BR112013030701B1

BR112013030701B1 - Processo para produzir uma composição de estévia compreendendo rebaudiosídeo b, a qual pode ser utilizada como intensificador de adoçante, um intensificador de sabor e/ou um adoçante

Info

Publication number: BR112013030701B1
Application number: BR112013030701-3A
Authority: BR
Inventors: Avetik Markosyan
Original assignee: Purecircle Usa Inc
Priority date: 2011-05-31
Filing date: 2011-08-11
Publication date: 2021-07-20
Also published as: EP3363808A1; EP2713763A1; ES2727031T3; EP3363808B1; MX2013014026A; MX2019004596A; WO2012166163A1; US10021899B2; EP2713763B1; US20180325152A1; US20220007700A1; US20140142201A1; US11712055B2; MX364311B; EP2713763A4; BR112013030701A2; PL2713763T3

Abstract

composição de estévia. composições de estévia são preparadas a partir de g licosídeos de esteviol de stevia rehaudiana bertoni. as composições são capazes de fornecer um perfil de sabor superior e podem ser usadas como intensificadores de doçura, intensificadores de sabor e como adoçantes em alimentos, bebidas, cosméticos e produtos farmacêuticos.

Description

Campo Da Invenção

[001]A invenção refere-se a um processo para produzir um ingrediente alimentício altamente purificado a partir do extrato de planta Stevia rebaudiana Bertoni e seu uso em vários produtos alimentícios e bebidas.

Descrição da Técnica Relacionada

[002]Alternativas de açúcar estão recebendo uma crescente atenção devido à consciência de muitas doenças associadas ao consumo de alimentos e bebidas com alto teor de açúcar. Entretanto, muitos adoçantes artificiais, tais como dulcina, cicla- mato de sódio e sacarina, foram proibidos ou restringidos em alguns países devido a preocupações acerca de sua segurança. Como resultado, adoçantes não calóricos de origem natural estão ficando crescentemente populares. A erva doce Stevia rebaudiana Bertoni produz vários glicosídeos diterpênicos que caracterizam doçura de alta intensidade e propriedades sensoriais superiores àquelas de muitos outros adoçantes de alta potência.

[003]Os glicosídeos doces supracitados têm uma aglicona comum, esteviol, e diferem pelo número e tipo de resíduos de carboidrato nas posições C13 e C19. As folhas de Stevia podem acumular até 10-20% (com base no peso seco) de glicosídeos de esteviol. Os glicosídeos principais encontrados em folhas de Stevia são rebaudio- sídeo A (2-10%), esteviosídeo (2-10%), e rebaudiosídeo C (1-2%). Outros glicosídeos, tais como rebaudiosídeo B, D, E e F, esteviolbiosídeo e rubusosídeo são encontrados em níveis muitos mais baixos (aproximadamente 0-0,2%).

[004]Dois glicosídeos principais - esteviosídeo e rebaudiosídeo A (reb A) - foram estudados extensivamente e caracterizados em termos de sua adequação como adoçantes comerciais de alta intensidade. Estudos de estabilidade com bebidas carbonatadas confirmaram sua estabilidade ao calor e pH (Chang S.S., Cook, J.M. (1983) Stability studies of stevioside and rebaudioside A in carbonated beverges. J. Agric. Food Chem. 31: 409-412).

[005]Glicosídeos de esteviol diferem-se dos outros não só pelas estruturas moleculares, mas também por suas propriedades de sabor. Normalmente, o estevio- sídeo é considerado como sendo de 110-270 vezes mais doce do que a sacarose, rebaudiosídeo A entre 150 e 320 vezes mais doce do que a sacarose e rebaudiosídeo C entre 40-60 vezes mais doce do que a sacarose. Dulcosídeo A é 30 vezes mais doce do que a sacarose. Rebaudiosídeo A tem o gosto residual menos adstringente, menos amargo e menos persistente, desse modo, possui os atributos sensoriais mais favoráveis dos principais glicosídeos de esteviol (Tanaka O. (1987) Improvement of taste of natural sweetners. Pure Appl. Chem. 69:675-683; Phillips K.C. (1989) Stevia: steps in developing a new sweetener. In: Grenby T.H. ed. Developments in sweeteners, vol. 3. Elsevier Applied Science, London. 1-43). A estrutura química do rebaudiosídeo A é mostrada na Fig. 1.

[006]Métodos para a extração e purificação de glicosídeos doces da planta Stevia rebaudiana usando água ou solventes orgânicos são descritos em, por exemplo, Patente U.S. N° 4.361.697; 4.082.858; 4.892.938; 5.972.120; 5.962.678; 7.838.044 e 7.862.845.

