RU2016132974A - Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами - Google Patents

Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами Download PDF

Info

Publication number
RU2016132974A
RU2016132974A RU2016132974A RU2016132974A RU2016132974A RU 2016132974 A RU2016132974 A RU 2016132974A RU 2016132974 A RU2016132974 A RU 2016132974A RU 2016132974 A RU2016132974 A RU 2016132974A RU 2016132974 A RU2016132974 A RU 2016132974A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
chymosin
polypeptide
seq
variant
amino acid
Prior art date
Application number
RU2016132974A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2016132974A3 (ru
RU2717770C2 (ru
Inventor
ДЕН БРИНК Йоханнес Мортен ВАН
Еспер Лангхольм ЙЕНСЕН
Йонас Якобсен
Мартин ЛУНД
Ибен ЙЕППЕСЕН
Кристиан ЯЭКЕЛЬ
Original Assignee
Кхр. Хансен А/С
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Кхр. Хансен А/С filed Critical Кхр. Хансен А/С
Publication of RU2016132974A publication Critical patent/RU2016132974A/ru
Publication of RU2016132974A3 publication Critical patent/RU2016132974A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2717770C2 publication Critical patent/RU2717770C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
    • C12N9/6478—Aspartic endopeptidases (3.4.23)
    • C12N9/6483—Chymosin (3.4.23.4), i.e. rennin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
    • A23C19/02—Making cheese curd
    • A23C19/04—Making cheese curd characterised by the use of specific enzymes of vegetable or animal origin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
    • A23C19/02—Making cheese curd
    • A23C19/04—Making cheese curd characterised by the use of specific enzymes of vegetable or animal origin
    • A23C19/041—Proteolytic or milk clotting enzymes from plants or vegetables, e.g. papain, ficin, bromelain
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/1203—Addition of, or treatment with, enzymes or microorganisms other than lactobacteriaceae
    • A23C9/1209—Proteolytic or milk coagulating enzymes, e.g. trypsine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/142—Amino acids; Derivatives thereof
    • A23K20/147—Polymeric derivatives, e.g. peptides or proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/23—Aspartic endopeptidases (3.4.23)
    • C12Y304/23004—Chymosin (3.4.23.4), i.e. rennin

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Beans For Foods Or Fodder (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Claims (244)

1. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина, включающий следующие стадии:
(а): создание изменения в одном или более положений в родительском полипептиде, обладающем активностью химозина, где изменение включает замену, делецию или инсерцию по меньшей мере в одном аминокислотном положении, соответствующем любому из положений 70; 75; 77; 79; 90; 102; 103; 108; 114; 117; 120; 124; 134; 154; 156; 163; 212; 222; 223; 224; 238; 246; 256; 261; K279V; L280; F281; R300D,E,S,T,N,Q,C,U,G,P,A,V,I,L,M,F,Y,W; G309; R312D,E,S,T,N,Q,C,U,G,P,A,V,I,L,M,F,Y,W; 320; 324; D325Q; 326; 331; 336; 346; 361; 367 и 379; и
(б): продуцирование и выделение измененного полипептида стадии (а) и, таким образом, получение выделенного варианта полипептида химозина, где вариант обладает активностью химозина;
и где:
(1): аминокислотное положение родительского полипептида определяют путем выравнивания родительского полипептида с полипептидом с SEQ ID NO: 1 (бычий химозин), т.е. полипептид с SEQ ID NO: 1 используют для определения соответствующей аминокислотной последовательности в родительском полипептиде; и
(2): родительский полипептид обладает по меньшей мере 65%-ной идентичностью последовательности со зрелым полипептидом с SEQ ID NO: 1 (бычий химозин), который находится от аминокислотного положения 59 до аминокислотного положения 381 SEQ ID NO: 1;
и при условии, что выделенный вариант полипептида химозина НЕ представляет собой конкретный вариант, выбранный из группы, состоящей из:
Q246E+G309D+S329P+D337E;
R125Q+G128N+H204R+Q246E+S284T;
Y185F+R213Q+Q246E;
V261A+V263I+G309W+L311I+Y326F;
G128D+L188I+Y326F;
G128N+R312S+S313Y+Y326F;
G128N+R312S+S313Y+Y326F;
D117N+V261A+R312S;
D216S+L224V+V263I+F281V+G309D;
Y79S+L224V+L311I; и
R119S+L224V+T297S.
2. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина по п. 1, где выделенный вариант полипептида химозина обладает:
- активностью химозина, обеспечивающей повышенное отношение С (удельная свертывающая активность)/Р(протеолитическая активность) по сравнению с отношением С/Р бычьего химозина, содержащего зрелый полипептид с SEQ ID NO: 1; и
- активностью химозина, обеспечивающей повышенное отношение С/Р по сравнению с отношением С/Р верблюжьего химозина, содержащего зрелый полипептид с SEQ ID NO: 2.
3. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина по п. 1, где изменение включает замену по меньшей мере в одном аминокислотном положении, и где замена представляет собой L70M; F75Y; К77Т; Y79S; V90L; D102N; I103V; K120Q; F124Y; H134Q; I154L; L163E; S212A; М223Е; L224V; L238I; Q246E; V256I; V261A; K279V; F281A; R300D,E,S,T,N,Q; R312D,E,S,T,N,Q; Е320Т; R324V; Y326F; K336D,E,S,T,N,Q,C,U,G,P,A,V,I,L,M,F,Y,W; S331Y; Q346E; 1361L; V367I; или K379P.
4. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина по п. 3, где замена представляет собой Q246E; K279V; R300Q; R312S; Y326F; K336D,E,S,T,N,Q или K336Q.
5. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина по п. 1, где изменение включает замену по меньшей мере в одном аминокислотном положении, и где замена представляет собой:
H134Q+Q246E+Y326F;
D117N+L280I+G309D;
H134Q+D156V+G309D;
D156V+Q246E+L280I;
D117N+H134Q+L280I;
D156V+G309D+Y326F;
D117N+D156V+D325M;
L280I+D325M+Y326F;
D117N+Q246E+Y326F;
D117N+H134Q+D325M;
N310Q+N349Q+K279V;
R300Q+N307D;
N307D+G309D;
N307D+R312S;
R300Q+K336Q;
N307D+K336Q;
G309D+R312S;
R300Q+N307D+G309D+R312S+K336Q;
N158Q+N349Q+R300Q+N307D+G309D+R312S+K336Q;
L280I+G309D+S331Y+T342S+D325Q;
L280I+G309D+L224V+E320T+T235S;
L280I+G309W+K77T+R324I;
L280I+G309D+H134Q+V213F+F281A;
L280I+G309D+V213F+E320T+V90L;
