016008110B1_D0149
Figure BR112016008110B1_D0150
.OMe
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 122/205
99/167
N-(2-((6-(3-(3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(4-etil piperazin-1 -il)fenil)acrilamida
Figure BR112016008110B1_D0151
Figure BR112016008110B1_D0152
a. 1 -(6-cloropirimidin-4-il)-3-(3,5-dimetoxifenil)-1 -metilurea [0175]A uma solução agitada de 6-cloro-N-metilpirimidin-4-amina (1g, 6,965 mmol) em dioxano (10 mL) foi adicionado DIPEA (3,6 mL, 20,895 mmol) e trifosgeno (0,81g, 2,786 mmol) em atmosfera de argônio a 0°C. A mistura resultante foi agitada por 1 hora a 70°C, e então deixada resfriar a temperatura ambiente. A mistura resultante foi adicionada via cânula a uma solução de 3,5-dimetoxianilina (1,2 g, 8,358 mmol) e DIPEA (1,2 mL, 6,965 mmol) em dioxano (4 mL) sob atmosfera de argônio a 0°C. A mistura de reação foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 12 h. Após término da reação por TLC (Hexanos:EtOAc, 7:3), mistura de reação foi diluída com acetato de etila e uma solução aquosa saturada de NaHCO3. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada ao vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (Hexanos:EtOAc, 70:30) para fornecer 1-(6-cloropirimidin-4-il)-3-(3,5dimetoxifenil)-1-metilureia (1,1 g, rendimento: 50%) como um sólido branco. 1HNMR (CDCls, 300MHz): δ 12,38 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,79 (d, 2H), 6,26 (t, 1H), 3,81 (s, 6H), 3,45 (s, 3H); MS (ESI): 323,10 [M+H]+.
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 123/205
100/167
Cl
N
Figure BR112016008110B1_D0153
•0Me THF, 0 °C-rt 16h
OMe
NaH, (Boc)2O
Cl m
Figure BR112016008110B1_D0154
Boc i
N
O
Figure BR112016008110B1_D0155
OMe .OMe
b. 1-(6-cloropirimidin-4-il)-3-(3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-t-butil carbonato de ureia [0176]NaH (0,124g, 3,098 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de 1(6-cloropirimidin-4-il)-3-(3,5-dimetoxifenil)-1-metilureia (0,5 g, 1,549 mmol) em DMF anidro (4 mL) em atmosfera de argônio a 0°C . A mistura resultante foi agitada por 15 min. e adicionado o dicarbonato de di-t-butila (0,50 mL, 2,323 mmol) a 0 °C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 16 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e um excesso de água fria. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 25 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada ao vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (Hexanos:EtOAc, 80:20) para fornecer o composto título (0,45 g, 69% de rendimento) como um sólido branco. 1HNMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,72 (d, 1H), 8,78 (d, 1H), 6,43-6,37 (m, 3H), 3,77 (s, 6H), 3,49 (s, 3H), 1,40 (s, 9H); MS (ESI): 424,10 [M+2]+.
.OMe
OMe
Pd2dba3(10%) Xantphos (20%) Cs2CO3 (2 eqv.)
Tolueno, 100°C por toda noite
OMe
OMe
c.
1-(3,5-dimetoxifenil)-3-(6-((4-(4-etil piperazin-1-il)-2nitrofenil)amino)pirimidin-4-il)-3-metil-1-t-butil carbonato ureia
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 124/205
101/167 [0177]Pd2(dba)3 (0,095g, 0,104 mmol) e Xantphos (0,1202 g, 0,208 mmol) foram tomados em 10 mL de tolueno seco em um tubo vedado em atmosfera de argônio a temperatura ambiente. A purga do gás de argônio continuou por mais 5-10 min. Então 1-(6-cloropirimidin-4-il)-3-(3,5-dimetoxifenil)-1-dimetil-3-t-butil carbonato ureia (0,43 g, 1,042 mmol) e 4-(4-etil piperazin-1-il)-2-nitroanilina (Procedimento 2C, Etapas a - c; 0,317g, 1,25 mmol) foi adicionado e a mistura de reação resultante foi purgada com gás argônio por 5 min., e então Cs2CO3 (0,676g, 2,08 mmol) foi adicionado. A purga do gás de argônio continuou por mais 5 min. antes da vedação do frasco de reação. Então a mistura de reação foi aquecida a 100°C por 12h. Após término da reação por TLC (DCM:MeOH, 98:2), massa de reação foi dividida entre EtOAc e água. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 25 mL) e a camada orgânica combinada foi lavada com água, salmoura, seca sobre Na2SO4 e evaporada ao vácuo. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre gel de sílica (DCM:MeOH/97:3) para fornecer o composto título (0,250 g, 37% de rendimento). 1HNMR (CDCl3, 300MHz): δ 9,30 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,17 (d, 1H), 7,59 (d, 1H), 7,14 (s, 1H), 7,08 (dd, 1H), 6,42 (d, 2H), 6,36 (t, 1H), 3,75 (s, 6H), 3,49 (s, 3H), 3,23 (t, 4H), 2,62 (t, 4H), 2,49 (q, 2H), 1,39 (s, 9H), 1,14 (t, 3H); MS (ESI): 637,4 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0156
d. (6-(3-(3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)(4(4-etil piperazin-1-il)-2-nitrofenil)carbamato e t-butila [0178]NaH (0,0314g, 0,786 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de
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-(3,5-dimetoxifenil)-3-(6-((4-(4-etil piperazin-1 -il)-2-nitrofenil)amino)pirimidin-4-il)-3metil-1-t-butil carbonato ureia (0,25g, 0,393 mmol) em DMF anidro (4 mL) em atmosfera de argônio a 0°C. A mistura resultante foi agitada por 15 min. Então dicarbonato de Di-t-butila (0,12 mL, 0,589 mmol) foi adicionado a 0°C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 18 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e água fria. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 20 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada ao vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (DCM:MeOH, 97:3) para fornecer o composto título (0,280g, 96% de rendimento) como um sólido marrom. 1HNMR (CDCls, 300MHz): δ 8,44 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,147,03 (m, 2H), 6,48 (d, 1H), 6,44-6,21 (m, 2H), 3,75 (s, 6H), 3,49 (s, 3H), 3,49 (t, 4H), 2,62 (t, 4H), 2,49 (q, 2H), 1,38 (d, 18H), 1,14 (t, 3H); MS (ESI):737,5 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0157
e. (2-Amino-4-(4-etil piperazin-1 -il)fenil)(6-(3-(3,5-dimetoxifenil)-1 -metil-3-tbutil carbonato ureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila [0179]Uma mistura de (6-(3-(3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)(4-(4-etil piperazin-1-il)-2-nitrofenil)carbamato de t-butila (0,280 g, 0,380 mmol) e níquel Raney (0,05 g) em mistura de MeOH e THF (1:1) (10 mL) foi agitada por 36 h a temperatura ambiente em atmosfera de hidrogênio (balão). A mistura de reação foi filtrada através de almofada Celite. O filtrado foi concentrado para fornecer o composto título (0,14g, 52% de rendimento). MS (ESI): 707,7 [M+H]+.
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 126/205
103/167
Figure BR112016008110B1_D0158
Figure BR112016008110B1_D0159
f. (2-Acrilamido-4-(4-etil piperazin-1-il)fenil)(6-(3-(3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila [0180]A uma solução agitada de (2-amino-4-(4-etil piperazin-1-il)fenil)(6-(3(3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il) carbamato de tbutila (0,1 4g, 0,183 mmol) em DCM anidro (5 mL) foi adicionado TEA (0,08 mL, 0,594 mmol) sob atmosfera de argônio a 0°C . A mistura resultante foi agitada por 15 min. e cloreto de acriloila lentamente adicionado (0,03 mL, 0,396 mmol) a 0°C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 3 h. A mistura de reação foi diluída com DCM e água. A camada aquosa foi separada e extraída com DCM (3 x 20 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (DCM:MeOH, 97:3) para fornecer o composto título (0,070g, 46% de rendimento) como um sólido marrom. MS (ESI):
761,4 [M+H]+ r
Figure BR112016008110B1_D0160
Figure BR112016008110B1_D0161
g. N-(2-((6-(3-(3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(4-etil piperazin-1-il)fenil)acrilamida [0181]TFA (0,35 mL, 5 vol) foi lentamente adicionado a uma solução agitada de (2-acrilamido-4-(4-etil piperazin-1 -il)fenil)(6-(3-(3,5-dimetoxifenil)-1 -metil-3-t-butil
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104/167 carbonato ureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila (0,070g, 0,124 mmol) em DCM seco (2 mL) sob atmosfera de argônio a 0°C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 24 horas. O progresso da reação foi monitorado por LCMS, após término da reação, solventes em excesso foram removidos em pressão reduzida. O resíduo resultante foi diluído com DCM e uma solução aquosa saturada de NaHCO3. A camada aquosa foi separada e extraída com DCM (3 x 10 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada ao vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (DCM/MeOH, 97:3) para fornecer 45 mg do produto desejado com pureza HPLC de 80%, que foi purificado por HPLC de preparação (Condições: Coluna: XBRIDGE-C18 (19,0 x 150 mm, 5 micra); (Fase móvel: A; 0,1% TFA em água, B; ACN) para fornecer o composto título (19 mg, 37% de rendimento) como um sólido esbranquiçado. 1HNMR (CDCb, 300MHz): δ 12,85 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,19 (d, 1H), 6,79 (s, 2H), 6,75 (d, 1H), 6,64 (s, 1H), 6,39 (d, 1H), 6,22-6,13 (m, 2H), 5,80-5,73 (m, 2H), 3,78 (s, 6H), 3,28 (t, 4H), 3,21 (s, 3H), 2,60 (t, 4H), 2,47 (q, 2H), 1,12 (t, 3H); MS (ESI): 561,60 [M+H]+; HPLC: 96,04%, tempo de retenção: 6,40 min.
Exemplo - 140
O
Figure BR112016008110B1_D0162
N-(2-((6-(3-(2,6-diclorofenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(4-etil piperazin-1-il)fenil)acrilamida [0182]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2H (Exemplo 139), substituindo 2,6-dicloroanilina na etapa (a) e (2Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 128/205
105/167 (clorometoxi)etil)trimetilssilano na etapa (b) para fornecer o composto título (18 mg, 3,2% de rendimento) como um sólido esbranquiçado. 1HNMR (CDCl3, 300MHz): δ
12,58 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,37 (d, 2H), 7,22 (d, 1H), 7,14 (t, 1H), 6,77 (dd, 1H), 6,67 (s, 1H), 6,42 (d, 1H), 6,25-6,16 (m, 1H), 5,85 (s, 1H), 5,78 (d, 1H), 3,35-3,24 (m, 7H), 2,62 (t, 4H), 2,49 (q, 2H), 1,14 (t, 3H); MS (ESI): 569,10 [M]+; HPLC: 96,98%, tempo de retenção: 3,49 min.
Exemplo - 141 o
Figure BR112016008110B1_D0163
OMe
OMe
N-(2-((6-(3-(2-cloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(4etil piperazin-1 -il)fenil)acrilamida [0183]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2H (Exemplo 139), substituindo 2-cloro-3,5-dimetoxianilina (procedimento mostrado abaixo) na etapa (a) para fornecer o composto título (20 mg, 6,8% de rendimento) como um sólido esbranquiçado. 1H-NMR (CDCl3, 400MHz): δ 13,46 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,79-7,71 (m, 2H), 7,56 (s, 1H), 7,18 (d, 1H),
6,74 (dd, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,38 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 6,21-6,15 (m, 1H), 5,79-5,74 (m, 2H), 3,86 (s, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,28 (t, 4H), 3,23 (s, 3H), 2,59 (t, 4H), 2,47 (q, 2H), 1,12 (t, 3H); MS (ESI): 595,15 [M]+; HPLC: 98,14%, tempo de retenção: 3,49 min.
Preparação de 2-cloro-3,5-dimetoxianilina
Figure BR112016008110B1_D0164
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 129/205
106/167
a. N-(3,5-dimetoxifenil)acetamida [0184]Anidrido acético (6,5 mL )foi adicionado lentamente a uma solução agitada de 3,5-dimetóxi anilina (10 g, 65,359 mmol) em tolueno (50 mL) sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente e a mistura de reação resultante foi agitada por 15 h. Após término da reação, a mesma foi diluída com hexano e o precipitado resultante foi coletado por filtração seco ao vácuo para fornecer o composto título (12,5 g, 98% de rendimento) como um sólido esbranquiçado. 1HNMR (CDCls, 300MHz): δ 7,38 (s, 1H), 6,75 (d, 2H), 6,23 (s, 1H), 3,76 (s, 6H), 2,15 (s, 3H); MS (ESI):196,1 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0165
[0185]A uma solução agitada de N-(3,5-dimetóxi-fenil)-acetamida (5g, 25,64 mmol) em ácido acético (17 mL) foi adicionada solução de ácido clorídrico aquosa a 32% (14 mL), seguida por uma solução de clorato de sódio (1,16 g, 11 mmol) em água (1,5 mL) a 0°C. a mistura de reação resultante foi agitada por 30 min. a 0° . Após isso a mistura de reação foi derramada em água gelada e se tornou básica com pó de K2CO3. O precipitado foi filtrado e lavado com água. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (Hexano/EtOAc, 88:12) para fornecer o composto título (1,8 g, 31% de rendimento) como um sólido branco. 1HNMR (DMSO-d6, 300MHz): δ 9,36 (s, 1H), 7,03 (d, 1H), 6,53 (d, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 2,08 (s, 3H); MS (ESI): 230,2 [M+H]+.
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107/167
MeO
Ο
Figure BR112016008110B1_D0166
Cl
OMe
KOH
EtOH refluxo MeO 12 h
Figure BR112016008110B1_D0167
.Cl
OMe
c. 2-cloro-3,5-dimetoxianilina [0186]Hidróxido de potássio (2,19 g, 39,18 mmol) foi adicionado a uma solução de N-(2-cloro-3,5-dimetoxifenil)acetamida (1,8g, 7,837 mmol) em EtOH (100mL) e água (10mL) e a mistura de reação aquecida ao refluxo por 12 horas. Excesso de EtOH foi removido sob pressão reduzida de modo a obter um resíduo. O resíduo foi então dividido entre água e dietil éter. A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada ao vácuo para fornecer o composto título (1,2 g, 82% de rendimento) como um sólido branco. 1HNMR (CDCl3, 300MHz): δ 5,97 (s, 2H), 4,08 (brs, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,75 (s, 3H); MS (ESI):188,1 [M+H]+.
Procedimento 2I: Exemplo - 142
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108/167
CL ,Ν
Figure BR112016008110B1_D0168
Figure BR112016008110B1_D0169
OMe
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)5-(2-metoxietoxi)fenil)acrilamida
HO
Figure BR112016008110B1_D0170
MeO
NH ,Br
K2CO3, DMF 50°C, 6h '0
Figure BR112016008110B1_D0171
nh2 no2
a. 4-(2-metoxietoxi)-2-nitroanilina [0187]Carbonato de potássio seco e em pó (3,58 g, 0,025 mol) foi adicionado a uma solução de 4-amino-3-nitrofenol (2 g, 0,012 mol) em DMF (20 mL) a 0°C em atmosfera de nitrogênio. A isso foi adicionado, 1-bromo-2-metoxietano (1,34 mL, 0,014 mol) gota a gota e a mistura de reação resultante foi refluxada por toda noite. Então, a mistura de reação foi filtrada através de celite. O filtrado foi concentrado e
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109/167 diluído com acetato de etila e água. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4,filtrada e concentrada ao vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica de modo a obter o composto título (0,6 g, rendimento: 24%) como um sólido. MS (ESI): 213,15 [M+H]+.
o„
Figure BR112016008110B1_D0172
Figure BR112016008110B1_D0173
b. N4-(4-(2-metoxietoxi)-2-nitrofenil)-N6-metilpirimidina-4,6-diamina [0188]4-(2-metoxietoxi)-2-nitroanilina (0,6 g, 2,830 mmol) e 6-cloro-Nmetilpirimidin-4-amina (0,404 g, 2,830 mmol) foram tomados em 10 mL de tolueno seco em um tubo de vedação sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente. A purga do gás de argônio continuou por mais 5-10 min. Então Cs2CO3 (2,3 g, 7,075 mmol, 2,5 eq) e Xantphos (0,490g, 0,849 mmol) foram adicionados e a mistura de reação resultante foi purgada com gás argônio por 5 min., seguido por Pd2(dba)3 (0,518 g, 0,566 mmol) que foi adicionado. A purga do gás de argônio continuou por mais 5 min. antes da vedação do frasco de reação. Então a mistura de reação foi aquecida a 100°C por 7 horas. Após término da reação por TLC (DCM:MeOH, 98:2), a massa de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi evaporado ao vácuo para obter o resido bruto. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre gel de sílica para fornecer o composto título (0,93g, rendimento: 70%); MS (ESI): 320,3 [M+H]+.