[007]Entretanto, até mesmo em um estado altamente purificado, os glicosídeos de esteviol ainda apresentam atributos de sabor indesejáveis, tais como amargor, gosto residual doce, sabor de alcaçuz, etc. Um dos principais obstáculos da comercialização bem sucedida de adoçantes de estévia são esses atributos de sabor indesejável. Foi mostrado que esses tons de sabor ficam mais proeminentes quando a concentração de glicosídeos de esteviol aumenta (Prakash I., DuBois G.E., Clos J.F., Wilkens K.L., Fosdick L.E. (2008) Development of rebiana, a natural, non-caloric sweetener. Food Chem. Toxicol., 46, S75-S82).

[008]Rebaudiosídeo B (CAS No: 58543-17-2), ou reb B, da mesma forma conhecido como esteviosídeo A4 (Kennelly E.J. (2002) Constituents o f Stevia rebaudi- ana In Stevia: The genus Stevia, Kinghorn A.D. (Ed), Taylor & Francis, London, p.71), é um dos glicosídeos doces encontrados em Stevia rebaudiana. Avaliações sensoriais mostram que reb B é aproximadamente 300-350 vezes mais doce que a sacarose, enquanto que para reb A este valor foi aproximadamente de 350-450 vezes (Crammer, B. e Ikan, R. (1986) Sweet glycosides from the Stevia plant. Chemistry in Britain 22, 915-916, e 918). A estrutura química do rebaudiosídeo B é mostrada na Fig. 2.

[009]Acredita-se que reb B forma-se a partir da hidrólise parcial de rebaudiosídeo A durante o processo de extração (Kobayashi, M., Horikawa, S., Degrandi, I.H., Ueno, J. e Mitsuhashi, H. (1977) Dulcosides A and B, new diterpene glycosides from Stevia rebaudiana. Phytochemistry 16, 1405 - 1408). Entretanto, outra pesquisa mostrou que reb B ocorre naturalmente nas folhas de Stevia rebaudiana e é atualmente um dos nove glicosídeos de esteviol reconhecidos por FAO/JECFA (United Nations' Food and Agriculture Organization/Joint Expert Committee on Food Additives) no cálculo do teor total de glicosídeos de esteviol em preparações comerciais de glicosídeos de esteviol (FAO JECFA (2010) Steviol Glycosides, Compendium of Food Additive Specifications, FAO JECFA Monographs 10, 17-21).

[0010]Apenas alguns métodos são descritos na literatura para preparar reb B.

[0011]Kohda et al., (1976) preparou reb B por hidrólise de reb A com hesperi- dinase. Reb B foi da mesma forma preparado por saponificação alcalina de reb A. A referida saponificação foi conduzida em 10% de hidróxido de potássio-etanol. A solu-ção foi acidificada com ácido acético e extraída com n-butanol. A camada de butanol foi lavada com água e concentrada em baixa temperatura à vácuo. O resíduo foi cris-talizado a partir de metanol para produzir reb B. (Kohda, H., Kasai, R., Yamasaki, K., Murakami, K. e Tanaka, O. (1976) New sweet diterpene glucosides from Stevia rebau- diana. Phytochemistry 15, 981- 983). Os processos descritos podem ser adequados para preparação em escala de laboratório de reb B, porém, não são adequados para qualquer preparação de reb B em grande escala ou em escala comercial.

[0012]Ahmed et al. usou hidrólise alcalina moderada de reb A para preparar reb B. De acordo com o procedimento descrito, reb A foi hidrolisado a reb B reflu- xando-se com KOH aquoso 10% a 100°C durante 1 hora. Após a neutralização com ácido acético glacial, a substância precipitada foi recristalizada duas vezes a partir de metanol (Ahmed M.S., Dobberstein R.H., e Farnsworth N.R. (1980) Stevia rebaudiana: I. Use of p-bromophenacyl bromide to enhance ultraviolet detection of water-soluble organic acids (steviolbioside and rebaudioside B) in high-performance liquid chromatographic analysis, J. Chromatogr., 192, 387-393).

[0013]O uso de metanol como meio de recristalização como descrito na literatura requererá sua remoção subsequente do produto. Nota-se que o manuseio das substâncias tóxicas, tal como metanol, requer instalações industriais especializadas e, quando aplicadas ao processo alimentício, medidas de segurança alimentar sofisticadas.

[0014]É da mesma forma notado que nenhum trabalho significante foi conduzido para determinar o potencial de reb B como um adoçante ou ingrediente alimentício. Além disso, reb B é visto frequentemente como artefato de processo e impureza desnecessária em preparações comerciais de glicosídeos de esteviol. Nenhuma avaliação significante da influência de reb B no perfil de sabor total das preparações de glicosídeo de esteviol foi conduzida.

