WO2011059076A1 - 磁性試薬、磁性試薬キット、磁性担体処理方法およびその処理装置 - Google Patents

磁性試薬、磁性試薬キット、磁性担体処理方法およびその処理装置 Download PDF

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WO2011059076A1
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秀二 田島
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ユニバーサル・バイオ・リサーチ株式会社
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    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
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    • B03C2201/00Details of magnetic or electrostatic separation
    • B03C2201/26Details of magnetic or electrostatic separation for use in medical applications

Definitions

  • the present invention relates to a magnetic reagent, a magnetic reagent kit, a magnetic carrier processing method and a processing apparatus therefor.
  • the fine particles containing more miniaturized nano-sizes aiming at higher reactivity by increasing the solid surface area.
  • a magnetic material having a diameter was used.
  • a micro-sized living body such as a cell or a bacterium can be efficiently bonded to the surface of the living body and covered with a magnetic material having a certain particle size and having a certain receptor.
  • a magnetic substance with a small particle size is mixed and suspended in a solution containing a target polymer compound or living body, and the target polymer or living body is detected, separated, isolated, extracted, etc.
  • the treatment can be performed more efficiently than the treatment using magnetic particles having a normal micro size (1 to several hundred ⁇ m).
  • a polymer showing an upper critical solution temperature in an aqueous solution is fixed to magnetic particles having a particle size of about 100 nm to 200 nm. It has been practiced to use temperature-responsive magnetic particles (Patent Document 1). Therein, the aqueous solution of the temperature-responsive magnetic particles is heated to bring the temperature below the upper critical solution temperature, and the temperature-responsive magnetic particles are aggregated and then recovered by applying a magnetic force. . In this case, in order to separate the particles, it is necessary to control the temperature using a temperature control means in addition to using a magnetic force means, which may complicate the apparatus and may require time and effort for operation. It had the problem that.
  • a porous member produced by sintering iron beads is fixed in a column, and a magnetic field is applied to the porous member when a solution containing minute magnetic particles is passed through the minute magnetic material.
  • Patent Document 2 There was a microcolumn system for separating particles (Patent Document 2).
  • the magnetic particles are captured and separated by unilaterally flowing a solution containing the magnetic particles in the discharge direction of the column. Then, in order to completely capture the magnetic particles contained in the solution, it is necessary to dilute the solution or increase the amount of reagent to increase the amount of liquid and circulate it under pressure, which is an equipment scale. May increase the processing time or the reagent amount.
  • the cleaning body is washed with flowing cleaning liquid, resuspended in the liquid, and re-suspended.
  • the porous member is fixed to the column, and there is a possibility that the encounterability with the magnetic carrier in the liquid may be lower than the same amount of the particulate member that can move around the whole liquid. Had.
  • the first of the present invention is a rapid and rapid process including capture or resuspension of a magnetic carrier having a fine particle size including nano-size.
  • An object of the present invention is to provide a magnetic reagent, a magnetic reagent kit, a magnetic carrier treatment method, and a treatment apparatus thereof that can be efficiently performed.
  • a magnetic reagent, a magnetic reagent kit, a magnetic carrier treatment method, and a treatment apparatus thereof suitable for automation of various treatments including a magnetic material having a small particle size including nano-size using a simple configuration. It was made for the purpose of providing.
  • a plurality of magnetic carriers that can be magnetized by receiving a magnetic field, have a particle size that can be bound to a predetermined chemical substance or living body in a liquid and can be suspended in the liquid, and the magnetic field.
  • a plurality of process-promoting magnetic bodies that are magnetized in such a way that they can adsorb the magnetic carrier on the surface and are formed so as to be movable in the liquid by the movement of the liquid or a magnetic field, and promote the capture or resuspension process of the magnetic carrier And a magnetic reagent kit having particles.
  • promoting the capture or resuspension process of the magnetic carrier means the time required to complete or nearly complete the process of capturing or resuspension of the magnetic carrier. It is to shorten. “Capturing the magnetic carrier” means separating the magnetic carrier from the liquid, and “resuspending the magnetic carrier” means returning the suspended magnetic carrier to the liquid and suspending it.
  • the “magnetic carrier” is a carrier having a magnetic substance that can be bound to a predetermined chemical substance or a living body in a liquid and has a particle size that can be suspended in the liquid. It is preferable that when a magnetic field is received, it is rapidly magnetized, and when the magnetic field is removed, it is quickly demagnetized.
  • An example of such a material is a superparamagnetic material.
  • the superparamagnetic material include amorphous ionic compounds such as oxide glass and fluoride glass containing magnetic ions. “Binding” includes, for example, specific binding or non-specific binding, and includes reaction, ionic bond, covalent bond, chemical or physical adsorption and the like.
  • the “predetermined chemical substance or living body” is a so-called target of treatment, which is a biopolymer containing nucleic acids such as DNA or RNA, proteins including antigens or antibodies, amino acids, fats, sugar chains, etc., dioxins, metals Or an environmental substance containing a chlorinated polymer or an inorganic substance, a chemical substance containing a toxin or the like, or a living body such as a cell, bacteria or virus.
  • a particle size that can be suspended in a liquid for example, it is several nanometers to several hundreds of micrometers, and preferably several nanometers to several tens of micrometers.
  • “Processing promoting magnetic particles” means that when a magnetic field is applied without being required to bind to a predetermined chemical substance in a liquid or a living body, the magnetic particles themselves are magnetized by the magnetic field.
  • the carrier or the treatment promoting magnetic particles can be adsorbed by magnetic force, and is formed so as to be movable in the liquid by the movement of the liquid or the magnetic field.
  • the treatment promoting magnetic carrier particles can be dispersed or suspended in the liquid by moving the liquid, for example, stirring or shaking the liquid, so that the magnetic carrier particles suspended in the liquid are at a close distance,
  • the magnetic carrier can be captured by a surface area that is enlarged compared to the area of a predetermined capture region such as a container on which the magnetic carrier is adsorbed or the inner wall of the chip.
  • the magnetic carrier for promoting treatment is attracted to the magnetic field direction by the magnetic field and moves, so that the magnetic carrier is adsorbed to the inner wall in the magnetic field direction of the container or the chip directly or indirectly ( It can be adsorbed on magnetic particles for promoting treatment or via a magnetic carrier.
  • the magnetic particles for promoting processing are particles that can enhance the magnetic force applied to the magnetic carrier and promote the capture (or separation) treatment of the magnetic carrier by the magnetic field as compared with the case where it does not exist. is there.
  • the magnetic carrier has a different structure, for example, has a different particle size or a different material.
  • the treatment promoting magnetic particles have a magnetic flux density that is at least greater than that of the liquid surrounding the particles, and more preferably, a magnetic flux larger than that of the magnetic carrier penetrates (has a large magnetic moment), or the magnetic It is preferable to have a higher magnetic flux density than the carrier.
  • the magnetic carrier can be attracted by magnetic force.
  • the magnetic flux penetrating is large, it is strongly magnetized by the received magnetic field and attracted more strongly in the magnetic field direction.
  • the area of the capture region where the magnetic carrier is adsorbed and captured is simply a container about the area of the magnetic pole of the magnet or the inner wall of the dispensing tip to be expanded to the surface area of the processing-promoting magnetic particles. become.
  • the treatment promoting magnetic particles are formed to be movable in the liquid by the movement of the liquid or a magnetic field. Therefore, by redispersing or resuspending the processing-promoting magnetic particles agglomerated when the magnetic carrier is once captured by applying a magnetic field, the magnetic field is removed and the liquid is stirred or shaken. The separation or detachment of the magnetic carrier from the treatment promoting magnetic carrier is promoted to facilitate resuspension of the magnetic carrier.
  • the processing-promoting magnetic particles are sufficiently smaller in size than the container or dispensing tip that accommodates them, but are formed larger than the magnetic carrier and are affected by the movement of the liquid. It is preferable to make it easier.
  • the treatment-promoting magnetic particles are preferably formed larger than the magnetic carrier and are configured so that a larger magnetic flux than the magnetic carrier penetrates, thereby capturing the magnetic carrier. And resuspension processing can be facilitated.
  • the material of the magnetic particles for promoting treatment include, for example, iron, permalloy, ferrite, amorphous, iron hydroxide, oxide hydrate, iron oxide, mixed iron oxide, chrome steel as a ferromagnetic material. Etc.
  • iron-based materials include electromagnetic soft iron (Fe), silicon steel (Fe-3Si), iron-aluminum (Fe-3.5Al), permendur (Fe-50Co-2V), sendust (Fe-9.5Si-5.5) Al).
  • permalloys include 45 permalloy (Fe-45Ni), 78 permalloy (Fe-78.5Ni), supermalloy (Fe-79Ni-5Mo), mu metal (Fe-77Ni-2Cr-5Cu), and hard palm (Fe -79Ni-9Nb).
  • ferrites examples include Mn-Zn ferrite (30MnO-17ZnO-51Fe 2 O 3 ), Ni-Zn ferrite (15NiO-35ZnO-51Fe 2 O 3 ), Cu-Zn ferrite (22.5CuO-27.5ZnO-50Fe 2) O 3 ).
  • Fe-based amorphous Fe-5SDi-3B
  • Co-based amorphous Co 81.8 -Fe 4.2 -Ni 4.2 -SI 10 -B 20 ).
  • the treatment promoting magnetic particles and the magnetic carrier are magnetized, they are attracted to and adsorbed to a predetermined capture region including the inner wall of the container or the dispensing tip, and the magnetic carrier is attached to the inner wall or the like. Since the adsorbed magnetic particles for promoting processing themselves are also adsorbed, the capture region, which is a portion to which the magnetic carrier is to be adsorbed directly or indirectly, is expanded reliably and efficiently. The magnetic carrier will be separated.
  • the “magnetic reagent” there is a reagent solution in which the plurality of treatment promoting magnetic particles and a plurality of magnetic carriers are mixed, or a liquid containing them, and the “magnetic reagent kit”
  • a set of a reagent composed of a plurality of treatment promoting magnetic particles and a reagent composed of a plurality of magnetic carriers, or a set of reagent liquids containing either or both of them in the liquid or a reagent and a reagent liquid There is a set with.
  • the treatment promoting magnetic particles are processed so as to be coated with the predetermined chemical substance or a material that cannot be combined with the living body or the material.
  • the surface of the magnetic particles for promoting treatment has no nonspecific binding property in order to prevent target binding based on the nonspecific binding property of a target such as DNA to a certain kind of material such as iron.
  • Processing such as coating with a substance is preferred. Thereby, the binding capacity of the magnetic carrier itself can be enhanced.
  • the second invention is a magnetic reagent or a magnetic reagent kit in which the treatment promoting magnetic particles have a particle size larger than that of the magnetic carrier.
  • the magnetic particles for promoting treatment When the magnetic particles for promoting treatment have a magnetic flux density greater than that of the liquid in which the magnetic particles for promoting treatment are suspended, a magnetic field is generated.
  • the magnetic support is attracted or adsorbed on the surface of the treatment promoting magnetic particles, or the treatment promoting magnetic particles themselves are attracted in the direction of the magnetic field or adsorbed to a predetermined capture region to promote the capture (separation) treatment. Will do.
  • the magnetic particles for promoting treatment pass a magnetic flux larger than that of the magnetic carrier for the same magnetic field, the magnetic particles for treatment promotion have a magnetic moment larger than that of the magnetic carrier.
  • the magnetic particles receive or generate a larger magnetic force with respect to the magnetic field than the magnetic carrier.
  • the processing-promoting magnetic particles are formed in a movable particle shape, they are attracted or adsorbed in the direction of the magnetic field in the container or the flow tube such as a dispensing tip with a large force against the magnetic field, and themselves , Smaller magnetic carriers will be attracted or adsorbed to the surface.
  • the magnetic carrier and the processing promoting magnetic particles may be the same material.
  • the magnetic reagent or the magnetic reagent kit wherein the treatment promoting magnetic particles have a particle size of 0.001 mm to 5 mm, and the magnetic carrier has a particle size of several nm to several tens of ⁇ m. is there.
  • the particle size of the treatment promoting magnetic particles may be smaller than the tip of the dispensing tip or the inner diameter of the small-diameter tube. preferable. In such a case, the particle size is, for example, 0.001 mm to 0.5 mm.
  • the treatment-promoting magnetic particles can be enclosed in a flow tube such as the dispensing tip. In such a case, the particle size is preferably about 0.5 mm to 5 mm, for example.
  • the liquid can pass through the lower side of the two filters, but the treatment promoting magnetic particles cannot pass through, and the gas can pass through the upper side but the liquid and the processing promoting magnetic particles cannot pass through.
  • the two stop portions are provided so as to have a gap that allows the liquid to pass through but does not allow the treatment promoting magnetic particles to pass through and is not blocked by the particles.
  • the fourth invention is a magnetic reagent or magnetic reagent kit in which the magnetic susceptibility of the treatment promoting magnetic particles is larger at room temperature than the magnetic susceptibility of the magnetic carrier.
  • magnetic permeability may be used instead of “magnetic susceptibility”.
  • normal temperature is, for example, a temperature lower than the Curie temperature of a ferromagnetic material, a ferrimagnetic material, or the like.
  • the magnetic susceptibility is a dimensionless constant determined by the magnetic material, and if the magnetic carrier and the processing promoting magnetic particles have the same particle size, the larger the magnetic susceptibility, the larger the magnetic flux. Become.
  • the fifth invention is a magnetic reagent or a magnetic reagent kit in which the treatment promoting magnetic particles have a ferromagnetic material and the magnetic carrier has a paramagnetic material or a superparamagnetic material.
  • a ferromagnetic material is magnetized with a larger magnetic susceptibility than a paramagnetic material, a superparamagnetic material, or a ferrimagnetic material. Therefore, the processing promoting magnetic material should be strongly magnetized compared to the magnetic carrier. Suitable for particles.
  • paramagnetic materials and superparamagnetic materials generally have little residual magnetization, and are magnetized when a magnetic field is applied, and demagnetized quickly when the magnetic field is removed. Suitable for carrier. Even if it is a ferromagnetic material, the aggregate of fine particles can be a superparamagnetic material exhibiting superparamagnetism.
  • the sixth invention is a magnetic reagent or magnetic reagent kit in which the treatment promoting magnetic particles are formed of a different size or different material from the magnetic carrier and can be bound to a predetermined chemical substance or a living body.
  • the “predetermined chemical substance or living body” may or may not match the “predetermined chemical substance or living body” of the magnetic carrier. If they match, the target can be more efficiently separated as a whole. If they are different, two processes can be performed in parallel.
  • the non-specific binding property of the treatment promoting magnetic particles is used, or the treatment promoting magnetic particles are used for specific binding similar to or different from the magnetic carrier.
  • Surface processing for example, coating of a binding substance
  • the magnetic carrier is housed in one liquid container of a cartridge container having one or a plurality of liquid containers, and the processing promoting magnetic particles are contained in the first liquid container of the cartridge container.
  • It is a magnetic reagent or magnetic reagent kit which is accommodated in a part or in another liquid storage part and in which the opening of one or a plurality of liquid storage parts is sealed with a thin film that can be perforated.
  • the treatment promoting magnetic particles are preferably accommodated in the liquid accommodating portion so as to be movable by the movement of the liquid or a magnetic field exerted from the outside. Further, it is preferably formed so that it can be sucked and discharged to the dispensing tip.
  • the magnetic carrier is accommodated in at least one liquid accommodating portion of a cartridge container having one or a plurality of liquid accommodating portions, and the opening of the liquid accommodating portion is sealed with a thin film that can be perforated,
  • the processing promoting magnetic particles are capable of sucking or discharging the liquid so as to be movable by the movement of the liquid or an externally applied magnetic field, and have a mouth part that can be inserted into the liquid containing part.
  • This is a magnetic reagent kit enclosed in an enclosed flow tube.
  • Processing-accelerated magnetic particle-filled flow tube is a liquid suction / discharge unit that can be used by being mounted on a movable nozzle head, such as a dispensing tip, that performs suction and discharge of gas. It is preferable to use a processing-promoting magnetic particle-encapsulating chip, which will be described later, formed as a chip having a mounting opening in addition to the mouth portion for performing the above-described processing.
  • the said flow tube can also include the case where it encloses in what flows a liquid in one direction like a column. Moreover, it may be enclosed with a part of flow tube, and the part may be provided so that attachment or detachment with respect to a flow tube is possible.
  • the cartridge container has one or a plurality of chip storage portions in addition to the one or a plurality of liquid storage portions, and a processing in which a dispensing chip and the processing promoting magnetic particles are enclosed in the chip storage portion.
  • the contact step is performed, for example, in a container, in a column that allows liquid to flow in one direction, or in a dispensing tip that performs suction and discharge of liquid.
  • the magnitude of the “magnetic field” is, for example, about 1000 to several thousand gauss and can be obtained using a commercially available permanent magnet.
  • “Applying a magnetic field” is performed by bringing a permanent magnet close to the side surface or bottom surface of the vessel or the side surface of the column or chip close to the container.
  • a member in which a permanent magnet is wrapped with a non-magnetic material, for example, plastic, resin, or the like, is provided so that it can be inserted / removed through the opening of the container or column, or the opening for mounting the nozzle of the chip, and the opening A magnetic field is applied to the inside of the container or chip by inserting the inside through the part.
  • the “capturing region” is a region in which the magnetic carrier can be directly adsorbed (captured), and the flow of the inner wall on the side surface of the container, the inner wall on the bottom surface, or a chip to which the permanent magnet approaches. It is the inner wall on the side of the tube, or the outer part of the member.
  • the solution can be agitated by repeating suction and discharge with the tip, and the processing can be made more efficient.
  • the separation step if necessary, for example, in a separation step for separating the chemical substance or living body bound from the separated magnetic carrier, or in a situation where the magnetic field is removed in order to resuspend the magnetic carrier.
  • a resuspension step for resuspending the adsorbed magnetic carrier by repeating suction and discharge of the suspension with the tip is provided.
  • the processing promoting magnetic particles sucked using the tip and the magnetic carrier are transferred and discharged into the container containing the target-containing solution, or the tip.
  • the target-containing solution aspirated using a carrier is transferred and discharged into a container containing the processing-promoting magnetic particles and the magnetic carrier, or by applying a magnetic field, the processing-promoting magnetic particles Further, the target-containing solution is brought into contact with the inside of the chip in which the magnetic carrier is adsorbed.
  • a tenth aspect of the invention is a magnetic carrier further comprising a resuspension step of resuspending the magnetic carrier in the liquid by stirring or shaking the liquid containing the captured magnetic carrier in a state where the magnetic field is removed. It is a processing method.
  • An eleventh aspect of the invention is a magnetic carrier treatment method in which the treatment promoting magnetic particles have a particle size larger than the particle size of the magnetic carrier.
  • a twelfth aspect of the invention is a magnetic carrier treatment method in which the magnetic susceptibility of the processing promoting magnetic particles is formed larger at room temperature than the magnetic susceptibility of the magnetic carrier. Therefore, for example, the processing promoting magnetic particles preferably have a ferromagnetic material, and the magnetic carrier preferably has a superparamagnetic material or a paramagnetic material.
  • a plurality of magnetic carriers having a particle size that can be magnetized by receiving a magnetic field, can be combined with a target in a liquid, and can be suspended in the liquid.
  • a liquid containing at least a plurality of the treatment promoting magnetic particles formed so as to be adsorbable on the surface and capable of moving in the liquid by liquid movement or magnetic field, and promoting the capture or resuspension process of the magnetic carrier.
  • Magnetic lines of force are formed so as to penetrate one or more chips for suctioning and discharging or one or more liquid containing parts containing the liquid, and the predetermined capture of the magnetic carrier or the processing promoting magnetic particles is performed.
  • the magnetic carrier or the processing promoting magnetic particles are directly or indirectly adsorbed to the inner wall of the chip or the liquid container, which is a region, and partition the chip or the liquid container.
  • a magnetic carrier processing method comprising: a particle layer forming step of opening to form a particle layer; and a passing step of moving a liquid containing at least a predetermined chemical substance or a target composed of a living body so as to pass through the particle layer. is there.
  • the present invention can be combined with the ninth invention.
  • a magnetic flux line is formed so as to penetrate the chip or the liquid container, and the magnetic carrier or the processing promoting magnetic particles are arranged in a predetermined trapping region on the inner wall of the chip or the liquid container.
  • the magnetic carrier or the like is developed so as to be directly or indirectly adsorbed on the inner wall of the part and to partition the chip or the liquid storage part.
  • the “passing step” is performed by, for example, sucking and discharging the liquid in the chip or the liquid storage unit using the chip or by repeating it.
  • the magnetic carrier, the processing promoting magnetic particles or the mixture thereof forms a filter-like particle layer that partitions the chip or the liquid storage portion in, for example, the vertical direction.
  • the amount of the magnetic carrier, the processing-promoting magnetic particles or the mixture thereof is determined so that they can be developed and partitioned based on the inner diameter of the liquid container or chip.
  • a fourteenth aspect of the present invention is a liquid containing a target made of a predetermined chemical substance or a living body, and has a particle size that can be magnetized by receiving a magnetic field, can bind to the target in the liquid and can be suspended in the liquid
  • a container having one or more liquid storage units capable of storing various reagents, a nozzle head provided with one or more nozzles for sucking and discharging gas, and detachable from the nozzles 1 or two or more chips, the tip of which is provided so as to be insertable into the liquid storage portion, a moving mechanism that is relatively movable between the nozzle head and the container, and the nozzle.
  • a magnetic force means capable of applying and removing a magnetic field to at least one of the chip or the liquid container, and at least one of the liquid container is sucked and discharged by the chip.
  • Magnetized and magnetized A plurality of processing promoting magnetic particles capable of adsorbing the carrier on the surface and accelerating the capture or resuspension processing of the magnetic carrier can be sucked and discharged by at least one of the liquid storage portions by the tip.
  • the magnetic carrier processing apparatus is accommodated so as to be movable in a liquid by the movement of the liquid or a magnetic field, or is sealed in at least one of the chips so as to be movable in the liquid by a movement of the liquid or a magnetic field.
  • the chip or the chip enclosing the processing promoting magnetic particles is held in the chip housing portion of the container so as to be attachable to the nozzle. Is preferred.
  • the sixteenth aspect of the invention further includes one or more perforating tips that can be attached to the nozzle provided in the nozzle head, and each liquid storage portion of the container has a perforating tip attached to the nozzle.
  • the container is a prepack type cartridge container.
  • the magnetic carrier processing apparatus wherein the particle diameter of the processing promoting magnetic particles is larger than the particle diameter of the magnetic carrier.
  • An eighteenth aspect of the invention is a magnetic carrier processing apparatus in which the magnetic susceptibility of the processing promoting magnetic particles is larger at room temperature than the magnetic susceptibility of the magnetic carrier.
  • a container having one or two or more liquid storage portions capable of storing various reagents, a nozzle head provided with one or more nozzles for sucking and discharging a gas, and detachable from the nozzles 1 or two or more chips, the tip of which is provided so as to be insertable into the liquid storage portion, a moving mechanism that is relatively movable between the nozzle head and the container, and the nozzle.
  • a magnetic force means capable of applying and removing a magnetic field to at least one of the chip or the liquid container, and at least one of the liquid container is sucked and discharged by the chip.
  • the magnetic particles for promoting are accommodated, and the magnetic force means is provided so as to be relatively movable with respect to the tip or the liquid storage portion, and is simultaneously provided in each chip or the liquid storage portion attached to the nozzle.
  • a set of corresponding magnets capable of exerting and removing a magnetic field has different magnetic poles of at least two magnets for each set when approaching each chip or each liquid container.
  • This is a magnetic carrier processing apparatus having a magnet arrangement member arranged so as to face each other across a chip or a liquid container.
  • positioning member is provided so that the said each magnet can move along the linear path
  • the “magnet” is a permanent magnet or an electromagnet, but is preferably a permanent magnet.
  • a twentieth aspect of the invention is a container having one or more liquid storage units capable of storing various reagents, a nozzle head provided with one or more nozzles for sucking and discharging gas, and detachable from the nozzles 1 or two or more chips, the tip of which is provided so as to be insertable into the liquid storage portion, a moving mechanism that is relatively movable between the nozzle head and the container, and the nozzle. And a magnetic force means capable of applying and removing a magnetic field to at least one of the chip or the liquid container, and at least one of the liquid container is sucked and discharged by the chip.
  • the magnetic particles for promotion are accommodated, and the magnetic force means is provided so as to be relatively movable with respect to the tip or the liquid storage part, and is simultaneously provided in the chips or the liquid storage part attached to the nozzle.
  • a magnetic field can be applied to and removed from the magnetic field, and a pair of corresponding one or more magnets is supported so that the magnetic poles can be changed for each of the chip or the liquid container.
  • a magnetic carrier processing apparatus having a magnet array member and a magnetic pole diverter capable of changing the magnetic pole of each magnet by applying a magnetic field for diverting.
  • the “direction-changing magnetic field” is a magnetic field large enough to change the magnetic poles of each magnet, and the direction-changing magnetic field for a certain magnet is, for example, around the magnet.
  • the magnitude of the magnetic field for turning is generally different from the magnitude of the magnetic field generated by each magnet.
  • the present invention can be combined with the nineteenth invention. In this case, the magnetic poles of the magnets facing each other so as to sandwich each of the chips or the liquid storage part are changed, and the effect of fluctuation of the magnetic field is great. In addition, it is preferable that the change of the magnetic pole is performed at a substantially fixed position.
  • each of the magnets is formed in a rotating body, and the magnet array member is configured to be able to change the chain of the plurality of corresponding magnets of each set in a chain at substantially fixed positions by rotation.
  • the magnet arrangement member is moved, the magnetic poles of the rear end magnets of each group are changed by applying a magnetic field for turning, thereby changing the magnetic poles of the front end magnets to contain the chip or liquid.
  • It is a magnetic carrier processing apparatus which has an electromagnet which fluctuates the magnetic field which acts on a part.
  • the “rotating body shape” is a three-dimensional shape in which a cross section perpendicular to the rotational symmetry axis is a circle centered on the axis.
  • the “predetermined interval” is, for example, an interval at which the chip or the liquid storage unit can be sandwiched therebetween.
  • the electromagnet is provided in, for example, a nozzle head, a magnet array member itself, or a moving mechanism related to the nozzle head.