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110/167
Figure BR112016008110B1_D0174
Figure BR112016008110B1_D0175
c. 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-(6-((4-(2-metoxietoxi)-2-nitrofenil)amino) pirimidin-4-il)-1 -metilureia [0189]A uma solução agitada de 2,6-dicloro-3,5-dimetoxianilina (500 mg, 2,252 mmol) em dioxano (10 mL) foi adicionado fosgeno a 20% em tolueno (4,4 mL, 9,0 mmol) sob atmosfera de argônio a 0°C . A mistura resultante foi agitada por 6 h a 90°C, e então deixada resfriar a temperatura ambiente. Os solventes foram removidos e o resíduo foi dissolvido em tolueno (10 mL). A isso, foi adicionado N4(4-(2-metoxietoxi)-2-nitrofenil)-N6-metilpirimidina-4,6-diamina (0,718g, 8,358 mmol, 1,0 eq). A mistura de reação resultante foi então refluxada por 6 h. Após término da reação por TLC (Hexanos:EtOAc, 7:3), mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente, concentrada ao vácuo de modo a obter uma mistura de reação bruta. O sólido precipitou quando da adição de acetato de etila, a mistura de reação bruta foi filtrada, lavada com éter e pentano para fornecer o composto título (0,285, rendimento: 32%) como um sólido branco. MS (ESI): 567,0 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0176
d. (6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metil-3-t-butila carbonato ureído)pirimidin-4-il)(4-(2-metoxietoxi)-2-nitrofenil)carbamato de t-butila [0190] DMAP(0,025 g, 0,2 mmol), e dicarbonato de Di-t-butila (0,438 g, 2,009 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de 3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1-(6-((4-(2-metoxietoxi)-2-nitrofenil)amino)pirimidin-4-il)-1-metiluriea
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111/167 (0,285 g, 0,502 mmol) em THF anidro (10 mL) em atmosfera de argônio a 0°C . A mistura resultante foi refluxada por 3-4h. Após término da reação por TLC (Hexanos:EtOAc, 1:1), mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente, concentrado ao vácuo de modo a obter um resíduo bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título (0,35g, rendimento: 88%) como um sólido esbranquiçado. MS (ESI): 767,1 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0177
Figure BR112016008110B1_D0178
e. (2-amino-4-(2-metoxietoxi)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil3-t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila [0191]Níquel Raneyl (0,05g) foi adicionado a uma solução de (6-(3-(2,6dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metil-3-t-butil carbonato ure/do)pirimidin-4-il)(4-(2metoxietoxi)-2-nitrofenil)carbamato de t-butila (0,350g, 0,456 mmol) em mistura de THF e MeOH (10 mL) e a mistura de reação resultante foi agitada por 14 h a temperatura ambiente em uma atmosfera de hidrogênio (balão). A mistura de reação foi filtrada através de almofada de Celite. O filtrado foi concentrado para fornecer a resíduo bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (MeOH:DCM, 5:95) para fornecer o composto título (0,26 g, rendimento: 77% ) como um sólido. MS (ESI): 737,2 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0179
Figure BR112016008110B1_D0180
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112/167
f. (2-acriamido-4-(2-metoxietoxi)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 metil-3-t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila [0192]A uma solução agitada de (2-amino-4-(2-metoxietoxi)fenil)(6-(3-(2,6dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metil-3-t-butil carbonato ure/do)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila (0,26g, 0,352 mmol) em DCM anidro (6 mL) foi adicionado TEA (0,09 mL, 0,704 mmol) sob atmosfera de argônio a 0°C . A mistura resultante foi agitada por 15 min. e o cloreto de acriloila foi lentamente adicionado (0,04 mL, 0,528 mmol) a 0 °C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecera temperatura ambiente e agitada por 2 h. A mistura de reação foi diluída com DCM e água. A camada aquosa foi separada e extraída com DCM (3 x 30 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título (0,200g, rendimento: 72%) como um sólido. MS (ESI): 791,2 [M+H]+.
o ^A
NH
Figure BR112016008110B1_D0181
Figure BR112016008110B1_D0182
O ^A
Figure BR112016008110B1_D0183
Figure BR112016008110B1_D0184
O
OMe
NH
Figure BR112016008110B1_D0185
Figure BR112016008110B1_D0186
g. N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metilureído)pirimidin-4il)amino)-5-(2-metoxietoxi)fenil)acrilamida
TFA (0,38 mL, 5,05 mmol) foi lentamente adicionado a uma solução agitada de (2-acrylamido-4-(2-metoxietoxi)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila (0,2 g, 0,252 mmol) em DCM seco (2 mL) sob atmosfera de argônio a 0°. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 12 h. O progresso da reação foi monitorado por LCMS. Após término da reação, solventes em excesso foram
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113/167 removidos em pressão reduzida. O sólido bruto foi lavado com éter para fornecer o composto título (86 mg, rendimento: 58%) como um sólido branco. 1HNMR (DMSOd6, 400MHz): δ12,01 (s, 1H), 9,60 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,33 (s, 1H); 7,42 (s, 1H), 7,34 (d, 1H), 6,89 (s,1H), 6,79 (d, 1H), 6,51 (dd, 1H), 6,23 (d, 2H), 5,72(d, 1H), 4,08 (m,2H), 3,93 (s, 6H), 3,66 (m, 2H), 3,31(s,3H), 3,23(s,3H). MS (ESI): 591,3 [M+H]+; HPLC: 96,04%, tempo de retenção: 3,72 min.
Exemplo: 144
O
Figure BR112016008110B1_D0187
N-(2-((6-(3-(2-cloro-6-flúor-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído) pirimidin-4il)amino)-5-(4-etil piperazin-1-il)fenil)acrilamida [0193]O composto título foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2I (Exemplo 142), substituindo N4-(4-(4-etil piperazin-1-il)-2nitrofenil)-N6-metilpirimidina-4,6-diamina (Procedimento 2C, Exemplo 108, Etapas a - d) e 2-cloro-6-flúor-3,5-dimetoxianilina (Procedimento mostrado abaixo) na etapa (c) para fornecer o composto título imediatamente após (0,46 mg, rendimento: 2,6 % por cinco etapas) como um sólido esbranquiçado. MS (ESI): 813,1 [M+H]+. A amina livre (46 mg, 0,075 mmol) foi dissolvida em mistura de acetato de etila: DCM: MeOH e tratada com ácido fosfórico (7 mg, 0,075 mmol). Após agitação por 1 hora, o precipitado sólido foi filtrado e lavado com éter e pentano para fornecer o composto título (34,7 mg, rendimento: 65%) como um sólido esbranquiçado. 1HNMR (DMSOde, 300MHz): δ 12,15 (s, 1H), 9,60 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,29 (d, 2H), 6,9 (d, 2H), 6,81 (dd, 1H), 6,51-6,45 (m, 1H), 6,25-6,20 (m, 2H), 5,72 (d, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 3,23 (t, 4H), 3,14 (t, 4H), 2,54-2,50 (m, 5H), 1,05 (t, 3H); MS (ESI): 613,2 (M-H3PO4]+; HPLC: 98,6%, tempo de retenção: 6,13 min.
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114/167
Preparação de 2-cloro-6-flúor-3,5-dimetoxianilina
CO,Me
MeO A,
Selectfluor, ACN
0“C, rt, por toda noite Me MeO
CO,Me
A '''OMe
a. 2-flúor-3,5-dimetóxibenzoato de metila [0194]Uma suspensão de Selectfluor (48,9 g, 0,15 mol) em acetonitrila (1,1L) foi adicionada a uma solução de 3,5-dimetóxi benzoato de metila (20 g, 0,10 mol) em acetonitrila a 0°C em atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação resultante foi aquecida a temperatura ambiente e agitada por toda noite. A mistura de reação foi concentrada em vácuo, diluída com solução saturada de carbonato de sódio e acetato de etila. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 200 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (gradiente hexano/éter 30:1 para 4:1) para fornecer o composto título (4 g, rendimento: 16,9%).
MeO
CO,Me
Figure BR112016008110B1_D0188
SO2CI2, AC D 0 °C-rt, 1h
OMe
MeO
Cl
CO2Me F
Figure BR112016008110B1_D0189
OMe
b. 2-cloro-6-flúor-3,5-dimetóxibenzoato de metila [0195]SO2Cl2 (2,20g, 0,016mol) foi adicionado gota a gota a uma solução de 2-flúor-3,5-dimetóxi benzoato de metila (3,5 g, 0,016 mol) em acetonitrila (4 0 mL) a 0°C em atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação resultante foi aquecida a temperatura ambiente e lentamente agitada por 1 h. A mistura de reação foi saturada com solução saturada de carbonato de sódio e extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica usando eluente (gradiente hexano/éter (20:1) para hexano/éter (5:1) para fornecer 0 composto título (2,7g, rendimento: 67%) como um sólido.
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115/167 ci.
MeO
CO5M&
,F
OMe
NaOH, EtOH retluxo 24h
Cl·
MeO
Figure BR112016008110B1_D0190
c. Ácido 2-cloro-6-flúor-3,5-dimetoxibenzóico [0196]Uma suspensão de 2-cloro-6-flúor-3,5-dimetóxibenzoato de metila (2,7 g, 0,010 mol) e hidróxido de sódio (1,088 g, 0,0272) em etanol anidro (30 mL) foi refluxada por 24 h. A mistura de reação resultante foi resfriada para temperatura ambiente e concentrada ao vácuo para obter um resíduo bruto. O resíduo bruto foi dissolvido em água e extraído com éter (3 X 30 mL). A camada aquosa foi acidificada com HCI conc. e o sólido precipitado foi filtrado, lavado com água fria e seco ao vácuo para fornecer o composto título (1,8 g, rendimento: 71%) como um sólido.
C02h
Cl·
MeO
OMe
i. DP PA,
TEA, ÍBuQH toda noite ii. TFA, DCM
2h
Cl,
MeC
OMe
d. 2-cloro-6-flúor-3,5-dimetoxianilina [0197]Uma suspensão de ácido 2-cloro-6-flúor-3,5-dimetoxi benzóico (1,8 g, 0,0077 mol) e trietil amina (0,934 g, 0,0092 mol) em f-BuOH (50 mL) foi agitada por 5 min. A mistura de reação resultante recebeu adição de difenil fosforil azida (2,53 g, 0,0092 mol) e foi aquecida até 82°C e mantida nessa temperatura por toda noite. A mistura de reação foi então concentrada ao vácuo de modo a obter um resíduo bruto. O resíduo bruto foi dissolvido em diclorometano (20 mL) e resfriado para 0°C. TFA (4 mL) foi adicionado à mistura de reação e a mistura de reação resultante foi então agitada a temperatura ambiente por 2 h. Os solventes foram removidos a vácuo e o resíduo bruto foi diluído com acetato de etila e solução saturada de carbonato de sódio. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica
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116/167 empregando o diluente (gradiente hexano para hexano-éter (65:35)) para fornecer o composto título (0,95g, rendimento: 60%) como um sólido. MS (ESI): 205,7 [M+H]+.
Procedimento 2J - Exemplo 145
OuN
BocaO. DMAP
THF, refluxo 'Cl 'f' 12h
QMe
Boc Cl
Χ,ΟΜβh2n
.. Pdjdbas(10%J MeCOC
Xanlphoe (20%)
OMe CsoCGi Í2eov.l Tolueno, 100“C
Figure BR112016008110B1_D0191
BocuO, DMAP MeOgC THF, Refluxo, 3 h
Figure BR112016008110B1_D0192
LíBH4 (1eep) THF.rt. 2.5h
NQ2 Bqc
OMe
Imidazol tbdmsci
DCM, 41.
NO; Boc NH2Bdc
-V \n C| Níquel Raney h2^_ 'Ç Q|
ÍTBDMS MeOH, 16h OTBDMS k-jkJkoMe
Figure BR112016008110B1_D0193
OMe
OMe
O ^c,
TEA DCM OaC-r.t.
Figure BR112016008110B1_D0194
Figure BR112016008110B1_D0195
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído) pirimidin-4-il)amino)5-(hidroximetil)fenil)acrilamida
Cl
Figure BR112016008110B1_D0196
Cl
OMe
Cl
BocjO. DMAP
THF. Refluxo, 12 h
Boc Cl .OMe >Me
a. 1-(6-cloropirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-t-butil carbonato ureia [0198]DMAP (0,080g, 0,655 mmol) e dicarbonato de Di-í-butila (2,9 mL, 12,6 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de 1 -(6-cloropirimidin-4-il)-3-(2,6dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilurea (Procedimento 2E, etapa b; 2,6 g, 6,632 mmol) em TPIF anidro (20 mL) em atmosfera de argônio a 0°C . A mistura resultante foi
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117/167 então refluxada por 2 h. Após término da reação por TLC (EtOAc:Hexano 3:7), a mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente, concentrada ao vácuo de modo a obter a resíduo bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título (2,5 g, rendimento: 69,4%) como um sólido. 1H-NMR (CDCb, 300MHz): δ 8,73 (d, 1H), 7,95 (d, 1H), 6,61 (s, 1H), 3,95 (s, 6H), 3,63 (s, 3H), 1,35 (s, 9H).
Figure BR112016008110B1_D0197
b. 4-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrobenzoateo de metila [0199]4-Amino-3-nitrobenzoato de metila (0,956 g, 0,004 mol) e 1-(6cloropirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metil-3-í-butil carbonato ureia (2 g, 0,004 mol) foram tomados em 10 mL de tolueno seco em um tubo de vedação a temperatura ambiente e gás argônio foi purgado por 5-10 min. Então CS2CO3 (3,25 g, 0,01 mol) e Xantphos (0,46 g, 0,0008 mol) foram adicionados e a mistura de reação resultante foi purgada com gás argônio por 5 min., seguido por adição de Pd2(dba)3 (0,36 g, 0,0004 mol). A purga do gás de argônio continuou por mais 5 minutos antes da vedação do frasco de reação. Então a mistura de reação foi aquecida a 100°C por 12 h. Após término da reação por TLC, a massa de reação foi filtrada através de celite e 0 filtrado foi evaporado ao vácuo para obter um resíduo bruto. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre gel de sílica para fornecer 0 composto título (2,1 Og, rendimento: 79%); 1H-NMR (CDCb, 300MHz): δ 10,3 (s, 1H), 9,00-8,95 (m, 2H), 8,75 (s, 1H), 8,22 (dd, 1H), 7,63 (s, 1H), 6,61 (s, 1H), 3,95 (s, 6H), 3,94 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 1,39 (s, 9H).
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118/167
Figure BR112016008110B1_D0198
Figure BR112016008110B1_D0199
c. 4-((t-butoxicarbonil) (6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil) -1 -metil-3-t-butil ureído)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrobenzoato de metila [0200]DMAP (0,039 g, 0,322 mmol) e dicarbonato de Di-í-butila (1,48mL, 6,45mmol) foram adicionados a uma solução agitada de 4-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1 -metiI-3-t-butil carbonato t/re/c/o)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrobenzoato de metila (2,1 g, 3,22 mmol) em THF anidro (5 mL) em atmosfera de argônio a 0°C . A mistura resultante foi refluxada por 12 h. Após término da reação por TLC (EtOAc:Hexano 40:60), a mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente, concentrada ao vácuo de modo a obter a resíduo bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título (2,1 g, rendimento: 87%) como um sólido. MS (ESI): 751,0 [M]+.
Figure BR112016008110B1_D0200
Figure BR112016008110B1_D0201
d. (6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metil-3-t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)(4-(hidroximetil)-2-nitrofenil)carbamato de t-butila [0201]Boroidreto de lítio (0,049 g, 2,26 mmol) foi adicionado a uma solução de 4-((í-butoxicarbonil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-í-butil ureído)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrobenzoato de metila (1,7 g, 2,26 mmol) em THF anidro (18 mL) em atmosfera de argônio a 0°C. A mistura de reação resultante foi então deixada aquecer a temperatura ambiente por 2 horas e meia. A mistura de reação foi então saturada com água gelada e diluída com acetato de etila. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 20 mL). A fase orgânica foi
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119/167 lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada ao vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título (0,480 g, rendimento: 29%) como um sólido. MS (ESI): 723,2 [M]+.
Figure BR112016008110B1_D0202
e. (4-(((t-butildimetilssilil)oxi)metil) -2-nitro fenil) (6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1-metil-3-t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila [0202]lmidazol (0,071 g, 1,051 mmol) e TBDMS-CI (0,118g, 0,787 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metil-3-í-ót/í/7 carbonato ureído) pirimidin-4-il)(4-(hidroximetil)-2-nitrofenil)carbamato de í-butila (0,380g, 0,525 mmol) em diclorometano anidro (5 mL) em atmosfera de argônio a 0°C. A mistura de reação resultante foi agitada por 4 h a temperatura ambiente. A mistura de reação foi então diluída com DCM e água. A camada aquosa foi separada e extraída com DCM (3x10 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada ao vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título (0,330g, rendimento: 75%) como um sólido. MS (ESI): 837,4 [M]+.
Figure BR112016008110B1_D0203
f. (2-amino-4-(((t-butidimetilssilil)oxi)metil)fenil) (6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1-metil-3-t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila [0203]Níquel Raney (0,06 g) foi adicionado a uma solução de (4-(((/butildimetilssilil)oxi)metil)-2-nitrofenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metil-3-/Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 143/205
120/167 butil carbonato ure/do)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila (0,3 g, 0,358 mmol) em MeOH (5 mL) e a mistura de reação resultante foi agitada por 12 h a temperatura ambiente em uma atmosfera de hidrogênio (balão). A mistura de reação foi filtrada através de almofada de Celite. O filtrado foi concentrado para fornecer a resíduo bruto que foi então purificado por cromatografia de coluna para fornecer o composto título (0,180 g, rendimento: 64%) como um sólido. MS (ESI): 807,2 [M]+ o
NH,Boc à ' 2-'· - 0 Boc yN Boc Cl
OTBDMS zNvN^i.OMe x ΥΎ
Figure BR112016008110B1_D0204
N_N
OTBDMS
Boc Cl ΝγΝ °CI
OMe
Figure BR112016008110B1_D0205
OMe ^Xc|
TEA, DCM °C-r.t.