[0015]A solubilidade em água de reb B é relatada como sendo de cerca de 0,1% (Kinghorn D.C. (2002) Constituents of Stevia rebaudiana In Stevia: The genus Stevia, Kinghorn A.D. (Ed), Taylor & Francis, London, p.8). Em muitos processos ali-mentícios onde ingredientes altamente concentrados são usados, uma forma altamente solúvel de reb B será necessária.

[0016]Considerando os fatos mencionados acima, há uma necessidade em avaliar reb B como um adoçante e ingrediente alimentício e desenvolver um processo simples e eficiente para preparações de reb B de grau alimentício adequadas para alimentos e outras aplicações.

[0017]É também notado que, tendo um grupo carboxila na molécula, torna-se possível para reb B existir nas formas de vários sais de carboxilato. Antes desta invenção, não se acreditava que uma forma de sal de carboxilato diferente de reb B tinha sido preparada ou avaliada quanto ao seu impacto sobre os perfis de sabor.

[0018]Dentro da descrição desta invenção mostraremos que, quando aplicados de maneira específica, sais de carboxilato de reb B podem impactar o perfil de sabor e oferecer vantagens significantes para o uso de adoçantes de estévia em várias aplicações.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0019]A presente invenção tem como objetivo superar as desvantagens dos adoçantes de Stevia existentes. A invenção descreve um processo para produzir um ingrediente alimentício de alta pureza a partir do extrato da planta Stevia rebaudiana Bertoni e uso do mesmo em vários produtos alimentícios e bebidas como um modificador de doçura e sabor.

[0020]A invenção, em parte, pertence a um ingrediente que compreende glicosídeos de esteviol da planta Stevia rebaudiana Bertoni. Os glicosídeos de esteviol são selecionados a partir do grupo que consiste em esteviosídeo, rebaudiosídeo A (FIG. 1), rebaudiosídeo B (FIG. 2), rebaudiosídeo C, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo F, dulcosídeo A, esteviolbiosídeo, rubusosídeo, bem como outros glicosídeos de esteviol encontrados na planta Stevia rebaudiana Bertoni e misturas dos mesmos.

[0021]A invenção, em parte, pertence a um processo para produzir um ingrediente que contém rebaudiosídeo B, e esteviosídeo, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo C, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo F, dulcosídeo A, esteviol- biosídeo, rubusosídeo, bem como outros glicosídeos de esteviol encontrados na planta Stevia rebaudiana Bertoni e misturas dos mesmos.

[0022]Na invenção, rebaudiosídeo A comercializado por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia) contendo rebaudiosídeo A (cerca de 95-100%), esteviosídeo (cerca de 01%), rebaudiosídeo C (cerca de 0-1%), rebaudiosídeo F (cerca de 0-1%), rebaudiosídeo B (cerca de 0,1-0,8%), rebaudiosídeo D (cerca de 0-1%) e outros glicosídeos que chegam ao teor de glicosídeos de esteviol total de pelo menos 95%, pode ser usado como um material de partida. Alternativamente, extratos de estévia com relações diferentes de glicosídeos de esteviol podem ser usados como materiais de partida.

[0023]Em uma modalidade, o material de partida é submetido à conversão parcial ou total em reb B usando um processo de conversão alcalina. O reb B obtido é transformado em seguida em uma forma de sal de carboxilato que interage com a respectiva base. Estas formas de sal são utilizadas de maneira similar como reb B "original" com um grupo carboxila.

[0024]O reb B obtido ou suas formas de sal de carboxilato e misturas dos mesmos podem ser submetidos a tratamento térmico adicional para aumentar a solubilidade.

[0025]Os produtos obtidos foram aplicados em vários alimentos e bebidas como adoçantes, intensificadores de adoçante e modificadores de sabor, incluindo refrigerantes, sorvete, biscoitos, pão, sucos de fruta, produtos de leite, mercadorias assadas e produtos de confeitaria.

[0026]Deve ser entendido que tanto a descrição geral precedente quanto a descrição detalhada seguinte são exemplares e explicativas e pretendem fornecer outra explicação da invenção conforme reivindicada.BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0027]Os desenhos acompanhantes são incluídos para fornecer um entendimento adicional da invenção. Os desenhos ilustram modalidades da invenção e, juntamente com a descrição, servem para explicar os princípios das modalidades da invenção.A FIG. 1 mostra a estrutura química do rebaudiosídeo A.A FIG. 2 mostra a estrutura química do rebaudiosídeo B.A FIG. 3 mostra uma cromatografia de HPLC de uma composição de estévia que compreende rebaudiosídeo A e rebaudiosídeo B.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0028]Vantagens da presente invenção ficarão mais evidentes a partir da descrição detalhada produzida em seguida. Entretanto, deve ser entendido que a descrição detalhada e exemplos específicos, enquanto indicando as modalidades preferidas da invenção, são dados apenas por meio de ilustração, visto que várias alterações e modificações dentro do espírito e escopo da invenção ficarão evidentes para aqueles versados na técnica a partir desta descrição detalhada.