  • the magnitude and direction of the magnetic force generated by the electromagnet are based on the direction and magnitude of the current flowing through the electromagnet.
  • the present invention and the nineteenth invention can be combined, and in this case, the plurality of magnets in each group has at least two groups of magnets.
  • the liquid storage portions of the container are arranged in a matrix, the nozzles are arranged in a matrix in the nozzle head, and all the chips mounted on the nozzles are placed in all or a part of the wells of the container.
  • the magnet arrangement member of the magnetic force means is provided so that it can be inserted all at once, and the nozzle row in which the nozzles are arranged in the row direction or the liquid accommodation portion row in which the liquid accommodation portions are arranged and the nozzle in the column direction And a nozzle row or a liquid storage portion row in which liquid storage portions are arranged, and is provided so as to be relatively movable along the row direction or the column direction with respect to the nozzle head or container provided with the liquid storage portion row.
  • each comb-teeth member is provided with one or a plurality of magnets arranged at the column interval or the row interval at a position corresponding to each chip or each liquid storage portion that can be adjacent thereto.
  • the matrix includes one column or one row.
  • a magnetic carrier that can bind to a target in a liquid is brought into contact with the liquid together with magnetic particles for promoting processing that can be magnetized by a magnetic field.
  • the magnetic support and the treatment promoting magnetic particles are magnetized by applying a magnetic field, and the magnetic support is attracted or adsorbed on the surface of the treatment promoting magnetic particles.
  • a predetermined capture region such as a chip directly or indirectly via a magnetic field
  • the surface area of the predetermined capture region is increased. Therefore, the magnetic carrier can be captured quickly and efficiently.
  • the treatment promoting magnetic carrier can be moved in the liquid by the movement of the liquid or a magnetic field, the encounterability with the magnetic carrier suspended in the liquid is high, and the magnetic support is magnetic at a close distance in the liquid. Since the carrier can be attracted or adsorbed, the capture is quick and the capture efficiency is high.
  • the treatment promoting magnetic particles are provided so as to be movable in the liquid by the movement of the liquid or the magnetic field, the treatment promoting magnetic particles aggregated when the magnetic carrier is once captured by applying the magnetic field, By stirring or shaking the liquid after removing the magnetic field, resuspension of the magnetic carrier can be facilitated by redispersing or resuspending the treatment promoting magnetic particles.
  • the particle diameter of the said magnetic particle for process promotion is formed larger than the particle diameter of the said magnetic support
  • carrier Even when the processing promoting magnetic particles and the magnetic carrier are formed of the same material, the magnetic carrier can be attracted and adsorbed more efficiently because the magnetic flux is large. Further, by using processing magnetic particles having a large particle diameter, the particles are easily affected by the movement of the liquid, and the resuspension can be efficiently performed in a shorter time. Further, since the magnetic carrier and the treatment promoting magnetic particles can be separated according to the difference in size, the treatment promoting magnetic carrier particles can be regenerated and reused.
  • the treatment promoting magnetic particles are large even if the treatment promoting magnetic particles and the magnetic carrier having almost no difference in particle diameter are used. Since the magnetic flux passes, even if the same magnetic field as that of the magnetic carrier is received, a large magnetic force is generated by the magnetic field and the magnetic force is received, so that the processing can be quickly and efficiently performed on the predetermined capture region. If the magnetic susceptibility is large, not only a ferromagnetic material but also a superparamagnetic material may be used. Further, since the magnetic carrier and the processing promoting magnetic particles can be separated based on the difference in magnetic flux, the processing promoting magnetic carrier particles can be regenerated and reused.
  • a ferromagnetic material is used as the processing promoting magnetic particle, and the magnetic carrier has a magnetic susceptibility smaller than that of the ferromagnetic material, but has a remanent magnetization of 0 or a small value.
  • the processing promoting magnetic particles can be bound to a predetermined chemical substance or living body, so that a target that matches the magnetic carrier or a different target can be added or processed in parallel. It will be possible. At this time, the magnetic carrier and the treatment promoting magnetic carrier particles can be separated based on a filter based on a difference in particle diameter or a difference in magnetization. Therefore, it is possible to perform a plurality of processes in parallel, increase the efficiency of the processes, and reduce the processing costs.
  • the magnetic carrier and the magnetic particles for promoting processing are accommodated or enclosed in a container or chip in advance. It is suitable for automation and can reliably prevent cross contamination without being touched manually.
  • the suction and discharge are repeated, and the encounterability and reactivity of the magnetic carrier are further increased, and a rapid process suitable for automation is performed. be able to.
  • the processing promoting magnetic particles and the magnetic carrier are provided so as to be movable in the liquid. Therefore, the processing promoting magnetic particles can be obtained by stirring or shaking the liquid. By redispersing or resuspending, the magnetic carrier can be easily resuspended.
  • the magnetic carrier, the processing promoting magnetic particles, or a mixture thereof is moved up and down by forming magnetic flux lines so as to penetrate the chip or the liquid container.
  • a filter-like particle layer is developed so as to partition, and for example, a magnetic carrier or the like and a chemical substance or the like are obtained by performing or repeating liquid suction and discharge vertically using a chip so as to pass through the particle layer. The encounter property with the target of the living body can be enhanced, and the reaction process can be promoted.
  • the magnetic pole of the magnet that exerts a magnetic field on the liquid containing the magnetic carrier or the treatment promoting magnetic particles is redirected by using the magnetic field for diverting.
  • the magnetic carrier or the processing-promoting magnetic particles accommodated in the chip or the liquid accommodating part is changed and stirred or shaken to further enhance the encounter property between the target and the magnetic carrier.
  • the reaction process can be promoted by increasing the temperature. Therefore, it can be realized by applying a magnetic field for turning to the magnet without providing a complicated mechanism and increasing the scale of the apparatus.
  • FIG. 1 It is a perspective view which shows the magnetic carrier processing apparatus which concerns on 2nd Embodiment using the magnetic reagent which concerns on 1st Embodiment of this invention. It is a side view which shows the magnetic carrier processing apparatus of FIG. It is a schematic diagram in the case of applying a magnetic field to the magnetic reagent cartridge container according to the first embodiment of the present invention. It is a comparison figure at the time of using the magnetic reagent which concerns on the 1st Embodiment of this invention. It is a state figure which shows the state of a magnetic field in case there exists a magnetic body particle for process promotion of this invention. 3 is a bar / line graph showing the recovery rate of the magnetic carrier before the dispersion treatment according to the first embodiment of the present invention.
  • FIG. 1 and 2 show a magnetic carrier according to a second embodiment for loading a cartridge container 14 containing the magnetic reagent and the magnetic reagent kit according to the first embodiment and using the magnetic reagent for processing. It is the perspective view and side view which show the processing apparatus.
  • the magnetic carrier processing apparatus 10 is, for example, a book-like housing 12 having a length of 250 mm to 400 mm (X axis direction), a width of 70 mm to 100 mm (Y axis direction), and a height of about 300 mm to 500 mm (Z axis direction). being surrounded.
  • X axis direction a length of 250 mm to 400 mm
  • Y axis direction a width of 70 mm to 100 mm
  • Z axis direction the height of about 300 mm to 500 mm
  • a magnetic reagent cartridge container 14 in which a plurality of (in this example, 10) liquid storage portions 22 or the like that can store or store reagent solutions are arranged in a line and are detachably provided in the housing 12;
  • the magnetic reagent cartridge container 14 is connected to an insertion plate 16 that is provided so as to be able to be pulled out of the casing 12 and is inserted into a rectangular hole formed in one side surface of the casing 12.
  • a loading box 18 which detachably loaded.
  • the automatic processing unit (15, 19) is configured to move the nozzle head 15 relative to the nozzle head 15 of the dispenser and the magnetic reagent cartridge container 14 accommodated in the housing 12. And have.
  • the nozzle head 15 of the dispenser can be moved by the moving mechanism 19 only in the X-axis direction corresponding to the longitudinal direction with respect to the magnetic reagent cartridge container 14 housed in the housing 12.
  • the movable body 11 and a cylindrical Z-axis movable body 35 are provided so as to be movable by being guided by the guide pillars 34 in the vertical direction with respect to the X-axis movable body 11.
  • a nut portion connected to the Z-axis moving body 35 is screwed into the X-axis moving body 11, and a Z-axis moving ball screw (not shown) that moves the Z-axis moving body 35 in the vertical direction rotates.
  • the guide pillar 34 and the support plate 39 attached via the guide pillar 34 are attached.
  • the nozzle head 15 includes a stainless steel pipe 33 that communicates with a cylinder that is attached to the X-axis movable body 11 and performs suction and discharge of gas, a rubber pipe 32 that is connected so that a tip of the stainless steel pipe 33 is inserted, An air pipe 27 attached to the Z-axis moving body 35 and connected to the rubber tube 32 is provided so as to protrude from the side surface.
  • the nozzle 17 communicates with the cylinder via the rubber tube 32 and the like, and is attachable to and detachable from the nozzle 17. It has a dispenser tip 26 mounted and a motor 30 attached to the X-axis moving body 11 for driving a piston in the cylinder. Accordingly, when the mouth portion 26a at the tip of the dispensing tip 26 moves up and down in conjunction with the Z-axis moving body 35, the rubber tube 32 is bent or stretched.
  • the support plate 39 attached to the X-axis moving body 11 supports the guide pillar 34 and rotatably supports the ball screw, and below the dispensing tip 26 and the like.
  • the tip detachment plate in which a U-shaped notch portion larger than the diameter of the nozzle 17 and smaller than the outer diameter of the thickest portion of the tip 26 is formed is moved in the front-rear direction.
  • a motor 48 for driving the chip attaching / detaching plate in the front-rear direction is attached to the support plate 39, and thus the X-axis moving body 11.
  • the chip detachment plate is supported by a chip detachment plate support member 47 attached to the support plate 39 so as to be movable in the front-rear direction, and the outer surface of the chip detachment plate support member 47 has an inner wall surface of the housing 12.
  • a guide roller 43 guided in contact with a guide rail 31 provided along the X-axis direction is rotatably provided.
  • Magnetic force means 60 capable of applying and removing a magnetic field in the small diameter tube or the large diameter tube by approaching or separating from the small diameter tube 26b or the large diameter tube 26c of the dispenser tip 26 attached. Have.
  • a moving mechanism 19 for moving the nozzle head 15 of the dispenser relative to the magnetic reagent cartridge container 14 accommodated in the housing 12 is engaged with the X-axis moving body 11 of the nozzle head 15 to A rail 31 for guiding the magnetic reagent cartridge container 14 along the longitudinal direction, that is, the X-axis direction; an X-axis moving motor 30 for moving the X-axis moving body 11 of the nozzle head 15 along the X-axis direction; A gear and belt 51 for transmitting the rotation of the X-axis moving motor 30 to the X-axis moving body, the guide column 34 for guiding the Z-axis moving body 35 in the vertical direction, that is, the Z-axis direction, and the Z-axis movement A ball screw and a Z-axis moving motor 52.
  • the cylinder and motor 49 correspond to a suction / discharge mechanism.
  • the guide pillar 34, the Z-axis moving ball screw, and the Z-axis moving motor 52 correspond to a Z-axis moving mechanism in the moving mechanism
  • the loading box 18 loaded with the magnetic reagent cartridge container 14 has a guide member extending along the X-axis direction in the casing 12 extending in the longitudinal direction of the loading box 18, that is, in the X-axis direction.
  • the magnetic reagent cartridge container 14 is guided by the guide rail 31 and can be manually moved in the X-axis direction.
  • the magnetic reagent cartridge container 14 can be completely stored in the housing 12.
  • the magnetic reagent cartridge container 14 When the magnetic reagent cartridge container 14 is loaded in the housing 12, an elastic force is applied so as to urge the loading box 18 loaded with the cartridge container 14 upward, and the loading box 18 does not float.
  • the cartridge container 14 is housed in the frame 13 provided with holes that expose the openings of the housing parts 22, 23, etc., and fixed so that the cartridge container 14 does not move.
  • a positioning plate 44 for positioning indicating that the cartridge container 14 has been loaded at a predetermined position is provided at the end of the loading box 18 opposite to the end on which the fitting insertion plate 16 is provided.
  • the sensor 45 provided on the housing 12 side detects the positioning plate 44, it outputs a loading signal indicating that the cartridge container 14 is loaded at a predetermined position, and when the loading signal is output, It is determined that the processing of the magnetic carrier is ready to start.
  • the magnetic reagent cartridge container 14 includes a holding hole 37 formed in the substrate 14a for detachably holding a sample storage portion 38 for storing a sample such as a sample, and the substrate 14a.
  • An opening is formed so as to protrude upward, and a tip accommodating portion 21 for accommodating the dispensing tip 26 so as to be attachable to the nozzle 17 when the nozzle 17 is lowered, and above the substrate 14a.
  • An opening is formed so as to protrude, and the nozzle 17 is lowered to lower the nozzle 17 so as to pierce a thin film such as a film attached to the substrate 14a so as to cover the opening of the liquid container 22 of the cartridge container 14. 17 and an opening is formed in the substrate 14a.
  • the punching tip accommodating portion 20 accommodates the perforating tip 50 formed in a tapered shape with a sharp tip so that it can be attached to the substrate 17a.
  • the substrate 14a is formed to detachably hold a liquid storage unit 22 that can store or store various reagents including the magnetic reagent 1 and a product storage unit 40 that stores a solution generated by processing.
  • the holding holes 28 and the reaction containers 23 that contain the solution that requires temperature control in order to promote the reaction by forming an opening in the substrate 14a are arranged in a line.
  • capacitance of each liquid storage part 22, the said specimen storage part 38, and the product storage part 40 is 1000 microliters, for example, accommodates and uses several hundred microliters of liquid.
  • the loading box 18 is provided with a temperature control chamber 41 having a heater for temperature control.
  • a temperature control chamber 41 having a heater for temperature control.
  • the liquid storage part 22a includes a magnetic reagent suspension
  • the liquid storage part 22b includes a lysis buffer solution that dissolves bacterial nuclei
  • the liquid storage part 22c includes the solution storage part 22c.
  • the liquid storage units 22h to 22j are left empty, and the product storage unit 40 and the reaction vessel 23 are also empty. In such a state, a film-like thin film is stuck on the substrate 14 a so as to cover the opening of the liquid container 22 and the opening of the reaction vessel 23.
  • the magnetic reagent 1 can be magnetized by receiving a magnetic field, and is coated with a material having an OH group on the surface so that it can bind to a nucleic acid as a predetermined chemical substance in the liquid.
  • a plurality of magnetic carriers 2 formed of a superparamagnetic material having a suspendable particle size, for example, nano size and several hundreds of nanometers, and can be magnetized by receiving a magnetic field.
  • the suspension of the magnetic carrier and the suspension of the magnetic particles for promoting processing are separated from the liquid storage unit 22, for example, the liquid storage unit 22a and the liquid storage unit.
  • FIG. 3 shows the magnetic carrier processing apparatus 10 according to the second embodiment in which the magnetic reagent cartridge container 14 according to the first embodiment containing the liquid in which the magnetic reagent 1 is suspended is loaded. Three examples are shown.
  • FIG. 3 (A) shows a first example of the magnetic carrier processing apparatus 10 according to the second embodiment, which is larger than the small diameter tube 26b having a mouth portion 26a at the tip, and the small diameter tube 26b.
  • a dispensing tip 26 having a diameter and a large-diameter tube 26c having a mounting opening 26d that can be attached to the nozzle 17, and a transition portion 26e connecting the small-diameter tube 26b and the large-diameter tube 26c;
  • a magnet 46 provided in the dispensing tip 26 so as to be able to contact with and separate from the thin tube 26b, and a reaction vessel 23 in the cartridge vessel 14 provided so that an opening 26a of the thin tube 26b can be inserted. Is shown.
  • the inner diameter of the small diameter tube 26b is about 1 mm to 3 mm
  • the inner diameter of the large diameter tube 26c is about 8 mm to 9 mm
  • the length in the longitudinal direction is about 100 mm. It is.
  • the inner wall portion of the small diameter tube 26b to which the magnet 46 approaches corresponds to the capture region 46a.
  • FIG. 3 (A) shows that the magnetic reagent 1 having the magnetic carrier 2 capable of binding the target is added to the solution containing the target contained in the reaction vessel 23 by the dispensing tip 26 and the magnet 46 is approached.
  • the nanosized magnetic carrier 2 to which the target is bound is applied to the inner wall of the small-diameter tube 26b using the magnetic force enhanced by the processing promoting magnetic particles 3 and the The particles are adsorbed on the processing promoting magnetic particles 3.
  • the magnitude of the magnetic field of the magnet 46 is, for example, 1000 to several thousand gauss.
  • FIG. 3B shows a second example of the magnetic carrier processing apparatus 10 according to the second embodiment, and dispenses the magnet 46 of the magnetic carrier processing apparatus 10 according to the first example.
  • a magnet 146 is provided below the cartridge container 14 so as to be able to contact and separate from the bottom of the reaction container 23 of the cartridge container 14.
  • a reaction vessel 23 containing the magnetic reagent 1 is stirred with a solution containing a target containing a target to which the magnetic carrier 2 contained in the magnetic reagent 1 can be bound, and then the reaction is performed.
  • the magnet 146 By bringing the magnet 146 close to the bottom of the container 23, a magnetic field is exerted in the reaction container 23, and the magnetic carrier 2 bound to the target is utilized at the bottom of the reaction container 23 by using the processing promoting magnetic particles 3. Or by adsorbing to the treatment promoting magnetic particles 3 adsorbed and precipitated on the inner bottom or adsorbed and precipitated on the inner bottom.
  • the inner bottom corresponds to the capture region 146a.
  • FIG. 3C shows a third example of the magnetic carrier processing apparatus 10 according to the second embodiment, which is replaced with the magnet 46 of the magnetic carrier processing apparatus 10 according to the first example.
  • a magnet 246 is provided on the side surface of the reaction container 23 of the cartridge container 14 containing the magnetic reagent 1 so as to be able to contact and separate.
  • a magnet 246 is brought close to the reaction container 23 containing the magnetic reagent 1 to exert a magnetic field in the reaction container 23, and the magnetic carrier 2 bound to the target is utilized for the processing promoting magnetic particles 3,
  • the magnetic reagent 1 is adsorbed on the inner surface of the reaction vessel 23.
  • the inner side surface corresponds to the capture region 246a.
  • a magnet is provided so as to be able to contact and separate from the side surface or the bottom surface of the other liquid storage portion of the cartridge container 14.
  • FIG. 4 shows a liquid (A) in which only the magnetic carrier 2 is suspended in the first magnetic reagent 1, and a liquid (B) in which the magnetic carrier 2 and the magnetic particles 3 for promoting processing are suspended.
  • the magnetic carrier 2 in the region where the magnet 46 is brought close to the large-diameter tube 26c of the dispensing tip can be directly adsorbed.
  • a certain capture region 46b is shown, and M1 and M2 represent an effective magnetic field reachable area (area) based on the capture region 46b.
  • the (A) side shows a case where a liquid in which only the magnetic carrier 2 is suspended is sucked into the dispensing tip 26, and the magnetic carrier 2 has not yet been adsorbed on the capture region 46b.
  • the effective magnetic field reachable range M1 indicates that the capture region 46b itself.
  • the (B) side shows the case where the liquid in which the magnetic carrier 2 and the treatment promoting magnetic particles 3 are suspended is sucked, and the processing promoting magnetic particles 3 that receive and generate a stronger magnetic force than the magnetic carrier 2 are shown.
  • the magnet 46 is approaching, and the suction and discharge are performed a plurality of times in each dispensing tip 26 to indicate the suction state.
  • the effective magnetic field reachable range M1 of the capture region 46b is only in the vicinity of the inner wall on the side where the magnet 46 is close, the magnetic carrier 2 in the most distant place is not captured and is suspended. It shows that there is.
  • the magnetic carrier 2 that has passed through the effective magnetic field reachable range M2 is directly or directly into the capture region 46b. Since the effective magnetic field reachable range based on the capture region 46b is expanded to M2 by being indirectly attracted, the magnetic carrier 2 located at a location farther from the inner wall on the side where the magnet 46 approaches is also captured.
  • the magnet 46 is separated from the large-diameter tube of the dispensing tip 26, and the suction and discharge are performed a plurality of times in the dispensing tip 26 to indicate the suction state.
  • the magnetic carrier 2 is still captured in the trapping region 46b or the effective magnetic field reachable range M1 in the form of a pellet even if suction and discharge are repeated. Yes, only the magnetic carrier 2 that has not been captured is suspended.
  • the treatment promoting magnetic particles 3 are more dispersed or suspended than the magnetic carrier 2 due to the influence of the movement of the liquid.
  • the magnetic carriers 2 are easily turbid and are not in close contact with each other, and are adsorbed on the magnetic particles 3 for promoting processing. Therefore, the magnetic carriers 2 are easily separated or detached and are resuspended in a short time.
  • FIG. 5 shows by simulation that the magnetic field (magnetic flux density) around it is enhanced by the presence of the magnetic particles 3 for promoting treatment of the magnetic reagent 1.
  • a two-dimensional magnet model (46) simulating a magnet 46 having a size of 1 mm in length and 0.32 mm in length and a magnetic flux density of 1 gauss in a two-dimensional space of 1 mm in length and width is shown on the left side of the two-dimensional space diagram. It is assumed that iron powder having a magnetic permeability 1000 times that of water is placed stationary on each square 4 (vertical and horizontal 0.04 mm) on the right side of the magnet model (46). Each arrow 5 shows the magnetic flux density vector obtained by the simulation in the position where the iron powder was placed.
  • FIG. 5A a two-dimensional particle model (3) simulating two treatment promoting magnetic particles 3 having a particle diameter of 0.32 mm is shown as a method for the magnet model (46).
  • FIG. 5B shows the magnetic flux density vector exerted on the iron powder in the particle model (3) when connected in a chain form along the line direction and attracted to the magnet model (46). ) Shows a magnetic flux density vector exerted on each iron powder when the particle model (3) does not exist.
  • the magnetic field magnetic flux density
  • FIGS. 6 and 7 are graphs showing experimental results showing that the recovery rate of the magnetic carrier is improved by the presence of the magnetic particles for promoting processing.
  • a suspension containing a nano-sized magnetic carrier for capturing nucleic acid formed of iron oxide is used as the magnetic carrier, which may be aggregated in the suspension. It is. Therefore, the case where the magnetic carrier before the dispersion treatment is used and the case where the magnetic carrier after the dispersion treatment is used are measured.
  • the dispersion process is performed by centrifugation.
  • any one of the following four types of treatment promoting magnetic particles is used. That is, as the first treatment promoting magnetic particles, the product name is “Steel Shot”, the code name is “TSH30” (manufactured by IKK Shot Co., Ltd.), the particle size is 425-125 ⁇ m, and the component is iron. Among them, carbon is 0.8 to 1.2%, silicon is 0.4% or more, manganese is 0.35 to less than 1.0%, phosphorus is 0.05% or less, and sulfur is 0.05% or less.
  • the product name is “Steel Shot” and the code name is “TSH60” (manufactured by IKK Shot Co., Ltd.), and the particle size is different from that of the first treatment promoting magnetic particles. 850-355 ⁇ m.
  • the third processing-promoting magnetic particles have a product name of “steel beads”, a code name of “SB50” (manufactured by Fuji Seisakusho Co., Ltd.), a particle size of 425-125 ⁇ m, and the components are in iron Further, it contains 0.9 to 1.1% carbon, 1.3% or more of silicon, 1.0% or less of manganese, 0.05% or less of phosphorus, and 0.05% or less of sulfur.
  • the product name is “PSS beads” (manufactured by PSS Co., Ltd.), a particle size of 0.5 ⁇ m to 2 ⁇ m, and a particle having a particle size of 190 nm and having an OH group on the surface of Fe 3 O 4
  • the nucleic acid-purified particles coated with are indefinite shapes.
  • the liquid storage portion 22a of the first magnetic reagent cartridge container 14 has a magnetic carrier suspension before the dispersion treatment and the first treatment promoting magnetism.
  • 500 ⁇ l of the first magnetic reagent for suspending or dispersing 20 body particles is accommodated, and 500 ⁇ l of the cleaning liquid (for example, distilled water) is accommodated in the liquid storage portion 22b.
  • the second magnetic suspension that suspends the magnetic carrier suspension before the dispersion treatment and the first treatment promoting magnetic particles 50 are suspended.
  • 500 ⁇ l of the cleaning liquid is stored in the liquid storage portion 22b, and the magnetic carrier suspension before the dispersion treatment and the third liquid storage portion 22a of the third magnetic reagent cartridge container 14 are stored in the liquid storage portion 22a.
  • 500 ⁇ l of the third magnetic reagent for suspending 20 treatment promoting magnetic particles is accommodated, and the cleaning liquid is similarly accommodated in the liquid accommodating portion 22b.
  • 500 ⁇ l is stored, and the cleaning liquid is similarly stored in the liquid storage portion 22b.
  • the liquid storage part 22a of the fifth magnetic reagent cartridge container 14 only 500 ⁇ l of the magnetic carrier before the dispersion treatment is stored, and the cleaning liquid is similarly stored in the liquid storage part 22b.
  • the magnetic carrier suspension before the dispersion treatment, the 20 third treatment promoting magnetic particles, and the second treatment promoting magnetic particles 1 are provided.
  • 500 ⁇ l of a fifth magnetic reagent containing the same is stored, and the cleaning liquid is similarly stored in the liquid storage portion 22b.
  • the liquid storage unit 22a of the seventh magnetic reagent cartridge container 14 stores 500 ⁇ l of the sixth magnetic reagent in which 30 ⁇ l of the magnetic carrier before dispersion processing and 30 ⁇ l of the fourth processing promoting magnetic particles are suspended.
  • the cleaning liquid is similarly stored in the portion 22b.
  • the liquid storage unit 22a of the eighth magnetic reagent cartridge container 14 stores 500 ⁇ l of the magnetic carrier suspension after the dispersion treatment, and the liquid storage unit 22b similarly stores the cleaning liquid.
  • a suspension of the magnetic carrier after dispersion processing, 20 third processing promoting magnetic particles, and 1 second processing promoting magnetic particle is suspended.