Figure BR112016008110B1_D0206
Dci-V
OMe
g. (2-acrilamido-4-(((t-butildimetilssilil)oxi)metil)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1-metil-3-t-butil carbonato ureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila [0204]A uma solução agitada de (2-amino-4-(((tbutildimetilssilil)óxi)metil)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-t-butil carbonato ure/do)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila (0,180 g, 0,223 mmol) em DCM anidro (5 mL) foi adicionado TEA (0,08mL, 0,557 mmol) sob atmosfera de argônio a 0°C. A mistura resultante foi agitada por 15 min. e cloreto de acriloila foi adicionado lentamente (0,03 mL, 0,334 mmol) a 0°C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 4 h. A mistura de reação foi então concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título desejado (0,130 g, rendimento: 68%) como um sólido. MS (ESI): 861,3 [M]+ o %Anh Boc
N^IY Ί1 N
Figure BR112016008110B1_D0207
Boc Cl
OTBDMS ,Ν^ΝγΧ-°Μθ
OMe
DCM, 13h
h.
O
NH
Figure BR112016008110B1_D0208
OH
H Νγ%
TNh Çi
A^lUyOtle °ci-V
OMe
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 144/205
121/167 il)amino)-5-(hidroximetil)fenil)acrilamida [0205]TFA (1,0 mL) foi lentamente adicionado a uma solução agitada de (2acrilamido-4-(((t-butildimetilssilil)óxi)metil)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metil-3-t-butil carbonato ure/do)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila (0,130 g, 0,150 mmol) em DCM seco (3 mL) sob atmosfera de argônio a 0°C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 13 h. O progresso da reação foi monitorado por LCMS, após término da reação, solventes em excesso foram removidos em pressão reduzida. O resíduo resultante foi diluído com DCM e uma solução aquosa saturada de NaHCO3. A camada aquosa foi separada e extraída com DCM (3 x1 0 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada ao vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer 95 mg do produto desejado com pureza HPLC de 84%, que foram então purificados por HPLC de preparação (Condições: Coluna: X ponte C18 ( 19 mm x 150 mm, 5 pm); (Fase móvel: A; 0,01% TFA em Água, B; ACN) para fornecer o composto título (16 mg, rendimento: 16%) como um sólido branco. 1H-NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 12,08 (s, 1H), 9,70 (s, 1H), 8,95 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,49 (d, 1H), 7,15 (s, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,53-7,46 (q, 1H), 6,32 (s, 1H), 6,25 (d, 1H), 5,74 (d, 1H), 5,42 (s, 1H), 5,35 (s, 1H), 4,49 (s, 2H), 3,94 (s, 6H), 3,25 (s, 3H); MS (ESI): 547,0 [M+H]+; HPLC: 97,4%, tempo de retenção: 3,83 min.
Figure BR112016008110B1_D0209
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído) pirimidin-4-il)amino)5-(metoximetil)fenil)acrilamida
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 145/205
122/167 [0206]0 composto título foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2I (Exemplo 142), substituindo N4-(4-(metoximetil)-2-nitrofenil)-N6metilpirimidina-4,6-diamina (procedimento mostrado abaixo) na etapa (c) para fornecer o composto título (5,0 mg, rendimento: 1,8%) como um sólido esbranquiçado. 1H-NMR (CDCb, 400MHz): δ 12,30 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,30 (d, 1H), 6,54 (s, 1H), 6,46 (d, 1H), 6,26 (dd, 1H), 6,07 (s, 1H), 5,83 (d, 1H), 5,18 (s, 2H), 3,93 (s, 6H), 3,82 (s, 3H), 3,34 (s, 3H); MS (ESI): 561,1 [M+H]+; HPLC: 95,76%, tempo de retenção: 4,36 min.
Preparação de N4-(4-(metoximetil)-2-nitrofenil)-Ne-metilpirimidina-4!6-diamina
O2N. ^.COjH SOCI2 ΟϊΝγ^γ,ΟΟϊΜβ
MeOH, refluxo, H2N' horas
a. 4-amino-3-nitrobenzoato de metila [0207]Cloreto de tionila (19,4g, 164,85 mmol) foi adicionado a uma solução de ácido 4-amino-3-nitrobenzóico (20 g, 109,89 mmol) em metanol (200 mL) a 0°C. A mistura resultante foi então refluxada por 12 h. A mistura de reação foi deixada resfriar a temperatura ambiente. O sólido amarelo precipitado foi filtrado e seco para fornecer o composto título (22g, rendimento: 100%) como um sólido. 1H-NMR (CDCb, 300MHz): δ 8,85 (d, 1H), 7,99 (dd, 1H), 6,83 (d, 1H), 6,40 (s, 2H), 3,90 (s, 3H).
Cl
O,N
C02Me .NH
HjN
PdjídbaF,, CsjCOj XantPhQs, tolueno 110°C, 15h
Figure BR112016008110B1_D0210
b. 4-((6-(metilamino)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrobenzoato de metila [0208]6-cloro-N-metilpirimidin-4-amina, 3 (3 g, 20,97mmol) e 4-amino-3nitrobenzoato de metila (3,9 g, 20,97 mmol) foram tomados em tolueno (5 mL) em um tubo de vedação em atmosfera de argônio a temperatura ambiente. O gás
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123/167 argônio foi purgado por 5-10 min. Então CS2CO3 (17,0 g, 52,4 mmol) e Xantphos (3,6 g, 6,29 mmol) foram adcionados e a mistura de reação resultante foi purgada com gás argônio por 5 min., seguido por adição de Pd2(dba)3 (3,8 g, 4,19 mmol). A purga do gás de argônio continuou por mais 5 min. antes da vedação do frasco de reação. Então a mistura de reação foi aquecida a 110°C por 16 h. Após término da reação por TLC, a mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente, filtrada através de leito de celite e 0 filtrado foi evaporado ao vácuo para obter um resíduo bruto. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre gel de sílica para fornecer 0 composto título (3,2g, rendimento: 51%) como um sólido; MS (ESI): 304,2 [M+H]+.
MeCXC no2H
N
Figure BR112016008110B1_D0211
,NH
BoCcO, DMAP
THF, refluxo, 3 h
NO·
Figure BR112016008110B1_D0212
'=BOC ,NBoc
c. 4-((t-butoxicarbonil)(6-((t-butoxicarbonil)(metil)amino)pirimidin-4-il)amino)3-nitrobenzoato de metila [0209]DMAP (0,497 g, 4,078 mmol) e dicarbonato de Di-í-butila (8,89 g, 40,78 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de intermediário-4 (3,1 g, 10,197 mmol) em THF anidro (35 mL) em atmosfera de argônio a temperatura ambiente. A mistura resultante foi refluxada por 2-3 h. Após término da reação por TLC, mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente, concentrada ao vácuo de modo a obter a resíduo bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título (1,9 g, rendimento: 37%) como um sólido. MS (ESI): 504,0 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0213
Figure BR112016008110B1_D0214
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124/167
d. (6-((t-butoxicarbonil)(4-(hidroximetil)-2-nitrofenil)amino)pirimidin-4il)(metil)carbamato de t-butila
Boroidreto de lítio (0,157 g, 7,14 mmol) foi adicionado a uma solução de 4((í-butoxicarbonil)(6-((í-butoxicarbonil)(metil)amino)pirimidin-4-il)amino)-3nitrobenzoato de metila (1,8g, 3,57 mmol) em THF (20ml_) em atmosfera de argônio a 0°C. A mistura resultante foi então deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada por 12 h. A mistura de reação foi então saturada com água gelada e diluída com acetato de etila. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 40 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada, e concentrada para obter um resíduo bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o intermediário-6 desejado (1,2 g, 75%) como um sólido. MS (ESI): 476,1 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0215
NQ2doc ‘ ,νΛν K2CO3,Me2SO4 II Ί Γ í, acetóna
NBoc Refluxo, 24 h
Figure BR112016008110B1_D0216
__,NBoc
e. (6-((t-butoxicarbonil)(4-(metoximetil)-2-nitrofenil)amino)pirimidin-4il)(metil)carbamato de t-butila [0210]A uma solução de (6-((í-butoxicarbonil)(4-(hidroximetil)-2nitrofenil)amino) pirimidin-4-il)(metil)carbamato de í-butila (1,5 g, 3,488 mmol) em acetona (20 mL) em atmosfera de argônio a 0°C, foi adicionado carbonato de potássio (0,48 g, 6,97 mmol) seguido por sulfato de dimetila (0,87 g, 6,97 mmol). A mistura de reação resultante foi então refluxada por 24 horas e então deixada resfriar para temperatura ambiente. A mistura de reação foi concentrada ao vácuo de modo a obter a resíduo bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer o composto título (0,3 g, rendimento: 19%) como um sólido. MS (ESI): 490,55 [M+H]+.
[0211]
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125/167
Figure BR112016008110B1_D0217
NBoc
TFA, DCM
O°C-rt, 1h /O
Figure BR112016008110B1_D0218
TFA ^NH
f. N4-(4-(metoximetil)-2-nitrofenil)-N6-metilpirimidina-4,6-diamina [0212]TFA (5 mL) foi lentamente adicionada a uma solução agitada de (6-((tbutoxicarbonil)(4-(metoximetil)-2-nitrofenil)amino)pirimidin-4-il)(metil)carbamato de tbutila (0,85g) em DCM seco (10 mL) sob atmosfera de argônio a 0°C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 1 h. Após término da reação, solventes em excesso foram removidos sob pressão reduzida e lavados com éter para fornecer o composto título (0,7 g brutos) como um sólido. MS (ESI): 290,2 [M+H]+.
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126/167
Procedimento 2K - Exemplo 148
Figure BR112016008110B1_D0219
□MAP, Soc2O
Me
THF, refluxo, 3 h
Figure BR112016008110B1_D0220
Figure BR112016008110B1_D0221
iMe
HATU, DIPEA, DMF
0°C-rL 1Sh hnV
Vn
Figure BR112016008110B1_D0222
O
Cl-V''
TEA, DCM OQC-rt, £h
Figure BR112016008110B1_D0223
Figure BR112016008110B1_D0224
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)5-(4-metil piperazina-1 -carbonil)fenil)acrilamida
Figure BR112016008110B1_D0225
a. Ácido 4-((t-butoxicarbonil)(6-(3-(tert-butoxicarbonil)-3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrobenzóico [0213]Hidróxido de lítio (0,08 g, 2,99 mmol) foi adicionado a uma solução de
4-((í-butoxicarbonil)(6-(3-(í-butoxicarbonil)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metilureído)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrobenzoato de metila (1,5 g, 1,997 mmol) (Procedimento 2J, Etapa c) em uma mistura de THF (10 mL) e água (2 mL) a 0°C. A
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127/167 mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 5 h. Após término da reação por TLC (EtOAc:Hexano 3:7), a mistura de reação foi concentrada ao vácuo para obter um resíduo bruto. O resíduo bruto foi dissolvido em água e extraído com éter (3 x 30 mL). A camada aquosa foi acidificada com solução de ácido cítrico a 10% e o sólido precipitado foi filtrado, lavado com água fria e seco ao vácuo para fornecer o composto título (1,3 g, rendimento: 93%) como um sólido marrom claro. MS (ESI): 737,2 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0226
b. (2-nitro-4-(4-metil piperazina-1 -carbonil)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-3-tert-butoxicarbonil-1 -metilureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila [0214]DIPEA (0,3 mL, 1,62 mmol), HATU (0,515 g, 1,355 mmol) e N-metil piperazina, 6 (0,09 mL, 0,813 mmol) foram adicionados a uma solução de ácido 4-((íbutoxicarbonil)(6-(3-(í-butoxicarbonil)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metilureído)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrobenzóico (0,4 g, 0,542 mmol) em DMF (5 mL) a 0°C em atmosfera de argônio. A mistura de reação resultante foi então deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada por 18 h. Após término da reação por TLC (MeOH:DCM 1:19), água foi adicionada à mistura de reação. O sólido bruto precipitado foi filtrado, seco e purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica de modo a obter o composto título (0,27 g, rendimento: 61%) como um sólido. MS (ESI): 819,1 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0227
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128/167
c. (2-amino-4-(4-metil piperazina-1 -carbonil)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-3-t-butoxicarbonil-1 -metilureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila [0215]Níquel Raney (0,06 g) foi adicionado a uma solução de (2-nitro-4-(4metil piperazina-1-carbonil)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-3-tbutoxicarbonil-1-metilureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila (0,27 g, 0,329 mmol) em uma mistura de MeOH (4 mL) e THF (4 mL) e a mistura de reação resultante foi agitada por 20 h a temperatura ambiente a uma atmosfera de hidrogênio. A mistura de reação foi filtrada através de leito de Celite. O filtrado foi concentrado, para fornecer o composto título bruto (0,22g, rendimento: 84%) como um sólido. MS (ESI): 789,4 [M+H]+.
NH2 Boc ' ,N_N
Figure BR112016008110B1_D0228
'V °CI
Boc Cl
Figure BR112016008110B1_D0229
OMe
OMe
Cl
TEA, DCM O°C-rt, 2h
O
Figure BR112016008110B1_D0230
NH Boc N_N
N'
I N Boc Cl
N^N^X^OMe
Cl'
OMe
d. (2-AcrIlamido-4-(4-metil piperazina-1 -carbonil)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-3-t-butoxicarbonil-1 -metilureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila [0216]A uma solução agitada de (2-amino-4-(4-metil piperazina-1carbonil)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-3-t-butoxicarbonil-1metilureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila (0,22 g, 0,278 mmol) em DCM anidro (5 mL) foi adicionado TEA (0,08 mL, 0,557 mmol) sob atmosfera de argônio a 0°C . A mistura resultante foi agitada por 15 min. e lentamente adicionada ao cloreto de acriloila (0,037g, 0,417 mmol) a 0°C. a mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 2 h. A mistura de reação foi saturada com uma solução saturada de carbonato de sódio e diluída com DCM. A camada aquosa foi separada e extraída com DCM (3 x 20 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada, e concentrada para obter um resíduo bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para
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129/167 fornecer o composto título (0,060g, rendimento: 25%) como um sólido. MS (ESI):
843,3 [M+H]+.
o
Figure BR112016008110B1_D0231
Boc Cl
ΝγΝ^τΟΜβ °ci-V
OMe
TFA, DCM O°C-rt, 18h
Figure BR112016008110B1_D0232
Cl
Ν'
I
N^N^A-OMe T cr
OMe
e. N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metilureído)pirimidin-4il)amino)-5-(4-metil piperazina-1 -carbonil)fenil)acrilamida [0217]TFA (0,2 mL) foi lentamente adicionado a uma solução agitada de (2acrilamido-4-(4-metil piperazina-1-carbonil)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)3-t-butilcarbonil-1-metilureído)pirimidin-4-il)carbamato de t-butila (0,060 g, 0,0711 mmol) em DCM seco (2 mL) sob atmosfera de argônio a 0°C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 18 h. O progresso da reação foi monitorado por LCMS, após término da reação, solventes em excesso foram removidos em pressão reduzida. O resíduo resultante foi diluído com DCM e saturado com uma solução aquosa saturada de NaHCO3. A camada aquosa foi separada e extraída com DCM (3 x 10 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada ao vácuo para obter um resíduo bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica para fornecer 70 mg do produto desejado com pureza HPLC de 35% que foi então purificada por HPLC de preparação (Condições: Coluna: Gemini NX C18 ( 21,2mm x 150 mm, tamanho de partícula 5 pm); (Fase móvel: A; 0,1% bicarbonato de amônio em água, B; ACN) para fornecer o composto desejado. O composto foi então diluído com diclorometano e água. A camada aquosa foi separada e extraída com DCM (3 x 10 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada ao vácuo para fornecer o composto título (0,005 g, rendimento: 11%) como um sólido branco. 1H-NMR (CD3OD, 400MHz): δ 8,41 (s, 1H), 7,79-7,76 (m,
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130/167
2H), 7,36 (dd, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,47-6,42 (m, 3H), 5,82 (d, 1H), 3,96 (s, 6H), 3,813,55 (m, 8H), 2,54 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), ; MS (ESI): 643,1 [M+H]+; HPLC: 97,26%, tempo de retenção: 6,19 min.
Exemplo 149 o
Figure BR112016008110B1_D0233
.OMe
OMe
3-acrilamido-4-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4il)amino)-N,N-dimetilbenzamida [0218]O composto título foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2K (Exemplo 148), substituindo dimetilamina na etapa (b) para fornecer o composto título (12,0 mg, rendimento: 6,1%) como um sólido esbranquiçado. 1H-NMR (CDsOD, 400MHz): δ 8,38 (s, 1H), 7,78- 7,72 (m, 2H), 7,34 (dd, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,46-6,38 (m, 3H), 5,80 (dd, 1H), 3,94 (s, 6H), 3,36 (s, 3H),
3,10 (s, 6H); MS (ESI): 587,9 [M+H]+; HPLC: 99,04%, tempo de retenção: 3,98 min.