[0029]Rebaudiosídeo A comercializado por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia) contendo rebaudiosídeo A (cerca de 95-100%), esteviosídeo (cerca de 0-1%), rebaudiosídeo C (cerca de 0-1 %), rebaudiosídeo D (cerca de 0-1 %), rebaudiosídeo F (cerca de 0-1%), rebaudiosídeo B (cerca de 0,1-0,8%) e outros glicosídeos que chegam ao teor de glicosídeos de esteviol total de 95%, podem ser usados como um material de partida. Alternativamente, extratos de estévia com relações diferentes de glicosídeos de esteviol podem ser usados como materiais de partida.

[0030]A análise de HPLC das matérias-primas e produtos pode ser realizada em uma cromatógrafo líquido Agilent Technologies 1200 Series (USA), equipado com Phenomenex Prodigy ODS3, coluna de 5 μm (4,6X250mm) a 40°C. A fase móvel era composta de 32:68 de acetonitrila e 10 mmol/L de tampão de fosfato de sódio (cerca pH 2,6) em 1 mL/min. Um detector de arranjo de diodo em 210 nm pode ser usado como o detector. Um exemplo de cromatografia de HPLC assim obtida é mostrado na FIG. 3.

[0031]Conforme aqui usado, a menos que também especificado, "reb B" e “composição de reb B" serão usadas alternadamente para referir-se ao rebaudiosídeo B purificado ou rebaudiosídeo B em combinação com qualquer outra entidade química.

Preparação de Reb B1. Conversão Alcalina

[0032]Uma maneira de obter reb B partindo de reb A é descrita como segue. Reb A é disperso em solução alcalina aquosa. A concentração de reb A é de cerca de 0-50% (p/v) preferivelmente cerca de 10-25%. Os agentes alcalinos preferidos incluem hidróxido de potássio e hidróxido de sódio, entretanto, outros agentes capazes de aumentar o pH dos meios acima para cerca de pH 7 podem ser usados igualmente ou alternativamente. A concentração de agentes alcalinos é de cerca de 0,05-2,0M, preferivelmente cerca de 0,1-1,0M. A mistura é incubada a cerca de 10-150°C, preferivelmente cerca de 30-100°C, durante um período de cerca de 0,5-48 horas, preferivelmente cerca de 1-24 horas. Como resultado, reb A é hidrolisado em reb B. O rendimento molar da conversão de reb B é de cerca de 5-100%, preferivelmente cerca de 10-90%.

[0033]Depois da reação, o agente alcalino é neutralizado por um ácido, preferivelmente por ácido sulfúrico ou ácido orto-fosfórico, até um pH de cerca de 3,0-5,0 ser alcançado, preferivelmente até um pH de cerca de 3,0-4,0 ser alcançado. Na neutralização, um precipitado é formado. O precipitado é separado por qualquer método conhecido na técnica, tal como filtração ou centrifugação, e lavado com água até que a água alcance um pH de cerca de 4,0-5,0. O material cristalino obtido é seco sob vácuo a cerca de 60-105°C para produzir uma mistura de reb A e reb B que tem uma relação de cerca de 5%:95% a cerca de 95%:5% (p/p), preferivelmente de cerca de 50%:50% a cerca de 90%:10% (p/p).

2. Purificação Pós-Conversão Opcional

[0034]Para obter o reb B purificado, em uma modalidade, o precipitado separado descrito acima é suspenso em água e a mistura é submetida à agitação contínua durante cerca de 0,5-24 horas, preferivelmente cerca de 1-3 horas, a cerca de 50-100°C, preferivelmente cerca de 60-80°C. A relação de precipitado para água (p/v) é de cerca de 1:5 a cerca de 1:20, preferivelmente cerca de 1:10 a cerca de 1:15. Os cristais lavados são separados e secos sob vácuo a cerca de 60-105°C para produzir reb B com cerca de 99% de pureza.3. Intensificação de Solubilidade Pós-Conversão Opcional

[0035]O seguinte procedimento pode ser usado para aumentar a solubilidade em água de reb B ou qualquer composição de reb B. As composições obtidas geralmente têm uma solubilidade em água menor que cerca de 0,2% (p/v). Para aumentar a solubilidade destas composições, a composição de reb B é combinada com água em uma relação de cerca de 1:1 (p/p) e a mistura obtida é submetida a um tratamento térmico de gradiente que resulta em uma solução de alta estabilidade e alta concentração. O gradiente de cerca de 1°C por minuto é usado para aquecer a mistura. A mistura é aquecida à temperatura de cerca de 110-140°C, preferivelmente cerca de 118-125°C, e é mantida em temperatura máxima durante cerca de 0-120 min, preferivelmente cerca de 50-70 min. Depois do tratamento com calor, a solução é resfriada em temperatura ambiente em gradiente de cerca de 1°C por minuto. A solução é seca por pulverização por um spray drier de laboratório que opera em temperaturas de entrada de cerca de 175°C e de saída de cerca de 100°C. Uma forma amorfa da composição é obtida com solubilidade maior que 20% em água em temperatura ambiente.