  • 500 ⁇ l of the seventh magnetic reagent made of a turbid liquid is stored, and the cleaning liquid is similarly stored in the liquid storage portion 22b.
  • the liquid storage portion 22a of the tenth magnetic reagent cartridge container 14 stores 500 ⁇ l of the eighth magnetic reagent consisting of 30 ⁇ l of the magnetic carrier suspension and the fourth processing promoting magnetic particles after the dispersion treatment.
  • the cleaning liquid is stored in the storage portion 22b.
  • the first magnetic reagent cartridge container 14 is loaded into the magnetic carrier processing apparatus 10, and the tip of the dispensing tip 26 is inserted into the liquid container 22a using the dispensing tip 26, and the suspension
  • the magnet 46 is attracted, the magnet 46 is brought close to the small-diameter tube 26b and a magnetic field is applied to the small-diameter tube 26b, so that the magnetic carrier of the first magnetic reagent and the first processing promoting magnetic body
  • the particles are adsorbed on the inner wall of the small-diameter tube 26b of the dispensing tip 26, and while being adsorbed, the dispensing tip 26 is lifted in the Z-axis direction to extract the dispensing tip 26 from the liquid storage portion 22a.
  • the dispensing tip 26 By moving the nozzle head 15 along the cartridge container 14, the dispensing tip 26 is moved to the position of the liquid storage portion 22b, and the tip of the dispensing tip 26 is moved into the liquid storage portion 22b. Insert the magnet 46. After cleaning the magnetic carrier and the first treatment promoting magnetic particles by repeating suction and discharge of the cleaning liquid in a state in which 46 is close to the thin tube 26b, the magnet 46 is removed from the thin tube 26b. The magnetic field in the small-diameter tube 26b is removed and the suction is performed repeatedly, and the liquid is suspended in the liquid.
  • the recovery rate of the magnetic carrier is calculated by measuring the remaining liquid in the liquid storage unit 22a with an absorbance meter of 480 nm. As a result, as shown in (1) of the bar / line graph of FIG. 6, the recovery rate of the magnetic carrier that may have aggregated before the dispersion treatment is about 86.3%, and the first treatment It was found that the number of recovered magnetic particles for promotion was about 10.
  • a photograph (1) in FIG. 7B is an observation of the suspension used as the magnetic carrier before the dispersion treatment with a 400 ⁇ microscope, and a photograph (2) in FIG.
  • the suspension before treatment was centrifuged at 2000 G, and the supernatant was observed with a 400 ⁇ microscope. Large particles are seen in the supernatant, but the number of particles is reduced, and the color of the liquid is orange, indicating that the suspended magnetic carrier has a nano-sized particle size.
  • FIG. 7C shows the case where the eighth magnetic reagent cartridge container 14 is used, and the processing-promoting magnetic particles are formed using the suspension of the magnetic carrier after the dispersion treatment. The case where it does not exist is shown, and the recovery rate is less than 30%.
  • (2) of the bar graph of FIG. 7C shows the case where the ninth magnetic reagent cartridge container 14 is used, and in the case where 500 ⁇ l of the seventh magnetic reagent containing the magnetic carrier after the dispersion treatment is used. This indicates that the recovery rate of the magnetic carrier exceeds 50%.
  • 7 (C) shows a case where the tenth magnetic reagent cartridge container 14 is used, and in the case where 500 ⁇ l of the eighth magnetic reagent containing the magnetic carrier after the dispersion treatment is used. This indicates that the recovery rate of the magnetic carrier also exceeds 50%.
  • FIG. 8 shows a flowchart of a process of capturing a magnetic carrier using the magnetic reagent cartridge container 14 according to the first embodiment and the apparatus 10 according to the second embodiment.
  • the sample storage unit 38 of the cartridge container 14 stores a sample solution containing bacteria 7 extracted in advance from a patient or the like as a sample.
  • the liquid container 22a is coated with silica for capturing nucleic acid, and has a nano-size and superparamagnetic magnetic support 2 and a processing-promoting magnet formed of a ferromagnetic material with a particle size of, for example, several tens of ⁇ m.
  • a suspension of magnetic reagents composed of body particles 3 is stored.
  • the liquid storage unit 22b stores a lysis buffer solution that dissolves the bacteria
  • the liquid storage unit 22c stores a neutralization buffer solution
  • the liquid storage unit 22d through the liquid storage unit 22i include various cleaning liquids. Is stored, and the eluate is stored in the liquid storage portion 22j.
  • step S1 the nozzle head 15 is moved in the positive direction of the X axis, and the nozzle 17 is positioned above the dispensing tip 26 held in the tip accommodating portion 21 of the cartridge container 14.
  • step S2 the nozzle head 15 is moved in the positive direction of the X axis, and the nozzle 17 is positioned above the dispensing tip 26 held in the tip accommodating portion 21 of the cartridge container 14.
  • step S1 by lowering the Z-axis moving body 35, the Z-axis moving body 35 is inserted into the mounting opening 26d of the dispensing tip 26, fitted, mounted, and lifted.
  • the cartridge container 14 is positioned above the substrate 14a.
  • the nozzle head 15 is further moved in the positive direction of the X-axis, moved to above the sample storage unit 38, and the Z-axis moving body 35 is lowered, whereby the tip of the dispensing tip 26 is moved. A part of the sample solution containing the bacteria is sucked and raised by being inserted into the specimen container 38, and the tip of the dispensing tip 26 is positioned on the substrate 14 a of the cartridge container 14.
  • the nozzle head 15 is moved along the negative direction of the X axis to be positioned above the reaction vessel 23. The sample liquid is discharged into the reaction vessel 23 by lowering the Z-axis moving body 35.
  • step S2 the nozzle head 15 is moved along the positive direction of the X axis, is positioned above the liquid container 22b, is lowered along the Z axis, and the tip of the dispensing tip 26 is stored in the liquid.
  • the lysis buffer solution stored in the liquid storage section 22b is sucked by being inserted into the section 22b.
  • the dispensing tip 26 is raised in the Z-axis direction and positioned on the substrate 14a of the cartridge container 14, and then moved in the negative direction of the X-axis to be positioned on the reaction container 23.
  • the dispensing tip 26 is lowered, the tip of the dispensing tip 26 is inserted into the reaction vessel 23, and the lysis buffer solution is discharged into the reaction vessel 23.
  • the dissolution buffer solution is stirred with the sample solution. Incubate for a predetermined time. This destroys the suspended bacteria and bacterial nuclei, and the nucleic acid is dissolved in a solution containing the lysis buffer solution.
  • step S3 the nozzle head 15 is moved along the positive direction of the X-axis and positioned above the liquid container 22c, and then lowered along the Z-axis so that the tip of the dispensing tip 26 is moved to the tip.
  • the neutralization buffer solution is aspirated by being inserted into the liquid container 22c.
  • the dispensing tip 26 is raised in the Z-axis direction and positioned on the substrate 14a of the cartridge container 14, and then moved in the negative direction of the X-axis to be positioned on the reaction container 23.
  • the dispensing tip 26 is lowered, the tip of the dispensing tip 26 is inserted into the reaction vessel 23, and the neutralization buffer solution is discharged into the reaction vessel 23.
  • the neutralization buffer solution is stirred with the solution contained in the reaction vessel 23 to react with the dissolution buffer solution and neutralize.
  • step S4 the nozzle head 15 is moved in the positive direction of the X axis so as to be positioned above the liquid container 22a, and then lowered along the Z axis so that the tip of the dispensing tip 26 is moved to the liquid.
  • the suspension is inserted into the container 22a and the suspension of the magnetic carrier 2 as the magnetic reagent 1 and the processing promoting magnetic particles 3 is sucked.
  • the dispensing tip 26 is raised in the Z-axis direction, is positioned above the substrate 14a of the cartridge container 14, and the nozzle head 15 is moved in the negative direction of the X-axis to be positioned above the reaction container 23. Then, the suspension is lowered in the Z-axis direction, and the suspension of the magnetic carrier 2 and the treatment promoting magnetic particles 3 is discharged into the reaction vessel 23.
  • the suspension in which the magnetic carrier 2 and the processing-promoting magnetic particles 3 are suspended or dispersed in the solution of the nucleic acid 8 accommodated in the reaction vessel 23 is agitated by repeated suction and discharge by the dispensing tip 26.
  • the magnetic carrier 2 and the nucleic acid 8 are encountered and the nucleic acid 8 is bound to the magnetic carrier 2.
  • step S5 a magnetic field is exerted in the small diameter tube 26b when the suspension is sucked in a state where the magnet 46 is brought close to the small diameter tube 26b of the dispensing tip 26, whereby the suspension
  • the magnetic carrier 2 bound to the nucleic acid 8 and the treatment promoting magnetic particles 3 are magnetized.
  • the treatment promoting magnetic particles 3 dispersed or suspended in the suspension have a larger particle size and a higher magnetic susceptibility than the magnetic carrier 2, so that they are suspended around the treatment promoting magnetic particles 3.
  • the magnetic carrier 2 While attracting or adsorbing the turbid magnetic carrier 2, the magnetic carrier 2 is attracted to the capture region 46 a, which is the inner wall of the dispensing tip 26 on the side where the magnet 46 is approaching, with a stronger magnetic force than the magnetic carrier 2. Or indirectly adsorb there. By repeating suction and discharge in this state, the magnetic carrier 2 in the suspension can be efficiently captured on the inner wall.
  • step S6 the magnetic carrier 2 and the processing promoting magnetic particles 3 are placed in the small-diameter tube of the dispensing tip 26 in a state where the magnet 46 is brought close to the small-diameter tube (26b) of the dispensing tip 26. While being captured by the inner wall, the dispensing tip 26 is lifted along the Z axis to be extracted from the reaction container 23 and positioned above the cartridge container 14. The dispensing tip 26 is moved in the positive direction along the X axis while capturing the magnetic carrier 2 and the processing promoting magnetic particles 3 in the inside thereof, and is positioned above the liquid container 22d.
  • the dispensing tip 26 With the magnet 46 approaching the small-diameter tube of the dispensing tip 26, the dispensing tip 26 is lowered along the Z axis to insert the tip of the dispensing tip 26 into the liquid container 22d. . Thereafter, with the magnet 46 separated and the magnetic field removed, the cleaning liquid stored in the liquid storage portion 22d is sucked and discharged, thereby cleaning the magnetic carrier 2 and the processing promoting magnetic particles 3. To do.
  • step S7 the liquid is further moved to the liquid storage unit 22e for further cleaning.
  • the magnetic carrier 2 and the processing promoting magnetic particles 3 are captured by repeating suction and discharge in a state where the magnet 46 is brought close to the small diameter tube of the dispensing tip 26. While the magnetic carrier 2 and the processing promoting magnetic particles 3 are captured, the magnet 46 is moved up along the Z axis while being approached, and is positioned above the substrate 14 a of the cartridge container 14. .
  • step S8 the nozzle head 15 is further moved in the negative direction of the X axis to move to the liquid container 22j, and the magnet 46 is brought close to the small diameter tube of the dispensing tip 26.
  • the nucleic acid 8 bound to the magnetic carrier 2 is lowered by lowering in the Z-axis direction and inserting the tip thereof into the eluate accommodated in the liquid accommodating portion 22j, and repeating suction and discharge in a state where a magnetic field is applied.
  • the magnetic carrier 2 is eluted in the liquid.
  • FIG. 9 shows a case in which the magnet 46 is separated or approached from the processing promoting magnetic particle-encapsulating chips 56 and 57 to be accommodated in the magnetic reagent cartridge containers 114 and 115 according to the two examples of the third embodiment.
  • the part corresponding to the liquid container 22a of the cartridge container 14 is only the magnetic carrier 2 instead of the suspension of the magnetic reagent 1.
  • treatment promoting magnetic particles 6 are enclosed in the tip accommodating portion 21 so as to be movable by liquid movement or magnetic field instead of the dispensing tip 26.
  • the magnetic particle enclosing tip for use 56 is accommodated.
  • the processing promoting magnetic particle-encapsulating tip 56 has a small diameter tube 56b having an inlet / outlet 56a at the tip, a larger diameter than the small diameter tube 56b, and can be attached to the nozzle 17.
  • a large-diameter tube 56c having an opening 56d and a transition portion 56e that connects the small-diameter tube 56b and the large-diameter tube 56c are provided.
  • a plurality of (for example, several tens of) treatment promoting magnetic particles 6 are formed by a filter 56f through which the body particles 3 cannot pass and 56g through which gas can pass but liquid and the processing promoting magnetic particles 3 cannot pass.
  • Iron particles having a diameter of 1 mm are encapsulated so as to be movable by the movement of the liquid and the magnetic field.
  • the magnet 46 is provided so as to be able to approach and separate from a portion where the processing promoting magnetic particles 6 between the two filters 56f and 56g of the large diameter tube 56c are enclosed.
  • a portion of the cartridge container 14 corresponding to the liquid storage portion 22a has a magnetic carrier 2 instead of the magnetic reagent 1 suspension.
  • the processing-enhanced magnetic particle-encapsulating tip 57 has a narrow diameter tube 57b having a mouth portion 57a at the tip, a larger diameter than the small diameter tube 57b, and a mounting opening that can be mounted on the nozzle 17.
  • a large-diameter tube 57c having a portion 57d and formed separately from the small-diameter tube 57b, and a transition portion 57e formed integrally with the large-diameter tube 57c and tapered,
  • a plurality (10 in this example) of the treatment promoting magnetic particles 6 are enclosed in a line. A plurality of the treatment promoting magnetic particles 6 can be moved along the row direction without disturbing the order of the rows due to the movement of the liquid and the magnetic field.
  • the stopper 57f and 57g are formed by caulking the small-diameter tube 57b in a direction twisted by 90 degrees such as the front-rear direction and the left-right direction, leaving a gap in the center toward the inner side of the small-diameter tube 57b. It is a depression. As a result, both of the liquids can pass but the particles 6 cannot pass.
  • the magnet 46 is provided so as to be able to contact and separate around the center of the portion of the small-diameter tube 57b where the ten processing promoting magnetic particles 6 are enclosed.
  • FIG. 10 shows a case where the processing-promoting magnetic particle-encapsulating chip 57 according to the second example of the third embodiment that contains the magnetic reagent kit and is to be accommodated in the magnetic reagent cartridge container 114 is used.
  • An experimental example of the recovery rate of the magnetic carrier 2 is shown.
  • 12 iron particles having a particle diameter of 1 mm are encapsulated in a small-diameter tube 57b so as to be movable by liquid movement or magnetic field.
  • the liquid storage portion 22 a stores the suspension of the magnetic carrier 2 after the dispersion treatment
  • the liquid storage portion 22 b stores 100 ⁇ l of distilled water
  • the chip storage portion 21 Accommodates the treatment promoting magnetic particle enclosing tip 57.
  • the liquid storage unit 22a stores 80 ⁇ l of the magnetic carrier suspension after the dispersion treatment
  • the liquid storage unit 22b stores 100 ⁇ l of distilled water.
  • the tip accommodating portion 21 accommodates the dispensing tip 26.
  • the liquid container 22a includes the magnetic carrier after the dispersion treatment and a magnetic particle having a particle diameter of 0.5 ⁇ m to 2 ⁇ m and having cellulose Ac on the surface.
  • 80 ⁇ l of a suspension in which 8 ⁇ l of PSS beads are suspended in the body Fe 3 O 4 (190 nm) is stored, and 100 ⁇ l of distilled water is stored in the liquid storage unit 22b.
  • the eleventh magnetic reagent cartridge container 14 is loaded into the magnetic carrier processing apparatus 10, and the tip of the dispensing tip 26 is inserted into the liquid container 22 a using the dispensing tip 26, and the suspension
  • the magnetic carrier 2 is applied to the inner wall of the small-diameter tube 26b of the dispensing tip 26 by bringing the magnet 46 close to the small-diameter tube 26b and applying a magnetic field in the small-diameter tube 26b.
  • the magnet 46 is moved to the liquid storage portion 22b while being adsorbed and cleaned by suction and discharge of the cleaning liquid, and then the magnet 46 is separated from the small diameter tube 26b so that the magnetic field in the small diameter tube 26b is changed. Remove and repeat suction and discharge to suspend in liquid. Therefore, the recovery rate of the magnetic carrier 2 is calculated by measuring the residual liquid in the liquid container 22a with an absorbance meter of 480 nm.
  • the recovery rate of the magnetic carrier was about 20% or less.
  • the magnetic reagent cartridge container 114 is loaded into the magnetic carrier processing apparatus 10, the nozzle head 15 is moved, and the processing promoting magnetic particles are enclosed from the chip accommodating portion 21 of the magnetic reagent cartridge container 114.
  • the tip 57 is attached to the nozzle, the tip is inserted into the liquid storage portion 22a using the sealed tip 57, and the magnet 146 is brought close to the small diameter tube 57b to enter the small diameter tube 57b.
  • the magnetic carrier 2 is repeatedly sucked and discharged, thereby adsorbing the magnetized magnetic carrier 2 to the magnetized magnetic particles 6 for promoting processing in the small diameter tube 57b of the enclosing tip 57. Capture by adsorbing to the inner wall.
  • the recovery rate of the magnetic carrier 2 is calculated by measuring the residual liquid in the liquid container 22a with the absorbance meter 480nm. As shown in FIG. 10 (2), the result exceeds 50% and indicates that the recovery rate is three times or more as compared with the case where there is no treatment promoting magnetic particle.
  • the twelfth magnetic reagent cartridge container 14 is loaded in the magnetic carrier processing apparatus 10, and the dispensing carrier 26 and the magnetic carrier 2 housed in the liquid container 22a and the processing promoting magnetic body are used.
  • the suspension of 8 ⁇ l as particles is adsorbed onto the inner wall of the small-diameter tube 26b by repeating the suction and discharge by bringing the magnet 46 close to the small-diameter tube 26b, and the dispensing tip 26 remains adsorbed. Is moved to the liquid container 22b and cleaned by sucking and discharging the cleaning liquid. Therefore, the recovery rate of the magnetic carrier 2 is calculated by measuring the residual liquid in the liquid container 22a with an absorbance meter of 480 nm.
  • the recovery rate of the magnetic carrier 2 is about 30% or more, and the recovery rate is more than twice as compared with the case where there is no magnetic particle for promoting treatment. It is shown that.
  • FIG. 11 a flow chart of a process of capturing a magnetic carrier using the magnetic reagent cartridge container 114 (or 115) according to the third embodiment and the apparatus 10 according to the second embodiment. Indicates.
  • the sample container 38 of the cartridge container 114 (or 115) stores a sample solution containing bacteria 7 extracted in advance from a patient or the like as a sample.
  • the liquid storage unit 22a stores a suspension of the superparamagnetic magnetic carrier 2 that is coated with silica for capturing nucleic acids and has a nano particle size.
  • the liquid storage unit 22b stores a lysis buffer solution that dissolves the bacteria 7, the liquid storage unit 22c stores a neutralization buffer solution, and the liquid storage unit 22d to the liquid storage unit 22i include various types of buffer solutions.
  • a cleaning liquid is accommodated, and an eluate is accommodated in the liquid accommodating portion 22j.
  • step S11 the nozzle head 15 is moved in the positive direction of the X axis, and the nozzle 17 is placed above the processing-promoting magnetic particle-containing chip 56 (or 57) held in the cartridge container 114 (or 115). Position.
  • the Z-axis moving body 35 is inserted into the mounting opening 56d (or 57d) of the sealing chip 56 (or 57), fitted, mounted, lifted, and sealed.
  • the tip of the chip 56 (or 57) is positioned above the substrate (corresponding to 14a) of the cartridge container 114 (or 115).
  • the nozzle head 15 is further moved in the X-axis direction, moved to above the specimen storage unit 38, and the Z-axis moving body 35 is lowered, whereby the tip of the enclosing tip 56 (or 57) is moved. Is inserted into the specimen container 38, a part of the sample solution containing the bacteria 7 is sucked and raised, and the tip of the enclosing tip 56 (or 57) is positioned at the cartridge container 114 (or 115). Located on the substrate. Next, the nozzle head 15 is moved along the negative direction of the X axis to be positioned above the reaction vessel 23. The sample liquid is discharged into the reaction vessel 23 by lowering the Z-axis moving body 35.
  • step S12 the nozzle head 15 is moved along the positive direction of the X axis, is positioned above the liquid container 22b, is lowered along the Z axis, and the tip of the enclosing tip 56 (or 57) is moved.
  • the solution buffer 22b is inserted into the liquid container 22b and the lysis buffer liquid stored in the liquid container 22b is aspirated.
  • the enclosing tip 56 (or 57) is raised in the Z-axis direction, positioned on the substrate of the cartridge container 114 (or 115), and moved in the negative direction of the X-axis to To be located.
  • the enclosing tip 56 (or 57) is lowered, the tip of the enclosing tip 56 (or 57) is inserted into the reaction vessel 23, and the lysis buffer solution is discharged into the reaction vessel 23.
  • the dissolution buffer solution is stirred with the sample solution. Incubate for a predetermined time. As a result, the suspended bacteria 7 and the nucleus of the bacteria 7 are destroyed, and the nucleic acid 8 is dissolved in a solution containing a lysis buffer solution.
  • step S13 the nozzle head 15 is moved along the positive direction of the X axis, is positioned above the liquid container 22c, is lowered along the Z axis, and the tip of the enclosing tip 56 (or 57) is moved. It inserts in this liquid storage part 22c, and the said neutralization buffer liquid is aspirated.
  • the enclosing tip 56 (or 57) is raised in the Z-axis direction, positioned on the substrate of the cartridge container 114 (or 115), and moved in the negative direction of the X-axis to To be located.
  • the enclosing tip 56 (or 57) is lowered, the tip of the enclosing tip 56 (or 57) is inserted into the reaction vessel 23, and the neutralization buffer solution is discharged into the reaction vessel 23.
  • the neutralization buffer solution is stirred with the solution contained in the reaction vessel 23 and reacted with the dissolution buffer solution to neutralize it. .
  • step S14 the nozzle head 15 is moved in the positive direction of the X axis to be positioned above the liquid container 22a, and is lowered along the Z axis so that the tip of the enclosing tip 56 (or 57) is moved to the top.
  • the magnetic carrier suspension 22a is inserted into the liquid container 22a to aspirate a magnetic carrier suspension that is part of the magnetic reagent.
  • the enclosing tip 56 (or 57) is raised in the Z-axis direction, positioned above the substrate of the cartridge container 114 (or 115), and the nozzle head 15 is moved in the negative direction of the X-axis to react the reaction.
  • the suspension of the magnetic carrier 2 is discharged into the reaction vessel 23 by being positioned above the vessel 23 and lowered in the Z-axis direction.
  • the suspension in which the magnetic carrier 2 is suspended in the solution of the nucleic acid 8 accommodated in the reaction vessel 23 is agitated by repeating suction and discharge with the enclosed chip 56 (and 57), and the magnetic carrier 2 and the nucleic acid are stirred. 8 is encountered, and the nucleic acid 8 is bound to the magnetic carrier 2.
  • step S15 when the suspension is sucked in the state where the magnet 46 is brought close to the large diameter tube 56c (the small diameter tube 57b) of the enclosing tip 56 (or 57), the small diameter tube 56b (or the large diameter tube 56b) is used.
  • the magnetic carrier 2 bound to the nucleic acid 8 in the suspension and the treatment promoting magnetic particles 6 enclosed in the encapsulation chip 56 (or 57) are Magnetize.
  • the processing promoting magnetic particles 6 dispersed or suspended in the suspension have a larger particle size and a higher magnetic susceptibility than the magnetic carrier 2, they are suspended around the processing promoting magnetic particles 6.
  • the magnet 46 While attracting or adsorbing the turbid magnetic carrier 2, the magnet 46 is attracted to the inner wall of the enclosing tip 56 (or 57) close to the magnet 46 by a magnetic force stronger than the magnetic carrier 2 or directly or indirectly there. Adsorbs. By repeating suction and discharge in this state, the magnetic carrier 2 in the suspension can be efficiently captured on the inner wall.
  • step S16 the magnetic carrier 2 and the processing promoting magnetic particles 6 are encapsulated with the magnet 46 approaching the large diameter tube 56c (or the small diameter tube 57b) of the encapsulating tip 56 (or 57).
  • the enclosed chip 56 (or 57) is raised along the Z axis and extracted from the reaction vessel 23.
  • the cartridge container 114 Located above the cartridge container 114 (or 115).
  • the magnetic carrier 2 and the processing-promoting magnetic particles 6 inside the encapsulating chip 56 (or 57) are captured along the X axis while being captured on the inner wall of the encapsulating chip 56 (or 57).
  • the enclosing tip 56 (or 57) is lowered along the Z-axis in a state where the magnet 46 is brought close to the large diameter tube 56c (or the small diameter tube 57b) of the enclosing tip 56 (or 57).
  • the tip of the enclosing tip 56 (or 57) is inserted into the portion 22d. After that, the magnet 46 is separated and the magnetic liquid is removed, and the cleaning liquid accommodated in the liquid accommodating portion 22d is sucked and discharged, whereby the magnetic carrier 2 and the encapsulated processing promoting magnetic body are removed.
  • the particles 6 are washed.
  • step S17 the liquid is further moved to the liquid storage unit 22e for further cleaning.
  • the magnetic carrier 2 and the magnetic carrier 2 and the magnetic carrier 2 can be recovered by repeating suction and discharge in a state where the magnet 46 is brought close to the large diameter tube 56c (or the small diameter tube 57b) of the enclosing tip 56 (or 57).
  • the processing promoting magnetic particles 6 are captured on the inner wall of the enclosing tip 56 (or 57). With the magnet 46 approached and the magnetic carrier 2 and the processing promoting magnetic particles 6 being captured, the magnet 46 is raised along the Z-axis to above the substrate of the cartridge container 114 (or 115). Position.
  • step S18 the nozzle head 15 is further moved in the negative direction of the X axis to move to the liquid container 22j, and the magnet 46 is moved to the large diameter tube 56c (or 57) of the enclosing tip 56 (or 57).
  • the tip thereof is inserted into the eluate accommodated in the liquid accommodating portion 22j, and the suction and discharge are repeated while the magnetic field is applied.
  • the nucleic acid 8 bound to the magnetic carrier 2 is eluted from the magnetic carrier 2 into the liquid.
  • FIGS. 12 and 13 the casing is removed for the explanation of the inside of the apparatus.