L280I+G309D+Q220S+L224V+H134Q;
L280I+G309W+L238I+T342S;
L280I+G309W+F75Y+Y79S;
L280I+G309D+F75Y+S331Y+Q346E;
L280I+G309D+L224V+I103V+L238I;
L280I+G309D+F124Y+Q346E+I154L;
L280I+G309D+I154L+V261A+V367I;
L280I+G309D+Y79S+L224V+S212A;
L280I+G309D+L70M+T342S;
L280I+G309D+H134Q+M223E+L70M;
L280I+G309D+Y79S+T342S+I154L;
L280I+G309D+Y79S+I103V+F281A;
L280I+G309D+V256I+V261A+K379P;
L280I+G309D+Q346E+K77T+T235S;
L280I+G309D+H239N+R324I+D325Q;
L280I+G309D+H134Q+V213F+F281A;
L280I+G309D+Y326F+L70M+D325Q;
L280I+G309D+H134Q+М223Е+L70M;
L280I+G309W+S212A+V261A;
L280I+G309D+S331Y+L224V+Y326F;
L280I+G309D+K120Q+М223Е+H239N;
L280I+G309D+H239N+R324I+D325Q;
L280I+G309W+L238I+T342S;
L280I+G309D+V213F+Е320Т+V90L;
L280I+G309D+L70M+T342S;
L280I+G309D+H134Q+V213F+F281A;
L280I+G309D+Y79S+L224V+S212A;
L280I+G309D+S331Y+L224V+Y326F;
L280I+G309D+H134Q+М223Е+L70M;
L280I+G309W+L238I+T342S;
L280I+G309D+V213F+Е320Т+V90L; или
L280I+G309W+S212A+V261A.
6. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина по любому из пп. 1-5, где родительский полипептид обладает по меньшей мере 95%-ной идентичностью последовательности со зрелым полипептидом с SEQ ID NO: 1 (бычий химозин).
7. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина по любому из пп. 1-5, где родительский полипептид обладает по меньшей мере 95%-ной идентичностью последовательности со зрелым полипептидом с SEQ ID NO: 2 (верблюжий химозин), который находится от аминокислотного положения 59 до аминокислотного положения 381 SEQ ID NO: 2.
8. Выделенный вариант полипептида химозина, полученный способом по любому из пп. 1-7.
9. Выделенный вариант полипептида химозина, содержащий:
(а): изменение в одном или более положений в родительском полипептиде, обладающем активностью химозина, где изменение включает замену, делецию или инсерцию по меньшей мере в одном аминокислотном положении, соответствующем любому из положений 70; 75; 77; 79; 90; 102; 103; 108; 114; 117; 120; 124; 134; 154; 156; 163; 212; 223; 224; 238; 246; 256; 261; K279V; L280; F281; R300D,E,S,T,N,Q,C,U,G,P,A,V,I,L,M,F,Y,W; G309; R312D,E,S,T,N,Q,C,U,G,P,A,V,I,L,M,F,Y,W; 320; 324; D325Q; 326; 331; 336; 346; 361; 367 и 379; и
(б): где вариант обладает активностью химозина;
и где
(1): аминокислотное положение родительского полипептида определяют путем выравнивания родительского полипептида с полипептидом с SEQ ID NO: 1 (бычий химозин), т.е. полипептид с SEQ ID NO: 1 используют для определения соответствующей аминокислотной последовательности в родительском полипептиде; и
(2): родительский полипептид обладает по меньшей мере 90%-ной идентичностью последовательности со зрелым полипептидом с SEQ ID NO: 1 (бычий химозин), который находится от аминокислотного положения 59 до аминокислотного положения 381 SEQ ID NO: 1; и
(3): выделенный вариантный полипептид обладает менее чем 100%-ной идентичностью последовательности со зрелым полипептидом с SEQ ID NO: 1 (бычий химозин);
и при условии, что выделенный вариант полипептида химозина НЕ представляет собой конкретный вариант, выбранный из группы, состоящей из:
Q246E+G309D+S329P+D337E;
R125Q+G128N+H204R+Q246E+S284T;
Y185F+R213Q+Q246E;
V261A+V263I+G309W+L311I+Y326F;
G128D+L188I+Y326F;
G128N+R312S+S313Y+Y326F;
G128N+R312S+S313Y+Y326F; и
D117N+V261A+R312S;
D216S+L224V+V263I+F281V+G309D
Y79S+L224V+L311I и
R119S+L224V+T297S; и
где выделенный вариант обладает активностью химозина, обеспечивающей повышенное отношение С/Р по сравнению с отношением С/Р бычьего химозина, содержащего зрелый полипептид с SEQ ID NO: 1.