Preparação de Sal de Reb B

[0036]Reb B obtido usando os processos descritos acima, ou qualquer outro processo, pode ser completamente ou parcialmente convertido em uma forma de sal de carboxilato. Reb B, ou uma composição contendo reb B, preferivelmente reb B com uma pureza maior que 90% (p/p), é disperso na água para preparar uma dispersão aquosa com 5-50% (p/v), preferivelmente 5-15% do teor de sólidos. A base em excesso é adicionada para alcançar um nível de pH de 6,5-14,0, preferivelmente 8,511,0. A mistura obtida é incubada durante 0,1-24 horas, preferivelmente 1-3 horas. Em seguida, os sólidos suspensos são separados através de filtração e lavados com água até ser obtido pH neutro da água de lavagem. Alternativamente, outras reações capazes de converter reb B em uma forma de sal de carboxilato podem ser usadas. Os cátions preferidos são K+ e Na+, e as respectivas bases - KOH e NaOH - são usadas. Entretanto, outros sais de carboxilato de reb B podem ser preparados de uma maneira similar usando a base que corresponde ao sal de carboxilato desejado.

[0037]O sal de carboxilato de reb B obtido pode também ser purificado e sua solubilidade intensificada, conforme descrito acima.

[0038]Enquanto não é pretendido estar ligado por teoria, acredita-se que qualquer glicosídeo de esteviol tendo um grupo carboxila pode ser convertido em sua forma de sal de carboxilato para melhorar o perfil de sabor e/ou doçura da molécula. Outro exemplo de um glicosídeo de esteviol contendo um grupo carboxila é esteviol- biosídeo.

Uso de Sal de Carboxilato de Reb B

[0039]O sal de carboxilato de reb B descrito acima pode ser usado como um intensificador de doçura, um intensificador de sabor e/ou adoçante em vários produtos de bebida e alimentícios. Exemplos não limitantes de produtos de bebida e alimentícios incluem refrigerantes carbonatados, bebidas prontas para beber, bebidas energéticas, bebidas isotônicas, bebidas de baixa caloria, bebidas de zero caloria, bebidas para esporte, chás, sucos de frutas e de vegetais, bebidas com suco, bebidas lácteas, bebidas de iogurte, bebidas alcoólicas, bebidas em pó, produtos de padaria, bolinhos, biscoitos, misturas de cozimento, cereais, confeitos, doces, balas de leite, chiclete, produtos de derivados de leite, leite flavorizado, iogurtes, iogurtes flavorizados, leite fermentado, molho de soja e outros produtos à base de soja, molhos de salada, maionese, vinagre, sobremesas congeladas, produtos de carne, produtos de carne de peixe, alimentos engarrafados e enlatados, adoçantes de mesa, frutas e legumes.

[0040]Adicionalmente, as composições de sal de carboxilato de reb B podem ser usadas em preparações de fármacos ou farmacêuticas e cosméticas, incluindo, porém não limitadas a: pastas de dente, antissépticos bucais, xarope para tosse, pastilhas mastigáveis, pastilhas, preparações de vitamina e similares.

[0041]As composições podem ser usadas "no estado em que se encontram" ou em combinação com outros adoçantes, sabores e ingredientes alimentícios.

[0042]Exemplos não limitantes de adoçantes incluem glicosídeos de esteviol, esteviosídeo, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo B, rebaudiosídeo C, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo F, dulcosídeo A, esteviolbiosídeo, rubusosídeo, bem como outros glicosídeos de esteviol encontrados na planta Stevia rebaudiana Bertoni e misturas dos mesmos, extrato de estévia, extrato de Luo Han Guo, mogrosídeos, xarope de milho com alto teor de frutose, xarope de milho, açúcar invertido, fruto- oligossacarídeos, inulina, inulo-oligossacarídeos, açúcar de acoplamento, malto-oli- gossacarídeos, maltodextinas, sólidos de xarope de milho, glicose, maltose, sacarose, lactose, aspartame, sacarina, sucralose, álcoois de açúcar.

[0043]Exemplos não limitantes de sabores incluem sabores de limão, laranja, fruta, banana, uva, pera, abacaxi, amêndoa amarga, cola, canela, açúcar, algodão doce, baunilha.