  • the magnetic carrier processing apparatus 310 is, for example, a matrix of 4 rows (extending in the X-axis direction) and 6 columns (extending in the Y-axis direction) containing the magnetic reagent and magnetic drug kit according to the first embodiment.
  • a 24-hole microplate 314 in which liquid storage portions 322 are arranged is loaded on a stage and used for processing magnetic reagents.
  • the magnetic carrier processing apparatus 310 has a size of, for example, about 500 to 600 mm (X-axis direction), width of about 500 to 600 mm (Y-axis direction), and height of about 500 to 600 mm (Z-axis direction). It is. On the stage, for example, 12 microplates are loaded and used. Or, for example, if it is a 96-well microplate, a maximum of about 8 plates are used.
  • the microplate 314 of one of the 12 microplates contains a suspension in which the magnetic reagent 1 composed of the magnetic carrier 2 and the processing promoting magnetic particles 3 is suspended.
  • the remaining microplate contains or is ready to contain various other reagents such as lysis buffer solution, neutralization buffer solution, various washing solutions, detachment solution, bacteria extracted from 24 types of specimens, etc. Yes.
  • the magnetic carrier processing device 310 includes a nozzle head 315 of a dispenser and a moving mechanism 319 that can move the nozzle head 315 with respect to the entire range of the stage including the microplate 314 loaded on the stage.
  • the nozzle head 315 is provided with a head frame 315a having a suction / discharge motor 349 on its upper side, and a piston inside thereof by the suction / discharge motor 349 on its lower side.
  • the tip 26 a of the dispensing tip 26 is provided so as to be able to be inserted into the liquid storage portions 322 all at once.
  • the nozzle head 315 has a chip row in which the dispensing tips 26 are mounted in a nozzle row in which the nozzles 317 are arranged in the row direction (X-axis direction) and a nozzle 317 in the row direction (Y-axis direction). A tip row in which the dispensing tip 26 is mounted is formed on the nozzle row thus formed.
  • the nozzle head 315 of the dispenser is driven by the Z-axis moving ball screw 334 in the vertical direction with respect to the XY-axis moving body 311 that can be moved only in the X-axis direction and the Y-axis direction by the moving mechanism 319. It is connected to a Z-axis drive plate 335 provided so as to be movable, and is movable along the Z-axis.
  • the XY axis moving body 311 is provided with a motor 330c that rotatably supports and rotates the ball screw 334, and is mounted on the nozzle 317 below the bottom plate 339 of the XY axis moving body 311.
  • Magnetic force means 360 capable of applying and removing a magnetic field to the inside of the small-diameter tube 26b of the tip 26 is provided. Further, the stage has a U-shaped slit that is larger than the diameter of the nozzle 317 and thinner than the outer diameter of the thickest portion of the tip 26 in order to detach the tip such as the dispensing tip 26 from the nozzle 317. A formed chip attaching / detaching plate is provided.
  • the moving mechanism 319 includes an X-axis moving mechanism 319x that moves the XY-axis moving body 311 with respect to the microplate 314 in the X-axis direction, and the XY-axis moving body 311 with respect to the microplate 314.
  • a Y-axis moving mechanism 319y that moves along the axial direction; and a Z-axis moving mechanism 319z that moves the nozzle head 315 along the Z-axis direction with respect to the XY-axis moving body 311.
  • the X-axis moving mechanism 319x is driven to rotate by an X-axis drive motor 330a supported by a mechanism support plate 351d attached to the main body of the magnetic carrier processing apparatus 310, and the motor 330a.
  • Pulley 351b and pulley 351c pivotally supported by the mechanism support plate 351d, a timing belt 351a spanned between these pulleys 351b and 351c, and connected to the timing belt 351a to move along the X-axis direction
  • It has a possible X-axis drive plate 351e and two guide shafts 331 for guiding the X-axis drive plate 351e.
  • the Y-axis moving mechanism 319y is pivotally supported by a Y-axis drive motor 330b supported by the X-axis drive plate 351a, a pulley 352b rotated by the motor 330b, and the X-axis drive plate 351e.
  • a body 311 and a guide rail 352d for guiding the XY-axis moving body 311 along the Y-axis direction.
  • the motor 330c, the Z-axis drive plate 335, and the ball screw 334 correspond to the Z-axis moving mechanism 319z.
  • the magnetic force means 360 is provided so as to be movable along the row direction (X-axis direction) with respect to the chips 26, and the 24 chips 26 mounted on the nozzles 317.
  • Twenty-four columnar magnets 346 arranged so as to be sandwiched from both sides corresponding to each chip 26 so that a magnetic field can be applied to and removed from the inside at once are supported so that they can be deflected at substantially fixed positions.
  • the magnet arrangement member 361 arranged, six electromagnets 344 as magnetic pole changers capable of changing the magnetic pole of the magnet 346 by applying a magnetic field for turning, and the bottom plate 339, Electromagnet support in which six electromagnets 344 are arranged in a row along the row direction, that is, in the X-axis direction so as to be adjacent to each chip 26 at the height position of the narrow tube 26b of the chip 26 attached to the nozzle 317. Board 3 43 and a magnet moving mechanism that is indirectly supported by the electromagnet support plate 343 and allows the magnet arrangement member 361 to move.
  • the magnet moving mechanism includes a pulley 342 that is rotationally driven by a motor (not shown) provided on the electromagnet support plate 343, a pulley 342 that is pivotally supported by the support plate 343, and these pulleys 341 and 342. It has a passed timing belt 340, a connecting portion 347 that connects the timing belt 340 and the magnet arrangement member 361, and a guide rail 348 that guides the connecting portion 347.
  • Reference numeral 361e is a cover plate for preventing the magnet 346 from falling off the magnet arrangement member 361.
  • FIG. 14 is an enlarged view of the magnet arrangement member 361 and the electromagnet 344 according to the fourth embodiment shown in FIG.
  • At least three of the magnet array members 361 have a width that can be inserted between the chip rows, and have a length that extends in the row direction adjacent to the chips 26 attached to all 24 nozzles when inserted.
  • a comb-tooth member 361a and a base 361d formed integrally with the comb-tooth member 361a.
  • Each comb-tooth member 361a is provided with six columnar magnets 346 arranged at intervals corresponding to each chip 26 when approaching the chip 26 attached to each nozzle.
  • a pair of two corresponding magnets are sandwiched so that different magnetic poles face each other with respect to each chip 26 inserted in a gap 361b formed between two adjacent comb-tooth members 361a.
  • the magnet arrangement member 361 supports all the twenty-four columnar magnets 346 corresponding to each of the chips 26 in an overlapping manner and supports the magnets 346 so that they can be deflected at substantially fixed positions. It has a cylindrical bottomed hole 361c. The side wall of the hole 361c that is closest to each chip 26 is removed to the extent that the magnet 346 does not come off, allowing the magnet 346 to be closer to the chip 26.
  • the hole 361c has a radius that allows the accommodated magnet 346 to smoothly rotate about its rotational symmetry axis.
  • the electromagnet 344 When approaching each chip 26, the electromagnet 344 changes so that different magnetic poles of a set of two magnets 346 are arranged facing each chip 26 from both sides. Applying a magnetic field to redirect or reverse the magnetic pole. Since the magnet 346 is formed in a columnar shape (rotating body), the magnet 346 rotates with respect to the rotationally symmetric axis, and the magnetic pole is redirected or reversed at a substantially fixed position.
  • the magnets 346 arranged on the comb teeth member 361a closest to the six electromagnets 344 are first reversed or turned. Then, the magnets 346 of the comb-tooth members 361a can be sequentially reversed or redirected by reversing or changing the direction of the magnets 346.
  • the magnetic carrier or the processing promoting magnetic particles accommodated in the chip 26 can be agitated and stirred by applying a magnetic field fluctuation in each chip 26.
  • FIG. 15 shows a magnet array member 362 and the electromagnet 344 according to a fifth embodiment.
  • the magnet array member 362 is used in place of the magnet array member 361 according to the fourth embodiment in the apparatus 310 shown in FIG.
  • the magnet arrangement member 362 uses a spherical magnet 446 instead of the columnar magnet 346.
  • the spherical magnet 446 is accommodated in 24 substantially cylindrical holes 362c that accommodate the magnetic poles so that they can be turned.
  • the electromagnet 344 causes the magnetic poles of the pair of two magnets 446 to be arranged so as to face each other with the respective chips 26 sandwiched from both sides.
  • the magnetic field for turning is applied to turn or reverse the magnetic pole.
  • the magnet 446 Since the magnet 446 is formed in a spherical shape, the magnetic pole is redirected or reversed at a substantially fixed position. Since the spherical magnet 446 has a smaller area in contact with the hole 362c than the cylindrical magnet 346, the turning and reversal are performed more smoothly. In addition, it is almost as described in the magnet arrangement member 361.
  • FIG. 16 shows a magnet array member 363 and the electromagnet 344 according to a sixth embodiment.
  • the magnet array member 363 has 12 chips mounted on a nozzle head (not shown) having 12 nozzles 317 having two rows (extending in the X-axis direction) and six columns (extending in the Y-axis direction).
  • a total of 54 spherical magnets 446 corresponding to each of the six chips 26 are allowed to be overlapped with each other so that the magnetic field can be simultaneously applied to and removed from the inside of the 26 and can be changed at a substantially fixed position.
  • a connecting hole 363c is provided along the X-axis direction (row direction) in which three substantially cylindrical holes that accommodate the spherical magnet 446 are connected along the Y-axis direction.
  • the magnets 446 belonging to one set of two groups of magnets are arranged in a line along the Y-axis direction so as to sandwich the chip 26 from both sides. Yes.
  • the electromagnet 344 that is the magnetic pole changer is The magnetic pole of the rear end magnet 446 (B) is turned or reversed by applying a magnetic field for turning, and the magnetic pole of the front end magnet 446 (F) is changed or reversed in a chained manner in the chip 26. Vary the applied magnetic field.
  • the magnet array member 363 is provided so as to be movable along the row direction (X-axis direction), and one of the magnet array members 363 has a width that can be inserted between the nozzle rows, and is attached to all 12 nozzles when inserted.
  • it has three comb-tooth members 363a having a length extending in the row direction adjacent to the chip 26, and a base portion 363d formed integrally with the comb-tooth members 363a.
  • Each comb-tooth member 363a is provided with six connecting holes 363c arranged at intervals corresponding to each chip 26 along the X-axis direction when approaching the chip 26 attached to the nozzle. It has been.
  • FIG. 17 shows a magnet arrangement member 364 according to the seventh embodiment.
  • the magnet array members 364 allow each chip 26 to overlap so that the magnetic fields can be simultaneously applied to and removed from the 24 chips 26 mounted on the nozzle 317.
  • the magnet array member 364 is provided so as to be movable along the row direction (X-axis direction). At least three of the magnet array members 364 have a width that can be inserted between the nozzle rows, and have a length that extends in the row direction adjacent to the chips 26 attached to all 24 nozzles when inserted.
  • Each comb-teeth member 364a is provided with six block-shaped magnets 546 arranged at intervals corresponding to each chip 26 when approaching each chip, and two adjacent comb teeth A pair of two corresponding magnets 546 are provided so as to be sandwiched so that different magnetic poles face each other with respect to each chip 26 inserted in a gap 364b formed between the members 364a.
  • 18 (a) and 18 (c) show, for example, when the magnet 346 is brought close to the small-diameter tube 26b of the tip 26 attached to the nozzle 317 or the container 23 from one side, for example, the magnetic carrier 2 or the processing promoting magnetism.
  • tip 26 of the body particle 3 or the container 23 is shown.
  • a state in which the magnetic carrier 2 or the like is adsorbed only to the capture regions 346a and 246a on the inner wall on the magnets 246 and 346 side is shown.
  • 18 (b) and 18 (d) show the small diameter tube of the tip 26 of the magnetic carrier 2 or the processing promoting magnetic particle 3 when the two magnets 346 are brought close to each other with different magnetic poles facing each other.
  • the state in 26b or the container 23 is shown.
  • a state in which filter-like particle layers 346L and 246L are formed so that a magnetic carrier or the like partitions the thin tube 26b or the container 23 is shown.
  • FIG. 19A shows that the magnetic pole of the block-shaped magnet 546 approaching the chip 26 is fixed and is not deflected