10. Выделенный вариант полипептида химозина по п. 9, где родительский полипептид обладает по меньшей мере 97%-ной идентичностью последовательности со зрелым полипептидом с SEQ ID NO: 1 (бычий химозин); и
где выделенный вариант бычьего химозина содержит менее 10 изменений аминокислот (например, замен) по сравнению со зрелым полипептидом с SEQ ID NO: 1 (бычий химозин).
11. Выделенный вариант полипептида химозина по любому из пп. 9-10, где изменение включает замену по меньшей мере в одном аминокислотном положении, и где замена представляет собой L70M; F75Y; К77Т; Y79S; V90L; D102N; 1103V; N108D; D117N; F114Y; K120Q; F124Y; H134Q; I154L; D156V; L163E; S212A; S222G; М223Е; L224V; D325Q; L238I; Q246E; V256I; V261A; K279V; L280I; F281A; R300D,E,S,T,N,Q; G309D,W; R312D,E,S,T,N,Q; Е320Т; R324V; Y326F; K336D,E,S,T,N,Q,C,U,G,P,A,V,I,L,M,F,Y,W; S331Y; Q346E; I361L; V367I; или K379P.
12. Выделенный вариант полипептида химозина по любому из пп. 9-10, где изменение включает замену по меньшей мере в одном аминокислотном положении, и где замена представляет собой:
H134Q+Q246E+Y326F;
D117N+L280I+G309D;
H134Q+D156V+G309D;
D156V+Q246E+L280I;
D117N+H134Q+L280I;
D156V+G309D+Y326F;
D117N+D156V+D325M;
L280I+D325M+Y326F;
D117N+Q246E+Y326F;
D117N+H134Q+D325M;
N310Q+N349Q+K279V;
R300Q+N307D;
N307D+G309D;
N307D+R312S;
R300Q+K336Q;
N307D+K336Q;
G309D+R312S;
R300Q+N307D+G309D+R312S+K336Q;
N158Q+N349Q+R300Q+N307D+G309D+R312S+K336Q;
L280I+G309D+S331Y+T342S+D325Q;
L280I+G309D+L224V+Е320Т+T235S;
L280I+G309W+К77Т+R324I;
L280I+G309D+H134Q+V213F+F281A;
L280I+G309D+V213F+Е320Т+V90L;
L280I+G309D+Q220S+L224V+H134Q;
L280I+G309W+L238I+T342S;
L280I+G309W+F75Y+Y79S;
L280I+G309D+F75Y+S331Y+Q346E;
L280I+G309D+L224V+I103V+L238I;
L280I+G309D+F124Y+Q346E+I154L;
L280I+G309D+I154L+V261A+V367I;
L280I+G309D+Y79S+L224V+S212A;
L280I+G309D+L70M+T342S;
L280I+G309D+H134Q+M223E+L70M;
L280I+G309D+Y79S+T342S+I154L;
L280I+G309D+Y79S+I103V+F281A;
L280I+G309D+V256I+V261A+K379P;
L280I+G309D+Q346E+K77T+T235S;
L280I+G309D+H239N+R324I+D325Q;
L280I+G309D+H134Q+V213F+F281A;
L280I+G309D+Y326F+L70M+D325Q;
L280I+G309D+H134Q+M223E+L70M;
L280I+G309W+S212A+V261A;
L280I+G309D+S331Y+L224V+Y326F;
L280I+G309D+K120Q+M223E+H239N;
L280I+G309D+H239N+R324I+D325Q;
L280I+G309W+L238I+T342S;
L280I+G309D+V213F+Е320Т+V90L;
L280I+G309D+L70M+T342S;
L280I+G309D+H134Q+V213F+F281A;
L280I+G309D+Y79S+L224V+S212A;
L280I+G309D+S331Y+L224V+Y326F;
L280I+G309D+H134Q+М223Е+L70M;
L280I+G309W+L238I+T342S;
L280I+G309D+V213F+Е320Т+V90L; или
L280I+G309W+S212A+V261A.
13. Выделенный вариант полипептида химозина, содержащий:
(а): изменение в одном или более положений в родительском полипептиде, обладающем активностью химозина, где изменение включает замену, делецию или инсерцию по меньшей мере в одном аминокислотном положении, соответствующем любому из положений 70; 75; 77; 79; 90; 102; 103; 108; 114; 117; 120; 124; 134; 154; 156; 163; 212; 222; 223; 224; 238; 246; 256; 261; K279V; L280; F281; R300D,E,S,T,N,Q,C,U,G,P,A,V,I,L,M,F,Y,W; G309; R312D,E,S,T,N,Q,C,U,G,P,A,V,I,L,M,F,Y,W; 320; 324; D325Q; 326; 331; 336; 346; 361; 367 и 379; и
(б): где вариант обладает активностью химозина;
и где
(1): аминокислотное положение родительского полипептида определяют путем выравнивания родительского полипептида с полипептидом с SEQ ID NO: 1 (бычий химозин), т.е. полипептид с SEQ ID NO: 1 используют для определения соответствующей аминокислотной последовательности в родительском полипептиде; и
(2): родительский полипептид обладает по меньшей мере 90%-ной идентичностью последовательности со зрелым полипептидом с SEQ ID NO: 2 (верблюжий химозин), который находится от аминокислотного положения 59 до аминокислотного положения 381 SEQ ID NO: 2; и