[0044]Exemplos não limitantes de outros ingredientes alimentícios incluem sabores, acidulantes, ácidos orgânicos e aminoácidos, agentes corantes, agentes de volume, amidos modificados, gomas, texturizantes, conservantes, antioxidantes, emulsificantes, estabilizantes, espessantes, agentes de gelificação.

[0045]Os seguintes exemplos ilustram várias modalidades da invenção. Será entendido que a invenção não está limitada aos materiais, proporções, condições e procedimentos mencionados nos exemplos, que são apenas ilustrativos.

EXEMPLO 1 Preparação de composição de estévia

[0046]100 g de rebaudiosídeo A produzido por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia) contendo 98,1% de rebaudiosídeo A, 0,3% de esteviosídeo, 0,2 % de rebaudiosídeo C, 0,2% de rebaudiosídeo F, 0,4% de rebaudiosídeo B e 0,6% de rebaudiosídeo D foram dispersos em 1000 mL de KOH aquoso (1M) e incubados a 50°C durante 2 horas. A temperatura da mistura foi diminuída para 20°C e o pH foi ajustado em pH 4,0 com ácido sulfúrico. A solução foi mantida sob condições de agitação moderada durante 4 horas e um precipitado foi formado. O precipitado foi filtrado e lavado no filtro com 2000 mL de água. Os cristais lavados foram secos sob vácuo para produzir 86g do material contendo cerca de 84% de reb A e 16% de reb B. A solubilidade em água (a 25°C) do material obtido foi de cerca de 0,2% (p/v).

EXEMPLO 2 Preparação de composição de estévia

[0047]100 g de rebaudiosídeo A produzido por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia) contendo 98,1% de rebaudiosídeo A, 0,3% de esteviosídeo, 0,2 % de rebaudiosídeo C, 0,2% de rebaudiosídeo F, 0,4% de rebaudiosídeo B e 0,6% de rebaudiosídeo D foram dispersos em 1000 mL de KOH aquoso (1M) e incubados a 80°C durante 5 horas. A temperatura da mistura foi diminuída para 20°C e o pH foi ajustado a cerca de pH 4,0 com ácido sulfúrico. A solução foi mantida sob condições de agitação moderada durante 4 horas e um precipitado foi formado. O precipitado foi filtrado e lavado no filtro com 2000 mL de água. Os cristais lavados foram secos sob vácuo para produzir cerca de 75g de material contendo cerca de 9% de reb A e cerca de 91 % de reb B. A solubilidade em água (a 25°C) do material obtido foi de cerca de 0,1% (p/v).

EXEMPLO 3 Preparação de composição de estévia

[0048]100 g de rebaudiosídeo A produzido por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia) contendo 98,1% de rebaudiosídeo A, 0,3% de esteviosídeo, 0,2 % de rebaudiosídeo C, 0,2% de rebaudiosídeo F, 0,4% de rebaudiosídeo B e 0,6% de rebaudiosídeo D foram dispersos em 1000 mL de KOH aquoso (1M) e incubados a 80°C durante 7 horas. A temperatura da mistura foi diminuída para 20°C e o pH foi ajustado a cerca de pH 4,0 com ácido sulfúrico. A solução foi mantida sob condições de agitação moderada durante 3-4 horas e um precipitado foi formado. O precipitado foi filtrado e lavado no filtro com 2000 mL de água. Os cristais lavados foram secos sob vácuo para produzir cerca de 71g de material contendo cerca de 99,1% de reb B. A solubili-dade em água (a 25°C) do material obtido foi de cerca de 0,1% (p/v).

EXEMPLO 4 Preparação de reb B

[0049]75g de material preparados de acordo com o EXEMPLO 2 foram suspensos em 1000 mL de água. A temperatura da mistura foi aumentada para 70°C. A suspensão foi mantida sob condições de agitação moderada durante 4 horas. Os cris-tais foram filtrados e secos sob vácuo para produzir cerca de 65g de material contendo cerca de 99,0% de reb B. A solubilidade em água (a 25°C) do material obtido foi de cerca de 0,1% (p/v).EXEMPLO 5 Preparação de sal de carboxilato de reb B

[0050]100 g de reb B preparados de acordo com o EXEMPLO 4 foram suspensos em 1000 mL de água. A suspensão foi mantida sob condições de agitação moderada em temperatura ambiente durante 1 hora. O pH da mistura foi ajustado em pH 11,0 com solução de KOH a 1M. A mistura obtida foi agitada durante 3 horas. Os cristais foram filtrados e lavados com água no filtro até que a água de lavagem alcançasse um pH neutro. O material cristalino obtido foi seco sob vácuo para produzir cerca de 95g do material. A solubilidade em água (a 25°C) do material obtido foi de cerca de 0,1% (p/v).