  • FIG. 19B shows that the spherical magnet 446 is an electromagnet whose magnetic pole is a magnetic pole changer.
  • FIG. 19C the cylindrical magnet 336 is rotated at each fixed position by the magnetic field for turning. Each of the operations of rotating 180 degrees sequentially with respect to the symmetry axis and reversing (turning) is schematically shown.
  • the size of the magnetic carrier is not limited to the nano size, and may be a micro size.
  • the size of the magnetic particles for promoting processing may be nano-sized.
  • the numerical values, the number of times, the shape, the number, the amount, etc. used in the above description are not limited to these cases.
  • the flow tube in which the processing promoting magnetic particles are enclosed may be a part of the column or a part of the flow tube other than the chip and provided detachably.
  • the magnetic reagent or its kit may be enclosed in a microplate.
  • the present invention is limited to these cases. Instead, it may be captured by directly or indirectly attracting the surface of the member in which the magnet inserted into the container or chip is built. In this case, the surface of the member is a capture region.
  • a magnetic field may be exerted on the liquid storage portions arranged in a matrix shape. Further, a magnetic field may be applied to the chips or liquid storage units arranged in a line or row, or one chip or liquid storage unit. Note that the spatial relationships such as “column”, “row”, “X axis”, “Y axis”, “Z axis”, and the like are not fixed in the examples of drawings and the like. Furthermore, various substances, various parts, or various processes used for the magnetic carrier processing apparatus or the magnetic carrier processing method used in the above description, such as a magnetic carrier, magnetic particles for promoting processing, various reagents, etc.
  • Container liquid container, nozzle head, tip, moving mechanism, magnetic means, tip detaching mechanism, magnet, magnet array member, comb tooth member, motor, etc., contact process, capture process, separation process, particle layer formation process, mixing Processes or variable processes can be combined with each other with necessary changes.
  • the present invention relates to a magnetic carrier treatment apparatus and a treatment method therefor, and in particular, fields requiring treatment of biopolymers such as genes, immune systems, amino acids, proteins, and sugars, and biomolecules such as biochemistry, industrial It can be used in various fields such as fields, agricultural fields such as food, agriculture, fish processing, pharmaceutical fields, hygiene, health, immunity, disease, genetics, and other medical fields.

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Abstract

 本発明は、磁性試薬、磁性試薬キット、磁性担体処理方法およびその処理装置に関し、迅速かつ効率的にナノサイズを含む微小な粒径の磁性担体を効率よく処理することを目的としてなされたものである。 磁場を受けて磁化可能であって、液中の所定の化学物質または生体と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体と、磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能でかつ前記液の移動または磁場により液中を移動可能に形成され前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の処理促進用磁性体粒子と、を有するように構成する。

Description

磁性試薬、磁性試薬キット、磁性担体処理方法およびその処理装置
 本発明は、磁性試薬、磁性試薬キット、磁性担体処理方法およびその処理装置に関するものである。
 近年、核酸、蛋白質、糖鎖等の高分子化合物の解析、処理等において、固相表面積をより拡大してより高い反応性を目指して、より微小化されたナノサイズを含むような微小な粒径の磁性体を用いるようになった。また、細胞、細菌等のマイクロサイズの生体についても、ある種のレセプターをもつ微小な粒径の磁性体を用いて生体の表面と効率よく結合させて生体を覆うことができる。このように微小な粒径の磁性体を標的である高分子化合物や生体を含有する溶液中に混合、懸濁させて、標的である高分子や生体の検出、分離、単離、抽出等の処理を、通常のマイクロサイズ(1から数100μm)の磁性体粒子を用いる処理に比較して、より効率的に行なうことができることになる。
 このような微小な粒径の磁性体を外部磁場により容易かつ迅速に回収することで、遠心分離やろ過といった工程を必要とせずに、磁性体を回収する磁石を備えた自動化システムを利用することができれば、ゲノミクス分野では、DNAやmRNAの単離、生成、プロテオミクス分野では、タンパク質やペプチドの単離、生成、タンパク質間相互作用の解析、医療分野では薬剤ターゲッティング、病原性ウィルスの検出等幅広い分野でその利益が大きい。特に、核酸抽出、ペプチド抽出、イムノアッセイといった部門での利益が期待されている。
 しかしながら、磁性体の粒径が微小化すると、帯びる磁気モーメントおよび通る磁束が小さくなる。そのために、磁性体の分離や捕獲に必要な時間が一層かかるようになり処理時間が長引き、短時間では完全な分離を行なう処理が困難になるおそれがあるという問題点を有していた。例えば、分注チップ内に磁場を及ぼし吸引吐出の際にその内壁に磁性体を吸着させて分離する場合には、磁性体を通る磁束が小さいために吸引吐出速度を落とす必要があり、処理時間がかかるおそれがあった。また試薬液等を吸引する際に、吸着した筈の微小な粒径の磁性体が分注チップから流れ出てしまうおそれがあった。一方、強力な磁石で強い磁場を及ぼして磁性体を吸着させようとすると、粒径が微小化すればするほど、より強固にペレット状に凝集し、再懸濁の時間がより一層かかるおそれがあるという問題点を有していた。
 なお、これらの点を改良するために、温度によって応答性を示す高分子組成物として、水溶液の状態で上限臨界溶液温度を示す高分子を、粒径が100nmから200nm程度の磁性体粒子に固定化した温度応答性磁性体粒子を用いることが行なわれている(特許文献1)。そこでは該温度応答性磁性体粒子の水溶液を加熱して、その温度を上限臨界溶液温度以下にして、該温度応答性磁性体粒子を凝集させた上で、磁力を及ぼして回収するものである。この場合には、該粒子の分離には、磁力手段を用いる他、温度制御手段を用いて温度の制御を行う必要があり、装置が複雑化しかつ操作上の手間や処理時間がかかるおそれがあるという問題点を有していた。
 一方、鉄ビーズを焼結させて製造した多孔質部材をカラム内に固定させ、微小な磁性体粒子を含有する溶液を通過させる際に該多孔質部材に磁場を及ぼすことで該微小な磁性体粒子を分離するマイクロカラムシステムがあった(特許文献2)。この場合、前記磁性体粒子を含有する溶液をカラムの吐出方向に一方的に流すことで前記磁性体粒子を捕獲して分離することになる。すると、該溶液に含有する磁性体粒子を完全に捕獲するには、該溶液を希釈化させてまたは試薬量を増加させて液体量を増やして圧力をかけて循環させることが必要となり、装置規模が増大し、処理時間がかかりまたは試薬量が増加するおそれがあった。さらに、カラム内に固定された焼結体の多孔のあちこちに前記磁性体粒子を吸着させて捕獲するために、該焼結体に洗浄液を流して洗浄し、液中に再懸濁し、さらに再懸濁した磁性体粒子を濃縮化する短時間での処理が困難となるおそれがあるという問題点を有していた。また、多孔質部材はカラムに固定されており、液の全体を動き回ることができる同量の粒子状部材と比較して液中の磁性担体との遭遇性が低くなるおそれがあるという問題点を有していた。
特開2009-13207号公報 特開平11-319628号公報
 そこで、本発明は、以上の問題点を解決するためになされたものであり、その第1は、ナノサイズを含む微小な粒径をもつ磁性担体の捕獲または再懸濁を含む処理を迅速かつ効率的に行なうことができる磁性試薬、磁性試薬キット、磁性担体処理方法およびその処理装置を提供することを目的としてなされたものである。その第2は、簡単な構成を用いて、ナノサイズを含む微小な粒径をもつ磁性体を含む種々の処理の自動化に適した磁性試薬、磁性試薬キット、磁性担体処理方法およびその処理装置を提供することを目的としてなされたものである。
 第1の発明は、磁場を受けて磁化可能であって、液中の所定の化学物質または生体と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体と、磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能であって前記液の移動または磁場により液中で移動可能に形成され前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の処理促進用磁性体粒子と、を有する磁性試薬または磁性試薬キットである。
 ここで、「前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する」とは、前記磁性担体の全部の捕獲または再懸濁の処理を完了しまたは完了に近い状態になるまでにかかる時間を短縮化することである。「磁性担体の捕獲」とは、磁性担体を液から分けること、「磁性担体の再懸濁」とは、捕獲した磁性担体を液中に戻し懸濁させることをいう。
 「磁性担体」とは、液中の所定の化学物質または生体と結合可能であって、該液中に懸濁可能な粒径をもつ磁性体を有する担体である。磁場を受けた場合には速やかに磁化され、磁場を除去した場合には、速やかに消磁されることが好ましい。そのような素材としては、例えば、超常磁性体がある。超常磁性体としては、例えば、磁性イオンを含有した酸化物ガラスやフッ化物ガラスのような非晶質のイオン性化合物がある。「結合」には、例えば、特異的結合または非特異的結合を含み、反応、イオン結合、共有結合、化学的または物理的吸着等をも含む。
 「所定の化学物質または生体」とは、いわゆる処理の標的であって、DNA若しくはRNA等の核酸、抗原若しくは抗体を含むタンパク、アミノ酸、脂肪、若しくは糖鎖等を含む生体高分子、ダイオキシン、金属、塩化ポリマー若しくは無機物等を含む環境物質または毒素等を含む化学物質、または、細胞、細菌若しくはウィルス等の生体である。
 「液中に懸濁可能な粒径」であるので、例えば、数ナノメートルから数百マイクロメートルであって、好ましくは、数ナノメートルから数十マイクロメートルである。
 「処理促進用磁性体粒子」とは、液中の所定の化学物質または生体との結合可能性が要求されずに、磁場が印加された際に、該磁場によってそれ自身が磁化されて前記磁性担体または処理促進用磁性体粒子を磁力によって吸着させることができるとともに、液中で液の移動または磁場によって移動可能に形成されたものである。したがって、該処理促進用磁性担体粒子は、液の移動、例えば、液の攪拌や振盪によって液中に分散または懸濁させることができるので、液中に懸濁する磁性担体に対し至近距離で、かつ磁性担体が吸着する容器やチップの内壁等の所定捕獲領域の面積に比較して拡大された表面積によって前記磁性担体を捕獲することができる。また、前記処理促進用磁性担体は、磁場によって、磁場方向にそれ自身引き付けられて移動することによって、磁性担体を吸着させた状態で容器やチップの磁場方向にある内壁に直接的または間接的(処理促進用磁性体粒子又は磁性担体を介して)に吸着させることができる。このようにして、処理促進用磁性体粒子は、それがない場合に比較して、磁性担体に与える磁力が強化され、磁場による磁性担体の捕獲(または分離)処理を促進することができる粒子である。
 そのためには、一般的に前記磁性担体とは異なる構成をもち、例えば、異なる粒径または異なる素材をもつことが好ましい。例えば、該処理促進用磁性体粒子は、少なくとも該粒子を囲む液よりも大きな磁束密度を有し、より好ましくは、前記磁性担体よりも大きな磁束が貫き(大きな磁気モーメントをもち)、または前記磁性担体よりも大きな磁束密度をもつのが好ましい。これによって、磁性担体を磁力によって引き付けることができる。また、貫く磁束が大きければ、受けた磁場に強く磁化されて磁場方向に一層強く引き付けられる。これによって前記磁性担体が吸着して捕獲される捕獲領域の面積が単に磁石の磁極の面積程度の容器や分注チップの内壁だったものが処理促進用磁性体粒子の表面積にまで、拡大することになる。
 また、処理促進用磁性体粒子は、液の移動または磁場によって液中で移動可能に形成されている。したがって、一旦磁場をかけて磁性担体を捕獲した際に凝集した処理促進用磁性体粒子同士を、磁場を除去した上で液の攪拌または振盪を加えることで、再分散または再懸濁させることによって該処理促進用磁性担体からの磁性担体の乖離または離脱を促進して磁性担体の再懸濁を容易化する。その場合には、処理促進用磁性体粒子は、それを収容する容器や分注チップよりも十分に小さい大きさであるが、前記磁性担体よりも大きく形成して、液の移動による影響を受けやすくするのが好ましい。
 このようにして、処理促進用磁性体粒子は、磁性担体に比較して、好ましくは、より大きく形成し、かつ、前記磁性担体よりも大きな磁束が貫くように構成することで、磁性担体の捕獲および再懸濁の双方の処理を促進することができる。
 該処理促進用磁性体粒子のサイズ、素材、構造(単一ドメイン、表面を加工、被覆等)、その性質(例えば、常磁性、超常磁性、強磁性、フェリ磁性等)、その量はその処理目的に応じて定めることができる。該処理促進用磁性体粒子の素材は、例えば、強磁性体として、例えば、鉄系、パーマロイ系、フェライト系、アモルファス系、水酸化鉄、酸化水和物、酸化鉄、混合酸化鉄、クローム鋼等がある。
 鉄系としては、例えば、電磁軟鉄(Fe)、ケイ素鋼(Fe-3Si)、鉄-アルミ(Fe-3.5Al)、パーメンジュール(Fe-50Co-2V)、センダスト(Fe-9.5Si-5.5Al)がある。パーマロイ系としては、例えば、45パーマロイ(Fe-45Ni)、78パーマロイ(Fe-78.5Ni)、スーパーマロイ(Fe-79Ni-5Mo)、ミューメタル(Fe-77Ni-2Cr-5Cu)、ハードパーム(Fe-79Ni-9Nb)がある。
 フェライト系としては、例えば、Mn-Znフェライト(30MnO-17ZnO-51Fe2O3)、Ni-Znフェライト(15NiO-35ZnO-51Fe2O3)、Cu-Znフェライト(22.5CuO-27.5ZnO-50Fe2O3)がある。アモルファス系としてはFe基アモルファス(Fe-5SDi-3B)、Co基アモルファス(Co81.8-Fe4.2-Ni4.2-SI10-B20)がある。
 前記処理促進用磁性体粒子および前記磁性担体が磁化されることによって、容器または分注チップの内部の内壁を含む所定捕獲領域に引き付けられて吸着するだけでなく、該磁性担体は該内壁等に吸着した処理促進用磁性体粒子自体にも吸着することになるので、前記磁性担体が直接的または間接的に吸着されるべき部分である前記捕獲領域が拡大することになって確実かつ効率的に磁性担体が分離されることになる。
 「磁性試薬」としては、前記複数の処理促進用磁性体粒子と複数の磁性担体とを混在させる場合、またはそれらを液中に含有させた試薬液があり、「磁性試薬キット」としては、前記複数の処理促進用磁性体粒子からなる試薬と、複数の磁性担体からなる試薬とのセット、または、これらのどちらか一方をまたは両方を液中に含有させた試薬液のセットまたは試薬と試薬液とのセットがある。
 ここで、該処理促進用磁性体粒子は、前記所定の化学物質又は生体と結合不能となるような素材又はその素材で被覆するように加工するのが好ましい。これは、ある種の鉄等の素材に対するDNA等の標的の非特異的結合性に基づく標的の結合を防止するために、該処理促進用磁性体粒子の表面を、非特異的結合性のない物質で被覆する等の加工するのが好ましい。これによって、磁性担体自体の結合能力を高めることができる。または、その他の加工によって磁性担体の前記処理促進用磁性体粒子からの乖離または離脱能力を高めるのが好ましい。
 第2の発明は、前記処理促進用磁性体粒子の粒径は前記磁性担体の粒径よりも大きく形成された磁性試薬または磁性試薬キットである。
 該処理促進用磁性体粒子は、少なくとも、該処理促進用磁性体粒子が懸濁する液よりも大きな磁束密度をもつ場合には、磁場が発生するために、それがない場合に比較して該処理促進用磁性体粒子の表面に前記磁性担体が引き付けられまたは吸着し、または該処理促進用磁性体粒子自体が磁場方向に引き付けられまたは所定捕獲領域に吸着して、捕獲(分離)処理を促進することになる。特に、該処理促進用磁性体粒子が、同一の磁場に対して前記磁性担体よりも大きな磁束が通る場合には、磁性担体より大きな磁気モーメントをもつので、同一の磁場に対して前記処理促進用磁性体粒子は磁性担体よりも磁場に対して大きな磁力を受けまたは生じさせる。処理促進用磁性体粒子は移動可能な粒子状に形成されているので、磁場に対して大きな力で容器中または分注チップ等の流管中を磁場方向に引き付けられまたは吸着し、かつそれ自身、より小さい磁性担体を表面に引き付けまたは吸着させることになる。なお、粒径が大きい場合には磁性担体と処理促進用磁性体粒子は、同一の素材であっても良い。
 第3の発明は、前記処理促進用磁性体粒子の粒径は、0.001mmから5mmの大きさであり、前記磁性担体の粒径は、数nmから数10μmである磁性試薬または磁性試薬キットである。
 前記処理促進用磁性体粒子を分注チップが吸引吐出可能である場合には、該処理促進用磁性体粒子の粒径は、該分注チップの先端または細径管の内径よりも小さいことが好ましい。このような場合には、粒径としては、例えば、0.001mmから0.5mmである。一方、前記処理促進用磁性体粒子を前記分注チップ等の流管に封入して用いることもできる。そのような場合には、粒径としては、例えば0.5mmから5mm程度が好ましい。なお、処理促進用磁性体粒子を分注チップに封入する場合には、その細径管に液の移動または磁場により移動可能であるが1列状に順序を乱さずに細径管の両端近傍の2箇所に設けた止め部によって挟むように封入し、または前記太径部に2枚のフィルタで挟んでその内部に液の移動または磁場により移動可能に封入するのが好ましい。2枚のフィルタの下側では液は通過可能であるが、前記処理促進用磁性体粒子が通過不能であり、上側では気体は通過可能であるが液および前記処理促進用磁性体粒子が通過不能であるようなポア径を設け、2つの止め部は、液は通過可能であるが、前記処理促進用磁性体粒子は通過不能であって該粒子によって閉塞されないような隙間を有するように設ける。
 第4の発明は、前記処理促進用磁性体粒子の磁化率は前記磁性担体の磁化率よりも常温において大きい磁性試薬または磁性試薬キットである。ここで、「磁化率」の代わりに「透磁率」であっても良い。ここで、「常温」とは、例えば、強磁性体、フェリ磁性体等のキューリ温度未満の温度である。
 磁性体が等方性の場合には磁化と磁束密度と磁場とが同一方向である。このような場合には、磁化率は磁性体によって定まる無次元の定数となり、前記磁性担体と処理促進用磁性体粒子の粒径が同一の場合には磁化率が大きい方が磁束が大きいことになる。
 第5の発明は、前記処理促進用磁性体粒子は強磁性体を有し、前記磁性担体は常磁性体または超常磁性体を有する磁性試薬または磁性試薬キットである。
 一般に、強磁性体は、常磁性体、超常磁性体、フェリ磁性体に比較して磁化率が大きく強く磁化されるので、前記磁性担体に比較して強力に磁化されるべき処理促進用磁性体粒子に適している。一方、常磁性体、超常磁性体は、一般に残留磁化が少なく、磁場を印加すると磁化され、磁場を除去すると速やかに消磁されるので、再懸濁が強磁性体に比較して容易であり磁性担体に適している。なお、強磁性体であっても、微粒子の集合は超常磁性を示す超常磁性体となり得る。
 第6の発明は、前記処理促進用磁性体粒子は、前記磁性担体と異なる大きさまたは異なる素材で形成され、所定の化学物質または生体と結合可能である磁性試薬または磁性試薬キットである。
 ここで、「所定の化学物質または生体」は、磁性担体の「所定の化学物質または生体」と一致する場合と、異なる場合とがある。一致する場合には、全体としてより効率的に標的の分離を行なうことができることになる。異なる場合には、同時に2つの処理を並行して行うことができることになる。この場合には、磁性担体と同様に、前記処理促進用磁性体粒子の非特異的結合性を利用し、または、該処理促進用磁性体粒子についても磁性担体と同様のまたは異なる特異的結合用の表面加工(例えば、結合物質の被覆等)が行われることになる。
 第7の発明は、前記磁性担体は、1または複数の液収容部をもつカートリッジ容器の1の液収容部内に収容され、前記処理促進用磁性体粒子は、前記カートリッジ容器の前記1の液収容部内または他の液収容部内に収容されて、1または複数の液収容部の開口部が穿孔可能な薄膜で密閉された磁性試薬または磁性試薬キットである。
 該処理促進用磁性体粒子は、好ましくは、前記液収容部に、液の移動または外部より及ぼした磁場によって移動可能となるように収容される。また、分注チップに対して吸引吐出可能となるように形成されるのが好ましい。
 第8の発明は、前記磁性担体は、1または複数の液収容部をもつカートリッジ容器の少なくとも1の液収容部内に収容され、該液収容部の開口部が穿孔可能な薄膜で密閉され、前記処理促進用磁性体粒子は、液の移動または外部より及ぼした磁場によって移動可能となるように液の吸引または吐出が可能で前記液収容部内に挿入可能な口部をもつ処理促進用磁性体粒子封入流管内に封入された磁性試薬キットである。
 「処理促進用磁性体粒子封入流管」は、分注チップのように、移動可能なノズルヘッドに設けられ気体の吸引吐出を行うノズルに装着して用いることができるように、液体の吸引吐出を行なう口部の他に装着用開口部をもつチップとして形成された後述する処理促進用磁性体粒子封入チップであるのが好ましい。なお、前記流管はカラムのように液体を一方向に流すものに封入される場合も含むことができる。また、流管の一部に封入されその部分が流管に対して着脱可能に設けられる場合がある。
 なお、前記カートリッジ容器が1または複数の液収容部の他に、1または複数のチップ収容部を有し、該チップ収容部に分注チップや、前記処理促進用磁性体粒子が封入された処理促進用磁性体粒子封入流管、例えば、処理促進用磁性体粒子封入チップを保持するようにしても良い。また、前記カートリッジ容器の1のチップ収容部に保持されるようにしても良い。さらに、穿孔チップを該カートリッジ容器の他の1のチップ収容部に保持されるようにしても良い。
 第9の発明は、所定の化学物質または生体からなる標的を含有する液と、磁場を受けて磁化可能であって液中の前記標的と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体、および磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能でかつ液の移動または磁場により液中で移動可能に形成され前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の処理促進用磁性体粒子とを接触させる接触工程と、磁場を及ぼして前記処理促進用磁性体粒子および前記磁性担体を磁化させて前記磁性担体または前記処理促進用磁性体粒子を前記処理促進用磁性体粒子の表面に吸着させるとともに、該磁性担体および前記処理促進用磁性体粒子を所定捕獲領域に直接的または間接的に吸着させることで該磁性担体を捕獲させる捕獲工程とを、有する磁性担体処理方法である。
 前記接触工程は、例えば、容器中、一方向に液体を流すカラム中で、または液体の吸引吐出を行なう分注チップ中で行なう。ここで、「磁場」の大きさとしては、例えば、1000ガウスから数1000ガウス程度であって、市販の永久磁石を用いて得ることができる。
 「磁場を及ぼす」には、前記容器の側面または底面に、またはカラムやチップの側面に接離可能に設けた永久磁石を接近させることによって行なう。または、永久磁石を非磁性体の素材、例えば、プラスチック、樹脂等で包んだ部材を、前記容器またはカラムの開口部、またはチップのノズルの装着用開口部を通って挿抜可能に設け、前記開口部を通して内部に挿入することによって容器若しくはチップの内部に磁場を及ぼす。ここで、「捕獲領域」とは、前記磁性担体が直接的に吸着可能(捕獲可能)な領域であって、前記永久磁石が接近する前記容器の側面の内壁、底面の内壁またはチップ等の流管の側面の内壁、または、前記部材の外側部分である。前記処理促進用磁性体粒子を用いることで、捕獲領域としての有効な表面積が拡大し、該捕獲領域に直接的または間接的に吸着した処理促進用磁性体粒子の表面にも磁性担体が直接吸着することになる。
 なお、接触工程または分離工程において、チップにより吸引吐出を繰り返すことで前記溶液を攪拌させて処理を効率化させることができる。分離工程の後には、必要ならば、例えば、分離した前記磁性担体から結合した前記化学物質または生体を乖離する乖離工程や、前記磁性担体を再懸濁させるために、前記磁場を除去した状況で、チップにより懸濁液の吸引吐出を繰り返すことで、吸着した磁性担体を再懸濁する再懸濁工程を設ける。
 なお、前記接触工程は、前記チップを用いて吸引した前記処理促進用磁性体粒子および前記磁性担体を移送して、前記標的含有溶液を収容した前記容器内に吐出することによって、または、前記チップを用いて吸引した前記標的含有溶液を移送して、前記処理促進用磁性体粒子および前記磁性担体を収容する容器内に吐出することによって、もしくは、磁場を及ぼすことによって前記処理促進用磁性体粒子および前記磁性担体が内部に吸着したチップ内に前記標的含有溶液を吸引することによって接触させる。
 第10の発明は、前記磁場を除去した状態で、捕獲した前記磁性担体を含有する液体について攪拌または振盪することで前記磁性担体を液中に再懸濁する再懸濁工程をさらに有する磁性担体処理方法である。
 第11の発明は、前記処理促進用磁性体粒子の前記粒径は、前記磁性担体の前記粒径よりも大きく形成された磁性担体処理方法である。
 第12の発明は、前記処理促進用磁性体粒子の磁化率は前記磁性担体の磁化率よりも常温において大きく形成された磁性担体処理方法である。したがって、例えば、前記処理促進用磁性体粒子は強磁性体を有するのが好ましく、磁性担体は、超常磁性体または常磁性体を有することが好ましい。
 第13の発明は、磁場を受けて磁化可能であって液中の標的と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径を持つ複数の磁性担体、または磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能でかつ液の移動または磁場により液中で移動可能に形成され前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の前記処理促進用磁性体粒子を少なくとも含有する液の吸引および吐出を行なう1または2以上のチップまたは前記液を収容した1または2以上の液収容部を貫くように磁力線を形成して、前記磁性担体または前記処理促進用磁性体粒子を前記所定捕獲領域である前記チップの内壁または前記液収容部の内壁に直接的または間接的に吸着させかつ前記チップまたは前記液収容部を仕切るように前記磁性担体または前記処理促進用磁性体粒子を展開させて粒子層を形成する粒子層形成工程と、少なくとも所定の化学物質または生体からなる標的を含有する液を、前記粒子層を通過するように移動させる通過工程とを有する磁性担体処理方法である。本発明は第9の発明と組み合わせることができる。前記「粒子層形成工程」は前記チップまたは液収容部を貫くように磁力線束を形成して、前記磁性担体または前記処理促進用磁性体粒子を所定捕獲領域である前記チップの内壁または前記液収容部の内壁に直接的または間接的に吸着させかつ前記チップまたは前記液収容部を仕切るように前記磁性担体等を展開させる。前記「通過工程」は、例えば、前記チップを用いて、前記チップ中においてまたは前記液収容部に対して前記液の吸引および吐出を行いまたはそれを繰り返すことで行なう。