(3): выделенный вариантный полипептид обладает менее чем 100%-ной идентичностью последовательности со зрелым полипептидом с SEQ ID NO: 2 (верблюжий химозин);
и при условии, что выделенный вариант полипептида химозина НЕ представляет собой конкретный вариант, выбранный из группы, состоящей из:
Q246E+G309D+S329P+D337E;
R125Q+G128N+H204R+Q246E+S284T;
Y185F+R213Q+Q246E;
V261A+V263I+G309W+L311I+Y326F;
G128D+L188I+Y326F;
G128N+R312S+S313Y+Y326F;
G128N+R312S+S313Y+Y326F;
D117N+V261A+R312S;
D216S+L224V+V263I+F281V+G309D;
Y79S+L224V+L311I; и
R119S+L224V+T297S; и
где выделенный вариант обладает активностью химозина, обеспечивающей повышенное отношение С/Р по сравнению с отношением С/Р верблюжьего химозина, содержащего зрелый полипептид с SEQ ID NO: 2.
14. Выделенный вариант полипептида химозина по п. 13, где изменение включает замену по меньшей мере в одном аминокислотном положении, и где замена представляет собой:
H134Q+Q246E+Y326F;
D117N+L280I+G309D;
H134Q+D156V+G309D;
D156V+Q246E+L280I;
D117N+H134Q+L280I;
D156V+G309D+Y326F;
D117N+D156V+D325M;
L280I+D325M+Y326F;
D117N+Q246E+Y326F;
D117N+H134Q+D325M;
N310Q+N349Q+K279V;
R300Q+N307D;
N307D+G309D;
N307D+R312S;
R300Q+K336Q;
N307D+K336Q;
G309D+R312S;
R300Q+N307D+G309D+R312S+K336Q; или
N158Q+N349Q+R300Q+N307D+G309D+R312S+K336Q;
L280I+G309D+S331Y+T342S+D325Q;
L280I+G309D+L224V+Е320Т+T235S;
L280I+G309W+К77Т+R324I;
L280I+G309D+H134Q+V213F+F281A;
L280I+G309D+V213F+Е320Т+V90L;
L280I+G309D+Q220S+L224V+H134Q;
L280I+G309W+L238I+T342S;
L280I+G309W+F75Y+Y79S;
L280I+G309D+F75Y+S331Y+Q346E;
L280I+G309D+L224V+I103V+L238I;
L280I+G309D+F124Y+Q346E+I154L;
L280I+G309D+I154L+V261A+V367I;
L280I+G309D+Y79S+L224V+S212A;
L280I+G309D+L70M+T342S;
L280I+G309D+H134Q+М223Е+L70M;
L280I+G309D+Y79S+T342S+I154L;
L280I+G309D+Y79S+1103V+F281A;
L280I+G309D+V256I+V261A+K379P;
L280I+G309D+Q346E+K77T+T235S;
L280I+G309D+H239N+R324I+D325Q;
L280I+G309D+H134Q+V213F+F281A;
L280I+G309D+Y326F+L70M+D325Q;
L280I+G309D+H134Q+M223E+L70M;
L280I+G309W+S212A+V261A;
L280I+G309D+S331Y+L224V+Y326F;
L280I+G309D+K120Q+М223Е+H239N;
L280I+G309D+H239N+R324I+D325Q;
L280I+G309W+L238I+T342S;
L280I+G309D+V213F+Е320Т+V90L;
L280I+G309D+L70M+T342S;
L280I+G309D+H134Q+V213F+F281A;
L280I+G309D+Y79S+L224V+S212A;
L280I+G309D+S331Y+L224V+Y326F;
L280I+G309D+H134Q+М223Е+L70M;
L280I+G309W+L238I+T342S;
L280I+G309D+V213F+Е320Т+V90L; или
L280I+G309W+S212A+V261A.
15. Способ изготовления пищевого или кормового продукта, включающий добавление эффективного количества выделенного варианта полипептида химозина по любому из пп. 8-14 к пищевому(ым) или кормовому(ым) ингредиенту(ам) и осуществление дальнейших этапов производства с получением пищевого или кормового продукта; и
где продукт представляет собой продукт на основе молока, и где способ включает добавление эффективного количества выделенного варианта полипептида химозина по любому из пп. 8-14 к молоку и осуществление дальнейших этапов производства с получением продукта на основе молока; и
где молоко представляет собой соевое молоко, овечье молоко, козье молоко, молоко буйволиц, молоко яков, молоко лам, верблюжье молоко или коровье молоко; и
где продукт на основе молока представляет собой кисломолочный продукт, творог или сыр.
RU2016132974A 2014-02-26 2015-02-26 Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами RU2717770C2 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP14156707.3 2014-02-26
EP14156707 2014-02-26
EP14176664 2014-07-11
EP14176664.2 2014-07-11
PCT/EP2015/054020 WO2015128417A1 (en) 2014-02-26 2015-02-26 Variants of chymosin with improved milk-clotting properties