Exemplo 150 O
O.
Figure BR112016008110B1_D0234
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)5-(4-etil piperazina-1-carbonil)fenil)acrilamida [0219]O composto título foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2K (Exemplo 148), substituindo 1-etil piperazina na etapa (b) para fornecer o composto título (10,0 mg, rendimento: 9,7%) como um sólido
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131/167 esbranquiçado. 1H-NMR (CD3OD, 400MHz): δ 8,41 (s, 1H), 7,76-7,79 (m, 2H), 7,36 (d, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,38-6,47 (m, 3H), 5,82 (d, 1H), 3,96 (s, 6H), 3,72-3,82 (m, 2H), 3,53-3,65 (m, 3H), 3,39 (s, 4H), 2,49-2,54 (m, 6H), 1,15 (t, 3H) ; MS (ESI): 657,0 [M+H]+; HPLC: 95,98%, tempo de retenção: 6,25 min.
Exemplo 151
O
Figure BR112016008110B1_D0235
Figure BR112016008110B1_D0236
Ácido N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4il)amino)-5-(4-isopropil piperazin-1 -il)fenil)acrilamida fosfórico [0220]O composto título foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2J (Exemplo 145), substituindo 4-(4-isopropil piperazin-1-il)-2nitroanilina (procedimento mostrado abaixo) na etapa (b) e omitindo (d) e (e) para fornecer a base livre do composto título (0,1 g, rendimento total: 9,7%) como um sólido esbranquiçado. MS (ESI): 643,1 [M+H]+. 85% H3PO4 foi lentamente adicionado a uma solução de N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(4-isopropil piperazin-1-il)fenil)acrilamida (0,1 g) em 95% de HF-MeOH (5mL). A mistura de reação resultante foi então deixada agitar a temperatura ambiente por 30 min., evaporado o solvente e triturada com dietil éter, seca ao vácuo para fornecer o composto título (0,16 g) como um sólido esbranquiçado. 1HNMR(DMSO-d6, 400MHz): δ 12,08 (s, 1H), 9,62 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,30 (d, 2H), 6,89 (d, 1H), 6,81 (d, 1H), 6,46-6,49 (m, 1H), 6,216,25 (m, 2H), 5,72 (d, 1H), 3,93 (s, 6H), 3,35-3,41 (m, 1H), 3,23 (s, 3H), 3,12-3,17 (m, 4H), 2,67-2,70 (m, 4H), 1,05-1,11 (m, 6H); MS (ESI): 643,3 (M +1); HPLC: 95,41%, tempo de retenção: 6,48 min.
Preparação de 4-(4-isopropil piperazin-1-il)-2-nitroanilina
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132/167
Acetona
Figure BR112016008110B1_D0237
NaBH(OAc)3 J DCM
Figure BR112016008110B1_D0238
O
Figure BR112016008110B1_D0239
a. 4-Isopropil piperazina-1 -carboxilato de t-butila [0221 ]Boc piperizina, 1 (10 g, 53,76 mmol) e acetona (4 mL) foi tomada em uma mistura de DCM seco (100 mL) e ácido acético (3,2 mL). Agitada a temperatura ambiente por 20 min. Na(OAc)3BH foi adicionado e agitação continuou (17 g, 80,2 mmol) a temperatura ambiente por 12 h. A mistura de reação foi diluída com água, extraída com acetato de etila (3 x 25 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada ao vácuo para obter o composto título bruto (13 g, bruto). MS (ESI): 229,2 [M+H]+.
VnY tfa DCM hn^J tfa o
b. 1-isopropil piperazina [0222]TFA (1 5mL) foi lentamente adicionada a uma solução agitada de 4isopropil piperazina-1-carboxilato de í-butila (13 g, bruto) em DCM seco (20 mL) sob atmosfera de argônio a 0°C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 18 h. A matéria de reação foi concentrada ao vácuo e o resíduo triturado com n-hexano e dietil éter e seco ao vácuo para fornecer o composto título (7 g, rendimento: 97%). MS (ESI): 129,1 [M+H]+.
no2
Figure BR112016008110B1_D0240
NHBoc
Br
Yn
TFA Pd2dt>a3, Xantphos CSjCOg Tolueno Dioxano, 100°C no2
X-NHBoc
Nj
c. (4-(4-isopropil piperazin-1 -il)-2-nitrofenil)carbamato de t-butila [0223]1 -isopropil piperazina (1,29 g, 5,66 mmol) e (4-bromo-2-nitrofenil) carbamato de í-butila (1,5 g, 4,71 mmol) foram tomados em uma mistura de tolueno
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133/167 seco (15 mL) e dioxano (2 mL) em um tubo de vedação em atmosfera de argônio a temperatura ambiente. O gás argônio foi purgado por 5-10 min. Então CS2CO3 (3,06 g, 9,43 mmol) e Xantphos (0,54 g, 0,94 mmol) foram adicionados e a mistura de reação resultante foi purgada com gás argônio por 5 min., seguido por Pd2(dba)3 (0,43 g, 0,47 mmol). A purga do gás de argônio continuou por mais 5 min. antes da vedação do frasco de reação. Então a mistura de reação foi aquecida a 100°C por 12 h. Após término da reação por TLC, a mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente, filtrada através do leito de celite e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (DCM:MeOH/97:3) para fornecer o composto título (1,2 g, rendimento: 70,5%). MS (ESI): 365,5 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0241
d. 4-(4-Isopropil piperazin-1-il)-2-nitroanilina [0224]TFA ( 3mL) foi lentamente adicionado a uma solução agitada de (4-(4isopropil piperazin-1-il)-2-nitrofenil)carbamato de t-butila (1,2 g, 3,29 mmol) em DCM seco (5 mL) sob atmosfera de argônio a 0°C. A mistura de reação resultante foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada por 12 h. O progresso da reação foi monitorado por LCMS, após término da reação, solventes em excesso foram removidos em pressão reduzida para fornecer a resíduo bruto. O resíduo bruto foi repetidamente lavado com éter para obter o composto título (1 g, rendimento: 80,6%) como um sólido vermelho. MS (ESI): 265,1 [M+H]+.
Exemplo - 154
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 157/205
134/167
Figure BR112016008110B1_D0242
Preparação de N-(5-(4-acetil piperazin-1-il)-2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)fenil)acrilamida [0225]N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metilureído)pirimidin-4il)amino)-5-(piperazin-1-il)fenil)acrilamida (Procedimento 2L, Exemplo 157) (8,6 mg, 0,014 mmol) e DIEA (7,5 pL, 0,043 mmol) foram agitados em DCM (1,0 mL) a temperatura ambiente em atmosfera de nitrogênio. Uma solução de cloreto de acetila (1,0 pL, 0,016 mmol) em DCM (11 uL) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. O solvente foi evaporado e o material resultante foi dissolvido em 400 pL de DMSO. A solução de DMSO foi diluída com 1,0 mL de MeOH e purificada por HPLC de preparação (água/ACN em condição de ácido fórmico) para fornecer o composto título (1,4 mg, rendimento: 15%). Ή-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 2,16 (s, 3 H) 3,65 - 3,80 (m, 4 H) 3,94 (s, 6 H) 5,76 (dd, 1 H) 6,15 (s, 1 H) 6,28 - 6,49 (m, 2 H) 6,78 - 6,82 (m, 1 H) 6,95 (dd, 2,89 Hz, 1 H) 7,28 - 7,38 (m, 2 H) 8,31 (d, 1 H) 8,58 (br. s., 1 H); ESI-MS: 643 [M+H]+.
Figure BR112016008110B1_D0243
Exemplos - 155 e 156
Figure BR112016008110B1_D0244
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 158/205
135/167 metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(1 -metoxietil)fenil)acrilamida e N-(2-((6-(3-(2,6dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(1-hidroxietil)fenil) [0226]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 4-(1-metoxietil)-2-nitroanilina (procedimento mostrado abaixo) na etapa (d) para fornecer o composto títulos após purificação empregando cromatografia flash sobre sílica eluindo com 90% a 100% de EtOAc/Hexano. A fração não polar foi N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(1-metoxietil)fenil)acrilamida (16 mg, rendimento: 6% em cinco etapas) Ή-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 1,46 (d, 3 H) 3,29 (s, 3 H) 3,96 (s, 6 H) 4,12 (d, 1 H) 4,40 (q, 1 H) 5,78 - 5,82 (m, 1 H) 6,33 - 6,50 (m, 3 H) 6,82 (s, 1 H) 7,27 (dd, 1 H) 7,55 - 7,64 (m, 2 H) 8,37 (d, 1 H); ESI-MS: 575 [M+H]+. A fração polar era N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído) pirimidin-4il)amino)-5-(1-hidroxietil)fenil) acrilamida (22 mg, rendimento: 8% em cinco etapas). Ή-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 1,53 (d, 3 H) 4,00 (s, 6 H) 5,83 (dd, 1 H) 6,29 - 6,56 (m, 3 H) 6,86 (s, 1 H) 7,38 (dd, 1 H) 7,57 (d, 1 H) 7,69 (s, 1 H) 8,40 (d, 1 H); ESI-MS: 661 [M+H]+.
Preparação de 4-(1-metoxietil)-2-nitroanilina
Figure BR112016008110B1_D0245
Figure BR112016008110B1_D0246
a. 1 -(4-flúor-3-nitrofenil)etanol [0227]1-(4-Flúor-3-nitrofenil)etanona (1,0 g, 5,46 mmol) foi dissolvida em MeOH (15,0 mL) e agitada em um banho de gelo.. NaBH4 (0,62 g, 16,0 mmol) foi adicionado em porções. Quando do término da adição, a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 10 minutos. A mistura de reação foi derramada em EtOAc e salmoura. A camada orgânica foi separada, seca sobre MgSO4 e evaporada. O material resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 159/205
136/167 eluindo com 20% a 70% EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (881 mg, rendimento: 87%). 1H-NMR (400 MHz, CDCb) δ 1,53 (d,4 H) 4,99 (dd, 1 H) 7,22 7,33 (m, 1 H) 7,66 (ddd, 1 H) 8,09 (dd, 1 H)
Figure BR112016008110B1_D0247
b. 1 -flúor-4-( 1 -metoxietil)-2-nitrobenzeno [0228]1-(4-flúor-3-nitrofenil)etanol (870 mg, 4,7 mmol) foi dissolvido em MeOH (10 mL) e ácido sulfúrico concentrado (2,5 mL, 47 mmol) foi adicionado cuidadosamente. A mistura de reação foi aquecida a 150°C usando micro-ondas (Iniciador Biotage) por 5 minutos. Após resfriamento a temperatura ambiente, a mistura de reação foi derramada em EtOAc/água. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre MgSO4 e evaporada. O material resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 0% a 50% EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (664 mg, rendimento: 71%). 1H-NMR (400 MHz, CDCb) δ 1,45 (d, 3 H) 3,27 (s, 3 H) 4,36 (q, 1 H) 7,28 - 7,32 (m, 1 H) 7,56 - 7,63 (m, 1 H) 7,98 - 8,04 (m, 1 H).
Figure BR112016008110B1_D0248
Figure BR112016008110B1_D0249
NH,
c. 4-(1-metoxietil)-2-nitroanilina [0229]1-Flúor-4-(1-metoxietil)-2-nitrobenzeno (664 mg, 3,33 mmol) foi agitado em THF (10 mL). NH4OH (0,39 mL, 10,0 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. Adicionalmente, 780 pL de NH4OH foram adicionados e a mistura de reação foi aquecida a 120°C por 10 minutos empregando micro-ondas (Iniciador Biotage) e então a 140°C por 50
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 160/205
137/167 minutos. Após resfriamento a temperatura ambiente, a mistura de reação foi derramada em EtOAc/água. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre MgSCM e evaporada. O material resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 0% a 50% de EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (290 mg, rendimento: 44%). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 1,42 (d, 3
H) 3,22 (s, 3 H) 4,24 (q, 1 H) 6,05 (br. s„ 2 H) 6,83 (d, 1 H) 7,38 (dd, 2,01 Hz, 1 H) 8,04 (d, 1 H)
Procedimento 2L: Exemplo -157
HO2
Figure BR112016008110B1_D0250
DMF
Micro-ondas 200°C, 1 min. rendimento: 92%
Tolueno, 10D°C, 5 h cl N rendimento: 30%
Pdjdbaj, Xantohos, <'''Ή Ce!COJ' n J
Boc'
Figure BR112016008110B1_D0251
NOZ .c
1M Hidrazina em THF- . .
THF, rt, 5 h. ΒκΗΉ rendimento: 93%
SEM Cl
A A o.
XI
Figure BR112016008110B1_D0252
PdudtHj, Xantphos, bqq·
CajCOj ,
Tolueno, 100QC, 5 h, rendimento: 30%
NH2 Büc __ ÀÁA.
liT Ϊ l
Ni Raney, gas H2, XzJ t.
j SEM Çl r
Boc
Figure BR112016008110B1_D0253
NO2 Bqc (Bdc),O, DMAP λ Jj J |l J,
THF, rt, 1h [-- Ν' - SEM Cl THRMaOH. rt, 12li , .
Rendi- brut° BoC-nH -n- w
mento: 32%
Boc/
Figure BR112016008110B1_D0254
TEA. THF. fl °C. 1h Rendimento: 42% Γ 7
Figure BR112016008110B1_D0255
I.TFA.DCM |
IjOH. DCM rendimento: 90% hn.^.J
Figure BR112016008110B1_D0256
Preparação de N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-( piperazin-1 -il)fenil)acrilamida
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 161/205
138/167
Figure BR112016008110B1_D0257
a. 2-(4-bromo-2-nitrofenil)isoindolina-1,3-diona [0230]4-bromo-1-flúor-2-nitrobenzeno (2,0 g, 9,1 mmol) e 1,3-dioxoisoindolin2-ido de potássio (2,0 g, 10,9 mmol) foram colocados no frasco de micro-ondas (0,5-2 mL) e NMP (12,0 mL) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida a 200°C usando um micro-ondas (Iniciador, Biotage) por 1 min. Após resfriamento para temperatura ambiente, a mistura de reação foi adicionada gota a gota à água de agitação o que resultou na formação de precipitado. O sólido foi coletado, lavado com água e seco sob corrente de nitrogênio para fornecer o composto título (2,89 g, rendimento: 92%). 1H-NMR (400 MHz, CDCL) δ 7,26 (s, 2 H) 7,43 (d, 2H) 7,81 - 7,87 (m, 3H) 7,91 (dd, ,2H) 7,95 - 8,05 (m, 3H) 8,33 (d, 1H).
NH
Figure BR112016008110B1_D0258
Bocx
Pd2dba3, Xantphos, Cs?CO3,
Tolueno, 100SC, Boc' h, rendimento:
30%
Figure BR112016008110B1_D0259
b. 4-(4-(1,3-Dioxoisoindolin-2-il)-3-nitrofenil) piperazina-1-carboxilato de tbutila [0231]2-(4-bromo-2-nitrofenil)isoindolina-1,3-diona (500 mg, 1,4 mmol), piperazina-1-carboxilato de t-butila (402 mg, 2,2 mmol), Pd2(dba)3 (66,0 mg, 0,07 mmol), Xantphos (83 mg, 144 mmol) e Cs2CO3 (939 mg, 2,9 mmol) foram colocados em um frasco de reação (frasco de reação de micro-ondas 10-20 mL) e purgados com nitrogênio. Tolueno (5,0 mL) foi adicionado e nitrogênio foi borbulhado por 10 minutos. A mistura de reação foi aquecida a 100°C por 5 horas. O aquecimento foi
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 162/205
139/167 parado e a mistura resfriada para temperatura ambiente. A mistura de reação foi filtrada através de uma almofada de celite e o filtrado foi evaporado. O material restante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 20% a 70% de EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (275 mg, rendimento: 42%). 1HNMR (400 MHz, CDCls) δ 1,51 (s, 6H) 3,28 - 3,39 (m, 2H) 3,57 - 3,70 (m, 2H) 7,20 7,24 (m, 1H) 7,35 (d, 1H) 7,66 (d, 1H) 7,75 - 7,87 (m, 1H) 7,96 (dd, 1H).