 該チップまたは液収容部を貫くように磁力線束を形成するには、例えば、前記チップまたは液収容部を挟んで異なる磁極同士が向き合うように2つの磁石を位置させることによって行なう。展開によって、磁性担体または処理促進用磁性体粒子またはその混合物は前記チップまたは液収容部を、例えば垂直方向に仕切るようなフィルタ状の粒子層を形成する。前記磁性担体、処理促進用磁性体粒子またはその混合物の量は、前記液収容部またはチップの内径に基づいて、展開してそれらを仕切ることができるように定める。
 第14の発明は、所定の化学物質または生体からなる標的を含有する液、磁場を受けて磁化可能であって前記液中の標的と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の前記磁性担体を含有する液、および磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能でかつ液の移動または磁場により液中で移動可能に形成された前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の前記処理促進用磁性体粒子を含有する液の中から選択された少なくとも2種類の液の混合液を1または2以上のチップに導入しまたは1もしくは2以上の液収容部に収容する混合工程と、前記混合液を導入した前記チップまたは収容した前記液収容部に接近させた磁石の磁極を変向用磁場を及ぼして変向させることで、前記磁性担体または前記処理促進用磁性体粒子を液中で変動させる変動工程と、を有する磁性担体処理方法である。本発明は、第13の発明に係る前記粒子層形成工程または通過工程と組み合わせることも可能である。「変向」には、磁極を通る磁力線の向きを逆向きに変える反転をも含む。
 第15の発明は、各種試薬を収容可能な1または2以上の液収容部を有する容器と、気体の吸引吐出を行なう1または2以上のノズルが設けられたノズルヘッドと、前記ノズルに着脱可能に装着され、先端が前記液収容部内に挿入可能に設けられた1または2以上のチップと、前記ノズルヘッドと前記容器との間を相対的に移動可能とする移動機構と、前記ノズルに装着されたチップまたは前記液収容部の内の少なくとも1の内部に磁場を及ぼしかつ除去することが可能な磁力手段とを有し、前記液収容部の内の少なくとも1には、前記チップによって吸引吐出可能であって、磁場を受けて磁化可能であり液中の所定の化学物質または生体と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体を収容し、磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能であって前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の処理促進用磁性体粒子を、前記液収容部の少なくとも1に前記チップによって吸引吐出可能であって前記液の移動または磁場により液中で移動可能となるように収容し、または前記チップの少なくとも1に液の移動または磁場により液中で移動可能となるように封入した磁性担体処理装置である。なお、前記チップまたは前記処理促進用磁性体粒子を封入したチップ(処理促進用磁性体粒子封入チップ)は、前記容器が有するチップ収容部に、前記ノズルに装着可能となるように保持されるのが好ましい。
 第16の発明は、前記ノズルヘッドに設けられた前記ノズルに装着可能な1または2以上の穿孔用チップをさらに有し、前記容器の各液収容部は、前記ノズルに装着された穿孔用チップにより穿孔可能な薄膜で密閉された磁性担体処理装置である。なお、該穿孔用チップは、前記容器のチップ収容部に、前記ノズルに装着可能となるように保持されるのが好ましい。前記容器は、プレパック式カートリッジ容器ということになる。
 第17の発明は、前記処理促進用磁性体粒子の前記粒径は、前記磁性担体の前記粒径よりも大きい磁性担体処理装置である。
 第18の発明は、前記処理促進用磁性体粒子の磁化率は前記磁性担体の磁化率よりも常温において大きい磁性担体処理装置である。
 第19の発明は、各種試薬を収容可能な1または2以上の液収容部を有する容器と、気体の吸引吐出を行なう1または2以上のノズルが設けられたノズルヘッドと、前記ノズルに着脱可能に装着され、先端が前記液収容部内に挿入可能に設けられた1または2以上のチップと、前記ノズルヘッドと前記容器との間を相対的に移動可能とする移動機構と、前記ノズルに装着されたチップまたは前記液収容部の内の少なくとも1の内部に磁場を及ぼしかつ除去することが可能な磁力手段とを有し、前記液収容部の内の少なくとも1には、前記チップによって吸引吐出可能であって、磁場を受けて磁化可能であり液中の所定の化学物質または生体と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体、または磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能であって前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進し、前記チップによって吸引吐出可能であって前記液の移動または磁場により液中で移動可能となる複数の処理促進用磁性体粒子を収容し、前記磁力手段は、前記チップまたは液収容部に対し相対的に移動可能に設けられ、前記ノズルに装着された各チップまたは前記各液収容部の内部に一斉に磁場を及ぼしかつ除去することが可能な1組の対応する複数の磁石は、前記各チップまたは各液収容部に接近した際には各組ごとに少なくとも2個の磁石の相異なる磁極が前記各チップまたは液収容部を挟んで向き合うように配列された磁石配列部材を有する磁性担体処理装置である。なお、前記磁石配列部材は、前記各磁石が前記チップまたは液収容部と交わらない直線状経路に沿って移動可能に設けるのが好ましい。ここで、「磁石」は永久磁石または電磁石であるが永久磁石が好ましい。
 第20の発明は、各種試薬を収容可能な1または2以上の液収容部を有する容器と、気体の吸引吐出を行なう1または2以上のノズルが設けられたノズルヘッドと、前記ノズルに着脱可能に装着され、先端が前記液収容部内に挿入可能に設けられた1または2以上のチップと、前記ノズルヘッドと前記容器との間を相対的に移動可能とする移動機構と、前記ノズルに装着されたチップまたは前記液収容部の内の少なくとも1の内部に磁場を及ぼしかつ除去することが可能な磁力手段とを有し、前記液収容部の内の少なくとも1には、前記チップによって吸引吐出可能であって、磁場を受けて磁化可能であり液中の所定の化学物質または生体と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体、または磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能であって前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進し、前記チップによって吸引吐出可能であって前記液の移動または磁場により液中で移動可能となる複数の処理促進用磁性体粒子を収容し、前記磁力手段は、前記チップまたは液収容部に対し相対的に移動可能に設けられ、前記ノズルに装着された前記各チップまたは前記各液収容部の内部に一斉に磁場を及ぼしかつ除去することが可能であって、1の前記チップまたは前記液収容部ごとに1組の対応する1または複数の磁石が、その磁極が変向可能となるように支持された磁石配列部材と、変向用磁場を及ぼすことによって前記各磁石の磁極を変向することが可能な磁極変向器とを有する磁性担体処理装置である。ここで、「変向用磁場」とは、前記各磁石の磁極を変向させるのに十分な大きさの磁場であって、ある磁石に対する変向用磁場は、例えば、該磁石がその周辺に配置された他の磁石から受ける磁力の総和よりも大きい磁力に相当する磁場であり、その大きさは、各磁石の磁力、磁石間の距離を含む各磁石の配列、磁石の個数、磁石の形状、各磁石の支持状態等に依存して定められる。該変向用磁場の大きさは一般的に各磁石による磁場の大きさとは異なる。なお、本発明を第19の発明と組み合わせることが可能である。この場合には、前記各チップまたは液収容部を挟むように向き合う磁石の磁極を変向させることになり、磁場の変動の効果は大きい。なお、磁極の変向は略定位置で行われるのが好ましい。
 第21の発明は、前記各磁石は回転体状に形成され、前記磁石配列部材は、前記各組の対応する複数の前記各磁石が回転により略定位置で連鎖的に変向可能となるように所定間隔を空けて1列状に配列された1または2群の磁石群を有し、前記磁極変向器は、各磁石群の先端の磁石が前記チップまたは液収容部に接近するように前記磁石配列部材を移動させた際に、前記各群の後端の磁石の磁極を変向用磁場を及ぼして変向させることによって、先端の磁石の磁極を変向させて前記チップまたは液収容部に及ぼす磁場を変動させる電磁石を有する磁性担体処理装置である。ここで、「回転体状」には、回転対称軸線に垂直な断面が該軸線を中心に持つ円形となる立体形状である。「所定間隔」としては、例えば、前記チップまたは液収容部を間に挟むことが可能な間隔である。前記電磁石は、例えば、ノズルヘッド、磁石配列部材自体、または該ノズルヘッドに関する移動機構等に設ける。ここで、電磁石が発生する磁力の大きさおよび向きは、該電磁石に流す電流の向き及び大きさに基づく。また、本発明と第19の発明とを組み合わせることが可能であり、この場合には、各組の複数の磁石は、少なくとも2群の磁石群を有することになる。
 なお、前記容器の液収容部がマトリクス状に配列され、前記ノズルヘッドには前記ノズルがマトリクス状に配列され、前記ノズルに装着された前記全チップは、前記容器の全部または一部のウェルに一斉に挿入可能に設けられるとともに、前記磁力手段の前記磁石配列部材は、行方向に沿ってノズルが配列されたノズル行もしくは液収容部が配列された液収容部行および列方向に沿ってノズルが配列されたノズル列もしくは液収容部が配列された液収容部列が各々設けられた前記ノズルヘッドもしくは容器に対して、前記行方向または列方向に沿って相対的に移動可能に設けられるとともに、前記行方向または列方向に沿って延び、かつ少なくとも1が前記ノズル行もしくは液収容部行間またはノズル列もしくは液収容部列間に挿入可能であって挿入した際に前記ノズルに装着された全チップもしくは全液収容部群と隣接可能な形状および大きさを有する複数本の櫛歯部材と、該櫛歯部材と連結しまたは一体的に形成された基部とを有し、前記各櫛歯部材にはそれに隣接可能な各チップもしくは各液収容部に対応する位置に前記列間隔または行間隔で配列された1または複数の磁石が設けられたものが好ましい。ここで、マトリクス状には、1列状または1行状も含む。
 第1の発明、第9の発明、または第15の発明によれば、液中の標的と結合可能な磁性担体を、磁場により磁化可能な処理促進用磁性体粒子とともに液と接触させた上で、磁場を印加させることで磁性担体および処理促進用磁性体粒子を磁化させて、該磁性担体を処理促進用磁性体粒子の表面に引きつけまたは吸着させ、さらに該処理促進用磁性体粒子を容器またはチップ等の所定捕獲領域に磁場を介して直接的または間接的に引きつけまたは吸着させることによって、前記所定捕獲領域の表面積が拡大することになる。そのために、前記磁性担体を迅速かつ効率的に捕獲することができる。
 また、該処理促進用磁性担体は、液の移動または磁場によって液中を移動可能であるので、液中に懸濁する磁性担体との遭遇性が高く、かつ、液中での至近距離で磁性担体を引き付けまたは吸着させることができるので、捕獲が迅速でありかつ捕獲効率が高い。
 さらに、処理促進用磁性体粒子は、液の移動または磁場によって液中を移動可能に設けているので、一旦磁場を及ぼして磁性担体を捕獲した際に凝集した処理促進用磁性体粒子同士を、磁場を除去した上で液について攪拌または振盪を行なうことで、該処理促進用磁性体粒子を、再分散または再懸濁させることによって磁性担体の再懸濁を容易化することができる。
 第2の発明、第3の発明、第11の発明または第17の発明によれば、前記処理促進用磁性体粒子の粒径を前記磁性担体の粒径よりも大きく形成しているので、前記処理促進用磁性体粒子と磁性担体とを同じ素材で形成した場合であっても、磁束が大きいので、磁性担体をより効率的に引き付けかつ吸着させることができる。また、大きな粒径の処理用磁性体粒子を用いることで、液の移動による影響を受けやすく、再懸濁をより短時間で効率よく行なうことができることになる。また、大きさの相違によって、前記磁性担体と処理促進用磁性体粒子とを分離することができるので、処理促進用磁性担体粒子を、再生して繰り返して利用することができることになる。
 第4の発明、第12の発明または第18の発明によれば、粒径にほとんど差がないような処理促進用磁性体粒子および磁性担体を用いたとしても、処理促進用磁性体粒子は大きな磁束が通るので、磁性担体と同一の磁場を受けたとしても、磁場により大きな磁力を発生しかつ磁力を受けるので、所定捕獲領域に処理を迅速かつ効率的に行うことができることになる。なお、磁化率が大きければ、強磁性体のみならず、超常磁性体等であっても良いことになる。また、磁束の相違に基づき、前記磁性担体と処理促進用磁性体粒子とを分離することができるので、処理促進用磁性担体粒子を、再生して繰り返して利用することができることになる。
 第5の発明によれば、処理促進用磁性体粒子として、強磁性体を用い、磁性担体としては、磁化率は強磁性体に比較して小さいが、残留磁化が0または小さい超常磁性体または常磁性体を用いることで迅速で効率の高い処理を行うことができる。
 第6の発明によれば、処理促進用磁性体粒子が所定の化学物質または生体と結合可能とすることによって、磁性担体と一致する標的または異なる標的を追加してまたは並行して処理することができることになる。その際、磁性担体と処理促進用磁性担体粒子とは、粒径の相違に基づくフィルタ、または磁化の相違に基づいて分離することができる。したがって、複数処理を並行して行なうことができるとともに、処理の効率化を図り、処理費用の削減を図ることができる。
 第7の発明、第8の発明、第15の発明、または第16の発明によれば、磁性担体と処理促進用磁性体粒子とを予め容器内またはチップ内に収容または封入して用いることによって、自動化に適するとともに、人手によって触れることなくクロスコンタミネーションを確実に防止することができる。
 第9の発明または第15の発明によれば、分注機と組み合わせることによって、吸引吐出を繰り返して、磁性担体の遭遇性および反応性をより高めて自動化に適した迅速性のある処理を行うことができる。
 第10の発明によれば、処理促進用磁性体粒子と磁性担体は、液中で移動可能に設けられているので、液に付いて攪拌または振盪をすることで、前記処理促進用磁性体粒子を再分散または再懸濁することによって、磁性担体を容易に再懸濁することができることになる。
 第13の発明または第19の発明によれば、チップまたは液収容部を貫くように磁力線束を形成することで、磁性担体、処理促進用磁性体粒子またはこれらの混合物をチップまたは容器を上下に仕切るようにフィルタ状の粒子層を形成するように展開させ、例えば、チップを用いて液体の吸引吐出を該粒子層を通過するように上下方向に行ないまたは繰り返すことで磁性担体等と化学物質または生体の標的との遭遇性を高め、反応処理を促進することができる。
 第14の発明、第20の発明または第21の発明によれば、磁性担体または処理促進用磁性体粒子を含有する液に磁場を及ぼす磁石の磁極を、変向用磁場を用いて変向させることで、前記チップまたは液収容部内に収容された前記磁性担体または処理促進用磁性体粒子に変動を与えて攪拌、または振盪させることで、さらに一層前記標的と前記磁性担体等との遭遇性を高めて反応処理を促進することができる。したがって、複雑な機構を設けて装置規模を拡大することなく、変向用磁場を磁石に及ぼすことで実現することができる。
本発明の第1の実施の形態に係る磁性試薬を用いた第2の実施の形態に係る磁性担体処理装置を示す斜視図である。 図1の磁性担体処理装置を示す側面図である。 本発明の第1の実施の形態に係る磁性試薬カートリッジ容器に磁場を及ぼす場合の模式図である。 本発明の第1の実施の形態に係る磁性試薬を用いた場合の対比図である。 本発明の処理促進用磁性体粒子がある場合の磁場の状態を示す状態図である。 本発明の第1の実施の形態に係る分散処理前の磁性担体の回収率を示す棒・折れ線グラフである。 本発明の第1の実施の形態に係る分散処理前後の磁性担体の回収率を示す棒グラフおよび分散処理の実験結果を示す写真である。 本発明の第2の実施の形態に係る磁性担体処理装置を用いた流れ図である。 本発明の第3の実施の形態に係る磁性試薬カートリッジ容器に収容すべき処理促進用磁性体粒子封入チップの例を示す断面図である。 本発明の第3の実施の形態に係る磁性試薬キットを用いた磁性担体の回収率を示す棒グラフである。 本発明の第3の実施の形態に係る磁性試薬キットについて前記第2の実施の形態に係る磁性担体処理装置を用いた流れ図である。 本発明の第4の実施の形態に係る磁性担体処理装置を示す主要斜視図である。 本発明の第4の実施の形態に係る磁性担体処理装置のノズルへッドを示す図である。 本発明の第4の実施の形態に係る磁性担体処理装置の磁力手段を示す斜視図である。 本発明の第5の実施の形態に係る磁性担体処理装置の磁力手段を示す斜視図である。 本発明の第6の実施の形態に係る磁性担体処理装置の磁力手段を示す斜視図である。 本発明の第7の実施の形態に係る磁性担体処理装置の磁力手段を示す斜視図である。 本発明の実施の形態に係る磁性担体処理装置の動作説明図である。 本発明の実施の形態に係る磁性担体処理装置の動作説明図である。
 図1および図2は、第1の実施の形態に係る磁性試薬および磁性試薬キットを収容したカートリッジ容器14を装填して磁性試薬を処理に利用するための第2の実施の形態に係る磁性担体処理装置10を示す斜視図と側面図である。
 該磁性担体処理装置10は、例えば、長さ250mmから400mm(X軸方向)、幅70mmから100mm(Y軸方向)、高さ300mmから500mm(Z軸方向)程度のブック状の筐体12に囲まれている。図1では、装置内部の説明の必要上、手前の側板が取り外されている。該筐体12には、磁性担体2および処理促進用磁性体粒子3からなる磁性試薬1を懸濁した懸濁液が少なくとも1の液収容部に収容され、その他、磁性担体の処理に必要な試薬溶液等が収容されまたは収容可能な複数(この例では10個)の液収容部22等が一列状に配列されて該筐体12内に着脱可能に設けられた磁性試薬カートリッジ容器14と、該カートリッジ容器14に収容された磁性担体を用いて所定の処理を行うための自動処理部(15,19)と、前記磁性試薬カートリッジ容器14が装填され該磁性試薬カートリッジ容器14とともに手動によって、前記筐体12から該筐体12外に引き出し可能に設けられ前記筐体12の1側面に穿設された長方形状の孔に嵌挿される嵌挿板16と連結し前記磁性試薬カートリッジ容器14を着脱可能に装填する装填箱18とを有する。
 前記自動処理部(15,19)は、分注機のノズルヘッド15と、前記筐体12内に収納された前記磁性試薬カートリッジ容器14に対して前記ノズルヘッド15を移動可能とする移動機構19とを有する。
 前記分注機の前記ノズルヘッド15は、前記移動機構19により、筐体12内に収納された前記磁性試薬カートリッジ容器14に対してその長手方向に相当するX軸方向にのみ移動可能なX軸移動体11と、該X軸移動体11に対して上下方向にガイド柱34に案内されて移動可能に設けられた円筒状のZ軸移動体35とを有する。前記X軸移動体11には、前記Z軸移動体35に連結したナット部が螺合し、該Z軸移動体35を上下方向に移動させるZ軸移動用ボール螺子(図示せず)が回転可能に取り付けられるとともに、前記ガイド柱34および該ガイド柱34を介して取り付けられた支持プレート39が取り付けられている。
 該ノズルヘッド15は、前記X軸移動体11に取り付けられ気体の吸引吐出を行なうシリンダと連通するステンレス管33と、該ステンレス管33の先端が差し込まれるように接続されたゴム管32と、前記Z軸移動体35に取り付けられ該ゴム管32と接続するエアパイプ27が側面から突出するように設けられ前記ゴム管32等を介して前記シリンダと連通するノズル17と、該ノズル17に着脱可能に装着された分注チップ26と、前記シリンダ内のピストンを駆動するために前記X軸移動体11に取り付けられたモータ30とを有する。したがって、前記Z軸移動体35に連動して前記分注チップ26の先端の口部26aが上下すると、前記ゴム管32は曲げられたり伸ばされたりすることになる。
 また、前記X軸移動体11に取り付けられた前記支持プレート39は、前記ガイド柱34を支持し、かつ前記ボール螺子を回転可能に支持するとともに、その下側で、前記分注チップ26等のチップを前記ノズル17から脱着させるために該ノズル17の径よりも大きく前記チップ26の最も太い部分の外径よりも細いU字状の切欠き部が形成されたチップ脱着板を前後方向に移動可能に支持し、その支持プレート39の上側では、該チップ脱着板を前後方向に駆動するモータ48が該支持プレート39、したがって前記X軸移動体11に取り付けられている。前記チップ脱着板は、前記支持プレート39に取り付けられたチップ脱着板支持部材47に前後方向に移動可能に支持され、該チップ脱着板支持部材47の外側面には、前記筐体12の内壁面にX軸方向に沿って設けられたガイドレール31に接して案内されるガイドローラ43が回転可能に設けられている。
 さらに、前記チップ脱着板支持部材47の下側には、該チップ脱着板支持部材47と連動して前後方向に動く磁石46が、磁石支持板36に支持され、該磁石46が前記ノズル17に装着された前記分注チップ26の細径管26bまたは太径管26cに対し接近しまたは離間することによって該細径管または太径管内に磁場を及ぼしかつ除去することが可能な磁力手段60を有する。
 該分注機のノズルヘッド15を前記筐体12内に収納された前記磁性試薬カートリッジ容器14に対して移動させる移動機構19は、前記ノズルヘッド15の前記X軸移動体11と係わり合って前記磁性試薬カートリッジ容器14の長手方向、すなわちX軸方向に沿って案内するレール31と、該ノズルヘッド15のX軸移動体11をX軸方向に沿って移動させるX軸移動用モータ30と、該X軸移動用モータ30の回転を前記X軸移動体に伝える歯車およびベルト51と、前記Z軸移動体35を上下方向すなわちZ軸方向に沿って案内する前記ガイド柱34と、前記Z軸移動用ボール螺子と、Z軸移動用モータ52とを有する。なお、前記シリンダ、モータ49は吸引吐出機構に相当する。また、前記ガイド柱34、前記Z軸移動用ボール螺子、および前記Z軸移動用モータ52は移動機構19の内のZ軸移動機構に相当する。
 前記磁性試薬カートリッジ容器14が装填される前記装填箱18は、その装填箱18の長手方向、すなわちX軸方向に沿って延びるガイド部材が前記筐体12内にX軸方向に沿って敷設されたガイドレール31に案内されて手動でX軸方向に移動可能に設けられ、これによって前記磁性試薬カートリッジ容器14を前記筐体12内に完全に収納することができる。
 前記磁性試薬カートリッジ容器14を筐体12内に装填した際には、該カートリッジ容器14が装填された装填箱18を上方向に付勢するように弾性力を加え、該装填箱18が浮き上がらないように前記カートリッジ容器14の各収容部22、23等の開口部が露出するような孔が設けられた枠体13内に収納して該カートリッジ容器14が動かないように固定する。
 該装填箱18の前記嵌挿板16が設けられた側の端部と逆側の端部には、該カートリッジ容器14が所定の位置に装填されたことを示す位置決め用の位置決め板44が設けられ、前記筐体12側に設けられたセンサ45が該位置決め板44を検知すると該カートリッジ容器14が所定位置に装填されたことを示す装填信号を出力し、該装填信号の出力があると、磁性担体の処理が開始可能状態にあると判断されることになる。
 図2に示すように、前記磁性試薬カートリッジ容器14は、検体等のサンプルを収容する検体収容部38を着脱可能に保持するために基板14aに形成された保持用孔37と、該基板14aよりも上側に突出するように開口部が形成され、前記ノズル17の下降によって該ノズル17に装着可能となるように前記分注チップ26を収容するチップ収容部21と、該基板14aよりも上側に突出するように開口部が形成され、該カートリッジ容器14の液収容部22の開口部を覆うように前記基板14aに貼られたフィルム等の薄膜を穿孔するために前記ノズル17の下降によって該ノズル17に装着可能となるように先端が鋭利な先細り状に形成された穿孔用チップ50を収容する穿孔用チップ収容部20と、前記基板14aに開口部が形成され前記磁性試薬1を含む種々の試薬が収容されまたは収容可能な液収容部22と、処理によって生成された溶液を収容する生成物収容部40を着脱可能に保持するために前記基板14aに形成された保持用孔28と、前記基板14aに開口部が形成され反応を促進するために温度制御を必要とする溶液を収容する反応容器23とが一列状に配列された容器である。なお、各液収容部22、前記検体収容部38、生成物収容部40の容量は、例えば、1000μlであり、数100μlの液を収容して用いる。
 前記装填箱18には、温度制御を行うヒータを有する温度制御室41が設けられ、前記磁性試薬カートリッジ容器14を装填した際に、前記生成物収容部40および前記反応容器23が前記温度制御室41内に収容される。
 例えば、検体に含有する細菌の核酸を分離するための磁性担体を用いた処理を行なう場合には、前記磁性試薬カートリッジ容器14の前記検体収容部38には、検体等から抽出した細菌が懸濁する溶液を、前記液収容部22の内、液収容部22aには、磁性試薬懸濁液を、液収容部22bには細菌の核を溶解する溶解バッファ液を、液収容部22cには前記溶解バッファ液のpHの調整を行うための中和バッファ液を、液収容部22dから22fには各種洗浄液を、液収容部22gには前記磁性担体から核酸等を乖離するための乖離液を収容し、液収容部22hから22jは空にしておき、前記生成物収容部40および反応容器23も空である。このような状態で、前記液収容部22の開口部および前記反応容器23の開口部を覆うように、フィルム状の薄膜が前記基板14a上に貼着される。
 ここで、前記磁性試薬1は、磁場を受けて磁化可能であって、液中の所定の化学物質としての核酸と結合可能なように表面にOH基を持つ材料で被覆され、該液中に懸濁可能な粒径、例えば、ナノサイズ、数100nmをもつ超常磁性体で形成された複数の磁性担体2と、磁場を受けて磁化可能であって、同一の磁場に対して前記磁性担体よりも大きな磁束が通るように前記磁性担体よりも大きな粒径、例えば、数100マイクロメータであり、かつより磁化率の大きい素材の強磁性体である鉄で形成された複数の処理促進用磁性体粒子3を有する懸濁液である。
 または、前記磁性試薬1の代わりに、前記磁性担体の懸濁液と、処理促進用磁性体粒子の懸濁液とを別の前記液収容部22、例えば、各々液収容部22aと、液収容部22bとに別々に収容した磁性試薬キットを収容する磁性試薬カートリッジ容器を用いても良い。この場合には、磁性担体の懸濁液と前記処理促進用磁性体粒子とを混合させて用いることになる。
 図3には、前記磁性試薬1を懸濁した液を収容した第1の実施の形態に係る磁性試薬カートリッジ容器14を装填して用いる第2の実施の形態に係る前記磁性担体処理装置10の3つの例を示すものである。
 図3(A)は第2の実施の形態に係る磁性担体処理装置10の第1の例を示すものであって、先端に口部26aをもつ細径管26b、細径管26bよりも大きな径をもち、前記ノズル17に装着可能な装着用開口部26dをもつ太径管26c、および前記細径管26bと前記太径管26cとを連結する移行部26eを有する分注チップ26と、該分注チップ26の前記細径管26bに対して接離可能に設けられた磁石46と、前記細径管26bの口部26aが挿入可能に設けられた前記カートリッジ容器14の反応容器23とを示すものである。なお、前記分注チップ26は、例えば細径管26bの内径は約1mmから3mm程度であり、太径管26cの内径は、約8mmから9mmであり、その長手方向の長さは約100mm程度である。該磁石46が接近する細径管26bの内壁部分が捕獲領域46aに相当する。図3(A)は、前記分注チップ26が反応容器23に収容した標的を含有する溶液に該標的を結合可能な磁性担体2を有する磁性試薬1を添加したものを、前記磁石46を接近させた状態で吸引および吐出を繰り返すことで、標的を結合したナノサイズの前記磁性担体2を、処理促進用磁性体粒子3によって強化された磁力を利用して前記細径管26bの内壁および該処理促進用磁性体粒子3に吸着させたものである。なお、前記磁石46の磁場の大きさは、例えば、1000から数1000ガウスである。
 図3(B)は、第2の実施の形態に係る磁性担体処理装置10の第2の例を示すものであって、第1の例に係る前記磁性担体処理装置10の磁石46を分注チップ26に対して接離可能に設ける代わりに、前記カートリッジ容器14の下側に、該カートリッジ容器14の反応容器23の底に対して接離可能に磁石146を設けたものである。前記磁性試薬1を収容した反応容器23に、該磁性試薬1に含有する磁性担体2が結合可能な標的を含有する溶液を前記分注チップ26により分注したものを攪拌させた後、前記反応容器23の底に前記磁石146を接近させることで反応容器23内に磁場を及ぼして、前記標的と結合した磁性担体2を前記処理促進用磁性体粒子3を利用して、反応容器23の底に吸着沈殿させまたは該内底に吸着沈殿した処理促進用磁性体粒子3に吸着させて分離するものである。該内底が前記捕獲領域146aに相当する。
 図3(C)は、第2の実施の形態例に係る磁性担体処理装置10の第3の例を示すものであって、第1の例に係る前記磁性担体処理装置10の磁石46に代えて、前記磁性試薬1を収容した前記カートリッジ容器14の反応容器23の側面に磁石246を接離可能に設けた例を示すものである。前記磁性試薬1を収容した反応容器23に磁石246を接近させることで反応容器23内に磁場を及ぼして、前記標的と結合した磁性担体2を前記処理促進用磁性体粒子3を利用して、該反応容器23の内側面に前記磁性試薬1を吸着させたものである。この場合には、該内側面が捕獲領域246aに相当する。なお、前記反応容器23の代わりに前記カートリッジ容器14の他の液収容部の側面または底面に対して、磁石を接離可能に設ける。
 図4は、第1の磁性試薬1について、磁性担体2のみを懸濁させた液(A)と、磁性担体2及び処理促進用磁性体粒子3を懸濁させた液(B)とを、分注チップ26に吸引して、その太径管に磁石46を接近させて、太径管内に磁場を及ぼす場合および磁場を除去する場合の磁場に対する状態の変化を時系列(T1,T2,T3)で示す模式図である。
 時刻T1では、懸濁液を分注チップ内26に吸引させた際に、磁石46を前記分注チップの太径管26cに接近させた場合の磁性担体2が直接的に吸着可能な領域である捕獲領域46bを示すものであり、M1およびM2は該捕獲領域46bに基づく有効磁場到達範囲(面積)を表す。(A)側は、磁性担体2のみを懸濁させた液を分注チップ26内に吸引した場合を示し、まだ、磁性担体2は前記捕獲領域46bには吸着していない。前記有効磁場到達範囲M1は、前記捕獲領域46bそのものであることを示している。一方、(B)側は、磁性担体2および処理促進用磁性体粒子3を懸濁した液を吸引した場合を示し、磁性担体2よりも強い磁力を受けかつ発生させる処理促進用磁性体粒子3が前記捕獲領域46bに直接的に吸着しまたは他の処理促進用磁性体粒子3を介して間接的に吸着して磁力線に沿うように処理促進用磁性体粒子3が鎖状に連結している状態を示している。これによって磁性担体2が直接的に吸着可能な前記捕獲領域46bが、処理促進用磁性体粒子3の表面積を含む有効磁場到達範囲(面積)M2にまで拡大されたことを示す。したがって、M2はM1よりも格段に大きいことが示されている。