EXEMPLO 6 Preparação de composição de estévia solúvel

[0051]50 g do material preparado de acordo com o EXEMPLO 1 foram misturados com 50g de água e incubados em banho de óleo com termostato. A temperatura foi aumentada a 1°C por minuto para 121°C. A mistura foi mantida a 121 °C durante 1 hora e em seguida a temperatura foi diminuída à temperatura ambiente (25°C) a 1 °C por minuto. A solução foi seca usando o spray drier de laboratório YC-015 (Shanghai Pilotech Instrument & Equipment Co. Ltd., China) operando em temperatura de entrada de 175°C e de saída de 100°C. Cerca de 47g de um pó amorfo foram obtidos com cerca de 25% (p/v) de solubilidade em água (a 25°C).

EXEMPLO 7 Preparação de composição de estévia solúvel

[0052]42 g de reb A produzido por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia) com pureza de 99,2% (base seca) e 8 g de reb B preparado de acordo com o EXEMPLO 4 foram misturados com 50g de água e incubados em banho de óleo com termostato. A temperatura foi aumentada a 1 °C por minuto para 121 °C. A mistura foi mantida a 121°C durante 1 hora e em seguida a temperatura foi diminuída à temperatura ambiente (25 °C) a 1°C por minuto. A solução foi seca usando o spray drier de laboratório YC-015 (Shanghai Pilotech Instrument & Equipment Co. Ltd., China) operando em temperatura de entrada de 175°C e de saída de 100°C. Cerca de 48g de um pó amorfo foram obtidos com cerca de 1,5% (p/v) de solubilidade em água (a 25°C).

EXEMPLO 8 Preparação de composição de estévia solúvel

[0053]42 g de reb A produzido por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia) com pureza de 99,2% (base seca) e 8 g de sal de potássio de reb B preparado de acordo com o EXEMPLO 5 foram misturados com 50g de água e incubados em banho de óleo com termostato. A temperatura foi aumentada a 1°C por minuto para 121°C. A mistura foi mantida a 121 °C durante 1 hora e em seguida a temperatura foi diminuída à temperatura ambiente (25°C) a 1°C por minuto. A solução foi seca usando o spray drier de laboratório YC-015 (Shanghai Pilotech Instrument & Equipment Co. Ltd., China) operando em temperatura de entrada de 175°C e de saída de 100°C. Cerca de 49g de um pó amorfo foram obtidos com cerca de 2,5% (p/v) de solubilidade em água (a 25°C).

EXEMPLO 9 Bebida de suco de laranja de baixa caloria

[0054]Concentrado de laranja (35%), ácido cítrico (0,35%), ácido ascórbico (0,05%), cor vermelho alaranjado (0,01%), sabor laranja (0,20%) e 0,05% de composição de estévia, foram misturados e dissolvidos completamente em água (até 100%) e pasteurizados. A composição de estévia foi selecionada de um extrato de estévia comercial (contendo 26% de esteviosídeo, 55% de rebaudiosídeo A e 16% de outros glicosídeos), um rebaudiosídeo A comercial (contendo 98,2% de reb A) ou material obtido de acordo com o EXEMPLO 7 e EXEMPLO 8.

[0055]As avaliações sensoriais das amostras são resumidas na Tabela 1. Os dados mostram que os melhores resultados podem ser obtidos usando a composição obtida de acordo com o EXEMPLO 8. Particularmente, as bebidas preparadas com a referida composição exibiram uma sensação bucal e perfil de sabor perfeito e completo.Tabela 1Avaliação c as amostras da bebida de suco de laranja

[0056]O mesmo método pode ser usado para preparar sucos e bebidas de suco a partir de outras frutas, tais como maçãs, limões, damascos, cerejas, abacaxis, mangas, etc.

EXEMPLO 10 Bebida carbonatada de zero caloria

[0057]Bebidas carbonatadas feitas de acordo com as fórmulas apresentadasna Tabela 2 foram preparadas.

[0058]As propriedades sensoriais foram avaliadas por 20 integrantes. Os resultados são resumidos na Tabela 3.Tabela 3

[0059]Avaliação de amostras de bebida carbonatada de zero caloria

[0060]Os resultados acima mostram que as bebidas preparadas usando a composição obtida de acordo com o EXEMPLO 8 possuem as melhores características organolépticas.