0 no2
NH,
Figure BR112016008110B1_D0260
Boc'
1M Hidrazina em THF, THF, RT, 5 h, rendimento: 93%
Figure BR112016008110B1_D0261
Boc'
c. 4-(4-amino-3-nitrofenil) piperazina-1-carboxilato de t-butila [0232]A uma suspensão de 4-(4-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)-3-nitrofenil) piperazina-1-carboxilato de t-butila (275,4 mg, 0,6 mmol) em THF (5,0 mL) foi adicionada 1,0 M Hidrazina em THF (1,8 mL, 1,8 mmol) a temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de reação foi derramada em EtOAc/água e a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre MgSO4 e evaporada. O óleo resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 20% a 70% de EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (182 mg, 93 % rendimento). 1H-NMR (400 MHz, DMSOde) δ 1,42 (s, 9 H) 2,89 - 2,99 (m, 4 H) 3,44 (d, 4 H) 6,98 (d, 1 H) 7,22 (s, 2H) 7,26 7,38 (m, 2 H)
Figure BR112016008110B1_D0262
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 163/205
140/167
d. 4-(4-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-((2(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrofenil) piperazina-1carboxilato de t-butila [0233]1-(6-Cloropirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-((2(trimetilssilil)etóxi)metil)ureia (175 mg, 0,34 mmol), 4-(4-amino-3-nitrofenil) piperazina-1-carboxilato de t-butila (90 mg, 0,28 mmol), Pd2(dba)3 (13 mg, 0,014 mmol), Brettphos (13 mg, 0,028 mmol) e t-butóxido de sódio (54 mg, 0,56 mmol) foram colocados em um frasco de reação (2 a 5 mL) e purgados com nitrogênio. Tolueno (1,0 mL) foi adicionado e nitrogênio foi borbulhado por 5 minutos e então a mistura de reação foi aquecida a 100°C por toda noite. O aquecimento foi parado e a mistura resfriada a temperatura ambiente. A mistura de reação foi filtrada através da almofada de Celite®. O filtrado foi evaporado e o material resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 20% a 70% de EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (102,4 mg, rendimento: 45%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,01 (s, 9 H) 0,85 - 0,98 (m, 2 H) 1,50 (s, 9 H) 3,03 (s, 3 H) 3,17 (br. s., 4 H) 3,563,66 (m, 4 H) 3,75 - 3,97 (m, 8 H) 5,22 (s, 2 H) 6,50 (s, 1 H) 6,95 (s, 1 H) 7,65 (s, 1 H) 8,46 (s, 1 H)
Figure BR112016008110B1_D0263
e. 4-(4-((t-butoxicarbonil) (6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil) -1 -metil-3-((2(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrofenil) piperazina-1carboxilato de t-butila
4-(4-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-((2(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrofenil) piperazina-1Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 164/205
141/167 carboxilato de t-butila (162 mg,0 0,2 mmol), dicarbonato de di-t-butila (53 mg, 0,24 mmol) e DMAP (4,9 mg, 0,04 mmol) foram agitados em THF (2,0 mL) a temperatura ambiente em atmosfera de nitrogênio por 1 hora. A mistura de reação foi derramada em EtOAc e água. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre MgSO4 e evaporada. O material resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 10% a 70% de EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (148 mg, rendimento: 82%). Ή-NMR (400 MHz, CDCls) δ 0,01 (s, 9 H) 0,80 - 1,04 (m, 2 H) 1,4 (s, 9 H) 1,49 (s, 9 H) 3,12 (s, 3 H) 3,19 - 3,36 (m, 4 H) 3,50 - 3,70 (m, 4 H) 3,83 - 3,92 (m, 9 H) 3,96 (d, 1H) 5,14 (d, 1 H) 5,42 (d, 1 H) 6,46 (s, 1 H) 7,05 - 7,19 (m, 2 H) 7,58 (d, 1 H) 8,03 (s, 1 H) 8,29 (s,1 H)
Boc' o
,N---J
Figure BR112016008110B1_D0264
Níquel Raney, gás H2,
Hr/MeuH, rt, izn bruto
Figure BR112016008110B1_D0265
Figure BR112016008110B1_D0266
f. 4-(3-amino-4-((t-butoxicarbonil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metil-3-((2-(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-il)amino)fenil) piperazina-1carboxilato de t-butila [0234]4-(4-((T-butoxicarbonil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3((2-(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-il)amino)-3-nitrofenil) piperazina-1carboxilato de t-butila (149 mg, 0,164 mmol) foi agitada em THF (1,5 mL) e MeOH (1,5 mL). Cinco gotas de suspensão de níquel Raney em água foram adicionadas. A solução foi agitada em atmosfera de hidrogênio a temperatura ambiente por toda noite. A reação foi filtrada através de uma almofada de Celite® e o filtrado foi concentrado de modo a fornecer o composto título bruto que foi tomado na próxima etapa sem purificação adicional. ESI-MS: 877 [M+H]+.
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 165/205
142/167
Figure BR112016008110B1_D0267
g. 4-(3-acrilamido-4-((t-butoxicarbonil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metil-3-((2-(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-il)amino)fenil) piperazina-1carboxilato de t-butila [0235]4-(3-amino-4-((T-butoxicarbonil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metil-3-((2-(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-il)amino)fenil) piperazina-1carboxilato de t-butila (95 mg, 0,11 mmol) foi dissolvida em THF (1,5 mL) e agitada por toda noite em atmosfera de nitrogênio. DIEA (57 pL, 0,30 mmol) seguido por cloreto de acriloila (13 pL, 0,16 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi derramada em EtOAc e salmoura. A camada orgânica foi separada, seca sobre MgSO4 e evaporada. O material resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 30% a 100% de EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (47 mg, rendimento: 47%). 1H-NMR (400 MHz, CDCls) δ 0,02 (s, 9 H) 0,79 - 1,04 (m, 2 H) 1,36 (s,9 H) 1,49 (s, 9 H) 3,08 (s, 4 H) 3,05 (s, 3 H) 3,25 (br. s., 4 H) 3,64 (br. s., 4 H) 3,86 (s, 6 H) 5,27 (s, 1 H) 5,67 - 5,79 (m, 1 H) 6,15 - 6,56 (m, 2 H) 6,48 (s, 1 H) 7,03 7,14 (m, 1 H) 7,87 - 8,09 (m, 2 H) 8,19 - 8,29 (br. s
Figure BR112016008110B1_D0268
Figure BR112016008110B1_D0269
h. N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metilureído)pirimidin-4il)amino)-5-( piperazin-1-il)fenil)acrilamida
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 166/205
143/167 [0236]4-(3-Acrilamido-4-((t-butoxicarbonil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1-metil-3-((2-(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído)pirimidin-4-il)amino)fenil) piperazina-1-carboxilato de í-butila (59 mg, 0,06 mmol) foi agitada em DCM (2,0 mL). TFA (97 pl, 1,3 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a temperatura ambiente por6 horas. A mistura de reação foi evaporada. O resíduo remanescente foi dissolvido em DCM e lavado com NaHCO3 saturado, seco sobre MgSO4 e evaporado. O material resultante foi dissolvido em THF (2,0 mL) e NH4OH (74 pL, 1,9 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 5 minutos. A mistura de reação foi evaporada de modo a obter o composto título (34 mg, rendimento: 90%) que foi tomado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2,62 (br. s., 4 H) 3,08 - 3,27 (m, 7 H) 3,77 - 4,03 (m, 6 H) 5,72 (d, 1 H) 6,11 - 6,34 (m, 2 H) 6,40 - 6,62 (m, 1 H) 6,70 - 6,98 (m, 2 H) 7,22 - 7,37 (m, 2 H) 8,32 (s, 1 H) 8,70 (s, 1 H) 9,58 (br. s., 1 H) 12,06 (s, 1 H); ESI-MS: 601 [M+H]+.
Exemplo - 158
Figure BR112016008110B1_D0270
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)5-((2-hidroxietil)(metil)amino)fenil)acrilamida [0237]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2L (Exemplo 157), substituindo 2-((t-butildimetilssilil)óxi)-Nmetiletanamina, Pd(dba)2 e Ruphos na etapa (b), e Pd(dba)2, Brettphos e t-butóxido de sódio na etapa (d) para fornecer o composto título (64 mg, rendimento: 16% em sete etapas) 1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 3,04 (s, 3 H) 3,26 (s, 3 H) 3,51 (s, 2
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 167/205
144/167
H) 3,69 - 3,81 (m, 2 H) 3,94 (s, 6 H) 5,71 - 5,78 (m, 1 H) 6,03 - 6,10 (m, 1 H) 6,26 6,45 (m, 2 H) 6,72 (d, 1 H) 6,79 (s, 1 H) 7,04 - 7,10 (m, 1 H) 7,23 (d, 1 H) 8,28 (d, 1
H); ESI-MS: 590 [M+H].
Preparação de 2-((t-butildimetilssilil)óxi)-N-metiletanamina
HO
Figure BR112016008110B1_D0271
DCM, RT, por toda noite, rendimento: 56%
Figure BR112016008110B1_D0272
TBDMS.
Figure BR112016008110B1_D0273
a. 2-((t-butildimetilssilil)óxi)-N-metiletanamina [0238]2-(Metilamino)etanol (1,0 g, 13,3 mmol) foi agitado em DCM (25,0 mL) sob atmosfera de nitrogênio. DIEA (3,23 mL, 18,6 mmol) seguido por tbutilclorodimetilssilano (2,0 g, 13,3 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por toda noite. A mistura de reação foi derramada em éter/água. A camada aquosa foi extraída com éter três vezes. A camada orgânica combinada foi seca sobre MgSO4 e evaporada e o restante do material foi seco sob vácuo elevado para fornecer o composto título (1,4 g, rendimento: 56%).
1H-NMR (400 MHz, CDCls) δ 0,08 (s, 6 H) 0,91 (s, 9 H) 1,93 (br. s., 1 H) 2,48 (s, 3 H) 2,71 (t, 2 H) 3,75 (t, 2 H).
Figure BR112016008110B1_D0274
Sal de TFA de N-(5-(1-aminoetil)-2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metilureído)pirimidin-4-il)amino)fenil)acrilamida [0239]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123) substituindo (1-(4-amino-3-nitrofenil)etil)carbamato
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 168/205
145/167 de t-butila, Pd(dba)2, Brettphos e t-butóxido de sódio na etapa (d) para fornecer a base livre que foi convertida em sal de TFA. A base livre foi dissolvida em DCM e 1 equivalente de TFA foi adicionado. A mistura foi evaporada e trituração com éter forneceu o composto título (65 mg, rendimento: 23% em cinco etapas). 1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 1,67 (d, 3 H) 3,33 - 3,37 (s, 3 H) 3,92 - 3,97 (s, 6 H) 4,49 (m, 1 H) 5,75 - 5,83 (m, 1 H) 6,30 - 6,50 (m, 3 H) 6,81 (s, 1 H) 7,36 (dd,, 1 H) 7,69 (d, 1 H) 7,82 (d, 1 H) 8,36 - 8,43 (m, 1 H); ESI-MS: 560 [M+H].
Preparação de (1-(4-amino-3-nitrofenil)etil)carbamato de í-butila h2n.
Figure BR112016008110B1_D0275
HNO3 pirogenado , Conc. h2SO4
0°C, 45min rendimento: 96%
H,N
Figure BR112016008110B1_D0276
a. 1 -(4-flúor-3-nitrofenil)etanamina [0240]HNO3 pirogenado (0,48 mL, 10,8 mmol) foi adicionado cuidadosamente ao H2SO4 concentrado, resfriado em banho de gelo (3,6 mL, 68,2 mmol). À mistura foi adicionada 1-(4-fluorfenil)etanamina (1,0 g, 7,2 mmol) gota a gota. A mistura de reação foi agitada com resfriamento por 50 minutos. A mistura de reação foi derramada em gelo e basificada com solução 3M NaOH (24 mL, 72,00 mmol) para cerca de pH8,0. A solução alcalina foi extraída com DCM duas vezes. A camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 e evaporada para fornecer o composto título (1,3 g, rendimento: 96%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,41 (d, 6 H)
4,25 (q, 1 H) 7,21 - 7,26 (m, 1 H) 7,67 (ddd, 1 H) 8,10 (dd, 1 H) h7n
Figure BR112016008110B1_D0277
(Boc)2O, diea, dmap THF. rt. 2h rendimento: 75%
Figure BR112016008110B1_D0278
b. (1-(4-flúor-3-nitrofenil)etil)carbamato e t-butila
A suspensão de 1-(4-flúor-3-nitrofenil)etanamina (1,3 g, 6,9 mmol) em THF
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 169/205
146/167 (10,0 mL) foi adicionado DIEA (2,4 mL 13,8 mmol) seguido por dicarbonato de di-tbutila (1,9 mL, 8,3 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente em atmosfera de nitrogênio por 2 horas. A mistura de reação foi derramada em EtOAc/água e a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre MgSO4 e evaporada. O material resultante purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 10% a 70% EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (1,5 g, rendimento: 75%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,37 - 1,50 (m, 12 H) 4,81 (br. s., 2H) 7,23 - 7,26 (m, 1 H) 7,59 (ddd, 1 H) 8,01 (dd, 1 H).
Figure BR112016008110B1_D0279
c. (1-(4-amino-3-nitrofenil)etil)carbamato de t-butila (1-(4-Flúor-3-nitrofenil)etil)carbamato de t-butila (500 mg, 1,75 mmol) foi agitado em THF (2 mL). NH4OH (0,978 mL, 7,0 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi aquecida a 150°C por 30 minutos usando o micro-ondas (Iniciador Biotage). NH4OH (0,6 00 mL) foi adicionado e então aquecido a 180°C. Após resfriamento a temperatura ambiente, a mistura de reação foi derramada em EtOAc/água. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre MgSO4 e evaporada. O material resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 0% a 50% de EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (376 mg, rendimento: 76%) Ή-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,43 - 1,48 (m, 12 H) 4,71 (br. s., 2
H) 6,79 (d, 1 H) 7,34 (dd, 1 H) 8,05 (d, 1 H).
Exemplo - 161
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 170/205
147/167
Η,Ν
Figure BR112016008110B1_D0280
2TFA
Preparação de 2 sal de TFA N-(5-(4-(2-aminoetil) piperazin-1-il)-2-((6-(3-(2,6dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metilureído)pirimidin-4-il)amino)fenil)acrilamida
Figure BR112016008110B1_D0281
□aBH3(CN), Boc^ ,
THF, MeOH, rt, 12h □
H
Rendimento: 54%
O
Boc^
Figure BR112016008110B1_D0282
O
a. (2-(4-(3-acrilamido-4-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 metilureído)pirimidin-4-il)amino)fenil) piperazin-1-il)etil)carbamato de t-butila [0241]A uma solução de N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(piperazin-1-il)fenil)acrilamida 2,2,2-trifluoracetato (Procedimento 2L, Exemplo 157) (30 mg, 0,042 mmol) em THF (1,0 mL) e MeOH (1,0 mL) foi adicionado (2-oxoetil)carbamato de t-butila (13 mg, 0,08 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 10 minutos. Cianoboroidreto de sódio (7,0 mg, 0,12 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por toda noite. Solvente foi evaporado e solução saturada de NaHCO3 foi adicionada. A mistura foi extraída três vezes com DCM. A camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 e evaporada. O material remanescente foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 0% a 15% MeOH em DCM para fornecer o composto título (17 mg, rendimento: 54%) ESIPetição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 171/205
148/167
Boc^
Figure BR112016008110B1_D0283
.O.
96%
TFA DCM Rendimento:
Figure BR112016008110B1_D0284
Sal de TFA de N-(5-(4-(2-aminoetil) piperazin-1-il)-2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)fenil)acrilamida [0242](2-Acrilamido-4-(4-(2-((t-butoxicarbonil)amino)etil) piperazin-1il)fenil)(6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metil-3-((2(trimetilssilil)etóxi)metil)ureído) pirimidin-4-il)carbamato de í-butila (17 mg, 0,017 mmol) foi agitado em DCM (1,0 mL). TFA (200 pL, 2,6 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. Solvente foi evaporado e o material remanescente foi triturado com éter. O sólido resultante foi coletado e lavado com éter e seco sob corrente de nitrogênio para fornecer o composto título (15 mg, rendimento: 96%). 1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 2,90 (br. s., 6 H) 3,15 3,22 (m, 2 H) 3,33 - 3,41 (m, 4 H) 3,94 (s, 6 H) 5,74 - 5,79 (m, 1 H) 6,17 (s, 1 H) 6,32 - 6,44 (m, 2 H) 6,81 (s, 1 H) 6,92 - 6,98 (m, 1 H) 7,35 (d, 2 H) 8,32 (d, 1 H); ESI-MS: 644 [M+H]+.
Exemplo - 162
2,2,2-Trifluoracetato de N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metilureído)pirimidin-4-il)amino)-3-fluorofenil)acrilamida [0243]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 172/205
149/167
Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 2-flúor-6-nitroanilina, Pd(dba)2,
Brettphos e t-butóxido de sódio na etapa (d) para fornecer a base livre, que foi convertida em sal de TFA. A base livre foi dissolvida em DCM e 1 equivalente de
TFA foi adicionado. A mistura foi evaporada e trituração com éter forneceu o composto título (47 mg, rendimento: 22% em quatro etapas). 1H-NMR (400 MHz,
MeOH-d4) δ 3,30 (s, 3 H) 3,93 (s, 6 H) 5,72 - 5,78 (m, 2 H) 6,21 - 6,29 (m, 1 H) 6,23 (d, 1 H) 6,27 (d, 1 H) 6,32 - 6,40 (m, 1 H) 6,56 (dd, 1 H) 6,90 (s, 1 H) 7,10 (t, 1 H)
7,25 - 7,37 (m, 1 H) 7,76 (d, 1 H) 8,32 (s, 1 H) 8,89 (s, 1 H) 9,66 (s, 1 H) 11,96 (s, 1
H) ; ESI-MS: 535 [M+H] +
Exemplo - 163 o
2,2,2-T rifluoracetato de N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(2-(dimetilamino)etil)fenil)acrilamida [0244]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 4-amino-3-nitrofenotilcarbamato de tbutila (procedimento mostrado abaixo), Pd(dba)2 e Brettphos na etapa (d) para fornecer sal de TFA bruto de amina de término livre, que foi empregada como está na etapa adicional que se segue. A uma solução de 2,2,2-trifluoroacetato de N-(5-(2aminoetil)-2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-3-(hidroximetil)-1metilureído)pirimidin-4-il)amino)fenil)acrilamida (9,2 mg, 0,014 mmol) em THF (1,0 mL) e MeOH (1,0 mL) foi adicionado formaldeído (5,1 pL, 0,068 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 10 minutos. Cianoboroidreto de sódio (3,4 mg, 0,055 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 173/205
150/167 ambiente por toda noite. O solvente foi evaporado e a solução saturada de NaHCO3 foi adicionado. A mistura foi extraída três vezes com DCM. A camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 e evaporada. O material remanescente foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 10% a 70% MeOH em DCM para fornecer base livre. A uma solução de base livre em DCM,TFA(11 pL, 0,014 mmol) foi adicionado. O solvente foi evaporado e seco em alto vácuo para fornecer o composto título (6,3 mg, rendimento: 66%). 1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 2,97 (s, 6 H) 3,10 (dd, 2 H) 3,34 (s, 3 H) 3,45 (dd, 2 H) 3,94 (s, 6 H) 4,63 - 4,63 (m, 1 H) 5,76 - 5,81 (m, 1 H) 6,31 - 6,48 (m, 3 H) 6,81 (s, 1 H) 7,25 (dd, 1 H) 7,55 (d, 1 H)
7,62 - 7,72 (m, 1 H) 8,35 (s, 1 H) ; ESI-MS: 588 [M+H].