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020107148A Division RU2739004C1 (ru) 2014-02-26 2015-02-26 Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2016132974A true RU2016132974A (ru) 2018-03-27
RU2016132974A3 RU2016132974A3 (ru) 2018-09-18
RU2717770C2 RU2717770C2 (ru) 2020-03-25

Family

ID=52596486

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016132974A RU2717770C2 (ru) 2014-02-26 2015-02-26 Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами
RU2020107148A RU2739004C1 (ru) 2014-02-26 2015-02-26 Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020107148A RU2739004C1 (ru) 2014-02-26 2015-02-26 Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами

Country Status (13)

Country Link
US (4) US10982204B2 (ru)
EP (1) EP3110948A1 (ru)
JP (3) JP7098270B2 (ru)
KR (2) KR102344861B1 (ru)
CN (2) CN106062187B (ru)
AU (2) AU2015222149B2 (ru)
BR (1) BR112016017502B1 (ru)
CA (1) CA2938015A1 (ru)
MX (2) MX2016009937A (ru)
NZ (1) NZ722003A (ru)
RU (2) RU2717770C2 (ru)
UA (1) UA121380C2 (ru)
WO (1) WO2015128417A1 (ru)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX366610B (es) 2012-05-25 2019-07-16 Chr Hansen As Variantes de quimosina con propiedades de coagulacion de leche mejoradas.
UA121380C2 (uk) 2014-02-26 2020-05-25 Кр. Гансен А/С Поліпептид хімозину з удосконаленими властивостями щодо згортання молока
EP4079849A1 (en) * 2015-06-22 2022-10-26 Chr. Hansen A/S Variants of chymosin with improved properties
CN108135193A (zh) * 2015-08-31 2018-06-08 科.汉森有限公司 具有改善性质的凝乳酶的变体
EP3143879A1 (en) * 2015-09-18 2017-03-22 DSM IP Assets B.V. Yogurt with reduced ripening
CA3024210C (en) * 2016-05-19 2024-03-19 Chr. Hansen A/S Variants of chymosin with improved milk-clotting properties
AR108526A1 (es) 2016-05-19 2018-08-29 Chr Hansen As Variantes de quimosina con propiedades mejoradas de coagulación de la leche
CN106754840B (zh) * 2016-12-22 2019-06-21 江南大学 一种酶活及热稳定性改善的凝乳酶突变体
BR112020013771A2 (pt) 2018-01-15 2020-12-01 Chr. Hansen A/S produto de leite fermentado e preparação deste utilizando fosfolipase
CN113801867B (zh) * 2021-11-18 2022-03-18 中国农业科学院生物技术研究所 骆驼凝乳酶原突变蛋白及其编码基因和应用
WO2023194285A2 (en) 2022-04-06 2023-10-12 Chr. Hansen A/S Aspartic protease, methods and uses thereof