EXEMPLO 11 Biscoitos diet

[0061]Farinha (50,0%), margarina (30,0%), frutose (10,0%), maltitol (8,0%), leite integral (1,0%), sal (0,2%), fermento (0,15%), baunilha (0,1%) e composições de estévia diferentes (0,03%) foram bem misturados em máquina de mistura de massa. A massa obtida foi moldada e assada em forno a 200°C durante 15 minutos. As composições de estévia foram selecionadas a partir de um extrato de estévia comercial (contendo 26% de esteviosídeo, 55% de rebaudiosídeo A e 16% de outros glicosídeos), um rebaudiosídeo A comercial (contendo 98,2% de reb A) e material obtido de acordo com o EXEMPLO 7 e EXEMPLO 8.

[0062]As propriedades sensoriais foram avaliadas por 20 integrantes. Os melhores resultados foram obtidos em amostras contendo a composição obtida de acordo com o EXEMPLO 8. Os integrantes notaram uma sensação bucal e perfil de sabor perfeito e completo.

EXEMPLO 12 Iogurte

[0063]Composições de estévia diferentes (0,03%) e sacarose (4%) foram dissolvidas em leite com baixo teor de gordura. As composições de estévia foram selecionadas a partir de um extrato de estévia comercial (contendo 26% de esteviosídeo, 55% de rebaudiosídeo A e 16% de outros glicosídeos), um rebaudiosídeo comercial A (contendo 98,2% de reb A) e o material obtido de acordo com o EXEMPLO 7 e EXEMPLO 8. Depois de pasteurizar a 82°C durante 20 minutos, o leite foi resfriado a 37°C. Uma cultura iniciadora (3%) foi adicionada e a mistura foi em seguida incubada a 37°C durante 6 horas e então a 5°C durante 12 horas.

[0064]As propriedades sensoriais foram avaliadas por 20 integrantes. Os melhores resultados foram obtidos em amostras contendo a composição obtida de acordo com o EXEMPLO 8. Os integrantes notaram uma sensação bucal e perfil de sabor perfeito e completo.

[0065]Deve ser entendido que as descrições e modalidades específicas precedentes mostradas aqui são meramente ilustrativas do melhor modo da invenção e dos princípios da mesma, e que modificações e adições podem ser facilmente feitas por aqueles versados na técnica sem afastarem-se do espírito e escopo da invenção que é, portanto, entendido como sendo limitado apenas pelo escopo das reivindicações anexas.

Claims

1. Processo para produzir uma composição de estévia compreendendo rebaudiosídeo B, a qual pode ser utilizada como um intensificador de adoçante, um intensi- ficador de sabor e/ou um adoçante, compreendendo as etapas de:fornecer um adoçante de estévia, em que o adoçante de estévia compreende rebaudiosídeo A;fornecer uma solução aquosa alcalina;dispersar o adoçante de estévia na solução alcalina e incubar durante 12 a 48 horas a 55 a 75°C para formar uma mistura;CARACTERIZADO pelo fato de que compreende as etapas adicionais de: resfriar a mistura a 10 a 30 °C e ajustar o pH com ácido até pH 3,0 a 4,0; incubar a mistura em baixa temperatura para obter um precipitado;separar o precipitado e lavá-lo com água; esecar o precipitado lavado para obter a composição de estévia;o método compreendendo ainda as etapas de:dispersar a composição de estévia em água para preparar uma dispersão aquosa de 5 a 50% (p/v) do teor de sólidos;adicionar uma base na dispersão;incubar a mistura por 0,1 a 24 horas para facilitar conversão parcial ou total de grupos carboxila do rebaudiosídeo B em um sal de carboxilato para preparar um sal de carboxilato de rebaudiosídeo B; eseparar os sólidos suspensos por filtração, lavar estes com água até um pH neutro da água de lavagem ser obtido e secar a composição de estévia compreendendo o sal de carboxilato de rebaudiosídeo B.

2. Processo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o excesso de base é adicionado na dispersão para alcançar um pH de 6,5 a 14.

3. Processo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende antes das etapas de preparar o sal de carboxilato de rebaudiosídeo B as etapas adicionais de:suspender a composição de estévia em água e incubar em uma temperatura de 50 a 100 °C durante 1 a 3 horas;separar a composição de estévia da água e secar a composição de estévia para obter uma composição de estévia purificada;em que a composição de estévia purificada compreende rebaudiosídeo B com mais do que 99% de pureza.

4. Processo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende antes das etapas de preparar o sal de carboxilato de rebaudiosídeo B as etapas adicionais de:suspender a composição de estévia em água em uma razão de 1:1 (p/p) para formar uma suspensão;aumentar a temperatura da suspensão por um método de aquecimento de gradiente de 1 °C por minuto;manter a suspensão em uma temperatura de 110 a 140 °C;diminuir a temperatura da suspensão a uma temperatura ambiente por um gradiente de resfriamento de 1 °C por minuto; esecar por pulverização a suspensão para fornecer uma composição de estévia com uma solubilidade maior do que 20% em água a temperatura ambiente.