Preparação de 4-amino-3-nitrofenetilcarbamato de í-butila ,F
Figure BR112016008110B1_D0285
H,N
i. HNO3 pirogenado, H2SO4 conc., 0°C, 45 min. rendimento 96% ii. (Boc)2O, DIEA, THF, o/n rendimento: 28% em 2 etapas
BoCs.
Figure BR112016008110B1_D0286
a. 4-flúor-3-nitrofenetilcarbamato de t-butila [0245]2-(4-fluorofenil) etanamina (1,0 g, 7,2 mmol) foi dissolvido em H2SO4 concentrado (4,0 mL, 75 mmol) e resfriado em banho de gelo. HNO3 pirogenada (0,48 mL, 10,8 mmol) foi adicionada cuidadosamente gota a gota à mistura. A mistura de reação foi agitada com resfriamento por 45 minutos e derramada em gelo. A mistura foi basificada com solução 3M NaOH (60 mL, 180 mmol) e a solução alcalina foi extraída com DCM três vezes. A camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 e evaporada para fornecer amina bruta. O material bruto foi dissolvido em THF (15,0 mL). Dicarbonato de Di-t-butila (1,7 g, 7,9 mmol) e DIEA (2,5 mL, 14,4 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 12 horas. A mistura de reação foi derramada em água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre MgSO4 e evaporada. O material resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 0%
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 174/205
151/167 a 20% EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (569 mg, rendimento: 28%).
Ή-NMR (400 MHz, CDCls) δ 1,44 (s, 9 H) 2,88 (t, 2 H) 3,40 (d, 2 H) 7,24 (t, 1 H) 7,42
- 7,54 (m, 1 H) 7,89 (dd, 1 H).
í/
Boc^
Figure BR112016008110B1_D0287
NH4OH, MeOH micro-ondas, 150°C 1 hora, rendimento: 45%
Boc^
Figure BR112016008110B1_D0288
b. 4-Amino-3-nitrofenetilcarbamato de t-butila [0246]4-flúor-3-nitrofenetilcarbamato de t-butila (569 mg, 2,00 mmol) foi agitado em THF (2,64 mL). NH4OH (2,50 mL, 17,97 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi aquecida a 150°C por 30 minutos usando micro-ondas (Biotage
Initiator). NH4OH (0,600 mL) foi adicionado e então aquecido a 180°C. Após resfriamento a temperatura ambiente, a mistura de reação foi derramada em
EtOAc/água. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre MgSO4 e evaporada. O material resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 0% a 30% EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (257 mg, rendimento: 46%) Ή-NMR (400 MHz, CDCls) δ 1,44 (s, 9 H) 2,73 (t, J = 7,03 Hz, 2
H) 3,34 (m, 2 H) 4,46 - 4,62 (m, 1 H) 6,78 (d, J = 8,53 Hz, 1 H) 7,24 (dd, J = 8,53,
1,76 Hz, 1 H) 7,94 (d, J = 1,76 Hz, 1 H).
Exemplo - 164 o
Figure BR112016008110B1_D0289
2,2,2-T rifluoracetato de N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(2-(dimetilamino)etil)fenil)acrilamida
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 175/205
152/167 [0247]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2L (Exemplo 157), substituindo 2-nitro-4-(2-((tetraidro-2H-piran-2il)óxi)etóxi)anilina (preparação mostrada a seguir) e t-butóxido de sódio na etapa (d) para fornecer o composto título (7 mg, rendimento: 2,7% por 4 etapas). 1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 3,28 (s, 3 H) 3,88 - 3,97 (m, 8 H) 4,06 - 4,14 (m, 2 H) 5,76 (dd, 1 H) 6,12 (s, 1 H) 6,32 - 6,46 (m, 2 H) 6,79 (s, 1 H) 6,91 (dd, 1 H) 7,34 - 7,41 (m, 2 H) 8,31 (d, 1 H); ESI-MS: 577 [M+H]+.
Preparação de 2-nitro-4-(2-((tetraidro-2H-piran-2-il)óxi)etóxi)anilina
Figure BR112016008110B1_D0290
THPX
Figure BR112016008110B1_D0291
-Br
K2CO3, DMF, 50°C 6hr Rendimento: 38%
THP'
Figure BR112016008110B1_D0292
a. 2-Nitro-4-(2-((tetraidro-2H-piran-2-il)óxi)etóxi)anilina [0248]4-amino-3-nitrofenol (2,0 g, 12,977 mmol) foi dissolvido em DMF (20 mL) e carbonato de potássio (3,59 g, 25,953 mmol) foi adicionado. À mistura foi adicionado 2-(2-bromoetoxi)tetraidro-2H-piran (2,55 mL, 16,87 mmol) e a mistura de reação foi agitada a 50°C por 6 horas e então por 3 dias a temperatura ambiente. A mistura de reação foi derramada em EtOAc/salmoura. A camada aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc. A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura três vezes, seca sobre MgSO4 e evaporada. O material resultante foi purificado por cromatografia flash sobre sílica eluindo com 5% a 40% de EtOAc/Hexano para fornecer o composto título (1,4 g, rendimento: 38%). 1H-NMR (400 MHz, CDCL) δ
1,51 - 1,68 (m, 4 H) 1,71 - 1,89 (m, 2 H) 3,46 - 3,61 (m, 1 H) 3,72 - 3,99 (m, 2 H) 4,03 - 4,24 (m, 3 H) 4,64 - 4,79 (m, 1 H) 6,78 (d, 1 H) 7,09 - 7,17 (m, 1 H) 7,60 (d, 1 H).
Exemplo - 165
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 176/205
153/167
Figure BR112016008110B1_D0293
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)3-metilfenil)acrilamida [0249]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 2-metil-6-nitroanilina, Pd(dba)2, Brettphos e t-butóxido de sódio na etapa (d) para fornecer o composto título (3,0 mg, rendimento: 6% em cinco etapas). 1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 3,52 (m, 3 H) 3,95 (m, 6 H) 5,69 (dd, 1 H) 6,21 (dd, 1 H) 6,46 (dd, 1 H) 6,64 (d, 1 H) 6,73 (d, 1 H) 6,82 (s, 1 H) 7,11 (t, 1 H) 8,06 (d, 1 H) 8,55 (d, 1 H) ; ESI-MS: 531 [M+H] +
Exemplo - 166
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)3-metoxifenil)acrilamida [0250]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 2-metóxi-6-nitroanilina, Pd(dba)2, Brettphos e í-butóxido de sódio na etapa (d) para fornecer o composto título (33,0 mg, rendimento: 6,1% em cinco etapas). 1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 3,76 (s, 3 H) 3,93 (s, 6 H) 5,70 (dd, 1 H) 6,23 (d, 1 H) 6,52 (d, 1 H) 6,88 - 6,95 (m, 2 H) 7,27 (t,
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 177/205
154/167
H) 7,44 - 7,56 (m, 1 H) 8,28 (s, 1 H) 8,57 (br. s., 1 H) 9,40 - 9,57 (m, 1 H) 12,15 (s, 1 H) ; ESI-MS: 547 [M+H] +
Exemplo - 167
Figure BR112016008110B1_D0294
N-(3-cloro-2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4il)amino)fenil)acrilamida [0251]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 2-cloro-6-nitroanilina, Pd(dba)2, Brettphos e í-butoxido de sódio na etapa (d) para fornecer o composto título (11,0 mg, rendimento: 5% em cinco etapas). 1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 3,29 (s, 3 H) 3,94 (s, 6 H) 5,71 - 5,75 (m, 1 H) 6,23 (dd, 1 H) 6,56 (dd, 1 H) 6,90 (s, 1 H) 7,31 7,39 (m, 2 H) 7,94 (d, 1 H) 8,30 (s, 1 H) 9,01 (s, 1 H) 9,51 - 9,70 (m, 1 H) 12,04 (s, 1 H) ; ESI-MS: 551 [M+H]+.
Exemplo - 168
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 178/205
155/167
A
Figure BR112016008110B1_D0295
Preparação de Sal de TFA de N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1metilureído)pirimidin-4-il)amino)-5-(4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il)fenil)acrilamida [0252]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no
Exemplo 161, substituindo 2-((í-butildimetilssilil)óxi)acetaldeído na etapa (a) para fornecer o composto título (13 mg, rendimento: 42%, duas etapas) 1H-NMR (400
MHz, MeOH-d4) δ 3,14 - 3,20 (m 2 H) 3,35 - 3,37 (m, 2H) 3,73 - 3,76 (m, 2 H) 3,84 3,96 (m, 10 H) 5,75 - 5,79 (m, 1 H) 6,24 (s, 1 H) 6,37 - 6,47 (m, 2 H) 6,81 (s, 1 H)
6,99 (dd, 1 H) 7,37 - 7,46 (m, 2 H) 8,34 - 8,36 (m, 1 H) ; ESI-MS: 645 [M+H] +.
Exemplo - 170 O
Cl .OMe
OMe (E)-3-cloro-N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin4-il)amino)fenil)acrilamida [0253]O composto título foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2A (Exemplo 100), modificação da etapa (i) para o seguinte
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156/167 procedimento: A uma solução de 1-(6-((2-aminofenil)amino) pirimidin-4-il)-3-(2,6dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureia (10 mg, 0,022 mmol), trietilamina (10,9 mg,
0,11 mmol), e ácido (£)-3-cloroacrílico (2,76 mg, 0,026 mmol) em DCM (0,4 mL, 6,22 mmol), resfriada para 0°C, foi adicionado 2,4,6-trioxido de 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6trioxatrifosfinano (0,023 mL, 0,039 mmol, solução a 50% em EtOAc). A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 4 h e concentrada. O resíduo remanescente foi purificado por cromatografia flash de gel de sílica, de modo a obter o composto título (7,2 mg, rendimento: 61%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3,30 (s, 3
H) 3,90 (s, 6 H) 6,02 (s, 1 H) 6,36 (d, J = 12,92 Hz, 1 H) 6,49 (s, 1 H) 7,21 - 7,33 (m,
H) 7,36 - 7,50 (m, 2 H) 7,75 (d, J = 6,53 Hz, 1 H) 7,93 (br. s., 1 H) 8,41 (s, 1 H)
12,50 (s, 1 H); MS (ESI): 551,0 [M+H]+
Exemplo - 171 ci o .OMe
OMe (Z)-3-cloro-N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin4-il)amino)fenil)acrilamida [0254]O composto título foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2A (Exemplo 100), modificação da etapa (i) para o seguinte procedimento: A uma solução de 1-(6-((2-aminofenil)amino) pirimidin-4-il)-3-(2,6dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureia (20 mg, 0,043 mmol), trietilamina (21,8 mg, 0,22 mmol), e ácido (Z)-3-cloroacrílico(5,5 mg, 0,052 mmol) em DCM (0,86 mL, 13,3 mmol), resfriado para 0°C foi adicionado 2,4,6-trioxido de 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6trioxatrifosfinano (49 mg, 0,78 mmmol, solução a 50% de EtOAc). A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2 h e concentrada. O resíduo foi
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157/167 purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica de modo a obter o composto título (15 mg, rendimento: 63%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ X; MS (ESI): 551,0 [M+H]+.
Exemplo - 172 .OMe
OMe (Z)-N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4il)amino)fenil)but-2-enamida [0255]O composto título foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2A (Exemplo 100), modificação da etapa (i) para o seguinte procedimento: A uma solução de 1-(6-((2-aminofenil)amino) pirimidin-4-il)-3-(2,6dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureia (20 mg, 0,043 mmol), trietilamina (21,8 mg, 0,22 mmol), e ácido (Z)-but-2-enóico (4,5 mg, 0,052 mmol) em DCM (0,86 mL, 13,3 mmol) foi adicionada uma solução de 2,4,6-trioxido de 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6trioxatrifosfinano (49,4 mg, 0,78 mmol, solução a 50% de EtOAc) a 0°C, e a mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2h. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica de modo a obter o composto título (8,5 mg, rendimento: 37%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2,20 (dd, J = 7,28, 1,76 Hz, 3 H) 3,30 (s, 3 H) 3,92 (s, 6 H) 5,85 (dd, J = 11,42, 1,76 Hz, 1 H) 5,99 (s, 1 H) 6,29 (dd, J = 11,36, 7,34 Hz, 1 H) 6,52 (s, 1 H) 7,23 - 7,34 (m, 2 H) 7,46 (d, J = 7,40 Hz, 1 H) 7,55 (br. s., 1 H) 7,78 (d, J = 7,53 Hz, 1 H) 8,40 (d, J = 0,88 Hz, 1 H) 12,50 (s, 1 H); MS (ESI): 531,3 [M+H]+.
Exemplo - 175
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158/167
Ο
Figure BR112016008110B1_D0296
OMe
OMe (S,Z)-N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -metilureído)pirimidin-4il)amino)fenil)-4-hidroxipent-2-enamida [0256]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no
Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 2-nitroanilina na etapa (d) e metilcloreto de acriloila na etapa (g) para fornecer o composto título (13 mg, rendimento: 72%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 2,03 (br. s., 3 H) 3,31 (s, 3 H) 3,92 (s,
H) 5,49 (s, 1 H) 5,81 (s, 1 H) 6,00 (s, 1 H) 6,53 (s, 1 H) 7,29 (m, 3 H) 7,44 (d, J =
7,91 Hz, 1 H) 7,83 (d, J = 7,53 Hz, 1 H) 7,92 (s, 1 H) 8,41 (s, 1 H) 12,34 (s, 1 H). MS (ESI): 531,1 [M+H]+.
Exemplo - 181 Cl o .OMe
OMe (Z)-3-cloro-N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin4-il)amino)-5-(4-etil piperazin-1-il)fenil)acrilamida
O composto título foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2C (Exemplo 108), modificação da etapa (g) para o seguinte procedimento: A uma solução de 1-(6-((2-amino-4-(4-etil piperazin-1il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureia (11 mg, 0,019 mmol), trietilamina (9,67 mg, 0,096 mmol), e ácido (2)-3-cloroacrílico (2,43
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159/167 mg, 0,023 mmol) em DCM (0,4 mL, 6,21 mmol) foi adicionada uma solução de 2,4,6trióxido de 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano (21,9 mg, 0,034 mmol) a 0°C, e a mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 30 min. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica de modo a obter o composto título (7,5 mg, rendimento: 59%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,29 (t, J = 8,0 Hz, 3 H) 2,90 (br. s., 4 H) 3,27 (s, 3 H) 3,45 (t, J = 4,64 Hz, 4 H) 3,91 (s, 6 H) 5,90 (s, 1 H) 6,32 (d, J = 8,41 Hz, 1 H) 6,52 (s, 1 H) 6,59 (d, J = 8,41 Hz, 1 H) 6,73 (dd, J = 8,78, 2,76 Hz, 1 H) 7,09 (br. s., 1H) 7,24 (s, 2 H) 7,83 (br. s., 1 H) 8,36 (s, 1 H) 8,69 (br. s., 1 H) 12,52 (s, 1 H); MS (ESI): 663,1 [M+H]+.
Exemplo - 185
Figure BR112016008110B1_D0297
N-(2-((6-(3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-metilureído)pirimidin-4-il)amino)6-fluorfenil)acrilamida [0257]O composto foi sintetizado seguindo-se a abordagem ressaltada no Procedimento 2G (Exemplo 123), substituindo 3-flúor-2-nitroanilina na etapa (d), omitindo a (e), e modificação da etapa (g) para o seguinte procedimento: A uma solução de 1-(6-((2-amino-3-metilfenil)amino)pirimidin-4-il)-3-(2,6-dicloro-3,5dimetoxifenil)-1-metil-3-((2-(trimetilssilil)etóxi)metil)ureia (31 mg, 0,051 mmol), diisopropil etilamina (13,1 mg, 0,103 mmol), e ácido acrílico (39,9 mg, 0,055 mmol) em DCM (1 mL, 15,54 mmol) foi adicionado uma solução de 2,4,6-trióxido de 2,4,6tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano (48,1 mg, 0,076 mmol, solução a 50% EtOAc) a 0°C, e a mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 2 h. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica de modo a obter o
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160/167 composto título SEM protegido SEM (24 mg, rendimento: 71% em três etapas). Seguindo-se a etapa final (g), o composto título foi isolado (12 mg, rendimento: 62%). Ή-NMR (400 MHz, CDCls) δ 3,40 (s, 3 H) 3,93 (m, 6 H) 5,91 (d, 1 H) 6,20 (s, 1 H) 6,30 - 6,45 (m, 1 H) 6,50 - 6,58 (m, 2 H) 7,01 (t, 1 H) 7,28 - 7,35 (m, 1 H) 7,42 7,63 (m, 2 H) 8,41 (s, 1 H) 12,43 (br. s., 1 H) ; ESI-MS: 535 [M+H]+.