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FI841288A (fi) 1983-03-31 1984-10-01 Codon Genetic Eng Lab Rekombinant-dna-kod foer uttryckning av polypeptid.
US7390936B1 (en) * 1999-08-23 2008-06-24 Sembiosys Genetics Inc. Commercial production of chymosin in plants
RU2192137C2 (ru) 2000-08-07 2002-11-10 Открытое акционерное общество "Уфамолагропром" Способ производства сыра
WO2002036752A2 (en) 2000-11-06 2002-05-10 Chr. Hansen A/S Method of producing non-bovine chymosin and use thereof
EP1608947A4 (en) 2002-10-02 2009-06-17 Catalyst Biosciences Inc PROCESS FOR PRODUCING AND TESTING FOR PROTEASES WITH CHANGED SPECIFICITY
WO2004072225A2 (en) 2003-02-12 2004-08-26 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Transgenic fungi expressing bcl-2 and methods of using bcl-2 or portions thereof for improving biomass production, survival, longevity, stress resistance and pathogenicity of fungi
EP1660655B1 (en) 2003-06-27 2016-11-02 Bioren, LLC Look-through mutagenesis
US7482148B2 (en) * 2004-03-30 2009-01-27 Sudershan Biotech Ltd. Recombinant calf-chymosin and a process for producing the same
US20110008492A1 (en) 2007-02-13 2011-01-13 Chr. Hansen A/S Coagulation of milk
JP2010046034A (ja) 2008-08-22 2010-03-04 Toyota Central R&D Labs Inc 変異体のスクリーニング方法
WO2010110464A1 (en) * 2009-03-24 2010-09-30 Meito Sangyo Co., Ltd. Improved type milk-clotting protease derived from a microorganism
CN105316303B (zh) * 2009-11-20 2019-05-31 丹尼斯科美国公司 具有改善的特性的β-葡萄糖苷酶I变体
WO2012021249A2 (en) * 2010-07-12 2012-02-16 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of histidyl-trna synthetases
CA2872309C (en) * 2012-05-03 2021-03-02 Dsm Ip Assets B.V. Improved chymosine enzyme variants
MX366610B (es) 2012-05-25 2019-07-16 Chr Hansen As Variantes de quimosina con propiedades de coagulacion de leche mejoradas.
CN103484488B (zh) * 2013-09-16 2015-07-15 中国农业科学院生物技术研究所 优化的牛凝乳酶原基因及其分泌表达方法和应用
UA121380C2 (uk) 2014-02-26 2020-05-25 Кр. Гансен А/С Поліпептид хімозину з удосконаленими властивостями щодо згортання молока
KR20170115614A (ko) 2015-02-10 2017-10-17 시에이치알. 한센 에이/에스 개선된 응유 특성을 갖는 키모신 배합물
EP4079849A1 (en) 2015-06-22 2022-10-26 Chr. Hansen A/S Variants of chymosin with improved properties
CN108135193A (zh) 2015-08-31 2018-06-08 科.汉森有限公司 具有改善性质的凝乳酶的变体
CA3024210C (en) 2016-05-19 2024-03-19 Chr. Hansen A/S Variants of chymosin with improved milk-clotting properties
AR108526A1 (es) 2016-05-19 2018-08-29 Chr Hansen As Variantes de quimosina con propiedades mejoradas de coagulación de la leche