 時刻T2の段階では、磁石46が接近したまま、各分注チップ26内で吸引吐出が複数回行なわれ吸引状態になっていることを示すものである。(A)側では、磁性担体2のみが懸濁した液であるため、前記有効磁場到達範囲M1内を通った一部の磁性担体2は前記捕獲領域46bに直接的または間接的に吸着しているが、捕獲領域46bの該有効磁場到達範囲M1は磁石46が接近した側の内壁近傍でしかないため、それより離れた大部分の場所にある磁性担体2は捕獲されずに懸濁状態にあることを示している。一方、(B)側では、磁性担体2および処理促進用磁性体粒子3を懸濁した液であるため、前記有効磁場到達範囲M2内を通った磁性担体2が前記捕獲領域46bに直接的または間接的に吸着し、捕獲領域46bに基づく該有効磁場到達範囲がM2にまで拡大されたため、磁石46が接近した側の内壁よりも離れた場所にある磁性担体2でも捕獲されている。
 時刻T3の段階では、前記磁石46を前記分注チップ26の太径管から離間させるとともに分注チップ26内で吸引吐出が複数回行なわれ吸引状態になっていることを示すものである。(A)側では、捕獲された磁性担体2同士が密着しているため、吸引吐出を繰り返しても該磁性担体2は相変わらずペレット状に前記捕獲領域46bまたは有効磁場到達範囲M1に捕獲されたままであり、捕獲されなかった磁性担体2のみが懸濁した状態である。一方、(B)側では、太径管内の磁場を除去した後、吸引吐出を繰り返すと、前記処理促進用磁性体粒子3は、液の移動の影響を受けて磁性担体2よりも分散または懸濁され易く、磁性担体2同士は密着しておらず処理促進用磁性体粒子3に吸着しているので乖離または離脱しやすく磁性担体2は短時間で再懸濁されることになる。
 続いて、図5は、前記磁性試薬1の処理促進用磁性体粒子3の存在によって、その周りの磁場(磁束密度)が強化されることをシミュレーションによって示す。
 このシミュレーションでは、縦横1mmの2次元空間内に、大きさ縦1mm横0.32mmで磁束密度が1ガウスの磁石46を模した2次元の磁石モデル(46)を前記2次元空間の図上左側に設置し、磁石モデル(46)の右側の各升目4(縦横0.04mm)には水に対して1000倍の透磁率をもつ鉄粉が静止して置かれたものとする。各矢印5は、鉄粉が置かれた位置におけるシミュレーションで得られた磁束密度ベクトルを示すものである。
 ここで、図5(A)には、粒径が0.32mmの2個の処理促進用磁性体粒子3を模した2次元の粒子モデル(3)が、磁石モデル(46)に対してその法線方向に沿って鎖状に連結して磁石モデル(46)に吸着した場合の、該粒子モデル(3)内および前記各鉄粉に及ぼされる磁束密度ベクトルを示すものであり、図5(B)には、該粒子モデル(3)が存在しない場合の各鉄粉に及ぼされる磁束密度ベクトルを示すものである。この2つの図を比較すると、処理促進用磁性体粒子3の存在によって、それがない場合に比較して、磁石46よりも十分に離れた位置でも、その磁場(磁束密度)が強化されていることがわかる。
 図6および図7は、磁性担体の回収率が、処理促進用磁性体粒子の存在によって向上することを示す実験結果を示すグラフ等である。
 本実験は、磁性担体としては、酸化鉄で形成された核酸捕獲用のナノサイズの磁性担体を含有する懸濁液を用いるが、それらが懸濁液中に凝集している可能性があるものである。そこで、分散処理前の磁性担体を用いた場合と、それらを分散処理した後の磁性担体を用いた場合とを各々測定する。ここで、分散処理は遠心分離によって行う。
 使用する磁性試薬に含有する処理促進用磁性体粒子としては、次の4種類の処理促進用磁性体粒子のいずれかを用いる。すなわち、第1の処理促進用磁性体粒子としては、製品名が「スチールショット」、コード名が「TSH30」(IKKショット株式会社製)で、粒径は、425-125μmであり、成分は鉄中に、炭素0.8~1.2%、ケイ素が0.4%以上、マンガンが0.35~1.0%未満、リンが0.05%以下、硫黄が0.05%以下含まれるものである。第2の処理促進用磁性体粒子としては、製品名が「スチールショット」、コード名が「TSH60」(IKKショット株式会社製)で、第1の処理促進用磁性体粒子とは粒径が異なり、850-355μmである。第3の処理促進用磁性体粒子としては、製品名が「スチールビーズ」、コード名が「SB50」(株式会社不二製作所製)で、粒径が425‐125μmであり、成分は、鉄中に、炭素0.9~1.1%、ケイ素が1.3%以上、マンガンが1.0%以下、リンが0.05%以下、硫黄が0.05%以下含まれるものである。第4の処理促進用磁性体粒子としては、製品名が「PSSビーズ」(PSS株式会社製)で、粒径0.5μmから2μmで、粒径190nmのFe3O4表面にOH基を持つ材料で被覆した核酸精製粒子であって形状は不定形である。
 そこで、10個の前記磁性試薬カートリッジ容器14を用意し、第1の磁性試薬カートリッジ容器14の前記液収容部22aには、分散処理前の磁性担体懸濁液および前記第1の処理促進用磁性体粒子20個を懸濁または分散する第1の磁性試薬を500μl収容し、液収容部22bには洗浄液(例えば、蒸留水)500μlを収容する。同様にして、第2の磁性試薬カートリッジ容器14の液収容部22aには分散処理前の前記磁性担体懸濁液および前記第1の処理促進用磁性体粒子50個を懸濁する第2の磁性試薬を収容し、液収容部22bには同様に洗浄液500μlを収容し、第3の磁性試薬カートリッジ容器14の液収容部22aには、分散処理前の前記磁性担体懸濁液および前記第3の処理促進用磁性体粒子20個を懸濁する第3の磁性試薬を500μl収容し、液収容部22bについては同様に洗浄液を収容する。第4の磁性試薬カートリッジ容器14に対の液収容部22aには、分散処理前の前記磁性担体懸濁液および前記第3の処理促進用磁性体粒子50個を懸濁する第4の磁性試薬を500μl収容し、液収容部22bには洗浄液を同様に収容する。
 第5の磁性試薬カートリッジ容器14の前記液収容部22aには、分散処理前の前記磁性担体のみを500μl収容し、液収容部22bには洗浄液を同様に収容する。第6の磁性試薬カートリッジ容器14の液収容部には、分散処理前の前記磁性担体懸濁液、前記第3の処理促進用磁性体粒子20個、および第2の処理促進用磁性体粒子1個を含有する第5の磁性試薬500μlを収容し、液収容部22bには洗浄液を同様に収容する。第7の磁性試薬カートリッジ容器14の液収容部22aには、分散処理前の前記磁性担体および第4の処理促進用磁性体粒子を30μl懸濁する第6の磁性試薬を500μl収容し、液収容部22bには、洗浄液を同様に収容する。
 第8の磁性試薬カートリッジ容器14の液収容部22aには、分散処理後の前記磁性担体懸濁液を500μl収容し、液収容部22bには、洗浄液を同様に収容する。第9の磁性試薬カートリッジ容器14の液収容部22aには、分散処理後の前記磁性担体、第3の処理促進用磁性体粒子20個、および第2の処理促進用磁性体粒子1個の懸濁液からなる第7の磁性試薬を500μl収容し、液収容部22bには、洗浄液を同様に収容する。第10の磁性試薬カートリッジ容器14の液収容部22aには、分散処理後の前記磁性担体懸濁液および第4の処理促進用磁性体粒子30μlからなる第8の磁性試薬を500μl収容し、液収容部22bには、洗浄液を同様に収容する。
 すると、第1の磁性試薬カートリッジ容器14を前記磁性担体処理装置10に装填し、分注チップ26を用いて、前記液収容部22aに該分注チップ26の先端を挿入させ、該懸濁液を吸引する際に、前記磁石46を前記細径管26bに接近させて該細径管26b内に磁場を及ぼすことによって、前記第1の磁性試薬の磁性担体および第1の処理促進用磁性体粒子を該分注チップ26の細径管26bの内壁に吸着させ、吸着させたまま、該分注チップ26をZ軸方向に上昇させて該液収容部22aから該分注チップ26を抜出し、前記ノズルヘッド15を前記カートリッジ容器14に沿って移動させることで、該分注チップ26を液収容部22bの位置にまで移動させて、該分注チップ26の先端を該液収容部22b内に挿入させ、前記磁石46を前記細径管26bに接近した状態で前記洗浄液の吸引吐出を繰り返すことで、前記磁性担体および第1の処理促進用磁性体粒子を洗浄した後、前記磁石46を前記細径管26bから離間させて該細径管26b内の磁場を除去し吸引吐出を繰り返すことで液中に懸濁させる。
 そこで、液収容部22aの残液を吸光度計480nmで測定することによって、磁性担体の回収率を算出する。
 すると、その結果は、図6の棒・折れ線グラフの(1)に示すように、分散処理前で凝集しているかもしれない磁性担体の回収率は約86.3%程度であり、第1の処理促進用磁性体粒子の回収個数は、10個程度であることがわかった。
 同様にして、第1の処理促進用磁性体粒子の個数を50個に増加させた第2の磁性試薬カートリッジ容器14については、図6の棒・折れ線グラフの(2)に示すように、磁性担体の回収率が増加して、89.0%程度を示し、第1の処理促進用磁性体粒子の回収個数は50個程度であることがわかった。
 同様にして、第3の磁性試薬カートリッジ容器14を用いた場合については、図6の棒・折れ線グラフの(3)、第4の磁性試薬カートリッジ容器14を用いた場合には、図6の棒・折れ線グラフの(4)に示す通りであり、処理促進用磁性体粒子の個数の増加が磁性担体の回収率の向上につながることが示されている。
 また、第5の磁性試薬カートリッジ容器14を用いた場合には、分散処理前の前記磁性担体であって、処理促進用磁性体粒子が存在しない場合には、図7(A)の棒グラフの(1)に示すように、その回収率は約82%程度であり、第6の磁性試薬カートリッジ容器14のように、分散処理前の前記磁性担体であって、処理促進用磁性体粒子が存在する場合には図7(A)の棒グラフの(2)に示すように、ない場合に比較して回収率が上昇している。同様に、第7の磁性試薬カートリッジ容器14を用いた場合については、図7(A)の棒グラフの(3)に示されている。その際、第5のカートリッジ容器14を前記ノズルの吸引吐出の液の流速を約4倍に増加させた場合(ステッピングモータのパルス数を62から262に増加)については、図7(A)の棒グラフの(4)に示され、回収率は処理促進用磁性体粒子がない場合の図7(A)(1)と比較して下がっていることを示している。これは、前記磁性担体の磁場に対する応答性が低いため、吸引吐出の流速を上げると回収率に影響を与えるためである。一方、第6のカートリッジ容器14を用いた、分散前の磁性担体であって、処理促進用磁性体粒子が存在する場合には、図7(A)の棒グラフの(5)に示すように、それがない場合の図7(A)(2)と比較し、たとえ流速が4倍になったとしても回収率はそれ程下がっていないことを示している。したがって、処理促進用磁性体粒子を用いた場合には、それがない場合には約20分かかっていた処理が、回収率をそれ程損なうことなく、約5分で行うことができることになり、処理速度を増加させることができることになる。
 図7(B)の写真(1)は、分散処理前の前記磁性担体として用いた懸濁液を400倍の顕微鏡で観測したものであり、図7(B)の写真(2)は、分散処理前の前記懸濁液を2000Gの遠心分離を行なってその上澄み液を400倍の顕微鏡で観測したものである。該上澄み液には、大きい粒子は見られるが、その粒子数は減り、液の色がオレンジ色であることから、懸濁している磁性担体はナノサイズの粒径を持つことを示している。
 図7(C)の棒グラフの(1)は、第8の磁性試薬カートリッジ容器14を用いた場合を示し、分散処理後の前記磁性担体の懸濁液を用いて、処理促進用磁性体粒子が存在しない場合を示し、その回収率は30%に満たないことを示している。図7(C)の棒グラフの(2)は、第9の磁性試薬カートリッジ容器14を用いた場合を示し、分散処理後の前記磁性担体を含有する第7の磁性試薬500μlを用いた場合には、その磁性担体の回収率は50%を越えることを示している。図7(C)の棒グラフの(3)は、第10の磁性試薬カートリッジ容器14を用いた場合を示し、分散処理後の前記磁性担体を含有する第8の磁性試薬500μlを用いた場合には、その磁性担体の回収率も、50%を越えていることを示している。
 すなわち、通常、磁性担体を処理に使用する場合には分散処理が必要であることから、この処理促進用磁性体粒子を用いた場合には、用いない場合に比較して、この例では2倍以上の磁性担体の回収率を得ることができ、処理促進用磁性体粒子を投入することにより大幅に磁性担体の回収率を伸ばすことができることが示された。
 図8は、第1の実施の形態に係る磁性試薬カートリッジ容器14および第2の実施の形態に係る前記装置10を用いて、磁性担体を捕獲する処理の流れ図を示す。
 例えば、前記カートリッジ容器14の前記検体収容部38には、サンプルとして患者等から予め抽出した細菌7を含有するサンプル溶液を収容しておく。液収容部22aには、核酸捕獲用のシリカで被覆され、粒径がナノサイズで超常磁性体の磁性担体2、および粒径が例えば、数10μmで強磁性体で形成された処理促進用磁性体粒子3からなる磁性試薬の懸濁液を収容しておく。また、液収容部22bには、前記細菌を溶解する溶解バッファ液を収容し、液収容部22cには、中和バッファ液が収容され、液収容部22dから液収容部22iには、各種洗浄液が収容され、液収容部22jには、溶出液が収容されている。
 ステップS1において、前記ノズルヘッド15をX軸の正方向に移動させ、ノズル17を前記カートリッジ容器14のチップ収容部21に保持された分注チップ26の上方に位置させる。次に、前記Z軸移動体35を下降させることによって、前記分注チップ26の装着用開口部26d内に挿入させて嵌合させて装着して上昇させ、該分注チップ26の先端が前記カートリッジ容器14の基板14aの上方にまで位置させる。
 次に、該ノズルヘッド15をX軸の正方向にさらに移動させて、前記検体収容部38の上方にまで移動し、Z軸移動体35を下降させることで、前記分注チップ26の先端を該検体収容部38内に挿入させて、前記細菌を含有するサンプル溶液の一部を吸引して、上昇させ、前記分注チップ26の先端を前記カートリッジ容器14の基板14a上に位置させる。次に、該ノズルヘッド15をX軸の負方向に沿って移動させて、反応容器23の上方に位置させる。Z軸移動体35を下降させることで、反応容器23内に前記サンプル液を吐出する。
 ステップS2において、前記ノズルヘッド15をX軸の正方向に沿って移動させ、前記液収容部22bの上方に位置させ、Z軸に沿って下降させて該分注チップ26の先端を該液収容部22b内に挿入して該液収容部22b内に収容されている溶解バッファ液を吸引する。
 吸引後、該分注チップ26をZ軸方向に上昇させて、前記カートリッジ容器14の基板14a上に位置させた後、X軸の負方向に移動させて、前記反応容器23上に位置させる。該分注チップ26を下降させて、該分注チップ26の先端を前記反応容器23内に挿入し、該溶解バッファ液を該反応容器23内に吐出させる。そして、該分注チップ26によって、吸引吐出を繰り返すことで、該溶解バッファ液を前記サンプル液と攪拌させる。所定時間インキュベーションを行う。これによって懸濁している細菌及び細菌の核が破壊され、核酸が溶解バッファ液を含有する液中に溶け出す。
 ステップS3において、前記ノズルヘッド15をX軸の正方向に沿って移動させ、前記液収容部22cの上方に位置させた後、Z軸に沿って下降させて該分注チップ26の先端を該液収容部22c内に挿入し、前記中和バッファ液を吸引する。
 吸引後、該分注チップ26をZ軸方向に上昇させて、前記カートリッジ容器14の基板14a上に位置させた後、X軸の負方向に移動させて、前記反応容器23上に位置させる。該分注チップ26を下降させて、該分注チップ26の先端を前記反応容器23内に挿入し、該中和バッファ液を該反応容器23内に吐出させる。そして、該分注チップ26によって、吸引吐出を繰り返すことで、該中和バッファ液を該反応容器23内に収容されている液と攪拌し前記溶解バッファ液と反応させて中和する。
 ステップS4において、前記ノズルヘッド15をX軸の正方向に移動させて前記液収容部22aの上方にまで位置させた後、Z軸に沿って下降させて該分注チップ26の先端を該液収容部22a内に挿入し、前記磁性試薬1としての磁性担体2及び処理促進用磁性体粒子3との懸濁液を吸引する。
 次に、該分注チップ26をZ軸方向に上昇させ、前記カートリッジ容器14の基板14aの上方に位置させ、ノズルヘッド15をX軸の負方向に移動させて前記反応容器23の上方に位置させた後、Z軸方向に下降させて、前記磁性担体2および処理促進用磁性体粒子3の懸濁液を前記反応容器23内に吐出させる。該反応容器23内に収容された核酸8の溶液に磁性担体2及び処理促進用磁性体粒子3が懸濁または分散する懸濁液について、前記分注チップ26により吸引吐出を繰り返すことで攪拌させ、前記磁性担体2と核酸8とを遭遇させて該磁性担体2に核酸8を結合させる。
 ステップS5において、前記磁石46を前記分注チップ26の細径管26bに接近させた状態で、前記懸濁液を吸引する際に細径管26b内に磁場を及ぼすことで、前記懸濁液中の前記核酸8と結合した磁性担体2および前記処理促進用磁性体粒子3を磁化する。すると、懸濁液中に分散または懸濁する前記処理促進用磁性体粒子3は前記磁性担体2よりも粒径が大きくかつ磁化率が高いので、その処理促進用磁性体粒子3の周囲に懸濁する前記磁性担体2を引き付けまたは吸着させながら、前記磁石46が接近している側の前記分注チップ26の内壁である捕獲領域46aに前記磁性担体2よりも強い磁力で引き付けられて直接的または間接的にそこに吸着する。その状態で吸引吐出を繰り返すことで前記懸濁液中の前記磁性担体2を効率よく内壁に捕獲することができることになる。
 ステップS6において、前記分注チップ26の細径管(26b)に前記磁石46を接近させた状態で前記磁性担体2および前記処理促進用磁性体粒子3を該分注チップ26の細径管の内壁に捕獲した状態で、Z軸に沿って該分注チップ26を上昇させて該反応容器23から抜出して、前記カートリッジ容器14の上方に位置させる。該分注チップ26を内部に前記磁性担体2および前記処理促進用磁性体粒子3を捕獲したままX軸に沿ってその正方向に移動させて、液収容部22dの上方に位置させる。前記分注チップ26の細径管に前記磁石46を接近させた状態で、Z軸に沿って分注チップ26を下降させて前記液収容部22d内に該分注チップ26の先端を挿入させる。その後、該磁石46を離間させて、磁場を除去した状態で、該液収容部22d内に収容されている洗浄液の吸引吐出を行なうことで、磁性担体2および処理促進用磁性体粒子3を洗浄する。
 必要な場合には、ステップS7において、さらに液収容部22eに移動してさらに洗浄を行なう。洗浄が終了した場合には、前記分注チップ26の細径管に前記磁石46を接近させた状態で、吸引吐出を繰り返すことで前記磁性担体2および処理促進用磁性体粒子3を捕獲する。該磁性担体2および該処理促進用磁性体粒子3を捕獲した状態のまま、前記磁石46を接近させたままZ軸に沿って上昇させて、前記カートリッジ容器14の基板14aの上方にまで位置させる。
 ステップS8において、前記ノズルヘッド15をさらにX軸の負方向に移動させることで、液収容部22jにまで移動させて、前記磁石46を前記分注チップ26の細径管に接近させた状態で、Z軸方向に下降させてその先端を該液収容部22jに収容された溶出液に挿入させ、磁場を及ぼした状態で、吸引吐出を繰り返すことによって、前記磁性担体2に結合した核酸8を該磁性担体2から液中に溶出させる。
 図9は、第3の実施の形態の2つの例に係る磁性試薬カートリッジ容器114、115に収容されるべき処理促進用磁性体粒子封入チップ56、57に対し磁石46を離間または接近させた場合を示す。
  第3の実施の形態の第1の例に係る磁性試薬カートリッジ容器114では、前記カートリッジ容器14の液収容部22aに相当する部分は、前記磁性試薬1の懸濁液の代わりに磁性担体2のみが懸濁する懸濁液を収容し、前記チップ収容部21内には、分注チップ26の代わりに、処理促進用磁性体粒子6が液の移動または磁場によって移動可能に封入された処理促進用磁性体粒子封入チップ56を収容する。
   第1の例に係る該処理促進用磁性体粒子封入チップ56は、先端に入出口56aを持つ細径管56b、細径管56bよりも大きな径をもち、前記ノズル17に装着可能な装着用開口部56dをもつ太径管56c、および前記細径管56bと前記太径管56cとを連結する移行部56eを有するとともに、前記太径管56cには、液を通過させるが処理促進用磁性体粒子3が通過できないフィルタ56f、気体を通過させるが液及び処理促進用磁性体粒子3は通過できない56gによって、複数(例えば、数10個)の前記処理促進用磁性体粒子6(例えば、粒径1mmの鉄粒)を前記液の移動および磁場によって移動可能であるように封入したものである。磁石46は太径管56cの2つのフィルタ56f、56gの間の処理促進用磁性体粒子6が封入されている部分に対して接近および離間可能に設けられている。
   第3の実施の形態の第2の例に係る磁性試薬カートリッジ容器115では、前記カートリッジ容器14の液収容部22aに相当する部分には、前記磁性試薬1の懸濁液の代わりに磁性担体2のみが懸濁する懸濁液を収容し、前記チップ収容部21内には、分注チップ26の代わりに、処理促進用磁性体粒子6が液の移動または磁場によって移動可能に封入された処理促進用磁性体粒子封入チップ57を収容する。
 第2の例に係る処理促進用磁性体粒子封入チップ57は、先端に口部57aをもつ細径管57b、細径管57bよりも大きな径をもち、前記ノズル17に装着可能な装着用開口部57dをもち前記細径管57bと別体に形成された太径管57c、および前記太径管57cと一体に形成され先細りに形成された移行部57eを有するとともに、該細径管57bには、複数個(この例では10個)の前記処理促進用磁性体粒子6が1列状に封入されている。複数個の該処理促進用磁性体粒子6は、液の移動および磁場によって列の順序を乱さずに該列方向に沿って移動可能となるように、前記処理促進用磁性体粒子6の複数個分よりも大きな間隔(好ましくは、前記処理促進用磁性体粒子6の密接した列長の2倍以上)を空けて前記細径管57bに設けた2つの止め部57fおよび止め部57gの間に封入されている。止め部57fおよび止め部57gは、図上、前後方向および左右方向のように90度捩れる方向に前記細径管57bをかしめて細径管57bの内方に向かって中央に隙間を残しながら陥没させたものである。これによって、両者とも液は通過可能であるが前記粒子6は通過不能である。磁石46は細径管57bの10個の前記処理促進用磁性体粒子6が封入された部分の中央あたりで接離可能となるように設けられている。
 図10には、前記磁性試薬キットを収容した、磁性試薬カートリッジ容器114に収容されるべき第3の実施の形態の第2の例に係る処理促進用磁性体粒子封入チップ57を用いた場合について磁性担体2の回収率の実験例を示す。該処理促進用磁性体粒子封入チップ57には、粒径が1mmの12個の鉄粒子が液の移動または磁場によって移動可能となるように細径管57bに封入されている。前記磁性試薬カートリッジ容器114としては、液収容部22aには、分散処理後の前記磁性担体2の懸濁液を収容し、液収容部22bには蒸留水を100μl収容し、前記チップ収容部21には、前記処理促進用磁性体粒子封入チップ57が収容されている。
 比較のため、第11の磁性試薬カートリッジ容器14として、液収容部22aには、分散処理後の前記磁性担体懸濁液を80μl収容し、液収容部22bには蒸留水を100μl収容し、前記チップ収容部21には、分注チップ26を収容する。
 さらに、比較のために、第12の磁性試薬カートリッジ容器14として、液収容部22aには、分散処理後の前記磁性担体と、粒径0.5μmから2μmであって、表面にセルロースAcを有する磁性体Fe3O4(190nm)を8μlのPSSビーズとが懸濁した懸濁液80μlを収容しておき、液収容部22bには蒸留水100μlを収容しておく。
 まず、第11の磁性試薬カートリッジ容器14を前記磁性担体処理装置10に装填し、分注チップ26を用いて、前記液収容部22aに前記分注チップ26の先端を挿入させ、該懸濁液を吸引する際に、前記磁石46を前記細径管26bに接近させて該細径管26b内に磁場を及ぼすことによって、前記磁性担体2を該分注チップ26の細径管26bの内壁に吸着させ、吸着させたまま、前記液収容部22bにまで移動して、前記洗浄液の吸引吐出によって洗浄後、前記磁石46を前記細径管26bから離間させて該細径管26b内の磁場を除去し吸引吐出を繰り返すことで、液中に懸濁させる。そこで、液収容部22aの残液を吸光度計480nmで測定することによって、磁性担体2の回収率を算出する。
 その結果は、図10(1)に示すように、磁性担体の回収率は、約20%以下であることがわかった。
 次に、前記磁性試薬カートリッジ容器114を前記磁性担体処理装置10に装填し、前記ノズルヘッド15を移動させて、該磁性試薬カートリッジ容器114の前記チップ収容部21から前記処理促進用磁性体粒子封入チップ57をノズルに装着した後、該封入チップ57を用いて、前記液収容部22aにその先端を挿入させ、前記磁石146を、前記細径管57bに接近させて該細径管57b内に磁場を及ぼすことによって、前記磁性担体2について吸引吐出を繰り返すことで、磁化された磁性担体2を該封入チップ57の細径管57b内の磁化された処理促進用磁性体粒子6に吸着させるとともに該内壁に吸着させることで捕獲する。該液収容部22aの残液を前記吸光度計480nmで測定することによって、磁性担体2の回収率を算出する。その結果は、図10(2)に示すように、50%を越えており、処理促進用磁性体粒子がない場合に比較して、回収率が3倍以上であることを示している。
 比較のために、第12の磁性試薬カートリッジ容器14を前記磁性担体処理装置10に装填し、分注チップ26を用いて、該液収容部22aに収容した磁性担体2と前記処理促進用磁性体粒子としての8μlの懸濁液を、前記磁石46を前記細径管26bに接近させて、吸引吐出を繰り返すことによって該細径管26bの内壁に吸着させ、吸着させたままで前記分注チップ26を液収容部22bに移動して、洗浄液の吸引吐出によって洗浄する。そこで、液収容部22aの残液を吸光度計480nmで測定することによって、磁性担体2の回収率を算出する。
 その結果は、図10(3)に示すように、磁性担体2の回収率は、約30%を越える程度であり、処理促進用磁性体粒子がない場合に比較して回収率が2倍以上であることを示している。
 続いて、図11に基づいて、第3の実施の形態に係る磁性試薬カートリッジ容器114(または115)および第2の実施の形態に係る前記装置10を用いて、磁性担体を捕獲する処理の流れ図を示す。
 前記カートリッジ容器114(または115)の前記検体収容部38には、サンプルとして患者等から予め抽出した細菌7を含有するサンプル溶液を収容しておく。液収容部22aには、核酸捕獲用のシリカで被覆され、粒径がナノサイズで超常磁性体の磁性担体2の懸濁液を収容しておく。また、液収容部22bには、前記細菌7を溶解する溶解バッファ液を収容し、液収容部22cには、中和バッファ液が収容され、液収容部22dから液収容部22iには、各種洗浄液が収容され、液収容部22jには、溶出液が収容されている。
 ステップS11において、前記ノズルヘッド15をX軸の正方向に移動させ、ノズル17を前記カートリッジ容器114(または115)に保持された前記処理促進用磁性体粒子封入チップ56(または57)の上方に位置させる。次に、前記Z軸移動体35を下降させることによって、前記封入チップ56(または57)の装着用開口部56d(または57d)内に挿入させて嵌合させて装着して上昇させ、該封入チップ56(または57)の先端が前記カートリッジ容器114(または115)の基板(14aに相当)の上方にまで位置させる。
 次に、該ノズルヘッド15をX軸方向にさらに移動させて、前記検体収容部38の上方にまで移動し、Z軸移動体35を下降させることで、前記封入チップ56(または57)の先端を該検体収容部38内に挿入させて、前記細菌7を含有するサンプル溶液の一部を吸引して、上昇させ、前記封入チップ56(または57)の先端が前記カートリッジ容器114(または115)の基板上に位置させる。次に、該ノズルヘッド15をX軸の負方向に沿って移動させて、反応容器23の上方に位置させる。Z軸移動体35を下降させることで、反応容器23内に前記サンプル液を吐出する。
 ステップS12において、前記ノズルヘッド15をX軸の正方向に沿って移動させ、前記液収容部22bの上方に位置させ、Z軸に沿って下降させて該封入チップ56(または57)の先端を該液収容部22b内に挿入して該液収容部22b内に収容されている溶解バッファ液を吸引する。
 吸引後、該封入チップ56(または57)をZ軸方向に上昇させて、前記カートリッジ容器114(または115)の基板上に位置させ、X軸の負方向に移動させて、前記反応容器23上に位置させる。該封入チップ56(または57)を下降させて、該封入チップ56(または57)の先端を前記反応容器23内に挿入し、該溶解バッファ液を該反応容器23内に吐出させる。そして、該封入チップ56(または57)によって、吸引吐出を繰り返すことで、該溶解バッファ液を前記サンプル液と攪拌させる。所定時間インキュベーションを行う。これによって懸濁している細菌7及び細菌7の核が破壊され、核酸8が溶解バッファ液を含有する液中に溶け出す。
 ステップS13において、前記ノズルヘッド15をX軸の正方向に沿って移動させ、前記液収容部22cの上方に位置させ、Z軸に沿って下降させて該封入チップ56(または57)の先端を該液収容部22c内に挿入し、前記中和バッファ液を吸引する。
 吸引後、該封入チップ56(または57)をZ軸方向に上昇させて、前記カートリッジ容器114(または115)の基板上に位置させ、X軸の負方向に移動させて、前記反応容器23上に位置させる。該封入チップ56(または57)を下降させて、該封入チップ56(または57)の先端を前記反応容器23内に挿入し、該中和バッファ液を該反応容器23内に吐出させる。そして、該封入チップ56(または57)によって、吸引吐出を繰り返すことで、該中和バッファ液を該反応容器23内に収容されている液と攪拌し前記溶解バッファ液と反応させて中和する。
 ステップS14において、前記ノズルヘッド15をX軸の正方向に移動させて前記液収容部22aの上方にまで位置させ、Z軸に沿って下降させて該封入チップ56(または57)の先端を該液収容部22a内に挿入し、前記磁性試薬の一部である磁性担体の懸濁液を吸引する。
 次に、該封入チップ56(または57)をZ軸方向に上昇させ、前記カートリッジ容器114(または115)の基板の上方に位置させ、ノズルヘッド15をX軸の負方向に移動させて前記反応容器23の上方に位置させ、Z軸方向に下降させて、前記磁性担体2の懸濁液を前記反応容器23内に吐出させる。該反応容器23内に収容された核酸8の溶液に磁性担体2が懸濁する懸濁液について、前記封入チップ56(および57)により吸引吐出を繰り返すことで攪拌させ、前記磁性担体2と核酸8とを遭遇させて該磁性担体2に核酸8を結合させる。
 ステップS15において、前記磁石46を前記封入チップ56(または57)の太径管56c(細径管57b)に接近させた状態で、前記懸濁液を吸引する際に細径管56b(または太径管57c)内に磁場を及ぼすことで、前記懸濁液中の前記核酸8と結合した磁性担体2および前記封入チップ56(または57)内に封入された前記処理促進用磁性体粒子6を磁化する。すると、懸濁液中に分散または懸濁する前記処理促進用磁性体粒子6は前記磁性担体2よりも粒径が大きくかつ磁化率が高いので、その処理促進用磁性体粒子6の周囲に懸濁する前記磁性担体2を引き付けまたは吸着させながら、前記磁石46が接近している前記封入チップ56(または57)の内壁に前記磁性担体2よりも強い磁力で引き付けられまたはそこに直接的または間接的に吸着する。その状態で吸引吐出を繰り返すことで前記懸濁液中の前記磁性担体2を効率よく内壁に捕獲することができることになる。