Ensaios de Atividade Biológica
Ensaio de Ligação a FGFR4. FGFR4 recombinante purificada foi préincubada com o composto de 10 uM durante a noite a 4°C, ou durante 1 hora a temperatura ambiente. Após pré-incubação, as amostras de proteína foram separadas utilizando SDS-PAGE e géis foram corados com SimplyBlue™ SafeStain (Life Technologies, Grand Island, Nova Iorque). Bandas FGFR foram cortadas e digeridas usando um Kit de Digestão In-Gel Tryptic (Thermo Scientific, Waltham, Massachusetts). Amostras digeridas foram operadas em um Thermo Scientific Q Exactive™ LCMS utilizando separação em fase reversa e espectrometria de massa em tandem, para identificar peptídeos modificados.
[0258]Alternativamente, seguindo pré-incubação FGFR4 foi concentrada e o tampão foi trocado em uma coluna C4 de dessalinização e concentração de proteína OPTI-TRAP (Optimize Technologies). A proteína foi eluída em acetonitrila contendo 0,1% de ácido fórmico e administrada por injeção direta em um Thermo Scientific Q Exactive™ LCMS para identificar FGFR4 intacta e modificada.
[0259]Os resultados apresentados a seguir na Tabela 2 confirmam a formação de aduto covalente dos compostos testados com os peptídeos por correspondência com a massa esperada do aduto de peptídeo-ligante com a massa observada.
TABELA 2
Composto número Massa Esperada [Da] Massa Observada [Da]
100 3.133,50 3.134,48
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161/167
Composto número Massa Experada [Da] Massa Observada [Da]
100 35.835,9 35.836,1
108 35.948,0 35.948,1
Perfil IC50 de inibição de atividade de cinase. Os compostos foram perfilados para a atividade de inibição de FGFR na Reaction Biology Corporation (Malvern, Pennsylvania) com o seu ensaio de Kinase HotSpotSM. Vide, Anastassiadis e outros, 2011, Comprehensive assay of kinase catalytic activity reveals features of kinase inhibitor selectivity. Nat Biotechnol 29, 1039-1045.
[0260]FGFR1 (2,5 nM), FGFR2 (1 nM), FGFR3 (5 nM), ou FGFR4 (12 nM) (InvitrogenTM) recombinantes foram preparados como uma mistura com substrato KKKSPGEYVNIEFG (SEQ ID NO: 1) (20 pM, substrato FGFR1); e poli [E, Y] 4:1 (0,2 mg/mL, substrato FGFR2,3,4)] em tampão de reação de cinase (HEPES 20 mM-HCl, pH 7,5, MgCl2 10 mM, MnCl2 a 2 mM, EGTA 1 mM, 0,02% de Brij35, Na3VO4 0,1 mM, 0,02 mg/mL de BSA, 2 mM de DTT, e 1% de DMSO). O composto foi adicionado à mistura de enzima/substrato usando tecnologia acústica (Labcyte® Echo 550, Sunnyvale, Califórnia) (vide, Olechno e outros, 2006, Improving IC50 with acoustic droplet ejection. JALA 11, 240-246) e pré-incubado durante 0, 15, ou 60 minutos à temperatura ambiente. Após pré-incubação do composto, uma mistura de ATP (Sigma-Aldrich®) e 33P-y-ATP (Perkin Elmer) foi adicionada a uma concentração final de 10 uM para iniciar reações de cinase. As reações foram incubadas durante 120 minutos à temperatura ambiente e, em seguida, coradas em papel de filtro P81 Whatman™ de permuta iônica. Fosfato não ligado foi removido por lavagem extensiva de filtros em ácido fosfórico a 0,75%. Vide Anastassiadis e outros, 2011, Comprehensive assay of kinase catalytic activity reveals features of kinase inhibitor selectivity. Nat Biotechnol 29, 1039-1045.
[0261]Resultados para FGFR4 e FGFR1 são mostrados a seguir para compostos individuais listados na Tabela 1 acima. Os compostos mostraram inibição
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162/167 seletiva de FGFR4, com uma IC50 mais elevada para FGFR1.
[0262]Sem pretender ficar limitado pela teoria, a atividade de IC50 em relação ao FGFR1 é geralmente representativa da atividade em relação a FGFR1, FGFR2 e FGFR3. Vide também, Dieci e outros, 2013, Fibroblast Growth Factor Receptor Inhibitors as a Cancer Treatment: From a Biologic Rationale to Medical Perspectives. Cancer Discovery, F1-F16.
[0263]Para confirmar, alguns dos compostos foram também testados quanto a inibição de FGFR2 e FGFR3. Estes resultados mostrados abaixo na Tabela 3 são consistentes com a atividade IC50 de FGFR1 sendo geralmente representativa da atividade de FGFR1, FGFR2, FGFR3, e demonstra ainda mais a seletividade destes inibidores de FGFR4.
TABELA 3
Composto número IC50 de FGFR2 (μΜ) IC50 de FGFR3 (μΜ) IC50 de FGFR1 (μΜ) IC50 de FGFR4 (μΜ)
100 4,18 1,98 >10,1 <0,001
108 1,98 2,00 0,173 <0,001
Eficácia in vivo em modelos de tumor.
[0264]O composto 108 foi avaliado quanto à sua capacidade para inibir o crescimento do tumor em camundongos nus portadores de xenoenxertos de tumores a partir de três linhagens celulares tumorais humanas diferentes de carcinoma hepatocelular. Estas linhagens celulares são representativas de cânceres que apresentam um estado FGF19 e/ou FGFR4 alterado. Vide Sawey e de outros, Cancer Cell 19 (3):. 347-358 (2011).
Animais:
[0265]Camundongos nus, com idades entre 6-8 semanas e pesando aproximadamente 19-25 g, foram adquiridos da Taconic (Taconic, Hudson, New York). Todos os experimentos com animais foram realizados de acordo com protocolos aprovados pelo Institutional Animal Care and Use Committee.
Xenotransplantes tumorais e tratamento:
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163/167 [0266]Células 7,5 x 106 HUH7 (HSRRB número cat. JCRB 0403), 5 x 106 Hep3B (ATCC número cat. HB8064..) ou 2,5 x 106 células JHH7 (HSRRB número cat. JCRB1031) cada um em um volume total de 100 pl, 1:1 Matrigel (Corning Inc., Corning, NY), foram injetados por via subcutânea (s.c.) no flanco lateral direito. Quando os tumores atingiram 150-200 mm3, os camundongos foram distribuídos aleatoriamente em grupos de tratamento de 5-10 animais. A dosagem foi realizada duas vezes ao dia por injecção intraperitoneal nas doses indicadas durante 15 dias utilizando o Composto 108, formulado em um veículo de DMSO a 5% (Alfa Aesar, Ward Hill, MA), 10% de PEG300 (Sigma, St. Louis, MO), 8% de Tween® 80 (Sigma, St. Louis, MO), 77% USP solução salina na concentração desejada. Os volumes dos tumores foram coletados duas vezes por semana usando a fórmula de volume = (comprimento * largura2)/ 2. Os pesos corporais foram registrados duas vezes por semana. Todos os animais foram observados e tratados de acordo com o The Guide for Care and Use of Laboratory Animals, 8â Edição (National Academies Press, Washington D.C.).
Métodos estatísticos:
[0267]As comparações estatísticas foram feitas no final do experimento usando Medições Repetidas ANOVA com Bonferroni pós-teste para comparações de grupos de tratamento, utilizando GraphPad Prism 5. Os seguintes critérios foram utilizados para determinar Doença Progressiva, Doença Estável, Regressão Parcial, e Regressão Completa. Doença Progressiva é definida como três medições consecutivas crescentes a partir da melhor resposta ou volume do tumor inicial > 120%. Doença Estável é representada por três medições consecutivas <120% e > 50% do volume inicial do tumor, ao passo que três medições consecutivas <50% do volume inicial do tumor se qualificam como uma Regressão Parcial. Uma regressão completa é de três medições consecutivas <30 mm3. Teste do qui-quadrado foi utilizado para comparar as respostas entre os grupos de tratamento (Microsoft
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Excel).
[0268]Os resultados de animais portadores de tumores de células cancerígenas HUH7, Hep3B e JHH7 são mostrados nas figuras 1-3, respectivamente, e estão também incluídos na Tabela 4.
TABELA 4 - Inibição do crescimento do tumor em Xenotransplantes HCC ampliados FGF19 de HUH7 (n = 10 por grupo)
Dose (mg/kg) Regressão Completa Regressão Parcial Doença Estável Doença Progressiva
25 1 4 3 2
37,5 2 5 3 0
HEP3B (n = 5 por grupo)
Dose (mg/kg) Regressão Completa Regressão Parcial Doença Estável Doença Progressiva
12,5 0 0 0 5
25 0 1 4 0
37,5 5 0 0 0
JHH7 (n = 10 por grupo)
Dose (mg/kg) Regressão Completa Regressão Parcial Doença Estável Doença Progressiva
12,5 0 0 0 10
25 0 0 0 10
37,5 0 0 0 10
[0269]Estes dados demonstram que o composto 108 é eficaz em todos os modelos. Entre os três modelos, HEP3B é o mais sensível, JHH7 o menos sensível e HUH7 mostra sensibilidade ao composto intermediário 108. Embora uma resposta à dose possa ser vista na figura 3 para JHH7, houve Doença Progressiva em todas as doses testadas.
Estudos Comparativos do Composto 108 com BGJ398 [0270]Estudos comparativos foram realizados com o Composto 108 e o inibidor BJG398 de FGFR conhecido.
[0271]Protocolo de Ensaio Bioquímico de Cinase para obter IC50: FGFR1
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165/167 recombinante (2,5 nM), ou FGFR4 (12 nM) foi preparado como uma mistura com substrato KKKSPGEYVNIEFG (SEQ ID NO: 1) (20 pM, substrato FGFR1); Poli [E, Y] 4: 1 (0,2 mg/mL, substrato FGFR2,3,4)] em tampão de reação de cinase (20 mM HEPES-HCl, pH 7,5, MgCl2 10 mM, MnCl2, 2 mM, EGTA 1 mM, 0,02 % de Brij35, Na3VO4 0,1 mM, 0,02 mg/ml de BSA, 2 mM de DTT, e 1% de DMSO). O composto foi adicionado à mistura de enzima/substrato usando tecnologia acústica e préincubado durante 0, 15, ou 60 minutos à temperatura ambiente. Após pré-incubação do composto, 33P-y-ATP foi adicionado a uma concentração final de 10 pM para iniciar reações de cinase. As reações foram incubadas durante 120 minutos à temperatura ambiente. Fosforilação do substrato foi monitorada por ensaio de filtração, como acima. Os resultados são mostrados na Tabela 5. Os resultados apresentados mostram que o composto 108 é um inibidor mais potente do FGFR4, considerado-se que BGJ398 é um inibidor mais potente de FGFR1.
TABELA 5 - Teste Comparativo do Composto 108 e BGJ398 com Ensaio Bioquímico de Cinase __
Cinase Composto 108 IC50 (nM) BGJ398 IC50 (nM)
FGFR4 <0,2 13
FGFR1 513 1,0
Protocolo de Ensaio de Viabilidade Celular para obter GI50:
[0272]Linhagens de células foram cultivadas a 37%, 5% de CO2 e 95% de umidade. Os meios de cultura foram adquiridos na Gibco®, USA. Para o ensaio de viabilidade, 2000 células/poço foram semeadas em placas de 96 poços, incubadas durante 24 h antes do tratamento com composto. Após adição do composto, as placas foram incubadas durante 72 h a 37% com 5% de CO2, e em seguida, medidas por meio do ensaio CTG (Ensaio de Viabilidade de Célula Luminescente CellTiter-Glo® Número Cat.: G7572, Promega). Os resultados são apresentados na Tabela 6. A tabela mostra que o composto 108 é mais potente que o BGJ398 em células Hep3B, uma linhagem de FGF19 amplificada. A potência em HUH7 e JHH7, as outras duas linhagens de FGF19 amplificadas, são comparáveis entre o
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166/167 composto 108 e BGJ398. HepG2 (ATCC número Cat. HB-8065), SNU398 (ATCC número cat CRL-2233) e SNU449 (ATCC número cat CRL-2234) são linhagens de células não ampliadas FGF19 que foram utilizadas como controles.
[0273]GI 50 é a concentração do fármaco de teste, onde 100 χ (T - T0)/(C T0) = 50. Vide, por exemplo, Monks e outros, Feasibility of a High-Flux Anticancer Drug Screen Using a Diverse Panel of Cultured Human Tumor Cell Lines, J Natl Cancer Inst (1991) 83(11):757-766; Boyd e outros, Data Display and Analysis Strategies for the NCI Disease-oriented In Vitro Antitumor Drug Screen, in CYTOTOXIC ANTICANCER DRUGS: MODELS AND CONCEPTS FOR DRUG DISCOVERY AND DEVELOPMENT, Valeriote e outros, eds. (1990), pp. 11-34. A luminescência do poço de teste depois de um período de 72 horas de exposição ao fármaco de teste é T, a luminescência no tempo zero é T0, e a luminescência de controle é C. A GI50 mede a potência inibidora do crescimento do agente de teste.
TABELA 6 - Teste Comparativo do Composto 108 e BGJ398 em Ensaios de Viabilidade celular
Linhagem celular Composto 108 GI50 (nM) BGJ398 GI50 (nM)
HEP3B 18 ± 6 nM (n=27) 74 ± 23 nM (n=6)
JHH7 216 ± 70 nM (n=4) 178 ± 30 nM (n=2)
HUH7 408 ± 128 nM (n=4) 231 ± 100 nM (n=2)
HEPG2 6.506 ± 1.424 nM (n=27) 2.260 ± 1.182 nM (n=6)
SNU398 > 10.000 (n=2) Não medida
SNU449 > 10.000 (n=2) Não medida
Comparação da eficácia in vivo:
[0274]Camundongos nus foram usados para estas experiências, como acima. 5,0 x 106 células Hep3B em um volume total de 100 plL, 1:1 Matrigel (Corning Inc., Corning, New York), foram injetados s.c. no flanco lateral direito. Quando os tumores atingiram 150-200 mm3, os camundongos foram distribuídos aleatoriamente
Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 190/205
167/167 em grupos de tratamento de 5-10 animais. O tratamento foi então iniciado utilizando o Composto 108, formulado em um veículo de DMSO a 5% (Alfa Aesar, Ward Hill, MA), 10% de PEG300 (Sigma, St. Louis, MO), 8% de Tween® 80 (Sigma, St. Louis, MO), 77% USP Solução salina na concentração desejada. BGJ398, formulada como uma suspensão em metilcelulose a 0,5% (Sigma)/0.2% TWEEN® 80, foi suspensa na concentração desejada. Ambos os fármacos foram administrados durante 18 dias, exceto para um grupo de tratamento (vide abaixo). Os volumes dos tumores foram coletados duas vezes por semana usando a fórmula volume = (comprimento * largura2)/2. Os pesos corporais foram coletados duas vezes por semana. Todos os animais foram observados e tratados de acordo com The Guide for Care and Use of Laboratory Animals, 8â edição (National Academies Press, Washington D.C.). Os resultados deste estudo comparativo in vivo são mostrados na figura. 4.
[0275]Os dados mostram que o composto 108 é mais eficaz do que BGJ398 em níveis de dosagem toleráveis. Embora BGJ398 a 60 mg/kg mostrasse eficácia comparável ao composto 108, a dosagem desta BGJ398 a 60 mg/grupo kg teve de ser encerrada no dia 11, devido a problemas de saúde dos animais. Esta diferença na toxicidade não é devida às vias de administração, porque o grupo de animais dosados por via oral com BGJ398 a 30 mg/kg não exibiu problemas de saúde.
[0276]O precedente é ilustrativo da presente invenção, e não deve ser interpretado como limitante da mesma. A invenção é definida pelas seguintes reivindicações, com equivalentes das reivindicações a serem incluídas.