Also Published As

Publication number Publication date
EP3110948A1 (en) 2017-01-04
KR20160125459A (ko) 2016-10-31
MX2022006692A (es) 2022-07-11
CA2938015A1 (en) 2015-09-03
US20170067041A1 (en) 2017-03-09
US20220154162A1 (en) 2022-05-19
RU2739004C1 (ru) 2020-12-21
US11629343B2 (en) 2023-04-18
US20210230571A1 (en) 2021-07-29
JP7144470B2 (ja) 2022-09-29
KR20220002714A (ko) 2022-01-06
US20240084281A1 (en) 2024-03-14
JP2022122926A (ja) 2022-08-23
UA121380C2 (uk) 2020-05-25
RU2016132974A3 (ru) 2018-09-18
NZ722003A (en) 2023-06-30
CN106062187A (zh) 2016-10-26
AU2015222149A1 (en) 2016-07-28
KR102344861B1 (ko) 2021-12-29
US11827913B2 (en) 2023-11-28
JP2017512059A (ja) 2017-05-18
JP7098270B2 (ja) 2022-07-11
CN111944791A (zh) 2020-11-17
MX2016009937A (es) 2016-10-31
WO2015128417A1 (en) 2015-09-03
JP2020141667A (ja) 2020-09-10
RU2717770C2 (ru) 2020-03-25
AU2015222149B2 (en) 2021-09-23
BR112016017502A2 (ru) 2017-08-08
CN106062187B (zh) 2020-09-15
BR112016017502B1 (pt) 2023-10-24
AU2021286442A1 (en) 2022-01-20
KR102494645B1 (ko) 2023-02-06
US10982204B2 (en) 2021-04-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2016132974A (ru) Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами
RU2014152723A (ru) Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами
RU2017129334A (ru) Смеси химозинов с улучшенными молокосвертывающими свойствами
PH12019500262A1 (en) Process for producing infant formula products and acidic dairy products from milk
EA201692283A1 (ru) Способ получения ферментированного молочного продукта с улучшенным контролем последующего подкисления
WO2013068653A3 (en) Method for producing a milk product
PH12019500263A1 (en) Process for producing infant formula products and dairy products
EA201791588A1 (ru) Свежий йогуртный сыр плотной консистенции с живой бактериальной флорой и изготовленные из него глазированные шоколадом йогуртные десерты, а также способ их изготовления
RU2017125923A (ru) Концентрат белка молочной сыворотки, кисломолочный продукт, содержащий концентрат, и способы
JP2018505672A5 (ru)
AR108526A1 (es) Variantes de quimosina con propiedades mejoradas de coagulación de la leche
AR105867A1 (es) VARIANTES DE QUIMOSINA CON PROPIEDADES MEJORADAS DE a-S1-CASEÍNA
RU2012123281A (ru) Способ производства творога
RU2017144572A (ru) Варианты химозина с улучшенными свойствами
PH12021551148A1 (en) Dairy product and process
NZ704190A (en) Processed cheese with cultured dairy components and method of manufacturing
TW200621165A (en) Dairy ingredient-preparation and use
MX2017008800A (es) Queso untable de la cuajada.
RU2018125939A (ru) Модификация минерального состава молока
EA201501120A3 (ru) Способ производства сыра типа швейцарского
RU2015126868A (ru) Продукты на основе молока и способы их получения
MX2018000613A (es) Procedimiento para la preparacion de un producto fermentado de la leche.
RU2020140600A (ru) Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами
RU2013117214A (ru) Способ получения бессывороточного творожного продукта
MX368623B (es) Metodo para la fabricacion de un queso crema.

Legal Events

Date Code Title Description
HC9A Changing information about inventors