 ステップS16において、前記封入チップ56(または57)の太径管56c(または細径管57b)に前記磁石46を接近させた状態で前記磁性担体2および前記処理促進用磁性体粒子6を該封入チップ56(または57)の太径管56c(または細径管57b)の内壁に捕獲した状態で、Z軸に沿って該封入チップ56(または57)を上昇させて該反応容器23から抜出して、前記カートリッジ容器114(または115)の上方に位置させる。該封入チップ56(または57)の内部にある前記磁性担体2および前記処理促進用磁性体粒子6を捕獲領域、ここでは封入チップ56(または57)の内壁に捕獲したままX軸に沿ってその正方向に移動させて、液収容部22dの上方に位置させる。前記封入チップ56(または57)の太径管56c(または細径管57b)に前記磁石46を接近させた状態で、Z軸に沿って封入チップ56(または57)を下降させて前記液収容部22d内に該封入チップ56(または57)の先端を挿入させる。その後、該磁石46を離間させて、磁場を除去した状態で、該液収容部22d内に収容されている洗浄液の吸引吐出を行なうことで、磁性担体2および封入されている処理促進用磁性体粒子6を洗浄する。
 必要な場合には、ステップS17において、さらに液収容部22eに移動してさらに洗浄を行なう。洗浄が終了した場合には、前記封入チップ56(または57)の太径管56c(または細径管57b)に前記磁石46を接近させた状態で、吸引吐出を繰り返すことで前記磁性担体2および処理促進用磁性体粒子6を前記封入チップ56(または57)の内壁に捕獲する。前記磁石46を接近させて該磁性担体2および該処理促進用磁性体粒子6を捕獲した状態のまま、Z軸に沿って上昇させて、前記カートリッジ容器114(または115)の基板の上方にまで位置させる。
 ステップS18において、前記ノズルヘッド15をさらにX軸の負方向に移動させることで、液収容部22jにまで移動させて、前記磁石46を前記封入チップ56(または57)の太径管56c(または細径管57b)に接近させた状態で、Z軸方向に下降させてその先端を該液収容部22jに収容された溶出液に挿入させ、磁場を及ぼした状態で、吸引吐出を繰り返すことによって、前記磁性担体2に結合した核酸8を該磁性担体2から液中に溶出させる。
 次に、図12乃至図14に基づいて、第4の実施の形態に係る磁性担体処理装置310について説明する。なお、図12および図13では、装置内部の説明の必要上、筐体は取外されている。
 該磁性担体処理装置310は、例えば、第1の実施の形態に係る磁性試薬および磁性持薬キットを収容した4行(X軸方向に延びる)および6列(Y軸方向に延びる)のマトリクス状に液収容部322を配列した24穴のマイクロプレート314を、ステージに装填して磁性試薬の処理に利用するものである。
 該磁性担体処理装置310は、ステージを除いて、例えば、500~600mm程度(X軸方向)、幅500~600mm程度(Y軸方向)、高さ500~600mm程度(Z軸方向)の大きさである。ステージ上には、前記マイクロプレートを、例えば12枚装填して用いる。または、例えば、96穴のマイクロプレートであれば、最大8枚程度用いる。
 12枚の前記マイクロプレートの1の前記マイクロプレート314には、磁性担体2および処理促進用磁性体粒子3からなる磁性試薬1を懸濁した懸濁液が収容されている。残りのマイクロプレートにはその他の各種試薬等、例えば、溶解バッファ液、中和バッファ液、各種洗浄液、乖離液、24種類の検体から抽出した細菌等が収容され、または収容可能な状態になっている。
 該磁性担体処理装置310は、分注機のノズルヘッド315と、前記ステージ上に装填された前記マイクロプレート314を含むステージの全範囲に対して前記ノズルヘッド315を移動可能とする移動機構319とを有する。
  図12では、該ノズルへッド315には、ヘッド枠体315aが設けられ、その上側に吸引吐出用モータ349を有し、その下側には、該吸引吐出用モータ349によってピストンが内部に摺動可能に設けられたシリンダと連通するノズル317に着脱可能に装着された4行(X軸方向に延びる)および6列(Y軸方向に延びる)の24本の分注チップ26が設けられている。前記分注チップ26の先端26aは前記各液収容部322内に一斉に挿入可能に設けられている。
 前記ノズルヘッド315は、行方向(X軸方向)に沿ってノズル317が配列されたノズル行に分注チップ26が装着されたチップ列および列方向(Y軸方向)に沿ってノズル317が配列されたノズル列に分注チップ26が装着されたチップ列が形成されている。
 前記分注機の前記ノズルヘッド315は、前記移動機構319によりX軸方向およびY軸方向にのみ移動可能なXY軸移動体311に対してZ軸移動用ボール螺子334により駆動されて上下方向に移動可能に設けられたZ軸駆動板335と連結し、Z軸に沿って移動可能である。前記XY軸移動体311には、前記ボール螺子334を回転可能に支持するとともに回転駆動するモータ330cが設けられ、該XY軸移動体311の底板339の下側には、前記ノズル317に装着されたチップ26の細径管26bの内部に磁場を及ぼしかつ除去することが可能な磁力手段360が設けられている。また、前記ステージには、前記分注チップ26等のチップを前記ノズル317から脱着させるために前記ノズル317の径よりも大きく前記チップ26の最も太い部分の外径よりも細いU字状スリットが形成されたチップ脱着板が設けられている。
 前記移動機構319は、前記XY軸移動体311を前記マイクロプレート314に対してX軸方向に沿って移動させるX軸移動機構319xと、該XY軸移動体311を該マイクロプレート314に対してY軸方向に沿って移動させるY軸移動機構319yと、該XY軸移動体311に対して前記ノズルヘッド315をZ軸方向に沿って移動させるZ軸移動機構319zとを有する。
 図12に示すように、該X軸移動機構319xは、該磁性担体処理装置310の本体に取付けられた機構支持板351dに支持されたX軸駆動用モータ330aと、該モータ330aによって回転駆動されるプーリ351bおよび前記機構支持板351dに軸支されたプーリ351cと、これらのプーリ351b、351cに掛け渡されたタイミングベルト351aと、該タイミングベルト351aと連結して、X軸方向に沿って移動可能なX軸駆動板351eと、該X軸駆動板351eを案内する2本のガイド用シャフト331とを有する。 
 また、前記Y軸移動機構319yは、前記X軸駆動板351aに支持されたY軸駆動用モータ330bと、該モータ330bによって回転駆動されるプーリ352bおよび前記X軸駆動板351eに軸支されたプーリ352cと、これらのプーリ352b、352cに掛け渡されたタイミングベルト352aと、前記X軸駆動板351eに設けられ該タイミングベルト352aと連結してY軸方向に沿って移動可能な前記XY軸移動体311と、該XY軸移動体311をY軸方向に沿って案内するガイドレール352dとを有する。
 なお、前記モータ330c、前記Z軸駆動板335、ボール螺子334は、前記Z軸移動機構319zに相当する。
 図12および図13に示すように、磁力手段360は、前記チップ26に対して前記行方向(X軸方向)に沿って移動可能に設けられ前記ノズル317に装着された24本のチップ26の内部に一斉に磁場を及ぼしかつ除去することが可能となるように各チップ26に対応して両側から挟むように配列した24個の円柱状の磁石346が、略定位置で変向可能に支持配列した磁石配列部材361と、変向用磁場を及ぼすことによって前記磁石346の磁極を変向することが可能な磁極変向器としての6個の電磁石344と、前記底板339と連結し、前記ノズル317に装着したチップ26の細径管26bの高さ位置で各チップ26に隣接するように行方向、すなわちX軸方向に沿って、前記電磁石344を1列状に6個配列した電磁石支持板343と、該電磁石支持板343に間接的に支持され前記磁石配列部材361を移動可能とする磁石移動機構とを有する。
 該磁石移動機構は、前記電磁石支持板343に設けられたモータ(図示せず)により回転駆動されるプーリ342および該支持板343に軸支されたプーリ342と、これらのプーリ341,342に掛け渡されたタイミングベルト340と、該タイミングベルト340と前記磁石配列部材361を連結する連結部347と、該連結部347を案内するガイドレール348とを有する。なお、符号361eは、前記磁石配列部材361から磁石346が抜け落ちることを防止するための被覆板である。
 図14は、図13に示した前記第4の実施の形態に係る磁石配列部材361および前記電磁石344を拡大して示したものである。
 該磁石配列部材361は、少なくとも3本が前記チップ行間に挿入可能な幅を有し、挿入した際に24本の全ノズルに装着されたチップ26に隣接する行方向に延びる長さを有する5本の櫛歯部材361aと、該櫛歯部材361aと一体的に形成された基部361dとを有する。前記各櫛歯部材361aには、前記各ノズルに装着されたチップ26に接近させた際に、各チップ26に対応する位置に列間隔で配列された6個の円柱状の磁石346が設けられ、隣接する2本の櫛歯部材361aの各間に形成された隙間361bに挿入された各チップ26に対して1組の対応する2個の磁石が両側から異なる磁極が向き合うように挟む。
 すなわち、該磁石配列部材361は、各チップ26に重複を許して2個1組で対応する全24個の円柱状磁石346と、略定位置で変向可能に該磁石346を支持配列する略円筒状の有底の穴361cとを有している。該穴361cの前記各チップ26に最も接近する側壁は磁石346が外れない程度に取り除かれて該磁石346がよりチップ26に接近することを可能にしている。なお、該穴361cは、収容された磁石346がその回転対称軸線について円滑に回転可能となる程度の半径をもつ。
 各チップ26に接近した際には、該各チップ26に対して1組の2個の磁石346の異なる磁極が前記各チップ26を両側から挟んで向き合って配列されるように前記電磁石344により変向用磁場を及ぼして磁極を変向させまたは磁極を反転させる。なお該磁石346は、円柱(回転体)状に形成されているので、その回転対称軸線に関し回転して略定位置で磁極の変向や反転が行われる。
 前記電磁石344の各磁石の変向用磁場を及ぼすことで、6個の各電磁石344に最も近い櫛歯部材361aに配列された前記各磁石346をまず反転または変向させる。すると、各磁石346の反転または変向により、順次連鎖的に各櫛歯部材361aの磁石346を反転または変向させることができることになる。これによって、前記各チップ26内に磁場の変動を与えることによって該チップ26内に収容されている前記磁性担体または処理促進用磁性体粒子に変動を与えて攪拌を行なうことができる。
 図15は、第5の実施の形態に係る磁石配列部材362および前記電磁石344を示すものである。該磁石配列部材362は、図13に示した装置310において、第4の実施の形態に係る磁石配列部材361と置き換えて用いるものである。該磁石配列部材362は、磁石配列部材361と異なり、円柱状磁石346に代えて球状磁石446を用いるものである。該球状磁石446は、磁極を変向可能に収容する24個の略円筒状の穴362cに収容されている。各チップ26に接近した際には、該チップ26に対して1組の2個の磁石446の異なる磁極が該各チップ26を両側から挟んで向き合うように配列されるように前記電磁石344により磁極の変向用磁場を及ぼして磁極を変向させまたは反転させる。なお、該磁石446は、球状に形成されているので、略定位置で磁極の変向や反転が行われる。なお、球状磁石446は、該穴362cと接する面積が前記円柱状磁石346に比較して小さいので変向や反転がより円滑に行なわれる。なお、その他、ほぼ前記磁石配列部材361で説明した通りである。
 図16は、第6の実施の形態に係る磁石配列部材363および前記電磁石344を示すものである。該磁石配列部材363は、2行(X軸方向に延びる)および6列(Y軸方向に延びる)からなる12個のノズル317を有するノズルヘッド(図示せず)に装着された12本のチップ26の内部に一斉に磁場を及ぼしかつ除去することが可能となるように各チップ26に重複を許して6個1組で対応する全54個の球状磁石446と、略定位置で変向可能に該球状磁石446を収容する3つの略円筒状の穴が、Y軸方向に沿って連結した連結穴363cが、X軸方向(行方向)に沿って設けられている。該各チップ26に対し1組6個の磁石446は3個ずつの磁石からなる2群の磁石群からなり、各磁石群は所定間隔を空けて1列状(列方向=Y軸方向に沿って)に配列された3個の磁石446からなる。
 各チップ26に接近した際には、該各チップ26に対して1組の2群の磁石群に属する磁石446が該チップ26を両側から挟むようにしてY軸方向に沿って一列状に配列されている。2つの磁石群の2つの先端の磁石446(F)が前記チップ26の両側から挟むように該磁石配列部材363を移動させた際に、前記磁極変向器である前記電磁石344は、各群の後端の磁石446(B)の磁極を変向用磁場を及ぼして変向または反転させることによって先端の磁石446(F)の磁極を連鎖的に変向または反転させて前記チップ26内に及ぼす磁場を変動させる。
 該磁石配列部材363は、行方向(X軸方向)に沿って移動可能に設けられ、1本が前記ノズル行間に挿入可能な幅を有し、挿入した際に12本の全ノズルに装着されたチップ26に隣接する行方向に延びる長さを有する3本の櫛歯部材363aと、該櫛歯部材363aと一体的に形成された基部363dとを有する。該各櫛歯部材363aには、前記ノズルに装着したチップ26に接近した際に、各チップ26に対応する位置に列間隔で配列された6個の連結穴363cがX軸方向に沿って設けられている。隣接する2本の櫛歯部材363aの各間に形成された隙間363bに挿入された各チップ26に対して両側から先端の磁石446の異なる磁極が向き合うように挟む1組の2群の磁石群が設けられている。
 図17は、第7の実施の形態に係る磁石配列部材364を示すものである。該磁石配列部材364は、前記ノズル317に装着された24本のチップ26の内部に一斉に磁場を及ぼしかつ除去することが可能となるように各チップ26に重複を許して2個1組で対応する全24個のブロック状磁石546と、定位置で磁極が変向不能となるように該磁石546を嵌合して取り付ける24個の有底のスリット状の穴364cとを有する。
 該磁石配列部材364が各チップ26に接近した際には、該各チップ26に対して1組の2個の磁石546の異なる磁極が前記各チップ26を両側から挟んで向き合うように配列されている。
 図17に示すように、該磁石配列部材364は、前記行方向(X軸方向)に沿って移動可能に設けられている。該磁石配列部材364は、少なくとも3本が前記ノズル行間に挿入可能な幅を有し、挿入した際に24本の全ノズルに装着されたチップ26に隣接する行方向に延びる長さを有する5本の櫛歯部材364aと、5本の該櫛歯部材364aと一体的に形成された基部364dとを有する。前記各櫛歯部材364aには、前記各チップに接近した際に、各チップ26に対応する位置に列間隔で配列された6個のブロック状磁石546が設けられ、隣接する2本の櫛歯部材364aの各間に形成された隙間364bに挿入された各チップ26に対して両側から異なる磁極が向き合うように挟む1組の対応する2個の磁石546が設けられている。
 図18(a)および図18(c)は、ノズル317に装着したチップ26の細径管26bまたは容器23に対し片側から磁石346を接近させた場合、例えば、磁性担体2または処理促進用磁性体粒子3のチップ26の細径管26bまたは容器23内の状態を示すものである。この場合には、磁性担体2等が磁石246、346側の内壁の捕獲領域346a,246aのみに吸着されている状態が示されている。
 図18(b)および図18(d)は両側から2つの磁石346を異なる磁極が向き合うようにして接近させた場合に、磁性担体2または処理促進用磁性体粒子3のチップ26の細径管26bまたは容器23内の状態を示すものである。この場合には、磁性担体等が前記細径管26bまたは容器23を仕切るようにフィルタ状の粒子層346L,246Lが形成された状態が示されている。
 図19(a)は前記チップ26に接近したブロック状磁石546の磁極が固定されていて変向されないことを示し、図19(b)は球状磁石446が、磁極が磁極変向器としての電磁石344の変向用磁場によって各定位置で順次180度回転して反転(変向)する動作を、図19(c)は、円筒状磁石336が、前記変向用磁場によって各定位置で回転対称軸に関して順次180度回転して反転(変向)する動作を各々模式的に示すものである。
 以上説明した各実施の形態は、本発明をより良く理解させる為に具体的に説明したものであって、別形態を制限するものではない。したがって、発明の主旨を変更しない範囲で変更可能である。例えば、磁性担体のサイズは、ナノサイズに限られず、マイクロサイズの場合もありうる。また処理促進用磁性体粒子のサイズについても、ナノサイズの場合もありうる。その他、以上の説明で用いた数値、回数、形状、個数、量等についてもこれらの場合に限定されるものではない。また、前記処理促進用磁性体粒子が封入される流管は、チップの他カラムや流管の一部であって着脱可能に設けられたものであっても良い。また、前記磁性試薬またはそのキットは、カートリッジ容器の他に、マイクロプレートに封入するようにしても良い。
 なお、以上の例では、磁性担体および処理促進用磁性体粒子を、容器やチップの内壁を捕獲領域として直接的または間接的に吸着させる場合について説明したのであるが、これらの場合に限られることなく、該容器またはチップ内に挿入される磁石が内蔵された部材の表面に直接的または間接的に吸着することで、捕獲するようにしても良い。この場合には、該部材の表面が捕獲領域ということになる。
 前記磁力手段の前記磁石配列部材はマトリクス状に配列されたチップに磁場を及ぼす場合について説明したが、マトリクス状に配列された液収容部に磁場を及ぼすようにしても良い。また、1列状または1行状に配列されたチップもしくは液収容部、または1個のチップや液収容部に磁場を及ぼすようにしても良い。なお、「列」、「行」、「X軸」、「Y軸」、「Z軸」等の空間的関係は、図面等の例示に固定されたものではない。さらに、以上の説明で用いた、磁性担体処理装置または磁性担体処理方法について用いた種々の物質、種々の部品または種々の工程、例えば、磁性担体、処理促進用磁性体粒子、もしくは各種試薬等、容器、液収容部、ノズルヘッド、チップ、移動機構、磁力手段、チップ脱着機構、磁石、磁石配列部材、櫛歯部材、もしくはモータ等、接触工程、捕獲工程、分離工程、粒子層形成工程、混合工程、もしくは変動工程等については、必要な変更を加えて、相互に組み合わせることができる。
 本発明は、磁性担体処理装置およびその処理方法に関し、特に、遺伝子、免疫系、アミノ酸、蛋白質、糖等の生体高分子、生体低分子の扱いが要求される分野、例えば、生化学分野、工業分野、食品、農産、水産加工等の農業分野、製剤分野、衛生、保健、免疫、疾病、遺伝等の医療分野等の様々な分野で利用可能である。
 1                 磁性試薬
 2                 磁性担体
 3,6               処理促進用磁性体粒子
 10,310            磁性担体処理装置 
 14,114,115        磁性試薬カートリッジ容器
 15,315            ノズルヘッド
 17,317            ノズル
 26                分注チップ
 46,146,246,346,446,546  磁石
 46a,46b,146a,246a       捕獲領域
 56,57             処理促進用磁性体粒子封入チップ
 60,360            磁力手段

Claims (21)

  1.  磁場を受けて磁化可能であって液中の所定の化学物質または生体と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体と、磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能であって前記液の移動または磁場により液中で移動可能に形成され前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の処理促進用磁性体粒子と、を有する磁性試薬または磁性試薬キット。
  2.  前記処理促進用磁性体粒子の粒径は前記磁性担体の粒径よりも大きく形成された請求項1に記載の磁性試薬または磁性試薬キット。
  3.  前記処理促進用磁性体粒子の粒径は、0.001mmから5mmの大きさであり、前記磁性担体の粒径は、数nmから数10μmである請求項1または請求項2に記載の磁性試薬または磁性試薬キット。
  4.  前記処理促進用磁性体粒子の磁化率は前記磁性担体の磁化率よりも常温において大きい請求項2または請求項3に記載の磁性試薬または磁性試薬キット。
  5.  前記処理促進用磁性体粒子は強磁性体を有し、前記磁性担体は常磁性体または超常磁性体を有する請求項1乃至請求項3のいずれかに記載の磁性試薬または磁性試薬キット。
  6.  前記処理促進用磁性体粒子は、前記磁性担体と異なる大きさまたは異なる素材で形成され、所定の化学物質または生体と結合可能である請求項1に記載の磁性試薬または磁性試薬キット。
  7.  前記磁性担体は、1または複数の液収容部をもつカートリッジ容器の1の液収容部内に収容され、前記処理促進用磁性体粒子は、前記カートリッジ容器の前記1の液収容部内または他の液収容部内に収容されて、1または複数の液収容部の開口部が穿孔可能な薄膜で密閉された請求項1乃至請求項6に記載の磁性試薬または磁性試薬キット。
  8.  前記磁性担体は、1または複数の液収容部をもつカートリッジ容器の少なくとも1の液収容部内に収容され、該液収容部の開口部が穿孔可能な薄膜で密閉され、前記処理促進用磁性体粒子は、液の移動または外部より及ぼした磁場によって移動可能となるように液の吸引または吐出が可能で前記液収容部内に挿入可能な口部をもつ処理促進用磁性体粒子封入流管内に封入された請求項1乃至請求項6のいずれかに記載の磁性試薬キット。
  9.  所定の化学物質または生体からなる標的を含有する液と、磁場を受けて磁化可能であって液中の前記標的と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体、および磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能でかつ液の移動または磁場により液中で移動可能に形成され前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の処理促進用磁性体粒子とを接触させる接触工程と、磁場を及ぼして前記処理促進用磁性体粒子および前記磁性担体を磁化させて前記磁性担体または前記処理促進用磁性体粒子を前記処理促進用磁性体粒子の表面に吸着させるとともに、該磁性担体および前記処理促進用磁性体粒子を所定捕獲領域に直接的または間接的に吸着させることで磁性担体を捕獲させる捕獲工程とを、有する磁性担体処理方法。
  10.  前記磁場を除去した状態で、捕獲した前記磁性担体を含有する液体について攪拌または振盪することで前記磁性担体を液中に再懸濁する再懸濁工程をさらに有する請求項9に記載の磁性担体処理方法。
  11.  前記処理促進用磁性体粒子の前記粒径は、前記磁性担体の前記粒径よりも大きく形成された請求項9に記載の磁性担体処理方法。
  12.  前記処理促進用磁性体粒子の磁化率は前記磁性担体の磁化率よりも常温において大きく形成された請求項9乃至請求項11に記載の磁性担体処理方法。
  13.  磁場を受けて磁化可能であって液中の標的と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径を持つ複数の磁性担体、または磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能でかつ液の移動または磁場により液中で移動可能に形成され前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の処理促進用磁性体粒子を少なくとも含有する液の吸引および吐出を行なう1または2以上のチップまたは前記液を収容した1または2以上の液収容部を仕切るように前記磁性担体または前記処理促進用磁性体粒子を展開させて粒子層を形成する粒子層形成工程と、少なくとも所定の化学物質または生体からなる標的を含有する液を、前記粒子層を通過するように移動させる通過工程とを有する磁性担体処理方法。
  14.  所定の化学物質または生体からなる標的を含有する液、磁場を受けて磁化可能であって前記液中の標的と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の前記磁性担体を含有する液、および磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能でかつ液の移動または磁場により液中で移動可能に形成された前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の前記処理促進用磁性体粒子を含有する液の中から選択された少なくとも2種類の液の混合液を1または2以上のチップに導入しまたは1もしくは2以上の液収容部に収容する混合工程と、前記混合液を導入した前記チップまたは収容した前記液収容部に接近させた磁石の磁極を変向用磁場を及ぼして変向させることで、前記磁性担体または前記処理促進用磁性体粒子を液中で変動させる変動工程と、を有する磁性担体処理方法。
  15.  各種試薬を収容可能な1または2以上の液収容部を有する容器と、気体の吸引吐出を行なう1または2以上のノズルが設けられたノズルヘッドと、前記ノズルに着脱可能に装着され、先端が前記液収容部内に挿入可能に設けられた1または2以上のチップと、前記ノズルヘッドと前記容器との間を相対的に移動可能とする移動機構と、前記ノズルに装着されたチップまたは前記液収容部の内の少なくとも1の内部に磁場を及ぼしかつ除去することが可能な磁力手段とを有し、前記液収容部の内の少なくとも1には、前記チップによって吸引吐出可能であって、磁場を受けて磁化可能であり液中の所定の化学物質または生体と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体を収容し、磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能であって前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進する複数の処理促進用磁性体粒子を、前記液収容部の少なくとも1に前記チップによって吸引吐出可能であって前記液の移動または磁場により液中で移動可能となるように収容し、または前記チップの少なくとも1に液の移動または磁場により液中で移動可能となるように封入した磁性担体処理装置。
  16.  前記ノズルヘッドに設けられた前記ノズルに装着可能な1または2以上の穿孔用チップをさらに有し、前記容器の各液収容部は、前記ノズルに装着された該穿孔用チップにより穿孔可能な薄膜で密閉された請求項15に記載の磁性担体処理装置。
  17.  前記処理促進用磁性体粒子の前記粒径は、前記磁性担体の前記粒径よりも大きい請求項15に記載の磁性担体処理装置。
  18.  前記処理促進用磁性体粒子の磁化率は前記磁性担体の磁化率よりも常温において大きい、請求項15または請求項17のいずれかに記載の磁性担体処理装置。
  19.  各種試薬を収容可能な1または2以上の液収容部を有する容器と、気体の吸引吐出を行なう1または2以上のノズルが設けられたノズルヘッドと、前記ノズルに着脱可能に装着され、先端が前記液収容部内に挿入可能に設けられた1または2以上のチップと、前記ノズルヘッドと前記容器との間を相対的に移動可能とする移動機構と、前記ノズルに装着されたチップまたは前記液収容部の内の少なくとも1の内部に磁場を及ぼしかつ除去することが可能な磁力手段とを有し、前記液収容部の内の少なくとも1には、前記チップによって吸引吐出可能であって、磁場を受けて磁化可能であり液中の所定の化学物質または生体と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体、または磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能であって前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進し、前記チップによって吸引吐出可能であって前記液の移動または磁場により液中で移動可能となる複数の処理促進用磁性体粒子を収容し、前記磁力手段は、前記チップまたは液収容部に対し相対的に移動可能に設けられ、前記ノズルに装着された前記各チップまたは前記各液収容部の内部に一斉に磁場を及ぼしかつ除去することが可能な1組の対応する複数の磁石は、前記各チップまたは各液収容部に接近した際には各組ごとに少なくとも2個の磁石の相異なる磁極が前記各チップまたは液収容部を挟んで向き合うように配列された磁石配列部材を有する磁性担体処理装置。
  20.  各種試薬を収容可能な1または2以上の液収容部を有する容器と、気体の吸引吐出を行なう1または2以上のノズルが設けられたノズルヘッドと、前記ノズルに着脱可能に装着され、先端が前記液収容部内に挿入可能に設けられた1または2以上のチップと、前記ノズルヘッドと前記容器との間を相対的に移動可能とする移動機構と、前記ノズルに装着されたチップまたは前記液収容部の内の少なくとも1の内部に磁場を及ぼしかつ除去することが可能な磁力手段とを有し、前記液収容部の内の少なくとも1には、前記チップによって吸引吐出可能であって、磁場を受けて磁化可能であり液中の所定の化学物質または生体と結合可能で該液中に懸濁可能な粒径をもつ複数の磁性担体、または磁場を受けて磁化され前記磁性担体を表面に吸着可能であって前記磁性担体の捕獲または再懸濁の処理を促進し、前記チップによって吸引吐出可能であって前記液の移動または磁場により液中で移動可能となる複数の処理促進用磁性体粒子を収容し、前記磁力手段は、前記チップまたは液収容部に対し相対的に移動可能に設けられ、前記ノズルに装着された前記各チップまたは前記各液収容部の内部に一斉に磁場を及ぼしかつ除去することが可能であって、1の前記チップまたは前記液収容部ごとに1組の対応する1または複数の磁石が、その磁極が変向可能となるように支持された磁石配列部材と、変向用磁場を及ぼすことによって前記各磁石の磁極を変向することが可能な磁極変向器とを有する磁性担体処理装置磁性担体処理装置。
  21.  前記各磁石は回転体状に形成され、前記磁石配列部材は、前記各組の対応する複数の前記各磁石が回転により略定位置で連鎖的に変向可能となるように所定間隔を空けて1列状に配列された1または2群の磁石群を有し、前記磁極変向器は、各磁石群の先端の磁石が前記チップまたは液収容部に接近するように前記磁石配列部材を移動させた際に、前記各群の後端の磁石の磁極を変向用磁場を及ぼして変向させることによって、先端の磁石の磁極を変向させて前記チップまたは液収容部に及ぼす磁場を変動させる電磁石を有する請求項20に記載の磁性担体処理装置。
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