Claims (12)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Composto CARACTERIZADO pelo fato de que apresenta a Fórmula I:
    em que:
    R3 é selecionado do grupo consistindo em: alquila C1-6, alcóxi C1-6alquila C16, NR10R11alquila C1-6, R10heterociclilalquila C1-6, R10arilalquila C1-6 e R10hetero arilalquila C1-6, em que R10 e R11 são, cada um, independentemente selecionados do grupo consistindo em: hidrogênio e alquila C1-6;
    E é selecionado do grupo consistindo em:
    -NR13C(O)CR14=CHR15, e
    -NR13C(O)CeCR14, em que R13 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio e metila, e R14 e R15 são, cada um, independentemente selecionados do grupo consistindo em: hidrogênio, metila, flúor e cloro;
    R12 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio, halo, alquila C1-6, alcóxi C1-6, hidroxialquila C1-6, hidroxialcóxi C1-6, alcóxi C1-6alcóxi C1-6, alcóxi C1ealquila C1-6, R5R6heterociclila, -C(O)heterociclilaR5R6, R5R6heterociclilalquila C1-6, NR5R6, NR5R6alquila C1-6, -C(O)NR5R6 e NR5R6alcóxi C1-6, em que R5 e R6 são, cada um, independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-6, hidroxialquila C1-6, aminoalquila C1-6, -C(O)alquila C1-6 e sulfonil alquila C1-6; e
    R1 é fenila, em que a dita fenila é substituída 2, 3 ou 4 vezes com halo ou alcóxi C1-6 independentemente selecionados;
    ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
    Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 12/205
  2. 2/13
    2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R3 é alquila C1-6 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, preferencialmente, em que R3 é selecionado do grupo consistindo em: metila, metoxietila, 4-piridilmetila, 3-piridilmetila, 2-piridilmetila, benzila, N,Ndimetilaminopropila, 3-metilisoxazol-5-il-metila e 4-metilpiperazin-1-il-propila ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  3. 3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que E é -NR13C(O)CH=CHR15 ou -NR13C(O)CF=CH2, em que R13 e R15 são como definidos na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, preferencialmente, em que E é -NHC(O)CH=CH2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  4. 4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R12 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio, flúor, cloro, metila, metóxi, N,N-dimetilaminoetila, piperazin-1-ila, 4-etilpiperazin-1-ila, 4-etilpiperazin-1il-metila, 1-metilpiperidina-4-ila, 1-etilpiperidina-4-ila, N,N-dimetilaminometila, N,Ndimetilaminopropila piperidina-4-ila, morfolina, 3,5-dimetilpiperazin-1-ila, 4(metilssulfonil)piperazin-1-ila, N,N-dimetilaminoetoxi, 4-(2-hidroxietil)piperazin-1-ila, hidroxietoxi, metoxietoxi, hidroximetila, metoximetila, 2-metoxipropila, 2hidroxipropila, 2-aminopropila, 4-metilpiperazin-1-il-carbonila, 4-etilpiperazin-1-ilcarbonila, 4-[2-propil]piperazin-1-ila, 4-acetilpiperazin-1-ila, N-metil-N-hidroxietilamino, N,N-dimetilamido e 4-(2-aminoetil)piperazin-1-ila ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  5. 5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R12 é selecionado do grupo consistindo em: hidrogênio, alquila C1-6, hidroxialquila C1-6, R5R6heterociclila, R5R6heterociclilalquila C1-6, -C(O)NR5R6, NR5R6 alquila C1-6, NR5R6 alcóxi C1-6, alcóxi C1-6 e alcóxi C1-6alquila C1-6, preferencialmente, em que R12 é R5R6heterociclila ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
    Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 13/205
    3/13 em que R5R6heterociclila é R5R6piperazinila ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R5 e R6 são, cada um, independentemente selecionados do grupo consistindo em: hidrogênio, alquila C1-6, hidroxialquila C1-6, -C(O)alquila C1-6 e alquila C1-6sulfonila ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.
  6. 6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R12 é 4-etilpiperazin-1-ila ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  7. 7. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R12 não é hidrogênio ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  8. 8. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R1 é 2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenila ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  9. 9. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R3 é metila, E é -NHC(O)CH=CH2 e R1 é 2,6-dicloro-3,5-dimetóxifenila ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  10. 10. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que E é -NHC(O)CH=CH2, R12 é hidrogênio e R1 é 2,6-dicloro-3,5dimetóxifenila ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  11. 11. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o dito composto é um composto de Fórmula I(a):
    I(a) em que R3, E, R12 e R1 são como definidos na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  12. 12. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o dito composto é selecionado do grupo consistindo em:
    Petição 870190028359, de 25/03/2019, pág. 14/205
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Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012088266A2 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Incyte Corporation Substituted imidazopyridazines and benzimidazoles as inhibitors of fgfr3
LT3495367T (lt) 2012-06-13 2021-02-25 Incyte Holdings Corporation Pakeistieji tricikliniai junginiai, kaip fgfr inhibitoriai
RS62233B1 (sr) 2012-07-11 2021-09-30 Blueprint Medicines Corp Inhibitori receptora fibroblast faktora rasta
WO2014026125A1 (en) 2012-08-10 2014-02-13 Incyte Corporation Pyrazine derivatives as fgfr inhibitors
EA036160B1 (ru) 2013-03-15 2020-10-08 Селджен Кар Ллс Гетероарильные соединения и их применение
KR102350704B1 (ko) 2013-03-15 2022-01-13 셀젠 카르 엘엘씨 헤테로아릴 화합물 및 이의 용도
US9321786B2 (en) 2013-03-15 2016-04-26 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
MY181497A (en) 2013-04-19 2020-12-23 Incyte Holdings Corp Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
PT3057943T (pt) * 2013-10-18 2018-07-24 Eisai R&D Man Co Ltd Inibidores de fgfr4 pirimidina
MX367723B (es) 2013-10-25 2019-09-03 Novartis Ag Compuestos de anillos fusionados bicíclicos derivados de piridilo como inhibidores de fgfr4.
ES2924111T3 (es) 2013-10-25 2022-10-04 Blueprint Medicines Corp Inhibidores del receptor del factor de crecimiento de fibroblastos
US9695165B2 (en) 2014-01-15 2017-07-04 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor
US20180185341A1 (en) 2014-10-03 2018-07-05 Novartis Ag Use of ring-fused bicyclic pyridyl derivatives as fgfr4 inhibitors
US10851105B2 (en) 2014-10-22 2020-12-01 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
WO2016134320A1 (en) 2015-02-20 2016-08-25 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
US9580423B2 (en) 2015-02-20 2017-02-28 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
US9802917B2 (en) 2015-03-25 2017-10-31 Novartis Ag Particles of N-(5-cyano-4-((2-methoxyethyl)amino)pyridin-2-yl)-7-formyl-6-((4-methyl-2-oxopiperazin-1-yl)methyl)-3,4-dihydro-1,8-naphthyridine-1(2H)-carboxamide
WO2016164703A1 (en) * 2015-04-09 2016-10-13 Eisai R & D Management Co., Ltd. Fgfr4 inhibitors
AU2016248056B2 (en) * 2015-04-14 2020-07-23 Eisai R&D Management Co., Ltd. Crystalline FGFR4 inhibitor compound and uses thereof
EP3324970A4 (en) * 2015-07-20 2019-03-06 Taipei Medical University CHLORINE-SUBSTITUTED AZAARYL COMPOUNDS
EP3325469A4 (en) 2015-07-20 2019-01-23 Dana Farber Cancer Institute, Inc. NOVEL PYRIMIDINES USEFUL AS EGFR INHIBITORS AND METHODS OF TREATING DISORDERS
CN105418441A (zh) * 2015-12-22 2016-03-23 中国工程物理研究院化工材料研究所 2,3-二氯-4-羟基苯胺的制备方法
WO2017118438A1 (zh) * 2016-01-08 2017-07-13 杭州英创医药科技有限公司 作为fgfr抑制剂的杂环化合物
EP3454898B1 (en) * 2016-05-10 2021-11-10 Eisai R&D Management Co., Ltd. Drug combinations for reducing cell viability and/or cell proliferation
CN107400092B (zh) * 2016-05-20 2021-08-24 浙江海正药业股份有限公司 嘧啶类衍生物及其制备方法和其在医药上的用途
JP6667014B2 (ja) * 2016-05-20 2020-03-18 浙江海正薬業股▲ふん▼有限公司Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｈｉｓｕｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＣＯ．，ＬＴＤ． ピリミジン誘導体、その調製方法および医療での使用
CN105884760B (zh) * 2016-06-13 2019-01-04 厦门市蔚嘉化学科技有限公司 一种可比司他中间体的制备方法
EP3503923B1 (en) * 2016-08-23 2023-10-04 Eisai R&D Management Co., Ltd. Combination therapies for the treatment of hepatocellular carcinoma
US20190192522A1 (en) 2016-09-08 2019-06-27 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor 4 in combination with cyclin-dependent kinase inhibitors
WO2018055503A1 (en) 2016-09-20 2018-03-29 Novartis Ag Combination comprising a pd-1 antagonist and an fgfr4 inhibitor
IL266293B (en) 2016-11-02 2022-07-01 Novartis Ag Combinations of fgfr4 inhibitors and bile acid sequestrants
WO2018090973A1 (zh) * 2016-11-17 2018-05-24 广东众生药业股份有限公司 Fgfr4抑制剂及其制备方法和应用
KR101812266B1 (ko) 2016-11-25 2017-12-27 한국과학기술연구원 4-((2-아크릴아미도페닐)아미노)티에노[3,2-d]피리미딘-7-카복스아미드 유도체 및 그의 약학적 활용
CN108239069B (zh) * 2016-12-26 2021-01-05 南京药捷安康生物科技有限公司 一种用于成纤维细胞生长因子受体的抑制剂及其用途
CN108503593B (zh) * 2017-02-28 2021-04-27 暨南大学 2-氨基嘧啶类化合物及其应用
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
CA3069602C (en) * 2017-08-04 2022-12-06 Abbisko Therapeutics Co., Ltd. Formylpyridine derivative having fgfr4 inhibitory activity, preparation method therefor and use thereof
CN109422760B (zh) * 2017-09-01 2022-05-27 南京圣和药物研发有限公司 Fgfr4抑制剂及其应用
EP3680236A4 (en) 2017-09-05 2021-04-21 Bioardis LLC AROMATIC DERIVATIVE, MANUFACTURING PROCESS FOR IT AND MEDICAL APPLICATION OF IT
CN111787922A (zh) 2018-01-10 2020-10-16 卫材 R&D 管理有限公司 用于治疗肝细胞癌的组合疗法
MA52494A (fr) 2018-05-04 2021-03-10 Incyte Corp Formes solides d'un inhibiteur de fgfr et leurs procédés de préparation
EP3788046A1 (en) 2018-05-04 2021-03-10 Incyte Corporation Salts of an fgfr inhibitor
CN112313207B (zh) * 2018-06-22 2023-02-14 北京赛特明强医药科技有限公司 一种氰基取代吡啶及氰基取代嘧啶类化合物、制备方法及其应用
US11628162B2 (en) 2019-03-08 2023-04-18 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an FGFR inhibitor
EP4295846A3 (en) 2019-05-10 2024-02-28 Deciphera Pharmaceuticals, LLC Heteroarylaminopyrimidine amide autophagy inhibitors and methods of use thereof
FI3966207T3 (fi) 2019-05-10 2023-11-30 Deciphera Pharmaceuticals Llc Autofagian fenyyliaminopyrimidiiniamidi-inhibiittoreita ja menetelmiä niiden käyttämiseksi
MX2021015628A (es) 2019-06-17 2022-04-18 Deciphera Pharmaceuticals Llc Inhibidores de la autofagia de la amida aminopirimidina y sus metodos de uso.
WO2021007269A1 (en) 2019-07-09 2021-01-14 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
CN112341344B (zh) * 2019-08-09 2021-10-26 上海喀露蓝科技有限公司 一种激酶抑制剂中间体的制备方法
EP4045151A1 (en) 2019-10-14 2022-08-24 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
WO2021076728A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
WO2021113479A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
CA3162010A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Incyte Corporation Derivatives of an fgfr inhibitor
JP2023508376A (ja) * 2019-12-23 2023-03-02 北京賽特明強医薬科技有限公司 シアノ置換ピリジンおよびシアノ置換ピリミジン系化合物、製造方法およびそれらの使用
WO2021231928A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Eisai R&D Management Co., Ltd. A method for treating cancer with an oral dosage form of an fgfr4 inhibitor
WO2021230886A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Eisai R&D Management Co., Ltd. A method for treating cancer with an oral dosage form of an fgfr4 inhibitor
KR20230083296A (ko) 2020-10-05 2023-06-09 치오메 바이오사이언스 가부시키가이샤 암 치료용 의약
TW202313611A (zh) 2021-06-09 2023-04-01 美商英塞特公司 作為ｆｇｆｒ抑制劑之三環雜環
CN115490670A (zh) * 2021-06-17 2022-12-20 浙江海正药业股份有限公司 Fgfr4选择性抑制剂的盐及其制备方法和用途
CN115504965A (zh) 2021-06-23 2022-12-23 浙江海正药业股份有限公司 嘧啶类衍生物的晶型及其制备方法
CN114276266A (zh) * 2021-12-30 2022-04-05 兰州康鹏威耳化工有限公司 一种4-氨基-2-氟苯甲酰胺的制备方法
CN114560815A (zh) * 2022-03-04 2022-05-31 北京工业大学 (2-((5-氯-取代苯基氨基嘧啶-2-基)氨基)苯基)氨基甲酸叔丁酯类衍生物
CN114835640B (zh) * 2022-05-24 2024-02-13 中国药科大学 成纤维细胞生长因子受体抑制剂、制备方法及应用

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3881320D1 (de) * 1987-09-28 1993-07-01 Ciba Geigy Ag Schaedlingsbekaempfungsmittel.
AU763839B2 (en) 1998-05-26 2003-07-31 Warner-Lambert Company Bicyclic pyrimidines and bicyclic 3,4-dihydropyrimidines as inhibitors of cellular proliferation
GB0103926D0 (en) 2001-02-17 2001-04-04 Astrazeneca Ab Chemical compounds
AU2003285012A1 (en) 2002-10-24 2004-05-13 Sepracor, Inc. Compositions comprising zopiclone derivatives and methods of making and using the same
JP2007500725A (ja) 2003-07-29 2007-01-18 アイアールエム・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー プロテインキナーゼ阻害剤としての化合物および組成物
GB0512324D0 (en) * 2005-06-16 2005-07-27 Novartis Ag Organic compounds
WO2006038112A1 (en) 2004-10-01 2006-04-13 Warner-Lambert Company Llc Use of kinase inhibitors to promote neochondrogenesis
SMP200800041B (it) 2005-12-21 2009-07-14 Novartis Ag Derivati di pirimidinil-aril-urea attivi come-fgf-inibitori
EP1918376A1 (en) 2006-11-03 2008-05-07 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. FGFR4 promotes cancer cell resistance in response to chemotherapeutic drugs
AU2008210266B2 (en) * 2007-01-31 2013-09-05 Ym Biosciences Australia Pty Ltd Thiopyrimidine-based compounds and uses thereof
US20090062320A1 (en) 2007-08-28 2009-03-05 Vito Guagnano Method of Treating Disorders Mediated by the Fibroblast Growth Factor Receptor
TWI546290B (zh) 2008-06-27 2016-08-21 賽基艾維洛米斯研究股份有限公司 雜芳基化合物及其用途
AR079257A1 (es) * 2009-12-07 2012-01-04 Novartis Ag Formas cristalinas de 3-(2,6-dicloro-3-5-dimetoxi-fenil)-1-{6-[4-(4-etil-piperazin-1-il)-fenil-amino]-pirimidin-4-il}-1-metil-urea y sales de las mismas
EP2519517B1 (en) 2009-12-29 2015-03-25 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Type ii raf kinase inhibitors
JP2013517282A (ja) 2010-01-14 2013-05-16 イェール ユニバ−シティ− 受容体チロシンキナーゼ（ｒｔｋ）のインヒビターおよびその使用方法
WO2011153553A2 (en) 2010-06-04 2011-12-08 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for kinase inhibition
AR085934A1 (es) 2011-04-08 2013-11-06 Ab Science Tratamiento de mieloma multiple con masitinib
CN102816162B (zh) 2011-06-10 2016-04-27 中国科学院广州生物医药与健康研究院 嘧啶并嘧啶酮类化合物及其药用组合物和应用
WO2013109856A2 (en) 2012-01-18 2013-07-25 Genentech, Inc. Methods of using fgf19 modulators
JP5343177B1 (ja) 2012-02-28 2013-11-13 アステラス製薬株式会社 含窒素芳香族へテロ環化合物
RS62233B1 (sr) * 2012-07-11 2021-09-30 Blueprint Medicines Corp Inhibitori receptora fibroblast faktora rasta
EA036160B1 (ru) * 2013-03-15 2020-10-08 Селджен Кар Ллс Гетероарильные соединения и их применение
US10138256B2 (en) * 2013-03-15 2018-11-27 Celgene Car Llc MK2 inhibitors and uses thereof
WO2015006492A1 (en) 2013-07-09 2015-01-15 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Kinase inhibitors for the treatment of disease
TW201605452A (zh) 2013-08-28 2016-02-16 安斯泰來製藥股份有限公司 以嘧啶化合物作爲有效成分之醫藥組成物
PT3057943T (pt) 2013-10-18 2018-07-24 Eisai R&D Man Co Ltd Inibidores de fgfr4 pirimidina
ES2924111T3 (es) 2013-10-25 2022-10-04 Blueprint Medicines Corp Inhibidores del receptor del factor de crecimiento de fibroblastos
US9695165B2 (en) 2014-01-15 2017-07-04 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor
JP6667014B2 (ja) 2016-05-20 2020-03-18 浙江海正薬業股▲ふん▼有限公司Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｈｉｓｕｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＣＯ．，ＬＴＤ． ピリミジン誘導体、その調製方法および医療での使用
EP3444250A4 (en) 2016-05-20 2019-09-25 Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co., Ltd. FGFR4 INHIBITOR, PROCESS FOR PREPARATION AND CORRESPONDING APPLICATIONS

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